特表 2023-515478 抗ＴＲＥＭ２抗体の使用方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-13

(54)【発明の名称】抗ＴＲＥＭ２抗体の使用方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20230406BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 25/04 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 13/10 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 1/00 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 25/28 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 25/24 20060101ALI20230406BHJP

   A61P 25/22 20060101ALI20230406BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20230406BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

A61P25/00

A61P25/04

A61P21/00

A61P13/10

A61P1/00

A61P25/28

A61P25/24

A61P25/22

C07K16/28 ZNA

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022549828

(86)(22)【出願日】2021-02-23

(85)【翻訳文提出日】2022-10-17

(86)【国際出願番号】 US2021019260

(87)【国際公開番号】W WO2021173565

(87)【国際公開日】2021-09-02

(31)【優先権主張番号】62/980,929

(32)【優先日】2020-02-24

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】517041235

【氏名又は名称】アレクトル エルエルシー

(71)【出願人】

【識別番号】597025806

【氏名又は名称】ワシントン・ユニバーシティ

【氏名又は名称原語表記】Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ

(74)【代理人】

【識別番号】110002077

【氏名又は名称】園田・小林弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】シグナレラ， フランセスカ

(72)【発明者】

【氏名】フィリペジョ， ファビア

(72)【発明者】

【氏名】ボールマン， ブライアン

(72)【発明者】

【氏名】ローゼンタール， アーノン

(72)【発明者】

【氏名】シュワーブ， ティナ

(72)【発明者】

【氏名】タッシ， イラーリア

(72)【発明者】

【氏名】ピッチョ， ローラ

【テーマコード（参考）】

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085BB33

4C085BB36

4C085BB37

4C085BB41

4C085BB43

4C085CC23

4C085EE01

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA75

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA50

(57)【要約】

本開示は概して、疾患を予防する、そのリスクを低下させる、またはそれを処置することを必要とする個体において疾患を予防する、そのリスクを低下させる、またはそれを処置する際の抗ＴＲＥＭ２抗体の使用を対象とする。
【選択図】図５Ｃ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を処置する、または予防するための方法であって、それを必要とする個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合するアゴニスト抗体を投与することを含む前記方法。

【請求項2】

前記抗体が前記個体の前記ＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を促進する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を有する個体において、１つまたは複数の脱髄病変の再有髄化を促進するための方法であって、前記個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合するアゴニスト抗体を投与することを含む前記方法。

【請求項4】

前記ＴＲＥＭ２タンパク質が哺乳動物タンパク質またはヒトタンパク質である、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項5】

前記ＴＲＥＭ２タンパク質が、野生型タンパク質、天然に存在するバリアント、または疾患バリアントである、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記抗体が、
ａ． ＤＡＰ１２に結合するＴＲＥＭ２；
ｂ． ＤＡＰ１２リン酸化；
ｃ． Ｓｙｋキナーゼの活性化；
ｄ． ＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体へのＳｙｋの動員；及び
ｅ． １つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇であって、任意選択で、前記１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子は活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む、前記上昇
からなる群から選択される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記抗体が、ミエリンの存在下で誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

ミエリンの存在下で誘導される前記１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性が、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇を含み、任意選択で、前記１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子が活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記抗体が、前記個体の前記ＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変へのオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の動員を促進する、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

前記ＯＰＣがＰＤＧＦＲα陽性である、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記抗体が、前記個体の前記ＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）の増加を促進する、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項12】

前記抗体が、前記個体の前記ＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣの分化を促進する、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

前記成熟ＯＬがＯＬＩＧ２及び／またはＣＮＰアーゼ陽性である、請求項１１または請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記抗体が、前記個体の前記ＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルの上昇を促進する、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記リン酸化ニューロフィラメントがＳＭＩ－３１陽性である、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記抗体が、前記個体において、１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリのクリアランスを促進する、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記抗体が、マウス抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、コンジュゲート抗体、またはキメラ抗体である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記抗体がモノクローナル抗体である、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

前記抗体が、配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；または配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つまたは複数のアミノ酸に結合する、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記抗体が、配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７からなる群から選択される１つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７からなる群から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物ＴＲＥＭ２タンパク質上の１つもしくは複数のアミノ酸残基に結合する、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記抗体が、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域ならびにＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ１が、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＱＷＭＮ（配列番号３４）を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ２が、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＧＧＤＴＮＹＡＧＫＦＱＧ（配列番号３５）を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ３が、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＱＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３１）を含み、前記ＨＶＲ－Ｌ１が、アミノ酸配列ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＹＴＹＬＨ（配列番号４１）を含み、前記ＨＶＲ－Ｌ２が、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号３３）を含み、かつ前記ＨＶＲ－Ｌ３が、アミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記抗体が、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記抗体が、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域ならびにＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ１が、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＤＷＭＮ（配列番号３６）を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ２が、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＥＧＤＴＮＹＡＲＫＦＨＧ（配列番号３７）を含み、前記ＨＶＲ－Ｈ３が、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＫＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３８）を含み、前記ＨＶＲ－Ｌ１が、アミノ酸配列ＲＴＳＱＳＬＶＨＳＮＡＹＴＹＬＨ（配列番号３９）を含み、前記ＨＶＲ－Ｌ２が、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＶＳ（配列番号４０）を含み、かつ前記ＨＶＲ－Ｌ３が、アミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記抗体が、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む、請求項１～２０または２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記抗体がフラグメントであり、かつ前記フラグメントが、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ＦｖまたはｓｃＦｖフラグメントである、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記抗体が、ＩｇＧクラス、ＩｇＭクラス、またはＩｇＡクラスのものである、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

前記抗体が、前記ＩｇＧクラスのものであり、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプを有する、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

前記抗体が、ヒトＩｇＧ１アイソタイプを有し、かつＦｃ領域において残基位置Ｐ３３１Ｓ及びＥ４３０Ｇでアミノ酸置換を含み、前記残基のナンバリングが、ＥＵナンバリングによる、請求項２６に記載の方法。

【請求項29】

前記抗体が、
ａ． 配列番号４３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖；または
ｂ． 配列番号４４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

前記抗体が、
ａ． 配列番号４５のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖；または
ｂ． 配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖
を含む、請求項１～２０または２３～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記個体がヒトである、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記個体が機能性ＴＲＥＭ２遺伝子の少なくとも１つのコピーを含む、請求項１～３１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記個体が、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異についてヘテロ接合型である、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記個体が、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異についてホモ接合型である。請求項３２に記載の方法。

【請求項35】

前記個体が、ミエリン損傷、前記ＣＮＳにおける１つまたは複数の脱髄病変、前記ＣＮＳにおける炎症、前記ＣＮＳにおける１つまたは複数のプラーク、ミエリン鞘の喪失、軸索損傷、ＯＰＣの減少、ＯＬの減少、ミエリンデブリクリアランスの減少、軸索バリコシティ、軸索スフェロイド、グリオーシス、自家蛍光脂質を持ったマクロファージ、軸索破壊、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される疾患特徴を有するか、またはそのリスクがある、請求項１～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

前記個体が、前記ＣＮＳにおける軸索損傷及び／または１つもしくは複数の脱髄病変を有するか、あるいはそれらを有するリスクがある、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記ＣＮＳにおける前記軸索損傷及び／または前記１つもしくは複数の脱髄病変が、前記ＣＮＳの白質、灰白質、または脳梁に存在する、請求項３６に記載の方法。

【請求項38】

前記個体が、感覚の変化、穿痛、しびれ、筋力低下、クローヌス、筋痙攣、移動困難、協調困難、平衡困難、発語障害、嚥下障害、視覚障害、疲労、急性疼痛、慢性疼痛、膀胱障害、腸障害、認知障害、うつ病、不安定な気分、Ｕｈｔｈｏｆｆ現象、レルミット徴候、及びそれらの任意の組合せからなる群から選択される症状を有するか、またはそれらを有するリスクがある、請求項１～３７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

前記脱髄疾患または障害が多発性硬化症である、請求項１～３８のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年２月２４日出願の米国仮特許出願第６２／９８０，９２９号の利益を主張し、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。

【0002】

本開示の分野
本開示は、抗ＴＲＥＭ２抗体の治療的使用に関する。

【0003】

ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出
ＡＳＣＩＩテキストファイルでの次の提出物の内容は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる：配列表のコンピュータ可読形式（ＣＲＦ）（ファイル名：７３５０２２００３４４０ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２１年２月２３日、サイズ：１０８ＫＢ）。

【背景技術】

【0004】

多発性硬化症（ＭＳ）は、その病因が炎症性及び神経変性プロセスに関係する中枢神経系（ＣＮＳ）の慢性脱髄疾患である。ＭＳにおける病理学的ホールマークは、白質及び灰白質における脱髄病変の形成である（Ｌａｓｓｍａｎｎ，Ｂｒｕｃｋ ｅｔ ａｌ．２００７）。脱髄中のオリゴデンドロサイト（ＯＬ）喪失の後には、成熟ＯＬへと分化するオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）によって主に持続される再有髄化が続く。ＭＳでは、ＯＬの生成不全が、脱髄と再有髄化との間の不均衡をもたらす。ＭＳにおける再有髄化の不足は最終的に、神経身体障害として臨床的に現れる軸索損傷をもたらす（Ｄｕｌａｍｅａ（２０１７）Ａｄｖ Ｅｘｐ Ｍｅｄ Ｂｉｏｌ，９５８：９１－１２７）。

【0005】

常在性ミクログリア細胞及び浸潤性単球／マクロファージが、病変形成の相に応じて、脱髄病変において二重の役割と果たすと考えられている。一方では、それらは、ミエリン損傷及び病変拡大に寄与し得るようであり；他方では、ＯＬの生成を支持して、ミエリンデブリをクリアランスし、炎症を軽減させ、かつ再生因子を分泌することによってそのような病変の再有髄化を促進し得る（Ｋｏｔｔｅｒ，Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２００６；Ｌａｍｐｒｏｎ，Ｌａｒｏｃｈｅｌｌｅ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｆｒａｎｋｌｉｎ ａｎｄ Ｆｒｅｎｃｈ－Ｃｏｎｓｔａｎｔ ２０１７；Ｖｏｅｔ，Ｐｒｉｎｚ ｅｔ ａｌ．２０１９）。ＴＲＥＭ２は、ＣＮＳにおけるミクログリア機能の重要な調節因子である（Ｃａｎｔｏｎｉ，Ｂｏｌｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｐｏｌｉａｎｉ，Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｋｉｉａｌａｉｎｅｎ ｅｔ ａｌ．，２００５；Ｓｃｈｍｉｄ ｅｔ ａｌ．，２００２）。ＴＲＥＭ２における変異は、脳におけるミエリン及び軸索の喪失によって特徴づけられる希少な遺伝性障害である那須－ハコラ病（ＮＨＤ）（Ｋｌｕｎｅｍａｎｎ，Ｒｉｄｈａ ｅｔ ａｌ．２００５）、アルツハイマー病、前頭側頭型認知症、パーキンソン病、及び筋萎縮性側索硬化症（Ｇｕｅｒｒｅｉｒｏ，Ｗｏｊｔａｓ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｊｏｎｓｓｏｎ，Ｓｔｅｆａｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｒａｙａｐｒｏｌｕ，Ｍｕｌｌｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｃａｄｙ，Ｋｏｖａｌ ｅｔ ａｌ．２０１４）などの神経変性疾患と関連している。

【0006】

ＭＳなどの脱髄疾患のための現行の処置は、炎症性疾患成分を標的としており、それによって、発作頻度を減少させる。しかしながら、ミエリンを再生して、疾患進行を止めるために利用可能な治療は現在存在しない。したがって、ＭＳ及び他の脱髄疾患において再有髄化を促進する処置が、当技術分野で必要とされている。

【0007】

特許出願及び刊行物を含む、本明細書に引用される全ての参考文献は、その全体が参照によって本明細書に組み込まれる。

【発明の概要】

【0008】

本開示は概して、脱髄疾患を有する個体を処置する方法であって、前記個体に、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合する抗体を投与することを含み、その際、前記抗体がアゴニストである前記方法を対象とする。

【0009】

一態様では、中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を処置する、または予防するための方法であって、それを必要とする個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合するアゴニスト抗体を投与することを含む、前記方法を本明細書において提供する。一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を促進する。

【0010】

別の態様では、中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を有する個体において、１つまたは複数の脱髄病変の再有髄化を促進するための方法であって、前記個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合するアゴニスト抗体を投与することを含む前記方法を本明細書において提供する。

【0011】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２タンパク質は、哺乳動物タンパク質またはヒトタンパク質である。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２タンパク質は、野生型タンパク質、天然に存在するバリアント、または疾患バリアントである。

【0012】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、（ａ）ＤＡＰ１２へのＴＲＥＭ２結合；（ｂ）ＤＡＰ１２リン酸化；（ｃ）Ｓｙｋキナーゼの活性化；（ｄ）ＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体へのＳｙｋの動員；または（ｅ）１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇（任意選択で、その際、前記１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子は、活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む）から選択される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する。

【0013】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、ミエリンの存在下で誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、ミエリンの存在下で誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇を含み、任意選択で、その際、前記１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子は、活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む。

【0014】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変へのオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の動員を促進する。一部の実施形態では、ＯＰＣは、ＰＤＧＦＲα陽性である。

【0015】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）の増加を促進する。一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）への分化を促進する。一部の実施形態では、成熟ＯＬは、ＯＬＩＧ２及び／またはＣＮＰアーゼ陽性である。

【0016】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルの上昇を促進する。一部の実施形態では、リン酸化ニューロフィラメントは、ＳＭＩ－３１陽性である。

【0017】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、個体において、１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリのクリアランスを促進する。

【0018】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、マウス抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、コンジュゲート抗体、またはキメラ抗体である。一部の実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；または配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、もしくはＨ１５７、または配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、もしくはＨ１５７から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物ＴＲＥＭ２タンパク質上の１つまたは複数のアミノ酸残基から選択される１つまたは複数のアミノ酸残基に結合する。

【0019】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域ならびにＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含み、その際、ＨＶＲ－Ｈ１は、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＱＷＭＮ（配列番号３４）を含み、ＨＶＲ－Ｈ２は、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＧＧＤＴＮＹＡＧＫＦＱＧ（配列番号３５）を含み、ＨＶＲ－Ｈ３は、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＱＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３１）を含み、ＨＶＲ－Ｌ１は、アミノ酸配列ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＹＴＹＬＨ（配列番号４１）を含み、ＨＶＲ－Ｌ２は、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号３３）を含み、かつＨＶＲ－Ｌ３は、アミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号４３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖；または（ｂ）配列番号４４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0020】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、ＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変領域ならびにＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変領域を含み、その際、ＨＶＲ－Ｈ１は、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＤＷＭＮ（配列番号３６）を含み、ＨＶＲ－Ｈ２は、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＥＧＤＴＮＹＡＲＫＦＨＧ（配列番号３７）を含み、ＨＶＲ－Ｈ３は、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＫＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３８）を含み、ＨＶＲ－Ｌ１は、アミノ酸配列ＲＴＳＱＳＬＶＨＳＮＡＹＴＹＬＨ（配列番号３９）を含み、ＨＶＲ－Ｌ２は、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＶＳ（配列番号４０）を含み、かつＨＶＲ－Ｌ３は、アミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、（ａ）配列番号４５のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖；または（ｂ）配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0021】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、抗体は、フラグメントであり、前記フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ＦｖまたはｓｃＦｖフラグメントである。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラス、ＩｇＭクラス、またはＩｇＡクラスのものである。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラスのものであり、かつＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプを有する。一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ１アイソタイプを有し、かつＦｃ領域において残基位置Ｐ３３１Ｓ及びＥ４３０Ｇでアミノ酸置換を含み、その際、残基のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる。

【0022】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、個体はヒトである。一部の実施形態では、個体は、機能性ＴＲＥＭ２遺伝子の少なくとも１つのコピーを含む。一部の実施形態では、個体は、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異についてヘテロ接合型である。一部の実施形態では、個体は、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異についてホモ接合型である。

【0023】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、個体は、ミエリン損傷、ＣＮＳにおける１つまたは複数の脱髄病変、ＣＮＳにおける炎症、ＣＮＳにおける１つまたは複数のプラーク、ミエリン鞘の喪失、軸索損傷、ＯＰＣの減少、ＯＬの減少、ミエリンデブリクリアランスの減少、軸索バリコシティ、軸索スフェロイド、グリオーシス、自家蛍光脂質を持ったマクロファージ、軸索破壊、またはそれらの任意の組合せから選択される疾患特徴を有するか、またはそのリスクがある。一部の実施形態では、個体は、ＣＮＳにおいて軸索損傷及び／または１つまたは複数の脱髄病変を有するか、またはそれらを有するリスクがある。一部の実施形態では、ＣＮＳにおける軸索損傷及び／または１つまたは複数の脱髄病変は、ＣＮＳの白質、灰白質、または脳梁に存在する。

【0024】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、個体は、感覚の変化、穿痛、しびれ、筋力低下、クローヌス、筋痙攣、移動困難、協調困難、平衡困難、発語障害、嚥下障害、視覚障害、疲労、急性疼痛、慢性疼痛、膀胱障害、腸障害、認知障害、うつ病、不安定な気分、Ｕｈｔｈｏｆｆ現象、レルミット徴候、またはそれらの任意の組合せから選択される症状を有するか、またはそれらを有するリスクがある。

【0025】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、脱髄疾患または障害は、多発性硬化症、視神経炎、視神経脊髄炎（デビック病）、横断性脊髄炎、急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、または副腎脊髄ニューロパシーである。一部の実施形態では、脱髄疾患または障害は多発性硬化症である。

【0026】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号５３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号５６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0027】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号６４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0028】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号７０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号７１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号７２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号７３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0029】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１６０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１６１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１５７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１５８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0030】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１６７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１６８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0031】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１７４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0032】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0033】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１８５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0034】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持している。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体４２Ｅ８．Ｈ１または配列番号５８のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体４２Ｅ８．Ｈ１または配列番号５９のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号５９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0035】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＲＳ９．Ｆ６または配列番号６６のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＲＳ９．Ｆ６または配列番号６７のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号６６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号６７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0036】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号７４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、配列番号７４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、配列番号７４のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号７５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、配列番号７５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、配列番号７５のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号７４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号７５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0037】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体６Ｅ７または配列番号１４９のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体６Ｅ７または配列番号１４８のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１４９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0038】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体５Ｅ３または配列番号１５１のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体５Ｅ３または配列番号１５０のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0039】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２４Ｇ６または配列番号１５３のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２４Ｇ６または配列番号１５２のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0040】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２５Ｆ１２または配列番号１５５のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２５Ｆ１２または配列番号１５４のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0041】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２または配列番号１６５のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２または配列番号１６４のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１６５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0042】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）または配列番号１６３のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）または配列番号１６２のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0043】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号３５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号４１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号３３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。

【0044】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号３７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。

【0045】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－４７または配列番号２８のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－４７または配列番号２９のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0046】

先行実施形態のいずれかと組み合わせることができる一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－５８または配列番号２７のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号３０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号３０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－５８または配列番号３０のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0047】

本明細書に記載の様々な実施形態の特性の１つ、いくつか、または全部を組み合わせて、本発明の他の実施形態を形成してもよいことは理解されるべきである。本発明のこれら及び他の態様は、当業者には明らかとなるであろう。次の詳細な説明によって、本発明のこれら及び他の実施形態をさらに記載する。

【0048】

本特許または本出願ファイルは、カラーで仕上げられた少なくとも１つの図面を含む。カラー図面（複数可）を備えた本特許公報または本公開特許公報の複製は、請求及び必要な手数料の納付により、庁によって提供されるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0049】

【図1A】クプリゾン（ＣＰＺ）誘導中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^－／－及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスを分析する実験の結果を示している。ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^－／－及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁の代表的な免疫組織化学画像を示している。抗分解ミエリン塩基性タンパク質（ｄＭＢＰ）抗体を使用して、ミエリンデブリの蓄積量を決定し；抗Ｉｂａ１抗体を使用して、Ｉｂａ１^＋ミクログリアを撮像し；４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール（ＤＡＰＩ）を使用して、ＤＮＡを撮像した。

【図1B】クプリゾン（ＣＰＺ）誘導中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^－／－及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスを分析する実験の結果を示している。図１Ａにおいて示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのｄＭＢＰ陽性ピクセルの数として測定されたｄＭＢＰ＋染色のパーセントを示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図1C】クプリゾン（ＣＰＺ）誘導中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^－／－及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスを分析する実験の結果を示している。図１Ａにおいて示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのＩｂａ１＋細胞の数として測定されたＩｂａ１＋細胞の密度を示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図2】インビトロＴＲＥＭ２シグナル伝達に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価する免疫沈降実験の結果を示している。インビトロで架橋もしくは可溶性抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で刺激されたＴｒｅｍ２^＋／＋及びＴｒｅｍ２^－／－骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）からのＴＲＥＭ２免疫沈着物におけるＤＡＰ１２リン酸化の免疫ブロットである。ＤＡＰ１２リン酸化を、抗ホスホチロシン抗体を使用して分析した。アクチン免疫ブロットを、ローディング／インプット対照として使用した。図２では、「ｘ架橋」は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体が二次抗体と架橋されたことを示す。「可溶性」は、二次抗体との架橋が行われなかったことを示す。

【図3A】マウスＴＲＥＭ２及びＤＡＰ１２を発現し、かつＮＦＡＴプロモーター制御下のルシフェラーゼレポーター遺伝子を形質導入されたＢＷＺ細胞を使用してのインビトロＴＲＥＭ２活性アッセイの結果を示している。ＢＷＺ細胞を、表示の濃度の抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で処理した。ｙ軸は、アイソタイプ対照抗体に対する、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５によって誘導されたルミネセンス倍数を示している（対照に対する倍数）。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図3B】マウスＴＲＥＭ２及びＤＡＰ１２を発現し、かつＮＦＡＴプロモーター制御下のルシフェラーゼレポーター遺伝子を形質導入されたＢＷＺ細胞を使用してのインビトロＴＲＥＭ２活性アッセイの結果を示している。ＢＷＺ細胞を、表示の濃度のミエリンに播種し、続いて、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で処理した。ｙ軸は、アイソタイプ対照抗体に対する、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５によって誘導されたルミネセンス倍数を示している（対照に対する倍数）。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図4A】インビボＴＲＥＭ２シグナル伝達に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を分析する免疫沈降実験の結果を示している。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で処置されたＣ５７ＢＬ／６マウスから得られたチオグリコール酸誘導マクロファージからのＴＲＥＭ２の免疫沈着物におけるＤＡＰ１２リン酸化の免疫ブロットである。ＤＡＰ１２リン酸化を、抗ホスホチロシン抗体を使用して分析した。アクチン免疫ブロットをローディング／インプット対照として使用した。

【図4B】インビボＴＲＥＭ２シグナル伝達に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を分析する免疫沈降実験の結果を示している。図４Ａにおいて示されている実験の定量化を示している。棒は、正規化ホスホチロシンシグナル（すなわち、リン酸化ＤＡＰ１２）を示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図5A】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスに対する、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスにおける抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体のための投薬レジメンのダイアグラムである。ＷＫＳ＝週；ＯＮ＝有効ＣＰＺ給餌；ＯＦＦ＝ＣＰＺ給餌後；Ｄ＝日；＋３Ｄ＝ＣＰＺ中止後３日；＋７Ｄ＝ＣＰＺ中止後７日；＋１４Ｄ＝ＣＰＺ中止後１４日。アステリスクは、分析のために脳試料を収集した日を示している。「ＩＮＪ」＝抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体の注射。

【図5B】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスに対する、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図５Ａのダイアグラムのとおりに抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で処置されたＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳の代表的な免疫組織化学画像を示している。抗ｄＭＢＰ抗体を使用して、ミエリンデブリの蓄積量を決定し；ＤＡＰＩを使用して、ＤＮＡを撮像した。ＷＫ４＝ＣＰＺ給餌後４週間；ＷＫ４＋３Ｄ＝ＣＰＺ中止後３日；ＷＫ４＋７Ｄ＝ＣＰＺ中止後７日；ＷＫ４＋１４Ｄ＝ＣＰＺ中止後１４日。

【図5C】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるミエリンデブリクリアランスに対する、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図５Ａ～５Ｂに示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのｄＭＢＰ陽性ピクセルの数として測定された、表示の時点でのｄＭＢＰ＋染色のパーセントを表示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。ＷＫ４＝ＣＰＺ給餌後４週間；ＷＫ４＋３Ｄ＝ＣＰＺ中止後３日；ＷＫ４＋７Ｄ＝ＣＰＺ中止後７日；ＷＫ４＋１４Ｄ＝ＣＰＺ中止後１４日。

【図6A】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における、脱髄病変へのオリゴデンドロサイト前駆体細胞（ＯＰＣ）の動員に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図５Ａにおけるダイアグラムのとおりに抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体を投与されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるＰＤＧＦＲαの代表的な免疫組織化学画像を示している。図６Ａに示されている画像は、ＣＰＺ中止から３日後（ＷＫ４＋３Ｄ）及び７日後（ＷＫ４＋７Ｄ）に採取された脳試料からのものである。ＤＡＰＩを使用して、ＤＮＡを撮像した。

【図6B】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における、脱髄病変へのオリゴデンドロサイト前駆体細胞（ＯＰＣ）の動員に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図６Ａに示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのＰＤＧＦＲα陽性細胞の数として測定された、表示の時点でのＰＤＧＦＲα^＋細胞の密度を表示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図7A】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における、成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣ分化に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図７Ａは、図５Ａにおけるダイアグラムのとおりに抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体を投与されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるＯＬＩＧ２及びＣＮＰアーゼの代表的な免疫組織化学画像を示している。図７Ａに示されている画像は、ＣＰＺ中止から３日後（ＷＫ４＋３Ｄ）に採取された脳試料からのものである。ＤＡＰＩを使用して、ＤＮＡを撮像した。

【図7B】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における、成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣ分化に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。ＣＰＺ中止から３日後（ＷＫ４＋３Ｄ）及び７日後（ＷＫ４＋７Ｄ）での、図７Ａに示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのＯＬＩＧ２陽性細胞の数として測定されたＯＬＩＧ２＋細胞の密度を表示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図7C】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における、成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣ分化に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。ＣＰＺ中止から３日後（ＷＫ４＋３Ｄ）及び７日後（ＷＫ４＋７Ｄ）での、図７Ａに示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのＣＮＰアーゼ陽性ピクセルの数として測定された、ＣＮＰアーゼ^＋染色のパーセントを表示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【図8A】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における軸索健康に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。図５Ａにおけるダイアグラムのとおりに抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体を投与されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳におけるＳＭＩ－３１の代表的な免疫組織化学画像を示している。図８Ａに示されている画像は、ＣＰＺ中止から７日後（ＷＫ４＋７Ｄ）に採取された脳試料からのものである。

【図8B】ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳における軸索健康に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の効果を評価するインビボ実験の結果を示している。ＣＰＺ中止後３日目（ＷＫ４＋３Ｄ）及び７日目（ＷＫ４＋７Ｄ）での、図８Ａに示されている実験の定量化を示している。棒は、１ｍｍ^２あたりのＳＭＩ３１陽性ピクセルの数として測定された、表示された時点でのＳＭＩ３１＋染色のパーセントを表示している。示されているデータは、平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意であると判断される。アステリスクは、統計学的有意性を表示している（「^＊」＝ｐ＜０．０５；「^＊＊」＝ｐ＜０．０１；「^＊＊＊」＝ｐ＜０．００１；「^＊＊＊＊」＝ｐ＜０．０００１）。

【発明を実施するための形態】

【0050】

ＴＲＥＭ２のアゴニストを投与することによって脱髄と関連する障害及び疾患を処置する方法を本明細書において提供する。そのような疾患または障害には、これに限定されないが、多発性硬化症、視神経炎、視神経脊髄炎（デビック病）、横断性脊髄炎、急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、及び副腎脊髄ニューロパシーが含まれる。ＴＲＥＭ２のアゴニストには、１つもしくは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する、ミエリンの存在下で誘導される１つもしくは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する、ＣＮＳにおいてオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の１つもしくは複数の脱髄病変への動員を促進する、ＣＮＳにおいて１つもしくは複数の脱髄病変における成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）の増加を促進する、ＣＮＳにおいて１つもしくは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）への分化を促進する、ＣＮＳにおいて１つもしくは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルの上昇を促進する、または個体において１つもしくは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリのクリアランスを促進する抗ＴＲＥＭ２抗体が含まれる。

【0051】

定義
本明細書で使用される場合、用語「予防する」は、そのような疾患、障害、もしくは状態に罹患しやすい、かかりやすい、またはそのような疾患、障害、もしくは状態を発症するリスクがあり得るが、まだその疾患、障害、もしくは状態と診断されていない個体における、特定の疾患、障害、または状態の発生の遅延を含めて、特定の疾患、障害、または状態の発生または再発に関する予防法の提供を含む。

【0052】

本明細書で使用される場合、特定の疾患、障害、または状態を発症する「リスクがある」個体は、本明細書に記載の処置方法の前に、検出可能な疾患または疾患の症状を有してもよいし、または有しなくてもよく、かつ検出可能な疾患または疾患の症状を示してもよいし、または示さなくてもよい。「リスクがある」は、個体が、当技術分野で公知のとおり、特定の疾患、障害、または状態の発症と相関する測定可能なパラメーターである１つまたは複数のリスク因子を有することを示す。これらのリスク因子の１つまたは複数を有する個体は、これらのリスク因子の１つまたは複数を有しない個体よりも、特定の疾患、障害、または状態を発症する確率が高い。

【0053】

本明細書で使用される場合、用語「処置」は、臨床病理の経過中に処置される個体の自然経過を変更するように設計された臨床的介入を指す。望ましい治療効果には、進行速度を減少させること、病的状態を改善すること、または軽減させること、及び特定の疾患、障害、または状態の寛解または予後の改善が含まれる。個体は、例えば、特定の疾患、障害、または状態と関連する１つまたは複数の症状が緩和または排除される場合、成功裏に「処置される」。

【0054】

「有効量」は、所望の治療または予防結果を達成するために必要な投薬量及び期間での、少なくとも有効である量を指す。有効量は、１回または複数回の投与で提供することができる。本明細書における有効量は、個体の病状、年齢、性別、及び体重などの因子、ならびに個体において治療が所望の反応を誘導する能力に応じて変化し得る。有効量はまた、処置の有毒または有害作用を、治療上の有益効果が上回るものである。予防的使用については、有益な、または所望の結果には、疾患、その合併症、及び疾患の発症の過程で見られる中間の病理学的表現型の生化学的、組織学的、及び／または行動上の症状を含めた疾患のリスクの除去もしくは低減、重症度の軽減、または発症の遅延が含まれる。治療的使用については、有益な、または所望の結果には、臨床結果、例えば、疾患に起因する１つまたは複数の症状の軽減、疾患に罹患しているものの生活の質の向上、疾患の治療に必要な他の薬物の用量の低減、別の薬物の効果の増強、例えば、疾患の進行の遅延、及び／または生存の延長が含まれる。薬物、化合物、または医薬組成物の有効量は、直接もしくは間接的に予防的または治療的処置を達成するのに十分な量である。臨床状況で理解されるように、薬物、化合物、または医薬組成物の有効量は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と併せて達成されてもよいし、またはされなくてもよい。したがって、「有効量」は、１つまたは複数の治療薬の投与に照らして判断され得、単一の薬剤は、１つまたは複数の他の薬剤と併せて所望の結果が達成され得るか、または達成される場合に、有効量で与えられると見なされ得る。

【0055】

処置する、予防する、またはリスクを減少させる目的での「個体」は、ヒト、家畜及び牧畜動物、及び動物園、スポーツ、またはペット用動物、例えば、イヌ、ウマ、ウサギ、ウシ、ブタ、ハムスター、アレチネズミ、マウス、フェレット、ラット、ネコなどを含む哺乳動物として分類される任意の動物を指す。一部の実施形態では、個体は、ヒトである。

【0056】

本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せて」投与することには、同期投与及び／または異なる時における投与が含まれる。併せて投与することには、異なる投薬頻度または間隔のもの、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用するものも含まれる、共製剤としての投与または別の組成物としての投与も包含される。

【0057】

「免疫グロブリン」（Ｉｇ）という用語は、本明細書の「抗体」と互換的に使用される。本明細書の用語「抗体」は、最も広い意味で使用され、具体的には、所望の生物学的活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つのインタクトな抗体から形成される多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、及び抗体フラグメントを含める。

【0058】

基本的な４本鎖の抗体単位は、２本の同一の軽（Ｌ）鎖及び２本の同一の重（Ｈ）鎖からなるヘテロ四量体の糖タンパク質である。Ｖ_ＨとＶ_Ｌが一緒に対合することで、単一の抗原結合性部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ Ｅｄ．，Ｄａｎｉｅｌ Ｐ．Ｓｔｉｔｅｓ，Ａｂｂａ Ｉ．Ｔｅｒｒ ａｎｄ Ｔｒｉｓｔｒａｍ Ｇ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ ＆ Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐａｇｅ ７１及びＣｈａｐｔｅｒ ６を参照されたい。

【0059】

任意の脊椎動物種由来のＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づき、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明らかに異なる種類のうちの１つに割り当てることができる。それらの重鎖定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てることができる。５つのクラスの免疫グロブリン、すなわち、それぞれアルファ（「α」）、デルタ（「δ」）、イプシロン（「ε」）、ガンマ（「γ」）、及びミュー（「μ」）と指定された重鎖を有するＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭがある。γ及びαクラスは、ＣＨ配列及び機能における比較的小さな差異に基づき、さらにサブクラス（アイソタイプ）に分けられる。例えば、ヒトは以下のサブクラスを発現する：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２。サブユニット構造及び異なるクラスの免疫グロブリンの三次元形状は周知であり、例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４^ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．，２０００）に一般的に記載されている。

【0060】

「天然抗体」は通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成される、約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって、重鎖に結合されているが、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖によって異なる。各重鎖及び軽鎖はまた、規則的間隔の鎖内ジスルフィド架橋も有している。各重鎖は、一端に、多数の定常ドメインが続く可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）を有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）を、その他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１定常ドメインと整列しており、軽鎖可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインの間のインターフェースを形成すると考えられている。

【0061】

本開示の単離抗ＴＲＥＭ２抗体などの「単離」抗体は、（例えば、天然または組換えでの）産生環境の構成成分から、同定、分離、及び／または回収されている抗体である。好ましくは、単離ポリペプチドは、産生環境からの他の実質的に全ての汚染構成成分とは関連性がない。組換え遺伝子導入された細胞から生じるような、産生環境からの汚染構成成分は通常、抗体に対する研究、診断、または治療的使用に支障を来すことになる材料であり、酵素、ホルモン、及び他のタンパク質溶質または非タンパク質溶質を含むことがある。好ましい実施形態では、ポリペプチドは、（１）例えば、Ｌｏｗｒｙ法によって測定される場合、抗体の９５重量％を超えるまで、一部の実施形態では、９９重量％を超えるまで、（２）Ｎ末端の少なくとも１５残基、もしくはスピニングカップシーケンサーの使用によって内部アミノ酸配列を得るために十分な程度まで、または（３）クーマシーブルーもしくは好ましくは、銀染色を使用して、非還元もしくは還元条件下のＳＤＳ－ＰＡＧＥによって、均一になるまで精製されることになる。

【0062】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ、「Ｖ_Ｈ」及び「Ｖ_Ｌ」と称されることがある。これらのドメインは一般に、（同じクラスの他の抗体と比較して）抗体の最も可変な部分であり、抗原結合部位を含有する。

【0063】

「可変」という用語は、可変ドメインの特定のセグメントが、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体間の配列において広範囲にわたって異なるという事実を指す。可変ドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体の、特定の抗原に対する特異性を規定する。しかし、可変性は、可変ドメインのスパン全体にわたって均一に分布しない。その代わりに、可変性は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインの両方の超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中する。可変ドメインの、より保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然の重鎖及び軽鎖の可変ドメインはそれぞれ、主にベータシート立体配置をとり、ベータシート構造を連結させるループを形成し、場合によっては、ベータシート構造の一部を形成する、３つのＨＶＲによって連結される４つのＦＲ領域を含む。各鎖のＨＶＲは、ＦＲ領域によって、共に近接して保たれ、他の鎖のＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗体の抗原への結合に直接関与しないが、抗体の抗体依存性細胞毒性への関与などの種々のエフェクター機能を示す。

【0064】

本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、実質的に均一な抗体の集団から得られた本開示のモノクローナル抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体を指し、すなわち、集団を構成する個々の抗体は、少量で存在し得る可能な天然変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化など）を除いて同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられる。典型的には異なる決定基（エピトープ）に対して向けられる異なる抗体を含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられる。それらの特異性に加えて、モノクローナル抗体は、他の免疫グロブリンによって実質的に汚染されていない、ハイブリドーマ培養によって合成され得る点で有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られるような抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生産を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるべきモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５－９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３－２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、組換えＤＮＡ法（例えば、米国特許第４，８１６，５６７号を参照されたい）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－４７２（２００４）；及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４））、酵母提示技術（例えば、ＷＯ２００９／０３６３７９Ａ２；ＷＯ２０１０１０５２５６；ＷＯ２０１２００９５６８、及びＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２６（１０）：６６３－７０（２０１３）を参照されたい）、ならびにヒト免疫グロブリン遺伝子座またはヒト免疫グロブリン配列をコードする遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を生産するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許第５，５４５，８０７号；同第５，５４５，８０６号；同第５，５６９，８２５号；同第５，６２５，１２６号；同第５，６３３，４２５号；及び同第５，６６１，０１６号；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；ならびにＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）を参照されたい）を包含する様々な技術によって作製され得る。

【0065】

「全長抗体」、「インタクト抗体」、または「完全抗体」という用語は、抗体フラグメントとは対照的に、実質的にインタクトな形態の、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体を指すために互換的に使用される。具体的には、完全抗体には、Ｆｃ領域を含む、重鎖及び軽鎖を有する抗体が含まれる。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列多様体であってもよい。場合によっては、インタクトな抗体は、１つまたは複数のエフェクター機能を有することがある。

【0066】

「抗体フラグメント」は、インタクト抗体の一部、好ましくは、インタクト抗体の抗原結合性領域及び／または可変領域を含む。抗体フラグメントの例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２及びＦｖフラグメント；ダイアボディ；線状抗体（米国特許第５，６４１，８７０号の実施例２；Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２（１９９５）を参照されたい）；一本鎖抗体分子；ならびに抗体フラグメントから形成される多重特異性抗体が含まれる。

【0067】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体のパパイン消化は、「Ｆａｂ」フラグメントと呼ばれる２つの同一の抗原結合フラグメント、及び残りの「Ｆｃ」フラグメント（名称が容易に結晶化する能力を反映している）を生じる。Ｆａｂフラグメントは、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（Ｖ_Ｈ）と共にＬ鎖全体、及び１つの重鎖の第１定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１）からなる。各Ｆａｂフラグメントは、抗原結合に関して一価であり、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、抗原と結合して架橋し得る２つのジスルフィド結合されたＦａｂフラグメントにおおよそ対応する単一の大きなＦ（ａｂ’）_２フラグメントをもたらす。Ｆａｂ’フラグメントは、抗体ヒンジ領域由来の１つまたは複数のシステインを含むＣ_Ｈ１ドメインのカルボキシ末端に、いくつかのさらなる残基を有する点で、Ｆａｂフラグメントとは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が、遊離チオール基を持つＦａｂ’のための本明細書での名称である。Ｆ（ａｂ’）_２抗体フラグメントは、それらの間にヒンジシステインを有するＦａｂ’フラグメントのペアとして生産され得る。抗体フラグメントの他の化学的連結も知られている。

【0068】

Ｆｃフラグメントは、ジスルフィドで共に保持される両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、特定種類の細胞に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識されるＦｃ領域の配列によって決定される。

【0069】

「Ｆｖ」は、完全な抗原認識及び抗原結合部位を含有する最小の抗体フラグメントである。このフラグメントは、緊密に非共有結合的に会合した、１つの重鎖可変領域ドメイン及び１つの軽鎖可変領域ドメインの二量体からなる。これらの２つのドメインの折りたたみから、抗原結合のためのアミノ酸残基に寄与して、抗体に抗原結合特異性を付与する６つの超可変ループ（それぞれＨ鎖及びＬ鎖から３ループ）が出ている。しかしながら、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的な３つのＨＶＲのみを含むＦｖの半分）は、結合部位全体よりも親和性が低いが、抗原を認識して結合する能力を有し得る。

【0070】

「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも略記される「一本鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖に連結されたＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体フラグメントである。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、ｓＦｖが抗原結合のための所望の構造を形成することを可能にするＶ_Ｈドメイン及びＶ_Ｌドメインとの間に、ポリペプチドリンカーをさらに含み、このことで、ｓＦｖは、抗原結合のための所望の構造を形成することが可能となる。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたい。

【0071】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体の「機能的フラグメント」は、インタクトな抗体の抗原結合もしくは可変領域またはＦｃＲ結合能を保持する、もしくは修飾している抗体のＦｃ領域を一般に含むインタクトな抗体の一部を含む。

【0072】

「ダイアボディ」という用語は、可変ドメインの鎖内ペアリングではなく鎖間ペアリングが達成され、それによって２価のフラグメント、すなわち、２つの抗原結合部位を有するフラグメントを生じるように、Ｖ_Ｈドメイン及びＶ_Ｌドメインとの間に短いリンカー（約５～１０残基）を有するｓＦｖフラグメント（先行段落を参照されたい）を構築することによって調製された小さな抗体フラグメントを指す。ダイアボディは、例えば、欧州特許第４０４，０９７号；ＷＯ９３／１１１６１；Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－４８（１９９３）に、より詳細に記載されている。

【0073】

本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、所望の生物学的活性を示す限り、重鎖及び／または軽鎖の一部が特定の種に由来する、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同であるが、鎖（複数可）の残部が別の種に由来する、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体の対応する配列と同一または相同である本開示のキメラ抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体、さらには、そのような抗体のフラグメントを指す（米国特許第４，８１６，５６７号；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－５５（１９８４））。キメラ抗体には、抗体の可変領域がマウス抗体に由来し、かつ定常領域がヒト抗体に由来する抗体が含まれる。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、「キメラ抗体」のサブセットである。

【0074】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体のヒト化形態などの非ヒト（例えばネズミ）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含有するキメラ抗体である。一実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲ由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び／または能力を有する、マウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲ由来の残基によって置き換えられたヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。一部の場合では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基によって置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体に見出されない残基を含むことがある。これらの修飾は、結合親和性などの抗体性能をさらに精密化するために行われることがある。一般に、ヒト化抗体は、超可変ループの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン配列のものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のものである、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むであろう。ただし、ＦＲ領域は、結合親和性、異性化、免疫原性などの抗体性能を改善する１つまたは複数の個々のＦＲ残基置換を含んでもよい。ＦＲのこれらのアミノ酸置換の数は典型的に、Ｈ鎖では６以下であり、Ｌ鎖では３以下である。ヒト化抗体は任意選択で、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部分、典型的に、ヒト免疫グロブリンのものを含むであろう。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。さらに、例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）；ならびに米国特許第６，９８２，３２１号及び同第７，０８７，４０９号を参照されたい。

【0075】

「ヒト抗体」は、本明細書で開示されるとおり、または別段に当技術分野で公知のとおり、ヒト抗体を作成するための技術のいずれかを使用して作製されている、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体の配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体である。ヒト抗体のこの定義は特に、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特異的に排除する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む、様々な当技術分野で公知の技術を使用して生産することができる。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。また、Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載されている方法は、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）も参照されたい。ヒト抗体は、抗原曝露に応答してこのような抗体を産生するために修飾されているが、その内因性の遺伝子座は無効化されているトランスジェニック動物、例えば免疫化ゼノマウスに、抗原を投与することによって調製することができる（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関する米国特許第６，０７５，１８１号、及び同第６，１５０，５８４号を参照されたい）。また、例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって生成されたヒト抗体に関するＬｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）を参照されたい。別法では、ヒト抗体を、酵母ライブラリならびに例えば、ＷＯ２００９／０３６３７９Ａ２；ＷＯ２０１０１０５２５６；ＷＯ２０１２００９５６８；及びＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２６（１０）：６６３－７０（２０１３）に開示のとおりの方法を用いることによって調製することもできる。

【0076】

「超可変領域」または「ＨＶＲ」という用語は、本明細書で使用される場合、配列中で超可変である、及び／または構造的に規定されたループを形成する、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体のような抗体可変ドメインの領域を指す。一般に、抗体は、６つのＨＶＲ；ＶＨの３つ（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）及びＶＬの３つ（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）を含む。天然抗体では、Ｈ３及びＬ３は、６つのＨＶＲのほとんどの多様性を示し、Ｈ３は特に、抗体に細かい特異性を付与することにおいて、独特の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）；Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｗｕ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３））を参照されたい。実際に、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ抗体は、軽鎖の非存在下では機能的で安定である。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）及びＳｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照されたい。

【0077】

複数のＨＶＲの描写が使用されており、本明細書に包含される。一部の実施形態では、ＨＶＲは、配列可変性に基づくＫａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）であり得、最も一般的に使用されている（前出Ｋａｂａｔら）。一部の実施形態では、ＨＶＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ ＣＤＲであり得る。その代わりに、Ｃｈｏｔｈｉａは、構造ループの位置を指す（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。一部の実施形態では、ＨＶＲは、ＡｂＭ ＨＶＲであり得る。ＡｂＭ ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲ及びＣｈｏｔｈｉａ構造ループとの間の折衷案を表し、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアによって使用される。一部の実施形態では、ＨＶＲは、「接触」ＨＶＲであり得る。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複雑な結晶構造の分析に基づいている。これらのＨＶＲのそれぞれからの残基を以下に示す。

【表1】

【0078】

ＨＶＲは、次のように「拡張ＨＶＲ」を含んでもよい：ＶＬの２４～３６または２４～３４（Ｌ１）、４６～５６または５０～５６（Ｌ２）、及び８９～９７または８９～９６（Ｌ３）、ならびに、ＶＨの２６～３５（Ｈ１）、５０～６５または４９～６５（好ましい実施形態）（Ｈ２）、及び９３～１０２、９４～１０２、または９５～１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの拡張ＨＶＲの定義のそれぞれについて、前出Ｋａｂａｔらに従ってナンバリングされる。

【0079】

「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書において規定するとおりのＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。

【0080】

「Ｋａｂａｔにおいてのとおりの可変ドメイン残基ナンバリング」または「Ｋａｂａｔにおいてのとおりのアミノ酸位置ナンバリング」という表現及びその変形形態は、前出Ｋａｂａｔらにおける抗体の編集の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインで使用されるナンバリングシステムを指す。このナンバリングシステムを使用して、実際の線状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲまたはＨＶＲの短縮、または、これへの挿入に対応する、より少ないまたは追加のアミノ酸を含有してもよい。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２の後に単一のアミノ酸インサート（Ｋａｂａｔによる残基５２ａ）、ならびに重鎖ＦＲ残基８２の後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔによる残基８２ａ、８２ｂ及び８２ｃなど）を含んでもよい。所与の抗体に対する残基のＫａｂａｔナンバリングは、抗体の配列の相同性の領域を、「標準」Ｋａｂａｔナンバリングされた配列と整列させることによって決定されてもよい。

【0081】

Ｋａｂａｔナンバリングシステムは一般に、可変ドメインの残基（およそ軽鎖の残基１～１０７及び重鎖の残基１～１１３）を指す場合に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵナンバリングシステム」、「ＥＵナンバリング」または「ＥＵインデックス」は一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域の残基を指す場合に使用される（例えば、前出Ｋａｂａｔらで報告されるＥＵインデックス）。「ＫａｂａｔのＥＵインデックス」は、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体の残基ナンバリングを指す。抗体の可変ドメインにおける残基番号への言及は、Ｋａｂａｔナンバリングシステムによる残基ナンバリングを意味する。抗体の定常領域における残基番号への言及は、ＥＵナンバリングシステムによる残基ナンバリングを意味する（例えば、米国特許出願公開第２０１０－２８０２２７号を参照されたい）。

【0082】

本明細書で使用される場合の「アクセプターヒトフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークに由来するＶＬまたはＶＨフレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、その同じアミノ酸配列を含んでいてもよく、または既存のアミノ酸配列変化を含有してもよい。一部の実施形態では、既存のアミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。既存のアミノ酸変化がＶＨに存在する場合、好ましくは、これらの変化は、位置７１Ｈ、７３Ｈ、及び７８Ｈの３つ、２つ、または１つのみで生じ、例えば、これらの位置のアミノ酸残基は、７１Ａ、７３Ｔ、及び／または７８Ａであってもよい。一実施形態では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、配列が、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。

【0083】

「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において、最も一般的に生じるアミノ酸残基を表すフレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループからのものである。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）においてのとおりのサブグループである。ＶＬでは、サブグループは例えば、前出ＫａｂａｔらのようなサブグループカッパＩ、カッパＩＩ、カッパＩＩＩ、またはカッパＩＶであってもよい。加えて、ＶＨでは、サブグループは例えば、前出ＫａｂａｔらのようなサブグループＩ、サブグループＩＩ、またはサブグループＩＩＩであってもよい。

【0084】

例えば、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の、特定の位置での「アミノ酸修飾」は、特定の残基の置換もしくは欠失、または特定の残基に隣接する少なくとも１つのアミノ酸残基の挿入を指す。特定の残基に「隣接している」挿入は、その１～２残基内の挿入を意味する。挿入は、特定の残基のＮ末端またはＣ末端であってもよい。本明細書の好ましいアミノ酸修飾は、置換である。

【0085】

本開示の親和性成熟抗ＴＲＥＭ２抗体などの「親和性成熟」抗体は、その１つまたは複数のＨＶＲに１つまたは複数の改変を有する抗体であり、これらは、これらの改変（複数可）を有さない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性に改善をもたらす。一実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモルまたはさらにピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当技術分野で公知の手順によって生産され得る。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）は、ＶＨドメイン及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟について記載する。ＨＶＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異導入は、例えば、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：３８０９－３８１３（１９９４）；Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅ １６９：１４７－１５５（１９９５）；Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４－２００４（１９９５）；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０－９（１９９５）；及びＨａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９－８９６（１９９２）によって記載されている。

【0086】

本明細書で使用される場合、「特異的に結合する」という用語は、生物学的分子などの分子の異種集団内で、標的の存在を決定づける、抗ＴＲＥＭ２抗体及びＴＲＥＭ２の間などの標的及び抗体の間の測定可能で再現性のある結合相互作用を指す。例えば、標的または標的のエピトープに特異的に結合する、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体は、例えば、他の無関係の標的またはエピトープに結合するよりも、より高い親和性または抗体結合活性で、この標的またはエピトープに優先的に結合する抗体である。第１の標的に特異的に結合する抗体は、第２の標的に特異的に結合することがある、または結合しないことがあることも理解される。したがって、「特異的結合」は、排他的結合を（含むことができるが）必ずしも必要とはしない。標的に特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０^３Ｍ^－１もしくは１０^４Ｍ^－１の、時によると、約１０^５Ｍ^－１もしくは１０^６Ｍ^－１、他の場合、約１０^６Ｍ^－１もしくは１０^７Ｍ^－１、約１０^８Ｍ^－１～１０^９Ｍ^－１、または１０^１０Ｍ^－１～１０^１１Ｍ^－１以上の結合定数を有し得る。様々なイムノアッセイフォーマットは、特定のタンパク質と特異的免疫反応性のある抗体を選択するために使用することができる。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的免疫反応性のあるモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用される。特異的免疫反応性を決定するために使用することができるイムノアッセイフォーマット及び条件の記載については、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、またはＶａｓｈｉｓｔ ａｎｄ Ｌｕｏｎｇ （２０１８） Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ，Ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｓ，ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓを参照されたい。

【0087】

本明細書で使用される場合、抗体が、２つのタンパク質の１つに結合することにより、２つのタンパク質間の相互作用を、破壊、低減、または完全に排除するときに、抗体は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。

【0088】

「アゴニスト」抗体は、標的に結合すると、標的の１つまたは複数の活性または機能を誘導する（例えば、増加させる）抗体である。

【0089】

「アンタゴニスト」抗体または「遮断」抗体は、抗体が抗原に結合した後に、１つまたは複数の結合パートナーに結合する抗原を低減させ、または排除する（例えば、減少させる）、及び／または抗体が抗原に結合した後に、抗原の１つまたは複数の活性または機能を低減させる、または排除する（例えば、減少させる）抗体である。一部の実施形態では、アンタゴニスト抗体、または遮断抗体は、１つまたは複数の結合パートナーへの抗原結合、及び／または抗原の１つまたは複数の活性または機能を実質的または完全に阻害する。

【0090】

抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列多様体Ｆｃ領域）に起因する生物学的活性を指し、抗体アイソタイプによって異なる。

【0091】

本明細書の用語「Ｆｃ領域」は、天然配列Ｆｃ領域及びバリアントＦｃ領域を含む免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を規定するために使用される。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は、変化することがあるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位またはＰｒｏ２３０位のアミノ酸残基から、そのカルボキシル末端に伸びると規定される。Ｆｃ領域のＣ末端リシン（ＥＵナンバリングシステムによる残基４４７）は、例えば、抗体の生産もしくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え遺伝子操作することによって、除去されてもよい。したがって、インタクト抗体の組成物は、全てのＫ４４７残基が除去された抗体集団、Ｋ４４７残基が除去されていない抗体集団、ならびにＫ４４７残基を有する抗体及びＫ４４７残基を有しない抗体の混合物を有する抗体集団を含んでもよい。本開示の抗体で使用するために適した天然配列Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４を含む。

【0092】

「天然配列Ｆｃ領域」は、天然に見出されるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域は、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（非Ａアロタイプ及びＡアロタイプ）；天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域；天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域；及び天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、ならびにそれらの天然に存在するバリアントを含む。

【0093】

「バリアントＦｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸修飾、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）のために天然配列Ｆｃ領域のものと異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、バリアントＦｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域に、約１～約１０のアミノ酸置換、好ましくは、約１～約５のアミノ酸置換を有する。本明細書のバリアントＦｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、最も好ましくは、それらと少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、それらと少なくとも約９５％の相同性を有することになる。

【0094】

「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体について記載する。好ましいＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）に結合し、これらの受容体の対立遺伝子変異型及びオルタナティブスプライシング形態を含むＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含むものであり、ＦｃγＲＩＩ受容体は、主にその細胞質ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有するＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）を含む。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、細胞質ドメインに、免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（「ＩＴＡＭ」）を含有する。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、細胞質ドメインに、免疫受容体チロシン系阻害モチーフ（「ＩＴＩＭ」）を含有する。（例えば、Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）を参照されたい）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－９２（１９９１）；Ｃａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）；及びｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０－４１（１９９５）で概説される。他のＦｃＲは、本明細書の用語「ＦｃＲ」に包含される。ＦｃＲはまた、抗体の血清半減期を増加させることができる。

【0095】

インビボでのＦｃＲへの結合及びヒトＦｃＲ高親和性結合ポリペプチドの血清半減期は、例えば、ヒトＦｃＲを発現するトランスジェニックマウスもしくは遺伝子導入されたヒト細胞系において、またはバリアントＦｃ領域を有するポリペプチドが投与される霊長類において、アッセイすることができる。ＷＯ２００４／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）は、ＦｃＲへの結合が改善されたまたは減少する抗体バリアントについて記載する。さらに、例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照されたい。

【0096】

ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に関して本明細書で使用される「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列を整列し、必要であればギャップを導入して最大限の配列同一性パーセントを得た後、配列同一性の一部として保存的置換を考慮せずに、特定のペプチドまたはポリペプチド配列のアミノ酸残基と同一のアミノ酸残基の候補配列における割合（％）を指す。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアラインメントは、当業者が備えている技術の範囲内にある様々な方法で、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、またはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアなどの公開されているコンピューターソフトウェアを用いて達成することができる。当業者であれば、比較される配列の全長にわたって最大限のアラインメントを実現するのに必要な当技術分野で公知の任意のアルゴリズムを含め、アラインメントの比較のための適切なパラメーターを決めることができる。

【0097】

例えば、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体などの抗体をコードする「単離」核酸分子は、同定され、それが産生された環境に普通は関連する少なくとも１つの汚染核酸分子から分離される核酸分子である。好ましくは、単離核酸は、産生環境に関連する実質的に全ての構成成分との関連がない。本明細書のポリペプチド及び抗体をコードする単離核酸分子は、細胞中に天然に存在する核酸とは区別される。

【0098】

本明細書で使用される場合の用語「ベクター」は、それが結合されている別の核酸を輸送することができる核酸分子を指すこととする。ベクターの１種は、「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡを指す。ベクターの別の種類は、ファージベクターである。ベクターの別の種類は、追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノムにライゲーションされ得るウイルスベクターである。特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター及びエピソーム性哺乳動物ベクター）において自律的複製することができる。他のベクター（例えば、非エピソーム性哺乳動物ベクター）は、宿主細胞への導入時に、宿主細胞のゲノムに組み込むことができ、それによって宿主ゲノムと共に複製される。さらに、特定のベクターは、それらが作動可能に結合されている遺伝子の発現を指示することができる。そのようなベクターは、本明細書では「組換え発現ベクター」または単に「発現ベクター」と称される。一般に、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターは多くの場合に、プラスミドの形態である。本明細書では、プラスミドが最も一般的に使用されるベクターの形態であるため、「プラスミド」及び「ベクター」は、互換的に使用され得る。

【0099】

本明細書で互換的に使用される「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチドもしくは塩基、及び／またはそれらの類似体、あるいは、ＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによって、または合成反応によって、ポリマーに取り込むことができる任意の基質である可能性がある。ポリヌクレオチドは、メチル化ヌクレオチド及びそれらの類似体などの修飾ヌクレオチドを含んでもよい。存在する場合、ヌクレオチド構造の修飾は、ポリマーの構築の前または後に付与されることがある。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド構成成分によって中断されてもよい。ポリヌクレオチドは、標識へのコンジュゲートなどの、合成後に行われる修飾（複数可）を含むことがある。他の種類の修飾には、例えば、「キャップ」、類似体での、天然に存在するヌクレオチドの１つまたは複数の置換；及び例えば、電荷のない結合を有するもの（例えば、メチルホスホナート、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）及び電荷を持つ結合を有するもの（例えば、ホスホロチオアート、ホスホロジチオアートなど）、例えば、タンパク質などのペンダント部分を含有するもの（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ｐｌｙ－Ｌ－リシンなど）、インターカレーターを有するもの（例えば、アクリジン、ソラレンなど）、キレート化剤を含有するもの（例えば、金属、放射性金属、ホウ素、酸化金属など）、アルキル化剤を含有するもの、結合が修飾されたもの（例えば、アルファアノマー核酸など）、未修飾形態のポリヌクレオチド（複数可）などのヌクレオチド間の修飾が含まれる。さらに、糖類に通常存在するヒドロキシル基のいずれかは、例えば、ホスホナート基、ホスファート基と置き換えられ、標準的な保護基で保護され、もしくは追加のヌクレオチドへのさらなる結合を調製するために活性化されてもよく、または固体もしくは半固体の支持体にコンジュゲートされてもよい。５’末端及び３’末端ＯＨは、リン酸化することができるか、またはアミンもしくは１～２０個の炭素原子の有機キャッピング基部分で置換することができる。他のヒドロキシルはまた、標準的な保護基に誘導体化されてもよい。ポリヌクレオチドはまた、例えば、２’－Ｏ－メチルリボース、２’－Ｏ－アリルリボース、２’－フルオロリボース、または２’－アジドリボース；炭素環式糖類似体；α－アノマー糖；アラビノース、キシロース、またはリキソースなどのエピマー糖類；ピラノース糖；フラノース糖；セドヘプツロース；非環式類似体；及びメチルリボシドなどの塩基性ヌクレオシド類似体を含む、当技術分野で一般に公知の類似の形態のリボースまたはデオキシリボース糖を含有することができる。１つまたは複数のホスホジエステル結合は、代替結合基によって置き換えられてもよい。これらの代替架橋基には、限定されないが、ホスファートが、Ｐ（Ｏ）Ｓ（「チオアート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオアート」）、（Ｏ）ＮＲ２（「アミダート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、またはＣＨ２（「ホルムアセタール」）によって置き換えられ、各ＲまたはＲ’が独立して、Ｈ、または、任意選択でエーテル（－Ｏ－）結合、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルまたはアルラルジルを含有する置換もしくは非置換アルキル（１～２０Ｃ）である、実施形態が含まれる。ポリヌクレオチド中の全ての結合が同一である必要はない。先行記載は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及される全てのポリヌクレオチドに適用される。

【0100】

「宿主細胞」は、例えば、ポリヌクレオチドインサート（複数可）を取り込むベクター（複数可）または他の外来核酸を含有し得る個々の細胞または細胞培養物を含む。一部の実施形態では、ベクターまたは他の外来核酸を、宿主細胞のゲノムに取り込む。宿主細胞は、単一の宿主細胞の子孫を含み、子孫は、自然の、偶然の、または故意の変異のために元の親細胞とは必ずしも（形態学的に、またはゲノムＤＮＡ相補的に）完全に同一でないことがある。宿主細胞は、本発明のポリヌクレオチド（複数可）を、インビボで遺伝子導入された細胞を含む。

【0101】

本明細書で使用される場合の「担体」は、用いられる投薬量及び濃度で、それに曝露される細胞または哺乳動物に対して非毒性である薬学的に許容される担体、賦形剤、または安定剤を含む。多くの場合、生理的に許容される担体は、ｐＨ緩衝水溶液である。生理学的に許容される担体の例には、リン酸、クエン酸、及び他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、もしくは免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、もしくはリシンなどのアミノ酸；単糖類、二糖類、及びグルコース、マンノース、もしくはデキストリンを含む他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；マンニトールもしくはソルビトールなどの糖アルコール；ナトリウムなどの塩形成対イオン；ならびに／または、ＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）などの非イオン性界面活性剤が含まれる。

【0102】

本明細書で使用される場合の「約」という用語は、当業者に容易に知られているそれぞれの値に対する通常の誤差範囲を指す。本明細書での「約」値またはパラメーターへの言及は、その値またはパラメーターそれ自体に関する実施形態を含む（及び記載する）。

【0103】

本明細書及び添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が別途明示しない限り、複数の言及を含む。例えば、「抗体」への言及は、モル量などの１つの抗体から多くの抗体までの言及であり、当業者に公知のそれらの等価物などを含む。

【0104】

本明細書に記載の本開示の態様及び実施形態が、態様及び実施形態「を含む」、「からなる」、及び「から本質的になる」を含むことは理解される。

【0105】

概要
本開示は、ＴＲＥＭ２のアゴニストを投与することによって脱髄と関連する障害及び疾患を処置する方法に関する。そのような疾患または障害には、これに限定されないが、多発性硬化症、視神経炎、視神経脊髄炎（デビック病）、横断性脊髄炎、急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、及び副腎脊髄ニューロパシーが含まれる。ＴＲＥＭ２のアゴニストには、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する、及び／または１つまたは複数のリガンドのＴＲＥＭ２への結合によって誘導される１つまたは複数の活性を増強する抗ＴＲＥＭ２抗体が含まれる。例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、可溶性ＴＲＥＭ２を減少させる、脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）リン酸化を誘導する、ＴＲＥＭ２のＤＡＰ１２への結合を誘導する、ＤＡＰ１２リン酸化を誘導する、樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞（ミクログリア）の増殖、生存、及び／または機能を上昇させる、またはＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性及び／または発現を増加させることができる。

【0106】

多発性硬化症などの脱髄疾患は、最終的には神経身体障害として臨床的に現れる軸索損傷に至る持続性の脱髄及び脳内でのミエリンデブリ蓄積によって特徴づけられる（Ｄｕｌａｍｅａ ２０１７）。脱髄疾患における再有髄化不全について可能性のある説明には、オリゴデンドロサイト前駆体細胞（ＯＰＣ）活性化または脱髄の部位への動員の不全、及び／または有髄化成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣ分化の異常が含まれる（Ｆｒａｎｋｌｉｎ ａｎｄ Ｆｆｒｅｎｃｈ－Ｃｏｎｓｔａｎｔ ２０１７）。

【0107】

したがって、本開示のある特定の態様は、少なくとも部分的に、ＣＮＳにおいて脱髄のインビボマウス毒素誘導モデルを使用すると、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、実施例２を参照されたい）がミエリンデブリクリアランスをインビボで有意に増強した（例えば、実施例３を参照されたい）；インビボでオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）の脱髄病変への動員を促進した（例えば、実施例４を参照されたい）；インビボでＯＰＣの成熟オリゴデンドロサイトへの分化を促進した（例えば、実施例４を参照されたい）；及びインビボで脳梁における軸索健康を促進した（例えば、実施例５を参照されたい）という発見に基づく。

【0108】

本開示の方法
本開示は、それを必要とする個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合する抗体を投与することを含み、その際、前記抗体がアゴニストである、中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を処置する、予防する、またはそのリスクを低下させる方法を提供する。一部の実施形態では、抗体は、個体のＣＮＳにおいて、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を促進する。

【0109】

中枢神経系（ＣＮＳ）脱髄疾患を有する個体において、１つまたは複数の脱髄病変の再有髄化を促進するための方法であって、前記個体に、治療有効量の、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合する抗体を投与することを含み、その際、前記抗体がアゴニストである前記方法も本明細書において提供する。

【0110】

脱髄疾患
「脱髄」または「脱髄性」疾患は、本明細書で使用される場合、１つまたは複数の脱髄病変の存在によって特徴づけられる何らかの疾患、障害または状態を指す。典型的には、プラークとしても公知の脱髄病変は、中枢神経系の白質及び／または灰白質におけるニューロンのミエリン鞘に対する損傷またはその喪失によって特徴づけられる。場合によっては、脱髄病変は、Ｔ細胞及びマクロファージ媒介炎症反応を示す。一部の実施形態では、脱髄病変は、当技術分野で公知の方法に従って、例えば、Ｌｕｃｃｈｉｎｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ．，（２０００），Ａｍ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｓｓｏｃ，４７：７０７－１７，ａｎｄ Ｐｏｐｅｓｃｕ ｅｔ ａｌ．，（２０１３），Ｃｏｎｔｉｎｕｕｍ （Ｍｉｎｎｅａｐ Ｍｉｎｎ），１９（４ Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）：９０１－２１に記載の４つの脱髄病変パターンを使用して、診断する、測定する、及び／または分類することができる。脱髄疾患には、限定ではないが、多発性硬化症など、例えば、視神経炎、視神経脊髄炎（デビック病）、横断性脊髄炎、急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、副腎脊髄ニューロパシー、ムコ多糖症（ハーラー症候群）、スフィンゴ脂質蓄積症、クラッベ病及び他の白質ジストロフィー、レーベル遺伝性視神経萎縮、フェニルケトン尿症、テイ－サックス病、ニーマンピック病、ゴーシェ病、急性出血性白質脳炎、浸透圧性脱髄症候群、ならびにマルキアファーヴァ－ビッグナミ病が含まれる。一部の実施形態では、脱髄疾患は多発性硬化症である。

【0111】

理論に拘束されることは望まないが、ＴＲＥＭ２をアゴナイズすることで、脱髄疾患、例えば、多発性硬化症の症状が寛解すると考えられる。ある特定の実施形態では、本明細書に記載のとおりのＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２によるシグナル伝達を活性化または増加させて、減少したＴＲＥＭ２機能またはコピー数を補償するか、または別段に回復させ得る。

【0112】

一部の実施形態では、本明細書において提供される方法に従って抗ＴＲＥＭ２抗体を投与される個体は、ミエリン損傷、ＣＮＳにおける１つまたは複数の脱髄病変、ＣＮＳにおける炎症、ＣＮＳにおける１つまたは複数のプラーク、ミエリン鞘の喪失、軸索損傷、ＯＰＣの減少、ＯＬの減少、ミエリンデブリクリアランスの減少、軸索バリコシティ、軸索スフェロイド、グリオーシス、自家蛍光脂質を持ったマクロファージ、軸索破壊、またはそれらの任意の組合せから選択される疾患特徴を有するか、またはそのリスクがある。一部の実施形態では、個体は、ＣＮＳにおける軸索損傷及び／または１つまたは複数の脱髄病変を有するか、またはそれらを有するリスクがある。一部の実施形態では、ＣＮＳにおける軸索損傷及び／または１つまたは複数の脱髄病変は、ＣＮＳの白質、灰白質、または脳梁にある。一部の実施形態では、個体は、感覚の変化、穿痛、しびれ、筋力低下、クローヌス、筋痙攣、移動困難、協調困難、平衡困難、発語障害、嚥下障害、視覚障害、疲労、急性疼痛、慢性疼痛、膀胱障害、腸障害、認知障害、うつ病、不安定な気分、Ｕｈｔｈｏｆｆ現象、レルミット徴候、またはそれらの任意の組合せから選択される症状を有するか、またはそれを有するリスクがある。

【0113】

多発性硬化症
多発性硬化症（ＭＳ）は、散在性硬化症または散在性脳脊髄炎とも称され得る。ＭＳは、脳及び脊髄の軸索周囲の脂肪ミエリン鞘が損傷し、脱髄及び瘢痕化ならびに広範囲の徴候及び症状をもたらす炎症性疾患である。ＭＳは、相互に効果的に伝達する脳及び脊髄内の神経細胞の能力に影響を及ぼす。神経細胞は、ミエリンと呼ばれる絶縁物質内に含有される軸索と呼ばれる長い繊維の下に活動電位と呼ばれる電気信号を送ることによって伝達する。ＭＳでは、自分の身体の免疫系が、ミエリンを攻撃して損傷する。ミエリンが失われると、軸索は、もはや効果的にシグナルを伝導することができない。ＭＳ発症は通常、若年成人で生じ、女性においてより一般的である。

【0114】

ＭＳの症状には、限定ではないが、感度の低下または刺痛感などの感覚の変化；感覚減退及び感覚異常などの穿刺またはしびれ；筋力低下；クローヌス；筋痙攣；移動困難；運動失調などの協調及び平衡障害；構音障害などの発語障害または嚥下障害などの嚥下における困難；眼振などの視覚障害、閃光感覚及び複視を含む視神経炎；疲労、急性または慢性疼痛；ならびに膀胱腸障害；様々な程度の認知障害；うつ病または不安な気分の感情的な症状；通常の周囲温度よりも高い温度に曝されることに起因する現存の症状の悪化であるＵｈｔｈｏｆｆ現象；ならびに首を曲げる時に背中に走る電気的感覚であるＬｈｅｒｍｉｔｔｅ徴候が含まれる。

【0115】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体を投与することによって、多発性硬化症を予防する、そのリスクを減少させる、及び／またはそれを処置することができる。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、多発性硬化症を有する個体において１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性（例えば、ＤＡＰ１２リン酸化反応、ＰＩ３Ｋ活性化、１つもしくは複数の抗炎症性メディエーターの発現の増加、及び１つもしくは複数の炎症誘発性メディエーターの発現の減少）を誘導し得る。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、感度の低下または刺痛感；感覚減退及び感覚異常などの穿刺またはしびれ；筋力低下；クローヌス；筋痙攣；移動困難；運動失調などの協調及び平衡障害；構音障害などの発語障害または嚥下障害などの嚥下における困難；眼振などの視覚障害、閃光感覚及び複視を含む視神経炎；疲労、急性または慢性疼痛；ならびに膀胱腸障害；様々な程度の認知障害；うつ病または不安な気分の感情的な症状；通常の周囲温度よりも高い温度に曝されることに起因する現存の症状の悪化であるＵｈｔｈｏｆｆ現象；ならびに首を曲げる時に背中に走る電気的感覚であるＬｈｅｒｍｉｔｔｅ徴候を含む、多発性硬化症の１つまたは複数の症状の改善または緩和をもたらす。

【0116】

ＴＲＥＭ２タンパク質
本開示は、個体において脱髄疾患を処置する、予防する、またはそのリスクを低下させる方法であって、前記個体に、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合する抗体を投与することを含み、その際、前記抗体がアゴニストである前記方法を提供する。

【0117】

骨髄細胞２（ＴＲＥＭ２）上に発現されるトリガー受容体は、ＴＲＥＭ－２、ＴＲＥＭ２ａ、ＴＲＥＭ２ｂ、ＴＲＥＭ２ｃ、骨髄系細胞－２ａ上に発現されるトリガー受容体、及び単球２上に発現されるトリガー受容体と様々に称される。ＴＲＥＭ２は、２３０アミノ酸の膜タンパク質である。ＴＲＥＭ２は、限定ではないが、マクロファージ、樹状細胞、単球、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、破骨細胞、及びミクログリアを含む、骨髄系細胞上に主に発現される免疫グロブリン様受容体である。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２は、ＤＡＰ１２との受容体シグナル伝達複合体を形成する。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２は、ＤＡＰ１２（ＩＴＡＭドメインアダプタータンパク質）を介して、リン酸化してシグナル伝達する。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２シグナル伝達は、ＰＩ３Ｋまたは他の細胞内シグナルの下流の活性化をもたらす。骨髄系細胞上で、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）シグナルは、例えば、感染応答との関連で、ＴＲＥＭ２活性の活性化に重要である。ＴＬＲ、例えば、マクロファージ及び樹状細胞で発現されるＴＬＲはまた、病的炎症応答において鍵となる役割も果たす。

【0118】

本開示のＴＲＥＭ２タンパク質は、限定ではないが、ヒトＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｑ９ＮＺＣ２、配列番号１）、及び非ヒト哺乳動物ＴＲＥＭ２タンパク質、例えばマウスＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｑ９９ＮＨ８、配列番号２）、ラットＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｄ３ＺＺ８９、配列番号３）、アカゲザルＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｆ６ＱＶＦ２、配列番号４）、カニクイザルＴＲＥＭ２タンパク質（ＮＣＢＩアクセッション番号ＸＰ＿０１５３０４９０９．１、配列番号５）、ウマＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｆ７Ｄ６Ｌ０、配列番号６）、ブタＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｈ２ＥＺＺ３、配列番号７）、及びイヌＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｅ２ＲＰ４６、配列番号８）を含む。本明細書で使用される場合、「ＴＲＥＭ２タンパク質」は、野生型配列及び天然に存在するバリアント配列の両方を指す。一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、野生型ＴＲＥＭ２タンパク質、ＴＲＥＭ２タンパク質の天然に存在するバリアント、またはＴＲＥＭ２タンパク質の疾患バリアントに結合する。

【0119】

一部の実施形態では、ヒトＴＲＥＭ２アミノ酸配列の例は、配列番号１として以下に示される：

【化1】

【0120】

一部の実施形態では、ヒトＴＲＥＭ２は、シグナルペプチドを含むプレタンパク質である。一部の実施形態では、ヒトＴＲＥＭ２は、成熟タンパク質である。一部の実施形態では、成熟ＴＲＥＭ２タンパク質は、シグナルペプチドを含まない。一部の実施形態では、成熟ＴＲＥＭ２タンパク質は、細胞上に発現される。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２は、ヒトＴＲＥＭ２（配列番号１）のアミノ酸残基１～１８に位置するシグナルペプチド、ヒトＴＲＥＭ２（配列番号１）のアミノ酸残基２９～１１２に位置する細胞外免疫グロブリン様可変型（ＩｇＶ）ドメイン、ヒトＴＲＥＭ２（配列番号１）のアミノ酸残基１１３～１７４に位置する追加の細胞外配列、ヒトＴＲＥＭ２（配列番号１）のアミノ酸残基１７５～１９５に位置する膜貫通ドメイン、及びヒトＴＲＥＭ２（配列番号１）のアミノ酸残基１９６～２３０に位置する細胞内ドメインを含有する。ＴＲＥＭ２切断部位は、ヒスチジン１５７のＣ末端側で生じると同定されており（ＷＯ２０１８／０１５５７３を参照されたい）、かつその部位での切断は、ＴＲＥＭ２のその部分に対応する可溶性ＴＲＥＭ２（ｓＴＲＥＭ２）の増加として検出され得る、ＴＲＥＭ２細胞外ドメインの関連部位のシェディングをもたらす。

【0121】

ヒトＴＲＥＭ２の膜貫通ドメインは、ＴＲＥＭ２、ＴＲＥＭ１、及び他の関連ＩｇＶファミリーメンバーからのシグナル伝達を変換する重要なアダプタータンパク質であるＤＡＰ１２におけるアスパラギン酸と相互作用し得るアミノ酸残基１８６のリシンを含む。

【0122】

ＴＲＥＭ２変異
ある特定の実施形態では、脱髄疾患には、「野生型」機能を有すると判断されるか、または正常範囲内であると判断される機能を有するＴＲＥＭ２タンパク質と比較した場合に機能が低下しているＴＲＥＭ２タンパク質が関係している。ある特定の実施形態では、脱髄疾患は、罹患個体におけるＴＲＥＭ２遺伝子の変異によって特徴づけられる。ある特定の実施形態では、変異は、罹患個体においてＴＲＥＭ２の機能の低下をもたらす。前記変異は、例えば、ミスセンス変異、インデル、または短縮化タンパク質産物を生成する変異を含む、いずれの型であってもよい。一部の実施形態では、個体は、機能性ＴＲＥＭ２遺伝子の少なくとも１つのコピーを含む。一部の実施形態では、個体は、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異について、ヘテロ接合型である。一部の実施形態では、個体は、ＴＲＥＭ２遺伝子における変異について、ホモ接合型である。

【0123】

抗ＴＲＥＭ２抗体
本開示のある特定の態様は、アゴニストであるＴＲＥＭ２タンパク質に結合する抗体（例えば、モノクローナル抗体）に関する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、成熟ＴＲＥＭ２タンパク質と結合する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、成熟ＴＲＥＭ２タンパク質と結合し、成熟ＴＲＥＭ２タンパク質は、細胞上に発現される。一部の実施形態では、本開示の抗体は、ヒト樹状細胞、ヒトマクロファージ、ヒト単球、ヒト破骨細胞、ヒト皮膚ランゲルハンス細胞、ヒトクッパー細胞、ヒトミクログリア、及びそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のヒト細胞上に発現されるＴＲＥＭ２タンパク質と結合する。一部の実施形態では、本開示の抗体は、１つまたは複数のヒトミクログリア上に発現されるＴＲＥＭ２タンパク質と結合する。

【0124】

活性を誘導する、及び／またはリガンド誘導活性を増強する抗ＴＲＥＭ２抗体
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導するアゴニスト抗体である。一部の実施形態では、抗体は、細胞上に発現されるＴＲＥＭ２タンパク質に結合した後に、ＴＲＥＭ２の１つまたは複数の活性を誘導する。

【0125】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドと競合する、それを阻害する、またはＴＲＥＭ２タンパク質への結合からそれを別段に遮断することなく、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合する。ＴＲＥＭ２リガンドの例には、限定ではないが、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞によって発現されるＴＲＥＭ２リガンド、アポトーシス細胞、核酸、陰イオン性脂質、ＡＰＯＥ、ＡＰＯＥ２、ＡＰＯＥ３、ＡＰＯＥ４、陰イオン性ＡＰＯＥ、陰イオン性ＡＰＯＥ２、陰イオン性ＡＰＯＥ３、陰イオン性ＡＰＯＥ４、脂質化ＡＰＯＥ、脂質化ＡＰＯＥ２、脂質化ＡＰＯＥ３、脂質化ＡＰＯＥ４、双性イオン性脂質、負の電荷をもつリン脂質、ホスファチジルセリン、スルファチド、ホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン、膜リン脂質、脂質化タンパク質、プロテオ脂質、脂質化ペプチド、及び脂質化アミロイドベータペプチドが含まれる。したがって、ある特定の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドは、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、アポトーシス細胞、核酸、陰イオン性脂質、双性イオン性脂質、負の電荷をもつリン脂質、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、スルファチド、ホスファチジルコリン、スフィンゴミエリン（ＳＭ）、リン脂質、脂質化タンパク質、プロテオ脂質、脂質化ペプチド、及び脂質化アミロイドベータペプチドを含む。

【0126】

本開示の方法で使用される抗ＴＲＥＭ２抗体は、アゴニスト抗体である。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２タンパク質と結合する本開示の抗体には、それらのエピトープ特異性によりＴＲＥＭ２と結合して、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を活性化するアゴニスト抗体が含まれ得る。一部の実施形態では、そのような抗体は、ＴＲＥＭ２上のリガンド結合部位に結合し、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの作用を模倣する、またはリガンド結合部位ではない１つまたは複数のドメインに結合することによって、シグナルを伝達するために、ＴＲＥＭ２を刺激し得る。一部の実施形態では、抗体は、ＴＲＥＭ２へのリガンド結合と競合しない、または別段に遮断しない。一部の実施形態では、抗体は、下に記載のとおり、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドと相加的または相乗的に作用して、１つより多いＴＲＥＭ２活性を活性化する、及び／または増強する。

【0127】

本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの同時結合を遮断することなく、ＴＲＥＭ２と結合する能力を示し得る。本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体はさらに、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドとの相加的及び／または相乗的機能的相互作用を示し得る。したがって、一部の実施形態では、本開示の１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドと組み合わせて本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体に結合した場合のＴＲＥＭ２の最大活性は、飽和濃度のリガンドに単独で、または飽和濃度の抗体に単独で曝露した場合のＴＲＥＭ２の最大活性よりも高くなり得る（例えば、増強され得る）。加えて、所与の濃度のＴＲＥＭ２リガンドでのＴＲＥＭ２の活性は、抗体の存在下で高くなり得る（例えば、増強され得る）。

【0128】

したがって、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドとの相加作用を有し、ＴＲＥＭ２タンパク質に結合した場合に、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドと相乗作用して、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体の非存在下で１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導するための１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの効力と比較して、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導するための１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの効力を増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２の細胞表面クラスター化の非存在下で１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２の細胞表面クラスター化を誘導または保持することによって、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、限定ではないが、Ｂ細胞及びミクログリア細胞を含む１つまたは複数の免疫細胞上に発現される１つまたは複数のＦｃ－ガンマ受容体によってクラスター化される。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の増強は、限定ではないが、樹状細胞、骨髄由来樹状細胞、単球、ミクログリア、マクロファージ、好中球、ＮＫ細胞、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、及びクッパー細胞を包含する初代細胞で、または細胞系で測定される。

【0129】

ある特定の実施形態では、ＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体の非存在下でＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性のレベルと比較した場合に、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍、少なくとも１１倍、少なくとも１２倍、少なくとも１３倍、少なくとも１４倍、少なくとも１５倍、少なくとも１６倍、少なくとも１７倍、少なくとも１８倍、少なくとも１９倍、少なくとも２０倍またはそれ以上に高い上昇を誘導する。

【0130】

一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、ミエリンの存在下で誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、ミエリンの存在下で誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性には、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇が含まれる。一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子には、活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子が含まれる。一部の実施形態では、マウスまたはヒトＴＲＥＭ２依存性遺伝子を活性化する抗ＴＲＥＭ２抗体の能力を、例えば、下記のとおり、ＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核因子）プロモーターの制御下のルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して評価する。

【0131】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体及び／または本開示の１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドによって誘導及び／または増強され得るＴＲＥＭ２活性には、限定ではないが、ＤＡＰ１２へのＴＲＥＭ２結合；ＤＡＰ１２リン酸化；Ｓｙｋキナーゼの活性化；ＩＦＮ－β、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α、ＹＭ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＣＲＰ、ＣＤ８６、ＭＣＰ－１／ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＲ２、ＣＸＣＬ－１０、Ｇａｔａ３、Ｒｏｒｃ、ＩＬ－２０ファミリーメンバー、ＩＬ－３３、ＬＩＦ、ＩＦＮ－ガンマ、ＯＳＭ、ＣＮＴＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ－１、ＭＨＣ－ＩＩ、ＯＰＮ、ＣＤ１１ｃ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、及びＩＬ－２３から選択される１つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節（任意選択で、調節は、マクロファージ、Ｍ１マクロファージ、活性化Ｍ１マクロファージ、Ｍ２マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞から選択される１つまたは複数の細胞で生じる）；ＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体へのＳｙｋ、ＺＡＰ７０、またはその両方の動員；１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇（任意選択で、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子は、活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む）；樹状細胞、マクロファージ、Ｍ１マクロファージ、活性化Ｍ１マクロファージ、Ｍ２マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、Ｍ１ミクログリア、活性化Ｍ１ミクログリア、及びＭ２ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増加；ＣＤ８３、ＣＤ８６ ＭＨＣクラスＩＩ、ＣＤ４０、及びそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数の刺激分子の発現の調節（任意選択で、ＣＤ４０は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せの上に発現され、任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含み得る）；記憶の増大、ならびに認知障害の減少が含まれる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体に投与された場合に、記憶を増大させる、及び／または認知障害を減少させる。

【0132】

一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＤＡＰ１２へのＴＲＥＭ２結合、ＤＡＰ１２リン酸化、Ｓｙｋキナーゼの活性化、ＳｙｋのＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体への動員、１つもしくは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇、またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する。一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子には、活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子が含まれる。

【0133】

Ｓｙｋリン酸化
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞で発現されるＴＲＥＭ２タンパク質に結合した後に、脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）リン酸化を誘導し得る。

【0134】

脾臓チロシンキナーゼ（Ｓｙｋ）は、いくつかの基質をリン酸化し、それによって、細胞活性化及び炎症プロセスをもたらすシグナル伝達複合体の形成を促進することによって、ＴＲＥＭ２の下流で機能する細胞内シグナル伝達分子である。

【0135】

一部の実施形態では、Ｓｙｋ活性化を誘導するアゴニストＴＲＥＭ２抗体の能力を、マウスマクロファージを培養し、かつ細胞抽出物中のＳｙｋタンパク質のリン酸化状態を測定することによって決定する。一部の実施形態では、野生型（ＷＴ）マウスからの、ＴＲＥＭ２ノックアウト（ＫＯ）からの、及び機能性Ｆｃ受容体共通ガンマ鎖遺伝子の発現を欠いたマウス（ＦｃｇＲ ＫＯ；ＲＥＦ：Ｔａｋａｉ Ｔ １９９４．Ｃｅｌｌ ７６（３）：５１９－２９）からの骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）を１％血清ＲＰＭＩ中で４時間にわたって飢餓させ、次いで、ＰＢＳ－ＥＤＴＡで組織培養皿から除去し、ＰＢＳで洗浄し、カウントする。一部の実施形態では、細胞を氷上で、全長ＴＲＥＭ２抗体で、または対照抗体で１５分間にわたってコーティングする。一部の実施形態では、冷ＰＢＳで洗浄した後に、細胞を３７℃で、表示の期間にわたって、ヤギ抗ヒトＩｇＧの存在下でインキュベートする。一部の実施形態では、刺激の後に、細胞を、溶解バッファー（１％ｖ／ｖ ＮＰ－４０％、５０Ｍｍトリス－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１０％グリセロール、ならびにプロテアーゼ及びホスファターゼ阻害薬）で溶解させ、続いて、１６，０００ｇで１０分間、４℃で遠心して、不溶性物質を除去する。一部の実施形態では、次いで、溶解産物を抗Ｓｙｋ抗体（ＢＭＤＭではＮ－１９またはヒトＤＣでは４Ｄ１０、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で免疫沈着させる。一部の実施形態では、沈着したタンパク質をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって画分し、ＰＶＤＦ膜に移し、かつ抗ホスホチロシン抗体（４Ｇ１０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）でプローブする。一部の実施形態では、全ての基質が適切に免疫沈着することを確認するために、免疫ブロットを抗Ｓｙｋ抗体（ＢＭＤＭでは、Ａｂｃａｍ）または抗Ｓｙｋ（ヒトＤＣでは、Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）で再プローブする。一部の実施形態では、記載されているとおりに（例えば、Ｐｅｎｇ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｓｃｉ Ｓｉｇｎａｌ．、３（１２２）：ｒａ３８）、可視化を、増強化学発光（ＥＣＬ）システム（ＧＥ ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）で実行する。

【0136】

ＤＡＰ１２結合及びリン酸化
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＤＡＰ１２へのＴＲＥＭ２の結合を誘導し得る。他の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞上に発現されるＴＲＥＭ２タンパク質に結合した後に、ＤＡＰ１２リン酸化を誘導し得る。他の実施形態では、ＴＲＥＭ２媒介性ＤＡＰ１２リン酸化は、１つまたは複数のＳＲＣファミリーチロシンキナーゼによって誘導される。Ｓｒｃファミリーチロシンキナーゼの例には、限定ではないが、Ｓｒｃ、Ｓｙｋ、Ｙｅｓ、Ｆｙｎ、Ｆｇｒ、Ｌｃｋ、Ｈｃｋ、Ｂｌｋ、Ｌｙｎ、及びＦｒｋが含まれる。

【0137】

ＤＡＰ１２は、ＴＹＲＯプロテインチロシンキナーゼ結合タンパク質、ＴＹＲＯＢＰ、ＫＡＲＡＰ、及びＰＬＯＳＬと様々に称される。ＤＡＰ１２は、その細胞質ドメインに、免疫受容体チロシン系活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を含有する膜貫通型シグナル伝達タンパク質である。ある特定の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＩＴＡＭモチーフに、ＤＡＰ１２リン酸化を誘導し得る。ＤＡＰ１２リン酸化などのタンパク質リン酸化を決定するための当技術分野で公知の任意の方法を使用してよい。

【0138】

一部の実施形態では、ＤＡＰ１２は、ＳＲＣファミリーキナーゼによってリン酸化されて、ＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体へのＳｙｋキナーゼ、ＺＡＰ７０キナーゼ、またはその両方の動員及び活性化をもたらす。

【0139】

一部の実施形態では、ＤＡＰ１２活性化を誘導するＴＲＥＭ２抗体の能力は、マウスマクロファージを培養し、かつ細胞抽出物中のＤＡＰ１２タンパク質のリン酸化状態を測定することによって決定する。一部の実施形態では、抗体で刺激する前に、マウス野生型（ＷＴ）骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）及びＴＲＥＭ２ノックアウト（ＫＯ）ＢＭＤＭを４時間にわたって、１％血清ＲＰＭＩ中で飢餓させる。一部の実施形態では、１５×１０^６の細胞を氷中で、１５分間にわたって、全長ＴＲＥＭ２抗体または対照抗体と共にインキュベートする。一部の実施形態では、細胞を洗浄し、３７℃で、表示の期間にわたって、ヤギ抗ヒトＩｇＧの存在下でインキュベートする。一部の実施形態では、刺激の後に、細胞を、溶解バッファー（１％ｖ／ｖ ｎ－ドデシル－β－Ｄ－マルトシド、５０Ｍｍトリス－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１０％グリセロール、ならびにプロテアーゼ及びホスファターゼ阻害薬）で溶解させ、続いて、１６，０００ｇで１０分間にわたって、４℃で遠心して、不溶性物質を除去する。一部の実施形態では、細胞溶解産物を、二次ＴＲＥＭ２抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）で免疫沈着させる。一部の実施形態では、沈着したタンパク質をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって画分し、ＰＶＤＦ膜に移し、かつ抗ホスホチロシンＡｂ（４Ｇ１０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）でプローブする。一部の実施形態では、その膜をストリッピングし、抗ＤＡＰ１２抗体（Ｃｅｌｌｓ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ、Ｄ７Ｇ１Ｘ）で再プローブする。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２免疫沈降のために使用される各細胞溶解産物は、対照抗体（ａｎｔｉ－Ａｃｔｉｎ、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）によって示されるとおり、等量のタンパク質を含有する。

【0140】

ＴＲＥＭ２発現細胞の増殖、生存及び機能
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞で発現されるＴＲＥＭ２タンパク質に結合した後に、樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞（ミクログリア）の増殖、生存、及び／または機能を増加させ得る。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数の先天免疫細胞の成長（例えば、増殖及び／または生存）を阻害しない。

【0141】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞で発現されるＴＲＥＭ２タンパク質に結合した後に、ミクログリア細胞（ミクログリア）の増殖、生存、及び／または機能を上昇させ得る。ミクログリア細胞は、脳及び脊髄の常在マクロファージであるグリア細胞の１種であり、したがって、中枢神経系（ＣＮＳ）における最初の及び主要な形態の能動的免疫防御として作用する。ミクログリア細胞は、脳内の全グリア細胞集団の２０％を構成する。ミクログリア細胞は常に、ＣＮＳからプラーク、損傷ニューロン、及び感染性因子を取り除く。脳及び脊髄は、それらが、ほとんどの感染が易損性の神経組織に到達するのを防止する血液脳関門として知られている一連の内皮細胞によって身体の残部から分離されている「免疫特権」臓器と考えられている。感染因子が脳に直接導入される、または血液脳関門を通過する場合、ミクログリア細胞は、炎症を減少させるために迅速に反応し、感染因子が敏感な神経組織を損傷する前に、それらを破壊しなければならない。身体の残部からの抗体を利用することができない（血液脳関門を通過するのに十分に小さい抗体はほとんどない）ために、ミクログリアは、異物を認識し、それらを飲み込み、Ｔ細胞を活性化する抗原提示細胞として作用することができなければならない。このプロセスは、致命的な損傷を潜在的に防止するために、迅速に行われなければならないので、ミクログリア細胞は、ＣＮＳの小さな病理学的変化にさえ極めて感受性が高い。それらは、細胞外カリウムの小さな変化にさえ応答する独特なカリウムチャネルを有することによって、この感受性を部分的に達成する。

【0142】

本明細書で使用される場合、本開示のマクロファージには、限定ではないが、Ｍ１マクロファージ、活性化Ｍ１マクロファージ、及びＭ２マクロファージが含まれる。本明細書で使用される場合、本開示のミクログリア細胞には、限定ではないが、Ｍ１ミクログリア細胞、活性化Ｍ１ミクログリア細胞、及びＭ２ミクログリア細胞が含まれる。

【0143】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、樹状細胞、単球、及び／またはマクロファージ上におけるＣＤ８３及び／またはＣＤ８６の発現を増加させ得る。

【0144】

本明細書で使用される場合、マクロファージ、樹状細胞、単球、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能は、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体で処置された対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能が、抗ＴＲＥＭ２抗体で処置されていない対応する対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能よりも多い場合に、発現の増加を含み得る。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能を、例えば、抗ＴＲＥＭ２抗体で処置されていない対応する対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能と比較して少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１１５％、少なくとも１２０％、少なくとも１２５％、少なくとも１３０％、少なくとも１３５％、少なくとも１４０％、少なくとも１４５％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、または少なくとも２００％増加させ得る。他の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能を、例えば、抗ＴＲＥＭ２抗体で処置されていない対応する対象の樹状細胞、マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及び／またはミクログリアの増殖速度、生存、及び／または機能と比較して少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍増加させ得る。

【0145】

一部の実施形態では、インビトロで細胞生存を誘導する、または増強する抗ＴＲＥＭ２抗体の能力を評価するために、ＦｃｇＲＩ、ＦｃｇＲＩＩＩ、及びＦｃｅＲＩ受容体のガンマ鎖サブユニットが欠損したマクロファージ（Ｆｃｇｒ１ＫＯマウス、ＲＥＦ： Ｔａｋａｉ Ｔ、Ｌｉ Ｍ、Ｓｙｌｖｅｓｔｒｅ Ｄ、Ｃｌｙｎｅｓ Ｒ、Ｒａｖｅｔｃｈ Ｊ．（１９９４）．Ｃｅｌｌ、７６：５１９－５２９）を、プレート結合した抗ＴＲＥＭ２抗体の存在下で培養し、細胞を最適以下の成長条件で培養した場合の細胞生存率を決定する。一部の実施形態では、ＦｃｇＲ１ ＫＯマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ、Ｍｏｄｅｌ ５８４）からのマウス骨髄前駆細胞を、冷ＰＢＳで脛骨及び大腿骨髄細胞をフラッシュすることによって得る。一部の実施形態では、ＰＢＳで１回洗浄した後に、赤血球を、ＡＣＫ溶解バッファー（Ｌｏｎｚａ）を使用して溶解させ、ＰＢＳで２回洗浄し、かつ０．５×１０^６細胞／ｍｌで完全ＲＰＭＩ培地（１０％ＦＣＳ、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、Ｇｌｎ、ｎｅＡＡ）中に、表示の量のＭ－ＣＳＦ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）と共に懸濁して、マクロファージを生成した。一部の実施形態では、骨髄由来マクロファージの細胞生存率を分析するために、細胞を上のとおりに調製し、２．５×１０^４／２００μｌで９６ウェルプレート内に、最適以下の量のＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）と共に、非組織培養処理されたプレート内で、２日間にわたってプレーティングする。一部の実施形態では、次いで、細胞を、ＴｏｘＧｌｏ（商標）キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して定量化し、かつルミネセンスを、細胞生存率の尺度として決定する。一部の実施形態では、全ての実験を、抗ＴＲＥＭ２抗体またはアイソタイプ対照抗体の存在下、または非存在下で行う。

【0146】

ＴＲＥＭ２依存性遺伝子発現
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、転写因子の活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）ファミリーの１つまたは複数の転写因子などのＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性及び／または発現を増加させ得る。

【0147】

一部の実施形態では、マウスまたはヒトＴＲＥＭ２依存性遺伝子を活性化する可溶性全長抗ＴＲＥＭ２抗体の能力を、ＮＦＡＴ（活性化Ｔ細胞核因子）プロモーターの制御下のルシフェラーゼレポーター遺伝子を使用して評価する。一部の実施形態では、マウス胸腺リンパ腫Ｔリンパ球に由来する細胞系ＢＷ５１４７．Ｇ．１．４（ＡＴＣＣ（登録商標）ＴＩＢ４８（商標））をマウスＴＲＥＭ２及びＤＡＰ１２に、ならびにＣｉｇｎａｌ Ｌｅｎｔｉ ＮＦＡＴ－ルシフェラーゼウイルス（Ｑｉａｇｅｎ）に感染させる。一部の実施形態では、別法で、ＢＷ５１４７．Ｇ．１．４細胞系を、ヒトＴＲＥＭ２／ＤＡＰ１２融合タンパク質に、かつＣｉｇｎａｌ Ｌｅｎｔｉ ＮＦＡＴ－ルシフェラーゼウイルス（Ｑｉａｇｅｎ）に感染させる。一部の実施形態では、シグナル伝達のための陽性対照として、ＰＭＡ（０．０５ｕｇ／ｍｌ）及びイオノマイシン（０．２５ｕＭ）を一緒に添加する。一部の実施形態では、細胞を可溶性抗ＴＲＥＭ２及びアイソタイプ対照抗体と一緒に６時間にわたってインキュベートし、かつルシフェラーゼ活性を、ＯｎｅＧｌｏ試薬（Ｐｒｏｍｅｇａ）を各ウェルに添加し、かつ３分間、室温で、プレート振盪機上でインキュベートすることによって測定する。一部の実施形態では、ルシフェラーゼシグナルを、ＢｉｏＴｅｋプレートリーダーを使用して測定する。一部の実施形態では、細胞は、持続性のＴＲＥＭ２依存性シグナル伝達を、ＴＲＥＭ２シグナル伝達をもたらす内在性リガンドの存在、または自発的受容体凝集のいずれかにより呈示する。

【0148】

一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドのＴＲＥＭ２タンパク質への結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の増強は、例えば、インビトロ細胞アッセイを利用して測定される。一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の増加は、本明細書に記載されているか、または当技術分野で知られている任意の適切なインビトロ細胞ベースのアッセイもしくは適切なインビボモデルによって、例えば、ＴＲＥＭ２依存性遺伝子発現を測定するためのルシフェラーゼベースのレポーターアッセイを利用すること、Ｓｙｋなどの下流シグナル伝達パートナーのＴＲＥＭ２誘導性リン酸化の増加を測定するためのウェスタンブロット分析を使用することによって、またはＴＲＥＭ２活性化のマーカーの細胞表面レベルでの変化を測定するための、蛍光標識細胞分取（ＦＡＣＳ）などのフローサイトメトリーを利用することによって測定され得る。ＴＲＥＭ２と１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドとの間の相互作用（例えば、結合）を測定するために、本明細書に記載されているか、または当技術分野で公知である任意のインビトロ細胞ベースのアッセイまたは適切なインビボモデルを使用してもよい。

【0149】

一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の上昇をインビトロ細胞ベースアッセイによって測定する。一部の実施形態では、インビトロで細胞生存を増強する抗ＴＲＥＭ２抗体の能力を評価するために、ＦｃｇＲＩ、ＦｃｇＲＩＩＩ、及びＦｃｅＲＩ受容体のガンマ鎖サブユニットが欠損しているマクロファージ（Ｆｃｇｒ１ＫＯ ｍｉｃｅ、ＲＥＦ： Ｔａｋａｉ Ｔ、Ｌｉ Ｍ、Ｓｙｌｖｅｓｔｒｅ Ｄ、Ｃｌｙｎｅｓ Ｒ、Ｒａｖｅｔｃｈ Ｊ．（１９９４）．Ｃｅｌｌ、７６：５１９－５２９）を、プレート結合した抗ＴＲＥＭ２抗体の存在下で培養し、細胞を最適以下の成長条件で培養した場合の細胞生存率を決定する。一部の実施形態では、ＦｃｇＲ１ ＫＯマウス（Ｔａｃｏｎｉｃ、Ｍｏｄｅｌ ５８４）からのマウス骨髄前駆細胞を、冷ＰＢＳで脛骨及び大腿骨髄細胞をフラッシュすることによって得る。一部の実施形態では、ＰＢＳで１回洗浄した後に、赤血球を、ＡＣＫ溶解バッファー（Ｌｏｎｚａ）を使用して溶解させ、ＰＢＳで２回洗浄し、かつ０．５×１０^６細胞／ｍｌで完全ＲＰＭＩ培地（１０％ＦＣＳ、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、Ｇｌｎ、ｎｅＡＡ）中に、表示の量のＭ－ＣＳＦ（Ｐｅｐｒｏｔｅｃｈ）と共に懸濁して、マクロファージを生成した。一部の実施形態では、骨髄由来マクロファージの細胞生存率を分析するために、細胞を上のとおりに調製し、２．５×１０^４／２００μｌで９６ウェルプレート内に、最適以下の量のＭ－ＣＳＦ（１０ｎｇ／ｍｌ）と共に、非組織培養処理されたプレート内で、２日間にわたってプレーティングする。一部の実施形態では、次いで、細胞を、ＴｏｘＧｌｏ（商標）キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して定量化し、かつルミネセンスを、細胞生存率の尺度として決定する。一部の実施形態では、全ての実験を、抗ＴＲＥＭ２抗体またはアイソタイプ対照抗体の存在下、または非存在下で行う。

【0150】

一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の上昇をインビボ細胞ベースのアッセイによって測定する。一部の実施形態では、インビボで免疫細胞の数を増加させる抗ＴＲＥＭ２抗体の能力を評価するために、Ｃ５７Ｂｌ６マウスに、抗ＴＲＥＭ２抗体またはマウスＩｇＧ１アイソタイプ対照抗体を腹腔内（ＩＰ）注射し、かつ脳内の免疫細胞の数をＦＡＣＳによって定量化する。一部の実施形態では、１群あたり３から４匹のマウスに、４０ｍｇ／ｋｇの抗ＴＲＥＭ２抗体またはアイソタイプ対照抗体ｍＩｇＧ１（クローンＭＯＰＣ－２１、Ｂｉｏｘｃｅｌｌ）のＩＰ注射を投与する。一部の実施形態では、４８時間後に、脳全体を採取し、ＰＢＳですすぎ、３７℃で、１ｍｇ／ｍｌのコラゲナーゼを含有するＰＢＳ中でインキュベートし、かつ細胞ストレーナに通して処理して、単一細胞懸濁液を得る。一部の実施形態では、次いで、細胞を抗ＣＤ４５－ＰｅｒＣｐ－Ｃｙ７、抗ＣＤ１１ｂ－ＰｅｒＣＰ－Ｃｙ５．５、抗Ｇｒ１－ＦＩＴＣ抗体及び細胞生存率色素（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｔ＃ Ｌ３４９５７）と共に３０分間にわたって、氷上でインキュベートし、次いで、冷ＦＡＣＳバッファーで２回洗浄する。一部の実施形態では、次いで、４％ＰＦＡ固定試料をＦＡＣＳによって分析する。一部の実施形態では、データをＢＤ ＦＡＣＳＣａｎｔｏ（商標）ＩＩ血球計算器（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ）で取得して、ＦｌｏｗＪｏソフトウェアで解析した。

【0151】

一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２リガンドをそのＥＣ_５０濃度で使用したときに、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、約０．５ｎＭ～約５０ｎＭの範囲、または５０ｎＭ超の濃度で使用した場合に、抗ＴＲＥＭ２抗体の非存在下でのＴＲＥＭ２タンパク質へのＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導されるＴＲＥＭ２依存性遺伝子転写のレベルと比較して、リガンド誘導性ＴＲＥＭ２依存性遺伝子転写の約１．５倍～約６倍、または６倍超の範囲の増加を誘導するならば、ＴＲＥＭ２タンパク質へのＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２リガンドをそのＥＣ_５０濃度で使用した場合に、リガンド誘導性ＴＲＥＭ２依存性遺伝子転写の増加は、約０．５ｎＭ～約５０ｎＭの範囲、または５０ｎＭ超の濃度で使用した場合に、抗ＴＲＥＭ２抗体の非存在下でのＴＲＥＭ２タンパク質へのＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導されるＴＲＥＭ２依存性遺伝子転写のレベルと比較して少なくとも１．５倍、少なくとも２倍、少なくとも３倍、少なくとも４倍、少なくとも５倍、少なくとも６倍、少なくとも７倍、少なくとも８倍、少なくとも９倍、少なくとも１０倍、少なくとも１１倍、少なくとも１２倍、少なくとも１３倍、少なくとも１４倍、少なくとも１５倍、少なくとも１６倍、少なくとも１７倍、少なくとも１８倍、少なくとも１９倍、少なくとも２０倍またはそれ以上である。

【0152】

一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、少なくとも０．５ｎＭ、少なくとも０．６ｎＭ、少なくとも０．７ｎＭ、少なくとも０．８ｎＭ、少なくとも０．９ｎＭ、少なくとも１ｎＭ、少なくとも２ｎＭ、少なくとも３ｎＭ、少なくとも４ｎＭ、少なくとも５ｎＭ、少なくとも６ｎＭ、少なくとも７ｎＭ、少なくとも８ｎＭ、少なくとも９ｎＭ、少なくとも１０ｎＭ、少なくとも１５ｎＭ、少なくとも２０ｎＭ、少なくとも２５ｎＭ、少なくとも３０ｎＭ、少なくとも３５ｎＭ、少なくとも４０ｎＭ、少なくとも４５ｎＭ、少なくとも４６ｎＭ、少なくとも４７ｎＭ、少なくとも４８ｎＭ、少なくとも４９ｎＭ、または少なくとも５０ｎＭの濃度で使用される。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２リガンドは、ホスファチジルセリン（ＰＳ）である。一部の実施形態では、ＴＲＥＭ２リガンドは、スフィンゴミエリン（ＳＭ）である。一部の実施形態では、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性の増加は、本明細書に記載されている、または当技術分野で知られている任意の適切なインビトロ細胞ベースのアッセイまたは適切なインビボモデルによって測定され得る。一部の実施形態では、例えば、ＷＯ２０１７／０６２６７２及びＷＯ２０１９／０２８２９２に記載されているとおり、抗体の存在下、及び非存在下で、リガンド誘導性ＴＲＥＭ２依存性遺伝子発現の倍数増加を測定するために、ルシフェラーゼベースのレポーターアッセイが使用される。

【0153】

本明細書で使用される場合、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、それが、本明細書に記載されている、または当技術分野で知られている任意のインビトロアッセイまたは細胞ベースの培養アッセイを利用して、飽和抗体濃度で、ＴＲＥＭ２へのリガンド結合を２０％未満低下させるならば、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドとＴＲＥＭ２との間の相互作用（例えば、結合）と競合しない、阻害しない、または別段に遮断しない。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、本明細書に記載されている、または当技術分野で知られている任意のインビトロアッセイまたは細胞ベースの培養アッセイを使用して、飽和抗体濃度で、１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドとＴＲＥＭ２との相互作用（例えば、結合）を２０％未満、１９％未満、１８％未満、１７％未満、１６％未満、１５％未満、１４％未満、１３％未満、１２％未満、１１％未満、１０％未満、９％未満、８％未満、７％未満、６％未満、５％未満、４％未満、３％未満、２％未満、または１％未満阻害する。

【0154】

可溶性ＴＲＥＭ２を減少させる抗ＴＲＥＭ２抗体
一部の実施形態では、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、可溶性ＴＲＥＭ２（ｓＴＲＥＭ２）を減少させる。一部の実施形態では、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞の細胞表面から細胞外試料へと「排出される（ｓｈｅｄ）」ｓＴＲＥＭ２レベル（例えば、シェディング）を低下させる。一部の実施形態では、そのような抗体は、ＴＲＥＭ２の切断をブロックするように、ＴＲＥＭ２の領域に結合する。そのような実施形態では、抗体は、ＴＲＥＭ２の切断部位であるＨｉｓ１５７を含む領域に結合する。

【0155】

抗ＴＲＥＭ２抗体によるＴＲＥＭ２の切断の阻害程度は、抗ＴＲＥＭ２抗体の非存在下でのｓＴＲＥＭ２の量と比較した場合に、抗ＴＲＥＭ２抗体の存在下での可溶性ＴＲＥＭ２（ｓＴＲＥＭ２）の量と負に相関する。例えば、抗ＴＲＥＭ２抗体は、例えばｓＴＲＥＭ２のＥＬＩＳＡベースの定量化によりアッセイした場合に、抗ＴＲＥＭ２抗体の存在下で、ｓＴＲＥＭ２の量が、抗ＴＲＥＭ２抗体の非存在下でのｓＴＲＥＭ２の量の０～９０％、好ましくは０～８０％、より好ましくは０～７０％、なおより好ましくは０～６０％、なおより好ましくは０～５０％、なおより好ましくは０～２０％である場合に、ＴＲＥＭ２の切断を阻害する抗ＴＲＥＭ２抗体と判断され得る。

【0156】

一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、処置された試料におけるｓＴＲＥＭ２の量が、対照値と比較した場合に、少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％またはそれ以上低下する場合に、ｓＴＲＥＭ２のレベルを低下させる。一部の実施形態では、対照値は、未処置の試料（例えば、抗ＴＲＥＭ２抗体で処置されていないＴＲＥＭ２発現細胞からの上清、または抗ＴＲＥＭ２抗体で処置されていない対象からの試料）または適切な非ＴＲＥＭ２結合抗体で処置された試料におけるｓＴＲＥＭ２の量である。

【0157】

一部の実施形態では、ｓＴＲＥＭ２シェディングは、液体、例えば、血液、血漿、血清、尿、または脳脊髄液を含む試料を使用して測定される。一部の実施形態では、試料は、脳脊髄液を含む。一部の実施形態では、試料は、細胞培養物からの上清（例えば、ＴＲＥＭ２を内因性発現する初代細胞もしくは細胞系、例えば、ヒトマクロファージ、またはＴＲＥＭ２を発現するように操作されている初代細胞もしくは細胞系からの上清を含む。

【0158】

一部の実施形態では、試料におけるｓＴＲＥＭ２のレベルは、イムノアッセイを使用して測定される。イムノアッセイは、当技術分野で公知であり、かつ、これに限定されないが、酵素イムノアッセイ（ＥＩＡ）、例えば、酵素増幅イムノアッセイ（ＥＭＩＡ）、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、微粒子酵素イムノアッセイ（ＭＥＩＡ）、免疫組織化学（ＩＨＣ）、免疫細胞化学、キャピラリー電気泳動イムノアッセイ（ＣＥＩＡ）、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）、免疫蛍光、化学発光イムノアッセイ（ＣＬ）、及び電気化学発光イムノアッセイ（ＥＣＬ）が含まれる。一部の実施形態では、ｓＴＲＥＭ２レベルは、ＥＬＩＳＡアッセイを使用して測定される。

【0159】

一部の実施形態では、ＥＬＩＳＡアッセイを、細胞培養上清においてｓＴＲＥＭ２のレベルを定量するために使用し得る。一部の実施形態では、ヒトｓＴＲＥＭ２のためのＥＬＩＳＡを、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ２４００を使用して行う。一部の実施形態では、ストレプトアビジンコーティングされた９６ウェルプレートを終夜４℃で、ＰＢＳ（ｐＨ７．４）中０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０（ブロッキングバッファー）中でブロックする。一部の実施形態では、プレートを１時間にわたって室温で、ブロッキングバッファー中で希釈されたビオチン化ポリクローナルヤギ抗ヒトＴＲＥＭ２捕捉抗体（０．２５ｍｇ／ｍｌ；Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）と共に振盪する。一部の実施形態では、続いて、プレートをＰＢＳ中０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０（洗浄バッファー）で４回洗浄し、かつ２時間にわたって室温で、プロテアーゼ阻害薬（Ｓｉｇｍａ）を補充されたＰＢＳ（ｐＨ７．４）中０．２５％ＢＳＡ及び０．０５％Ｔｗｅｅｎ ２０（アッセイバッファー）中で１：４希釈された試料と共にインキュベートする。一部の実施形態では、組換えヒトＴＲＥＭ２タンパク質（Ｈｏｌｚｅｌ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｋａ）をアッセイバッファー中で２倍希釈系列で希釈して、標準曲線のために使用する（濃度範囲、４０００～６２．５ｐｇ／ｍｌ）。一部の実施形態では、プレートを５分間にわたって洗浄バッファーで３回洗浄し、その後、１時間にわたって室温で、ブロッキングバッファー中で希釈されたマウスモノクローナル抗ＴＲＥＭ２抗体（１ｍｇ／ｍｌ；Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ；Ｂ－３）と共にインキュベートする。一部の実施形態では、３回の追加の洗浄ステップの後に、プレートをＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ標識抗マウス二次抗体（１：１０００；Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ）と共にインキュベートし、かつ１時間にわたって暗所でインキュベートする。一部の実施形態では、プレートを洗浄バッファーで３回洗浄し、ＰＢＳ中での２回の洗浄ステップを続け、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｒｅａｄバッファーを添加することによって現像する。一部の実施形態では、電気化学刺激後の６２０ｎｍでの発光を、Ｍｅｓｏ Ｓｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＳＥＣＴＯＲ Ｉｍａｇｅｒ ２４００リーダーを使用して測定する。一部の実施形態では、分泌されたＴＲＥＭ２のレベルを定量化するために、生物学的反復からの馴化培地を２連で分析する。一部の実施形態では、ｓＴＲＥＭ２標準曲線を、ＭａｓｔｅｒＰｌｅｘ ＲｅａｄｅｒＦｉｔソフトウェア（ＭｉｒａｉＢｉｏ Ｇｒｏｕｐ、Ｈｉｔａｃｈｉ Ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ Ａｍｅｒｉｃａ）を使用して５パラメーターロジスティックフィットにより生成する。一部の実施形態では、続いて、ｓＴＲＥＭ２のレベルを、ウェスタンブロットから定量化されたとおりの未熟ＴＲＥＭ２のレベルに対して正規化する。

【0160】

一部の実施形態では、ｓＴＲＥＭ２は、細胞ＴＲＥＭ２受容体の不活性なバリアントであり得る。一部の実施形態では、ｓＴＲＥＭ２は、末梢に、例えば、対象の血漿、または脳に存在し得て、かつ抗ＴＲＥＭ２抗体を隔離し得る。そのような隔離された抗体は、例えば、細胞上に存在する細胞ＴＲＥＭ２受容体に結合して、それを活性化することはできないであろう。したがって、ある特定の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体、例えば本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、可溶性ＴＲＥＭ２に結合しない。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体、例えば本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体はインビボで可溶性ＴＲＥＭ２に結合しない。一部の実施形態では、可溶性ＴＲＥＭ２に結合しない本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、例えば、ｓＴＲＥＭ２には含まれない細胞ＴＲＥＭ２の細胞外ドメインの一部、例えば、アミノ酸残基１６１～１７５内の１つまたは複数のアミノ酸残基を含み得るか；ＴＲＥＭ２の膜貫通部分にあるか、もしくはその付近にあり得るか；またはＴＲＥＭ２の膜貫通部分を含み得るＴＲＥＭ２上のエピトープに結合し得る。

【0161】

ミエリンクリアランスを促進する抗ＴＲＥＭ２抗体
脱髄疾患の病理学的ホールマークは、ＣＮＳにおける脱髄病変の形成である。例えば、多発性硬化症では、脱髄病変は、白色の及び灰白質において見い出され得る（Ｌａｓｓｍａｎｎ，Ｂｒｕｃｋ ｅｔ ａｌ．２００７）。食細胞によるミエリンデブリの除去及びクリアランスが、組織において再有髄化に干渉し得る阻害シグナルを排除するために重要であることは公知である（Ｋｏｔｔｅｒ，Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２００６；Ｌａｍｐｒｏｎ，Ｌａｒｏｃｈｅｌｌｅ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｆｒａｎｋｌｉｎ ａｎｄ Ｆｆｒｅｎｃｈ－Ｃｏｎｓｔａｎｔ ２０１７）。

【0162】

したがって、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリのクリアランスを増加させる、または促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量を少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも１００％減少させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量を減少させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量を減少させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリの量と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で減少させる。

【0163】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度を上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体におけるミエリンデブリ除去の速度と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度を上昇させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるミエリンデブリ除去の速度と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で上昇させる。

【0164】

脱髄病変、及び／または有髄化状態を個体において、当技術分野における任意の方法、例えば、磁化移動率（ＭＴＲ）、制限プロトン画分（ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ ｐｒｏｔｏｎ ｆｒａｃｔｉｏｎ）ｆ、ミエリン水画分及び拡散テンソル画像法（ＤＴＩ）、陽電子放射型断層撮影法（ＰＥＴ）、及び磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を使用して測定することができる（例えば、Ｍａｌｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，（２０１４） Ｊ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ，ａｎｄ Ｐｓｙｃｈｉａｔｒｙ，８５（１２）：１３９６－１４０４を参照されたい）。

【0165】

オリゴデンドロサイトを促進する抗ＴＲＥＭ２抗体
通常、脱髄中のオリゴデンドロサイト（ＯＬ）喪失には、ＣＮＳに広く分布している多能性成体前駆細胞であるオリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）によって主に持続される再有髄化が続く。多発性硬化症では、ＯＰＣからのＯＬの生成不全が脱髄及び再有髄化との間の不均衡につながり、これが、脳内での持続性の脱髄及びミエリンデブリ蓄積の主な原因であり、最終的には、神経学的身体障害として臨床的に現れる軸索損傷をもたらす（Ｄｕｌａｍｅａ ２０１７）。理論に拘束されることは望まないが、ＭＳなどの脱髄疾患における軸索再有髄化の失敗は、ＯＰＣ活性化不全、脱髄部位へのＯＰＣ動員不全、及び／または有髄化成熟ＯＬへのＯＰＣ分化の異常により得ると考えられる（Ｆｒａｎｋｌｉｎ及びＦｆｒｅｎｃｈ－Ｃｏｎｓｔａｎｔ ２０１７）．

【0166】

したがって、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）１つまたは複数の脱髄病変へのＯＰＣの動員を増加させる、または促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数を増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数を増加させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるＯＰＣの数と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で増加させる。一部の実施形態では、ＯＰＣは、ＰＤＧＦＲａ陽性である。

【0167】

他の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化を増加させる、または促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍に上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度と比較して上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度と比較して上昇させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬへのＯＰＣの分化速度と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で上昇させる。

【0168】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）、１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの増加を促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍に増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数を増加させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数と比較して、個体において１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数を増加させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変における成熟ＯＬの数と比較して、複数での個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で増加させる。

【0169】

一部の実施形態では、成熟ＯＬは、ＯＬＩＧ２及び／またはＣＮＰアーゼ陽性である。成熟ＯＬを定量化するための方法が記載されている（例えば、Ｌｕｃｃｈｉｎｅｔｔｉ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｂｒａｉｎ １２２（１２）：２２７９－２２９５を参照されたい）。

【0170】

再有髄化及び軸索健康を促進する抗ＴＲＥＭ２抗体
多発性硬化症などの脱髄疾患における脱髄は最終的に、神経学的身体障害として臨床的に現れる軸索損傷をもたらす（Ｄｕｌａｍｅａ ２０１７）。

【0171】

したがって、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を増大させる、または促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍に増大させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化と比較して増大させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化と比較して増大させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で増大させる。

【0172】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度を少なくとも１．５倍、少なくとも１．６倍、少なくとも１．７倍、少なくとも１．８倍、少なくとも１．９倍、少なくとも２．０倍、少なくとも２．１倍、少なくとも２．１５倍、少なくとも２．２倍、少なくとも２．２５倍、少なくとも２．３倍、少なくとも２．３５倍、少なくとも２．４倍、少なくとも２．４５倍、少なくとも２．５倍、少なくとも２．５５倍、少なくとも３．０倍、少なくとも３．５倍、少なくとも４．０倍、少なくとも４．５倍、少なくとも５．０倍、少なくとも５．５倍、少なくとも６．０倍、少なくとも６．５倍、少なくとも７．０倍、少なくとも７．５倍、少なくとも８．０倍、少なくとも８．５倍、少なくとも９．０倍、少なくとも９．５倍、または少なくとも１０倍に上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度と比較して上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度と比較して上昇させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度を、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化の速度と比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で上昇させる。

【0173】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体（例えば、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体）は、個体において（例えば、個体のＣＮＳにおいて）、１つまたは複数の脱髄病変における軸索健康を増加させる、または促進する。例えば、一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において、１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルを少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも４５％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも１００％、少なくとも１１０％、少なくとも１１５％、少なくとも１２０％、少なくとも１２５％、少なくとも１３０％、少なくとも１３５％、少なくとも１４０％、少なくとも１４５％、少なくとも１５０％、少なくとも１６０％、少なくとも１７０％、少なくとも１８０％、少なくとも１９０％、または少なくとも２００％上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルを、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルと比較して上昇させる。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体において１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルを、抗ＴＲＥＭ２抗体を投与されていない対応する個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルと比較して上昇させる。一部の実施形態では、複数の個体への本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の投与は、１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルを、抗ＴＲＥＭ２抗体の投与前の同じ複数の個体における１つまたは複数の脱髄病変におけるリン酸化ニューロフィラメントのレベルと比較して、複数の個体の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、または１００％で上昇させる。一部の実施形態では、リン酸化ニューロフィラメントはＳＭＩ３１陽性である。

【0174】

１つまたは複数の脱髄病変における再有髄化のレベル、再有髄化の速度、及び／または軸索健康は、個体において、当技術分野において公知の任意の方法、例えば、磁化移動率（ＭＴＲ）、制限プロトン画分ｆ、ミエリン水画分及び拡散テンソル画像法（ＤＴＩ）、陽電子放射型断層撮影法（ＰＥＴ）、視覚誘発電位（ＶＥＰ）、及び磁気共鳴画像法（ＭＲＩ）を使用して測定することができる（例えば、Ｍａｌｉｋ ｅｔ ａｌ．，（２０１４） Ｊ Ｎｅｕｒｏｌｏｇｙ，Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ、及びＰｓｙｃｈｉａｔｒｙ，８５（１２）：１３９６－１４０４；及びＢｏｖｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１７） Ｎｅｕｒｏｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，１４：８９４－９０４を参照されたい）。

【0175】

一部の実施形態では、軸索健康を、軸索健康及び／または神経変性のバイオマーカーを使用して測定することができる。例えば、軸索健康及び／または神経変性のバイオマーカー（例えば、ＳＩＭ３１、ＳＭＩ３５、ＮＦ－Ｌ、ＮＦ－Ｈ、ＮＦ－Ｍ、アルファ－Ｉｎｔｅｒｎｅｘｉｎ、ｔａｕ、アミノ酸ｎ－アセチルアスパラギン酸、ｐＮＦ－Ｈ、及び当技術分野で公知の他のマーカー）を、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロット、質量分析法、及びドットブロットなどの当技術分野で公知の方法を使用して、個体からの脳脊髄液の試料及び／または血液の試料において検出することができる（例えば、Ｇｒｅｓｌｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１１） Ｍｕｌｔｉｐｌｅ Ｓｃｌｅｒｏｓｉｓ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ，３１５４０６を参照されたい）。

【0176】

ＴＲＥＭ２クラスター化に影響を及ぼす抗体
インビボで、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、複数の潜在的機序によって、受容体を活性化し得る。一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、適切なエピトープ特異性によって、プレート上に結合した二次抗体とクラスター化する、またはＦｃｇ受容体を介してクラスター化する必要なしに、溶液中のＴＲＥＭ２を活性化する能力を有する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、それらの特有の構造によって、受容体をクラスター化する、または受容体をクラスター化配置に保持し、それによって、Ｆｃ受容体に結合することなく、ＴＲＥＭ２などの受容体を活性化する固有の能力を有するＩｇＧ２などのヒト抗体のアイソタイプを有する（例えば、Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８）。

【0177】

ある特定の実施形態では、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２を活性化して、シグナルを伝達するために、細胞表面上でクラスター化を誘導するか、またはそれを維持し得る。ある特定の実施形態では、適切なエピトープ特異性を有するアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、細胞表面上でＴＲＥＭ２のクラスター化を誘導する、もしくは維持する、及び／またはＴＲＥＭ２を活性化することができる。一部の実施形態では、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内；または配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つまたは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７からなる群から選択される１つもしくは複数のアミノ酸残基、または配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７からなる群から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物ＴＲＥＭ２タンパク質上の１つもしくは複数のアミノ酸残基に結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、隣接する細胞上のＦｃｇ受容体に結合することによって受容体（例えば、ＴＲＥＭ２）をクラスター化する。Ｆｃｇ受容体への抗体の定常ＩｇＧ Ｆｃ部分の結合は、抗体の凝集をもたらし、かつ抗体は次いで、それらの可変領域を介して結合する受容体を凝集する（Ｃｈｕ ｅｔ ａｌ（２００８）Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ 、４５：３９２６－３９３３；及びＷｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ １９、１０１－１１３）。当業者に公知の任意の適切なアッセイ（ＷＯ２０１７／０６２６７２及びＷＯ２０１９／０２８２９２に記載のものなど）を、抗体クラスター化を決定するために使用することができる。

【0178】

他の機構も、受容体（例えば、ＴＲＥＭ２）をクラスター化するために使用することができる。例えば、一部の実施形態では、一緒に架橋する抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂフラグメント）を、前記のとおり、Ｆｃｇ受容体と結合するＦｃ領域を有する抗体と同様の手法で、受容体（例えば、ＴＲＥＭ２）をクラスター化するために使用することができる。一部の実施形態では、細胞表面で受容体クラスター化を誘導して、標的（例えば、ＴＲＥＭ２）上の適切なエピトープと結合するならば、架橋した抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂフラグメント）は、アゴニスト抗体として機能し得る。

【0179】

標的受容体を活性化するＦｃｇＲ受容体への結合に依存する抗体は、ＦｃｇＲ結合を排除するように操作された場合、そのアゴニスト活性を失うことがある（例えば、Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，（２０１１）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ １９，１０１－１１３；Ａｒｍｏｕｒ ａｔ ａｌ．，（２００３）Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４０（２００３）５８５－５９３）；及びＷｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８を参照されたい）。したがって、適切なエピトープ特異性を有する本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、前記抗体がＦｃドメインを有するとき、ＴＲＥＭ２を活性化することができると考えられる。

【0180】

例示的な抗体Ｆｃアイソタイプ及び修飾を、以下の表Ａに提示する。一部の実施形態では、抗体は、以下の表Ａに列挙されているＦｃアイソタイプを有する。

【表2-1】

【表2-2】

【0181】

一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧクラス、ＩｇＭクラス、またはＩｇＡクラスのものである。一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプを有する。

【0182】

表Ａに記載されているアイソタイプに加えて、理論に束縛されることは望まないが、ヒトの活性化Ｆｃｇ受容体Ｉ、ＩＩＡ、ＩＩＣ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ならびに／またはマウスのＦｃｇ受容体Ｉ、ＩＩＩ、及びＩＶに結合するヒトＩｇＧ１またはＩｇＧ３アイソタイプ及びそれらの変異体（例えば、Ｓｔｒｏｈｌ（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２００９，２０：６８５－６９１）を有する抗体は、インビボでアゴニスト抗体として作用することもあるが、ＡＤＣＣと関連する作用と関連することもあると考えられている。しかしながら、そのようなＦｃｇ受容体は、阻害Ｆｃｇ受容体ＦｃｇＲＩＩＢと比較して、インビボでの抗体結合にはあまり利用されないようである（例えば、Ｗｈｉｔｅ，ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．６２，９４１－９４８；及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，（２０１１） Ｓｃｉｅｎｃｅ ３３３（６０４５）：１０３０－１０３４．を参照されたい）。

【0183】

ある特定の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプを有する。一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ２定常領域を含有する。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ２定常領域は、Ｆｃ領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、Ｆｃ受容体への結合とは関係なく、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性、ＤＡＰ１２活性、またはその両方を誘導する。ある特定の実施形態では、抗体は、阻害性Ｆｃ受容体に結合する。ある特定の実施形態では、阻害性Ｆｃ受容体は、ＡＤＣＣを最小化するか、または除去する阻害性Ｆｃ－ガンマ受容体ＩＩＢ（ＦｃγＲＩＩＢ）である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、１つまたは複数の修飾を含有する。例えば、一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、（例えば、同じアイソタイプの野生型Ｆｃ領域と比較して）１つまたは複数のアミノ酸置換を含有する。一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸置換は、Ｖ２３４Ａ（Ａｌｅｇｒｅ ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５７：１５３７－１５４３．３１；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，（２０００）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００：１６－２６）、Ｇ２３７Ａ（Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ，６８：５６３－５７１）、Ｈ２６８Ｑ、Ｖ３０９Ｌ、Ａ３３０Ｓ、Ｐ３３１Ｓ（米国特許出願公開第２００７／０１４８１６７号；Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．（１９９９）Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２９：２６１３－２６２４；Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｔｈｅ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ｊｏｕｒｎａｌ １（Ｓｕｐｐｌ．１）：２７；Ａｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｔｈｅ Ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ｊｏｕｒｎａｌ １（Ｓｕｐｐｌ．１）：２７）、Ｃ２３２Ｓ、及び／もしくはＣ２３３Ｓ（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８）、Ｓ２６７Ｅ、Ｌ３２８Ｆ（Ｃｈｕ ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，４５：３９２６－３９３３）、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、ならびに／またはＴ２５６Ｅから選択され、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による。

【0184】

一部の実施形態では、抗体は、Ｃ１２７Ｓアミノ酸置換を含有する重鎖定常ドメインを有するＩｇＧ２アイソタイプを有し、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８；Ｌｉｇｈｔｌｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）ＰＲＯＴＥＩＮ ＳＣＩＥＮＣＥ １９：７５３－７６２；及びＷＯ２００８０７９２４６）。

【0185】

一部の実施形態では、抗体は、Ｃ２１４Ｓアミノ酸置換を含有するカッパ軽鎖定常ドメインを有するＩｇＧ２アイソタイプを有し、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８；Ｌｉｇｈｔｌｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）ＰＲＯＴＥＩＮ ＳＣＩＥＮＣＥ １９：７５３－７６２；及びＷＯ２００８０７９２４６）。

【0186】

ある特定の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１アイソタイプを有する。一部の実施形態では、抗体は、マウスＩｇＧ１定常領域を含有する。一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ１定常領域を含有する。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ１定常領域は、Ｆｃ領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、阻害性Ｆｃ受容体に結合する。ある特定の実施形態では、阻害性Ｆｃ受容体は、阻害性Ｆｃ－ガンマ受容体ＩＩＢ（ＦｃγＲＩＩＢ）である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、１つまたは複数の修飾を含有する。例えば、一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、（例えば、同じアイソタイプの野生型Ｆｃ領域と比較して）１つまたは複数のアミノ酸置換を含有する。一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸置換は、Ｎ２９７Ａ（Ｂｏｌｔ Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９３）Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２３：４０３－４１１）、Ｄ２６５Ａ（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．（２００１）Ｒ．Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７６，６５９１－６６０４）、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａ（Ｈｕｔｃｈｉｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９５）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，９２：１１９８０－１１９８４；Ａｌｅｇｒｅ ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５７：１５３７－１５４３．３１；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，（２０００）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００：１６－２６）、Ｇ２３７Ａ（Ａｌｅｇｒｅ ｅｔ ａｌ．（１９９４）Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ５７：１５３７－１５４３．３１；Ｘｕ ｅｔ ａｌ．（２０００）Ｃｅｌｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，２００：１６－２６）、Ｃ２２６Ｓ、Ｃ２２９Ｓ、Ｅ２３３Ｐ、Ｌ２３４Ｖ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ（ＭｃＥａｒｃｈｅｒｎ ｅｔ ａｌ．，（２００７）Ｂｌｏｏｄ，１０９：１１８５－１１９２）、Ｐ３３１Ｓ（Ｓａｚｉｎｓｋｙ ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ ２００８，１０５：２０１６７－２０１７２）、Ｓ２６７Ｅ、Ｌ３２８Ｆ、Ａ３３０Ｌ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及び／またはＴ２５６Ｅから選択され、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による。

【0187】

一部の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ２アイソタイプ重鎖定常ドメイン１（ＣＨ１）及びヒンジ領域を含む（Ｗｈｉｔｅ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ２７，１３８－１４８）。ある特定の実施形態では、ＩｇＧ２アイソタイプＣＨ１及びヒンジ領域は、ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＮＦＧＴＱＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＴＶＥＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰ（配列番号４２）のアミノ酸配列を含有する。一部の実施形態では、抗体Ｆｃ領域は、Ｓ２６７Ｅアミノ酸置換、Ｌ３２８Ｆアミノ酸置換、もしくはその両方、及び／またはＮ２９７ＡもしくはＮ２９７Ｑアミノ酸置換を含有し、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による。

【0188】

ある特定の実施形態では、抗体は、ＩｇＧ４アイソタイプを有する。一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ４定常領域を含有する。一部の実施形態では、ヒトＩｇＧ４定常領域は、Ｆｃ領域を含む。一部の実施形態では、抗体は、阻害性Ｆｃ受容体に結合する。ある特定の実施形態では、阻害性Ｆｃ受容体は、阻害性Ｆｃ－ガンマ受容体ＩＩＢ（ＦｃγＲＩＩＢ）である。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、１つ以上の修飾を含有する。例えば、一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、（例えば、同じアイソタイプの野生型Ｆｃ領域と比較して）１つまたは複数のアミノ酸置換を含有する。一部の実施形態では、１つまたは複数のアミノ酸置換は、Ｌ２３５Ａ、Ｇ２３７Ａ、Ｓ２２８Ｐ、Ｌ２３６Ｅ（Ｒｅｄｄｙ ｅｔ ａｌ．，（２０００）Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１６４：１９２５－１９３３）、Ｓ２６７Ｅ、Ｅ３１８Ａ、Ｌ３２８Ｆ、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、及び／またはＴ２５６Ｅから選択され、アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による。

【0189】

ある特定の実施形態では、抗体は、ハイブリッドＩｇＧ２／４アイソタイプを有する。一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ２のＥＵナンバリングによるアミノ酸１１８～２６０、及びヒトＩｇＧ４のＥＵナンバリングによるアミノ酸２６１～４４７を含有するアミノ酸配列を含む（ＷＯ１９９７／１１９７１；ＷＯ２００７／１０６５８５）。

【0190】

ある特定の実施形態では、抗体は、マウスＩｇＧ４定常領域を含有する（Ｂａｒｔｈｏｌｏｍａｅｕｓ，ｅｔ ａｌ．（２０１４）．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９２，２０９１－２０９８）。

【0191】

一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、ＥＵナンバリングによるＡ３３０Ｌ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及び／またはＰ３３１Ｓから選択される１つまたは複数の追加のアミノ酸置換；ならびにそれらの任意の組合せをさらに含有する。

【0192】

ある特定の実施形態では、抗体は、１つまたは複数のアミノ酸置換をＦｃ領域に、Ｃ１２７Ｓ、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ａ、Ｌ２３５Ｅ、Ｓ２６７Ｅ、Ｋ３２２Ａ、Ｌ３２８Ｆ、Ａ３３０Ｓ、Ｐ３３１Ｓ、Ｅ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ、Ｓ４４０Ｙ、及びそれらの任意の組み合わせから選択される残基位置で含有する（残基のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ、Ｌ２４３Ａ、Ｌ２３５Ａ、及びＰ３３１Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ及びＰ３３１Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ及びＫ３２２Ａ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ位に含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ、Ｋ３２２Ａ、Ａ３３０Ｓ、及びＰ３３１Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ、Ｋ３２２Ａ、及びＡ３３０Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ４３０Ｇ、Ｋ３２２Ａ、及びＰ３３１Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＳ２６７Ｅ及びＬ３２８Ｆ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＣ１２７Ｓ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。一部の実施形態では、Ｆｃ領域は、アミノ酸置換をＥ３４５Ｒ、Ｅ４３０Ｇ及びＳ４４０Ｙ位で含有する（残基位置のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。

【0193】

一部の実施形態では、抗体は、ヒトＩｇＧ１アイソタイプを有し、かつ残基位置Ｐ３３１Ｓ及びＥ４３０ＧでＦｃ領域にアミノ酸置換を含む（残基のナンバリングは、ＥＵナンバリングによる）。残基位置Ｐ３３１Ｓ及びＥ４３０Ｇにアミノ酸置換を含むＦｃ領域は、「ＰＳＥＧ」と称されることもある。

【0194】

さらなるＩｇＧ変異
一部の実施形態では、本明細書に記載のＩｇＧ１バリアントのうちの１つまたは複数は、補体活性化を排除するために、Ａ３３０Ｌ変異（Ｌａｚａｒ ｅｔ ａｌ．，（２００６）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１０３：４００５－４０１０）、またはＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、及び／またはＰ３３１Ｓ変異（Ｓａｚｉｎｓｋｙ ｅｔ ａｌ．，（２００８）Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ，１０５：２０１６７－２０１７２）のうちの１つまたは複数と組み合わされてもよい（アミノ酸位置は、ＥＵナンバリング規則による）。一部の実施形態では、本明細書に記載のＩｇＧバリアントは、ヒト血清中での抗体半減期を増加させるために、１つまたは複数の変異と組み合わされてもよい（例えば、ＥＵナンバリング規則によるＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ、Ｔ２５６Ｅ変異）（Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ ｅｔ ａｌ．，（２００６）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２８１：２３５１４－２３５２４；及びＳｔｒｏｈｌ ｅ ａｌ．，（２００９）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０：６８５－６９１）。

【0195】

一部の実施形態では、本開示のＩｇＧ４バリアントは、抗体の安定性を増強するために、ＥＵナンバリング規則によるＳ２２８Ｐ変異（Ａｎｇａｌ ｅｔ ａｌ．，（１９９３）Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ，３０：１０５－１０８）、及び／またはＰｅｔｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，（２０１２）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．１３；２８７（２９）：２４５２５－３３）に記載されている１つまたは複数の変異と組み合わされてもよい。

【0196】

例示的な抗ＴＲＥＭ２抗体
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、高い親和性でＴＲＥＭ２に結合し、アゴニストであり、かつ１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を誘導する。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、単離抗体の非存在下でＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性と比較して、ＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合によって誘導される１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２タンパク質への１つまたは複数のＴＲＥＭ２リガンドの結合と競合することなく、または別段に遮断することなく、１つまたは複数のＴＲＥＭ２活性を増強する。一部の実施形態では、抗体は、ヒト化抗体、二重特異性抗体、多価抗体、またはキメラ抗体である。そのような抗体の例示的な記載は、本開示を通じて見出される。一部の実施形態では、抗体は、第１の抗原及び第２の抗原を認識する二重特異性抗体である。

【0197】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、限定ではないが、哺乳動物（例えば、非ヒト哺乳動物）ＴＲＥＭ２タンパク質、マウスＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｑ９９ＮＨ８）、ラットＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｄ３ＺＺ８９）、アカゲザルＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｆ６ＱＶＦ２）、カニクイザルＴＲＥＭ２タンパク質（ＮＣＢＩアクセッション番号ＸＰ＿０１５３０４９０９．１）、ウマＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｆ７Ｄ６Ｌ０）、ブタＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｈ２ＥＺＺ３）、及びイヌＴＲＥＭ２タンパク質（Ｕｎｉｐｒｏｔアクセッション番号Ｅ２ＲＰ４６）を含む、ヒトＴＲＥＭ２、またはそのホモログに結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ヒトＴＲＥＭ２に特異的に結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、カニクイザルＴＲＥＭ２に特異的に結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ヒトＴＲＥＭ２及びカニクイザルＴＲＥＭ２の両方に特異的に結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、本開示の少なくとも１つのＴＲＥＭ２活性を誘導する。

【0198】

抗ＴＲＥＭ２抗体結合領域
一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２４～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つもしくは複数のアミノ酸；配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１２９～１５３に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つもしくは複数のアミノ酸；配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４０～１４９に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つもしくは複数のアミノ酸；配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１４９～１５７に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つもしくは複数のアミノ酸；または配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２、もしくは配列番号１のアミノ酸残基１５３～１６２に対応するＴＲＥＭ２タンパク質上のアミノ酸残基内の１つもしくは複数のアミノ酸に結合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号１のアミノ酸残基Ｄ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７のうちの１つもしくは複数と、または配列番号１のＤ１４０、Ｌ１４１、Ｗ１４２、Ｆ１４３、Ｐ１４４、Ｅ１５１、Ｄ１５２、Ｈ１５４、Ｅ１５６、及びＨ１５７からなる群から選択されるアミノ酸残基に対応する哺乳動物ＴＲＥＭ２タンパク質上の１つもしくは複数のアミノ酸残基と結合する。

【0199】

抗ＴＲＥＭ２抗体軽鎖及び重鎖可変領域
一部の実施形態では、本開示の方法で使用される抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＷＯ２０１８／１９５５０６、ＷＯ２０１９／０２８２９２、ＷＯ２０１８／０１５５７３、またはＷＯ２０１９／０５５８４１に記載されており、これらはそれぞれ、参照により本明細書に組み込まれる。一部の実施形態では、本開示の方法で使用される抗ＴＲＥＭ２抗体は、次のＴＲＥＭ２活性のうちの１つまたは複数を誘導するか、または増強する：ＤＡＰ１２へのＴＲＥＭ２結合；ＤＡＰ１２リン酸化；Ｓｙｋキナーゼの活性化；ＩＦＮ－β、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＴＮＦ－α，ＹＭ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＣＲＰ、ＣＤ８６、ＭＣＰ－１／ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＲ２、ＣＸＣＬ－１０、Ｇａｔａ３、Ｒｏｒｃ、ＩＬ－２０ファミリーメンバー、ＩＬ－３３、ＬＩＦ、ＩＦＮ－ガンマ、ＯＳＭ、ＣＮＴＦ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＳＦ－１、ＭＨＣ－ＩＩ、ＯＰＮ、ＣＤ１１ｃ、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、及びＩＬ－２３から選択される１つまたは複数の炎症誘発性メディエーターの調節（任意選択で、その際、調節は、マクロファージ、Ｍ１マクロファージ、活性化Ｍ１マクロファージ、Ｍ２マクロファージ、樹状細胞、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、及びミクログリア細胞から選択される１種または複数の細胞で生じる）；ＤＡＰ１２／ＴＲＥＭ２複合体へのＳｙｋ、ＺＡＰ７０、またはその両方の動員；１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子の活性の上昇（任意選択で、その際、１つまたは複数のＴＲＥＭ２依存性遺伝子は活性化Ｔ細胞核因子（ＮＦＡＴ）転写因子を含む）；樹状細胞、マクロファージ、Ｍ１マクロファージ、活性化Ｍ１マクロファージ、Ｍ２マクロファージ、単球、破骨細胞、皮膚ランゲルハンス細胞、クッパー細胞、ミクログリア、Ｍ１ミクログリア、活性化Ｍ１ミクログリア、及びＭ２ミクログリア、またはそれらの任意の組合せの生存の増大；ＣＤ８３、ＣＤ８６ＭＨＣクラスＩＩ、ＣＤ４０、及びそれらの任意の組合せから選択される１種または複数の刺激分子の発現の調節（任意選択で、その際、ＣＤ４０は、樹状細胞、単球、マクロファージ、またはそれらの任意の組合せ上に発現され、かつ任意選択で、樹状細胞は、骨髄由来樹状細胞を含む）；記憶の増加；ならびに認知障害の軽減。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、個体に投与された場合に、記憶を増大させる、及び／または認知障害を軽減する。

【0200】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号３５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号４１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号３３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。

【0201】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号３７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号３８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号３９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号４０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号３２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。

【0202】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＤＷＭＮ（配列番号３６）を含むＨＶＲ－Ｈ１、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＥＧＤＴＮＹＡＲＫＦＨＧ（配列番号３７）を含むＨＶＲ－Ｈ２、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＫＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３８）を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、かつ前記軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＲＴＳＱＳＬＶＨＳＮＡＹＴＹＬＨ（配列番号３９）を含むＨＶＲ－Ｌ１、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＶＳ（配列番号４０）を含むＨＶＲ－Ｌ２、及びアミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変領域は、アミノ酸配列ＹＡＦＳＳＱＷＭＮ（配列番号３４）を含むＨＶＲ－Ｈ１、アミノ酸配列ＲＩＹＰＧＧＧＤＴＮＹＡＧＫＦＱＧ（配列番号３５）を含むＨＶＲ－Ｈ２、アミノ酸配列ＡＲＬＬＲＮＱＰＧＥＳＹＡＭＤＹ（配列番号３１）を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み、かつ前記軽鎖可変領域は、アミノ酸配列ＲＳＳＱＳＬＶＨＳＮＲＹＴＹＬＨ（配列番号４１）を含むＨＶＲ－Ｌ１、アミノ酸配列ＫＶＳＮＲＦＳ（配列番号３３）を含むＨＶＲ－Ｌ２、及びアミノ酸配列ＳＱＳＴＲＶＰＹＴ（配列番号３２）を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含み、その際、前記重鎖可変領域は、ＶＨ ＦＲ１、ＶＨ ＦＲ２、ＶＨ ＦＲ３、及びＶＨ ＦＲ４から選択される１つ、２つ、３つまたは４つのフレームワーク領域を含み、その際、ＶＨ ＦＲ１は、配列番号９～１１からなる群から選択される配列を含み、ＶＨ ＦＲ２は、配列番号１２及び１３からなる群から選択される配列を含み、ＶＨ ＦＲ３は、配列番号１４及び１５からなる群から選択される配列を含み、かつＶＨ ＦＲ４は、配列番号１６の配列を含み；及び／または軽鎖可変領域は、ＶＬ ＦＲ１、ＶＬ ＦＲ２、ＶＬ ＦＲ３、及びＶＬ ＦＲ４から選択される１つ、２つ、３つまたは４つのフレームワーク領域を含み、その際、Ｌ ＦＲ１は、配列番号１７～２０からなる群から選択される配列を含み、ＶＬ ＦＲ２は、配列番号２１及び２２からなる群から選択される配列を含み、ＶＬ ＦＲ３は、配列番号２３及び２４からなる群から選択される配列を含み、かつＶＬ ＦＲ４は、配列番号２５及び２６からなる群から選択される配列を含む。

【0203】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－４７または配列番号２８ＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－４７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－４７または配列番号２９のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－４７のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号２９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0204】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号２７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号２７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－５８または配列番号２７のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号３０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号３０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＡＬ２ｐ－５８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号３０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＡＬ２ｐ－５８または配列番号３０のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＡＬ２ｐ－５８のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号２７のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号３０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0205】

一部の実施形態では、抗体は、配列番号４３のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖；または配列番号４４のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４７のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0206】

一部の実施形態では、抗体は、配列番号４５のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖；または配列番号４６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

【0207】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号５３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号５６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0208】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号６４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号６２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号６４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号６５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0209】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号７０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号７１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号７２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号７３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。

【0210】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１６０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１６１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１５７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１５８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１６０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１６１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１５６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１５７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１５８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0211】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１６７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１６８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１６６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１６７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１６８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0212】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１７４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１７６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１７７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１７４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0213】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８１に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８２に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８３に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８０に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８１のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８２のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８３のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１７８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１７９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８０のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0214】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８７に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８８に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８９に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３のうちの１つまたは複数を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８４に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１８５に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８６に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３のうちの１つまたは複数を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８７のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ１；（ｂ）配列番号１８８のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ２；及び（ｃ）配列番号１８９のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｈ３を含み；かつ前記軽鎖可変ドメインは、（ａ）配列番号１８４のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ１；（ｂ）配列番号１８５のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ２；及び（ｃ）配列番号１８６のアミノ酸配列を含むＨＶＲ－Ｌ３を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0215】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体４２Ｅ８．Ｈ１または配列番号５８のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号５９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体４２Ｅ８．Ｈ１の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号５９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体４２Ｅ８．Ｈ１または配列番号５９のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体４２Ｅ８．Ｈ１のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号５８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号５９のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0216】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６６のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６６のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＲＳ９．Ｆ６または配列番号６６のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号６７のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体ＲＳ９．Ｆ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号６７のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体ＲＳ９．Ｆ６または配列番号６７のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体ＲＳ９．Ｆ６のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号６６のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号６７のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0217】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号７４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号７４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、配列番号７４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、配列番号７４のＶＨ配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、配列番号７５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、配列番号７５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、配列番号７５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、配列番号７５のＶＬ配列を含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号７４のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号７５のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。

【0218】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４９のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４９のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体６Ｅ７または配列番号１４９のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１４８のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体６Ｅ７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１４８のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体６Ｅ７または配列番号１４８のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体６Ｅ７のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１４９のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１４８のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0219】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５１のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５１のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体５Ｅ３または配列番号１５１のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５０のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、抗体５Ｅ３の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５０のアミノ酸配列において合計１～５個のアミノ酸が、置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体５Ｅ３または配列番号１５０のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体５Ｅ３のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５１のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５０のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0220】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２４Ｇ６または配列番号１５３のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２４Ｇ６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２４Ｇ６または配列番号１５２のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２４Ｇ６のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0221】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２５Ｆ１２または配列番号１５５のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１５４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体２５Ｆ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１５４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体２５Ｆ１２または配列番号１５４のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体２５Ｆ１２のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１５５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１５４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0222】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６５のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６５のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２または配列番号１６５のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６４のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６４のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２または配列番号１６４のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ１ アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７ １４Ｃ１２のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１６５のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６４のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0223】

一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含み；及び／または前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、その際、前記重鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、その際、前記軽鎖可変ドメインは、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６３のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する重鎖可変ドメイン（ＶＨ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の重鎖可変ドメインアミノ酸配列または配列番号１６３のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）または配列番号１６３のＶＨ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＨは、（ａ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｈ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列に対して、または配列番号１６２のアミノ酸配列に対して少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、または１００％の同一性を有する軽鎖可変ドメイン（ＶＬ）配列を含み、かつ置換（例えば、基準配列と比べて保存的置換、挿入、または欠失）を含有するが、その配列を含む抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２に結合する能力を保持する。ある特定の実施形態では、合計１～１０個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、または配列番号１６２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、合計１～５個のアミノ酸が、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列、または配列番号１６２のアミノ酸配列において置換されている、挿入されている、及び／または欠失している。ある特定の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＨＶＲ外の領域において（すなわち、ＦＲ領域において）生じている。一部の実施形態では、置換、挿入、または欠失は、ＦＲ領域において生じている。任意選択で、抗ＴＲＥＭ２抗体は、その配列の翻訳後修飾を含めて、抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）または配列番号１６２のＶＬ配列を含む。特定の実施形態では、ＶＬは、（ａ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ１アミノ酸配列、（ｂ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ２アミノ酸配列、及び（ｃ）抗体１３Ｅ７（ＳＳＴ２０２４４３）のＨＶＲ－Ｌ３アミノ酸配列から選択される１、２または３つのＨＶＲを含む。一部の実施形態では、抗体は、配列番号１６３のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域及び配列番号１６２のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＴＲＥＭ２への結合について、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体と競合する。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、このパラグラフに記載の実施形態のいずれかの抗体が結合するＴＲＥＭ２エピトープと同じＴＲＥＭ２エピトープに結合する。

【0224】

一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＡＬ２ｐ－５８ ｈｕＩｇＧ１ ＰＳＥＧである。一部の実施形態では、本開示のアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＡＬ２ｐ－４７ ｈｕＩｇＧ１である。本明細書において提供される実施例では、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５を、例示的なアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体として使用した。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、マウスＩｇＧ１ Ｆｃ領域を含み、かつマウス及びヒトＴＲＥＭ２の両方に結合するので、これは、実施例に記載のマウスクプリゾン（ＣＰＺ）モデルにおいて使用するために適切になっている。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、本明細書における実施例に示されているとおりに、かつそれらの全体が参照によって本明細書に組み込まれるＷＯ２０１７０６２６７２Ａ２及びＷＯ２０１９０２８２９２に開示のとおりに、アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体ＡＬ２ｐ－５８ ｈｕＩｇＧ１ ＰＳＥＧ及びＡＬ２ｐ－４７ ｈｕＩｇＧ１と同様に、アゴニスト活性を含む特性を持つ。したがって、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、抗ＴＲＥＭ２抗体ＡＬ２ｐ－５８ ｈｕＩｇＧ１ ＰＳＥＧ及びＡＬ２ｐ－４７ ｈｕＩｇＧ１のための適切な代用物である。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

【表3-4】

【表3-5】

【表3-6】

【表3-7】

【表3-8】

【表3-9】

【表3-10】

【表3-11】

【表3-12】

【表3-13】

【表3-14】

【表3-15】

【表3-16】

【表3-17】

【表3-18】

【表3-19】

【表3-20】

【表3-21】

【表3-22】

【表3-23】

【表3-24】

【表3-25】

【0225】

本開示の抗体のいずれかを、細胞系によって生産してもよい。一部の実施形態では、細胞系は、哺乳動物細胞系であってもよい。ある特定の実施形態では、細胞系は、ハイブリドーマ細胞系であってもよい。他の実施形態では、細胞系は、酵母細胞系であってもよい。抗体生産に適した当技術分野で公知の任意の細胞系を、本開示の抗体を生産するために使用してもよい。抗体生産のための例示的な細胞系は、本開示を通して記載される。

【0226】

抗体フラグメント
本開示のある特定の態様は、ヒトＴＲＥＭ２、ヒトＴＲＥＭ２の天然に存在するバリアント、及びヒトＴＲＥＭ２の疾患バリアントのうちの１つまたは複数に結合する抗体フラグメントに関する。一部の実施形態では、抗体フラグメントは、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆ（ａｂ’）２、ＦｖまたはｓｃＦｖフラグメントである。

【0227】

抗体フレームワーク
本明細書に記載の抗体のいずれかはさらに、フレームワークを含む。一部の実施形態では、フレームワークは、ヒト免疫グロブリンフレームワークである。例えば、一部の実施形態では、抗体（例えば、抗ＴＲＥＭ２抗体）は、上記実施形態のいずれかのようなＨＶＲを含み、アクセプターヒトフレームワーク、例えば、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワークをさらに含む。ヒト免疫グロブリンフレームワークは、ヒト抗体の一部であってもよい、または非ヒト抗体は、１つまたは複数の内因性のフレームワークを、ヒトフレームワーク領域（複数可）と置き換えることによってヒト化されていてもよい。ヒト化のために使用され得るヒトフレームワーク領域には、限定されないが、「ベストフィット」法を使用して選択されるフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照されたい）、軽鎖または重鎖可変領域の特定のサブグループのヒト抗体のコンセンサス配列に由来するフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）及びＰｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照されたい）、ヒト成熟（体細胞成熟）フレームワーク領域またはヒト生殖細胞系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照されたい）、ならびにスクリーニングＦＲライブラリに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４（１９９７）及びＲｏｓｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１－２２６１８（１９９６）を参照されたい）が含まれる。

【0228】

抗体の調製
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体には、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体、ヒト化及びキメラ抗体、ヒト抗体、抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ及びＦ（ａｂ’）_２）、二重特異性及び多特異性抗体、多価抗体、ライブラリ由来抗体、修飾されたエフェクター機能を有する抗体、抗体部分を含有する融合タンパク質、ならびに抗体のグリコシル化バリアント、抗体のアミノ酸配列バリアント、及び共有結合的に修飾された抗体を含む、本開示のＴＲＥＭ２タンパク質のアミノ酸残基を有するエピトープなどの抗原認識部位を含む、他の任意の修飾された立体配置の免疫グロブリン分子が包含され得る。抗ＴＲＥＭ２抗体は、ヒト、マウス、ラット、または（キメラもしくはヒト化抗体を含む）他の任意の起源のものであってもよい。

【0229】

（１）ポリクローナル抗体
抗ＴＲＥＭ２ポリクローナル抗体などのポリクローナル抗体は一般に、関連抗原及びアジュバントの複数の皮下（ｓｃ）または腹腔内（ｉｐ）注射によって、動物中で生じる。二官能性または誘導体化剤、例えば、マレイミドベンゾイルスルホスクシンイミドエステル（システイン残基を介したコンジュゲーション）、Ｎ－ヒドロキシスクシンイミド（リシン残基を介する）、グルタルアルデヒド、無水コハク酸、ＳＯＣｌ_２、またはＲ^１Ｎ＝Ｃ＝ＮＲ（Ｒ及びＲ^１は独立に、低級アルキル基である）を使用して、免疫されるべき種に免疫原性があるタンパク質、例えば、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、血清アルブミン、ウシサイロログロブリン、またはダイズトリプシン阻害薬に、関連抗原（例えば、本開示の精製または組換えＴＲＥＭ２タンパク質）をコンジュゲートすることは有用であり得る。使用され得るアジュバントの例には、フロイント完全アジュバント及びＭＰＬ－ＴＤＭアジュバント（モノホスホリル脂質Ａ、合成トレハロースジコリノミコレート（ｄｉｃｏｒｙｎｏｍｙｃｏｌａｔｅ））が含まれる。免疫化プロトコルは、過度な実験をすることなく、当業者によって選択され得る。

【0230】

動物は、所望の抗原、免疫原性複合体、もしくは誘導体に対して、例えば、１００μｇ（ウサギ用）または５μｇ（マウス用）のタンパク質または複合体を３体積のフロイント完全アジュバントと組み合わせ、その溶液を複数の部位に皮内注射することによって免疫化される。１ヶ月後に、動物は、ペプチドもしくは複合体のフロイント完全アジュバント溶液の元の量の１／５～１／１０を複数の部位に皮下注射することによって追加免疫される。７～１４日後に、動物から採血し、血清を抗体力価についてアッセイする。力価がプラトーに達するまで動物は追加免疫される。複合体は、組み換え細胞培養中で、タンパク質融合として製造することもできる。また、ミョウバンなどの凝集剤も、免疫応答を高めるために適している。

【0231】

（２）モノクローナル抗体
モノクローナル抗体、例えば、抗ＴＲＥＭ２モノクローナル抗体は、実質的に均質な抗体の集団、すなわち、その集団を構成する個々の抗体が、少量で存在する場合がある、起こり得る自然に生じる突然変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化）を除いて同じである集団から得られる。したがって、修飾語「モノクローナル」は、個別の抗体の混合物ではない抗体の特徴を示す。

【0232】

例えば、抗ＴＲＥＭ２モノクローナル抗体は、Ｋｏｈｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）によって最初に記載されたハイブリドーマ法を用いて製造されてもよいし、または組み換えＤＮＡ法（米国特許第４，８１６，５６７号）によって製造されてもよい。

【0233】

ハイブリドーマ法では、マウスまたは他の適切な宿主動物、例えば、ハムスターを、上記のとおりに免疫化し、免疫化に使用されたタンパク質（例えば、本開示の精製もしくは組み換えＴＲＥＭ２タンパク質）に特異的に結合する抗体を産生する、または産生することが可能なリンパ球を誘導する。別法では、リンパ球をインビトロで免疫化してもよい。次いで、リンパ球を、ポリエチレングリコールなどの適切な融剤を用いて骨髄腫細胞などの不死化細胞系と融合させ、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９－１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。

【0234】

例えば、免疫沈降またはインビトロ結合アッセイ、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）もしくは酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によって測定されるとおり、ハイブリドーマ細胞が増殖している培養培地を、所望の抗原（例えば、本開示のＴＲＥＭ２タンパク質）を指向するモノクローナル抗体の存在についてアッセイすることができる。そのような技術及びアッセイは、当技術分野で公知である。

【0235】

所望の特異性、親和性、及び／または活性の抗体を産生するハイブリドーマ細胞を同定した後に、クローンをサブクローニングすることができ、かつサブクローンによって分泌されたモノクローナル抗体を、従来の免疫グロブリン精製手順、例えば、プロテインＡ－セファロースクロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、アフィニティークロマトグラフィー、及び上記のとおりの他の方法などによって、培養培地、腹水、または血清から分離することができる。

【0236】

抗ＴＲＥＭ２モノクローナル抗体はまた、例えば、上記のとおりに、組み換えＤＮＡ法によって製造してもよい。モノクローナル抗体をコードするＤＮＡは、従来の手順を用いて（例えば、マウス抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合するオリゴヌクレオチドプローブを用いることによって）容易に単離及び配列決定される。ハイブリドーマ細胞は、そのようなＤＮＡの好ましい供給源として役立つ。単離されると、ＤＮＡは発現ベクターに入れられ、これは次いで、宿主細胞、例えば、Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、または他の場合には免疫グロブリンタンパク質を産生しない骨髄腫細胞に遺伝子導入され、そのような組み換え宿主細胞でモノクローナル抗体を合成する。抗体をコードするＤＮＡの細菌での組み換え発現に関する概説には、Ｓｋｅｒｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，５：２５６－２６２（１９９３）及びＰｌｕｃｋｔｈｕｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖ．１３０：１５１－１８８（１９９２）が含まれる。

【0237】

ある特定の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体は、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２－５５４（１９９０）に記載の技術を用いて生成される抗体ファージライブラリから単離することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）及びＭａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１－５９７（１９９１）は、それぞれ、ファージライブラリからのマウス及びヒト抗体の単離を記載した。その後の刊行物は、鎖シャフリングによる高親和性（ナノモル（「ｎＭ」）の範囲）ヒト抗体の産生（Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９－７８３（１９９２））、ならびに非常に大きなファージライブラリを構築するための戦略としてのコンビナトリアル感染及びインビボ組み換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２１：２２６５－２２６６（１９９３））を記載している。

【0238】

抗体またはそのフラグメントをコードするＤＮＡはまた、例えば、相同マウス配列の代わりにヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード配列を置換することによって（米国特許第４，８１６，５６７号、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））、または非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列のすべてもしくは一部を免疫グロブリンのコード配列に共有結合で結合することによって修飾されてもよい。典型的には、そのような非免疫グロブリンポリペプチドは、抗体の定常ドメインと置換されるか、または、抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインと置換され、抗原に対する特異性を有する１つの抗原結合部位及び異なる抗原に対する特異性を有する別の抗原結合部位を含むキメラ二価抗体を形成する。

【0239】

（３）ヒト化抗体
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体またはその抗体フラグメントには、さらにヒト化もしくはヒト抗体が含まれ得る。非ヒト（例えば、マウス）抗体のヒト化形態は、最小限の非ヒト免疫グロブリン由来の配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそのフラグメント（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、Ｆ（ａｂ’）_２、または抗体の他の抗原結合サブ配列）である。ヒト化抗体は、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）を含み、この中で、そのレシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、所望の特異性、親和性、及び能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残基で置換されている。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク残基が、対応する非ヒト残基で置換される。ヒト化抗体はまた、レシピエント抗体にも、取り込まれたＣＤＲやフレームワーク配列にも見られない残基を含んでもよい。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、通常は２つの可変ドメインの実質的にすべてを含み、この中で、ＣＤＲ領域のすべてまたは実質的にすべてが非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域のすべてまたは実質的にすべては、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである。ヒト化抗体は、最適には、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、通常はヒト免疫グロブリンのものの少なくとも一部もまた含む。Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）。

【0240】

非ヒト抗ＴＲＥＭ２抗体をヒト化するためのある特定の方法が当技術分野で公知である。一般に、ヒト化抗体は、その中に導入された非ヒト起源からの１つまたは複数のアミノ酸残基を有する。これら非ヒトアミノ酸残基は、しばしば「取り込み」残基と呼ばれ、これらは通常、「取り込み」可変ドメインから取り込まれる。ヒト化は、基本的に、Ｗｉｎｔｅｒ ａｎｄ ｃｏ－ｗｏｒｋｅｒｓ，Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２７（１９８８）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４－１５３６（１９８８）の方法に従って、またはげっ歯類ＣＤＲまたはＣＤＲ配列で対応するヒト抗体の配列を置換することによって行うことができる。したがって、そのような「ヒト化」抗体は、キメラ抗体（米国特許第４，８１６，５６７号）であって、ここでは、非ヒト種由来の対応する配列によって、インタクトなヒト可変ドメインに実質的に満たないものが置換されている。実際には、ヒト化抗体は通常、いくつかのＣＤＲ残基及び場合によりいくつかのＦＲ残基が、げっ歯類抗体の類似部位由来の残基で置換されているヒト抗体である。

【0241】

ヒト化抗体の製造に使用される軽鎖及び重鎖の両方のヒト可変領域の選択は、免疫原性に影響を及ぼし得る。いわゆる「ベストフィット」法に従って、げっ歯類抗体の可変領域の配列は、公知のヒト可変ドメイン配列のライブラリ全体に対してスクリーニングされる。次いで、げっ歯類のものに最も近いヒト配列がヒト化抗体用のヒトフレームワーク（ＦＲ）として受容される。Ｓｉｍｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２２９６（１９９３）、Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，１９６：９０１（１９８７）。別の方法は、軽鎖または重鎖の特定の下位群のすべてのヒト抗体のコンセンサス配列由来の特定のフレームワークを用いる。いくつかの異なるヒト化抗体に対して、同じフレームワークを使用してもよい。Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：４２８５（１９９２）、Ｐｒｅｓｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２６２３（１９９３）。

【0242】

ヒト化抗体は好ましくは、抗原に対する高い親和性及び他の好適な生物学的特性を保持する。この目標を達成するため、好ましい方法によれば、ヒト化抗体は、親配列及びヒト化配列の３次元モデルを用いて、親配列及び様々な概念的ヒト化産物の分析過程によって調製される。３次元免疫グロブリンモデルは、一般に入手可能であり、当業者には熟知されている。選択された候補免疫グロブリン配列の推定される３次元立体配座構造を図解して示すコンピュータープログラムが利用可能である。これらの表示を検査することで、候補免疫グロブリン配列の機能において、残基の可能性のある役割の分析、すなわち、候補免疫グロブリンがその抗原と結合する能力に影響する残基の分析が可能になる。このようにして、ＦＲ残基は、標的抗原または複数の標的抗原（例えば、本開示のＴＲＥＭ２タンパク質）に対する親和性の増加などの所望の抗体特性が達成されるように、レシピエント及び取り込み配列から選択及び組み合わせることができる。一般に、ＣＤＲ残基は、抗原結合に影響を及ぼすことに直接かつ最も頻繁に関与している。

【0243】

様々な形態のヒト化抗ＴＲＥＭ２抗体が企図される。例えば、ヒト化抗ＴＲＥＭ２抗体は、Ｆａｂなどの抗体フラグメント、またはインタクトなＩｇＧ１抗体などのインタクトな抗体でもよい。

【0244】

（４）抗体フラグメント
ある特定の実施形態では、抗ＴＲＥＭ２抗体全体ではなく、抗ＴＲＥＭ２抗体フラグメントを用いることに利点がある。一部の実施形態では、フラグメントサイズが小さいほど、急速なクリアランス及びより良好な脳透過性が可能になる。

【0245】

抗体フラグメントの生産に向けて、様々な技術が開発されている。従来、これらのフラグメントは、インタクトな抗体のタンパク質分解を介して得られた（例えば、Ｍｏｒｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｍｅｔｈｏｄ．２４：１０７－１１７（１９９２）；及びＢｒｅｎｎａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２２９：８１（１９８５）を参照されたい）。しかしながら、これらのフラグメントは、例えば、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体をコードする核酸を用いて、今や組み換え宿主細胞によって直接生産することができる。Ｆａｂ、Ｆｖ、及びｓｃＦｖ抗体フラグメントはすべて、Ｅ．ｃｏｌｉで発現すること及びＥ．ｃｏｌｉから分泌させることができ、ひいては、大量のこれらフラグメントの容易な生産が可能になる。抗ＴＲＥＭ２抗体フラグメントはまた、上記で論じた抗体ファージライブラリから単離することもできる。別法では、Ｆａｂ’－ＳＨフラグメントは、Ｅ．ｃｏｌｉから直接回収することができ、化学的に結合してＦ（ａｂ’）_２フラグメントを形成することができる（Ｃａｒｔｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：１６３－１６７（１９９２））。別の手法によれば、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントは、組み換え宿主細胞培養から直接単離することができる。インビボ半減期が延長されたＦａｂ及びＦ（ａｂ’）_２抗体フラグメントの生産は、米国特許第５，８６９，０４６号に記載されている。他の実施形態では、選択される抗体は、一本鎖Ｆｖフラグメント（ｓｃＦｖ）である。ＷＯ９３／１６１８５、米国特許第５，５７１，８９４号及び米国特許第５，５８７，４５８号を参照されたい。抗ＴＲＥＭ２抗体フラグメントはまた、例えば、米国特許第５，６４１，８７０号に記載の「直線状抗体」でよい。そのような直線状抗体フラグメントは、単一特異性でも二重特異性でもよい。

【0246】

（５）二重特異性及び多特異性抗体
二重特異性抗体（ＢｓＡｂ）は、同一または別のタンパク質（例えば、本開示の１つまたは複数のＴＲＥＭ２タンパク質）上のものを含め、少なくとも２つの異なるエピトープに対して結合特異性を有する抗体である。別法では、ＢｓＡｂの１つの部分は、標的ＴＲＥＭ２抗原に結合するアームとすることができ、もう一方は、第二のタンパク質に結合するアームと組み合わせることができる。そのような抗体は、全長抗体または抗体フラグメント（例えば、Ｆ（ａｂ’）_２二重特異性抗体）に由来し得る。

【0247】

（６）エフェクター機能の操作
エフェクター機能を修飾する、及び／または抗体の血清半減期を増加させるために、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体を修飾することがさらに望ましいことがある。例えば、定常領域上のＦｃ受容体結合部位は、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害を低減させるために、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及び／またはＦｃγＲＩＩＩなどの特定のＦｃ受容体に対する結合親和性を除去する、または低減させるように修飾され、または変異してもよい。一部の実施形態では、エフェクター機能は、抗体の（例えば、ＩｇＧのＣＨ２ドメインの）Ｆｃ領域のＮ－グリコシル化を除去することによって損なわれる。一部の実施形態では、エフェクター機能は、ＰＣＴ ＷＯ９９／５８５７２及びＡｒｍｏｕｒ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４０：５８５－５９３（２００３）；Ｒｅｄｄｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ １６４：１９２５－１９３３（２０００）に記載されているとおり、ヒトＩｇＧの２３３～２３６、２９７、及び／または３２７～３３１などの領域を修飾することによって損なわれる。他の実施形態では、抗体依存性細胞媒介性細胞傷害及び抗体依存性細胞貪食を含む体液性応答を活性化することなく、隣接細胞上のＴＲＥＭ２抗体のクラスター化を増加させるための、ＩＴＩＭ含有ＦｃｇＲＩＩｂ（ＣＤ３２ｂ）に対する選択性を増加させるために、エフェクター機能を修飾するように本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体を修飾することが望ましくあり得る。

【0248】

抗体の血清半減期を増加させるために、例えば、米国特許第５，７３９，２７７号に記載されているとおり、エピトープに結合するサルベージ受容体を、抗体（特に、抗体フラグメント）に取り込むことがある。本明細書で使用される場合、「エピトープに結合するサルベージ受容体」といいう用語は、ＩｇＧ分子のインビボ血清半減期の増加を担う、ＩｇＧ分子（例えば、ＩｇＧ_１、ＩｇＧ_２、ＩｇＧ_３、またはＩｇＧ_４）のＦｃ領域のエピトープを指す。

【0249】

（７）他のアミノ酸配列の修飾
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体またはそれらの抗体フラグメントのアミノ酸配列修飾も企図される。例えば、抗体または抗体フラグメントの結合親和性及び／または他の生物学的特性を改善することは、望ましいことがある。抗体または抗体フラグメントのアミノ酸配列バリアントは、抗体または抗体フラグメントをコードする核酸に、適切なヌクレオチド変化を導入することによって、またはペプチド合成によって調製される。そのような修飾は、例えば、抗体のアミノ酸配列内の残基からの欠失、及び／またはそれらの挿入、及び／またはそれらの置換を含む。欠失、挿入、及び置換の任意の組み合わせが、最終構築物に到達するために行われる。ただし、最終構築物は、所望の特徴（すなわち、本開示のＴＲＥＭ２タンパク質に結合する能力またはこれと物理的に相互作用する能力）を有する。アミノ酸変化は、グリコシル化部位の数または位置を変化させることなどの抗体の翻訳後プロセスを改変し得る。

【0250】

変異誘発に好ましい位置の抗ＴＲＥＭ２抗体の特定の残基または領域を同定するための有用な方法は、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ ＷｅｌｌｓによってＳｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５（１９８９）に記載されているとおりの「アラニンスキャニング変異誘発」と呼ばれる。ここで、残基または標的残基のグループ（例えば、ａｒｇ、ａｓｐ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、及びｇｌｕなどの電荷を持つ残基）が同定され、標的抗原とのアミノ酸の相互作用に影響を与えるために、中性または負に荷電したアミノ酸（最も好ましくは、アラニンまたはポリアラニン）によって交換される。次いで、置換に対する機能的感受性を示すそれらのアミノ酸位置は、置換の部位に、またはそれらに対し、さらなるまたは他のバリアントを導入することによって精密化される。したがって、アミノ酸配列変化を導入するための部位が予め決定されているが、変異それ自体の性質を予め決定する必要はない。例えば、所与の部位での変異の性能を分析するために、アラニンスキャニングまたはランダム変異導入は、標的コドンまたは領域で行われ、発現した抗体バリアントは、所望の活性についてスクリーニングされる。

【0251】

アミノ酸配列挿入は、長さが１残基～１００以上の残基を含有するポリペプチドの範囲のアミノ（「Ｎ」）末端融合及び／またはカルボキシ（「Ｃ」）末端融合、ならびに、単一または複数のアミノ酸残基の配列間挿入を含む。末端挿入の例には、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体または細胞毒性ポリペプチドに融合した抗体が含まれる。抗体分子の他の挿入バリアントには、抗体の血清半減期を増加させる酵素またはポリペプチドに対する抗体のＮ末端またはＣ末端への融合が含まれる。

【0252】

別の種類のバリアントは、アミノ酸置換バリアントである。これらのバリアントでは、抗体分子中の少なくとも１つのアミノ酸残基が、異なる残基によって置き換えられている。置換変異誘発にとって最重要な部位は、超可変領域を含むが、ＦＲ改変も企図される。保存的置換は、「好ましい置換」の見出しの下の以下の表Ｃに示される。このような置換が生物学的活性の変化をもたらす場合、表Ｃの「例示的置換」と呼ばれる、またはアミノ酸クラスに関して以下にさらに記載されるとおりの、より実質的な変化が導入され、産物はスクリーニングされ得る。

【表4】

【0253】

抗体の生物学的特性における実質的な修飾は、（ａ）例えば、シートもしくはヘリックスコンフォメーションとしての、置換の領域におけるポリペプチド骨格の構造、（ｂ）標的部位での分子の電荷もしくは疎水性、または（ｃ）側鎖のかさ高さ、を維持することに及ぼす影響が著しく異なる置換を選択することによって達成される。天然に存在する残基は、一般的な側鎖特性に基づき、グループに分けられる。
（１）疎水性：ノルロイシン、ｍｅｔ、ａｌａ、ｖａｌ、ｌｅｕ、ｉｌｅ；
（２）中性親水性：ｃｙｓ、ｓｅｒ、ｔｈｒ；
（３）酸性：ａｓｐ、ｇｌｕ；
（４）塩基性：ａｓｎ、ｇｌｎ、ｈｉｓ、ｌｙｓ、ａｒｇ；
（５）鎖の配向に影響を与える残基：ｇｌｙ、ｐｒｏ；及び
（６）芳香族：ｔｒｐ、ｔｙｒ、ｐｈｅ。

【0254】

非保存的置換は、これらのクラスのうちの１つのメンバーを、別のクラスに置き換えることを伴う。

【0255】

抗体の適切なコンフォメーションを維持することに関与しない任意のシステイン残基はまた、分子の酸化安定性を改善し、異常な架橋を防止するために、一般にセリンで置換されてもよい。逆に、システイン結合（複数可）は、（特に抗体がＦｖフラグメンなどの抗体フラグメントである場合）その安定性を改善するために抗体に添加されてもよい。

【0256】

特に好ましい種類の置換バリアントは、親抗体（例えば、ヒト化またはヒト抗ＴＲＥＭ２抗体）の１つまたは複数の超可変領域残基を置換することを含む。一般に、さらなる開発のために選択される得られたバリアント（複数可）は、それらが生成される親抗体と比較して、改善された生物学的特性を有するであろう。そのような置換バリアントを生成するための便利な手段は、ファージディスプレイを使用した親和性成熟を含む。簡単に述べると、いくつかの超可変領域部位（例えば、６～７部位）は、各部位で全ての可能なアミノ酸置換を生成するために変異する。そうして生成された抗体バリアントは、各粒子内にパッケージングされたＭ１３の遺伝子ＩＩＩ産物に対する融合物として、繊維状ファージ粒子から一価様式でディスプレイされる。次いで、ファージディスプレイされたバリアントは、本明細書に開示されるとおり、それらの生物学的活性（例えば、結合親和性）についてスクリーニングされる。修飾に対する候補超可変領域部位を同定するためには、抗原結合に有意に寄与する超可変領域残基を同定するアラニンスキャニング変異誘発を実施することができる。別法では、または加えて、抗体及び抗原（例えば、本開示のＴＲＥＭ２タンパク質）の接触点を同定するために、抗原－抗体複合体の結晶構造を分析することが有益であることがある。そのような接触残基及び隣接残基は、本明細書で詳述される技術による置換の候補である。そのようなバリアントが生成されると、バリアントのパネルは、本明細書に記載されているとおりに、スクリーニングを受け、１つまたは複数の関連するアッセイにおいて優れた特性を有する抗体が、さらなる開発のために選択され得る。親和性成熟は、例えば、ＷＯ２００９／０３６３７９Ａ２；ＷＯ２０１０１０５２５６；ＷＯ２０１２００９５６８；及びＸｕ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．Ｄｅｓ．Ｓｅｌ．，２６（１０）：６６３－７０（２０１３）において開示されているものなどの酵母提示技術を用いることによって行うこともできる。

【0257】

抗体の別の種類のアミノ酸バリアントは、抗体の元のグリコシル化パターンを改変する。改変とは、抗体に見出される１つまたは複数の炭水化物部分を欠失させること、及び／または抗体に存在しない１つまたは複数のグリコシル化部位を付加することを意味する。

【0258】

抗体のグリコシル化は典型的には、Ｎ結合型またはＯ結合型のいずれかである。Ｎ結合型は、アスパラギン残基の側鎖への炭化水素部分の付加を指す。トリペプチド配列アスパラギン－Ｘ－セリン及びアスパラギン－Ｘ－トレオニン（Ｘはプロリンを除く任意のアミノ酸である）は、アスパラギン側鎖への炭水化物部分の酵素的付加のための認識配列である。したがって、ポリペプチドのこれらのトリペプチド配列のいずれかが存在すると、潜在的なグリコシル化部位が作製される。Ｏ結合型グリコシル化は、ヒドロキシアミノ酸、最も一般的にはセリンまたはトレオニンへの糖Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、またはキシロースのうちの１つの付加を指すが、５－ヒドロキシプロリンまたは５－ヒドロキシリシンも使用され得る。

【0259】

抗体へのグリコシル化部位の付加は、抗体が、（Ｎ結合型グリコシル化部位のための）上記のトリペプチド配列のうちの１つまたは複数を含有するように、アミノ酸配列を改変することによって、都合よく達成される。改変はまた、元の抗体（Ｏ結合型グリコシル化部位のための）の配列に、１つまたは複数のセリンまたはトレオニン残基を付加することによって、またはこれらによって置換することによって、行われ得る。

【0260】

（８）他の抗体修飾
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体、またはその抗体フラグメントは、当技術分野で公知であり、容易に入手可能である、追加の非タンパク質性部分を含有するように、または当技術分野で公知であり、容易に入手可能である異なる種類の薬物コンジュゲートを含有するように、さらに修飾することができる。好ましくは、抗体の誘導体化に適した部分は、水溶性ポリマーである。水溶性ポリマーの非限定例には、限定されないが、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマーまたはランダムコポリマーのいずれか）、及びデキストランまたはポリ（ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールホモポリマー、ポリプロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール、ならびにそれらの混合物が含まれる。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中でのその安定性によって、製造において利点を有することがある。ポリマーは、任意の分子量のものであってよく、分枝状または非分枝状であってもよい。抗体に付着するポリマーの数は、変化してもよく、複数のポリマーが付着する場合、それらは、同一、または異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／または種類は、限定されないが、改善されるべき抗体の特定の特性または機能、抗体誘導体が、規定された条件下での治療に使用されるかどうかなどを含む考察に基づき決定することができる。そのような技術及び他の適切な製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２０ｔｈ Ｅｄ．，Ａｌｆｏｎｓｏ Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｅｄ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ａｎｄ Ｓｃｉｅｎｃｅ（２０００）に開示されている。

【0261】

薬物コンジュゲーションは、特定の腫瘍マーカー（例えば、理想的には、腫瘍細胞内または腫瘍細胞上にのみ見出されるべきタンパク質）を特異的に標的とする抗体への生物学的活性細胞毒性（抗がん）ペイロードまたは薬物の連結を含む。抗体は、体内でこれらのタンパク質を追跡し、がん細胞の表面に付着する。抗体と標的タンパク質（抗原）との間の生化学反応は、腫瘍細胞でシグナルを誘発し、次いで、腫瘍細胞は、細胞毒素と一緒に抗体を吸収するまたは内部移行させる。ＡＤＣが内部移行された後に、細胞毒性薬物が放出され、がんを死滅させる。この標的化のために、理想的には、薬物は、より低い副作用を有し、他の化学療法薬より広い治療ウインドウを与える。抗体をコンジュゲートする技術は、当技術分野で公知である（例えば、Ｊａｎｅ ｄｅ Ｌａｒｔｉｇｕｅ，ＯｎｃＬｉｖｅ Ｊｕｌｙ ５，２０１２；ＡＤＣ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｒｕｇ ｃｏｎｊｕｇａｔｅｓ；及びＤｕｃｒｙ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）．Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２１（１）：５－１３を参照されたい）。

【0262】

（９）結合アッセイ及び他のアッセイ
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ウェスタンブロットなどの公知の方法によって、抗原結合活性について試験され得る。

【0263】

抗体が結合するエピトープをマッピングするための詳細な例示的方法は、Ｍｏｒｒｉｓ（１９９６）“Ｅｐｉｔｏｐｅ Ｍａｐｐｉｎｇ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ，”ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６６（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ）で提供されている。

【0264】

核酸、ベクター、及び宿主細胞
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、例えば、米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているとおりの組換え方法及び組成物を使用して生産され得る。一部の実施形態では、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離核酸が提供される。そのような核酸は、抗ＴＲＥＭ２抗体のＶＬを含有するアミノ酸配列及び／またはＶＨを含有するアミノ酸配列（例えば、抗体の軽鎖及び／または重鎖）をコードしてもよい。一部の実施形態では、そのような核酸を含有する１つまたは複数のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。一部の実施形態では、そのような核酸を含有する宿主細胞も提供される。一部の実施形態では、宿主細胞は、（１）抗体のＶＬを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶＨを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶＬを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶＨを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有する（例えば、これらを形質導入されている）。一部の実施形態では、宿主細胞は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。本開示の宿主細胞にはまた、限定ではないが、単離細胞、インビトロ培養細胞、及びエクスビボ培養細胞が含まれる。

【0265】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体の作製方法が提供される。一部の実施形態では、方法は、抗ＴＲＥＭ２抗体をコードする核酸を含有する本開示の宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養することを含む。一部の実施形態では、抗体は、その後、宿主細胞（または宿主細胞培養培地）から回収される。

【0266】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体を組み換え生産するためには、抗ＴＲＥＭ２抗体をコードする核酸を単離し、これを、宿主細胞におけるさらなるクローニング及び／または発現のために、１つまたは複数のベクター中に挿入する。そのような核酸は、従来の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合することができるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、配列決定され得る。

【0267】

本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体のいずれかをコードする核酸配列、または本明細書に記載されているそれらのフラグメントポリペプチド（抗体を含む）を含有する適切なベクターには、限定ではないが、クローニングベクター及び発現ベクターが含まれる。適切なクローニングベクターは、標準的な技術に従って構築することができる、または当技術分野で入手可能な多数のクローニングベクターから選択されてもよい。選択されたクローニングベクターは、使用されることが意図されている宿主細胞に従って変化することがあるが、有用なクローニングベクターは一般に、自己複製する能力を有し、特定の制限エンドヌクレアーゼのための単一の標的を有してもよく、及び／またはベクターを含有するクローンを選択する際に使用することができるマーカーの遺伝子を保有してもよい。適切な例には、プラスミド及び細菌ウイルス、例えば、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（例えば、ｐＢＳ ＳＫ＋）及びその誘導体、ｍｐｌ８、ｍｐｌ９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡ、ならびにｐＳＡ３及びｐＡＴ２８などのシャトルベクターが含まれる。これら及び他の多くのクローニングベクターは、ＢｉｏＲａｄ、Ｓｔｒａｔｅｇｅｎｅ、及びＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎなどの販売業者から入手可能である。

【0268】

発現ベクターは一般に、本開示の核酸を含有する複製可能なポリヌクレオチド構築物である。発現ベクターは、エピソームまたは染色体ＤＮＡの不可欠な部分のいずれかとして、宿主細胞において複製可能であることがある。適切な発現ベクターには、限定されないが、プラスミド、アデノウイルスを含むウイルスベクター、アデノ随伴ウイルス、レトロウイルス、コスミド及びＰＣＴ公報ＷＯ８７／０４４６２号に開示されている発現ベクター（複数可）が含まれる。ベクター構成成分は一般に、限定されないが、シグナル配列、複製起点、１つ以上のマーカー遺伝子、適切な転写制御エレメント（例えば、プロモーター、エンハンサー、及びターミネーター）のうちの１つまたは複数を含み得る。発現（すなわち、翻訳）のために、リボソーム結合部位、翻訳開始部位、及び終止コドンなどの１つまたは複数の翻訳制御エレメントもまた通常必要とされる。

【0269】

目的の核酸を含有するベクターは、電気穿孔法；塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥ－デキストラン、または他の物質を用いる遺伝子導入；マイクロプロジェクタイルボンバードメント；リポフェクション；及び感染（例えば、ベクターは、ワクシニアウイルスなどの感染性因子である）を含む多くの適切な手段のいずれかによって、宿主細胞内に導入することができる。ベクターまたはポリヌクレオチドを導入する選択は多くの場合に、宿主細胞の特徴に依存するであろう。一部の実施形態では、ベクターは、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体をコードする１つまたは複数のアミノ酸配列を含有する核酸を含有する。

【0270】

ベクターをコードする抗体のクローニングまたは発現に適した宿主細胞には、原核細胞または真核細胞が含まれる。例えば、本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体は、特に、グリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要でないときには、細菌において生産されてもよい。細菌における抗体フラグメント及びペプチドの発現については、（例えば、米国特許第５，６４８，２３７号、同第５，７８９，１９９号、及び同第５，８４０，５２３号；ならびに、Ｃｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４，ｄｅｓｃｒｉｂｉｎｇ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ Ｅ．ｃｏｌｉ．）。発現後に、抗体は、可溶性画分中の細菌細胞ペーストから単離されてもよく、さらに精製され得る。

【0271】

原核生物に加えて、糸状菌または酵母などの真核微生物も、グリコシル化経路が「ヒト化」されて、部分的または完全なヒトグリコシル化パターンを有する抗体の産生をもたらす真菌及び酵母株を含む抗体をコードするベクターに適したクローニングまたは発現宿主である（例えば、Ｇｅｒｎｇｒｏｓｓ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２２：１４０９－１４１４（２００４）；及びＬｉ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２４：２１０－２１５（２００６））。

【0272】

脊椎動物細胞も、宿主として使用され得る。例えば、懸濁液中で成長するように構成される哺乳動物細胞系が有用であり得る。有用な哺乳動物宿主細胞系の他の例は、ＳＶ４０によって形質転換されたサル腎臓ＣＶ１株（ＣＯＳ－７）；ヒト胎児由来腎臓系（例えば、Ｇｒａｈａｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｇｅｎ Ｖｉｒｏｌ．３６：５９（１９７７）に記載されている２９３または２９３細胞）；ベビーハムスター腎臓細胞（ＢＨＫ）；マウスセルトリ細胞（例えば、Ｍａｔｈｅｒ，Ｂｉｏｌ．Ｒｅｐｒｏｄ．２３：２４３－２５１（１９８０）に記載されているとおりのＴＭ４細胞）；サル腎臓細胞（ＣＶ１）；アフリカミドリザル腎臓細胞（ＶＥＲＯ－７６）；ヒト子宮頸癌細胞（ＨＥＬＡ）；イヌ腎臓細胞（ＭＤＣＫ）；バッファローラット肝細胞（ＢＲＬ ３Ａ）；ヒト肺細胞（Ｗ１３８）；ヒト肝臓細胞（Ｈｅｐ Ｇ２）；マウス乳房腫瘍（ＭＭＴ ０６０５６２）；例えば、Ｍａｔｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎａｌｓ Ｎ．Ｙ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．３８３：４４－６８（１９８２）に記載されているとおりのＴＲＩ細胞；ＭＲＣ５細胞；及びＦＳ４細胞である。他の有用な哺乳動物宿主細胞系には、ＤＨＦＲ－ＣＨＯ細胞を含むチャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞（Ｕｒｌａｕｂ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ７７：４２１６（１９８０））；ならびにＹ０、ＮＳ０、及びＳｐ２／０などの骨髄腫細胞系が含まれる。抗体生産に適した特定の哺乳動物宿主細胞系の概説については、例えば、Ｙａｚａｋｉ ａｎｄ Ｗｕ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ），ｐｐ．２５５－２６８（２００３）を参照されたい。

【0273】

医薬組成物及び製剤
本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体と、薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物を本明細書において提供する。一部の実施形態では、生理学的に許容される担体、添加剤または安定剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ （１９９０） Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．）中で所望の程度の純度を有する本開示の抗ＴＲＥＭ２抗体を含む医薬組成物を本明細書において提供する。許容される担体、添加剤、または安定剤は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性である。

【0274】

様々な実施形態で、抗ＴＲＥＭ２抗体を含む医薬組成物を、薬学的に許容される担体を含む製剤で提供する（例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ ｗｉｔｈ Ｆａｃｔｓ ａｎｄ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓ： Ｄｒｕｇｆａｃｔｓ Ｐｌｕｓ，２０ｔｈ ｅｄ．（２００３）；Ａｎｓｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ，７ｔｈ ｅｄ．，Ｌｉｐｐｅｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ （２００４）；Ｋｉｂｂｅ ｅｔ ａｌ．，Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ，３ｒｄ ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ （２０００）を参照されたい）。非経口投与に適した製剤には、抗酸化剤、緩衝剤、静菌剤、及び製剤を意図されているレシピエントの血液と等張性にする溶質を含んでよい水性及び非水性等張性無菌注射液、ならびに懸濁化剤、溶解補助剤、増粘剤、安定剤、及び防腐剤を含んでよい水性及び非水性無菌懸濁剤が含まれる。

【0275】

薬学的投薬量及び投与
本明細書において提供される抗ＴＲＥＭ２抗体は、非経口、肺内、鼻腔内、病変内投与、脳脊髄内、頭蓋内、髄腔内、滑液包内、髄腔内、経口、局所、または吸入経路を含む任意の適切な手段によって投与することができる。非経口注入には、筋肉内、ボーラス剤としての、もしくはある期間にわたる連続注入による静脈内投与、動脈内、関節内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。一部の実施形態では、投与は静脈内投与である。一部の実施形態では、投与は皮下である。投薬は、部分的には、投与が短期または長期であるかどうかに応じて、任意の適切な経路によって、例えば、静脈内または皮下注射などの注射によってよい。これに限定されないが、様々な時点での単回または複数回投与、ボーラス投与、及びパルス注入を含む様々な投薬スケジュールが本明細書において企図される。

【0276】

疾患の予防または処置のために、抗ＴＲＥＭ２抗体の適切な投薬量は、処置される疾患の種類、特定の抗体、疾患の重症度及び経過、抗体が予防または治療目的で投与されるかどうか、先行の治療、抗体に対する患者の臨床履歴及び応答、ならびに主治医の判断に依存することとなる。抗体は１回で、または一連の処置で患者に適切に投与される。

【0277】

キット／製品
本開示はまた、本開示の単離抗体（例えば、本明細書に記載の抗ＴＲＥＭ２）またはその機能的フラグメントを含有するキットを提供する。本開示のキットは、本開示の精製された抗体を含む１つまたは複数の容器を含んでもよい。一部の実施形態では、キットは、本開示の方法に従って使用するための取扱説明書をさらに含む。一部の実施形態では、これらの取扱説明書は、脱髄疾患、障害、または損傷を予防する、そのリスクを低減させる、またはそれを有する個体を処置するための、本開示の単離抗体（例えば、本明細書に記載の抗ＴＲＥＭ２）の投与の記載を含む。一部の実施形態では、脱髄疾患、障害、または損傷は、多発性硬化症、視神経炎、視神経脊髄炎（デビック病）、横断性脊髄炎、急性播種性脳脊髄炎、副腎白質ジストロフィー、または副腎脊髄ニューロパシーである。一部の実施形態では、脱髄疾患、障害、または損傷は、多発性硬化症である。

【0278】

一部の実施形態では、説明書は、例えば、個体、組織サンプル、または細胞において、ＴＲＥＭ２を検出する方法の記載を含む。キットは、その個体が疾患及び疾患の段階を有するかどうかを識別することに基づき、処置に適した個体を選択する記載をさらに含んでもよい。

【0279】

一部の実施形態では、キットは、本開示の別の抗体（例えば、阻害性チェックポイント分子に特異的に結合する少なくとも１つの抗体、阻害性サイトカインに特異的に結合する少なくとも１つの抗体、及び／または刺激性チェックポイントタンパク質に特異的に結合する少なくとも１つのアゴニスト抗体）、及び／または少なくとも１つの刺激性サイトカインをさらに含んでもよい。一部の実施形態では、キットは、本開示の任意の方法に従って、抗体及び／もしくは刺激性サイトカインを本開示の単離抗体（例えば、本明細書に記載の抗ＴＲＥＭ２抗体）と組み合わせて使用するための取扱説明書、本開示の単離抗体を抗体及び／もしくは刺激性サイトカインと組み合わせて使用するための取扱説明書、または本開示の単離抗体及び抗体及び／もしくは刺激性サイトカインを使用するための取扱説明書をさらに含んでもよい。

【0280】

取扱説明書は一般に、意図された処置のための投薬量、投薬スケジュール、及び投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量、バルクパッケージ（例えば、複数回用量パッケージ）またはサブユニット用量であってもよい。本開示のキットで供給される取扱説明書は典型的には、ラベルまたは添付文書（例えば、キットに含まれる紙シート）に書かれた取扱説明書であるが、機械で読み取ることができる取扱説明書（例えば、磁気または光学記憶ディスク上に担持される取扱説明書）も許容される。

【0281】

ラベルまたは添付文書は、組成物が、例えば、本開示の疾患を処置するために使用されることを示す。取扱説明書は、本明細書に記載の方法のいずれかを実行するために提供されてもよい。

【0282】

本開示のキットは、適切なパッケージング内にある。適切なパッケージングには、限定されないが、バイアル、ボトル、ジャー、フレキシブルパッケージング（例えば、密封マイラーまたはプラスチックバッグ）などが含まれる。吸入器、経鼻投与デバイス（例えば、アトマイザー）、またはミニポンプなどの注入デバイスなどの特定のデバイスと組み合わせて使用するためのパッケージも企図される。キットは、滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって穿刺可能な栓を有するバイアルであってもよい）。容器はまた、滅菌アクセスポートを有してもよい（例えば、容器は、静脈内溶液バッグまたは皮下注射針によって穿刺可能な栓を有するバイアルであってもよい）。組成物中の少なくとも１つの活性薬は、本開示の単離抗体（例えば、本明細書に記載の抗ＴＲＥＭ２抗体）である。容器は、第２の薬学的に活性な薬剤をさらに含んでもよい。

【0283】

キットは任意選択で、緩衝剤及び説明情報などの追加の構成要素を提供してもよい。通常、キットは、容器、及び容器上の、または容器に伴うラベルまたは添付文書（複数可）を含む。

【0284】

本開示は、以下の実施例を参照することによって、より十分に理解されるであろう。しかしながら、これらは、本開示の範囲を限定するものとして解釈されるべきではない。本開示全体にわたる全ての引用は、参照によって明示的に本明細書に組み込まれる。

【実施例】

【0285】

実施例１：Ｔｒｅｍ２ハプロ不全は、非効率的なミエリンデブリクリアランスをもたらす。
ホモ接合型Ｔｒｅｍ２^－／－マウスは、脱髄のクプリゾン（ＣＰＺ）誘導モデルにおけるミエリンデブリのクリアランスにおいて、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較して有意な不全を示す（例えば、Ｃａｎｔｏｎｉ，Ｂｏｌｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．２０１５，Ｐｏｌｉａｎｉ，Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１５を参照されたい）。ヘテロ接合型（Ｔｒｅｍ２^＋／－）マウスがＴｒｅｍ２^－／－マウスと同じか、またはそれよりも穏やかな表現型を呈示するかどうかをこの実施例では評価する。

【0286】

材料及び方法
マウス
Ｔｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^＋／－及びＴｒｅｍ２^－／－マウス（Ｃ５７ＢＬ／６バックグラウンドに戻し交配された１２世代）を使用した。これら３つの株を平行して繁殖させた。マウスを制御条件下で飼育した（１９～２２℃、かつ１２時間明暗サイクルで、食餌及び水は制限せずに摂取させる）。

【0287】

脱髄のＣＰＺ誘導モデル
Ｔｒｅｍ２^＋／＋、Ｔｒｅｍ２^＋／－、及びＴｒｅｍ２^－／－マウスに、０．２％Ｃｕｐｒｉｚｏｎｅ Ｄｉｅｔ（５Ｃ５Ｎ：Ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＰｉｃｏＬａｂ（登録商標）Ｒｏｄｅｎｔ ｗ／０．２％Ｃｕｐｒｉｚｏｎｅ、ＴｅｓｔＤｉｅｔ；Ｓｉｇｍａ製クプリゾン（ｃｏｄ Ｃ９０１２－２５Ｇ））を４週間にわたって給餌する、または４週間給餌し、その後に３日間もしくは７日間もしくは１４日間にわたって通常の固形飼料（ＰｉｃｏＬａｂ Ｒｏｄｅｎｔ Ｄｉｅｔ ２０ ＃５０５３、Ｐｕｒｉｎａ）を給餌した。

【0288】

マウス組織の処理及び組織学的分析
マウスにケタミン（１００ｍｇｋｇ^－１）で麻酔をかけて、４％パラホルムアルデヒド（ＰＦＡ）を潅流させた。マウス脳を取り出し、４％ＰＦＡ中で２４時間にわたって後固定し、続いて、３０％スクロース中に２４～４８時間にわたって液浸した。次いで、試料を最適切削温度（ＯＣＴ）に包埋した。厚切片（５μｍ）をガラススライドに載せて、既に記載されているとおりに（Ｋｉｅｒｎａｎ、１９８４）、ソロクロムシアニンで染色して、病変の存在を確認した。切片を次の一次抗体：ウサギ（Ｒｂ）抗ｄＭＢＰ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ、ａｂ５８６４，１：２０００）、Ｒｂ抗Ｉｂａ１（Ｗａｋｏ、０１９－１９７４１，１：６００）、ヤギ（Ｇｔ）抗Ｉｂａ１（Ｎｏｖｕｓ、ＮＢ１００－１０２８，１：２５０）、Ｒｂ抗ＰＤＧＦＲａ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ、ＰＡ５－１６７４２，１：５０）、Ｒｂ抗ＯＬＩＧ２（Ｍｉｌｉｐｏｒｅ、ＡＢ９６１０，１：３００）、マウス（Ｍｓ）抗ＣＮＰａｓｅ（Ａｂｃａｍ、ａｂ６３１９，１：１００）、及び抗ＳＭＩ－３１抗体で染色した。ＡｌｅｘａＦｌｕｏｒコンジュゲートした二次抗体（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ、１：４００）を使用した。画像の一部は、１０倍、２０倍、及び６０倍対物レンズを備えたＮｉｋｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｅ ９０ｉ蛍光明視野顕微鏡で取得し、Ｍｅｔａｍｏｒｐｈ ７．７ソフトウェアで分析した。ＣＮＰアーゼ、ＳＭＩ－３１、及びｄＭＢＰを、目的の領域内での陽性染色のパーセンテージ面積（陽性ピクセルの数／ｍｍ^２）として分析した。Ｉｂａ１、ＰＤＧＦＲａ、及びＯＬＩＧ２を、目的の領域における細胞の密度（細胞の数／ｍｍ^２）として定量化した。共焦点分析では、画像を、ＰｌａｎＡｐｏＮ ６０Ｘ、１．４ ＮＡスーパー補正オイル液浸対物レンズ（ｓｕｐｅｒ ｃｏｒｒｅｃｔｅｄ ｏｉｌ ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ）を備えたＯｌｙｍｐｕｓ ＦＶ１２００レーザー走査型共焦点顕微鏡（Ｏｌｙｍｐｕｓ－Ａｍｅｒｉｃａ Ｉｎｃ．、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）で取得した。Ｏｌｙｍｐｕｓ ＦＶ１２００共焦点顕微鏡は５つの検出器を備えていた：２つのスペクトル及び１つのフィルターベースの検出器ならびに２つのヒ化リン化ガリウム（ＧａＡｓＰ）光電子増倍管（ＰＭＴ）。４０５－、４８８－、及び５５９－ｎｍダイオードレーザー及び６３５－ｎｍ ＨｅＮｅ（ヘリウムネオン）レーザーを１エアリーユニットの最適なピンホールで使用して、画像を取得した。画像を最後に、ＩｍａｇｅＪソフトウェアで処理した。

【0289】

ミエリンデブリ蓄積の免疫組織化学分析
ＣＰＺモデルにおいて特に深刻で一致した脱髄の部位である脳梁（ＣＣ）（Ｍａｔｓｕｓｈｉｍａ ａｎｄ Ｍｏｒｅｌｌ ２００１）におけるミエリンデブリの蓄積量を評価するために、ミエリン分解の後に初めて暴露されるＭＢＰエピトープに結合し得る抗体を使用して、分解ミエリン塩基性タンパク質（ｄＭＢＰ）を免疫組織化学により分析した（Ｍａｔｓｕｏ、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．１９９７）。

【0290】

統計的解析
Ｐｒｉｓｍ ８．０（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ）を統計的分析のために使用した。示されているデータは平均±標準偏差（ｓ．ｄ．）であり、Ｐ＜０．０５が統計学的に有意と判断された。群差を、複数の群について一元配置分散分析（ＡＮＯＶＡ）、続いて、ＳｉｄａｋまたはＢｅｎｊａｍｉｎｉ、Ｋｒｉｅｇｅｒ及びＹｅｋｕｔｉｅｌｉ補正多重比較検定によって、または二元ＡＮＯＶＡ、続いて、Ｔｕｋｅｙ多重比較検定によって分析した。

【0291】

結果
図１Ａ～１Ｂに示されているとおり、ＣＰＺで４週間後のＴｒｅｍ２^－／－マウスは、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較した場合に、ｄＭＢＰシグナルの有意な上昇を示した。Ｔｒｅｍ２^－／－マウスにおけるｄＭＢＰシグナルの上昇は、Ｉｂａ１^＋ミクログリアの有意な減少を随伴した（図１Ａ及び１Ｃを参照されたい）。Ｔｒｅｍ２^－／－マウスではＯＰＣの数も、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較して有意に減少した（データは図示せず）。グリア線維性酸性タンパク質（ＧＦＡＰ）陽性細胞として定量化された星状細胞活性化では、Ｔｒｅｍ２^＋／＋とＴｒｅｍ２^－／－マウスとの間で相違は見い出されなかった（データは図示せず）。

【0292】

特に、Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスは、Ｔｒｅｍ２^＋／＋とＴｒｅｍ２^－／－マウスとの中間である表現型を示した。例えば、図１Ａ～１Ｂに示されているとおり、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較した場合にＴｒｅｍ２^＋／－マウスは、ｄＭＢＰシグナルの有意な上昇を示したが、その上昇は、Ｔｒｅｍ２^－／－マウスで観察された上昇よりも有意に小さかった。Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスは、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較して少ないＰＤＧＦＲα^＋ＯＰＣも示した（データは図示せず）。Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較してＴｒｅｍ２^－／－マウスではミクログリア数の有意な減少が観察されたこととは対照的に、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較してＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁ではＩｂａ１^＋細胞の数に差は認められなかった（図１Ａ及び１Ｃ）。脳梁におけるＧＦＡＰ^＋細胞の数は、Ｔｒｅｍ２^＋／－とＴｒｅｍ２^＋／＋マウスとの間で異ならなかった（データは図示せず）。

【0293】

この実施例に記載の結果は、Ｔｒｅｍ２ハプロ不全（すなわち、ＴＲＥＭ２の一方のコピーの喪失）が中間表現型をもたらすことを示しており、これは、ミクログリアによるミエリン除去がＴＲＥＭ２コピー数に対して感受性を有することを示唆している。特に、Ｔｒｅｍ２ハプロ不全は、脳梁におけるミクログリア蓄積の数に影響を及ぼさなかったとしても、非効率的なミエリンデブリクリアランスにつながって、ＯＰＣ動員を減少させる。これらの結果は、１コピーのＴＲＥＭ２は、ＣＰＺ誘導損傷後にミクログリア展開を持続させるには十分であるが、大量のオリゴデンドロサイト死に由来するミエリンデブリをクリアランスするためのミクログリアによる完全に機能性の応答を支持することはできないことを示唆した。

【0294】

総じて、この実施例に記載の結果は、ミクログリア上に完全に機能性のＴＲＥＭ２受容体が存在することが、効率的なミエリンデブリ除去及びＯＰＣ動員にとって最適であることを示した。さらに、Ｔｒｅｍ２ハプロ不全マウス（Ｔｒｅｍ２^＋／－マウス）が中間表現型を示し、ミエリンデブリクリアランスにおいて欠陥を有するという発見は、このプロセスにおけるＴＲＥＭ２アゴニスト抗体の作用を調査するためのモデルを提供した。ＴＲＥＭ２タンパク質は、Ｔｒｅｍ２^＋／＋マウスと比較しておそらく低下したレベルでも、Ｔｒｅｍ２ハプロ不全マウスに存在し、したがって、ＴＲＥＭ２アゴニスト抗体を試験することができる。

【0295】

実施例２：ＴＲＥＭ２シグナル伝達に対するアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体の作用の特徴づけ。
この実施例では、インビトロ及びインビボでのＴＲＥＭ２シグナル伝達に対するアゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体の作用を分析した。

【0296】

材料及び方法
抗ＴＲＥＭ２抗体の生成
ＴＲＥＭ２を遺伝的に欠損したマウス（Ｔｒｅｍ２^－／－）を組換えＴＲＥＭ２タンパク質で免疫化し、続いて、ハイブリドーマ生成することによって、マウスＴＲＥＭ２を標的とするモノクローナル抗体を生成した。マウスＩｇＧ１ Ｆｃ領域（ｍＩｇＧ１）を有する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５を、Ｔｒｅｍ２^－／－骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）ではなく、野生型（Ｔｒｅｍ２^＋／＋）への特異的結合について選択した。

【0297】

抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、次の配列を含む軽鎖可変ドメインを有する：

【化2】

【0298】

抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、次の配列を含む重鎖可変ドメインを有する：

【化3】

【0299】

抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の軽鎖及び重鎖可変ドメインの上の配列において、ＨＶＲ配列に下線が引かれている。

【0300】

骨髄由来マクロファージ
骨髄由来マクロファージ（ＢＭＤＭ）を、冷ＰＢＳ２％ＦＢＳで脛骨及び大腿骨髄細胞をフラッシュすることによって得た。赤血球を、ＡＣＫ溶解バッファー（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ）を使用して溶解させ、ＰＢＳ２％ＦＢＳ中で２回洗浄した後に、細胞をマウスＭ－ＣＳＦ（ｍ－ＭＣＳＦ）（５０ｎｇ／ｍｌ）を含む完全培地（ＲＰＭＩ、１０％ＦＢＳ、Ｐｅｎ／Ｓｔｒｅｐ、Ｌ－グルタミン、非必須アミノ酸）に再懸濁して、６日後に分化したマクロファージを得た。付着マクロファージをＰＢＳ中１ｍＭ ＥＤＴＡで取り外した。

【0301】

インビトロ及びインビボ免疫沈降及び免疫ブロット法
インビトロ免疫沈降実験のために、ＢＭＤＭ細胞を４時間にわたって、１％ＦＢＳを含むＲＰＭＩ中で飢餓させた。１０×１０^６細胞を１５分間にわたって４℃で、１μｇの対照抗体または抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５と共にインキュベートした。次いで、細胞を洗浄して、３７℃で、ヤギ抗マウスＩｇＧ（１×１０^６細胞で１．５μｇ）の存在下でインキュベートした。刺激の後に、細胞を、溶解バッファー（１％ｎ－ドデシル－β－Ｄ－マルトシド、５０Ｍｍトリス－ＨＣｌ（ｐＨ８．０）、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ２、１０％グリセロール、プロテアーゼ及びホスファターゼ阻害薬）で溶解させ、かつ抗体７Ｅ５とは異なるＴＲＥＭ２のドメインと結合する抗ＴＲＥＭ２抗体（ラット抗ｈ／ｍ－ＴＲＥＭ２、クローン２３７９２０、Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍ）またはアイソタイプ対照で免疫沈着させた。

【0302】

インビボ免疫沈降実験では、６～８週齢のＣ５７ＢＬ／６マウスに、３ｍｌの３％チオグリコール酸を腹腔内注射した。３日後に、腹腔が、ＴＲＥＭ２を発現するＣＤ１１ｂ^＋Ｆ４／８０^＋マクロファージで富化されたときに、マウスに、対照抗体または抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５（４０ｍｇ／ｋｇ）を注射した。抗体注射から２４時間後に、腹膜マクロファージを収集し、溶解バッファー（前記のとおり）中で即時溶解させて、ラット抗ｈ／ｍ ＴＲＥＭ２抗体（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍ、クローン２３７９２０）で免疫沈着させた。

【0303】

インビトロ及びインビボ実験の両方で、沈着したタンパク質を、非還元条件でＳＤＳ－ＰＡＧＥによって画分し、ＰＶＤＦ膜に移し、抗ホスホチロシン抗体（４Ｇ１０、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）でプローブした。ＴＲＥＭ２は、非還元条件下では検出されない。全ての基質が適正に免疫沈着したことを確認するために、各試料からの全細胞溶解産物も、還元条件下でのＳＤＳ－ＰＡＧＥによって画分して、抗アクチン抗体（アクチン、ｓｃ－４７７７８ Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ）で免疫ブロットした。

【0304】

ＮＦＡＴ－ルシフェラーゼレポーターアッセイ
マウスＴＲＥＭ２及びＤＡＰ１２の両方を発現する安定なＢＷ５１４７．Ｇ．１．４（ＡＴＣＣ（登録商標）ＴＩＢ４８（商標））（ＢＷＺ）細胞系をＣｉｇｎａｌ ＰＬｅｎｔｉ ＮＦＡＴ－Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅウイルス（Ｑｉａｇｅｎ）に感染させて、ＴＲＥＭ２活性化でルシフェラーゼシグナル伝達を誘導する安定なマウスＴＲＥＭ２レポーター細胞系を生成した。レポーターの活性を、ホルボール１２－ミリスチン酸１３－酢酸（ＰＭＡ）（０．０５μｇ／ｍｌ）及びイオノマイシン（０．２５μＭ）を使用して確認した。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がシグナル伝達を誘導するかどうかを試験するために、５μｇ／ｍｌの可溶性抗ＴＲＥＭ２または対照抗体を９６ウェル培養プレートの各ウェルに、１００，０００細胞／ウェルと一緒に添加して、４～６時間にわたって３７℃で、ダルベッコ変法イーグル培地（ＤＭＥＭ）中でインキュベートした。ルシフェラーゼ活性を、培地を除去し、かつＰＢＳ５０μｌ及びＯｎｅＧｌｏ Ｒｅａｇｅｎｔ５０μｌ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を添加することによって測定した。次いで、混合物を３分間にわたって室温で、プレート振盪機上でインキュベートして、細胞を溶解させた。ルシフェラーゼシグナルを、ＢｉｏＴｅｋプレートリーダーを使用して測定した。データを、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを使用して分析した。

【0305】

ミエリン誘導シグナル伝達を試験するために、ヒトミエリンをＰＢＳ中で２００μｇ／ｍｌに希釈し、９６ウェル組織培養プレート上に滴定し、かつ４℃で終夜インキュベートした。翌朝、溶液を除去し、プレートをＰＢＳ２００μｌで３回洗浄した。プレートを空気乾燥させ、ＢＷＺ細胞（抗体を伴って、または伴わずに）を添加し、インキュベートし、かつ前記のとおりに分析した。

【0306】

ミエリンの生成
ヒトミエリンを調製して、凍結乾燥形態で－８０℃で貯蔵した。使用前に、ミエリンをＤＭＥＭ中で２ｍｇ／ｍｌの最終濃度に懸濁し、かつボルテックス処理及び音波処理によって溶解させた。次いで、ミエリンに１００００ＲＡＤＳを照射して、無菌を達成した。さらに使用するために、アリコットを－８０℃で貯蔵した。

【0307】

結果
インビトロＴＲＥＭ２シグナル伝達
受容体エンゲージメント後に、架橋した抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がシグナル伝達を誘導するかどうかを試験するために、Ｔｒｅｍ２^＋／＋及びＴｒｅｍ２^－／－ＢＭＤＭをインビトロで抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で刺激し、続いて、受容体クラスター化を誘導するために、二次抗体と架橋した。次いで、ＴＲＥＭ２を免疫沈着させて、ＤＡＰ１２リン酸化を分析した。図２に示されているとおり、架橋（「ｘ架橋」）抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、ＴＲＥＭ２関連ＤＡＰ１２のリン酸化をＴｒｅｍ２^＋／＋では誘導したが、Ｔｒｅｍ２^－／－ＢＭＤＭでは誘導しなかった。アイソタイプ対照抗体での処理は、いずれのＤＡＰ１２リン酸化ももたらさなかった。これらの結果は、架橋抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がＤＡＰ１２リン酸化の強力な誘導因子であって、ＴＲＥＭ２シグナル伝達を媒介するアゴニストとして作用することを実証した。

【0308】

架橋の非存在下で、受容体エンゲージメント後に、可溶性抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がシグナル伝達を誘導するかどうかも試験した。図２に示されているとおり、可溶性抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５（二次架橋を伴わない）はＤＡＰ１２リン酸化を誘導した。これらの結果は、可溶性（非架橋）抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がＤＡＰ１２リン酸化を誘導して、ＴＲＥＭ２シグナル伝達を媒介するアゴニストとして作用することを実証した。

【0309】

ＴＲＥＭ２レポーター細胞アッセイにおいて、マウスＴＲＥＭ２／ＤＡＰ１２複合体を発現し、かつＮＦＡＴプロモーター制御下のルシフェラーゼレポーター遺伝子を形質導入されているＢＷＺ細胞を使用して、ＴＲＥＭ２シグナル伝達を活性化する可溶性抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の能力も試験した。図３Ａに示されているとおり、アイソタイプ対照抗体と比べて増加したルシフェラーゼ誘導によって実証されるとおり、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は用量依存的にＴＲＥＭ２シグナル伝達を誘導した。

【0310】

続いて、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がミエリン誘導ＴＲＥＭ２シグナル伝達をブロックし得る、または増強し得るかどうかを、前記のＴＲＥＭ２レポーター細胞アッセイを使用して試験した。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体を、漸増濃度のプレート結合ミエリン上に播種されたＢＷＺ細胞に添加した。図３Ｂに示されているとおり、低いミエリン濃度（＜１００μｇ／ｍｌ）では、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、アイソタイプ対照抗体と異なるようにシグナル伝達を調節することはなかった。対照的に、高い濃度（＞１００μｇ／ｍｌ）では、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、アイソタイプ対照抗体と比べてミエリン誘導ルシフェラーゼ活性化を有意に上昇させた。これらの結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がインビトロでミエリン媒介ＴＲＥＭ２シグナル伝達活性化を強化することを示した。

【0311】

インビボＴＲＥＭ２シグナル伝達
次に、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がインビボでＴＲＥＭ２シグナル伝達活性化を誘導し得るかどうかを調査した。腹腔へのマクロファージのチオグリコール酸誘導動員後に、マウスに、抗ＴＲＥＭ２抗体を注射した。次いで、ＴＲＥＭ２を免疫沈着させ、ＤＡＰ１２リン酸化を分析した。図４Ａ～４Ｂに示されているとおり、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、アイソタイプ対照と比較して、ＴＲＥＭ２関連ＤＡＰ１２のリン酸化を有意に誘導した。これらの結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がインビボでのＴＲＥＭ２細胞内シグナル伝達の強力な誘導因子であることを実証した。

【0312】

結論として、この実施例に記載の結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がインビトロ及びインビボの両方において強力なＴＲＥＭ２アゴニストであること、及びそのアゴニスト活性がミエリンの存在によってブーストされることを実証した。

【0313】

実施例３：アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５はミエリンデブリクリアランスを促進する。
この実施例では、Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスにおいて、ＣＰＺ誘導脱髄に起因するミエリンデブリのクリアランスを促進する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の能力を評価した。

【0314】

材料及び方法
抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の投与
Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスを、ＣＰＺ給餌開始の４日前、その後は、実験を通じて毎週、８０ｍｇ／ｋｇの用量で腹腔内投与される抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体で処置した（図５Ａを参照されたい）。抗ＴＲＥＭ２抗体は脳に達して、脳梁及び皮質において検出可能であったと決定された（データは図示せず）。ＣＰＺ給餌後４週目（４ＷＫ；このとき、脱髄のピークが観察された）、次いで、再有髄化を可能にするために通常の固形飼料がマウスに給餌されるＣＰＺ中止後３日目（ＷＫ４＋３Ｄ）、７日目（ＷＫ４＋７Ｄ）、及び１４日目（ＷＫ４＋１４Ｄ）に、分析を行った（図５Ａを参照されたい）。

【0315】

結果
抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５でのインビボでの処置は、Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスにおいてＣＰＺ誘導病態の寛解をもたらした。具体的には、図５Ｂ～５Ｃに示されているとおり、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５処置は、ＣＰＺ中４週目のｄＭＢＰ染色を縮小させる傾向によって実証されたとおり、アイソタイプ対照抗体と比べてミエリンデブリクリアランスを増強した。抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５で処置されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスにおいて観察されたミエリンデブリクリアランスの増強は、対照抗体で処置されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスと比較して、ＣＰＺ中止後３日目に高度に統計学的に有意であった（図５Ｃ）。

【0316】

この実施例に記載のインビボ実験の結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がミエリンクリアランスを促進することを実証し、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５がミクログリアに対するＴＲＥＭ２機能を強化することを示唆した。理論に拘束されることは望まないが、Ｔｒｅｍ２^＋／－マウスにおけるミエリンクリアランスに対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の作用は、ＴＲＥＭ２を発現することが一貫して示されているＣＮＳ細胞型であるミクログリアに対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の直接的な作用によるものであり（Ｓｃｈｍｉｄ、Ｓａｕｔｋｕｌｉｓ ｅｔ ａｌ．２００２）、かつＣＰＺ誘導脱髄後の損傷に対する応答に高度に関係していると考えられる。

【0317】

実施例４：アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、オリゴデンドロサイト前駆細胞の動員及び成熟オリゴデンドロサイトへの分化を促進した。
オリゴデンドロサイト前駆細胞（ＯＰＣ）は、再有髄化を持続させて、脱髄中に生じるオリゴデンドロサイトの減少を妨げる。この実施例では、ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスにおけるＯＰＣの数及び成熟オリゴデンドロサイト（ＯＬ）へのＯＰＣ分化に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の作用を分析した。

【0318】

材料及び方法
ＣＰＺ誘導脱髄及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスへの抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体の投与を、実施例３に記載されているとおりに実施した。

【0319】

免疫組織化学実験を前記のとおりに行った。

【0320】

結果
ＯＰＣ動員
図６Ａ～６Ｂに示されているとおり、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５処置後、ＷＫ４＋３Ｄ及びＷＫ４＋７Ｄ目に、対照抗体で処置されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスと比較して、ＰＤＧＦＲα^＋ＯＰＣ密度の統計学的に有意な上昇がＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁において観察された。ＰＤＧＦＲａ^＋ＢｒｄＵ^＋細胞の密度として定量化されたＰＤＧＦＲα^＋ＯＰＣ増殖では、ＷＫ４＋３Ｄ目に差は観察されなかった（データは図示せず）。

【0321】

成熟ＯＬへのＯＰＣ分化
成熟ＯＬによって特異的に発現されるＯＬＩＧ２及びＣＮＰアーゼマーカーの発現を分析して、オリゴデンドロサイト成熟に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の作用を評価した。図７Ａ～７Ｃに示されているとおり、ＯＬＩＧ２^＋細胞（図７Ａ及び７Ｂ）及びＣＮＰアーゼ^＋細胞（図７Ａ及び７Ｃ）の両方の統計学的に有意な増加が、対照抗体で処置されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスと比較して、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５を投与されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスにおいて、ＣＰＺ中止後ＷＫ４＋３Ｄ目に観察された。

【0322】

この実施例に記載の結果は、ＣＰＺ誘導脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスへの抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５投与が脳梁へのオリゴデンドロサイト前駆細胞の動員をもたらすことを示した。加えて、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、成熟オリゴデンドロサイトへのＯＰＣの分化を促進した。

【0323】

これらの結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５が、常在ＯＰＣの増殖の増強よりも、周囲脳領域からＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁へのＯＰＣの動員を促進することを示唆した。しかしながら、ミクログリア増殖に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の作用がＣＰＺ中の４週目に観察されなくても、ミクログリア増殖は、より強固である早い時点では、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５によって影響を受け得た（例えば、（Ｇｕｄｉ、Ｇｉｎｇｅｌｅ ｅｔ ａｌ．２０１４）を参照されたい）。

【0324】

実施例５：アゴニスト抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５は、ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うマウスにおいて軸索健康を促進する。
この実施例では、ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁における軸索健康に対する抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５の作用を分析した。

【0325】

材料及び方法
ＣＰＺ誘導脱髄及びＴｒｅｍ２^＋／－マウスへの抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５またはアイソタイプ対照抗体の投与を実施例３に記載のとおりに実施した。

【0326】

免疫組織化学実験を前記のとおりに行った。

【0327】

結果
ＳＭＩ－３１の発現
図８Ａ～８Ｂに示されているとおり、対照抗体で処置されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスと比較して、リン酸化ニューロフィラメントのためのマーカーであるＳＭＩ－３１発現の統計学的に有意な増加が、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５を投与されたＴｒｅｍ２^＋／－マウスにおいてＣＰＺ中止後のＷＫ４＋７Ｄ目に観察された。

【0328】

リン酸化ニューロフィラメントの存在は、軸索健康の指標である。したがって、これらの結果は、抗ＴＲＥＭ２抗体７Ｅ５が、ＣＰＺ誘導ＣＮＳ脱髄を伴うＴｒｅｍ２^＋／－マウスの脳梁において軸索健康を促進することを示した。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2】

【図3A】

【図3B】

【図4A】

【図4B】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6A】

【図6B】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【配列表】

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【国際調査報告】