特表 2023-510609 ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体、ならびにインスリンおよび／またはインスリン類似体を含む併用療法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-03-14

(54)【発明の名称】ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体、ならびにインスリンおよび／またはインスリン類似体を含む併用療法

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/28 20060101AFI20230307BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20230307BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230307BHJP

   A61K 38/26 20060101ALI20230307BHJP

   C07K 14/62 20060101ALI20230307BHJP

   C07K 14/605 20060101ALI20230307BHJP

【ＦＩ】

A61K38/28 ZNA

A61P3/10

A61P43/00 121

A61K38/26

C07K14/62

C07K14/605

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022543421

(86)(22)【出願日】2021-01-15

(85)【翻訳文提出日】2022-08-18

(86)【国際出願番号】 CN2021072268

(87)【国際公開番号】W WO2021143879

(87)【国際公開日】2021-07-22

(31)【優先権主張番号】PCT/CN2020/072544

(32)【優先日】2020-01-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＢＲＩＪ

３．ＳＰＡＮ

４．ＰＬＵＲＯＮＩＣ

(71)【出願人】

【識別番号】513243561

【氏名又は名称】上海仁会生物制▲やく▼股▲ふん▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＳＨＡＮＧＨＡＩ ＢＥＮＥＭＡＥ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬ ＣＯＲＰＯＲＡＴＩＯＮ

【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．９１６ Ｚｉｐｉｎｇ Ｒｏａｄ，Ｚｈｏｕｐｕ Ｔｏｗｎ，Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ａｒｅａ，Ｓｈａｎｇｈａｉ ２００３２１，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ

(74)【代理人】

【識別番号】230104019

【弁護士】

【氏名又は名称】大野 聖二

(74)【代理人】

【識別番号】100119183

【弁理士】

【氏名又は名称】松任谷 優子

(74)【代理人】

【識別番号】100149076

【弁理士】

【氏名又は名称】梅田 慎介

(74)【代理人】

【識別番号】100173185

【弁理士】

【氏名又は名称】森田 裕

(74)【代理人】

【識別番号】100162503

【弁理士】

【氏名又は名称】今野 智介

(74)【代理人】

【識別番号】100144794

【弁理士】

【氏名又は名称】大木 信人

(74)【代理人】

【識別番号】100204582

【弁理士】

【氏名又は名称】大栗 由美

(72)【発明者】

【氏名】ズゥオ，ヤジュン

(72)【発明者】

【氏名】ファン，シァンカン

(72)【発明者】

【氏名】ドゥ，ジチァン

(72)【発明者】

【氏名】シァ，チン

【テーマコード（参考）】

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA19

4C084BA23

4C084BA44

4C084DB34

4C084DB35

4C084MA02

4C084NA05

4C084ZC35

4C084ZC75

4H045AA10

4H045AA30

4H045BA18

4H045CA40

4H045DA30

4H045DA37

4H045EA20

(57)【要約】

第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分と、第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体からなる群から選択される１つ以上の第２の有効成分と、を含む、糖尿病のための併用療法が、本明細書に開示される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象における血糖上昇に関連する状態を治療する方法であって、第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分と、第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体からなる群から選択される１つ以上の第２の有効成分とを対象に投与し、前記状態を治療することを含む、方法。

【請求項2】

前記対象が、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ＧＬＰ－１類似体が、ＧＬＰ－１（７－３７）、ＧＬＰ－１（７－３６）、およびＧＬＰ－１（７－３５）からなる群から選択される、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記第２の有効量（Ｕ）の前記インスリンおよび／またはインスリン類似体ならびに前記第１の有効量の（ｍｇ）の前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体が、１０：１～８００：１、約３０：１～約５００：１ｍ 約５０：１～約２５０：１、約７０：１～約２２０：１、または約１００：１～約２００：１、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１５０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、または約８００：１の比で投与される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体が、約０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与され、ならびに／または前記インスリンおよび／もしくはインスリン類似体が、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲で投与される、請求項１～４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記第１の有効量の前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体ならびに／または前記第２の有効量の前記インスリンおよび／もしくはインスリン類似体が、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回投与される、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記第１の有効量の前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体が、前記第２の有効量の前記インスリンおよび／またはインスリン類似体の投与前、投与中、または投与後に投与される、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体が、約０．０１ｍｇ／日～約１ｍｇ／日、約０．０６ｍｇ／日～０．６ｍｇ／日、または約０．１２ｍｇ／日～約０．４ｍｇ／日の１日投与量で投与される、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記ＧＬＰ－１類似体が、ベイナグルチドである、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

対象における血糖上昇に関連する状態を治療するための、第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分と、第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体からなる群から選択される１つ以上の第２の有効成分と、を含む、併用療法。

【請求項11】

前記対象が、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い、請求項１０に記載の併用療法。

【請求項12】

前記ＧＬＰ－１類似体が、ベイナグルチドである、請求項１０または１１に記載の併用療法。

【請求項13】

前記第２の有効量（Ｕ）の前記インスリンおよび／またはインスリン類似体ならびに前記第１の有効量の（ｍｇ）の前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体を、１０：１～８００：１、約３０：１～約５００：１ｍ 約５０：１～約２５０：１、約７０：１～約２２０：１、または約１００：１～約２００：１、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１５０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、または約８００：１の比で含む、請求項１０～１２のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項14】

前記ＧＬＰ－１および／もしくはＧＬＰ－１類似体が、０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与されるか、または前記インスリンおよび／もしくはインスリン類似体が、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲で投与される、請求項１０～１３のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項15】

１）前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と、２）前記インスリンおよび／またはインスリン類似体とが、単一の組成物で製剤化される、請求項１０～１４のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項16】

１）前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と、２）前記インスリンおよび／またはインスリン類似体とが、２つの別個の組成物で製剤化される、請求項１０～１５のいずれか一項に記載の併用療法。

【請求項17】

対象における血糖上昇に関連する状態を治療するための、第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分と、第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体からなる群から選択される１つ以上の第２の有効成分と、を含む、キット。

【請求項18】

前記対象が、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い、請求項１７に記載のキット。

【請求項19】

前記ＧＬＰ－１類似体が、ベイナグルチドである、請求項１６または１８に記載のキット。

【請求項20】

１）前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と、２）前記インスリンおよび／またはインスリン類似体とが、単一の組成物で製剤化される、請求項１７～１９のいずれか一項に記載のキット。

【請求項21】

１）前記ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と、２）前記インスリンおよび／またはインスリン類似体とが、２つの別個の組成物に製剤化される、請求項１７～２０のいずれか一項に記載のキット。

【請求項22】

それを使用するための説明書をさらに含む、請求項１７～２１のいずれか一項に記載のキット。

【発明の詳細な説明】

【背景技術】

【0001】

ＧＬＰ－１は、特に膵臓のインスリン分泌β細胞および脳のニューロンで発現されるＧＬＰ－１受容体に作用するインスリン分泌刺激ペプチドである。天然型のＧＬＰ－１は、食事後に腸のＬ細胞により分泌され、インスリン分泌の強力なペプチド刺激因子である。ＧＬＰ－１は、２型糖尿病の潜在的な治療法である。Ｈｏｌｓｔ，Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．８７：１４０９－１４３９（２００７）。ＧＬＰ－１は、Ｃ末端アミド－ＮＨ２を含むＧＬＰ－１（７－３６）とＣ末端遊離カルボキシル基を含むＧＬＰ－１（７－３７）の２つの活性型を有している。循環に入ると、ＧＬＰ－１はジペプチジルペプチダーゼ－４（ＤＰＰ４）によって急速に分解され、半減期は約２分と短くなる。Ｋｉｅｆｆｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １３６：３５８５－３５９６（１９９５）。ＧＬＰ－１およびその類似体は、血糖の制御に対する効果に加えて、体重減少の誘発、胃内容排出の遅延、および満腹感の増加に効果があることが分かっている。Ｍｏｎａｍｉ ｅｔ ａｌ．，Ｅｘｐ．Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｒｅｓ．２０１２：６７２６５８（２０１２）。ＦＤＡは、２０１４年１２月にＳａｘｅｎｄａ（リラグルチド３ｍｇ）を承認したが、これは、ＧＬＰ－１類似体の最初のＮＤＡアプリケーションであり、少なくとも２型糖尿病などの過体重に関連する少なくとも１つの疾患または状態を有する肥満の成人の低カロリーの食事および身体活動の増加で補完される長期的な体重管理である。ＧＬＰ－１類似体の有効性をさらに改善するために継続的な努力がなされている。本開示は、ＧＬＰ－１類似体の治療効果をさらに改善する併用療法を提供する。

【発明の概要】

【0002】

一態様では、対象の血糖上昇に関連する状態を治療する方法が提供される。この方法は、第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分ならびに第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体からなる群から選択される１つ以上の第２の有効成分を対象に投与することを伴う。いくつかの実施形態では、対象は、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１類似体は、ＧＬＰ－１（７－３７）、ＧＬＰ－１（７－３６）、およびＧＬＰ－１（７－３５）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１類似体は、ＧＬＰ－１（７－３６）（例えば、ベイナグルチド）である。いくつかの実施形態では、インスリン類似体は、超速効型インスリン（例えば、インスリンリスプロ、インスリンアスパート、インスリングルリシン）および長時間作用型インスリン（例えば、インスリングラルギン、インスリンデグルデク、およびインスリンデテミル）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第２の有効量（Ｕ）のインスリンおよび／またはインスリン類似体ならびに第１の有効量の（ｍｇ）のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体は、約１０：１～約８００：１、約３０：１～約５００：１、約５０：１～約２５０：１、約７０：１～約２２０：１、または約１００：１～約２００：１、例えば、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１５０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、または約８００：１の比で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１５９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ ｍｇ／ｋｇ～約０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１２１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１１１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７３ｍｇ／ｋｇ～約０．０１０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７６ｍｇ／ｋｇ～約０．００９２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８０ｍｇ／ｋｇ～約０．００８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８９ｍｇ／ｋｇ～約０．００７９２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１０８ｍｇ／ｋｇ～約０．００７３５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１２７ｍｇ／ｋｇ～約０．００６７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１６５ｍｇ／ｋｇ～約０．００６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１８４ｍｇ／ｋｇ～約０．００６０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２０３ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２２２ｍｇ／ｋｇ～約０．００５４５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２６ｍｇ／ｋｇ～約０．００５８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２７９ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、または約０．００２９８ｍｇ／ｋｇ～約０．００５２６ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００３ｍｇ／ｋｇ～約９．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約８．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約７．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約６．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ～約５．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約４．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約４．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約３．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ～約２．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０ｍｇ／ｋｇ～約２．７ｍｇ／ｋｇ体重、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、または約１．２ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０１ｍｇ／日～約１ｍｇ／日、約０．０６ｍｇ／日～０．６ｍｇ／日、または約０．１２ｍｇ／日～約０．４ｍｇ／日の１日投与量で投与され得る。

【0003】

いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回投与され得る。いくつかの実施形態では、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。

【0004】

いくつかの実施形態では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに／または第２の有効量のインスリンおよび／もしくはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回投与される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の投与前、投与中、または投与後に投与され得る。

【0005】

別の態様では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに有効量のインスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）を含む併用療法が提供される。併用療法は、対象の血糖上昇に関連する状態を治療するためのものである。いくつかの実施形態では、対象は、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１類似体は、ＧＬＰ－１（７－３７）、ＧＬＰ－１（７－３６）、およびＧＬＰ－１（７－３５）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１類似体は、ＧＬＰ－１（７－３６）（例えば、ベイナグルチド）である。いくつかの実施形態では、インスリン類似体は、超速効型インスリン（例えば、インスリンリスプロ、インスリンアスパート、インスリングルリシン）および長時間作用型インスリン（例えば、インスリングラルギン、インスリンデグルデク、およびインスリンデテミル）からなる群から選択される。いくつかの実施形態では、第２の有効量（Ｕ）のインスリンおよび／またはインスリン類似体ならびに第１の有効量の（ｍｇ）のＧＬＰ－１および／もしくはＧＬＰ－１類似体は、約１０：１～約８００：１、約３０：１～約５００：１ｍ 約５０：１～約２５０：１、約７０：１～約２２０：１、または約１００：１～約２００：１、例えば、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１５０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、または約８００：１の比で投与される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１５９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ ｍｇ／ｋｇ～約０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１２１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１１１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７３ｍｇ／ｋｇ～約０．０１０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７６ｍｇ／ｋｇ～約０．００９２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８０ｍｇ／ｋｇ～約０．００８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８９ｍｇ／ｋｇ～約０．００７９２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１０８ｍｇ／ｋｇ～約０．００７３５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１２７ｍｇ／ｋｇ～約０．００６７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１６５ｍｇ／ｋｇ～約０．００６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１８４ｍｇ／ｋｇ～約０．００６０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２０３ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２２２ｍｇ／ｋｇ～約０．００５４５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２６ｍｇ／ｋｇ～約０．００５８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２７９ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、または約０．００２９８ｍｇ／ｋｇ～約０．００５２６ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００３ｍｇ／ｋｇ～約９．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約８．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約７．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約６．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ～約５．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約４．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約４．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約３．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ～約２．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０ｍｇ／ｋｇ～約２．７ｍｇ／ｋｇ体重、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、または約１．２ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与され得る。いくつかの実施形態では、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０１ｍｇ／日～約１ｍｇ／日、約０．０６ｍｇ／日～０．６ｍｇ／日、または約０．１２ｍｇ／日～約０．４ｍｇ／日の１日投与量で投与され得る。

【0006】

いくつかの実施形態では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と、第２の有効量のインスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）とは、単一組成物で製剤化される。いくつかの実施形態では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と第２の有効量のインスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）とは、２つの別個の組成物で製剤化されて、治療中に組み合わされる。

【0007】

さらに別の態様では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と、第２の有効量のインスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）と、を含むキットが提供される。キットは、対象の血糖上昇に関連する状態を治療するために使用される。いくつかの実施形態では、対象は、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い。いくつかの実施形態では、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と、２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）とは、単一組成物に製剤化される。いくつかの実施形態では、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と、２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）とは、２つの別個の組成物に製剤化される。いくつかの実施形態では、キットは、それを使用するための説明書をさらに含む。

【図面の簡単な説明】

【0008】

【図1】ベイナグルチド注射後４時間にわたる、６０Ｕ／ｋｇのインスリングラルギン（ＩＧｌａ）と組み合わせた０．２ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド（Ｂｅｉ）の様々な用量において試験したｄｂ／ｄｂマウス（ｎ＝５）の血糖値を示す。

【図2】ベイナグルチド注射後４時間にわたる、６０Ｕ／ｋｇのインスリングラルギン（ＩＧｌａ）と組み合わせた０．１ｍｇ／ｋｇ～１．２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド（Ｂｅｉ）の様々な用量において試験したｄｂ／ｄｂマウス（ｎ＝５）の血糖値を示す。

【図3】ベイナグルチド（Ｂｅｉ）、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）、またはＢｅｉとＩＧｌａとの組み合わせを単回注射した後の、試験したＳＴＺ誘発糖尿病マウス（ｎ＝６）の血糖値を示す。用量は、それぞれ、Ｂｅｉについては０．１ｍｇ／ｋｇおよび２．４ｍｇ／ｋｇ、ＩＧｌａについては５Ｕ／ｋｇおよび１０Ｕ／ｋｇであった。併用群についての用量は、それぞれ０．０５ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと５Ｕ／ｋｇのＩＧｌａ、および０．１ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと１０Ｕ／ｋｇのＩＧｌａであった。

【図4】ベイナグルチド（Ｂｅｉ）、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）、またはＢｅｉとＩＧｌａとの組み合わせを単回注射した後の、試験したＳＴＺ誘発糖尿病マウス（ｎ＝６）の血糖値の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。用量は、それぞれ、Ｂｅｉについては０．１ｍｇ／ｋｇおよび２．４ｍｇ／ｋｇ、ＩＧｌａについては５Ｕ／ｋｇおよび１０Ｕ／ｋｇであった。併用群についての用量は、それぞれ０．０５ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと５Ｕ／ｋｇのＩＧｌａ、および０．１ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと１０Ｕ／ｋｇのＩＧｌａであった。

【図5】ベイナグルチド（Ｂｅｉ）、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）、またはＢｅｉとＩＧｌａとの組み合わせを単回注射した後の、各群（Ａ～Ｇ）についての個々のマウスの血糖値を示す。用量は、それぞれ、Ｂｅｉについては０．１ｍｇ／ｋｇおよび２．４ｍｇ／ｋｇ、ＩＧｌａについては５Ｕ／ｋｇおよび１０Ｕ／ｋｇであった。併用群についての用量は、それぞれ０．０５ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと５Ｕ／ｋｇのＩＧｌａ、および０．１ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと１０Ｕ／ｋｇのＩＧｌａであった。

【図6】ベイナグルチド（Ｂｅｉ、０．１ｍｇ／ｋｇ）、インスリングラルギン（ＩＧｌａ、５Ｕ／ｋｇ）、またはＢｅｉとＩＧｌａとの組み合わせ（それぞれ０．０５ｍｇ／ｋｇのＢｅｉ、５Ｕ／ｋｇのＩＧｌａ）の４週間の複数回注射後の試験したＳＴＺ誘発糖尿病マウス（ｎ＝６）の体重変化を示す。マウスは、各群について、１日２回２８日間処置した。体重変化は、１日目の初期体重を比較することによって計算した。

【図7】１日目の初期体重を比較した２８日目の体重変化を示す。マウスは、１日２回２８日間処置した。用量は、バイナグルチド（Ｂｅｉ）では０．１ｍｇ／ｋｇ、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）では５Ｕ／ｋｇ、併用群ではそれぞれ０．０５ｍｇ／ｋｇのＢｅｉと５Ｕ／ｋｇのＩＧｌａであった。

【図8】６時間の絶食後の２８日目の試験されたＳＴＺ誘発糖尿病マウス（ｎ＝６）の空腹時血糖を示す。

【図9】２８日目のＳＴＺ誘発糖尿病マウス（ｎ＝６）の経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）の血糖値を示す。約６時間絶食させたマウスにブドウ糖液（１ｇ／ｋｇ）を経口投与した。示された時点で血糖を測定した。

【図10】ＯＧＴＴ中の１２０分にわたる血糖値の曲線下面積（ＡＵＣ）を示す。

【発明を実施するための形態】

【0009】

血糖値を最適な範囲に制御することは、糖尿病治療の重要な目標である。最適範囲を大幅に上回っている（高血糖症）または下回っている（低血糖症）血糖値は、問題があり危険な場合がある。糖尿病患者、特にインスリンで治療されている患者は、低血糖症を発症するリスクがある。本明細書に開示される実施例１に示されるように、ベイナグルチドとインスリングラルギンとの併用療法の様々な実施形態で治療された対象のいずれも、低血糖症を発症しなかった。さらに、実施例１は、一定用量のインスリングラルギン（６０Ｕ／ｋｇ）で治療された対象において、血糖コントロールのバイナグルチド用量依存性の相乗的改善を示し、図１を参照すると、ベイナグルチドは、０．２ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、１．２ｍｇ／ｋｇ、および２ｍｇ／ｋｇで投与され、図２を参照すると、ベイナグルチドは、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．２４ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇ、０．６ｍｇ／ｋｇ、および１．２ｍｇ／ｋｇで投与された。実施例２は、血糖コントロールにおけるベイナグルチドとインスリングラルギンとの併用療法の有効性が、インスリングラルギン単独投与と比較して、より安定し、耐久性があり、より速いことを示した（図３および４）が、インスリングラルギンの単独投与は、ベイナグルチドとインスリングラルギンとの併用療法よりも大幅に高い体重増加を誘発し（図６および７）、ベイナグルチドとインスリングラルギンとの併用療法は、ビヒクル群と比較して空腹時血糖を大幅に低下させ（図８）、また、ベイナグルチドとインスリングラルギンとの併用療法は、ベイナグルチド単独およびインスリングラルギン単独と比較して、血糖値を低下させる相乗効果を有した（図９および１０）。１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と２）本明細書に開示されるインスリンおよび／またはインスリン類似体との併用療法は、血糖コントロールを必要とする対象、例えば糖尿病の対象において所望の治療効果を達成し得ることが企図される。

【0010】

本明細書に開示されるのは、第１の有効量のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分と、第２の有効量のインスリンおよびインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）からなる群から選択される１つ以上の第１の有効成分とを含む併用療法であり、ここで、１つ以上の第１の有効成分および１つ以上の第２の有効成分は、異なる用量および／または比で組み合わせることができる。併用療法は、１型および２型糖尿病を含む糖尿病などの血糖値の上昇に関連する様々な状態を治療するために使用することができる。併用療法は、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体または２）インスリンおよび／またはインスリン類似体の単剤療法と比較して治療効果を改善する。例えば、本明細書に開示される実施例１に提供されるように、ベイナグルチドとインスリングラルギンの併用療法の実施形態は、インスリングラルギンまたはベイナグルチドのみで治療された対象と比較して、対象における血糖コントロールを改善した。

【0011】

本開示の文脈において、１）ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに／または２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）を含む薬学的組成物の「治療有効量」または「有効量」という句は、本明細書で使用される場合、糖尿病を治療するなどの、対象において所望の治療効果を作り出す薬学的組成物の量である。ある特定の実施形態では、治療有効量は、最大の治療効果をもたら薬学的組成物の量である。他の実施形態では、治療有効量は、最大治療効果よりも少ない治療効果をもたらす。例えば、治療有効量は、最大の治療効果をもたらす投薬量に関連する１つ以上の副作用を回避しながら治療効果を生み出す量であってもよい。いくつかの実施形態において、治療有効量は、治療効果をもたらす最小量である。特定の組成物の治療有効量は、治療組成物の特性（例えば、活性、薬物動態、薬力学、および生物学的利用能）、対象の生理学的状態（例えば、年齢、体重、性別、疾患の種類および病期、病歴、一般的な体調、所定の投薬量に対する反応性、ならびにその他の現在の投薬）、組成物中の任意の薬学的に許容される担体、賦形剤、および保存剤の性質、ならびに投与経路を含むがそれらに限定されない、様々な因子に基づいて変動する。臨床および薬理学分野の当業者は、日常的な実験により、すなわち、医薬組成物の投与に対する対象の反応をモニタリングし、それに応じて投薬量を調整することにより、治療有効量を決定することができる。追加のガイダンスについては、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，Ｌｏｎｄｏｎ，２０１２、およびＧｏｏｄｍａｎ ＆ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１２ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ，２０１１を参照されたく、その開示全体は参照によって本明細書に組み込まれる。

【0012】

「治療する（ｔｒｅａｔ）」、「治療する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、および「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、状態に関して本明細書において使用される場合、状態を部分的または完全に緩和する、状態の発生もしくは再発の可能性を低下させる、状態の進行もしくは発達を遅延させる、または病状に関連する１つ以上の症状の発達を排除、軽減もしくは遅延させることを指す。

【0013】

「対象」という用語は、本明細書において使用される場合、哺乳動物対象、好ましくはヒトを指す。ある特定の実施形態では、対象は、１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するか、または血糖上昇ならびに／もしくは１型および２型糖尿病などの糖尿病を有するリスクが高い。「対象」および「患者」という語句は、本明細書では同義的に使用され得る。

【0014】

併用療法およびその使用
ある特定の実施形態では、本明細書に開示される組成物は、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体、ならびに２）インスリンおよび／またはインスリン類似体のいずれかまたは両方を含む。

【0015】

いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１類似体は、ＧＬＰ－１（７－３７）、ＧＬＰ－１（７－３６）、およびＧＬＰ－１（７－３５）からなる群から選択される。特に明記しない限り、ＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１類似体は、Ｃ末端遊離カルボキシル基またはＣ末端アミド基を有し得る。例えば、ＧＬＰ－１類似体は、Ｈｉｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ（配列番号１）の配列を有する組換えヒトＧＬＰ－１（７－３６）ペプチドで有り得、この開示においてベイナグルチドと呼ばれ得る。ベイナグルチドは、Ｃ_１４９Ｈ_２２５Ｎ_３９Ｏ_４６の分子式を有し、分子量は３，２９８．７である。ベイナグルチドは、天然型のＮＨ_２が組換えペプチドのＯＨ基で置き換えられた内因性のアミド化を除く、循環型ＧＬＰ－１の活性型と本質的に同じである。ベイナグルチドは、Ｃ末端遊離カルボキシル基を含む。他の実施形態において、ＧＬＰ－１（７－３５）またはＧＬＰ－１（７－３７）は、開示された技術で使用され得る。Ｃ末端遊離カルボキシル基を有するＧＬＰ－１（７－３５）およびＣ末端遊離カルボキシル基を有するＧＬＰ－１（７－３７）の配列は以下のとおりである：
Ｈｉｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ（配列番号２）、および
Ｈｉｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ－Ｇｌｙ（配列番号３）。

【0016】

いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１５９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ ｍｇ／ｋｇ～約０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１２１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１１１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７３ｍｇ／ｋｇ～約０．０１０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７６ｍｇ／ｋｇ～約０．００９２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８０ｍｇ／ｋｇ～約０．００８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８９ｍｇ／ｋｇ～約０．００７９２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１０８ｍｇ／ｋｇ～約０．００７３５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１２７ｍｇ／ｋｇ～約０．００６７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１６５ｍｇ／ｋｇ～約０．００６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１８４ｍｇ／ｋｇ～約０．００６０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２０３ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２２２ｍｇ／ｋｇ～約０．００５４５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２６ｍｇ／ｋｇ～約０．００５８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２７９ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、または約０．００２９８ｍｇ／ｋｇ～約０．００５２６ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００３ｍｇ／ｋｇ～約９．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約８．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約７．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約６．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ～約５．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約４．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約４．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約３．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ～約２．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０ｍｇ／ｋｇ～約２．７ｍｇ／ｋｇ体重、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、または約１．２ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０１ｍｇ／日～約１ｍｇ／日、約０．０６ｍｇ／日～０．６ｍｇ／日、または約０．１２ｍｇ／日～約０．４ｍｇ／日の１日投与量で投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回投与され得る。

【0017】

いくつかの実施形態では、インスリン類似体は、超速効型インスリン（例えば、インスリンリスプロ、インスリンアスパート、インスリングルリシン）および長時間作用型インスリン（例えば、インスリングラルギン、インスリンデグルデク、およびインスリンデテミル）からなる群から選択される。

【0018】

いくつかの実施形態では、第２の有効量（Ｕ）のインスリンおよび／またはインスリン類似体ならびに第１の有効量の（ｍｇ）のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体は、約１０：１～約８００：１、約３０：１～約５００：１ｍ 約５０：１～約２５０：１、約７０：１～約２２０：１、または約１００：１～約２００：１、例えば、約１０：１、約２０：１、約３０：１、約４０：１、約５０：１、約６０：１、約６０：１、約７０：１、約８０：１、約９０：１、約１００：１、約１５０：１、約２００：１、約２５０：１、約３００：１、約３５０：１、約４００：１、約４５０：１、約５００：１、約５５０：１、約６００：１、約６５０：１、約７００：１、約７５０：１、または約８００：１の比で投与される。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０００７０ｍｇ／ｋｇ～約０．０１９７ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７１ｍｇ／ｋｇ～約０．０１５９ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ ｍｇ／ｋｇ～約０．０１４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１２１ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７２ｍｇ／ｋｇ～約０．０１１１５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７３ｍｇ／ｋｇ～約０．０１０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００７６ｍｇ／ｋｇ～約０．００９２５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８０ｍｇ／ｋｇ～約０．００８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０００８９ｍｇ／ｋｇ～約０．００７９２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１０８ｍｇ／ｋｇ～約０．００７３５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１２７ｍｇ／ｋｇ～約０．００６７８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１６５ｍｇ／ｋｇ～約０．００６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００１８４ｍｇ／ｋｇ～約０．００６０２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２０３ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２２２ｍｇ／ｋｇ～約０．００５４５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２６ｍｇ／ｋｇ～約０．００５８３ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００２７９ｍｇ／ｋｇ～約０．００５６４ｍｇ／ｋｇ体重、または約０．００２９８ｍｇ／ｋｇ～約０．００５２６ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．００１ｍｇ／ｋｇ～約１０．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００３ｍｇ／ｋｇ～約９．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．００５ｍｇ／ｋｇ～約８．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約７．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約６．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約５．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０１５ｍｇ／ｋｇ～約５．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０３ｍｇ／ｋｇ～約４．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．０５ｍｇ／ｋｇ～約４．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約３．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．２ｍｇ／ｋｇ～約３．５ｍｇ／ｋｇ体重、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約３．２ｍｇ／ｋｇ体重、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約３．０ｍｇ／ｋｇ体重、約０．６ｍｇ／ｋｇ～約２．８ｍｇ／ｋｇ体重、約０．７ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ体重、約１．０ｍｇ／ｋｇ～約２．７ｍｇ／ｋｇ体重、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ体重、または約１．２ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲で投与され得る。いくつかの実施形態では、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲で、対象（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態では、第１の有効量のＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに／または第２の有効量のインスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の投与前、投与中、または投与後に投与され得る。ある特定の実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の投与前または投与後約５分～約３０分、約１０分～約２０分、または約１５分に投与され得る。いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、約０．０１ｍｇ／日～約１ｍｇ／日、約０．０６ｍｇ／日～０．６ｍｇ／日、または約０．１２ｍｇ／日～約０．４ｍｇ／日の１日投与量で投与され得る。

【0019】

いくつかの実施形態では、治療有効量のインスリンおよび／または本明細書に開示されるインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、約２Ｕ／日～約１００Ｕ／日、約６Ｕ／日～約６０Ｕ／日、約１２Ｕ／日～約４０Ｕ／日、約２０Ｕ／日～約３０Ｕ／日、または約１５Ｕ／日の範囲であり得る。いくつかの実施形態では、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン、Ｕ）と、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチド、ｍｇ）とは、１０：１～８００：１、例えば、３０：１、５０：１、１００：１、２００：１、２５０：１、３００：１、または６００：１の範囲の比で組み合わされる。

【0020】

１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）のいずれかまたは両方に加えて、本明細書に開示される薬学的組成物は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤、および／または組成物の所望のｐＨ範囲維持するための緩衝液（例えば、ヒスチジン－塩酸（ヒスチジン－ＨＣｌ）、クエン酸ナトリウム－クエン酸、リン酸一水素二ナトリウム－クエン酸、ＮａＯＨ－クエン酸、酢酸ナトリウム－酢酸（ＮａＡＣ－ＨＡＣ）、コハク酸塩－コハク酸、乳酸塩－乳酸、グルタミン酸塩－グルタミン酸、リンゴ酸－リンゴ酸、安息香酸塩－安息香酸、酒石酸塩－酒石酸、またはグリシン－塩酸（Ｇｌｙ－ＨＣｌ）、またはそれらの任意お組み合わせ）塩を含有し得る。薬学的組成物のための追加の成分は、１つ以上の保存剤（例えば、フェノール、ベンジルアルコール、メチルｐ－ヒドロキシベンゾエート、エチルｐ－ヒドロキシベンゾエート、プロピルｐ－ヒドロキシベンゾエート、ブチルｐ－ヒドロキシベンゾエート、クロロブタノール、２－フェノキシエタノール、２－フェネチルアルコール、塩化ベンザルコニウム（臭化物）、メルチオレートまたはそれらの任意の組み合わせ）、等張剤（ポリオール、塩化ナトリウム、糖またはそれらの任意の組み合わせ；ここで、ポリオールは、マンニトール、ソルビトール、イノシトール、キシリトール、グリセリン、プロピレングリコールまたはそれらの任意の組み合わせであり、糖はスクロース、トレハロース、ラクトース、フルクトース、グルコースまたはそれらの任意の組み合わせである）、および溶解促進剤（例えば、Ｔｗｅｅｎ２０、Ｔｗｅｅｎ４０、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ２０、Ｓｐａｎ４０、Ｓｐａｎ８０、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ１８８、ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ６８、Ｂｒｉｊ３５、デキストラン－２０、ＰＥＧ４００、ＰＥＧ１０００、ＰＥＧ１５００、ＰＥＧ２０００、プロピレングリコールまたはそれらの任意の組み合わせ）を含み得る。

【0021】

薬学的組成物は、特定の投与経路に適して製剤化される。例えば、薬学的組成物は、皮下もしくは静脈内に注射することができ、または注入もしくは経口投与によって投与することができる。いくつかの実施形態では、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の両方は、同時投与用の単一組成物に製剤化される。いくつかの実施形態では、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体と２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）との異なる用量または比が同時もしくは連続投与に組み合わせることができるように２つの別個の組成物に製剤化される。例えば、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））は、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の投与前、投与中、または投与後に投与され得る。別の例では、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）は、様々な組み合わせで、１日１回、１日２回、１日３回、または１日４回送達され得る。例えば、インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）の１回の投与の後に、ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））の１回以上の投与が続き、逆もまた同様である。インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）もしくはＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））の複数回投与が実施される場合、毎回同じ用量を対象に投与する必要はない。第１の用量の１）ＧＬＰ－１および／もしくはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに／または２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）を投与し、次いで、第１の用量に応答する患者の血糖レベルに応じて、その後の用量をより高くまたはより低く調整するか、または１）ＧＬＰ－１および／もしくはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびに／または２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン）のいずれかまたは両方の用量をスキップすることも可能である。

【0022】

また開示されるのは、１）ＧＬＰ－１および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））と、２）インスリンおよび／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギンと、３）これらの使用説明書と、を含むキットである。ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびにインスリン（および／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン））は、単一組成物または２つの別個の組成物に含まれてもよい。ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびにインスリン（および／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン））が２つの別個の組成物で提供される場合、これらは、様々な組み合わせで同時にまたは連続的に投与されてもよい。例えば、説明書は、ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））ならびにインスリン（および／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン））のどちらを、最初に、どの用量で投与されるか、それぞれのどれほどの用量が１日に投与されるか、ならびに必要に応じて、ユーザーが、初期血糖値および初回投与に応答した血糖値に基づいて、送達用量の最適な組み合わせを選択することができるように、インスリン（および／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン））の１回の投与後に、ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））の１回以上の投与が続くべきであるか、その逆も同様であるべきかを提供するであろう。この目的のために、ＧＬＰ－１（および／またはＧＬＰ－１類似体（例えば、ベイナグルチドなどのＧＬＰ－１（７－３６））とインスリン（および／またはインスリン類似体（例えば、インスリングラルギン））とは、ユーザーがそれぞれの２つ以上を組み合わせて増量した所望の投与量を達成することができるように、小容量で提供され得る。

【0023】

以下の実施例は、請求される発明および本明細書に記載の実施形態をより良く例示するために提供されるものであり、本発明の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。特定の材料が言及される場合、それは単に例示を目的としており、本発明を限定することを意図しない。当業者には、本発明の範囲から逸脱することなく様々な等価物、変更、および修正が実現され得ることが明らかであり、そのような等価の実施形態は本明細書に含まれることが理解されるであろう。さらに、本開示で引用されるすべての参考文献は、本明細書に完全に記載されているかのように、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0024】

実施例１：ｄｂ／ｄｂマウスの血糖値に対するインスリングラルギンおよびベイナグルチドの効果
この実施例は、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）とベイナグルチド（Ｂｅｉ）との組み合わせが、様々な用量と比率で糖尿病のｄｂ／ｄｂマウスの血糖値に及ぼす効果を実証する。

【0025】

材料
動物：雄のｄｂ／ｄｂマウス（ｎ＝４２、ロット番号：ＤＢ２０１９０９２６）は、ＧｅｍＰｈａｒｍａｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。到着後、マウスを復旦大学（ＦＵＤＡＮ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ）の動物施設に一定の温度（２０～２４℃）および湿度（４０～７０％）下で収容した。ハウジングには、１２：１２時間の明暗サイクルが設けた。

【0026】

活性剤：インスリングラルギンはＳａｎｏｆｉから入手し、２～８℃の温度で保存した。Ｈｉｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ（配列番号１）の配列を有するベイナグルチドを、Ｂｅｎｅｍａｅ（注射用ベイナグルチド、２ｍｇ／ｍＬ）から得て、２～８℃で保存した。

【0027】

動物は、実験の前に１週間動物施設で順応させた。マウス（ｎ＝５）を、実験前日の摂食条件下での血糖値および体重によって、異なる群にランダム化した。マウスの各群は、最初の投薬の前に２時間絶食させた。絶食の２時間後、－１５分の時点で、各マウスの血糖値を血糖計（ＯＮＥＴＯＵＣＨ）で測定して記録し、陰性対照またはインスリングラルギン（ＩＧｌａ）の用量を、各マウスの第１の部位に皮下注射した。初回注射の１５分後、時点０で、各マウスの血糖値を測定して再度記録し、直後に陰性対照の２回目の皮下注射または各マウスの異なる部位へのベイナグルチド（Ｂｅｉ）の投与を行った。各マウスの血糖値は、２回目の注射後、様々な間隔で、それぞれ１５分、３０分、６０分、１２０分、１８０分、および２４０分で測定した。

【0028】

以下の表１および表２に詳述されているように、様々な用量のベイナグルチドを使用して２つの実験を実施した。

【0029】

【表1】

【0030】

【表2】

【0031】

図１と図２は、それぞれ実験１と実験２のベイナグルチド注射後４時間にわたるマウスの血糖値を示している。高用量のインスリンおよび／またはインスリン類似体で治療された対象は、低血糖症を患う可能性が高く、これは問題であり危険であり得る。対象における低血糖は、実験では観察されなかった。インスリングラルギンの投与量は、インスリングラルギンの単剤療法（図１および２、白四角、ＩＧＩＡ＿６０Ｕ／ｋｇ）またはベイナグルチド－インスリングラルギンの併用療法のいずれかで治療されたすべての対象で同じ（６０Ｕ／ｋｇ）であった。併用療法は、治療を受けた対象の血糖値を下げるという相乗効果を示した。例えば、０．１ｍｇ／ｋｇという低いベイナグルチド投与量の併用療法（図２、白逆三角、Ｂｅｉ＿０．１ｍｐｋ）は、インスリングラルギンのみで治療された対象と比較して、血糖値をより急速に低下させた（図２の白四角、ＩＧＩａ＿６０Ｕ／ｋｇ）またはベイナグルチドのみ（図２、黒三角、Ｂｅｉ＿０．３ｍｐｋ）。０．２４ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、黒ひし形、Ｂｅｉ＿０．２４ｍｐｋ）、０．３ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、白丸、Ｂｅｉ＿０．３ｍｐｋ）、０．６ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、黒四角、Ｂｅｉ＿０．６ｍｐｋ）、１．２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、白三角、Ｂｅｉ＿１．２ｍｐｋ）を有する併用療法の結果も参照されたい。同様に、０．２ｍｇ／ｋｇという低いベイナグルチド投与量の併用療法（図１、白逆三角、Ｂｅｉ＿０．２ｍｐｋ）は、インスリングラルギンのみで治療された対象と比較して、血糖値をより急速に低下させた（図１の白四角、ＩＧＩａ＿６０Ｕ／ｋｇ）またはベイナグルチドのみ（図１、黒三角、Ｂｅｉ＿２ｍｐｋ）。０．３ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、黒ひし形、Ｂｅｉ＿０．３ｍｐｋ）、０．６ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、白丸、Ｂｅｉ＿０．６ｍｐｋ）、１．２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、黒四角、Ｂｅｉ＿１．２ｍｐｋ）、２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、白三角、Ｂｅｉ＿２ｍｐｋ）を有する併用療法の結果も参照されたい。

【0032】

ベイナグルチド単剤療法で治療された対象の血糖値は、２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド治療の４時間後に（図１、黒三角、Ｂｅｉ＿２ｍｐｋ）、またはそれよりも早く、陰性対照群（図１、黒丸、ビヒクル）の同じレベルに上昇した。ベイナグルチド単剤療法で治療された対象の血糖値は、０．３ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド治療の１．５時間後に（図２、白四角、Ｂｅｉ＿０．３ｍｐｋ）、またはそれよりも早く、陰性対照群（図２、黒丸、ビヒクル）の同じレベルに上昇した。しかしながら、ベイナグルチドとインスリングラルギンとのいくつかの併用療法で治療された対象は、インスリングラルギンのみで治療された対象よりも血糖値が低かった。例えば、インスリングラルギンのみで治療した対象（図１、白四角、ＩＧＩａ＿６０Ｕ／ｋｇ）と比較した、０．６ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、白丸、Ｂｅｉ＿０．６ｍｐｋ）、１．２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、黒四角、Ｂｅｉ＿１．２ｍｐｋ）、２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図１、白四角、Ｂｅｉ＿２ｍｐｋ）との併用療法；ならびにインスリングラルギンのみで治療された対象（図２、白四角、ＩＧＩａ＿６０Ｕ／ｋｇ）と比較した、０．６ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、黒四角、Ｂｅｉ＿０．６ｍｐｋ）および１．２ｍｇ／ｋｇのベイナグルチド投与量（図２、白三角、Ｂｅｉ＿１．２ｍｐｋ）との併用療法を参照されたい。

【0033】

したがって、ベイナグルチドとインスリングラルギンの様々な併用療法を治療した対象は、ベイナグルチドまたはインスリングラルギンのみを治療した対象と比較して、相乗的に改善された血糖コントロールを示した。

【0034】

実施例２：ストレプトゾシン（ＳＴＺ）誘発糖尿病Ｃ５７ＢＬ／６マウスの血糖に対するインスリングラルギンおよびベイナグルチドの効果
この実施例は、インスリングラルギン（ＩＧｌａ）とベイナグルチド（Ｂｅｉ）との組み合わせが、ＳＴＺ誘発糖尿病Ｃ５７ＢＬ／６マウスの血糖に及ぼす効果を実証する。

【0035】

動物：雄のＣ５７ＢＬ／６マウス（ｎ＝７０）は、Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｊｉｈｕｉ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．から購入した。到着後、マウスを上海健康医学院（Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ＆ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）の動物施設に一定の温度（２０～２４℃）および湿度（４０～７０％）下で収容した。ハウジングには、１２：１２時間の明暗サイクルが設けた。

【0036】

活性剤：インスリングラルギンはＳａｎｏｆｉから入手し、２～８℃の温度で保存した。Ｈｉｓ－Ａｌａ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｓｐ－Ｖａｌ－Ｓｅｒ－Ｓｅｒ－Ｔｙｒ－Ｌｅｕ－Ｇｌｕ－Ｇｌｙ－Ｇｌｎ－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ－Ｇｌｕ－Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ａｌａ－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｖａｌ－Ｌｙｓ－Ｇｌｙ－Ａｒｇ（配列番号１）の配列を有するベイナグルチドを、Ｂｅｎｅｍａｅ（注射用ベイナグルチド、２ｍｇ／ｍＬ）から得て、２～８℃で保存した。

【0037】

１週間の順応後、ＳＴＺ注射の前に、マウスに６０ｋｃａｌ％の脂肪を含む高脂肪食（Ｄ１２４９２、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ）を３週間与えた。糖尿病モデルは、５日間の連続した複数回の低用量ＳＴＺ注射（５０ｍｇ／ｋｇ、腹腔内；ｉ．ｐ．）で誘発させた。モデリング期間中、マウスは毎日ＳＴＺ治療の前に４時間絶食させた。ＳＴＺ溶液（５ｍｇ／ｍｌ）は、使用前に０．１Ｍクエン酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ４．５）で新たに調製し、調製後１０分以内に注入した。７日後、１６．７ｍＭ～２７．７ｍＭの空腹時でない血糖値を有するマウスを選択し、血糖値と体重によって異なる群にランダム化した。１日目の午前９時（Ｔ＝０分）に、注射の直前に混合されたビヒクル、インスリングラルギン、ベイナグルチド、またはインスリングラルギンとベイナグルチドの混合物をマウスに皮下投与した（表３）。初回注射後、注射後の様々な間隔で、それぞれ１５分、３０分、６０分、１２０分、１８０分、および２４０分で、尾の血糖値を測定した。その後、４つの群（Ｎｏ．１、Ｎｏ．２、Ｎｏ．４、Ｎｏ．６）のマウスに４週間の複数回投与を続けた。体重を週に２回測定した。２８日目、血糖測定後、マウスを午前９時から６時間絶食させた後、経口ブドウ糖負荷試験（ブドウ糖溶液：１ｇ／ｋｇ、１０ｍｌ／ｋｇ）を行った。血糖を、ブドウ糖負荷後０分（ブドウ糖負荷前）、１５分、３０分、６０分および１２０分で監視した。

【0038】

【表3】

【0039】

単回投与後の血糖：単回投与後、ベイナグルチド（Ｂｅｉ）およびインスリングラルギン（ＩＧｌａｒ）は、ＳＴＺ誘発高血糖マウスの血糖を有意に低下させた。血糖の曲線下面積（ＡＵＣ）に基づくと、Ｂｅｉ＿２．４ｍｇ／ｋｇ、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ、ＩＧｌａｒ＿１０Ｕ／ｋｇ、および２つの併用群で血糖の有意な低下が観察された。ＩＧｌａｒとその併用群との間に有意差は観察されなかったが、併用群の変動係数（ＣＶ）は、いくつかの時点でＩＧｌａｒ単独と比較して小さかった。３０分でのＣＶ値は、それぞれ、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群で０．２５７３であり、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇおよびＢｅｉ＿０．０５ｍｇ／ｋｇ併用群で０．１４７５であった。１２０分でのＣＶ値は、それぞれ、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群で０．４１５１であり、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇおよびＢｅｉ＿０．０５ｍｇ／ｋｇ併用群で０．３１０２であった。ＩＧｌａｒ＿１０Ｕ／ｋｇ群のＣＶ値は３０分で０．５５１７、６０分で０．４２４０であったが、ＩＧｌａｒ＿１０Ｕ／ｋｇとＢｅｉ＿０．１ｍｇ／ｋｇの併用群では、ＣＶは３０分で０．１０２３、６０分で０．１３１９であった。ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群とＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇおよびＢｅｉ＿０．０５ｍｇ／ｋｇ併用群の最小血糖は、６０分でそれぞれ６．０７±０．４３ｍＭおよび５．６７±０．４７ｍＭであった。ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群とＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇおよびＢｅｉ＿０．０５ｍｇ／ｋｇ併用群については、最小血糖は、それぞれ、１２０分５．５０±０．４３ｍＭおよび３．７５±０．４７ｍＭであった。１８０分では、最小値血糖は、それぞれ、ＩＧｌａｒ＿１０Ｕ／ｋｇ群で９．９５±５．２２ｍＭであり、ＩＧｌａｒ＿１０Ｕ／ｋｇおよびＢｅｉ＿０．１ｍｇ／ｋｇ併用群で７．５０±９．０４ｍＭであった。まとめると、血糖コントロールにおける併用群の有効性は、ＩＧｌａｒ単独投与と比較して、より安定し、耐久性があり、より高速であった。結果を図３～５に示し、以下の表４にまとめる。

【0040】

【表4-1】

【0041】

【表4-2】

【0042】

【表4-3】

【0043】

【表4-4】

【0044】

複数回投与後の血糖値および体重の変化：図６および７に示すように、４週間の治療中、ＩＧｌａｒ単独では、２８日目に２．４±０．４ｇの体重増加が見られたが、これに比べてビヒクル群は１．４±０．３ｇであった。対照的に、ベイナグルチドは２８日目に１．０±０．３ｇの減少で体重を低下させた。併用群の場合、２８日目の体重増加は１．３±０．３ｇであり、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群の体重増加よりも有意に低かった。結果を以下の表５にまとめる。

【0045】

【表5-1】

【0046】

【表5-2】

【0047】

２８日目に、６時間の絶食後に空腹時血糖を測定した。データは、ＩＧｌａｒ＿５Ｕ／ｋｇ群および併用群が、２０．５±１．５０ｍＭのビヒクル群と比較して、それぞれ１４．０±２．４３ｍＭおよび１１．７±０．９２ｍＭで空腹時血糖を有意に低下させることを示した。結果を図８および下記表６に示す。

【0048】

【表6】

【0049】

２８日目の経口ブドウ糖負荷試験（ＯＧＴＴ）中に、ベイナグルチドのみ、インスリングラルギンのみ、および併用群を含むすべての試験群は、ＡＵＣに基づいて血糖を有意に低下させた。さらに、併用群は、ベイナグルチド単独およびインスリングラルギン単独と比較して、血糖値低下させるという相乗効果を有していた。結果を図９および１０ならびに下記表７に示す。

【0050】

【表7】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【配列表】

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【国際調査報告】