特表 2023-525423 ＰＲＡＭＥに特異的に結合する抗原結合タンパク質

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-16

(54)【発明の名称】ＰＲＡＭＥに特異的に結合する抗原結合タンパク質

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/13 20060101AFI20230609BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20230609BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20230609BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20230609BHJP

   C07K 16/30 20060101ALI20230609BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20230609BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20230609BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20230609BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20230609BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20230609BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20230609BHJP

   C12P 21/08 20060101ALI20230609BHJP

   A61K 31/7088 20060101ALI20230609BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20230609BHJP

   A61K 35/12 20150101ALI20230609BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20230609BHJP

【ＦＩ】

C12N15/13 ZNA

C12N15/62 Z

C12N15/63 Z

C07K16/28

C07K16/30

C07K16/46

C07K19/00

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12P21/08

A61K31/7088

A61K48/00

A61K35/12

A61K39/395 E

A61K39/395 T

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022540953

(86)(22)【出願日】2020-01-15

(85)【翻訳文提出日】2022-07-13

(86)【国際出願番号】 EP2020050936

(87)【国際公開番号】W WO2021144020

(87)【国際公開日】2021-07-22

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】506258073

【氏名又は名称】イマティクス バイオテクノロジーズ ゲーエムベーハー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100122301

【弁理士】

【氏名又は名称】冨田 憲史

(74)【代理人】

【識別番号】100157956

【弁理士】

【氏名又は名称】稲井 史生

(74)【代理人】

【識別番号】100170520

【弁理士】

【氏名又は名称】笹倉 真奈美

(74)【代理人】

【識別番号】100221545

【弁理士】

【氏名又は名称】白江 雄介

(74)【代理人】

【識別番号】100088904

【弁理士】

【氏名又は名称】庄司 隆

(74)【代理人】

【識別番号】100124453

【弁理士】

【氏名又は名称】資延 由利子

(74)【代理人】

【識別番号】100135208

【弁理士】

【氏名又は名称】大杉 卓也

(74)【代理人】

【識別番号】100183656

【弁理士】

【氏名又は名称】庄司 晃

(74)【代理人】

【識別番号】100224786

【弁理士】

【氏名又は名称】大島 卓之

(74)【代理人】

【識別番号】100225015

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 彩夏

(72)【発明者】

【氏名】ブンク，セバスティアン

(72)【発明者】

【氏名】ホフマン，マーティン

(72)【発明者】

【氏名】ハット，マイケ

(72)【発明者】

【氏名】マウラー，ドミニク

(72)【発明者】

【氏名】ポスゾラ，ガブリエーレ

(72)【発明者】

【氏名】シュヴェーベル ，フランク

(72)【発明者】

【氏名】ウンフェルドルベン，フィリックス

(72)【発明者】

【氏名】ワグナー，クラウディア

(72)【発明者】

【氏名】ユスフ，サラ

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C084

4C085

4C086

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG27

4B064CA10

4B064CA19

4B064CC24

4B064CE12

4B064DA01

4B065AA91X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA25

4B065CA44

4C084AA13

4C084MA02

4C084NA14

4C084ZB261

4C084ZB262

4C085AA13

4C085BB31

4C085CC22

4C085DD61

4C085EE01

4C085EE03

4C085GG01

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA02

4C086MA05

4C086NA14

4C086ZB26

4C087AA01

4C087AA02

4C087BB63

4C087CA12

4C087MA02

4C087NA14

4C087ZB26

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA28

4H045FA74

(57)【要約】

本発明は、ＰＲＡＭＥタンパク質由来の抗原に向けられた、抗原結合タンパク質に関する。本発明は、特に、腫瘍発現抗原ＰＲＡＭＥに対して選択的かつ特異的な抗原結合タンパク質を提供し、ここで、腫瘍抗原は、配列番号８を含んでなるかまたはそれからなり、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タンパク質との複合体中にある。本発明の抗原結合タンパク質は、特に、前記ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する新規操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する。本発明の抗原結合タンパク質は、がん性疾患を発現するＰＲＡＭの診断、治療、および予防で使用するためのものである。さらに、本発明の抗原結合タンパク質をコード化する核酸、前記核酸を含んでなるベクター、抗原結合タンパク質を発現する組換え細胞、および本発明の抗原結合タンパク質を含んでなる、医薬組成物が提供される。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する抗原結合タンパク質であって、前記ＰＲＡＭＥペプチドが、配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなり、ＭＨＣタンパク質との複合体中にあり、前記抗原結合タンパク質が、
（ａ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、
ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＸ_１（配列番号１）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１は、任意のアミノ酸であり、
前記ＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＸ_２Ｘ_３ＧＤ（配列番号２）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_２およびＸ_３は、任意のアミノ酸であるが、ただしＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）を含まずまたはそれから構成されず、
前記ＣＤＲａ３は、アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＸ_４ＮＸ_５Ｘ_６ＧＧＸ_７ＬＴＦ（配列番号３）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_４～Ｘ_７は、任意のアミノ酸である）
および
（ｂ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３を含んでなる第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、
前記ＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列Ｘ_８ＧＨＲＸ_９（配列番号４）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_８およびＸ_９は、任意のアミノ酸であり、
前記ＣＤＲｂ２は、アミノ酸配列ＹＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４（配列番号５）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１０～Ｘ_１４は任意のアミノ酸であり、
前記ＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ（配列番号６）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１５は、任意のアミノ酸である）
を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項2】

前記抗原結合タンパク質が、ＭＨＣタンパク質、特にＨＬＡタンパク質との複合体中のＰＲＡＭＥの配列番号８のアミノ酸配列を含んでなるペプチドに特異的に結合する、請求項１に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項3】

前記抗原結合タンパク質が、２００ｎＭ以下のＫ_Ｄで、前記ＰＲＡＭＥペプチドとＨＬＡ－Ａ^＊０２との複合体に結合する、請求項１または２に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項4】

前記抗原結合タンパク質が、抗体またはその断片、または二重特異性抗体またはその断片、またはＴ細胞受容体またはその断片、または二重特異性Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその断片である、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項5】

前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドが、一緒に連結されている、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項6】

前記抗原結合タンパクが、一本鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）または一本鎖二重特異性抗体である、請求項５に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項7】

前記第１の可変ドメインが、ＦＲ２－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、およびＦＲ４－ａからなる群から選択される１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなる、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、ここで、
ＦＲ１－ａが、配列番号５４のアミノ酸配列、または配列番号５４と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ａが、配列番号５５のアミノ酸配列または配列番号５５と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ａが、配列番号５６のアミノ酸配列、または配列番号５６と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ４－ａが、配列番号５７のアミノ酸配列、または配列番号５７と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
前記第２の可変ドメインが、ＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂ、およびＦＲ４－ｂからなる群から選択される１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなり、ここで、
ＦＲ１－ｂが、配列番号５８のアミノ酸配列、または配列番号５８と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ｂが、配列番号５９のアミノ酸配列、または配列番号５９と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ｂが、配列番号６０のアミノ酸配列、または配列番号６０と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ｂが、配列番号６１のアミノ酸配列、または配列番号６１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ４－ｂが、配列番号６２のアミノ酸配列、または配列番号６２と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、抗原結合タンパク質。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、前記抗原結合タンパク質が、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号６３配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号１１２のアミノ酸配列または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、前記抗原結合タンパク質が、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２アミノ酸配列、および配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３８、配列番号１８１または配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）、および
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８、配列番号２４、配列番号２６、配列番号３３、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４２、配列番号４３、配列番号１７９配列番号４４、配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）、および
配列番号８３、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型のアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型の前記ＣＤＲは、好ましくは配列番号１６または配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０、配列番号３８、配列番号３９、配列番号２６または配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）、および
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型の前記ＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項10】

前記第１の可変ドメインがＴＣＲαまたはγ鎖に含まれ、および／または前記第２の可変ドメインがＴＣＲβまたはδ鎖に含まれる、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項11】

（ｉ）１つまたは複数のさらなる抗原結合部位；
（ｉｉ）任意選択的に、細胞質シグナル伝達領域を含む膜貫通領域、
（ｉｉｉ）診断薬；
（ｉｖ）治療薬；または
（ｖ）ＰＫ修飾部分
の１つまたは複数をさらに含んでなる、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項12】

２つの抗原結合部位を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなる、請求項１～４および１１～７のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、
ここで、第１のポリペプチド鎖は、式、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ［Ｉ］
によって表わされる構造を有し、
（ここで、Ｖ_３は第３の可変ドメインであり；
Ｖ_４は第４の可変ドメインであり；
Ｌ_１およびＬ_２はリンカーであり；
Ｌ_２は存在してもまたは存在しなくてもよく；
Ｃ_Ｌは軽鎖定常ドメインまたはその一部であり、存在するかまたは存在しない）；
ここで、第２のポリペプチド鎖は、式、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１［ＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
（ここで、Ｖ_５は第５の可変ドメインであり；
Ｖ_６は第６の可変ドメインであり；
Ｌ_３およびＬ_４はリンカーであり；
Ｌ_４は存在してもまたは存在しなくてもよく；
Ｃ_Ｈ１は重鎖定常ドメイン１またはその一部であり、存在するかまたは存在しない）；
ここで、
Ｖ_３またはＶ_４は、第１の可変ドメインであり、
Ｖ_５またはＶ_６は、請求項１で定義される第２の可変ドメインであるか、または
Ｖ_５またはＶ_６は請求項１で定義される第１の可変ドメインであり、Ｖ_３またはＶ_４は請求項１で定義される第２の可変ドメインであり、ここで、
Ｖ_３およびＶ_５が請求項１で定義される可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_６の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、ここで、
Ｖ_３およびＶ_６が請求項１で定義される可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_５の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインは、一緒に１つの抗原結合部位を形成する、抗原結合タンパク質。

【請求項13】

前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、からなる群より選択される抗原に結合し、前記軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）が、ＣＤ３（ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、およびＣＤ３ε鎖など）、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３２ａ、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ４１、ＣＤ４１ｂ、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４９、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ６４、ＣＤ６８、ＣＤ９４、ＣＤ９０、ＣＤ１１７、ＣＤ１２３、ＣＤ１２５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１９３、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８７、Ｎｋｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＧＩＴＲ、Ｆ_ｃεＲＩ、ＴＣＲα／βおよびＴＣＲγ／δ、ＨＬＡ－ＤＲからなる群より選択される抗原に結合し、および／またはエフェクター細胞に結合する、請求項１２記載の抗原結合タンパク質。

【請求項14】

２つの抗原結合部位を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなる、請求項１２または１３に記載の抗原結合タンパク質であって、
ここで、１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＩＩ］、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＶ］、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_３、Ｌ_１、Ｖ_４、Ｌ_２、Ｃ_Ｌ、Ｆ_ｃ１、Ｖ_５、Ｌ_３、Ｖ_６、Ｌ_４、Ｃ_１、Ｆ_ｃ２は、請求項１～１３のいずれか一項で定義されるとおりであり、ここで、Ｌ_５およびＬ_６はリンカーであり、存在するかまたは存在せず、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２はＦ_ｃドメインであり、ここで、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２は同じかまたは異なる、抗原結合タンパク質。

【請求項15】

請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質をコード化する配列を含んでなる、単離核酸。

【請求項16】

請求項１５に記載の核酸を含んでなる、ベクター。

【請求項17】

請求項１５に記載の核酸または請求項に記載の１６ベクターで形質転換されている、宿主細胞。

【請求項18】

請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、または請求項１５に記載の核酸または請求項１６に記載のベクターを含んでなる、宿主細胞。

【請求項19】

請求項の１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、請求項１６に記載のベクター、または請求項１７または１８に記載の細胞宿主、および薬学的に許容可能な担体を含んでなる、医薬組成物。

【請求項20】

ａ．宿主細胞を提供するステップと、
ｂ．請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質をコードするコード配列を含んでなる、遺伝子コンストラクトを提供するステップと、
ｃ．前記遺伝子コンストラクトを前記適切な宿主細胞に導入するステップと、
ｄ．前記適切な宿主細胞によって前記遺伝子コンストラクトを発現させるステップと
を含んでなる、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を製造する方法。

【請求項21】

前記宿主細胞から前記抗原結合タンパク質を単離および精製するステップと、任意選択的に、Ｔ細胞内で前記抗原結合タンパク質を再構成するステップとをさらに含んでなる、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

医療で使用するための、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物。

【請求項23】

非小細胞肺がんや小細胞肺がんなどの肺がん、肝臓がん、頭頸部がん、皮膚がん、腎細胞がん、脳がん、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、白血病、乳がん、メルケル細胞がん腫、黒色腫、卵巣がん、膀胱がん、子宮がん、胆嚢および胆管がん、および食道がんからなるがんの群から選択されるがんなどの増殖性疾患の診断、予防、および／または治療で使用するための、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、または請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＰＲＡＭＥタンパク質由来の抗原に向けられた、抗原結合タンパク質に関する。本発明は、特に、腫瘍発現抗原ＰＲＡＭＥに対して選択的かつ特異的な抗原結合タンパク質を提供し、ここで、腫瘍抗原は、配列番号８を含んでなるかまたはそれからなり、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）タンパク質との複合体中にある。本発明の抗原結合タンパク質は、特に、前記ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する新規操作Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含有する。本発明の抗原結合タンパク質は、がん性疾患を発現するＰＲＡＭの診断、治療、および予防で使用するためのものである。さらに、本発明の抗原結合タンパク質をコード化する核酸、前記核酸を含んでなるベクター、抗原結合タンパク質を発現する組換え細胞、および本発明の抗原結合タンパク質を含んでなる、医薬組成物が提供される。

【背景技術】

【0002】

ＰＲＡＭＥは黒色腫で優先的に発現する抗原を指し、がん精巣抗原として知られる生殖細胞系列にコード化された抗原のファミリーに属する。がん精巣抗原は、典型的には、正常な成人組織では発現が制限されるかまたは発現しないため、免疫療法介入の魅力的な標的である。ＰＲＡＭＥは、いくつかの固形腫瘍で、ならびに白血病およびリンパ腫で発現されるペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）は、全長ＰＲＡＭＥタンパク質のアミノ酸４２５～４３３に相当し、前記ペプチドは、ＭＨＣ分子、特にＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成して細胞表面上に提示される（非特許文献１）。

【0003】

ＭＨＣ分子によって提示されるＰＲＡＭＥ由来ペプチド「ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ」などのペプチドエピトープは、ＴＣＲによって結合されてもよい。

【0004】

がん治療のための分子標的薬の開発が進歩しているものの、当該技術分野において、がん細胞に高度に特異的であるが、正常細胞にはそうでない分子を特異的に標的化する、新たな抗がん剤を開発する必要性がなおもある。

【0005】

したがって、本発明は、ＭＨＣタンパク質との複合体中で腫瘍発現抗原ＰＲＡＭに選択的かつ特異的であり、したがって、例えば、Ｔ細胞ベースの免疫療法の標的である、新規の抗原結合タンパク質を提供することに言及する。

【0006】

特許文献１は、ＭＨＣタンパク質複合体との複合体中の配列番号８アミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに結合する、操作されたＴＣＲおよびＴＣＲベースの分子と、ＰＲＡＭＥを（過剰）発現するがん性疾患の診断、治療、および予防における、前記ＴＣＲおよびＴＣＲベースの分子の使用とを開示している。

【0007】

しかしながら、ＭＨＣに提示されたがん抗原に特異的に結合する天然Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）は、ＭＨＣに提示されたウイルス抗原に特異的に結合するＴＣＲと比較して、親和性が低い（Ｋ_Ｄ＝１～３００μＭ）ことが多い。この現象の説明の一部は、胸腺で発達するＴ細胞が自己ペプチドＭＨＣリガンド上で負に選択され（耐性誘導）、このような自己ペプチドＭＨＣに対して高すぎる親和性を有するＴ細胞が削除されることであるように見える。この低親和性は、腫瘍免疫逃避の１つの可能な説明であってもよい（非特許文献２）。したがって、養子細胞療法（ＡＣＴ）の抗原認識コンストラクトとして、または可溶性アプローチの認識モジュールとして使用するために、すなわち二重特異性分子を使用するために、がん抗原に対してより高い親和性で結合するＴＣＲ変異型を設計することが望ましいようである（非特許文献３）。

【0008】

しかしながら、ＴＣＲの親和性を高めることは、副作用のリスクもまた高めることがある。上述したように、自然界では、自己タンパク質である腫瘍関連抗原に向けられた高親和性ＴＣＲは、交差反応性を介した正常組織上に存在する自己ペプチドの認識を回避するために、胸腺選択によって排除される。したがって、その標的配列に対するＴＣＲ親和性を単純に増加させると、類似した非がん特異的ペプチドへの親和性も増加する可能性が高く、したがって、交差反応性および健常組織に対する望ましくない細胞傷害性効果のリスクが増加する。これが単なる理論上のリスクではないことは、ＭＡＧＥ－Ａ３を標的化する操作されたＴＣＲで痛切に発見された。特に、これまでに発表された結果では、前臨床試験で交差反応が予測されていなかったにもかかわらず、筋肉タンパク質であるタイチンのペプチドと交差反応する、ＭＡＧＥ－Ａ３を標的化するＴＣＲを発現するように操作されたＴ細胞を注入された２人の患者において、致死的な毒性が示されている（非特許文献４）。これらの患者は、ＴＣＲで操作されたＴ細胞が重篤で予測不可能なオフターゲットおよび臓器特異的毒性を有し得ることを実証した。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0009】

【特許文献1】国際公開第２０１８／１７２５３３号パンフレット

【非特許文献】

【0010】

【非特許文献1】Ｋｅｓｓｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２００１ Ｊａｎ １；１９３（１）：７３－８８

【非特許文献2】Ａｌｅｋｓｉｃ ｅｔ ａｌ．２０１２，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１２ Ｄｅｃ；４２（１２）：３１７４－９

【非特許文献3】Ｈｉｃｋｍａｎ ｅｔ ａｌ．２０１６，Ｊ Ｂｉｏｍｏｌ Ｓｃｒｅｅｎ．２０１６ Ｓｅｐ；２１（８）：７６９－８５

【非特許文献4】Ｌｉｎｅｔｔｅ ＧＰ ｅｔ ａｌ．Ｂｌｏｏｄ ２０１３；１２２：８６３－７１，Ｃａｍｅｒｏｎ ＢＪ，ｅｔ ａｌ．Ｓｃｉ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．２０１３；５：１９７－１０３

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0011】

したがって、オフターゲットペプチド（「類似ペプチド」とも称される）との交差反応性の低下または減少による高い安全性プロファイルを維持しながら、より高い親和性でそれらの標的に特異的に結合し、したがって、標的抗原ペプチドの発現低下を伴う腫瘍細胞または細胞株でさえも標的化できる、ＴＣＲまたは抗原結合タンパク質を開発および提供するという、満たされていない医学的ニーズがある。

【課題を解決するための手段】

【0012】

換言すれば、本発明者らは、高い腫瘍選択性を維持しながら、それらの標的ペプチドに対して高い結合親和性を示す抗原結合タンパク質を開発することができた。

【0013】

さらに、本発明者らによって示されるように、ＴＣＲ分子Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０は、一本鎖コンストラクトとして、またはＴ細胞の表面分子に特異的に結合する部分と、ＭＨＣ－ペプチド複合体に特異的に結合する部分とを含んでなる、ＴＣＥＲ（以下「ＴＣＥＲ（登録商標）」）と称される二重特異性フォーマットにおいて、比較的低い溶解度を示す。

【0014】

したがって、これらのＴＣＲ技術の進歩にもかかわらず、追加的ながん治療法、特にがん細胞を効率的に標的化して滅殺する治療法に対する必要性が、依然として存在する。特に、ｉ）所望の生物学的活性を有するＭＨＣタンパク質との複合体中の腫瘍発現ＰＲＡＭＥ由来ペプチドに対して選択的かつ特異的であり、ｉｉ）良好な代謝、薬物動態または安全性のプロファイルを有し、ｉｉｉ）産業慣行と適合性のある大規模で製造され得る、新規抗原結合タンパク質を開発する必要がある。

【0015】

したがって、本発明の文脈において、本発明者らは、前記親ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０に由来するＣＤＲ変異型を含んでなる、いくつかの抗原結合タンパク質を操作した。これらの抗原結合タンパク質は、ペプチド－ＭＨＣ複合体に対する結合親和性が増加し、安定性が増加し、および／または溶解性が増加しているため、医療用途に好適である。

【0016】

さらに、本発明の抗原結合タンパク質、特にＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディ（ＴＣＥＲ（登録商標）分子または単にＴＣＥＲ（登録商標））は、新規のＴＣＲ変異型の可変αおよびβドメインを含んでなり、腫瘍細胞に向けられた高い細胞傷害性を発揮し、ここで、最大半量有効濃度（ＥＣ_５０）は１０ｐＭ～１５０ｐＭの間にある。

【0017】

例えば、ＴＣＥＲ（登録商標）分子などの本発明の抗原結合タンパク質では、ＵＡＣＣ２５７、Ｈｓ６９５Ｔ細胞、およびＵ２ＯＳに対する最大半量有効濃度（ＥＣ_５０）は、１～６００ｐＭ、１～３００ｐＭ、１ｐＭ～１００ｐＭ、より特には１ｐＭ～２０ｐＭの間の範囲にある。さらに、本発明の抗原結合タンパク質のＥＣ_５０は、腫瘍細胞株と対比して初代細胞株などの健常組織細胞株中では、１００倍、好ましくは１０００倍を超えて高く、その安全性の向上を実証する。

【0018】

さらに、本発明者らは、治療的生体内マウスモデルにおいて、低用量で、本発明の抗原結合タンパク質（ＴＣＥＲ（登録商標）分子）の有意な腫瘍増殖阻害を実証した。

【0019】

したがって、本発明は、発現および／または精製中の凝集の減少など、結合親和性の増加および安定性の増加をもたらす変異を含んでなる、ＭＨＣタンパク質との複合体中の腫瘍発現抗原ＰＲＡＭに、選択的かつ特異的な抗原結合タンパク質に言及する。さらに、前記抗原結合タンパク質は、例えば、ＵＡＣＣ２５７細胞、ＨＳ６９５Ｔ細胞、およびＵ２ＯＳ細胞に向けられた細胞傷害性を有する。

【0020】

要約すると、本発明者らの驚くべき発見は、とりわけ、技術分野に、（ｉ）健常組織上の類似ペプチドとのＴＣＲまたは抗原結合タンパク質の交差反応性の減少、および高い腫瘍選択性の維持；（ｉｉ）ＴＣＲまたは抗原結合タンパク質の安全性プロファイルの向上；（ｉｉｉ）ＴＣＲまたは抗原結合タンパク質が、オフターゲットおよび腫瘍外の細胞傷害性を減少させること；および（ｉｖ）改善された特異的、選択的、および安全なＴＣＲまたは抗原結合タンパク質の提供の利点を提供する。

【0021】

（詳細な説明）
定義
「抗原」または「標的抗原」という用語は、本明細書の用法では、１つの抗原結合部位によって結合され得る分子、または分子または複合体の一部を指し、ここで、前記１つの抗原結合部位は、例えば、従来の抗体、従来のＴＣＲ、および／または本発明のその他の抗原結合タンパク質に存在する。本発明の文脈における抗原は、特に、配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥペプチド、より特には、ＨＬＡタンパク質、例えばＨＬＡ－Ａ^＊０２などのＭＨＣタンパク質との複合体中の配列番号８のアミノ酸配列を含んでなるＰＲＡＭＥペプチド、より特には、配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドである。

【0022】

本明細書における「抗原結合タンパク質」という用語は、１つの抗原に結合できるポリペプチドまたは結合タンパク質を指す。好ましい実施形態では、前記抗原結合タンパク質は、例えば、二重特異性抗体から知られているように、２つの異なる抗原に同時に結合できる。しかしながら、本明細書で定義される従来の抗体とは異なり、本発明の抗原結合タンパク質は、ＴＣＲからの少なくとも６つのＣＤＲを含んでなる。特定の実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、従来の抗体とは異なり、ＴＣＲからの少なくとも１つの可変αドメインおよび少なくとも１つの可変βドメインを含んでなる。

【0023】

「ドメイン」は、タンパク質の任意の領域であってもよく、一般に配列相同性に基づいて定義され、しばしば特定の構造的または機能的実体に関連している。このようなドメインの例は、抗体軽鎖の可変軽鎖ドメイン、抗体重鎖の可変重鎖ドメイン、および定常ドメイン（Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、およびＣ_Ｈ３ドメイン）、ＴＣＲのα鎖の可変ドメイン、またはＴＣＲのβ鎖の可変ドメインである。

【0024】

「エピトープ」という用語は、本明細書の用法では、「構造的エピトープ」および「機能的エピトープ」という用語を含んでなる。「構造的エピトープ」は、抗原に結合したときに抗原結合タンパク質によってカバーされる、例えば、ペプチド－ＭＨＣ複合体などの抗原のアミノ酸である。典型的には、抗原結合タンパク質のアミノ酸の任意の原子から５Å以内にある、抗原の全てのアミノ酸がカバーされていると見なされる。抗原の構造的エピトープは、Ｘ線結晶学またはＮＭＲ分析をはじめとする、当該技術分野で知られている方法によって判定されてもよい。抗体の構造的エピトープは、典型的には、２０～３０個のアミノ酸を含んでなる。ＴＣＲの構造的エピトープは、典型的には、２０～３０個のアミノ酸を含んでなる。「機能的エピトープ」は、構造的エピトープを形成するアミノ酸のサブセットであり、Ｈ結合、塩橋、芳香族スタッキングまたは疎水性相互作用などの非共有結合を直接形成することによって、または抗原の結合コンフォメーションを間接的に安定化させることによって、本発明の抗原結合タンパク質との界面形成に重要な抗原のアミノ酸を含んでなり、例えば、変異スキャンニングによって判定される。典型的には、抗体が結合する抗原の機能的エピトープは、４～６個のアミノ酸を含んでなる。典型的には、ペプチド－ＭＨＣ複合体の機能的エピトープは、ペプチドの２～６個のアミノ酸と、ＭＨＣ分子の２～７個のアミノ酸とを含んでなる。ＭＨＣＩ提示ペプチドは典型的には、８～１０アミノ酸長を有するので、各所与のペプチドのアミノ酸のサブセットのみが、ペプチド－ＭＨＣ複合体の機能的エピトープの一部である。本発明の文脈において、エピトープ、特に本発明の抗原結合タンパク質によって結合される機能的エピトープは、結合界面の形成に必要とされる抗原のアミノ酸、したがって、配列番号８のＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドの少なくとも３つ、好ましくは少なくとも４つのアミノ酸を含んでなる、機能的エピトープを含んでなるかまたはそれからなる。

【0025】

「ＰＲＡＭＥ」または「黒色腫で優先的に発現される抗原」は、黒色腫で過剰発現される抗原として最初に同定されており（Ｉｋｅｄａ ｅｔ ａｌ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ．１９９７ Ｆｅｂ；６（２）：１９９－２０８）；それは、ＣＴ１３０、ＭＡＰＥ、ＯＩＰ－４としても知られており、Ｕｎｉｐｒｏｔ受入れ番号Ｐ７８３９５を有する（２０１９年１月１１日時点で利用可能）。このタンパク質は、レチノイン酸受容体シグナル伝達の抑制因子として機能する（Ｅｐｐｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌ．２００５ Ｓｅｐ ２３；１２２（６）：８３５－４７）。ＰＲＡＭＥは、がん精巣抗原として知られている生殖細胞系コード化抗原のファミリーに属する。がん精巣抗原は、典型的には、正常な成人組織では発現が制限されるかまたは発現しないため、免疫療法介入の魅力的な標的である。ＰＲＡＭＥは、いくつかの固形腫瘍で、ならびに白血病およびリンパ腫で発現される（Ｄｏｏｌａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｔｒｅａｔ．２００８ Ｍａｙ；１０９（２）：３５９－６５；Ｅｐｐｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２００６ Ｎｏｖ １５；６６（２２）：１０６３９－４２；Ｅｒｃｏｌａｋ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｅａｓｔ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ Ｔｒｅａｔ．２００８ Ｍａｙ；１０９（２）：３５９－６５；Ｍａｔｓｕｓｈｉｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋ Ｌｙｍｐｈｏｍａ．２００３ Ｍａｒ；４４（３）：４３９－４４；Ｍｉｔｓｕｈａｓｈｉ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ Ｈｅｍａｔｏｌ．２０１４；１００（１）：８８－９５；Ｐｒｏｔｏ－Ｓｅｑｕｅｉｒｅ ｅｔ ａｌ．，Ｌｅｕｋ Ｒｅｓ．２００６ Ｎｏｖ；３０（１１）：１３３３－９；Ｓｚｃｚｅｐａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．，Ｏｒａｌ Ｏｎｃｏｌ．２０１３ Ｆｅｂ；４９（２）：１４４－５１；Ｖａｎ Ｂａｒｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ．１９９８ Ｓｅｐ；１０２（５）：１３７６－９）。本発明のＰＲＡＭＥ標的化療法は、特に、非小細胞肺がんや小細胞肺がんなどの肺がん、肝臓がん、頭頸部がん、皮膚がん、腎細胞がん、脳がん、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、白血病、乳がん、メルケル細胞がん腫、黒色腫、卵巣がん、膀胱がん、子宮がん、胆嚢および胆管がん、および食道がんをはじめとするが、これらに限定されるものではない、がんの治療に特に適していてもよい。

【0026】

本発明の文脈における「ＰＲＡＭＥ由来ペプチド」は、Ｕｎｉｐｒｏｔ受入れ番号Ｐ７８３９５の下でアクセス可能な配列番号７のアミノ酸配列の全長ＰＲＡＭＥタンパク質のアミノ酸４２５～４３３に対応する、アミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなるかまたはそれからなる（２０１９年１月１１日時点で利用可能）。アミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなまるかたはそれからなるＰＲＡＭＥ由来ペプチドは、本明細書ではＰＲＡＭＥ－００４とも称される。ＰＲＡＭＥ－００４ペプチドは、腫瘍関連または腫瘍特異的タンパク質に由来するペプチドエピトープであり、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）の分子によって細胞表面上に提示される。より具体的には、ＰＲＡＭＥ－００４由来のペプチドは、ＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成して細胞表面上に提示される。（Ｋｅｓｓｌｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｅｘｐ Ｍｅｄ．２００１ Ｊａｎ １；１９３（１）：７３－８８）。本発明の文脈において、「ＰＲＡＭＥ由来ペプチド」または「ＰＲＡＭＥ－００４」は同義的に使用され、したがって、アミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭ由来ペプチドを指す。

【0027】

「主要組織適合性複合体」（ＭＨＣ）は、脊椎動物の獲得免疫系が外来分子を認識するために不可欠な細胞表面タンパク質のセットであり、これによって組織適合性が決定される。ＭＨＣ分子の主な機能は、病原体に由来する抗原に結合し、それらを細胞表面上に提示して適切なＴ細胞に認識させることである。ヒトＭＨＣは、ＨＬＡ（ヒト白血球抗原）複合体（しばしば単にＨＬＡ）とも称される。ＭＨＣ遺伝子ファミリーは、クラスＩ、クラスＩＩ、クラスＩＩＩの３つのサブグループに分けられる。ペプチドとＭＨＣクラスＩの複合体が、適切なＴ細胞受容体（ＴＣＲ）を保有するＣＤ８陽性Ｔ細胞によって認識される一方で、ペプチドとＭＨＣクラスＩＩ分子の複合体は、適切なＴＣＲを保有するＣＤ４陽性ヘルパーＴ細胞によって認識される。ＣＤ８依存性およびＣＤ４依存性の双方のタイプの応答が、抗腫瘍効果と共同して相乗的に寄与するので、腫瘍関連抗原および対応するＴ細胞受容体の同定および特性評価は、ワクチンおよび細胞療法などのがん免疫療法の開発において重要である。ＨＬＡ－Ａ遺伝子は第６染色体の短腕上に位置し、ＨＬＡ－Ａのより大きなα鎖の構成物をコード化する。ＨＬＡ－Ａα鎖の多様性は、ＨＬＡ機能の鍵である。この多様性は、集団の遺伝的多様性を促進する。各ＨＬＡは、特定の構造のペプチドに対して異なる親和性を有することから、ＨＬＡの種類が多いほど、細胞表面上に「提示」される抗原の種類も多くなる。各個人は、それぞれの親から１タイプずつの最大２タイプのＨＬＡ－Ａを発現し得る。一部の個人は、両親から同一のＨＬＡ－Ａを継承し、個々のＨＬＡの多様性が低下する；しかしながら、大多数の個人は、ＨＬＡ－Ａの２つの異なるコピーを受け継ぐ。これと同じパターンが、全てのＨＬＡグループで続く。換言すれば、各個人は、２４３２個の既知のＨＬＡ－Ａ対立遺伝子のうちの１つまたは２つのみを発現する。

【0028】

「ＨＬＡ－Ａ^＊０２」は特定のＨＬＡ対立遺伝子を表し、ここで、文字Ａは遺伝子を表し、接尾辞「^＊０２接尾辞」はＡ２血清型を示す。

【0029】

ＭＨＣクラスＩ依存免疫反応において、ペプチドは腫瘍細胞によって発現される特定のＭＨＣクラスＩ分子に結合できるだけでなく、それらはまた、引き続いて特異的Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）を有するＴ細胞によって認識されなくてはならない。

【0030】

「ＴＣＲ」は、免疫グロブリンスーパーファミリーのヘテロ二量体細胞表面タンパク質であり、これはシグナル伝達の媒介に関与するＣＤ３複合体の不変タンパク質に関与している。ＴＣＲはαβおよびγδ形態で存在し、それらは構造的に類似しているが、かなり異なる解剖学的位置とおそらくは機能を有する。天然のヘテロ二量体αβＴＣＲおよびγδＴＣＲの細胞外部分は、それぞれ２つのポリペプチドを含有し、そのそれぞれは膜近位定常ドメインおよび膜遠位可変ドメインを有する。定常ドメインおよび可変ドメインのそれぞれは、鎖内ジスルフィド結合を含む。可変ドメインは、抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）に類似した、高度に多型性のループを含有する。ＴＣＲ遺伝子治療の使用は、いくつかの現在のハードルを克服する。それは、対象（患者）自身のＴ細胞に所望の特異性を与えて、十分な数のＴ細胞を短期間で産生できるようにし、それらの枯渇を回避する。例えば、ＴＣＲは効力のあるＴ細胞（例えば、中央メモリーＴ細胞または幹細胞特性を有するＴ細胞）に形質導入され、それは移入時に良好な持続性、保存、および機能を確実にしてもよい。ＴＣＲ操作Ｔ細胞は、化学療法または照射によってリンパ球減少症になったがん患者に注入され、効率的な生着ができるようにするが、免疫抑制は阻害する。

【0031】

本明細書における「ＴＣＲ」という用語は、ＴＣＲおよびそれらの断片、ならびに一本鎖ＴＣＲおよびそれらの断片、特に単一ドメインＴＣＲの可変αおよびβドメイン、ならびにキメラ、ヒト化、二重特異性または多重特異性ＴＣＲを示す。

【0032】

「ＴＣＲの断片」は、天然ＴＣＲまたは従来のＴＣＲの一部、特に、天然ＴＣＲの抗原結合領域または可変領域を含んでなる。ＴＣＲ断片の例としては、Ｖ_α－Ｃ_ａまたはＶ_β－Ｃ_βなどのα、β、δ、γ鎖の断片またはその一部が挙げられ、このような断片はまた、対応するヒンジ領域または単一の可変ドメイン、例えば、Ｖ_α、Ｖ_β、Ｖ_δ、Ｖ_γ、一本鎖Ｖ_αＶ_β断片、またはＴＣＲ断片から形成される二重特異性および多重特異性ＴＣＲもさらに含んでなるかもしれない。ＴＣＲの断片は、無傷のＴＣＲの一部、特に無傷のＴＣＲの抗原結合領域または可変領域を含んでなり、したがって、天然に存在する全長ＴＣＲと比較して、それらの標的ペプチドに選択的かつ特異的に結合する。

【0033】

「一本鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）」は、本明細書ではタンパク質を示し、ここで、Ｖ_αとＶ_β、またはＶ_δとＶ_γなどのＴＣＲの可変ドメインは、１つのポリペプチド上に位置する。典型的には、ｓｃＴＣＲの可変ドメインはリンカーによって分離され、ここで、前記リンカーは、典型的には、例えば５～１５などの５～２０個のアミノ酸を含んでなる。

【0034】

例えば、「天然ＴＣＲ」という文言で使用される「天然」は、野生型ＴＣＲを指す。

【0035】

養子細胞移入（ＡＣＴ）アプローチでは、製造された導入遺伝子Ｔ細胞が、野生型α鎖およびβ鎖を有する野生型ＴＣＲと、それぞれの組換え抗原－ＭＨＣ複合体に特異的なα鎖およびβ鎖を有する遺伝子組換えＴＣＲとを発現してもよい。野生型α鎖およびβ鎖と、遺伝子組換えα鎖およびβ鎖はどちらも、通常、なおも相互に交差対合できる。この望まれない対合は「ＴＣＲ誤対合」と称され、ＴＣＲ（遺伝子）治療の分野で認識されている問題である。遺伝子組換えＴＣＲαまたはβ鎖と、内在性ＴＣＲβまたはα鎖との間で、それぞれ誤対合および不正確な対合が起こると、遺伝子組換えＴＣＲαβヘテロ二量体の表面発現の減少が帰結することがあり、これによって、修飾Ｔ細胞の機能的結合活性が低下する。さらに、誤対合ＴＣＲを発現して高ＩＬ－２条件下で増殖されたＴ細胞は、前臨床モデルで移植片対宿主病（ＧｖＨＤ）を誘発することが実証された。

【0036】

遺伝子組換えＴＣＲαおよびβの対合を最適化して誤対合を回避するためのいくつかのストラテジーとしては、以下が挙げられてもよい：１．マウス化ＴＣＲ：このアプローチでは、ヒトＴＣＲαおよびβ定常鎖が対応するマウスドメインで置き換えられる。ヒトとマウスのＴＣＲ－Ｃドメインは高度な相同性を示すが、小さな違いがＴＣＲ／ＣＤ３相互作用の安定性に影響を与え、したがって、ＴＣＲ表面発現レベルに影響を与える。２．システイン修飾ＴＣＲ：このアプローチは、構造的に好ましい位置にシステインアミノ酸を導入し、したがって、追加的なジスルフィド架橋の形成を可能にし、２つのＴＣＲ鎖間の正しい対合を促進する。例えば、ＴＣＲα定常鎖中のＴ４８ＣおよびＴＣＲβ定常鎖中のＳ５７Ｃなどの部位特異的変異は、２つの鎖間結合（すなわち導入されたジスルフィド架橋＋内在性膜貫通ジスルフィド架橋（α定常ドメインの９５位とβ定常ドメインの１３１位）によって連結されるＴＣＲヘテロ二量体をもたらす。３．ドメイン交換：腫瘍特異的Ｔ細胞受容体のαおよびβ鎖の間で定常ドメインを入れ替え、ドメイン交換（ｄｓ）ＴＣＲを生成する。これらのｄｓＴＣＲ鎖は、正しく対合すると、ＣＤ３タンパク質を動員するのに必要な全てのドメインを保持し、Ｔ細胞の表面上で発現し、標的抗原との結合時の機能性Ｔ細胞応答を媒介する。対照的に、１つのｄｓＴＣＲ鎖と１つの野生型ＴＣＲ鎖を含有する誤対合ＴＣＲは、ＣＤ３の動員、搬出、およびシグナル伝達に必要な重要なドメインを欠いており、したがって、有害な自己免疫を媒介できない。４．排他的ＴＣＲヘテロ二量体：このアプローチでは、立体力と静電力を利用して、ＴＣＲαおよびβ導入遺伝子間の正しい対合を促進し、同時に外因性と内因性のＴＣＲα鎖およびβ鎖間の対合を抑制する。一例では、必要な静電荷の変化を得るために、部位特異的変異を利用して、α定数ドメインにＳ８５Ｒ、β定数ドメインにＲ８８Ｇを導入し、ひいては相互の「ノブ－イン－ホール」構造を作製し、二次構造および三次構造の歪みを最小にしたとされている。５．各ＴＣＲ鎖がＣＤ３ζ分子に融合している、キメラＴＣＲ－ＣＤ３ζ鎖の使用。６．定義されたＴＣＲのＶ_αが、柔軟なペプチドリンカーを使用してβ鎖に融合されている、一本鎖ＴＣＲの使用。７．内在性ＴＣＲの発現をノックダウンするためのｓｈＲＮＡ配列またはジンクフィンガーヌクレアーゼの使用。「ベルクロ」と称される別のアプローチは、ヘテロ二量体状態での好ましい静電相互作用により、２つのＴＣＲ鎖を互いに対合できる。すなわち２つのペプチドは、主に単離形態で展開されるが、混合されると優先的に会合し、安定した平行コイルドコイルヘテロ二量体を形成する。このアプローチは、可溶性ＴＣＲを製造するために適用されてもよく、その中では、ペプチドを短縮型α鎖およびβ鎖にそれぞれ融合させることによって、ヘテロ二量体複合体が優先される。

【0037】

天然α－βヘテロ二量体ＴＣＲは、α鎖およびβ鎖を有する。各α鎖は可変領域、連結領域、および定常領域を含んでなり、β鎖は通常、可変領域と連結領域の間の短い多様性領域もまた含有するが、この多様性領域はしばしば連結領域の一部と見なされる。ＴＣＲα鎖およびβ鎖の定常領域またはＣ領域は、それぞれＴＲＡＣおよびＴＲＢＣと称される（Ｌｅｆｒａｎｃ，（２００１），Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｔｏｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ａｐｐｅｎｄｉｘ １：Ａｐｐｅｎｄｉｘ １０）。本明細書におけるα可変ドメインおよびβ可変ドメインと称される各可変領域は、フレームワーク配列に埋め込まれた３つの「相補性決定領域」（ＣＤＲ）を含んでなり、１つはＣＤＲ３と命名された超可変領域である。α可変ドメインＣＤＲは、本明細書においてＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、ＣＤＲａ３と称され、β可変ドメインＣＤＲは、本明細書においてＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３と称される。それらのフレームワークによって、ＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列によって、ならびに部分的に定義されたＣＤＲ３配列によって区別される、数種類のα鎖可変（Ｖ_α）領域および数種類のβ鎖可変（Ｖ_β）領域がある。Ｖ_αタイプは、ＩＭＧＴ命名法で一意のＴＲＡＶ番号によって参照され、Ｖ_βタイプは、ＩＭＧＴ命名法で一意のＴＲＢＶ番号によって参照される（Ｆｏｌｃｈ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ，（２０００），Ｅｘｐ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔ １７（１）：４２－５４；Ｓｃａｖｉｎｅｒ ａｎｄ Ｌｅｆｒａｎｃ，（２０００），Ｅｘｐ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｇｅｎｅｔ １７（２）：８３－９６；ＬｅＦｒａｎｃ ａｎｄ ＬｅＦｒａｎｃ，（２００１），"Ｔ ｃｅｌｌ Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ｆａｃｔｓｂｏｏｋ"，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ）。免疫グロブリン遺伝子についてより詳しくは、国際ＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓ ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ（登録商標）、Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ－Ｐ ｅｔ ａｌ（Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．２０１５ Ｊａｎ；４３（データベース出版）：Ｄ４１３－２２；およびｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／）を参照されたい。したがって、天然または従来のＴＣＲ抗原結合部位には、αおよびβ鎖可変領域のそれぞれからのＣＤＲセットを含んでなる、通常、６つのＣＤＲが含まれ、ここで、ＣＤＲ１およびＣＤＲ３配列は、ＨＬＡタンパク質に結合するペプチド抗原の認識および結合に関連し、ＣＤＲ２配列は、ＨＬＡタンパク質の認識および結合に関連する。

【0038】

抗体と同様に、「ＴＣＲフレームワーク領域」（ＦＲ）は、ＣＤＲの間に挿入されたアミノ酸配列、すなわち異なるＴＣＲ間である程度保存されているＴＣＲαおよびβ鎖可変領域の部分を指す。ＴＣＲのα鎖およびβ鎖は、それぞれ４つのＦＲを有し、本明細書において、それぞれＦＲ１－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、ＦＲ４－ａ、およびＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂ、ＦＲ４－ｂと称される。したがって、α鎖可変ドメインは、このように（ＦＲ１－ａ）－（ＣＤＲａ１）－（ＦＲ２－１）－（ＣＤＲａ２）－（ＦＲ３－ａ）－（ＣＤＲａ３）－（ＦＲ４－ａ）と称されてもよく、β鎖可変ドメインは、このように（ＦＲ１－ｂ）－（ＣＤＲｂ１）－（ＦＲ２－ｂ）－（ＣＤＲｂ２）－（ＦＲ３－ｂ）－（ＣＤＲｂ３）－（ＦＲ４－ｂ）と称されてもよい。

【0039】

本発明の文脈において、αまたはβ鎖またはγまたはδ鎖におけるＣＤＲ／ＦＲ定義は、ＩＭＧＴ定義に基づいて判定されることになっている（Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，２７（１）：５５－７７；ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ）。したがって、ＴＣＲまたはＴＣＲ由来ドメインに関連する場合のＣＤＲ／ＦＲアミノ酸位置は、前記のＩＭＧＴ定義に従って示される。好ましくは、第１の可変ドメインのＣＤＲ／ＦＲアミノ酸位置のＩＭＧＴ位置は、ＴＲＡＶ１２－２のＩＭＧＴ番号付けとの類似性で与えられ、および／または第２の可変ドメインのＣＤＲ／ＦＲアミノ酸位置のＩＭＧＴ位置は、ＴＲＢＶ５－１のＩＭＧＴ番号付けとの類似性で与えられる。

【0040】

「親和性」は、理論的には、抗原結合タンパク質と抗原との間の平衡結合によって定義され、本発明の文脈では、抗原結合タンパク質と抗原の間、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体における、配列番号８に記載のＰＲＡＭＥ－００４ペプチドとの間の平衡結合によって定義される。親和性は、例えば、最大半量有効濃度（ＥＣ_５０）または平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）で表わされてもよい。

【0041】

「Ｋ_Ｄ」は、抗原結合タンパク質とその抗原の間の平衡解離定数、ｋ_ｏｆｆ／ｋ_ｏｎの比率である。Ｋ_Ｄおよび親和性は、反比例の関係にある。Ｋ_Ｄ値は、抗原結合タンパク質の濃度に関係し、Ｋ_Ｄ値が低いほど、抗原結合タンパク質の親和性がより高くなる。親和性、すなわちＫ_Ｄ値は、本明細書の「抗原結合タンパク質」の項で下に記載されるように、表面プラズモン共鳴またはバイオレイヤー干渉法を用いて会合および解離の速度を測定するなど、様々な既知の方法によって実験的に評価され得る。

【0042】

「免疫グロブリン」とも称される「抗体」では、２つの重鎖がジスルフィド結合によって互いに連結され、各重鎖はジスルフィド結合によって軽鎖に連結されている。軽鎖には、ラムダ（λ）およびカッパ（κ）の２種類がある。抗体分子の機能的活性を決定する５つの主要な重鎖クラス（またはイソタイプ）がある：ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＥ。それぞれの鎖は、異なる配列ドメインを含有する。軽鎖は、可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）と定常ドメイン（Ｃ_Ｌ）との２つのドメインまたは領域を含む。重鎖は、可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）と、３つの定常ドメイン（集合的にＣＨと称される、Ｃ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、およびＣ_Ｈ３）との４つのドメインを含む。軽鎖（Ｖ_Ｌ）と重鎖（Ｖ_Ｈ）の双方の可変領域は、抗原への結合認識および特異性を決定する。軽鎖（Ｃ_Ｌ）と重鎖（Ｃ_Ｈ）の定常領域ドメインは、抗体鎖の結合、分泌、胎盤通過性、補体結合、およびＦ_ｃ受容体（Ｆ_ｃＲ）への結合などの重要な生物学的特性を付与する。Ｆｖ断片は、免疫グロブリンのＦａｂ断片のＮ末端部分であり、１つの軽鎖可変部分と１つの重鎖可変部分とからなる。抗体の特異性は、抗体組み合わせ部位（抗体結合部位の同義語）と抗原決定基の間の構造的相補性にある。抗体組み合わせ部位は、主に超可変または相補性決定領域（ＣＤＲ）からの残基で構成されている。時折、非超可変またはフレームワーク領域（ＦＲ）からの残基は、全体的なドメイン構造に影響を与え、したがって、結合組み合わせ部位に影響を与える。ＣＤＲは、天然免疫グロブリン結合部位の天然Ｆｖ領域の結合親和性および特異性を一緒に定義するアミノ酸配列を指す。免疫グロブリンの軽鎖および重鎖は、それぞれＣＤＲ１－Ｌ、ＣＤＲ２－Ｌ、ＣＤＲ３－Ｌ、およびＣＤＲ１－Ｈ、ＣＤＲ２－Ｈ、ＣＤＲ３－Ｈと称される、３つのＣＤＲをそれぞれ有する。したがって、従来の抗体抗原結合部位は、重鎖および軽鎖Ｖ領域のそれぞれからのＣＤＲセットを含んでなる６つのＣＤＲを含む。

【0043】

本発明の文脈において、抗体または免疫グロブリンは、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＧ、ＩｇＡまたはＩｇＥである。

【0044】

「抗体フレームワーク領域」（ＦＲ）は、ＣＤＲの間に挿入されたアミノ酸配列、すなわち単一生物種の異なる免疫グロブリン間で比較的保存されている、免疫グロブリン軽鎖および重鎖可変領域の部分を指す。免疫グロブリンの軽鎖および重鎖は、それぞれＦＲ１－Ｌ、ＦＲ２－Ｌ、ＦＲ３－Ｌ、ＦＲ４－Ｌ、およびＦＲ１－Ｈ、ＦＲ２－Ｈ、ＦＲ３－Ｈ、ＦＲ４－Ｈと称される、４つのＦＲをそれぞれ有する。それに応じて、軽鎖可変ドメインは、したがって（ＦＲ１－Ｌ）－（ＣＤＲ１－Ｌ）－（ＦＲ２－Ｌ）－（ＣＤＲ２－Ｌ）－（ＦＲ３－Ｌ）－（ＣＤＲ３－Ｌ）－（ＦＲ４－Ｌ）と称されてもよく、重鎖可変ドメインは、したがって（ＦＲ１－Ｈ）－（ＣＤＲ１－Ｈ）－（ＦＲ２－Ｈ）－（ＣＤＲ２－Ｈ）－（ＦＲ３－Ｈ）－（ＣＤＲ３－Ｈ）－（ＦＲ４－Ｈ）と称されてもよい。

【0045】

本発明の文脈において、ＦＣドメイン以外の免疫グロブリン軽鎖または重鎖中のＣＤＲ／ＦＲの定義は、ＩＭＧＴ定義に基づいて決定されることになっている（Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２００３，２７（１）：５５－７７；ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ）。したがって、所与の可変鎖のＣＤＲ１、ＣＤＲ２、およびＣＤＲ３のアミノ酸配列と、ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３、ＦＲ４、およびＦＲ５のアミノ酸配列は、前記のＩＭＧＴ定義に従って示される。

【0046】

当業者であれば理解できるように、抗体の構造、特に抗体の可変重鎖および軽鎖の構造は、従来の抗体、二重特異性抗体、または多重特異性抗体への本発明の文脈で定義されるＣＤＲのグラフト化を容易にする、ＴＣＲαおよびβ可変ドメイン構造の構造と類似している。

【0047】

本発明の抗体、ＴＣＲまたは抗原結合タンパク質のＣＤＲのアミノ酸配列を知ることにより、当業者は、ＴＣＲフレームワーク領域または抗体フレームワーク領域などのフレームワーク領域を容易に判定し得る。しかしながら、ＣＤＲが示されていない場合、当業者は、最初に、ＴＣＲのＩＭＧＴ定義または抗体のＩＭＧＴ定義に基づいてＣＤＲアミノ酸配列を決定し、次に、フレームワーク領域のアミノ酸配列を決定し得る。

【0048】

例えば、ＣＤＲのアミノ酸配列を知ることにより、当業者はフレームワーク領域ＦＲ１－Ｌ、ＦＲ２－Ｌ、ＦＲ３－Ｌ、ＦＲ４－Ｌおよび／またはＦＲ１－Ｈ、ＦＲ２－Ｈ、ＦＲ３－Ｈ、ＦＲ４－Ｈを容易に判定し得る。

【0049】

本明細書の用法では「ヒトフレームワーク領域」は、天然に存在するヒト抗体のフレームワーク領域と実質的に（約８５％以上、特に９０％、９５％、９７％、９９％または１００％）同一であるフレームワーク領域を意味する。

【0050】

本明細書の用法では、用語「抗体」は、従来の抗体およびそれらの断片、ならびに単一ドメイン抗体およびそれらの断片、特に単一ドメイン抗体の可変重鎖、およびキメラ抗体、ヒト化抗体、二重特異性抗体または多重特異性抗体などの抗体およびその断片を示す。

【0051】

本明細書で言及される「従来の抗体」は、自然から単離された抗体と同じタイプのドメインおよびドメイン配置を有し、抗体由来のＣＤＲおよびフレームワーク領域を含んでなる抗体である。同様に、本明細書で言及される「従来のＴＣＲ」は、天然ＴＣＲおよびＴＣＲ由来のＣＤＲおよびフレームワーク領域と同じタイプのドメインとドメイン配置を含んでなる、ＴＣＲである。

【0052】

「ヒト化抗体」という用語は、完全にまたは部分的に非ヒト起源であり、ヒトの免疫反応を回避するかまたは最小化するために、特に重鎖および軽鎖のフレームワーク領域において、特定のアミノ酸を置換することによって修飾された抗体を指す。ヒト化抗体の定常ドメインは、主にヒトＣ_ＨおよびＣ_Ｌドメインである。

【0053】

抗体配列をヒト化するための多くの方法が当該技術分野で公知であり；例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ＆ Ｆｒａｎｓｓｏｎ（２００８）Ｆｒｏｎｔ Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３によるレビューを参照されたい。一般的に使用される方法の１つは、ＣＤＲグラフト化、または抗体再形成であり、これは、通常はマウス抗体であるドナー抗体のＣＤＲ配列を異なる特異性のヒト抗体のフレームワークスキャフォールドにグラフト化することを伴う。ＣＤＲグラフト化は、ＣＤＲグラフト化非ヒト抗体の結合特異性および親和性、ひいては生物学的活性を低下させることもあるので、親抗体の結合特異性および親和性を維持するために、ＣＤＲグラフト化抗体の選択された位置に復帰変異が導入されてもよい。可能な復帰変異の位置の同定は、文献および抗体データベースで利用可能な情報を使用して実施され得る。復帰変異の候補となるアミノ酸残基は、典型的には、抗体分子の表面に位置するものである一方、埋没残基または表面露出の程度が低い残基は、通常は改変されない。ＣＤＲグラフト化および復帰変異の代替のヒト化技術は、表面再構成であり、その中では、非ヒト起源の非表面露出残基が保持される一方、表面残基はヒト残基に改変される。別の代替技術は、「ガイド付き選択」として知られ（Ｊｅｓｐｅｒｓ ｅｔ ａｌ．，（１９９４）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １２，８９９）、例えば、ネズミまたはラットの抗体から、親抗体のエピトープおよび結合特性を維持する完全なヒト抗体を誘導するために使用され得る。ヒト化のさらなる方法は、米国特許第２０１１００２７２６６Ａ１号明細書（国際公開第２００９０３２６６１Ａ１号パンフレット）に記載されるような、いわゆる４Ｄヒト化である。

【0054】

キメラ抗体では、ヒト化は典型的には、可変領域配列のフレームワーク領域の修飾を伴う。

【0055】

ＣＤＲの一部であるアミノ酸残基は、典型的にはヒト化に関連して改変されないが、特定例では、例えば、グリコシル化部位、脱アミド化部位、または望ましくないシステイン残基を除去するために、個々のＣＤＲアミノ酸残基を改変することが望ましい場合がある。Ｎ結合グリコシル化は、トリペプチド配列Ａｓｎ－Ｘ－ＳｅｒまたはＡｓｎ－Ｘ－Ｔｈｒ中のアスパラギン残基にオリゴ糖鎖が結合することによって起こり、ここで、ＸはＰｒｏ以外の任意のアミノ酸であってもよい。Ｎグリコシル化部位の除去は、ＡｓｎまたはＳｅｒ／Ｔｈｒ残基のいずれかを異なる残基に変異させることによって、特に保存的置換を介して達成されてもよい。アスパラギンおよびグルタミン残基の脱アミド化は、ｐＨおよび表面露出などの要因に応じて生じ得る。アスパラギン残基は、主にＡｓｎ－Ｇｌｙの配列で存在する場合に特に脱アミドの影響を受けやすく、Ａｓｎ－Ａｌａなどのその他のジペプチド配列ではその影響より少ない。したがって、このような脱アミド化部位、特にＡｓｎ－ＧｌｙがＣＤＲ配列中に存在する場合、典型的には保存的置換によって、関与する残基の１つを除去することによって、その部位を除去することが望ましくあってもよい。関与する残基の１つを除去するためのＣＤＲ配列中の置換もまた、本発明に包含されることが意図される。

【0056】

抗体の「断片」、例えば従来の抗体は、無傷の抗体の一部、特に無傷の抗体の抗原結合領域または可変領域を含んでなる。抗体断片の例としては、Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆ（ａｂ'）２、Ｆａｂ'、ｄｓＦｖ、（ｄｓＦｖ）２、ｓｃＦｖ、ｓｃ（Ｆｖ）２、ダイアボディ、および抗体断片から形成される二重特異性抗体および多重特異性抗体が挙げられる。従来の抗体の断片はまた、重鎖抗体またはＶＨＨなどの単一ドメイン抗体であってもよい。

【0057】

「Ｆａｂ」という用語は、約５０，０００ダルトンの分子量および抗原結合活性を有する抗体断片を示し、その中では、例えば、パパインなどのプロテアーゼでＩｇＧを処理して得られた断片のうち、Ｈ鎖のＮ末端側のほぼ半分とＬ鎖全体が、ジスルフィド結合を介して共に結合する。

【0058】

例えば、「二重特異性抗体」または「ＢｓＡｂ」における「二重特異性」という用語は、通常、単一分子内の２つの抗体の抗原結合部位を組み合わせた抗体を示す。したがって、ＢｓＡｂｓは２つの異なる抗原に同時に結合するできる。

【0059】

特に、本発明の文脈における「二重特異性」という用語は、少なくとも２つの原子価および２つの異なる抗原に対する結合特異性を有する抗原結合タンパク質を指し、したがって、２つの抗原結合部位を含んでなり、換言すれば、二重特異性抗原結合タンパク質は、２つの異なる標的に特異的に結合する結合タンパク質を指す。

【0060】

「原子価」という用語は、抗原結合タンパク質の結合部位の数を指し、例えば、二価の抗原結合タンパク質は、２つの結合部位を有する抗原結合タンパク質に関連する。原子価という用語は、結合部位の数を指すことに留意すべきであり、ここで、それらの結合部位は、同じかまたは異なる標的に結合してもよく、すなわち二価の抗原結合タンパク質は、単一特異性、すなわち１つの標的に結合するか、または二重特異性、すなわち２つの異なる標的に結合してもよい。標的は、抗原、標的ペプチド、オフターゲット、すなわち類似ペプチドなどでであってもよい。本発明の文脈において、少なくとも１つの抗原結合部位がＴＣＲに由来することが好ましく、より具体的には、少なくとも１つの抗原結合部位が、本発明の文脈で定義されるＴＣＲ由来のＣＤＲを含んでなることが好ましい。したがって、本発明の文脈における「二重特異性」は、ＴＣＲ ＣＤＲを含んでなる少なくとも１つの抗原結合部位と１つのさらなる抗原結合部位とが組み合わさった抗原結合タンパク質を指し、ここで、前記さらなる抗原結合部位は、典型的には抗体に由来し、したがって、典型的には抗体ＣＤＲを含んでなる。

【0061】

したがって、「二重特異性抗体」または「ＢｓＡｂ」という用語は、本発明の文脈において、単一分子内でＴＣＲ ＣＤＲを含んでなる１つの抗原結合部位と、抗体ＣＤＲを含んでなる１つの抗原結合部位とが組み合わさった、抗体フォーマットの二重特異性タンパク質を示す。したがって、ＢｓＡｂｓは２つの異なる抗原に同時に結合するできる。遺伝子操作は、例えば、欧州特許第２０５０７６４Ａ１号明細書に記載されるような、結合特性およびエフェクター機能の所望のセットを有する抗体または抗体誘導体を設計、改変、および製造するためにますます頻繁に使用されてきた。

【0062】

本明細書における「フォーマット」という用語は、本発明の抗原結合タンパク質中に存在するドメインの数およびタイプ、ならびにその空間的構成を指す。例えば、本発明の抗原結合タンパク質の文脈では、抗原結合タンパク質は、Ｖ_α－Ｌ－Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）－Ｆ_ｃを有する第１のポリペプチドと、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）－Ｌ－Ｖ_β－Ｆ_ｃを有する第２のポリペプチドとを含んでなってもよく、したがって、Ｆ_ｃドメインのない抗原結合タンパク質と異なるフォーマットであってもよい。Ｌは、Ｖ_αとＶ_Ｌドメイン、およびＶ_ＨとＶ_βドメインをそれぞれ結合するリンカーである。

【0063】

二重特異性フォーマットなどの多くの異なるフォーマットが、当該技術分野で記載されている。抗体の文脈において、このようなフォーマットは、典型的に、ダイアボディ、交差二重可変ドメイン（ＣＯＤＶ）および／または二重可変ドメイン（ＤＶＤ）タンパク質などの非限定的な例を含む。これらの異なる二重特異性抗体の概要と製造方法は、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．ａｎｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｅ．Ｅ．ＭＡｂｓ．２０１７ Ｆｅｂ－Ｍａｒ；９（２）：１８２－２１２で開示されている。特に、ＤＶＤフォーマットは、例えば、以下の科学論文で開示されている（Ｗｕ Ｃ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２００７；２５：１２９０－７；ＰＭＩＤ：１７９３４４５２；Ｗｕ Ｃ．ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２００９；１：３３９－４７；Ｌａｃｙ ＳＥ ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２０１５；７：６０５－１９；ＰＭＩＤ：２５７６４２０８；Ｃｒａｉｇ ＲＢ ｅｔ ａｌ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１２；７：ｅ４６７７８；ＰＭＩＤ：２３０５６４４８；Ｐｉｃｃｉｏｎｅ ＥＣ ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２０１５）。ＣＯＤＶは、例えば、Ｏｎｕｏｈａ ＳＣ ｅｔ ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２０１５ Ｏｃｔ；６７（１０）：２６６１－７２、または例えば、国際公開第２０１２／１３５３４５号パンフレット、国際公開第２０１６／１１６６２６号パンフレットで開示されている。二重特異性ダイアボディは、例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ １９９６；９：２９９－３０５；ＰＭＩＤ：８７３６４９７；Ａｔｗｅｌｌ ＪＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９６；３３：１３０１－１２；ＰＭＩＤ：９１７１８９０；Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＲＥ，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １９９７；１５：６２９－３１；ＰＭＩＤ：９２１９２６３；Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＲＥ ｅｔ ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １９９７；３：１３７－４４；ＰＭＩＤ：９２３７０９８；Ｃｏｃｈｌｏｖｉｕｓ Ｂ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４３３６－４１；ＰＭＩＤ：１０９６９７７２；およびＤｅＮａｒｄｏ ＤＧ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ ２００１；１６：５２５－３５；ＰＭＩＤ：１１７８９０２９に記載される。

【0064】

抗体の文脈で用いられる「ダイアボディ」は、典型的には、同じまたは異なる抗体からの、それぞれがＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインを含んでなる２つの鎖から構成される二価の分子を指す。２つの鎖は典型的には、Ｖ_ＨＡ－Ｖ_ＬＢとＶ_ＨＢ－Ｖ_ＬＡ（ＡとＢは２つの異なる特異性を表す）、またはＶ_ＬＡ－Ｖ_ＨＢとＶ_ＬＢ－Ｖ_ＨＡの構成を有する。

【0065】

本発明の文脈における「ダイアボディ（Ｄｂ）」または「ダイアボディフォーマット」は、本明細書でそれぞれ、リンカー（Ｌ_Ｄｂ１およびＬ_Ｄｂ２）によって連結された２つの可変ドメインを含んでなる２つのポリペプチド鎖から構成された二価の分子を指し、ここで、ドメインの２つは、本発明の文脈で定義される第１および第２のドメイン（Ｖ_１およびＶ_２）であって、その他の２つのドメインは、ＴＣＲ由来または抗体由来の可変ドメイン（Ｖ_Ａ、Ｖ_Ｂ）であってもよい。Ｖ_１Ｖ_２ドメインは、２つの異なるポリペプチド上に位置し、Ｖ_ＡＶ_Ｂドメインは、２つの異なるポリペプチド上に位置し、ドメインは頭ー尾方向で二量体化する。したがって、方向は、Ｖ_１－Ｌ_Ｄｂ１－Ｖ_ＡとＶ_Ｂ－Ｌ_Ｄｂ２－Ｖ_２、Ｖ_２－Ｌ_Ｄｂ１－Ｖ_ＡとＶ_Ｂ－Ｌ_Ｄｂ２－Ｖ_１、Ｖ_１－Ｌ_Ｄｂ１－Ｖ_ＢとＶ_Ａ－Ｌ_Ｄｂ２－Ｖ_２、またはＶ_２－Ｌ_Ｄｂ１－Ｖ_ＢとＶ_Ａ－Ｌ_Ｄｂ２－Ｖ_１であってもよい。ドメインが頭－尾方向で二量体化できるようにするために、リンカー、すなわち同一であるかまたは異なるＬ_Ｄｂ１およびＬ_Ｄｂ１は、短いリンカーである。短いリンカーは、典型的には例えば、４、５など、例えば３、４、５、６、７、８、９アミノ酸長の２～１２、３～１３アミノ酸長の間であり（Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．ａｎｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｅ．Ｅ．（ＭＡｂｓ．２０１７ Ｆｅｂ－Ｍａｒ；９（２）：１８２－２１２）、または配列番号７０の「ＧＧＧＳ」、配列番号７１の「ＧＧＧＧＳ」、または配列番号６４の「ＧＧＧＳＧＧＧＧ」などの８アミノ酸長である。

【0066】

「二重可変ドメイン免疫グロブリン（ＤＶＤ－Ｉｇ（商標））」フォーマットは、２００７年に最初にＷｕ Ｃ．ｅｔ ａｌ．（Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００７ Ｎｏｖ；２５（１１）：１２９０－７）によって記載された。このフォーマットでは、典型的には、第２のモノクローナル抗体（Ｂ）の標的結合可変ドメインは、従来の抗体（Ａ）（ドメインＶＬＡおよびＶＨＡを含んでなる）に融合し、したがって、ここで、従来の抗体（Ａ）の軽鎖は、追加的な軽鎖可変ドメイン（ＶＬＢ）を含んでなり、従来の抗体（Ａ）の重鎖は、追加的な重鎖可変ドメイン（ＶＨＢ）を含んでなる。したがって、当該技術分野で記載されているようなＤＶＤ－Ｉｇ（商標）は、典型的には、２つのポリペプチド鎖から構成され、１つの重鎖はＶ_ＨＢ－Ｌ－Ｖ_ＨＡ－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３を含んでなり、１つの軽鎖はＶ_ＬＢ－Ｌ－Ｖ_ＬＡ－Ｃ_Ｌを含んでなる。したがって、ドメインＶ_ＬＡ／Ｖ_ＨＡとＶ_ＬＡ／Ｖ_ＬＡは、平行して対合する。

【0067】

本発明の文脈における「二重可変ドメインＩｇフォーマット」は、それぞれ、リンカー（Ｌ_１、Ｌ_３）によって連結された、２つの可変ドメインを含んでなる２つのポリペプチド鎖を含んでなるタンパク質を指し、ここで、ドメインの２つは、本発明の文脈で定義される第１および第２のドメイン（Ｖ_１およびＶ_２）であり、その他の２つのドメインは、重鎖および軽鎖可変ドメイン（ＶＨＡおよびＶＨＢ）に由来する抗体である。本発明の文脈におけるＤＶＤ－Ｉｇフォーマットでは、ポリペプチド鎖は、例えば、Ｖ_１－Ｌ_１－Ｖ_ＨＡ－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_２－Ｌ_３－Ｖ_ＬＡ－Ｌ_４－Ｃ_Ｌ、またはＶ_２－Ｌ_１－Ｖ_ＨＡ－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_１－Ｌ_３－Ｖ_ＬＡ－Ｌ_４－Ｃ_Ｌの構成を有する。連結リンカーＬ_１およびＬ_３は、好ましくは５～１５アミノ酸などの５～２０残基の間であり、および／または接続リンカーＬ_２およびＬ_４は、存在してもまたは存在しなくてもよい。

【0068】

抗体の文脈で当該技術分野で記載されるような「交差二重可変ドメインＩｇ様タンパク質」は、その中で、２つのＶ_Ｈおよび２つのＶ_Ｌドメインが、可変Ｖ_Ｈ－Ｖ_Ｌドメインの交差対合を可能にする様式で連結され、それらが、Ｖ_ＨＡ－Ｖ_ＨＢとＶ_ＬＢ－Ｖ_ＬＡの順序、またはＶ_ＨＢ－Ｖ_ＨＡとＶ_ＬＡ－Ｖ_ＬＢの順序のどちらかで（ＮからＣ末端方向に）配列されるフォーマットを表す。

【0069】

本発明の文脈において、「交差二重可変ドメインＩｇ様タンパク質」は、それぞれがリンカー（Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、およびＬ_４）によって連結された２つの可変ドメインを含んでなる２つのポリペプチド鎖を含んでなる、タンパク質を指し、ここで、２つのドメインは、本発明の文脈で定義される第１および第２のドメイン（Ｖ_１およびＶ_２）であり、その他の２つのドメインは、抗体由来の重鎖および軽鎖可変ドメイン（Ｖ_ＨＡ、Ｖ_ＨＢ）である。本発明の文脈におけるＣＤＶＤ－Ｉｇフォーマットでは、ポリペプチド鎖は、例えば、Ｖ_１－Ｌ_１－Ｖ_ＨＡ－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_ＬＡ－Ｌ_３－Ｖ_２－Ｌ_４－Ｃ_Ｌ；Ｖ_２－Ｌ_１－Ｖ_ＨＡ－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_ＬＡ－Ｌ_３－Ｖ_１－Ｌ_４－Ｃ_Ｌ；Ｖ_ＨＡ－Ｌ_１－Ｖ_１－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_２－Ｌ_３－Ｖ_ＬＡ－Ｌ_ＤＶＤ３－Ｃ_Ｌ；またはＶ_ＨＡ－Ｌ_１－Ｖ_２－Ｌ_２－Ｃ_Ｈ１－Ｃ_Ｈ２－Ｃ_Ｈ３とＶ_１－Ｌ_３－Ｖ_ＬＡ－Ｌ_４－Ｃ_Ｌの構成を有する。このＣＤＶＤフォーマットでは、リンカー（Ｌ_１～Ｌ_４）は、典型的には、全グリシンリンカーおよび本明細書のリンカーの項で下に記載されるリンカーを含めて、異なる長さである。例えば、Ｌ_１は３～１２アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_２は３～１４アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_３は１～８アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_４は１～３アミノ酸残基の長さであるか、または
Ｌ_１は５～１０アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_２は５～８アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_３は１～５アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_４は１～２アミノ酸残基の長さであるか、またはＬ_１は７アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_２は５アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_３は１アミノ酸残基の長さであり、Ｌ_４は２アミノ酸残基の長さである。

【0070】

本明細書における「抗体フォーマット」はタンパク質を指し、ここで、定常ドメインなどの含まれるかもしれないさらなるドメインは、好ましくは抗体に由来する。上記の例を参照すると、Ｖ_α－Ｌ－Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）－Ｆ_ｃを有する第１のポリペプチドと、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）－Ｌ－Ｖ_β－Ｆ_ｃを有する第２のポリペプチドとを含んでなる抗原結合タンパク質は、Ｆ_ｃドメインが抗体に由来することから、抗体フォーマットと称されるかもしれない。

【0071】

ＢｓＡｂと類似して、本発明の文脈における「二重特異性ＴＣＲ」は、単一分子内で、ＴＣＲ ＣＤＲを含んでなる１つの抗原結合部位と、抗体ＣＤＲを含んでなる１つの抗原結合部位とが組み合わさった、ＴＣＲフォーマットの二重特異性タンパク質を示す。

【0072】

本明細書における「ＴＣＲフォーマット」はタンパク質を指し、ここで、定常ドメインなどの含まれるかもしれないさらなるドメインは、好ましくはＴＣＲに由来する。しかしながら、ｓｃＴＣＲは抗体の定常ドメインまたはそれらの断片もまた含んでなるかもしれないので、例外も可能である。

【0073】

ＴＣＲ由来のドメインの数が抗体由来のドメインの数と等しい場合、「抗体フォーマット」は「ＴＣＲフォーマット」と必ずしも明確に区別できるとは限らず、例えば、Ｖ_α－ＬＶ_Ｌ（ＣＤ３）を有する第１のポリペプチドと、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）－Ｌ－Ｖ_βを有する第２のポリペプチドとを含んでなる抗原結合タンパク質の場合、この特殊なケースでは、抗原結合タンパク質はＴＣＲフォーマットであると同時に、抗体フォーマットであると見なされるかもしれない。

【0074】

本明細書における「少なくとも１つ」は、１、２、３、４、５または６つ以上の特定の物体などの１つまたは複数の特定の物体を指す。例えば、本明細書における少なくとも１つの結合部位は、１、２、３、４、５または６つ以上の結合部位を指す。

【0075】

「参照配列と少なくとも８５％の同一性を有する」配列とは、その全長において、参照配列の全長と８５％以上、特に９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性を有する配列である。

【0076】

本出願の文脈では、「同一性の百分率」は、グローバルなペアワイズアラインメントを用いて計算される（すなわち２つの配列が、それらの全長にわたって比較される）。２つ以上の配列の同一性を比較するための方法は、当該技術分野で周知である。例えば、Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ－Ｗｕｎｓｃｈ大域アラインメントアルゴリズム（Ｎｅｅｄｌｅｍａｎ ａｎｄ Ｗｕｎｓｃｈ，１９７０ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４８：４４３－４５３）を用いて、それらの全長を考慮した場合の２つの配列の最適なアラインメント（ギャップを含む）を見つける「ｎｅｅｄｌｅ」プログラムが、用いられてもよい。Ｎｅｅｄｌｅプログラムは、例えば、ｅｂｉ．ａｃ．ｕｋ Ｗｏｒｌｄ Ｗｉｄｅ Ｗｅｂサイトで利用でき、以下の出版物にさらに記載されている（ＥＭＢＯＳＳ：Ｔｈｅ Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｏｐｅｎ Ｓｏｆｔｗａｒｅ Ｓｕｉｔｅ（２０００）Ｒｉｃｅ，Ｐ．Ｌｏｎｇｄｅｎ，Ｉ．ａｎｄ Ｂｌｅａｓｂｙ，Ａ．Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ １６，（６）ｐｐ．２７６－２７７）。本発明による２つのポリペプチド間の同一性の百分率は、１０．０に等しい「Ｇａｐ Ｏｐｅｎ」パラメーター、０．５に等しい「Ｇａｐ Ｅｘｔｅｎｄ」パラメーター、およびＢｌｏｓｕｍ６２マトリックスで、ＥＭＢＯＳＳ：ｎｅｅｄｌｅ（大域）プログラムを用いて計算される。

【0077】

参照配列と「少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一」のアミノ酸配列からなるタンパク質は、参照配列と比較して、欠失、挿入および／または置換などの変異を含んでなってもよい。置換の場合、参照配列と少なくとも８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列からなるタンパク質は、参照配列とは別の種に由来する相同配列に対応してもよい。

【0078】

「アミノ酸置換」は、保存的または非保存的であってもよい。好ましくは、置換は保存的置換であり、その中ではあるアミノ酸が類似の構造的および／または化学的特性を有する別のアミノ酸によって置換される。

【発明を実施するための形態】

【0079】

一実施形態では、保存的置換としては、それらの内容全体が参照により援用される、Ｄａｙｈｏｆｆによって「Ｔｈｅ Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎｄ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ．Ｖｏｌ．５」，Ｎａｔｌ．Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈに記載されているものが挙げられてもよい。例えば、一態様では、以下のグループの１つに属するアミノ酸は、互いに交換され得て、したがって、保守的な交換を構成する：グループ１：アラニン（Ａ）、プロリン（Ｐ）、グリシン（Ｇ）、アスパラギン（Ｎ）、セリン（Ｓ）、スレオニン（Ｔ）；グループ２：システイン（Ｃ）、セリン（Ｓ）、チロシン（Ｙ）、スレオニン（Ｔ）；グループ３：バリン（Ｖ）、イソロイシン（Ｉ）、ロイシン（Ｌ）、メチオニン（Ｍ）、アラニン（Ａ）、フェニルアラニン（Ｆ）；グループ４：リジン（Ｋ）、アルギニン（Ｒ）、ヒスチジン（Ｈ）；グループ５：フェニルアラニン（Ｆ）、チロシン（Ｙ）、トリプトファン（Ｗ）、ヒスチジン（Ｈ）；およびグループ６：アスパラギン酸（Ｄ）、グルタミン酸（Ｅ）。一態様では、保存的アミノ酸置換は、Ｔ→Ａ、Ｇ→Ａ、Ａ→Ｉ、Ｔ→Ｖ、Ａ→Ｍ、Ｔ→Ｉ、Ａ→Ｖ、Ｔ→Ｇ、および／またはＴ→Ｓから選択されてもよい。

【0080】

さらなる実施形態では、保存的アミノ酸置換としては、例えば、（１）非極性：Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ；（２）非荷電極性：Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；および（４）塩基性：Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓなど、同一クラスの別のアミノ酸によるアミノ酸の置換が挙げられてもよい。その他の保存的アミノ酸置換はまた、以下のように行われ得る：（１）芳香族：Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｈｉｓ；（２）プロトン供与体：Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ、Ｔｒｐ；および（３）プロトン受容体：Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ、Ｔｙｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ（例えば、それらの内容全体が参照により援用される、米国特許第１０，１０６，８０５号明細書を参照されたい）。

【0081】

別の実施形態では、表１に従って保存的置換が行なわれてもよい。タンパク質修飾に対する耐性を予測する方法は、例えば、その内容全体が参照により援用される、Ｇｕｏ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．，ＵＳＡ，１０１（２５）：９２０５－９２１０（２００４）にある。

【0082】

表1：保存的アミノ酸置換

【表1】

【0083】

別の実施形態では、保存的置換は、「保存的置換」の見出しの下で表２に示されるものであってもよい。このような置換が生物学的活性の変化をもたらす場合、表２で「例示的な置換」と命名される、より実質的な変化が導入され、必要に応じて生成物がスクリーニングされてもよい。

【0084】

表2：アミノ酸置換

【表2】

【0085】

いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は変異型抗原結合タンパク質を含んでもよく、ここで、前記変異型抗原結合タンパク質は、第１のポリペプチド鎖（α鎖など）と第２のポリペプチド鎖（β鎖など）とを含み、変異型がそれに由来する抗原結合タンパク質と比較して、好ましくはＶ_αおよびＶ_β領域のＣＤＲ領域に、最大８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、またはそれ以上のアミノ酸置換を含んでなる。この点において、抗原結合タンパク質のＣＤＲ領域には、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５以上のアミノ酸置換が存在してもよい。置換は、Ｖ_αおよび／またはＶ_β領域のどちらのＣＤＲにあってもよい。

【0086】

高親和性抗原結合タンパク質は、本発明の抗原結合タンパク質に基づいて操作されてもよく、それぞれの野生型抗原結合タンパク質よりも、ＭＨＣと複合体形成したＰＲＡＭＥ－００４への結合がより強力であり、それは約１０^－６Ｍ～約１０^－１２Ｍの間、約１０^－７Ｍ～約１０^－１２Ｍの間、約１０^－８Ｍ～約１０^－１２Ｍの間、約１０^－９Ｍ～約１０^－１２Ｍの間、約１０^－１０Ｍ～約１０^－１２Ｍの間、または約１０^－１１Ｍ～約１０^－１２Ｍの間のＫ_Ｄの親和性を有してもよい

【0087】

一実施形態では、変異型は機能的変異型である。

【0088】

「機能的変異型」という用語は、本明細書の用法では、保存的アミノ酸置換を含有する抗原結合タンパク質などの親抗原結合タンパク質と、実質的または有意な配列同一性または類似性を有する抗原結合タンパク質を指し、ここで、前記機能的変異型は、親抗原結合タンパク質の生物学的活性を維持する。一態様では、機能的変異型は、例えば、本明細書に記載の抗原結合タンパク質（親抗原結合タンパク質）の変異型を包含し、これは、親抗原結合タンパク質と類似した程度、同程度、またはより高い程度で、標的細胞を認識する能力を維持する。親抗原結合タンパク質に関連して、機能的変異型は、例えば、親抗原結合タンパク質に対するアミノ酸配列に対して、少なくとも５０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％以上同一のアミノ酸配列を有し得る。

【0089】

機能的変異型は、例えば、少なくとも１つの保存的アミノ酸置換を含む親抗原結合タンパク質のアミノ酸配列を含んでなり得る。代案としては、またはそれに加えて、機能的変異型は、少なくとも１つの非保存的アミノ酸置換を有する、親抗原結合タンパク質のアミノ酸配列を含んでなり得る。この場合、非保存的アミノ酸置換が機能的変異型の生物学的活性を妨害または阻害しないことが好ましい。好ましくは、非保存的アミノ酸置換は、機能的変異型の生物学的活性を増強し、その結果、機能的変異型の生物学的活性は、抗原結合タンパク質と比較して増加する。

【0090】

本開示の修飾されたＴＣＲ、ポリペプチド、およびタンパク質（機能的部分および機能的変異型を含む）は、修飾されたＴＣＲ、ポリペプチド、またはタンパク質（またはその機能的部分または機能的変異型）が、例えば、抗原に特異的に結合する能力、宿主における罹患細胞を検出する能力、または宿主における疾患を治療または予防する能力などのそれらの生物学的活性を維持するという条件で、任意の長さであり得て、すなわち任意の数のアミノ酸を含んでなり得る。

【0091】

本発明の抗原結合タンパク質（機能的部分および機能的変異型を含む）は、１つまたは複数の天然アミノ酸の代わりに合成アミノ酸を含んでなり得る。このような合成アミノ酸は、当該技術分野で公知であり、例えば、アミノシクロヘキサンカルボン酸、ノルロイシン、α－アミノｎ－デカン酸、ホモセリン、Ｓ－アセチルアミノメチル－システイン、トランス－３－およびトランス－４－ヒドロキシプロリン、４－アミノフェニルアラニン、４－ニトロフェニルアラニン、４－クロロフェニルアラニン、４－カルボキシフェニルアラニン、β－フェニルセリンβ－ヒドロキシフェニルアラニン、フェニルグリシン、α－ナフチルアラニン、シクロヘキシルアラニン、シクロヘキシルグリシン、インドリン－２－カルボン酸、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸、アミノマロン酸酸、アミノマロン酸酸モノアミド、Ｎ'－ベンジル－Ｎ'－メチル－リジン、Ｎ'，Ｎ'－ジベンジル－リジン、６－ヒドロキシリジン、オルニチン、α－アミノシクロペンタンカルボン酸、α－アミノシクロヘキサンカルボン酸、α－アミノシクロヘプタンカルボン酸、α－（２－アミノ－２－ノルボルナン）－カルボン酸、α，γ－ジアミノ酪酸、α，β－ジアミノプロピオン酸、ホモフェニルアラニン、およびα－ｔｅｒｔ－ブチルグリシンが挙げられてもよい。

【0092】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質（機能的部分および機能的変異型をはじめとする）は、グリコシル化、アミド化、カルボキシル化、リン酸化、エステル化、Ｎアシル化され得て、例えば、ジスルフィド架橋を介して環化され得て、または酸付加塩に変換され得て、および／または任意選択的に、二量体化または重合、または抱合され得る。

【0093】

さらなる実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質（機能的部分および機能的変異型を含む）は、例えば、薬学的に許容可能な塩などの塩の形態である。薬学的に許容可能な酸付加塩としては、塩酸、臭化水素酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、および硫酸などの鉱酸に由来するもの、および酒石酸、酢酸、クエン酸、リンゴ酸、乳酸、フマル酸、安息香酸、グリコール酸、グルコン酸、コハク酸、および例えばｐ－トルエンスルホン酸酸などのアリールスルホン酸などの有機酸に由来するものが挙げられてもよい。

【0094】

この点において、本開示の抗原結合タンパク質は、合成、組換え、単離、および／または精製され得る。

【0095】

「リンカー」という用語は、本明細書の用法では、例えば、本発明の抗原結合抗体の第１の可変ドメインおよび第２の可変ドメインなどのドメインに十分な移動度を提供するように、ドメイン間に挿入され、任意選択的に、軽鎖および重鎖可変ドメインの第１の可変ドメインおよび第２の可変ドメイン間に挿入され、抗原結合タンパク質の交差対合（ＣＯＤＶフォーマットまたはいくつかのダイアボディフォーマット）または平行対合構成（例えば、ＤＶＤフォーマット）のどちらかで、正しく折りたたまれて抗原結合部位または二重特異性抗原結合タンパク質が形成し、少なくとも１つのさらなる抗原結合部位が形成される、１つまたは複数のアミノ酸残基を指す。

【0096】

いくつかの実施形態では、リンカーは０個のアミノ酸からなり、すなわちリンカーは存在しない。リンカーは、アミノ酸配列レベルで、可変ドメイン間、または可変ドメインと定数ドメイン間の移行部にそれぞれ挿入される。免疫グロブリンドメインならびにＴＣＲドメインのおよそのサイズが良く理解されているため、ドメイン間の移行部が同定され得る。ドメイン遷移の正確な位置は、実験データによって実証されるように、またはモデリングまたは二次構造予測の技術によって想定されるように、βシートまたはαらせんなどの二次構造要素を形成しないペプチドストレッチを探し当てることによって判定され得る。本発明の文脈で用いられるリンカーという用語は、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６と称されるリンカーを指すが、これらに限定されるものではない。

【0097】

それぞれの文脈で特に指定されていない限り、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６、などのリンカーは、少なくとも１～３０アミノ酸の長さであり得る。いくつかの実施形態では、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６などのリンカーは、２～２５、２～２０、または３～１８アミノ酸長であり得る。いくつかの実施形態では、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６などのリンカーは、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、または５アミノ酸長以下のペプチドであり得る。その他の実施形態では、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６などのリンカーは、５～２５、５～１５、４～１１、１０～２０、または２０～３０アミノ酸長であり得る。その他の実施形態では、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５、およびＬ_６などのリンカーは、約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０アミノ酸長であり得る。特定の、実施形態では、Ｌ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５およびＬ_６などのリンカーは、長さが、例えば、５～２４、１０～２４または５～１０など、２４未満、２０未満、１６未満、１２未満、１０未満のアミノ酸残基であってもよい。いくつかの実施形態では、前記リンカーは、例えば、長さが、１を超え、２を超え、５を超え、１０を超え、２０を超えるアミノ酸残基、２２を超えるアミノ酸残基など、長さが、１以上のアミノ酸残基である。

【0098】

例示的なリンカーとしては、例えば、ＴＶＡＡＰ（配列番号６９）、
ＧＧＧＳ（配列番号７０）、
ＧＧＧＧＳ（配列番号７１）、
ＴＶＬＲＴ（配列番号７２）、
ＴＶＳＳＡＳ（配列番号７３）、
ＧＧＧＳＧＧＧＧ（配列番号６４）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７４）、
ＧＧＧＧＳＡＡＡ（配列番号７５）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号７６）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＳ（配列番号７７）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１５１）、
ＴＶＬＳＳＡＳ（配列番号７８）および
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１１７）、
ＧＧＧＧＳＧＴ（配列番号１５９）、
ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧ（配列番号１６０）、
ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧ（配列番号１６１）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴ（配列番号１６２）
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴ（配列番号１６３）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴ（配列番号１６４）、
ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧ（配列番号１６５）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴ（配列番号１６６）、
ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧ（配列番号１６７）、
ＧＳＡＤＤＡＫＫＤＡＡＫＫＤＧＫＳ（配列番号１６８）、
ＧＧＱＧＳＧＧＴＧＳＧＧＱＧＳＧＧＴＧＳＧＧＱＧＳ（配列番号１６９）、
ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＳＥＱＩＤＮＯ：１７０）、特にＧＧＧＳＧＧＧＧ（配列番号６４）、ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１１７）、およびＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（配列番号１５１）のアミノ酸配列が挙げられる。

【0099】

本発明の文脈で用いられる「Ｆ_ｃドメイン」という用語は、天然Ｆ_ｃおよびＦ_ｃ変異型を包含する。Ｆ_ｃ変異型および天然Ｆ_ｃ分子と同様に、「Ｆ_ｃドメイン」という用語には、抗体全体から分解されたか、またはその他の手段で製造されたかにかかわらず、単量体または多量体の形態の分子が含まれる。

【0100】

「天然Ｆ_ｃ」という用語は、本明細書の用法では、抗体の消化から得られるか、または単量体または多量体の形態であるかどうかにかかわらず、その他の手段によって製造された非抗原結合断片の配列を含んでなり、ヒンジ領域を含有し得る分子を指す。天然Ｆ_ｃの元の免疫グロブリン源は、特にヒト由来であり、免疫グロブリンのいずれかであるが、ＩｇＧ１およびＩｇＧ２が好ましい。天然Ｆ_ｃ分子は、共有結合（すなわちジスルフィド結合）および非共有結合によって二量体または多量体の形態に結合し得る単量体ポリペプチドで構成される。天然Ｆ_ｃ分子の単量体サブユニット間の分子間ジスルフィド結合の数は、クラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびＩｇＥなど）またはサブクラス（例えばＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＡ１、およびＩｇＧＡ２など）に応じて、１～４の範囲である。天然Ｆ_ｃの一例は、ＩｇＧのパパイン消化から得られるジスルフィド結合二量体である。「天然Ｆ_ｃ」という用語は、本明細書の用法では単量体、二量体、および多量体の形態に一般的である。天然Ｆ_ｃの一例は、配列番号７９のアミノ酸配列である。

【0101】

「ヒンジ」または「ヒンジ領域」または「ヒンジドメイン」は、典型的には、Ｃ_Ｈ１ドメインとＣ_Ｈ２ドメインの間に位置する重鎖の可動性部分を指す。それは約２５アミノ酸長であり、「上部ヒンジ」、「中部ヒンジ」または「コアヒンジ」、および「下部ヒンジ」に分割される。「ヒンジサブドメイン」は、上部ヒンジ、中部（またはコア）ヒンジ、または下部ヒンジを指す。ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、およびＩｇＧ４分子のヒンジのアミノ酸配列を以下に示す：
ＩｇＧ１：Ｅ_２１６ＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧ（配列番号１５５）
ＩｇＧ２：Ｅ_２１６ＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰ（配列番号１５６）
ＩｇＧ３：ＥＬＫＴＰＬＧＤＴＴＨＴＣＰＲＣＰＥＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＥ_２１６ＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＡＰＥＬＬＧ（配列番号１５７）
ＩｇＧ４：Ｅ_２１６ＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧ（配列番号１５８）。

【0102】

本発明の文脈において、これはＦ_ｃドメイン中のアミノ酸位置に言及し、これらのアミノ酸位置または残基は、例えば、Ｅｄｅｌｍａｎ，Ｇ．Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．ＵＳＡ，６３，７８－８５（１９６９）に記載されているようなＥＵ番号付けシステムに従って示される。

【0103】

「Ｆ_ｃ変異型」という用語は、本明細書の用法では、天然Ｆ_ｃから修飾されているが、サルベージ受容体であるＦ_ｃＲｎ（新生児Ｆ_ｃ受容体）に対する結合部位をなおも含んでなる、分子または配列を指す。例示的なＦ_ｃ変異型、およびそれらとサルベージ受容体との相互作用は、当該技術分野で公知である。したがって、「Ｆ_ｃ変異型」という用語は、非ヒト天然Ｆ_ｃからヒト化された分子または配列を含んでなり得る。さらに、天然Ｆ_ｃは、本発明の抗原結合タンパク質に必要でない構造的特徴または生物学的活性を提供するので、除去され得る領域を含んでなる。したがって、「Ｆ_ｃ変異型」という用語は、１つまたは複数の天然Ｆ_ｃ部位または残基を欠く分子または配列を含んでなり、またはその中では、１つまたは複数のＦ_ｃ部位または残基が修飾されて、（１）ジスルフィド結合形成、（２）選択された宿主細胞との非適合性、（３）選択された宿主細胞での発現時のＮ末端不均一性、（４）グリコシル化、（５）補体との相互作用、（６）サルベージ受容体以外のＦ_ｃ受容体への結合、または（７）抗体依存性細胞の細胞傷害性（ＡＤＣＣ）に影響を与えるかまたは関与している。

【0104】

一実施形態では、Ｆ_ｃドメインは、ヒトＩｇＧＦ_ｃドメインであり、好ましくはヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４、好ましくはＩｇＧ１またはＩｇＧ２、より好ましくはＩｇＧ１由来のものである。

【0105】

いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質が２つのＦｃドメイン、すなわち実施例で使用されたＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディフォーマット（ＴＣＥＲ（登録商標）フォーマット）（Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２）を含む場合、２つのＦ_ｃドメインは同じ免疫グロブリンイソタイプまたはイソタイプサブクラスのものである。したがって、いくつかの実施形態では、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２はどちらも、ＩｇＧ１サブクラス、またはＩｇＧ２サブクラス、またはＩｇＧ３サブクラス、またはＩｇＧ４サブクラスのものである。

【0106】

好ましい実施形態では、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２はどちらも、ＩｇＧ１サブクラス、またはＩｇＧ２サブクラス、より好ましくはＩｇＧ１サブクラスのものである。

【0107】

いくつかの実施形態では、Ｆ_ｃ領域は、本明細書で上記に定義されるようなＲＦおよび／または「ノブ・インツー・ホール」変異をさらに含んでなる。

【0108】

「ＲＦ変異」とは、一般に、Ｆ_ｃドメインのＣ_Ｈ３ドメインにおけるアミノ酸ＨＹのＲＦへの変異を指し、例えば、Ｊｅｎｄｅｂｅｒｇ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．，（１９９７，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈ．，２０１：２５－３４）が記載するＣ_Ｈ３ドメインにおける変異Ｈ４３５ＲおよびＹ４３６Ｆなどがあり、プロテインＡとの結合がなくなるため精製の目的で有利になると記載されている。抗原結合タンパク質が２つのＦ_ｃドメインを含んでなる場合、ＲＦ変異は片方または双方の、好ましくは片方のＦ_ｃドメインにあってもよい。

【0109】

「ノブ・インツー・ホール」または「ノブ・インツー・ホール」技術とは、どちらもＣ_Ｈ３－Ｃ_Ｈ３インターフェースにあってヘテロ多量体形成を促進する、変異Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖ（ホール）とＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗ（ノブ）を指し、特に、参照により本明細書に援用される、米国特許第５７３１１６８号明細書および米国特許第８２１６８０５号明細書に記載されている。これらの「ノブ・インツー・ホール」変異は、追加的なシステインアミノ酸置換であるＹ３４９ＣおよびＳ３５４Ｃの導入によってさらに安定化され得る。

【0110】

本発明の文脈において「ノブ」変異は、例えば、配列番号６６のＦ_ｃアミノ酸配列中に存在し、「ホール」変異は、例えば、配列番号６８のＦ_ｃアミノ酸配列中に存在する。

【0111】

いくつかの実施形態では、例えば、Ｆ_ｃ１などのポリペプチドの１つのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｔ３６６Ｗ（ノブ）を含んでなり、例えば、Ｆ_ｃ２などのその他のポリペプチドのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖ（ホール）を含んでなり、逆もまた同様である。

【0112】

いくつかの実施形態では、例えば、Ｆ_ｃ１などのポリペプチドの１つのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｓ３５４Ｃを含んでなるかまたはさらに含んでなり、例えば、Ｆ_ｃ２などのその他のポリペプチドのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｙ３４９Ｃ含んでなるかまたはさらに含んでなり、逆もまた同様である。

【0113】

したがって、いくつかの実施形態では、例えば、Ｆ_ｃ１などのポリペプチドの１つのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｓ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗ（ノブ）を含んでなり、例えば、Ｆ_ｃ２などのその他のポリペプチドのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｙ３４９Ｃ、Ｔ３４９Ｓ、Ｌ３６８Ａ、およびＹ４０７Ｖ（ホール）を含んでなり、逆もまた同様である。

【0114】

この一連のアミノ酸置換は、Ｗｅｉ ｅｔ ａｌ．（Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｂａｓｉｓ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒｉｃ Ｆ_ｃ ｆｏｒ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ，Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ．２０１７）によって記載されたように、一方のポリペプチドにアミノ酸置換Ｋ４０９Ａを含め、もう一方のポリペプチドにＦ４０５Ｋを含めることによって、さらに拡張され得る。したがって、いくつかの実施形態では、例えば、Ｆ_ｃ１などのポリペプチドの１つのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｋ４０９Ａを含んでなるかまたはさらに含んでなり、例えば、Ｆ_ｃ２などのその他のポリペプチドのＦ_ｃドメインは、そのＣ_Ｈ３ドメイン中にアミノ酸置換Ｆ４０５Ｋを含んでなるかまたはさらに含んでなり、逆もまた同様である。

【0115】

場合によっては、人為的に導入されたシステイン架橋は、最適には抗原結合タンパク質の結合特性を妨げることなく、抗原結合タンパク質の安定性を改善してもよい。このようなシステイン架橋は、ヘテロ二量体化をさらに改善し得る。

【0116】

得られたタンパク質のヘテロ二量体化を改善するための、荷電対置換などのさらなるアミノ酸置換が、例えば、欧州特許第２９７０４８４号明細書など、当該技術分野で記載されている。

【0117】

したがって、一実施形態では、ポリペプチドの１つのＦ_ｃドメイン、例えば、Ｆ_ｃ１は、電荷対置換Ｅ３５６Ｋ、Ｅ３５６Ｒ、Ｄ３５６Ｒ、またはＤ３５６ＫおよびＤ３９９ＫまたはＤ３９９Ｒを含んでなるかまたはさらに含んでなり、その他のポリペプチドのＦ_ｃドメイン、例えばＦ_ｃ２は、電荷対置換Ｒ４０９Ｄ、Ｒ４０９Ｅ、Ｋ４０９Ｅ、またはＫ４０９ＤおよびＮ３９２Ｄ、Ｎ３９２Ｅ、Ｋ３９２Ｅ、またはＫ３９２Ｄを含んでなるかまたはさらに含んでなり、または逆もまた同様である。

【0118】

さらなる実施形態では、片方または双方、好ましくは双方のポリペプチド鎖上のＦ_ｃドメインは、Ｆ_ｃγ受容体（Ｆ_ｃｙＲ）結合を阻害する１つまたは複数の改変を含んでなり得る。このような改変としては、Ｌ２３４Ａ、Ｌ２３５Ａが挙げられ得る。

【0119】

ヒンジ、Ｈ２、およびＣ_Ｈ３ドメインからなるＦ_ｃ部分、またはその一部を抗原結合タンパク質に、より具体的には二重特異性抗原結合タンパク質に含めることにより、Ｆ_ｃ：Ｆ_ｃ－γ受容体（Ｆ_ｃｇＲ）相互作用によって誘発される、これらの分子の非特異的固定化という問題が発生した。Ｆ_ｃｇＲは、ＩｇＧ分子のＦ_ｃ部分によって提示されるエピトープに異なる親和性で結合する、異なる細胞表面分子（Ｆ_ｃｇＲＩ、Ｆ_ｃｇＲＩＩａ、Ｆ_ｃｇＲＩＩｂ、Ｆ_ｃｇＲＩＩＩ）から構成されている。このような非特異的（すなわち二重特異性分子の２つの結合ドメインのどちらによっても誘導されない）固定化は、ｉ）分子の薬物動態への影響、およびｉｉ）免疫エフェクター細胞のオフターゲット活性化の理由から好ましくなく、Ｆ_ｃｇＲ結合を除去するための様々なＦ_ｃ変異型および変異が同定されている。この文脈において、Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．１９９５，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｔｈｅ Ｎ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｅｎｄ ｏｆ ｔｈｅ Ｃ_Ｈ２ ｄｏｍａｉｎ ｏｆ ｃｈｉｍｅｒｉｃ ｈｕｍａｎ ＩｇＧ１ ａｎｔｉ－ＨＬＡ－ＤＲ ｉｓ ｎｅｃｅｓｓａｒｙ ｆｏｒ Ｃ１ｑ，Ｆ_ｃｙＲＩ ａｎｄ Ｆ_ｃｙＲＩＩＩ ｂｉｎｄｉｎｇ）は、ヒトＩｇＧ１の残基２３３～２３６のヒトＩｇＧ２に由来する対応する配列、すなわち残基２３３Ｐ、２３４Ｖ、および２３５Ａとの交換を開示しており、ここで、２３６位にアミノ酸が存在しないため、Ｆ_ｃｇＲＩ結合が消失し、Ｃ１ｑ結合が消失し、Ｆ_ｃｇＲＩＩＩ結合が減少している。欧州特許第１０７５４９６号明細書は、Ｆ_ｃ領域に変動がある抗体およびその他のＦ_ｃ含有分子（２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３５Ａ、２３６位にＧがない、３２７Ｇ、３３０Ｓ、および３３１Ｓの１つまたは複数）を開示しており、ここで、組換え抗体は、有意な補体依存性溶解、または標的の細胞媒介性破壊を誘発することなく、標的分子に結合できる。

【0120】

したがって、いくつかの実施形態では、Ｆ_ｃ領域は、２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３５Ａ、２３６（残基なし）またはＧと；３２７Ｇ、３３０Ｓ、３３１Ｓからなる群から選択されるアミノ酸の１つまたは複数または欠失とを含んでなるかまたはさらに含んでなり、好ましくは、Ｆ_ｃ領域は、アミノ酸２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３５Ａ、２３６（残基なし）またはＧと、３２７Ｇ、３３０Ｓ、３３１Ｓからなる群から選択される１つまたは複数のアミノ酸とを含んでなるかまたはさらに含んでなり、最も好ましくは、Ｆ_ｃ領域は、アミノ酸２３３Ｐ、２３４Ｖ、２３５Ａ、２３６（残基なし）および３３１Ｓを含んでなるかまたはさらに含んでなる。

【0121】

さらなる一実施形態では、Ｆ_ｃドメインは、アミノ酸置換Ｎ２９７Ｑ、Ｎ２９７ＧまたはＮ２９７Ａ、好ましくはＮ２９７Ｑを含んでなるかまたはさらに含んでなる。

【0122】

アミノ酸置換「Ｎ２９７Ｑ」、「Ｎ２９７Ｇ」、または「Ｎ２９７Ａ」は、Ｆ_ｃドメイン内の天然Ｎグリコシル化部位を無効化する２９７位でのアミノ酸置換を指す。このアミノ酸置換は、Ｆ_ｃ－γ－受容体相互作用をさらに防ぎ、例えば、Ｔａｏ，ＭＨ ａｎｄ Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，ＳＬ（Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９８９ Ｏｃｔ １５；１４３（８）：２５９５－６０１）に記載されているような糖残基に起因する、最終タンパク質産物、すなわち本発明の抗原結合タンパク質の変動性を減少させる。

【0123】

さらなる一実施形態では、特に軽鎖がない場合、Ｆ_ｃドメインは、アミノ酸置換Ｓ２２０Ｃを含んでなるかまたはさらに含んでなる。アミノ酸置換「Ｓ２２０Ｃ」は、Ｃ_Ｈ１ＣＬジスルフィド架橋を形成するシステインを欠失させる。

【0124】

いくつかの実施形態では、Ｆ_ｃドメインは、例えば、Ｓ３５４ＣとＹ３４９ＣまたはＬ２４２ＣとＫ３３４Ｃなどの少なくとも２つの追加的なシステイン残基を含んでなるかまたはさらに含んでなり、ここで、Ｓ３５４Ｃは、Ｆ_ｃ１などの１つのポリペプチドのＦ_ｃドメイン中にあり、Ｙ３４９Ｃは、Ｆ_ｃ２などのその他のポリペプチドのＦ_ｃドメイン中にあって、ヘテロ二量体を形成し、および／またはここで、Ｌ２４２ＣおよびＫ３３４Ｃは、ポリペプチドの片方または双方のＦ_ｃ１またはＦ_ｃ２のどちらかの同じＦ_ｃドメインに位置して、ドメイン内Ｃ－Ｃ橋を形成する。

【0125】

「精製された」および「単離された」とは、ポリペプチド（すなわち本発明の抗体）またはヌクレオチド配列を指す場合、示された分子が、同じタイプのその他の生物学的巨大分子の実質的な不在下で、存在することを意味する。「精製された」という用語は、本明細書の用法では、特に、同じタイプの生物学的巨大分子の少なくとも７５重量％、８５重量％、９５重量％、または９８重量％が存在することを意味する。

【0126】

特定のポリペプチドをコード化する「単離された」核酸分子は、対象ポリペプチドをコード化しないその他の核酸分子を実質的に含まない核酸分子を指す；しかしながら、分子は、組成物の基本的特性に悪影響を及ぼさないいくつかの追加的な塩基または部分を含んでもよい。

【0127】

「ドメイン」は、タンパク質の任意の領域であってもよく、一般に配列相同性に基づいて定義され、しばしば特定の構造的または機能的実体に関連している。

【0128】

「組換え」分子は、組換え手段によって調製、発現、生成、または単離された分子である。

【0129】

「遺伝子」という用語は、１つまたは複数のタンパク質または酵素の全部または一部を含んでなるアミノ酸の特定の配列をコードするか、またはそれに対応するＤＮＡ配列を意味し、例えば、遺伝子が発現される条件を判定するプロモーター配列などの調節ＤＮＡ配列を含んでも含まなくてもよい。構造遺伝子ではないいくつかの遺伝子は、ＤＮＡからＲＮＡに転写されてもよいが、アミノ酸配列には翻訳されない。その他の遺伝子は、構造遺伝子の調節因子またはＤＮＡ転写の調節因子として機能してもよい。特に、遺伝子という用語は、タンパク質をコード化するゲノム配列、すなわち調節因子、プロモーター、イントロン、およびエクソン配列を含んでなる配列を意図してもよい。

【0130】

「ＥＣ_５０」とも称される「最大半量有効濃度」は、通常、指定された曝露時間後に、ベースラインと最大値の中間の応答を誘発する分子の濃度を指す。ＥＣ_５０と親和性は反比例の関係にあり、ＥＣ_５０値が低いほど、分子の親和性がより高くなる。一例として、「ＥＣ_５０」は、指定された曝露時間後に、ベースラインと最大値の中間の反応を誘発する本発明の抗原結合タンパク質の濃度を指し、より具体的には、指定された曝露時間後に、ベースラインと最大値の中間の反応を誘導する本発明の抗原結合タンパク質の濃度を指す。ＥＣ_５０値は、例えば、ＩＦＮ－γ放出アッセイまたはＬＤＨ放出アッセイなど、様々な既知の方法で実験的に評価され得る。

【0131】

抗原結合タンパク質
参照により本明細書に援用される国際公開第２０１８／１７２５３３号パンフレットで開示されているＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０を出発点として使用して、本発明者らは、一本鎖（ｓｃＴＣＲ）フォーマットである；より正確には、任意選択的に、Ｆａｂ断片に結合した一本鎖二重特異性ＴＣＲ、またはＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディフォーマットのどちらかである、ＴＣＲ可変α（Ｖ_α）および可変β（Ｖ_β）ドメイン変異型を設計、製造、試験した。このようにして、発明者らは、本発明の抗原結合タンパク質が標的、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに、高親和性かつ高特異性で結合することに関連する、可変αおよびβドメインの異なる変異型、より具体的には、可変αドメインの２つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１（１つの変異型を有する）およびＣＤＲａ３（２７の変異型を有する）の異なる変異型と、可変βドメインの２つの相補性決定領域（ＣＤＲ）の異なる変異型およびＣＤＲｂ１（２つの変異型を有する）とＣＤＲｂ３（１～１４の変異型を有する）とを同定した。本発明者らは、実施例において、ＣＤＲが、二重特異性抗体だけでなく、一本鎖ＴＣＲコンストラクトでも使用されてもよいことを実証し、したがって、同定されたＣＤＲ変異型が、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに対する、高い親和性だけでなく高い特異性も有する異なる抗原結合タンパク質を製造するのに使用されてもよいことを原理証明の形で実証した。さらに、本発明者らは、ＣＤＲａ２のアミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）をアミノ酸配列ＩＹＸ_２Ｘ_３ＧＤ（配列番号２）（ここで、Ｘ_２は、任意のアミノ酸、好ましくはＳまたはＱ、より好ましくはＱであり、Ｘ_３は、任意のアミノ酸、好ましくはＴ、Ｅ、ＤまたはＡ、より好ましくはＥである）に変異させることによって、本発明の抗原結合タンパク質のストレス安定性が改善されることを発見した。

【0132】

実施例において、本発明者らは、例えば、ヒトＴＣＲ－ＣＤ３複合体に、およびＭＨＣクラスＩ分子、例えばＨＬＡ－Ａ２^＊０１に結合したＰＲＡＭＥペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなる、ペプチド：ＭＨＣ複合体に、特異的に結合する、Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディを設計した。ＴＣＲ－ＣＤ３複合体を標的化するために、Ｚｈｕ ｅｔ ａｌ．，（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅａｖｙ ｃｈａｉｎ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ｉｎ ａ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉ－ＣＤ３ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆｏｒ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ａｎｔｉｇｅｎ ｂｉｎｄｉｎｇ ａｎｄ Ｔ ｃｅｌｌ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９５，１５５，１９０３－１９１０）によって記載された、ＣＤ３特異的ヒト化抗体ｈＵＣＨＴ１（Ｖ９）に由来するＶＨおよびＶＬドメインが、これらの実施例で使用され、あるいは、Ｓｈｅａｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．（Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ，ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎｉｚｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｄｉｒｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ａｌｐｈａ／ｂｅｔａ Ｔ ｃｅｌｌ ｒｅｃｅｐｔｏｒ（Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ，１９９１，１４７，４３６６－７３）に記載された、α／βＴＣＲ－特異的抗体ＢＭＡ０３１に由来するＶ_ＨおよびＶ_Ｌドメインおよびそれらのヒト化バージョンが使用されてもよい。ＰＲＡＭＥ－００４：ＭＨＣ複合体を標的化するために、本明細書で開示されているＣＤＲを含んでなるＶ_αおよびＶ_βドメインを用いて、抗原結合タンパク質の安定性および親和性成熟がもたらされてもよい。同じＶ_ＬおよびＶ_Ｈ、Ｖ_αおよびＶ_βドメインが、Ｆａｂドメイン（Ｃ_Ｈ１－ヒンジおよびＣ_Ｌを含んでなる）をさらに含んでなるヒト一本鎖ＴＣＲでさらに使用された。これらの参考文献は、その内容全体が参照により本明細書に援用される。

【0133】

したがって、一実施形態では、本発明は、ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する抗原結合タンパク質に言及し、このＰＲＡＭＥペプチドは、配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなり、ＭＨＣタンパク質との複合体中にあり、抗原結合タンパク質は、以下を含んでなる：
（ａ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、
ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＸ_１（配列番号１）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１は、任意のアミノ酸、好ましくはＬであり；
ＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＸ_２Ｘ_３ＧＤ（配列番号２）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_２は、任意のアミノ酸、好ましくはＳまたはＱ、より好ましくはＱであり、Ｘ_３は、任意のアミノ酸、好ましくはＴ、Ｅ、ＤまたはＡ、より好ましくはＥであるが、ただしＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）を含まずまたはそれから構成されず、
ＣＤＲａ３は、アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＸ_４ＮＸ_５Ｘ_６ＧＧＸ_７ＬＴＦ（配列番号３）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_４～Ｘ_７は、任意のアミノ酸であり、
好ましくは、Ｘ_４は、Ｓ、Ｎ、Ｄ、Ｐ、Ｔ、またはＥ、より好ましくはＰであり；Ｘ_５は、Ｌ、Ｉ、Ｖ、Ｑ、Ｎ、Ｐ、Ｓ、Ａ、Ｇ、Ｔ、Ｄ、Ｋ、Ｒ、Ｆ、より好ましくはＶであり；Ｘ_６は、Ｅ、Ａ、Ｖ、Ｒ、Ｎ、Ｇ、Ｙ、Ｉ、Ｄ、Ｈ、Ｌ、Ｐ、Ｓ、Ｑ、より好ましくはＶであり；Ｘ_７は、Ｓ、Ｉ、Ｑ、Ａ、Ｒ、Ｌ、Ｐ、Ｙ、Ｋ、Ｍ、より好ましくはＱである）；
および
（ｂ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３を含んでなる第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、
ＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列Ｘ_８ＧＨＲＸ_９（配列番号４）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_８は、任意のアミノ酸、好ましくはＳまたはＰ、より好ましくはＰであり、Ｘ_９は、任意のアミノ酸、好ましくはＳまたはＡ、より好ましくはＡであり；
ＣＤＲｂ２は、アミノ酸配列ＹＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４（配列番号５）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１０～Ｘ_１４は、任意のアミノ酸、好ましくはＸ_１０は、Ｖ、Ｉ、ＦまたはＥ、より好ましくはＩまたはＶ、より好ましくはＶであり；Ｘ_１１は、Ｈ、Ｄ、またはＳ、より好ましくはＤまたはＨ、より好ましくはＨであり；Ｘ_１２は、Ｇ、ＲまたはＥ、より好ましくはＧであり；Ｘ_１３は、Ｑ、Ｒ、Ａ、Ｆ、Ｖ、Ｑ、Ｅ、Ｌ、ＹまたはＴ、より好ましくはＥまたはＡ、より好ましくはＥであり；Ｘ_１４は、Ｅ、ＡまたはＱ、より好ましくはＥまたはＱ、より好ましくはＥであり、ＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ（配列番号６）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１５は、任意のアミノ酸、好ましくはＶである）。

【0134】

当業者であれば理解できるように、本明細書で定義されるＣＤＲアミノ酸配列を含んでなる第１の可変ドメインは、本明細書で定義されるＣＤＲアミノ酸配列を含んでなる第２の可変ドメインと一緒に抗原結合部位を形成し、ここで、前記抗原結合部位は、ＭＨＣタンパク質と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥペプチドに結合する。

【0135】

３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３は、ＴＣＲの可変αメインに由来し、したがって、当業者であれば理解できるように、いくつかの実施形態では、第１の可変ドメインはまた、可変αドメインと称されることもある。同様に、３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３は、前記ＴＣＲの可変βドメインに由来し、したがって、当業者によって理解されるように、第２の可変ドメインもまた、可変βドメインと称されることもある。より具体的には、配列（ＦＲ１－ａ）－（ＣＤＲａ１）－（ＦＲ２－ａ）－（ＣＤＲａ２）－（ＦＲ３－ａ）－（ＣＤＲａ３）－（ＦＲ４－ａ）などの本発明の文脈で定義されるα可変フレームワークアミノ酸配列とα可変ＣＤＲとを含んでなる第１の可変ドメインは、可変αドメインおよび／またはと称されるかもしれず、および／または配列（ＦＲ１－ｂ）－（ＣＤＲｂ１）－（ＦＲ２－ｂ）－（ＣＤＲｂ２）－（ＦＲ３－ｂ）－（ＣＤＲｂ３）－（ＦＲ４－ｂ）などの本発明の文脈で定義されるβ可変フレームワークアミノ酸配列とβ可変ＣＤＲとを含んでなる第２の可変ドメインは、可変βドメインと称されるかもしれない。

【0136】

いくつかの実施形態では、ＣＤＲは、抗体フレームワーク配列に移植されてもよい。したがって、一例では、α可変ドメインＣＤＲは、軽鎖可変ドメインに移植されるかもしれず、したがって、第１の可変ドメインは、配列（ＦＲ１－Ｌ）－（ＣＤＲａ１）－（ＦＲ２－Ｌ）－（ＣＤＲａ２）－（ＦＲ３－Ｌ）－（ＣＤＲａ３）－（ＦＲ４－Ｌ）を含んでなるかまたはそれからなり、軽鎖可変ドメインと称されるかもしれない。同じ例では、β可変ドメインＣＤＲは重鎖可変ドメインに移植されるかもしれず、したがって、第２の可変ドメインは配列（ＦＲ１－Ｈ）－（ＣＤＲｂ１）－（ＦＲ２－Ｈ）－（ＣＤＲｂ２）－（ＦＲ３－Ｈ）－（ＣＤＲｂ３）－（ＦＲ４－Ｈ）を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインと称されるかもしれない。

【0137】

一実施形態では、ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＸ_１（配列番号１）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１は、Ｓ以外の任意のアミノ酸であり、および／または
ＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列Ｘ_８ＧＨＲＸ_９（配列番号４）を含んでなるかまたはそれからなるが、ただしＸ_８およびＸ_９は、どちらもＳでなく、および／または
ＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ（配列番号６）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１５は、Ｅ以外の任意のアミノ酸である。

【0138】

一実施形態では、ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＸ_１（配列番号１）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１は、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｑ、Ｅ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｔ、Ｗ、ＹまたはＶ、好ましくはＬからなる群から選択される任意のアミノ酸であり、
および／またはＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列Ｘ_８ＧＨＲＸ_９（配列番号４）を含んでなるかまたはそれからなるが、ただしＸ_８およびＸ_９は、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｑ、Ｇ、Ｅ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｔ、Ｗ、ＹまたはＶからなる群から選択される同じかまたは異なる任意のアミノ酸であり、
および／またはＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ（配列番号６）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１５は、Ａ、Ｒ、Ｎ、Ｄ、Ｃ、Ｑ、Ｇ、Ｈ、Ｉ、Ｌ、Ｋ、Ｍ、Ｆ、Ｐ、Ｓ、Ｔ、Ｗ、ＹまたはＶからなる群から選択される任意のアミノ酸である。

【0139】

本発明の文脈において、本発明の抗原結合タンパク質のＣＤＲは、国際公開第２０１８／１７２５３３号パンフレットに開示されているように、少なくとも前記親ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲａ３のアミノ酸配列において、親ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲとは異なる。当業者であれば理解できるように、本明細書で上に定義されるＣＤＲａ３は、親ＴＣＲ Ｒ１０Ｐ１Ｄ１０のＣＤＲａ３であるアミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＳＮＦＧＮＥＫＬＴＦ」（配列番号１０）を含まずまたはそれから構成されない。

【0140】

さらに、いくつかの実施形態では、ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＳ（配列番号１１）を含まずまたはそれから構成されず、および／またはＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列ＳＧＨＲＳ（配列番号１２）を含まずまたはそれから構成されず、および／またはＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＥＱＹＦ（配列番号１３）を含まずまたはそれから構成されない。

【0141】

一実施形態では、前記第２の可変ドメインは、アミノ酸配列ＹＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４（配列番号５）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ２を含んでなるが、ただしＣＤＲｂ２は、アミノ酸配列「ＹＦＳＥＴＱ」（配列番号１４）を含まずまたはそれから構成されない。

【0142】

さらなる実施形態では、前記第２の可変ドメインは、アミノ酸配列ＹＶＨＧＸ_１６Ｅ（配列番号１５）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ２をさらに含んでなり、ここで、Ｘ_１６は、任意のアミノ酸であり、好ましくはＸ_１６は、Ｑ、Ｒ、Ａ、Ｆ、Ｖ、Ｑ、Ｅ、Ｌ、ＹまたはＴ、好ましくはＥである。

【0143】

一実施形態では、本明細書で定義される第１の可変ドメインおよび第２の可変ドメインじは、ＩＭＧＴ番号付けによる４４位のアミノ酸置換を含んでなってもよい。好ましい実施形態では、対合を改善するために、４４位の前記アミノ酸が別の適切なアミノ酸で置換される。好ましくは前記抗原結合タンパク質がＴＣＲである特定の実施形態では、前記変異は、例えば鎖の対合（すなわちαとβ鎖の対合またはγとδの対合）を改善する。一実施形態では、第１の可変ドメイン（ｖ_１４４）中の４４位に存在するアミノ酸の片方または双方、および第２の可変ドメイン（ｖ_２４４）中の４４位に存在するアミノ酸は、ｖ_１４４Ｄ／ｖ_２４４Ｒ、ｖ_１４４Ｒ／ｖ_２４４Ｄ、ｖ_１４４Ｅ／ｖ_２４４Ｋ、ｖ_１４４Ｋ／ｖ_２４４Ｅ、ｖ_１４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ、ｖ_１４４Ｋ／ｖ_２４４Ｄ、ｖ_１４４Ｒ／ｖ_２４４Ｅ；ｖ_１４４Ｅ／ｖ_２４４Ｒ、ｖ_１４４Ｌ／ｖ_２４４Ｗ、ｖ_１４４Ｗ／ｖ_２４４Ｌ、ｖ_１４４Ｖ／ｖ_２４４Ｗ、ｖ_１４４Ｗ／ｖ_２４４Ｖからなるアミノ酸対の群から選択されるアミノ酸対ｖ_１４４／ｖ_２４４に置換される。

【0144】

したがって、さらなる実施形態では、抗原結合タンパク質は、ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｌ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；ｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｌ；ｖ_１Ｑ４４Ｖ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；およびｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｖ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｌ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；ｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｌ；ｖ_１Ｗ４４Ｖ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；およびｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｖ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｌ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；ｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｌ；ｖ_１Ｈ４４Ｖ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；およびｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｖ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｌ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；ｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｌ；ｖ_１Ｋ４４Ｖ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；およびｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｖ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２Ｑ４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４／ｖ_２Ｑ４４Ｒ；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｌ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；ｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｌ；ｖ_１Ｅ４４Ｖ／ｖ_２Ｑ４４Ｗ；およびｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｖ；ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｌ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；ｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｌ；ｖ_１Ｑ４４Ｖ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；およびｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｖ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｌ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；ｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｒ４４Ｌ；ｖ_１Ｗ４４Ｖ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；およびｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｒ４４Ｖ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｌ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；ｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｌ；ｖ_１Ｈ４４Ｖ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；およびｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｖ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｌ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；ｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｌ；ｖ_１Ｋ４４Ｖ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；およびｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｖ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２Ｒ４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｒ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｒ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｌ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；ｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｌ；ｖ_１Ｅ４４Ｖ／ｖ_２Ｒ４４Ｗ；およびｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｒ４４Ｖ；ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｑ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｑ４４Ｅ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｑ４４Ｌ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；ｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｌ；ｖ_１Ｑ４４Ｖ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；およびｖ_１Ｑ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｖ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｗ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｗ４４Ｅ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｗ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｗ４４Ｌ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；ｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｋ４４Ｌ；ｖ_１Ｗ４４Ｖ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；およびｖ_１Ｗ４４／ｖ_２Ｋ４４Ｖ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｈ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｈ４４Ｅ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｈ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｈ４４Ｌ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；ｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｌ；ｖ_１Ｈ４４Ｖ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；およびｖ_１Ｈ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｖ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｋ４４／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｋ４４Ｅ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｋ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｋ４４Ｌ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；ｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｌ；ｖ_１Ｋ４４Ｖ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；およびｖ_１Ｋ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｖ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｄ／ｖ_２４４Ｋ；ｖ_１Ｅ４４Ｋ／ｖ_２Ｋ４４Ｄ；ｖ_１Ｅ４４／ｖ_２Ｋ４４Ｒ；ｖ_１Ｅ４４Ｒ／ｖ_２Ｋ４４Ｅ；ｖ_１Ｅ４４Ｌ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；ｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｋ４４Ｌ；ｖ_１Ｅ４４Ｖ／ｖ_２Ｋ４４Ｗ；およびｖ_１Ｅ４４Ｗ／ｖ_２Ｑ４４Ｖからなる群から選択される、好ましい置換対（ｖ_１４４／ｖ_２４４）の１つをさらに含んでもよい。

【0145】

上記において、例えば、「ｖ_１Ｑ４４Ｒ／ｖ_２Ｑ４４Ｄ」とは、第１の可変ドメインではＱ４４がＲで置換され、第２の可変ドメインではＱ４４がＤで置換されていることを意味するものとする。追加的な置換および説明は、米国特許出願第２０１８－０１６２９２２号明細書に記載される。

【0146】

好ましい実施形態では、可変ドメインの４４位に存在するアミノ酸は、Ｑ、Ｒ、Ｄ、Ｅ、Ｋ、Ｌ、Ｗ、およびＶからなる群から選択される１つのアミノ酸によって置換される。

【0147】

したがって、さらなるましい実施形態では、抗原結合タンパク質は、以下のリストから選択される好ましい置換対のうちの１つをさらに含んでもよい：αＱ４４Ｄ／βＱ４４Ｒ；αＱ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ；αＱ４４Ｅ／βＱ４４Ｋ；αＱ４４Ｋ／βＱ４４Ｅ；αＱ４４Ｄ／βＱ４４Ｋ；αＱ４４Ｋ／βＱ４４Ｄ；αＱ４４Ｅ／βＱ４４Ｒ；αＱ４４Ｒ／βＱ４４Ｅ；αＱ４４Ｌ／βＱ４４Ｗ；αＱ４４Ｗ／βＱ４４Ｌ；αＱ４４Ｖ／βＱ４４Ｗ；およびαＱ４４Ｗ／βＱ４４Ｖ；αＷ４４Ｄ／βＱ４４Ｒ；αＷ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ；αＷ４４Ｅ／βＱ４４Ｋ；αＷ４４Ｋ／βＱ４４Ｅ；αＷ４４Ｄ／βＱ４４Ｋ；αＷ４４Ｋ／βＱ４４Ｄ；αＷ４４Ｅ／βＱ４４Ｒ；αＷ４４Ｒ／βＱ４４Ｅ；αＷ４４Ｌ／βＱ４４Ｗ；αＷ４４／βＱ４４Ｌ；αＷ４４Ｖ／βＱ４４Ｗ；およびαＷ４４／βＱ４４Ｖ；αＨ４４Ｄ／βＱ４４Ｒ；αＨ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ；αＨ４４Ｅ／βＱ４４Ｋ；αＨ４４Ｋ／βＱ４４Ｅ；αＨ４４Ｄ／βＱ４４Ｋ；αＨ４４Ｋ／βＱ４４Ｄ；αＨ４４Ｅ／βＱ４４Ｒ；αＨ４４Ｒ／βＱ４４Ｅ；αＨ４４Ｌ／βＱ４４Ｗ；αＨ４４Ｗ／βＱ４４Ｌ；αＨ４４Ｖ／βＱ４４Ｗ；およびαＨ４４Ｗ／βＱ４４Ｖ；αＫ４４Ｄ／βＱ４４Ｒ；αＫ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ；αＫ４４Ｅ／βＱ４４Ｋ；αＫ４４／βＱ４４Ｅ；αＫ４４Ｄ／βＱ４４Ｋ；αＫ４４／βＱ４４Ｄ；αＫ４４Ｅ／βＱ４４Ｒ；αＫ４４Ｒ／βＱ４４Ｅ；αＫ４４Ｌ／βＱ４４Ｗ；αＫ４４Ｗ／βＱ４４Ｌ；αＫ４４Ｖ／βＱ４４Ｗ；およびαＫ４４Ｗ／βＱ４４Ｖ；αＥ４４Ｄ／βＱ４４Ｒ；αＥ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ；αＥ４４／βＱ４４Ｋ；αＥ４４Ｋ／βＱ４４Ｅ；αＥ４４Ｄ／βＱ４４Ｋ；αＥ４４Ｋ／βＱ４４Ｄ；αＥ４４／βＱ４４Ｒ；αＥ４４Ｒ／βＱ４４Ｅ；αＥ４４Ｌ／βＱ４４Ｗ；αＥ４４Ｗ／βＱ４４Ｌ；αＥ４４Ｖ／βＱ４４Ｗ；およびαＥ４４Ｗ／βＱ４４Ｖ；αＱ４４Ｄ／βＲ４４；αＱ４４Ｒ／βＲ４４Ｄ；αＱ４４Ｅ／βＲ４４Ｋ；αＱ４４Ｋ／βＲ４４Ｅ；αＱ４４Ｄ／βＲ４４Ｋ；αＱ４４Ｋ／βＲ４４Ｄ；αＱ４４Ｅ／βＲ４４；αＱ４４Ｒ／βＲ４４Ｅ；αＱ４４Ｌ／βＲ４４Ｗ；αＱ４４Ｗ／βＲ４４Ｌ；αＱ４４Ｖ／βＲ４４Ｗ；およびαＱ４４Ｗ／βＲ４４Ｖ；αＷ４４Ｄ／βＲ４４；αＷ４４Ｒ／βＲ４４Ｄ；αＷ４４Ｅ／βＲ４４Ｋ；αＷ４４Ｋ／βＲ４４Ｅ；αＷ４４Ｄ／βＲ４４Ｋ；αＷ４４Ｋ／βＲ４４Ｄ；αＷ４４Ｅ／βＲ４４；αＷ４４Ｒ／βＲ４４Ｅ；αＷ４４Ｌ／βＲ４４Ｗ；αＷ４４／βＲ４４Ｌ；αＷ４４Ｖ／βＲ４４Ｗ；およびαＷ４４／βＲ４４Ｖ；αＨ４４Ｄ／βＲ４４；αＨ４４Ｒ／βＲ４４Ｄ；αＨ４４Ｅ／βＲ４４Ｋ；αＨ４４Ｋ／βＲ４４Ｅ；αＨ４４Ｄ／βＲ４４Ｋ；αＨ４４Ｋ／βＲ４４Ｄ；αＨ４４Ｅ／βＲ４４；αＨ４４Ｒ／βＲ４４Ｅ；αＨ４４Ｌ／βＲ４４Ｗ；αＨ４４Ｗ／βＲ４４Ｌ；αＨ４４Ｖ／βＲ４４Ｗ；およびαＨ４４Ｗ／βＲ４４Ｖ；αＫ４４Ｄ／βＲ４４；αＫ４４Ｒ／βＲ４４Ｄ；αＫ４４Ｅ／βＲ４４Ｋ；αＫ４４／βＲ４４Ｅ；αＫ４４Ｄ／βＲ４４Ｋ；αＫ４４／βＲ４４Ｄ；αＫ４４Ｅ／βＲ４４；αＫ４４Ｒ／βＲ４４Ｅ；αＫ４４Ｌ／βＲ４４Ｗ；αＫ４４Ｗ／βＲ４４Ｌ；αＫ４４Ｖ／βＲ４４Ｗ；およびαＫ４４Ｗ／βＲ４４Ｖ；αＥ４４Ｄ／βＲ４４；αＥ４４Ｒ／βＲ４４Ｄ；αＥ４４／βＲ４４Ｋ；αＥ４４Ｋ／βＲ４４Ｅ；αＥ４４Ｄ／βＲ４４Ｋ；αＥ４４Ｋ／βＲ４４Ｄ；αＥ４４Ｒ／βＲ４４Ｅ；αＥ４４Ｌ／βＲ４４Ｗ；αＥ４４Ｗ／βＲ４４Ｌ；αＥ４４Ｖ／βＲ４４Ｗ；およびαＥ４４Ｗ／βＲ４４Ｖ。

【0148】

上記において、例えば、「αＱ４４Ｒ／βＱ４４Ｄ」は、例えば、第１の可変ドメイン中でＱ４４がＲによって置換され、第２の可変ドメイン中でＱ４４がＤによって置換されることを意味するものとする。追加的な置換および説明は、その内容全体が参照により本明細書に援用される、米国特許出願第２０１８－０１６２９２２号明細書に記載される。

【0149】

一実施形態では、前記抗原結合タンパク質は、ＭＨＣタンパク質、特に、ＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、ＨＬＡ－ＣなどのＭＨＣクラスＩＨＬＡタンパク質、より好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２タンパク質との複合体中の配列番号８のアミノ酸配列を含んでなる、ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する。

【0150】

ＭＨＣタンパク質、特にＭＨＣクラスＩおよびＨＬＡ－Ａ^＊０２タンパク質は、本明細書で上に「定義」の項で定義される。

【0151】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質の第１の可変ドメインは、以下を含んでなる：
アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＳ（配列番号１１）およびＤＲＧＳＱＬ（配列番号１６）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ１および／または
アミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）およびＩＹＱＥＧＤ（配列番号１７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ２および／または
アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＮＮＰＳＧＧＭＬＴＦ（配列番号１８）、ＣＡＡＶＩＤＮＳＮＧＧＩＬＴＦ（配列番号１９）、ＣＡＡＶＩＤＮＰＳＧＧＩＬＴＦ（配列番号２０）、ＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦ（配列番号２１）、ＣＡＡＶＩＰＮＰＰＧＧＫＬＴＦ（配列番号２２）、ＣＡＡＶＩＰＮＰＧＧＧＡＬＴＦ（配列番号２３）、ＣＡＡＶＩＰＮＳＡＧＧＲＬＴＦ（配列番号２４）、ＣＡＡＶＩＰＮＬＥＧＧＳＬＴＦ（配列番号２５）、ＣＡＡＶＩＰＮＲＬＧＧＹＬＴＦ（配列番号２６）、ＣＡＡＶＩＰＮＴＤＧＧＲＬＴＦ（配列番号２７）、ＣＡＡＶＩＰＮＱＲＧＧＡＬＴＦ（配列番号２８）、ＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＩＬＴＦ（配列番号２９）、ＣＡＡＶＩＴＮＩＡＧＧＳＬＴＦ（配列番号３０）、ＣＡＡＶＩＰＮＮＤＧＧＹＬＴＦ（配列番号３１）、ＣＡＡＶＩＰＮＧＲＧＧＬＬＴＦ（配列番号３２）、ＣＡＡＶＩＰＮＴＨＧＧＰＬＴＦ（配列番号３３）、ＣＡＡＶＩＰＮＤＶＧＧＳＬＴＦ（配列番号３４）、ＣＡＡＶＩＥＮＫＰＧＧＰＬＴＦ（配列番号３５）、ＣＡＡＶＩＤＮＰＶＧＧＰＬＴＦ（配列番号３６）、ＣＡＡＶＩＰＮＮＮＧＧＡＬＴＦ（配列番号３７）、ＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＩＬＴＦ（配列番号３８）、ＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＱＬＴＦ（配列番号３９）、ＣＡＡＶＩＰＮＳＹＧＧＬＬＴＦ（配列番号４０）、ＣＡＡＶＩＰＮＤＤＧＧＬＬＴＦ（配列番号４１）、ＣＡＡＶＩＰＮＡＡＧＧＬＬＴＦ（配列番号４２）、ＣＡＡＶＩＰＮＴＩＧＧＬＬＴＦ（配列番号４３）、およびＣＡＡＶＩＰＮＴＲＧＧＬＬＴＦ（配列番号４４）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ３、および
以下を含んでなる第２の可変ドメイン：
アミノ酸配列ＳＧＨＲＳ（配列番号１２）およびＰＧＨＲＡ（配列番号４５）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ１および／または
アミノ酸配列ＹＦＳＥＴＱ（配列番号１４）、ＹＶＨＧＥＥ（配列番号４６）およびＹＶＨＧＡＥ（配列番号４７）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ２および／または
アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＥＱＹＦ（配列番号１３）およびＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ（配列番号４８）からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ３。

【0152】

本発明の発明者らは、実施例、特に本明細書で開示されている実施例１～４において、ＴＣＲ変異型「ＨｉＡｆｆ１」および「ＬｏＡｆｆ３」を同定したが、そのうちのＣＤＲアミノ酸配列は、本発明の抗原結合タンパク質、特に二重特異性抗原結合タンパク質、より具体的にはＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディフォーマットで使用された場合に、特に参照タンパク質と比較して、それらのＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質の結合親和性、安定性、および特異性を増加させる。

【0153】

このような参照タンパク質は、例えば、国際公開第２０１８／１７２５３３号パンフレットで開示されている親／野性型ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質、例えば、前記ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲを含んでなる本明細書に記載のＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディであってもよく、または参照タンパク質は、前記ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質であり、それが比較される抗原結合タンパク質と、同じフォーマットである。このような参照タンパク質はまた、例えば、「ＣＤＲ６」のＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質、例えば、本明細書に記載の「ＣＤＲ６」のＣＤＲを含んでなるＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディであってもよく、または参照タンパク質は、「ＣＤＲ６」のＣＤＲを含んでなり、それが比較される抗原結合タンパク質と同じフォーマットである抗原結合タンパク質であって、ここで、「ＣＤＲ６」のＣＤＲは、本明細書で上に開示されているものである。

【0154】

本発明者らは、さらに、上述のＣＤＲを含んでなる本発明の抗原結合タンパク質が、「ＣＤＲ６」と称される参照抗原結合タンパク質のＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質と比較して、改善された安定性を有することを実証し、ここで、「ＣＤＲ６」と称される抗原結合タンパク質は、以下のαおよびβＣＤＲを含んでなる：
アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＳ（配列番号１１）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ１、アミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ２、アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦ（配列番号２１）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲａ３、アミノ酸配列ＰＧＨＲＡ（配列番号４５）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ１、アミノ酸配列ＹＶＨＧＥＥ（配列番号４６）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ２、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ（配列番号４８）を含んでなるかまたはそれからなるＣＤＲｂ３。

【0155】

特定の一実施形態では、本発明は、いわゆる「ＨｉＡｆｆ＃１」および「ＬｏＡｆｆ＃３」の変異型およびそれらの変異型のＣＤＲを含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0156】

したがって、好ましい一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、以下を含んでなる：
ａ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、
ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＳ（配列番号１１）または配列番号１１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＱＥＧＤ（配列番号１７）を含んでなるかまたはそれからなり、
ＣＤＲａ３は、アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦ（配列番号２１）を含んでなるかまたはそれからなる）、および
ｂ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲｓ）ＣＤＲｂ１、ＣＤＲ２ｂ、およびＣＤＲｂ３を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、
ＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列ＰＧＨＲＡ（配列番号４５）またはＰＧＨＲＳ（配列番号４９）、好ましくはＰＧＨＲＡ（配列番号４５）、または配列番号４５または配列番号４９、好ましくは配列番号４５と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり；
ＣＤＲｂ２は、アミノ酸配列ＹＶＨＧＥＥ（配列番号４６）または配列番号４６と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＥＱＹＦ（配列番号１３）またはＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ（配列番号４８）、好ましくはＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ（配列番号４８）、または配列番号１３または配列番号４８、好ましくはＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ（配列番号４８）と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる）。

【0157】

例えば、実施例４などの実施例から分かるように、例えば、Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディの形態の本発明の抗原結合タンパク質は、ＣＤＲｂ１が安定化変異Ｓ２７Ｐを含有してＣＨＯ細胞における発現を改善させることを例外として、ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲを含んでなるＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディ形態の抗原結合タンパク質などの参照タンパク質と比較して、増加した親和性を有する。

【0158】

したがって、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、任意選択的に、参照タンパク質と比較して増加した親和性を有する。

【0159】

本明細書における「参照タンパク質」は、本発明の抗原結合タンパク質がそれと比較されるタンパク質を指す。一実施形態では、参照タンパク質は、それが比較される抗原結合タンパク質と同じフォーマットであり、および／または前記参照タンパク質は、親ＴＣＲ Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０のＣＤＲまたはαおよびβ可変ドメインを含んでなる。

【0160】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号８のアミノ酸配列と、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２であるＨＬＡ分とを含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥペプチドの複合体に、例えば、１０ｐＭ～２００ｎＭ、１０ｐＭ～１５０ｎＭ、１０ｐＭ～１００ｎＭ、特に５０ｐＭ～１００ｎＭ、１００ｐＭ～１００ｎＭ、１ｎＭ～１００ｎＭなど、２００ｎＭ以下、１５０ｎＭ以下、１２０ｎＭ以下、１１０ｎＭ、好ましくは１００ｎＭ以下のＫ_Ｄで結合する。

【0161】

したがって、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号８のアミノ酸配列と、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２であるＨＬＡ分子とを含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥペプチドの複合体に対する、２００ｎＭ以下、１５０ｎＭ以下、１２０ｎＭ以下、１１０ｎＭ、好ましくは１００ｎＭ以下、特に５０ｐＭ～１００ｎＭ、１００ｐＭ～１００ｎＭ、１ｎＭ～１００ｎＭの親和性（Ｋ_Ｄ）を有する。「Ｋ_Ｄ」および「親和性」は、本明細書で上に定義の項で定義される。

【0162】

関連する一実施形態では、抗原結合タンパク質は、好ましくはダイアボディ、任意選択的に、Ｆ_ｃＦ_ｃドメインを含んでなるダイアボディ、より特には任意選択的に、Ｆ_ｃドメインを含んでなる二重特異性ダイアボディである。

【0163】

Ｋ_Ｄなどの親和性を測定する方法は当業者に知られており、例えば、表面プラズモン共鳴およびバイオレイヤー干渉法が挙げられる。当業者に知られているように、使用される緩衝液、タンパク質の濃度など、それらの実験に使用される実験条件は、結果に強く影響し得る。

【0164】

したがって、一例では、本発明の抗原結合タンパク質は、例えば、可溶性Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディとして発現され、複合体ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４単量体に対するそれらの結合親和性について解析される。典型的には、測定は、例えば、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ３８４システムで、典型的には、製造業者によって推奨される設定を用いて実施される。簡潔に述べると、結合動態は、典型的には、例えば、ＰＢＳ、０．０５％ツイーン２０、０．１％ＢＳＡを緩衝剤として使用して、３０℃で、例えば、１０００ｒｐｍの振盪速度で測定された。抗原結合タンパク質、特にＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディは、ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４複合体の連続希釈液を分析する前に、ＦＡＢ２ＧまたはＡＨＣなどのバイオセンサー上に負荷された。

【0165】

本明細書で開示されているように、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号８のアミノ酸配列と、ＨＬＡ分子、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２とを含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥペプチドの複合体を認識しおよび／またはそれに特異的に結合する。したがって、ＰＲＡＭＥ－００４およびＨＬＡ分子は、主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩに存在し、前記複合体への抗原結合タンパク質の結合は、結合時に免疫応答を惹起してもよい。

【0166】

したがって、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は免疫応答を誘導し、好ましくは、ここで、免疫応答は、インターフェロンγ（ＩＦＮγ）レベルの増加によって特徴付けられる。

【0167】

実施例からさらに分かるように、本発明者らは、例えば実施例３で、本発明の抗原結合タンパク質が、参照タンパク質と比較して、例えば変異型ＣＤＲ６のＣＤＲを含んでなる抗原結合タンパク質と比較して、改善された安定性を有することを実証した。

【0168】

したがって、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、任意選択的に、参照タンパク質と比較して改善された安定性を有する。本発明の文脈において、改善された安定性は、例えば、温度ストレスに曝された場合の物理的安定性の増加を指す。したがって、本発明の新たに開発された抗原結合タンパク質は、参照抗原結合タンパク質よりもストレス条件、特に温度ストレスにより良く耐え得る。

【0169】

本発明の文脈における「安定性」という用語は、物理的安定性を指し、当該技術分野で記載される様々な分析技術を使用して定性的および／または定量的に評価され得て、例えば、Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ，２４７－３０１，Ｖｉｎｃｅｎｔ Ｌｅｅ Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，Ｎ．Ｙ．，Ｐｕｂｓ．（１９９１）、およびＪｏｎｅｓ，Ａ．Ａｄｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｒｅｖ．１０：２９－９０（１９９３）で概説される。本発明の文脈において、これらの方法は、特に、（例えば、サイズ排除クロマトグラフィーの使用、濁度の測定、および／または目視検査による）、凝集体形成の評価を指す。安定性を測定するために、本発明の抗原結合タンパク質を含んでなるサンプルは、安定性試験で試験されてもよく、ここで、サンプルは選択された期間ストレス条件に曝され、適切な分析技術を使用した化学的および物理的安定性の定量的および任意選択的に、定性的な分析がそれに続いた。

【0170】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、例えば、４０℃の温度に例えば、１４日間曝された場合など、特定の期間にわたりストレス条件に曝された場合に、物理的に安定している。

【0171】

「物理的安定性」は、本発明の文脈において、実質的に、凝集、沈殿および／または変性の兆候を有さない抗原結合タンパク質を指す。

【0172】

物理的安定性にアクセスする方法は、例えば、サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）、動的光散乱（ＤＬＳ）、光掩蔽（ＬＯ）、および目視検査によって判定される色と透明度である。

【0173】

「凝集の兆候がない」とは、例えば、ＰＢＳなどの緩衝液中で１４日にわたる４０℃の温度などのストレス条件に曝された後に、抗原結合タンパク質を含んでなるサンプルが、典型的に、ＰＢＳなどの緩衝液中でＳＥＣ－ＨＰＬＣなどのＳＥＣによって測定された場合、９４％～９９％、９５％～９９％、９６％～９９％、９７％～９９％の単量体含有量など、９４％を超え、９５％を超え、９６％を超え、９７％を超え、９８％を超え、９９％を超える単量体含有量を有することを意味する。

【0174】

したがって、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、例えば、参照タンパク質と比較して、低減された凝集を有する。

【0175】

サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥＣ）では、使用されるカラム、操作圧力、および緩衝液の速度に応じて、試験された条件下で、単量体含量の１％、２％、３％、４％、好ましくは１または２％、より好ましくは１％の差が、本発明の文脈では有意差があると見なされる。

【0176】

これは、参照抗原結合タンパク質が９６％の単量体含有量を有し、本発明の抗原結合タンパク質が９７％の単量体含有量を有する場合、本発明の抗原結合タンパク質の単量体含有量は、同じ条件で測定した場合、参照抗原結合タンパク質と比較して有意に異なり、したがって、有意に増加していることを意味する。

【0177】

さらに、本発明の発明者らは、実施例、特に実施例７および８において、本発明の抗原結合タンパク質が、標的抗原、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに、高い特異性で結合することを実証した。

【0178】

「特異性」という用語は、一般に、それが結合する標的ペプチド配列（「エピトープ」）を密接に関連する高度に相同的なペプチド配列から区別する、抗原結合タンパク質の能力を示す。

【0179】

本発明の文脈において、本明細書においてオフターゲットペプチドまたは類似ペプチドとも称される、密接に関連する高度に相同なペプチド配列は、アミノ酸配列（配列番号５０）からなるペプチドＩＦＩＴ１－００１、アミノ酸配列（配列番号５１）からなるＩＦＴ１７－００３、アミノ酸配列（配列番号５２）からなるＦＡＤＳ２－００１、およびアミノ酸配列（配列番号５３）からなるＣＴＢＰ１－００１である。

【0180】

本発明者らは、本発明の抗原結合タンパク質による結合に関連するＰＲＡＭＥ－００４の残基を同定し、さらにオフターゲットを同定するために、実施例７で実験を実施した。その結果、本発明者らは、配列番号８のアミノ酸５～９位を結合に関連するものとして特定し得た。

【0181】

したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、特異的抗原、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに対する親和性と比較して減少した親和性で、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のＰＲＡＭＥ変異型に結合し、ここで、ＰＲＡＭＥ変異型複合体に対するそれぞれのＫ_Ｄは、４倍および１０倍、好ましくは４倍増加し、ここで、ＰＲＡＭＥ変異型は、配列番号８のアミノ酸配列のペプチドを指し、ここで、配列番号８のアミノ酸５、６、７、８または９位の少なくとも１つは置換され、好ましくはアラニンで置換されている。

【0182】

さらに、本発明の発明者らは、実施例、特に実施例７において、本発明の抗原結合タンパク質が標的抗原に結合することを実証し、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊００４と複合体形成した高い特異性を有するＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチド、すなわち抗原結合タンパク質は、同定されたエピトープに特異的に結合する。

【0183】

したがって、本発明の抗原結合タンパク質は、配列番号８のアミノ酸配列「ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ」を含んでなるかまたはそれからなるＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチドに特異的に結合し、ここで、前記抗原性ペプチドは、ＭＨＣタンパク質と複合体形成し、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成する。好ましい実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８のＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドの本明細書で定義されるような構造的エピトープに特異的に結合する。好ましい実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８のＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドの本明細書で定義されるような機能的エピトープに特異的に結合する。より具体的には、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８のＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチドの少なくとも３つまたは少なくとも４つまたは少なくとも５つのアミノ酸位置、好ましくは、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つのアミノ酸位置、より好ましくは配列番号８のアミノ酸配列のアミノ酸５、６、７、８および９位、特に５、７および９位からなる群から選択される、３つまたは４つなどの少なくとも３つ、好ましくは３つを含んでなるかまたはそれからなる機能的エピトープに特異的に結合する。正確なエピトープの判定は、使用された方法と選択されたカットオフ値によってわずかに変動するかもしれない。

【0184】

本発明の抗原結合タンパク質、特にＴ細胞発現抗原結合タンパク質など、ＴＣＲまたはそれらの断片または二重特異性ＴＣＲおよびそれらの断片の文脈で、「有意に結合しない」とは、好ましくは同じ実験条件において、典型的には、機能アッセイ、例えば、上記のＩＦＮ－γ放出などのＴＣＲ活性化アッセイにおける、配列番号８のアミノ酸配列「ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ」からなるＰＲＡＭＥ－００４ペプチドから得られた、応答、すなわちシグナルの３０％未満、２５％未満、２０％未満、１５％未満、好ましくは３０％未満である、例えば、抗原性ペプチド変異型について検出されたシグナルなどの応答を示す。例えば、本発明の文脈において、抗原結合タンパク質は、同じ実験設定および同じ抗原結合タンパク質濃度で、ＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチド／ＭＨＣ複合体に対する同じ抗原結合タンパク質結合の応答の５０％未満、４５％未満、４０％未満、３０％未満、２０％未満、２０％未満、１０％未満、５％未満、４％未満、３％未満の少なくとも１つの類似ペプチド／ＭＨＣ複合体に対する結合応答を有し、および／または、例えば、本発明の文脈において、抗原結合タンパク質は、特異的抗原、すなわち本明細書に記載されるＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチド／ＭＨＣ複合体に対する親和性と比較して減少した親和性で、少なくとも１つの類似ペプチド／ＭＨＣ複合体に結合し、ここで、それぞれの類似ペプチドに対するそれぞれのＫ_Ｄは、５、７、１０、１５、２０、３０、４０、５０、１００倍、好ましくは２０～１００倍、より好ましくは３０～１００倍、４０～１００倍など、典型的には４０～５０倍増加している。抗原結合タンパク質が例えば、ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣの複合体に１ｎＭのＫ_Ｄで結合し、抗原結合タンパク質が例えば、ＩＦＩＴ１－００１／ＭＨＣの複合体に１００ｎＭのＫ_Ｄで結合する場合、抗原結合タンパク質は１００倍に増加したＫ_Ｄで、したがって、１００分の１に減少した親和性で、ＩＦＩＴ１－００１／ＭＨＣに結合する。これらの例において、結合応答、解離定数、および結合親和性は、好ましくは実施例４に記載されているように、バイオレイヤー干渉法を用いて測定される。

【0185】

本発明の抗原結合タンパク質、特に本発明の可溶性抗原結合タンパク質の文脈では、「有意に結合しない」とは、好ましくは同じ実験条件において、典型的には、結合アッセイ、例えばバイオレイヤー干渉法などにおける、配列番号８のアミノ酸配列「ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ」からなるＰＲＡＭＥ－００４ペプチドについて判定されたＫ_Ｄよりも、３～１０倍など、３倍を超え、３．５倍を超え、４倍を超え、４．５倍を超え、５倍を超え、好ましくは３倍を超えて増加した、抗原性ペプチド変異型で判定されたＫ_Ｄを示し、ここで、抗原ペプチド変異型について得られるシグナルは、好ましくはバックグラウンドシグナルであり、ここで、抗原ペプチド変異型またはＰＲＡＭＥ－００４ペプチドは、ＭＨＣ分子と複合体形成する。

【0186】

上記によれば、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質、特に可溶性抗原結合タンパク質は、特異的抗原、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した本発明の文脈で記載されるＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチドに対する親和性と比較して減少した親和性で、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチド変異型に結合し、ここで、ＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチド変異型複合体に対するそれぞれのＫ_Ｄは、３～１０倍など、３倍を超え、３．５倍を超え、４倍を超え、４．５倍を超え、５倍を超え、好ましくは３倍を超えて増加する。「親和性」および「Ｋ_Ｄ」という用語は、本明細書で上に「定義」の項で定義される。

【0187】

ＭＨＣタンパク質、特にＭＨＣクラスＩおよびＨＬＡ－Ａ^＊０２タンパク質は、本明細書で上に「定義」の項で定義される。

【0188】

ＰＲＡＭＥ－００４の位置を特定した後、発明者らは潜在的なオフターゲットペプチド（以下では類似ペプチドとも称される）を特定した。

【0189】

特に、ペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１は、本明細書でオフターゲットペプチドまたは類似ペプチドと称される。

【0190】

したがって、さらなる関連する実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したＰＲＡＭＥ－００４ペプチドまたはＰＲＡＭＥエピトープに特異的に結合し、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したオフターゲットＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１と、好ましくはＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１と交差反応しない。

【0191】

抗原結合タンパク質が第２の抗原に有意に交差反応しない場合、第１の抗原に「特異的に結合する」。

【0192】

抗原ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣ１に結合する抗原結合タンパク質は、２つの抗原に対する親和性が大幅に異なる場合、オフターゲットペプチド／ＭＨＣに対して「有意に交差反応性でない」。結合応答が低すぎる場合、オフターゲットペプチドまたは類似ペプチドに対する親和性は、測定可能でないこともある。本願発明において、ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣ１に結合する抗原結合タンパク質は、オフターゲット／ＭＨＣに対する抗原結合タンパク質の結合応答が、同じ実験設定と同じ抗体濃度において、ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣ１に対する同じ抗原結合タンパク質の結合応答の５％未満である場合、オフターゲットペプチドのＭＨＣに対する有意な交差反応性を示さない。

【0193】

本発明者らは、実施例において、本発明の抗原結合タンパク質が、ＰＲＡＭＥ－００４に高親和性で結合し、最小のまたは減少した結合親和性のみで、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１に結合する能力を有することを実証した。

【0194】

本明細書における「最小親和性」とは、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した、ペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１、好ましくはＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１に対する親和性を指し、それは、特異的抗原、すなわちＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成した配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなるＰＲＡＭＥペプチドに対する親和性と比較して減少し、ここで、オフターゲットペプチドまたは類似ペプチドに対するそれぞれのＫ_Ｄは、１０、１００、１０００、好ましくは１００または１０００倍、より好ましくは１０００倍増加する。

【0195】

抗原結合タンパク質が、例えば１ｎＭのＫ_Ｄで複合体ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣに結合し、抗原結合タンパク質が、例えば１００ｎＭのＫ_ＤでＦＡＤＳ２－００１ＭＨＣの複合体に結合する場合、抗原結合タンパク質は、１００倍に増加したＫ_Ｄで、したがって、１００倍に減少した親和性で、ＦＡＤＳ２－００１／ＭＨＣに結合する。

【0196】

オフターゲットペプチドまたは類似のペプチドへの結合は副作用のリスクを高めるかもしれないことから、これは本発明の抗原結合タンパク質の重要な利点であり、したがって、本発明の抗原結合タンパク質がオフターゲットペプチドに低親和性でのみ結合するという事実は、それを安全性と有効性に関して有望な抗がん剤治療薬にする。

【0197】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１、好ましくはＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１、より好ましくはＩＦＩＴ１－００１に有意に結合しない。

【0198】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ペプチドＩＦＴ１７－００３に有意に結合しない。

【0199】

本明細書における「有意に結合しない」とはまた、本明細書において実施例８に記載されるように、ＭＨＣタンパク質との複合体中の、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成したペプチドを使用して、表面上に抗原結合タンパク質を表示する酵母細胞が染色され、陽性酵母細胞が典型的には、フローサイトメトリー分析を介して測定された場合、陽性酵母細胞が有意に検出されないことを指すためにも用いられる。特異性を測定する方法は当業者に知られており、その典型的な例については、実施例８の実施例の項でさらに記載されている。

【0200】

本発明の抗原結合タンパク質は、本明細書で上に特定されるようなＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチド複合体に、より具体的には本明細書で上に定義される配列番号８のエピトープに、特異的に結合し、そのそれぞれの標的、すなわちＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドと、それが有意に結合しないその他の類似ペプチドとが区別され得る。

【0201】

「特異性」または「特異的に結合する」という用語は、その結合する標的ペプチド配列（「エピトープ」）を類似したエピトープ、ペプチドまたはタンパク質から区別する抗原結合タンパク質の能力を示し、すなわち抗原結合タンパク質は、第２の抗原に有意に交差反応性でない場合、第１の抗原に「特異的に結合」する。

【0202】

本発明の文脈における「類似ペプチド」はまた、「オフターゲット」と称されることもあり、典型的には８～１１アミノ酸長を含んでなるペプチドに関する。本発明の文脈における類似ペプチドは、典型的にはＭＨＣ提示である。さらに、本発明の文脈における類似ペプチドは、ＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドのアミノ酸配列と類似したアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるペプチド、より具体的には、ＰＲＡＭＥ－００４抗原ペプチドのエピトープと比較して、エピトープを構成するペプチドであり、ここで、一部または全部のアミノ酸は、対応するＭＡＧＥ－Ａペプチドのエピトープを構成するアミノ酸と比較して、アミノ酸の生化学的／生物物理学的特性において同一および／または類似している。この配列類似性のために、類似ペプチドは抗原結合タンパク質によって結合されるかもしれず、このシナリオでは、例えば、類似ペプチドがＭＨＣタンパク質によって提示され、したがって、例えば、ＴＣＲなどの抗原結合タンパク質によって結合される場合、ＴＣＲなどの所与の抗原結合タンパク質が類似ペプチドに結合する能力は、望ましいＴ細胞応答をもたらさず、有害反応をもたらすこともある。このような有害反応は、Ｌｏｗｄｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｃｙｔｏｔｈｅｒａｐｙ，２０１８年１２月４日公開，７ページで報告されたように、健常組織でペプチドと交差反応する、特異的ＴＣＲの交差反応性などの「腫瘍外」の副作用であってもよい。ＰＲＡＭＥ－００４ペプチドの結合関連位置５～９内の類似性スコアリングを用いて、例えば、正常組織提示ＨＬＡ－Ａ^＊０２結合ペプチドのデータベース（ＸＰＲＥＳＩＤＥＮＴデータベース）から、本発明の文脈で類似したペプチドが選択された。したがって、本発明の抗原結合タンパク質は、類似ペプチド、特に本明細書に以下に列挙される類似ペプチドへの結合を回避するが、標的ペプチドに対するそれらの親和性を維持するように操作される。

【0203】

したがって、本発明の文脈における類似ペプチドは、表４から選択される。

【0204】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質、特にＴ細胞発現抗原結合タンパク質などのＴＣＲまたはそれらの断片、または二重特異性ＴＣＲおよびそれらの断片は、前記類似ペプチドがＭＨＣタンパク質との複合体中にある、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成する場合、ＩＦＩＴ１－００１（配列番号５０）、ＩＦＴ１７－００３（配列番号５１）、ＦＡＤＳ２－００１（配列番号５２）およびＣＴＢＰ１－００１（配列番号５３）、ＡＴＰ１Ａ１－００１（配列番号１２５）、ＮＡＤＫ－００２（配列番号１２６）、ＩＴＳＮ１－００１（配列番号１２７）、ＳＭＡ－００３（配列番号２８）、ＶＰＳ１３Ａ－００１（配列番号１２９）、ＳＦ３Ｂ３－００５（配列番号１３０）、ＮＣＡＭ２－００１（配列番号１３１）、ＫＮＴ－００１（配列番号１３２）、ＥＨＤ４－００１（配列番号１３３）、ＥＨＤ－００１（配列番号１３４）、ＭＣＭＢ－００２（配列番号１３５）、ＨＳＰＡ５－００１（配列番号１３６）、ＣＥＢＰＺ－００２（配列番号１３７）、ＤＣＡＦ１２－００１（配列番号１３８）、ＥＨＤ２－００２（配列番号１３９）、ＫＩＡＡ１３２４－００１（配列番号１４０）、ＭＹＯ１Ａ－００１（配列番号１４１）、ＳＥＲＰＩＮＡ６－００１（配列番号１４２）、ＳＭＡＲＣＤ１－００１（配列番号１４３）、ＴＳＣ１－００１（配列番号１４４）、ＵＧＴ－００５（配列番号１４５）、ＶＡＶ１－００１（配列番号１４６）、ＷＤＦＹ３－００４（配列番号１４７）からなるリストから選択される、少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５など、１、２、３、４、５など、好ましくは少なくとも３つのまたは全ての類似ペプチドに結合せずまたはに有意に結合しない。類似ペプチド、すなわちオフターゲットペプチドへの結合は副作用のリスクを高めることもあることから、本発明の抗原結合タンパク質が本明細書で列挙された類似ペプチドと交差反応しないという事実は、それを安全性と有効性に関して有望な抗がん剤治療薬にする。

【0205】

「有意に結合しない」は、類似ペプチドの文脈において、および本発明の抗原結合タンパク質、特にＴ細胞発現抗原結合タンパク質などのＴＣＲまたはそれらの断片、または二重特異性ＴＣＲおよびそれらの断片の文脈において、「交差反応しない」と称されることもあり、本明細書で、例えば、ＭＡＧＥ－ＡＭＡＧＥ－Ａと比較した類似ペプチド／ＭＨＣへの抗原結合タンパク質について機能アッセイで測定される機能応答を指し、ここで、類似ペプチド／ＭＨＣに対する抗原結合タンパク質の応答は、同じ実験設定におけるＰＲＡＭＥ－００４抗原性ペプチド／ＭＨＣ複合体に対する同じ抗原結合タンパク質の応答の８％、６％、５％など、３０％未満、２０％未満、１０％未満、５％未満、好ましくは５％である。一例では、応答は、前記抗原結合タンパク質を発現するＴ細胞の機能応答であり、類似ペプチドの文脈でＩＦＮ－γ放出アッセイを使用して判定される。

【0206】

さらに、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質、特に本発明の可溶性抗原結合タンパク質は、前記類似ペプチドがＭＨＣタンパク質との複合体中にある、好ましくはＨＬＡ－Ａ^＊０２と複合体形成する場合、ＩＦＩＴ１－００１（配列番号５０）、ＩＦＴ１７－００３（配列番号５１）、ＦＡＤＳ２－００１（配列番号５２）、およびＣＴＢＰ１－００１（配列番号５３）００１からなるペプチド群から選択される、少なくとも１つの類似ペプチド、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５など、１、２、３、４、５など、好ましくは少なくとも３つのまたは全ての類似ペプチドに結合せずまたは有意に結合しない。

【0207】

本発明の発明者は、ＬＤＨ放出アッセイによって、抗原結合タンパク質、特にＴＣＥＲ（登録商標）分子が、ＰＲＡＭＥ陽性腫瘍細胞株においてＴ細胞媒介性細胞傷害性を示す一方、ヒトの正常組織細胞は、ＴＣＥＲ（登録商標）分子との共培養による影響を受なかったことを実証し得た。この生体外実験は、生体外評価における本発明の抗原結合タンパク質の安全性を証明し、細胞傷害効果が、腫瘍細胞株、すなわち腫瘍組織に対して高度に選択的であることを実証する。したがって、本発明の分子は有益な安全性プロファイルを示す。

【0208】

本発明の発明者は、抗原結合タンパク質が生体外モデルにおいて、サイトカイン放出の減少をもたらしたことをさらに実証し得た（図１２）。本発明の抗原結合タンパク質と共にインキュベートされた全血サンプルは、対照のＴＣＥＲ（登録商標）分子および抗ＣＤ３と比較して、ＩＦＮ－γおよびインターロイキン－６（ＩＬ－６）のレベルが有意に減少していることが示された。これらの結果は、本発明の抗原結合タンパク質が有益な安全性プロファイルを示すという発見を支持する。

【0209】

本発明の発明者らは、ＴＣＲαおよびβ可変ドメインから最初に得られたＣＤＲが、ＴＣＲとは異なるフォーマットを有する抗原結合タンパク質で使用されてもよいことを実証した。例えば、実験の項において、本発明者らはＶ_α－Ｌ_Ｙ－Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）－Ｆ_ｃを有する第１のポリペプチドと、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）－Ｌ_ｘ－Ｖ_β－Ｆ_ｃを有する第２のポリペプチドとを含んでなる、Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディ中のＴＣＲαおよびβ可変ドメインのＣＤＲを使用したが、ここで、Ｖ_αおよびＶ_βは、本発明の文脈で定義されるＣＤＲＳを含んでなるαおよびβ可変ドメインであり、Ｌ_ＹおよびＬ_ｘはリンカーであり、Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）およびＶ_Ｈ（ＣＤ３）は、例えば、マウスモノクローナル抗ＣＤ３抗体ＵＣＨＴ１などの抗ＣＤ３抗体の重鎖および軽鎖可変ドメインである。

【0210】

さらに、本発明者らは、特に、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）－Ｃ_Ｈ１－Ｖ_α－Ｌ_ｚ－Ｖ_βを有する第１のポリペプチドと、Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）－Ｃ_Ｌを有する第２のポリペプチドとを含んでなる、ｓｃＴＣＲを含んでなる二重特異性ＴＣＲなど、一本鎖ＴＣＲコンストラクト中のＴＣＲαおよびβ可変ドメインのＣＤＲを使用したが、ここで、Ｖ_Ｈ（ＣＤ３）、Ｖ_Ｌ（ＣＤ３）、Ｖ_αおよびＶ_βは、上記で定義されたとおりであり、Ｌｚはリンカーであり、Ｃ_Ｈ１は、重鎖の定常ドメインであり、Ｃ_Ｌは軽鎖の定常領域である。

【0211】

したがって、当業者は、実施例１に記載されのこれら２つの実験から、実際に、本明細書に記載のＣＤＲが本発明の異なる抗原結合タンパク質に使用されてもよいことを理解している。

【0212】

一実施形態では、抗原結合タンパク質のフォーマットが変更された場合（すなわち第１および第２の可変ドメインのＣＤＲが同じである場合）、エピトープおよび結合特性が保存される。

【0213】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、抗体またはその断片、あるいはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその断片である。

【0214】

抗体およびＴＣＲは、「定義」の項で上に定義されているとおりである。

【0215】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、二重特異性である。

【0216】

したがって、二重特異性抗原結合タンパク質はまた、本明細書で「二重特異性分子」とも称される。

【0217】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、ヒト起源であり、これは、ヒト抗原遺伝子座から作製され、したがって、ヒト配列、特にヒトＴＣＲまたは抗体配列を含んでなるものと理解される。

【0218】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、ＰＲＡＭＥ－００４／ＭＨＣ複合体抗原に特異的かつ選択的に結合し／それを認識できる親和性成熟抗原結合タンパク質として特徴付けられる。

【0219】

より具体的には、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、二重特異性抗体またはその断片、またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその断片、または二重特異性Ｔ細胞受容体またはその断片など、抗体またはその断片である。

【0220】

抗体、二重特異性抗体、およびＴ細胞受容体（ＴＣＲ）は、「定義」の項で上に定義されているとおりである。

【0221】

本発明の抗原結合タンパク質は、好ましくは、親分子の抗原結合／認識能力、特に上記で定義されたその特異性および／または選択性を維持し、ここで、親分子は、親ＴＣＲであるか、または好ましくは、前記親ＴＣＲの可変ドメインを含んでなる二重特異性抗体であってもよい。一実施形態では、このような結合機能は、本明細書で定義されるようなＣＤＲを含んでなる、第１のポリペプチドおよび第２のポリペプチドの存在によって維持されてもよい。さらなる実施形態では、このような結合機能は、本明細書で定義されるようなＣＤＲとＦＲドメインとを含んでなる、第１のポリペプチドおよび第２のポリペプチドの存在によって維持されてもよい。

【0222】

既に上述したように、本発明の文脈におけるＣＤＲの結合機能性は、抗体のフレームワークにおいて提供されてもよい。例えば、おそらく３つ、２つまたは１つの追加的なＮおよび／またはＣ末端フレームワーク残基を含む、本発明の文脈で定義されるＣＤＲアミノ酸配列が、抗体可変重鎖／軽鎖配列に直接グラフトされてもよい。より具体的には、ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３ドメインは、可変重鎖アミノ酸配列にグラフトされてもよく、ＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３は、可変軽鎖アミノ酸配列にグラフトされてもよく、逆もまた同様である。

【0223】

これもまた理解されるであろうように、いくつかの実施形態では、抗体のフレームワークにおいて、抗体の可変軽鎖ドメインは、本発明の文脈で定義されるようなα可変ドメインによって置き換えられてもよく、可変重鎖ドメインはβ可変ドメインによって置き換えられてもよく、逆もまた同様である。

【0224】

本発明の発明者らは、抗原結合タンパク質のフレームワーク領域における特定の変異が、有利な効果を有することをさらに発見した。特に、β可変ドメイン中の変異Ｒ８６Ｓ、Ｖ９１Ｉ、およびＴ９３Ｎは、タンパク質の安定性を増加させ、したがって、本発明の抗原結合タンパク質は、変異Ｒ８６Ｓ、Ｖ９１ＩおよびＴ９３ＮまたはＳ８５Ｆを有するアミノ酸配列を有するフレームワーク領域を含んでなり、これらの変異はＩＭＧＴの命名法に従って示され、ＦＲ３－ｂ中のβ可変ドメインに位置する。さらに、これらの抗原結合タンパク質は変異Ｆ５５Ｓを含んでなり、前記変異もまたＩＭＧＴ命名法に従って示され、ＦＲ２－ａ中のα可変ドメインに位置する。

【0225】

したがって、一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質の前記第１の可変ドメインは、ＦＲ１－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、およびＦＲ４－ａからなる群から選択される、１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなり、ここで、
ＦＲ１－ａは、配列番号５４のＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳのアミノ酸配列、または配列番号５４と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ａは、配列番号５５のＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳのアミノ酸配列、または配列番号５５と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ａは、配列番号５６のＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬのアミノ酸配列、または配列番号５６と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ４－ａは、配列番号５７のＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのアミノ酸配列、または配列番号５７と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
前記第２の可変ドメインは、ＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂ、およびＦＲ４－ｂからなる群から選択される１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなり、ここで、
ＦＲ１－ｂは、配列番号５８のＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩのアミノ酸配列、または配列番号５８と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ｂは、配列番号５９のＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥのアミノ酸配列、または配列番号５９と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ｂは、配列番号６０のＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬのアミノ酸配列、または配列番号６０と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ４－ｂは、配列番号６２のＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮのアミノ酸配列、または配列番号６２と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる。

【0226】

本明細書に記載の抗原結合タンパク質の変異型が想定され、本明細書で上に「定義」の項で定義される「参照配列と少なくとも８５％同一である」という表現を用いて、明示的に言及される。例えば、配列ＦＲ１－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、およびＦＲ４－ａ、およびＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂおよびＦＲ４－ｂは、適切な場合は、少なくとも１つのアミノ酸置換によって、特に少なくとも１つの保存的アミノ酸置換によって、および／またはカノニカル残基との置換によって、配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、および配列番号６２の参照配列と異なってもよい。特に、第１および第２の可変ドメインの配列ＦＲ１－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、およびＦＲ４－ａ、ならびにＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂ、およびＦＲ４－ｂは、保存的アミノ酸置換のみによって、参照配列配列番号５４、配列番号５５、配列番号５６、配列番号５７、配列番号５８、配列番号５９、配列番号６０、および配列番号６２と異なってもよい。

【0227】

本発明の抗原結合タンパク質のアミノ酸配列、およびそれらをコード化するＤＮＡ配列に、修飾および変更が加えられてもよく、それでもなお、望ましい特性を有する機能的抗原結合タンパク質またはポリペプチドが帰結する。

【0228】

したがって、一実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８、からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0229】

好ましくは第１のポリペプチドおよび第２のポリペプチドは、ｉｉ）およびｉｉｉ）で定義されるとおりである。

【0230】

本明細書に記載の抗原結合タンパク質の変異型が想定され、本明細書で上に「定義」の項で定義される「参照配列と少なくとも８５％同一である」という表現を用いて、明示的に言及される。例えば、第１の可変ドメインの配列は、適宜、少なくとも１つのアミノ酸置換（群）、特に少なくとも１つの保存的アミノ酸置換（群）および／または正準残基との置換（群）によって、ｉ）、ｉｉ）およびｉｉｉ）で定義される参照配列と異なってもよい。特に、第１および第２の可変ドメインの配列は、保存的アミノ酸置換のみによって、ｉ）、ｉｉ）、およびｉｉｉ）で定義される参照配列と異なってもよい。

【0231】

本発明の抗原結合タンパク質のアミノ酸配列、および対応するＤＮＡ配列にそれぞれ修飾および変更が加えられてもよく、それでもなお、望ましい特性を有する機能的抗原結合タンパク質またはポリペプチドが帰結する。修飾は、第１または第２の可変ドメイン、特にフレームワーク領域に、または第１または第２の可変ドメインに含まれるＣＤＲに、加えられてもよい。

【0232】

一実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで前記第１の可変ドメインまたは変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３８、配列番号１８１または配列番号１８２のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）、または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１８０、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１８０、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％あるいは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記第１の可変ドメインあるいはその変異型ＣＤＲは、好ましくは配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８、配列番号２４、配列番号２６、配列番号３３、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４２、配列番号４３、配列番号１７９、配列番号４４、配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）、または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％あるいは少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号１６または配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０、配列番号３８、配列番号３９、配列番号２６または配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる）
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0233】

一実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００，からなる群から選択されるアミノ酸配列または配列番号配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一の、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３８、配列番号１８１または配列番号１８２ＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
（ｉｉ）配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２のポリペプチド鎖を含んでなる第２の可変ドメイン
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、ＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンまたはそれらの組み合わせをさらに含んでなる）と
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0234】

したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸配列、または配列番号８５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0235】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸配列、または配列番号８５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0236】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸配列、または配列番号８５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0237】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸配列、または配列番号８５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0238】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８５のアミノ酸配列、または配列番号８５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0239】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列、または配列番号８６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0240】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列、または配列番号８６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）とを含んでなる。

【0241】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列、または配列番号８６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0242】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列、または配列番号８６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0243】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８６のアミノ酸配列、または配列番号８６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0244】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0245】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0246】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0247】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0248】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８７のアミノ酸配列、または配列番号８７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0249】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８８のアミノ酸配列、または配列番号８８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0250】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８８のアミノ酸配列、または配列番号８８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）とを含んでなる。

【0251】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８８のアミノ酸配列、または配列番号８８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0252】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８８のアミノ酸配列、または配列番号８８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0253】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８８のアミノ酸配列、または配列番号８８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0254】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列、または配列番号８９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２７のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0255】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列、または配列番号８９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２７のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0256】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列、または配列番号８９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２７のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0257】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列、または配列番号８９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２７のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0258】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号８９のアミノ酸配列、または配列番号８９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２７のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0259】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列、または配列番号９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0260】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列、または配列番号９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0261】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列、または配列番号９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0262】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列、または配列番号９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0263】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９０のアミノ酸配列、または配列番号９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0264】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９１のアミノ酸配列、または配列番号９１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0265】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９１のアミノ酸配列、または配列番号９１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0266】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９１のアミノ酸配列、または配列番号９１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0267】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９１のアミノ酸配列、または配列番号９１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0268】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９１のアミノ酸配列、または配列番号９１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0269】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９２のアミノ酸配列、または配列番号９２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0270】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９２のアミノ酸配列、または配列番号９２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0271】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９２のアミノ酸配列、または配列番号９２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0272】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９２のアミノ酸配列、または配列番号９２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0273】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９２のアミノ酸配列、または配列番号９２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0274】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９３のアミノ酸配列、または配列番号９３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0275】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９３のアミノ酸配列、または配列番号９３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0276】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９３のアミノ酸配列、または配列番号９３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0277】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９３のアミノ酸配列、または配列番号９３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0278】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９３のアミノ酸配列、または配列番号９３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0279】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９４のアミノ酸配列、または配列番号９４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0280】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９４のアミノ酸配列、または配列番号９４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0281】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９４のアミノ酸配列、または配列番号９４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0282】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９４のアミノ酸配列、または配列番号９４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0283】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９４のアミノ酸配列、または配列番号９４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0284】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９５のアミノ酸配列、または配列番号９５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0285】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９５のアミノ酸配列、または配列番号９５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0286】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９５のアミノ酸配列、または配列番号９５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0287】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９５のアミノ酸配列、または配列番号９５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0288】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９５のアミノ酸配列、または配列番号９５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0289】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９６のアミノ酸配列、または配列番号９６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0290】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９６のアミノ酸配列、または配列番号９６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0291】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９６のアミノ酸配列、または配列番号９６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0292】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９６のアミノ酸配列、または配列番号９６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0293】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９６のアミノ酸配列、または配列番号９６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0294】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列、または配列番号９７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0295】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列、または配列番号９７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0296】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列、または配列番号９７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0297】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列、または配列番号９７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0298】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９７のアミノ酸配列、または配列番号９７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３５のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0299】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９８のアミノ酸配列、または配列番号９８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0300】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９８のアミノ酸配列、または配列番号９８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0301】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９８のアミノ酸配列、または配列番号９８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0302】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９８のアミノ酸配列、または配列番号９８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0303】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９８のアミノ酸配列、または配列番号９８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0304】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９９のアミノ酸配列、または配列番号９９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0305】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９９のアミノ酸配列、または配列番号９９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0306】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９９のアミノ酸配列、または配列番号９９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0307】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９９のアミノ酸配列、または配列番号９９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0308】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号９９のアミノ酸配列、または配列番号９９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0309】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0310】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0311】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0312】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0313】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１００のアミノ酸配列、または配列番号１００と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0314】

別の実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、およびｆ配列番号３８、配列番号２４、配列番号２６、配列番号３３、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４２、配列番号４３、配列番号１７９、配列番号４４、配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
（ｉｉ）配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２のポリペプチド鎖を含んでなる第２の可変ドメイン
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、ＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンまたはそれらの組み合わせをさらに含んでなる）と
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0315】

したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０１のアミノ酸配列、または配列番号１０１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0316】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０１のアミノ酸配列、または配列番号１０１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）とを含んでなる。

【0317】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０１のアミノ酸配列、または配列番号１０１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0318】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０１のアミノ酸配列、または配列番号１０１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0319】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０１のアミノ酸配列、または配列番号１０１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0320】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０２のアミノ酸配列、または配列番号１０２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0321】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０２のアミノ酸配列、または配列番号１０２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0322】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０２のアミノ酸配列、または配列番号１０２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0323】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０２のアミノ酸配列、または配列番号１０２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0324】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０２のアミノ酸配列、または配列番号１０２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0325】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列、または配列番号１０３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0326】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列、または配列番号１０３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0327】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列、または配列番号１０３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0328】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列、または配列番号１０３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0329】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０３のアミノ酸配列、または配列番号１０３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、および位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0330】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列、または配列番号１０４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0331】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列、または配列番号１０４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0332】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列、または配列番号１０４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0333】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列、または配列番号１０４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0334】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０４のアミノ酸配列、または配列番号１０４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0335】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０５のアミノ酸配列、または配列番号１０５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0336】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０５のアミノ酸配列、または配列番号１０５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0337】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０５のアミノ酸配列、または配列番号１０５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0338】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０５のアミノ酸配列、または配列番号１０５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0339】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０５のアミノ酸配列、または配列番号１０５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0340】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０６のアミノ酸配列、または配列番号１０６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0341】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０６のアミノ酸配列、または配列番号１０６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0342】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０６のアミノ酸配列、または配列番号１０６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0343】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０６のアミノ酸配列、または配列番号１０６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0344】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０６のアミノ酸配列、または配列番号１０６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0345】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０７のアミノ酸配列、または配列番号１０７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0346】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０７のアミノ酸配列、または配列番号１０７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0347】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０７のアミノ酸配列、または配列番号１０７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0348】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０７のアミノ酸配列、または配列番号１０７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0349】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０７のアミノ酸配列、または配列番号１０７と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0350】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０８のアミノ酸配列、または配列番号１０８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0351】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０８のアミノ酸配列、または配列番号１０８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0352】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０８のアミノ酸配列、または配列番号１０８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0353】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０８のアミノ酸配列、または配列番号１０８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0354】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０８のアミノ酸配列、または配列番号１０８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４３のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0355】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列、または配列番号１０９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0356】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列、または配列番号１０９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0357】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列、または配列番号１０９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0358】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列、または配列番号１０９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0359】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１０９のアミノ酸配列、または配列番号１０９と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0360】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１８０のアミノ酸配列、または配列番号１８０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0361】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１８０のアミノ酸配列、または配列番号１８０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0362】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１８０のアミノ酸配列、または配列番号１８０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0363】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１９０のアミノ酸配列、または配列番号１９０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0364】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１８０のアミノ酸配列、または配列番号１８０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号１７９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0365】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１０のアミノ酸配列、または配列番号１１０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0366】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１０のアミノ酸配列、または配列番号１１０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0367】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１０のアミノ酸配列、または配列番号１１０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0368】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１０のアミノ酸配列、または配列番号１１０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0369】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１０のアミノ酸配列、または配列番号１１０と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４４のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0370】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１１のアミノ酸配列、または配列番号１１１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0371】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１１のアミノ酸配列、または配列番号１１１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0372】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１１のアミノ酸配列、または配列番号１１１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0373】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１１のアミノ酸配列、または配列番号１１１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0374】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１１のアミノ酸配列、または配列番号１１１と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0375】

別の実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号１６または配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０、配列番号３８、配列番号３９、配列番号２６または配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
（ｉｉ）配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２のポリペプチド鎖を含んでなる第２の可変ドメイン
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、ＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンまたはそれらの組み合わせをさらに含んでなる）と
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0376】

配列番号１６に記載のＣＤＲａ１
したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0377】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0378】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0379】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0380】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0381】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0382】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0383】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0384】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0385】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0386】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0387】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0388】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0389】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0390】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0391】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0392】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0393】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0394】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0395】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0396】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0397】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0398】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0399】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0400】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0401】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0402】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）とを含んでなる。

【0403】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0404】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0405】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0406】

配列番号１１に記載のＣＤＲａ１
したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0407】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0408】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0409】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0410】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0411】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0412】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0413】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0414】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0415】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0416】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0417】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0418】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0419】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0420】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0421】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0422】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0423】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0424】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0425】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0426】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0427】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）、と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0428】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0429】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0430】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0431】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0432】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0433】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0434】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0435】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0436】

別の実施形態では、本発明は、
（ｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型からなる群から選択されるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号１６または配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０、配列番号３８、配列番号３９、配列番号２６または配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
（ｉｉ）配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％同一であり、好ましくは少なくとも９０％または９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２のポリペプチド鎖を含んでなる第２の可変ドメイン
（ここで、前記変異型は、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、ＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンまたはそれらの組み合わせをさらに含んでなる）と
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0437】

配列番号１６に記載のＣＤＲａ１
したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0438】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0439】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号１８３のアミノ酸配列、または配列番号１８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0440】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0441】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0442】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0443】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0444】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0445】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0446】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0447】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0448】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0449】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0450】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0451】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0452】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0453】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0454】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0455】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0456】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0457】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0458】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0459】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0460】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0461】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0462】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0463】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0464】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0465】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0466】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0467】

配列番号１１に記載のＣＤＲａ１
したがって、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0468】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0469】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0470】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0471】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１３のアミノ酸配列、または配列番号１１３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0472】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0473】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0474】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0475】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0476】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１４のアミノ酸配列、または配列番号１１４と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0477】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0478】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0479】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）、と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0480】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0481】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１５のアミノ酸配列、または配列番号１１５と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３９のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0482】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0483】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0484】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0485】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0486】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１６のアミノ酸配列、または配列番号１１６と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２６のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0487】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0488】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0489】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0490】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0491】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号６３のアミノ酸配列、または配列番号６３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0492】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0493】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置８６のセリンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0494】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９１のイソロイシンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0495】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0496】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、配列番号１１８のアミノ酸配列、または配列番号１１８と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖（ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号２１のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、ここで、第１の可変ドメインは、好ましくはＩＭＧＴ位置５５のセリンをさらに含んでなる）と、
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなるかまたはそれからなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその（ｔｈｅｒｅｏｆｔｈｅｒｅｏｆ訂正）変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなり、
ここで、第２の可変ドメインは、好ましくは、ＩＭＧＴ位置８５のフェニルアラニン、ＩＭＧＴ位置８６のセリン、ＩＭＧＴ位置９１のイソロイシン、およびＩＭＧＴ位置９３のアスパラギンをさらに含んでなる）と
を含んでなる。

【0497】

一実施形態では、第１のポリペプチドと第２のポリペプチドは、特に共有結合を介して一緒に連結されている。

【0498】

本明細書における「共有結合」とは、例えば、ポリペプチドリンカーなどのリンカーを介した、ジスルフィド架橋またはペプチド結合、または共有結合を指す。

【0499】

「リンカー」または「リンカー配列」または「ポリペプチドリンカー」は、本明細書で上に「定義」の項で「リンカー」の下に定義される。

【0500】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、
（ｉ）１つまたは複数のさらなる抗原結合部位；
（ｉｉ）任意選択的に、細胞質シグナル伝達領域を含む膜貫通領域、
（ｉｉｉ）診断薬；
（ｉｖ）治療薬；または
（ｖ）ＰＫ修飾部分
の１つまたは複数をさらに含んでなる。

【0501】

当業者に知られているように、例えば、抗体の文脈における抗原結合部位は、典型的には、抗原に結合する６つのＣＤＲによって形成される。

【0502】

本発明の文脈では、１つまたは複数の結合部位は、好ましくは抗原ＣＤ３（ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、およびＣＤ３ε鎖など）、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３２ａ、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ４１、ＣＤ４１ｂ、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４９、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ６４、ＣＤ６８、ＣＤ９４、ＣＤ９０、ＣＤ１１７、ＣＤ１２３、ＣＤ１２５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１９３、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８７、Ｎｋｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＧＩＴＲ、Ｆ_ｃεＲＩ、ＴＣＲα／βおよびＴＣＲγ／δ、ＨＬＡ－ＤＲからなる群から選択される抗原に、またはエフェクター細胞、好ましくはＣＤ３または２８、より好ましくはＣＤ３の抗原に、結合する結合部位から選択される。

【0503】

「ＣＤ３」はタンパク質複合体であり、４つの異なる鎖から構成される。哺乳類では、複合体は、ＣＤ３γ鎖、ＣＤ３δ鎖、および２つのＣＤ３ε鎖を含有するこれらの鎖は、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）およびζ鎖として知られている分子に結合し、Ｔリンパ球中で活性化シグナルを生じる。

【0504】

「ＣＤ２８」はまた、Ｔ細胞上でも発現され、Ｔ細胞活性化に必要な共刺激シグナルを提供し得る。ＣＤ２８は、Ｔ細胞の増殖と生存、サイトカイン産生、およびＴヘルパー２型発生に重要な役割を果たす。

【0505】

いくつかの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質の結合部位の１つは、Ｔ細胞特異的受容体分子および／またはナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）特異的受容体分子に結合できる。特定の実施形態では、抗原結合タンパク質は、ＣＤ３Ｔ細胞共受容体と複合体を形成する。

【0506】

いくつかの実施形態では、Ｔ細胞特異的受容体は、ＣＤ３Ｔ細胞共受容体である。

【0507】

いくつかの実施形態では、Ｔ細胞特異的受容体は、ＣＤ２８、ＣＤ１３４、４－１ＢＢ、ＣＤ５またはＣＤ９５である。

【0508】

「ＣＤ２８」はまた、Ｔ細胞上でも発現され、Ｔ細胞活性化に必要な共刺激シグナルを提供し得る。ＣＤ２８は、Ｔ細胞の増殖と生存、サイトカイン産生、およびＴヘルパー２型発生に重要な役割を果たす。

【0509】

「ＣＤ１３４」はまた、Ｏｘ４０とも称される。ＣＤ１３４／ＯＸ４０は、活性化に続いて２４～７２時間後に発現しており、二次共刺激分子を定義すると考えられる。

【0510】

「４－１ＢＢ」は、抗原提示細胞（ＡＰＣ）上の４－１ＢＢリガンドに結合でき、それによってＴ細胞の共刺激シグナルが生じる。

【0511】

「ＣＤ５」は主にＴ細胞上に見られる受容体の別の例であり、ＣＤ５はＢ細胞上にも低レベルで見られる。

【0512】

「ＣＤ９５」は、Ｔ細胞機能を修飾する受容体のさらなる例であり、その他の細胞の表面上で発現されるＦａｓリガンドによるアポトーシスシグナル伝達を媒介するＦａｓ受容体としても知られている。ＣＤ９５は、休止状態のＴリンパ球におけるＴＣＲ／ＣＤ３駆動型シグナル伝達経路を調節することが報告されている。

【0513】

「ＮＫ細胞特異的受容体分子」は、例えば、ＣＤ１６、低親和性Ｆ_ｃ受容体およびＮＫＧ２Ｄである。

【0514】

Ｔ細胞とナチュラルキラー（ＮＫ）細胞の双方の表面上に存在する受容体分子の一例は、ＣＤ２、およびＣＤ２スーパーファミリーのさらなるメンバーである。ＣＤ２は、ＴおよびＮＫ細胞上で共刺激分子として機能できる。

【0515】

本発明の文脈における「膜貫通領域」は、例えば、ＴＣＲαまたはβ膜貫通ドメインであってもよい。

【0516】

「細胞質シグナル伝達領域」は、例えば、ＴＣＲαまたはβ細胞内ドメインであってもよい。

【0517】

本明細書における「診断薬」は、（直接的または間接的に）シグナルを提供する、蛍光分子、放射性分子、または当該技術分野で公知の任意のその他の標識などの検出可能な分子または物質を指す。

【0518】

当該技術分野で公知の「蛍光分子」としては、イソチオシアン酸フルオレセイン（ＦＩＴＣ）、フィコエリトリン（ＰＥ）、青色レーザーで使用するためのフルオロフォア（例えば、ＰｅｒＣＰ、ＰＥ－Ｃｙ７、ＰＥ－Ｃｙ５、ＦＬ３およびＡＰＣまたはＣｙ５、ＦＬ４）、赤色、紫色、またはＵＶレーザーで使用するためのフルオロフォア（例えば、パシフィックブルー、パシフィックオレンジ）が挙げられる。

【0519】

「放射性分子」としては、Ｉ^１２３、Ｉ^１２４、Ｉｎ^１１１、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｔｃ^９９などのシンチグラフィー研究用の放射性原子が挙げられるが、これらに限定されるものではない。本発明の抗原結合タンパク質はまた、ヨウ素１２３、インジウム１１１、フッ素１９、炭素１３、窒素１５、酸素１７、ガドリニウム、マンガンまたは鉄などの、核磁気共鳴（ＮＭＲ）イメージング（磁気共鳴画像法、ＭＲＩとしても知られている）のためのスピン標識を含んでなってもよい。

【0520】

このような診断薬は、抗原結合タンパク質に直接結合（すなわち物理的に結合）されるか、または間接的に結合されてもよい。

【0521】

本明細書における「治療薬」は、治療効果を有する薬剤を指す。一実施形態では、このような治療薬は、細胞傷害剤または放射性同位体などの増殖阻害剤であってもよい。

【0522】

無差別に使用され得る「増殖阻害剤」または「抗増殖剤」は、生体外または生体内のどちらかで、細胞、特に腫瘍細胞の増殖を阻害する化合物または組成物を指す。

【0523】

「細胞傷害剤」という用語は、本明細書の用法では、細胞の機能を阻害するかまたは妨げる、および／または細胞の破壊を引き起こす物質を指す。「細胞傷害剤」という用語は、化学療法剤、酵素、抗生物質、および細菌、真菌、植物または動物由来の小分子毒素または酵素活性毒素などの毒素（それらの断片および／または変異型を含む）、ならびに以下に開示されている様々な抗腫瘍剤または抗がん剤を含むことが意図される。いくつかの実施形態では、細胞傷害剤は、タキソイド、ビンカ、タキサン、メイタンシノイドまたはＤＭ１もしくはＤＭ４などのメイタンシノイド類似体、小型薬剤、トマイマイシンまたはピロロベンゾジアゼピン誘導体、クリプトフィシン誘導体、レプトマイシン誘導体、オーリスタチンまたはドラスタチン類似体、プロドラッグ、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、ＤＮＡアルキル化剤、抗チューブリン剤、ＣＣ－１０６５またはＣＣ－１０６５類似体である。

【0524】

「放射性同位体」という用語は、Ａｔ^２１１、Ｂｉ^２１２、Ｅｒ^１６９、Ｉ^１３１、Ｉ^１２５、Ｙ^９０、Ｉｎ^１１１、Ｐ^３２、Ｒｅ^１８６、Ｒｅ^１８８、Ｓｍ^１５３、Ｓｒ^８９、およびＬｕの放射性同位体など、がんの治療に適切な放射性同位体を含むことが意図される。このような放射性同位元素は、一般的に主にβ線を放出する。一実施形態では、放射性同位体は、α放射性同位体、より正確には、α線を放出するトリウム２２７である。

【0525】

いくつかの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、直接、または切断可能または切断不能なリンカーを介して、少なくとも１つの増殖阻害剤に共有結合する。このような少なくとも１つの増殖阻害剤が付着する抗原結合タンパク質はまた、コンジュゲートと称されることもある。

【0526】

このようなコンジュゲート、例えば免疫複合体の調製は、その内容全体が参照により本明細書に援用される、国際公開第２００４／０９１６６８号パンフレットまたはＨｕｄｅｃｚ，Ｆ．，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２９８：２０９－２２３（２００５）、およびＫｉｒｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｏｒｇ Ｃｈｅｍ．４４（１５）：５４０５－５４１５（２００５）に記載され、当業者によって、このような少なくとも１つの増殖阻害剤が付着している、本発明の抗原結合タンパク質の調製に移されてもよい。

【0527】

少なくとも１つの増殖阻害剤の付着の文脈における「リンカー」は、ポリペプチドを薬物部分に共有結合的に付着させる、共有結合または原子の鎖を含んでなる化学部分を意味する。

【0528】

コンジュゲートは、インビトロ法によって調製されてもよい。薬物またはプロドラッグを抗体に結合させるために、結合基が使用される。適切な連結基は当該技術分野で周知であり、ジスルフィド基、チオエーテル基、酸不安定基、光不安定基、ペプチダーゼ不安定基、およびエステラーゼ不安定基が挙げられる。本発明の抗原結合タンパク質と細胞傷害剤または増殖阻害剤との結合は、Ｎ－スクシンイミジルピリジルジチオブチレート（ＳＰＤＢ）、ブタン酸４－［（５－ニトロ－２－ピリジニル）ジチオ］－２，５－ジオキソ－１－ピロリジニルエステル（ニトロ－ＳＰＤＢ）、４－（ピリジン－２－イルジスルファニル）－２－スルホ－酪酸（スルホ－ＳＰＤＢ）、Ｎ－スクシンイミジル（２－ピリジルジチオ）プロピオネート（ＳＰＤＰ）、スクシンイミジル（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート（ＳＭＣＣ）、イミノチオラン（ＩＴ）；イミドエステルの二官能性誘導体：（ジメチルアジピミデートＨＣＬなど）、活性エステル（ジスクシンイミジルスベレートなど）、アルデヒド（グルタルアルデヒドなど）、ビス－アジド化合物（ビス（ｐ－アジドベンゾイル）－ヘキサンジアミンなど）、ビス－ジアゾニウム誘導体（ビス－（ｐ－ジアゾニウムベンゾイル）－エチレンジアミンなど）、ジイソシアネート（トルエン２，６－ジイソシアネートなど）、およびビス活性フッ素化合物（１，５－ジフルオロ－２，４－ジニトロベンゼンなど）をはじめとするが、これらに限定されるものではない、様々な二機能性タンパク質結合剤を使用して行われてもよい。例えば、リシン免疫毒素は、Ｖｉｔｅｔｔａ ｅｔ ａｌ（１９８７）に記載されたように調製され得る。炭素標識された１－イソチオシアナトベンジルメチルジエチレントリアミン五酢酸（ＭＸ－ＤＴＰＡ）は、放射性ヌクレオチドを抗体に結合させるための例示的なキレート剤である（国際公開第９４／１１０２６号パンフレット）。

【0529】

リンカーは、細胞内の細胞傷害剤または増殖阻害剤の放出を促進する「切断可なリンカー」であってもよい。例えば、酸不安定リンカー、ペプチダーゼ感受性リンカー、エステラーゼ不安定リンカー、光不安定リンカー、またはジスルフィド含有リンカー（例えば、米国特許第５，２０８，０２０号明細書を参照されたい）が使用されてもよい。リンカーはまた、場合によっては、より良好な耐性をもたらすかもしれない「切断不能リンカー」（例えばＳＭＣＣリンカー）であってもよい。

【0530】

代案としては、本発明の抗体および細胞傷害性または増殖阻害ポリペプチドを含んでなる融合タンパク質は、組換え技術またはペプチド合成によって生成されてもよい。ＤＮＡの長さは、互いに隣接するか、またはコンジュゲートの所望の特性を破壊しないリンカーペプチドをコード化する領域によって分離されている、コンジュゲートの２つの部分をコードする、それぞれの領域を含んでなってもよい。

【0531】

本発明の抗原結合タンパク質はまた、プロドラッグ（例えばペプチジル化学療法剤、国際公開第８１／０１１４５号パンフレットを参照されたい）を活性抗がん剤に変換するプロドラッグ活性化酵素に、ポリペプチドをコンジュゲートすることによって、依存性酵素媒介プロドラッグ療法で使用されてもよい（例えば、国際公開第８８／０７３７８号パンフレットおよび米国特許第４，９７５，２７８号明細書を参照されたい）。

【0532】

本明細書における「ＰＫ修飾部分」は、本発明の抗原結合タンパク質の薬物動態を修飾する部分を指す。したがって、この部分は、特に、本発明の抗原結合タンパク質の生体内半減期および分布を改変する。好ましい実施形態では、ＰＫ修飾部分は、抗原結合タンパク質の半減期を延長する。ＰＫ修飾部分の例としては、ＰＥＧ（Ｄｏｚｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２０１５）Ｉｎｔ Ｊ Ｍｏｌ Ｓｃｉ．Ｏｃｔ ２８；１６（１０）：２５８３１－６４およびＪｅｖｓｅｖａｒ ｅｔ ａｌ．，（２０１０）Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｊ．Ｊａｎ；５（１）：１１３－２８）、Ｐａｓ化（Ｓｃｈｌａｐｓｃｈｙ ｅｔ ａｌ．，（２０１３）Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ Ｓｅｌ．Ａｕｇ；２６（８）：４８９－５０１）、アルブミン（Ｄｅｎｎｉｓ ｅｔ ａｌ．，（２００２）Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ．Ｓｅｐ ２０；２７７（３８）：３５０３５－４３）、抗体のＦ_ｃ部分および／または非構造化ポリペプチド（Ｓｃｈｅｌｌｅｎｂｅｒｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，（２００９）Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｄｅｃ；２７（１２）：１１８６－９０）が挙げられるが、これらに限定されるものではない。

【0533】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、酵素、サイトカイン（ヒトＩＬ－２、ＩＬ－７またはＩＬ－１５などの）、ナノキャリア、または核酸の１つまたは複数をさらに含んでなる。

【0534】

上記のように、一実施形態では、抗原結合タンパク質は、二重特異性抗原結合タンパク質であってもよい。少なくとも２つの結合部位を有する抗原結合タンパク質の多くの異なるフォーマットが当該技術分野で記載されており、抗体ベースのフォーマットは、例えば、ダイアボディ、交差二重可変ドメイン（ＣＯＤＶ）および／または二重可変ドメイン（ＤＶＤ）タンパク質である。これらの異なる二重特異性抗体の概要およびそれらを生成する方法は、例えば、Ｂｒｉｎｋｍａｎｎ Ｕ．ａｎｄ Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ Ｅ．Ｅ．ＭＡｂｓ．２０１７ Ｆｅｂ－Ｍａｒ；９（２）：１８２－２１２で開示されている。より具体的には、ＤＶＤフォーマットは、例えば、以下の科学論文で開示されている（Ｗｕ Ｃ ｅｔ ａｌ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ ２００７；２５：１２９０－７；ＰＭＩＤ：１７９３４４５２；Ｗｕ Ｃ．ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２００９；１：３３９－４７；Ｌａｃｙ ＳＥ ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２０１５；７：６０５－１９；ＰＭＩＤ：２５７６４２０８；Ｃｒａｉｇ ＲＢ ｅｔ ａｌ．ＰＬｏＳ Ｏｎｅ ２０１２；７：ｅ４６７７８；ＰＭＩＤ：２３０５６４４８；Ｐｉｃｃｉｏｎｅ ＥＣ ｅｔ ａｌ．ＭＡｂｓ ２０１５）。ＣＯＤＶは、例えば、Ｏｎｕｏｈａ ＳＣ ｅｔ ａｌ．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ．２０１５ Ｏｃｔ；６７（１０）：２６６１－７２、または例えば、国際公開第２０１２／１３５３４５号パンフレット、国際公開第２０１６／１１６６２６号パンフレットで開示されている。二重特異性ダイアボディは、例えば、Ｈｏｌｌｉｇｅｒ Ｐ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ １９９６；９：２９９－３０５；ＰＭＩＤ：８７３６４９７；Ａｔｗｅｌｌ ＪＬ ｅｔ ａｌ．Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ １９９６；３３：１３０１－１２；ＰＭＩＤ：９１７１８９０；Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＲＥ，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ １９９７；１５：６２９－３１；ＰＭＩＤ：９２１９２６３；Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＲＥ ｅｔ ａｌ．Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １９９７；３：１３７－４４；ＰＭＩＤ：９２３７０９８；Ｃｏｃｈｌｏｖｉｕｓ Ｂ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２０００；６０：４３３６－４１；ＰＭＩＤ：１０９６９７７２；およびＤｅＮａｒｄｏ ＤＧ ｅｔ ａｌ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｔｈｅｒ Ｒａｄｉｏｐｈａｒｍ ２００１；１６：５２５－３５；ＰＭＩＤ：１１７８９０２９に記載されている。

【0535】

このような二重特異性抗体を製造する技術もまた、上記に引用される先行技術で開示されており、したがって、当業者は、本明細書で定義されるＣＤＲまたは可変ドメインを容易に使用して、本明細書で開示されているフォーマットで本発明の抗原結合タンパク質を作製および製造し得る。

【0536】

したがって、本発明は、２つの抗原結合部位（抗原結合部位ＡおよびＢなど）を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなる、抗原結合タンパク質にさらに言及し、ここで、第１のポリペプチド鎖は、式、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ［Ｉ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_３は第３の可変ドメインであり；Ｖ_４は第４の可変ドメインであり；Ｌ_１およびＬ_２はリンカーであり；Ｌ_２は存在してもまたは存在しなくてもよく；Ｃ_Ｌは軽鎖定常ドメインまたはその一部であり、存在するかまたは存在せず、
ここで、第２のポリペプチド鎖は、式、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１［ＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_５は第１の可変ドメインであり；Ｖ_６は第６の可変ドメインであり；Ｌ_３およびＬ_４はリンカーであり；Ｌ_４は存在してもまたは存在しなくてもよく；Ｃ_Ｈ１は軽鎖定常ドメインまたはその一部であり、存在するかまたは存在せず、ここで、Ｖ_３またはＶ_４は本明細書で上に定義される第１の可変ドメインであり、Ｖ_５またはＶ_６は本明細書で上に定義される第２の可変ドメインであるか、または
Ｖ_５またはＶ_６は、本明細書で上に定義される第１の可変領域であり、Ｖ_３またはＶ_４は、本明細書で上に定義される第２の可変領域であり、ここで、
Ｖ_３およびＶ_５が本明細書で上に定義される可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_６の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、ここで、
Ｖ_３およびＶ_６が可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_５の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、ここで、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインは、一緒に１つの抗原結合部位を形成する。

【0537】

リンカーＬ_１、Ｌ_２、Ｌ_３、Ｌ_４、Ｌ_５は、本明細書で上に「定義」の項で定義される。

【0538】

関連する実施形態では、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインは、一緒に１つの抗原結合部位Ｂを形成し、本明細書で上に定義される第１および第２の可変ドメインは、１つの抗原結合部位Ａを形成する。

【0539】

しかしいくつかの実施形態では、いくつかのリンカーの長さは、特定のフォーマットにとって好ましいかもしれない。しかしながら、リンカーの長さおよびそれらのアミノ酸配列に関する知識は、当該技術分野の一般知識に属し、異なるフォーマットのためのリンカーならびにリンカーアミノ酸配列は、最新技術の一部であり、本明細書で上記に引用した開示に開示されている。

【0540】

本明細書で上に定義される第１および第２の可変ドメインを形成する抗原結合部位Ａが、本発明の文脈で本明細書に記載されるようなＰＲＡＭＥペプチド／ＭＨＣ複合体に特異的に結合することは、当業者であれば理解できるであろう。

【0541】

ＤＶＤフォーマットの場合のように、軽鎖および重鎖可変ドメインが平行配向であってもよく、αおよびβ可変ドメインが平行配向であってもよく、またはＣＯＤＶフォーマットの場合のように、軽鎖および重鎖の可変ドメインが交差配向であってもよく、αおよびβ可変ドメインが交差配向であってもよいことは、当業者であれば理解できるであろう。

【0542】

したがって、一実施形態では、Ｖ_３は本明細書で上に定義される第１の可変ドメインであってＶ_５は第２の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであってＶ_６は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_４は重鎖可変ドメインであってＶ_６は軽鎖可変ドメインであるか、または
Ｖ_３は本明細書で上に定義される第２の可変ドメインであってＶ_５は第１の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであってＶ_６は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_４は重鎖可変ドメインであってＶ_６は軽鎖可変ドメインであるか、または
Ｖ_３は本明細書で上に定義される第１の可変ドメインであってＶ_６は第２の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであってＶ_５は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_４は重鎖可変ドメインであってＶ_５は軽鎖可変ドメインであるか、または
Ｖ_３は本明細書で上に定義される第２の可変ドメインであってＶ_６は第１の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであってＶ_５は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_４は重鎖可変ドメインであってＶ_５は軽鎖可変ドメインであり、
Ｖ_４は本明細書で上に定義される第１の可変ドメインであってＶ_５は第２の可変ドメインであり、Ｖ_３は軽鎖可変ドメインであってＶ_６は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_３は重鎖可変ドメインであってＶ_６は軽鎖可変ドメインであるか、または
Ｖ_４は本明細書で上に定義される第２の可変ドメインであってＶ_５は第１の可変ドメインであり、Ｖ_３は軽鎖可変ドメインであってＶ_６は重鎖可変ドメインであるか、またはＶ_３は重鎖可変ドメインであってＶ６は軽鎖可変ドメインであり、

【0543】

好ましい実施形態では、Ｖ_３は本発明の文脈で定義される第１の可変ドメインであって、Ｖ_６は第２の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであって、Ｖ_５は重鎖可変ドメインであるか、または
Ｖ_３は第１の可変ドメインであってＶ_６は本発明の文脈で定義される第２の可変ドメインであり、Ｖ_４は重鎖可変ドメインであってＶ_５は軽鎖可変ドメインである。

【0544】

一実施形態では、式［Ｉ］のポリペプチドは、式［Ｉ］のポリペプチドのＣ末端に、リンカー（Ｌ_５）とＦ_ｃドメインまたはその一部をさらに含んでなり、および／またはここで、式［ＩＩ］のポリペプチドは、式［ＩＩ］のポリペプチドのＣ末端に、リンカー（Ｌ_６）とＦ_ｃドメインまたはその一部とをさらに含んでなる。

【0545】

Ｆ_ｃドメインは、本明細書で上に「定義」の項で定義されるとおりである。

【0546】

一実施形態では、Ｆ_ｃドメインはＮ２９７Ｑ変異を含んでなり、Ｆ_ｃ部分内のＮ－グリコシル化部位を除去し、このような変異はＦ_ｃ－γ－受容体相互作用を無効化する。本発明の文脈で採用されるかもしれない可能なＦ_ｃ変異は、本明細書で以下に開示されている。

【0547】

一実施形態では、抗原結合タンパク質は、２つの抗原結合部位（ＡおよびＢなど）を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなり、
ここで、１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＩＩ］、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＶ］、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_３、Ｌ_１、Ｖ_４、Ｌ_２、Ｃ_Ｌ、Ｖ_５、Ｌ_３、Ｖ_６、Ｌ_４、Ｃ_Ｈ１は、本明細書で上に定義されるとおりであり、ここで、Ｌ５およびＬ６は、存在するかまたは存在しないリンカーであり、ここで、Ｆ_ｃ１、およびＦ_ｃ２は、Ｆ_ｃドメインであり、ここで、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２は同じかまたは異なり、好ましくは異なる抗原結合タンパク質である。

【0548】

Ｆ_ｃドメインは、本明細書で上に「定義」の項で定義されるとおりである。

【0549】

一実施形態では、Ｆ_ｃ１は、配列番号６８（ホール）のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、Ｆ_ｃ２は、配列番号６６（ノブ）のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、逆もまた同様である。より好ましくはＶ_４またはＶ_３が重鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ１は配列番号６８のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、それに応じてＶ_５またはＶ_６が軽鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ２は配列番号６６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または
Ｖ_４またはＶ_３が軽鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ１は配列番号６６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、それに応じて、Ｖ_５またはＶ_６が重鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ２は配列番号６８のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる。

【0550】

一実施形態では、重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）および軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）は、ＣＤ３（ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、およびＣＤ３ε鎖など）、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３２ａ、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ４１、ＣＤ４１ｂ、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４９、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ６４、ＣＤ６８、ＣＤ９４、ＣＤ９０、ＣＤ１１７、ＣＤ１２３、ＣＤ１２５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１９３、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８７、Ｎｋｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＧＩＴＲ、Ｆ_ｃεＲＩ、ＴＣＲα／βおよびＴＣＲγ／δ、ＨＬＡ－ＤＲからなる群から選択される抗原に結合し、および／またはエフェクター細胞に結合する。

【0551】

さらなる実施形態では、重鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｈ）および軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）は、Ｔ細胞特異的受容体分子および／またはナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）特異的受容体分子に結合し、ここで、Ｔ細胞特異的受容体分子およびナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）特異的受容体分子は、本明細書で上に定義されるとおりである。

【0552】

一実施形態では、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７１のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７２のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号１７３のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７４のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号１７５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７７のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７８のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる

【0553】

好ましくは、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７１のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７２のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号１７５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７７のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または、軽鎖可変ドメインは配列番号６５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７８のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、より好ましくは、軽鎖可変ドメインは配列番号１７５のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、重鎖可変ドメインは配列番号１７６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる。

【0554】

実施例から分かるように、本発明の発明者は、Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディ（ＴＣＥＲ（登録商標））における、ＣＤＲ（例えば、ＨｉＡｆｆ１およびＬｏｗＡｆｆ３のＣＤＲ）に由来するＴＣＲ、より具体的には可変ドメインに由来するＴＣＲ使用を原理の証明として実証し、ここで、第１のポリペプチド鎖は、式［ＩＩＩ］、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
第２のポリペプチド鎖は、式［ＩＶ］、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、本明細書で上に定義されるようなＬ_２、Ｃ_Ｌ、Ｌ_４、Ｃ_Ｈ１、Ｌ_５、およびＬ_６は存在せず、ここで、Ｖ_３、Ｌ_１、Ｖ_４、Ｆ_ｃ１、Ｖ_５、Ｌ_３、Ｖ_６、Ｆ_ｃ２は、本明細書で上に定義されるとおりである。

【0555】

したがって、好ましい一実施形態では、抗原結合タンパク質は、２つの抗原結合部位を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなり、ここで、１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＩＩ］、
Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
１つのポリペプチド鎖は、式［ＩＶ］、
Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１－Ｌ_６－Ｆｃ_２［ＩＶ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｌ_２、Ｃ_Ｌ、Ｌ_５およびＬ_４、Ｃ_Ｈ１、Ｌ_６は存在せず、
ここで、Ｖ_３、Ｌ_１、Ｖ_４、Ｖ_５、Ｌ_３、Ｖ_６は本明細書で上に定義されるようであり、ここで、Ｆ_ｃ１、およびＦ_ｃ２は、Ｆ_ｃドメインであり、ここで、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２は、異なる。

【0556】

同じ実施形態において、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２は、好ましくは、本明細書で上に「定義」の項に記載される「ノブ・インツー・ホールへ」の変異を含んでなる。

【0557】

一実施形態では、好ましくはＶ_３は第１の可変ドメインであってＶ_６は本発明の文脈で定義される第２の可変ドメインであり、Ｖ_４は軽鎖可変ドメインであってＶ_５は重鎖可変ドメインであり、好ましくは、Ｌ_１およびＬ_３は、（配列番号６４）のアミノ酸配列「ＧＧＧＳＧＧＧＧ」を含んでなるかまたはそれからなり、
好ましくはＦ_ｃ１＞は配列番号６６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、Ｆ_ｃ２は配列番号６８のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、逆もまた同様である。

【0558】

より好ましくは、Ｖ_４が重鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ１はアミノ酸配列６８を含んでなるかまたはそれからなり、したがって、Ｖ_５が軽鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ２は配列番号６６のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または
より好ましくはＶ_４が軽鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ１はアミノ酸配列６６を含んでなるかまたはそれからなり、したがって、Ｖ_５が重鎖可変ドメインである場合、Ｆ_ｃ２はアミノ酸配列６８を含んでなるかまたはそれからなり、
軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインは、好ましくは、ＣＤ３、ＴＣＲα／βまたはＣＤ２８、より好ましくはＣＤ３またはＴＣＲα／βである、本明細書で上に定義される抗原に結合する、１つの抗原結合部位を一緒に形成し、
ここで、第１および第２の可変ドメインは、本発明の文脈で定義されるＰＲＡＭＥ抗原ペプチドに特異的に結合する、１つの抗原結合部位を形成する。

【0559】

この実施形態の抗原結合タンパク質は、二重特異性ＴＣＲ、またはＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディと称されることもある。この実施形態の抗原結合タンパク質はまた、ＴＣＥＲ（登録商標）と称されることもある。

【0560】

「ＴＣＥＲ（登録商標）」分子は重特異性Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）であり、本発明の文脈で定義されるような第１および第２の可変ドメインによって形成される第１の抗原結合ドメインと、ＣＤ３に向けられた、またはＴＣＲα／βに向けられた、可変軽鎖および可変重鎖ドメインなどの、リクルーターとも称される、抗体の重鎖および軽鎖可変ドメインによって形成されるさらなる抗原結合ドメインとの２つの抗原結合ドメインを含んでなる、可溶性抗原結合タンパク質である。

【0561】

特定の例では、新たに開発されたいわゆる「Ｆｃ含有ＨｉＡｆｆ１二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディ」抗原結合タンパク質は、以下を含んでなる：
－アミノ酸配列（配列番号１１９）の式Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］の１つの第１のポリペプチド：
ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＳＧＧＧＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰ
（ここで、Ｌ_２、Ｃ_Ｌ、Ｌ_５は存在せず、配列番号６３のＶ_３（ＴＣＲ由来α可変ドメイン）（配列番号１１、配列番号１７および配列番号２１のＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、ＣＤＲａ３は太字）、配列番号６４のＬ_１（下線）、配列番号６５のＶ_４（抗ＣＤ３ Ｖ_Ｌ）、および配列番号６６のＦ_ｃ１（斜体および下線）を含んでなる）；および
－アミノ酸配列（配列番号１２０）の式Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］の１つの第２のポリペプチド：
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＳＧＧＧＧＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰ
（ここで、Ｌ_４、Ｃ_Ｈ１、Ｌ_６は存在せず、配列番号６７のＶ_５（抗ＣＤ３ Ｖ_Ｈ）、配列番号６７のＬ_３（下線）、配列番号６７のＶ_４（β可変ドメイン由来ＴＣＲ）（配列番号４５、配列番号４６、配列番号４８のＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、ＣＤＲａ３は太字）、および配列番号６８のＦ_ｃ２（斜体および下線）を含んでなり、ここで、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２配列は、システインを介して軽鎖を連結する必要がないため、システインからセリンへの変異（太字で示されるＳ）、Ｆｃ－γ受容体相互作用を無効化する、ＩｇＧ２ヒンジに類似したＩｇＧ１ヒンジ領域（太字で示されるＰＶＡ）の変異、Ｆ_ｃ部分のＮ－グリコシル化部位を除去してＦ_ｃγ受容体間の相互作用を無効化する、Ｎ２９７Ｑ変異（太字のＱ）、さらにＦ_ｃ２の場合はホール変異、Ｆ_ｃ１の場合はノブ変異を含んでなる）。

【0562】

したがって、好ましい一実施形態では、Ｆ_ｃ１は配列番号６６であり、Ｆ_ｃ２は配列番号６８であり、逆もまた同様である。

【0563】

一実施形態では、本発明は、
配列番号１１９のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、式Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］の第１のポリペプチドと、配列番号１２０のアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、式Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］の第２のポリペプチドと
を含んでなる、抗原結合タンパク質に言及する。

【0564】

また、エフェクター機能に関して、例えば、抗原結合タンパク質の抗原依存性細胞媒介性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）および／または補体依存性細胞傷害性（ＣＤＣ）を増強または低減するように、本発明の抗原結合タンパク質を修飾することが望ましくあってもよい。これは、本発明の抗原結合タンパク質との関連で、本明細書ではＦ_ｃ変異型とも称される、抗原結合タンパク質のＦ_ｃ領域に、１つまたは複数のアミノ酸置換を導入することによって達成されてもよい。代案としては、またはそれに加えて、Ｆ_ｃ領域にシステイン残基が導入されて、この領域での鎖間ジスルフィド結合の形成が可能になってもよい。このように作製されたホモ二量体抗原結合タンパク質は、内部移行能力の改善または減少、および／または補体媒介性細胞滅殺および／または抗体依存性細胞傷害性（ＡＤＣＣ）の増加を有してもよい（Ｃａｒｏｎ ＰＣ．ｅｔ ａｌ．１９９２；およびＳｈｏｐｅｓ Ｂ．１９９２）。

【0565】

本発明の抗原結合タンパク質の別のタイプのアミノ酸修飾、すなわち抗原結合タンパク質に見られる１つまたは複数の炭水化物部分を削除すること、および／または抗原結合タンパク質中に存在しない１つまたは複数のグリコシル化部位を付加することは、抗原結合タンパク質の元来のグリコシル化パターンを変化させるのに有用であってもよい。トリペプチド配列アスパラギン－Ｘ－セリン、およびアスパラギン－Ｘ－スレオニン（ここで、Ｘはプロリン以外の任意のアミノ酸である）のどちらかの存在は、潜在的なグリコシル化部位を生じる。抗原結合タンパク質へのグリコシル化部位の付加または欠失は、好都合には、アミノ酸配列を改変して（Ｎ結合型グリコシル化部位の場合）、それが上記のトリペプチド配列の１つまたは複数を含有するようにすることによって達成される。

【0566】

別のタイプの修飾は、潜在的に分解産物または抗原結合タンパク質調製物の不均一性をもたらすものとしてインシリコでまたは実験で同定された配列の除去を伴う。例として、アスパラギンおよびグルタミン残基の脱アミド化は、ｐＨおよび表面露出などの要因に応じて生じ得る。アスパラギン残基は、主にＡｓｎ－Ｇｌｙの配列で存在する場合に特に脱アミドの影響を受けやすく、Ａｓｎ－Ａｌａなどのその他のジペプチド配列ではその影響より少ない。したがって、このような脱アミド化部位、特にＡｓｎ－Ｇｌｙが、本発明の抗原結合タンパク質中に存在する場合、典型的には保存的置換によってその部位が除去され、関与する残基の１つを除去することが望ましくあってもよい。１つまたは複数の関与する残基を除去するための、配列中のこのような置換もまた、本発明に包含されることが意図される。

【0567】

別のタイプの共有結合修飾は、グリコシドを抗原結合タンパク質に化学的または酵素的に共役させることを伴うこれらの手順は、Ｎ－またはＯ－結合グリコシル化のためのグリコシル化能力を有する宿主細胞における、抗原結合タンパク質の産生を必要としないという点で有利である。使用する共役様式に応じて、糖（類）は、（ａ）アルギニンおよびヒスチジン、（ｂ）遊離カルボキシル基、（ｃ）システインのなどの遊離スルフヒドリル基、（ｄ）セリン、スレオニン、またはヒドロキシプロリンなどの遊離ヒドロキシル基、（ｅ）フェニルアラニン、チロシン、またはトリプトファンなどの芳香族残基、または（ｆ）グルタミンのアミド基に付着してもよい。例えば、このような方法は、国際公開第８７／０５３３０号パンフレットに記載される。

【0568】

抗原結合タンパク質上に存在する任意の炭水化物部分の除去は、化学的または酵素的に達成されてもよい。化学的脱グリコシル化には、抗原結合タンパク質を化合物トリフルオロメタンスルホン酸または同等の化合物に曝露させることが必要である。この処理は、結合糖（Ｎ－アセチルグルコサミンまたはＮ－アセチルガラクトサミン）を除くほとんどまたは全ての糖の切断をもたらすが、抗原結合タンパク質は無傷のままにする。化学的脱グリコシル化は、Ｓｏｊａｈｒ Ｈ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）およびＥｄｇｅ，ＡＳ．ｅｔ ａｌ．（１９８１）によって記載される。抗体の炭水化物部分の酵素的切断は、Ｔｈｏｔａｋｕｒａ，ＮＲ．ｅｔ ａｌ．（１９８７）によって記載されたように、様々なエンドおよびエキソグリコシダーゼの使用によって達成され得る。

【0569】

抗原結合タンパク質の別のタイプの共有結合修飾は、米国特許第４，６４０，８３５号明細書；米国特許第４，４９６，６８９号明細書；米国特許第４，３０１，１４４号明細書；米国特許第４，６７０，４１７号明細書；米国特許第４，７９１，１９２号明細書；または米国特許第４，１７９，３３７号明細書に記載されているような様式で、例えば、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、またはポリオキシアルキレンなどの様々な非タンパク質性ポリマーの１つに抗原結合タンパク質を結合させることを含んでなる。

【0570】

特定の一実施形態では、抗原結合タンパク質は、ＴＣＲまたは一本鎖ＴＣＲである。特定の一実施形態では、ＴＣＲはヒトＴＣＲである。したがって、一実施形態では、前記第１の可変ドメインはＴＣＲαまたはγ鎖に含まれ；および／またはここで、前記第２の可変ドメインはＴＣＲβまたはδ鎖に含まれる。一実施形態では、前記ＴＣＲはα－βヘテロ二量体であり、α鎖ＴＲＡＣ定常ドメイン配列と、β鎖ＴＲＢＣ１またはＴＲＢＣ２定常ドメイン配列とを含んでなる。

【0571】

α鎖ＴＲＡＣ定常ドメイン配列、およびβ鎖ＴＲＢＣ１またはＴＲＢＣ２定常ドメインは、以下でＴＣＲ定常ドメイン配列とも称される。一実施形態では、ＴＣＲ定常ドメイン配列は、例えば、ヒト、ラット、サル、ウサギ、ロバ、またはマウス、好ましくはヒトなどの任意の哺乳類などの任意の好適な生物種に由来してもよい。いくつかの好ましい実施形態では、ＴＣＲ定常ドメイン配列は、例えば、異種配列、好ましくはマウス配列の導入によって、わずかに修飾されてもよく、それはＴＣＲの発現と安定性を高めてもよい。また、可変領域の好ましくないアミノ酸の置換および／またはＴＣＲ Ｃドメイン間のジスルフィド架橋の導入、および不対システインの除去など、現状技術（例えば、国際公開第２０１８／１０４４０７号パンフレット、ＰＣＴ／ＥＰ２０１８／０６９１５１号明細書、国際公開第２０１１／０４４１８６号パンフレット、国際公開第２０１４／０１８８６３号パンフレット）から知られている、さらなる安定化変異が導入されてもよい。

【0572】

特に、ＴＣＲ定常ドメイン配列をトランケーションまたは置換によって修飾し、ＴＲＡＣのエクソン２のＣｙｓ４と、ＴＲＢＣ１またはＴＲＢＣ２のエクソン２のＣｙｓ２との間の天然ジスルフィド結合が削除されてもよい。また、ＴＲＡＣのＴｈｒ４８と、ＴＲＢＣ１またはＴＲＢＣ２のＳｅｒ５７とをシステイン残基で置換することによって、αおよび／またはβ鎖の定常ドメイン配列が修飾されてもよく、前記システインは、ＴＣＲαおよびβ定常ドメイン間にジスルフィド結合を形成する。ＴＲＢＣ１またはＴＲＢＣ２は、定常ドメインの７５位でのシステインからアラニンへの変異、８９位でのアスパラギンからアスパラギン酸への変異をさらに含んでもよい。定常ドメインは、それに加えてまたは代案として、天然ＴＲＡＣおよび／またはＴＲＢＣ１／２配列に対する、さらなる変異、置換または欠失を含有してもよい。ＴＲＢＣ１／２という用語は、例えば、ＴＲＡＣの４位でのＮからＫなどの天然多型変異型を包含する（Ｂｒａｇａｄｏ ｅｔ ａｌ Ｉｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９４ Ｆｅｂ；６（２）：２２３－３０）。

【0573】

一実施形態では、ＴＣＲはキメラである。

【0574】

本明細書における「キメラＴＣＲ」はＴＣＲを指し、ここで、ＴＣＲ鎖は複数の生物種からの配列を含んでなる。好ましくは、本発明の文脈におけるＴＣＲは、例えば、α鎖のヒト可変領域と、マウスＴＣＲα鎖のマウス定常領域とを含んでなる、α鎖を含んでなってもよい。

【0575】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、一本鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）または一本鎖二重特異性抗体である。

【0576】

ｓｃＴＣＲは、第１のＴＣＲ鎖（例えば、α鎖）の可変領域のポリペプチドと、全（完全長）第２のＴＣＲ鎖（例えば、β鎖）のポリペプチドとを含んでなり得て、または逆もまた然りである。さらに、ｓｃＴＣＲは、任意選択的に、２つ以上のポリペプチドを主に連結する、１つまたは複数のリンカーを含んでなり得る。リンカーは、例えば、本明細書に記載されるように、２つの一本鎖を共に結合するペプチドであり得る。また、ＩＬ－２、ＩＬ－７またはＩＬ－１５などのヒトサイトカインに融合された本発明のｓｃＴＣＲも提供される。

【0577】

一実施形態では、前記一本鎖ＴＣＲは、Ｖ_α－Ｌ_ｔ－Ｖ_β、Ｖ_β－Ｌ_ｔ－Ｖ_α、Ｖ_α－Ｃ_ａ－Ｌ_ｔ－Ｖ_β、Ｖ_α－Ｃ_ｂ－Ｌ_ｔ－Ｖ_β、Ｖ_α－Ｌ_ｔ－Ｖ_β－Ｃ_ｂ、Ｖ_α－Ｌ_ｔ－Ｖ_β－Ｃ_ａ、Ｖ_α－Ｃ_ａ－Ｌ_ｔ－Ｖ_β－Ｃ_ｂ、Ｖ_α－Ｃ_ｂ－Ｌ_ｔ－Ｖ_β－Ｃ_ａ、好ましくはＶ_α－Ｌ_ｔ－Ｖ_β、Ｖ_β－Ｌ_ｔ－Ｖ_αからなる群から選択される一本鎖フォーマットの１つであり、ここで、Ｖ_αは本明細書で上に定義される第１の可変ドメインであり、Ｖ_βは本明細書で上に定義される第２の可変ドメインであり、Ｃ_ａおよびＣ_ｂはそれぞれ存在するかまたは存在しないＴＣＲαおよびβ定常領域であり、Ｌ_ｔは存在するかまたは存在しないリンカーであり、本明細書で上に定義の項で定義される。

【0578】

一実施形態では、このような一本鎖ＴＣＲは、Ｃ末端またはＮ末端に連結されたさらなる可変ドメインをさらに含んでもよい。

【0579】

一実施形態ではこのようなさらなる可変ドメインは、さらなるリンカーＬ_ｋを介して連結されてもよい。好ましい一実施形態では、リンカーＬ_ｋは、本明細書で上に定義されるリンカーであるか、または配列番号８０のアミノ酸配列のヒンジーＣ_Ｈ１配列である。

【0580】

上記に沿って、本発明の発明者らは、一本鎖ＴＣＲを含む二重特異性抗原結合タンパク質を調製し、前記いわゆる「ｓｃＴＣＲを含んでなるＨｉＡＦＦ１二重特異性Ｇａｂ安定化分子」は以下を含んでなる：
－アミノ酸配列（配列番号８１）の１つの第１のポリペプチド
ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＳＰＰＳＰＡＰＰＶＡＧＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＳＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮ
（ここで、前記アミノ酸配列は、（この順序で）アミノ酸配列６７の抗ＣＤＲ３Ｖ_Ｈドメイン、アミノ酸配列８０のヒンジ－Ｃ_Ｈ１ドメイン（下線付き）、アミノ酸配列６３のＨｉＡｆｆ１のα可変ドメイン、アミノ酸配列７７のリンカーＬ（下線付き）を含んでなり、およびアミノ酸配列８３のβ可変ドメインＨｉＡｆｆ１を含んでなる）
－およびアミノ酸配列（配列番号８２）のもう１つのポリペプチド
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
（ここで前記アミノ酸配列は、（この順序で）アミノ酸配列１２２の抗－ＣＤＲ３Ｖ_Ｌドメイン、およびアミノ酸配列１２３のＣ_Ｌドメインを含んでなる）。

【0581】

したがって、特定の一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、第２のポリペプチドに連結した第１のポリペプチドを含んでなり、ここで、連結されたポリペプチドは、配列番号８１のアミノ酸配列または配列番号８１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる）。

【0582】

本発明はまた、抗原結合タンパク質、特にＴＣＲを提示する粒子、および前記粒子を粒子のライブラリ内に含めることを含む。このような粒子としては、ファージ、酵母、リボソーム、または哺乳類細胞が挙げられるが、これらに限定されるものではない。このような粒子およびライブラリを製造する方法は、当該技術分野で公知である（例えば、国際公開第２００４／０４４００４号パンフレット；国際公開第０１／４８１４５号パンフレット；Ｃｈｅｒｖｉｎ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ３３９．２：１７５－１８４を参照されたい）。

【0583】

核酸、ベクター、および組換え宿主細胞
本発明のさらなる目的は、本明細書で上に定義される抗原結合タンパク質をコードする配列を含んでなるかまたはそれからなる単離核酸配列に関する。

【0584】

典型的には、前記核酸は、プラスミド、コスミド、エピソーム、人工染色体、ファージまたはウイルスベクターなどの任意の適切なベクターに含まれてもよいＤＮＡまたはＲＮＡ分子である。

【0585】

「ベクター」、「クローニングベクター」、および「発現ベクター」という用語は、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列（例えば、外来遺伝子）を宿主細胞に導入して、宿主を形質転換し、導入した配列の発現（例えば、転写および翻訳）を促進し得るビヒクルを意味する。

【0586】

したがって、本発明のさらなる目的は、本発明の核酸を含んでなるベクターに関する。

【0587】

このようなベクターは、プロモーター、エンハンサー、ターミネーターなどの調節エレメントを含んでなり、対象への投与時に前記ポリペプチドの発現を引き起こすかまたは誘導してもよい。動物細胞のための発現ベクターで使用されるプロモーターおよびエンハンサーの例としては、ＳＶ４０の初期プロモーターおよびエンハンサー（Ｍｉｚｕｋａｍｉ Ｔ．ｅｔ ａｌ．１９８７）、モロニーマウス白血病ウイルスのＬＴＲプロモーターおよびエンハンサー（Ｋｕｗａｎａ Ｙ ｅｔ ａｌ．１９８７）、免疫グロブリンＨ鎖などのプロモーター（Ｍａｓｏｎ ＪＯ ｅｔ ａｌ．１９８５）およびエンハンサー（Ｇｉｌｌｉｅｓ ＳＤ ｅｔ ａｌ．１９８３）が挙げられる。

【0588】

ヒト抗体Ｃ領域をコード化する遺伝子を挿入して発現させることができる限り、動物細胞のための任意の発現ベクターが使用され得る。適切なベクターの例としては、ｐＡＧＥ１０７（Ｍｉｙａｊｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．１９９０）、ｐＡＧＥ１０３（Ｍｉｚｕｋａｍｉ Ｔ ｅｔ ａｌ．１９８７）、ｐＨＳＧ２７４（Ｂｒａｄｙ Ｇ ｅｔ ａｌ．１９８４）、ｐＫＣＲ（Ｏ'Ｈａｒｅ Ｋ ｅｔ ａｌ．１９８１）、ｐＳＧ１ β ｄ２－４－（Ｍｉｙａｊｉ Ｈ ｅｔ ａｌ．１９９０）などが挙げられる。プラスミドのその他の例としては、複製起点を含んでなる自己複製プラスミドド、または例えば、ｐＵＣ、ｐｃＤＮＡ、ｐＢＲなどの統合プラスミドが挙げられる。

【0589】

ウイルスベクターのその他の例としては、アデノウイルス、レトロウイルス、ヘルペスウイルス、およびＡＡＶベクターが挙げられる。このような組換えウイルスは、パッケージング細胞への形質移入によって、またはヘルパープラスミドまたはウイルスを用いた一過性形質移入によって、当該技術分野で公知の技術によって製造されてもよい。ウイルスパッケージング細胞の典型的な例としては、ＰＡ３１７細胞、ＰｓｉＣＲＩＰ細胞、ＧＰｅｎｖ＋細胞、２９３細胞などが挙げられる。このような複製欠損組換えウイルスを製造するための詳細なプロトコルは、例えば、国際公開第９５／１４７８５号パンフレット、国際公開第９６／２２３７８号パンフレット、米国特許第５，８８２，８７７号明細書、米国特許第６，０１３，５１６号明細書、米国特許第４，８６１，７１９号明細書、米国特許第５，２７８，０５６号明細書、および国際公開第９４／１９４７８号パンフレットある。

【0590】

本発明のさらなる目的は、本発明による核酸および／またはベクターで形質移入された、感染された、または形質転換された宿主細胞に関する。

【0591】

「形質転換」という用語は、宿主細胞に「外来」（すなわち外因性）の遺伝子、ＤＮＡまたはＲＮＡ配列を導入し、宿主細胞が導入された遺伝子または配列を発現して所望の物質、典型的には導入された遺伝子または配列によってコードされるタンパク質または酵素を産生するようにすることを意味する。導入されたＤＮＡまたはＲＮＡを受け取って発現する宿主細胞は、「形質転換」されている。

【0592】

本発明の核酸を使用して、適切な発現系において本発明の組換え抗原結合タンパク質が製造されてもよい。「発現系」という用語は、例えば、ベクターによって運ばれ、宿主細胞に導入された外来ＤＮＡによってコードされるタンパク質の発現のための適切な条件下にある、宿主細胞および適合性ベクターを意味する。

【0593】

一般的な発現系としては、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）宿主細胞とプラスミドベクター、昆虫宿主細胞とバキュロウイルスベクター、および哺乳類宿主細胞とベクターが挙げられる。その他の宿主細胞の例としては、限定されることなく、原核生物細胞（細菌など）および真核細胞（酵母細胞、哺乳類細胞、昆虫細胞、植物細胞など）が挙げられる。特定の例としては、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）、クルイベロミセス属（Ｋｌｕｙｖｅｒｏｍｙｃｅｓ）属またはサッカロミセス属（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ）の酵母、哺乳類細胞株（例えば、Ｖｅｒｏ細胞、ＣＨＯ細胞、３Ｔ３細胞、ＣＯＳ細胞など）、初代または確立された哺乳類細胞培養物（例えば、リンパ芽球、線維芽細胞、胚性細胞、上皮細胞、神経細胞、脂肪細胞などから産生される）が挙げられる。例としてはまた、マウスＳＰ２／０－Ａｇ１４細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ１５８１）、マウスＰ３Ｘ６３－Ａｇ８．６５３細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ１５８０）、ジヒドロ葉酸還元酵素遺伝子（以下、「ＤＨＦＲ遺伝子」と称される）が欠損したＣＨＯ細胞（Ｕｒｌａｕｂ Ｇ ｅｔ ａｌ；１９８０）、ラットＹＢ２／３ＨＬ．Ｐ２．Ｇ１１．１６Ａｇ．２０細胞（ＡＴＣＣ ＣＲＬ１６６２、以下、「ＹＢ２／０細胞」と称される）なども挙げられる。いくつかの実施形態では、キメラまたはヒト化抗体のＡＤＣＣ活性は、この細胞で発現させると増強されることから、ＹＢ２／０細胞が好ましくあってもよい。

【0594】

上記によれば、一実施形態では、本発明は、本明細書で上に定義される本発明の抗原結合タンパク質、または核酸、または本発明のベクターを含んでなる宿主細に言及し、ここで前記宿主細胞は、好ましくはａ）Ｔリンパ球またはＴリンパ球前駆細胞などのリンパ球、例えば、ＣＤ４またはＣＤ８陽性Ｔ細胞であるか、またはｂ）チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞などの組換え発現のための細胞である。

【0595】

特に、本発明のいくつかの抗原結合タンパク質、特に連結されていない２つのポリペプチドを含んでなる抗原結合タンパク質の発現のために、発現ベクターは、抗体重鎖をコード化する遺伝子と抗体軽鎖をコード化する遺伝子が別々のベクター上に存在するか、または双方の遺伝子が同じベクター上に存在する（タンデムタイプ）かのどちらのタイプであってもよい。抗原結合タンパク質発現ベクターの構築の容易さ、動物細胞への導入の容易さ、および動物細胞における抗体ＨとＬ鎖の発現レベル間のバランスの点から、タンデム型のヒト化抗体発現ベクターが好ましい（Ｓｈｉｔａｒａ Ｋ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．１９９４ Ｊａｎ．３；１６７（１－２）：２７１－８）。タンデム型ヒト化抗体発現ベクターとの例しては、ｐＫＡＮＴＥＸ９３（国際公開第９７／１０３５４号パンフレット）、ｐＥＥ１８などが挙げられる。

【0596】

一実施形態では、このような組換え宿主細胞は、本発明の少なくとも１つの抗原結合タンパク質の製造に使用され得る。

【0597】

本発明の抗原結合タンパク質の方法
本発明はまた、
ａ．宿主細胞を提供するステップと、
ｂ．本明細書で上に定義されるような抗原結合タンパク質をコード化するコード配列を含んでなる、遺伝子コンストラクトを提供するステップと、
ｃ．前記遺伝子コンストラクトを前記適切な宿主細胞に導入するステップと、
ｄ．前記適切な宿主細胞によって前記遺伝子コンストラクトを発現させるステップと、任意選択的に、
ｅ．前記抗体を発現および／または分泌する細胞を選択するステップと
を含んでなる本明細書で上に定義される抗原結合タンパク質を製造する方法にも関する。

【0598】

一実施形態では、方法は、宿主細胞からの抗原結合タンパク質の単離と精製、任意選択的に、Ｔ細胞における抗原結合タンパク質の再構成をさらに含んでなる。

【0599】

本発明の抗原結合タンパク質は、限定されることなく、化学的、生物学的、遺伝学的または酵素的技術のいずれか単独または組み合わせなど、当該技術分野で公知の任意の技術によって製造されてもよい。

【0600】

いくつかの実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、抗体または免疫グロブリン様フレームワークを有する。

【0601】

所望の配列のアミノ酸配列を知ることにより、当業者は、ポリペプチドの製造のための標準技術によって、抗体または免疫グロブリン鎖を製造し得て、これらの技術は、当業者によって本発明の抗原結合タンパク質に移行され得る。例えば、それらは、周知の固相法を使用して、特に市販のペプチド合成装置（カリフォルニア州フォスターシティーのＡｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓによって製造されたものなど）を使用して、製造業者の指示に従って合成され得る。代案としては、本発明の抗体、免疫グロブリン鎖、および抗原結合タンパク質は、当該技術分野で周知のように、組換えＤＮＡ技術によって合成され得る。例えば、所望の（ポリ）ペプチドをコード化するＤＮＡ配列を発現ベクターに組み込み、このようなベクターを所望のポリペプチドを発現する適切な真核生物または原核生物の宿主に導入した後に、ＤＮＡ発現産物として断片を得ることができ、その後、周知の技術を用いてそれから断片が分離され得る。

【0602】

一例では、すなわちＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディの場合は、Ｖ_ＨおよびＶ_Ｌならびに可変α（Ｖ_α）および可変β（Ｖ_β）の様々な組み合わせをコードし、ならびにリンカーをコードするＤＮＡ配列は、例えば遺伝子合成によって得られてもよい。得られたＤＮＡ配列は、例えば、ヒトＩｇＧ４［受入番号Ｋ０１３１６］およびＩｇＧ１［受入番号Ｐ０１８５７］にそれぞれ由来するヒンジ領域、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメインをコードする発現ベクターにフレーム内でクローン化され、さらに操作されてもよい。Ｒｅｉｔｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｓｔａｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｖ Ｆｒａｇｍｅｎｔｓ ｉｎ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｔｏｘｉｎｓ ｂｙ Ｄｉｓｕｌｆｉｄｅ Ｂｏｎｄｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ ｉｎｔｏ Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ Ｆｒａｍｅｗｏｒｋ Ｒｅｇｉｏｎｓ．Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９４，３３，５４５１－５４５９）によって記載された方法に従って、遺伝子操作が実施され、追加的な鎖間ジスルフィド結合の安定化の有無にかかわらず、ノブ・インツー・ホール変異異がＣ_Ｈ３ドメインに組み込まれ；Ｃ_Ｈ２のＮ－グリコシル化部位（例えば、Ｎ２９７Ｑ変異）が除去され；Ｆ_ｃ－サイレンシング変異が導入され；またはＶ_ＬとＶ_Ｈにそれぞれ追加的なジスルフィド結合安定化が導入されてもよい。

【0603】

本発明の抗原結合タンパク質は、例えば、プロテインＡ－セファロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、またはアフィニティクロマトグラフィーなどの免疫グロブリン精製手順によって培地から適切に分離される。

【0604】

一実施形態では、本明細書において、発現した抗原結合タンパク質またはポリペプチドを回収することは、プロテインＡクロマトグラフィー、κ選択クロマトグラフィー、および／またはサイズ排除クロマトグラフィー、好ましくはプロテインＡクロマトグラフィーおよび／またはサイズ排除クロマトグラフィー、より好ましくはプロテインＡ－クロマトグラフィーおよびサイズ排除クロマトグラフィーを実施することを指す。

【0605】

組換えＤＮＡを伴う本発明の抗原結合タンパク質を製造するための方法、および遺伝子形質移入技術は、当該技術分野で周知である（Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ＳＬ．ｅｔ ａｌ．（１９８４）および特許文献米国特許第５，２０２，２３８号明細書；および米国特許第５，２０４、２４４号明細書を参照されたい）。

【0606】

従来の組換えＤＮＡに基づいてヒト化抗体を製造するための方法、および遺伝子形質移入技術は、当該技術分野で周知であり（例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ Ｌ．ｅｔ ａｌ．１９８８；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ ＭＳ．ｅｔ ａｌ．１９８５を参照されたい）、抗原結合タンパク質の製造に簡単に適用され得る。

【0607】

一例では、本発明の組換え抗原結合タンパク質の発現のためのベクターは、例えば、ＨＣＭＶ由来のプロモーター要素であるｐＵＣ１９誘導体によって制御される、モノシストロン性として設計された。プラスミドＤＮＡは、例えば、標準的な培養方法に従って大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で増幅され、引き続いて、市販のキット（Ｍａｃｈｅｒｅｙ ＆ Ｎａｇｅｌ）を使用して精製された。精製されたプラスミドＤＮＡは、製造業者（ＥｘｐｉＣＨＯ（商標）システム；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の指示に従って、例えば、ＣＨＯ－Ｓ細胞の一過性形質移入に使用された。形質移入されたＣＨＯ細胞は、例えば３２℃～３７℃で例えば６～１４日間培養され、ＥｘｐｉＣＨＯ（商標）供給液が１～２回栄養供給された。

【0608】

調整された細胞上清は、例えば、Ｓａｒｔｏｃｌｅａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ（登録商標）Ｌａｂ Ｆｉｌｔｅｒ Ａｉｄ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ社）を使用した濾過（０．２２μｍ）によって清澄化された。二重特異性抗原結合タンパク質は、例えば、親和性およびサイズ排除クロマトグラフィーをインラインで実行するように装備された、Ａｋｔａ Ｐｕｒｅ ２５ Ｌ ＦＰＬＣシステム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して精製された。アフィニティークロマトグラフィーは、例えば、プロテインＡまたはＬカラム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で、標準的なアフィニティークロマトグラフィープロトコルに従って実施された。例えば、Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ １６／６００カラム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を用いて、アフィニティカラムからの溶出（ｐＨ２．８）直後に、サイズ排除クロマトグラフィーが実施され、標準的なプロトコルに従って高純度の単量体タンパク質が得られた。タンパク質濃度は、例えば、ＮａｎｏＤｒｏｐシステム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で、予測されたタンパク質配列に従って計算された吸光係数を用いて判定された。必要に応じて、Ｖｉｖａｓｐｉｎデバイス（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を使用して、濃度が調節された。最後に、精製された分子は、例えば、２～８℃の温度で約１ｍｇ／ｍＬの濃度のリン酸緩衝生理食塩水中に保存された。

【0609】

精製された二重特異性抗原結合タンパク質の品質は、例えば、Ｖａｎｑｕｉｓｈｕ ＵＨＰＬＣ－Ｓｙｓｔｅｍ内で、３００ｍＭのＮａＣｌを含有する５０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ６．８で実行される、例えば、ＭａｂＰａｃ ＳＥＣ－１カラム（５μｍ、７．８ｘ３００ｍｍ）上のＨＰＬＣ－ＳＥＣによって判定された。

【0610】

医薬組成物
本発明は、本発明の抗原結合タンパク質、本発明の核酸、本発明のベクター、または本発明の宿主細胞と、薬学的に許容可能な担体とを含んでなる、医薬組成物にさらに言及する。

【0611】

本発明はまた、薬剤として使用するための本発明による抗原結合タンパク質にも関する。本発明はまた、薬剤として使用するための本発明の医薬組成物にも関する。

【0612】

「医薬組成物「または「治療用組成物」という用語は、本明細書の用法では、対象に適切に投与された場合に、望ましい治療的効果を誘導できる化合物または組成物を指す。

【0613】

いくつかの実施形態では、対象はまた、患者と称されることもある。

【0614】

このような医薬組成物は、投与様式との適合性のために選択された薬学的または生理学的に許容可能な調合剤と混合された、本発明の抗原結合タンパク質、または治療薬をさらに含んでなる抗原結合タンパク質の治療的有効量を含んでなってもよい。

【0615】

本発明の抗原結合タンパク質は、通常、無菌の医薬組成物の一部として供給され、これは、通常、薬学的に許容可能な担体および／または薬学的に許容可能な担体希釈剤を含む。

【0616】

「薬学的に」または「薬学的に許容可能な」は、哺乳類、特にヒトに投与したときに、適宜、有害反応、アレルギー反応、その他の不都合な反応を生じない分子体および組成物に言及する。薬学的に許容可能な担体または賦形剤は、非毒性の固体、半固体または液体の充填剤、希釈剤、カプセル化材料、または任意のタイプの製剤助剤を指す。

【0617】

本明細書の用法では、「薬学的に許容可能な担体」としては、生理学的適合性であるありとあらゆる溶媒、分散媒、コーティング剤、抗菌剤、および抗真菌剤などが挙げられる。適切な担体、希釈剤および／または賦形剤の例としては、水、アミノ酸、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどの１つまたは複数、ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、組成物に糖、多価アルコール、または塩化ナトリウムなどの等張剤を含めることが好ましく、調合物は、トリプタミンなどの抗酸化剤およびツイーン２０などの安定剤もまた含有してもよい。

【0618】

「薬学的に許容可能な希釈剤」としては、例えば、生理学的適合性である、溶剤、増量剤、安定剤、分散媒、コーティング、抗菌剤および抗真菌剤、等張剤および吸収遅延剤などが挙げられる。薬学的に許容可能な希釈剤の例としては、生理食塩水、リン酸緩衝食塩水、デキストロース、グリセロール、エタノールなどの１つまたは複数ならびにそれらの組み合わせが挙げられる。多くの場合、例えば、トレハロースおよびスクロースなどの糖、マンニトールまたはソルビトールなどのポリアルコール、または塩化ナトリウムなどの１つまたは複数の等張剤を組成物に含めることが好ましい。湿潤剤または少量の湿潤剤もしくは乳化剤、保存料もしくは緩衝剤のような補助剤などの薬学的に許容可能な物質もまた、本発明の範囲内である。さらに組成物は、緩衝液、結合剤、ブラスチング剤、希釈剤、香料、および潤滑剤などの賦形剤を含有し得る。

【0619】

医薬組成物の形態、投与経路、投与量、およびレジメンは、必然的に、治療される病状、疾患の重症度、患者の年齢、体重、および性別などに依存する。この医薬組成物は、（それを患者に投与する所望の方法に応じて）任意の適切な形態であってもよい。それは、単位用量剤形で提供されてもよく、一般に密封容器内に提供され、キットの一部として提供されてもよい。このようなキットには、通常、（必ずしも必須ではないが）使用説明書が含まれる。それは、複数の前記単位用量剤形を含んでもよい。

【0620】

生物学的半減期などの経験的考察事項は、一般的に投与量の決定に寄与する。投与の頻度は、治療の過程で判定および調整されてもよく、がん細胞の数を低減すること、がん細胞の減少を維持すること、がん細胞の増殖を低減すること、またはがん細胞を滅殺することに基づいている。代案としては、抗原結合タンパク質の持続的な徐放性製剤が適切であってもよい。徐放を達成するための様々な製剤および装置が当該技術分野で公知である。

【0621】

一実施形態では、抗原結合タンパク質の投与量は、１回または複数回の投与を受けた個人において経験的に決定され得る。個人には、抗原結合タンパク質の漸増投与量が与えられる。抗原結合タンパク質の有効性を評価するために、がん細胞の状態のマーカーが追跡され得る。これらとしては、ＦＡＣＳ、その他の画像技術によるがん細胞増殖および細胞死の直接測定；およびこのような測定によって評価される健康の改善、または認められた試験または生存期間の延長によって測定される生活の質の向上が挙げられる。投与量は、個人、疾患の病期、および使用されている過去および並行治療に応じて変動することが当業者には明らかであろう。

【0622】

本発明の医薬組成物は、局所、経口、非経口、鼻腔内、静脈内、筋肉内、皮下または眼内投与などのために製剤化され得る。このような組成物は、薬学の分野で公知の任意の方法によって、例えば、無菌条件下で活性成分を担体または賦形剤と混合することによって、調製されてもよい。

【0623】

特に、医薬組成物は、注射できる製剤のために、薬学的に許容可能なビヒクルを含有する。これらは、特に等張性、滅菌、生理食塩水（リン酸一ナトリウムまたは二ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウムまたは塩化マグネシウムなど、またはこのような塩の混合物）、または乾燥した、特に凍結乾燥した組成物であってもよく、これは滅菌水または生理食塩水の添加時に、注射液の構成が可能になる。

【0624】

投与に使用される用量は、様々なパラメーターの関数として、特に、使用される投与様式、関連病理、または代案としては所望の治療持続期間の関数として適合され得る。

【0625】

医薬組成物を調製するために、本発明の有効量の抗原結合タンパク質は、薬学的に許容可能な担体または水性媒体に、溶解または分散されてもよい。

【0626】

注射用途に適した医薬品形態としては、滅菌水溶液または分散液；ゴマ油、落花生油または水性プロピレングリコールを含む製剤；および無菌の注射液または分散液の即時調合のための無菌粉末が挙げられる。全ての場合において、形態は無菌でなければならず、容易に注射針通過性程度に流動性でなければならない。それは、製造および保管の条件下で安定している必要があり、細菌および真菌などの微生物の汚染作用に対して保存されている必要がある。

【0627】

遊離塩基または薬理学的に許容可能な塩としての活性化合物の溶液は、ヒドロキシプロピルセルロースなどの界面活性剤と適切に混合された水中で調製され得る。分散液はまた、グリセロール、液体ポリエチレングリコール、およびそれらの混合物、および油中で調製され得る。通常の保存および使用条件下で、これらの製剤は、微生物の増殖を防ぐ保存料を含有する。

【0628】

本発明の抗原結合タンパク質は、中性または塩形態で組成物に調合され得る。薬学的に許容可能な塩としては、酸付加塩（タンパク質の遊離アミノ基で形成される）が挙げられ、これは、例えば、塩酸またはリン酸などの無機酸、または酢酸、シュウ酸、酒石酸、マンデル酸などの有機酸で形成される。遊離カルボキシル基で形成される塩はまた、例えば、ナトリウム、カリウム、アンモニウム、カルシウム、または水酸化第二鉄などの無機塩基、およびイソプロピルアミン、トリメチルアミン、グリシン、ヒスチジン、プロカインなどのような有機塩基に由来し得る。

【0629】

本開示によるこれらの塩は、アニオンとしてのＰＯ_４ ^３－、ＳＯ_４ ^２－、ＣＨ_３ＣＯＯ^－、Ｃｌ^－、Ｂｒ^－、ＮＯ_３ ^－、ＣｌＯ_４ ^－、Ｉ^－、ＳＣＮ^－、およびカチオンとしてのＮＨ_４ ^＋、Ｒｂ^＋、Ｋ^＋、Ｎａ^＋、Ｃｓ^＋、Ｌｉ^＋、Ｚｎ^２＋、Ｍｇ^２＋、Ｃａ^２＋、Ｍｎ^２＋、Ｃｕ^２＋、およびＢａ^２＋を含んでなるホフマイスター系列の塩類などのアルカリ塩および土類アルカリ塩もまた含んでもよい。特に塩は、（ＮＨ_４）_３ＰＯ_４、（ＮＨ_４）_２ＨＰＯ_４、（ＮＨ_４）Ｈ_２ＰＯ_４、（ＮＨ_４）_２ＳＯ_４、ＮＨ_４ＣＨ_３ＣＯＯ、ＮＨ_４Ｃｌ、ＮＨ_４Ｂｒ、ＮＨ_４ＮＯ_３、ＮＨ_４ＣＩＯ_４、ＮＨ_４Ｉ、ＮＨ_４ＳＣＮ、Ｒｂ_３ＰＯ_４、Ｒｂ_２ＨＰＯ_４、ＲｂＨ_２ＰＯ_４、Ｒｂ_２ＳＯ_４、Ｒｂ_４ＣＨ_３ＣＯＯ、Ｒｂ_４Ｃｌ、Ｒｂ_４Ｂｒ、Ｒｂ_４ＮＯ_３、Ｒｂ_４ＣＩＯ_４、Ｒｂ_４Ｉ、Ｒｂ_４ＳＣＮ、Ｋ_３ＰＯ_４、Ｋ_２ＨＰＯ_４、ＫＨ_２ＰＯ_４、Ｋ_２ＳＯ_４、ＫＣＨ_３ＣＯＯ、ＫＣｌ、ＫＢｒ、ＫＮＯ_３、ＫＣｌＯ_４、ＫＩ、ＫＳＣＮ、Ｎａ_３ＰＯ_４、Ｎａ_２ＨＰＯ_４、ＮａＨ_２ＰＯ_４、Ｎａ_２ＳＯ_４、ＮａＣＨ_３ＣＯＯ、ＮａＣｌ、ＮａＢｒ、ＮａＮＯ_３、ＮａＣＩＯ_４、ＮａＩ、ＮａＳＣＮ、ＺｎＣＩ_２Ｃｓ_３ＰＯ_４、Ｃｓ_２ＨＰＯ_４、ＣｓＨ_２ＰＯ_４、Ｃｓ_２ＳＯ_４、ＣｓＣＨ_３ＣＯＯ、ＣｓＣｌ、ＣｓＢｒ、ＣｓＮＯ_３、ＣｓＣＩＯ_４、ＣｓＩ、ＣｓＳＣＮ、Ｌｉ_３ＰＯ_４、Ｌｉ_２ＨＰＯ_４、ＬｉＨ_２ＰＯ_４、Ｌｉ_２ＳＯ_４、ＬｉＣＨ_３ＣＯＯ、ＬｉＣｌ、ＬｉＢｒ、ＬｉＮＯ_３、ＬｉＣｌＯ_４、ＬｉＩ、ＬｉＳＣＮ、Ｃｕ_２ＳＯ_４、Ｍｇ_３（ＰＯ_４）_２、Ｍｇ_２ＨＰＯ_４、Ｍｇ（Ｈ_２ＰＯ_４）_２、Ｍｇ_２ＳＯ_４、Ｍｇ（ＣＨ_３ＣＯＯ）_２、ＭｇＣｌ_２、ＭｇＢｒ_２、Ｍｇ（ＮＯ_３）_２、Ｍｇ（ＣｌＯ_４）_２、ＭｇＩ_２、Ｍｇ（ＳＣＮ）_２、ＭｎＣｌ_２、Ｃａ_３（ＰＯ_４）、Ｃａ_２ＨＰＯ_４、Ｃａ（Ｈ_２ＰＯ_４）_２、ＣａＳＯ_４、Ｃａ（ＣＨ_３ＣＯＯ）_２、ＣａＣｌ_２、ＣａＢｒ_２、Ｃａ（ＮＯ_３）_２、Ｃａ（ＣｌＯ_４）_２、ＣａＩ_２、Ｃａ（ＳＣＮ）_２、Ｂａ_３（ＰＯ_４）_２、Ｂａ_２ＨＰＯ_４、Ｂａ（Ｈ_２ＰＯ_４）_２、ＢａＳＯ_４、Ｂａ（ＣＨ_３ＣＯＯ）_２、ＢａＣｌ_２、ＢａＢｒ_２、Ｂａ（ＮＯ_３）_２、Ｂａ（ＣｌＯ_４）_２、ＢａＩ_２、およびＢａ（ＳＣＮ）_２から選択される。特に好ましいのは、例えば、塩化物塩または酢酸塩（トリフルオロ酢酸塩）などのＮＨ酢酸塩、ＭｇＣｌ_２、ＫＨ_２ＰＯ_４、Ｎａ_２ＳＯ_４、ＫＣｌ、ＮａＣｌ、およびＣａＣｌ_２である。

【0630】

担体はまた、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、および液体ポリエチレングリコールなど）、それらの適切な混合物、および植物性油を含有する、溶媒または分散媒であり得る。例えば、レシチンなどのコーティングの使用によって、分散体の場合は必要な粒度の維持によって、および界面活性剤の使用によって、適切な流動性が保たれ得る。微生物の作用の防止は、例えば、パラベン、クロロブタノール、フェノール、ソルビン酸、チメロサールなどの様々な抗菌剤および抗真菌剤によってもたらされ得る。多くの場合、等張剤、例えば、糖または塩化ナトリウムを含めることが好ましいであろう。注射可能な組成物の持続的吸収は、吸収を遅延させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンの組成物中の使用によってもたらされ得る。

【0631】

したがって、一実施形態では担体は、水性担体である。

【0632】

「水性担体」は、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、レシチン、ヒト血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩やグリシンやソルビン酸やソルビン酸カリウムなどの緩衝物質、飽和植物性脂肪酸の部分グリセリド混合物、硫酸プロタミンやリン酸水素二ナトリウムやリン酸二カルシウムやリン酸水素カリウムや塩化ナトリウムや亜鉛塩などの塩または電解質、コロイダルシリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリビニルピロリドン酢酸ビニル、セルロースベースの物質（例えば、微結晶セルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、酢酸コハク酸メチルセルロースヒドロキシプロピル、ヒドロキシプロピルメチルセルロースフタレート）、デンプン、ラクトース一水和物、マンニトール、トレハロースラウリル硫酸ナトリウム、およびクロスカルメロースナトリウム、ポリエチレングリコール、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、ポリアクリレート、ポリメタクリレート、ワックス、ポリエチレンポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコール、および羊毛脂をさらに含有し得る。

【0633】

別の態様では、水性担体は、本明細書に記載のペプチドまたはその他の分子と組み合わされると、例えば、改善された溶解性、有効性、および／または改善された免疫療法などの改善された特性を与えることができる。

【0634】

滅菌注射液は、必要に応じて、上に列挙されるその他の様々な成分と共に、適切な溶媒に必要な量の活性化合物を組み込んだ後、濾過滅菌によって調製される。一般に、分散液は、様々な滅菌された活性成分を、基礎的分散媒および上に列挙されたものからの必要なその他の成分を含有する、滅菌ビヒクルに組み込むことによって調製される。滅菌注射液の調製のための無菌粉末の場合、好ましい調製法としては、活性成分と、あらかじめ滅菌濾過された溶液からの任意の追加的な所望の成分との粉末をもたらす、真空乾燥および凍結乾燥技術が挙げられる。

【0635】

直接注射のためのより濃縮された、または高度に濃縮された溶液の調製もまた想定され、ここで、溶媒としてのＤＭＳＯの使用は、非常に迅速な浸透をもたらし、小さな腫瘍領域に高濃度の活性剤を送達することが想定される。

【0636】

製剤化されると、溶液は、投与剤形と適合性のある様式で、治療的に有効であるような量で投与される。製剤は、上記の注射液のタイプなどの様々な剤形で容易に投与されるが、薬物放出カプセルなどもまた使用され得る。

【0637】

本発明の文脈における全身投与のための製剤は、経腸投与、非経口投与、または局所投与のために製剤化されてもよい。実際、有効成分の全身投与を達成するために、３つのタイプの製剤全てが同時に使用されてもよい。非経口および非経口薬物送達のための賦形剤ならびに製剤は、その内容全体が参照により本明細書に援用される、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ（２００５）に記載されている。

【0638】

例えば、水溶液中の非経口投与では、必要に応じて溶液を適切に緩衝化し、液体希釈剤を最初に十分な生理食塩水またはグルコースで等張にする必要がある。これらの特定の水溶液は、静脈内、筋肉内、皮下および腹腔内投与に特に適する。これに関連して、採用し得る無菌水性媒体は、本開示に照らして当業者には既知であろう。例えば、１用量が１ｍｌの等張ＮａＣｌ溶液に溶解され、１０００ｍｌの皮下注射液に添加されるか、または提案された注入部位に注射される（例えば、「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ'ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」 １５ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，ｐａｇｅｓ １０３５－１０３８および１５７０－１５８０を参照されたい）。用量のいくらかの変動は、治療される対象の状態に応じて必然的に発生する。いずれにせよ、投与の責任者が、個々の対象に適切な用量を決定するであろう。

【0639】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は治療混合物に製剤化され、１用量当たり約０．０１～１００ミリグラム前後を含んでなる。

【0640】

静脈内または筋肉内注射などの非経口投与のために製剤化された抗原結合タンパク質に加えて、その他の薬学的に許容可能な形態としては、例えば、経口投与のための錠剤またはその他の固体；徐放性カプセル；および現在使用されているその他の任意の形態が挙げられる。

【0641】

経口投与に適した製剤としては、硬質または軟質ゼラチンカプセル、丸薬、コーティングされた錠剤をはじめとする錠剤、エリキシル剤、懸濁液、シロップまたは吸入、およびそれらの放出制御形態が挙げられる。一般に、これらの薬剤は、注射による投与（例えば、腹腔内、静脈内、皮下、筋肉内など）のために製剤化されるが、その他の形態の投与（例えば、経口、粘膜など）もまた使用され得る。したがって、抗原結合タンパク質は、好ましくは、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液などの薬学的に許容可能なビヒクルと組み合わされる。

【0642】

特定の実施形態では、リポソームおよび／またはナノ粒子の使用は、宿主細胞への抗原結合タンパク質などのポリペプチドの導入のために想定される。リポソームおよび／またはナノ粒子の形成および使用は、当業者に知られている。

【0643】

ナノカプセルは一般に、安定した再現性のある方法で化合物を封入し得る。細胞内の高分子過負荷による副作用を回避するため、このような超微粒子（約０．１μｍのサイズ）は、一般に、生体内で分解できるポリマーを使用して設計されている。これらの要件を満たす生分解性ポリアルキルシアノアクリレートナノ粒子は、本発明での使用が想定されている。

【0644】

リポソームはリン脂質から形成されるが、これは水性媒体に分散されて自然発生的に多重膜同心円状二重層小胞（多重膜小胞（ＭＬＶ）とも称される）を形成する。ＭＬＶは一般に、２５ｎｍ～４μｍの直径を有する。ＭＬＶの超音波処理は、コアに水溶液を含有する、直径が２００～５００Ａの範囲の小さな単層小胞（ＳＵＶ）の形成をもたらす。リポソームの物理的特性は、ｐＨ、イオン強度、および二価陽イオンの存在に依存する。

【0645】

ひとたび医薬組成物が調合されたら、それは、溶液、懸濁液、ゲル、エマルション、固体として、または脱水または凍結乾燥粉末として、滅菌バイアル内に保存され得る。このような製剤は、すぐ使用できる形態、または投与に先だって水戻しを要する形態（例えば、凍結乾燥形態）のどちらかで、保存され得る。

【0646】

治療法と使用法
本発明者らは、実験の項の実施例５において、ＨｉＡｆｆ１またはＬｏＡｆｆ３のαおよびβ可変ドメインを含んでなり、ＣＤＲ３重鎖および軽鎖可変ドメインを含んでなる、二重特異性化合物などの本発明のいくつかの二重特異性化合物について、ＵＡＣＣ２５７、Ｈｓ６９５Ｔ、およびＵ２ＯＳなどのＰＲＡＭＥ陽性がん細胞株に対するこれらのコンストラクトの細胞傷害活性を生体外で示した。本発明者らは、ＨＬＡ－Ａ^＊０２を発現するがペプチドＰＲＡＭＥ－００４を提示しない細胞株において、二重特異性抗原結合タンパク質によってわずかな溶解のみが誘導されたことから、前記細胞傷害活性が非常に特異的であり、ＰＲＡＭＥ陽性細胞に限定されることをさらに実証した。

【0647】

さらに、本発明者らは、超免疫不全マウスＮＯＧ系統における薬力学的試験で、ＨｉＡｆｆ１のαおよびβ可変ドメインとＣＤＲ３重鎖および軽鎖可変ドメインを含んでなる二重特異性化合物などの本発明の抗原結合タンパク質の生体内効力を実証した。より具体的には、このマウス系統は、皮下注射されたヒト腫瘍細胞株ＨＳ６９５Ｔおよび静脈内注射されたヒト末梢血単核細胞異種移植片の宿主であった。ヒト血液細胞の移植後１時間以内に、処置が開始された。二重特異性化合物による処置は、生体内で強力な抗がん活性および有効性を示した。生体内実験については、実験の項にさらに記載する。

【0648】

したがって、本発明の抗原結合タンパク質、特にＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディなどの二重特異性抗原結合タンパク質は、例えば、様々な形態のがん、感染症、自己免疫または炎症状態、および／または線維症状態をはじめとする様々な病状の治療に使用されてもよい。本発明の抗原結合タンパク質は、ヒトおよび／または非ヒト哺乳類の動物における治療目的で使用されてもよい。一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、腫瘍細胞に結合し、それらの細胞表面上にペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）／ＭＨＣ複合体提示する、腫瘍細胞の増殖を低減しおよび／または殺滅し得る。抗原結合タンパク質は、生理学的（例えば、生体内）条件での結合を促進する濃度で投与されることが理解される。別の実施形態では、抗原結合タンパク質は、結腸、肺、乳房、前立腺、卵巣、膵臓、腎臓などの異なる組織の腫瘍細胞に向けられた免疫療法のために使用され得る。別の実施形態では、抗原結合タンパク質は、単独で腫瘍細胞に結合し、その増殖を低減しおよび／または殺滅し得る。

【0649】

したがって、一実施形態では、本発明は、それを必要とする対象に、本発明に従って、本明細書で上に「抗原結合タンパク質」、「核酸」または「医薬組成物」の項で定義される、治療有効量の抗原結合タンパク質、核酸またはベクター、宿主細胞または医薬組成物を投与することを含んでなる、増殖性疾患または障害を治療または予防する方法を提供する。

【0650】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質、本発明の核酸または本発明のベクター、本発明の宿主細胞または本発明の医薬組成物は、増殖性疾患の診断、予防、および／または治療で使用するためのものである。

【0651】

本発明は、対象における増殖性疾患または障害を治療または予防するための薬剤を調製するための、本発明による抗原結合タンパク質、核酸またはベクター、宿主細胞または医薬組成物の使用にさらに言及する。

【0652】

一実施形態では、本発明は、対象における疾患または障害を治療または予防するための、本発明による抗原結合タンパク質、核酸またはベクター、宿主細胞または医薬組成物の使用に言及する。

【0653】

「対象」または「個体」という用語は同義的に使用され、例えば、ヒトまたは非ヒト哺乳類、好ましくは、ヒトであってもよい。

【0654】

本発明の文脈における「治療する」または「治療」という用語は、治療的使用（すなわち所与の疾患を有する対象における）を指し、このような障害または病状の１つまたは複数の症状の進行を逆転させ、緩和し、阻害することを意味する。したがって、治療は、疾患の完全な治癒をもたらす治療だけでなく、疾患の進行を遅らせ、および／または対象の生存を延長する治療も指す。

【0655】

「予防する」とは、予防的使用（すなわち所与の疾患に罹り易い対象における）を意味する。

【0656】

一実施形態では、「疾患」または「障害」は、本発明の抗原結合タンパク質による治療から利益を得るであろう任意の病状である。一実施形態では、これは、対象を問題の障害に罹り易くする病的状態も含めた、慢性および急性の障害または疾患を含む。「治療を必要とする」という用語は、既に障害を有する対象、ならびに障害が予防されるべき対象を指す。

【0657】

特定の実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質は、二重特異性、より具体的には本明細書に記載されるようなＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディである。

【0658】

がんなどの「増殖性疾患」は、細胞の無制御および／または不適切な増殖を伴い、隣接組織の破壊および新規血管の成長を伴うことがあり、これは、がん細胞の新規領域への侵入、すなわち転移を可能にする。抗原結合タンパク質を用いて治療可能な病状には、結腸直腸ポリープ、脳虚血、肉眼的嚢胞性疾患、多発性嚢胞腎疾患、良性前立腺肥大、および子宮内膜症をはじめとする、不適切な細胞増殖を伴う非悪性状態が含まれる。本発明の抗原結合タンパク質を使用して、血液学的または固形腫瘍の悪性腫瘍が治療され得る。より具体的には、抗原結合タンパク質を使用して治療され得る細胞増殖性疾患としては、例えば、中皮腫、扁平上皮細胞がん腫、骨髄腫、骨肉腫、膠芽細胞腫、神経膠腫、がん腫、腺がん、黒色腫、肉腫、急性および慢性の白血病、リンパ腫、および髄膜腫、ホジキン病、セザリー症候群、多発性骨髄腫、および肺がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、喉頭がん、乳がん、頭頸部がん、膀胱がん、卵巣がん、皮膚がん、前立腺がん、子宮頸がん、膣がん、胃がん、腎細胞がん、腎臓がん、膵臓がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん、食道がん、肝胆道がん、骨がん、皮膚がん、および血液がん、ならびに鼻腔および副鼻腔、鼻咽頭、口腔、中咽頭、喉頭、喉頭下部、唾液腺、縦隔、胃、小腸、結腸、直腸および肛門部、尿管、尿道、陰茎、精巣、外陰部、内分泌系、中枢神経系およびプラズマ細胞のがんが挙げられる。

【0659】

したがって、一実施形態では、増殖性障害はがんである。

【0660】

さらなる実施形態では、がんは、ＰＲＡＭＥ抗原が過剰発現され、変異し、および／またはＭＨＣに関連するＰＲＡＭＥ由来の腫瘍関連抗原が提示されるがんである。

【0661】

好ましい一実施形態では、前記がんは、非小細胞肺がんや小細胞肺がんなどの肺がん、肝臓がん、頭頸部がん、皮膚がん、腎細胞がん、脳がん、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、白血病、乳がん、メルケル細胞がん腫、黒色腫、卵巣がん、膀胱がん、子宮がん、胆嚢および胆管がん、および食道がん、好ましくは卵巣がん、白血病または黒色腫からなるリストから選択される。

【0662】

一実施形態では、がんが、ＰＲＡＭＥ抗原が過剰発現され、変異し、および／またはＭＨＣに関連するＰＲＡＭＥ由来の腫瘍関連抗原が提示されるがんであるはどうかは、例えば、本発明の抗原結合タンパク質、特に例えば、本明細書で上に定義されるような第１の可変ドメインと第２の可変ドメインのみ（したがって、本発明の抗原結合タンパク質に関して本明細書で上に定義されるように、ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、ＣＤＲａ３、およびＣＤＲａ１、ＣＤＲｂ２、ＣＤＲｂ３に限定される）を含んでなる抗原結合タンパク質を使用することによって、容易にアッセイされる抗原結合タンパク質を使用してがんを発現する抗原を同定する方法は、当業者に知られている。

【0663】

がん治療の指針を提供するテキストとしては、Ｃａｎｃｅｒ，Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ，４ｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ， ＤｅＶｉｔａ ｅｔ ａｌ，Ｅｄｓ．Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏ．，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．（１９９３）がある。適切な治療アプローチは、特定のタイプのがん、および関連分野で認識されているように、患者の全身状態などのその他の要因に応じて選択される。本発明の抗原結合タンパク質は、それ自体で使用され得て、またはがん患者を治療する際にその他の抗腫瘍剤を使用する治療レジメンに加え得る。

【0664】

いくつかの実施形態では、抗原結合タンパク質は、例えば、化学療法剤、非化学療法剤、抗腫瘍剤、および／または放射線などのがん治療において広く採用されている様々な薬剤および治療と同時、前、または後に投与され得る。例えば、化学療法および／または放射線は、本明細書に記載の治療のいずれかの前、最中、および／または後に起こり得る。化学療法剤の例は上で考察されており、これらに限定されるものではないが、シスプラチン、タキソール、エトポシド、ミトキサントロン（ノバントロン（登録商標））、アクチノマイシンＤ、シクロヘキシミド、カンプトテシン（またはその水溶性誘導体）、メトトレキサート、マイトマイシン（例えば、マイトマイシンＣ）、ダカルバジン（ＤＴＩＣ）、アドリアマイシン（ドキソルビシン）およびダウノマイシンなどの抗腫瘍性抗生物質、および上記の全ての化学療法剤が挙げられる。

【0665】

抗原結合タンパク質はまた、例えば、慢性ＨＢＶ感染症、ＨＣＶ感染症、ＨＩＶ感染症、エプスタインバーウイルス（ＥＢＶ）感染症、またはサイトメガロウイルス（ＣＭＶ）感染症などの感染性疾患の治療にも使用され得る。

【0666】

抗原結合タンパク質は、特定の細胞型を枯渇させることが有益であるそ他の種類の病状で、さらに使用され得る。例えば、喘息におけるヒト好酸球の枯渇、全身性エリテマトーデスにおける過剰なヒトＢ細胞の枯渇、自己免疫状態における過剰なヒトＴｈ２Ｔ細胞の枯渇、または感染症における病原体感染細胞の枯渇は、有益であり得る。線維症状態では、線維性組織を形成する細胞を枯渇させることが有用であり得る。

【0667】

本発明の抗原結合タンパク質またはその医薬組成物は、それ自体で投与され得て、またはこのような感染症を治療するために使用される他の治療薬の投与と同時に、前に、または後に投与され得る。

【0668】

本明細書における「診断」は、医学的診断を意味し、どの疾患または病状が、人の症状および徴候を説明するかを判定することを指す。

【0669】

抗原結合タンパク質またはその医薬組成物の「治療有効量」とは、任意の医学的治療に適用可能な合理的な利益／リスク比で、前記増殖性疾患を治療するのに十分な量の抗原結合タンパク質を意味する。しかしながら、本発明の抗原結合タンパク質、核酸またはベクター、宿主細胞または医薬組成物の毎日の総使用量は、健全な医学的判断の範囲内で主治医によって決定されることが理解されるであろう。任意の特定の患者に対する特定の治療有効量レベルは、治療される障害および障害の重症度；使用される特定の抗原結合タンパク質の活性；用いられる特定の組成物、患者の年齢、体重、一般的な健康状態、性別、および食生活；投与時間、投与経路、および用いられる特定のポリペプチドの排泄速度；治療持続期間；用いられる特定のポリペプチドと組み合わせてまたは同時に使用される薬物；および医学分野で周知の同様の要因をはじめとする様々な要因に依存する。例えば、所望の治療効果を達成するために必要とされるレベルよりも低いレベルで化合物の投与を開始し、所望の効果が達成されるまで用量を徐々に増加させることは、当業者の技術の範囲内で周知である。

【0670】

例えば、本発明の抗原結合タンパク質、本発明の核酸または本発明のベクター、本発明の宿主細胞または本発明の医薬組成物は、週２回、週１回、２、３、４、５、６、７、８、９または１０週間に１回、または２、３、４、５または６ヶ月に１回投与され得る。各日に投与される治療有効量は、約０．００３６ｍｇ～約４５０ｍｇであり得る。代案としては、用量は、患者の推定皮膚表面に従って較正され得て、各用量は、約０．００２ｍｇ／ｍ^２～約２５０ｍｇ／ｍ^２であり得る。別の代案では、用量は、患者の体重に従って較正され得て、各用量は、約０．００００５１ｍｇ／ｋｇ～約６．４ｍｇ／ｋｇであり得る。

【0671】

一実施形態では、本発明の抗原結合タンパク質による治療の有効性は、例えば、がんのマウスモデルにおいて、生体内で、例えば、治療群と対照群との間の腫瘍体積の変化を測定することによってアッセイされる。

【0672】

本発明の抗原結合タンパク質の投与量は、治療される疾患または障害、治療される個体の年齢および状態などに応じて、広い範囲内で変動し得て；例えば、二重特異性ポリペプチド分子の適切な用量範囲は、１０ｎｇ／ｋｇ～１００ｎｇ／ｋｇの間、好ましくは２５ｎｇ／ｋｇ～５０μｇ／ｋｇの間であってもよい。最終的には、医師が適切な用量を決定する。

【0673】

本発明の医薬組成物、ベクター、核酸、および細胞は、実質的に純粋形態で提供されてもよく、例えば少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％または１００％純粋である。

【0674】

本発明の抗原結合タンパク質、本発明の核酸または本発明のベクター、本発明の宿主細胞または本発明の医薬組成物は、任意の実行可能な方法によって投与され得る。タンパク質治療薬は通常、例えば注射などの非経口経路によって投与されるが、これは、経口投与が、特別な製剤または状況がない場合、胃の酸性環境内でタンパク質の断片化および／または加水分解を引き起こすためである。皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、病巣内、または腹膜のボーラス注射が可能な投与経路である。本発明の抗原結合タンパク質、本発明の宿主細胞、または本発明の医薬組成物はまた、例えば、静脈内または皮下注入などのを注入を介して投与され得る。特に皮膚に関連する疾患の場合、局所投与もまた可能である。代案としては、抗原結合タンパク質は、例えば、鼻腔内、舌下、膣、または直腸投与または吸入剤としての投与によって、粘膜との接触を介して投与され得る。代案としては、特定の適切な医薬組成物は、経口投与され得る。

【0675】

本明細書で開示されているように、いくつかの実施形態では、本明細書に上で定義されるような宿主細胞は、本明細書に記載の医学的使用または治療方法において使用される。同じ実施形態において、宿主細胞は、好ましくは、ａ）Ｔリンパ球またはＴリンパ球前駆細胞などのリンパ球、例えば、ＣＤ４またはＣＤ８陽性Ｔ細胞、最も好ましくはＴ細胞である。

【0676】

したがって、本発明の宿主細胞、好ましくはＴ細胞は、治療用組成物の活性成分として使用されてもよい。したがって、本発明はまた、標的細胞がペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなるポリペプチドを異常に発現する患者において標的細胞を殺滅する方法を提供し、方法は、患者に有効数の宿主細胞、好ましくはＴ細胞を投与することを含んでなる。この方法の文脈において、宿主細胞は、ひとたび対象に投与されると、好ましくは免疫応答を惹起する。

【0677】

したがって、本明細書で上に定義されるような宿主細胞は、対象からのもの（自系）または別の個体からのものであってもよく：好ましくは、前記その他の個体は健康である。

【0678】

特定の例では、宿主細胞はＴ細胞である。したがって、本発明の文脈において、本明細書で上に定義されるＴ細胞が薬剤として使用される場合、通常、Ｔ細胞は、アフェレーシスによって対象から採取される。次に、Ｔ細胞は、それらの細胞表面上に本発明の抗原結合タンパク質を発現するように遺伝子操作され、次に、遺伝子操作されたＴ細胞は増殖され、次に、対象に再注入される。この例では、抗原結合タンパク質は好ましくはＴＣＲである。

【0679】

別のアプローチでは、宿主細胞は、間葉系幹細胞などの幹細胞であってもよく、本発明の抗原結合タンパク質を発現するように操作される。この例では、抗原結合タンパク質は、本明細書で上記に定義されるような抗体、ｓｃＴＣＲまたはダイアボディなどの可溶性タンパク質である。

【0680】

したがって、宿主細胞は、本明細書で上に「核酸、ベクター、および組換え宿主細胞」の項に記載されるように、本発明による核酸および／またはベクターで形質移入され、感染または形質転換されている。

【0681】

本発明の抗原結合タンパク質を発現するために宿主細胞が形質移入される場合、好ましくは、細胞は、抗原結合タンパク質を発現できる発現ベクターを含んでなる。その場合、宿主細胞は、活性化宿主細胞と称されてもよい。

【0682】

「異常に発現される」によって、本発明者らは、正常な（健康な）組織における発現レベルと比較して、ポリペプチドが過剰発現されること、または腫瘍がそれに由来する組織においては遺伝子がサイレントであるが、腫瘍においてはそれが発現されることもまた意味する。「過剰発現」によって、本発明者らは、ポリペプチドが、正常組織に存在するレベルの少なくとも１．２倍のレベルで；好ましくは正常組織に存在するレベルの少なくとも２倍、より好ましくは少なくとも５倍または１０倍のレベルで存在することを意味する。

【0683】

このいわゆるＴ細胞の養子免疫伝達のためのプロトコルは、当該技術分野で周知である。概説は、Ｇａｔｔｉｏｎｉ ｅｔ ａｌ．ａｎｄ Ｍｏｒｇａｎ ｅｔ ａｌ．（Ｇａｔｔｉｎｏｎｉ，Ｌ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．６（２００６）：３８３－３９３；Ｍｏｒｇａｎ，Ｒ．Ａ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ３１４（２００６）：１２６－１２９）にある。

【0684】

一態様では、ＴＣＲ誘発免疫応答またはＴ細胞応答は、生体外または生体内で、ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）などのペプチドによって誘導されるエフェクター機能の増殖および活性化を指してもよい。例えば、ＭＨＣクラスＩ拘束性細胞傷害性Ｔ細胞では、エフェクター機能は、ペプチドパルスされた、ペプチド前駆体パルスされた、または天然にペプチドを提示する、標的細胞の溶解；好ましくはペプチドによって誘導されるインターフェロン－γ、ＴＮＦ－α、またはＩＬ－２であるサイトカインの分泌；例えば、ペプチドによって誘導されるグランザイムまたはパーフォリンであるエフェクター分子の分泌；または脱顆粒であってもよい。

【0685】

生体外でＴ細胞を作製するために、その他のいくつかの方法が使用されてもよい。例えば、自己由来腫瘍浸潤性リンパ球が、ＣＴＬの作製において使用され得る。Ｐｌｅｂａｎｓｋｉ ｅｔ ａｌ．（Ｐｌｅｂａｎｓｋｉ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．，Ｅｕｒ．Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２５（１９９５）：１７８３－１７８７）は、Ｔ細胞の調製において自系末梢血リンパ球（ＰＬＢ）を利用した。Ｂ細胞もまた、自己由来Ｔ細胞の製造において使用され得る。

【0686】

Ｔ細胞の調製では、同種異系細胞もまた使用されてもよく、方法は、参照によって本明細書に援用される、米国特許第６８０５８６１号明細書で詳細に記載されている。
ペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）に向けられた本発明の抗原結合タンパク質を発現する宿主細胞は、治療において有用である。したがって、本発明のさらなる態様は、前述の本発明の方法によって入手可能な活性化宿主細胞を提供する。

【0687】

上記の方法によって製造される活性化宿主細胞は、ペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなるポリペプチドを異常に発現する細胞を選択的に認識してもよい。

【0688】

一態様では、宿主細胞、特にＴ細胞は、その抗原結合タンパク質、特にそのＴＣＲを介して、ＰＲＡＭＥ－００４複合体と相互作用（例えば、結合）することによって、細胞を認識する。宿主細胞は、標的細胞がペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）を含んでなるポリペプチドを異常に発現する患者の標的細胞を殺滅する方法において有用であり、ここで、患者は、有効数の活性化宿主細胞を投与される。患者に投与されるＴ細胞は、患者に由来して、上述のように活性化されてもよい（すなわちそれらは自己Ｔ細胞である）。代案としては、Ｔ細胞は、患者でなく別の個人に由来する。もちろん、個人が健常人であれば、それが好ましい。「健常人」によって、本発明者らは、個人が概して健康良好であり、好ましくは有能な免疫系を有して、より好ましくは容易に検査され検出され得るいかなる疾患にも罹患していないことを意味する。

【0689】

生体内では、本発明によるＣＤ８陽性Ｔ細胞の標的細胞は、腫瘍細胞（これは時にＭＨＣクラスＩＩを発現する）および／または腫瘍（腫瘍細胞）周囲の間質細胞であり得る（これも時にＭＨＣクラスＩＩを発現する；（Ｄｅｎｇｊｅｌ，Ｊ．ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １２（２００６）：４１６３－４１７０））。

【0690】

キット
最後に、本発明はまた、本発明の少なくとも１つの抗原結合タンパク質を含んでなるキットを提供する。

【0691】

一実施形態では、キットは、
ａ）本明細書で上に「抗原結合タンパク質」の項で定義される少なくとも１つの本発明の抗原結合タンパク質；
ｂ）任意選択的に、包装材料、および
ｃ）任意選択的に、がんを治療するのに、またはがんの治療で使用するのに、前記抗原結合タンパク質が有効であることを示す、前記包装材料内に含まれるラベルまたは包装挿入物
を含んでなる。

【0692】

関連する実施形態では、本発明の少なくとも１つの抗原結合タンパク質は、単一および／または複数チャンバーのプレフィルドシリンジ（例えば、液体シリンジおよび溶解シリンジ）に含有されている。

【0693】

一実施形態では、本発明は、単回用量投与ユニットを製造するためのキットを包含する。

【0694】

したがって、一実施形態では、本発明のキットのａ）で言及される本発明の少なくとも１つの抗原結合タンパク質は、第１の容器に含有される本発明の乾燥抗原結合タンパク質である。次に、キットは、水性製剤を有する第２の容器をさらに含む。

【0695】

したがって、キットは、
ａ）本明細書で上に「抗原結合タンパク質」の項で定義される本発明の少なくとも１つの乾燥抗原結合タンパク質を含んでなる第１の容器、
ｂ）水性製剤を含んでなる第２の容器；
ｃ）任意選択的に、包装材料、および
ｄ）任意選択的に、がんを治療するのに、またはがんの治療で使用するのに、前記抗原結合タンパク質が有効であることを示す、前記包装材料内に含まれるラベルまたは包装挿入物
を含んでなる。

【0696】

水性製剤は、典型的には、本明細書で上に「医薬組成物」の項で定義される、薬理的に許容可能な担体を含んでなる水溶液である。

【0697】

関連する実施形態では、「第１の容器」および「第２の」容器は、複数チャンバーのプレフィルドシリンジ（例えば、溶解シリンジ）のチャンバーを指す。

【0698】

本出願を通して、「および／または」という用語は、それが接続する１つまたは複数の状況が発生してもよいことを包含すると解釈されるべき文法的接続詞である。例えば、「このような天然配列タンパク質は、標準的な組換えおよび／または合成方法を使用して調製され得る」という表現は、天然配列タンパク質が、標準的な組換え法と合成法とを使用して調製され得ること、天然配列タンパク質が、標準組換え法を使用して調製され得ること、または天然配列タンパクが、質合成法を使用して調製され得ることを示す。

【0699】

さらに、本出願を通して、「含んでなる」という用語は、具体的に言及された全ての機能、ならびに任意選択的で、追加的な、特定されていない機能を包含すると解釈されるべきである。本明細書で使用される場合、「含んでなる」という用語の使用はまた、具体的に言及された特徴以外の特徴が存在しない（すなわち「からなる」）実施形態も開示する。

【0700】

さらに、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」は、複数を除外しない。特定の措置が相互に異なる従属請求項に記載されているという単なる事実は、これらの措置の組み合わせを有利に使用できないことを示すものではない。

【0701】

次に、以下の図および実施例を参照して、本発明をより詳細に説明する。本明細書で引用される全ての文献および特許文献は、本明細書に参照により援用される。本発明を図示し、前述の説明で詳細に説明してきたが、実施例は例示的または模範的なものであり、制限的なものではないと見なされるべきである。

【0702】

アジュバント
本発明の抗原結合タンパク質は、Ｔ細胞応答を刺激できることが示されている（実施例５および６）。したがって、本発明の抗原結合タンパク質は、それによって腫瘍細胞が破壊され得る、患者における免疫応答を生じさせるのに有用である。患者における免疫応答は、記載された抗原結合タンパク質を理想的には免疫原性を増強する薬剤（すなわちアジュバント）と組み合わせて、患者に直接投与することによって誘導され得る。ペプチドＳＬＬＱＨＬＩＧＬ（配列番号８）は、同等のコピー数で正常組織上に提示または過剰提示されないことから、このような治療的ワクチン接種に由来する免疫応答は、腫瘍細胞に対して非常に特異的であると予想され得て、患者の正常細胞に向けられた望まれない自己免疫反応のリスクを防ぐ。

【0703】

本発明の薬剤は、１つまたは複数のアジュバントもまた含んでもよい。アジュバントは、免疫応答（例えば、ＣＤ８陽性Ｔ細胞およびヘルパーＴ（ＴＨ）細胞によって媒介される抗原に対する免疫応答を非特異的に促進または増強する物質であり、したがって、本発明の薬剤中で有用であると見なされる。適切なアジュバントとしては、１０１８ ＩＳＳ、アルミニウム塩、ＡＭＰＬＩＶＡＸ（登録商標）、ＡＳ１５、ＢＣＧ、ＣＰ－８７０，８９３、ＣｐＧ７９０９、ＣｙａＡ、ｄＳＬＩＭ、フラジェリンまたはフラジェリン由来のＴＬＲ５リガンド、ＦＬＴ３リガンド、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＣ３０、ＩＣ３１、イミキモド（ＡＬＤＡＲＡ（登録商標））、レシキモド、ＩｍｕＦａｃｔ ＩＭＰ３２１；ＩＬ－２、ＩＬ－１３、ＩＬ－２１、インターフェロン－αまたは－βなどのインターロイキン、またはそれらのＰＥＧ化誘導体；ＩＳパッチ、ＩＳＳ、ＩＳＣＯＭＡＴＲＩＸ、ＩＳＣＯＭｓ、ＪｕｖＩｍｍｕｎｅ（登録商標）、ＬｉｐｏＶａｃ、ＭＡＬＰ２、ＭＦ５９、モノホスホリルリピドＡ、モンタニドＩＭＳ １３１２、モンタニドＩＳＡ ２０６、モンタニドＩＳＡ ５０Ｖ、モンタニドＩＳＡ－５１、油中水型および水中油型エマルション、ＯＫ－４３２、ＯＭ－１７４、ＯＭ－１９７－ＭＰ－ＥＣ、ＯＮＴＡＫ、ＯｓｐＡ、ＰｅｐＴｅｌ（登録商標）ベクターシステム、ポリ（ラクチドコグリコリド）［ＰＬＧ］－ベースおよびデキストラン微粒子、タラクトフェリンＳＲＬ１７２、ビロソームおよびその他のウイルス様粒子、ＹＦ－１７Ｄ、ＶＥＧＦトラップ、Ｒ８４８、β－グルカン、Ｐａｍ３Ｃｙｓ、サポニン由来のＡｑｕｉｌａ'ｓ ＱＳ２１スティミュロン、マイコバクテリア抽出物および合成細菌細胞壁模倣体；およびＲｉｂｉ'ｓ Ｄｅｔｏｘ、Ｑｕｉｌ、またはＳｕｐｅｒｆｏｓなどのその他の独自仕様のアジュバントが挙げられるが、これに限定されるものではない。フロイントまたはＧＭ－ＣＳＦなどのアジュバントが好ましい。樹状細胞およびそれらの調製物に対して特異的な、いくつかの免疫学的アジュバント（例えばＭＦ５９）が、以前記載されている（Ａｌｌｉｓｏｎ，Ｊ．Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７０（１９９５）：９３２－９３３）。サイトカインもまた使用されてもよい。数種のサイトカインは、樹状細胞のリンパ組織（例えばＴＮＦ－）への遊走に影響を与えること、Ｔリンパ球（例えば、ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－１、およびＩＬ－４）のための効率的な抗原提示細胞への樹状細胞の成熟を加速すること（その内容全体が参照により本明細書に具体的に援用される、米国特許第５，８４９，５８９号明細書）、および免疫増強剤（例えば、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２３、ＩＬ－７、ＩＦＮ－α、ＩＦＮ－β）として作用することと、直接関連付けられている（Ｇａｂｒｉｌｏｖｉｃｈ，Ｄ．Ｉ．ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｍｅｄ．２（１９９６）：１０９６－１１０３）。

【0704】

ＣｐＧ免疫賦活性オリゴヌクレオチドもまた、ワクチン環境において、アジュバント効果を増強することが報告されている。理論により拘束されることなく、ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、Ｔｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）、主にＴＬＲ９を通じた、内在的（非適応性）免疫系の活性化によって作用する。ＣｐＧ誘導性ＴＬＲ９活性化は、ペプチドまたはタンパク質抗原、生きたまたは死滅ウイルス、樹状細胞ワクチン、自己細胞ワクチン、そして予防的および治療的ワクチンの双方における多糖コンジュゲートをはじめとする多種多様な抗原に対する、抗原特異的体液性および細胞性応答を増強する。より重要なことには、それは樹状細胞の成熟と分化を増強し、ＣＤ４ Ｔ細胞援助の不在下であってさえも、ＴＨ１細胞の活性化の促進、および強力な細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）生成をもたらす。ＴＬＲ９刺激によって誘導されるＴＨ１バイアスは、通常はＴＨ２バイアスを促進するミョウバンまたは不完全フロイントアジュバント（ＩＦＡ）などのワクチンアジュバント存在下であってさえも、維持される。ＣｐＧオリゴヌクレオチドは、その他のアジュバントと調合されるかまたは同時投与された際に、または微粒子、ナノ粒子、脂質エマルションなどの調合物または類似調合物中で、なおもより高いアジュバント活性を示し、それは、抗原が比較的弱い場合、強力な応答を誘導するのに特に必要である。それらは免疫応答もまた加速し、いくつかの実験では、ＣｐＧなしのワクチン総量と同等の抗体応答で、抗原用量のほぼ２桁分の低減を可能にする（Ｋｒｉｅｇ，Ａ．Ｍ．，Ｎａｔ Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ．５（２００６）：４７１－４８４）。米国特許第６，４０６，７０５Ｂ１号明細書は、抗原特異的免疫応答を誘導するためのＣｐＧオリゴヌクレオチド、非核酸アジュバント、および抗原の併用を記載する。ＣｐＧ ＴＬＲ９拮抗薬は、本発明の医薬組成物の好ましい構成要素である、Ｍｏｌｏｇｅｎ（独国ベルリン）製のｄＳＬＩＭ（二重ステムループ免疫調節剤）である。ＲＮＡ結合ＴＬＲ７、ＴＬＲ８および／またはＴＬＲ９などのその他のＴＬＲ結合分子もまた、使用されてもよい。

【0705】

有用なアジュバントのその他の例としては、化学修飾ＣｐＧ（例えば、ＣｐＲ、Ｉｄｅｒａ）；Ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ）などのｄｓＲＮＡ類似体およびそれらの誘導体（例えば、ＡｍｐｌｉＧｅｎ（登録商標）、Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標）、ｐｏｌｙ－（ＩＣＬＣ）、ｐｏｌｙ（ＩＣ－Ｒ）、ｐｏｌｙ（Ｉ：Ｃ１２Ｕ）；非ＣｐＧ細菌ＤＮＡまたはＲＮＡ）、ならびにシクロホスファミド、スニチニブ、ベバシズマブ（登録商標）、セレブレックス、ＮＣＸ－４０１６、シルデナフィル、タダラフィル、バルデナフィル、ソラフェニブ、テモゾロマイド、テムシロリムス、ＸＬ－９９９、ＣＰ－５４７６３２、パゾパニブ、ＶＥＧＦトラップ、ＺＤ２１７１、ＡＺＤ２１７１、抗ＣＴＬＡ４などの免疫活性小分子および抗体；免疫系の主要構造を標的化するその他の抗体（例えば、抗ＣＤ４０、抗ＴＧＦβ、抗ＴＮＦα受容体）；およびＳＣ５８１７５が挙げられるが、これに限定されるものではなく、これらは治療的におよび／またはアジュバントとして作用してもよい。本発明の文脈で有用なアジュバントおよび添加剤の量と濃度は、過度の実験を実施することなく、当業者によって容易に判定され得る。

【0706】

好ましいアジュバントは、抗ＣＤ４０、イミキモド、レシキモド、ＧＭ－ＣＳＦ、シクロホスファミド、スニチニブ、ベバシズマブ、インターフェロンα、ＣｐＧオリゴヌクレオチドおよび誘導体、ｐｏｌｙ－（Ｉ：Ｃ）および誘導体、ＲＮＡ、シルデナフィル、およびＰＬＧまたはビロソーム微粒子調合物である。

【0707】

好ましい実施形態では、本発明による医薬組成物は、アジュバントを含んでなり、前記アジュバントは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ、サルグラモスチム）、シクロホスファミド、イミキモド、レシキモド、およびインターフェロンαなどのコロニー刺激因子からなる群から選択される。

【0708】

別の好ましい実施形態では、本発明による医薬組成物は、アジュバントを含んでなり、前記アジュバントは、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ、サルグラモスチム）、シクロホスファミド、イミキモド、およびレシキモドなどのコロニー刺激因子からなる群から選択される。本発明による医薬組成物の好ましい実施形態では、アジュバントは、シクロホスファミド、イミキモドまたはレシキモドである。なおもより好ましいアジュバントは、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＭＳ １３１２、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ２０、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ ５０Ｖ、Ｍｏｎｔａｎｉｄｅ ＩＳＡ－５１、ｐｏｌｙＩＣＬＣ（Ｈｉｌｔｏｎｏｌ（登録商標））、および抗ＣＤ４０ｍＡＢまたはそれらの組み合わせである。

【0709】

配列の説明
配列番号１はＣＤＲａ１コンセンサス配列「ＤＲＧＳＱＸ_１」のアミノ酸配列を示す
配列番号２は、ＣＤＲａ２コンセンサス配列「ＩＹＸ_２Ｘ_３ＧＤ」のアミノ酸配列を示す
配列番号３は、ＣＤＲａ３コンセンサス配列「ＣＡＡＶＩＸ_４ＮＸ_５Ｘ_６ＧＧＸ_７ＬＴＦ」のアミノ酸配列を示す
配列番号４は、ＣＤＲｂ１コンセンサス配列「Ｘ_８ＧＨＲＸ_９」のアミノ酸配列を示す
配列番号５は、ＣＤＲｂ２コンセンサス配列「ＹＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４」のアミノ酸配列を示す
配列番号６は、ＣＤＲｂ３コンセンサス配列「ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ」のアミノ酸配列を示す
配列番号７は、Ｕｎｉｐｒｏｔデータベースから受入れ番号Ｐ７８３９５（２０１９年１月１１日時点で利用可能）で入手可能な、全長ＰＲＡＭＥタンパク質のアミノ酸配列を示す
配列番号８は、アミノ酸配列「ＳＬＬＱＨＬＩＧＬ」のＰＲＡＭＥ－００４ペプチドのアミノ酸配列を示す
配列番号９は、配列「ＩＹＳＮＧＤ」のＣＤＲａ２（すなわちＲ１６Ｐ１Ｃ１０）のアミノ酸配列を示す
配列番号１０は、配列「ＣＡＡＶＩＳＮＦＧＮＥＫＬＴＦ」のＣＤＲａ３（すなわちＲ１６Ｐ１Ｃ１０）のアミノ酸配列を示す
配列番号１１は、配列「ＤＲＧＳＱＳ」のＣＤＲａ１（すなわちＨｉＡｆｆ１）のアミノ酸配列を示す
配列番号１２は、配列「ＳＧＨＲＳ」のＣＤＲｂ１（すなわちＲ１６Ｐ１Ｃ１０）のアミノ酸配列を示す
配列番号１３は、配列「ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＥＱＹＦ」のＣＤＲｂ３（すなわちＲ１６Ｐ１Ｃ１０）のアミノ酸配列を示す
配列番号１４は、配列「ＹＦＳＥＴＱ」のＣＤＲｂ２（すなわちＲ１６Ｐ１Ｃ１０）のアミノ酸配列を示す
配列番号１５は、配列「ＹＶＨＧＸ_１６Ｅ」のＣＤＲｂ２アミノ酸配列を示す
配列番号１６は、配列「ＤＲＧＳＱＬ」のＣＤＲａ１変異型１のアミノ酸配列を示す
配列番号１７は、配列「ＩＹＱＥＧＤ」のＣＤＲａ２変異型２のアミノ酸配列を示す
配列番号１８は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＮＮＰＳＧＧＭＬＴＦ」を示す
配列番号１９は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＤＮＳＮＧＧＩＬＴＦ」を示す
配列番号２０は、ＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＤＮＰＳＧＧＩＬＴＦ」を示す
配列番号２１は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦ」を示す
配列番号２２は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＰＰＧＧＫＬＴＦ」を示す
配列番号２３は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＰＧＧＧＡＬＴＦ」を示す
配列番号２４は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＳＡＧＧＲＬＴＦ」を示す
配列番号２５は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＬＥＧＧＳＬＴＦ」を示す
配列番号２６は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＲＬＧＧＹＬＴＦ」を示す
配列番号２７は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＴＤＧＧＲＬＴＦ」を示す
配列番号２８は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＱＲＧＧＡＬＴＦ」を示す
配列番号２９は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＩＬＴＦ」を示す
配列番号３０は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＴＮＩＡＧＧＳＬＴＦ」を示す
配列番号３１は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＮＤＧＧＹＬＴＦ」を示す
配列番号３２は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＧＲＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号３３は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＴＨＧＧＰＬＴＦ」を示す
配列番号３４は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＤＶＧＧＳＬＴＦ」を示す
配列番号３５は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＥＮＫＰＧＧＰＬＴＦ」を示す
配列番号３６は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＤＮＰＶＧＧＰＬＴＦ」を示す
配列番号３７は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＮＮＧＧＡＬＴＦ」を示す
配列番号３８は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＩＬＴＦ」を示す
配列番号３９は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＱＬＴＦ」を示す
配列番号４０は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＳＹＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号４１は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＤＤＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号４２は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＡＡＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号４３は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＴＩＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号４４は、ＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＴＲＧＧＬＬＴＦ」を示す
配列番号４５は、ＣＤＲｂ１（すなわちＨｉＡｆｆ１）アミノ酸配列「ＰＧＨＲＡ」を示す
配列番号４６は、ＣＤＲｂ２（すなわちＨｉＡｆｆ１）アミノ酸配列「ＹＶＨＧＥＥ」を示す
配列番号４７は、ＣＤＲｂ２（すなわち改善された）アミノ酸配列「ＹＶＨＧＡＥ」を示す
配列番号４８は、ＣＤＲｂ３（すなわちＨｉＡｆｆ１）アミノ酸配列「ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦ」を示す
配列番号４９は、ＣＤＲｂ１（すなわち改善された）アミノ酸配列「ＰＧＨＲＳ」を示す
配列番号５０は、配列「ＶＬＬＨＨＱＩＧＬ」のＩＦＩＴ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号５１は、配列「ＦＭＮＰＨＬＩＳＶ」のＩＦＴ１７－００３のアミノ酸配列を示す
配列番号５２は、配列「ＬＬＬＡＨＩＩＡＬ」のＦＡＤＳ２－００１を示す
配列番号５３は、配列「ＡＬＭＹＨＴＩＴＬ」のＣＴＢＰ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号５４は、ＦＲ１－ａアミノ酸配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳ」を示す
配列番号５５は、ＦＲ２－ａアミノ酸配列「ＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳ」を示す
配列番号５６は、ＦＲ３－ａアミノ酸配列「ＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬ」を示す
配列番号５７は、ＦＲ４－ａアミノ酸配列「ＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」を示す
配列番号５８は、ＦＲ１－ｂアミノ酸配列「ＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩ」を示す
配列番号５９は、ＦＲ２－ｂアミノ酸配列「ＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥ」を示す
配列番号６０は、ＦＲ３－ｂアミノ酸配列「ＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬ」を示す
配列番号６１は、ＦＲ３－ｂアミノ酸配列「ＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＦＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬ」を示す
配列番号６２は、ＦＲ４－ｂアミノ酸配列「ＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮ」を示す
配列番号６３は、「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＦ_ｃ含有ＨｉＡｆｆ１ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディのＶ_３のアミノ酸配列を示す
配列番号６４は、「ＧＧＧＳＧＧＧＧ」の分子Ｆ_ｃ含有ＨｉＡｆｆ１ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディ中のリンカーＬ_１のアミノ酸配列を示す
配列番号６５は、配列「ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ」のヒト化ＵＣＨＴ１のＶ_Ｌのアミノ酸配列を示す
配列番号６６は、配列「ＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰ」のＦ_ｃ１（「ノブ」変異を含んでなる）のアミノ酸配列を示す
配列番号６７は、「ＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮ」のＶ_β可変ドメインのアミノ酸配列を示す
配列番号６８は、配列「ＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰ」のＦ_ｃ２（「ノブ」変異を含んでなる）のアミノ酸配列を示す
配列番号６９はリンカーアミノ酸配列「ＴＶＡＡＰ」を示す
配列番号７０はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＳ」を示す
配列番号７１はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＧＳ」を示す
配列番号７２はリンカーアミノ酸配列「ＴＶＬＲＴ」を示す
配列番号７３はリンカーアミノ酸配列「ＴＶＳＳＡＳ」を示す
配列番号７４はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ」を示す
配列番号７５はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＧＳＡＡＡ」を示す
配列番号７６はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ」を示す
配列番号７７はリンカーアミノ酸配列「ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＳ」を示す
配列番号７８はリンカーアミノ酸配列「ＴＶＬＳＳＡＳ」を示す
配列番号７９は、天然Ｆ_ｃアミノ酸配列（ＩＧＨＧ１^＊０１）ＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫを示す
配列番号８０は、ヒンジ－Ｃ_Ｈ１アミノ酸配列ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＳＰＰＳＰＡＰＰＶＡＧを示す
配列番号８１は、配列「ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＳＰＰＳＰＡＰＰＶＡＧＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＳＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮ」のｓｃＴＣＲ－Ｆａｂコンストラクトの第１のポリペプチドのアミノ酸配列を示す
配列番号８２は、配列「ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ」のｓｃＴＣＲ－Ｆａｂコンストラクトの第２のポリペプチドのアミノ酸配列を示す
配列番号８３は、配列「ＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮ」のＶ_β－ドメイン（Ｂ２と称される）のアミノ酸配列を示す
配列番号８４は、配列「ＡＡＡＧＧＳＧＧＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬ」のリンカーおよびＭｙｃタグのアミノ酸配列を示す
配列番号８５は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＰＧＧＧＡＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１のアミノ酸配列を示す
配列番号８６は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＳＡＧＧＲＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２のアミノ酸配列を示す
配列番号８７は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＬＥＧＧＳＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃３のアミノ酸配列を示す
配列番号８８は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＲＬＧＧＹＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃４のアミノ酸配列を示す
配列番号８９は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＴＤＧＧＲＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃５のアミノ酸配列を示す
配列番号９０は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＱＲＧＧＡＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃６のアミノ酸配列を示す
配列番号９１は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃７のアミノ酸配列を示す
配列番号９２は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＴＮＩＡＧＧＳＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃９のアミノ酸配列を示す
配列番号９３は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＹＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１０のアミノ酸配列を示す
配列番号９４は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＧＲＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１１のアミノ酸配列を示す
配列番号９５は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＴＨＧＧＰＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１２のアミノ酸配列を示す
配列番号９６は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＶＧＧＳＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１３のアミノ酸配列を示す
配列番号９７は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＥＮＫＰＧＧＰＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１４のアミノ酸配列を示す
配列番号９８は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＰＶＧＧＰＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１５のアミノ酸配列を示す
配列番号９９は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＮＩＧＧＡＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１６のアミノ酸配列を示す
配列番号１００は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１７のアミノ酸配列を示す
配列番号１０１は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１８のアミノ酸配列を示す
配列番号１０２は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＳＡＧＧＲＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１９のアミノ酸配列を示す
配列番号１０３は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＲＬＧＧＹＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２０のアミノ酸配列を示す
配列番号１０４は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＴＨＧＧＰＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２２のアミノ酸配列を示す
配列番号１０５は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＱＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２３のアミノ酸配列を示す
配列番号１０６は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＳＹＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２４のアミノ酸配列を示す
配列番号１０７は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＡＡＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２６のアミノ酸配列を示す
配列番号１０８は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＴＩＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２７のアミノ酸配列を示す
配列番号１０９は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＤＧＧＲＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２９のアミノ酸配列を示す
配列番号１１０は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＴＲＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃３０のアミノ酸配列を示す
配列番号１１１は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃３８のアミノ酸配列を示す
配列番号１１２は、配列ＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＦＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮのＶ_βＢ２_Ｓ８５Ｆのアミノ酸配列を示す
配列番号１１３は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＳＹＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２４のアミノ酸配列を示す
配列番号１１４は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃１８のアミノ酸配列を示す
配列番号１１５は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＶＶＧＧＱＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２３のアミノ酸配列を示す
配列番号１１６は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＲＬＧＧＹＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２０のアミノ酸配列を示す
配列番号１１７は、リンカーアミノ酸配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳを示す
配列番号１１８は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮのＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃３８のアミノ酸配列を示す
配列番号１１９は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＳＧＧＧＧＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＣＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＷＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰのＦ_ｃ含有ＨｉＡｆｆ１二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディの第１のポリペプチドのアミノ酸配列を示す
配列番号１２０は、配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＧＧＧＳＧＧＧＧＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮＥＰＫＳＳＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＣＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＳＣＡＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＶＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰのＦ_ｃ含有ＨｉＡｆｆ１二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ（抗ＣＤ３）ダイアボディの第２のポリペプチドのアミノ酸配列を示す
配列番号１２１は、配列ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲの抗ＣＤ３のＶＨのアミノ酸配列を示す
配列番号１２２は、配列ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＩＲＮＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＹＴＳＲＬＨＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＩＡＴＹＦＣＱＱＧＱＴＬＰＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲの抗ＣＤ３のＶＬのアミノ酸配列を示す
配列番号１２３は、配列ＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣのＣＬのアミノ酸配列を示す
配列番号１２４は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＳＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮのαβ融合のアミノ酸配列を示す
配列番号１２５は、配列ＦＬＰＩＨＬＬＧＬのペプチドＡＴＰ１Ａ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１２６は、配列ＹＬＤＧＨＬＩＴＴのペプチドＮＡＤＫ－００２のアミノ酸配列を示す
配列番号１２７は、配列ＩＬＡＭＨＬＩＤＶのペプチドＩＴＳＮ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１２８は、配列ＩＶＩＮＨＶＩＳＶのペプチドＳＭＡ－００３のアミノ酸配列を示す
配列番号１２９は、配列ＩＬＱＰＨＶＩＡＬのペプチドＶＰＳ１３Ａ－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３０は、配列ＴＬＶＹＨＶＶＧＶのペプチドＳＦ３Ｂ３－００５のアミノ酸配列を示す
配列番号１３１は、配列ＦＶＱＰＨＩＩＱＬのペプチドＮＣＡＭ２－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３２は、配列ＹＭＬＥＨＶＩＴＬのペプチドＫＮＴ－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３３は、配列ＡＬＡＫＨＬＩＫＩのペプチドＥＨＤ４－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３４は、配列ＡＬＡＮＨＬＩＫＶのペプチドＥＨＤ－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３５は、配列ＹＬＩＬＨＬＩＳＴのペプチドＭＣＭＢ－００２のアミノ酸配列を示す
配列番号１３６は、配列ＲＶＭＥＨＦＩＫＬのペプチドＨＳＰＡ５－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３７は、配列ＫＬＹＱＨＥＩＮＬのペプチドＣＥＢＰＺ－００２のアミノ酸配列を示す
配列番号１３８は、配列ＳＦＹＥＨＩＩＴＶのペプチドＤＣＡＦ１２－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１３９は、配列ＡＬＡＳＨＬＩＥＡのペプチドＥＨＤ２－００２のアミノ酸配列を示す
配列番号１４０は、配列ＳＬＡＤＲＬＩＧＶのペプチドＫＩＡＡ１３２４－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４１は、配列ＬＶＳＥＨＶＩＥＬのペプチドＭＹＯ１Ａ－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４２は、配列ＳＬＹＫＨＬＶＡＬのペプチドＳＥＲＰＩＮＡ６－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４３は、配列ＩＩＩＮＨＶＩＳＶのペプチドＳＭＡＲＣＤ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４４は、配列ＳＬＬＧＨＶＩＲＬのペプチドＴＳＣ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４５は、配列ＳＬＩＥＨＭＩＭＬのペプチドＵＧＴ３－００５のアミノ酸配列を示す
配列番号１４６は、配列ＮＬＬＰＨＡＩＮＬのペプチドＶＡＶ１－００１のアミノ酸配列を示す
配列番号１４７は、配列ＳＬＦＥＨＦＩＥＬのペプチドＷＤＦＹ３－００４のアミノ酸配列を示す
配列番号１４８は、配列ＭＫＳＬＲＶＬＬＶＩＬＷＬＱＬＳＷＶＷＳＱＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＦＩＹＳＮＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＳＮＦＧＮＥＫＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰのＲ１６Ｐ１Ｃ１０α可変ドメインのアミノ酸配列を示す
配列番号１４９は、配列ＭＧＳＲＬＬＣＷＶＬＬＣＬＬＧＡＧＰＶＫＡＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＳＧＨＲＳＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＦＳＥＴＱＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＲＳＥＭＮＶＳＴＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＥＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴのＲ１６Ｐ１Ｃ１０β可変ドメインのアミノ酸配列を示す
配列番号１５０は、配列ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＳＮＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮのｓｃＴＣＲＣＤＲ６のアミノ酸配列を示す
配列番号１５１は、配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳのリンカーのアミノ酸配列を示す
配列番号１５２は、配列ＭＱＬＬＲＣＦＳＩＦＳＶＩＡＳＶＬＡＱＥＬＴＴＩＣＥＱＩＰＳＰＴＬＥＳＴＰＹＳＬＳＴＴＴＩＬＡＮＧＫＡＭＱＧＶＦＥＹＹＫＳＶＴＦＶＳＮＣＧＳＨＰＳＴＴＳＫＧＳＰＩＮＴＱＹＶＦのリーダー配列と一緒に、Ａｇａ２ｐ酵母接合タンパク質のアミノ酸配列を示す
配列番号１５３は、配列ＭＱＬＬＲＣＦＳＩＦＳＶＩＡＳＶＬＡＱＥＬＴＴＩＣＥＱＩＰＳＰＴＬＥＳＴＰＹＳＬＳＴＴＴＩＬＡＮＧＫＡＭＱＧＶＦＥＹＹＫＳＶＴＦＶＳＮＣＧＳＨＰＳＴＴＳＫＧＳＰＩＮＴＱＹＶＦＧＧＧＧＳＤＹＫＤＤＤＤＫＧＧＧＡＳＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＳＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＳＮＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＤＮＤＱＧＧＩＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＶＴＱＴＰＲＹＬＩＫＴＲＧＱＱＶＴＬＳＣＳＰＩＰＧＨＲＡＶＳＷＹＱＱＴＰＧＱＧＬＱＦＬＦＥＹＶＨＧＥＥＲＮＫＧＮＦＰＧＲＦＳＧＲＱＦＳＮＳＳＳＥＭＮＩＳＮＬＥＬＧＤＳＡＬＹＬＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＶＱＹＦＧＰＧＴＲＬＴＶＴＥＤＬＫＮＡＡＡＧＧＳＧＧＥＱＫＬＩＳＥＥＤＬの融合タンパク質リーダーペプチド－Ａｇａ２ｐ－ＦＬＡＧ－Ｌ－ｓｃＴＣＲ ＣＤＲ６－Ｌ－Ｍｙｃのアミノ酸配列を示す
配列番号１５４は、配列ＧＧＧＧＳＤＹＫＤＤＤＤＫＧＧＧＡＳのＦＬＡＧタグとリンカーのアミノ酸配列を示す
配列番号１５５は、ヒンジ領域ＩｇＧ１配列Ｅ_２１６ＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧを示す
配列番号１５６は、ヒンジ領域ＩｇＧ２配列Ｅ_２１６ＲＫＣＣＶＥＣＰＰＣＰＡＰＰＶＡＧＰを示す
配列番号１５７は、ヒンジ領域ＩｇＧ３配列ＥＬＫＴＰＬＧＤＴＴＨＴＣＰＲＣＰＥＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＥ_２１６ＰＫＳＣＤＴＰＰＰＣＰＲＣＰＡＰＥＬＬＧを示す
配列番号１５８は、ヒンジ領域ＩｇＧ４配列Ｅ_２１６ＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＬＧを示す
配列番号１５９は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＴを示す
配列番号１６０は、リンカー配列ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧを示す
配列番号１６１は、リンカー配列ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧを示す
配列番号１６２は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴを示す
配列番号１６３は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴを示す
配列番号１６４は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴを示す
配列番号１６５は、リンカー配列ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧを示す
配列番号１６６は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＴを示す
配列番号１６７は、リンカー配列ＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧを示す
配列番号１６８は、リンカー配列ＧＳＡＤＤＡＫＫＤＡＡＫＫＤＧＫＳを示す
配列番号１６９は、リンカー配列ＧＧＱＧＳＧＧＴＧＳＧＧＱＧＳＧＧＴＧＳＧＧＱＧＳを示す
配列番号１７０は、リンカー配列ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳを示す
配列番号１７１は、ＵＣＨＴ１（１７）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７２は、ＵＣＨＴ１（２３）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＥＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＱＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７３は、ＢＭＡ（１０）ＶＬ配列ＱＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＴＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫを示す
配列番号１７４は、ＢＭＡ（１０）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＫＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＹＮＤＶＴＫＹＡＥＫＦＱＧＲＶＴＬＴＳＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＨＹＣＡＲＧＳＹＹＤＹＤＧＦＶＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７５は、ＢＭＡ（３６）ＶＬ配列ＱＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＳＡＴＳＳＶＳＹＭＨＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＲＷＩＹＤＴＳＫＬＡＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＹＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＡＡＴＹＹＣＱＱＷＳＳＮＰＬＴＦＧＧＧＴＫＶＥＩＫを示す
配列番号１７６は、ＢＭＡ（３６）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＫＦＴＳＹＶＭＨＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＹＩＮＰＹＮＤＶＴＫＹＡＥＫＦＱＧＲＶＴＬＴＳＤＴＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＨＹＣＡＲＧＳＹＹＤＹＥＧＦＶＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７７は、ＵＣＨＴ１（１７ｏｐｔ）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＹＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＥＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７８は、ＵＣＨＴ１（２１）ＶＨ配列ＥＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＡＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＳＦＴＧＹＴＭＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＬＩＮＰＱＫＧＶＳＴＹＡＱＫＦＱＤＲＶＴＬＴＶＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＳＧＹＹＧＤＳＤＷＹＦＤＶＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳを示す
配列番号１７９は、配列番号１０９のＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＤＤＧＧＲＬＴＦ」を示す。
配列番号１８０は、配列「ＱＫＥＶＥＱＮＳＧＰＬＳＶＰＥＧＡＩＡＳＬＮＣＴＹＳＤＲＧＳＱＬＦＦＷＹＲＱＹＳＧＫＳＰＥＬＩＭＳＩＹＱＥＧＤＫＥＤＧＲＦＴＡＱＬＮＫＡＳＱＹＶＳＬＬＩＲＤＳＱＰＳＤＳＡＴＹＬＣＡＡＶＩＰＮＤＤＧＧＬＬＴＦＧＴＧＴＲＬＴＩＩＰＮＩＱＮ」のＶ_αＡ_ＨｉＡｆｆ１＃２９Ｂのアミノ酸配列を示す
配列番号１８１は、配列番号９３のＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＤＱＧＧＹＬＴＦ」を示し；
配列番号１８２は、配列番号９９のＣＤＲａ３アミノ酸配列「ＣＡＡＶＩＰＮＮＩＧＧＡＬＴＦ」を示す。

【図面の簡単な説明】

【0710】

【図1】ＴＣＲ変異型ＣＤＲ６、ＬｏＡｆｆ３、またはＨｉＡｆｆ１の可変ドメインをそれぞれ含有する、二重特異性分子のストレス安定性試験の結果。分子の完全性と凝集体の形成は、４０℃で２週間にわたるインキュベーション後にＳＥＣ－ＨＰＬＣで分析し（灰色の上部トレースは）、２～８℃で保存したストレスのない分子（黒色の下部トレース）と比較した。グラフの下部パネルは、倍率を上げた上部パネルのグラフに相当する。

【図2】ＴＣＲ変異型ＣＤＲ６、ＬｏＡｆｆ３、またはＨｉＡｆｆ１の可変ドメインをそれぞれ含有する、二重特異性分子のストレス安定性試験の結果。単量体二重特異性分子の回収率は、ＨＰＬＣ－ＳＥＣ分析に従って計算した。

【図3】異なるＲ１６Ｐ１Ｃ１０変異型を含んでなる二重特異性分子の結合動態。ｓｃＴＣＲ－ＦａｂフォーマットではＦＡＢ２Ｇセンサー（２０μｇ／ｍｌを１２０秒間負荷）を使用し、ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットではＡＨＣセンサー（改善された変異型では１０μｇ／ｍｌを１２０秒間負荷；安定化された変異型、ＬｏＡｆｆ３、ＣＤＲ６、ＨｉＡｆｆ１では５μｇ／ｍｌを１２０秒間負荷）を使用した。ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４の分析濃度は、ｎＭで表される。グラフは、測定データと計算された近似の曲線を示す。

【図4】２人の健常ドナー（ＨＢＣ－８８７およびＨＢＣ－８８９）に由来するＣＤ８＋Ｔ細胞の存在下で、それぞれＣＤＲ６、ＨｉＡｆｆ１、またはＬｏＡｆｆ３ＴＣＲ変異型を含有する、二重特異性分子によって誘導されたＰＲＡＭＥ陽性腫瘍細胞株の溶解。溶解は、放出されたＬＤＨの定量化によって、４８時間の共培養後に判定した。ＣＤＲ６は黒丸、ＨｉＡｆｆ１は淡灰色四角、ＬｏＡｆｆ３は暗灰色三角形、およびｂｓＴＣＲなしの対照群は白抜き逆三角形としてそれぞれ示されている。

【図5】２人の健常ドナー（ＨＢＣ－８８７およびＨＢＣ－８８９）に由来するＣＤ８＋Ｔ細胞の存在下で、それぞれＣＤＲ６、ＨｉＡｆｆ１、またはＬｏＡｆｆ３ＴＣＲ変異型を含有する、二重特異性分子によって誘導されたＰＲＡＭＥ陰性腫瘍細胞株の溶解。溶解は、放出されたＬＤＨの定量化によって、４８時間の共培養後に判定した。ＣＤＲ６は黒丸、ＨｉＡｆｆ１は淡灰色四角、ＬｏＡｆｆ３は暗灰色三角形、およびｂｓＴＣＲなしの対照群は白抜き逆三角形としてそれぞれ示されている。

【図6】生体内効力。約５０ｍｍ^３のＨＳ６９５Ｔ腫瘍を保有するＮＯＧマウスにヒトＰＢＭＣを移植し、ＰＢＳ（グループ１）、０．５ｍｇ／ｋｇ体重のＨｉＡｆｆ１／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃ（グループ２）または０．５ｍｇ／ｋｇの抗ＨＩＶ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃ（グループ）を週二回ｉ．ｖ投与した。腫瘍体積は、キャリパーで測定し、長さｘ幅^２／２で計算した。

【図7】結合モチーフ解析。ＰＲＡＭＥ－００４および連続アラニン置換（_Ａ１～_Ａ９）を含んでなるペプチドとの結合について、ＨｉＡｆｆ１およびＬｏＡｆｆ３変異型（ダイアボディ－Ｆ_ｃとして）のＫ_Ｄ値をバイオレイヤー干渉法によって測定した。それぞれの比率Ｋ_Ｄ（ＰＲＡＭＥ－００４）／Ｋ_Ｄ（Ａｌａ置換変異型）を計算した。

【図8】ＰＲＡＭＥ－００４およびオフターゲットペプチド認識ｓｃＴＣＲ ＣＤＲ６に由来するＣＤＲａ３ライブラリから得られたｓｃＴＣＲ変異型を酵母表面上に提示させ、ＨＬＡ－Ａ^＊０２の文脈で、ＰＲＡＭＥ－００４と標的外ペプチドＩＦＴ１７－００３、ＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１に対する結合をそれぞれ解析した。全てのＨＬＡ－Ａ^＊０２／ペプチド複合体は、１００ｎＭの濃度でｓｃＴＣＲ提示酵母に添加し、陽性酵母細胞の百分率をフローサイトメトリー分析によって判定した。

【図9】ＰＲＡＭＥ－００４およびオフターゲットペプチド認識

【図10】ヒトＰＢＭＣを移植した免疫不全ＮＯＧマウスにおけるＴＣＥＲ（登録商標）媒介性生体内効力。ＴＣＥＲ（登録商標）は、ヒトＰＢＭＣを移植した免疫不全ＮＯＧマウスにおいて、ＰＲＡＭＥ－００４の検出可能な提示があるＨＬＡ－Ａ^＊０２陽性腫瘍細胞株であるＮＣＩ－Ｈ１７５５細胞の腫瘍異種移植片に向けられた、生体内効力を媒介した。マウスに、ＰＲＡＭＥ－００４標的化ＴＣＥＲ（ＨｉＡｆｆ１／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃ、０．５ｍｇ／（ｋｇ体重×用量）、グループ２）またはビヒクル（グループ１）を週２回投与した。ＰＲＡＭＥ－００４を標的化するＴＣＥＲ（登録商標）について、完全寛解が示されている。腫瘍体積は、キャリパーで測定し、長さｘ幅^２／２で計算した。線で結ばれた各記号は個々の動物をに相当し、治療日は矢印で示される。２２日目に、グループ１とグループ２で３匹の動物が死亡した。

【図11】健常組織細胞を用いた生体外安全性評価。ＴＣＥＲ（登録商標）分子ＨｉＡｆｆ１の生体外安全性データは、異なる臓器からの異なるヒトＨＬＡ－Ａ^＊０２－陽性正常組織初代細胞を用いたＬＤＨ殺滅実験で評価した。異なる細胞を、健康なＨＬＡ－Ａ^＊０２ドナーからのＰＢＭＣエフェクター細胞と１：１０の比率で、ＴＣＥＲ（商標）濃度を上げながら共培養した。細胞を、初代組織細胞特異的培地とＴ細胞培地との５０％混合物中で同時インキュベートした。各プロットは、腫瘍対照細胞株Ｈｓ６９５Ｔ（黒丸）と初代正常細胞（灰色三角形）のＬＤＨデータを同じ培地の組み合わせで示す。腫瘍細胞株上のＴＣＥＲなし対照は黒十字の丸で示され、初代正常細胞上のＴＣＥＲなし対照は灰色のベタ塗り三角形で示されている。

【図12】ＴＣＥＲ（登録商標）分子の生体外サイトカイン放出評価。全血中のＴＣＥＲ（登録商標）分子によって誘導されるサイトカイン分泌の分析は、サイトカイン誘導が低いかまたは存在しないＴＣＥＲ（登録商標）分子の選択を可能にする。サイトカイン放出は、ＨＬＡ－Ａ^＊０２陽性ドナー３名の全血を、示された濃度のＨｉＡｆｆ１ ＴＣＥＲ（登録商標）、または抗ＣＤ３対照抗体とヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）の存在下で４８時間培養した後に、評価した。上清中のサイトカイン濃度は、多重分析によって判定した。ＩＦＮγおよびＩＬ－６放出の例示的なデータが示されている。

【図13】がんおよび正常組織におけるＰＲＡＭＥ由来の標的ペプチドのＨＬＡ－Ａ^＊０２依存性提示。略語は次のとおり：ａｄｉｐｏｓｅ：脂肪組織；ａｄｒｅｎａｌｇｌ：副腎；ｂｌａｄｄｅｒ：膀胱；ｂｌｏｏｄｖｅｓｓ：血管；ｅｓｏｐｈ：食道；ｇａｌｌ ｂｌ：胆嚢；ｉｎｔｅｓｔ．ｌａ：大腸；ｉｎｔｅｓｔ．ｓｍ：小腸；ｎｅｒｖｅ ｃｅｎｔ：中枢神経；ｎｅｒｖｅ ｐｅｒｉｐｈ：末梢神経；ｐａｒａｔｈｙｒ：副甲状腺；ｐｅｒｉｔ：腹膜；ｐｉｔｕｉｔ：下垂体；ｓｋｅｌ．ｍｕｓ：骨格筋；ＡＭＬ：急性骨髄性白血病；ＢＲＣＡ：乳がん；ＣＣＣ：胆管細胞がん腫；ＣＬＬ：慢性リンパ球性白血病；ＣＲＣ：結腸直腸がん；ＧＢＣ：胆嚢がん；ＧＢＭ：神経膠芽腫；ＧＣ：胃がん；ＧＥＪＣ：胃食道接合部がん；ＨＣＣ：肝細胞がん腫；ＨＮＳＣＣ：頭頸部扁上皮がん腫；ＭＥＬ：黒色腫；ＮＨＬ：非ホジキンリンパ腫；ＮＳＣＬＣａｄｅｎｏ：非小細胞肺がん腺がん；ＮＳＣＬＣｏｔｈｅｒ：ＮＳＣＬＣａｄｅｎｏまたはＮＳＣＬＣｓｑｕａｍに明確に割り当てることができなかったＮＳＣＬＣサンプル；ＮＳＣＬＣｓｑｕａｍ：扁平上皮細胞非小細胞肺がん；ＯＣ：卵巣がん；ＯＳＣＡＲ：食道がん；ＰＡＣＡ：膵臓がん；ＰＲＣＡ：前立腺がん；ＲＣＣ：腎細胞がん腫；ＳＣＬＣ：小細胞肺がん；ＵＢＣ：膀胱がん腫；ＵＥＣ：子宮および子宮内膜がん。

【実施例】

【0711】

がん抗原に向けられた天然細胞受容体（ＴＣＲ）は、ウイルス抗原を標的化するＴＣＲと比較した場合に、親和性がより低いことが多く、これは腫瘍の免疫逃避の１つの可能な説明であってもよい（Ａｌｅｋｓｉｃ ｅｔ ａｌ．２０１２）。したがって、可溶性アプローチの認識モジュールとして、すなわち二重特異性分子を使用して、または養子細胞療法において、抗原認識コンストラクトとして使用するために設計された、より高い親和性を有するＴＣＲ変異型を有することが望ましい（Ｈｉｃｋｍａｎ ｅｔ ａｌ．２０１６）。したがって、本発明は、腫瘍関連ペプチドＰＲＡＭＥ－００４（配列番号８）を標的化する天然に存在するＴ細胞受容体Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０の修飾と最適化に関し、ここで、前記Ｔ細胞受容体Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０は、配列番号１４８のアミノ酸配列を含んでなるα可変ドメインと、配列番号１４９のアミノ酸配列を含んでなるβ可変ドメインとを含んでなり、これは、国際公開第２０１８／１７２５３３号パンフレットで開示されている。

【0712】

実施例１：溶性二重特異性ＴＣＲ分子の設計
Ｖ_αおよびＶ_βドメインからなるＴＣＲを、Ｆａｂ断片に結合された一本鎖（ｓｃＴＣＲ）フォーマット、またはＦ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディフォーマットのどちらかかで、設計、製造、試験した。Ｆ_ｃ含有二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂダイアボディの場合、Ｖ_ＨとＶ_Ｌの様々な組み合わせをコードするＤＮＡ配列ｈＵＣＨＴ１（Ｖａｒ１７）に由来する抗ＣＤ３抗体ＵＣＨＴ１の新たにヒト化されたバージョン、およびＶ_αとＶ_βならびにリンカーをコードする配列を遺伝子合成によって得た。得られたＤＮＡ配列は、ヒトＩｇＧ１に由来するヒンジ領域、Ｃ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメイン［受入番号Ｐ０１８５７］をコードする発現ベクターにインフレームでクローン化し、さらに操作した。操作を実施して、追加的な鎖間ジスルフィド結合の安定化を用いてノブ・インツー・ホール変異をＣ_Ｈ３ドメインに組み込み；Ｃ_Ｈ２中のＮ－グリコシル化部位（例えばＮ２９７Ｑ変異）を除去し；Ｆ_ｃサイレンシング変異を導入した。

【0713】

実施例２：可溶性二重特異性分子の製造と精製
組換えタンパク質の発現のためのベクターは、ＨＣＭＶ由来のプロモーター要素であるｐＵＣ１９誘導体によって制御されるモノシストロン性として設計した。プラスミドＤＮＡを標準的な培養方法に従って大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で増幅し、引き続いて、市販のキット（Ｍａｃｈｅｒｅｙ ＆ Ｎａｇｅｌ）を使用して精製した。精製されたプラスミドＤＮＡは、製造業者（ＥｘｐｉＣＨＯ（商標）システム；Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の指示に従って、ＣＨＯ－Ｓ細胞の一過性形質移入に使用した。形質移入されたＣＨＯ細胞を３２℃～３７℃で６～１４日間培養し、ＥｘｐｉＣＨＯ（商標）供給液を１～２回栄養供給した。調整された細胞上清は、Ｓａｒｔｏｃｌｅａｒ Ｄｙｎａｍｉｃｓ（登録商標）Ｌａｂ Ｆｉｌｔｅｒ Ａｉｄ（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を利用した濾過（０．２２μｍ）によって清澄化した。二重特異性抗原結合タンパク質は、親和性およびサイズ排除クロマトグラフィーをインラインで実行するように装備された、Ａｋｔａ Ｐｕｒｅ ２５ Ｌ ＦＰＬＣシステム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して精製した。アフィニティークロマトグラフィーは、標準的なアフィニティクロマトグラフィープロトコルに従って、プロテインＡまたはＬカラム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ）上で実施した。Ｓｕｐｅｒｄｅｘ ２００ ｐｇ １６／６００カラム（ＧＥ Ｌｉｆｅｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を使用して、アフィニティカラムからの溶出（ｐＨ２．８）直後にサイズ排除クロマトグラフィーを実施し、標準的なプロトコルに従って高純度の単量体タンパク質を得た。タンパク質濃度は、ＮａｎｏＤｒｏｐシステム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）上で、予測されたタンパク質配列に従って計算された吸光係数を用いて判定した。必要に応じて、Ｖｉｖａｓｐｉｎデバイス（Ｓａｒｔｏｒｉｕｓ）を使用して、濃度を調節した。最後に、精製された分子を２～８℃の温度で約１ｍｇ／ｍＬの濃度のリン酸緩衝生理食塩水中に保存した。精製された二重特異性分子の品質は、Ｖａｎｑｕｉｓｈ ＵＨＰＬＣ－Ｓｙｓｔｅｍ内で、３００ｍＭのＮａＣｌを含有する５０ｍＭのリン酸ナトリウム、ｐＨ６．８で実行される、ＭａｂＰａｃ ＳＥＣ－１カラム（５μｍ、７．８ｘ３００ｍｍ）上で、ＨＰＬＣ－ＳＥＣによって判定した。非還元および還元ＳＤＳ－ＰＡＧＥによって、異なる二重特異性ＴＣＲ／ｍＡｂ分子の純度と予想サイズを確認した。

【0714】

実施例３：ストレス安定性試験
成熟Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ ＴＣＲ変異型を、ＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットを用いた可溶性二重特異性分子として発現させた。ストレス安定性試験は、ＰＢＳ中で調合された分子を４０℃で最大２週間インキュベートすることによって実施した。完全性、凝集体含有量（図１）、ならびに単量体回収率（図２）を、上記のようにＨＰＬＣ－ＳＥＣ分析によって分析した。

【0715】

実施例４：成熟ＴＣＲ変異型の結合親和性
可溶性二重特異性分子として発現された成熟Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ ＴＣＲ変異型（安定化され改善されている：ｓｃＴＣＲ／抗ＣＤ３ Ｆａｂフォーマット；安定化され改善されている、ＣＤＲ６、ＨｉＡｆｆ１、およびＬｏＡｆｆ３：ＴＣＲ／ａｎｔｉＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマット）を、バイオレイヤー干渉法を介して、ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４単量体に対するそれらの結合親和性について解析した。製造業者によって推奨される設定を使用して、Ｏｃｔｅｔ ＲＥＤ３８４システムで測定を実施した。簡潔に述べると、緩衝液としてＰＢＳ、０．０５％ツイーン２０、０．１％ＢＳＡを使用し、３０℃、１０００ｒｐｍの振盪速度で結合動態を測定した。ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４の段連続希釈液を分析する前に、二重特異性分子をバイオセンサー（ＦＡＢ２ＧまたはＡＨＣ）に負荷した。Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０の安定化バージョンはおよそ１μＭの親和性を示した（ｓｃＴＣＲ－Ｆａｂとして１．２μＭ、ダイアボディ－Ｆ_ｃとして９３０ｎＭ）一方で、成熟ＣＤＲを含有する全ての変異型では、かなり低いＫ_Ｄ値が判定された（表３、図３）。ＴＣＲ変異型の親和性が、フォーマットによってわずかな程度だけ影響を受けることをさらに検証するために、親和性成熟ＴＣＲ変異型のＫ_Ｄ値をｓｃＴＣＲ－Ｆａｂまたはダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットとして測定した。ｓｃＴＣＲ－Ｆａｂおよびダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットは、それぞれ１０ｎＭおよび８．７ｎＭのＫ_Ｄ値を示し、異なるフォーマット間の良好な相互比較性がさらに強調された（表３、図３）。

【0716】

表3：scTCR-Fab（配列番号81および82に基づく）またはダイアボディ-Fc（配列番号119および120に基づく）として発現される、野生型および成熟TCRのCDR配列および結合親和性。

【表3】

¹scTCR-Fabとして発現される
²ダイアボディ-F_cとして発現される

【0717】

実施例５：標的陽性および標的陰性腫瘍細胞株の殺滅
成熟Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ ＴＣＲ変異型は、実施例１による、ＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットを用いた可溶性二重特異性分子として発現させた。ＰＲＡＭＥ陽性腫瘍細胞株とＰＲＡＭＥ陰性腫瘍細胞株に向けられた、二重特異性分子の細胞傷害活性をそれぞれＬＤＨ放出アッセイで分析した。したがって、細胞表面上に可変量のＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４を提示する腫瘍細胞株を、２人の健常ドナーから単離したＣＤ８＋Ｔ細胞と共に、二重特異性分子の濃度を上げながら同時インキュベートした。４８時間後、ＣｙｔｏＴｏｘ ９６ Ｎｏｎ－Ｒａｄｉｏａｃｔｉｖｅ Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ Ａｓｓａｙキット（ＰＲＯＭＥＧＡ）を使用して、標的細胞株の溶解を測定した。試験された全てのＰＲＡＭＥ陽性細胞株について、非常に効率的な溶解の誘導が検出可能であり、二重特異性分子の濃度に明らかに依存していた。ＨＬＡ－Ａ^＊０２を発現するがペプチドＰＲＡＭＥ－００４を検出可能なレベルで提示しない細胞株を用いた同様の実験では、二重特異性分子による標的の溶解は皆無でありまたはごくわずかしか起こらなかった。

【0718】

実施例６：生体内効力
成熟Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ ＴＣＲ変異型ＨｉＡｆｆ１およびＨＩＶ特異的高親和性対照ＴＣＲを、実施例１に従って、ＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットを用いた可溶性二重特異性分子として発現させた。それぞれ図６および１０に示されるように、ＰＲＡＭＥ陽性腫瘍細胞株ＨＳ６９５ＴおよびＮＣＩ－Ｈ１７５５に向けられたヒト細胞傷害性ＣＤ３＋Ｔ細胞の活性を動員して誘導する、二重特異性ＴＣＲ分子の能力を試験するために設計された薬力学的試験を超免疫不全ＮＯＧマウス系統において実施した。ＮＯＧマウス系統は、皮下注射されたヒト腫瘍細胞株ＨＳ６９５ＴまたはＮＣＩ－Ｈ１７５５と、静脈内注射されたヒト末梢血単核細胞異種移植片の宿主であった。ヒト末梢血単核細胞（５ｘ１０^６細胞／マウス、静脈内注射）は、個々の腫瘍体積が５０ｍｍ^３に達した２４時間以内に移植した。ヒト血液細胞の移植後１時間以内に、処置を開始した。グループ当たり４～６匹の雌マウスに、尾静脈への静脈内ボーラス注射（５ｍＬ／ｋｇ体重、週２回の投与、最大７回の投与、無作為化の１日後から開始）を投与した。ＰＲＡＭＥ標的化二重特異性ＴＣＲ分子の注射用量は、注射当たり０．５ｍｇ／ｋｇ体重（グループ２）であり、ビヒクル対照群（グループ１）ではＰＢＳを使用し、陰性対照物質群（グループ３）ではＨＩＶ標的化ＴＣＲ二重特異性分子（注射当たり０．５ｍｇ／ｋｇ体重）を使用した。示された時点で、キャリパーで測定し、長さｘ幅^２／２として計算した個々の腫瘍体積に基づいて、全てのグループの平均腫瘍体積を計算した。２３日目に、ビヒクル対照群で観察された基礎レベル６９から１２６６ｍｍ^３、陰性対照物質群で観察された基礎レベル６６から１６８６ｍｍ^３への腫瘍体積の増加と比較して、ＰＲＡＭＥ標的化二重特異性ＴＣＲ分子での治療は、基礎レベル（無作為化の開始）６５から４０９ｍｍ^３への腫瘍体積の減少した増加によって示されるように、ＨＳ６９５Ｔの腫瘍増殖を抑制した（図６）。ＰＲＡＭＥ標的化二重特異性ＴＣＲ分子による治療は、ＮＣＩ－Ｈ１７５５腫瘍の完全寛解を誘導した。腫瘍の成長は全ての動物で抑制され、腫瘍は２２日目（無作為化開始時の基本平均レベル６８ｍｍ^３）から２９日目（グループ２）の研究終了まで、残りの動物において検出不能であった。ビヒクル処置群（グループ１）では、２２日目に、基礎平均レベル７０から１７５ｍｍ^３まで腫瘍体積の継続的な増加が観察された（図１０）。

【0719】

実施例７：オフターゲットペプチドの同定と確認
Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０の成熟ＣＤＲ６、ＨｉＡｆｆ１、およびＬｏＡｆｆ３ ＴＣＲ変異型を組み込んだ二重特異性ＴＣＲ分子を、実施例１に従ってＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットとして設計した。成熟ＴＣＲ変異型の潜在的なオフターゲットペプチドを特定するために、変異解析によるＰＲＡＭＥ－００４ペプチドに向けられた結合親和性測定を通じて、ＴＣＲ結合に関与するＰＲＡＭＥ－００４残基を同定した（図７、_Ａ１～_Ａ９）。親和性測定は実施例４に従って実施したが、ＳＡセンサーを使用してビオチン化ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ペプチド複合体（１μｇ／ｍｌの濃度で１８０秒間）を負荷し、溶液中の二重特異性分子を分析した。ＰＲＡＭＥ－００４の変異型の結合親和性の４倍を超える減少に基づいて、ＰＲＡＭＥ－００４の５～９位をＴＣＲ結合に関連するものとして特定した（点線で示す）。潜在的なオフターゲットペプチドは、ＰＲＡＭＥ－００４の結合関連位置５～９内の類似性スコアリングを使用して、正常組織に提示されたＨＬＡ－Ａ^＊０２結合ペプチドのデータベース（ＸＰＲＥＳＩＤＥＮＴデータベース）に対するＢＬＡＳＴ検索を通じて特定した。２７の異なる潜在的なオフターゲットを類似性ＢＬＡＳＴ検索によって特定した（表４）。潜在的なオフターゲットの関連性を試験するために、ペプチドをＨＬＡ－Ａ^＊０２陽性Ｔ２標的細胞に１０ｎＭの濃度で負荷した。ペプチド負荷Ｔ２細胞を、２名の異なるドナーのヒトＣＤ８＋Ｔ細胞と共に、５：１のエフェクター／標的比で、二重特異性ＴＣＲ分子の濃度を上げながら同時インキュベートした。２７の潜在的オフターゲットのうち、ペプチドＩＦＴ１７－００３、ＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、ＣＴＢＰ１－００１、ＡＴＰ１Ａ１－００１、ＮＡＤＫ－００２、およびＩＴＳＮ１－００１が、それぞれペプチド負荷Ｔ２細胞に向けられた検出可能な細胞傷害性を誘発した。判定された細胞傷害性のＥＣ_５０値に基づいて、オフターゲットペプチドＩＦＴ１７－００３、ＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１を最も関連性の高いオフターゲットとして確認した（表４）。

【0720】

表4

【表4】

【0721】

実施例８：特異性熟成
ＰＲＡＭＥ－００４と、健常組織発現オフターゲットペプチドＩＦＴ１７－００３、ＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１との細胞傷害性ウィンドウを増やすために、ＴＣＲ変異型ＣＤＲ６に基いて酵母表面ディスプレイを実施した。このために、対応する配列を、適切なグリシン－セリンリンカー配列（配列番号１５１）を有するｓｃＴＣＲＣＤＲ６（配列番号１５０）に変換した。ｐＣＴ３０２に基づくリーダー配列とＡｇａ２ｐ酵母接合タンパク質（配列番号１５２）とを含有する酵母ディスプレイベクターと共に、対応する配列のＤＮＡをＣＤＲａ３を縮退させて合成し、サッカロミセス・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ）ＥＢＹ１００（ＭＡＴａ ＡＧＡ１：：ＧＡＬ２０－ＡＧＡ１００：：ＵＲＡ３ ｕｒａ１－５２ ｔｒｐ３ ｌｅｕ１．６－ｄｅｌｔａ２００ ｈｉｓ１－ｄｅｌｔａ２ ｐｅｐ４：：ＨＩＳ３ ｐｒｂｄ１．６Ｒ ｃａｎ４ ＧＡＬ）（ＡＴＣＣ（登録商標）ＭＹＡ－４９４１（商標））に形質転換した（Ｂｏｄｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｅｎｚｙｍｏｌ．２０００；３２８：４３０－４４）。酵母中での相同組換え後に得られた融合タンパク質（配列番号１５３）は、目的のタンパク質の提示に関与するＡｇａ２ｐタンパク質のＮ末端にあるリーダーペプチド（Ｂｏｄｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１９９７ Ｊｕｎ；１５（６）：５５３－７）、発現制御のためのリンカー配列（それぞれ配列番号１５４および８４）を含む短鎖ペプチドタグ（ＦＬＡＧおよびＭｙｃ）、および目的のタンパク質、すなわちｓｃＴＣＲ ＣＤＲ６（配列番号１５０）またはその変異型を含有する。独国特許第１０２０１６１２１８９９号明細書に記載されるように形質転換を実施し、ライブラリあたり最大１０^９個の酵母クローンを得た。

【0722】

酵母表面提示とそれに応じた選択および分析は、基本的にＳｍｉｔｈ ｅｔ ａｌ．２０１５（Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２０１５；１３１９：９５－１４１）に記載されるように実施した。特異性が改善されているが、それでもなお高親和性のｓｃＴＣＲ変異型を選択するために、低濃度の単量体ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４を正の選択に使用した。同時に、４つの最も関連性の高いオフターゲットペプチド、すなわちＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１に対する負の選択を、ＨＬＡ－Ａ^＊０２の文脈で実施した。３回の選択ラウンドの後、単一クローンを単離して分析し（図８）、残りのバルク選択は、製造業者のプロトコルに従ってＧｅｎｅＭｏｒｐｈ ＩＩ（Ａｇｉｌｅｎｔ）を使用して、ｓｃＴＣＲ配列全体にかけて誤りがちなＰＣＲに供した。得られたＤＮＡは、新規選択ライブラリを作成するために、上記のように酵母に形質転換した。この新規に導出したライブラリを用いて、ＨＬＡ－Ａ^＊０２／ＰＲＡＭＥ－００４に対する高親和性とＨＬＡ－Ａ^＊０２／オフターゲットペプチドへの最小限の結合について選択プロセスを上述したように実施したところ、ＰＲＡＭＥ－００４への結合と、オフターゲットペプチドＩＦＩＴ１－００１、ＩＦＴ１７－００３、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１への結合との識別が強く増加した変異型が得られた（図９）。ｓｃＴＣＲ ＣＤＲ６に由来するＣＤＲａ３ライブラリの誤りがちなＰＣＲライブラリから得られたｓｃＴＣＲ変異型を酵母表面上に提示し、ＨＬＡ－Ａ^＊０２の文脈で、ＰＲＡＭＥ－００４と標的外ペプチドＩＦＴ１７－００３、ＩＦＩＴ１－００１、ＦＡＤＳ２－００１、およびＣＴＢＰ１－００１に対する結合をそれぞれ解析した。全てのＨＬＡ－Ａ^＊０２／ペプチド複合体を１００ｎＭの濃度でｓｃＴＣＲ提示酵母に添加し、陽性酵母細胞の百分率をフローサイトメトリー分析によって判定した。

【0723】

実施例９：健常組織細胞を用いた生体外安全性評価。
成熟Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０ ＴＣＲ変異型ＨｉＡｆｆ１を、実施例３による、ＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットを用いた可溶性二重特異性分子として発現させた。ＴＣＥＲ（登録商標）分子ＨｉＡｆｆ１の安全性プロファイルを異なる臓器のヒト正常組織初代細胞を用いたＬＤＨ殺滅実験で評価した（図１１）。健康なＨＬＡ－Ａ^＊０２＋ドナーからのＰＢＭＣエフェクター細胞と、初代組織細胞とを１０：１の比率で、ＴＣＥＲ（登録商標）濃度を上げながら共培養した。細胞は、正常組織初代細胞特異的培地と、Ｔ細胞培地との１：１混合物中で同時インキュベートした。対照として、ＰＲＡＭＥ陽性腫瘍細胞株Ｈｓ６９５Ｔを、正常組織初代細胞のそれぞれの培地の組み合わせで使用した。共培養の４８時間後、上清を採取し、ＬＤＨ－Ｇｌｏ（商標）キット（Ｐｒｏｍｅｇａ）を使用してＬＤＨ放出を測定することによって、腫瘍細胞溶解を分析した。溶解はＬＤＨ放出に基づいて計算し、標的細胞のみの総ＬＤＨ含有量が１００％溶解値として機能した。

【0724】

実施例１０：全血中で評価された安全性
Ｒ１６Ｐ１Ｃ１０の成熟ＨｉＡｆｆ１ ＴＣＲ変異型を組み込んだ二重特異性ＴＣＲ分子を、実施例１に従ってＴＣＲ／抗ＣＤ３ダイアボディ－Ｆ_ｃフォーマットとして設計した。ＨｉＡｆｆ１ ＴＣＥＲ（登録商標）によって誘導されるサイトカイン放出は、全血中で生体外で評価した（分析はドイツ独国ロイトリンゲンのＨＯＴ Ｓｃｒｅｅｎ ＧｍｂＨによって実施された）。３名の健康なＨＬＡ－Ａ^＊０２陽性ドナーから新鮮に取得した全血を、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ；１０，０００細胞／ウェル）の存在下で、定義された濃度のＨｉＡｆｆ１または抗ＣＤ３対照抗体と共にインキュベートした。４８時間後に上清を回収し、－２０℃で保存した後、上清中のサイトカイン濃度を多重化解析（Ｌｕｍｉｎｅｘ（登録商標）ベースの技術）によって測定した。ＩＦＮ－γおよびＩＬ－６の放出の例示的データは、抗ＣＤ３対照抗体と比較してサイトカイン放出が皆無であるかまたは最小限であることを示し、ＨｉＡｆｆ１ ＴＣＥＲ（登録商標）の良好な安全性プロファイルを強調している（図１２）。

【0725】

実施例１１：質量分析法による初代組織上のＰＲＡＭＥペプチドの検出
質量分析によるＨＬＡリガンドの同定と相対的定量化のために、衝撃凍結サンプルからのＨＬＡ分子を精製し、ＨＬＡ関連ペプチドを単離した。オンラインナノエレクトロスプレーイオン化（ｎａｎｏＥＳＩ）液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）実験によって、単離ペプチドを分離し、配列を同定した。ペプチドは原発性腫瘍のＨＬＡ分子のリガンドとして直接同定されたので、これらの結果は、同定されたペプチドが原発性がん組織上で自然にプロセスされ提示されること、ひいてはペプチドのＬＣ－ＭＳシグナル領域が、サンプル中のその存在量と相関することの直接的証拠を提供する。取得されたＬＣ－ＭＳデータは、引き続いて、配列同定、スペクトルクラスタリング、イオン計数、保持時間アライメント、荷電状態デコンボリューション、および正規化のためのアルゴリズムと組み合わされた、独自仕様のラベルフリー定量データ解析パイプラインを用いて、処理および定量化する（図１３を参照されたい）。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【配列表】

2023525423000001.app

【手続補正書】

【提出日】2023-01-13

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ＰＲＡＭＥペプチドに特異的に結合する抗原結合タンパク質であって、前記ＰＲＡＭＥペプチドが、配列番号８のアミノ酸配列ＳＬＬＱＨＬＩＧＬを含んでなり、ＭＨＣタンパク質との複合体中にあり、前記抗原結合タンパク質が、
（ａ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲａ１、ＣＤＲａ２、およびＣＤＲａ３を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖であって、ここで、
前記ＣＤＲａ１は、アミノ酸配列ＤＲＧＳＱＸ_１（配列番号１）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１は、任意のアミノ酸であり、
前記ＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＸ_２Ｘ_３ＧＤ（配列番号２）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_２およびＸ_３は、任意のアミノ酸であるが、ただしＣＤＲａ２は、アミノ酸配列ＩＹＳＮＧＤ（配列番号９）を含まずまたはそれから構成されず、および
前記ＣＤＲａ３は、アミノ酸配列ＣＡＡＶＩＸ_４ＮＸ_５Ｘ_６ＧＧＸ_７ＬＴＦ（配列番号３）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_４～Ｘ_７は、任意のアミノ酸である、
および
（ｂ）３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）ＣＤＲｂ１、ＣＤＲｂ２、およびＣＤＲｂ３を含んでなる第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖であって、ここで、
前記ＣＤＲｂ１は、アミノ酸配列Ｘ_８ＧＨＲＸ_９（配列番号４）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_８およびＸ_９は、任意のアミノ酸であり、
前記ＣＤＲｂ２は、アミノ酸配列ＹＸ_１０Ｘ_１１Ｘ_１２Ｘ_１３Ｘ_１４（配列番号５）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１０～Ｘ_１４は任意のアミノ酸であり、および
前記ＣＤＲｂ３は、アミノ酸配列ＣＡＳＳＰＷＤＳＰＮＸ_１５ＱＹＦ（配列番号６）を含んでなるかまたはそれからなり、ここで、Ｘ_１５は、任意のアミノ酸である、
を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項2】

前記抗原結合タンパク質が、ＭＨＣタンパク質、特にＨＬＡタンパク質との複合体中のＰＲＡＭＥの配列番号８のアミノ酸配列を含んでなるペプチドに特異的に結合する、請求項１に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項3】

前記抗原結合タンパク質が、２００ｎＭ以下のＫ_Ｄで、前記ＰＲＡＭＥペプチドとＨＬＡ－Ａ^＊０２との複合体に結合する、請求項１または２に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項4】

前記抗原結合タンパク質が、抗体またはその断片、または二重特異性抗体またはその断片、またはＴ細胞受容体（ＴＣＲ）またはその断片、または二重特異性Ｔ細胞受容体またはその断片である、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項5】

前記第１のポリペプチドおよび前記第２のポリペプチドが、一緒に連結されている、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項6】

前記抗原結合タンパクが、一本鎖ＴＣＲ（ｓｃＴＣＲ）または一本鎖二重特異性抗体である、請求項５に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項7】

前記第１の可変ドメインが、ＦＲ１－ａ、ＦＲ２－ａ、ＦＲ３－ａ、およびＦＲ４－ａからなる群から選択される１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなる、請求項１～６のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、ここで、
ＦＲ１－ａが、配列番号５４のアミノ酸配列、または配列番号５４と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ａが、配列番号５５のアミノ酸配列または配列番号５５と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ａが、配列番号５６のアミノ酸配列、または配列番号５６と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ４－ａが、配列番号５７のアミノ酸配列、または配列番号５７と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
前記第２の可変ドメインが、ＦＲ１－ｂ、ＦＲ２－ｂ、ＦＲ３－ｂ、およびＦＲ４－ｂからなる群から選択される１つまたは複数のフレームワーク領域をさらに含んでなり、ここで、
ＦＲ１－ｂが、配列番号５８のアミノ酸配列、または配列番号５８と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ２－ｂが、配列番号５９のアミノ酸配列、または配列番号５９と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、
ＦＲ３－ｂが、配列番号６０のアミノ酸配列、または配列番号６０と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、もしくは
ＦＲ３－ｂが、配列番号６１のアミノ酸配列、または配列番号６１と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなり、または
ＦＲ４－ｂが、配列番号６２のアミノ酸配列、または配列番号６２と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなる、抗原結合タンパク質。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、前記抗原結合タンパク質が、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号８３のアミノ酸配列または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖、または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖、および
配列番号１１２のアミノ酸配列または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖
を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、前記抗原結合タンパク質が、
（ｉ）配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、および配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号８５、配列番号８６、配列番号８７、配列番号８８、配列番号８９、配列番号９０、配列番号９１、配列番号９２、配列番号９３、配列番号９４、配列番号９５、配列番号９６、配列番号９７、配列番号９８、配列番号９９、配列番号１００からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖であって、ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２アミノ酸配列、および配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７、配列番号２８、配列番号２９、配列番号３０、配列番号３２、配列番号３３、配列番号３４、配列番号３５、配列番号３６、配列番号３８、配列番号１８１または配列番号１８２のＣＤＲａ３を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、および
配列番号８３のアミノ酸配列、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖であって、ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、または
（ｉｉ）配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１、または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１０１、配列番号１０２、配列番号１０３、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１０６、配列番号１０７、配列番号１０８、配列番号１０９、配列番号１１０、配列番号１１１または配列番号１８０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖であって、ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型中のＣＤＲは、好ましくは配列番号１６のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号３８、配列番号２４、配列番号２６、配列番号３３、配列番号３９、配列番号４０、配列番号４２、配列番号４３、配列番号１７９配列番号４４、配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、および
配列番号８３、または配列番号８３と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型のアミノ酸配列を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖であって、ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型のＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、または
（ｉｉｉ）配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列、または配列番号１１３、配列番号１１４、配列番号１１５、配列番号１１６、配列番号６３、配列番号１１８からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第１の可変ドメインを含んでなる第１のポリペプチド鎖であって、ここで、前記第１の可変ドメインまたはその変異型の前記ＣＤＲは、好ましくは配列番号１６または配列番号１１のＣＤＲａ１、配列番号１７のＣＤＲａ２、および配列番号４０、配列番号３８、配列番号３９、配列番号２６または配列番号２１のＣＤＲａ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、および
配列番号１１２のアミノ酸配列、または配列番号１１２と少なくとも８５％、少なくとも９０％または少なくとも９５％同一であるアミノ酸配列を含んでなるかまたはそれからなるその変異型を含んでなる、第２の可変ドメインを含んでなる第２のポリペプチド鎖（ここで、前記第２の可変ドメインまたはその変異型の前記ＣＤＲは、好ましくは配列番号４５のＣＤＲｂ１、配列番号４６のＣＤＲｂ２、および配列番号４８のＣＤＲｂ３のアミノ酸配列を含んでなり、好ましくは１つまたは２つのアミノ酸置換を含んでなる、
を含んでなる、抗原結合タンパク質。

【請求項10】

前記第１の可変ドメインがＴＣＲαまたはγ鎖に含まれ、および／または前記第２の可変ドメインがＴＣＲβまたはδ鎖に含まれる、請求項１～９のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項11】

（ｉ）１つまたは複数のさらなる抗原結合部位；
（ｉｉ）細胞質シグナル伝達領域を任意で含む、膜貫通領域、
（ｉｉｉ）診断薬；
（ｉｖ）治療薬；または
（ｖ）ＰＫ修飾部分
の１つまたは複数をさらに含んでなる、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質。

【請求項12】

２つの抗原結合部位を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなる、請求項１～４および７～１１のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質であって、
ここで、第１のポリペプチド鎖は、
式、Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ ［Ｉ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_３は第３の可変ドメインであり；
Ｖ_４は第４の可変ドメインであり；
Ｌ_１およびＬ_２はリンカーであり；
Ｌ_２は存在してもまたは存在しなくてもよく；
Ｃ_Ｌは軽鎖定常ドメインまたはその一部であり、存在するかまたは存在しないものである；
および、ここで、第２のポリペプチド鎖は、
式、Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_Ｈ１ ［ＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_５は第５の可変ドメインであり；
Ｖ_６は第６の可変ドメインであり；
Ｌ_３およびＬ_４はリンカーであり；
Ｌ_４は存在してもまたは存在しなくてもよく；
Ｃ_Ｈ１は重鎖定常ドメイン１またはその一部であり、存在するかまたは存在しないものである；
ここで、
Ｖ_３またはＶ_４は、第１の可変ドメインであり、
Ｖ_５またはＶ_６は、請求項１で定義される第２の可変ドメインであるか、または
Ｖ_５またはＶ_６は請求項１で定義される第１の可変ドメインであり、およびＶ_３またはＶ_４は請求項１で定義される第２の可変ドメインであり、ここで、
Ｖ_３およびＶ_５が請求項１で定義される可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_６の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、ここで、
Ｖ_３およびＶ_６が請求項１で定義される可変ドメインである場合、Ｖ_４またはＶ_５の１つは軽鎖可変ドメインであり、もう１つは重鎖可変ドメインであって、軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインは、一緒に１つの抗原結合部位を形成する、抗原結合タンパク質。

【請求項13】

前記重鎖可変ドメインおよび前記軽鎖可変ドメインが、からなる群より選択される抗原に結合し、前記軽鎖可変ドメイン（Ｖ_Ｌ）が、ＣＤ３（ＣＤ３γ、ＣＤ３δ、およびＣＤ３ε鎖を含む）、ＣＤ４、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ１０、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１１ｃ、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１８、ＣＤ２２、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ３２ａ、ＣＤ３２ｂ、ＣＤ３３、ＣＤ４１、ＣＤ４１ｂ、ＣＤ４２ａ、ＣＤ４２ｂ、ＣＤ４４、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ４９、ＣＤ５５、ＣＤ５６、ＣＤ６１、ＣＤ６４、ＣＤ６８、ＣＤ９４、ＣＤ９０、ＣＤ１１７、ＣＤ１２３、ＣＤ１２５、ＣＤ１３４、ＣＤ１３７、ＣＤ１５２、ＣＤ１６３、ＣＤ１９３、ＣＤ２０３ｃ、ＣＤ２３５ａ、ＣＤ２７８、ＣＤ２７９、ＣＤ２８７、Ｎｋｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、ＧＩＴＲ、Ｆ_ｃεＲＩ、ＴＣＲα／βおよびＴＣＲγ／δ、ＨＬＡ－ＤＲからなる群より選択される抗原に結合し、および／またはエフェクター細胞に結合する、請求項１２記載の抗原結合タンパク質。

【請求項14】

２つの抗原結合部位を形成する２つのポリペプチド鎖を含んでなる、請求項１２または１３に記載の抗原結合タンパク質であって、
ここで、１つのポリペプチド鎖は、
式［ＩＩＩ］、Ｖ_３－Ｌ_１－Ｖ_４－Ｌ_２－Ｃ_Ｌ－Ｌ_５－Ｆ_ｃ１［ＩＩＩ］
によって表わされる構造を有し、
１つのポリペプチド鎖は、
式［ＩＶ］、Ｖ_５－Ｌ_３－Ｖ_６－Ｌ_４－Ｃ_１－Ｌ_６－Ｆ_ｃ２［ＩＶ］
によって表わされる構造を有し、
ここで、Ｖ_３、Ｌ_１、Ｖ_４、Ｌ_２、Ｃ_Ｌ、Ｆ_ｃ１、Ｖ_５、Ｌ_３、Ｖ_６、Ｌ_４、Ｃ_１、Ｆ_ｃ２は、請求項１～１３のいずれか一項で定義されるとおりであり、
ここで、Ｌ_５およびＬ_６はリンカーであり、存在するかまたは存在せず、および
Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２はＦ_ｃドメインであり、ここで、Ｆ_ｃ１およびＦ_ｃ２は同じかまたは異なる、抗原結合タンパク質。

【請求項15】

請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質をコード化する配列を含んでなる、単離核酸または２つの分離された単離核酸。

【請求項16】

請求項１５に記載の核酸を含んでなる、ベクター。

【請求項17】

請求項１５に記載の核酸または請求項に記載の１６ベクターで形質転換されている、宿主細胞。

【請求項18】

請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、または請求項１５に記載の核酸または請求項１６に記載のベクターを含んでなる、宿主細胞。

【請求項19】

請求項の１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、請求項１６に記載のベクター、または請求項１７または１８に記載の細胞宿主、および薬学的に許容可能な担体を含んでなる、医薬組成物。

【請求項20】

ａ．宿主細胞を提供するステップと、
ｂ．請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質をコードするコード配列を含んでなる、遺伝子コンストラクトを提供するステップと、
ｃ．前記遺伝子コンストラクトを前記適切な宿主細胞に導入するステップと、
ｄ．前記適切な宿主細胞によって前記遺伝子コンストラクトを発現させるステップと
を含んでなる、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質を製造する方法。

【請求項21】

前記宿主細胞から前記抗原結合タンパク質を単離および精製するステップと、任意選択的に、Ｔ細胞内で前記抗原結合タンパク質を再構成するステップとをさらに含んでなる、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

医療で使用するための、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物。

【請求項23】

非小細胞肺がんおよび小細胞肺がんを含む肺がん、肝臓がん、頭頸部がん、皮膚がん、腎細胞がん、脳がん、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、白血病、乳がん、メルケル細胞がん腫、黒色腫、卵巣がん、膀胱がん、子宮がん、胆嚢および胆管がん、および食道がんからなるがんの群から選択されるがんを含む増殖性疾患の診断、予防、および／または治療で使用するための、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、または請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物。

【請求項24】

医薬の製造における、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物の使用。

【請求項25】

非小細胞肺がんおよび小細胞肺がんを含む肺がん、肝臓がん、頭頸部がん、皮膚がん、腎細胞がん、脳がん、胃がん、結腸直腸がん、肝細胞がん、膵臓がん、前立腺がん、白血病、乳がん、メルケル細胞がん腫、黒色腫、卵巣がん、膀胱がん、子宮がん、胆嚢および胆管がん、および食道がんからなるがんの群から選択されるがんを含む増殖性疾患の診断、予防、および／または治療のための医薬の製造における、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原結合タンパク質、請求項１５に記載の核酸、または請求項１６に記載のベクター、請求項１７または１８に記載の宿主細胞、または請求項１９に記載の医薬組成物の使用。

【国際調査報告】