特表 2023-520872 ピラゾリルプロパンアミド化合物およびその前立腺がんを処置するための使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-22

(54)【発明の名称】ピラゾリルプロパンアミド化合物およびその前立腺がんを処置するための使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/415 20060101AFI20230515BHJP

   A61K 31/4439 20060101ALI20230515BHJP

   A61K 31/517 20060101ALI20230515BHJP

   A61K 31/422 20060101ALI20230515BHJP

   A61K 31/506 20060101ALI20230515BHJP

   A61K 31/4192 20060101ALI20230515BHJP

   A61K 31/4155 20060101ALI20230515BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230515BHJP

   A61P 13/08 20060101ALI20230515BHJP

【ＦＩ】

A61K31/415

A61K31/4439

A61K31/517

A61K31/422

A61K31/506

A61K31/4192

A61K31/4155

A61P35/00

A61P13/08

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022559381

(86)(22)【出願日】2021-04-01

(85)【翻訳文提出日】2022-11-22

(86)【国際出願番号】 US2021025468

(87)【国際公開番号】W WO2021202936

(87)【国際公開日】2021-10-07

(31)【優先権主張番号】63/004,474

(32)【優先日】2020-04-02

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】504326686

【氏名又は名称】ユニバーシティ オブ テネシー リサーチ ファウンデーション

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】ナラヤナン， ラメシュ

(72)【発明者】

【氏名】ミラー， デュアン ディー．

(72)【発明者】

【氏名】ヒー， ヤーリー

(72)【発明者】

【氏名】ポンヌサミ， タマライ

(72)【発明者】

【氏名】ホワン， ドン－ジン

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086BC36

4C086BC42

4C086BC46

4C086BC60

4C086BC69

4C086GA07

4C086GA08

4C086GA09

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA81

4C086ZB26

4C086ZC41

(57)【要約】

本発明は、ピラゾリルプロパンアミド化合物、ならびに前立腺がん、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がん、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんを処置するためのその使用に関する。一部の実施形態では、前立腺がんは、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がんである。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

それを必要とする対象の前立腺がんを処置する方法であって、式Ｉ

【化53】

の構造［式中、
ＴはＯＨであり、
Ｒ^１はＣＨ_３であり、
ＹはＨ、ＣＦ_３、Ｆ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
ＺはＨ、ＮＯ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＮＨＣＯＲ、またはＣＯＮＨＲであるか、
あるいはＹおよびＺは、５から８員縮合環を形成し、
ＸおよびＤは、それぞれＣＨまたはＮであり、
Ｂは結合またはＣＨであり、Ｂが結合であるとき、Ｄ＝Ｂ－ＸはＤ－Ｘによって表され、
ＲはＨ、アルキル、ハロアルキル、アルキル－ＯＨ、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＯＨであり、
Ａは、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲからそれぞれ独立して選択される、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４のうちの少なくとも１つで必要に応じて置換された、少なくとも１個の窒素原子を有する５員不飽和ヘテロアリールであり、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せによって表される化合物の治療有効量を前記対象に投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記化合物が、式ＩＩＡまたは式ＩＩＢの化合物

【化54】

によって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記化合物が、式ＩＩＩの化合物

【化55】

［式中、
ＴはＯＨであり、
Ｒ^１はＣＨ_３であり、
ＹはＨ、ＣＦ_３、Ｆ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
ＺはＨ、ＮＯ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＮＨＣＯＲ、またはＣＯＮＨＲであるか、
あるいはＹおよびＺは、５から８員縮合環を形成し、
ＸはＣＨまたはＮであり、
ＲはＨ、アルキル、ハロアルキル、アルキル－ＯＨ、ＣＦ_３、ＣＨ_２Ｃｌ、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌ、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＯＨであり、
Ａは、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲからそれぞれ独立して選択される、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４のうちの少なくとも１つでそれぞれ必要に応じて置換されたピロール、ピラゾール、トリアゾール、またはイミダゾールであり、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せ
によって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記化合物が、式ＩＩＩＡまたは式ＩＩＩＢ

【化56】

の構造によって表される、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記化合物が、式ＩＶＡまたは式ＩＶＢ

【化57】

の構造によって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

前記化合物が、式Ｖ

【化58】

の構造［式中、
Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４は、それぞれ独立して、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲから選択され、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せ
によって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項7】

前記化合物が、式ＶＡまたは式ＶＢ

【化59】

の構造によって表される、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４が、ＣＮ、ＮＯ_２、ＣＦ_３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＲ、またはフェニルであり、前記フェニルが、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨで必要に応じて置換されている、請求項１に記載の方法。

【請求項9】

前記化合物が、下記の化合物

【化60】

【化61】

【化62】

【化63】

【化64】

【化65】

のいずれか１つによって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項10】

前記化合物が、下記の化合物

【化66】

【化67】

のいずれか１つによって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項11】

前記化合物が、化合物２６ａ

【化68】

によって表される、請求項１に記載の方法。

【請求項12】

前記前立腺がんが、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項13】

前記去勢抵抗性前立腺がんが、ＡＲ過剰発現去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ変異発現去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異発現去勢抵抗性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現去勢抵抗性前立腺がん、ｄ５６７ＥＳ発現去勢抵抗性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢抵抗性前立腺がんである、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記去勢感受性前立腺がんが、Ｆ８７６Ｌ変異発現去勢感受性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異去勢感受性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢感受性前立腺がんである、請求項１２に記載の方法。

【請求項15】

前記去勢感受性前立腺がんを処置することが、非去勢状況で、または単独治療として、または去勢感受性前立腺がん腫瘍がエンザルタミド、アパルタミド、および／またはアビラテロンに対して抵抗性があるときに実行される、請求項１２に記載の方法。

【請求項16】

前記去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）が、転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）、または高リスクｎｍＣＲＰＣである、請求項１２に記載の方法。

【請求項17】

アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）を施用することをさらに含む、請求項１に記載の方法。

【請求項18】

前記前立腺がんが、アンドロゲン受容体アンタゴニストによる処置に抵抗性がある、請求項１に記載の方法。

【請求項19】

前記アンドロゲン受容体アンタゴニストが、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ビカルタミド、アビラテロン、ＥＰＩ－００１、ＥＰＩ－５０６、ＡＺＤ－３５１４、ガレテロン、ＡＳＣ－Ｊ９、フルタミド、ヒドロキシフルタミド、ニルタミド、酢酸シプロテロン、ケトコナゾール、またはスピロノラクトンのうちの少なくとも１種である、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

前記前立腺がんが、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項21】

前記前立腺がんが、ダロルタミド抵抗性前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項22】

前記前立腺がんが、エンザルタミド抵抗性前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項23】

前記前立腺がんが、アパルタミド抵抗性前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【請求項24】

前記前立腺がんが、アビラテロン抵抗性前立腺がんである、請求項１に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

発明の分野
本発明は、ピラゾリルプロパンアミド化合物、ならびに前立腺がん、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がん、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんを処置するためのその使用に関する。

【背景技術】

【0002】

発明の背景
前立腺がん（ＰＣ）は、アメリカ人の男性で、肺がんに次いでがん関連死の２番目に多い原因である。前立腺がんは、その発症、進行、成長、および生存のために、アンドロゲン受容体（ＡＲ）シグナル伝達の活性化に依存する。

【0003】

放射線および根治的前立腺摘除で処置したＰＣ患者の約２０～４０％は、腫瘍再発を経験することになる。腫瘍再発後は、アンドロゲン除去治療またはアンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）がほとんどの患者の標準治療である。ＡＤＴは、外科的去勢（精巣摘除）または化学的去勢（ゴナドトロピン放出ホルモンアゴニストまたはアンタゴニストの注射）を通して実現され、これらは共に、精巣によるテストステロン生合成の低減を引き起こすものである。ＡＤＴに加え、二次ホルモン抑制が、フルタミド（１）、ビカルタミド（２）、ニルタミド（３）、エンザルタミド（４）、アパルタミド（５）、もしくはダロルタミド（６）などの抗アンドロゲンと呼ばれる直接競合リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）指向型ＡＲアンタゴニスト、または酢酸アビラテロン（７）などのアンドロゲン合成阻害、加えてプレドニゾンによって、提供される。二次ホルモン抑制（即ちＡＤＴに加えられる）は、去勢感受性ＰＣ（ＣＳＰＣ）または去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）を処置することが承認されており、疾患の進行をさらに効果的に遅延させるため、疾患の自然病歴におけるその早期使用に向けた承認傾向にある。

【0004】

ＡＤＴは、進行性ＰＣの初期には有効であるが、抗アンドロゲンと組み合わせた持続的ＡＤＴ処置は、ＰＣが難治性になる前の２～３年にわたり疾患をしばしば安定化させるだけであり、その結果、より侵襲的なＣＲＰＣ腫瘍表現型がもたらされ、腫瘍は（進行中のＡＤＴおよび）二次ホルモン治療に抵抗性を持つようになる。ビカルタミド（２）、エンザルタミド（４）、アパルタミド（５）、または酢酸アビラテロン（７）のいずれか１つに対する抵抗性は、開始後わずか数カ月で出現する可能性があり、研究は、ダロルタミド（６）がＣＰＲＣ集団において同様に振る舞う可能性があることを示唆している（ダロルタミド（６）はｍＣＳＰＣ用に承認された）。直接的（１～６）であろうと間接的（７）であろうとＣＲＰＣにおける二次ホルモン治療に対する抵抗性に関わらず、ＡＲシグナル伝達は腫瘍成長および疾患進行の基礎であり続ける。これに対応して、ＡＲ軸を阻害する新規なメカニズムが、ホルモン抵抗性ＰＣで求められている。

【0005】

ＣＲＰＣ進行の正確なメカニズムは、臨床上常に公知でもなくまたはそれらは相互に排他的でもないが、前臨床および臨床研究は、ＣＲＰＣの出現に対する数多くの寄与因子を実証し、これらには、（ｉ）腫瘍内アンドロゲン（例えば、副腎前駆体から合成されたＤＨＴ）の補償的生成、（ｉｉ）ＡＲ遺伝子増幅および過剰発現、（ｉｉｉ）ＡＲ ＬＢＤ点変異、（ｉｖ）同時調節タンパク質の発現の変更、（ｖ）ＡＲのリガンド非依存性活性化、（ｖｉ）構成的に活性な短縮型ＡＲスプライス変異体（ＡＲ ＳＶ）、および（ｖｉｉ）イントラクリンアンドロゲン代謝酵素の誘発が含まれる。直接および間接的抗アンドロゲン治療は全て、ＬＢＤでのＡＲを標的とし、最終的には、上述の抵抗メカニズムにより失敗に終わる。ビカルタミド（２）、エンザルタミド（４）、アパルタミド（５）、および酢酸アビラテロン（７）（４および５に対する７の交差抵抗性が一般的であり；フルタミド（１）およびニルタミド（３）は稀に使用される）、またはダロルタミド（６）（２０１９年に承認され；６に対する抵抗性のパターンが依然として出現している）に対して抵抗性を持つ患者を永続的に処置することが可能な新規な作用機序によるＣＲＰＣに向けたＡＲアンタゴニストの開発が、緊急に求められている。

【0006】

ＣＲＰＣのための臨床上の利益を得るためにまたはＣＲＰＣの出現を回避するために、次世代のＡＲ標的治療は理想的に、ＡＲの新規なおよび／または多数のドメインに結合できるべきであり、かつ重度に予備治療されたＣＰＲＣ集団に存在するおよび出現する広範なＡＲ配列全体にわたる広範なＡＲ機能を阻害できるべきである。そのような新規なアンタゴニストは、ＰＣが処置に対して漸進的にさらに難治性になるとき、ＡＲ軸の抑制を維持するのに十分な効力で、野生型（ｗｔ）、点変異体、ＡＲ ＳＶ、および／またはＡＲ過剰発現病原性状態の活性を理想的には維持する。

【0007】

非ＬＢＤ部位との結合およびＡＲタンパク質の分解は、ＣＲＰＣを合理的に標的とする有望な前臨床手法である。ＡＲの分解は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ＲＮＡ干渉、ＤＮＡ編集などの遺伝子ノックダウン技法により実現することができる。遺伝的手法は、かなりの治療の潜在性を有するにも関わらず、前立腺および転移性腫瘍にオリゴヌクレオチド（ポリアニオン性高分子）を送達する際の技術的な難しさに起因して、臨床的に困難なままである。さらに、腫瘍細胞へのオリゴヌクレオチドの取込みが不十分である。あるいは、ユビキチンプロテアソーム系（ＵＰＳ）を介してＡＲを分解する、タンパク質ノックダウン技術によるＡＲの標的化破壊は、臨床状況においてまだ決定的に試験がなされていない有望な選択肢のままである。

【0008】

最近の抗腫瘍研究では、腫瘍成長を選択的に阻害しかつこれらの腫瘍内でＡＲ（完全長）およびＡＲ ＳＶ（短縮型）を分解するＡＲアンタゴニストの発見および特徴付けが報告されている（Ponnusamy, et al. Cancer Res. 2017, 77, 6282-6298）。一連のアリールインドール－１－イルプロパンアミドおよびアリールインドリン－１－イルプロパンアミドは、選択的アンドロゲン受容体分解剤（ＳＡＲＤ）として報告されてきた（Hwang, et al. J. Med. Chem. 2019, 62, 491-511）。これらのＳＡＲＤ活性は、ＵＰＳ阻害剤研究により決定されたようにＵＰＳを通して媒介された（Ponnusamy, et al. Cancer Res. 2017, 77, 6282-6298; Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。ＳＡＲＤは、ＡＲを分解し、ＡＲ機能を阻害し、かつスクリーニングアッセイ（例えば、ＬＢＤ結合、転写阻害、ＡＲ分解、および抗増殖アッセイ）でのｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害効力、および承認されたＡＲアンタゴニストよりも大きいｉｎ ｖｉｖｏ有効性（Ｈｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイおよび様々なＡＲ依存性ＣＰＲＣ異種移植）を示すことが見出されてきた。
本明細書で記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、選択的アンドロゲン受容体分解剤（ＳＡＲＤ）でありかつｐａｎ－アンタゴニストである。これらの化合物は、有望な分布、代謝、および薬物動態特性を含む強力なＡＲアンタゴニスト活性と、強力なｉｎ ｖｉｖｏ抗腫瘍活性を含む広域ＡＲアンタゴニスト特性を示す。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】Ponnusamy, et al. Cancer Res. 2017, 77, 6282-6298

【非特許文献2】Hwang, et al. J. Med. Chem. 2019, 62, 491-511

【非特許文献3】Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0010】

発明の概要
一態様では、本発明は、それを必要とする対象の前立腺がんを処置する方法であって、式Ｉ

【化1】

の構造［式中、
ＴはＯＨであり、
Ｒ^１はＣＨ_３であり、
ＹはＨ、ＣＦ_３、Ｆ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
ＺはＨ、ＮＯ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＮＨＣＯＲ、またはＣＯＮＨＲであるか、
あるいはＹおよびＺは、５から８員縮合環を形成し、
ＸおよびＤは、それぞれＣＨまたはＮであり、
Ｂは結合またはＣＨであり、Ｂが結合であるとき、Ｄ＝Ｂ－ＸはＤ－Ｘによって表され、
ＲはＨ、アルキル、ハロアルキル、アルキル－ＯＨ、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＯＨであり、
Ａは、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲからそれぞれ独立して選択される、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４のうちの少なくとも１つで必要に応じて置換された、少なくとも１個の窒素原子および０、１または２個の二重結合を有する５員不飽和環であり、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せによって表される化合物の治療有効量を前記対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0011】

一部の実施形態では、前立腺がんは、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がんである。

【0012】

一部の実施形態では、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）は、転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）、または高リスクｎｍＣＲＰＣである。

【0013】

一部の実施形態では、去勢抵抗性前立腺がんは、ＡＲ過剰発現去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ変異発現去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異発現去勢抵抗性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現去勢抵抗性前立腺がん、ｄ５６７ＥＳ発現去勢抵抗性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢抵抗性前立腺がんである。

【0014】

一部の実施形態では、去勢感受性前立腺がんは、Ｆ８７６Ｌ変異発現去勢感受性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異去勢感受性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢感受性前立腺がんである。一部の実施形態では、去勢感受性前立腺がんを処置することは、非去勢状況で、または単独治療として、または去勢感受性前立腺がん腫瘍がエンザルタミド、アパルタミド、および／またはアビラテロンに対して抵抗性があるときに実行される。

【0015】

一部の実施形態では、本発明の方法はさらに、アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）を施用することを含む。

【0016】

一部の実施形態では、前立腺がんは、アンドロゲン受容体アンタゴニストにより処置に対して抵抗性がある。一部の実施形態では、アンドロゲン受容体アンタゴニストは、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ビカルタミド、アビラテロン、ＥＰＩ－００１、ＥＰＩ－５０６、ＡＺＤ－３５１４、ガレテロン、ＡＳＣ－Ｊ９、フルタミド、ヒドロキシフルタミド、ニルタミド、酢酸シプロテロン、ケトコナゾール、またはスピロノラクトンのうちの少なくとも１種である。

【0017】

一部の実施形態では、前立腺がんは、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんである。一部の実施形態では、前立腺がんは、ダロルタミド抵抗性前立腺がんである。一部の実施形態では、前立腺がんは、エンザルタミド抵抗性前立腺がんである。他の実施形態では、前立腺がんは、アパルタミド抵抗性前立腺がんである。一部の実施形態では、前立腺がんは、アビラテロン抵抗性前立腺がんである。

【0018】

例示を単純および明確にするため、図面中に示されている要素は、必ずしも縮尺通りに図示されていないことが理解されよう。例えば、要素の一部の寸法は、明確にするため、他の要素に比べて、誇大されていることがある。さらに、適切と考えられる場合、参照番号は、対応する要素または類似の要素を表示するよう、図面中に繰り返されていることがある。

【0019】

図面の簡単な説明
本発明と見なされる主題は、本明細書の結論部分において具体的に指摘され、明白に特許請求されている。しかし、本発明は、操作の統合および方法の両方に関して、その目的、特徴および利点と併せて、添付の図面と共に一読した場合、以下の詳細説明を参照することにより、最良に理解することができる。

【図面の簡単な説明】

【0020】

【図1】図１は、Ｆ８７６Ｌ－変異体ＡＲトランス活性化の拮抗作用を示す。フェニルアラニン８７６が、ロイシン（Ｆ８７６Ｌ）、ＧＲＥ－ＬＵＣ、およびＣＭＶ－ウミシイタケＬＵＣに変異したＡＲを、ＣＯＳ細胞にトランスフェクトした。細胞を、トランスフェクションから２４時間後に０．１ｎＭ Ｒ１８８１（アゴニスト）および用量応答のアンタゴニストで処理した。ルシフェラーゼアッセイを、トランスフェクションから４８時間後に行った。各化合物の効果は、アンタゴニストモード（０．１ｎＭ Ｒ１８８１の存在下）で実行された。

【0021】

【図2】図２は、ｗｔＰＲトランス活性化の拮抗作用を示す。ＣＯＳ細胞にｗｔＰＲをトランスフェクトし、トランス活性化研究を図１のように行った。

【0022】

【図3】図３は、ＳＡＲＤが前立腺がん細胞であるＬＮＣａＰにおいてＡＲ機能をアンタゴナイズしたことを示す。ＬＮＣａＰ細胞を、木炭処理済み血清含有培地中で２日間維持した。細胞を、図に示されるように２０～２４時間、アンタゴニストで処理し、ＲＮＡを単離し、ＡＲ標的遺伝子であるＦＫＢＰ５の発現を測定し、リアルタイムＰＣＲを使用してＧＡＰＤＨに正規化した。

【0023】

【図4】図４は、エンザルタミド抵抗性ＬＮＣａＰ（ＭＲ４９Ｆ）細胞抗増殖を示す。エンザルタミド（４）抵抗性（Ｅｎｚ－Ｒ）ＬＮＣａＰ（ＭＲ４９Ｆ）細胞を、１％木炭処理済み血清含有培地にプレーティングし、０．１ｎＭ Ｒ１８８１で処理し、図に示されるようにアンタゴニストの滴定を行った。細胞を、１回目の処理から３日後に再度処理し、生存可能な細胞の数をＣｅｌｌ－Ｔｉｔｅｒ Ｇｌｏアッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ、Ｍａｄｉｓｏｎ、ＷＩ）により測定した。Ｎ＝３。

【0024】

【図5】図５は、ＳＡＲＤが、エンザルタミド抵抗性を与えるエスケープ変異体ＡＲを分解したことを示す。エンザルタミド（４）抵抗性（Ｅｎｚ－Ｒ）ＬＮＣａＰ細胞（ＭＲ４９Ｆ）（上部パネル）または２２ＲＶ１細胞（下部パネル）を、木炭処理済み血清含有培地中で２日間維持し、０．１ｎＭ Ｒ１８８１（アゴニスト）で処理し、図に示されるようにＳＡＲＤまたはエンザルタミドの滴定を行った。処理の２４時間後に、細胞を収集し、タンパク質を抽出し、タンパク質をＡＲ－Ｎ２０抗体でブロットした。ブロットを取り除き、ＧＡＰＤＨ抗体で再度プローブした。ＡＲのＧＡＰＤＨまたは各レーンに対する比を、各ブロットの下に与える。

【0025】

【図6】図６は、化合物２６ａに関して、ラットにおける濃度－時間のプロットを示す。１２週齢の雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、それぞれ５匹の動物（Ｎ＝５）である５つの群に、図示される用量で投与した。血液試料を図示される時点で採取し、分析物濃度をＭＳ／ＭＳにより決定した。全ての用量群に関する濃度－時間プロットを、１日目（左）および７日目（右）について示す。

【0026】

【図7】図７Ａおよび７Ｂは、ＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストがラットのアンドロゲン依存性臓器を阻害したことを示す。図７Ａおよび７Ｂは、１４日間にわたりアンタゴニストまたはビヒクルで毎日２０ｍｇ／ｋｇ（ｍｐｋ）ｐｏでインタクトなラットを処置した後の、ＶＰおよびＳＶ重量の低減を示す（ｎ＝５／群）。ラットを、処置期間の終わりに犠牲にし、前立腺およびＳＶの重量を測定し、体重に対して正規化した。

【0027】

【図8】図８Ａおよび８Ｂは、ＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストが、エンザルタミド抵抗性前立腺がんの成長を阻害したことを示す。エンザルタミド抵抗性ＭＤＶＲ細胞（１０×１０^６細胞／ラット）を、雄性ＳＲＧ（Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ－Ｒａｇ２：ＩＬ２ｒｇ ＫＯ）ラットにおいて皮下移植した。腫瘍が１０００～３０００ｍｍ^３に達したら、動物を無作為化し、処置した（インタクト）。腫瘍が２０００～３０００ｍｍ^３になったら、動物をビヒクル（ＤＭＳＯ／ＰＥＧ－３００ １５：８５）または１０ｍｇ／ｋｇ／日の２６ａで経口的に処置した。腫瘍体積（Ｔ．Ｖ．）を毎週２回測定し、変化パーセント（図９Ａ）または犠牲時の体重（図８Ｂ）として表した。

【0028】

【図9】図９は、２１ａに関するラットでのＰＫ結果を示す。Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに３０ｍｇ／ｋｇの２１ａを投与し、血液を、投薬後５分、３０分、１時間、３時間、３６０時間、１２時間、および２４時間で頸静脈から収集した。血清を分離し、ＬＣ／ＭＳ－ＭＳを使用して、２１ａの量に関して分析した。

【0029】

【図10】図１０は、２９ｑ以外のピラゾリルプロパンアミド化合物がＡＲアンタゴニストであり、それらは全て、アンドロゲンＲ１８８１により誘発されたＡＲ活性を効率的にアンタゴナイズしたことを示す。ＣＯＳ－７細胞を、３０，０００細胞／ウェルで、ＤＭＥ＋５％ｃｓＦＢＳ ｗ／ｏ中で２４ウェルプレートにプレーティングした。細胞に、０．２５μｇ ＧＲＥ－ＬＵＣ、１０ｎｇ ＣＭＶ－ウミシイタケ－ＬＵＣ、および２５ｎｇ ヒトＡＲプラスミドをリポフェクタミントランスフェクション試薬に加えたもので、トランスフェクトした。細胞を、トランスフェクションから２４時間後に処理し、ルシフェラーゼアッセイを、処理の２４時間後に行った。ホタルルシフェラーゼ値を、ウミシイタケルシフェラーゼに対して正規化した。

【0030】

【図11】図１１Ａおよび１１Ｂは、化合物２１ｃが、ＡＲおよびＡＲ－Ｖ７陽性２２ＲＶ１異種移植片を６３％阻害し、一方、エンザルタミドは成長を阻害しなかったことを示す。ビヒクルで処置された動物の腫瘍体積は３１５から２３００ｍｍ^３まで増大したが、２１ｃで処置した動物の体積は３０１から１２０５ｍｍ^３まで増大した。５０５アームにおける最大ＴＶ阻害は６３％であった。安楽死基準に達していないビヒクルおよび５０５で処置した群の動物は、それらが安楽死に到達するまで継続することになる。２２ＲＶ１細胞（２百万／マウス）を、ＮＳＧマウスにおいて皮下移植した。腫瘍が１００～４００ｍｍ^３体積（長さ×幅×幅）まで成長したら、動物を、腫瘍体積に基づいて無作為化し、経口的に処置した。腫瘍体積を、毎週２回測定した。動物を、研究の終わりに犠牲にし、腫瘍を、さらなる分析のために収集した。

【0031】

【図12】図１２は、Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒグラフが、２２ＲＶ１腫瘍を保持する動物に関してプロットされたことを示す（図１１Ａおよび１１Ｂに示される）。安楽死基準は、腫瘍が＞２ｃｍまたは２０００ｍｍ^３の体積に到達したときである。ビヒクルおよびエンザルタミドで処置された腫瘍保持動物は、２１ｃで処置された動物よりも早く、安楽死基準に到達した。安楽死基準（長さ＞２ｃｍまたは体積＞２０００ｍｍ^３）。安楽死基準に関するＫａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒプロットを作成して、生存率の差を示した。

【0032】

【図13】図１３Ａ～１３Ｃは、化合物２１ｃおよび１０がトリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）患者由来異種移植片（ＰＤＸ）ＵＴ－１３５５の成長を著しく阻害したことを示す。ＵＴ－１３５５は、ＡＲおよびＡＲ－Ｖ７の両方を発現する。ビヒクルで処置された腫瘍は２３７から１３５５まで成長したが、２１ｃおよび１０で処置された腫瘍は２２７および４２７から３３１および１３５４までそれぞれ増大した。これらの結果は、１０および２１ｃがＰＤＸに対して有効であることを示す。患者からのＴＮＢＣ乳がん検体を、マウスに移植した。腫瘍が成長したら、Ｐ－１腫瘍を凍結した。Ｐ１腫瘍を、２０２０年８月に６０匹の雌性ＮＳＧマウスに移植した。腫瘍が１００～４００ｍｍ^３に成長したら、動物を無作為化し、ビヒクル（ｎ＝１２）、６０ｍｐｋ ２１ｃ（ｎ＝１１）、１０（ｎ＝９；６０ｍｐｋ ｂ．ｉ．ｄ）、およびエンザルタミド（ｎ＝９；６０ｍｐｋ）の群で処置した。体重を、処置開始日および研究の終わりに測定した。腫瘍体積を、週に２回測定した。特徴付け：ＰＤＸ試料を、ＡＲ発現に関して評価した。１１０ＫｄａでのＡＲバンドを観察した。しかしながら、約７０Ｋｄａの別のバンドも観察された。ＡＲ－Ｖ７抗体を用いるウェスタンブロットは、７０Ｋｄａでバンドを示した。患者および腫瘍の特徴：アフリカ系アメリカ人、６５歳、収集日０１／０２／２０２０、ｋｉ６７ ４５～５０％

【0033】

【図14】図１４は、図１３Ａ～１３Ｃからの腫瘍体積のｐ値を示す。

【0034】

【図15】図１５は、Ｋａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒグラフが、ＵＴ－１３５５腫瘍を保持する動物に関してプロットされたことを示す（図１３Ａ～１３Ｃに示される）。安楽死基準は、腫瘍が＞２ｃｍまたは２０００ｍｍ^３の体積に到達したときである。ビヒクルおよびエンザルタミドで処置された腫瘍保持動物は、２１ｃで処置された動物よりも早く安楽死基準に到達した。安楽死基準（長さ＞２ｃｍまたは体積＞２０００ｍｍ^３）。

【発明を実施するための形態】

【0035】

本発明の詳細な説明
以下の詳細な説明において、多くの具体的な詳細が、本発明の完全な理解をもたらすよう説明されている。しかし、本発明が、これらの特定の詳細説明なしに実施することができることが、当業者によって理解される。他の例において、周知の方法、手順および構成要素は、本発明を不明瞭にしないよう、詳細に記載されていない。

【0036】

アンドロゲンは、転写因子のステロイド受容体スーパーファミリーのメンバーであるＡＲに結合することによって細胞内で作用する。前立腺がん（ＰＣａ）の成長および維持は、循環するアンドロゲンによって主に制御されるので、ＰＣａの処置は、ＡＲを標的とする処置法に大きく依存する。受容体活性化を妨害するための、ダロルタミド、エンザルタミド、アビラテロン（間接的ＡＲアンタゴニスト；他はＬＢＤ結合直接的ＡＲアンタゴニスト）、アパルタミド、ビカルタミドまたはヒドロキシフルタミドなどのＡＲアンタゴニストによる処置が、ＰＣａの成長を低下させるために、過去において首尾よく使用されてきた。現在、利用可能なすべての直接的なＡＲアンタゴニストは、ＡＲに競合的に結合し、ＮＣｏＲおよびＳＭＲＴなどのコリプレッサーを動員して、標的遺伝子の転写を抑制する。しかし、変更された細胞内シグナル伝達、ＡＲ変異およびコアクチベーターの発現の増加は、アンタゴニストの機能障害を、またはアンタゴニストのアゴニストへの変換さえももたらす。

【0037】

検討により、ＡＲ内のＷ７４１およびＴ８７７の変異が、ビカルタミドおよびヒドロキシフルタミドをそれぞれアゴニストに変換することが実証された。同様に、増加した細胞内サイトカインは、ＡＲ応答性プロモーターに対するコリプレッサーの代わりにコアクチベーターを動員し、続いてビカルタミドをアゴニストに変換する。エンザルタミド、アパルタミドおよびアビラテロンの抵抗性にリンクした変異は、Ｆ８７６、Ｈ８７４、Ｔ８７７、および二変異体Ｔ８７７／Ｓ８８８、Ｔ８７７／Ｄ８９０、Ｆ８７６／Ｔ８７７（すなわち、ＭＲ４９細胞）、およびＨ８７４／Ｔ８７７を含む（Genome Biol. (2016) 17:10 (doi: 10.1186/s13059-015-0864-1)）。

【0038】

アビラテロン抵抗性変異はＬ７０２Ｈ変異を含み、Ｌ７０２Ｈ変異は、プレドニゾンなどのグルココルチコイドによってＡＲの活性化をもたらし、これは、アビラテロンが、通常、プレドニゾンと組み合わせて処方されるので、アビラテロンへの抵抗性を引き起こす。抵抗性が、エンザルタミドまたはアパルタミドに対して発生する場合には、多くの場合、患者は、アビラテロンに対して不応性となり、その逆も真である。または奏効期間は、非常に短い。

【0039】

ダロルタミドはまた、ＣＲＰＣでは、有効性および作用期間が限定されている。この状況は、進行前立腺がんにおけるＡＲ再活性化を予防する、決定的なアンドロゲン消失治療法の必要性を強調するものである。Ａｒｏｒａらは、Cell 155, 1309-1322において、前立腺がん細胞系（ＬＮＣａＰ／ＡＲ）および臨床試料に由来する薬物抵抗性腫瘍の共通した特徴として、グルココルチコイド受容体（ＧＲ）発現が誘発されることを報告している。類似しているが、区別可能な一連の標的遺伝子を活性化するためにＧＲは、ＡＲの代わりになり、抵抗性表現型の維持にとって必要であった。ＧＲアゴニストであるデキサメタゾンは、エンザルタミド（またはアパルタミド）抵抗性を付与するのに十分である一方、ＧＲアンタゴニストは、感受性を回復させた。急性ＡＲ阻害は、ＧＲ発現のＡＲ媒介性フィードバック抑制が軽減されるので、前立腺がん細胞のサブセットにおいてＧＲの上方調節をもたらした。これらの知見により、薬物曝露すると、代替核内受容体を介してＡＲ標的遺伝子を推進するようプライミングされた細胞の増殖によるＡＲ遮断からの逃避機構が確立される。本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、強力なＡＲアンタゴニストであることに加え、強力なＧＲアンタゴニストでもあり得る。したがって、本発明のＳＡＲＤにより、ＧＲ依存性抗アンドロゲン抵抗性の発生が予防されるか、またはＧＲに依存性の抗アンドロゲン抵抗性前立腺がんが処置される可能性がある。ダロルタミドに抵抗性を付与する、特異的なＡＲ変異またはＡＲバイパス機構は、未だ報告されていないが、ダロルタミドは、ＡＲ上の同じＬＢＤ標的に結合し、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物に対して感受性の抵抗性変異が発生する可能性がある。

【0040】

本発明は、選択的アンドロゲン受容体分解剤（ＳＡＲＤ）およびｐａｎ－アンタゴニストであるピラゾリルプロパンアミド化合物に関する。本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、前立腺がん、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、ＡＲ過剰発現前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７発現前立腺がん、またはｄ５６７ＥＳ発現前立腺がん、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんの処置に使用される。

【0041】

本明細書で使用する場合、特に定義しない限り、「選択的アンドロゲン受容体分解剤」（ＳＡＲＤ）化合物は、増殖するためにＡＲ完全長（ＡＲ－ＦＬ）および／またはＡＲスプライスバリアント（ＡＲ－ＳＶ）に依存する、ＰＣａ細胞および腫瘍の成長を阻害することが可能なアンドロゲン受容体アンタゴニストである。本ＳＡＲＤ化合物は、リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）に結合しないことがある。代替的に、「選択的アンドロゲン受容体分解剤」（ＳＡＲＤ）化合物は、様々な病原性の変異体バリアントＡＲおよび野性型ＡＲの分解を引き起こすことができるアンドロゲン受容体アンタゴニストであって、したがって、本発明において具現化される疾患状態において見出される幅広い変化した病原性細胞環境において、抗アンドロゲン作用を発揮することができる、アンドロゲン受容体アンタゴニストである。一実施形態では、ＳＡＲＤは、経口活性である。別の実施形態では、ＳＡＲＤは、作用部位に局所適用される。

【0042】

本ＳＡＲＤ化合物は、ＡＲのＮ末端ドメイン（ＮＴＤ）に；ＡＲの交代結合および分解ドメイン（ＢＤＤ）に；ＡＲリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）と交代結合および分解ドメイン（ＢＤＤ）の両方に、またはＡＲのＮ末端ドメイン（ＮＴＤ）とリガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）の両方に結合することができる。一実施形態では、ＢＤＤは、ＮＴＤに位置し得る。一実施形態では、ＢＤＤは、ＮＴＤのＡＦ－１領域に位置する。代替的に、本ＳＡＲＤ化合物は、Ｎ末端ドメイン（ＮＴＤ）依存性の構成的に活性なＡＲ－ＳＶによって駆動される成長を阻害すること、またはＡＲ ＬＢＤとは区別されるドメインに結合することによりＡＲを阻害することが可能となり得る。同様に、本ＳＡＲＤ化合物は、強力な（すなわち、非常に効力が高く、非常に効果的である）選択的アンドロゲン受容体アンタゴニストとなり得、これは、他の公知のＡＲアンタゴニスト（例えば、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ビカルタミドおよびアビラテロン）よりも強力にＡＲを拮抗する。

【0043】

本ＳＡＲＤ化合物は、従来的なアンタゴニストによって阻害され得ない、ＡＲーＳＶを標的とする選択的アンドロゲン受容体アンタゴニストとすることができる。本ＳＡＲＤ化合物は、以下に限定されないが、ＡＲ－ＳＶ分解活性；ＡＲ－ＦＬ分解活性；ＡＲ－ＳＶ阻害活性（すなわち、ＡＲ－ＳＶアンタゴニストである）；ＡＲ－ＦＬ阻害活性（すなわち、ＡＲ－ＦＬアンタゴニストである）；ＡＲ－ＳＶの構成的活性化の阻害、またはＡＲ－ＦＬの構成的活性化の阻害を含めた、いくつかの活性のいずれか１つを示すことができる。代替的に、本ＳＡＲＤ化合物は、デュアルＡＲ－ＳＶ活性およびＡＲ－ＳＶ阻害機能、ならびに／またはデュアルＡＲ－ＦＬ分解およびＡＲ－ＦＬ阻害機能を有することができるか、または代替として、これらの活性の４つすべてを有することができる。

【0044】

本ＳＡＲＤ化合物はまた、ＡＲ－ＦＬおよびＡＲ－ＳＶを分解することもできる。本ＳＡＲＤ化合物は、ＡＲ ＬＢＤとは区別されるドメインに結合することによって、ＡＲを分解することができる。本ＳＡＲＤ化合物は、デュアル分解およびＡＲ－ＳＶ阻害機能を有しており、利用可能ないずれのＣＲＰＣ治療剤とも異なる。本ＳＡＲＤ化合物は、細胞内分泌アンドロゲン合成、リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）が欠如したＡＲ－ＳＶの発現、およびアンタゴニストに抵抗性する能力を有するＡＲ－ＬＢＤ変異などの代替機構によるＡＲの再活性化を阻害すること、または変化した病原性細胞環境に存在する再活性化されたアンドロゲン受容体を阻害することができる。

【0045】

ＡＲ－スプライスバリアントの例には、以下に限定されないが、ＡＲ－Ｖ７およびＡＲｖ５６７ｅｓ（別名ＡＲ－Ｖ１２；S. Sun, et al. Castration resistance in human prostate cancer is conferred by a frequently occurring androgen receptor splice variant. J Clin Invest. (2010) 120(8), 2715-2730）が含まれる。抗アンドロゲン抵抗性を付与するＡＲ変異の非限定例は、Ｗ７４１Ｌ、Ｔ８７７ＡおよびＦ８７６Ｌ（J. D. Joseph et al. A clinically relevant androgen receptor mutation confers resistance to second-generation antiandrogens enzalutamide and ARN-509 [apalutamide]. Cancer Discov. (2013) 3(9), 1020-1029）変異である。ＬＢＤ抵抗性を付与する他の多数の変異が、当分野で公知であり、引き続き発見されている。ＡＲ－Ｖ７は、ＬＢＤが欠如したＡＲのスプライスバリアントである（A. H. Bryce & E. S. Antonarakis. Androgen receptor splice variant 7 in castration-resistant prostate cancer: Clinical considerations. Int J Urol. (2016 June 3) 23(8), 646-53. doi: 10.1111/iju.13134）。ＡＲ－Ｖ７は、構成的に活性であり、侵襲性ＰＣａおよび内分泌療法に対する抵抗性を担っていることが実証されている。

【0046】

本明細書で使用される場合、一部の実施形態では、「ｐａｎ－アンタゴニスト」という用語は、野生型ＡＲおよび試験される全てのＡＲ変異体であって限定するものではないがＦ８７６Ｌ、Ｔ８７７Ａ、およびＷ７４１Ｌを含むものに対して有効なアンタゴニストを指す。

【0047】

本明細書で使用される場合、「ＵＴ－１３５５」は、本出願の発明者らにより開発された、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）患者由来の異種移植片（ＰＤＸ）である。これは腫瘍として動物において成長したＴＮＢＣ患者検体である。

【0048】

本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、いかなる他のアンタゴニストにより処置することができないＣＲＰＣの処置に使用することができるＳＡＲＤおよび汎アンタゴニストである。本ピラゾリルプロパンアミド化合物により、ＡＲ－ＳＶの分解によってＣＲＰＣが処置され得る。本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＡＲアンタゴニストをアゴニストに通常変換するＡＲ変異体において、それらのアンタゴニスト活性を維持することができる。例えば、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＡＲ変異体である、Ｗ７４１Ｌ、Ｔ８７７ＡおよびＦ８７６Ｌに対するそのアンタゴニスト活性を維持する（J. D. Joseph et al. A clinically relevant androgen receptor mutation confers resistance to second-generation antiandrogens enzalutamide and ARN-509 [apalutamide]. Cancer Discov. (2013) 3(9), 1020-1029）。代替的に、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＬＢＤを標的とする薬剤が有効ではない、またはＮＴＤ依存性ＡＲ活性が構成的に活性な、変化した細胞環境内でアンタゴニスト活性を誘発する。代替的に、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＡＲとＧＲのコアンタゴニストとなり、これによって、ＧＲが過剰発現されている、および／またはＧＲが、ＡＲ軸を活性化している抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣに打ち勝つか、またはこれを阻止することができる。代替的に、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＡＲとＰＲのコアンタゴニストとなり、これによって、ＰＲが過剰発現されている、および／またはＰＲがＡＲ軸を活性化している抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣに打ち勝つか、またはこれを阻止する。

【0049】

本発明は、それを必要とする対象の前立腺がんを処置する方法であって、式Ｉ

【化2】

の構造［式中、
ＴはＯＨであり、
Ｒ^１はＣＨ_３であり、
ＹはＨ、ＣＦ_３、Ｆ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
ＺはＨ、ＮＯ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＮＨＣＯＲ、またはＣＯＮＨＲであるか、
あるいはＹおよびＺは、５から８員縮合環を形成し、
ＸおよびＤは、それぞれＣＨまたはＮであり、
Ｂは結合またはＣＨであり、Ｂが結合であるとき、Ｄ＝Ｂ－ＸはＤ－Ｘによって表され、
ＲはＨ、アルキル、ハロアルキル、アルキル－ＯＨ、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＯＨであり、
Ａは、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲからそれぞれ独立して選択される、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４のうちの少なくとも１つで必要に応じて置換された、少なくとも１個の窒素原子および０、１もしくは２個の二重結合を有する５員不飽和環であり、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せによって表される化合物の治療有効量を前記対象に投与することを含む、方法を提供する。

【0050】

一部の実施形態では、化合物が、式ＩＩ

【化3】

の化合物によって表される。

【0051】

一部の実施形態では、化合物は、式ＩＩＡまたは式ＩＩＢ

【化4】

の化合物によって表される。

【0052】

一部の実施形態では、化合物は、式ＩＩＩの化合物

【化5】

［式中、
ＴはＯＨであり、
Ｒ^１はＣＨ_３であり、
ＹはＨ、ＣＦ_３、Ｆ、Ｉ、Ｂｒ、Ｃｌ、またはＣＮであり、
ＺはＨ、ＮＯ_２、ＣＮ、ハロゲン、ＣＯＯＲ、ＣＯＲ、ＮＨＣＯＲ、またはＣＯＮＨＲであるか、
あるいはＹおよびＺは、５から８員縮合環を形成し、
ＸはＣＨまたはＮであり、
ＲはＨ、アルキル、ハロアルキル、アルキル－ＯＨ、ＣＦ_３、ＣＨ_２Ｃｌ、ＣＨ_２ＣＨ_２Ｃｌ、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、またはＯＨであり、
Ａは、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲからそれぞれ独立して選択される、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４のうちの少なくとも１つでそれぞれ必要に応じて置換されたピロール、ピラゾール、トリアゾール、またはイミダゾールであり、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せ
によって表される。

【0053】

一部の実施形態では、化合物は、式ＩＩＩＡまたは式ＩＩＩＢ

【化6】

の構造によって表される。

【0054】

一部の実施形態では、化合物は、式ＩＶ

【化7】

の構造によって表される。

【0055】

一部の実施形態では、化合物は、式ＩＶＡまたは式ＩＶＢ

【化8】

の構造によって表される。

【0056】

一部の実施形態では、化合物は、式Ｖ

【化9】

の構造［式中、
Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４は、それぞれ独立して、直鎖状または分岐状アルキル、ハロアルキル、ＣＦ_３、アリール、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、ＣＮ、ＮＯ_２、ＯＲ、ベンジル、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＮＨＲ、ＣＯＯＲ、またはＣＯＲから選択され、前記アルキル、アルキニル、およびアリールは、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨでそれぞれ必要に応じて置換されている］
もしくはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せ
によって表される。

【0057】

一部の実施形態では、化合物は、式ＶＡまたは式ＶＡ

【化10】

の構造によって表される。

【0058】

一部の実施形態では、Ｑ^１、Ｑ^２、Ｑ^３、およびＱ^４は、ＣＮ、ＮＯ_２、ＣＦ_３、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、Ｉ、アルキニル、ＳＯ_２Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＯＲ、Ｎ（Ｒ）_２、ＮＨＣＯＲ、ＣＯＲ、またはフェニルであり、前記フェニルが、ハロゲン、ＣＮ、またはＯＨで必要に応じて置換されている。

【0059】

一部の実施形態では、化合物は、以下の化合物：

【化11】

【化12】

【化13】

【化14】

のいずれか１つによって表される。

【0060】

一部の実施形態では、化合物は、化合物２６ａ

【化15】

によって表される。

【0061】

一部の実施形態では、化合物は、下記の化合物

【化16】

のいずれか１つによって表される。

【0062】

一部の実施形態では、化合物は、化合物２１ａまたは２１ｃによって表される。

【化17】

【0063】

一部の実施形態では、化合物は、下記の化合物

【化18】

【化19】

のいずれか１つによって表される。

【0064】

本明細書で使用される場合、「アルキル」という用語は、直鎖または分岐鎖の飽和脂肪族炭化水素を指す。アルキル基は、１～１２個の炭素、１～７個の炭素、１～６個の炭素、または１～４個の炭素原子を有し得る。一部の実施形態では、アルキル基は、ハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシル、アルコキシカルボニル、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、ニトロ、ＣＮ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシル、チオ、またはチオアルキルで置換されてもよい。

【0065】

「アリールアルキル」基は、アリールに結合されたアルキルを指し、ここでアルキルおよびアリールは本明細書で定義された通りである。アリールアルキル基の例はベンジル基である。

【0066】

「アルキニル」基は、１つまたは複数の三重結合を有する不飽和直鎖または分岐鎖炭化水素を指す。アルキニル基は、２～１２個の炭素を有していてもよい。一部の実施形態では、アルキニル基は２～６個の炭素または２～４個の炭素を有する。アルキニル基の例には、限定するものではないがエチニル、プロピニル、またはブチニルなどが含まれる。アルキニル基は、ハロゲン、ヒドロキシ、アルコキシカルボニル、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシル、チオ、またはチオアルキルで置換されてもよい。

【0067】

本明細書で使用される場合、「アリール」という用語は、置換されなくても置換されてもよい、少なくとも１個の炭素環式芳香族基を有する芳香族基を指す。置換基には、限定するものではないがハロゲン、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシカルボニル、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、チオ、またはチオアルキルが含まれる。アリール環の非限定的な例は、フェニルおよびナフチルである。アリール基は、６～１２員環であり得る。一部の実施形態では、アリール基はフェニル基であり得る。

【0068】

用語「ヘテロアリール」とは、少なくとも１つの複素環式芳香環を有する、芳香族基を指す。一実施形態では、ヘテロアリールは、環の部分として、硫黄、酸素、窒素、ケイ素、リンなどの少なくとも１個のヘテロ原子、またはそれらの任意の組合せを含む。別の実施形態では、ヘテロアリールは、無置換であってもよく、あるいはハロゲン、アリール、ヘテロアリール、シアノ、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシカルボニル、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、ニトロ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、カルボキシ、チオまたはチオアルキルから選択される、１つまたは複数の基によって置換されていてもよい。ヘテロアリール環の非限定例は、ピラニル、ピロリル、ピラジニル、ピリミジニル、ピラゾリル、ピリジニル、フラニル、チオフェニル、チアゾリル、インドリル、イミダゾリル、イソオキサゾリルなどである。一実施形態では、ヘテロアリール基は、５～１２員環である。一実施形態では、ヘテロアリール基は、５員環である。一実施形態では、ヘテロアリール基は、６員環である。別の実施形態では、ヘテロアリール基は、５～８員環である。別の実施形態では、ヘテロアリール基は、１～４つの縮合した環を含む。一実施形態では、ヘテロアリール基は、１，２，３－トリアゾールである。一実施形態では、ヘテロアリールは、ピリジルである。一実施形態では、ヘテロアリールは、ビピリジルである。一実施形態では、ヘテロアリールは、テルピリジルである。

【0069】

本明細書で使用する場合、用語「ハロアルキル」基は、１個または複数のハロゲン原子により、例えばＦ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩにより置換されているアルキル基を指す。

【0070】

「ヒドロキシル」基は、ＯＨ基を指す。

【0071】

用語「ハロゲン」または「ハロ」または「ハライド」は、ハロゲン、例えば、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩを指す。

【0072】

本明細書で使用される場合、一部の実施形態では、「ピラゾール化合物」という用語は、「ピラゾリルプロパンアミド化合物」を指してもよい。一部の実施形態では、「ピラゾールプロパンアミド」および「ピラゾリルプロパンアミド」という用語は、同義で使用され得る。

【0073】

一実施形態では、本発明は、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、またはその誘導体、光学異性体、異性体、代謝産物、薬学的に許容される塩、医薬製品、水和物、Ｎ－オキシド、プロドラッグ、多形、結晶、またはそれらの組合せの使用を提供する。

【0074】

一実施形態では、本発明の方法は、化合物を酸または塩基と反応させることによって生成することができる、本ピラゾリルプロパンアミド化合物の「薬学的に許容される塩」を使用する。

【0075】

本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、薬学的に許容される塩に変換されてもよい。薬学的に許容される塩は、化合物を酸または塩基と反応させることによって生成することができる。

【0076】

アミンの好適な薬学的に許容される塩は、無機酸または有機酸から調製することができる。アミンの無機塩の例には、以下に限定されないが、硫酸水素塩、ホウ酸塩、臭化物、塩化物、ヘミ硫酸塩、臭化水素酸塩、塩化水素酸塩（hydrochlorate）、２－ヒドロキシエチルスルホン酸塩（ヒドロキシエタンスルホン酸塩）、ヨウ素酸塩、ヨウ化物、イソチオネート、硝酸塩、過硫酸塩、リン酸塩、硫酸塩、スルファミン酸塩、スルファニル酸塩、スルホン酸（アルキルスルホン酸塩、アリールスルホン酸塩、ハロゲン置換アルキルスルホン酸塩、ハロゲン置換アリールスルホン酸塩）、スルホン酸塩、またはチオシアン酸塩が含まれる。

【0077】

アミンの有機塩の例には、有機酸の脂肪族、脂環式、芳香族、芳香脂肪族（araliphatic）、複素環式、カルボン酸およびスルホン酸のクラスから選択することができ、この例は、酢酸塩、アルギニン、アスパラギン酸塩、アスコルビン酸塩、アジピン酸塩、アントラニル酸塩、アルゲン酸塩（algenate）、アルカンカルボン酸塩、置換アルカンカルボン酸塩、アルギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、硫酸水素塩、酪酸塩、重炭酸塩、酒石酸水素塩、カルボン酸塩、クエン酸塩、樟脳酸塩、樟脳スルホン酸塩、シクロヘキシルスルファミン酸塩、シクロペンタンプロピオン酸塩、カルシウムエデト酸塩、カンシル酸塩（camsylate）、炭酸塩、クラブラン酸塩、桂皮酸塩、ジカルボン酸塩、ジグルコン酸塩、ドデシルスルホン酸塩、二塩酸塩、デカン酸塩、エナント酸塩、エタンスルホン酸塩、エデト酸塩、エジシル酸塩、エストレート、エシル酸塩、フマル酸塩、ギ酸塩、フッ化物、ガラクツロン酸塩、グルコン酸塩、グルタミン酸塩、グリコール酸塩、グルコン酸塩、グルコヘプタン酸塩、グリセロリン酸塩、グルセプト酸塩、グリコリルアルサニル酸塩、グルタル酸塩、グルタミン酸塩、ヘプタン酸塩、ヘキサン酸塩、ヒドロキシマレイン酸塩、ヒドロキシカルボン酸、ヘキシルレゾルシン酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、フッ化水素酸塩（hydrofluorate）、乳酸塩、ラクトビオン酸塩、ラウリン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、メチレンビス（ベータ－オキシナフトエ酸塩）、マロン酸塩、マンデル酸塩、メシル酸塩、メタンスルホン酸塩、臭化メチル（methylbromide）、メチル硝酸塩、メチルスルホン酸塩、マレイン酸一カリウム塩、ムチン酸塩、モノカルボン酸塩、硝酸塩、ナフタレンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、ナプシル酸塩、Ｎ－メチルグルカミン、シュウ酸塩、オクタン酸塩、オレイン酸塩、パモ酸塩、フェニル酢酸塩、ピクリン酸塩、フェニル安息香酸塩、ピバル酸塩、プロピオン酸塩、フタル酸塩、ペクチン酸塩、フェニルプロピオン酸塩、パルミチン酸塩、パントテン酸塩、ポリガラクツロン酸塩、ピルビン酸塩、キナ酸塩、サリチル酸塩、コハク酸塩、ステアリン酸塩、スルファニル酸塩、塩基性酢酸塩（subacetate）、酒石酸塩、テオフィリン酢酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩（トシル酸塩）、トリフルオロ酢酸塩、テレフタル酸塩、タンニン酸塩、テオクル酸塩、トリハロ酢酸塩、トリエチオジド、トリカルボン酸塩、ウンデカン酸塩および吉草酸塩である。カルボン酸またはフェノールの無機塩の例は、アンモニウム、アルカリ金属およびアルカリ土類金属から選択されてもよい。アルカリ金属には、以下に限定されないが、リチウム、ナトリウム、カリウムまたはセシウムが含まれる。アルカリ土類金属には、以下に限定されないが、カルシウム、マグネシウム、アルミニウム；亜鉛、バリウム、コリンまたは第四級アンモニウムが含まれる。カルボン酸またはフェノールの有機塩の例は、アルギニン、脂肪族有機アミン、脂環式有機アミン、芳香族有機アミン、ベンザチン、ｔ－ブチルアミン、ベネタミン（Ｎ－ベンジルフェネチルアミン）、ジシクロヘキシルアミン、ジメチルアミン、ジエタノールアミン、エタノールアミン、エチレンジアミン、ヒドラバミン、イミダゾール、リジン、メチルアミン、メグラミン、Ｎ－メチル－Ｄ－グルカミン、Ｎ，Ｎ’－ジベンジルエチレンジアミン、ニコチンアミド、有機アミン、オルニチン、ピリジン、ピコリン、ピペラジン、プロカイン、トリス（ヒドロキシメチル）メチルアミン、トリエチルアミン、トリエタノールアミン、トリメチルアミン、トロメタミンおよび尿素を含めた有機アミンから選択することができる。

【0078】

様々な実施形態では、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物の薬学的に許容される塩には、ＨＣｌ塩、シュウ酸塩、Ｌ－（＋）－酒石酸塩、ＨＢｒ塩およびコハク酸塩が含まれるが、これらに限定されない。それぞれは、本発明の別個の実施形態となる。

【0079】

塩は、従来の手段によって、例えば、塩が不溶性である溶媒もしくは媒体中、もしくは真空で、もしくは凍結乾燥によって除去される水などの溶媒中、生成物の遊離塩基もしくは遊離酸形態を１当量もしくはそれより多い当量の適切な酸もしくは塩基と反応させることによって、または既存の塩のイオンを別のイオンもしくは好適なイオン交換樹脂と交換することによって形成することができる。

【0080】

本発明の方法は、非荷電化合物、または該化合物の薬学的に許容される塩を使用してもよい。特に、本方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の薬学的に許容される塩を使用する。薬学的に許容される塩は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物のアミン塩またはフェノールの塩とすることができる。

【0081】

一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの遊離塩基、有機酸、非荷電化合物もしくは非錯体化化合物、および／またはその異性体、光学異性体もしくは光学異性体の任意の混合物、医薬製品、水和物、多形、またはそれらの組合せを使用する。

【0082】

一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の光学異性体を使用する。一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の異性体を使用する。一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の医薬製品を使用する。一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の水和物を使用する。一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の多形を使用する。一実施形態では、本発明の方法は、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の代謝産物を使用する。別の実施形態では、本発明の方法は、本明細書に記載されている式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、または別の実施形態では、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物の異性体、光学異性体、薬学的に許容される塩、代謝産物、医薬製品、水和物、多形の組合せを含む、組成物を使用する。

【0083】

本明細書で使用する場合、用語「異性体」は、以下に限定されないが、光学異性体、構造異性体または配座異性体を含む。

【0084】

用語「異性体」は、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物の光学異性体を包含することが意図されている。本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、少なくとも１個のキラル中心を含有することが当業者によって理解される。したがって、本化合物は、光学的に活性な形態（（Ｒ）異性体または（Ｓ）異性体など）またはラセミ形態として存在することができる。光学的に活性な化合物は、鏡像異性体に富む混合物として存在し得る。一部の化合物はまた、多形を示すことがある。本発明は、ラセミ体、光学活性体、多形体もしくは立体異性体、またはそれらの混合物のいずれかを包含することが理解されるべきである。したがって、本発明は、ピラゾリルプロパンアミド化合物を純粋な（Ｒ）－異性体として、または純粋な（Ｓ）－異性体として使用することができる。光学活性体を調製する方法は、当分野で公知である。例えば、再結晶化技法によるラセミ体の分割による、光学活性な出発原料からの合成による、キラル合成による、またはキラル固定相を使用するクロマトグラフィー分離による。

【0085】

本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、該化合物の水和物であってもよい。本明細書で使用する場合、用語「水和物」には、以下に限定されないが、半水和物、一水和物、二水和物または三水和物が含まれる。本発明はまた、本明細書において記載されている化合物のアミノ置換基のＮ－オキシドの使用を含む。

【0086】

本発明は、本明細書に記載されているピラゾリルプロパンアミド化合物の代謝産物の使用を使用することができる。一実施形態では、「代謝産物」は、代謝または代謝過程によって別の物質から生成する任意の物質を意味する。

【0087】

一部の実施形態では、本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、当技術分野で公知の任意の方法によって調製することができる。他の実施形態では、本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、実施例１の合成方法に基づいて調製される。

【0088】

本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、好ましいｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングプロファイル、ラットにおける有利なｉｎ ｖｉｖｏ ＰＫ特性、精嚢（ＳＶ）および腹側前立腺（ＶＰ）などの二次性徴臓器のｉｎ ｖｉｖｏ薬力学の改善された効力および有効性、ならびにエンザルタミド抵抗性（ＭＤＶＲと呼ばれる）ＶＣａＰ異種移植片などの抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣのｉｎ ｖｉｖｏモデルでの改善された効力を、有することが見出される。本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物のｉｎ ｖｉｖｏ抗アンドロゲン作用性は、広範な前臨床モデルおよび下記における、前の世代のＳＡＲＤを遥かに超えた効力および有効性を有する。これらのデータは、これらのピラゾリルプロパンアミド化合物がｐａｎ－拮抗作用特性を有しかつ高度に強力で有効性のあるｉｎ ｖｉｖｏ活性であることを示唆する。

【0089】

本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、これまでこのように試験されてきた全ての形のＡＲタンパク質を阻害し分解する点で、直接（フルタミド（１）ビカルタミド （２）、ニルタミド（３）、エンザルタミド（４）、アパルタミド（５）、またはダロルタミド（６））または間接（酢酸アビラテロン（７））的ＬＢＤ標的ＡＲアンタゴニストに勝る利点を有し、それによって、承認された薬剤と比較して阻害を受け易いＣＲＰＣモデルの範囲が拡張される。さらに、本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、ｉｎ ｖｉｖｏで優れたＡＤＭＥおよびＰＫ特性を示し、抗アンドロゲン抵抗性のモデルのインタクトな動物において前例のない異種移植の有効性を可能にし、本明細書では類似の分子に関して報告される。前臨床プロファイルは、ｗｔＡＲ、ＡＲ点変異、短縮型変異体、ＡＲ過剰発現（例えば、ＡＲ遺伝子増幅）、およびこれらの組合せを分解（ほとんどの症例で）および阻害する能力、ならびに改善されたｉｎ ｖｉｖｏ ＰＫおよびＰＤ特性を含む。

【0090】

一態様では、本発明は、それを必要とする対象において前立腺がん（ＰＣａ）を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0091】

本発明は、前立腺がん（ＰＣａ）を処置するまたはその進行を阻害する、または前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0092】

一部の実施形態では、前立腺がんは、増殖するため、ＡＲ－ＦＬおよび／またはＡＲ－ＳＶに依存することがある。前立腺がんは、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ビカルタミド、アビラテロン、ＥＰＩ－００１、ＥＰＩ－５０６、ＡＺＤ－３５１４、ガレテロン、ＡＳＣ－Ｊ９、フルタミド、ヒドロキシフルタミド、ニルタミド、酢酸シプロテロン、ケトコナゾール、スピロノラクトンまたはそれらの任意の組合せによる処置に抵抗性であってもよい。

【0093】

本発明の方法は、ＡＲ、ＡＲ－ＦＬ、抗アンドロゲン抵抗性を付与するＡＲ－ＬＢＤ変異を有するＡＲ－ＦＬ、ＡＲ－ＳＶ、遺伝子増幅されたＡＲ、またはそれらの任意の組合せのレベルを低下させることもできる。

【0094】

本発明の方法の一部の実施形態では、前立腺がんは、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんである。

【0095】

一実施形態では、本発明は、ダロルタミド抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0096】

本発明は、ダロルタミド抵抗性前立腺がん（ＰＣａ）を処置するまたはその進行を阻害する、またはアパルタミド抵抗性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0097】

一実施形態では、本発明は、エンザルタミド抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0098】

本発明は、エンザルタミド抵抗性前立腺がんを処置するまたはその進行を阻害する、またはエンザルタミド抵抗性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0099】

一実施形態では、本発明は、アパルタミド抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0100】

本発明は、アパルタミド抵抗性前立腺がん（ＰＣａ）を処置するまたはその進行を阻害する、またはアパルタミド抵抗性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0101】

一実施形態では、本発明は、アビラテロン抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0102】

本発明は、アビラテロン抵抗性前立腺がんを処置するまたはその進行を阻害する、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0103】

本発明の方法の一部の実施形態では、前立腺がんが、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、または去勢抵抗性前立腺がん、または去勢感受性前立腺がんである。一部の実施形態では、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）が、転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）、または高リスクｎｍＣＲＰＣである。

【0104】

本発明は、それを必要とする対象において進行性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0105】

本発明は、進行性前立腺がん（ＰＣａ）を処置するまたはその進行を阻害する、または進行性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0106】

本発明は、それを必要とする対象において難治性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0107】

本発明は、難治性前立腺がん（ＰＣａ）を処置するまたはその進行を阻害する、または難治性前立腺がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0108】

本発明は、それを必要とする対象において去勢抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0109】

本発明の方法の一部の実施形態では、方法はさらに、アンドロゲン遮断療法を対象に施用することを含む。

【0110】

本発明は、去勢抵抗性前立腺がんを処置するまたはその進行を阻害する、または去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）に罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0111】

本発明の方法の一部の実施形態では、方法はさらに、アンドロゲン遮断療法を対象に施用することを含む。

【0112】

一部の実施形態では、本方法は、アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）またはＬＨＲＨアゴニストまたはアンタゴニストなどの第２の治療をさらに含む。ＬＨＲＨアゴニストには、以下に限定されないが、リュープロリド酢酸塩が含まれる。

【0113】

本明細書で使用される場合、「生存率の上昇」という用語は、対象の生存率について記述するときの時間の長期化を指す。したがってこの文脈において、本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、進行性前立腺がん、難治性前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）、転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）、高リスクｎｍＣＲＰＣ、またはダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんの男性の生存率を上昇させるのに使用されてもよい。

【0114】

代替的に、本明細書で使用する場合、用語「増大する」、「増大すること」または「増大した」は、互換的に使用されてもよく、次第に大きくなる実体（サイズ、量、数または強度のような）を指し、この場合、例えば、実体は、性ホルモン結合グロブリン（ＳＨＢＧ）または前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）である。

【0115】

本明細書に記載される化合物は、非転移性前立腺がんに罹患している対象における、無転移生存（ＭＦＳ）を増大させるために使用され得る。非転移性前立腺がんは、非転移性進行前立腺がん、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）または高リスクｎｍＣＲＰＣとすることができる。

【0116】

本明細書に記載されているピラゾリルプロパンアミド化合物は、デュアル作用を提供するために使用することができる。例えば、本ピラゾリルプロパンアミド化合物により前立腺がんが処置され得、転移が予防され得る。前立腺がんは、不応性前立腺がん、進行前立腺がん；去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）、転移性ＣＲＰＣ（ｍＣＲＰＣ）、非転移性ＣＲＰＣ（ｎｍＣＲＰＣ）、または高リスクｎｍＣＲＰＣとすることができる。

【0117】

去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）に進行するリスクが高い、進行前立腺がんを有する男性は、２０ｎｇ／ｄＬより高い血清中総テストステロン濃度でＡＤＴを受けている男性、またはＡＤＴの開始時に、（１）Ｇｌｅａｓｏｎパターンが４または５の前立腺がんであることが確認された、（２）転移性前立腺がん、（３）＜３か月のＰＳＡ倍加時間、（４）ＰＳＡ≧２０ｎｇ／ｍＬ、もしくは（５）根治的局所治療法（根治的前立腺切除または放射線療法）後３年未満でのＰＳＡ再発のいずれかを有する男性である。

【0118】

前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）の正常なレベルは、とりわけ、男性対象の年齢、およびその前立腺のサイズなどのいくつかの因子に依存する。２．５～１０ｎｇ／ｍＬの間の範囲のＰＳＡレベルが、「高境界値」と考えられる一方、１０ｎｇ／ｍＬより高いＰＳＡレベルは、「高い」と考えられる。０．７５／年より大きな変化速度または「ＰＳＡ速度」が、高速であると考えられる。ＰＳＡレベルは、継続中のＡＤＴもしくはＡＤＴ歴、外科的去勢にも関わらず、または抗アンドロゲンおよび／またはＬＨＲＨアゴニストによる処置にもかかわらず、増大することがある。

【0119】

高リスク非転移性去勢抵抗性前立腺がん（高リスクｎｍＣＲＰＣ）を有する男性は、約１８か月またはそれ未満の予測される無憎悪生存を有する、迅速なＰＳＡ倍加時間を有する男性を含むことができる（Miller K, Moul JW, Gleave M, et al. 2013. "Phase III, randomized, placebo-controlled study of once-daily oral zibotentan (ZD4054) in patients with non-metastatic castration-resistant prostate cancer," Prostate Canc Prost Dis. Feb; 16:187-192）。このような比較的に迅速なそれらの疾患の進行は、これらの個体に対する新規な治療法の重要性を強調するものである。

【0120】

本発明の方法により、高リスクｎｍＣＲＰＣに罹患している、８ｎｇ／ｍＬより高いＰＳＡレベルを有する対象が処置され得る。患者集団は、ｎｍＣＲＰＣに罹患している対象であって、ＰＳＡが、８か月未満または１０か月未満に２倍になる、対象を含む。本方法により、高リスクｎｍＣＲＰＣに罹患している対象における、全血清テストステロンレベルが２０ｎｇ／ｍＬより高い患者集団も処置され得る。一例では、血清中の遊離テストステロンレベルは、高リスクｎｍＣＲＰＣに罹患している対象において、精巣摘除術を受けた男性において観察されるレベルより高い。

【0121】

前立腺がん、進行性前立腺がん、ＣＲＰＣ、ｍＣＲＰＣ、ｎｍＣＲＰＣダロルタミド、抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、および／またはアビラテロン抵抗性前立腺がんの処置は、前立腺がん関連の症状、機能、および／または生存率で、臨床上意味のある改善をもたらし得る。臨床的に有意な改善は、とりわけ、がんが転移性である場合、X線撮影による無増悪生存（ｒＰＦＳ）の増大、またはがんが非転移性である場合、無転移生存（ＭＦＳ）の増大によって決定することができる。

【0122】

本発明は、前立腺がん、進行性前立腺がん、転移性前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、エンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんに罹患している男性対象における血清前立腺特異抗原（ＰＳＡ）レベルを低下させる方法であって、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの構造によって表される化合物の治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0123】

本発明は、去勢抵抗性前立腺がんに罹患している男性対象における血清中ＰＳＡを低下させる治療有効量の式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈおよび２９ａ～２９ｒの化合物を投与するステップを含む、去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）に罹患している男性対象における、血清中ＰＳＡを低下させる二次ホルモン治療の方法を包含する。

【0124】

本発明は、それを必要とする対象における腫瘍内の、ＡＲ、ＡＲ完全長（ＡＲ－ＦＬ）、抗アンドロゲン抵抗性を付与するＡＲ－ＬＢＤ変異を有するＡＲ－ＦＬ、ＡＲ－スプライスバリアント（ＡＲ－ＳＶ）および／またはＡＲ遺伝子の増幅のレベルを低下させる方法であって、腫瘍内のＡＲ、ＡＲ完全長（ＡＲ－ＦＬ）、抗アンドロゲン抵抗性を付与するＡＲ－ＬＢＤ変異もしくは他のＡＲ変異を有するＡＲ－ＦＬ、ＡＲ－スプライスバリアント（ＡＲ－ＳＶ）および／またはＡＲ遺伝子の増幅のレベルを低下させる、治療有効量の式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈおよび２９ａ～２９ｒの化合物を投与するステップを含む、方法を包含する。

【0125】

本方法は、X線撮影による無増悪生存（ｒＰＦＳ）、また無転移生存（ＭＦＳ）を増大
することができる。

【0126】

対象は、非転移性がんを有すること、アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）に成功しなかったこと、精巣摘除術を受けること、または高いもしくは向上している前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）レベルを有することがある。対象は、前立腺がん、進行前立腺がん、不応性前立腺がんを有する患者、ＣＲＰＣ患者、転移性去勢抵抗性前立腺がん（ｍＣＲＰＣ）患者または非転移性去勢抵抗性前立腺がん（ｎｍＣＲＰＣ）患者、ダロルタミド抵抗性前立腺がん、またはエンザルタミド抵抗性前立腺がん、アパルタミド抵抗性前立腺がん、またはアビラテロン抵抗性前立腺がんとすることができる。これらの対象では、ｎｍＣＲＰＣは、高リスクｎｍＣＲＰＣであってもよい。さらに、対象は、全Ｔの去勢レベルの有無にかかわらず、アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）を受けていてもよい。

【0127】

本明細書で使用する場合、語句「去勢抵抗性前立腺がんに罹患している対象」とは、以下：アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）により以前に処置されている；ＡＤＴに応答し、現在、血清中ＰＳＡが、＞２ｎｇ／ｍＬまたは＞２ｎｇ／ｍＬを有し、かつＡＤＴで達成される底値よりも２５％高いことを表す；アンドロゲン遮断療法に維持されているにもかかわらず、血清中ＰＳＡが向上していると診断された対象；去勢レベルの血清中の全テストステロン（＜５０ｎｇ／ｄＬ）、または去勢レベルの血清中の全テストステロン（＜２０ｎｇ／ｄＬ）、のうちの少なくとも１つを有する対象を指す。対象は、少なくとも２週間の間隔で、２回の逐次的な評価に対して、血清中ＰＳＡの向上を有すること、ＡＤＴにより効果的に処置されていること、またはＡＤＴの開始後、血清中のＰＳＡ応答歴を有することができる。

【0128】

本明細書で使用する場合、用語「血清中ＰＳＡの向上」とは、アンドロゲン遮断療法（ＡＤＴ）の開始後の、血清中ＰＳＡの２５％またはそれより大きな上昇、および底値からの２ｎｇ／ｍｌまたはそれより大きな絶対的上昇；または血清中ＰＳＡが＞２ｎｇ／ｍＬ、または＞２ｎｇ／ｍＬかつ底値より２５％の上昇を指す。用語「底値」とは、患者がＡＤＴを受けている間の、最低ＰＳＡレベルを指す。

【0129】

用語「血清中ＰＳＡの応答」とは、以下：ＡＤＴの開始前から血清中ＰＳＡ値の少なくとも９０％の低下、任意の時点における＜１０ｎｇ／ｍＬの検出不可能なレベルの血清中ＰＳＡ（＜０．２ｎｇ／ｍＬ）、血清中ＰＳＡのベースラインからの少なくとも５０％の低下、血清中ＰＳＡのベースラインからの少なくとも９０％の低下、血清中ＰＳＡのベースラインからの少なくとも３０％の低下、または血清中ＰＳＡのベースラインからの少なくとも１０％の低下のうちの少なくとも１つを指す。

【0130】

本発明の方法は、ＡＤＴの形態と、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈおよび２９ａ～２９ｒの化合物との組合せを投与するステップを含む。ＡＤＴの形態は、ＬＨＲＨアゴニストを含む。ＬＨＲＨアゴニストには、以下に限定されないが、酢酸リュープロリド（Ｌｕｐｒｏｎ（登録商標））（参照により本明細書に組み込まれている、米国特許第５，４８０，６５６号；５，５７５，９８７号；５，６３１，０２０号；５，６４３，６０７号；５，７１６，６４０号；５，８１４，３４２号；および６，０３６，９７６号）または酢酸ゴセレリン（Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標））（参照により本明細書に組み込まれている米国特許第７，１１８，５５２号；７，２２０，２４７号；および７，５００，９６４号）が含まれる。ＡＤＴの形態には、以下に限定されないが、ＬＨＲＨアンタゴニスト、可逆性抗アンドロゲンまたは両側精巣摘除術が含まれる。ＬＨＲＨアンタゴニストには、以下に限定されないが、デガレリクスおよびアバレリックスが含まれる。抗アンドロゲンには、以下に限定されないが、ビカルタミド、フルタミド、ヒドロキシフルタミド、フィナステリド、デュタステリド、エンザルタミド、アパルタミド、ＥＰＩ－００１、ＥＰＩ－５０６、ダロルタミド、ニルタミド、クロルマジノン、アビラテロンまたはそれらの任意の組合せが含まれる。一部の実施形態では、本発明の方法は、少なくとも本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、ならびにリアーゼ阻害剤（例えば、アビラテロン）を投与することを包含する。

【0131】

用語「進行前立腺がん」とは、前立腺に起源があり、精嚢、骨盤リンパ節または骨を含めた周囲組織などの前立腺を越えて、または身体の他の部分へと広く転移した転移性がんを指す。前立腺がんの病理は、悪性度の増加する順に１～５のＧｌｅａｓｏｎ等級付けにより等級付けされる。進行性疾患および／または前立腺がんに起因する死亡の大きなリスクを有する患者は、その定義に含まれるべきであり、ＩＩＢという低い疾患期の前立腺カプセルの外側にがんを有するいかなる患者も、明らかに「進行した」疾患を有する。「進行前立腺がん」は、局所的な進行前立腺がんを指すことができる。

【0132】

用語「不応性」とは、処置に応答しないがんを指すことができる。例えば、前立腺がんまたは乳がんは、処置の開始時に抵抗性であってもよく、または処置の間に抵抗性になってもよい。「不応性がん」は、本明細書において、「抵抗性がん」と称されてもよい。

【0133】

用語「去勢抵抗性前立腺がん」（ＣＲＰＣ）は、患者が依然としてテストステロンを低下させるＡＤＴもしくは他の治療中である間に、悪化または進行する進行前立腺がん、あるいはホルモン不応性、ホルモンナイーブ、アンドロゲン非依存性、または化学的もしくは外科的去勢抵抗性と考えられる前立腺がんを指す。ＣＲＰＣは、細胞内分泌アンドロゲン合成によるＡＲ活性化、リガンド結合ドメイン（ＬＢＤ）を欠くＡＲスプライスバリアント（ＡＲ－ＳＶ）の発現、アンタゴニストに抵抗する能力を有するＡＲ－ＬＢＤまたは他のＡＲ変異の発現の結果とすることができる。去勢抵抗性前立腺がん（ＣＲＰＣ）は、進行中のＡＤＴおよび／または外科的去勢があるにもかかわらず、発症した進行前立腺がんである。去勢抵抗性前立腺がんは、前立腺特異的抗原（ＰＳＡ）の血清中レベルの上昇もしくはより高い血清中レベル、転移、骨転移、疼痛、リンパ節の関与、腫瘍成長のサイズまたはその血清中マーカーの増大、予後の診断マーカーもしくは患者の状態の悪化によって証明される通り、以前の外科的去勢、性腺刺激ホルモン放出ホルモンアゴニスト（例えば、リュープロリド）もしくはアンタゴニスト（例えば、デガレリクスまたはアバレリックス）、抗アンドロゲン（例えば、ビカルタミド、フルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ダロルタミド、ケトコナゾール、アミノグルテタミド）、化学療法剤（例えば、ドセタキセル、パクリタキセル、カバジタキセル、アドリアマイシン、ミトキサントロン、エストラムスチン、シクロホスファミド）、キナーゼ阻害剤（イマチニブ（Ｇｌｅｅｖｅｃ（登録商標））もしくはゲフィチニブ（Ｉｒｅｓｓａ（登録商標））、カボザンチニブ（Ｃｏｍｅｔｒｉｑ（商標）、ＸＬ１８４としても知られている）、または他の前立腺がん療法（例えば、ワクチン（シプリューセル－Ｔ（Ｐｒｏｖｅｎｇｅ（登録商標））、ＧＶＡＸなど）、草本（herbal）（ＰＣ－ＳＰＥＳ）およびリアーゼ阻害剤（アビラテロン）での継続処置にもかかわらず、進行もしくは悪化し続けるか、または患者の健康に悪影響を及ぼす前立腺がんとして定義される。

【0134】

去勢抵抗性前立腺がんは、ホルモンにナイーブな前立腺がんとして定義されてもよい。去勢抵抗性前立腺がんを有する男性では、腫瘍細胞は、アンドロゲン（男性の性別の特徴の発生および維持を促進するホルモン）の非存在下で成長する能力を有することができる。

【0135】

多数の早期前立腺がんは、成長のためにアンドロゲンを必要とするが、進行前立腺がんは、アンドロゲン非依存性またはホルモンナイーブである。

【0136】

用語「アンドロゲン遮断療法」（ＡＤＴ）は、精巣摘除術、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アナログの投与、黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アンタゴニストの投与、５α－レダクターゼ阻害剤の投与、抗アンドロゲンの投与、テストステロン生合成の阻害剤の投与、エストロゲンの投与、または１７α－ヒドロキシラーゼ／Ｃ１７，２０リアーゼ（ＣＹＰ１７Ａ１）阻害剤の投与を含むことができる。ＬＨＲＨ薬は、睾丸によって産生されたテストステロンの量を低下させる。米国において利用可能なＬＨＲＨアナログの例には、リュープロリド（Ｌｕｐｒｏｎ（登録商標）、Ｖｉａｄｕｒ（登録商標）、Ｅｌｉｇａｒｄ（登録商標））、ゴセレリン（Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標））、トリプトレリン（Ｔｒｅｌｓｔａｒ（登録商標））およびヒストレリン（Ｖａｎｔａｓ（登録商標））が含まれる。抗アンドロゲンは、アンドロゲンのいずれかを身体が使用する能力を遮断する。抗アンドロゲン薬の例には、ダロルタミド（Ｎｕｂｅｑａ（登録商標））、エンザルタミド（Ｘｔａｎｄｉ（登録商標））、アパルタミド（Ｅｒｌｅａｄａ（登録商標））、フルタミド（Ｅｕｌｅｘｉｎ（登録商標））、ビカルタミド（Ｃａｓｏｄｅｘ（登録商標））およびニルタミド（Ｎｉｌａｎｄｒｏｎ（登録商標））が含まれる。黄体形成ホルモン放出ホルモン（ＬＨＲＨ）アンタゴニストには、アバレリックス（Ｐｌｅｎａｘｉｓ（登録商標））またはデガレリクス（Ｆｉｒｍａｇｏｎ（登録商標））（進行前立腺がんを処置するため、２００８年にＦＤＡによって使用が承認された）が含まれる。５α－レダクターゼ阻害剤は、テストステロンを一層活性なアンドロゲン、５α－ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ）に変換する身体の能力を遮断し、フィナステリド（Ｐｒｏｓｃａｒ（登録商標））およびデュタステリド（Ａｖｏｄａｒｔ（登録商標））などの薬物を含む。テストステロン生合成の阻害剤は、ケトコナゾール（Ｎｉｚｏｒａｌ（登録商標））などの薬物を含む。エストロゲンは、ジエチルスチルベストロールまたは１７β－エストラジオールを含む。１７α－ヒドロキシラーゼ／Ｃ１７，２０リアーゼ（ＣＹＰ１７Ａ１）阻害剤は、アビラテロン（Ｚｙｔｉｇａ（登録商標））を含む。

【0137】

本発明は、抗アンドロゲン抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。一部の実施形態では、抗アンドロゲンは、以下に限定されないが、ビカルタミド、ヒドロキシフルタミド、フルタミド、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミドおよび／またはアビラテロンを含むことができる。

【0138】

本発明は、それを必要とする対象における、前立腺がんを処置する方法であって、前記対象が、再配列したＡＲ、ＡＲを過剰発現する前立腺がん、去勢抵抗性前立腺がん、去勢感受性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７を発現する前立腺がんまたはｄ５６７ＥＳを発現する前立腺がんを有しており、前記方法が、対象に、治療有効量の本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物、またはそれらの任意の組合せを投与するステップを含む、方法を包含する。一部の実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ． ２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆ、または２６ｇである。別の実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0139】

一実施形態では、去勢抵抗性前立腺がんは、再配列したＡＲ、ＡＲを過剰発現する去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ変異を発現する去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異を発現する去勢抵抗性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７を発現する去勢抵抗性前立腺がん、ｄ５６７ＥＳを発現する去勢抵抗性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢抵抗性前立腺がんである。

【0140】

一実施形態では、去勢感受性前立腺がんは、Ｆ８７６Ｌ変異を発現する去勢感受性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異去勢感受性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢感受性前立腺がんである。

【0141】

一実施形態では、去勢感受性前立腺がんの処置は、非去勢背景において、または単剤療法として、または去勢感受性前立腺がんの腫瘍が、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミドおよび／またはアビラテロンに抵抗性である場合に行われる。

【0142】

本発明は、それを必要とする対象においてＡＲ過剰発現前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0143】

本発明は、それを必要とする対象において去勢抵抗性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。
一実施形態では、去勢抵抗性前立腺がんは、再配列したＡＲ、ＡＲを過剰発現する去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ変異を発現する去勢抵抗性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異を発現する去勢抵抗性前立腺がん、ＡＲ－Ｖ７を発現する去勢抵抗性前立腺がん、ｄ５６７ＥＳを発現する去勢抵抗性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢抵抗性前立腺がんである。

【0144】

本発明は、それを必要とする対象において去勢感受性前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。一実施形態では、去勢感受性前立腺がんは、Ｆ８７６Ｌ変異を発現する去勢感受性前立腺がん、Ｆ８７６Ｌ＿Ｔ８７７Ａ二重変異去勢感受性前立腺がん、および／または腫瘍内アンドロゲン合成を特徴とする去勢感受性前立腺がんである。一実施形態では、去勢感受性前立腺がんの処置は、非去勢背景において、または単剤療法として、または去勢感受性前立腺がんの腫瘍が、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミドおよび／またはアビラテロンに抵抗性である場合に行われる。

【0145】

本発明は、それを必要とする対象においてＡＲ－Ｖ７発現前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0146】

本発明は、それを必要とする対象においてｄ５６７ＥＳ発現前立腺がんを処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0147】

別の態様では、本発明は、それを必要とする対象においてアンドロゲン受容体依存性疾患もしくは状態またはアンドロゲン依存性疾患もしくは状態を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0148】

本明細書で使用する場合、用語「アンドロゲン受容体関連状態」または「アンドロゲン感受性疾患または障害」または「アンドロゲン依存性疾患または障害」とは、アンドロゲン受容体によってモジュレートされる、またはその病因が、アンドロゲン受容体の活性に依存する状態、疾患または障害のことである。アンドロゲン受容体は、身体の大部分の組織において発現されるが、とりわけ前立腺および皮膚において過剰発現される。ＡＤＴは、長年にわたり、前立腺がん処置の主軸であり、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、様々な前立腺がん、良性前立腺肥大、前立腺腫大（prostamegaly）、および前立腺の他の病気の処置にも有用となり得る。一実施形態では、「アンドロゲン受容体依存性疾患または状態」とは、一部または全体が、アンドロゲン活性または身体におけるＡＲ軸の活性化の存在に依存する、またはその存在に感受性が高い医学的状態のことである。一実施形態では、アンドロゲン依存性疾患または状態は、アンドロゲン受容体依存性疾患または状態と互換的に使用される。

【0149】

本発明は、良性前立腺肥大を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0150】

本発明は、前立腺腫大を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0151】

本発明は、過剰増殖性前立腺障害および疾患を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0152】

用語「病因を低減する」は、特定の疾患、障害または状態と関連する組織損傷または臓器損傷の低減を包含することが理解されるべきである。この用語は、問題の疾患、障害もしくは状態を含めた、関連する疾患、障害もしくは状態の出現率または重症度を低減すること、または示されている症状またはそれに関連する症状を含めた、関連する疾患、障害もしくは状態の数の低減を含むことができる。

【0153】

トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）は、エストロゲン受容体（ＥＲ）、プロゲステロン受容体（ＰＲ）、およびＨＥＲ２受容体キナーゼの発現に欠ける乳がんのタイプである。ＴＮＢＣは、他のタイプの原発性乳がんを処置するのに使用されるホルモンおよびキナーゼ治療標的に欠ける。化学療法はしばしば、ＴＮＢＣの最初の薬物治療である。ＡＲはしばしば、ＴＮＢＣにおいて依然として発現し、化学療法に代わるホルモン標的治療を提供し得る。ＥＲ陽性乳がんでは、ＡＲの活性化が乳組織および腫瘍でＥＲの作用を制限しおよび／または対抗すると考えられるので、ＡＲが陽性予後指標である。ＥＲが存在しない状態では、ＡＲが乳がん腫瘍の成長を実際に支持する可能性がある。ＡＲの役割は、ＴＮＢＣでは完全に理解されていないが、ある特定のＴＮＢＣは、ＬＢＤに欠けるＡＲ－ＳＶのアンドロゲン非依存性活性化またはＡＲ完全長のアンドロゲン依存性活性化により支持され得る。ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、およびその他のＬＢＤ指向型伝統的ＡＲアンタゴニストは、これらのＴＮＢＣにおいてＡＲ－ＳＶをアンタゴナイズできないと考えられる。本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、ＡＲのＮＴＤにおける結合部位を通してＡＲ－ＳＶを破壊することが可能なものであるが、ＴＮＢＣ患者由来の異種移植片で観察されるＡＲ－ＳＶを含むＡＲをアンタゴナイズし、抗腫瘍効果を発揮できると考えられる。

【0154】

一実施形態では、本発明は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を処置する方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を提供する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0155】

本発明は、トリプルネガティブ乳がん（ＴＮＢＣ）を処置するまたはその進行を阻害する、またはトリプルネガティブ乳がんに罹患している対象の生存率を上昇させる方法であって、対象に本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物、またはその光学異性体、薬学的に許容される塩、水和物あるいはその任意の組合せの治療有効量を投与することを含む方法を包含する。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、式１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物によって表される。一部の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、１６ｊ、２１ａ、２１ｃ、２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、２６ｆまたは２６ｇである。他の実施形態では、本ピラゾリルプロパンアミド化合物は、化合物２６ａである。

【0156】

本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、医薬組成物に使用されてもよい。本明細書で使用する場合、「医薬組成物」は、薬学的に許容される担体または希釈剤と一緒になった、本化合物または活性成分の薬学的に許容される塩のいずれかを意味する。「治療有効量」とは、本明細書で使用する場合、所与の適応症および投与レジメンに対して治療作用を提供する量を指す。

【0157】

本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物を含有する医薬組成物は、さらに、少なくとも１種のＬＨＲＨアゴニストまたはアンタゴニスト、抗アンドロゲン、抗プログラム死受容体１（抗－ＰＤ－１）薬または抗－ＰＤ－Ｌ１薬を含んでいてもよい。ＬＨＲＨアゴニストには、限定するものではないが酢酸リュープロリド（Ｌｕｐｒｏｎ（登録商標））（参照により本明細書に組み込まれる米国特許第５，４８０，６５６号；第５，５７５，９８７号；第５，６３１，０２０号；第５，６４３，６０７号；第５，７１６，６４０号；第５，８１４，３４２号；および第６，０３６，９７６号）または酢酸ゴセレリン（Ｚｏｌａｄｅｘ（登録商標））（参照により本明細書に組み込まれる米国特許第７，１１８，５５２号；第７，２２０，２４７号；および第７，５００，９６４号）が含まれる。ＬＨＲＨアンタゴニストには、限定するものではないがデガレリクスまたはアバレリクスが含まれる。抗アンドロゲンには、限定するものではないがビカルタミド、フルタミド、フィナステリド、デュタステリド、ダロルタミド、エンザルタミド、アパルタミド、ニルタミド、クロルマジノン、アビラテロン、またはこれらの任意の組合せが含まれる。抗－ＰＤ－１薬には、限定するものではないがＡＭＰ－２２４、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、およびＡＭＰ－５５４が含まれる。抗－ＰＤ－Ｌ１薬には、限定するものではないがＢＭＳ－９３６５５９、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ、およびＭＰＤＬ３２８０Ａが含まれる。抗－ＣＴＬＡ－４薬には、限定するものではないがイピリムマブおよびトレメリムマブが含まれる。

【0158】

本明細書で使用する場合、用語「投与する」とは、本発明の化合物に対象を接触させることを指す。本明細書で使用する場合、投与は、ｉｎ ｖｉｔｒｏで、すなわち試験管中で、またはｉｎ ｖｉｖｏで、すなわち生存生物、例えばヒトの細胞または組織中で行うことができる。対象は、男性または女性の対象であってもよく、または両方であってもよい。

【0159】

本発明の化合物の投与に好適な、様々な組成物または製剤を調製するための手順を記載する、多数の標準参考文献が入手可能である。製剤および調製物を作製する方法の例は、Handbook of Pharmaceutical Excipients, American Pharmaceutical Association (現行版); Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (Lieberman, Lachman and Schwartz, editors)現行版、Marcel Dekker, Inc.による出版、およびRemington's Pharmaceutical Sciences (Arthur Osol, editor), 1553-1593 (現行版)に見出すことができる。

【0160】

投与様式および剤形は、所与の処置適用にとって望ましくかつ有効な、治療量の化合物または組成物に密接に関連する。

【0161】

本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物の医薬組成物は、当業者に公知の任意の方法によって対象に投与することができる。これらの方法は、以下に限定されないが、経口、非経口、脈管内、がん周辺（paracancerally）、経粘膜、経皮、筋肉内、鼻内、静脈内、皮内、皮下、舌下、腹腔内、脳室内、頭蓋内、膣内、吸入により、直腸または腫瘍内を含む。これらの方法は、組成物を組織に送達することができる任意の手段（例えば、ニードルまたはカテーテル）を含む。代替的に、局所投与は、皮膚、眼または粘膜表面への適用に望ましいものとなり得る。投与の別の方法は、吸引またはエアロゾル製剤による。本医薬組成物は、身体表面に局所投与されてもよく、したがって、局所投与に好適な形態で製剤化される。好適な局所用製剤は、ゲル剤、軟膏剤、クリーム剤、ローション剤、点滴剤などを含む。局所投与の場合、本組成物は、薬学的担体と共に、またはこれを使用しないで、生理的に許容される希釈剤中の液剤、懸濁剤またはエマルション剤として調製されて適用される。

【0162】

好適な剤形には、以下に限定されないが、経口、直腸、舌下、粘膜、鼻、眼、皮下、筋肉内、静脈内、経皮、脊髄、髄腔内、関節内、動脈内、くも膜下、気管支、リンパ系および子宮内投与、および活性成分の全身性送達のための他の剤形が含まれる。適応症に応じて、経口または局所投与に好適な製剤が好ましい。

【0163】

局所投与：本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物は、局所投与されてもよい。本明細書で使用する場合、「局所投与」とは、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒ（および必要に応じた担体）の化合物の、皮膚および／または毛髪への直接適用を指す。本局所用組成物は、液剤、ローション剤、軟膏剤、クリーム剤、軟膏剤、リポソーム剤、スプレー剤、ゲル剤、フォーム剤、ローラー状スティック剤、および皮膚科学において常套的に使用される任意の他の製剤の形態にあることができる。

【0164】

局所投与は、男性型多毛症、脱毛症、ざ瘡および過剰皮脂などの皮膚表面に見出される適応症に使用される。用量は様々となるが、一般的なガイドラインとして、本化合物は、約０．０１～５０ｗ／ｗ％、およびさらに典型的には、約０．１～１０ｗ／ｗ％の量で、皮膚科学的に許容される担体に存在する。通常、皮膚科学的調製物は、毎日、１～４回、罹患領域に適用される。「皮膚科学的に許容される」とは、皮膚または毛髪に適用することができる担体であって、薬物を作用部位に拡散させる担体を指す。より詳細には、「作用部位」は、アンドロゲン受容体の阻害またはアンドロゲン受容体の分解が望ましい、部位を指す。

【0165】

本発明の組成物はまた、クレンジング用石鹸または棒などの、固形調製物を含んでもよい。これらの組成物は、当分野において公知の方法に準拠して調製される。

【0166】

製剤、例えば、水性液剤、アルコール性液剤もしくは水性アルコール液剤、またはクリーム剤、ゲル剤、エマルション剤もしくはムース剤あるいは噴霧体を含むエアロゾル組成物を使用して、毛髪が存在する場所に発生する適応症を処置することができる。したがって、本組成物は、ヘアケア組成物とすることもできる。このようなヘアケア組成物には、以下に限定されないが、シャンプー、ヘアセットローション、トリートメントローション、スタイリングクリームまたはゲル、染料組成物、または脱毛を予防するローションもしくはゲルが含まれる。皮膚科学的組成物中の様々な構成要素の量は、考えられる分野において慣用的に使用される量である。

【0167】

本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物を含有する医療剤および化粧剤（ｃｏｓｍｅｔｉｃ ａｇｅｎｔ）は、小売りで流通させるために、通常、包装される（すなわち、製造物品）。このような物品は、患者が本製品を使用する方法を指示するようラベルが貼られて、包装される。このような指示は、処置される状態、処置期間、投与スケジュールなどを含む。

【0168】

このような医薬剤形を調製するために、活性成分を、従来の薬学的配合技法に準拠して、薬学的担体と混合することができる。担体は、投与に望ましい調製物の形態に応じて、幅広い形態をとることができる。

【0169】

本明細書で使用する場合、「薬学的に許容される担体または希釈剤」は、当業者に周知である。担体または希釈剤は、固形製剤のための固体担体もしくは希釈剤、液体製剤のための液体担体もしくは希釈剤、またはそれらの混合物であり得る。

【0170】

固体担体／希釈剤には、以下に限定されないが、ガム、デンプン（例えば、トウモロコシデンプン、アルファ化デンプン）、糖（例えば、ラクトース、マンニトール、スクロース、デキストロース）、セルロース物質（例えば微結晶性セルロース）、アクリレート（例えば、ポリメチルアクリレート）、炭酸カルシウム、酸化マグネシウム、タルクまたはそれらの混合物が含まれる。

【0171】

経口および非経口投与：経口剤形の組成物を調製する際に、通常の薬学的媒体のいずれかが使用されてもよい。したがって、懸濁剤、エリキシル剤および液剤などの液状経口調製物の場合、好適な担体および添加物には、水、グリコール、油、アルコール、矯味矯臭剤、保存剤、着色剤などが含まれる。散剤、カプセル剤および錠剤などの固形経口調製物の場合、好適な担体および添加物には、デンプン、糖、希釈剤、造粒剤、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などが含まれる。投与を容易にするため、錠剤およびカプセル剤は、最も有利な経口投与単位形態とする。所望の場合、錠剤は、標準技法によって、糖コーティングされていてもよく、または腸溶コーティングされていてもよい。

【0172】

非経口製剤の場合、担体は、通常、滅菌水を含むが、溶解性を補助するため、または保存するための成分などの他の成分が含まれてもよい。注射液剤もまた調製されてもよく、この場合、適切な安定化剤が使用されてもよい。

【0173】

一部の適用では、リポソームもしくは他の封入媒体中の活性剤のカプセル封入、または、例えば、タンパク質、リポタンパク質、グリコタンパク質および多糖から選択されるものなどの好適な生体分子への共有結合、キレート形成もしくは会合性配位による活性剤の固定化などによって、「ベクトル化（vectorized）」形態の活性剤を利用することが有利となり得る。

【0174】

経口投与に好適な製剤を使用する処置の方法は、カプセル剤、カシェ剤、錠剤またはロゼンジ剤などの別個の単位として提示されてもよく、各々が、所定量の活性成分を含有する。必要に応じて、シロップ剤、エリキシル剤、エマルション剤または一回分量（draught）などの水性アルコールまたは非水性液体中の懸濁剤が使用されてもよい。

【0175】

錠剤は、必要に応じて１種または複数の副成分と共に、圧縮もしくは成形、または湿式造粒によって作製され得る。圧縮錠剤は、好適な機械において、例えば、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、不活性希釈剤、表面活性剤または放出剤（discharging agent）と必要に応じて混合された、粉末または顆粒などの自由流動形態にある活性化合物と共に圧縮することによって調製することができる。粉末状活性化合物と好適な担体との混合物からなる成形錠剤は、好適な機械で成形することによって作製することができる。

【0176】

シロップ剤は、活性化合物を、糖、例えばスクロースの濃縮水溶液に添加することによって作製することができ、これに任意の副成分が添加されてもよい。このような副成分には、矯味矯臭剤、好適な保存剤、糖の結晶化を遅延させる作用物質、およびポリヒドロキシアルコールなどの任意の他の成分の溶解度を高めるための作用物質、例えばグリセロールまたはソルビトールが含まれ得る。

【0177】

非経口投与に好適な製剤は、レシピエントの血液と好ましくは等張性である、活性化合物の滅菌水性調製物（例えば、生理食塩溶液）を含んでもよい。このような製剤には、化合物が血液構成成分または１つもしくは複数の臓器を標的とするように設計されている懸濁化剤、および増粘剤、およびリポソーム、または他のマイクロ微粒子系が含まれ得る。これらの製剤は、単位用量形態または多回用量形態で提示され得る。

【0178】

非経口投与は、全身送達の任意の好適な形態を含むことができる。投与は、例えば、静脈内、動脈内、髄腔内、筋肉内、皮下、筋肉内、腹部内（例えば、腹腔内）などとすることができ、注入ポンプ（外部型または埋込型）または望ましい投与モダリティに適切な任意の他の好適な手段によって行うことができる。

【0179】

鼻および他の粘膜スプレー製剤（例えば、吸入可能な形態）は、活性化合物の精製水溶液を、保存剤および等張剤と共に含むことができる。このような製剤は、好ましくは、鼻または他の粘膜と適合するｐＨおよび等張性状態に調整される。代替的に、それらは、ガス担体中に懸濁された微細に分割された固形散剤の形態であり得る。このような製剤は、任意の好適な手段または方法によって、例えば、ネブライザー、噴霧器、定量吸入器などによって送達することができる。

【0180】

直腸投与のための製剤は、カカオ脂、水素添加脂肪または水素添加脂肪カルボン酸などの好適な担体と共に坐薬として提示され得る。

【0181】

経皮製剤は、活性剤を、セルロース媒体、例えばメチルセルロースまたはヒドロキシエチルセルロースなどのチキソトロピックな担体またはゼラチン様担体に組み込むことによって調製することができ、得られた製剤は、次に、着用者の皮膚と皮膚接触して固定されるように適合された経皮デバイス内に充填される。

【0182】

上記の成分に加えて、本発明の製剤は、希釈剤、緩衝液、矯味矯臭剤、結合剤、崩壊剤、表面活性剤、増粘剤、滑沢剤、保存剤（抗酸化剤を含む）などから選択される１種または複数の成分をさらに含んでもよい。

【0183】

本製剤は、即時放出、持続放出、遅延発生放出、または当業者に公知の任意の他の放出プロファイルとなり得る。

【0184】

哺乳動物、特にヒトへの投与の場合、医師が、個体にとって最も好適となり、かつ特定の個体の年齢、体重、遺伝的特質および／または応答に応じて変わり得る、実際の投与量および処置期間を決定することが予期される。

【0185】

本発明の方法は、治療有効量での化合物の投与を含む。治療有効量は、様々な投与量を含んでもよい。

【0186】

一実施形態では、本明細書に記載されるピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば、式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＡ、ＩＩＢ、ＩＩＩ、ＩＩＩＡ、ＩＩＩＢ、ＩＶ、ＩＶＡ、ＩＶＢ、Ｖ、ＶＡ、ＶＢ、１０、１６ａ～１６ｘ、２１ａ～２１ｊ、２６ａ～２６ｈ、および２９ａ～２９ｒの化合物は、１日あたり１～３０００ｍｇの投与量で投与される。追加的な実施形態では、本発明の化合物は、１日あたり１～１０ｍｇ、１日あたり３～２６ｍｇ、１日あたり３～６０ｍｇ、１日あたり３～１６ｍｇ、１日あたり３～３０ｍｇ、１日あたり１０～２６ｍｇ、１５～６０ｍｇ、１日あたり５０～１００ｍｇ、１日あたり５０～２００ｍｇ、１日あたり１００～２５０ｍｇ、１日あたり１２５～３００ｍｇ、１日あたり２０～５０ｍｇ、１日あたり５～５０ｍｇ、１日あたり２００～５００ｍｇ、１日あたり１２５～５００ｍｇ、１日あたり５００～１０００ｍｇ、１日あたり２００～１０００ｍｇ、１日あたり１０００～２０００ｍｇ、１日あたり１０００～３０００ｍｇ、１日あたり１２５～３０００ｍｇ、１日あたり２０００～３０００ｍｇ、１日あたり３００～１５００ｍｇ、または１日あたり１００～１０００ｍｇの用量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり２５ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり４０ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり５０ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり６７．５ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり７５ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり８０ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり１００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり１２５ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり２５０ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり３００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり５００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり６００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり１０００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり１５００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり２０００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり２５００ｍｇの投与量で投与される。一実施形態では、ピラゾリルプロパンアミド化合物は、１日あたり３０００ｍｇの投与量で投与される。

【0187】

本方法は、様々な投与量で化合物を投与するステップを含むことができる。例えば、本化合物は、３ｍｇ、１０ｍｇ、３０ｍｇ、４０ｍｇ、５０ｍｇ、８０ｍｇ、１００ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、２００ｍｇ、２５０ｍｇ、３００ｍｇ、４５０ｍｇ、５００ｍｇ、６００ｍｇ、９００ｍｇ、１０００ｍｇ、１５００ｍｇ、２０００ｍｇ、２５００ｍｇまたは３０００ｍｇの投与量で投与されてもよい。

【0188】

代替的に、本化合物は、０．１ｍｇ／ｋｇ／日の投与量で投与されてもよい。本化合物は、０．２～３０ｍｇ／ｋｇ／日、または０．２ｍｇ／ｋｇ／日、０．３ｍｇ／ｋｇ／日、１ｍｇ／ｋｇ／日、３ｍｇ／ｋｇ／日、５ｍｇ／ｋｇ／日、１０ｍｇ／ｋｇ／日、２０ｍｇ／ｋｇ／日、３０ｍｇ／ｋｇ／日、５０ｍｇ／ｋｇ／日または１００ｍｇ／ｋｇ／日の間の投与量で投与されてもよい。

【0189】

本医薬組成物は、固形剤形、液剤または経皮パッチ剤であってもよい。固形剤形には、以下に限定されないが、錠剤およびカプセル剤が含まれる。

【0190】

以下の実施例は、本発明の好ましい実施形態を一層完全に例示するために提示されている。しかし、以下の実施例は、本発明の幅広い範囲を限定するものと決して解釈されるべきではない。

【実施例】

【0191】

一般手順、材料、および情報。
全ての溶媒および化学物質を、さらに精製することなく、購入したままの状態で使用した。全ての反応の進行を、シリカゲル６０ Ｆ２５４プレート（Ｍｅｒｃｋ）上での薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）分析によってモニターした。カラムクロマトグラフィーを、シリカゲルカラム［（Ｍｅｒｃｋ Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ ６０、７０～２３０メッシュ、Ｍｅｒｃｋ）で行った。

【0192】

一般方法：全ての非水性反応を、乾燥窒素の不活性雰囲気下、オーブンで乾燥したガラス器具内で行った。全ての試薬および溶媒を、Ａｌｄｒｉｃｈ（Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ、ＭＯ）、Ａｌｆａ－Ａｅｓａｒ（Ｗａｒｄ Ｈｉｌｌ、ＭＡ）、Ｃｏｍｂｉ－Ｂｌｏｃｋｓ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ、ＣＡ）、Ａｒｋ Ｐｈａｒｍ（Ｌｉｂｅｒｔｙｖｉｌｌｅ、ＩＬ）から購入し、さらに精製することなく使用した。分析薄層クロマトグラフィーを、シリカゲルＧＨＬＦ １０×２０ｃｍ Ａｎａｌｔｅｃｈ ＴＬＣ Ｕｎｉｐｌａｔｅｓ（Ａｎａｌｔｅｃｈ、Ｎｅｗａｒｋ、ＤＥ）で行い、ＵＶ光の下で蛍光消光により視覚化した。Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＰ１フラッシュクロマトグラフィー精製システム（Ｃｈａｒｌｏｔｔｅ、ＮＣ）（Ｂｉｏｔａｇｅ ＳＮＡＰカートリッジ、シリカ、５０ｇおよび１００ｇ）を使用して、化合物を精製した。^１Ｈ ＮＭＲおよび^１３Ｃ ＮＭＲスペクトルを、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｓｃｅｎｄ ４００（４００ＭＨｚ）（Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ、ＭＡ）分光光度計で記録した。^１Ｈ ＮＭＲに関する化学シフトを、重水素化溶媒中、内部標準としてのテトラメチルシランから低磁場側への百万分率（ｐｐｍ）（δ）で報告し、結合定数（Ｊ）はヘルツ（Ｈｚ）を単位とする。下記の略称を、スピン多重度に関して使用する：ｓ＝一重線、ｄ＝二重線、ｔ＝三重線、ｑ＝四重線、ｑｕｉｎ＝五重線、ｄｄ＝二重線の二重線、ｄｔ＝三重線の二重線、ｑｄ＝二重線の四重線、ｄｑｕｉｎ＝五重線の二重線、ｍ＝多重線、およびｂｒ ｓ＝ブロード一重線。低分解能質量スペクトル（ＭＳ）は、ポジティブおよびネガティブモードでＢｒｕｃｋｅｒ ＥＳＱＵＩＲＥエレクトロスプレー／イオントラップ機器を使用して取得された。高分解能質量分光光度計（ＨＲＭＳ）データは、Ａｃｑｕｉｔｙ Ｉ－クラス ＵＰＬＣシステムを備えたＷａｔｅｒｓ Ｘｅｖｏ Ｇ２－Ｓ ＱＴＯＦ（Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ）システムで取得された。
（実施例１）
ピラゾリルプロパンアミド化合物の合成

【0193】

表１に示されるような、ピラゾールＢ環の様々な一置換基（シリーズＩ）、芳香族Ａ環の変形例（シリーズＩＩ）、ピラゾールＢ環の様々な二置換基（シリーズＩＩＩ）、または連結部分の修飾（シリーズＩＶ）を持つ一連のピラゾール－１－イル－プロパンアミド化合物を合成した。

【表1-1】

【表1-2】

【表1-3】

【表1-4】

スキーム１．ピラゾール－１－イル－プロパンアミド１６ａ～１６ｘの合成

【化20】

試薬および条件：（ａ）１．ＴＨＦ中ＳＯＣｌ_２、－１０℃から０℃。２．ＴＨＦ中Ｅｔ_３Ｎ、－１０℃から０℃、次いで５０℃まで、２～３時間；（ｂ）２－ブタノン、Ｋ_２ＣＯ_３、還流；（ｃ）ＴＨＦ中ＮａＨ、０℃から室温。
化合物１３の合成

【0194】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸１１（５．００ｇ、２７ｍｍｏｌ）を、ＥａｓｙＭａｘ １００ｍＬ反応器内で、ＴＨＦ（２７ｍＬ、５．４体積）に溶解した。撹拌を４００ｒｐｍに設定し、溶液を２．５℃に冷却した。塩化チオニル（２．３９ｍＬ、１．２０当量、０．４８体積）を、反応温度を１２℃よりも低く維持しながら、３０分にわたり反応混合物にゆっくりと添加した。反応混合物を１．５時間撹拌した。反応物を－５℃に冷却した。トリエチルアミン（５．０ｍＬ、１．３０当量、１体積）を、温度を１２℃よりも低く維持しながら、反応混合物にゆっくりと添加した。次いで４－アミノ－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル１２（４．８５ｇ、０．９５当量、０．９７重量）およびＴＨＦ（３．３７ｍＬ、０．６７体積）をバッチに投入した。次いでバッチを５０±５℃に加熱し、２時間撹拌した。次いでバッチを２０±５℃に冷却し、その後、水（１４．７ｍＬ、２．９体積）およびトルエン（２０．２ｍＬ、４．０体積）を添加した。短時間撹拌した後、層が分離した。次いで有機層を水（１４．７ｍＬ、２．９体積）で洗浄した。次いでバッチを、バッチ温度を５０℃よりも低く維持しながら５±０．５体積（４±０．５重量）に濃縮し、その後、トルエン（３０ｍＬ、６体積）を添加した。次いでバッチを５±０．５体積（４±０．５重量）まで蒸留し、バッチ温度を２．５±２．５℃まで低減させた。次いでバッチを濾過し、フィルターケーキをトルエンで２回（それぞれ８．５ｍＬ、それぞれ１．７体積）洗浄した。次いでバッチを、２５～３０インチの真空下で乾燥して、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド１３を得た。
化合物１４の合成

【0195】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド１３（５．００ｇ、０．０１８５０４ｍｏｌ）の、２５ｍＬの２－ブタノン中の溶液に、炭酸カリウム（３．８３６ｇ、０．０２７７５６ｍｏｌ）を添加した。得られた反応混合物を、アルゴン雰囲気下で２時間、加熱還流した。反応の完了がＴＬＣにより確認された後、反応物を室温（ｒｔ）まで冷却し、セライトのパッドに通して濾過し、セライトのパッドを１５ｍＬの２－ブタノンで濯いだ。濾液を真空下で濃縮し、２５～３０インチの真空下で乾燥して、（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミド１４を得た。
一般手順Ａ
例として１０（ＵＴ－３４）を使用した、１６（ａ～ｙ）、２１（ａ～ｋ）、２６（ａ～ｈ）、ならびに２９（ａ～ｐ）の合成

【0196】

アルゴン雰囲気下で氷水浴で冷却した、４－フルオロ－ピラゾール（０．１０ｇ、０．００１１６ｍｏｌ）または一般にピラゾール１５の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．１２ｇ、０．００２９１ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド１３（０．４１ｇ、０．００１１６ｍｏｌ）または（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミド１４（０．３１３ｇ、０．００１１６ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた反応混合物を、アルゴン下で一晩、室温で撹拌した。反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出液として酢酸エチルおよびヘキサン（１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．１３ｇの１０を白色固体として得た。
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ａ）

【0197】

化合物１６ａを、一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．５２ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.39 (s, 1H, NH), 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.22 (dd, J = 8.2 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.66-7.65 (m, 1H, ピラゾール-H), 7.39-7.38 (m, 1H, ピラゾール-H), 6.28 (s, 1H, OH), 6.25-6.23 (m, 1H, ピラゾール-H), 4.50 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 4.29 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 1.35 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₄F₃N₄O₂ ⁺]: 計算値339.1099、実測値339.1105 [M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１０（ＵＴ－３４））。

【0198】

化合物１０を、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（１：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．１３ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝３２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.39 (s, 1H, NH), 8.47 (d, J = 1.6 Hz, 1H, ArH), 8.24 (dd, J = 8.4 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 1H, ArH), 7.73 (d, J = 4.4 Hz, , 1H, ピラゾール-H), 7.41 (d, J = 4.4Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.31 (s, 1H, OH), 4.38 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.21 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.34 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃F₄N₄O₂ ⁺]: 計算値357.0975、実測値357.0966[M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（３－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｂ）

【0199】

化合物１６ｂを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．３６ｇの表題の化合物を白色の針として得た。収率＝４４％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.39 (s, 1H, NH), 8.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.24 (dd, J = 8.8 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.55 (t, J = 3.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.29 (s, 1H, OH), 5.93-5.91 (m, 1H, ピラゾール-H), 4.34 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 4.15 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 1.36 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃F₄N₄O₂ ⁺]: 計算値357.0975、実測値357.0985[M+H]⁺.
（Ｓ）－３－（４－クロロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｃ）

【0200】

化合物１６ｃを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．３０ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５５％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 8.46 (s, 1H, ArH), 8.23 (d, J = 8.6 Hz, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.6 Hz, 1H, ArH), 7.83 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.47 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.34 (s, 1H, OH), 4.45 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.27 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.36 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃ClF₃N₄O₂ ⁺]: 計算値373.0679、実測値373.0678[M+H]⁺.純度：97.69% (HPLC).
（Ｓ）－３－（４－ブロモ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｄ）

【0201】

化合物１６ｄは、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．４７ｇの表題の化合物を白色形態として得た。収率＝７９．６％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.08 (s, 1H, NH), 8.00 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 7.87 (dd, J = 8.4 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H, ArH), 7.49 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.47 (s, 1H, ピラゾール-H), 5.92 (s, 1H, OH), 4.64 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.24 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.47 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃BrF₃N₄O₂ ⁺]: 計算値417.0174、実測値417.0167[M+H]⁺.純度：99.53% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－３－（４－ヨード－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－メチルプロパンアミド（１６ｅ）

【0202】

化合物１６ｅを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。粗生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．２５ｇの表題の化合物をオフホワイトの固体として得た。収率＝５２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.36 (s, 1H, NH), 8.45 (s, 1H, ArH), 8.23 (d, J = 8.8 Hz, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.78 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.31 (s, 1H, OH), 4.48 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.31 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.35 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃F₃IN₄O₂ ⁺]: 計算値465.0035、実測値465.0045[M+H]⁺.
（Ｓ）－３－（４－アセチル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｆ）

【0203】

化合物１６ｆを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。

【0204】

生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、７０ｍｇの表題の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝２０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.37 (s, 1H, NH), 8.45 (d, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.25 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.23 (d, J = 8.2 Hz, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.86 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.37 (s, 1H, OH), 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.33 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 2.34 (s, 3H, CH₃), 1.39 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₇H₁₆F₃N₄O₃ ⁺]: 計算値381.1175、実測値381.1178[M+H]⁺.純度：95.66% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｇ）

【0205】

化合物１６ｇを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．３０ｇの表題の化合物を白色フォームとして得た。収率＝５０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 8.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.25-8.22 (m, 2H, ArH & ピラゾール-H), 8.11 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.82 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.39 (s, 1H, OH), 4.55 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.37 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.40 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₃F₆N₄O₂] ⁺: 計算値407.0943、実測値407.0945 [M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｈ）

【0206】

化合物１６ｈを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．３１ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.31 (s, 1H, NH), 8.42 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.18 (dd, J = 8.8 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.09 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.84-7.83 (m, 1H, ピラゾール-H), 6.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.41 (s, 1H, OH), 4.56 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.38 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.40 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₃F₆N₄O₂ ⁺]: 計算値407.0943、実測値407.0945 [M+H]⁺.
（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｉ）

【0207】

化合物１６ｉを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出液としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１から１：２）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．１８ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝４６％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.35 (s, 1H, NH), 8.45 (d, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.43 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.22 (d, J = 8.8 Hz, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.98 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.41 (s, 1H, OH), 4.45 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.36 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.38 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₃F₃N₅O₂ ⁺]: 計算値364.1021、実測値364.1016[M+H]⁺.純度：98.48% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－ニトロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｊ）

【0208】

化合物１６ｊを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．１５ｇの表題の化合物をオフホワイトの固体として得た。収率＝４４％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.36 (s, 1H, NH), 8.69 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.45 (d, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.23 (d, J = 8.8 Hz, J = 1.2 Hz, 1H, ArH), 8.19 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 6.47 (s, 1H, OH), 4.56 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.38 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.41 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₃F₃N₅O₄ ⁺]: 計算値384.0920、実測値384.0932[M+H]⁺.純度：99.58% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－３－（４－メトキシ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－メチルプロパンアミド（１６ｋ）

【0209】

化合物１６ｋを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．３０ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 8.46 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.24 (dd, J = 8.2 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.35 (d, J = 0.8 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.15 (d, J = 0.8 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.25 (s, 1H, OH), 4.35 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.18 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 3.61 (s, 3H, CH₃), 1.36 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₆F₃N₄O₃ ⁺]: 計算値369.1175、実測値369.1182[M+H]⁺.純度：99.28% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－メチル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｌ）

【0210】

化合物１６ｌを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．２８ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６６％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 8.46 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.23 (dd, J = 8.8 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.41 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.17 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.24 (s, 1H, OH), 4.40 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.22 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.97 (s, 3H, CH₃), 1.36 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₆F₃N₄O₂ ⁺]: 計算値353.1225、実測値353.1232[M+H]⁺.純度：99.75% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｍ）

【0211】

化合物１６ｍを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（１：２）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．９０ｇの表題の化合物を白色の針として得た。収率＝６８．５％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.40 (s, 1H, NH), 8.46 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.24 (dd, J = 8.4 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H, ArH), 8.05 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.82 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.52-7.45 (m, 2H, ArH), 7.35-7.31 (m, 2H, ArH), 7.20-7.16 (m, 1H, ArH), 6.33 (s, 1H, OH), 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.30 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.40 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₂₁H₁₈F₃N₄O₂]⁺: 計算値415.1382、実測値415.1391[M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（３－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（１６ｎ）

【0212】

化合物１６ｎを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（１：３から１：２）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．６０ｇの表題の化合物を白色の針として得た。収率＝４１．７％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H, NH), 8.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.22 (dd, J = 8.2 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.05 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 7.60-7.57 (m, 2H, ArH), 7.28-7.21 (m, 3H, ArH), 6.66 (d, J = 3.0 Hz, 1H, ArH), 6.31 (s, 1H, OH), 4.52 (d, J = 14.6 Hz, 1H, CH), 4.32 (d, J = 14.6 Hz, 1H, CH), 1.43 (s, 3H, CH₃). 質量(ESI、陽): [C₂₁H₁₈F₃N₄O₂ ⁺]: 計算値415.1382、実測値514.1423 [M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｏ）

【0213】

化合物１６ｏを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．３３ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.29 (s, 1H, NH), 8.41 (s, 1H, ArH), 8.21 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.68 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.61 (t, J = 6.4 Hz, 2H, ArH), 7.08 (t, J = 8.4 Hz, 2H, ArH), 6.65 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.30 (s, 1H, OH), 4.51 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.31 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.42 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₂₁H₁₇F₄N₄O₂ ⁺]: 計算値433.1288、実測値433.1291[M+H]⁺.純度：96.01% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（３－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｐ）

【0214】

化合物１６ｐを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．２７ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝４３％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.29 (s, 1H, NH), 8.41 (s, 1H, ArH), 8.21 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 8.05 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.69 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.61 (t, J = 6.4 Hz, 2H, ArH), 7.08 (t, J = 8.4 Hz, 2H, ArH), 6.65 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.30 (s, 1H, OH), 4.51 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.31 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.42 (s, 3H, CH₃). 質量(ESI、陰): 431.12 [M-H]^-. HRMS [C₂₁H₁₇F₄N₄O₂ ⁺]: 計算値433.1288、実測値433.1290[M+H]⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－エチニル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｑ）

【0215】

化合物１６ｑを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９５：５）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．３７ｇの表題の化合物を白色フォームとして得た。収率＝６２．７％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.40 (s, 1H, NH), 8.47 (s, 1H, ArH), 8.24 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.91 (s 1H, ピラゾール-H), 7.57 (s 1H, ピラゾール-H), 6.35 (s, 1H, OH), 4.46 (d, J = 14.4 Hz, 1H, CH), 4.29 (d, J = 14.4 Hz, 1H, CH), 4.00 (s, 1H, CH), 1.35 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₇H₁₄F₃N₄O₂ ⁺]: 計算値363.1069、実測値 [M+H]⁺.純度：99.55% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－３－（４－（４－ヒドロキシブタ－１－イン－１－イル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－メチルプロパンアミド（１６ｒ）

【0216】

化合物１６ｒを、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびメタノール（９５：５）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．４７７ｇの表題の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝２０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.99 (brs, 1H), 10.47 (s, 1H, NH), 8.55 (s, 1H, ArH), 8.29 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 8.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.87 (s 1H, ピラゾール-H), 7.49 (s 1H, ピラゾール-H), 6.00 (s, 1H, OH), 3.64 (d, J = 8.2 Hz, 1H, CH), 4.50 (d, J = 9.6 Hz, 1H, CH), 3.60-3.56 (m, 2H, CH₂), 2.59-2.55 (m, 2H, CH₂), 1.31 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₉H₁₈F₃N₄O₃ ⁺]: 計算値407.1331、実測値407.1267 [M+H]⁺; HRMS [C₁₉H₁₇F₃N₄NaO₃ ⁺]: 計算値429.1150、実測値429.1099 [M+Na]⁺.純度：% (HPLC).
（Ｓ）－１－（３－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド（１６ｓ）

【0217】

化合物１６ｓを、２ステップで調製した。第１のステップでは、（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）カルバメート１６ｕ（１６ｓに関する中間化合物）を、以下に詳述されるようにスキーム１による一般手順Ａに従って合成した。化合物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、化合物を白色固体として得た。収率＝６９％。¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 9.13 (bs, 1H, NH), 8.18 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.66 (bs, C(O)NHC(O)), 5.79 (bs, 1H, OH), 4.70 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.50 (s, 9H). ¹⁹F NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ -62.20. MS (ESI) m/z 480.23 [M - H]^-; HRMS (ESI) m/z C₂₁H₂₂F₃N₅O₅ 382.1127 [(M － t-Boc) + H]⁺の計算値、実測値382.1129 [[(M － t-Boc) + H]⁺.

【0218】

第２のステップ：１６ｕ（０．７２１ｇ、２．０５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液に、塩化アセチル（３ｍＬ）を０℃で滴下により添加し、さらに室温で３時間撹拌した。減圧下で溶媒を除去した後、混合物を酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）で処理して、所望の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝９５％。ＵＶ ｍａｘ １９４．４５、２７０．４５。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.39 (bs, 1H, NHC(O)), 8.46 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.20 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.55 (bs, 2H, C(O)NH₂), 6.99 (bs, 1H, OH), 4.45 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 4.28 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.34 (s, 3H). ¹⁹F NMR (DMSO-d₆, デカップル) δ -61.13. MS (ESI) m/z 380.19 [M - H] ^-; HRMS (ESI) m/z C₁₆H₁₄F₃N₅O₃ 382.1127 [M + H]⁺の計算値、実測値382.1282 [M + H]⁺. HPLC純度：98.75%.
（Ｓ）－３－（４－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｔ）

【0219】

１６ｕ（下記参照）（０．８１５ｇ、０．００１８ｍｏｌ）の無水ＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中の溶液に、塩化アセチル（０．４ｍＬ、５．４ｍｍｏｌ）を０℃で添加し、さらに室温で３時間撹拌した。真空下で溶媒を除去した後、得られた混合物を、ヘキサンおよび酢酸エチル（１：１、ｖ／ｖ）を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、設計された化合物を褐色の固体として得た。収率＝９１％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.31 (bs, 1H, NH), 10.21 (bs, 2H, NH₂), 8.20 (s, 1H), 7.98 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.77-7.73 (m, 2H), 7.62 (bs, 1H), 7.21 (bs, 1H), 6.28 (bs, 1H, OH), 4.23 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.04 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.04 (s, 3H); ¹⁹F NMR (アセトン-d₆, デカップル) δ １１４．７７. MS (ESI) m/z 354.08 [M + H] ⁺; 351.98 [M － H] ^-.
（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）カルバメート（１６ｕ）

【0220】

化合物１６ｕは、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、設計された化合物を褐色の固体として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.12 (bs, 1H, NH), 8.01 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (bs, 1H), 7.43 (bs, 1H), 6.21 (bs, 1H, HN), 6.17 (bs, 1H, OH), 4.54 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.45 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル)δ -62.21. MS (ESI) m/z 452.11 [M － H] ^-; 454.11 [M + H] ⁺; 476.12 [M + Na]⁺.
（Ｓ）－３－（４－アセトアミド－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｖ）

【0221】

アルゴン雰囲気下、１６ｔ（０．１７ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）の、１０ｍＬの無水ＤＣＭ中の溶液に、塩化アセチル（０．０４ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を、氷水浴で添加した。３０分間撹拌した後、温度を室温まで上昇させ、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を減圧下で凝縮し、次いで１０ｍＬの酢酸エチル中に分散させ、水で洗浄し、蒸発させ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、蒸発乾固した。混合物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２／１、ｖ／ｖ）を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、設計された化合物を黄色の固体として生成した。収率＝９２％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.08 (bs, 1H, NH), 7.92 (bs, 1H, NH), 7.82-7.80 (m, 2H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 (bs, 1H), 7.15 (bs, 1H), 6.10 (bs, 1H, OH), 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.13 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.39 (s, 3H). ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -62.20. MS (ESI) m/z 356.11 [M + H] ⁺; 354.06 [M － H] ^-.
（Ｓ）－３－（４－（２－クロロアセトアミド）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（１６ｗ）

【0222】

アルゴン雰囲気下、１６ｔ（０．１７ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）の、１０ｍＬの無水ＤＣＭ中の溶液に、塩化２－クロロアセチル（０．０４ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を氷水浴内で添加した。３０分間撹拌した後、温度を室温まで上昇させ、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を真空下で凝縮し、次いで１０ｍＬの酢酸エチル中に分散させ、水で洗浄し、蒸発させ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、蒸発乾固した。混合物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２／１、ｖ／ｖ）を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、表題の化合物を黄色の固体として生成した。収率＝６８％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.12 (bs, 1H, NH), 8.12 (bs, 1H, NH), 7.99 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (bs, 1H), 7.88 (dd, J = 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.61 (bs, 1H), 6.11 (bs, 1H, OH), 4.60 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 4.17 (s, 2H), 1.47(s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -62.19. MS (ESI) m/z 452.01 [M + Na] ⁺; 428.00 [M － H] ^-.
（Ｓ）－メチル（１－（３－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）カルバメート（１６ｘ）

【0223】

アルゴン雰囲気下、１６ｔ（０．１７ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）の、１０ｍＬの無水ＤＣＭ中の溶液に、カルボノクロリド酸メチル（０．０４ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を氷水浴内で添加した。３０分間撹拌した後、温度を室温まで上昇させ、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を真空下で凝縮し、次いで１０ｍＬの酢酸エチル中に分散させ、水で洗浄し、蒸発させ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、蒸発乾固した。混合物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２／１、ｖ／ｖ）を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、表題の化合物を白色固体として生成した。収率＝７１％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.07 (bs, 1H,C(O)NH), 7.91 (s, 1H, ArH), 7.79 (d, J = 7.2 Hz, 1H, ArH), 7.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H, ArH), 7.57 (s, 1H, ArH), 7.40 (s, 1H, ArH), 6.33 (bs, 1H, NH), 6.08 (bs, 1H, OH), 4.50 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH₂), 4.12 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH₂), 3.67 (s, 3H, NH(CO)OCH₃), 1.39 (s, 3H, CH₃); ¹⁹F NMR (CDCl_3, デカップル) δ -62.21. MS (ESI) m/z 410.30 [M - H] ^-; 413.21 [M + H] ⁺.
スキーム２．ピラゾール－１－イル－プロパンアミド２１ａ～２１ｊの合成

【化21】

試薬および条件：（ａ）１．ＴＨＦ中ＳＯＣｌ_２、－１０℃から０℃。２．ＴＨＦ中Ｅｔ_３Ｎ、－１０℃から０℃、次いで５０℃に加熱、２～３時間；（ｂ）２－ブタノン、Ｋ_２ＣＯ_３、還流；（ｃ）ＴＨＦ中ＮａＨ、０℃から室温。
（Ｓ）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２１ａ）

【0224】

化合物２１ａを、１７が５－アミノ－３－（トリフルオロメチル）ピコリノニトリルである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して０．５０ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６０．２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.64 (s, 1H, NH), 9.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 7.75 (d, J = 4.8 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.40 (d, J = 4.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.41 (s, 1H, OH), 4.39 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.22 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.36 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₄H₁₂F₄N₅O₂ ⁺]: 計算値358.0927、実測値358.0932.
（Ｓ）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（２１ｂ）

【0225】

化合物２１ｂを、１７が５－アミノ－３－（トリフルオロメチル）ピコリノニトリルである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．１８ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.63 (s, 1H, NH), 9.31 (s, 1H, ArH), 8.80 (s, 1H, ArH), 8.32 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.81 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.48 (s, 1H, OH), 4.55 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.37 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.42 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₂F₆N₅O₂ ⁺]: 計算値408.0892、実測値408.0890[M+H]⁺.純度：96.81% (HPLC).
（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２１ｃ）

【0226】

化合物２１ｃを、１７が５－アミノ－３－（トリフルオロメチル）ピコリノニトリルである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、表題の化合物をオフホワイトの固体として得た。収率＝５２％。ＭＰ １６９．７～１６９．９℃；ＵＶ ｍａｘ １９５．４５、２７４．４５；¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.17 (bs, 1H, NH), 8.83 (s, 1H), 8.67 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 5.58 (s, OH), 4.73 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.34 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.53 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ-62.11. MS (ESI) m/z 363.1 [M - H] ^-; 365.0 [M + H] ⁺; HRMS (ESI) m/z C₁₅H₁₁F₃N₆O₂ 365.0974 [M + H]⁺の計算値、実測値365.0931 [M+ H]⁺; 387.0754 [M + Na]⁺.
（Ｓ）－ｔｅｒｔ－ブチル（１－（３－（（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル）カルバメート（２１ｄ）

【0227】

化合物２１ｄを、１７が５－アミノ－３－（トリフルオロメチル）ピコリノニトリルである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、設計された化合物の褐色固体を得た。収率＝６０％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.28 (bs, 1H, NH), 8.80 (s, 1H), 7.63 (bs, 1H), 7.43 (bs, 1H), 6.29 (bs, 1H, NH), 6.21 (bs, 1H, OH), 4.55 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ-62.11. MS (ESI) m/z 453.16 [M － H] ^-; 477.16 [M + Na] ⁺.
（Ｓ）－Ｎ－（３－クロロ－４－シアノフェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２１ｅ）

【0228】

化合物２１ｅを、１７が４－アミノ－２－クロロベンゾニトリルである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、設計された化合物を白色固体として得た。収率＝７１％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.97 (bs, 1H, NH), 7.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 8.8, J = 4.0 Hz, 1H), 5.86 (bs, 1H, OH), 4.55 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.46 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl_3, デカップル) δ -176.47. HRMS (ESI) m/z C₁₄H₁₂FN₄O₂ 323.0711 [M + H]⁺の計算値、実測値323.0710 [M + H]⁺.
（Ｓ）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（２１ｆ）

【0229】

化合物２１ｆを、１７が４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）アニリンである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、設計された化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝６７％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.14 (bs, 1H, NH), 8.01 (s, 1H), 7.97-7.91 (m, 2H), 7.38 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.95 (s, 1H, OH), 4.56 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.48 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl_3, デカップル) δ -60.13, -176.47. MS (ESI) m/z 375.08 [M － H]^-; 377.22 [M + H] ⁺; 399.04 [M + Na]⁺.
（Ｓ）－５－（３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド）ピコリンアミド（２１ｇ）

【0230】

化合物２１ｇを、ステップａの１７が５－シアノ－６－（トリフルオロメチル）ピコリンアミドである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。ステップｃでは、アルゴン雰囲気下で氷水浴で冷却した、４－フルオロ－ピラゾール（２０；０．２０ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．２８ｇ、０．００６９７１１ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（６－シアノピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド１８（０．６６ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた反応混合物を一晩、室温で、アルゴン下で撹拌した。反応を水によってクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびメタノール（９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．１０ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝１４．１％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.08 (s, 1H, NH), 8.89 (d, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 8.30 (dd, J = 8.2 Hz, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 8.01 (s, 1H, NH), 7.98 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.73 (d, J = 4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.51 (s, 1H, NH), 7.42 (d, J = 4.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.24 (s, 1H, OH), 4.38 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.42 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.34 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₃H₁₅FN₅O₃ ⁺]: 計算値308.1159、実測値308.1177 [M+H]⁺; HRMS [C₁₃H₁₄FN₅NaO₃ ⁺] 計算値330.0978、実測値330.0987 [M+Na]⁺.
（Ｓ）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（キナゾリン－６－イル）プロパンアミド（２１ｈ）

【0231】

化合物２１ｈを、ステップａの１７がキナゾリン－６－アミンである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。ステップｃでは、アルゴン雰囲気下で氷水浴で冷却した、４－フルオロ－ピラゾール（２０；０．２０ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．２８ｇ、０．００６９７１１ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（キナゾリン－６－イル）プロパンアミド（１８；０．７２ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた反応混合物をアルゴン下で室温で、一晩撹拌した。反応を水によりクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、５０ｍｇの表題の化合物を黄色の固体として得た。収率＝１３．７％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.10 (s, 1H, NH), 9.54 (s, 1H, ArH), 9.21 (s, 1H, ArH), 8.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 8.22 (dd, J = 8.6 Hz, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 7.97 (d, J = 8.6 Hz, 1H, ArH), 7.75 (d, J = 4.8 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.43 (d, J = 4.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.26 (s, 1H, OH), 4.42 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.25 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.36 (s, 3H, CH₃). 質量(ESI、陰): 314.05[M-H]^-.
（Ｓ）－Ｎ－（２－クロロピリジン－４－イル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２１ｉ）

【0232】

化合物２１ｉを、２ステップで調製した。第１のステップでは、中間化合物としての（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロピリジン－４－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミドを、１７が２－クロロピリジン－４－アミンであるスキーム２に従い合成した。塩化チオニル（１１．２ｍＬ、０．１５４ｍｏｌ）を、アルゴン雰囲気下、１１（１８．３ｇ、０．１００ｍｏｌ）の、１００ｍＬのＴＨＦ中の冷却溶液（４℃未満）に、滴下により添加した。得られた混合物を、同じ条件下で３時間撹拌した。ここにＥｔ_３Ｎ（２５．７ｍＬ、０．１８５ｍｏｌ）を添加し、２０分間、同じ条件下で撹拌した。２０分後、２－クロロピリジン－４－アミン（１７；９．８９ｇ、０．０７７ｍｏｌ）、１００ｍＬのＴＨＦを添加し、次いで混合物を一晩、室温で撹拌した。溶媒を減圧下で除去して、固体を得、これを１００ｍＬのＨ_２Ｏで処理し、酢酸エチル（２×５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機抽出物を、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液（２×１００ｍＬ）およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥し、減圧下で濃縮して固体を得、これを、酢酸エチルおよびＤＣＭ（８０：２０）を使用するカラムクロマトグラフィーから精製して、固体を得た。この固体を、ＤＣＭおよびヘキサンから再結晶して、１２．６ｇの中間化合物を薄黄色の固体として得た。収率＝４３％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.06 (bs, 1H, NH), 8.31 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 5.6, 0.8 Hz, 1H), 4.81 (bs, 1H, OH), 3.97 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.60 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 1.64 (s, 3H). MS (ESI) m/z 295.28 [M + H]⁺.

【0233】

第２のステップ：２１ｉを、１８が（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロピリジン－４－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミドである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、所望の化合物を白色固体として得た。収率＝５５％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.90 (bs, 1H, NH), 8.26 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.75 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 5.6, 1.2 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H, OH), 4.53 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.14 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 1.45 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl_3, デカップル) δ -176.47. MS (ESI) m/z 298.98 [M + H] ⁺; 296.96 [M － H]^-.
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－２－ヨード－５－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２１ｊ）

【0234】

化合物２１ｊを、ステップａの１７が４－シアノ－２－ヨードアニリンである、スキーム２による一般手順Ａに従い調製した。ステップｃでは、２０が４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール（０．０９ｇ、０．００１０４８ｍｏｌ）であった。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１から１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．３２ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝６４％。¹H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.60 (s, 1H, NH), 8.76 (s, 1H, ArH), 8.69 (s, 1H, ArH), 7.76 (d, J = 4.8 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.36 (d, J = 4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.85 (s, 1H, OH), 4.39 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.20 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.41 (s, 3H, CH₃). 質量(ESI、陰): 481.00 [M-H]^-.
スキーム３．ピラゾール－１－イル－プロパンアミド２６ａ～２６ｈの合成

【化22】

試薬および条件：（ａ）１．ＴＨＦ中ＳＯＣｌ_２、－１０℃から０℃。２．ＴＨＦ中Ｅｔ_３Ｎ、－１０℃から０℃、次いで５０℃に加熱、２～３時間；（ｂ）２－ブタノン、Ｋ_２ＣＯ_３、還流；（ｃ）ＴＨＦ中ＮａＨ、０℃から室温。
（Ｓ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ａ）

【0235】

化合物２６ａを、スキーム３による一般手順Ａに従い調製した。アルゴン雰囲気下で氷水浴で冷却した、４－ブロモ－３－フルオロ－ピラゾール（２５；０．３０ｇ、０．００１８１９ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．２６ｇ、０．００６３６５ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。２３（ＸはＣＨである；０．６４ｇ、０．００１８１９ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩撹拌した。反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．３４ｇの表題の化合物をピンクがかった固体として得た。収率＝３４％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 8.45 (d, J = 2.0-1.6 Hz, 1H, ArH), 8.23 (dd, J = 8.2 Hz, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.35 (s, 1H, OH), 4.35 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.04 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.37 (s, 3H, CH₃). m.p 110-112℃. HRMS [C₁₅H₁₂BrF₄N₄O₂ ⁺]: 計算値435.0080、実測値435.0080[M+H]⁺.純度：96.98% (HPLC).
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（３－フルオロ－４－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｂ）

【0236】

化合物２６ｂを、Ｓｕｚｕｋｉ反応により、２６ａ（０．２０ｇ、０．４５９６ｍｍｏｌ）、４－フルオロボロン酸（７７ｍｇ、０．５５１５ｍｍｏｌ）、Ｐｄ（ＩＩ）（ＯＡｃ）_２（２～３ｍｇ、０．００９１９２ｍｍｏｌ）、ＰＰｈ_３（７～８ｍｇ、０．０２７５８ｍｍｏｌ）、およびＫ_２ＣＯ_３（０．１３ｇ、０．９６５ｍｍｏｌ）をＡＣＮ（４～５ｍＬ）およびＨ_２Ｏ（２～３ｍＬ）に混合することによって調製した。混合物を脱気してアルゴンを補充することを３回行った。得られた反応混合物を、アルゴン下で３時間、加熱還流した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１から１：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、５１ｍｇの表題の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝２５％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₆) δ 9.12 (s, 1H, NH), 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H, ArH), 7.85 (dd, J = 8.2 Hz, J = 1.6 Hz, 1H, ArH), 7.77 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.51 (d, J = 3.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.43-7.40 (m, 2H, ArH), 7.08-7.04 (m, 2H, ArH), 4.57 (d, J = 10.5 Hz, 1H, CH), 4.17 (d, J = 10.5 Hz, 1H, CH), 1.26 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₂₁H₁₆F₅N₄O₂ ⁺]: 計算値451.1193、実測値451.1196[M+H]⁺.純度：% (HPLC).
（Ｓ）－３－（３－ブロモ－４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｃ）

【0237】

化合物２６ｃを、２２（ステップａ）のＸがＣＨでありかつステップｃの２５が３－ブロモ－４－シアノ－ピラゾールである、スキーム３による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤として酢酸エチルおよびヘキサン（２：１）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．１０ｇの表題の化合物をオフホワイトの固体として得た。収率＝２０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.32 (s, 1H, NH), 8.50 (s 1H, ピラゾール-H), 8.41 (s, 1H, ArH), 8.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H, ArH), 6.47 (s, 1H, OH), 4.52 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 4.33 (d, J = 13.6 Hz, 1H, CH), 1.41 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₂BrF₃N₅O₂ ⁺]: 計算値442.0126、実測値442.0109[M+H]⁺.純度：98.84% (HPLC).
（Ｓ）－３－（３－クロロ－４－メチル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｄ）

【0238】

化合物２６ｄを、２２（ステップａ）のＸがＣＨでありかつステップｃの２５が３－クロロ－４－メチル－ピラゾールである、スキーム３による一般手順Ａに従って調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９８：２から９５：５）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．２７ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５４％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.33 (s, 1H, NH), 8.42 (d, J = 0.8 Hz, 1H, ArH), 8.21 (dd, J = 8.4 Hz, J = 0.8 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.50 (s 1H, ピラゾール-H), 6.29 (s, 1H, OH), 4.36 (d, J = 14.4 Hz, 1H, CH), 4.18 (d, J = 14.4 Hz, 1H, CH), 1.91 (s, 3H, CH₃), 1.35 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₅ClF₃N₄O₂ ⁺]: 計算値387.0836、実測値387.0839[M+H]⁺.純度：97.07% (HPLC).
（Ｓ）－３－（３－ブロモ－４－クロロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｅ）

【0239】

化合物２６ｅを、２２（ステップａ）のＸがＣＨでありかつステップｃの２５が３－ブロモ－４－クロロ－ピラゾールである、スキーム３による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９５：５）を使用するシリカゲルカラムによって精製して、０．２５ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.34 (s, 1H, NH), 8.41 (s, 1H, ArH), 8.20 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.93 (s 1H, ピラゾール-H), 6.39 (s, 1H, OH), 4.43 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.25 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.38 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₂BrClF₃N₄O₂ ⁺]: 計算値450.9784、実測値450.9807 [M+H]⁺.純度：96.55% (HPLC).
（Ｓ）－３－（４－ブロモ－３－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｆ）

【0240】

化合物２６ｆを、２２（ステップａ）のＸがＮでありかつステップｃの２５が４－ブロモ－３－フルオロ－ピラゾールである、スキーム３による概略手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１から１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．２８ｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝５４％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.67 (s, 1H, NH), 9.32 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 8.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H, ArH), 7.85 (d, J = 2.0 Hz 1H, ピラゾール-H), 6.47 (s, 1H, OH), 4.35 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 4.17 (d, J = 14.0 Hz, 1H, CH), 1.39 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₅H₁₂BrClF₃N₄O₂ ⁺]: 計算値434.9954、実測値435.9997 [M+H]⁺.純度：93.41% (HPLC).
（Ｓ）－３－（３－ブロモ－４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｇ）

【0241】

化合物２６ｇを、２２（ステップａ）のＸがＮでありかつステップｃの２５が３－ブロモ－４－シアノ－ピラゾールである、スキーム３による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、表題の化合物を白色固体として得た。収率＝８１％。ＭＰ １７２．５～１７３．６℃；¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.60 (bs, 1H, NH), 9.29 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 6.59 (s, OH), 4.50 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.32 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.43 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -61.25. MS (ESI) m/z 442.1 [M - H]^-; HRMS (ESI) m/z C₁₅H₁₀BrF₃N₆O₂ 443.0079 [M + H]⁺の計算値、実測値443.0083 [M+ H]⁺; 464.9903 [M + Na] ⁺.
（Ｓ）－３－（４－シアノ－３－フェニル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（６－シアノ－５－（トリフルオロメチル）ピリジン－３－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２６ｈ）

【0242】

還流冷却器、セプタム入口、および磁気撹拌棒を備えたフラスコに、２６ｇ（０．０５３ｇ、０．２３ｍｍｏｌ）、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（０）（９ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）、およびフェニルボロン酸（３５ｍｇ、０．２８ｍｍｏｌ）をＴＨＦ／ＭｅＯＨ（５ｍＬ／１ｍＬ）に加え、そこに脱酸素水（１ｍＬ）中の炭酸ナトリウム（５０ｍｇ、０．４８ｍｍｏｌ）と共に投入し、撹拌し、出発材料がＴＬＣで検出できなくなるまで２時間にわたり加熱還流した。混合物を室温に冷却し、溶媒を減圧中で除去し、次いで酢酸エチル（１０ｍＬ）中に注ぎ、酢酸エチルで抽出した。合わせた有機層を飽和ＮＨ_４Ｃｌ、水で洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥した。溶媒を減圧中で除去し、次いで溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルでのフラッシュカラムクロマトグラフィーにより精製して、３６ｍｇの標的化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝６９％。ＭＰ １１２．３～１２４．４℃；¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.17 (bs, 1H, NH), 8.76 (s, 1H), 8.60 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.57-7.52 (m, 3H), 7.18 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.32 (s, OH), 4.60 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.23 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H). ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -62.09. MS (ESI) m/z 439.2 [M - H] ^-; HRMS (ESI) m/z C₂₁H₁₅F₃N₆O₂ 441.1287 [M + H]⁺の計算値、実測値441.1291 [M+ H]⁺; 463.1111 [M + Na]⁺.
スキーム４．ピラゾール－１－イル－プロパンアミド２９ａ～２９ｆの合成

【化23】

試薬および条件：（ａ）１．ＴＨＦ中ＳＯＣｌ_２、－１０℃から０℃。２．ＴＨＦ中Ｅｔ_３Ｎ、－１０℃から０℃、次いで５０℃に加熱、２～３時間；（ｂ）ＴＨＦ中ＮａＨ、０℃から室温。
（Ｒ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２９ａ）

【0243】

化合物２９ａを、１１の代わりに逆の異性体を使用したこと以外［（Ｓ）－１１、すなわち（Ｓ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸］、１０に関して上記にて例示されたように、スキーム１による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、表題の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝６４％。［α］_Ｄ ^２４＋１２６．７°（ｃ＝１．０、ＭｅＯＨ）；¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.07 (bs, 1H, NH), 8.01 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.95 (dd, J = 8.4, J = 2.0 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.92 (s, OH), 4.54 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.16 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -62.23, -176.47. HRMS (ESI) m/z C₁₅H₁₂F₄N₄O₂: 357.0975 [M + H]⁺の計算値. 実測値357.0984 [M + H] ⁺.
Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－メチルプロパンアミド（２９ｂ）

【0244】

化合物２９ｂを、２７のＹが全ての先の化合物のように第四級［Ｃ（ＯＨ）（ＣＨ_３）］の代わりに第三級炭素［ＣＨ（ＣＨ_３）］である、スキーム４による一般手順Ａに従い調製した。アルゴン雰囲気下で氷水浴で冷却した、４－フルオロ－ピラゾール（２０；０．２０ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．２８ｇ、０．００６９７１１ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－メチルプロパンアミド（２８；０．７８ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた反応混合物を、アルゴン下で一晩、室温で撹拌した。反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．０５０ｇの表題の化合物を黄色がかった固体として得た。収率＝６．３％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.77 (s, 1H, NH), 8.25 (s, 1H, ArH), 8.10 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.96 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.85 (d, J = 4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.47 (d, J = 4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 4.35-4.30 (m, 1H, CH), 4.12-4.07 (m, 1H, CH), 3.12-3.10 (m, 1H, CH), 1.22 (d, J = 6.8 Hz, 3H, CH₃). 質量(ESI、陽): 341.14 [M+H]⁺.
Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロパンアミド（２９ｃ）

【0245】

化合物２９ｃを、２７のＹが第四級［Ｃ（ＯＨ）（ＣＨ_３）］の代わりに第二級炭素［ＣＨ_２］］である、スキーム４による一般手順Ａに従い調製した。アルゴン雰囲気下、氷水浴で冷却した、４－フルオロ－ピラゾール（２０；０．２０ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（５ｍＬ）中の溶液に、水素化ナトリウム（油中６０％分散液、０．２８ｇ、０．００６９７１１ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を３時間撹拌した。３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（２８；０．７５ｇ、０．００２３２３７ｍｏｌ）を上記溶液に添加し、得られた混合物を、アルゴン下で一晩、室温で撹拌した。反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．７５ｍｇの表題の化合物を白色固体として得た。収率＝１０％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.81 (s, 1H, NH), 8.25 (d, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 8.10 (dd, J = 8.8 Hz, J = 2.4 Hz, 1H, ArH), 7.95 (d, J = 8.8 Hz, 1H, ArH), 7.88 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 4.35 (t, J = 6.0 Hz, 2H, CH2), 2.79 (t, J = 6.0 Hz, 2H, CH2). 質量(ESI、陰): 325.03 [M-H]^-; (ESI、陽): [M+H]⁺.
（Ｓ）－４－（５－（（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）メチル）－５－メチル－２，４－ジオキソオキサゾリジン－３－イル）－２－（トリフルオロメチル）ベンゾニトリル（２９ｄ）

【0246】

１０の２－メチル－２－ヒドロキシ－プロパンアミドリンカーの環化によって進行した２９ｄの調製は、オキサゾリジンジオン環系を形成する。１０（０．２３４ｇ、０．０００６５６８ｍｏｌ）の無水ピリジン（８ｍＬ）中の溶液に、１，１’－カルボニルジイミダゾール（ＣＤＩ）（０．１６ｇ、０．０００９８２５ｍｏｌ）を添加した。添加後、得られた混合物を、アルゴン下で一晩、室温で撹拌した。反応を水でクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥し、濾過し、真空下で濃縮した。生成物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、０．１３４ｇの表題の化合物を白色フォームとして得た。収率＝４２％。¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 8.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H, ArH), 7.98 (s, 1H, ArH), 7.94 (d, J = 4.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.85 (d, J = 8.2 Hz, 1H, ArH), 7.58 (d, J = 4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 4.78 (d, J = 14.8 Hz, 1H, CH), 4.69 (d, J = 14.8 Hz, 1H, CH), 1.71 (s, 3H, CH₃). HRMS [C₁₆H₁₁F₄N₄O₃ ⁺]: 計算値383.0767、実測値383.0726 [M+H]⁺.純度：97.64% (HPLC).
（Ｓ）－３－（４－アミノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－１－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－メチル－１－オキソプロパン－２－イル２－クロロアセテート（２９ｅ）

【0247】

アルゴン雰囲気下、１６ｔ（０．１７ｇ、０．４８ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１６ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）の、１０ｍＬの無水ＤＣＭ中の溶液に、塩化２－クロロアセチル（０．０４ｍＬ、０．５８ｍｍｏｌ）を氷水浴内で添加した。３０分間撹拌後、温度を室温まで上昇させ、混合物を２時間撹拌した。反応混合物を真空下で凝縮し、次いで１０ｍＬのＥｔＯＡｃに分散させ、水で洗浄し、蒸発させ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥し、蒸発乾固した。混合物を、溶出剤としてヘキサンおよび酢酸エチル（２／１、ｖ／ｖ）を使用するフラッシュカラムクロマトグラフィーで精製して、表題の化合物を黄色の固体として得た。収率＝１９％。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.22 (bs, 1H, NH), 8.10 (bs, 2H, NH₂), 7.93 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.89-7.86 (m, 2H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (bs, 1H), 5.16 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 14.8 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 1.78 (s, 3H); ¹⁹F NMR (CDCl₃, デカップル) δ -62.19. MS (ESI) m/z 452.01 [M + Na] ⁺; 428.03 [M － H] ^-.
（Ｓ）－Ｎ－（３－（（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）アミノ）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－オキソプロピル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボキサミド（２９ｆ）

【0248】

化合物２９ｆを、スキーム４による一般手順Ａに従い調製した。生成物を、溶出剤としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１）を使用するシリカゲルカラムにより精製して、表題の化合物を褐色の固体として得た。収率＝４３％。¹H NMR (400 MHz, アセトン-d₆) δ 9.92 (bs, 1H, NHCO), 8.44 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.24 (dd, J = 8.8, J = 1.8 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.03 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.11 (bs, 1H, NHCO), 6.38 (bs, 1H, NH), 5.74 (s, OH), 4.67 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 14.0 Hz, 1H), 1.50 (s, 3H). ¹⁹F NMR (アセトン-d₆, デカップル) δ 114.69. MS (ESI) m/z 380.1 [M - H] ^-; 382.1 [M + H] ⁺. HRMS (ESI) m/z C₁₆H₁₄F₃N₅O₃ 382.1127 [M + H]⁺の計算値、実測値382.1051 [M + H]⁺; 404.0882 [M + Na]⁺.
化合物２９ｇの合成

【化24】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_９Ｈ_９ＢｒＮ_４Ｏ_２）

【化25】

【0249】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（３．００ｇ、０．０１６３９３４ｍｏｌ）を塩化チオニル（２．３４ｇ、０．０１９６７２１１ｍｏｌ）、トリメチルアミン（２．１６ｇ、０．０２１３１１５ｍｏｌ）および５－アミノピリミジン－２－カルボニトリル（１．９７ｇ、０．０１６３９３４ｍｏｌ）と反応させて、表題化合物を得た。溶離液としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、３．４４ｇ（７３．３％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0250】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.71 (s, 1H, NH), 9.40-9.37 (m, 2H, ArH), 6.51 (s, 1H, OH), 3.84 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 3.59 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 1.50 (s, 3H, CH₃).

【0251】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0252】

ＨＲＭＳ［Ｃ_９Ｈ_１０ＢｒＮ_４Ｏ_２ ^＋］：計算値２８４．９９８７、実測値２８４．９９８５［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９７．０９％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミド（Ｃ_９Ｈ_８Ｎ_４Ｏ_２）

【化26】

【0253】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（５．００ｇ、０．０１７５４ｍｏｌ）の２５ｍＬの２－ブタノン溶液に、炭酸カリウム（６．０６ｇ、０．０４３８４ｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物を、アルゴン雰囲気下、還流で２時間、加熱した。この反応の終了をＴＬＣによって確立した後、この反応物を室温（ｒｔ）まで冷却し、セライトのパッドに通してろ過し、このセライトパッドを１５ｍＬの２－ブタノンにより洗浄した。ろ液を真空下で濃縮し、２５～３０インチの真空下で乾燥し、（Ｓ）－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミドを得た。

【0254】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.38 (s, 1H, NH), 9.27 (br. s, 2H, ArH), 3.11 (d, J=5.2 Hz, 1H, CH), 3.07 (d, J=8.8 Hz, 1H, CH), 1.56 (s, 3H, CH₃).

【0255】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0256】

ＨＲＭＳ［Ｃ_９Ｈ_９Ｎ_４Ｏ_２ ^＋］：計算値２０５．０７２６、実測値２０５．０７２１［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９８．９３％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１２Ｈ_１１ＦＮ_６Ｏ_２）（２９ｇ）

【化27】

【0257】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール（０．１２１ｇ、０．００１４０３ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．２０ｇ、０．００４９１０１ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４０ｇ、０．００１４０３ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．１２ｇ（３３．０％）の表題化合物がオフホワイト色の固体として得られた。

【0258】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.53 (s, 1H, NH), 9.30 (br s, 2H, ArH), 7.75 (d, J=4.4 Hz, 1H, ピラゾール-H), 7.42 (d, J=4.0 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.41 (s, 1H, OH), 4.38 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.19 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.35 (s, 3H, CH₃).

【0259】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0260】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１２Ｈ_１２ＦＮ_６Ｏ_２ ^＋］：計算値２９１．１００６、実測値２９１．１００３［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９８．６６％（ＨＰＬＣ）。

【0261】

（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１３Ｈ_１１Ｎ_７Ｏ_２）（２９ｈ）

【化28】

【0262】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール（０．１３１ｇ、０．００１４０３ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．２０ｇ、０．００４９１０１ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－シアノピリミジン－５－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４０ｇ、０．００１４０３ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．１１５ｇ（２７．６％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0263】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.50 (s, 1H, NH), 9.29 (br s, 2H, ArH), 8.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.00 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.52 (s, 1H, OH), 4.55 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.37 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.48 (s, 3H, CH₃).

【0264】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0265】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１３Ｈ_１２Ｎ_７Ｏ_２ ^＋］：計算値２９８．１０５２、実測値２９８．１０５５［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９９．２６％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９ｉの合成

【化29】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１１Ｈ_１０ＢｒＣｌＮ_２Ｏ_２）

【化30】

【0266】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（３．３３ｇ、０．０１８１８２ｍｏｌ）を塩化チオニル（２．６０ｇ、０．０２１８２ｍｏｌ）、トリメチルアミン（２．１６ｇ、０．０２１３１１５ｍｏｌ）および５－アミノピリミジン－２－カルボニトリル（２．３９ｇ、０．０２３６３８ｍｏｌ）と反応させて、表題化合物を得た。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、４．０２ｇ（６９．５％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0267】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.78 (s, 1H, NH), 8.49 (dd, J=8.8 Hz, J=4.4 Hz, 1H, ArH), 8.19 (d, J=1.6 Hz, 1H, ArH), 7.88 (dd, J=8.8 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 6.84 (s, 1H, OH), 3.84 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 3.59 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 1.56 (s, 3H, CH3).

【0268】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0269】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１１Ｈ_１１ＢｒＣｌＮ_２Ｏ_２ ^＋］：計算値３１６．９６９０、実測値３１６．９６８４［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９８．３８％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミド（Ｃ_１１Ｈ_９ＣｌＮ_２Ｏ_２）

【化31】

【0270】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（５．００ｇ、０．０１５７５ｍｏｌ）の２５ｍＬの２－ブタノン溶液に、炭酸カリウム（３．２６ｇ、０．０２３６２ｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物を、アルゴン雰囲気下、還流で２時間、加熱した。この反応の終了をＴＬＣによって確立した後、この反応物を室温（ｒｔ）まで冷却し、セライトのパッドに通してろ過し、このセライトパッドを１５ｍＬの２－ブタノンにより洗浄した。ろ液を真空下で濃縮し、２５～３０インチの真空下で乾燥し、（Ｓ）－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－メチルオキシラン－２－カルボキサミドを得た。

【0271】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.17 (s, 1H, NH), 8.19-8.15 (m, 2H, ArH), 7.87-7.84 (m, 1H, ArH), 3.17 (d, J=5.2 Hz, 1H, CH), 3.08 (d, J=5.2 Hz, 1H, CH), 1.56 (s, 3H, CH₃).

【0272】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0273】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１１Ｈ_８ＣｌＮ_２Ｏ_２ ^－］：計算値２３５．０２７４、実測値２３５．０２６５［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：６７．４８％（ＨＰＬＣ）。

【0274】

（Ｓ）－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－３－（４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１４Ｈ_１２ＣｌＦＮ_４Ｏ_２）（２９ｉ）

【化32】

【0275】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－フルオロ－１Ｈ－ピラゾール（０．１０８ｇ、０．００１２５９５ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．１７６ｇ、０．００４４０８２ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４０ｇ、０．００１２５９５ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１～９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．１５ｇ（３１．６％）の表題化合物がオフホワイト色の固体として得られた。

【0276】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.50 (br s, 1H, NH), 8.44 (d, J=8.8 Hz, 1H, ArH), 8.15 (d, J=1.6 Hz, 1H, ArH), 7.86 (dd, J= 8.8 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 7.75 (d, J=4.8Hz, 1H, ピラゾール- H), 7.38 (d, J=4.2 Hz, 1H, ピラゾール-H), 6.76 (br s, 1H, OH), 4.39 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.12 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.39 (s, 3H, CH3).

【0277】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0278】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１４Ｈ_１３ＣｌＦＮ_４Ｏ_２ ^＋］：計算値３２３．０７１１、実測値３２３．０７２３［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９８．８１％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１５Ｈ_１２ＣｌＮ_５Ｏ_２）（２９ｊ）

【化33】

【0279】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール（０．１１７ｇ、０．００１２５９５ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．１７６ｇ、０．００４４０８２ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（２－クロロ－４－シアノフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４０ｇ、０．００１２５９５ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１～９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．１５ｇ（３１．６％）の表題化合物がオフホワイト色の固体として得られた。

【0280】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (br s, 1H, NH), 8.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.42 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.15 (d, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 7.97 (s, 1H, ピラゾール-H), 7.88 (dd, J= 8.2 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 6.88 (br s, 1H, OH), 4.56 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.36(d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.43 (s, 3H, CH3).

【0281】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0282】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１５Ｈ_１３ＣｌＮ_５Ｏ_２ ^＋］：計算値３３０．０７５８、実測値３３０．０７５３［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９５．７５％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９ｋの合成

【化34】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（３－クロロ－４－シアノ－２－メチルフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１２Ｈ_１２ＢｒＣｌＮ_２Ｏ_２）

【化35】

【0283】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（１．２１ｇ、０．００６６０２ｍｏｌ）を塩化チオニル（０．８６ｇ、０．００７２０２ｍｏｌ）、トリメチルアミン（０．７９ｇ、０．００７８０２ｍｏｌ）および４－アミノ－２－クロロ－３－メチルベンゾニトリル（１．００ｇ、０．００６００２ｍｏｌ）と反応させて、表題化合物を得た。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、１．６０ｇ（８０．４％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0284】

¹HNMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.70 (s, 1H, NH), 7.84 (d, J=8.4 Hz, 1H, ArH), 7.76 (d, J=8.4 Hz, 1H, ArH), 6.50(s, 1H, OH), 3.84 (d, J=9.2 Hz, 1H, CH), 3.59(d, J=9.2 Hz, 1H, CH), 2.32 (s, 3H, CH₃), 1.50 (s, 3H, CH₃).

【0285】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0286】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１２Ｈ_１３ＢｒＣｌＮ_２Ｏ_２ ^＋］：計算値３３０．９８４９、実測値３３０．９８４３［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９８．８０％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（３－クロロ－４－シアノ－２－メチルフェニル）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１６Ｈ_１４ＣｌＮ_５Ｏ_２）（２９ｋ）

【化36】

【0287】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール（０．１１２ｇ、０．００１２０６３ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．１６９ｇ、０．００４２２１７ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（３－クロロ－４－シアノ－２－メチルフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４０ｇ、０．００１２０６３ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（９：１～５：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．３１ｇ（７４．７％）の表題化合物がオフホワイト色の固体として得られた。

【0288】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 9.52 (br s, 1H, NH), 8.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.04(s, 1H, ピラゾール-H), 7.83 (d, J=8.8 Hz, 1H, ArH), 7.78 (d, J=8.8 Hz, 1H, ArH), 6.51 (br s, 1H, OH), 4.56(d, J=14.4 Hz, 1H, CH), 4.34 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 2.18(s, 3H, CH₃), 1.40 (s, 3H, CH₃).

【0289】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0290】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１６Ｈ_１５ＣｌＮ_５Ｏ_２ ^＋］：計算値３４４．０９１４、実測値３４４．０９１０［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９９．５９％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９Ｉおよび２９ｍの合成

【化37】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（Ｃ_１１Ｈ_１０ＢｒＦ_３Ｎ_２Ｏ_４）

【化38】

【0291】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（１．９５ｇ、０．０１０６７３４ｍｏｌ）を塩化チオニル（０．３８５ｇ、０．０１１６４３７ｍｏｌ）、トリメチルアミン（１．２７６ｇ、０．０１２６１４ｍｏｌ）および４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）アニリン（２．００ｇ、０．００９７０３１ｍｏｌ）と反応させて、表題化合物を得た。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、２．７０ｇ（７５．０％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0292】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.61(s, 1 H, NH), 8.58(d, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 8.38 (dd, J=8.8 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 8.22 (d, J=8.8 Hz, 1H, ArH), 6.45 (br s, 1H, OH), 3.85 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 3.61 (d, J=10.4 Hz, 1H, CH), 1.50 (s, 3H, CH3).

【0293】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0294】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１１Ｈ_１１ＢｒＦ３Ｎ_２Ｏ_４ ^＋］：計算値３７０．９８５４、実測値３７０．９８５４［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９５．２３％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（Ｃ_１５Ｈ_１２Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_４）（２９Ｉ）

【化39】

【0295】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール（０．３７６ｇ、０．００４０４１９ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（２０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．５６６ｇ、０．０１４１４６６ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を３時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（１．５０ｇ、０．００４０４１９ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物をアルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（９：１～５：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．５２ｇ（３３．５％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0296】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.42 (br s, 1H, NH), 8.47(d, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 8.46 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.30 (dd, J=8.8 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 8.20 (d, J=8.8 Hz, 1H, ArH), 8.00 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.44 (br s, 1H, OH), 4.55 (d, J=14.4 Hz, 1H, CH), 4.36 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.39 (s, 3H, CH₃).

【0297】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0298】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１５Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_４ ^＋］：計算値３８４．０９２０、実測値３８４．０９１４［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：１００．００％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（４－アミノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１５Ｈ_１４Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２）

【化40】

【0299】

（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－Ｎ－（４－ニトロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）プロパンアミド（０．３０ｇ、０．０００７８２７ｍｏｌ）を、１０％のパラジウム活性炭上で、２５ｐｓｉで２～３時間、室温で水素化した。反応の終わりがＴＬＣによって確認された後、反応混合物をセライトに通して濾過し、真空下で濃縮し、乾燥し、次のステップにさらなる精製なしに進んだ。

【0300】

¹HNMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ

【0301】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0302】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１５Ｈ_１３Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２ ^－］：計算値３５２．１０２１、実測値３５２．１０３０［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－Ｎ－（４－イソチオシアナト－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１６Ｈ_１２Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２Ｓ）（２９ｍ）

【化41】

【0303】

氷水浴中で冷却した（Ｓ）－Ｎ－（４－アミノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．１３５ｇ、０．０００３８２１ｍｏｌ）の５ｍＬの無水ＴＨＦ溶液に、アルゴン下、チオホスゲン（８８ｍｇ、０．０００７６４２ｍｏｌ）およびトリエチルアミン（０．１９３ｇ、０．００１９１０５ｍｏｌ）を加えた。得られた反応混合物をアルゴン下、室温で４～５時間おいた。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、２０ｍｇ（１３．３％）の表題化合物が明褐色固体として得られた（非常に安定しているわけではなかった）。

【0304】

¹H NMR (400MHz, DMSO-d₆) δ 10.13 (s, 1H, NH), 8.30 (d, J=2.0Hz, 1H, ArH), 8.13 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.04 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 7.64 (dd, J=8.2 Hz, J=2.0 Hz, 1H, ArH), 7.45 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.19 (s, 1H, OH), 4.39 (m, 1H, CH), 4.21 (m, 1H, CH), 1.32 (s, 3H, CH₃).

【0305】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0306】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１６Ｈ_１１Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２Ｓ^－］：計算値３９４．０５８６、実測値３９６．０６１３［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９ｑの合成

【化42】

１－アミノ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボニトリル（Ｃ_５Ｈ_３Ｆ_３Ｎ_４）

【化43】

【0307】

３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボニトリル（０．５ｇ、０．００３１０４１ｍｏｌ）の１０ｍＬの水溶液に、砕いたＮａＯＨ（０．５ｇ、０．０１２４１６ｍｏｌ）を加えた。この溶液を５５～６０℃で、２０分間、撹拌した。上記の溶液に、ヒドロキシアミン－Ｏ－スルホン酸（１．０５ｇ、０．００９３１２ｍｏｌ）を少量ずつ注意深く加えた。得られた反応混合物を６５℃で２時間、加熱し、室温で２時間、撹拌した。反応物をＤＣＭにより３回、抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空で濃縮して乾燥し、さらに精製することなく、次の工程に進んだ。

【0308】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ

【0309】

HRMS [C₅H₂F₃N₄-]: 計算値175.0232, 実測値175.0317 [M-H]-.純度：％（ＨＰＬＣ）。（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_９Ｈ_８ＢｒＦ_３Ｎ_４Ｏ_２）

【化44】

【0310】

（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（０．８６４ｇ、０．００４７２２３ｍｏｌ）を塩化チオニル（０．６１３ｇ、０．００５１５１６ｍｏｌ）、トリメチルアミン（０．５６５ｇ、０．００５５８０９ｍｏｌ）および１－アミノ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボニトリル（０．７５６ｇ、０．００４２９３ｍｏｌ）と反応させて、表題化合物を得た。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９：１～４：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．４６ｇ（３１．５％）の表題化合物が黄色固体として得られた。
（Ｓ）－３－（４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１３Ｈ_１０Ｆ_３Ｎ_７Ｏ_２）（２９ｑ）

【化45】

【0311】

アルゴン雰囲気下、氷水浴中で冷却した、４－シアノ－１Ｈ－ピラゾール（０．１５ｇ、０．００１６１８３ｍｏｌ）の無水ＴＨＦ（１０ｍＬ）溶液に、水素化ナトリウム（油中の６０％分散物、０．１９ｇ、０．００４７２０１ｍｏｌ）を加えた。添加後、得られた混合物を２時間、撹拌した。上記の溶液に、（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．４６ｇ、０．００１３４８６ｍｏｌ）を加え、得られた反応混合物を、アルゴン下、室温で一晩、撹拌した。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で濃縮した。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（４：１～２：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．１１５ｇ（５０．４％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0312】

¹ NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 12.27 (s, 1H, NH), 8.83 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.46(s, 1H, ピラゾール-H), 8.15 (s, 1H, ピラゾール-H), 6.49 (s, 1H, OH), 4.51 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.35(d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.40 (s, 3H, CH3).

【0313】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0314】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１３Ｈ_９Ｆ_３Ｎ_７Ｏ_２ ^－］：計算値３５２．０７７０、実測値３５２．０７６１［Ｍ－Ｈ］^－。純度：９９．００％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９ｏの合成

【化46】

（Ｓ）－３－アジド－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_１２Ｈ_１０Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２）

【化47】

【0315】

（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（２．００ｇ、０．００５６９６ｍｏｌ）の無水ＤＭＦ（１０ｍＬ）溶液に、アジ化ナトリウム（０．７４ｇ、０．０１１３９２ｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃で３～４時間、加熱した。反応の終了をＴＬＣによって確立した後、反応物を水によってクエンチし、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で体積を減少させた。溶離液としてＤＣＭおよび酢酸エチル（９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．９３ｇ（５２．４％）の表題化合物が黄色固体として得られた。

【0316】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.58 (s, 1H, NH), 8.54 (s, 1H, ArH), 8.31 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.11 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 6.43 (s, 1H, OH), 4.02 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 3.39 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.37 (s, 3H, CH₃).

【0317】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0318】

ＨＲＭＳ［Ｃ_１２Ｈ_１１Ｆ_３Ｎ_５Ｏ_２ ^＋］：計算値３１４．０８６５、実測値３１４．０８６５［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：９９．００％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－３－（４－（４－シアノフェニル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（Ｃ_２１Ｈ_１５Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_２）（２９o）

【化48】

【0319】

ＣＡＮと水（８ｍＬ＋２ｍＬ）との混合物中の（Ｓ）－３－アジド－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．５０ｇ、０．００１５６９２ｍｏｌ）の溶液に、４－エチニルベンゾニトリル（０．３０ｇ、０．００２３９４３ｍｏｌ）、および触媒としてＣｕＩ（３０ｍｇ、０．０００１５９６ｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で３日間、撹拌した（アジド－アルキンのＨｕｉｓｇｅｎ付加環化、クリック反応とも呼ばれる）。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で体積を減少させた。溶離液としてＤＣＭおよびメタノール（１９：１）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．２２ｇ（３１％）の表題化合物が白色固体として得られた。

【0320】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d₆) δ 10.44 (s, 1H, NH), 8.63 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.42 (s, 1H, ArH), 8.23 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.09 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.03(d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 7.91 (d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 6.56 (s, 1H, OH), 4.79 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.61 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.43 (s, 3H, CH₃).

【0321】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0322】

ＨＲＭＳ［Ｃ_２１Ｈ_１６Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_２ ^＋］：計算値４４１．１２８７ 実測値４４１．１２８７［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：％（ＨＰＬＣ）。
化合物２９ｐの合成

【化49】

（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－（４－（トリフルオロメチル）フェニル）－１Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル）プロペンアミド（Ｃ_２１Ｈ_１５Ｆ_６Ｎ_５Ｏ_２）（２９ｐ）

【化50】

【0323】

ＣＡＮと水（８ｍＬ＋２ｍＬ）との混合物中の（Ｓ）－３－アジド－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（０．５０ｇ、０．００１５６９２ｍｏｌ）の溶液に、１－エチニル－４－（トリフルオロメチル）ベンゼン（０．４１ｇ、０．００２３９４３ｍｏｌ）、および触媒としてＣｕＩ（３０ｍｇ、０．０００１５９６ｍｏｌ）を加えた。得られた混合物を室温で３日間、撹拌した（アジド－アルキンのＨｕｉｓｇｅｎ付加環化、クリック反応とも呼ばれる）。この反応物を水によりクエンチして、酢酸エチルにより抽出した。有機層をブラインにより洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥してろ過し、真空下で体積を減少させた。溶離液としてヘキサンおよび酢酸エチル（１：１～１：１．５）を使用するシリカゲルカラムによって生成物を精製し、０．５３８ｇ（７０％）の表題化合物が白色固体として得られた。

【0324】

¹H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.45 (s, 1H, NH), 8.59 (s, 1H, ピラゾール-H), 8.42 (s, 1H, ArH), 8.24 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.10 (d, J=8.2 Hz, 1H, ArH), 8.05 (d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 7.80 (d, J=8.0 Hz, 2H, ArH), 6.56 (s, 1H, OH), 4.80 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 4.61 (d, J=14.0 Hz, 1H, CH), 1.44 (s, 3H, CH₃).

【0325】

質量（ＥＳＩ、ポジティブ）：［Ｍ＋Ｈ］^＋。

【0326】

ＨＲＭＳ［Ｃ_２１Ｈ_１６Ｆ_３Ｎ_６Ｏ_２ ^＋］：計算値４４１．１２８７、実測値４４１．１２８７［Ｍ＋Ｈ］^＋。純度：％（ＨＰＬＣ）。
（Ｓ）－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチル－３－（４－スルファモイル－１Ｈ－ピラゾール－１－イル）プロペンアミド（２９ｎ）

【化51】

【0327】

アルゴン雰囲気下、滴下漏斗を備えた、乾燥した窒素パージ済みの１００ｍＬの丸底フラスコに、鉱油中６０％の水素化ナトリウム（ＮａＨ）分散液（２４０ｍｇ、６ｍｍｏｌ）を、氷水浴でそのフラスコ内の無水ＴＨＦ溶媒１０ｍＬに添加し、１Ｈ－ピラゾール－４－スルホンアミド（２９５ｍｇ、２ｍｍｏｌ）の、５ｍｌの無水ＴＨＦ中の溶液を、氷水浴で３０分間撹拌しながら添加した。このフラスコに、５ｍＬの無水ＴＨＦ中の（Ｒ）－３－ブロモ－Ｎ－（４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド（７０２ｍｇ、２ｍｍｏｌ）を、氷水浴で、アルゴン雰囲気下、滴下漏斗を通して添加し、室温で一晩撹拌した。１ｍＬのＨ_２Ｏを添加した後、反応混合物を減圧下で濃縮し、次いで５０ｍＬのＥｔＯＡｃに分散させ、５０ｍＬ（×２）の水で洗浄し、蒸発させ、無水ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、蒸発乾固した。混合物を、アセトン／ヘキサンで結晶化して、目標の化合物を白色固体として生成した。

【0328】

収率：48%;純度：98.18%; UV max: 270.45; MS (ESI) m/z 416.20 [M - H] ^-; LCMS (ESI) m/z C₁₅H₁₄F₃N₅O₄S 416.0640 [M - H]^-の計算値、実測値416.0679 [M - H]^- 418.0789 [M + H] ⁺, 440.0613 [M + Na] ⁺;

【0329】

¹HNMR (アセトン-d₆, 400 MHz) δ 9.76 (bs, 1H, NH), 8.32 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.39 (bs, 2H, SO₂NH₂), 5.53 (bs, OH), 4.54 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 14.4 Hz, 1H), 1.38 (s, 3H);

【0330】

¹⁹FNMR (CDCl₃, 400 MHz) δ -62.80.
（実施例２）
ＳＡＲＤのアンドロゲン受容体への結合、トランス活性化、分解および代謝
リガンド結合アッセイ（Ｋｉ値）：

【0331】

ｈＡＲ－ＬＢＤ（６３３－９１９）をｐＧｅｘ４ｔ．１にクローニングした。ＧＳＴをタグ付けしたＡＲ－ＬＢＤを大スケールで調製し、ＧＳＴカラムを使用して精製した。組換えＡＲ－ＬＢＤを、緩衝液Ａ（１０ｍＭ Ｔｒｉｓ、ｐＨ７．４、１．５ｍＭ ＥＤＴＡ二ナトリウム、０．２５Ｍスクロース、１０ｍＭ モリブデン酸ナトリウム、１ｍＭ ＰＭＳＦ）中で、［^３Ｈ］ミボレロン（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、ＭＡ）と合わせ、［^３Ｈ］ミボレロンの平衡解離定数（Ｋ_ｄ）を決定した。全結合および非特異的結合を決定するため、高濃度の非標識ミボレロンと共に、およびこれを使用しないで、［^３Ｈ］ミボレロンの濃度を漸増させて、タンパク質を４℃で１８時間、インキュベートした。次に、非特異的結合を全結合から減算して、特異的結合、および１部位飽和を伴うリガンド結合曲線の非線形回帰を求めて、ミボレロンのＫ_ｄを決定した。

【0332】

上記の条件を使用し、漸増濃度のＳＡＲＤまたはＤＨＴ（範囲：１０^－１２～１０^－２Ｍ）を［^３Ｈ］ミボレロンおよびＡＲ ＬＢＤと共にインキュベートした。インキュベート後、リガンドが結合したＡＲ－ＬＢＤ複合体を、Ｂｉｏ Ｇｅｌ ＨＴ（登録商標）ヒドロキシアパタイトを使用して単離し、洗浄してシンチレーションカクテルを加えた後にシンチレーションカウンターで計数した。値は、Ｋ_ｉとして表す。

【0333】

ｗｔ ＡＲによるトランス活性化アッセイ（ＩＣ_５０値）
フェノールレッドを含まないＤＭＥ＋５％ｃｓＦＢＳ中で、ＨＥＫ－２９３細胞を２４ウェルプレートのウェルあたり１２５，０００個の細胞でプレーティングした。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅトランスフェクション試薬を使用し、ｏｐｔｉＭＥＭ培地中で、細胞に０．２５ｕｇのＧＲＥ－ＬＵＣ、１０ｎｇのＣＭＶ－ウミシイタケＬＵＣおよび５０ｎｇのＣＭＶ－ｈＡＲ（ｗｔ）をトランスフェクトした。トランスフェクトして２４時間後に、フェノールレッドを含まないＤＭＥ＋５％ｃｓＦＢＳに培地を交換し、用量応答の様々な薬物（１ｐＭ～１０μＭ）で処理した。ＳＡＲＤおよびアンタゴニストは、０．１ｎＭ Ｒ１８８１と組み合わせて処理した。Ｂｉｏｔｅｋ ｓｙｎｅｒｇｙ４プレートリーダーで、処置の２４時間後に、ルシフェラーゼアッセイを行った。ホタルルシフェラーゼ値を、ウミシイタケルシフェラーゼ値に正規化した。

【0334】

プラスミド構築物および一過性トランスフェクション
ＣＭＶベクターバックボーンにクローニングしたヒトＡＲをトランス活性化研究に使用した。ＤＭＥ＋５％ｃｓＦＢＳ中、ＨＥＫ－２９３細胞を２４ウェルプレートのウェルあたり１２０，０００個の細胞でプレーティングした。Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を使用し、この細胞に０．２５μｇ ＧＲＥ－ＬＵＣ、０．０１μｇ ＣＭＶ－ＬＵＣ（ウミシイタケルシフェラーゼ）および２５ｎｇのＡＲをトランスフェクトした。図に示されている通り、トランスフェクトして２４時間後に細胞を処理し、トランスフェクションの４８時間の後にルシフェラーゼアッセイを行った。データは、４パラメータのロジスティクス曲線から得たＩＣ_５０として表す。

【0335】

ＬＮＣａＰ遺伝子発現アッセイ
フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ＋１％ｃｓＦＢＳ中で、ＬＮＣａＰ細胞を９６ウェルプレートのウェルあたり１５，０００個の細胞でプレーティングした。プレーティングして４８時間後、細胞を用量応答のＳＡＲＤで処理した。処理の２４時間後に、ｃｅｌｌｓ－ｔｏ－ｃｔ試薬を使用してＲＮＡを単離し、ｃＤＮＡを合成して、ｔａｑｍａｎプライマーおよびプローブを使用して、リアルタイムｒｔＰＣＲ（ＡＢＩ７９００）によって様々な遺伝子の発現を測定した。遺伝子発現結果をＧＡＰＤＨに正規化した。

【0336】

ＬＮＣａＰ成長アッセイ
フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ＋１％ｃｓＦＢＳ中で、ＬＮＣａＰ細胞を９６ウェルプレートのウェルあたり１０，０００個の細胞でプレーティングした。細胞を用量応答のＳＡＲＤで処理した。処理の３日後、細胞を再度、処理した。処理の６日後に細胞を固定し、ＳＲＢアッセイによって細胞生存度を測定した。

【0337】

ＬＮＣａＰまたはＡＤ１分解（ＡＲ ＦＬ）
完全長ＡＲを発現するＬＮＣａＰまたはＡＤ１細胞を、増殖培地（ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ）中の６ウェルプレートのウェルあたり７５０，０００～１，０００，０００個の細胞でプレーティングした。プレーティングの２４時間後、培地を、フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ＋１％ｃｓＦＢＳに変更し、この培地中で２日間、維持した。フェノールレッドを含まないＲＰＭＩ＋１％ｃｓＦＢＳに培地を再度、変更し、０．１ｎＭのＲ１８８１と組み合わせたＳＡＲＤ（１ｎＭ～１０μＭ）で細胞を処理した。処理の２４時間後に、細胞を冷ＰＢＳで洗浄して回収した。塩を含有する溶解緩衝液を使用し、３回の凍結－融解（free-thaw）サイクルでタンパク質を抽出した。タンパク質濃度を推定し、総タンパク質５マイクログラムをＳＤＳ－ＰＡＧＥにロードし、分画して、ＰＶＤＦ膜に移した。この膜をＳａｎｔａＣｒｕｚ製のＡＲ Ｎ－２０抗体およびＳｉｇｍａ製のアクチン抗体でプローブした。

【0338】

２２ＲＶ１およびＤ５６７ｅｓ分解（ＡＲ ＳＶ）
増殖培地（ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ）中、ＡＲスプライスバリアントを発現する２２ＲＶ１およびＤ５６７ｅｓ細胞を６ウェルプレートのウェルあたり７５０，０００～１，０００，０００個の細胞でプレーティングした。プレーティングして２４時間後に、培地を変更して処理した。処理の２４～３０時間後に、細胞を冷ＰＢＳで洗浄して回収した。塩を含有する溶解緩衝液を使用し、３回の凍結－融解サイクルでタンパク質を抽出した。タンパク質濃度を推定し、総タンパク質５マイクログラムをＳＤＳ－ＰＡＧＥにロードし、分画して、ＰＶＤＦ膜に移した。この膜をＳａｎｔａＣｒｕｚ製のＡＲ Ｎ－２０抗体およびＳｉｇｍａ製のアクチン抗体でプローブした。

【0339】

２２ＲＶ１の成長および遺伝子発現
ＳＲＢアッセイによって、先に記載した通り細胞成長を評価した。９６ウェルプレートにおいて、全血清中で細胞をプレーティングし、３日目の後に培地を交換して６日間、処理した。遺伝子発現研究は、９６ウェルプレートにおいて、ＲＰＭＩ＋１０％ＦＢＳ中、１０，０００個の細胞／ウェルでプレーティングした２２ＲＶ１細胞で行った。プレーティングして２４時間後、細胞を３日間、処理し、遺伝子発現研究を先に記載した通りに行った。

【0340】

トランス活性化（ＩＣ５０）
表Ａに示された化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏでのＡＲ拮抗作用。ｏｐｔｉＭＥＭ培地中、ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅを使用し、ＣＯＳ７細胞に０．２５ｕｇのＧＲＥ－ＬＵＣ、０．０１ｕｇのＣＭＶ－ウミシイタケＬＵＣおよび２５ｎｇのＣＭＶ－ｈＡＲをトランスフェクトした。０．１ｎＭのＲ１８８１の存在下でトランスフェクトして２４時間後に細胞を処理し、ルシフェラーゼアッセイをトランスフェクションの４８時間後に行った。ホタルルシフェラーゼ値を、ウミシイタケルシフェラーゼ値に正規化した。

【0341】

分解
表Ａは、示された化合物に関する、ＦＬおよびＳＶ ＡＲ分解活性を表す。各列の下の数は、ビヒクルからの変化％を表す。バンドは、画像ソフトウエアを使用して定量した。各値に関して、ＡＲのバンドをＧＡＰＤＨのバンドにより除算し、ビヒクルからの差異％を算出して表示した。示されている数は、０（分解がない）、またはＧＡＰＤＨレベルに対して正規化したＡＲレベルの低下として表されている。ＦＬ ＡＲ分解に関すると、ＬＮＣａＰ細胞を、チャコールストリップＦＢＳ含有培地中に２日間、維持した。０．１ｎＭのＲ１８８１の存在下、この培地中で細胞を処理した。処理して２４時間後に細胞を回収して、タンパク質を抽出し、ＡＲおよびＧＡＰＤＨに関するウェスタンブロットを行った。ＳＶ ＡＲ分解に関すると、ＬＮＣａＰの場合に表示されている通りに２２ＲＶ１細胞を処理した。

【0342】

試験化合物の代謝安定性（ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＣＬ_ｉｎｔ）の決定
第Ｉ相代謝
このアッセイは、二連（ｎ＝２）で、最終体積０．５ｍｌ中で行った。試験化合物（１μＭ）を、０．５ｍｇ／ｍｌの肝臓ミクロソームタンパク質を含有する１００ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ（ｐＨ７．５）中、３７℃で１０分間、事前インキュベートした。事前インキュベート後、１ｍＭ ＮＡＤＰＨ（３７℃で事前インキュベートした）を添加することによって反応を開始した。インキュベーションは三連で、および様々な時点（０、５、１０、１５、３０および６０分間）で行った。１００μＬのアリコートを取り出し、内部標準を含有する１００μＬのアセトニトリルでクエンチした。試料をボルテックス混合し、４０００ｒｐｍで１０分間、遠心分離した。上清を９６ウェルプレートに移し、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析に供した。対照として、ＮＡＤＰＨの非存在下で行った試料インキュベーションを含ませた。％ＰＣＲ（残留親化合物％）から、化合物の消失速度を求め（傾き）、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＣＬ_ｉｎｔ（μＬ／分／ｍｇのタンパク質）を計算した。

【0343】

第Ｉ相および第ＩＩ相の経路における代謝安定性
このアッセイでは、試験化合物を肝臓ミクロソームと共にインキュベートし、薬物の消失をディスカバリーグレード（discovery grade）ＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して決定した。第ＩＩ相の代謝経路（グルクロン酸化）を刺激するため、ＵＤＰＧＡおよびアラメチシンをアッセイに含ませた。

【0344】

ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析
研究下にある化合物の分析は、ＭＤＳ／Ｓｃｉｅｘ ４０００ Ｑ－Ｔｒａｐ（商標）質量分析計を備えたＡｇｉｌｅｎｔ１１００ ＨＰＬＣからなる、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳシステムを使用して行った。分離はＣ_１８ガードカートリッジシステム（４．６ｍｍ ＩＤのカラム用のＳｅｃｕｒｉｔｙＧｕａｒｄ（商標）ＵＬＴＲＡカートリッジＵＨＰＬＣ、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ）によって保護したＣ_１８分析用カラム（Ａｌｌｔｉｍａ（商標）、２．１×１００ｍｍ、３μｍ）を使用して達成した。移動相は、チャネルＡ（９５％アセトニトリル＋５％水＋０．１％ギ酸）およびチャネルＣ（９５％水＋５％アセトニトリル＋０．１％ギ酸）からなり、０．４ｍＬ／分の流量で送達した。アセトニトリルと水との体積比は、検体の各々に最適化した。多重反応モニタリング（ＭＲＭ）スキャンは、各化合物に対して最適化した、カーテンガス、衝突ガス、ネブライザーガスおよび補助ガス、ならびに５５０℃のソース温度で行った。－４２００Ｖ（ネガティブモード）のイオンスプレー電圧を使用して、分子イオンを形成させた。デクラスタリング電位、入口電位、衝突エネルギー、生成物イオン質量およびセル出口電位を各化合物に対して最適化した。

【0345】

ラット血清濃度を決定するためのＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析
最後の用量の２４～３０時間後に血清を採取した。１００μＬの血清を２００μＬのアセトニトリル／内部標準と混合した。１００μＬのラット血清を用いて、標準の段階希釈（ｎＭ）（濃度は、１０００、５００、２５０、１２５、６２．５、３１．２、１５．６、７．８、３．９、１．９、０．９７および０とした）によって標準曲線を調製した。標準を２００μＬのアセトニトリル／内部標準を用いて抽出した。これらの実験の内部標準は、（Ｓ）－３－（４－シアノフェノキシ）－Ｎ－（３－（クロロ）－４－シアノフェニル）－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミドとした。

【0346】

検体であるＳＡＲＤの機器分析は、ＭＤＳ／Ｓｃｉｅｘ４０００ Ｑ－Ｔｒａｐ（商標）質量分析計を備えたＡｇｉｌｅｎｔ１１００ ＨＰＬＣからなる、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳシステムを使用して行った。この分離は、Ｃ_１８ガードカラム（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（商標）、ホルダーを備える４．６ｍｍ ＩＤカートリッジ）によって保護したＣ_１８分析用カラム（Ａｌｌｔｉｍａ（商標）、２．１×１００ｍｍ、３μｍ）を使用して達成した。移動相は、チャネルＡ（９５％アセトニトリル＋５％水＋０．１％ギ酸）およびチャネルＣ（９５％水＋５％アセトニトリル＋０．１％ギ酸）からなり、Ａ７０％およびＢ３０％で０．４ｍＬ／分の流量の定組成で送達した。検体であるＳＡＲＤに関する全稼働時間を最適化したが、一般に、２～４分間であり、注入体積は１０μＬとした。多重反応モニタリング（ＭＲＭ）スキャンは、カーテンガス１０、中程度の衝突ガス、ネブライザーガス６０．０および補助ガス６０．０、およびソース温度５５０℃で行った。４２００（ネガティブモード）のイオンスプレー電圧（ＩＳ）を使用して、分子イオンを形成させた。デクラスタリング電位（ＤＰ）、入口電位（ＥＰ）、衝突エネルギー（ＣＥ）、生成物イオン質量およびセル出口電位（ＣＸＰ）は、観察された質量ペアに関する検体であるＳＡＲＤの各々に対して最適化した。

【0347】

ＬｏｇＰ：オクタノール－水分配係数（ＬｏｇＰ）
ＬｏｇＰは、特定の分子が生物膜を通過する可能性があるかどうかのおおまかな推定値として、創薬の取り組みにおいて、早期に一般に使用される、オクタノール－水の分配係数のＬｏｇである。ＬｏｇＰは、ＣｈｅｍＤｒａｗ Ｕｌｔｒａバージョン１２．０．２．１０１６（Ｐｅｒｋｉｎ－Ｅｌｍｅｒ、Ｗａｌｔｈａｍ、Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２４５１）を使用して計算した。計算したＬｏｇＰ値は、表Ａ中の「ＬｏｇＰ（－０．４～＋５．６）」と記された列に報告されている。Ｌｉｐｉｎｓｋｉの５つの法則は、経口生体利用率を予測することを目的とする一連の基準である。経口生体利用率に関するこれらの基準の１つは、ＬｏｇＰが、列の見出し（－０．４（相対的に親水性）～＋５．６（相対的に親油性）の範囲）に示されている値の間、またはさらに一般には、＜５と明記されるものである。ＳＡＲＤ設計の目的の１つは、水溶解度を改善することであった。ピラゾール、ピロールなどの本発明の単環式テンプレートは、以前のアナログよりも水溶性が高かった。

【表A-1】

【表A-2】

（実施例３）
ピラゾール部分（Ｂ環、シリーズＩ）の一置換
生物学的方法
競合リガンド結合アッセイ

【0348】

ＡＲリガンド結合アッセイを、ラット前立腺からクローニングした精製済みＡＲ－ＬＢＤを使用して、前述のように行った（Cancer Res 2017, 77, 6282-6298; J Med Chem 2019, 62, 491-511）。
ＡＲトランス活性化アッセイ

【0349】

７０，０００細胞／ウェルで２４ウェルプレートにプレーティングしたＨＥＫ－２９３細胞を、リポフェクタミントランスフェクション試薬（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、Ｃａｒｌｓｂａｄ、ＣＡ）を使用してトランスフェクトした。細胞に、０．２５μｇ ＧＲＥ－ＬＵＣ、２５ｎｇ ＣＭＶ－ｈＡＲ、および１０ｎｇ ＣＭＶ－ＬＵＣをトランスフェクトした。細胞を、トランスフェクションの２４時間後に処理し、ルシフェラーゼアッセイをトランスフェクションの４８時間後に行った。ホタルルシフェラーゼアッセイ値を、ウミシイタケルシフェラーゼアッセイの数値に対して正規化した。
変異体ＡＲ（Ｆ８７６Ｌ）およびｗｔＰＲトランス活性化アッセイ

【0350】

ＣＯＳ細胞を、フェノールレッドなしで、５％のｃｓＦＢＳを加えたＤＭＥ中、２４ウェルプレートに７０，０００細胞／ウェルでプレーティングした。細胞に、０．２５μｇ ＧＲＥ－ＬＵＣ、１０ｎｇ ＣＭＶ－ウミシイタケＬＵＣ、および５０ｎｇ ｐＣＲ３．１－ｈＰＲ（ｗｔ）またはＦ８７６Ｌ ＡＲを、ｏｐｔｉＭＥＭ培地にリポフェクタミントランスフェクション試薬を加えたものを使用してトランスフェクトした。培地を、トランスフェクションから２４時間後に、フェノールレッドなしのＤＭＥ＋５％ｃｓＦＢＳに交換し、用量応答性の様々な薬物（１ｐＭから１０μＭ）で、０．１ｎＭのプロゲステロン（ＰＲ）またはＲ１８８１（Ｆ８７６Ｌ ＡＲ）の存在下または非存在下で処理した。ルシフェラーゼアッセイを、Ｂｉｏｔｅｋシナジー４プレートリーダーで、処理から２４時間後に行った。ホタルルシフェラーゼ値を、ウミシイタケルシフェラーゼ値に対して正規化した。
ＬＮＣａＰ細胞におけるアンドロゲン受容体依存性遺伝子発現（図３）

【0351】

ＬＮＣａＰ細胞を、フェノールレッドなしで、１％ ｃｓＦＢＳを加えたＲＰＭＩ中、９６ウェルプレートにプレーティングした。細胞を、この培地中で２日間維持し、０．１ｎＭ Ｒ１８８１の存在下で処理した。処理から２４時間後、細胞を収集し、ＲＮＡを単離し、ｃＤＮＡを、ｃｅｌｌｓ－ｔｏ－ｃｔキット（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用して調製した。遺伝子の発現を、ＴａｑＭａｎプライマーおよびプローブ（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）を使用するリアルタイムＰＣＲを使用して測定した。
ＭＲ４９Ｆ ＬＮＣａＰ細胞における細胞増殖アッセイ（図４）

【0352】

ＭＲ４９Ｆ細胞を、フェノールレッドなしで、１％ ｃｓＦＢＳを加えたＲＰＭＩ中、９６ウェルプレートにプレーティングした。細胞を、６日間にわたり、０．１ｎＭ Ｒ１８８１の存在下、この培地中で処理し、培地は、３日後に交換しかつ再処理した。生存可能細胞の数を、ｃｅｌｌ－ｔｉｔｅｒ－ｇｌｏ（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用して測定した。
ウェスタンブロット

【0353】

指示された細胞系を、２４時間処理した。細胞を収集し、タンパク質を抽出し、ＡＲ、ＡＲ－ＳＶ、およびＧＡＰＤＨに関するウェスタンブロットを、ＡＲのＮ末端に結合するＡＲ ＰＧ－２１ウサギポリクローナル抗体を使用して行った。^１，１２
ｉｎ ｖｉｔｒｏ代謝アッセイ

【0354】

ＤＭＰＫアッセイを、前述のように行った。^１，１２代謝アッセイを、前述のようにマウス、ラット、およびヒトの肝臓ミクロソームで行った。
ラットにおけるｉｎ ｖｉｖｏ薬物動態

【0355】

ＰＫ研究を、以下に簡単に論じるように、標準的な方法を使用してＣｏｖａｎｃｅで実行した。
畜産および実験設計

【0356】

Ｅｎｖｉｇｏ ＲＭＳ，Ｉｎｃ．からの雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットを、最初の用量投与前の５日間、研究条件に順応させた。最初の投薬時、動物は１２週齢であった。動物を、硬材チップを敷いたポリカーボネートのケージに群収容した（最大で３動物／ケージ／群）。認証済みげっ歯類食餌＃２０１６Ｃ（Ｅｎｖｉｇｏ ＲＭＳ，Ｉｎｃ．）を適宜提供した。水を、適宜、毎日新たに提供した。動物室の環境制御は、温度２０から２６℃、相対湿度５０±２０％、および１２時間の明／１２時間の暗サイクルを維持するように設定された。必要に応じて、１２時間の暗サイクルを中断して、研究手順に順応するようにした。試験物品は、Ｃｏｖａｎｃｅにより１５％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）／８５％ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）３００中に調製した。個々の用量は、用量投与の１日目および７日目に記録された体重に基づき計算した。単一経口日用量を、７日間連続して経管栄養針を介して投与し、血液を、以下に記述されるように試料採取した。単一静脈内用量を、尾部静脈を介して投与し、１日目に血液を採取した。

【0357】

群、群当たりの動物の数、用量（１日当たり経口５、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇ、７日間にわたる；ｉｖ １０ｍｇ／ｋｇ、１日目）、および経路を含む、２６ａの実験に関する追加の詳細な情報は、以下の実験設計表Ｂに示される。動物を、死亡率ならびに疼痛および苦痛の徴候に関して毎日２回（ａ．ｍ．およびｐ．ｍ．）観察し、全身の健康および外観に関するケージ外からの（cage side）観察を毎日１回行った。動物を、動物選択時ならびに用量投与の１日目および７日目に計量した。

【表B】

試料収集

【0358】

血液（約０．５ｍＬ）を、注射器および針を介して頸静脈を介して収集し、Ｋ_３ＥＤＴＡを含有するチューブに、３動物／群から、投与前（７日目のみ）１日目および７日目に、投与から約０．０８３、０．２５、０．５、１、３、６、１２、および２４時間後に移した。ｉ．ｖ．群では、血液（約０．５ｍＬ）を頸静脈を介して、投与後約０．０８３、０．２５、０．５、１、３、６、１２、および２４時間で収集した。血液を、血漿を得るための遠心分離の前に、冷えたクライオラック内で維持した。遠心分離を、収集から１時間以内に開始した。血漿を、バーコードラベルの付いた９６ウェルチューブに入れた。血漿を、約－７０℃で保存する前にドライアイス上で維持した。薬物濃度を、確立されたクロマトグラフィー／質量分光測定（ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ）法により測定した。
Ｈｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイ

【0359】

雄性ラット（６～８週齢）を、体重に基づいて群に無作為化した。動物を、１４日間、図に示されるように経口投与により薬物で処置した。動物を犠牲にし、前立腺および精嚢を計量し、臓器重量を体重に対して正規化した。雄性ラット（ｎ＝５／群）を、１３日間にわたりインタクトなままにした。インタクトなラットを、指示された化合物で、１３日間にわたり毎日、口により指示された用量で処置した。ラットを、処置の１４日目に犠牲にし、前立腺および精嚢臓器を取り出し、計量した。臓器の重量を体重に対して正規化した。この２０ｍｇ／ｋｇの固定用量スクリーニングＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒを、１０、２１ａ、１６ｉ（毒性、したがってデータなし）、および２６ａに関して行った。実験の目標は、１０よりも高いｉｎ ｖｉｖｏ抗アンドロゲン有効性を持つ化合物を見出すことであった。
異種移植研究

【0360】

異種移植研究を、Ｈｅｒａ Ｂｉｏｌａｂｓ（Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ、ＫＹ）で行った。エンザルタミド抵抗性ＶＣａＰ（ＭＤＶＲ ＶＣａＰ；Ｄｒ．Ｄｏｎａｌｄ ＭｃＤｏｎｎｅｌｌ、Ｄｕｋｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ、Ｄｕｒｈａｍ、ＮＣからライセンス供与された）細胞を、ＳＲＧラット（ｎ＝５～７／群）（Ｈｅｒａ Ｂｉｏｌａｂｓ）に皮下移植した。腫瘍が１０００～２０００ｍｍ^３に成長したら、動物を無作為化し、指示された薬物で処置した。腫瘍体積を、毎週３回測定した。処置から３０日後、動物を犠牲にし、腫瘍を計量し、さらなる研究のために保存した。

【0361】

１６ａ～１６ｘの合成を、スキーム１に従い行った。市販の（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパン酸（１１）をＳＯＣｌ_２で処理して、酸１１を酸塩化物（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパノイルクロリド（図示せず）に変換し、これをアニリン（１２）と反応させて、臭化物化合物（１３）を得た。塩基性条件下（例えば、Ｋ_２ＣＯ_３）で、１３を、重要なオキシラン中間体（１４）に変換した。１４とのそれらの反応による市販のピラゾール（１５）のアルキル化は、ピラゾール－１－イル－プロパンアミド１６ａ～１６ｘを提供した。シリーズＩおよび本明細書で試験された全てのその他の化合物を、ＡＲ ＬＢＤ結合（Ｋ_ｉ）、トランス活性化の阻害（ＩＣ_５０）、前立腺がん細胞系における完全長（ＬＮＣａＰ細胞内のＡＲ ＦＬ）およびスプライス変異体（２２ＲＶ１細胞におけるＡＲ ＳＶ）アンドロゲン受容体のＡＲ分解（分解％）、ならびにＬＮＣａＰ細胞における分解効力（ＤＣ_５０値）に関して、ｉｎ ｖｉｔｒｏでスクリーニングした（表２）。最適なＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストは、ＡＲトランス活性化（ＩＣ_５０）を強力に阻害しかつＡＲ ＦＬまたはＡＲ ＳＶを必要に応じて分解する化合物であり、１０よりも大きい効力の、抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣのモデルでのｉｎ ｖｉｖｏ有効性を有する。

【0362】

ピラゾール環上に置換がない化合物１６ａは、ＩＣ_５０値が１．４４２μＭである弱いＡＲ阻害活性を有した。ｉｎ ｖｉｔｒｏでのＡＲ阻害は、ルシフェラーゼアッセイにより測定されたとき、Ｒ１８８１誘発性ｗｔＡＲ転写活性を阻害する能力と定義され［表２のトランス活性化（ＩＣ_５０）欄の値を参照］、本明細書ではｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＲ阻害と呼ばれる。ピラゾール上へのハロゲンの導入は、４－ヨード化合物１６ｅ以外、ＡＲ阻害活性を著しく増大させた。ハロゲン置換によるＡＲ阻害効力の順序は：１６ｃ（４－Ｃｌ、０．１３６μＭ）＞１０（４－Ｆ、０．１９９μＭ）＞１６ｂ（３－Ｆ、０．２２０μＭ）＞１６ｄ（４－Ｂｒ、０．４２７μＭ）＞１６ａ（４－Ｈ、１．４４２μＭ）＞１６ｅ（４－Ｉ、２．０３８μＭ）であった。４－置換を持つ化合物は、それらの３－置換対応物の場合よりも、例えば１０（４－Ｆ）を１６ｂ（３－Ｆ）と、１６ｇ（４－ＣＦ_３）を１６ｈ（３－ＣＦ_３）と、１６ｍ（４－フェニル）を１６ｎ（３－フェニル）と、および１６ｏ［４－（４－フルオロフェニル）］を１６ｐ［３－（４－フルオロフェニル）］とそれぞれ比較して、より強力なＡＲ阻害活性を示した。

【0363】

より強力な電子求引基（ＥＷＧ）がピラゾール環上にあるほど、ＡＲ阻害活性はより強力になり、その効力の順序は、１６ｊ（４－ＮＯ_２、０．０３６μＭ）＞１６ｉ（４－ＣＮ、０．０４５μＭ）＞１６ｇ（４－ＣＦ_３、０．０７１μＭ）＞１６ｈ（３－ＣＦ_３、０．２０５μＭ）＞１６ｑ（４－エチニル、０．２７６μＭ）＞１６ｆ（４－ＣＯＣＨ_３、０．７５８μＭ）である。ピラゾール環上に電子供与基を保持する化合物は、低効力のＡＲ阻害活性（１６ｌ、１６ｕ、および１６ｘ）、ＡＲ阻害活性なし（１６ｋ、１６ｓ、１６ｖ、および１６ｗ）、またはＡＲアゴニスト活性でもある（４－ＮＨ_２である１６ｔ）状態を示した。例えば、ピラゾール環上に［４－（４－ＯＨ－ブタ－１－イン－１－イル）］を保持する１６ｒは、ＡＲ阻害活性を示さずに、５１％のＡＲ完全長タンパク質分解活性を示した。

【0364】

ＳＡＲＤ活性に関し、ピラゾール環の置換は、必要であるように見えるが（１６ａ；分解％で０％／０％）、一部の電子供与基、例えば１６ｋの４－ＯＣＨ_３、ならびに１６ｍおよび１６ｎの４－フェニルまたは３－フェニルは不活性である。ＡＲ阻害効力のように、電子求引基（ＥＷＧ）および４置換の強度は、１０（４－Ｆ；ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶ有効性に関して１００％／１００％）、１６ｇ（４－ＣＦ_３；８０％／１００％有効性）、１６ｉ（４－ＣＮ；９０％／１００％有効性）に見られるように有利に寄与するように見え、それに対して３置換ＥＷＧは、１６ｂ（３－Ｆ；８２％／７３％有効性）および１６ｈ（３－ＣＦ_３；６７％／５４％有効性）に見ることができるように、わずかに低いＳＡＲＤ活性を有した。しかしながら、１６ｐ（３－（４－フルオロフェニル））は、その４位異性体１６ｏ（４－（４－フルオロフェニル））よりも優れており、分解有効性は５４％／８１％対７２％／０％である。

【0365】

阻害効力（ＩＣ_５０）は、分解％に常に相関するわけではない。例えば、最も強力な阻害剤１６ｊ（４－ＮＯ_２；０．０３６μＭ）は、不十分な分解剤であり、最も強力なシリーズＩのハロゲン１６ｃ（４－Ｃｌ；０．１３６μＭ）は、中程度のＳＡＲＤ活性（７１％／３４％）を実証しただけであった。さらに、ＬＢＤ結合（Ｋ_ｉ）は、ＡＲ阻害効力（ＩＣ_５０）にもＳＡＲＤ活性にも相関しない。例えば、非結合剤１０および１６ｃ（Ｋ_ｉ値＞１０μＭ）は阻害しかつ分解し、それに対して非結合剤１６ｒは分解したが阻害剤ではなかった。

【0366】

ＳＡＲＤ活性の有効性％の構造活性関係（ＳＡＲ）（半定量値としてのそれらの制限に起因して、凝集体でのＡＲ ＦＬ ＳＡＲＤおよびＡＲ ＳＶ ＳＡＲＤ活性を考慮する）は、いくらかの程度までＡＲ阻害効力と相関するように、および［かなり］低い程度までＬＢＤ Ｋ_ｉと相関するように見える。スクリーニングプロファイルは、抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣのモデルの試験に関して最大限の強度および広範なアンタゴニストを提供するように、ＦＬおよびＳＶ ＳＡＲＤ有効性およびＡＲ阻害効力を最大限にすることが意図される。ある場合には、１６ｇ、１６ｉ、および２６ａなど、高い有効性のＳＡＲＤ（ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶの両方に関して＞７０％）が強力なＡＲ阻害剤であり（＜０．１００μＭ ＩＣ_５０）；１６ｂ、１６ｃ、１６ｈ、および２６ｃなどの中程度の有効性のＳＡＲＤは、中程度の効力の阻害剤であった。しかしながら、ＳＡＲＤ有効性％は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害効力またはＬＢＤ結合と常に十分相関するわけではない。例えば１６ｊは、わずか２０％のＡＲ ＦＬ有効性（ＳＶに関してＮ．Ａ．）を有する不十分な分解剤であったが、ＬＢＤ結合（２．２２５μＭ）と比較して非常に強力な阻害（０．０３６μＭ）を有し、２６ｆは、１および１０μＭでわずか８％、１５％のＡＲ ＦＬ有効性を有したが、極めて強力な阻害（０．０３５μＭ）を有し、これはＬＢＤ結合（０．５６７μＭ）よりも＞１０倍強力である。このように、今日まで試験された全てのＡＲ形態を阻害し、ほとんどの場合分解するその能力に主に重点を置く代わりにＡＲ分解剤（即ち、ＳＡＲＤ）としてこれらの分子に主に重点を置くことが考慮された。観察されたＡＲ拮抗作用へのＡＲ ＳＡＲＤ活性の寄与を決定しようとして、ＬＮＣａＰ細胞における分解効力値（ＤＣ_５０値）は、初めて本明細書で提供された。これらの値は、ＩＣ_５０値よりも約４から１０倍大きく（表２～５）、ＳＡＲＤ活性のみでこれらの化合物の強力なＡＲ ｐａｎ－拮抗作用を説明できないことを示唆している。したがって、これらの広範で強力な非正規ＡＲアンタゴニストは、ＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストと本明細書では注記される。

【表2-1】

【表2-2】

【表2-3】

^ａ ＡＲ結合は、１ｎＭ［^３Ｈ］ＭＩＢと野生型ＡＲ（ｗｔＡＲ）の組換えＬＢＤとの競合結合によって決定された。ＤＨＴは、標準剤として各実験で使用され、値は、ＤＨＴのＩＣ_５０を１ｎＭとして、ＤＨＴに対して正規化される。
^ｂ トランス活性化の阻害は、ＨＥＫ－２９３細胞に完全長ｗｔＡＲ、ＧＲＥ－ＬＵＣ、およびＣＭＶ－ウミシイタケルシフェラーゼをトランスフェクション対照としてトランスフェクトすることによって決定した。細胞を、トランスフェクションの２４時間後に用量応答性の化合物（１ｐＭから１０μＭ）で、０．１ｎＭ Ｒ１８８１（アンタゴニストモード）の存在下でまたはＲ１８８１（アゴニストモード）の非存在下で処理した。ルシフェラーゼアッセイは、二重ルシフェラーゼ（ホタルおよびウミシイタケ）アッセイキット（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を使用して、処理から２４時間後に行った。
^ｃ ＳＡＲＤ活性は、それぞれＦＬ ＡＲ（アンタゴニスト１μＭで）またはＳＶ ＡＲ（アンタゴニスト１０μＭで）タンパク質レベルを決定するためにＬＮＣａＰ細胞または２２ＲＶ１細胞を処理することによりアッセイした。細胞を、木炭処理済み血清含有培地中に４８時間維持し、指示される用量のアンタゴニストで２４時間、０．１ｎＭ Ｒ１８８１（アゴニスト）の存在下で処理した。細胞を収集し、ＡＲに関するウェスタンブロットを、ＡＲのＮＴＤおよびアクチン（タンパク質付加の内部対照）に向けて方向付けるＡＲ－Ｎ２０またはＰＧ－２１抗体を使用して行った。ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶバンドを定量し、アクチンバンドに対して正規化し、ビヒクル処理した細胞からの阻害パーセントとして表した。
^ｄ 結果は、本明細書に記述されるものと同じアッセイで、文献に報告された。
^ｅ Ｎ．Ａ．は、データが得られたかったことを意味する。
^ｆ ２つの値は、１および１０□Ｍのアンタゴニストで実行されたＳＡＲＤアッセイを示す。
^ｇ 転写活性化は、アンタゴニストモードでの同じアッセイで行われ、ＩＣ_５０値が報告される。
^ｈ トランス活性化の結合親和性およびｗｔＡＲ阻害は、ダロルタミドのジアステレオマーの混合物に関する文献で報告された。
（実施例４）
芳香族Ａ環の修飾（シリーズＩＩ）

【0367】

化合物２１ａ～２１ｊを、スキーム２に示される経路により調製した。ＳＯＣｌ_２による酸１１の処理は、酸塩化物（Ｒ）－３－ブロモ－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパノイルクロリド（図示せず）を提供し、これを塩基性Ｅｔ_３Ｎ条件下で様々なアミン（１７）と反応させて、種々のＡ環を持つブロモアミド１８を得た。塩基性条件（例えば、Ｋ_２ＣＯ_３）は、ブロモアミド１８をオキシラン中間体１９に変換し、その後、水素化ナトリウムの塩基性条件下で様々なピラゾール２０とカップリングさせて、目標化合物２１ａ～２１ｊを生成した。化合物を、ＡＲ活性に関してｉｎ ｖｉｔｒｏで試験した（表３）。

【0368】

４－Ｆピラゾールに関し、Ａ環の３’位で炭素（ＣＨ）を窒素（Ｎ）で置き換え、即ち１０の３’－ピリジノ誘導体は、その対応物１０（ＩＣ_５０＝０．１９９μＭ）と比較して、ＡＲ阻害ＩＣ_５０値が０．０６２μＭである、より強力な化合物（２１ａ）を誘導した。しかしながら、他の場合には、３’－ピリジノ誘導体が、そのフェニルＡ環類似体に等しい強度またはそれよりも低い強度であった。３’－ピリジノ２１ｃ（４－ＣＮ；０．０５９μＭ）は、そのＡ環フェニル類似体１６ｉ（ＩＣ_５０＝０．０４５μＭ）と比較して、ほとんど等しい強度のＡＲ阻害活性を示した。しかしながら、３’－ピリジノ化合物２１ｂ（４－ＣＦ_３）および２１ｄ（４－ＮＨＣＯＯｔＢｕ）は、それらのフェニルＡ環対応物１６ｇおよび１６ｕよりも低い活性（ＩＣ_５０値がそれぞれ０．２０８μＭおよび６．１０８μＭ）を示した。１０の他のＡ環の修飾は、３’－ＣＦ_３を３’－Ｃｌで置き換えること（２１ｅ；０．４２７μＭ；４２％／０％分解）、４’－ＣＮを４’－ＮＯ_２で置き換えること（２１ｆ；部分アゴニスト；Ｎ．Ａ．分解％）、および２１ｇ～２１ｋのようなその他の修飾も含め、１０（０．１９９μＭ；１００％／１００％）と比較したときにＡＲ阻害活性および分解％を減少させた。低いまたは全くないＡＲ ＬＢＤ結合親和性（Ｋ_ｉ）を示す、他のピラゾールプロパンアミドとは異なって、ピラゾールにおける４－ＣＮ置換基と３’－ピリジノＡ環との組合せは、２１ｃ（Ｋ_ｉ＝０．０８９μＭ）で見られる緊密なＬＢＤ結合を促進するが、ＳＡＲＤ活性が比較的不十分（１５％／Ｎ．Ａ．）であることが見出された。

【表3-1】

【表3-2】

【表3-3】

^ａＡＲ結合、トランス活性化、および分解アッセイを行い、値は、表２に記述されるように報告した。
^ｂＮ．Ａ．は、データが得られたかったことを意味する。
（実施例５）
ピラゾールＢ環の二置換（シリーズＩＩＩ）

【0369】

化合物２６ａ～２６ｈを、スキーム１および２に類似の合成方法を利用して、スキーム３に示されるように合成し、ＡＲ活性に関して試験をした（表４）。

【0370】

化合物２６ａは、２個の電子求引基（３－Ｆおよび４－Ｂｒ）をピラゾール環上に有し、強力な阻害活性（ＩＣ_５０は０．０８４μＭ）および中程度から高度な有効性のＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶ分解（７０～８０％の分解）を示した。化合物２６ａは、ＡＲ阻害効力を３－Ｆ（１６ｂ；０．２２０μＭ；８２％／７３％）および４－Ｂｒ（１６ｄ；０．４２７μＭ；４２％／０％）一置換類似体の３～４倍改善し、分解特性を保持しまたは改善し、二置換のさらなる調査を支援した。２６ａのＡ環の炭素（ＣＨ）の、窒素（Ｎ）による置換えは、３’－ピリジノ２６ｆを誘導し、これはＩＣ_５０値が０．０３５μＭの非常に強力なＡＲ阻害剤であったが、ＳＡＲＤ活性は不十分であった（８％、ＦＬ／ＳＶに関し１５％／Ｎ．Ａ．）（表４）。ピラゾール上に二置換基を持つ化合物２６ｂ～２６ｅは、１０（０．１９９μＭ）と同等の阻害活性を示し、ＡＲ阻害ＩＣ_５０値の順序は２６ｅ（３－Ｂｒ，４－Ｃｌ；０．１３８μＭ）＞２６ｃ（３－Ｂｒ，４－ＣＮ；０．２０２μＭ）＞２６ｂ（３－Ｂｒ，４－（４－フルオロフェニル）；０．２８５μＭ）＞２６ｄ（３－Ｃｌ，４－メチル）；０．３３２μＭ）であった。

【0371】

化合物２６ｅ（０．１３８μＭ）および２６ｃ（０．２０２μＭ）は、それらの一置換類似体１６ｃ（４－Ｃｌ；０．１３６μＭ）および１６ｉ（４－ＣＮ；０．０４５μＭ）を改善しなかった。４－ＥＤＧピラゾールへのハロゲンの付加は、例えば２６ｂ（３－Ｂｒ，４－（４－フルオロフェニル）；０．２８５μＭ）および１６ｏ（４－（４－フルオロフェニル）；０．９６９μＭ）および２６ｄ（３－Ｃｌ，４－メチル）；０．３３２μＭ）および１６ｌ（４－メチル；８．０８７μＭ）と比較して、少なくとも部分的に活性を取り戻した。この場合も、これらの結果は、ピラゾール置換基のＥＷＧ強度が、阻害活性に有利に寄与することを示唆する。２６ｃの３’－ピリジノＡ環バージョンは、ＡＲ ＦＬの８０％ＳＡＲＤ有効性にも関わらず（しかしＡＲ ＳＶでは有効性がない）、ＡＲ阻害ＩＣ_５０値が５．４８１μＭである、１０分の１未満の強度の阻害剤２６ｇを提供した。ピラゾールの３位での余分なブロモ（２６ｇ）またはフェニル（２６ｈ）基の導入は、２１ｃ（４－ＣＮ；０．０５９μＭ）と比較して、それぞれ５．４８１または０．５７９μＭに阻害活性を大幅に減少させた。ピラゾール上の３－Ｂｒおよび４－ＣＮ置換基は、２６ｃに関してより緊密なＬＢＤ結合（Ｋ_ｉ＝０．２０２μＭ）を促進し、ピラゾール（２６ａ）上の３－Ｆ，４－Ｂｒ置換基は、ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶ（７０％／８０％）のＳＡＲＤ活性を保持しながら、強力な阻害剤（ＩＣ_５０＝０．０８４μＭ）を誘導することが見出された。

【表4】

^ａ ＡＲ結合、トランス活性化、および分解アッセイを行い、値を表２に記述されるように報告した。
^ｂ ２つの値は、１および１０μＭのアンタゴニストで実行されたＳＡＲＤアッセイを示す。
^ｃ Ｎ．Ａ．は、データが得られたかったことを意味する。
（実施例６）
連結部分の修飾（シリーズＩＶ）

【0372】

化合物２９ａ～２９ｆを、スキーム４に示されるように、スキーム１～３の場合に類似した合成方法を利用して合成し、２９ａ～２９ｆを、それらのＡＲ活性に関して試験した（表５および表１）。

【0373】

１０（Ｓ異性体）のキラリティーの切換えは、ＡＲ阻害ＩＣ_５０値が０．１９２μＭであるほとんど同じ強度の２９ａ（Ｒ異性体）を提供し、１０（１００％）と比較して８４％の分解までわずかに減少した。１０の２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミドリンカーからの２－ヒドロキシル部分の除去は、ＡＲ阻害活性が低減し（０．４６２μＭ）かつ１０（０．１９９μＭ；１００％／１００％）と比較して６０％／７０％のＦＬ／ＳＶ ＳＡＲＤ活性である、２６ｂを生成した。１０の連結から２－メチルおよび２－ヒドロキシ部分を除去して直鎖状プロパンアミド２９ｃを生成することにより、ＡＲ阻害性およびＳＡＲＤ活性がさらに減少した。

【0374】

１０のオキサゾリジン－２，４－ジオンリンカー変異体として、化合物２９ｄは、リンカーのアミドおよびヒドロキシル基に類似した基を（カルバメート中の酸素として）有する。２９ｄは、依然として活性を示したが、そのＡＲ阻害性（１．１３１μＭ）およびＳＡＲＤ（１８％、５０％／Ｎ．Ａ．）活性は、１０（０．１９９μＭ；１００％／１００％）と比較して著しく減少した。２－ヒドロキシＡＲアゴニスト１６ｔ（４－ＮＨ_２）のアシル化は２９ｅを生成し、これはいくらかのアンタゴニスト活性を回復してＡＲ阻害ＩＣ_５０値は０．９０１μＭであり、それに対して２９ｆにおけるような第２のアミドのリンカーへの導入およびピラゾール結合位置の変更は、アゴニストを生成した。リンカー要素はシリーズＩＶのこの初期ＳＡＲで最適化されなかったが、キラル中心の反転に対する許容性が再び観察され、阻害性およびＳＡＲＤ活性に関して２－ヒドロキシ－２－メチルプロパミドリンカーに関する絶対的要件がないことが確認された。

【表5】

^ａ ＡＲ結合、トランス活性化、および分解アッセイを行い、値を表２に記述されるように報告した。
^ｂ Ｎ．Ａ．は、データが得られたかったことを意味する。
^ｃ ２つの値は、１および１０μＭのアンタゴニストで実行されたＳＡＲＤアッセイを示す。

【0375】

シリーズＩ～ＩＩＩの、ＡＲ ＬＢＤ親和性（一部の化合物に関し）およびｉｎ ｖｉｔｒｏアンタゴニスト特性は、ＰＣの処置のために現在臨床的に用いられている公知の標準ＡＲアンタゴニストに対して同等から好ましいレベルにまで及んだ。例えば、２、４、５、および６は、＞１０μＭの結合および０．１９９μＭの拮抗作用である１０と比較して、０．５０９、３．６４１、１．４５２、および０．０１１μＭのＬＢＤ結合親和性（３～５の値は内部で決定され、それに対して６は文献からである）、ならびに０．２４８、０．２１６、０．１６０、および０．０６５μＭのｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害（３～５の値は内部で決定され、それに対して６は文献からである）を有していた。シリーズＩからの化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、１６ｈ、１６ｉ、および１６ｍ、シリーズＩＩからの２１ａ、およびシリーズＩＩＩからの２６ａおよび２６ｃ、およびシリーズＩＶからの２９ａは、０．０４１から０．２２０μＭに及ぶ比較的強力なＡＲ阻害ＩＣ_５０値を示すが、２および４～６とは異なって、ＳＡＲＤは１００％から４５％の範囲の分解活性値を持つことが見出された。１６ｍ以外のこれらの化合物は、公知のＬＢＤ標的抗アンドロゲンに対して改善された阻害剤と同等であったが、新規なｐａｎ－拮抗作用およびＳＡＲＤ活性を有した。
（実施例７）
マウス、ラット、およびヒト肝臓ミクロソームでのｉｎ ｖｉｔｒｏ代謝研究

【0376】

各シリーズの強力な阻害活性を持つ化合物を、第Ｉ相および第ＩＩ相の両方の代謝の酵素の補因子を含むマウス肝臓ミクロソーム（ＭＬＭ）におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ代謝安定性をさらに評価するために選択した。半減期（Ｔ_１／２）および固有クリアランス（ＣＬ_ｉｎｔ）値を、これらの化合物の分布、代謝、および薬物動態（ＤＭＰＫ）特性の予測因子として計算した（表６）。これらの化合物のＣＬ_ｉｎｔは、前世代のＳＡＲＤよりも遅く、これらのピラゾール－１－イルプロパンアミド（１６ｂ、１６ｇ、１６ｈ、１６ｉ、１６ｍ、２１ａ、２６ａ、および２９ａ）に関して４８．４５分から＞３６０分に及ぶ比較的安定なＴ_１／２値を生成し、９種の試験をしたピラゾールのうち６種は、ＭＬＭにおいて＞３６０分にわたり安定であった。これは、第三級アミン８に関する１．１５分、インドール９に関する１２．１１分（Ponnusamy, et al. Cancer Res. 2017, 77, 6282-6298）、および同じｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイで既に公開された様々なインドールおよびインドリンＢ環化合物に関する９～３６分（Dellis, et al. Expet. Opin. Invest. Drugs 2018, 27, 553-559）などの以前のＳＡＲＤテンプレートと比較した場合、大きな改善であり、１０（Ｔ_１／２が７７．９６分）に勝る改善である。

【化52】

【表6】

^ａ 化合物を、実験セクションで記述されるように、第Ｉ相および第ＩＩ相に関する補因子が提供されたマウス肝臓ミクロソーム（ＭＬＭ）と一緒にインキュベートした。
^ｂ 実験セクションの場合と同じ方法の使用において既に報告された。
^ｃ 参考文献^５８で既に報告されたように、ヒトにおける経口投与後のＴ_１／２（時）。
^ｄ 既に報告されたヒトでの経口投与後のＣＬ（ｍＬ／時／ｋｇ）。５８

【0377】

インドールおよびインドリンなどのアリール二環における同様の代謝傾向は、Ｂ環のアリールヒドロキシル化であってもよい。Ａ環およびプロパンアミド部分は、２（Ｎ－［４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル］－３－（４－フルオロフェニル）スルホニル－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド）およびエノボサーム（（２Ｓ）－３－（４－シアノフェノキシ）－Ｎ－［４－シアノ－３－（トリフルオロメチル）フェニル］－２－ヒドロキシ－２－メチルプロパンアミド）など、多くの生物利用可能化合物に組み込まれており、Ｂ環は同様の代謝的に不安定な部位として残される。ピラゾールにより改善されたＰＫ特性に関する可能性ある根拠は、Ｂ環上の可能性あるアリールヒドロキシル化部位の一部の排除である。ピラゾールの２位窒素原子上の増大した正電荷は、化合物を、代謝酵素に関して不十分な基質にし、かつ／または生物学的分割を改善する可能性もある。

【0378】

４種のさらなる化合物は、これらの読取りが、ラットＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイおよびＳＲＧラット（下記参照）での異種移植などのＰＤモデルにおけるｉｎ ｖｉｖｏ試験、ならびに最終的には診療所での、化合物の安定性を示唆するのに妥当なので、ラット肝臓ミクロソーム（ＲＬＭ）およびヒト肝臓ミクロソーム（ＨＬＭ）においても特徴付けた（表７）。シリーズＩの化合物１６ｃおよび１６ｇはＲＬＭ中で安定（Ｔ１／２が＞１２０分）であったが、１６ｃはＨＬＭにおいてそれほど安定ではなかった（Ｔ１／２が１０２分）。２１ａ（３－ピリジノ，４－Ｆ）および２６ａ（３－Ｆ，４－Ｂｒ）は、ＲＬＭおよびＨＬＭの両方で安定であり（Ｔ１／２が＞１２０分）、これはＲＬＭ（１８１分）およびＨＬＭ（２７４分）において１０に関して既に公開されたデータに類似していた（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。ＲＬＭおよびＨＬＭ中での安定性は、１０で既に見られたように、これらピラゾールの経口バイオアベイラビリティの可能性と矛盾がない。しかしながら、２１ａおよび２６ａは、１６ｃおよび１０に対して改善されたｉｎ ｖｉｔｒｏ有効性を有する。

【0379】

これに対応して、２１ａおよび２６ａの十分に高い血中レベルが実現されかつ化合物が作用部位に、即ち全身の腫瘍（複数可）に分布した場合、１０と比較して抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣを処置する有効性を改善することが可能と考えられる。その結果、様々な活性プロファイルを持つピラゾール化合物（１６ｉ、２１ａ、および２６ａ）は、４（Ｆ８７６Ｌ ＡＲ点変異体を有するＭＲ４９Ｆ細胞）および１（Ｔ８７７Ａを有するＬＮＣａＰ細胞）に対する抵抗性を含む、ＣＲＰＣのモデルでの試験に進んだ。

【表7】

^ａ 化合物を、実験セクションで記述されるように、第Ｉ相および第ＩＩ相に関する補因子が提供されたＲＬＭと一緒にインキュベートした。^ｂ 化合物を、実験セクションに記述されるように、第Ｉ相および第ＩＩ相に関する補因子が提供されたＨＬＭと一緒にインキュベートした。
（実施例８）
去勢抵抗性前立腺がんのモデルにおけるｉｎ ｖｉｔｒｏ薬力学

【0380】

化合物を、競合ＬＢＤ結合アッセイ（Ｋ_ｉ）、阻害ＡＲトランス活性化アッセイ（ＩＣ_５０）、ならびにＡＲ ＦＬ（ＬＮＣａＰ細胞中）およびＡＲ ＳＶ（２２ＲＶ１細胞中）分解アッセイ（分解％）において、ｉｎ ｖｉｔｒｏでスクリーニングした（上記表２～５）。強力なｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングプロファイルが単一分子（複数可）に関して実現したら、ｉｎ ｖｉｔｒｏ代謝安定性基準も、さらにｉｎ ｖｉｔｒｏで試験されることになる化合物の選択において考慮された（上記表６および７）。ｉｎ ｖｉｖｏ試験での有効性を改善するために、１０と比較して優れたｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングプロファイルを持つ化合物を探索し、ＡＲとＰＲとの間のトランス活性化選択性、ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲ標的遺伝子発現、およびＥｎｚ－Ｒ ＰＣ細胞（ＭＲ４９Ｆ ＬＮＣａＰ細胞）における増殖研究に関してさらに試験した。
変異体ＡＲおよびｗｔＰＲアンタゴニスト効果

【0381】

選択された化合物１６ｉ（４－ＣＮ）、２１ａ（３－ピリジノ，４－Ｆ）、２６ａ（３－Ｆ，４－Ｂｒ）、および１０（４－Ｆ）を、エンザルタミド（４）抵抗性（Ｅｎｚ－Ｒ）表現型をＰＣ細胞に提供する、ＬＢＤ点変異体ＡＲをアンタゴナイズするそれらの能力に関して試験した。このＦ８７６Ｌ変異体ＡＲまたは野生型ＰＲ（ｗｔＰＲ）を、非ＰＣ細胞系であるＣＯＳ細胞にトランスフェクトし、ルシフェラーゼアッセイにより定量した（図１）。化合物１６ｉ、２１ａ、２６ａ、および１０は、Ｆ８７６Ｌ変異体ＡＲを強固に阻害し、そのＩＣ_５０値は０．０４３、０．０６３、０．０８４、および０．２１９μＭであり（図１）、ｗｔＡＲ ＩＣ_５０値である０．０４５、０．０６２、０．０８４、および０．１９９μＭと同等である（表２～４）。等しい強度でＦ８７６ＬおよびｗｔＡＲを阻害する能力は、これらのＳＡＲＤがｐａｎ－拮抗作用をＥｎｚ－Ｒのモデルで示すことを、示す。さらに、このｐａｎ－拮抗作用は、１６ｉ、２１ａ、２６ａ、および１０に関する１．４９９、＞１０、０．６０７、および＞１０μＭのＡＲ ＬＢＤ Ｋ_ｉ値によって説明することができない。さらに、ｗｔＡＲ阻害効力において１０に対して増大した１６ｉ、２１ａ、および２６ａの効力は、Ｅｎｚ－Ｒのこのモデルにおいても認められた。

【0382】

これらの分子はｗｔＰＲ活性も阻害し、ＩＣ_５０値は、１６ｉ、２１ａ、２６ａ、および１０に関して３．５４０、０．２３５、１．１０１、および０．４０３μＭであり（図２）、それに対してｗｔＡＲ阻害は０．０４５、０．０６２、０．０８４、および０．１９９μＭであった（表２～５）。ｗｔＰＲ阻害は保存されたが、選択比（［ＰＲ ＩＣ_５０］／［ＡＲ ＩＣ_５０］）は変化し、その値は、試験用に選択された化合物に関して７９倍、３．８倍、１３．１倍、および２．０倍であり、ＡＲ選択性もさらなる試験で最適化できることを示唆している。重要なのは、これらの分子が、ＧＲ、ＭＲ、またはＥＲトランス活性化に対していかなる影響も及ぼさないことであった（データは図示せず）。
ＣＲＰＣ細胞におけるＡＲ標的遺伝子発現。

【0383】

ＡＲ標的遺伝子阻害実験を行って、ＬＮＣａＰ細胞におけるＲ１８８１誘発性ＡＲ標的遺伝子発現に対するリードピラゾール２６ａの作用を決定した（図３）。ＬＮＣａＰ細胞系は、１に対する抵抗性を与える、ＡＲのＴ８７７Ａ点変異を発現する、ＣＲＰＣの非常に十分に特徴付けられたモデルである。化合物２６ａは、１０に対して代謝を遮断する（ＭＬＭ中でＴ_１／２＞３６０分対７７．９６分（表６））３，４－二置換によって、高い効力の阻害（０．０８４μＭ）と高い有効性の分解（ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶの両方に関して７０～８０％）とのバランスを有し、そして２６ａはＲＬＭおよびＨＬＭ中で安定でもある（＞１２０分）ので、２６ａはリードピラゾールとして選択された。ｗｔＡＲ（０．０８４μＭ；表４）およびＦ８７６Ｌ ＡＲ（０．０８４μＭ；図１）のトランス活性化のｎＭ阻害に一致して、ＬＮＣａＰ細胞におけるＦＫＢＰ５遺伝子発現は、０．１μＭ程度に低い濃度で２６ａにより強固に阻害され、抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣの別のモデルでは効力を失うことなく抗アンドロゲン効果が内因性遺伝子発現の阻害を含むことを示した（図３）。予測されるように、抗アンドロゲン４は、ＦＫＢＰ５の発現も阻害したが、わずかに低い効力であった。同じ結果が、ＰＳＡおよびＴＭＰＲＳＳ２などの他のＡＲ標的遺伝子で観察された（データは図示せず）。累積的に、上述の上記データは、２６ａが少なくともｗｔＡＲ（表４）、Ｆ８７６Ｌ（図１）、Ｔ８７７Ａ（図３）、およびＡＲ ＳＶ（表４）でｐａｎ－アンタゴニスト効果を有することを裏付ける。
エンザルタミド抵抗性ＬＮＣａＰ細胞における増殖研究。

【0384】

増殖研究を２６ａで実行して、Ｔ８７７Ａ抗アンドロゲン抵抗性変異を有するＣＲＰＣのモデル（即ち、ＬＮＣａＰ細胞）におけるＡＲ依存性遺伝子発現の強力な阻害が、さらにより難治性のＣＲＰＣモデルにおいて、即ちＡＲのＦ８７６ＬおよびＴ８７７Ａ点変異を有するＭＲ４９Ｆ ＬＮＣａＰ細胞において、抗増殖に変換されることを確認した。上述のように、Ｆ８７６Ｌ変異は、エンザルタミド（４）抵抗性（Ｅｎｚ－Ｒ）をＭＲ４９Ｆ細胞に与え；しかしながらＭＲ４９Ｆ細胞は、成長に関してＡＲに依存したままである。ＭＲ４９Ｆ細胞を、図４に示されるように２６ａまたは４の滴定用量の存在下で試験した。化合物２６ａは、０．１μＭ程度に低い用量で、強力であるが部分的な有効性を示す（ビヒクルから約５０～６０％低減）、用量応答性抗増殖を実証した。ＭＲ４９ＦモデルのＥｎｚ－Ｒは、４の抗増殖が約１００分の１の強度であると実証された。例えば、１０μＭの４は、０．１μＭの２６ａと同等の効果を発揮し、これは約２０％の有効性で弱く、ビヒクルと著しく異ならなかった。２６ａは腫瘍に到達できると仮定すると、この強力な抗増殖は、２６ａがＥｎｚ－Ｒ ＣＲＰＣのｉｎ ｖｉｖｏモデルで十分機能し得ることを示唆する。
ＣＲＰＣのモデルにおけるＡＲ ＦＬ（Ｆ８７６Ｌ）およびＡＲ ＳＶ（ＡＲ－Ｖ７）分解

【0385】

ＭＲ４９Ｆ細胞におけるＦＬ ＡＲ分解研究は、１６ｉ（ＡＲ ＦＬおよびＡＲ ＳＶ分解アッセイ、ｗｔＡＲ阻害において０．０４５μＭ、９０％、１００％）および２６ａ（０．０８４μＭ、７０％、８０％）の強固なｉｎ ｖｉｔｒｏ ＡＲ拮抗作用プロファイルが、高難治性ＣＲＰＣのこのモデルでのＳＡＲＤ活性を予測することを確認するために行った。化合物２６ａは、ＬＮＣａＰ細胞におけるＡＲ依存性遺伝子発現を抑制する能力を有し、ＭＲ４９Ｆ細胞における増殖を上述のように抑制し、Ｅｎｚ－Ｒ ＣＲＰＣの状況においてＦＬ ＡＲを分解することもできた（図５の上部パネル）。ウェスタンブロットは、定量的方法ではなく、相対的バンド密度に基づいて化合物同士でＡＲレベルを比較することが難しくなる可能性がある。したがってＧＡＰＤＨもまた、各レーンにおいてタンパク質ローディング対照として含まれた。ＡＲのレベルは、そのレーンにおけるＧＡＤＰＨのレベルに対して正規化される。ウェスタンブロットは、濃度測定により定量され、ＡＲ／ＧＡＤＰＨ値は倍率変化として（図５のブロットの下）またはビヒクル処理された細胞からの変化パーセントとして（表２～５）表される。

【0386】

高い有効性のＳＡＲＤ活性は、３μＭで２６ａにより観察され、１０μＭで分解が完了し（図５、上部パネル）、ＭＲ４９Ｆ ＬＮＣａＰ細胞にＥｎｚ－Ｒを与えるこの変異体ＡＲ ＦＬは、２６ａによる破壊を受けることを示している。１６ｉもＳＡＲＤ活性を実証したが、完全な有効性ではなく、それに対して４は、ＭＲ４９Ｆ細胞においてＡＲ分解をもたらさなかった。下部パネルは、ＳＡＲＤ活性が、ＬＢＤでの点変異を持つＴ８７７Ａ（ＬＮＣａＰ；表２～５）およびＦ８７６Ｌ／Ｔ８７７Ａ（ＭＲ４９Ｆ ＬＮＣａＰ細胞；図５、上部パネル）ＡＲ ＦＬで存在するだけではなく、ＬＢＤの発現に欠けるＡＲ－Ｖ７などのＡＲ ＳＶを分解もできることも実証する（２２ＲＶ１細胞；図５の下部パネル）。表４および２に示されるように（ＡＲ ＳＶ分解欄参照）、２６ａおよび１６ｉは、１０μＭで２２ＲＶ１細胞でのＡＲ－Ｖ７レベルを低減させることができた。図５は、３および１０μＭでのＡＲ－Ｖ７ ＳＡＲＤ活性を確認し、しかし分解％は、この特定の実験におけるいずれのＳＡＲＤに関しても完全ではなかった。ＡＲ ＦＬよりも低い、ＡＲ ＳＶに関する分解％は、最初の報告および表２～５と一致しており、ＡＲ ＳＶ分解を完了することができるが、一般にＡＲ ＦＬ（１μＭでスクリーニング）の場合よりも高い処置濃度（１０μＭでスクリーニングした）において分解が完了することを明らかにした。ＡＲ ＳＶを発現するＰＣは、伝統的な（または正規の）抗アンドロゲンがＡＲに結合する結合部位を有さず、不十分な予後に関連付けられ、１～７を含む承認された治療に対して汎抵抗性であることが考えられる。^６６ したがって、これらのピラゾールＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニスト、例えば低用量で経口投与と同等のＰＫ特性を有する１０、２１ａ、および２６ａは、非常に広範なＡＲアンタゴニスト能力を、少なくとも：
１） ｗｔＡＲ（表２～５中のＩＣ_５０値）、
２） Ｔ８７７Ａ（表２～５におけるＬＮＣａＰ ＡＲ ＦＬ分解、および図３におけるＡＲ依存性遺伝子発現の阻害）
３） Ｆ８７６Ｌ（図１におけるＣＯＳ細胞での阻害）、
４） Ｆ８７６Ｌ／Ｔ８７７Ａ共変異体（図４におけるＭＲ４９Ｆ細胞での増殖）、
５） ＡＲ－Ｖ７（表２～５および図５における、２２ＲＶ１細胞でのＡＲ ＳＶの分解）、および
６） ＡＲ増幅／過剰発現（以下に報告するＶＣａＰデータを参照）
に提供する。

【0387】

様々な抵抗性を与えるＡＲ変異体全体にわたる広範なＡＲ拮抗作用は、これらのおよび／またはその他のＡＲ変異を含有するように進化している処置済みの腫瘍が、本明細書に記述されるＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストに対して感受性なままになることを確実にするのを助ける。さらに、これらのＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストは、ＶＣａＰ細胞に存在するような、ＡＲ過剰発現および／またはＡＲ遺伝子組換えのモデルにおいて十分機能しており、これらのＰＣはこの処置にも耐えることができないはずであることを示唆している。ＳＡＲＤ活性が必ずしもこれらの活性に必要ではないかもしれないという事実に鑑み、これらの化合物はＡＲ ｐａｎ－アンタゴニストとして作用する。化合物２６ａを、リードＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストの１つとしてｉｎ ｖｉｔｒｏで試験し、一連のｉｎ ｖｉｖｏ試験に供して、健康なラットおよびラットにおける抗アンドロゲン抵抗性ＰＣのモデルにおけるその薬物動態および薬力学的プロファイルについて記述した。
（実施例９）
ｉｎ ｖｉｖｏラット薬物動態

【0388】

ラットＰＫ研究を実行して、ピラゾール２６ａが、前の世代のＳＡＲＤと比較して改善されたＰＫ特性を有することを確認した。ピラゾールテンプレート内で最適化されたＰＫ特性は、進行性ＰＣのｉｎ ｖｉｖｏモデルにおけるそれら独自のＡＲ作用機序を持つ分子に関して最適化されたｉｎ ｖｉｖｏ ＰＤプロファイルを明らかにする最良の機会を提供する。

【0389】

雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットに、単回経口（ｐｏ）日用量を７日間連続してまたは１日目に単回静脈内（ｉｖ）用量を与え、血液を、投与から０．０８３、０．２５、０．５、１、３、６、１２、および２４時間後に周期的に試料採取した。５、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇ ｐｏ（群１～４）ならびに１０ｍｇ／ｋｇ ｉｖ（群５）の用量を、一連のパイロット実験で見られるｉｎ ｖｉｖｏ有効性に基づいて選択し、これはこのセクションで詳細に論じたＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒ研究と同様であった。濃度－時間曲線を、２６ａに関してこのデータからプロットし（図６）、ＰＫパラメーターを、このデータから２６ａに関して計算した（表８）。

【表8】

【0390】

１０のように、化合物２６ａは、毎日の経口投薬と矛盾することのない、マイクロモル濃度の血中レベルおよび終末相消失半減期（ｔ１／２）（表８）を特徴とするラットにおいて、強固なＰＫプロファイルを実証した。１０に勝る２６ａの利点は、その比較的長いｔ１／２であり、これは２．６時間に対して２４時間過剰である（１０に関してＰｏｎｎｕｓａｍｙ論文で報告された、７日目のラットＰＫデータに基づき計算された）（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。２６ａの正確なｔ１／２値は、ｔ１／２が２４時間投薬間隔よりも長いので、計算することができなかった（図６）。２６ａ用量を増加させた場合の群１～４に関する、０から２４時間までの濃度－時間曲線下の用量正規化面積（ＤＮ ＡＵＣ０－２４）の値の減少、および最大濃度の時間（Ｔ_ｍａｘ）値の増大によって明らかにされたように、２６ａは、より高い用量で、減少する経口バイオアベイラビリティを有していた（表８）。２６ａの５、１０、２０、および３０ｍｇ／ｋｇ用量に関する計算された経口バイオアベイラビリティは、１．１８、０．９８２、０．７０５、および０．５２４であった。１０に対して２６ａのより長いｔ１／２は、少なくとも部分的に、減少する経口バイオアベイラビリティを高用量でオフセットし、２６ａは、１０と比較してわずかに増加した絶対曝露を実現した。例えば、３０ｍｇ／ｋｇ ｐｏ ２６ａおよび１０に関するＡＵＣ_０－２４値は、それぞれ７１，５００および６２，０００時・ｎｇ／ｍＬであった。後者の値はやはり、Ｐｏｎｎｕｓａｍｙの論文で提示された７日間ラットＰＫデータから計算される（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。

【0391】

化合物２６ａは、ラットにおける経口的な毎日の投薬を介して、ｉｎ ｖｉｖｏで高い血中レベルを維持するのに十分に強固なＰＫプロファイルを示した。３０ｍｇ ｐｏ ２１ａに関する予備的ラットＰＫデータも示した（図９）。濃度対時間のプロットは、大部分の２１ａが２４時間までに排除されたことにより、低減したｉｎ ｖｉｖｏ安定性を実証し、このことは、２４時間での血中レベルがそのＣ_ｍａｘからほとんど低減しない３０ｍｇ ｐｏの２６ａとは明らかに対照的である（図６）。３０ｍｇ ｐｏでの化合物２１ａは、ラットにおけるそのＰＤ特性の観察を可能にするのに十分低いＣＬを実証した。活性の強力なｉｎ ｖｉｔｒｏパネルにも関わらず、１６ｉは、ｉｎ ｖｉｖｏで５ｍｇ／ｋｇで致死的であることを実証した。化合物２１ａおよび２６ａを、ラットＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイで研究し、２６ａは、異種移植研究のためのリードの１つとして選択された。

【0392】

２６ａに関して観察されたマイクロモル濃度のＣ_ｍａｘ血中レベルおよび長いｔ１／２は、実施例２～８のデータから得られるｉｎ ｖｉｖｏでの２６ａのいかなる高い有効性のＡＲ拮抗作用も明らかにすることに一致したラットのＰＫ特性を示唆した。これらの例は、２６ａが、抗アンドロゲン抵抗性ＣＲＰＣのモデルにおけるものも含めて、１０と比較して、高い効力により広域にわたる抗アンドロゲン活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで阻害することを実証した。２６ａによる、ラットにおける経口的な毎日の投薬は、ＡＲ依存性異種移植においてＡＲ軸を抑制するために必要と考えられるので、ＡＲ拮抗作用のＩＣ５０値よりも高い血中レベル（表４）、ならびにＡＲ依存性転写（図３）および増殖（図４）に対する阻害効果を維持できるべきである。さらに、２１ａ（図９）、２６ａ（図６および表８）、および１０２で見られる低マイクロモル濃度の薬物レベルは、２１ａ（８８０ｎＭ）、２６ａ（８６０ｎＭ）、および１０（７４０ｎＭ）に関してＤＣ_５０値が過剰であり（表２～４参照）、腫瘍内分解が観察される１０で既に見られるように、ＳＡＲＤ活性がｉｎ ｖｉｖｏ ＡＲ拮抗作用に寄与し得ることを示唆している。
（実施例１０）
ｉｎ ｖｉｖｏアンドロゲン受容体アンタゴニスト活性

【0393】

Ｈｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイ。強固なＰＫ特性を持つこれらのピラゾリルプロパンアミド化合物が、臨床的に意味のあるＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニスト活性をｉｎ ｖｉｖｏで有するか否かを見出すために、ラットにおける経口バイオアベイラビリティが実証された２１ａおよび２６ａに関してＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイをインタクトなラットで行った（図９および７）。Ｈｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイは、何十年にもわたり、アンドロゲンの同化選択性を実証するのに使用されてきた。ラットの腹側前立腺（ＶＰ）、精嚢（ＳＶ）、および肛門挙筋（ＬＡ）は、ＡＲ依存性組織であり、そのサイズ（それらの重量により反映される）は去勢に即座に応答する。

【0394】

去勢後、約８５％（ＶＰ）、９０％（ＳＶ）、および５０％（ＬＡ）である臓器重量に至る３～７日以内でのこれらの臓器萎縮は、それらのインタクトな臓器重量と比較して低減した。伝統的にアゴニストは、増加したアンドロゲン性組織（ＳＶまたはＶＰ）重量を元のインタクトなレベルに戻すことなく、インタクトなレベルまたはそれよりも高いレベルまで同化組織重量［ＬＡまたはその他の骨格筋および骨（後者は、萎縮および回復までに、何日ではなく何カ月かを要する）］を予防（それによってアゴニストは、去勢後に与えられる）または回復（アゴニストは、組織萎縮後に与えられる）させるために投薬される。本明細書で用いられるように、即ちアンタゴニストモードで、若いインタクトな動物が使用され、図７Ａおよび７Ｂのビヒクル欄に関する０％の変化により反映されるように、この内因性アンドロゲン環境がＡＲ媒介性担体をＶＰ、ＳＶ、およびＬＡ重量に提供した。

【0395】

外因性アンタゴニスト２１ａおよび２６ａは、強力なｉｎ ｖｉｔｒｏ阻害［０．０６２および０．０８４μＭ（表３および４）］を持つものであり、それらのｉｎ ｖｉｖｏでのＡＲ拮抗作用を観察するために投薬された。ｉｎ ｖｉｖｏ ＡＲ拮抗作用の改善された効力は、１０に対する（１）２１ａにおけるような３’－ピリジノＮの付加、または（２）２６ａにおける３－Ｆもしくは４－Ｂｒなどのピラゾール上の追加のハロゲンによる、１０の誘導体で見られた。２１ａおよび２６ａが２０ｍｇ／ｋｇで、即ち上述の１０の用量の３分の１でＶＰ重量は約３５および３０％低減し（図７Ａ）、２１ａおよび２６ａに固有のｉｎ ｖｉｖｏ ＰＤ特性が、１０に対してさらに低い用量で観察可能であることを実証している。この用量のＳＶでは、約４５～５０％の低減が、２１ａおよび２６ａにより提供された。実施例９と矛盾することなく、これらの結果は、経口投与された２６ａが吸収されかつＡＲ標的臓器の作用部位に分布したことを確認し、これらの化合物は異種移植モデルの腫瘍にも分布するはずでありかつ感受性あるモデルで抗腫瘍効果を発揮するはずであることを示唆している。

【0396】

ラットにおけるＥｎｚ－Ｒ（ＭＤＶＲ）ＶＣａＰ異種移植。ＶＣａＰ細胞系は、ホルモン抵抗性ＰＣの患者の椎骨転移から誘導される（https://atcc.org/Products/all/CRL-2876.aspx;２０２０年１月２０日にアクセス）。５５ ＶＣａＰは、ＣＲＰＣのモデルとして一般に使用され、ＡＲ ＳＶ（ＡＲ－Ｖ７）およびＡＲ ＦＬの過剰発現（ＴＭＰＲＳＳ２－ＥＲＧ遺伝子融合）の両方を表す。下記の実験で使用されるＭＤＶＲ ＶＣａＰの親細胞系であるＶＣａＰは、高度に進化したＰＣのモデルであり、ホルモン抵抗性の多数のメカニズムが、単一ＡＲ軸推進型細胞系におけるアンドロゲン除去に応答して出現した。親ＶＣａＰ細胞は、それにも関わらず、エンザルタミド（４）に対して感受性があり；しかしながらＭＤＶＲ ＶＣａＰ細胞は、親細胞系での抵抗メカニズムに加えて獲得されたＥｎｚ－Ｒを有する。既に、ＶＣａＰは、４に対して部分的に感受性があり、それに対してＭＤＶＲ ＶＣａＰは感受性がないことが観察された（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。

【0397】

ｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングパネルの１０よりも優れた２６ａによる実証の後、ＭＲ４９Ｆ（Ｅｎｚ－Ｒ ＬＮＣａＰ細胞系）でのｉｎ ｖｉｔｒｏ活性およびＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイでのｉｎ ｖｉｖｏ拮抗作用で、２６ａの活性をＥｎｚ－Ｒ ＭＤＶＲ ＶＣａＰ異種移植で示した。２６ａと１０との直接比較を可能にするため、ＭＤＶＲ ＶＣａＰ異種移植を、１０に関して公開されたように行った（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。１０では、このモデルでの有効性を示すのに、去勢が必ずしも必要ではなく（本発明者らの知る限り全ての以前のＡＲアンタゴニストとは異なって）；しかしながら１０は、マウスにおいて安定ではなく；したがってインタクトなＳＲＧラットを、ＭＤＶＲ ＶＣａＰ異種移植実験用の宿主として使用した。

【0398】

毎日、１０ｍｇ／ｋｇ ｐｏの２６ａでインタクトなＳＲＧラットを処置（ＨＥＲＡ Ｂｉｏｌａｂｓ，Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ ＫＹで行われた研究）することにより、最大８３％ＴＧＩの同等の有効性がもたらされ（図８Ａ）、それに対して１０は、類似の結果を実現するのに２０～３０ｍｇ／ｋｇを必要とし、一方、４は、いずれの効果も永続的に発揮することができなかった（図示せず；既に公開された）（図５）（Ponnusamy, et al. Clin. Cancer Res. 2019, 25, 6764-6780）。研究の終わりに測定された腫瘍重量は、著しい阻害も実証した（図８）。示された高い効力の抗腫瘍活性と矛盾することなく、２６ａは、ｗｔＡＲまたはＦ８７６ＬにおけるそのＩＣ５０値（共に８４ｎＭ）よりも１０倍高い８８１ｎＭの腫瘍内の平均濃度で、この研究で観察された。さらに腫瘍内レベルは、これら動物の血液中の２６ａの１３１９ｎＭの平均濃度からわずかに低減されただけであった（表９）。このことは、ＶＰおよびＳＶに加え、腫瘍内への２６ａの効率的な分布を裏付け、進行性ＰＣでのその使用を裏付ける。

【表9】

^ａ 最後の用量（２８日目）の２０から２４時間後、動物を犠牲にし、血液および腫瘍をさらなる分析のために収集した。血清を血液から分離し、血清および腫瘍内の薬物濃度を、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ法（ｎ＝４）を使用して測定した。

【0399】

表３および４で報告した２１ａ（８８０ｎＭ）および２６ａ（８６０ｎＭ）に関するＬＮＣａＰ細胞におけるｉｎ ｖｉｔｒｏ ＤＣ_５０値（分解効力の第５０百分位数の濃度）は、ＭＤＶＲ ＶＣａＰ異種移植で得られた腫瘍内レベルと同等であった。ｉｎ ｖｉｔｒｏ研究とｉｎ ｖｉｖｏ研究との間での異なる細胞型にも関わらず、データは、この実験の腫瘍における完全有効性ＳＡＲＤ活性に関して準最適な曝露の可能性を示唆する。この推定される半有効性腫瘍内ＳＡＲＤ活性が、ＴＧＩに寄与し得る。上昇した腫瘍内レベルで、即ち増大した用量の２６ａで、または改善された分解効力類似体で、抗腫瘍活性を改善することが可能となり得る。

【0400】

結果は、２６ａがラットで安定でありかつＥｎｚ－Ｒ ＣＲＰＣのこのＡＲ過剰発現およびＡＲ－Ｖ７発現モデルで非常に強力で高い有効性があったことを明らかに示す。結果はさらに、２６ａの改善されたＰＫおよびＰＤが、１０と比較してさらに強力なｉｎ ｖｉｖｏ有効性に変換されること、まだ観察されていないものに関して毒性が用量を制限する場合、用量節約ＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストが提供されることを示唆する。さらに、改善されたＰＫは、がん患者全体にわたり改善された浸透に変換される可能性があり、離れた転移性成長のより良好な抑制が可能になる。上記全ては、広域にわたるＣＲＰＣ抵抗性メカニズムを発現するヒト集団で試みた場合（表７のＨＬＭ研究）、疾病負荷の臨床上有意な低減を観察する機会を増大させる。この集団は、ＡＲ ＳＶを発現する場合であっても（ＡＲ－Ｖ７のように）、ＡＲを過剰発現するＡＲ遺伝子増幅（ＴＭＰＲＳＳ２－ＥＲＧのように）またはＬＢＤ指向型抗アンドロゲン抵抗性（ＭＲ４９ＦまたはＭＤＶ ＶＣａＰ細胞で観察されるＥｎｚ－Ｒおよび／またはダロルタミド抵抗性のように）、またはＭＤＶＲ ＶＣａＰにおけるようなこれらの組合せに依然として感受性があると考えられる。

【0401】

これらの結果は、２６ａに関し、ｉｎ ｖｉｔｒｏスクリーニングパラダイムが、ＣＲＰＣのｉｎ ｖｉｖｏモデルにおける非常に有効性のある改善されたリード化合物を、ＳＡＲＤおよびｐａｎ－アンタゴニストから特定するのに成功したことを確認する。１０に関して公開されたような完全有効性ｉｎ ｖｉｔｒｏ ＳＡＲＤ活性は独自のものでありかつＡＲ依存性疾患で有益であるべきだが、診療所での有効性に関しては必ずしも必要ではない。このことは、１０とは異なって（１００％／１００％；表２）ｉｎ ｖｉｔｒｏで完全有効性ＳＡＲＤではない（７０％／８０％；表４）、２６ａに関するｉｎ ｖｉｖｏでのより強力で同等の有効性の抗腫瘍活性によって裏付けられる。２６ａの高い有効性の正確で疑う余地のない機械的な説明は可能ではないが、その強力なｉｎ ｖｉｖｏ有効性も疑う余地がない。ピラゾールテンプレートは、今日まで提示されてきた最適なＢ環テンプレートを表し、２６ａは、このテンプレートから最適化されたリードの１つである。１０または２６ａは、診療所で存在するＣＰＲＣの多数のメカニズムを克服するために、かなりの潜在性を保持することが考えられる。

【0402】

シリーズＩからの化合物１６ｃ、１６ｇ、１６ｉ、および１６ｊ；シリーズＩＩからの２１ａおよび２１ｃ；ならびにシリーズＩＩＩからの２６ａ、２６ｃ、２６ｅ、および２６ｆは、ｉｎ ｖｉｔｒｏで強力な阻害活性を示し、一方、シリーズＩからの化合物１６ｂ、１６ｃ、１６ｇ、および１６ｉ；シリーズＩＩからの２１ａ；ならびにシリーズＩＩＩからの２６ａおよび２６ｇは、強力なＳＡＲＤ活性をｉｎ ｖｉｔｒｏで有した（表２～４）。第三級アミン８に関する１．１５分およびリードインドール９に関する１２．１１分などの、以前のＳＡＲＤテンプレート（Ponnusamy, et al. Cancer Res. 2017, 77, 6282-6298）と比較すると、これらのピラゾリルプロパンアミド化合物、例えば１６ｇ、１６ｉ、２１ａ、および２６ａは、ＭＬＭにおけるｉｎ ｖｉｔｒｏでのそれらの安定性を著しく改善し（表６）、２１ａおよび２６ａは、ＲＬＭおよびＨＬＭで安定であった（表７）。化合物１６ｉ、２１ａ、および２６ａは、Ｆ８７６Ｌ変異体ＡＲを強固に阻害して、そのＩＣ５０値が０．０４３、０．０６３、および０．０８４μＭであり（図１）、それと共にｗｔＰＲ活性を阻害し、そのＩＣ５０値が３．５４０、０．２３５、および１．１０１μＭであった（図２）。化合物２６ａは、０．１μＭ程度の低い濃度で、ＬＮＣａＰ細胞におけるＦＫＢＰ５の発現を効果的に阻害し、抗アンドロゲン効果には内因性遺伝子発現の阻害（図３）が含まれることを示しており、それと共に０．１μＭ程度に低い用量での用量応答性抗増殖を実証した（図４）。化合物２６ａは、１０および２１ａと比較して優れたｉｎ ｖｉｖｏラットＰＫおよびＰＤ特性ももたらし、その比較的長いｔ１／２は２４時間を十分に超えており（図６）、ラットＨｅｒｓｈｂｅｒｇｅｒアッセイにおけるＡＲ拮抗作用は、２１ａと同等のそのインタクトな臓器重量と比較して約３０％（ＶＰ）および５０％（ＳＶ）低減した（図７）。

【0403】

インタクトなラットモデルにおける２６ａの毎日の１０ｍｇ／ｋｇ ｐｏによるＥｎｚ－Ｒ（ＭＤＶＲ）ＶＣａＰ異種移植実験は、腫瘍内の高い薬物レベル（８８１ｎＭ）を実証し、８３％ＴＧＩの有効性をもたらし（図８Ａ）、これは２０～３０ｍｇ／ｋｇ ｐｏの１０と同等であった。結果は明らかに、２６ａが、Ｅｎｚ－Ｒ ＣＲＰＣのこのＡＲ過剰発現およびＡＲ－Ｖ７発現モデルで非常に強力で高度に有効性があり、Ｅｎｚ－Ｒ前立腺がんに関する次世代ＡＲアンダゴニストに向けた全ての基準をまとめて満たすことを示す。

【0404】

本明細書に記述されるピラゾリルプロパンアミド化合物は、選択的アンドロゲン受容体（ＡＲ）分解剤（ＳＡＲＤ）であり、かつ広範なＡＲ拮抗作用をもたらすｐａｎ－アンタゴニストである。薬理学的評価は、これらの小分子が独自のＳＡＲＤ活性およびｐａｎ－アンタゴニスト活性を示すことを実証した。これらの化合物は、強力なｉｎ ｖｉｖｏ活性を含みかつ分布、代謝、および薬物動態（ＤＭＰＫ）特性を約束する、強力で広域にわたるＡＲアンタゴニスト活性を示した。

【0405】

本発明のある種の特徴が本明細書に例示および記載されているが、多数の改変、置き換え、変更および均等物を、当業者は思いつくであろう。したがって、添付の特許請求の範囲は、本発明の真の趣旨に収まるすべてのこのような改変および変更に及ぶことが意図されていることを理解されたい。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【図15】

【国際調査報告】