特表2023-518694感染性疾患又は呼吸器疾患の予防的処置又は曝露後処置に使用するための抗ウイルス剤の組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-05-08
(54)【発明の名称】感染性疾患又は呼吸器疾患の予防的処置又は曝露後処置に使用するための抗ウイルス剤の組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20230426BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20230426BHJP
A61K 9/127 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/28 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/24 20060101ALI20230426BHJP
A61K 31/4706 20060101ALI20230426BHJP
A61K 45/06 20060101ALI20230426BHJP
A61K 31/7052 20060101ALI20230426BHJP
A61K 31/53 20060101ALI20230426BHJP
A61K 9/12 20060101ALI20230426BHJP
A61P 31/16 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/36 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/04 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/20 20060101ALI20230426BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20230426BHJP
A61P 33/06 20060101ALI20230426BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00
A61P31/14
A61K9/127
A61K47/28
A61K47/24
A61K31/4706
A61K45/06
A61K31/7052
A61K31/53
A61K9/12
A61P31/16
A61K47/26
A61K47/36
A61K47/04
A61K47/12
A61K47/20
A61K47/10
A61P33/06
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022554352
(86)(22)【出願日】2021-03-22
(85)【翻訳文提出日】2022-10-28
(86)【国際出願番号】 US2021023405
(87)【国際公開番号】W WO2021194927
(87)【国際公開日】2021-09-30
(31)【優先権主張番号】62/993,060
(32)【優先日】2020-03-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/134,645
(32)【優先日】2021-01-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/017,297
(32)【優先日】2020-04-29
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522149326
【氏名又は名称】インスパーメッド コーポレーション
(74)【代理人】
【識別番号】100120857
【弁理士】
【氏名又は名称】渡邉 聡
(72)【発明者】
【氏名】タイ ティエン－ツー
(72)【発明者】
【氏名】ツェン ユン－ロン
(72)【発明者】
【氏名】チェン ティン－ユー
(72)【発明者】
【氏名】シー シュエ－ファン
(72)【発明者】
【氏名】チェン ヘ－ル
(72)【発明者】
【氏名】ホン キールン
(72)【発明者】
【氏名】ファン ジョナサン
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA19
4C076AA24
4C076BB21
4C076CC15
4C076CC34
4C076CC35
4C076DD22
4C076DD23
4C076DD24
4C076DD25
4C076DD26
4C076DD30A
4C076DD42
4C076DD43
4C076DD57
4C076DD63
4C076DD66
4C076DD70
4C076EE23
4C076EE38
4C084AA17
4C084AA20
4C084AA24
4C084MA24
4C084NA05
4C084NA10
4C084ZA591
4C084ZB331
4C084ZB332
4C084ZB352
4C084ZB381
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC28
4C086CB05
4C086EA11
4C086MA13
4C086MA55
4C086NA10
4C086ZA59
4C086ZB33
4C086ZB35
4C086ZB38
(57)【要約】
病原菌感染に対する予防又は治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物が提供される。この組成物のリポソーム性抗ウイルス剤は、リポソームと、このリポソーム中に捕捉された抗ウイルス剤とを有する。この抗ウイルス剤は、リポソーム中に安定に封入されており、得られたリポソーム性抗ウイルス剤は、吸入経路による投与のために安定にエアロゾル化又は霧化されることが明らかになっており、必要とする対象を副作用が低減した状態で治療する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
リポソーム性抗ウイルス剤を含む、呼吸器疾患又は感染性疾患の予防又は治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物であって、前記リポソーム性抗ウイルス剤は、少なくとも１種の脂質を含むリポソームと、
前記リポソームに封入された抗ウイルス剤と
を含む、使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項2】
前記感染性疾患が、ウイルス感染及び任意選択でコロナウイルス感染によって引き起こされる請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項3】
前記少なくとも１種の脂質が１種以上のリン脂質及びステロールを含み、前記ステロールに対する総リン脂質のモル比が１：１～２：１の範囲にある請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項4】
前記ステロールがコレステロールである請求項３に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項5】
前記少なくとも１種の脂質が、水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン脂質、例えば１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、及びこれらの組み合わせからなる群から選択される請求項３に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項6】
前記リポソーム性抗ウイルス剤が、５０ｎｍ～１，０００ｎｍ、５０ｎｍ～５００ｎｍ、１００ｎｍ～３００ｎｍ及び１５０ｎｍ～２５０ｎｍからなる群から選択される範囲の平均粒径を有する請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項7】
前記抗ウイルス剤が、キニーネ化合物、ヌクレオシド化合物及びこれらの組み合わせからなる群から選択される請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項8】
前記抗ウイルス剤が、ヒドロキシクロロキン、クロロキン、アモジアキン及びこれらの薬学的に許容できる塩からなる群から選択される請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項9】
前記抗ウイルス剤が構造式Ｉのヌクレオシド化合物であり、【化1】
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、前記複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環であり、各前記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい
請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項10】
抗生物質をさらに含む請求項１、請求項８又は請求項９に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項11】
前記抗生物質がキュリマイシン及びアジスロマイシンからなる群から選択される請求項１０に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項12】
１ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～９０ｍＭ、１０ｍＭ～８０ｍＭ、１５ｍＭ～７０ｍＭ及び２０ｍＭ～６０ｍＭからなる群から選択される範囲の脂質濃度を有する請求項１、請求項８又は請求項９に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項13】
遊離型の抗ウイルス剤をさらに有する請求項１から請求項１２のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項14】
０．０１モル／モル～２．０モル／モル、０．０５モル／モル～２．０モル／モル、０．０３モル／モル～０．５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１モル／モル、０．０５モル／モル～１．５モル／モル、０．０５モル／モル～１．０モル／モル、０．０５モル／モル～０．５モル／モル、０．０５モル／モル～０．３モル／モル、０．０５モル／モル～０．２モル／モル、０．０５モル／モル～０．１５モル／モル、０．０１モル／モル～１モル／モル、０．０５モル／モル～０．１５モル／モル、０．０５モル／モル～０．１モル／モルからなる群から選択される範囲の薬物対脂質比を有する請求項１から請求項１２のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項15】
前記抗ウイルス剤がヒドロキシクロロキン又はその薬学的に許容できる塩であり、前記抗ウイルス剤の総量が、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約８０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ～約８０ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約６０ｍｇ／ｍＬ、約０．５～約３０ｍｇ／ｍＬ及び約０．５ｍｇ／ｍＬ～約１５ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約１０ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ～約８ｍｇ／ｍＬ、約１．０ｍｇ／ｍＬ～約６ｍｇ／ｍＬ、約１．５ｍｇ／ｍＬ～約５．０ｍｇ／ｍＬ、約１．５ｍｇ／ｍＬ～約３．０ｍｇ／ｍＬ又は約２ｍｇ／ｍＬである請求項１から請求項１２のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項16】
リポソーム性抗ウイルス剤及び遊離型の抗ウイルス剤を含む、呼吸器疾患又は感染性疾患の予防又は治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物であって、前記リポソーム性抗ウイルス剤は、１種以上のリン脂質及びコレステロールを含むリポソームと、
前記リポソーム封入されたヒドロキシクロロキン、クロロキン、又は（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－２－（４－アミノピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－７－イル）－３，４－ジヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－カルボニトリルと
を含み、
前記組成物は、０．５ｍｇ／ｍＬ～１５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬ、又は０．５ｍｇ／ｍＬ～４ｍｇ／ｍＬの範囲の前記抗ウイルス剤の総量の濃度、５ｍＭ～６０ｍＭの範囲の脂質濃度、及び０．０１モル／モル～２モル／モル、０．０１モル／モル～０．３モル／モル、０．０３モル／モル～０．５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１モル／モル、任意選択で約０．０５モル／モル、又は０．０５モル／モル～０．１５モル／モルの範囲の薬物対脂質比を有する、使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項17】
前記組成物が噴霧スプレーである請求項１に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物。
【請求項18】
吸入による感染性疾患又は呼吸器疾患の予防又は治療に使用するための、請求項１に記載から請求項１６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤の組成物を含む粒子のエアロゾル化組成物であって、前記抗ウイルス剤の組成物は、少なくとも１種の脂質を含むリポソームと、
前記リポソームに封入された抗ウイルス剤と
を含む、粒子のエアロゾル化組成物。
【請求項19】
複数の粒子が、約０．５μｍ～５μｍの範囲の空気動力学的質量中央粒子径を有する請求項１８に記載の粒子のエアロゾル化組成物。
【請求項20】
感染性疾患又は呼吸器疾患を治療又は予防する方法であって、有効量の請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の組成物を、必要とする対象に投与する工程
を含む方法。
【請求項21】
前記呼吸器疾患が、重症肺炎、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含む急性呼吸器感染症（ＳＡＲＩ）、敗血症及び敗血症性ショックからなる群から選択される請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記感染性疾患が、ウイルス、任意選択でインフルエンザウイルス又はレトロウイルス、任意選択でコロナウイルス、及び任意選択でＳＡＲＳ－Ｃｏ Ｖ－２によって引き起こされたものである請求項２０に記載の方法。
【請求項23】
抗ウイルス剤の組成物を、それを必要とする対象に投与するためのシステムであって、請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載の抗ウイルス剤の組成物と、
前記抗ウイルス剤の組成物をエアロゾル化することができる肺送達デバイスと
を含み、エアロゾル化された前記抗ウイルス剤の組成物は、即時抗ウイルス活性を提供するのに有効な量の遊離抗ウイルス剤及び持続抗ウイルス活性を提供するのに有効な量の前記リポソーム性抗ウイルス剤を含有する粒子を含むシステム。
【請求項24】
リポソーム性抗ウイルス剤を含む、感染性疾患の治療に使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物であって、前記リポソーム性抗ウイルス剤は、少なくとも１種の脂質を含むリポソームと、
捕捉剤を用いたリモートローディングによって前記リポソームに封入された抗ウイルス剤と
を含み、前記捕捉剤は、アンモニウム化合物及びアニオン性対イオンから構成され、前記アニオン性対イオンは、オクタ硫酸スクロースアニオン、デキストラン硫酸アニオン、硫酸アニオン、クエン酸アニオン、グルコン酸アニオン、スルホン酸アニオン、リン酸アニオン、ピロリン酸アニオン、酒石酸アニオン、コハク酸アニオン、マレイン酸アニオン、ホウ酸アニオン、カルボン酸アニオン、炭酸水素アニオン、グルクロン酸アニオン、塩化物アニオン、水酸化物アニオン、硝酸アニオン、シアン酸アニオン、臭化物アニオン及びこれらの組み合わせからなる群から選択される、使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項25】
脂質二重層が、総脂質に基づいて、０．０００１モル％～１０モル％の範囲、任意選択で６モル％未満、任意選択で０．００１モル％～５モル％の範囲の量のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾脂質を含む請求項２４に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項26】
前記ＰＥＧ修飾脂質が、１，０００ｇ／モル～５，０００ｇ／モルの範囲の平均分子量を有するＰＥＧ部分を有する請求項２５に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項27】
前記ＰＥＧ修飾脂質が１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）］（ＤＳＰＥ－ＰＥＧ）である請求項２５に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項28】
前記１種以上のリン脂質が中性リン脂質であり、前記リポソームのＤＳＰＥ－ＰＥＧの量が、リン脂質及びステロールの総量に基づき、０．００１～５モル％の範囲にある請求項２７に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項29】
前記抗ウイルス剤が抗マラリア剤又は抗レトロウイルス剤である請求項２４に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項30】
前記抗ウイルス剤が構造式（Ｉ）のヌクレオシド化合物であり、【化2】
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、前記複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環であり、各前記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい
請求項２４に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項31】
前記抗ウイルス剤が、【化3】
【化4】
【請求項32】
０．１～８０ｍｇ／ｍＬの範囲の前記抗ウイルス剤の濃度を有する請求項２４から請求項３１のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項33】
０．５～５ｍｇ／ｍＬの範囲の前記抗ウイルス剤の濃度を有する請求項２４から請求項３１のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物。
【請求項34】
感染性疾患の治療に使用するための、リポソーム性抗ウイルス剤を含有する粒子のエアロゾル化組成物であって、請求項２４から請求項３１のいずれか１項に記載の、呼吸器疾患の治療に使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物の複数の粒子を含む、粒子のエアロゾル化組成物。
【請求項35】
前記複数の粒子が、約０．５μｍ～５μｍの範囲の空気動力学的質量中央粒子径を有する請求項３４に記載の粒子のエアロゾル化組成物。
【請求項36】
感染性疾患又は呼吸器疾患を治療する方法であって、請求項２４から請求項３１のいずれか１項に記載の使用するための抗ウイルス剤の医薬組成物を、必要とする対象に投与する工程
を含む方法。
【請求項37】
前記呼吸器疾患が、重症肺炎、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を含む急性呼吸器感染症（ＳＡＲＩ）、敗血症及び敗血症性ショックからなる群から選択される請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
ヒト対象における呼吸器疾患又は感染性疾患の治療と関連する合併症を前記合併症について低減する方法であって、請求項１から請求項１６のいずれか１項に記載の組成物を、必要とする対象に投与する工程
を含む方法。
【請求項39】
前記合併症が心毒性又は肝毒性を含む請求項３８に記載の方法。
【請求項40】
前記合併症が補正ＱＴ時間（ＱＴｃ）の延長を含む請求項３８に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、抗ウイルス剤の送達のための薬物送達系に関する。本発明は、この薬物送達系の調製方法に関する。本発明は、全身性副作用が低減された、肺への送達系に適合した持続放出性医薬組成物にも関する。
【背景技術】
【0002】
感染性疾患は、接触感染、飛沫感染、及び血液媒介感染等の異なる感染経路によって伝染する可能性があり、罹患した物理的環境における薬物のバイオアベイラビリティは、薬物の全身投与では低い可能性がある。標的組織の標的細胞上への薬物送達系の浸透は、肺の感染性疾患等の感染性疾患を吸入により効果的に治療するための重要な障害である。薬物送達系が標的上皮細胞に付着する前のリポソーム内の薬物物質の保持は、リポソームの脂質膜を横切る遊離の、電荷を帯びていない薬物物質の拡散速度に基づいて、リポソーム薬ごとに変化する可能性があるが、これは、リポソームの外側の微小環境の存在下での脂質バリアの物理化学的特性、並びにリポソームの内部の水性環境に大きく依存する。
【0003】
感染又は他の不明の理由によって引き起こされる呼吸器疾患は、とりわけ、ウイルス誘導性細胞溶解又は免疫病理によって引き起こされる後続の効率的なウイルス複製及び細胞損傷を特徴とするものの中で、早期死をもたらす極めて重篤な衰弱性の肺疾患である。感染細胞株及び死後肺組織は、アポトーシス、壊死、又は時には合胞体形成による細胞変性変化を示した。
【0004】
リポソームは、米国特許出願公開第２０１１０１０４２５９Ａ１号明細書に記載されるように、喘息の治療において吸入の際の薬物の不快な味をマスキングするための薬物担体として利用されている。薬物物質のリポソーム封入は、薬物物質の薬物動態プロファイルを変更し、局所物理的環境において遅い薬物放出を提供し、薬物投与の頻度を少なくして最適な投与用量を可能にし、かつ／又は副作用及び毒性を低減する可能性がある。しかしながら、吸入経路を介した場合に、リポソーム全体によって送達されるキニーネ化合物又は他の抗ウイルス剤が、ウイルスの細胞内標的部位への侵入のためのドケット部位として好適な受容体を発現する標的細胞株上への沈着等の、必要な機能を効果的に発揮し、インビボで所望の薬物動態プロファイルを行うかどうかは知られていない。
【0005】
抗ウイルス剤を再構築するためにリポソーム技術を利用することが、重症急性呼吸器症候群を予防するための予防用量又は副作用を低減して呼吸器疾患又は感染性疾患を治療するための治療用量で吸入用のリポソーム製剤をもたらしうることは容易には明らかではない。現在、予防、軽症例の治療、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺傷害（ＡＬＩ）又はＳＡＲＳ－ＣｏＶ２としても知られるコロナウイルスＣＯＶＩＤ－１９等のウイルスの感染によって引き起こされる重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）の治療等の化学的予防のための薬物製品としての吸入のための実用的なリポソーム性薬物製剤は存在していない。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】米国特許出願公開第２０１１０１０４２５９Ａ１号明細書
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0007】
キニーネ化合物及びヌクレオシド化合物等の抗ウイルス剤についての投与頻度及び／又は投与量を減少させること、並びに肺送達のための所望の予防的又は治療的な濃度域（ウィンドウ）を標的とすることによってバランスを達成するための所定の封入効率を有する吸入可能な製剤に対する満たされていない必要性が依然として存在する。加えて、呼吸器疾患に適した製剤は、吸入可能であること、吸入投与後に充分な封入効率を示すこと、肺表面活性物質等の局所物質による破壊に対して改善された安定性又は適切な耐性を有すること、さらには、肺環境において所望の有効性に達する可能性を確実にする所望の用量強度を有すること、等の特性を有するべきである。本発明は、この必要性及び他の必要性に対処する。
【課題を解決するための手段】
【0008】
本発明は、特に吸入による呼吸器疾患又は感染性疾患の治療のためのリポソーム性薬物製剤であって、少なくとも１種の脂質、任意選択でリン脂質（複数種可）及びステロール、並びに／又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾リン脂質と、リポソームの水性内部に封入された抗ウイルス剤とを含むリポソーム性薬物製剤を提供する。
【0009】
呼吸器疾患又は感染性疾患の既存の治療パラダイムを改善し、ゆっくりとした持続的な薬物放出の利点を利用するために、本発明者らは、呼吸器疾患の予防的処置又は増強された治療のためにエアロゾル化及び吸入されることができる水性懸濁液中にリポソーム性抗ウイルス剤及び所定量の遊離抗ウイルス剤を含む抗ウイルス剤の組成物を開発した。特に、ＳＡＲＳの予防又は治療のための吸入可能な製剤が必要とされている。
【0010】
本開示は、以下の利点を有する、呼吸器疾患又は感染性疾患、特にＳＡＲＳの予防又は治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物を提供する：１）吸入された遊離薬物物質と比較してより長い治療効果を達成すること、２）薬物を疾患部位若しくはウイルス感染部位に直接送達すること、３）作用のより迅速な開始、４）有害な薬物反応及び全身作用を低減すること、５）経口投与において観察される初回通過代謝を迂回し、従って、薬物物質のバイオアベイラビリティを増加させる（加えて、場合によっては、心毒性、網膜症の眼症状、悪心、嘔吐、下痢及び腹部不快感を含む胃腸（ＧＩ）効果、並びに肝毒性を低減させる）こと、６）リポソーム性薬物からの持続放出を介して標的組織における薬物物質の滞留時間を増加させること、７）薬物投与の頻度を減少させること、８）非侵襲的吸入送達、並びに／又は９）患者の転帰及びコンプライアンスを改善すること。
【0011】
特定の実施形態では、本開示に係る抗ウイルス剤は、好ましい放出プロファイル、及び毒性、特に心臓毒性の低減を伴う組成物を達成するために、リポソーム中に所定の量で封入されて、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物が形成される。
【0012】
吸入可能でありリポソーム性抗ウイルス剤を含む、呼吸器疾患の治療又は予防に使用するための抗ウイルス剤の組成物であって、このリポソーム性抗ウイルス剤は、
少なくとも１種の脂質を含むリポソームと、
このリポソームに封入された抗ウイルス剤と
を含む抗ウイルス剤の組成物が提供される。
少なくとも１種の脂質を含むリポソームと、
このリポソームに封入された抗ウイルス剤と
を含む抗ウイルス剤の組成物が提供される。
【0013】
いくつかの実施形態では、上記リポソームは、１種以上のリン脂質及びステロールから構成される脂質二重層を含み、このステロールはコレステロールであり、リン脂質（複数種可）：コレステロールは、１：１～２：１、任意選択で３：２のモル比である。
【0014】
いくつかの実施形態では、上記１種以上のリン脂質は、ホスホコリン（ＰＣ）を含み、これは、水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、又はこれらの混合物であってもよいが、これらに限定されない。いくつかの他の実施形態では、１種以上のリン脂質は、１：１又は３：２のモル比でＤＳＰＣ及び１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＰＰＥ）を含む。
【0015】
いくつかの実施形態では、当該リポソーム性抗ウイルス剤は、４－アミノキノリン化合物を含む。
【0016】
いくつかの実施形態では、上記４－アミノキノリン化合物は、クロロキン及びヒドロキシクロロキン、並びにアモジアキンからなる群から選択される。
【0017】
いくつかの実施形態では、上記抗ウイルス剤は、構造式Ｉのヌクレオシド化合物を含み、
各Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５は独立に、Ｈ、ＯＲａ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ３、ＣＮ、ＮＯ２、Ｓ（Ｏ）ｎＲａ、ハロゲン又はメチルであり、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、この複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環であり、各上記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい。
【化1】
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、この複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２ＯＲｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環であり、各上記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい。
【0018】
いくつかの実施形態では、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、抗生物質、サプリメント、抗レトロウイルス剤又はこれらの組み合わせをさらに含む。抗生物質の例は、ペニシリン類（アンピシリン・スルバクタム合剤、ピペラシリン・タゾバクタム合剤）、マクロライド類、セファロスポリン類、アミノグリコシド類及びグリコペプチド類である。いくつかの実施形態では、抗生物質は、キュリマイシン（ｃｕｒｒｉｍｙｃｉｎ）及びアジスロマイシンからなる群から選択される。
【0019】
別の態様では、本開示は、感染性疾患若しくは呼吸器疾患の予防若しくは治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物、又はこの抗ウイルス剤の組成物を含有する粒子のエアロゾル化組成物であって、少なくとも０．０１モル（ｍｏｌ）／モル、及び任意選択で０．０１モル／モル～２．０モル／モル、０．０５モル／モル～２．０モル／モル、０．０５モル／モル～１．５モル／モル、０．０５モル／モル～１．０モル／モル、０．０５モル／モル～０．５モル／モル、０．０５モル／モル～０．３モル／モル、０．０５モル／モル～０．２モル／モル、０．０５モル／モル～０．１５モル／モル、０．０１モル／モル～１モル／モル、０．０５モル／モル～０．１モル／モル、０．０７モル／モル～０．０９モル／モル、又は約０．０８５モル／モルの薬物対脂質比、並びに０．１ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬの範囲の抗ウイルス剤の濃度を有する組成物も提供する。
【0020】
別の態様では、本開示は、本開示に係る呼吸器疾患の予防又は治療に使用するためのリポソーム性キニーネ化合物を含む粒子のエアロゾル化組成物であって、少なくとも０．０１モル／モル、任意選択で少なくとも０．０５モル／モル、任意選択で０．０１モル／モル～２．０モル／モル、０．０５モル／モル～２．０モル／モル、０．０５モル／モル～１．５モル／モル、０．０５モル／モル～１．０モル／モル、０．０５モル／モル～０．５モル／モル、０．０５モル／モル～０．３モル／モル、０．０５モル／モル～０．２モル／モル、０．０５モル／モル～０．１５モル／モル、任意選択で約０．５モル／モルの薬物対脂質比、及び当該組成物に基づいて１ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬの範囲のキニーネ化合物の濃度を有する粒子のエアロゾル化組成物も提供する。
【0021】
別の態様では、本開示は、本開示に係る感染性疾患の予防又は治療に使用するためのリポソーム性ヌクレオシド化合物を含む粒子のエアロゾル化組成物であって、少なくとも０．０１モル／モル、任意選択で少なくとも０．０５モル／モル、任意選択で０．０１モル／モル～１モル／モル、０．０３モル／モル～０．５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１モル／モル、任意選択で約０．０５モル／モル、０．０５モル／モル～０．５モル／モル、０．０５モル／モル～０．１５モル／モル、０．０５モル／モル～０．１モル／モル、０．０７モル／モル～０．１モル／モル、任意選択で約０．０８５モル／モルの薬物対脂質比、及び当該組成物に基づいて０．１ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬのヌクレオシド化合物の濃度を有する粒子のエアロゾル化組成物も提供する。
【0022】
別の態様では、本開示は、本開示に係る使用のための抗ウイルス剤の組成物を含む噴霧スプレー（吸入投与用スプレー）も提供する。
【0023】
別の態様では、本開示は、呼吸器疾患又は感染性疾患の予防又は治療に使用するための抗ウイルス剤の組成物を含有する粒子のエアロゾル化組成物であって、本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤を含む粒子のエアロゾル化組成物も提供する。
【0024】
別の態様では、本開示は、呼吸器疾患又は感染性疾患を治療又は予防する方法であって、有効量の、本開示に係る呼吸器疾患の治療又は予防に使用するための抗ウイルス剤の組成物を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法も提供する。
【0025】
別の態様では、本開示は、抗ウイルス剤の組成物を、それを必要とする対象に投与するためのシステムも提供する。当該システムは、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物と、肺送達デバイスとを含む。この肺送達デバイスは、抗ウイルス剤の組成物をエアロゾル化することができ、エアロゾル化後に、リポソーム性抗ウイルス剤を含有する形成された粒子は、即時抗ウイルス活性を提供するのに有効な量の遊離抗ウイルス剤と、持続抗ウイルス活性を提供するのに有効な量の上記リポソーム性抗ウイルス剤とを含む。
【0026】
別の態様では、本開示は、ヒト対象における呼吸器疾患又は感染性疾患の処置に関連する合併症を、その合併症について軽減する方法であって、本開示に係る組成物を、それを必要とする対象に投与する工程を含む方法も提供する。本開示によれば、合併症としては、心毒性又は肝毒性が挙げられるが、これらに限定されない。本開示によれば、合併症としては、補正ＱＴ時間（ＱＴｃ）の延長を含むが、これに限定されない。
【0027】
本開示の他の目的物、利点及び新規な特徴は、添付の図面と併せて解釈すると、以下の詳細な説明からより明らかになるであろう。
【図面の簡単な説明】
【0028】
【発明を実施するための形態】
【0029】
上記及び本開示を通して用いられる場合、以下の用語は、特段の記載がない限り、以下の意味を有すると理解されるものとする。
【0030】
本明細書で使用する場合、単数形「ａ」、「ａｎ」及び「ｔｈｅ」は、文脈と明らかに矛盾しないかぎり、複数形の指示対象を含む。
【0031】
本明細書におけるすべての数値は、「約」によって修飾されると理解されてもよく、この「約」は、量、時間的継続時間等の測定可能な値に言及する場合、指定の値から±１０％、好ましくは±５％、より好ましくは±１％、さらにより好ましくは±０．１％の変動を包含することを意味する。これは、特段の記載がないかぎり、そのような変動は、所望の量のリポソーム性薬物を得るために適切であるからである。
【0032】
本明細書で使用される用語「治療すること」、「処置すること」、「治療される」、「処置される」、「治療」又は「処置」は、防止的（例えば、予防的）、緩和的、及び治癒的な使用又は結果を含む。用語「対象」は、呼吸器疾患若しくは他の疾患を有するか、又はウイルス感染が疑われる脊椎動物を含む。好ましくは、この対象は、哺乳動物、好ましくはヒトを含む温血動物である。
【0033】
本明細書で使用する場合、用語「薬物」は、本開示に係る所望の治療効果に対する活性に関連するキニーネ化合物又はヌクレオシド化合物等の抗ウイルス剤を指す。本明細書で使用する場合、用語「薬物対脂質比（Ｄ／Ｌ）」は、本開示に係る組成物中の少なくとも１種の脂質に対する抗ウイルス剤の比を指す。本開示に係るリポソーム性薬物の組成物の遊離型薬物又はリポソーム性薬物中の薬物含有量は、紫外可視吸光度測定又は高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）法によって決定されることが可能であるが、これらに限定されない。リポソーム及びリポソーム性薬物のリン脂質含有量又は濃度は、リンアッセイ（Ｇ．Ｒｏｕｓｅｒら、Ｌｉｐｉｄｓ １９７０、５、４９４－４９６から適合させる）又はＨＰＬＣ法を使用して、リポソーム及びリポソーム性薬物試料のリン含量をアッセイすることによって決定されることが可能であるが、これに限定されない。
【0034】
本明細書で使用する場合、薬物動態データはラットにおいて得られたが、本開示に係る吸入組成物と相関する薬物動態プロファイルは、吸入組成物を開発するために、ネコ、イヌ、ウマ、マウス、ブタ、非ヒト霊長類及びヒトを含むがこれらに限定されない他の哺乳動物において得ることができる。
【0035】
感染性疾患及び呼吸器疾患
本開示において、感染性疾患及び病原菌感染は、ウイルス、寄生生物及び細菌等の生物によって引き起こされる障害を指す。１つの態様では、感染性疾患は、糞口感染、飛沫接触、性行為感染、経口感染、直接接触、媒介物感染、垂直感染（母子感染）、医原性感染、又は宿主媒介性感染を介して感染したものである。別の態様では、感染性疾患は、尿路感染症、皮膚感染症、呼吸器感染症、歯原性感染症、膣感染症及び羊膜内感染症を含んでもよいが、これらに限定されない。
本開示において、感染性疾患及び病原菌感染は、ウイルス、寄生生物及び細菌等の生物によって引き起こされる障害を指す。１つの態様では、感染性疾患は、糞口感染、飛沫接触、性行為感染、経口感染、直接接触、媒介物感染、垂直感染（母子感染）、医原性感染、又は宿主媒介性感染を介して感染したものである。別の態様では、感染性疾患は、尿路感染症、皮膚感染症、呼吸器感染症、歯原性感染症、膣感染症及び羊膜内感染症を含んでもよいが、これらに限定されない。
【0036】
いくつかの実施形態では、感染性疾患としては、急性弛緩性骨髄炎（ＡＦＭ）、アナプラズマ症、炭疽病、バベシア症、ボツリヌス中毒、ブルセラ症、カンピロバクテリウム症、カルバペネム耐性感染症（ＣＲＥ／ＣＲＰＡ）、軟性下疳、チクングニアウイルス感染症（チクングニア）、クラミジア、シグアテラ（有害藻類ブルーム（ＨＡＢＳ））、クロストリジウム・ディフィシル感染症、クロストリジウム・パーフリンジェンス（ウェルシュ菌）（イプシロン毒素）、コクシジオイデス症（コクシジオイドミセス）真菌感染症（渓谷熱、バレー熱）、ｃｏｖｉｄ－１９（新型コロナウイルス感染症）、クロイツフェルト・ヤコブ病、伝染性海綿状脳症（ＣＪＤ）、クリプトスポリジウム症（クリプト）、シクロスポラ症、デング熱、１、２、３、４（デング熱）、ジフテリア、大腸菌感染症、志賀毒素産生（ＳＴＥＣ）、東部ウマ脳炎（ＥＥＥ）、エボラ出血熱（エボラ）、エーリキア症、脳炎、アルボウイルス性又は後感染性、エンテロウイルス感染症、非ポリオ（非ポリオエンテロウイルス）、エンテロウイルス感染Ｄ６８（ＥＶ－Ｄ６８）、ジアルジア症（ジアルジア）、鼻疽、淋菌感染症（淋病）、鼠径肉芽腫、インフルエンザ菌感染症、ｂ型（ＨＩＢ又はｈ－ｆｌｕ）、ハンタウイルス肺症候群（ＨＰＳ）、溶血性尿毒症症候群（ＨＵＳ）、Ａ型肝炎（Ｈｅｐ Ａ）、Ｂ型肝炎（Ｈｅｐ Ｂ）、Ｃ型肝炎（Ｈｅｐ Ｃ）、Ｄ型肝炎（Ｈｅｐ Ｄ）、Ｅ型肝炎（Ｈｅｐ Ｅ）、ヘルペス、帯状疱疹（Ｚｏｓｔｅｒ）、帯状疱疹ＶＺＶ（帯状疱疹（ｓｈｉｎｇｌｅｓ））、ヒストプラスマ症感染（ヒストプラスマ症）、ヒト免疫不全ウイルス／エイズ（ＨＩＶ／ＡＩＤＳ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、インフルエンザ（ｆｌｕ）、鉛中毒レジオネラ症（レジオネラ病）、ライ病（ハンセン病）、レプトスピラ症、リステリア症（リステリア）、ライム病、鼠径リンパ肉芽腫症（ＬＧＶ）、マラリア、麻疹、類鼻疽、髄膜炎、ウイルス性（髄膜炎、ウイルス性）、髄膜炎菌性疾患、細菌性（髄膜炎、細菌性）、中東呼吸器症候群コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）、小児多系統炎症症候群（ＭＩＳ－Ｃ）、流行性耳下腺炎、ノロウイルス、麻痺性甲殻類中毒（麻痺性貝中毒）（麻痺性甲殻類中毒、シガテラ）、シラミ寄生症（シラミ、頭部及び身体のシラミ）、骨盤内炎症性疾患（ＰＩＤ）、百日咳（百日ぜき（ｗｈｏｏｐｉｎｇ ｃｏｕｇｈ））、ペスト（腺ペスト、敗血症性ペスト、肺ペスト）、肺炎球菌性疾患（肺炎）、脊髄灰白質炎（ポリオ）、ポワッサン、オウム病（オウム熱）、シラミ寄生症（毛ジラミ；鼠径部シラミ寄生）、膿疱性発疹疾患（天然痘、サル痘、牛痘）、Ｑ熱、狂犬病、リシン中毒、リケッチア症（ロッキー山紅斑熱）、先天性を含む風疹（風疹（ｇｅｒｍａｎ ｍｅａｓｌｅｓ））、サルモネラ症胃腸炎（サルモネラ）、ヒゼンダニ寄生（ヒゼンダニ）、スコンブロイド（スコンブロイド食中毒）、敗血症性ショック（敗血症）、重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）、細菌性赤痢胃腸炎（赤痢菌）、天然痘、ブドウ球菌感染、メチシリン耐性（ＭＲＳＡ）、ブドウ球菌性食中毒、エンテロトキシンＢ中毒（ブドウ球菌食中毒）、ブドウ球菌感染症、バンコマイシン中等度耐性（ＶＩＳＡ）、ブドウ球菌感染症、バンコマイシン耐性（ＶＲＳＡ）、連鎖球菌性疾患、ａ群（侵襲性）（Ａ群連鎖球菌（侵襲性））、連鎖球菌性疾患、ｂ群（Ｂ群連鎖球菌）、連鎖球菌毒素ショック症候群、ｓｔｓｓ、毒素ショック（ＳＴＳＳ、ＴＳＳ）、梅毒、第１期、第２期、早期潜伏性、後期潜伏性、先天性、破傷風感染症、破傷風（咬痙）、トリコモナス症（トリコモナス感染症）、旋毛虫感染症（旋毛虫症）、結核（ＴＢ）、結核（潜伏）（ＬＴＢＩ）、野兎病（ウサギ熱）、腸チフス（Ｄ群）、チフス、膣症、細菌（酵母菌感染症）、ベイピング関連肺障害（電子タバコ関連肺障害）、水痘（水疱瘡）、コレラ菌（ビブリオ・コレラエ）（コレラ）、ビブリオ症（ビブリオ）、ウイルス性出血熱（エボラ、ＬＡＳＳＡ、マールブルグ（Ｍａｒｂｕｒｇ））、西ナイルウイルス感染症、黄熱病、エルセニア（Ｙｅｒｓｅｎｉａ）（エルシニア（Ｙｅｒｓｉｎｉａ））、及びジカウイルス感染（ジカ（Ｚｉｋａ））が挙げられるが、これらに限定されない。
【0037】
本開示に係る呼吸器疾患としては、流体が肺に漏出し、呼吸を困難又は不可能にすることを含む主な合併症を伴う、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺傷害（ＡＬＩ）又は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）が挙げられるが、これらに限定されない。症状としては、典型的には、発熱、咳、湿性咳嗽、乾性咳嗽、呼吸困難及び疲労又は筋肉痛、胸部の絞扼感、及び息切れの段階的発症が挙げられる。合併症としては、肺高血圧症、心不全、肺炎、又は肺塞栓症が挙げられる。
【0038】
いくつかの実施形態では、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、コロナウイルス又はその誘導体によって引き起こされる、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺傷害（ＡＬＩ）又は重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）の防止としての予防、軽度症例の治療、治療における使用に適している。
【0039】
リポソーム及びリポソーム性抗ウイルス剤
本明細書で使用する場合の用語「リポソーム」又は「リポソーム性」は、小胞の集団あって、各小胞が、１つ以上の二重層膜（二重膜）の膜によって外側媒体から隔離された水性内部空間を有することを特徴とする小胞の集団に向けられる。リポソームの二重層膜は、典型的には、１つ以上の脂質、すなわち、空間的に分離された疎水性ドメイン及び親水性ドメインを含む、合成又は天然起源の両親媒性分子によって形成される。
本明細書で使用する場合の用語「リポソーム」又は「リポソーム性」は、小胞の集団あって、各小胞が、１つ以上の二重層膜（二重膜）の膜によって外側媒体から隔離された水性内部空間を有することを特徴とする小胞の集団に向けられる。リポソームの二重層膜は、典型的には、１つ以上の脂質、すなわち、空間的に分離された疎水性ドメイン及び親水性ドメインを含む、合成又は天然起源の両親媒性分子によって形成される。
【0040】
リポソームの内部水性空間は、トリグリセリド等の中性脂質、非水性相（油相）、水－油エマルション、第２のリポソーム又は非水性相を含有する他の混合物を実質的に含まない。リポソームの非限定的な例としては、５０ｎｍ～１００００ｎｍ、５０ｎｍ～５００ｎｍ、５０ｎｍ～４５０ｎｍ、５０ｎｍ～４００ｎｍ、５０ｎｍ～３５０ｎｍ、５０ｎｍ～３００ｎｍ、５０ｎｍ～２５０ｎｍ、５０ｎｍ～２００ｎｍ、１００ｎｍ～５００ｎｍ、１００ｎｍ～４５０ｎｍ、１００ｎｍ～４００ｎｍ、１００ｎｍ～３５０ｎｍ、１００ｎｍ～３００ｎｍ、１００ｎｍ～２５０ｎｍ、又は１００ｎｍ～２００ｎｍの範囲の平均直径を有する小型単層小胞体（ｓｍａｌｌ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ、ＳＵＶ）及び大型単層小胞体（ｌａｒｇｅ ｕｎｉｌａｍｅｌｌａｒ ｖｅｓｉｃｌｅ、ＬＵＶ）、並びに多層小胞（ＭＬＶ）が挙げられ、これらは、滅菌フィルタを通過することができる。例えば、ＭＬＶは、捕捉剤を有する選択された脂質組成物の水和脂質薄膜、噴霧乾燥粉末又は凍結乾燥ケーキによって直接形成されてもよく、ＳＵＶ及びＬＵＶは、超音波処理、ホモジナイゼーション、マイクロフルイダイゼーション（微少溶液操作）又は押出によってＭＬＶからサイズ調整することができる。
【0041】
一般に、リポソームは、典型的には、二脂肪族（ｄｉａｌｉｐｈａｔｉｃ）鎖脂質、例えばリン脂質、ジグリセリド、二脂肪族糖脂質、単一脂質、例えばスフィンゴミエリン及びスフィンゴ糖脂質、ステロール、例えばコレステロール、並びにこれらの誘導体並びにこれらの組み合わせからなる群から選択される少なくとも１種の脂質を含む脂質混合物を含む。
【0042】
本開示に係るリン脂質の例としては、１，２－ジラウロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）、１－パルミトイル－２－ステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＳＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスファチジルコリン（ＰＯＰＣ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）、水素化大豆ホスファチジルコリン（ＨＳＰＣ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＭＰＧ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＰＰＧ）、１－パルミトイル－２－ステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール）（ナトリウム塩）（ＰＳＰＧ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール）（ナトリウム塩）（ＤＳＰＧ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール）（ＤＯＰＧ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン（ナトリウム塩）（ＤＭＰＳ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン（ナトリウム塩）（ＤＰＰＳ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン（ナトリウム塩）（ＤＳＰＳ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン（ＤＯＰＳ）、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＭＰＡ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＰＰＡ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＳＰＡ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスフェート（ナトリウム塩）（ＤＯＰＡ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＰＰＥ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＰＯＰＥ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン（ＤＯＰＥ）、１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ミオイノシトール）（アンモニウム塩）（ＤＰＰＩ）、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホイノシトール（アンモニウム塩）（ＤＳＰＩ）、１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ミオイノシトール）（アンモニウム塩）（ＤＯＰＩ）、カルジオリピン、Ｌ－α－ホスファチジルコリン（ＥＰＣ）、及びＬ－α－ホスファチジルエタノールアミン（ＥＰＥ）が挙げられるが、これらに限定されない。
【0043】
本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤は、任意選択で、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）を小胞の膜に組み込むことによって、有意義な量のＰＥＧ部分を小胞の表面に組み込んで、安全で、有効で、投与頻度が低い、より長く、持続的な薬物放出を達成する。
【0044】
本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤は、任意選択で、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）又は脂肪酸を小胞の膜に組み込むことによって、有意義な量の負電荷部分を小胞の表面に組み込んで、貯蔵中の溶液中でのリポソーム凝集又は凝結（綿状沈殿）プロセスを防止する。
【0045】
上記ポリエチレングリコール修飾脂質は、脂質とコンジュゲートしたポリエチレングリコール部分を含む。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ部分は、約５，００～約２０，０００ダルトンの分子量を有する。特定の実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質はリン脂質と混合されて、１つ以上の二重層膜を有するリポソームが形成される。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質の量は、総リン脂質及びステロールに基づいて、０．０００１モル％～４０モル％、任意選択で０．００１モル％～３０モル％、任意選択で０．０１モル％～２０モル％、任意選択で０．０００１モル％～１０モル％、任意選択で０．００１モル％～５モル％、特に、６モル％以下、任意選択で５モル％以下、３モル％以下又は２モル％以下の範囲である。いくつかの実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質は、１，０００ｇ／モル～５，０００ｇ／モルの範囲の平均分子量を有するＰＥＧ部分を有する。特定の実施形態では、ＰＥＧ修飾脂質は、ポリエチレングリコール基に連結されたホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ－ＰＥＧ）である。さらなる実施形態では、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミンは１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン－Ｎ－［メトキシ（ポリエチレングリコール）］（ＤＳＰＥ－ＰＥＧ）である。
【0046】
特定の実施形態では、ＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）は、リポソームの全脂質含有量の０．０００１モル％～４０モル％、任意選択で０．０１モル％～２０モル％の範囲の量のＤＳＰＥ－ＰＥＧであり、２，０００ｇ／モルの平均分子量を有するＰＥＧ部分を有する。
【0047】
用語「リポソーム性抗ウイルス剤」及び「リポソーム性薬物」は、本開示において互換的に使用される。本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤は、膜貫通ｐＨ勾配駆動リモートローディング（ｐＨ ｇｒａｄｉｅｎｔ－ｄｒｉｖｅｎ ｒｅｍｏｔｅ ｌｏａｄｉｎｇ）法によって抗ウイルス剤をリポソームの水性内部に封入することによって調製される、抗ウイルス剤が捕捉されたリポソームを含む。
【0048】
いくつかの実施形態では、リポソームは、ヒドロキシクロロキン又はＧＳ－４４１５２４等の薬物物質と一緒に形成されて、リポソームの水性内部にその薬物物質を封入するか、又はリポソーム性薬物を形成するための、リモートローディングとしても知られる能動ローディング法としての薬物ローディングプロセスにおいて後で使用するための膜貫通勾配を有する空のリポソームとして単独で形成される。
【0049】
いくつかの実施形態では、膜貫通ｐＨ勾配は、抗ウイルス剤をリポソームにリモートローディングするための捕捉剤を使用することによって作り出され、この捕捉剤はアンモニウム化合物及びアニオン性対イオンから構成される。
【0050】
用語「アンモニウム化合物」は、ＮＲ４
＋によって提示されるカチオン性イオンである非置換又は置換のアンモニウムを含み、式中、各Ｒは独立に、Ｈ又は有機残基であり、この有機残基は独立に、アルキル、アルキリデン、複素環式アルキル、シクロアルキル、アリール、アルケニル、シクロアルケニル、又はこれらのヒドロキシル置換誘導体であり、任意選択で、その炭化水素鎖内にＳ、Ｏ、又はＮ原子を含み、エーテル、エステル、チオエーテル、アミン、又はアミド結合を形成する。１つの実施形態では、アンモニウム化合物はアンモニウムである。
【0051】
用語「アニオン性対イオン」は、アニオン性イオン、又は１つのアニオン性官能基に共有結合している実体を指す。アニオン性イオン又はアニオン性官能基は、生理的環境下で負の電荷を有する。
【0052】
アニオン性イオン又はアニオン性官能基は、硫酸アニオン、クエン酸アニオン、スルホン酸アニオン、リン酸アニオン、ピロリン酸アニオン、酒石酸アニオン、コハク酸アニオン、マレイン酸アニオン、ホウ酸アニオン、カルボン酸アニオン、炭酸水素アニオン、グルクロン酸アニオン、塩化物アニオン、水酸化物アニオン、硝酸アニオン、シアン酸アニオン又は臭化物アニオンのうちの１つ以上から選択することができる。
【0053】
１つの実施形態では、アニオン性イオン及びアニオン性官能基は、クエン酸アニオン、硫酸アニオン、スルホン酸アニオン、リン酸アニオン、ピロリン酸アニオン及びカルボン酸アニオンのうちの１つ以上から選択される。
【0054】
さらに別の実施形態では、アニオン性官能基に連結された実体は、天然又は合成の有機化合物又は無機化合物であることができる。この実体の例としては、アルキル基又はアリール基、例えばベンゼン、ヌクレオチド及び糖類から選択される非ポリマー物質が挙げられるが、これらに限定されない。アルキルは、指示された数の炭素原子を有する飽和炭化水素ラジカルを指す。例えば、アルキルは、炭素数１～４のアルキル（Ｃ１～４アルキル）、炭素数１～６のアルキル（Ｃ１～６アルキル）、炭素数１～８のアルキル（Ｃ１～８アルキル）、炭素数１～１０のアルキル（Ｃ１～１０アルキル）、炭素数１～１２のアルキル（Ｃ１～１２アルキル）、炭素数１～１４のアルキル（Ｃ１～１４アルキル）、炭素数１～１６のアルキル（Ｃ１～１６アルキル）、炭素数１～１８のアルキル（Ｃ１～１８アルキル）及び炭素数１～２０のアルキル（Ｃ１～２０アルキル）からなる群から選択される。
【0055】
いくつかの実施形態では、アニオン性対イオンは、硫酸アニオン、リン酸アニオン、クエン酸アニオン、グルコン酸アニオン、オクタ硫酸スクロースアニオン、デキストラン硫酸アニオン及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【0056】
いくつかの実施形態では、上記捕捉剤は、硫酸アンモニウム、リン酸アンモニウム、クエン酸アンモニウム、オクタ硫酸スクロースアンモニウム塩、デキストラン硫酸アンモニウム、硫酸ジメチルアンモニウム、リン酸ジメチルアンモニウム、クエン酸ジメチルアンモニウム、硫酸ジエチルアンモニウム、リン酸ジエチルアンモニウム、クエン酸ジエチルアンモニウム、オクタ硫酸スクロースジエチルアンモニウム塩、デキストラン硫酸ジエチルアンモニウム、硫酸トリメチルアンモニウム、リン酸トリメチルアンモニウム、クエン酸トリメチルアンモニウム、硫酸トリエチルアンモニウム、リン酸トリエチルアンモニウム、クエン酸トリエチルアンモニウム、オクタ硫酸スクローストリエチルアンモニウム塩、デキストラン硫酸トリエチルアンモニウム、グルコン酸銅、グルクロン酸銅及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【0057】
いくつかの実施形態では、リポソーム性抗ウイルス剤は、５０ｎｍ～１，０００ｎｍの平均粒径を有する。リポソーム性抗ウイルス剤の非限定的な例は、５０ｎｍ～２０μｍ、５０ｎｍ～１０μｍ、５０ｎｍ～１０００ｎｍ、５０ｎｍ～５００ｎｍ、５０ｎｍ～４００ｎｍ、５０ｎｍ～３００ｎｍ、５０ｎｍ～２５０ｎｍ、５０ｎｍ～２００ｎｍ、１００ｎｍ～３００ｎｍ又は１５０ｎｍ～２５０ｎｍの範囲の平均直径を有する。
【0058】
いくつかの実施形態では、上記抗ウイルス剤としては、抗マラリア剤、抗レトロウイルス剤又はこれらの組み合わせが挙げられるが、これらに限定されない。特に、抗ウイルス剤は、キニーネ化合物、ヌクレオシド化合物及びこれらの組み合わせからなる群から選択される。
【0059】
用語「キニーネ化合物」は、キナ属の樹木の樹皮から抽出された抗マラリア活性を有するリード化合物であるキニーネに由来する物質を指す。キニーネ化合物、例えばヒドロキシクロロキンは、肺炎の増悪の阻害、画像所見の改善、ウイルス陰性化の促進、及び疾患経過の短縮において潜在能力を有することが示されている。しかしながら、キニーネ化合物の全身投与は、視朦（かすみ目）、悪心、嘔吐、腹部疝痛、頭痛及び下痢等の副作用を示す可能性がある。
【0060】
本開示に係るキニーネ化合物としては、キニーネ及び他の４－アミノキノリン、例えば、キニーネ、キニジン、シンコニン、シンコニジン、クロロキン（ＣＱ）、ヒドロキシクロロキン（ＨＣＱ）等が挙げられるが、これらに限定されない。例示的なキニーネ化合物であるＣＱ及びＨＣＱは、細胞内オルガネラの酸性化を防止し、ウイルスゲノムのリソソーム放出を阻害することができることが示唆されている。加えて、これらの薬物は、宿主細胞上のアンジオテンシン変換酵素－２（ＡＣＥ２）受容体のグリコシル化を妨害し、受容体とコロナウイルスの表面上のスパイクタンパク質との間の結合効率を低下させることができる。
【0061】
ＲＮＡウイルス感染の有望な治療法として使用されている、ＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ等の非構造ウイルスタンパク質の阻害剤としてのヌクレオシドが報告されている。ヌクレオシドは、細胞によって取り込まれ、インビボで三リン酸（トリホスフェート）に変換されて、ポリメラーゼヌクレオチド結合部位と競合し、ポリメラーゼ連鎖反応を終結させると予想される。三リン酸へのこの変換は、通常、細胞キナーゼによって媒介され、これは、潜在的なヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤にさらなる構造的要件を付与する。ヌクレオシドキナーゼによる一リン酸（モノホスフェート）の形成は、一般に、３つのリン酸化事象の律速段階とみなされる。米国特許第７，９６４，５８０号明細書は、ヌクレオシド一リン酸の細胞内濃度を親ヌクレオシド単独の投与と比較して劇的に増強する、細胞への取り込み及び輸送を最適化するための適切な分配係数を得るために中性親油性基でマスクされているホスホロアミデート部分を含有するプロヌクレオシドを開示する。論争の的となる観察予見は存在するが、リン酸エステル部分の酵素媒介加水分解は、おそらく標的ヌクレオシド一リン酸の代わりにヌクレオシド自体を、所望の部位へのその標的化の前に循環の直後に生成する。例えば、静脈内投与を介すると、公知のヌクレオシド化合物である（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－２－（４－アミノピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－７－イル）－３，４－ジヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－カルボニトリル（ＧＳ－４４１５２４としても知られる）は、その一リン酸形態よりも安定なレムデシビルの代謝産物である（Ｈｕｍｅｎｉｕｋ Ｒ、Ｍａｔｈｉａｓ Ａ、Ｃａｏ Ｈら、Ｓａｆｅｔｙ，Ｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙ，ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓ ｏｆ Ｒｅｍｄｅｓｉｖｉｒ，Ａｎ Ａｎｔｉｖｉｒａｌ ｆｏｒ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ＣＯＶＩＤ－１９，ｉｎ Ｈｅａｌｔｈｙ Ｓｕｂｊｅｃｔｓ． Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｓｃｉ． ２０２０；１３（５）：８９６－９０６． ｄｏｉ：１０．１１１１／ｃｔｓ．１２８４０）。重要な律速ヌクレオシドキナーゼに関して濃縮された標的細胞部位へのヌクレオシド化合物の効率的な送達は、広範囲のヌクレオシド化合物の異なるプロヌクレオシドの複雑な製造プロセスを回避するための普遍的なプラットフォーム手段（ソリューション）である可能性がある。
【0062】
いくつかの実施形態では、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、抗生物質、サプリメント、又はこれらの組み合わせをさらに含む。
【0063】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス剤は、米国特許第８，００８，２６４号明細書及び米国特許第９，４８１７０４号明細書に記載される１種以上の１’－置換カルバ－ヌクレオシド化合物又は２’－置換カルバ－ヌクレオシド化合物を含む。
【0064】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス剤は、１’－置換カルバ－ヌクレオシド化合物及びその薬学的に許容できる塩を含むがこれらに限定されないヌクレオシド化合物に向けられる。
【0065】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス剤は、ＲＮＡ依存性ＲＮＡウイルスポリメラーゼの阻害剤を含み、この阻害剤は、構造式（Ｉ）のヌクレオシド化合物を含み、
各Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４又はＲ５は独立に、Ｈ、ＯＲａ、Ｎ（Ｒａ）２、Ｎ３、ＣＮ、ＮＯ２、Ｓ（Ｏ）ｎＲａ、ハロゲン又はメチルであり、ｎは０、１又は２であり、
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、この複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２Ｏｒｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環環であり、各上記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい。
【化2】
Ｒ６はＣＮ又はＨであり、
各Ｒａは独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＳＲ１１、－Ｓ（Ｏ）Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）２Ｒ１１、－Ｓ（Ｏ）（ＯＲ１１）、－Ｓ（Ｏ）２（ＯＲ１１）、又は－ＳＯ２ＮＲ１１Ｒ１２であり、
Ｒ７はＨであり、
各Ｘ１又はＸ２は独立に、Ｃ－Ｒ１０又はＮであり、
Ｒ８は、ハロゲン、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、アリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、ＯＲ１１又はＳＲ１１であり、各アリール又はヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
各Ｒ９又はＲ１０は独立に、Ｈ、ハロゲン、Ｒ１１、ＯＲ１１、ＳＲ１１、ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ（Ｒ１１）（ＯＲ１１）、ＮＲ１１ＮＲ１１Ｒ１２、Ｎ３、ＮＯ、ＮＯ２、ＣＨＯ、ＣＮ、－ＣＨ（＝ＮＲ１１）、－ＣＨ＝ＮＨＮＲ１１、－ＣＨ＝Ｎ（ＯＲ１１）、－ＣＨ（ＯＲ１１）２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｓ）ＮＲ１１Ｒ１２、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１１であり、
各Ｒ１１若しくはＲ１２は独立に、Ｈ、（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、（Ｃ２～Ｃ８）アルケニル、（Ｃ２～Ｃ８）アルキニル、（Ｃ４～Ｃ８）カルボシクリルアルキル、置換されていてもよいアリール、置換されていてもよいヘテロアリール、－Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ１～Ｃ８）アルキル、－Ｓ（Ｏ）ｎ（Ｃ１～Ｃ８）アルキル若しくはアリール（Ｃ１～Ｃ８）アルキルであり、各アリール若しくはヘテロアリールは独立に、１つ以上のＺ基で置換されていてもよく、
又は、Ｒ１１若しくはＲ１２は、それらがともに結合している窒素とともに、３～７員の複素環を形成し、この複素環のいずれか１つの炭素原子は、任意選択で、－Ｏ－、－Ｓ－若しくは－ＮＲａ－で置き換えられてもよく、
各Ｚ基は独立に、ハロゲン、－Ｏ－、＝Ｏ、－ＯＲｂ、－ＳＲｂ、－Ｓ－、－ＮＲｂ ２、－Ｎ＋Ｒｂ ３、＝ＮＲｂ、－ＣＮ、－ＯＣＮ、－ＳＣＮ、－Ｎ＝Ｃ＝Ｏ、－ＮＣＳ、－ＮＯ、－ＮＯ２、＝Ｎ２、－Ｎ３、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｓ（＝Ｏ）２－、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）２Ｒｂ、－ＯＳ（＝Ｏ）２Ｏｒｂ、－Ｓ（＝Ｏ）２ＯＨ、－Ｓ（＝Ｏ）Ｒｂ、－ＯＰ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（ＯＲｂ）２、－Ｐ（＝Ｏ）（Ｏ－）２、－Ｐ（Ｏ）（ＯＲｂ）（Ｏ－）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒｂ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｘ、－Ｃ（Ｓ）Ｒｂ、－Ｃ（Ｏ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）Ｏ－、－Ｃ（Ｓ）ＯＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｓ）ＳＲｂ、－Ｃ（Ｏ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（Ｓ）ＮＲｂ ２、－Ｃ（＝ＮＲｂ）ＮＲｂ ２であり、各Ｒｂは独立に、Ｈ、アルキル、アリール、アリールアルキル又は複素環環であり、各上記（Ｃ１～Ｃ８）アルキルの非末端炭素原子のうちの１つ以上は、－Ｏ－、－Ｓ－又は－ＮＲａ－で置換されていてもよい。
【0066】
いくつかの実施形態では、抗ウイルス剤は、
又はこれらの薬学的に許容できる塩からなる群から選択される。
【化3】
【化4】
【0067】
１つの態様では、当該リポソーム性抗ウイルス剤は、１種以上のリン脂質、ステロール、及び任意選択のポリエチレングリコール（ＰＥＧ）修飾脂質、特にＰＥＧ修飾ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥＧ－ＰＥ）を含む脂質二重層と、この脂質二重層によって包含され、１種以上の抗ウイルス剤を含有する水性内部とを含む。
【0068】
１つの実施形態では、上記１種以上のリン脂質は中性リン脂質であり、ＰＥＧ修飾脂質はＤＳＰＥ－ＰＥＧである。ＤＳＰＥ－ＰＥＧの量は、総リン脂質及びステロールに基づいて、０．００１～５モル％、任意選択で０．０００１モル％～４０モル％、任意選択で６モル％未満の範囲にあり、任意選択で０．００１モル％～３０モル％の範囲にある。
【0069】
１つの実施形態では、当該リポソーム性抗ウイルス剤の組成物は、少なくとも０．０１モル／モル～０．１モル／モルである薬物対脂質比（少なくとも１種の脂質に対する抗ウイルス剤の比）を有し、かつ、ＤＰＰＣ及びコレステロールを含む脂質二重層と、この脂質二重層によって包含され、捕捉剤によって捕捉された抗ウイルス剤を含有する水性内部とを含み、この抗ウイルス剤は（２Ｒ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－２－（４－アミノピロロ［２，１－ｆ］［１，２，４］トリアジン－７－イル）－３，４－ジヒドロキシ－５－（ヒドロキシメチル）オキソラン－２－カルボニトリル（ＧＳ－４４１５２４）であり、捕捉剤は硫酸アンモニウムである。
【0070】
吸入可能な（吸入用）組成物及びそのエアロゾル化粒子
本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、上述のリポソーム性抗ウイルス剤を含有する粒子の吸入可能なエアロゾル化組成物の調製に適合される。この組成物は、噴霧スプレー若しくはエアロゾルとして吸入のために、又は髄腔内投与によって投与することができる。吸入投与が好ましい。全体的な結果は、遊離薬物又はその薬物の非経口形態と比較して、投与頻度が少なく、治療指数が高いことである。この組成物中のリポソーム性抗ウイルス剤は、肺内層又は肺表面活性物質と適合性でありながら薬物を保護するそれらの能力に起因して、特に有利である。
本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、上述のリポソーム性抗ウイルス剤を含有する粒子の吸入可能なエアロゾル化組成物の調製に適合される。この組成物は、噴霧スプレー若しくはエアロゾルとして吸入のために、又は髄腔内投与によって投与することができる。吸入投与が好ましい。全体的な結果は、遊離薬物又はその薬物の非経口形態と比較して、投与頻度が少なく、治療指数が高いことである。この組成物中のリポソーム性抗ウイルス剤は、肺内層又は肺表面活性物質と適合性でありながら薬物を保護するそれらの能力に起因して、特に有利である。
【0071】
１つの実施形態では、本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、少なくとも０．０１モル／モル、任意選択で少なくとも０．１モル／モル、好ましくは０．０５モル／モル～１モル／モル、任意選択で０．１モル／モル～０．７モル／モル、任意選択で０．１５モル／モル～０．６モル／モル、及び任意選択で０．１５モル／モル～０．２モル／モルの範囲の薬物対脂質比（Ｄ／Ｌ）を有する。薬物対脂質比は、少なくとも１種の脂質に対する抗ウイルス剤のモル比を指す。特定の実施形態では、少なくとも１種の脂質は、１：１又は３：２のモル比で中性リン脂質及びステロールを含む。任意選択で、この中性リン脂質はＤＰＰＣであり、ステロールはコレステロールである。
【0072】
１つの実施形態では、当該抗ウイルス剤の組成物は、１ｍＭ～２００ｍＭ、１ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～１００ｍＭ、１０ｍＭ～１８０ｍＭ、１５ｍＭ～１４０ｍＭ、２０～１６０ｍＭ、３０ｍＭ～１４０ｍＭ、及び４０ｍＭ～１２０ｍＭの範囲の濃度の少なくとも１種の脂質を有する。あるいは、当該抗ウイルス剤の組成物は、１ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～９０ｍＭ、１０ｍＭ～８０ｍＭ、１５ｍＭ～７０ｍＭ又は２０ｍＭ～６０ｍＭの範囲の濃度の１種以上のリン脂質を有する。
【0073】
１つの実施形態では、当該抗ウイルス剤の組成物は、０．１ｍｇ／ｍＬ～８０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ、１～３０ｍｇ／ｍＬ及び２ｍｇ／ｍＬ～１５ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～７０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～５０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～４０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～３０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～２０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～８ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ～５ｍｇ／ｍＬ、１．０ｍｇ／ｍＬ～６ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ～５．０ｍｇ／ｍＬ、１．５ｍｇ／ｍＬ～４．０ｍｇ／ｍＬの範囲、又は約２．０ｍｇ／ｍＬのキニーネ化合物の総濃度を有する。
【0074】
１つの実施形態では、当該抗ウイルス剤の組成物は、１ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～１００ｍＭ、５ｍＭ～９０ｍＭ、１０ｍＭ～８０ｍＭ、１５ｍＭ～７０ｍＭ又は２０ｍＭ～６０ｍＭの範囲の濃度の１種以上のリン脂質、及び０．０１モル／モル～１モル／モル、０．０３モル／モル～０．５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１５モル／モル、０．０３モル／モル～０．１モル／モル、約０．００５モル／モル、０．０５モル／モル～０．１モル／モル、０．０７モル／モル～０．０９モル／モルの範囲、又は０．０８５モル／モルの薬物対脂質（Ｄ／Ｌ）比を有し、抗ウイルス剤は、遊離５’－ＯＨ基を有する１’－置換カルバ－ヌクレオシド化合物、２’－置換カルバ－ヌクレオシド化合物である。
【0075】
いくつかの実施形態では、当該リポソーム性抗ウイルス剤の組成物は、遊離型抗ウイルス剤をさらに有し、本開示に係る組成物の遊離型抗ウイルス剤は、当該組成物の抗ウイルス剤の総量の６０％未満、５０％未満、４５％未満、４０％未満、３５％未満、３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、１０％未満、５％未満未満、又は１０％～４０％、１５％～３５％、又は１０％～３０％の範囲の量である。
【0076】
いくつかの実施形態では、本開示の組成物を含有する粒子のエアロゾル化組成物は、エアジェットネブライザ、超音波ネブライザ、振動メッシュネブライザ、凝縮エアロゾル発生器、電気流体力学的ネブライザ、又は当該技術分野で公知の他の肺送達デバイスからなる群から選択されるネブライザ（噴霧器、霧化器）を用いて上記組成物をエアロゾル化することによって生成される。
【0077】
いくつかの実施形態では、当該粒子のエアロゾル化組成物は、０．５μｍ～５μｍ、任意選択で１μｍ～３μｍの空気動力学的質量中央粒子径（ｍａｓｓ ｍｅｄｉａｎ ａｅｒｏｄｙｎａｍｉｃ ｄｉａｍｅｔｅｒ）を有する。
【0078】
エアロゾル化の後、本開示に係る組成物中のリポソーム性抗ウイルス剤のリポソームからの抗ウイルス剤の漏出は、抗ウイルス剤の一部が、リポソームによって捕捉されない遊離型になることをもたらす。エアロゾル化組成物中の生じた遊離型の抗ウイルス剤は、６０％未満、５０％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満、１０％未満又は５％未満であり、任意選択で、０．１％～５０％、０．５％～４０％、０．５％～３０％、０．５％～２０％、０．５％～１０％、０．５％～５％、１０％～５０％、１５％～４５％、２０％～４５％、２５％～３５％の範囲の制御された割合である。
【0079】
具体的な実施形態では、当該粒子のエアロゾル化組成物は、投与された薬物用量の約０．５％～２５％／時間の放出速度を行う必要がある対象への肺送達に供され、抗ウイルス剤の完全な放出は、最低約１２～２４時間後に生じる。
【0080】
本開示は、以下の特定の非限定的な実施例を参照してさらに説明される。
【実施例】
【0081】
以下の実施例は、本開示の特定の実施形態の調製及び特性を例示する。
【0082】
実施例１ リポソーム性抗ウイルス剤の安定性
本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤は、当該技術分野で公知の能動ローディング又は受動ローディングによって調製された、抗ウイルス剤が捕捉されたリポソームを含む。
本開示に係るリポソーム性抗ウイルス剤は、当該技術分野で公知の能動ローディング又は受動ローディングによって調製された、抗ウイルス剤が捕捉されたリポソームを含む。
【0083】
Ａ． 能動ローディングによるリポソーム性抗ウイルス剤の調製
Ｉ． 空リポソームの調製
リモートローディングのための空リポソームを調製するプロセスは、薄膜水和法又は溶媒注入によって行った。これらの方法は、以下の工程を含んでもよい。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらを丸底フラスコ中で１０ｍＬのクロロホルムに加える工程、
２． 脂質組成に応じて適切な温度のロータリーエバポレーターにフラスコを取り付け、このフラスコを撹拌して脂質混合物を溶解させた後、フラスコを撹拌しながら真空下に置いてクロロホルムを蒸発させて乾燥脂質薄膜を得る工程、
３． 蒸留水に捕捉剤を添加し、溶液をボルテックスして粉末を溶解させて捕捉剤溶液（例えば、硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．））を調製する工程、
４． 乾燥した脂質薄膜に上記捕捉剤溶液を添加し、脂質組成に応じて適切な温度で撹拌してリポソーム溶液を形成する工程、
５． このリポソーム溶液を液体窒素、及び脂質組成に応じて水浴により適切な温度を用いて凍結融解し、リポソーム試料を得る工程、
６． 得られたリポソーム試料を、０．２μｍのポリカーボネート膜、０．１μｍのポリカーボネート膜を通して脂質組成に応じて適切な温度で押出し、設計された粒子サイズを得る工程、
７． 押し出されたリポソーム試料を透析して遊離捕捉剤を除去し、続いて試料を透析バッグ（ＭＷＣＯ：２５ｋＤ）に添加し、バッグを密封し、１００×容量の９．４％（ｗ／ｖ）スクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液中で透析バッグを撹拌し、さらに、１時間、４時間後にスクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液を交換し、一晩撹拌する工程、並びに
８． 透析したリポソーム試料を０．４５μｍのＰＴＦＥ膜を通して濾過することによって滅菌し、空リポソームを得る工程。
Ｉ． 空リポソームの調製
リモートローディングのための空リポソームを調製するプロセスは、薄膜水和法又は溶媒注入によって行った。これらの方法は、以下の工程を含んでもよい。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらを丸底フラスコ中で１０ｍＬのクロロホルムに加える工程、
２． 脂質組成に応じて適切な温度のロータリーエバポレーターにフラスコを取り付け、このフラスコを撹拌して脂質混合物を溶解させた後、フラスコを撹拌しながら真空下に置いてクロロホルムを蒸発させて乾燥脂質薄膜を得る工程、
３． 蒸留水に捕捉剤を添加し、溶液をボルテックスして粉末を溶解させて捕捉剤溶液（例えば、硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．））を調製する工程、
４． 乾燥した脂質薄膜に上記捕捉剤溶液を添加し、脂質組成に応じて適切な温度で撹拌してリポソーム溶液を形成する工程、
５． このリポソーム溶液を液体窒素、及び脂質組成に応じて水浴により適切な温度を用いて凍結融解し、リポソーム試料を得る工程、
６． 得られたリポソーム試料を、０．２μｍのポリカーボネート膜、０．１μｍのポリカーボネート膜を通して脂質組成に応じて適切な温度で押出し、設計された粒子サイズを得る工程、
７． 押し出されたリポソーム試料を透析して遊離捕捉剤を除去し、続いて試料を透析バッグ（ＭＷＣＯ：２５ｋＤ）に添加し、バッグを密封し、１００×容量の９．４％（ｗ／ｖ）スクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液中で透析バッグを撹拌し、さらに、１時間、４時間後にスクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液を交換し、一晩撹拌する工程、並びに
８． 透析したリポソーム試料を０．４５μｍのＰＴＦＥ膜を通して濾過することによって滅菌し、空リポソームを得る工程。
【0084】
ＩＩ． リポソーム性抗ウイルス剤を得るための抗ウイルス剤のリポソームへの薬物ローディング
以下の方法は、リモートローディングによるリポソームへのヒドロキシクロロキン又はクロロキンの封入（カプセル化）のための典型的なプロトコルを表し、このプロトコルは以下の工程を含む。
１． ９．４％（ｗ／ｖ）スクロース又は適切な媒体中の４０ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度のヒドロキシクロロキン又はクロロキンの溶液を調製し、それを適切な温度で短時間加熱して、ヒドロキシクロロキン又はクロロキンを含有するストック溶液（以下、ストック溶液と表す）を得る工程、
２． 実施例１のセクションＡ（Ｉ）に係るプロセス［典型的な実施形態では、３：２のＤＰＰＣ：コレステロールのモル比、３００ｍＭの硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．）及び３０ｍＭのリン脂質濃度の条件を用いる］によって調製した空リポソーム、生理食塩水、及びストック溶液を円錐管の中で一緒に混合し、Ｄ／Ｌ比が１００ｇ／モル又は０．１９モル／モルを目標とするローディング溶液を得る工程、
３． 適切な温度で３０分間又は設計された時間、ローディング溶液を連続的に振盪して、薬物ローディング済みリポソームの試料を形成する工程、
４． 必要に応じて、遊離薬物を除去するか、又は緩衝液を変更するか、又は透析法若しくは膜ベースのタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって薬物濃度を調整する工程、並びに
５． サイズ排除カラムクロマトグラフィー及びＨＰＬＣ分析を使用して最終試料の薬物封入量（すなわち、ローディング効率）を決定して、組成物全体に基づき、２ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬの範囲の薬物濃度及び０．０５モル／モル～１．５モル／モルの脂質に対する抗ウイルス剤の比のリポソーム性抗ウイルス剤の組成物を得る（以下の製剤番号１～番号３を参照）工程。
以下の方法は、リモートローディングによるリポソームへのヒドロキシクロロキン又はクロロキンの封入（カプセル化）のための典型的なプロトコルを表し、このプロトコルは以下の工程を含む。
１． ９．４％（ｗ／ｖ）スクロース又は適切な媒体中の４０ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度のヒドロキシクロロキン又はクロロキンの溶液を調製し、それを適切な温度で短時間加熱して、ヒドロキシクロロキン又はクロロキンを含有するストック溶液（以下、ストック溶液と表す）を得る工程、
２． 実施例１のセクションＡ（Ｉ）に係るプロセス［典型的な実施形態では、３：２のＤＰＰＣ：コレステロールのモル比、３００ｍＭの硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．）及び３０ｍＭのリン脂質濃度の条件を用いる］によって調製した空リポソーム、生理食塩水、及びストック溶液を円錐管の中で一緒に混合し、Ｄ／Ｌ比が１００ｇ／モル又は０．１９モル／モルを目標とするローディング溶液を得る工程、
３． 適切な温度で３０分間又は設計された時間、ローディング溶液を連続的に振盪して、薬物ローディング済みリポソームの試料を形成する工程、
４． 必要に応じて、遊離薬物を除去するか、又は緩衝液を変更するか、又は透析法若しくは膜ベースのタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）によって薬物濃度を調整する工程、並びに
５． サイズ排除カラムクロマトグラフィー及びＨＰＬＣ分析を使用して最終試料の薬物封入量（すなわち、ローディング効率）を決定して、組成物全体に基づき、２ｍｇ／ｍＬ～１０ｍｇ／ｍＬの範囲の薬物濃度及び０．０５モル／モル～１．５モル／モルの脂質に対する抗ウイルス剤の比のリポソーム性抗ウイルス剤の組成物を得る（以下の製剤番号１～番号３を参照）工程。
【0085】
【表1】
【0086】
Ｂ． 受動ローディングによるリポソーム性抗ウイルス剤の調製
リポソームは、薄膜水和法又は溶媒注入法によって調製することができる。溶媒注入法によりリポソーム性抗ウイルス剤を調製するプロセスは、以下の工程を含む方法によって具体化される。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらをフラスコ中で１０ｍＬのエタノールに添加して、脂質を含有する溶媒相を形成する工程、
２． 水相を形成するために、４０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度の、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）又は適切な媒体中のヒドロキシクロロキン又はクロロキン溶液を調製する工程、
３． ４０ｍＬの指示された水相（４０ｍｇ／ｍＬヒドロキシクロロキン）を５０℃で少なくとも３０分間予熱する工程、
４． 溶解した脂質混合物、すなわち溶媒相を、予熱した水相に撹拌下でシリンジによって添加してプロリポソーム試料を形成し、次いでこのプロリポソーム試料を５０℃で５分間撹拌し続ける工程、
５． 上記プロリポソーム試料を、脂質組成に応じて適切な温度で０．２μｍポリカーボネート膜を通して押し出して、設計された粒子サイズを得る工程、
６． 押し出したリポソーム試料を透析濾過して、遊離薬物物質を生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ）で除去する工程、及び
７． 透析濾過したリポソーム試料を、０．２μｍのポリカーボネート膜を通して濾過することによって滅菌し、リポソーム性抗ウイルス剤を得る工程。
リポソームは、薄膜水和法又は溶媒注入法によって調製することができる。溶媒注入法によりリポソーム性抗ウイルス剤を調製するプロセスは、以下の工程を含む方法によって具体化される。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらをフラスコ中で１０ｍＬのエタノールに添加して、脂質を含有する溶媒相を形成する工程、
２． 水相を形成するために、４０ｍｇ／ｍＬ～６０ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度の、０．９％塩化ナトリウム（生理食塩水）又は適切な媒体中のヒドロキシクロロキン又はクロロキン溶液を調製する工程、
３． ４０ｍＬの指示された水相（４０ｍｇ／ｍＬヒドロキシクロロキン）を５０℃で少なくとも３０分間予熱する工程、
４． 溶解した脂質混合物、すなわち溶媒相を、予熱した水相に撹拌下でシリンジによって添加してプロリポソーム試料を形成し、次いでこのプロリポソーム試料を５０℃で５分間撹拌し続ける工程、
５． 上記プロリポソーム試料を、脂質組成に応じて適切な温度で０．２μｍポリカーボネート膜を通して押し出して、設計された粒子サイズを得る工程、
６． 押し出したリポソーム試料を透析濾過して、遊離薬物物質を生理食塩水（０．９％ＮａＣｌ）で除去する工程、及び
７． 透析濾過したリポソーム試料を、０．２μｍのポリカーボネート膜を通して濾過することによって滅菌し、リポソーム性抗ウイルス剤を得る工程。
【0087】
本開示に係る抗ウイルス剤の組成物は、それぞれ組成物全体に基づき、１．０ｍｇ／ｍＬ～４ｍｇ／ｍＬの濃度の抗ウイルス剤の濃度、及び少なくとも０．０５モル／モル～０．３０モル／モルの脂質に対する抗ウイルス剤の比を標的にするための遊離型の抗ウイルス剤を添加することによって製剤化することができる（以下の製剤番号４～番号６を参照）。
【0088】
【表2】
【0089】
Ｃ． リポソーム性抗ウイルス剤の保存安定性
４℃で保存した上記セクションＡ及びＢで調製したリポソーム性ヒドロキシクロロキン又はクロロキンの安定性を、少なくとも２週間又は設計された期間モニターすることができた。空リポソームに、硫酸アンモニウムを用いた能動ローディングによって、又は受動ローディングによってローディングしてリポソーム性薬物試料を得たヒドロキシクロロキン又はクロロキンを研究することができた。上記リポソーム性薬物試料を４℃又は適切な温度で２週間又は設計された期間にわたって保存した後に、リポソームの薬物効力、物理化学的特性を経時的に研究することができた。
４℃で保存した上記セクションＡ及びＢで調製したリポソーム性ヒドロキシクロロキン又はクロロキンの安定性を、少なくとも２週間又は設計された期間モニターすることができた。空リポソームに、硫酸アンモニウムを用いた能動ローディングによって、又は受動ローディングによってローディングしてリポソーム性薬物試料を得たヒドロキシクロロキン又はクロロキンを研究することができた。上記リポソーム性薬物試料を４℃又は適切な温度で２週間又は設計された期間にわたって保存した後に、リポソームの薬物効力、物理化学的特性を経時的に研究することができた。
【0090】
実施例２ 動物モデルにおける吸入リポソーム性抗ウイルス剤の前臨床評価
動物における実施例１Ｂで調製したリポソーム性ヒドロキシクロロキン（ＨＣＱ）の例示的な組成物（ＴＬＣ１９とも表す）の毒性を検討した。ＨＣＱ硫酸塩溶液（遊離ＨＣＱ）の単回用量静脈内（ＩＶ）／気管内（ＩＴ）投与又はＴＬＣ１９のパイロット製剤（試験番号ＰＫ２００２１）のＩＴ投与後のスプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ、ＳＤ）ラットにおける１つの予備的な概念実証の薬物動態（ＰＫ）及び組織分布試験を行った。この研究は、ＨＣＱの組織分布、主に肺、及び全身曝露を検討するように設計した。
動物における実施例１Ｂで調製したリポソーム性ヒドロキシクロロキン（ＨＣＱ）の例示的な組成物（ＴＬＣ１９とも表す）の毒性を検討した。ＨＣＱ硫酸塩溶液（遊離ＨＣＱ）の単回用量静脈内（ＩＶ）／気管内（ＩＴ）投与又はＴＬＣ１９のパイロット製剤（試験番号ＰＫ２００２１）のＩＴ投与後のスプラーグドーリー（Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ、ＳＤ）ラットにおける１つの予備的な概念実証の薬物動態（ＰＫ）及び組織分布試験を行った。この研究は、ＨＣＱの組織分布、主に肺、及び全身曝露を検討するように設計した。
【0091】
合計５２匹のラットを３つの処置群に割り当てた。各ラットは、ＩＴ投与又はＩＶ注射を介してＨＣＱの単回投与を受けた。血液及び肺を含む臓器／組織試料を、投与後０．２５時間、１時間（血液のみ）、４時間、２４時間及び７２時間の予め指定した時間点で収集し、タンデム質量分析を伴う液体クロマトグラフィーによるＨＣＱの決定に使用した。研究設計を下記表１に要約する。
【0092】
【表3】
【0093】
血液、肺及び心臓中のＨＣＱの濃度を、Ａｎａｌｙｓｔ（登録商標）又はＭａｓｓＬ ｙｎｘ Ｓｏｆｔｗａｒｅを使用することによって計算し、薬物動態ＰＫパラメータを、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）を使用して決定した。ＴＬＣ１９パイロット製剤及び遊離ＨＣＱの投与後の肺、血液及び心臓におけるＨＣＱ濃度対時間プロファイルを、それぞれ図１、図２及び図３に示す。肺、血液及び心臓におけるＨＣＱの平均ＰＫパラメータを表２に列挙する。
【0094】
【表4】
ｂ：肺及び心臓についての単位：μｇ／ｇ；血液についての単位：μｇ／ｍＬ
ｃ：肺及び心臓についての単位：ｈｒ＊μｇ／ｇ；血液についての単位：ｈｒ＊μｇ／ｍＬ
ｄ：適用なし
【0095】
遊離ＨＣＱを投与したラットにおける肺分布に関して、ＨＣＱ濃度は、とりわけ遊離ＨＣＱ ＩＴ投与群において、投与後最初の２４時間の間に着実に急速に低下した。平均ＨＣＱ濃度は、ＩＴ群では４７．８μｇ／ｇから２．１６μｇ／ｇに、ＩＶ群では９．４μｇ／ｇから３．７７μｇ／ｇに低下した。対照的に、肺におけるＨＣＱ沈着の程度は、遊離ＨＣＱ群と比較してＴＬＣ１９（パイロット製剤）群で有意に上昇し、これはリポソーム性薬物の持続放出特性に起因する。ＴＬＣ１９群は、遊離ＨＣＱ用量の半分の投与後の最初の投与後２４時間の間に平均ＨＣＱ濃度が１２９μｇ／ｇから５７．１μｇ／ｇに低下したので、肺におけるＨＣＱの放出をある期間持続した。
【0096】
遊離ＨＣＱ ＩＶ及びＩＴ群における肺におけるＨＣＱの半減期は、それぞれ１５．２時間及び１７．７時間であり、これは、ＨＣＱが生理学的ｐＨで迅速に細胞膜を自由に移動することができるというＨＣＱの物理化学的特性と整合する。ＴＬＣ１９（パイロット製剤）群におけるＨＣＱの半減期（３７．５時間）は、遊離ＨＣＱ群の約２倍であった。ＴＬＣ１９（パイロット製剤）群のＡＵＣ０－７２及びＣｍａｘに関する肺曝露は、用量で正規化した場合、それぞれ、遊離ＨＣＱ ＩＶ群の肺曝露の３５倍及び２９倍であった。これらの結果は、ＨＣＱの持続放出製剤であるＴＬＣ１９（パイロット製剤）が、ＩＶ又はＩＴ投与による遊離ＨＣＱと比較して、ＨＣＱの肺滞留時間を首尾よく延長したことを示唆する。また、本発明者らの研究では、遊離ＨＣＱのＩＶ投与もＩＴ投与も、肺におけるＨＣＱ濃度を長期間維持することができなかった。
【0097】
全身曝露については、ＨＣＱは、ＨＣＱ投与後に迅速に吸収され、系に分配された。３群の血液中のＨＣＱのＴｍａｘ中央値は、投与後０．２５時間であった。Ｃｍａｘ及びＡＵＣを含む全体的な全身曝露は、遊離ＨＣＱ ＩＶ及びＩＴ群において同様であった。ＴＬＣ１９（パイロット製剤）については、血液中のＨＣＱのＣｍａｘは、遊離ＨＣＱのＣｍａｘよりも有意に低かった。少量のＨＣＱは、ＴＬＣ１９（パイロット製剤）の投与後１時間以内に初期ピーク濃度をもたらした。残りのＨＣＱは肺に留まり、長い滞留時間及び投与後２４～７２時間の間のＴＬＣ１９（パイロット製剤）の着実な低い平均血中濃度を可能にした。経時的に観察されたより低い血中ＨＣＱ濃度レベルは、ＨＣＱが局所部位で徐々に放出されたことを示唆する。ＴＬＣ１９（パイロット製剤）のより長い半減期によって反映されるように、ＴＬＣ１９（パイロット製剤）は、非製剤化ＨＣＱ溶液よりも長い放出プロファイルを示した。
【0098】
ＨＣＱは、補正ＱＴ時間（ＱＴｃ）の延長を含む心臓障害を引き起こすことが示されている。心臓におけるＴＬＣ１９の分布を決定するために、心臓組織におけるＨＣＱ ＰＫプロファイルを決定した（図３）。ＴＬＣ１９は、ＨＣＱ溶液と比較した場合、より低い心臓曝露（Ｃｍａｘ）を有した。用量を正規化した場合、同様のＡＵＣがすべての群で観察された。全身投与（すなわち、経口又はＩＶ）よりもむしろ局所投与（すなわち、ＩＴ投与）に必要とされるより低い用量を考慮すると、これらの結果は、ＴＬＣ１９が従来のＨＣＱ投与よりも少ない心毒性を引き起こしうることを示唆する。
【0099】
２つの前臨床ＰＫ研究を、スプラーグドーリー（ＳＤ）ラットにおけるＩＴ投与によるＴＬＣ１９最適化製剤について実施した。説明は以下の通りである。
【0100】
（１）ＳＤラットにおける単回用量ＰＫ試験：ＴＬＣ１９の単回用量ＩＴ投与後の血液薬物動態及び組織濃度試験をＳＤラットにおいて実施することができた。血液及び肺を含む主要な臓器は、予定されたサンプリング時間点で収集することができた。ＨＣＱの濃度は、全血及び臓器について決定される。ＴＬＣ１９の予備的ＰＫプロファイルを決定することができた。肺におけるＴＬＣ１９の薬物分布のパーセンテージも計算することができた。
【0101】
（２）ＳＤラットにおける複数回用量ＰＫ試験：本試験は、複数回用量ＩＴ投与後のＴＬＣ１９の薬物蓄積を特徴付け、評価するように設計される。最初の投与及び最後の投与後の予定されたサンプリング時間点で、血液及び肺を含む主要な臓器を収集することができた。血液及び肺におけるＴＬＣ１９の蓄積速度を計算することができた。
【0102】
実施例３ リポソーム性抗ウイルス剤の調製
スルホブチルエーテル－β－シクロデキストリン（ＳＢＥＣＤ）は、Ｚｉｂｏ Ｑｉａｎｈｕｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏ．，ｌｔｄ（ズーボー・チエンフイ生物科技有限公司）、中国から購入した。ＳＢＥＣＤ製剤化ＧＳ－４４１５２４（１．０ｍｇ／ｍＬのＧＳ－４４１５２４を含有する）を、約４．４のｐＨを有する１５０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥＣＤ溶液にＧＳ－４４１５２４（抗ウイルス剤）を溶解することによって調製し、試験品（１）ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶとして使用した。
スルホブチルエーテル－β－シクロデキストリン（ＳＢＥＣＤ）は、Ｚｉｂｏ Ｑｉａｎｈｕｉ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｃｏ．，ｌｔｄ（ズーボー・チエンフイ生物科技有限公司）、中国から購入した。ＳＢＥＣＤ製剤化ＧＳ－４４１５２４（１．０ｍｇ／ｍＬのＧＳ－４４１５２４を含有する）を、約４．４のｐＨを有する１５０ｍｇ／ｍＬのＳＢＥＣＤ溶液にＧＳ－４４１５２４（抗ウイルス剤）を溶解することによって調製し、試験品（１）ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶとして使用した。
【0103】
試験薬物（リポソーム性ＧＳ－４４１５２４、ＩＳＰＭ２１とも表す）は、Ｔａｉｗａｎ Ｌｉｐｏｓｏｍｅ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｌｔｄ．（台湾リポソーム）、台湾、によって調製された。これは、約２００ｎｍの平均粒子サイズを有するリポソームに封入されたＧＳ－４４１５２４から構成される。ＧＳ－４４１５２４は、純粋な淡黄色粉末としてＦｏｒｍｏｓａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ，Ｉｎｃ．（台新薬股彬有限公司）によって提供された。リポソームは、ジパルミトイルホスファチジルコリン（日本精化株式会社、日本）及びコレステロール（Ｄｉｓｈｍａｎ（ディッシュマン）、オランダ）から構成され、これらは両方とも肺表面活性物質の天然成分である２３。空の予め形成されたリポソームを溶媒注入によって調製した。簡潔には、適切な量の脂質混合物（１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＰＰＣ）及びコレステロール）をエタノール（Ｊ．Ｔ．Ｂａｋｅｒ（ジェイ・ティー・ベーカー）、米国）に溶解し、５０℃で撹拌しながら硫酸アンモニウム溶液に注入した。押出機を用いて、０．２μｍのポリカーボネート膜を通して５０℃で押し出すことによって、リポソームのサイズを約２００ｎｍに調整した。封入されていない硫酸アンモニウム及びエタノールを透析濾過によって除去して、最終的な空リポソームを得た。
【0104】
リポソームへのＧＳ－４４１５２４の封入は、能動ローディング法を用いて行った。空の予め形成されたリポソームをＧＳ－４４１５２４薬物溶液と混合し、５０℃でインキュベートして、６～７のｐＨを有する最終ＩＳＰＭ２１試料（リポソーム性薬物懸濁液）を得て、これを試験品（２）ＩＳＰＭ２１－ＩＴとして使用した。
【0105】
Ａ． リポソーム性ヌクレオシド化合物の調製
Ｉ． 空リポソームの調製
リポソームは、薄膜水和法又は溶媒注入法によって調製することができた。
Ｉ． 空リポソームの調製
リポソームは、薄膜水和法又は溶媒注入法によって調製することができた。
【0106】
溶媒注入法によって空リポソームを調製するためのプロセスは、以下の工程を含む方法によって具体化される。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらをエタノールにより高温で溶解する工程、
２． 蒸留水に捕捉剤（例えば、硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．））を添加してこの溶液を混合し、塩を溶解させることにより捕捉剤溶液を調製する工程、
３． 上記脂質混合物を脂質組成に応じて適切な温度で上記捕捉剤溶液に添加してリポソーム溶液を形成する工程、
４． 得られたリポソーム溶液を、脂質組成に応じて適切な温度でポリカーボネート膜を通して押し出して、設計された粒子サイズを得る工程
５． スクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液に対する押出されたリポソームの透析濾過により、遊離の捕捉剤及びエタノールを除去する工程。
１． ＤＳＰＥ－ＰＥＧ２０００の存在下又は不存在下で所定のモル比のリン脂質、コレステロールの脂質混合物を秤量し、それらをエタノールにより高温で溶解する工程、
２． 蒸留水に捕捉剤（例えば、硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．））を添加してこの溶液を混合し、塩を溶解させることにより捕捉剤溶液を調製する工程、
３． 上記脂質混合物を脂質組成に応じて適切な温度で上記捕捉剤溶液に添加してリポソーム溶液を形成する工程、
４． 得られたリポソーム溶液を、脂質組成に応じて適切な温度でポリカーボネート膜を通して押し出して、設計された粒子サイズを得る工程
５． スクロース溶液又は生理食塩水又は適切な緩衝液に対する押出されたリポソームの透析濾過により、遊離の捕捉剤及びエタノールを除去する工程。
【0107】
ＩＩ． 抗ウイルス剤のリポソームへの薬物ローディング
以下の方法は、リモートローディングによるリポソームへのヌクレオシド化合物の封入のための典型的なプロトコルを表し、このプロトコルは以下の工程を含む。
１． 適切な媒体中の１５．４ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度のヌクレオシド化合物の溶液を調製して、ヌクレオシド化合物を含有するストック溶液（以下、ストック溶液と表す）を得る工程、
２． 実施例１のセクション（Ａ）、セクション（Ｉ）に係るプロセス［典型的な実施形態では、３：２のＤＰＰＣ：コレステロールのモル比、捕捉剤として３００ｍＭの硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．）、及び２０～５０ｍＭのリン脂質濃度の条件を用いる］によって調製した空リポソーム、及び上記ストック溶液を円錐管の中で一緒に混合し、Ｄ／Ｌ比が２５ｇ／モル又は設計されたＤ／Ｌ比を目標とするローディング溶液を得る工程、
３． 適切な温度で６０分間又は設計された時間、上記ローディング溶液を連続的に振盪して、薬物ローディング済みリポソームを形成する工程、
４． ＮａＯＨ溶液又は緩衝溶液を薬物ローディング済みリポソームに添加して、溶液のｐＨを６．０～７．０に調整する工程、並びに
５． サイズ排除カラムクロマトグラフィー及び紫外可視吸光度測定又はＨＰＬＣ分析を使用して、最終試料の薬物封入量（すなわち、ローディング効率）を決定する工程。
以下の方法は、リモートローディングによるリポソームへのヌクレオシド化合物の封入のための典型的なプロトコルを表し、このプロトコルは以下の工程を含む。
１． 適切な媒体中の１５．４ｍｇ／ｍＬ又は適切な濃度のヌクレオシド化合物の溶液を調製して、ヌクレオシド化合物を含有するストック溶液（以下、ストック溶液と表す）を得る工程、
２． 実施例１のセクション（Ａ）、セクション（Ｉ）に係るプロセス［典型的な実施形態では、３：２のＤＰＰＣ：コレステロールのモル比、捕捉剤として３００ｍＭの硫酸アンモニウム（Ａ．Ｓ．）、及び２０～５０ｍＭのリン脂質濃度の条件を用いる］によって調製した空リポソーム、及び上記ストック溶液を円錐管の中で一緒に混合し、Ｄ／Ｌ比が２５ｇ／モル又は設計されたＤ／Ｌ比を目標とするローディング溶液を得る工程、
３． 適切な温度で６０分間又は設計された時間、上記ローディング溶液を連続的に振盪して、薬物ローディング済みリポソームを形成する工程、
４． ＮａＯＨ溶液又は緩衝溶液を薬物ローディング済みリポソームに添加して、溶液のｐＨを６．０～７．０に調整する工程、並びに
５． サイズ排除カラムクロマトグラフィー及び紫外可視吸光度測定又はＨＰＬＣ分析を使用して、最終試料の薬物封入量（すなわち、ローディング効率）を決定する工程。
【0108】
【表5】
【0109】
Ｂ． リポソーム性抗ウイルス剤の保存安定性
４℃で保存したリポソーム性ヌクレオシド化合物の安定性は、少なくとも２ヶ月間又は設計された期間モニターすることができた。３００ｍＭの硫酸アンモニウム又は７５ｍＭのオクタ硫酸スクローストリエチルアンモニウム塩を、リポソーム性薬物試料（表Ａ）を得るための捕捉剤として用いて空リポソームにローディングしたヌクレオシド化合物を研究することができた。リポソーム性薬物試料を４℃又は適切な温度で２ヶ月以上又は設計された期間にわたって保存した後に、リポソームの薬物効力、物理化学的特性を経時的に研究することができた。
４℃で保存したリポソーム性ヌクレオシド化合物の安定性は、少なくとも２ヶ月間又は設計された期間モニターすることができた。３００ｍＭの硫酸アンモニウム又は７５ｍＭのオクタ硫酸スクローストリエチルアンモニウム塩を、リポソーム性薬物試料（表Ａ）を得るための捕捉剤として用いて空リポソームにローディングしたヌクレオシド化合物を研究することができた。リポソーム性薬物試料を４℃又は適切な温度で２ヶ月以上又は設計された期間にわたって保存した後に、リポソームの薬物効力、物理化学的特性を経時的に研究することができた。
【0110】
実施例４ リポソーム性抗ウイルス剤の放出プロファイル
模擬肺液におけるインビトロ薬物放出
実施例１によって調製したリポソーム性抗ウイルス剤の放出プロファイル実験を実施して、それらの持続放出特性を実証することができた。インビトロ放出（ＩＶＲ）実験のプロトコルの概要は以下の通りである。
１． リポソーム性抗ウイルス剤の各試料０．５ｍＬをＳＬＦ４．５ｍＬ（３７℃で予熱）と混合することによって試験品を１０倍希釈し、希釈した試料を１５ｍＬ遠心管に入れ、
２． 希釈した試料を含む遠心管をＩｎｔｅｌｌｉミキサー回転子の試料ウェル上に置き、２０ｒｐｍで回転させ、３７℃でインキュベートし、
３． 封入効率を分析するために所定の時間点で１ｍＬの希釈試料をサンプリングする。
模擬肺液におけるインビトロ薬物放出
実施例１によって調製したリポソーム性抗ウイルス剤の放出プロファイル実験を実施して、それらの持続放出特性を実証することができた。インビトロ放出（ＩＶＲ）実験のプロトコルの概要は以下の通りである。
１． リポソーム性抗ウイルス剤の各試料０．５ｍＬをＳＬＦ４．５ｍＬ（３７℃で予熱）と混合することによって試験品を１０倍希釈し、希釈した試料を１５ｍＬ遠心管に入れ、
２． 希釈した試料を含む遠心管をＩｎｔｅｌｌｉミキサー回転子の試料ウェル上に置き、２０ｒｐｍで回転させ、３７℃でインキュベートし、
３． 封入効率を分析するために所定の時間点で１ｍＬの希釈試料をサンプリングする。
【0111】
ヌクレオシド化合物の封入効率を決定するための分析方法は以下の通りである。
ａ． ２ｍＬのＧ５０カラムを条件溶液で充填及び洗浄し、
ｂ． ０．１ｍＬの試料をカラムに添加し、次いで０．４５ｍＬの溶離液を添加し、溶液が溶出するのを待ち、
ｃ． ０．８ｍＬの溶離液をカラムに加え、溶出物をリポソーム形態として収集し、
ｄ． カラム前及びカラム後の試料（リポソーム形態及び全形態）を適切な溶媒によって破壊し、
ｅ． 紫外可視又はＨＰＬＣ法を使用して、示された波長での試料の吸光度を測定して、各試料の薬物濃度を決定する。
ａ． ２ｍＬのＧ５０カラムを条件溶液で充填及び洗浄し、
ｂ． ０．１ｍＬの試料をカラムに添加し、次いで０．４５ｍＬの溶離液を添加し、溶液が溶出するのを待ち、
ｃ． ０．８ｍＬの溶離液をカラムに加え、溶出物をリポソーム形態として収集し、
ｄ． カラム前及びカラム後の試料（リポソーム形態及び全形態）を適切な溶媒によって破壊し、
ｅ． 紫外可視又はＨＰＬＣ法を使用して、示された波長での試料の吸光度を測定して、各試料の薬物濃度を決定する。
【0112】
リポソーム中の抗ウイルス剤の封入効率（ＥＥ）を計算し、下式によって得ることができた：薬物の総形態（ＴＦ）で割った薬物のリポソーム形態（ＬＦ）：
ＥＥ（％）＝ＬＦ／ＴＦ×１００％
ＥＥ（％）＝ＬＦ／ＴＦ×１００％
【0113】
放出プロファイルをプロットして、放出速度（％）対時間を描くことができた。放出速度は、下式によって計算することができた：初期のリポソーム形態から各時間点におけるリポソーム形態を引いたものを、次いで初期リポソーム形態で割る：
（ＬＦｔ０－ＬＦｔ）／ＬＦｔ０×１００％
（ＬＦｔ０－ＬＦｔ）／ＬＦｔ０×１００％
【0114】
薬物物質の長期放出プロファイルは、有効性の改善及びより低い投与頻度での治療のために望ましい。それゆえ、選択されたリポソーム性抗ウイルス剤は、すべての製剤の中でより遅い又は適切な放出プロファイルを有し、以下の毒性試験においてそれらを使用した。
【0115】
実施例５ 動物モデルにおける吸入リポソーム性抗ウイルス剤の薬物動態
研究設計
合計４８匹の雌ＳＤラット（ＢｉｏＬＡＳＣＯ Ｔａｉｗａｎ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．（バイオラスコ・タイワン））を、２つの処置群のうちの１つに割り当てた：（１）ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶ：２４匹のラットに、０．２０ｍｇ ＧＳ－４４１５２４／動物の単回用量をＩＶ注射により投与した；（２）ＩＳＰＭ２１－ＩＴ：２４匹のラットに、臨床設定における吸入を模倣するために使用する投与経路であるＩＴ点滴注入を介して０．２０ｍｇのＩＳＰＭ２１（１．０ｍｇ／ｍＬのＧＳ－４４１５２４を含有するリポソーム懸濁液）／動物の単回用量を投与した。血液試料のサンプリング時間点は、投与後０．２５時間、１時間、４時間、２４時間、及び７２時間であり、肺試料のサンプリング時間点は、投与後０．２５時間、４時間、２４時間、及び７２時間であった。動物に関するすべての手順は、ＴＬＣ動物施設において、ＴＬＣ、台湾におけるＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ、組織内動物実験委員会）の倫理ガイドラインに従って行った（番号ＴＬＣ２０ＩＡＣＵＣ０３７）。
研究設計
合計４８匹の雌ＳＤラット（ＢｉｏＬＡＳＣＯ Ｔａｉｗａｎ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．（バイオラスコ・タイワン））を、２つの処置群のうちの１つに割り当てた：（１）ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶ：２４匹のラットに、０．２０ｍｇ ＧＳ－４４１５２４／動物の単回用量をＩＶ注射により投与した；（２）ＩＳＰＭ２１－ＩＴ：２４匹のラットに、臨床設定における吸入を模倣するために使用する投与経路であるＩＴ点滴注入を介して０．２０ｍｇのＩＳＰＭ２１（１．０ｍｇ／ｍＬのＧＳ－４４１５２４を含有するリポソーム懸濁液）／動物の単回用量を投与した。血液試料のサンプリング時間点は、投与後０．２５時間、１時間、４時間、２４時間、及び７２時間であり、肺試料のサンプリング時間点は、投与後０．２５時間、４時間、２４時間、及び７２時間であった。動物に関するすべての手順は、ＴＬＣ動物施設において、ＴＬＣ、台湾におけるＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ（ＩＡＣＵＣ、組織内動物実験委員会）の倫理ガイドラインに従って行った（番号ＴＬＣ２０ＩＡＣＵＣ０３７）。
【0116】
血液及び肺の試料の採取及び取扱い
血液を、予定されたサンプリング時間点で頸静脈から抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡが入った採取チューブに収集した。各採取チューブを穏やかに反転させて、試料が抗凝固剤と完全に混合されることを確実にした。実際のサンプリング時間を記録した。採取した血液試料を１，５００×ｇで１０分間、２～８℃で遠心分離して血漿を得た。上清血漿を直ちに標識マイクロチューブに移した。直ちに処理しない場合には、血漿を－８０℃に設定した冷凍庫に移した。血漿採取は、血液採取後２時間以内に完了した。
血液を、予定されたサンプリング時間点で頸静脈から抗凝固剤としてのＫ２ＥＤＴＡが入った採取チューブに収集した。各採取チューブを穏やかに反転させて、試料が抗凝固剤と完全に混合されることを確実にした。実際のサンプリング時間を記録した。採取した血液試料を１，５００×ｇで１０分間、２～８℃で遠心分離して血漿を得た。上清血漿を直ちに標識マイクロチューブに移した。直ちに処理しない場合には、血漿を－８０℃に設定した冷凍庫に移した。血漿採取は、血液採取後２時間以内に完了した。
【0117】
予定された肺試料採取時間で動物を安楽死させた。各ラットを、ＫＤ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（登録商標）シリンジポンプにより少なくとも８分間、約１００ｍＬの２ｍＭ Ｋ２ＥＤＴＡ／生理食塩水溶液で灌流した。灌流後、肺を採取し、液体窒素中で凍結した。凍結後、肺を秤量し、－８０℃の冷凍庫に移すまで湿った氷上に置いた。すべての肺試料をホモジナイズ（均質化）するまで－８０℃の冷凍庫に保存した。
【0118】
生物学的分析及びＰＫ計算
血液試料に内部標準（６，７－ジメチル－２，３－ジ－２－ピリジルキノキサリン）を添加した後、タンパク質沈殿のためにメタノールとよく混合した。遠心分離後、分析のためにタンデム質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ（ウォーターズ） Ｘｅｖｏ（商標） ＴＱ－Ｓ）と連結した液体クロマトグラフィー（Ｗａｔｅｒｓ Ｉ－Ｃｌａｓｓ ＵＰＬＣ）（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）に上清を注入した。肺試料については、組織／臓器を０．１％ギ酸を含む５０％メタノールでホモジナイズした。組織／臓器ホモジネートに内部標準（ＩＳ）を添加した後、タンパク質沈殿のためにメタノールとよく混合した。得られた試料上清を、遠心分離後の分析のためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳに注入した。ＧＳ－４４１５２４の濃度は、ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウェアを使用して計算した。線形範囲は、肺アッセイ及び血漿アッセイについて、それぞれ１０～１００００ｎｇ／ｍＬ及び０．５～５００ｎｇ／ｍＬであった。ＧＳ－４４１５２４のＰＫパラメータは、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）（バージョン８．０以上）を用いたスパースサンプリング計算を適用するノンコンパートメント法によって計算した。
血液試料に内部標準（６，７－ジメチル－２，３－ジ－２－ピリジルキノキサリン）を添加した後、タンパク質沈殿のためにメタノールとよく混合した。遠心分離後、分析のためにタンデム質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ（ウォーターズ） Ｘｅｖｏ（商標） ＴＱ－Ｓ）と連結した液体クロマトグラフィー（Ｗａｔｅｒｓ Ｉ－Ｃｌａｓｓ ＵＰＬＣ）（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）に上清を注入した。肺試料については、組織／臓器を０．１％ギ酸を含む５０％メタノールでホモジナイズした。組織／臓器ホモジネートに内部標準（ＩＳ）を添加した後、タンパク質沈殿のためにメタノールとよく混合した。得られた試料上清を、遠心分離後の分析のためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳに注入した。ＧＳ－４４１５２４の濃度は、ＭａｓｓＬｙｎｘソフトウェアを使用して計算した。線形範囲は、肺アッセイ及び血漿アッセイについて、それぞれ１０～１００００ｎｇ／ｍＬ及び０．５～５００ｎｇ／ｍＬであった。ＧＳ－４４１５２４のＰＫパラメータは、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）（バージョン８．０以上）を用いたスパースサンプリング計算を適用するノンコンパートメント法によって計算した。
【0119】
結果
肺におけるＧＳ－４４１５２４薬物動態
ＩＳＰＭ２１の単回用量ＩＴ投与後、肺における長い半減期（２２．８時間）及びより高いＧＳ－４４１５２４レベル（図４Ａ）が、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較してＩＳＰＭ２１－ＩＴについて観察された（表３）。肺におけるＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶの半減期及びＡＵＣは、濃度が最初の時間点（０．２５時間）でのみ測定可能であったため、計算することができなかった。特に、０．２ｍｇのＩＳＰＭ２１－ＩＴの単回投与は、７４．９μｇ／ｇのＣｍａｘ及び３６９ｈ＊μｇ／ｇのＡＵＣ０－７２を達成し、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して２０７倍のＣｍａｘで劇的に高い肺曝露を示した（表４）。
肺におけるＧＳ－４４１５２４薬物動態
ＩＳＰＭ２１の単回用量ＩＴ投与後、肺における長い半減期（２２．８時間）及びより高いＧＳ－４４１５２４レベル（図４Ａ）が、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較してＩＳＰＭ２１－ＩＴについて観察された（表３）。肺におけるＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶの半減期及びＡＵＣは、濃度が最初の時間点（０．２５時間）でのみ測定可能であったため、計算することができなかった。特に、０．２ｍｇのＩＳＰＭ２１－ＩＴの単回投与は、７４．９μｇ／ｇのＣｍａｘ及び３６９ｈ＊μｇ／ｇのＡＵＣ０－７２を達成し、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して２０７倍のＣｍａｘで劇的に高い肺曝露を示した（表４）。
【0120】
【表6】
【0121】
【表7】
【0122】
血漿中のＧＳ－４４１５２４薬物動態
単回用量投与後、ＩＳＰＭ２１－ＩＴは、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して血漿中で同様のＰＫプロファイル（図４Ｂ）及びＡＵＣ（表３及び表４）を示した。ＩＳＰＭ２１－ＩＴの血漿半減期（９．９８時間）は、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶの血漿半減期（７．４３時間）よりもわずかに長かった。特に、ＩＳＰＭ２１－ＩＴは、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して血漿中でより低い全身曝露（Ｃｍａｘの３７％）を示した（表４）。
単回用量投与後、ＩＳＰＭ２１－ＩＴは、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して血漿中で同様のＰＫプロファイル（図４Ｂ）及びＡＵＣ（表３及び表４）を示した。ＩＳＰＭ２１－ＩＴの血漿半減期（９．９８時間）は、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶの血漿半減期（７．４３時間）よりもわずかに長かった。特に、ＩＳＰＭ２１－ＩＴは、ＧＳ－４４１５２４溶液－ＩＶと比較して血漿中でより低い全身曝露（Ｃｍａｘの３７％）を示した（表４）。
【0123】
このラットＰＫ研究において、吸入可能なＩＳＰＭ２１の肺への標的化送達を検討し、肺におけるＧＳ－４４１５２４の有意により高い曝露を伴う持続放出を実証した。ＩＳＰＭ２１の単回ＩＴ投与後、投与後７２時間後の肺におけるＧＳ－４４１５２４の平均濃度は１．０７μｇ／ｇ（３．６７μＭ、肺組織試料の密度が１ｇ／ｍＬであると仮定）であり、これは、肺におけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ感染したヒト気道上皮（ＨＡＥ）細胞に対する０．１８μＭのインビトロ抗ウイルスＥＣ５０よりも１９倍高く、ＩＳＰＭ２１が比較的高いＧＳ－４４１５２４濃度を維持できることを示す。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4A】
【図4B】
【国際調査報告】