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特表2023-516461経口使用のための、抗ウイルス作用を有するラクトフェリン
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-04-19
(54)【発明の名称】経口使用のための、抗ウイルス作用を有するラクトフェリン
(51)【国際特許分類】
A61K 38/40 20060101AFI20230412BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20230412BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20230412BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20230412BHJP
【ＦＩ】
A61K38/40
A61P11/00
A61P31/12
A61P31/14
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022554336
(86)(22)【出願日】2020-10-15
(85)【翻訳文提出日】2022-10-27
(86)【国際出願番号】 IB2020059695
(87)【国際公開番号】W WO2020250209
(87)【国際公開日】2020-12-17
(31)【優先権主張番号】102020000005011
(32)【優先日】2020-03-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】IT
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】516067302
【氏名又は名称】ソファル ソチエタ ペル アツィオニ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100122301
【弁理士】
【氏名又は名称】冨田 憲史
(74)【代理人】
【識別番号】100157956
【弁理士】
【氏名又は名称】稲井 史生
(74)【代理人】
【識別番号】100170520
【弁理士】
【氏名又は名称】笹倉 真奈美
(74)【代理人】
【識別番号】100221545
【弁理士】
【氏名又は名称】白江 雄介
(72)【発明者】
【氏名】ビッフィ，アンドレア
(72)【発明者】
【氏名】フィオーレ，ヴァルテル
【テーマコード（参考）】
4C084
【Ｆターム（参考）】
4C084AA01
4C084AA02
4C084DC50
4C084MA13
4C084MA17
4C084MA21
4C084MA22
4C084MA23
4C084MA24
4C084MA34
4C084MA35
4C084MA37
4C084MA41
4C084MA43
4C084MA52
4C084NA10
4C084ZA591
4C084ZA592
4C084ZB331
4C084ZB332
(57)【要約】
本発明は、ラクトフェリンを含む組成物であって、抗ウイルス剤として経口使用するための、好ましくは呼吸器系のウイルス感染および該ウイルス感染、好ましくはＳＡＲＳ－コロナウイルスのウイルス感染（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）に由来するかまたは関連する症状または障害の処置における使用のための組成物に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ウイルス感染の処置方法における使用のための組成物であって、ここで該組成物が、
（ｉ）ラクトフェリン、および任意には
（ｉｉ）少なくとも１つの許容できる薬学的グレードの添加剤および／または賦形剤を含み、
ここで該組成物が経口経路による使用のためのものである、組成物。
【請求項2】
組成物が、呼吸器系のウイルス感染、好ましくは上気道および／または下気道のウイルス感染ならびに該ウイルス感染に由来するかまたは関連する症状および／または障害の処置方法における使用のためのものである、請求項１に記載の使用のための組成物。
【請求項3】
ウイルス感染が、コロナウイルス科、亜科：コロナウイルス亜科、属：ベータコロナウイルス属、種：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種、のウイルスであって、以下の株：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ）であってＣＯＶＩＤ－１９疾患の原因、および重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－様（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様またはＳＬ－ＣｏＶ）から選択されるウイルス；好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、によって引き起こされる感染である、請求項１または請求項２に記載の使用のための組成物。
【請求項4】
呼吸器系のウイルス感染に由来するかまたは関連する症状および／または障害が、以下：重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、呼吸器合併症、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支炎、肺気腫、嚢胞性線維症、咳、百日咳、肺炎、胸膜炎、気管支炎、風邪、副鼻腔炎、鼻炎、気管炎、咽頭炎、喉頭炎、急性喉頭気管気管支炎、喉頭蓋炎、気管支拡張症、呼吸困難（ｄｉｆｆｉｃｕｌｔｙ ｂｒｅａｔｈｉｎｇ）、呼吸困難（ｄｙｓｐｎｏｅａ）、息切れ（ｂｒｅａｔｈｌｅｓｓｎｅｓｓ）、息切れ（ｓｈｏｒｔｎｅｓｓ ｏｆ ｂｒｅａｔｈ）、発熱、疲れ、筋肉痛（ｍｕｓｃｌｅ ａｃｈｅｓ）、筋肉痛（ｍｕｓｃｌｅ ｐａｉｎ）、鼻づまり、鼻水、喉の痛み、胃腸症状、吐き気、下痢、腎不全、食欲不振、全身の不快感（ｇｅｎｅｒａｌ ｆｅｅｌｉｎｇ ｕｎｗｅｌｌ）から選択される、請求項２または請求項３に記載の使用のための組成物。
【請求項5】
組成物が、錠剤、チュアブル錠、口内で溶けやすい錠剤、顆粒、粉末、フレーク、可溶性の粉末または顆粒、口内で溶けやすい粉末または顆粒、カプセルから選択される固形である；あるいは溶液、懸濁液、分散液、乳化液、スプレー状に吐出可能な液体、またはシロップから選択される液体状である；あるいは、ソフトゲル、ゲルから選択される半固形である；好ましくは固形である、前述の請求項の何れか１項に記載の使用のための組成物。
【請求項6】
ラクトフェリンがリポソーム形態である；好ましくはリン脂質ベースのリポソーム形態である、前述の請求項の何れか１項に記載の使用のための組成物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、抗ウイルス剤として経口使用するためのラクトフェリンを含む組成物であって、好ましくは呼吸器系のウイルス感染の処置、および当該ウイルス感染、好ましくはＳＡＲＳ－コロナウイルス感染（例えば、ＣＯＶＩＤ－１９）に由来するかまたは関連する症状または障害の処置における使用のための組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
呼吸器のウイルス感染は、その名の通り、上気道および／または下気道（ｕｐｐｅｒ ａｎｄ／ｏｒ ｌｏｗｅｒ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｓｔｅｍ）器官（鼻、咽頭（ｐｈａｒｙｎｘ）、喉頭（ｌａｒｙｎｘ）、気管（ｔｒａｃｈｅａ）、気管支（ｂｒｏｎｃｈｉ）および肺）を侵すウイルスによって起こる感染症である。
【0003】
好ましくは、本発明は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶと省略される重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種の少なくとも１つのウイルスによって引き起こされるウイルス感染に関する。上記のＳＡＲＳ－ＣｏＶ種のウイルスは、ベータコロナウイルス属に属する、プラス鎖ＲＮＡウイルス（バルティモア分類の第４群）である。
【0004】
重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種のウイルスは、中国における２００２年～２００３年のＳＡＲＳの流行を引き起こしたウイルスであり、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ株と呼ばれる。
【0005】
これは２００２年の１１月に中国の広東省において最初に発見された。２００２年１１月１日から２００３年８月３１日にわたって、主に中国、香港、台湾および全ての南アジアにおいて、約３０ヶ国で８０９６人がこのウイルスに感染し、７７４人が死亡した。２０１９年の末頃、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２株、あるいは２０１９－ｎＣｏＶと呼ばれる、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種の第２のウイルスが中国および世界のその他の地域で、より一般的にはＣＯＶＩＤ－１９（コロナウイルス疾患１９（ＣＯｒｏｎａＶＩｒｕｓ Ｄｉｓｅａｓｅ １９）、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２急性呼吸器疾患、あるいはコロナウイルス疾患２０１９、コロナウイルス症候群２０１９としても知られる）として知られる新たなＳＡＲＳの流行を引き起こした。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0006】
広範な研究開発活動に続き、本出願人は、ウイルス感染、好ましくは呼吸器（上気道および／または下気道）のウイルス感染、特に重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２／２０１９－ｎＣｏＶ 株（その疾患はＣＯＶＩＤ－１９として知られる）またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様）の少なくとも１つのウイルスによって引き起こされる呼吸器のウイルス感染の処置という問題に対して、ラクトフェリンもしくはその誘導体を含む経口使用するための組成物であって、上記のウイルス感染またはそれに関連する症状もしくは障害の処置方法における使用のための組成物を提供する事によって取り組み、解決する。
【0007】
ラクトフェリンは、ラクトトランスフェリンとしても知られ、多機能な球状タンパク質である。ラクトフェリンはトランスフェリンファミリーに属し、その分子量は約８０ｋＤａであり、トランスフェリン自身と同様に第二鉄イオン（Ｆｅ３＋）に対する結合部位を２つ有する。ラクトフェリンが鉄によって飽和する事はなく、その鉄含有量は様々である。ラクトフェリンは殺菌、殺真菌、および様々なウイルスに対する抗微生物活性を有する。ラクトフェリンの抗微生物活性はそのＦｅ３＋への親和性、すなわち遊離状態において鉄依存性の微生物と競合するその高い能力、およびグラム陰性細菌の外膜への直接作用に関連しているとする仮説がある。粘膜分泌物中におけるラクトフェリンと第二鉄イオンの結合は細菌およびウイルスの活性および細胞膜への凝集能を調節する。これは、ある細菌およびウイルスは細胞複製を行うために鉄を要求するが、ラクトフェリンは逆に周囲の環境から鉄を除去するのでこの細菌およびウイルスの増殖を防ぐという事実によるものである。
【0008】
ラクトフェリンは、ロタウイルス、呼吸器合胞体ウイルス、ヘルペスウイルスおよびＨＩＶを含むＤＮＡおよびＲＮＡウイルスに対する抗ウイルス活性を示す。ラクトフェリンの抗菌活性は感染の初期段階にある。ラクトフェリンは、細胞受容体を遮断するかまたはウイルス粒子に直接結合することで宿主細胞へのウイルスの侵入を防ぐ。具体的には、ラクトフェリンの抗ウイルス効果は主にその細胞膜のグリコサミノグリカンに結合する能力にある。さらに、ラクトフェリンは、ＮＫ細胞活性を亢進し、および好中球の凝集及び接着を刺激する事により、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）による急性侵入に対する宿主の免疫応答に関与する事が文献において知られている。さらに、ＨＳＰＧ（ヘパラン硫酸プロテオグリカン、広く分布）がＳＡＲＳ－ＣｏＶ細胞の侵入に関与する細胞表面の必須分子であることから、ラクトフェリンは、ＨＳＰＧに結合し、ＳＡＲＳ－ＣｏＶおよび宿主細胞間の予備的相互作用を遮断する事によって、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ感染に対する宿主の防御における防御的な役割を果たしうるとする仮説が立てられている。
【0009】
本発明の文脈において、ラクトフェリン誘導体という表現は、例えばアポラクトフェリンまたはラクトフェリシンなどの、ラクトフェリンに由来し、同様の抗ウイルス効果を示す任意の多機能性ペプチドまたは球状タンパク質を示すために使用される。ラクトフェリシンは知られた抗細菌活性を持つラクトフェリン誘導体であり、アポラクトフェリンはラクトフェリンのＮ末端ローブ（またはアポラクトフェリン）が開いた立体構造をとるラクトフェリンである。
【0010】
ラクトフェリンまたはその誘導体に基づき、経口使用するために製剤化され、好ましくは固形である本発明の組成物は、抗ウイルス剤として、特に呼吸器のウイルス感染およびそれに関連する症状または障害の処置において、特に重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ株（ＣＯＶＩＤ－１９として知られる疾患の原因となる）またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様）の少なくとも１つのウイルスによって引き起こされる感染において有効である。
【0011】
ラクトフェリンまたはその誘導体に基づく本発明の組成物は、特定の賦形剤および添加剤を加える事によって、吸入、経口または鼻腔用に、鼻または喉へと霧化して投与する－スプレー装置を用いて－ために好適な、溶液または乳化液または分散液として製剤化され得る。この噴霧可能な組成物は抗ウイルス剤として、特に呼吸器のウイルス感染およびそれに関連する症状または障害の処置において、特に重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ株（ＣＯＶＩＤ－１９として知られる疾患の原因となる）またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様）の少なくとも１つのウイルスによって引き起こされる感染において有効である。
【0012】
ラクトフェリンもしくはその誘導体に基づく本発明の組成物は、関連する副作用を有さず、高齢者、妊娠中または授乳期間中の女性、小児対象（０～１２歳）、呼吸器系もしくは循環器系の合併症を患う対象、または糖尿病を患う対象、またはウイルス感染の事象においてリスクもしくは危険をもたらし得るその他の合併症を患う対象を含む、全てのカテゴリーの必要とする対象に投与し得る。
【0013】
さらに、ラクトフェリンに基づく本発明の組成物は、調製が容易であり、費用対効果に優れている。
【0014】
以下の発明の詳細な説明から明らかになるこれらのおよびその他の目的は、本願明細書において報告され、および添付の特許請求の範囲において主張される技術的特徴をもって本願の組成物および混合物によって達成される。
【図面の簡単な説明】
【0015】
図面の簡単な説明
【0016】
【図1-1】図１Ａ－Ｄは、Ｃａｃｏ－２腸上皮細胞から産生される、抗ウイルス作用を持つ、または抗ウイルス応答に関与するサイトカイン／ケモカインおよび分子のパネルに対するラクトフェリン（Ｌ）の効果を示す。
【図1-2】同上。
【図1-3】同上。
【0017】
【0018】
【図3-1】図３Ａ－Ｅは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを用いた処置について、ラクトフェリン（Ｌ）を用いた前処置に続く、Ｃａｃｏ－２腸上皮細胞によって産生された抗ウイルス作用を持つ、または抗ウイルス応答に関与するサイトカイン／ケモカインおよび分子のパネルに対するラクトフェリンの効果を示す。
【図3-2】同上。
【図3-3】同上。
【0019】
【図4-1】図４Ａ－Ｄは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスおよびラクトフェリン（Ｌ）を用いた同時処置に続く、Ｃａｃｏ－２腸上皮細胞によって産生された抗ウイルス作用を持つ、または抗ウイルス応答に関与するサイトカイン／ケモカインおよび分子のパネルに対するラクトフェリンの効果を示す。
【図4-2】同上。
【発明を実施するための形態】
【0020】
発明の詳細な説明
本発明の目的を形成するものは、経口使用するための組成物（略して本発明の組成物）であって、抗ウイルス剤として使用するための、好ましくは必要とする患者における呼吸器系（上気道および／下気道）のウイルス感染および当該ウイルス感染に由来するかまたは関連する症状または障害の処置方法における使用のための組成物であり、当該組成物は、（ｉ）許容できる薬学的グレードのラクトフェリン（略してＬＦ）またはその誘導体を含むかまたはそれからなる混合物Ｍ（略して本発明の混合物Ｍ）；および、任意には（ｉｉ）少なくとも１つの許容できる薬学的グレードの添加剤および／または賦形剤、を含む。
本発明の目的を形成するものは、経口使用するための組成物（略して本発明の組成物）であって、抗ウイルス剤として使用するための、好ましくは必要とする患者における呼吸器系（上気道および／下気道）のウイルス感染および当該ウイルス感染に由来するかまたは関連する症状または障害の処置方法における使用のための組成物であり、当該組成物は、（ｉ）許容できる薬学的グレードのラクトフェリン（略してＬＦ）またはその誘導体を含むかまたはそれからなる混合物Ｍ（略して本発明の混合物Ｍ）；および、任意には（ｉｉ）少なくとも１つの許容できる薬学的グレードの添加剤および／または賦形剤、を含む。
【0021】
好ましくは、本発明の組成物を使用して処置されるウイルス感染が、科：コロナウイルス科、亜科：コロナウイルス亜科、属：ベータコロナウイルス属、種：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種（略して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶまたはＳＡＲＳ－コロナウイルス）；以下の株：（Ｉ）重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ またはＳＡＲＳ）、（ＩＩ）重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ（ＣＯＶＩＤ－１９として知られる疾患の原因となる））、および（ＩＩＩ）重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－様（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様またはＳＬ－ＣｏＶ）から選択されるウイルス；好ましくは、ＣＯＶＩＤ－１９として知られる疾患の原因となるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ、によって引き起こされる感染である。
【0022】
略して、本発明の文脈において、これらのウイルス（例えば、（Ｉ）、（ＩＩ）および（ＩＩＩ））は「ＳＡＲＳ－コロナウイルス種のウイルス」または単に「ＳＡＲＳ－コロナウイルス」と呼ばれる。
【0023】
上記の呼吸器（上気道および／または下気道）のウイルス感染、好ましくは上記に定義されるコロナウイルス感染（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様）に由来するかまたは関連する症状または障害は以下：重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、呼吸器合併症、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支炎（ｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ）、肺気腫（ｅｍｐｈｙｓｅｍａ）、嚢胞性線維症（ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、咳、百日咳（ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ）、肺炎（ｐｎｅｕｍｏｎｉａ）、胸膜炎（ｐｌｅｕｒｉｓｙ）、気管支炎（ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ）、風邪、副鼻腔炎（ｓｉｎｕｓｉｔｉｓ）、鼻炎（ｒｈｉｎｉｔｉｓ）、気管炎（ｔｒａｃｈｅｉｔｉｓ）、咽頭炎（ｐｈａｒｙｎｇｉｔｉｓ）、喉頭炎（ｌａｒｙｎｇｉｔｉｓ）、急性喉頭気管気管支炎（ａｃｕｔｅ ｌａｒｙｎｇｏｔｒａｃｈｅｏｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ）、喉頭蓋炎（ｅｐｉｇｌｏｔｔｉｔｉｓ）、気管支拡張症（ｂｒｏｎｃｈｉｅｃｔａｓｉｓ）、呼吸困難、呼吸困難（息切れ（ｂｒｅａｔｈｌｅｓｓｎｅｓｓ）、息切れ（ｓｈｏｒｔｎｅｓｓ ｏｆ ｂｒｅａｔｈ））、発熱、疲労、筋肉痛、鼻づまり、鼻水、喉の痛み、吐き気（ｎａｕｓｅａ）および下痢（ｄｉａｒｒｈｏｅａ）などの胃腸症状、腎不全、食欲不振および／または全身の不快感（ｇｅｎｅｒａｌ ｆｅｅｌｉｎｇ ｏｆ ｕｎｗｅｌｌ）であり得る。
【0024】
ラクトフェリンは、組成物または混合物Ｍの総重量に対して１０％～９０％の重量％（例えば１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、または８５％）、好ましくは２０％から８０％、より好ましくは、３０％から７０％または３０％から５０％で、本発明の組成物中、または本発明の混合物Ｍ中に存在し得る。
【0025】
本発明の実施形態の何れか１つの上記の混合物Ｍを含む本発明の組成物は、上記の少なくとも１つの薬学的または食品グレードの添加物および／または賦形剤、すなわち、薬学的または食品用途に好適な治療活性の無い物質をさらに含み得る。本発明の文脈において、薬学的または食品用途に許容可能な添加物および／または賦形剤は、固形、半固形または液体状の組成物を調製するための当業者に知られる全ての補助物質を含み、例えば、希釈剤、溶媒（水、グリセリン、エチルアルコールを含む）、可溶化剤、酸性化剤、増粘剤、甘味料、風味増強剤、着色料、潤滑剤、界面活性剤、保存料、安定化剤、ｐＨ安定化緩衝剤およびその混合物を含む。
【0026】
経口使用のための本発明の組成物は、錠剤、チュアブル錠、または口内で溶けやすい錠剤、顆粒、粉末、フレーク、可溶性の粉末または顆粒、口内で溶けやすい粉末または顆粒、カプセルから選択される固形に製剤化され得、あるいは溶液、懸濁液、分散液、乳化液、またはスプレー状に吐出可能な液体、シロップから選択される液体状に製剤化され得、あるいは、ソフトゲル、ゲルから選択される半固形に製剤化され得る；好ましくは本発明の組成物は固形である。
【0027】
本発明において記載される実施形態のいずれか１つに従って、本発明の組成物の混合物Ｍにおいてラクトフェリンはリポソーム形態、例えばリン脂質ベースのリポソーム形態であり得る。
【0028】
上記のリポソーム形態（または製剤）のラクトフェリンは、投与（経口またはスプレー製剤による鼻腔内投与）の後のラクトフェリンのクリアランスを低下させ、よってその吸収の程度を増加させ得る。加えて、リポソームによって運搬される物質は、酵素（プロテアーゼ、ヌクレアーゼ）の作用または変性環境（ｐＨ）から保護される。リポソームは、一般にその膜がコレステロール（またはコレステロールエステル）およびリン脂質、例えばホスファチジルコリン、ジアセチルリン酸およびホスファチジルエタノールアミンなど、からなる１つ以上の脂質２重層によって形成される中空の微小球である。リポソームの大きさは２０ｎｍから２５ｎｍ、最大２．５μｍまで様々である。
【0029】
本発明の文脈において、経口使用という用語は、経口（または胃腸）投与および舌下（または頬）投与の両方を示すために使用される。
【0030】
経口使用のための、好ましくは固形の本発明の組成物は、抗ウイルス剤として、特にＳＡＲＳ－コロナウイルスウイルス、好ましくはＣＯＶＩＤ－１９として知られる疾患の原因となるＳＡＲＳ－ＣｏＶまたは２０１９－ｎＣｏＶ、によって引き起こされる呼吸器感染の処置において有効であり、ラクトフェリンの一日の用量は５ｍｇから１０００ｍｇ、好ましくは１０ｍｇから５００ｍｇ、より好ましくは、２０ｍｇから４００ｍｇの範囲に含まれ、例えば、５０ｍｇから３５０ｍｇ、５０ｍｇから３００ｍｇ、５０ｍｇから２５０ｍｇ、５０ｍｇから２００ｍｇ、１００ｍｇから２００ｍｇ、の範囲に含まれる。
【0031】
上述の一日の用量は単回投与（１回投与）または複数回投与、例えば２、３、または４回の一日あたりの投与で、それを必要とする対象に投与され得る。
【0032】
記載される実施形態の何れかに従い、本発明の組成物はさらなる抗ウイルス治療アプローチのアジュバントとしての使用のためのものであり得る。
【0033】
別段の特定が無い限り、組成物または混合物またはその他が、ある成分を「ｘからｙの範囲に含まれる」量で含む、という表現は、上記の成分が組成物または混合物またはその他中に上記の範囲に存在する全部の量で存在し得る事を示すために使用され、特定されない場合でもその範囲の端も含む。
【0034】
別段の特定が無い限り、組成物または混合物が１つ以上の成分または物質を「含む」という指示は、具体的に示された１つ以上の成分または物質の他に、その他の成分または物質が存在し得ることを意味する。
【0035】
本発明の文脈において、「処置方法」という表現は、疾患または病気およびその症状または障害を排除、低下／減少または予防する目的で、治療有効量（当業者によって理解される）の物質の組成物または混合物を投与する事を含む、必要とする患者への介入を示すために使用される。
【0036】
本発明の文脈において、「対象」とはヒトまたは動物対象、好ましくは哺乳類（例えばイヌ、ネコ、ウマ、ヒツジまたはウシなどのペット）を示すために使用される。好ましくは、本発明の組成物は、ヒト対象の処置方法における使用のためのものである。
【0037】
本発明の好ましい実施形態ＦＲｎを以下に記載する。
【0038】
ＦＲ１．ウイルス感染の処置方法における使用のための組成物であって、ここで該組成物が、（ｉ）ラクトフェリン、および任意には（ｉｉ）少なくとも１つの許容できる薬学的グレードの添加剤および／または賦形剤、を含み、ここで該組成物が経口経路による使用のためのものである、組成物。
【0039】
ＦＲ２．組成物が、呼吸器系のウイルス感染ならびに該ウイルス感染、好ましくは上気道および／または下気道のウイルス感染に由来するかまたは関連する症状および／または障害の処置方法における使用のためのものである、ＦＲ１に記載の使用のための組成物。
【0040】
ＦＲ３．ウイルス感染が、コロナウイルス科、亜科：コロナウイルス亜科、属：ベータコロナウイルス属、種：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス種、のウイルスであって、以下の株：重症急性呼吸器症候群コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２または２０１９－ｎＣｏＶ）であってＣＯＶＩＤ－１９疾患の原因、および重症急性呼吸器症候群コロナウイルス－様（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－様またはＳＬ－ＣｏＶ）から選択されるウイルス；好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、によって引き起こされる感染である、ＦＲ１またはＦＲ２に記載の使用のための組成物。
【0041】
ＦＲ４．呼吸器系のウイルス感染に由来するかまたは関連する症状および／または障害が、以下：重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、呼吸器合併症、喘息、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、気管支炎、肺気腫、嚢胞性線維症、咳、百日咳、肺炎、胸膜炎、気管支炎、風邪、副鼻腔炎、鼻炎、気管炎、咽頭炎、喉頭炎、急性喉頭気管気管支炎、喉頭蓋炎、気管支拡張症、呼吸困難、呼吸困難、息切れ、息切れ、発熱、疲れ、筋肉痛、筋肉痛、鼻づまり、鼻水、喉の痛み、胃腸症状、吐き気、下痢、腎臓機能不全、食欲不振、全身の不快感から選択される、ＦＲ２またはＦＲ３に記載の使用のための組成物。
【0042】
ＦＲ５．組成物が、以下；錠剤、チュアブル錠、口内で溶けやすい錠剤、顆粒、粉末、フレーク、可溶性の粉末または顆粒、口内で溶けやすい粉末または顆粒、カプセルから選択される固形；あるいは溶液、懸濁液、分散液、乳化液、スプレー状に吐出可能な液体、またはシロップから選択される液体状；あるいは、ソフトゲル、ゲルから選択される半固形である；好ましくは固形である、前述のＦＲｎの何れか１つに記載の使用のための組成物。
【0043】
ＦＲ６．ラクトフェリンがリポソーム形態；好ましくはリン脂質ベースのリポソーム形態である、前述のＦＲｎの何れか１つに記載の使用のための組成物。
【実施例】
【0044】
実験部分
出願人は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）ウイルス感染に対抗するための、対象における自然抗ウイルス免疫応答を刺激するラクトフェリンの能力を評価するためにｉｎ ｖｉｔｒｏでの研究を行った。詳細には、以下を評価した：
（１）腸上皮細胞における抗ウイルス応答を増強するラクトフェリンの能力；および（２）ヒト腸上皮細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に影響を与えるラクトフェリンの能力。
出願人は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）ウイルス感染に対抗するための、対象における自然抗ウイルス免疫応答を刺激するラクトフェリンの能力を評価するためにｉｎ ｖｉｔｒｏでの研究を行った。詳細には、以下を評価した：
（１）腸上皮細胞における抗ウイルス応答を増強するラクトフェリンの能力；および（２）ヒト腸上皮細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に影響を与えるラクトフェリンの能力。
【0045】
材料（１）および（２）
－コンフルエントな単層Ｃａｃｏ－２細胞（結腸がん由来不死化上皮細胞）：Ｃａｃｏ－２細胞をＥｕｒｏｐｅａｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｅｄ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ （ＥＣＡＣＣ）から入手し、および完全ＤＭＥＭ培地（１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１％（ｖ／ｖ）ピルビン酸ナトリウムおよび１％（ｖ／ｖ）ペニシリンおよびストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地）を用いてＴ２５ボトル中で、５％ＣＯ２を含む湿潤なインキュベーター内で３７℃で増殖させ、約７５％コンフルエントに達した時点で分割し、１２ウェル／プレートに５×１０５細胞／ウェルの濃度で播種した。細胞がコンフルエントな単層を形成するまで４８時間ごとに培養培地を交換した。その後、培養培地を除去し、抗生物質を含まない新鮮な培地と交換した。
－ラクトフェリン（コード“Ｌ”）（１００μｇ／ｍＬ）。
－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（コード“ＳＡＲＳ”）：パドヴァで患者から単離され、完全に特徴付けがなされた；このウイルスをＶＥＲＯ Ｃ１００８細胞において増殖させ、ワーキングストックを入手し、－８０℃で保管した。
－コンフルエントな単層Ｃａｃｏ－２細胞（結腸がん由来不死化上皮細胞）：Ｃａｃｏ－２細胞をＥｕｒｏｐｅａｎ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ ｏｆ Ａｕｔｈｅｎｔｉｃａｔｅｄ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅｓ （ＥＣＡＣＣ）から入手し、および完全ＤＭＥＭ培地（１０％（ｖ／ｖ）ウシ胎児血清（ＦＢＳ）、１％（ｖ／ｖ）ピルビン酸ナトリウムおよび１％（ｖ／ｖ）ペニシリンおよびストレプトマイシンを添加したダルベッコ変法イーグル培地）を用いてＴ２５ボトル中で、５％ＣＯ２を含む湿潤なインキュベーター内で３７℃で増殖させ、約７５％コンフルエントに達した時点で分割し、１２ウェル／プレートに５×１０５細胞／ウェルの濃度で播種した。細胞がコンフルエントな単層を形成するまで４８時間ごとに培養培地を交換した。その後、培養培地を除去し、抗生物質を含まない新鮮な培地と交換した。
－ラクトフェリン（コード“Ｌ”）（１００μｇ／ｍＬ）。
－ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（コード“ＳＡＲＳ”）：パドヴァで患者から単離され、完全に特徴付けがなされた；このウイルスをＶＥＲＯ Ｃ１００８細胞において増殖させ、ワーキングストックを入手し、－８０℃で保管した。
【0046】
１．腸上皮細胞における抗ウイルス応答へのラクトフェリンの効果
１．１．方法
１）Ｃａｃｏ－２細胞のコンフルエントな単層を培養培地のみ（対照、コード「ｎｔ」：未処置）またはラクトフェリン（コード「Ｌ」）で２時間インキュベートした。
２）４時間後、培養培地を除去し、抗生物質を含む完全培地と交換し、および単層をさらに３７℃で１６時間インキュベートした。
３）インキュベーションの終点において培地を除去し、単層を凍らせたＤＭＥＭで洗浄した後、細胞を回収しすぐに溶解した。細胞から全ＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡへと転写し（ｉＳｃｒｉｐｔ（商標） Ｓｅｌｅｃｔ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ （ＢｉｏＲａｄ））、これを使用して以下のｍＲＮＡ－トランスクリプター（ｍＲＮＡ－ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ）における定量ＲＴ－ＰＣＲを行った：
・ＩＦＮ－β および ＩＦＮ－α，抗ウイルス作用に特異的；
・ＩＲＦ－３および ＩＲＦ－７，インタ－フェロン（抗ウイルス分子）と関連するシグナル伝達分子；
・ＴＬＲ３および ＴＬＲ７，ウイルスＲＮＡを「見て」、抗ウイルス応答を開始する自然免疫の特異的な受容体；
・ＩＬ－１０およびＴＧＦ－β，抗炎症性マーカー
・ＩＬ６，炎症誘発性マーカー
４）全ての試験は３回行った。ハウスキーピング遺伝子Ｒｎ１８Ｓを参照として使用した。データはΔΔＣｔ（倍率変化）法を使用して解析した。
１．１．方法
１）Ｃａｃｏ－２細胞のコンフルエントな単層を培養培地のみ（対照、コード「ｎｔ」：未処置）またはラクトフェリン（コード「Ｌ」）で２時間インキュベートした。
２）４時間後、培養培地を除去し、抗生物質を含む完全培地と交換し、および単層をさらに３７℃で１６時間インキュベートした。
３）インキュベーションの終点において培地を除去し、単層を凍らせたＤＭＥＭで洗浄した後、細胞を回収しすぐに溶解した。細胞から全ＲＮＡを抽出し、ｃＤＮＡへと転写し（ｉＳｃｒｉｐｔ（商標） Ｓｅｌｅｃｔ ｃＤＮＡ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ Ｋｉｔ （ＢｉｏＲａｄ））、これを使用して以下のｍＲＮＡ－トランスクリプター（ｍＲＮＡ－ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｏｒ）における定量ＲＴ－ＰＣＲを行った：
・ＩＦＮ－β および ＩＦＮ－α，抗ウイルス作用に特異的；
・ＩＲＦ－３および ＩＲＦ－７，インタ－フェロン（抗ウイルス分子）と関連するシグナル伝達分子；
・ＴＬＲ３および ＴＬＲ７，ウイルスＲＮＡを「見て」、抗ウイルス応答を開始する自然免疫の特異的な受容体；
・ＩＬ－１０およびＴＧＦ－β，抗炎症性マーカー
・ＩＬ６，炎症誘発性マーカー
４）全ての試験は３回行った。ハウスキーピング遺伝子Ｒｎ１８Ｓを参照として使用した。データはΔΔＣｔ（倍率変化）法を使用して解析した。
【0047】
１．２．結果
ラクトフェリンは、自然免疫防御を刺激する事が可能であり（ＴＬＲ３およびＴＬＲ７；図１Ａ）、よい抗炎症性応答を示し（ＩＬ－１０、ＴＧＦ－βにおける有意なデータ；図１Ｂ）および炎症誘発性マーカーを減少させる傾向を示した（ＩＬ６；図１Ｃ）。さらに、ラクトフェリンは抗ウイルス応答に関与するいくつかのシグナル伝達経路において有意な活性を示した（ＩＦＮ－β，ＩＦＮ－α，ＩＲＦ－３およびＩＲＦ－７；図１Ｄ）。
ラクトフェリンは、自然免疫防御を刺激する事が可能であり（ＴＬＲ３およびＴＬＲ７；図１Ａ）、よい抗炎症性応答を示し（ＩＬ－１０、ＴＧＦ－βにおける有意なデータ；図１Ｂ）および炎症誘発性マーカーを減少させる傾向を示した（ＩＬ６；図１Ｃ）。さらに、ラクトフェリンは抗ウイルス応答に関与するいくつかのシグナル伝達経路において有意な活性を示した（ＩＦＮ－β，ＩＦＮ－α，ＩＲＦ－３およびＩＲＦ－７；図１Ｄ）。
【0048】
αおよびβインターフェロン（ＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－β）をコードする遺伝子の発現を、ウイルスの存在に応じて宿主細胞から放出されるシグナル伝達タンパク質として定量した。ヒトの腸管粘膜はウイルス感染と闘うためにこれらの分子を産生する。
【0049】
その他のサイトカインを、遺伝子発現について定量した：抗炎症性マーカーであるＩＬ－１０およびＴＧＦ－β；抗炎症性サイトカインの発現を刺激することは、ウイルス感染の有害な効果を相殺する事ができる有益なツールである。
【0050】
さらに、ＴＬＲ３およびＴＬＲ７受容体は一本鎖および二本鎖ＲＮＡの認識を介してウイルスへの反応に関与する；一般に、ＴＬＲの活性化はインターフェロンを放出させやすくする。
【0051】
２．ヒト腸上皮細胞におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染に対するラクトフェリンの効果
２．１．方法
図２Ａおよび２Ｂに示す模式図に従って、Ｃａｃｏ－２細胞のコンフルエントな単層をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス処置についてラクトフェリン（コード「Ｌ」）で前処置または同時処置した；得られた結果を培養培地のみで処置したＣａｃｏ－２細胞（対照、コード「ｎｔ」）およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスのみで処置したＣａｃｏ－２細胞（コード「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２」）と比較した。
２．１．方法
図２Ａおよび２Ｂに示す模式図に従って、Ｃａｃｏ－２細胞のコンフルエントな単層をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス処置についてラクトフェリン（コード「Ｌ」）で前処置または同時処置した；得られた結果を培養培地のみで処置したＣａｃｏ－２細胞（対照、コード「ｎｔ」）およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスのみで処置したＣａｃｏ－２細胞（コード「ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２」）と比較した。
【0052】
インキュベーションの終点において、各種処置について培地を除去し、細胞から全ＲＮＡを抽出してｃＤＮＡへと転写し、これを使用して以下のｍＲＮＡ－トランスクリプターにおける定量ＲＴ－ＰＣＲを行った：
・ＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－β，抗ウイルス作用に特異的；
・・ＴＬＲ３およびＴＬＲ７，ウイルスＲＮＡを「見て」、抗ウイルス応答を開始する自然免疫の特異的な受容体；
・ＭＤＡ５およびＭＡＶＳ，細胞における抗ウイルス応答に関与する遺伝子のウイルス受容体
・ＴＧＦ－β，抗炎症性マーカー
・ＩＬ－１βおよびＩＬ－８，炎症誘発性マーカー；
・ＴＳＬＰ１，腸上皮細胞から放出されるサイトカインであって、樹状細胞およびマクロファージの抗炎症性表現型の制御に重要な効果を有する。
・ＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－β，抗ウイルス作用に特異的；
・・ＴＬＲ３およびＴＬＲ７，ウイルスＲＮＡを「見て」、抗ウイルス応答を開始する自然免疫の特異的な受容体；
・ＭＤＡ５およびＭＡＶＳ，細胞における抗ウイルス応答に関与する遺伝子のウイルス受容体
・ＴＧＦ－β，抗炎症性マーカー
・ＩＬ－１βおよびＩＬ－８，炎症誘発性マーカー；
・ＴＳＬＰ１，腸上皮細胞から放出されるサイトカインであって、樹状細胞およびマクロファージの抗炎症性表現型の制御に重要な効果を有する。
【0053】
全ての試験と結果について３回行った。ハウスキーピング遺伝子Ｒｎ１８Ｓを参照として使用した。データはΔΔＣｔ（倍率変化）法を使用して解析した。
【0054】
前処置プロトコル（図２Ａ）：培養培地のみ（対照、コード「ｎｔ」）または１００μｇ／ｍｌのラクトフェリンで処置した各ウェルをインキュベートした。３時間後、培地を除去し、抗生物質を含む新鮮な培地と交換し、単雄をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２で感染させた。
【0055】
同時処置プロトコル：培養培地のみ（対照、コード「ｎｔ」）または１００μｇ／ｍｌのラクトフェリンで処置した各ウェルをインキュベートした。同時に細胞にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２を感染させた。これらの実験において、２時間後に全てのウェルから培地を除去し、抗生物質を含む新鮮な培地と交換した。
【0056】
２．２．結果
この研究は、ラクトフェリンがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染した細胞において抗ウイルスおよび抗炎症作用を発揮できる事を示し、ラクトフェリンをＣＯＶＩＤ－１９の予防的処置および治療処置の両者について好適なもとのとして定義づけるものである。
この研究は、ラクトフェリンがＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに感染した細胞において抗ウイルスおよび抗炎症作用を発揮できる事を示し、ラクトフェリンをＣＯＶＩＤ－１９の予防的処置および治療処置の両者について好適なもとのとして定義づけるものである。
【0057】
図３に示す結果は、ラクトフェリンによる、
－前処置におけるインターフェロンＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－βの誘導（図３Ａ）、
－前処置におけるＴＲＬ３の誘導（図３Ｂ）、
－同時処置におけるＴＲＬ３の誘導（図４Ａ）、および
－同時処置における、ウイルス認識に関与するＭａｖｓおよびＭｄａ５の誘導（図４Ｂ）を示す。
－前処置におけるインターフェロンＩＦＮ－αおよびＩＦＮ－βの誘導（図３Ａ）、
－前処置におけるＴＲＬ３の誘導（図３Ｂ）、
－同時処置におけるＴＲＬ３の誘導（図４Ａ）、および
－同時処置における、ウイルス認識に関与するＭａｖｓおよびＭｄａ５の誘導（図４Ｂ）を示す。
【0058】
さらに、ラクトフェリンによる抗炎症効果が観察された：
－前処置におけるＩＬ－８（図３Ｃ）および同時処置におけるＩＬ－１β（図４Ｃ）の発現の減少、
－前処置（図３Ｄ）および同時処置（図４Ｃ）におけるＴＳＬＰ１の発現の減少、および、
－前処置（図３Ｅ）および同時処置（図４Ｄ）における抗炎症性マーカーＴＧＦ－βの発現の増加。
－前処置におけるＩＬ－８（図３Ｃ）および同時処置におけるＩＬ－１β（図４Ｃ）の発現の減少、
－前処置（図３Ｄ）および同時処置（図４Ｃ）におけるＴＳＬＰ１の発現の減少、および、
－前処置（図３Ｅ）および同時処置（図４Ｄ）における抗炎症性マーカーＴＧＦ－βの発現の増加。
【0059】
ラクトフェリンによってＴＧＦ－βはその発現が顕著に活性化された。
【0060】
インターフェロンの誘導に関与する反応のカスケードに基づいて、ＴＬＲ受容体はラクトフェリンによって活性化され、これはＴＬＲ３において特に活性があり、ＴＬＲ７においては穏やかに活性があった。
【0061】
抗ウイルス免疫応答の開始段階はＭＡＶＳおよびＭＤＡ５によって仲介される；ラクトフェリンは、有意ではないものの、ＭＡＶＳを誘導し得る事が見出された。
【0062】
前処置モデルではラクトフェリンによってＴＳＬＰ１の発現は有意に減少され、これはラクトフェリンがウイルスに誘発される炎症状態の軽減に寄与する事を実証する。
【0063】
ＴＳＬＰ１は、腸上皮細胞から放出されるサイトカインであり、樹状細胞およびマクロファージの抗炎症性表現型の制御に重要な効果を有する。
【0064】
結論（１）および（２）
得られた結果は、前処置および同時処置の実験プロトコル両者の場合において、ラクトフェリンが抗ウイルス応答および抗炎症性応答を正に調節できること、よってラクトフェリンが抗ウイルス療法における有用なアジュバントである事を示す。
得られた結果は、前処置および同時処置の実験プロトコル両者の場合において、ラクトフェリンが抗ウイルス応答および抗炎症性応答を正に調節できること、よってラクトフェリンが抗ウイルス療法における有用なアジュバントである事を示す。
【0065】
事実として、ＣＯＶＩＤ－１９患者において炎症誘発性サイトカインの発現の上昇が観察され、および非常に重症なＣＯＶＩＤ－１９患者では、比較的軽症な患者に比して、ＬＤＨ、ＣＲＰ、ＰＣＴ血清レベルおよびフェリチンが顕著に増加する事が文献から知られている。フェリチンおよびＩＬ－６の高いレベルは致死性の予測因子と考えられており、ウイルスに起因する高い炎症状態（ｈｙｐｅｒｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）が死亡要因であり得ることを示唆する。
【0066】
その抗炎症および抗ウイルス特性により、ラクトフェリン（またはラクトトランスフェリン）は炎症状態を軽減する事ができる。抗微生物作用を持つ糖タンパク質であり、鉄の担体であるラクトフェリンは、感染／炎症細胞においてＩＬ－６に対する抗炎症作用を発揮できる事が示され、よって鉄の恒常性および炎症過程における主要な因子であるフェリチンの下方制御を促進する。
【図1-1】
【図1-2】
【図1-3】
【図2】
【図3-1】
【図3-2】
【図3-3】
【図4-1】
【図4-2】
【国際調査報告】