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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-04-10
(54)【発明の名称】放射性金属用キレート剤組成物およびその使用方法
(51)【国際特許分類】
C07K 1/13 20060101AFI20230403BHJP
C07K 14/47 20060101ALI20230403BHJP
C07K 16/18 20060101ALI20230403BHJP
A61K 51/10 20060101ALI20230403BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230403BHJP
G01T 1/161 20060101ALI20230403BHJP
C07F 5/00 20060101ALN20230403BHJP
C07F 9/94 20060101ALN20230403BHJP
【ＦＩ】
C07K1/13 ZNA
C07K14/47
C07K16/18
A61K51/10 200
A61K51/10 100
A61P35/00
G01T1/161 D
C07F5/00 E
C07F5/00 D
C07F9/94
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022550888
(86)(22)【出願日】2021-02-25
(85)【翻訳文提出日】2022-10-24
(86)【国際出願番号】 CA2021050226
(87)【国際公開番号】W WO2021168567
(87)【国際公開日】2021-09-02
(31)【優先権主張番号】62/981,113
(32)【優先日】2020-02-25
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】62/993,636
(32)【優先日】2020-03-23
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【新規性喪失の例外の表示】特許法第３０条第２項適用申請有り 令和２年６月２５日にウェブサイトのアドレス ｈｔｔｐｓ：／／ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ－ｅｕｒｏｐｅ．ｏｎｌｉｎｅｌｉｂｒａｒｙ．ｗｉｌｅｙ．ｃｏｍ／ｄｏｉ／ａｂｓ／１０．１００２／ｃｈｅｍ．２０２００２９９９にて発表
(71)【出願人】
【識別番号】521282974
【氏名又は名称】トライアンフ インコーポレイテッド
(71)【出願人】
【識別番号】520143199
【氏名又は名称】プロビンシャル・ヘルス・サービシーズ・オーソリティ
【氏名又は名称原語表記】ＰＲＯＶＩＮＣＩＡＬ ＨＥＡＬＴＨ ＳＥＲＶＩＣＥＳ ＡＵＴＨＯＲＩＴＹ
(71)【出願人】
【識別番号】300066874
【氏名又は名称】ザ・ユニバーシティ・オブ・ブリティッシュ・コロンビア
(74)【代理人】
【識別番号】100105957
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 誠
(74)【代理人】
【識別番号】100068755
【弁理士】
【氏名又は名称】恩田 博宣
(74)【代理人】
【識別番号】100142907
【弁理士】
【氏名又は名称】本田 淳
(74)【代理人】
【識別番号】100152489
【弁理士】
【氏名又は名称】中村 美樹
(72)【発明者】
【氏名】ヤン、フア
(72)【発明者】
【氏名】ガオ、フォン
(72)【発明者】
【氏名】シェーファー、ポール
(72)【発明者】
【氏名】ユアン、ジェリャン
(72)【発明者】
【氏名】チャン、チェンチェン
(72)【発明者】
【氏名】ベナール、フランソワ
(72)【発明者】
【氏名】ウォートン、ルーク
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C188
4H045
4H048
4H050
【Ｆターム（参考）】
4C084AA12
4C084NA13
4C084ZB26
4C085HH03
4C085KA01
4C085KA03
4C085KA09
4C085KA29
4C085KB82
4C085KB92
4C085KB95
4C085LL18
4C188EE02
4C188FF04
4C188FF07
4H045AA10
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA11
4H045BA13
4H045BA15
4H045BA50
4H045BA56
4H045BA71
4H045CA40
4H045DA75
4H045DA86
4H045EA20
4H045EA50
4H045FA10
4H045GA25
4H048AA03
4H048AB20
4H048VA70
4H048VB10
4H050AA03
4H050AB20
(57)【要約】
穏やかな条件下で２２５Ａｃなどの放射性金属をキレート化するための一般構造（Ｉ）を有するキレート剤が提供される。キレート剤は、生物学的標的化部分に結合して、哺乳動物対象におけるキレート化放射性金属の標的送達を容易にすることができる。
【化１】
【化１】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
生物学的標的化部分と、構造（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）を有するキレート剤と【化1】
を含むインビボ放射性同位体標的化構築物であって、
式中、
Ｘ１およびＸ２は独立してＯ、ＮまたはＳであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、独立して、存在しないかまたは前記キレート剤を前記生物学的標的化部分に結合するために使用できる官能基である、
前記インビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項2】
以下の構造（ＩＶ）、（Ｖ）または（ＶＩ）を含み、【化2】
式中、Ｒ１は、存在する場合、前記生物学的標的化部分を表す、
請求項１に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項3】
以下の構造（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）を含み、【化3】
式中、Ｌは、存在する場合、リンカーを表す、
請求項２に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項4】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つのみが存在する、請求項１～３のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項5】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６は、存在する場合、独立して、カルボキシル基、エステル基、アミド基、イミド基、チオアミド基、チオエステル基、グアニジニウム基、エーテル基、チオエーテル基、またはアミン基である、請求項１～４のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項6】
前記リンカーＬは、存在する場合、場合により１つまたは複数のヘテロ原子で置換されているかまたは１つまたは複数の置換基を有するＣ１～Ｃ１０炭化水素リンカー、芳香族リンカー、カチオンリンカー、アニオンリンカー、１～１０個のアミノ酸を有するアミノ酸リンカー、環化アミノ酸リンカー、ＰＥＧリンカー、環化リングリンカー、芳香族リンカー、またはクリックケミストリーリンカーを含む、請求項１～５のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項7】
前記キレート剤によってキレート化された放射性金属をさらに含む、請求項１～６のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項8】
前記放射性金属が、２２５Ａｃ、２２７Ｔｈ、２２６Ｔｈ、２１１Ａｔ、４４Ｓｃ、９０Ｙ、８９Ｚｒ，１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、８６／８９／９０Ｙ、２１１Ａｔ、２１１Ｆｒ、２１２／２１３Ｂｉ、１５３Ｓｍ、１６１／１６６Ｈｏ、１６５／１６６Ｄｙ、１６１／１５５Ｔｂ、１４０Ｌａ、１４２／１４３／１４５Ｐｒ、１５９Ｇｄ、１６９／１７５Ｙｂ、１６７／１７０Ｔｍ、１６９Ｅｒ、１４９Ｐｍ、１５０Ｅｕ、６８Ｇａ、１３７Ｃｓ、または１４１Ｃｅを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項9】
前記放射性金属が、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項10】
前記放射性金属が２２５Ａｃを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項11】
少なくとも４ＭＢｑ／ｎｍｏｌのモル放射能を有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項12】
前記標的化部分が、ハプテン、抗原、アプタマー、アフィボディ、酵素、タンパク質、ペプチド、抗体、抗体の抗原結合断片、ペプチドミメティックス、受容体リガンド、ステロイド、ホルモン、成長因子、サイトカイン、細胞表面受容体を認識する分子、脂質、親油性基、または炭水化物を含む、請求項１～１１のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項13】
前記抗体の抗原結合断片が、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ断片、ミニボディ、またはダイアボディを含む、請求項１２に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項14】
前記生物学的標的化部分が、Ａ３３抗体、ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）、ＨｕＭａｂ－５Ｂ１、ギレンツキシマブ、ＡＭＧ２１１二重特異性Ｔ細胞誘導、ＩＡＢ２２Ｍ２Ｃミニボディ、リツキシマブ、オビヌツズマブ、Ｕ３６抗体、プレリキサフォル、ペンチキサホル、ＮＦＢ、イピリムマブ、エルロチニブ、ＰＤ１５３０３５、アファチニブ、セツキシマブ、パニツムマブ、ＡＢＹ－０２５アフィボディ、ＨＥＲ２－ナノボディ、トラスツズマブ、ペルツズマブ、ＧＳＫ２８４９３３０、ラムレツズマブ、４ＦＭＦＥＳ、ＦＡＰＩ－０４、ＦＡＰＩ－２１、ＦＡＰＩ－４６、ガラクトース、ＣＢ－ＴＥ２Ａ－ＡＲ０６ペプチド（ＤＯＴＡをクラウンで置換）、ＢＡＹ８６４３６７ペプチド（１８Ｆラベリングの代わりにクラウン結合配位子標識を使用）、ＲＭ２ペプチド（ＤＯＴＡをクラウンで置換）、ＳＢ３ペプチド（ＤＯＴＡをクラウンで置換）、ＲＭ２６ペプチド、ＢＢＮ－ＲＧＤペプチド、Ａｃａ－ＢＢＮペプチド、ＮｅｏＢＯＭＢ１ペプチド（ＤＯＴＡの代わりにクラウンを使用）、エクセンディン－４ペプチド、グルコース、コドリツズマブ、ＥＦ５、ＭＩＳＯ、ＡＺＡ、ＨＸ４、ＡＳＴＭ、ＬＬＰ２Ａ、ペプチドミメティック、ガラクトＲＧＤペプチド、ＦＰＰ（ＲＧＤ）２ペプチド、ＲＧＤ－Ｋ５ペプチド、フルシクラチド、アルファチド－Ｉ、アルファチド－ＩＩ、ＰＲＧＤ２ペプチド、αｖβ６－ＢＰペプチド、ＣｙｃＭＳＨｈｅｘ標的化ペプチド、ＭＭＯＴ０５３０Ａ抗体、ＳＰペプチド、ニューロテンシン、ＰＡＲＰｉ、ＰＳＭＡペプチドミメティック、ＤＣＦＰｙＬ、ＤＣＦＢＣ、ＨｕＪ５９１抗体、デュルバルマブ、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ＢＭＳ－９８６１９２アドネクチン、アテゾリズマブ、ＭＳＴＰ２１０９Ａ抗体、ＴＡＴＥペプチド（オクトレオテート）、ＴＯＣペプチド、ＮＯＣペプチド、ＪＲ１１、チミジン、フレソリムマブ、またはベバシズマブを含む、請求項１～１３のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項15】
前記インビボ放射性同位元素標的化構築物によって標的にされる生物学的標的が、腫瘍関連抗原、Ａ３３膜貫通糖タンパク質、アンドロゲン受容体（ＡＲ）、ＣＡ１９．９、炭酸脱水酵素９（ＣＡ－ＩＸ）、がん胎児性抗原、ＣＤ８、ＣＤ２０、ＣＤ４４ｖ６、Ｃ－Ｘ－Ｃケモカイン受容体４型（ＣＸＣＲ４）、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４（ＣＴＬＡ－４）、上皮成長因子受容体（ＥＧＦＲ）、上皮成長因子受容体２（ＥＲＢＢ２）、上皮成長因子受容体３（ＥＲＢＢ３）、エストロゲン受容体（ＥＲ）、線維芽細胞活性化タンパク質α、ガストリン放出ペプチド受容体（ＧＲＰＲ）、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）、グリピカン３、インテグリンα４β１、インテグリンαｖβ３、インテグリンαｖβ６、メラノコルチン－１受容体（ＭＣ１Ｒ）、メソテリン、ニューロキニン１受容体（ＮＫ１Ｒ）、ニューロテンシン１受容体（ＮＴＳ１Ｒ）、ポリ（ＡＤＰ－リボース）ポリメラーゼ１（ＰＡＲＰ１）、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）、プログラム細胞死タンパク質（ＰＤ－１）、プログラム死リガンド１（ＰＤ－Ｌ１）、前立腺の６回膜貫通上皮抗原－１（ＳＴＥＡＰ１）、ソマトスタチン受容体２（ＳＳＴＲ２）、チミジンキナーゼ、トランスフォーミング増殖因子ベータ（ＴＧＦ－β）、または血管内皮増殖因子受容体（ＶＥＧＦＲ）を含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位元素標的化構築物。
【請求項16】
２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸をキレート剤として含むインビボ放射性同位体標的化構築物。
【請求項17】
請求項１～１６のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物と、薬学的に許容される担体、賦形剤またはビヒクルとを含む医薬組成物。
【請求項18】
哺乳動物対象の体内の選択された場所に放射性同位元素を送達する方法であって、前記放射性同位体を担持する請求項１～１６のいずれか一項に記載のインビボ放射性同位体標的化構築物を前記哺乳動物対象に投与するステップを含む、前記方法。
【請求項19】
前記インビボ放射性同位体標的化構築物の前記標的化部分が、体内の他の場所に比べて体内の選択された場所での前記放射性同位元素の蓄積を増強させて、前記選択された場所に放射線を選択的に送達することをさらに含む、請求項１８に記載の方法。
【請求項20】
前記投与するステップの前に、前記放射性同位体と前記インビボ放射性同位体標的化構築物とを含むキレートを形成するステップをさらに含み、前記キレート構築物を形成するステップは、インキュベーション期間中、約１０℃から約６５℃の間の温度で前記放射性同位元素と前記インビボ放射性同位体標的化構築物とを混合するステップを含む、請求項１８または１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項21】
前記インキュベーション期間中の温度が約１５℃から約２５℃の間である、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記インキュベーション期間が約５分から約３０分の間である、請求項２０または２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項23】
前記混合するステップが、約５．０から約７．４の範囲のｐＨで実施される、請求項１８～２２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項24】
前記混合するステップが、実質的にアルコールを含まない水溶液中で実施される、請求項１８～２３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項25】
体内の前記インビボ放射性同位元素標的化構築物の局在化を評価するためのイメージング手順を実施することをさらに含む前記方法であって、前記イメージング手順は、場合により、陽電子放出断層撮影法（ＰＥＴ）イメージングまたは単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）イメージングを含む、請求項１８～２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項26】
細胞を放射性同位体からの放射線に曝露することにより、体内の選択された場所で細胞死を引き起こすように、前記インビボ放射性同位体標的化構築物を使用する、請求項１８～２５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項27】
体内の選択された場所でがん細胞の死を引き起こすように、前記インビボ放射性同位体標的化構築物を使用する、請求項２６に記載の方法。
【請求項28】
前記放射線がアルファ放射線を含む、請求項２６または２７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項29】
前記哺乳動物対象がヒトである、請求項１８～２８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項30】
金属と、以下の構造（Ｉ）、（ＩＩ）または（ＩＩＩ）を有するキレート剤と【化4】
を含む金属キレートであって、
式中、
Ｘ１およびＸ２は独立してＯ、ＮまたはＳであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して、存在しないかまたはキレート剤を生物学的標的化部分に結合するために使用できる官能基であり、
ここで、前記金属は、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓからなる群から選択される、
前記金属キレート。
【請求項31】
前記金属がアクチニウムである、請求項３０に記載の金属キレート。
【請求項32】
前記金属がアクチニウム－２２５である、請求項３０または３１のいずれか一項に記載の金属キレート。
【請求項33】
前記アクチニウムがＡｃ３＋である請求項３０～３２のいずれか一項に記載の金属キレート。
【請求項34】
請求項３０～３３のいずれか一項に記載の金属キレートを含む水溶液。
【請求項35】
前記水溶液が実質的にアルコールを含まない、請求項３４に記載の水溶液。
【請求項36】
以下の構造（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）を有するキレート剤を放射性金属と水溶液中で１５℃から２５℃の間の温度で混合することを含む、金属キレートを形成する方法であって、【化5】
式中、
Ｘ１およびＸ２は独立してＯ、ＮまたはＳであり、
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して、存在しないかまたは前記キレート剤を生物学的標的化部分に結合するために使用できる官能基であり、
Ｒ１は、存在する場合、生物学的標的化部分を表し、
Ｌは、存在する場合、リンカーを表す、
前記方法。
【請求項37】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つのみが存在する、請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
前記金属が、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓである、請求項３６または３７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項39】
前記水溶液が約５．０から約７．４の範囲のｐＨを含む、請求項３６～３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項40】
前記混合するステップが約５～約３０分間行われる、請求項３６～３９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項41】
前記水溶液がアルコールを実質的に含まない、請求項３６～４０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項42】
請求項３０～３３のいずれか一項に記載の金属キレートであるかまたは請求項３６～４１のいずれか一項に記載の方法によって生成された金属キレートであって、哺乳動物血清または哺乳動物血液中に、場合により、ヒト血清またはヒト血液中に存在する前記金属キレート。
【請求項43】
哺乳動物に存在する、請求項３０～３３のいずれか一項に記載の金属キレートであるかまたは請求項３６～４１のいずれか一項に記載の方法によって生成された金属キレートであって、前記哺乳動物は場合によりヒトである、前記金属キレート。
【請求項44】
哺乳動物細胞内に存在する、請求項３０～３３のいずれか一項に記載の金属キレートであるか、または請求項３６～４１のいずれか一項に記載の方法によって生成された金属キレートであって、前記哺乳動物細胞が場合によりヒト細胞である、前記金属キレート。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
いくつかの実施形態は、改良されたキレート剤（ｃｈｅｌａｔｏｒ）に関する。いくつかの実施形態は、キレート剤を組み込んだ改良された生物学的標的化構築物（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｏｎｓｔｒｕｃｔ）に関する。いくつかの実施形態は、哺乳動物対象内の所望の場所を標的にした放射性同位体のインビボ送達を提供するよう、標的化部分（ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｍｏｉｅｔｙ）に結合されかつ放射性同位体に結合することができるキレート剤に関する。
【背景技術】
【0002】
放射性核種は、特に対象の体内の標的場所に選択的に送達できる場合、がんの診断および治療において潜在的な有用性を有する。放射性核種の標的送達は、インビボ送達のために放射性核種を安全に保持し、体内の非標的領域への送達を適度に低く抑えながら放射性核種を体内の所望の場所に選択的に送達するように設計された構築物を使用することによって達成できる。
【0003】
その目的のために、放射性核種を固定的に保持させるためにキレート剤と共有結合され体の所望の領域（例えば、腫瘍関連抗原）を標的とする標的化部分を活用する標的化構築物が開発されている。標的化部分は、リンカーを介してキレート剤に結合することができる。そのような標的化構築物は、放射性免疫コンジュゲートと呼ばれることがある。放射性免疫コンジュゲートは、インビボ送達のための所望の放射性核種をキレート化するために、例えば、画像診断、構築物を使用した標的放射性核種治療、またはその両方を提供するために（すなわち、セラノスティクス（ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃ）構築物として）使用される。
【0004】
そのような構築物に有用なキレート剤は、穏やかな条件（例えば、室温などの低温、数分以内に高度の錯体形成が起こる）下での迅速な錯体形成速度論および放射性核種に対する強い親和性、ならびに配位の完全性を犠牲にしないリンカー組み込みの高い多様性（すなわち二官能性化）などの特徴を有することができる。小さなペプチドミメティックスおよび他のそのような構築物は、より厳しい放射性ラベリング条件（例えば、高温で）に対してより高い耐性を有する場合がある標的化部分を提供するが、生物製剤などの他の標的化部分、例えば抗体およびその抗原結合断片は、温度上昇などの過酷な放射性ラベリング条件に耐性がない場合がある（例えば、６０℃～９０℃またはそれ以上の範囲の高いラベリング温度に対応できない場合がある）。
【0005】
標的放射性核種療法（ＴＲＴ）は、特定のがんの治療で人気を集めており、特に従来の治療法の選択肢が限られている後期疾患に対して、有意な治療効果および生存利益を示している［１，２］。臨床ＴＲＴに使用されるほとんどの同位体は、ルテチウム－１７７［３］、イットリウム－９０［４］、ストロンチウム－８９［５］、およびサマリウム－１５３［６］を含むベータ線放射体であり、ラジウム－２２３［７］は現在までにＦＤＡが承認した唯一のアルファ線放射体である．アルファ線放射体は、ベータ線放射体（１～２ｋｅＶ／μｍ）と比較して、線エネルギー付与（ＬＥＴ、単位経路長あたりのエネルギー蓄積）が約１００ｋｅＶ／μｍとはるかに高く、フリーラジカル（ＲＯＳ）の生成および致死ＤＮＡ切断が大幅に増加する。［８］、［９］短い範囲のアルファ粒子（４０～１００μｍ）は、腫瘍特異的な標的化ベクターと共に送達されると、周囲の健康な組織を潜在的に保護することができる。これは、微小転移を治療する場合に特に望ましい特徴である。また、アルファ線放射体の細胞毒性は、細胞周期または酸素化状態とは無関係である。［１０，１１］
アクチニウム－２２５（２２５Ａｃ）は、標的アルファ治療（ＴＡＴ）のための新たなアルファ線放射体であり、その好ましい半減期（９．９日）により、放射性医薬品の調製、同位体のグローバル分布、患者への投与、および抗体などのより長い血液循環のための妥当な時間を可能にする（ＩｇＡおよびＩｇＭの場合は５～６日）。２２５Ａｃは、その高い細胞毒性に寄与する急速な崩壊系列を通じて４つの高エネルギーアルファ粒子を放出する（図１）。この潜在能力は、他のすべての従来の治療法を使い果たした患者における転移性去勢抵抗性前立腺がん（ｍＣＲＰＣ）を伴う２２５Ａｃ－ＰＳＭＡ－６１７に関する臨床研究によって実証されている。２人の患者の早期サルベージ治療により、完全寛解が示された［１２］。４０人の患者を対象とした大規模な研究では、少なくとも８週間生存した３８人の患者のうち、２４人（６３％）が５０％を超えるＰＳＡ低下を示し、３３人（８７％）が何らかの程度のＰＳＡ反応を示した。［１３］まだ実験段階ではあるが、２２５Ａｃ標的アルファ療法は、他の末期がん患者に最終的な臨床治療を提供する可能性が高いことを示している。しかしながら、アクチニウムのキレート剤の利用可能性は、少数の例に限定されたままである。
アクチニウム－２２５（２２５Ａｃ）は、標的アルファ治療（ＴＡＴ）のための新たなアルファ線放射体であり、その好ましい半減期（９．９日）により、放射性医薬品の調製、同位体のグローバル分布、患者への投与、および抗体などのより長い血液循環のための妥当な時間を可能にする（ＩｇＡおよびＩｇＭの場合は５～６日）。２２５Ａｃは、その高い細胞毒性に寄与する急速な崩壊系列を通じて４つの高エネルギーアルファ粒子を放出する（図１）。この潜在能力は、他のすべての従来の治療法を使い果たした患者における転移性去勢抵抗性前立腺がん（ｍＣＲＰＣ）を伴う２２５Ａｃ－ＰＳＭＡ－６１７に関する臨床研究によって実証されている。２人の患者の早期サルベージ治療により、完全寛解が示された［１２］。４０人の患者を対象とした大規模な研究では、少なくとも８週間生存した３８人の患者のうち、２４人（６３％）が５０％を超えるＰＳＡ低下を示し、３３人（８７％）が何らかの程度のＰＳＡ反応を示した。［１３］まだ実験段階ではあるが、２２５Ａｃ標的アルファ療法は、他の末期がん患者に最終的な臨床治療を提供する可能性が高いことを示している。しかしながら、アクチニウムのキレート剤の利用可能性は、少数の例に限定されたままである。
【0006】
２２５Ａｃ放射性医薬品に関する研究は、地球上の同位体供給源が限られていることによって妨げられており、その結果、現在までの化学および放射化学の発展が制限されている。［９，１４］２２５Ａｃをペプチド、抗体および他の標的化分子に結合させるには、下のチャート１に示す構造を有するＤＯＴＡキレート剤が現在の主力商品である。実際、それは現在までのすべての臨床試験で使用されている。しかしながら、ＤＯＴＡはより大きな金属イオンに対して熱力学的安定性が減少することがよく知られており［１５］、２２５Ａｃへのキレート化は動力学的に遅いことが確立されており、小さな金属不純物（Ｃａ２＋など）の影響を受けやすく、妥当な放射性標識収率を得るためには、十分な加熱と高い配位子濃度が必要である。［１６－１８］以下のチャート１に示す構造を持つＭａｃｒｏｐａは、サブマイクロモルレベル（＜１０－６Ｍ）でＡｃを定量的に標識できる有望なキレート剤の一例である。［１９，２０］二官能性イソチオシアネート誘導体は合成が難しく不安定であるが、新規のＰＳＭＡ標的化放射性医薬品（ＲＰＳ－０７４）の一部として使用されている。［１９］他のいくつかのキレート剤（ｂｉｓｐａ、［２１］ＣＨＸｏｃｔａｐａ、［２２］およびＤＯＴＰ［２３］）も高いＡｃ結合親和性を示すが、インビボでの安定性はまだ評価されていない。他のいくつかのキレート剤は、結合親和性（ＴＥＴＡ、ＴＥＴＰＡ、ＤＯＴＰＡ）またはインビボでの安定性（ＤＯＴＭＰ、ＨＥＨＡ）のために、成功が限られている。［９，２４］親油性および電荷といったキレート剤固有の特性は、放射性医薬品の生物学的機能に予測できない大きな影響を与える可能性があり［２５，２６］、２２５Ａｃの有する潜在的用途を完全に実現できるように、好ましい特性を持つキレート剤を提供することが重要である。
【0007】
【化1】
【0008】
放射性核種を標的化ベクターに良好な安定性で結合させるには、金属をキレートし、かつ、標的化部分にコンジュゲートすることができるキレート剤が必要である。現在、アクチニウムをキレート化する方策は限られており、その臨床応用を妨げている。穏やかな条件下で配位し、インビボで安定した錯体を生成できるアクチニウム－２２５のキレート剤が必要である。さらにまた、高度の特異性および結合親和性で結合する優れたキレート剤が必要であり、特に、低密度で発現し、したがって容易に飽和する受容体または標的に対して標的アルファ療法を適用することが望まれる場合に必要である。
【0009】
アクチニウム－２２５は、キレート剤を介して適切な標的化部分にコンジュゲートできる場合、標的アルファ療法を実施するのに潜在的に有用である。２２５Ａｃを用いた標的アルファ療法を行うために使用できる１つの標的化部分の例は、α－メラノサイト刺激ホルモン（αＭＳＨ）誘導体、ＣＣＺ０１０４８であり、ＭＣ１Ｒを標的にしたメラノーマイメージングおよび治療用に設計されており、これは急速な腫瘍の取り込みおよび内部移行が示された候補であり、腫瘍を有するマウスにおけるその後の機能化およびインビボ取り込み研究のために選択された。［２９］後期転移性メラノーマは、免疫療法薬を使用しても長期生存率が低い致死性の疾患である。［３０－３３］この疾患には、現在、治癒のための選択肢はない。ＭＣ１Ｒは、原発性および転移性メラノーマで特異的に発現し、正常組織での発現は低い。［３４，３５］本発明者らは、以前、マウスＢ１６Ｆ１０メラノーマの前臨床モデルにおける陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージング用に［６８Ｇａ］Ｇａ－ＣＣＺ０１０４８［２９］および［１８Ｆ］ＣＣＺ０１０６４［３６］によるＭＣ１Ｒを標的にしたαＭＳＨ系放射性医薬品の開発を行っている。本発明者らはまた、ＳＫ－ＭＥＬ－１細胞株を用いたヒトメラノーマの前臨床モデルにおいて、新規αＭＳＨ系の［１８Ｆ］ＣＣＺ０１０９６放射性トレーサーを評価した。［３７］３つのケースすべてで、ＰＥＴ画像での優れた腫瘍の可視化が達成され、素晴らしい腫瘍対正常組織比、すなわち、平均腫瘍対血液比および平均腫瘍対筋肉腫瘍対肝臓比は、それぞれ＞３０および＞９０が達成された。本発明者らは、以前に２２５Ａｃ－ＣＣＺ０１０４８（ＤＯＴＡ）も評価した［２２］。特許文献１も参照されたい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0010】
【特許文献1】国際公開第２０１９／２２２８５１号
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0011】
理想的には、Ａｃ放射性医薬品は、放射性医薬品は、健康な組織への照射によって誘発される細胞毒性を緩和するように、正常組織への低い取り込み、および、腫瘍への早い取り込みを有するべきであり、また、標的化ベクターから放出されるアルファ線放出娘核種が腫瘍内に確実に取り込まれるべきである。これを達成するには、結合した放射性金属を生理学的条件下で容易に放出しない効果的なキレート剤が重要である。
【0012】
２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸の構造および合成酸はＣＮ１０２２１２０４２、ＣＮ１０４１５３６７およびＣＮ１０４１５１３６８に記載されている。
【0013】
関連技術の前述の例およびそれに関連する制限は、例示を意図したものであり、排他的ではない。関連技術の他の制限は、明細書を読み、図面を検討することにより、当業者には明らかになるであろう。
【課題を解決するための手段】
【0014】
以下の実施形態およびその態様は、システム、ツール、および方法に関連して説明および図示されるが、これらは、例示的および説明的であることを意味し、範囲を限定するものではない。様々な実施形態では、上記の問題の１つまたは複数が軽減または排除され、他の実施形態は他の改善を対象としている。
【0015】
いくつかの態様において、インビボ放射性同位体標的化構築物は、生物学的標的化部分および下記構造（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）を有するキレート剤を有し、
【0016】
【化2】
【0017】
式中：Ｘ１およびＸ２は独立してＯ、ＮまたはＳであり；Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は独立して、存在しないかまたはキレート剤を生物学的標的化部分に結合するために使用できる官能基であり、場合によりＲ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６のうちの１つだけが存在し；Ｒ１は、存在する場合、生物学的標的化部分を表し；Ｌは、存在する場合、リンカーを表す。
【0018】
Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６は、存在する場合、独立して、カルボキシル、エステル、アミド、イミド、チオアミド、チオエステル、グアニジニウム、エーテル、チオエーテルまたはアミン基であり得る。存在する場合、リンカーＬは、１つまたは複数のヘテロ原子で場合により置換されるか、または１つまたは複数の置換基を有するＣ１～Ｃ１０炭化水素リンカー、芳香族リンカー、カチオン性リンカー、アニオン性リンカー、１～１０個のアミノ酸を有するアミノ酸リンカー、環化アミノ酸リンカー、ＰＥＧリンカー、環化環リンカー、芳香族リンカー、またはクリックケミストリーリンカーであり得る。構築物は、キレート剤によってキレート化された放射性金属を有し得、放射性金属は、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓであり得る。標的化部分は、ハプテン、抗原、アプタマー、アフィボディ、酵素、タンパク質、ペプチド、抗体、抗体の抗原結合断片、ペプチドミメティック、受容体リガンド、ステロイド、ホルモン、成長因子、サイトカイン、細胞表面受容体を認識する分子、脂質、親油性基、または炭水化物であり得る。標的化部分は、任意の適切な生物学的標的、例えば腫瘍関連抗原を標的とすることができる。
【0019】
いくつかの態様では、放射性同位体を担持する本明細書に記載のインビボ放射性同位元素標的化構築物を哺乳動物対象に投与することによって、放射性同位元素を哺乳動物対象の体内の選択された場所に送達する方法が提供される。標的化部分は、選択された場所に放射線を選択的に送達するために、体内の他の場所に対して、体内の選択された標的場所での構築物の蓄積を容易にすることができる。いくつかの態様では、局在化された放射性同位体を使用して、イメージング手順、例えば、ＰＥＴまたはＳＰＥＣＴイメージングを実行する。いくつかの態様において、局在化された放射性同位体は、細胞を放射性同位体からの放射線に曝露することによって、選択された場所で細胞死を引き起こすために使用される。いくつかの態様において、放射線はアルファ放射線である。いくつかの態様において、放射線によって殺傷される細胞はがん細胞である。哺乳動物対象はヒトであり得る。
【0020】
いくつかの態様では、インビボ放射性同位体標的化構築物および放射性同位体から、穏やかな条件下、例えば約５．０から約７．４の範囲のｐＨで、約５から約３０分間、約１０℃から約６５℃の間の温度で、その２つを混合することにより、キレートを形成することができる。
【0021】
いくつかの態様では、上に示した構造（Ｉ）、（ＩＩ）、または（ＩＩＩ）を有するキレート剤と、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓのうちの１つとを含む金属キレートが提供される。いくつかの態様では、上記構造（Ｉ）、（ＩＩ）、（ＩＩＩ）、（ＩＶ）、（Ｖ）、（ＶＩ）、（ＶＩＩ）、（ＶＩＩＩ）または（ＩＸ）を有するキレート剤と放射性金属とを水溶液中で１５℃から２５℃の間の温度で混合することによって金属キレートを形成する方法が提供される。金属は、２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、６８Ｇａ、１５５Ｔｂ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓであり得る。ｐＨは、約５．０から約７．４の範囲であり得る。前記混合するステップは、約５分から約３０分の間、実施することができる。金属キレートは、哺乳動物血清または哺乳動物血液、場合によってはヒト血清またはヒト血液中で安定して存在し得る。金属キレートは、哺乳動物、場合によってはヒトに存在し得る。
【0022】
上記の例示的な態様および実施形態に加えて、図面を参照することによって、および、以下の詳細な説明を検討することによって、さらなる態様および実施形態が明らかになるであろう。
【0023】
例示的な実施形態は、図面の参照図に示されている。本明細書に開示された実施形態および図面は、限定的ではなく例示的であると考えられることが意図されている。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【図1】
２２５Ａｃの崩壊系列を示す図。
【図2】クラウンおよび標的化部分を介在するリンカーを有するクラウンキレート剤を組み込むインビボ放射性同位体標的化構築物の一例示的な実施形態を示す図。
【図3】リンカーなしでキレート剤としてクラウンを組み込んだインビボ放射性同位体標的化構築物の一例示的な実施形態を示す図。
【図4】二官能性クラウンと標的化部分との間に介在するリンカーを有するキレート剤として二官能性クラウンを組み込んだインビボ放射性同位体標的化構築物の一例示的な実施形態を示す図。
【図5】リンカーなしでキレート剤として二官能性クラウンを組み込んだインビボ放射性同位体標的化構築物の一例示的な実施形態を示す図。
【図6A】１つの例示的な実施形態に従って、クラウンキレート剤をペプチド標的化部分にカップリングするためのスキームを表す図。
【図6B】別の例示的な実施形態に従って、クラウンキレート剤をペプチド標的化部分にカップリングするためのスキームを表す図。
【図7】一例示的な実施形態による、２２５Ａｃをキレート化する一例示的なクラウンオクトレオテート（ＴＡＴＥ）構築物についてのラジオＴＬＣの結果を示す図。
【図8】対応する対照（遊離Ａｃ）についてのラジオＴＬＣ結果を示す図。
【図9】１回の実験における室温でのクラウンキレート剤（［Ｃ］）の様々な濃度での２２５Ａｃによるラベリング収率を示す図。
【図10】３０分間または６０分間のインキュベーション期間中の１つの実験における室温でのクラウンキレート剤（クラウン－ＴＡＴＥ標的化構築物として提供される）の様々な濃度での２２５Ａｃでの放射性ラベリング収率を示す図。
【図11】様々なｐＨレベルの様々な緩衝液中の２２５Ａｃによるクラウンのラベリングを示す図。
【図12】３７℃での２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの血清安定性を示す図。
【図13】
２２５Ａｃ標識クラウンの経時的な放射化学的収率を示す図。
【図14】様々なキレート剤濃度（［配位子］）での２２５ＡｃでのクラウンおよびＤＯＴＡの比較ラベリングを示す図。
【図15】経時的な２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの血清安定性を示す図。
【図16】クラウン、クラウン－ＴＡＴＥ、クラウン－αＭＳＨおよびＤＯＴＡの１７７Ｌｕによる異なるキレート剤濃度での比較ラベリングを示す図。
【図17】
２１３Ｂｉでのクラウンおよびクラウン－αＭＳＨのラベリングを示す図。
【図18】
１５５ＴｂによるＤＯＴＡに対するクラウンおよびクラウン－αＭＳＨのラベリングを示す図。
【図19】
６８Ｇａによるクラウン－ＴＡＴＥのラベリングを示す図。
【図20】
１７７Ｌｕを含むクラウン、クラウン－αＭＳＨおよびクラウン－ＴＡＴＥの血清安定性を示す図。
【図21】３７℃での１５５Ｔｂ－クラウン－αＭＳＨの血清安定性を示す図。
【図22】
２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ構築物の体内分布（％ＩＤ／ｇ）を、Ｓｅｐ－Ｐａｋ精製と０．１Ｍ Ｌ－アスコルビン酸で、前夜に調製した場合（Ａ）と、同日（４時間前）に調製した場合（Ｄ）で示した図。（双方向ＡＮＯＶＡ、Ｓｉｄａｋメソッドを使用して修正された多重比較、＊＊＊ｐ＜０．０００１、ｎ≧３）。
【図23】０．１Ｍ Ｌ－アスコルビン酸を含む場合と含まない場合の２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨのＨＰＬＣガンマトレースを示す図。
【図24】Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの生物学的分布を、組織１グラム当たりの％注射用量（％ＩＤ／ｇ）として示す図。
【図25】Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２１３Ｂｉ－クラウン－ＴＡＴＥの生物学的分布を、組織１グラム当たりの％注射用量（％ＩＤ／ｇ）として示す図。
【発明を実施するための形態】
【0025】
以下の説明を通して、当業者により深い理解を提供するために具体的な詳細が記載される。しかしながら、周知の要素は、本開示を不必要に不明瞭にすることを避けるために、詳細に図示または説明されていない場合がある。したがって、説明および図面は、限定的な意味ではなく、例示的な意味でみなされるべきである。
【0026】
本明細書で使用される場合、予防という用語は、症状の予防、症状の重症度の最小化、または症状の悪化の防止を含む。本明細書で使用される場合、治療する、または治療、という用語は、症状の重症度を逆転または軽減することを含む。
【0027】
本明細書で使用される場合、抗体という用語は、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、単鎖抗体、多量体抗体などを含むすべての形態の抗体を含む。抗体の抗原結合断片という用語は、抗原に結合することができる抗体の任意の部分を指し、これには、例としてのみ、限定するものではないが、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ断片、ミニボディ、ダイアボディなどが含まれる。特定の抗体への言及には、任意の規制当局によってその特定の抗体とバイオシミラーであると決定された任意の抗体への言及が含まれる。
【0028】
本明細書で使用される場合、ペプチドミメティックという用語は、ペプチドを模倣するように設計された小さなタンパク質様分子を意味し、限定するものではないが、修飾ペプチド、ペプチドフォルダマー、構造ミメティック、および機構ミメティックを含む。
【0029】
放射性金属のためのキレート剤組成物が開示される。本組成物の使用方法および製造方法も開示される。本組成物は、治療薬および／または診断薬として使用することができる。
【0030】
本発明者らは、一般構造（１）を有するキレート剤が穏やかな条件下で２２５Ａｃを含む放射性同位体を配位し、インビボ条件下で安定な錯体を生成することができ、そのようなキレート剤を例えば放射線治療、診断および／またはセラノスティック構築物における用途に特に適したものにすることを決定した。キレート剤は、生物学的標的化部分に直接またはリンカーを介して結合して、そのような用途での使用に適切な構築物を作成することができる。
【0031】
【化3】
【0032】
構造（１）は、２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸を表す。これは、本明細書では「クラウン」と呼ばれる。本発明者らは、クラウンが、穏やかな条件下で配位し、インビボで安定な錯体を生成することができる、アクチニウムなどの大きな金属に対する新規の有効なキレート剤であることを実証した。さらに、標的化部分にコンジュゲートした場合のクラウンのインビボ分布プロファイルは好ましいものであり、所望の放射性金属のキレート化に対する良好な選択性および特異性を示している。また、アクチニウムなどの所望の大きな放射性金属に対するクラウンの結合親和性は、現在利用可能なキレート剤と比較して非常に高く、高い比放射能を有するインビボ放射性同位体標的化キレート構築物の調製を可能にする。高い比放射能を有するインビボ放射性同位体標的化キレート構築物の調製は、標的分子が比較的低レベルで発現され、標的分子がインビボで容易に飽和可能になる状態の治療または予防に特に重要であり得る。
【0033】
いくつかの実施形態において、クラウンは、生物学的標的化部分またはリンカーを構造（１）のカルボキシル基のうちの１つに直接結合させることによって、生物学的標的化部分に直接結合することができ（場合によりクラウンおよび生物学的標的化部分を介在するリンカーを有し）、以下の（２）として示される構造が得られ、ここでＲ１は生物学的標的化部分であり、場合により、以下の構造（３）においてＬとして示される、生物学的標的化部分およびクラウンキレート剤を介在するリンカーを有する。
【0034】
【化4】
【0035】
さらにまた、いくつかの実施形態において、カルボキシル基の１つまたは複数の酸素原子が、異なるヘテロ原子、例えばＮまたはＳによって置換されている。いくつかの実施形態において、クラウンキレート剤は、下記（４）として示される構造を有し、Ｘ１およびＸ２は独立して、Ｏ、Ｎ、またはＳである。したがって、様々な実施形態において、キレート剤を生物学的標的化部分に結合させるために二官能性クラウンキレート剤上に設けられる官能基は、カルボキシル、エステル、アミド、イミド、チオアミド、チオエステル、グアニジニウムなどであり得、（５）として以下に示す構造をもたらし、Ｒ１が、生物学的標的化部分であり、場合により以下の構造（６）においてＬとして図示される、生物学的標的化部分およびクラウンキレート剤を介在するリンカーを有し得る。
【0036】
【化5】
【0037】
いくつかの実施形態において、クラウンキレート剤は、二官能性キレート剤、すなわち、遊離カルボキシル基のうちの１つを使用するのではなく、キレート剤を標的化部分に結合するために使用できる追加の官能基を有するキレート剤として提供される。任意の適切な官能基を任意の適切な位置で構造（１）に結合させて、二官能性キレート剤を得ることができる。例えば、いくつかの実施形態において、二官能性キレート剤は、以下の構造（７）を有し、二官能性キレート剤を生物学的標的化部分と結合させて以下の構造を得るために使用できる官能基は、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６で示される位置のうちの１つに設けることができ、ここで、Ｒ１は、構造（８）または（９）に存在する場合、生物学的標的化部分であり、場合により、下記構造（９）でＬとして示される、キレート剤および生物学的標的化部分を介在するリンカーを伴う。Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５またはＲ６に使用できる官能基の例には、カルボキシル、エステル、アミド、イミド、チオアミド、チオエステル、グアニジニウム、エーテル、チオエーテル、アミンなどが含まれる。
【0038】
【化6】
【0039】
１つの例示的な実施形態では、二官能性クラウンは、以下の構造（１０）を有する。
【0040】
【化7】
【0041】
図２、３、４および５を参照すると、１つの例示的な実施形態では、２０Ａ、２０Ｂ、２０Ｃまたは２０Ｄとして概略的に示されるインビボ標的化キレート構築物の例（本明細書においてインビボ標的化キレート構築物２０と総称される）は、キレート剤２６Ａまたは二官能性キレート剤２６Ｂ（本明細書ではまとめてキレート剤２６と呼ぶ）に結合された標的化部分２２を有する。図２および３に示される実施形態を含むいくつかの実施形態において、キレート剤２６Ａは構造（１）を有するが、他の実施形態では、キレート剤２６Ａは構造（４）を有するキレート剤で置き換えることができる。いくつかの実施形態において、キレート剤２６Ｂは、構造（１０）を有する（図４および５の図示された実施形態のように）が、他の実施形態では、キレート剤２６Ｂは構造（７）を有するキレート剤で置き換えることができる。いくつかの他の実施形態では、構造（２）は、インビボ標的化構築物３０Ｂに対応し、構造（５）は、キレート剤２６Ａの代わりに異なるクラウンキレート剤を有するインビボ標的化構築物３０Ｂに対応する。いくつかの他の実施形態では、構造（３）はインビボ標的化構築物３０Ａに対応し、構造（６）はキレート剤２６Ａを異なるクラウンキレート剤で置換したインビボ標的化構築物３０Ａに対応する。いくつかの他の実施形態では、構造（８）はインビボ標的化構築物３０Ｄに対応し、構造（９）はインビボ標的化構築物３０Ｃに対応し、異なる二官能性クラウンキレート剤がキレート剤２６Ｂに置換されている。
【0042】
図２および４に示す実施形態を含むいくつかの実施形態において、標的化部分２２は、適切なリンカー２４を介してキレート剤２６に結合されて、インビボ標的化構築物３０Ａまたは３０Ｃ（インビボ標的化構築物３０Ｂおよび３０Ｄと共にインビボ標的化構築物３０と総称される）を生じる。図３および５に示す実施形態を含むいくつかの実施形態において、リンカーは使用されず、キレート剤２６は、標的化部分２２に直接結合されて、インビボ標的化構築物３０Ｂまたは３０Ｄを生じる。キレート剤２６は、放射性核種２８をインビボ標的化構築物３０にキレート化して、標的化部分２２によって支援される放射性核種２８ペイロードの標的インビボ送達に適切なインビボ標的化キレート構築物２０と呼ばれる金属キレート構築物を生成するために使用することができる。
【0043】
インビボでのインビボ標的化キレート構築物２０の標的送達を方向づけるのに適した任意の部分を、標的化部分２２またはＲ１として使用することができる。いくつかの実施形態において、標的化構築物２０の標的化部分２２は、ハプテン、抗原、アプタマー、アフィボディ分子、酵素、タンパク質、ペプチド、抗体、抗体の抗原結合断片、ペプチドミメティック、受容体リガンド、ステロイド、ホルモン、成長因子、サイトカイン、細胞表面受容体を認識する分子（細胞の成長、代謝、または機能に関与する分子を含む）、脂質、親油性基、炭水化物、または体内の特定の場所に構築物を選択的に方向づけることができる任意の他の分子または標的化成分である。標的化部分は、任意の適切な方法で、例えば、生物学的、半合成的、または合成的に生成することができる。
【0044】
放射性同位元素標的化構築物を哺乳類被験者の体内の所望の場所にインビボで送達するために開発された標的化部分の例としては、特定の種類のがんに関連する特定のマーカーを標的とする抗体、がん細胞で高発現するタンパク質を標的とするペプチドミメティックスなどがある。適切な標的化部分の例示的な非限定的な例を表１に列挙する。［４５］いくつかの標的化部分は、正常細胞に比べてがん細胞で過剰発現している細胞表面に存在する抗原、タンパク質、炭水化物または他の分子、例えば腫瘍関連抗原などの生物学的標的と選択的に相互作用する。適切な標的の例示的な非限定的な例を表１に列挙する。放射性医薬品の適切な標的および／または標的化部分は、現在知られているか、発見されたか、または将来開発されるかにかかわらず、当業者に知られるであろう。いくつかの実施形態において、標的化部分２２は、抗体または抗体の抗原結合断片である。いくつかの実施形態において、標的化部分２２はペプチドミメティックである。いくつかの実施形態において、標的化部分２２は、表１に列挙された標的化部分のうちの１つであり、参照分子に存在する任意のキレート剤がクラウンキレート剤によって置き換えられている。いくつかの実施形態において、標的化部分２２は、表１に列挙された標的のうちの１つと選択的に相互作用する。
【0045】
【表1-1】
【0046】
【表1-2】
【0047】
【表1-3】
【0048】
【表1-4】
【0049】
任意の適切なリンカーをリンカー２４またはＬとして使用して、キレート剤２６を標的化部分２２またはＲ１に結合することができる。例えば、例示のみを目的として、適切なリンカーには次のものを含めることができる：
・場合により飽和または不飽和であり、場合により１つまたは複数のヘテロ原子で置換されているか、または１つまたは複数の置換基を有する２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を含む１～１０個の炭素原子（Ｃ１～Ｃ１０）を含む炭化水素リンカー；前記炭化水素リンカーは、例えば８－アミノオクタン酸、６－アミノヘクサン酸などの直鎖、環状および／または分枝であり得る；
・例えばアミノフェニル酢酸などのベンジル基などの芳香族部分を含む芳香族リンカー；
・２、３、４、５、６、７、８、または９個のアミノ酸残基を含む１～１０個のアミノ酸残基を有するアミノ酸リンカーであって、そのうちのいずれか１つまたは複数は、天然に存在するアミノ酸残基、Ｄ－アミノ酸残基または他の天然に存在しない残基であってもよく、その例は、ＧｌｙＧｌｙ（配列番号：３）、ＧｌｕＧｌｕ（配列番号：４）、ＧｌｙＳｅｒＧｌｙＳｅｒ（配列番号：５）などが挙げられる；
・環化リンカー、または環化環構造、場合により環化アミノ酸リンカー、例えばアミノシクロヘキサンカルボン酸；
・任意の適切な長さのＰＥＧリンカー；
・アミノ酸残基または他の残基から形成されたかどうかにかかわらず、カチオン性リンカー、例えば、Ｐｉｐ、４－（２－アミノエチル）－１－カルボキシメチル－ピペラジン（Ａｃｐ）；
・アミノ酸残基または他の残基から形成されたかどうかにかかわらず、アニオン性リンカー、例えば、ＡｓｐＡｓｐ（配列番号６）、ＧｌｕＧｌｕ（配列番号７）；
・炭水化物含有リンカー；
・クリックケミストリーリンカー（トリアゾール）；
・任意の他の適切なリンカー；
・または前述の組み合わせまたは改良。
・場合により飽和または不飽和であり、場合により１つまたは複数のヘテロ原子で置換されているか、または１つまたは複数の置換基を有する２、３、４、５、６、７、８または９個の炭素原子を含む１～１０個の炭素原子（Ｃ１～Ｃ１０）を含む炭化水素リンカー；前記炭化水素リンカーは、例えば８－アミノオクタン酸、６－アミノヘクサン酸などの直鎖、環状および／または分枝であり得る；
・例えばアミノフェニル酢酸などのベンジル基などの芳香族部分を含む芳香族リンカー；
・２、３、４、５、６、７、８、または９個のアミノ酸残基を含む１～１０個のアミノ酸残基を有するアミノ酸リンカーであって、そのうちのいずれか１つまたは複数は、天然に存在するアミノ酸残基、Ｄ－アミノ酸残基または他の天然に存在しない残基であってもよく、その例は、ＧｌｙＧｌｙ（配列番号：３）、ＧｌｕＧｌｕ（配列番号：４）、ＧｌｙＳｅｒＧｌｙＳｅｒ（配列番号：５）などが挙げられる；
・環化リンカー、または環化環構造、場合により環化アミノ酸リンカー、例えばアミノシクロヘキサンカルボン酸；
・任意の適切な長さのＰＥＧリンカー；
・アミノ酸残基または他の残基から形成されたかどうかにかかわらず、カチオン性リンカー、例えば、Ｐｉｐ、４－（２－アミノエチル）－１－カルボキシメチル－ピペラジン（Ａｃｐ）；
・アミノ酸残基または他の残基から形成されたかどうかにかかわらず、アニオン性リンカー、例えば、ＡｓｐＡｓｐ（配列番号６）、ＧｌｕＧｌｕ（配列番号７）；
・炭水化物含有リンカー；
・クリックケミストリーリンカー（トリアゾール）；
・任意の他の適切なリンカー；
・または前述の組み合わせまたは改良。
【0050】
他の放射性医薬品標的化構築物のために当技術分野で開発されたリンカーの例は、当業者に知られている。ＰＥＧリンカーまたはカチオン性／アニオン性リンカーなどの親水性または荷電リンカーを使用して、標的化構築物の全体的な水溶性を高めることができる。アミノ酸側鎖の置換および／または炭水化物部分の包含は、標的化構築物の溶解性および／または薬物動態を改良または変更するために行うことができる。当業者は、必要に応じて、特定の用途に適切なリンカーを開発および最適化することができる。他の放射性医薬品標的化構築物のために当技術分野で開発されたリンカーの例は、例としてのみであって限定するものではないが、Ｂｅｎｅｓｏｖａら、Ｂａｒｎａｓｋｉら、およびＫｕｏ［４１、４２、４３、４４］らによって記載されている。当業者は、特定の用途に適したリンカーを開発し、最適化することができる。
【0051】
いくつかの実施形態において、構築物２０などの構築物は、例えば、適切な化学反応を介して、標的化部分２２とキレート剤２６とを結合する適切な反応を実行して、場合により標的化部分２２およびキレート剤２６を介在するリンカー２４で、インビボ標的化構築物３０を生成することによって調製される。次いで、放射性核種２８を、例えば、後の時点で、病院または診療所の環境において、キレート剤２６に添加および結合させて、所望のインビボ標的化金属キレート構築物２０を形成させる。他の実施形態では、放射性核種２８を最初にキレート剤２６でキレート化することができ、次にキレート剤２６を任意の適切な方法で標的化部分２２とコンジュゲートさせてインビボ標的化キレート構築物２０を得る。
【0052】
いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、穏やかな温度条件下、例えば約６５℃未満、６０℃、５５℃、５０℃、４５℃、４０℃、３５℃または３０℃でキレート剤２６（構築物３０の一部として含む）に結合される。いくつかの実施形態において、穏やかな温度条件は、約１０℃から６５℃の間（その間の任意の値または下位範囲を含む、例えば、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３５℃、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃または６５℃）である。いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、室温で、すなわち約１５℃から約２５℃の範囲（その間の任意の値を含む、例えば、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、または２４℃）でキレート剤２６または構築物３０にコンジュゲートされる。
【0053】
いくつかの実施形態において、放射性核種２８または構築物３０は、キレート剤２６と混合されて、穏やかなｐＨ条件下、例えば約５．０から約７．４の間（その間の任意の値または部分範囲を含む、例えば、５．２、５．４、５．６、５．８、６．０、６．２、６．４、６．６、６．８、７．０または７．２）で、金属キレートを形成する。いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、おおよそ中性のｐＨ、すなわち、おおよそ７．０のｐＨ、例えば、約７．０のｐＨで、例えば、約６．８から７．２の間（その間の任意の値を含む、例えば６．９、７．０または７．１）キレート剤２６にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、おおよそ生理学的ｐＨ、すなわちおおよそｐＨ７．４、例えば約７．２から７．６の間（その間の任意の値を含む、例えば、７．３、７．４または７．５）でキレート剤２６にコンジュゲートされる。いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、水溶液中でキレート剤２６または構築物３０と混合される。いくつかの実施形態において、水溶液は、エタノールなどのアルコールを含まないかまたは実質的に含まない。
【0054】
いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、キレート化金属錯体を形成させるインキュベーション期間中、キレート剤２６または構築物３０と混合される。いくつかの実施形態において、インキュベーション期間は、約５分から約６時間の間であり、その間の任意の期間、例えば、１０、１５、２０、２５、３０、４５、６０、または９０分、または２、３、４、または５時間を含む。いくつかの実施形態において、インキュベーション期間は、約５分から約３０分の間である。
【0055】
いくつかの実施形態において、放射性核種２８にコンジュゲートしたときに存在するキレート剤２６または構築物３０の濃度は、その間の任意の値、例えば１０－５または１０－６Ｍを含む、約１０－４から１０－７Ｍの間である。使用されるキレート剤２６または構築物３０の濃度は、任意の特定の実施形態で使用される特定のキレート剤２６と放射性核種２８との間の錯体形成速度論に応じて調整することができる。同様に、放射性核種２８がキレート剤２６または構築物３０と混合される温度は、錯体形成速度論に応じて変えることができる。
【0056】
いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物血清中に、場合によりヒト血清中に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物血清中で、場合によりヒト血清中で安定である。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物の体内の哺乳動物血清中に、場合によりヒトの体内のヒト血清中に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物の血液中に存在し、場合によってはヒトの血液中に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物の体内の哺乳動物の血液に、場合によってはヒトの体内のヒトの血液に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物の体内に、場合によってはヒトの体内に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物細胞に、場合によってはヒト細胞に存在する。
【0057】
いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、放射性核種２８と、結合した放射性核種２８を含むインビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０を対象の体内の選択された場所に特異的に方向づける標的化部分２２とを組み込んだインビボ放射性同位体標的化キレート構築物を対象に投与することによって哺乳動物対象の体内の選択された場所に送達される。いくつかの実施形態において、本方法は、体内の他の場所と比較して、体内の選択された場所で標的化部分２２がインビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０の蓄積を増強して、選択された場所に放射線量を選択的に送達することを可能にすることを含む。いくつかの実施形態において、標的線量の放射線を送達することにより、選択された場所で細胞死を引き起こすために、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０が使用される。いくつかの実施形態において、選択された場所で殺傷される細胞はがん細胞である。いくつかの実施形態において、放射線はアルファ放射線である。
【0058】
いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、例えばエンドサイトーシスまたは他の方法により、哺乳動物対象内の細胞によって内部移行される。したがって、いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、哺乳動物細胞内に存在する。いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、ヒト細胞内に存在する。
【0059】
いくつかの実施形態において、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０は、対象への構築物２０の投与の前に、標的化部分２２と、キレート剤２６と、場合によりリンカー２４とを有するインビボ放射性同位体標的化構築物３０を、放射性核種２８と混合して、インビボ放射性同位体標的化キレート構築物２０を形成することにより、調製される。いくつかの実施形態において、前記混合は、穏やかな温度、例えば約１０℃から約６５℃の範囲の温度で実施される（その間の任意の値、例えば、１５℃、１６℃、１７℃、１８℃、１９℃、２０℃、２１℃、２２℃、２３℃、２４℃、２５℃、２６℃、２７℃、２８℃、２９℃、３０℃、３５℃、４０℃、４５℃、５０℃、５５℃または６０℃を含む）。いくつかの実施形態において、前記混合は、穏やかなｐＨ、例えば、おおよそ中性のｐＨまたはおおよそ生理学的なｐＨで実施される。いくつかの実施形態において、穏やかなｐＨは、約５．０から約７．４の間のｐＨであり、その間の任意の値、例えば、５．２、５．４、５．６、５．８、６．０、６．２、６．４、６．６、６．８、７．０または７．４を含む。いくつかの実施形態において、穏やかなｐＨはおおよそ６．０である。いくつかの実施形態において、前記混合は生理学的ｐＨ、例えば約７．０から７．４の間の範囲（その間の任意の値、例えば７．１、７．２、または７．３などを含む）で行われる。いくつかの実施形態において、放射性核種２８は、水溶液中のインビボ放射性同位体標的化構築物３０と混合される。いくつかの実施形態において、水溶液は、エタノールなどのアルコールを含まないかまたは実質的に含まない。いくつかの実施形態において、混合は、約５分から約３０分の間（その間の任意の値、例えば１０、１５、２０、または２５分を含む）で実行される。
【0060】
いくつかの実施形態において、インビボ標的化キレート構築物２０が診断用途に使用される。例えば、インビボ標的化キレート構築物２０は、任意の適切な方法で対象に投与されてもよく、結合した放射性核種２８の場所を可視化することによって、標的化部分２２を介した体内の標的化キレート構築物２０の局在を評価するために任意の適切なイメージング技術または手順、例えば、陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）イメージングまたは単一光子放出コンピュータ断層撮影（ＳＰＥＣＴ）イメージングを使用してもよい。そのようなイメージング手順は、例えば、対象を特定の障害またはがんの種類を有すると診断するため、または特定の障害またはがんの種類によって影響を受ける対象の体の領域を特定するために実行することができる。いくつかの実施形態において、そのようなイメージング技術によって評価される、体内の標的器官、領域、または複数の場所への標的化キレート構築物２０の局在は、対象が特定の形態のがんを有することを示し得、および／またはがんの程度、およびまたはがん細胞があるもしくはある可能性がある体内の場所を評価するために使用することができ、および／またはがんの転移の程度を評価するために使用することができる。
【0061】
いくつかの実施形態において、標的化キレート構築物２０などの構築物は、例えば、標的放射性核種療法を実施するために、治療用途に使用される。例えば、標的化キレート構築物２０は、任意の適切な方法で対象に投与されてもよく、標的化部分２２によって付与される標的化効果を使用して、キレート化された放射性核種２８を対象の体内の所望の場所に送達することができる。いくつかの実施形態において、放射性核種２８からの放射線を使用して、所望の場所で細胞を殺傷する。いくつかの実施形態において、所望の場所で殺傷される細胞はがん細胞である。いくつかの実施形態において、標的化構築物２０は、標的放射性核種治療を行うために使用される。いくつかの実施形態において、標的化構築物２０は、標的アルファ治療を行うために使用される。
【0062】
いくつかの実施形態において、医薬組成物が提供され、前記医薬組成物は、標的化構築物２０および薬学的に許容される担体を含む。医薬組成物は、任意の適切な賦形剤、ビヒクル、緩衝剤、希釈剤、結合剤、増粘剤、潤滑剤、保存剤などを含み得、任意の所望の状態で例えば液体、懸濁液、エマルジョン、ペーストなどとして提供され得る。いくつかの実施形態において、医薬組成物は、任意の適切な方法、例えば、経口、静脈内、筋肉内、皮下、腹腔内、腫瘍内、吸入などで投与することができる。
【0063】
いくつかの実施形態において、がんを有するか、またはがんを有すると考えられる対象の予防および／または治療の方法が提供される。いくつかの実施形態において、本方法は、インビボ標的化キレート構築物２０またはそのような標的化キレート構築物２０を含む医薬組成物を対象に投与することを含む。いくつかの実施形態において、本方法は、治療的および／または予防的に有効量の標的化キレート構築物２０を対象に投与することを含む。
【0064】
いくつかの実施形態において、対象は哺乳動物である。いくつかの実施形態において、対象はヒトである。代替的な実施形態では、対象は家畜またはペット、例えば、ウマ、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、イヌ、ウサギなどである。いくつかの実施形態において、対象はサルである。
【0065】
例示的な実施形態は、がん細胞の標的化および殺傷に関して本明細書に記載されているが、そのような構築物は、他の望ましくない細胞型、例えば、細菌、真菌、自己免疫疾患に関与する細胞、ウイルス感染細胞、寄生虫などの選択的な殺傷および／または切除に使用することができる。
【0066】
いくつかの実施形態において、金属２８として使用できる金属には、アクチニド、ランタニド、希土類金属、または主族金属が含まれる。いくつかの実施形態において、ランタニドは、Ｌａ、Ｃｅ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｐｍ、Ｓｍ、Ｅｕ、Ｇｄ、Ｔｂ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｅｒ、Ｔｍ、ＹｂまたはＬｕである。いくつかの実施形態において、ランタニドは、Ｇｄ、Ｌｕ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｈｏ、ＥｒまたはＹｂである。いくつかの実施形態において、ランタニドは放射性ランタニドである。いくつかの実施形態において、アクチニドは、Ａｃ、Ｔｈ、Ｐａ、Ｕ、Ｎｐ、Ｐｕ、Ａｍ、Ｃｍ、Ｂｋ、Ｃｆ、Ｅｓ、Ｆｍ、Ｍｄ、ＮｏまたはＬｒである。いくつかの実施形態において、アクチニドはＡｃ、ＴｈまたはＵである。いくつかの実施形態において、アクチニドは放射性アクチニドである。いくつかの実施形態において、希土類金属は、Ｓｃ、Ｙ、Ｌａ、Ｃｅ、Ｐｒ、Ｎｄ、Ｐｍ、Ｓｍ、Ｇｄ、Ｔｂ、Ｄｙ、Ｈｏ、Ｅｒ、Ｔｍ、ＹｂまたはＬｕである。
【0067】
いくつかの実施形態において、金属は放射性同位元素である。いくつかの実施形態において、放射性同位体は任意の所望の放射性同位体、例えば２２５Ａｃ、２２７Ｔｈ、２２６Ｔｈ、２１１Ａｔ、４４Ｓｃ、９０Ｙ、８９Ｚｒ、１７７Ｌｕ、１１１Ｉｎ、８６／８９／９０Ｙ、２１１Ａｔ、２１１Ｆｒ、２１２／２１３Ｂｉ、１５３Ｓｍ、１６１／１６６Ｈｏ、１６５／１６６Ｄｙ、１６１／１５５Ｔｂ、１４０Ｌａ、１４２／１４３／１４５Ｐｒ、１５９Ｇｄ、１６９／１７５Ｙｂ、１６７／１７０Ｔｍ、１６９Ｅｒ、１４９Ｐｍ、１５０Ｅｕ、６８Ｇａ、１３７Ｃｓ、１４１Ｃｅなどである。
【0068】
いくつかの実施形態において、金属は、アクチニウム（Ａｃ）、ルテチウム（Ｌｕ）、ビスマス（Ｂｉ）、ガリウム（Ｇａ）、インジウム（Ｉｎ）、テルビウム（Ｔｂ）、トリウム（Ｔｈ）、またはセシウム（Ｃｓ）である。いくつかの実施形態において、金属は、アクチニウム（ＩＩＩ）（Ａｃ３＋）、ルテチウム（ＩＩＩ）（Ｌｕ３＋）、ビスマス（ＩＩＩ）（Ｂｉ３＋）、ガリウム（ＩＩＩ）（Ｇａ３＋）、インジウム（ＩＩＩ）（Ｉｎ３＋）、テルビウム（Ｔｂ３＋）、トリウム（ＩＩＩ）（Ｔｈ３＋）、またはセシウム（Ｉ）（Ｃｓ１＋）である。いくつかの実施形態において、金属は２２５Ａｃ、１７７Ｌｕ、２１３Ｂｉ、２３２Ｔｈ、２３０Ｔｈ、２２８Ｔｈ、６８Ｇａ、１６１Ｔｂ、１５５Ｔｂ、１５２Ｔｂ、１４９Ｔｂ、１１１Ｉｎ、または１３７Ｃｓである。
【0069】
いくつかの実施形態において、クラウンは金属イオンに結合して配位錯体を形成する。いくつかの実施形態において、配位錯体は金属キレートと呼ばれる。いくつかの実施形態において、キレート配位子としての金属キレートまたはクラウンは、対イオンとしての１つまたは複数の陽イオン、例えばＮａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋などと会合している。いくつかの実施形態において、金属キレートまたはキレート配位子は完全にプロトン化されている。いくつかの実施形態において、金属キレートまたはキレート配位子はその遊離酸形態である。いくつかの実施形態において、金属キレートまたはキレート配位子は、部分的にプロトン化された状態にある。
【0070】
いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物血清、場合によりヒト血清中に存在する。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物血清、場合によりヒト血清中で安定である。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物の体内の哺乳動物血清中に存在し、場合によってはヒトの体内のヒト血清中に存在する。いくつかの実施形態において、配位錯体は、血液、場合によってはヒトの血液中に存在する。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物の血液、場合によってはヒトの血液中で安定している。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物の体内の哺乳動物の血液に存在し、場合によっては、ヒトの体内のヒトの血液に存在する。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物の体内に存在し、場合によってはヒトの体内に存在する。いくつかの実施形態において、配位錯体は、哺乳動物対象の細胞内に存在し、場合によってはヒト対象の細胞内に存在する。
【0071】
理論に束縛されるものではないが、本明細書に記載の例は、キレート剤としてのクラウンが、放射性金属、特により大きな放射性金属（例示的な放射性金属２２５Ａｃ、２１３Ｂｉ、１７７Ｌｕ、１５５Ｔｂおよび６８Ｇａを含む）を結合するための高い結合親和性を有することを実証している。そのような例示的な放射性金属に対するクラウンの高い結合親和性は、現在のゴールドスタンダードのキレーターＤＯＴＡが、同様の標識度を得るためには１０－４Ｍという高い濃度および９０℃、３０分という厳しいキレート条件での使用を必要とする（多くの生物学的標的化部分（例えば抗体）には過酷すぎて耐えられない）ということと比べて、例えば、クラウンが室温条件および中性ｐＨにおいて１０－５Ｍまたは１０－６Ｍという低いキレート剤濃度で放射性金属と定量的に配位錯体を形成する能力によって示される。この高い結合親和性により、例えば、４．１ＭＢｑ／ｎｍｏｌのモル放射能（比放射能）を持つ２２５Ａｃを組み込んだインビボ標的化キレート構築物の生成が可能になった。これは、２２５Ａｃをわずかおおよそ２００ｋＢｑ／ｎｍｏｌのモル放射能でキレートすることができたＤＯＴＡを使用して以前に生成された並列調製品よりもかなり高い［２９］。比放射能のこの違いにより、他の組織と比較して、腫瘍組織における放射性金属のより高い取り込みの蓄積が可能になる。したがって、いくつかの実施形態において、キレート剤としてクラウンを組み込んだ放射性同位体標的化構築物は、少なくとも４ＭＢｑ／ｎｍｏｌの比放射能を有する。
【0072】
理論に束縛されるものではないが、インビボ標的化キレート構築物の著しく高い比放射能は、本構築物がインビボでの発現レベルが比較的低い標的に対して使用される場合に特に重要であり、これは、標的が、放射性金属に結合しないインビボ標的化構築物分子によって容易に飽和され得、それによって、所望の投与部位への放射性金属の有効な送達が妨害され得るということを意味する。したがって、クラウンは、現在のキレート剤が標的放射線療法の実施にうまく機能しないインビボでの発現レベルが低い標的に対してより効果的であると予想される。
【0073】
さらにまた、本発明者らは、クラウンが、ヒト血清中３７℃で数日間にわたり良好な安定性で所望の放射性金属を効果的にキレート化し、さらに、例示的に試験したインビボ標的化キレート構築物の生物学的分布プロファイルが、正常組織と比較して腫瘍組織における良好な選択的蓄積を実証したことを発見した。クラウン－放射性金属錯体がインビボで不安定である場合、遊離２２５Ａｃの投与で観察されたように、血液、肝臓、および脾臓に放射性金属の蓄積が観察されると予想される。［１９］対照的に、本発明者らは、試験したインビボ放射性同位体標的化キレート構築物のクリアランストラック（すなわち、腎経路、腎臓、尿及び膀胱）においてのみ放射性金属の蓄積を観察し、これは、インビボ投与時にクラウンが結合した放射性金属を有効に保持することを示す。
【0074】
したがって、本明細書に記載された実施例から、ベクターをインビボの適切な場所に標的化する標的化部分にクラウンが結合されたとき、標的放射線治療またはイメージングの実施のための放射性同位元素のインビボ送達のためのキレート剤として使用できることが十分に予測され得る。
【0075】
実施例
以下の実施例を参照して特定の実施形態をさらに説明するが、これらは例示を目的としており、範囲を限定するものではない。
以下の実施例を参照して特定の実施形態をさらに説明するが、これらは例示を目的としており、範囲を限定するものではない。
【0076】
実施例１．０－クラウンの合成および特性評価
構造（１）を有するクラウンを２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸（「クラウン」）の合成を示すスキーム１に従って合成した。
構造（１）を有するクラウンを２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸（「クラウン」）の合成を示すスキーム１に従って合成した。
【0077】
【化8】
【0078】
Ｓ１、Ｓ２、Ｓ３は、報告された方法［２８］を使用して合成された。Ｓ４は、報告された方法［２７］を応用して合成された。
Ｎ，Ｎ’－（エタン－１，２－ジイル）ビス（４－メチルベンゼンスルホンアミド）Ｓ１の調製：塩化ｐ－トルエンスルホニル（７．８ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）をエチレンジアミン（１．３３ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）の１００ｍＬピリジン中の撹拌溶液に０℃で添加した。室温で一晩攪拌した後、混合物を水２５０ｍＬに注いだ。得られた沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、表題の化合物（６．８ｇ、９２．４％）を白色粉末として得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ７．６１－７．５７（ｍ、４Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、４Ｈ）、２．７３－２．６５（ｍ、４Ｈ）、２．３７（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．５７、１６０．３４、１４６．９０、１３７．７６、１２４．１１、１２３．８３、７７．２７、７７．０６、７６．８５、６４．６４、５２．９４。ＥＳＩ ＭＳ：［Ｍ＋Ｐｙ＋Ｈ］＋：４４８．１。
Ｎ，Ｎ’－（エタン－１，２－ジイル）ビス（４－メチルベンゼンスルホンアミド）Ｓ１の調製：塩化ｐ－トルエンスルホニル（７．８ｇ、４０．５ｍｍｏｌ）をエチレンジアミン（１．３３ｍＬ、２０ｍｍｏｌ）の１００ｍＬピリジン中の撹拌溶液に０℃で添加した。室温で一晩攪拌した後、混合物を水２５０ｍＬに注いだ。得られた沈殿物を濾過し、ジエチルエーテルで洗浄し、乾燥して、表題の化合物（６．８ｇ、９２．４％）を白色粉末として得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）：δ７．６１－７．５７（ｍ、４Ｈ）、７．３６（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、４Ｈ）、２．７３－２．６５（ｍ、４Ｈ）、２．３７（ｓ、６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．５７、１６０．３４、１４６．９０、１３７．７６、１２４．１１、１２３．８３、７７．２７、７７．０６、７６．８５、６４．６４、５２．９４。ＥＳＩ ＭＳ：［Ｍ＋Ｐｙ＋Ｈ］＋：４４８．１。
【0079】
４，７，１３，１６－テトラトシル－１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカンＳ２の調製：Ｎ，Ｎ’－（エタン－１，２－ジイル）ビス（４－メチルベンゼンスルホンアミド）（７．４ｇ、０．０２ｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４．２ｇ、０．０３ｍｏｌ）、２－クロロエチルエーテル（２．３５ｍＬ、０．０２ｍｏｌ）をジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）に溶解し、オイルバスで、１７０℃で１２時間加熱した。室温まで冷却した後、水６０ｍＬを反応混合物に添加した。沈殿物を濾過し、水（３回）およびアセトン（５０ｍＬ）で洗浄した。ＤＭＦから粗生成物を再結晶した後、Ｓ２（２．５ｇ、１４．３％）を白色固体として得た。１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ７．６３（ｄ、Ｊ＝８．０Ｈｚ、８Ｈ）、７．４１（ｄ、Ｊ＝８．１Ｈｚ、８Ｈ）、３．４５（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、８Ｈ）、３．２５－３．０６（ｍ、１６Ｈ）、２．４２－２．３２（ｍ、１２Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６５．１３、１５７．３６、１４７．３５、１３８．５０、１２７．３３、１２４．５６、７７．２７、７７．０６、７６．８５、５３．１９、３２．８９。ＥＳＩ ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］＋：８７７．６。
【0080】
１，１０－ジオキソ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカンＳ３の調製：４，７，１３，１６－テトラトシル－１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン（２ｇ、２．３ｍｍｏｌ）を濃硫酸２０ｍＬに溶解し、１００℃で１８時間加熱した。次に、水酸化ナトリウム溶液を反応混合物に添加して、ｐＨを１０～１１に調整した。混合物をクロロホルムで抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させてテトラアザクラウンエーテルＳ３をわずかに無色の固体として得た（３００ｍｇ、５０．２％）。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ３．４８－３．４３（ｍ、８Ｈ）、２．６５（ｍ、８Ｈ）、２．６０（ｓ、８Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ７０．１５、４９．４６、４９．４３。ＥＳＩ ＭＳ：［Ｍ＋Ｎａ］＋：２８３．２。
【0081】
テトラ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）テトラアセテートＳ４の調製：ｔｅｒｔ－ブチルブロモアセテート（１７６ｍｇ、０．９ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ３ＣＮ（５ｍＬ）溶液を、１，１０－ジオキソ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン（５２ｍｇ、０．２ｍｍｏｌ）と、乾燥ＣＨ３ＣＮ（１０ｍＬ）中のＫ２ＣＯ３（１３８ｍｇ、１ｍｍｏｌ）と、ＫＩ（７ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。得られた混合物を室温で１時間撹拌し、次いで一晩還流した。室温まで冷却した後、混合物を濾過し、残渣を乾燥ＣＨ３ＣＮで洗浄した。濾液を回収し、蒸発させて、Ｓ４を白色固体として得た（９５ｍｇ、６６％）。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ３．８５（ｓ、８Ｈ）、３．６４（ｔ、Ｊ＝５．０Ｈｚ、８Ｈ）、３．２６－３．０６（ｍ、１６Ｈ）、１．４６（ｓ、３６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ１６８．４７、８２．６４、６７．０３、５４．７８、５３．５７、５０．７２、２８．１９。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３６Ｈ６９Ｎ４Ｏ１０
＋［Ｍ＋Ｈ］＋：７１７．５０１３、ｆｏｕｎｄ：７１７．５１０５。
【0082】
２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）四酢酸（１）（クラウン）：テトラ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’，２’’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３，１６－テトライル）テトラアセテート（１０５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）を、ＴＦＡ ９．５ｍＬと、ＴＩＰＳ ０．２５ｍＬと、Ｈ２Ｏ ０．２５ｍＬを含む混合溶媒１０ｍＬに溶解した。混合物を室温で２時間撹拌した。溶媒を空気流で除去し、残渣をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（１／１）に溶解し、次の方法でさらにＨＰＬＣ精製した：０～５分１００％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ、５～２５分１００％～６０％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ。６．８分の画分を回収し、凍結乾燥してクラウンを無色オイルとして得た（４０ｍｇ、５５．４％）。１Ｈ ＮＭＲ（６００ＭＨｚ、ＤＭＳＯ－ｄ６）δ３．８６（ｓ、８Ｈ）、３．７２－３．５８（ｍ、８Ｈ）、３．３９－３．０２（ｍ、１６Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５１ＭＨｚ、ＤＭＳＯ）δ１７０．６３、１５８．６０（ｑ、Ｊ＝３４．７Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、１１６．６８（ｑ、Ｊ＝２９３．９Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、６６．９２、５４．１０、５３．６３、５０．６５。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ２０Ｈ３７Ｎ４Ｏ１０
＋［Ｍ＋Ｈ］＋：４９２．２４３１、ｆｏｕｎｄ：４９２．２５０２。
【0083】
実施例２．０－クラウン－ＴＡＴＥ標的化構築物の合成
本発明者らは、以下の構造（１１）：
本発明者らは、以下の構造（１１）：
【0084】
【化9】
【0085】
を有するアミノ酸配列Ｈ－Ｄ－Ｐｈｅ－Ｃｙｓ－Ｐｈｅ－Ｄ－Ｔｒｐ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｃｙｓ－Ｔｈｒ－ＯＨ（配列番号１）を有する標的化部分であるペプチド（オクトレオテート（本明細書では「ＴＡＴＥ」と称する））にクラウンを結合させた。
【0086】
ＴＡＴＥは、中枢神経系、乳房、肺、リンパ系の悪性腫瘍を含む様々な悪性腫瘍で高密度に見られるＳＳＲに構築物を標的化するための標的化部分として使用できるＳＳＲアゴニストである。Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥは次の構造（１２）を有し、クラウンは、クラウンの遊離カルボン酸基のうちの１つを介して形成されるアミド結合を介して、ＴＡＴＥのＮ末端Ｄ－フェニルアラニン残基の遊離アミノ基に直接連結される：
【0087】
【化10】
【0088】
構造（１）を有するクラウンを樹脂上の切断されていないペプチドにカップリングすると、おそらく溶解度が低いために収率が低くなった。３ｔＢｕ－クラウンは、スキーム２に従って溶解度を改良するために合成された。
【0089】
【化11】
【0090】
トリ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３－トリイル）トリアセテートＴＦＡ塩Ｓ６の調製：乾燥ＣＨ３ＣＮ（２ｍＬ）中のｔｅｒｔ－ブチルブロモアセテート（６５６．８ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）の溶液を、乾燥ＣＨ３ＣＮ（２０ｍＬ）中の１，１０－ジオキソ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン（２６５．０ｍｇ、１．０ｍｍｏｌ）と、ＮａＨＣＯ３（２８２．２ｍｇ、３．４ｍｍｏｌ）の混合物に滴下した。得られた混合物を室温で一晩撹拌した。濾過後、濾液を回収して蒸発させた。残渣をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（２／１）に溶解し、次の方法でさらにＨＰＬＣ精製した：０～１分 ９８％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ、１～１０分 ９８％～０％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ。６．８分の画分を回収し、凍結乾燥して、表題の化合物を白色固体（２４６．３ｍｇ、３４．０％）として得た。また、Ｓ４を使用（７．４分、１５１．３ｍｇ、２１．１％）。１ＨＮＭＲ（５００Ｍ、ＣＤＣｌ３）：δ １１．９５（ｂｒｓ、３Ｈ、ＴＦＡ）、９．１９（ｂｒｓ、１Ｈ、ＴＦＡ）、３．９３（ｓ、２Ｈ）、３．８２（ｔ、Ｊ＝４．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．７８－３．７０（ｍ、４Ｈ）、３．６７（ｓ、２Ｈ）、３．５６（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．５０（ｔ、Ｊ＝５．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．４６（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、３．４２（ｓ、２Ｈ）、３．３９（ｔ、Ｊ＝５．７Ｈｚ、２Ｈ）、３．２５－３．２０（ｍ、４Ｈ）、３．１７－３．０８（ｍ、４Ｈ）、２．９５（ｔ、Ｊ＝４．６Ｈｚ、２Ｈ）、１．４４（ｓ、９Ｈ）、１．４２（ｓ、９Ｈ）、１．４１（ｓ、９Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１７０．８、１６７．８、１６６．１、１６０．９（ｑ、Ｊ＝３６．７Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、１１５．９（ｑ、Ｊ＝２９０．３Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、８４．３、８３．６、８２．８、６７．８、６７．１、６６．２、６５．２、５６．１、５５．２、５４．５、５３．６、５３．２、５１．１、５０．４、４９．９、４７．２、４５．７、２７．８、２７．８、２７．７。ＲＭＳ（ＥＳＩ） ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３０Ｈ５９Ｎ４Ｏ８
＋ ［Ｍ＋Ｈ］＋：６０３．４３２７、ｆｏｕｎｄ：６０３．４３１２。
【0091】
トリ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’－（１６－（２－（ベンジルオキシ）－２－オキソエチル）－１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３－トリイル）トリアセテートＳ７の調製：１５ｍｌのＣＨ２Ｃｌ２溶液のトリ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’－（１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３－トリイル）トリアセテート（２４６．３ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ）と、ブロモ酢酸ベンジル（２３６．４ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ）と、トリエチルアミン（２０８．２ｍｇ、２．０６ｍｍｏｌ）との混合物を、８０℃で一晩加熱還流した。室温まで冷却した後、溶媒を回転蒸発で除去し、残渣をＣＨ３ＣＮ／Ｈ２Ｏ（２／１）に溶解し、次の方法でさらにＨＰＬＣ精製した：０～１分 ９８％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ、１～１０分 ９８％～０％Ｈ２Ｏ＋０．１％ＴＦＡ。７．４分の画分を回収し、凍結乾燥して、表題の化合物を白色固体（１９７．７ｍｇ、７７．４％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００ Ｍ、ＣＤＣｌ３）：δ１２．２７（ｂｒｓ、４Ｈ、ＴＦＡ）、７．３９－７．２８（ｍ、５Ｈ）、５．１３（ｓ、２Ｈ）、３．９１（ｓ、２Ｈ）、３．８１－３．６８（ｍ、１２Ｈ）、３．６３（ｔ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２Ｈ）、３．４８－３．４２（ｍ、４Ｈ）、３．４２－３．３１（ｍ、６Ｈ）、３．２９－３．２３（ｍ、４Ｈ）、３．１１（ｔ、Ｊ＝４．８Ｈｚ、２Ｈ）、１．６５－０．８８（ｍ、２７Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６９．４、１６７．４、１６７．０、１６６．２、１６０．８（ｑ、Ｊ＝３７．１Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、１３４．８、１２８．６（炭素２つ）、１２８．４、１１５．９（ｑ、Ｊ＝２９０．１Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、８４．４、８４．０、８３．８、６７．５、６７．２、６６．７、６６．３、６５．８、５４．５、５４．４、５４．０５、５４．０１、５３．９８、５３．９３、５３．８、５３．７、５１．３、５０．７、５０．６、５０．０、２７．７５、２７．７４、２７．７２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ３９Ｈ６７Ｎ４Ｏ１０
＋［Ｍ＋Ｈ］＋：７５１．４８５２、ｆｏｕｎｄ：７５１．４７７４。
【0092】
２－（７，１３，１６－トリス（２－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－２－オキソエチル）－１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４－イル）酢酸（１３）の調製：１２ｍｌのＭｅＯＨ中のトリ－ｔｅｒｔ－ブチル２，２’，２’’－（１６－（２－（ベンジルオキシ）－２－オキソエチル）－１，１０－ジオキサ－４，７，１３，１６－テトラアザシクロオクタデカン－４，７，１３－トリイル）トリアセテート（１９７．７ｍｇ、０．２６ｍｍｏｌ）、１０％Ｐｄ／Ｃ（６０ｍｇ）を、Ｈ２バルーンを介してＨ２雰囲気で４時間撹拌した。濾過後、濾液を回収し、蒸発させて、表題の化合物を発泡固体（１６２．２ｍｇ、９４．５％）として得た。１Ｈ ＮＭＲ（６００Ｍ、ＣＤＣｌ３）：δ１１．４６（ｂｒｓ、４Ｈ、ＴＦＡおよびＣＯ２Ｈ）、４．２２－３．２０（ｍ、３２Ｈ）、１．４８－１．３７（ｍ、２７Ｈ）。１３Ｃ ＮＭＲ（１５０ＭＨｚ、ＣＤＣｌ３）δ１６９．５、１６７．０、１６６．９、１６６．２、１６０．９（ｑ、Ｊ＝３６．７Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、１１６．０９（ｑ、Ｊ＝２９０．８Ｈｚ、ＣＦ３ＣＯ２Ｈ）、８４．３、８４．０、８３．８、６６．５１、６６．４６、６５．８、６５．５、５５．０、５４．４３、５４．３９、５４．３０、５４．１、５４．０、５１．２、５０．３、４９．９、４９．７、２７．９、２７．８４、２７．８２。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ ｆｏｒ Ｃ３２Ｈ６１Ｎ４Ｏ１０
＋［Ｍ＋Ｈ］＋：６６１．４３８２、ｆｏｕｎｄ：６６１．４３２７。
【0093】
図６Ａに示す合成スキーム（スキーム３）を用いて、３ｔＢｕ－クラウンをペプチドＴＡＴＥに結合させた。
実施例３．０－２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの調製
クラウンの合成を上記のスキーム１に示す［２７，２８］。以下の構造（１４）を有するαＭＳＨと結合したクラウンからなる標的化構築物を図６Ｂに示すスキーム（スキーム４）に従って、以下にさらに記載するように合成した。αＭＳＨ標的化部分は、ラクタム架橋環化α－メラノサイト刺激ホルモンコア（Ａｃ－Ｎｌｅ４－シクロ［Ａｓｐ５－Ｈｉｓ－Ｄ－Ｐｈｅ７－Ａｒｇ－Ｔｒｐ－Ｌｙｓ１０］－ＮＨ２）部分（配列番号：２）（Ｎｌｅ－ＣｙｃＭＳＨｈｅｘとも呼ばれる）を有し、そのアミノ末端で４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジン（Ｐｉｐ）に結合する。クラウンは、クラウンの遊離カルボン酸基のうちの１つを介して４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジンの遊離アミノ基に結合し、４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジンはノルロイシン残基と一緒になってＣｙｃＭＳＨｈｅｘ部分にリンカーを形成する。
実施例３．０－２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの調製
クラウンの合成を上記のスキーム１に示す［２７，２８］。以下の構造（１４）を有するαＭＳＨと結合したクラウンからなる標的化構築物を図６Ｂに示すスキーム（スキーム４）に従って、以下にさらに記載するように合成した。αＭＳＨ標的化部分は、ラクタム架橋環化α－メラノサイト刺激ホルモンコア（Ａｃ－Ｎｌｅ４－シクロ［Ａｓｐ５－Ｈｉｓ－Ｄ－Ｐｈｅ７－Ａｒｇ－Ｔｒｐ－Ｌｙｓ１０］－ＮＨ２）部分（配列番号：２）（Ｎｌｅ－ＣｙｃＭＳＨｈｅｘとも呼ばれる）を有し、そのアミノ末端で４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジン（Ｐｉｐ）に結合する。クラウンは、クラウンの遊離カルボン酸基のうちの１つを介して４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジンの遊離アミノ基に結合し、４－アミノ－（１－カルボキシメチル）ピペリジンはノルロイシン残基と一緒になってＣｙｃＭＳＨｈｅｘ部分にリンカーを形成する。
【0094】
【化12】
【0095】
クラウン－αＭＳＨペプチドの調製：Ｆｍｏｃ－Ｐｉｐ－Ｎｌｅ－ＣｙｃＭＳＨｈｅｘ樹脂（Ｆｍｏｃ－αＭＳＨ樹脂）のペプチド合成は、図６Ｂに示すスキーム（スキーム４）を使用して、以前に公開された手順［２９］に記載されているように実行された。その後、Ｆｍｏｃを除去した。ベンゾトリアゾール－１－イル－オキシトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート（ＰｙＢＯＰ、４当量）、シアノ（ヒドロキシイミノ）酢酸エチル（Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ、４当量）、およびクラウン（ｔＢｕ）３（４当量）をＤＭＦ（最小）に溶解し、次に樹脂（１当量）に添加し、Ｎ、Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン（ＤＩＥＡ、１５当量）の添加によって開始する。カップリングは、振盪しながら室温で約２１時間行った。樹脂をＤＭＦおよびＤＣＭで十分に洗浄し、溶媒をＮ２流で除去した。樹脂をＴＦＡ／ＴＩＰＳ／水／フェノール（９０／２．５／２．５／５）の混合物に浸し、室温で３時間振盪することにより、ペプチドを切断および脱保護した。濾過後、濾液を回収し、Ｎ２によって乾燥させた。残渣をＡＣＮと水に溶解し、次の方法を使用してＨＰＬＣ精製を行った。Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８分取カラム（５ｕｍ、１１０Å、５０ｘ３０ｍｍ）、２３％ＡＣＮ、Ｈ２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、定組成、流速１５ｍＬ／分。クラウンαＭＳＨの保持時間は３．７分である。ＨＲＭＳ（ＥＳＩ）ｃａｌｃｄ ｆｏｒ Ｃ７２Ｈ１０８Ｎ２０Ｏ１６
２＋［Ｍ＋２Ｈ］２＋：７９８．４３８３、ｆｏｕｎｄ：７９８．８３９６。
【0096】
得られたクラウン－αＭＳＨ構築物を２２５Ａｃで標識して、構造（１５）を得た：
【0097】
【化13】
【0098】
２２５Ａｃは、Ｃａｎａｄｉａｎ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから提供された同位体を使用して、古い２３３Ｕからその後分離された２２９Ｔｈの崩壊から得られた。陽イオン交換と陰イオン交換とを組み合わせて精製した後、高純度の２２５Ａｃ（＞９９％）を濃塩酸で溶出し、蒸発残渣として出荷した。受け取り後、酸蒸発時に混入した潜在的な不純物を除去するため、分岐ＤＧＡイオン交換クロマトグラフィーによって放射能を再度精製した。
【0099】
実施例４．１－クラウン、クラウン－ＴＡＴＥ、およびクラウン－α－ＭＳＨの２２５Ａｃラベリング
クラウンの２２５Ａｃラベリングは、周囲温度でｐＨ５～７の酢酸緩衝液中で配位子および同位体を混合することによって達成された。反応はラジオＴＬＣによって監視された。ＴＬＣプレートを展開後５時間でスキャンして、短寿命同位体、特にＤＯＴＡ型キレート剤とより強く結合する２１３Ｂｉを崩壊させ、２２５Ａｃが平衡に達するようにした。クラウンまたはクラウン－ＴＡＴＥ（指定がない限り３μＬ、１０－３Ｍ水溶液）、精製済２２５Ａｃ（０．０５Ｍ ＨＮＯ３中２．５μＬ）および酢酸アンモニウム緩衝液（２０μＬ、１Ｍ、新鮮）を一緒に混合し、室温で３０分間保持する。
クラウンの２２５Ａｃラベリングは、周囲温度でｐＨ５～７の酢酸緩衝液中で配位子および同位体を混合することによって達成された。反応はラジオＴＬＣによって監視された。ＴＬＣプレートを展開後５時間でスキャンして、短寿命同位体、特にＤＯＴＡ型キレート剤とより強く結合する２１３Ｂｉを崩壊させ、２２５Ａｃが平衡に達するようにした。クラウンまたはクラウン－ＴＡＴＥ（指定がない限り３μＬ、１０－３Ｍ水溶液）、精製済２２５Ａｃ（０．０５Ｍ ＨＮＯ３中２．５μＬ）および酢酸アンモニウム緩衝液（２０μＬ、１Ｍ、新鮮）を一緒に混合し、室温で３０分間保持する。
【0100】
２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥのラジオＴＬＣ特性評価
１～５μＬのサンプルをＳＡ ｉＴＬＣプレート（ケイ酸包埋インスタント薄層クロマトグラフィープレート）にスポットし、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）（ｐＨ５、０．０５Ｍ）で展開した。遊離のＡｃは溶媒前面に移動し、Ａｃ標識生成物はプレートの底近くにとどまる。あるいは、ＴＬＣは、クエン酸緩衝液（ｐＨ４、０．４Ｍ）を使用して、Ａｌバッキングを備えたシリカプレート上で展開することもできる。短寿命同位体の崩壊を可能にするために、プレートを１日後にカウントした。図７は、キレート化された２２５Ａｃを有するクラウン－ＴＡＴＥ構築物のラジオＴＬＣの結果を示している（標識された２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの大きなピークはプレートの底に残っている）。一方、図８は、遊離２２５Ａｃ（対照）のラジオＴＬＣの比較結果（２２５Ａｃは溶媒フロントに移動する）を示す。
１～５μＬのサンプルをＳＡ ｉＴＬＣプレート（ケイ酸包埋インスタント薄層クロマトグラフィープレート）にスポットし、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）（ｐＨ５、０．０５Ｍ）で展開した。遊離のＡｃは溶媒前面に移動し、Ａｃ標識生成物はプレートの底近くにとどまる。あるいは、ＴＬＣは、クエン酸緩衝液（ｐＨ４、０．４Ｍ）を使用して、Ａｌバッキングを備えたシリカプレート上で展開することもできる。短寿命同位体の崩壊を可能にするために、プレートを１日後にカウントした。図７は、キレート化された２２５Ａｃを有するクラウン－ＴＡＴＥ構築物のラジオＴＬＣの結果を示している（標識された２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの大きなピークはプレートの底に残っている）。一方、図８は、遊離２２５Ａｃ（対照）のラジオＴＬＣの比較結果（２２５Ａｃは溶媒フロントに移動する）を示す。
【0101】
様々なクラウン濃度および様々なｐＨでのラベリング収率
図９は、ｐＨ７で精製済２２５Ａｃを用いて様々な濃度で、室温で３０分間インキュベートしたクラウンの放射性ラベリング収率を示す。図１０は、ｐＨ７で精製済２２５Ａｃを用いて様々なキレート剤濃度で、室温で３０分間または６０分間インキュベートしたクラウン－ＴＡＴＥの放射性ラベリング収率を示す。
図９は、ｐＨ７で精製済２２５Ａｃを用いて様々な濃度で、室温で３０分間インキュベートしたクラウンの放射性ラベリング収率を示す。図１０は、ｐＨ７で精製済２２５Ａｃを用いて様々なキレート剤濃度で、室温で３０分間または６０分間インキュベートしたクラウン－ＴＡＴＥの放射性ラベリング収率を示す。
【0102】
図１１は、様々な緩衝液中および様々なｐＨレベルでの２２５Ａｃによるクラウンのラベリングを示す。反応は、様々な緩衝液中および様々なｐＨレベルで実施された。配位子濃度は１０－６Ｍで、緩衝液濃度は０．１Ｍであった。ｐＨはＮａＯＨまたはＨＮＯ３で調整した。
【0103】
研究した緩衝液の中で、ＮＨ４ＯＡｃ緩衝液が最良の収率を与え、ＮａＯＡｃがそれに続いた。最適なｐＨは約６の範囲で、作業に便利な範囲であるｐＨ５～７の間で良好な収率が得られる。ラベリングは生理的ｐＨ、ｐＨ７．４でも有効である。
【0104】
この実施例の結果は、クラウンキレート剤およびクラウン－ＴＡＴＥインビボ標的化構築物が、室温および中性ｐＨで、１０－５Ｍという低濃度で定量的に、例示的な放射性金属２２５Ａｃと安定な錯体を形成できることを示している。
【0105】
クラウン－ＴＡＴＥインビボ標的化構築物の血清安定性
クラウン－ＴＡＴＥインビボ標的化構築物の血清安定性は、キレート化された２２５Ａｃをヒト血清に添加することによって評価された。得られた溶液を３７℃で８日間インキュベートし、この期間にわたって結合したままのアクチニウムのパーセンテージを監視した。アッセイに使用した条件は次のとおりである：９０μＬＮＨ４ＯＡｃ緩衝液：０．２Ｍ、ｐＨ５．８４；１００μＬのヒト血清；１μＬ２２５Ａｃ、５０ｋＢｑ；クラウン－ＴＡＴＥ：５ｘ１０－６Ｍ（１０μＬストックを添加することにより）；配位子：金属＝１０４：１。
クラウン－ＴＡＴＥインビボ標的化構築物の血清安定性は、キレート化された２２５Ａｃをヒト血清に添加することによって評価された。得られた溶液を３７℃で８日間インキュベートし、この期間にわたって結合したままのアクチニウムのパーセンテージを監視した。アッセイに使用した条件は次のとおりである：９０μＬＮＨ４ＯＡｃ緩衝液：０．２Ｍ、ｐＨ５．８４；１００μＬのヒト血清；１μＬ２２５Ａｃ、５０ｋＢｑ；クラウン－ＴＡＴＥ：５ｘ１０－６Ｍ（１０μＬストックを添加することにより）；配位子：金属＝１０４：１。
【0106】
結果を以下の図１２および表２に示す（ＲＣＹ＝放射化学的収率、Ａは第１の反応Ａ、Ｂは第２の反応Ｂ、ＳＤは標準偏差）。結果は、試験された２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥ構築物がヒト血清中で良好な安定性を有することを示している。
【0107】
【表2】
【0108】
クラウン（１０－３Ｍ～１０－６Ｍ）およびＤＯＴＡ（１０－３Ｍ～１０－６Ｍ）のストック溶液を水中で調製した。配位子（１μＬ）、緩衝液（１Ｍ ｐＨ７ ＮＨ４ＯＨ、１μＬ）、水（７μＬ）、および２２５Ａｃストック（１μＬ、１０～３０ｋＢｑ）を一緒に混合した。クラウンについては、反応を室温で１５分間維持し、ＤＯＴＡについては、反応を９０℃で１５分間維持した。ラジオＴＬＣモニタリング用に、様々な時点で２～５μＬを採取した。サンプルは、アルミニウム裏張り（１０ｃｍｘ１．５ｃｍ）を備えたシリカプレートにスポットされ、クエン酸ナトリウム（０．４Ｍ、ｐＨ４）で展開された。プレートは、すべての娘核種が長期平衡に達したときから５時間より後にスキャンされた。これらの条件下では、キレート化されていないアクチニウムは溶媒フロントに移動し（Ｒｆ＝１）、キレート化されたアクチニウムはベースラインに近いままである（Ｒｆ＜０．５）。各データポイントはｎ＝３。
【0109】
クラウンによる２２５Ａｃのキレート化について図１３に示されるように、１０－５Ｍのクラウン濃度での反応は、１０、２０および３０分でラジオＴＬＣによって監視された。反応は１０分で＞９６％に達した。
【0110】
クラウン対ＤＯＴＡのラベリングを比較すると、クラウン濃度＞１０－６Ｍ、またはＤＯＴＡ＞１０－４Ｍで定量的ラベリングが達成された（図１４）。反応は１０分後におおむね完了した。周囲温度で放置した場合、最大５日間、２回目の実験では最大８日間、＜２％の遊離２２５Ａｃが観察され、錯体の安定性が長期化したことが示された。図１４に示すデータを得るために、クラウンによるラベリングは室温で１５分間行い、ＤＯＴＡによるラベリングは９０℃で１５分間行った。
【0111】
２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの血清安定性を調べた。クラウン－αＭＳＨストック（１０μＬ、１０－４Ｍ）、ＮＨ４ＯＡｃ緩衝液（９０μＬ、０．２Ｍ、ｐＨ７）、および１μＬの２２５Ａｃ（１５ｋＢｑ）を一緒に混合し、室温で３５分間保持した。１００μＬのヒト血清を加えた後、溶液を３７℃で８日間保存した。放射化学的純度は、ラジオＴＬＣによって定期的に監視された。サンプルをｉＴＬＣ－ＳＡストリップ（１２ｃｍｘ１．５ｃｍ）にスポットし、ＥＤＴＡ（０．０５Ｍ、ｐＨ５）で展開した。プレートは、すべての娘核種が長期平衡に達した５時間後にスキャンされた。これらの条件下では、キレート化されていないアクチニウムは溶媒フロント（Ｒｆ＝１）に移動し、キレート化されたアクチニウムはベースラインに留まる（Ｒｆ＝０）。各データポイントはＮ＝３。結果を図１５に示す（ＲＣＰ＝放射化学的純度）。
【0112】
クラウン、クラウン－ＴＡＴＥおよびクラウン－αＭＳＨの他の放射性金属によるラベリング
他の放射性金属によるクラウン、クラウン－αＭＳＨおよびクラウン－ＴＡＴＥのラベリングを評価するための実験も行った。１７７Ｌｕをキレートする３つの構築物および比較キレート剤ＤＯＴＡの結果を、キレート剤の様々な濃度で図１６に示す。クラウンは、ＤＯＴＡよりも１７７Ｌｕで大幅に改良されたラベリングを示した。ラベリングは、クラウンの場合、室温で、１５分で行うことができたが、ＤＯＴＡでは３０分間、９０℃の温度が必要であった。クラウンについても、ＤＯＴＡの１０－４Ｍに対して１０－６Ｍで定量的なラベリングが達成された。
他の放射性金属によるクラウン、クラウン－αＭＳＨおよびクラウン－ＴＡＴＥのラベリングを評価するための実験も行った。１７７Ｌｕをキレートする３つの構築物および比較キレート剤ＤＯＴＡの結果を、キレート剤の様々な濃度で図１６に示す。クラウンは、ＤＯＴＡよりも１７７Ｌｕで大幅に改良されたラベリングを示した。ラベリングは、クラウンの場合、室温で、１５分で行うことができたが、ＤＯＴＡでは３０分間、９０℃の温度が必要であった。クラウンについても、ＤＯＴＡの１０－４Ｍに対して１０－６Ｍで定量的なラベリングが達成された。
【0113】
図１７は、２１３Ｂｉによるキレート剤の様々な濃度でのクラウンおよびクラウン－αＭＳＨのラベリングを示す。反応は、ＭＥＳ緩衝液（２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸）中、室温で８分間行った。
【0114】
図１８は、１５５Ｔｂによるキレート剤の様々な濃度でのクラウンおよびクラウン－αＭＳＨのラベリングを示す。反応は、酢酸アンモニウム緩衝液中、室温で１５分間行った。ＤＯＴＡの１５５Ｔｂラベリング化のデータも含まれているが、ＤＯＴＡのラベリング化は９０℃で３０分間行われた。
【0115】
６８Ｇａによるクラウン－ＴＡＴＥのラベリングも評価した。試験した反応には、酢酸エチル緩衝液中におおよそ４ＭＢｑの６８Ｇａを含む２ｎｍｏｌのクラウン－ＴＡＴＥが含まれていた。ｐＨはおおよそ４～５であり、反応は室温で１５分間行った。これらの条件下での放射化学的変換は、ＨＰＬＣにより５５％であると決定された（結果を図１９に示す）。
【0116】
【0117】
αＭＳＨは、４つのペンダントカルボキシル基のうちの１つをリンカーとして使用してクラウンで修飾され、３＋金属との結合時に全体的に中性荷電錯体を生成した。二官能性配位子を必要としないため、このアプローチはすぐにコンジュゲーションできる配位子（クラウン－３ｔＢｕ）の簡単な合成を表す。アミドリンカーを有するαＭＳＨ標的化部分の安定性は、以前に実証された［３８］。
【0118】
上記と同様の方法で、修飾ペプチドを酢酸緩衝液中で２２５Ａｃとインキュベートすることにより、２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨを生成した。６ＭＢｑまでのレベルで高い放射性ラベリング収率（＞９８％）が達成された。精製が必要な場合は、ｌｉｇｈｔ Ｃ１８ Ｓｅｐ－Ｐａｋ（商標）を使用して遊離の２２５Ａｃを除去した。最終生成物のモル放射能は、４．１±１．９ＭＢｑ／ｎｍｏｌ（ｎ＝５）であると決定された。これは、現在までに報告された方法の中で最も高い値である［２０，２２］。血清安定性試験では、８日間にわたり２２５Ａｃが約９０％キレートされることが確認された。
【0119】
実施例５．１－２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの生物学的分布
本発明者らは、インビボ評価を行って、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの体内分布プロファイルを確立した。
本発明者らは、インビボ評価を行って、Ｂ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの体内分布プロファイルを確立した。
【0120】
細胞培養
Ｂ１６Ｆ１０細胞株（Ｍｕｓ Ｍｕｓｃｕｌｕｓ）は、ＡＴＣＣから商業的に入手し（ＣＲＬ－６４７５）、ＩＭＰＡＣＴ１マウスプロファイル（ＩＤＥＸＸ ＢｉｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を使用して病原体のないことを確認した。細胞は、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ培地（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で、５％ＣＯ２を含む加湿インキュベーターで、３７℃で培養した。
Ｂ１６Ｆ１０細胞株（Ｍｕｓ Ｍｕｓｃｕｌｕｓ）は、ＡＴＣＣから商業的に入手し（ＣＲＬ－６４７５）、ＩＭＰＡＣＴ１マウスプロファイル（ＩＤＥＸＸ ＢｉｏＲｅｓｅａｒｃｈ）を使用して病原体のないことを確認した。細胞は、１０％ＦＢＳ、１００Ｕ／ｍＬペニシリン、および１００μｇ／ｍＬストレプトマイシンを添加したＤＭＥＭ培地（ＳｔｅｍＣｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）で、５％ＣＯ２を含む加湿インキュベーターで、３７℃で培養した。
【0121】
腫瘍接種
すべての動物実験は、カナダ動物管理協会（Ｃａｎａｄｉａｎ Ｃｏｕｎｃｉｌ ｏｎ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ）によって確立され、ブリティッシュコロンビア大学（ＵＢＣ）の動物倫理委員会によって承認されたガイドラインに従って行った。オスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスは自前のものを入手し、ＢＣがん研究センターの動物資源センターで病原体のない状態で飼育された。マウスは、２Ｌ／分の酸素中の２％イソフルランの吸入によって麻酔され、１×１０６個のＢ１６Ｆ１０細胞が右側脇腹の皮下に接種された。接種の２～４日後、マウスをＵＢＣ比較医学センターに移し、腫瘍が８～１０ｍｍに達した時点で体内分布の研究を行った。
すべての動物実験は、カナダ動物管理協会（Ｃａｎａｄｉａｎ Ｃｏｕｎｃｉｌ ｏｎ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ）によって確立され、ブリティッシュコロンビア大学（ＵＢＣ）の動物倫理委員会によって承認されたガイドラインに従って行った。オスのＣ５７ＢＬ／６Ｊマウスは自前のものを入手し、ＢＣがん研究センターの動物資源センターで病原体のない状態で飼育された。マウスは、２Ｌ／分の酸素中の２％イソフルランの吸入によって麻酔され、１×１０６個のＢ１６Ｆ１０細胞が右側脇腹の皮下に接種された。接種の２～４日後、マウスをＵＢＣ比較医学センターに移し、腫瘍が８～１０ｍｍに達した時点で体内分布の研究を行った。
【0122】
体内分布研究
体内分布の日に、マウスの尾静脈に約２０ｋＢｑの２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ（範囲：１０．８～３１．６ｋＢｑ）を注射した。注射後、マウスをケージ内で自由に歩き回らせ、注射後２時間で、イソフルラン麻酔下でＣＯ２窒息により４匹のグループに分けて安楽死させた。心臓穿刺によって血液を回収し、完全な体内分布を行った。臓器を血液から洗浄し、重量を測定し、３つのエネルギーウィンドウ、６０～１２０ｋｅＶ（ウィンドウＡ）、１８０～２６０ｋｅＶ（ウィンドウＢ）、および４００～４８０ｋｅＶ（ウィンドウＣ）を使用して、較正されたガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｃｏｂｒａ ＩＩ Ａｕｔｏ－ｇａｍｍａ ｃｏｕｎｔｅｒ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、マサチューセッツ州、米国）を使用して放射能を決定した。２２５Ａｃ崩壊系列の平衡を確実にするために、屠殺から６時間後にカウントを行った。カウントは屠殺時から減衰補正され、組織のグラム当たりの注射用量（％ＩＤ／ｇ）の計算には総臓器重量が使用された。３つの異なるウィンドウで計算されたデータ間に違いは見られなかった。したがって、体内分布は、ウィンドウＡを使用して取得したデータを使用して報告される。
体内分布の日に、マウスの尾静脈に約２０ｋＢｑの２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ（範囲：１０．８～３１．６ｋＢｑ）を注射した。注射後、マウスをケージ内で自由に歩き回らせ、注射後２時間で、イソフルラン麻酔下でＣＯ２窒息により４匹のグループに分けて安楽死させた。心臓穿刺によって血液を回収し、完全な体内分布を行った。臓器を血液から洗浄し、重量を測定し、３つのエネルギーウィンドウ、６０～１２０ｋｅＶ（ウィンドウＡ）、１８０～２６０ｋｅＶ（ウィンドウＢ）、および４００～４８０ｋｅＶ（ウィンドウＣ）を使用して、較正されたガンマカウンター（Ｐａｃｋａｒｄ Ｃｏｂｒａ ＩＩ Ａｕｔｏ－ｇａｍｍａ ｃｏｕｎｔｅｒ、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、マサチューセッツ州、米国）を使用して放射能を決定した。２２５Ａｃ崩壊系列の平衡を確実にするために、屠殺から６時間後にカウントを行った。カウントは屠殺時から減衰補正され、組織のグラム当たりの注射用量（％ＩＤ／ｇ）の計算には総臓器重量が使用された。３つの異なるウィンドウで計算されたデータ間に違いは見られなかった。したがって、体内分布は、ウィンドウＡを使用して取得したデータを使用して報告される。
【0123】
結果
本発明者らは、合計５群のマウスを用いた２つの別々の研究において、注射後（ｐ．ｉ．）２時間のＢ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの体内分布を評価した（表３）。最初の研究では、次の３つの条件、すなわち、前日（１８時間）（Ａ、図２２、右の棒）、同日（４時間）（Ｂ）、または同日（４時間）にＳｅｐ－Ｐａｋ精製で（Ｃ）調製した２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨが評価された。第２の研究では、本発明者らは、Ｓｅｐ－Ｐａｋ精製しかつ０．１ＭのＬ－アスコルビン酸を導入した、４時間前に標識された２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ（Ｄ、図２２、左の棒）、または１８時間前にＬ－アスコルビン酸（Ｅ）を使用して調製された２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨと比較した。
本発明者らは、合計５群のマウスを用いた２つの別々の研究において、注射後（ｐ．ｉ．）２時間のＢ１６Ｆ１０腫瘍を有するマウスにおける２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの体内分布を評価した（表３）。最初の研究では、次の３つの条件、すなわち、前日（１８時間）（Ａ、図２２、右の棒）、同日（４時間）（Ｂ）、または同日（４時間）にＳｅｐ－Ｐａｋ精製で（Ｃ）調製した２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨが評価された。第２の研究では、本発明者らは、Ｓｅｐ－Ｐａｋ精製しかつ０．１ＭのＬ－アスコルビン酸を導入した、４時間前に標識された２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ（Ｄ、図２２、左の棒）、または１８時間前にＬ－アスコルビン酸（Ｅ）を使用して調製された２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨと比較した。
【0124】
前日に調製した構築物は、腫瘍への取り込みが乏しいことを示したが、新たに合成された化合物は優れた腫瘍対バックグラウンド比（Ａ対Ｂ）を示した。Ｓｅｐ－Ｐａｋ精製により腫瘍対バックグラウンド比が改良されたが、結果は統計的に有意ではなかった（Ｂ対Ｃ、調整済Ｐ値０．０６～０．６１）。Ｌ－アスコルビン酸の添加により、本発明者らは、より高い腫瘍取り込みを観察したが、腫瘍対バックグラウンド比は統計的に異ならない（Ｃ対Ｄ、調整済Ｐ値０．１１～０．８９）。０．１ＭのＬ－アスコルビン酸を含んでいるにもかかわらず、一晩放置したサンプルには、注射時に実行可能な放射性医薬品が含まれていなかった（Ｅ）。２２５Ａｃによって生成された高エネルギーイオン化ヘリウム（５～８．５ＭｅＶ）は、水の十分な放射線分解を引き起こし、種々の活性酸素種を生成する可能性がある。［３９］したがって、結果として生体分子が分解することは驚くべきことではない。Ｓｅｐ－Ｐａｋ精製済サンプルおよび未精製サンプルのわずかな違いは、ＲＯＳスカベンジャーとして作用する溶出に使用されるＥｔＯＨの存在に起因する可能性がある。
【0125】
５つのケースすべてにおいて、ラジオＴＬＣが＞９８％の放射化学的純度を示したことに注目することは重要である。ＴＬＣは、注射前に放射性医薬品の純度を迅速に測定するために広く使用されている方法である。さらに、２２５Ａｃ放射性医薬品の品質管理に関する現在のＩＡＥＡガイドラインでは、化合物の完全性を迅速に評価するための最適な方法としてラジオＴＬＣのみがリストされている。［４０］この研究の目的のために、本発明者らは、ラジオＨＰＬＣを追加の品質管理方法として使用して調査した。２２５Ａｃからのガンマシグナルは、主に２２１Ｆｒ（１１．４％、２１８ｋｅＶ）、２１３Ｂｉ（２５．９％、４４０ｋｅＶ）、およびコンプトンピークからのものであり、２２５Ａｃ自体からのものではない。したがって、ガンマトレースのピーク面積は、必ずしも２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの放射化学的純度を反映しているとは限らない。大きな溶媒フロントピーク（ＴＲ約１．７分、図２３）は、このピークを収集してガンマ分光法で分析することによって決定されるように、ほとんどが２１２Ｆｒによるものである。対照的に、２１３ＢｉはＡｃと同様のキレート化学を示し、クラウンペプチドに結合していることがわかる（ＴＲ約９．４分、図２３）。図２３に示されるように、ペプチドピークは経時的にゆっくりと分解した。Ｌ－アスコルビン酸（０．１Ｍ）を添加すると分解が遅くなったが、翌日に十分な化合物放射能を維持するには不十分であった。したがって、合成終了から注入までの時間を短縮することが望ましい。品質管理のために、ラジオＴＬＣおよびガンマ線分光法（切断して３０分後に２２１Ｆｒをカウントする）を使用して遊離２２５Ａｃの存在を評価し、ＨＰＬＣを使用してペプチドの完全性を評価することをお勧めする。別の一般的なやり方は、残留遊離金属イオンのキレート剤としてＤＴＰＡを添加することである。［４０］１０００当量のＤＴＰＡを２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨに添加時、本発明者らは、ＨＰＬＣでゆっくりとしたトランスメタル化を観察した（７時間で６４％）。
【0126】
【表3】
【0127】
Ｂ１６Ｆ１０メラノーマを有するマウス（Ｄ、図２２および表３）における注射後（ｐ．ｉ．）２時間の２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨ体内分布データの詳細な検査は、正常組織への蓄積が極めて少ない、［６８Ｇａ］Ｇａ－ＤＯＴＡ－αＭＳＨ（ＣＣＺ０１０４８）［２９］と同様の取り込みプロファイルを示した。２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－αＭＳＨと比較すると［２２］、クラウン錯体は１２．７±２．３１％ＩＤ／ｇではるかに高い腫瘍取り込みを示し、優れた腫瘍対正常組織取り込み比を示した。２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－αＭＳＨの場合、腫瘍に対する血液、骨、および腎臓の比率はそれぞれ２０．４±３．４、２３．２±１０．３、１．１±０．１であり［２２］、２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨの場合、これらの比率はそれぞれ８５．４±４６．８、６３．５±１３．２、および２．８０±０．９８（Ｄ）であった。これは、おそらく、２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨのモル放射能がはるかに高い、１．６ｋＢｑ／ｎｍｏｌ（ＤＯＴＡ）対４．１ＭＢｑ／ｎｍｏｌ（クラウン）であるためであろう。クリアランストラック（腎臓、膀胱、尿）以外では、この錯体の正常組織への取り込みは非常に低く、優れた腫瘍対バックグラウンド比が得られた（表３、ＣおよびＤ）。これは、ペプチドの迅速な内部移行能力と相まって、インビボ診断および治療用途におけるキレート剤としてのクラウンの使用の優れた可能性を示している。さらに、使用した標的化部分および動物モデルが両方の研究で同じであったため、本明細書に記載されているデータは、Ｒａｍｏｇｉｄａら［２２］が２２５Ａｃ－ＤＯＴＡ－αＭＳＨ構築物で得たデータと直接比較することが可能であり、おおよそ１００倍の比放射能が得られ、現在のゴールドスタンダードＤＯＴＡに対するキレート剤としてのクラウンの優位性があることが実証された。
【0128】
前述の実験は、クラウンが、周囲温度で、および、高いモル放射能で２２５Ａｃを取り込むことができることを示している。２２５Ａｃ－クラウン－αＭＳＨとして生物学的標的化構築物に組み込むと、標的化構築物を使用して、メラノーマ腫瘍で発現するＭＣ１Ｒを標的にすることができる。Ｂ１６Ｆ１０メラノーマ腫瘍を有するマウスにおけるインビボ評価は、優れた標的対正常組織比を示した。この放射性医薬品の開発中に、発明者らは、２２５Ａｃ化合物の完全性を決定するための現在のラジオＴＬＣベースの品質管理方法論の欠陥を発見した。本発明者らは、化合物の純度を確認するためにＨＰＬＣを使用することを推奨し、放射線分解による分解を最小限に抑えるために、製造と注入との間の遅延が短い２２５Ａｃ標識放射性医薬品の使用を提案する。
【0129】
実施例５．２－２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの生物学的分布
２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの生物学的分布は、実施例５．１について上述したのと同様のプロトコルに従って発明者によって調べられた。結果を図２４および表４に示す。
２２５Ａｃ－クラウン－ＴＡＴＥの生物学的分布は、実施例５．１について上述したのと同様のプロトコルに従って発明者によって調べられた。結果を図２４および表４に示す。
【0130】
【表4】
【0131】
実施例 ５．３－２１３Ｂｉ－クラウン－αＭＳＨの生物学的分布
実施例５．１と同様の研究が、２２５Ａｃの代わりに２１３Ｂｉを使用して行われた。体内分布は、注射後１時間で評価され、表５および図２５に示す結果が得られた。２２５Ａｃと同様の結果が観察された。すなわち、放射性金属は腫瘍組織に良好な蓄積を示し、他の組織には有意な蓄積を示さなかった。
実施例５．１と同様の研究が、２２５Ａｃの代わりに２１３Ｂｉを使用して行われた。体内分布は、注射後１時間で評価され、表５および図２５に示す結果が得られた。２２５Ａｃと同様の結果が観察された。すなわち、放射性金属は腫瘍組織に良好な蓄積を示し、他の組織には有意な蓄積を示さなかった。
【0132】
【表5】
【0133】
実施例６．０－２２５Ａｃの測定と定量の方法
２２５Ａｃは７つの娘同位体を有する（図１）。その中で、２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉは、２２５Ａｃの定量化に使用できる明確なガンマ放出を有する。２２１Ｆｒは３２分で２２５Ａｃの９９％に達し、２１３Ｂｉは２９２分（４．８６時間）で２２５Ａｃの９９％に達する。ガンマ分光法が必要な場合、発明者らは２２１Ｆｒ（２１８ｋｅＶ）を使用して２２５Ａｃを定量化するために３０分より長く待機するか、または２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉ（４４０ｋｅＶ）の両方を使用して２２５Ａｃを定量化するために５時間より長く待機した。ラジオＴＬＣが必要な場合、配位子とより強く結合する２１３Ｂｉを崩壊させるために、プレートをスキャンするのに５時間より長く待つことが必要である。あるいは、本発明者らは、ＴＬＣプレートを切断し、３０分後にガンマ分光法でカウントした。同様に、体内分布の研究では、回収された組織を５時間より長くカウントした。異なるエネルギーウィンドウ（６０～１２０ｋｅＶ、１８０～２６０ｋｅＶ、４００～４８０ｋｅＶ）で読み取っても同じ結果が得られ、６０～１２０ｋｅＶで最高のカウントが得られた。ラジオＨＰＬＣでは、シグナルを最大化するためにガンマ検出器を１９～１１００ｋｅＶの全範囲に設定して、シグナルはほとんど２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉ２２１Ｆｒと２１３Ｂｉからであった。したがって、ラジオＨＰＬＣガンマトレースは、ラベリング収率の定量的な反映ではない。必要に応じてそのような情報を生成するために、画分を回収し、ガンマ分光法でカウントする必要がある。
２２５Ａｃは７つの娘同位体を有する（図１）。その中で、２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉは、２２５Ａｃの定量化に使用できる明確なガンマ放出を有する。２２１Ｆｒは３２分で２２５Ａｃの９９％に達し、２１３Ｂｉは２９２分（４．８６時間）で２２５Ａｃの９９％に達する。ガンマ分光法が必要な場合、発明者らは２２１Ｆｒ（２１８ｋｅＶ）を使用して２２５Ａｃを定量化するために３０分より長く待機するか、または２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉ（４４０ｋｅＶ）の両方を使用して２２５Ａｃを定量化するために５時間より長く待機した。ラジオＴＬＣが必要な場合、配位子とより強く結合する２１３Ｂｉを崩壊させるために、プレートをスキャンするのに５時間より長く待つことが必要である。あるいは、本発明者らは、ＴＬＣプレートを切断し、３０分後にガンマ分光法でカウントした。同様に、体内分布の研究では、回収された組織を５時間より長くカウントした。異なるエネルギーウィンドウ（６０～１２０ｋｅＶ、１８０～２６０ｋｅＶ、４００～４８０ｋｅＶ）で読み取っても同じ結果が得られ、６０～１２０ｋｅＶで最高のカウントが得られた。ラジオＨＰＬＣでは、シグナルを最大化するためにガンマ検出器を１９～１１００ｋｅＶの全範囲に設定して、シグナルはほとんど２２１Ｆｒおよび２１３Ｂｉ２２１Ｆｒと２１３Ｂｉからであった。したがって、ラジオＨＰＬＣガンマトレースは、ラベリング収率の定量的な反映ではない。必要に応じてそのような情報を生成するために、画分を回収し、ガンマ分光法でカウントする必要がある。
【0134】
多くの例示的な態様および実施形態が上で論じられてきたが、当業者は、それらの特定の変更、置換、追加、およびサブコンビネーションを認識するであろう。したがって、以下の添付の特許請求の範囲および以下に導入される特許請求の範囲は、明細書全体の最も広い解釈と一致するようなすべての変更、置換、追加、およびサブコンビネーションを含むと解釈されることが意図されている。
【0135】
参考文献
以下の参考文献は、本明細書の主題に関して興味深いものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる：
［１］Ｓ．Ｇｕｄｋｏｖ、Ｎ．Ｓｈｉｌｙａｇｉｎａ、Ｖ．Ｖｏｄｅｎｅｅｖ、Ａ．Ｚｖｙａｇｉｎ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．２０１５、１７、３３．
［２］Ｊ．Ｐ．Ｐｏｕｇｅｔ、Ｉ．Ｎａｖａｒｒｏ－Ｔｅｕｌｏｎ、Ｍ．Ｂａｒｄｉｅｓ、Ｎ．Ｃｈｏｕｉｎ、Ｇ．Ｃａｒｔｒｏｎ、Ａ．Ｐｅｌｅｇｒｉｎ、Ｄ．Ａｚｒｉａ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１１、８、７２０－７３４．
［３］Ｊ．Ｓｔｒｏｓｂｅｒｇ、Ｇ．Ｅｌ－Ｈａｄｄａｄ、Ｅ．Ｗｏｌｉｎ、Ａ．Ｈｅｎｄｉｆａｒ、Ｊ．Ｙａｏ、Ｂ．Ｃｈａｓｅｎ、Ｅ．Ｍｉｔｔｒａ、Ｐ．Ｌ．Ｋｕｎｚ、Ｍ．Ｈ．Ｋｕｌｋｅ、Ｈ．Ｊａｃｅｎｅら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１７、３７６、１２５－１３５．
［４］Ｂ．Ｓａｎｇｒｏ、Ｌ．Ｃａｒｐａｎｅｓｅ、Ｒ．Ｃｉａｎｎｉ、Ｒ．Ｇｏｌｆｉｅｒｉ、Ｄ．Ｇａｓｐａｒｉｎｉ、Ｓ．Ｅｚｚｉｄｄｉｎ、Ｐ．Ｍ．Ｐａｐｒｏｔｔｋａ、Ｆ．Ｆｉｏｒｅ、Ｍ．Ｖａｎ Ｂｕｓｋｉｒｋ、Ｊ．Ｉｇｎａｃｉｏ Ｂｉｌｂａｏら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０１１、５４、８６８－８７８．
［５］Ｓ．Ｄ．Ｂｏｓ、Ｐｒｏｓｔａｔｅ １９９４、２５、２３－２６．
［６］Ｏ．Ｓａｒｔｏｒ、Ｒｅｖ．Ｕｒｏｌ．２００４、６ Ｓｕｐｐｌ １０、Ｓ３－Ｓ１２．
［７］Ｃ．Ｐａｒｋｅｒ、Ｓ．Ｎｉｌｓｓｏｎ Ｄ Ｈｅｉｎｒｉｃｈ、Ｓ．Ｉ．Ｈｅｌｌｅ、Ｊ．Ｍ．Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ、Ｓ．Ｄ．Ｆｏｓｓａ、Ａ．Ｃｈｏｄａｃｋｉ、Ｐ．Ｗｉｅｃｈｎｏ、Ｊ．Ｌｏｇｕｅ、Ｍ．Ｓｅｋｅ、Ａ．Ｗｉｄｍａｒｋら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１３、３６９、２１３－２２３．
［８］Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｃ．Ａｐｏｓｔｏｌｉｄｉｓ、Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｍ．Ｓａｔｈｅｋｇｅ、Ｌ．Ｋｒｏｌｉｃｋｉ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１８、１１、２００－２０８．
［９］Ｄ．Ａ．Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇ、Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１２、４、３０６－３２０．
［１０］Ｇ．Ｓｇｏｕｒｏｓ、Ｊ．Ｃ．Ｒｏｅｓｋｅ、Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｓ．Ｐａｌｍ、Ｂ．Ｊ．Ａｌｌｅｎ、Ｄ．Ｒ．Ｆｉｓｈｅｒ、Ａ．Ｂ．Ｂｒｉｌｌ、Ｈ．Ｓｏｎｇ、Ｒ．Ｗ．Ｈｏｗｅｌｌ、Ｇ．Ａｋａｂａｎｉら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１０、５１、３１１－３２８．
［１１］Ｃ．Ｗｕｌｂｒａｎｄ、Ｃ．Ｓｅｉｄｌ、Ｆ．Ｃ．Ｇａｅｒｔｎｅｒ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｍ．Ｅｓｓｌｅｒ、Ｒ．Ｓｅｎｅｋｏｗｉｔｓｃｈ－Ｓｃｈｍｉｄｔｋｅ、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１３、８、ＤＯＩ １０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００６４７３０．
［１２］Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｆ．Ｌ．Ｇｉｅｓｅｌ、Ｍ．Ｗｅｉｓ、Ｆ．Ａ．Ｖｅｒｂｕｒｇ、Ｆ．Ｍｏｔｔａｇｈｙ、Ｋ．Ｋｏｐｋａ、Ｃ．Ａｐｏｓｔｏｌｉｄｉｓ、Ｕ．Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１６、５７、１９４１－１９４４．
［１３］Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｈ．Ｒａｔｈｋｅ、Ｍ．Ｈｏｈｅｎｆｅｌｌｎｅｒ、Ｆ．Ｌ．Ｇｉｅｓｅｌ、Ｕ．Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１８、５９、７９５－８０２．
［１４］Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ｐ．Ｓｃｈａｆｆｅｒ、Ｖ．Ｒａｄｃｈｅｎｋｏ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１８、１１、１５６－１７２．
［１５］Ｓ．Ｌ．Ｗｕ、Ｗ．ＤｅＷ．Ｈｏｒｒｏｃｋｓ、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｄａｌｔ．Ｔｒａｎｓ．１９９７、１４９７－１５０２．
［１６］Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｄ．Ｍａ、Ｊ．Ｓｉｍｏｎ、Ｒ．Ｋ．Ｆｒａｎｋ、Ｄ．Ａ．Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇ、Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．２００２、５７、８４１－８４７．
［１７］Ｍ．Ｍｉｅｄｅｒｅｒ、Ｇ．Ｈｅｎｒｉｋｓｅｎ、Ａ．Ａｌｋｅ、Ｉ．Ｍｏｓｓｂｒｕｇｇｅｒ、Ｌ．Ｑｕｉｎｔａｎｉｌｌａ－Ｍａｒｔｉｎｅｚ、Ｒ．Ｓｅｎｅｋｏｗｉｔｓｃｈ－Ｓｃｈｍｉｄｔｋｅ、Ｍ．Ｅｓｓｌｅｒ、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００８、１４、３５５５－３５６１．
［１８］Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｄ．Ｍａ、Ｌ．Ｔ．Ｌａｉ、Ｊ．Ｓｉｍｏｎ、Ｐ．Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ、Ｒ．Ｋ．Ｆｒａｎｋ、Ｋ．Ｗｕ、Ｖ．Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ、Ｍ．Ｊ．Ｃｕｒｃｉｏ、Ｍ．Ｍｉｅｄｅｒｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００１、２９４、１５３７－１５４０．
［１９］Ｎ．Ａ．Ｔｈｉｅｌｅ、Ｖ．Ｂｒｏｗｎ、Ｊ．Ｍ．Ｋｅｌｌｙ、Ａ．Ａｍｏｒ－Ｃｏａｒａｓａ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｓ．Ｎ．ＭａｃＭｉｌｌａｎ、Ａ．Ｎｉｋｏｌｏｐｏｕｌｏｕ、Ｓ．Ｐｏｎｎａｌａ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１７、５６、１４７１２－１４７１７．
［２０］Ｊ．Ｍ．Ｋｅｌｌｙ、Ａ．Ａｍｏｒ－Ｃｏａｒａｓａ、Ｓ．Ｐｏｎｎａｌａ、Ａ．Ｎｉｋｏｌｏｐｏｕｌｏｕ、Ｃ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｎ．Ａ．Ｔｈｉｅｌｅ、Ｄ．Ｓｃｈｌｙｅｒ、Ｊ．Ｊ．Ｗｉｌｓｏｎ、Ｓ．Ｇ．ＤｉＭａｇｎｏ、Ｊ．Ｗ．Ｂａｂｉｃｈ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１９、６０、６４９－６５５．
［２１］Ｐ．Ｃｏｍｂａ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｃ．Ｏｒｖｉｇ、Ｂ．Ｏ．Ｐａｔｒｉｃｋ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ｋ．Ｒｕｅｃｋ、Ｃ．Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ、Ｍ．Ｓｔａｒｋｅ、Ｃｈｅｍ．－Ａ Ｅｕｒ．Ｊ．２０１７、２３、１５９４５－１５９５６．
［２２］Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｈ．Ｙａｎｇ、Ｐ．Ｋｕｎｚ、Ｊ．Ｌａｓｓｅｎ、Ｉ．Ｂｒａｔａｎｏｖｉｃ、Ｖ．Ｂｒｏｗｎ、Ｌ．Ｓｏｕｔｈｃｏｔｔら、ＥＪＮＭＭＩ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍ．２０１９、４、１－２０．
［２３］Ｂ．Ｗ．Ｓｔｅｉｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｅ．Ｒ．Ｂａｔｉｓｔａ、Ｅ．Ｒ．Ｂｉｒｎｂａｕｍ、Ｓ．Ｅ．Ｂｏｎｅ、Ｓ．Ｋ．Ｃａｒｙ、Ｍ．Ｇ．Ｆｅｒｒｉｅｒ、Ｋ．Ｄ．Ｊｏｈｎ、Ｊ．Ｌ．Ｐａｃｈｅｃｏ、Ｓ．Ａ．Ｋｏｚｉｍｏｒら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１９、１４１、１９４０４－１９４１４．
［２４］Ｓ．Ｊ．Ｋｅｎｎｅｌ、Ｌ．Ｌ．Ｃｈａｐｐｅｌｌ、Ｋ．Ｄａｄａｃｈｏｖａ、Ｍ．Ｗ．Ｂｒｅｃｈｂｉｅｌ、Ｔ．Ｋ．Ｌａｎｋｆｏｒｄ、Ｉ．Ａ．Ｄａｖｉｓ、Ｍ．Ｓｔａｂｉｎ、Ｓ．Ｍｉｒｚａｄｅｈ、Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０００、１５、２３５－２４４．
［２５］Ｓ．Ｒａｙ Ｂａｎｅｒｊｅｅ、Ｍ．Ｐｕｌｌａｍｂｈａｔｌａ、Ｃ．Ａ．Ｆｏｓｓ、Ａ．Ｆａｌｋ、Ｙ．Ｂｙｕｎ、Ｓ．Ｎｉｍｍａｇａｄｄａ、Ｒ．Ｃ．Ｍｅａｓｅ、Ｍ．Ｇ．Ｐｏｍｐｅｒ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３、５６、６１０８－６１２１．
［２６］Ｂ．Ｍｉｔｒａｎ、Ｚ．Ｖａｒａｓｔｅｈ、Ｒ．Ｋ．Ｓｅｌｖａｒａｊｕ、Ｇ．Ｌｉｎｄｅｂｅｒｇ、Ｊ．Ｓｏｒｅｎｓｅｎ、Ｍ．Ｌａｒｈｅｄ、Ｖ．Ｔｏｌｍａｃｈｅｖ、Ｕ．Ｒｏｓｅｎｓｔｒｏｍ、Ａ．Ｏｒｌｏｖａ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．２０１６、４８、２１２４－２１３４．
［２７］Ａ．Ｂａｒｇｅ、Ｌ．Ｔｅｉ、Ｄ．Ｕｐａｄｈｙａｙａ、Ｆ．Ｆｅｄｅｌｉ、Ｌ．Ｂｅｌｔｒａｍｉ、Ｒ．Ｓｔｅｆａｎｉａ、Ｓ．Ａｉｍｅ、Ｇ．Ｃｒａｖｏｔｔｏ、Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００８、６、１１７６－１１８４．
［２８］Ｓ．－Ｌ．Ｍａ、Ｗ．－Ｘ．Ｚｈｕ、Ｓ．－Ｊ．Ｄｏｎｇ、Ｑ．－Ｌ．Ｇｕｏ、Ｙ．－Ｂ．Ｓｈｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊ．Ｃｈｅｍ．２０１０、２１、１１７８－１１８２．
［２９］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｊ．Ｐａｎ、Ｉ．Ｄｕｄｅ、Ｎ．Ｈｕｎｄａｌ－Ｊａｂａｌ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ ２０１７、７、８０５－８１３．
［３０］Ｍ．Ａ．Ｐｏｓｔｏｗ、Ｍ．Ｋ．Ｃａｌｌａｈａｎ、Ｊ．Ｄ．Ｗｏｌｃｈｏｋ、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５、３３、１９７４－８２．
［３１］Ｃ．Ｈｅｒｔｚｍａｎ Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ、Ｓ．Ｅｇｙｈａｚｉ Ｂｒａｇｅ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２０１４、１４２、１７６－１８２．
［３２］Ｃ．Ｓ．Ｈｉｎｒｉｃｈｓ、Ｓ．Ａ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２０１４、２５７、５６－７１．
［３３］Ｒ．Ｈ．Ｉ．Ａｎｄｔｂａｃｋａ、Ｈ．Ｌ．Ｋａｕｆｍａｎ、Ｆ．Ｃｏｌｌｉｃｈｉｏ、Ｔ．Ａｍａｔｒｕｄａ、Ｎ．Ｓｅｎｚｅｒ、Ｊ．Ｃｈｅｓｎｅｙ、Ｋ．Ａ．Ｄｅｌｍａｎ、Ｌ．Ｅ．Ｓｐｉｔｌｅｒ、Ｉ．Ｐｕｚａｎｏｖ、Ｓ．Ｓ．Ａｇａｒｗａｌａら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５、３３、２７８０－２７８８．
［３４］Ｆ．Ｓａｌａｚａｒ－Ｏｎｆｒａｙ、Ｍ．Ｌoｐｅｚ、Ａ．Ｌｕｎｄｑｖｉｓｔ、Ａ．Ａｇｕｉｒｒｅ、Ａ．Ｅｓｃｏｂａｒ、Ａ．Ｓｅｒｒａｎｏ、Ｃ．Ｋｏｒｅｎｂｌｉｔ、Ｍ．Ｐｅｔｅｒｓｓｏｎ、Ｖ．Ｃｈｈａｊｌａｎｉ、Ｏ．Ｌａｒｓｓｏｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ２００２、８７、４１４－４２２．
［３５］Ｍ．Ｎ．Ｌｏｐｅｚ、Ｃ．Ｐｅｒｅｄａ、Ｍ．Ｒａｍｉｒｅｚ、Ａ．Ｍｅｎｄｏｚａ－Ｎａｒａｎｊｏ、Ａ．Ｓｅｒｒａｎｏ、Ａ．Ｆｅｒｒｅｉｒａ、Ｒ．Ｐｏｂｌｅｔｅ、Ａ．Ｍ．Ｋａｌｅｒｇｉｓ、Ｒ．Ｋｉｅｓｓｌｉｎｇ、Ｆ．Ｓａｌａｚａｒ－Ｏｎｆｒａｙ、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．２００７、４８、１２１９－１２２７．
［３６］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｊ．Ｌａｕ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｄ．Ｍ．Ｐｅｒｒｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２０１８、１５、２１１６－２１２２．
［３７］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｈ．Ｍｅｒｋｅｎｓ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｎ．Ｈｕｎｄａｌ－Ｊａｂａｌ、Ｄ．Ｍ．Ｐｅｒｒｉｎ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．２０１９、９、ＤＯＩ １０．１０３８／ｓ４１５９８－０１９－５００１４－５．
［３８］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｋ．－Ｓ．Ｌｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、ＡＣＳ Ｏｍｅｇａ ２０２０、ａｃｓｏｍｅｇａ．０ｃ００３１０．
［３９］Ｐ．Ｍ．Ｙ．Ｇａｒｃｉａ、Ｇ．Ｍ．Ｓｉｇａｕｄ、Ｈ．Ｌｕｎａ、Ａ．Ｃ．Ｆ．Ｓａｎｔｏｓ、Ｅ．Ｃ．Ｍｏｎｔｅｎｅｇｒｏ、Ｍ．Ｂ．Ｓｈａｈ、Ｐｈｙｓ．Ｒｅｖ．Ａ－Ａｔ．Ｍｏｌ．Ｏｐｔ．Ｐｈｙｓ．２００８、７７、０５２７０８．
［４０］ＩＡＥＡ、Ｑｕａｌｉｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｜ ＩＡＥＡ ＴＥＣＨＤＯＣ－１８５６、２０１８．
［４１］Ｂｅｎｅｓｏｖａ、Ｍ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ａｆｓｈａｒ－Ｏｒｏｍｉｅｈ、Ａ．；Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｃ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｔａｉｌｏｒ－Ｍａｄｅ ＤＯＴＡ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＰＳＭＡ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｗｉｔｈ Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ Ｌｉｎｋｅｒ Ｍｏｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｉｍａｇｉｎｇ ａｎｄ Ｅｎｄｏｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１５、５６、９１４－９２０．
［４２］Ｂａｒａｎｓｋｉ、Ａ．－Ｃ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ｗａｃｋｅｒ、Ａ．；Ｓｃｈｍｉｄｔ、Ｊ．；Ｌｉｏｌｉｏｓ、Ｃ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｅｉｓｅｎｈｕｔ、Ｍ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｃｏｎｔｒａｓｔ ｏｆ ６８Ｇａ－ＰＳＭＡ－１１ ｂｙ Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｌｉｎｋｅｒ Ｄｅｓｉｇｎ：Ｃｈａｒｇｅｄ Ｓｐａｃｅｒ Ｍｏｉｅｔｉｅｓ Ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２０１７、２８、２４８５－２４９２．
［４３］Ｋｕｏ、Ｈ．－Ｔ．；Ｐａｎ、Ｊ．；Ｚｈａｎｇ、Ｚ．；Ｌａｕ、Ｊ．；Ｍｅｒｋｅｎｓ、Ｈ．；Ｚｈａｎｇ、Ｃ．；Ｃｏｌｐｏ、Ｎ．；Ｌｉｎ、Ｋ．－Ｓ．；Ｂｅｎａｒｄ、Ｆ．、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｉｎｋｅｒ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｕｍｏｒ－ｔｏ－ｋｉｄｎｅｙ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｏｆ ６８Ｇａ－ｌａｂｅｌｅｄ ＰＳＭＡ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｍａｇｉｎｇ ｐｒｏｂｅｓ．Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍ．２０１８、１５、３５０２－３５１１．
［４４］Ｂｅｎｅｓｏｖａ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｋｌｉｋａ、Ｋ．Ｄ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｌｉｎｋｅｒ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ Ｔｏ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｈｅ Ｐｒｏｓｔａｔｅ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ａｎｔｉｇｅｎ （ＰＳＭＡ）－Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ＤＯＴＡ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＰＳＭＡ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１６、５９、１７６１－１７７５．
［４５］Ｌａｕ、Ｊ．；Ｒｏｕｓｓｅａｕ、Ｅ．；Ｋｗｏｎ、Ｄ．；Ｌｉｎ、Ｋ．；Ｂｅｎａｒｄ、Ｆ．；Ｃｈｅｎ、Ｘ．、Ｉｎｓｉｇｈｔ ｉｎｔｏ ｔｈｅ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ＰＥＴ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ． Ｃａｎｃｅｒｓ ２０２０、１２、１３１２．
以下の参考文献は、本明細書の主題に関して興味深いものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる：
［１］Ｓ．Ｇｕｄｋｏｖ、Ｎ．Ｓｈｉｌｙａｇｉｎａ、Ｖ．Ｖｏｄｅｎｅｅｖ、Ａ．Ｚｖｙａｇｉｎ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．２０１５、１７、３３．
［２］Ｊ．Ｐ．Ｐｏｕｇｅｔ、Ｉ．Ｎａｖａｒｒｏ－Ｔｅｕｌｏｎ、Ｍ．Ｂａｒｄｉｅｓ、Ｎ．Ｃｈｏｕｉｎ、Ｇ．Ｃａｒｔｒｏｎ、Ａ．Ｐｅｌｅｇｒｉｎ、Ｄ．Ａｚｒｉａ、Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１１、８、７２０－７３４．
［３］Ｊ．Ｓｔｒｏｓｂｅｒｇ、Ｇ．Ｅｌ－Ｈａｄｄａｄ、Ｅ．Ｗｏｌｉｎ、Ａ．Ｈｅｎｄｉｆａｒ、Ｊ．Ｙａｏ、Ｂ．Ｃｈａｓｅｎ、Ｅ．Ｍｉｔｔｒａ、Ｐ．Ｌ．Ｋｕｎｚ、Ｍ．Ｈ．Ｋｕｌｋｅ、Ｈ．Ｊａｃｅｎｅら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１７、３７６、１２５－１３５．
［４］Ｂ．Ｓａｎｇｒｏ、Ｌ．Ｃａｒｐａｎｅｓｅ、Ｒ．Ｃｉａｎｎｉ、Ｒ．Ｇｏｌｆｉｅｒｉ、Ｄ．Ｇａｓｐａｒｉｎｉ、Ｓ．Ｅｚｚｉｄｄｉｎ、Ｐ．Ｍ．Ｐａｐｒｏｔｔｋａ、Ｆ．Ｆｉｏｒｅ、Ｍ．Ｖａｎ Ｂｕｓｋｉｒｋ、Ｊ．Ｉｇｎａｃｉｏ Ｂｉｌｂａｏら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２０１１、５４、８６８－８７８．
［５］Ｓ．Ｄ．Ｂｏｓ、Ｐｒｏｓｔａｔｅ １９９４、２５、２３－２６．
［６］Ｏ．Ｓａｒｔｏｒ、Ｒｅｖ．Ｕｒｏｌ．２００４、６ Ｓｕｐｐｌ １０、Ｓ３－Ｓ１２．
［７］Ｃ．Ｐａｒｋｅｒ、Ｓ．Ｎｉｌｓｓｏｎ Ｄ Ｈｅｉｎｒｉｃｈ、Ｓ．Ｉ．Ｈｅｌｌｅ、Ｊ．Ｍ．Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎ、Ｓ．Ｄ．Ｆｏｓｓａ、Ａ．Ｃｈｏｄａｃｋｉ、Ｐ．Ｗｉｅｃｈｎｏ、Ｊ．Ｌｏｇｕｅ、Ｍ．Ｓｅｋｅ、Ａ．Ｗｉｄｍａｒｋら、Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．２０１３、３６９、２１３－２２３．
［８］Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｃ．Ａｐｏｓｔｏｌｉｄｉｓ、Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｍ．Ｓａｔｈｅｋｇｅ、Ｌ．Ｋｒｏｌｉｃｋｉ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１８、１１、２００－２０８．
［９］Ｄ．Ａ．Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇ、Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１２、４、３０６－３２０．
［１０］Ｇ．Ｓｇｏｕｒｏｓ、Ｊ．Ｃ．Ｒｏｅｓｋｅ、Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｓ．Ｐａｌｍ、Ｂ．Ｊ．Ａｌｌｅｎ、Ｄ．Ｒ．Ｆｉｓｈｅｒ、Ａ．Ｂ．Ｂｒｉｌｌ、Ｈ．Ｓｏｎｇ、Ｒ．Ｗ．Ｈｏｗｅｌｌ、Ｇ．Ａｋａｂａｎｉら、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１０、５１、３１１－３２８．
［１１］Ｃ．Ｗｕｌｂｒａｎｄ、Ｃ．Ｓｅｉｄｌ、Ｆ．Ｃ．Ｇａｅｒｔｎｅｒ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｍ．Ｅｓｓｌｅｒ、Ｒ．Ｓｅｎｅｋｏｗｉｔｓｃｈ－Ｓｃｈｍｉｄｔｋｅ、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１３、８、ＤＯＩ １０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００６４７３０．
［１２］Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｆ．Ｌ．Ｇｉｅｓｅｌ、Ｍ．Ｗｅｉｓ、Ｆ．Ａ．Ｖｅｒｂｕｒｇ、Ｆ．Ｍｏｔｔａｇｈｙ、Ｋ．Ｋｏｐｋａ、Ｃ．Ａｐｏｓｔｏｌｉｄｉｓ、Ｕ．Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１６、５７、１９４１－１９４４．
［１３］Ｃ．Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｆ．Ｂｒｕｃｈｅｒｔｓｅｉｆｅｒ、Ｈ．Ｒａｔｈｋｅ、Ｍ．Ｈｏｈｅｎｆｅｌｌｎｅｒ、Ｆ．Ｌ．Ｇｉｅｓｅｌ、Ｕ．Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１８、５９、７９５－８０２．
［１４］Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ｐ．Ｓｃｈａｆｆｅｒ、Ｖ．Ｒａｄｃｈｅｎｋｏ、Ｃｕｒｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０１８、１１、１５６－１７２．
［１５］Ｓ．Ｌ．Ｗｕ、Ｗ．ＤｅＷ．Ｈｏｒｒｏｃｋｓ、Ｊ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｄａｌｔ．Ｔｒａｎｓ．１９９７、１４９７－１５０２．
［１６］Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｄ．Ｍａ、Ｊ．Ｓｉｍｏｎ、Ｒ．Ｋ．Ｆｒａｎｋ、Ｄ．Ａ．Ｓｃｈｅｉｎｂｅｒｇ、Ａｐｐｌ．Ｒａｄｉａｔ．Ｉｓｏｔ．２００２、５７、８４１－８４７．
［１７］Ｍ．Ｍｉｅｄｅｒｅｒ、Ｇ．Ｈｅｎｒｉｋｓｅｎ、Ａ．Ａｌｋｅ、Ｉ．Ｍｏｓｓｂｒｕｇｇｅｒ、Ｌ．Ｑｕｉｎｔａｎｉｌｌａ－Ｍａｒｔｉｎｅｚ、Ｒ．Ｓｅｎｅｋｏｗｉｔｓｃｈ－Ｓｃｈｍｉｄｔｋｅ、Ｍ．Ｅｓｓｌｅｒ、Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００８、１４、３５５５－３５６１．
［１８］Ｍ．Ｒ．ＭｃＤｅｖｉｔｔ、Ｄ．Ｍａ、Ｌ．Ｔ．Ｌａｉ、Ｊ．Ｓｉｍｏｎ、Ｐ．Ｂｏｒｃｈａｒｄｔ、Ｒ．Ｋ．Ｆｒａｎｋ、Ｋ．Ｗｕ、Ｖ．Ｐｅｌｌｅｇｒｉｎｉ、Ｍ．Ｊ．Ｃｕｒｃｉｏ、Ｍ．Ｍｉｅｄｅｒｅｒら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２００１、２９４、１５３７－１５４０．
［１９］Ｎ．Ａ．Ｔｈｉｅｌｅ、Ｖ．Ｂｒｏｗｎ、Ｊ．Ｍ．Ｋｅｌｌｙ、Ａ．Ａｍｏｒ－Ｃｏａｒａｓａ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｓ．Ｎ．ＭａｃＭｉｌｌａｎ、Ａ．Ｎｉｋｏｌｏｐｏｕｌｏｕ、Ｓ．Ｐｏｎｎａｌａ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎら、Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅｄ．２０１７、５６、１４７１２－１４７１７．
［２０］Ｊ．Ｍ．Ｋｅｌｌｙ、Ａ．Ａｍｏｒ－Ｃｏａｒａｓａ、Ｓ．Ｐｏｎｎａｌａ、Ａ．Ｎｉｋｏｌｏｐｏｕｌｏｕ、Ｃ．Ｗｉｌｌｉａｍｓ、Ｎ．Ａ．Ｔｈｉｅｌｅ、Ｄ．Ｓｃｈｌｙｅｒ、Ｊ．Ｊ．Ｗｉｌｓｏｎ、Ｓ．Ｇ．ＤｉＭａｇｎｏ、Ｊ．Ｗ．Ｂａｂｉｃｈ、Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１９、６０、６４９－６５５．
［２１］Ｐ．Ｃｏｍｂａ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｃ．Ｏｒｖｉｇ、Ｂ．Ｏ．Ｐａｔｒｉｃｋ、Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ｋ．Ｒｕｅｃｋ、Ｃ．Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ、Ｍ．Ｓｔａｒｋｅ、Ｃｈｅｍ．－Ａ Ｅｕｒ．Ｊ．２０１７、２３、１５９４５－１５９５６．
［２２］Ｃ．Ｆ．Ｒａｍｏｇｉｄａ、Ａ．Ｋ．Ｈ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ、Ｕ．Ｊｅｒｍｉｌｏｖａ、Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｈ．Ｙａｎｇ、Ｐ．Ｋｕｎｚ、Ｊ．Ｌａｓｓｅｎ、Ｉ．Ｂｒａｔａｎｏｖｉｃ、Ｖ．Ｂｒｏｗｎ、Ｌ．Ｓｏｕｔｈｃｏｔｔら、ＥＪＮＭＭＩ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．Ｃｈｅｍ．２０１９、４、１－２０．
［２３］Ｂ．Ｗ．Ｓｔｅｉｎ、Ａ．Ｍｏｒｇｅｎｓｔｅｒｎ、Ｅ．Ｒ．Ｂａｔｉｓｔａ、Ｅ．Ｒ．Ｂｉｒｎｂａｕｍ、Ｓ．Ｅ．Ｂｏｎｅ、Ｓ．Ｋ．Ｃａｒｙ、Ｍ．Ｇ．Ｆｅｒｒｉｅｒ、Ｋ．Ｄ．Ｊｏｈｎ、Ｊ．Ｌ．Ｐａｃｈｅｃｏ、Ｓ．Ａ．Ｋｏｚｉｍｏｒら、Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．２０１９、１４１、１９４０４－１９４１４．
［２４］Ｓ．Ｊ．Ｋｅｎｎｅｌ、Ｌ．Ｌ．Ｃｈａｐｐｅｌｌ、Ｋ．Ｄａｄａｃｈｏｖａ、Ｍ．Ｗ．Ｂｒｅｃｈｂｉｅｌ、Ｔ．Ｋ．Ｌａｎｋｆｏｒｄ、Ｉ．Ａ．Ｄａｖｉｓ、Ｍ．Ｓｔａｂｉｎ、Ｓ．Ｍｉｒｚａｄｅｈ、Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ．Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ．２０００、１５、２３５－２４４．
［２５］Ｓ．Ｒａｙ Ｂａｎｅｒｊｅｅ、Ｍ．Ｐｕｌｌａｍｂｈａｔｌａ、Ｃ．Ａ．Ｆｏｓｓ、Ａ．Ｆａｌｋ、Ｙ．Ｂｙｕｎ、Ｓ．Ｎｉｍｍａｇａｄｄａ、Ｒ．Ｃ．Ｍｅａｓｅ、Ｍ．Ｇ．Ｐｏｍｐｅｒ、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１３、５６、６１０８－６１２１．
［２６］Ｂ．Ｍｉｔｒａｎ、Ｚ．Ｖａｒａｓｔｅｈ、Ｒ．Ｋ．Ｓｅｌｖａｒａｊｕ、Ｇ．Ｌｉｎｄｅｂｅｒｇ、Ｊ．Ｓｏｒｅｎｓｅｎ、Ｍ．Ｌａｒｈｅｄ、Ｖ．Ｔｏｌｍａｃｈｅｖ、Ｕ．Ｒｏｓｅｎｓｔｒｏｍ、Ａ．Ｏｒｌｏｖａ、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．２０１６、４８、２１２４－２１３４．
［２７］Ａ．Ｂａｒｇｅ、Ｌ．Ｔｅｉ、Ｄ．Ｕｐａｄｈｙａｙａ、Ｆ．Ｆｅｄｅｌｉ、Ｌ．Ｂｅｌｔｒａｍｉ、Ｒ．Ｓｔｅｆａｎｉａ、Ｓ．Ａｉｍｅ、Ｇ．Ｃｒａｖｏｔｔｏ、Ｏｒｇ．Ｂｉｏｍｏｌ．Ｃｈｅｍ．２００８、６、１１７６－１１８４．
［２８］Ｓ．－Ｌ．Ｍａ、Ｗ．－Ｘ．Ｚｈｕ、Ｓ．－Ｊ．Ｄｏｎｇ、Ｑ．－Ｌ．Ｇｕｏ、Ｙ．－Ｂ．Ｓｈｅ、Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｊ．Ｃｈｅｍ．２０１０、２１、１１７８－１１８２．
［２９］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｊ．Ｐａｎ、Ｉ．Ｄｕｄｅ、Ｎ．Ｈｕｎｄａｌ－Ｊａｂａｌ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｔｈｅｒａｎｏｓｔｉｃｓ ２０１７、７、８０５－８１３．
［３０］Ｍ．Ａ．Ｐｏｓｔｏｗ、Ｍ．Ｋ．Ｃａｌｌａｈａｎ、Ｊ．Ｄ．Ｗｏｌｃｈｏｋ、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５、３３、１９７４－８２．
［３１］Ｃ．Ｈｅｒｔｚｍａｎ Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ、Ｓ．Ｅｇｙｈａｚｉ Ｂｒａｇｅ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．Ｔｈｅｒ．２０１４、１４２、１７６－１８２．
［３２］Ｃ．Ｓ．Ｈｉｎｒｉｃｈｓ、Ｓ．Ａ．Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ、Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．２０１４、２５７、５６－７１．
［３３］Ｒ．Ｈ．Ｉ．Ａｎｄｔｂａｃｋａ、Ｈ．Ｌ．Ｋａｕｆｍａｎ、Ｆ．Ｃｏｌｌｉｃｈｉｏ、Ｔ．Ａｍａｔｒｕｄａ、Ｎ．Ｓｅｎｚｅｒ、Ｊ．Ｃｈｅｓｎｅｙ、Ｋ．Ａ．Ｄｅｌｍａｎ、Ｌ．Ｅ．Ｓｐｉｔｌｅｒ、Ｉ．Ｐｕｚａｎｏｖ、Ｓ．Ｓ．Ａｇａｒｗａｌａら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ．２０１５、３３、２７８０－２７８８．
［３４］Ｆ．Ｓａｌａｚａｒ－Ｏｎｆｒａｙ、Ｍ．Ｌoｐｅｚ、Ａ．Ｌｕｎｄｑｖｉｓｔ、Ａ．Ａｇｕｉｒｒｅ、Ａ．Ｅｓｃｏｂａｒ、Ａ．Ｓｅｒｒａｎｏ、Ｃ．Ｋｏｒｅｎｂｌｉｔ、Ｍ．Ｐｅｔｅｒｓｓｏｎ、Ｖ．Ｃｈｈａｊｌａｎｉ、Ｏ．Ｌａｒｓｓｏｎら、Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ２００２、８７、４１４－４２２．
［３５］Ｍ．Ｎ．Ｌｏｐｅｚ、Ｃ．Ｐｅｒｅｄａ、Ｍ．Ｒａｍｉｒｅｚ、Ａ．Ｍｅｎｄｏｚａ－Ｎａｒａｎｊｏ、Ａ．Ｓｅｒｒａｎｏ、Ａ．Ｆｅｒｒｅｉｒａ、Ｒ．Ｐｏｂｌｅｔｅ、Ａ．Ｍ．Ｋａｌｅｒｇｉｓ、Ｒ．Ｋｉｅｓｓｌｉｎｇ、Ｆ．Ｓａｌａｚａｒ－Ｏｎｆｒａｙ、Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｏｐｈｔｈａｌｍｏｌ．Ｖｉｓ．Ｓｃｉ．２００７、４８、１２１９－１２２７．
［３６］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｊ．Ｌａｕ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｄ．Ｍ．Ｐｅｒｒｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍ．２０１８、１５、２１１６－２１２２．
［３７］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｈ．Ｍｅｒｋｅｎｓ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｎ．Ｈｕｎｄａｌ－Ｊａｂａｌ、Ｄ．Ｍ．Ｐｅｒｒｉｎ、Ｋ．Ｓ．Ｌｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、Ｓｃｉ．Ｒｅｐ．２０１９、９、ＤＯＩ １０．１０３８／ｓ４１５９８－０１９－５００１４－５．
［３８］Ｃ．Ｚｈａｎｇ、Ｚ．Ｚｈａｎｇ、Ｊ．Ｚｅｉｓｌｅｒ、Ｎ．Ｃｏｌｐｏ、Ｋ．－Ｓ．Ｌｉｎ、Ｆ．Ｂｅｎａｒｄ、ＡＣＳ Ｏｍｅｇａ ２０２０、ａｃｓｏｍｅｇａ．０ｃ００３１０．
［３９］Ｐ．Ｍ．Ｙ．Ｇａｒｃｉａ、Ｇ．Ｍ．Ｓｉｇａｕｄ、Ｈ．Ｌｕｎａ、Ａ．Ｃ．Ｆ．Ｓａｎｔｏｓ、Ｅ．Ｃ．Ｍｏｎｔｅｎｅｇｒｏ、Ｍ．Ｂ．Ｓｈａｈ、Ｐｈｙｓ．Ｒｅｖ．Ａ－Ａｔ．Ｍｏｌ．Ｏｐｔ．Ｐｈｙｓ．２００８、７７、０５２７０８．
［４０］ＩＡＥＡ、Ｑｕａｌｉｔｙ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｜ ＩＡＥＡ ＴＥＣＨＤＯＣ－１８５６、２０１８．
［４１］Ｂｅｎｅｓｏｖａ、Ｍ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ａｆｓｈａｒ－Ｏｒｏｍｉｅｈ、Ａ．；Ｋｒａｔｏｃｈｗｉｌ、Ｃ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ａ Ｔａｉｌｏｒ－Ｍａｄｅ ＤＯＴＡ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＰＳＭＡ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｗｉｔｈ Ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ Ｌｉｎｋｅｒ Ｍｏｉｅｔｙ ｆｏｒ Ｉｍａｇｉｎｇ ａｎｄ Ｅｎｄｏｒａｄｉｏｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｐｒｏｓｔａｔｅ Ｃａｎｃｅｒ．Ｊ．Ｎｕｃｌ．Ｍｅｄ．２０１５、５６、９１４－９２０．
［４２］Ｂａｒａｎｓｋｉ、Ａ．－Ｃ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ｗａｃｋｅｒ、Ａ．；Ｓｃｈｍｉｄｔ、Ｊ．；Ｌｉｏｌｉｏｓ、Ｃ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｅｉｓｅｎｈｕｔ、Ｍ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ ｔｈｅ Ｉｍａｇｉｎｇ Ｃｏｎｔｒａｓｔ ｏｆ ６８Ｇａ－ＰＳＭＡ－１１ ｂｙ Ｔａｒｇｅｔｅｄ Ｌｉｎｋｅｒ Ｄｅｓｉｇｎ：Ｃｈａｒｇｅｄ Ｓｐａｃｅｒ Ｍｏｉｅｔｉｅｓ Ｅｎｈａｎｃｅ ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍ．２０１７、２８、２４８５－２４９２．
［４３］Ｋｕｏ、Ｈ．－Ｔ．；Ｐａｎ、Ｊ．；Ｚｈａｎｇ、Ｚ．；Ｌａｕ、Ｊ．；Ｍｅｒｋｅｎｓ、Ｈ．；Ｚｈａｎｇ、Ｃ．；Ｃｏｌｐｏ、Ｎ．；Ｌｉｎ、Ｋ．－Ｓ．；Ｂｅｎａｒｄ、Ｆ．、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｌｉｎｋｅｒ ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｎ ｔｕｍｏｒ－ｔｏ－ｋｉｄｎｅｙ ｃｏｎｔｒａｓｔ ｏｆ ６８Ｇａ－ｌａｂｅｌｅｄ ＰＳＭＡ－ｔａｒｇｅｔｅｄ ｉｍａｇｉｎｇ ｐｒｏｂｅｓ．Ｍｏｌ Ｐｈａｒｍ．２０１８、１５、３５０２－３５１１．
［４４］Ｂｅｎｅｓｏｖａ、Ｍ．；Ｂａｕｄｅｒ－Ｗｕｅｓｔ、Ｕ．；Ｓｃｈａｅｆｅｒ、Ｍ．；Ｋｌｉｋａ、Ｋ．Ｄ．；Ｍｉｅｒ、Ｗ．；Ｈａｂｅｒｋｏｒｎ、Ｕ．；Ｋｏｐｋａ、Ｋ．；Ｅｄｅｒ、Ｍ．、Ｌｉｎｋｅｒ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎ Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓ Ｔｏ Ｃｏｎｔｒｏｌ ｔｈｅ Ｐｒｏｓｔａｔｅ－Ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｍｅｍｂｒａｎｅ Ａｎｔｉｇｅｎ （ＰＳＭＡ）－Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃ Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆ ＤＯＴＡ－Ｃｏｎｊｕｇａｔｅｄ ＰＳＭＡ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２０１６、５９、１７６１－１７７５．
［４５］Ｌａｕ、Ｊ．；Ｒｏｕｓｓｅａｕ、Ｅ．；Ｋｗｏｎ、Ｄ．；Ｌｉｎ、Ｋ．；Ｂｅｎａｒｄ、Ｆ．；Ｃｈｅｎ、Ｘ．、Ｉｎｓｉｇｈｔ ｉｎｔｏ ｔｈｅ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ＰＥＴ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ｆｏｒ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ． Ｃａｎｃｅｒｓ ２０２０、１２、１３１２．
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【配列表】
【国際調査報告】