特表 2023-524149 ＣＤ３およびＣＤ２０に対する二重特異性抗体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-08

(54)【発明の名称】ＣＤ３およびＣＤ２０に対する二重特異性抗体

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20230601BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/56 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/135 20060101ALI20230601BHJP

   A61K 31/167 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230601BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20230601BHJP

   C07K 16/46 20060101ALN20230601BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 E

A61P35/00

A61K39/395 T

A61K31/56

A61K31/573

A61K31/135

A61K31/167

A61P43/00 111

A61P29/00

C07K16/46 ZNA

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022567357

(86)(22)【出願日】2021-05-07

(85)【翻訳文提出日】2022-12-28

(86)【国際出願番号】 EP2021062231

(87)【国際公開番号】W WO2021224499

(87)【国際公開日】2021-11-11

(31)【優先権主張番号】63/022,212

(32)【優先日】2020-05-08

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/078,667

(32)【優先日】2020-09-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/121,690

(32)【優先日】2020-12-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】507316398

【氏名又は名称】ジェンマブ エー／エス

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100172683

【弁理士】

【氏名又は名称】綾 聡平

(74)【代理人】

【識別番号】100219265

【弁理士】

【氏名又は名称】鈴木 崇大

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】アーマディ，タハムタン

(72)【発明者】

【氏名】グプタ，マニシュ

(72)【発明者】

【氏名】リー，トミー・アール

(72)【発明者】

【氏名】オリヴェリ，ロベルト

(72)【発明者】

【氏名】デマルコ，ディナ

(72)【発明者】

【氏名】ヒエムストラ，イーダ

(72)【発明者】

【氏名】チュー，クリストファー

(72)【発明者】

【氏名】エリオット，ブライアン

(72)【発明者】

【氏名】アザリアン，エーダ

【テーマコード（参考）】

4C085

4C086

4C206

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C085AA13

4C085BB31

4C085CC22

4C085DD61

4C085EE01

4C085EE03

4C085GG01

4C085GG08

4C086AA01

4C086AA02

4C086DA08

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA52

4C086MA66

4C086NA05

4C086NA14

4C086ZB26

4C086ZC75

4C206AA01

4C206AA02

4C206FA05

4C206GA02

4C206GA31

4C206MA02

4C206MA04

4C206MA72

4C206MA86

4C206NA05

4C206NA14

4C206ZA07

4C206ZC42

4C206ZC75

4H045AA11

4H045AA30

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA76

4H045EA22

4H045EA28

4H045FA72

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、二重特異性抗体（ｂｓＡｂ）、ならびに注目すべき疾患の治療におけるそのような抗体の使用に関する。さらに、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の治療のための有利な治療レジメンが提供される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）を治療する方法であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む、完全な長さの抗体である二重特異性抗体を、それを必要とするヒト対象の皮下に投与することを含み、
前記二重特異性抗体を少なくとも２４ｍｇの用量で投与する、方法。

【請求項2】

前記Ｂ－ＮＨＬが、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（ＨＧＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、辺縁帯リンパ腫および小リンパ球性リンパ腫からなる群から選択される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記Ｂ－ＮＨＬが、ＦＬ、ＨＧＢＣＬまたはＤＬＢＣＬである、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記対象が、前記二重特異性抗体による前記治療の前に、リツキシマブなどのＣＤ２０単一特異性抗体による治療を受けている、請求項１～３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項5】

前記ＣＤ２０単一特異性抗体による前記治療の期間中、前記がんが再発した、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記ＣＤ２０単一特異性抗体による前記治療の期間中、前記がんが前記治療に対して難治性であった、請求項４に記載の方法。

【請求項7】

前記ＣＤ２０単一特異性抗体が併用治療において使用された、請求項４～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記患者が、前記Ｂ細胞ＮＨＬに対するさらなる先行の治療の方針を受けた、請求項１～７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項9】

前記二重特異性抗体を少なくとも４０ｍｇの用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

前記二重特異性抗体を４０ｍｇ～１００ｍｇの範囲内の用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記二重特異性抗体を少なくとも４８ｍｇの用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記二重特異性抗体を少なくとも６０ｍｇの用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記二重特異性抗体を４８ｍｇの用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記二重特異性抗体を６０ｍｇの用量で投与する、請求項１～８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項15】

前記用量が毎週投与される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記毎週の投与が少なくとも４回行われる、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

前記毎週の投与の後、前記抗体を二週間に一回投与する、請求項１５または１６に記載の方法。

【請求項18】

前記隔週の投与が（少なくとも）６回行われる、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記二週間に一回の投与後、前記抗体を四週間に一回投与する、請求項１７または１８に記載の方法。

【請求項20】

前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体のプライミング用量を投与する、請求項１５～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記初回用量の前記毎週の用量を投与する一週間前に、前記プライミング用量を投与する、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記プライミング用量が５０～３５０μｇの範囲内である、請求項２０または２１に記載の方法。

【請求項23】

前記プライミング用量が１６０μｇである、請求項２０～２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

前記プライミング用量を投与した後、前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体の中間用量を投与する、請求項２０～２３に記載の方法。

【請求項25】

前記初回用量の前記毎週の用量を投与する前に、前記プライミング用量が二週間投与され、前記中間用量が一週間投与される、請求項２４に記載の方法。

【請求項26】

前記中間用量が６００～１２００μｇの範囲である、請求項２４または２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

前記中間用量が８００μｇである、請求項２４～２６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

前記治療方法が、前記二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、プライミング用量を１日目に投与し、中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、４８ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する、請求項２４～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

前記治療方法が、前記二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、４８ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する、請求項２４～２７に記載の方法。

【請求項30】

前記治療方法が、前記二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、プライミング用量を１日目に投与し、中間用量を８日目に投与し、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、６０ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する、請求項２４～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記治療方法が、前記二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１日目、８日目、１５日目および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、６０ｍｇの用量を投与し、
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する、請求項２４～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項32】

前記Ｂ細胞ＮＨＬがＦＬ、ＤＬＢＣＬ、および／またはＨＧＢＣＬである、請求項２８～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

前記対象が、グレード１またはグレード２の管理可能なサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を間に有する、請求項１～３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項34】

前記対象が腫瘍崩壊症候群を経ていない、請求項１～３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

前記対象が、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の予防で治療される、請求項１～３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項36】

前記予防がコルチコステロイドの前記投与を含む、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記予防が、前記二重特異性抗体と同じ日に投与される、請求項３５～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

前記予防が、後の２～３日目に、および４日目であっていてもよい、または後の２～４日目に投与される、請求項３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記予防が前記二重特異性抗体と同じ日に投与される場合、前記予防は、前記二重特異性抗体の前記投与の３０～１２０分前に投与される、請求項３７～３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

前記コルチコステロイドが、プレドニゾロンであり、例えば、経口での用量を含む１００ｍｇの静脈内用量またはその等価物である、請求項３６～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記ヒト対象が、注射に対する反応を低下させるために前投薬で治療される、請求項１～４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

前記前投薬が抗ヒスタミン薬の前記投与を含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記前投薬が解熱薬の前記投与を含む、請求項４１～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記抗ヒスタミン剤が、例えば５０ｍｇの静脈内または経口での用量でのジフェンヒドラミン、またはその等価物である、請求項４１～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

前記解熱薬がアセトアミノフェン、例えば６５０～１０００ｍｇの経口での用量、またはその等価物である、請求項４３～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

前記前投薬が、前記二重特異性抗体と同じ日に投与される、請求項４１～４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

前記前投薬が、前記二重特異性抗体の前記投与の３０～１２０分前に投与された、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

請求項３５～４０において定義される前記予防が前記第１のサイクルの間に投与される、請求項２８～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

請求項４１～４７において定義される前記前投薬が前記第１のサイクルの間に投与される、請求項２８～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記予防が、サイクル１での前記二重特異性抗体の４回目の投与後に、前記ヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経るとき、第２のサイクルの間に投与される、請求項４８および４９に記載の方法。

【請求項51】

前記予防が、先行のサイクルの前記二重特異性抗体の最後の投与において、前記ヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経る場合、その後のサイクルの間継続される、請求項５０に記載の方法。

【請求項52】

前記前投薬が、前記第２のサイクル中に投与されていてもよい、請求項４９および５０に記載の方法。

【請求項53】

前記前投薬が、後のサイクルの間に投与されていてもよい、請求項５２に記載の方法。

【請求項54】

前記二重特異性抗体が、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、前記第１の抗原結合領域が、それぞれ配列番号１、２、および３に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＧＴＮである配列番号４に示される配列および配列番号５に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第１の結合アーム、ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、前記第２の抗原結合領域が、それぞれ配列番号８、９、および１０に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＤＡＳである配列番号１１に示される配列および配列番号１２に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第２の結合アーム
を含む、請求項１～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項55】

前記二重特異性抗体が、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が配列番号６を含み、前記可変軽鎖領域が配列番号７を含む、第１の結合アーム、ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が配列番号１３を含み、前記可変軽鎖領域が配列番号１４を含む、第２の結合アーム
を含む、請求項１～５４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記二重特異性抗体の前記第１の結合アームが、ヒト化抗体、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、λ（ラムダ）抗体に由来する、請求項１～５５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項57】

前記二重特異性抗体が、配列番号２２で定められるλ軽鎖定常領域を含む、請求項５６に記載の方法。

【請求項58】

前記二重特異性抗体の前記第２の結合アームが、ヒト抗体、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、κ（カッパ）抗体に由来する、請求項１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項59】

前記二重特異性抗体が、配列番号２３で定められるκ軽鎖定常領域を含む、請求項５８に記載の方法。

【請求項60】

前記二重特異性抗体が、ヒトＩｇＧ１定常領域を有する完全な長さの抗体である、請求項１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記二重特異性抗体が不活Ｆｃ領域を含む、請求項１～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

前記二重特異性抗体が、前記第１の重鎖および前記第２の重鎖の両方の配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＬ２３４、Ｌ２３５、およびＤ２６５位に対応する位置の前記第１および第２の重鎖に、それぞれアミノ酸Ｆ、Ｅ、およびＡを含む、請求項６１に記載の方法。

【請求項63】

前記二重特異性抗体が、前記第１の重鎖において、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＦ４０５に対応する位置にアミノ酸Ｌを含み、前記第２の重鎖が、Ｒである配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＫ４０９に対応する前記位置にアミノ酸Ｒを含むか、またはその逆である、請求項１～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記二重特異性抗体が、前記第１の重鎖および前記第２の重鎖の両方の、配列番号１５の前記ヒトＩｇＧ１重鎖のＬ２３４、Ｌ２３５、およびＤ２６５の位置に対応する前記位置の前記第１の重鎖および前記第２の重鎖に、それぞれアミノ酸Ｆ、Ｅ、およびＡを含み、前記第１の重鎖に、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＦ４０５に対応する前記位置のアミノ酸Ｌを含み、前記第２の重鎖に、Ｒである配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＫ４０９に対応する前記位置の前記アミノ酸Ｒを含む、またはその逆である、請求項１～６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

前記二重特異性抗体が、配列番号１９および２０において定められる定常領域を含む、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記二重特異性抗体が、それぞれ配列番号２４および２５において定められる重鎖および軽鎖、ならびに配列番号２６および２７において定められる重鎖および軽鎖を含む、請求項１～６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項67】

前記二重特異性抗体が、それぞれ配列番号２４および２５において定められる重鎖および軽鎖、ならびに配列番号２６および２７において定められる重鎖および軽鎖からなる、請求項１～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

前記二重特異性抗体がエプコリタマブまたはそのバイオシミラーである、請求項１～６７のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＣＤ３およびＣＤ２０の両方を標的とする二重特異性抗体（ｂｓＡｂ）、ならびに注目すべき疾患の治療におけるそのような抗体の使用に関する。さらに、有利な治療レジメンが提供される。

【背景技術】

【0002】

モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は、がんの治療に対しておおいに成功していることが示されてきた。抗体療法を改善するためのさらなる有望なアプローチは、抗原発現がん細胞に特異的にＴ細胞を動員することによるものである。これは、Ｔ細胞および抗原発現細胞の両方を標的とするｂｓＡｂを利用することによって達成することができる。しかし、初期の臨床研究は、主に二重特異性抗体の低い効力、重篤な有害作用（サイトカインストーム）および免疫原性のために、どちらかと言えば期待外れであった。二重特異性抗体の設計および応用における進歩は、サイトカイン放出症候群の初期の障壁を部分的に克服し、用量制限毒性を伴わずに臨床的有効性を改善している（Ｇａｒｂｅｒ，２０１４，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．１３：７９９－８０１）。

【0003】

ＣＤ２０分子は、ヒトＢリンパ球拘束性分化抗原またはＢｐ３５とも呼ばれ、末梢血またはリンパ器官由来のＢ細胞の９０％超の表面に見られ、Ｂ細胞発生前初期に発現され、形質細胞分化まで残る。ＣＤ２０は、正常Ｂ細胞および悪性Ｂ細胞の両方に存在する。特に、ＣＤ２０は、Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の９０％超で発現されるが、造血幹細胞、プロＢ細胞、正常な形質細胞、または他の正常組織では見出されない。ＣＤ２０を標的とすることによってがんならびに自己免疫疾患および免疫疾患を治療する方法は、当技術分野で公知である。

【0004】

例えば、キメラＣＤ２０抗体リツキシマブは、Ｂ－ＮＨＬや慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）などのがんの治療に使用されてきた、または治療において使用するために示唆されてきた。ヒトモノクローナル抗ＣＤ２０抗体オファツムマブは、とりわけ様々なＣＬＬ適応症、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、視神経脊髄炎（ＮＭＯ）、びまん性および再発寛解型多発性硬化症（ＲＲＭＳ）の治療に使用するために使用されているか、またはその使用が示唆されている。

【0005】

現在、ＣＤ２０およびＣＤ３の両方を標的とする二重特異性抗体が開発中である。例えば、国際公開第２０１１０２８９５２号には、とりわけ、ＸｅｎｃｏｒのＸｍＡｂ二重特異性Ｆｃドメイン技術を使用したＣＤ３ｘＣＤ２０二重特異性分子の生成が記載されており、国際公開第２０１４０４７２３１号には、Ｒｅｇｅｎｅｒｏｎ ＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓからのＦｃΔＡｄｐ技術を使用して生成されたＲＥＧＮ １９７９および他のＣＤ３ｘＣＤ２０二重特異性抗体が記載されており、Ｓｕｎら（２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ７，２８７ ｒａ ７０）には、「ノブ・イントゥ・ホール」技術を使用して構築されたＢ細胞標的化抗ＣＤ２０／ＣＤ３ Ｔ細胞依存性二重特異性抗体が記載されている。そのような二重特異性抗体は、現在、ヒトにおける特異的な適応症についての臨床試験において試験されている。

【0006】

開発中の特に注目すべき二重特異性抗体は、エプコリタマブ（Ｄｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０；ＧＥＮ ３０１３）である（参照により本明細書に組み込まれる、Ｅｎｇｅｌｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，２０２０，ＥＢｉｏＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．５２，１０２６２５、国際公開第２０１６１１０５７６号および国際公開第２０１９１５５００８号）。

【0007】

Ｂ－ＮＨＬなどのＣＤ２０＋がんの治療に利用可能な治療レジメンが現在存在するが、現在利用可能な治療に対して再発または難治性の患者が依然として存在するため、さらなる治療選択肢が依然として必要である。エプコリタマブは、Ｂ－ＮＨＬなどのがんに罹患している患者に利益をもたらし得る、治療選択肢のレパートリーに追加することができる候補である。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0008】

【特許文献1】国際公開第２０１１０２８９５２号

【特許文献2】国際公開第２０１４０４７２３１号

【特許文献3】国際公開第２０１６１１０５７６号

【特許文献4】国際公開第２０１９１５５００８号

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】Ｇａｒｂｅｒ， ２０１４，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．１３：７９９－８０１

【非特許文献2】２０１５，Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ７，２８７ ｒａ ７０

【非特許文献3】Ｅｎｇｅｌｂｅｒｔｓ ｅｔ ａｌ．，２０２０，ＥＢｉｏＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｖｏｌ．５２，１０２６２５

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0010】

したがって、本発明の１つの目的は、本明細書に記載されるようなＣＤ３ｘＣＤ２０を標的とする二重特異性抗体、例えばエプコリタマブを使用することによってがんを治療するための手段および方法を提供すること、ならびにがんの治療において使用するための、本明細書に記載されるようなＣＤ３ｘＣＤ２０を標的とする二重特異性抗体、例えばエプコリタマブを提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0011】

そのような方法または使用に関して、例えば、Ｂ－ＮＨＬなどのＣＤ２０に対して陽性であることが公知であるかまたは特定されたがんに対して有利な特定の用量範囲および／または投与レジメンが提供される。より具体的には、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫、ＦＬに罹患している患者の治療に関して有利な特定の用量範囲および／または投与レジメンが本明細書で提供される。本明細書で提供される用量範囲および／または投与レジメンは、ヒトでの使用に対して安全であると評価され、および／またはＢ－ＮＨＬの治療に非常に有効であることが示された。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1】集団ＰＫモデルが、標的媒介性薬物動態（ＴＭＤＤ）の飽和を予測した。各用量について、１００人の仮想患者をシミュレートし、モデル予測ＴＭＤＤ飽和を箱ひげ図でまとめ、中央値（中央の水平の棒線）、２５および７５パーセンタイル（下部ヒンジおよび上部ヒンジ）、１．５＊四分位範囲（ひげ）、および外れ値（点）を表した。

【図2】ヒトＰＫ／ＰＤモデリング分析の概要。

【図3】観察および較正されたモデルの予測のエプコリタマブ用量漸増試行の奏効率の比較。観察されたエプコリタマブ用量漸増試行の奏効率およびエプコリタマブ曝露３分位数の関数としての９０％ＣＩを、それぞれ黒丸およびエラーバーで示す。モデルの予測試行奏功率および９０％予測区間を実線および網掛け領域によって示す。

【図4】ＦＬの統合されたＰＫ／ＰＤモデル予測三量体形成。各用量について、シミュレーション用の１００人の仮想患者および最初の８４日間にわたって形成された三量体のモデル予測平均数を腫瘍細胞の数によって正規化させ、中央値（中央の水平な棒線）、２５および７５パーセンタイル（下部ヒンジおよび上部ヒンジ）、１．５＊四分位範囲（ひげ）および外れ値（点）を表す箱ひげ図でまとめた。

【図5】ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬについての統合された薬物動態／薬力学モデルでの予測された三量体形成。各用量について、エプコリタマブ増大試験における１００人の仮想患者をシミュレートし、腫瘍細胞の数によって正規化された、最初の８４日間にわたって形成された三量体のモデル予測平均数を箱ひげ図でまとめた。

【図6】統合されたＰＫ／ＰＤモデルは、ＦＬ患者に対するエプコリタマブ増大試験の奏効率を予測した。各用量について、エプコリタマブ増大試験における１００人の仮想患者をシミュレートし、モデルの予測された試験奏効率を箱ひげ図でまとめ、中央値（中央の水平な棒線）、２５および７５パーセンタイル（下ヒンジおよび上ヒンジ）、１．５＊四分位範囲（ひげ）および外れ値（点）を表した。

【図7】統合されたＰＫ／ＰＤモデルは、ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬ患者に対するエプコリタマブ増大試験の奏効率を予測した。各用量について、エプコリタマブ増大試験における１００人の仮想患者をシミュレートし、モデルの予測された試験奏効率を箱ひげ図でまとめ、中央値（中央の水平な棒線）、２５および７５パーセンタイル（下ヒンジおよび上ヒンジ）、１．５＊四分位範囲（ひげ）および外れ値（点）を表した。

【発明を実施するための形態】

【0013】

本明細書における「免疫グロブリン」という用語は、２対のポリペプチド鎖、１対の低分子量軽（Ｌ）鎖および１対の重（Ｈ）鎖からなり、４つすべてがジスルフィド結合によって相互接続されている、構造的に関連する糖タンパク質のクラスを指す。免疫グロブリンの構造は十分に特徴付けられている。例えば、Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｃｈ．７（Ｐａｕｌ，Ｗ．，ｅｄ．，２ｎｄ ｅｄ．Ｒａｖｅｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎ．Ｙ．（１９８９））を参照されたい。簡潔には、各重鎖は、典型的には、重鎖可変領域（本明細書ではＶＨまたはＶ_Ｈと略す）および重鎖定常領域（本明細書ではＣＨまたはＣ_Ｈと略す）から構成される。重鎖定常領域は、典型的には、３つのドメイン、ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３から構成される。ヒンジ領域は、重鎖のＣＨ１ドメインとＣＨ２ドメインとの間の領域であり、非常に柔軟である。ヒンジ領域のジスルフィド結合は、ＩｇＧ分子の２つの重鎖間の相互作用の一部である。各軽鎖は、典型的には、軽鎖可変領域（本明細書ではＶＬまたはＶ_Ｌと略される）および軽鎖定常領域（本明細書ではＣＬまたはＣ_Ｌと略される）から構成される。軽鎖定常領域は、典型的には、１つのドメインＣＬで構成される。ＶＨおよびＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれるより保存された領域が散在しながら、相補性決定領域（ＣＤＲ）とも呼ばれる超可変領域（または配列および／または構造的に定められたループの形態で超可変であり得る、超可変領域）に、さらに細分することができる。各ＶＨおよびＶＬは通常、次の順序、つまりＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４でアミノ末端からカルボキシ末端に配置された、３つのＣＤＲと４つのＦＲから構成される（Ｃｈｏｔｈｉａ ａｎｄ Ｌｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６，９０１－９１７（１９８７））も参照されたい。特に明記しない限り、または文脈と矛盾しない限り、本明細書のＣＤＲ配列は、ＩＭＧＴ規則により特定される（Ｂｒｏｃｈｅｔ Ｘ．，Ｎｕｃｌ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２００８；３６：Ｗ５０３－５０８ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ ＭＰ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ １９９９；２７：２０９－２１２；また、インターネットｈｔｔｐ ａｄｄｒｅｓｓ ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／を参照されたい）。特に明記しない限り、または文脈と矛盾しない限り、本発明における定常領域のアミノ酸の位置への言及は、ＥＵのナンバリングに従う（（Ｅｄｅｌｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ Ｕ Ｓ Ａ．１９６９ Ｍａｙ；６３（１）：７８－８５；Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ．１９９１ ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２））。例えば、本明細書の配列番号１５は、ＩｇＧ１重鎖定常領域のＥＵのナンバリングでのアミノ酸の位置１１８～４４７位を示す。

【0014】

本明細書で使用される場合、「位置．．．に対応するアミノ酸」という用語は、ヒトＩｇＧ１重鎖のアミノ酸の位置の番号を指す。他の免疫グロブリンの対応するアミノ酸の位置は、ヒトＩｇＧ１とのアラインメントによって見出され得る。したがって、別の配列のアミノ酸またはセグメント「に対応する」１つの配列のアミノ酸またはセグメントは、典型的にはデフォルト設定で、ＡＬＩＧＮ、ＣｌｕｓｔａｌＷまたは同様の標準的な配列アラインメントプログラムを使用して、他のアミノ酸またはセグメントとアライメントするものであり、ヒトＩｇＧ１重鎖に対して少なくとも５０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、または少なくとも９５％の同一性を有する。配列、または配列のセグメントを整列させ、それによって本発明によるアミノ酸の位置に対する配列の対応する位置を判定する方法は、当技術分野で周知であると考えられる。

【0015】

本発明の文脈における「抗体」（Ａｂ）という用語は、典型的な生理学的条件下で、少なくとも約３０分、少なくとも約４５分、少なくとも約１時間、少なくとも約２時間、少なくとも約４時間、少なくとも約８時間、少なくとも約１２時間、約２４時間以上、約４８時間以上、約３、４、５、６、７日間以上など、または任意の他の関連する機能的に定められた期間（例えば、抗原への抗体結合に関連する生理学的応答を誘導、促進、増強および／または調節するのに十分な時間、および／または抗体がエフェクター活性を動員するのに十分な時間）の重要な期間の半減期で、抗原に特異的に結合する能力を有する、免疫グロブリン分子、免疫グロブリン分子の断片、またはそれらいずれかの誘導体を指す。免疫グロブリン分子の重鎖および軽鎖の可変領域は、抗原と相互作用する結合ドメインを含む。本明細書で使用される場合、「抗体結合領域」という用語は、抗原と相互作用し、ＶＨ領域とＶＬ領域の両方を含む領域を指す。抗体という用語は、本明細書で使用される場合、単一特異性抗体だけでなく、複数、例えば２つ以上、例えば３つ以上の異なる抗原結合領域を含む多重特異性抗体も含む。抗体の定常領域（Ａｂ）は、免疫系の様々な細胞（エフェクター細胞など）および補体活性化の古典的経路における第１の成分であるＣ１ｑなどの補体システムの成分を含む、宿主組織または因子への免疫グロブリンの結合を媒介し得る。上記のように、本明細書における抗体という用語は、特に明記しない限り、または文脈と明らかに矛盾しない限り、抗原結合断片である、すなわち抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体の断片を含む。抗体の抗原結合機能は、完全な長さの抗体の断片によって行われ得ることが示されている。「抗体」という用語に包含される抗原結合断片の例には、（ｉ）Ｆａｂ’もしくはＦａｂ断片、ＶＬ、ＶＨ、ＣＬおよびＣＨ１ドメインからなる一価断片、または国際公開第２００７０５９７８２号（Ｇｅｎｍａｂ）に記載されている一価抗体；（ｉｉ）Ｆ（ａｂ’）_２断片、ヒンジ領域でジスルフィド架橋によって連結された２つのＦａｂ断片を含む二価断片；（ｉｉｉ）ＶＨドメインおよびＣＨ１ドメインから本質的になるＦｄ断片；（ｉｖ）抗体の単一アームのＶＬドメインおよびＶＨドメインから本質的になるＦｖ断片、（ｖ）ＶＨドメインから本質的になり、ドメイン抗体とも呼ばれる（Ｈｏｌｔ ｅｔ ａｌ；Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００３ Ｎｏｖ；２１（１１）：４８４－９０）ｄＡｂ断片（Ｗａｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３４１，５４４－５４６（１９８９））；（ｖｉ）ラクダ科動物またはナノボディ（Ｒｅｖｅｔｓ ｅｔ ａｌ；Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．２００５ Ｊａｎ；５（１）：１１１－２４）、および（ｖｉｉ）単離された相補性決定領域（ＣＤＲ）が含まれる。さらに、Ｆｖ断片の２つのドメイン、ＶＬおよびＶＨは、別個の遺伝子によってコードされるが、それらは、組換え法を使用して、合成リンカーによって連結され得、このリンカーはＶＬおよびＶＨ領域が対合して一価分子を形成する単一のタンパク質鎖としてそれらを作製することを可能にするものである（一本鎖抗体または一本鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）として知られており、例えばＢｉｒｄ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４２，４２３－４２６（１９８８）およびＨｕｓｔｏｎ ｅｔ ａｌ．，ＰＮＡＳ ＵＳＡ ８５，５８７９－５８８３（１９８８）を参照されたい）。そのような一本鎖抗体は、特に明記されない限り、または文脈によって明確に示されていない限り、抗体という用語に包含される。そのような断片は一般に抗体の意味の範囲内に含まれるが、それらは集合的におよびそれぞれ独立して、本発明の固有の特徴であり、異なる生物学的特性および有用性を示す。本発明の文脈におけるこれらおよび他の有用な抗体断片、ならびにそのような断片の二重特異性フォーマットは、本明細書でさらに論じられる。抗体という用語は、特に明記しない限り、ポリクローナル抗体、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）、抗体様ポリペプチド、キメラ抗体およびヒト化抗体、ならびに酵素切断、ペプチド合成、および組換え技術などの任意の公知の技術によって得られる抗原に特異的に結合する能力を保持する抗体断片（抗原結合断片）も含むということがまた、理解されるべきである。生成された抗体は、いずれかのアイソタイプを有し得る。本明細書で使用される場合、「アイソタイプ」という用語は、重鎖定常領域遺伝子によってコードされる免疫グロブリンクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＤ、ＩｇＡ、ＩｇＥまたはＩｇＭ）を指す。特定のアイソタイプ、例えばＩｇＧ１が本明細書で言及される場合、この用語は、特定のアイソタイプの配列、例えば特定のＩｇＧ１の配列に限定されないが、抗体が他のアイソタイプよりもそのアイソタイプ、例えばＩｇＧ１に配列が近いことを示すために使用される。したがって、例えば、本発明のＩｇＧ１抗体は、定常領域の変異を含む、天然に存在するＩｇＧ１抗体の配列変異体であり得る。

【0016】

本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」という用語は、単一分子組成の抗体分子の調製物を指す。モノクローナル抗体組成物は、特定のエピトープに対する単一の結合特異性と親和性を示す。したがって、「ヒトモノクローナル抗体」という用語は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する単一の結合特異性を示す抗体を指す。ヒトモノクローナル抗体は、不死化細胞に融合されたヒト重鎖導入遺伝子および軽鎖導入遺伝子を含むゲノムを有する、トランスジェニックマウスなどの、トランスジェニックまたはトランスクロモソーマル非ヒト動物から得られたＢ細胞を含むハイブリドーマによって、生成され得る。

【0017】

本発明の文脈における「二重特異性抗体」または「ｂｓ」または「ｂｓＡｂ」という用語は、異なる抗体配列によって定められる２つの異なる抗原結合領域を有する抗体を指す。二重特異性抗体は、任意の形式のものであり得る。

【0018】

本明細書で使用される場合、「半分子」、「Ｆａｂアーム」および「アーム」という用語は、１つの重鎖－軽鎖対を指す。

【0019】

二重特異性抗体が、第１の親抗体「に由来する」半分子抗体、および第２の親抗体「に由来する」半分子抗体を含むと記載されている場合、「に由来する」という用語は、任意の公知の方法によって、前記第１および第２の親抗体のそれぞれからの前記半分子を、得られた二重特異性抗体に再結合することによって、二重特異性抗体が生成されたことを示す。これに関連して、「組換え」は、どのような特定の組換え方法によっても限定されることが意図されず、したがって、例えば、半分子交換（「制御されたＦａｂアーム交換」としても知られる）による組換え、同様に、核酸レベルでの、および／または、同じ細胞における２つの半分子の共発現による組換えを含めて、本明細書において下段に記載される二重特異性抗体を産生するための方法のすべてを含む。

【0020】

「完全な長さ」という用語は、抗体との関連で使用される場合、抗体が断片ではないが、そのアイソタイプについて自然界で通常見られる特定のアイソタイプのドメイン、例えばＩｇＧ１抗体のＶＨ、ＣＨ１、ＣＨ２、ＣＨ３、ヒンジ、ＶＬおよびＣＬドメインのすべてを含むことを示す。完全な長さの抗体を操作することができる。「完全な長さ」抗体の例は、エプコリタマブである。

【0021】

本明細書で使用される場合、文脈によって矛盾しない限り、「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリンの２つの重鎖のＦｃ配列からなる抗体領域を指し、前記Ｆｃ配列は、少なくともヒンジ領域、ＣＨ２ドメイン、およびＣＨ３ドメインを含む。

【0022】

本明細書で使用される場合、「第１のＣＨ３領域と第２のＣＨ３領域との間のヘテロ二量体相互作用」という用語は、第１のＣＨ３／第２のＣＨ３ヘテロ二量体タンパク質における第１のＣＨ３領域と第２のＣＨ３領域との間の相互作用を指す。

【0023】

本明細書で使用される場合、「第１および第２のＣＨ３領域のホモ二量体相互作用」という用語は、第１のＣＨ３／第１のＣＨ３ホモ二量体タンパク質の第１のＣＨ３領域と別の第１のＣＨ３領域との間の相互作用、および第２のＣＨ３／第２のＣＨ３ホモ二量体タンパク質の第２のＣＨ３領域と別の第２のＣＨ３領域との間の相互作用を指す。

【0024】

本明細書で使用される場合、所定の抗原への抗体の結合に関連する「結合」という用語は、典型的には、リガンドとして抗体および分析種として抗原を使用するＯｃｔｅｔ ＨＴＸ機器のバイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）技術などによって判定された場合、約１０^－６Ｍ以下、例えば１０^－７Ｍ以下、例えば約１０^－８Ｍ以下、例えば約１０^－９Ｍ以下、約１０^－１０Ｍ以下、または約１０^－１１Ｍ以下のＫ_Ｄに対応する親和性での結合であり、それにおいて、抗体は、所定の抗原または密接に関連する抗原以外の非特異的抗原（例えば、ＢＳＡ、カゼイン）へ結合するＫ_Ｄよりも少なくとも十分の１以下、例えば１００分の１以下、例えば１，０００分の１以下、例えば１０，０００分の１以下、例えば１００，０００分の１以下のＫ_Ｄに対応する親和性で、所定の抗原に結合する。Ｋ_Ｄが結合する量がより少ないことは、抗体のＫ_Ｄに依存するので、抗体のＫ_Ｄが非常に少ない場合、抗原とＫ_Ｄが結合する量は、Ｋ_Ｄが非特異的抗原と結合するよりも少なく、少なくとも１万倍（すなわち、抗体は高度に特異的である）であり得る。

【0025】

本明細書で使用される場合、「Ｋ_Ｄ」（Ｍ）という用語は、特定の抗体－抗原相互作用の解離平衡定数を指す。本明細書で使用される場合、親和性とＫ_Ｄは逆の関係にあり、すなわち、より高い親和性はより低いＫ_Ｄを指すことを意図し、より低い親和性はより高いＫ_Ｄを指すことを意図する。

【0026】

好ましい実施形態では、本発明の抗体を単離する。本明細書で使用される場合、「単離された抗体」は、異なる抗原特異性を有する他の抗体を実質的に含まない抗体を指すことを意図する。好ましい実施形態において、ＣＤ２０およびＣＤ３に特異的に結合する単離された二重特異性抗体はさらに、ＣＤ２０またはＣＤ３に特異的に結合する単一特異性抗体を実質的に含まない。

【0027】

本明細書で使用される場合、「ＣＤ３」という用語は、Ｔ細胞共受容体タンパク質複合体の一部であり、４つの異なる鎖で構成されるヒトクラスター分類の３タンパク質を指す。ＣＤ３はまた、他の種に見られるため、「ＣＤ３」という用語は、文脈と矛盾しない限り、ヒトＣＤ３に限定されない。哺乳動物では、複合体は、ＣＤ３γ（ガンマ）鎖（ヒトＣＤ３γ鎖ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｐ０９６９３、またはカニクイザルＣＤ３γ ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｑ９５ＬＩ７）、ＣＤ３δ（デルタ）鎖（ヒトＣＤ３δ ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｐ０４２３４、またはカニクイザルＣＤ３δ ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｑ９５ＬＩ８）、２つのＣＤ３ε（イプシロン）鎖（ヒトＣＤ３ε ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｐ０７７６６；カニクイザルＣＤ３εＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ ＮｏＱ９５ＬＩ５；またはアカゲザルＣＤ３ε ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｇ７ＮＣＢ９）、およびＣＤ３ζ鎖（ゼータ）鎖（ヒトＣＤ３ζＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｐ２０９６３、カニクイザルＣＤ３ζ ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｑ０９ＴＫ０）を含む。これらの鎖は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）として知られる分子と会合し、Ｔリンパ球において活性化シグナルを生成する。ＴＣＲおよびＣＤ３分子は共にＴＣＲ複合体を含む。

【0028】

「ＣＤ３抗体」または「抗ＣＤ３抗体」は、抗原ＣＤ３、特にヒトＣＤ３ε（イプシロン）に特異的に結合する抗体である。

【0029】

「ヒトＣＤ２０」または「ＣＤ２０」という用語は、ヒトＣＤ２０（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｐ１１８３６）を指し、腫瘍細胞を含む細胞によって天然に発現される、またはＣＤ２０遺伝子もしくはｃＤＮＡでトランスフェクトされた細胞で発現されるＣＤ２０の任意の変異体、アイソフォームおよび種ホモログを含む。種ホモログには、アカゲザルＣＤ２０（アカゲザル；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ／Ｓｗｉｓｓ－Ｐｒｏｔ Ｎｏ Ｈ９ＹＸＰ１）およびカニクイザルＣＤ２０（カニクイザル；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ Ｎｏ Ｇ７ＰＱ０３）が含まれる。

【0030】

「ＣＤ２０抗体」または「抗ＣＤ２０抗体」は、抗原ＣＤ２０、特にヒトＣＤ２０に特異的に結合する抗体である。

【0031】

「ＣＤ３ｘＣＤ２０抗体」、「抗ＣＤ３ｘＣＤ２０抗体」、「ＣＤ２０ｘＣＤ３抗体」または「抗ＣＤ２０ｘＣＤ３抗体」は、２つの異なる抗原結合領域を含む二重特異性抗体であり、その１つは抗原ＣＤ２０に特異的に結合し、その１つはＣＤ３に特異的に結合する。

【0032】

本明細書における「ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０」は、それぞれ配列番号２４および配列番号２５で定められるような第１の重鎖および軽鎖対を含み、配列番号２６および配列番号２７で定められるような第２の重鎖および軽鎖対を含むＩｇＧ１二重特異性ＣＤ３ｘＣＤ２０抗体を指す。第１の重鎖および軽鎖の対は、ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する結合領域を含み、第２の重鎖および軽鎖の対は、ヒトＣＤ２０に結合する結合領域を含む。第１の結合領域は、配列番号６および７によって定義されるＶＨおよびＶＬ配列を含み、第２の結合領域は、配列番号１３および１４によって定義されるＶＨおよびＶＬ配列を含む。この二重特異性抗体は、国際公開第２０１６／１１０５７６号に記載されているように調製することができる。

【0033】

本発明はまた、実施例の抗体の重鎖、軽鎖、ＶＬ領域、ＶＨ領域または１つもしくは複数のＣＤＲの機能的変異体を含む抗体を提供する。抗体との関連で使用される重鎖、軽鎖、ＶＬ、ＶＨ、またはＣＤＲの機能的変異体は、依然として、抗体が、ＣＤ２０および／またはＣＤ３の特定のエピトープに対する親和性および／または特異性／選択性、Ｆｃ不活性、ならびに半減期、Ｔｍａｘ、ＣｍａｘなどのＰＫパラメータを含む、「参照」および／または「親」抗体の機能的特徴の少なくともかなりの割合（少なくとも約９０％、９５％以上）を保持することを可能にする。

【0034】

そのような機能的変異体は、典型的には、親抗体と意味ある配列同一性を保持し、および／または実質的に同様の長さの重鎖および軽鎖を有する。２つの配列間の同一性率は、２つの配列の最適なアライメントのために導入する必要があるギャップの数と各ギャップの長さを考慮して、シーケンスによって共有される同じ位置の数（すなわち、相同性％＝同一位置の数／位置の総数×１００）の関数である。２つのヌクレオチドまたはアミノ酸配列間の同一性率は、例えば、ＡＬＩＧＮプログラム（バージョン２．０）に組み込まれているＥ．Ｍｅｙｅｒｓ ａｎｄ Ｗ．Ｍｉｌｌｅｒ Ｃｏｍｐｕｔ．Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｓｃｉ ４，１１－１７（１９８８）のアルゴリズムを使用して、ＰＡＭ１２０ウェイト残余表、ギャップ長ペナルティ１２、ギャップペナルティ４を用いて、決定できる。さらに、２つのアミノ酸配列間の同一性率は、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８，４４４－４５３（１９７０）のアルゴリズムを用いて決定できる。

【0035】

例示的な変異体には、主に保存的置換によって親抗体配列の重鎖および／または軽鎖、ＶＨおよび／またはＶＬおよび／またはＣＤＲ領域とは異なるもの、例えば、変異体における置換のうちの１０個、例えば９個、８個、７個、６個、５個、４個、３個、２個または１個が、保存的アミノ酸残基置換であり得るものが含まれる。

【0036】

本発明の文脈において、保存的置換は、以下の表に反映されるアミノ酸のクラスの中での置換によって定義され得る。

【表1】

【0037】

本発明の文脈において、以下の注記、すなわちｉ）所与の位置におけるアミノ酸の置換は、例えばＫ４０９Ｒと記載され、これは、アルギニンによる位置４０９におけるリジンの置換を意味すること、およびｉｉ）特定の変異体について、任意のアミノ酸残基を示すためのコードＸａａおよびＸを含む、特定の３文字または１文字のコードが使用されることが、特に指示しない限り、突然変異を説明するために使用される。したがって、４０９位のアルギニンによるリジンの置換は：Ｋ４０９Ｒと呼称され、４０９位の任意のアミノ酸残基によるリジンの置換はＫ４０９Ｘと呼称される。位置４０９におけるリジンの欠失の場合、それはＫ４０９＊によって示される。

【0038】

「エピトープ」という用語は、抗体への特異的結合能を有するタンパク質決定基を意味する。エピトープは、通常、アミノ酸または糖側鎖などの分子の表面グループからなり、通常、特定の三次元構造特性および特定の電荷特性を有する。立体配座エピトープおよび非立体配座エピトープは、変性溶媒の存在下では前者への結合が失われるが後者への結合は失われないという点で区別される。エピトープは、結合に直接関与するアミノ酸残基および結合に直接関与しない他のアミノ酸残基、例えば特異的抗原結合ペプチドによって効果的にブロックまたは被覆されるアミノ酸残基を含み得る（換言すれば、アミノ酸残基は、特異的抗原結合ペプチドのフットプリントの範囲内である）。

【0039】

本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」という用語は、可変領域が非ヒト種（例えば、げっ歯類に由来する）に由来し、定常領域がヒトなどの異なる種に由来する抗体を指す。治療用途のためのキメラモノクローナル抗体は、抗体免疫原性を低下させるために開発されている。キメラ抗体の文脈で使用される「可変領域」または「可変ドメイン」という用語は、免疫グロブリンの重鎖および軽鎖の両方のＣＤＲおよびフレームワーク領域を含む領域を指す。キメラ抗体は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，１９８９，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｈ．１５に記載されているような標準的なＤＮＡ技術を使用することにより、生成できる。キメラ抗体は、遺伝子操作または酵素が操作された組換え抗体であり得る。キメラ抗体を作製することは当業者が公知のことであり、したがって、本発明によるキメラ抗体の作製は、本明細書に記載される以外の方法によって行われ得る。

【0040】

本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」という用語は、ヒト抗体定常ドメインと、ヒト可変ドメインに対して高レベルの配列相同性を含むように改変された非ヒト可変ドメインとを含む、遺伝子操作された非ヒト抗体を指す。これは、一緒になって抗原結合部位を形成する６つの非ヒト抗体相補性決定領域（ＣＤＲ）を相同ヒトアクセプターフレームワーク領域（ＦＲ）にグラフトすることによって達成することができる（国際公開第９２／２２６５３号および欧州特許第０６２９２４０号明細書参照）。親抗体の結合親和性および結合特異性を完全に再構成するために、親抗体（すなわち、非ヒト抗体）からヒトフレームワーク領域へのフレームワーク残基の置換（復帰突然変異）が必要とされ得る。構造相同性モデリングは、抗体の結合特性に重要なフレームワーク領域内のアミノ酸残基を同定するのに役立ち得る。したがって、ヒト化抗体は、非ヒトＣＤＲ配列、主に、非ヒトアミノ酸配列に対する１つ以上のアミノ酸復帰突然変異を含んでいてもよいヒトフレームワーク領域、および完全ヒト定常領域を含み得る。Ｄｕｏｂｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０において本明細書で使用されるＣＤ３アームのＶＨおよびＶＬは、ヒト化抗原結合領域を表す。必ずしも復帰突然変異ではないさらなるアミノ酸修飾を適用して、親和性および生化学的特性などの好ましい特徴を有するヒト化抗体を得ることができていてもよい。

【0041】

本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来する可変領域および定常領域を有する抗体を指す。ヒト抗体は、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、インビトロでのランダムもしくは部位特異的突然変異誘発またはインビボでの体細胞突然変異によって導入された突然変異）を含み得る。しかしながら、「ヒト抗体」という用語は、本明細書で使用される場合、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖細胞系列に由来するＣＤＲ配列が、ヒトフレームワーク配列にグラフトされている抗体を含むことを意図しない。Ｄｕｏｂｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０において本明細書で使用されるＣＤ２０アームのＶＨおよびＶＬは、ヒト抗原結合領域を表す。本発明のヒトモノクローナル抗体は、従来のモノクローナル抗体方法論、例えばＫｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ，Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５（１９７５）の標準的な体細胞ハイブリダイゼーション技術を含む様々な技術によって産生され得る。体細胞ハイブリダイゼーション治療が原則として好ましいが、モノクローナル抗体を産生するための他の技術、例えば、Ｂリンパ球のウイルスもしくは発がん性の形質転換またはヒト抗体遺伝子のライブラリーを使用するファージディスプレイ技術を使用することができる。ヒトモノクローナル抗体を分泌するハイブリドーマを調製するための適切な動物系は、マウス系である。マウスにおけるハイブリドーマ産生は、非常によく確立された治療である。融合のために免疫化脾細胞を単離するための免疫化プロトコルおよび技術は、当技術分野で公知である。融合パートナー（例えば、マウス骨髄腫細胞）および融合の治療も公知である。したがって、ヒトモノクローナル抗体は、例えば、マウス系またはラット系ではなく、ヒト免疫系の一部を有するトランスジェニックもしくはトランスクロモソーマルマウスまたはラットを用いて作製することができる。したがって、１つの実施形態において、ヒト抗体は、動物免疫グロブリン配列の代わりにヒト生殖細胞系列免疫グロブリン配列を有するトランスジェニック動物、例えば、マウスまたはラットから得られる。そのような実施形態では、抗体は、動物に導入されたヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列に由来するが、最終抗体配列は、内因性動物抗体機構による体細胞高頻度変異および親和性成熟によって前記ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列がさらに改変された結果であり、例えば、Ｍｅｎｄｅｚ ｅｔ ａｌ．１９９７ Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．１５（２）：１４６－５６を参照されたい。Ｄｕｏｂｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０において本明細書で使用されるＣＤ２０アームのＶＨおよびＶＬは、ヒト抗原結合領域を表す。

【0042】

「還元条件」または「還元環境」という用語は、基質、ここでは抗体のヒンジ領域中のシステイン残基が酸化されるよりも還元される可能性が高い状態または環境を指す。

【0043】

本明細書で使用される場合、「組換え宿主細胞」（または単に「宿主細胞」）という用語は、発現ベクター、例えば本発明の抗体をコードする発現ベクターが導入された細胞を指すことを意図している。組換え宿主細胞としては、例えば、トランスフェクトーマ、例えばＣＨＯ、ＣＨＯ－Ｓ、ＨＥＫ、ＨＥＫ２９３、ＨＥＫ－２９３Ｆ、Ｅｘｐｉ２９３Ｆ、ＰＥＲ．Ｃ６またはＮＳ０細胞、およびリンパ球性細胞が挙げられる。

【0044】

「治療」という用語は、症状または疾患の状態を緩和、改善、停止または根絶（治癒）する目的での本発明の治療活性抗体の有効量の投与を指す。

【0045】

「有効量」または「治療有効量」という用語は、所望の治療の結果を達成するために、必要な投与量および期間での有効な量を指す。抗体の治療有効量は、個体の疾患の状態、年齢、性別および体重、ならびに個体において所望の応答を誘発する抗体の能力などの因子に応じて変動し得る。治療有効量はまた、抗体または抗体部分の任意の毒性または有害作用が治療的に有益な作用によって上回る量である。

【0046】

本明細書で使用される場合、「緩衝剤」という用語は、薬学的に許容される緩衝剤を表す。「緩衝剤」という用語は、溶液のｐＨの値を、例えば許容範囲内に維持する薬剤を包含し、限定するものではないが、酢酸塩、ヒスチジン、ＴＲＩＳ（登録商標）（トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン）、クエン酸塩、コハク酸塩、グリコール酸塩などを含む。一般に、本明細書で使用される場合、「緩衝剤」は、約５～約６、好ましくは約５．５のｐＨの範囲に適したｐＫａおよび緩衝能力を有する。

【0047】

本明細書で使用される場合、「界面活性剤」は、表面への薬物の吸着、およびまたは凝集を防ぐために、医薬製剤に典型的に使用される化合物である。さらに、界面活性剤は、２つの液体間または液体と固体との間の表面張力（または界面張力）を低下させる。例えば、例示的な界面活性剤は、非常に低い濃度（例えば、５％ ｗ／ｖ以下、例えば３％ ｗ／ｖ以下、例えば１％ ｗ／ｖ以下、例えば０．４％ ｗ／ｖ以下、例えば０．１％ ｗ／ｖ未満、例えば０．０４％ ｗ／ｖ）で存在する場合、表面張力を著しく低下させることができる。界面活性剤は両親媒性であり、これは、界面活性剤が通常、親水性基と疎水性基または親油性基の両方から構成され、したがって水溶液においてミセルまたは同様の自己集合構造を形成することができることを意味する。薬学的に使用するための公知の界面活性剤としては、グリセロールモノオレエート、塩化ベンゼトニウム、ドキュセートナトリウム、リン脂質、ポリエチレンアルキルエーテル、ラウリル硫酸ナトリウムおよびトリカプリリン（アニオン性界面活性剤）；塩化ベンザルコニウム、シトリミド、塩化セチルピリジニウムおよびリン脂質（カチオン性界面活性剤）；およびαトコフェロール、グリセロールモノオレエート、ミリスチルアルコール、リン脂質、ポロキサマー、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンヒマシ油誘導体、ポリオキシエチレンソルビンタン脂肪酸エステル、ポリオキシエチレンステラレート、ポリオキシルヒドロキシステアレート、ポリオキシルグリセリド、ポリソルベート、例えばポリソルベート２０またはポリソルベート８０、プロピレングリコールジラウレート、プロピレングリコールモノラウレート、ソルビタンエステルスクロースパルミテート、スクロースステアレート、トリカプリリンおよびＴＰＧＳ（非イオン性および両性イオン性界面活性剤）が挙げられる。

【0048】

本明細書における関心対象の「希釈剤」は、薬学的に許容され（ヒトへの投与に安全かつ非毒性であり）、医薬組成物の希釈液の調製に有用なものである。好ましくは、本発明の組成物のこのような希釈は、抗体濃度のみを希釈し、緩衝剤および安定剤を希釈しない。したがって、好ましい実施形態では、希釈剤は、本発明の医薬組成物に存在するのと同じ濃度の緩衝剤および安定剤を含有する。さらなる例示的な希釈剤には、滅菌水、静菌性注射用水（ＢＷＦＩ）、好ましくは酢酸緩衝剤であるｐＨ緩衝剤、滅菌生理食塩水、リンゲル液またはデキストロース溶液が含まれる。好ましい実施形態では、希釈剤は、酢酸緩衝剤およびソルビトールを含むか、またはそれらから本質的になる。

【0049】

「医薬組成物」および「医薬製剤」という用語は、本明細書では互換的に使用される。

【0050】

実施形態
一態様において、本発明は、ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）を治療する方法であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む、二重特異性抗体を、それを必要とする対象に皮下（ｓｃ）で投与することを含み、
前記二重特異性抗体を少なくとも２４ｍｇの用量で投与する方法を提供する。

【0051】

別の態様において、本発明は、ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）を治療する方法であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む、不活Ｆｃ領域を有する完全な長さの抗体である二重特異性抗体を、それを必要とする対象に皮下で投与することを含み、
前記二重特異性抗体を少なくとも２４ｍｇの用量で投与する方法を提供する。

【0052】

さらに別の態様において、本発明は、ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）を治療する方法であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む、完全な長さの抗体である二重特異性抗体を、それを必要とする対象に皮下で投与することを含み、
前記二重特異性抗体を少なくとも２４ｍｇの用量で投与する方法を提供する。

【0053】

別の態様において、本発明は、ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）を治療する方法であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む、不活Ｆｃ領域を含む二重特異性抗体を、それを必要とする対象に皮下で投与することを含み、
前記二重特異性抗体を少なくとも２４ｍｇの用量で投与する方法を提供する。

【0054】

本明細書において、治療方法、すなわちヒト対象のＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の治療方法について言及されるとき、その方法は、それを必要とするヒト対象の皮下に本発明による二重特異性抗体を投与することを含み、それは好ましくは完全な長さの抗体であり、かつ／または不活Ｆｃ領域を含み、別言すると、本発明による二重特異性抗体も、ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の治療において使用するため、言及され、本発明による二重特異性抗体を、それを必要とするヒト対象の皮下に投与することを使用が含み、それは好ましくは完全な長さの抗体であり、かつ／または不活Ｆｃ領域を含むことが理解される。したがって、本明細書では、本明細書で定義されるＣＤ３およびＣＤ２０を標的とする二重特異性抗体でＢ－ＮＨＬを治療する方法が言及され、ヒト対象におけるＢ－ＮＨＬの治療に使用するためのＣＤ３およびＣＤ２０を標的とする前記二重特異性抗体も言及される。

【0055】

さらなる態様において、本発明は、Ｂ－ＮＨＬを治療する方法であって、前記二重特異性抗体が、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、前記第１の抗原結合領域が、それぞれ配列番号１、２、および３に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＧＴＮである配列番号４に示される配列および配列番号５に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第１の結合アーム、ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、前記第２の抗原結合領域が、それぞれ配列番号８、９、および１０に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＤＡＳである配列番号１１に示される配列および配列番号１２に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第２の結合アームを含む。

【0056】

なおさらなる態様において、本発明は、Ｂ－ＮＨＬを治療する方法であって、前記二重特異性抗体が、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号６を含み、可変軽鎖領域が配列番号７を含む、第１の結合アーム、および
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３を含み、可変軽鎖領域が配列番号１４を含む、第２の結合アームを含む方法を提供する。

【0057】

非ホジキンリンパ腫（ＮＨＬ）は、リンパ組織からの細胞の悪性形質転換を特徴とする疾患実体を表す。本明細書で定義されるＢ細胞起源のＮＨＬ（「Ｂ－ＮＨＬ」または「Ｂ細胞ＮＨＬ」）は、ＮＨＬのより大きなコンテキスト内での多様な一連の新生物を構成する。これらは診断され、Ｂ－ＮＨＬサブタイプの区別は、組織学による形態学的特徴、表面マーカー（免疫組織化学／フローサイトメトリー）、染色体異常／転座（核型分析、蛍光インサイチュハイブリダイゼーション（ＦＩＳＨ））、および分子（遺伝子変異）の所見を含む、病理学者による（組織生検に基づく）標準的な分類基準を使用して、決定される。Ｂ－ＮＨＬは、参照により本明細書に含まれるＷＨＯ分類に基づいて診断および分類される（Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２０１７）；Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００８））。

【0058】

手短に言えば、Ｂ－ＮＨＬは、典型的には、緩徐進行型（増殖が遅い）および侵襲性のサブタイプに分けられる。侵襲性Ｂ－ＮＨＬは高Ｋｉ６７の発現を有するのに対して、低悪性度Ｂ－ＮＨＬは比較的低いＫｉ６７発現を有する。一般化として、緩徐進行型リンパ腫は治療に反応し、長年に及ぶ長期生存を伴って制御下（寛解状態）に保たれるが、治癒しない。侵襲性リンパ腫は通常、集中的な治療を必要とし、一部は永久的な治癒の見込みが高い。侵襲性Ｂ－ＮＨＬには、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（ＨＧＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）が含まれる。緩徐進行型Ｂ－ＮＨＬには、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）、および小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）が含まれる。びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）は、すべてのＮＨＬ診断の約３０％～４０％を占めるＮＨＬの最も一般的なタイプであり、次いでＦＬ（すべてのＮＨＬ診断の２０％～２５％）である。Ｂ細胞リンパ腫の大部分は、ＣＤ１９、ＣＤ２０、ＣＤ２２およびＣＤ７９ｂなどのＢ細胞マーカーを発現する。Ｂ細胞悪性腫瘍の生物学的不均一性は、個々の疾患の臨床的な経過および転帰に反映される。ＦＬ、ＭＺＬ、およびＳＬＬなどの無痛性疾患はゆっくりと進行し、生存期間の中央値は８～１０年である。対照的に、ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬなどのより侵襲性の疾患は、無治療のままである場合、６ヶ月の生存期間中央値を有する。リンパ腫の大半の患者の診断時年齢の中央値は約６０～６５歳（ＷＨＯ、２００８年）である。

【0059】

したがって、本発明による方法は、Ｂ－ＮＨＬの治療をさらに含み、前記Ｂ－ＮＨＬは、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（ＨＧＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、辺縁帯リンパ腫（ＭＺＬ）および小リンパ球性リンパ腫（ＳＬＬ）からなる群から選択される。

【0060】

別の態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＦＬ、ＨＧＢＣＬまたはＤＬＢＣＬの治療を含む。さらに別の態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＦＬの治療を含む。別の態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＨＧＢＣＬの治療を含む。さらに別の態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＤＬＢＣＬの治療を含む。別のさらなる態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＨＧＢＣＬおよび／またはＤＬＢＣＬの治療を含む。さらに別の態様では、本明細書で提供される本発明による方法は、ＦＬ、ＭＣＬ、ＨＧＢＣＬまたはＤＬＢＣＬの治療を含む。別の態様では、本明細書に記載の本発明による方法は、ＭＣＬの治療を含む。

【0061】

本明細書で定義される「ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬ」または「ＤＬＢＣＬおよびＨＧＢＣＬ」または「ＤＬＢＣＬまたはＨＧＢＣＬ」は、参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００８）、およびＳｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２０１７）で定義されるＷＨＯの分類に従って、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫または高悪性度Ｂ細胞リンパ腫のいずれかとして分類されるＢ－ＮＨＬを指す。

【0062】

本明細書で定義される「ＦＬ」、すなわち濾胞性リンパ腫は、典型的には濾胞性または濾胞様の構造を形成する中心細胞および中心芽細胞として知られる特定の種類のＢ細胞に由来するＢ－ＮＨＬを指す。ＦＬは、典型的には、何年も実質的な無変化が続く、ゆっくりとした疾患の経過を辿る。ＦＬは、参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００８）、およびＳｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２０１７）で定義されているＷＨＯの分類に従って分類することができる。

【0063】

「ＭＣＬ」、すなわちマントル細胞リンパ腫は、ＣＤ５＋も含むサイクリンＤ１の発現をもたらす染色体転座ｔ（１１；１４）を伴うＢ細胞リンパ腫を含む。本明細書で定義されるＭＣＬには、参照により本明細書に組み込まれる、Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２００８）ａｎｄ Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ．４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ（２０１７）で定義されるＷＨＯの分類に従ってＭＣＬとして分類されるＢ－ＮＨＬが含まれる。

【0064】

投与される二重特異性抗体の少なくとも２４ｍｇの用量、または任意の他の特定の用量に関して、この量は、実施例の節で定義されるエプコリタマブなどの完全な長さの抗体を表す二重特異性抗体の量を指すと理解される。したがって、別の言い方をすれば、少なくとも２４ｍｇの用量の二重特異性抗体を、本発明による二重特異性抗体の用量を投与する際に投与することを指し得、この場合前記用量は、少なくとも用量２４ｍｇのエプコリタマブの用量に対応する。例えば、エプコリタマブなどの完全な長さの抗体の分子量とは分子量が実質的に異なる抗体が使用される場合、投与される抗体の量を判定することができる。本明細書で定義されるこのように必要とされる抗体の量は、抗体の分子量をエプコリタマブなどの完全な長さの抗体の重量で除し、その結果に本明細書に記載される特定の用量を乗じることによって計算することができる。二重特異性抗体がＤｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０と非常に類似した特徴を有する限り、血漿中半減期、Ｆｃ不活性、および／またはＣＤ３およびＣＤ２０の結合領域の特徴に関して、すなわちＣＤＲおよびエピトープ結合特徴、例えばＤｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０の機能的変異体に関して、そのような抗体は本発明に従って企図されて、エプコリタマブなどの完全な長さの抗体について本明細書で定義される用量に対応する用量で投与され得る。

【0065】

上記のように、ＣＤ３およびＣＤ２０に結合する二重特異性抗体は皮下投与されるべきである。したがって、二重特異性抗体は、皮下（ｓ．ｃ．）投与に適合する、すなわち、本明細書で定義されるような選択された用量で医薬的に許容され得るｓ．ｃ．投与を可能にする製剤および／または濃度を有するように、医薬組成物において製剤化される。好ましくは、皮下投与は注射によって行われる。例えば、企図され得る皮下製剤と適合するＤｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０の製剤が記載されている（例えば、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１９１５５００８号に記載されているように）。本発明による二重特異性抗体のための好ましい製剤は、５．５のｐＨを有する酢酸ナトリウム三水和物、酢酸、水酸化ナトリウム、ソルビトール、ポリソルベート８０、注射用水を使用して製剤化され得る。

【0066】

本発明による二重特異性抗体に適した医薬組成物は、二重特異性抗体、２０～４０ｍＭの酢酸塩、１４０～１６０ｍＭのソルビトール、およびポリソルベート８０などの界面活性剤を含むことができ、ｐＨは５．３～５．６である。本発明による二重特異性抗体に適した医薬製剤は、５～１００ｍｇ／ｍＬ、例えば４８または６０ｍｇ／ｍＬの二重特異性抗体、３０ｍＭの酢酸塩、１５０ｍＭのソルビトール、０．０４％ ｗ／ｖのポリソルベート８０の範囲の抗体の濃度を含み得、ｐＨは５．５である。そのような製剤は、適切な投与および皮下投与を可能にするために、例えば製剤緩衝剤で適切に希釈され得る。いずれの場合も、医薬組成物の体積は、抗体の皮下投与を可能にするように適切に選択される。例えば、投与される体積は、約０．３ｍＬ～約３ｍＬ、例えば０．３ｍＬ～３ｍＬの範囲である。投与される体積は、０．５ｍＬ、０．８ｍＬ、１ｍＬ、１．２ｍＬ、１．５ｍＬ、１．７ｍＬ、２ｍＬ、または２．５ｍＬであり得る。投与される体積は０．５ｍＬであり得る。投与される体積は０．８ｍＬであり得る。投与される体積は１．２ｍＬであり得る。投与される体積は１．５ｍＬであり得る。投与される体積は１．７ｍＬであり得る。投与される体積は２ｍＬであり得る。投与される体積は２．５ｍＬであり得る。一実施形態では、ｓ．ｃ．投与のための好ましい体積は約１ｍＬである。別の実施形態では、ｓ．ｃ．投与のための好ましい体積は１ｍＬである。

【0067】

上記のように、本発明による方法（またはＣＤ３ｘＣＤ２０抗体の使用）は、Ｂ－ＮＨＬに罹患しているヒト患者を治療するためのものである。本発明による方法は、第１の治療であってもよく、またはそのような患者に施される第１の治療の一部であってもよいことが理解される。しかしながら、患者はＢ－ＮＨＬの先行の治療を受けている可能性がある。先行の治療は、化学療法、放射線療法、免疫療法、および標的療法、またはこれらの組み合わせのうちの１つまたは複数を含み得るが、それらに限定されることはない。最も一般的には、標準治療は、ＣＤ２０モノクローナル抗体、アルキル化剤およびアントラサイクリンを単独でまたは組み合わせて用いる治療を含む。本発明による方法および使用はまた、他の適切な治療と組み合わせて使用され得ることが理解される。

【0068】

例えば、侵襲性ＮＨＬの最初の治療のための最も一般的な化学療法の組み合わせは、ＣＨＯＰと呼ばれ、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、およびプレドニゾンの４つの薬物を含む。リツキシマブなどの抗ＣＤ２０モノクローナル抗体を添加したものは、ＣＨＯＰ単独に対して改善したものであることが示され、Ｒ－ＣＨＯＰとも呼ばれている。Ｒ－ＣＨＯＰによる誘導は、ＤＬＢＣＬの第一選択治療における標準治療であり、ＦＬにおけるより利用可能な第一標準治療の１つである。ＤＬＢＣＬでは、第二選択の治療には、集中的サルベージ治療（リツキシマブ／デキサメタゾン／高用量シタラビン／シスプラチン［Ｒ－ＤＨＡＰ］、リツキシマブ／イホスファミド／カルボプラチン／エトポシド［Ｒ－ＩＣＥ］、またはリツキシマブ／ゲムシタビン／デキサメタゾン／シスプラチン［Ｒ－ＧＤＰ］）、引き続いて化学感受性であれば、自家造血幹細胞移植（ＨＤＴ－ＡＳＣＴ）を伴う高用量化学療法が含まれる。年齢または併存症のために集中的なサルベージ治療およびＨＤＴ－ＡＳＣＴに適格でないＤＬＢＣＬの患者の場合、第二選択の治療には、リツキシマブ／ゲムシタビン／オキサリプラチン（Ｒ－ＧｅｍＯｘ）およびリツキシマブ／ベンダムスチン（ＲＢ）が含まれる。ＤＬＢＣＬの後期再発に対する明確な標準治療はないが、介入には、同種造血幹細胞移植、レナリドミド、イブルチニブ、およびキメラ抗原受容体Ｔ（ＣＡＲ－Ｔ）細胞療法（Ｃｈａｖｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔ Ｒｅｓ Ｃｌｉｎ Ｈａｅｍａｔｏｌ，２０１８ Ｊｕｎ；３１（２）：１３５－１４６）が含まれる。

【0069】

したがって、さらなる実施形態では、本発明による方法において、Ｂ－ＮＨＬを有するヒト対象は、本発明による治療の前に少なくとも１つの方針の治療を受けている。別の実施形態では、Ｂ－ＮＨＬを有するヒト対象は、本発明による治療の前に、１つの方針の治療を受けている。別のさらなる実施形態では、Ｂ－ＮＨＬを有するヒト対象は、本発明による治療の前に２つの方針の治療を受けている。さらに別のさらなる実施形態では、Ｂ－ＮＨＬを有するヒト対象は、本発明による治療の前に３つの方針の治療を受けている。さらに別のさらなる実施形態では、Ｂ－ＮＨＬを有する対象が、本発明による治療の前に３つを超える方針の治療を受けたことがある。別のさらなる実施形態では、Ｂ－ＮＨＬを有する対象は、本発明による治療の前に１、２、３またはそれより多い方針の治療を受けたことがある。さらなる実施形態では、先行する方針の治療はＲ－ＣＨＯＰを含む。さらに別のさらなる実施形態では、先行する方針の治療はＣＡＲ－Ｔ細胞療法を含む。

【0070】

Ｂ－ＮＨＬを有するヒト対象は、ＣＤ２０陽性がんを有すると分類される。したがって、そのようなヒト対象が受けた可能性がある先行のがん治療には抗ＣＤ２０ｍＡｂが含まれ、また、ＣＤ２０を標的とする操作されたＴ細胞、例えばＣＡＲ－Ｔ療法も含まれ得る（Ｓｃｈｕｓｔｅｒ ＳＪ，Ｂｉｓｈｏｐ ＭＲ，Ｔａｍ ＣＳ，ｅｔ ａｌ．Ｔｉｓａｇｅｎｌｅｃｌｅｕｃｅｌ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｒｅｌａｐｓｅｄ ｏｒ ｒｅｆｒａｃｔｏｒｙ ｄｉｆｆｕｓｅ ｌａｒｇｅ Ｂ－ｃｅｌｌ ｌｙｍｐｈｏｍａ．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．２０１９；３８０（１）：４５－５６）。そのような治療または任意の他の治療の間、Ｂ－ＮＨＬは、難治性であり得るか、または前記治療に対して再発し得る。したがって、本発明の１つの態様において、前記ヒト対象は、二重特異性抗体による治療の前に、ＣＤ２０単一特異性抗体、例えばリツキシマブによる治療を受けている。さらに、ＣＤ２０単一特異性抗体による前記先行の治療中に、Ｂ－ＮＨＬがんが再発したか、またはＢ－ＮＨＬがんが前記治療に対して難治性であった。ＣＤ２０単一特異性抗体によるそのような先行の治療は、ＣＤ２０単一特異性抗体がコンビナトリアルのアプローチにおいて使用された治療であり得る。

【0071】

さらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、少なくとも４０ｍｇの用量で投与される。別のさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、３０ｍｇ～１００ｍｇまたは３５ｍｇ～９０ｍｇの範囲の用量で投与される。より好ましくは、別のさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、４０ｍｇ～７０ｍｇの範囲内の用量で投与される。別のさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、少なくとも４８ｍｇの用量で投与される。別のさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、少なくとも６０ｍｇの用量で投与される。前記二重特異性抗体を６０ｍｇの用量で投与することも企図され得る。別の実施形態において、前記二重特異性抗体は、７２ｍｇの用量で投与される。なおも別のさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、８４ｍｇの用量で投与される。

【0072】

なおさらなる実施形態において、前記二重特異性抗体は、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７または６９ｍｇの用量で投与される。好ましい実施形態では、前記二重特異性抗体を４８ｍｇの用量で投与する。

【0073】

前記用量は好ましくは毎週投与され、好ましくは前記用量は（少なくとも）４回投与される。前記毎週の投与の後、隔週投与とも呼ばれる２週間に１回の投与までの投与間隔を短縮することができる。このような隔週投与は、（少なくとも）６回行うことができる。前記隔週投与の後、間隔をさらに４週間に１回に短縮することができる。このような４週間ごとの投与は、長期間にわたって行われ得る。

【0074】

本明細書では、本明細書上で言及した前記用量は、例えば前記毎週の用量、２週間ごとの前記用量および／または４週間ごとの前記用量が同じレベルで投与される上記シナリオでは、フル用量またはフラット用量とも呼ばれ得ることが理解される。したがって、４８ｍｇの用量が選択される場合、好ましくは、例えば毎週の投与、隔週投与、および４週間ごとの各投与に、４８ｍｇの同じ用量が毎回投与される。前記用量（これは、フル用量またはフラット用量と呼ぶことができる）を投与する前に、プライミング、またはプライミングおよびその後の中間（第２のプライミング）用量を、投与することができる。これは、本発明によるＣＤ３およびＣＤ２０の両方に結合する二重特異性抗体による治療中に起こり得る副作用である、ＣＲＳのリスクおよび重症度を効果的に軽減することを可能にし得るので、有利であり得る。そのようなプライミング、またはプライミングおよび中間用量は、フラット用量またはフル用量と比較してより低い用量である。

【0075】

したがって、本発明による方法または使用では、前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体のプライミング用量を投与することができる。前記プライミング用量は、好ましくは、前記毎週の用量の第１の用量を投与する１週間前に投与される。２０～２０００μｇの範囲、好ましくは５０～１０００μｇの範囲、より好ましくは７０～３５０μｇの範囲のプライミング用量を選択することができる。選択され得るプライミング用量は、８０、１００、１２０、１４０、１６０、１８０、２００、２２０、２４０、２６０、２８０、３００、３２０、３５０、４００、４５０、５００、６００、７００、８００、９００または１０００μｇである。選択され得る好ましいプライミング用量は、１６０μｇの完全な長さの二重特異性抗体である。

【0076】

また、本発明による方法または使用では、前記プライミング用量を投与した後、前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体の中間用量を投与することができる。好ましくは、前記プライミング用量は、２週間投与され、前記中間用量は、前記毎週の用量の最初の用量を投与する１週間前に、投与される。前記中間用量は、典型的には、プライミング用量と、フラット用量またはフル用量との間の範囲から選択される。前記中間用量は、２００～８０００μｇの範囲、または好ましくは４００～４０００の範囲、より好ましくは６００～２０００μｇの範囲で選択され得る。選択され得る中間用量は、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００、１０００、１１００、１２００、１３００、１４００、１５００または１６００μｇである。選択され得る好ましい中間用量は、８００μｇの完全な長さの二重特異性抗体である。

【0077】

したがって、別の実施形態において、本発明の方法および使用において企図され得る有利な投薬レジメンは、二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み得、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、プライミング用量を１日目に投与し、中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、４８ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する。

【0078】

またさらなる別の実施形態において、本発明の方法および使用において企図され得る有利な投薬レジメンは、二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み得、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、４８ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する。

【0079】

さらに別の実施形態において、本発明の方法および使用において企図され得る有利な投薬レジメンは、二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み得、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルのためプライミング用量を１日目に、中間用量を８日目に、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、６０ｍｇの用量を投与し、また
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する。

【0080】

また別のさらなる別の実施形態において、本発明の方法および使用において企図され得る有利な投薬レジメンは、二重特異性抗体を２８日間サイクルで皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目に、第１のサイクルの間、１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与し、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与し、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目、６０ｍｇの用量を投与し、
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する。

【0081】

一実施形態では、代替的に、第１のサイクルの第１日および第８日に、８０μｇのプライミング用量および８００μｇの中間用量が選択される。一実施形態では、代替的に、第１のサイクルの第１日および第８日に、８０μｇのプライミング用量および１２００μｇの中間用量が選択される。一実施形態では、代替的に、第１のサイクルの第１日および第８日に、８０μｇのプライミング用量および１６００μｇの中間用量が選択される。別の実施形態では、第１のサイクルの第１日および第８日に、１６０μｇのプライミング用量および１２００μｇの中間用量が選択される。別の実施形態では、最初のサイクルの１日目および８日目に、１６０μｇのプライミング用量および１６００μｇの中間用量が選択される。

【0082】

上記のように、そのような使用および方法は、Ｂ－ＮＨＬの治療、より好ましくはＦＬ、ＤＬＢＣＬ、および／またはＨＧＢＣＬの治療に有利である。本発明による前記治療は、上記で概説した治療レジメンを使用して連続的に維持される。進行性疾患が発症すると、許容できない毒性が生じるか、または患者の死亡によって、治療を終了され得る。

【0083】

サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）は、ＣＤ３を係合することなどによる免疫エフェクター細胞の活性化によって機能する免疫細胞および二重特異的抗体に基づくアプローチを利用する手段および方法がヒト対象において使用される場合に起こり得る（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２０１９ Ａｐｒ；２５（４）：６２５－６３８、参照により本明細書に組み込まれる）。したがって、ＣＲＳの緩和は、本発明による方法および使用において好ましい。ＣＲＳの緩和の一部として、プライミング用量および／または中間用量の選択は、本発明に従って少なくとも２４ｍｇ用量、すなわちフル用量またはフラット用量を投与する前に非常に好ましい。ＣＲＳは、標準的な慣行に従って分類することができる（例えば、参照により本明細書に組み込まれる、Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ Ｂｌｏｏｄ Ｍａｒｒｏｗ Ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ．２０１９ Ａｐｒ；２５（４）：６２５－６３８に概説されている）。ＣＲＳは、発熱、悪心、嘔吐および悪寒などの有害作用をもたらし得るサイトカイン、例えば炎症促進性サイトカイン、例えばＩＬ－６、ＴＮＦ－αまたはＩＬ－８の過剰放出を含み得る。したがって、エプコリタマブなどの二重特異性抗体の独特の抗腫瘍活性にもかかわらず、それらの免疫学的作用様式は、望ましくない「側」の効果、すなわち望ましくない炎症反応の誘導を誘発し得る。したがって、患者は、起こり得るＣＲＳの症状を緩和するために、例えば鎮痛薬、解熱薬、および／または抗炎症薬による併用治療、予防および／または前投薬にさらに供され得る。

【0084】

一実施形態では、本発明による方法および使用における前記ヒト対象は、サイトカイン放出症候群の予防について治療される。好ましくは、そのような予防には、コルチコステロイドの投与が含まれる。一実施形態における前記予防は、二重特異性抗体と同じ日に施される。前記予防は、翌日にも、より好ましくはその後の２日目および３日目にも施すことができる。前記予防は４日目にさらに施され得ていてもよい。予防などのさらなる薬物療法に関連する場合、２日目、３日目および４日目は、１日目に投与される二重特異性抗体の投与に関連することが理解される。したがって、例えば、１５日目のサイクルで抗体が投与され、予防が施される場合、２、３および４日目に対応する前記予防は、サイクルの１６、１７および１８日目である。さらなる実施形態において、前記予防は、二重特異性抗体が投与される日、およびその後の２～３日目に施され、４日目は任意である。前記予防が二重特異性抗体と同じ日に施される場合、前記予防は、好ましくは、前記二重特異性抗体の投与の３０～１２０分前に施される。好ましくなり得るコルチコステロイドは、例えば１００ｍｇの静脈内用量でのプレドニゾロン、または経口での用量を含むその等価物である。

【0085】

さらに、一実施形態では、本発明による方法および使用における前記ヒト対象は、注射に対する反応を減少させるために前投薬で治療される。一実施形態では、前記前投薬は抗ヒスタミン薬の投与を含む。別の実施形態では、前記前投薬は、解熱薬の投与を含む。さらなる実施形態では、前記前投薬には、全身性抗ヒスタミン薬および解熱薬が含まれる。選択され得る抗ヒスタミン剤は、例えば、静脈内または経口での用量５０ｍｇでのジフェンヒドラミン、またはその等価物である。選択され得る解熱薬は、アセトアミノフェン、例えば６５０～１０００ｍｇの経口での用量またはその等価物である。より好ましくは、前記前投薬は、二重特異性抗体と同じ日に、最も好ましくは二重特異性抗体の注射の前に、例えば二重特異性抗体の前記投与の３０～１２０分前に投与される。

【0086】

前記前投薬および／または予防は、少なくとも治療の初期段階で与えられるべきであることが理解される。より好ましくは、二重特異性抗体の最初の４回の投与の間である。例えば、前記予防は、二重特異性抗体の投与の最初の２８日間のサイクルの間に、本明細書の上段で記載されているように施され得る。前記前投薬は、好ましくは、前記第１のサイクルの間にも与えられる。

【0087】

通常、初期治療中の反応のリスクは、数回の投与後、例えば最初の４回の投与後（第１のサイクル）に、低下する。したがって、ヒト対象がＣＲＳを経ていない場合、ＣＲＳの予防薬を中止することができる。しかしながら、好ましくは、ヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経る場合、ＣＲＳの予防を継続し得る。同様に、前投薬はまた継続していてもよい。

【0088】

さらなる実施形態において、本明細書に記載されるような本発明による方法および使用では、前記予防は、サイクル１での二重特異性抗体の４回目の投与後に、ヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経る２８日間の第２のサイクルの間に投与される。さらに、前記予防は、前のサイクルの二重特異性抗体の最後の投与において、ヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経る場合、その後のサイクル中に継続することができる。任意の前投薬が、第２のサイクルの間に投与されていてもよい。さらなる前投薬は、後続のサイクルの間に同様に投与されていてもよい。

【0089】

一実施形態では、ＣＲＳの前投薬および予防が施され、例えば抗ヒスタミン剤が５０ｍｇなどの静脈内もしくは経口での用量のジフェンヒドラミンまたはその等価物であり得る抗ヒスタミン剤、例えば、６５０～１０００ｍｇの経口での用量またはその等価物であるアセトアミノフェンであってもよい解熱薬、および
コルチコステロイドの投与であって、コルチコステロイドがプレドニゾロンであり得る、例えば１００ｍｇの静脈内用量またはその等価物でのコルチコステロイドの投与があり、前記前投薬および予防が、二重特異性抗体の投与の３０～１２０分前に投与される。その後の２、３日目に、また４日目であっていてもよい、コルチコステロイドの全身投与を含むさらなる予防が施され、このコルチコステロイドは、例えば１００ｍｇの静脈内用量またはその等価物でプレドニゾロンであり得る。好ましくは、その後の２、３および４日目に、コルチコステロイドの全身投与を含む前記さらなる予防が施され、このコルチコステロイドは、例えば１００ｍｇの静脈内用量またはその等価物でプレドニゾロンであり得る。そのような前投薬および予防スケジュールは、好ましくは、本発明による二重特異性抗体の最初の４回の投与の間に施される。例えば、本明細書に記載されるような二重特異性抗体投与の最初の２８日間のサイクルの間である。さらに、後続のサイクルは、例えば前のサイクルの最後の投与の最中に発生するグレード１を超えるＣＲＳの場合、同じ投与スケジュールを含むことができ、それにおいて投与スケジュールの一部としての前投薬は任意である。

【0090】

本明細書で提供される、提供される有利な用量および／または治療レジメンでは、ＣＲＳを十分に管理することができ、同時にＢ－ＮＨＬを効果的に制御および／または治療することを可能にする。実施例の節に示されるように、本明細書中に記載されるような方法および使用では、前記ヒト対象において、管理可能なサイトカイン放出症候群ＣＲＳが起こり得る。本発明による治療を受けているヒト対象は、標準的な慣例に従って定義されるグレード１のＣＲＳを有し得る。本発明による治療を受けているヒト対象は、標準的な慣例に従って定義されるグレード２の管理可能なＣＲＳを有し得る。したがって、本発明による治療を受けているヒト対象は、標準的な慣例に従って定義されるように、グレード１またはグレード２の管理可能なＣＲＳを有し得る。ＣＲＳの標準的な分類によれば、グレード１のＣＲＳには、少なくとも３８℃までの発熱、低血圧なし、低酸素症なしが含まれ、グレード２のＣＲＳには、少なくとも３８℃までの発熱に加えて、昇圧剤を必要としない低血圧、および／または低流量鼻カニューレまたはブローバイによる酸素を必要とする低酸素症が含まれる。このような管理可能なＣＲＳは、サイクル１の間に起こり得る。本発明による治療を受けているヒト対象はまた、標準的な慣例に従って定義される前記治療の間にグレード２を超えるＣＲＳを有し得る。したがって、本発明による治療を受けているヒト対象はまた、標準的な慣例に従って定義されるように、前記治療中にグレード３のＣＲＳを有し得る。このような管理可能なＣＲＳは、サイクル１および後続のサイクル中にさらに発生し得る。

【0091】

前記ヒト対象は、本発明による方法および使用において発熱を経験し得る。疲労および注射部位の反応も起こり得る。ヒト対象は、神経毒性、部分発作、ＣＲＳに関連する失書症、またはＣＲＳに関連する錯乱状態を経験し得る。さらに、前記ヒト対象は、腫瘍崩壊症候群を経験しないことが観察され得る。

【0092】

エプコリタマブの安全性プロファイルのために、エプコリタマブを投与するために患者を入院させる必要がない場合がある。さらなる実施形態では、Ｂ－ＮＨＬの治療のための本発明による方法および使用は、外来環境でのエプコリタマブの投与を含む。外来での管理は、入院を伴わない。別の実施形態では、患者は、第１のフル用量のみの投与のために入院する。前記第１のフル用量は、例えば、サイクル１の１５日目に投与され、この場合、１日目および８日目はそれぞれ、本明細書に記載されるような漸増用量を含む。エプコリタマブを外来で使用するための本明細書に記載の方法および使用における好ましい用量には、最大６０ｍｇであり得るフル用量が含まれる。より好ましくは、外来で使用する際の投与量は４８ｍｇである。別の実施形態では、Ｂ－ＮＨＬの治療のための本発明による方法および使用は、専ら外来の環境でのエプコリタマブの投与を含む。

【0093】

本明細書に記載されるように、本発明による方法および使用において、ＣＤ３およびＣＤ２０を標的とすることを目的とする本発明による二重特異性抗体は、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含む。

【0094】

ＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３領域は、当技術分野で公知の方法を使用して、可変重鎖および軽鎖領域から同定することができる。前記可変重鎖領域および可変軽鎖領域からのＣＤＲ領域は、ＩＭＧＴ（Ｌｅｆｒａｎｃ ＭＰ．ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２７，２０９－２１２，１９９９］およびＢｒｏｃｈｅｔ Ｘ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．３６，Ｗ５０３－５０８（２００８）を参照されたい）に従って注釈を付けることができる。したがって、本発明による方法および使用においても開示されるが、ＣＤ３およびＣＤ２０を標的とすることを目的とする本発明による二重特異性抗体は、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、前記第１の抗原結合領域が、それぞれ配列番号１、２、および３に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＧＴＮである配列番号４に示される配列および配列番号５に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第１の結合アーム、ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、前記第２の抗原結合領域が、それぞれ配列番号８、９、および１０に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＤＡＳである配列番号１１に示される配列および配列番号１２に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第２の結合アームを含む。

【0095】

なおさらなる実施形態では、本発明による方法および使用において、二重特異性抗体は、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号６を含み、可変軽鎖領域が配列番号７を含む、第１の結合アーム、および
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３を含み、可変軽鎖領域が配列番号１４を含む、第２の結合アームを含む。

【0096】

前記のように、本発明による二重特異性抗体は、最も好ましくは完全な長さの抗体であり、不活Ｆｃ領域を有し得る。より好ましくは、ＣＤ３に対する第１の結合アームは、ヒト化抗体、好ましくは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２０１５００１０８５号に記載されるＨ１Ｌ１などの完全な長さのＩｇＧ１、λ（ラムダ）抗体）に由来し、および／または、ＣＤ２０に対する第２の結合アームは、ヒト抗体、好ましくは、参照により本明細書に組み込まれる国際公開第２００４０３５６０７号に記載されるクローン７Ｄ８などの完全な長さのＩｇＧ１、κ（カッパ）抗体に由来する。二重特異性抗体は、２つの半分子抗体から産生され得る。２つの半分子抗体の各々は、例えば、本明細書において配列番号６および７、ならびに配列番号１３および１４に列挙されるそれぞれの第１および第２の結合アームを含む。半抗体は、ＣＨＯ細胞において産生され得、二重特異性抗体は、例えばＦａｂアーム交換によって生成され得る。一実施形態では、本発明による前記二重特異性抗体は、Ｄｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０の機能的変異体である。

【0097】

本発明によれば、様々な定常領域またはその変異が企図され得る。それにもかかわらず、最も好ましくは、本発明による二重特異性抗体は、ヒトＩｇＧ１定常領域、例えば、配列番号１５で定められるヒトＩｇＧ１定常領域、または任意の他の適切なＩｇＧ１アロタイプを含む。上記のように、二重特異性抗体の第１の結合アームは、好ましくはヒト化抗体、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、λ（ラムダ）抗体に由来し、したがってλ軽鎖定常領域を含む。より好ましくは、本明細書において定義される前記第１の結合アームは、配列番号２２において定められるλ軽鎖定常領域を含む。さらに、二重特異性抗体の前記第２の結合アームは、ヒト抗体、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、κ（カッパ）抗体に由来し、したがってκ軽鎖定常領域を含む。より好ましくは、前記第２の結合アームは、配列番号２３で定められるκ軽鎖定常領域を含む。

【0098】

定常領域は、二重特異性抗体の一部であるので、前記定常領域は、二重特異性抗体の効率的な形成／産生を可能にする、および／または不活Ｆｃ領域を設けるための修飾を含み得ることが理解される。そのような修飾は当技術分野で公知である。

【0099】

二重特異性抗体の種々のフォーマットおよび使用は当技術分野で公知であり（Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ；Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ，２０１５ Ｊｕｌ；２０（７）：８３８－４７および；ＭＡｂｓ，２０１２ Ｍａｒ－Ａｐｒ；４（２）：１８２－９７によるレビュー）、必ずしも特定の二重特異性フォーマットまたはその産生方法に限定されない。例えば、二重特異性抗体としては、限定されないが、（ｉ）ヘテロ二量体化を強制する相補的ＣＨ３ドメインを有する二重特異性抗体；）、いわゆるノブ孔内分子（Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ、国際公開第９８５０４３１号）、ＣｒｏｓｓＭＡｂ（Ｒｏｃｈｅ、国際公開第２０１１１１７３２９号）、または静電的に一致した分子（Ａｍｇｅｎ、欧州特許第１８７０４５９号明細書および国際公開第２００９０８９００４号；Ｃｈｕｇａｉ、米国特許第２０１０００１５５１３３号明細書；Ｏｎｃｏｍｅｄ、国際公開第２０１０１２９３０４号）が挙げられ得る。

【0100】

好ましくは、本発明の二重特異性抗体は、第１のＣＨ３領域を含む第１のＦｃ配列を有する第１の重鎖と、第２のＣＨ３領域を含む第２のＦｃ配列を有する第２の重鎖とを含むＦｃ領域を含み、第１および第２のＣＨ３領域の配列は異なり、前記第１および第２のＣＨ３領域間のヘテロ二量体相互作用が前記第１および第２のＣＨ３領域のホモ二量体相互作用の各々よりも強くなるようなものである。これらの相互作用およびそれらがどのようにして達成され得るかに関するさらなる詳細は、例えば、国際公開第２０１１１３１７４６号および国際公開第２０１３０６０８６７号（Ｇｅｎｍａｂ）に提示されており、これらは参照により本明細書に組み込まれる。好ましい実施形態において、本発明による方法および使用における二重特異性抗体は、前記第１の重鎖に、（ｉ）配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＦ４０５に対応する位置のアミノ酸Ｌを含み、前記第２の重鎖に、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＫ４０９に対応する位置のアミノ酸ＲがＲであるか、またはその逆であるアミノ酸Ｒを含む。

【0101】

本発明による抗体は、抗体のＦｃ領域を不活性化または非活性化にするためのＦｃ領域における修飾を含み得る。したがって、本明細書に開示される二重特異性抗体、一方または両方の重鎖は、そのような修飾を有さない二重特異性抗体と比較して、抗体がより少ない程度でＦｃ媒介エフェクター機能を誘導するように、修飾され得る。Ｆｃ媒介エフェクター機能は、Ｔ細胞でのＦｃ媒介ＣＤ６９発現（すなわち、ＣＤ３抗体媒介Ｆｃγ受容体依存性ＣＤ３架橋の結果としてのＣＤ６９発現）を判定することによって、Ｆｃγ受容体に結合することによって、Ｃ１ｑに結合することによって、またはＦｃγＲのＦｃ媒介性架橋の誘導によって、測定することができる。特に、重鎖定常配列は、Ｆｃ媒介ＣＤ６９発現が、野生型（非改変）抗体と比較した場合、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９９％または１００％低下するように改変されていてもよく、前記Ｆｃ媒介ＣＤ６９発現は、例えば国際公開第２０１５００１０８５号の実施例３に記載されているようなＰＢＭＣベースの機能アッセイで判定される。重鎖定常配列および軽鎖定常配列の改変はまた、前記抗体へのＣ１ｑの結合の減少をもたらし得る。未改変の抗体と比較して、減少は少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９７％、または１００％であり得、Ｃ１ｑ結合はＥＬＩＳＡによって判定され得る。さらに、前記抗体が、非改変の抗体と比較して、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９９％または１００％、低下したＦｃ媒介性Ｔ細胞増殖を媒介するように改変され得るＦｃ領域であり得、前記Ｔ細胞の増殖がＰＢＭＣベースの機能アッセイで測定される。例えばＩｇＧ１アイソタイプ抗体において修飾され得るアミノ酸位置の例としては、位置Ｌ２３４およびＬ２３５が挙げられる。したがって、本発明による抗体は第１および第２の重鎖を含み得、第１および第２の重鎖の両方において、Ｅｕの番号付けによるヒトＩｇＧ１重鎖の位置Ｌ２３４およびＬ２３５に対応する位置のアミノ酸残基は、それぞれＦおよびＥである。さらに、Ｄ２６５Ａアミノ酸置換は、すべてのＦｃγ受容体への結合を減少させ、ＡＤＣＣを防止することができる（Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，２００１，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．（２７６）：６５９１－６０４）。したがって、本発明による抗体は、第１および第２の重鎖を含み得、第１および第２の重鎖の両方において、Ｅｕの番号付けによるヒトＩｇＧ１重鎖の位置Ｄ２６５に対応する位置のアミノ酸残基はＡである。

【0102】

最も好ましくは、本発明による方法および使用において、前記第１および第２の重鎖、ヒトＩｇＧ１重鎖のＬ２３４、Ｌ２３５およびＤ２６５位に対応する位置のアミノ酸が、それぞれＦ、ＥおよびＡである、二重特異性抗体が提供される。これらのアミノ酸をこれらの位置に有する抗体は、不活性なＦｃ領域または非活性なＦｃ領域を有する抗体の例である。

【0103】

本願では、３つのアミノ酸置換Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５ＥおよびＤ２６５Ａの組み合わせを有し、さらに上記の本明細書に開示されるＫ４０９ＲまたはＦ４０５Ｌ変異を有する抗体は、それぞれ接尾辞「ＦＥＡＲ」または「ＦＥＡＬ」で命名され得る。

【0104】

前記のように、野生型ＩｇＧ１重鎖定常領域のアミノ酸配列は、本明細書では配列番号１５として同定される。上に開示される実施形態と一致して、本発明の抗体は、Ｆ４０５Ｌ置換を有するＩｇＧ１重鎖定常領域を含み得、配列番号１７に示されるアミノ酸配列および／またはＫ４０９Ｒ置換を有するＩｇＧ１重鎖定常領域を有し得、配列番号１８に示されるアミノ酸配列を有し得、Ｆｃ領域を不活性化または非活性化にするさらなる置換を有し得る。したがって、本発明による二重特異性抗体に含まれるＩｇＧ１重鎖定常領域の最もおよび特に好ましい組み合わせは、本明細書において配列番号１９として特定されるようなＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６５ＡおよびＦ４０５Ｌ置換を有するＩｇＧ１重鎖定常領域のアミノ酸配列、ならびに本明細書において配列番号２０として特定されるようなＬ２３４Ｆ、Ｌ２３５Ｅ、Ｄ２６５ＡおよびＫ４０９Ｒ置換を有するＩｇＧ１重鎖定常領域のアミノ酸配列である。

【0105】

さらに特に好ましい一実施形態では、本明細書に記載の方法および使用における二重特異性抗体は、配列番号２４および２５において定められる重鎖および軽鎖を有する第１の結合アーム、ならびに配列番号２６および２７において定められる重鎖および軽鎖を有する第２の結合アームを含む。そのような抗体は、本明細書ではＤｕｏｂｏｄｙ ＣＤ３ｘＣＤ２０と呼ばれることがある。また、そのような抗体の変異体は、本明細書に記載の方法および使用のために企図され得る。なおさらなる実施形態において、本発明による二重特異性抗体は、エプコリタマブ（ＣＡＳ ２１３４６４１－３４－０）またはそのバイオシミラーである。

【0106】

さらなる実施形態
１．二重特異性抗体であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含み、
ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の治療における使用のためであり、前記治療が、前記二重特異性抗体を、少なくとも２４ｍｇの用量で、それを必要とするヒト対象の皮下に投与することを含む、二重特異性抗体。

【0107】

２．完全な長さの抗体である二重特異性抗体であって、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が、配列番号６のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号７のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第１の結合アーム；ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、可変重鎖領域および可変軽鎖領域を含み、前記可変重鎖領域が配列番号１３のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含み、前記可変軽鎖領域が、配列番号１４のＣＤＲ１、ＣＤＲ２およびＣＤＲ３配列を含む、第２の結合アーム
を含み、
ヒト対象におけるＢ細胞非ホジキンリンパ腫（Ｂ－ＮＨＬ）の治療における使用のためであり、前記治療が、前記二重特異性抗体を、少なくとも２４ｍｇの用量で、それを必要とするヒト対象の皮下に投与することを含む、二重特異性抗体。

【0108】

３．前記Ｂ－ＮＨＬが、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（ＨＧＢＣＬ）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＰＭＢＣＬ）、マントル細胞リンパ腫、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）、辺縁帯リンパ腫および小リンパ球性リンパ腫からなる群から選択される、実施形態１または２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0109】

４．前記Ｂ－ＮＨＬがＦＬ、ＨＧＢＣＬまたはＤＬＢＣＬである、実施形態１または２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0110】

５．前記対象が、二重特異性抗体による治療の前に、リツキシマブなどのＣＤ２０単一特異性抗体による治療を受けている、実施形態１～４のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0111】

６．ＣＤ２０単一特異性抗体による前記治療の期間中、がんが再発した、実施形態５に記載の使用するための二重特異性抗体。

【0112】

７．ＣＤ２０単一特異性抗体による前記治療の期間中、がんが前記治療に対して難治性であった、実施形態５に記載の使用するための二重特異性抗体。

【0113】

８．前記ＣＤ２０単一特異性抗体が併用治療において使用された、実施形態５～７のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0114】

９．患者が、前記Ｂ細胞ＮＨＬに対するさらなる先行の治療の方針を受けた、実施形態１～８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0115】

１０．前記二重特異性抗体が少なくとも４０ｍｇの用量で投与される、実施形態１～９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0116】

１１．４０ｍｇ～１００ｍｇの範囲内の用量で前記二重特異性抗体が投与される、実施形態１から９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0117】

１２．前記二重特異性抗体が少なくとも４８ｍｇの用量で投与される、実施形態１～９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0118】

１３．前記二重特異性抗体が少なくとも６０ｍｇの用量で投与される、実施形態１～９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0119】

１４．前記二重特異性抗体が４８ｍｇの用量で投与される、実施形態１～９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0120】

１５．前記二重特異性抗体が６０ｍｇの用量で投与される、実施形態１～９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0121】

１６．前記用量が毎週投与される、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0122】

１７．前記毎週の投与が少なくとも４回行われる、実施形態１６に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0123】

１８．前記毎週の投与の後、前記抗体を二週間に一回投与する、実施形態１６または１７に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0124】

１９．前記隔週の投与が（少なくとも）６回行われる、実施形態１８に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0125】

２０．前記二週間に一回の投与の後、前記抗体を四週間に一回投与する、実施形態１８または１９に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0126】

２１．前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体のプライミング用量を投与する、実施形態１６～２０のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0127】

２２．初回用量の前記毎週の用量を投与する１週間前に、前記プライミング用量を投与する、実施形態２１に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0128】

２３．前記プライミング用量が５０～３００μｇの範囲である、実施形態２１または２２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0129】

２４．前記プライミング用量が１６０μｇである、実施形態２１～２３のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0130】

２５．前記プライミング用量を投与した後、前記毎週の用量を投与する前に、前記二重特異性抗体の中間用量を投与する、実施形態２１～２４に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0131】

２６．初回用量の前記毎週の用量を投与する前に、前記プライミング用量を２週間投与し、前記中間用量を１週間投与する、実施形態２５に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0132】

２７．前記中間用量が６００～１２００μｇの範囲である、実施形態２５または２６のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0133】

２８．前記中間用量が８００μｇである、実施形態２５～２７のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0134】

２９．前記使用が、２８日間サイクルで二重特異性抗体を皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目において、第１のサイクルでプライミング用量を１日目に投与し、中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与する、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与する、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、４８ｍｇの用量を投与する、および
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0135】

３０．前記使用が、２８日間サイクルで二重特異性抗体を皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目において、第１のサイクルで１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、４８ｍｇの用量を１５、２２日目に投与する、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、４８ｍｇの用量を投与する、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、４８ｍｇの用量を投与する、および
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、４８ｍｇの用量を投与する、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0136】

３１．前記使用が、２８日間サイクルで二重特異性抗体を皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目において、第１のサイクルでプライミング用量を１日目に投与し、中間用量を８日目に投与し、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与する、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与する、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、６０ｍｇの用量を投与する、および
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体
３２．治療方法が、２８日間サイクルで二重特異性抗体を皮下投与することを含み、
ａ）第１のサイクルの１、８、１５および２２日目において、第１のサイクルで１６０μｇのプライミング用量を１日目に投与し、８００μｇの中間用量を８日目に投与し、６０ｍｇの用量を１５、２２日目に投与する、
ｂ）サイクル２～３の１、８、１５および２２日目に、６０ｍｇの用量を投与する、
ｃ）サイクル４～９の１、１５日目に、６０ｍｇの用量を投与する、
ｄ）さらなる後続サイクルの１日目に、６０ｍｇの用量を投与する、実施形態２５～２８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0137】

３３．前記Ｂ－ＮＨＬがＦＬ、ＤＬＢＣＬおよび／またはＨＧＢＣＬである、実施形態２９～３２のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0138】

３４．前記対象が、前記使用中にグレード１またはグレード２の管理可能なサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を有する、実施形態１～３３のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0139】

３５．前記対象が腫瘍崩壊症候群を経ていない、実施形態１～３４のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0140】

３６．前記対象がサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）の予防で治療される、実施形態１～３５のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0141】

３７．前記予防がコルチコステロイドの投与を含む、実施形態３６に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0142】

３８．前記予防が二重特異性抗体と同じ日に投与される、実施形態３６～３７のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0143】

３９．前記予防が、後の２～３日目に、および４日目であっていてもよい、または後の２～４日目に投与される、実施形態３８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0144】

４０．前記予防が二重特異性抗体と同じ日に施される場合、前記予防は、二重特異性抗体の前記投与の３０～１２０分前に施される、実施形態３８～３９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0145】

４１．前記コルチコステロイドが、プレドニゾロンであり、例えば、経口での用量を含む１００ｍｇの静脈内用量またはその等価物である、実施形態３７～４０のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0146】

４２．前記ヒト対象が、注射に対する反応を低下させるために前投薬で治療される、実施形態１～４１のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0147】

４３．前記前投薬が抗ヒスタミン薬の投与を含む、実施形態４２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0148】

４４．前記前投薬が解熱薬の投与を含む、実施形態４２～４３のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0149】

４５．前記抗ヒスタミン薬がジフェンヒドラミンであり、例えば、静脈内もしくは経口での用量で５０ｍｇまたはその等価物である、実施形態４２～４４のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0150】

４６．前記解熱薬がアセトアミノフェンであり、例えば６５０～１０００ｍｇの経口での用量またはその等価物である、実施形態４３～４５のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0151】

４７．前記前投薬が二重特異性抗体と同じ日に投与される、実施形態４２～４５のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0152】

４８．前記前投薬が、二重特異性抗体の前記投与の３０～１２０分前に投与された、実施形態４７に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0153】

４９．実施形態３５～４１で定義される前記予防が第１のサイクルの間に施される、実施形態２９～４８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0154】

５０．実施形態４２～４８で定義される前記前投薬が第１のサイクルの間に施される、実施形態２９～４９のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0155】

５１．ヒト対象がサイクル１での二重特異性抗体の４回目の投与後にグレード１を超えるＣＲＳを経る場合、前記予防が第２のサイクルの間に施される、実施形態４９および５０に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0156】

５２．前記予防が、先行のサイクルの二重特異性抗体の最後の投与においてヒト対象がグレード１を超えるＣＲＳを経る場合、その後のサイクルの間継続される、実施形態５１に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0157】

５３．前記前投薬が、第２のサイクル中に投与されていてもよい、実施形態５１または５２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0158】

５４．前記前投薬が、後のサイクル中に投与されていてもよい、実施形態５３に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0159】

５５．二重特異性抗体が、
（ｉ）ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アームであって、前記第１の抗原結合領域が、それぞれ配列番号１、２、および３に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＧＴＮである配列番号４に示される配列および配列番号５に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第１の結合アーム、ならびに
（ｉｉ）ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームであって、前記第２の抗原結合領域が、それぞれ配列番号８、９、および１０に示される配列を有する重鎖可変（ＶＨ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３、ならびに配列ＤＡＳである配列番号１１に示される配列および配列番号１２に示される配列をそれぞれ有する軽鎖可変（ＶＬ）領域ＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３を含む、第２の結合アームを含む、実施形態１～５４のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0160】

５６．二重特異性抗体が、
（ｉ）配列番号６によって定められる可変重鎖領域、および配列番号７によって定められる可変軽鎖領域を含む、ヒトＣＤ３ε（イプシロン）に結合する第１の抗原結合領域を含む第１の結合アーム、および
（ｉｉ）配列番号１３によって定められる可変重鎖領域、および配列番号１４によって定められる可変軽鎖領域を含む、ヒトＣＤ２０に結合する第２の抗原結合領域を含む第２の結合アームを含む、実施形態１～５５のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0161】

５７．二重特異性抗体の第１の結合アームがヒト化抗体、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、λ（ラムダ）抗体に由来する、実施形態１～５６のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0162】

５８．配列番号２２で定められるλ軽鎖定常領域を含む、実施形態５７に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0163】

５９．二重特異性抗体の第２の結合アームがヒト抗体に由来し、好ましくは完全な長さのＩｇＧ１、κ（カッパ）抗体に由来する、実施形態１～５８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0164】

６０．配列番号２３で定められるκ軽鎖定常領域を含む、実施形態５９に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0165】

６１．ヒトＩｇＧ１定常領域を有する完全な長さの抗体である、実施形態１～６０のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0166】

６２．二重特異性抗体が不活Ｆｃ領域を含む、実施形態１～６１のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0167】

６３．二重特異性抗体が、第１の重鎖および第２の重鎖の両方の配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＬ２３４、Ｌ２３５、およびＤ２６５位に対応する位置の第１および第２の重鎖に、それぞれアミノ酸Ｆ、Ｅ、およびＡを含む、実施形態６２に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0168】

６４．二重特異性抗体が、前記第１の重鎖において、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＦ４０５に対応する位置にアミノ酸Ｌを含み、前記第２の重鎖が、Ｒである配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＫ４０９に対応する位置にアミノ酸Ｒを含むか、またはその逆である、実施形態１～６３のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0169】

６５．二重特異性抗体が、第１の重鎖および第２の重鎖の両方の、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＬ２３４、Ｌ２３５、およびＤ２６５の位置に対応する位置の第１の重鎖および第２の重鎖に、それぞれアミノ酸Ｆ、Ｅ、およびＡを含み、前記第１の重鎖に、配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＦ４０５に対応する位置のアミノ酸Ｌを含み、前記第２の重鎖に、Ｒである配列番号１５のヒトＩｇＧ１重鎖のＫ４０９に対応する位置のアミノ酸Ｒを含む、またはその逆である、実施形態１～６４のいずれか１つに記載の方法。

【0170】

６６．配列番号１９および２０で定められる定常領域を含む、実施形態６５に記載の使用のための二重特異性抗体。

【0171】

６７．二重特異性抗体が、それぞれ配列番号２４および２５において定められる重鎖および軽鎖、ならびに配列番号２６および２７において定められる重鎖および軽鎖を含む、実施形態１～６６のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0172】

６８．二重特異性抗体が、それぞれ配列番号２４および２５において定められる重鎖および軽鎖、ならびに配列番号２６および２７において定められる重鎖および軽鎖からなる、実施形態１～６７のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0173】

６９．二重特異性抗体がエプコリタマブまたはそのバイオシミラーである、実施形態１～６８のいずれか１つに記載の使用のための二重特異性抗体。

【0174】

配列

【表2】

［実施例］
ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０
ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０は、Ｔ細胞抗原ＣＤ３およびＢ細胞抗原ＣＤ２０を認識するｂｓＡｂである。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０は、ＣＤ２０発現細胞の強力なＴ細胞媒介殺傷をトリガーする。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０は、規則的なＩｇＧ１構造を有する。

【0175】

２つの親抗体、ＩｇＧ１－ＣＤ３－ＦＥＡＬ、それぞれ配列番号２４および２５に記されている重鎖配列および軽鎖配列を有するヒト化ＩｇＧ１λ、ＣＤ３ε特異的抗体と、ＩｇＧ１－ＣＤ２０－ＦＥＡＲ、配列番号２６および２７にそれぞれ示される重鎖配列および軽鎖配列を有するヒトＩｇＧ１κＣＤ２０特異的抗体７Ｄ８に由来するものとを、別々の生物学的中間体として製造した。各親抗体は、ＤｕｏＢｏｄｙ分子の生成に必要なＣＨ３ドメインの相補的突然変異の１つを含有する（それぞれＦ４０５ＬおよびＫ４０９Ｒ）。親抗体は、Ｆｃ領域に３つのさらなる変異を含んでいた（Ｌ２３４Ｆ、Ｌ２３５ＥおよびＤ２６５Ａ；ＦＥＡ）。標準的な浮遊細胞培養および精製技術を使用して、哺乳動物チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株において親抗体を産生した。その後、ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０を、制御されたＦａｂアーム交換（ｃＦＡＥ）プロセスによって製造した（Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．２０１３，Ｌａｂｒｉｊｎ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｇｒａｍｅｒ ｅｔ ａｌ．２０１３）。親抗体を混合し、制御された還元条件に供する。これは、再酸化下で再集合する親抗体の分離をもたらす。このようにして、ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０（約９３～９５％）の高純度調製物を得た。さらに研磨／精製した後、純度１００％に近い最終生成物を得た。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０の濃度を、理論的吸光係数ε＝１．５９７ｍＬ・ｍｇ^－１ｃｍ^－１を使用して、２８０ｎｍでの吸光度によって測定した。最終生成物を４℃で保存した。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０のグリコシル化プロファイルは、それが主に様々な程度の末端ガラクトースを有するコア－フコシル化Ｎ結合バイアンテナ型グリカンを含有することを示した。産生された生成物について、国際的な商標名、すなわちエプコリタマブが得られた。

【0176】

ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０（５ｍｇ／ｍＬまたは６０ｍｇ／ｍＬ）を、皮下（ＳＣ）注射用溶液のための濃縮物として供給される無色からわずかに黄色の滅菌透明溶液として調製した。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０は、緩衝剤および等張化剤を含有する。製剤化された製品中のすべての賦形剤（酢酸ナトリウム三水和物、酢酸、水酸化ナトリウム、ソルビトール、ポリソルベート８０、注射用水）およびその量は、皮下注射製品について薬学的に許容された。適切な用量を皮下注射のために約１ｍＬの体積に再構成した。

【0177】

臨床試験：用量漸増
ＧＣＴ３０１３－０１（ＮＣＴ０３６２５０３７）は、文書化されたＣＤ２０＋成熟Ｂ細胞新生物ならびに再発性および／または難治性Ｂ細胞ＮＨＬを有する１８歳以上の患者、ヒト対象における非盲検２部（用量漸増および増大）試験である。

【0178】

Ｔ細胞、すなわちＧＥＮ３０１３の機能に対するエフェクター細胞の数が患者の体重および／または体表面積と相関すると予想されなかったので、用量の投与を単純化するために固定用量の投与アプローチを選択した。ＥＭＡ Ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｏｎ ｔｈｅ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ Ａｎｔｉ－ｃａｎｃｅｒ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｎ Ｍａｎ（ＥＭＡ、２０１２；ＥＭＡ、２０１７）は、体格ベースの投薬に対する科学的支持が弱いことを認めており、ｉ．ａ．ＰＫデータを使用して投与戦略を定めるモデリングおよびシミュレーションのアプローチを推奨している。したがって、本明細書では、用量漸増パートの目的は、最大耐量（ＭＴＤ）を確立すること、および／またはエプコリタマブの投与戦略に到達することであった。

【0179】

用量漸増パートは、加速滴定および標準滴定を含む。初期の用量レベルは、単一対象コホート（加速滴定）であり、追加の薬物動態（ＰＫ）／薬力学およびバイオマーカーのデータを得る目的で、最大２人の追加対象でコホートを拡大する選択肢があった。標準的な滴定パートは、用量制限毒性（ＤＬＴ）評価のための標準的な３つの対象コホートを含み、ＤＬＴ評価期間（すなわち、最初のサイクル、２８日間）中にいずれもグレード≧２の毒性を経なかった場合、最低２人の評価可能な対象が登録される。用量漸増は、利用可能なすべてのデータに基づいており、加速滴定パートでは半分のｌｏｇ１０（３．２倍）を超えない増分であり、標準滴定パートでは１００％（２倍）を超えない増分である。

【0180】

用量漸増パートでは、６１人の対象が現在治療されている（表２）。初期のコホート１～５では、対象を、より低いプライミング用量が先行する、エプコリタマブのフル（フラット）用量に曝露した。初回抗原刺激用量に加えて、中間用量をコホート６（１．５ｍｇ）と共に導入して、プライミング用量と連続的に漸増するフル用量との間のギャップの拡大を最小限に抑え、サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）のリスクおよび発生率を低下させるようにした。ＤＬＴは発生しておらず、０．００４（コホート１のプライミング用量）～４８ｍｇ（コホート１１および１１Ａのフル用量）の用量が、登録を継続するのに安全であると概観されている。ＭＴＤには到達していない。

【0181】

対象のコホートに投与される計画されたサイクル１の用量を表２に挙げる。例えば、コホート８では、最初の２８日間のサイクルの１日目に０．０４ｍｇのプライミング用量、８日目に０．５ｍｇの中間用量、続いて１５および２２日目に６ｍｇのフル（フラット）用量を投与した。投与される場合、サイクル２に含まれる後続の２８日間サイクルは、２８日間サイクルの１、８、１５および２２日目のフラット用量の投与、サイクル３～６から、２８日間サイクルの１および１５日目のフラット用量の投与、ならびにサイクル７＋から、２８日間サイクルの１日目のフラット用量の投与を含んでいた。

【表3】

【0182】

急性的な注射反応を防ぐための前投薬は、ジフェンヒドラミン５０ｍｇのＩＶまたは経口（ＰＯ）（または同等物）、およびサイクル１の間のエプコリタマブ投与の３０～１２０分前に投与されたパラセタモール（アセトアミノフェン）６５０から１０００ｍｇのＰＯ（または同等物）からなった。ＣＲＳ緩和薬予防は、エプコリタマブの投与の３０～１２０分前に投与されたプレドニゾロン１００ｍｇのＩＶ（またはコルチコステロイドの同等の経口またはＩＶの用量）、引き続いてサイクル１のエプコリタマブの最初の４用量について、エプコリタマブの投与後２日目および３日目（すなわち、合計３日間連続したコルチコステロイド）に追加のプレドニゾロン１００ｍｇのＩＶ（または経口での用量を含む同等物）からなった。グレード１より高いＣＲＳが、４回目のエプコリタマブの投与後に発生した場合、任意選択の前投薬による予防の施行は、サイクル２（１、２、３日目）以降も継続する。

【0183】

錯乱から致死性脳浮腫に及ぶ神経学的な症状が、ＣＤ３を標的とする他の化合物または薬物で報告されている。したがって、諸研究で、神経学的な症状の綿密なモニタリングを、キメラ抗原受容体Ｔ細胞（ＣＡＲ－Ｔ）療法、ＣＡＲ－Ｔ細胞関連毒性１０点神経学的評価（ＣＡＲＴＯＸ－１０）および米国移植細胞療法学会（ＡＳＣＴＣ）免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群（ＩＣＡＮＳ）評価のために最初に開発された、関連する評価用ツールを利用して、各用量、治療の終了時、および臨床的に徴候のあったときに行った。サイトカイン放出関連ＩＣＡＮＳのリスクおよび重症度を低下させるために投与された薬物スキームは、ＣＲＳ予防スキーム、すなわち、エプコリタマブの投与の日にプレドニゾロン１００ｍｇのＩＶ（または経口での用量を含む等価物）、ジフェンヒドラミン５０ｍｇのＩＶまたは経口（ＰＯ）（または等価物）、およびパラセタモール（アセトアミノフェン）６５０から１０００ｍｇのＰＯ（または等価物）、引き続いてエプコリタマブの投与後２日目および３日目に追加のプレドニゾロン１００ｍｇのＩＶ（または経口での用量を含む等価物）によって網羅された（すなわち、合計３日間連続したプレドニゾロン）。

【0184】

人口統計
登録された様々なＢ細胞ＮＨＬサブタイプのうち、患者をＷＨＯ ２００８またはＷＨＯ ２０１６のガイドラインに従って分類した（Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（ｅｄ ４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ；２００８；Ｓｗｅｒｄｌｏｗ ＳＨ，Ｃａｍｐｏ Ｅ，Ｈａｒｒｉｓ ＮＬ，ｅｔ ａｌ．ＷＨＯ Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｔｕｍｏｕｒｓ ｏｆ Ｈａｅｍａｔｏｐｏｉｅｔｉｃ ａｎｄ Ｌｙｍｐｈｏｉｄ Ｔｉｓｓｕｅｓ（Ｒｅｖｉｓｅｄ ｅｄ ４ｔｈ）．Ｌｙｏｎ，Ｆｒａｎｃｅ：ＩＡＲＣ Ｐｒｅｓｓ；２０１７）。ＷＨＯ ２０１６ガイドラインとＷＨＯ ２００８ガイドラインとの間でＤＬＢＣＬ分類とＨＧＢＣＬ分類との間に重複があるため、ＤＬＢＣＬまたはＨＧＢＣＬと診断された患者は、ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬとして分類される１つの群として定められる。

【0185】

様々なＢ細胞ＮＨＬサブタイプで治療された６１人の患者のうち、４５人（７３．８％）がＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬとして分類される疾患を有し、１１人（１８．０％）の対象がＦＬとして分類された。含まれる他のＢ細胞ＮＨＬは、ＭＣＬ（３名の患者）、ＭＺＬ（１名の患者）およびＳＬＬ（１名の患者）であった。

【0186】

５８人の患者からのベースライン疾患特性データが臨床データベースで利用可能であり、患者の大部分はスクリーニング時にＡｎｎ ＡｒｂｏｒのＩＩＩ期（２５．９％）またはＩＶ期（５１．７％）であり、大半がリンパ外の疾患の存在を有していた（５８．６％）。リンパ腫の診断からの時間の中央値は２６．７ヶ月（６～３３０の範囲）であり、最後の再発または進行からの時間の中央値は１．６ヶ月（０～８８の範囲）であった。ほとんどの患者は、最後の治療方針（６７．２％）および／または最新の抗ＣＤ２０療法（６３．８％）に対して難治性であり、６．９％が先行のＣＡＲ Ｔ療法を受けていた。先行の治療方針の数の中央値は３（１から１８の範囲）であり、最も一般的にはリツキシマブ（１００％）、アルキル化剤（９８．３％）およびアントラサイクリン（８９．７％）であった。２３人の対象（３９．７％）が３を超える先行の治療の方針を有していた。

【0187】

臨床的有効性
治療に対する応答を、ＦＤＧ－ＰＥＴに対する代謝活性を組み込んでいる、Ｌｕｇａｎｏ基準（Ｃｈｅｓｏｎ，ｅｔ ａｌ．（２０１４）。Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ３２，３０５９－３０６８）、ＣＴ／ＭＲＩによる限られた数の標的病変のサイズの評価、およびいずれかの新しい病変の存在により、指定された時点での放射線画像と、必要に応じて組織生検によって、評価された。スクリーニング時にＦＤＧ親和性腫瘍を有する患者は、例えば、Ｄｅａｕｖｉｌｌｅ ５点尺度（ＤＳ）を使用してＦＤＧ－ＰＥＴ－ＣＴを用いて行われたその後の疾患評価を受けた（Ｂａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ｅｔ ａｌ．（２０１４）Ｊ Ｃｌｉｎ Ｏｎｃｏｌ ３２，３０４８－３０５８）。非親和性または可変ＦＤＧ親和性腫瘍を有する患者について、頸部／胸部／腹部／骨盤／さらなる既知の病変のＩＶ造影剤を用いたＣＴスキャン、または場合によってはＭＲＩを実施して奏功を評価した。奏効基準には、最大６つの測定可能な優性病変について垂直直径の積の和（ＳＰＤ）を計算すること、およびその後の各スキャンでのこのＳＰＤの変化を比較すること、ならびに任意の新しい病変の外観を考慮することが含まれた。ＦＤＧ－ＰＥＴを実施した場合、最高の取り込みを示す標的病変に従って、全体的なＤＳを適用した。場合によっては、応答を明確にするまたは確認するために組織生検が必要であった。

【0188】

表３は、奏功の評価が可能な集団（ｎ＝５３）に対する最良総合効果（ＢＯＲ）を示し、これは、少なくとも１回の試験薬の投与を受けたことがある、および少なくとも１回のベースライン後の応答評価を受けたか、または２０２０年５月５日現在で死亡した、すべての組織型およびすべての投与量にわたる対象を含む。試験中に冠動脈バイパス移植（ＣＡＢＧ）の手術を受けた１人の対象、およびＣＯＶＩＤ－１９を有し、その後死亡した１人の対象を、除外した。全奏効率（ＯＲＲ）は３４．０％であり、疾患制御率（ＤＣＲ）は５２．８％であった。

【表4】

【0189】

少なくとも６．０ｍｇのフル用量を受けたＲ／Ｒ ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬの奏功評価可能な対象の中で、８／１９（４２．１％）が応答し、４名（２１．１％）がＣＲを達成し、４名（２１．１％）がＰＲを達成し、４名（２１．１％）のさらなる対象がＳＤを達成した。データカットオフ時に少なくとも０．７６ｍｇのフル用量を受けたＦＬの応答評価可能な対象の中で、７／８（８７．５％）がＰＲを達成し、１／８（１２．５％）がＳＤを有していた。

【0190】

ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬ（フル用量≧６ｍｇ）およびＦＬ（フル用量≧０．７６ｍｇ）の対象についての研究者による標的病変（すなわち、すべての標的病変のＳＰＤの最良の変化率）およびＢＯＲの最大の減少を挙げる表を以下に挙げる。

【表5】

【0191】

ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬおよびＦＬとして分類されない患者に関して、０．７６ｍｇのフル用量で治療されたＭＺＬ患者は、第８週の画像化スキャンでＳＤを示した。ＭＣＬについては、１名の患者がＣＲを達成し、別の患者がＳＤを達成した。

【0192】

要約すると、皮下投与されたエプコリタマブは、一部の患者における非常に低い用量でのいくつかの応答を含む、用量漸増中のＢ－ＮＨＬ、特にＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬおよびＦＬにおいて、抗腫瘍活性を示した。ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬ群における奏功（ＣＲ、ＰＲ）の大部分は、少なくとも６ｍｇのフル用量で見られ、ＦＬ群におけるすべての奏功は、少なくとも０．７６ｍｇのフル用量で見られた。

【0193】

臨床的安全性
すべての対象のすべての治療下で発現した有害事象の概要を表５Ａおよび５Ｂに列挙する。

【表6】

【表7】

【0194】

安全性分析で評価した５８人の対象のうち、５８人（１００％）の対象が少なくとも１つの治療下で発現した有害事象（ＴＥＡＥ）を経て、対象の６９．０％がグレード３またはグレード４のＴＥＡＥを有していた（表５Ａおよび５Ｂ）。４つの最も一般的なＴＥＡＥは、発熱（６９．０％）、ＣＲＳ（５６．９％）、疲労（４１．４％）、および注射部位反応（４１．４％）であった。１１名（１９．０％）の対象が、死に至るＴＥＡＥを有し、９名（１５．５％）の対象が悪性新生物進行（リンパ腫の進行）を有し、１名（１．７％）が「安楽死」によるものであった（進行性疾患との関連においても同様）。１名（１．７％）の患者がコロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）により死亡した。これらの事象のいずれもエプコリタマブに関連すると考えられなかった。

【0195】

重篤な有害事象（ＳＡＥ）が３９名（６７．２％）の対象で報告された。最も頻繁に報告されたＳＡＥは、発熱（２５．９％）、悪性新生物進行（１５．５％）および肺感染（６．９％）であった。

【0196】

永続的な治療中止をもたらすＴＥＡＥの発生は７人の対象（１２．１％）に限定され、これらのすべてが疾患の進行を伴った。５名（８．６％）の対象が悪性新生物進行の事象を報告し、１名（１．７％）の対象が部分発作を経験し（リンパ腫を伴う可能なＣＮＳ関与の状況で）、１名（１．７％）の対象が基礎疾患のために呼吸困難を経た。

【0197】

特に注目すべき有害事象（ＡＥＳＩ）が対象の３５名（６０．３％）で発生した；これらのうち、３３名（５６．９％）の対象がグレード１またはグレード２のＣＲＳを経た；ＣＲＳのために治療を中止した患者はいなかった。４名（６．９％）の対象が神経毒性を経た（１名［１．７％］の対象［０．７６ｍｇ］がグレード１の部分発作を経た；１名［１．７％］の対象［１２ｍｇ］は、ＣＲＳに関連するグレード１の失書症を有していた；１名［１．７％］の対象［１２ｍｇ］は、ＣＲＳに関連するグレード３の錯乱状態を有していた；１名［１．７％］の対象［１２ｍｇ］は、インフルエンザおよび軟膜疾患の状況においてグレード３の錯乱を有していた）。

【0198】

要約すると、６０ｍｇ以下の用量を投与すると、治療は十分に忍容された。用量制限毒性は観察されず、したがって最大耐量に達しなかった。重度（グレード３以上）のＣＲＳ事象はなく、治療関連死もなかった。

【0199】

臨床応答および作用機序の評価
薬力学（ＰＤ）バイオマーカーも試験して、エプコリタマブおよび作用機序（ＭＯＡ）に対する臨床応答を評価した。末梢血を使用してバイオマーカー分析を行い、フローサイトメトリーおよびイムノアッセイをそれぞれ使用して、循環性の免疫細胞およびサイトカインに対するエプコリタマブの効果を評価した。エプコリタマブは、循環性のＢ細胞の急速かつ持続的な枯渇を誘導した（先行の抗ＣＤ２０療法後のベースラインに存在する場合）。末梢ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞の一過性の減少が最初の投与の６時間以内に観察され、その後の投与はＣＤ８＋およびＣＤ４＋Ｔ細胞の両方のベースラインからの増大を誘導した。さらに、活性化マーカーＣＤ６９およびＣＤ２７９は、ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ細胞にて上方制御された。臨床応答に関連するバイオマーカーの探索的分析は、エプコリタマブに対する部分応答または完全応答を有した患者において、活性化Ｔ細胞および全Ｔ細胞（ＣＤ８＋およびＣＤ４＋の両方）のより大きな増大ならびにより高いＩＦＮγレベルの傾向を示した。

【0200】

用量漸増中のエプコリタマブの段階的投与およびＳＣ投与を、ＣＲＳを軽減するために実施した。ＣＲＳ関連サイトカイン、ＩＬ－６およびＴＮＦの中程度の上昇が観察された。Ｔ細胞およびサイトカインにおけるこれらのＰＤバイオマーカーの変化は、異なるＢ－ＮＨＬの分類にわたって一貫して観察された。さらなるバイオマーカー分析が進行中であり、更新されたデータが提示される。

【0201】

エプコリタマブの作用機序は、Ｔ細胞表面抗原ＣＤ３およびＢ細胞表面抗原ＣＤ２０を標的化し、ＣＤ２０陽性細胞のＴ細胞媒介性殺傷をトリガーすることを含む。ＤｕｏＢｏｄｙ－ＣＤ３ｘＣＤ２０は、悪性Ｂ細胞に対する強力なＴ細胞媒介性細胞傷害性をもたらすＴ細胞の活性化および増大を誘導することが示され、観察されたデータは、Ｂ－ＮＨＬの治療のためのエプコリタマブの臨床活性を確認する作用機序と一致している。

【0202】

モデリング
コホート群あたりの本発明者らの臨床試験で評価された患者の数が少なかったため、本発明者らは、ＤＬＢＣＬおよびＦＬの治療においてエプコリタマブの最適な皮下用量に到達するために、モデリングアプローチで患者データを分析することに頼った。

【0203】

血漿エプコリタマブ濃度対時間薬物動態（ＰＫ）のデータは、０．０１２８ｍｇ～４８ｍｇのフル用量で治療された患者から入手可能であった。エプコリタマブの皮下投与のために、利用可能なＰＫデータおよびＭｏｎｏｌｉｘ集団ＰＫモデリングソフトウェア（ＭｏｎｏｌｉｘＳｕｉｔｅ）を使用して、集団ＰＫモデルを発展させた。一次吸収、線形およびミカエリス・メンテン除去を伴った１区画モデルが、ＰＫデータを最もよく説明するモデルであると決定された。

【0204】

集団ＰＫモデルに基づいて、エプコリタマブは、Ｔｍａｘが２．９６（４８．７％）日（幾何平均およびＣＶ）の遅い吸収を示す。モデルは、エプコリタマブの最終半減期が９．５８（１１２％）日であると予測する（幾何平均およびＣＶ）。注目すべきことに、ｓ．ｃ．投与されたエプコリタマブは、吸収速度が排出速度よりも遅いフリップフロップ速度論を示す。したがって、最終半減期は吸収半減期の代表であり、用量に依存しない。４８ｍｇのフル用量では、定常状態でのＣｍａｘは３．３０Ｅ６（７５．０％）ｐｇ／ｍＬ（幾何平均およびＣＶ）である。集団ＰＫ分析は、エプコリタマブが標的媒介性薬物動態（ＴＭＤＤ）を呈することを示した。集団ＰＫモデルを使用したシミュレーションは、１２ｍｇ超の用量レベルで標的媒介性薬物配置の飽和（９０％超）が起こることを示し、血漿中のＣＤ３およびＣＤ２０の関与および飽和を示した（図１参照）。

【0205】

しかし、集団ＰＫモデルによって予測されるように、血漿中の標的の関与および飽和は、有効性評価に最も関連するものではない。作用部位（腫瘍付近）における関与および飽和は、より関連性がある。さらに、二重特異性抗体の場合、２つの標的の飽和が順次起こり、高親和性標的化アーム（ＣＤ２０）が最初に飽和に達し、低親和性標的化アーム（ＣＤ３）が続く。三量体の形成（二重特異性抗体によるＣＤ３およびＣＤ２０の架橋）は、二重特異性抗体の濃度がＣＤ２０アームのＫＤの値に近づくにつれて増加する。二重特異性抗体の濃度がＣＤ２０アームのＫＤの値を超えて増加すると、三量体の濃度は最終的にプラトーに達する。プラトーに続いて、二重特異性抗体の濃度がＣＤ３アームのＫＤの値を超えると、三量体の濃度は低下し始める。したがって、最大の三量体形成は、ＣＤ３およびＣＤ２０が完全に飽和する前に起こる。したがって、二重特異性抗体が最大の三量体形成、ひいては最大の有効性を達成する最適な範囲が存在する。

【0206】

腫瘍における三量体形成を定量的に予測するために、半機構モデルを発展させた。最初に、前臨床のサルのデータを使用して半機構的ＰＫ／ＰＤモデルを発展させた。ｉ．ｖ．およびｓ．ｃ．投与された用量範囲（３桁の大きさ、単回投与および複数回投与に及ぶ）集約的ＰＫのデータ、経時的血中Ｔ細胞計数のデータ、経時的血中Ｂ細胞計数のデータ、ならびに経時的活性化Ｔ細胞サブセット計数のデータを含む、サルにおけるエプコリタマブの調査は豊富なデータを生成した。

【0207】

発展させたモデルは、最小の生理学的ベースのＰＫモデル（ｍＰＢＰＫ）を利用して、組織中のエプコリタマブ濃度の生理学的に関連する予測をもたらす。このモデルはまた、Ｔ細胞およびＢ細胞の血液から組織および逆方向への輸送、Ｔ／Ｂ細胞の動的な産生および死、ならびにＴ／Ｂ細胞の恒常性を維持するフィードバック機構を考慮する。このモデルは、ＣＤ３およびＣＤ２０の測定されたＫＤの値に基づいて、Ｔ細胞上のＣＤ３およびＢ細胞上のＣＤ２０へのエプコリタマブ（血液中および組織中）の結合、ならびにＣＤ３およびＣＤ２０の架橋を組み込んでいる。このモデルは、三量体の形成をＴ細胞の活性化、それに続くＴ細胞の増大に結び付ける。次いで、活性化されたＴ細胞は、Ｂ細胞の排除を誘導する。発展させたＰＫ／ＰＤモデルを、集団ベースのモデリングアプローチおよびＭｏｎｏｌｉｘソフトウェアを使用して、ＰＫ、Ｔ細胞数、活性化Ｔ細胞数およびＢ細胞数のデータに同時に適合させた。

【0208】

ＰＫ／ＰＤモデルは、観察対予測、残差対予測、および残差対時間などのモデル診断、モデルパラメータ推定精度に基づいて、ＰＫ／ＰＤデータ（血漿濃度、血中Ｔ細胞数、血中活性化Ｔ細胞数および血中Ｂ細胞数のデータ）を合理的に良好に記述することができた。

【0209】

次に、その後、サルのデータに基づいて発展させたＰＫ／ＰＤモデルの構造に基づいて、統合されたヒトＰＫ／ＰＤモデルを発展させた。ヒトＰＫ／ＰＤモデリング分析の概要を図２に示す。このモデルは、非臨床および臨床の両方のＰＫおよび有効性データを活用して、三量体の形成および有効性を予測する。Ｍｏｎｏｌｉｘソフトウェアをモデルのフィッティングに使用した（集団ＰＫモデルおよびサルＰＫ／ＰＤモデルの両方）。ｍｒｇｓｏｌｖｅパッケージと共にＲ（Ｍｉｃｒｏｓｏｆｔ）を使用してシミュレーションを行った。このモデルは、腫瘍病変におけるエプコリタマブの濃度を予測するためにｍＰＢＰＫモデルを組み込んでいる。このモデルはまた、Ｔ細胞、Ｂ細胞および腫瘍細胞数、ならびにこれらの細胞のＣＤ３およびＣＤ２０の発現を組み込んでいる。さらに、このモデルは、ＣＤ３およびＣＤ２０へのエプコリタマブの動的結合ならびに三量体の形成を組み込んでいる。最後に、ＰＫ／ＰＤモデルは、三量体形成およびＴ細胞活性化の結果として腫瘍の動態および腫瘍の死滅を組み込む。

【0210】

ヒトＰＫ／ＰＤモデルは、サルＰＫ／ＰＤモデルによって推定されたいくつかの関連パラメータを利用する。ヒトＰＫ／ＰＤモデルパラメータは、入手可能な臨床データまたは文献からのヒト特異的な値に基づいた。ＰＫサブモデルパラメータは、ｍＰＢＰＫモデルを臨床ＰＫデータに適合させることによって知らされた。三量体形成サブモデルパラメータは、患者のバイオマーカーデータ（例えば、Ｔ細胞数、Ｂ細胞数、腫瘍細胞数）、インビトロ測定値（例えば、ＣＤ３およびＣＤ２０のエプコリタマブＫＤ（それぞれ１６および５．４ｎＭ）、ならびに／または文献上の値（例えば、Ｔ細胞上のＣＤ３発現、Ｂ細胞／腫瘍細胞上のＣＤ２０発現）に基づいた。腫瘍動的サブモデルパラメータは、文献上の値（例えば腫瘍成長速度）、患者腫瘍サイズデータ（例えば、ベースラインの腫瘍サイズ）に基づくか、またはエプコリタマブ用量漸増試験から観察された奏効率（例えば、腫瘍死滅率）に対するヒトＰＫ／ＰＤモデルの予測奏効率を較正することによって推定した。較正されたモデルは、エプコリタマブ用量漸増試験（図３）で十分観察された奏効率（病変のサイズの変化に基づく）を記載しており、したがって、このモデルは、最適な投薬を予測するためのインシリコ分析のために検証される。

【0211】

したがって、臨床試験のシミュレーションは、その後、重要なモデルパラメータにおける個々の変動性を組み込み、統合されたヒトＰＫ／ＰＤモデルを使用して実施される。モデルパラメータの変動は、エプコリタマブ用量漸増試験で観察された個体間変動（例えば、Ｔ細胞、Ｂ細胞およびベースライン腫瘍サイズ、ＰＫパラメータ）または文献上の値（例えば、ＣＤ３、ＣＤ２０発現、腫瘍成長速度）に基づく。異なる腫瘍増殖速度によって区別されるＦＬおよびＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬについて別々のシミュレーションを行った。ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬの場合、１ヶ月の腫瘍倍加時間を使用し、ＦＬの場合、６ヶ月の腫瘍倍加時間を使用した。

【0212】

ヒトＰＫ／ＰＤモデル（図４および図５）は、ＦＬおよびＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬの両方において４８ｍｇ以上のエプコリタマブ用量で三量体形成プラトーを示した。さらに、ＰＫ／ＰＤモデルは、ＦＬおよびＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬの両方において≧４８ｍｇのエプコリタマブ用量で生じる有効性のプラトー（予測される増大試験奏効率）を予測する（図６および７）。モデル予測に基づき、患者から入手可能な臨床データを利用すると、選択され得るエプコリタマブの最適用量は４８ｍｇである。

【0213】

さらなる分析Ｉ
上段で提示した結果に続いて、患者は評価され続け、および／または治療を受け続け、さらに患者はエプコリタマブで治療された。

【0214】

この後の評価時点で、登録された患者の総数は６７人であり、これにはびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の患者４５人（６７％）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）の患者１２人（１８％）およびマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の患者４人（６％）が含まれた。患者は相当な前処置がなされ、ＤＬＢＣＬ患者については３（１～６）の先行の治療の方針の中央値（範囲）で、ＦＬ患者については４．５（１～１８）で、ＭＣＬ患者については４（３～５）であった。合計６名の患者が先行のＣＡＲ－Ｔ療法を受けていた。患者の半数以上（３７／６７；５５％）が直近の全身療法に対して抵抗性であり、３５／６７（５２％）が直近の抗ＣＤ２０ ｍＡｂ療法に対して抵抗性であった。

【0215】

８．３ヶ月の中央値の全体的なフォローアップでは、２５人の患者（３７％）で治療が進行中である。フォローアップの中央値は、ＤＬＢＣＬ患者については８．３ヶ月であり、ＦＬ患者については８．８ヶ月である。エプコリタマブは忍容性が高く、治療関連有害事象（ＡＥ）による中断はなかった。最も一般的な治療下で発現したＡＥ（ＴＥＡＥ）は、発熱（７０％）、局所注射部位反応（４８％）および疲労（４５％）であった。用量が増加すると、特に注目すべきＴＥＡＥは以前の報告と一致し、ＣＲＳ事象はすべてグレード１／２（５８％）であり、グレード３／４の事象はなく、限られた神経毒性が観察された（６％；グレード１：３％；グレード３：３％；全部が過渡的）。

【0216】

用量制限毒性、腫瘍崩壊症候群または発熱性好中球減少症事象はなく、治療関連ＡＥによる死亡はなかった。ＤＬＢＣＬおよびＦＬを有する評価可能な患者における抗腫瘍活性を表６に示す。エプコリタマブ≧１２ｍｇを投与されたＤＬＢＣＬ患者１８名では、全奏効率（ＯＲＲ）が６６．７％であり、６名の患者が完全奏効（ＣＲ）を達成した。エプコリタマブ≧４８ｍｇ（４８ｍｇのＲＰ２Ｄ、ｎ＝４；６０ｍｇ、ｎ＝３）を投与された７名の患者のうち、全員が、２名の患者におけるＣＲを含めて、奏功を達成した。以前にＣＡＲ－Ｔ療法で治療されたＤＬＢＣＬ患者はすべて奏効を達成した（４／４：２名はＣＲ；２名は部分奏効［ＰＲ］）。エプコリタマブ≧０．７６ｍｇを投与されたＦＬ患者８名全員のうち、ＯＲＲは１００％であり、２名の患者がＣＲを達成した。

【表8】

【0217】

さらに、ＭＣＬの合計４名の患者がエプコリタマブによる治療を受け、１名の患者（芽球様体；６ｍｇで）がプライミング用量（Ｃ１Ｄ１）を受けた１週間後に急速な疾患悪化後に死亡し、１名の患者（１２ｍｇ）が第６週の評価でＳＤをもたらしたが、１２週目にＰＤをもたらし、１名の患者（４８ｍｇで芽球様体）は第６週の評価でＰＲをもたらしたが、第１２週にＰＤをもたらし、１名の患者（多形；プライミング用量０．１６ｍｇ、中間用量０．８ｍｇ、２４ｍｇ）は第６週の評価で深い構造的および代謝性ＣＲをもたらし、これは最新の応答評価（２４週目：ＳＰＤ＝０ｃｍ^２；ＤＳ＝１）で維持された。ＭＣＬのる４人の患者のうち３人がサイクル１中に６つのＣＲＳ事象を経験し、これらはすべてグレード１（すなわち、唯一の所見としての発熱）であり、発症の４８時間以内に消散した（＃１、プライミング用量４０μｇ、中間用量、フル用量６ｍｇ、プライミング用量後２４時間以内にＣＲＳ１のエピソード。

【0218】

＃２、プライミング用量０．１６ｍｇ、中間用量０．８ｍｇ、フル用量２４ｍｇ、ＣＲＳの２回のエピソード：プライミング用量の４日後の最初のエピソード、中間用量の４日後の別のエピソード；＃３、プライミング用量０．１６ｍｇ、中間用量０．８ｍｇ、フル用量４８ｍｇ、ＣＲＳの３エピソード：プライミング用量後２４時間以内の最初のエピソード、中間用量後さらに３日、および最初のフル用量後２４時間の３番目のエピソード）。いずれのＣＲＳ事象も、計画された次回のエプコリタマブ投与の遅延、エプコリタマブ用量の変更、または試験の中止をもたらさなかった。結論として、エプコリタマブは、ＭＣＬにおいて活性および良好な耐容性を示した。

【0219】

これらの結果は、エプコリタマブが、外来患者への投与を支持して、グレード３以上のＣＲＳ事象がなく、神経毒性が限定的である、好ましい安全性プロファイルを示し続けることを示す。結果は、ＦＬ、ＭＣＬおよびＤＬＢＣＬで相当の前処置がなされた患者における完全奏効を含む、実質的な単剤有効性を示す。

【0220】

安全性および有効性パラメータを評価することに加えて、さらなるＰＫ／ＰＤ分析のために患者（０．０１２８～６０ｍｇの範囲のエプコリタマブを投与されている患者を含む）から、さらなるデータを収集した。このさらなるデータ解析は、エプコリタマブが遅い吸収を示し、Ｔｍａｘが２．８日、終末半減期が８．６７日、標的媒介性配置（ＴＭＤ）であることを示した。上に示されるように、モデルは、ＴＭＤの飽和が≧４８ｍｇの用量レベルで起こると予測し、これは、血中のＣＤ３およびＣＤ２０の関与および飽和を示す。さらに、このモデルは、ＰＫ／ＰＤモデルを使用した臨床および臨床試験のシミュレーションにおいて観察された曝露－応答関係を記述することができ、この場合も、４８ｍｇの用量がＦＬおよびＤＬＢＣＬの両方において最適な三量体形成および臨床応答を達成し得ることが実証された。曝露－有害事象分析は、評価した用量範囲において、エプコリタマブの曝露とサイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）のリスクとの間に平坦な関係を示した。

【0221】

さらなる分析ＩＩ
上段で提示した結果からの別のさらなるフォローアップにおいて、患者は評価され続け、および／またはエプコリタマブによる治療を受け続けた。

【0222】

この後の評価時点で、登録された患者の総数は６８人であり、これにはびまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）の患者４６人（６８％）、濾胞性リンパ腫（ＦＬ）の患者１２人（１８％）およびマントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）の患者４人（６％）が含まれた。患者は相当な前処置がなされ、ＤＬＢＣＬ患者については３（１～６）の先行の治療の方針の中央値（範囲）で、ＦＬ患者については４．５（１～１８）で、ＭＣＬ患者については４（３～５）であった。合計６名（９％）の患者が先行のＣＡＲ－Ｔ療法を受けていた。患者の大部分（５９／６８；８７％）が直近の全身療法に対して抵抗性であり、６０／６８（８８％）は、直近の抗ＣＤ２０ ｍＡｂ療法に対して抵抗性であった。

【0223】

１０ヶ月のフォローアップの中央値では、１７人の患者（２５％）で治療が進行中である。フォローアップの中央値は、ＤＬＢＣＬ患者では７ヶ月であり、ＦＬ患者では１２ヶ月である。６０ｍｇまで投与された用量では、用量制限毒性は観察されず、最大耐量に達しなかった。エプコリタマブは忍容性が高く、治療関連有害事象（ＡＥ）による中断はなかった。最も一般的な治療下で発現したＡＥ（ＴＥＡＥ）は、発熱（６９％）、局所注射部位反応（４７％）および疲労（４３％）であった。有害事象の大部分はグレード１～２であった。用量が増加すると、特に注目すべきＴＥＡＥは以前の報告と一致した：ＣＲＳ事象はすべてグレード１／２（５９％）であり、グレード３／４事象はなく（表７参照）、限られた神経毒性が観察され（６％；グレード１：３％；グレード３：３％；すべてが一過性であり、中央値［範囲］が１．５［＜１～３］日であり、標準治療で管理可能である）。疾患の進行に関連するグレード３の腫瘍崩壊症候群の患者が１人いた。

【0224】

ほとんどのＣＲＳ事象がサイクル１で発生し、４８ｍｇの２回目のフル用量ではＣＲＳ事象がなかったことが観察された。大部分の事象がサイクル１で発生し、解消した。解消までの時間の中央値（範囲）は２（１．０から９．０）日であった。４８ｍｇおよび６０ｍｇの推奨された用量まで用量が漸増したにもかかわらず、グレード３以上のＣＲＳ事象はなかった。ＣＲＳのリスクは、投与経路、昇圧投与、およびコルチコステロイドによる前処置によって軽減された。

【表9】

【0225】

ＤＬＢＣＬ、ＦＬおよびＭＣＬの評価可能な患者における抗腫瘍活性を表８に示す。エプコリタマブ１２～６０ｍｇを投与されたＤＬＢＣＬ患者２２名では、全奏効率（ＯＲＲ）が６８％であり、１０名の患者が完全奏効（ＣＲ）を達成した。エプコリタマブ４８～６０ｍｇ（４８ｍｇのＲＰ２Ｄ、ｎ＝８名；６０ｍｇ、ｎ＝３）を投与された１１名のＤＬＢＣＬ患者のうち、１０名の患者が、６名の患者におけるＣＲを含めて、応答を達成した。以前にＣＡＲ－Ｔ療法で治療され、応答評価可能であったＤＬＢＣＬ患者はすべて、奏功を達成した（４／４：２名はＣＲ；２名は部分奏効［ＰＲ］）。エプコリタマブ０．７６～４８ｍｇを投与されたＦＬ患者１０人全員のうち、ＯＲＲは９０％であり、５人の患者がＣＲを達成した。エプコリタマブ１２～４８ｍｇを投与されたＦＬ患者５名のうち、ＯＲＲは８０％であり、３名の患者がＣＲを達成した。

【0226】

さらなるＭＣＬ患者がエプコリタマブによる治療を受けることはなかった。手短に言えば、４名の患者のうち、１名の患者（芽球様体；６ｍｇで）は、推定される急速な疾患の悪化の後、プライミング用量（Ｃ１Ｄ１）を受けた１週間後に応答評価なしで死亡し、１名の患者（１２ｍｇ）は、６週目の評価でＳＤをもたらしたが、１２週目でＰＤをもたらし、１名の患者（４８ｍｇの芽球様体）は、６週目の評価でＰＲをもたらしたが、１２週目でＰＤをもたらし、１名の患者（多形；プライミング用量０．１６ｍｇ、中間用量０．８ｍｇ、２４ｍｇ）は、６週目の評価で深い構造的および代謝的ＣＲをもたらし、これは、直近の応答評価（２４週目：ＳＰＤ＝０ｃｍ２；ＤＳ＝１）で持続した。

【表10】

【0227】

上記のＰＫ／ＰＤモデルに関して、これを患者から得られたさらなるデータで連続的に更新した。得られた結果は、例えば図１および図３～図７に示す結果と非常に類似していた。全体的な結論は同じままであり、ＦＬおよびＤＬＢＣＬの両方について、予測された三量体の形成は４８～１９２ｍｇからプラトーに達し、予測された奏効率は４８ｍｇでプラトーに達し始めた。曝露－有害事象分析も行い、プライミング用量、中間用量およびフル用量、ならびにエプコリタマブＣｍａｘとグレード２のＣＲＳとの間の平坦な関係を用いて、グレード２のＣＲＳの全体的な低リスクがあったことを示した。モデルおよび臨床試験のシミュレーションに基づいて、４８ｍｇのフル用量が生物学的に有効な用量として特定され、有害事象のリスクと比較して適切な標的調節および臨床活性が得られた。

【0228】

結論
良好な安全性プロファイルに基づき、完全奏効を含む高い奏効率を有する印象的な有効性プロファイルと相まって、エプコリタマブは、少なくとも再発性または難治性のＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬ、ＦＬおよびＭＣＬを有する患者にとって、クラス最高の治療である可能性を有する。これらのデータは、エプコリタマブの将来の外来での投与を支持する。臨床的有効性、安全性データ、およびＰＫ／ＰＤモデリングに基づいて、推奨されるフル用量は、ＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬとＦＬの両方について、および一般にＢ－ＮＨＬについて、少なくとも４８ｍｇであり得る。現在利用可能なデータに基づいて、６０ｍｇのフル用量が企図され得る。４８ｍｇのフル用量が推奨され得る。０．１６ｍｇのプライミング用量および０．８０ｍｇの中間用量で観察された安全性データは、これらの用量後のすべてのＣＲＳ事象が軽度から中等度（≦ｇｒ．２）の重症度のみであり、標準的なＣＲＳ管理で解消されたという観察とともに、プライミング用量０．１６ｍｇおよび中間用量０．８０ｍｇが推奨され得ることを示す。したがって、サイクル１は、２８日間サイクルの１、８、１５および２２日目に、それぞれ０．１６ｍｇ、０．８０ｍｇ、４８ｍｇおよび４８ｍｇの投与を含むことが推奨され得る。また、サイクル１の後に投与されるサイクルは、サイクル２～３に、２８日間サイクルの１、８、１５および２２日目のフル用量の投与、サイクル４～９から、２８日間サイクルの１および１５日目のフル用量の投与、ならびにサイクル１０から、２８日間サイクルの１日目のフル用量の前進的な投与を含むように推奨することができる。本明細書に概説されるＣＲＳ緩和のための予防および前投薬は、サイクル１の４回の毎週の投与すべてについて３～４日間連続して推奨することができ、ＣＲＳ＞ｇｒ．１が、サイクル１における４回目の毎週のエプコリタマブ投与後に認められるときに、継続することができる。現在、臨床試験は、この投薬レジメンを、推奨される４８ｍｇのフル用量で利用しており、ｉ．ａ．ＦＬ、ＭＣＬおよびＤＬＢＣＬ／ＨＧＢＣＬにおいて拡張し、また第ＩＩＩ相試験が、ＨＤＴ－ＡＳＣＴに失敗したかまたは不適格である再発性、難治性ＤＬＢＣＬにおいて開始された。

【0229】

用量漸増および増大パートおよび第ＩＩＩ相試験 全体で、１６９名の対象が、エプコリタマブ：ＧＣＴ ３０１３－０１（ｎ＝１５３名の対象合計；用量漸増パートの対象６８名、増大パートの対象８５名）、ＧＣＴ３０１３－０４（ｎ＝１４名の対象；漸増パート７名、増大パートの対象７名）およびＧＣＴ３０１３－０５（ｎ＝２名の対象）の３つの進行中の試験にわたって治療されてきた。

【0230】

ＧＣＴ３０１３－０１は、再発性、進行性、または難治性のＢ細胞リンパ腫を有する対象におけるエプコリタマブの安全性および予備的有効性を調査する第Ｉ／ＩＩ相非盲検試験である。患者は用量漸増パートで治療されており、その結果は上記で広く記載されている。上記のような結果に対するさらなる更新が以下に提示される。用量漸増に続いて、増大パートにおいて、患者は、エプコリタマブによる治療を２８日間のサイクルで、サイクル１の中で、１日目に０．１６ｍｇ、８日目に０．８ｍｇ、１５および２２日目に４８ｍｇ、サイクル２～３に、１、８、１５、および２２日目に４８ｍｇ；サイクル４～９に、１、１５日目に４８ｍｇ；またサイクル１０＋に、１日目に４８ｍｇを皮下に受けた。１５３名の対象をこの試験に登録した。

【0231】

ＧＣＴ ３０１３－０５は、エプコリタマブの無作為化非盲検第ＩＩＩ相臨床試験であり、最初の患者が治療されている。登録される患者は、先行のＡＳＣＴに失敗したかまたはスクリーニングにおいてＡＳＣＴに不適格である、Ｒ／Ｒ ＤＬＢＣＬの対象である。有効性は、ゲムシタビンおよびオキサリプラチンと組み合わせたリツキシマブであるＲ－ＧｅｍＯｘ、およびベンダムスチンと組み合わせたリツキシマブを含む標準的なケア治療と比較される。エプコリタマブは、２８日間のサイクルで皮下投与され、サイクル１の中で、１日目に０．１６ｍｇ、８日目に０．８ｍｇ、１５および２２日目に４８ｍｇ、サイクル２～３に、１、８、１５、および２２日目に４８ｍｇ；サイクル４～９に、１、１５日目に４８ｍｇ；またサイクル１０＋に、１日目に４８ｍｇを皮下に受けた。２名の対象をこの試験に登録した。

【0232】

ＧＣＴ３０１３－０４は、再発性または難治性（Ｒ／Ｒ）Ｂ－ＮＨＬの日本人対象におけるエプコリタマブの安全性および予備的有効性を調査する第Ｉ／ＩＩ相非盲検試験コホートである。患者は、用量漸増および増大パートで治療されており、患者は、エプコリタマブによる治療を２８日間のサイクルで皮下的に受け、サイクル１の中で、１日目に０．１６ｍｇ、８日目に０．８ｍｇ、１５および２２日目に４８ｍｇ、サイクル２～３に、１、８、１５、および２２日目に４８ｍｇ；サイクル４～９に、１、１５日目に４８ｍｇ；またサイクル１０＋に、１日目に４８ｍｇを皮下に受けた。１４名の対象をこの試験に登録した。

【表11】

【0233】

データカットオフ時に３から６０ｍｇの投薬群（３ｍｇの２人の対象、６ｍｇの１人の対象、１２ｍｇの２人の対象、２４ｍｇの４人の対象、４８ｍｇの４人の対象、および６０ｍｇの２人の対象）においてエプコリタマブの投与を継続していた１５名の対象（２２．１％）を含む、６８名の対象が、ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートにおいてエプコリタマブによる治療を受けていた。治療を中断した５３名の対象のうち、４６名の対象が疾患の進行のために中断した。ＧＣＴ３０１３－０１の用量漸増パートで治療された６８人の対象のうち、年齢の中央値は６７．５歳であり、対象の大部分（４５名、６６．２％）は男性であった。リンパ腫診断から初回の投与までの時間の中央値は２９．７ヶ月であった。直近の再発、再発または進行からの時間の中央値は１．６ヶ月であった。登録された様々なＢ－ＮＨＬサブタイプのうち、４６人の対象（６７．６％）がＤＬＢＣＬを有し、１２人の対象（１７．６％）がＦＬを有していた。登録した患者は、以下の疾患のタイプを有していた：びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、すなわち、デノボ（２８）、形質転換（１７）または未知（１）；高悪性度Ｂ細胞リンパ腫（３）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（１）、濾胞性リンパ腫（１２）、マントル細胞リンパ腫（４）、小リンパ球性リンパ腫（１）および辺縁帯リンパ腫（１）。フル用量を受けた患者には、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫、すなわちデノボ（９）、原発性縦隔大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（１）、濾胞性リンパ腫（１）、およびマントル細胞リンパ腫（１）が含まれた。

【0234】

データカットオフの時点でエプコリタマブの投与を継続している６１名の対象（７１．８％）を含めて、８５名の対象がＧＣＴ３０１３－０１増大パートにおいてエプコリタマブで治療されている；５０人の対象が攻撃的Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ａＮＨＬ）コホートを継続しており、１１人の対象が低悪性度Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫（ｉＮＨＬ）コホートであった。治療を中断した２４名の対象（２８．２％）のうち、１４名の対象が疾患の進行のために中断した。ＧＣＴ３０１３－０１増大パートで治療された８５名の対象のうち、年齢の中央値は６８．０歳であり、対象の大部分（６０、７０．６％）は男性であった。リンパ腫診断から初回投与までの時間の中央値は２４．９ヶ月であった。直近の難治性または再発からの時間の中央値は１．１３ヶ月であった。登録された様々なＢ－ＮＨＬサブタイプのうち、７１名（８３．５％）の対象がＤＬＢＣＬを有し、１３名（１５．３％）の対象がＦＬを有していた。侵襲的ＮＨＬコホートでは、ほとんどの対象がＤＬＢＣＬ、すなわち、デノボ（４４）、形質転換（１７）、適用不可能（５）、未知（３）、欠落（１）を有していた。１名の患者は高悪性度Ｂ細胞リンパ腫を有していた。低悪性度Ｂ細胞非ホジキンリンパ腫コホートの対象のうち、１２人が濾胞性リンパ腫グレード１－３Ａおよび未知のグレードの１つを有していた。

【表12】

【0235】

薬力学
エプコリタマブは、循環性のＢ細胞の急速かつ持続的な枯渇を誘導した（検出可能なＢ細胞を有する患者のサブセットにおいて、以前の抗ＣＤ２０療法のためにほとんどの対象において存在しない）。Ｂ細胞をＣＤ１９に対する抗体で検出した。その後の投与は、１２ｍｇを超える用量で、ベースラインからの循環Ｔ細胞の増大ならびに循環ＩＦＮγ、ＩＬ－６およびＴＮＦαの中程度の上昇（血清免疫アッセイによる）を誘導した。末梢ＣＤ４＋およびＣＤ８＋Ｔ－細胞の一過性の減少が最初のＳＣ用量の６時間以内に観察され、これは他の二重特異性で見られるＴ細胞の周縁化と一致する。重要なことに、その後の投与は、ベースラインからのＴ細胞の増大を誘導した。ＣＲＳを軽減するために、エプコリタマブの段階的投与およびＳＣ投与を実施した。エプコリタマブのＳＣ投与は、中程度のＩＦＮγ、ＩＬ－６およびＴＮＦα上昇をもたらした。

【0236】

有効性
用量漸増パートでは、治療に対する応答の評価は、Ｌｕｇａｎｏ基準（Ｃｈｅｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，２０１４）による研究者の評価に基づいた。完全解析セットを使用して、ＤＬＢＣＬを有する１８／４６の対象（３９．１％）が奏功を達成した（部分奏効または完全奏効を有する対象を応答者と見なす）。ＦＬを有する対象では、９／１２（７５．０％）が応答を達成した（表１１）。

【表13】

【表14】

【0237】

安全性および忍容性
ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートの６８人の対象全員が、少なくとも１つの治療下で発現した有害事象（ＴＥＡＥ）を経験していた。４つの最も一般的なＴＥＡＥは、発熱（６９．１％）、ＣＲＳ（５８．８％）、注射部位反応（４７．１％）、および疲労（４４．１％）であった。合計で、対象の８０．９％が少なくとも１つのグレード３以上のＴＥＡＥを有していた。死亡に至るＴＥＡＥの対象は１３名であった（１１人の対象が悪性新生物進行を有し、１人が安楽死［進行性疾患との関連においても］を有し、１人がＣＯＶＩＤ－１９［コロナウイルス疾患２０１９］肺炎を有する）。エプコリタマブに関連すると考えられたものはなかった。重篤な有害事象（ＳＡＥ）が対象のうち４６名の対象（６７．６％）について報告された。試験薬に関連していると考えられた最も一般的なＳＡＥは発熱（１９人の対象、２７．９％）であり、これはＣＲＳの症状として報告された（セクション４．６．２．２参照）。永続的な治療中止につながるＴＥＡＥの発生率は低かった（対象の１３．２％）。特に注目すべき有害事象（ＡＥＳＩ）には、以下が含まれた：４０人の対象（５８．８％）がＣＲＳを経験し、４人の対象（５．９％）が、免疫介在性であると試験者が考えた神経症状を経験し、１人の対象（１．５％）が臨床的腫瘍崩壊症候群を経た。ＡＥＳＩは、ｅＣＲＦの別個のＡＥＳＩページで捕捉された。重篤度基準を満たすＡＥＳＩに関連する症状は、全体的な診断を主要事象として有するＳＡＥとして報告された。ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートで治療された６８人の対象のうち４６人（６７．６％）が少なくとも１つのＳＡＥを経験していた。合計２４名の対象（３５．３％）が、エプコリタマブに関連すると考えられるＳＡＥを経た。試験薬に関連していると考えられた最も一般的なＳＡＥは発熱（１９人の対象、２７．９％）であり、これはＣＲＳの症状として報告された。

【0238】

ＧＣＴ３０１３－０１増大パートの８５人の対象のうち７６人（８９．４％）が少なくとも１つのＴＥＡＥを経験していた（表１２）。最も一般的な３つのＴＥＡＥは、ＣＲＳ（４７．１％）、疲労（１８．８％）、および発熱（１８．８％）であった（表１３）。合計で、対象の４０．０％が少なくとも１つのグレード３以上のＴＥＡＥを有していた（表１４）。死に至るＴＥＡＥの７人の対象が存在していた。１名の対象が、研究者によってエプコリタマブに関連すると見なされた、死をもたらすＴＥＡＥを経た（免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群［ＩＣＡＮＳ］）。ＳＡＥは対象の５５．３％について報告された。試験薬に関連すると考えられる最も一般的なＳＡＥはＣＲＳ（２５人の対象、２９．４％）であった。永続的な治療中止につながるＴＥＡＥの発生率は低かった（対象の５．９％）。ＡＥＳＩには以下が含まれていた：４０人の対象（４７．１％）がＣＲＳを経験し、３人の対象（３．５％）がＩＣＡＮＳを経験し、１人の対象（１．２％）が臨床的腫瘍崩壊症候群を経た。

【0239】

前述のように、ＧＣＴ３０１３－０１増大パートで治療された８５人の対象のうち７人（８．２％）が死に至るＴＥＡＥを経た。１名の対象が、研究者によってエプコリタマブに関連すると見なされた、死をもたらすＴＥＡＥを経た。この対象は、ＩＶ期の非ＧＣＢ ＤＬＢＣＬ、および糖尿病、高血圧、高脂血症の病歴、また肺がんによる右上葉切除がある７２歳女性であった。スクリーニング時に、対象は、膵臓、脾臓および傍大動脈リンパ腫に関与していた。対象は、０．１６ｍｇのエプコリタマブのプライミング用量の２日後に持続性の腹痛を経て、後にグレード３の膵炎と診断され、モルヒネの複数回の反復用量で治療され、イメージングに基づいて進行性リンパ腫が判定された。中間用量０．８ｍｇのエプコリタマブの４日後、グレード２のＩＣＡＮＳが報告され、これは後にグレード４に悪化した。さらに、グレード１の脳虚血が脳イメージングで観察された。試験薬を中止した。対象の状態は悪化し、対象は中間用量０．８ｍｇのエプコリタマブの１７日後に死亡し、死亡はＩＣＡＮＳによるものと報告された。しかし、長い歴の糖尿病、高血圧、高脂血症、可能性のある微小血管障害（新たな多巣性脳梗塞、脾臓梗塞、凝固障害の検査所見、および腎機能障害によって示唆される）、ならびにモルヒネを使用したことでの活性代謝産物の蓄積（これらは浄化のため機能している腎臓に依存する）が伴う対象における高アンモニア血症によって引き起こされる代謝性脳症は、神経毒性に対する非常に可能性の高い交絡因子である。ＣＲＳの非存在下で神経学的症状を治療するためのトシリズマブの不当な投与は、ＩＬ－６の循環レベルを増加させることによって、神経毒性の可能性を高めることが知られており、この場合、神経毒性の悪化に寄与した可能性が高い。

【表15】

【表16】

【表17】

【表18】

【0240】

ＧＣＴ３０１３－０１増大パートで治療された８５人の対象のうち４７人（５５．３％）が少なくとも１回のＳＡＥを経験していた（表２３）。合計２８名の対象（３２．９％）が、エプコリタマブに関連すると考えられるＳＡＥを経た。試験薬に関連すると考えられた最も一般的なＳＡＥはＣＲＳ（２５人の対象、２９．４％）であった（表１５）。

【表19】

【0241】

ＧＣＴ３０１３－０１増大パートで治療された８５人の対象のうち合計５人（５．９％）が、試験薬の永続的な中止をもたらすＴＥＡＥを経ていた：１人の対象がそれぞれ、肺新生物、悪性新生物の進行、腹痛、肝毒性、高ビリルビン血症、進行性多巣性白質脳症、トランスアミナーゼ上昇、免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群、および呼吸不全を経た（表１６）。２人の対象が治療の永続的な中止をもたらす複数のＴＥＡＥを経た：１人の対象が肺新生物および呼吸不全を経た；１名の対象は、疾患の進行により、腹痛、肝毒性、高ビリルビン血症、およびトランスアミナーゼの増加を経た。

【表20】

【0242】

特に注目すべき有害事象
以下は、エプコリタマブＡＥＳＩの概要である。

【0243】

サイトカイン放出症候群は、ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートの４０名の対象、ＧＣＴ３０１３－０１増大パートの４０名の対象、およびＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートの６名の対象を含む８６名の対象で報告された。ＣＲＳを（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１９）に従って等級付けした。グレード３であったＧＣＴ３０１３－０１増大パートにおける２つの事象およびＧＣＴ３０１３－０４用量漸増部分における１つの事象を除いて、すべてのＣＲＳの事象はグレード１または２であった。

【0244】

神経毒性は、ＡＥＳＩとしてエプコリタマブプロトコルに列挙されている。ＧＣＴ３０１３－０１試験の用量漸増パートでは、ＣＡＲＴＯＸ－１０スケール（Ｎｅｅｌａｐｕ ｅｔ ａｌ．，２０１７）に従って神経学的評価を行った。ＩＣＡＮＳと一致する免疫介在性の疑われる神経症状を別々のＡＥＳＩとして捉えた。ＧＣＴ３０１３－０１試験およびＧＣＴ３０１３－０４試験の増大パートでは、ＩＣＡＮＳの症例は、ＩＣＡＮＳの正確な用語を使用して報告されている。ＡＥＳＩとして報告された神経学的症状は、用量漸増パートの４名の対象、および増大パートの３名の対象を含むＧＣＴ３０１３－０１の７名の対象で報告され、ＧＣＴ３０１３－０４の用量漸増パートの対象は報告されなかった。

【0245】

臨床腫瘍崩壊症候群は、ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートの１名の対象、ＧＣＴ３０１３－０１増大パートの１名の対象、およびＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートの対象なしを含む２名の対象で報告された。臨床腫瘍崩壊症候群を、Ｃａｉｒｏ－Ｂｉｓｈｏｐ（Ｃｏｉｆｆｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，２００８）に従って等級付けした。腫瘍崩壊症候群の両事象はグレード３であった。

【0246】

臨床データの概要
これは、ＧＣＴ３０１３－０１（用量漸増パートおよび用量増大パートの安全性、用量漸増パートの有効性、ならびに用量漸増パートのＰＫ）のデータ、およびＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートの安全性データをまとめたものである。ＤＬＴは生じておらず、ＭＴＤに到達しておらず、ＲＰ２Ｄは４８ｍｇのフル用量であると明言された。ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートの６８人の対象全員が少なくとも１つのＴＥＡＥを経た；対象の８０．９％が少なくとも１つのグレード３以上のＴＥＡＥを有していた。最も一般的なＴＥＡＥは、発熱、ＣＲＳ、注射部位反応および疲労であった。死亡に至るＴＥＡＥの対象は１３名であった（１１人の対象が悪性新生物進行を有し、１人が安楽死［進行性疾患との関連においても］を有し、１人がＣＯＶＩＤ－１９肺炎を有する）。ＳＡＥは対象の６７．６％について報告された。試験薬に関連していると考えられた最も一般的なＳＡＥは発熱であり、これはＣＲＳの症状として報告された。永続的な治療中止につながるＴＥＡＥは１３．２％で報告された。。ＡＥＳＩには以下が含まれていた：４０人の対象がＣＲＳを経験し、４人の対象が免疫介在性であると試験者が考えた神経症状を経験し、１人の対象が臨床的腫瘍崩壊症候群を経た。

【0247】

ＧＣＴ３０１３－０１増大パートの合計７６人の対象（８９．４％）が少なくとも１つのＴＥＡＥを経た；対象の４０．０％が少なくとも１つのグレード３以上のＴＥＡＥを有していた。最も一般的なＴＥＡＥは、ＣＲＳ、疲労および発熱であった。死に至るＴＥＡＥの対象は７人であった（疾患の進行、全身の健康状態の悪化、ＣＯＶＩＤ－１９、肝毒性、悪性新生物の進行および免疫エフェクター細胞関連神経毒性症候群をそれぞれ有する１名の対象）。ＳＡＥは対象の５５．３％について報告された。試験薬に関連すると考えられる最も一般的なＳＡＥはＣＲＳであった。永続的な治療中止をもたらすＴＥＡＥが対象の５．９％で報告された。ＡＥＳＩには以下が含まれた：４０人の対象がＣＲＳを経験し、３人の対象がＩＣＡＮＳを経験し、１人の対象が臨床腫瘍崩壊症候群を経た。

【0248】

ＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートの７人の対象全員が少なくとも１つのＴＥＡＥを経た；対象の７１．４％が少なくとも１つのグレード３以上のＴＥＡＥを有していた。最も一般的なＴＥＡＥは、ＣＲＳおよび注射部位紅斑であった。治療の中止をもたらすＴＥＡＥ、ＳＡＥ、または死をもたらすＴＥＡＥを経た対象はいなかった。２人の対象が、用量の変更をもたらすＴＥＡＥを経た。ＣＲＳのＡＥＳＩは６人の対象（８５．７％）で発生した。

【0249】

エプコリタマブの投与は、循環性のＢ細胞（先行の抗ＣＤ２０療法のためにほとんどの患者には存在しない、検出可能なＢ細胞を有する対象のサブセットにおいて）の迅速かつ持続的な枯渇を誘導し、末梢Ｔ細胞および循環性のＩＦＮγを増加させた。

【0250】

患者において、エプコリタマブに対する有意なＡＤＡ（力価≧１）は観察されなかった。

【0251】

ＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートでは、合わせたすべての用量レベルについて、ＯＲＲは４４．１％であった；ＲＰ２Ｄレベル（４８ｍｇ）について、ＯＲＲは６６．７％であった。

【0252】

クラス効果
エプコリタマブが属する化合物のクラス、すなわち二重特異性Ｔ細胞エンゲージャーについて報告された有害反応には、ＣＲＳ、神経症状、および感染が含まれる。

【0253】

Ｂ細胞の枯渇は、感染のリスク増加をもたらし得る。感染は、最良の医療行為に従って管理されるべきである。エポリタマブでの治療中および治療後に、リスクのある対象の潜伏ウイルス感染、例えばＢ型肝炎またはサイトメガロウイルスのモニタリングを行うべきである。ＧＣＴ３０１３－０１試験およびＧＣＴ３０１３－０４試験の漸増パートの合計５８人の対象が感染を経た。エプコリタマブ関連感染は、ＧＣＴ３０１３－０１増大またはＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートでは報告されなかった。

【0254】

ＣＲＳは、エプコリタマブ、ならびにＣＤ３およびキメラ抗原受容体Ｔ細胞を標的とする他の化合物または薬物で報告されている。バイタルサイン、特に体温、血圧、および酸素飽和度の綿密なモニタリング、ならびに血液学、肝臓および腎臓のパラメータの検査室での評価は、必要に応じて支持療法のタイムリーな開始を確保するために重要である。（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１９）および（Ｎｅｅｌａｐｕ ｅｔ ａｌ．，２０１７）に基づく支持療法には、それだけに限らないが、以下が含まれ得る。

【0255】

・生理食塩水の注入
・全身性糖質コルチコステロイド、抗ヒスタミン剤、解熱
・血圧支持
・換気のための支持
・ＩＬ－６Ｒ、ＩＬ－６またはＩＬ－１に対するモノクローナル抗体（例えば、トシリズマブ、シルツキシマブおよび／またはアナキンラ）
サイクル１でのエプコリタマブの投与に関連して、４日間連続した予防的なコルチコステロイドの投与を含む追加のＣＲＳリスク低減措置を実施した。ＣＲＳ事象の大部分はグレード１および２として報告されている；３名の対象のみがグレード３としてＣＲＳとして報告されている。

【0256】

合計で８６名の対象が、ＧＣＴ３０１３－０１およびＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートにおいて少なくとも１つのＣＲＳ事象を報告した。症例の大部分はグレード１またはグレード２のＣＲＳであったが、グレード３のＣＲＳが３人の患者でのみ発生し、グレード１またはグレード２のＣＲＳが非常に一般的な事象であるのに対してグレード３は一般的であると思われることを示している。このうち、４０名（５８．８％）の対象（２０人の対象－グレード１；２０人の対象－グレード２）がＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートにおり、４０名（４７．１％）の対象（２４人の対象－グレード１；１４人の対象－グレード２；２人の対象－グレード３）がＧＣＴ３０１３－０１増大パートにあり、６名（８５．７％）の対象（４人の対象－グレード１；１人の対象－グレード２；１人の対象－グレード３）がＧＣＴ３０１３－０４用量漸増パートにいた。ＣＲＳ事象を経た８６名の対象のうち、２５名がＳＡＥとして報告された。ＣＲＳのすべての症例を、エプコリタマブに関連する、回復／消散として評価した。生命を脅かすまたは致死的なＣＲＳの症例は報告されなかった。ＣＲＳは治療中止に至らなかった。

【0257】

錯乱から致死性脳浮腫に及ぶ神経学的な症状が、ＣＤ３を標的とする他の化合物または薬物で報告されている。神経学的評価は、ＩＣＡＮＳ評価（Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１９）に従って行うべきである。ＩＣＡＮＳの等級付けには、１０点の免疫エフェクター細胞関連脳症スコアの評価、ならびに４つの他の神経学的ドメイン、すなわち意識レベル、発作、運動症状、および脳症の有無にかかわらず起こり得る頭蓋内圧上昇／脳浮腫の徴候の評価が必要である（プロトコルを参照）。治療中の精神状態の綿密な監視が、必要に応じて支持療法の適時の開始を確実にするために、重要である。支持療法には、それだけに限らないが、以下が含まれ得る：
・ＩＶ水和の開始
・経口摂取を控える
・中枢神経系鬱病を引き起こす薬物を回避する
・コルチコステロイドの開始
・抗サイトカイン療法
・抗痙攣療法
合計７人の対象が、神経症状（ＡＥＳＩ）に関連する有害事象を経た。ＧＣＴ３０１３－０１増大パートの３名の対象がＩＣＡＮＳを発症し、これは１名の対象において致死的であった。７人の対象のうち４人はＧＣＴ３０１３－０１用量漸増パートからであり、グレード３の意識水準の低下、グレード３の過眠、グレード１の部分発作の３つの重篤なＡＥＳＩ、ならびにグレード１の書字障害およびグレード１の失書症の２つの非重篤なＡＥＳＩを経た。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【配列表】

2023524149000001.app

【国際調査報告】