特表 2023-524051 サイトカインストーム症候群（ＣＳＳ）および急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療するための負帯電粒子

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-08

(54)【発明の名称】サイトカインストーム症候群（ＣＳＳ）および急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療するための負帯電粒子

(51)【国際特許分類】

   A61K 45/00 20060101AFI20230601BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 31/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 31/12 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 31/20 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/765 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/745 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/722 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/715 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 33/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 33/242 20190101ALI20230601BHJP

   A61K 33/26 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 33/24 20190101ALI20230601BHJP

   A61P 31/16 20060101ALI20230601BHJP

【ＦＩ】

A61K45/00

A61P43/00

A61P11/00

A61P31/00

A61P31/12

A61P31/14

A61P31/20

A61P31/04

A61K31/765

A61K31/745

A61K31/722

A61K31/715

A61K33/00

A61K33/242

A61K33/26

A61K33/24

A61P31/16

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022566156

(86)(22)【出願日】2021-04-29

(85)【翻訳文提出日】2022-12-27

(86)【国際出願番号】 US2021029893

(87)【国際公開番号】W WO2021222565

(87)【国際公開日】2021-11-04

(31)【優先権主張番号】63/018,210

(32)【優先日】2020-04-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/018,214

(32)【優先日】2020-04-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/128,386

(32)【優先日】2020-12-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．プルロニック

(71)【出願人】

【識別番号】521029416

【氏名又は名称】オンコア ファーマ，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100079108

【弁理士】

【氏名又は名称】稲葉 良幸

(74)【代理人】

【識別番号】100109346

【弁理士】

【氏名又は名称】大貫 敏史

(74)【代理人】

【識別番号】100117189

【弁理士】

【氏名又は名称】江口 昭彦

(74)【代理人】

【識別番号】100134120

【弁理士】

【氏名又は名称】内藤 和彦

(72)【発明者】

【氏名】プイシス，ジョン

(72)【発明者】

【氏名】ハーマン，ジム

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA17

4C084MA66

4C084NA14

4C084ZA591

4C084ZA592

4C084ZB311

4C084ZB312

4C084ZB331

4C084ZB332

4C084ZB351

4C084ZB352

4C084ZC541

4C084ZC542

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA20

4C086EA23

4C086FA01

4C086FA02

4C086HA01

4C086HA03

4C086HA06

4C086HA09

4C086HA11

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA66

4C086NA14

4C086ZA59

4C086ZB31

4C086ZB33

4C086ZB35

4C086ZC54

(57)【要約】

負帯電粒子を含む組成物、ならびにその作製および使用方法をここに提供する。また、サイトカインストーム症候群（CSS）または急性呼吸窮迫症候群（ARDS）を軽減または治療する方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

治療有効量の負帯電粒子を対象に投与することを含む、対象における急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）またはサイトカインストーム症候群（ＣＳＳ）を治療する方法であって、負帯電粒子が他の治療有効薬を含まない方法。

【請求項2】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳが直接的肺傷害または間接的肺傷害の結果である、請求項１
に記載の方法。

【請求項3】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳが、肺炎、肺炎症、細菌感染、ウイルス感染、真菌感染、日和見感染、敗血症、胃内容物の誤嚥、外傷、火傷、膵臓炎、肺挫傷、出血性ショック、溺水、輸血、気道傷害、サイトカイン放出症候群（CRS）、重度炎症反応症候群（SIRS）、高サイトカイン血症、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、外傷、またはそれらの組合せの結果である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳがウイルス感染の結果であり、ウイルス感染が、ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスによるものである、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

ＤＮＡウイルスが一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスが二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（+）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（－）ウイルスまたは環状ｓｓＲＮＡウイルスである、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスが呼吸器系ウイルスである、請求項４または５に記載の方法。

【請求項7】

ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスが、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、コロナウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスおよびジカウイルスからなる群から選択される、請求項４～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳが細菌感染の結果であり、細菌感染が、ブドウ球菌、レンサ球菌、マイコバクテリア、バシラス、サルモネラ、ビブリオ、スピロヘータ、ナイセリア、双球菌、シュードモナス、クロストリジウム、トレポネーマ、スピリルム、またはそれらの組合せによるものである、請求項３に記載の方法。

【請求項9】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳが１つまたは複数の免疫標的療法によるものである、請求項１に記載の方法。

【請求項10】

１つまたは複数の免疫標的療法が、抗体、タンパク質療法、ペプチド、サイトカイン、免疫シグナル伝達モジュレーター、ｍＲＮＡ、腫瘍溶解性ウイルス、または細胞ベースの療法である、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

１つまたは複数の免疫標的療法が抗体を含み、抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体または二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE）抗体である、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

抗体が、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１３７、ＯＸ－４０、ＧＩＴＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤＲ３、ＳＬＡＭ、ＩＣＯＳ、ＬＩＬＲＢ２、ＬＩＬＲＢ３、ＬＩＬＲＢ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＩＬ－１２もしくはＩＬ－１５、ＲＴＫ、ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦＲ、ＨＥＲ２／Ｎｅｕ、ＥＲ、ＰＲ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、ＳＩＲＰ－α、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ３、ＣＤ２５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３９、ＣＤ４７、ＣＤ７３、ＦＡＰ、ＩＬ－１β、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－３３、ＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－４Ｒα、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロファージ、単球または好中球を標的とする、請求項１１に記載の方法。

【請求項13】

１つまたは複数の免疫標的療法がサイトカインを含み、サイトカインが、ＩＦＮ－α、ＩＮＦ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒａ、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＧＭ－ＣＳＦまたはそれらの変異体から選択される、請求項１０に記載の方法。

【請求項14】

１つまたは複数の免疫標的療法が免疫シグナル伝達モジュレーターを含み、免疫シグナル伝達モジュレーターが、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒａ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒｙ、ＩＬ－３Ｒａ、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒａ、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒａ、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒａ、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１２Ｒα１、ＩＬ－１２Ｒα２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒａ、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒａ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒα、ＩＬ－２８ＲＡ、ＴＬＲ、ＪＡＫ、ＢＴＫ、ＴＹＫ、ＳＹＫ、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＮＦＫＢ、ＮＦＡＴ、ＳＴＡＴまたはキナーゼの１つまたは複数数を標的とする、請求項１０に記載の方法。

【請求項15】

１つまたは複数の免疫標的療法が細胞ベースの療法を含み、細胞ベースの療法が同種異系、自己またはｉＰＳＣ由来細胞を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項16】

１つまたは複数の免疫標的療法が細胞ベースの療法を含み、細胞ベースの療法が、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、赤血球、幹細胞、抗原提示細胞、マクロファージまたは樹状細胞の１つまたは複数を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項17】

負帯電粒子が１つまたは複数の生分解性重合体を含む、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

負帯電粒子が、ポリグリコール酸（PGA）、ポリ乳酸（PLA）、ポリスチレン、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、キトサン、多糖、脂質、ダイアモンド、鉄、亜鉛、カドミウム、金または銀の１つまたは複数を含む、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

負帯電粒子がＰＬＧＡを含む、請求項１８に記載の方法。

【請求項20】

ＰＬＧＡを含む負帯電粒子が、約９０：１０から約１０：９０まで、約５０：５０から約９０：１０まで、約５０：５０から約８０：２０まで、約９０：１０から約５０：５０まで、または約８０：２０から約５０：５０までの範囲のポリ乳酸：ポリグリコール酸の比率を含む、請求項１８に記載の方法。

【請求項21】

ＰＬＧＡを含む負帯電粒子が、約５０：５０の範囲のポリ乳酸：ポリグリコール酸の比率を含む、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

負帯電粒子が、表面にカルボキシル基をさらに含む、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

負のゼータ電位が、約－１００ｍＶから約－１ｍＶまでの範囲である、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

負のゼータ電位が、約－８０ｍＶから約－３０ｍＶまでの範囲である、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

負帯電粒子が、約０．１μｍから約１０μｍまでの範囲の中間径を有する、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

負帯電粒子の中間径が、約３００ｎｍから約８００ｎｍまでの範囲である、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

負帯電粒子を対象に投与することにより、ＡＲＤＳまたはＣＳＳに関連する１つまたは複数の症状を向上させる、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

ＡＲＤＳまたはＣＳＳに関連する１つまたは複数の症状が、肺炎症、無気肺、窮迫性呼吸、疲労、低血圧、発熱、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、多臓器機能障害、脳損傷、肺損傷、肝臓損傷、腎臓損傷、心臓損傷、浮腫、脳浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、呼吸窮迫、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高トリグリセリド血症、白血球減少症、血球減少症および炎症マーカーレベルの上昇からなる群から選択される、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

炎症マーカーが、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＰ－１０、ＭＩＰ－１β、ＭＣＰ－１、ＧＭ－ＣＳＦ、ｃ反応性タンパク質、ｄ－ダイマー、フェリチン、好中球細胞外トラップ（NET）、およびそれらの組合せからなる、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

負帯電粒子の投与により、循環系または炎症部位における炎症性メディエーターの蓄積を低減する、請求項１～２９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

負帯電粒子が静脈内投与される、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

その治療を必要とする対象における呼吸器系ウイルス感染に関連する全身性感染、敗血症または肺炎の入院成人患者の急性炎症を治療する方法であって、薬物が結合または封入されていない負帯電粒子を投与することを含み、負帯電粒子が１つまたは複数の生分解性の医薬として許容し得る重合体を含み、１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇまでの用量で投与される方法。

【請求項33】

呼吸器系ウイルス感染が、インフルエンザおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

負帯電粒子が、１ｍｇ／ｋｇから６ｍｇ／ｋｇまでの用量レベルで投与される、請求項３２または３３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項35】

負帯電粒子が、５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで投与される、請求項３２～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

負帯電粒子が、５０ｍｇから４００ｍｇまでの用量レベルで投与される、請求項３２～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

負帯電粒子が、１つまたは複数の生分解性重合体を含む、請求項３２～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

負帯電粒子が、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、ポリ（乳酸）（PLA）、ポリ（グリコール酸）（PGA）またはポリスチレンを含む、請求項３２～３７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

負帯電粒子がＰＬＧＡを含む、請求項３２～３８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

負帯電粒子が、約－３０ｍＶから－８０ｍＶまでのゼータ電位を有する、請求項３２～３９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

負帯電粒子が、０．３μｍから３μｍまたは０．３μｍから１μｍまでの平均径を有する、請求項３２～４０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項42】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清ｃ反応性タンパク質レベルをベースラインより低下させる、請求項３２～４１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項43】

血清ｃ反応性タンパク質レベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、請求項４２に記載の方法。

【請求項44】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清フェリチンレベルをベースラインより低下させる、請求項３２～４３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項45】

血清フェリチンレベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、請求項４４に記載の方法。

【請求項46】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清ｄ－ダイマーレベルをベースラインより低下させる、請求項３２～４５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項47】

血清ｄ－ダイマータンパク質レベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血液中の好中球の数をベースラインより低下させる、請求項３２～４７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項49】

血液中の好中球の数が、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血液中のリンパ球の数をベースラインより増加させる、請求項３２～４９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項51】

血液中のリンパ球の数が、ベースラインと比較して、２、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５または１００倍増加する、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、好中球対リンパ球比（NLR）をベースラインより低下させる、請求項３２～５１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ＮＬＲを４以下とする、請求項５２に記載の方法。

【請求項54】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ＳｐＯ_２／ＦｉＯ_２比をベースラインより増加させる、請求項３２～５３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項55】

ＳｐＯ_２／ＦｉＯ_２比が３００ｍｍＨｇ以上である、請求項５４に記載の方法。

【請求項56】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより入院日数を減少させる、請求項３２～５５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項57】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、呼吸器を使用しない日数を増加させる、請求項３２～５６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項58】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより死亡のリスクを低下させる、請求項３２～５７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項59】

負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ベースラインと比較して肺機能を向上させる、請求項３２～５８のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
[0001] 本出願は、いずれもその全体が参照により本明細書に組み込まれている、２０２０年４月３０日に出願された米国仮出願第６３／０１８，２１０号、２０２０年４月３０日に出願された米国仮出願第６３／０１８，２１４号、および２０２０年１２月２１日に出願された米国仮出願第６３／１２８，３８６号の利益を主張するものである。

【背景技術】

【0002】

[0002] サイトカインストーム症候群（CSS）および急性呼吸窮迫症候群（ARDS）は、重篤な全身性炎症、多臓器不全、さらには死をもたらす、一連の炎症事象によって引き起こされる、潜在的に末期的な臨床状態である。ＣＳＳおよびＡＲＤＳは、臨床所見および誘発事象にいくらかの相違があるものの、多臓器不全および死をもたらす全身性炎症を引き起こす、自然免疫細胞（例えば、単球、好中球およびマクロファージ）の無秩序の活性化、増加および機能化、過剰なサイトカイン、ケモカインおよび炎症促進性メディエーターの分泌などの共通の炎症過程を伴うことにより一括りにされる^１～５。さらに、多くの対象において、ＣＳＳはＡＲＤＳをもたらし、ＡＲＤＳはＣＳＳをもたらし得るため、これらの状態の間には著しい重複が存在する。

【0003】

[0003] ＣＳＳは、ウイルス感染、細菌感染、病原体、外傷、および免疫指向性療法（例えば、CAR-T、抗体およびサイトカイン）などの様々な異なる誘因により生じ得る。ＣＳＳは、自己免疫性およびリウマチ性状態（例えば関節炎および狼瘡）、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、および二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）にも関連する。単球、マクロファージおよび好中球は、ＣＳＳの主たる要因である。ＣＳＳを誘発する初期事象は、サイトカイン、ケモカインおよび増殖因子シグナル伝達を介する炎症性単球、マクロファージおよび好中球の活性化および増加をもたらす。これらの細胞は、それらが炎症促進性サイトカインおよびケモカイン（例えば、IL-6、IL-1β、IFN-γ、IP-10、TNF-αおよびMCP-1、CCL-2、CXCL-1、CXCL-2、CXCL-5）、酸化性種（例えばROS）、タンパク質（例えばｃ反応性タンパク質）、プロテアーゼおよび代謝産物を生成することによって炎症促進性環境に反応する持続的炎症の部位に盛んに取り込まれる。これらの細胞の炎症促進活性は、長期的な過度の全身性炎症および致死的病状を引き起こす炎症性免疫反応をさらにエスカレートさせる無制御のフィードバックループを加速させる^5～8。

【0004】

[0004] ＡＲＤＳは、直接的または間接的肺傷害によって誘発され得る。直接的肺傷害に起因するＡＲＤＳの例としては、細菌、ウイルス、真菌または日和見感染、肺挫傷、外傷、化学物質、微粒子または他の刺激物質による気道傷害、胃内容物の誤嚥および溺水による肺炎が挙げられる。間接的肺傷害に起因するＡＲＤＳの例としては、出血性ショック、膵臓炎、重度の火傷、薬物過剰摂取、血液製剤の輸血、心肺バイパス、敗血症および再かん流傷害が挙げられる。直接的肺傷害によるものか間接的肺傷害によるものかに関わらず、ＡＲＤＳを誘発させる初期損傷は、強固で亢進された免疫反応を引き出す肺損傷を引き起こす。この免疫反応は、初期傷害から２４～４８時間以内に、炎症促進性サイトカインおよびケモカインを生成する常在免疫細胞（例えば気管支肺胞マクロファージ）を活性化し、その直後に炎症性単球および好中球を迅速に肺に流入させることを含む。肺に達すると、末梢由来の炎症性単球および好中球が局所的な炎症性環境に反応し、炎症促進性サイトカイン（例えば、IL-6、IL-β、IFN-γ、IP-10、TNF-αおよびMCP-1）、ケモカイン（例えば、CCL-2、CXCL- 1、CXCL-2およびCXCL-5）、酸化剤（例えばROS）、タンパク質（例えばc反応性タンパク質）、好中球細胞外トラップ（NET）およびプロテアーゼ（例えばMMP-9）の生成を介して炎症をさらに促進する。肺傷害の消散にはある程度の炎症が重要であるが、過剰かつ長期的炎症は、特にＡＲＤＳの場合は、著しい呼吸器損傷をもたらし、致死的な病状に関連する^1、2、4。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

[0005] ＣＳＳおよびＡＲＤＳの治療のための現行の手法は、感染、さらには死亡のリスクを高める有害副作用を引き起こす広範的免疫抑制剤（例えば抗IL1β、抗IL-6、抗TNFαおよびステロイド）に依存している。広範的免疫抑制を引き起こさずに、ＣＳＳおよびＡＲＤＳ時に病理学的過剰炎症を消散させるための標的療法の必要性に迫られている。

【課題を解決するための手段】

【0006】

[0006] 本開示は、負のゼータ電位を有する負帯電粒子を対象に投与することを含む、対象におけるサイトカインストーム症候群（CSS）および／または急性呼吸窮迫症候群（ARDS）を治療する方法であって、負帯電粒子が別の療法薬を含まない方法に関する。本明細書に開示されている方法の一実施形態において、被験者は、ウイルス感染、細菌感染、真菌感染、日和見感染、敗血症、サイトカイン放出症候群（CRS）、重度炎症反応症候群（SIRS）、高サイトカイン血症、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、胃内容物の誤嚥、外傷、火傷、膵臓炎、肺挫傷、出血性ショック、溺水、輸血、気道傷害、またはそれらの組合せから選択される１つまたは複数の状態に起因するＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している。

【0007】

[0007] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、対象における負帯電粒子の投与により、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの１つまたは複数の症状が軽減される。ある実施形態において、症状は、多臓器不全、脳損傷、肺損傷、肝臓損傷、腎臓損傷、心臓損傷、浮腫、脳浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、呼吸窮迫、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高トリグリセリド血症、白血球減少症、血球減少症、または炎症マーカーレベルの上昇の１つまたは複数から選択される。本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、本開示は、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状を改善することであって、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与する、改善することに関する。ある実施形態において、ＡＲＤＳに関連する症状には、息切れ、呼吸促迫（頻呼吸）、呼吸困難、人工呼吸の必要性、筋肉疲労、全身疲労、低血圧、低血中酸素レベル（低酸素血症）、皮膚の変色、爪の変色、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、空咳、発熱、胸痛、頭痛、肺の炎症、肺の水分蓄積、無気肺、肺の亀裂若しくは水泡音、高脈拍数、目眩、精神錯乱、浮腫、肺浮腫、および／または肺胞浮腫が含まれる。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する症状には、肺炎症、無気肺、窮迫性呼吸、疲労、低血圧、発熱、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫または肺胞浮腫から選択される１つまたは複数が含まれる。ある実施形態において、炎症マーカーは、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＭＣＰ－１、ｃ反応性タンパク質またはフェリチンである。

【0008】

[0008] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、ウイルス感染の結果である。ある実施形態において、ウイルス感染は、ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスおよび／またはレトロウイルスによるものである。ある実施形態において、ＤＮＡウイルスは、一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスは、二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（＋）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（－）ウイルスまたは循環ｓｓＲＮＡウイルスである。ある実施形態において、ウイルスは呼吸器系ウイルスである。ある実施形態において、ウイルスは、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、コロナウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスまたはジカウイルスからなる群から選択される。

【0009】

[0009] 本明細書に開示されている方法のいずれかにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、細菌感染の結果である。ある実施形態において、細菌感染は、ブドウ球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ）、レンサ球菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）、マイコバクテリア（Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）、バシラス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、サルモネラ（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ）、ビブリオ（Ｖｉｂｒｉｏ）、スピロヘータ（Ｓｐｉｒｏｃｈｅｔｅ）、ナイセリア（Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ）、双球菌（Ｄｉｐｌｏｃｏｃｃｕｓ）、シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）、クロストリジウム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ）、トレポネーマ（Ｔｒｅｐｏｎａｅｍａ）、スピリルム（Ｓｐｉｒｉｌｌｕｍ）、またはそれらの組合せによるものである。

【0010】

[0010] 本明細書に開示されている方法のいずれかにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、１つまたは複数の免疫標的療法によるものである。ある実施形態において、免疫標的療法は、抗体、タンパク質療法、ペプチド、サイトカイン、免疫シグナル伝達モジュレーター、ｍＲＮＡ、腫瘍溶解性ウイルスまたは細胞ベースの療法を含む。ある実施形態において、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体または二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE）抗体である。ある実施形態において、抗体は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１３７、ＯＸ－４０、ＧＩＴＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤＲ３、ＳＬＡＭまたはＩＣＯＳの１つまたは複数を標的とする。ある実施形態において、サイトカインは、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＧＭ－ＣＳＦ、またはそれらの変異体から選択される。ある実施形態において、免疫シグナル伝達モジュレーターは、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒβ、ＩＬ－２Ｒγ、ＩＬ－３Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒα、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒα、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－１２Ｒβ１、ＩＬ－１２Ｒβ２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒα、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒβ、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒβ、ＩＬ－２８ＲＡ、ＴＬＲ、ＪＡＫ、ＢＴＫ、ＴＹＫ、ＳＹＫ、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＮＦκＢ、ＮＦＡＴ、ＳＴＡＴまたはキナーゼの１つまたは複数を標的とする。ある実施形態において、細胞ベースの療法は、同種異系、自己またはｉＰＳＣ由来細胞を含む。ある実施形態において、細胞ベースの療法は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、赤血球、幹細胞、抗原提示細胞、マクロファージまたは樹状細胞の１つまたは複数を含む。

【0011】

[0011] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、ポリグリコール酸（PGA）、ポリ乳酸（PLA）、ポリスチレン、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、キトサン、多糖、脂質、ダイアモンド、鉄、亜鉛、カドミウム、金または銀の１つまたは複数を含む。ある実施形態において、負帯電粒子は、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）粒子である。ある実施形態において、ＰＬＧＡ粒子は、約９０：１０から約１０：９０まで、約５０：５０から約９０：１０まで、約５０：５０から約８０：２０まで、約９０：１０から約５０：５０まで、または約８０：２０から約５０：５０までの範囲のポリ乳酸：ポリグリコール酸の比率を含む。ある実施形態において、負帯電粒子は、ポリ乳酸：ポリグリコール酸を５０：５０で含む。

【0012】

[0012] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、１つまたは複数のカルボキシル基を粒子の表面に添加することにより表面機能化されている。

【0013】

[0013] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、約－１００ｍＶから約－１ｍＶまでのゼータ電位を有する。ある実施形態において、負帯電粒子は、約－８０ｍＶから約－３０ｍＶまでのゼータ電位を有する。

【0014】

[0014] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、約０．１μｍから約１０μｍまでの範囲の平均径を有する。ある実施形態において、負帯電粒子は、約３００ｎｍから約８００ｎｍまでの範囲の平均径を有する。

【0015】

[0015] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、静脈内投与される。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】[0016] 一次ＬＣＭＶ感染後の体重減少に対するＯＮＰ－３０２の影響を示す図である。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを静脈内尾静脈注射により２×１０^６のプラーク形成単位（pfu）ＬＣＭＶ（クローン１３）で感染させた。感染後５日目に、マウスを３つの処置群の１つに無作為に分け、尾静脈注射により指定の処置剤を投与した。マウスを体重減少について観察した。（１処置群当たりのｎ＝５）（^＊＝ｐ＜０．０５、^＊＊＝ｐ＜０．００５、^＊＊＊＝ｐ＜０．０００５、^＊＊*＊＝ｐ＜０．００００５）。

【図2A】[0017] ＬＣＭＶで感染させたマウスの脾臓における免疫細胞に対するＯＮＰ－３０２の影響を示す図である。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを静脈内尾静脈注射により２×１０^６のプラーク形成単位（pfu）ＬＣＭＶ（クローン１３）で感染させた。感染後５日目から、連続５日間にわたって（５～９日目）静脈内尾静脈注射によりマウスを食塩水またはＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）で処置した。マウスを体重減少について毎日観察した。１２日目に、感染後マウスを屠殺し、それらの脾臓および血液を採取した。

【図2B】アッセイした脾細胞および白血球のフローサイトメトリデータを示す図である。

【図2C】アッセイした脾細胞および白血球のフローサイトメトリデータを示す図である。

【図2D】アッセイした脾細胞および白血球のフローサイトメトリデータを示す図である。

【図2E】アッセイした脾細胞および白血球のフローサイトメトリデータを示す図である。

【図2F】アッセイした脾細胞および白血球のフローサイトメトリデータを示す図である。（^＊＝ｐ＜０．０５、^＊＊＝ｐ＜０．００５、^＊＊＊＝ｐ＜０．０００５、^＊＊*＊＝ｐ＜０．００００５）。

【図3】[0018] ＬＣＭＶで感染させたマウスの脾臓における免疫細胞およびウイルス力価に対するＯＮＰ－３０２の影響を示す図である。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを静脈内尾静脈注射により２×１０^６のプラーク形成単位（pfu）ＬＣＭＶ（クローン１３）で感染させた。感染後５日目から、連続５日間にわたって（５～９日目）静脈内尾静脈注射によりマウスを食塩水またはＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）で処置した。各群のマウスのサブセットを感染後１２および３５日目に屠殺した。脾臓および血液をマウスから採取した。脾細胞および血液の白血球をフローサイトメトリによってアッセイした。脾臓におけるＬＣＭＶウイルス力価をプラークアッセイにより測定した。（^＊＝ｐ＜０．０５、^＊＊＝ｐ＜０．００５、^＊＊＊＝ｐ＜０．０００５、^＊＊*＊＝ｐ＜０．００００５）。

【図4A】[0019] Ｈ１Ｎ１インフルエンザ感染症に感染させた高齢マウスにおける肺機能に対するＯＮＰ－３０２の影響を示す図である。雌のＣ５７ＢＬ／６マウスに麻酔し、６００ｐｆｕのＨ１Ｎ１インフルエンザウイルスに経鼻感染させた。感染後３日目からマウスを食塩水またはＯＮＰ－３０２で処置した。処置剤を連続５日間にわたって（３～７日目）１日１回投与した。

【図4B】パルスオキシメータ（MouseStar Jr.）を使用して血液中の酸素飽和度を毎日測定することによってアッセイした肺機能を示す図である（ｎ≧２２）。感染後９日目にマウスを屠殺し、単球（CD45+/CD11b+）、炎症性単球（CD45+/CD11ｂ＋/Ly6C+）および好中球（CD45+/Ly6G+）のレベルを気管支肺胞洗浄（BAL）によりアッセイした。

【図4C】フローサイトメトリによる脾臓データを示す図である（n≧9）を示す図である。

【図4D】炎症性タンパク質のレベルを示す図である。

【図4E】ＭＰＯ、およびＩＬ－６を示す図である。

【図4F】ＥＬＩＳＡを使用して感染後９日目にＢＡＬを試験したＣＸＣＬ－５を示す図である（ｎ≧１２）。

【図4G】ＢＡＬによる損傷マーカーアルブミンのアッセイにより評価した肺損傷を示す図である。

【図4H】感染後９日目にマウスから回収し、免疫浸潤のレベルを評価するために病理組織分析した肺組織を示す図である。（^＊＝ｐ＜０．０５、^＊＊＝ｐ＜０．００５、^＊＊＊＝ｐ＜０．０００５、^＊＊*＊＝ｐ＜０．００００５）。

【図5A】[0020] 生体外でＬＰＳにより刺激されたヒトＰＢＭＣからの炎症促進性サイトカインの生成を阻害する負帯電粒子ＯＮＰ－３０２の効果を示す図である。新たに単離したヒトＰＢＭＣを指定濃度のＯＮＰ－３０２とともに３０分間培養した後、０．１ｎｇ／ｍＬのＬＰＳとともに２４時間コインキュベートした。細胞培養上澄みをＬＰＳの添加後６時間、１２時間および２４時間目に採取し、ＩＬ－１βのレベルを測定した。

【図5B】ＭＣＰ－１のレベルを示す図である。

【図5C】ＥＬＩＳＡにより測定したＴＮＦ－αのレベルを示す図である。

【図6】[0021] 実験室内で加熱死菌（HK菌）（黄色ブドウ球菌）により刺激された単球による炎症促進性ＩＬ－６の生成に対する負帯電粒子ＯＮＰ－３０２の影響を示す図である。Ｍｏｎｏ－Ｍａｃ－０６細胞を１００μｇ／ｍＬのＣＮＰ－３０１および加熱死菌（HK菌）（黄色ブドウ球菌）とともに２４時間コインキュベートした。非刺激細胞および食塩水を陰性対照として使用した。インキュベートの２４時間後に、細胞培養上澄みを採取し、ＩＬ－６のレベルをＥＬＩＳＡによりアッセイした。

【発明を実施するための形態】

【0017】

[0022] サイトカインストーム症候群（CSS）および急性呼吸窮迫症候群（ARDS）は、治療しなければ、重篤な全身性炎症、多臓器不全、さらには死をもたらす、一連の炎症事象によって引き起こされる重度の臨床状態である。ＣＳＳおよびＡＲＤＳは、無制御のフィードフォワード免疫活性化および増幅をもたらす炎症促進性骨髄由来細胞（例えば、単球、好中球およびマクロファージ）の無秩序の活性化および増加ならびに過剰な炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン、ケモカインおよび他のタンパク質）の生成による病理学的過剰炎症によって引き起こされる。この無秩序の炎症性免疫反応は、全身性炎症を生じさせて、多臓器不全、さらには死をもたらす。

【0018】

[0023] 本開示は、ＣＳＳおよびＡＲＤＳを治療するための本明細書に記載の負帯電粒子、および該負帯電粒子を含む組成物に関する。本開示の負帯電粒子は、ＣＳＳおよびＡＲＤＳの症状を緩和または軽減することができる。本開示の負帯電粒子は、ＣＳＳおよびＡＲＤＳの発病に重要な役割を果たす炎症促進性骨髄由来細胞（例えば、単球、好中球およびマクロファージ）に優先的に吸収される。粒子を吸収すると、これらの細胞は肝臓および脾臓で非炎症的に隔離される。その結果、ＣＳＳおよびＡＲＤＳ時に病理学的過剰炎症を引き起こす陽性フィードバックループに関与可能な炎症促進性骨髄由来細胞が少なくなり、炎症の消散をもたらす。炎症促進性骨髄由来細胞を優先的に標的とすると、他の免疫調節性および有益性組織修復機能が影響を受けないため、広範的免疫抑制を生じることなく病理学的炎症が消散すること確実にし、向上した回復をもたらす。

【0019】

[0024] あらゆる図面およびそれらに含まれる付属書を含むすべての刊行物、特許および特許出願は、各々の個別の刊行物、特許もしくは特許出願、図面または付属書が、あらゆる目的のためにその全体が参照により組み込まれていることを具体的および個別に示唆されるのと同様の程度に、あらゆる目的のためにそれらの全体が参照により組み込まれている。

【0020】

定義
[0025] 以下の用語は、当業者によく理解されていると考えられるが、

【0021】

[0026] ここに開示されている主題の説明を容易にするために以下の定義を明記する。

【0022】

[0027] 本明細書および添付の特許請求の範囲に用いられている単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上そうでないことが明記されている場合を除いて複数形を含むことに留意する。

【0023】

[0028] 本明細書に用いられている「粒子」とは、主題の任意の非組織由来組成物を指し、球体もしくは球状物体、ビーズまたはリポソームであってもよい。「粒子」という用語、「免疫修飾粒子」という用語、および「ビーズ」という用語は、文脈に応じて、同じ意味で用いられてもよい。また、「粒子」という用語は、ビーズおよび球体を包含するように用いられてもよい。

【0024】

[0029] 本明細書に用いられている「負帯電粒子」は、０より小さい正味表面電荷（本明細書ではゼータ電位とも称する）を保有する粒子を指す。ゼータ電位とは、固体表面とその液体媒体との界面に発生する電荷である。「負のゼータ電位」とは、ミリボルト（ｍＶ）で表され、ゼータ電位を産出する当該分野で公知の測定装置、例えば、ＮａｎｏＢｒｏｏｋ ＺｅｔａＰｌｕｓゼータ電位分析装置またはＭａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒにより測定される、０より小さい粒子の正味表面電荷を有する粒子を指す。ある実施形態において、負のゼータ電位は、粒子の表面に存在する陰性基によって与えられてもよい。

【0025】

[0030] ある実施形態において、「負帯電粒子」は、その表面が、負電荷を与えるように機能化された粒子（本明細書では「表面機能化粒子（SEP）」と称する）であってもよい。ある実施形態において、表面機能化は、１つまたは複数の官能基を粒子の表面に導入することによって行われる。ある実施形態において、負電荷は、カルボキシル化（すなわち、粒子表面に対する１つまたは複数のカルボキシル基の添加）、または他の陰性基（生理的pHにおいて負電荷を担持する基）、例えば、限定することなくスルホン酸もしくはリン酸の添加によって与えられてもよい。ある実施形態において、官能基は、粒子の表面、芯（例えばビーズ）の表面に配置された上層の成分、または粒子を構成する材料の成分に化学的に結合されてもよく、本明細書に記載のゼータ電位を与えるために十分な量の官能基が粒子表面に提供される。例えば、酸末端封止ＰＬＧＡ重合体はカルボキシル基を含み、これらのカルボキシル基は、本明細書に記載のゼータ電位を有する負帯電粒子を与えるために粒子の表面に提供されてもよい。特定の実施形態において、負帯電粒子は、粒子の表面にカルボキシル基を含む。例えば、それぞれあらゆる目的のためにその全体が参照により組み込まれている、Ｆｒｏｉｍｏｗｉｃｚら、Ｃｕｒｒ Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ １７：９００～９１２頁、２０１３年、または米国第２０２０／００９３７５３号には、負帯電粒子の作製方法が記載されている。ある実施形態において、負帯電粒子は、療法薬を含まない、例えばペプチドもしくは抗原部分または他の生物活性剤が結合されないことを想定する。いくつかの実施形態において、ポリペプチド、抗体、核酸、脂質、小分子、炭水化物および界面活性剤などの標的化剤を添加することにより、負帯電粒子をさらに修飾することができる。本開示により当該さらなる修飾が想定されるが、本明細書に記載の負帯電粒子は、当該修飾を行うことなくＡＲＤＳまたはＣＳＳを治療することが可能である。

【0026】

[0031] 本明細書に用いられている「対象」という用語は、本明細書に記載の粒子が投与されるヒト、または哺乳動物もしくは霊長類を含む非ヒト動物を指す。対象としては、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ウサギ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ウシ、ならびにヒトおよび他の霊長類などの動物を挙げることができる。

【0027】

[0032] 「療法薬」という用語は、治療有効量を投与すると、治療している疾患または障害の１つまたは複数の症状または兆候を緩和または軽減することが可能である部分を指す。療法薬の非限定的な例としては、ペプチド、タンパク質または小分子療法薬を含む他の療法が挙げられる。誤解を避けるために、本開示の負帯電粒子は、それ自体が、治療効果があるため療法薬剤であり、ペプチド、タンパク質または小分子療法薬などのさらなる従来の療法薬の非存在下で本明細書に記載の状態を治療できる。

【0028】

[0033] 「治療有効量」という用語は、治療している疾患または障害の１つまたは複数の症状または兆候を緩和または軽減するのに有効である本開示の標的特異的組成物の量を示唆するように本明細書において用いられている。

【0029】

[0034] 本明細書において方法に関して用いられている「治療する（treat）」、「治療された（treated）」、「治療している（treating）」および「治療（treatment）」という用語は、事象、疾患または状態の１つまたは複数の症状、所見または進行を一時的または永久的のいずれかに、部分的または完全のいずれかに排除、軽減、抑制または緩和することを指す。当該治療は、完全に有用である必要がない。

【0030】

[0035] 以下の説明には、本開示を理解する上で有用であると考えられる情報が含まれる。本明細書に提示されている情報のいずれかが先行技術である、もしくはここに特許請求された開示内容に該当する、または参照されているいずれかの刊行物が具体的または暗示的に先行技術であることを認めるものではない。

【0031】

負帯電粒子
[0036] 本開示は、負帯電粒子、および負帯電粒子を含む組成物に関する。本開示は、ＡＲＤＳおよび／またはＣＳＳを含む様々な疾患または状態を治療または緩和するための負帯電粒子の使用にも関する。本開示の負帯電粒子は、免疫調節性を示す。明確に述べると、本開示の負帯電粒子は、治療有効薬剤であり、１つの有効薬剤としてＡＲＤＳおよび／またはＣＳＳを治療することが可能である。

【0032】

[0037] 負帯電粒子は、幅広い材料から形成できる。ある実施形態において、粒子は、生物学的使用に好適な材料から構成されている。ある実施形態において、粒子は、医薬として許容し得る材料から構成されている。ある実施形態において、粒子は、重合体、共重合体、デンドリマー、ダイアモンドナノ粒子、ポリスチレンナノ粒子または金属を含む。例えば、粒子は、ダイアモンド、ガラス、シリカ、ヒドロキシカルボン酸のポリエステル、ジカルボン酸のポリ酸無水物、またはヒドロキシカルボン酸とジカルボン酸の共重合体、および生体適合性金属から構成されていてもよい。ある実施形態において、粒子は、直鎖状もしくは分枝状、置換もしくは無置換、飽和もしくは不飽和、線状もしくは架橋アルカニル、ハロアルキル、チオアルキル、アミノアルキル、アリール、アラルキル、アルケニル、アラルケニル、ヘテロアリールもしくはアルコキシヒドロキシ酸のポリエステル、または直鎖状もしくは分枝状、置換もしくは無置換、飽和もしくは不飽和、線状もしくは架橋アルカニル、ハロアルキル、チオアルキル、アミノアルキル、アリール、アラルキル、アルケニル、アラルケニル、ヘテロアリールもしくはアルコキシジカルボン酸のポリ酸無水物から構成されていてもよい。また、粒子は、量子ドット、または量子ドットポリスチレン粒子（Joumaaら、（2006年）Langmuir 22: 1810～6頁）などの量子ドットから構成されるものであり得る。エステルと無水物結合の混合物（例えば、グリコール酸とセバシン酸の共重合体）を含む粒子も採用できる。例えば、粒子は、ポリグリコール酸（PGA）、ポリ乳酸（PLA）、ポリセバシン酸重合体（PSA）、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、［ｒｈｏ]ｏｌｙ（乳酸・セバシン酸）共重合体（PLSA）、ポリ（グリコール酸・セバシン酸）共重合体（PGSA）、硫酸ポリプロピレン重合体、ポリ（カプロラクトン）（PLC）、キトサン、多糖、糖、ヒアルロン酸、１つまたは複数の脂質、リポソーム、ポリエチレングリコール（PEG）、シクロデキストリン等を含む材料を含んでいてもよい。

【0033】

[0038] 限定することなく、カプロラクトン、カーボネート、アミド、アミノ酸、オルトエステル、アセタール、シアノアクリレートおよび分解性ウレタンの重合体または共重合体、ならびにこれらと直鎖状もしくは分枝状、置換もしくは無置換のアルカニル、ハロアルキル、チオアルキル、アミノアルキル、アルケニル、または芳香族ヒドロキシもしくはジカルボン酸との共重合体を含む生体適合性の生分解性重合体を使用して負帯電粒子を形成することもできる。また、反応性側鎖基を有する生物学的に重要なアミノ酸、例えば、リシン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、チロシンおよびシステイン、またはそれらの光学異性体を上記材料のいずれかとともに含めることができる。ある実施形態において、粒子は、ポリ（アスパラギン酸）、ポリ（ガンマグルタミン酸）またはポリ（グルタミン酸）などのアスパラギン酸またはグルタミン酸の重合体を含む。本開示に好適な生分解性材料としては、ＰＬＡ、ＰＧＡ、硫酸ポリプロピレンおよびＰＬＧＡ重合体、ならびに鉄（Fe）、亜鉛（Zn）、カドミウム（Cd）、金（Au）または銀（Ag）などの金属が挙げられる。生体適合性を有する非生分解性材料を本明細書に記載の粒子に使用することもできる。例えば、アクリレート、エチレン－酢酸ビニル、アシル置換酢酸セルロース、非分解性ウレタン、スチレン、塩化ビニル、フッ化ビニル、ビニルイミダゾール、クロロスルホン化オレフィン、酸化エチレン、ビニルアルコール、ＴＥＦＬＯＮ（登録商標）（Dupont、デラウエア州Wilmington）およびナイロンの非生分解性重合体を採用することができる。本明細書に用いられている「生分解性」とは、例えば、官能基が溶液中の水と反応することにより、分解し得る重合体を含む粒子を指す。本明細書に用いられている「分解」という用語は、分子量の低減または疎水性基の親水性基への変換のいずれかにより可溶性になることを指す。生分解性粒子は、体内に長時間存続せず、完全に分解する時間を制御できる。

【0034】

[0039] ある実施形態において、本開示の負帯電粒子は、哺乳動物の体内で生分解可能である。ある実施形態において、本開示の粒子は、ヒトの体内で生分解可能である。ある実施形態において、本開示の粒子は、水の存在下で加水分解して、安全な副産物を生成する。ある実施形態において、本開示の粒子は、生体内で加水分解して、安全な副産物を生成する。

【0035】

[0040] ある実施形態において、粒子は、ＰＧＡ、ＰＬＧ、ＰＬＡ、ポリスチレン、ＰＬＧＡ、ＰＥＧ、キトサン、脂質、糖、ヒアルロン酸、ＰＣＬ、ダイアモンド、Ｆｅ、Ｚｎ、Ｃｄ、ＡｕまたはＡｇから選択される１つまたは複数を含む。

【0036】

[0041] ある実施形態において、粒子は、ＰＧＡ、ＰＬＡ、ポリスチレンまたはＰＬＧＡを含む。ある実施形態において、粒子は、ＰＧＡ、ＰＬＡまたはＰＬＧＡを含む。

【0037】

[0042] 特定の実施形態において、粒子は、ＰＬＧＡを含む。ＰＬＧＡは安全であり、本質的にヒトの体内で生分解可能である。ＰＬＧＡは、水の存在下でエステル結合の加水分解し、本明細書に開示されている粒子の想定される投与量ではともに安全である乳酸およびグリコール酸を生成することができる。

【0038】

[0043] ある実施形態において、負帯電粒子は、２つの単量体のモル比が、約９９：１から約１：９９まで、例えば、約９９：１、約９５：５、約９０：１０、約８５：１５、約８０：２０、約７５：２５、約７０：３０、約６５：３５、約６０：４０、約５５：４５、約５０：５０、約４５：５５、約４０：６０、約３５：６５、約３０：７０、約２５：７５、約２０：８０、約１５：８５、約１０：９０、約５：９５および約１：９９の範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲の共重合体である。ある実施形態において、粒子は、２つの単量体のモル比が約５０：５０から約９９：１まで、約６０：４０から約９５：５まで、約７０：３０から約９０：１０まで、もしくはその中のいずれかの値の範囲、またはその中のいずれかの部分範囲の共重合体である。

【0039】

[0044] ある実施形態において、ポリ乳酸：ポリグリコール酸のモル比が、約９９：１、約９５：５、約９０：１０、約８５：１５、約８０：２０、約７５：２５、約７０：３０、約６５：３５、約６０：４０、約５５：４５、約５０：５０、約４５：５５、約４０：６０、約３５：６５、約３０：７０、約２５：７５、約２０：８０、約１５：８５、約１０：９０、約５：９５、約１：９９、ならびにこれらの値の間にあるすべての値および範囲を含む約９９：１から約１：９９までの範囲のＰＬＧＡを含む。ある実施形態において、粒子は、ポリグリコール酸：ポリ乳酸のモル比が約５０：５０から約９０：１０まで、約５０：５０から約８０：２０まで、約１０：９０から約５０：５０まで、約２０：８０から約５０：５０まで、またはその中のいずれかの値もしくはその中のいずれかの部分範囲を含む約１０：９０から約９０：１０までの範囲のＰＬＧＡ（PLGとPLAの共重合体）である。特定の実施形態において、粒子は、ポリ乳酸：ポリグリコール酸を５０：５０で含む。ある実施形態において、粒子は、ポリ乳酸：ポリグリコール酸のモル比が５０：５０のＰＬＧＡである。

【0040】

[0045] 本開示の粒子は、当該技術分野で公知の任意の手段によって製造できる。粒子を製造する例示的な方法としては、マイクロエマルジョン重合、界面重合、沈殿重合、エマルジョン蒸発、エマルジョン拡散、溶媒置換、および塩析（Astete and Sabliov、J. Biomater. Sci. Polymer Edn.、17: 247～289（2006年））が挙げられるが、それらに限定されない。本明細書で想定される粒子の作製方法は、米国特許第９，６１６，１１３号およびＷＯ／２０１７／１４３３４６に開示されている。それらの全体が参照により本明細書に組み込まれている米国第２０１５／００１０６３１号および米国第２０１５／０１７４１５５号をも参照されたい。

【0041】

[0046] ＰＬＧＡ粒子の製造工程の操作により、粒子特性（例えば、サイズ、サイズ分布、ゼータ電位、形態、疎水性／親水性、ポリペプチドの取り込み等）を制御できる。粒子のサイズは、限定することなく、重合体、例えばＰＬＧＡの濃度、粒子の製造に使用する溶媒、有機相の性質、製造に使用する界面活性剤、連続および不連続相の粘度、使用する溶媒の性質、使用する水の温度、超音波処理、蒸発速度、添加剤、剪断応力、滅菌、および任意の封入抗原またはポリペプチドの性質を含む多くの要因に影響される。

【0042】

[0047] 粒子は、界面活性剤をさらに含んでいてもよいことが想定される。界面活性剤は、陰イオン性、陽イオン性または非イオン性であり得る。界面活性剤は、疎水性または親水性であり得る。粒子合成では、ポロクサマーおよびポロキサミン系の界面活性剤が広く使用されている。使用できる界面活性剤としては、ポリビニルアルコール（PVA）、ポリアクリル酸、ＰＥＧ、Ｔｗｅｅｎ－８０、ゼラチン、デキストラン、プルロニックＬ－６３、メチルセルロース、レシチン、ＤＭＡＢ、ＰＥＭＡ、またはそれらの組合せが挙げられるが、それらに限定されない。また、限定することなく、ビタミンＥ ＴＰＧＳ（Ｄ－α－トコフェリルポリエチレングリコール１０００サクシネート）およびアミノ酸の重合体（例えば、リシン、アルギニン、アスパラギン酸、グルタミン酸、セリン、トレオニン、チロシンおよびシステイン、またはそれらの光学異性体）を含む生分解性および生体適合性界面活性剤。ある実施形態において、プロセス界面活性剤は、ポリビニルアルコールもしくはポリアクリル酸、またはそれらの組合せから選択される。特定の実施形態において、２つの界面活性剤が使用される。例えば、粒子がダブルエマルジョン法によって生成される場合は、２つの界面活性剤が、第１のエマルジョンに対する疎水性界面活性剤、および第２のエマルジョンに対する疎水性界面活性剤を含むことができる。ある実施形態において、ナノ沈殿、共沈殿、不活性ガス濃縮、スパッタリング、マイクロエマルジョン、ゾルゲル法、交互積層法またはイオン性ゲル化法によって製造される。ナノ粒子を製造するためのいくつかの方法が、文献に記載されており、参照により本明細書に組み込まれている^９、１０。

【0043】

[0048] ある実施形態において、本開示の粒子は、負のゼータ電位を有する。いくつかの実施形態において、粒子のゼータ電位は、約－１００ｍＶから約－１ｍＶまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲にある。ある実施形態において、粒子のゼータ電位は、約－８０ｍＶから約－３０ｍＶまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲にある。ある実施形態において、粒子のゼータ電位は、約－１００ｍＶから約－４０ｍＶまで、約－８０ｍＶから約－３０ｍＶまで、約－７５ｍＶから約－４０ｍＶまで、約－７０ｍＶから約－３０ｍＶまで、約－６０ｍＶから約－４５ｍＶまで、約－６０ｍＶから約－３５ｍＶまで、約－５０ｍＶから約－４０ｍＶまで、約－５５ｍＶから約－３０ｍＶまで、約－５０ｍＶから約－３５ｍＶまでであって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む。様々な実施形態において、ゼータ電位は、約－３０ｍＶ、－３５ｍＶ、－４０ｍＶ、－４５ｍＶ、－５０ｍＶ、－５５ｍＶ、－６０ｍＶ、－６５ｍＶ、－７０ｍＶ、－７５ｍＶ、－８０ｍＶ、－８５ｍＶ、－９０ｍＶ、－９５ｍＶまたは－１００ｍＶであって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む。

【0044】

[0049] ある実施形態において、粒子は、約０．０５μｍから約１５μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．１μｍから約１０μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．２μｍから約２μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．３μｍから約５μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．３μｍから約３μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．３μｍから約１μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．３μｍから約０．８μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約０．５μｍから約１μｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約１００ｎｍから約１５００ｎｍまで、約２００ｎｍから約２０００ｎｍまで、約１００ｎｍから約１０００ｎｍまで、約３００ｎｍから約１０００ｎｍまで、約３００ｎｍから約９００ｎｍまで、約３５０ｎｍから約８５０ｎｍまで、約３５０ｎｍから約８５０ｎｍまで、約３５０ｎｍから約７５０ｎｍまで、約３７５ｎｍから約８２５ｎｍまで、約４００ｎｍから約８００ｎｍまで、または約２００ｎｍから約７００ｎｍまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約１００ｎｍ、２００ｎｍ、３００ｎｍ、４００ｎｍ、５００ｎｍ、６００ｎｍ、７００ｎｍ、８００ｎｍ、９００ｎｍ、１０００ｎｍ、１１００ｎｍ、１２００ｎｍ、１３００ｎｍ、１４００ｎｍ、１５００ｎｍまたは２０００ｎｍであって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む平均または中間径を有する。ある実施形態において、粒子は、約３００ｎｍから約８００ｎｍまでの範囲の平均または中間径を有する。

【0045】

[0050] ある実施形態において、粒子を形成するのに使用される重合体（例えばPLGA）は、約５００から約１，０００，０００Ｄａまで、例えば５００Ｄａ、６００Ｄａ、７００Ｄａ、８００Ｄａ、９００Ｄａ、１，０００Ｄａ、２，０００Ｄａ、３，０００Ｄａ、４，０００Ｄａ、５，０００Ｄａ、６，０００Ｄａ、７，０００Ｄａ、８，０００Ｄａ、９，０００Ｄａ、１０，０００Ｄａ、１１，０００Ｄａ、１２，０００Ｄａ、１３，０００Ｄａ、１４，０００Ｄａ、１５，０００Ｄａ、１６，０００Ｄａ、１７，０００Ｄａ、１８，０００Ｄａ、１９，０００Ｄａ、２０，０００Ｄａ、２１，０００Ｄａ、２２，０００Ｄａ、２３，０００Ｄａ、２４，０００Ｄａ、２５，０００Ｄａ、２６，０００Ｄａ、２７，０００Ｄａ、２８，０００Ｄａ、２９，０００Ｄａ、３０，０００Ｄａ、３１，０００Ｄａ、３２，０００Ｄａ、３３，０００Ｄａ、３４，０００Ｄａ、３５，０００Ｄａ、３６，０００Ｄａ、３７，０００Ｄａ、３８，０００Ｄａ、３９，０００Ｄａ、４０，０００Ｄａ、４１，０００Ｄａ、４２，０００Ｄａ、４３，０００Ｄａ、４４，０００Ｄａ、４５，０００Ｄａ、４６，０００Ｄａ、４７，０００Ｄａ、４８，０００Ｄａ、４９，０００Ｄａ、５０，０００Ｄａ、５１，０００Ｄａ、５２，０００Ｄａ、５３，０００Ｄａ、５４，０００Ｄａ、５５，０００Ｄａ、５６，０００Ｄａ、５７，０００Ｄａ、５８，０００Ｄａ、５９，０００Ｄａ、６０，０００Ｄａ、６１，０００Ｄａ、６２，０００Ｄａ、６３，０００Ｄａ、６４，０００Ｄａ、６５，０００Ｄａ、６６，０００Ｄａ、６７，０００Ｄａ、６８，０００Ｄａ、６９，０００Ｄａ、７０，０００Ｄａ、７１，０００Ｄａ、７２，０００Ｄａ、７３，０００Ｄａ、７４，０００Ｄａ、７５，０００Ｄａ、７６，０００Ｄａ、７７，０００Ｄａ、７８，０００Ｄａ、７９，０００Ｄａ、８０，０００Ｄａ、８１，０００Ｄａ、８２，０００Ｄａ、８３，０００Ｄａ、８４，０００Ｄａ、８５，０００Ｄａ、８６，０００Ｄａ、８７，０００Ｄａ、８８，０００Ｄａ、８９，０００Ｄａ、９０，０００Ｄａ、９１，０００Ｄａ、９２，０００Ｄａ、９３，０００Ｄａ、９４，０００Ｄａ、９５，０００Ｄａ、９６，０００Ｄａ、９７，０００Ｄａ、９８，０００Ｄａ、９９，０００Ｄａまたは１００，０００Ｄａの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む範囲の分子量を有する。

【0046】

[0051] ある実施形態において、粒子は、（ｉ）生分解性重合体（例えばPGA、PLAまたはＰＬＧＡ）、（ｉｉ）－１００ｍＶから－３０ｍＶまでの（例えば、－１００ｍＶ、－９０ｍＶ、－８０ｍＶ、－７０ｍＶ、－６０ｍＶ、－５０ｍＶ、－４０ｍＶ、－３０ｍＶであって、これらの値の間にあるすべての値および部分範囲を含む）範囲のゼータ電位、および（ｉｉｉ）約０．３μｍから約５μｍまでの範囲（例えば０．３μｍ、０．４μｍ、０．５μｍ、０．６μｍ、０．７μｍ、０．８μｍ、０．９μｍ、１．０μｍ、１．１μｍ、１．２μｍ、１．３μｍ、１．４μｍ、１．５μｍ、１．６μｍ、１．７μｍ、１．８μｍ、１．９μｍ、２．０μｍ、２．１μｍ、２．２μｍ、２．３μｍ、２．４μｍ、２．５μｍ、２．６μｍ、２．７μｍ、２．８μｍ、２．９μｍ、３．０μｍ、３．１μｍ、３．２μｍ、３．３μｍ、３．４μｍ、３．５μｍ、３．６μｍ、３．７μｍ、３．８μｍ、３．９μｍ、４．０μｍ、４．１μｍ、４．２μｍ、４．３μｍ、４．４μｍ、４．５μｍ、４．６μｍ、４．７μｍ、４．８μｍ、４．９μｍまたは約５．０μｍ）の平均粒径を含む。

【0047】

[0052] 粒子のサイズは、重合体濃度に影響され得る。概して、重合体濃度が高いとより大きな粒子が形成される。例えば、プロピレンカーボネート溶媒を使用する場合は、ＰＬＧＡ濃度が１％から４％（ｗ／ｖ）に上昇すると、中間粒子サイズが約２０５ｎｍから約２９０ｎｍに増大し得る。あるいは、酢酸エチルおよび５％プルロニックＦ－１２７中では、ＰＬＧＡ濃度が１％から５％（ｗ／ｖ）に上昇すると、中間粒子サイズが１２０ｎｍから２３０ｎｍに増大する。

【0048】

[0053] 連続および不連続相の粘度は、より小さい粒子を形成する上での要の工程である拡散プロセスに影響を与える重要なパラメータでもある。分散相の粘度の上昇に伴って粒子のサイズが大きくなるのに対して、粘性連続相の拡大に伴って粒子のサイズが小さくなる。概して、水性溶媒に対する有機溶媒の相比が低くなるほど、粒子サイズが小さくなる。

【0049】

[0054] ホモジナイザの速度および撹拌も粒子サイズに影響する。概して、速度が大きくなり撹拌が強くなると、粒子サイズが小さくなるが、速度および撹拌がさらに増大しても粒子サイズが小さくならないポイントがある。高圧ホモジナイザを用いてエマルジョンをホモジナイズすると、単に高速に撹き混ぜた場合と比較して、サイズの低減に好ましい影響がもたらされる。例えば、５％ＰＶＡの相割当量が２０％であると、撹き混ぜ撹拌による中間粒子サイズが２８８ｎｍであり、（３００バールの高圧）ホモジナイズによる中間粒子サイズが２３１ｎｍである。

【0050】

[0055] 溶媒の拡散を向上させるために添加される水の温度を変更することによって粒子サイズの低減を達成することもできる。概して、中間粒子サイズは、水の温度の上昇に伴って小さくなる。

【0051】

[0056] ＰＬＧＡの分子質量も最終的な中間粒子サイズに影響し得る。概して、分子質量が大きくなると、中間粒子サイズが大きくなる。例えば、ＰＬＧＡの組成および分子質量が（例えば、５０：５０のPLGAでは１２から４８ｋＤａ、７５：２５PLGAでは１２から９８ｋＤａに）変化すると、中間粒子サイズが（それぞれ約１０２ｎｍから１５４ｎｍ、約１３２ｎｍから１５２ｎｍに）変化する。粒子が同じ分子質量であっても、それらの組成が平均粒子サイズに影響し、例えば、５０：５０の比率の粒子は、一般に、７５：２５の比率の粒子より小さい粒子を形成し得る。重合体の末端基も粒子サイズに影響する。例えば、エステル末端基で調製された粒子は、平均サイズが７４０ｎｍ（ＰＩ＝０．３９４）の粒子を形成するのに対して、酸ＰＬＧＡ末端基での中間サイズは２４０ｎｍ（ＰＩ＝０．２２５）である。

【0052】

[0057] 使用される溶媒も粒子サイズに影響し得る。概して、溶液の表面張力を低減する溶媒は、粒子サイズを低減する。負帯電粒子の調製時に、真空下での蒸発により有機溶媒を除去して、重合体およびポリペプチドの損傷を回避するとともに、最終的な粒子サイズの低減を促進することができる。概して、真空下での有機溶媒の蒸発は、より小さな粒子を形成する上でより効率的である。例えば、真空下での蒸発は、通常速度の蒸発によりもたらされる中間粒子サイズと比較しておよそ３０％小さな中間粒子サイズをもたらす。本開示の粒子の生成に使用できる有機溶媒としては、酢酸エチル、メチルエチルケトン、プロピレンカーボネートおよびベンジルアルコールが挙げられるが、それらに限定されない。本発明の粒子の生成に使用できる他の溶媒としては、アセトン、テトラヒドロフラン（THF）、クロロホルム、および塩素系のメンバー、塩化メチルが挙げられるが、それらに限定されない。

【0053】

[0058] ある実施形態において、粒子の負電荷は、粒子の表面にカルボキシル基が存在することによって達成される。いくつかの実施形態において、１つまたは複数のカルボキシル基が粒子の表面上に結合している。カルボキシル化により、そうでなければ中性の粒子上に負電荷を生成する、または負帯電粒子の負電荷を増加することができる。ある実施形態において、粒子のカルボキシル化は、限定することなく、ポリ（エチレン・マレイン酸無水物）（PEMA）、ポリアクリル酸（PAA）、ヒアルロン酸、ポリアミノ酸を含む、カルボキシル基を添加する任意の化合物を使用して達成できる。理論に縛られるものではないが、カルボキシル化により負帯電表面が生成され、この負電荷は、コラーゲン性（MARCO）構造単球を有するマクロファージ受容体を含む食細胞および単球による負帯電粒子の吸収を促すことによって治療反応を生じさせる。理論に縛られるものではないが、本開示の負帯電粒子は、単球およびマクロファージに発現したスカベンジャー受容体に結合することができると考えられる。本開示の負帯電粒子は、他の調節免疫プロセスに概ね影響を与えることなく、肺への炎症促進性単球の取り込みを抑制することができると考えられる。ある実施形態において、炎症促進性単球および好中球に吸収された負帯電粒子は、単球および好中球を脾臓および肝臓へとリダイレクトすることができ、そこで炎症促進性単球および好中球を隔離し、かつ／またはアポトーシスさせることができる。この単球および好中球のリダイレクトは、単球が大量の炎症促進性タンパク質を患部に放出すること、例えば肺に放出して急性呼吸窮迫症候群（ARDS）をもたらし得ること、ならびに／または肝臓、腎臓などの臓器およびＣＮＳに放出してＡＲＤＳおよびＣＳＳに関連する多臓器不全および死亡をもたらすことを防止すると考えられる。ある実施形態において、負帯電粒子の吸収は、炎症促進性単球、好中球およびマクロファージによる。

【0054】

[0059] ウイルス感染（例えばWNV）を含む急性過剰炎症のモデルにおいて、炎症性単球は、あらゆる他の細胞型と比較して有意に多くの負帯電粒子を吸収することが見いだされた。急性炎症時の負帯電粒子による処置により、炎症性単球が肝臓および脾臓で隔離された。例えば、負帯電粒子が標識されたＦＩＴＣ（フルオレセインイソチオシアネート）で処置されたＷＮＶ感染マウスの脾臓は、中性粒子（負に帯電していない）またはビヒクル対照で処置されたものと比較して有意に多くの炎症性単球を有しており、これらのＷＮＶ感染マウスにおける末梢血液中の循環炎症性単球の減少に対応していた。その結果、脳内に浸潤する炎症性単球が減少して、炎症の消散がもたらされた。さらに、感染後６日目にＷＮＶ感染マウスの骨髄からＬｙ６Ｃｈｉ単球を選別し、ＰＫＨ２６を標識し、感染後６日目に偽感染またはＷＮＶ感染レシピエントに移し、その直後に負帯電粒子、中性粒子またはビヒクルのみを注射した。偽感染およびＷＮＶ感染マウスにおけるＰＫＨ２６標識細胞の脾臓内への移動を観察したが、負帯電粒子処置では、ＷＮＶ感染マウスの脾臓におけるＬｙ６ｃｈｉ単球の蓄積が有意に大きかった。これらの試験によるデータは、注入された負帯電粒子が炎症性単球に吸収され、脾臓に送られると、炎症部位に移動する血液中の炎症性単球の数が減少することを示唆するものである。あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれている米国第９，９１３，８８３号およびＧｅｔｔｓら（Sci. Trans. Med、2014年）を参照されたい。

【0055】

[0060] 別の試験において、ＭＡＲＣＯは、ＷＮＶ感染マウスの脾臓から単離されたＬｙ６Ｃｈｉ／ＣＤ１１ｂ＋／ＣＤ１１ｃ－ФＩＭの上方制御が見られたが、偽感染マウスでは見られなかった。チオグリコール酸を使用して腹膜炎症を誘導したＷＴマウスにおける負帯電粒子処置注入により、腹膜におけるＬｙ６Ｃｈｉ／ＣＤ１１ｂ＋ФＩＭの減少がもたらされた。しかし、同じくチオグリコール酸で誘導したＭＡＲＣＯ－／－（MARCO欠乏）マウスでは、Ｌｙ６Ｃｈｉ／ＣＤ１１ｂマクロファージが減少しておらず、負帯電粒子の吸収および有効性におけるＭＡＲＣＯの役割について直接示唆するものであった。興味深いことに、負帯電粒子は、負帯電粒子の注入の２時間後に、ＷＴマウスの脾臓において、アポトーシスマーカー、アネキシンＶおよびカスパーゼ－３陽性炎症性単球の数を有意に増加させたが、ＭＡＲＣＯ－／－マウスにおいては増加させなかった。このデータは、負帯電粒子が、ＭＡＲＣＯスカベンジャー受容体を介して吸収されて、下流のシグナル伝達経路を媒介することで、炎症性単球の移動、蓄積およびその後の脾臓でのアポトーシスをもたらし得る可能性が高いことを示唆するものである。あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれている米国第９，９１３，８８３号を参照されたい。

【0056】

[0061] したがって、これらの試験は、本明細書に記載の負帯電粒子が炎症性骨髄由来細胞（例えば単球）に吸収され、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している患者の処置に有用であることを示している。

【0057】

[0062] いくつかの実施形態において、主題の粒子の負帯電は、標的化剤の添加によって達成される。いくつかの実施形態において、標的化剤は、ペプチド、ポリペプチド、抗体、炭水化物、核酸、脂質、小分子および界面活性剤を含む。

【0058】

[0063] ある実施形態において、負帯電粒子は、単球、好中球、マクロファージ、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、ＮＫ Ｔ細胞、線維芽細胞、内皮細胞、含脂肪細胞、周皮細胞、内皮、血管系、リンパ管、間葉系間質細胞、間葉系幹細胞、および／または細胞外基質を優先的に標的とする。

【0059】

[0064] ある実施形態において、負帯電粒子は、単球、好中球およびマクロファージを標的とする（に吸収される）。ある実施形態において、負帯電粒子は、炎症促進性単球、好中球およびマクロファージを標的とする。ある実施形態において、負帯電粒子は、ウイルス感染、細菌感染、組織傷害、病原体、免疫指向性療法（例えば、CAR-T、抗体およびサイトカイン）、自己免疫性およびリウマチ性状態（例えば関節炎および狼瘡）、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、日和見感染、肺挫傷、外傷、化学物質、微粒子または他の刺激物質による気道傷害、胃内容物の誤嚥、および溺水により誘発されるＣＳＳおよびＡＲＤＳ時の免疫シグナル伝達によって取り込まれる炎症促進性単球、好中球およびマクロファージを標的とする。間接的肺傷害に起因するＡＲＤＳの例としては、出血性ショック、膵臓炎、重度の火傷、薬物過剰摂取、血液製剤の輸血、心肺バイパス、敗血症および再かん流傷害が挙げられる。ある実施形態において、負帯電粒子は、活性化され、呼吸器感染に反応して病理学的過剰炎症に寄与する炎症促進性単球、好中球およびマクロファージを標的とする。

【0060】

[0065] ある実施形態において、負帯電粒子は、別の治療有効薬剤を含まない（例えば、唯一の治療有効薬剤が負帯電粒子自体である）。ある実施形態において、負帯電粒子は、別の治療有効薬剤を有さない（すなわち含まない）。

【0061】

負帯電粒子を含む組成物
[0066] ヒトまたは他の哺乳動物に本明細書に記載の粒子を投与するために、粒子は、

【0062】

[0067] １つまたは複数の医薬として許容し得る担体を含む組成物に配合されてもよい。「医薬として、または薬理学的に許容し得る」という語句は、以下の記載される、当該技術分野で周知の経路を用いて投与された場合にアレルギー反応または他の有害な反応を生じない分子実体および組成物を指す。「医薬として許容し得る担体」としては、任意およびすべての臨床的に有用な溶媒、分散媒体、コーティング、抗菌および抗真菌剤、等張剤ならびに吸収遅延剤等が挙げられる。ある実施形態において、本明細書に開示されている粒子を含む組成物は、無菌組成物である。

【0063】

[0068] 本明細書に開示されている粒子を含む本開示の医薬組成物は、投与の経路に応じて医薬として許容し得る担体または添加物を含んでいてもよい。医薬組成物は、経口投与、経鼻投与、経皮投与、経肺投与、吸入投与、口腔投与、舌下投与、腹腔内投与、皮下投与、筋肉内投与、静脈内投与、直腸内投与、胸膜内投与、鞘内投与、門脈内投与または非経口投与に好適であり得る。ある実施形態において、本明細書に開示されている負帯電粒子を含む医薬組成物は静脈内投与用である。ある実施形態において、医薬組成物は注射用溶液である。ある実施形態において、医薬組成物は、静脈内投与用の即使用可能配合物である。ある実施形態において、医薬組成物は固形配合物である。ある実施形態において、医薬組成物は、使用に際して復元される凍結乾燥組成物である。

【0064】

[0069] ある実施形態において、医薬として許容し得る担体または添加物は、結着剤、滑剤、不活性希釈剤、抗凍結剤、緩衝剤、香料、防腐剤、崩壊剤、または分散剤の１つまたは複数から選択される。

【0065】

[0070] 当該担体または添加剤の非限定的な例としては、水、医薬として許容し得る有機溶媒、コラーゲン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシビニル重合体、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸ナトリウム、アルギン酸ナトリウム、水溶性デキストラン、カルボキシメチルデンプンナトリウム、ペクチン、メチルセルロース、エチルセルロース、キサンタンガム、アラビアゴム、カゼイン、ゼラチン、寒天、ジグリセリン、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、ワセリン、パラフィン、ステアリルアルコール、ステアリン酸、ヒト血清アルブミン（HSA）、マンニトール、ソルビトール、ラクトース、医薬として許容し得る界面活性剤等が挙げられる。使用される添加剤は、本開示の剤形に応じて、限定することなく、上述のものまたはそれらの組合せから適宜選択される。溶液またはエマルジョンについては、好適な担体としては、例えば、食塩水および緩衝媒体を含む水溶液またはアルコール／水溶液、エマルジョンまたは懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルとしては、塩化ナトリウム溶液、リンゲルデキストロース、デキストロースおよび塩化ナトリウム、乳酸加リンゲルまたは固定油を挙げることができる。静脈内ビヒクルとしては、様々な添加剤、防腐剤、または流体、栄養もしくは電解質補給物を挙げることができる。多種多様な水性担体、例えば、無菌リン酸緩衝食塩水、静菌水、水、緩衝水、０．４％食塩水および０．３％グリシン等が好適であり、軽度の化学修飾等が施された安定性向上のための他のタンパク質、例えば、アルブミン、リポタンパク質、グロブリン等を含むことができる。

【0066】

[0071] 所望の純度を有する粒子を任意選択の生理的に許容し得る担体、賦形剤または安定剤と混合することにより、保存用に粒子を含む医薬組成物を調製することができる（Remington’s Pharmaceutical Sciences、第16版、Osol, A.編（1980年）参照）。ある実施形態において、粒子を含む医薬組成物は、凍結乾燥配合物または水溶液の形態である。許容し得る担体、賦形剤または安定剤は、採用される投与量および濃度でレシピエントに対して無毒性であり、リン酸塩、クエン酸塩（例えばクエン酸ナトリウム二水和物）、コハク酸塩および他の有機酸などの緩衝剤、アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤、防腐剤（例えば、塩化オクタデシルジメチルベンジルアンモニウム、塩化ヘキサメトニウム、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンズエトニウム、フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール、メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン、カテコール、レゾルシノール、シクロヘキサノール、３－ペンタノール、およびｍ－クレゾール）、（１０残基未満の）低分子量ポリペプチド、血清アルブミン、ゼラチンもしくはイムノグロブリンなどのタンパク質、ポリビニルピロリドンなどの親水性重合体、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニンもしくはリシンなどのアミノ酸、単糖類、二糖類、およびグルコース、マンノースもしくはデキストリンを含む他の炭水化物、ＥＤＴＡなどのキレート剤、スクロース、マンニトール、トレハロースもしくはソルビトールなどの糖、ナトリウムなどの塩形成性対イオン、または金属錯体（例えばＺｎ-タンパク質錯体）を含む。ある実施形態において、糖を抗凍結剤として使用することができる。

【0067】

[0072] 粒子の調製物を凍結乾燥によって安定化させることができる。トレハロース、スクロースおよび／またはマンニトール（例えばD-マンニトール）などの抗凍結剤を添加することにより、凍結乾燥による粒子の凝集を低下させることができる。ある実施形態において、本明細書に開示されている粒子を含む凍結乾燥組成物は、１つまたは複数の抗凍結剤および緩衝剤をも含む。

【0068】

[0073] 任意の好適な凍結乾燥技術および復元技術を採用することができる。粒子を含む凍結乾燥組成物を静脈内注射用無菌注射液で復元することができる。ある実施形態において、医薬組成物は、無菌注射液に凍結乾燥粒子を含む。ある実施形態において、医薬組成物は、注射用無菌水に凍結乾燥粒子を含む。

【0069】

[0074] ある実施形態において、本開示の組成物は、キットの形態であり得る。ある実施形態において、キットは、負帯電粒子を含む固形組成物、および注射に好適な溶液を含む個別組成物を含む。注射に好適な溶液は無菌液である。ある実施形態において、注射用無菌液は、水、グルコース溶液、デキストロース溶液、スクロース溶液および食塩水から選択される。ある実施形態において、キットは、負帯電粒子を含む凍結乾燥組成物、および注射に好適な溶液を含む個別組成物を含む。

【0070】

[0075] 本明細書に開示されているキットのいずれか１つにおいて、キットは、シリンジ、フィルター、および／または使用説明書をさらに含むことができる。

【0071】

負帯電粒子の治療上の使用
[0076] 本開示は、サイトカインストーム症候群（CSS）および急性呼吸窮迫症候群（ARDS）を治療するための本明細書に開示されている負帯電粒子の使用に関する。ある実施形態において、負帯電粒子は、ＣＳＳおよびＡＲＤＳの症状を治療するのに有用である。ＣＳＳおよびＡＲＤＳは、重篤な全身性炎症、多臓器不全、さらには死をもたらす、一連の炎症事象によって引き起こされる重度の臨床状態である。ＣＳＳおよびＡＲＤＳは、無制御のフィードフォワード免疫活性化および増幅をもたらす炎症促進性骨髄由来細胞（例えば、単球、好中球およびマクロファージ）の無秩序の活性化および増加ならびに過剰な炎症促進性メディエーター（例えば、サイトカイン、ケモカインおよび他のタンパク質）の生成による病理学的過剰炎症によって引き起こされる。この無秩序の炎症性免疫反応は、全身性炎症を生じさせて、多臓器不全、さらには死をもたらす。

【0072】

[0077] 一態様において、負帯電粒子は、スカベンジャー機構により食細胞（例えば、単球、好中球およびマクロファージ）に吸収されることが推定される。いずれの理論にも縛られるものではないが、負帯電粒子が炎症促進性単球、マクロファージおよび好中球に吸収されると、粒子は、細胞を脾臓または肝臓へとリダイレクトすることができ、そこでそれらを隔離し、かつ／またはアポトーシスさせることができる。ある実施形態において、本開示の粒子は、炎症促進性単球、好中球およびマクロファージをリダイレクトする。ある実施形態において、本開示の粒子は、炎症促進性単球をリダイレクトする。ある実施形態において、本開示の粒子は、炎症促進性好中球をリダイレクトする。ある実施形態において、本開示の粒子は、炎症促進性単球、好中球を肺からリダイレクトする。ある実施形態において、炎症促進性単球および好中球を炎症部位（例えば肺）からリダイレクトすることにより、ＣＳＳおよびＡＲＤＳに発展し得る炎症性タンパク質の放出を防止または緩和することができる。ある実施形態において、炎症促進性単球、マクロファージおよび好中球を炎症部位からリダイレクトすることにより、ＡＲＤＳに進行し得るＣＳＳまたはＣＳＳに進行し得るＡＲＤＳを防止または緩和することができる。ある実施形態において、本開示の負帯電粒子は、他の調節性免疫プロセスに概ね影響または混乱を及ぼすことなく、炎症促進性単球、好中球およびマクロファージの炎症部位への取り込みを抑制することができる。ある実施形態において、本開示の負帯電粒子は、広範な免疫抑制を引き起こさない。

【0073】

[0078] ある実施形態において、本開示の粒子は、単球、好中球およびマクロファージに吸収される。ある実施形態において、粒子の吸収は、単球、好中球およびマクロファージの再プログラム化をもたらす。ある実施形態において、粒子の吸収は、単球、好中球およびマクロファージの炎症促進型から抗炎症型への再プログラム化をもたらす。ある実施形態において、粒子の吸収は、単球およびマクロファージの炎症促進Ｍ１型から抗炎症Ｍ２型への再プログラム化をもたらす。ある実施形態において、粒子の吸収は、好中球の炎症Ｎ１型から抗炎症Ｎ２型への再プログラム化をもたらす。

【0074】

[0079] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している対象は、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、サイトカイン放出症候群（CRS）、重度炎症反応症候群（SIRS）、高サイトカイン血症、マクロファージ活性化症候群（MAS）、全身性若年性特発性関節炎関連マクロファージ活性化症候群（全身性JIA-MAS）、非全身性ＪＩＡ－ＭＡＳ、ＮＬＲＣ４－ＭＡＳ、全身性ＪＩＡ、悪性腫瘍随伴過剰炎症（MASH）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、血球貪食性リンパ組織球症（HLH）、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、家族性血球貪食性リンパ組織症（FHLH）、エプスタイン・バーウイルス随伴血球貪食性リンパ組織症（EBV-HLH）、外傷、成人スティル病、全身性エリテマトーデス、川崎病、またはそれらの組合せに罹患している。

【0075】

[0080] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、肺傷害の結果である。ある実施形態において、肺傷害は、直接的肺傷害または間接的肺傷害である。直接的肺傷害に起因するＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの非限定的な例としては、細菌、ウイルス、真菌または日和見感染、肺挫傷、外傷、化学物質、微粒子または他の刺激物質による気道傷害、胃内容物の誤嚥および溺水による肺炎が挙げられる。間接的肺傷害に起因するＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの非限定的な例としては、出血性ショック、膵臓炎、重度の火傷、薬物過剰摂取、血液製剤の輸血、心肺バイパス、敗血症および再かん流傷害が挙げられる。ある実施形態において、肺傷害は、敗血症、肺炎、ウイルス感染、細菌感染、真菌感染、日和見感染、肺挫傷、外傷、化学物質、微粒子または他の刺激物質による気道傷害、胃内容物の誤嚥、溺水、出血性ショック、膵臓炎、重度の火傷、薬物過剰摂取、血液製剤の輸血、心肺バイパス、および再かん流傷害の結果である。

【0076】

[0081] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、肺炎、肺炎症、細菌感染、ウイルス感染、真菌感染、日和見感染、敗血症、胃内容物の誤嚥、外傷、火傷、膵臓炎、肺挫傷、出血性ショック、溺水、輸血、気道傷害、またはそれらの組合せの結果である。

【0077】

[0082] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、ウイルス感染または細菌感染の結果である。患者におけるウイルスまたは細菌感染に起因するＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、感染自体によるものでなく、感染に対する病理学的過剰炎症反応によるものであるため、ＣＳＳまたはＡＲＤＳは、感染に反応する過剰炎症を発症させる患者においてのみ発症する。呼吸器感染の場合は、単球および関連免疫細胞が肺を占拠して大量の炎症促進性タンパク質が放出されるときに患者にＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳが発症し得る。例えば、２０１９年１２月に発見されたＳＡＲＳコロナウイルス２は、特に、糖尿病、慢性心臓血管疾患、慢性肺疾患、慢性腎疾患、がん、および／または免疫不全症を含む併発状態を有する高齢患者でＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳを発症するリスクがより大きいことが実証された。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、ウイルス感染の結果である。

【0078】

[0083] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、ＡＲＤＳは、ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスおよび／またはレトロウイルスによって引き起こされるウイルス感染の結果である。ある実施形態において、ＤＮＡウイルスは、一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスは、二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（＋）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（－）ウイルス、または環状ｓｓＲＮＡウイルスである。

【0079】

[0084] ある実施形態において、ｓｓＤＮＡウイルスは、アネロウイルス、サーコウイルス、ゲノモウイルスまたはパルボウイルスから選択される。ある実施形態において、アネロウイルスは、アルファトルクウイルス、ベータトルクウイルスまたはガンマトルクウイルスである。ある実施形態において、サーコウイルスはシクロウイルスである。ある実施形態において、ゲノモウイルスは、ゲミサークラウイルス、ゲミキビウイルスまたはゲミボングウイルスである。ある実施形態において、パルボウイルスは、エリスロウイルス、デペンドウイルスまたはボカウイルスである。ある実施形態において、ｄｓＤＮＡウイルスは、ヘルペスウイルス、アデノウイルス、パピローマウイルス、ポリオーマウイルスまたはポックスウイルスから選択される。ある実施形態において、ヘルペスウイルスは、シンプレックスウイルス、Ｖエリセロウイルス、Ｖイトメガロウイルス、ロゼオロウイルス、リンホクリプトウイルスまたはラジノウイルスである。ある実施形態において、アデノウイルスは、マストアデノウイルスである。ある実施形態において、パピローマウイルスは、アルファパピローマウイルス、ベータパピローマウイルス、ガンマパピローマウイルス、ミューパピローマウイルスまたはヌパピローマウイルスである。ある実施形態において、ポリオーマウイルスは、アルファポリオーマウイルス、ベータポリオーマウイルス、ガンマポリオーマウイルスまたはデルタポリオーマウイルスである。ある実施形態において、ポックスウイルスは、モルシポックスウイルス、オルトポックスウイルスまたはパラポックスウイルスである。

【0080】

[0085] ある実施形態において、レトロウイルスは、ヘパドナウイルス、オルトヘパドナウイルス、ガンマレトロウイルス、デルタレトロウイルス、レンチウイルスまたはシムリスプルナウイルスである。ある実施形態において、ｄＳＲＮＡウイルスは、ピコビルナウイルスまたはレオウイルスである。ある実施形態において、レオウイルスは、ボルチウイルス、ロタウイルスまたはセアドーマウイルスである。

【0081】

[0086] ある実施形態において、ｓｓＲＮＡ（＋）ウイルスは、コロナウイルス、アストロウイルス、カリシウイルス、フラビウイルス、ヘペウイルス、マトナウイルス、ピコルナウイルスまたはトガウイルスである。ある実施形態において、コロナウイルスは、アルファコロナウイルス、ベータコロナウイルスまたはトロウイルスである。ある実施形態において、アストロウイルスはママストロウイルスである。ある実施形態において、カリシウイルスは、ノロウイルスまたはサポウイルスである。ある実施形態において、フラビウイルスハ、ヘパシウイルスまたはペギウイルスである。ある実施形態において、ヘペウイルスはオルトヘペウイルスである。ある実施形態において、マトナウイルスはルビウイルスである。ある実施形態において、ピコルナウイルスは、カルジオウイルス、コサウイルス、エンテロウイルス、ヘパトウイルス、コブウイルス、パレコウイルス、ロザウイルスまたはサリウイルスである。トガウイルスはアルファウイルスである。ある実施形態において、ｓｓＲＮＡ（－）ウイルスは、フィロウイルス、パラミクソウイルス、ニューモウイルス、ラブドウイルス、アレナウイルス、ヘンタウイルス、ナイロウイルス、ペリブニアウイルス、フェヌウイルスまたはオルトミクソウイルスである。ある実施形態において、フィロウイルスは、エボラウイルスまたはマールブルグウイルスである。ある実施形態において、パラミクソウイルスは、ヘニパウイルス、モルビリウイルス、レピロウイルスまたはルブラウイルスである。ある実施形態において、ニューモウイルスは、メタニューモウイルスまたはオルトニューモウイルスである。ある実施形態において、ラブドウイルスは、レダンテウイルス、リッサウイルスまたはベシクロウイルスである。ある実施形態において、アレナウイルスはマンマレナウイルスである。ある実施形態において、ハンタウイルスはオルトハンタウイルスである。ある実施形態において、ナイロウイルスはオルトナイロウイルスである。ある実施形態において、ペリブニアウイルスはオルトブニアウイルスである。ある実施形態において、フェヌウイルスはフレボウイルスである。ある実施形態において、オルトミクソウイルスは、アルファインフルエンザウイルス、ベータインフルエンザウイルス、ガンマインフルエンザウイルス、クアランジャウイルスまたはソゴトウイルスである。

【0082】

[0087] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、呼吸器系ウイルスによって引き起こされるウイルス感染の結果である。ある実施形態において、ウイルス感染は、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスまたはジカウイルスから選択されるウイルスによって引き起こされる。ある実施形態において、ウイルス感染はコロナウイルスである。ある実施形態において、ウイルス感染はヒトコロナウイルスである。ある実施形態において、ウイルス感染は、ヒトＳＡＲＳコロナウイルスまたはＳＡＲＳコロナウイルス２である。

【0083】

[0088] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、細菌感染の結果である。ある実施形態において、細菌感染は、ブドウ球菌、レンサ球菌、マイコバクテリア、バシラス、サルモネラ、ビブリオ、スピロヘータ、ナイセリア、双球菌、シュードモナス、クロストリジウム、トレポネーマ、スピリルム、またはそれらの組合せによるものである。

【0084】

[0089] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、対象は、１つまたは複数の免疫標的療法によるＣＲＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している。ある実施形態において、免疫標的療法は、抗体、タンパク質療法、ペプチド、サイトカイン、免疫シグナル伝達モジュレーター、ｍＲＮＡ、腫瘍溶解性ウイルスまたは細胞ベースの療法である。

【0085】

[0090] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、対象は、１つまたは複数の抗体療法によるＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している。ある実施形態において、抗体療法に使用される抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体または二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE）抗体である。ある実施形態において、抗体療法に使用される抗体は、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１３７、ＯＸ－４０、ＧＩＴＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤＲ３、ＳＬＡＭ、ＩＣＯＳ、ＬＩＬＲＢ２、ＬＩＬＲＢ３、ＬＩＬＲＢ４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＩＬ－１２またはＩＬ－１５の１つまたは複数を標的とする。ある実施形態において、抗体は、受容体チロシンキナーゼ（RTK）、ＥＧＦＲ、ＶＥＧＦ、ＶＥＧＦＲ、ＰＤＧＦ、ＰＤＧＦＲ、ＨＥＲ２／Ｎｅｕ、ＥＲ、ＰＲ、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、ＴＧＦ－β３、ＳＩＲＰ－α、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＣＴＬＡ－４、ＣＤ３、ＣＤ２５、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ３９、ＣＤ４７、ＣＤ７３、ＦＡＰ、ＩＬ－１β、ＩＬ－２Ｒ、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５Ｒ、ＩＬ－２３、ＩＬ－３３、ＩＬ－２Ｒ，ＩＬ－４Ｒα、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞、マクロファージ、単球および／または好中球を標的とする。

【0086】

[0091] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、対象は、１つまたは複数のサイトカイン療法によるＣＲＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している。ある実施形態において、サイトカイン療法に使用されるサイトカインは、ＩＦＮ－α、ＩＮＦ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＧＭ－ＣＳＦまたはそれらの変異体から選択される。

【0087】

[0092] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、対象は、１つまたは複数の免疫シグナル伝達モジュレーター療法によるＣＲＳおよび／またはＡＲＤＳに罹患している。ある実施形態において、免疫シグナル伝達モジュレーターに使用される免疫シグナル伝達モジュレーターは、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒβ、ＩＬ－２Ｒγ、ＩＬ－３Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒα、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒα、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－１２Ｒβ１、ＩＬ－１２Ｒβ２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒα、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒβ、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒβ、ＩＬ－２８ＲＡ、ＴＬＲ、ＪＡＫ、ＢＴＫ、ＴＹＫ、ＳＹＫ、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＮＦκＢ、ＮＦＡＴ、ＳＴＡＴまたはキナーゼの１つまたは複数を標的とする。

【0088】

[0093] ある実施形態において、対象は、１つまたは複数の細胞ベースの療法によるＣＲＳに罹患している。ある実施形態において、細胞ベースの療法は、同種異系、自己またはｉＰＳＣ由来細胞を含む。ある実施形態において、細胞ベースの療法は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、赤血球、幹細胞、抗原提示細胞、マクロファージまたは樹状細胞の１つまたは複数を含む。

【0089】

[0094] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳは、ウイルス感染、細菌感染、組織傷害、病原体、免疫指向性療法（例えば、CAR-T、抗体およびサイトカイン）、自己免疫性およびリウマチ性状態（例えば関節炎および狼瘡）、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、および二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、日和見感染、肺挫傷、化学物質、微粒子または他の刺激物質による気道傷害、胃内容物の誤嚥、および溺水の結果である。間接的肺傷害に起因するＡＲＤＳの例としては、出血性ショック、膵臓炎、重度の火傷、薬物過剰摂取、血液製剤の輸血、心肺バイパス、敗血症および再かん流傷害が挙げられる。ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳを誘発する事象に続いて、初期傷害の約２４～４８時間以内に、炎症促進サイトカインおよびケモカインを生成する常在免疫細胞を活性化させた後に炎症性単球および好中球を迅速に傷害部位に流入させることを含む強固で亢進された免疫反応を生じさせることができる。傷害部位に浸潤する末梢由来の炎症促進性単球、好中球およびマクロファージは、局所的な炎症性環境に反応し、炎症促進性サイトカイン（例えば、IL-1β、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IP-10、GM-CSF）、ケモカイン（例えば、CCL-2、CXCL-1、CXCL-2、MIP-1β、MCP-1およびCXCL-5）、酸化剤（例えばROS）、タンパク質（例えばc反応性タンパク質）、プロテアーゼ（例えばMMPおよびMPO）、および好中球細胞外トラップ（NET）の生成を介して炎症をさらに促進する。傷害の消散にはある程度の炎症が重要であるが、過剰かつ長期的炎症は、致死的になり得る著しい組織／臓器損傷をもたらし得る。

【0090】

[0095] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、肺における炎症性メディエーターの蓄積の低減に関する。いくつかの実施形態において、炎症性メディエーターは、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減される。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の全身および／または炎症部位（例えば肺）に存在する炎症性メディエーターのレベルの変更にも関する。

【0091】

[0096] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の循環系における炎症性メディエーターのレベルの低減にも関する。いくつかの実施形態において、炎症性メディエーターは、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して少なくとも約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減される。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の循環系および／または炎症部位における炎症性メディエーターのレベルの変更にも関する。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の炎症部位および／または循環系における炎症性メディエーターのレベルの調節にも関する。

【0092】

[0097] ある実施形態において、炎症性メディエーターは、免疫細胞、プロテアーゼ、酸化剤、酵素、エイコサノイド、リン脂質、タンパク質、サイトカイン、ケモカインおよび代謝産物を含む。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、免疫細胞、サイトカイン、ケモカイン、酸化剤、酵素、タンパク質またはプロテアーゼの１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、末梢細胞に損傷を与える、または末梢細胞死を誘導する。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、２型肺胞上皮細胞に損傷を与える、または２型肺胞上皮細胞死を誘導する。ある実施形態において、炎症性メディエーター濃度が異常に高い場合は、炎症性メディエーターの蓄積を低減する必要がある。ある実施形態において、本明細書に開示されている方法は、炎症性メディエーターの濃度を低減する。ある実施形態において、本明細書に開示されている方法は、炎症性メディエーターの濃度を正常レベルまで低減する。

【0093】

[0098] ある実施形態において、免疫細胞は、抗原提示細胞（APC）、単球、好中球、マクロファージ、顆粒球、樹状細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞および／またはＮＫ細胞である。ある実施形態において、サイトカインは、ＩＬ－１α、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－３、ＩＬ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－９、ＩＬ－１０、ＩＬ－１１、ＩＬ－１２、ＩＬ－１３、ＩＬ－１４、ＩＬ－１５、ＩＬ－１６、ＩＬ－１７、ＩＬ－１７、ＩＬ－１８、ＩＬ－２０、ＩＬ－２１、ＩＬ－２２、ＩＬ－２３、ＩＬ－２４、ＩＬ－２５、ＩＬ－２６、ＩＬ－２７、ＩＬ－２８、ＩＬ－２９、ＩＬ－３０、ＩＬ－３１、ＩＬ－３２、ＩＬ－３３、ＩＬ－３５、ＩＬ－３６、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β、ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α、ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－β２、またはＴＧＦ－β３の１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、ケモカインは、ＣＣＬ１、ＣＣＬ２、ＣＣＬ３、ＣＣＬ４、ＣＣＬ５、ＣＣＬ６、ＣＣＬ７、ＣＣＬ８、ＣＣＬ９、ＣＣＬ１０、ＣＣＬ１１、ＣＣＬ１２、ＣＣＬ１４、ＣＣＬ１５、ＣＣＬ１６、ＣＣＬ１７、ＣＣＬ１８、ＣＣＬ１９、ＣＣＬ２０、ＣＣＬ２１、ＣＣＬ２２、ＣＣＬ２３、ＣＣＬ２４、ＣＣＬ２５、ＣＣＬ２６、ＣＣＬ２７、ＣＣＬ２８、ＣＸＣＬ１、ＣＸＣＬ２（ＭＣＰ－１）、ＣＸＣＬ３（ＭＩＰ－１α）、ＣＸＣＬ４（ＭＩＰ－１β）、ＣＸＣＬ５（ＲＡＮＴＥＳ）、ＣＸＣＬ６、ＣＸＣＬ７、ＣＸＣＬ８、ＣＸＣＬ９、ＣＸＣＬ１０、ＣＸＣＬ１１、ＣＸＣＬ１２、ＣＸＣＬ１３、ＣＸＣＬ１４、ＣＸＣＬ１５、ＣＸＣＬ１６、またはＣＸＣＬ１７の１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、プロテアーゼは、ＡＤＡＭ１、ＡＤＡＭ２、ＡＤＡＭ７、ＡＤＡＭ８、ＡＤＡＭ９、ＡＤＡＭ１０、ＡＤＡＭ１１、ＡＤＡＭ１２、ＡＤＡＭ１５、ＡＤＡＭ１７、ＡＤＡＭ１８、ＡＤＡＭ１９、ＡＤＡＡＭ２０、ＡＤＡＭ２１、ＡＤＡＭ２２、ＡＤＡＭ２３、ＡＤＡＭ２８、ＡＤＡＭ２９、ＡＤＡＭ３０、ＡＤＡＭ３３、ＭＭＰ１、ＭＭＰ２、ＭＭＰ３、ＭＭＰ７、ＭＭＰ８、ＭＭＰ９、ＭＭＰ１０、ＭＭＰ１１、ＭＭＰ１２、ＭＭＰ１３、ＭＭＰ１４、ＭＭＰ１５、ＭＭＰ１６、ＭＭＰ１７、ＭＭＰ１８、ＭＭＰ１９、ＭＭＰ２０、ＭＭＰ２１、ＭＭＰ２３Ａ、ＭＭＰ２３Ｂ、ＭＭＰ２４、ＭＭＰ２５、ＭＭＰ２６、ＭＭＰ２７、ＭＭＰ２８、または好中球エラスターゼの１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、酵素は、シクロオキシゲナーゼ－１（COX-1）、シクロオキシゲナーゼ－２（COX-2）、５－リポオキシゲナーゼ（5-LOX）、ミエロペルオキシダーゼ（MPO）および好中球エラスターゼ（NE）の１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、タンパク質はアポトーシス調節因子である。ある実施形態において、アポトーシス調節因子は、Ｐ５３、カスパーゼ１、カスパーゼ２、カスパーゼ３、カスパーゼ４、カスパーゼ５、カスパーゼ６、カスパーゼ７、カスパーゼ８、カスパーゼ９、カスパーゼ１０、カスパーゼ１１、カスパーゼ１２、カスパーゼ１３、カスパーゼ１４、ＢＣＬ－２、ＢＣＬ－ＸＬ、ＭＣＬ－１、ＣＥＤ－９、Ａ１、ＢＦＬ１、ＢＡＸ、ＢＡＫ、ＤＩＶＡ、ＢＣＬ－ＸＳ、ＢＩＫ、ＢＩＭ、ＢＡＤ、ＢＩＤまたはＥＧＬ－１の１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、炎症性モジュレーターは好中球細胞外トラップ（NET）である。ある実施形態において、炎症性メディエーターはカテプシンＧである。ある実施形態において、炎症性メディエーターはペプチジルアルギニンデアミナーゼ４（PADI-4）である。ある実施形態において、炎症性メディエーターは免疫グロブリン（Ig）である。ある実施形態において、免疫グロブリンは、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭまたはそれらの変異体の１つまたは複数から選択される。生体サンプルからアッセイすることができるヒト代謝産物の一覧を、（Psychogiosら、2011年）、（Wishartら、HMDB: ヒューマン・メタボローム・データベース．Nucleic Acids Res. 2007年1月、35（Database issue）：D521～6、2007年）およびヒューマン・メタボローム・データベース（HMDB）を含む文献に見いだすことが可能であり、それらは参照により本明細書に組み込まれている。

【0094】

[0099] ある実施形態において、本明細書に開示されている方法は、サイトカインおよび／またはケモカイン炎症性メディエーターの蓄積を低減する。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、炎症促進性サイトカインまたはケモカインである。ある実施形態において、炎症促進性サイトカインおよびケモカインは、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＰ－１０、ＧＭ－ＣＳＦ、ＣＣＬ－２、ＣＸＣＬ－１、ＣＸＣＬ－２、ＭＩＰ－１β、ＭＣＰ－１およびＣＸＣＬ－５からなる群から選択される。ある実施形態において、炎症促進性サイトカインは、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＬ－１８、またはＴＮＦ－αなどのＴＮＦから選択される。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、ＩＬ－１β、ＩＬ－６、ＴＮＦ、ＭＣＰ－１、トロンビン、血管内皮増殖因子（VEGF）および／またはアラルミン（損傷関連分子パターン、DAMP）である。ある実施形態において、炎症性メディエーターは、ＢＭＰ－１５、ＣＸＣＬ１６、ＣＸＣＲ３、ＩＬ－６、ＮＯＶ／ＣＣＮ３、グリピカン３、ＩＧＦＢＰ－４、ＩＬ－５、ＩＬ－５Ｒα、ＩＬ－２２ＢＰ、レプチン、ＭＩＰ－１ｄまたはオレキシンＢの１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、炎症性メディエーターはケモカインである。ある実施形態において、ケモカインは、ＣＣＬ－２、ＣＸＣＬ－１、ＣＸＣＬ－２およびＣＸＣＬ－５から選択される。ある実施形態において、炎症性メディエーターは酸化剤である。ある実施形態において、酸化剤は反応性酸素種（ROS）である。ある実施形態において、炎症性メディエーターはタンパク質である。ある実施形態において、タンパク質はｃ反応性タンパク質である。ある実施形態において、炎症性メディエーターはプロテアーゼである。ある実施形態において、炎症性メディエーターは好中球細胞外トラップ（NET）である。

【0095】

[0100] 患者における炎症性メディエーターのレベルは、患者の全血液、血清、血漿、PBMC、尿、脳脊髄液（CSF）、排泄物、組織生検および／または骨髄生検で測定できる。ある実施形態において、患者の血液、血清または血漿での炎症性メディエーターは、抗体マイクロアレイによって測定できる。Ｃｈｅｎら、Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ Ｔｏｘｉｃｏｌ（２０１６年）３２：１６９～１８４頁を参照されたい。患者における炎症性メディエーターのレベルは、患者の気管支肺胞洗浄（BAL）においても測定できる。Ｇｒａｚｉｏｌｉ Ｓ．ら、（２０１９年）ＰＬｏｓ ＯＮＥ１４（１１）：ｅ０２２５４６８を参照されたい。

【0096】

[0101] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における免疫細胞上の細胞表面タンパク質のレベルの変更にも関する。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳ患者における免疫細胞上の細胞表面タンパク質のレベルの調節にも関する。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における免疫細胞上の細胞表面タンパク質のレベルの低減にも関する。ある実施形態において、細胞表面タンパク質は、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減される。ある実施形態において、細胞表面タンパク質は、ＣＤ１ｃ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ１５、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２１、ＣＤ２２、ＣＤ２３、ＣＤ２４、ＴＡＣＩ、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ３１、ＣＤ３２、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３４、ＣＤ３３、ＣＤ３８、ＣＤ３９、ＣＤ４０、ＣＤ４０－Ｌ、ＣＤ４１ｂ、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４３、ＣＤ４４、ＣＤ４５、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４７、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ４８、ＣＤ５２、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ５８、ＣＤ６１、ＣＤ６６ｂ、ＣＤ６９、ＣＤ７０、ＣＤ７２、ＣＤ７９、ＣＤ６８、ＣＤ８４、ＣＤ８６、ＣＤ９３、ＣＤ９４、ＣＤ９５、ＣＲＡＣＣ、ＢＬＡＭＥ、ＢＣＭＡ、ＣＤ１０３、ＣＤ１０７、ＣＤ１１２、ＣＤ１２０ａ、ＣＤ１２０ｂ、ＣＤ１２３、ＣＤ１２５、ＣＤ１２７、ＣＤ１３４、ＣＤ１３５、ＣＤ１４０ａ、ＣＤ１４１、ＣＤ１５４、ＣＤ１５５、ＣＤ１６０、ＣＤ１６１、ＣＤ１６３、ＣＤ１７２ａ、ＸＣＲ１、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２０４、ＣＤ２０６、ＣＤ２０７ ＣＤ２２６、ＣＤ２４４、ＣＤ２６７、ＣＤ２６８、ＣＤ２６９、ＣＤ３５５、ＣＤ３５８、ＣＲＴＨ２、ＮＫＧ２Ａ、ＮＫＧ２Ｂ、ＮＫＧ２Ｃ、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫＧ２Ｅ、ＮＫＧ２Ｆ、ＮＫＧ２Ｈ、ＫＩＲ２ＤＬ１、ＫＩＲ２ＤＬ２、ＫＩＲ２ＤＬ３、ＫＩＲ２ＤＬ５Ａ、ＫＩＲ２ＤＬ５Ｂ、ＫＩＲ３ＤＬ１、ＫＩＲ３ＤＬ２、ＫＩＲ３ＤＬ３、ＫＩＲ３ＤＬ４、ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ２、ＫＩＲ２ＤＳ３、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＤＡＰ１２、ＫＩＲ３ＤＳ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６、ＴＣＲ、ＢＣＲ、インテグリン、ＦｃβεＲＩ、ＭＨＣ－Ｉ、ＭＨＣ－ＩＩ、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒβ、ＩＬ－２Ｒγ、ＩＬ－３Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒα、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒα、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒ、ＩＬ－１２Ｒβ１、ＩＬ－１２Ｒβ２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒα、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒβ、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒβ、ＩＬ－２８ＲＡ、ＰＤ－１、ＰＤ－１Ｈ、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、２Ｂ４、Ｂ７－１、Ｂ７－２、Ｂ７－Ｈ１、Ｂ７－Ｈ４、Ｂ７－ＤＣ、ＤＲ３、ＬＩＧＨＴ、ＬＡＩＲ、ＬＴα１β２、ＬＴβＲ、ＴＩＭ－１、ＴＩＭ－３、ＴＩＭ－４、ＴＩＧＩＴ、ＬＡＧ－３、ＩＣＯＳ、ＩＣＯＳ－Ｌ、ＳＬＡＭ、ＳＬＡＭＦ２、ＯＸ－４０、ＯＸ－４０Ｌ、ＧＩＴＲ、ＧＩＴＲＬ、ＴＬ１Ａ、ＨＶＥＭ、４１－ＢＢ、４１ＢＢ－Ｌ、ＴＬ－１Ａ、ＴＲＡＦ１、ＴＲＡＦ２、ＴＲＡＦ３、ＴＲＡＦ５、ＢＡＦＦ、ＢＡＦＦ－Ｒ、ＡＰＲＩＬ、ＴＲＡＩＬ、ＲＡＮＫ、ＡＩＴＲ、ＴＲＡＭＰ、ＣＣＲ１、ＣＣＲ２、ＣＣＲ３、ＣＣＲ４、ＣＣＲ５、ＣＣＲ６、ＣＣＲ７、ＣＣＲ８、ＣＣＲ９、ＣＣＲ１０、ＣＣＲ１１、ＣＸＣＲ１、ＣＸＣＲ２、ＣＸＣＲ３、ＣＸＣＲ４、ＣＸＣＲ５、ＣＸＣＲ６、ＣＸＣＲ７、ＣＬＥＣＬ９ａ、ＤＣ－ＳＩＧＮ、ＩＧＳＦ４Ａ、ＳＩＧＬＥＣ、ＥＧＦＲ、ＰＤＧＦＲ、ＶＥＧＦＲ、ＦＡＰ、α－ＳＭＡ、ＦＡＳ、ＦＡＳ－Ｌ、Ｆ_Ｃ、ＩＣＡＭ－１、ＩＣＡＭ－２、ＩＣＡＭ－３、ＩＣＡＭ－４、ＩＣＡＭ－５、ＰＥＣＡＭ－１、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＵＬ１６、ＵＬＢＰ１、ＵＬＢＰ２、ＩＬＢＰ３、ＵＬＢＰ４、ＵＬＢＰ５、ＵＬＢＰ６、ＭＵＬＴ１、ＲＡＥ１α、β、γ、δおよびε、Ｈ６０ａ、Ｈ６０ｂ、Ｈ６０ｃ、ＧＰＲ１５およびＳＴ２の１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、インテグリンは、α１、α１、α２、αＩＩｂ、α３、α４，α５、α６、α７、α８、α９、α１０、α１１、αＤ、αＥ、αＬ、αＭ、αＶ、αＸ、β１、β１、β２、β３、β４、β５、β６、β７、β８、またはそれらの組合せの１つまたは複数から選択される。ある実施形態において、ＴＣＲは、α、β、γ、δ、ε、ζ、またはそれらの組合せの１つまたは複数から選択される。フローサイトメトリおよびマスサイトメトリ（CyTOF）を含む、細胞表面タンパク質発現をアッセイするいくつかの方法が文献に記載されている。

【0097】

[0102] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよびＡＲＤＳに関連する病理学的過剰炎症の治療にも関する。ある実施形態において、本開示の負帯電粒子は、広範な免疫抑制を引き起こすことなくＡＲＤＳ時の病理学的炎症を治療する。ある実施形態において、本開示の負帯電粒子は、ＣＳＳおよびＡＲＤＳに関連する炎症、およびそれに関連する続発症を治療する。末梢の炎症性単球および好中球を細胞表面マーカーの発現によって特徴づけることができる。特異的な細胞表面マーカーの発現によって分化される異なる循環単球集団は、特異的なエフェクタ機能を果たすことが示された。炎症性単球は、ヒトにおけるＣＤ１４＋ＣＤ１６－表現型を示す（マウスにおけるＣＸ３ＣＲＩＬｏ ＣＣＲ２＋Ｇｒ１＋またはＣＸ３ＣＲ１ＬｏＣＣＲ２＋Ｌｙ６ＣＨｉ表現型）を示す。逆に、ヒトにおけるＣＤ１４ＬｏＣＤ１６＋表現型を有する単球、すなわち傷害部位に取り込まれるＣＸ３ＣＲ１ＨｉＣＣＲ２－Ｇｒ１－またはＣＸ３ＣＲ１ＨｉＣＣＲ２－Ｌｙ６ＣＬｏ単球は、創傷の治癒を促進し、抗炎症性恒常性維持機能を発揮する成熟マクロファージ集団に分化する。同様に、炎症性好中球を細胞表面マーカー（例えばCD66bおよびCD63）の発現、タンパク質（例えば、ミエロペルオキシダーゼ、好中球エラスターゼ、ガスデルミン、カテプシン－Gおよびペプチジルアルギニンデアミナーゼ４（PADI-4））および好中球細胞外トラップ（NET）と呼ばれるタンパク質－ＤＮＡ錯体の生成によって特徴づけることもできる。

【0098】

[0103] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子は、ＣＤ１４＋ＣＤ１６－表現型を示す炎症性単球およびＣＤ＋１５＋ＣＤ６６ｂ＋ＣＤ６３＋表現型を示す好中球のレベルが異常である対象に投与される。ある実施形態において、本明細書に開示されている方法は、ＣＤ１４＋ＣＤ１６－表現型を示す炎症性単球およびＣＤ１５＋ＣＤ６６ｂ＋ＣＤ６３＋表現型を示す好中球の異常なレベルを低減または緩和する。

【0099】

[0104] 本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、負帯電粒子は、炎症性好中球のレベルが異常である対象に投与される。ある実施形態において、異常なレベルの炎症性好中球は、細胞表面マーカーＣＤ６６ｂおよび／またはＣＤ６３を発現する。ある実施形態において、本明細書に開示されている方法は、炎症性好中球の異常なレベルを低減または緩和する。ある実施形態において、炎症性好中球は、ミエロペルオキシダーゼまたは好中球エラスターゼなどのタンパク質の生成によって特徴づけられる。ある実施形態において、炎症性好中球は、好中球細胞外トラップ（NET）と呼ばれるタンパク質－ＤＮＡ錯体によって特徴づけられる。

【0100】

[0105] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳまたはＣＳＳの対象における炎症性単球および／または好中球の蓄積の低減にも関する。ＣＳＳおよびＡＲＤＳの事例を含めて、炎症のいくつかの前臨床動物モデルおよびヒトにおいて、炎症性単球および好中球は、それらの炎症促進活性が致死的病状に関連する炎症部位に急速に浸潤および蓄積することを示している。

【0101】

[0106] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳまたはＣＳＳの患者における炎症性単球、マクロファージおよび好中球の再プログラム化にも関する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、炎症促進性単球およびマクロファージを抗炎症性単球およびマクロファージに再プログラム化する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、炎症促進性単球およびマクロファージをＭ１型から抗炎症性Ｍ２型に再プログラム化する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、単球およびマクロファージによる炎症促進性メディエーターの生成および／または分泌を低減する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、単球およびマクロファージによる炎症促進性メディエーターの生成および／または分泌を、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、単球およびマクロファージによる抗炎症性メディエーターの生成および／または分泌を増加させる。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、単球およびマクロファージによる抗炎症性メディエーターの生成および／または分泌を、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％増加させる。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、炎症促進性好中球を抗炎症成功中級に再プログラム化する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、炎症促進性好中球をＮ１型から抗炎症性Ｎ２型に再プログラム化する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、好中球による炎症促進性メディエーターの生成および／または分泌を低減する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、好中球による炎症促進性メディエーターの生成および／または分泌を、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減する。ある実施形態において、負帯電粒子を投与することにより、好中球による抗炎症性メディエーターの生成および／または分泌を、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％増加させる。

【0102】

[0107] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の組織、臓器および／または炎症部位における免疫細胞蓄積の調節にも関する。ある実施形態において、免疫細胞蓄積を調節することは、免疫細胞蓄積を低減することである。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の組織、臓器および／または炎症部位における免疫細胞活性化の調節（例えば低減）にも関する。ある実施形態において、免疫細胞蓄積は、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％低減される。ある実施形態において、免疫細胞は、単球、好中球、マクロファージ、顆粒球、樹状細胞、Ｔ細胞、Ｂ細胞、ＮＫ細胞およびＮＫＴ細胞の１つまたは複数から選択される。

【0103】

[0108] 本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳ患者における免疫反応、異物反応、代謝、アポトーシス、細胞死、壊死、フェロトーシス、自食作用、細胞遊走、エンドサイトーシス、貪食、ＤＮＡ障害反応、飲作用、密着結合調節、細胞接着、および／または細胞分化の変更にも関する。本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における免疫反応、異物反応、代謝、アポトーシス、細胞死、壊死、フェロトーシス、自食作用、細胞遊走、エンドサイトーシス、貪食、ＤＮＡ障害反応、飲作用、密着結合調節、細胞接着、および／または細胞分化の調節にも関する。

【0104】

[0109] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状の改善に関する。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する症状には、息切れ、呼吸促迫（頻呼吸）、呼吸困難、人工呼吸の必要性、筋肉疲労、全身疲労、低血圧、低血中酸素レベル（低酸素血症）、皮膚の変色、爪の変色、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、空咳、発熱、胸痛、頭痛、肺の炎症、肺の水分蓄積、無気肺、肺の亀裂若しくは水泡音、高脈拍数、目眩、精神錯乱、浮腫、肺浮腫、および／または肺胞浮腫が含まれる。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する症状には、肺炎症、無気肺、窮迫性呼吸、疲労、低血圧、発熱、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫または肺胞浮腫から選択される１つまたは複数が含まれる。

【0105】

[0110] ある実施形態において、本開示は、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状の改善に関し、該症状は、多臓器不全、脳損傷、肺損傷、肝臓損傷、腎臓損傷、心臓損傷、浮腫、脳浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、呼吸窮迫、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高トリグリセリド血症、白血球減少症、血球減少症、体重減少または炎症マーカーレベルの上昇の１つまたは複数から選択される。本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状の改善に関する。ある実施形態において、ＡＲＤＳに関連する症状には、息切れ、呼吸促迫（頻呼吸）、呼吸困難、人工呼吸の必要性、筋肉疲労、全身疲労、低血圧、低血中酸素レベル（低酸素血症）、皮膚の変色、爪の変色、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、空咳、発熱、胸痛、頭痛、肺の炎症、肺の水分蓄積、無気肺、肺の亀裂若しくは水泡音、高脈拍数、目眩、精神錯乱、浮腫、肺浮腫、体重減少および／または肺胞浮腫が含まれる。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する症状は、肺炎症、無気肺、窮迫性呼吸、疲労、低血圧、発熱、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫、体重減少、肺胞浮腫、またはそれらの任意の組合せから選択される１つまたは複数を含む。

【0106】

[0111] ある実施形態において、本開示は、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状の改善に関し、該症状は、発熱、疲労、四肢のむくみ、肝炎、脾腫、食欲不振、筋肉および関節痛、吐き気、嘔吐、下痢、発疹、頻呼吸、息切れ、ＡＲＤＳ、頻拍、咳、低血圧（低血圧症）、血球減少、発作、頭痛、倦怠感、反応性低下、錯乱、せん妄、幻覚、震え、調整失調、凝固障害、多系臓器機能障害、多臓器不全、乳酸脱水素酵素（LDH）レベルの上昇、ｃ反応性タンパク質レベルの上昇、フェリチンレベルの上昇、炎症促進性サイトカインレベルの上昇、アラニントランスアミラーゼ（ALT）レベルの上昇、アスパラギン酸トランスアミラーゼ（AST）レベルの上昇、低白血球レベル、低リンパ球レベル、低血小板レベル、低フィブリノゲンレベル、体重減少、低赤血球沈降速度（ESR）レベル、またはそれらの任意の組合せから選択される。

【0107】

[0112] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における血漿または血清ＡＳＴレベルの低減に関する。ある実施形態において、ＡＳＴレベルは、約６０Ｕ／Ｉ未満、約５９／ＵＩ未満、約５８／ＵＩ未満、約５７／ＵＩ未満、約５６／ＵＩ未満、約５５／ＵＩ未満、約５４Ｕ／Ｉ未満、約５３／ＵＩ未満、約５２／ＵＩ未満、約５１／ＵＩ未満、約５０／ＵＩ未満、約４９／ＵＩ未満、約４８Ｕ／Ｉ未満、約４７／ＵＩ未満、約４６／ＵＩ未満、約４５／ＵＩ未満、約４４／ＵＩ未満、約４３／ＵＩ未満、約４２Ｕ／Ｉ未満、約４１／ＵＩ未満、約４０／ＵＩ未満、約３９／ＵＩ未満、約３８／ＵＩ未満、約３７／ＵＩ未満、約３６Ｕ／Ｉ未満、約３５／ＵＩ未満、約３４／ＵＩ未満、約３３／ＵＩ未満、約３２／ＵＩ未満、約３１／ＵＩ未満、約３０／ＵＩに低減される。ある実施形態において、ＡＳＴレベルは、正常上限（ULN）以下に低減される。ある実施形態において、ＡＳＴレベルは、４０Ｕ／Ｉ以下のＵＬＮに低減される。

【0108】

[0113] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における血漿または血清フィブリノゲンレベルの上昇に関する。ある実施形態において、フィブリノゲンレベルは、その中のすべての値および範囲を含めて、約１００ｍｇ／ｄｌ超、約１２０ｍｇ／ｄｌ超、約１４０ｍｇ／ｄｌ超、約１６０ｍｇ／ｄｌ超、約１８０ｍｇ／ｄｌ超、約２００ｍｇ／ｄｌ超、約２２０ｍｇ／ｄｌ超、約２４０ｍｇ／ｄｌ超、約２６０ｍｇ／ｄｌ超、約２８０ｍｇ／ｄｌ超、約３００ｍｇ／ｄｌ超、約３２０ｍｇ／ｄｌ超、約３４０ｍｇ／ｄｌ超、約３６０ｍｇ／ｄｌ超、または約３４０ｍｇ／ｄｌ超に上昇する。ある実施形態において、フィブリノゲンレベルは、正常下限に上昇する。ある実施形態において、フィブリノゲンレベルは、正常上限に上昇する。ある実施形態において、フィブリノゲンレベルは、２００ｍｇ／ｄｌと４００ｍｇ／ｄｌの間のレベルに上昇する。

【0109】

[0114] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、患者におけるＰａＯ２／ＦｉＯ２比の向上に関する。ある実施形態において、該方法は、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を１００ｍｍＨｇ超に向上させる。ある実施形態において、該方法は、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を約２００ｍｍＨｇ超に向上させる。ある実施形態において、該方法は、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を約２５０ｍｍＨｇ超に向上させる。ある実施形態において、該方法は、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を約３００ｍｍＨｇ超に向上させる。ある実施形態において、該方法は、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を３００ｍｍＨｇ超に向上させる。ベルリンの定義では、軽度ＡＲＤＳ（２００ｍｍＨｇ＜ＰａＯ２／ＦｉＯ２≦３００ｍｍＨｇ）、中度ＡＲＤＳ（１００ｍｍＨｇ＜ＰａＯ２／ＦｉＯ２≦２００ｍｍＨｇ）および重度ＡＲＤＳ（ＰａＯ２／ＦｉＯ２≦１００ｍｍＨｇ）を区別するためにＰａＯ２／ＦｉＯ２比が用いられる。Ｐａｐａｚｉａｎ、Ｌ．ら、Ａｎｎ．Ｉｎｔｅｎｓｉｖｅ Ｃａｒｅ（２０１９年）９：６９を参照されたい。

【0110】

[0115] ある実施形態において、本開示は、ＣＳＳまたはＡＲＤＳを有する患者における体重減少の安定化または軽減に関する。一実施形態において、患者は、ＣＳＳまたはＡＲＤＳ患者における体重減少を安定化または軽減するために本開示の負帯電粒子が投与される。一実施形態において、投与は、投与を行わないこと以外は同等の方法と比較して、体重減少を防止するのに有効である。一実施形態において、投与は、投与を行わないこと以外は同等の方法と比較して、体重減少を安定化させるのに有効である。一実施形態において、投与は、負帯電粒子の投与を行わないこと以外は同等の方法と比較して、体重減少を、体重減少パーセントで少なくとも約１％、２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、５～１０％、１０～１５％、５～１５％、１０～２０％、１０～２５％、５～２０％、１０～３０％、２０～４０％または１５～３５％防止するのに有効である。一実施形態において、該方法は、本開示の負帯電粒子の投与後少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、２０、２５、３０、３５、４０または５０日間体重減少を防止するのに有効である。一実施形態において、該方法は、本開示の負帯電粒子の投与後少なくとも約５～７日間、７～１４日間、５～３０日間、または少なくとも約５日、７日、１４日、２０日、３０日、１か月もしくは２か月間体重減少を防止するのに有効である。体重減少のパーセンテージは、減少した体重（例えばポンド）を初期体重で除し、その結果に１００を乗ずることによって求めることが可能である。

【0111】

[0116] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者が呼吸器の使用を必要とすることの防止に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳ患者の呼吸器補助の必要性の低減に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＡＲＤＳ患者の人工呼吸器の必要性の低減に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における呼吸器の使用時間の短縮に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の生命維持補助の必要性の低減に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者の生存の向上に関する。ある実施形態において、生存を、本明細書に開示されている負帯電粒子による処置を受けていないＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者と比較して、約１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９９％または１００％向上させることができる。

【0112】

[0117] ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における臓器機能の向上に関する。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの患者に負帯電粒子を投与することにより、肺、肝臓、腎臓、脳、胃、膵臓、肝臓、血管系、眼および心臓の機能を向上させる。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における抗炎症効果の増大に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、患者の肺、肝臓、腎臓、脳、胃、膵臓、肝臓、血管系、眼および心臓における抗炎症効果の増大に関する。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における組織損傷の軽減に関する。ある実施形態において、組織損傷は、肺、肝臓、腎臓、脳、胃、膵臓、肝臓、血管系、眼および心臓の組織損傷である。ある実施形態において、本開示は、本明細書に開示されている負帯電粒子を投与することを含む、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳ患者における免疫治癒機構の加速化に関する。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの被験者に負帯電粒子を投与することにより、機能回復を向上させる。ある実施形態において、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの被験者に負帯電粒子を投与することにより、運動機能、視覚機能、心臓血管機能、呼吸機能、腎機能および／または認知機能を向上させる。機能回復を評価するための様々な臨床採点法が、文献に開示されており、参照により本明細書に組み込まれている（グラスゴー・コーマ・スケール、拡大グラスゴー・アウトカム・スケール（Extended Glasgow Outcomes Scale）、WHOオーディナル・アウトカム・スケール（WHO Ordinal Outcomes Scale）¹¹、認知状態の電話インタビュー（Telephone Interview for Cognitive Status）（TICS）¹²、ARDSのベルリン基準（Berlin Criteria for ARDS）¹³、ASIA脊髄損傷評価スケール（ASIA Spinal Cord Injury Assessment Scale）¹⁴、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群のHスコア¹⁵、ARDSのAPPSアウトカムスコア¹⁶、および認知機能のBIMSスケール¹⁷）。

【0113】

投与および投薬
[0118] 本開示の方法は、限定することなく、注射、経口摂取、鼻内投与、局所投与、経皮投与、非経口投与、吸入噴霧投与、膣投与または直腸投与を含む、療法を哺乳動物に直接的または間接的に導入するための任意の医学的に許容される手段を使用して実施される。本明細書に用いられている非経口という用語は、皮下、静脈内注射、筋肉内注射、関節内注射、腹腔内注射、鞘内注射および嚢内注射、ならびにカテーテルまたは注入技術を含む。様々な実施形態において、粒子は静脈内投与されるが、限定することなく、皮内、皮下、皮膚上、経口、関節内および鞘内などの他の投与経路を介して投与されてもよい。本明細書に開示されている方法のいずれか1つにおいて、対象はヒトである。

【0114】

[0119] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、約０．１ｍｇ／ｋｇから約１０ｍｇ／ｋｇまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲の用量で投与することができる。ある実施形態において、負帯電粒子の用量は、約１ｍｇ／ｋｇから約８ｍｇ／ｋｇまで、約１．５ｍｇ／ｋｇから約７ｍｇ／ｋｇまで、約１．５ｍｇ／ｋｇから約６ｍｇ／ｋｇまで、約１．５ｍｇ／ｋｇから約５ｍｇ／ｋｇまで、約１．５ｍｇ／ｋｇから約４．５ｍｇ／ｋｇまで、約２ｍｇ／ｋｇから約４ｍｇ／ｋｇまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲にある。

【0115】

[0120] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、約１ｍｇから約８００ｍｇまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲の用量で投与することができる。ある実施形態において、負帯電粒子の用量は、約１０ｍｇから約７００ｍｇまで、約１０ｍｇから約６５０ｍｇまで、約１５ｍｇから約６５０ｍｇまで、約２０ｍｇから約６５０ｍｇまで、約２５ｍｇから約６５０ｍｇまで、約３０ｍｇから約６５０ｍｇまで、約３５ｍｇから約６５０ｍｇまで、約４０ｍｇから約６５０ｍｇまで、約４５ｍｇから約６５０ｍｇまで、約５０ｍｇから約６５０ｍｇまでの範囲であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む範囲である。ある実施形態において、本明細書に記載の用量は１日用量である。

【0116】

[0121] 様々な実施形態において、粒子は、毎日、１日おき、１日２回、１日３回、週に７回、週に６回、週に５回、週に４回、週に３回、週に２回、週に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、２か月に１回、３か月に１回、６か月に１回または１年に１回の頻度であって、それらの間にある値および範囲を含む頻度で投与される。

【0117】

[0122] 様々な実施形態において、粒子は、単一剤形として、または複数剤形として投与される。

【0118】

[0123] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、１日１回、２回または３回投与することができる。ある実施形態において、負帯電粒子は、１日１回投与される。

【0119】

[0124] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、医師が決定した期間にわたって毎日投与することができる。ある実施形態において、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、医師が決定した期間にわたって週に２回以上投与することができる。

【0120】

[0125] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの発症前、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの発症時またはＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの発症後に投与することができる。

【0121】

[0126] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に経口、吸入または静脈内投与することができる。ある実施形態において、負帯電粒子は、ＩＶ（静脈内）注入により投与される。ある実施形態において、ＩＶ注入物は、約３０分から約５時間までの時間であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む時間にわたって投与される。ある実施形態において、ＩＶ注入物は、約３０分から約４時間まで、約３０分から約３時間まで、約３０分から約２．５時間まで、約１時間から約２時間までの時間であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む時間にわたって投与される。

【0122】

[0127] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に一定の注入速度でＩＶ注入により投与することができる。ある実施形態において、ＩＶ注入による投与は、投与時に注入速度を調整しながら行われる。ある実施形態において、ＩＶ注入は、約１０ｍＬ／ｈｒ、約１５ｍＬ／ｈｒ、約２０ｍＬ／ｈｒ、約２５ｍＬ／ｈｒ、約３０ｍＬ／ｈｒ、約３５ｍＬ／ｈｒ、約４０ｍＬ／ｈｒ、約４５ｍＬ／ｈｒ、約５０ｍＬ／ｈｒ、約５５ｍＬ／ｈｒ、約６０ｍＬ／ｈｒ、約６５ｍＬ／ｈｒ、約７０ｍＬ／ｈｒ、約７５ｍＬ／ｈｒ、約８０ｍＬ／ｈｒ、約８５ｍＬ／ｈｒ、約９０ｍＬ／ｈｒ、約９５ｍＬ／ｈｒ、約１００ｍＬ／ｈｒ、約１０５ｍＬ／ｈｒ、約１１０ｍＬ／ｈｒ、約１１５ｍＬ／ｈｒ、約１２０ｍＬ／ｈｒ、約１２５ｍＬ／ｈｒ、約１３０ｍＬ／ｈｒ、約１３５ｍＬ／ｈｒ、約１４０ｍＬ／ｈｒ、約１４５ｍＬ／ｈｒ、または約１５０ｍＬ／ｈｒの速度であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む速度の１つまたは複数の速度を含む。

【0123】

[0128] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、注入速度が１回以上変化するＩＶ注入により投与することができる。ある実施形態において、ＩＶ注入速度は、投与時に１回、２回または３回変化する。ある実施形態において、ＩＶ注入は、最初は第１の注入速度で行われ、第２の注入速度に変化され、次いで第３の注入速度に再度変化される。ある実施形態において、第１の注入速度は、約１０ｍＬ／ｈｒから約４０ｍＬ／ｈｒまで、または約１５ｍＬ／ｈｒから約２５ｍＬ／ｈｒまでである。ある実施形態において、第１の注入速度は約２０ｍＬ／ｈｒである。ある実施形態において、第２の注入速度は、約２０ｍＬ／ｈｒから約８０ｍＬ／ｈｒまで、または約３０ｍＬ／ｈｒから約５０ｍＬ／ｈｒまでである。ある実施形態において、第２の注入速度は約４０ｍＬ／ｈｒである。ある実施形態において、第３の注入速度は、約４０ｍＬ／ｈｒから約１２０ｍＬ／ｈｒまで、または約７０ｍＬ／ｈｒから約９０ｍＬ／ｈｒまでである。ある実施形態において、第３の注入速度は約８０ｍＬ／ｈｒである。ある実施形態において、第１の注入速度および第２の注入速度は、約５分から約３０分まで、または約１０分から約２５分までの範囲の時間であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む時間保持される。ある実施形態において、第１の注入速度および第２の注入速度は約１５分間保持される。ある実施形態において、第３の注入速度は、約３０分から約４時間まで、約３０分から約３時間まで、約４５分から約１５０分まで、約６０分から約１２０分まで、約７５分から約１０５分までの範囲の時間であって、これらの値の間にあるすべての値および範囲を含む時間保持される。ある実施形態において、第３の注入速度は、注入が完了するまで保持される。ある実施形態において、第３の注入速度は約９０分間保持される。

【0124】

[0129] 本明細書に開示されている方法のいずれか１つにおいて、負帯電粒子を、それを必要とする対象に、ＩＶ注入により、最初の１５分間は２０ｍＬ／ｈｒの第１の注入速度で投与し、次の１５分間は４０ｍＬ／ｈｒの第２の注入速度で投与し、注入が完了するまで（残りの時間）は８０ｍＬ／ｈｒの第３の注入速度で投与することができる。

【実施例】

【0125】

実施例１：負帯電粒子の調製
[0130] 酸終端末端基を有する市販のＰＬＧＡ（５０：５０）の溶液を水と混合して、一次エマルジョンを作製した。一次エマルジョンをポリビニルアルコールおよびポリアクリル酸の溶液と迅速に混合して二次エマルジョンを形成した。得られたダブルエマルジョンの溶媒を除去して、負帯電粒子の懸濁液を形成した。負帯電粒子を洗浄し、濾過し、接線流濾過により濃縮した。

【0126】

[0131] 負帯電粒子を、１８．２ＭΩの水中にて毎秒２．５×１０５カウントの計数速度で動的光散乱（DLS）分析およびＭａｌｖｅｒｎ Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ（Malvern Instruments、マサチューセッツ州Westborough）により特徴づけた。平均粒子サイズは、約３５０から約７５０ｎｍまでであった。粒子のゼータ電位は、約－３２から約－５０ｍＶまでであった。

【0127】

実施例２：負帯電粒子を含む凍結乾燥組成物の調製
[0132] 実施例１で調製された負帯電粒子に、Ｄ－マンニトール、スクロース、無水クエン酸ナトリウムおよび水を添加した。無菌法を用いて凍結乾燥バイアルに充填し、部分的に密栓して凍結乾燥した。凍結乾燥後のバイアルを密封し、アルミニウムシールを圧着させた。密封後のバイアルをガンマ放射線で滅菌した。その組成物は、表１に記載された比率の成分を有する。

【0128】

【表1】

【0129】

実施例３：負帯電粒子の安全性および毒性
[0133] 平均粒子サイズが３５０～７５０ｎｍの範囲でゼータ電位が－３２ｍＶ未満の負帯電粒子を用いてラットでの安全性および毒性試験を実施した。

【0130】

[0134] ラットでの試験

【0131】

[0135] ５０ｍｇ／ｋｇから１００ｍｇ／ｋｇまでの用量（８ｍｇ／ｋｇから１６ｍｇ／ｋｇまでのヒト相当用量レベル）では毒性効果が認められなかった。いずれの効果も有害でなく可逆的であった。

【0132】

[0136] 負帯電粒子は、アメリカ国立がん研究所ナノテクノロジー・キャラクタライゼーション・ラボラトリー（NCI-NCL）での実験室内アッセイにおいて、補体活性化、溶血、凝血、Ｔ細胞活性化または肝臓毒性の兆候を示さなかった。

【0133】

実施例４：ＬＣＭＶ感染に関連する病状を防止する負帯電粒子の有効性
[0137] ウイルス感染誘導全身性炎症およびそれに関連する病状を消散させる負帯電ＯＮＰ－３０２の有効性を一次リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス（LCMV）感染のマウスモデルにて調べた。一次ＬＣＭＶ感染モデルにおいて、ＬＣＭＶの静脈内注入により、全身性炎症および体重減少を引き起こす全身性感染をもたらす。また、マウスは、Ｔ細胞の消耗および不十分な抗ウイルスエフェクタ免疫機能により感染を排除できない。

【0134】

[0138] この試験で使用したＯＮＰ－３０２は、平均径が３５０～７５０ｎｍであり、ゼータ電位が－３２～－５０ｍＶであった。

【0135】

[0139] 簡潔に説明すると、Ｃ５７ＢＬ／６マウスを静脈内尾静脈注射により２×１０^６のプラーク形成単位（pfu）ＬＣＭＶ（クローン１３）で感染させた。感染後５日目に、マウスを以下の３つの処置群の１つに無作為に分けた。
ａ．連続５日間の食塩水
ｂ．連続５日間のＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）
ｃ．３日毎に１回のＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）（合計５回）

【0136】

[0140] いずれの処置物も尾静脈を介して静脈内投与した。図１に示されるように、連続５日間のＯＮＰ－３０２による処置は、最適の有効性を示し、食塩水、および３日毎に１回投与したＯＮＰ－３０２処置物（１処置群当たりｎ＝５）と比較して体重減少を有意に低減させた。

【0137】

[0141] 次に、免疫系に対するＯＮＰ－３０２の影響および全身性ウイルス感染を排除するその能力を調べた。Ｃ５７ＢＬ／６マウスを静脈内尾静脈注射により２×１０^６ｐｆｕのＬＣＭＶ（クローン１３）で感染させた。感染後５日目から、連続５日間にわたって（５～９日目）静脈内尾静脈注射によりマウスを食塩水またはＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）で処置した。マウスを３５日目まで体重減少について観察し、先に見られたように、ＯＮＰ－３０２による処置は、食塩水による処置と比較して体重減少を有意に低減させた（図２Ａ）。

【0138】

[0142] この第２の疾患過程における感染後１２日目に、各処置群のマウスのサブセットを屠殺し、脾細胞をフローサイトメトリによりアッセイした。図２Ｂに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、脾細胞の総数を有意に増加させた。図２Ｃに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、食塩水による処置と比較して、ＣＤ８Ｔ細胞、ＣＤ８^＋／ＣＤ４４^＋／ＰＤ１^＋Ｔ細胞、ＣＤ８^＋／ＩＦＮ－γ^＋Ｔ細胞およびＣＤ８^＋／ＰＤ１^＋Ｔ細胞の総数を有意に増加させた。尚、ＣＤ４４ｈｉ／ＰＤ－１＋Ｔ細胞集団は、このモデルにおいてＬＣＭＶ特異的であることが既に報告されている。

【0139】

[0143] 脾臓における活性化ＣＤ８^＋／ＣＤ４４^＋／ＰＤ１^＋Ｔ細胞のパーセンテージを示すフローサイトメトリのプロットを図２Ｄに示す。図２Ｅおよび図２Ｆに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、脾臓および血液におけるＣＤ８^＋Ｔ細胞または活性化ＣＤ８^＋Ｔ細胞のパーセンテージを変化させなかった。

【0140】

[0144] 感染後１２および３５日目にプラークアッセイにより脾臓におけるＬＣＭＶウイルス力価を測定した。図３Ａに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、１２日目にウイルス力価を変化させなかったが、食塩水による処置と比較して３５日目にウイルス力価を統計的に有意に低下させた。

【0141】

[0145] ３５日目に、脾細胞をフローサイトメトリによりアッセイして、この時点での免疫細胞に対するＯＮＰ－３０２の影響を調べた。図３Ｂに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、脾臓における細胞の数の増加の傾向をもたらしたが、統計的に有意性には達しなかった（ｐ＝０．０７１）。図３Ｃに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、脾臓におけるＣＤ８^＋Ｔ細胞およびＣＤ^＋／ＰＤ－１^＋Ｔ細胞の総数を有意に増加させた。図３Ｄに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、食塩水と比較して、脾臓におけるＣＤ８^＋／ＣＤ４４^＋／ＰＤ１^＋Ｔ細胞、ＣＤ８^＋／ＩＦＮ－γ^＋Ｔ細胞および全ＰＤ－１^＋細胞集団のパーセンテージを有意に増加させた。血液においては差が観察されなかった（図３Ｅ）。

【0142】

[0146] 結論として、これらの実験の結果により以下のことが実証される。
ａ．ＯＮＰ－３０２は、一次ＬＣＭＶ感染後の体重減少を防止するのに有効である。
ｂ．ＯＮＰ－３０２の最適の有効性は、感染後５日目に開始して連続５日間にわたって処置物が投与される場合に観察される。
ｃ．ＯＮＰ－３０２による処置は、脾臓における活性化ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増加によって特徴づけられる抗ウイルス免疫活性化をもたらす。この活性化ＣＤ８^＋Ｔ細胞反応は、ウイルス排除の向上、およびさもなければ慢性的に持続するＬＣＭＶウイルス力価の低下に関連する。

【0143】

実施例５：Ｈ１Ｎ１感染に関連する病状を防止する負帯電粒子の有効性
[0147] ウイルス感染誘導急性炎症、およびそれに関連する肺免疫病を消散させる負電荷ＯＮＰ－３０２の有効性を、高齢マウスを使用したＨ１Ｎ１インフルエンザ感染のマウスモデルにて調べた。この高齢マウスのモデルにおいて、Ｈ１Ｎ１感染誘導一次肺損傷は、炎症促進性骨髄由来細胞（例えば単球および好中球）を迅速に肺に流入させる免疫反応を誘導する。肺では、これらの細胞が、二次的な肺損傷をもたらし肺機能の低下に関連する過剰な炎症を引き起こす大量の炎症促進性メディエーターを生成する。

【0144】

[0148] この試験で使用したＯＮＰ－３０２粒子は、平均径が３５０～７５０ｎｍであり、ゼータ電位が－３２～－５０ｍＶであった。

【0145】

[0149] 簡潔に説明すると、１８～２２月齢の雌のＣ５７ＢＬ／６マウスに麻酔し、６００ｐｆｕのＨ１Ｎ１インフルエンザウイルスに経鼻感染させた。感染後３日目（ｐ．ｉ）から、マウスを以下の２つの群の１つに無作為に分けた。
ａ．食塩水
ｂ．ＯＮＰ－３０２（マウス１匹当たり１ｍｇ）

【0146】

[0150] いずれの処置物も尾静脈注射により投与した。処置物を連続５日間にわたって（３～７日目）１日１回投与した。肺機能に対するＯＮＰ－３０２処置物の影響を評価するために、パルス酸素測定法評価を毎日実施し、両処置群についての血液中の酸素飽和度を記録した。パルス酸素測定法により測定される血液中の酸素飽和度レベルは、肺機能の臨床的に重要な尺度であり、ヒト対象の肺機能をモニタリングするのに汎用されている。

【0147】

[0151] 図４Ａに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、食塩水（対照）と比較して、パルス酸素測定法による酸素飽和度評価によって測定された感染後５～９日目の肺機能の統計的に有意な向上をもたらす。

【0148】

[0152] 次に、肺炎症を防止するＯＮＰ－３０２の有効性を調べた。感染後９日目に、マウスを屠殺し、炎症促進性骨髄由来細胞の浸潤、炎症促進性サイトカイン／ケモカインおよび細胞損傷のマーカーのレベルを、下呼吸器系をアッセイするための方法である気管支肺胞洗浄（BAL）のアッセイにより測定した。

【0149】

[0153] 図４Ｂに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、食塩水と比較して、全（CD45⁺/CD11b⁺）および炎症性単球（CD45⁺/CD11b⁺/Ly6C⁺）のレベルの統計的に有意な減少、ならびに気管支肺胞洗浄（BAL）における好中球の減少の傾向（ｐ＝０．０６）をもたらした。むしろ、これらの細胞は、脾臓において隔離され（図４Ｃ）、公知のＯＮＰ－３０２の作用機構に合致していることが認められた。図４Ｄおよび４Ｅに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、ＢＡＬにおける炎症促進性タンパク質ＭＰＯおよびＣＸＣＬ－５のレベルの統計的に有意な減少をもたらした。図４Ｄ、４Ｅおよび４Ｆに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、ＢＡＬにおける炎症促進性タンパク質ＭＰＯ、ＩＬ－６およびＣＸＣＬ－５のレベルの統計的に有意な減少をもたらした。図４Ｇに示されるように、ＯＮＰ－３０２による処置は、肺損傷マーカーのアルブミンのレベルの統計的に有意な減少によって示される肺損傷の軽減をもたらした。

【0150】

[0154] 肺炎症の抑制により肺損傷が防止されたかどうかを判断するために、感染後９日目に、食塩水またはＯＮＰ－３０２で処置したマウスから肺組織を採取し、組織病理学的評価を実施した。図４Ｈに示されるように、食塩水（対照）処理マウスでは有意な肺損傷が観察されたが、ＯＮＰ－３０２処置マウスでは、肺組織が維持され、観察された損傷が小さいようであった。

【0151】

[0155] 結論として、この試験の結果により、ＯＮＰ－３０２による処置は、高齢マウスにおけるＨ１Ｎ１感染後に肺免疫病理を軽減し、肺機能の向上に有効であることが実証される。

【0152】

実施例６：生体外にてＬＰＳに刺激されたＰＢＭＣによる炎症促進性サイトカインの生成を阻害する負帯電粒子の有効性
[0156] リポ多糖体（LPS）は、細菌細胞壁成分であり、敗血症誘導サイトカインストームを生じさせる内毒素である。健康なヒト対象から単離したヒト末梢血単核球（PBMC）による炎症促進性サイトカインの生成を阻害する負帯電粒子ＯＮＰ－３０２の有効性を、ＬＰＳとのインキュベート後に生体外で調べた。

【0153】

[0157] 新たに単離したＰＢＭＣを異なる濃度のＣＮＰ－３０１と３０分間インキュベートした後、生体外培養物にて０．１ｎｇ／ｍＬのＬＰＳで６、１２または２４時間刺激した。インキュベート後、細胞培養物の上澄みを回収し、炎症促進性サイトカインおよびケモカイン（IL-1β、TNF-αおよびMCP-1）のレベルをＥＬＩＳＡによりアッセイした。非刺激ＰＢＭＣを対照として使用した。

【0154】

[0158] 図５Ａに示されるように、５０μｇ／ｍＬのＣＮＰ－３０１をＬＰＳ刺激ＰＢＭＣと６および２４時間インキュベートすることにより、ＩＬ－１β濃度レベルがそれぞれ統計的に有意な４６％および５４％の低下を示した。

【0155】

[0159] 図５Ｂに示されるように、５０μｇ／ｍＬのＣＮＰ－３０１をＬＰＳ刺激ＰＢＭＣと２４時間インキュベートすることにより、細胞培養物上澄みにおけるＭＣＰ－１のレベルが統計的に有意な４２％の低下を示した。

【0156】

[0160] 図５Ｃに示されるように、５０μｇ／ｍＬのＣＮＰ－３０１をＬＰＳ刺激ＰＢＭＣと６、１２または２４時間インキュベートすることにより、ＴＮＦ－αのレベルがそれぞれ統計的に有意な５０％、５５％および６２％の低下を示した。

【0157】

[0161] 結論として、これらのデータにより、生体外でのＬＰＳとのインキュベート後のＰＢＭＣによる炎症促進性サイトカイン／ケモカインの生成を阻害する負帯電粒子の有効性が実証され、敗血症および生体内の細菌感染に起因するＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳを治療する可能性が示唆される。

【0158】

実施例７：実験室内で加熱死菌に刺激された単球による炎症促進性サイトカインの生成を阻害する負帯電粒子の有効性
[0162] 細菌感染は、ＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳに発展し得る、ＴＬＲ２シグナル伝達を介する自然免疫細胞（例えば単球）による炎症促進反応の誘導に関連する。負帯電粒子が、細菌との接触後に単球による炎症促進性サイトカインの生成を防止し得るかどうかを判断するために、加熱死菌に刺激された単球による炎症促進性サイトカインＩＬ－６の生成を阻害するＣＮＰ－３０１粒子の有効性を実験室内で調べた。ヒト単球細胞株Ｍｏｎｏ－Ｍａｃ－０６およびＰｙｒｏＭＡＴ（登録商標）アッセイキット（Millipore Sigma）をこのアッセイに使用した。

【0159】

[0163] 簡潔に説明すると、メーカーの説明書に従って、Ｍｏｎｏ－Ｍａｃ－０６細胞を１００μｇ／ｍＬのＣＮＰ－３０１および加熱死黄色ブドウ球菌（HKSA）と２４時間コインキュベートした。非刺激細胞および食塩水を陰性対照として使用した。インキュベートの２４時間後に、細胞培養物上澄みを採取し、メーカーの説明書に従って、ＩＬ－６のレベルをＥＬＩＳＡによりアッセイした。

【0160】

[0164] 図６に示されるように、ＣＮＰ－３０１の非存在下で細胞をＨＫＳＡとインキュベートすることにより、非刺激細胞と比較して強いＩＬ－６生成の誘導がもたらされた。対照的に、ＣＮＰ－３０１による処置により、ＨＫＳＡとインキュベートした細胞によるＩＬ－６の生成が５０％未満に阻害された。

【0161】

[0165] 結論として、この試験の結果により、負帯電粒子は、実験室内での細菌による刺激後の単球による炎症促進性ＩＬ－６の生成を阻害し、細菌感染後の生体内でのＣＳＳおよび／またはＡＲＤＳの防止に有益であり得ることが示唆される。

【0162】

実施例８：負帯電ＯＮＰ－３０２粒子の安全性および許容性を評価するための二部フェーズ１ｂ／２ａ試験
[0166] 本開示では、パートＡの非盲検センチネルコホートにおける負帯電ＯＮＰ－３０２粒子の安全性および許容性を評価するための二部フェーズ１ｂ／２ａ試験、ならびにそれに続く全身性炎症、敗血症、および／または呼吸器系ウイルス感染（例えばインフルエンザおよびSARS-Cov-2）に関連する肺炎の入院成人患者における安全性、許容性および有効性を評価するためのランダム化プラセボ対照パートＢについて説明する。

【0163】

[0167] パートＡは、最少で３つの対象のセンチネルコホートにおけるＯＮＰ－３０２の非盲検反復投与試験を含む。パートＡで決定されたＯＮＰ－３０２の最大許容用量（MTD）を用いてランダム化二重盲検反復投与試験としてのパートＢが続く。

【0164】

[0168] この試験に参加する資格のある対象は、以下の特徴を有する。
ａ．呼吸器系ウイルス感染（例えばインフルエンザおよびSARS-Cov-2）に対する試験結果が陽性であることが確認された。
ｂ．６Ｌ／分未満（WHO COVIDスコア３または４）の低流量酸素治療を受けている、または受けていない公知の呼吸器系ウイルス感染で入院している。
ｃ．血清ｃ反応性タンパク質レベルが４０ｍｇ／Ｌ以上であり、血清フェリチンレベルが３００ｎｇ／ｍＬであるか、または血清Ｄ－ダイマーが０．７５μｇ／ｍＬのいずれかであることによって特徴づけられるスクリーニングでの炎症の兆候がある。

【0165】

[0169] パートＡにおいて、有資格対象は、ＯＮＰ－３０２の第１の用量の投与（１日目）の直前にセンチネルコホートに登録される。最少で３つの対象をセンチネルコホートに登録する。各対象のセンチネルコホートへの登録は、安全性委員会が、前の被験者から投与後２４時間を経て入手可能なすべての安全性データを受領し、投与の継続を推奨されてから進める。センチネルコホートにおける対象は、ＯＮＰ－３０２の投与を５回受ける。対象は、１日目に、体重に基づいて最大で４００ｍｇ（最大で５ｍｇ／ｋｇまで）のＯＮＰ－３０２の投薬を受ける。対象に対するＯＮＰ－３０２の用量レベルは、１日目に、以下の表に従って、対象の重量に基づいて選択される。

【0166】

【表2】

【0167】

[0170] 対象は、静脈内注入により連続５日間（１～５日目）にわたってＯＮＰ－３０２が投与される。試験薬物は、安全上の懸念により対象での早期停止が求められなければ、およそ３～４時間かけて静脈内注入により投与される。注入されるＯＮＰ－３０２の最大濃度は、２．０ｍｇ／ｍＬを超えない。対象は、１～５日目に、注入後２時間までは注入反応（IR）を含む急性有害事象（AE）について観察される。

【0168】

[0171] パートＢにおいて、有資格対象は無作為に分けられて、パートＡにより決定されたＯＮＰ－３０２のＭＴＤレベルでＯＮＰ－３０２が投与されるか、または同様の治療設計で偽薬が投与されるかのいずれかである。およそ４０の対象がパートＢに登録される。対象は、連続５日間（１～５日目）にわたってＯＮＰ－３０２または偽薬（標準食塩水）を５回投与される。試験薬物は、安全上の懸念により対象での早期停止が求められなければ、およそ３～４時間かけて静脈内注入により投与される。注入されるＯＮＰ－３０２の最大濃度は、２．０ｍｇ／ｍＬを超えない。対象は、１～５日目に、注入後２時間まではＩＲを含む急性ＡＥについて観察される。

【0169】

[0172] ＯＮＰ－３０２は、以下の段階的注入量を用いておよそ３～４時間持続する静脈内（IV）注入により連続５日間にわたって１日１回投与される。
ａ．最初の１５分間は２０ｍＬ／ｈｒ
ｂ．次の１５分間は４０ｍＬ／ｈｒ
ｃ．残りの注入は８０ｍＬ／ｈｒ

【0170】

[0173] 試験の終点として以下を用いる。

【0171】

[0174] 安全上の終点
ａ．有害事象（AE）および重度有害事象（SAE）の頻度
ｂ．実験的安全評価（血液学、血清化学、凝血審査、尿検査）
ｃ．生命兆候を含む検診（血圧、心拍数、体温）およびＯ_２飽和度
ｄ．１２誘導心電図（ECG）
ｅ．補体およびサイトカイン／ケモカイン（補体およびサイトカイン／ケモカインの関与が想定される注入反応または他の関連注入反応有害事象の場合は回収したサンプルを分析する）

【0172】

[0175] 薬力学的終点（ベースラインとして用いられる１日目投与前評価）
ａ．血清Ｃ反応性タンパク質（CRP）
ｂ．血液中のリンパ球絶対数
ｃ．臨床的有効性終点（ベースラインとして用いられる１日目投与前評価）
ｄ．以下で定義されるＣＯＶＩＤオーディナル・アウトカム・スケールの組合せ
ｅ．入院日数
ｆ．死亡率

【0173】

[0176] 探索的終点（ベースラインとして用いられる１日目投与前評価）
ａ．血清ｄ－ダイマー
ｂ．血清フェリチン
ｃ．炎症性サイトカインおよびケモカイン（IL-1β、IL-2、IL-6、IL-7、IL-8、IL-10、TNF-α、IFN-γ、IP-10、MIP-1β、MCP-1およびGM-CSF）
ｄ．リンパ球に対する好中球の比率
ｅ．呼吸器離脱期間
ｆ．ＳｐＯ_２／ＦｉＯ_２
ｇ．ＣＴスキャンによって測定される肺機能

【0174】

[0177] 探索的ＰＫ終点：投与前、ならびに１日目のＯＮＰ－３０２の静脈内投与の０．５、１、２、３、４および８時間後のＯＮＰ－３０２ＰＤサイトカインバイオマーカーＩＬ－８の血漿濃度を測定する。

【0175】

番号付き実施形態
[0178] 特許請求の範囲が添付されているが、以下の番号付き実施形態も本開示の一部を形成する。

【0176】

[0179] １．負のゼータ電位を有する治療有効量の表面機能化粒子を対象に投与することを含む、対象における急性呼吸窮迫症候群（ARDS）を治療する方法であって、表面機能化粒子が他の治療有効薬を含まない方法。

【0177】

[0180] ２．ＡＲＤＳが直接的肺傷害または間接的肺傷害の結果である、実施形態１に記載の方法。

【0178】

[0181] ３．ＡＲＤＳが肺炎、肺炎症、細菌感染、ウイルス感染、真菌感染、日和見感染、敗血症、胃内容物の誤嚥、外傷、火傷、膵臓炎、肺挫傷、出血性ショック、溺水、輸血、気道傷害、またはそれらの組合せの結果である、実施形態１に記載の方法。

【0179】

[0182] ４．ウイルス感染がＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスによるものである、実施形態３に記載の方法。

【0180】

[0183] ５．ＤＮＡウイルスが一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスが二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（+）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（－）ウイルスまたは環状ｓｓＲＮＡウイルスである、実施形態４に記載の方法。

【0181】

[0184] ６．ウイルスが呼吸器系ウイルスである、実施形態３または４に記載の方法。

【0182】

[0185] ７．ウイルスが、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、コロナウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスまたはジカウイルスからなる群から選択される、実施形態３または４に記載の方法。

【0183】

[0186] ８．細菌感染が、ブドウ球菌、レンサ球菌、マイコバクテリア、バシラス、サルモネラ、ビブリオ、スピロヘータ、ナイセリア、双球菌、シュードモナス、クロストリジウム、トレポネーマ、スピリルム、またはそれらの組合せによるものである、実施形態３に記載の方法。

【0184】

[0187] ９．表面機能化粒子が、ポリグリコール酸（PGA）、ポリ乳酸（PLA）、ポリスチレン、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、キトサン、多糖、脂質、ダイアモンド、鉄、亜鉛、カドミウム、金または銀の１つまたは複数を含む、実施形態１に記載の方法。

【0185】

[0188] １０．表面機能化粒子が乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）粒子である、実施形態８に記載の方法。

【0186】

[0189] １１．ＰＬＧＡ粒子が、約９０：１０から約１０：９０まで、約５０：５０から約９０：１０まで、約５０：５０から約８０：２０まで、約９０：１０から約５０：５０まで、または約８０：２０から約５０：５０までの範囲のポリ乳酸：ポリグリコール酸の比率を含む、実施形態９に記載の方法。

【0187】

[0190] １２．表面機能化粒子が５０：５０のポリ乳酸：ポリグリコール酸を含む、実施形態９に記載の方法。

【0188】

[0191] １３．表面機能化粒子が、粒子の表面にカルボキシル基を含む、実施形態１に記載の方法。

【0189】

[0192] １４．表面機能化粒子が、約－１００ｍＶから－１ｍＶまでの範囲のゼータ電位を有する、実施形態１に記載の方法。

【0190】

[0193] １５．表面機能化粒子が、約－８０ｍＶから－３０ｍＶまでの範囲のゼータ電位を有する、実施形態１３に記載の方法。

【0191】

[0194] １６．表面機能化粒子が、約０．１μｍから約１０μｍまでの範囲の中間径を有する、実施形態１に記載の方法。

【0192】

[0195] １７．表面機能化粒子の径が約４００ｎｍから約８００ｎｍまでの範囲である、実施形態１６に記載の方法。

【0193】

[0196] １８．対象における表面機能化粒子を投与することにより、ＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状を改善する、実施形態１に記載の方法。

【0194】

[0197] １９．ＡＲＤＳに関連する１つまたは複数の症状が、肺炎症、無気肺、窮迫性呼吸、疲労、低血圧、発熱、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫および肺胞浮腫から選択される、実施形態１８に記載の方法。

【0195】

[0198] ２０．表面機能化粒子を投与することにより、肺における炎症性メディエーターの蓄積を低減する、実施形態１８に記載の方法。

【0196】

[0199] ２１．表面機能化粒子が静脈内投与される、実施形態１～２０のいずれかに記載の方法。

【0197】

[0200] ２２．薬物が結合または封入されていない負帯電粒子を投与することを含む、対象における急性炎症を治療する方法であって、粒子を０．１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇまでの用量で投与する方法。

【0198】

[0201] ２３．薬物が結合または封入されていない負帯電粒子を投与することを含む、対象における急性炎症を治療する方法であって、粒子を１０ｍｇから１０００ｍｇまでの用量で投与する方法。

【0199】

[0202] ２４．負帯電粒子が、静脈内、皮下、筋肉内、腹腔内、鼻内または経口投与される、実施形態２２または２３に記載の方法。

【0200】

[0203] ２５．負帯電粒子が単一用量として投与される、実施形態２２～２４のいずれか１つに記載の方法。

【0201】

[0204] ２６．負帯電粒子が複数用量で投与される、実施形態２２～２４のいずれか１つに記載の方法。

【0202】

[0205] ２７．負帯電粒子が、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、ポリ（乳酸）（PLA）、ポリ（グリコール酸）（PGA）、ポリスチレン、キトサン、多糖、１つもしくは複数の脂質、ダイアモンド、鉄、亜鉛、カドミウム、金または銀を含む、実施形態２２～２６のいずれか１つに記載の方法。

【0203】

[0206] ２８．負帯電粒子が１つまたは複数の生分解性重合体を含む、実施形態２２～２７のいずれか１つに記載の方法。

【0204】

[0207] ２９．負帯電粒子がＰＬＧＡを含む、実施形態２２～２８のいずれか１つに記載の方法。

【0205】

[0208] ３０．負帯電粒子が負のゼータ電位を有する、実施形態２２～２９のいずれか１つに記載の方法。

【0206】

[0209] ３１．負帯電粒子が、約０ｍＶから－１００ｍＶまでのゼータ電位を有する、実施形態２２～３０のいずれか１つに記載の方法。

【0207】

[0210] ３２．負帯電粒子が、約－３０ｍＶから－８０ｍＶまでのゼータ電位を有する、実施形態２２～３１のいずれか１つに記載の方法。

【0208】

[0211] ３３．表面機能化粒子が、０．３μｍから３μｍまでの平均径を有する、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の方法。

【0209】

[0212] ３４．負帯電粒子は、０．５、１、２、３、４、５、６、７または８時間の時間にわたって静脈内注入により投与される、実施形態２４に記載の方法。

【0210】

[0213] ３５．負帯電粒子は、４時間未満の時間にわたって静脈内注入により投与される、実施形態２４に記載の方法。

【0211】

[0214] ３６．負帯電粒子は、３～４時間の時間にわたって静脈内注入により投与される、実施形態２４に記載の方法。

【0212】

[0215] ３７．複数用量の負帯電粒子が、連続する日数にわたって１日１回投与される、実施形態２６に記載の方法。

【0213】

[0216] ３８．複数用量の負帯電粒子が、連続２、３、４、５、６、７、８、９または１０日間にわたって１日１回投与される、実施形態３７に記載の方法。

【0214】

[0217] ３９．ＩＭＰが、１２．５ｍｇ／ｍＬ未満の濃度で投与される、実施形態１～３８のいずれか１つに記載の方法。

【0215】

[0218] ４０．負帯電粒子が、０．０５ｍｇ／ｍＬ、０．１ｍｇ／ｍＬ、０．５ｍｇ／ｍＬ、１ｍｇ／ｍＬ、２ｍｇ／ｍＬ、３ｍｇ／ｍＬ、４ｍｇ／ｍＬ、５ｍｇ／ｍＬ、６ｍｇ／ｍＬ、７ｍｇ／ｍＬ、８ｍｇ／ｍＬ、９ｍｇ／ｍＬ、１０ｍｇ／ｍＬ、１１ｍｇ／ｍＬ、１２．５ｍｇ／ｍＬ、１５ｍｇ／ｍＬ、１７．５ｍｇ／ｍＬ、２０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、３０ｍｇ／ｍＬ、４０ｍｇ／ｍＬまたは５０ｍｇ／ｍＬの濃度で投与される、実施形態３９に記載の方法。

【0216】

[0219] ４１．負帯電粒子が、急性炎症の発症の０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、１２、２４、４８、７２または９６時間後から投与される、実施形態２２～４０のいずれか１つに記載の方法。

【0217】

[0220] ４２．対象が、１つもしくは複数の感染、外傷性脳傷害、震とう、脊髄傷害、火傷、虚血傷害、再かん流傷害、敗血症、サイトカイン放出症候群、膵臓炎、肺挫傷、急性呼吸窮迫症候群、出血性ショック、吸入、肺炎、傷害、マクロファージ活性化症候群、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）、重度炎症反応症候群（SIRS）細胞療法、重症急性呼吸器症候群（SARS）、またはそれらの組合せに起因する急性炎症を有する、実施形態２２に記載の方法。

【0218】

[0221] ４３．炎症が、１つまたは複数のウイルス感染、細菌感染、真菌感染、プリオン感染または日和見感染を含む、実施形態４２に記載の方法。

【0219】

[0222] ４４．ウイルスが、ＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスである、実施形態４３に記載の方法。

【0220】

[0223] ４５．ＤＮＡウイルスが一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスが二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（+）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（-）ウイルスまたは環状ｓｓＲＮＡウイルスである、実施形態４４に記載の方法。

【0221】

[0224] ４６．ウイルスが呼吸器系ウイルスである、実施形態４３～４５に記載の方法。

【0222】

[0225] ４７．ウイルスが、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、コロナウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスまたはジカウイルスから選択される、実施形態４３～４６のいずれか１つに記載の方法。

【0223】

[0226] ４８．細菌感染が、ブドウ球菌、レンサ球菌、マイコバクテリア、バシラス、サルモネラ、ビブリオ、スピロヘータ、ナイセリア、双球菌、シュードモナス、クロストリジウム、トレポネーマ、スピリルム、肺炎球菌、またはそれらの組合せによるものである、実施形態４３に記載の方法。

【0224】

[0227] ４９．サイトカイン放出症候群が１つまたは複数の免疫標的療法によるものである、実施形態４２～４８のいずれか１つに記載の方法。

【0225】

[0228] ５０．免疫標的療法が、抗体、タンパク質、ペプチド、サイトカイン、免疫シグナル伝達モジュレーター、ｍＲＮＡ、腫瘍溶解性ウイルス、または細胞ベースの療法である、実施形態４９に記載の方法。

【0226】

[0229] ５１．抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体または二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE）抗体である、実施形態５０に記載の方法。

【0227】

[0230] ５２．抗体が、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１３７、ＯＸ－４０、ＧＩＴＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤＲ３、ＳＬＡＭまたはＩＣＯＳを標的とする、実施形態５０または５１に記載の方法。

【0228】

[0231] ５３．サイトカインがＩＦＮ－α、ＩＦＮ－ｙ、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＧＭ－ＣＳＦまたはそれらの変異体である、実施形態５０に記載の方法。

【0229】

[0232] ５４．免疫シグナル伝達モジュレーターが、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒβ、ＩＬ－２Ｒγ、ＩＬ－３Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒα、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒα、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－１２Ｒβ１、ＩＬ－１２Ｒβ２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒα、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒβ、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒβ、ＩＬ－２８ＲＡ、ＴＬＲ、ＪＡＫ、ＢＴＫ、ＴＹＫ、ＳＹＫ、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＮＦκＢ、ＮＦＡＴ、ＳＴＡＴまたはキナーゼである、実施形態５０に記載の方法。

【0230】

[0233] ５５．細胞ベースの療法が、同種異系、自己もしくはｉＰＳＣ由来Ｔ細胞、ＮＫ細胞、赤血球、幹細胞、抗原提示細胞、マクロファージまたは樹状細胞を含む、実施形態５０に記載の方法。

【0231】

[0234] ５６．対象における負帯電粒子の投与により、急性炎症の１つまたは複数の症状を軽減する、実施形態２２～５５のいずれか１つに記載の方法。

【0232】

[0235] ５７．急性炎症の１つまたは複数の症状が、呼吸窮迫、低血圧、頭痛、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高炭酸症、浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、肺損傷、肝臓損傷、腎臓損傷、異常肝機能、肝機能障害、肝酵素増加、多臓器機能障害、単球増加、好中球増加、フェリチン増加、リンパ球増加、好中球対リンパ球比（NLR）の増加、肝酵素増加、汎血球減少症、凝固障害、ｄ－ダイマーレベルの上昇、ＰａＯ２／ＦｉＯ２の減少、ＳｐＯ２／ＦｉＯ２の減少、または炎症促進性分子レベルの上昇からなる群から選択される、実施形態５６に記載の方法。

【0233】

[0236] ５８．炎症促進性分子が、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－８、ＩＬ－１０、ＩＬ－３３、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＰ－１０、ＭＩＰ－１β、ＭＣＰ－１、ＧＭ－ＣＳＦ、ｃ反応性タンパク質（CRP）およびｓＳＴからなる群から選択される、実施形態５７に記載の方法。

【0234】

[0237] ５９．異常肝機能が、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）レベル、アラニントランスフェラーゼ（ALT）レベル、アルカリホスファターゼ（ALP）レベル、アルブミンおよび全タンパク質レベル、ビリルビンレベル、ガンマ－グルタミルトランスフェラーゼ（GGT）レベルまたは乳酸脱水素酵素（LD）レベルを評価することによって判断される、実施形態５７に記載の方法。

【0235】

[0238] ６０．急性炎症に罹患している対象における負帯電粒子の投与により死亡のリスクを低減する、実施形態２２～５９のいずれか１つに記載の方法。

【0236】

[0239] ６１．急性炎症に罹患している対象における負帯電粒子の投与により回復を向上させる、実施形態２２～６０のいずれか１つに記載の方法。

【0237】

[0240] ６２．負帯電粒子を投与することにより、血液中の炎症促進性サイトカインおよびケモカイン、ｃ反応性タンパク質、ｄ－ダイマー、肝酵素、フェリチン、単球、好中球、マクロファージ、リンパ球、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ALT）、アルカリホスファターゼ（ALP）、アルブミンおよび全タンパク質、ビリルビン、ガンマ－グルタミルトランスフェラーゼ（GGT）および乳酸脱水素酵素（LD）レベルを正常化する、実施形態２２～６１のいずれか１つに記載の方法。

【0238】

[0241] ６３．負帯電粒子を投与することにより肺機能を正常化する、実施形態２２～６２に記載の方法。

【0239】

[0242] ６４．肺機能が、ＰａＯ２／ＦｉＯ２、ＳｐＯ２／ＦｉＯ２、ＣＴ、Ｘ線、気管支鏡検査法、ＰＥＴおよびＭＲＩを用いて評価される、実施形態６３に記載の方法。

【0240】

[0243] ６５．負帯電粒子を投与することにより、酸素補給療法、高流量酸素、人工呼吸器、ＣＰＡＰ、臓器補助、昇圧、ＲＲＴ、ＥＣＭＯおよびステロイドの使用を軽減する、実施形態６３または６４に記載の方法。

【0241】

[0244] ６６．負帯電粒子を投与することにより、入院日数を減少させる、実施形態２２～６５のいずれか１つに記載の方法。

【0242】

[0245] ６７．薬物が結合または封入されていない負帯電粒子を投与することを含む、呼吸器系ウイルス感染に関連する全身性感染、敗血症または肺炎の入院成人患者の急性炎症を、その治療を必要とする対象において治療する方法であって、負帯電粒子が１つまたは複数の生分解性の医薬として許容し得る重合体を含み、粒子が、１ｍｇ／ｋｇから１０ｍｇ／ｋｇまでの用量で投与される方法。

【0243】

[0246] ６８．呼吸器系ウイルス感染が、インフルエンザまたはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に関連する、実施形態６７に記載の方法。

【0244】

[0247] ６９．負帯電粒子が、１ｍｇ／ｋｇから６ｍｇ／ｋｇまでの用量レベルで投与される、実施形態６７または６８に記載の方法。

【0245】

[0248] ７０．負帯電粒子が、５ｍｇ／ｋｇの用量レベルで投与される、実施形態６７～６９のいずれか１つに記載の方法。

【0246】

[0249] ７１．負帯電粒子が、５０ｍｇから４００ｍｇまでの用量レベルで投与される、実施形態６７～７０のいずれか１つに記載の方法。

【0247】

[0250] ７２．負帯電粒子が１つまたは複数の生分解性重合体を含む、実施形態６７～７１のいずれか１つに記載の方法。

【0248】

[0251] ７３．負帯電粒子が、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、ポリ（乳酸）（PLA）、ポリ（グリコール酸）（PGA）またはポリスチレンを含む、実施形態６７～７２のいずれか１つに記載の方法。

【0249】

[0252] ７４．負帯電粒子がＰＬＧＡを含む、実施形態６７～７３のいずれか１つに記載の方法。

【0250】

[0253] ７５．負帯電粒子が、約－３０ｍＶから－８０ｍＶまでのゼータ電位を有する、実施形態６７～７４のいずれか１つに記載の方法。

【0251】

[0254] ７６．負帯電粒子が、０．３μｍから３μｍまたは０．３μｍから１μｍまでの平均径を有する、実施形態６７～７５のいずれか１つに記載の方法。

【0252】

[0255] ７７．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清ｃ反応性タンパク質レベルをベースラインより低下させる、実施形態６７～７６のいずれか１つに記載の方法。

【0253】

[0256] ７８．血清ｃ反応性タンパク質レベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、実施形態７７に記載の方法。

【0254】

[0257] ７９．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清フェリチンレベルをベースラインより低下させる、実施形態６７～７８のいずれか１つに記載の方法。

【0255】

[0258] ８０．血清フェリチンレベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、実施形態７９に記載の方法。

【0256】

[0259] ８１．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血清ｄ－ダイマーレベルをベースラインより低下させる、実施形態６７～８０のいずれか１つに記載の方法。

【0257】

[0260] ８２．血清ｄ－ダイマーレベルが、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、実施形態８１に記載の方法。

【0258】

[0261] ８３．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血液中の好中球の数をベースラインより低下させる、実施形態６７～８２のいずれか１つに記載の方法。

【0259】

[0262] ８４．血液中の好中球の数が、ベースラインと比較して、２分の１、５分の１、１０分の１、１５分の１、２０分の１、２５分の１、３０分の１、３５分の１、４０分の１、４５分の１、５０分の１、５５分の１、６０分の１、６５分の１、７０分の１、７５分の１、８０分の１、８５分の１、９０分の１、９５分の１または１００分の１に低下する、実施形態８３に記載の方法。

【0260】

[0263] ８５．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、血液中のリンパ球の数をベースラインより増加させる、実施形態６７～８４のいずれか１つに記載の方法。

【0261】

[0264] ８６．血液中のリンパ球の数が、ベースラインと比較して、２、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５または１００倍増加する、実施形態８５に記載の方法。

【0262】

[0265] ８７．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、好中球対リンパ球比（NLR）をベースラインより低下させる、実施形態６７～８６のいずれか１つに記載の方法。

【0263】

[0266] ８８．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ＮＬＲを４未満とする、実施形態８７に記載の方法。

【0264】

[0267] ８９．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ＳｐＯ２／ＦｉＯ２比をベースラインより増加させる、実施形態６７～８８のいずれか１つに記載の方法。

【0265】

[0268] ９０．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ＳｐＯ２／ＦｉＯ２比を３００ｍｍＨｇ超とする、実施形態８９に記載の方法。

【0266】

[0269] ９１．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより入院日数を減少させる、実施形態６７～９０のいずれか１つに記載の方法。

【0267】

[0270] ９２．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、呼吸器を使用しない日数を増加させる、実施形態６７～９１のいずれか１つに記載の方法。

【0268】

[0271] ９３．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより死亡のリスクを低下させる、実施形態６７～９２のいずれか１つに記載の方法。

【0269】

[0272] ９４．負帯電粒子を、それを必要とする対象に投与することにより、ベースラインと比較して肺機能を向上させる、実施形態６７～９３のいずれか１つに記載の方法。

【0270】

[0273] ９５．負のゼータ電位を有する表面機能化粒子を対象に投与することを含む、対象におけるサイトカインストーム症候群(CSS)を治療する方法であって、表面機能化粒子が別の療法薬を含まない方法。

【0271】

[0274] ９６．対象が、ウイルス感染、細菌感染、敗血症、サイトカイン放出症候群（CRS）、重度炎症反応症候群（SIRS）、高サイトカイン血症、マクロファージ活性化症候群（MAS）、反応性血球貪食性リンパ組織球症候群、二次血球貪食性リンパ組織症（sHLH）または外傷から選択される１つまたは複数の状態に罹患している、実施形態９５に記載の方法。

【0272】

[0275] ９７．表面機能化粒子を対象に投与することによりCSSの１つまたは複数の症状を軽減する、実施形態９５または９６に記載の方法。

【0273】

[0276] ９８．症状が、多臓器機能障害、脳損傷、肺損傷、肝臓損傷、腎臓損傷、心臓損傷、浮腫、脳浮腫、肺浮腫、肺胞浮腫、呼吸窮迫、低酸素血症、呼吸性アシドーシス、高トリグリセリド血症、白血球減少症、血球減少症、または炎症マーカーレベルの上昇の１つまたは複数から選択される、実施形態９７に記載の方法。

【0274】

[0277] ９９．炎症マーカーが、ＩＬ－１β、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＴＮＦ－α、ＩＦＮ－γ、ＭＣＰ－１、ｃ反応性タンパク質またはフェリチンである、実施形態９８に記載の方法。

【0275】

[0278] １００．ウイルス感染がＤＮＡウイルス、ＲＮＡウイルスまたはレトロウイルスの１つまたは複数によるものである、実施形態９６に記載の方法。

【0276】

[0279] １０１．ＤＮＡウイルスが一本鎖ＤＮＡ（ssDNA）ウイルスまたは二本鎖（dsDNA）ウイルスであり、ＲＮＡウイルスが二本鎖ＲＮＡウイルス、一本鎖ＲＮＡ（ssRNA）（+）ウイルス、ｓｓＲＮＡ（-）ウイルスまたは環状ｓｓＲＮＡウイルスである、実施形態１００に記載の方法。

【0277】

[0280] １０２．ウイルスが呼吸器系ウイルスである、実施形態１００または１０１に記載の方法。

【0278】

[0281] １０３．ウイルスが、アデノ随伴ウイルス、アイチウイルス、オーストラリカコウモリリッサウイルス、ＢＫポリオーマウイルス、バンナウイルス、バーマ森林ウイルス、カンジキウサギブニアウイルス、セルコピテシンヘルペスウイルス、チャンデプラウイルス、チクングニアウイルス、コサウイルスＡ、牛痘ウイルス、コクサッキーウイルス、クリミア・コンゴ出血熱ウイルス、コロナウイルス、デングウイルス、ドーリウイルス、ジュグベウイルス、デゥベンヘイジウイルス、東部ウマ脳炎ウイルス、エコーウイルス、脳心筋炎ウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヨーロッパコウモリリッサウイルス、ＧＢウイルスＣ／Ｇ型肝炎ウイルス、ハンタンウイルス、ヘンドラウイルス、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、デルタ型肝炎ウイルス、ヒトアデノウイルス、ヒトアストロウイルス、ヒトコロナウイルス、ヒトサイトメガロウイルス、ヒトエンテロウイルス６８、７０、ヒトヘルペスウイルス１、ヒトヘルペスウイルス２、ヒトヘルペスウイルス６、ヒトヘルペスウイルス７、ヒト免疫不全ウイルス（HIV）、ヒトパピローマウイルス１、ヒトパピローマウイルス２、ヒトパピローマウイルス１６、１８、ヒトパラインフルエンザウイルス、ヒトパルボウイルスＢ１９、ヒト呼吸器多核体ウイルス、ヒトライノウイルス、ヒトＳＡＲＳコロナウイルス、ヒトスプマレトロウイルス、ヒトＴリンパ球向性ウイルス、ヒトトロウイルス、Ａ型インフルエンザウイルス、Ｂ型インフルエンザウイルス、Ｃ型インフルエンザウイルス、イスファハンウイルス、ＪＣポリオーマウイルス、日本脳炎ウイルス、フニンアレナウイルス、ＫＩポリオーマウイルス、クンジンウイルス、ラゴスコウモリウイルス、ヴィクトリア湖マールブルグウイルス、ランガットウイルス、ラッサウイルス、ローズデールウイルス、ルーピングイルウイルス、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス、マチュポウイルス、マヤロウイルス、ＭＥＲＳコロナウイルス、麻疹ウイルス、メンゴ脳心筋炎、メルケル細胞ポリオーマウイルス、モコラウイルス、伝染性軟属腫ウイルス、サル痘ウイルス、ムンプスウイルス、マレー渓谷脳炎ウイルス、ニューヨークウイルス、ニパウイルス、ノーウォークウイルス、オニョンニョンウイルス、Ｏｒｆウイルス、オロポーシェウイルス、ピチンデウイルス、ポリオウイルス、プンタトロフレボウイルス、プーマラウイルス、狂犬病ウイルス、リフトバレー熱ウイルス、ロザウイルスＡ、ロスリバーウイルス、ロタウイルスＡ、ロタウイルスＢ、ロタウイルスＣ、風疹ウイルス、サギヤマ、サリウイルスＡ、シチリア型サシチョウバエ熱ウイルス、サッポロウイルス、ＳＡＲＳコロナウイルス２、セムリキ森林ウイルス、ソウルウイルス、サル泡沫状ウイルス、シミアンウイルス５、シンドビスウイルス、サウサンプトンウイルス、セントルイス脳炎ウイルス、マダニ媒介ポワッサンウイルス、トルクテノウイルス、トスカーナウイルス、ウークニエミウイルス、水痘帯状疱疹ウイルス、痘瘡ウイルス、ベネズエラウマ脳炎ウイルス、ＷＵポリオーマウイルス、ヤバサル腫瘍ウイルス、ヤバ類似疾患ウイルス、黄熱ウイルスまたはジカウイルスから選択される、実施形態１００～１０２のいずれか１つに記載の方法。

【0279】

[0282] １０４．細菌感染が、ブドウ球菌、レンサ球菌、マイコバクテリア、バシラス、サルモネラ、ビブリオ、スピロヘータ、ナイセリア、双球菌、シュードモナス、クロストリジウム、トレポネーマ、スピリルム、またはそれらの組合せによるものである、実施形態９６～１０３に記載の方法。

【0280】

[0283] １０５．ＣＲＳが、１つまたは複数の免疫標的療法によるものである、実施形態９６～１０４のいずれか１つに記載の方法。

【0281】

[0284] １０６．免疫標的療法が、抗体、タンパク質療法、ペプチド、サイトカイン、免疫シグナル伝達モジュレーター、ｍＲＮＡ、腫瘍溶解性ウイルス、または細胞ベースの療法である、実施形態１０５に記載の方法。

【0282】

[0285] １０７．抗体が、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、二重特異性抗体、三重特異性抗体または二重特異性Ｔ細胞誘導（BiTE）抗体である、実施形態１０６に記載の方法。

【0283】

[0286] １０８．抗体が、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ２０、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ３０、ＣＤ４０Ｌ、ＣＤ１３７、ＯＸ－４０、ＧＩＴＲ、ＬＩＧＨＴ、ＤＲ３、ＳＬＡＭまたはＩＣＯＳの１つまたは複数を標的とする、実施形態１０６または１０７に記載の方法。

【0284】

[0287] １０９．サイトカインがＩＦＮ－α、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－２、ＩＬ－１０、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＧＭ－ＣＳＦまたはそれらの変異体である、実施形態１０６～１０８のいずれか１つに記載の方法。

【0285】

[0288] １１０．免疫シグナル伝達モジュレーターが、ＩＬ－１Ｒ、ＩＬ－２Ｒα、ＩＬ－２Ｒβ、ＩＬ－２Ｒγ、ＩＬ－３Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－４Ｒ、ＩＬ－５Ｒα、ＣＳＦ２ＲＢ、ＩＬ－６Ｒα、ｇｐ１３０、ＩＬ－７Ｒα、ＩＬ－９Ｒ、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－１２Ｒβ１、ＩＬ－１２Ｒβ２、ＩＬ－１３Ｒα１、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１５Ｒα、ＩＬ－２１Ｒ、ＩＬ２３Ｒ、ＩＬ－２７Ｒα、ＩＬ－３１Ｒα、ＯＳＭＲ、ＣＳＦ－１Ｒ、ＧＭ－ＣＳＦ－Ｒ、細胞表面ＩＬ－１５、ＩＬ－１０Ｒα、ＩＬ－１０Ｒβ、ＩＬ－２０Ｒα、ＩＬ－２０Ｒβ、ＩＬ－２２Ｒα１、ＩＬ－２２Ｒα２、ＩＬ－２２Ｒβ、ＩＬ－２８ＲＡ、ＴＬＲ、ＪＡＫ、ＢＴＫ、ＴＹＫ、ＳＹＫ、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ、ＮＦκＢ、ＮＦＡＴ、ＳＴＡＴまたはキナーゼの１つまたは複数を標的とする、実施形態１０６～１０９のいずれか１つに記載の方法。

【0286】

[0289] １１１．細胞ベースの療法が、同種異系、自己またはｉＰＳＣ由来細胞を含む、実施形態１０６～１１０のいずれか１つに記載の方法。

【0287】

[0290] １１２．細胞ベースの療法が、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、赤血球、幹細胞、抗原提示細胞、マクロファージまたは樹状細胞の１つまたは複数を含む、実施形態１０６～１１１のいずれか１つに記載の方法。

【0288】

[0291] １１３．表面機能化粒子が、１つまたは複数のカルボキシル基を粒子の表面に添加することにより表面機能化されている。実施形態９５～１１２のいずれか１つに記載の方法。

【0289】

[0292] １１４．表面機能化粒子が、約－１００ｍＶから約－１ｍＶまでのゼータ電位を有する、実施形態９５～１１３のいずれか１つに記載の方法。

【0290】

[0293] １１５．表面機能化粒子が、約－８０ｍＶから約－３０ｍＶまでのゼータ電位を有する、実施形態１１４に記載の方法。

【0291】

[0294] １１６．表面機能化粒子の平均径が約０．１μｍから約１０μｍまでである、実施形態９５～１１５のいずれか１つに記載の方法。

【0292】

[0295] １１７．表面機能化粒子の平均径が約４００ｎｍから約８００ｎｍまでである、実施形態１１６に記載の方法。

【0293】

[0296] １１８．粒子が、ポリグリコール酸（PGA）、ポリ乳酸（PLA）、ポリスチレン、乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）、キトサン、多糖、脂質、ダイアモンド、鉄、亜鉛、カドミウム、金または銀の１つまたは複数を含む、実施形態９５～１１７のいずれか１つに記載の方法。

【0294】

[0297] １１９．表面機能化粒子が乳酸・グリコール酸共重合体（PLGA）粒子である、実施形態１１８に記載の方法。

【0295】

[0298] １２０．ＰＬＧＡ粒子が、約９０：１０から約１０：９０まで、約５０：５０から約９０：１０まで、約５０：５０から約８０：２０まで、約９０：１０から約５０：５０まで、または約８０：２０から約５０：５０までの範囲のポリ乳酸：ポリグリコール酸の比率を含む、実施形態１１９に記載の方法。

【0296】

[0299] １２１．粒子が、ポリ乳酸：ポリグリコール酸を５０：５０で含む、実施形態１２０に記載の方法。

【0297】

[0300] １２２．表面機能化粒子が静脈内投与される、実施形態９５～１２１のいずれかに記載の方法。

【0298】

参考文献
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【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図4E】

【図4F】

【図4G】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6】

【国際調査報告】