特表 2023-514506 多価不飽和脂肪酸の固体中性アミノ酸塩の製造プロセス

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-06

(54)【発明の名称】多価不飽和脂肪酸の固体中性アミノ酸塩の製造プロセス

(51)【国際特許分類】

   C07C 51/41 20060101AFI20230330BHJP

   C07C 57/03 20060101ALI20230330BHJP

   C07C 229/08 20060101ALI20230330BHJP

   C07C 309/14 20060101ALI20230330BHJP

   A61K 31/201 20060101ALN20230330BHJP

   A61K 31/202 20060101ALN20230330BHJP

   A61P 9/12 20060101ALN20230330BHJP

   A61P 3/10 20060101ALN20230330BHJP

   A61P 35/00 20060101ALN20230330BHJP

   A23L 33/175 20160101ALN20230330BHJP

   A23L 33/12 20160101ALN20230330BHJP

【ＦＩ】

C07C51/41

C07C57/03

C07C229/08

C07C309/14

A61K31/201

A61K31/202

A61P9/12

A61P3/10

A61P35/00

A23L33/175

A23L33/12

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022545134

(86)(22)【出願日】2021-01-29

(85)【翻訳文提出日】2022-09-05

(86)【国際出願番号】 CA2021050096

(87)【国際公開番号】W WO2021151201

(87)【国際公開日】2021-08-05

(31)【優先権主張番号】62/967,667

(32)【優先日】2020-01-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521163477

【氏名又は名称】シリサイクル インコーポレイティド

(74)【代理人】

【識別番号】100147485

【弁理士】

【氏名又は名称】杉村 憲司

(74)【代理人】

【識別番号】230118913

【弁護士】

【氏名又は名称】杉村 光嗣

(74)【代理人】

【識別番号】100225060

【弁理士】

【氏名又は名称】屋代 直樹

(72)【発明者】

【氏名】シアオウェイ ウー

(72)【発明者】

【氏名】クリストフ メロン

(72)【発明者】

【氏名】クラウディア カーペンティア

(72)【発明者】

【氏名】シャビエル ピジョン

【テーマコード（参考）】

4B018

4C206

4H006

【Ｆターム（参考）】

4B018MD10

4B018MD11

4B018MD12

4B018MD13

4B018MD16

4B018MD19

4B018ME02

4B018ME04

4B018ME08

4B018ME14

4B018MF02

4C206DA04

4C206DA05

4C206MA72

4C206NA03

4C206NA09

4C206ZA42

4C206ZB26

4C206ZC35

4H006AA01

4H006AA02

4H006AB10

4H006AB20

4H006AC47

4H006BB14

4H006BB31

4H006BS10

4H006BU32

4H006NB11

4H006NB12

4H006NB16

(57)【要約】

本開示は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の中性アミノ酸塩に関し、また、それを生成するプロセスであって、酸形態の１つ以上のＰＵＦＡ、アルカリ塩基、および中性アミノ酸を、第１の有機溶媒と水との混合物中で混合するステップと、混合物にＰＵＦＡｓの塩を沈殿させるのに有効な量の第２の有機溶媒を添加するステップと、第１および第２の有機溶媒ならびに水を蒸発させて、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を回収するステップと、を含む、プロセスに関する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の少なくとも１つの中性アミノ酸塩を調製するためのプロセスであって、
酸形態の１つ以上のＰＵＦＡ、アルカリ塩基、および中性アミノ酸を、第１の有機溶媒と水との混合物中で、約０℃超から該第１の有機溶媒の沸点付近までの間の温度で混合するステップと、
前記第１の有機溶媒と水との前記混合物に、前記ＰＵＦＡｓの塩を沈殿させるのに有効な量の第２の有機溶媒を添加するステップと、および
前記第１および第２の有機溶媒ならびに水を蒸発させて、前記ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を回収するステップと、
を含む、プロセス。

【請求項2】

請求項１に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は固体形態である、プロセス。

【請求項3】

請求項１または２に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓは、オメガ－３ ＰＵＦＡｓおよびオメガ－６ ＰＵＦＡｓのうちの少なくとも１つを含む、プロセス。

【請求項4】

請求項３に記載のプロセスにおいて、前記オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６（ｎ－３））（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（２０：５（ｎ－３）（ＥＰＡ）およびα－リノレン酸（Ｃ１８：３（ｎ－３））（ＡＬＡ）のうちの少なくとも１つを含む、プロセス。

【請求項5】

請求項３または４に記載のプロセスにおいて、前記オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、エイコサトリエン酸（Ｃ２０：３（ｎ－３））（ＥＴＥ）、エイコサテトラエン酸（Ｃ２０：４（ｎ－３））（ＥＴＡ）、ヘンエイコサペンタエン酸（Ｃ２１：５（ｎ－３））（ＨＰＡ）、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５（ｎ－３））（ＤＰＡ）、テトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－３））、およびテトラコサヘキサエン酸（Ｃ２４：６（ｎ－３））のうちの少なくとも１つを含む、プロセス。

【請求項6】

請求項３～５のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記オメガ－６ ＰＵＦＡｓは、リノール酸（Ｃ１８：２（ｎ－６））およびアラキドン酸（Ｃ２０：４（ｎ－６））のうちの少なくとも１つを含む、プロセス。

【請求項7】

請求項３～６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記オメガ－６ ＰＵＦＡｓは、エイコサジエン酸（Ｃ２０：２（ｎ－６））、ジホモ－γ－リノレン酸（Ｃ２０：３（ｎ－６））（ＤＧＬＡ）、ドコサジエン酸（Ｃ２２：２（ｎ－６））、アドレン酸（Ｃ２２：４（ｎ－６））、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５（ｎ－６））、テトラコサテトラエン酸（Ｃ２４：４（ｎ－６））、およびテトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－６））のうちの少なくとも１つを含む、プロセス。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓは、脂肪および／または油に含まれる、プロセス。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓはＥＰＡを含む、プロセス。

【請求項10】

請求項１～８のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓはＤＨＡを含む、プロセス。

【請求項11】

請求項１～１０のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓはマグロ油に含まれる、プロセス。

【請求項12】

請求項１１に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓは、５０～５５％のＤＨＡおよび２０～２５％のＥＰＡを含む、プロセス。

【請求項13】

請求項１１に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓは、４５～６０％のＤＨＡおよび１８～２７％のＥＰＡを含む、プロセス。

【請求項14】

請求項１～１０のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓはアザラシ油に含まれる、プロセス。

【請求項15】

請求項１４に記載のプロセスにおいて、前記ＰＵＦＡｓは、５～４０％のＤＨＡ、５～４５％のＥＰＡ、および３～１０％のＤＰＡを含む、プロセス。

【請求項16】

請求項１～１５のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記混合するステップは、前記第１の有機溶媒中に酸形態の前記１つ以上のＰＵＦＡを含む有機溶液を準備するステップと、前記中性アミノ酸および水を含む水溶液を準備するステップと、前記有機溶液と前記水溶液とを混合するステップと、を含む、プロセス。

【請求項17】

請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記中性アミノ酸は、グリシン、α－アラニン、β－アラニン、タウリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、セリン、システイン、スレオニン、チロシン、プロリン、フェニルアラニン、ホモセリン、γ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、スタチン、またはそれらの組み合わせを含む、プロセス。

【請求項18】

請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記中性アミノ酸はグリシンである、プロセス。

【請求項19】

請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記中性アミノ酸はα－アラニンである、プロセス。

【請求項20】

請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記中性アミノ酸はβ－アラニンである、プロセス。

【請求項21】

請求項１～１６のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記中性アミノ酸はタウリンである、プロセス。

【請求項22】

請求項１～２１のいずれか一項に記載のプロセスにおいて、前記第２の有機溶媒は、エタノールまたはアセトニトリルである、プロセス。

【請求項23】

請求項１～２２のいずれか一項に記載のプロセスによって調製される、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の中性アミノ酸塩。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本開示は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ：polyunsaturated fatty acids）の中性アミノ酸塩、およびその生成プロセスに関する。

【背景技術】

【0002】

１９８０年代に、いくつかの刊行物により、海洋哺乳類および魚類が豊富である伝統的なグリーンランドの食事によって、イヌイットの人口やデンマークの入植者の虚血性心疾患（ＩＨＤ）による死亡率が大幅に低下したことが明らかとなった。このような事実は、伝統的な海洋食中の多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の効果が寄与していると考えられる。

【0003】

抗炎症作用や抗血液凝固作用、トリグリセリド（ＴＡＧ）レベルの低下、血圧の低下、糖尿病や一部の癌等々のリスクの低下など、人間へのプラスの効果がもたらされていることから、近年、オメガ－３（ω－３）への関心が拡大している。

【0004】

しかし、食品添加物または栄養補助食品としてのＰＵＦＡｓの使用は、安定性の問題、ならびに不快な味および臭いによって制限される。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0005】

開示の一態様は、多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の少なくとも１つの中性アミノ酸塩を調製するためのプロセスであって、酸形態の１つ以上のＰＵＦＡ、アルカリ塩基、および中性アミノ酸を、第１の有機溶媒と水との混合物中で、約０℃超から該第１の有機溶媒の沸点付近までの間の温度で混合するステップと、前記第１の有機溶媒と水との前記混合物に、前記ＰＵＦＡの塩を沈殿させるのに有効な量の第２の有機溶媒を添加するステップと、および前記第１および第２の有機溶媒ならびに水を蒸発させて、前記ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を回収するステップと、を含む、プロセスに関する。

【0006】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は固体形態である。

【0007】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓは、オメガ－３ ＰＵＦＡｓおよびオメガ－６ ＰＵＦＡｓのうちの少なくとも１つを含む。

【0008】

別の実施形態において、オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、ドコサヘキサエン酸（Ｃ２２：６（ｎ－３））（ＤＨＡ）、エイコサペンタエン酸（２０：５（ｎ－３）（ＥＰＡ）およびα－リノレン酸（Ｃ１８：３（ｎ－３））（ＡＬＡ）のうちの少なくとも１つを含む。

【0009】

代替の実施形態において、オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、エイコサトリエン酸（Ｃ２０：３（ｎ－３））（ＥＴＥ）、エイコサテトラエン酸（Ｃ２０：４（ｎ－３））（ＥＴＡ）、ヘンエイコサペンタエン酸（Ｃ２１：５（ｎ－３））（ＨＰＡ）、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５（ｎ－３））（ＤＰＡ）、テトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－３））、およびテトラコサヘキサエン酸（Ｃ２４：６（ｎ－３））のうちの少なくとも１つを含む。

【0010】

一実施形態において、オメガ－６ ＰＵＦＡｓは、リノール酸（Ｃ１８：２（ｎ－６））およびアラキドン酸（Ｃ２０：４（ｎ－６））のうちの少なくとも１つを含む。

【0011】

別の実施形態において、オメガ－６ ＰＵＦＡｓは、エイコサジエン酸（Ｃ２０：２（ｎ－６））、ジホモ－γ－リノレン酸（Ｃ２０：３（ｎ－６））（ＤＧＬＡ）、ドコサジエン酸（Ｃ２２：２（ｎ－６））、アドレン酸（Ｃ２２：４（ｎ－６））、ドコサペンタエン酸（Ｃ２２：５（ｎ－６））、テトラコサテトラエン酸（Ｃ２４：４（ｎ－６））、およびテトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－６））のうちの少なくとも１つを含む。

【0012】

補足的な実施形態において、ＰＵＦＡｓは、脂肪および／または油に含まれる。

【0013】

さらなる実施形態において、ＰＵＦＡｓはＥＰＡを含む。

【0014】

別の実施形態において、ＰＵＦＡｓはＤＨＡを含む。

【0015】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓはマグロ油に含まれる。

【0016】

別の実施形態において、ＰＵＦＡｓは、５０～５５％のＤＨＡおよび２０～２５％のＥＰＡを含む。

【0017】

さらなる実施形態において、ＰＵＦＡｓは、４５～６０％のＤＨＡおよび１８～２７％のＥＰＡを含む。

【0018】

追加の実施形態において、ＰＵＦＡｓはアザラシ油に含まれる。

【0019】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓは、５～４０％のＤＨＡ、５～４５％のＥＰＡ、および３～１０％のＤＰＡを含む。

【0020】

一実施形態において、前記混合するステップは、前記第１の有機溶媒中に酸形態の前記１つ以上のＰＵＦＡを含む有機溶液を準備するステップと、前記中性アミノ酸および水を含む水溶液を準備するステップと、前記有機溶液と前記水溶液とを混合するステップと、を含む。

【0021】

別の実施形態において、中性アミノ酸は、グリシン、α－アラニン、β－アラニン、タウリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、セリン、システイン、スレオニン、チロシン、プロリン、フェニルアラニン、ホモセリン、γ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、スタチン、またはそれらの組み合わせを含む。

【0022】

補足的な実施形態において、中性アミノ酸はグリシンである。

【0023】

一実施形態において、中性アミノ酸はα－アラニンである。

【0024】

さらなる実施形態において、中性アミノ酸はβ－アラニンである。

【0025】

別の実施形態において、中性アミノ酸はタウリンである。

【0026】

一実施形態において、第２の有機溶媒は、エタノールまたはアセトニトリルである。

【0027】

本明細書で定義される方法によって調製される多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）の中性アミノ酸塩もまた包含される。

【発明を実施するための形態】

【0028】

本開示は、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を調製する方策に関するものであり、これは、ワンステップで自由流動性（free-flowing）粉末の形成をもたらす。

【0029】

本明細書で使用される「多価不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid）」、すなわち「ＰＵＦＡ」という用語は、それらの炭素骨格に２つ以上のエチレン性炭素－炭素二重結合を含む脂肪酸化合物を意味する。ＰＵＦＡｓの２つの主要な分類は、オメガ－３ ＰＵＦＡｓおよびオメガ－６ ＰＵＦＡｓであり、これらはＰＵＦＡｓの化学構造における最後の二重結合の位置によって特徴付けられる。

【0030】

オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、最後の二重結合の位置を指し、オメガ－３では、二重結合は「オメガ」、すなわち分子鎖の末端、から３番目および４番目の炭素原子の間にある。

【0031】

最も重要な３つのオメガ－３ ＰＵＦＡｓはドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）で、２２個の炭素およびメチル末端から３番目の炭素から始まる６個の二重結合を有し、（Ｃ２２：６（ｎ－３））と表され、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）は（２０：５（ｎ－３））と表され、および、α－リノレン酸（ＡＬＡ）は（Ｃ１８：３（ｎ－３））と表される。

【0032】

その他のオメガ－３ ＰＵＦＡｓとしては、エイコサトリエン酸（ＥＴＥ）（Ｃ２０：３（ｎ－３））、エイコサテトラエン酸（ＥＴＡ）（Ｃ２０：４（ｎ－３））、ヘネイコサペンタエン酸（ＨＰＡ）（Ｃ２１：５（ｎ－３））、ドコサペンタエン酸（イワシ酸（Clupanodonic acid）) （ＤＰＡ）（Ｃ２２：５（ｎ－３））、テトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－３））、テトラコサヘキサエン酸（ニシン酸）（Ｃ２４：６（ｎ－３））が挙げられる。

【0033】

オメガ－６ ＰＵＦＡｓは、オメガ６位と呼ばれる部分に末端二重結合を有し、これは、最後の二重結合が脂肪酸分子のオメガ末端から６番目の炭素に存在することを意味する。

【0034】

オメガ－６ ＰＵＦＡｓのうち、リノール酸（Ｃ１８：２（ｎ－６））およびアラキドン酸（Ｃ２０：４（ｎ－６））は、２つの主要なオメガ－６である。

【0035】

その他のオメガ－６ ＰＵＦＡｓとしては、エイコサジエン酸（Ｃ２０：２（ｎ－６））、ジホモ－γ－リノレン酸（ＤＧＬＡ）（Ｃ２０：３（ｎ－６））、ドコサジエン酸（Ｃ２２：２（ｎ－６））、アドレン酸（Ｃ２２：４（ｎ－６））、ドコサペンタエン酸（オスボンド酸）（Ｃ２２：５（ｎ－６））、テトラコサテトラエン酸（Ｃ２４：４（ｎ－６））、テトラコサペンタエン酸（Ｃ２４：５（ｎ－６））
が挙げられる。

【0036】

本明細書で使用される「脂肪（fat）」および／または「油（oil）」という用語は、本明細書に記載のプロセスでの使用に適したレベルのＰＵＦＡｓを含有する任意の脂肪および／または油を指す。脂肪または油中に存在するＰＵＦＡエステルは、アルキルエステル、トリグリセリド、ジグリセリドもしくはモノグリセリド、またはそれらの混合物として存在する。ジグリセリドまたはトリグリセリドの場合、グリセロール単位は随意にリン誘導体を有することがあり得る（したがって、脂肪および／または油はリン脂質であるか、リン脂質を含有することができる）。

【0037】

本明細書で使用される「アルカリ塩基（alkali base）」という用語は、水酸化アルカリ塩基などの任意のアルカリ金属塩基を指す。水酸化アルカリ塩基の例は、ＮａＯＨ、ＬｉＯＨ、ＫＯＨまたはそれらの組み合わせである。

【0038】

本明細書で使用される「第１の有機溶媒（first organic solvent）」は、水と混和する任意の有機溶媒（クラス３）を指す。第１の有機溶媒はまた、少なくとも＞０～２０（ｗｔ／ｗｔ）の比率で前記１つ以上のＰＵＦＡ（またはそれを含む脂肪／油）を溶解できる。

【0039】

本明細書で使用される「中性アミノ酸（neutral amino acid）」という用語は、好ましくは非毒性かつ食用であり、より好ましくは天然源からの任意の両親媒性化合物を指し、１つの第一級アミン基および、１つのカルボン酸（－ＣＯＯＨ）基、スルホン酸（－ＳＯ_３Ｈ）基またはホスホン酸（－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）_２）基のいずれか１つを含み、したがって、これらの酸基のエステルは除外される。アミノ酸は、好ましくは非芳香族アミノ酸である。

【0040】

本明細書で使用される「中性アミノ酸（neutral amino acids）」という用語は、一般に安全と認められる（ＧＲＡＳ：Generally Recognized as Safe）化合物のカテゴリーの一部であり、また、単一の第一級アミン基および約２００ｇ／ｍｏｌ未満の分子量を有する中性アミノ酸およびその誘導体を指す。

【0041】

中性アミノ酸は、アルギニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸を含まない。

【0042】

中性アミノ酸としては、グリシン、α－アラニン、β－アラニン、タウリン、ロイシン、イソロイシン、メチオニン、セリン、システイン、スレオニン、チロシン、プロリン、フェニルアラニン、ホモセリン、γ－アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）、スタチン、およびそれらの組み合わせからなるグループが挙げられる。

【0043】

本明細書で使用される「第２の有機溶媒（second organic solvent）」とは、ＰＵＦＡのアミノ酸塩を沈殿させることができる溶媒を意味する。

【0044】

上記のように、一態様は、１つ以上の多価不飽和脂肪酸（ＰＵＦＡｓ）のうちの少なくとも１つの中性アミノ酸塩を生成するためのプロセスであって、酸形態の１つ以上のＰＵＦＡ、アルカリ塩基、および中性アミノ酸を、第１の有機溶媒と水との混合物中で、約０℃超から前記第１の有機溶媒の沸点付近までの温度で混合するステップと、前記第１の有機溶媒と水との前記混合物に、前記ＰＵＦＡｓの塩を沈殿させるのに有効な量の第２の有機溶媒を添加するステップと、および前記第１および第２の有機溶媒ならびに水を蒸発させて、前記ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を回収するステップと、を含む、プロセスに関する。

【0045】

本明細書で使用される場合、「大気条件（atmospheric condition）」は、室温（例えば、約２０～２５℃）および大気圧で行われるステップまたはプロセスを指す。本明細書記載のプロセスは、好ましくは大気圧および室温で実行される。

【0046】

本明細書記載のプロセスは、不活性ガスを使用せずに実行され得る。

【0047】

一実施形態において、混合するステップは、前記第１の有機溶媒中に酸形態の前記１つ以上のＰＵＦＡを有する有機溶液を準備するステップと、前記中性アミノ酸を含む水溶液を準備するステップと、前記有機溶液および前記水溶液を混合するステップと、を含む。

【0048】

一実施形態において、前記ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は、例えば粉末のような固体形態である。さらなる実施形態において、粉末は自由流動性粉末である。

【0049】

一実施形態において、プロセスは、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩を粗引きポンプ（roughing pump）に掛けるステップをさらに含む。

【0050】

一実施形態において、１つ以上のＰＵＦＡｓは、ＰＵＦＡｓの総量に対して９０％ｗｔ／ｗｔを超えるオメガ－３ ＰＵＦＡｓ ＥＰＡを含むＥＰＡｓである。

【0051】

一実施形態において、１つ以上のＰＵＦＡｓは、ＰＵＦＡｓの総量に対して９０％ｗｔ／ｗｔを超えるオメガ－３ ＰＵＦＡｓ ＤＨＡを含むＤＨＡｓである。

【0052】

一実施形態において、オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、ＰＵＦＡｓの総量に対して、５０～５５％ ｗｔ／ｗｔのＤＨＡおよび２０～２５％ ｗｔ／ｗｔのＥＰＡ、あるいは４５～６０％ ｗｔ／ｗｔのＤＨＡおよび１８～２７％ ｗｔ／ｗｔのＥＰＡからなるマグロ油に由来する。

【0053】

一実施形態において、オメガ－３ ＰＵＦＡｓは、ＰＵＦＡｓの総量に対して、５～４０％ ｗｔ／ｗｔのＤＨＡ、５～４５％ ｗｔ／ｗｔのＥＰＡ、および３～１０％ ｗｔ／ｗｔのＤＰＡからなるアザラシ油に由来する。

【0054】

一実施形態において、第１の有機溶媒はエタノールである。

【0055】

一実施形態において、第１の有機溶媒はメタノールである。

【0056】

一実施形態において、第１の有機溶媒は、エタノールおよびメタノールの混合物である。

【0057】

一実施形態において、第１の有機溶媒はイソプロパノールである。

【0058】

一実施形態において、第１の有機溶媒はブタノールである。

【0059】

一実施形態において、第１の有機溶媒はアセトンである。

【0060】

一実施形態において、第１の有機溶媒はＴＨＦである。

【0061】

一実施形態において、中性アミノ酸はグリシンである。

【0062】

一実施形態において、中性アミノ酸はα－アラニンである。

【0063】

一実施形態において、中性アミノ酸はβ－アラニンである。

【0064】

一実施形態において、中性アミノ酸はタウリンである。

【0065】

アルカリ塩基に相当する中性アミノ酸の正確な化学量論を使用して、水溶液を形成する。中性アミノ酸に対する水溶液の重量比は、アミノ酸の性質に依存する。水性成分は、アミノ酸を溶解するための最小量として、最小量の１０倍までを使用することができ、ここで、前記溶解は、実質的な量の固体塩基性アミノ酸が水性成分中に視覚的に存在しない場合に達成され、該溶解は室温（すなわち、約２０～２５℃）で行われる。一実施形態において、使用される量は、最小量の２倍、または最小量の４倍、または最小量の５倍である。

【0066】

一実施形態において、アルカリ塩基および油分に対する中性アミノ酸のモル比は、０．９～１．１：０．９～１．１：０．９～１．１、または０．９５～１．０．５：０．９５～１．０５：０．９５～１．０５である。さらなる実施形態において、モル比は１：１：１である。

【0067】

一実施形態において、油混合物に対する第２の有機溶媒の重量比は、１０：１～１００：１、１０：１～７０：１、１０：１～５０：１、好ましくは１０：１～３０：１である。第２の有機溶媒は、好ましくは、１）第１の有機溶媒および水と一緒に蒸発ステップ下で除去できるものであり、２）有機溶媒および水の両方を同時に除去するため（有機溶媒が最初に除去され、最終生成物が粘着性の固体になるのを避けるため）、水の沸点と同様の沸点（例えば、摂氏約７５℃以上の沸点）を有するものであり、３）微量の溶媒が消費者にとって安全であるもの（つまり、毒性が低いこと）である。

【0068】

一実施形態において、第２の有機溶媒はアセトニトリルである。

【0069】

一実施形態において、第２の有機溶媒はエタノールである。

【0070】

脂肪または油を使用する場合、例えば、魚油の分子量が不明確であることに起因して、遊離酸中の前記１つ以上のＰＵＦＡに相当する中性アミノ酸の正確な化学量論を確実に確立することは困難である。さらに、魚油の起源は互いに異なり、ω－３組成、ω－６組成および飽和脂肪酸の様々な割合など、異なる種の割合を含有し得る。しかしながら、当業者は、脂肪酸組成の炭素長がＣ１４～Ｃ２４の範囲にあると仮定することにより、分子量を容易に見積もることができる。脂肪酸の炭素鎖の平均長は、Ｃ１９であると仮定する。ゆえに、本明細書では脂肪酸塩の形成に使用される中性アミノ酸の量を見積もるために、３００ｇ／ｍｏｌの分子量を使用する。

【0071】

脂肪酸塩を製造するのに必要な中性アミノ酸の量は、脂肪酸１モル当たり中性アミノ酸１～１．５モルであり、好ましくは１モルで十分である。

【0072】

回転子-固定子ホモジナイザーを混合プロセスに使用してもよい。通常、ホモジナイザーの速度は５０ｒｐｍ～１０００ｒｐｍ、好ましくは１００～２００ｒｐｍである。

【0073】

粉末形態の最終生成物は、反応混合物から前記第１および第２の有機溶媒ならびに水を蒸発させることにより単離され、ＰＵＦＡｓの前記塩基性アミノ酸塩を回収する。好ましくは、前記蒸発ステップは、使用される装置の特性に応じて、約０℃～７０℃の間の減圧下で実施される。本明細書に記載される得られた最終生成物の酸化状態は、過酸化物価（ＰＶ）、アニシジン価（ＡＶ）およびＴｏｔｏｘ値によって定量化される。ＰＶは、生成物中の一次酸化生成物（primary oxidation products）（脂質ヒドロペルオキシド）のレベルの尺度であり、サンプル１ｋｇあたりのミリ当量Ｏ_２で規定され、一方、ＡＶは飽和および不飽和カルボニル化合物の非特異的な尺度である。Ｔｏｔｏｘは、式 Ｔｏｔｏｘ＝２×ＰＶ＋ＡＶによって計算される。

【0074】

オメガ－３のアミノ酸塩、エステル形態の出発物質、および遊離酸形態の魚油の酸化状態の比較は、ＰＶおよびＡＶを測定して評価し、次いですべてのサンプルに対して一定時間同じ酸化条件を課し、その後、サンプルのＰＶおよびＡＶを測定する。酸化条件は、以下のいずれか、１）大気条件で７か月間の密閉容器保管、または２）４０℃で空気にさらされた緩い密閉容器で１か月間の保管、から選択される。

【0075】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は、ＰＵＦＡｓの総量に対する濃度が＞９０％ｗｔ／ｗｔ、ＰＶが＞５０ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが＞１００Ａ／ｇであるエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を用いて、一般的手順に従って合成される。中性アミノ酸に対するＥＰＡのモルパーセント範囲は、それぞれ３０％～５０％／７０％～５０％、４０～５０％／６０～５０％、４５～５０％／５５～５０％であり、優先的には、モルパーセント組成は、５０％／５０％である。溶媒は、０℃～７０℃で０～７０ｍｍＨｇ、優先的には４０℃で３０ｍｍＨｇの減圧下で除去され、続いて粗引きポンプで１日除去される。

【0076】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は、ＰＵＦＡｓの総量に対する濃度が＞９０％ｗｔ／ｗｔ、ＰＶが＞５０ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが＞１００Ａ／ｇであるドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）を用いて、一般的手順に従って合成される。中性アミノ酸に対するＤＨＡのモルパーセント範囲は、それぞれ３０％～５０％／７０％～５０％、４０～５０％／６０～５０％、４５～５０％／５５～５０％であり、優先的には、モルパーセント組成は、５０％／５０％である。溶媒は、０℃～７０℃で０～７０ｍｍＨｇ、優先的には４０℃で３０ｍｍＨｇの減圧下で除去され、続いて粗引きポンプで１日除去される。

【0077】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は、ＰＵＦＡｓの総量に対して、５～４５％ｗｔ／ｗｔのＥＰＡ、５～４０％ｗｔ／ｗｔのＤＨＡ、および３～１０％ｗｔ／ｗｔのＤＰＡを有する、遊離酸としてのアザラシ油を用いて、一般的手順に従って合成される。中性アミノ酸に対する遊離酸としてのアザラシ油のモルパーセント範囲は、それぞれ３０％～５０％／７０％～５０％、４０～５０％／６０～５０％、４５～５０％／５５～５０％であり、優先的には、モルパーセント組成は、５０％／５０％である。溶媒は、０℃～７０℃で０～７０ｍｍＨｇ、優先的には４０℃で３０ｍｍＨｇの減圧下で除去され、続いて粗引きポンプで１日除去される。

【0078】

一実施形態において、ＰＵＦＡｓの中性アミノ酸塩は、ＰＵＦＡｓの総量に対して２０～２５％ｗｔ／ｗｔのＥＰＡおよび５０～５６％ｗｔ／ｗｔのＤＨＡを含有する、遊離酸としてマグロ油を用いて、一般的手順に従って合成される。中性アミノ酸に対するマグロ油のモルパーセント範囲は、それぞれ３０％～５０％／７０％～５０％、４０～５０％／６０～５０％、４５～５０％／５５～５０％であり、優先的には、モルパーセント組成は、５０％／５０％である。溶媒はろ過して除去され、続いて粗引きポンプで１日除去される。

【0079】

［サンプルの特性評価］
フードラボアナライザー（Food Lab Analyzer）とは、サンプルの酸化レベルを決定するための、当技術分野で知られているいくつかの手法の１つである。ＰＶおよびＡＶを決定するために、本明細書ではＣＤＲ ＦｏｏｄＬａｂ（登録商標）ジュニアアナライザーを使用する。手順は以下の通りである。

【0080】

固体生成物０．５ｇを、１：１０（ｖ／ｖ）の比率のＭｅＯＨおよびＨＣｌ溶液２ｍｌに溶解した。混合物を５分間攪拌し、続いて５ｍｌの水を添加した。混合物を、１００ｐｐｍのブチルヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）を含有する３ｍｌのヘキサンで抽出した。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧下で０～７０℃の温度で蒸発させて、遊離酸形態の魚油を得た。これをＣＤＲ ＦｏｏｄＬａｂ（登録商標）ジュニアアナライザーを使用してアニシジン価および過酸化物価を得ることで、評価した。

【0081】

ガスクロマトグラフィー－質量分析（ＧＣ－ＭＳ）によって、最終生成物のＰＵＦＡｓ濃縮物を同定する。

【0082】

ＰＵＦＡｓのエステル化として、約２５ｍｇの遊離脂肪酸（ＦＦＡ）またはＦＦＡの塩を密閉チューブ内で準備し、２％ Ｈ_２ＳＯ_４溶液２ｍｌを加えて均一な溶液を生成し、次いでこれを（攪拌せずに）８０℃で３０分間加熱し、続いて、溶液を室温まで冷却した後、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液２ｍｌを加えた。エステル形態のＦＦＡを、８～１０ｍｌの１００ｐｐｍ ＢＨＴヘキサンで１度抽出した。続いて、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、ＧＣ－ＭＳで分析した。

【0083】

球状オルガノシロキサンのサブミクロン／ナノ粒子における水分定量化（Ｋａｒｌ Ｆｉｓｈｅｒ）として、Ｍｅｔｔｌｅｒ Ｔｏｌｅｄｏの滴定装置Ｃｏｍｐａｃｔ Ｖ２０ｓを使用して水の割合を見積もった。

【実施例】

【0084】

［実施例１］
マグロ油の遊離酸形態であるＰＵＦＡｓエチルエステルとしてのマグロ油の調製

【0085】

２Ｌの三つ口丸瓶ガラス器具に２００ｍＬのエタノールを入れ、その後６４ｇの５０％ＮａＯＨ水溶液を加えた。続いて、ＡＶが６．８Ａ／ｇおよびＰＶが１３ｍｅｑＯ_２／ｋｇを有するマグロ油のＰＵＦＡエチルエステルを窒素下で混合物に添加し、オーバーヘッド撹拌器を用いて１５０ｒｐｍの速度で攪拌した。得られた溶液を室温で１．５時間攪拌した。室温まで冷却後、Ｈ_２Ｏを６００ｍＬ、Ｈ_３ＰＯ_４（８５％）を６０ｍＬ加え、１０分間攪拌した。次いで、有機相を６０ｍＬのヘキサンで１度抽出し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させた。有機溶媒を除去した後、２３．７％のＥＰＡおよび５５．６％のＤＨＡを含む１７０ｇの遊離酸形態のマグロ油は、ＰＶが１．９９ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが＜０．５Ａ／ｇである油として生成された。

【0086】

［実施例２］
エイコサペンタエン酸のグリシン塩（ＥＰＡ－ｇｌｙ）の調製

【0087】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが＞５０ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＞１００Ａ／ｇを示す、６ｇのＥＰＡ、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、グリシン１．５ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。ＥＰＡ、ＮａＯＨおよびグリシンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件（すなわち、大気圧および室温）で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、グリシン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、茶色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが２９．９ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが１４．６Ａ／ｇであるＥＰＡ－ｇｌｙを生成した。約８ｇのＥＰＡ－ｇｌｙを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、６０日間の安定性試験を行った。結果を表１にまとめる。

【0088】

［実施例３］
ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ－ｇｌｙ）のグリシン塩の調製

【0089】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが＞５０ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＞１００Ａ／ｇを示す、６ｇのＤＰＡ、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、グリシン１．５ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。ＥＰＡ、ＮａＯＨおよびグリシンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、グリシン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、茶色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが９．７１ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが＞１００Ａ／ｇであるＤＨＡ－ｇｌｙを生成した。約８ｇのＤＨＡ－ｇｌｙを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、６０日間の安定性試験を行った。結果を表１にまとめる。

【0090】

［実施例４］
遊離酸形態にあるマグロ油のグリシン塩の調製（２３．７％のＥＰＡおよび５５．６％のＤＨＡ）（ｔｕｎａ－ｇｌｙ）

【0091】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが１．９９ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＜０．５Ａ／ｇを示す、６ｇの遊離酸形態にあるマグロ油、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、グリシン１．５ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。魚油、ＮａＯＨおよびグリシンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、グリシン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、淡黄色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが１．０１ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが１．３Ａ／ｇであるｔｕｎａ－ｇｌｙを生成した。約８ｇのｔｕｎａ－ｇｌｙを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、３０日間の安定性試験を行い、さらに、蓋を開けた状態のバイアルを、通気口を開けたオーブンに４５℃でさらに３０日間保管して評価した。得られた結果を表１および表２にまとめる。

【0092】

［実施例５］
遊離酸形態にあるアザラシ油のグリシン塩の調製（ＥＰＡ ２０．２％、ＤＨＡ ２５．３％、ＤＰＡ ７．７％）（ｓｅａｌ－ｇｌｙ）

【0093】

２５０ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが＞５０ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが４７．７Ａ／ｇを示す、３ｇの遊離酸形態にあるアザラシ油、ならびに１０ｇのエタノールを入れ、その後、グリシン０．７５ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液１ｇを添加した。魚油、ＮａＯＨおよびグリシンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、グリシン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、黄色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが６．３２ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが１１．３Ａ／ｇであるＳｅａｌ－ｇｌｙを生成した。約４ｇのＳｅａｌ－ｇｌｙを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、６０日間の安定性試験を行った。結果を表１にまとめる。

【0094】

［実施例６］
遊離酸形態にあるマグロ油のα－アラニン塩の調製（２３．７％のＥＰＡおよび５５．６％のＤＨＡ）（ｔｕｎａ－α－ａｌａ）

【0095】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが１．９９ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＜０．５Ａ／ｇを示す、６ｇの遊離酸形態にあるマグロ油、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、α－アラニン１．８ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。魚油、ＮａＯＨおよびα－アラニンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、α－アラニン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、黄色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが２．０７ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが０．９Ａ／ｇであるｔｕｎａ－α－ａｌａを生成した。約８ｇのｔｕｎａ－α－ａｌａを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、３０日間の安定性試験を行い、さらに、蓋を開けた状態のバイアルを、通気口を開けたオーブンに４５℃でさらに３０日間保管して評価した。得られた結果を表２にまとめる。

【0096】

［実施例７］
遊離酸形態にあるマグロ油のβ－アラニン塩の調製（２３．７％のＥＰＡおよび５５．６％のＤＨＡ）（ｔｕｎａ－β－ａｌａ）

【0097】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが１．９９ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＜０．５Ａ／ｇを示す、６ｇの遊離酸形態にあるマグロ油、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、β－アラニン１．８ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。魚油、ＮａＯＨおよびβ－アラニンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、β－アラニン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、黄色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが０．９７ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが０．８Ａ／ｇであるＰＵＦＡｓ－ｇｌｙを生成した。約８ｇのｔｕｎａ－β－ａｌａを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、３０日間の安定性試験を行い、さらに、蓋を開けた状態のバイアルを、通気口を開けたオーブンに４５℃でさらに３０日間保管して評価した。得られた結果を表２にまとめる。

【0098】

［実施例８］
遊離酸形態にあるマグロ油のタウリン塩の調製（２３．７％のＥＰＡおよび５５．６％のＤＨＡ）（ｔｕｎａ－ｔａｕ）

【0099】

５００ｍＬの丸型ボトルフラスコに、先ずＰＶが１．９９ｍｅｑＯ_２／ｋｇ、およびＡＶが＜０．５Ａ／ｇを示す、６ｇの遊離酸形態にあるマグロ油、ならびに２０ｇのエタノールを入れ、その後、タウリン２．５ｇを含有する４０％ＮａＯＨ水溶液２ｇを添加した。魚油、ＮａＯＨおよびタウリンのモル比は１：１：１であった。混合物を大気圧条件で５分間撹拌して、懸濁液を得た。アセトニトリル１００ｍＬを加えて、タウリン塩をさらに沈殿させた。続いて、４０℃、３０ｍｍＨｇの減圧下で溶媒を蒸発させ、黄色の粉末として最終生成物を得て、これをさらに１日間粗引きポンプに掛け、ＰＶが１．６９ｍｅｑＯ_２／ｋｇおよびＡＶが＜０．５Ａ／ｇであるｔｕｎａ－ｔａｕを生成した。約８ｇのｔｕｎａ－ｔａｕを直径２７ｍｍの透明な２０ｍｌバイアルに保存し、蓋を閉めた状態でベンチに室温で置き、３０日間の安定性試験を行い、さらに、蓋を開けた状態のバイアルを、通気口を開けたオーブンに４５℃でさらに３０日間保管して評価した。得られた結果を表２にまとめる。

【0100】

【表1】

【0101】

【表2】

【0102】

本開示は、その具体的な実施形態に関連して説明されてきたが、さらなる変更が可能であり、本出願は、当技術分野内の既知または慣例の範囲内にあり、本明細書で前に述べた本質的な特徴に適用され得るような、および添付の特許請求の範囲において記載のような本開示からの逸脱を含む、あらゆる変形、使用または適合を包含することを意図していることを理解されたい。

【国際調査報告】