▶ ファーサイト メディカル テクノロジー （シャンハイ） カンパニー リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-05-08
(54)【発明の名称】シクロスポリン誘導体の調製
(51)【国際特許分類】
C07K 7/66 20060101AFI20230426BHJP
A61K 38/13 20060101ALI20230426BHJP
A61P 37/06 20060101ALI20230426BHJP
【ＦＩ】
C07K7/66
A61K38/13
A61P37/06
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022556477
(86)(22)【出願日】2021-03-25
(85)【翻訳文提出日】2022-11-03
(86)【国際出願番号】 CN2021083016
(87)【国際公開番号】W WO2021190604
(87)【国際公開日】2021-09-30
(31)【優先権主張番号】PCT/CN2020/081295
(32)【優先日】2020-03-26
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(31)【優先権主張番号】PCT/CN2021/078391
(32)【優先日】2021-03-01
(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】521313500
【氏名又は名称】ファーサイト メディカル テクノロジー （シャンハイ） カンパニー リミテッド
【氏名又は名称原語表記】ＦＡＲＳＩＧＨＴ ＭＥＤＩＣＡＬ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ （ＳＨＡＮＧＨＡＩ） ＣＯ．， ＬＴＤ．
(74)【代理人】
【識別番号】100133503
【弁理士】
【氏名又は名称】関口 一哉
(72)【発明者】
【氏名】マック， チン‐ポン
(72)【発明者】
【氏名】マー， ファシュー
(72)【発明者】
【氏名】リー， ダオフェイ
(72)【発明者】
【氏名】ユー， シャオ
【テーマコード（参考）】
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084AA06
4C084BA24
4C084DA11
4C084NA20
4C084ZB08
4H045AA10
4H045AA20
4H045BA01
4H045BA16
4H045BA35
4H045EA20
4H045EA22
4H045FA31
4H045GA40
(57)【要約】
本発明は、シクロスポリン誘導体の調製のための方法を提供する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式１ａ
Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル又はｎ－プロピルであり、
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ１及びＲ２は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、アリール、置換アリール、ベンジル、カルボニル、カルボキシル、スルホニルから選択されるか、又はＲ３及びＲ４は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ５及びＲ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ５及びＲ６は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成する）、
の化合物又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法であって、
前記方法が、式２ａの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み
前記式２ａの化合物が、以下：
Ｒｂは、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールである）
であり、
前記アミノアルコールが式３：
のものである、方法。
【請求項2】
前記方法が、式１ｂ
前記方法が式２ｂの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み、
前記式２ｂの化合物が、以下：
【請求項3】
Ｒｂが、例えばピリジン、ピリミジン、ピラジン、チアゾール、オキサゾール、ベンゾチアゾール及びベンズイミダゾールから選択されるヘテロアリール又は置換ヘテロアリール置換基である、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項4】
前記式２ａの化合物が、以下：
【請求項5】
前記式２ｂの化合物が、以下：
【請求項6】
Ｒ１及びＲ２が両方とも水素である、請求項１～５のいずれかに記載の方法。
【請求項7】
Ｒ１又はＲ２の少なくとも１つがＣ１～Ｃ６アルキル、例えばメチルである、請求項１～６のいずれかに記載の方法。
【請求項8】
Ｒ１及びＲ２が共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環、又は好ましくはＣ３～Ｃ６シクロアルキル環、例えばシクロプロピルを形成する、請求項１～６に記載の方法。
【請求項9】
Ｒａがエチルである、請求項１～８のいずれかに記載の方法。
【請求項10】
Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つがメチルであるか、又はＲ３及びＲ４が両方ともメチルである、請求項１～９のいずれかに記載の方法。
【請求項11】
Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つがカルボニル又はカルボキシル（例えば、ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）置換基である、請求項１～１０のいずれかに記載の方法。
【請求項12】
Ｒ３及びＲ４が共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル環を形成する、請求項１～９に記載の方法。
【請求項13】
Ｒ５及びＲ６の少なくとも１つが水素であるか、又はＲ５及びＲ６の両方が水素である、請求項１～１２のいずれかに記載の方法。
【請求項14】
Ｒ５がＣ１～Ｃ６アルキル（例えば、メチル）であり、Ｒ６がＨである、請求項１～１２に記載の方法。
【請求項15】
前記式２ａ又は２ｂの化合物を３～５当量の前記アミノアルコールと反応させる、請求項１～１４のいずれかに記載の方法。
【請求項16】
前記アミノアルコールがジメチルアミノエタノールである、請求項１～１５のいずれかに記載の方法。
【請求項17】
前記式２ａ又は２ｂの化合物を、３～４当量の銅塩の存在下で前記アミノアルコールと反応させる、請求項１～１６のいずれかに記載の方法。
【請求項18】
前記式２ａ又は２ｂの化合物を、１．８～２．４当量のハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で前記アミノアルコールと反応させる、請求項１～１７のいずれかに記載の方法。
【請求項19】
前記ハロゲン化トリアルキルシリルが塩化トリメチルシリルである、請求項１～１８のいずれかに記載の方法。
【請求項20】
前記銅塩が銅（ＩＩ）塩である、請求項１～１９のいずれかに記載の方法。
【請求項21】
前記銅塩が銅トリフラートである、請求項１～２０のいずれかに記載の方法。
【請求項22】
前記式２ａ又は２ｂの化合物を、２．４当量の塩化トリメチルシリル及び３．６当量の銅トリフラートの存在下で、４．２当量の前記アミノアルコールと反応させる、請求項１～２１のいずれかに記載の方法。
【請求項23】
化合物１
前記方法は、化合物２
【請求項24】
化合物２を３～５当量のジメチルアミノエタノールと反応させる、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
前記銅塩が銅（ＩＩ）塩であり、任意に、前記銅塩が銅トリフラートである、請求項２３又は２４に記載の方法。
【請求項26】
化合物２を、３～４当量の前記銅塩、例えば銅トリフラートの存在下でジメチルアミノエタノールと反応させる、請求項２３～２５に記載の方法。
【請求項27】
前記ハロゲン化トリアルキルシリルが塩化トリメチルシリルである、請求項２３～２６に記載の方法。
【請求項28】
化合物２を、１．８～２．４当量の前記ハロゲン化トリアルキルシリル、例えば塩化トリメチルシリルの存在下でジメチルアミノエタノールと反応させる、請求項２３～２７に記載の方法。
【請求項29】
化合物２を、２．４当量の塩化トリメチルシリル及び３．６当量の銅トリフラートの存在下で、４．２当量の前記ジメチルアミノエタノールと反応させる、請求項２３～２８に記載の方法。
【請求項30】
反応溶媒がＴＨＦである、請求項１～２９のいずれかに記載の方法。
【請求項31】
前記反応が室温で行われる、請求項１～３０のいずれかに記載の方法。
【請求項32】
前記反応がモレキュラーシーブの非存在下で行われる、請求項１～３１のいずれかに記載の方法。
【請求項33】
化合物１又はその塩の調製のための方法であって、前記方法が、
ａ）塩基の存在下で、シクロスポリンＡとジスルフィド化合物（例えばピリジルジスルフィド）とを反応させる工程、
ｂ）工程ａ）の生成物を、銅塩、例えば、銅トリフラート、及びハロゲン化トリアルキルシリル、例えば、塩化トリメチルシリル、の存在下で、ジメチルアミノエタノールと反応させる工程、
を含む、方法。
【請求項34】
工程ｂ）が、請求項２３～３２に記載の反応条件のいずれか１つ又は組み合わせの下で行われる、請求項３３に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【背景技術】
【0001】
シクロスポリンＡは、その免疫抑制特性で周知の化合物である。サルコシン残基に修飾を有する誘導体を含むシクロスポリンＡの誘導体も合成され、それらの生物学的特性について調査されている。
【0002】
例えば、米国特許第６，５８３，２６５号には、サルコシン置換を有するシクロスポリン化合物の調製が記載されている。サルコシン位置で「－Ｏ－Ｒ３」置換基で置換されたシクロスポリン化合物は、サルコシン置換基「－Ｓ－Ｒ２」を交換することによって調製することができ、そのような交換反応は金属塩、ルイス酸、又はブレンステッド酸によって行われることが記載されている。化合物［Ｄ－Ｓａｒ－（２－Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノエトキシ））３］－シクロスポリンの調製に関して、これは、Ｎ，Ｎ－ジメチル－アミノエタノールと３－（メルカプトベンズチアゾール－２－イルチオ）－シクロスポリンとをカンファースルホン酸の存在下で反応させることによって調製され得ることが開示されている。米国特許第６，５８３，２６５号は、この化合物の調製の収率を記載していない。
【0003】
国際公開第２０１９／０１６５７２号はまた、この化合物、化合物１の調製方法を開示している。
【0004】
国際公開第２０１９／０１６５７２号によれば、化合物１は、銅トリフラート及びモレキュラーシーブの存在下で、チオピリジルシクロスポリンＡ中間体とジメチルアミノエタノールとの反応によって得ることができる。この方法は、米国特許第６，５８３，２６５号の方法論に従った場合に観察される不十分な再現性を克服することが記載されている。モレキュラーシーブは乾燥剤として使用される。しかしながら、モレキュラーシーブは実験室環境で使用され得るが、生産規模の方法には好ましくもなく実用的でもない。
【0005】
したがって、本発明の目的は、化合物１及び関連類縁体を製造するための改善されたスケーラブルな方法を提供することである。本発明の更なる目的は、本発明の以下の説明、実施例及び特許請求の範囲に基づいて明らかになるであろう。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0006】
【特許文献1】米国特許第６，５８３，２６５号
【特許文献2】国際公開第２０１９／０１６５７２号
【発明の概要】
【0007】
第１の態様では、本発明は、式１ａ
の化合物又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法を提供し、
該方法は、式２ａ
の化合物を銅塩（例えば、銅トリフラート）及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含む。
該方法は、式２ａ
【0008】
更なる態様では、本発明は、化合物１
又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法を提供し、
該方法は、化合物２
を、銅塩、例えば銅トリフラート及びトリメチルアルキルハライド（例えば塩化トリメチルシリル）の存在下で、ジメチルアミノエタノールと反応させる工程を含む。
該方法は、化合物２
【発明を実施するための形態】
【0009】
第１の態様では、本開示は、式１ａ
（式中
Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル又はｎ－プロピルであり、
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ１及びＲ２は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、アリール、置換アリール、ベンジル、カルボニル、カルボキシル、スルホニルから選択されるか、又はＲ３及びＲ４は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ５及びＲ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ５及びＲ６は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成する）
の化合物又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法であって、
該方法が、式２ａの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み
式２ａの化合物が、以下：
（式中、Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルから選択され、
Ｒｂは、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールである）
であり、
アミノアルコールが、式３
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、式１について定義される通りである）
のものである、方法に関する。
Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル又はｎ－プロピルであり、
Ｒ１及びＲ２は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ１及びＲ２は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ３及びＲ４は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、アリール、置換アリール、ベンジル、カルボニル、カルボキシル、スルホニルから選択されるか、又はＲ３及びＲ４は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成し、
Ｒ５及びＲ６は、独立して、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキルから選択されるか、又はＲ５及びＲ６は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル若しくはヘテロシクロアルキル環を形成する）
の化合物又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法であって、
該方法が、式２ａの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み
式２ａの化合物が、以下：
Ｒｂは、アリール、置換アリール、ヘテロアリール又は置換ヘテロアリールである）
であり、
アミノアルコールが、式３
のものである、方法に関する。
【0010】
一実施形態では、本開示によるシクロスポリン化合物、中間体又は前駆体化合物は、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせで定義されるような大環状環の３位のサルコシン残基に置換基を含むシクロスポリンＡ化合物（Ｒａはエチルである）である。他の実施形態では、本開示によるシクロスポリン化合物は、３位に置換基、すなわち本明細書に記載の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせについて定義されるサルコシン残基を含む、シクロスポリンＣ化合物（Ｒａは１－ヒドロキシエチルである）、シクロスポリンＤ化合物（Ｒａはイソプロピルである）、又はシクロスポリンＧ化合物（Ｒａはｎ－プロピルである）である。
【0011】
本明細書で使用される位置ナンバリングは、シクロスポリンのコアに特徴的な１１アミノ酸残基の一般的に使用される命名法及び番号割り当てを指す。シクロスポリンＡを基準として、アミノ酸残基は以下のようにナンバリングされ得る：メチル－ブテニル－トレオニン（ＭｅＢｍｔ（１）と略され得る）、アミノ酪酸（２））、サルコシン（Ｓａｒ（３）と略され得る）、Ｎ－メチルロイシン（４）、バリン（５）、Ｎ－メチルロイシン（６）、アラニン（７）、Ｄ－アラニン（８）、Ｎ－メチルロイシン（９）、Ｎ－メチルロイシン（１０）、Ｎ－メチルバリン（１１）。
【0012】
更なる態様では、本開示は、式１ｂ
の化合物又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法に関し、
該方法は、式２ｂの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み、
式２ｂの化合物は、以下：
である。
該方法は、式２ｂの化合物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下でアミノアルコールと反応させる工程を含み、
式２ｂの化合物は、以下：
【0013】
本明細書で使用される「Ｈ」という用語は、水素を指す。本明細書で使用される「Ｃ１～Ｃ６アルキル」という用語は、任意の異性体配置の１～６個の炭素原子を含む飽和又は不飽和アルキル炭化水素部分として定義される。直鎖の直鎖アルキル、例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、ｎ－ブチル、１－ペンチル、ｎ－ヘキシルが含まれる。分枝アルキル（すなわち、分岐Ｃ３～Ｃ６アルキル）、例えばイソプロピル、ｓｅｃ－ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、２－ペンチル、３－ペンチル、イソペンチル、ｔｅｒｔ－ペンチル、ネオペンチル及びヘキシルの異性体も含まれる。「Ｃ１～Ｃ６アルキル」の定義内に更に含まれるのは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシル等の環状異性体である。不飽和Ｃ１～Ｃ６アルキルの例としては、ビニル、アリル、ブテニル、ペンテニル、及びヘキセニル、並びに例えば１個以上の二重結合を含む他のアルケニル又はアルキレン部分、例えばペンタジエニルが挙げられるが、これらに限定されない。「Ｃ３～Ｃ６」という用語は、同様に理解されるべきであるが、３～６個の炭素原子の範囲を含む部分を表す。
【0014】
一実施形態では、Ｃ１～Ｃ６アルキル置換基は、上記で定義したような非置換炭化水素部分である。任意の実施形態では、Ｃ１～Ｃ６アルキルは、１個以上の置換基で置換されていてもよく、それにより、１個以上の水素原子は、当該置換基又は水素以外の部分との結合で置き換えられる。
【0015】
置換アルキル（例えば置換Ｃ１～Ｃ６アルキル）のような「置換（された）」という用語は、１個以上の水素が、独立して、少なくとも１個以上の（例えば、２個、３個、又はそれ以上）置換基、例えばハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシル（－ＯＨ）、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、アミノ（－ＮＨ２）、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオアルキル、ニトロ、シアノ、カルボニル、カルボキシルアルコキシカルボニル、アリール及びヘテロアリールで置換されている部分又はラジカルを指し得る。
【0016】
「ハロゲン」という用語は、「ハロ」又は「ハロゲン化物」と交換可能であり、クロロ、ブロモ、ヨード又はフルオロ原子を指し得る。「ハロアルキル」は、１個以上の水素原子が１個以上のハロゲン原子によって置き換えられているアルキル置換基を指す。ハロアルキルの例は、トリフルオロメチル等のトリフルオロアルキルである。
【0017】
「ヒドロキシル」という用語は、－ＯＨラジカルを指す。いくつかの実施形態では、水素は、例えば当技術分野内のヒドロキシ保護基で置換されてもよい。「アルコキシル」等の用語は、アルキル化ヒドロキシル置換基、すなわち水素がアルキル基で置き換えられていることを意味する。「Ｃ１～Ｃ６アルコキシ」は、ヒドロキシ水素を上記で定義したようなＣ１～Ｃ６アルキルで置き換えることを指す。例としては、メトキシ、イソプロポキシ、フェノキシ又はｔ－ブトキシが挙げられる。
【0018】
「アミノ」という用語は、－ＮＨ２ラジカルを指し得る。いくつかの実施形態では、水素は、例えば保護基、又はアルキル等の１個以上の更なる置換基で置換されてもよい。「モノアルキルアミノ」という用語は、水素の１つがアルキル、例えば上記で定義されたようなＣ１～Ｃ６アルキル（すなわち、－ＮＨＲ（式中、Ｒはアルキルである））で置き換えられているアミノラジカルを指す。「ジアルキルアミノ」は、両方の水素が独立してアルキル（すなわち、－ＮＲＲ’であり、ここで、Ｒ及びＲ’はアルキルであり、同じ（例えばジメチルアミノ）であっても異なっていてもよい）で置き換えられるアミノラジカルを指す。「チオアルキル」は、ラジカル－ＳＲ’’を指し得、式中、Ｒ’’は、アルキル、例えば上記で定義されるようなＣ１～Ｃ６アルキルである。「カルボニル」という用語は、ラジカル－Ｃ（Ｏ）－Ｒｃを指し得、式中、Ｒｃは、水素、アルキル、アリール、ヘタリール、ヒドロキシ、アルコキシ（例えば、－ＯＣＨ３）、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオアルキル等から選択され得る。「アルコキシカルボニル」又は「カルボキシル」という用語は、ラジカル－ＯＣ（Ｏ）－Ｒｃを指し得、ここで、Ｒｃは、アルキル（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル、例えば、メチル、ｔｅｒｔ－ブチル）、アリール、ヘタリール、アルコキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオアルキル等から選択される。
【0019】
いくつかの実施形態では、２つの隣接するＲ１及びＲ２置換基（又は隣接するＲ５又はＲ６置換基）は、共に環、例えばＣ３～Ｃ６シクロアルキル環を形成するように共に結合されてもよい。本明細書で使用される「シクロアルキル」は、飽和又は不飽和の非芳香族炭化水素環である。隣接するＲ１及びＲ２置換基（又は隣接するＲ５又はＲ６置換基）が共に環を形成することによって形成される部分の例は、例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル及びシクロヘキシルである。一実施形態では、２つの隣接するＲ１及びＲ２置換基（又は隣接するＲ５又はＲ６置換基）が結合してシクロプロピル環を形成する。
【0020】
「ヘテロ」という用語は、化合物又は置換基を説明するために使用される場合、１個以上の炭素原子が酸素、窒素又は硫黄原子で置き換えられていることを意味する。本開示の更なる実施形態では、Ｒ１及びＲ２等の隣接する置換基、又は置換基Ｒ５及びＲ６が共に結合して、ヘテロシクロアルキル環、例えばＣ３～Ｃ６ヘテロシクロアルキル環を形成する。別段の指示がない限り、「ヘテロシクロアルキル」は、環構造の少なくとも一部を形成し、少なくとも１個以上の炭素原子が酸素、窒素又は硫黄原子で置き換えられている（及び３～６個の炭素原子を含むＣ３～Ｃ６ヘテロシクロアルキルの場合）飽和又は不飽和の非芳香族環を指す。例えば、置換基Ｒ１及びＲ２又は置換基Ｒ５及びＲ６は、共に結合して、少なくとも１つのヘテロ原子を含む４員、５員又は６員の飽和非芳香族環を形成してもよい。ヘテロシクロアルキル環は、Ｏ、Ｎ又はＳから選択される少なくとも１つのヘテロ原子を含み得る。
【0021】
式１ａ、１ｂ、２ａ又は２ｂの化合物の置換基Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルから選択され得る。一実施形態では、Ｒａは、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルからなる群から選択される。別の実施形態では、Ｒａはエチルである。
【0022】
開示される方法の一実施形態では、本明細書の式で定義されるＲ１及びＲ２は両方とも水素である。別の実施形態では、Ｒ１又はＲ２の少なくとも１つは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、例えばメチルである。更なる実施形態では、本明細書で定義される式のＲ５及びＲ６の少なくとも１つは水素である。あるいは、Ｒ５及びＲ６は両方とも水素である。本開示による方法の更に別の実施形態では、Ｒ５はＣ１～Ｃ６アルキル（例えば、メチル）であり、Ｒ６はＨ（水素）である。更なる実施形態では、Ｒ１ Ｒ２、Ｒ５及びＲ６は全て水素として選択される。
【0023】
本開示による実施形態では、式のＲ３及びＲ４は、Ｈ、Ｃ１～Ｃ６アルキル、置換Ｃ１～Ｃ６アルキル、アリール、置換アリール、ベンジル、カルボニル、カルボキシル、スルホニルから独立して選択されるか、又はＲ３及びＲ４は共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル環を形成する。好ましい実施形態では、Ｒ３及びＲ４は両方とも－ＣＨ３（メチル）である。本方法の別の実施形態では、本明細書の式に定義されるＲ３及びＲ４の少なくとも１つはメチルである。なお更なる実施形態では、Ｒ３及びＲ４の少なくとも１つは、カルボニル、又はカルボキシル置換基、例えばｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、又は窒素基を保護するために使用することができるが、窒素原子の更なる官能化のために後で除去することができる類似のものである。
【0024】
別の実施形態では、Ｒ３及びＲ４が共に結合して、Ｃ３～Ｃ６シクロアルキル又はヘテロシクロアルキル環を形成する。例えば、置換基Ｒ３及びＲ４は、４員、５員又は６員の飽和非芳香族環を形成するために共に結合されてもよい。本発明の式の化合物に関連して、互いに結合する隣接するＲ３及びＲ４置換基によって形成されるシクロアルキル環は、例えば、アゼチジン、ピロリジン又はピペリジンを含み得る。ヘテロシクロアルキル環は、環構造の少なくとも一部を形成する飽和又は不飽和の非芳香族環であってもよく、少なくとも１個以上の炭素原子が、Ｒ３及びＲ４が結合している窒素に加えて、酸素、窒素又は硫黄原子によって置き換えられている。置換基Ｒ３及びＲ４は、共に結合して、それらが結合している窒素原子に対する少なくとも１つの更なるヘテロ原子、例えば、Ｏ、Ｎ又はＳから選択される少なくとも１つの更なるヘテロ原子を含む４員、５員又は６員飽和非芳香族環を形成してもよい。一実施形態では、Ｒ３及びＲ４は、モルホリン残基を形成するように共に結合される。任意の実施形態では、Ｒ３及びＲ４によって形成されるシクロアルキル又はヘテロシクロアルキル部分は、１個以上の水素原子が当該置換基との結合で置き換えられている、上で定義したような１個以上の置換基で置換されていてもよい。
【0025】
本発明で定義されるハロゲン化トリアルキルシリルは、式Ｒ７Ｒ８Ｒ９ＳｉＸ（式中、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９はアルキル置換基（例えば、Ｃ１～Ｃ６アルキル）から選択され、Ｘはハロゲン化物、好ましくは塩化物である）で定義される化合物であり得る。一実施形態では、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９は同じアルキル置換基である。好ましい実施形態では、本開示による方法で使用されるハロゲン化トリアルキルシリルは、塩化トリメチルシリル（ＴＭＳＣｌ、又は（ＣＨ３）ＳｉＣｌ）である。一実施形態では、式２ａ又は２ｂの化合物を、１．０～３当量又は１．８～２．４当量のハロゲン化トリアルキルシリル、例えば塩化トリメチルシリルの存在下で、本明細書で定義される式３のアミノアルコールと反応させることができる。別の実施形態では、記載された反応過程は、１．８～２．４当量のハロゲン化トリアルキルシリル、例えば塩化トリメチルシリルの存在下で実施され得る。
【0026】
ＴＭＳＣｌ（塩化トリメチルシリル）等のハロゲン化トリアルキルシリルの使用は、所望の反応生成物の転化率及び収率を増加させること、及び特に加水分解付加物、例えばＳａｒ－３－ヒドロキシシクロスポリンの形成に対する出発物質（例えば、化合物２、又は式２ａ若しくは２ｂの化合物）の損失を減少させることがわかった。驚くべきことに、反応は、結果として、モレキュラーシーブ（例えば、３Å又は４Å）又は同様のタイプの乾燥剤の非存在下で行われ得る。
【0027】
式２ａ又は２ｂの化合物を、３～５当量の式３
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５及びＲ６は、本明細書で定義される通りである）のアミノアルコールと反応させることができる。一実施形態では、式２ａ又は２ｂの化合物を、４～５当量のアミノアルコールと反応させる。
【0028】
一実施形態では、アミノアルコール化合物はアミノエタノール化合物であり、式中、Ｒ５、Ｒ６、Ｒ１及びＲ２は水素として選択される。好ましい実施形態では、アミノアルコールはジメチルアミノエタノールである。他の実施形態では、Ｒ３又はＲ４の少なくとも１つは、Ｃ１～Ｃ６アルキル、例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチルから選択される。他の実施形態では、Ｒ３又はＲ４の少なくとも１つは、より不安定な置換基、例えばカルボニル又はカルボキシル残基から選択することができ、これらは、例えばアミノ置換基の更なる官能化のために、下流の処理工程で任意に除去することができる。
【0029】
本明細書に開示される方法によれば、式２ａ若しくは２ｂの化合物、又は化合物２を、銅塩の存在下で式３のアミノアルコール化合物と反応させる。銅塩は、銅（ＩＩ）塩であってもよい。好ましい実施形態では、銅塩は銅トリフラートである。銅塩、例えば銅トリフラートは、好ましくは実質的に無水であり、方法の一実施形態では、反応に使用する前に前処理に供して、任意に高温下で、例えば真空乾燥によって任意の微量の残留水又は酸を除去することができる。
【0030】
本開示による方法の一実施形態では、式２ａ又は２ｂの化合物を、３～４当量の銅塩の存在下でアミノアルコールと反応させる。好ましい実施形態では、本開示による方法で使用される銅塩は、銅トリフラートである。一実施形態では、方法で使用される銅塩（例えば、銅トリフラート）の量は、式２ａ又は２ｂの化合物に対して３．６当量である。
【0031】
本明細書に開示される方法の具体的な一実施形態では、式１ａ又は１ｂの化合物は、１．８～２．４当量（例えば、２．４当量）の塩化トリメチルシリル及び３～４当量（例えば、３．６当量）の銅トリフラートの存在下で、式２ａ又は２ｂの化合物と３～５当量（例えば、４．２当量）の式３のアミノアルコールとの反応によって調製される。
【0032】
式２ａ又は２ｂの化合物に関して、置換基Ｒｂは、アリール、置換アリール、又はヘテロアリール又は置換ヘテロアリールであり得る。
【0033】
本明細書で使用される「アリール」という用語は、１つ（単環式）又はそれを超える（例えば二環式）芳香環を有する炭素環系を指し、例としては、フェニル、ナフタレニル、アントラセニル等が挙げられ得るが、これらに限定されない。アリール環ラジカルは、その環原子のいずれか１つで式２ａ又は２ｂの硫黄原子に結合していてもよい。「置換」アリールという用語は、アリール部分又はラジカルを指し、１個以上の水素原子が、独立して、Ｃ１～Ｃ６アルキル、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシル（－ＯＨ）、Ｃ１～Ｃ６アルコキシル、アミノ（－ＮＨ２）、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、チオアルキル、ニトロ、シアノ、カルボキシルアルコキシカルボニル、アリール及びヘテロアリールを含むがこれらに限定されない少なくとも１個以上の（例えば、２個、３個、又はそれ以上）置換基で置き換えられている。置換基は、化合物に結合していないアリール部分の環原子のいずれか１つを特徴とし得る。
【0034】
「ヘテロアリール」という用語は、環原子の１つがＳ、Ｏ及びＮから選択される少なくとも１個の原子で置き換えられており、残りの原子が炭素である１個以上（例えば、二環式）の芳香環を有する環状芳香環系を指す。環状芳香族環系は、例えば、５～１０個の環原子を含んでもよく、１個、２個又はそれ以上の環を含んでもよい。「置換ヘテロアリール」は、１個以上の水素原子が、独立して、本明細書で定義されるような少なくとも１個以上の（例えば、２個、３個、又はそれ以上）置換基で置き換えられているヘテロアリール部分を指す。ヘテロアリールラジカルは、化合物の環原子のいずれかで化合物に結合していてもよい。ヘテロアリール置換基の例としては、ピリジン、ピリミジン、ピラジン、チアゾール、オキサゾール、ベンゾチアゾール、ベンゾイミダゾール、フラン、キノリン、ピラゾール及びイミダゾールが挙げられるが、これらに限定されず、これらは任意に置換されていてもよい。
【0035】
本発明による方法の更なる実施形態では、式１ａ、１ｂの化合物又は化合物１の調製方法は、銅塩、例えば銅トリフラート及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で式２ａの化合物をアミノアルコールと反応させる工程を含んでもよく、化合物は、以下：
（式中、Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルから選択され、アミノアルコール化合物及びハロゲン化トリアルキルシリルは、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせに従って定義される）である。好ましくは、Ｒａはエチルである。関連する実施形態では、銅塩は銅トリフラートであり、ハロゲン化トリアルキルシリルは塩化トリメチルシリルである。
【0036】
本発明による方法の更に別の実施形態では、式１ａ、１ｂの化合物又は化合物１の調製方法は、銅塩、及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で式２ｂの化合物をアミノアルコールと反応させる工程を含んでもよく、化合物は、以下：
（式中、Ｒａは、エチル、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルから選択され、アミノアルコール化合物及びハロゲン化トリアルキルシリルは、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせに従って定義される）である。好ましくは、Ｒａはエチルである。関連する実施形態では、銅塩は銅トリフラートであり、ハロゲン化トリアルキルシリルは塩化トリメチルシリルである。
【0037】
本開示は、さらに、化合物１
又はその薬学的に許容され得る塩の調製のための方法であって、
方法は、化合物２
を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で、ジメチルアミノエタノールと反応させる工程を含む、方法に関する。
方法は、化合物２
【0038】
この方法の好ましい実施形態では、銅塩は、銅トリフラート等の銅（ＩＩ）塩であり、ハロゲン化トリアルキルシリルは塩化トリメチルシリルである。
【0039】
この方法の別の実施形態では、３～５当量のジメチルアミノエタノールを化合物２と反応させる。別の実施形態では、４～５当量のジメチルアミノエタノールが使用される。使用される銅塩、例えば銅トリフラートの量は、３～４当量であり得る。特定の実施形態では、反応過程で使用される銅塩、例えば銅トリフラートの量は３．６当量である。更なる実施形態では、化合物２を、１．８～２．４当量のハロゲン化トリアルキルシリル、例えば塩化トリメチルシリルの存在下でジメチルアミノエタノールと反応させる。
【0040】
この方法の具体的な実施形態では、化合物２を、２．４当量の塩化トリメチルシリル及び３．６当量の銅トリフラートの存在下において、４．２当量のジメチルアミノエタノールと反応させる。
【0041】
本明細書で使用される場合、「当量」という用語は、化合物２、又は式２ａ若しくは２ｂの化合物に対するモル当量を指す。
【0042】
本発明による方法は、一実施形態では、反応溶媒又は媒体として無水ＴＨＦ（テトラヒドロフラン）中で行われる。反応は、不活性雰囲気下で行ってもよい。反応は室温条件（例えば２０～２５℃）で行ってもよい。好ましくは、反応は実質的に無水条件下で行われる。任意に、試薬、中間体又は出発物質のいずれか１つを乾燥又は処理して、反応過程に導入する前に微量の水を除去することができる。
【0043】
更なる態様では、本開示は、式１ａの化合物又は式１ｂの化合物、化合物１又はその塩の調製のための方法に関し、該方法は、
ａ）塩基の存在下で、シクロスポリンＡとジスルフィド化合物（例えばピリジルジスルフィド）とを反応させる工程、及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で、ジメチルアミノエタノールと反応させる工程、を含む。
ａ）塩基の存在下で、シクロスポリンＡとジスルフィド化合物（例えばピリジルジスルフィド）とを反応させる工程、及び
ｂ）工程ａ）の生成物を、銅塩及びハロゲン化トリアルキルシリルの存在下で、ジメチルアミノエタノールと反応させる工程、を含む。
【0044】
当該方法において、工程ｂ）は、本明細書で定義される反応条件のいずれか１つ又は組み合わせの下で、及び式１ａ、１ｂの化合物１のいずれか、又は実施例に記載される化合物のいずれか１つの調製のために実施され得る。当該方法が式１ａ又は１ｂの化合物の調製に関するものであり、Ｒａがエチルではないが、１－ヒドロキシエチル、イソプロピル及びｎ－プロピルから選択される場合、工程ａ）のシクロスポリンＡを必要に応じてシクロスポリンＣ、Ｄ又はＧで置き換えることができる。
【0045】
本開示の化合物及び中間体は、様々な立体異性体形態及び混合物で存在し得る。式に指定又は図示される立体中心に加えて、本開示は、それらのエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体又は他の混合物、並びに多形、溶媒和物、水和物、錯体、遊離形態又は塩形態も含み得る。別段の指示がない限り、式に指定も図示もされていない、又は具体的に指定／記載されていない１個以上の不斉中心を含む本開示の範囲内の化合物は、全てのエナンチオマー、ジアステレオマー、又はそれらの混合物、ラセミ体若しくはその他のものも含み得る。当技術分野で周知の方法によって決定される、任意の光学的に純粋な又は立体化学的に純粋な立体異性体、並びに立体異性体の任意の組み合わせの使用も含まれ得る。任意に、本発明の化合物はまた、それらの同位体、例えば、原子が重水素を有する水素又は炭素－１３を有する炭素等の同位体で置き換えられた化合物を含んでもよい。
【0046】
本明細書で定義されるように、薬学的に許容され得る化合物は、一般に安全で、非毒性であり、生物学的にも他の点でも望ましくないものではなく、許容可能であり、ヒトにおける医薬使用に適合する化合物である。薬学的に許容され得る塩は、その生物学的特性を保持し、非毒性であり、薬学的使用に適合する化合物の塩である。
【0047】
化合物１、又は式１ａ若しくは１ｂの化合物は、本明細書に記載の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせによる方法によって得ることができる。化合物１の調製について記載される一般的な方法は、他の又は関連するシクロスポリン類縁体の調製にも適用され得る。これらは、例えば、最初にシクロスポリン化合物（例えば、シクロスポリンＣ、Ｄ、Ｇ、又は他の類縁体）をジピリジルジスルフィドと反応させてチオピリジル中間体（２’－（２－チオピリジル）－Ｓａｒ］３－シクロスポリンＣ、又はＤ、又はＧ等）を形成する工程、続いて、本明細書に記載の実施形態による、銅塩、例えば銅トリフラート及びハロゲン化トリアルキルシリル（ＴＭＳＣｌ等）の存在下で、この中間体とアミノアルコール化合物との反応を含む第２の工程を含む方法によって調製され得る。
【0048】
更なる態様では、上記の実施形態のいずれか１つ又は組み合わせで定義される方法（すなわち、化合物１、又は式１ａ若しくは１ｂの化合物）によって調製された化合物は、疾患又は医学的状態の予防及び／又は治療に使用され得る。それらは、疾患又は病状を予防及び／又は治療するための医薬品の製造に更に使用され得る。疾患又は状態の例としては、細胞、組織又は器官の損傷に関連する疾患又は状態が挙げられるが、これらに限定されない。
【0049】
以下の実施例は、本発明を説明する役割を果たすが、これらは、本発明の範囲を限定するものとして理解されるべきではない。
実施例
実施例
【0050】
実施例１－化合物１の調製
工程１：化合物２又は［２’－（２－チオピリジル）－Ｓａｒ］３－シクロスポリンＡ）は、国際公開第２０１９／０１６５７２号に記載されている一般的な方法に従ってシクロスポリンＡから調製することができる。
工程１：化合物２又は［２’－（２－チオピリジル）－Ｓａｒ］３－シクロスポリンＡ）は、国際公開第２０１９／０１６５７２号に記載されている一般的な方法に従ってシクロスポリンＡから調製することができる。
【0051】
工程２：化合物１を調製するための化合物２とジメチルアミノエタノールとの反応を、表１に概説されるように種々の条件下で実行し、ＨＰＬＣによって分析した。
【0052】
無水ＴＨＦ中の化合物２（純度９７．８％）及びジメチルアミノエタノールの溶液を調製し、不活性雰囲気下、無水ＴＨＦ中の銅トリフラート（真空乾燥）、及び存在する場合はモレキュラーシーブ又は更なる試薬の懸濁液に添加した。使用前に、銅トリフラート、モレキュラーシーブを、例えば真空下で乾燥させた。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌し、その後、反応混合物をＨＰＬＣによって分析した。
【0053】
【0054】
化合物１は、乾燥剤（表１、エントリ番号１）としてモレキュラーシーブの存在下で当技術分野による方法を使用して調製することができるが、かなりの量の化合物２が副生成物（Ａ）としてＳａｒ－３－ヒドロキシシクロスポリンＡに変換されることが観察された。大量の望ましくない副生成物の生成は、コストの観点から、また追加の精製負荷のために望ましくない。
【0055】
しかしながら、反応過程からモレキュラーシーブを省いても、ヒドロキシ付加物への変換は減少しなかった（表１、エントリ番号２参照）。しかしながら、予想外にも、ハロゲン化トリアルキルシリル化合物、すなわち、試薬としての塩化トリメチルシリル（ＴＭＳＣｌ）の添加が、化合物２の化合物１への変換の効率を改善することができることが見出された（表１、エントリ番号４参照）。対照的に、水捕捉剤として塩化アセチルを使用すると、反応速度が低下し、更にヒドロキシ副生成物Ａの形成の減少に関して影響を及ぼさなかった（表１、エントリ番号３参照）。
【0056】
１．８～２．４当量の塩化トリメチルシリル（ＴＭＳＣｌ）を反応混合物に添加すると、乾燥剤としてモレキュラーシーブが存在しない場合であっても、化合物２から化合物１への変換効率が改善されることが見出された。約１０％未満のヒドロキシシクロスポリン副生成物Ａが反応過程で形成されることが観察された（表２参照）。
【0057】
【0058】
モレキュラーシーブと比較して、ＴＭＳＣｌの存在下で行われた比較反応の実行で改善された反応プロファイルが観察され（表３を参照）、これらの反応を、化合物２及び反応試薬の同じバッチを用いて行った。反応は実質的に無水条件下で行った。反応を実施する前に、化合物２を真空下６０℃で乾燥させ、Ｃｕ（ＯＴｆ）２及びモレキュラーシーブ（４Å）を真空下１２０℃で４時間乾燥させた。
【0059】
反応１：化合物２及びジメチルアミノエタノールのＴＨＦ中溶液を、Ｃｕ（ＯＴｆ）２及びＴＨＦを含有するフラスコに０℃で添加した。ＴＭＳＣｌを添加し、反応混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。
【0060】
反応２：化合物２及びジメチルアミノエタノールのＴＨＦ中溶液を、Ｃｕ（ＯＴｆ）２及び４Åモレキュラーシーブを含むＴＨＦ中フラスコに０℃で添加した。反応混合物を室温に加温し、１６時間撹拌した。
【0061】
反応を２連で行った。粗反応混合物をＨＰＬＣ（Ｔｈｅｒｍｏ Ｈｙｐｅｒｓｉｌ ＧＯＬＤ（商標）、直径２５０×４．６ｍｍ、粒径５μｍ、カラム温度４０℃、Ａ相：１０００ｍＬのＨ２Ｏ＋０．５ｍＬのギ酸／Ｂ相：１０００ｍＬのアセトニトリル＋０．５ｍＬのギ酸）によって分析した。
【0062】
【0063】
化合物２からのヒドロキシシクロスポリン副生成物の形成は、分子ふるいの代わりにＴＭＳＣｌを添加剤として使用した場合に有意に減少することが観察された。
【0064】
実施例２－化合物１の調製（１００ｇスケール）
【0065】
ＴＨＦ中の化合物２（１００ｇ）及びジメチルアミノエタノール（２８．５４ｇ、４．３当量）の溶液を、無水ＴＨＦ中のＣｕ（ＯＴｆ）２（乾燥、９９．２６ｇ、３．６当量）及び塩化トリメチルシリル（１９．８８ｇ、２．４当量）を含む反応容器に加えた（総体積１０００ｍＬ）。得られた反応混合物を室温で１６時間撹拌した。１６時間後、反応混合物を水でクエンチした。粗反応混合物をＨＰＬＣ（ＨＰＬＣ結果：６６．３％の化合物１、６．１％のＡ及び３．５％のＢ、並びに０％の化合物２）によって分析した。
【0066】
水相をｉ－ＰｒＯＡｃで抽出した。有機相をリンゴ酸水溶液で２回洗浄した。水相を合わせ、ｐＨ値を８に調整し、ｉ－ＰｒＯＡｃで再度抽出した。合わせた有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮し、カラムクロマトグラフィーによって精製して、７５．２２ｇの化合物１を得た（収率７６．５％）（特性評価は文献、例えば国際公開第２０１９／０１６５７２号Ａ１に一致する；１Ｈ－ＮＭＲ（４００ ＭＨｚ ＣＤＣｌ３，δ（ｐｐｍ））：６．０１、サルコシン共鳴。
【0067】
実施例３－シクロスポリン類縁体の調製
【0068】
実施例２の化合物１の調製について記載される手順を一般的に適用して、他のアミノアルコール中間体に基づく類縁体化合物を調製した（表４参照）。粗反応混合物のＬＣ－ＭＳ分析は、全ての反応において、形成されたヒドロキシシクロスポリンＡ副生成物の量が低いままであることを実証した。
【0069】
【0070】
追加の化合物を、実施例２の方法論に基づいて以下のように調製する：
Ｃｕ（ＯＴｆ）２触媒（５．０ｇ、１６．３９ｍｍｏｌ）をＴＨＦ １５ｍＬに入れ、０℃に冷却する。３５ｍＬのＴＨＦ中の化合物２（５．０ｇ、３．８１ｍｍｏｌ）及びアミノアルコール化合物Ｇ２５（１．９ｇ、１６．３９ｍｍｏｌ）の溶液をフラスコに加えた。ＴＭＳＣｌ（１．０ｇ、９．１５ｍｍｏｌ）を最後に混合物に滴下した。次いで、混合物を２０～２５℃で撹拌した。１６時間後、反応混合物を１５０ｍＬの水に注ぎ入れた。Ｋ２ＣＯ３水溶液を添加してｐＨを１０に調整した。ｉ－ＰｒＯＡｃ（５０ｍｌ）を混合物に添加し、不溶性物を濾別した。濾液をｉ－ＰｒＯＡｃ（５０ｍＬ＊２）で抽出した。有機相をリンゴ酸水溶液で２回洗浄した。水相を合わせ、ｐＨ値を８に調整し、ｉ－ＰｒＯＡｃで再度抽出した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮して１．４ｇの化合物３を得た。生成物をクロマトグラフィーによって更に精製した。化合物３（（１Ｈ－ＮＭＲ（４００ＭＨｚ ＣＤＣｌ３，δ（ｐｐｍ））：５．９０，サルコシン残基）；ＨＲＭＳエレクトロスプレー（Ｍ＋１）１３１７．８０；１３１８．７０；同位体分布による質量１３１６．９４（１００％）、１３１７．９４（７３．５％））。
【0071】
【0072】
【0073】
【国際調査報告】