知財求人 - 知財ポータルサイト「IP Force」
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-04-12
(54)【発明の名称】抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用
(51)【国際特許分類】
A61K 31/145 20060101AFI20230405BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20230405BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230405BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20230405BHJP
【ＦＩ】
A61K31/145
A61P31/14
A61P43/00 171
A61K45/00
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022551788
(86)(22)【出願日】2021-02-26
(85)【翻訳文提出日】2022-10-24
(86)【国際出願番号】 CN2021078185
(87)【国際公開番号】W WO2021170093
(87)【国際公開日】2021-09-02
(31)【優先権主張番号】202010121688.4
(32)【優先日】2020-02-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】518222745
【氏名又は名称】上海科技大学
【氏名又は名称原語表記】ＳＨＡＮＧＨＡＩ ＴＥＣＨ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ
【住所又は居所原語表記】Ｎｏ．３９３ Ｍｉｄｄｌｅ Ｈｕａｘｉａ Ｒｏａｄ， Ｐｕｄｏｎｇ Ｎｅｗ Ａｒｅａ， Ｓｈａｎｇｈａｉ， Ｃｈｉｎａ
(74)【代理人】
【識別番号】110000578
【氏名又は名称】名古屋国際弁理士法人
(72)【発明者】
【氏名】▲楊▼▲海▼涛
(72)【発明者】
【氏名】▲ジン▼振明
(72)【発明者】
【氏名】▲楊▼秀娜
(72)【発明者】
【氏名】▲趙▼耀
(72)【発明者】
【氏名】▲饒▼子和
【テーマコード（参考）】
4C084
4C206
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084NA05
4C084ZB332
4C206AA01
4C206AA02
4C206JA72
4C206MA01
4C206MA04
4C206NA14
4C206ZB33
4C206ZC61
(57)【要約】
本発明は抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用を開示する。コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用である。本発明は、体外酵素活性実験により、ジスルフィラムが好適にコロナウイルスにおける主要プロテアーゼの活性を阻害することができ、既存技術にコロナウイルスによる疾患を治療するものが欠けているという不足を補うことが見出された。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用であって、前記コロナウイルスはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ、ＰＤＣｏＶ、ＦＩＰＶ又はＩＢＶから選ばれる使用。
【請求項2】
前記疾患は哺乳動物又はトリ類の疾患であることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項3】
前記哺乳動物はヒト、ブタ及びネコを含むことを特徴とする請求項２に記載の使用。
【請求項4】
前記ジスルフィラムを薬物組成物の唯一の活性成分とすることを特徴とする請求項１に記載の使用。
【請求項5】
前記薬物組成物は、さらに、薬学的に許容される担体、例えば薬学的に許容される薬用助剤を含むことを特徴とする請求項４に記載の使用。
【請求項6】
前記ジスルフィラムはそれを含むキットの様態で存在し、前記キットは、さらに、コロナウイルスに関連する疾患を治療する薬物及び／又はほかのウイルスによる疾患を治療する薬物を含むことを特徴とする請求項１～５のいずれか１項に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【発明の詳細な説明】
【0001】
［関連出願の相互参照］
本出願は出願日が２０２０年２月２６日である中国出願２０２０１０１２１６８８４の優先権を主張する。本出願は中国特許出願の全文を引用する。
本出願は出願日が２０２０年２月２６日である中国出願２０２０１０１２１６８８４の優先権を主張する。本出願は中国特許出願の全文を引用する。
【0002】
［技術分野］
本発明は、生物医薬の技術分野に属し、抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用、具体的に、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用に関する。
本発明は、生物医薬の技術分野に属し、抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用、具体的に、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用に関する。
【0003】
［背景技術］
コロナウイルスは人畜に密接に関連するウイルスである。コロナウイルスＨＣｏＶ－２２９Ｅ及びＨＣｏＶ－ＯＣ４３は通常の風邪を引き起こす（ｖａｎ ｄｅｒ Ｈｏｅｋ， Ｌ．， Ｐｙｒｃ， Ｋ．， Ｊｅｂｂｉｎｋ， Ｍ． ら Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４，１０， ３６８－３７３）。２００２から２００３年の間にＳＡＲＳコロナウイルスによる重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）は全世界で８０９８人を感染させた（Ｓｔａｄｌｅｒ， Ｋ．， Ｍａｓｉｇｎａｎｉ， Ｖ．， Ｅｉｃｋｍａｎｎ， Ｍ． ら ＳＡＲＳ － ｂｅｇｉｎｎｉｎｇ ｔｏ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ ａ ｎｅｗ ｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２００３， １， ２０９－２１８）。２００４年に同定されたＨＣｏＶ－ＮＬ６３は同様に風邪に似た気道疾患を引き起こす（ｖａｎ ｄｅｒ Ｈｏｅｋ， Ｌ．， Ｐｙｒｃ， Ｋ．， Ｊｅｂｂｉｎｋ， Ｍ． ら Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４，１０， ３６８－３７３）。２０１２年に中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）が現れ、２０１６年４月２６日までに、２７か国で１７２８例の感染があった（ｄｅ Ｗｉｔ， Ｅ．， ｖａｎ Ｄｏｒｅｍａｌｅｎ， Ｎ．， Ｆａｌｚａｒａｎｏ， Ｄ． ら ＳＡＲＳ ａｎｄ ＭＥＲＳ： ｒｅｃｅｎｔ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２０１６，１４， ５２３－５３４．）。最近流行中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスはＣＯＶＩＤ－１９を引き起こし、臨床所見が発熱、乾性咳及び呼吸困難である（Ｊｅａｎｎｅｔｔｅ Ｇｕａｒｎｅｒ， ＭＤ， Ｔｈｒｅｅ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ Ｔｗｏ Ｄｅｃａｄｅｓ： Ｔｈｅ Ｓｔｏｒｙ ｏｆ ＳＡＲＳ， ＭＥＲＳ， ａｎｄ Ｎｏｗ ＣＯＶＩＤ－１９， Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ， ， ａｑａａ０２９）。コロナウイルスは牧畜業に対する影響が大きく、ブタ流行性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）及びブタデルタコロナウイルス（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｄｅｌｔａ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ、ＰＤＣｏＶ、デルタウイルスとも呼ばれる）は、ブタの重症胃腸炎、下痢、嘔吐及び脱水を引き起こし、養豚業に莫大な損失をもたらす（Ａｋｉｍｋｉｎ Ｖ， Ｂｅｅｒ Ｍ， Ｂｌｏｍｅ Ｓ， ら Ｎｅｗ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｉｎ Ｓｗｉｎｅ Ｆｅｃｅｓ， Ｇｅｒｍａｎｙ， ２０１２． Ｅｍｅｒｇ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ． ２０１６，２２（７）：１３１４－１３１５）。ネコ伝染性腹膜炎ウイルス（ＦＩＰＶ）はネコ科動物の致死性疾患を引き起こす。トリ伝染性気管支炎ウイルス（ＩＢＶ）はトリ類に感染し、幅広く分布する家禽疾患で、家禽業に大きな悪影響を与える。
コロナウイルスは人畜に密接に関連するウイルスである。コロナウイルスＨＣｏＶ－２２９Ｅ及びＨＣｏＶ－ＯＣ４３は通常の風邪を引き起こす（ｖａｎ ｄｅｒ Ｈｏｅｋ， Ｌ．， Ｐｙｒｃ， Ｋ．， Ｊｅｂｂｉｎｋ， Ｍ． ら Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４，１０， ３６８－３７３）。２００２から２００３年の間にＳＡＲＳコロナウイルスによる重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）は全世界で８０９８人を感染させた（Ｓｔａｄｌｅｒ， Ｋ．， Ｍａｓｉｇｎａｎｉ， Ｖ．， Ｅｉｃｋｍａｎｎ， Ｍ． ら ＳＡＲＳ － ｂｅｇｉｎｎｉｎｇ ｔｏ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ ａ ｎｅｗ ｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２００３， １， ２０９－２１８）。２００４年に同定されたＨＣｏＶ－ＮＬ６３は同様に風邪に似た気道疾患を引き起こす（ｖａｎ ｄｅｒ Ｈｏｅｋ， Ｌ．， Ｐｙｒｃ， Ｋ．， Ｊｅｂｂｉｎｋ， Ｍ． ら Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｅｗ ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ． Ｎａｔ Ｍｅｄ ２００４，１０， ３６８－３７３）。２０１２年に中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）が現れ、２０１６年４月２６日までに、２７か国で１７２８例の感染があった（ｄｅ Ｗｉｔ， Ｅ．， ｖａｎ Ｄｏｒｅｍａｌｅｎ， Ｎ．， Ｆａｌｚａｒａｎｏ， Ｄ． ら ＳＡＲＳ ａｎｄ ＭＥＲＳ： ｒｅｃｅｎｔ ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｉｎｔｏ ｅｍｅｒｇｉｎｇ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２０１６，１４， ５２３－５３４．）。最近流行中のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスはＣＯＶＩＤ－１９を引き起こし、臨床所見が発熱、乾性咳及び呼吸困難である（Ｊｅａｎｎｅｔｔｅ Ｇｕａｒｎｅｒ， ＭＤ， Ｔｈｒｅｅ Ｅｍｅｒｇｉｎｇ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓｅｓ ｉｎ Ｔｗｏ Ｄｅｃａｄｅｓ： Ｔｈｅ Ｓｔｏｒｙ ｏｆ ＳＡＲＳ， ＭＥＲＳ， ａｎｄ Ｎｏｗ ＣＯＶＩＤ－１９， Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ， ， ａｑａａ０２９）。コロナウイルスは牧畜業に対する影響が大きく、ブタ流行性下痢ウイルス（ＰＥＤＶ）、胃腸炎ウイルス（ＴＧＥＶ）及びブタデルタコロナウイルス（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｄｅｌｔａ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ、ＰＤＣｏＶ、デルタウイルスとも呼ばれる）は、ブタの重症胃腸炎、下痢、嘔吐及び脱水を引き起こし、養豚業に莫大な損失をもたらす（Ａｋｉｍｋｉｎ Ｖ， Ｂｅｅｒ Ｍ， Ｂｌｏｍｅ Ｓ， ら Ｎｅｗ Ｃｈｉｍｅｒｉｃ Ｐｏｒｃｉｎｅ Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｉｎ Ｓｗｉｎｅ Ｆｅｃｅｓ， Ｇｅｒｍａｎｙ， ２０１２． Ｅｍｅｒｇ Ｉｎｆｅｃｔ Ｄｉｓ． ２０１６，２２（７）：１３１４－１３１５）。ネコ伝染性腹膜炎ウイルス（ＦＩＰＶ）はネコ科動物の致死性疾患を引き起こす。トリ伝染性気管支炎ウイルス（ＩＢＶ）はトリ類に感染し、幅広く分布する家禽疾患で、家禽業に大きな悪影響を与える。
【0004】
コロナウイルスは系統分類においてニドウイルス目（Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ）コロナウイルス科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）オルトコロナウイルス亜科（Ｏｒｔｈｏｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｎａｅ）に属し、現在、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルスのゲノム配列が既に開示されており、当該配列はＳＡＲＳ－Ｃｏｖとのヌクレオチド類似度が約９０％であり、タンパク質配列はＳＡＲＳ－ＣｏＶと約８０％の配列類似性がある。コロナウイルスのゲノムは一本鎖のセンス鎖ＲＮＡで、長さが約２８ ｋｂで、主にウイルスのパッケージングに必要な構造タンパク質及び複製・転写に関連する非構造タンパク質をコードする。コロナウイルス関連疾患を治療する薬物及びワクチンの開発は主に上記２種類のタンパク質に対する。ウイルスゲノムの三分の二の遺伝子は主に非構造タンパク質をコードする。ウイルスはｐｐ１ａとｐｐ１ａｂの２種類のポリメラーゼタンパク質をコードし、ウイルスの複製過程に関与する。ｐｐ１ａとｐｐ１ａｂは２種類のウイルスによってコードされるパパイン及び主要プロテアーゼ（ｍａｉｎ ｐｒｏｔｅａｓｅ）によって１６の非構造タンパク質ｎｓｐ１－１６に切断することができ、これらの機能的サブユニットがウイルスによってコードされるプロテアーゼに独立したタンパク質単位に切断されないと、ウイルスは正常の転写・複製機能を完成し、さらに複製・転写複合体に組み立て、ウイルスの複製と転写を完成させることができない。中では、パパインは３つの酵素切断部位が、主要プロテアーゼはｐｐ１ａとｐｐ１ａｂに１１個の酵素切断部位が存在する。主要プロテアーゼがウイルスの転写・複製の過程において重要な調節作用を発揮することがわかったため、研究の焦点になってきた（Ｚｉｅｂｕｈｒ， Ｊ．； Ｓｎｉｊｄｅｒ， Ｅ． Ｊ．； Ｇｏｒｂａｌｅｎｙａ， Ａ． Ｅ． Ｖｉｒｕｓ－ｅｎｃｏｄｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｏｌｙｔｉｃ ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅ Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ． Ｊ Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ ２０００， ８１， ８５３－７９．；Ｚｉｅｂｕｈｒ， Ｊ． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｓｅｖｅｒｅ ａｃｕｔｅ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ． Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ ２００４， ７， ４１２－９．）。主要プロテアーゼのコロナウイルスの増幅・複製に対する重要性のため、主要プロテアーゼの触媒部位に対する専一性が強く、安全性が高い阻害剤の探索は薬物の開発に特に重要である。
【0005】
ジスルフィラム（Ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ；ＣＡＳ番号：９７－７７－８）は特異的なアセトアルデヒド脱水素酵素（ＡＬＤＨ１）阻害剤で（Ｌｉｕ， Ｘｉｎｗｅｉ， ら “Ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ＡＬＤＨ１Ａ１ ｂｙ ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ／ｃｏｐｐｅｒ ｃｏｍｐｌｅｘ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｎｏｎ－ｓｍａｌｌ ｃｅｌｌ ｌｕｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｄｒｉｖｅｎ ｂｙ ＡＬＤＨ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｃａｎｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ．” Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ ７．３６ （２０１６）： ５８５１６．）、慢性アルコール中毒の治療に使用され、アルコールに急性感受性が生じる。また、ジスルフィラムはドーパミン作動系に作用し、ジスルフィラム及びその代謝物である二硫化炭素はいずれもドーパミン－β－ヒドロキシラーゼ（ＤＢＨ）で、ドーパミンレベルを上昇させる。これによって譫妄、偏執、記憶障害、運動失調、構音障害及び前頭放出信号のようないくつかの神経・精神的症状につながる。このような作用以外、ジスルフィラムはドーパミン－β－ヒドロキシラーゼを阻害することで、大脳におけるドーパミン濃度が上昇し、ノルアドレナリンが低下することから、ジスルフィラムのアルコール依存における抗依存性作用が示唆される。
【0006】
２０１７年に雑誌ネイチャー（Ｓｋｒｏｔｔ， Ｚｄｅｎｅｋ， ら “Ａｌｃｏｈｏｌ－ａｂｕｓｅ ｄｒｕｇ ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ ｔａｒｇｅｔｓ ｃａｎｃｅｒ ｖｉａ ｐ９７ ｓｅｇｒｅｇａｓｅ ａｄａｐｔｏｒ ＮＰＬ４．” Ｎａｔｕｒｅ ５５２．７６８４ （２０１７）： １９４－１９９．］ ）では、その抗腫瘍活性が発表され、研究ではジスルフィラムは体内において１種類の小分子に代謝されることで、天然タンパク質ＮＰＬ４の凝集を促進してそのリガンドであるｐ９７酵素類に結合すると、この過程は腫瘍生長を促進するＮＰＬ４－ｐ９７複合体の作用の発揮を阻害し、そして癌細胞の死亡を誘導することが見出された。また、ジスルフィラムはジンクフィンガー及びリングフィンガーＥ３ユビキチンリガーゼに特異的活性があることが見出され、これらのリガーゼは癌の進展において重要な作用を果たす（Ｒ Ｋｏｎａ， Ｆ．， Ｄ． Ａ． Ｍ． Ｂ． Ｂｕａｃ， ａｎｄ Ａ． Ｍ Ｂｕｒｇｅｒ． “Ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ， ａｎｄ ｄｉｓｕｌｆｉｒａｍ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ ｎｏｖｅｌ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｔｈｅ ｕｂｉｑｕｉｔｉｎ ｐｒｏｔｅａｓｏｍｅ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｂｏｔｈ ｐｒｅｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ．” Ｃｕｒｒｅｎｔ ｃａｎｃｅｒ ｄｒｕｇ ｔａｒｇｅｔｓ １１．３ （２０１１）： ３３８－３４６．）。関連特許出願はＷＯ２０１７０７７３３６Ａ１である。
既存技術では、上記ジスルフィラムがコロナウイルスによる関連疾患の治療に使用できるものがまだ存在しない。
既存技術では、上記ジスルフィラムがコロナウイルスによる関連疾患の治療に使用できるものがまだ存在しない。
【0007】
［発明の開示］
本発明の解決しようとする技術課題は、既存技術に有効にコロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物がまだ存在しないという欠陥に対するもので、抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用を提供し、具体的に、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用に関する。
本発明の解決しようとする技術課題は、既存技術に有効にコロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物がまだ存在しないという欠陥に対するもので、抗コロナウイルスにおけるジスルフィラムの使用を提供し、具体的に、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラムの使用に関する。
【0008】
本発明は、主に以下の技術的解決策によって上記技術課題を解決する。
本発明は、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラム（ＣＡＳ番号：９７－７７－８）の使用を提供する。
本発明は、コロナウイルスによる疾患を治療及び／又は予防する薬物の製造におけるジスルフィラム（ＣＡＳ番号：９７－７７－８）の使用を提供する。
【0009】
好ましくは、前記の疾患は哺乳動物又はトリ類の疾患である。
好ましくは、前記の哺乳動物はヒト、ブタ及びネコを含む。
本発明に記載のコロナウイルスは、定義が本分野で熟知されるもので、系統分類においてニドウイルス目（Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ）コロナウイルス科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）オルトコロナウイルス亜科（Ｏｒｔｈｏｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｎａｅ）に属する。コロナウイルスはエンベロープ（ｅｎｖｅｌｏｐｅ）を有し、ゲノムが一本鎖のセンス鎖のＲＮＡウイルスで、自然界に幅広く存在する一種類のウイルスである。
好ましくは、前記の哺乳動物はヒト、ブタ及びネコを含む。
本発明に記載のコロナウイルスは、定義が本分野で熟知されるもので、系統分類においてニドウイルス目（Ｎｉｄｏｖｉｒａｌｅｓ）コロナウイルス科（Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｄａｅ）オルトコロナウイルス亜科（Ｏｒｔｈｏｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｎａｅ）に属する。コロナウイルスはエンベロープ（ｅｎｖｅｌｏｐｅ）を有し、ゲノムが一本鎖のセンス鎖のＲＮＡウイルスで、自然界に幅広く存在する一種類のウイルスである。
【0010】
本発明の目的は、コロナウイルス感染による疾患の潜在的な治療プランを提供することである。本発明に記載のコロナウイルスは、好ましくはオルトコロナウイルス亜科（Ｏｒｔｈｏｃｏｒｏｎａｖｉｒｉｎａｅ）に属し、より好ましくはアルファコロナウイルス属、ベータコロナウイルス属、ガンマコロナウイルス属又はデルタコロナウイルス属に属する。
【0011】
本発明の一つの好適な実施例において、前記のジスルフィラムはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ベータコロナウイルス属）による疾患の治療以外、ほかのコロナウイルスのＳＡＲＳ－ＣｏＶ（ベータコロナウイルス属）やＭＥＲＳ－ＣｏＶなどによる重要な伝染病を治療することもでき、通常の風邪薬として、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１（Ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＨＫＵ１；ベータコロナウイルス属）、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３（Ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＮＬ６３；アルファコロナウイルス属）、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３（Ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ＯＣ４３）及びＨＣｏＶ－２２９Ｅ（Ｈｕｍａｎ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ２２Ｅ；アルファコロナウイルス属）などのコロナウイルスによる疾患を治療することもでき、さらに、獣医薬として、ブタ伝染性胃腸炎ウイルス（Ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｂｌｅ ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ、ＴＧＥＶ；アルファコロナウイルス属）、ブタ流行性下痢ウイルス（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｅｐｉｄｅｍｉｃ ｄｉａｒｒｈｅａ ｖｉｒｕｓ、ＰＥＤＶ；アルファコロナウイルス属）、ブタデルタコロナウイルス（Ｐｏｒｃｉｎｅ ｄｅｌｔａ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ、ＰＤＣｏＶ；デルタコロナウイルス属）、ネコ伝染性腹膜炎ウイルス（Ｆｅｌｉｎｅ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｐｅｒｉｔｏｎｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ、ＦＩＰＶ；アルファコロナウイルス属）、トリ伝染性気管支炎ウイルス（Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ、ＩＢＶ；ガンマコロナウイルス属）などの動物疾患を治療することもできる。
【0012】
そのため、本発明に記載のコロナウイルスは好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＴＧＥＶ、ＰＥＤＶ、ＰＤＣｏＶ、ＦＩＰＶ又はＩＢＶから選ばれる。
【0013】
ある形態において、本発明のジスルフィラム又はその薬学的に許容される塩はそれを含む薬物組成物の様態で存在し、好ましくは、前記薬物組成物はジスルフィラム及び／又はその薬学的に許容される塩を前記薬物組成物の唯一の活性成分とし、ならびに／あるいは、前記薬物組成物は、さらに、薬学的に許容される担体、例えば薬学的に許容される薬用助剤を含む。
【0014】
ある形態において、本発明のジスルフィラム又はその薬学的に許容される塩はそれを含むキットの様態で存在し、前記キットは、さらに、コロナウイルスに関連する疾患を治療する薬物及び／又はほかのウイルスによる疾患を治療する薬物を含む。
【0015】
本発明に係るジスルフィラムを活性生物とする薬物組成物は、いずれも本分野で公知の方法によって製造することができる。本発明の化合物をヒト又は動物の使用に適する任意の剤形にすることによって製造することができる。本発明の化合物のその薬物組成物における重量含有量が、通常、０．１～９９．０％である。
【0016】
前記の薬学的に許容される担体は本分野の通常の担体で、前記の担体は任意の適切な生理学的に又は薬学的に許容される薬物助剤でもよい。前記の薬物助剤は本分野の通常の薬物助剤で、好ましくは薬学的に許容される賦形剤、充填剤又は希釈剤などを含む。より好ましくは、前記の薬物組成物は０．０１～９９．９９％の上記タンパク質及び／又は上記の抗体薬物複合体と、０．０１～９９．９９％の薬用担体とを含み、前記百分率は前記薬物組成物で占める質量百分率である。
【0017】
本発明におけるジスルフィラム又はそれを含む薬物組成物は、単位投与量の形で投与してもよく、投与経路は腸管又は非腸管であり、例えば経口、静脈注射、筋肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、目、肺と気道、皮膚、膣、直腸などでもよい。
【0018】
投与剤形は液体剤形、固体剤形又は半固体剤形でもよい。液体剤形は溶液剤（真溶液（ｔｒｕｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ）やコロイド溶液を含む）、乳剤（ｏ／ｗ型、ｗ／ｏ型及び多重エマルション）、懸濁剤、注射剤（水注射剤、粉末注射剤及び輸液剤を含む）、点眼剤、点鼻剤、洗剤及び擦剤などでもよい。固体剤形は錠剤（一般的な錠、腸衣錠、トローチ錠、分散錠、咀嚼錠、泡錠、口腔内崩壊錠）、カプセル錠（硬カプセル、軟カプセル、腸衣カプセル）、顆粒剤、散剤、マイクロペレット、滴丸、坐剤、膜剤、粘着シート、エアゾール（粉末吸入）剤、噴霧剤などでもよい。半固体剤形は軟膏剤、ゲル剤、ペースト剤などでもよい。
【0019】
本発明におけるジスルフィラムは通常の製剤にも、徐放製剤、放出制御製剤、標的製剤及び様々な微粒子投与システムにも製造することができる。
用語「薬学的に許容される」とは、塩、溶媒、助剤などが一般的に無毒で、安全で、かつ患者の使用に適することである。前記の「患者」は好ましくは哺乳動物で、より好ましくはヒトである。
用語「薬学的に許容される」とは、塩、溶媒、助剤などが一般的に無毒で、安全で、かつ患者の使用に適することである。前記の「患者」は好ましくは哺乳動物で、より好ましくはヒトである。
【0020】
用語「薬学的許容される塩」とは本発明におけるジスルフィラムと比較的に無毒の、薬学的に許容される酸又は塩基で製造される塩のことである。
本分野の常識に合うことを前提に、上記各好適な条件を任意に組み合わせれば、本発明の各好適な実例が得られる。
本分野の常識に合うことを前提に、上記各好適な条件を任意に組み合わせれば、本発明の各好適な実例が得られる。
【0021】
本発明で用いられる試薬及び原料はいずれも市販品として得られる。
本発明の積極的な進歩効果は以下の通りである。
本発明は、体外酵素活性実験により、ジスルフィラムが好適にコロナウイルスにおける主要プロテアーゼの活性を阻害することができ、既存技術にコロナウイルスによる疾患を治療するものが欠けているという不足を補うことが見出された。ジスルフィラムをさらに研究し、改造することにより応用することができる。
本発明の積極的な進歩効果は以下の通りである。
本発明は、体外酵素活性実験により、ジスルフィラムが好適にコロナウイルスにおける主要プロテアーゼの活性を阻害することができ、既存技術にコロナウイルスによる疾患を治療するものが欠けているという不足を補うことが見出された。ジスルフィラムをさらに研究し、改造することにより応用することができる。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【発明を実施するための形態】
【0023】
以下、実施例の形によってさらに本発明を説明するが、これによって本発明を記載された実施例の範囲内に限定するわけではない。以下の実施例において、具体的な条件が記載されていない実験方法は、通常の方法及び条件、あるいは商品の説明書に従って選ばれた。
【0024】
［実施例１］
異なる化合物ライブラリーからハイスループットのスクリーニングを行い、得られたジスルフィラムはいずれも新型コロナウイルスの主要プロテアーゼに良い阻害効果がある。酵素活性実験の条件は、具体的に以下の通りである。
異なる化合物ライブラリーからハイスループットのスクリーニングを行い、得られたジスルフィラムはいずれも新型コロナウイルスの主要プロテアーゼに良い阻害効果がある。酵素活性実験の条件は、具体的に以下の通りである。
【0025】
酵素活性実験の蛍光基質：ＭＣＡ－ＡＶＬＱＳＧＦＲ－Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）－Ｌｙｓ－ＮＨ２であり、当該蛍光基質の励起波長及び放出波長がそれぞれ３２０ｎｍ及び４０５ｎｍである。
酵素活性反応緩衝液は５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ７．３）、１ｍＭ ＥＤＴＡであり、酵素活性反応温度は３０℃である。反応はプロテアーゼの添加によって開始し、プロテアーゼ反応の最終濃度が０．２μＭであり、基質濃度が２０μＭであり、ジスルフィラム濃度が１．５μＭである（Ｘｕｅ Ｘ， Ｙａｎｇ Ｈ， Ｓｈｅｎ Ｗ， ら Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｈｅｎｔｉｃ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ Ｍｐｒｏ ｗｉｔｈ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ： ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｔａｇ－ｃｌｅａｖａｇｅ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｖｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ， ２００７， ３６６（３）： ９６５－９７５．）。
酵素活性反応緩衝液は５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ７．３）、１ｍＭ ＥＤＴＡであり、酵素活性反応温度は３０℃である。反応はプロテアーゼの添加によって開始し、プロテアーゼ反応の最終濃度が０．２μＭであり、基質濃度が２０μＭであり、ジスルフィラム濃度が１．５μＭである（Ｘｕｅ Ｘ， Ｙａｎｇ Ｈ， Ｓｈｅｎ Ｗ， ら Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｈｅｎｔｉｃ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ Ｍｐｒｏ ｗｉｔｈ ｅｎｈａｎｃｅｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ： ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ａｓ ａ ｎｏｖｅｌ ｔａｇ－ｃｌｅａｖａｇｅ ｅｎｄｏｐｅｐｔｉｄａｓｅ ｆｏｒ ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｖｅｒｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］． Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ， ２００７， ３６６（３）： ９６５－９７５．）。
【0026】
使用される陽性対照はＮ３阻害剤であり、有効にコロナウイルスの主要プロテアーゼを不活性化させることができ（楊海涛， 謝衛青， Ｘｉａｏｙｕ Ｘ ， ら Ｄｅｓｉｇｎ ｏｆ ｗｉｄｅ－ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｍａｉｎ ｐｒｏｔｅａｓｅｓ［Ｊ］． 生命有機化学， ２００５， ３（１０）：１７４２－１７５２．）、構造式が以下で示される。
【0027】
【化1】
【0028】
図１から、ジスルフィラムの酵素活性実験曲線は、明らかに陰性対照と異なり、コロナウイルスの主要プロテアーゼに明らかな阻害活性を有することがわかる。
【0029】
［実施例２］
酵素活性阻害曲線測定に使用される蛍光基質：ＭＣＡ－ＡＶＬＱＳＧＦＲ－Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）－Ｌｙｓ－ＮＨ２であり、当該蛍光基質の励起波長及び放出波長がそれぞれ３２０ｎｍ及び４０５ｎｍである。
酵素活性阻害曲線測定に使用される蛍光基質：ＭＣＡ－ＡＶＬＱＳＧＦＲ－Ｌｙｓ（Ｄｎｐ）－Ｌｙｓ－ＮＨ２であり、当該蛍光基質の励起波長及び放出波長がそれぞれ３２０ｎｍ及び４０５ｎｍである。
【0030】
酵素活性阻害曲線測定の緩衝液は５０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ ７．３）、１ｍＭ ＥＤＴＡで、反応温度は３０℃である。反応はプロテアーゼの添加によって開始し、プロテアーゼ反応の最終濃度が０．２μＭであり、基質濃度が２０μＭであり、１１個の異なる濃度のジスルフィラムで測定した結果、ＩＣ５０値が９．３５μＭであった（図２）（Ｊｉｎ Ｚ ， Ｄｕ Ｘ ， Ｘｕ Ｙ ， ら Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍｐｒｏ ｆｒｏｍ ＣＯＶＩＤ－１９ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ， ２０２０， ５８２（７８１１）：１－９．）。
【0031】
［実施例３］
体外細胞抗ウイルス実験でｑＲＴ－ＰＣＲの方法によって検出した。Ｖｅｒｏ細胞を９６ウェルプレートに接種し、３７℃で２０～２４ｈインキュベートした後、１０ μＭのジスルフィラムで細胞を１ｈ処理した。その後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した細胞を２時間入れたところ、ＭＯＩ（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、感染多重度）が０．０１であった。その後、ウイルス及び薬物混合物を除去し、洗浄後、薬物を含む新鮮な培地でさらに細胞を培養した。７２時間培養した後、ＱＩＡａｍｐ ｖｉｒａｌ ＲＮＡ ｍｉｎｉ ｋｉｔ （Ｑｉａｇｅｎ）で培養上清液からウイルスＲＮＡを抽出し、最後にｑＲＴ－ＰＣＲによって検出した（Ｊｉｎ Ｚ ， Ｄｕ Ｘ ， Ｘｕ Ｙ ， ら Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍｐｒｏ ｆｒｏｍ ＣＯＶＩＤ－１９ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ， ２０２０， ５８２（７８１１）：１－９．）。
体外細胞抗ウイルス実験でｑＲＴ－ＰＣＲの方法によって検出した。Ｖｅｒｏ細胞を９６ウェルプレートに接種し、３７℃で２０～２４ｈインキュベートした後、１０ μＭのジスルフィラムで細胞を１ｈ処理した。その後、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に感染した細胞を２時間入れたところ、ＭＯＩ（ｍｕｌｔｉｐｌｉｃｉｔｙ ｏｆ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ、感染多重度）が０．０１であった。その後、ウイルス及び薬物混合物を除去し、洗浄後、薬物を含む新鮮な培地でさらに細胞を培養した。７２時間培養した後、ＱＩＡａｍｐ ｖｉｒａｌ ＲＮＡ ｍｉｎｉ ｋｉｔ （Ｑｉａｇｅｎ）で培養上清液からウイルスＲＮＡを抽出し、最後にｑＲＴ－ＰＣＲによって検出した（Ｊｉｎ Ｚ ， Ｄｕ Ｘ ， Ｘｕ Ｙ ， ら Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｍｐｒｏ ｆｒｏｍ ＣＯＶＩＤ－１９ ｖｉｒｕｓ ａｎｄ ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｉｔｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］． Ｎａｔｕｒｅ， ２０２０， ５８２（７８１１）：１－９．）。
【0032】
体外細胞抗ウイルス実験により、ジスルフィラムは新型コロナウイルスの複製を阻害することが見出されたため、ジスルフィラムはコロナウイルスによる関連疾患の治療に使用することができる。
以上、本発明の具体的な実施形態を記述したが、当業者にとって、これらは例示の説明だけで、本発明の原理と実質に反しないという前提下において、これらの実施形態に対して様々な変更や修正をすることができる。そのため、本発明の保護範囲は添付の請求の範囲によって限定される。
以上、本発明の具体的な実施形態を記述したが、当業者にとって、これらは例示の説明だけで、本発明の原理と実質に反しないという前提下において、これらの実施形態に対して様々な変更や修正をすることができる。そのため、本発明の保護範囲は添付の請求の範囲によって限定される。
【図1】
【図2】
【図3】
【国際調査報告】