特表 2023-517546 ２，３，５－置換されたチオフェン化合物の卵巣癌の予防、改善または治療用途

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-04-26

(54)【発明の名称】２，３，５－置換されたチオフェン化合物の卵巣癌の予防、改善または治療用途

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/4535 20060101AFI20230419BHJP

   A61P 15/00 20060101ALI20230419BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230419BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230419BHJP

   A61K 33/24 20190101ALI20230419BHJP

   A61K 31/337 20060101ALI20230419BHJP

   A61K 31/4745 20060101ALI20230419BHJP

   A23L 33/10 20160101ALI20230419BHJP

【ＦＩ】

A61K31/4535

A61P15/00

A61P35/00

A61P43/00 121

A61K33/24

A61K31/337

A61K31/4745

A23L33/10

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022553164

(86)(22)【出願日】2021-03-04

(85)【翻訳文提出日】2022-09-05

(86)【国際出願番号】 KR2021002649

(87)【国際公開番号】W WO2021177728

(87)【国際公開日】2021-09-10

(31)【優先権主張番号】10-2020-0027448

(32)【優先日】2020-03-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(31)【優先権主張番号】10-2021-0028261

(32)【優先日】2021-03-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520470431

【氏名又は名称】ファロス・アイバイオ・カンパニー・リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100108453

【弁理士】

【氏名又は名称】村山 靖彦

(74)【代理人】

【識別番号】100110364

【弁理士】

【氏名又は名称】実広 信哉

(74)【代理人】

【識別番号】100133400

【弁理士】

【氏名又は名称】阿部 達彦

(72)【発明者】

【氏名】ジョン・ヒョク・ユン

(72)【発明者】

【氏名】キィ・ヨブ・ナム

【テーマコード（参考）】

4B018

4C086

【Ｆターム（参考）】

4B018MD07

4B018MD18

4B018ME08

4C086AA01

4C086AA02

4C086BA02

4C086BC21

4C086CB22

4C086GA03

4C086GA07

4C086GA16

4C086HA12

4C086HA24

4C086HA26

4C086HA28

4C086MA01

4C086MA02

4C086MA04

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZA81

4C086ZB26

4C086ZC75

(57)【要約】

本発明は、２，３，５－置換されたチオフェン化合物を含む卵巣癌の予防、改善または治療用組成物に関し、卵巣癌に対する増殖抑制活性に優れ、卵巣癌の予防、改善または治療に有用に活用できる。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物。

【化1】

【請求項2】

前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つである、請求項１に記載の卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物。

【請求項3】

前記組成物は、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）およびトポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）からなる群より選択される１つ以上の抗癌剤をさらに含むものである、請求項１に記載の卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物。

【請求項4】

前記組成物は、オラパリブ（Ｏｌａｐａｒｉｂ）をさらに含むものである、請求項１に記載の卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物。

【請求項5】

下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または改善用食品組成物。

【化2】

【請求項6】

前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つである、請求項５に記載の卵巣癌の予防または改善用食品組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、２，３，５－置換されたチオフェン化合物の卵巣癌の予防、改善または治療用途に関する。

【背景技術】

【0002】

卵巣癌は、米国で２００８年２２，０００人が新しい患者に登録され、１５，０００人が死亡するという、婦人癌の中で最も致命的な癌腫であり（Ｊｅｍａｌ ｅｔ ａｌ．，２００８）、米国で２０１７年２２，４００人が新しい患者に登録されており、１４，０００人が死亡し、癌で死亡する患者の２．３％に相当する。欧州の２８カ国で２００２年から２０１２年の卵巣癌による死亡率が１０％減少し、同期間、米国では１６％減少した。

【0003】

卵巣癌の全病期（ｓｔａｇｅ Ｉ－ＩＶ）で手術から治療が始まるが、少ない％だけが手術可能である。７０％以上の患者がＳｔａｇｅ ＩＩＩ期以上で広範囲な転移が進行した患者である。２０１４年、米国で卵巣癌の５年の全病期で生存率は４６％であり、局所の場合に９２％、転移段階で２９％と急激に減少した。手術後、進行性患者にｃｉｓｐｌａｔｉｎまたはｐａｃｌｉｔａｘｅｌのようなａｄｊｕｖａｎｔ化学療法が施され、初期に７０％以上の場合、ｐｌａｔｉｎｕｍとｔａｘａｎｅの併用療法でｓｅｒｕｍのＣＡ－１２５レベル、ＣＴ ｓｃａｎによる映像学的な方法で臨床的完全寛解の効能結果を得る。

【0004】

このような臨床的完全寛解にもかかわらず、Ｓｔａｇｅ ＩＩＩ期の場合に２５％、Ｓｔａｇｅ ＩＶ期の場合に１０％未満で５年生存率が低く（ＭｃＧｕｉｒｅ ｅｔ ａｌ．，１９９６）、化学療法の抵抗性によって大部分再発後死亡に至る。

【0005】

卵巣癌の治療において一般的な化学療法剤の限界によって、新生血管阻害のシグナル伝達体系を標的とするＢｅｖａｃｉｔｕｍａｂが臨床的効能の向上を示しており、再発卵巣癌患者の１８％で反応率を報告した（Ｂｕｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００７；Ｃａｎｎｉｓｔｒａ ｅｔ ａｌ．，２００７）。

【0006】

卵巣癌患者においてｇｅｍｌｉｎｅ ＢＲＣＡ１とＢＲＣＡ２遺伝子の変異程度は８～１８％程度であり、特異なユダヤ人の場合、より高いことが知られている。ＢＲＣＡ１／２突然変異の場合、ＢＲＣＡ１／２の機能とｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎに影響を及ぼし、卵巣癌患者の５％でｓｏｍａｔｉｃ ＢＲＣＡ１／２突然変異が発見された。Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒとＴＮＢＣ患者群の４６人を対象に進行したＯｌａｐａｒｉｂの臨床２床で全体的な反応率は２３．９％と観察された（Ｇｅｌｍｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１０）。

【0007】

現在、既存の卵巣癌治療剤の場合、副作用が大きく、卵巣癌の転移による再発で５年生存率が低い状況で、既存の治療剤と併用治療時、追加毒性が少なく、卵巣癌の転移抑制による生存率の向上が可能な新たな新薬の開発が必要な状況である。したがって、新たな卵巣癌標的新薬の開発により２つの要素（追加毒性がなく、転移抑制効能優秀）を満たす医薬品の開発が急がれるのが現状である。

【0008】

そこで、本発明者らは、卵巣癌の治療に効果的な治療剤を発掘するための研究を行って、本発明を完成した。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】ＫＲ１０－２００６－０１２７１２７

【特許文献2】ＫＲ１０－２０１７－００９６５９９

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

本発明の目的は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩の卵巣癌の予防、改善または治療用途を提供することである。

【化1】

【課題を解決するための手段】

【0011】

本発明は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物を提供する。

【化2】

【0012】

本発明の一具体例として、前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つであってもよい。

【0013】

本発明の一具体例として、前記組成物は、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）およびトポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）からなる群より選択される１つ以上の抗癌剤をさらに含むものであってもよい。

【0014】

本発明の一具体例として、前記組成物は、オラパリブ（Ｏｌａｐａｒｉｂ）をさらに含むものであってもよい。

【0015】

本発明の他の態様は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または改善用食品組成物を提供する。

【化3】

【0016】

本発明の一具体例として、前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つであってもよい。

【発明の効果】

【0017】

本発明の一具体例による２，３，５－置換されたチオフェン化合物を含む卵巣癌の予防、改善または治療用組成物は、卵巣癌に対する増殖抑制活性に優れ、卵巣癌の予防、改善または治療に有用に活用できる。

【図面の簡単な説明】

【0018】

【図1】（Ａ）ＣＡＯＶ３、（Ｂ）ＯＶＣＡＲ３、（Ｃ）ＳＫ－ＯＶ－３および（Ｄ）ＳＷ６２６卵巣癌細胞株に対するシスプラチン、およびシスプラチンとＰＨＩ－１０１の併用製剤に対するＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図2】（Ａ）ＣＡＯＶ３、（Ｂ）ＯＶＣＡＲ３、（Ｃ）ＳＫ－ＯＶ－３および（Ｄ）ＳＷ６２６卵巣癌細胞株に対するパクリタキセル、およびパクリタキセルとＰＨＩ－１０１の併用製剤に対するＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図3】（Ａ）ＣＡＯＶ３、（Ｂ）ＯＶＣＡＲ３、（Ｃ）ＳＫ－ＯＶ－３および（Ｄ）ＳＷ６２６卵巣癌細胞株に対するトポテカン、およびトポテカンとＰＨＩ－１０１の併用製剤に対するＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図4】連続希釈したＰＨＩ－１０１の９６－ウェルプレートの配列を示す図である。

【図5】連続希釈したオラパリブの９６－ウェルプレートの配列を示す図である。

【図6】ＰＨＩ－１０１およびオラパリブ連続希釈液の処理配列および濃度を示す図である。

【図7】ＣＡＯＶ３卵巣癌細胞株に対する（Ａ）オラパリブ、（Ｂ）ＰＨＩ－１０１、および（Ｃ）オラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤のＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図8】ＯＶＣＡＲ３卵巣癌細胞株に対する（Ａ）オラパリブ、（Ｂ）ＰＨＩ－１０１、および（Ｃ）オラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤のＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図9】ＳＫ－ＯＶ３卵巣癌細胞株に対する（Ａ）オラパリブ、（Ｂ）ＰＨＩ－１０１、および（Ｃ）オラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤のＩＣ_５０値を示すグラフである。

【図10】ＣＡＯＶ３卵巣癌細胞株に対するオラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤の相乗効果を示すグラフである。

【図11】ＯＶＣＡＲ３卵巣癌細胞株に対するオラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤の相乗効果を示すグラフである。

【図12】ＳＫ－ＯＶ３卵巣癌細胞株に対するオラパリブとＰＨＩ－１０１の併用製剤の相乗効果を示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0019】

本発明の一態様は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または治療用薬学的組成物を提供する。

【化4】

【0020】

本発明の薬学的組成物に有効成分として含まれる、化学式１で表される化合物は、（Ｓ）－５－（（３－フルオロフェニル）エチニル）－Ｎ－（ピペリジン－３－イル）－３－ウレイドチオフェン－２－カルボキサミド（（Ｓ）－５－（（３－ｆｌｕｏｒｏｐｈｅｎｙｌ）ｅｔｈｙｎｙｌ）－Ｎ－（ｐｉｐｅｒｉｄｉｎ－３－ｙｌ）－３－ｕｒｅｉｄｏ ｔｈｉｏｐｈｅｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅ）である。

【0021】

本発明の一具体例によれば、前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つであってもよい。

【0022】

化学式１で表される化合物は、卵巣癌、特に卵巣癌の中でもＴＰ５３突然変異卵巣癌の抑制能力に優れる。

【0023】

本発明の一具体例によれば、前記組成物は、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）およびトポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）からなる群より選択される１つ以上の抗癌剤をさらに含むことができる。

【0024】

本発明の一具体例によれば、前記組成物は、オラパリブ（Ｏｌａｐａｒｉｂ）をさらに含むことができる。

【0025】

この化合物は、単独で使用されるか、シスプラチン、パクリタキセル、トポテカンおよび／またはオラパリブなどの既存の抗癌剤と併用して使用可能であり、併用使用される場合、既存の抗癌剤の卵巣癌治療効果を著しく増進させることができる。

【0026】

シスプラチンは、睾丸癌、卵巣癌、肺癌、頭頸部癌、膀胱癌、胃癌および子宮頸癌などの治療に広く使用される抗癌剤であるが、貧血などの造血毒性、嘔吐、悪心などの消化器毒性、腎臓細尿管損傷などの腎臓毒性、難聴、体内電解質異常、ショックおよび末梢神経異常などのような副作用を伴う場合が多い。パクリタキセルは、卵巣癌に対する代表的な抗癌剤であるが、脱毛、胃腸障害、悪心、嘔吐、手足のしびれおよびアレルギー反応などのような副作用を伴う。トポテカンは、広範囲に広がった卵巣癌、小細胞肺癌、リンパ腫、急性骨髄性白血病、進行子宮頸癌などに使用される抗癌剤であるが、骨髄抑制による白血球減少症、血小板減少症、脱毛症、呼吸障害などのような副作用を伴う。オラパリブは、ＰＡＲＰをターゲットとする標的抗癌剤であるが、悪心、貧血、疲労、嘔吐、好中球減少症、呼吸器感染、白血球減少症、下痢および頭痛などのような副作用を伴う。

【0027】

本発明の化学式１で表される化合物がシスプラチン、パクリタキセル、トポテカンおよび／または併用して使用される場合、それぞれ使用される時より卵巣癌の抑制効果が著しく上昇することが確認された。したがって、既存に卵巣癌の治療に使用されていた抗癌剤を単独で使用する時より低い濃度で投与可能で、前記のような各抗癌剤による副作用の発生を減少させることがあるので、本発明の化学式１で表される化合物は、卵巣癌の予防または治療に併用されて有用に活用できる。

【0028】

また、本発明の化学式１で表される化合物は、オラパリブと併用投与される場合、相乗効果を示すので、特にオラパリブと併用されて有用に活用できる。

【0029】

本発明の一具体例による薬学的組成物は、卵巣癌の治療のために、単独で、または手術、ホルモン治療、薬物治療、放射線治療および／または生物学的反応調節剤を使用する方法と併用して使用できる。

【0030】

本発明の薬学的組成物は、薬学的に許容される担体を含むことができる。本発明の薬学的組成物に含まれる薬学的に許容される担体は、薬剤の製造に通常用いられるものとして、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、デンプン、アカシアガム、リン酸カルシウム、アルギネート、ゼラチン、ケイ酸カルシウム、微細結晶性セルロース、ポリビニルピロリドン、セルロース、水、シロップ、メチルセルロース、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、滑石、ステアリン酸マグネシウムおよびミネラルオイルなどを含むが、これらに限定されるものではない。本発明の薬学的組成物は、前記成分のほか、潤滑剤、湿潤剤、甘味剤、香味剤、乳化剤、懸濁剤、保存剤などを追加的に含むことができる。好適な薬学的に許容される担体および製剤は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：ｔｈｅ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ ｐｈａｒｍａｃｙ ２２ｎｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（２０１３）に詳しく記載されている。

【0031】

本発明の薬学的組成物は、その剤形の製剤化に必要で適切な各種基剤および／または添加物を含むことができ、その効果を低下させない範囲内で非イオン界面活性剤、シリコーンポリマー、体質顔料、香料、防腐剤、殺菌剤、酸化安定化剤、有機溶媒、イオン性または非イオン性増粘剤、柔軟化剤、酸化防止剤、自由ラジカル破壊剤、不透明化剤、安定化剤、エモリエント（ｅｍｏｌｌｉｅｎｔ）、シリコーン、α－ヒドロキシ酸、消泡剤、保湿剤、ビタミン、昆虫忌避剤、香料、保存剤、界面活性剤、消炎剤、物質Ｐ拮抗剤、充填剤、重合体、推進剤、塩基性化または酸性化剤、または着色剤など公知の化合物をさらに含んで製造できる。

【0032】

本発明の薬学的組成物の適した投与量は、製剤化方法、投与方式、患者の年齢、体重、性別、病的状態、食物、投与時間、投与経路、排泄速度および反応感応性のような要因によって多様に処方可能である。本発明の薬学的組成物の投与量は、成人基準で０．００１～１０００ｍｇ／ｋｇであってもよい。

【0033】

本発明の薬学的組成物は、経口または非経口投与することができる。

【0034】

本発明の薬学的組成物は、経口投与時に多様な剤形に投与されるが、錠剤、丸剤、硬質／軟質カプセル剤、液剤、懸濁剤、乳化剤、シロップ剤、顆粒剤、エリキシル剤、トローチ剤などの形態で投与可能であり、様々な賦形剤、例えば、湿潤剤、甘味剤、芳香剤、保存剤などをさらに含むことができる。具体的には、本発明の組成物を経口投与剤形に剤形化する場合、その製造に通常使用する適切な担体、賦形剤および希釈剤をさらに含むことができる。前記担体、賦形剤および希釈剤としては、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、ソルビトール、マンニトール、キシリトール、エリスリトール、マルチトール、デンプン、アカシアガム、アルギネート、ゼラチン、リン酸カルシウム、ケイ酸カルシウム、セルロース、メチルセルロース、微晶質セルロース、ポリビニルピロリドン、水、メチルヒドロキシベンゾエート、プロピルヒドロキシベンゾエート、タルク、マグネシウムステアレートおよび／または鉱物油が使用できるが、これに限定されない。また、製剤化に一般的に使用される充填剤、増量剤、結合剤、湿潤剤、崩壊剤、界面活性剤などの希釈剤または賦形剤を含んで調製されてもよいし、前記賦形剤のほか、マグネシウムステアレートまたはタルクのような潤滑剤をさらに含むことができる。

【0035】

本発明の薬学的組成物は、非経口投与可能であり、例えば、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射または胸部内注射などの方法により投与されるものであってもよいが、これに限定されない。

【0036】

非経口投与用剤形への製剤化は、例えば、本発明の薬学的組成物を安定剤または緩衝剤とともに水に混合して溶液または懸濁液で製造し、これをアンプルまたはバイアル単位投与型で製造するものであってもよい。また、前記組成物は滅菌され、防腐剤、安定化剤、水和剤または乳化促進剤、浸透圧調節のための塩および緩衝剤などの補助剤、およびその他の治療的に有用な物質を追加的に含むことができ、通常の方法によって製剤化できる。

【0037】

本発明の他の態様は、化学式１で表される化合物を有効成分として含む組成物を卵巣癌患者に投与するステップを含む卵巣癌の治療方法を提供する。

【0038】

本発明の一具体例による薬学的組成物は、化学式１で表される化合物を有効成分として含み、卵巣癌の中で、特にＴＰ５３突然変異卵巣癌に優れた抗癌効果を示す。したがって、本発明の薬学的組成物を投与する前、化学式１で表される化合物に効果を示す患者群を選別するコンパニオン診断（Ｃｏｍｐａｎｉｏｎ Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ）ステップをさらに含むことができ、これは当業界にて公知のＴＰ５３突然変異卵巣癌の診断方法によって行われる。

【0039】

本発明で使われる用語、「コンパニオン診断」は、患者の特定の薬物治療に対する反応性を予め予測するための診断をいう。

【0040】

本発明の他の態様は、下記化学式１で表される化合物またはその薬学的に許容可能な塩を含む卵巣癌の予防または改善用食品組成物を提供する。

【化5】

【0041】

本発明の食品組成物は、当業界にて通常添加する原料および成分を添加して製造することができ、有効成分である化学式１で表される化合物を含有するほか、通常の食品組成物のように様々な香味剤または天然炭水化物などを追加成分として含有することができる。

【0042】

本発明の一具体例によれば、天然炭水化物は、モノサッカライド（例えば、ブドウ糖、果糖など）、ジサッカライド（例えば、マルトース、スクロースなど）、およびポリサッカライド（例えば、デキストリン、シクロデキストリンなど）のような通常の糖、およびキシリトール、ソルビトール、エリスリトールなどの糖アルコールであってもよい。前記香味剤は、天然香味剤（タウマチン）、ステビア抽出物（例えば、レバウジオシドＡ、グリチルリチンなど）および／または合成香味剤（サッカリン、アスパルテームなど）を含むことができる。

【0043】

本発明の食品組成物は、前記記載の有効成分のほか、追加的に食品学的に許容可能であるか薬学的に許容可能な担体を１種以上含んで食品組成物に製剤化される。前記食品組成物の製剤形態は、錠剤、カプセル剤、粉末、顆粒、液状、丸、液剤、シロップ、汁、懸濁剤、乳剤、または点滴剤などであってもよい。例えば、錠剤またはカプセル剤の形態への製剤化のために、有効成分は、エタノール、グリセロール、水などのような経口、無毒性の薬剤学的に許容可能な不活性担体と結合できる。

【0044】

本発明の食品組成物は、ビタミンＡアセテート、ビタミンＥ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ビタミンＣ、ビオチン、ニコチン酸アミド、葉酸、パントテン酸カルシウムからなるビタミン混合物、および硫酸第１鉄、酸化亜鉛、炭酸マグネシウム、第１リン酸カリウム、第２リン酸カリウム、クエン酸カリウム、炭酸カルシウムおよび塩化マグネシウムなど、当業界にて通常添加可能な１つ以上の無機質を含むことができる。

【0045】

必要な場合、適した結合剤、潤滑剤、崩壊剤および発色剤も混合物に含まれる。適した結合剤は、デンプン、ゼラチン、グルコースまたはベータ－ラクトースのような天然糖、トウモロコシ甘味剤、アカシア、トラガカントまたはソジウムオレエートのような天然および合成ガム、ソジウムステアレート、マグネシウムステアレート、ソジウムベンゾエート、ソジウムアセテート、ソジウムクロライドなどを含むことができる。崩壊剤は、デンプン、メチルセルロース、寒天、ベントナイト、キサンタンガムなどを含むことができる。

【0046】

このような成分は、独立してまたは組み合わせて使用可能であり、このような添加剤の比率は、本発明の食品組成物１００重量部あたり０～約２０重量部の範囲から選択できるが、これに限定されるものではない。

【0047】

一方、本発明の食品組成物に通常の技術者に知られている多様な剤形の製造方法を適用して多様な食品を製造することができる。例えば、本発明の食品組成物は、飲料や丸、粉末などのような通常の健康機能食品剤形に製造できるが、これに限定されるものではない。

【0048】

本発明の一具体例によれば、前記卵巣癌は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌、再発性上皮周辺腹膜癌（Ｒｅｃｕｒｒｅｎｔ Ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）、卵管癌（ｆａｌｌｏｐｉａｎ）および高級漿液性卵巣癌（ｈｉｇｈ ｇｒａｄｅ ｓｅｒｏｕｓ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ）のいずれか１つであってもよい。

【0049】

本発明の食品組成物は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌細胞株の増殖抑制能力が特に優れているので、ＴＰ５３突然変異卵巣癌の予防または改善に有用に活用できる。

【実施例】

【0050】

以下、本発明を一つ以上の実施例を通じてより詳細に説明する。しかし、これらの実施例は本発明を例示的に説明するためのものであり、本発明の範囲がこれらの実施例に限定されるものではない。

【0051】

実施例１．卵巣癌細胞株の培養および希釈
５％ＣＯ_２の３７℃条件で１００ｍｍ培養皿（ｃｕｌｔｕｒｅ ｄｉｓｈ）（ＳＰＬ）で、ＣＡＯＶ３卵巣癌細胞株はＤＭＥＭ（Ｄｕｌｂｅｃｏ’ｓ Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｅａｇｌｅ Ｍｅｄｉｕｍ）培地を用いて培養し、ＯＶＣＡＲ３、ＳＫ－ＯＶ－３およびＳＷ６２６卵巣癌細胞株はＲＰＭＩ１６４０培地を用いて培養した。その後、ＰＢＳ（Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ－ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）（Ｂｉｏｓｅｓａｎｇ）を用いて各細胞株を３０００ｃｅｌｌｓ／８０μｌで希釈して用意した。

【0052】

実施例２．卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１の抑制活性の確認
１－１．卵巣癌細胞株に対する抑制活性評価
実施例１で希釈した各卵巣癌細胞株９０μｌに、１／２ずつ連続希釈（ｓｅｒｉａｌ ｄｉｌｕｔｉｏｎ）した化学式１で表される化合物（以下、「ＰＨＩ－１０１」という）、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、プレキサセルチブ（Ｐｒｅｘａｓｅｒｔｉｂ）またはトポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）を１０μｌずつ処理して処理開始濃度が１００μＭとなるように処理し、５％ＣＯ_２の３７℃条件で７２時間培養した。培養後、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ ｇｌｏ ａｓｓａｙキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて細胞数を測定し、これをＰＨＩ－１０１または抗癌剤を処理しない対照群に対する比率で表して細胞生存力を評価した。

【化6】

【0053】

ＰＲＩＺＭソフトウェアを用いてＳ字曲線（ｓｉｇｍｏｉｄａｌ ｃｕｒｖｅ）でＩＣ_５０を計算した結果、各卵巣癌細胞株に対する各単独製剤のＩＣ_５０は下記表１のように確認されて、既存の抗癌剤に比べて卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１の優れた抑制能力が確認された。

【表1】

【0054】

１－２．ＴＰ５３突然変異卵巣癌細胞株に対する選択的な抑制活性の確認
ＰＨＩ－１０１の選択的抑制活性を評価するために、各細胞株の特徴とＰＨＩ－１０１の卵巣癌細胞株の抑制活性を下記表２のように調べた。

【表2】

【0055】

その結果、ＰＨＩ－１０１は、ＴＰ５３突然変異卵巣癌細胞株に対してさらに優れた抑制活性を示すことが確認されて、Ｐ５３突然変異卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１の選択的な抑制活性を確認した。

【0056】

実施例３．卵巣癌細胞株に対する抗癌剤併用製剤の抑制活性の確認
実施例１で希釈した各卵巣癌細胞株９０μｌに、１／２ずつ連続希釈（ｓｅｒｉａｌ ｄｉｌｕｔｉｏｎ）したＰＨＩ－１０１を１０μｌずつ処理して最終濃度が最高１００μＭとなるように処理し、５％ＣＯ_２の３７℃条件で１時間培養した後、シスプラチン（Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、パクリタキセル（Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）またはトポテカン（Ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）を各細胞株に対するＩＣ_５０の濃度で処理した。その後、５％ＣＯ_２の３７℃条件で７２時間培養し、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ ｇｌｏ ａｓｓａｙキット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を用いて細胞数を測定し、これを併用製剤を処理しない対照群に対する比率で表して細胞生存力を評価した。

【0057】

ＰＲＩＺＭソフトウェアを用いてＳ字曲線でＩＣ_５０を計算した結果、ＰＨＩ－１０１は、シスプラチン（図１）、パクリタキセル（図２）またはトポテカン（図３）と併用される場合、単独使用に比べてより低いＩＣ_５０を示すことが分かり、卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１の優れた併用効果が確認された（表３）。

【表3】

【0058】

実施例４．卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１およびオラパリブの相乗効果の確認
４－１．ＰＨＩ－１０１およびオラパリブ処理開始濃度の確立
Ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｉｎｄｅｘ実験においてＰＨＩ－１０１およびオラパリブの整数比が成立する濃度を確立するために、ＩＣ_５０値が相対的に低いＰＨＩ－１０１のＩＣ_５０の濃度１ｘを基準として、オラパリブのＩＣ_５０の値に基づいてＰＨＩ－１０１およびオラパリブの整数比を表４のように求めた。

【表4】

【0059】

処理開始濃度はｄｏｓｅ濃度勾配においてＩＣ_５０値が中間にくるようにＩＣ_５０の濃度の２^３倍にした濃度で表５のように定めた。

【表5】

【0060】

４－２．ＰＨＩ－１０１およびオラパリブ連続希釈液の用意
ＰＨＩ－１０１およびオラパリブは表５のような比率で物質ｓｔｏｃｋと培地とを混合して１０ｘ ｓｏｌｕｔｉｏｎとして用意した。

【表6】

【0061】

用意した１０ｘ ｓｏｌｕｔｉｏｎを１５０μｌの培地が入っている６つのＥ－ｔｕｂｅに１５０μｌずつ１／２連続希釈（ｓｅｒｉａｌ ｄｉｌｕｔｉｏｎ）した後、ＰＨＩ－１０１ ９６－ウェルプレート（図４）およびオラパリブ９６－ウェルプレート（図５）をそれぞれ用意し、連続希釈したＰＨＩ－１０１またはオラパリブを当該プレートにウェルあたり３０μｌずつ分注した。物質が入らないウェルには培地を３０μｌずつ分注した。

【0062】

４－３．ＰＨＩ－１０１およびオラパリブ連続希釈液の処理
実施例１で希釈した各卵巣癌細胞株８０μｌが分注された９６－ウェルプレートに、実施例４－２で用意したＰＨＩ－１０１プレートおよびオラパリブプレートの連続希釈液を、ＪＡＮＵＳを用いて図６のように当該位置のウェルにウェルあたり１０μｌずつ分注して最終体積が１００μｌとなるように処理した。その後、５％ＣＯ_２の３７℃条件で７２時間培養し、３の繰り返しで進行させた。

【0063】

４－４．ＰＨＩ－１０１およびオラパリブの相乗作用の確認
実施例４－３で連続希釈液処理した各卵巣癌細胞株に対して、Ｃｅｌｌｔｉｔｅｒ ｇｌｏ ａｓｓａｙキットを用いて細胞数を測定した後、これをＰＨＩ－１０１およびオラパリブを処理しない対照群に対する比率で表して細胞生存力を測定した後、ＰＲＩＺＭソフトウェアを用いてＳ字曲線でＩＣ_５０を計算した。

【0064】

その結果、ＣＡＯＶ３（図７）、ＯＶＣＡＲ３（図８）およびＳＫ－ＯＶ３（図９）の卵巣癌細胞株に対するＰＨＩ－１０１、オラパリブ、およびＰＨＩ－１０１およびオラパリブ併用のＩＣ_５０は表７のように確認された。

【表7】

【0065】

その後、ＣａｌｃｕＳｙｎ ｓｏｆｔｗａｒｅを用いて表８のＣｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ Ｉｎｄｅｘ（ＣＩ）を基準として、ＰＨＩ－１０１およびオラパリブの処理濃度による各卵巣癌細胞株に対するＣＩを求め、物質間の相乗作用（ｓｙｎｅｒｇｉｓｍ）の有無を評価した。

【表8】

【0066】

その結果、ＣＡＯＶ３のＣＩは表９のように確認され、最も低濃度を除いて全般的な濃度区間でＣｏＡ ＰＨＩ－１０１とオラパリブとの間に相乗効果が確認された（図１０）。ＯＶＣＡＲ３のＣＩは表１０のように確認され、すべての濃度区間で大体ＣｏＡ ＰＨＩ－１０１とオラパリブとの間に相乗効果が確認された（図１１）。また、ＳＫ－ＯＶ－３のＣＩは表１０のように確認され、高濃度と低濃度区間で部分的に相乗効果が現れたことが確認された（図１２）。

【表9】

【表10】

【0067】

このような結果により、ＰＨＩ－１０１は、オラパリブとの相乗効果によって卵巣癌に効果的に適用できることが確認された。

【0068】

これまで本発明についてその実施例を中心に説明した。本発明の属する技術分野における通常の知識を有する者は、本発明が本発明の本質的な特性を逸脱しない範囲で変形された形態で実現できることを理解するであろう。そのため、開示された実施例は、限定的な観点ではなく、説明的な観点で考慮されなければならない。本発明の範囲は上述した説明ではなく、特許請求の範囲に示されており、それと同等範囲内にあるすべての差異は本発明に含まれていると解釈されなければならない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【国際調査報告】