特表 2023-525697 抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス薬であるＡｎｔｉｐｒｏｖｉｒ

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-19

(54)【発明の名称】抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス薬であるＡｎｔｉｐｒｏｖｉｒ

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/17 20060101AFI20230612BHJP

   A61K 38/57 20060101ALI20230612BHJP

   A61K 9/19 20060101ALI20230612BHJP

   A61K 9/08 20060101ALI20230612BHJP

   A61K 9/72 20060101ALI20230612BHJP

   A61P 31/14 20060101ALI20230612BHJP

【ＦＩ】

A61K38/17

A61K38/57

A61K9/19

A61K9/08

A61K9/72

A61P31/14

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022566651

(86)(22)【出願日】2020-07-03

(85)【翻訳文提出日】2022-11-22

(86)【国際出願番号】 RU2020000328

(87)【国際公開番号】W WO2021221532

(87)【国際公開日】2021-11-04

(31)【優先権主張番号】2020116573

(32)【優先日】2020-04-30

(33)【優先権主張国・地域又は機関】RU

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】513016895

【氏名又は名称】アレクサンドル・バシリエビッチ・イワシェンコ

(71)【出願人】

【識別番号】509277338

【氏名又は名称】アンドレイ・アレクサンドロビッチ・イワシェンコ

(71)【出願人】

【識別番号】519311293

【氏名又は名称】イワシェンコ，アレナ・アレクサンドロブナ

(71)【出願人】

【識別番号】513016909

【氏名又は名称】ニコライ・フィリッポビッチ・サブチュク

(71)【出願人】

【識別番号】522425840

【氏名又は名称】ウラジーミル・グリゴリエビチ・ロギノフ

(71)【出願人】

【識別番号】522425851

【氏名又は名称】ミハイル・タプール

(74)【代理人】

【識別番号】100118902

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 修

(74)【代理人】

【識別番号】100106208

【弁理士】

【氏名又は名称】宮前 徹

(74)【代理人】

【識別番号】100196508

【弁理士】

【氏名又は名称】松尾 淳一

(74)【代理人】

【識別番号】100135415

【弁理士】

【氏名又は名称】中濱 明子

(72)【発明者】

【氏名】アレクサンドル・バシリエビッチ・イワシェンコ

(72)【発明者】

【氏名】アンドレイ・アレクサンドロビッチ・イワシェンコ

(72)【発明者】

【氏名】イワシェンコ，アレナ・アレクサンドロブナ

(72)【発明者】

【氏名】ニコライ・フィリッポビッチ・サブチュク

(72)【発明者】

【氏名】ウラジーミル・グリゴリエビチ・ロギノフ

(72)【発明者】

【氏名】ミハイル・タプール

【テーマコード（参考）】

4C076

4C084

【Ｆターム（参考）】

4C076AA12

4C076AA30

4C076AA93

4C076BB13

4C076BB25

4C076BB27

4C076CC35

4C076DD23Z

4C076DD30Z

4C076DD35

4C076DD37

4C076DD38

4C076DD67

4C076EE53

4C076FF04

4C076FF12

4C084AA02

4C084BA01

4C084BA08

4C084BA20

4C084BA26

4C084BA44

4C084CA20

4C084DC32

4C084MA05

4C084MA13

4C084MA17

4C084MA44

4C084MA56

4C084MA59

4C084MA66

4C084NA14

4C084ZB331

4C084ZB332

4C084ZC201

4C084ZC202

(57)【要約】

本発明は、コロナウイルス疾患（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防および治療のための新規のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗ウイルス薬であるAntiprovirに関する。コロナウイルス疾患（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防および治療のための、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス薬であるAntiprovirとして、活性成分であるアプロチニンおよび賦形剤を含有する医薬組成物、とりわけＡｐｒｏｔｅｘ（登録商標）、Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）またはＡｅｒｕｓ（登録商標）の使用が提唱される。コロナウイルス疾患（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防および治療のための薬物であるAntiprovirは、０．１～０．２ｗｔ％のアプロチニンおよび任意選択で０．２～１．０ｗｔ％の賦形剤を含有し、残部が注射用水である医薬組成物である。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

活性成分としてアプロチニンおよび賦形剤を含有する、Ａｐｒｏｔｅｘ（登録商標）、Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）およびＡｅｒｕｓ（登録商標）を含む医薬組成物の使用であって、前記組成物は、コロナウイルス疾患ＣＯＶＩＤ－１９の予防および治療を意図した抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス薬であるAntiprovirである、上記使用。

【請求項2】

コロナウイルス疾患ＣＯＶＩＤ－１９の予防および治療のための薬物であるAntiprovirであって、０．１ｗｔ％～０．２ｗｔ％のアプロチニン、任意選択で０．２ｗｔ％～１．０ｗｔ％の賦形剤を含有し、残部は注射用水である医薬組成物である、上記Antiprovir。

【請求項3】

塩化ナトリウム、水酸化ナトリウム、ベンジルアルコール、ラクトース、１，１，１，２－テトラフルオロエタン、ペパーミントリーフ油、エタノール、およびグリセロールから選択される賦形剤を含有する、請求項２に記載のAntiprovir。

【請求項4】

薬物Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）である、請求項２に記載のAntiprovir。

【請求項5】

薬物Ａｐｒｏｔｅｘ（登録商標）である、請求項２に記載のAntiprovir。

【請求項6】

薬物Ａｅｒｕｓ（登録商標）である、請求項２に記載のAntiprovir。

【請求項7】

０．１ｗｔ％～０．２ｗｔ％のアプロチニン、および任意選択で０．２ｗｔ％～１．０ｗｔ％の賦形剤を含有する薬物であるAntiprovirの調製のための凍結乾燥物。

【請求項8】

塩化ナトリウム、水酸化ナトリウム、およびラクトースから選択される賦形剤を含有する、請求項７に記載の凍結乾燥物。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか一項に記載のAntiprovirを生産するための方法であって、請求項７または８に記載の凍結乾燥物を注射用水に溶解させることによる、上記方法。

【請求項10】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）感染の予防および治療のための方法であって、本発明の薬物であるAntiprovirを患者に投与することを含む、上記方法。

【請求項11】

静脈内療法を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

スプレー療法を含む、請求項１０に記載の方法。

【請求項13】

薬物であるAntiprovirを、５～１４日間、１日２～４回、３００～１５０，０００ＫＩＵの用量で患者に投与することを含む、請求項１０～１２のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、ＣＯＶＩＤ－１９コロナウイルス疾患の予防および治療のために使用される新規の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス剤であるAntiprovir（抗ウイルス剤）に関する。

【背景技術】

【0002】

２０１９年中国武漢における新型コロナウイルス（後にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２と名付けられた）の突発的な大発生は、すぐに世界的なパンデミックと化し、人間社会に有害性のコロナウイルスの第３の導入をもたらし、医療制度だけでなく世界経済にも影響を及ぼした。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）のワクチン接種、予防、および治療への有効なアプローチならびに疫学的な制御はまだない。

【0003】

これに関して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防および治療のための集中的なワクチンと治療剤の探索が世界的に進行中である。新たに出現するパンデミックに対する迅速な応答としての１つの実用的なアプローチは、それまで他のウイルス感染を対象とした既存の治療剤を転用することであり、これはなぜなら、これらの薬剤のほとんどはすでにそれらの安全性に関して試験されているためである。これらの薬剤は、ウイルス複製サイクルを直接標的化し得るものと、自然の抗ウイルス免疫応答を強化することか、または炎症性応答の調節異常によって引き起こされるダメージを低減させることのいずれかを目的とした免疫療法アプローチに基づくものとの２つの広範なカテゴリーに分けることができる。

【0004】

初期の臨床治験は、数々のこのような薬物の、例えば、ウイルス複製に干渉する広域スペクトル抗ウイルス薬であるファビピラビル；ウイルスのエンドソーム経路に干渉する転用された抗マラリア薬であるヒドロキシクロロキン；および広域スペクトルの抗ウイルス活性を有するレムデシビルなどの有望な治療上の可能性を明らかにした。レムデシビルは、あらゆる状態の治療に関する安全性または効能が証明されていない実験的な薬物である。レムデシビルは、インビトロおよび動物モデルでのインビボにおいて、コロナウイルスでもあり、ＣＯＶＩＤ－１９に構造的に類似したウイルス病原体ＭＥＲＳおよびＳＡＲＳに対して実証された活性を有する。ＭＥＲＳおよびＳＡＲＳにおけるレムデシビルの限定的な前臨床データは、レムデシビルがＣＯＶＩＤ－１９に対して潜在的に活性である可能性があることを示す。

【0005】

２０２０年４月２６日の時点で、ＣＯＶＩＤ－１９コロナウイルスは２１０の国および地域に影響を及ぼし、ＣＯＶＩＤ－１９感染個体は合計３，０５５，３０８症例であり、そのうち９１７，４３２人が回復し、２１１，０３２人が死亡した。

【発明の概要】

【0006】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が世界の公衆衛生および経済に深刻な脅威をもたらすことを考えれば、新規の有力な抗コロナウイルス薬を探索することが適切であると思われる。

【0007】

本発明の明細書にわたり使用される様々な用語の定義を以下に列挙する。
用語「医薬用薬物」は、錠剤、カプセル剤、注射剤、軟膏剤の形態の、またはヒトおよび動物における生理学的機能の回復、改善、もしくは改変、それに加えて疾患の治療および予防、診断、麻酔、避妊、美容術などを意図した他の完成した剤形の形態の、化合物（または医薬組成物を構成する化合物の混合物）を指す。

【0008】

用語「医薬組成物」は、式１の化合物と、医薬的に許容され薬理学的に適合性のある増量剤、溶媒、希釈剤、担体、賦形剤、分配剤、および検知剤、送達のための薬剤、例えば保存剤、安定剤、増量剤、崩壊薬、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、増粘剤、甘味料、矯味矯臭剤、着香剤、抗細菌剤、殺真菌剤、潤滑剤、および長期送達を制御する薬剤からなる群から選択される成分の少なくとも１つとを含む組成物を指し、これらの選択および比率は、投与の性質および経路ならびに投薬量による。好適な懸濁化剤の例は、エトキシ化イソステアリルアルコール、ポリオキシエチレン、ソルビトールおよびソルビトールエーテル、微結晶性セルロース、アルミニウムメタヒドロキシド、ベントナイト、寒天およびトラガカント、ならびにそれらの混合物である。微生物からの保護は、様々な抗菌剤および抗真菌剤、例えばパラベン、クロロブタノール、ソルビン酸などを使用してもたらすことができる。前記組成物はまた、等張剤、例えば糖、塩化ナトリウムなどを含んでいてもよい。組成物の持続的な作用は、活性成分の吸収を減速させる薬剤、例えば、モノステアリン酸アルミニウムやゼラチンを使用して達成することができる。好適な担体、溶媒、希釈剤および送達剤の例としては、注射剤の場合、水、エタノール、多価アルコールおよびそれらの混合物、天然油（例えばオリーブ油）、ならびに有機エステル（例えばオレイン酸エチル）が挙げられる。増量剤の例は、ラクトース、乳糖、クエン酸ナトリウム、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムなどである。崩壊薬および分配剤の例は、デンプン、アルギン酸およびその塩、ならびにケイ酸塩である。潤滑剤の例は、ステアリン酸マグネシウム、ラウリル硫酸ナトリウム、タルク、および高分子量ポリエチレングリコールである。活性成分単独の、または活性成分と別の活性成分と組合せの、経口、舌下、経皮、筋肉内、静脈内、皮下、および局所または直腸内投与のための医薬組成物は、従来の製剤用担体との混合物として、標準的な投与形態で動物およびヒトに投与することができる。好適な標準的な投与形態としては、経口用の形態、例えば錠剤、ゼラチンカプセル剤、丸剤、散剤、顆粒剤、チューインガム、および経口溶液または懸濁液；舌下および口腔粘膜投与形態；エアロゾル；インプラント；局所、経皮、皮下、筋肉内、静脈内、鼻腔内、または眼球内への形態；ならびに直腸内投与形態が挙げられる。

【0009】

用語「不活性増量剤」は、本明細書で使用される場合、医薬組成物を調製するために使用され、一般的に安全であり、非毒性であり、生物学的にもそれ以外の観点でも別段の有害ではない化合物を指し、動物用およびヒト用の医薬的使用に許容できる賦形剤を含む。本発明の化合物は、個々に投与してもよいが、それらは、一般的に、薬物の予期される投与経路と標準的な製薬の慣例に応じて選ばれる１種またはそれより多くの医薬的に許容される賦形剤、希釈剤、または担体との混合物で投与されると予想される。

【0010】

用語「治療有効量」は、本明細書で使用される場合、対象における疾患の症状を軽減するのに必要な物質、プロドラッグ、または薬物の量を指す。物質、プロドラッグ、または薬物の用量は、それぞれ特定のケースにおいて個別の要求を満たすものと予想される。前記用量は、治療しようとする疾患の重症度、患者の年齢および全身状態、患者の治療に使用された他の医薬、投与の様式および経路、ならびに担当医の経験のような多数の要因に応じて広範囲で変更が可能である。経口投与の場合、１日用量は、単独療法および／または併用療法の両方で、間の全ての値を含めおよそ０．０１～１０ｇである。好ましい１日用量は、約０．１～７ｇである。一般的に、ウイルスを軽減または排除するために、治療の初期にはより高い負荷用量が与えられ、それに続いて、感染爆発を予防するのに十分なレベルに用量を低減させる。

【0011】

用語「対象」は、これらに限定されないが、ウシ、ブタ、ヒツジ、ニワトリ、シチメンチョウ、スイギュウ、ラマ、ダチョウ、イヌ、ネコ、およびヒトなどの哺乳動物を指し、ヒト対象が最も好ましい。対象の治療は、一般式１のあらゆるプロドラッグ、その立体異性体、同位体豊富なアナログ、医薬的に許容される塩、水和物、溶媒和物、および結晶形態もしくは多形体、またはそれらと、別の化合物、例えば様々なＲＮＡウイルスのＲＮＡ依存性ＲＮＡポリメラーゼ（ＲｄＲｐ）の阻害剤などとの組合せの使用を含み得ることが想定される。

【0012】

アプロチニンは、ウシ臓器から抽出されるポリペプチドであり、これは、抗タンパク質分解、止血、および抗フィブリン溶解作用を有することが知られており、様々な疾患を治療するための多数の薬物のコア成分であり、例えばＡｐｒｏｔｅｘ（登録商標）、Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）、Ａｅｒｕｓ（登録商標）などがある。

【0013】

Ａｐｒｏｔｅｘ（登録商標）は、活性成分としてアプロチニン凍結乾燥物および賦形剤（ラクトース、水酸化ナトリウム）を含む医薬組成物であり、静脈内投与のための溶液の調製のために使用され［https://www.rlsnet.ru/tn_index_id_26457.htm］、抗タンパク質分解、止血、および抗フィブリン溶解作用を有する。Ａｐｒｏｔｅｘは、急性膵炎または悪化した慢性膵炎および膵臓壊死；線溶亢進の背景における出血：外傷後、術後（特に前立腺、肺への手術において）、出産の前、その後およびその間（羊水塞栓を含む）；頻発月経；血管浮腫；ショック（毒性、外傷性、熱傷、出血性）；広範囲で深い外傷性組織傷害の治療のために、加えて、急性の非特異性の術後耳下腺炎を予防するため、ならびに診断テストおよび膵臓への手術を実行するために（手術中の膵臓および隣接する腹部臓器における酵素による自己分解の防止）使用される［https://www.vidal.ru/drugs/aprotex_30966］。

【0014】

Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）は、活性成分としてアプロチニン、賦形剤（塩化ナトリウム、ベンジルアルコール、および注射用水）を含み、抗フィブリン溶解作用を有する注射用医薬組成物である［https://yandex.ru/health/pills/product/gordoks-203］。Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）は、出血のリスクが高い状態にあるかまたは輸血が必要な成人患者において、術中の失血を予防し、ＣＰＲを使用する大動脈バイパス手術中の輸血の体積を低減するために使用される［https://yandex.ru/health/pills/product/gordoks-203］。この薬物はまた、出血のリスクが高いかまたは輸注への必要性がある可能性がある患者のための予防的治療としても推奨されている［https://www.vidal.by/poisk_preparatov/gordox.html］。

【0015】

Ａｅｒｕｓ（登録商標）は、エアロゾル吸入用であり［ＷＯ２０１２００８８６９、ＲＵ２４２５６９１、ＥＰ２５９４２８３］、ウイルス呼吸器感染症ならびにウイルスが原因の感染性および炎症性疾患の治療のためのものであり、これは、活性成分としてアプロチニンおよび賦形剤（噴射剤：１，１，１，２－テトラフルオロエタン；溶媒：エタノール、グリセロール、および水；ならびに安定剤：ペパーミント油）を含む医薬組成物である［https://www.vidal.ru/drugs/aerus__23575；https://www.rlsnet.ru/tn_index_id_44141.htm］。

【0016】

発明者らは、驚くべきことに、活性成分としてアプロチニンおよび賦形剤を含むＡｐｒｏｔｅｘ（登録商標）、Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）およびＡｅｒｕｓ（登録商標）などの周知の医薬組成物を、新しい方法で、すなわち、ＣＯＶＩＤ－１９コロナウイルス疾患の予防および治療のための抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス薬であるAntiprovirとして使用できることを発見した。

【0017】

本発明の主題は、コロナウイルス疾患ＣＯＶＩＤ－１９の予防および治療のための薬物であるAntiprovirであって、０．１ｗｔ％～０．２ｗｔ％のアプロチニン、任意選択で０．２ｗｔ％～１．０ｗｔ％の賦形剤を含有し、残部は注射用水である医薬組成物である、上記Antiprovirである。可能性のある賦形剤としては、塩化ナトリウム、水酸化ナトリウム、ベンジルアルコール、ラクトース、１，１，１，２－テトラフルオロエタン、ペパーミントリーフ油、エタノール、グリセロールなどが挙げられる。

【0018】

好ましくは、Antiprovir薬物は、Ｇｏｒｄｏｘ（登録商標）である。
好ましくは、Antiprovir薬物は、Ａｅｒｕｓ（登録商標）である。
好ましくは、Antiprovir薬物は、Ａｐｒｏｔｅｘ（登録商標）である。

【0019】

本発明の主題は、１～２重量部のアプロチニンおよび任意選択で２～１０重量部の賦形剤を含有する、本発明のAntiprovirの調製のための凍結乾燥物である。可能性のある賦形剤としては、塩化ナトリウム、水酸化ナトリウム、ベンジルアルコール、ラクトース、１，１，１，２－テトラフルオロエタン、ペパーミントリーフ油、エタノール、グリセロールなどが挙げられる。

【0020】

本発明の主題は、本発明の凍結乾燥物を注射用水に溶解させることによる、本発明のAntiprovirを生産するための方法である。

【0021】

ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対するＶｅｒｏ Ｅ６細胞培養物における本発明のAntiprovirのＣｏｖｉｄ－０１４抗ウイルス効能の評価。
Antiprovirを、薬物Ａｐｒｏｔｅｘ、ＧｏｒｄｏｘおよびＡｅｒｕｓの凍結乾燥物として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対して、約５３，０００ＫＩＵ／ｍｌ（または約１０，０００ＫＩＵ＋／ウェル）の濃度で、リアルタイムＰＣＲでの確認を用いて、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞培養物における細胞変性作用によってウイルス生産を分析することによって研究した。本発明のAntiprovirが、約５３，０００ＫＩＥ／ｍｌ（または約１０，０００ＫＩＥ／ウェル）の濃度で、ウイルスの細胞変性作用を、１００ＴＣＩＤ_５０／ウェルの用量で完全に抑制し、１０００ＴＣＩＤ_５０／ウェルの用量でそれを部分的に抑制したことが見出された。

【0022】

本発明のAntiprovirの抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの効能を、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）を使用して評価した。研究したウェル中で、リアルタイムでＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスを検出した。単離段階の陽性および陰性対照と並行してさらにＲＮＡ単離に使用するために、０ＴＣＩＤ_５０、１００ＴＣＩＤ_５０および１０００ＴＣＩＤ_５０のウイルスに対応する３つの薬物希釈ウェルから上清を収集した。単離されたＲＮＡをリアルタイムＰＣＲに使用した。ウイルスＲＮＡの存在を閾値サイクル値（Ｃｔ）によって評価した。ＰＣＲデータは、１００ＴＣＤ_５０のウイルス負荷量、約５３，０００ＫＩＵ／ｍｌの濃度でのAntiprovirによるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスの完全な阻害を示した。

【0023】

本発明の別の目的は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）感染の予防および治療のための方法であって、本発明の薬物であるAntiprovirを患者に投与することを含む、上記方法である。

【0024】

医薬用薬物は、非経口的に、例えば静脈内、皮下、腹部などに、またはスプレーデバイスを介して投与することができる。本発明の薬物の臨床的な投薬量は、患者の体における治療有効性、それらの代謝およびクリアランス速度、加えて年齢、性別および疾患のフェーズに応じて調整することができる。医師または薬剤師の指示に従って、これらの薬物療法は、特定の期間内に数回（好ましくは、１～６回）摂取してもよい。

【0025】

感染個体や医療関係者と密接に接触したヒトにおけるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ－１９）の予防の場合、本発明のAntiprovirは、１４日間、吸入または鼻内噴霧として、各鼻孔につき３００ＫＩＵ（活性単位）の用量で１日２回摂取される。非常時の予防の場合、Antiprovirは、１４日間、吸入または鼻内噴霧として、各鼻孔につき３００ＫＩＵの用量で、１日４回摂取される。

【0026】

ＣＯＶＩＤ－１９感染の軽度の形態の場合、Antiprovir吸入は、７日間、１日４回摂取される。中程度のケースにおいて、Antiprovirの投薬量は、７日間、２時間ごとに摂取される吸入によって、５．０ＫＩＵ／患者／日に増加させることができる（６００ＫＩＵから５０００ＫＩＵに）。

【0027】

ＣＯＶＩＤ－１９の重度の形態の場合、Antiprovirの投薬量は、３００００ＫＩＵ／患者／日であり、５０，０００ＫＩＵ／患者／日まで増加させることができる。この投薬量は、肺および他の重要な臓器において、ウイルスの繁殖を抑制し、全身性炎症を低減するのに十分なレベルで薬物の治療的な濃度を維持する量と予想される。Antiprovirは、５～７日間、１００，０００ＫＩＵの用量で、１日２～３回、または５～７日間、１５０，０００ＫＩＵで、１日３回、ゆっくり噴射で、または滴下によって投与される。

【0028】

本発明は、これらに限定されないが、以下の実施例によって例示される。

【実施例】

【0029】

実施例１．ＣＯＶＩＤ－１９静脈内またはスプレー療法を意図したAntiprovirの調製のための凍結乾燥物。
アプロチニン（１．５ｇ）、塩化ナトリウム（８５ｇ）、およびベンジルアルコール（１００ｇ）を、１０ｌの注射用水に溶解させる。得られた溶液を、Ｒｏｔａ ＦＬＲ５０充填装置を使用して好適なバイアルに流し込む（１０ｍｌ／バイアル）。充填されたバイアルを、１２０～１２２℃、１２０ｋＰａの圧力で８分間滅菌し、Ｚｉｒｂｕｓ昇華器で、０．３ｂａｒ未満の真空下で凍結乾燥し、コルク栓をし、アルミニウムキャップをし、１０ピースの箱中にパッキングして、１０ｍｌ中１０００００ＫＩＵのAntiprovirの調製のための凍結乾燥物を得た。

【0030】

実施例２．ＣＯＶＩＤ－１９の静脈内療法のための抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２剤Antiprovir。
アプロチニン（１．５ｇ）、塩化ナトリウム（８５ｇ）、およびベンジルアルコール（１００ｇ）を、１０ｌの注射用水に溶解させる。得られた溶液の半分を、Ｒｏｔａ ＦＬＲ５０充填装置を使用して、好適な無色のガラスの１ｍｌアンプルに流し込み、残りの半分を１０ｍｌアンプルに流し込む。充填されたアンプルを、１２０～１２２℃、１２０ｋＰａの圧力で８分間滅菌し、ガスバーナーでシールし、１０ピースの箱中にパッキングして、ＣＯＶＩＤ－１９静脈内療法のための１ｍｌ中１００００ＫＩＵおよび１０ｍｌ中１０００００ＫＩＵのAntiprovirキットを得る。

【0031】

実施例３．ＣＯＶＩＤ－１９スプレー療法のための抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２薬物療法剤Antiprovir。
アプロチニン（１．５ｇ）、塩化ナトリウム（５７ｇ）、およびベンジルアルコール（６７ｇ）を、１０ｌの注射用水に溶解させる。得られた溶液を、１２０～１２２℃、１２０ｋＰａの圧力で８分間滅菌し、（鼻および／または喉のための）それぞれ１００ｍｌの適切なスプレー缶に分配して、ＣＯＶＩＤ－１９スプレー療法のための抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス剤Antiprovirを得る。

【0032】

実施例４．ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対するＶｅｒｏ Ｅ６細胞培養物におけるAntiprovirのＣｏｖｉｄ－０１４抗ウイルス効能の評価。
Antiprovirを、約５３０００ＫＩＵ／ｍｌの濃度でのＡｐｒｏｔｅｘおよびＧｏｒｄｏｘ凍結乾燥物として、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルスに対して研究した。ウイルス生産を、免疫生物学的薬物の品質管理のための試験センターであるガマレヤ連邦疫学・微生物学研究センターで、リアルタイムＰＣＲでの確認を用いて、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞培養物における細胞変性作用に関して評価した。

【0033】

Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞を、１００．０μｌの新たに調製された完全培養培地（ＣＭ）中で、９６ウェル培養平底プレートに入れた（細胞１２０００個／ウェル）。細胞を、３７℃、５％ＣＯ_２で２４時間培養した。１０６，４００Ｕ／ｍｌの濃度で試験薬物の２倍希釈物を調製するために、８つのバイアルの内容物を連続的に１ｍｌの反応培地（ＲＭ）に溶解した。得られた１０６，４００ＫＩＵ／ｍｌの溶液を２～８℃で２時間維持して、薬物の溶解性を制御した。ＣＭをプレートから除去し、細胞をＲＭ培地で洗浄し、試験物質の１００μｌの各希釈物で充填した。各希釈ポイントを３ウェルで（３連で）試験した。加えて、起こり得る細胞傷害作用を評価し、調査記録を維持するために、ウイルス非含有対照ウェルに薬物を添加した。細胞対照ウェルに純粋なＲＭを添加した。細胞を感染させるために、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞に対して１０^６ＴＣＩＤ_５０／１ｍｌの感染活性を有するＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス（継代４）の懸濁液を調製した。１０^－１から１０^－６までの一連の１０倍のウイルス希釈物を作製した。各試験管中９００μｌのＲＭおよび１００μｌのウイルス懸濁液の必要量の対応するＲＭを含む試験管に連続して移動させることによって懸濁液を希釈した。１０００ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの濃度でウイルス懸濁液を調製するために、１０μｌの懸濁液を、１×１０^６ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの濃度でストックウイルス懸濁液から取り、１０．０ｍｌのＲＭに入れた。１００００ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの濃度でウイルス懸濁液を調製するために、１００μｌの懸濁液を、１×１０^６ＴＣＩＤ_５０／ｍｌの濃度でストックウイルス懸濁液から取り、９．９ｍｌのＲＭに入れた。ウイルス懸濁液の希釈物を試験される薬物の希釈物と２時間インキュベートした後、細胞に添加し、次いでそれらを一緒に９６時間インキュベートした。１０００および１００００ＴＣＩＤ_５０／ｍｌ（それぞれ１００および１０００ＴＣＩＤ_５０／ウェル）の濃度でのウイルス（１００μｌ）を、ＲＭ培地中１００ＴＣＩＤ_５０および１０００ＴＣＩＤ_５０で、ウェルに添加した。各細胞対照ウェルにＲＭ（１００μｌ）を添加した。ウイルス対照におけるウイルスが、期待される範囲内で細胞変性作用を十分証明するまで、細胞を含むプレートを、３７℃、５％ＣＯ_２で９６時間インキュベートした。感染の９６時間後に、Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞培養物におけるウイルスの細胞変性作用（ＣＰＥ）の阻害によって、サンプルの抗ウイルス活性を顕微鏡下で視覚的に評価した。薬物に曝露されたときのＶｅｒｏ Ｅ６細胞培養物におけるウイルスの細胞変性作用の阻害に関する報告で研究を完結させた：完全な阻害（３ウェルのうち３ウェルでＣＰＥ非存在）、不完全な阻害（３ウェルのうち１または２ウェルでＣＰＥ存在）、阻害の非存在（３ウェルのうち３ウェルでＣＰＥ存在）。結果：約５３０００ＫＩＵ／ｍｌの濃度（または約１００００ＫＩＵ／ウェル）でのAntiprovirは、１００ＴＣＩＤ_５０／ウェルの用量でウイルスの細胞変性作用を完全に抑制し、１０００ＴＣＩＤ_５０／ウェルの用量で前記作用を部分的に抑制した。

【0034】

研究したウェルにおける薬物の抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス作用の効能を、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）方法を使用して、リアルタイムで決定した。０ＴＣＩＤ_５０、１００ＴＣＩＤ_５０および１０００ＴＣＩＤ_５０のウイルスの薬物希釈物の３つのウェルから、上清を除去し、単離段階の陽性および陰性対照と並行してＲＮＡ単離に使用した。単離されたＲＮＡをリアルタイムＰＣＲに使用した。ウイルスＲＮＡの存在を、閾値サイクル（Ｃｔ）に関して評価した。結果は、以下の通りである：ＰＣＲデータは、約５３，０００ＫＩＵ／ｍｌのAntiprovir濃度でＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス繁殖の完全な阻害を示したAntiprovirの高い抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス活性を確認した。

【国際調査報告】