特表2023-515053 | 知財ポータル「IP Force」

知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」

青山学院大学 (神奈川県相模原市中央区淵野辺)

▶ インテグレーティッドディーエヌエイテクノロジーズインコーポレーティッドの特許一覧

特表2023-515053固体支持体上でのオリゴヌクレオチド合成

書誌要約請求の範囲詳細な説明課題実施例実施するための形態図面の説明

目に優しい文字サイズ小中大 PDF Top

< >

1A
1B

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-12

(54)【発明の名称】固体支持体上でのオリゴヌクレオチド合成

(51)【国際特許分類】

C07H 19/073 20060101AFI20230405BHJP

【ＦＩ】

C07H19/073

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022549788

(86)(22)【出願日】2021-02-24

(85)【翻訳文提出日】2022-10-13

(86)【国際出願番号】 US2021019335

(87)【国際公開番号】W WO2021173615

(87)【国際公開日】2021-09-02

(31)【優先権主張番号】62/980,880

(32)【優先日】2020-02-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】505092968

【氏名又は名称】インテグレーティッドディーエヌエイテクノロジーズインコーポレーティッド

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前徹

(74)【代理人】

【識別番号】100196508

【弁理士】

【氏名又は名称】松尾淳一

(74)【代理人】

【識別番号】100196243

【弁理士】

【氏名又は名称】運敬太

(72)【発明者】

【氏名】ジー，アン

(72)【発明者】

【氏名】マーヴィン，マイケル

(72)【発明者】

【氏名】マークス，ケビン

(72)【発明者】

【氏名】アンダーソン，デヴィッド

【テーマコード（参考）】

4C057

【Ｆターム（参考）】

4C057AA30

4C057CC03

4C057DD03

4C057LL11

4C057LL19

(57)【要約】

官能化固体支持体は、オリゴヌクレオチドの合成に有用である。官能化固体支持体は、末端官能基又は第１のヌクレオチドもしくはヌクレオシド部分への拡張リンカーを含む。拡張リンカーは、オリゴヌクレオチド合成が、より効率的に固体支持体からより大きな距離で行われることを可能にする。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式（Ｉ）

【化1】

の官能化固体支持体、又はその塩であって、
Ａが、固体支持体材料であり、
Ｌ^１が、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素、及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、
ここで
（ａ）前記２価のリンカーの原子が、任意に置換された鎖、又は任意に置換された環によって中断された任意に置換された鎖を形成するように配置され、
（ｂ）前記鎖、又は鎖と環が一緒になって、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素からなる群から選択される原子の１２～４０員の連続線状配列を含み、
Ｌ^２が、各出現時に、独立して、－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、－（ＣＨＣＨ_３ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、又は（ＣＨ_２ＣＨＣＨ_３Ｏ）_ｍ－であり、
Ｇ^１が、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２、水素、又はＰＧ^１であり、
Ｒ^１が、各出現時に、独立して、－ＯＲ^１ａ又はＲ^１ａであり、
Ｒ^１ａが、各出現時に、独立して、Ｃ_１－１０アルキル、Ｃ_２－１０アルケニル、Ｃ_２－１０アルキニル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又はＣ_５－１０シクロアルケニルであり、ここでＲ^１ａが、シアノ、ハロゲン、オキソ、ＯＨ、－ＯＣ_１－４アルキル、－ＯＣ_１－４ハロアルキル又はＣ_３－６シクロアルキルからなる群から独立して選択される１～６つの置換基で任意に置換され、前記Ｃ_３－６シクロアルキルがハロゲン又はＣ_１－４アルキルで任意に置換され、
Ｌ^３が、－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨＣＨ_３ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３）_ｐ－、－ＯＣ_２－１０アルキレン－、－ＯＣ_０－４アルキレン－Ｃ_３－１０シクロアルキレン－Ｃ_０－４アルキレン－、又はＯＣ_０－４アルキレン－フェニレン－Ｃ_０－４アルキレン－であり、ここでＬ^３中の前記アルキレンが、１～６つのハロゲンで任意に置換され、前記シクロアルキレン及びフェニレンが、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、Ｃ_１－４ハロアルキル、シアノ、－ＯＣ_１－４アルキル、及びＯＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換され、
Ｒ^２が、－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、
Ｒ^２ａが、水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであり、
Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、水素、ＰＧ^２、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａ、又は、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、又は、
Ｒ^２ａ及びＲ^２ｂが、それらが結合する窒素とともに、保護された窒素原子を形成し、
Ｌ^４が、Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）又はＣ（Ｏ）であり、
Ｌ^５が、Ｌ^７－Ｏであり、
Ｌ^６が、Ｌ^７－Ｓｉ（Ｃ_１－４アルキル）_２であり、
Ｌ^７が、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素、及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、
ここで
（ａ）前記２価のリンカーの原子が、任意に置換された鎖、任意に置換された環、又は任意に置換された鎖（複数可）と環（複数可）の組み合わせを形成するように配置され、
（ｂ）前記鎖（複数可）、環（複数可）、又はそれらの組み合わせが、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素からなる群から選択される原子の１～２０員の連続線状配列を含み、
Ｇ^１ａが、ヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分であり、
ＰＧ^１が、ヒドロキシ保護基であり、
ＰＧ^２が、アミノ保護基であり、
ＰＧ^３が、カルボン酸保護基であり、
ｍ及びｐが、独立して、３～１０の整数であり、
ｎが、１～２０の整数である、
式（Ｉ）の官能化固体支持体、又はその塩。

【請求項2】

Ｇ^１が水素である、請求項１に記載の官能化固体支持体。

【請求項3】

Ｇ^１がＰＧ^１である、請求項１に記載の官能化固体支持体。

【請求項4】

Ｇ^１がＰ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である、請求項１に記載の官能化固体支持体。

【請求項5】

Ｌ^３が－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ－である、請求項１又は４に記載の官能化固体支持体。

【請求項6】

ｐが６である、請求項１、４及び５のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項7】

Ｌ^３が－ＯＣ_２－１０アルキレン－である、請求項１又は４に記載の官能化固体支持体。

【請求項8】

Ｌ^３が－ＯＣ_４－８アルキレン－である、請求項１、４及び７のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項9】

Ｌ^３が－ＯＣ_６アルキレン－である、請求項１、４、７及び８のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項10】

Ｌ^３が－Ｏ（ＣＨ_２）_６－である、請求項１、４、７及び８のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項11】

Ｒ^２ａが水素である、請求項１及び４～１０のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項12】

Ｒ^２ｂが水素である、請求項１及び４～１１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項13】

Ｒ^２ｂがＰＧ^２である、請求項１及び４～１１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項14】

Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３である、請求項１及び４～１１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項15】

Ｌ^４が、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、又は

【化2】

であり、ここで、前記フェニレンが、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている、請求項１４に記載の官能化固体支持体。

【請求項16】

Ｌ^４が、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化3】

である、請求項１５に記載の官能化固体支持体。

【請求項17】

Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａである、請求項１及び４～１１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項18】

Ｌ^５が、Ｌ^５ｂ又はＬ^５ａ－Ｌ^５ｂであり、
Ｌ^５ａが、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－であり、
Ｌ^５ｂが、

【化4】

、－（ＣＨ_２）_１－１０－Ｏ－，又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_２－６－であり、
Ｒ^１０が、フェニル、Ｃ_１－１０アルキル、又はＣ_１－１０ハロアルキルであり、
ここで、前記フェニレン及びフェニルが、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている、請求項１７に記載の官能化固体支持体。

【請求項19】

Ｌ^５ａが、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化5】

であり、
Ｌ^５ｂが、

【化6】

、－ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である、請求項１８に記載の官能化固体支持体。

【請求項20】

Ｌ^５が、

【化7】

、ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である、請求項１９に記載の官能化固体支持体。

【請求項21】

Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３であり、
Ｌ^４が、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化8】

である、請求項１４記載の官能化固体支持体。

【請求項22】

Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１であり、
Ｌ^５が、

【化9】

、ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である、請求項１７に記載の官能化固体支持体。

【請求項23】

Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、Ｌ^６が

【化10】

である、請求項１及び４～１１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項24】

Ｌ^６が、

【化11】

である、請求項２３に記載の官能化固体支持体。

【請求項25】

Ｌ^１が、１つ又は複数の共有結合した部分を含み、前記１つ又は複数の部分が、Ｃ_２－１０アルキレン、－ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、シリル、及びＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）Ｃ_１－４アルキル）ＣＨ_２Ｏ－からなる群から独立して選択される、請求項１～２４のいずれか１項に記載の官能化固体担持体。

【請求項26】

Ｌ^１が、シリル基に結合したＣ_{１１－３９}アルキレンであり、前記シリル基が固体支持材料に結合しており、前記Ｃ_{１１－３９}アルキレンの２～６つのメチレン単位が－ＮＨ－、－Ｏ－、又はＮＨＣ（Ｏ）－で置換されており、前記Ｃ_{１１－３９}アルキレンが任意に－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３で置換されている、請求項１～２４のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項27】

Ｌ^１が、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ_２－１０アルキレン－又はシリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ_２－１０アルキレン－である、請求項１～２４のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項28】

Ｌ^１が、－シリル－（ＣＨ_２）_３－ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－又はシリル－（ＣＨ_２）_３－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－である、請求項１～２４のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項29】

Ｌ^２が、各出現時に、独立して、－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－である、請求項１～２８のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項30】

ｍが６である、請求項１～２９のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項31】

ｎが４～７である、請求項１～３０のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項32】

Ｒ^１が、各出現時に、独立して、－ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮ、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、又はＯＣＨ（ＣＨ_３）_２である、請求項１～３１のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項33】

前記固体支持体材料が、細孔制御ガラス（ＣＰＧ）、シリカゲル、マクロポーラス架橋ポリスチレン、ポリメタクリレートビニルアルコールコポリマー、シリコンチップ、ガラス、ポリスチレンビーズ、ポリプロピレンシート、非多孔質シリカビーズ、ポリアクリルアミド、又はポリアクリレートである、請求項１～３２のいずれか１項に記載の官能化固体支持体。

【請求項34】

Ｇ^１が水素又はＰＧ^１である、請求項１～３及び２５～３３のいずれか１項に記載の官能化固体支持体を調製するための方法であって、
（ａ）式（ＩＩ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである式（ＩＩＩ）

【化12】

の化合物と反応させて、式（ＩＶ）

【化13】

の官能化固体支持体を提供するステップ、
（ｂ）式（ＩＶ）の官能化固体支持体を酸化して、Ｇ^１がＰＧ^１であり、ｎが１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
（ｃ）任意に前記保護基ＰＧ^１を除去して、Ｇ^１が水素であり、ｎが１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法。

【請求項35】

（ｄ）Ｇ^１が水素であり、ｎが１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を、式（ＩＩＩ）の化合物と反応させて、式（ＩＶ－Ａ）

【化14】

の官能化固体支持体を提供するステップ、
（ｅ）式（ＩＶ－Ａ）の官能化固体支持体を酸化して、Ｇ^１がＰＧ^１であり、ｎが２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
（ｆ）任意に前記保護基ＰＧ^１を除去して、Ｇ^１が水素であり、ｎが２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
任意に、ステップ（ｄ）及び（ｅ）、又は（ｄ）、（ｅ）及び（ｆ）の反応を繰り返して、Ｇ^１が水素又はＰＧ^１であり、ｎが３～２０の整数である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
をさらに含む、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である、請求項１及び４～３３のいずれか１項に記載の官能化固体支持体を調製するための方法であって、
（ｇ）Ｇ^１が水素である式（Ｉ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである、式（Ｖ）

【化15】

の化合物と反応させて、式（ＶＩ）

【化16】

の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
（ｈ）式（ＶＩ）の官能化固体支持体を酸化して、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法。

【請求項37】

Ｒ^２ａが、水素であり、
Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである、
請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

Ｒ^２ａが、水素であり、
Ｒ^２ｂが、ＰＧ^２である、
請求項３６に記載の方法。

【請求項39】

前記保護基ＰＧ^２を除去して、Ｒ^２ｂが水素である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項３８に記載の方法。

【請求項40】

Ｒ^２が－ＮＨ_２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａの化合物と反応させて、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

Ｒ^２が－ＮＨ_２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を無水コハク酸と反応させて、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項42】

Ｒ^２が－ＮＨ_２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨ又はＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＰＧ^３の化合物と反応させて、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＰＧ^３である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項43】

Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＰＧ^３であり、前記保護基ＰＧ^３を除去するステップをさらに含む、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を、３’又は５’ＯＨでヌクレオシド又はヌクレオチドと反応させて、式（ＩＸ）

【化17】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項４１～４３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項45】

Ｒ^２が－ＮＨ_２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨ又はＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＰＧ^１の化合物と反応させて、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＰＧ^１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップをさらに含む、請求項３９に記載の方法。

【請求項46】

Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＰＧ^１であり、前記保護基ＰＧ^１を除去するステップをさらに含む、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルであり、Ｇ^１ａがヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分である式（ＶＩＩ）

【化18】

の化合物と反応させて、式（ＶＩＩＩ）の

【化19】

官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
式（ＶＩＩＩ）の官能化固体支持体を酸化して、式（Ｘ）

【化20】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
をさらに含む、請求項４５又は４６に記載の製法。

【請求項48】

（ａ）式（Ｉ）の官能化固体支持体を、１つ又は複数のサイクルのヌクレオチド付加化学に付すステップであって、

【化21】

Ｇ^１が、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２が、－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、
Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、
Ｇ^１ａが、ヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分であり、前記ヌクレオチド部分及びヌクレオシド部分が、単一のヌクレオチド又はヌクレオシド残基を含み、
Ａ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｌ^５、Ｌ^６、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、及びｎが、請求項１～３３のいずれかに定義されている通りである、
ステップ、ならびに
（ｂ）式（Ｉ）の官能化固体支持体を得るステップであって、
Ｇ^１が、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、
Ｒ^２が、－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、
Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、
Ｇ^１ａが、オリゴヌクレオチド部分である、
ステップ、
を含むオリゴヌクレオチドの合成方法。

【請求項49】

前記官能化固体支持体から前記オリゴヌクレオチド部分を開裂して前記オリゴヌクレオチドを提供するステップをさらに含む、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

開裂の前に前記オリゴヌクレオチド部分から１つ又は複数の保護基を除去するステップをさらに含む、請求項４８又は４９に記載の方法。

【請求項51】

開裂後に前記オリゴヌクレオチドから１つ又は複数の保護基を除去するステップをさらに含む、請求項４８～５０のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願
[0001]本出願は、２０２０年２月２４日に出願された米国仮出願第６２／９８０，８８０号の優先権を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

[0002]本発明は、オリゴヌクレオチド合成のための官能化固体支持体に関する。

【背景技術】

【0003】

[0003]固相オリゴヌクレオチド合成は、一般に、細孔制御ガラス（ＣＰＧ）粒子からなるフリット上で行われる。ＣＰＧは、合成中に迅速な物質移動を促進する細孔網目構造からなり、孔の直径は５００～２０００Åの範囲である。オリゴヌクレオチド合成の場合、ＣＰＧ粒子は、非ヌクレオシドリンカーやヌクレオシドサクシネートの結合点として機能する反応性アミノ基を含む（３－アミノプロピル）トリエトキシシランなどの基材で均一にコーティングされ、合成プロセスでオリゴヌクレオチドの結合点として機能する。オリゴヌクレオチドは、その３’末端のヒドロキシル基を介してリンカーに共有結合し、鎖のアセンブリ全体にわたって結合したままになり、その後切断され、脱保護される。ハイスループット／パラレル／小規模なオリゴヌクレオチド合成では、固体支持体はマルチウェルプレートのウェルに含まれる。

【0004】

[0004]合成の規模を最大化するために、基材の分子構造は、最適なオリゴ合成のために高密度の均一に分布した結合点を持つ必要がある。しかし、そのような高密度は、特に長いオリゴの場合、合成プロセス中にオリゴの混雑と立体障害を引き起こし、最終生成物に誤差が生じる可能性がある。

【0005】

[0005]立体障害を回避する一つの方法は、より大きな孔径を使用することである。しかし、ＣＰＧの表面積は孔径に反比例し、シラノール結合基の密度は表面積の関数であるので、大きな孔のＣＰＧはリガンド負荷容量が少ない。さらに、すべてのシラノール結合点が均一に分布しているわけではなく、一部は密集しすぎていて全長オリゴ合成に有用でない。

【0006】

[0006]立体障害を回避するもう一つの方法は、オリゴがつながれるスペーサーを使用することであり、これはオリゴと合成プロセスを基材から遠くに配置する役割を果たす。これは、より柔軟で、合成のためのより多くのスペースを可能にするであろう。

【0007】

[0007]よく使われるスペーサーの１つは、長鎖アルキルアミン（ＬＣＡＡ；図１Ａ及び１Ｂ）である。ＬＣＡＡはアミノプロピルＣＰＧに結合している（図１Ａ）。場合によっては、ＬＣＡＡは、リンカー、例えばアセチルグリセロールを介して結合される（図１Ｂ）。次に、結合したＬＣＡＡのアミノ基は、オリゴヌクレオチド合成に適したリンカー、例えばスクシニルスペーサーのアンカーポイントとして使用される。

【発明の概要】

【0008】

[0008]本発明は、合成が、固体支持体（例えば、ＣＰＧ粒子）の表面からより大きな距離で、１つ又は複数のポリアルキレングリコールホスフェート／ホスホン酸エステル単位を含む長さが拡張されたリンカーを用いて行われる、固相オリゴヌクレオチド合成に関する。長さが拡張されたリンカーは、オリゴヌクレオチド合成の出発点として機能する。ポリアルキレングリコールホスフェート／ホスホン酸エステル単位は、ホスホロアミダイト化学を介して結合されうる。本明細書に記載される拡張リンカーは、オリゴヌクレオチド合成に用いられるユニバーサルリンカー及び従来のリンカーアームと互換性がある。

【0009】

[0009]一態様では、式（Ｉ）の官能化固体支持体、又はその塩であって、

【化1】

Ａが、固体支持体材料であり、
Ｌ^１が、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素、及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、
ここで
（ａ）２価のリンカーの原子が、任意に置換された鎖、又は任意に置換された環によって中断された任意に置換された鎖を形成するように配置され、
（ｂ）鎖又は鎖と環が一緒になって、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素からなる群から選択される原子の１２～４０員の連続線状配列を含み、
Ｌ^２が、各出現時に、独立して、－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、－（ＣＨＣＨ_３ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、又は（ＣＨ_２ＣＨＣＨ_３Ｏ）_ｍ－であり、
Ｇ^１が、水素、ＰＧ^１、又はＰ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、
Ｒ^１が、各出現時に、独立して、Ｒ^１ａ又はＯＲ^１ａであり、
Ｒ^１ａが、各出現時に、独立して、Ｃ_１－１０アルキル、Ｃ_２－１０アルケニル、Ｃ_２－１０アルキニル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又はＣ_５－１０シクロアルケニルであり、ここでＲ^１ａが、ハロゲン、シアノ、オキソ、ＯＨ、－ＯＣ_１－４アルキル、－ＯＣ_１－４ハロアルキル又はＣ_３－６シクロアルキルからなる群から独立して選択される１～６つの置換基で任意に置換され、Ｃ_３－６シクロアルキルが、ハロゲン又はＣ_１－４アルキルで任意に置換され、
Ｌ^３が、－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨＣＨ_３ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３）_ｐ－、－ＯＣ_２－１０アルキレン－、－ＯＣ_０－４アルキレン－Ｃ_３－１０シクロアルキレン－Ｃ_０－４アルキレン－、又はＯＣ_０－４アルキレン－フェニレン－Ｃ_０－４アルキレン－であり、ここでＬ^３中のアルキレンが、１～６つのハロゲンで任意に置換され、シクロアルキレン及びフェニレンが、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、Ｃ_１－４ハロアルキル、シアノ、－ＯＣ_１－４アルキル、及びＯＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換され、
Ｒ^２が－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、
Ｒ^２ａが、水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであり、
Ｒ^２ｂが、水素、ＰＧ^２、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａ、又は、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、又は、
Ｒ^２ａ及びＲ^２ｂが、それらが結合する窒素とともに、保護された窒素原子を形成し、
Ｌ^４がＣ（Ｏ）又はＬ^７－Ｃ（Ｏ）であり、
Ｌ^５が、Ｌ^７－Ｏであり、
Ｌ^６が、Ｌ^７－Ｓｉ（Ｃ_１－４アルキル）_２であり、
Ｌ^７が、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素、及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、
ここで
（ａ）２価のリンカーの原子が、任意に置換された鎖、任意に置換された環、又は任意に置換された鎖（複数可）と環（複数可）の組み合わせを形成するように配置され、
（ｂ）鎖（複数可）、環（複数可）、又はそれらの組み合わせが、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素からなる群から選択される原子の１～２０員の連続線状配列を含み、
Ｇ^１ａが、ヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分であり、
ＰＧ^１が、ヒドロキシ保護基であり、
ＰＧ^２がアミノ保護基であり、
ＰＧ^３がカルボン酸保護基であり、
ｍ及びｐが、独立して、３～１０の整数であり、
ｎが、１～２０の整数である、
式（Ｉ）の官能化固体支持体、又はその塩を開示する。

【0010】

[0010]別の態様では、本発明は、Ｇ^１が水素又はＰＧ^１である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製するための方法であって、
ａ）式（ＩＩ）の官能化固体支持体をＲ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである式（ＩＩＩ）

【化2】

の化合物と反応させて、式（ＩＶ）

【化3】

の官能化固体支持体を提供するステップ、
ｂ）式（ＩＶ）の官能化固体支持体を酸化して、Ｇ^１がＰＧ^１であり、ｎが１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
ｃ）任意に保護基ＰＧ^１を除去して、Ｇ^１が水素であり、ｎが１である式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法を提供する。

【0011】

[0011]別の態様では、本発明は、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製するための方法であって、Ｇ^１が水素である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである、式（Ｖ）

【化4】

の化合物と反応させて、
式（ＶＩ）

【化5】

の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
式（ＶＩ）の官能化固体支持体を酸化して、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである、式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法を提供する。

【0012】

[0012]別の態様では、本発明は、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である、式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製するための方法であって、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を、３’又は５’ＯＨにおいてヌクレオシド又はヌクレオチドと反応させて、式（ＩＸ－ａ）

【化6】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法を提供する。

【0013】

[0013]別の態様では、本発明は、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２である式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製するための方法であって、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルであり、Ｇ^１ａがヌクレオチド部分もしくはヌクレオシド部分である式（ＶＩＩ）

【化7】

の化合物と反応させて、式（ＶＩＩＩ－ａ）

【化8】

の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
式（ＶＩＩＩ－ａ）の官能化固体支持体を酸化して、式（Ｘ－ａ）

【化9】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、方法を提供する。

【0014】

[0014]別の態様では、本発明は、オリゴヌクレオチドを合成する方法を提供する。

【図面の簡単な説明】

【0015】

【図1A】[0015]３－アミノプロピルシランに由来する第１の部分１と、長鎖アルキルアミン（ＬＣＡＡ）と呼ばれる第２の部分２とを有する鎖で官能化した細孔制御ガラス（ＣＰＧ）を示す図である。

【図1B】[0016]アセチルグリセロールに由来する部分３を有する鎖で官能化されたＣＰＧを示す図である。

【発明を実施するための形態】

【0016】

１．定義
[0017]別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合には、定義を含む本明細書が支配的となる。好ましい方法及び材料を以下に記載するが、本明細書に記載されたものと類似又は等価の方法及び材料を本発明の実施又は試験に使用することができる。本明細書に記載のすべての刊行物、特許出願、特許及び他の参考文献は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。本明細書に開示される材料、方法、及び実施例は、例示に過ぎず、限定することを意図しない。

【0017】

[0018]本明細書で使用される用語「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（ｓ）」、「ｉｎｃｌｕｄｅ（ｓ）」、「ｈａｖｉｎｇ」、「ｈａｓ」、「ｃａｎ」、「ｃｏｎｔａｉｎ（ｓ）」、及びそれらの変形は、追加の行為又は構造の可能性を排除しないオープンエンドで過渡的なフレーズ、用語又は単語であると意図される。単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈からそうではないことが指示されない限り、複数形の参照を含む。本開示は、明示的に規定されているか否かにかかわらず、本明細書に提示された実施形態又は要素「を含む」、「からなる」、及び「から本質的になる」他の実施形態も検討する。

【0018】

[0019]量に関連して使用される修飾語句「約」は、記載された値を含み、文脈によって規定される意味を有する（例えば、特定の量の測定に関連する誤差の程度を少なくとも含む）。修飾語句「約」は、２つの端点の絶対値によって定義される範囲を開示するものであるとも考えるべきである。例えば、「約２～約４」という表現は、「２～４」の範囲も開示している。用語「約」は、示された数値のプラス又はマイナス１０％を指す場合がある。例えば、「約１０％」は、９％～１１％の範囲を示すことがあり、「約１」は、０．９～１．１を意味することがある。「約」の他の意味は、四捨五入などの文脈から明らかな場合があるので、例えば「約１」は、０．５～１．４を意味することもある。

【0019】

[0020]特定の官能基及び化学用語の定義は、以下でより詳細に説明される。本開示の目的のために、化学元素は、元素周期表、ＣＡＳ版、ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄＰｈｙｓｉｃｓ、第７５版、内表紙に従って特定され、特定の官能基は、一般に本明細書に記載されるように定義される。さらに、有機化学の一般原理、ならびに特定の官能部分及び反応性は、ＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＴｈｏｍａｓＳｏｒｒｅｌｌ、ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＳｃｉｅｎｃｅＢｏｏｋｓ、Ｓａｕｓａｌｉｔｏ、１９９９；Ｓｍｉｔｈ及びＭａｒｃｈ、Ｍａｒｃｈ’ｓＡｄｖａｎｃｅｄＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ、第５版、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．、ＮｅｗＹｏｒｋ、２００１；Ｌａｒｏｃｋ、ＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＯｒｇａｎｉｃＴｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ、ＶＣＨＰｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，Ｉｎｃ．、ＮｅｗＹｏｒｋ、１９８９；Ｃａｒｒｕｔｈｅｒｓ、ＳｏｍｅＭｏｄｅｒｎＭｅｔｈｏｄｓｏｆＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓ、第３版、ＣａｍｂｒｉｄｇｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＰｒｅｓｓ、Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ、１９８７に記載され、それらの各々の内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。

【0020】

[0021]本明細書で使用される用語「アルキル」は、直鎖又は分枝状の飽和炭化水素鎖を意味する。用語「低級アルキル」又は「Ｃ_１－６アルキル」は、１～６個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖の炭化水素を意味する。用語「Ｃ_１－４アルキル」は、１～４個の炭素原子を含む直鎖又は分枝鎖の飽和炭化水素を意味する。アルキルの代表例は、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｉｓｏ－プロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｉｓｏ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ－ヘキシル、３－メチルヘキシル、２，２－ジメチルペンチル、２，３－ジメチルペンチル、ｎ－へプチル、ｎ－オクチル、ｎ－ノニル及びｎ－デシルを含むが、これらに限定されない。

【0021】

[0022]本明細書で使用される用語「アルケニル」は、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含む直鎖又は分枝状の、炭化水素鎖を意味する。

【0022】

[0023]本明細書で使用される用語「アルキレン」は、例えば１～６個の炭素原子の直鎖又は分枝状の飽和鎖炭化水素に由来する２価の基を指す。アルキレンの代表例は、－ＣＨ_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－、及びＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２－を含むが、これらに限定されない。

【0023】

[0024]本明細書で使用される用語「アルケニレン」は、少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を有する直鎖又は分枝鎖炭化水素に由来する２価の基を指す。

【0024】

[0025]本明細書で使用される用語「アルコキシ」は、基－Ｏ－アルキルを指す。アルコキシの代表例は、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、２－プロポキシ、ブトキシ及びｔｅｒｔ－ブトキシを含むが、これらに限定されない。

【0025】

[0026]本明細書で使用される用語「アルコキシアルキル」は、本明細書で定義されるように、アルキレン基を介して親分子部分に付加されたアルコキシ基を指す。

【0026】

[0027]本明細書で使用される用語「アリール」は、フェニル、又は親分子部分に付加され、シクロアルカン基に融合した（例えば、アリールはインダン－４－イルであってもよい）、６員アレーン基に融合した（すなわち、アリールはナフチルである）、又は非芳香族ヘテロ環に融合した（例えば、アリールはベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イルであってもよい）フェニルを指す。置換基を指す場合は「フェニル」という用語を用い、縮合環を指す場合は「６員アレーン」という用語を用いる。６員アレーンは、単環式（例えば、ベンゼン又はベンゾ）である。アリールは、単環式（フェニル）又は二環式（例えば、９～１２員縮合二環式）であってもよい。

【0027】

[0028]本明細書で使用される用語「シクロアルキル」又は「シクロアルカン」は、すべての炭素原子を環員として含み、二重結合がゼロの飽和環系を指す。用語「シクロアルキル」は、本明細書では、置換基として存在する場合のシクロアルカンを指すために使用される。シクロアルキルは、単環式シクロアルキル（例えば、シクロプロピル）、縮合二環式シクロアルキル（例えば、デカヒドロナフタレニル）、スピロ環、又は環の２つの隣接しない原子が１、２、３又は４個の炭素原子のアルキレン橋によって連結されている架橋シクロアルキル（例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプタニル）であってもよい。シクロアルキルの代表例は、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、アダマンチル及びビシクロ［１．１．１］ペンタニルを含むが、これらには限定されない。

【0028】

[0029]本明細書で使用される用語「シクロアルケニル」又は「シクロアルケン」は、環員としてすべての炭素原子及び少なくとも１つの炭素－炭素二重結合を含み、好ましくは環当たり５～１０個の炭素原子を有する非芳香族単環式又は多環式環系を意味する。「シクロアルケニル」という用語は、本明細書では、置換基として存在する場合、シクロアルケンを指すために使用される。シクロアルケニルは、単環式シクロアルケニル（例えば、シクロペンテニル）、縮合二環式シクロアルケニル（例えば、オクタヒドロナフタレニル）、又は環の２つの隣接しない原子が１、２、３又は４個の炭素原子のアルキレン橋によって連結されている架橋シクロアルケニル（例えば、ビシクロ［２．２．１］ヘプテニル）であってもよい。例示的な単環式シクロアルケニル環は、シクロペンテニル、シクロヘキセニル又はシクロヘプテニルを含む。

【0029】

[0030]本明細書で使用される用語「フルオロアルキル」は、本明細書で定義されるように、１、２、３、４、５、６、７又は８個の水素原子がフッ素で置換されているアルキル基を意味する。フルオロアルキルの代表例は、２－フルオロエチル、２，２，２－トリフルオロエチル、トリフルオロメチル、ジフルオロメチル、ペンタフルオロエチル、及び３，３，３－トリフルオロプロピルなどのトリフルオロプロピルを含むが、これらに限定されない。

【0030】

[0031]本明細書で使用される用語「ハロゲン」又は「ハロ」は、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、又はＦを意味する。

【0031】

[0032]本明細書で使用される用語「ハロアルキル」は、本明細書で定義されるように、１、２、３、４、５、６、７又は８個の水素原子がハロゲンで置換されているアルキル基を意味する。

【0032】

[0033]本明細書で使用される用語「ヘテロアリール」は、芳香族単環式ヘテロ原子含有環（単環式ヘテロアリール）、又は少なくとも１つの単環式複素芳香環を含む二環式環系（二環式ヘテロアリール）を指す。「ヘテロアリール」という用語は、置換基として存在する場合、本明細書では、ヘテロアレーンを指すために使用される。単環式ヘテロアリールは、Ｎ、Ｏ及びＳからなる群から独立して選択される少なくとも１個のヘテロ原子（例えば、Ｏ、Ｓ及びＮから独立して選択される１、２、３又は４個のヘテロ原子）を含む５員環又は６員環である。五員芳香族単環は２個の二重結合を有し、六員芳香族単環は３個の二重結合を有する。二環式ヘテロアリールは、８～１２員環系であり、縮合二環式ヘテロ環系（すなわち、１０π電子系）、例えば、６員アレーンに縮合した単環式ヘテロアリール環（例えば、キノリン－４－イル、インドール－１－イル）、単環式ヘテロアレーンに縮合した単環式ヘテロアリール環（例えば、ナフチリジニル）、及び単環式ヘテロアレーンに縮合したフェニル（例えば、キノリン－５－イル、インドール－４－イル）を含む。二環式ヘテロアリール／ヘテロアレーン基は、４個の二重結合と完全芳香族１０π電子系に孤立電子対を与える少なくとも１個のヘテロ原子を有する９員縮合二環式ヘテロ芳香環系、例えば、環接合部に窒素原子を有する環系（例えばイミダゾピリジン）又はベンゾキサジアゾリルを含む。また、二環式ヘテロアリールは、１つのヘテロ芳香環と１つの非芳香環からなる縮合二環系、例えば、単環式炭素環に縮合した単環式ヘテロアリール環（例えば、６，７－ジヒドロ－５Ｈ－シクロペンタ［ｂ］ピリジニル）、又は単環式ヘテロ環に縮合した単環式ヘテロアリール環（例えば、２，３－ジヒドロフロ［３，２－ｂ］ピリジニル）を含む。二環式ヘテロアリールは、芳香環原子で親分子部分に結合している。ヘテロアリールの他の代表例は、これらに限定されないが、インドリル（例えば、インドール－１－イル、インドール－２－イル、インドール－４－イル）、ピリジニル（ピリジン－２－イル、ピリジン－３－イル、ピリジン－４－イルを含む）、ピリミジニル、ピラジニル、ピリダジニル、ピラゾリル（例えば、ピラゾール－４－イル）、ピロリル、ベンゾピラゾリル、１，２，３－トリアゾリル（例えば、トリアゾール－４－イル）、１，３，４－チアジアゾリル、１，２，４－チアジアゾリル、１，３，４－オキサジアゾリル、１，２，４－オキサジアゾリル、イミダゾリル、チアゾリル（例えば、チアゾール－４－イル）、イソチアゾリル、チエニル、ベンゾイミダゾリル（例えば、ベンズイミダゾール－５－イル）、ベンゾチアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾオキサジアゾリル、ベンゾチエニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、フラニル、オキサゾリル、イソキサゾリル、プリニル、イソインドリル、キノキサリニル、インダゾリル（例えば、インダゾール－４－イル、インダゾール－５－イル）、キナゾリニル、１，２，４－トリアジニル、１，３，５－トリアジニル、イソキノリニル、キノリニル、イミダゾ［１，２－ａ］ピリジニル（例えば、イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン－６－イル）、ナフチリジニル、ピリドイミダゾリル、チアゾロ［５，４－ｂ］ピリジン－２－イル、及びチアゾロ［５，４－ｄ］ピリミジン－２－イルを含む。

【0033】

[0034]本明細書で使用される用語「ヘテロ環」又は「ヘテロ環」は、単環式ヘテロ環、二環式ヘテロ環、又は三環式ヘテロ環を意味する。用語「ヘテロシクリル」は、本明細書では、置換基として存在する場合のヘテロ環を指すために使用される。単環式ヘテロ環は、Ｏ、Ｎ、及びＳからなる群から独立して選択される少なくとも１個のヘテロ原子を含む３、４、５、６、７、又は８員環である。３又は４員環は、ゼロ又は１個の二重結合、及びＯ、Ｎ、及びＳからなる群から選択される１個のヘテロ原子を含む。５員環は、ゼロ又は１個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含む。６員環は、ゼロ、１又は２個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含む。７及び８員環はゼロ、１、２又は３個の二重結合と、Ｏ、Ｎ及びＳからなる群から選択される１、２又は３個のヘテロ原子を含む。単環式ヘテロ環の代表例は、これらに限定されないが、アゼチジニル、アゼパニル、アジリジニル、ジアゼパニル、１，３－ジオキサニル、１，３－ジオキソラニル、１，３－ジチオラニル、１，３－ジチアニル、イミダゾリニル、イミダゾリジニル、イソチアゾリニル、イソチアゾリジニル、イソキサゾリニル、イソキサゾリジニル、モルホリニル、２－オキソ－３－ピペリジニル、２－オキソアゼパン－３－イル、オキサジアゾリニル、オキサジアゾリジニル、オキサゾリニル、オキサゾリジニル、オキセタニル、オキセパニル、オキソカニル、ピペラジニル、ピペリジニル、ピラニル、ピラゾリニル、ピラゾリジニル、ピロリニル、ピロリジニル、テトラヒドロフラニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロピリジニル、テトラヒドロチエニル、チアジアゾリニル、チアジアゾリジニル、１，２－チアジナニル、１，３－チアジナニル、チアゾリニル、チアゾリジニル、チオモルホリニル、１，１－ジオキシドチオモルホリニル（チオモルホリンスルホン）、チオピラニル及びトリチアニルを含む。二環式ヘテロ環は、６員アレーンに縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルカンに縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルケンに縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式ヘテロ環に縮合した単環式ヘテロ環、又は単環式ヘテロアレーンに縮合した単環式ヘテロ環、又はスピロヘテロ環基、又は環の２つの隣接しない原子が１、２、３又は４個の炭素原子のアルキレン橋、又は２、３又は４個の炭素原子のアルケニレン橋によって連結されている架橋単環式ヘテロ環系である。二環式ヘテロシクリルは、非芳香族環原子で親分子部分に結合している（例えば、インドリン－１－イル）。二環式ヘテロシクリルの代表例は、これらに限定されないが、クロマン－４－イル、２，３－ジヒドロベンゾフラン－２－イル、２，３－ジヒドロベンゾチエン－２－イル、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－２－イル、２－アザスピロ［３．３］ヘプタン－２－イル、２－オキサ－６－アザスピロ［３．３］ヘプタン－６－イル、アザビシクロ［２．２．１］ヘプチル（２－アザビシクロ［２．２．１］ヘプト－２－イルを含む）、アザビシクロ［３．１．０］ヘキサニル（３－アザビシクロ［３．１．０］ヘキサン－３－イルを含む）、２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インドール－１－イル、イソインドリン－２－イル、オクタヒドロシクロペンタ［ｃ］ピロリル、オクタヒドロピロロピリジニル、テトラヒドロイソキノリニル、７－オキサビシクロ［２．２．１］ヘプタニル、ヘキサヒドロ－２Ｈ－シクロペンタ［ｂ］フラニル、２－オキサスピロ［３．３］ヘプタニル、及び３－オキサスピロ［５．５］ウンデカニルを含む。三環式ヘテロ環は、６員アレーンに縮合した二環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルカンに縮合した二環式ヘテロ環、又は単環式シクロアルケンに縮合した二環式ヘテロ環、又は単環式ヘテロ環に縮合した二環式ヘテロ環、又は二環式環の隣接しない２つの原子が１、２、３又は４個の炭素原子のアルキレン橋、もしくは２、３又は４個の炭素原子のアルケニレン橋で連結された二環式ヘテロ環により例示される。三環式ヘテロ環の例は、これらに限定されないが、オクタヒドロ－２，５－エポキシペンタレン、ヘキサヒドロ－２Ｈ－２，５－メタノシクロペンタ［ｂ］フラン、ヘキサヒドロ－１Ｈ－１，４－メタノシクロペンタ［ｃ］フラン、アザアダマンタン（１－アザトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン）、及びオキサアダマンタン（２－オキサトリシクロ［３．３．１．１３，７］デカン）を含む。単環式、二環式、及び三環式ヘテロ環は、非芳香環原子で親分子部分に連結されている。

【0034】

[0035]本明細書で使用される用語「ヒドロキシル」又は「ヒドロキシ」は、－ＯＨ基を意味する。

【0035】

[0036]本明細書で使用される用語「ヒドロキシアルキル」は、少なくとも１つの－ＯＨ基が、本明細書で定義するように、アルキレン基を介して親分子部分に付加されることを意味する。

【0036】

[0037]シクロアルキレン、アリーレン、フェニレン、ヘテロシクリレン等の用語は、ベースリング、例えばシクロアルカン、ヘテロ環等に由来する２価の基を指す。例示の目的のために、シクロアルキレン及びフェニレンの例は、それぞれ、

【化10】

を含む。シクロアルキレンは、１，１－シクロアルキレン（例えば、

【化11】

）、例えば、１，１－シクロプロピレン（すなわち、

【化12】

）を含む。

【0037】

[0038]「アルキル」、「シクロアルキル」、「アルキレン」などの用語の前に、特定の場合に基中に存在する原子の数を示す記号を付けることができる（例えば、「Ｃ_１－４アルキル」、「Ｃ_３－６シクロアルキル」、「Ｃ_１－４アルキレン」）。これらの記号は、当業者によって一般的に理解されるように使用される。例えば、下付き数字が続く表現「Ｃ」は、その後に続く基中に存在する炭素原子の数を示す。従って、「Ｃ_３アルキル」は、３個の炭素原子を有するアルキル基（すなわち、ｎ－プロピル、イソプロピル）である。「Ｃ_１－４」のように範囲が指定されている場合、後に続く基の部分は、列挙された範囲内に入る任意の数の炭素原子を有しうる。例えば、「Ｃ_１－４アルキル」は、どのように配列されていても（すなわち、直鎖又は分枝）、１～４個の炭素原子を有するアルキル基である。

【0038】

[0039]本明細書に記載された化合物について、その基及び置換基は、選択及び置換が、安定な化合物、例えば、転位、環化、脱離などによる変換を自発的に受けないものをもたらすように、原子及び置換基の許容原子価に従って選択されうる。

【0039】

[0040]本明細書における数値範囲の列挙については、その間に同程度の精度で介在する各数値が明確に考慮される。例えば、６～９の範囲については、６及び９に加えて７及び８の数が考慮され、６．０～７．０の範囲については、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９及び７．０の数が明確に考慮される。

【0040】

２．官能化固体支持体
[0041]本発明の態様は、式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供し、ここでＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｒ^１、Ｇ^１、及びｎは本明細書で定義される通りである。

【0041】

[0042]式（Ｉ）の固体支持体において、Ａは、オリゴヌクレオチド合成に適した固体支持体材料である。適切な固体支持体材料は、細孔制御ガラス（ＣＰＧ）、シリカゲル、マクロポーラス架橋ポリスチレン、ポリメタクリレートビニルアルコールコポリマー、シリコンチップ、ガラス、ポリスチレンビーズ、ポリプロピレンシート、非多孔質シリカビーズ、ポリアクリルアミド、又はポリアクリレートを含む。固体支持体は、ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２０００、第３章、セクション３．１の「Ｓｏｌｉｄ－ＰｈａｓｅＳｕｐｐｏｒｔｓｆｏｒＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」に記載されているように、当技術分野でよく知られている。ＣＰＧは、オリゴヌクレオチド合成を用意するのに適切な孔径（例えば、３００～２０００Å）、例えば１０００又は２０００Åを有しうる。ＣＰＧ支持体は、４０～５００メッシュの粒径、０．１～１．０ｇ／ｃｃのかさ密度、１０～２００Ｍ^２／ｇのＳＳ面積、及び０．２～３．０５０ｃｃ／ｇの孔容積を有しうる。

【0042】

[0043]式（Ｉ）において、Ｌ^１は炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、ここで（ａ）２価のリンカーの原子は、任意に置換された鎖、又は任意に置換された環で中断された任意に置換された鎖を形成するように配置されており、（ｂ）鎖、又は鎖と環が一緒になって、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン及びケイ素からなる群から選択される原子の１２～４０員の連続線状配列を含む。

【0043】

[0044]原子の１２～４０員の連続線状配列は、切れ目のない原子のひもを指し、原子の少なくとも一部は鎖状原子又は非環状原子であり、任意に原子の一部は環状原子である。原子の１２員～４０員の連続線状配列は、以下の例によって示され、連続線状原子配列の原子は太字で示される。

【化13】

【0044】

[0045]連続線状配列（ａ）では、配列のすべての原子が鎖状原子である。連続線状配列（ｂ）～（ｆ）は、鎖状原子と環状原子の混合物を含み、（ｂ）は１つの環状原子、（ｃ）は２つの環状原子、（ｄ）は３つの環状原子、（ｅ）及び（ｆ）は４つの環状原子を有する。

【0045】

[0046]連続線状配列は、

【化14】

などの、又は（ｆ）のように、隣接する原子間の不飽和結合を有しうる。

【0046】

[0047]Ｌ^１上の任意の置換基は、ハロゲン（例えば、フルオロ）、Ｃ_１－６アルキル（例えば、メチル）、Ｃ_１－６ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、オキソ（すなわち、＝Ｏ）、チオン（すなわち、＝Ｓ）、ＯＨ、－ＯＣ_１－６アルキル（例えば、メトキシ）、－ＯＣ_３－６シクロアルキル、－ＯＣＨ_２Ｃ_３－６シクロアルキル、－ＯＣ（Ｏ）Ｃ_１－６アルキル（例えば、－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）、－ＯＣ（Ｏ）Ｃ_３－６シクロアルキル、－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ_３－６シクロアルキル、Ｃ_１－６ヒドロキシアルキル及びＣ_１－６アルコキシＣ_１－６アルキル（例えば、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３）を含む。Ｌ^１上の任意の置換は、Ｌ^１が分岐構造を有することを可能にする。

【0047】

[0048]Ｌ^１は、その任意の置換基とともに、種々の官能基、例えば、アミン（例えば、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－）、アミド（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）－）、チオアミド（例えば、－ＮＨＣ（Ｓ）－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｓ）－）、エーテル（－Ｏ－）、エステル（－ＯＣ（Ｏ）－）、チオエステル（－ＯＣ（Ｓ）－）、スルフィド（－Ｓ－）、スルホキシド（－Ｓ（Ｏ）－）、スルホン（－Ｓ（Ｏ）_２－）、スルホンアミド（例えば、－ＮＨＳ（Ｏ）_２－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｓ（Ｏ）_２－）、シリル、アルキルオルトシリケート（例えば、－ＯＳｉ（ＯＣ_１－６アルキル）_２Ｏ－）、カルバメート（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）Ｏ－）、尿素（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－）、ヒドラジド（例えば、－ＮＨＮＨＣ（Ｏ）－）、グアニジン（例えば、－ＮＨＣ（ＮＨ）＝Ｎ－）、及びリン酸エステル（例えば、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＣ_１－６アルキル）Ｏ－）を含みうる。従って、Ｌ^１は、ヘテロ原子含有官能基、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレン、ヘテロシクリレン、アリーレン（例えば、フェニレン）、及びヘテロアリーレン基を含む１つ又は複数の共有結合した部分を含みうる。例えば、Ｌ^１は、Ｃ_２－１０アルキレン、－ＮＨ－、－ＮＨＣ（Ｏ）－、シリル、及びＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）Ｃ_１－４アルキル）ＣＨ_２Ｏ－からなる群から独立して選択される１つ又は複数の共有結合した部分を含みうる。Ｌ^１は、シリル基に結合したＣ_{１１－３９}アルキレンであってもよく、シリル基は固体支持体材料に結合しており、ここでＣ_{１１－３９}アルキレンの２～６つのメチレン単位は－ＮＨ－、－Ｏ－又はＮＨＣ（Ｏ）－で置換され、Ｃ_{１１－３９}アルキレンは任意に－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３で置換される。Ｌ^１は、Ｌ^１ａ－Ｌ^１ｂであってもよく、ここでＬ^１ａは固体支持体材料に結合している。Ｌ^１ａは、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨ－であってもよい。Ｌ^１ａは、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨ－Ｃ_３－１０シクロアルキレン－ＮＨ－であってもよい。Ｌ^１ａは、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨ－であってもよい。Ｌ^１ａは、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨ－Ｃ（Ｏ）Ｃ_２－１０アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨ－であってもよい。Ｌ^１ａは、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨ－であってもよい。Ｌ^１ｂは、－Ｃ（Ｏ）Ｃ_１－１０アルキレン－であってもよい。Ｌ^１は、－シリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ_２－１０アルキレン－又はシリル－Ｃ_２－４アルキレン－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－Ｃ_２－１０アルキレン－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｃ_２－１０アルキレン－であってもよい。Ｌ^１は、－シリル－（ＣＨ_２）_３－ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－又はシリル－（ＣＨ_２）_３－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－であってもよい。

【0048】

[0049]Ｌ^１が末端シリル基を含む場合、シリル基は、Ｓｉ－Ｌ^１＊がＬ^１である（すなわち、Ｌ^１＊が、Ｌ^１からその原子の１２～４０員の連続線状配列の１員（すなわち、シリル）を除いたものを表す）、次式に示されるＣＰＧなどの固体支持体上の酸素原子に結合しうる。

【化15】

固体支持材料に対するシリルの他の結合配置が可能であり、例えば、

【化16】

である。

【0049】

[0050]Ｌ^２は、各出現時に、独立して、－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、－（ＣＨＣＨ_３ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－、又は（ＣＨ_２ＣＨＣＨ_３Ｏ）_ｍ－であり、ここでｍは、３、４、５、６、７、８、９、又は１０であり、すなわち式（Ｉ）の固体支持体は、

【化17】

である。好ましく、Ｌ^２は、－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_ｍ－である。好ましくは、ｍは６である。

【0050】

[0051]さらに説明すると、式（Ｉ）の官能化固体支持体は、例えば、

【化18】

を含む。

【0051】

[0052]Ｒ^１は、各出現時に、独立してＲ^１ａ又はＯＲ^１ａであり、ここでＲ^１ａは、各出現時に、独立してＣ_１－１０アルキル、Ｃ_２－１０アルケニル、Ｃ_２－１０アルキニル、Ｃ_３－１０シクロアルキル、又はＣ_５－１０シクロアルケニルであり、ここでＲ^１ａはハロゲン（例えば、フルオロ）、シアノ、オキソ、ＯＨ、－ＯＣ_１－４アルキル、－ＯＣ_１－４ハロアルキル、又はＣ_３－６シクロアルキルからなる群から独立して選択される１～６つの置換基で任意に置換され、Ｃ_３－６シクロアルキルは、ハロゲン（例えば、フルオロ）又はＣ_１－４アルキルで任意に置換される。Ｒ^１は、各出現時に、独立して、Ｃ_１－４アルキル、－ＯＣ_１－４アルキル、又はＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮであってもよい。Ｒ^１は、各出現時に、独立して、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ（ＣＨ_３）_２、又はＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮであってもよい。

【0052】

[0053]Ｇ^１は水素であってもよく、すなわち、式（Ｉ）は右側がヒドロキシ基で終端する。

【0053】

[0054]Ｇ^１はＰＧ^１であってもよく、ここでＰＧ^１はヒドロキシ保護基である。ヒドロキシ保護基は、ＰＧＭＷｕｔｓ及びＴＷＧｒｅｅｎｅ、ＧｒｅｅｎｅのＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓと題する書籍（第４版）、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（２００６）に記載されているように、当技術分野でよく知られており、参照により本明細書にその全体が組み込まれている。適切なヒドロキシ保護基は、例えば、トリチル基（例えば、トリチル、ジメトキシトリチル、メトキシトリチル）、アセチル、ベンゾイル、ベンジル、ｐ－メトキシベンジル、β－メトキシエトキシメチル（ＭＥＭ）、メトキシメチル（ＭＯＭ）、メチルチオメチル、ピバロイル、テトラヒドロピラニル（ＴＨＰ）、テトラヒドロフラニル（ＴＨＦ）、シリル（例えば、トリメチルシリル（ＴＭＳ）、ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル（ＴＢＤＭＳ）、トリイソプロピルシリルオキシメチル（ＴＯＭ）、トリイソプロピルシリル（ＴＩＰＳ）、メチル、及びエトキシエチルを含む。

【0054】

[0055]Ｇ^１は、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であってよく、ここでＲ^１、Ｒ^２、及びＬ^３は本明細書に記載されている通りである。

【0055】

[0056]Ｌ^３は、－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨＣＨ_３ＣＨ_２）_ｐ－、－（ＯＣＨ_２ＣＨＣＨ_３）_ｐ－、－ＯＣ_２－１０アルキレン－、－ＯＣ_０－４アルキレン－Ｃ_３－１０シクロアルキレン－Ｃ_０－４アルキレン－、又はＯＣ_０－４アルキレン－フェニレン－Ｃ_０－４アルキレン－であり、ここでＬ^３中のアルキレンは、１～６つのハロゲン（例えば、フルオロ）で任意に置換され、シクロアルキレン及びフェニレンは、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、Ｃ_１－４ハロアルキル、シアノ、－ＯＣ_１－４アルキル、及びＯＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換され、ｐは３，４，５，６，７，８，９、又は１０である。好ましくは、ｐは６である。

【0056】

[0057]Ｌ^３は、－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_ｐ－、例えば、－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_６－であってもよい。

【0057】

[0058]Ｌ^３は、－ＯＣ_２－１０アルキレン－、例えば－ＯＣ_４－８アルキレン－、－ＯＣ_６アルキレン－、又はＯ（ＣＨ_２）_６－であってもよい。

【0058】

[0059]Ｒ^２は－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、ここでＲ^２ａは水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであり、Ｒ^２ｂは、水素、ＰＧ^２、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、又はＲ^２ａ及びＲ^２ｂは、それらが結合する窒素と一緒になって保護窒素原子を形成する（例えば、フタルイミド）。

【0059】

[0060]Ｒ^２ａ及びＲ^２ｂは、それぞれ水素であってもよい（すなわち、Ｒ^２がＮＨ_２である）。

【0060】

[0061]Ｒ^２ａは、水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであってもよく、ここでＲ^２ｂは、ＰＧ^２であり、ＰＧ^２は、アミノ保護基である。アミノ保護基は、ＰＧＭＷｕｔｓ及びＴＷＧｒｅｅｎｅ、ＧｒｅｅｎｅのＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓと題する書籍（第４版）、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（２００６）に記載されているように、当技術分野でよく知られている。適切なアミノ保護基は、例えば、カルボベンジルオキシ（Ｃｂｚ）、ｐ－メトキシベンジルカルボニル（ＭｅＯＺ）、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、９－フルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、アセチル、ベンゾイル、ベンジル、カルバメート、ｐ－メトキシベンジル（ＰＭＢ）、３，４－ジメトキシベンジル（ＤＭＰＭ）、ｐ－メトキシフェニル（ＰＭＰ）、トシル、及びトリクロロエチルカルボニル（Ｔｒｏｃ）を含む。Ｒ^２ａは水素であってもよく、ここでＲ^２ｂはＰＧ^２であり、ＰＧ^２は好ましくはＢＯＣである。

【0061】

[0062]Ｒ^２ａは水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであってもよく、Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａであり、Ｌ^４は、Ｃ（Ｏ）又はＬ^７－Ｃ（Ｏ）である。従って、Ｌ^４は、Ｃ（Ｏ）部分によって、ＯＨ、ＯＰＧ^３、及びＧ^１ａに結合する。Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｃ（Ｏ）－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ（Ｏ）－ＯＰＧ^３、又はＣ（Ｏ）－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａであってもよい。あるいは、Ｌ^４がＬ^７－Ｃ（Ｏ）である場合、Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）－ＯＰＧ^３、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａであってもよい。Ｒ^２ａは水素であってもよく、ここでＲ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａであり、ここでＬ^４は、本明細書に示されるか記載される通りである。

【0062】

[0063]Ｌ^７は、炭素、水素、酸素、窒素、硫黄、リン、ケイ素及びハロゲンからなる群から選択される原子からなる２価の化学的リンカーであり、ここで（ａ）２価のリンカーの原子は、任意に置換された鎖、任意に置換された環又は任意に置換された鎖（複数可）及び環（複数可）の組み合わせを形成するように配置されており、（ｂ）鎖（複数可）、環（複数可）、又はそれらの組み合わせは、炭素、酸素、窒素、硫黄、リン、及びケイ素からなる群から選択される原子の１～２０員の連続線状配列を含む。Ｌ^７の原子の１～２０員の連続線状配列は、Ｌ^１に類似する切れ目のない原子列を指す。

【0063】

[0064]Ｌ^７上の任意の置換基は、ハロゲン（例えば、フルオロ）、Ｃ_１－６アルキル（例えば、メチル）、Ｃ_１－６ハロアルキル（例えば、トリフルオロメチル）、オキソ（すなわち、＝Ｏ）、チオン（すなわち、＝Ｓ）、ＯＨ、－ＯＣ_１－６アルキル（例えば、メトキシ）、－ＯＣ_３－６シクロアルキル、－ＯＣＨ_２Ｃ_３－６シクロアルキル、－ＯＣ（Ｏ）Ｃ_１－６アルキル（例えば、－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）、－ＯＣ（Ｏ）Ｃ_３－６シクロアルキル、－ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_２Ｃ_３－６シクロアルキル、Ｃ_１－６ヒドロキシアルキル及びＣ_１－６アルコキシＣ_１－６アルキル（例えば、－ＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３）を含む。Ｌ^７上の任意の置換は、Ｌ^７が分岐構造を有することを可能にする。

【0064】

[0065]Ｌ^７は、その任意の置換基とともに、様々な官能基、例えば、アミン（例えば、－ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－）、アミド（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）－）、チオアミド（例えば、－ＮＨＣ（Ｓ）－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｓ）－）、エーテル（－Ｏ－）、エステル（－ＯＣ（Ｏ）－）、チオエステル（－ＯＣ（Ｓ）－）、スルフィド（－Ｓ－）、スルホキシド（－Ｓ（Ｏ）－）、スルホン（－Ｓ（Ｏ）_２－）、スルホンアミド（例えば、－ＮＨＳ（Ｏ）_２－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｓ（Ｏ）_２－）、シリル、アルキルオルトシリケート（例えば、－ＯＳｉ（ＯＣ_１－６アルキル）_２Ｏ－）、カルバメート（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）Ｏ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）Ｏ－）、尿素（例えば、－ＮＨＣ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）ＮＨ－、－Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）Ｃ（Ｏ）Ｎ（Ｃ_１－６アルキル）－）、ヒドラジド（例えば、－ＮＨＮＨＣ（Ｏ）－）、グアニジン（例えば、－ＮＨＣ（ＮＨ）＝Ｎ－）、及びリン酸エステル（例えば、－ＯＰ（Ｏ）（ＯＣ_１－６アルキル）Ｏ－）を含みうる。従って、Ｌ^７は、ヘテロ原子含有官能基、アルキレン、アルケニレン、アルキニレン、シクロアルキレン、ヘテロシクリレン、アリーレン（例えば、フェニレン）、及びヘテロアリーレン基を含む１つ又は複数の共有結合した部分を含みうる。

【0065】

[0066]Ｌ^４は、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、又は

【化19】

であってもよく、ここで、フェニレンは、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている。Ｌ^４に関する先の選択肢の各々は、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－の－Ｃ_０－Ｃ（Ｏ）－を除き、Ｌ^４がＬ^７－Ｃ（Ｏ）であることに対応する。従って、これらの例におけるＬ^７は、－Ｃ_１－４アルキレン－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－、－フェニレン－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－、－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－、又は

【化20】

である。Ｌ^４の結合配置をさらに説明すると、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａは、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａ、又は

【化21】

であってもよい。

【0066】

[0067]Ｌ^４は、－Ｃ（Ｏ）－であってもよく、又はＬ^４は－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化22】

であってもよく、すなわち、Ｌ^７は、－ＣＨ_２－、－（ＣＨ_２）_２－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－、

【化23】

であり、ここで、Ｌ^７基の連続線状原子配列は、太字で示されている。

【0067】

[0068]Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３であってもよく、ここで、Ｌ^４は、－Ｃ（Ｏ）－であるか、又はＬ^４は、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化24】

である。

【0068】

[0069]ＰＧ^３はカルボン酸保護基である。カルボン酸保護基は、ＰＧＭＷｕｔｓ及びＴＷＧｒｅｅｎｅ、ＧｒｅｅｎｅのＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓと題する書籍（第４版）、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（２００６）に記載されているように、当技術分野でよく知られている。適切なカルボン酸保護基は、例えば、メチル、ベンジル、ｔｅｒｔ－ブチル、２，６－二置換フェノール（例えば、２，６－ジメチルフェノール、２，６－ジイソプロピルフェノール、２，６－ジ－ｔｅｒｔ－ブチルフェノール）及びシリルを含む。

【0069】

[0070]Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２が－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＨ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－ＯＰＧ^３、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである、式（Ｉ）の官能化固体支持体は、それぞれ式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ｂ）及び（Ｉ－Ｃ）を有し、ここでＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、ＰＧ^３、ｎ及びＧ^１ａは、本明細書に定義される通りである。

【化25】

【0070】

[0071]例えば、官能化固体支持体である式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ｂ）及び（Ｉ－Ｃ）では、Ｌ^１が－シリル－（ＣＨ_２）_３－ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－又はシリル－（ＣＨ_２）_３－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－であり、Ｌ^２が－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_６－であり、ｎは４～７であり、Ｌ^３は－Ｏ（ＣＨ_２）_３－であり、Ｒ^１は、各出現時に、独立して、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ（ＣＨ_３）_２、又はＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮであり、Ｒ^２ａは、水素であり、Ｌ^４は、本明細書で定義される通りであり、例えば、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化26】

であり、ＰＧ^３及びＧ^１ａは、本明細書に定義されている通りである。

【0071】

[0072]さらに例えば、官能化固体支持体である式（Ｉ－Ａ）、（Ｉ－Ｂ）及び（Ｉ－Ｃ）では、Ｌ^１が－シリル－（ＣＨ_２）_３－ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－又はシリル－（ＣＨ_２）_３－ＯＣＨ_２ＣＨ（ＯＣ（Ｏ）ＣＨ_３）ＣＨ_２ＯＣ（Ｏ）ＮＨ－（ＣＨ_２）_６－ＮＨＣ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_５－であり、Ｌ^２は－（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_６－であり、ｎは４～７であり、Ｌ^３は－（ＯＣＨ_２ＣＨ_２）_６－であり、Ｒ^１は、各出現時に、独立して、－ＣＨ_３、－ＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ_３、－ＯＣＨ_２ＣＨ_３、－ＯＣＨ（ＣＨ_３）_２、又はＯＣＨ_２ＣＨ_２ＣＮであり、Ｒ^２ａは、水素であり、Ｌ^４は、本明細書で定義される通りであり、例えば、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化27】

であり、ＰＧ^３及びＧ^１ａが、本明細書に定義されている通りである。

【0072】

[0073]Ｒ^２ａは、水素、Ｃ_１－６アルキル、Ｃ_１－６ハロアルキル、Ｃ_３－６シクロアルキル、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ_３－６シクロアルキルであってもよく、ここでＲ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａであり、Ｌ^５は、Ｌ^７－Ｏであり、ここでＬ^７は、本明細書に定義されている通りである。従って、Ｌ^５（Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５の右側の酸素原子によって、Ｈ、ＰＧ^１、Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、及びＰ（Ｏ）（ＯＨ）－Ｇ^１ａに結合する。

【0073】

[0074]Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ｂ又はＬ^５ａ－Ｌ^５ｂであってもよく、ここでＬ^５ａは、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－であり、Ｌ^５ｂは、

【化28】

、－（ＣＨ_２）_１－１０－Ｏ－，又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_２－６－であり、Ｒ^１０は、フェニル、Ｃ_１－１０アルキル、又はＣ_１－１０ハロアルキルであり、ここでフェニレン及びフェニルは、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている。Ｌ^５の結合配置をさらに説明すると、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ａ－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａであってもよく、これは次にＣ（Ｏ）－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）－Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａであってよく、ここで、－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａは、

【化29】

、－（ＣＨ_２）_１－１０－Ｏ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_２－６－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａであり、Ｒ^１０は、フェニル、Ｃ_１－１０アルキル又はＣ_１－１０ハロアルキルである。

【0074】

[0075]Ｌ^５ｂ基

【化30】

は、フタルイミド基の除去に続いて、３’末端アミノ基を有するオリゴヌクレオチドの調製に有用である。

【0075】

[0076]Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ｂ又はＬ^５ａ－Ｌ^５ｂであってもよく、ここでＬ^５ａは、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）、

【化31】

であり、
Ｌ^５ｂは

【化32】

－ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である。

【0076】

[0077]Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ｂであってもよく、ここで、Ｌ^５ｂは、

【化33】

、－（ＣＨ_２）_１－１０－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_２－６－であり、フェニルは、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル、及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている。Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ｂであってもよく、ここで、Ｌ^５ｂは、

【化34】

、－ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である。

【0077】

[0078]Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ａ－Ｌ^５ｂであってもよく、ここで、Ｌ^５ａは、－Ｃ_０－４アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｎ（Ｃ_１－３アルキル）Ｃ（Ｏ）－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｏ－Ｃ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）－、－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－フェニレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－、又はＣ_１－３アルキレン－Ｃ（Ｏ）ＮＨ－フルオレン－Ｃ_１－３アルキレン－Ｏ－Ｃ（Ｏ）－であり、Ｌ^５ｂは、

【化35】

であり、Ｒ^１０は、フェニル、Ｃ_１－１０アルキル、又はＣ_１－１０ハロアルキルであり、ここで、フェニレン及びフェニルは、ＮＯ_２、－ＯＣ_１－４アルキル、ハロゲン、Ｃ_１－４アルキル及びＣ_１－４ハロアルキルからなる群から独立して選択される１～４つの置換基で任意に置換されている。Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、Ｌ^５ａ－Ｌ^５ｂであってもよく、ここで、Ｌ^５ａは、－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｏ－ＣＨ_２－Ｃ（Ｏ）－、－ＣＨ_２－Ｎ（ＣＨ_３）Ｃ（Ｏ）－（ＣＨ_２）_２－Ｃ（Ｏ）－、

【化36】

であり、
Ｌ^５ｂは、

【化37】

である。

【0078】

[0079]従って、例えば、Ｌ^５（すなわち、Ｌ^７－Ｏ）は、

【化38】

、－ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－であってよく、ここで、Ｌ^５のＬ^７部分の連続線状原子配列が、太字で示されている。

【0079】

[0080]Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１であってもよく、ここで、ＰＧ^１は本明細書で定義される通りであり、Ｌ^５は、

【化39】

、－ＣＨ_２－Ｏ－、－（ＣＨ_２）_３－Ｏ－、又は（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）_４－である。

【0080】

[0081]Ｒ^２ｂは、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであってもよく、ここで、Ｇ^１ａは本明細書で定義される通りであり、Ｌ^６はＬ^７－Ｓｉ（Ｃ_１－４アルキル）_２であり、Ｌ^７は本明細書で定義される通りである。例えば、Ｌ^６は、

【化40】

であってもよく、すなわち、Ｌ^７は、

【化41】

である。例えば、Ｌ^６は、

【化42】

であってもよい。Ｌ^６の結合を説明するために、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａは、

【化43】

であってもよい。

【0081】

[0082]Ｇ^１ａは、ヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分であり、これらの部分は、それぞれのヌクレオチド又はヌクレオシドからその結合点における水素を除いたものにそれぞれ対応する。ヌクレオチドは、モノヌクレオチド及びオリゴヌクレオチド（すなわちポリヌクレオチド）の両方を指す。ヌクレオシドは、定義上、ヌクレオシド１残基に限定される。ヌクレオチド及びヌクレオシドは、デオキシリボヌクレオチド／デオキシリボヌクレオシド及びリボヌクレオチド／リボヌクレオシドを含む。

【0082】

[0083]オリゴヌクレオチドは、ＤＮＡオリゴヌクレオチド、ＲＮＡオリゴヌクレオチド、又はアンチセンスオリゴヌクレオチド（例えば、アンチセンスＲＮＡ）であってもよい。

【0083】

[0084]ヌクレオチド及びヌクレオシドは、遊離（非保護）、修飾ヌクレオチド及びヌクレオシド、ならびにヌクレオチド及びヌクレオシドの保護バージョンを含む。

【0084】

[0085]修飾ヌクレオチド又はヌクレオシドは、ポリヌクレオチドの場合、核酸塩基、糖、又はヌクレオチド間結合上に化学修飾又は置換を有する分子を含み、例えば、Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｒｅｖ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９８、６７：９９～１３４ページ；Ｉｎｔ．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｓｃｉ．２０１７、１８（８）、１６８３ページ；Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９５、６：１２～１９ページ；及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ１９９３、４９（２８）、６１２３～６１９４ページに記載されており、これらは参照により本明細書に組み込まれる。例えば、ヌクレオチド間結合の修飾は、ホスホロチオエート、Ｎ３’－Ｏ５’ホスホロアミデート、Ｏ３’－Ｎ５’ホスホロアミデート、３－ホスホロチオレート、５’－ホスホロチオレート、ホスホロジチオエート、メチルホスホネート及びトリアゾールを含みうる。

【0085】

[0086]ヌクレオチド及びヌクレオシドは、公知のプリン及びピリミジン塩基だけでなく、修飾されたプリン及びピリミジン塩基ならびに修飾された他のヘテロ環塩基を含む部分（これらの部分は、総称して「プリン及びピリミジン塩基ならびにその類似体」と呼ばれることがある）を含む。このような修飾は、メチル化プリン又はピリミジン、アシル化プリン又はピリミジンなどを含む。核酸塩基の修飾は、例えば、デアザプリン、Ｎ－１－メチルグアノシン、イソグアニン、２－アミノプリン、１，３－ジアザ－２－オキソフェノチアジン、１，３－ジアザ－２－オキソフェノキサジン、７－ニトロ－１，３－ジアザ－２－オキソフェノチアジン、２，６－ジアミノプリン、プリン、６－チオグアニン、ヒポキサンチン、２－ピリミジノン、２－ピリドン、４－チオウリジン、イミダゾール－４－カルボキサミド、Ｎ－置換５－（カルボキシアミド）ウリジン、例えば、５－（Ｎ－ベンジルカルボキシアミド）－ウリジン、５－フルオロ－デオキシウリジンを含みうる。

【0086】

[0087]糖の修飾は、例えば、脱塩基ヌクレオチド／ヌクレオシド、４’－カルボシクロ類似体、４’－チオ類似体、４’アミノ類似体、及びフルオロ、アミノ、メトキシ、アリルオキシなどの２’－置換糖類、例えば、

【化44】

を含みうる。

【0087】

[0088]さらなる修飾ヌクレオチド又はヌクレオシドは、スペーサーユニットを介して結合されうる蛍光標識又は蛍光消光剤などの非放射性標識での置換を含む。蛍光体のクラスは、キサンテン（例えば、フルオレセイン、ローダミン）、シアニン（例えば、シアニン３、３．５、５、５．５）、及びボロンジピロメテン（ＢＯＤＩＰＹ（商標）染料）を含む。蛍光消光剤のクラスは、アゾ消光剤（例えば、ダブシル、ＩＯＷＡＢＬＡＣＫ（登録商標）ＦＱ）及びアントラキノン消光剤（例えば、ＩＯＷＡＢＬＡＣＫ（登録商標）ＲＱ）を含む。蛍光標識及び消光剤は、核酸塩基又は糖の３’－もしくは５’－位から離れて結合されうる。例えば、

【化45】

【0088】

[0089]追加のヌクレオチド／ヌクレオシド修飾は、当業者によく知られており、例えば、ポリエチレングリコール基、コレステロール基、ビオチン基、脂質基、及びアミノ、アルデヒド、カルボン酸、及びアルキンなどの種々の官能基による置換がある。

【0089】

[0090]保護基は、ヌクレオチド又はヌクレオシドの糖又は核酸塩基部分の酸素原子又は窒素原子上に存在しうる。保護基はまた、ヌクレオチドのリン酸部分の酸素上に存在しうる。ヌクレオチド及びヌクレオシドの保護基は、当技術分野でよく知られている。

【0090】

[0091]代表的な保護基は、Ｂｅａｕｃａｇｅ，Ｓ．Ｌ．；Ｕｙｅｒ，Ｒ．Ｐ．、「ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎｔｈｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｂｙｔｈｅＰｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅＡｐｐｒｏａｃｈ」、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ、１９９２、４８、２２２３～２３１１ページによって開示され、この論文は参照により完全に組み込まれている。酸性又は中性条件下で除去することができる例示的な保護基は、トリチル（Ｔｒ）、ジメトキシトリチル（ＤＭＴｒ）、モノメトキシトリチル、９－フェニルキサンテン－９－イル（Ｐｉｘｙｌ）、９－（ｐ－メトキシフェニル）キサンテン－９－イル（Ｍｏｘ）及び４，４’、４”－トリス－ｔｅｒｔ－ブチルトリチル（ＴＴＴｒ）を含む。中性条件下で除去することができる例示的な保護基は、塩基に不安定な保護基、例えばアシル基又はアロイル基である。

【0091】

[0092]核酸塩基上の外環式アミノ基は、アシル化により保護されうる。ベンゾイル基は、アデニンとシトシンの両方を保護するために使用され、イソブチリル基とジメチルホルムアミジル基は、グアニンを保護するために使用されうる。他の代替的な保護基、例えば、アデニンのアミノ基にはフェノキシアセチル、フタロイル又はジ－Ｎ－ブチルアミノメチレン、シトシンにはアセチル、及びグアニンにはイソプロピルフェノキシアセチルが知られている。

【0092】

[0093]当業者が認めるように、５’－ヒドロキシル又は３’－ヒドロキシル基は、典型的にはトリフェニルメチル（トリチル）、４－メトキシトリフェニルメチル（メトキシトリチル）、又は４，４’－ジメトキシトリフェニルメチル（ジメトキシトリチル）で保護される。ジメトキシトリチル保護基が一般的には好ましい。２’－ヒドロキシ保護基は、ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２０００第３．５章の「ＳｔｒａｔｅｇｉｅｓｆｏｒＯｌｉｇｏｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓＡｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅＰｈｏｓｐｈａｒａｍｉｄｉｔｅＭｅｔｈｏｄ」に記載のシリル（例えば、ｔ－ブチルジメチルシリル）、アセタールなどを含む。リン酸保護基としては、２－シアノエチル基及びメチル基を含む。

【0093】

[0094]Ｇ^１ａのヌクレオチド又はヌクレオシド部分は、ヌクレオチド又はヌクレオシド部分中の３’又は５’酸素原子を介して式（Ｉ）の親分子部分に結合する。

【0094】

[0095]例示の目的で、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）－Ｇ^１ａである、Ｇ^１ａの３’酸素に結合した式（Ｉ）の官能化固体支持体の例は、

【化46】

であってもよく、ここでＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^７、Ｒ^１、Ｒ^２ａ及びｎは、本明細書に定義されている通りである。

【0095】

[0096]Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^５ａ－Ｌ^５ｂ－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａである、Ｇ^１ａの３’酸素に結合した式（Ｉ）の官能化固体支持体のさらなる例は、

【化47】

であってもよく、ここでＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^５ａ、Ｌ^５ｂ、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、及びｎは、本明細書に定義されている通りである。

【0096】

[0097]Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、Ｌ^６がＬ^７－Ｓｉ（Ｃ_１－４アルキル）_２である、３’酸素に結合した式（Ｉ）の官能化固体支持体のさらなる例は、

【化48】

であってもよく、ここでＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^７、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、及びｎは本明細書に定義されている通りである。

【0097】

[0098]Ｇ^１ａの代表的な例は、

【化49】

を含む。

【0098】

[0099]本発明の化合物の実施形態及び説明を通じて、ハロアルキルのすべての例はフルオロアルキルであってもよい（例えば、任意のＣ_１－４ハロアルキルは、Ｃ_１－４フルオロアルキルであってもよい）。

【0099】

[00100]化合物は、非対称中心又はキラル中心が存在する立体異性体として存在しうる。立体異性体は、キラル炭素原子の周りの置換基の配置に依存して「Ｒ」又は「Ｓ」である。本明細書で使用される用語「Ｒ」及び「Ｓ」は、ＩＵＰＡＣ１９７４ＲｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓｆｏｒＳｅｃｔｉｏｎＥ、ＦｕｎｄａｍｅｎｔａｌＳｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、ＰｕｒｅＡｐｐｌ．Ｃｈｅｍ．、１９７６、４５：１３－３０ページで定義されるような構成である。本開示は、様々な立体異性体及びその混合物を検討し、これらは特に本発明の範囲に含まれる。立体異性体は、エナンチオマー及びジアステレオマー、ならびにエナンチオマー又はジアステレオマーの混合物を含む。化合物の個々の立体異性体は、非対称中心又はキラル中心を含む市販の出発物質から合成的に、又はラセミ混合物の調製に続いて当業者によく知られている分離方法によって調製されうる。これらの分離方法は、（１）Ｆｕｒｎｉｓｓ、Ｈａｎｎａｆｏｒｄ、Ｓｍｉｔｈ、及びＴａｔｃｈｅｌｌ、「Ｖｏｇｅｌ’ｓＴｅｘｔｂｏｏｋｏｆＰｒａｃｔｉｃａｌＯｒｇａｎｉｃＣｈｅｍｉｓｔｒｙ」、第５版（１９８９）、ＬｏｎｇｍａｎＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ＆Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ、ＥｓｓｅｘＣＭ２０２ＪＥ、Ｅｎｇｌａｎｄに記載されるように、エナンチオマーの混合物をキラル補助剤に結合し、得られたジアステレオマーの混合物を再結晶又はクロマトグラフィーにより分離し、任意に光学的に純粋な生成物を補助剤から遊離させること、又は（２）光学エナンチオマーの混合物のキラルクロマトカラムでの直接分離、又は（３）分別再結晶法によって例示される。

【0100】

[00101]化合物は、互変異性体、ならびに幾何異性体を有してもよく、これらも本発明の一態様を構成することを理解されたい。

【0101】

[00102]本開示は、１つ又は複数の原子が、自然界で通常見られる原子質量又は質量数とは異なる原子質量又は質量数を有する原子によって置換されている同位体標識化合物も含む。本発明の化合物に含めるのに適した同位体の例は、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、及び塩素、例えば、これらに限定されないが、それぞれ^２Ｈ、^３Ｈ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、及び^３６Ｃｌである。重水素、すなわち^２Ｈなどのより重い同位体での置換は、より大きな代謝安定性、例えば、ｉｎｖｉｖｏ半減期の増加又は投与量要件の減少から生じるある種の治療上の利点をもたらすことが可能であり、従って、ある状況下では好ましい場合がある。化合物は、受容体の分布を決定するための医療画像及び陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）研究のための陽電子放出同位体を組み込みうる。式（Ｉ）の化合物に組み込むことができる適切な陽電子放出同位体は、^１１Ｃ、^１３Ｎ、^１５Ｏ、及び^１８Ｆである。式（Ｉ）の同位体標識化合物は、一般に、当業者に公知の従来の技術によって、又は非同位体標識試薬の代わりに適切な同位体標識試薬を用いて添付の実施例に記載されているものと類似の方法によって調製することができる。

【0102】

[00103]開示された化合物は、塩として存在しうる。塩は、化合物の最終的な単離及び精製中に、又は化合物のアミノ基を適切な酸と反応させることによって別々に調製されうる。例えば、化合物は、これらに限定されないが、メタノール及び水などの適切な溶媒に溶解し、塩酸のような少なくとも１当量の酸で処理されうる。得られた塩は、析出し、濾過により単離され、減圧下で乾燥されうる。あるいは、溶媒及び過剰の酸は、減圧下で除去されて、塩を提供しうる。代表的な塩は、酢酸塩、アジピン酸塩、アルギン酸塩、クエン酸塩、アスパラギン酸塩、安息香酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、重硫酸塩、酪酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、ジグルコン酸塩、グリセロリン酸塩、ヘミスル酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ギ酸塩、イセチオン酸塩、フマル酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、メタンスルホン酸塩、ナフチレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、シュウ酸塩、パモ酸塩、ペクチン酸塩、過硫酸塩、３－フェニルプロピオン酸塩、ピクリン酸塩、シュウ酸塩、マレイン酸塩、ピバリン酸塩、プロピオン酸塩、コハク酸塩、酒石酸塩、トリクロロ酢酸塩、トリフルオロ酢酸塩、グルタミン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩、ウンデカン酸塩、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩などを含む。また、化合物のアミノ基は、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、ラウリル、ミリスチル、ステアリル等の塩化、臭化、及びヨウ化アルキルで４級化されていてもよい。

【0103】

[00104]塩基性付加塩は、カルボキシル基と、適切な塩基、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、アルミニウムなどの金属カチオンの水酸化物、炭酸塩、重炭酸塩、又は有機第１級、第２級、又は第３級アミンとを反応させることにより、開示化合物の最終分離及び精製の際に調製されうる。第４級アミン塩、例えば、メチルアミン、ジメチルアミン、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジエチルアミン、エチルアミン、トリブチルアミン、ピリジン、Ｎ，Ｎ－ジメチルアニリン、Ｎ－メチルピペリジン、Ｎ－メチルモルホリン、ジシクロヘキシルアミン、プロカイン、ジベンジルアミン、Ｎ，Ｎ－ジベンジルフェネチルアミン、１－エフェナミン及びＮ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、エチレンジアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、ピペリジン、ピペラジンなどから得られるものを調製することができる。

【0104】

Ｂ．合成の方法
[00105]本発明の態様は、式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製するための方法を提供する。式（Ｉ）の官能化支持体は、ヌクレオチド又はヌクレオシド部分で置換された支持体、及びヌクレオチド又はヌクレオシド部分で置換された支持体を調製するための化学的中間体である支持体を含む。ある種の化学中間体支持体は、他の化学中間体支持体を調製するために反応させることができる。ヌクレオチド又はヌクレオシド部分を有する官能化支持体はまた、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓ．２０１１、３９、５７５～５８０ページ；及び「ＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆＵｎｍｏｄｉｆｉｅｄＯｌｉｇｏｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ」、ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２０００、Ｃｈａｐｔｅｒ３（この各セクションは、参照により本明細書に組み込まれる）に記載のようなよく知られているオリゴヌクレオチド合成技術を使用して、オリゴヌクレオチドを調製するために反応させることができる。オリゴヌクレオチドは、確立されたプロトコルを用いて、本発明の固体支持体から開裂されうる。

【0105】

[00106]本発明の一態様は、
Ｇ^１がＰＧ^１であり、ｎが１である、式（Ｉ）の中間体の合成であって、（ａ）式（ＩＩ）の官能化固体支持体を、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである式（ＩＩＩ）

【化50】

の化合物と反応させて、式（ＩＶ）

【化51】

の官能化固体支持体を提供するステップ、ならびに
（ｂ）式（ＩＶ）の官能化固体支持体を酸化して、Ａ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｒ^１、及びＰＧ^１が、本明細書に定義される通りである、以下の式（Ｉ－ａ）

【化52】

の官能化固体支持体を提供するステップ、
を含む、合成を提供する。ステップ（ａ）及び（ｂ）は、標準的なホスホロアミダイトカップリング及び酸化手順を用いて実施されうる。

【0106】

[00107]式（Ｉ－ａ）の官能化支持体は、保護基ＰＧ^１を除去するためにステップ（ｃ）で適切な試薬と反応して、以下の式（Ｉ－ｂ）

【化53】

の官能化固体支持体を提供しうる。

【0107】

[00108]式（Ｉ－ｂ）の官能化支持体は、ステップ（ｄ）での式（ＩＩＩ）の化合物との反応により追加の化学中間体に変換して、式（ＩＶ－Ａ）

【化54】

の官能化固体支持体を提供しえて、（ｅ）式（ＩＶ－Ａ）の官能化固体支持体を酸化して、Ａ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｒ^１、及びＰＧ^１が、本明細書に定義される通りである、式（Ｉ－ｃ）

【化55】

の官能化固体支持体を提供しうる。ステップ（ｄ）及び（ｅ）は、標準的なホスホロアミダイトカップリング及び酸化手順を用いて実施されうる。

【0108】

[00109]式（Ｉ－ｃ）は、ステップ（ｆ）で保護基ＰＧ^１を除去するように反応して、式（Ｉ－ｃ１）を提供し、得られたアルコールは、ステップ（ｄ）及び（ｅ）、又は（ｄ）、（ｅ）及び（ｆ）に従ってさらに反応して、式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供しえて、ここでＧ^１は水素又はＰＧ^１であり、ｎは３～２０の整数である。特定の配列の末端でのＰＧ^１の除去は、式（Ｉ－ｃ２）

【化56】

を提供する。

【化57】

【0109】

[00110]スキーム１に示されるのは、特定のＡ、Ｌ^１、Ｌ^２、及びＧ^１基を有するステップ（ａ）～（ｆ）の実施を示す代表的な合成である。

【0110】

[00111]本発明の別の態様は、Ｇ^１が水素である、ステップ（ｇ）で、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである、式（Ｖ－ａ）

【化58】

の化合物との反応により、式（Ｉ）の本発明のさらなる中間体の調製を実施して、
式（ＶＩ－ａ）

【化59】

の官能化固体支持体を提供し、
（ｈ）式（ＶＩ－ａ）の官能化固体支持体を酸化して、Ａ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、ｎ、及びＰＧ^２が本明細書に定義される通りである（すなわち、式（Ｉ）で、Ｇ^１が－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２がＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、Ｒ^２ｂがＰＧ^２である）、式（Ｉ－ｄ）

【化60】

の官能化固体支持体を提供する。いくつかの実施形態では、Ｒ^２ａは水素である。ステップ（ｇ）及び（ｈ）は、標準的なホスホロアミダイトカップリング及び酸化手順を用いて実施されうる。

【0111】

[00112]式（Ｉ－ｄ）の官能化支持体は、ステップ（ｉ）で、保護基ＰＧ^２を除去するために適切な試薬と反応して、以下の式（Ｉ－ｅ）

【化61】

の官能化固体支持体を提供しうる。いくつかの実施形態において、Ｒ^２ａは水素である。

【化62】

【0112】

[00113]スキーム２に示されるのは、特定のＡ、Ｌ^２、Ｌ^３、及びＲ^２ｂ基を有するステップ（ｇ）～（ｉ）の実施を示す代表的な合成である。

【0113】

[00114]式（Ｉ－ｅ）の官能化固体支持体（例えば、Ｒ^２ａは水素である）は、無水コハク酸との反応により、本発明の追加の中間体を提供するようにさらに処理して、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－ＣＨ_２ＣＨ_２ＣＯＯＨである式（Ｉ）の官能化固体支持体を式（Ｉ－ｆ）

【化63】

の形態で提供しうる。

【0114】

[00115]式（Ｉ－ｅ）の官能化固体支持体（例えば、Ｒ^２ａは水素である）は、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨ又はＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＰＧ^３の化合物との反応により、本発明の追加の中間体を提供するようにさらに処理して、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＨ又はＣ（Ｏ）－Ｌ^７－Ｃ（Ｏ）ＯＰＧ^３である式（Ｉ）の官能化固体支持体を式（Ｉ－ｇ）又は（Ｉ－ｈ）

【化64】

の形態で提供しうる。式（Ｉ－ｈ）は、当技術分野でよく知られているカルボン酸保護基を除去するための標準条件を用いて保護基ＰＧ^３を除去することにより式（Ｉ－ｇ）に変換されうる。

【化65】

【0115】

[00116]スキーム３に示されるのは、特定のＡ、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｒ^２ａ、及びＲ^２ｂ基を有する式（Ｉ－ｅ）、代表的な（ｉ－ｅ２）と無水コハク酸をカップリングして、（ｉ－ｆ１）を生成することを示す代表的な合成である。

【0116】

[00117]式（Ｉ－ｅ）の官能化固体支持体（例えば、Ｒ^２ａは水素である）は、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨ又はＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＰＧ^１の化合物との反応により、本発明の追加の中間体を提供するようにさらに処理されて、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＰＧ^１又はＣ（Ｏ）－Ｌ^７－ＯＨである（すなわち、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^５－ＰＧ^１又はＣ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｈである）式（Ｉ）の官能化固体支持体を、式（Ｉ－ｉ）及び（Ｉ－ｊ）

【化66】

の形態で提供しうる。式（Ｉ－ｉ）及び（Ｉ－ｊ）で、Ｌ^７は、Ｌ^７－Ｏ－ＰＧ^１がエーテル部分であり、Ｌ^７－Ｏ－Ｈがアルコール部分であるように構成される。式（Ｉ－ｉ）は、当技術分野でよく知られているアルコール保護基を除去するための標準条件を用いて保護基ＰＧ^１を除去することにより、式（Ｉ－ｊ）に変換されうる。

【化67】

【0117】

[00118]スキーム４に示すのは、代表的なユニバーサルリンカーとアミドカップリングして式（ｉ－ｉ）を形成し、次いでアルコール脱保護して式（ｉ－ｊ）を提供する代表的な合成である。ユニバーサルリンカーは、当技術分野でよく知られており、Ｏｒｇ．ＰｒｏｃｅｓｓＲｅｓ．Ｄｅｖ．（２００８）１２（３）：３９９～４１０ページ；Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ，Ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ，ａｎｄＮｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ（２０１０）２９（１１）：８６７～８７８ページ；「Ｓｏｌｉｄ－ＰｈａｓｅＳｕｐｐｏｒｔｓｆｏｒＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ」、ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙ２０００、第３章、セクション３．１；米国特許第６，７７０，７５４号；米国特許第７，２０２，２６４号；米国特許第７，４９１，８１７号；及び国際公開第２０１８／１７７８８１号パンフレットに記載されている。

【0118】

[00119]式（Ｉ－ｂ）、（Ｉ－ｃ１）、（Ｉ－ｃ２）、（Ｉ－ｅ）、（Ｉ－ｆ）、（Ｉ－ｇ）、及び（Ｉ－ｊ）の中間体は、さらに反応して、ヌクレオチド又はヌクレオシド部分Ｇ^１ａを有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を調製しうる。

【0119】

[00120]集合的に式（Ｉ－ｃ３）

【化68】

としての、式（Ｉ－ｂ）、（Ｉ－ｃ１）、及び（Ｉ－ｃ２）は、標準的なホスホロアミダイトカップリング条件を使用して、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルである式（Ｖ－ｂ）

【化69】

の化合物と反応して、式（ＶＩ－ｂ）

【化70】

の官能化固体支持体を提供しえて、
式（ＶＩ－ｂ）の官能化固体支持体を酸化して、Ａ、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｌ^４、Ｒ^１、Ｒ^２ａ、及びＧ^１ａが本明細書で定義する通りである（すなわち、式（Ｉ）で、Ｇ^１は－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２はＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、Ｒ^２ｂはＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである）、式（Ｉ－ｋ）

【化71】

の官能化固体支持体を提供する。いくつかの実施形態では、Ｒ^２ａは水素である。

【0120】

[00121]式（Ｉ－ｅ）は、標準的なアミド結合形成条件を用いて、式ＨＯ－Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａの化合物と反応して、Ｒ^２ｂがＣ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａである式（Ｉ）の官能化固体支持体を式（Ｉ－ｋ）の形態で提供しうる。

【化72】

【0121】

[00122]スキーム５に示されるのは、式（Ｉ）でヌクレオチド又はヌクレオシド部分Ｇ^１ａ、及び特定のＡ、Ｌ^３、Ｒ^２ａ、及びＲ^２ｂ基を有する式（ｉ－ｋ）の官能化固体支持体の代表的な合成である。

【0122】

[00123]式（Ｉ－ｇ）は、エステル形成条件下で３’又は５’ＯＨでヌクレオシド又はヌクレオチドと反応して、式（ＩＸ－ａ）

【化73】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供しうる。式（Ｉ－ｆ）の反応は、Ｌ^７が－ＣＨ_２ＣＨ_２－である式（ＩＸ－ａ）を提供する。

【0123】

[00124]式（Ｉ－ｊ）は、Ｒ^２０及びＲ^２１が独立してＣ_１－６アルキルであり、Ｇ^１ａがヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分である、式（ＶＩＩ）

【化74】

の化合物と反応して、式（ＶＩＩＩ－ａ）の

【化75】

官能化固体支持体を提供しえて、
式（ＶＩＩＩ－ａ）の官能化固体支持体を酸化して、式（Ｘ－ａ）

【化76】

を有する式（Ｉ）の官能化固体支持体を提供する。

【化77】

【0124】

[00125]スキーム６に示されるのは、式（Ｉ）でヌクレオチド又はヌクレオシド部分Ｇ^１ａ、及び特定のＡ、Ｌ^５、Ｒ^２ａ、及びＲ^２ｂ基を有する式（Ｘ－ａ）の官能化固体支持体の代表的な合成である。

【0125】

[00126]本発明の別の態様は、（ａ）式（Ｉ）の官能化固体支持体を１つ又は複数のサイクルのヌクレオチド付加化学に付すステップであって、Ｇ^１が、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２が、－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、Ｇ^１ａが、ヌクレオチド部分又はヌクレオシド部分であり、ヌクレオチド部分及びヌクレオシド部分が、単一のヌクレオチド又はヌクレオシド残基を含む、ステップ、ならびに
（ｂ）式（Ｉ）の官能化固体支持体を得るステップであって、Ｇ^１が、－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｌ^３－Ｒ^２であり、Ｒ^２が、－ＮＲ^２ａＲ^２ｂであり、Ｒ^２ｂが、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^４－Ｇ^１ａ、Ｃ（Ｏ）－Ｌ^５－Ｐ（Ｏ）（Ｒ^１）－Ｇ^１ａ、又はＣ（Ｏ）－Ｌ^６－Ｇ^１ａであり、Ｇ^１ａが、オリゴヌクレオチド部分である、ステップ、
を含むオリゴヌクレオチドの合成方法を提供する。

【0126】

[00127]ヌクレオチド付加化学の１つ又は複数のサイクルは、ホスホロアミダイトを介するヌクレオチド付加の１つ又は複数のサイクルであってもよい。

【0127】

[00128]本発明の官能化固体支持体を用いて、オリゴヌクレオチドは、１０，０００塩基対当たり１０、９、８、７、６、５、４、３、２、又は１未満の平均誤差及び／又は欠失率で調製されうる。

【0128】

[00129]オリゴヌクレオチド合成方法は、官能化固体支持体からオリゴヌクレオチド部分を開裂することをさらに含みうる。本方法は、開裂前に、オリゴヌクレオチド部分から１つ又は複数の保護基を除去することをさらに含みうる。本方法は、開裂後にオリゴヌクレオチドから１つ又は複数の保護基を除去することをさらに含みうる。

【0129】

[00130]本発明の官能化固体支持体は、当業者に公知の多くの技術及び合成プロトコルを用いて合成されうる。

【0130】

[00131]ホスホロアミダイトカップリングは、アセトニトリルなどの溶媒中で酸性アゾール触媒を用いた適切なホスホロアミダイトの活性化により、次いで過剰の活性化ホスファイトのアルコール反応相手との反応、及び中間体亜リン酸トリステルの酸化によって実施されうる。アゾール触媒は、「Ｃｏｕｐｌｉｎｇａｃｔｉｖａｔｏｒｓｆｏｒｔｈｅｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓｙｎｔｈｅｓｉｓｖｉａｐｈｏｓｐｈｏｒａｍｉｄｉｔｅａｐｐｒｏａｃｈ」、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ（２０１３）６９（１８）、３６１５～３６３７ページに記載されているように、１Ｈ－テトラゾール、５－エチルチオ－１Ｈテトラゾール、２－ベンジルチオテトラゾール、４，５－ジシアノイミダゾール、又は多数の類似化合物を含む。不安定な３価の亜リン酸トリエステルは、ＴＨＦ／ピリジン／水中で０．１Ｍ又は０．０２Ｍのいずれかのヨウ素を使用することにより、安定な５価のリン酸トリエステルに酸化されうる。

【0131】

[00132]アミドカップリングは、よく知られた条件を用いて、例えば、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ジクロロメタン、酢酸エチル、又はＤＭＳＯなどの溶媒中で、場合によってはＮ－メチルモルホリン、ヒューニッヒ塩基、ピリジン、２，６－ルチジン、トリエチルアミンなどのアミン塩基を添加して、ＨＡＴＵ、ＥＤＣ、ＰｙＢＯＰ、ＤＣＣ、ＨＢＴＵ、又はＴＢＴＵなどのカップリング試薬を用いてアミンとカルボン酸を反応させることにより、実施して、生成物を提供しうる。例えば、室温程度でＤＭＳＯ中、ジイソプロピルエチルアミン（３当量）の存在下で、アミン（１当量）を、酸（２．５当量）及びＨＡＴＵ（２．５当量）と反応させることである。

【0132】

[00133]アルコール及びアミン保護基を除去するための条件は、ＰＧＭＷｕｔｓ及びＴＷＧｒｅｅｎｅ、ＧｒｅｅｎｅのＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅＧｒｏｕｐｓｉｎＯｒｇａｎｉｃＳｙｎｔｈｅｓｉｓと題する書籍（第４版）、ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ、ＮＹ（２００６）に記載されているように、当技術分野でよく知られており、参照により本明細書に組み込まれる。例えば、ＤＭＴｒ基は、ジクロロメタン（ＤＣＭ）中の３％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）、ＤＣＭ中の３％ジクロロ酢酸（ＤＣＡ）、又はトルエン中の５％ＤＣＡとの反応により除去されうる。アミンに対するＢｏｃ保護基は、ＤＣＭ中のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）又はジオキサン／水混合物中のＨＣｌを使用して除去されうる。

【0133】

[00134]オリゴヌクレオチド合成は、所望の配列が組み立てられるまで、成長する鎖の５’－末端へのヌクレオチド残基の段階的付加によって実施されうる。各付加は合成サイクルと呼ばれ、一般に４つの化学反応：（１）脱ブロック化、（２）カップリング、（３）キャッピング、及び（４）酸化からなる。脱ブロック化は、５’－ＤＭＴｒ基の除去を含みうり、遊離の５’－末端ヒドロキシ基を有する固体支持体結合型前駆体を提供する。ＤＭＴｒ除去のための一般的な条件は、不活性溶媒（ジクロロメタン又はトルエン）中の２％トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）又は３％ジクロロ酢酸（ＤＣＡ）などの酸の溶液との反応を含む。遊離の５’－ヒドロキシは、酸性アゾール触媒、１Ｈ－テトラゾール、５－エチルチオ－１Ｈテトラゾール、２－ベンジルチオテトラゾール、４，５－ジシアノイミダゾール、又は多くの同様の化合物で活性化されたアセトニトリル中でヌクレオシドのホスホロアミドとカップリングして、亜リン酸トリエステル結合を形成しうる。任意の未反応の５’－ＯＨを有する分子は、次にアセチル化によってキャップされる。最後に、亜リン酸トリエステル結合は、典型的には弱塩基（例えば、ピリジン、ルチジン、コリン）の存在下でヨウ素と水を用いてリン酸トリエステルへと酸化される。あるいは、Ａｐｐｌ．Ｓｃｉ．２０１９、９、１３５７ページに記載されているように、オリゴヌクレオチド合成は、３’－方向で実施されうる。

【0134】

[00135]合成後、オリゴヌクレオチドは、支持体から開裂され、脱保護されうる。一般に、脱保護条件は、オリゴヌクレオチドに組み込まれた修飾タイプによって決定される。また、オリゴ骨格を合成するために使用した核酸塩基の保護によって決定することもできる。Ｎ－アシル塩基保護及びリン酸２－シアノエチル保護は、無機塩基又はアミンで処理することにより、同時に除去することができる。固体支持体結合型オリゴヌクレオチドは、有機溶媒中の塩基の溶液、例えばアセトニトリル中の５０％トリエチルアミン又はアセトニトリル中の１０％ジエチルアミンで処理することができる。従来の基で保護された標準的なＤＮＡ塩基（Ｂｚ－ｄＡ、Ｂｚ－ｄＣ、及びｉＢｕ－ｄＧ）は、水酸化アンモニウム溶液を用いて脱保護されうる。しかし、この脱保護は一般に遅く、すべての修飾に対応できるわけではない。Ａｃ－ｄＣ及びｄｍｆ－ｄＧ、ならびに対応するＲＮＡ塩基は、２８％（又はそれ以上）の水酸化アンモニウムと４０％の水性メチルアミンの１：１混合物を使用してはるかに速く脱保護することが可能である。オリゴヌクレオチドが任意の２’－Ｏ－保護リボヌクレオチド残基を含む場合、脱保護プロトコルは、２’－Ｏ－保護シリル基が種々の方法によってフッ化物イオンで処理して除去される第２のステップを含む。完全に脱保護された生成物はそのまま使用するか、又は所望のオリゴヌクレオチドは多くの方法によって精製することができる。最も一般的には、粗生成物は、エタノール沈殿、サイズ排除クロマトグラフィー、又は逆相ＨＰＬＣを用いて脱塩される。不要な切断産物を除去するために、オリゴヌクレオチドは、ポリアクリルアミドゲル電気泳動又は陰イオン交換ＨＰＬＣ、その後、脱塩により精製することができる。オリゴヌクレオチドは、「ＤＭＴＯＮ」で合成し、精製中又は精製後に最終的なジメトキシトリチル基を除去することができる。これを達成するために、最終的なホスホロアミダイトの添加後に、脱ブロックによる処理は行わない。オリゴは必要に応じて開裂され、脱保護される。精製時にＤＭＴｒ基が残っている場合は、酸（水中８０％酢酸）で処理することにより除去することができる。ユニバーサルリンカーを完全に除去するために、以下の１つを使用することができる。（１）水酸化アンモニウム水溶液、８０℃で１７時間；（２）（２８％（又はそれ以上）水酸化アンモニウムと４０％水性メチルアミンの１：１混合物）、８０℃で５時間；又は（３）（２８％（又はそれ以上）水酸化アンモニウムと４０％水性メチルアミンの１：１混合物）、５５℃で一晩。Ｑリンカーは、脱保護の際に、２８％（又はそれ以上）水酸化アンモニウムと４０％水性メチルアミンの１：１混合物と７０℃で２．５時間反応させることにより除去することができる。

【0135】

[00136]本開示の化合物は、このセクションに記載された例示的な反応及び技術を使用して調製することができる。反応は、用いる試薬及び材料に適した溶媒で行われ、有効な変換に適している。また、後述の合成方法の説明において、溶媒、反応雰囲気、反応温度、実験時間、及び精密検査手順を含む提案されたすべての反応条件は、その反応の標準的な条件として選択されており、当業者には容易に認識されるはずであると理解されるであろう。当業者は、本明細書に記載された条件の１つ又は複数を調整することができる。有機合成の技術に精通した者は、エディクト分子（edict molecule）の様々な部分に存在する官能性が、提案された試薬及び反応と適合しなければならないことを理解する。所与のクラスに入る本開示のすべての化合物が、記載された方法のいくつかで必要とされる反応条件のいくつかに適合するわけではない可能性がある。反応条件に適合する、置換基に対するそのような制限は、当業者には容易に明らかであり、代替方法を使用することができる。

【0136】

略号
Ａｃ－ｄＣ＝Ｎ－アセチル－２’－デオキシシチジン
Ａｃ_２Ｏ＝無水酢酸
ａｑ．＝水性
Ｂｚ－ｄＡ＝ベンゾイル－２’－デオキシアデノシン
Ｂｚ－ｄＣ＝ベンゾイル－２’－デオキシシチジン
ｃｏｎｃ．＝濃縮
ＤＣＣ＝Ｎ，Ｎ’－ジシクロヘキシルカルボジイミド
ＤＣＭ＝ジクロロメタン、ＣＨ_２Ｃｌ_２
ＤＩＰＥＡ＝ジ－イソプロピルエチルアミン
ｄｍｆ－ｄＧ＝Ｎ－ジメチルホルムアミジン－２’－デオキシグアノシン
ＤＭＳＯ＝ジメチルスルホキシド
ＥＤＣ＝１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ｅｑ＝等量
ＥｔＯＨ＝エタノール
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
Ｅｔ_３Ｎ＝トリエチルアミン
ｈ＝時間
ＨＯＡｃ＝酢酸
ＨＡＴＵ＝１－［ビス（ジメチルアミノ）メチレン］－１Ｈ－１，２，３－トリアゾロ［４，５－ｂ］ピリジニウム３－オキシドヘキサフルオロホスフェート
ＨＢＴＵ＝（２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート
ｉＢｕ－ｄＧ＝イソブチル－２’－デオキシグアノシン
ＭｅＣＮ＝アセトニトリル
ＭｅＯＨ＝メタノール
ｍｉｎ＝分
ＰｙＢｏｐ＝ブロモトリピロリジノホスホニウムヘキサフルオロホスフェート
Ｑリンカー＝

【化78】

ｒ．ｔ．＝室温
ｒｔ＝室温
ｓａｔ．＝飽和
ＴＢＤＭＳ＝ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル
ＴＢＴＵ＝２－（１Ｈ－ベンゾトリアゾール－１－イル）－１，１，３，３－テトラメチルアミニウムテトラフルオロボレート
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
ｗｔ．＝重量
ＸａｎｔＰｈｏｓ＝４，５－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９－ジメチルキサンテン

【実施例】

【0137】

実施例１．拡張リンカーＣＰＧ支持体の合成
[00137]スキーム７は、例示的な前駆体分子８の合成を示す。１０００Åの孔径を有するＬＣＡＡＣＰＧビーズを、過剰のε－カプロラクトン７と、トルエン中、還流で２４時間反応させた。この生成された構造体８は、続くホスホロアミダイト化学の助けとなるアルコール系支持体を有する。

【化79】

【0138】

[00138]スキーム８に示すように、次に、１～４個のスペーサー１８ホスホロアミダイトを、最大４サイクルの標準ホスホロアミダイト化学を用いてシアノエチル保護基９と結合し、拡張リンカーＣＰＧ１０を生じた。

【化80】

【0139】

[00139]スキーム９に示すように、拡張リンカー１０の脱保護後、次に、開裂可能な修飾ｄＴホスホロアミダイト１１を標準ホスホロアミダイト化学によって１０に結合して、１２を生成し、これに標準ホスホロアミダイト化学によって後続のヌクレオチドが結合して最終オリゴヌクレオチド生成物を生成させる。

【化81】

【0140】

実施例２．拡張リンカーＣＰＧ支持体構造を使用するオリゴ合成のカップリング効率
[00140]化合物１２として一般的なタイプの官能化支持体を用いて、１０，０００ｂｐ当たり３未満の誤差及び欠失率でオリゴヌクレオチドを生成した。
実施例３．拡張リンカーＣＰＧ支持体の合成
[00141]拡張リンカーＣＰＧのさらなる実施形態は、保存期間を延長し、分岐及び副反応を抑制するためのスペーサー１８の修飾を含む。例えば、スペーサー１８アミダイトは、シアノエチル保護基を、非開裂性又はより安定な基、例えばメチル、エチル、メトキシ、エトキシ、及びイソプロポキシで置き換えるように修飾することができる。

【0141】

[00142]これらの修飾構造を調製するために、その末端１４の遊離ＯＨに結合したＤＭＴｒで一端を保護したスペーサー１８を、ピリジン・トリフルオロ酢酸（Ｐｙ－ＴＦＡ）の存在下で、ミキサーミル４００ボールミルホモジナイザーで、２－シアノエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトライソプロピルホスホロジアミダイトではなくエチルＮ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’－テトライソプロピルホスホロジアミダイト１５と反応させた。これにより、やはりＤＭＴｒで保護され、ホスホアミダイト１６にエチル保護基を有するスペーサー１８アミダイトが生成された。

【化82】