特表 2023-518431 コレステロール関連疾患の治療方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-01

(54)【発明の名称】コレステロール関連疾患の治療方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20230424BHJP

   A61P 3/06 20060101ALI20230424BHJP

   C07K 16/40 20060101ALN20230424BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20230424BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

A61P3/06

C07K16/40 ZNA

C12N15/13

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022556102

(86)(22)【出願日】2021-03-19

(85)【翻訳文提出日】2022-10-17

(86)【国際出願番号】 CN2021081705

(87)【国際公開番号】W WO2021185344

(87)【国際公開日】2021-09-23

(31)【優先権主張番号】202010194665.6

(32)【優先日】2020-03-19

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】519126343

【氏名又は名称】スゥジョウ サンカディア バイオファーマシューティカルズ カンパニー リミテッド

【氏名又は名称原語表記】ＳＵＺＨＯＵ ＳＵＮＣＡＤＩＡ ＢＩＯＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＣＯ．， ＬＴＤ．

(71)【出願人】

【識別番号】519352757

【氏名又は名称】江▲蘇▼恒瑞医▲薬▼股▲フン▼有限公司

【氏名又は名称原語表記】ＪＩＡＮＧＳＵ ＨＥＮＧＲＵＩ ＰＨＡＲＭＡ ＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＣＯ．， ＬＴＤ．

【住所又は居所原語表記】ＮＯ．７ ＫＵＮＬＵＮＳＨＡＮ ＲＯＡＤ， ＥＣＯＮＯＭＩＣ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＩＣＡＬ ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ ＺＯＮＥ， ＬＩＡＮＹＵＮＧＡＮＧ， ＪＩＡＮＧＳＵ ２２２０４７， ＣＨＩＮＡ

(74)【代理人】

【識別番号】110001818

【氏名又は名称】弁理士法人Ｒ＆Ｃ

(72)【発明者】

【氏名】▲張▼ ▲連▼山

(72)【発明者】

【氏名】朱 波

(72)【発明者】

【氏名】夏 晶

【テーマコード（参考）】

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C085AA14

4C085CC23

4C085DD62

4C085GG04

4H045AA11

4H045AA30

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA27

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、コレステロール関連疾患の治療方法を提供する。具体的には、プロタンパク質転換酵素スブチリシン／ｋｅｘｉｎ９型（ＰＣＳＫ９）に対する抗体又は抗原結合フラグメントを使用して、コレステロール関連疾患を治療又は予防する方法に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

１回に最大６００ｍｇの投与量で、４週以上の投与間隔で患者に少なくとも１つのＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを投与することを含み、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号４、配列番号５と配列番号６で示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３及びそれぞれ配列番号１、配列番号２と配列番号３で示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３を有し、前記投与間隔は、好ましくは、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週である、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させ、又は患者の高脂血症を治療及び／又は予防し、又はコレステロール関連疾患を治療及び／又は予防する方法。

【請求項2】

前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号８で示される軽鎖可変領域と、配列番号７で示される重鎖可変領域を有する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１０で示される軽鎖と、配列番号９で示される重鎖を含む、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記投与量は、７０～２００ｍｇから選択され、好ましくは、７０～１５０ｍｇであり、投与間隔は、４、５、６、７、８、９又は１０週から選択され、好ましくは、４週又は８週である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記投与量は、１００～３００ｍｇから選択され、好ましくは、１５０～３００ｍｇであり、投与間隔は、６週以上であり、好ましくは、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４週であり、より好ましくは、８週又は１２週である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項6】

前記投与量は、２５０～５５０ｍｇから選択され、好ましくは、３００～５５０ｍｇであり、投与間隔は、８週以上であり、好ましくは、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週であり、より好ましくは、８週又は１２週である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、ａ）６０～５５０ｍｇ、ｂ）７０ｍｇ、ｃ）７５ｍｇ、ｄ）１００ｍｇ、ｅ）１２０ｍｇ、ｆ）１３０ｍｇ、ｇ）１４０ｍｇ、ｈ）１５０ｍｇ、ｉ）２１０ｍｇ、ｊ）２８０ｍｇ、ｋ）３００ｍｇ、ｌ）３５０ｍｇ、ｍ）４００ｍｇ、ｎ）４５０ｍｇ、ｏ）５００ｍｇ又はｐ）５５０ｍｇから選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与間隔は、４、８、１２又は１６週から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与方法は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ又は４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗから選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させる量が少なくとも１０％である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させる量が、ａ）少なくとも１５％、ｂ）少なくとも２０％、ｃ）少なくとも３０％、ｄ）少なくとも５０％、ｅ）少なくとも５０％、ｆ）少なくとも５５％、ｇ）少なくとも６０％、又は、ｈ）少なくとも６５％から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記高脂血症は、高コレステロール血症又は混合性高脂血症から選択される、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記コレステロール関連疾患は、原発性高コレステロール血症であり、好ましくは、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症又はホモ接合型家族性高コレステロール血症である、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記患者は以前に、少なくとも１つのコレステロール合成阻害剤及び／又はコレステロール吸収阻害剤で治療されており、
好ましくは、前記コレステロール合成阻害剤はスタチンであり、より好ましくは、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン又はシンバスタチンであり、
好ましくは、前記コレステロール吸収阻害剤はエゼチミブである、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

前記患者は以前に、少なくとも１つのコレステロール合成阻害剤又はコレステロール吸収阻害剤で少なくとも４週間治療されている、請求項１４に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は出願日が２０２０年３月１９である中国特許出願ＣＮ２０２０１０１９４６６５．６の優先権を主張する。本出願は上記の中国特許出願の全文を引用する。

【0002】

本開示は、プロタンパク質転換酵素スブチリシン／ｋｅｘｉｎ９型（ＰＣＳＫ９）に対する抗体又は抗原結合フラグメントを使用して、コレステロール関連疾患（高脂血症、高脂血症又は脂質異常症）を治療又は予防する方法に関する。

【背景技術】

【0003】

心血管疾患は現在、ヒトの健康を脅かす主要な疾患である。２０１６年、ヨーロッパ心臓病学会及びヨーロッパアテローム性動脈硬化症学会（ＥＳＣ／ＥＡＳ）は共同で「２０１６ＥＳＣ／ＥＡＳ脂質異常症管理ガイドライン」を発表し、ガイドラインは、ヨーロッパでは４００万人以上が心血管疾患（ＣＶＤ）で亡くなっていることを指摘した。２００９年のＣＶＤ関連医療費は合計１０６０億ユーロに達し、ＥＵの総医療予算の約９％を示した。米国では、２０１０年～２０３０年の間にＣＶＤの年間直接費用は３倍増加すると予想されている。中国には、現在約３億人が心臓血管疾患を患っており、毎年約３５０万人が様々な心血管疾患で死亡しており、直接医療支出は１３００億元に達し、また年々増加の傾向を表している。研究により、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ－Ｃ）又は総コレステロール（ＴＣ）の上昇を特徴とする脂質異常症が、アテローム性動脈硬化性心血管疾患（ＡＳＣＶＤ）の重要な危険因子であり、ＬＤＬ－Ｃ又はＴＣレベルを下げることにより、ＡＳＣＶＤの発症及び死亡率を有意に減少することができると指摘された。研究では、ＬＤＬ－Ｃが１．０ｍｍｏｌ／Ｌ減少するごとに、心臓発作、血行再建術、虚血性脳卒中の年間発生率が２０％以上減少することを発現した。

【0004】

現在、中国の脂質異常症の治療率及び治療遵守率はまだ低いレベルにある。臨床で主流のコレステロール低下剤は、スタチン（コレステロール合成阻害剤）及びエゼチミブ（コレステロール吸収阻害剤）である。スタチンはＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼ阻害剤であり、主にコレステロール合成の律速酵素であるＨＭＧ－ＣｏＡレダクターゼを阻害し、コレステロール合成を低下させることで、脂質を低下させる目的を達成する。臨床試験では、スタチンはＣＶＤ及び高リスク群の死亡率を低下させ得るとが実証された。スタチンは、疾患の初期段階（二次予防）とリスクは高くなっているがＣＶＤのない（一次予防）治療に有効がある。心血管疾患の低リスク群における適用効果については、さらなる研究が必要である。しかし、スタチンは臨床使用において、筋肉痛、筋炎、肝機能障害及び横紋筋融解症などの副作用があるため、スタチンの長期使用は、新規発症糖尿病のリスクを高める危険性があり、発病率は約１０％～１２％であり、スタチン効果に属し；コレステロール吸収阻害剤エゼチミブは、主に頭痛及び消化器症状として現れ、スタチンと併用する場合、トランスアミナーゼの上昇や筋肉痛などの副作用が起こる可能性があり、またコレステロールを下げる効果が弱い。スタチンの長期使用により、より多くの患者に薬剤耐性が現れた。統計によると、６０％のリスクの高い患者は、スタチン又はその他の市販の脂質低下剤を服用しても依然としてＬＤＬ－Ｃレベルを十分にコントロールすることができず、非常にリスクの高い患者群では、当該割合は８０％を超えている。特に、心血管疾患のリスクが高いヘテロ接合型家族性高コレステロール血症（ＨｅＦＨ）又はホモ接合型家族性高コレステロール血症（ＨｏＦＨ）の患者、スタチン不耐症又は第一選択薬又は第二選択薬の耐容量が最も高い脂質低下剤を使用して治療してもＬＤＬ－Ｃレベルが目標値に達していない患者に対しては、新しい機序によるコレステロール低下剤が臨床的に急務となっている。

【0005】

ＰＣＳＫ９（Ｐｒｏｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｎｖｅｒｔａｓｅ ｓｕｂｔｉｌｉｎ／ｋｅｘｉｎ ｔｙｐｅ９、ヒトサブチリシン変換酵素９）はプロタンパク質転換酵素ファミリーの９番目のメンバーである。ＰＣＳＫ９は主に肝臓で発現しているが、腸、腎臓、膵臓、脳を含む他の臓器でも検出されている。肝臓から循環系に分泌されたＰＣＳＫ９は、肝細胞表面のＬＤＬＲと結合し、形成した複合体がエンドサイトーシスされ、リソゾームでのＬＤＬＲ分解を促進することにより、細胞膜へのＬＤＬＲ再循環を阻害してＬＤＬＲ再利用率を減らし、肝細胞膜中のＬＤＬＲレベルを低下させ、ＬＤＬ－Ｃ排出の減少をもたらしている。ＰＣＳＫ９は、肝臓表面のＬＤＬＲ濃度を低下させることにより、コレステロールのバランスに重要な役割を果たしている。最近、当該メカニズムに対して、新たな医薬のＰＣＳＫ９モノクローナル抗体が登場し、ＰＣＳＫ９の循環レベルを低下させ、細胞表面のＬＤＬＲの発現を増加させ、ＬＤＬ－Ｃクリアランスを増加させて、循環ＬＤＬ－Ｃレベルを低下させている。作用機序の観点から見て、これらの医薬は、肝臓の表面にＬＤＬＲを発現できるすべての患者のＬＤＬ－Ｃレベルを低下させのに効果的である。従って、これらの医薬は大多数の患者、特にスタチン不耐症の患者又はスタチンの最大用量で治療を受けてもＬＤＬ－Ｃレベルを効果的に制御できない患者に有効である。

【0006】

現在販売されている主なＰＣＳＫ９モノクローナル抗体は、Ａｍｇｅｎ社が開発したＥｖｏｌｏｃｕｍａｂ（Ｒｅｐａｔｈａ）、及びＳａｎｏｆｉ社とＲｅｇｅｎｏｎ社が共同開発したＡｌｉｒｏｃｕｍａｂ（Ｐｒａｌｕｅｎｔ）である。市販されている２種類のＰＣＳＫ９モノクローナル抗体は、スタチンとの併用する時ＬＤＬ－Ｃを約５０％～６０％低下させる。ＰＣＳＫ９モノクローナル抗体の安全性、良好な忍容性及び有効性は、数多くの試験で実証されている。臨床試験の被験者には、原発性高コレステロール血症（ヘテロ接合体の家族性及び非家族性高コレステロール血症を含む）及び混合型高コレステロール血症の被験者が含まれ、これらの被験者にはスタチン療法不耐症の患者、スタチン及び／又は他の脂質低下薬がＬＤＬ－Ｃに対する低下が標準以下の患者を含み、また、ホモ接合型家族性高コレステロール血症の患者を対象とした臨床試験も実施されており、所定の治癒効果を得た。Ｅｖｏｌｏｃｕｍａｂの投与方法は、１４０ｍｇ Ｑ２Ｗ又は４２０ｍｇ Ｑ４Ｗである。Ａｌｉｒｏｃｕｍａｂの投与方法の推奨投与量は７５ｍｇ Ｑ２Ｗであり、選択可能な開始投与量はまた３００ｍｇ Ｑ４Ｗを含み、調整可能な最大投与量は１５０ｍｇ Ｑ２Ｗである。

【0007】

ＷＯ２０１７１１４２３０Ａ、ＷＯ２０１７１１８３０７Ａ、ＷＯ２０１８２２８４０６、ＷＯ２０１９００１５６０には、Ｅｖｏｌｏｃｕｍａｂ及びＡｌｉｒｏｃｕｍａｂと異なる新規なＰＣＳＫ９抗体が開示されている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】国際公開第２０１７１１４２３０Ａ号

【特許文献2】国際公開第２０１７１１８３０７Ａ号

【特許文献3】国際公開第２０１８２２８４０６号

【特許文献4】国際公開第２０１９００１５６０号

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0009】

本開示は、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させ、又は患者の高脂血症を治療及び／又は予防し、又はコレステロール関連疾患を治療及び／又は予防する方法を提供し、前記方法はスキームが簡単であり、投与頻度が低く、投与量が少ないため、患者の治療負担を効果的に軽減し、患者の治療コンプライアンスを向上させることができる。

【課題を解決するための手段】

【0010】

本開示の一形態は、１回に最大６００ｍｇの投与量で、４週以上の投与間隔で患者に少なくとも１つのＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを患者に投与することを含む、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させ、又は患者の高脂血症を治療及び／又は予防し、又はコレステロール関連疾患を治療及び／又は予防する方法を提供し、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号４、配列番号５と配列番号６で示されるＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２とＬＣＤＲ３及びそれぞれ配列番号１、配列番号２と配列番号３で示されるＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２とＨＣＤＲ３であり、前記投与間隔は、例えば４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週である。

【0011】

ここで、前記記載の各ＣＤＲ配列は下記の表に示された通りである。

【0012】

【0013】

本開示の実施形態において、患者が本開示の方法による治療を受けた後、血清ＬＤＬコレステロール（ＬＤＬ－Ｃ）レベルの低下量は、ａ）少なくとも１５％、ｂ）少なくとも２０％、ｃ）少なくとも３０％、ｄ）少なくとも４０％、ｅ）少なくとも５０％、ｆ）少なくとも５５％、ｇ）少なくとも６０％、ｈ）少なくとも６５％、ｉ）少なくとも７０％、ｊ）少なくとも７５％、ｋ）少なくとも８０％、ｌ）少なくとも８５％又はｍ）少なくとも９０％から選択される。いくつかの実施形態において、患者が本開示の方法による治療を受けた後、血清ＬＤＬコレステロールレベルの低下は、７～８４日間持続することができ、例えば、７～１４日間、１４～２１日間、２１～２８日間、２８～３５日間、３５～４２日間、４２～４９日間、４９～５６日間、５６～６３日間、６３～７０日間、７０～７７日間、７７～８４日間である。

【0014】

選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体から選択される組換え抗体又はその抗原結合フラグメントである。
選択可能な実施形態において、ヒト化抗体の軽鎖及び重鎖可変領域上の軽鎖及び重鎖フレームワーク領域配列は、ヒト生殖系列軽鎖及び重鎖フレームワーク領域配列又はその変異配列である。

【0015】

選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、それぞれ配列番号８で示される軽鎖可変領域、及び配列番号７で示される重鎖可変領域を有する。

【0016】

重鎖可変領域
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＳＳＧＦＴＫＹＨＱＮＦＫＤＲＶＴＭＴＲＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＹＤＹＤＥＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号７

【0017】

軽鎖可変領域
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＫＱＳＦＮＬＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号８

【0018】

いくつかの選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４アイソタイプの重鎖定常領域を含み、好ましくは、ＩｇＧ１アイソタイプの重鎖定常領域を含む。

【0019】

もう一つの選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合断片は、κ又はλの軽鎖定常領域の軽鎖定常領域を含む。

【0020】

いくつかの選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、配列番号１０で示される配列を有する軽鎖、及び配列番号９で示される配列を有する重鎖を含む。

【0021】

選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体は抗体ｈ００１－４－ＹＴＥである。前記ｈ００１－４－ＹＴＥ抗体の軽鎖配列は配列番号１０で示された通りであり、ｈ００１－４－ＹＴＥ抗体の重鎖配列は配列番号９で示された通りである。

【0022】

重鎖
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＴＦＴＤＹＷＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＳＳＧＦＴＫＹＨＱＮＦＫＤＲＶＴＭＴＲＤＴＳＩＳＴＡＹＭＥＬＳＲＬＲＳＤＤＴＡＶＹＹＣＡＲＱＹＤＹＤＥＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＹＩＴＲＥＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号９

【0023】

軽鎖
ＤＩＶＭＳＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＫＳＳＱＳＬＬＮＳＲＴＲＫＮＦＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＳＰＫＬＬＩＹＷＡＳＴＲＥＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＫＱＳＦＮＬＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１０

【0024】

ＷＯ２０１９００１５６０Ａの内容は、全てを引用することにより本明細書に組み込まれる。

【0025】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、７０～２００ｍｇから選択され、例えば、７０～１５０ｍｇであり、投与間隔は、４、５、６、７、８、９又は１０週から選択され、例えば、４週又は８週である。

【0026】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、１００～３００ｍｇから選択され、例えば、１５０～３００ｍｇであり、投与間隔は、６週以上であり、例えば、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３又は１４週であり、例えば、８週又は１２週である。

【0027】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、２５０～５５０ｍｇから選択され、例えば、３００～４５０ｍｇであり、投与間隔は、８週以上であり、例えば、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週であり、例えば、８週又は１２週である。

【0028】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、ａ）６０～５５０ｍｇ、ｂ）７０ｍｇ、ｃ）７５ｍｇ、ｄ）１００ｍｇ、ｅ）１２０ｍｇ、ｆ）１３０ｍｇ、ｇ）１４０ｍｇ、ｈ）１５０ｍｇ、ｉ）２１０ｍｇ、ｊ）２８０ｍｇ、ｋ）３００ｍｇ、ｌ）３５０ｍｇ、ｍ）４００ｍｇ、ｎ）４５０ｍｇ、ｏ）５００ｍｇ又はｐ）５５０ｍｇから選択される。

【0029】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与間隔は、１、２、４、８、１２又は１６週から選択される。

【0030】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与方法は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ又は４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗから選択される。

【0031】

本開示のいくつかの実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、非経口の方法で投与される。本開示のいくつかの実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、静脈内で投与される。本開示のいくつかの実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは、皮下で投与される。例えば、抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの注射可能な形態は、抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメント、緩衝液、安定剤を含み、任意選択で界面活性剤を更に含む注射剤又は凍結乾燥粉末である。緩衝液はヒスチジン－塩酸塩系であり、安定剤は例えば、スクロース、ラクトース、トレハロース、マルトースなどの二糖類の糖又はアミノ酸から選択されることができる。界面活性剤は、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、グリセリン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルから選択され、例えば、前記ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルは、ポリソルベート２０、４０、６０又は８０であり、例えば、ポリソルベート２０である。例えば、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの注射可能な形態は、抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメント、ヒスチジン塩酸塩緩衝液、スクロース及びポリソルベート８０を含む。

【0032】

選択可能な実施形態において、前記抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは３０ｍｇ～７０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、３０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、３５ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、７０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、５０ｍｇ～２８０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、７５ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１０５ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１２０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１５０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、２１０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、２８０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１００ｍｇ～５００ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、１５０ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、３００ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、４５０ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、１５０ｍｇ～５００ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、８０～８４日間持続し、３００ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％低下し、８０～８４日間持続し、４５０ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも１５％～少なくとも５０％に低下し、８０～８４日間持続する。

【0033】

選択可能な実施形態において、前記抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントは３０ｍｇ～７０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、３０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、３５ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、７０ｍｇの投与量で、２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、７～１４日間持続し、５０ｍｇ～２８０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、７５ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１０５ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１２０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、３００ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、２１０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、２８０ｍｇの投与量で、４週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、２１～３１日間持続し、１００ｍｇ～５００ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、３００ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、３００ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、４５０ｍｇの投与量で、８週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、５０～５６日間持続し、３００ｍｇ～５００ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、８０～８４日間持続し、３００ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、８０～８４日間持続し、４５０ｍｇの投与量で、１２週ごとに患者に皮下投与し、ここで、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルは少なくとも３０％～少なくとも５０％低下し、８０～８４日間持続する。

【0034】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントをコレステロール関連疾患を有する患者に投与し、投与方法は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ又は４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗから選択され、コレステロール関連疾患を効果的に治療でき、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させることができる。前記患者の前記血清ＬＤＬコレステロールレベルが低下する量は、ａ）少なくとも１５％、ｂ）少なくとも３０％、ｃ）少なくとも４０％、ｄ）少なくとも５０％又はｅ）少なくとも６０％から選択される。

【0035】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを必要とする患者に投与し、投与方法は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ又は４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗから選択され、必要とする患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを効果的に低下させることができる。前記患者の前記血清ＬＤＬコレステロールレベルが低下する量は、ａ）少なくとも１５％、ｂ）少なくとも３０％、ｃ）少なくとも４０％、ｄ）少なくとも５０％又はｅ）少なくとも６０％から選択される。

【0036】

いくつかの実施形態において、前記患者は以前に、少なくとも１つのコレステロール合成阻害剤及び／又はコレステロール吸収阻害剤で治療されたことがある。いくつかの実施形態において、前記患者は以前に、少なくとも１つのコレステロール合成阻害剤又はコレステロール吸収阻害剤で４週間以上治療されたことがある。

【0037】

いくつかの実施形態において、コレステロール合成阻害剤はスタチンである。いくつかの実施形態において、コレステロール吸収阻害剤はエゼチミブである。

【0038】

本開示の選択可能な実施形態において、前記少なくとも１つの抗ＰＣＳＫ９抗体は、少なくとも１つのスタチンの使用前、使用後又は使用と同時に患者に投与される。スタチンは、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、ロバスタチン、メバスタチン、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチン、シンバスタチンなどを含むが、これらに限定されない。

【0039】

本開示において、高脂血症は、血液中に異常に高いレベルの脂質が存在する疾患又は病症を指す。高脂血症は、（１）高コレステロール血症、即ち上昇したコレステロールレベル、（２）高トリグリセリド血症、即ち上昇したトリグリセリドレベル、及び（３）複合型高脂血症、即ち高コレステロール血症及び高トリグリセリド血症の組み合わせから選択される形態で出現する。

【0040】

本開示において、高脂血症の意味は、高脂血症関連病症にも及ぼし、例えば、アテローム性動脈硬化症、狭心症、頸動脈疾患、脳動脈硬化症、黄色腫、冠動脈疾患、虚血性脳卒中、血管形成術後の再狭窄、末梢血管疾患、間欠性跛行、心筋梗塞後の壊死の減少、脂質異常症、食後脂血症、膵炎である。

【0041】

高脂血症はまた、原発性高脂血症及び続発性高脂血症に分けられる。例示的な原発性高脂血症には、１）家族性高カイロミクロン血症、２）家族性高コレステロール血症、３）家族性複合性高脂血症、４）家族性高脂血症アポリポタンパク質Ｂ－１００欠乏症、５）家族性異常ベータリポタンパク質血症、及び６）家族性高トリグリセリド血症などを含むが、これらに限定されない。

【0042】

続発性高脂血症の危険因子は、１）例えば、１型糖尿病、２型糖尿病、クッシング症候群、甲状腺機能低下症、胆汁うっ滞及び特定の種類の腎不全の病歴などの疾患の危険因子；２）避妊薬、エストロゲン及びコルチコステロイドなどのホルモン、特定の利尿薬、各種β－遮断薬を含む医薬危険因子、３）食事脂肪摂取量が総カロリーの４０％以上、飽和脂肪摂取量が総カロリーの１０％以上、１日のコレステロール摂取量が３００ｍｇ以上、習慣的で過度のアルコール摂取、食欲亢振、神経性食欲不振症及び肥満症を含む食事危険因子などを含むが、これらに限定されない。

【0043】

本開示において、前記コレステロール関連疾患には、高コレステロール血症、心臓病、メタボリックシンドローム、糖尿病、冠動脈疾患、脳卒中、心血管疾患、アルツハイマー病及び一般的な脂質異常症などを含むが、これらに限定されない。

【0044】

いくつかの実施形態において、コレステロール関連疾患は高コレステロール血症である。いくつかの実施形態において、高コレステロール血症は、原発性高コレステロール血症及び続発性高コレステロール血症から選択される。いくつかの実施形態において、原発性高コレステロール血症は、ヘテロ接合型家族性高コレステロール血症及びホモ接合型家族性高コレステロール血症から選択される。

【0045】

選択可能な実施形態において、ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを安定したスタチン治療を受けている高脂血症患者へ投与することにより、必要とする患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを効果的に低下させることができる。前記患者の前記血清ＬＤＬコレステロールレベルの低下量は、ａ）少なくとも１５％、ｂ）少なくとも３０％、ｃ）少なくとも４０％、ｄ）少なくとも５０％又はｅ）少なくとも６０％から選択される。

【0046】

本開示は、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させ、又は患者の高脂血症を治療及び／又は予防し、又はコレステロール関連疾患を治療及び／又は予防する方法を提供し、１回に３００ｍｇ未満の投与量で、４週以上の投与間隔で患者に少なくとも１つの抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを投与することを含み、前記投与間隔は、例えば、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週である。

【0047】

いくつかの実施形態において、前記投与量は７０～２５０ｍｇであり、例えば、７５～１５０ｍｇであり、及び／又は前記投与間隔は、４週、８週、１２週又は１６週から選択され、例えば、４週である。

【0048】

いくつかの実施形態において、前記ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与量は、ａ）７５ｍｇ、ｂ）１００ｍｇ、ｃ）１５０ｍｇ、ｄ）２００ｍｇ、又はｅ）２５０ｍｇから選択され、例えば、１５０ｍｇである。

【0049】

いくつかの実施形態において、前記抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与方法は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ又は１５０ｍｇ Ｑ８Ｗから選択される。

【0050】

本開示は、患者の血清ＬＤＬコレステロールレベルを低下させ、又は患者の高脂血症を治療及び／又は予防し、又はコレステロール関連疾患を治療及び／又は予防する方法を提供し、１回に３００～６００ｍｇ投与量で、４週以上の投与間隔で患者に少なくとも１つの抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントを投与することを含む。

【0051】

選択可能な実施形態において、投与量は３００～５００ｍｇから選択され、例えば、３００ｍｇ又は４５０ｍｇである。

【0052】

選択可能な実施形態において、投与間隔は、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５又は１６週から選択される。

【0053】

選択可能な実施形態において、投与間隔は、８、１２又は１６週から選択される。

【0054】

いくつかの実施形態において、前記抗ＰＣＳＫ９抗体又はその抗原結合フラグメントの投与方法は、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ又は４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗから選択される。

【0055】

いくつかの実施形態において、治療周期は、少なくとも４週間、少なくとも６週間、少なくとも８週間、少なくとも１０週間、少なくとも１２週間、少なくとも１６週間、少なくとも２０週間、少なくとも２４週間、少なくとも２８週間、少なくとも３２週間、少なくとも３６週間、少なくとも４０週間、少なくとも４４週間、少なくとも４８週間、少なくとも５２週間、少なくとも５６週間、少なくとも１年、少なくとも２年、又はそれ以上である。

【図面の簡単な説明】

【0056】

【図1】図１は、全治療期間のＬＤＬ－Ｃ濃度の平均変化率を示す。

【図2】図２は、全治療期間のＴＣ濃度の平均変化率を示す。

【図3】図３は、全治療期間のｎｏｎ－ＨＤＬ－Ｃ濃度の平均変化率を示す。

【図4】図４は、全治療期間のＡｐｏＢ濃度の平均変化率を示す。

【図5】図５は、全治療期間のＬｐ（ａ）濃度の平均変化率を示す。

【図6】図６は、全治療期間の遊離ＰＣＳＫ９濃度の平均変化率を示す。

【発明を実施するための形態】

【0057】

１．用語
本開示で使用されるアミノ酸の３文字コード及び１文字コードは、Ｊ． ｂｉｏｌ． ｃｈｅｍ、２４３、ｐ３５５８（１９６８）に記載された通りである。

【0058】

本開示に記載の「抗体」は、免疫グロブリンを指し、２本の同一の重鎖及び２本の同一の軽鎖が鎖間ジスルフィド結合によって連結されたテトラペプチド鎖構造である。

【0059】

本開示において、本開示に記載の抗体軽鎖は、更に軽鎖定常領域を含むことができ、前記軽鎖定常領域は、ヒト又はマウスのκ、λ鎖又はその変異体を含む。

【0060】

本開示において、本開示に記載の抗体重鎖は、更に重鎖定常領域を含むことができ、前記重鎖定常領域は、ヒト又はマウスＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４又はその変異体を含む。

【0061】

抗体の重鎖及び軽鎖のＮ末端付近の約１１０個のアミノ酸の配列は大きく異なり、可変領域（Ｆｖ領域）であり、Ｃ末端付近の残りのアミノ酸配列は比較的安定しており、定常領域である。可変領域には、３つの超可変領域（ＨＶＲ）と４つの比較的保存された配列を有するフレームワーク領域（ＦＲ）が含まれる。３つの超可変領域は、抗体の特異性を決定し、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる。各軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）及び重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）は、３つのＣＤＲ領域及び４つのＦＲ領域で構成され、アミノ末端からカルボキシ末端の順で、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４である。軽鎖の３つのＣＤＲ領域は、ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２及びＬＣＤＲ３を指し、重鎖の３つのＣＤＲ領域は、ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２及びＨＣＤＲ３を指す。本開示に記載の抗体又は抗原結合フラグメントのＬＣＶＲ領域及びＨＣＶＲ領域のＣＤＲアミノ酸残基の数及び位置は、既知のＫａｂａｔ番号付け規則（ＬＣＤＲ１－３、ＨＣＤＲ１－３）に従う。

【0062】

本開示の抗体は、マウス抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体を含み、好ましくは、ヒト化抗体である。

【0063】

用語「マウス抗体」は本開示において、当技術分野の知識及び技術に従って製造されたヒトＰＣＳＫ９のノクローナル抗体を指す。製造の際は、試験対象にＰＣＳＫ９抗原を注射し、次に目的の配列又は機能特性を持つ抗体を発現するハイブリドーマを分離する。

【0064】

用語「キメラ抗体（ｃｈｉｍｅｒｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、マウス抗体の可変領域とヒト抗体の定常領域を融合させて形成された抗体を指し、マウス抗体によって誘導される免疫応答を低下させることができる。キメラ抗体を構築するには、まずマウス特異的モノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを構築し、次にマウスハイブリドーマ細胞から可変領域遺伝子をクローニングし、必要に応じてヒト抗体の定常領域遺伝子をクローニングし、マウス可変領域遺伝子及びヒト定常領域遺伝子を連結してキメラ遺伝子を形成し、ヒトベクターに挿入し、最後的にキメラ抗体分子を真核産業又は原核産業で発現させる。本開示の一つの選択可能な実施形態において、前記ＰＣＳＫ９キメラ抗体の抗体軽鎖は、更にヒトκ、λ鎖又はその変異体の軽鎖定常領域を含む。前記ＰＣＳＫ９キメラ抗体の抗体重鎖は、更にヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４又はその変異体の重鎖定常領域を含む。ヒト抗体の定常領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４又はその変異体の重鎖定常領域から選択されてもよく、例えば、ヒトＩｇＧ２又はＩｇＧ４重鎖定常領域を含み、又はアミノ酸変異後のＡＤＣＣ（ａｎｔｉｂｏｄｙ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔ ｃｅｌｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ、抗体依存性細胞介性細胞傷害）毒性を持たないＩｇＧ４を使用する。

【0065】

用語「ヒト化抗体（ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ）」は、ＣＤＲ移植抗体（ＣＤＲ－ｇｒａｆｔｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ）とも呼ばれ、マウスＣＤＲ配列をヒト抗体可変領域フレームワークに移植して製造した抗体、即ち異なるタイプのヒト生殖系抗体フレームワーク配列から生成された抗体を指す。キメラ抗体が多くのマウスタンパク質成分を搭載するによって誘導される強い抗体可変抗体応答を克服することができる。このようなフレームワーク配列は、生殖細胞抗体遺伝子配列を含む公開ＤＮＡデータベース又は公開した参考文献から入手することができる。例えば、ヒトの重鎖及び軽鎖可変領域遺伝子の生殖系列ＤＮＡ配列は、「ＶＢａｓｅ」ヒト生殖系列配列データベース（インターネットでｗｗｗ．ｍｒｃｃｐｅ．ｃｏｍ．ａｃ．ｕｋ／ｖｂａｓｅから入手可能）、及びＫａｂａｔ、Ｅ．Ａ．ｅｔ ａｌ．１９９１ Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎから見つけることができる。免疫原性を低下とそれによって生じる活性の低下を回避するために、前記ヒト抗体可変領域フレームワーク配列は、活性を維持するために、最小限の逆突然変異又は復帰変異を施することができる。本開示のヒト化抗体には、ファージディスプレイによりＣＤＲに更に親和性成熟させたヒト化抗体も含まれる。

【0066】

「ＰＣＳＫ９抗体」は、ＰＣＳＫ９に特異的に結合する抗体であり、ＰＣＴ／ＣＮ２０１６／１１１０５３のｈ００１シリーズのＰＣＳＫ９ヒト化抗体を含むが、これらに限定されない。ここで、ｈ００１シリーズのＰＣＳＫ９ヒト化抗体は、マウスをヒトＰＣＳＫ９で免疫することによってスクリーニングし、ヒト化形質転換によって得られる。

【0067】

本開示に記載の「抗原結合フラグメント」は、抗原結合活性を有するＦａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ´）２フラグメント、及びヒトＰＣＳＫ９と結合するＳｃＦｖフラグメントと他のヒトＰＣＳＫ９と結合することができる抗体のＶＨ及びＶＬ領域を使用して形成されたヒトＰＣＳＫ９と結合することができるフラグメントを指し、本開示に記載の抗体の配列番号７又は配列番号８から選択される１つ又は複数のＣＤＲ領域を含む。Ｆｖフラグメントは、抗体の重鎖及び軽鎖の可変領域を含むが、定常領域を含まず、すべての抗原結合部位の最小の抗体フラグメントを有する。一般に、Ｆｖ抗体はまた、ＶＨドメイン及びＶＬドメインの間にポリペプチドリンカーも含み、且つ抗原結合に必要な構造を形成することができる。また、異なるリンカーを使用し、２つの抗体の可変領域を単鎖抗体（ｓｉｎｇｌｅ ｃｈａｉｎ ａｎｔｉｂｏｄｙ）又は単鎖Ｆｖ（ｓＦｖ）と呼ばれる単一のポリペプチド鎖に結合することもできる。本開示における用語「ＰＣＳＫ９と結合する」とは、ヒトＰＣＳＫ９と相互作用できることを指す。本開示における用語「抗原結合部位」は、ＰＣＳＫ９抗体又は抗原結合フラグメントによって認識される抗原上の連続又は不連続な三次元空間部位を指す。

【0068】

「治療」は、患者に内部又は外部治療剤を投与することを指し、例えば、本開示のいずれかの抗体含む組成物であり、前記患者は１つ又は複数の疾患症状を有し、前記治療剤はこれらの症状に治療効果があることは知られている。通常、治療される患者又は集団に１つ又は複数の疾患症状を効果的に緩和する量で治療薬を投与して、そのような症状の退行を誘発し、又はそのような症状が臨床的に測定可能な程度まで進行することを阻害する。任意の特定の疾患の症状を緩和するのに有効な治療薬の量（「治療有効量」とも呼ばれる）は、例えば、患者の病状、年齢と体重、及び薬の患者に望ましい効果をもたらす能力などの様ざな要因によって変化することができる。症状の重症度又は進行状況を評価するために医師又は他の医療専門家が一般に使用する任意の臨床検出方法を通じて、疾患の症状が緩和されたかどうかを評価することができる。本開示の実施形態（例えば、治療方法又は製品）は、各標的疾患の症状を軽減するのに効果がない可能性はあるが、当技術分野で公知の任意の統計的試験方法、例えば、Ｓｔｕｄｅｎｔ ｔ検定、カイ二乗検定、Ｍａｎｎ及びＷｈｉｔｎｅｙによるＵ検定、Ｋｒｕｓｋａｌ－Ｗａｌｌｉｓ検定（Ｈ検定）、Ｊｏｎｃｋｈｅｅｒｅ－Ｔｅｒｐｓｔｒａ検定及びＷｉｌｃｏｘｏｎ検定によって確認でき、統計的に有意な数の患者で標的疾患の症状を軽減する必要があると判断する。

【0069】

「有効量」には、医学的疾患の症状又は病症を改善又は予防するのに十分な量は含まれる。有効量はまた、診断を可能にさせるか又は促進するのに十分な量を意味する。特定の患者又は獣医対象に対する有効量は、例えば、治療される病症、患者の健康状態、投与の方法、経路及び投与量、ならびに副作用の重症度に応じて変化してもよい。有効量は、有意な副作用又は毒性作用を回避するための最大用量又は投与方法であってもよい。

【0070】

実例として、「Ｑ４Ｗ」は４週ごとに１回投与されることを意味し、「Ｑ８Ｗ」は８週ごとに１回投与されることを意味する。「１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ」は８週ごとに投与され、１回当たりの投与量は１５０ｍｇであることを表す。

【0071】

家族性高カイロミクロン血症は、脂肪分子を分解する酵素、即ちＬＰリパーゼの欠陥を引き起こす稀な遺伝性疾患である。ＬＰリパーゼの欠陥は、血中の脂肪又はリポタンパク質の大量の蓄積につながる可能性がある。

【0072】

家族性高コレステロール血症は、比較的一般的な遺伝性疾患であり、その潜在的欠陥はＬＤＬ受容体遺伝子の一連の突然変異であり、ＬＤＬ受容体の機能異常及び／又はＬＤＬ受容体の欠陥を引き起こす。これにより、ＬＤＬ受容体によるＬＤＬのクリアランスが無効になるため、血漿においてのＬＤＬ及び総コレステロールレベルが上昇する。

【0073】

家族性複合高脂血症は、複合リポタンパク型高脂血症とも呼ばれ、患者とその影響を受けた第一度近親者が異なる時期に高コレステロールと高トリグリセリドを示す遺伝性疾患である。ＨＤＬコレステロールレベルは、しばしば適度に低下する。

【0074】

家族性アポリポタンパク質Ｂ－１００欠陥は、比較的一般的な常染色体優性の遺伝子異常である。この欠陥は、アルギニンがグルタミンに置き換えた単一ヌクレオチドの変異によって引き起こされ、ＬＤＬ受容体に対するＬＤＬ粒子の親和性が低下する。その結果、血漿ＬＤＬ及び総コレステロールレベルが高くなる。

【0075】

家族性異常βリポタンパク血症は、ＩＩＩ型高リポタンパク血症とも呼ばれ、中等度から重度の血清ＴＧ及びコレステロールレベルの上昇とアポリポタンパクＥの機能異常をもたらす稀な遺伝性疾患である。ＨＤＬ値は正常であることが多い。

【0076】

家族性高トリグリセリド血症は、血漿中のＶＬＤＬ濃度が上昇する一般的な遺伝性疾患である。その結果、トリグリセリドレベルが軽度から中等度に上昇し（通常、コレステロール値は上昇しない）、多くの場合、血漿ＨＤＬレベルの低下を伴う。

【実施例】

【0077】

実施例１：高脂血症患者を対象としたｈ００１－４－ＹＴＥ皮下複数回注射の安全性、忍容性及び有効性研究－無作為化、二重盲検、プラセボ平行対照第Ｉｂ／ＩＩ相臨床試験

【0078】

１．試験医薬
ｈ００１－４－ＹＴＥ

【0079】

２．登録された被験者
本試験に参加するためには、被験者は下記のすべての参加基準を満たす必要がある。
（１）スクリーニング時にスタチン療法を受けているか、又はスタチン療法の適応があり、無作為化前の２８日以上安定した量のスタチン療法を受けることが可能で、本試験において安定したスタチン療法を維持する意思がある被験者（本試験で認められるスタチンの種類及び用量：アトルバスタチン１０～４０ｍｇ／ｄ）（Ｌｉｐｉｔｏｒ(R)、ファイザー製薬株式会社）、
（２）スクリーニング時にスタチン及び／又は他の脂質改善薬の投与を受けている被験者の血清ＬＤＬＣ≧２．６ｍｍｏｌ／Ｌ、スクリーニング時に脂質改善薬の投与を受けていない被験者の血清ＬＤＬ－Ｃ?３．４ｍｍｏｌ／Ｌ、且つ無作為化前にＬＤＬ－Ｃ?２．６ｍｍｏｌ／Ｌの条件を満たしている被験者。
（３）空腹時トリグリセリド?４．５ｍｍｏｌ／Ｌ；
（４）体格指数（ＢＭＩ）が１８以上で且つ３５ｋｇ／ｍ２以下である必要がある。

【0080】

３、投与方法
試験には、７５ｍｇ Ｑ４Ｗ（群１）、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ（群２）、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ（群３）、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ（群４）、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ（群５）、４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗ（群６）の６つの群を計画して皮下注射し、Ｑ４Ｗ及びＱ８Ｗのスキームは１６週間投与し、Ｑ１２Ｗスキームは２４週間投与された。

【0081】

４．有効性データ
臨床試験には１１０名の被験者が参加し、無作為に群を分け、Ｈ００１－４－ＹＴＥ及びプラセボをそれぞれ５：１の比で投与された。すべての患者は、無作為化前の少なくとも２８日間及び試験期間全体を通じて、アトルバスタチン（１０～４０ｍｇ／日）の安定した治療スキームを受けた。プラセボ群と比較して、Ｈ００１－４－ＹＴＥ群のすべての用量及び時間スキームは、ベースラインから投与間隔の完了までＬＤＬ－Ｃの有意な減少を達成した。表１より、Ｈ００１－４－ＹＴＥの７５ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ及び４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗの各群の投与スキームにおいて、ＬＤＬ－ＣのＬＳ平均減少率はそれぞれ－４８．６３％（９５％ＣＩ：－５９．７９５、－３７．４５５）、－５５．０６％（－６２．９５６、－４７．１７２）、－５２．０２％（－６３．１８８、－４０．８５９）、－４８．３８％（－５６．３２１、－４０．４４０）、－４３．９３％（－５５．０９７、－３２．７６９）及び－５２．７７％（－６０．４８７、－４５．０５４）であるが、プラセボ群は４．４４％（－３．６８８、１２．５７０）（すべてのｐ値＜０．０００１）増加したことが分かる。プラセボ群に対する各Ｈ００１－４－ＹＴＥ群のＬＤＬ－ＣのＬＳ平均減少率範囲は、－４８．３３％～－５９．００％であった。プラセボ群に対する各Ｈ００１－４－ＹＴＥ群のＬＤＬ－ＣのＬＳ平均絶対減少率範囲は、－１．５９ｍｍｏｌ／Ｌ～－１．９２ｍｍｏｌ／Ｌであった。

【0082】

【表1】

【0083】

図１は、全治療期間のＬＤＬ－Ｃ濃度の平均変化率を示している。最初の投与後（第０週）、Ｈ００１－４－ＹＴＥ群のＬＤＬ－Ｃはいずれも急速に減少した。最初のサイクルでは、ＬＤＬ－Ｃレベルの最大の低下は、７５ｍｇ Ｑ４Ｗの第３週目（－４８．１８２％）及び１５０ｍｇ Ｑ４Ｗの第４週目（－５６．７４４％）で発生し、その後、Ｈ００１－４－ＹＴＥの７５ｍｇ Ｑ４Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－５４．９１６％～－４２．１０８％を維持し、Ｈ００１－４－ＹＴＥの１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－６４．５２７％～－５４．５７９％を維持した。最初のサイクルでは、ＬＤＬ－Ｃの最大の低下は、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ（－７３．５１９％）及び３００ｍｇ Ｑ８Ｗ（－５９．２７４％）の第４週目及び３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ（－６５．７２１％）及び４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗ（－６５．５２２％）の第３週目で発生し、その後、再投与により小さなリバウンドが起こったが、大きな減少傾向は依然として存在し、１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－５２．０５０％～－６９．３２３％であり、３００ｍｇ Ｑ８Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－４６．１３３％～－６０．４７６％であり、３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－４３．９０９％～－６３．１０８％であり、４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗ群のＬＤＬ－Ｃ変化率は、－４４．４９１％～－５９．５５６％であった。

【0084】

表２は、他の脂質及びアポリポタンパク質測定値における減少率をまとめたものである。すべてのＨ００１－４－ＹＴＥ群において、ＴＣ、ｎｏｎ－ＨＤＬ－Ｃ、ＡｐｏＢ及びＬｐ（ａ）の持続的で急速な減少が観察された（図２～図５）。Ｈ００１－４－ＹＴＥ群でベースラインから投与間隔の完了までのＴＣ変化率の範囲は、－３１．２６３％～－３７．７６０％であったが、プラセボ群では３．５３４％～－３．０６５％であった。Ｈ００１－４－ＹＴＥ群でベースラインから投与間隔の完了までのｎｏｎ－ＨＤＬ－Ｃ変化率の範囲は－３９．９２０％～－５２．３４９％であったが、プラセボ群では７．４１２％～－５．９５７％であった。Ｈ００１－４－ＹＴＥ群でベースラインから投与間隔の完了までのＡｐｏＢ変化率の範囲は、－３５．５９２％～－４７．６８７％であったが、プラセボ群では１２．５６５％～－６．６２３％であった。Ｈ００１－４－ＹＴＥ群でベースラインから投与間隔の完了までのＬｐ（ａ）変化率の範囲は、－３１．２６３％～－３５．３３９％であったが、プラセボ群では１．５７８％～－３．０６５％であった。

【0085】

Ｈ００１－４－ＹＴＥ治療後、投与直後に遊離ＰＣＳＫ９の急激な減少及び投与量依存的な減少率が検出された（図６）。第２日目において、Ｈ００１－４－ＹＴＥの７５ｍｇ Ｑ４Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－３１．６０％（ＳＥ、７．４６２％）減少し、Ｈ００１－４－ＹＴＥの１５０ｍｇ Ｑ４Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－３７．０９％（５．６４５％）減少し、プラセボＱ４Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－９．４４％（１１．０４８％）減少し、Ｈ００１－４－ＹＴＥの１５０ｍｇ Ｑ８Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－３９．１２％（５．７６０％）減少し、Ｈ００１－４－ＹＴＥの３００ｍｇ Ｑ８Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－６３．８８％（４．０７９％）減少し、プラセボＱ８Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は１０．１７％（８．６９１％）上昇し、；Ｈ００１－４－ＹＴＥの３００ｍｇ Ｑ１２Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－６１．５９％（４．５０７％）減少し、Ｈ００１－４－ＹＴＥの４５０ｍｇ Ｑ１２Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は－６８．５６％（４．５５４％）減少し、プラセボＱ１２Ｗ群の遊離ＰＣＳＫ９は１６．５７％（２８．５８５）上昇した。

【0086】

また、研究過程において、重篤な治療上薬物有害事象（ＴＥＡＥ）はなく、治療を中止するか又は死亡に至るまでのＴＥＡＥはなく、注射部位反応も報告されていなかった。

【0087】

【表2】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【配列表】

2023518431000001.app

【国際調査報告】