特表 2023-519888 コロナウイルス感染症およびレトロウイルス感染症ならびにＣ型肝炎を処置するための薬物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-15

(54)【発明の名称】コロナウイルス感染症およびレトロウイルス感染症ならびにＣ型肝炎を処置するための薬物

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/115 20060101AFI20230508BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20230508BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20230508BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230508BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20230508BHJP

   A61K 47/02 20060101ALI20230508BHJP

【ＦＩ】

A61K31/115

A61P37/02

A61P31/14

A61P1/16

A61K9/08

A61K47/02

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022558419

(86)(22)【出願日】2020-11-19

(85)【翻訳文提出日】2022-11-17

(86)【国際出願番号】 RU2020050334

(87)【国際公開番号】W WO2021194375

(87)【国際公開日】2021-09-30

(31)【優先権主張番号】2020112322

(32)【優先日】2020-03-26

(33)【優先権主張国・地域又は機関】RU

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522377789

【氏名又は名称】ラスカヴィー， ヴラディスラフ ニコラエヴィッチ

【氏名又は名称原語表記】ＬＡＳＫＡＶＹＩ， Ｖｌａｄｉｓｌａｖ Ｎｉｋｏｌａｅｖｉｃｈ

(74)【代理人】

【識別番号】100133503

【弁理士】

【氏名又は名称】関口 一哉

(72)【発明者】

【氏名】ラスカヴィー， ヴラディスラフ ニコラエヴィッチ

(72)【発明者】

【氏名】シュルドフ， ミハイル アルカデヴィッチ

【テーマコード（参考）】

4C076

4C206

【Ｆターム（参考）】

4C076AA11

4C076BB15

4C076CC07

4C076DD23

4C206AA01

4C206AA02

4C206CB02

4C206MA02

4C206MA05

4C206MA86

4C206NA14

4C206ZA75

4C206ZB07

4C206ZB33

(57)【要約】

本発明は医学および獣医学に関し、より詳細には薬理学に関し、脂質エンベロープを有するＲＮＡウイルスによって引き起こされたウイルス感染症、特にコロナウイルス感染症、ＡＩＤＳおよびＣ型肝炎を処置するために使用され得る。本発明は、特許請求される目的のための薬物の範囲を拡大する。技術的な結果は、副作用および毒性作用を有しないヒトおよび動物の体内での内因性ホルムアルデヒドの産生を活性化させる、細胞内での防腐効果を有する薬物の創出である。技術的な結果は、コロナウイルス感染症およびレトロウイルス感染症ならびにＣ型肝炎を処置するために単独で５ｍｌの注射投与量にて筋肉内注射するための薬物として、等張な塩化ナトリウム溶液中０．０７３～０．０７５％のホルムアルデヒドを含む免疫調節薬を使用することで達成される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

コロナウイルス感染症、レトロウイルス感染症およびＣ型肝炎の処置のための、注射につき５ｍＬの単回用量で筋肉内注射するための薬剤としての、等張な塩化ナトリウム溶液中０．０７３～０．０７５％の量でギ酸アルデヒドを含有している免疫調節薬剤の使用。

【請求項2】

７日間にわたり１日１回前記薬剤を投与することによる、請求項１に記載の薬剤の使用。

【請求項3】

２回目が１回目の注射後７日目または１回目の注射後１ヶ月のいずれかで前記薬剤を２回導入することによる、請求項１に記載の薬剤の使用。

【請求項4】

前記１回目の注射後２日目、３日目および１０日目に前記薬剤を導入することによる、請求項１に記載の薬剤の使用。

【請求項5】

各注射間１２時間の間隔で３回、続いて１日または２日後に各注射間１２時間の間隔でさらに５回前記薬剤を導入し、続いて最後の注射の１日後に単回注射を実施し、続いて３日後に繰り返し単回注射を実施し、最後の注射の５日後に前記薬剤の最後の単回投与を実施することによる、請求項１に記載の薬剤の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は医学および獣医学に関し、より詳細には薬理学に関し、脂質エンベロープＲＮＡウイルスによって引き起こされたウイルス感染症、特にコロナウイルス感染症、ＡＩＤＳおよびＣ型肝炎を処置するために使用され得る。本発明により、特許請求されている目的向けの備蓄が拡大する。

【背景技術】

【0002】

Ｃ型肝炎を処置するための医薬が知られている（２００５年１月２０日に公開されたロシア国特許第２，２４４，５５４号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｋ３５／７８）を参照されたい）が、これは７０％超のベツリン含有量を有するシラカバ抽出物および薬学的に許容される担体を含有する。この医薬は、経口で患者に投与されている。

【0003】

この医薬は薬草の調合薬であることから、ウイルスに対する保護の活性化を可能とするだけでなく、ヒトおよび動物の体の恒常性もまた変化させ、アレルギー患者の可能性がある者や妊娠中および授乳中の女性において、ある成分に対するアレルギー反応を引き起こす可能性がある多成分系であり得る。これまでにベツリンと他の薬物との相互作用は確認されていないが、これが排除されてもいないことに留意されたい。

【0004】

少なくとも７５重量％２５±１０ヌクレオチドのフラグメントを有し、好ましくは少なくとも９９％の純度を有し、２：１～３：１の重量比でマンニトールと組み合わせられた高度に精製された酵母からのＲＮＡ抽出物に由来し（２０１６年９月１０日に公開されたロシア国特許第２，５９７，１５０号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｋ３１／７１０５）を参照されたい）、同時にこの酵母ＲＮＡ抽出物が組成物の重量の少なくとも５０％を構成している組成物が知られている。この組成物は、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、肝炎ウイルス科、ヘルペスウイルス科のウイルス、ならびにエンテロウイルスおよびアデノウイルスによって引き起こされたウイルス性疾患の処置のために意図されている。加えて、修飾酵母ＲＮＡはインフルエンザウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、性器ヘルペスウイルス、ヒト免疫不全ウイルスおよびコクサッキーウイルスＢ群の複製を阻害することが可能である。

【0005】

ただし、この薬物はこれらのウイルス全てを完全に除去することはできず、例えばＣ型肝炎ウイルスのウイルス量の減少のみが可能である。加えてＲＮＡへのこうした深刻な干渉により、体の恒常性に確実に悪影響を与えてしまう。

【0006】

錠剤形状である重症型ウイルス感染症の処置のための組成物が知られている（２０１５年１０月８日に公開されたロシア国特許第２，５５９，１７９号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｋ９／１０）を参照されたい）が、これは組換えインターフェロン－α、組換えインターフェロン－β、組換えインターフェロン－γといった群から選択された組換えインターフェロン；メキシドール、エモキシピン、ジブノール、α－リポ酸、カルニチン塩酸塩といった群から選択された抗酸化剤；アセチルシステイン、システイン、リジン、アルギニンといった群から選択されたアミノ酸；オロト酸カリウム、リボキシン、メチルウラシルといった群から選択されるタンパク質同化作用再生剤、および成形基剤を含有している。

【0007】

ただし、こうした化合調合薬を使用する際には制限がある。薬物は、肝疾患、重度のうつ病および／または希死念慮、てんかんの病歴および妊娠においては注意して使用されなければならない。この薬物を用いた抗痙攣薬を投与している患者、ＮＹＨＡ分類による心不全ステージＩＩＩ～ＩＶの患者、および心筋症、骨髄不全、貧血または血小板減少の患者の処置においては慎重に実施されなければならない。

【0008】

インフルエンザに対する防腐剤が知られている（２００９年５月２０日に公開されたロシア国特許第２，３５５，３９１号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｋ３１／０４５）を参照されたい）が、ある一定の成分の比で陽イオン界面活性剤、低分子量のグリコールまたはグリセロール、およびアンモニウム塩、および構成成分、尿素、ならびに追加的にはアンモニウム塩として硝酸アンモニウムを含有している。陽イオン界面活性剤としては、ドデシルジメチルアンモニウムブロミドまたはドデシルジメチルアンモニウムクロリドが使用される。低分子量グリコールとしては、トリエチレングリコール、または１，２－プロピレングリコール、またはポリプロピレングリコールが使用される。構成成分としては、水またはエチルもしくはイソプロピルアルコールの８～２０％水溶液が使用される。この発明は、目的とする生成物の長期保存中の殺生物性活性の増加、作用スペクトルの拡大、刺激特性および毒性の低減を提供する。

【0009】

ただし、この薬物は体外のウイルスを死滅させるためのみに使用され得る。この薬物はウイルス性疾患を処置すると想定されてはいない。

【0010】

ＲＮＡ含有ウイルス（好ましくはインフルエンザＡウイルスまたはライノウイルス）により引き起こされたウイルス感染症の予防および処置向けの薬剤もまた知られている（２０１４年７月２７日に公開されたロシア国特許第２，５２４，３０４号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｍ１５／００）を参照されたい）。この薬剤は、活性部分としてはｏ－アセチルサリチル酸の塩を、目的とする添加剤としてはリジン、アルギニン、オルニチンおよびジアミノ酪酸を含む群から選択されたアミノ酸を、含有する。この薬剤は、鼻または口を通した吸入によるエアロゾル投与を意図している。

【0011】

この薬物のデメリットは、アセチルサリチル酸の使用が重度の呼吸器刺激を引き起こす可能性があるという点である。アミノ酸とｏ－アセチルサリチル酸の塩との複合体を用いた治療によってこうした可能性を減少させたとしても、これはアレルギー反応の可能性を完全に除外するわけではない。

【0012】

蕁麻疹、アセチルサリチル酸および他のＮＳＡＩＤを摂取することで引き起こされた鼻炎、血友病、出血傾向、低プロトロンビン血症、解離性大動脈瘤、門脈圧亢進症、ビタミンＫ欠乏症、肝機能不全および／または腎機能不全、グルコース－６－リン酸脱水素酵素の欠乏症、ライ症候群、小児の年齢（１５歳まで、ウイルス性疾患の基礎環境にて高体温症を有する小児における、ライ症候群発症のリスク）、アセチルサリチル酸および他のサリチル酸に対する過敏症の病歴を有する人々には、この組成物を使用した際に高いリスクが存在している。

【0013】

アセチルサリチル酸は、少ない用量であったとしても体からの尿酸の排出を減少させる。これによって、素因がある患者に痛風の急性発作を引き起こす可能性が生じる。

【0014】

アセチルサリチル酸は多くの場合、例えばカルシウム摂取を制限もしくは体からのカルシウムの排出を増加させる薬物であるカルシウムチャネルブロッカーといった他の薬物と相互作用し、または利尿薬（スピロノラクトン、フロセミドなど）の有効性を減少させることに留意されたい。

【0015】

特許請求されているものに最も近いものは、有効成分および目的とする添加剤を含有する免疫調整薬剤である（１９９７年４月２７日に公開されたロシア国特許第２，０７７，８８２号明細書（特許分類ＩＰＣ Ａ６１Ｋ ３１／１１５）を参照されたい）。有効成分としてはホルムアルデヒドを、目的とする添加剤としてはＮａＣｌおよび蒸留水を含むが、一方で０．０７～０．２４重量％のホルムアルデヒド、０．９～０．９５重量％のＮａＣｌ、１００％に達するまでの水を含有する注射液である。

【0016】

こうした類似物質は、抗ウイルス薬の設計が解決された課題とは全く異なっていることを示している。したがって、ウイルス感染症に対する保護の新規手段の探索は非常に意味のあることである。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0017】

【特許文献1】ロシア国特許第２，２４４，５５４号明細書

【特許文献2】ロシア国特許第２，５９７，１５０号明細書

【特許文献3】ロシア国特許第２，５５９，１７９号明細書

【特許文献4】ロシア国特許第２，３５５，３９１号明細書

【特許文献5】ロシア国特許第２，５２４，３０４号明細書

【特許文献6】ロシア国特許第２，０７７，８８２号明細書

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0018】

特許請求されている発明の技術的な課題は、ヒトおよび動物におけるＲＮＡ含有ウイルスにより引き起こされた感染症の処置にとって効果的である注射可能な設計と、コロナウイルス感染症、レトロウイルス感染症およびＣ型肝炎に対する医薬品の備蓄の拡大である。

【課題を解決するための手段】

【0019】

技術的な結果は、副作用および毒性作用がない状態でヒトおよび動物の体内で内因性ギ酸アルデヒドの産生を活性化させる、細胞内の防腐効果を有する薬剤の設計である。

【0020】

技術的な結果は、コロナウイルス感染症、レトロウイルス感染症およびＣ型肝炎の処置のための、注射につき５ｍＬの単回用量で筋肉内注射するための薬剤として、等張な塩化ナトリウム溶液中０．０７３～０．０７５％の量でギ酸アルデヒドを含有している免疫調節薬剤を使用することで獲得される。疾患の重症度によっては、この薬剤は様々なスキームに従って投与される。すなわち、７日間にわたり１日につき１回または２回、２回目に関しては１回目の注射後７日目または１回目の注射後１ヶ月のいずれかである。この薬剤は１回目の注射後２日目、３日目および１０日目に投与され得る。特に重篤な場合、この薬剤は各注射間１２時間の間隔で３回投与され、続いて１日または２日後に各注射間１２時間の間隔でさらに５回投与され、続いて最後の注射の１日後にこの薬剤は１回投与され、続いて３日後に２回目の単回注射を行い、この後、最後の注射の５日後にこの薬剤の最後の単回投与が実施される。

【0021】

著者らに知られている特許ならびに科学的情報および技術的情報の情報源は、細胞内内因性ギ酸アルデヒドの産生の活性化に基づくＲＮＡ含有ウイルス、特にヒトおよび動物におけるコロナウイルス感染症、ＡＩＤＳ、Ｃ型肝炎によって引き起こされたウイルス感染症の処置のための手段を何ら記載していない。この新たな機能および提案された目的は、既に知られている特性から明確に生じているわけではない。薬物の投与方法は、これまでどこかにて記載されてはいない。

【発明を実施するための形態】

【0022】

現在、恒常性に悪影響を及ぼすことなく、ヒトおよび動物の体の細胞内部での感染性疾患（ウイルス）の病原体を破壊することができる一般的な防腐薬は存在しない。既存の防腐剤は、原則として、外部環境で病原体を不活化するために使用される。

【0023】

最も関心が高いのは、自然界で最も単純な化合物の１つであるギ酸アルデヒド（ホルムアルデヒド）である。この物質は、外部環境にて感染性疾患の病原体を破壊する化学的性質の防腐薬（有機化合物）として、組織学および病理解剖学における細胞および組織の化学防腐剤として、分類されている。

【0024】

生体中に内因性ホルムアルデヒドが存在することが現在確認されているが、これは天然の代謝産物であり、多くの体の生化学反応に関与している。内因性ホルムアルデヒドの濃度は０．２～０．５ｍＭに達することがあり、血液中でのその含有量は０．０５～０．１ｍＭであり得る（Ｍ．Ｃａｓａｎｏｖａ，Ｈ．Ｄ．Ｈｅｃｋ，Ｊ．Ｉ．Ｅｖｅｒｉｔｔ，Ｗ．Ｗ．Ｈａｒｒｉｎｇｔｏｎ，Ｊ．Ａ．Ｐｏｐｐ．Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｂｌｏｏｄ ｏｆ Ｒｈｅｓｕｓ ｍｏｎｋｅｙｓ ａｆｔｅｒ ｉｎｈａｌａｔｉｏｎ ｅｘｐｏｓｕｒｅ／／Ｆｏｏｄ Ｃｈｅｍ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．Ｉｎｔ．Ｊ．Ｐｕｂｌ．Ｂｒ．Ｉｎｄ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ．Ａｓｓｏｃ．１９８８，２６，７１５；Ｘ．Ｓｏｎｇ，Ｘ．Ｈａｎ，Ｆ．Ｙｕ，Ｊ．Ｚｈａｎｇ，Ｌ．Ｃｈｅｎ，Ｃ．Ｌｖ，Ａ ｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ ｐｒｏｂｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ Ｃ＝Ｎ ｉｓｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｉｎ ｌｉｖｉｎｇ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｉｎ ｖｉｖｏ．／／Ｔｈｅ Ａｎａｌｙｓｔ ２０１８，１４３，４２９；Ｈｕｍａｎ Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ａｓ ａｎ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ：Ｉｔｓ Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ Ｍａｙ Ｂｅ ａ Ｍｅａｎｓ ｏｆ Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｔｈｅｒａｐｙ Ｙｕｒｉ Ｌ．Ｄｏｒｏｋｈｏｖ Ｅｋａｔｅｒｉｎａ Ｖ．Ｓｈｅｓｈｕｋｏｖａ Ｔａｔｉａｎａ Ｅ．Ｂｉａｌｉｋ Ｔａｔｉａｎａ Ｖ．Ｋｏｍａｒｏｖａ／／ＢｉｏＥｓｓａｙｓ ２０１８，１８００１３６）。ホルムアルデヒドは、全ての細胞へと容易に浸透し、その濃度が生理学的な基準を超える場合には容易に除去されることで知られている。体内のホルムアルデヒドの生理学的レベルは、Ｐ４５０モノオキシゲナーゼ、ミトコンドリアＡ１ＤＨ２およびＡＤＨ５またはホルムアルデヒド脱水素酵素をコードする遺伝子を含む３つの別個の経路にてホルムアルデヒドを酸化する細胞酵素が連続して作用することで終始維持されている（Ｄｏｒｏｋｈｏｖ Ｙ．Ｌ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｃ ｍｅｔｈａｎｏｌ：ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｐａｔｈｗａｙｓ ａｎｄ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｏｌｅ／／Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｒｅｖ．２０１５．９５（２），６０３－６４４；Ｙｕｒｉ Ｌ．Ｄｏｒｏｋｈｏｖ Ｅｋａｔｅｒｉｎａ Ｖ．Ｓｈｅｓｈｕｋｏｖａ Ｔａｔｉａｎａ Ｅ．Ｂｉａｌｉｋ Ｔａｔｉａｎａ Ｖ．Ｋｏｍａｒｏｖａ Ｈｕｍａｎ Ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ａｓ ａｎ Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ：Ｉｔｓ Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ Ｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ Ｍａｙ Ｂｅ ａ Ｍｅａｎｓ ｏｆ Ｉｍｐｒｏｖｉｎｇ Ｔｈｅｒａｐｙ／／ＢｉｏＥｓｓａｙｓ ２０１８，１８００１３６）。ホルムアルデヒドは、メタンおよびメチルメタクリラートのジハロゲン誘導体を生体内変換する間、ミクロソームジメチラーゼの作用の下で肝臓にて形成される（Ｍａｌｙｕｔｉｎａ Ｎ．Ｎ．，Ｔａｒａｎｅｎｋｏ Ｌ．Ａ．Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｏｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｂｏｄｙ／／Ｍｏｄｅｒｎ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ｏｆ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｅｄｕｃａｔｉｏｎ．－２０１４．－Ｎｏ．２［Ｒｕｓｓ．］；ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｓｃｉｅｎｃｅ－ｅｄｕｃａｔｉｏｎ．ｒｕ／ｒｕ／ａｒｔｉｃｌｅ／ｖｉｅｗ？ｉｄ＝１２８２６（ｄａｔｅ ｏｆ ａｃｃｅｓｓ：１７．０３．２０２０））。ホルムアルデヒドは、チミジン、プリンおよび他の酸を合成するために体に使用され、セリンおよびそれよりは少ない程度である他のアミノ酸を破壊する間に形成される。ホルムアルデヒドが一連の酵素変換反応を通じて血液に入ると、肝臓内で酸化されてギ酸となり、一方でメチルアルコールが肝臓内で形成される。さらには、ギ酸はギ酸デヒドロゲナーゼの作用の下で代謝されてＣＯ_２となる、または一炭素残基の交換におけるテトラヒドロ葉酸系に関与している。ホルムアルデヒドは、タンパク質、アミン、アミド、各タンパク質および核酸と容易に相互作用する（Ｍａｌｙｕｔｉｎａ Ｎ．Ｎ．，Ｔａｒａｎｅｎｋｏ Ｌ．Ａ．Ｐａｔｈｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｎｄ ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ ｏｎ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｂｏｄｙ／／Ｍｏｄｅｒｎ ｐｒｏｂｌｅｍｓ ｏｆ ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ ｅｄｕｃａｔｉｏｎ．－２０１４．－Ｎｏ．２［Ｒｕｓｓ．］；ＵＲＬ：ｈｔｔｐ：／／ｓｃｉｅｎｃｅ－ｅｄｕｃａｔｉｏｎ．ｒｕ／ｒｕ／ａｒｔｉｃｌｅ／ｖｉｅｗ？ｉｄ＝１２８２６（ｄａｔｅ ｏｆ ａｃｃｅｓｓ：１７．０３．２０２０））。

【0025】

ホルムアルデヒドは、少量にてヒトおよび動物の全ての内液中で確認されており、尿中でのみ、例えば血液中よりも２０％を超えている。これは、ホルムアルデヒドが体から排出される主要な方法を指している。

【0026】

試験は、低濃度のホルムアルデヒド（例えば、１０ｍｍｏｌ／Ｌ）がＨｅＬａ細胞の増殖を促進することを示している。ただし、ホルムアルデヒド濃度が６２．５ｍｍｏｌ／Ｌに達していると、これは細胞成長を阻害する。

【0027】

一定の体内ホルムアルデヒド濃度は、内因性ホルムアルデヒドは重要な代謝産物であることから細胞の生命活動にとって重要である。ただし、ホルムアルデヒド濃度が顕著に増加した場合には、これは遺伝毒性物質としても作用する可能性がある（Ｒｉｃｈａｒｄ Ｊ．Ｈｏｐｋｉｎｓｏｎ，Ｃｈｒｉｓｔｏｐｈｅｒ Ｊ．Ｓｃｈｏｆｉｅｌｄ．Ｄｅｃｉｐｈｅｒｉｎｇ Ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｏｆ Ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ Ｆｏｒｍａｌｄｅｈｙｄｅ：Ｌｉｎｋｉｎｇ Ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ Ａｌｄｅｈｙｄｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ／／ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２０１８，５７，６，９０４－９０６）。

【0028】

コロナウイルス感染症に属するブタ伝染性胃腸炎ウイルスの例を使用した場合、ホルマリンは０．０１％の濃度でウイルスを不活化することが確認された（Ｓｔｅｐａｎｅｋ Ｊ．，Ｍｅｎｓｉｋ Ｊ．，Ｐｏｓｐｉｓｉｌ Ｚ．，Ｒｏｚｋｏｎｙ Ｖ．Ｖｌｅｖ ｆｏｒｍａｌｉｎｕ ａ ｂｅｔａｐｒｏｐｉｏｌａｋｔｏｎｕｎａ ｉｎｆｅｋｃｎｏｓｔ ａ ａｎｔｉｇｅｎｉｃｉｔｕ ｐｕｖｏｄｃｅ ｖｉｒｏｖｅｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｉｔ ｄｕ ｐｒａｓａｔ（ＶＧＲ）／／Ｖｅｔｅｒ．Ｍｅｄ．（ＣＳＳＲ）．－１９７３．－Ｖ．１８．－＃５．－Ｐ．２６９－２８０）。３７℃のホルマリンの影響下では、このウイルスはちょうど１５０分後にはその病原性を失った（（古典的な腸内バリアント）／／Ｖｉｒｕｓ Ｉｎｆｅｃ．Ｐｒｏｃｉｎｅｓ．Ａｍｓｔｅｒｄａｍ ｅｃｔ．－１９８９．－Ｐ．１３９－１５３）。他のコロナウイルス感染症（マウスの肝炎ウイルス、ニワトリの感染性気管支炎、ネコの感染性腹膜炎、ウシの胃腸炎および呼吸性感染症のウイルス、ヒト胃腸炎など）もまたホルムアルデヒドに感受性がある。

【0029】

開発された薬剤は、等張な塩化ナトリウム溶液中のギ酸アルデヒド溶液である。これは一般的な調製方法を用いて取得され、有効成分は非常に低用量で担体中に溶解され、使用された濃度では正常な細胞には毒性作用を何ら引き起こさない。

【0030】

薬剤は体に複数の効果をもたらし、恒常性を維持する一助となる。この薬剤は、抗原特異免疫反応の活性化を促進する新規分類の薬物に属し、この開発によって体から病原体を完全に排除した状態とすることができる。

【0031】

本発明者らの意見では、外因性ギ酸アルデヒド（ホルムアルデヒド）の非経口投与により、ヒトリンパおよび血液中での濃度上昇がもたらされる。次にこれは、体の細胞から細胞内の空間へのホルムアルデヒドの流出を妨ぐ。このことによって、Ｌｅ Ｃｈａｔｅｌｉｅｒ－Ｂｒｏｗｎの法則のうち１つに従い、細胞内部のホルムアルデヒド量の上昇がもたらされる。これは、反応生成物のうちの１つの濃度が上昇することで、内因性ホルムアルデヒドの形成に（左方に）シフトすることを示している。これによって、細胞内部のウイルスの不活化が発生する。

【0032】

ギ酸アルデヒド水溶液は独特の刺激臭を有し、どの比率でも水とアルコールを混和可能である、透明で無色の液体である。

【0033】

ギ酸アルデヒド（ＨＣＯＨ）は、アルデヒドの部類の代表例である。これは、刺激臭を有する無色の気体であり、３０．０３のモル重量、２０℃での密度が０．８１５、融点が９２℃、沸点が１９．２℃である。これは水、アルコールによく溶解する。

【0034】

注射用の等張な塩化ナトリウム溶液は、０．８５～０．９５％の濃度で塩化ナトリウムを含み、塩味がある無色透明な液体である。この溶液は無菌であり、発熱性ではない。

【0035】

塩化ナトリウムは、塩味があり無臭の立方晶または白色の結晶粉末である。これは水に可溶である（１：３）。

【0036】

特許請求されている薬剤は、わずかに塩味があり、透明、無色、無臭の液体である。

【0037】

この薬剤は以下のように調製される。

【0038】

３６．５～３７．５％のギ酸アルデヒドの薬液を２部（重量）取り分け、薬剤中のギ酸アルデヒド濃度が０．０７３～０．０７５％になるまで、無菌の注射用の０．８５～０．９５％の塩化ナトリウム溶液（無菌）９９８部（重量）にこれを加える。生成物は、１５～３５℃の範囲内の温度で暗所にて保存する。

【0039】

実施例１．３７％のギ酸アルデヒドの薬液を０．２ｍＬ取り分け、無菌の０．９％（または０．９５％）の等張な塩化ナトリウム溶液９９．８ｍｌにこれを加える。溶液の混合物を十分に撹拌させる。得られる生成物のギ酸アルデヒドの最終濃度は０．０７４重量％になる。

【0040】

実施例２．３６．５％のギ酸アルデヒドの薬液を０．２ｍＬ取り分け、無菌の０．９％（または０．９５％）の等張な塩化ナトリウム溶液９９．８ｍｌにこれを加える。溶液の混合物を十分に撹拌させる。得られる生成物のギ酸アルデヒドの最終濃度は０．０７３重量％になる。

【0041】

実施例３．
１４Ｃで標識したホルムアルデヒドで細胞をインキュベートすることにより、内因性ホルムアルデヒドの産生を活性化させる外因性ホルムアルデヒドの能力を試験した。１．７ＴＢｑ／Ｍの比放射能および１０．１ＧＢｑ／Ｌ（５．９ｍＭ溶液）の放射能濃度および９８％の放射化学的純度で標識したホルムアルデヒドを使用した。新しい３７％のホルムアルデヒド（Ｓｉｇｍａ，ＵＳＡ）を使用し、必要とされる濃度の溶液を得た。

【0042】

ネガティブコントロールとして、放射線標識したホルムアルデヒドでインキュベートされていない細胞試料を使用した。

【0043】

ＵＬＴＩＭＡ ＧＯＬＤ ＬＬＴシンチレータ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，ＵＳＡ）のＴｒｉ－Ｃａｒｂ ２８００ ＴＲ β－カウンタ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ，ＵＳＡ）で試料の放射能を測定した。試料のアリコート（０．１ｍＬ）をシンチレータ（０．９ｍＬ）と十分に混合し、混合物を調製した後わずかに２時間以内に放射能を測定した。

【0044】

４８ウェルのポリスチレンプレートの表面上で細胞を培養した。

【0045】

初代ヒト歯肉線維芽細胞および頚部腺がんＨｅＬａ細胞を細胞培養物として使用した。６％のＣＯ_２の雰囲気、３７℃にて、１０％のウシ胎児血清および抗生物質（ペニシリンおよびストレプトマイシン）を追加したＩＭＤＭ培地で細胞を培養した。

【0046】

実験中、細胞を１ｃｍのウェル径を有する４８ウェルのポリスチレンプレートへ、ウェルあたり１２，０００個の細胞の量で、それぞれのタイプの試料について３回反復して（０．５ｍｌの培地に）入れた。細胞を播種して２４時間インキュベートした後、培地を除去し、細胞を０．５ｍＬの生理食塩水ですすぎ、ホルムアルデヒドを含まない生理食塩水またはこれを含む生理食塩水をコントロールおよび実験ウェルに加え、３０分、１時間および２時間インキュベートさせた（最終濃度は０．１１％、０．０７４％、０．０１４％、０．００２８％および０．０００５６％、５倍希釈、１０，０００ｐｐｍ／ウェル）。培地中でのホルムアルデヒドの効果を試験するため、生理食塩水中のホルムアルデヒド溶液５０μｌ（１／１０の体積）を、４５０μｌの培地（ホルマリン濃度は、これまでに言及したものよりも１０倍高く、結果として、生理食塩水中で細胞インキュベーションをした場合と同じ濃度のホルムアルデヒド溶液を得た）とともにコントロールおよび実験ウェルに加えた。インキュベート後、培地の２つのアリコート１００μｌ（倍量）を上清から取り分け、取り入れた総放射能を測定した。続いてホルムアルデヒド溶液を除去し、リン酸塩緩衝液で細胞を２回洗浄し、培養プラスチック面から細胞を解離するため、０．２５％のトリプシン溶液（Ｓｉｇｍａ，ＵＳＡ）で処理した。８００ｇで１０分間、遠心分離によって細胞懸濁液を沈降させ、トリプシン上清からアリコートを取り分けた。２２０μｌの生理食塩水中に細胞沈殿物を再懸濁し、２つのアリコート１００μｌを取り分け、試料の放射能を測定した。

【0047】

試料の放射能に関するデータを取得した後、試料の比放射能および初期体積に基づき、画分中のホルムアルデヒドの割合を算出（ｃａｌｃｕｌｅｔｅｄ）した。ホルムアルデヒド溶液のモル比放射能に基づき、画分中のホルムアルデヒド濃度を分析した。

【表1】

【0048】

表１から確認され得るように、０．０７４％の濃度で生理食塩水中に溶解されたホルムアルデヒドで細胞をインキュベートすることで、０．１１％のホルムアルデヒド溶液中での細胞インキュベーションと比較すると、初代ヒト歯肉線維芽細胞中および頚部の腺がん中の内因性ホルムアルデヒドの産生をそれぞれ１８．４％および３２％活性化する。

【0049】

培地中で希釈されたホルムアルデヒドで細胞をインキュベートした場合、同様の結果が得られたことに留意されたい。例えば、０．０７４％のホルムアルデヒド溶液で細胞をインキュベーションすることで、０．１１％のホルムアルデヒド溶液中での細胞インキュベーションと比較すると（表２）、初代ヒト歯肉線維芽細胞および頚部の腺がん中の内因性ホルムアルデヒドの産生をそれぞれ２０．６％および３０．２％活性化する。

【表2】

【0050】

したがって、試験は他の濃度（０．１１％、０．０２８％、０．０００５２％および０．０１４％）と比較した場合、使用した０．０７４％のホルムアルデヒドのみが初代ヒト線維芽細胞および頚部ＨｅＬａの腺がん中の内因性ホルムアルデヒドの産生を活性化することができる。これは、Ｌｅ Ｃｈａｔｅｌｉｅｒ－Ｂｒｏｗｎの法則に対応している。これは、反応生成物のうち１つの濃度の上昇に関して（本発明者らの場合には、０．０７４％の濃度の外因性ホルムアルデヒド）、平衡は細胞中の初期段階の（内因性）ホルムアルデヒドの形成を増加させる方向にシフトしたことを示している。

【0051】

以下は様々なウイルス感染症用の薬剤の使用例である。

【0052】

治療目的のため、薬剤を１回の注射で５ｍＬ筋肉内投与するが、投与スキームは異なっていてもよい。すなわち：
－第１のスキームによれば、薬剤は１回目の注射後、１日目および７日目の２回投与し、
－第２のスキームによれば、１ヶ月の間隔をあけて２回、
－第３のスキームによれば、１回目の注射後、２日目、３日目および１０日目、
－第４のスキームによれば、薬剤を各注射間１２時間の間隔で３回投与し、続いて１～２日後に各注射間１２時間の間隔で５回以上投与する。続いて最後の注射の１日後、薬剤を１回投与し、続いて３日後に繰り返し単回注射を実施し、最後の注射の５日後に最後の単回注射を実施する。
－第５のスキームによれば、７日間にわたり１日につき１回、投与する。

【0053】

プロトコルの注射の数は、疾患の重症度によって増加させてもよい。

【0054】

実施例４．雌ブタ、乳飲み仔ブタおよび離乳仔ブタについて、ブタのコロナウイルス感染症（ブタ伝染性胃腸炎）を記録する。

【0055】

伝染性胃腸炎が好ましくない飼育場では、雌ブタは分娩後に肺の疾患を示し、肺と腸の疾患が離乳仔ブタで記録され、乳飲み仔ブタでは腸の疾患が記録されている。

【0056】

伝染性胃腸炎を記録した女王細胞のうち１つにおいて、１５３頭の新生仔ブタとともに１６頭の雌ブタ類似体に関して実験を行った。この実験を行うために０．０７４％のギ酸アルデヒド溶液を調製した。動物の第１群（８頭の雌ブタと７５頭の新生仔ブタ）に、雌ブタ１頭あたり５ｍＬ、仔ブタ１頭あたり２ｍＬの割合で０．０７４％のギ酸アルデヒド溶液を注射した。コントロール群（８頭の雌ブタと７８頭の新生仔ブタ）に、同量の生理食塩水を注射した。薬剤を２回、すなわち１日目と１回目の注射後７日目に投与した。

【0057】

動物を最大２週齢まで臨床的に観察し、伝染性胃腸炎の臨床症状および動物の死亡を記録した。得られた結果を表３に示す。

【表3】

【0058】

本発明者らによる試験の結果は、雌ブタおよび新生仔ブタに０．０７４％のギ酸アルデヒド溶液を同時に導入することで、伝染性胃腸炎による乳飲み仔ブタの発症率および死亡率を有意に減少させたことを示していた。２つの関連性（雌ブタおよび新生仔ブタ）におけるこの作用は、２つの観点から考慮されなければならない。雌ブタへの薬剤の１回目の投与により、母親の体内の病原体数を減少させ、新生児に対する感染用量を減少させた。仔ブタへの薬物の導入は、治療効果をもたらした。

【0059】

表から確認され得るように、発症率は５０％（７４．４～２４．０）減少した。これは、母親のウイルス量を減少させる予防効果に関連していた。死亡率は、仔ブタへの薬物の投与後の治療効果により６倍減少した。

【0060】

実施例５．レトロウイルス感染症（ＡＩＤＳ）の例における薬剤の防腐効果試験。６人のボランティアに試験を実施した。

【0061】

最初の５人の患者には、１回目の注射後、２日目、３日目および１０日目に５ｍＬの用量で薬物を投与し、最後の（６番目の）患者には、５ｍＬの用量で２回（１回目の導入後１ヶ月に２回目）薬物を投与した。
処置結果：

【0062】

患者１、初期ウイルス量は７５０，０００ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は２，１８７ＲＮＡ／ｍＬであり、３４２分の１のウイルス量の減少が認められた。

【0063】

患者２、初期ウイルス量は１５０，２０１ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は１，２３０ＲＮＡ／ｍＬであり、１２２分の１のウイルス量の減少が認められた。

【0064】

患者３、初期ウイルス量は９７，１７１ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は１，１０１ＲＮＡ／ｍＬであり、ウイルス量の減少は８８分の１であった。

【0065】

患者４、初期ウイルス量は７８，１２２ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は１，０３７ＲＮＡ／ｍＬであり、７５分の１のウイルス量の減少が認められた。

【0066】

患者５、初期ウイルス量は７８，１２２ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は１，８３７ＲＮＡ／ｍＬであり、４２．５分の１のウイルス量の減少が認められた。

【0067】

患者６、初期ウイルス量は１１，１８２ＲＮＡ／ｍＬ、処置後２ヶ月のウイルス量は１，１６５ＲＮＡ／ｍＬであり、９分の１のウイルス量の減少が認められた。

【0068】

全ての患者は、体に悪影響を及ぼすことなくかつ毒性作用なく、細胞レベルでの薬剤の防腐効果によりウイルス量の急激な減少を示した。

【0069】

実施例６．ウイルス性Ｃ型肝炎の例における薬剤の防腐効果試験。１０人のボランティアに処置を実施した。

【0070】

全ての患者はウイルス複製の再発性変化を示し、ウイルス量は１～３ヶ月ごとに１常用対数で変動していた（周期的に減少および上昇）。３人の患者においては、この患者らの疾患の血清反応陰性期に処置を開始した。

【0071】

７人の患者では、ウイルス量の最小化が観察された。すなわち、最終レベルは１，０００ＲＮＡコピー／ｍＬであり、一方で初期レベルは２，５００，０００ＲＮＡコピー／ｍＬであった。

【0072】

疾患の血清反応陰性期における治療開始時には、３症例でＰＣＲが陰性であると認められた。

【0073】

ウイルス性肝炎に罹患している全ての患者は、自身の全身状態、睡眠、気分の改善、能力の上昇、および身体活動に対する許容性の良好化が認められた。患者の社会的活動は増加し、家族内および仕事における関係性は改善した。

【0074】

実施例７．患者Ｍ、４６歳、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２コロナウイルス感染症（既往歴、臨床徴候およびＸ線写真に基づく）。

【0075】

臨床徴候：高熱（３８～３９．２℃）、無益でしつこい咳、胸痛を伴う呼吸不全、倦怠感および中等度の頭痛。

【0076】

胸腔のＸ線パターン：肺野周辺部における炎症の小さな病巣の存在。

【0077】

抗生物質を用いた３日間にわたる処置は効果がなかった。

【0078】

以下のスキームに従い、処置を行った。５ｍＬの用量で薬剤を投与した。１２時間ごとに薬剤を３回注射し、続いて翌日１２時間ごとに薬剤を５回以上注射した。続いて翌日に薬物を１回注射で投与し、３日後にさらに注射で投与し、前回の注射の５日後に最後の注射で投与した。

【0079】

結果：臨床徴候は消失；Ｘ線写真では炎症の病巣は存在しなかった。薬物の副作用および毒性作用はなかった。

【0080】

実施例８．患者Ｓ、３５歳－コロナウイルス感染症（既往歴および臨床徴候に基づく）。

【0081】

臨床徴候：体温３７．２～３７．７℃、無益でしつこい咳、倦怠感および中等度の頭痛。患者はコロナウイルス感染症の確定診断を受けた人々との接触があった。抗生物質を用いた１０日間にわたる処置は効果がなかった。

【0082】

処置の過程は、以下のスキームに従って行った：７日間にわたり１日１回、５ｍＬの用量で筋肉内投与した。

【0083】

結果：臨床徴候は消失し、完全に回復した。薬物の副作用および毒性作用が存在しなかったことが認められた。

【0084】

実施例９．患者Ｓ、５６歳、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された（ＰＣＲ法）。

【0085】

処置開始時の臨床徴候：体温３９．２℃、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）による両側の肺損傷（各側で２５％）、乾性咳、胸痛、全身脱力感、発汗、嗅覚が働かない。疾患の１日目から、この患者は目に見える結果は得られなかったが抗生物質を摂取した。

【0086】

疾患の３日目には、以下のスキームに従い、特許請求されている薬剤を用いた処置を開始した：２４時間の間隔で７日間にわたり、毎日５ｍＬ薬剤を投与した。抗生物質は何ら使用しなかった。
結果。

【0087】

２日目には、咳が激しくなり、湿性咳の段階に変わった。体温は３７．４℃に低下し、頭痛が消失した。治療開始から３日目には体温は平熱（３６．６℃）に戻り、いずれの疼痛症状も消失した。全身状態は改善した。患者は抵抗力の変動を認め、発汗がなくなった。７日目には、患者は客観的に完全な回復を記録した。

【0088】

特許請求されている薬剤を用いて治療を開始した１４日目に、肺のＣＴスキャンを行った。実験結果に基づいた結論は「健康」である。炎症の徴候または残留している症状は何ら見られなかった。コントロールＰＣＲ試験は陰性であった。

【0089】

実施例１０．患者Ｒ、４６歳、ＣＯＶＩＤ－１９と診断された（ＰＣＲ法）。

【0090】

処置開始時の臨床徴候：体温３９．６℃、ＣＴによる両側の肺損傷（それぞれ、２０％および３０％）、乾性咳、胸骨後の疼痛、全身脱力感、発汗、不断の頭痛、嗅覚が働かない。

【0091】

特許請求されている薬剤を用いた処置を疾患の５日目に開始した。薬剤を２４時間の間隔で７日間にわたり毎日５ｍＬ投与した。抗生物質は何ら使用しなかった。
結果。

【0092】

特許請求されている薬剤を用いた処置の開始から２日目には、咳が激しくなり、湿性咳の段階に変わった。体温は３７．０℃に低下し、頭痛が消失した。治療開始から３日目には体温は平熱（３６．６℃）に戻り、いずれの疼痛症状も消失した。全身状態は改善した。患者は、自身の肺からの痰の能動的な排出、抵抗力の変動および発汗の消失を認めた。７日目には、客観的に、患者は完全な回復を記録した。

【0093】

特許請求されている薬剤を用いて治療を開始した１４日目に、肺のＣＴスキャンを行った。実験結果に基づいた結論は「健康」である。炎症の徴候または残留している症状は何ら見られなかった。コントロールＰＣＲ試験は陰性であった。

【0094】

したがって、薬剤は細胞内の防腐効果を有し、副作用および毒性作用がない状態で、ヒトおよび動物の体内にて内因性ギ酸アルデヒドの産生を活性化させる。

【国際調査報告】