特表 2023-522062 代謝異常を治療するためのベンズイミダゾール化合物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-05-26

(54)【発明の名称】代謝異常を治療するためのベンズイミダゾール化合物

(51)【国際特許分類】

   C07D 235/26 20060101AFI20230519BHJP

   A61K 31/4184 20060101ALI20230519BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230519BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20230519BHJP

   A61P 3/04 20060101ALI20230519BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230519BHJP

【ＦＩ】

C07D235/26 A CSP

A61K31/4184

A61P1/16

A61P3/10

A61P3/04

A61P43/00 111

A61P43/00 123

【審査請求】未請求

【予備審査請求】有

(21)【出願番号】P 2022562996

(86)(22)【出願日】2021-04-15

(85)【翻訳文提出日】2022-12-14

(86)【国際出願番号】 BR2021050158

(87)【国際公開番号】W WO2021207816

(87)【国際公開日】2021-10-21

(31)【優先権主張番号】63/010,128

(32)【優先日】2020-04-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522404133

【氏名又は名称】アッシェ ラボラトーリオス ファルマセウチコズ エスィ． ア．

(74)【代理人】

【識別番号】110001139

【氏名又は名称】ＳＫ弁理士法人

(74)【代理人】

【識別番号】100130328

【弁理士】

【氏名又は名称】奥野 彰彦

(74)【代理人】

【識別番号】100130672

【弁理士】

【氏名又は名称】伊藤 寛之

(72)【発明者】

【氏名】ジ アゼヴィエッド， アチィラス フェリィピ ザネェチ

(72)【発明者】

【氏名】フェヘイラ ジュニオル， マルコズ ゥントニオ

(72)【発明者】

【氏名】セグレエッチ， ナタナエル ドゥィンチ

(72)【発明者】

【氏名】マスカレェッロ， アレッスンドゥラ

(72)【発明者】

【氏名】ギマルィンス， クリスチュアノ フーキ ヴェルネッキ

【テーマコード（参考）】

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BC39

4C086GA14

4C086MA02

4C086MA05

4C086NA14

4C086NA15

4C086ZA70

4C086ZA75

4C086ZC35

4C086ZC41

(57)【要約】

本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、プロドラッグ、代謝物若しくは溶媒和物に関する。
【化１】

【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物。

【化1】

【請求項2】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物。

【化2】

【請求項3】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための医薬組成物であって、
式Ｉのベンズイミダゾール化合物又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物と、薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。

【化3】

【請求項4】

０．０１－５０００ｍｇの式Ｉのベンズイミダゾール化合物を含む、請求項３に記載の医薬組成物。

【請求項5】

塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩を含む無機付加塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、グリコール酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、アシスト酸塩、ベシル酸塩、トシル酸塩、キシナホ酸塩、安息香酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、桂皮酸塩、ｐ－クロロベンゼンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンフルスルホン酸塩、酢酸トリメチル、酢酸ｔ－ブチル、硫酸ラウリル、グルコン酸塩、グルタル酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、ムコン酸塩、マンデル酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸を含む有機付加塩；ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、ビスマスを含む金属のアルカリ付加塩；ブロマイド；第一級、第二級又は第三級アミンの有機塩基との薬学的に許容される塩；アルギニン、リジン、ヒスチジンを含むアミノ酸との塩；カフェイン、プロカイン、ヒドロバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリンとの塩から選択される、請求項１に記載の式Ｉのベンズイミダゾール化合物の薬学的に許容される塩。

【請求項6】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療方法であって、
式Ｉのベンズイミダゾール化合物、

【化4】

又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物を用いる、方法。

【請求項7】

０．０１－５０００ｍｇの式Ｉのベンズイミダゾール化合物を必要な患者に投与する、請求項６に記載の方法。

【請求項8】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための医薬組成物の製造における式Ｉのベンズイミダゾール化合物、その薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物の使用。

【化5】

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するためのベンズイミダゾール化合物に関する。

【背景技術】

【0002】

肥満、糖尿病及び非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）は、世界中で主要な公衆衛生上の問題となっており、これらの流行の規模は毎年拡大し続けている。肥満は、糖尿病やＮＡＦＬＤなどのいくつかの併存疾患の発症の主要な危険因子を表す慢性疾患である（Wang C and Liao JK (2013). A Mouse Model of Diet-Induced Obesity and Insulin Resistance. Methods Mol Biol. 821: 421-433）。世界保健機関（ＷＨＯ）の推定によると、２０１６年には世界中で１９億人以上の太りすぎの成人がおり、そのうち６億５０００万人が肥満であった。世界でＮＡＦＬＤの有病率は、世界人口の２５％と推定されている。しかし、糖尿病患者では、さらに高い有病率（４２％－７０％）が観察された。さらに、成人の１１人に１人が糖尿病を患うと予測されている。

【0003】

ＮＡＦＬＤは、その重症度に応じて、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）と非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）に分類できる複雑な疾患である。ＮＡＦＬは、重大な肝細胞損傷を伴わない脂肪肝で構成される一方、ＮＡＳＨは、線維症を伴う及び伴わない脂肪症、肝細胞損傷及び炎症の組み合わせによって特徴付けられる。ＮＡＦＬＤは、肝硬変、肝細胞癌、及び肝移植が唯一の治療選択肢である他の合併症にさらに進行する可能性がある。現在、ＮＡＦＬＤの治療薬として承認された薬は市場にない。この分野で満たされていない高いレベルの臨床的ニーズがあることを考えると、肥満、糖尿病、ＮＡＦＬＤ及びＮＡＳＨを治療するための新しい治療法の開発には大きな関心が寄せられている。

【0004】

メラトニン（Ｎ－アセチル－５－メトキシトリプタミン）は、グルコース及びインスリンレベルの概日調節に影響を与える天然ホルモンであり、代謝を毎日の摂食及び絶食サイクルと同期させる（Cipolla-Neto J et al. (2014). Melatonin, energy metabolism, and obesity: a review. J Pineal Res. 56(4):371-81）。メラトニン受容体の遺伝子変異とメラトニンシグナル伝達の変化は、空腹時血糖値の上昇、インスリン分泌の障害及び２型糖尿病のリスクの上昇に関連している（Bouatia-Naji N et al. (2009). A variant near MTNR1B is associated with increased fasting plasma glucose levels and type 2 diabetes risk. Nat Genet. 41(1):89-94; Tuomi T et al. (2016). Increased Melatonin Signaling Is a Risk Factor for Type 2 Diabetes. Cell Metab. 23(6):1067-1077）。ＭＴ１（ＭＴ１－／－）及びＭＴ２（ＭＴ２－／－）を遺伝的に除去したマウスでの研究では、グルコース及びインスリン代謝に対するこれらの受容体の様々な効果が示されている。ＭＴ１－／－ マウスは、より高い累積体重増加、高血糖、及び顕著なインスリン抵抗性を伴う、堅牢な代謝表現型を示す。これに対し、ＭＴ２－／－マウスでは、肝臓のインスリン感受性が低下したが、インスリン放出は増加した（Owino S et al. (2018). Nocturnal activation of melatonin receptor type 1 signaling modulates diurnal insulin sensitivity via regulation of PI3K activity. J Pineal Res. 64(3); Tuomi T et al. (2016). Increased Melatonin Signaling Is a Risk Factor for Type 2 Diabetes. Cell Metab. 23(6):1067-1077）。さらに、ＭＴ１とＭＴ２の調節は、メラトニン刺激時に重要な違いがある。ＭＴ２の活性化はｃＡＭＰ応答を鈍感にする一方、ＭＴ１の活性化はその後の休薬期間にｃＡＭＰの過剰感作を引き起す（Witt-Enderby PA et al. (1998). Physiological exposure to melatonin supersensitizes the cyclic adenosine 3',5'-monophosphate-dependent signal transduction cascade in Chinese hamster ovary cells expressing the human mt1 melatonin receptor. Endocrinology.139(7):3064-71; Karamitri A et al. (2019). Melatonin in type 2 diabetes mellitus and obesity. Nat Rev Endocrinol. 15(2):105-125）。これらの発見は、ＭＴ１／ＭＴ２受容体を調節する薬が肥満、糖尿病、肝臓代謝疾患の治療にプラスの影響を与える可能性があることを示唆しているが、末梢組織の特定のメラトニン受容体（ＭＴ１及びＭＴ２）を標的とする薬物はまだ開発されていない。

【発明の概要】

【0005】

本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、プロドラッグ、代謝物若しくは溶媒和物に関する。

【化1】

【0006】

本発明のベンズイミダゾール誘導体化合物の意味には、化合物の活性を有意に与える限り、それらの薬学的に許容される塩、結晶、水和物及び溶媒和物も含まれる。本発明のベンズイミダゾール誘導体化合物の意味には、そのプロドラッグ及び代謝物並びに少し修飾された遊離塩基分子（例えば、置換基の包含）も含まれる。この修飾された遊離塩基分子は、当業者に知られているように、同等の化合物をもたらし、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療に向けて分子のファーマコフォアを大幅に変更しない。

【0007】

本発明の別の態様は、式Ｉの化合物の薬学的に許容される酸付加塩、例えば、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機付加塩；式Ｉの化合物の薬学的に許容される有機付加塩、例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、グリコール酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、アシスト酸塩、ベシル酸塩、トシル酸塩、キシナホ酸塩、安息香酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、桂皮酸塩、ｐ－クロロベンゼンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンフルスルホン酸塩、酢酸トリメチル、酢酸ｔ－ブチル、硫酸ラウリル、グルコン酸塩、グルタル酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、ムコン酸塩、マンデル酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸；ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、ビスマスを含む金属のアルカリ付加塩；ブロマイド；第一級、第二級又は第三級アミンの有機塩基との薬学的に許容される塩；アルギニン、リジン、ヒスチジンを含むアミノ酸との塩；カフェイン、プロカイン、ヒドロバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリンとの塩である。

【0008】

本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉの化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物にも関する。

【0009】

使用する賦形剤の選択及び医薬組成物の調製は、一般に、投与経路のタイプ、賦形剤と有効成分の物理的及び化学的適合性、医薬品形態（剤形）の作成方法とその有効性への影響を考慮して行われる。これらの賦形剤は当技術分野で知られており、文献に記載されており（例えば、Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations-Vol. 1 a 6-2004-Sarfaraz K. Niazi-CRC Press and Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing）、この分野の技術専門家によって広く使用されている。

【0010】

治療用途及び投与のために、本発明のベンズイミダゾール化合物は、従来技術及び適切な賦形剤を使用して、経口、非経口、経鼻、直腸、経粘膜及び経皮投与に適した組成物に製剤化することができる。

【0011】

本発明のベンズイミダゾール化合物を含む剤形に関して特定の制限はない。例えば、経口投与用の固体として、適切な剤形は、錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、顆粒、粉末、ペレット、凍結乾燥製剤及び類似の形態であり得る。経口投与用の液体として、適切な剤形は、溶液、分散液、懸濁液、乳液、油、シロップなどであり得る。液体剤形は、静脈内、筋肉内、皮下、皮内などの注射に使用できる。

【0012】

剤形の他の例には、リポソーム及びナノ粒子、及び当業者に知られている他の任意の投与態様が含まれる。剤形は、本発明のベンズイミダゾール化合物の即時放出、制御放出及び遅延放出を提供することができる。

【0013】

他の実施形態において、本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための医薬組成物の製造における式Ｉの化合物の使用に関する。

【0014】

本発明の別の態様は、例えば、本発明のベンズイミダゾール化合物を０．０１－５０００ｍｇ含み、治療中に１日１回以上投与することができる上記の剤形である。

【0015】

特定の実施例において、ベンズイミダゾール化合物以外に、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療に使用される少なくとも別の有効成分を含んでもよい。この別の有効成分は、例えば、メトホルミン、インスリン及びその誘導体、スルホニル尿素、ＳＧＬＴ－２阻害剤、ＤＰＰ４阻害剤、ＧＬＰ－１アゴニスト、メグリチニド、チアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤、ＦＸＲアゴニスト、ＰＰＡＲアゴニスト、ＡＳＫ１阻害剤、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５アンタゴニスト、カスパーゼ阻害剤、インスリン増感剤、コール酸－アラキジン酸複合体から選択される。

【0016】

別の態様において、本発明は、式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物を用いて肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療する方法に関する。

【化2】

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】図１Ａ～Ｄは、ＨＦＤで維持された雄ＳＤラットの体重（ＢＷ）及び摂餌量（ＦＩ）に対する式Ｉの化合物の影響を示す。式Ｉのベンズイミダゾール化合物、式ＩＩの比較化合物、及びダパグリフロジンを、ＨＦＤを与えられた動物に投与した。通常の飼料（normal chow）及びＨＦＤを与えられた動物にビヒクルを投与した。データは、ｎ＝９－１０動物（ＢＷ及びＢＷ増加）及びｎ＝５ケージ（ＦＩ及び１日平均ＦＩ）の群あたりの調整済み平均値－ＳＥＭとして示される。データは、共変量として１日目のＢＷ（Ａ及びＣ）及びベースライン期間中の平均ＦＩ（Ｂ及びＤ）を使用してＡＮＣＯＶＡによって分析され、飼料（chow）ビヒクル群は除外された。治療群は、別個のウィリアムズ検定（化合物Ｉ及びＩＩ）及び多重ｔ検定（ダパグリフロジン）によってＨＦＤビヒクルと比較され、ｐ＜０．０５の場合、統計的に有意であると見なされた。それぞれダパグリフロジン、１０ｍｇ／ｋｇの化合物ＩＩ、３０ｍｇ／ｋｇの化合物ＩＩ、１０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉ及び３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉで治療されたＨＦＤ群に対して、統計的有意性は、「ａ」、「ｂ」、「ｃ」、「ｄ」及び「ｅ」として示される。＃（ｐ＝０．０５１）及び＆（ｐ＝０．０９８）は、ＨＦＤビヒクルとの比較における有意性への傾向を意味する。

【0018】

【図2】図２Ａ～Ｃは、ＨＦＤで維持された雄ＳＤラットの血漿グルコース（Ａ）、インスリン（Ｂ）及びＨＯＭＡ－ＩＲ（Ｃ）に対する式Ｉの化合物の影響を示す。化合物Ｉ、化合物ＩＩ、ダパグリフロジンを、ＨＦＤを与えた動物に投与した。通常の飼料及びＨＦＤを与えられた動物にビヒクルを投与した。５１日目にパラメータを評価した。データは、調整済み平均値±ＳＥＭ（ｎ＝９－１０）として表示される。統計分析は、治療を因子とし、１日目の出血順序及びＢＷ（飼料ビヒクル群との比較を除く）を共変量として、一般線形モデル（グルコース及びＨＯＭＡ－ＩＲ）及び対数変換されたデータ（インスリン）のロバスト回帰（インスリン）により行われた。治療群は、別個のウィリアムズ検定（化合物ＩＩ及び化合物Ｉ）及び多重ｔ検定（ダパグリフロジン）によってＨＦＤビヒクルと比較され、統計的有意差は＊＊ｐ＜０．０１及び＊＊＊ｐ＜０．００１で示される。飼料ビヒクルとの比較は、多重ｔ検定（ＨＦＤビヒクル及びダパグリフロジン群）及びダネット検定（化合物Ｉ及び化合物ＩＩ）によって実行され、統計的に有意な差は、†（ｐ＜０．０５）及び††（ｐ＜０．０１）で示される。

【0019】

【図3】図３Ａ～Ｈは、ＨＦＤで維持された雄ＳＤラットの肝臓トリグリセリド（Ａ～Ｂ）、グリコーゲン（Ｃ～Ｄ）及び組織病理学（Ｅ～Ｈ）に対する式Ｉの化合物の影響を示す。パラメータは、ＨＦＤを受けている動物に１０及び３０ｍｇ／ｋｇの化合物Ｉ、５ｍｇ／ｋｇのダパグリフロジン、及びビヒクルを用いた長期経口治療後に評価された。ビヒクルは、通常の飼料を与えられた動物にも投与された。肝臓トリグリセリドは、Cobas C111臨床分析装置TRIGL 04657594 190を用いて定量化された。市販のキット（Thermo BioVision, Glycogen Assay Kit, K646-100）を用いて肝臓サンプルのグリコーゲン定量を実施した。データは、平均±ＳＥＭ（Ａ～Ｄ）及び平均±ＳＥＭ（Ｅ～Ｈ）、ｎ＝９－１０を含む生データとして示される。肝臓トリグリセリド（Ａ－Ｂ）及びグリコーゲン（Ｃ－Ｄ）の統計分析は、治療とコーホートを因子とし、１日目の終了順序及びＢＷを共変量として、対数変換データ（トリグリセリドのみ）の一般線形モデルによって実行された。治療群は、別個のウィリアムズ検定（化合物Ｉ）及び多重t検定（ダパグリフロジン）によってＨＦＤビヒクルと比較され、統計的有意差は＊（ｐ＜０．０５）、＊＊（ｐ＜０．０１）及び＊＊＊（ｐ＜０．００１）で示される。飼料ビヒクルとの比較は、多重ｔ検定（ＨＦＤビヒクル及びダパグリフロジン群）及びダネット検定（化合物Ｉ）によって実行され、統計的有意差は、†（ｐ＜０．０５）、††（ｐ＜０．０１）及び†††（ｐ＜０．００１）で示される。肝臓組織病理学データ（Ｅ－Ｈ）の分析は、正確なウィルコクソン順位和検定によって行われた。統計的有意差は、ＨＦＤビヒクルする場合＊（ｐ＜０．０５）で示され、飼料ビヒクルと比較する場合†（ｐ＜０．０５）、††（ｐ＜０．０１）及び†††（ｐ＜０．００１）で示される。

【発明を実施するための形態】

【0020】

研究調査により、式Ｉで表される特定のベンズイミダゾール（Ｎ－［２－（５－クロロ－２，６－ジメトキシ－ベンゾイミダゾール－１－イル）－エチル］－アセトアミドとも呼ばれる）誘導体、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、プロドラッグ、代謝物若しくは溶媒和物が発見された。

【化3】

【0021】

1 H NMR (400 MHz CDCl 3) δ 1.91 (s, 3H), 3.52 - 3.57(m, 2H), 3.91 (s, 3H), 4.10 - 4.14( m, 5H), 5.62 (br s, 1H), 6.80 (s, 1H), 7.52 (s, 1H). 13 C NMR (125 MHz, CDCl3) δ ppm 23.16; 39.00; 41.16; 56.94; 57.21; 93.02; 116.73; 119.08; 133.20; 133.68; 150.85; 157.61; 170.81. MS (ESI) m/z calculated C 13H 16ClN 3O 3: 297.0880; found [M+H] + 298.0977.

【0022】

この化合物は、ｉ）ＭＴ２受容体よりもＭＴ１でより高い効力を持つメラトニン作動性アゴニストとして作用し（表１）、ｉｉ）中央曝露よりも高い末梢曝露、すなわち低い脳対血漿比を示す（表２）ことで末梢組織に優先的に作用するように発明された。本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体は、強力で末梢に好ましいメラトニン受容体アゴニストであり、ＭＴ１受容体に対する中程度の選択性を持ち、体重増加とインスリン抵抗性、肝臓トリグリセリドレベル、及び組織学的に決定された脂肪症を調節する。したがって、本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体は、肥満、糖尿病及びＮＡＦＬＤ／ＮＡＳＨの治療に顕著な価値を付加する。

【0023】

したがって、本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、プロドラッグ、代謝物若しくは溶媒和物に関する。

【化4】

【0024】

本発明のベンズイミダゾール誘導体化合物の意味には、化合物の活性を有意に与える限り、それらの薬学的に許容される塩、結晶、水和物及び溶媒和物も含まれる。本発明のベンズイミダゾール誘導体化合物の意味には、そのプロドラッグ及び代謝物並びに少し修飾された遊離塩基分子（例えば、置換基の包含）も含まれる。この修飾された遊離塩基分子は、当業者に知られているように、同等の化合物をもたらし、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療に向けて分子のファーマコフォアを大幅に変更しない。

【0025】

他の選択肢を排除することなく、本発明のベンズイミダゾール化合物の適切な塩は、その薬学的に許容される酸付加塩、例えば、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機付加塩；薬学的に許容される有機付加塩、例えば、酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、グリコール酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、アシスト酸塩、ベシル酸塩、トシル酸塩、キシナホ酸塩、安息香酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、桂皮酸塩、ｐ－クロロベンゼンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンフルスルホン酸塩、酢酸トリメチル、酢酸ｔ－ブチル、硫酸ラウリル、グルコン酸塩、グルタル酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、ムコン酸塩、マンデル酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸；ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、ビスマスを含む金属のアルカリ付加塩；ブロマイド；第一級、第二級又は第三級アミンの有機塩基との薬学的に許容される塩；アルギニン、リジン、ヒスチジンを含むアミノ酸との塩；カフェイン、プロカイン、ヒドロバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリンとの塩である。

【0026】

本発明は、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉの化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物にも関する。

【0027】

使用する賦形剤の選択及び医薬組成物の調製は、一般に、投与経路のタイプ、賦形剤と有効成分の物理的及び化学的適合性、医薬品形態（剤形）の作成方法とその有効性への影響を考慮して行われる。これらの賦形剤は当技術分野で知られており、文献に記載されており（例えば、Handbook of Pharmaceutical Manufacturing Formulations-Vol. 1 a 6-2004-Sarfaraz K. Niazi-CRC Press and Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing）、この分野の技術専門家によって広く使用されている。

【0028】

医薬品賦形剤は通常、医薬品組成物及び／及び製造技術で果たす機能に基づいて分類及び下位分類される。それらは、希釈剤、結合剤、分解剤及び凝集防止剤、潤滑剤、懸濁剤、増粘剤、溶剤、界面活性剤、スリップ剤、抗凝集剤及び流動剤、コーティング剤、可塑剤、甘味料、等張化剤、着色料、保存剤、酸化防止剤、ｐＨ制御及び調整剤、フレーバーをマスキングし、溶解性を改善し、製剤の安定性を促進し、バイオアベイラビリティを調節するために使用される錯化剤、並びにキレート剤、芳香剤及び香料添加剤と呼ばれ得る。

【0029】

希釈剤は、錠剤、カプセル、丸薬、ペレット、粉末、及び顆粒などの固形剤形に含まれる医薬品賦形剤であり、製剤の体積及び重量を増加させるためのものである。それらはまた、同じ目的のために液体及び半固体の薬学的形態で使用されてもよい。本発明の医薬組成物の調製に適した希釈剤の例には、炭酸カルシウム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、微結晶セルロース、粉末セルロース、デキストリン、ブドウ糖、果糖、カオリン、無水及び／及び一水和乳糖、麦芽糖、ソルビトール、各種の澱粉（トウモロコシ、小麦、ジャガイモ、タピオカ）、アルファ化デンプン、サッカロース、砂糖が含まれるが、これらに限定されない。

【0030】

結合剤は、造粒液として水を使用するか、ヒドロアルコール混合物及び他の溶媒を使用する混合（及び造粒）段階で粉末を顆粒に容易に凝集させるために製剤に含まれる医薬品賦形剤である。結合剤はまた、液体を必要としない乾式混合プロセスで使用することもできる。本発明の医薬組成物の調製に適した結合剤の例には、アカシアガム、アルギン酸、メタクリル酸アンモニウムコポリマー、カルボマーコポリマー及びホモポリマー及びインターポリマー、デンプン（トウモロコシ、小麦、ジャガイモ、タピオカ）、微結晶セルロース、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、デキストリン、マルトデキストリン、マルトース、サッカロース、ゼラチン、ブドウ糖、グアーガム、ポビドンが含まれるが、これらに限定されない。

【0031】

分解剤及び凝集防止剤は、生体液と接触したときに製剤の分解及び溶解を加速できる医薬品賦形剤である。本発明の医薬組成物の調製に適した分解剤及び抗凝集剤の例には、アルギン酸、デンプン、アルギン酸ナトリウム、クロスカラメロースナトリウム、グリコール酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロースナトリウム、微結晶セルロース、クロスポビドンが含まれるが、これらに限定されない。

【0032】

潤滑剤は、製剤中の粒子間の摩擦を減らし、粒子とそれらを調製するために使用される装置の壁との間の摩擦も減らす賦形剤である。本発明の医薬組成物の調製に適した潤滑剤の例には、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸亜鉛、ミネラルオイル、ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、フマル酸ステアリルナトリウム、デンプン、ステアリン酸、タルク、Ｉ型硬化植物油が含まれるが、これらに限定されない。

【0033】

懸濁剤及び増粘剤は、粒子の沈降速度を低下させたり、液体製剤の流動性を低下させたりするために、分散系（懸濁液やエマルジョンなど）の安定性を確保するために製剤に使用される賦形剤である。本発明の医薬組成物の調製に適した懸濁剤及び増粘剤の例には、アカシアガム、寒天、アルギン酸、モノステアリン酸アルミニウム、ベントナイト、カルボマー、コポリマーカルボマー、ホモポリマーカルボマー、インターポリマーカルボマー、カルボキシメチルセルロースのカルシウム及びナトリウム、カラギーナン、微結晶セルロース、デキストリン、グアーガム、ジェランガム、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシプロピルセルロース、メチルセルロース、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、ペクチン、ポリエチレンオキサイド、ポリビニルアルコール、ポビドン、アルギン酸プロピレングリコール、アルギン酸ナトリウム、二酸化ケイ素、コロイド状二酸化ケイ素、デンプン（トウモロコシ、小麦、ジャガイモ、タピオカ）、トラガントガム、キサンタンガムが含まれるが、これらに限定されない。

【0034】

溶媒は、液体、半固体、及び固体組成物を調製する際に、他の物質を溶解するために使用される賦形剤であり、後者に使用される場合では、より容易な混合を確保し、及び／及び医薬品有効成分若しくは他の賦形剤の均一な濃度の混合を提供するために使用される。本発明の医薬組成物の調製に適した溶媒の例には、水、エタノール、イソプロパノール、植物油（トウモロコシ、綿、ごま、大豆）、ミネラルオイル、グリセリン、ソルビトール、オレイン酸が含まれるが、これらに限定されない。

【0035】

界面活性剤は表面張力調節剤としても知られており、様々な機能を備えた賦形剤であり、乳化剤、保湿剤、及び／及び可溶化剤として使用されている。本発明の医薬組成物の調製に適した界面活性剤の例には、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、ノノキシノール９、オクトキシノール９、ステアリン酸ポリオキシル５０、ポリオキシル１０オレイルエーテル、ポリオキシル２０セトステアリルエーテル、ポリオキサレート３５リシン油、水添ポリオキサレート４０リシン油、ポリオキシル４０ステアレート、ポリオキシルラウリルエーテル、ポリオキシルステアリルエーテル、ポリソルベート２０、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート８０、セトエステアリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、ソルビタンモノオレエート、ソルビタンモノプラミテート、ソルビタンセスキオレエート、ソルビタントリオレエート、セチルアルコール、オレイルアルコール、ポロキサマー、モノステアリン酸プロピレングリコール、カルボマーコポリマー及びインターポリマー、コレステロール、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、ステアリン酸ジエチレングリコール、ドクセートナトリウム、ステアリン酸エチレングリコール、ジステアリン酸グリセリル、モノリノール酸グリセリル、モノオレイン酸グリセリル、モノステアリン酸グリセリル、ラノリンアルコール、レシチン、モノ及びジグリセリド、ステアリン酸ナトリウム、ステアリン酸、乳化ワックスが含まれるが、これらに限定されない。

【0036】

流動剤、凝集防止剤及びスリップ剤は、流動を促進し、粉体流動及び処理中の固体伝導漏斗での凝集を減らすために製剤に使用される賦形剤である。本発明の医薬組成物の調製に適した流動剤、凝集防止剤及びスリップ剤の例には、ケイ酸カルシウム、ケイ酸マグネシウム、コロイド状二酸化ケイ素、タルクが含まれるが、これらに限定されない。

【0037】

コーティング剤は、不快な味や臭いのマスキング、薬物放出速度の制御、外観の向上、、飲み込みやすくすること、及び 消化管での薬物の放出の制御（腸溶性コーティングなど）などの様々な機能で使用できる賦形剤である。本発明の医薬組成物の調製に適したコーティング剤の例には、メタクリル酸アンモニウムコポリマー、カルボキシメチルセルロースナトリウム、酢酸フタル酸セルロース、酢酸セルロース、コポビドン、エチルセルロース及びその水性分散液、ゼラチン、医薬品ワニス、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロースアセテートサクシネート、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート、マルトデキストリン、メタクリル酸共重合体及びその分散液、メチルセルロース、ポリエチレングリコール、フタル酸酢酸ビニル、セラック、加工α化デンプン、サッカロース、二酸化チタン、カルナバワックス、マイクロクリスタルワックスが含まれるが、これらに限定されない。

【0038】

可塑剤は、可塑性と弾力（弾性）を高めるために他の薬剤に添加される賦形剤である。これらは、ポリマー系に必要な物性を付与するための重要な成分である。本発明の医薬組成物の調製に適した可塑剤の例には、クエン酸アセチルトリブチル、アセチルクエン酸トリエチル、リシン油、ジアセチル化モノグリセリド、セバシン酸ジブチル、ソルビトール、デキストリン、フタル酸ジエチル、グリセリン、ポリエチレングリコール、ポリエチレングリコールモノメチルエーテル、プロピレングリコール、安息香酸ベンジル、トリアセチン、クエン酸トリブチル、クエン酸トリエチル、クロロブタノールが含まれるが、これらに限定されない。

【0039】

非経口投与の場合、一般的に、溶血を避け、痛みや投与の不快感を軽減するために、等張液、つまり接触する組織と同様の浸透圧を持つ溶液を使用している。本発明の医薬組成物の等張性を確保するために頻繁に使用される等張化剤の例には、デキストロース、グリセリン、マンニトール、塩化ナトリウム、塩化カリウムが含まれるが、これらに限定されない。

【0040】

甘味料は、不快な風味をマスクし、経口製剤を甘くするために使用される薬剤である。本発明の医薬組成物の調製に適した甘味料の例には、アセスルファムカリウム、アスパルテーム、アセスルファムアスパルテーム塩、ブドウ糖、デキストロース、フルクトース、ガラクトース、マルチトール、マルトースマンニトール、サッカリン、サッカリンカルシウム、サッカリンナトリウム、ソルビトール、スクラロース、サッカリン、砂糖、タガトースが含まれるが、これらに限定されない。

【0041】

本発明が対象とする組成物の範囲には、各医薬品に明確な外観を与え、類似した物理的性質を持つ製剤の中で特定の製剤を簡単に区別できるようにするために、剤形に含まれる薬学的着色剤も含まれる。本発明の組成物に適用する医薬品着色剤の例には、赤色三二酸化鉄、黄色三二酸化鉄、混合酸化第二鉄、カラメル、二酸化チタン、ＦＤ＆Ｃ着色剤、Ｄ＆Ｃ着色剤が含まれる。

【0042】

投与経路並びに本発明に係る化合物に固有の物理的及び化学的特性に応じて、これらの化合物で調製された医薬組成物に、その成分を安定化、保存でき、早期分解を防止及び／及び回避できる物質を添加することができる。これらの追加の賦形剤は、抗酸化剤、防腐剤、ｐＨ調節剤及び調整剤として作用することができる。本発明に係る医薬組成物の調製に適したこれらの特性で使用される賦形剤の例には、アスコルビン酸、ソルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、α－トコフェロール、メチルパラベン、プロピルパラベンブチルパラベン、亜硫酸ナトリウム、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、フェノール、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、塩化セチルピリジニウム、安息香酸、安息香酸ナトリウム、プロピオン酸ナトリウム、ホウ酸及びｐＨ調整剤が含まれるが、これらに限定されない。後者は、有機酸及び無機酸、基剤及び緩衝剤を含み、通常、薬学的組成物に使用される。

【0043】

本発明に係る化合物を含む医薬組成物は、（ａ）フレーバーをマスキングし、溶解性を改善し、製剤の溶解性を促進し、及び／及びバイオアベイラビリティを調節するための錯化剤；（ｂ）不快な臭いや風味を修正及びマスキングするため、及び心地よい臭いや風味を与えるために使用される芳香剤及び香味剤を含むか、及びそれらを用いて調製することができる。いくつかの物質及び調剤がそのような用途のために市場で入手可能であり、それらの使用は承認された薬剤、及び組成物中の成分と適合する正式に承認された薬剤に限定されている。治療用途及び投与のために、本発明のベンズイミダゾール化合物は、従来技術及び適切な賦形剤を使用して、経口、非経口、経鼻、直腸、経粘膜及び経皮投与に適した組成物に製剤化することができる。

【0044】

本発明のベンズイミダゾール化合物を含む剤形に関して特定の制限はない。例えば、経口投与用の固体として、適切な剤形は、錠剤、丸薬、糖衣錠、カプセル、顆粒、粉末、ペレット、凍結乾燥製剤及び類似の形態であり得る。経口投与用の液体として、適切な剤形は、溶液、分散液、懸濁液、乳液、油、シロップなどであり得る。液体剤形は、静脈内、筋肉内、皮下、皮内などの注射に使用できる。

【0045】

剤形の他の例には、リポソーム及びナノ粒子、及び当業者に知られている他の任意の投与態様が含まれる。剤形は、本発明のベンズイミダゾール化合物の即時放出、制御放出及び遅延放出を提供することができる。

【0046】

本発明の別の態様は、例えば、本発明のベンズイミダゾール化合物を０．０１－５０００ｍｇ含み、治療中に１日１回以上投与することができる上記の剤形である。

【0047】

特定の実施例において、ベンズイミダゾール化合物以外に、肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療に使用される少なくとも別の有効成分を含んでもよい。この別の有効成分は、例えば、メトホルミン、インスリン及びその誘導体、スルホニル尿素、ＳＧＬＴ－２阻害剤、ＤＰＰ４阻害剤、ＧＬＰ－１アゴニスト、メグリチニド、チアゾリジンジオン、α－グルコシダーゼ阻害剤、ＦＸＲアゴニスト、ＰＰＡＲアゴニスト、ＡＳＫ１阻害剤、ＣＣＲ２及びＣＣＲ５アンタゴニスト、カスパーゼ阻害剤、インスリン増感剤、コール酸－アラキジン酸複合体から選択される。

【0048】

他の実施形態において、本発明は、ｉ）医薬組成物の製造又はｉｉ）肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療における式Ｉの化合物の使用に関する。

【0049】

別の態様において、本発明は、式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物を用いて肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療する方法に関する。

【化5】

【0050】

本発明の式Ｉのベンズイミダゾール誘導体の効果を示す非網羅的な例を以下に示す。
実施例

【0051】

実施例１：式Ｉのベンズイミダゾール誘導体の効果

【0052】

式Ｉのベンゾイミダゾール誘導体の効果は、インスリン抵抗性や肝臓でのトリグリセリド蓄積など、ヒトの肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）と同様の変化を示す食事誘発性肥満（ＤＩＯ）モデルを表す、高脂肪食（ＨＦＤ）で維持されたＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラットで評価された（van Herck MA et al. (2017). Animal Models of Nonalcoholic Fatty Liver Disease-A Starter's Guide. Nutrients. 9(10). pii: E1072; Wang C and Liao JK (2013). A Mouse Model of Diet-Induced Obesity and Insulin Resistance. Methods Mol Biol. 821: 421-433）。式Ｉのベンズイミダゾール誘導体（ＭＴ２よりもＭＴ１でより強力なアゴニスト）の効果を、Ｎ－［３－（５－クロロ－２－エトキシ－６－メトキシ－ベンゾイミダゾール－１－イル）－プロピル］－アセトアミド（下式ＩＩで表される構造；ＭＴ１受容体よりもＭＴ２でより高い効力を持つメラトニン作動性アゴニスト；即ち、本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体の反対）、及びダパグリフロジン（血糖値を正常化し、ＤＩＯモデルの体重を減少させるＳＧＬＴ２阻害剤）の効果と比較した（Millar P et al. (2017). Metabolic and neuroprotective effects of dapagliflozin and liraglutide in diabetic mice. J Endocrinol. 234(3):255-267; Devenny JJ et al. (2012). Weight loss induced by chronic dapagliflozin treatment is attenuated by compensatory hyperphagia in diet-induced obese (DIO) rats. Obesity. 20: 1645-1652.）。

【化6】

【0053】

1 H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 1.48 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.94 - 2.01( m, 5H), 3.24 (q, J = 4.80 Hz, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.99 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.57 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 5.58 (br s, 1H), 6.71 (s, 1H), 7.52 (s, 1H). 13 C NMR (125 MHz, CDCl 3) δ ppm 14.74; 23.28; 28.73; 36.91; 39.70; 57.11; 66.48; 93.25; 116.79; 119.10; 132.35; 134.10; 150.67; 157.06; 170.22. MS (ESI) m/z calculated C 15H 20ClN 3O 3: 325.1193; found [M + H]+ 326.1292

【0054】

ＨＦＤモデルでは、治療開始前に顕著な体重（ＢＷ）増加を誘導するために、最初に４週間ＨＦＤで動物を維持した。次いで、１０及び３０ｍｇ／ｋｇの式Ｉの化合物、１０及び３０ｍｇ／ｋｇの式ＩＩの化合物、及び５ｍｇ／ｋｇのダパグリフロジンを１日１回で経口投与することによりＨＦＤの動物を処理した。通常の飼料（飼料ビヒクル）及びＨＦＤ（ＨＦＤビヒクル）を与えられた２つのビヒクル処理対照群も含まれた。

【0055】

研究中にＢＷと食物摂取量（ＦＩ）を評価し、結果を図１に示す。ＨＦＤビヒクルの動物の体重は、１日目の初期平均４５９．９ｇから５７日目の６１２．４ｇまで着実に増加した。興味深いことに、ＨＦＤと比較して、式Ｉの化合物（１０及び３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）による処理は、１３日目から３２日目（ｐ＜０．０５）まで体重（ＢＷ）を顕著に減少させ（ｐ＜０．０５）、ダパグリフロジン（５ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）による処理は２日目から４８日目、５０日目から５４日目、及び５６日目まで体重を有意に減少させた（ｐ＜０．０５）（図１Ａ）。また、ＨＦＤビヒクルと比較して、１日目から５７日目までのＢＷ増加の減少傾向（図１Ｃ）は、１０及び３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．の化合物Ｉ（ｐ＝０．０９８）及び５ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．のダパグリフロジン（ｐ＝０．０５１）で処理された動物で観察された。これに対し、式ＩＩの化合物（１０及び３０ｍｇ／ｋｇ）による処理は、毎日のＢＷ増加に顕著な影響を及ぼさなかった。化合物Ｉ及び化合物ＩＩは、後者で観察された単独の変化を除いて、ＨＦＤビヒクル群と比較して毎日の食物摂取量に影響を与えなかった（図１Ｂ及び１Ｄ）。これに対し、ダパグリフロジンは、８日目から５６日目までの毎日のＦＩを顕著に増加させ（ｐ＜０．０５）、ＨＦＤビヒクルと比較して毎日の平均ＦＩ（ｐ＜０．００１）を増加させた。

【0056】

インスリン抵抗性及び耐糖能障害の程度は、インスリン抵抗性に対する恒常性モデル評価（ＨＯＭＡ－ＩＲ）方法により評価された（van Dijk TH et al. (2013). A novel approach to monitor glucose metabolism using stable isotopically labelled glucose in longitudinal studies in mice. Lab Anim. 47(2):79-88.）。ＨＯＭＡ－ＩＲは、５１日目の４時間絶食後の血漿インスリン及びグルコース濃度に基づいて計算された。ＨＦＤビヒクル動物では、飼料ビヒクル群と比較して、血漿グルコース（＋１７．６％、ｐ＜０．０１）、インスリン（＋５６．４％、ｐ＜０．０５）及びＨＯＭＡ－ＩＲ（＋７９．３％、ｐ＜０．０１）が顕著に増加した（図２）。予想どおり、ダパグリフロジンは、ＨＦＤビヒクルと比較して、血漿グルコース（－２１．６％ ｐ＜０．００１）、血漿インスリン（－５６．７％、ｐ＜０．００１）及び血漿ＨＯＭＡ－ＩＲ（－６６．７％、ｐ＜０．００１）を顕著に減少させた。特に、式Ｉの化合物はまた、１０ｍｇ／ｋｇの経口用量で血漿グルコースを有意に減少させた（－１６．４％、ｐ＜０．０１）。最大用量（３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）で、本発明に係る化合物Ｉは、ＨＦＤビヒクルと比較して、血漿グルコース（－１７％、ｐ＜０．０１）及びＨＯＭＡ－ＩＲ（－３６％、ｐ＜０．０１）の両方を有意に減少させた（図２Ａ及び２Ｃ）。これに対し、比較化合物（化合物ＩＩ）は、ＨＦＤビヒクルと比較して、血漿グルコース、インスリン及びＨＯＭＡ－ＩＲを変化させなかった。

【0057】

研究終了後（６５／６６日目）、体組成及び選択した組織（褐色脂肪褥、精巣上体脂肪褥、肝臓及び腓腹筋）の重量に対する影響を評価した。組織の重量は、下記の２つの方法で分析された。ｉ）１日目のＢＷ（体重）は、研究開始時のＢＷの違いを補正するための共変量として使用され、又はｉｉ）最終ＢＷ（６５／６６日目）は、減量による変化を補正するための共変量として使用された（表３）。ダパグリフロジンは、データが最終ＢＷで補正された場合、ＨＦＤビヒクルと比較して肝臓重量の有意な増加をもたらした（＋１０．８％、ｐ＜０．０１）。これに対し、初期ＢＷによって補正された分析において、式Ｉのベンズイミダゾール誘導体で処理された動物の両方の群では、肝臓重量減少の傾向が見られた（ｐ＝０．１２）。これらの変化とは別に、補正に関係なく、選択した組織の重量に対する有意な影響は、ＨＦＤビヒクル群との比較では観察されなかった。体組成は、ＦｏｏｄＳｃａｎ ＴＭ近赤外線アナライザー分析を使用して決定され、水分、タンパク質、脂肪含有量及び枝肉（carcass）の最終重量が評価された（表４）。本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体及び比較化合物ＩＩの効果は、ＨＦＤビヒクル対照との比較では評価されたパラメータのいずれにも見られなかった。ダパグリフロジンは、ＨＦＤビヒクルと比較して最終枝肉重量を顕著に減少させたが（ｐ＜０．０５）、体組成は変化しなかった。

【0058】

本発明による式Ｉのベンズイミダゾール誘導体のみがＨＦＤモデルにおけるＢＷ増加、肝臓重量、血漿グルコースレベル及びＨＯＭＡ－ＩＲに影響を与え、比較ベンズイミダゾール化合物ＩＩは影響しなかったので、動物の肝臓における化合物Ｉの特異的効果を、ダパグリフロジン及び対照群と比較して評価した。ＨＦＤビヒクル動物は、飼料ビヒクル対照と比較して、肝臓トリグリセリドの含有量と濃度が顕著に増加した（それぞれ＋４７３％及び＋４０９％）（図３Ａ及び３Ｂ）。興味深いことに、ＨＦＤビヒクルと比較して、式Ｉの化合物（１０及び３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）による処理は、肝臓トリグリセリド含有量を顕著に減少させ（それぞれ－４１．３％及び－５５．１％、ｐ＜０．０５）、３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．の化合物Ｉは、肝臓トリグリセリド濃度を５１．６％（ｐ＜０．０１）顕著に低下させた。これに対し、ダパグリフロジン処理は、ＨＦＤビヒクル対照と比較して肝臓のトリグリセリド含有量も、濃度も顕著に低下させなかった。飼料ビヒクルとＨＦＤビヒクル動物の両方では、肝臓グリコーゲンの含有量及び濃度は類似した（図３Ｃ及び３Ｄ）。式Ｉの化合物（１０及び３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）は、ＨＦＤビヒクルと比較して、肝臓グリコーゲン含有量（それぞれ３６．６％及び３６．６％）及び濃度（それぞれ４２．８％及び４０．８％）を顕著に（ｐ＜０．０５）減少させた。ＨＦＤビヒクル対照と比較して、肝臓のグリコーゲン含有量及び濃度に対するダパグリフロジンの影響は観察されなかった。

【0059】

肝臓について、組織病理学的分析によりＮＡＦＬＤを評価した（図３Ｅ－Ｈ）。上記方法に従って、サンプルを切片化し、染色し、スコアリングした（Kleiner DE et al. (2005). Design and validation of a histological scoring system for nonalcoholic fatty liver disease. Hepatology. 41(6):1313-21; Nishida T et al. (2013). Spontaneous onset of nonalcoholic steatohepatitis and hepatocellular carcinoma in a mouse model of metabolic syndrome. Lab Invest. 93(2):230-41）。分析されたパラメータは、脂肪症（０～３）、小葉内炎症（０～３）、及び肝細胞のバルーニング（０～２）であった。総「ＮＡＦＬＤ活動スコア」（ＮＡＳ）スコアは、すべてのパラメータ（０～８）の総として計算された。飼料ビヒクル動物の肝臓には、脂肪症、小葉内炎症、肝細胞バルーニングの病理スコア（ゼロ）がなく、総ＮＡＳスコアがなかった。ＨＦＤビヒクル群では、脂肪症、小葉内炎症及び及び総ＮＡＳの病理スコアは、顕著に（ｐ＜０．０５）増加したが、肝細胞のバルーニングは顕著な影響を受けなかった。注目すべきことに、本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体（３０ｍｇ／ｋｇ ｐ．ｏ．）は、ＨＦＤ群と比較して、脂肪症を顕著に（ｐ＜０．０５）～５７％減少させた（図３Ｆ）。小葉内炎症もまた、本発明に係る式Ｉのベンズイミダゾール誘導体を３０ｍｇ／ｋｇの用量で処理した動物において減少し、飼料ビヒクル対照ともはや顕著に異ならなくなった（図３Ｇ）。この群とＨＦＤビヒクル動物の間の総ＮＡＳ値についても、有意性に向かう傾向が観察された（図３Ｅ、ｐ＝０．１２６）。これに対し、ＨＦＤビヒクル群と比較して、ダパグリフロジンで治療したラットでは、評価されたパラメータへの影響は観察されなかった。

【表1】

【0060】

細胞機能アッセイは、アゴニストモードで実行された。ＥＣ５０：最大有効濃度の半分。Ｉ．Ａ．：固有活性。

【表2】

【0061】

各時点での２～３匹の動物の平均データ。化合物をＷｉｓｔａｒ（１００ｍｇ／ｋｇ）及びＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）ラット（１０及び３０ｍｇ／ｋｇ）に経口投与し、サンプル（血漿及び脳）を選択した時点で収集した。ＮＤ：脳内濃度が定量下限（５ｎｇ／ｇ）を下回っているため、確定できなかった。

【表3】

【0062】

データは平均±ＳＥＭ（ｎ＝９－１０）として示される。１日目及び６５／６６日目（研究終了）に治療群間のＢＷ差に応じて平均値を調整した。ＳＥＭは、統計モデルの残差から計算された。式Ｉの化合物、式ＩＩの化合物、ダパグリフロジン及びビヒクルを、通常の飼料及びＨＦＤを与えた動物に投与し、終了後にパラメータを評価した。データは、処理及びコーホートを因子として、１日目のＢＷ及び最終枝肉重量を共変量としてＡＮＣＯＶＡによって分析した（それぞれ１日目及び６５／６６日目のＢＷのデータ調整に使用）。治療群は、個別のウィリアムズ検定（化合物Ｉ及び化合物ＩＩ）及び多重ｔ検定（ダパグリフロジン）によってＨＦＤビヒクルと比較され、統計的有意差は＊＊（ｐ＜０．０１）で示される。＃（ｐ＝０．１２）は、ＨＦＤビヒクルと比較して有意な傾向があることを意味する。

【表4】

【0063】

データは、調整済み平均±ＳＥＭ（ｎ＝９－１０）として示される。ＳＥＭは、統計モデルの残差から計算された。分析は、治療を因子とし、１日目のＢＷを共変量とするデータのロバスト回帰により実行された。別個のウィリアムズ検定（化合物Ｉ及び化合物ＩＩ）及び多重ｔ検定（ダパグリフロジン）によって、治療群をＨＦＤビヒクルと比較し、統計的有意差は＊（ｐ＜０．０５）で示される。飼料ビヒクルとの比較は、多重ｔ検定（ＨＦＤビヒクル及びダパグリフロジン群）及びダネット検定（化合物Ｉ及び化合物ＩＩ）によって行われ、統計的有意差は†（ｐ＜０．０５）及び††（ｐ＜０．０１）で示される。

【図1】

【図2】

【図3】

【手続補正書】

【提出日】2022-12-15

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための式Ｉのベンズイミダゾール化合物、又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物。

【化1】

【請求項2】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための医薬組成物であって、
式Ｉのベンズイミダゾール化合物又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物と、薬学的に許容される賦形剤とを含む、医薬組成物。

【化2】

【請求項3】

０．０１－５０００ｍｇの式Ｉのベンズイミダゾール化合物を含む、請求項２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

式Ｉのベンズイミダゾール化合物の薬学的に許容される塩は、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩を含む無機付加塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、ヘキサン酸塩、ヘプタン酸塩、グリコール酸塩、ピルビン酸塩、乳酸塩、マロン酸塩、リンゴ酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、酒石酸塩、クエン酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、アシスト酸塩、ベシル酸塩、トシル酸塩、キシナホ酸塩、安息香酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、桂皮酸塩、ｐ－クロロベンゼンスルホン酸塩、２－ナフタレンスルホン酸塩、ｐ－トルエンスルホン酸塩、カンフルスルホン酸塩、酢酸トリメチル、酢酸ｔ－ブチル、硫酸ラウリル、グルコン酸塩、グルタル酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、サリチル酸塩、ステアリン酸塩、ムコン酸塩、マンデル酸塩、２－ヒドロキシエタンスルホン酸を含む有機付加塩；ナトリウム、カリウム、リチウム、カルシウム、マグネシウム、ビスマスを含む金属のアルカリ付加塩；ブロマイド；第一級、第二級又は第三級アミンの有機塩基との薬学的に許容される塩；アルギニン、リジン、ヒスチジンを含むアミノ酸との塩；カフェイン、プロカイン、ヒドロバミン、コリン、ベタイン、エチレンジアミン、グルコサミン、テオブロミン、プリン、モルホリンとの塩から選択される、請求項２に記載の医薬組成物。

【請求項5】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎の治療方法であって、
式Ｉのベンズイミダゾール化合物、

【化3】

又はその薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物を用いる、方法。

【請求項6】

０．０１－５０００ｍｇの式Ｉのベンズイミダゾール化合物を必要な患者に投与する、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪肝疾患及び非アルコール性脂肪性肝炎を治療するための医薬組成物の製造における式Ｉのベンズイミダゾール化合物、その薬学的に許容される塩、結晶、水和物、溶媒和物、プロドラッグ若しくは代謝物の使用。

【化4】

【国際調査報告】