特表 2023-513795 メタ亜ヒ酸塩を使用する治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-03

(54)【発明の名称】メタ亜ヒ酸塩を使用する治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 33/36 20060101AFI20230327BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20230327BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20230327BHJP

   A61K 47/32 20060101ALI20230327BHJP

   A61K 47/14 20170101ALI20230327BHJP

   A61K 47/04 20060101ALI20230327BHJP

   A61K 47/38 20060101ALI20230327BHJP

   A61K 9/32 20060101ALI20230327BHJP

【ＦＩ】

A61K33/36

A61P31/14

A61P29/00

A61K47/32

A61K47/14

A61K47/04

A61K47/38

A61K9/32

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022549149

(86)(22)【出願日】2021-02-15

(85)【翻訳文提出日】2022-10-13

(86)【国際出願番号】 AU2021050128

(87)【国際公開番号】W WO2021159187

(87)【国際公開日】2021-08-19

(31)【優先権主張番号】2020900433

(32)【優先日】2020-02-16

(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU

(31)【優先権主張番号】2021900204

(32)【優先日】2021-01-29

(33)【優先権主張国・地域又は機関】AU

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＲＩＴＯＮ

(71)【出願人】

【識別番号】520363362

【氏名又は名称】コミファーム インターナショナル オーストラリア ピーティーワイ リミテッド

(71)【出願人】

【識別番号】520363373

【氏名又は名称】パナフィックス インコーポレーテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100092783

【弁理士】

【氏名又は名称】小林 浩

(74)【代理人】

【識別番号】100120134

【弁理士】

【氏名又は名称】大森 規雄

(74)【代理人】

【識別番号】100217663

【弁理士】

【氏名又は名称】末広 尚也

(72)【発明者】

【氏名】ヤン，ヨンジン

【テーマコード（参考）】

4C076

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C076AA45

4C076BB01

4C076CC35

4C076DD26

4C076DD29

4C076DD47

4C076EE09J

4C076EE31

4C076EE32

4C076EE38

4C076FF04

4C076FF05

4C076FF06

4C076FF09

4C076FF25

4C076GG16

4C086AA01

4C086AA02

4C086HA07

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA52

4C086NA14

4C086ZB11

4C086ZB33

(57)【要約】

本発明は、ａ）ウイルス感染が原因の炎症反応を低減する、ｂ）ウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防する、またはｃ）ウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療もしくは予防する方法において、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムを使用することに関する。本発明は、対象においてウイルス感染を治療または予防する方法にも関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記ウイルス感染がコロナウイルス感染である、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項２に記載の方法。

【請求項4】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項7】

前記ウイルス感染がコロナウイルス感染である、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

前記コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、請求項６に記載の方法。

【請求項10】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、請求項６に記載の方法。

【請求項11】

対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項12】

前記ウイルス感染がコロナウイルスによる感染である、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

前記コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

対象においてウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項15】

前記ウイルス感染が、コロナウイルスによる感染が原因である、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、請求項１４に記載の方法。

【請求項18】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される請求項１４に記載の方法。

【請求項19】

対象においてコロナウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項20】

前記コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、請求項１９に記載の方法。

【請求項22】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される請求項１９に記載の方法。

【請求項23】

ウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項24】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、請求項２３に記載の方法。

【請求項26】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む組成物により投与され、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

前記メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む組成物により投与され、
前記薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、請求項１から２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、前記医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、前記医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物。

【請求項29】

ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
前記薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物。

【請求項30】

対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項31】

対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項32】

対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項33】

対象においてウイルス感染を治療する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項34】

ウイルス感染が原因の炎症反状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項35】

前記ウイルス感染がコロナウイルス感染である、請求項３０から３４のいずれか一項に記載の使用。

【請求項36】

対象においてコロナウイルス感染を治療する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。

【請求項37】

前記コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、請求項３５または３６に記載の使用。

【請求項38】

前記医薬が経口投与用に製剤化される、請求項３０から３７のいずれか一項に記載の使用。

【請求項39】

前記医薬が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）および１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む医薬組成物であって、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、前記医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、前記医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物を含む、請求項３０から３８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項40】

前記医薬が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む医薬組成物であって、
前記薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、前記医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、前記医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、
医薬組成物を含む、請求項３０から３８のいずれか一項に記載の使用。

【請求項41】

経口投与用の医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、前記１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、前記医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、前記医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％であり、
対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染を治療するために使用されるか、
ウイルス感染が原因で炎症状態を患っている対象において、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６レベルを低減するために使用されるか、または
対象においてコロナウイルス感染を治療するために使用される、医薬組成物。

【請求項42】

経口投与用の医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
前記薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
前記腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、前記医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、前記医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％であり、
対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染を治療するために使用されるか、
ウイルス感染が原因で炎症状態を患っている対象において、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６レベルを低減するために使用されるか、または
対象においてコロナウイルス感染を治療するために使用される、医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０２０年２月１６日に出願されたオーストラリア仮特許出願第２０２０９００４３３号、および２０２１年１月２９日に出願されたオーストラリア仮特許出願第２０２１９００２０４号の優先権を主張する。オーストラリア仮特許出願第２０２０９００４３３号および同第２０２１９００２０４号のすべての内容は、参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

本発明は、対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する方法、および対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する方法に関する。

【背景技術】

【0003】

炎症反応は、傷害、感染、および他の侵襲に反応して身体で生じる。炎症反応には、炎症促進性および抗炎症性サイトカインの両方のカスケードが関与する。これらのサイトカイン間の均衡は、多くの場合、炎症または傷害後の結果を決定する。

【0004】

炎症または傷害後の成功した結果として、炎症促進性サイトカインの産生は、血中白血球の動員、組織マクロファージの活性化、および免疫メディエーターの産生をもたらす。

【0005】

しかし、敗血症などの一部の状況において、またはトリインフルエンザもしくはコロナウイスのある特定の株（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）など、ウイルスなどの感染性病原体による感染後において、感染に対する炎症反応は、腫瘍壊死因子アルファ（ＴＮＦ－α）、インターロイキン１ベータ（ＩＬ－１β）およびインターロイキン６（ＩＬ－６）などの炎症促進性サイトカインが未制御産生される急性炎症状態をもたらすことがある。そのような炎症促進性サイトカインの未制御産生は、肺炎および／または多臓器不全をもたらすことがあり、感受性の高い個体にとって致死的になりうる。

【0006】

炎症促進性サイトカインの過剰な、一部の場合では未制御の分泌および／または産生は、多くの場合、一部のウイルス感染において、疾患症状の急速な拡大をもたらしうる因子である。例えば、コロナウイス（ＣｏＶ）は、感冒からより重症の疾患までの範囲の疾病を引き起こすウイルスの大きなファミリーであり、炎症促進性サイトカインの増加された、一部の場合では未制御の分泌を引き起こすことが知られている。コロナウイスの例には、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が含まれる。コロナウイスによる一般的な感染兆候には、呼吸器症状、発熱、咳、息切れ、および呼吸の困難さ（breathing difficulties）が含まれる。より重症の場合には、感染は、肺炎、重症急性呼吸器症候群、腎不全および死亡を引き起こすことがある。

【0007】

このように、ウイルス感染が原因で炎症促進性サイトカインが未制御産生される炎症状態の治療または予防に使用するための、改善された医薬組成物の必要性が存在する。

【発明の概要】

【0008】

本発明者は、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）（ＳＭＡ）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）（ＫＭＡ）が、マクロファージからの炎症促進性サイトカインＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の産生を低減または阻害ができることを見出した。

【0009】

したがって、第１の態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0010】

さらなる第１の態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症反応の低減に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0011】

本発明者は、ＳＭＡおよびＫＭＡを、ウイルス感染に対する炎症反応をもたらす状態（ウイルス感染が原因の炎症状態）の治療または予防に使用できることを予見する。

【0012】

したがって、第２の態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0013】

さらなる第２の態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症状態の治療または予防に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0014】

第３の態様は、対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0015】

さらなる第３の態様は、対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症の治療または予防に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0016】

第４の態様は、対象においてウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0017】

さらなる第４の態様は、対象においてウイルス感染の治療に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染を治療する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0018】

第５の態様は、対象においてコロナウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0019】

さらなる第５の態様は、対象においてコロナウイルス感染の治療に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてコロナウイルス感染を治療する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0020】

第６の態様は、ウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0021】

さらなる第６の態様は、ウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６産生の低減に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、またはウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６産生を低減する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0022】

第７の態様は、対象においてコロナウイスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0023】

さらなる第７の態様は、対象においてコロナウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の治療に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてコロナウイルスＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染を治療する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0024】

第８の態様は、対象においてウイルス感染が原因で上昇したＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルにより媒介された疾患または状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0025】

さらなる第８の態様は、対象においてウイルス感染が原因で上昇したＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６により媒介された疾患もしくは状態の治療もしくは予防に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染が原因で上昇したＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６により媒介された疾患もしくは状態を治療もしくは予防する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0026】

第９の態様は、ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を含む医薬組成物を提供する。

【0027】

第１０の態様は、ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物を提供する。

【0028】

第１１の態様は、ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、
医薬組成物を提供する。

【0029】

第１２の態様は、対象においてウイルス感染により引き起こされる疾患または症状を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0030】

さらなる第１２の態様は、対象においてウイルス感染により引き起こされる疾患もしくは症状の治療に使用するためのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、または対象においてウイルス感染により引き起こされる疾患もしくは症状を治療する医薬の製造におけるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）もしくはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用を提供する。

【0031】

本発明は、以下を提供する。
１．対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
２．ウイルス感染がコロナウイルス感染である、項目１に記載の方法。
３．コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、項目２に記載の方法。
４．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、項目１に記載の方法。
５．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、項目１に記載の方法。
６．対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
７．ウイルス感染がコロナウイルス感染である、項目６に記載の方法。
８．コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、項目７に記載の方法。
９．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、項目６に記載の方法。
１０．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、項目６に記載の方法。
１１．対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
１２．ウイルス感染がコロナウイルスによる感染である、項目１１に記載の方法。
１３．コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、項目１２に記載の方法。
１４．対象においてウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
１５．ウイルス感染が、コロナウイルスによる感染が原因である、項目１４に記載の方法。
１６．コロナウイルスがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、項目１５に記載の方法。
１７．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、項目１４に記載の方法。
１８．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、項目１４に記載の方法。
１９．対象においてコロナウイルス感染を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
２０．コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、項目１９に記載の方法。
２１．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、項目１９に記載の方法。
２２．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、項目１９に記載の方法。
２３．ウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法。
２４．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が経口投与される、項目２３に記載の方法。
２５．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、１日あたり２ｍｇ～１日あたり２０ｍｇの範囲の用量で投与される、項目２３に記載の方法。
２６．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む組成物により投与され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、項目１から２５のいずれか一項に記載の方法。
２７．メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（Ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む組成物により投与され、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、項目１から２５のいずれか一項に記載の方法。
２８．ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物。
２９．ウイルス感染が原因の炎症反応を低減するため、および／またはウイルス感染が原因の炎症状態を治療もしくは予防するために使用される場合、経口投与による医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物。
３０．対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３１．対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３２．対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３３．対象においてウイルス感染を治療する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３４．ウイルス感染が原因の炎症反状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３５．ウイルス感染がコロナウイルス感染である、項目３０から３４のいずれか一項に記載の使用。
３６．対象においてコロナウイルス感染を治療する医薬の製造における、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の使用。
３７．コロナウイルス感染がＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２により引き起こされる、項目３５または３６に記載の使用。
３８．医薬が経口投与用に製剤化される、項目３０から３７のいずれか一項に記載の使用。
３９．医薬が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）および１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む医薬組成物であって、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、
医薬組成物を含む、項目３０から３８のいずれか一項に記載の使用。
４０．医薬が、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含む医薬組成物であって、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、
医薬組成物を含む、項目３０から３８のいずれか一項に記載の使用。
４１．経口投与用の医薬組成物であって、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたはの薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％であり、
対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染を治療するために使用されるか、
ウイルス感染が原因で炎症状態を患っている対象において、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６レベルを低減するために使用されるか、または
対象においてコロナウイルス感染を治療するために使用される、医薬組成物。
４２．経口投与用の医薬組成物であって、
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセンテージが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％であり、
対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染が原因の高サイトカイン血症を治療または予防するために使用されるか、
対象においてウイルス感染を治療するために使用されるか、
ウイルス感染が原因で炎症状態を患っている対象において、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／もしくはＩＬ－６レベルを低減するために使用されるか、または
対象においてコロナウイルス感染を治療するために使用される、医薬組成物。

【図面の簡単な説明】

【0032】

【図1】図１Ａ～Ｃ １００ｎｇ／ｍＬのリポ多糖（ＬＰＳ）、ならびにメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ａ；３０、１０、７、５、３、１、０．３および０．１μＭ）または対照（ＢおよびＣ）を含有する培養培地において２４時間インキュベートした、培養ラット初代マクロファージの平均（±ＳＥＭ）細胞傷害性および生存率を示すグラフである。ｎ＝３。

【図2】図２Ａ～Ｆ 陽性（セレコキシブ）および陰性（ビヒクル）対照（Ｂ、Ｄ及びＦ）と比べた、１００ｎｇ／ｍＬのＬＰＳ、ならびに様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウム（３０、１０、７、５、３、１、０．３および０．１μＭ）を含有する培養培地において２４時間インキュベートした、培養ラット初代マクロファージの平均（±ＳＥＭ）ＴＮＦ－α（Ａ）、ＩＬ－１β（Ｃ）またはＩＬ－６（Ｅ）分泌および生存率を示すグラフである。ｎ＝３。共通文字を共有しない値は有意に異なっている（ｐ≦０．０５）。

【図3】図３ＡおよびＢ Ａ．ＬＰＳによる刺激、ならびに様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いた、および用いない処理の後、ＲＡＷ２６４．７細胞により産生される一酸化炭素を示す（すなわち、一酸化炭素産生に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す（ｉＮＯＳアッセイ））グラフであり、Ｂ．ＬＰＳおよびメタ亜ヒ酸ナトリウムで処理した後の細胞生存率を示す（^＊：対照（ＬＰＳ＋）と比較してｐ＜０．０１）グラフである。

【図4】ＬＰＳによる刺激、ならびに様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いた、および用いない処理の後、ＲＡＷ２６４．７細胞によるプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）産生を示す（すなわち、ＰＧＥ２産生に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す（ＰＧＥ２アッセイ）；^＊：対照（ＬＰＳ＋）と比較してｐ＜０．０１））グラフである。

【図5】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２タンパク質の発現を示す（すなわち、ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２タンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す）ウエスタンブロットである。

【図6】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βタンパク質の発現を示す（すなわち、ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βタンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す）ウエスタンブロットである。

【図7】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２のＲＴ－ＰＣＲにより決定されたｍＲＮＡ発現を示す（すなわち、ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２遺伝子発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す）電気泳動ゲルの画像である。

【図8】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ発現を示す（すなわち、ｉＮＯＳ ｍＲＮＡ発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す（リアルタイムＰＣＲ）；^＊：対照（ＬＰＳ＋）と比較してｐ＜０．０１））グラフである。

【図9】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理したＲＡＷ２６４．７細胞における、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＦＮ－β ｍＲＮＡ発現を示す（すなわち、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＦＮ－β遺伝子発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す）ＲＴ－ＰＣＲ産物のゲル電気泳動の画像である。

【図10】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ＮＦ－κＢ転写活性を示す（すなわち、ＬＰＳ誘導ＮＦ－κＢ転写活性に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す；^＊：対照（ＬＰＳ＋）と比較してｐ＜０．０１））グラフである。

【図11】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ＮＦ－κＢ（ｐ５０）および（ｐ６５）のタンパク質発現を示す（すなわち、ＮＦ－κＢタンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を示す）ウエスタンブロットである。

【図12】様々な濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムを用いて、および用いないでＬＰＳにより処理されたＲＡＷ２６４．７細胞における、ＩκＢおよびＩＫＫのタンパク質発現を示すウエスタンブロットである。

【図13】ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）による治療、デキサメタゾンによる治療または治療なしの後のＡＲＤＳマウスモデルの気管支肺胞洗浄液における、ＴＮＦ－αレベルのＡＵＣ（曲線下面積）値を示すグラフである。データを平均±９５％信頼区間で表した（^＊：ｐ＜０．０５、^＊＊：Ｐ＜０．００５）。

【図14】ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）による治療、デキサメタゾンによる治療、または治療なしの後のＡＲＤＳマウスモデルの気管支肺胞洗浄液における、ＩＬ－６レベルのＡＵＣ（曲線下面積）値を示すグラフである。データを平均±９５％信頼区間で表した（^＊：ｐ＜０．０５、^＊＊：Ｐ＜０．００５）。

【図15】ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）による治療、デキサメタゾンによる治療または治療なしの後のＡＲＤＳマウスモデルの気管支肺胞洗浄液における、ＩＬ－１βレベルのＡＵＣ（曲線下面積）値を示すグラフである。データを平均±９５％信頼区間で表した（^＊：ｐ＜０．０５、^＊＊：Ｐ＜０．００５）。

【図16】ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）による治療、デキサメタゾンによる治療または治療なしの後のＡＲＤＳマウスモデルにおけるマウスの生存を示すグラフである（Ｇ１（陰性対照、０ｍｇ／ｋｇ）、Ｇ２（ＰＡＸ－１、１．０３ｍｇ／ｋｇ）、Ｇ３（ＰＡＸ－１、１．５４ｍｇ／ｋｇ）、Ｇ４（ＰＡＸ－１、２．０５ｍｇ／ｋｇ）、Ｇ５（デキサメタゾン、３ｍｇ／ｋｇ）；^＊＊ｐ＜０．００５、ログランク（マンテル－コックス）検定による陰性対照（Ｇ１）からの有意差；^＊＊＊ｐ＜０．０００５、ログランク（マンテル－コックス）検定による陰性対照（Ｇ１）からの有意差；^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、ログランク（マンテル－コックス）検定による陰性対照（Ｇ１）からの有意差；ｎ＝１０）。

【図17】クロロキン、レムデシビル、ロピナビル、ＤＭＳＯ中ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）（「Ｋｏｍｉｐｈａｒｍ（ＤＭＳＯ）」）およびＰＢＳ中ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）（「Ｋｏｍｉｐｈａｒｍ（ＰＢＳ）」）による、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２複製の阻害を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0033】

本発明の好ましい実施形態が、単なる例として下記に記載される。

【0034】

定義
本明細書において特に定義されない限り、以下の用語は、後に続く一般的な意味を有することが理解される。下記に参照される用語は、特に指示されない限り、用語が単独で使用される場合および用語が他の用語と組み合わせて使用される場合、後に続く一般的な意味を有する。

【0035】

本明細書で使用されるとき、「治療すること」は、対象、組織または細胞が所望の薬理学的および／または生理学的効果を得るように影響を及ぼすことを意味し、状態を阻害する、すなわち発病を阻止すること、または状態の影響を軽減する、もしくは寛解させる、すなわち状態の影響を逆転もしくは退行させることを含む。

【0036】

本明細書で使用されるとき、「予防すること」は、状態を有するリスクがありうる細胞、組織または対象に状態が発生するのを予防することを意味するが、この状態が最終的に発病すること、または対象が最終的に状態を発病することを必ずしも意味しない。予防することには、細胞、組織または対象において状態の発症を遅延することを含む。

【0037】

本明細書で使用されるとき、「ウイルス感染が原因の炎症反応を低減すること」は、未治療炎症反応の重症度と比べて、ウイルス感染に対する炎症反応の重症度を低減することを意味する。重症度を低減することは、例えば、未治療反応の際に現れる症状の重症度もしくは数と比べて、現れる症状の重症度もしくは数を低減すること、または未治療反応における１つもしくは複数の炎症促進性サイトカインの血清レベルと比べて、１つもしくは複数の炎症促進性サイトカインの血清レベルを低減することを伴ってもよい。

【0038】

本明細書で使用されるとき、「ウイルス感染が原因の炎症状態」は、ウイルス感染に対する炎症反応から生じる状態を指す。典型的には、炎症状態は、ウイルス感染中に１つまたは複数の炎症促進性サイトカインの増加された、一部の場合では未制御のレベルにより、少なくとも部分的に引き起こされる。ウイルスによる感染中に、炎症促進性免疫細胞は感染部位に遊走し、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６、特にＩＬ－１βおよびＩＬ－６などの炎症促進性サイトカインを幹部において大量に分泌することによって反応する。そのような炎症促進性サイトカインの分泌は、感染部位へのさらなる免疫細胞の遊走を促進する。免疫細胞の急速な流入、炎症促進性サイトカインのさらなる分泌、および感染細胞の破壊の結果として、体液が患部の中に堆積し、組織の損傷が発生する。例えば、コロナウイスは、対象の肺に感染する呼吸器ウイルスである。コロナウイスに対する炎症反応は呼吸器の炎症を生じ、肺胞に体液を蓄積させ、重症例では息切れ、および肺炎をもたらす。経時的に、炎症からの液体は硬化し、肺線維症、一部の場合では死亡をもたらすことがある。対象が生存する場合であっても、炎症は、肺機能の低減を生じることがある。

【0039】

本明細書で使用されるとき、「ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルを低減すること」は、免疫細胞、典型的にはマクロファージから分泌されたＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６の量を低減することを指す。免疫細胞から分泌されたＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６の量は、例えば、対象におけるＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６の血清レベルを決定することによって決定することができる。

【0040】

本明細書で使用されるとき、用語「対象」は哺乳動物を指す。 哺乳動物は、ヒトまたは非ヒトでありうる。非ヒトの例には、霊長類、家畜（例えば、ヒツジ、ウシ、ウマ、ロバ、ブタ）、伴侶動物（companion animal）（例えば、イヌ、ネコ）、実験動物（例えば、マウス、ウサギ、ラット、モルモット、ハムスター）、捕獲野生動物（captive wild animal ）（例えば、キツネ、シカ）が含まれる。典型的には、哺乳動物はヒトまたは霊長類である。 より典型的には、哺乳動物はヒトである。

【0041】

用語「組成物」は、医薬活性成分（「ＡＰＩ」）と賦形剤または担体を含む組成物および製剤を包含し、また、医薬活性成分が（他の担体を伴って、または伴うことなく）カプセル化担体により囲まれているカプセル剤を提供するため、担体としてカプセル化物質を有する組成物および製剤も包含する。医薬組成物では、賦形剤または担体は「薬学的に許容され」、これは生物学的理由または別の理由で望ましくないものではないことを意味し、すなわち、この物質は、任意の望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、または含有されている組成物中の他の構成成分のいずれかと有害な方法で相互作用することなく、患者に投与される医薬組成物に組み込むことができる。補足的な活性成分を組成物に組み込むこともできる。

【0042】

「薬学的に許容される塩」または「薬学的に許容される賦形剤または担体」の列挙などにおける「薬学的に許容される」とは、本明細書において生物学的理由または別の理由で望ましくないものではない物質を意味し、すなわち、この物質は、任意の望ましくない生物学的効果を引き起こすことなく、または含有されている組成物中の他の構成成分のいずれかと有害な方法で相互作用することなく、患者に投与される医薬組成物に組み込むことができる。

【0043】

用語「有効量」または「治療有効量」は、本発明の方法で使用されるときに妥当な利益／危険比に相当する、過度の有害な副作用（例えば、毒性、刺激、またはアレルギー応答）を有することなく望ましい治療応答を生じるのに十分な医薬活性成分の量を指す。この量は、例えば、対象の免疫細胞、より典型的にはマクロファージによるＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６産生を低減するのに有効でありうる。具体的な有効量または治療有効量は、治療される特定の状態、対象の年齢、体重、身体全体の健康状態、体調、性別および食事、治療の持続期間、併用療法の性質（存在する場合）、ならびに特定の状態の重症度などの要因によって変わる。

【0044】

本明細書で使用されるとき、「担体」には、あらゆる溶媒、分散媒体、ビヒクル、コーティング、希釈剤、抗菌および抗真菌剤、等張および吸収遅延剤、緩衝剤、担体溶液、懸濁液、コロイドなどが含まれる。薬学的に活性な物質におけるそのような媒体および薬剤の使用は、当該技術においてよく知られている。任意の従来媒体または薬剤が活性成分と適合性がない場合を除いて、治療組成物におけるその使用が熟慮される。

【0045】

本明細書で使用されるとき、「投与」または「投与する」または「投与すること」は、２つ以上の薬剤（例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウムおよび／または三酸化ヒ素、ならびにシスプラチン、アドリアマイシンおよび／またはタキサン、例えば、パクリタキセルもしくはドセタキセル）を対象に調剤、適用または提案する（tendering）ことを指す。投与は、いくつかの当該技術に公知の方法のうちのいずれかを使用して実施することができる。例えば、「投与すること」は、本明細書で使用されるとき、注入（静脈内投与（ｉ．ｖ．））、非経口および／または経口投与を介することを意味する。「非経口」とは、静脈内、皮下および筋肉内投与を意味する。実際の投与の好ましい方法および順番は、とりわけ、利用されるＳＭＡまたはＫＭＡの特定の製剤に応じて変わることが理解される。所与の設定条件でのＳＭＡまたはＫＭＡの投与の方法および順番は、従来の技術を使用し、本明細書に記載されている情報を鑑みて当業者によって確定することができる。

【0046】

本明細書で使用されるとき、用語「約」は、特定される値のわずかな変動、好ましくは特定される値の１０パーセント以内を意味する。いずれにしても、用語「約」は、例えば使用される実験技術に応じて、比較的高度に変動が許容されることを意味することができる。特定される値の前記変動は当業者に理解されており、本発明の文脈の範囲内である。さらに、より簡潔な記載を提供するために、本明細書に提示される定量表現のうちのいくつかは、用語「約」で制限されていない。用語「約」が明示的に使用されているか否かにかかわらず、本明細書に提示されるあらゆる量は、実際の所定の値を指すことが意図され、そのような所定の値の実験および／または測定条件に起因する等価値および近似値を含むそのような所定値に対して、当該技術における通常の技能に基づいて合理的に推測される近似値を指すことも意図されることが理解される。

【0047】

特に記述されない限り、すべての量は重量パーセント（％ｗ／ｗ）として本明細書に表される。

【0048】

当然のことながら、本明細書に記載されている医薬組成物の調製に使用される任意の物質は、薬学的に純粋であり、用いられる量において実質的に非毒性であるべきである。

【0049】

炎症反応
一態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症反応を低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0050】

ウイルス感染が原因の炎症反応は、ウイルス感染に対する免疫反応であり、炎症促進性サイトカインがウイルス感染に反応して免疫細胞、典型的にはマクロファージにより分泌される。一実施形態において、炎症促進性サイトカインは、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６を含む。一部の実施形態において、炎症反応には、高サイトカイン血症（「サイトカインストーム」としても知られている）が含まれる。

【0051】

ウイルス感染が原因の炎症反応は、急性または慢性のいずれかでありうる。急性炎症は、典型的には数日間しか続かない。対象的に、慢性炎症は、典型的には数週間、数か月間、さらには無限に続き、組織損傷を引き起こすことがある。

【0052】

一態様は、対象においてウイルス感染が原因の炎症状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。ウイルス感染が原因の炎症状態は、ウイルス感染が原因の炎症反応から生じる状態である。

【0053】

一実施形態において、炎症状態は、ウイルス感染が原因の全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）である。一実施形態において、ウイルス感染は、ＲＮＡウイルスが原因である。

【0054】

一実施形態において、炎症状態は、インフルエンザ感染が原因である。一実施形態において、インフルエンザは、トリインフルエンザである。一実施形態において、インフルエンザ感染が原因である炎症状態は、肺炎である。

【0055】

一実施形態において、炎症状態は、コロナウイルス感染が原因である。一実施形態において、コロナウイルスは、２２９Ｅ、ＮＬ６３、ＯＣ４３、ＨＫＵ１、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２からなる群から選択される。一実施形態において、コロナウイルスはＭＥＲＳ－ＣｏＶである。一実施形態において、コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶである。一実施形態において、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（「２０１９新型コロナウイルス」としても知られている）である。

【0056】

様々な実施形態において、炎症状態は、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ－ＭＥＲＳ－Ｃｏｖにより引き起こされる）および重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ－ＳＡＲＳ－ＣｏＶにより引き起こされる）、または２０１９新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）により引き起こされる状態（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）から選択される。

【0057】

一実施形態において、炎症状態は、ＣＯＶＩＤ－１９により引き起こされる肺炎である。

【0058】

本明細書に記載されている方法は、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の投与を伴う。

【0059】

実施例に記載されているように、本発明者は、メタ亜ヒ酸ナトリウムが、マクロファージからの炎症性サイトカインＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６の産生および／または分泌を低減または阻害できることを見出した。

【0060】

一態様は、ウイルス感染が原因の炎症状態を患っている対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６のレベル、典型的には血清レベルを低減する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0061】

一実施形態において、方法は、対象においてＴＮＦ－αレベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＴＮＦ－α血清レベルを低減する。

【0062】

一実施形態において、方法は、対象においてＩＬ－１βレベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＩＬ－１β血清レベルを低減する。

【0063】

一実施形態において、方法は、対象においてＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βのレベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βの血清レベルを低減する。

【0064】

一実施形態において、方法は、対象においてＩＬ－６レベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＩＬ－６血清レベルを低減する。

【0065】

一実施形態において、方法は、対象においてＩＬ－１βおよびＩＬ－６のレベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＩＬ－１βおよびＩＬ－６の血清レベルを低減する。

【0066】

一実施形態において、方法は、対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６のレベルを低減する。典型的には、方法は、対象においてＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の血清レベルを低減する。

【0067】

一態様は、対象においてウイルス感染が原因で上昇されたＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよび／またはＩＬ－６レベルにより媒介された疾患または状態を治療または予防する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0068】

一実施形態において、疾患または状態は、肺炎である。一実施形態において、ウイルス感染はコロナウイルス感染である。一実施形態において、コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

【0069】

一実施形態において、疾患または状態は、ＭＥＡＲＳまたはＳＡＲＳである。

【0070】

一実施形態において、疾患または状態は、高サイトカイン血症である。一実施形態において、ウイルス感染はコロナウイルス感染である。一実施形態において、コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

【0071】

一態様は、対象においてウイルス感染により引き起こされる疾患または症状を治療する方法であって、有効量のメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0072】

一実施形態において、疾患または症状は、発熱、悪寒、インフルエンザ様症状、炎症、もしくは脳の霧（brain fog）、またはこれらの組合せなどの疾病である。このように、一実施形態において、疾患または症状は、発熱である。別の実施形態において、疾患または状態は、悪寒である。別の実施形態において、疾患または状態は、インフルエンザ様症状である。別の実施形態において、疾患または状態は、炎症である。別の実施形態において、疾患または状態は、脳の霧である。

【0073】

インフルエンザ様症状には、頭痛、発熱、咳、息切れ（呼吸困難）、呼吸の困難さ、痰の発生、胸部絞扼感、疲労、咽喉痛、鼻水、食欲喪失、および疼痛（筋肉痛および体の痛みを含む）が含まれる。

【0074】

一実施形態において、ウイルス感染はコロナウイルス感染である。一実施形態において、コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。

【0075】

一実施形態において、疾患または症状は、抗炎症性機構を介して、および／またはウイルス複製の抑制を介して、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）により治療される。一実施形態において、疾患または症状は、抗炎症性機構を介して、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）により治療される。一実施形態において、疾患または症状は、ウイルス複製の抑制を介して、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）により治療される。一実施形態において、疾患または症状は、抗炎症性機構およびウイルス複製の抑制を介して、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）により治療される。

【0076】

典型的には、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）は、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態で投与される。

【0077】

一部の実施態様において、担体は非天然に生じる担体である。

【0078】

医薬組成物
上記に記載されたように、典型的には、本明細書に記載されている方法および使用に使用されるメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）は、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）および薬学的に許容される担体を含む医薬組成物の形態で投与される。

【0079】

医薬組成物は、上記に記載された他の薬剤またはさらなる活性剤を含有してもよく、例えば、従来の固体もしくは液体のビヒクルまたは希釈剤、および所望の投与様式に適切な種類の医薬添加物（例えば、賦形剤、結合剤、保存剤、安定剤、香味料など）を、周知の医薬処方の技術（例えば、Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., 2005, Lippincott Williams & Wilkinsを参照すること）などの技術に従って用いることによって処方されうる。

【0080】

医薬組成物は、静脈内、経口、経鼻、局所（真皮、口腔および舌下を含む）、または非経口（筋肉内、皮下および静脈内を含む）投与、および吸入または通気による投与に適した形態でありうる。

【0081】

このように、本明細書に記載されている化合物を、薬学的に許容される担体と一緒に、医薬組成物およびその単位投与量の形態の中に入れることができる。医薬組成物は、経口投与のため、錠剤もしくは充填カプセル剤などの固体、または液剤、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤などの液体、もしくはこれらが充填されたカプセル剤でありうる。医薬組成物は、静脈内投与のため、液剤、懸濁剤、または乳剤などの液体でありうる。

【0082】

そのような医薬組成物およびその単位剤形は、従来の成分を、追加の活性化合物もしくは有効成分を伴うか、または伴うことなく、従来の割合で含むことができ、そのような単位剤形は、用いられる意図された１日投与量範囲に相応する活性成分のあらゆる適切な有効量を含有することができる。

【0083】

本明細書に記載されている化合物から医薬組成物を調製するために、薬学的に許容される担体は、固体または液体のいずれかでありうる。固体形態の調合剤には、散剤、錠剤、丸剤、カプセル剤、カシェ剤、ロゼンジ剤（固体または咀嚼性）、坐剤、および分散性粒剤が含まれる。固体担体は、希釈剤、香味剤、可溶化剤、滑沢剤、懸濁化剤、結合剤、保存剤、錠剤崩解剤、またはカプセル化材料としても作用することができる１つまたは複数の物質でありうる。

【0084】

適切な担体は、炭酸マグネシウム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、糖、ラクトース、ペクチン、デキストリン、デンプン、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、低融点ワックス、カカオバターなどである。錠剤、散剤、カプセル剤、丸剤、カシェ剤、およびロゼンジ剤を、経口投与に適した固体形態で使用することができる。

【0085】

液体形態の調合剤には、液剤、懸濁剤、および乳剤、例えば水または水－プロピレングリコール液剤が含まれる。例えば、非経口注射液体調合剤を、食塩水、水、またはポリエチレングルコール水溶液中の液剤として製剤化することができる。

【0086】

滅菌液体形態の組成物には、滅菌液剤、懸濁剤、乳剤、シロップ剤、およびエリキシル剤が含まれる。活性成分を、滅菌水、滅菌有機溶媒、または両方の混合物などの薬学的に許容される担体に溶解または懸濁することができる。

【0087】

一実施形態において、メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウムは経口投与用に製剤化される。経口投与用の組成物は、固体または液体調合剤でありうる。

【0088】

一実施形態において、経口投与用の組成物は固体調合剤である。

【0089】

メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウムを三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）から合成することができる。例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウムは、三酸化ヒ素（Ａｓ_２Ｏ_３）を水酸化ナトリウム水溶液と反応させて、三価メタ亜ヒ酸ナトリウムを形成することによって合成することができる（下記のスキーム１の上部左側）。溶液を冷却し、メタ亜ヒ酸ナトリウムをろ過し、水を蒸発させる。次いで、形成されたメタ亜ヒ酸ナトリウムをメタノールで洗浄して、水を除去し、真空下でろ過し、次いで乾燥する。メタ亜ヒ酸カリウムは、水酸化ナトリウム水溶液の代わりに水酸化カリウム水溶液を使用して、メタ亜ヒ酸ナトリウムと同様の方法で調製することができる。

【0090】

しかし、メタ亜ヒ酸塩（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－の塩）における主な複雑な問題は、その種分化の化学およびメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）を含む経口剤形が胃の中で溶解する場合など、溶液中でいくつかの異なる形態に変換するその能力である。例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）は強酸中、強塩基中、および中性状態で容易に可溶性である。存在する形態は、溶液のｐＨおよびメタ亜ヒ酸ナトリウムの酸化傾向によって決まる（下記のスキーム１）。メタ亜ヒ酸カリウムはメタ亜ヒ酸ナトリウムと同様に挙動する。一般に、中性からアルカリ性条件がＡｓ（ＩＩＩ）（亜ヒ酸塩）の形成（または保持）に好ましい傾向があり、一方、酸性条件（とりわけ、胃の中など塩化物イオンの存在下）がＡｓ（Ｖ）（ヒ酸塩）の形成に好ましい傾向がある。

【0091】

【化1】

【0092】

加えて、メタ亜ヒ酸塩（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－）は、塩化物、金属イオン、もしくは水分（例えば、溶解媒体内または賦形剤内において、賦形剤、例えば、金属イオン、特に、鉄のイオンを有する賦形剤が酸化を触媒しうる）、または大気中の酸素が存在する場合、保管中にメタヒ酸塩に酸化されうる。メタ亜ヒ酸塩の酸化は低いｐＨで極め急速に発生しうる。メタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）およびメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）は、両方とも吸湿性である。

【0093】

溶液中では、メタ亜ヒ酸ナトリウムの主な分解物は、酸化反応によって形成される五価メタヒ酸塩（ＡｓＯ_４ ^３－またはＡｓ（Ｖ））種である。これは下記のボックス１に示されるように進行すると仮定されるが、理論上は、酸化（原子価の変化）は発生する酸素を吸収することなく（例えば、賦形剤との相互作用により、またはメタ亜ヒ酸ナトリウムもしくは組成物内に存在する金属イオンとの反応により）生じうる。

【0094】

【化2】

【0095】

胃の中でのメタ亜ヒ酸ナトリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｎａ^＋）またはメタ亜ヒ酸カリウム（Ｏ＝Ａｓ－Ｏ^－Ｋ^＋）の溶解によって生じるさらなる複雑な問題は、胃の中の塩化物イオンから塩化ヒ素（ＩＩＩ）（ＡｓＣｌ_３）が形成することである。メタ亜ヒ酸塩の酸化は、塩化物が存在するとより急速に発生しうる。塩化ヒ素（ＩＩＩ）は、ヒトに有害であり、重篤な有害作用を引き起こす。

【0096】

組成物が経口投与用である一部の実施形態において、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムを含み、経口投与に適切であり、胃を通過して小腸内（酸性度がｐＨ６．５～７．５である）で溶解を開始する、腸溶性コーティング固体医薬組成物が提供される。メタ亜ヒ酸塩形態からメタヒ酸塩形態への酸化の危険性（胃の中または保管中）、および胃の中の塩化物イオンによる毒性塩化ヒ素（ＩＩＩ）の形成の危険性は、適切な賦形剤および単体、ならびに適切な厚さの適切な腸溶性コーティングを用いることによって最小限になる。小腸の中の腸溶性コーティング固体医薬組成物の溶解は、急速に発生しうる、または長時間（例えば、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、または６時間、好ましくは２時間以内）にわたって発生しうる。

【0097】

経口投与による医薬組成物の好ましい実施形態が下記に記載される。経口投与による医薬組成物は下記に記載される有効な方法によって製造されうる。

【0098】

経口投与による医薬組成物
一実施形態において、経口投与に適した医薬組成物は、
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムおよび１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む固体コアであって、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
ここで腸溶性コーティングの重量パーセンテージは、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、コーティング厚は、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である。

【0099】

例えば、上記の実施形態において、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤は、充填剤または希釈剤、崩壊剤、流動促進剤、滑沢剤、および結合剤から選択されうる。一部の実施形態において、固体コアは、これらの賦形剤の２つ以上、これらの賦形剤の３つ以上、これらの賦形剤の４つ以上、またはこれらの賦形剤のすべてを含んでもよい。このように、一部の実施形態において、固体コアは、充填剤または希釈剤、崩壊剤、流動促進剤、滑沢剤、および結合剤を含む。

【0100】

一実施形態において、経口投与に適した医薬組成物は、以下：
（ａ）メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム、ならびに以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）約５～９５％ｗ／ｗの範囲の充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）約１０～９０％ｗ／ｗの範囲の崩壊剤、
（ｉｉｉ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の流動促進剤、
（ｉｖ）約０．１～５％ｗ／ｗの範囲の滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で０～約３０％ｗ／ｗの範囲の結合剤
を含む、固体コア、
ならびに
（ｂ）腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティング
を含み、
薬学的に許容される賦形剤が、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択され、
腸溶性コーティングの重量パーセントが、医薬組成物の総重量に対して約６％ｗ／ｗ～約２０％ｗ／ｗであり、
コーティング厚が、医薬組成物の厚さの約６．５％～約１５％である、医薬組成物を提供する。

【0101】

医薬組成物は、腸溶性コーティング錠剤または腸溶性コーティングカプセル剤の形態でありうる。一部の実施形態において、医薬組成物は腸溶性コーティング錠剤である。一部の実施形態において、医薬組成物は腸溶性コーティングカプセル剤である。

【0102】

医薬組成物において、医薬活性成分（ＡＰＩ）は、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムである。

【0103】

メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウムは、高い純度（＞９８％のＡｓ（ＩＩＩ）および最小レベルのＡｓ（Ｖ））で商業的に得ることができる。メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウムは、吸湿性である。

【0104】

無機化合物であるメタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウムは、それぞれ、典型的な錠剤賦形剤（典型的な錠剤賦形剤は、通常、およそ１．２～１．６ｇ／ｃｍ^３の密度を有する有機物質である）と比較して、より高い粒子（真）密度（例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウムではおよそ２．１～２．３ｇ／ｃｍ^３、およびメタ亜ヒ酸カリウムでは約８．７６ｇ／ｃｍ^３）を有する。

【0105】

ＡＰＩの粒径と賦形剤の粒径に差があるので、組成物中におけるＡＰＩの分離の可能性は高い。好ましい粒径のＡＰＩを使用することは、改善された粉末の混合およびブレンドの均一性をもたらす、圧縮時に粉末の分離を最小限にする、または排除する、および組成物中の含有物に十分な均一性を達成するので有利であることが、当業者に理解される。

【0106】

経口投与用の組成物の一部の実施形態において、ＡＰＩの粒径は約５０～１５０ミクロンである。一部の実施形態において、ＡＰＩの粒径は約７０～１２０ミクロンである。一部の実施形態において、ＡＰＩの粒径は約９０～１００ミクロンである。

【0107】

一部の実施形態において、ＡＰＩはメタ亜ヒ酸ナトリウムである。

【0108】

一部の実施形態において、ＡＰＩはメタ亜ヒ酸カリウムである。

【0109】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物の固体コアにおけるＡＰＩの量は、固体コアの約０．１～５．０％ｗ／ｗ、好ましくは固体コアの約０．５～３．０％ｗ／ｗ、より好ましくは固体コアの約１．０～２．５％ｗ／ｗ、さらにより好ましくは固体コアの約１．５～２．０％ｗ／ｗ、および最も好ましくは固体コアの約１．６～１．８％ｗ／ｗ、例えば、固体コアの約１．６５％ｗ／ｗ、約１．６６％ｗ／ｗ、約１．６７％ｗ／ｗ、約１．６８％ｗ／ｗ、約１．６９％ｗ／ｗ、約１．７０％ｗ／ｗ、約１．７１％ｗ／ｗ、約１．７２％ｗ／ｗ、約１．７３％ｗ／ｗ、約１．７４％ｗ／ｗ、または約１．７５％ｗ／ｗである。

【0110】

一部の実施形態において、ＡＰＩの粒径および薬学的に許容される賦形剤の粒径は類似している。有利なことに、類似した粒径を有するＡＰＩおよび賦形剤の使用は、改善された粉末の混合およびブレンドの均一性をもたらすことができ、圧縮時に粉末の分離を最小限にする、または排除することができ、組成物中の含有物に十分な均一性を達成することができる。

【0111】

一部の実施形態において、ＡＰＩは微粉化されている。微粉化によりＡＰＩの粒径を低減することは、ＡＰＩが低レベルで存在する場合、剤形（例えば、錠剤）におけるブレンドの均一性および含有物の均一性を改善できることが当業者に理解される。

【0112】

一部の実施形態において、ＡＰＩは微粉化されていない。吸湿性のＡＰＩ（例えば、メタ亜ヒ酸ナトリウムおよびメタ亜ヒ酸カリウム）の微粉化は、より高い表面積および反応性のために分解する危険性を増大させうることが当業者に理解される。

【0113】

一実施形態において、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムに加えて、経口投与による医薬組成物は、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化が最小限になるように選択される１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤を含む。

【0114】

一部の実施形態において、薬学的に許容される賦形剤は、室温で少なくとも約１か月、好ましくは少なくとも約２か月、より好ましくは少なくとも約３か月、さらにより好ましくは少なくとも約４か月、最も好ましくは少なくとも約６か月間保管した後、約１０％ｗ／ｗ未満、好ましくは約５％ｗ／ｗ未満、より好ましくは約２％ｗ／ｗ未満、さらにより好ましくは約１％ｗ／ｗ未満、および最も好ましくは約０．５％ｗ／ｗ未満のメタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムがメタヒ酸ナトリウムまたはメタヒ酸カリウムに酸化されるように選択される。

【0115】

別の実施形態において、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムに加えて、経口投与用の医薬組成物は、以下の薬学的に許容される賦形剤：
（ｉ）充填剤または希釈剤、
（ｉｉ）崩壊剤、
（ｉｉｉ）流動促進剤、
（ｉｖ）滑沢剤、および
（ｖ）任意選択で結合剤
を含む。

【0116】

一部の賦形剤は、多重機能を有することが当業者に理解される。医薬組成物に含まれる賦形剤が多重機能を有する場合、医薬組成物はこれらの機能を有する賦形剤を含むことが考慮され、例えば、賦形剤が結合剤としても崩壊剤としても作用する場合、医薬組成物は結合剤および崩壊剤を含んでいると理解される。

【0117】

一般に、１つまたは複数の薬学的に許容される賦形剤は、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムと適合性がある。好ましくは、薬学的に許容される賦形剤は、メタ亜ヒ酸塩からメタヒ酸塩への酸化の可能性を最小限にするために、低い水分レベルまたは低い水分活性を有する。このように、好ましくは経口投与による医薬組成物は、高い水分レベルまたは高い水分活性を有する賦形剤を含有しない（そのような賦形剤、例えば、金属イオン、特に、鉄のイオンを有する賦形剤は、酸化を触媒しうる）。しかし、いくらかの利用可能な水分が十分な圧縮のために必要であるので、経口投与による医薬組成物にとってこのことの実用性には限界があることを当業者は理解する。

【0118】

一部の実施形態において、ＡＰＩの粒径および薬学的に許容される賦形剤の粒径は類似している。有利なことに、類似した粒径を有するＡＰＩおよび賦形剤の使用は、改善された粉末の混合およびブレンドの均一性をもたらすことができ、圧縮時に粉末の分離を最小限にする、または排除することができ、固体コア中の含有物に十分な均一性を達成することができる。

【0119】

一部の実施形態において、可能であれば、主な高密度型賦形剤は、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの密度と釣り合うように選択され（メタ亜ヒ酸ナトリウムは推定真密度のおよそ２．１～２．３ｇ／ｃｍ^３を有し、メタ亜ヒ酸カリウムは推定真密度のおよそ８．７６ｇ／ｃｍ^３を有する）、典型的な錠剤賦形剤は、有機物質であり、およそ１．２～１．６ｇ／ｃｍ^３の密度を有する。

【0120】

充填剤または希釈剤は、例えば、リン酸二カルシウム無水物（dibasic calcium phosphate anhydrous）、部分アルファ化デンプン、ケイ化微晶質セルロース、微晶質セルロース、硫酸カルシウム二水和物、ラクトース、リン酸水素カルシウム、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウム、リン酸ナトリウム、またはこれらの混合物から選択されうる。一部の実施形態において、充填剤または希釈剤は、リン酸二カルシウム無水物、部分アルファ化デンプン、またはこれらの混合物である。一部の実施形態において、充填剤または希釈剤は、リン酸二カルシウム無水物である。一部の実施形態において、充填剤または希釈剤は部分アルファ化デンプンである。一部の実施形態において、希釈剤は、圧縮性希釈剤、例えば、ケイ化微晶質セルロース、微晶質セルロース、または部分アルファ化デンプンであってもよい。

【0121】

充填剤または希釈剤は、固体コアの約５～９５％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在しうる。一部の実施形態において、充填剤または希釈剤は、固体コアの約１０～９０％ｗ／ｗ、例えば、固体コアの約１０％ｗ／ｗ、固体コアの約１５％ｗ／ｗ、固体コアの約２０％ｗ／ｗ、固体コアの約２５％ｗ／ｗ、固体コアの約３０％ｗ／ｗ、固体コアの約３５％ｗ／ｗ、固体コアの約４０％ｗ／ｗ、固体コアの約４５％ｗ／ｗ、固体コアの約５０％ｗ／ｗ、固体コアの約５５％ｗ／ｗ、固体コアの約６０％ｗ／ｗ、固体コアの約６５％ｗ／ｗ、固体コアの約７０％ｗ／ｗ、固体コアの約７５％ｗ／ｗ、固体コアの約８０％ｗ／ｗ、固体コアの約８５％ｗ／ｗ、または固体コアの約９０％ｗ／ｗの量で医薬組成物の固体コアに存在する。

【0122】

崩壊剤は、例えば、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、部分アルファ化デンプン、クロスポビドン、ジャガイモデンプン、トウモロコシデンプン、デンプングリコール酸ナトリウム（sodium starch glycolate）、およびアルギン酸から選択されうる。デンプングリコール酸ナトリウムおよびクロスポビドンは、超崩壊剤（super disintegrant）である。一部の実施形態において、崩壊剤は、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、部分アルファ化デンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、またはこれらの２つ以上の混合物である。一部の実施形態において、崩壊剤はＬ－ヒドロキシプロピルセルロースである。一部の実施形態において、崩壊剤は部分アルファ化デンプンである。一部の実施形態において、崩壊剤はデンプングリコール酸ナトリウムである。

【0123】

崩壊剤は、固体コアの約１０～９０％ｗ／ｗ、例えば固体コアの約１０～５０％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在しうる。一部の実施形態において、崩壊剤は、固体コアの約１５～８５％ｗ／ｗ、例えば、固体コアの約１５％ｗ／ｗ、固体コアの約２０％ｗ／ｗ、固体コアの約２５％ｗ／ｗ、固体コアの約３０％ｗ／ｗ、固体コアの約３５％ｗ／ｗ、固体コアの約４０％ｗ／ｗ、固体コアの約４５％ｗ／ｗ、固体コアの約５０％ｗ／ｗ、固体コアの約５５％ｗ／ｗ、固体コアの約６０％ｗ／ｗ、固体コアの約６５％ｗ／ｗ、固体コアの約７０％ｗ／ｗ、固体コアの約７５％ｗ／ｗ、固体コアの約８０％ｗ／ｗ、または固体コアの約８５％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在する。

【0124】

流動促進剤は、例えば、コロイド状二酸化ケイ素およびタルクから選択されうる。一部の実施形態において、流動促進剤はコロイド状二酸化ケイ素である。一部の実施形態において、流動促進剤はタルクである。

【0125】

流動促進剤は、固体コアの約０．１～５％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在しうる。一部の実施形態において、流動促進剤は、固体コアの約０．３～４％ｗ／ｗ、例えば、固体コアの約０．３％ｗ／ｗ、固体コアの約０．４％ｗ／ｗ、固体コアの約０．５％ｗ／ｗ、固体コアの約０．６％ｗ／ｗ、固体コアの約０．７％ｗ／ｗ、固体コアの約０．８％ｗ／ｗ、固体コアの約０．９％ｗ／ｗ、固体コアの約１．０％ｗ／ｗ、固体コアの約１．１％ｗ／ｗ、固体コアの約１．２％ｗ／ｗ、固体コアの約１．３％ｗ／ｗ、固体コアの約１．４％ｗ／ｗ、固体コアの約１．５％ｗ／ｗ、固体コアの約１．６％ｗ／ｗ、固体コアの約１．７％ｗ／ｗ、固体コアの約１．８％ｗ／ｗ、固体コアの約１．９％ｗ／ｗ、固体コアの約２．０％ｗ／ｗ、固体コアの約２．１％ｗ／ｗ、固体コアの約２．２％ｗ／ｗ、固体コアの約２．３％ｗ／ｗ、固体コアの約２．４％ｗ／ｗ、固体コアの約２．５％ｗ／ｗ、固体コアの約２．６％ｗ／ｗ、固体コアの約２．７％ｗ／ｗ、固体コアの約２．８％ｗ／ｗ、固体コアの約２．９％ｗ／ｗ、固体コアの約３．０％ｗ／ｗ、固体コアの約３．１％ｗ／ｗ、固体コアの約３．２％ｗ／ｗ、固体コアの約３．３％ｗ／ｗ、固体コアの約３．４％ｗ／ｗ、固体コアの約３．５％ｗ／ｗ、固体コアの約３．６％ｗ／ｗ、固体コアの約３．７％ｗ／ｗ、固体コアの約３．８％ｗ／ｗ、固体コアの約３．９％ｗ／ｗ、または固体コアの約４．０％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在する。

【0126】

滑沢剤は、例えば、フマル酸ステアリルナトリウム（sodium stearyl fumarate）、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、タルク、およびシリカから選択されうる。一部の実施形態において、滑沢剤はフマル酸ステアリルナトリウムである。一部の実施形態において、滑沢剤はステアリン酸マグネシウムである。一部の実施形態において、滑沢剤はステアリン酸である。一部の実施形態において、滑沢剤はタルクである。一部の実施形態において、滑沢剤はシリカである。

【0127】

滑沢剤は、固体コアの約０．１～５％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在しうる。一部の実施形態において、滑沢剤は、固体コアの約０．３～４％ｗ／ｗ、例えば、固体コアの約０．３％ｗ／ｗ、固体コアの約０．４％ｗ／ｗ、固体コアの約０．５％ｗ／ｗ、固体コアの約０．６％ｗ／ｗ、固体コアの約０．７％ｗ／ｗ、固体コアの約０．８％ｗ／ｗ、固体コアの約０．９％ｗ／ｗ、固体コアの約１．０％ｗ／ｗ、固体コアの約１．１％ｗ／ｗ、固体コアの約１．２％ｗ／ｗ、固体コアの約１．３％ｗ／ｗ、固体コアの約１．４％ｗ／ｗ、固体コアの約１．５％ｗ／ｗ、固体コアの約１．６％ｗ／ｗ、固体コアの約１．７％ｗ／ｗ、固体コアの約１．８％ｗ／ｗ、固体コアの約１．９％ｗ／ｗ、固体コアの約２．０％ｗ／ｗ、固体コアの約２．１％ｗ／ｗ、固体コアの約２．２％ｗ／ｗ、固体コアの約２．３％ｗ／ｗ、固体コアの約２．４％ｗ／ｗ、固体コアの約２．５％ｗ／ｗ、固体コアの約２．６％ｗ／ｗ、固体コアの約２．７％ｗ／ｗ、固体コアの約２．８％ｗ／ｗ、固体コアの約２．９％ｗ／ｗ、固体コアの約３．０％ｗ／ｗ、固体コアの約３．１％ｗ／ｗ、固体コアの約３．２％ｗ／ｗ、固体コアの約３．３％ｗ／ｗ、固体コアの約３．４％ｗ／ｗ、固体コアの約３．５％ｗ／ｗ、固体コアの約３．６％ｗ／ｗ、固体コアの約３．７％ｗ／ｗ、固体コアの約３．８％ｗ／ｗ、固体コアの約３．９％ｗ／ｗ、または固体コアの約４．０％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在する。

【0128】

存在する場合、結合剤は、例えば、ケイ化微晶質セルロース、微晶質セルロース、部分アルファ化デンプン、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース（低置換ヒドロキシプロピルセルロース）、ヒドロキシプロピルセルロース、コポビドン（copovidone）（ポリビニルピロリドン）、アルファ化トウモロコシ（maize）デンプン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、デンプン、アカシア、トウモロコシデンプン、およびゼラチンから選択されうる。一部の実施形態において、結合剤はＬ－ヒドロキシプロピルセルロース（低置換ヒドロキシプロピルセルロース）である。一部の実施形態において、結合剤は、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース（低置換ヒドロキシプロピルセルロース）とヒドロキシプロピルセルロースとの混合物である。一部の実施形態において、結合剤は部分アルファ化デンプンである。

【0129】

結合剤は、固体コアの約０～３０％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在しうる。一部の実施形態において、結合剤は、固体コアの約１～３０％ｗ／ｗ、例えば固体コアの約５～２５％ｗ／ｗの量で経口投与による医薬組成物の固体コアに存在する。例えば、結合剤は、固体コアの約約５％ｗ／ｗ、固体コアの約１０％ｗ／ｗ、固体コアの約１５％ｗ／ｗ、固体コアの約２０％ｗ／ｗ、固体コアの約２５％ｗ／ｗ、固体コアの約３０％ｗ／ｗの量で医薬組成物の固体コアに存在しうる。

【0130】

経口投与による医薬組成物は、任意選択で酸化防止剤をコアに含んでもよい。酸化防止剤は、（ａ）酸化還元電位を低下させること、（ｂ）酸素を補足すること、または（ｃ）フリーラジカル反応を停止させること（フリーラジカル阻害剤として作用すること）によって、還元剤として機能する。機構（ａ）および（ｂ）は、メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムからメタヒ酸ナトリムまたはメタヒ酸カリウムへの分解に最も関連性がある。有利なことに、酸化防止剤は、組成物中のＡｓ（ＩＩＩ）からＡｓ（Ｖ）への酸化を低減または防止するように作用する。

【0131】

固形コアに使用されうる酸化防止剤の例には、亜硫酸ナトリウム、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、塩酸システイン、アスコルビン酸、没食子酸プロピル、ブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、およびブチルヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）が含まれる。

【0132】

酸化防止剤は、固体コアの約０．０１～０．２％ｗ／ｗ、例えば、０．０１％ｗ／ｗ、０．０２％ｗ／ｗ、０．０３％ｗ／ｗ、０．０４％ｗ／ｗ、０．０５％ｗ／ｗ、０．０６％ｗ／ｗ、０．０７％ｗ／ｗ、０．０８％ｗ／ｗ、０．０９％ｗ／ｗ、０．１０％ｗ／ｗ、０．１１％ｗ／ｗ、０．１２％ｗ／ｗ、０．１３％ｗ／ｗ、０．１４％ｗ／ｗ、０．１５％ｗ／ｗ、０．１６％ｗ／ｗ、０．１７％ｗ／ｗ、０．１８％ｗ／ｗ、０．１９％ｗ／ｗ、または０．２０％ｗ／ｗの量で固体コアに存在しうる。

【0133】

当然のことながら、当業者は、固体コア中のＡＰＩ（メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウム）、賦形剤、および他の成分の量が、固体コアの１００％を構成するように調整されることを理解する。

【0134】

有利なことに、経口投与による医薬組成物の固体コアは、上記に記載された適切な賦形剤の使用によって、良好なブレンド均一性および含有物均一性を有する。

【0135】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物の固体コアは、以下のうちの任意の１つまたは複数を含まない：ケイ化微晶質セルロース、微晶質セルロース、硫酸カルシウム二水和物、コポビドン（ポリビニルピロリドン）、クロスポビドン、ステアリン酸、タルク、およびメタ重亜硫酸ナトリウム。

【0136】

経口投与用の医薬組成物は、腸溶性ポリマーを含む腸溶性コーティングを含むことができる。腸溶性コーティングは、当該技術において公知の適切なコーティング技術を使用して塗布することができる。腸溶性コーティング材料は、水または適切な有機溶媒のいずれかに分散または溶解されうる。

【0137】

腸溶性コーティングポリマーとして、例えば、以下のうちの１つまたは複数を別々に、または組み合わせて使用することができる：アクリル酸およびそのエステルまたはメタクリル酸もしくはそのエステルのコポリマー、ポリソルベート、セルロースアセテートフタレートポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレートポリマー、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートスクシネート、ポリビニルアセテートフタレート、セルロースアセテートトリメリテート、カルボキシメチルエチルセルロース、シェラック、または他の適切な腸溶性コーティングポリマーの溶液または分散体。

【0138】

一部の実施形態において、腸溶性コーティングは、メタクリレートベースコーティングであり、例えば、メタクリル酸とアクリル酸エチルとのコポリマーを含むものである。いくつかの有用な生成物が市販されている。

【0139】

腸溶性コーティングポリマーの製品は、商標名ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）でＲｏｈｍ ＧｍｂＨ ＆ Ｃｏ．、Ｄａｒｍｓｔａｄｔ、Ｇｅｒｍａｎｙから市販されており、Ｌ１００、１００－５５、およびＳ１００が含まれる。有用なＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）製品の例には、ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ１００－５５、ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｓ１００、およびＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ３０Ｄ－５５が含まれる。ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ１００－５５はポリ（メタクリル酸－ｃｏ－アクリル酸エチル）（１：１）である。ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｓ１００は、メタクリル酸－メタクリル酸メチルコポリマー（１：２）である。ＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ３０Ｄ－５５は、十二指腸への標的化送達のためｐＨ５．５以上で可溶性になるｐＨ依存性ポリマーの水性分散体である。メタクリル酸コポリマーのＥＵＤＲＡＧＩＴ Ｌ３０Ｄ－５５は、メタクリル酸とアクリル酸エチルの１：１比のコポリマーであり、式（Ｃ_５Ｈ_２Ｏ_２・Ｃ_４Ｈ_６Ｏ_２）_ｘを有する。

【0140】

ＣｏｌｏｒｃｏｎからのＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ（登録商標）は、水性アクリル腸溶系であり、錠剤、顆粒剤、およびビーズ剤などの固体剤形への腸溶性フィルムコーティングの塗布のために水に分散性である。有用なＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ（登録商標）製品の例には、Ａｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）およびＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ Ｇｒｅｅｎ（９３Ｏ１１８６３）が含まれる。

【0141】

腸溶性コーティングは、薬学的に許容される可塑剤をさらに含有して、腸溶性コーティングの柔軟性および硬度などの望ましい機械的特性を得ることができる。そのような可塑剤は、例えば、トリアセチン、クエン酸エステル、フタル酸エステル、セバシン酸ジブチル、セチルアルコール、ポリエチレングリコール、ポリソルベート、または他の可塑剤であるが、これらに限定されない。例えば、ステアリン酸マグネシウム、二酸化チタン、タルクなどの粘着防止剤（anti-tacking agent）、および他の添加剤も腸溶性コーティングに含まれてもよい。

【0142】

一部の実施形態において、腸溶性コーティングは、固体コアの約７～１７％ｗ／ｗの重量増加、例えば、固体コアの約８～１４％ｗ／ｗの重量増加をもたらす。一部の実施形態において、腸溶性コーティングは、約８％ｗ／ｗの重量増加、約８．５％ｗ／ｗの重量増加、約９％ｗ／ｗの重量増加、約９．５％ｗ／ｗの重量増加、約１０％ｗ／ｗの重量増加、約１０．５％ｗ／ｗの重量増加、約１１％ｗ／ｗの重量増加、約１１．５％ｗ／ｗの重量増加、約１２％ｗ／ｗの重量増加、約１２．５％ｗ／ｗの重量増加、約１３％ｗ／ｗの重量増加、約１３．５％ｗ／ｗの重量増加、または約１４％ｗ／ｗの重量増加をもたらす。一部の実施形態において、腸溶性コーティングは、固体コアの約１２％ｗ／ｗの重量増加をもたらす。

【0143】

一部の実施形態において、固体コアは、サブコーティング（sub-coating）に適していることが当該技術において公知のポリマーを使用して、腸溶性コーティングでコーティングする前にサブコーティングされてもよい。

【0144】

経口投与用の医薬組成物は、一実施形態において、固体であり、腸溶性コーティングされており、経口投与に適しており、例えば、腸溶性コーティング錠剤または腸溶性コーティングカプセル剤である。

【0145】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、約５～８ｍｍの直径を有する固体コアを有する腸溶性コーティング錠剤である。直径は、固体コアの最大幅の直径である。一部の実施形態において、固体コアの直径は約５．５～７．５ｍｍである。一部の実施形態において、固体コアの直径は約６．０～７ｍｍ、例えば、約６ｍｍ、約６．５ｍｍ、または約７ｍｍである。好ましくは、経口投与による医薬組成物は、６．５ｍｍの直径を有する固体コアを有する腸溶性コーティング錠剤である。より好ましくは、本発明の医薬組成物は、６．５ｍｍの直径を有する固体コアを有し、メタ亜ヒ酸ナトリウムを含む、腸溶性コーティング錠剤である。

【0146】

一部の実施形態において、腸溶性コーティング錠剤の固体コアの厚さは、約２ｍｍ～６ｍｍ、例えば、約２ｍｍ～５ｍｍでありうる。腸溶性コーティング錠剤の固体コアの厚さは、固体コアの深さであり、すなわち、固体コアが平面上に置かれたときに測定される固体コアの高さである。一部の実施形態において、腸溶性コーティング錠剤の固体コアの厚さは、約３ｍｍ～４．５ｍｍである。一部の実施形態において、腸溶性コーティング錠剤の固体コアの厚さは、約３．１ｍｍ～４．２ｍｍ、例えば、約３．１ｍｍ、約３．２ｍｍ、約３．３ｍｍ、約３．４ｍｍ、約３．５ｍｍ、約３．６ｍｍ、約３．７ｍｍ、約３．８ｍｍ、約３．９ｍｍ、約４．０ｍｍ、約４．１ｍｍ、または約４．２ｍｍである。好ましくは、腸溶性コーティング錠剤の固体コアの厚さは、約３．４ｍｍ、約３．５ｍｍ、約３．６ｍｍ、約３．７ｍｍ、約３．８ｍｍ、または約３．９ｍｍである。

【0147】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、約８．０～１６ｍｍの長さを有する固体コアを有する腸溶性コーティングカプセル剤である。一部の実施形態において、固体コアの長は約８．５～１５ｍｍである。一部の実施形態において、固体コアの長さは、約８．５ｍｍ～１４．５ｍｍ、例えば、約８．５ｍｍ、約９．０ｍｍ、約９．５ｍｍ、約１０．０ｍｍ、約１０．５ｍｍ、約１１．０ｍｍ、約１１．５ｍｍ、約１２．０ｍｍ、約１２．５ｍｍ、約１３．０ｍｍ、約１３．５ｍｍ、約１４ｍｍ、または約１４．５ｍｍである。好ましくは、経口投与による医薬組成物は、約１４．３ｍｍの長さを有する固体コアを有する腸溶性コーティングカプセル剤である。より好ましくは、本発明の医薬組成物は、約１４．３ｍｍの長さを有する固体コアを有し、メタ亜ヒ酸ナトリウムを含む、腸溶性コーティングカプセル剤である。

【0148】

一部の実施形態において、腸溶性コーティングカプセル剤の固体コアの厚さは、約３ｍｍ～８ｍｍ、例えば、約４．０ｍｍ～７．０ｍｍでありうる。腸溶性コーティングカプセル剤の固体コアの厚さは、固体コアの深さであり、すなわち、固体コアが平面上に置かれたときに測定される固体コアの高さである。一部の実施形態において、固体コアの厚さは、約４．５～６．５ｍｍ、例えば、約４．５ｍｍ、約４．６ｍｍ、約４．７ｍｍ、約４．８ｍｍ、約４．９ｍｍ、約５．０ｍｍ、約５．１ｍｍ、約５．２ｍｍ、約５．３ｍｍ、約５．４ｍｍ、約５．５ｍｍ、約５．６ｍｍ、約５．７ｍｍ、約５．８ｍｍ、約５．９ｍｍ、約６．０ｍｍ、約６．１ｍｍ、約６．２ｍｍ、約６．３ｍｍ、約６．４ｍｍ、または約６．５ｍｍである。好ましくは、腸溶性コーティングカプセル剤の固体コアの厚さは、約５．３１ｍｍである。

【0149】

一部の実施形態において、固体コアの硬度は、約５０Ｎ～約２００Ｎ、例えば、約５０～約１５０Ｎ、または約７０～約１２０Ｎである。一部の実施形態において、固体コアの硬度は、約８０Ｎ～約１１５Ｎ、例えば、約８５Ｎ、約９０Ｎ、約９５Ｎ、約１００Ｎ、約１０５Ｎ、または約１１０Ｎである。一部の実施形態において、固体コアの硬度は、少なくとも約５０Ｎ、少なくとも約５５Ｎ、少なくとも約６０Ｎ、少なくとも約６５Ｎ、少なくとも約７０Ｎ、少なくとも約７５Ｎ、少なくとも約８０Ｎ、少なくとも約８５Ｎ、少なくとも約９０Ｎ、少なくとも約９５Ｎ、少なくとも約１００Ｎ、少なくとも約１０５Ｎ、少なくとも約１１０Ｎ、少なくとも約１１５Ｎ、少なくとも約１２０Ｎ、少なくとも約１２５Ｎ、少なくとも約１３０Ｎ、少なくとも約１３５Ｎ、少なくとも約１４０Ｎ、少なくとも約１４５Ｎ、少なくとも約１５０Ｎ、少なくとも約１５５Ｎ、少なくとも約１６０Ｎ、少なくとも約１６５Ｎ、少なくとも約１７０Ｎ、少なくとも約１７５Ｎ、少なくとも約１８０Ｎ、少なくとも約１８５Ｎ、少なくとも約１９０Ｎ、少なくとも約１９５Ｎ、または約２００Ｎである。好ましくは、固体コアの硬度は、少なくとも約８５Ｎ、より好ましくは少なくとも約９０Ｎ、さらにより好ましくは少なくとも約１００Ｎ、最も好ましくは少なくとも約１１０Ｎである。典型的には、固体コアの硬度は約２１０Ｎを超えない。

【0150】

一部の実施形態において、固体コアの摩損度は、約０．５％未満、好ましくは約０．４５％未満、より好ましくは約０．４％未満、さらにより好ましくは約０．３５％未満、最も好ましくは約０．３％未満である。一部の実施形態において、固体コアの摩損度は約０．２５％未満である。一部の実施形態において、固体コアの摩損度は約０．２％未満である。一部の実施形態において、固体コアの摩損度は約０．１５％未満である。一部の実施形態において、固体コアの摩損度は約０．１％未満、例えば約０．０８％である。

【0151】

一部の実施形態において、固体コアの質量は約５０ｍｇ～２５０ｍｇである。一部の実施形態において、固体コアの質量は約８０ｍｇ～２２０ｍｇである。一部の実施形態において、固体コアの質量は約１００ｍｇ～２００ｍｇである。一部の実施形態において、固体コアの質量は約１２０ｍｇ～１８０ｍｇである。一部の実施形態において、固体コアの質量は、約１４０ｍｇ～１６０ｍｇ、例えば、約１４０ｍｇ、約１４５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１５５ｍｇ、または約１６０ｍｇである。好ましくは、固体コアの質量は１５０ｍｇである。

【0152】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、以下から選択される固体コアを含む。
・メタ亜ヒ酸ナトリウム、リン酸二カルシウム無水物、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウムを含む、固体コア、
・メタ亜ヒ酸ナトリウム、リン酸二カルシウム無水物粉末、部分アルファ化デンプン、リン酸二カルシウム無水物、デンプングリコール酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウムを含む、固体コア、
・メタ亜ヒ酸ナトリウム、リン酸二カルシウム無水物粉末、リン酸二カルシウム無水物、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウムを含む、固体コア、
・メタ亜ヒ酸ナトリウム、リン酸二カルシウム無水物、部分アルファ化デンプン、デンプングリコール酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウムを含む、固体コア、ならびに
・メタ亜ヒ酸ナトリウム、リン酸二カルシウム無水物、ケイ化微晶質セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウムを含む、固体コア。

【0153】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、固体コアの１．６７％ｗ／ｗのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含み、約６．５ｍｍの固体コア直径、１５０ｍｇの固体コア質量、および固体コアの約１２％ｗ／ｗを付加する腸溶性コーティングを有する、腸溶性コーティング錠剤である。

【0154】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、固体コアの１．６７％ｗ／ｗのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含み、約６．５ｍｍの固体コア直径、１５０ｍｇの固体コア質量、および約０．２ｍｍのコーティング厚を有する腸溶性コーティングを有する、腸溶性コーティング錠剤である。

【0155】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物を投与した後に、医薬組成物は以下の溶解特性を有する：４５分間で７５％以上、好ましくは３０分間で７５％以上。

【0156】

一部の実施形態において、小腸の中の本発明の医薬組成物の溶解およびＡＰＩの放出は、急速に発生する、または長時間（例えば、０．５、０．７５、１、２、３、４、５、または６時間、好ましくは２時間以内）にわたって発生する。

【0157】

一部の実施形態では、腸溶性コーティングが溶解すると、固体コアは、約１０分未満、好ましくは約８分未満、より好ましくは約６分未満、さらにより好ましくは約５分未満、および最も好ましくは約４分未満で崩壊する。

【0158】

経口投与による医薬組成物は、好ましくは単位剤形で提供される。単位剤形はパッケージ化された調合剤であってもよく、パッケージは医薬組成物の別個の量を含有し、例えば、パケット錠剤またはカプセル剤である。また、単位剤形は、それ自体が錠剤もしくはカプセル剤であってもよく、またはこれらのうちの任意の適切な数がパッケージ形態であってもよい。パッケージ形態は、例えば、金属またはプラスチックホイル、例えばブリスターパック、例えば、酸素不浸透性また低浸透性のＡｌｕ－Ａｌｕブリスターで構成されてもよい。パッケージ形態には、投与説明書が添付されていてもよい。

【0159】

一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は、周囲温度または室温で少なくとも３か月間、好ましくは少なくとも６か月間、より好ましくは少なくとも１年間、最も好ましくは１８～２４か月間保管されうる。一部の実施形態において、経口投与による医薬組成物は（例えば、約２～８℃で）冷蔵されうる。

【0160】

医薬組成物は、国際公開第２０１９／１７８６４３号パンフレットに開示されている方法により製造することができる。

【0161】

非経口投与用の組成物
ある特定の状況において、本明細書に開示されている医薬組成物を、非経口、静脈内、筋肉内、またはさらには腹腔内で送達することが望ましい。遊離塩基または薬理学的に許容される塩としての活性化合物の液剤は、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と適切に混合された水により調製することができる。分散剤は、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびこれらの混合物、ならびに油により調製することもできる。保管および使用の通常の条件下では、これらの調合剤は、微生物の増殖を予防するため保存剤を含有する。

【0162】

注射用途に適した医薬形態には、滅菌水性液剤または分散剤、および滅菌注射用液剤または分散剤のその場での調製用の滅菌散剤が含まれる。すべての場合において、形態は滅菌でなければならず、容易なシリンジ通過能（syringability）が存在する程度に流体でなければならない。製造および保管条件下で安定でなければならず、細菌および真菌などの微生物の汚染作用から保護されなければならない。担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングルコールおよび液体ポリエチレングルコールなど)、これらの適切な混合物、ならびに／または植物油を含有する溶媒または分散媒でありうる。正確な流動性は、例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散剤の場合では必要とされる粒径の維持によって、および界面活性剤の使用によって、維持することができる。微生物作用の予防は、様々な抗菌および抗真菌剤、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどにより促進することができる。多くの場合において、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウムを含めることが好ましい。注射用組成物の延長吸収は、吸収を遅延する薬剤、例えばモノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンを組成物中に使用することによってもたらすことができる。

【0163】

水性液剤による非経口投与では、例えば、液剤は、必要であれば適切に緩衝されるべきであり、液体希釈剤は、最初に、十分な食塩水またはグルコースにより等張にされる。これらの特定の水性液剤は、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内投与にとりわけ適している。これに関連して、用いることができる滅菌水性媒体は、本開示を鑑みて当業者にとって公知である。例えば、１つの投与量を等張ＮａＣ ｌｍｌ溶液に溶解し、１０００ｍｌの皮下注入液に添加してもよく、または提案された注入部位に注射してもよい。投与量のいくらかの変動は、治療される対象の状態に応じて必然的に発生する。いずれにしても、投与の責任者は個別の対象に適切な用量を決定する。さらに、ヒトへの投与では、調合剤は、政府および地方機関の生物製剤基準によって要求される、滅菌性、発熱性、および一般的安全性、ならびに純度基準を満たさなければならない。

【0164】

滅菌注射用液剤は、適切な溶媒中の必要量の活性化合物を、必要であれば上記に列挙された、いくつかの他の成分と共に組み込み、続いてろ過滅菌することによって調製される。一般に、分散剤は、様々な滅菌活性成分を、塩基性分散媒および上記に列挙された必要な他の成分を含有する滅菌ビヒクルに組み込むことにより調製される。滅菌注射用液剤の調製のための滅菌散剤の場合では、好ましい調製方法は真空乾燥およびフリーズドライ技術であり、活性成分の散剤および前述の滅菌ろ過液剤からの任意の追加の所望の成分を生じる。

【0165】

製剤は、様々な剤形により、例えば、注射用液剤、薬物放出カプセル剤などで容易に投与される。

【0166】

治療剤は、注射による、例えばボーラス注射または連続注入による非経口投与用に製剤化されうる。そのような製剤は滅菌されている。注射用製剤は、単位剤形、例えば、保存剤が添加されているアンプルまたは多用量容器で提示されうる。組成物は、油または水性ビヒクル中の懸濁剤、液剤または乳剤としてそのような形態をとることができ、懸濁化剤、安定剤および／または分散剤などの配合剤（formulatory agent）を含有することができる。あるいは、活性成分は、使用する前に適切なビヒクル、例えば発熱性物質を含まない滅菌水と構成するための粉末形態でありうる。

【0167】

既に記載された製剤に加えて、化合物をデポー型調合剤として製剤化することもできる。そのような長期作用製剤は、移植（例えば、皮下もしくは筋肉内）により、または筋肉内注射により投与することができる。このように、例えば、化合物は、適切なポリマー物質もしくは疎水性物質（例えば、許容される油中の乳剤）またはイオン交換樹脂により、あるいは難溶性誘導体、例えば難溶性塩として製剤化されうる。リポソームおよび乳剤は、親水性薬物のための送達ビヒクルまたは担体の周知の例である。

【0168】

本発明の医薬調合剤に利用される適切な薬学的に許容される担体および希釈剤は、化合物を医薬組成物に製剤化する当業者に周知である。非経口投与に適した形態の本発明の医薬調合剤は、薬学的に許容される担体を用いて当業者に周知の多数の手段により静脈内注入または注射用に製剤化することができる。ある特定の実施形態において、そのような医薬調合剤は、従来技術により調製される、活性成分のフリーズドライ混合物の単位剤形の形態であり、投与時に水または他の適切な注入液により再構成されうる。

【0169】

投与量
メタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの適切な投与量は、当業者によって容易に決定することができる。

【0170】

対象に投与されるメタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの適切な投与量レベルは、一般に、１日あたり対象の体重の約０．０１～０．８ｍｇ／ｋｇ、例えば、１日あたり対象の体重の約０．０５～０．７ｍｇ／ｋｇ、１日あたり対象の体重の約０．１～０．６ｍｇ／ｋｇ、または１日あたり対象の体重の約０．２～０．５ｍｇ／ｋｇであり、１日あたり単回または多回用量で投与することができる。

【0171】

例えば、患者（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染などのコロナウイルス感染を患っている患者）に投与されるメタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの適切な投与量レベルは、約２．０～３０ｍｇ／日／人、例えば、約２．５～２０．０ｍｇ／日／人または約２．５～１７．５ｍｇ／日／人でありうる。好ましくは、投与されるメタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの投与量レベルは、約５．０～１２．５ｍｇ／日／人、より好ましくは約１０．０～１２．５ｍｇ／日／人、例えば、５．０ｍｇ／日／人、５．５ｍｇ／日／人、６．０ｍｇ／日／人、６．５ｍｇ／日／人、７．０ｍｇ／日／人、７．５ｍｇ／日／人、８．０ｍｇ／日／人、８．５ｍｇ／日／人、９．０ｍｇ／日／人、９．５ｍｇ／日／人、１０．０ｍｇ／日／人、１０．５ｍｇ／日／人、１１．０ｍｇ／日／人、１１．５ｍｇ／日／人、１２．０ｍｇ／日／人、または１２．５ｍｇ／日／人である。一部の実施形態において、投与されるメタ亜ヒ酸ナトリウムまたはメタ亜ヒ酸カリウムの投与量レベルは、１日あたり７．５ｍｇである。

【0172】

任意の特定の対象への投与量の特定の用量レベルおよび頻度は変わりうること、ならびに対象の年齢、体重、身体全体の健康状態、性別および食事、投与の様式および時間、排出速度、薬物の組合せ、および特定の状態の重症度を含む様々な要因によって左右されることが理解される。

【0173】

本発明の医薬組成物は、食前（例えば、３０分前）、食中、または食後（例えば、３０分後）に摂取されうる。好ましくは、本発明の医薬組成物は食事の直後に摂取される。

【0174】

２．５ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（ＳＭＡ）を有する本発明の錠剤による投与レジメンの例を下記に記載する：
－ ５．０ｍｇのＳＭＡ摂取：朝食の直後に１錠、夕食の直後に１錠、
－ ７．５ｍｇのＳＭＡ摂取：朝食の直後に２錠、夕食の直後に１錠、
－ １０．０ｍｇのＳＭＡ摂取：朝食の直後に２錠、夕食の直後に２錠。

【0175】

他の薬剤を伴う投与
一部の実施形態において、医薬組成物は１つまたは複数の他の薬剤と組み合わせて使用することができる。

【0176】

例えば、本明細書に記載されている医薬組成物は、鎮痛薬、麻酔薬、抗真菌薬、抗生物質、抗ヒスタミン薬、降圧薬、抗マラリア薬、抗菌薬、防腐薬、抗関節炎薬、抗トロンビン剤、抗結核薬、鎮咳薬、抗ウイルス薬、心臓作用薬（cardioactive drug）、去痰薬、免疫抑制剤、鎮静薬、交感神経様作用物質、毒素（例えば、コレラ毒素）、精神安定剤、および尿路感染症薬などの他の治療剤と共に投与することができる。

【0177】

各治療剤の順次または実質的に同時の投与は、経口経路、静脈内経路、筋肉内経路、粘膜組織を介した直接吸収、およびこれらの組合せが含まれるが、これらに限定されない任意の適切な経路によって遂行される。治療剤は、同じ経路または異なる経路により投与することができる。例えば、選択された組合せの第１の治療剤を静脈内注射により投与することができ、例えばシスプラチンまたは三酸化ヒ素であり、一方、他の治療剤、例えばメタ亜ヒ酸ナトリウムを経口投与することができる。あるいは、例えば両方の、またはすべての治療剤を静脈内注射または注入により投与することができる。治療剤が投与される順番は、重要ではない。

【0178】

キット
本発明は、本発明の治療レジメンを実行するキットも提供する。そのようなキットは、１つまたは複数の容器に、治療有効量の薬学的に許容される形態のＳＭＡまたはＫＭＡを含む。本発明のキットのバイアル中のＳＭＡまたはＫＭＡは、例えば、滅菌食塩水、デキストロース溶液もしくは緩衝溶液、または他の薬学的に許容される滅菌液と組み合わせた薬学的に許容される液剤の形態でありうる。あるいは、ＳＭＡまたはＫＭＡは凍結乾燥または乾燥されてもよく、この場合、キットは、容器に薬学的に許容される溶液（例えば、食塩水デキストロース溶液など）、好ましくは食塩水を任意選択でさらに含み、錯体を再構成して、注射目的の液剤を形成する。キットは、また、疼痛および／または炎症を治療するための別の治療剤を適切な量で含む。そのようの他の治療剤は、キットに含有されたＳＭＡまたはＫＭＡとの併用薬として製剤化されうる、あるいは別々に製剤化されうる。

【0179】

本発明は以下の非限定的な実施例を参照して下記にさらに記載される。

【実施例】

【0180】

[実施例１]
炎症促進性サイトカイン分泌の阻害

【0181】

材料および方法
下記に例示される医薬組成物の製造に使用されるすべての材料は、商業供給者から購入した。

【0182】

マクロファージ増殖培地
使用したマクロファージは初代ラット腹膜マクロファージであった。マクロファージを、熱不活性化ウシ胎児血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１００９９－１４１）を最終濃度の１０％、ペニシリン／ストレプトマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１５１４０－１２２）を最終濃度の１００Ｕ／ｍＬ／１００μｇ／ｍＬ、ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号３５０５０－０６１）を最終濃度の２ｍＭ、およびＭＥＭ ＮＥＡＡ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１１１４０－０５０）をＭＥＭ培地（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１１０９５）に適合する最終濃度で補充した、高グルコースでピルビン酸塩のＤＭＥＭ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１１９９５）で増殖させた。

【0183】

ＴＨＰ－１細胞およびＴＨＰ－１マクロファージを、熱不活性化ウシ胎児血清（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号１００９９－１４１）を最終濃度の１０％、および２－メルカプトエタノールを最終濃度の０．０５ｍＭで補充したＡＴＣＣ改変ＲＰＭＩ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎカタログ番号Ａ１０４９１－０１）で増殖させた。

【0184】

すべての細胞を加湿雰囲気下、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。

【0185】

細胞傷害性（Cell cytotoxicity）および生存率（ＭＴＴベース）アッセイ
ビヒクル対照と比べた、一連のＮａＡｓＯ_２濃度でインキュベートした培養初代マクロファージの細胞傷害性および生存率を、ＣｙｔｏＴｏｘ－ＧＬＯキット（細胞傷害性）およびＭＴＴアッセイ（生存率）を使用して、処理の２４時間後に決定した。

【0186】

１日目には、増殖培地中の１×１０^６個細胞／ｍＬの１２５μＬを、１０％ポリ－Ｌ－リジンがコーティングされた９６ウエルプレートの各ウエルに添加することにより、マクロファージ細胞を９６ウエルプレートに播種した。非接着細胞を３時間後に除去した。

【0187】

２日目には、増殖培地を穏やかに１００μＬ／ウエルの新たな無血清ＤＭＥＭ培地に３時間交換した。無血清培地を、一連のＮａＡｓＯ_２濃度（３０、１０、７、５、３、１、０．３、０．１および０μＭ）、および１００ｎｇ／ｍｌのＬＰＳまたは対照を含有する６３μＬの培地に交換し、２４時間インキュベートした。

【0188】

３日目には、
１．ＣｙｔｏＴｏｘ－ＧＬＯキットを製造者の取扱説明書に従って使用して、細胞傷害性を決定した。
２．ＭＴＴでＤＭＥＭを最終濃度の５ｍｇ／ｍＬに再構成した。
３．処理の２４時間後、６．３μＬの再構成ＭＴＴ溶液を各ウエルに添加し、ＣＯ_２インキュベーターで４時間インキュベートした。
４．７０μＬのＭＴＴ可溶化溶液を各ウエルに添加し、１０回反復ピペット操作する（re-pipetting）ことによって、生じたホルマザン結晶を溶解した。
５．各ウエルの吸光度を、分光光度計を使用して５７０ｎｍの波長で測定し、バックグラウンド吸光度を６９０ｎｍで差し引いた。

【0189】

サイトカイン分泌
ラットマクロファージの初代培養からのサイトカインの分泌に対するＮａＡｓＯ_２の効果を調査するため、様々な濃度のＮａＡｓＯ_２およびＬＰＳと共に２４時間インキュベートしたマクロファージウエルの上清を、ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｖ－ＰＬＥＸキットを使用して、炎症促進性サイトカイン濃度について分析した。

【0190】

１日目
増殖培地中の１×１０^６個細胞／ｍＬの３２３μＬを、１０％ポリ－Ｌ－リジンがコーティングされた２４ウエルプレートの各ウエルに添加することにより、マクロファージ細胞を２４ウエルプレートに播種した。非接着細胞を３時間後に除去し、培地を５００μＬ／ウエルの新たなＤＭＥＭ培地に交換した。

【0191】

２日目
１．増殖培地を穏やかに５００μＬ／ウエルの新たな無血清ＤＭＥＭ培地に３時間交換した。
２．無血清培地を、一連のＮａＡｓＯ_２濃度（３０、１０、７、５、３、１、０．３、０．１および０μＭ）、および１００ｎｇ／ｍｌのＬＰＳ（炎症状態を誘導するため）または対照を含有する２５０μＬの増殖培地に交換し、２４時間インキュベートした。

【0192】

３日目
１．処理の２４時間後、細胞上清を収集し、－８０℃で保存した。
２．ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｖ－ＰＬＥＸキットを製造者の取扱説明書に従って使用して、炎症促進性サイトカインを測定した。

【0193】

ＴＨＰ－１細胞の分化
１日目
１μＬ／ｍＬのホルボール１２－ミリステート１３－アセテート（ＰＭＡ）を含有するＴＨＰ－１増殖培地中の２×１０^５個細胞／ｍＬの２５０μＬを、１０％ポリ－Ｌ－リジンがコーティングされた９６ウエルプレートの各ウエルに添加することにより、ＴＨＰ－１細胞を９６ウエルプレートに播種した。

【0194】

２日目
増殖培地を穏やかに１００μＬ／ウエルの新たな無血清ＤＭＥＭ培地に２時間交換した。無血清培地を、一連のＮａＡｓＯ_２濃度（３０、１０、７、５、３、１、０．３、０．１および０μＭ）、および１００ｎｇ／ｍｌのＬＰＳ（炎症状態を誘導するため）または対照を含有する６３μＬの増殖培地に交換し、２４時間インキュベートした。

【0195】

３日目
処理の２４時間後、ＭＴＴアッセイを上記に詳述されたように実施した。

【0196】

データ解析
データを平均（±ＳＥＭ）で表し、初代マクロファージサイトカイン分泌対照との差を、事後チューキー多重比較検定を用いるＡＮＯＶＡを使用して決定した。Ｐｒｉｓｍバージョン６．０５を、すべての数値データ（data figure）、統計分析およびＩＣ_５０計算に使用した。統計的有意の基準は、ｐ≦０．０５であった。

【0197】

結果
初代腹膜マクロファージをラットから採取し、ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）および一連の濃度（０．１～３０μＭ）のメタ亜ヒ酸ナトリウムで２４時間培養し、続いてＣｙｔｏＴｏｘ－ＧＬＯおよびＭＴＴアッセイキットを使用して、細胞傷害性および細胞生存率を査定した（図１Ａ）。細胞に対して細胞傷害性の洗剤であるジギトニンは、ＣｙｔｏＴｏｘ－ＧＬＯキットにおいて、ビヒクルと比較して高い毒性を引き起こした（図１Ｂ）。加えて、別の洗剤であるＴｒｉｔｏｎ－Ｘは、ＭＴＴアッセイにおいて、ヒクルと比較して低い細胞生存率を引き起こした（図１Ｃ）。メタ亜ヒ酸ナトリウムと共にインキュベートした場合、細胞傷害性に濃度依存性の増加があり、対応して生存率に濃度依存性減少があった。ＥＣ_５０およびＩＣ_５０値を誘導するために使用された細胞傷害性および細胞生存率は類似しているが相反関係を示し、メタ亜ヒ酸ナトリウムのインキュベーション中の生存率の減少は、細胞内機構の単なる不全ではなく、細胞死が原因である可能性を示している。

【0198】

ＩＣ_５０値が、それぞれ２．３、０．８および０．５μＭであったので、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の分泌に濃度依存性減少があった（図２Ａ、ＣおよびＥ）。重要なことに、細胞生存率のＩＣ_５０は５．７μＭと高く、メタ亜ヒ酸ナトリウムが、細胞生存率のＩＣ_５０より低い濃度で培養初代マクロファージからの目的のサイトカインの放出を阻害することを示している。これらの結果は、メタ亜ヒ酸ナトリウムが、細胞を殺滅させない濃度で、培養ラットマクロファージからサイトカインＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の分泌を阻害しうることを示唆している。重要なことに、セレコキシブ（１０μＭ）は３つすべての炎症促進性サイトカインの分泌を阻害することに成功した（図２Ｂ、ＤおよびＥ）。

【0199】

要約
細胞と３μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムとのインキュベーションが、有意な細胞死の非存在下で細胞からのＩＬ－１βおよびＩＬ－６放出の分泌の完全な阻害を誘発したように、炎症促進性サイトカインの分泌に濃度依存性の減少があった。

【0200】

細胞生存率を有意に低減しなかった濃度のメタ亜ヒ酸ナトリウムで、マクロファージからのＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の分泌に有意な阻害があった。

【0201】

結論として、本明細書のｉｎ ｖｉｔｒｏデータは、培養ラット初代マクロファージとメタ亜ヒ酸ナトリウムとの２４時間のインキュベーションは、炎症促進性サイトカインの分泌の濃度依存性阻害を生じることを示している。

【0202】

[実施例２]
この研究では、本発明者らは、メタ亜ヒ酸ナトリウムがネズミマクロファージＲａｗ２６４．７細胞においてリポ多糖（ＬＰＳ）誘導炎症反応を抑制するかを調査した。リポ多糖で活性化されたマクロファージは、多数の分子およびタンパク質、例えば、腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ＩＬ－１β、誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）、シクロオキシゲナーゼ－２（ＣＯＸ－２）およびフリーラジカルを、急性炎症に随伴して産生する。反応は、細胞内カスケードであるＮＦ－κＢ経路により誘導された。そのため、この経路の調節は炎症の制御において非常に重要である。

【0203】

細胞培養
ネズミマクロファージ細胞系ＲＡＷ２６４．７（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＡＴＣＣ；Ｍａｎａｓｓａｓ、ＶＡ、ＵＳＡ）を、１０％熱不活性化ＦＢＳおよび抗生物質抗真菌薬（antibioticsantimycotics）（１００Ｕ／ｍｌのペニシリンＧナトリウム、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン硫酸塩および０．２５ｍｇ／ｍｌのムホテリシン）を補充したＤＭＥＭで増殖させた。ｐＮＦ－κＢ－ＳＥＡＰ－ＮＰＴプラスミドで安定してトランスフェクトされたＲＡＷ２６４．７細胞（ＳＥＡＰ－ＲＡＷ細胞）は、Ｄｒ．Ｙｅｏｎｇ Ｓｈｉｋ Ｋｉｍ（Ｓｅｏｕｌ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、Ｋｏｒｅａ）の好意により提供された。ＳＥＡＰ－ＲＡＷ細胞を、５００μｇ／ｍｌのＧ４１８を含有するＤＭＥＭで維持した。すべての細胞を、加湿雰囲気の５％ＣＯ_２下、３７℃でインキュベートした。

【0204】

一酸化窒素（ＮＯ）アッセイ
ＲＡＷ２６４．７マクロファージ細胞系をリポ多糖（ＬＰＳ、大腸菌（E.coli）の内毒素）と共にインキュベートし、続いて、ＣＯＸ－２およびｉＮＯＳにより誘導されたＮＯレベルを測定した。スルホローダミンＢアッセイまたは３－（４，５－ジメチルチアゾール－２－イル）－２，５－ジフェニルテトラゾリウムブロミド（ＭＴＴ）を使用して、細胞傷害性を決定した。

【0205】

ＰＧＥ２蓄積の測定
ＣＯＸ－２に対する試験物質の阻害活性を評価するため、ＲＡＷ２６４．７細胞を１μｇ／ｍｌのＬＰＳと共にインキュベートした。さらなる２０時間のインキュベーションの後、培地を取り出し、ＰＧＥ２酵素結合免疫吸着検定法（ＰＧＥ２－ＥＬＩＳＡ）により分析した。これらのアッセイでは、活性を、メタ亜ヒ酸ナトリウムの非存在および存在下におけるＰＧＥ２蓄積間の差と定義した。

【0206】

ＣＯＸ－２酵素活性アッセイ
過剰発現ＣＯＸ－２酵素阻害活性の測定では、ＲＡＷ２６４．７細胞をＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）で２０時間処理し、細胞をメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間処理した。続いて、細胞をＣＯＸ－２基質（アラキドン酸、１０μＭ）で処理し、ＰＧＥ２－ＥＬＩＳＡを使用して、ＰＧＥ２のレベルを決定した。

【0207】

ＲＴ－ＰＣＲ分析
ＲＡＷ２６４．７細胞をメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理した後に全ＲＮＡを抽出するため、細胞をＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）で５時間処理した。ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２、ｍＲＮＡおよびサイトカインの遺伝子発現用のメタ亜ヒ酸ナトリウムを、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）により決定した。

【0208】

ウエスタンブロット分析
ＲＡＷ２６４．７細胞をメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理し、１６時間培養し、続いてＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）で処理した。破壊された細胞から得たタンパク質の濃度を、ＢＳＡアッセイを使用して決定した。ｉＮＯＳ、ＣＯＸ－２、サイトカインおよびＮＦ－κＢのタンパク質発現におけるメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果について、Ａｋｔをウエスタンブロット分析により決定した。

【0209】

レポーター遺伝子アッセイ
ＳＥＡＰ－ＲＡＷ細胞をメタ亜ヒ酸ナトリウムで２時間前処理した後、細胞をＬＰＳ（１μｇ／ｍｌ）と共に１８時間インキュベートした。収集した上清を６５℃で５分間加熱し、ＳＥＡＰアッセイ緩衝剤（２Ｍのジエタノールアミン、１ｍＭのＭｇＣｌ_２、５００μＭの４－メチルウンベリフェリルホスフェート（ＭＵＰ））を暗黒下、３７℃で１時間加えた。ＳＥＡＰ／ＭＵＰの産物からの蛍光を、３６０ｎｍの励起および４４９ｎｍの発光で９６ウエルマイクロプレート蛍光計を使用して測定し、タンパク質濃度で正規化した。データを、ＬＰＳを用いないビヒクル処理対照細胞に対するメタ亜ヒ酸ナトリウム処理細胞の割合として表す。

【0210】

結果
一酸化窒素（ＮＯ）産生に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
一酸化窒素（ＮＯ）は、炎症の病理発生における周知の炎症促進性メディエーターである。大部分のＮＯは、誘導型一酸化窒素合成酵素（ｉＮＯＳ）により合成される。ｉＮＯＳは、炎症反応およびがん形成に密接に関連する酵素である。ｉＮＯＳによるＮＯ産生は、ＣＯＸ－２の活性および発現に影響を及ぼすことが記載されている。メタ亜ヒ酸ナトリウムがＮＯ阻害活性を有するかを調査するため、ＮＯ産生を、ＬＰＳ誘導ＲＡＷ２６４．７マススマクロファージ細胞において０．６２５～１０μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムの存在下で決定した。

【0211】

ＮＯ産生は、有意であり、メタ亜ヒ酸ナトリウム（１０、５、２．５、１．２５および０．６２５μＭの濃度）により、それぞれ１００．２、７７．２、４２．２、２１．５および１２．５％濃度依存的に減弱した。メタ亜ヒ酸ナトリウムのＮＯ産生阻害のＩＣ５０値は、約２．８７μＭであった（図３Ａ）。

【0212】

ＰＧＥ２産生におけるメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
ｉＮＯＳはマクロファージにおいて高度に発現され、一部の炎症性および自己免疫性疾患において臓器破壊をもたらす。ＣＯＸ－２も炎症促進性酵素であり、アラキドン酸をプロスタグランジンに変換することによって、プロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）を産生する。ＰＧＥ２は、炎症反応においてＣＯＸ－２により触媒されるアラキドン酸代謝産物により産生される別の重要なメディエーターでもある。基礎的条件下では、ＮＯおよびプロスタグランジンを含むｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２の産物は、細胞機能およびホメオスタシスの調節に関与する。

【0213】

メタ亜ヒ酸ナトリウムがＣＯＸ－２によるＰＧＥ２の産生を調節できるかを調査するため、ＰＧＥ２産生を、ＲＡＷ２６４．７細胞においてメタ亜ヒ酸ナトリウム（２．５、５、７．５および１０μＭ）で処理した後に測定した。メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ＰＧＥ２産生を用量依存的に阻害した。メタ亜ヒ酸ナトリウムの最大用量（１０μＭ）では、ＰＧＥ２産生は、２０％阻害された（図４）。

【0214】

タンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの査定
ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２のタンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
ｉＮＯＳ誘導ＣＯＸ－２産生に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの阻害効果を評価するため、ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２のタンパク質レベルをウエスタンブロット分析により分析した。Ｒａｗ２６４．７細胞を２．５、５、７．５または１０μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理し、１μｇ／ｍｌのＬＰＳで１６時間刺激した。図５に示されているように、ｉＮＯＳ発現は、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより濃度依存的に有意に阻害された。ＣＯＸ－２発現は、メタ亜ヒ酸ナトリウムによりわずかに阻害された。

【0215】

ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βのタンパク質発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
炎症性サイトカインである腫瘍壊死因子－α（ＴＮＦ－α）は、炎症反応における中心的なメディエーターであると考慮される。また、ＬＰＳに反応して、ＩＬ－１βおよびＰＧＥ２を含む様々な炎症促進性メディエーターを分泌することによって、炎症反応を媒介する。ＩＬ－１βは、広範囲の機能が注目に値する炎症促進性サイトカインである。ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βのタンパク質レベルに対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を、ウエスタンブロット分析により分析した。Ｒａｗ２６４．７細胞を２．５、５、７．５または１０μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理し、１μｇ／ｍｌのＬＰＳで８時間刺激した。ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１β発現は、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより濃度依存的に有意に阻害された（図６）。

【0216】

遺伝子発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの査定
ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２のｍＲＮＡ発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２のｍＲＮＡ発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果をＲＴ－ＰＣＲで研究した。Ｒａｗ２６４．７細胞を２．５、５、７．５または１０μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理し、１μｇ／ｍｌのＬＰＳで８時間刺激した。次いで、得られた全ＲＮＡの１μｇをＲＴ－ＰＣＲに使用した。

【0217】

ｉＮＯＳ発現は、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより濃度依存的に有意に阻害された（図７および図８）。ＣＯＸ－２発現は、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより影響を受けなかった（図７）。

【0218】

このことは、メタ亜ヒ酸ナトリウムがＣＯＸ－２ではなくｉＮＯＳに阻害効果を示したことによって確証され、メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ｉＮＯＳ発現の調節を介して炎症反応を強力に阻害することを示唆している（図６）。ｉＮＯＳおよびＣＯＸ－２遺伝子発現をウエスタンブロット分析により分析した。ｉＮＯＳのｍＲＮＡレベルをリアルタイムＰＣＲにより測定し、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより濃度依存的に有意に阻害された（図８）。

【0219】

ＴＮＦ－αおよびＩＬ－１βのｍＲＮＡ発現に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
炎症性サイトカインであるＴＮＦ－αは、炎症反応における中心的なメディエーターであると考慮される。また、ＬＰＳに反応して、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＰＧＥ２を含む様々な炎症促進性メディエーターを分泌することによって、炎症反応を媒介する。炎症促進性サイトカインのうち、ＩＬ－１βまたはＩＦＮ－βは、宿主組織に損傷を引き起こす最高の潜在性を有するものの１つであり、事実、様々な機構が、炎症反応によるその転写およびプロセシングを注意深く制御することによって、細胞内の活性を拘束することに専念している。よって、ＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＦＮ－βのｍＲＮＡレベルに対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果を、ＲＴ－ＰＣＲ分析により分析した。

【0220】

Ｒａｗ２６４．７細胞を２．５、５、７．５または１０μＭのメタ亜ヒ酸ナトリウムで３０分間前処理し、１μｇ／ｍｌのＬＰＳで５時間刺激した。次いで、得られた全ＲＮＡの１μｇをＲＴＰＣＲに使用した。ＴＮＦ－αのｍＲＮＡレベルは、メタ亜ヒ酸ナトリウムにより濃度依存的に有意に減少したが、メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ＲＡＷ２６４．７マクロファージにおけるＩＬ－１βおよびＩＦＮ－βのｍＲＮＡの発現に対して影響を有さなかった（図９）。

【0221】

核因子カッパＢ（ＮＦ－κＢ）の転写活性に対するメタ亜ヒ酸ナトリウムの効果
ＮＦ－κＢ転写因子は、ｉＮＯＳを含む炎症促進性メディエーターのＬＰＳ誘導発現に有意な役割を果たすことが示されている。ｉＮＯＳをコードする遺伝子のプロモーター領域は、ＮＦ－κＢ結合モチーフを含有し、ｉＮＯＳプロモーターの上流のＮＦ－κＢ部位へのＮＦ－κＢの結合が、ｉＮＯＳ遺伝子のＬＰＳ誘導上方制御に重要な役割を果たすことを示している。メタ亜ヒ酸ナトリウムにより媒介されるＮＦ－κＢ転写の阻害の分子構造を調査するため、ＮＦ－κＢ転写活性を、レポーター遺伝子アッセイ系を使用して調査した。レポーターとしてＳＥＡＰに融合されたκＢ配列の４つのコピーを含有するｐＮＦ－κＢ分泌アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）－ＮＰＴプラスミドを用いて、ＲＡＷ２６４．７細胞を安定してトランスフェクトした。宿主細胞におけるゲネチシン抵抗性のためにネオマイシンホスホトランスフェラーゼ（ＮＰＴ）遺伝子を含有するｐＮＦ－κＢ－ＳＥＡＰ－ＮＰＴプラスミドを構築し、ＲＡＷ２６４．７マクロファージにトランスフェクトした。培養培地のアリコートを加熱し、次いで４－メチルウンベリフェリルホスフェート（ＭＵＰ）と反応させた。ＳＥＡＰ活性を、相対蛍光単位（ＲＦＵ）として測定した。トランスフェクト細胞の１８時間のＬＰＳ処理は、ＳＥＡＰ発現を、ＬＰＳを用いなかった対照細胞と比較して、基礎レベルでおよそ３倍増加した。メタ亜ヒ酸ナトリウムによる細胞の処理は、ＬＰＳ誘導ＳＥＡＰ発現を濃度依存的に有意に阻害した（図１０）。

【0222】

メタ亜ヒ酸ナトリウムがＮＦ－κＢシグナル伝達経路を調節するかを調査するため、ＲＡＷ２６４．７マクロファージを、３０分間のメタ亜ヒ酸ナトリウム（２．５、５、７．５または１０μＭ）の前処理において、ＬＰＳ（１μｇ／ｍＬ）で１５分間処理し、ｐ６５、ｐ５０、IκＢおよびＩＫＫのレベルもウエスタンブロット分析により分析した。

【0223】

メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ＮＦ－κＢタンパク質レベルを濃度依存的に著しく減少した（図１１）。メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ＩκＢ分解を濃度依存的に著しく阻害した（図１２）。

【0224】

[実施例３]
経口組成物の調製
経口組成物

【0225】

メタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）は、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ Ｆｉｎｅ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓから得た。供給されたとき、ＳＭＡ原薬は、非常に高い純度（＞９８％のＡｓ（ＩＩＩ））および最小レベルのＡｓ（Ｖ）を示した。下記の表１は、供給されたＳＭＡ原薬の特性を提示する。

【0226】

【表1】

【0227】

下記の表２に列挙されている材料を使用して、２．５ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）腸溶性コーティング錠剤を調製した。可能であれば、高密度型の主要賦形剤を選択して、ＳＭＡ（およそ２．１～２．３ｇ／ｃｍ^－３の推定真密度を有する無機物質であり、大部分の賦形剤と比較して非常に密度が高い）の密度と釣り合うようにした。

【0228】

【表2】

【0229】

下記の表３に列挙されている機器を、ＳＭＡ腸溶性コーティング組成物の調製および分析に使用した。

【0230】

【表3】

【0231】

[製造実施例１]
医薬活性成分（ＡＰＩ）としてメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）を含む製剤化実施例１．１～１．４の腸溶性コーティング錠剤を、下記に記載される手順に従って調製した。

【0232】

一般に、下記に詳細に記載されるように、メタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）および賦形剤を一緒にブレンドして（水または溶媒を伴わない３段階ブレンド過程によって）、粉末ブレンドを形成した。次いで粉末ブレンドを圧縮して、錠剤の固体コアを形成した。次いで錠剤の固体コアを腸溶性コーティングでコーティングした。

【0233】

ブレンド
下記に記載されるブレンド過程を成分のブレンドに使用した。

【0234】

組成物のＡＰＩおよび他の成分を分配し、計量した。ＡＰＩの濃度は非常に低かったので、３段階のブレンド過程（「ＡＰＩプレミックス」および「メインミックス」を利用する）を、ブレンド均一性の改善のために利用した。

【0235】

ＡＰＩを２００μｍの篩を通してスクリーニングした（ハンドスクリーニング）。篩分け時間は５～８分の間であった。

【0236】

ＡＰＩを含有するプレミックス（「ＡＰＩプレミックス」）は、スクリーニングしたＡＰＩを、数グラム（５００ｇバッチサイズでは２０ｇ、および７００ｇバッチサイズでは３０ｇ）の充填剤と、適切な容器（５００ｇバッチサイズでは１００ｍｌの容器、および７００ｇのバッチサイズでは１５０ｍｌ）において、Ｔｕｒｂｌａブレンダーにより４９ｒｐｍで１０分間ブレンドすることによって調製した。

【0237】

流動促進剤（コロイド状二酸化ケイ素）を５００μｍの篩を通してスクリーニングして、脱凝集した。次いで、滑沢剤（フマル酸ステアリルナトリウム）を除いて、篩分けされた流動促進剤を含む分配した他のすべての成分を２ＬのガラスＴｕｒｂｕｌａジャーに加え、ＡＰＩプレミックスを粉末塊の真ん中に挟み込んだ。

【0238】

得られた混合物（「メインミックス」）を、Ｔｕｒｂｕｌａブレンダーを使用して４９ｒｐｍで約１０～約２０分間ブレンドして、ブレンド粉末（「メインブレンド」）を形成した。

【0239】

滑沢剤（フマル酸ステアリルナトリウム）を、５００μｍの篩を使用して少量のメインブレンドと同時スクリーニングし、次いで同時スクリーニングした混合物をメインブレンドに加えた。この潤滑ステップは、過剰潤滑による複雑な問題（例えば、錠剤硬度の低減または溶解の問題）の可能性を避けるために別個に行った。

【0240】

得られた混合物をＴｕｒｂｕｌａブレンダー中で４９ｒｐｍで２分間混合し、それによって粉末ブレンドを形成した。粉末ブレンドを流れ特性について特徴決定した。

【0241】

圧縮
粉末ブレンドを、６．５ｍｍの垂直凹面（ＮＣＣＰ）成形型を使用して、Ｍａｎｅｓｔｙ Ｆ３シングルパンチ錠剤プレスにより標的錠剤重量の１５０ｍｇに圧縮した。Ｍａｎｅｓｔｙ Ｆ３は圧縮力のために単に汎用ユニット（ＡＵ）のみを有し、加えた力を直接測定することが不可能である。標的硬度レベルは９０Ｎを超えていた。

【0242】

腸溶性コーティング
２０％ｗ／ｗの固形分の腸溶性コーティング分散体は、Ａｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）を脱イオン水に分散することによって調製した。分散体は、パドル撹拌機を使用して、使用前に４５分間およびコーティング過程の全体を通して撹拌した。分散体は、使用する前に２５０μｍの篩を通してスクリーニングした。

【0243】

１５”コーティングパン（Ｔｈａｉ Ｃｏａｔｅｒ）を平衡にして、錠剤の固体コアを投入する前に、点温度を設定した。バッチサイズが小さいので、「増量不活性物（bulking inerts）」をＡＰＩ固体コアに加えて、コーティングパンの装填要件を満たした。錠剤の固体コアを、コーティングする前に、乾燥パンにおいて１０分間平衡にした。同じ温度および空気流を、加熱、コーティングおよび乾燥段階に使用した。コーティングした錠剤をコーティング後にパンで１０分間乾燥した。試料を、８、１０および１２％ｗ／ｗの重量増加の後に収集した。

【0244】

溶解試験
溶解試験は、５００ｍＬの媒質およびＵＳＰ Ｍｅｔｈｏｄ ２（パドル）を使用し、最初にパドル速度の１００ｒｐｍで実施した。６個の腸溶性コーティング錠剤の単一セット（ｎ＝６）を検査した。溶解媒質の試料を酸の中に２時間入れた後に引き出し、メタ亜ヒ酸ナトリウムのレベルを決定して、胃液への抵抗性を評価した。媒質をｐＨ６．８のリン酸緩衝液に取り換えて、試料を１５分の間隔で引き抜いて、溶解プロファイルを生成した。

【0245】

この方法は、腸溶性剤形の薬局方の方法（ＥＰ．２．９．３およびＵＳＰ＜７１１＞）に基づき、下記の表４に示される。

【0246】

【表4】

【0247】

製剤化
医薬活性成分（ＡＰＩ）としてメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）を含む固体医薬組成物（Ｐ６３）を、上記の製造実施例１に記載された方法を使用して調製した。

【0248】

組成物は７００ｇスケールで製造した。ブレンド均一性および含有物均一性試料を収集して、主要ブレンド時間の２０分後の均質性を評価した。

【0249】

下記の表５は、２．５３ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の組成を提示する。（下記の表５．１は、２．５０ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の可能な別の組成を提示する。）

【0250】

【表5】

【0251】

ブレンドステップの後、粉末ブレンドは、Ｃａｒｒ指数（２９．３％）で示されるように良好な流れ特性を実証した。圧縮前の粉末ブレンドは以下の特性を有した；
・ゆるみ密度（aerated density）：０．６４ｇ／ｃｍ^３
・固め密度（tapped density）：０．９１ｇ／ｃｍ^３
・Ｃａｒｒ指数：２９．３％
・Ｈａｕｓｎｅｒ比：１．３０

【0252】

粉末ブレンドは、非常に良好に圧縮され、重量のばらつき、および／または目に見える分離は、実行の全体にわたって観察されなかった。高い錠剤硬度（１０４．８Ｎ）および低い摩損度（０．０８％）が達成され、崩壊時間（３４秒）は、比較的素早かった。錠剤の固体コアの平均厚さは３．６３ｍｍであった。

【0253】

ブレンド均一性試料を２０分間のブレンドの後に取り出し、含有量均一性試料を、圧縮実行の開始時、中間、および終了時に収集した。ブレンド均一性の結果は優れた均質性を示し、相対標準偏差（ＲＳＤ）％値は１．３であった。圧縮実行の際（開始時、中間、および終了時）の錠剤の固体コアの含有量均一性は、良好な均質性を示し、最大許容値（ＡＶ値）の＜７．４を達成した（ＡＶ値の＜１５が許容される）。

【0254】

圧縮ステップの後、錠剤の固体コアをＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）腸溶性コーティングポリマー系でコーティングし、製造実施例１に記載されたように調製した。コーティングパラメーターを下記の表６に示す。

【0255】

【表6】

【0256】

腸溶性コーティング錠剤は許容される溶解プロファイルを示した（５００ｍｌの媒質、パドル速度の１００ｒｐｍ）。１２０分後、組成物は酸性媒質中（ｐＨ１．０）において無傷であり、０％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１３５分後、９１％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１５０分後、９８％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１６５分後、１００％のＡＰＩを放出した。

【0257】

腸溶性コーティング錠剤は、十分な胃液抵抗性を実証し、腸溶性剤形の４５分間で７５％以上の放出という暫定提案仕様（proposed preliminary specification）に合致した。

【0258】

下記の表５．１は、２．５０ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の可能な別の組成を提示する。表５．１に記載される構成成分を有する固体コアは、表５に記載された構成成分を有する固体コアについて上記に記載された方法と類似した方法で調製することができる。

【0259】

【表7】

【0260】

[製剤化実施例１．２]
医薬活性成分（ＡＰＩ）としてメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）を含む固体医薬組成物（Ｐ２３）を、上記の製造実施例１に記載された方法を使用して調製した。

【0261】

組成物は、５００ｇスケールで製造した。ブレンド均一性試料をメインブレンド時間の１０分、１５分、および２０分後に収集した。ブレンドを圧縮して、錠剤の固体コアを形成し、次いで錠剤の固体コアをコーティングした。

【0262】

下記の表７は、２．５０ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の組成を提示する。

【0263】

【表8】

【0264】

ブレンドステップの後、粉末ブレンドは、Ｃａｒｒ指数（２６．３７％）で示されるように良好な流れ特性を実証した。圧縮前の粉末ブレンドは以下の特性を有した：
・ゆるみ密度：０．６７ｇ／ｃｍ^３
・固め密度：０．９１ｇ／ｃｍ^３
・Ｃａｒｒ指数：２６．３７％
・Ｈａｕｓｎｅｒ比：１．３６
・安息角：２４．３２°

【0265】

ブレンド均一性試料をメインブレンド時間の１０分、１５分、および２０分間ブレンドした後に収集した。組成物は、２０分のブレンド時間で良好な均質性を示した。

【0266】

圧縮は、６．５ｍｍＮＣＣＰツールを使用してＭａｎｅｓｔｙ Ｆ３シングルパンチ機で実施した。固体コアの平均硬度は９４．３Ｎであり、平均厚さは３．６２ｍｍであり、摩損度は０．３３％であり、崩壊時間は３９秒であった。

【0267】

固体コアの重量は、圧縮を実行した全体を通して一定しており、許容される固体コアが生成された。目に見える分離は観察されなかった。試料（１０個の固体コアを２通り）を圧縮実行の開始時、中間、および終了時に収集し、含有量均一性の試験に移した。

【0268】

圧縮ステップの後、錠剤の固体コアをＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）腸溶性コーティングポリマー系でコーティングし、製造実施例１に記載されたように調製し、試料を８、１０、および１２％ｗ／ｗの重量増加後に収集した。コーティングパラメーターを下記の表８に示す。

【0269】

【表9】

【0270】

８％、１０％および１２％ｗ／ｗの重量増加を有する腸溶性コーティング錠剤に溶解試験（５００ｍｌの溶解媒質、パドル速度の７５ｒｐｍ）を行って、腸溶性コーティングの適切なレベルを特定した。溶解結果を下記の図９に表す。

【0271】

【表10】

【0272】

腸溶性コーティング錠剤は、１２０分後に酸性媒質中において無傷であった。腸溶性コーティング錠剤は、十分な胃液抵抗性を実証し、腸溶性剤形の４５分間で７５％以上の放出という暫定提案仕様に合致した。

【0273】

溶解結果に基づいて、１２％ｗ／ｗは最適のコーティング重量増加であることが見出された。

【0274】

[製剤化実施例１．３]
医薬活性成分（ＡＰＩ）としてメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）を含む固体医薬組成物（Ｐ３１）を、上記の製造実施例１に記載された方法を使用して調製した。

【0275】

組成物は、５００ｇスケールで製造した。ブレンド均一性試料をメインブレンド時間の１０分、１５分、および２０分後に収集した。ブレンドを圧縮して、錠剤の固体コアを形成し、次いで錠剤の固体コアをコーティングした。結合剤および崩壊剤として作用するので、Ｌ－ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ－ＨＰＣ、低置換ヒドロキシプロピルセルロースＬＨ－Ｂ１グレード）を使用した。Ｌ－ＨＰＣは水に不溶性なので、これによって硬質錠剤を得ることが予想された。

【0276】

下記の表１０は、２．５０ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の組成を提示する。

【0277】

【表11】

【0278】

ブレンドステップの後、粉末ブレンドは、Ｃａｒｒ指数（２３．６８％）で示されるように良好な流れ特性を実証した。圧縮前の粉末ブレンドは以下の特性を有した：
・ゆるみ密度：０．５８ｇ／ｃｍ^３
・固め密度：０．７６ｇ／ｃｍ^３
・Ｃａｒｒ指数：２３．６８％
・Ｈａｕｓｎｅｒ比：１．３１
・安息角：２７．９６°

【0279】

ブレンド均一性試料をメインブレンド時間の１０分、１５分、および２０分でブレンドした後に収集した。組成物は、２０分のブレンド時間で良好な均質性を示した。

【0280】

圧縮は、６．５ｍｍＮＣＣＰツールを使用してＭａｎｅｓｔｙ Ｆ３シングルパンチ機で実施した。固体コアの平均硬度は１０４．３Ｎであり、平均厚さは３．５２ｍｍであり、摩損度は０．２３％であり、崩壊時間は３０秒であった。

【0281】

固体コアの重量は、圧縮を実行した全体を通して一定しており、許容される固体コアが生成された。目に見える分離は観察されなかった。試料（１０個の固体コアを２連）を圧縮実行の開始時、中間、および終了時に収集し、含有量均一性の試験に移した。

【0282】

圧縮ステップの後、錠剤の固体コアをＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）腸溶性コーティングポリマー系でコーティングし、製造実施例１に記載されたように調製し、試料を８、１０、および１２％ｗ／ｗの重量増加後に収集した。コーティングパラメーターを下記の表１１に示す。

【0283】

【表12】

【0284】

８％、１０％および１２％ｗ／ｗの重量増加を有する腸溶性コーティング錠剤に溶解試験（５００ｍｌの溶解媒質、パドル速度の７５ｒｐｍ）を行って、腸溶性コーティングの適切なレベルを特定した。溶解結果を下記の図１２に表す。

【0285】

【表13】

【0286】

８％ｗ／ｗ重量増加腸溶性コーティング錠剤は、酸抵抗性試験に不合格であった。１０％ｗ／ｗ重量増加腸溶性コーティング錠剤および１２％ｗ／ｗ重量増加腸溶性コーティング錠剤は、十分な胃液抵抗性を実証し、腸溶性剤形の４５分間で７５％以上の放出という暫定提案仕様に合致した。

【0287】

溶解結果に基づいて、１２％ｗ／ｗは最適のコーティング重量増加であることが見出された。

【0288】

[製剤化実施例１．４]
医薬活性成分（ＡＰＩ）としてメタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）を含む固体医薬組成物（Ｐ６６）を、上記の製造実施例１に記載された方法を使用して調製した。

【0289】

組成物は７００ｇスケールで製造した。ブレンド均一性および含有物均一性試料を収集して、主要ブレンド時間の２０分後の均質性を評価した。

【0290】

下記の表１３は、２．５３ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む錠剤の固体コア（コーティングステップの前）の組成を提示する。

【0291】

【表14】

【0292】

ブレンドステップの後、粉末ブレンドは、Ｃａｒｒ指数（２５．７４％）で示されるように良好な流れ特性を実証した。圧縮前の粉末ブレンドは以下の特性を有した：
・ゆるみ密度：０．７５ｇ／ｃｍ^３
・固め密度：１．０１ｇ／ｃｍ^３
・Ｃａｒｒ指数：２５．７４％
・Ｈａｕｓｎｅｒ比：１．３５

【0293】

粉末ブレンドは、非常に良好に圧縮され、重量のばらつき、および／または目に見える分離は、実行の全体にわたって観察されなかった。高い固体コア硬度（８７．４Ｎ）および低い摩損度（０．１１％）が達成され、崩壊時間（２分５２秒）は、比較的素早いものであった。固体コアの平均厚さは３．６６ｍｍであった。

【0294】

ブレンド均一性試料を２０分間のブレンドの後に取り出し、含有量均一性試料を、圧縮実行の開始時、中間、および終了時に収集した。ブレンド均一性の結果は優れた均質性を示し、相対標準偏差（ＲＳＤ）％値は２．１であった。圧縮実行の際（開始時、中間、および終了時）の固体コアの含有量均一性は、良好な均質性を示し、最大許容値（ＡＶ値）の＜６．３を達成した（ＡＶ値の＜１５が許容される）。

【0295】

圧縮ステップの後、錠剤の固体コアをＡｃｒｙｌ－ＥＺＥ ＩＩ ｗｈｉｔｅ（４９３Ｚ１８００２２）腸溶性コーティングポリマー系でコーティングし、製造実施例１に記載されたように調製した。コーティングパラメーターを下記の表１４に示す。

【0296】

【表15】

【0297】

腸溶性コーティング錠剤は許容される溶解プロファイルを示した（５００ｍｌの媒質、パドル速度の１００ｒｐｍ）。１２０分後、組成物は酸性媒質中（ｐＨ１．０）において無傷であり、０％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１３５分後、２１％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１５０分後、８６％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１６５分後、９６％のＡＰＩを放出した。ｐＨ６．８で１９５分後、９８％のＡＰＩを放出した。

【0298】

腸溶性コーティング錠剤は、十分な胃液抵抗性を実証し、腸溶性剤形の４５分間で７５％以上の放出という暫定提案仕様に合致した。

【0299】

[製造実施例２]
下記の表１５は、医薬活性成分（ＡＰＩ）として２．５ｍｇのメタ亜ヒ酸ナトリウムを含む腸溶性コーティング錠剤の組成を提示する。腸溶性コーティング錠剤は下記に記載される方法を使用して調製した。

【0300】

【表16】

【0301】

一般に、下記に詳細に記載されるように、メタ亜ヒ酸ナトリウム（「ＳＭＡ」）および賦形剤を一緒にブレンドして（水または溶媒を伴わない２段階ブレンド過程によって）、粉末ブレンドを形成した。次いで粉末ブレンドを圧縮して、錠剤の固体コアを形成した。次いで錠剤の固体コアを腸溶性コーティングでコーティングした。

【0302】

ブレンド
下記に記載されるブレンド過程を成分のブレンドに使用した。

【0303】

組成物のＡＰＩおよび他の成分を分配し、計量した。ＡＰＩの濃度は非常に低かったので、２段階のブレンド過程（「ＡＰＩプレミックス」および「メインミックス」を利用する）を、ブレンド均一性の改善のために利用した。

【0304】

ＡＰＩを１０６μｍの篩を通してスクリーニングした（篩分け時間は約５～８分であった）。

【0305】

リン酸二カルシウム（calcium phosphate dibasic）の一部分を、篩分けしたＡＰＩに加え、得られた混合物を３０分間ブレンドして、「ＡＰＩプレミックス」をもたらした。

【0306】

次いでＡＰＩプレミックスを残りのリン酸二カルシウム（calcium phosphate dibasic）、ならびに他の賦形剤（ケイ化微晶質セルロース、デンプングリコール酸ナトリウム、コロイド状二酸化ケイ素、およびフマル酸ステアリルナトリウム）とブレンドして、「メインミックス」をもたらした。メインミックスを増圧器バーで４分間ブレンドして、粉末ブレンドをもたらした。

【0307】

圧縮
粉末ブレンドを、０．２５インチ成形型を使用してＫｅｙ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ錠剤機により標的錠剤重量の１５０ｍｇ±５％（１４２．５～１５７．５ｍｇの範囲）に圧縮した。固体コアを除塵した（de-dust）。

【0308】

最終固体コアは、有意な摩損率を示さず（０．００％）、硬度は１５６．９Ｎ（１６ｋｐ）であった。

【0309】

腸溶性コーティング
２５％ｗ／ｗの固形分の腸溶性コーティング分散体は、Ａｃｒｙｌ－ＥＺＥ ｇｒｅｅｎ粉末を脱イオン水に分散することによって調製した。分散体を約３０分間（均質になるまで）撹拌した。

【0310】

除塵した固体コアに分散体を約１０～１２％ｗ／ｗの重量増加でスプレーコーティング（３５０ｇ／分）した。パンの速度は約６～８ｒｐｍであった。コーティング錠剤をコーティング後に乾燥した。

【0311】

[実施例４]
ＢＡＬＢ／ｃマウスのＬＰＳ誘導ＡＲＤＳモデルにおけるＳＭＡの単回用量の阻害効果
この研究は、試験物質であるＳＭＡ、および陽性対照物質であるデキサメタゾンの経口投与後に、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のサイトカインのレベルを測定することによって、ハツカネズミ（Mus musculus）（ＢＡＬＢ／ｃ）へのＬＰＳの気管内投与により誘導された急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）をＡＲＤＳモデルにおいて制御する物質の能力を評価した。

【0312】

Ｇ１からＧ５の５つのマウス群があり、（Ｇ１）陰性対照、（Ｇ２）１．０３ｍｇ／ｋｇ用量のＳＭＡ、（Ｇ３）１．５４ｍｇ／ｋｇ用量のＳＭＡ、（Ｇ４）２．０５ｍｇ／ｋｇ用量のＳＭＡおよび（Ｇ５）３ｍｇ／ｋｇ用量の陽性対照物質のデキサメタゾンであった。各群に１０匹のマウスがいた。

【0313】

試験物質であるＳＭＡを、ＡＲＤＳを誘導する２時間前に１回経口投与し、陽性対照物質のデキサメタゾンを、ＡＲＤＳを誘導する１時間前に１回経口投与した。

【0314】

一般的な症状を、隔離順応期間終了の１日後に１回観察した。動物の体重を、取得前および試験開始時で２回測定した。試験の終了時まで、物質の投与が原因の異常は、すべての群において観察されなかった。

【0315】

群の割当では、体重をすべての動物で測定し、動物を各群に無作為に割り当て、すべての群において動物の体重に統計的有意性はなかった。

【0316】

生存分析は、生存が試験物質の投与により、統計的有意的性（Ｇ３：ｐ＜０．００５（ＬＰＳ治療の４８時間後）；Ｇ４：ｐ＜０．０００５（ＬＰＳ治療の４８時間後）；Ｇ５：ｐ＜０．０００１（ＬＰＳ治療の４８時間後））を伴って延長されたことを示した。

【0317】

ＴＮＦ－α分析は、測定値が、すべての時点で定量限界（ＬｏＱ）を上回ったこと、および標的発現が試験物質の投与により、ＬＰＳ投与前（０時間）および２４時間を除いて、統計的に有意（Ｇ４：ｐ＜０．００５（ＬＰＳ投与の１時間、２時間、６時間および１２時間後）；Ｇ５：ｐ＜０．０００５（ＬＰＳ投与の４時間後）、およびｐ＜０．０００１（ＬＰＳ投与の１時間、２時間、６時間および１２時間後））に抑制されたことを示した。

【0318】

ＩＬ－６分析は、測定値が、すべての時点でＬｏＱを上回ったこと、および標的発現が試験物質の投与により、ＬＰＳ投与前（０時間）を除いて、統計的に有意（Ｇ４：ｐ＜０．０５（ＬＰＳ投与の２時間および４時間後）、ならびにｐ＜０．００５（ＬＰＳ投与の６時間および１２時間後）；Ｇ５：ｐ＜０．０５（ＬＰＳ投与の１時間、２時間、４時間および２４時間後）、ｐ＜０．０００５（ＬＰＳ投与の６時間後）、およびｐ＜０．０００１（ＬＰＳ投与の１２時間後））に抑制されたことを見出した。

【0319】

ＩＬ－β分析は、ＩＬ－β測定値が４時間および６時間でＬｏＱを上回ったこと、ならびに標的発現が試験物質の投与により、ＬＰＳ投与前（０時間）、１時間、２時間、１２時間および２４時間を除いて、統計的に有意（Ｇ４：ｐ＜０．００５（ＬＰＳ投与の４時間および６時間後）；Ｇ５：ｐ＜０．０００５（ＬＰＳ投与の４時間および６時間後））に抑制されることが見出されたことを見出した。発現は、ＬＰＳ投与の１２時間後に統計的に有意である（Ｇ４：ｐ＜０．００５、Ｇ５：ｐ＜０．０００５）ことが見出されたが、測定値がＬｏＱを上回らなかったので除外した。

【0320】

ＩＦＮ－ガンマデータは、すべての測定時点でＬｏＱを超えることができなかったので、分析から除外した。

【0321】

ＧＭ－ＣＳＦ分析の結果として、ＬＰＳ投与の６時間後に測定が行われたＧ１群を除いてＬｏＱを超えなかったので、すべての測定値を分析から除外した。ＬＰＳ投与の４時間後の発現を統計的に有意である（Ｇ２：ｐ＜０．０５、Ｇ３：ｐ＜０．０５、Ｇ４：ｐ＜０．０５、Ｇ５：ｐ＜０．０５）と分析したが、測定値がＬｏＱを上回らなかったので除外した。

【0322】

この研究を実行して、ハツカネズミ（Mus musculus）（ＢＡＬＢ／ｃ）へのＬＰＳの反復気管内投与によって誘導されたＡＲＤＳモデルにおいて、ＬＰＳ刺激炎症促進性メディエーターに対する試験物質ＳＭＡの阻害能力を、試験物質ＳＭＡの投与により検査した。この研究では、ＬＰＳ刺激炎症促進性メディエーターに対する試験物質および陽性対照物質の効果を、試験物質または陽性対照物質が投与された群において評価した。ＡＲＤＳの主なメディエーターであることが公知のサイトカイン（ＴＮＦ－α、ＩＬ－６およびＩＬ－１β）のレベルは、ＢＡＬＦを使用して分析した場合、試験物質が投与された群および陽性対照物質が投与された群において有意に阻害されたことが見出された。

【0323】

試験物質ＳＭＡは、特定の測定時点でＬＰＳ刺激ＴＮＦ－αおよびＩＬ－６の産生を用量依存的に阻害することが確証され、ＡＲＤＳを予防する治療剤としてＳＭＡの有効性を証明している。

【0324】

ＩＦＮ－ガンマ、ＧＭ－ＣＳＦおよびＩＬ－１βの場合では、分析値をいくつかの測定時点のＬｏＱによって分析範囲から除外したが、試験物質ＳＭＡは、いくつかの測定時点でＩＬ－１βの産生を用量依存的に阻害することが見出された。

【0325】

結論として、ＳＭＡは、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６およびＩＬ－１βなどの炎症促進性メディエーターの産生に急速な阻害効果を発揮し、このように、急性呼吸症候群（acute respiratory syndrome）を緩和して生存を延長することに使用することができる。

【0326】

実施例４の図および表において、ＳＭＡは「ＰＡＸ－１」と称される。

【0327】

４．１ 実験の概要
ハツカネズミ（Mus musculus）（ＢＡＬＢ／ｃ）への気管内投与によるＬＰＳ誘導ＡＲＤＳモデルにおいて、試験物質であるＳＭＡおよび陽性対照であるデキサメタゾンの経口投与後の気管支肺胞洗浄液中のサイトカイン放出を測定して、急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）を制御する能力を評価することによって、この研究を行った。

【0328】

４．２．研究材料および手順
４．２．１ 試験物質

【0329】

【表17】

【0330】

４．２．２ 陽性対照物質

【0331】

【表18】

【0332】

４．２．３ ビヒクル

【0333】

【表19】

【0334】

４．２．４ 試験物質の調製および製剤の分析
試験物質（ＳＭＡ）は、成分を投与量濃度の１．０３、１．５４および２．０５ｍｇ／ｋｇに計量することによって調製した。
４．２．５ 急性呼吸促迫症候群（ＡＲＤＳ）モデルの生成
４．２．５．１ 誘導物質

【0335】

【表20】

【0336】

４．２．５．２ 調製および治療方法
調製（ＢＡＬＦ）
ＬＰＳ治療の当日、動物の体重に基づいて必要な体積を、計量された１００μｇのＬＰＳと添加された５００μＬの注射用水の比率で調製した。混合物を含有するチューブを、ボルテックスミキサーを使用して十分に混合し、治療まで氷中に保持した。

【0337】

【表21】

【0338】

調製（生存）
ＬＰＳ治療の当日、動物の体重に基づいて必要な体積を、計量された４８ｍｇのＬＰＳと添加された１２ｍＬの注射用水とで調製した。混合物を含有するチューブを、ボルテックスミキサーを使用して十分に混合し、投与まで氷中に保持した。

【0339】

【表22】

【0340】

４．２．６ 試験動物
種および品種 ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＴａｃ
製造会社 ＤａｅｈａｎＢｉｏｌｉｎｋ ｃｏ．，Ｌｔｄ．、Ｋｏｒｅａ
週齢 ８週齢
Ｄ．Ｏ．Ｂ． ２０２０年２月１０～１２日（ＢＡＬＦ）
Ｄ．Ｏ．Ｂ． ２０２０年４月１～３日（生存）
性別 雄（ＢＡＬＦ）、雌（生存）
購入場所 ＤａｅｈａｎＢｉｏｌｉｎｋ ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｋｏｒｅａ
参加時の性別、動物の数、週齢および体重範囲（ＢＡＬＦ）
雄、３６０匹のマウス、８週齢、１９．２ｇ～２５．０ｇ
参加時の性別、動物の数、および体重範囲（生存）
雌、６０匹のマウス、６週齢、１８．２ｇ～２１．３ｇ

【0341】

ＡＲＤＳの誘導
ＢＡＬＦ
隔離順応期間が終了した１日後にマウスの体重を測定した後、５０μＬのＬＰＳ混合物を、使い捨てピペットチップを使用して負荷し、１０μｇ／５０μＬ/頭の強制投与を、既に麻酔をかけられたマウスに、気管内を介して実施した。投与後に、麻酔から覚めている間にマウスを調べた。マウスをＬＰＳで２回治療し、治療は１日目および５日目に実施した。治療されたマウスを、一般的な症状について１日１回観察した。

【0342】

生存
隔離順応期間が完了した１日後に体重を測定した後、ＬＰＳ混合物を、使い捨てシリンジ（１ｍＬ、２６Ｇ）を使用して、２０ｍｇ／ｋｇの濃度で腹膜に注射した。治療されたマウスを、一般的な症状について毎時間観察し、死亡したマウスを調べた。

【0343】

群割当
ＢＡＬＦ
一次ＬＰＳ治療マウスのうち、二次投与（追加投与（boosting））の前に健康に問題のないものを、各群の体重に基づいて可能な限り均一にした、１群あたり７０匹のマウスを有する合計で５群に群分けした。

【0344】

生存
隔離順応期間の後、異常のない動物を、各群の体重に基づいて可能な限り均一にした、１群あたり１０匹のマウスを有する合計で５群に群分けした。

【0345】

４．２．７ 治療
治療経路
研究物質：経口（胃への強制投与）
ＬＰＳ（ＢＡＬＦ）：気管支への強制投与（気管内注射）
ＬＰＳ（生存）：腹腔内

【0346】

治療方法および頻度
治療は、使い捨てシリンジ（ＢＤ １ｍｌのシリンジ、カタログ：ＲＥＦ３０１３２１、ロット：９３２６９９０ ＢＤ、Ｕ．Ｓ．Ａ．）を使用して１回行い、各研究物質では、急性呼吸促迫症候群を誘導するのにかかる時間に基づいて治療した（ＬＰＳ治療）。
ＳＭＡ（試験物質） ２時間前
デキサメタゾン（陽性対照物質） １時間前

【0347】

４．２．８ 群の組成および治療用量
４．２．８．１ 群の組成（ＢＡＬＦ）

【0348】

【表23】

【0349】

４．２．８．２ 群の組成（生存）

【0350】

【表24】

【0351】

４．２．８．３ 治療用量の設定
試験物質（ＳＭＡ）の治療用量を、５、７．５および１０ｍｇと計画し、体重が６０ｋｇの健康な成人の臨床設定で適用する。ヒト等用量（ＨＥＤ）は、体表面積を使用するＦＤＡ指針^＊の計算方法により、試験動物（マウス）の体表面積を調整するために置換することによって計算し、１．０３、１．５４および２．０５ｍｇ／ｋｇと設定した。

【0352】

^＊産業界向けガイダンス（Guidance for industry）からの抽出であり、成人の健康な志願者における治療薬の初期臨床試験における最大安全開始用量（maximum safe starting dose）を推定する。

【0353】

【表25】

【0354】

４．２．９ 観察および体重測定
一般的な症状の観察
観察期間中に、外観、行動および糞便などの一般的な症状を毎日１回検査し、死亡した動物を調べた。

【0355】

死亡動物の処分
観察期間中に、合計で８例の死亡が発生し、これらを分析から除外した。

【0356】

体重測定
体重を細胞系移植の当日、１週間に１回および殺処分の当日に測定した。体重を治療の当日に測定する場合には、投与の前に測定した。

【0357】

４．２．１０ ＢＡＬＦサンプリングおよびサイトカイン分析
気管支肺胞洗浄液ＢＡＬＦのサンプリング
麻酔薬を使用して麻酔をかけた実体の気道を切開し、気管支を露出させ、使い捨て２２Ｇカテーテル（ＢＤ、カタログ：ＲＥＦ３８２４２３、Ｕ．Ｓ．Ａ．）を気管支に挿入した。挿入したカテーテルおよび気管支を固定するために縫合して（ＡＩＬＥＥ、カタログ：ＳＫ５２１、ロット：７９０８７７２Ｕ、ＫＯＲＥＡ）、注入液の漏れを防止し、肺の内部を、使い捨てシリンジ（ＢＤ１ｍｌシリンジ、ＢＤ、カタログ：ＲＥＦ３０１３２１、ロット：９３２６９９０、Ｕ．Ｓ．Ａ．）に装填された６００μＬのＰＢＳ（ｗｅｌｇｅｎｅ、カタログ：ＭＬ００８－０１、ロット：ＭＬ０８２００２０１、ＫＯＲＥＡ）により、カテーテルを介してゆっくりと２回洗浄し、洗浄液をマイクロチューブ（ＳＰＬ、カタログ：６００１５、ロット：ＬＡＯＣ１６Ａ６００１５、ＫＯＲＥＡ）に移した。移したＢＡＬＦ（肺洗浄液）を直ぐに遠心分離して（Ｈａｎｉｌ、ＨＩ＿ＳＭ－１３／Ａ２．０、ＫＯＲＥＡ）、細胞と上清とを分離し、上清を新たなチューブに移し、液体窒素を使用して新たに冷凍した後、サイトカイン分析まで超低温冷凍庫に保管した。

【0358】

【表26】

【0359】

４．２．１１ 生存分析
死亡した動物を、ＬＰＳ治療の２４時間後まで毎時間、および４８時間目に調べた。

【0360】

４．２．１２ データの統計分析
研究によって得られた気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）からのサイトカインの分析結果は、Ｐｒｉｓｍ（Ｇｒａｐｈｐａｄ、バージョン７）を使用して行った。

【0361】

等分散性検定（equal variance test）を、ダゴスティーノ・ピアソンオムニバス正規性検定（D’Agostino-pearson omnibus normality test）を使用して実施した。試料の分析結果として、体重データを除いて、試料品質を欠いていたので等分散性検定は却下された。体重分析では、等分散（equivariant）の場合、一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ、有意レベル：０．０５）を実施し、有意性が観察された場合、ダネットのｔ検定の多重検定を実施して、陰性対照群（Ｇ１）に対する各試験群間（Ｇ２～Ｇ５）の有意性（有意レベル：片側０．０５および０．０１）を確証した。試験が、いくつかの体重測定時点およびサイトカインの分析結果によって却下されると、クラスカル・ワリス検定（有意レベル：０．０５）を実施し、有意性が観察された場合、ダン（Ｄｕｎｎ）の検定の多重検定を実施して、陰性対照群（Ｇ１）に対する各試験群間（Ｇ２～Ｇ５）の有意性（有意レベル：片側０．０５および両側０．１）を確証した。

【0362】

生存分析の結果では、ログランク（マンテル－コックス）検定を実施して、陰性対照群（Ｇ１）に対する各試験群間（Ｇ２～Ｇ５）の有意性（有意レベル：片側０．０５および両側０．１）を確証した。

【0363】

４．３．結果および考察
４．３．１ サイトカイン産生および阻害の評価
４．３．１．１．サイトカイン産生の分析（図１３～１５、表１６～１９）
平均蛍光強度（ＭＦＩ）を測定するＭｕｌｔｉｐｌｅｘ（Ｌｉｍｉｎｅｘ、Ａｕｓｔｉｎ、ＴＸ、ＵＳＡ）を、ＴＮＦ－α、ＩＬ６、ＩＬ－１β、ＩＦＮ－ガンマおよびＧＭ－ＣＳＦの分析に使用した。各試料を群およびＢＡＬＦ取得時点により選別することによって、合計７セットを分析に使用し、１つのセット毎に各群から１つの試料を割り当てるように設計した。

【0364】

すべての分析は、四次多項式により計算された各セットの標準曲線式で、測定されたＭＦＩを置換することによって算定した。標準値のＲ^２値は、すべての分析において１であることが確証され、測定データは信頼性が高いことが確証された。

【0365】

定量限界のために分析から除外されたそれらの試料を、研究プロトコールの試薬を使用して希釈した。

【0366】

希釈比を適用してＬＰＳ刺激高レベルサイトカイン放出を分析すると、低い値を有するものは定量限界を下回って測定されること、および不正確な測定として含まれることが確証された。これらは希釈比による増幅のため分析から除外されたが、表および図は、すべてのデータを含めて作成された。

【0367】

ＴＮＦ－αの分析（図１３、表１６）
すべての群におけるＴＮＦ－αの発現を測定し、ＬＰＳ治療前（０時間）および２４時間の分析において、２ｐｇ／ｍＬおよび１１～１２ｐｇ／ｍＬであった。しかし、ＭＦＩの定量限界を下回っていたので、データ分析から除外した。分析は、ＬＰＳ治療の１時間、２時間、６時間および１２時間後に行った。

【0368】

【表27】

【0369】

陰性対照群（Ｇ１）におけるＴＮＦ－α産生の変化は、１，９９７ｐｇ／ｍＬから開始し、次いで１，４１７ｐｇ／ｍＬ、１，０３６ｐｇ／ｍＬ、７３５ｐｇ／ｍＬおよび２４９ｐｇ／ｍＬであり、ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察された。

【0370】

１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ２）におけるＴＮＦ－α産生の変化は、１，３０３ｐｇ／ｍＬ、１，００４ｐｇ／ｍＬ、７９４ｍｇ／ｍＬ、５０２ｐｇ／ｍＬおよび１７４ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、時間依存性のＴＮＦ－α産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0371】

１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ３）におけるＴＮＦ－α産生の変化は、１，０６２ｐｇ／ｍＬ、７０７ｐｇ／ｍＬ、６１１ｍｇ／ｍＬ、４０７ｐｇ／ｍＬおよび１２０ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、時間依存性のＴＮＦ－α産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0372】

２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ４）におけるＴＮＦ－α産生の変化は、７２９ｐｇ／ｍＬ、５５９ｐｇ／ｍＬ、５３９ｍｇ／ｍＬ、３０３ｐｇ／ｍＬおよび３８ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、そのＴＮＦ－α値は、統計的に有意（ｐ＜０．００５、１時間、２時間、６時間および１２時間）であった。

【0373】

３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質のデキサメタゾンで治療された群（Ｇ５）におけるＴＮＦ－α産生の変化は、５０８ｐｇ／ｍＬ、３９４ｐｇ／ｍＬ、３３８ｍｇ／ｍＬ、２０４ｐｇ／ｍＬおよび２３ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、ＴＮＦ－α値は、統計的に有意（ｐ＜０．０００５：４時間、ｐ＜０．０００１：１時間、２時間、６時間、１２時間）であった。

【0374】

すべての群（Ｇ１～Ｇ５）におけるＴＮＦ－α産生の変化を経時的にグラフのプロットし（データ示されず）、そこから、ＴＮＦ－αの全体的な低減を、各群のＡＵＣ（曲線下面積）値を計算することによって入手した（図１３）。ＴＮＦ－α産生における統計的に有意な減少は、陰性対照群（Ｇ１）と比較して、ＳＭＡまたはデキサメタゾンにより治療されたすべての群において明白（ｐ＜０．００５：Ｇ２～Ｇ５）であった。下記の表１９は、薬物治療群それぞれのＡＵＣ値の数値および統計分析を提供する。

【0375】

ＩＬ－６の分析（図１４、表１７）
ＬＰＳ治療前（０時間）の分析では、すべての群におけるＩＬ－６の発現を測定し、１２～１３ｐｇ／ｍＬであった。しかし、それらの値がＭＦＩの定量限界を下回ったので、これらはデータ分析から除外され、ＰＬＳ治療の１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間および２４時間後のデータを分析に使用した。

【0376】

【表28】

【0377】

陰性対照群（Ｇ１）におけるＩＬ－６産生の変化は、３，６６３ｐｇ／ｍＬから開始し、次いで１０，２３８ｐｇ／ｍＬ、１３，０１５ｐｇ／ｍＬ、１０，２９８ｐｇ／ｍＬ、８，１６９ｐｇ／ｍＬおよび３，５１３ｐｇ／ｍＬであり、ＬＰＳ誘導ＩＬ－６産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察された。

【0378】

１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ２）におけるＩＬ－６産生の変化は、２，９８４ｐｇ／ｍＬ、１０，１８８ｐｇ／ｍＬ、１２，８７１ｍｇ／ｍＬ、８，９５４ｐｇ／ｍＬ、７，２７６ｐｇ／ｍＬ、および３，４０２ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－６産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、その時間依存性のＩＬ－６産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0379】

１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ３）におけるＩＬ－６産生の変化は、３，１５２ｐｇ／ｍＬ、７，１０７ｐｇ／ｍＬ、９，８４２ｍｇ／ｍＬ、６．８１４ｐｇ／ｍＬ、５，０９４ｐｇ／ｍＬ、および３，６２３ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－６産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、その時間依存性のＩＬ－６産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0380】

２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ４）におけるＩＬ－６産生の変化は、２，１９３ｐｇ／ｍＬ、４，７０１ｐｇ／ｍＬ、８，２０９ｍｇ／ｍＬ、４，３４１ｐｇ／ｍＬ、２，６２９ｐｇ／ｍＬ、および２，０９６ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＴＮＦ－α産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、そのＩＬ－６値は、統計的に有意（ｐ＜０．０５：２時間および４時間、ｐ＜０．００５：６時間および１２時間）であった。

【0381】

３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質のデキサメタゾンで治療された群（Ｇ５）におけるＩＬ－６産生の変化は、２，１７２ｐｇ／ｍＬ、４，４１１ｐｇ／ｍＬ、７．７２７ｍｇ／ｍＬ、２．０６４ｐｇ／ｍＬ、１．２９４ｐｇ／ｍＬ、および１，８０４ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－６産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、そのＩＬ－６値は、統計的に有意（ｐ＜０．０５：１時間、２時間、４時間および２４時間、ｐ＜０．０００５：６時間、ｐ＜０．０００１：１２時間）であった。

【0382】

すべての群（Ｇ１～Ｇ５）におけるＩＬ－６産生の変化を経時的にグラフのプロットし（データ示されず）、そこから、ＩＬ－６の全体的な低減を、各群のＡＵＣ（曲線下面積）値を計算することによって入手した（図１４）。ＩＬ－６産生における統計的に有意な減少は、陰性対照群（Ｇ１）と比較して、ＳＭＡまたはデキサメタゾンにより治療されたいくつかの群において明白（ｐ＜０．００５：Ｇ３、Ｇ５）であった。下記の表１９は、薬物治療群それぞれのＡＵＣ値の数値および統計分析を提供する。

【0383】

ＩＬ－１βの分析（図１５、表１８）
ＬＰＳ治療前（０時間）、ならびにＬＰＳ治療の１時間、２時間および２４時間後の分析では、すべての群におけるＩＬ－１βの発現を測定し、２０３～２９５ｐｇ／ｍＬであった。しかし、それらの値がＭＦＩの定量限界を下回ったので、これらはデータ分析から除外され、ＰＬＳ治療の４時間、６時間および１２時間後のデータを分析に使用した。

【0384】

【表29】

【0385】

陰性対照群（Ｇ１）におけるＩＬ－１β産生の変化は、５１０ｐｇ／ｍＬから開始し、次いで６８６ｐｇ／ｍＬおよび４１４ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－１β産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察された。

【0386】

１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ２）におけるＩＬ－１β産生の変化は、４６８ｐｇ／ｍＬ、６００ｐｇ／ｍＬおよび４０５ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－１β産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、その時間依存性のＩＬ－１β産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0387】

１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ３）におけるＩＬ－１β産生の変化は、４１３ｐｇ／ｍＬ、５１７ｐｇ／ｍＬおよび３８２ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－１β産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、その時間依存性のＩＬ－１β産生を陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0388】

２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療された群（Ｇ４）におけるＩＬ－１β産生の変化は、３７４ｐｇ／ｍＬ、４８３ｐｇ／ｍＬおよび３３５ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－１β産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、そのＩＬ－１β値は、統計的に有意（ｐ＜０．００５：４時間、６時間および１２時間）であった。

【0389】

３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質のデキサメタゾンで治療された群（Ｇ５）におけるＩＬ－１β産生の変化は、３５０ｐｇ／ｍＬ、４５８ｐｇ／ｍＬおよび３１８ｐｇ／ｍＬであった。ＬＰＳ誘導ＩＬ－１β産生は増加し、次いで時間依存的に減少したことが観察されたが、いくつかの時点において、陰性対照群（Ｇ１）のものと比較した場合、そのＩＬ－１β値は、統計的に有意（ｐ＜０．０００５：４時間、６時間および１２時間）であった。

【0390】

すべての群（Ｇ１～Ｇ５）におけるＩＬ－１β産生の変化を経時的にグラフのプロットし（データ示されず）、そこから、ＩＬ－１βの全体的な低減を、各群のＡＵＣ（曲線下面積）値を計算することによって入手した（図１５）。ＩＬ－１β産生における統計的に有意な減少は、陰性対照群（Ｇ１）と比較して、ＳＭＡまたはデキサメタゾンにより治療されたいくつかの群において明白（ｐ＜０．００５：Ｇ３、Ｇ５）であった。下記の表１９は、薬物治療群それぞれのＡＵＣ値の数値および統計分析を提供する。

【0391】

【表30】

【0392】

ＩＦＮ－ガンマの分析
ＩＮＦ－ガンマの分析は、そのＭＦＩがすべての時点で定量限界を下回っていたので、データ分析から除外した。

【0393】

ＧＭ－ＣＳＦの分析
ＧＭ－ＣＳＦの分析は、そのＭＦＩがすべての時点で定量限界を下回っていたので、データ分析から除外した。

【0394】

４．３．１．２ 産生率の分析
標準化陰性対照群を１００％として、試験物質および陽性対照物質で治療した群のサイトカイン産生の阻害率を計算した。

【0395】

ＴＮＦ－αの分析
ＴＮＦ－αの産生率分析を、１時間、２時間、４時間、６時間および１２時間のデータを用いて実施し、０時間および２４時間のデータを除外した。

【0396】

ＴＮＦ－α産生の阻害率は、１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ２）において６５％、７１％、７７％、６８％および７０％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0397】

ＴＮＦ－α産生の阻害率は、１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ３）において５３％、５０％、５９％、５５％および４８％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0398】

ＴＮＦ－α産生の阻害率は、２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ４）において３７％、３９％、５２％、４１％および１５％であった。いくつかの時点において、ＳＭＡの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．００５：１時間、２時間、６時間および１２時間）であることが観察された。

【0399】

ＴＮＦ－α産生の阻害率は、３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質であるデキサメタゾンで治療した群（Ｇ５）において２５％、２８％、３３％、２８％および９％であった。いくつかの時点において、デキサメタゾンの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．０００５：４時間、ｐ＜０．０００１：１時間、２時間、６時間および１２時間）であることが観察された。

【0400】

ＩＬ－６の分析
ＩＬ－６の産生率分析を、１時間、２時間、４時間、６時間、１２時間および２４時間のデータを用いて実施し、０時間のデータを除外した。

【0401】

ＩＬ－６産生の阻害率は、１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ２）において８１％、１００％、９９％、８７％、８９％および９７％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0402】

ＩＬ－６産生の阻害率は、１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ３）において８６％、６９％、７６％、６６％、６２％および１０３％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0403】

ＩＬ－６産生の阻害率は、２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ４）において６０％、４６％、６３％、４２％、３２％および６０％であった。いくつかの時点において、ＳＭＡの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．０５：２時間および４時間、ｐ＜０．００５：６時間および１２時間）であることが観察された。

【0404】

ＩＬ－６産生の阻害率は、３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質であるデキサメタゾンで治療した群（Ｇ５）において５９％、４３％、５９％、２０％、１６％および５１％であった。いくつかの時点において、デキサメタゾンの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．０５：１時間、２時間、４時間および２４時間、ｐ＜０．０００１：６時間および１２時間）であることが観察された。

【0405】

ＩＬ－１βの分析
ＩＬ－１βの産生率分析を、４時間、６時間および１２時間のデータを用いて実施し、０時間、１時間、２時間および２４時間のデータを除外した。

【0406】

ＩＬ－１β産生の阻害率は、１．０３ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ２）において９２％、８７％および９８％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0407】

ＩＬ－１β産生の阻害率は、１．５４ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ３）において８１％、７５％および９２％であり、有意な差（ｐ＜０．０５）は、すべての統計分析において観察されなかった。

【0408】

ＴＮＦ－１β産生の阻害率は、２．０５ｍｇ／ｋｇのＳＭＡで治療した群（Ｇ４）において７３％、７０％および８１％であった。いくつかの時点において、ＳＭＡの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．０５：４時間、６時間および１２時間）であることが観察された。

【0409】

ＩＬ－１β産生の阻害率は、３ｍｇ／ｋｇの陽性対照物質であるデキサメタゾンで治療した群（Ｇ５）において６９％、６７％および７７％であった。いくつかの時点において、デキサメタゾンの低減効果は、統計的に有意（ｐ＜０．０００１：４時間、６時間および２４時間）であることが観察された。

【0410】

ＩＦＮ－ガンマの分析
ＩＮＦ－ガンマの分析は、ＭＦＩがすべての時点で定量限界を下回っていたので、産生率分析から除外した。

【0411】

ＧＭ－ＣＳＦの分析
ＧＭ－ＣＳＦの分析は、ＭＦＩがすべての時点で定量限界を下回っていたので、産生率分析から除外した。

【0412】

４．３．２ 生存分析
４．３．２．１ 生存分析（図１６）
死亡したマウスを、２０ｍｇ／ｋｇのＬＰＳで治療した後に毎時間調べた。生存率は、陰性対照群（Ｇ１）と比較した場合、統計的に有意（Ｇ３：ｐ＜０．００５、Ｇ４：ｐ＜０．０００５、Ｇ５：ｐ＜０．０００１）に延長されていることが確証された。

【0413】

４．３．３ 体重および一般的症状
体重
すべてのマウスの平均体重は、参加時に２２．３ｇであり、群割当時に２４．１ｇであった。正常な体重増加が、隔離順応期間中に観察された。

【0414】

群割当は、すべての群が平均体重を有するように実施した。陰性対照群（Ｇ１）と比較した場合、統計的有意性（ｐ＜０．０５）はなかった。

【0415】

一般的症状
一般的症状の観察が毎日実施された隔離順応期間中に、異常は観察されなかった。

【0416】

研究期間中に、ＬＰＳ治療の気管内方法を介した肺への液体注入が原因で、合計８件の死亡が発生した。呼吸促迫の症状は、気管内投与の終了直後に実体に発生した。一時的な呼吸促迫が、ＬＰＳで治療されたすべてのマウスに観察されたが、一時的な呼吸促迫は、ＬＰＳ投与の液体体積によるものであり、ＬＰＳ誘導呼吸促迫症候群ではないと思われる。それでも８匹のマウスは、症状から回復したとは思われなかった。心肺蘇生法および体温維持などの措置を、重度の呼吸促迫を有する８匹のマウスに行ったが、死亡し、分析用の試料は取得されなかった。

【0417】

４．４．結論
この研究は、気管内投与を介した反復ＬＰＳ治療により誘導されたハツカネズミ（Mus musculus）（ＢＡＬＢ／ｃ）の急性呼吸症候群（ＡＲＤＳ）モデルにおける、ＬＰＳ誘導炎症促進性メディエーターに対する試験物質ＳＭＡの阻害効果を確証するために行った。この研究の結果は、ＬＰＳ誘導炎症促進性メディエーターに対する試験物質および陽性対照物質の阻害効果を確証、急性呼吸促迫症候群の主なメディエーター（ＴＮＦ－α、ＩＬ－６、ＩＬ－１β）であることが公知のサイトカインの発現が、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中で有意に抑制されたことを示した。

【0418】

この研究は、試験物質ＳＭＡがＴＮＦ－αおよびＩＬ－６の産生を特定の時点で阻害すること、ならびに試験物質ＳＭＡが急性呼吸症候群の予防処置（preventive treatment）として有効であることを確証した。

【0419】

ＩＦＮ－ガンマ、ＧＭ－ＣＳＦおよびＩＬ－１βの分析値がいくつかの時点において定量限界を下回り、したがって、分析から除外されたが、試験物質ＳＭＡは、いくつかの時点においてＩＬ－１βの産生を用量依存的に阻害した。

【0420】

結論として、ＳＭＡは、ＴＮＦ－α、ＩＬ－６およびＩＬ－１βなどの炎症促進性メディエーターの産生に急速な阻害効果を発揮し、したがって、急性呼吸症候群を緩和して生存を延長することに使用することができる。

【0421】

[実施例５]
ＳＭＡがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対してウイルス抑制効果を呈することを示すｉｎ ｖｉｔｒｏ実験
上記の実施例４に記載されたｉｎ ｖｉｖｏ実験は、ＰＡＸ－１（ＳＭＡ）が、ヨーロッパでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２関連肺炎の治療としての使用が承認されている薬物であるデキサメタゾンに類似して、炎症性サイトカインの阻害に有効であることを確証した。

【0422】

実施例５は、ＰＡＸ－１が抗ウイルス薬レムデシビルに類似したウイルス抑制効果を呈することも明らかにしたｉｎ ｖｉｔｒｏ研究を記載する。ＰＡＸ－１は、抗ウイルスおよび抗炎症特性を有し、ウイルス感染誘導肺炎などの疾患の治療に有効である。ＰＡＸ－１による治療は、回復期間を１週間ほどの短さに有意に低減することが期待される。ＣＯＶＩＤ－１９関連疾患の進行は、ＰＡＸ－１が感染の初期段階中に摂取されると予防することができる。

【0423】

５．１ ウイルス抑制／死および炎症性サイトカインの阻害の機構
ＰＡＸ－１の作用機構は、固形ヒト腫瘍細胞系のテロメアへのＰＡＸ－１の特異的結合を伴い、テロメア関連ＤＮＡ損傷、テロメア侵食および細胞死をもたらす（Phatak P, Dai F, Butler M, et al. (2008) KML001 Cytotoxic Activity Is Associated with Its Binding to Telomeric Sequences and Telomere Erosion in Prostate Cancer Cells. Cancer Therapy: Preclinical 14(14): 4593-4603）。ＰＡＸ－１は、また、テロメラーゼｍＲＮＡの転写に関与する転写因子の発現を低減することによって、がん細胞の繁殖の抑制を示す。さらに、３つのＴＴＡＧＧＧ反復あたり１つの分子の比でＰＡＸ－１がテロメア配列に結合すると、テロメラーゼ逆転写酵素（ｈＴＥＲＴ）と呼ばれるテロメアーゼ触媒サブユニットが細胞質に転位することをもたらし、それによって、テロメアーゼ活性を阻害し、最終的にがん細胞を死滅させる。最近の研究は、右手構造（指、親指、および手のひらドメイン）からなる保存逆転写酵素モチーフを有することによって、ｈＴＥＲＴドメインとウイルスＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲＰ）との構造的および機能的類似性を発見した（Machitani M, Yasukawa M, Nakashima J, Furuichi Y, Masutomi K. RNA-dependent RNA polymerase, RdRP, a promising therapeutic target for cancer and potentially COVID-19. Cancer Sci. 2020 Aug 17;111(11):3976-84. doi: 10.1111/cas.14618）。ウイルスＲｄＲＰは、ウイルスゲノムの転写および複製に必須の機能を果たし、ＲｄＲＰの抑制は、抗ウイルス薬の主な標的の１つと考慮される。ｈＴＥＲＴへのＰＡＸ－１の証明された阻害効果、およびウイルスＲｄＲＰとｈＴＥＲＴ ＲｄＲＰドメインとの構造類似性を考慮すると、ＰＡＸ－１によるｈＴＥＲＴのＲｄＲＰ活性の阻害をコロナウイルスのＲｄＲＰ活性の阻害に適用できることを提案することが妥当と思われる。さらに、ＰＡＸ－１の抗ウイルス特性は、コロナウイルスに限定されず、広範囲のウイルスにも適用可能であり、抗がんおよび抗ウイルス治療に対するＰＡＸ－１の多用途治療特性を示している（Machitani M, Yasukawa M, Nakashima J, Furuichi Y, Masutomi K. RNA-dependent RNA polymerase, RdRP, a promising therapeutic target for cancer and potentially COVID-19. Cancer Sci. 2020 Aug 17;111(11):3976-84. doi: 10.1111/cas.14618）。

【0424】

メタ亜ヒ酸ナトリウムは、ヒトテロメアーゼの強力な阻害剤であることを示している。

【0425】

ウイルス感染に反応したサイトカインの過剰産生は、ＣＯＶＩＤ－１９誘導肺炎（炎症）の主な原因であることが広く受け入れられてきた。

【0426】

ウイルス感染には、過剰なサイトカイン放出をもたらす遺伝子発現の異常な細胞活性化が続き、次に炎症（肺炎）を誘導する。ＰＡＸ－１は、炎症促進性サイトカインのＴＮＦ－α、ＩＬ－１βおよびＩＬ－６の産生／分泌を阻害または低減することが実施例４に示されている。

【0427】

５．２ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞に対するＰＡＸ－１の抗ウイルス効果のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
５．２．１．概観
この研究の目的は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対するＰＡＸ－１の抗ウイルス効果を検証することであった。化合物の抗ウイルス有効性は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２細胞感染モデルにおいて用量反応曲線（ＤＲＣ）実験により決定した。感染細胞は、ウイルスヌクレオカプシド（Ｎ）タンパク質に特異的な抗体を使用する免疫蛍光を介して画像化し、取得した画像は、Ｃｏｌｕｍｂｕｓソフトウエア（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して分析した。

【0428】

Ｐａｓｔｅｕｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅで行った実験によると、ＰＡＸ－１の抗ウイルス効果（ＩＣ_５０＝４．２５μＭ）は、レムデシビルのもの（ＩＣ_５０＝５．２７μＭ）よりわずかに高く、ＰＡＸ－１がレムデシビルと同じ程度の抗ウイルス特性を有することを示している。

【0429】

５．２．２．材料および方法
５．２．２．１ ウイルスおよび細胞系
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は、Ｋｏｒｅａ Ｃｅｎｔｅｒｓ ｆｏｒ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ（ＫＣＤＣ）から提供され、ベロ細胞は、ＡＴＣＣ（ＡＴＣＣ－ＣＣＬ８１）から得た。

【0430】

５．２．２．２ 試薬
クロロキン、ロピナビル、およびレムデシビルを基準化合物として使用し、Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ、ＳｅｌｌｅｃｋＣｈｅｍ、およびＭｅｄＣｈｅｍＥｘｐｒｅｓｓからそれぞれ購入した。抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２Ｎタンパク質に特異的な一次抗体は、Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌから購入し、二次抗体のＡｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ４８８ヤギ抗ウサギＩｇＧおよびＨｏｅｃｈｓｔ３３３４２は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓから購入した。

【0431】

５．２．２．３ 免疫蛍光法による用量反応曲線分析
３８４組織培養プレートに、ウエル１つあたり１．２×１０^４個のベロ細胞を接種した。播種した２４時間後、１０個の異なる濃度の化合物を、ＤＭＳＯおよびＰＢＳで系列希釈して調製し、細胞を処理し、最高濃度は５０μＭであった。薬物処理の１時間後、ＢＳＬ３施設で細胞にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（０．０１２５ＭＯＩ）を感染させ、３７℃で２４時間インキュベートした。その後、細胞を４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）で固定し、続いて透過処理した。次いで細胞を、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ヌクレオカプシド（Ｎ）一次抗体、Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ４８８結合ヤギ抗ウサギＩｇＧ二次抗体およびＨｏｅｃｈｓｔ３３３４２で染色した。感染細胞の蛍光画像を、画像分析デバイスＯｐｅｒａｔｔａ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して取得した。

【0432】

５．２．２．４ 画像分析
取得した画像を、Ｃｏｌｕｍｂｕｓソフトウエアを使用して分析した。ウエル１つあたりのＨｏｅｃｈｓｔ染色細胞の総数を数え、細胞の総数とした。ウイルスＮタンパク質を発現する細胞の数を、感染細胞の総数とした。感染率を、Ｎタンパク質を発現する細胞数／細胞の総数として計算した。

【0433】

ウエル１つあたりの感染の程度を、同じプレートの非感染細胞（ｍｏｃｋ）のウエルの平均感染力、および０．５％ＤＭＳＯ（ｖ／ｖ）で処理した感染細胞のウエルの平均感染力に正規化した。

【0434】

化合物の細胞傷害性は、各ウエルの細胞の数を、ｍｏｃｋ群ウエルの細胞の平均数に正規化することによって正規化し、グラフに「ｍｏｃｋに対する細胞数」と表した。

【0435】

各薬物濃度から誘導された反応曲線、ならびにＩＣ_５０およびＣＣ_５０値は、ＸＬＦｉｔ４（ＩＤＢＳ）ソフトウエアの式Ｙ＝底＋（頂点－底）／（１＋（ＩＣ_５０／Ｘ）^{ヒルスロープ}）を使用して誘導した。すべてのＩＣ_５０およびＣＣ_５０値は、独立した実験の２つの複製から得た当てはめ用量反応曲線により計算し、選択性指数（ＳＩ）値をＣＣ_５０／ＩＣ_５０により計算した。

【0436】

５．２．３．結果－化合物の用量反応曲線（ＤＲＣ）分析
この研究は、ベロ細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９ウイルス）の複製に対するＰＡＸ－１の抗ウイルス効果、ならびにその可能な細胞傷害効果を、レムデシビル（すなわち、ＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの際に使用が認可された最初の抗ウイルス薬）およびロピナビル（すなわち、リトナビルと組み合わせたＣＯＶＩＤ－１９の抗ウイルス治療のために現在評価段階にある薬物）と比較して探索した。

【0437】

ベロ細胞は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を複製および単離するために広く使用され、受け入れられてきた細胞モデルである。簡潔には、ベロ細胞（ＡＴＣＣ－ＣＣＬ８１）に、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｋｏｒｅａ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ Ａｇｅｎｃｙから得た）を、様々な濃度の試験薬またはＤＭＳＯ／ＰＢＳ（対照）の存在下、０．０１２５の感染多重度（ＭＯ）で感染させた。感染細胞を感染の２４時間後に固定し、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ヌクレオカプシド抗体およびＨｏｅｃｈｓｔ ３３３４２で染色し、免疫蛍光染色法を使用して感染細胞の総数を特定した。画像分析を、Ｏｐｅｒａｔｔａ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）を使用して実施した。各薬物の最大半減阻害濃度（ＩＣ_５０）および最大半量細胞傷害性濃度（ＣＣ_５０）値を、当てはめ用量反応曲線を使用して決定した。

【0438】

結果を図１７に示す。青色ドットは、化合物のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の阻害を示し、赤色四角は、化合物の細胞傷害性を示す。

【0439】

図１７に示されているように、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の複製は、ＰＡＸ－１（図１７の「Ｋｏｍｉｐｈａｒｍ（ＰＢＳ）」）により、レムデシビルと同じ程度およびロピナビルより効率的に阻害された。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染のＰＡＸ－１阻害のＩＣ_５０値は、４．２５μＭであり、すなわち、レムデシビルと同じ規模（ＩＣ_５０＝５．２７μＭ）であり、ロピナビルより低い規模（ＩＣ_５０＝１３．１１μＭ）であった。ＰＡＸ－１のＣＣ_５０値は、レムデシビルおよびロピナビルの両方のものが５０μＭを超えることと比較して、２１．０５μＭであった。ＰＡＸ－１が他の２つの化合物と比較して細胞生存率にわずかに大きな阻害を示すにもかかわらず、ＣＣ_５０／ＩＣ_５０で計算した、細胞傷害性に対する抗ウイルス活性のＳＩは、ロピナビルのものと同じ程度であった。このように、ＰＡＸ－１はＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２複製をｉｎ ｖｉｔｒｏで有効に阻害した。

【0440】

５．２．４．考察
正常な細胞に対するＰＡＸ－１の細胞傷害性濃度（ＣＣ_５０）は２１．０５μＭであり、これは抗ウイルス活性指数（ＩＣ_５０、４．２５μＭ）より４．９６倍高く、薬物の安全性を示している。抗ウイルス効果を達成するために、ＩＣ_５０値より５倍高い濃度のＰＡＸ－１を摂取する必要はない。

【0441】

ＰＡＸ－１毒性についての最近の研究は、比較のためにレムデシビルおよびロピナビルの両方を同時に試験することを伴う。実験結果は、ロピナビルに以下の指数：ＩＣ_５０＝１３．１１μＭ、ＣＣ_５０＞５０μＭおよびＳＩ値の３．８１を示し、ＰＡＸ－１と比較してより高い細胞傷害性を報告している。ロピナビルは、ＵＳ ＦＤＡが主導して、ＣＯＶＩＤ－１９の治療のために臨床試験を現在受けている。

【0442】

上記の要素を考慮すると、ＰＡＸ－１を、治療中に副作用または重度の有害作用引き起こすことなく抗ウイルス剤として使用することもできる。

【0443】

ＰＡＸ－１は、染色体の末端に結合した増殖ポテンシャル（proliferative potential）であるテロメア配列に結合する。炎症性サイトカインの阻害に使用されるＰＡＸ－１の濃度は、正常な免疫細胞に対して細胞傷害作用を有さない。さらに、ＰＡＸ－１は、完全に代謝され、摂取した７２時間後に身体から排泄される。

【0444】

ＰＡＸ－１の臨床試験における患者（これまでのところ４７２人の患者が臨床試験に関与した）の一部に、２０ｍｇ／日が与えられた（１日に８錠を摂取する）。薬物の毒性が原因の死亡は報告されておらず、ＰＡＸ－１が非常に安全な物質であることを示している。

【0445】

コロナウイルス抗体は急速に弱まり、動物種由来のコロナウイルスは変異してヒトと交差することができ、再感染のリスクを作り出すことを、増え続ける証拠が示している。疑いもなく、ＣＯＶＩＤ－１９に対する抗ウイルス薬の急速な開発の大きな必要性が存在する。

【0446】

[実施例６]
ＣＯＶＩＤ－１９患者の日記（ＳＭＡによる治療）
実施例６は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染し、ＳＭＡで治療された５９歳の女性（既往歴（pre-existing condition）を有さず）の日々の生活記録を記載する。この実施例は、ＳＭＡがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染の症状、例えば、胸部絞扼感、呼吸の困難さ、息切れ（呼吸困難）、発熱、食欲喪失、鼻水、咳、痰の発生、および疼痛の緩和または治療に有効であることを示している。

【0447】

【表31-1】

【0448】

【表31-2】

【0449】

【表31-3】

【0450】

任意の従来技術の出版物が本明細書において参照される場合、そのような参考文献は、出版物がオーストラリアまたは任意のその他の国において当該技術の共通する一般知識の一部を形成することの容認を構成しないことが、理解されるべきである。

【0451】

以下の特許請求の範囲および上述の発明の説明において、明示的言語または必然的含意に起因して文脈から必要とされる以外は、単語「含む（comprise）」、または「含む（comprises）」もしくは「含んでいる（comprising）」などの変形は包括的な意味で使用され、すなわち、記述される特徴が存在することを特定するが、本発明の様々な実施形態におけるさらなる特徴の存在または追加を除外しない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【図16】

【図17】

【国際調査報告】