特表 2023-526149 Ｇ１２Ｖ突然変異ＲＡＳに対するＨＬＡクラスＩ拘束性Ｔ細胞受容体

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-06-21

(54)【発明の名称】Ｇ１２Ｖ突然変異ＲＡＳに対するＨＬＡクラスＩ拘束性Ｔ細胞受容体

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/12 20060101AFI20230614BHJP

   C07K 14/725 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 15/09 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 15/867 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20230614BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20230614BHJP

   C12P 21/02 20060101ALI20230614BHJP

   C12Q 1/6886 20180101ALI20230614BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20230614BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230614BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20230614BHJP

   A61K 35/17 20150101ALI20230614BHJP

   A61K 35/76 20150101ALI20230614BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20230614BHJP

   A61K 47/68 20170101ALN20230614BHJP

【ＦＩ】

C12N15/12

C07K14/725 ZNA

C12N15/09 100

C12N15/63

C12N15/867 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12P21/02 C

C12Q1/6886 Z

A61P37/04

A61P35/00

A61K39/395 E

A61K39/395 T

A61K35/17

A61K35/76

A61K48/00

A61K39/395 C

A61K39/395 L

A61K47/68

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022549088

(86)(22)【出願日】2021-02-12

(85)【翻訳文提出日】2022-10-12

(86)【国際出願番号】 US2021017852

(87)【国際公開番号】W WO2021163477

(87)【国際公開日】2021-08-19

(31)【優先権主張番号】62/976,655

(32)【優先日】2020-02-14

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/060,340

(32)【優先日】2020-08-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】510002280

【氏名又は名称】アメリカ合衆国

(74)【代理人】

【識別番号】100080791

【弁理士】

【氏名又は名称】高島 一

(74)【代理人】

【識別番号】100136629

【弁理士】

【氏名又は名称】鎌田 光宜

(74)【代理人】

【識別番号】100125070

【弁理士】

【氏名又は名称】土井 京子

(74)【代理人】

【識別番号】100121212

【弁理士】

【氏名又は名称】田村 弥栄子

(74)【代理人】

【識別番号】100174296

【弁理士】

【氏名又は名称】當麻 博文

(74)【代理人】

【識別番号】100137729

【弁理士】

【氏名又は名称】赤井 厚子

(74)【代理人】

【識別番号】100151301

【弁理士】

【氏名又は名称】戸崎 富哉

(74)【代理人】

【識別番号】100152308

【弁理士】

【氏名又は名称】中 正道

(74)【代理人】

【識別番号】100201558

【弁理士】

【氏名又は名称】亀井 恵二郎

(74)【代理人】

【識別番号】100125081

【弁理士】

【氏名又は名称】小合 宗一

(72)【発明者】

【氏名】レヴィン、ノーム

(72)【発明者】

【氏名】パーカスト、マリア アール．

(72)【発明者】

【氏名】ロウリー、ザ サード、フランク ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】ローゼンバーグ、スティーヴン エー．

【テーマコード（参考）】

4B063

4B064

4B065

4C076

4C084

4C085

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B063QA12

4B063QA19

4B063QQ03

4B063QQ08

4B063QQ42

4B063QQ52

4B063QR08

4B063QR32

4B063QR35

4B063QR55

4B063QR62

4B063QR72

4B063QR77

4B063QS25

4B063QS34

4B064AG20

4B064CA02

4B064CA05

4B064CA06

4B064CA08

4B064CA10

4B064CA19

4B064CC24

4B064DA01

4B064DA13

4B065AA01X

4B065AA01Y

4B065AA57X

4B065AA57Y

4B065AA72X

4B065AA72Y

4B065AA83X

4B065AA83Y

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA44

4B065CA46

4C076AA95

4C076CC07

4C076CC27

4C076CC41

4C076EE59

4C084AA13

4C084NA06

4C084NA13

4C084ZB021

4C084ZB091

4C084ZB261

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA26

4C085BB01

4C085BB12

4C085BB50

4C085CC03

4C085CC31

4C085DD62

4C085EE01

4C085GG01

4C085GG02

4C085GG03

4C085GG04

4C085GG06

4C087AA01

4C087AA02

4C087AA03

4C087BB37

4C087BC83

4C087CA04

4C087CA12

4C087NA06

4C087NA13

4C087ZB02

4C087ZB09

4C087ZB26

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA09

4H045CA40

4H045DA50

4H045EA20

4H045EA50

4H045FA74

(57)【要約】

単離又は精製されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）が開示され、ここで、ＴＣＲは、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ分子によって提示される変異ＲＡＳアミノ酸配列に対する抗原特異性を有する。関連するポリペプチド及びタンパク質、ならびに関連する核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、細胞集団、及び医薬組成物もまた提供される。また、哺乳動物における癌の存在を検出する方法、及び哺乳動物における癌を治療又は予防する方法が開示される。
【選択図】図３

【特許請求の範囲】

【請求項1】

単離又は精製Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）であって、
（ａ）配列番号１～３の全て、
（ｂ）配列番号４－６の全て、
（ｃ）配列番号３１－３３の全て、
（ｄ）配列番号３４－３６の全て、
（ｅ）配列番号６４－６６の全て、
（ｆ）配列番号６７－６９の全て、
（ｇ）配列番号１～６の全て、
（ｈ）配列番号３１～３６の全て、又は
（ｉ）配列番号６４－６９の全て
のアミノ酸配列を含み、
ＴＣＲが、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ分子によって提示される変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有する、及び
ここで、変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列は、変異したヒトＫｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）、変異したヒトＨａｒｖｅｙラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＨＲＡＳ）、又は変異したヒト神経芽腫ラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）のアミノ酸配列である、Ｔ細胞受容体。

【請求項2】

変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列が配列番号２９又は配列番号３０である、請求項１に記載の単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項3】

ＴＣＲが、配列番号２６及び配列番号２７の一方又は両方の野生型ヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有しない、請求項１又は２に記載の単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項4】

ＨＬＡクラスＩ分子がＨＬＡ－Ｃ分子である、請求項１～３のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項5】

ＨＬＡクラスＩ分子がＨＬＡ－Ｃ＊０１分子である、請求項１～４のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項6】

ＨＬＡクラスＩ分子がＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２分子である、請求項１～５のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項7】

請求項１～６のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲであって、
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｉｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｉｘ）及び（ｘｘ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、
を含む、単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項8】

請求項１～７のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲであって、
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列、
（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方。（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉ）及び（ｘｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘ）の両方、。（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方を含む、単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項9】

請求項１～８のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲであって、
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖定常領域であって、
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖定常領域であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方の配列番号
を更に含む、単離又は精製ＴＣＲ。

【請求項10】

請求項１～９のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲであって、
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含むα鎖定常領域、であり、
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含むβ鎖定常領域であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方 配列番号

【請求項11】

請求項１～１０のいずれか１項に記載の単離又は精製ＴＣＲであって、
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの。
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの。
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの。
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０７の１９５位のＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及び（ｈ）の両方、（ｆ）及び（ｇ）の両方、又は（ｇ）及び（ｈ）の両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌ）の両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｓｓｓ）配列番号１１０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ａａａａ）配列番号１４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方、（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方、（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方、（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂｂ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ａａａａ）の両方、又は（ａａａａ）及び（ｂｂｂｂ）の両方
を含む、単離又は精製したＴＣＲ。

【請求項12】

請求項１～１１のいずれか一項に記載の単離又は精製したＴＣＲであって、
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号４１のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号１０６のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０７の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及び（ｈ）の両方、（ｆ）及び（ｇ）の両方、又は（ｇ）及び（ｈ）の両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌの両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、）
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号５７のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号７６のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｓｓｓ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ａａａａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方；（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方；（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂ）の両方、あるいは（ａａａａ）及び（ｂｂｂ）の両方
を含む、単離又は精製したＴＣＲ。

【請求項13】

請求項１～１２のいずれか１項に記載のＴＣＲの機能的部分を含む単離又は精製ポリペプチドであって、該機能的部分が以下のアミノ酸配列：
（ａ）配列番号１～３の全て。
（ｂ）配列番号４－６の全て。
（ｃ）配列番号３１－３３の全て。
（ｄ）配列番号３４－３６の全て。
（ｅ）配列番号６４－６６の全て。
（ｆ）配列番号６７～６９の全て
（ｇ）配列番号１～６の全て。
（ｈ）配列番号３１～３６の全て、又は
（ｉ）配列番号６４－６９の全て
を含むことを特徴とする、単離又は精製ポリペプチド。

【請求項14】

請求項１３に記載の単離又は精製されたポリペプチドであって、
機能性部分が以下：
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一である アミノ酸配列、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列、
（二十七 （ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、他。及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方。（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｉｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｉｘ）及び（ｘｘ），（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方
を含む、ポリペプチド。

【請求項15】

請求項１３又は１４に記載の単離又は精製されたポリペプチドであって、
機能性部分が以下：
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列、
（二十七 （ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、他。及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方。（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉ）及び（ｘｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘ）の両方、。（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方
を含む、ポリペプチド。

【請求項16】

請求項１３～１５のいずれか１項に記載の単離又は精製されたポリペプチドであって、
以下：
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列と少なくとも９９％同一であるアミノ酸配列であり、
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、 アミノ酸配列；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方
を含む、ポリペプチド。

【請求項17】

請求項１３～１６のいずれか１項に記載の単離又は精製されたポリペプチドであって、
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列、ここで、。
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐ であり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、もの；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方
を含む、ポリペプチド。

【請求項18】

請求項１３～１７のいずれか１項に記載の単離又は精製ポリペプチドであって、以下：
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０７の１９５位のＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及び（ｈ）の両方、（ｆ）及び（ｇ）の両方、又は（ｇ）及び（ｈ）の両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌの両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、）
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、β鎖、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｓｓｓ）配列番号１１０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ａａａａ）配列番号１４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方、（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方、（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方、（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂｂ）の両方、（ｙｙｙ）及び（ａａａａ）の両方、又は（ａａａａ）及び（ｂｂｂｂ）の両方
を含む、ポリペプチド

【請求項19】

請求項１３～１８のいずれか１項に記載の単離又は精製ポリペプチドであって、以下：
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号４１のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号１０６のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１０７の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及びｈの両方、（ｆ）及びｇの両方、又は（ｇ）及びｈの両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌの両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、）
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号５７のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列を含むα鎖であって、ここで、配列番号７６のアミノ酸配列は、以下のとおりであり、
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含むα鎖であり、
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｓｓｓ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ａａａａ）ＳＥＱＩＤＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含むα鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列を含むβ鎖、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方；（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方；（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂ）の両方、あるいは（ａａａａ）及び（ｂｂｂ）の両方
を含む、ポリペプチド。

【請求項20】

請求項１３～１９のいずれか１項に記載のポリペプチドの少なくとも１つを含む、単離又は精製されたタンパク質。

【請求項21】

請求項２０に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ａ）配列番号１～３のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、及び配列番号４～６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｂ）配列番号３１－３３のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、及び配列番号３４－３６のアミノ酸配列から なる第２のポリペプチド鎖；又は
（ｃ）配列番号６４～６６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、及び配列番号６７～６９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
を含む、タンパク質。

【請求項22】

請求項２０又は２１に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を 含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む 第２のポリペプチド鎖、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む 第２のポリペプチド鎖、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を 含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（二十七 （ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、他。及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方。（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉ）及び（ｘｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘ）の両方、。（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方のを含む、タンパク質。

【請求項23】

請求項２０～２２のいずれか１項に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｉ）配列番号８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｖ）配列番号９１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｉ）配列番号３８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｉｉｉ）配列番号９３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｘ）配列番号７０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘ）配列番号７１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｉ）配列番号１３３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｉｉｉ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｖ）配列番号４８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉ）配列番号８５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉｉ）配列番号９５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｖｉｉｉ）配列番号４９のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｉｘ）配列番号５０のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘ）配列番号９６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉ）配列番号８７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉｉ）配列番号９７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｉｉｉ）配列番号７２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖｉ）配列番号７３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｖｉ）配列番号８９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（二十七 （ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｉｖ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉ）の両方、（ｖ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｖｉ）及び（ｖｉｉ）の両方、（ｖｉｉ）及び（ｖｉｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、（ｉ）及び（ｉｉ）の両方、他。及び（ｘ）の両方、（ｉｘ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘ）及び（ｘｉ）の両方、（ｘｉ）及び（ｘｉｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｉｖ）の両方、（ｘｉｉｉ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｉｉ）及び（ｘｖｉｉ）の両方。（ｘｉｖ）及び（ｘｖ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉ）の両方、（ｘｖ）及び（ｘｖｉｉ）の両方、（ｘｖｉｉ）及び（ｘｘ）の両方、（ｘｖｉｉｉ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘ）の両方、。（ｘｘ）及び（ｘｘｉ）の両方、（ｘｘ）及び（ｘｘｉｉ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｉｖ）の両方、（ｘｘｉｉｉ）及び（ｘｘｖｉ）の両方、（ｘｘｉｖ）及び（ｘｘｖ）の両方、又は（ｘｘｖ）及び（ｘｘｖｉ）の両方
を含む、タンパク質。

【請求項24】

請求項２０～２３のいずれか１項に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列及び少なくとも９９％同一なアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方
を含む、タンパク質。

【請求項25】

請求項２０～２４のいずれか１項に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下： （ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１７の１１２ 位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１８の５７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、もの；又は
（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の両方
を含む、タンパク質。

【請求項26】

請求項２０～２５のいずれか１項に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸが、Ｓｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸが、Ｓｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１０７の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、ポリペプチド鎖、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及び（ｈ）の両方、（ｆ）及び（ｇ）の両方、又は（ｇ）及び（ｈ）の両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌの両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、）
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、第２のポリペプチド鎖、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸが、Ｓｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第一のポリペプチド鎖であり、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｓｓｓ）配列番号１１０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であり、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ａａａａ）配列番号１４０のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列との同一性が少なくとも９９％のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であり、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方；（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方；（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂ）の両方、あるいは（ａａａａ）及び（ｂｂｂ）の両方
を含む、タンパク質。

【請求項27】

請求項２０～２６のいずれか１項に記載の単離又は精製タンパク質であって、
以下：
（ａ）配列番号２１のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｂ）配列番号２２のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号２２の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｃ）配列番号１００のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｄ）配列番号１０１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１０１の１９０位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、ポリペプチド鎖、
（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｆ）配列番号４２のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号４２の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｇ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１０７の１９５位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｊ）配列番号７５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｋ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７５の１８７位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｍ）（ａ）及び（ｂ）の両方、（ａ）及び（ｄ）の両方、（ｂ）及び（ｃ）の両方、又は（ｃ）及び（ｄ）の両方を満たす。
（ｎ）（ｅ）及び（ｆ）の両方、（ｅ）及び（ｈ）の両方、（ｆ）及び（ｇ）の両方、又は（ｇ）及び（ｈ）の両方。
（ｎ）（ｉ）及び（ｊ）の両方、（ｉ）及びｌの両方、（ｊ）及び（ｋ）の両方、又は（ｋ）及び（ｌ）の両方、）
（ｏ）配列番号５５のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐである；及び
（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｐ）配列番号５６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号５６の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、ポリペプチド鎖、
（ｑ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であって、ここで
（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｒ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１１３の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｓ）配列番号５７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｔ）配列番号５８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号５８の１７３位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓである、ポリペプチド鎖、
（ｕ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖であって、ここで
（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｖ）配列番号１１９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１１９の１０３１７８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｗ）配列番号７６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｘ）配列番号７７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ｙ）配列番号１４４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、であって
（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸは、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり、
（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸは、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位におけるＸは、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び
（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位におけるＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり、
（ｚ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１４５の１６６位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであり、
（ａａ）（ｏ）及び（ｐ）の両方、又は（ｑ）及び（ｒ）の両方。
（ｂｂ）（ｓ）及び（ｔ）の両方、又は（ｕ）及び（ｖ）の両方。
（ｃｃ）（ｗ）及び（ｘ）の両方、又は（ｙ）及び（ｚ）の両方。
（ｄｄ）配列番号５１のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｅｅ）配列番号５２のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｆｆ）配列番号１１４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｇｇ）配列番号１１５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｈｈ）配列番号１２８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｉｉ）配列番号１２９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｊｊ）配列番号１１６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｋｋ）配列番号１１７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｌｌ）配列番号５３のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｍｍ）配列番号５４のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｎｎ）配列番号１２０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｏｏ）配列番号１２１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｐｐ）配列番号１３０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｑｑ）配列番号１３１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｒｒ）配列番号１２２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｓｓ）配列番号１２３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｔｔ）配列番号８０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｕｕ）配列番号８１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｖｖ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｗｗ）配列番号１４６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｘｘ）配列番号１４２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｙｙ）配列番号１４３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｚｚ）配列番号１４８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ａａａ）配列番号１４９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｂｂｂ）（ｄｄ）及び（ｅｅ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｈｈ）及び（ｉｉ）の両方、又は（ｊｊ）及び（ｋｋ）の両方。
（ｃｃｃ）（ｌｌ）及び（ｍｍ）の両方、（ｎｎ）及び（ｏｏ）の両方、（ｐｐ）及び（ｑｑ）の両方、又は（ｒｒ）及び（ｓｓ）の両方。
（ｄｄｄ）（ｔｔ）及び（ｕｕ）の両方、（ｖｖ）及び（ｗｗ）の両方、（ｘｘ）及び（ｙｙ）の両方、又は（ｚｚ）及び（ａａａ）の両方。
（ｅｅｅ）配列番号２３のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｆｆｆ）配列番号２４のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｇｇｇ）配列番号１０２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｈｈｈ）配列番号１０３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｉｉｉ）配列番号１２４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｊｊｊ）配列番号１２５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｋｋｋ）配列番号１０４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｌｌｌ）配列番号１０５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｍｍｍ）配列番号３９のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｎｎｎ）配列番号４０のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｏｏｏ）配列番号１０８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｐｐｐ）配列番号１０９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｑｑｑ）配列番号１２６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｒｒｒ）配列番号１２７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｓｓｓ）配列番号１１０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｔｔｔ）配列番号１１１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｕｕｕ）配列番号７８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｖｖｖ）配列番号７９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｗｗｗ）配列番号１３８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｘｘｘ）配列番号１３９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｙｙｙ）配列番号１３４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｚｚｚ）配列番号１３５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ａａａａ）配列番号１４０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、
（ｂｂｂｂ）配列番号１４１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖、
（ｄｄｄｄ）（ｅｅｅ）及び（ｆｆ）の両方、（ｅｅｅ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｆｆ）及び（ｇｇ）の両方、（ｇｇ）及び（ｈｈｈ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｊｊｊ）の両方、（ｉｉｉ）及び（ｌｌ）の両方、（ｊｊｊ）及び（ｋｋｋ）の両方、又は（ｋｋｋ）及び（ｌｌｌ）の両方。
（ｅｅｅｅ）（ｍｍｍ）及び（ｎｎｎ）の両方；（ｍｍｍ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｎｎｎ）及び（ｏｏｏ）の両方；（ｏｏｏ）及び（ｐｐｐ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｒｒｒ）の両方；（ｑｑｑ）及び（ｔｔｔ）の両方；（ｒｒｒ）及び（ｓｓｓ）の両方；又は（ｓｓｓ）及び（ｔｔｔ）の両方；又は
（ｆｆｆｆ）（ｕｕｕ）及び（ｖｖｖ）の両方；（ｕｕｕ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｖｖｖ）及び（ｗｗｗ）の両方；（ｗｗｗ）及び（ｘｘｘ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｚｚｚ）の両方；（ｙｙｙ）及び（ｂｂｂ）の両方、あるいは（ａａａａ）及び（ｂｂｂ）の両方
を含む、タンパク質。

【請求項28】

請求項１～１２のいずれか１項に記載のＴＣＲ、請求項１３～１９のいずれか１項に記載のポリペプチド、又は請求項２０～２７のいずれか１項に記載のタンパク質をコードするヌクレオチド配列を含む、単離又は精製された核酸。

【請求項29】

５’から３’まで、第１の核酸配列及び第２の核酸配列を含む単離又は精製核酸であって、第１及び第２の核酸配列が、それぞれ、
配列番号７及び８；７及び９１；９０及び８；９０及び９１；８及び７；９１及び７；８及び９０；９１及び９０；３７及び３８；３７及び９３；９２及び３８；９２及び９３；３８及び３７；９３及び３７；３８及び９２；９３及び９２；７０及び７１；７０及び１３３；１３２及び７１；１３２及び１３３；７１及び７０；１３３及び７０のアミノ配列をそれぞれコードする。７１及び１３２、１３３及び１３２、２３及び２４、２３及び１０３、１０２及び２４、１０２及び１０３、２４及び２３、１０３及び２３、２４及び１０２、１０３及び１０２、３９及び４０、３９及び１０９、１０８及び４０、１０８及び１０９、４０及び３９、１０９及び３９、４０及び１０８、１０９及び１０８、７８及び７９、７８及び１３９。１３８及び７９、１３８及び１３９、７９及び７８、１３９及び７８、７９及び１３８、１３９及び１３８、２１及び２２、２１及び１０１、１００及び２２、１００及び１０１、２２及び２１、１０１及び２１、２２及び１００、４１及び４２、４１及び１０７、１０６及び４２、１０６及び１０７、４２及び４１、１０７及び４１。４２及び１０６、１０７及び１０６、７４及び７５、７４及び１０１、１００及び７５、１００及び１０１、７５及び７４、１０１及び７４、７５及び１００、１０１及び１００、１２４及び１２５、１２４及び１０５、１０４及び１２５、１０４及び１０５、１２５及び１２４、１０５及び１２４、１２５及び１０４、１０５及び１０４、１２６及び１２７、１２６及び１１１。１１０及び１２７、１１０及び１１１、１２７及び１２６、１１１及び１２６、１２７及び１１０、１１１及び１１０、１３４及び１３５、１４０及び１３５、１３４及び１４１、１４０及び１４１、１３５及び１３４、１３５及び１４０、１４１及び１３４、１４１及び１４０、４７及び４８、４８及び４７、４９及び５０、５０及び４９、７２及び７３。７３及び７２；９４及び９５；９５及び９４；９４及び８５；８５及び９４；９６及び９７；９７及び９６；９６及び８７；８７及び９６；８８及び８９；８９及び８８；５１及び５２；５２及び５１；５３及び５４；５４及び５３；８０及び８１；８１及び８０；５５及び５６；５６及び５５；５７及び５８；５８及び５７；７６及び７７。７７及び７６；１２８及び１２９；１２９及び１２８；１３０及び１３１；１３１及び１３０；１４２及び１４３；１４３及び１４２；１１２及び１１３；１１３及び１１２；１１８及び１１９；１１９及び１１８；１４４及び１４５；１４５及び１４４；１１４及び１１５；１１５及び１１４；１２０及び１２１；１２１及び１２０；１４６及び１４７；１４７及び１４６。１１６及び１１７、１１７及び１１６、１２２及び１２３、１２３及び１２２、１４８及び１４９、１４９及び１４８、１５０及び１５１、１５１及び１５０、１５４及び１５５、１５５及び１５４、１５２及び１５３、１５３及び１５２、１５６及び１５７、１５７及び１５６、１６０及び１６１、１６１及び１６０、１５８及び１５９、又は１５９及び１５８
のアミノ配列をコードする、単離又は精製核酸。

【請求項30】

第１及び第２ヌクレオチド配列の間に介在する第３ヌクレオチド配列をさらに含み、第３ヌクレオチド配列が切断可能なリンカーペプチドをコードする、請求項２９に記載の単離又は精製された核酸。

【請求項31】

切断可能なリンカーペプチドが配列番号２５のアミノ酸配列を含む、請求項３０に記載の単離又は精製核酸。

【請求項32】

請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸を含む組換え発現ベクター。

【請求項33】

トランスポゾン又はレンチウイルスベクターである、請求項３２に記載の組換え発現ベクター。

【請求項34】

請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸又は請求項３２もしくは３３に記載のベクターによってコードされる単離又は精製されたＴＣＲ、ポリペプチド、又は蛋白質。

【請求項35】

請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸又は請求項３２もしくは３３に記載のベクターの細胞内での発現により生じる、単離又は精製されたＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質。

【請求項36】

配列番号３０のペプチドに対して抗原特異性を有するＴＣＲを発現する宿主細胞を製造する方法であって、細胞に請求項３２又は３３に記載のベクターを導入可能な条件下で接触させることを含む、方法。

【請求項37】

請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸又は請求項３２もしくは３３に記載の組換え発現ベクターを含む、単離又は精製された宿主細胞。

【請求項38】

細胞がヒトリンパ球である、請求項３７に記載の宿主細胞。

【請求項39】

細胞が、Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、インバリアントナチュラルキラーＴ（ｉＮＫＴ）細胞、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む群から選択される、請求項３７又は３８に記載の宿主細胞。

【請求項40】

請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞を含む、細胞の単離又は精製された集団。

【請求項41】

請求項１～１２、３４、又は３５のいずれか１項に記載のＴＣＲ、請求項１３～１９、３４、又は３５のいずれか１項に記載のポリペプチド、又は請求項２０～２７、３４、又は３５のいずれか１項に記載のタンパク質の製造方法であって、ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質が生産されるように請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞又は請求項４０記載の宿主細胞の集団の培養を含むことを特徴とする、方法。

【請求項42】

ａ）請求項１～１２、３４、又は３５のいずれか１項に記載のＴＣＲ、請求項１３～１９、３４、又は３５のいずれか１項に記載のポリペプチド、又は請求項２０～２７、３４、又は３５のいずれか１項に記載のタンパク質、請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸、請求項３２又は３３記載の組み換え発現ベクター、請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞又は請求項４０記載の細胞集団及び
（ｂ）医薬的に許容できる担体を
含む、医薬組成物。

【請求項43】

哺乳類における癌の存在を検出する方法であって、
（ａ）癌の細胞を含む試料を、請求項１～１２、３４、又は３５のいずれか１項に記載のＴＣＲ、請求項１３～１９、３４、又は３５のいずれか１項に記載のポリペプチド、又は請求項２０～２７、３４、又は３５のいずれか１項に記載のタンパク質、請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸、請求項３２又は３３記載の組み換え発現ベクター、請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞、請求項４０記載の細胞集団、若しくは請求項４２記載の医薬組成物とを接触させて複合体を形成すること、及び
（ｂ）複合体を検出すること
を含み、
ここで、該複合体の検出は、該哺乳動物における癌の存在を示すものである、
哺乳類における癌の存在を検出する方法。

【請求項44】

哺乳動物における癌に対する免疫応答の誘導に使用するための、請求項１～１２のいずれか１項に記載のＴＣＲ、３４、又は３５、請求項１３～１９のいずれか１項に記載のポリペプチド、３４又は３５、又は請求項２０～２７のいずれか１項に記載のタンパク質、請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸、請求項３２又は３３に記載の組み換え発現ベクター、請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞、請求項４０に記載の細胞集団、又は請求項４２に記載の薬学的組成物。

【請求項45】

哺乳動物における癌の治療又は予防に使用するための、請求項１～１２、３４、又は３５のいずれか１項に記載のＴＣＲ、請求項１３～１９、３４、又は３５のいずれか１項に記載のポリペプチド、又は請求項２０～２７、３４、又は３５のいずれか１項に記載のタンパク質、請求項２８～３１のいずれか１項に記載の核酸、請求項３２又は３３項に記載の組み換え発現ベクター、請求項３７～３９のいずれか１項に記載の宿主細胞、請求項４０記載の細胞集団、もしくは請求項４２に記載の医薬組成物。

【請求項46】

請求項４３に記載の方法又は請求項４４もしくは４５に記載の使用であって、癌が１２位のグリシンをバリンで置換した変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列を発現する、方法又は使用であって、
ここで、変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列は、変異したヒトＫｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）、変異したヒトＨａｒｖｅｙラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＨＲＡＳ）、又は変異したヒト神経芽腫ラット肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）アミノ酸配列であり、かつ、
ここで、１２位は、それぞれ野生型ヒトＫＲＡＳ、野生型ヒトＨＲＡＳ、又は野生型ヒトＮＲＡＳタンパク質を参照して定義される、方法。

【請求項47】

請求項４３もしくは４６に記載の方法、又は請求項４４～４６のいずれか一項に記載の使用であって、変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列が変異ヒトキルステンラト肉腫ウイルス癌遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）アミノ酸配列である、方法又は使用。

【請求項48】

請求項４３もしくは４６に記載の方法、又は請求項４４～４６のいずれか一項に記載の使用であって、変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列が変異ヒト神経芽腫ラット肉腫ウイルス腫瘍遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）アミノ酸配列である、方法又は使用。

【請求項49】

請求項４３もしくは４６に記載の方法、又は請求項４４～４６のいずれか一項に記載の使用であって、変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列が変異ヒトハーベイ・ラット肉腫ウイルス腫瘍遺伝子（ＨＲＡＳ）アミノ酸配列である、方法又は使用。

【請求項50】

請求項４３及び４６～４９のいずれか１項に記載の方法、又は請求項４４～４９のいずれか１項に記載の使用であって、癌が膵臓癌、大腸癌、肺癌、子宮内膜癌、卵巣癌、又は前立腺癌である、方法又は使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本特許出願は、２０２０年２月１４日に出願された米国仮特許出願番号第６２／９７６，６５５号、及び２０２０年８月３日に出願された米国仮特許出願第６３／０６０，３４０号の利益を主張し、これらの各々は参照によりその全体が本明細書に組み込まれるものとする。

【0002】

連邦によって支援された研究開発に関する陳述
本発明は、連邦政府の支援を受け、プロジェクト番号ＺＩＡＢＣ０１０９８４の下、米国国立衛生研究所、米国国立がん研究所によりなされた。本発明において、連邦政府は一定の権利を有する。

【0003】

電子的に提出された物件の参照による組込み
本明細書と同時に提出され、以下のとおり識別される、コンピューターで読み取り可能なヌクレオチド／アミノ酸の配列表は、参照により、その全体が本明細書に組込まれる：２０２１年２月４日付の「７５１５０８＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」という名前の３０７，２０６バイトのＡＳＣＩＩ（テキスト）ファイル１件。

【背景技術】

【0004】

発明の背景
ある種のがんは、特に、がんが転移性で切除不能になった場合、治療選択肢が非常に限られる場合がある。例えば、手術、化学療法、及び放射線療法等の治療における進歩にもかかわらず、例えば膵臓がん、結腸直腸がん、肺がん、子宮内膜がん、卵巣がん及び前立腺がん等の多くのがんの予後は、不良な場合がある。従って、がんに対する更なる治療について、満たされていないニーズが存在する。

【発明の概要】

【0005】

本発明の一実施形態は、（ａ）配列番号１～３、（ｂ）配列番号４～６、（ｃ）配列番号３１～３３、（ｄ）配列番号３４～３６、（ｅ）配列番号６４～６６、（ｆ）配列番号６７～６９、（ｇ）配列番号１～６、（ｈ）配列番号３１～３６、又は（ｉ）配列番号６４～６９のアミノ酸配列を含む単離又は精製されたＴ細胞受容体（ＴＣＲ）であって、ＴＣＲが、ヒト白血球抗原（ＨＬＡ）クラスＩ分子によって提示される１２位のグリシンからアスパラギン酸への置換を伴う突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有し、突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列が、突然変異ヒトキルステンラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）、突然変異ヒトハーベイラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＨＲＡＳ）、又は突然変異ヒト神経芽腫ラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）のアミノ酸配列であり、１２位は、それぞれ、野生型ヒトＫＲＡＳ、野生型ヒトＨＲＡＳ、又は野生型ヒトＮＲＡＳを参照して定義される、ＴＣＲを提供する。

【0006】

本発明の別の実施形態は、本発明のＴＣＲの機能的部分を含む単離又は精製されたポリペプチドであって、機能的部分が、（ａ）配列番号１～３の全て、（ｂ）配列番号４～６の全て、全て（ｃ）配列番号３１～３３の全て、（ｄ）配列番号３４～３６の全て、（ｅ）配列番号の全て、（ｅ）配列番号６４～６６の全て。６４～６６、（ｆ）配列番号６７～６９の全て、（ｇ）配列番号１～６の全て、（ｈ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｉ）配列番号６４～６９の全てのアミノ酸配列を含む、ポリペプチドを提供する。

【0007】

本発明の更に別の実施形態は、本発明のポリペプチドの少なくとも１つを含む、単離又は精製されたタンパク質を提供する。

【0008】

本発明の更なる実施形態は、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質に関連する、核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、細胞集団及び医薬組成物を提供する。

【0009】

本発明の実施形態は、５’から３’まで、第１の核酸配列及び第２の核酸配列を含む単離又は精製核酸を提供し、ここで、第１及び第２の核酸配列は、それぞれ、配列番号７及び８；７及び９１；９０及び８；９０及び９１；８及び７；９１及び７；８及び９０；９１及び９０；３７及び３８；３７及び９３；９２及び３８；９２及び９３；３８及び３７；９３及び３７；３８及び９２；９３及び９２；７０及び７１；７０及び１３３；１３２及び７１；１３２及び１３３；７１及び７０；１３３及び７０のアミノ配列をそれぞれコードする。７１及び１３２、１３３及び１３２、２３及び２４、２３及び１０３、１０２及び２４、１０２及び１０３、２４及び２３、１０３及び２３、２４及び１０２、１０３及び１０２、３９及び４０、３９及び１０９、１０８及び４０、１０８及び１０９、４０及び３９、１０９及び３９、４０及び１０８、１０９及び１０８、７８及び７９、７８及び１３９。１３８及び７９、１３８及び１３９、７９及び７８、１３９及び７８、７９及び１３８、１３９及び１３８、２１及び２２、２１及び１０１、１００及び２２、１００及び１０１、２２及び２１、１０１及び２１、２２及び１００、４１及び４２、４１及び１０７、１０６及び４２、１０６及び１０７、４２及び４１、１０７及び４１。４２及び１０６、１０７及び１０６、７４及び７５、７４及び１０１、１００及び７５、１００及び１０１、７５及び７４、１０１及び７４、７５及び１００、１０１及び１００、１２４及び１２５、１２４及び１０５、１０４及び１２５、１０４及び１０５、１２５及び１２４、１０５及び１２４、１２５及び１０４、１０５及び１０４、１２６及び１２７、１２６及び１１１。１１０及び１２７、１１０及び１１１、１２７及び１２６、１１１及び１２６、１２７及び１１０、１１１及び１１０、１３４及び１３５、１４０及び１３５、１３４及び１４１、１４０及び１４１、１３５及び１３４、１３５及び１４０、１４１及び１３４、１４１及び１４０、４７及び４８、４８及び４７、４９及び５０、５０及び４９、７２及び７３。７３及び７２；９４及び９５；９５及び９４；９４及び８５；８５及び９４；９６及び９７；９７及び９６；９６及び８７；８７及び９６；８８及び８９；８９及び８８；５１及び５２；５２及び５１；５３及び５４；５４及び５３；８０及び８１；８１及び８０；５５及び５６；５６及び５５；５７及び５８；５８及び５７；７６及び７７。７７及び７６；１２８及び１２９；１２９及び１２８；１３０及び１３１；１３１及び１３０；１４２及び１４３；１４３及び１４２；１１２及び１１３；１１３及び１１２；１１８及び１１９；１１９及び１１８；１４４及び１４５；１４５及び１４４；１１４及び１１５；１１５及び１１４；１２０及び１２１；１２１及び１２０；１４６及び１４７；１４７及び１４６。１１６及び１１７、１１７及び１１６、１２２及び１２３、１２３及び１２２、１４８及び１４９、１４９及び１４８、１５０及び１５１、１５１及び１５０、１５４及び１５５、１５５及び１５４、１５２及び１５３、１５３及び１５２、１５６及び１５７、１５７及び１５６、１６０及び１６１、１６１及び１６０、１５８及び１５９、又は１５９及び１５８のアミノ配列をコードしている。

【0010】

本発明の実施形態により、哺乳動物におけるがんの存在を検出する方法、哺乳動物におけるがんを治療又は予防する方法、哺乳動物における癌に対する免疫応答を誘導する方法、配列番号２９又は３０のペプチドに対する抗原特異性を有するＴＣＲを発現する宿主細胞を製造する方法、ならびに本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質を製造する方法が、更に提供される。

【0011】

その他の実施形態は、本明細書で説明される。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1A】図１Ａは、野生型（ＷＴ）ＲＡＳをコードするタンデムミニ遺伝子（ＴＭＧ）ｍＲＮＡをトランスフェクトした自己ＤＣ標的細胞の反応性を示している。ＴＩＬは、患者４３９１の腫瘍片Ｆ１、Ｆ１３、又は腫瘍片Ｆ２、Ｆ３、Ｆ５の組み合わせから単離された。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによってＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することによって測定された。

【図1B】図１Ｂは、変異型（Ｍｕｔ）ＲＡＳをコードするｍＲＮＡ ＴＭＧをトランスフェクトした自己ＤＣ標的細胞の反応性を示している。ＴＩＬは、患者４３９１の腫瘍片Ｆ１、Ｆ１３、又は腫瘍片Ｆ２、Ｆ３、Ｆ５の組み合わせから単離された。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによってＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することによって測定された。

【図1C】図１Ｃは、ＷＴ ＲＡＳロングペプチド（ＬＰ）パルスをかけた腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の反応性を示している。ＴＩＬは、患者４３９１の腫瘍片Ｆ１、Ｆ１３、又は腫瘍片Ｆ２、Ｆ３、Ｆ５の組み合わせから単離された。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによってＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することによって測定された。

【図1D】図１Ｄは、ＲＡＳ Ｇ１２ＶＬＰをパルスをかけた腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）の反応性を示している。ＴＩＬは、患者４３９１の腫瘍片Ｆ１、Ｆ１３、又は腫瘍片Ｆ２、Ｆ３、Ｆ５の組み合わせから単離された。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによってＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することによって測定された。

【図2A】図２Ａは、ＷＴ ＬＰでパルスした標的細胞に対する患者４３９１の腫瘍片Ｆ１からのＴＩＬの反応性を示している。標的細胞は、４３９１自家ＤＣ、ＣＯＳ－Ａ０３（ＣＯＳ７細胞がＨＬＡ－Ａ＊０３：０１を安定発現）、又はＣＯＳ－Ａ０２（ＣＯＳ７細胞がＨＬＡ－Ａ＊０２：０１を安定発現）細胞株であった。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによるＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することにより測定した。

【図2B】図２Ｂは、ＷＴ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰのいずれかでパルスした標的細胞に対する患者４３９１の腫瘍片Ｆ１からのＴＩＬの反応性を示している。ＤＭＳＯでパルスした標的細胞はコントロールとして機能した。標的細胞は、４３９１自家ＤＣ、ＣＯＳ－Ａ０３（ＣＯＳ７細胞がＨＬＡ－Ａ＊０３：０１を安定発現）、又はＣＯＳ－Ａ０２（ＣＯＳ７細胞がＨＬＡ－Ａ＊０２：０１を安定発現）細胞株であった。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋でゲーティングされた。反応性は、ＦＡＣＳによるＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することにより測定した。

【図3】図３は、ＷＴ ＬＰ、Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＧ１２Ｖ ＭＥでパルスした自己ＤＣとの共培養に対する、患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からのＴＩＬによるＩＦＮ－γ分泌（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定値を示すグラフである。単独で培養したＴＩＬはネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＴＩＬをポジティブコントロールとした。

【図4A】図４Ａは、ＤＮＡトランスフェクトされていない標的ＣＯＳ７細胞（ＣＯＳ７）又は患者４３９１によって発現された４つの異なるＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０３：０１、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊５５：０１又はＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２）のいずれかでＤＮＡトランスフェクトされた標的ＣＯＳ７細胞と共同培養することに対して患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からＴＩＬによって分泌されたＩＦＮ－γ（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定結果を示すグラフである。標的細胞に、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＭＥ８をパルス照射した。

【図4B】図４Ｂは、ＤＮＡトランスフェクトされていない標的ＣＯＳ７細胞（ＣＯＳ７）又は患者４３９１によって発現された４つの異なるＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０３：０１、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊５５：０１又はＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２）のいずれかでＤＮＡトランスフェクトされた標的ＣＯＳ７細胞と共同培養することに対して患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からＴＩＬによって分泌されたＩＦＮ－γ（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定結果を示すグラフである。標的細胞に、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＬＰをパルス照射した。

【図4C】図４Ｃは、ＤＮＡトランスフェクトされていない標的ＣＯＳ７細胞（ＣＯＳ７）又は患者４３９１によって発現された４つの異なるＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０３：０１、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊５５：０１又はＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２）のいずれかでＤＮＡトランスフェクトされた標的ＣＯＳ７細胞と共同培養することに対して患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からＴＩＬによって分泌されたＩＦＮ－γ（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定結果を示すグラフである。標的細胞に、指示された濃度のＷＴ ＬＰをパルス照射した。

【図4D】図４Ｄは、ＤＮＡトランスフェクトされていない標的ＣＯＳ７細胞（ＣＯＳ７）又は患者４３９１によって発現された４つの異なるＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０３：０１、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊５５：０１又はＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２）のいずれかでＤＮＡトランスフェクトされた標的ＣＯＳ７細胞と共同培養することに対して患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からＴＩＬによって分泌されたＩＦＮ－γ（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定結果を示すグラフである。ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２でＤＮＡトランスフェクトしたＣＯＳ７細胞を、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＭＥ８、Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＷＴ ＬＰでパルスした（図４Ｄ）。

【図5A】図５Ａは、ＴＣＲで形質転換されたＰＢＬと、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした標的細胞との共培養に応答して、分泌したＩＦＮ－γ（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）のＥＬＩＳＰＯＴ測定値を示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞はポジティブコントロールとして用いた。

【図5B】図５Ｂは、ＴＣＲで形質転換されたＰＢＬと、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした標的細胞との共培養に応答して、４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞の割合のＥＬＩＳＰＯＴ測定値を示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞はポジティブコントロールとして用いた。ＣＤ８＋ゲートされた細胞は、図５Ｂに示されている。

【図5C】図５Ｃは、ＴＣＲで形質転換されたＰＢＬと、指示された濃度のＧ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした標的細胞との共培養に応答して、４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞の割合のＥＬＩＳＰＯＴ測定値を示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞はポジティブコントロールとして用いた。ＣＤ４＋ゲートされた細胞は、図５Ｃに示されている。

【図6】図６は、異なるペプチドプール（ＰＰ）又は異なるＴＭＧに対する新規抗原反応性についてスクリーニングした４３８５ ＴＩＬフラグメント１１によって分泌されたＩＦＮ－γのＥＬＩＳＰＯＴ測定結果を示す（ＰＭＡ／Ｉｏ材料はポジティブコントロールとして機能した）。

【図7A】図７Ａは、ＴＣＲ ４又はＴＩＬフラグメント１１（Ｆ１１）で形質転換した４３８５ ＰＢＬと、ＲＡＳ最小エピトープ（ＭＥ）４～８のいずれかでパルスした４３８５自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する、ＣＤ８ ＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセントを示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ、Ｇ１２Ｖ ＦＬ、ＴＭＧ２（図６のＴＭＧ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを含む）でトランスフェクトしたＤＣ ｍＲＮＡでトランスフェクトした。ＤＭＳＯでパルスした標的細胞、又はＴ細胞のみをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料を用いたＴ細胞の共培養は、ポジティブコントロールとして機能した。ラベルは、必要に応じてマーカーを区別するために使用されている。

【図7B】図７Ｂは、ＴＣＲ ４又はＴＩＬフラグメント１１（Ｆ１１）で形質転換した４３８５ ＰＢＬと、ＲＡＳ最小エピトープ（ＭＥ）４～８のいずれかでパルスした４３８５自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する、ＣＤ４＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセントを示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ、Ｇ１２Ｖ ＦＬ、ＴＭＧ２（図６のＴＭＧ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを含む）でトランスフェクトしたＤＣ ｍＲＮＡでトランスフェクトした。ＤＭＳＯでパルスした標的細胞、又はＴ細胞のみをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料を用いたＴ細胞の共培養は、ポジティブコントロールとして機能した。ラベルは、必要に応じてマーカーを区別するために使用されている。

【図7C】図７Ｃは、ＴＣＲ ４又はＴＩＬフラグメント１１（Ｆ１１）で形質転換した４３８５ ＰＢＬと、ＲＡＳ最小エピトープ（ＭＥ）４～８のいずれかでパルスした４３８５自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する、分泌ＩＦＮ－γのＥＬＩＳＰＯＴ測定（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセントを示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ、Ｇ１２Ｖ ＦＬ、ＴＭＧ２（図６のＴＭＧ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを含む）でトランスフェクトしたＤＣ ｍＲＮＡでトランスフェクトした。ＤＭＳＯでパルスした標的細胞、又はＴ細胞のみをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料を用いたＴ細胞の共培養は、ポジティブコントロールとして機能した。ラベルは、必要に応じてマーカーを区別するために使用されている。

【図8A】図８Ａは、４３８５個のＰＢＬへのＴＣＲ導入効力、及びこの実験に使用した細胞のＣＤ８／ＣＤ４集団分布を示すドットプロットである。

【図8B】図８Ｂは、ＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＰＯＴ画像を示す。

【図9A】図９Ａは、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ又は、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の示された濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との４３８５ ＴＩＬ Ｆ１１の共培養に対する応答として、分泌されたＩＦＮ－γのＥＬＩＳＰＯＴ測定（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養したＴＩＬ Ｆ１１細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図9B】図９Ｂは、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ又は、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の示された濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との４３８５ ＴＩＬ Ｆ１１の共培養に対する応答として、ＣＤ８＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養したＴＩＬ Ｆ１１細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図9C】図９Ｃは、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ又は、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の示された濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との４３８５ ＴＩＬ Ｆ１１の共培養に対する応答として、ＣＤ４＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養したＴＩＬ Ｆ１１細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図10A】図１０Ａは、４３８５抗ＲＡＳ ＴＣＲで形質転換したＰＢＬと、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の指示濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する応答として、分泌されたＩＦＮ－γのＥＬＩＳＰＯＴ測定（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図10B】図１０Ｂは、４３８５抗ＲＡＳ ＴＣＲで形質転換したＰＢＬと、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の指示濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する応答として、ＣＤ８＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図10C】図１０Ｃは、４３８５抗ＲＡＳ ＴＣＲで形質転換したＰＢＬと、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８の指示濃度でパルスした自己ＤＣ標的細胞との共培養に対する応答として、ＣＤ４＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞のパーセンテージを示すグラフである。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用。Ｔ細胞のみ（標的細胞なし）をネガティブコントロールとした。

【図11A】図１１Ａは、分泌されたＩＦＮ－γのＥＬＩＳＰＯＴ測定（スポット／３ｅ４（３×１０^４）細胞）中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞の割合を、共同培養に対する応答として示すグラフである。４３８５抗ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＴＣＲ４で形質転換したＰＢＬを、指示濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした自己のＤＣ標的細胞と共培養する。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用した。

【図11B】図１１Ｂは、ＣＤ８＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞の割合を、共同培養に対する応答として示すグラフである。４３８５抗ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＴＣＲ４で形質転換したＰＢＬを、指示濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした自己のＤＣ標的細胞と共培養する。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用した。

【図11C】図１１Ｃは、ＣＤ４＋ゲート細胞中の４－１ＢＢ／ＯＸ４０＋細胞の割合を、共同培養に対する応答として示すグラフである。４３８５抗ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＴＣＲ４で形質転換したＰＢＬを、指示濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）でパルスした自己のＤＣ標的細胞と共培養する。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料と共培養した形質転換細胞をポジティブコントロールとして使用した。

【図12A】図１２Ａは、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴにより試験した反応性を示したグラフである。ＤＭＳＯ又は抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで処理したＤＣは、それぞれ、ネガティブ又はポジティブコントロールとした。

【図12B】図１２Ｂは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ、ＲＡＳ ＷＴ ＦＬをトランスフェクトし、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ（ＭＥ８なし）又はＭＥ８を負荷した自己ＤＣとの共同培養によるＴＩＬ断片のＣＤ８にゲートした４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリ・アッセイの使用を示したグラフである。ＤＭＳＯ又は抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで処理したＤＣは、それぞれ、ネガティブ又はポジティブコントロールとした。

【図12C】図１２Ｃは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ、ＲＡＳ ＷＴ ＦＬをトランスフェクトし、ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ（ＭＥ８なし）又はＭＥ８を負荷した自己ＤＣとの共同培養によるＴＩＬ断片のＣＤ４（図１２Ｃ）にゲートした４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリ・アッセイの使用を示したグラフである。ＤＭＳＯ又は抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓで処理したＤＣは、それぞれ、ネガティブ又はポジティブコントロールとした。

【図13A】図１３Ａは、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴを用いて試験した反応性を示すグラフであり、ソート濃縮後にＣＤ８＋にゲーティングされたものである。患者４３９４の腫瘍断片Ｆ１２からのＴＩＬを、ＲＡＳ反応性ＴＩＬ集団の濃縮後、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した。

【図13B】図１３Ｂは、Ｉ４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーアッセイを用いて試験した反応性を示すグラフであり、ソート濃縮後にＣＤ８＋にゲーティングされたものである。患者４３９４の腫瘍断片Ｆ１２からのＴＩＬを、ＲＡＳ反応性ＴＩＬ集団の濃縮後、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した。

【図14A】図１４Ａは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＷＴ４ ＭＥ（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ－及び４３９４ ＴＣＲＢ－トランスフェクトＰＢＬについて、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴによってテストした反応性を示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ遺伝子のｍＲＮＡでトランスフェクトした自己ＤＣと共培養した。ＤＭＳＯで処理したＤＣとの共培養はネガティブコントロールとして扱った。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養による非特異的刺激をポジティブコントロールとした。

【図14B】図１４Ｂは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＷＴ４ ＭＥ（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ－及び４３９４ ＴＣＲＢ－トランスフェクトＰＢＬについて、ＣＤ４へのゲーティングによる４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリよってテストした反応性を示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ遺伝子のｍＲＮＡでトランスフェクトした自己ＤＣと共培養した。ＤＭＳＯで処理したＤＣとの共培養はネガティブコントロールとして扱った。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養による非特異的刺激をポジティブコントロールとした。

【図14C】図１４Ｃは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＷＴ４ ＭＥ（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ－及び４３９４ ＴＣＲＢ－トランスフェクトＰＢＬについて、ＣＤ８へのゲーティングによる４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリによってテストした反応性を示すグラフである。ＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ、又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ遺伝子のｍＲＮＡでトランスフェクトした自己ＤＣと共培養した。ＤＭＳＯで処理したＤＣとの共培養はネガティブコントロールとして扱った。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養による非特異的刺激をポジティブコントロールとした。

【図15A】図１５Ａは、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した４３９４ ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ導入ＰＢＬについてＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴによる反応性の試験を示すグラフである。単独で培養したＴＣＲ導入ＰＢＬをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＴＣＲ導入ＰＢＬをポジティブコントロールとした。

【図15B】図１５Ｂは、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した４３９４ ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ導入ＰＢＬについてＣＤ４へのゲーティングによる反応性の試験を示すグラフである。単独で培養したＴＣＲ導入ＰＢＬをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＴＣＲ導入ＰＢＬをポジティブコントロールとした。

【図15C】図１５Ｃは、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した４３９４ ＤＣと共培養した４３９４ ＴＣＲＡ導入ＰＢＬについてＣＤ８へのゲーティングによる反応性の試験を示すグラフである。単独で培養したＴＣＲ導入ＰＢＬをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＴＣＲ導入ＰＢＬをポジティブコントロールとした。

【発明を実施するための形態】

【0013】

ＲＡＳファミリーのタンパク質は、低分子量ＧＴＰアーゼの大ファミリーに属する。特定の理論又はメカニズムには縛られないが、突然変異すると、ＲＡＳタンパク質は多くのヒトがんの発がんの初期において、シグナル伝達に関与し得ると考えられている。単一のアミノ酸置換がタンパク質を活性化し得る。突然変異ＲＡＳタンパク質産物は、構成的に活性化され得る。突然変異ＲＡＳタンパク質は、例えば、膵臓がん（例えば、膵臓がん（ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ））、結腸直腸がん、肺がん（例えば、肺腺がん）、子宮内膜がん、卵巣がん（例えば、上皮性卵巣がん）、及び前立腺がん等の種々のヒトのがんのいずれかで発現し得る。ヒトＲＡＳファミリーのタンパク質は、Ｋｉｒｓｔｅｎラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＫＲＡＳ）、Ｈａｒｖｅｙラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＨＲＡＳ）、及び神経芽腫ラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ（ＮＲＡＳ）を含む。

【0014】

ＫＲＡＳは、ＧＴＰアーゼＫＲａｓ、Ｖ－Ｋｉ－Ｒａｓ２キルステンラット肉腫ウイルスがん遺伝子、又はＫＲＡＳ２とも称される。２のＫＲＡＳ転写産物変異体：ＫＲＡＳ変異体Ａ及びＫＲＡＳ変異体Ｂがある。野生型（ＷＴ）ＫＲＡＳ変異体Ａは、配列番号９のアミノ酸配列を有する。野生型（ＷＴ）ＫＲＡＳ変異体Ｂは配列番号１０のアミノ酸を有する。以下、「ＫＲＡＳ」（突然変異又は非突然変異（ＷＴ））への言及は、特に明記しない限り、変異体Ａ及び変異体Ｂの両方を指す。活性化されると、突然変異ＫＲＡＳはグアノシン５’－三リン酸（ＧＴＰ）に結合し、ＧＴＰをグアノシン５’－二リン酸（ＧＤＰ）に変換する。

【0015】

ＨＲＡＳは、ＲＡＳタンパク質ファミリーの別のメンバーである。ＨＲＡＳは、ハーベイラット肉腫ウイルスがんタンパク質、Ｖ－Ｈａ－Ｒａｓハーベイラット肉腫ウイルスがん遺伝子ホモログ、又はＲａｓファミリー低分子量ＧＴＰ結合タンパク質Ｈ－Ｒａｓとも称される。ＷＴ ＨＲＡＳは、配列番号１１のアミノ酸配列を有する。

【0016】

ＮＲＡＳは、ＲＡＳタンパク質ファミリーの更に別のメンバーである。ＮＲＡＳは、ＧＴＰａｓｅ ＮＲａｓ、Ｖ－Ｒａｓ神経芽細胞種ＲＡＳウイルスがん遺伝子ホモログ、又はＮＲＡＳ１とも称される。ＷＴ ＮＲＡＳは、配列番号１２のアミノ酸配列を有する。

【0017】

本発明の一実施形態は、１２位のグリシンのバリンへの置換を伴う突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列（以下、「突然変異ＲＡＳ」と称する。）に対して抗原特異性を有する単離又は精製されたＴＣＲを提供し、突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列は、突然変異ヒトＫＲＡＳ、突然変異ヒトＨＲＡＳ、又は突然変異ヒトＮＲＡＳのアミノ酸配列であり。１２位は、それぞれ、ＷＴヒトＫＲＡＳ、ＷＴヒトＨＲＡＳ、又はＷＴヒトＮＲＡＳタンパク質を参照して定義される。以下、「ＴＣＲ」への言及は、特に明記しない限り、ＴＣＲの機能的部分及び機能的変異体も指す。

【0018】

本発明ＴＣＲは、任意の変異型ヒトＲＡＳタンパク質、ポリペプチド又はペプチドアミノ酸配列に対して抗原特異性を有していてもよい。本発明の実施形態では、変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列は、変異したヒトＫＲＡＳアミノ酸配列、変異したヒトＨＲＡＳアミノ酸配列、又は変異したヒトＮＲＡＳアミノ酸配列である。ＷＴヒトＫＲＡＳ、ＮＲＡＳ、及びＨＲＡＳのタンパク質のアミノ酸配列は、それぞれ１８８～１８９アミノ酸残基の長さを有し、互いに高度な同一性を有している。例えば、ＷＴヒトＮＲＡＳタンパク質のアミノ酸配列は、ＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のそれと８６．８％同一である。ＷＴヒトＮＲＡＳタンパク質及びＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のアミノ酸残基１～８６は、１００％同一である。ＷＴヒトＨＲＡＳタンパク質のアミノ酸配列は、ＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のそれと８６．３％同一である。ＷＴヒトＨＲＡＳタンパク質及びＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のアミノ酸残基１～９４は、１００％同一である。以下、「ＲＡＳ」（突然変異又は非突然変異（ＷＴ））への言及は、特に明記しない限り、集合的にＫＲＡＳ、ＨＲＡＳ、及びＮＲＡＳを指す。

【0019】

本発明の実施形態では、変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列は、１２位にグリシンの置換を有するＷＴ ＲＡＳアミノ酸配列を含み、ここで１２位は、それぞれＷＴ ＲＡＳタンパク質を参照して定義される。ＷＴ ＲＡＳタンパク質は、上記で説明したように、ＷＴヒトＮＲＡＳタンパク質及びＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のアミノ酸残基１～８６は１００％同一であり、ＷＴヒトＨＲＡＳタンパク質及びＷＴヒトＫＲＡＳタンパク質のアミノ酸残基１～９４は１００％同一なので、ＷＴ ＫＲＡＳタンパク質（配列番号９又は１０）、ＷＴ ＨＲＡＳタンパク質（配列番号１１）、ＷＴ ＮＲＡＳタンパク質（配列番号１２）のどれでもあってもよい。したがって、ＷＴ ＫＲＡＳタンパク質、ＷＴ ＨＲＡＳタンパク質及びＷＴ ＮＲＡＳタンパク質のそれぞれの１２位のアミノ酸残基は同一であり、すなわちグリシンである。

【0020】

ＷＴ ＲＡＳアミノ酸配列の１２位のグリシンは、グリシン以外の任意のアミノ酸残基で置換されていてもよい。本発明の実施形態では、置換は、ＷＴ ＲＡＳアミノ酸配列の１２位のグリシンをバリンで置換する。この点に関して、本発明の実施形態は、Ｇ１２Ｖ変異を有する任意のＷＴ ＲＡＳタンパク質、ポリペプチド又はペプチドアミノ酸配列に対して抗原特異性を有するＴＣＲを提供する。

【0021】

ＲＡＳの突然変異及び置換は、本明細書において、ＷＴ ＲＡＳタンパク質のアミノ酸配列を参照して定義される。従って、ＲＡＳの突然変異及び置換は、ＷＴ ＲＡＳタンパク質中の特定の位置に存在するアミノ酸残基、次に位置番号、次に、その残基が、検討中の特定の突然変異又は置換において置換されたアミノ酸残基を基準にして、本明細書に記載される。ＲＡＳアミノ酸配列（例えば、ＲＡＳペプチド）は、全長のＷＴ ＲＡＳタンパク質の全部に満たない、アミノ酸残基を含み得る。従って、１２位は、本明細書において、ＲＡＳアミノ酸配列の特定の例における対応する残基の実際の位置が異なる場合があるという理解の下で、ＷＴ全長ＲＡＳタンパク質（即ち、配列番号９～１２のいずれか１つ）を参照して定義される。位置が配列番号９～１２のいずれか１つで定義されるとおりである場合、用語「Ｇ１２」は、配列番号９～１２のいずれか１つの１２位に通常存在するグリシンを指し、「Ｇ１２Ｖ」は、配列番号９～１２のいずれか１つの１２位に通常存在するグリシンはバリンにより置換されていることを示す。例えば、ＲＡＳアミノ酸配列の特定の例が、例えば、

【0022】

【化1】

【0023】

（配列番号２８）（配列番号９の連続するアミノ酸残基７～１６に対応する例示的なＷＴＫＲＡＳペプチド）である場合、「Ｇ１２Ｖ」は、たとえ配列番号３１の下線付きグリシンの実際の位置が６であるとしても、配列番号３１の下線付きグリシンのアスパラギン酸への置換を指す。Ｇ１２Ｖ突然変異を有するヒトＲＡＳアミノ酸配列を、以下、「Ｇ１２Ｖ ＲＡＳ」と称する。

【0024】

Ｇ１２Ｖ突然変異を含む全長ＲＡＳタンパク質の例を、以下の表１に示す。

【0025】

【表1】

【0026】

本発明の実施形態では、ＴＣＲは、上記のＧ１２Ｖ変異を有するＲＡＳペプチドに対する抗原特異性を有し、ここで、変異ＲＡＳペプチドは、任意の長さを有する。本発明の実施形態では、変異ＲＡＳペプチドは、本明細書に記載されるＨＬＡクラスＩ分子のいずれかに結合するのに適した任意の長さを有する。例えば、ＴＣＲは、Ｇ１２Ｖ変異を有するＲＡＳペプチドに対して抗原特異性を有してよく、ＲＡＳペプチドは、約９ないし約１０アミノ酸残基の長さを有する。変異ＲＡＳペプチドは、Ｇ１２Ｖ変異を含む変異ＲＡＳタンパク質の任意の連続したアミノ酸残基を含んでもよい。本発明の実施形態では、ＴＣＲは、Ｇ１２Ｖ変異を有するＲＡＳペプチドに対して抗原特異性を有してよく、変異ＲＡＳペプチドは、約９アミノ酸残基又は約１０アミノ酸残基の長さを有する。本発明のＧ１２Ｖ ＴＣＲによって認識され得るＧ１２Ｖを有する特異的ペプチドの例は、例えば２４－ｍｅｒ ＭＴＥＹＫＬＶＶＶＧＡＶＧＶＧＫＳＡＬＴＩＱＬＩ（配列番号３０）内の９－ｍｅｒ ＡＶＧＶＧＫＳＡＬ（配列番号２９）で、そのうち配列番号２６及び２７はそれぞれＷＴバージョンのぺプチドである。本発明の実施形態では、ＴＣＲは、配列番号２９又は３０の変異したヒトＲＡＳアミノ酸配列に対する抗原特異性を有する。本発明の実施形態では、ＴＣＲは、配列番号２６又は配列番号２７の野生型ヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有さない。理論に拘束されることを望まないが、配列番号３０の２４－ｍｅｒは、例えば配列番号２９のような、より小さなセグメントで処理され提示されてもよい。

【0027】

本発明の一実施形態においては、本発明のＴＣＲは、ＨＬＡクラスＩ分子によって提示されるＧ１２ＶＲＡＳを認識することができる。これに関して、ＴＣＲは、Ｇ１２ＶＲＡＳへの結合に際して、ＨＬＡクラスＩ分子の関連内で、免疫応答を誘発し得る。本発明のＴＣＲは、ＨＬＡクラスＩ分子によって提示されるＧ１２ＶＲＡＳを認識でき、Ｇ１２ＶＲＡＳに加え、ＨＬＡクラスＩ分子に結合し得る。

【0028】

本発明の一実施形態においては、ＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡ－Ｃ分子である。ＨＬＡ－Ｃ分子は、α鎖とβ２マイクログロブリンのヘテロ二量体である。ＨＬＡ－Ｃα鎖は、ＨＬＡ－Ａ遺伝子によってコードされ得る。β２マイクログロブリンは、アルファ鎖のアルファ１、アルファ２、アルファ３ドメインに非共有結合的に結合して、ＨＬＡ－Ａ複合体を構築する。ＨＬＡ－Ａ分子は、任意のＨＬＡ－Ａ分子であってもよい。本発明の一実施形態においては、ＨＬＡクラスＩ分子は、ＨＬＡ－Ｃ０１分子である。ＨＬＡ－Ｃ０１分子は、任意のＨＬＡ－Ｃ０１分子であってもよい。ＨＬＡ－Ｃ０１分子の例としては、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０１を含み得る。

【0029】

例えば、本発明のＴＣＲは、養子細胞移入のために用いられる細胞によって発現される場合を含め、種々の利点のいずれか１以上を提供し得る。突然変異ＲＡＳはがん細胞によって発現され、健常な非がん細胞によっては発現されない。特定の理論又はメカニズムには縛られないが、本発明のＴＣＲは、健常な非がん細胞の破壊を最小化又は排除し、それにより毒性を低減しながら、がん細胞の破壊を好都合に目的とすると考えられる。更に、本発明のＴＣＲは、例えば、化学療法、手術又は放射線療法等の他のタイプの治療に応答しない突然変異ＲＡＳ陽性がんを、首尾よく好都合に治療又は予防し得る。ＲＡＳ^Ｇ１２ 変異は、多くの癌種に見られる最も一般的なホットスポット変異の一つである。例えば、ＫＲＡＳ Ｇ１２Ｖ変異は、膵臓癌及び大腸癌の患者のそれぞれ約２７％及び約９％に発現している。さらに、ＲＡＳファミリーのメンバーは、異なる癌種においてＧ１２ホットスポット変異を共有している（例えば、メラノーマにおけるＮＲＡＳ）。追加的に、本発明のＴＣＲは、親和性の高い突然変異ＲＡＳの認識を提供し、これは、操作されていない腫瘍細胞（例えば、インターフェロン（ＩＦＮ）γで処理されていない、突然変異ＲＡＳ及びＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２の一方若しくは両方をコードするベクターでトランスフェクションされていない、Ｇ１２Ｖ突然変異を有するＲＡＳペプチドでパルスされていない、又はそれらの組合せの腫瘍細胞）を認識する能力を提供し得る。更に、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２アレルは、コーカサス及びヒスパニックの民族の概ね６％及び概ね１０％でそれぞれ発現し、合衆国におけるアジア系民族の最大約４０％で発現する。従って、本発明のＴＣＲは、他のＭＨＣ分子によって提示されたＲＡＳを認識するＴＣＲを用いた免疫療法に適していない場合があるＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２アレルを発現する患者を含む、免疫療法に適格ながん患者数を増加させ得る。更に、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は、ヒトアミノ酸配列を含み、これは、例えば、マウスアミノ酸配列を含むＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質と比較して、ヒト免疫系による拒絶のリスクを低減し得る。

【0030】

本明細書で用いられる場合、語句「抗原特異性」は、ＴＣＲが高いアビディティで突然変異ＲＡＳに特異的に結合し得、免疫学的に認識し得ることを意味する。例えば、（ａ）低濃度の突然変異ＲＡＳペプチド（例えば、約０．０５ｎｇ／ｍＬ～約１０ｎｇ／ｍＬ、１ｎｇ／ｍＬ、２ｎｇ／ｍＬ、５ｎｇ／ｍＬ、８ｎｇ／ｍＬ、１０ｎｇ／ｍＬ、又は前記値の任意の２つによって定義される範囲）でパルスした抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、又は（ｂ）標的細胞が突然変異ＲＡＳを発現するよう、突然変異ＲＡＳをコードするヌクレオチド配列が導入されている抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、との共培養に際して、ＴＣＲを発現する約１×１０^４～約１×１０^５のＴ細胞が、少なくとも約２００ｐｇ／ｍＬ以上（例えば、２００ｐｇ／ｍＬ以上、３００ｐｇ／ｍＬ以上、４００ｐｇ／ｍＬ以上、５００ｐｇ／ｍＬ以上、６００ｐｇ／ｍＬ以上、７００ｐｇ／ｍＬ以上、１０００ｐｇ／ｍＬ以上、５，０００ｐｇ／ｍＬ以上、７，０００ｐｇ／ｍＬ以上、１０，０００ｐｇ／ｍＬ以上、２０，０００ｐｇ／ｍＬ以上、又は前記値の任意の２つによって定義される範囲）のＩＦＮ－γを分泌する場合、ＴＣＲは突然変異ＲＡＳに対して「抗原特異性」を有すると考えられ得る。本発明のＴＣＲを発現する細胞はまた、より高濃度の突然変異ＲＡＳペプチドでパルスした抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞との共培養に際しても、ＩＦＮ－γを分泌し得る。ＨＬＡクラスＩ分子は、本明細書に記載のＨＬＡクラスＩ分子のいずれであってもよい（例えば、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２分子）。

【0031】

代替的に又は追加的に、（ａ）低濃度の突然変異ＲＡＳペプチドでパルスした抗原陰性ＨＬＡ－クラスＩ分子陽性標的細胞、又は（ｂ）標的細胞が、突然変異ＲＡＳを発現するよう、突然変異ＲＡＳをコードするヌクレオチド配列が導入されている抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、との共培養に際して、ＴＣＲを発現するＴ細胞が、ネガティブコントロールによって発現されるＩＦＮ－γの量と比べて少なくとも２倍の多さのＩＦＮ－γを分泌する場合、ＴＣＲはＧ１２ＶＲＡＳに対して「抗原特異性」を有すると考えられ得る。ネガティブコントロールは、例えば、（ｉ）（ａ）同じ濃度の関係性のないペプチド（例えば、突然変異ＲＡＳペプチドとは異なる配列を含む幾つかの他のペプチド）でパルスした抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、若しくは（ｂ）標的細胞が関係性のないペプチドを発現するよう、関係性のないペプチドをコードするヌクレオチド配列が導入されている抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、と共培養された、ＴＣＲを発現するＴ細胞、又は（ｉｉ）（ａ）同じ濃度の突然変異ＲＡＳペプチドでパルスされた抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、若しくは（ｂ）標的細胞が突然変異ＲＡＳを発現するよう、突然変異Ｇ１２ＶＲＡＳをコードするヌクレオチド配列が導入されている抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、と共培養された、非形質導入Ｔ細胞（例えば、ＴＣＲを発現しないＰＢＭＣ由来）であってもよい。ネガティブコントロールの標的細胞によって発現されるＨＬＡクラスＩ分子は、試験されるＴ細胞と共培養される標的細胞によって発現されるＨＬＡクラスＩ分子と同じである。ＨＬＡクラスＩ分子は、本明細書に記載のＨＬＡクラスＩ分子のいずれであってもよい（例えば、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２分子）。ＩＦＮ－γ分泌は、例えば、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）等の当該技術分野において公知の方法によって測定され得る。

【0032】

代替的に又は追加的に、（ａ）低濃度の突然変異ＲＡＳペプチドでパルスされた抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、又は（ｂ）標的細胞が突然変異ＲＡＳを発現するよう、突然変異ＲＡＳをコードするヌクレオチド配列が導入されている抗原陰性ＨＬＡクラスＩ分子陽性標的細胞、との共培養に際して、ＩＦＮ－γを分泌するネガティブコントロールＴ細胞の数と比べて、少なくとも２倍の多さの数の、ＴＣＲを発現するＴ細胞がＩＦＮ－γを分泌する場合、ＴＣＲは突然変異ＲＡＳに対して「抗原特異性」を有すると考えられ得る。ＨＬＡクラスＩ分子、ペプチドの濃度及びネガティブコントロールは、本発明の他の態様に関して明細書に記載されるとおりであってもよい。ＩＦＮ－γを分泌する細胞の数は、例えば、例えば、ＥＬＩＳＰＯＴ等の当該技術分野において公知の方法によって測定され得る。

【0033】

代替的に又は追加的に、ＴＣＲを発現するＴ細胞が、例えば、突然変異ＲＡＳを発現する標的細胞で刺激後にフローサイトメトリーによって測定された、１以上のＴ細胞活性化マーカーの発現を上方制御する場合、ＴＣＲは突然変異ＲＡＳに対して「抗原特異性」を有すると考えられ得る。Ｔ細胞活性化マーカーの例としては、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ１０７ａ、ＣＤ６９、及び抗原刺激に際して上方制御されるサイトカイン（例えば、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン（ＩＬ）－２等）が挙げられる。

【0034】

本発明の一実施形態は、ＴＣＲのアルファ（α）鎖、ＴＣＲのベータ（β）鎖、ＴＣＲのガンマ（γ）鎖、ＴＣＲのデルタ（δ）鎖又はそれらの組合せ等の、２のポリペプチド（即ち、ポリペプチド鎖）を含むＴＣＲを提供する。本発明のＴＣＲのポリペプチドは、ＴＣＲが突然変異ＲＡＳに対して抗原特異性を有するという条件で、任意のアミノ酸配列を含み得る。一部の実施態様では、ＴＣＲは天然には発生しない。

【0035】

本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは２のポリペプチド鎖を含み、そのそれぞれが、ＴＣＲの相補性決定領域（ＣＤＲ）１、ＣＤＲ２、及びＣＤＲ３を含む可変領域を含む。本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは、配列番号１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（α鎖のＣＤＲ２）、及び配列番号３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（α鎖のＣＤＲ３）を含む第一のポリペプチド鎖、並びに配列番号４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（β鎖のＣＤＲ１）、配列番号５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（β鎖のＣＤＲ２）、及び配列番号６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３（β鎖のＣＤＲ３）を含む第二のポリペプチド鎖を含む。

【0036】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲは、配列番号３１のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号３２のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（α鎖のＣＤＲ２）、及び配列番号．のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む第１のポリペプチド鎖を含んでおり、配列番号３３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（β鎖のＣＤＲ３）、及び配列番号２９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（α鎖のＣＤＲ３）を含む第２のポリペプチド鎖を含む。３３（α鎖のＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号３４（β鎖のＣＤＲ１）、配列番号３５（β鎖のＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２、及び配列番号３６（β鎖のＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む第２のポリペプチド鎖である。

【0037】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲは、配列番号６４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号６５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２（α鎖のＣＤＲ２）、及び配列番号．のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む第１のポリペプチド鎖と、配列番号６６のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１（β鎖のＣＤＲ２）、ＣＤＲ３を含む第２のポリペプチド鎖から構成される。６６（α鎖のＣＤＲ３）、及び配列番号６７（β鎖のＣＤＲ１）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ１、配列番号６８（β鎖のＣＤＲ２）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ２及び配列番号６９（β鎖のＣＤＲ３）のアミノ酸配列を含むＣＤＲ３を含む第２のポリペプチド鎖を提供する。

【0038】

これに関して、本発明のＴＣＲは、配列番号１～６、３１～３６及び６４～６９のいずれかから選択されるアミノ酸配列のいずれか１以上を含み得る。本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは、（ａ）配列番号１～３の全て、（ｂ）配列番号４～６の全て、（ｃ）全て全て（ｃ）配列番号３１～３３の全て、（ｄ）配列番号３４～３６の全て、（ｅ）配列番号の全てのアミノ酸配列。６４～６６、（ｆ）配列番号６７～６９の全て、（ｇ）配列番号１～６の全て、（ｈ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｉ）配列番号６４～６９の全てである。特に好ましい実施形態では、ＴＣＲは、以下のアミノ酸配列を含む。（ｉ）配列番号１～６の全て、（ｉｉ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｉｉｉ）配列番号６４～６９の全てのアミノ酸配列を含む。

【0039】

配列番号３、６、３３、３６、６６、及び６９のいずれか１以上のＣＤＲ３、すなわちα鎖もしくはβ鎖又はその両方のＣＤＲは、ＣＤＲの最初のアミノ酸のすぐＮ末端側のシステイン又は最終アミノ酸のすぐＣ末端側のフェニルアラニン又はその両方を更に含んでもよい。

【0040】

本発明の実施形態において、ＴＣＲは、上記で規定されたＣＤＲを含むＴＣＲの可変領域のアミノ酸配列を含む。ＴＣＲは、ヒト可変領域、例えば、ヒトα鎖可変領域及びヒトβ鎖可変領域を含むことができる。この点に関して、ＴＣＲは、例えば、以下のアミノ酸配列を含むことができる。配列番号７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９０（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号８（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９８（Ｎ 末端の信号ペプチドの可変領域）：配列番号３７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号３８（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９３（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７０（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号１３２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号７１（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号１３３（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号４７（ＩＭＧＴで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９４（ＳｉｇｎａｌＰで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号４８（ＩＭＧＴで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９５（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナル配列を有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号４９（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９６（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号４９（Ｎ末端シグナルペプタイドの可変領域）；配列番号５０（ＩＭＧＴで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９７（ＳｉｇｎａｌＰで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７２（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号８８（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号７３（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号８９（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナル配列を有さない４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７及び８の両方；配列番号７及び９１の両方；配列番号９０及び８の両方；配列番号９０及び９１の両方；配列番号３７ 及び３８；配列番号３７及び９３の両方；配列番号９２及び３８の両方；配列番号９２及び９３の両方；配列番号７０及び７１の両方；配列番号７０及び１３３の両方；配列番号１３２及び７１の両方；配列番号１３２及び１３３の両方；配列番号４７及び４８の両方；配列番号９４及び９５の両方；配列番号４９及び５０の両方；配列番号９６及び９７の両方；配列番号７２及び７３の両方；又は配列番号８８及び８９の両方である。好ましくは、ＴＣＲは、（ｉ）配列番号７及び８の両方；（ｉｉ）配列番号９０及び９１の両方；（ｉｉｉ）配列番号３７及び３８の両方；（ｉｖ）配列番号９２及び９３の両方；（ｖ）配列番号７０及び７１の両方；（ｖｉ）配列番号１３２及び１３３の両方；（ｖｉｉ）配列番号４７及び４８の両方；（ｖｉｉｉ）配列番号９４及び９５の両方；（ｉｘ）配列番号４９及び５０の両方；（ｘ）配列番号９６及び９７の両方；（ｘｉ）配列番号７２及び７３の両方；あるいは（ｘｉｉ）配列番号８８及び８９の両方を含む。

【0041】

本発明のＴＣＲは、α鎖定常領域及びβ鎖定常領域を更に含み得る。定常領域は、例えば、ヒト又はマウス等の任意の好適な種に由来し得る。本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは、マウスα鎖及びβ鎖定常領域又はヒトα鎖及びβ鎖定常領域を更に含む。本明細書で用いられる場合、用語「マウス」又は「ヒト」は、本明細書に記載のＴＣＲ又はＴＣＲの任意の構成要素（例えば、ＣＤＲ、可変領域、定常領域、α鎖、及び／又はβ鎖）に言及する場合は、それぞれマウス又はヒトに由来するＴＣＲ（又はその構成要素）、即ち、それぞれマウスＴ細胞又はヒトＴ細胞起源であるか、又はかつてそれに発現したＴＣＲ（又はその構成要素）を意味する。

【0042】

本発明の実施形態は、ヒト可変領域とマウス定常領域とを含むキメラＴＣＲを提供し、ここで、ＴＣＲは、ＨＬＡクラスＩ分子によって提示される変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有する。マウス定常領域は、任意の１つ又は複数の利点を提供し得る。例えば、マウス定常領域は、本発明ＴＣＲが導入された宿主細胞の内在性ＴＣＲとのミスペアを減少させることができる。代替的又は追加的に、マウス定常領域は、ヒト定常領域を有する同じＴＣＲと比較して、本発明ＴＣＲの発現を増加させることができる。キメラＴＣＲは、配列番号１９（野生型（ＷＴ）マウスα鎖定常領域）、配列番号２０（ＷＴマウスβ鎖定常領域）、又は配列番号１９及び２０の両方のアミノ酸配列から構成されてもよい。好ましくは、本発明ＴＣＲは、配列番号１９及び２０の両方のアミノ酸配列を含む。キメラＴＣＲは、本発明の他の側面に関して本明細書に記載されるようなＣＤＲ領域のいずれかと組み合わせて、本明細書に記載されるマウス定常領域のいずれかを含んでいてもよい。この点に関して、ＴＣＲは、例えば、以下のアミノ酸配列から構成されてもよい。（ａ）配列番号１～３及び１９の全て；（ｂ）配列番号４～６及び２０の全て；（ｃ）配列番号３１～３３及び１９の全て；（ｄ）配列番号３４～３６及び２０の全て；（ｅ）配列番号１～３の全て；。６４～６６及び１９；（ｆ）配列番号６７～６９及び２０の全て；（ｇ）配列番号１～６の全て及び１９～２０；（ｈ）配列番号３１～３６及び１９～２０の全て；又は配列番号６４～６９の全てのものである。本発明の別の実施形態では、キメラＴＣＲは、例えば、本発明の他の態様に関して本明細書に記載された可変領域のいずれかと組み合わせて、本明細書に記載されたマウス定常領域のいずれかを含んでいてもよい。この点に関して、ＴＣＲは、以下のアミノ酸配列から構成されてもよい。（ｉ）配列番号７及び１９の両方；（ｉｉ）配列番号９０及び１９の両方；（ｉｉｉ）配列番号８及び２０の両方；（ｉｖ）配列番号９１及び２０の両方；（ｖ）配列番号７及び１９の両方；（ｉｖ）配列番号３７及び１９の両方；（ｖｉ）配列番号９２及び１９の両方；（ｖｉｉ）配列番号３８及び２０の両方；（ｖｉｉｉ）配列番号９３及び２０の両方；（ｉｘ）配列番号７０及び１９の両方；（ｘ）配列番号１３２及び１９の両方；（ｘｉ）配列番号７１及び２０の両方；（ｘｉｉ）配列番号１３３及び２０の両方；（ｘｉｉｉ）配列番号７～８及び１９～２０の全て；（ｘｉｖ）配列番号９０～９１及び１９～２０の全て；（ｘｖ）配列番号３７～３８及び１９～２０の全て；（ｘｖｉ）配列番号９２～９３及び１９～２０の全て；又は（ｘｖｉｉ）配列番号７０～７１及び１９～２０の全て；（ｘｖｉｉｉ）配列番号１３２～１３３及び１９～２０の全て；を含み得る。

【0043】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲは、以下のアミノ酸配列を含む。配列番号２３（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１０２（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号２４（ＷＴ マウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号２４（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１０３（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号４２（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号３９（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１０８（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）、配列番号４２（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号４０（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１０９（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号７０（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、配列番号７８（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１３８（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、配列番号７９（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号７９（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１３９（ＷＴマウス定常領域及びＷＴ Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号５１（ＷＴマウス定常領域及び変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、配列番号５１（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１１４（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号５２（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１１５（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号５３（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１２０（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号２０（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのα鎖）、配列番号５４（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１２１（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号８０（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号１４６（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖）、配列番号８１（ＷＴマウス定常領域を有し、ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号１４７（ＷＴマウス定常領域を有し、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、配列番号２３及び２４の両方、配列番号２３及び１０３の両方、配列番号１０２及び２４の両方、配列番号１０２及び１０３の両方、配列番号２３及び２４の両方の配列番号３９及び４０の両方、配列番号３９及び１０９の両方、配列番号１０８及び４０の両方、配列番号１０８及び１０９の両方、配列番号７８及び７９の両方、配列番号７８及び１３９の両方、配列番号１３８及び７９の両方、配列番号１３９の両方、配列番号１３８及び１３９の両方、配列番号５１及び５２の両方、配列番号１１４及び１１５の両方、配列番号５３～５４の両方、配列番号１２０及び１２１の両方、配列番号８０及び８１の両方、又は配列番号１４６及び１４７の両方を含む。

【0044】

本発明の実施形態では、ＴＣＲは、可変領域及び定常領域を含むα鎖と、可変領域及び定常領域を含むβ鎖を含む。この点に関して、ＴＣＲは例えば、（ａ）配列番号２１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖を含み、ここで、（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｂ）配列番号１００（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖を含み、ここで（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｃ）配列番号２２（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含むβ鎖、ここで配列番号２２の１９０位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｄ）配列番号１０１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）であり、ここで配列番号１０１の１９０位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｆ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）であり、ここで（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｇ）配列番号４２のアミノ酸配列を含むβ鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号４２の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｈ）配列番号１０７のアミノ酸配列を含むβ鎖、（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで、配列番号４２の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｈ）配列番号１０７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１０７の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（Ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むα鎖（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、ここで（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｊ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）であり、ここで（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｋ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むβ鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号７５の１８７位におけるＸは、Ｓｅｒ又はＣｙｓである；（ｉｖ）配列番号７５の１８８位におけるＹは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｌｕ、Ｐｈｅ又はＰｒｏｐであり、（ｇ）は配列番号７５はＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｌ）配列番号１３７の１８７位のＸは、野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖である。１３７はＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｍ）（ａ）及び（ｃ）の両方；（ｎ）（ｂ）及び（ｄ）の両方；（ｏ）（ｅ）及び（ｇ）の両方；（ｐ）（ｆ）及び（ｈ）の両方；（ｑ）（ｉ）及び（ｋ）の両方；（ｒ）（ｊ）及び（ｌ）の両方；（ｓ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むα鎖（ＩＭＧＴにより予測されたＮ末端シグナルペプチドなしの４３９１ＴＣＲのα鎖）；ここで、（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号５５の２２７位はＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｔ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９１ ＴＣＲのα鎖）であり、ここで（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｕ）配列番号５６（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号５６の１６８位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｖ）配列番号１１３（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含むβ鎖であり、ここで配列番号１１３の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｗ）配列番号５７（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３８５ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｘ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３８５ ＴＣＲのα鎖）であって、ここで（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｙ）配列番号５８のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）であって、ここで配列番号５８の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｚ）配列番号１１９のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで、配列番号１１９の１７８位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ａａ）配列番号７６（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖であり、ここで。（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｂｂ）配列番号１４４のアミノ酸配列（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで、（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１４４の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｃｃ）配列番号７７（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの；（ｄｄ）配列番号１４５（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、ここで配列番号１４５の１６６位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｅｅ）（ｓ）及び（ｕ）両方；（ｆｆ）（ｔ）及び（ｖ）両方；（ｇｇ）（ｗ）及び（ｙ）両方；（ｈｈ）（ｘ））及び（ｚ）両方；（ｈｈ）（ａａ）及び（ｃｃ）両方；又は（ｉｉ）（ｂｂ）及び（ｄｄ）両方を含む。本発明の実施形態では、配列番号２１を含むＴＣＲは、配列番号２３（４３９１ＴＣＲの非置換α鎖）を含んでいない。本発明の実施形態において、配列番号１００を含むＴＣＲは、配列番号１０２（４３９１ＴＣＲの非置換α鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号２２を構成するＴＣＲは、配列番号２４（４３９１ＴＣＲの非置換β鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号１０１を含むＴＣＲは、配列番号１０３（４３９１ＴＣＲの非置換β鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号４１を含むＴＣＲは、配列番号３９（４３８５ＴＣＲの非置換α鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号１０６を構成するＴＣＲは、配列番号１０８（４３８５ＴＣＲの非置換α鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号４２を含むＴＣＲは、配列番号４０（４３８５ＴＣＲの非置換β鎖）を含まない。本発明の実施形態において、配列番号１０７を含むＴＣＲは、配列番号１０９（４３８５ＴＣＲの非置換β鎖）を
含まない。本発明の実施形態において、配列番号７４を含むＴＣＲは、配列番号７８（４３９４ＴＣＲの非置換α鎖）を含まない。本発明の実施形態では、配列番号１３６を含むＴＣＲは、配列番号１３８（４３９４ＴＣＲの非置換α鎖）を含まない。本発明の実施形態では、配列番号７５を含むＴＣＲは、配列番号７９（４３９４ＴＣＲの非置換β鎖）を含まない。本発明の実施形態では、配列番号１３７を含むＴＣＲは、配列番号１３９（４３９４ＴＣＲの非置換β鎖）を含まない。

【0045】

本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは置換定常領域を含む。これに関して、ＴＣＲは例えば、α鎖及びβ鎖の一方又は両方の定常領域に１、２、３、又は４アミノ酸の置換を含む、本明細書に記載のＴＣＲのいずれかのアミノ酸配列を含み得る。好ましくは、ＴＣＲは、α鎖及びβ鎖の一方又は両方のマウス定常領域において１、２、３、又は４アミノ酸の置換を含むマウス定常領域を含む。特に好ましい実施形態においては、ＴＣＲは、α鎖のマウス定常領域に１、２、３、又は４アミノ酸の置換及びβ鎖のマウス定常領域に１のアミノ酸置換を含むマウス定常領域を含む。いくつかの実施形態においては、置換定常領域を含むＴＣＲは、非置換（野生型）定常領域を含む親ＴＣＲと比較して、好都合に、突然変異ＲＡＳ^＋標的の認識の増大、宿主細胞による発現の増大、内因性ＴＣＲとの誤対合の減少、及び抗腫瘍活性の増大のうちの１以上を提供する。一般に、ＴＣＲα鎖及びβ鎖のマウス定常領域の置換アミノ酸配列、それぞれ配列番号１７及び１８は、非置換マウス定常領域アミノ酸配列の全て又は一部に対応し、配列番号１７は、配列番号１９と比較した場合に、１、２、３、又は４アミノ酸の置換を有し、配列番号１８は、配列番号２０と比較した場合に、１のアミノ酸置換を有する。これに関して、本発明の一実施形態は、（ａ）配列番号１７（α鎖の定常領域）であって；（ｉ）４８位のＸが、Ｔｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）１１２位のＸが、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）１１４位のＸが、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）１１５位のＸが、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである、配列番号１７；（ｂ）配列番号１８（β鎖の定常領域）であって、５７位のＸが、Ｓｅｒ又はＣｙｓである、配列番号１８；又は（ｃ）配列番号１７及び１８の両方、のアミノ酸配列を含む、ＴＣＲを提供する。本発明の一実施形態においては、配列番号１７を含むＴＣＲは、配列番号１９（α鎖の非置換マウス定常領域）を含まない。本発明の一実施形態においては、配列番号１８を含むＴＣＲは、配列番号２０（β鎖の非置換マウス定常領域）を含まない。

【0046】

本明細書に記載されるマウスα定常領域のいずれかの第１アミノ酸は、配列番号１７、１９及び９８に提供されるようなＮとは異なっていてもよい。例えば、本明細書に記載の任意のＴＣＲ構築物、ポリペプチド、タンパク質等において、この第１アミノ酸は、マウスα定常領域のいずれかがその位置に異なるアミノ酸を有することができるように、分割コドン（可変領域と定常領域の両方からのヌクレオチドを有する）によってコードされ得る。例えば、配列番号２１、２３、３９、４１、５１、５３、５５、５７、７４、７８、１００、１０２、１０４、１０６、１０８、１１０、１２６、１３４、１３６、１３８又は１４０はそれぞれ、定常領域の最初のアミノ酸に対応する位置にＨを有していてもよい。同様に、本明細書に記載のマウスβ定常領域のいずれかの第１アミノ酸は、配列番号１８、２０及び９９に提供されるＥと異なっていてもよく、例えば、この第１アミノ酸は分割コドンによりコードされ得る。

【0047】

本発明の一実施形態においては、置換定常領域は、α鎖及びβ鎖の一方又は両方の定常領域におけるシステイン置換を含み、システイン置換ＴＣＲを提供する。α鎖とβ鎖の対向するシステインは、非置換マウス定常領域を含むＴＣＲには存在しない、置換ＴＣＲのα鎖及びβ鎖の定常領域を相互に連結するジスルフィド結合を提供する。これに関して、ＴＣＲは例えば、配列番号１９の４８位のネイティブのＴｈｒ（Ｔｈｒ４８）及び配列番号２０の５７位のネイティブのＳｅｒ（Ｓｅｒ５７）の一方又は両方がＣｙｓで置換されてもよいシステイン置換ＴＣＲであってもよい。好ましくは、配列番号１９のネイティブのＴｈｒ４８及び配列番号２０のネイティブのＳｅｒ５７の両方がＣｙｓで置換される。システイン置換ＴＣＲ定常領域配列の例を表２に示す。本発明の一実施形態においては、システイン置換ＴＣＲは、（ｉ）配列番号１７、（ｉｉ）配列番号１８、又は（ｉｉｉ）配列番号１７及び１８の両方を含み、配列番号１７及び１８の両方は、表２に定義されるとおりである。本発明のシステイン置換ＴＣＲは、本明細書に記載のＣＤＲのいずれか又は可変領域に加えて置換定常領域を含み得る。

【0048】

本発明の一実施形態においては、システイン置換キメラＴＣＲは、全長α鎖及び全長β鎖を含む。システイン置換キメラＴＣＲのアルファ鎖及びベータ鎖の配列の例を表２に示す。本発明の一実施形態においては、ＴＣＲは、（ｉ）配列番号２１、（ｉｉ）配列番号２２、（ｉｉｉ）配列番号１００；（ｉｖ）配列番号１０１；（ｖ）配列番号４１；（ｖｉ）配列番号４２；（ｖｉｉ）配列番号１０６；（ｉ）配列番号７４、（ｉｉ）配列番号７５、（ｉｉｉ）配列番号１３６、（ｉｖ）配列番号１３７；（ｖｉｉｉ）配列番号１０７、（ｉｘ）配列番号２１及び２２の両方、（ｘ）配列番号１００１０１の両方、（ｘｉ）配列番号４１及び４２の両方；（ｘｉｉ）配列番号１０６及び１０７の両方；（ｘｉ）配列番号７４及び７５の両方；（ｘｉ）配列番号１３６及び１３７の両方；（ｘｉｉｉ）配列番号５５；（ｘｉｖ）配列番号５６；（ｘｖ）配列番号．１１２；（ｘｖｉ）配列番号１１３；（ｘｖｉｉ）配列番号５７；（ｘｖｉｉｉ）配列番号５８；（ｘｉｘ）配列番号１１８；（ｘｘ）配列番号１１９；（ｘｉｉｉ）配列番号７６；（ｘｉｖ）配列番号７７；（ｘｖ）配列番号１４４；（ｘｖｉ）配列番号１４５；（ｘｘｉ）配列番号５５及び５６の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号１１２及び１１３の両方；（ｘｘｉｉｉ）配列番号の両方。５７及び５８の両方；（ｘｘｉｖ）配列番号１１８及び１１９の両方；（ｘｘｉ）配列番号７６及び７７の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号１４４及び１４５の両方；ここで配列番号２１、２２、４１、４２、５５～５８、７４～７７、１００、１０１、１０６、１０７、１１２、１１３、１１８、１１９、１３６、１３７、１４４及び１４５は全て表２において定義されるとおりである。

【0049】

【表2-1】

【0050】

【表2-2】

【0051】

【表2-3】

【0052】

【表2-4】

【0053】

本発明の一実施形態においては、置換されたアミノ酸配列は、α鎖及びβ鎖の一方又は両方の定常領域の膜貫通（ＴＭ）ドメインにおける１、２、又は３アミノ酸の、疎水性アミノ酸による置換を含み、疎水性アミノ酸置換ＴＣＲを提供する（本明細書中、「ＬＶＬ改変ＴＣＲ」とも呼ばれる）。ＴＣＲのＴＭドメインにおける疎水性アミノ酸置換は、ＴＭドメイン中に疎水性アミノ酸置換を欠くＴＣＲと比較して、ＴＣＲのＴＭドメインの疎水性を増大させ得る。これに関して、ＴＣＲはＬＶＬ改変ＴＣＲであり、配列番号１９のネイティブのＳｅｒ１１２、Ｍｅｔ１１４、及びＧｌｙ１１５のうちの１つ、２つ、又は３つが独立して、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐで；好ましくは、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、又はＶａｌで置換され得る。好ましくは、配列番号１９のネイティブのＳｅｒ１１２、Ｍｅｔ１１４、及びＧｌｙ１１５の３つ全てが、独立して、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐで；好ましくはＬｅｕ、Ｉｌｅ、又はＶａｌで置換され得、及び配列番号２０のネイティブのＳｅｒ５７がＣｙｓで置換される。本発明の一実施形態においては、ＬＶＬ改変ＴＣＲは、（ｉ）配列番号１７、（ｉｉ）配列番号１８、又は（ｉｉｉ）配列番号１７及び１８の両方を含み、配列番号１７及び１８の両方は、表３に定義されるとおりである。本発明のＬＶＬ改変ＴＣＲは、本明細書に記載のＣＤＲ又は可変領域のいずれかに加えて、置換定常領域を含み得る。

【0054】

本発明の実施形態では、ＬＶＬ修飾ＴＣＲは、全長アルファ鎖及び全長ベータ鎖を含んでいる。ＬＶＬ修飾ＴＣＲアルファ鎖及びベータ鎖の配列の例は、表３に記載されている。本発明の実施形態では、ＴＣＲは、（ｉ）配列番号２１、（ｉｉ）配列番号２２、（ｉｉｉ）配列番号１００、（ｉｖ）配列番号１０１、（ｖ）配列番号．４１、（ｖｉ）配列番号４２、（ｖｉｉ）配列番号１０６、（ｖｉｉｉ）配列番号１０７、（ｉ）配列番号７４、（ｉｉ）配列番号７５、（ｉｉｉ）配列番号１３６、（ｉｖ）配列番号．１３７；（ｉｘ）配列番号２１及び２２の両方；（ｘ）配列番号１００及び１０１の両方；（ｘｉ）配列番号４１及び４２の両方；（ｘｉｉ）配列番号１０６及び１０７の両方；（ｘｉ）配列番号７４及び７５の両方；（ｘｉ）配列番号１３６及び１３７の両方；（ｘｉｉｉ）配列番号５５；（ｘｉｖ）配列番号５６；（ｘｖ）配列番号．１１２；（ｘｖｉ）配列番号１１３；（ｘｖｉｉ）配列番号５７；（ｘｖｉｉｉ）配列番号５８；（ｘｉｘ）配列番号１１８；（ｘｘ）配列番号１１９；（ｘｉｉｉ）配列番号７６；（ｘｉｖ）配列番号７７；（ｘｖ）配列番号１４４；（ｘｖｉ）配列番号１４５；（ｘｘｉ）配列番号５５及び５６の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号１１２及び１１３の両方；（ｘｘｉｉｉ）配列番号の両方。５７及び５８の両方；（ｘｘｉｖ）配列番号１１８及び１１９の両方；（ｘｘｉ）配列番号７６及び７７の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号１４４及び１４５の両方；ここで配列番号２１、２２、４１、４２、５５～５８、７４～７７、１００、１０１、１０６、１０７、１１２、１１３、１１８、１１９、１３６、１３７、１４４及び１４５は全て表３において定義されるとおりである。

【0055】

【表3-1】

【0056】

【表3-2】

【0057】

【表3-3】

【0058】

【表3-4】

【0059】

【表3-5】

【0060】

【表3-6】

【0061】

【表3-7】

【0062】

本発明の実施形態では、置換アミノ酸配列は、α鎖及びβ鎖の一方又は両方の定常領域におけるシステイン置換と、α鎖及びβ鎖の一方又は両方の定常領域の膜貫通（ＴＭ）ドメインにおける１、２又は３のアミノ酸の疎水性アミノ酸による置換（複数可）とを含む（以下、「システイン置換ＬＶＬ－ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＴＣＲ」としても称される）。この点に関して、ＴＣＲは、配列番号１９のネイティブなＴｈｒ４８がＣｙｓで置換され；配列番号１９のネイティブなＳｅｒ１１２、Ｍｅｔ１１４、及びＧｌｙ１１５の１、２、又は３が、独立して、Ｃｙｓで置換された、システイン置換、ＬＶＬ－改変、キメラＴＣＲである。１９は、独立して、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐで置換され；好ましくはＬｅｕ、Ｉｌｅ、又はＶａｌで置換され；及び配列番号２０のネイティブＳｅｒ５７はＣｙｓで置換される。好ましくは、配列番号１９のネイティブＳｅｒ１１２、Ｍｅｔ１１４、及びＧｌｙ１１５の３つ全てが、独立して、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐで置換されていてもよく；好ましくは、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、又はＶａｌで置換されていてもよい。本発明の実施形態では、システイン置換されたＬＶＬ修飾ＴＣＲは、（ｉ）配列番号１７、（ｉｉ）配列番号１８、又は（ｉｉｉ）配列番号１７及び１８の両方を含み、ここで配列番号１７及び１８の両方は表４で定義されるとおりである。本発明のシステイン置換されたＬＶＬ修飾ＴＣＲは、本明細書に記載のＣＤＲ又は可変領域のいずれかに加えて、置換された定常領域を含んでもよい。

【0063】

実施形態では、システイン置換されたＬＶＬ修飾ＴＣＲは、全長α鎖及び全長β鎖を含む。本発明の実施形態では、システイン置換されたＬＶＬ修飾ＴＣＲは、（ｉ）配列番号２１、（ｉｉ）配列番号２２、（ｉｉｉ）配列番号１００、（ｉｖ）配列番号１０１；（ｖ）配列番号４１，（ｖｉ）配列番号４２；（ｖｉｉ）配列番号１０６；（ｖｉｉｉ）配列番号１０７；（ｉ）配列番号７４，（ｉｉ）配列番号７５，（ｉｉｉ）配列番号１３６；（ｉｖ）配列番号１３７；（ｉｘ）配列番号２１及び２２の両方；（ｘ）配列番号１００及び１０１の両方；（ｘｉ）配列番号４１及び４２の両方；（ｘｉｉ）配列番号１０６及び１０７の両方；（ｘｉ）配列番号７４及び７５の両方；（ｘｉ）配列番号１３６及び１３７の両方；（（ｘｉｉｉ）配列番号５５；（ｘｉｖ）配列番号５６；（ｘｖ）配列番号１１２；（ｘｖｉ）配列番号１１３；（ｘｖｉｉ）配列番号５７；（ｘｖｉｉｉ）配列番号５８；（ｘｉｘ）配列番号１１８；（ｘｘ）配列番号１１９；（ｘｉｉｉ）配列番号．７６；（ｘｉｖ）配列番号７７；（ｘｖ）配列番号１４４；（ｘｖｉ）配列番号１４５；（ｘｘｉ）配列番号５５及び５６の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号の両方：１１２及び１１３の両方；（ｘｘｉｉｉ）配列番号５７及び５８の両方；（ｘｘｉｖ）配列番号１１８及び１１９の両方、（ｘｘｉ）配列番号７６及び７７の両方；（ｘｘｉｉ）配列番号１４４及び１４５の両方；ここで配列番号２１、２２、４１、４２、５５～５８、７４～７７、１００、１０１、１０６、１０７、１１２、１１３、１１８、１１９、１３６、１３７、１４４及び１４５は全て表４に定義したとおりである。

【0064】

【表4-1】

【0065】

【表4-2】

【0066】

【表4-3】

【0067】

【表4-4】

【0068】

【表4-5】

【0069】

【表4-6】

【0070】

【表4-7】

【0071】

本発明の実施形態において、システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲは、（ａ）配列番号９８（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのα鎖定常領域）；（ｂ）配列番号９９（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのβ鎖定常領域）；（ｃ）配列番号１２４（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９１ＴＣＲのα鎖）；（ｄ）配列番号１２５（変異型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９１ＴＣＲのβ鎖）；（ｅ）配列番号１２８（ＩＭＧＴによって予測されたＮ末端シグナル配列を有しないシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９１ＴＣＲのα鎖）；（ｆ）配列番号１２９（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３９１ ＴＣＲのβ鎖）；（ｇ）配列番号１１６（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３９１ ＴＣＲのα鎖）；（ｈ）配列番号１１６（配列番号．１１７（システイン置換された、ＬＶＬ修飾４３９１ ＴＣＲのβ鎖、ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナル配列なし）；（ｉ）配列番号１０４（システイン置換されたＬＶＬ修飾４３９１ＴＣＲのα鎖、Ｎ末端シグナル配列の変異体）；（ｊ）配列番号１０５（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換ＬＶＬ修飾４３９１ＴＣＲのβ鎖）；（ｋ）（ａ）及び（ｂ）の両方；（ｌ）（ｃ）及び（ｄ）の両方；（ｍ）（ｅ）及び（ｆ）の両方；（ｎ）（ｇ）及び（ｈ）の両方；又は、（ｏ）（ｉ）及び（ｊ）の両方。

【0072】

本発明の実施形態において、システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲは、（ａ）配列番号９８（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのα鎖定常領域）；（ｂ）配列番号９９（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのβ鎖定常領域）；（ｃ）配列番号１２６（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのα鎖）；（ｄ）配列番号１２７（変異型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのβ鎖）；（ｅ）配列番号１３０（ＩＭＧＴによって予測されたＮ末端シグナル配列を有しないシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのα鎖）；（ｆ）配列番号１３１（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのβ鎖）；（ｇ）配列番号１２２（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのα鎖）；（ｈ）配列番号１２２（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端信号のないＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのβ鎖）。１２３（システイン置換された、ＬＶＬ修飾４３８５ ＴＣＲのβ鎖、ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナル配列なし）；（ｉ）配列番号１１０（システイン置換されたＬＶＬ修飾４３８５ＴＣＲのα鎖、Ｎ末端シグナル配列の変異体）；（ｊ）配列番号１１１（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換ＬＶＬ修飾４３８５ＴＣＲのβ鎖）；（ｋ）（ａ）及び（ｂ）の両方；（ｌ）（ｃ）及び（ｄ）の両方；（ｍ）（ｅ）及び（ｆ）の両方；（ｎ）（ｇ）及び（ｈ）の両方；又は、（ｏ）（ｉ）及び（ｊ）の両方。

【0073】

本発明の実施形態において、システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲは、（ａ）配列番号９８（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのα鎖定常領域）；（ｂ）配列番号９９（システイン置換、ＬＶＬ修飾ＴＣＲのβ鎖定常領域）；（ｃ）配列番号１３４（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのα鎖）；（ｄ）配列番号１３５（変異型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのβ鎖）；（ｅ）配列番号１４２（ＩＭＧＴによって予測されたＮ末端シグナル配列を有しないシステイン置換、ＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのα鎖）；（ｆ）配列番号１４３（システイン置換され、ＬＶＬ修飾された４３９４ ＴＣＲのα鎖。１４３（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのβ鎖）；（ｇ）配列番号１４８（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナル配列のないシステイン置換されたＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのα鎖）；（ｈ）配列番号１４９（システイン置換された、ＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのβ鎖、ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナル配列なし）；（ｉ）配列番号１４０（変異体Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換ＬＶＬ修飾４３９４ ＴＣＲのα鎖）；（ｊ）配列番号１４１（野生型Ｎ末端シグナル配列を有するシステイン置換ＬＶＬ修飾４３９４ＴＣＲのβ鎖）；（ｋ）（ａ）及び（ｂ）の両方；（ｌ）（ｃ）及び（ｄ）の両方；（ｍ）（ｅ）及び（ｆ）の両方；（ｎ）（ｇ）及び（ｈ）の両方；又は（ｏ）（ｉ）及び（ｊ）の両方。

【0074】

本発明の実施態様によって、本明細書に記載のＴＣＲのいずれかの機能的部分を含むポリペプチドも提供される。本明細書で用いられる場合、用語「ポリペプチド」は、オリゴペプチドを含み、１以上のペプチド結合によって連結した一本のアミノ酸鎖を指す。

【0075】

本発明のポリペプチドに関して、機能的部分が突然変異ＲＡＳに特異的に結合するという条件で、機能的部分はＴＣＲの一部である連続するアミノ酸を含む任意の部分であってもよい。ＴＣＲに関連して用いられる場合、用語「機能的部分」は、本発明のＴＣＲの任意の部分又はフラグメントを指し、そしてその部分又はフラグメントは、それが一部であるところのＴＣＲ（親ＴＣＲ）の生物学的活性を保持する。機能的部分は、例えば、突然変異ＲＡＳに特異的に結合する能力（例えば、ＨＬＡ－Ｃ^＊０１：０２分子の関連内で）、又は親ＴＣＲと類似する程度、同じ程度、又はより高い程度にがんを検出、治療若しくは予防する能力、を保持するＴＣＲの部分を包含する。親ＴＣＲに関連して、機能的部分は、例えば、親ＴＣＲの約１０％、約２５％、約３０％、約５０％、約６８％、約８０％、約９０％、約９５％以上を含み得る。

【0076】

機能的部分は、該部分のアミノ末端若しくはカルボキシ末端、又は両方の末端に、追加的なアミノ酸を含み得る。該追加的なアミノ酸は、親ＴＣＲのアミノ酸配列中には見られない。望ましくは、追加のアミノ酸は、機能的部分の生物学的機能、例えば、突然変異ＲＡＳに特異的に結合すること；及び／又はがんを検出し、がんを治療し若しくは予防する能力を有すること等と干渉しない。より望ましくは、追加のアミノ酸は、親ＴＣＲの生物学的活性と比較して、その生物学的活性を増強する。

【0077】

ポリペプチドは、本発明のＴＣＲのα鎖及び／又はβ鎖の可変領域のＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３の１以上を含む機能的部分等の、本発明のＴＣＲのα鎖及びβ鎖のいずれか又は両方の機能的部分を含み得る。本発明の一実施形態においては、ポリペプチドは配列番号１（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号２（α鎖のＣＤＲ２）、配列番号３（α鎖のＣＤＲ３）、配列番号４（β鎖のＣＤＲ１）、配列番号５（β鎖のＣＤＲ２）、配列番号６（β鎖のＣＤＲ３）又はそれらの組合せのアミノ酸配列を含み得る。本発明の別の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号３１（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号３２（α鎖のＣＤＲ２）、配列番号３３（α鎖のＣＤＲ３）、配列番号３４（β鎖のＣＤＲ１）、配列番号３５（β鎖のＣＤＲ２）、配列番号３６（β鎖のＣＤＲ３）のアミノ酸配列、又はその組み合わせを含むことができる。本発明の別の実施形態では、ポリペプチドは、配列番号６４（α鎖のＣＤＲ１）、配列番号６５（α鎖のＣＤＲ２）、配列番号６６（α鎖のＣＤＲ３）、配列番号６７（β鎖のＣＤＲ１）、配列番号６８（β鎖のＣＤＲ２）、配列番号６９（β鎖のＣＤＲ３）、又はそれらの組み合わせのアミノ酸配列を含むことができる。

【0078】

これに関して、本発明のポリペプチドは、配列番号１～６及び３１～３６から選択される任意の１つ以上のアミノ酸配列を含み得る。本発明の一実施形態では、ＴＣＲは、以下のアミノ酸配列を含む。（ａ）配列番号１～３の全て、（ｂ）配列番号４～６の全て、（ｃ）配列番号３１～３３の全て、（ｄ）配列番号３４～３６の全て、（ｅ）配列番号の全て、。６４～６６、（ｆ）配列番号６７～６９の全て、（ｇ）配列番号１～６の全て、（ｈ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｉ）配列番号６４～６９の全てである。特に好ましい実施形態では、ＴＣＲは、以下のアミノ酸配列を含む。（ｉ）配列番号１～６の全て、（ｉｉ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｉｉｉ）配列番号６４～６９の全てのアミノ酸配列を含む。配列番号３、６、３３、３６、６６、及び６９のいずれか１つ以上のＣＤＲ３、すなわちα鎖もしくはβ鎖又はその両方のＣＤＲは、ＣＤＲの最初のアミノ酸のすぐＮ末端のシステイン又は最終アミノ酸のすぐＣ末端のフェニルアラニン又はその両方をさらに含んでもよい。

【0079】

本発明の一実施形態においては、本発明のポリペプチドは、例えば、上記のＣＤＲ領域の組合せを含む本発明のＴＣＲの可変領域を含み得る。この点に関して、ポリペプチドは、配列番号７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９０（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号８（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号３７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号３８（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９３（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７０（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号１３２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号７１（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号１３３（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号４７（ＩＭＧＴで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９４（ＳｉｇｎａｌＰで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号４８（ＩＭＧＴで予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９５（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナル配列を有さない４３９１ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号４９（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号９６（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号５０（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号９７（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７２（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号８８（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのα鎖の可変領域）；配列番号７６（Ｎ末端シグナルペプタイドの可変領域）；配列番号７３（ＩＭＧＴで予測されたＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号８９（ＳｉｇｎａｌＰで予測されたＮ末端シグナル配列を有さない４３９４ ＴＣＲのβ鎖の可変領域）；配列番号７及び８の両方；配列番号７及び９１の両方；配列番号９０及び８の両方；配列番号９０及び９１の両方；配列番号３７ 及び３８； 配列番号０：３７及び９３；配列番号９２及び３８の両方；配列番号９２及び９３の両方；配列番号７０及び７１の両方；配列番号７０及び１３３の両方；配列番号１３２及び７１の両方；配列番号の両方。１３２及び１３３の両方；配列番号４７及び４８の両方；配列番号９４及び９５の両方；配列番号４９及び５０の両方；配列番号９６及び９７の両方；配列番号７２及び７３の両方；又は配列番号８８及び８９の両方を含む場合がある。

【0080】

本発明の一実施形態においては、本発明のポリペプチドは、上記の本発明のＴＣＲの定常領域を更に含み得る。この点に関して、ポリペプチドは、配列番号１９（α鎖のＷＴマウス定常領域）、配列番号２０（β鎖のＷＴマウス定常領域）、配列番号１７、（α鎖の置換マウス定常領域）、配列番号１８（β鎖の置換マウス定常領域）、配列番号１９及び２０の両方、又は配列番号１７及び１８の両方のアミノ酸配列を含むことができる。好ましくは、ポリペプチドは、配列番号１９及び２０の両方、又は配列番号１７及び１８の両方のアミノ酸配列を、本発明の他の側面に関して本明細書に記載したＣＤＲ領域又は可変領域のいずれかと組み合わせてさらに含む。

【0081】

本発明の実施形態において、ポリペプチドは、（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列、ここで、（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓである；（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、又はＣｙｓである；（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｂ）配列番号１８の５７位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓであり；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方のアミノ酸配列を含む。本発明の実施形態では、ポリペプチドの配列番号１７及び１８の一方又は両方は、表２～４のいずれか１つに定義されているとおりである。本明細書で提供されるα鎖定常領域は、Ｎ末端アスパラギンで示される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるα鎖定常領域のＮ末端アミノ酸は、アスパラギン酸である。

【0082】

本発明の実施形態では、本発明ポリペプチドは、本明細書に記載のＴＣＲのα鎖又はβ鎖の全長を含むことができる。この点に関して、本発明ポリペプチドは、配列番号２１、配列番号１００、配列番号２２、配列番号１０１、配列番号２３、配列番号１０２、配列番号２４、配列番号１０３、配列番号２４、配列番号１０３、配列番号１２４、配列番号１０４、配列番号１２５、配列番号１０５、配列番号２１及び２２の両方、配列番号１００及び１０１の両方、配列番号２３及び２４の両方、配列番号１０２及び１０３、配列番号の両方。１２４及び１２５の両方、配列番号１０４及び１０５の両方、配列番号５５、配列番号１１２、配列番号５６、配列番号１１３、配列番号５１、配列番号１１４、配列番号５２、配列番号１１５、配列番号１２８、配列番号１１６、配列番号１１６．１２９、配列番号１１７、配列番号５５及び５６の両方、配列番号１１２及び１１３の両方、配列番号５１及び５２の両方、配列番号１１４及び１１５の両方、配列番号１２８及び１２９の両方、又は配列番号１１６及び１１７の両方を含む。この点に関して、本発明ポリペプチドはまた、配列番号４１、配列番号１０６、配列番号４２、配列番号１０７、配列番号３９、配列番号１０８、配列番号４０、配列番号．のアミノ酸配列を含むことが可能である。１０９、配列番号１２６、配列番号１１０、配列番号１２７、配列番号１１１、配列番号４１及び４２の両方、配列番号１０６及び１０７の両方、配列番号３９及び４０の両方、配列番号１０８及び１０９、配列番号の両方。１２６及び１２７の両方、配列番号１１０及び１１１の両方、配列番号５７、配列番号１１８、配列番号５８、配列番号１１９、配列番号５３、配列番号１２０、配列番号５４、配列番号１２１、配列番号１３０、配列番号１２２、配列番号１２７．配列番号５７及び５８の両方、配列番号１１８及び１１９の両方、配列番号５３及び５４の両方、配列番号１２０及び１２１の両方、配列番号１３０及び１３１の両方、又は配列番号１２２及び１２３の両方、であることが好ましい。この点に関して、本発明ポリペプチドはまた、配列番号７４、配列番号１３６、配列番号７５、配列番号１３７、配列番号７８、配列番号１３８、配列番号７９、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むことができる。１３９、配列番号１３４、配列番号１４０、配列番号１３５、配列番号１４１、配列番号７４及び７５の両方、配列番号１３６及び１３７の両方、配列番号７８及び７９、配列番号１３８及び１３９、配列番号の両方。１３４及び１３５の両方、配列番号１４０及び１４１の両方、配列番号７６、配列番号１４４、配列番号７７、配列番号１４５、配列番号８０、配列番号１４６、配列番号８１、配列番号１４７、配列番号１４２、配列番号１４８、配列番号１４５：１４３、配列番号１４９、配列番号７６及び７７の両方、配列番号１４４及び１４５の両方、配列番号８０及び８１の両方、配列番号１４６及び１４７の両方、配列番号１４２及び１４３の両方、又は配列番号１４８及び１４９の両方である。あるいは、本発明のポリペプチドは、本明細書に記載されるＴＣＲの両鎖を含むことができる。

【0083】

本発明の実施形態において、ポリペプチドは、以下を含む：（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列、ここで、配列番号１７。（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓである；（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、又はＣｙｓである；（ｉｖ）配列番号．１７はＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｂ）配列番号１８の５７位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓであり；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方のアミノ酸配列である。本発明の実施形態では、ポリペプチドの配列番号１７及び１８の一方又は両方は、表２～４のいずれか１つに定義されているとおりである。本明細書で提供されるα鎖定常領域は、Ｎ末端アスパラギンで示される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるα鎖定常領域定常領域のＮ末端アミノ酸は、アスパラギン酸である。

【0084】

本発明の実施形態では、本発明ポリペプチドは、本明細書に記載のＴＣＲのα鎖又はβ鎖の全長を含むことができる。この点に関して、本発明ポリペプチドは、配列番号２１、配列番号１００、配列番号２２、配列番号１０１、配列番号２３、配列番号１０２、配列番号２４、配列番号１０３、配列番号２４、配列番号１０３、配列番号１２４、配列番号１０４、配列番号１２５、配列番号１０５、配列番号２１及び２２の両方、配列番号１００及び１０１の両方、配列番号２３及び２４の両方、配列番号１０２及び１０３、配列番号の両方。１２４及び１２５の両方、配列番号１０４及び１０５の両方、配列番号５５、配列番号１１２、配列番号５６、配列番号１１３、配列番号５１、配列番号１１４、配列番号５２、配列番号１１５、配列番号１２８、配列番号１１６、配列番号１１６．１２９、配列番号１１７、配列番号５５及び５６の両方、配列番号１１２及び１１３の両方、配列番号５１及び５２の両方、配列番号１１４及び１１５の両方、配列番号１２８及び１２９の両方、又は配列番号１１６及び１１７の両方を含む。この点に関して、本発明ポリペプチドはまた、配列番号４１、配列番号１０６、配列番号４２、配列番号１０７、配列番号３９、配列番号１０８、配列番号４０、配列番号．のアミノ酸配列を含むことが可能である。１０９、配列番号１２６、配列番号１１０、配列番号１２７、配列番号１１１、配列番号４１及び４２の両方、配列番号１０６及び１０７の両方、配列番号３９及び４０の両方、配列番号１０８及び１０９、配列番号の両方。１２６及び１２７の両方、配列番号１１０及び１１１の両方、配列番号５７、配列番号１１８、配列番号５８、配列番号１１９、配列番号５３、配列番号１２０、配列番号５４、配列番号１２１、配列番号１３０、配列番号１２２、配列番号１２７．配列番号５７及び５８の両方、配列番号１１８及び１１９の両方、配列番号５３及び５４の両方、配列番号１２０及び１２１の両方、配列番号１３０及び１３１の両方、又は配列番号１２２及び１２３の両方、であることが好ましい。この点に関して、本発明ポリペプチドはまた、配列番号７４、配列番号１３６、配列番号７５、配列番号１３７、配列番号７８、配列番号１３８、配列番号７９、配列番号１３９のアミノ酸配列を含むことができる。１３９、配列番号１３４、配列番号１４０、配列番号１３５、配列番号１４１、配列番号７４及び７５の両方、配列番号１３６及び１３７の両方、配列番号７８及び７９、配列番号１３８及び１３９、配列番号の両方。１３４及び１３５の両方、配列番号１４０及び１４１の両方、配列番号７６、配列番号１４４、配列番号７７、配列番号１４５、配列番号８０、配列番号１４６、配列番号８１、配列番号１４７、配列番号１４２、配列番号１４８、配列番号１４５：１４３、配列番号１４９、配列番号７６及び７７の両方、配列番号１４４及び１４５の両方、配列番号８０及び８１の両方、配列番号１４６及び１４７の両方、配列番号１４２及び１４３の両方、又は配列番号１４８及び１４９の両方である。あるいは、本発明のポリペプチドは、本明細書に記載されるＴＣＲの両鎖を含むことができる。

【0085】

本発明の実施形態において、ポリペプチドは：（ａ）配列番号２１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖を含み、ここで、以下のとおりである。（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｂ）配列番号１００のアミノ酸配列を含むα鎖（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）であり、ここで（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである。１００はＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｃ）配列番号２２（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号２２の１９０位におけるＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｄ）配列番号１０１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）であり、ここで配列番号１０１の１９０位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｆ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）を含む。（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｇ）配列番号４２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号４２の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｈ）配列番号１０７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１０７の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むα鎖（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、ここで。（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号７４の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｊ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、ここで（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｋ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むβ鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号７５の１８７位におけるＸは、Ｓｅｒ又はＣｙｓである；（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むβ鎖（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）であって、配列番号１３７の１８７位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｍ）（ａ）及び（ｃ）の両方；（ｎ）（ｂ）及び（ｄ）の両方；（ｏ）（ｅ）及び（ｇ）の両方；（ｐ）（ｆ）及び（ｈ）の両方；（ｑ）（ｉ）及び（ｋ）の両方；（ｒ）（ｊ）及び（ｌ）の両方；（ｓ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むα鎖（ＩＭＧＴにより予測されたＮ末端シグナルペプチドなしの４３９１ＴＣＲのα鎖）；ここで、（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号５５の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｔ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９１ ＴＣＲのα鎖）であり、ここで（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１１２の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔｈ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｕ）配列番号５６のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号５６の１６８位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｖ）配列番号１１３のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）であり、ここで配列番号１１３の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｗ）配列番号５７（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３８５ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号５７の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｘ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３８５ ＴＣＲのα鎖）、であり、ここで（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｙ）配列番号５８（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号５８の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｚ）配列番号１１９（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで、配列番号１１９の１７８位のＸは、Ｓｅｒ又はＣｙｓ；（ａａ）配列番号７６（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのα鎖）であって（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号の２２６位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｂｂ）配列番号１４４のアミノ酸配列（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号．の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである。１４４はＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｃｃ）配列番号７７のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号７７の１６８位におけるＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｄｄ）配列番号１４５のアミノ酸配列を含むβ鎖（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドのない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１４５の１６６位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｅｅ）（ｓ）及び（ｕ）の両方；（ｆｆ）（ｔ）及び（ｖ）の両方；（ｇｇ）（ｗ）及び（ｙ）の両方；（ｈｈ）（ｘ））及び（ｚ）の両方；（ｈｈ）（ａａ）の両方及び（ｃｃ）；又は（ｉｉ）（ｂｂ）の両方及び（ｄｄ）を含む。本発明の実施形態では、ポリペプチドの配列番号２１、２２、４１、４２、５５～５８、７４～７７、１００、１０１、１０６、１０７、１１２、１１３、１１８、１１９、１３６、１３７、１４４及び１４５のいずれか１以上が、表２～４のいずれか１つに定義されるとおりである。

【0086】

本発明は、本明細書に記載の少なくとも１のポリペプチドを含むタンパク質を更に提供する。「タンパク質」は、１以上のポリペプチド鎖を含む分子を意味する。

【0087】

実施形態において、本発明のタンパク質は、（ａ）配列番号１～３のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号４～６のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｂ）配列番号のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖を含み得る。３１～３３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｃ）配列番号６４～６６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号６７～６９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖を挙げることができる。配列番号３、６、３３、３６、６６、及び６９のＣＤＲ３、すなわちα鎖もしくはβ鎖又はその両方のＣＤＲは、ＣＤＲの最初のアミノ酸のすぐＮ末端のシステイン又は最終アミノ酸のすぐＣ末端のフェニルアラニン又はその両方をさらに含んでいてもよい。

【0088】

本発明の別の実施形態では、タンパク質は、（ｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）配列番号７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号９１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｖ）配列番号９０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｖ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｖｉ）配列番号９２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号９３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｖｉｉ）配列番号３７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号．のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｖｉｉｉ）配列番号９２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号３８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉ）配列番号７０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号７１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号１３３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｉｉ）配列番号７０のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号１３３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｖ）配列番号１３２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号７１のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｘ）配列番号４７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号４８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｘ）配列番号９４のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号９５のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｘｉ）配列番号４９のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号５０のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｘｉｉ）配列番号９６のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号９７のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；（ｉｘ）配列番号７２のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号７３のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖；又は（ｘ）配列番号８８のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖及び配列番号８９のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖を含む。

【0089】

本発明のタンパク質は、本発明の他の態様に関して本明細書に記載される定常領域のいずれかを更に含み得る。これに関して、本発明の一実施形態においては、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１７のアミノ酸配列を更に含み得、第２のポリペプチド鎖は、配列番号１８のアミノ酸配列を更に含み得る；本発明の実施態様では、第１のポリペプチド鎖は、配列番号１９のアミノ酸配列を更に含み得、第２のポリペプチド鎖は、配列番号２０のアミノ酸配列を更に含み得る。

【0090】

本発明の実施形態において、タンパク質は：（ａ）配列番号１７のアミノ酸配列を含む第１のポリペプチド鎖、ここで（ｉ）配列番号１７の４８位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１７の１１２位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１７の１１４位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１７の１１５位のＸは１７はＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｂ）配列番号１８のアミノ酸配列を含む第２のポリペプチド鎖であって、配列番号１８の５７位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）両方である。本発明の実施形態では、タンパク質の配列番号１７及び１８の一方又は両方は、表２～４のいずれか１つに定義されているとおりである。

【0091】

代替的に又は追加的に、本発明の実施形態のタンパク質は、（ａ）配列番号２１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖を含み得、ここで、以下のとおりである。（ｉ）配列番号２１の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号２１の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号２１の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号２１の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｂ）配列番号１００のアミノ酸配列を含むα鎖（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのα鎖）であり、（ｉ）配列番号１００の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１００の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１００の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１００の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｃ）配列番号２２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号２２の１９０位におけるＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｄ）配列番号１０１（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９１ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１０１の１９０位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｅ）配列番号４１のアミノ酸配列（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで。（ｉ）配列番号４１の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号４１の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号４１の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号４１の２４８位のＸは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｆ）配列番号１０６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異体Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのα鎖）、であり、（ｉ）配列番号１０６の１８１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１０６の２４５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１０６の２４７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１０６の２４８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｇ）配列番号４２（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号４２の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｈ）配列番号１０７（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１０７の１９５位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｉ）配列番号７４のアミノ酸配列を含むα鎖（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、ここで（ｉ）配列番号７４の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７４の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７４の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである；（ｊ）配列番号１３６のアミノ酸配列を含むα鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのα鎖）、であり（ｉ）配列番号１３６の１８０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１３６の２４４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１３６の２４６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号１３６の２４７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｋ）配列番号７５のアミノ酸配列を含むβ鎖（変異型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号７５の１８７位におけるＸは、Ｓｅｒ又はＣｙｓである；（ｉｖ）配列番号７５の１８８位におけるＹは、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｌｕ、Ｐｈｅ又はＰｒｏｐであり、（ｌ）配列番号１３７のアミノ酸配列を含むβ鎖（野生型Ｎ末端シグナルペプチドを有する４３９４ ＴＣＲのβ鎖）であって、配列番号１３７の１８７位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｍ）（ａ）及び（ｃ）の両方；（ｎ）（ｂ）及び（ｄ）の両方；（ｏ）（ｅ）及び（ｇ）の両方；（ｐ）（ｆ）及び（ｈ）の両方；（ｑ）（ｉ）及び（ｋ）の両方；（ｒ）（ｊ）及び（ｌ）の両方；（ｓ）配列番号５５のアミノ酸配列を含むα鎖（ＩＭＧＴにより予測されたＮ末端シグナルペプチドなしの４３９１ＴＣＲのα鎖）；ここで、（ｉ）配列番号５５の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５５の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５５の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；（ｉｖ）配列番号５５の２２７位はＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｔ）配列番号１１２のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９１ ＴＣＲのα鎖）であって、ここで（ｉ）配列番号１１２の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１２の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号．の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｍｅｔｈ、又はＴｒｐである。１１２はＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１２の２２６位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｕ）配列番号５６（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含み、ここで配列番号５６の１６８位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｖ）配列番号１１３（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９１ ＴＣＲのβ鎖）であり、ここで、配列番号１１３の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｗ）配列番号５７（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖であり、ここで。（ｉ）配列番号５７の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号５７の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号５７の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号５７の２１１位は、Ｔｈｒ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｃｙｓ又はＴｒｐのいずれかとなる。５７は、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｘ）配列番号１１８のアミノ酸配列を含むα鎖（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３８５ ＴＣＲのα鎖）、であり、ここで（ｉ）配列番号１１８の１６１位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１１８の２２５位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号１１８の２２７位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１１８の２２８位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｙ）配列番号５８（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号５８の１７３位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓ；（ｚ）配列番号１１９（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３８５ ＴＣＲのβ鎖）であり、ここで配列番号１１９の１７８位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ａａ）配列番号７６（ＩＭＧＴによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを有さない４３９４ ＴＣＲのα鎖）のアミノ酸配列を含むα鎖であり、ここで（ｉ）配列番号７６の１５９位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号７６の２２３位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号７６の２２５位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号７６の２２６位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｂｂ）配列番号１４４のアミノ酸配列（ＳｉｇｎａｌＰにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのα鎖）を含むα鎖であり、ここで、以下のとおりである。（ｉ）配列番号１４４の１６０位のＸはＴｈｒ又はＣｙｓであり；（ｉｉ）配列番号１４４の２２４位のＸはＳｅｒ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｉｉｉ）配列番号．の２２６位のＸはＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐである。１４４はＭｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、又はＴｒｐであり；及び（ｉｖ）配列番号１４４の２２７位のＸはＧｌｙ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｒｏ、Ｐｈｅ、Ｍｅｔ、又はＴｒｐであり；（ｃｃ）配列番号７７（ＩＭＧＴにより予測されるＮ末端シグナルペプチドを有しない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）のアミノ酸配列を含むβ鎖であって、配列番号７７の１６８位におけるＸがＳｅｒ又はＣｙｓであるもの；（ｄｄ）配列番号１４５（ＳｉｇｎａｌＰによって予測されるＮ末端シグナルペプチドを含まない４３９４ ＴＣＲのβ鎖）、ここで配列番号１４５の１６６位のＸはＳｅｒ又はＣｙｓである；（ｅｅ）（ｓ）及び（ｕ）の両方；（ｆｆ）（ｔ）及び（ｖ）の両方；（ｇｇ）（ｗ）及び（ｙ）の両方；（ｈｈ）（ｘ））及び（ｚ）の両方；（ｈｈ）（ａａ）の両方及び（ｃｃ）；又は（ｉｉ）（ｂｂ）の両方及び（ｄｄ）である。本発明の実施形態では、配列番号２１、２２、４１、４２、５５～５８、１００、１０１、１０６、１０７、１１２、１１３、１１８、及び１１９の１つ以上は、表２～４のいずれか１つに定義されるとおりである。

【0092】

本発明のタンパク質は、ＴＣＲであってもよい。あるいは、例えば、タンパク質が、配列番号２１及び２２の両方、配列番号２３及び２４の両方、配列番号１２４及び１２５の両方、配列番号１００及び１０１の両方、配列番号１０２及び１０３の両方、配列番号１０４及び１０５の両方、配列番号４１及び４２の両方、配列番号３９及び４０の両方、配列番号のアミノ酸配列を含む単一のポリペプチド鎖を含むものである場合、そのタンパク質は、以下のとおりである。１２６及び１２７の両方、配列番号１０６及び１０７の両方、配列番号１０８及び１０９の両方、配列番号１１０及び８５の両方、配列番号７４及び７５の両方、配列番号７８及び７９の両方、配列番号１３４及び１３５の両方、配列番号１２６及び１２７の両方、配列番号１０７及び１０９の両方、配列番号１０８及び１０９、配列番号１１０及び８５、配列番号１２６及び１２７、１３６及び１３７の両方、配列番号１３８及び１３９の両方、配列番号１４０及び１４１の両方、又はタンパク質の第１及び／又は第２のポリペプチド鎖がさらに他のアミノ酸配列を含む場合、ｅ．ｇ．，免疫グロブリン又はその一部をコードするアミノ酸配列である場合、本発明タンパク質は融合タンパク質であってもよい。この点に関して、本発明の実施形態は、本明細書に記載の本発明ポリペプチドの少なくとも１つを、少なくとも１つの他のポリペプチドとともに含む融合タンパク質も提供する。他のポリペプチドは、融合タンパク質の別個のポリペプチドとして存在することができ、又は本明細書に記載の本発明ポリペプチドの１つとフレーム内で（タンデムに）発現される、ポリペプチドとして存在することができる。他のポリペプチドは、免疫グロブリン、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＭＨＣ分子、ＣＤ１分子、例えばＣＤ１ａ、ＣＤ１ｂ、ＣＤ１ｃ、ＣＤ１ｄなどを含むがこれらに限定されない、任意のペプチド性もしくはタンパク質性分子、又はその一部をコードすることができる。

【0093】

融合タンパク質は、本発明のポリペプチドの１以上のコピー及び／又は他のポリペプチドの１以上のコピーを含み得る。例えば、融合タンパク質は、本発明のポリペプチド及び／又は他のポリペプチドの１、２、３、４、５以上のコピーを含み得る。融合タンパク質を作製する好適な方法は、当該技術分野において公知であり、例えば、組換え法が挙げられる。

【0094】

本発明の幾つかの実施形態においては、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は、α鎖及びβ鎖を連結するリンカーペプチドを含む単一のタンパク質として発現され得る。これに関して、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質はリンカーペプチドを更に含み得る。リンカーペプチドは、宿主細胞内で、組換えＴＣＲ、ポリペプチド及び／又はタンパク質の発現を好都合に容易にし得る。リンカーペプチドは、任意の好適なアミノ酸配列を含み得る。例えば、リンカーペプチドは、配列番号２５のアミノ酸配列を含むフューリン－ＳＧＳＧ－Ｐ２Ａリンカーであってもよい。宿主細胞によるリンカーペプチドを含むコンストラクトの発現に際して、リンカーペプチドは切断され得、結果として分離したα鎖及びβ鎖となる。本発明の一実施形態においては、ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質は、全長α鎖、全長β鎖、並びにα鎖とβ鎖との間に位置するリンカーペプチドを含むアミノ酸配列、例えば、α鎖－リンカー－β鎖又はβ鎖－リンカー－α鎖を含み得る。

【0095】

本発明の実施形態において、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、β鎖、リンカー（配列番号２５）、及びα鎖を含む配列番号１６１に記載のアミノ酸配列を含んでもよい。変異体は、配列番号８に記載のβ鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に記載の改変β定常ドメインを含む。変異体の全長β鎖は、配列番号１２５に記載される。変異体はまた、配列番号７に記載のα鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に記載の改変型α定常ドメインを含む。変異体の全長α鎖は、配列番号１２４に記載される。

【0096】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、α鎖、リンカー（配列番号２５）、及びβ鎖を含む配列番号１６２に記載のアミノ酸配列を含んでもよい。変異体は、配列番号１９０に記載のα鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に記載の改変α定常ドメインを含む。変異体の全長α鎖は、配列番号１０４に記載される。変異体はまた、配列番号９１に規定されるβ鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に規定される改変型β定常ドメインを含む。変異体の全長β鎖は、配列番号１０５に記載される。

【0097】

本発明の実施形態において、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、β鎖、リンカー（配列番号２５）、及びα鎖を含む配列番号１６３に記載のアミノ酸配列から構成されてもよい。変異体は、配列番号３８に規定されるβ鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に規定される修飾β定数ドメインを含む。変異体の完全長β鎖は、配列番号１２７に規定される。変異体はまた、配列番号３７に規定されるようなα鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に規定されるような修飾α定数ドメインを含む。変異体の全長α鎖は、配列番号１２６に記載されている。

【0098】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、α鎖、リンカー（配列番号２５）、及びβ鎖を含む配列番号１６４に記載のアミノ酸配列から構成されてもよい。変異体は、配列番号９２に記載のα鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に記載の改変α定数ドメインから構成される。変異体の全長α鎖は、配列番号１１０に記載されている。変異体はまた、配列番号９３に記載のβ鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に記載の修飾β定数ドメインを含む。変異体の全長β鎖は、配列番号１１１に記載されている。

【0099】

本発明の実施形態において、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、β鎖、リンカー（配列番号２５）、及びα鎖を含む配列番号１６５に記載のアミノ酸配列から構成されてもよい。変異体は、配列番号７１に記載のβ鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に記載の改変β定数ドメインを含む。変異体の完全長β鎖は、配列番号１３５に記載されている。変異体はまた、配列番号７０に規定されるようなα鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に規定されるような修飾α定数ドメインを含む。変異体の全長α鎖は、配列番号１３４に記載されている。

【0100】

本発明の別の実施形態では、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、Ｎ末端からＣ末端まで、α鎖、リンカー（配列番号２５）、及びβ鎖を含む配列番号１６６に記載のアミノ酸配列から構成されてもよい。変異体は、配列番号１３２に記載のα鎖可変領域（変異体シグナルペプチドを有する）及び配列番号９８に記載の改変α定数ドメインから構成される。変異体の全長α鎖は、配列番号１４０に記載されている。変異体はまた、配列番号１３３に記載のβ鎖可変領域（野生型シグナルペプチドを有する）及び配列番号９９に記載の修飾β定数ドメインを含む。変異体の全長β鎖は、配列番号１４１に記載されている。

【0101】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質は、本明細書に開示されるように、シグナルペプチドを含むα鎖及び／又はβ鎖を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるα鎖及び／又はβ鎖のいずれかのシグナルペプチドの配列は、２位で野生型残基に置換されたアラニン又はヒスチジン残基を含む。

【0102】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示されるＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質は、本明細書に開示されるように、シグナルペプチドを欠くα鎖及び／又はβ鎖の成熟型を含む。シグナルペプチド又はα鎖及び／もしくはβ鎖の成熟型の配列は、ＩＭＧＴ及びＳｉｇｎａｌＰを含む当技術分野で既知の任意の方法に従って実施することができる。

【0103】

本発明のタンパク質は、本明細書に記載の本発明のポリペプチドの少なくとも１を含む組換え抗体又はその抗原結合部分であってもよい。本明細書で用いられる場合、「組換え抗体」は、本発明のポリペプチド、抗体のポリペプチド鎖又はその抗原結合部分の少なくとも１を含む組換え（例えば、遺伝学的に操作された）タンパク質を指す。抗体のポリペプチド又はその抗原結合部分は、抗体の重鎖、軽鎖、重鎖若しくは軽鎖の可変領域若しくは定常領域、一本鎖可変フラグメント（ｓｃＦｖ）、又はＦｃ、Ｆａｂ若しくはＦ（ａｂ）_２’フラグメント等であってもよい。抗体のポリペプチド鎖又はその抗原結合部分は、組換え抗体の別のポリペプチドとして存在し得る。代替的には、抗体のポリペプチド鎖又はその抗原結合部分は、本発明のポリペプチドとインフレームで（タンデムで）で発現されるポリペプチドとして存在し得る。抗体のポリペプチド又はその抗原結合部分は、本明細書に記載の抗体及び抗体フラグメントのいずれかを含む、任意の抗体又は任意の抗体フラグメントのポリペプチドであってもよい。

【0104】

本発明の範囲内には、本明細書に記載の本発明のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質の機能的変異体が含まれる。本明細書で用いられる場合、用語「機能的変異体」は、機能的変異体が、それが変異体であるところのＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質の生物学的活性を保持している、親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質に対する実質的又は有意な配列同一性又は類似性を有するＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質を指す。機能的変異体は、例えば、親ＴＣＲが抗原特異性を有するか、又は親ポリペプチド若しくはタンパク質が、特異的に結合する突然変異ＲＡＳに、親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質と類似する程度、同じ程度若しくはより高い程度に特異的に結合する能力を保持する、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質（親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質）の変異体を包含する。親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質に関連して、例えば、機能的変異体は、親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のそれぞれに対して、アミノ酸配列で、少なくとも、約３０％、約５０％、約７５％、約８０％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％以上同一であってもよい。

【0105】

例えば、機能的変異体は、少なくとも１の保存的アミノ酸置換を含む親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のアミノ酸配列を含み得る。保存的アミノ酸置換は当該技術分野において公知であり、特定の物理的及び／又は化学的特性を有する１のアミノ酸が、同じ化学的又は物理的特性を有する別のアミノ酸に置き換えられるアミノ酸置換が挙げられる。例えば、保存的アミノ酸置換は、酸性アミノ酸の別の酸性アミノ酸（例えば、Ａｓｐ又はＧｌｕ）への置換、非極性側鎖を含むアミノ酸の非極性側鎖を含む別のアミノ酸（例えば、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｌｅｕ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｐｒｏ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ等）への置換、塩基性アミノ酸の別の塩基性アミノ酸（Ｌｙｓ、Ａｒｇ等）への置換、極性側鎖を含むアミノ酸の極性側鎖を含む別のアミノ酸（Ａｓｎ、Ｃｙｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｔｙｒ等）への置換等であってもよい。

【0106】

代替的に又は追加的に、機能的変異体は、少なくとも１の非保存的アミノ酸置換を含む親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のアミノ酸配列を含み得る。この場合においては、非保存的アミノ酸置換が、機能的変異体の生物学的活性と干渉しないか又は阻害しないことが好ましい。好ましくは、非保存的アミノ酸置換は、機能的変異体の生物学的活性が、親ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質と比較して増大するよう、機能的変異体の生物学的活性を増強する。

【0107】

本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、機能的変異体、及び機能的部分の各シグナルペプチドは、存在する場合、ＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、又は機能的変異体が発現し、ＨＬＡクラスＩ分子が提示する１２位のグリシンをバリンで置換した変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列に対して抗原特異性を有する限り、任意の適切なＴＣＲシグナルペプチドでありえる。

【0108】

ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質の他の構成要素、例えば、他のアミノ酸が、ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質の生物学的活性を実質的に変化させないよう、ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質は、本明細書に記載の特定のアミノ酸配列の一つ又は複数（ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｏｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ）から実質的になり得る。この点に関して、本発明ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、例えば、本質的に配列番号２１、配列番号１００、配列番号２２、配列番号１０１、配列番号２３、配列番号１０２、配列番号２４、配列番号１０３、配列番号１２４、配列番号１０４、配列番号１０５、配列番号１２５、配列番号１０５、配列番号２１及び２２の両方、配列番号１００及び１０１の両方、配列番号２３及び２４の両方、配列番号１０２及び１０３の両方、配列番号１２４及び１２５、配列番号１０４及び１０５の両方、配列番号５５、配列番号１１２、配列番号５６、配列番号１１３、配列番号５１、配列番号１１５．１１４、配列番号５２、配列番号１１５、配列番号１２８、配列番号１１６、配列番号１２９、配列番号１１７、配列番号５５及び５６の両方、配列番号１１２及び１１３の両方、配列番号５１及び５２の両方、配列番号１１４及び１１５の両方、配列番号１２８及び１２９の両方又は配列番号１１６及び１１７の両方、配列番号４１、配列番号１０６、配列番号４２、配列番号１０７、配列番号３９、配列番号１０８、配列番号４０、配列番号１０９、配列番号１２６、配列番号１１０、配列番号１２７、配列番号１１１、配列番号４１及び４２の両方、配列番号１０６及び１０７の両方、配列番号３９及び４０の両方、配列番号１１１：１０８及び１０９の両方、配列番号１２６及び１２７の両方、配列番号１１０及び１１１の両方、配列番号５７、配列番号１１８、配列番号５８、配列番号１１９、配列番号５３、配列番号１２０、配列番号５４、配列番号１２１、配列番号１３０、配列番号１２２、配列番号１３１、配列番号１２３、配列番号５７及び５８の両方の、配列番号１２６ 及び１２３の両方の。１１８及び１１９の両方、配列番号５３及び５４の両方、配列番号１２０及び１２１の両方、配列番号１３０及び１３１の両方、又は配列番号１２２及び１２３の両方、配列番号７４、配列番号１３６、配列番号７５、配列番号１３７、配列番号７８、配列番号１３８、配列番号７９、配列番号１３９、配列番号１３４、配列番号１４０、配列番号１３５、配列番号１４１、配列番号７４及び７５の両方、配列番号１３６及び１３７の両方、配列番号７８及び７９の両方、配列番号１３８及び１３９、配列番号１３４及び１３５、配列番号１４０及び１４１の両方、配列番号７６、配列番号１４４、配列番号７７、配列番号１４５、配列番号８０、配列番号１４６、配列番号８１、配列番号１４７、配列番号１４２、配列番号１４８、配列番号１４３、配列番号１４９、配列番号７６及び７７の両方、配列番号１４４及び１４５の両方、配列番号８０及び８１の両方、配列番号１４６及び１４７の両方、配列番号１４２及び１４３の両方、又は配列番号１４８及び１４９の両方から本質的になる。また、例えば、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、本質的に、（ｉ）配列番号７、（ｉｉ）配列番号９０、（ｉｉｉ）配列番号８、（ｉｖ）配列番号９１、（ｖ）配列番号３７、（ｖｉ）配列番号９２、（ｖｉｉ）配列番号３８、（ｖｉｉｉ）配列番号１０５Ｎ３、（ｉｘ）配列番号７０、（ｘ）配列番号１３２、（ｘｉ）配列番号７１、（ｘｉｉ）配列番号１３３、（ｘｉｉｉ）配列番号の両方、（ｉｆ）の配列番号７ 及び８ の単数又は複数。７及び８、（ｘｉｖ）配列番号７及び９１の両方、（ｘｖ）配列番号９０及び８の両方、（ｘｖｉ）配列番号９０及び９１の両方、（ｘｖｉｉ）配列番号３７及び３８の両方、（ｘｖｉｉｉ）配列番号９２及び３８の両方、（ｘｉｘ）配列番号３７及び９３の両方、。３７及び９３の両方、（ｘｘ）配列番号９２及び９３の両方、（ｘｘｉ）配列番号７０及び７１の両方、（ｘｘｉｉ）配列番号７０及び１３３の両方、（ｘｘｉｉｉ）配列番号１３２及び７１の両方、又は（ｘｘｉｖ）配列番号１３２及び１３３の両方である。さらに、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質は、本質的に、（ａ）配列番号１～６、３１～３６及び６４～６９のいずれか１つ以上；（ｂ）配列番号１～３の全て；（ｃ）配列番号４～６の全て；（ｄ）配列番号３１～３３の全て；（ｅ）配列番号３４～３６の全て；（ｆ）配列番号６４～６６の全て、（ｇ）配列番号６７～６９の全て、（ｈ）配列番号１～６の全て、（ｉ）配列番号３１～３６の全て、又は（ｊ）配列番号６４～６９の全ての配列から本質的に成り得る。

【0109】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は、ＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質が、それらの生物学的活性、例えば、Ｇ１２ＶＲＡＳに特異的に結合し；哺乳動物におけるがんを検出し；又は哺乳動物におけるがんを治療若しくは予防する能力等を保持するという条件で、任意の長さであり得、即ち、任意の数のアミノ酸を含み得る。例えば、ポリペプチドは、約５０、約７０、約７５、約１００、約１２５、約１５０、約１７５、約２００、約３００、約４００、約５００、約６００、約７００、約８００、約９００、約１０００以上のアミノ酸長等の約５０～約５０００アミノ酸長の範囲であってもよい。これに関して、本発明のポリペプチドはオリゴペプチドも含む。

【0110】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は、天然で生じた１以上のアミノ酸の代わりに合成アミノ酸を含み得る。かかる合成アミノ酸は、当該技術分野において公知であり、例えば、アミノシクロヘキサンカルボン酸（ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、ノルロイシン（ｎｏｒｌｅｕｃｉｎｅ）、α－アミノ－ｎ－デカン酸（α－ａｍｉｎｏ ｎ－ｄｅｃａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、ホモセリン（ｈｏｍｏｓｅｒｉｎｅ）、Ｓ－アセチルアミノメチル－システイン（Ｓ－ａｃｅｔｙｌａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ－ｃｙｓｔｅｉｎｅ）、トランス－３－及びトランス－４－ヒドロキシプロリン（ｔｒａｎｓ－３－ ａｎｄ ｔｒａｎｓ－４－ｈｙｄｒｏｘｙｐｒｏｌｉｎｅ）、４－アミノフェニルアラニン（４－ａｍｉｎｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）、４－ニトロフェニルアラニン（４－ｎｉｔｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）、４－クロロフェニルアラニン（４－ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）、４－カルボキシフェニルアラニン（４－ｃａｒｂｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）、β－フェニルセリン（β－ｐｈｅｎｙｌｓｅｒｉｎｅ））β－ヒドロキシフェニルアラニン（β－ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）、フェニルグリシン（ｐｈｅｎｙｌｇｌｙｃｉｎｅ）、α－ナフチルアラニン（α－ｎａｐｈｔｈｙｌａｌａｎｉｎｅ）、シクロヘキシルアラニン（ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌａｌａｎｉｎｅ）、シクロヘキシルグリシン（ｃｙｃｌｏｈｅｘｙｌｇｌｙｃｉｎｅ）、インドリン－２－カルボン酸（ｉｎｄｏｌｉｎｅ－２－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸（１，２，３，４－ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｉｓｏｑｕｉｎｏｌｉｎｅ－３－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、アミノマロン酸（ａｍｉｎｏｍａｌｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、アミノマロン酸モノアミド（ａｍｉｎｏｍａｌｏｎｉｃ ａｃｉｄ ｍｏｎｏａｍｉｄｅ）、Ｎ’－ベンジル－Ｎ’－メチル－リジン（Ｎ’－ｂｅｎｚｙｌ－Ｎ’－ｍｅｔｈｙｌ－ｌｙｓｉｎｅ）、Ｎ’，－ジベンジルリジン（Ｎ’，Ｎ’－ｄｉｂｅｎｚｙｌ－ｌｙｓｉｎｅ）、６－ヒドロキシリジン（６－ｈｙｄｒｏｘｙｌｙｓｉｎｅ）、オルニチン（ｏｒｎｉｔｈｉｎｅ）、α－アミノシクロペンタンカルボン酸（α－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｐｅｎｔａｎｅ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、α－アミノシクロヘキサンカルボン酸（α－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｘａｎｅ ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、α－アミノシクロヘプタンカルボン酸（α－ａｍｉｎｏｃｙｃｌｏｈｅｐｔａｎｅ
ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、α－（２－アミノ－２－ノルボルナン）－カルボン酸（α－（２－ａｍｉｎｏ－２－ｎｏｒｂｏｒｎａｎｅ）－ｃａｒｂｏｘｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、α，γ－ジアミノ酪酸（α，γ－ｄｉａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ ａｃｉｄ）、α，β－ジアミノプロピオン酸（α，β－ｄｉａｍｉｎｏｐｒｏｐｉｏｎｉｃ ａｃｉｄ）、ホモフェニルアラニン（ｈｏｍｏｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ）及びα－ｔｅｒｔ－ブチルグリシン（α－ｔｅｒｔ－ｂｕｔｙｌｇｌｙｃｉｎｅ）が挙げられる。

【0111】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は例えば、グリコシル化、アミド化、カルボキシル化、リン酸化、エステル化、Ｎ－アシル化、（例えば、ジスルフィド架橋を介した）環化、若しくは酸付加塩への変換、及び／或いは必要に応じて二量体化若しくは重合化、又はコンジュゲート化され得る。

【0112】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及び／又はタンパク質は、例えば、例えば、デノボ合成等の当該技術分野で公知の方法によって得られ得る。また、ポリペプチド及びタンパク質は、標準的な組換え法を用い、本明細書に記載の核酸を用いて、組換えにより作製され得る。例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（第４版）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ（２０１２）を参照。代替的には、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド及び／又はタンパク質は、さまざまな営利団体のいずれかによって商業的に合成され得る。これに関して、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド及びタンパク質は、合成、組換え、単離及び／又は精製され得る。本発明の実施形態は、本発明の他の側面に関して本明細書に記載される核酸又はベクターのいずれかによってコードされる単離又は精製されたＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質を提供する。本発明の別の実施形態は、本発明の他の側面に関して本明細書に記載された核酸又はベクターのいずれかの細胞における発現から生じる、単離又は精製されたＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質を提供する。本発明の更に別の実施形態は、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれかを生産する方法を提供し、この方法は、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質が生産されるように本明細書に記載の宿主細胞又は宿主細胞の集団のいずれかを培養することを含む。

【0113】

本発明の範囲には、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質（それらの機能的部分又は変異体のいずれかを含む）、核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、宿主細胞集団、又は抗体若しくはその抗原結合部分のいずれかを含む、コンジュゲート、例えば、バイオコンジュゲートが含まれる。コンジュゲート及びコンジュゲートを合成する方法は、一般的に、当該技術分野において公知である。

【0114】

本発明の一実施形態は、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸を提供する。本明細書で用いられる場合、「核酸」は「ポリヌクレオチド」、「オリゴヌクレオチド」及び「核酸分子」を含み、一般にＤＮＡ又はＲＮＡの重合体を意味し、一本鎖又は二本鎖であり得、天然、非天然又は改変されたヌクレオチドを含有し得、天然、非天然又は改変されたヌクレオチド間結合、例えば、未修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオチド間にみられるホスホジエステルの代わりに、ホスホロアミデート結合又はホスホロチオエート結合等を含有し得る。一実施形態においては、核酸は相補的ＤＮＡ（ｃＤＮＡ）を含む。一般的には、核酸が、挿入、欠失、逆位及び／又は置換を何ら含まないことが好ましい。しかし、本明細書で検討されるとおり、幾つかの例においては核酸が１以上の挿入、欠失、逆位、及び／又は置換を含むことが、好適であってもよい。

【0115】

好ましくは、本発明の核酸は組換え体である。本明細書で用いられる場合、用語「組換え体」は、（ｉ）天然又は合成の核酸セグメントを、生細胞内で複製できる核酸分子に接合することによって、生細胞外で構築される分子、又は（ｉｉ）上記（ｉ）に記載されたものの複製から生じる分子を指す。本明細書における目的のためには、複製はｉｎ ｖｉｔｒｏ複製、又はｉｎ ｖｉｖｏ複製であってもよい。

【0116】

核酸は、当該技術分野で公知の手順を用いて、化学合成及び／又は酵素的ライゲーション反応に基づいて構築され得る。例えば、上記のＧｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．を参照。例えば、核酸は、天然で生じたヌクレオチド、又は分子の生物学的安定性を増大させるよう、若しくはハイブリダイゼーション時に形成される二本鎖の物理的安定性を増大させるよう設計された、様々に修飾されたヌクレオチド（例えば、ホスホロチオエート誘導体及びアクリジン置換ヌクレオチド）を用いて化学的に合成され得る。核酸を生成するために用いられ得る修飾ヌクレオチドの例としては、５－フルオロウラシル（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、５－ブロモウラシル（５－ｂｒｏｍｏｕｒａｃｉｌ）、５－クロロウラシル（５－ｃｈｌｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、５－ヨードウラシウル（５－ｉｏｄｏｕｒａｃｉｌ）、ヒポキサンチン（ｈｙｐｏｘａｎｔｈｉｎｅ）、キサンチン（ｘａｎｔｈｉｎｅ）、４－アセチルシトシン（４－ａｃｅｔｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ）、５－（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル（５－（ｃａｒｂｏｘｙｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌ）ｕｒａｃｉｌ）、５－カルボキシメチルアミノメチル－２－チオウリジン（５－ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ－２－ｔｈｉｏｕｒｉｄｉｎｅ）、５－カルボキシメチルアミノメチルウラシル（５－ｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｕｒａｃｉｌ）、ジヒドロウラシル（ｄｉｈｙｄｒｏｕｒａｃｉｌ）、ベータ－Ｄ－ガラクトシルキューオシン（ｂｅｔａ－Ｄ－ｇａｌａｃｔｏｓｙｌｑｕｅｏｓｉｎｅ）、イノシン（ｉｎｏｓｉｎｅ）、Ｎ^６－イソペンテニルアデニン（Ｎ^６－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）、１－メチルグアニン（１－ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ）、１－メチルイノシン（１－ｍｅｔｈｙｌｉｎｏｓｉｎｅ）、２，２－ジメチルグアニン（２，２－ｄｉｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ）、２－メチルアデニン（２－ｍｅｔｈｙｌａｄｅｎｉｎｅ）、２－メチルグアニン（２－ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ）、３－メチルシトシン（３－ｍｅｔｈｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ）、５－メチルシトシン（５－ｍｅｔｈｙｌｃｙｔｏｓｉｎｅ）、Ｎ^６－置換アデニン（Ｎ^６－ｓｕｂｓｔｉｔｕｔｅｄ ａｄｅｎｉｎｅ）、７－メチルグアニン（７－ｍｅｔｈｙｌｇｕａｎｉｎｅ）、５－メチルアミノメチルウラシル（５－ｍｅｔｈｙｌａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌｕｒａｃｉｌ）、５－メトキシアミノメチル－２－チオウラシル（５－ｍｅｔｈｏｘｙａｍｉｎｏｍｅｔｈｙｌ－２－ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、ベータ－Ｄ－マンノシルキューオシン（ｂｅｔａ－Ｄ－ｍａｎｎｏｓｙｌｑｕｅｏｓｉｎｅ）、５’－メトキシカルボキシメチルウラシル（５’－ｍｅｔｈｏｘｙｃａｒｂｏｘｙｍｅｔｈｙｌｕｒａｃｉｌ）、５－メトキシウラシル（５－ｍｅｔｈｏｘｙｕｒａｃｉｌ）、２－メチルチオ－Ｎ^６－イソペンテニルアデニン（２－ｍｅｔｈｙｌｔｈｉｏ－Ｎ^６－ｉｓｏｐｅｎｔｅｎｙｌａｄｅｎｉｎｅ）、ウラシル－５－オキシ酢酸（ｖ）（ｕｒａｃｉｌ－５－ｏｘｙａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ（ｖ））、ワイブトキソシン（ｗｙｂｕｔｏｘｏｓｉｎｅ）、シュードウラシル（ｐｓｅｕｄｏｕｒａｃｉｌ）、キューオシン（ｑｕｅｏｓｉｎｅ）、２－チオシトシン（２－ｔｈｉｏｃｙｔｏｓｉｎｅ）、５－メチル－２－チオウラシル（５－ｍｅｔｈｙｌ－２－ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、２－チオウラシル（２－ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、４－チオウラシル（４－ｔｈｉｏｕｒａｃｉｌ）、５－メチルウラシル（５－ｍｅｔｈｙｌｕｒａｃｉｌ）、ウラシル－５－オキシ酢酸メチルエステル（ｕｒａｃｉｌ－５－ｏｘｙａｃｅｔｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｙｌｅｓｔｅｒ）、３－（３－アミノ－３－Ｎ－２－カルボキシプロピル）ウラシル（３－（３－ａｍｉｎｏ－３－Ｎ－２－ｃａｒｂｏｘｙｐｒｏｐｙｌ）ｕｒａｃｉｌ）及び２，６－ジアミノプリン（２，６－ｄｉａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ）が挙げられるが、これらに限定されない。代替的には、本発明の核酸の１以上は、さまざまな営利団体のいずれかから購入され得る。

【0117】

核酸は、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のいずれかをコードする、任意のヌクレオチド配列を含み得る。本発明の実施形態では、核酸は、配列番号４３～４６（表５）のいずれか１つのヌクレオチド配列を含み得る。本発明の実施形態では、核酸は、配列番号４３～４４の両方、又は配列番号４５～４６の両方のヌクレオチド配列を含む。

【0118】

【表5】

【0119】

本発明の実施形態においては、核酸は、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質のいずれかをコードする、コドンを最適化したヌクレオチド配列を含む。如何なる特定の理論又はメカニズムにも縛られないが、ヌクレオチド配列のコドンの最適化は、ｍＲＮＡ転写産物の翻訳効率を増大させると考えられる。ヌクレオチド配列のコドンの最適化は、ネイティブのコドンを、同じアミノ酸をコードするが、細胞内でより容易に利用できるｔＲＮＡによって翻訳され得る、別のコドンに置換することを含み得、従って、翻訳効率が上昇する。ヌクレオチド配列の最適化は、翻訳に干渉するｍＲＮＡの二次構造も減少させ得、従って、翻訳効率が上昇する。

【0120】

本発明は、本明細書に記載の核酸のいずれかのヌクレオチド配列に対して相補的なヌクレオチド配列、又は本明細書に記載の核酸のいずれかのヌクレオチド配列に対し、ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列を含む、核酸も提供する。

【0121】

ストリンジェントな条件下でハイブリダイズするヌクレオチド配列は、好ましくは、高ストリンジェンシー条件下でハイブリダイズする。「高ストリンジェンシー条件」とは、ヌクレオチド配列が、非特異的ハイブリダイゼーションよりも検出可能に強い量で標的配列（本明細書に記載の核酸のいずれかのヌクレオチド配列）に特異的にハイブリダイズすることを意味する。高ストリンジェンシー条件としては、正確に相補的な配列を有するポリヌクレオチド、又は散らばったミスマッチを少しだけ含有するポリヌクレオチドを、ヌクレオチド配列にマッチしたいくつかの小領域（例えば、３～１０塩基）を偶然有するランダム配列から識別する条件が挙げられる。かかる相補的な小領域は、１４～１７又はそれ以上の塩基の全長相補体よりも容易に融解され、高ストリンジェンシーのハイブリダイゼーションにより、それらが容易に識別可能となる。比較的高ストリンジェンシーの条件としては、例えば、低塩及び／又は高温条件（約０．０２～０．１ＭのＮａＣｌ又は当量によって、約５０～７０℃の温度で提供される等）が挙げられる。かかる高ストリンジェンシー条件は、許容したとしても、ヌクレオチド配列とテンプレート鎖若しくは標的鎖との間のミスマッチをほとんど許容せず、本発明のＴＣＲのいずれかの発現を検出するのに特に好適である。条件は、漸増量のホルムアミドの添加によって、よりストリンジェントになり得ることが、一般的に理解される。

【0122】

本発明は、本明細書に記載の核酸のいずれかと、少なくとも約７０％以上、例えば、約８０％、約９０％、約９１％、約９２％、約９３％、約９４％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％又は約９９％同一であるヌクレオチド配列を含む核酸も提供する。これに関して、核酸は、本明細書に記載のヌクレオチド配列のいずれかから実質的になり得る。

【0123】

本発明の実施形態は、５’から３’まで、第１の核酸配列及び第２の核酸配列を含む単離又は精製核酸を提供し、ここで、第１及び第２の核酸配列は、それぞれ、配列番号７及び８；７及び９１；９０及び８；９０及び９１；８及び７；９１及び７；８及び９０；９１及び９０；３７及び３８；３７及び９３；９２及び３８；９２及び９３；３８及び３７；９３及び３７；３８及び９２；９３及び９２；７０及び７１；７０及び１３３；１３２及び７１；１３２及び１３３；７１及び７０；１３３及び７０のアミノ配列をそれぞれコードする。７１及び１３２；１３３及び１３２；２３及び２４；２３及び１０３；１０２及び２４；１０２及び１０３；２４及び２３；１０３及び２３；２４及び１０２；１０３及び１０２；３９及び４０；３９及び１０９；１０８及び４０；１０８及び１０９；４０及び３９；１０９及び３９；４０及び１０８；１０９及び１０８；７８及び７９；７８及び１３９。１３８及び７９；１３８及び１３９；７９及び７８；１３９及び７８；７９及び１３８；１３９及び１３８；２１及び２２；２１及び１０１；１００及び２２；１００及び１０１；２２及び２１；１０１及び２１；２２及び１００；４１及び４２；４１及び１０７；１０６及び４２；１０６及び１０７；４２及び４１；１０７及び４１。４２及び１０６；１０７及び１０６；７４及び７５；７４及び１０１；１００及び７５；１００及び１０１；７５及び７４；１０１及び７４；７５及び１００；１０１及び１００；１２４及び１２５；１２４及び１０５；１０４及び１２５；１０４及び１０５；１２５及び１２４；１０５及び１２４；１２５及び１０４；１０５及び１０４；１２６及び１２７；１２６及び１１１；１１０及び１２７；１１０及び１１１；１２７及び１２６；１１１及び１２６；１２７及び１１０；１１１及び１１０；１３４及び１３５；１４０及び１３５；１３４及び１４１；１４０及び１４１；１３５及び１３４；１３５及び１４０；１４１及び１３４；１４１及び１４０；４７及び４８；４８及び４７；４９及び５０；５０及び４９；７２及び７３；７３及び７２；９４及び９５；９５及び９４；９４及び８５；８５及び９４；９６及び９７；９７及び９６；９６及び８７；８７及び９６；８８及び８９；８９及び８８；５１及び５２；５２及び５１；５３及び５４；５４及び５３；８０及び８１；８１及び８０；５５及び５６；５６及び５５；５７及び５８；５８及び５７；７６及び７７；７７及び７６；１２８及び１２９；１２９及び１２８；１３０及び１３１；１３１及び１３０；１４２及び１４３；１４３及び１４２；１１２及び１１３；１１３及び１１２；１１８及び１１９；１１９及び１１８；１４４及び１４５；１４５及び１４４；１１４及び１１５；１１５及び１１４；１２０及び１２１；１２１及び１２０；１４６及び１４７；１４７及び１４６。１１６及び１１７；１１７及び１１６；１２２及び１２３；１２３及び１２２；１４８及び１４９；１４９及び１４８；１５０及び１５１；１５１及び１５０；１５４及び１５５；１５５及び１５４；１５２及び１５３；１５３及び１５２；１５６及び１５７；１５７及び１５６；１６０及び１６１；１６１及び１６０；１５８及び１５９；又は１５９及び１５８のアミノ配列をコードする。。

【0124】

本発明の実施形態では、単離又は精製核酸は、第１及び第２のヌクレオチド配列の間に介在する第３のヌクレオチド配列を更に含み、第３のヌクレオチド配列は、切断可能なリンカーペプチドをコードしている。本発明の実施形態では、切断可能なリンカーペプチドは、配列番号２５のアミノ酸配列を含む。

【0125】

本発明の核酸は、組換え発現ベクターに組込まれ得る。これに関して、本発明は、本発明の核酸のいずれかを含む組換え発現ベクターを提供する。本発明の一実施形態においては、組換え発現ベクターは、α鎖、β鎖及びリンカーペプチドをコードするヌクレオチド配列を含む。

【0126】

本明細書における目的のためには、用語「組換え発現ベクター」とは、宿主細胞によるｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドの発現を可能にする、遺伝学的に改変されたオリゴヌクレオチド又はポリヌクレオチドコンストラクトを意味し、この場合、コンストラクトは、ｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドをコードするヌクレオチド配列を含み、ベクターは、細胞内でｍＲＮＡ、タンパク質、ポリペプチド、又はペプチドを発現させるのに十分な条件下で細胞と接触させられる。本発明のベクターは、全体としては天然には存在しない。しかし、該ベクターの一部は天然に存在し得る。本発明の組換え発現ベクターは、ＤＮＡ及びＲＮＡ（一本鎖又は二本鎖であり得、合成され得るか、又は一部が天然のソースから得られ得、天然、非天然又は改変されたヌクレオチドを含有し得る）を含む（がこれらに限定されない）、任意のタイプのヌクレオチドを含み得る。組換え発現ベクターは、天然に存在するヌクレオチド間結合、天然に存在しないヌクレオチド間結合、又は両方のタイプの結合を含み得る。好ましくは、天然に存在しない又は改変されたヌクレオチド又はヌクレオチド間結合は、ベクターの転写や複製を妨害しない。

【0127】

本発明の組換え発現ベクターは、任意の好適な組換え発現ベクターであり得、任意の好適な宿主細胞を形質転換又はトランスフェクションするために用いられ得る。好適なベクターとしては、プラスミド及びウイルス等の増殖及び増幅のため、若しくは発現のため、又は両方のために設計されたベクターが挙げられる。ベクターは、ｐＵＣシリーズ（Ｆｅｒｍｅｎｔａｓ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔシリーズ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ，ＬａＪｏｌｌａ，ＣＡ）、ｐＥＴシリーズ（Ｎｏｖａｇｅｎ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）、ｐＧＥＸシリーズ（Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ，Ｕｐｐｓａｌａ，Ｓｗｅｄｅｎ）、及びｐＥＸシリーズ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ，Ｐａｌｏ Ａｌｔｏ，ＣＡ）から選択され得る。λＧＴ１０、λＧＴ１１、λＺａｐＩＩ（Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ）、λＥＭＢＬ４及びλＮＭ１１４９等のバクテリオファージベクターも用いられ得る。植物発現ベクターの例としては、ｐＢＩ０１、ｐＢＩ１０１．２、ｐＢＩ１０１．３、ｐＢＩ１２１及びｐＢＩＮ１９（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）が挙げられる。動物発現ベクターの例としては、ｐＥＵＫ－Ｃｌ、ｐＭＡＭ及びｐＭＡＭｎｅｏ（Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）が挙げられる。好ましくは、組換え発現ベクターは、ウイルスベクター、例えば、レトロウイルスベクターである。特に好ましい実施形態においては、組換え発現ベクターはＭＳＧＶ１ベクターである。本発明の実施形態では、組換え発現ベクターは、トランスポゾン又はレンチウイルスベクターである。

【0128】

本発明の組換え発現ベクターは、例えば、Ｇｒｅｅｎ ａｎｄ Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．（上記）に記載の標準的な組換えＤＮＡ技術を用いて調製され得る。環状又は線状の発現ベクターのコンストラクトは、原核又は真核の宿主細胞において機能する複製系を含有するように調製され得る。複製系は、例えば、ＣｏｌＥｌ、２μプラスミド、λ、ＳＶ４０、ウシ乳頭腫ウイルス等に由来し得る。

【0129】

望ましくは、組換え発現ベクターは、適宜、ベクターがＤＮＡベースであるかＲＮＡベースであるかを考慮して、ベクターが導入される宿主細胞の種類（例えば、細菌、真菌、植物、又は動物）に特異的な、転写、並びに翻訳の開始及び終止コドン等の調節配列を含む。

【0130】

組換え発現ベクターは、形質転換又はトランスフェクションされた宿主細胞の選択を可能にする、１以上のマーカー遺伝子を含み得る。マーカー遺伝子は、殺生物剤耐性、例えば、抗生物質、重金属などに対する耐性、原栄養性を提供するための栄養要求性宿主細胞における補完等を含む。本発明の発現ベクターに好適なマーカー遺伝子としては、例えば、ネオマイシン／Ｇ４１８耐性遺伝子、ハイグロマイシン耐性遺伝子、ヒスチジノール耐性遺伝子、テトラサイクリン耐性遺伝子及びアンピシリン耐性遺伝子が挙げられる。

【0131】

組換え発現ベクターは、ＴＣＲ、ポリペプチド、若しくはタンパク質をコードするヌクレオチド配列に、又は、ＴＣＲ、ポリペプチド、若しくはタンパク質をコードするヌクレオチド配列に相補的であるか、又はハイブリダイズするヌクレオチド配列に作動可能に結合したネイティブの、又は非ネイティブのプロモーターを含み得る。プロモーター、例えば、強力なプロモーター、弱いプロモーター、誘導性プロモーター、組織特異的プロモーター及び発生特異的（ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ－ｓｐｅｃｉｆｉｃ）プロモーターの選択は、当業者の通常の技術の範囲内である。同様に、ヌクレオチド配列をプロモーターと組合せることも、当業者の技術の範囲内である。プロモーターは、非ウイルスプロモーター、又はウイルスプロモーター、例えば、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）プロモーター、ＳＶ４０プロモーター、ＲＳＶプロモーター、及びマウス幹細胞ウイルス長鎖末端反復配列（ｌｏｎｇ－ｔｅｒｍｉｎａｌ ｒｅｐｅａｔ）において見受けられるプロモーターであってもよい。

【0132】

本発明の組換え発現ベクターは、一過性の発現のため、安定した発現のためのいずれか、又はその両方のために設計され得る。また、組換え発現ベクターは、構成的発現のため、又は誘導性発現のために作製され得る。

【0133】

更に、組換え発現ベクターは、自殺遺伝子を含むように作製され得る。用語「自殺遺伝子」は、本明細書で用いられる場合、自殺遺伝子を発現する細胞を死に至らしめる遺伝子を指す。自殺遺伝子は、その遺伝子を発現する細胞に対し物質、例えば、薬物に対する感受性を付与し、細胞が該物質と接触するとき又は該物質に曝露されるときに細胞を死に至らしめる遺伝子であってもよい。自殺遺伝子は、当該技術分野において公知であり、例えば、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）チミジンキナーゼ（ＴＫ）遺伝子、シトシンデアミナーゼ、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ、ニトロレダクターゼ及び誘導性カスパーゼ９遺伝子の系が挙げられる。

【0134】

本発明の別の実施形態は、本明細書に記載の組換え発現ベクターのいずれかを含む宿主細胞を更に提供する。用語「宿主細胞」は、本明細書で用いられる場合、本発明の組換え発現ベクターを含有し得る任意の種類の細胞を指す。宿主細胞は、真核細胞、例えば、植物、動物、真菌又は藻類であり得、又は、原核細胞、例えば、細菌若しくは原生動物であってもよい。宿主細胞は、培養細胞、又は、初代細胞であり得、即ち、生物、例えば、ヒト又はマウスから直接単離され得る。宿主細胞は、接着細胞、又は、浮遊細胞、即ち、懸濁物中で増殖する細胞であってもよい。好適な宿主細胞は、当該技術分野において公知であり、例えば、ＤＨ５α Ｅ．ｃｏｌｉ細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞、サルＶＥＲＯ細胞、ＣＯＳ細胞、ＨＥＫ２９３細胞等が挙げられる。組換え発現ベクターを増幅又は複製する目的のためには、宿主細胞は、好ましくは、原核細胞、例えば、ＤＨ５α細胞である。組換えＴＣＲ、ポリペプチド又はタンパク質を産生する目的のためには、宿主細胞は、好ましくは、哺乳動物細胞である。最も好ましくは、宿主細胞はヒト細胞である。宿主細胞は任意の種類の細胞であり得、任意の種類の組織由来であり得、任意の発生段階のものであってもよいが、宿主細胞は、好ましくは、末梢血リンパ球（ＰＢＬ）又は末梢血単核球（ＰＢＭＣ）である。より好ましくは、宿主細胞は、Ｔ細胞である。本発明の一実施形態では、宿主細胞は、ヒトリンパ球である。本発明の別の実施形態では、宿主細胞は、Ｔ細胞、ナチュラルキラーＴ（ＮＫＴ）細胞、イン変異体ナチュラルキラーＴ（ｉＮＫＴ）細胞、及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞から選択される。本発明の更に別の実施形態は、配列番号２９又は３０のペプチドに対して抗原特異性を有するＴＣＲを発現する宿主細胞を製造する方法を提供し、該方法は、細胞にベクターを導入することができる条件下で、細胞を、本明細書に記載のベクターのうちのいずれかと接触させることを含む。

【0135】

本明細書における目的のためには、Ｔ細胞は、任意のＴ細胞（培養Ｔ細胞（例えば、初代Ｔ細胞）、若しくは培養Ｔ細胞株（例えば、Ｊｕｒｋａｔ、ＳｕｐＴ１など）由来のＴ細胞、又は哺乳動物から得られたＴ細胞等）であってもよい。哺乳動物から得られる場合、Ｔ細胞は、多数のソース（血液、骨髄、リンパ節、胸腺又は他の組織若しくは体液が含まれるが、これらに限定されない）から得られ得る。Ｔ細胞は、濃縮又は精製もされ得る。好ましくは、Ｔ細胞はヒトＴ細胞である。Ｔ細胞は、任意の種類のＴ細胞であり得、任意の発生段階のものであってもよい（ＣＤ４^＋／ＣＤ８^＋二重陽性Ｔ細胞、ＣＤ４^＋ヘルパーＴ細胞、例えば、Ｔｈ_１及びＴｈ_２細胞、ＣＤ４^＋Ｔ細胞、ＣＤ８^＋Ｔ細胞（例えば、細胞傷害性Ｔ細胞）、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）、メモリーＴ細胞（例えば、セントラルメモリーＴ細胞及びエフェクターメモリーＴ細胞）、ナイーブＴ細胞等が挙げられるが、これらに限定されない）。

【0136】

本明細書に記載の、少なくとも１の宿主細胞を含む細胞集団も本発明により提供される。細胞集団は、記載された組換え発現ベクターのいずれかを含む宿主細胞を、いずれの組換え発現ベクターも含まない、少なくとも１の他の細胞、例えば、宿主細胞（例えば、Ｔ細胞）、又はＴ細胞以外の細胞、例えば、Ｂ細胞、マクロファージ、好中球、赤血球、肝細胞、内皮細胞、上皮細胞、筋肉細胞、脳細胞等に加えて含む不均一集団であってもよい。代替的には、細胞集団は、実質的に均一な集団であって、組換え発現ベクターを含む宿主細胞を主に含む（例えば、実質的にそれを含む）集団であってもよい。集団はまた、集団の全ての細胞が組換え発現ベクターを含むように、集団の全ての細胞が、組換え発現ベクターを含む単一の宿主細胞のクローンである、細胞のクローン集団でもあってもよい。本発明の一実施形態においては、細胞集団は、本明細書に記載のとおりの組換え発現ベクターを含む宿主細胞を含むクローン集団である。

【0137】

本発明の一実施形態においては、集団中の細胞数が急速に増幅され得る。Ｔ細胞数の増幅は、例えば、米国特許第８，０３４，３３４号；米国特許第８，３８３，０９９号；米国特許出願公開番号第２０１２／０２４４１３３号；Ｄｕｄｌｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ．，２６：３３２－４２（２００３）；及びＲｉｄｄｅｌｌ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，１２８：１８９－２０１（１９９０）に記載のとおりの、当該技術分野で公知の多くの方法のいずれかによって達成され得る。一実施形態においては、Ｔ細胞数の増幅は、Ｔ細胞をＯＫＴ３抗体、ＩＬ－２、及びフィーダーＰＢＭＣ（例えば、放射線照射された同種異系ＰＢＭＣ）と共に培養することによって行われる。

【0138】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、組換え発現ベクター、及び宿主細胞（その集団を含む）は、単離及び／又は精製され得る。用語「単離された」は、本明細書で用いられる場合、その自然環境から取り出されたことを意味する。用語「精製された」は、本明細書で用いられる場合、純度が増したことを意味するが、「純度」は、相対的な用語であって、必ずしも絶対的純度として解釈されるべきでない。例えば、純度は、少なくとも約５０％であり得、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％を超え得、又は約１００％であってもよい。

【0139】

本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、組換え発現ベクター、及び宿主細胞（その集団を含む）は、これら全てが、以降、「本発明のＴＣＲ材料」と総称されるものであるが、医薬組成物等の、組成物へと製剤化され得る。これに関して、本発明は、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、発現ベクター、及び宿主細胞（その集団を含む）のいずれか、並びに医薬的に許容可能な担体を含む医薬組成物を提供する。本発明のＴＣＲ材料のいずれかを含有する本発明の医薬組成物は、１超の本発明のＴＣＲ材料、例えば、ポリペプチド及び核酸、又は２以上の異なるＴＣＲを含み得る。代替的には、医薬組成物は、化学療法剤等、別の医薬的に活性な物質又は薬物、例えば、アスパラギナーゼ（ａｓｐａｒａｇｉｎａｓｅ）、ブスルファン（ｂｕｓｕｌｆａｎ）、カルボプラチン（ｃａｒｂｏｐｌａｔｉｎ）、シスプラチン（ｃｉｓｐｌａｔｉｎ）、ダウノルビシン（ｄａｕｎｏｒｕｂｉｃｉｎ）、ドキソルビシン（ｄｏｘｏｒｕｂｉｃｉｎ）、フルオロウラシル（ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ）、ゲムシタビン（ｇｅｍｃｉｔａｂｉｎｅ）、ヒドロキシウレア（ｈｙｄｒｏｘｙｕｒｅａ）、メトトレキサート（ｍｅｔｈｏｔｒｅｘａｔｅ）、パクリタキセル（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ）、リツキシマブ（ｒｉｔｕｘｉｍａｂ）、ビンブラスチン（ｖｉｎｂｌａｓｔｉｎｅ）、ビンクリスチン（ｖｉｎｃｒｉｓｔｉｎｅ）など）と組合せて、本発明のＴＣＲ材料を含み得る。

【0140】

好ましくは、担体は医薬的に許容可能な担体である。医薬組成物に関して、担体は、考慮中の特定の本発明のＴＣＲ材料のために従来用いられているもののいずれかであってもよい。投与できる組成物を調製するための方法は、当業者に公知又は明らかであり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，第２２版，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ（２０１２）においてより詳細に記載されている。医薬的に許容可能な担体は、使用条件下で有害な副作用又は毒性を有さないものであることが好ましい。

【0141】

担体の選択は、特定の本発明のＴＣＲ材料によって、及び本発明のＴＣＲ材料を投与するために用いられる特定の方法によってある程度決定される。従って、多様な、本発明の医薬組成物の好適な製剤がある。好適な製剤としては、非経口、皮下、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、腫瘍内及び腹腔内投与のための、いずれかの製剤を含み得る。本発明のＴＣＲ材料を投与するために、１超の経路が用いられ得、特定の例においては、特定の経路が、別の経路よりも迅速且つ効果的な反応をもたらし得る。

【0142】

好ましくは、本発明のＴＣＲ材料は、注射により、例えば、静脈内に投与される。本発明のＴＣＲ材料が、本発明のＴＣＲを発現する宿主細胞（その集団を含む）である場合には、注射用の細胞のための医薬的に許容可能な担体としては、任意の等張性の担体、例えば、通常の生理食塩水（水中約０．９０％ ｗ／ｖのＮａＣｌ、水中約３００ｍＯｓｍ／ＬのＮａＣｌ、又は水１リットル当たり約９．０ｇのＮａＣｌ）、ＮＯＲＭＯＳＯＬ Ｒ電解質溶液（Ａｂｂｏｔｔ，Ｃｈｉｃａｇｏ，ＩＬ）、ＰＬＡＳＭＡ－ＬＹＴＥ Ａ（Ｂａｘｔｅｒ，Ｄｅｅｒｆｉｅｌｄ，ＩＬ）、水中約５％のデキストロース、又は乳酸リンゲル液等を含み得る。一実施形態においては、医薬的に許容可能な担体には、ヒト血清アルブミンが補充される。

【0143】

本発明の目的のためには、投与される本発明のＴＣＲ材料の量又は用量（例えば、本発明のＴＣＲ材料が１以上の細胞の場合、細胞数）は、被験者又は動物において、適切な期間にわたって、例えば、治療的又は予防的応答をもたらすのに十分でなければならない。例えば、本発明のＴＣＲ材料の用量は、がん抗原（例えば、突然変異ＲＡＳ）と結合するのに、又は、投与時から約２時間以上、例えば、１２～２４時間以上という期間でがんを検出、治療若しくは予防するのに十分でなければならない。特定の実施形態においては、期間は、もっと長くなり得る。用量は、特定の本発明のＴＣＲ材料の有効性、及び動物（例えば、ヒト）の状態と、治療する動物（例えば、ヒト）の体重とによって決定される。

【0144】

投与される用量を決定するための多くのアッセイが当該技術分野において公知である。本発明の目的のためには、それぞれが異なる用量のＴ細胞を与えられる１組の哺乳動物のうち、１匹の哺乳動物への、ある特定の用量のかかるＴ細胞の投与の際の、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質を発現するＴ細胞によって標的細胞が溶解される程度、又は、ＩＦＮ－γが分泌される程度を比較することを含むアッセイが、哺乳動物に投与する開始用量を決定するために用いられ得る。一定用量の投与の際の、標的細胞が溶解する程度、又はＩＦＮ－γが分泌される程度は、当該技術分野において公知の方法によってアッセイされ得る。

【0145】

本発明のＴＣＲ材料の用量は、特定の本発明のＴＣＲ材料の投与に伴い得る任意の有害な副作用の存在、性質及び程度によっても決定される。典型的には、主治医が、年齢、体重、全般的健康、食習慣、性別、投与する本発明のＴＣＲ材料、投与経路、及び治療されるがんの重篤度等、様々な要因を考慮に入れて、各個々の患者を治療するための本発明のＴＣＲ材料の用量を決定する。本発明のＴＣＲ材料が細胞集団である実施形態においては、注入あたりで投与される細胞の数は、例えば、約１×１０^６から約１×１０^１２細胞又はより多くまで変動し得る。特定の実施形態においては、１×１０^６未満の細胞が投与され得る。

【0146】

当業者は、本発明のＴＣＲ材料の治療効力又は予防効力が修飾によって増大するよう、本発明のＴＣＲ材料（ｉｎｖｅｎｔｉｖｅ ＴＣＲ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｖｅｎｔｉｏｎ）が、いくつもの形に修飾され得ることを、容易に理解する。例えば、本発明のＴＣＲ材料は、直接的又は化学療法剤への架橋物（ｂｒｉｄｇｅ）を介する間接的のいずれかでコンジュゲート化され得る。化合物を化学療法剤にコンジュゲート化する実務は、当該技術分野において公知である。当業者は、本発明のＴＣＲ材料の機能には必要でない、本発明のＴＣＲ材料における部位が、架橋物及び／又は化学療法剤を結合させるのに好適な部位であると認識する（但し、架橋物及び／又は化学療法剤は、本発明のＴＣＲ材料に結合して、本発明のＴＣＲ材料の機能（即ち、突然変異ＲＡＳに結合する能力、又はがんを検出、治療若しくは予防する能力）を妨害しないものとする）。

【0147】

本発明の医薬組成物、ＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞及び細胞集団が、がんを治療又は予防する方法において用いられ得ることが企図される。特定の理論には縛られないが、本発明のＴＣＲは、突然変異ＲＡＳに特異的に結合すると考えられ、その結果、ＴＣＲ（又は関連する本発明のポリペプチド又はタンパク質）が、細胞に発現すると、突然変異ＲＡＳを発現する標的細胞に対する免疫反応を調節することができる。これに関して、本発明の実施態様は、哺乳動物におけるがんを治療又は予防する方法であって、本明細書に記載の医薬組成物、ＴＣＲ、ポリペプチド、若しくはタンパク質のいずれか、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む、任意の核酸又は組換え発現ベクター、又は本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド若しくはタンパク質のいずれかをコードする組換えベクターを含む、任意の宿主細胞又は細胞集団を、哺乳動物におけるがんを治療又は予防するのに有効な量で、哺乳動物に投与することを含む、方法を提供する。

【0148】

本発明の実施形態は、哺乳動物において癌に対する免疫応答を誘導する方法であって、本明細書に記載の医薬組成物、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれか、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸又は組み換え発現ベクターのいずれか、を哺乳動物において癌に対する免疫応答を誘導するのに有効な量で哺乳動物に投与することを含む、方法を提供する。

【0149】

本発明の一実施形態は、哺乳動物におけるがんの治療又は予防において用いるための、本明細書に記載の医薬組成物、ＴＣＲ、ポリペプチド、若しくはタンパク質のいずれか、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む、任意の核酸若しくは組換え発現ベクター、又は本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、若しくはタンパク質のいずれかをコードする組換えベクターを含む、任意の宿主細胞又は細胞集団を提供する。

【0150】

本発明の実施形態は、哺乳動物における癌に対する免疫応答の誘導における使用のために、本明細書に記載の医薬組成物、ＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれか、本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれかをコードするヌクレオチド配列を含む核酸又は組換え発現ベクターのいずれか、又は本明細書に記載のＴＣＲ、ポリペプチド、又はタンパク質のいずれかをコードする組換えベクターを含む宿主細胞又は細胞の集団のいずれかを提供する。

【0151】

用語「治療する」及び「予防する」並びにそれらの派生語は、本明細書で用いられる場合、１００％の、又は完全な治療若しくは予防を必ずしも意味しない。むしろ、当業者が潜在的な利益又は治療効果を有すると認識する、様々な程度の治療又は予防が存在する。これに関して、本発明の方法は、任意のレベルの任意の量の、哺乳動物におけるがんの治療又は予防を提供し得る。更に、本発明の方法により提供される治療又は予防は、治療又は予防される１以上の、がんの状態又は症状の治療又は予防を含み得る。例えば、治療又は予防は、腫瘍の退行を促進することを含み得る。また、本明細書における目的のためには、「予防」は、がん、又はその症状若しくは状態の発症を遅延させることを包含し得る。代替的に又は追加的に、「予防」は、がん、又はその症状若しくは状態の再発を予防又は遅延させることを包含し得る。

【0152】

哺乳動物におけるがんの存在を検出する方法も提供される。該方法は、（ｉ）哺乳動物由来の１以上の細胞を含む試料と、本明細書に記載の、本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、細胞集団、又は医薬組成物のいずれかとを接触させ、それにより複合体を形成すること、及び（ｉｉ）該複合体を検出することを含み、該複合体の検出が哺乳動物におけるがんの存在を示す。

【0153】

本発明の、哺乳動物におけるがんを検出する方法に関して、細胞の試料は、全細胞、その溶解物、又は全細胞溶解物の画分、例えば、核若しくは細胞質画分、全タンパク質画分、又は核酸画分を含む試料であってもよい。

【0154】

本発明のがんを検出する方法の目的のためには、接触は、哺乳動物に関してインビトロ又はインビボで行い得る。好ましくは、接触はインビトロである。

【0155】

また、複合体の検出は、当該技術分野で公知の、任意の数の方法によって行われ得る。例えば、本明細書に記載の本発明のＴＣＲ、ポリペプチド、タンパク質、核酸、組換え発現ベクター、宿主細胞、又は細胞集団は、例えば、放射性同位体、蛍光色素（例えば、フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）、フィコエリトリン（ＰＥ））、酵素（例えば、アルカリホスファターゼ、セイヨウワサビペルオキシダーゼ）、及び元素粒子（例えば、金粒子）等の検出可能な標識で標識され得る。

【0156】

宿主細胞又は細胞集団が投与される、本発明の方法の目的のためには、細胞は、哺乳動物に対して同種異系又は自己の細胞であってもよい。好ましくは、細胞は哺乳動物に対して自己である。

【0157】

本発明の方法に関して、がんは例えば、急性リンパ球性がん、急性骨髄性白血病、肺胞横紋筋肉腫、骨がん、脳がん、乳がん、肛門、肛門管又は肛門直腸のがん、眼のがん、肝内胆管のがん、関節のがん、頸部、胆嚢又は胸膜のがん、鼻、鼻腔、又は中耳のがん、口腔のがん、膣のがん、外陰のがん、慢性リンパ球性白血病、慢性骨髄性がん、結腸がん、結腸直腸がん、子宮内膜がん、食道がん、子宮頸がん、胃腸カルチノイド腫瘍、神経膠腫、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、腎臓がん、喉頭がん、肝臓がん、肺がん、悪性中皮腫、黒色腫、多発性骨髄腫、鼻咽頭がん、非ホジキンリンパ腫、中咽頭のがん、卵巣がん、陰茎のがん、膵臓がん、腹膜がん、大網がん及び腸間膜がん、咽頭がん、前立腺がん、直腸がん、腎臓がん、皮膚がん、小腸がん、軟部組織がん、胃がん、精巣がん、甲状腺がん、子宮のがん、尿管がん及び膀胱がんのいずれかを含む、任意のがんであってもよい。好ましいがんは、膵臓がん、結腸直腸がん、肺がん、子宮内膜がん、卵巣がん、又は前立腺がんである。好ましくは、肺がんは肺腺がんであり、卵巣がんは上皮性卵巣がんであり、膵臓がんは膵臓腺がんである。本発明の一実施形態においては、がんは、突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列であって、突然変異ヒトＫＲＡＳ、突然変異ヒトＨＲＡＳ、又は突然変異ヒトＮＲＡＳのアミノ酸配列である、突然変異ヒトＲＡＳアミノ酸配列を発現する。がんによって発現される突然変異ヒトＫＲＡＳ、突然変異ヒトＨＲＡＳ、及び突然変異ヒトＮＲＡＳは、本発明の他の態様に関して本明細書に記載されるとおりであってもよい。

【0158】

本発明の方法において言及される哺乳動物は、任意の哺乳動物であってもよい。用語「哺乳動物」は、本明細書で用いられる場合、マウス及びハムスター等、ネズミ目の哺乳動物、及びウサギ等、ウサギ目の哺乳動物を含むが、これらに限定されない、任意の哺乳動物を指す。哺乳動物が、ネコ科の動物（ネコ）及びイヌ科の動物（イヌ）を含むネコ目由来であることが好ましい。哺乳動物が、ウシ科の動物（ウシ）及びイノシシ科の動物（ブタ）を含むウシ目、又はウマ科の動物（ウマ）を含むウマ目（Ｐｅｒｓｓｏｄａｃｔｙｌａ）由来であることが、より好ましい。哺乳動物が、霊長目、セボイド（Ｃｅｂｏｉｄｓ）目若しくはシモイド（Ｓｉｍｏｉｄｓ）目（サル）又は、類人（Ａｎｔｈｒｏｐｏｉｄｓ）目（ヒト及び類人猿）であることが、最も好ましい。特に好ましい哺乳動物は、ヒトである。

【0159】

以上は、単に実施形態の例示であることに留意されたい。他の例示的な実施形態は、本明細書の説明の全体から明らかである。また、これらの実施形態の各々は、本明細書で提供される他の実施形態と様々に組み合わせて使用することができることも、当業者は理解するであろう。

【0160】

以下の実施例は、本発明を更に説明するが、もちろん、決してその範囲を限定するものとして解釈すべきではない。

【実施例】

【0161】

実施例１ 本実施例は、大腸癌患者４３９１の腫瘍片からＲＡＳ Ｇ１２Ｖに反応するＴＩＬの同定を実証するものである。この実施例はまた、患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１からのＴＩＬによって認識される最小エピトープの同定を実証している。

【0162】

ＴＩＬを、５μｇ／ｍｌのロングペプチド（ＬＰ）（配列番号３０であるＷＴ、又は配列番号２７であるＧ１２Ｖ）を負荷した、又はＲＡＳ ＷＴ又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖをコードするタンデムミニ遺伝子（ＴＭＧ）をトランスフェクトした樹状細胞（ＤＣ）に対する４１ＢＢ＋／ＯＸ４０＋フローサイトメトリーアッセイによってテストし、反応性についてのスクリーニングを行った。

【0163】

患者４３９１の腫瘍片Ｆ１、Ｆ１３、及び腫瘍片Ｆ２、Ｆ３、Ｆ５の組み合わせからＴＩＬｓを分離した。反応性は、ＦＡＣＳによってＯＸ４０及び４－１ＢＢのアップレギュレーションを検出することによって測定された。ＴＩＬは、ｌｉｖｅ／ＣＤ３＋／ＣＤ８＋のゲーティングを行った。

【0164】

その結果を図１Ａ－１Ｄに示す。フラグメント１（Ｆ１；Ｇ１２Ｖ ＴＭＧで検査すると７０％の細胞が反応した）に反応性があり、また他のいくつかのフラグメントにも（頻度は低いが）反応性があった。

【0165】

腫瘍片Ｆ１からのＴＩＬは、ネガティブコントロールとして５μｇ／ｍｌのＲＡＳ最小エピトープ（ＭＥ）又はＲＡＳ ＷＴ ＬＰ、ポジティブコントロールとしてＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰを負荷した自己ＤＣ、ＣＯＳ７細胞（ＨＬＡ－Ａ０２：０１安定発現）又はＣＯＳ７細胞（ＨＬＡ－Ａ０３：０１安定発現）と共培養させた。ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）で培養したＴＩＬもネガティブコントロールとした。ミニマムエピトープを表６に示す。

【0166】

【表6】

【0167】

結果は図２Ａ及び図２Ｂにある。反応性は、４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーアッセイで試験した。ＭＥに対する反応性が最も高かったのはＭＥ ８であった。

【0168】

実施例２
本実施例は、患者４３９１の腫瘍片Ｆ１から分離したＴＩＬが、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを特異的に認識することを示している。

【0169】

患者４３９１の腫瘍片Ｆ１からのＴＩＬを、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ ８又はＲＡＳ ＬＰ（Ｇ１２Ｖ又はＷＴ）を負荷した自家ＤＣと共培養した。単独で培養したＴＩＬをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８抗体との共培養により非特異的に刺激されたＴＩＬをポジティブコントロールとした。反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴによって試験した。その結果を図３に示す。

【0170】

実施例３
本実施例は、患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１から分離したＴＩＬが、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２が提示するＲＡＳ Ｇ１２Ｖを特異的に認識することを示している。

【0171】

ＭＨＣ－Ｉ拘束要素を見つけるために、患者４３９１の腫瘍断片Ｆ１から単離したＴＩＬを、患者４３９１が発現する４種類のＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０３：０１、ＨＬＡ－Ａ＊１１：０１、ＨＬＡ－Ｂ＊５５：０１又はＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２）の一つをコードするプラスミドでトランスフェクトしたＣＯＳ７セルラインと共培養させた。細胞には、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ ８（図４Ａ）、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＬＰ（図４Ｂ）、又はＲＡＳ ＷＴ ＬＰ（図４Ｃ）が負荷された。反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴで試験した。ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２をトランスフェクトしたＣＯＳ７に対するＦ１の結果を含む（図４Ｄ）。

【0172】

実施例４
本実施例は、患者４３９１のＴＩＬから、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２によって提示されるＧ１２Ｖ変異を有するヒトＲＡＳに対して抗原特異性を有するＴＣＲの単離を実証するものである。

【0173】

患者４３９１の腫瘍片Ｆ１からのＴＩＬは、実施例１－３において、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを認識し、ＷＴ ＲＡＳを認識しないことを決定した。

【0174】

反応性ＴＣＲの配列を決定するために、反応性ＴＩＬはＴ細胞活性化マーカーである４－１ＢＢ／ＯＸ４０のアップレギュレーションに基づいて蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）により選別された。その後、細胞を溶解し、ＴＣＲ転写物をサンガー配列決定した。

【0175】

実施例５
本実施例は、実施例４のヒト抗Ｇ１２Ｖ ＴＣＲをコードするヌクレオチド配列と、改変されたマウス定常領域とを含むレトロウイルスベクターを調製する方法を実証する。

【0176】

実施例４のヒトＧ１２Ｖ ＲＡＳ反応性４３９１ ＴＣＲをコードし、システイン置換されたＬＶＬ修飾マウス定常領域を含む核酸配列を、レトロウイルス発現ベクターにクローニングした。このα鎖マウス定常領域は、４８位のＸがＣｙｓ、１１２位のＸがＬｅｕ、１１４位のＸがＩｌｅ、１１５位のＸがＶａｌである配列番号１７のアミノ酸配列で構成されていた。得られた全長α鎖は、配列番号２３のアミノ酸配列で構成されていた。β鎖定常領域は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、５７位のＸはＣｙｓである。得られた全長β鎖は、配列番号２４のアミノ酸配列を含む。ＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むリンカーが、α鎖定常領域とβ鎖可変領域との間に配置された。提供されたような配列は、コドン最適化されている。

【0177】

クローニングを可能にするために、Ｎ－末端シグナルペプチド内の２番目のアミノ酸はアラニンに変更された（Ａ）。この例は、５’ＴＣＲβからＴＣＲαの３’方向へのバイシストロンベクターの合成を説明しているが、ＴＣＲβからＴＣＲαの順序は逆にすることができる。

【0178】

ＴＣＲα鎖及びβ鎖可変領域のアミノ酸配列を表７に示す。ＣＤＲには下線を引いてある。

【0179】

【表7-1】

【0180】

【表7-2】

【0181】

実施例６
本実施例は、実施例５のレトロウイルスベクターを導入したＰＢＬがＲＡＳ Ｇ１２Ｖを特異的に認識することを実証している。

【0182】

健康なドナーのＰＢＬに４３９１ ＴＣＲを導入した。形質導入されたＰＢＬを、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＭＥ ＷＴ ４（ＭＥ ８のＷＴ配列；ＡＧＧＶＧＫＳＡＬ（配列番号２６））を負荷した自己ＤＣと共培養した。

【0183】

反応性はＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図５Ａ）と４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーでＣＤ８＋へのゲーティング（図５Ｂ）とＣＤ４へのゲーティング（図５Ｃ）で検証された。

【0184】

実施例７
本実施例は、大腸がん患者４３８５の腫瘍片からＲＡＳ Ｇ１２Ｖに反応するＴＩＬを同定したことを示すものである。

【0185】

患者４３８５の腫瘍断片Ｆ１１から単離されたＴＩＬは、ペプチドプール（ＰＰ）を負荷したＤＣ、又はタンデムミニ遺伝子（ＴＭＧ）ｍＲＮＡをトランスフェクトしたＤＣに対するＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴアッセイを用いて反応性をスクリーニングされた。

【0186】

ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ抗原を含むＴＭＧ２及びＰＰ３に対して、腫瘍片Ｆ１１で反応性ＴＩＬが確認された。その結果は図６にある。

【0187】

特異的なペプチドをテストした結果、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖに対する反応性があることが判明した。

【0188】

実施例８
本実施例は、患者４３８５のＴＩＬから、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２によって提示されるヒトＲＡＳ Ｇ１２Ｖ変異に対する抗原特異性を有するＴＣＲの単離を実証するものである。

【0189】

患者４３８５の腫瘍片Ｆ１１からのＴＩＬは、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを認識し、ＲＡＳ ＷＴを認識しないことが確認された。

【0190】

反応性ＴＣＲの配列を決定するために、反応性ＴＩＬはＴ細胞活性化マーカーである４－１ＢＢ／ＯＸ４０のアップレギュレーションに基づいて蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）により選別された。その後、細胞を溶解し、ＴＣＲ転写物をサンガー配列決定した。

【0191】

実施例９
本実施例は、実施例８のヒト抗Ｇ１２Ｖ ＴＣＲをコードするヌクレオチド配列と、改変されたマウス定常領域とを含むレトロウイルスベクターを調製する方法を示すものである。

【0192】

ヒトＲＡＳ Ｇ１２Ｖ －反応性４３８５ ＴＣＲをコードし、システイン置換されたＬＶＬ修飾マウス定常領域を含む核酸配列が、レトロウイルス発現ベクターにクローニングされた。このα鎖マウス定常領域は、配列番号１７のアミノ酸配列を含み、４８位のＸはＣｙｓ、１１２位のＸはＬｅｕ、１１４位のＸはＩｌｅ、そして１１５位のＸはＶａｌであることがわかった。得られた全長α鎖は、配列番号３９のアミノ酸配列で構成されていた。β鎖定常領域は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、５７位のＸはＣｙｓである。得られた全長β鎖は、配列番号４０のアミノ酸配列を含む。ＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むリンカーが、α鎖定常領域とβ鎖可変領域との間に配置された。提供されたような配列は、コドン最適化されている。

【0193】

クローニングを可能にするために、Ｎ－末端シグナルペプチド内の２番目のアミノ酸はアラニンに変更された（Ａ）。この例は、５’ＴＣＲβからＴＣＲαの３’方向へのバイシストロンベクターの合成を説明しているが、ＴＣＲβからＴＣＲαの順序は逆にすることができる。

【0194】

ＴＣＲα鎖及びβ鎖可変領域のアミノ酸配列を表８に示す。ＣＤＲには下線を引いてある。

【0195】

【表8-1】

【0196】

【表8-2】

【0197】

実施例１０
本実施例は、腫瘍片Ｆ１１のＴＩＬのＲＡＳ Ｇ１２Ｖに対する反応性を、Ｆ１１からもともと分離されたＴＣＲ４と比較して示している。

【0198】

４３８５（ＴＣＲ４）を４３８５ ＰＢＬにウイルス導入した。形質転換細胞及びＴＩＬ Ｆ１１を、ＬＰ／ＭＥとして示されたペプチドを負荷したＤＣと、又はＴＭＧ／全長（ＦＬ）として示された遺伝子をトランスフェクトしたｍＲＮＡと共培養した。反応性は、ＣＤ８＋（図７Ａ）及びＣＤ４（図７Ｂ）及びＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図７Ｃ）にゲートした４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリ・アッセイを用いて試験した。

【0199】

ＴＣＲ４及びＴＩＬ Ｆ１１を導入したＰＢＬは、ｒａｓ Ｇ１２Ｖ ＦＬ及びＴＭＧ２（ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ抗原を含む）遺伝子、及びｒａｓ Ｇ１２Ｖ ＬＰに対して反応性を示した。表６に示したＭＥペプチドの中で、ＭＥ８に対して最も大きな反応性が検出された。

【0200】

実施例１１
本実施例は、患者４３８５の腫瘍片Ｆ１１から分離したＴＩＬが、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２が提示するＲＡＳ Ｇ１２Ｖを特異的に認識することを実証している。

【0201】

ＴＩＬ Ｆ１１－及びＴＣＲ４－導入細胞をＭＨＣ－ＩトランスフェクトしたＣＯＳ７細胞（１００ｎｇのＨＬＡパルス＋ＴＭＧをトランスフェクトしたＣｏｓ７を３万個、Ｔ細胞２万個と共培養した）と共培養した。Ｃ＊０１：０２に対する反応性が認められた。

【0202】

図８Ａは、４３８５個のＰＢＬへのＴＣＲ導入効果と、この実験に使用した細胞のＣＤ８／ＣＤ４集団分布を示すドットプロットである。

【0203】

結果は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図８Ｂ）アッセイ及び４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリー（表９）からのものである。表９は、ＴＣＲ４又はＴＩＬフラグメント１１（Ｆ１１）で形質転換した４３８５ＰＢＬを、変異（Ｍｕｔ）ＲＡＳミニゲン（Ｇ１２Ｖを含む）をコードするＴＭＧで形質転換したＣＯＳ７細胞株ＤＮＡと、患者４３８５が発現する６種類のＨＬＡ対立遺伝子（ＨＬＡ－Ａ＊０１．０１）の１つと、ＣＤ８＋ゲート細胞における４－１ＢＢ＋／ＯＸ４０＋細胞の割合、への反応として、提示する。０１、ＨＬＡ－Ａ＊０２：０７、ＨＬＡ－Ｂ＊１８：０２、ＨＬＡ－Ｂ＊４６：０１、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２又はＨＬＡ－Ｃ＊０７：０４）。

【0204】

【表9】

【0205】

実施例１２
本実施例では、ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＰＯＴを用いた滴定アッセイを紹介する（４３８５ ＴＩＬ Ｆ１１）。

【0206】

４３８５ ＴＩＬ Ｆ１１を、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＬＰ（Ｇ１２Ｖ／ＷＴ）を負荷した自家ＤＣと共培養した。

【0207】

反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図９Ａ）、ＣＤ８へのゲーティング（図９Ｂ）及びＣＤ４へのゲーティング（図９Ｃ）による４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーによって試験した。

【0208】

実施例１３
本実施例では、ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＰＯＴを用いた滴定アッセイを紹介する（４３８５形質転換（Ｔｄ）ＴＣＲ４）。

【0209】

４３８５ ＴＣＲ４導入ＰＢＬを、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＬＰ（Ｇ１２Ｖ／ＷＴ）を負荷した自家ＤＣと共培養した。

【0210】

反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１０Ａ）、ＣＤ８へのゲーティング（図１０Ｂ）及びＣＤ４へのゲーティング（図１０Ｃ）による４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーによって試験した。

【0211】

実施例１４
本実施例では、ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＰＯＴを用いた滴定アッセイ（４３８５ ＴＣＲ４で形質転換（Ｔｄ）された健康なドナーＰＢＬ）を紹介する。

【0212】

４３８５ ＴＣＲ４導入ＰＢＬを、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８ のＷＴ配列）を負荷した４３８５ ＤＣと共培養した。

【0213】

反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１１Ａ）、ＣＤ８へのゲーティング（図１１Ｂ）及びＣＤ４へのゲーティング（図１１Ｃ）による４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーによって試験した。

【0214】

実施例１５
本実施例は、大腸がん患者４３９４の腫瘍片からＲＡＳ Ｇ１２Ｖに反応するＴＩＬを同定したことを示す。

【0215】

患者４３９４の腫瘍片からのＴＩＬを、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＲＡＳ ＬＰ（Ｇ１２Ｖ又はＷＴ）を負荷した自家ＤＣと共培養するか、ＲＡＳ ＦＬ（Ｇ１２Ｖ又はＷＴ）遺伝子をトランスフェクトしたものを使用した。ＤＭＳＯで処理したＤＣと共培養したＴＩＬは、ネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料で非特異的に刺激したＴＩＬをポジティブコントロールとした。反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１２Ａ）、及びＣＤ８へのゲーティング（図１２Ｂ）及びＣＤ４へのゲーティング（図１２Ｃ）を有する４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリによって試験した。

【0216】

実施例１６
本実施例は、患者４３９４の腫瘍断片Ｆ１２から分離されたＴＩＬがＲＡＳ Ｇ１２Ｖを特異的に認識することを実証する。

【0217】

患者４３９４の腫瘍断片Ｆ１２からのＴＩＬを、ＴＩＬの濃縮後に、異なる濃度のＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８又はＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）を負荷した自己ＤＣと共培養した。反応性は、ソート濃縮後、ＣＤ８にゲーティングされた４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリ・アッセイを用いて試験した（図１３）。反応性は、ＣＤ８にゲーティングした４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリー（図１３Ａ）、及び抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養によって非特異的に刺激したＴＩＬがポジティブコントロールとして機能するソート濃縮後のＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１３Ｂ）により試験した。

【0218】

フラグメントＦ１２の２つのＴＣＲ（ＴＣＲＡ及びＴＣＲＢと称する）をさらに研究した。

【0219】

【表10】

【0220】

ＴＣＲＡ及びＴＣＲＢはＣ＊０１：０２で拘束されていることがわかった。

【0221】

実施例１７
本実施例は、患者４３９４のＴＩＬから、ＨＬＡ－Ｃ＊０１：０２によって提示されるヒトＲＡＳ Ｇ１２Ｖ変異に対する抗原特異性を有するＴＣＲの単離を実証している。

【0222】

患者４３９４の腫瘍片Ｆ１２からのＴＩＬは、実施例１５及び１６において、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖを認識し、ＷＴ ＲＡＳを認識しないことが決定された。

【0223】

ＴＣＲ配列を同定するために、反応性ＴＩＬはＴ細胞活性化マーカーである４－１ＢＢ／ＯＸ４０のアップレギュレーションに基づいて蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）で選別された。その後、細胞を溶解し、ＴＣＲ転写産物をサンガー配列決定した。

【0224】

実施例１８
本実施例は、実施例１７のヒト抗ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＴＣＲをコードするヌクレオチド配列と、改変されたマウス定常領域とを含むレトロウイルスベクターを調製する方法を示すものである。

【0225】

実施例１７のヒトＲＡＳ Ｇ１２Ｖ反応性４３９４ ＴＣＲＡをコードし、システイン置換され、ＬＶＬ修飾されたマウス定常領域を含む核酸配列をレトロウイルス発現ベクターにクローニングした。α鎖マウス定常領域は、４８位のＸがＣｙｓ、１１２位のＸがＬｅｕ、１１４位のＸがＩｌｅ、１１５位のＸがＶａｌである配列番号１７のアミノ酸配列から構成されるものであった。得られた全長α鎖は、配列番号７４のアミノ酸配列で構成されていた。β鎖定常領域は、配列番号１８のアミノ酸配列を含み、５７位のＸはＣｙｓである。得られた全長β鎖は、配列番号７５のアミノ酸配列を含む。ＲＡＫＲＳＧＳＧＡＴＮＦＳＬＫＱＡＧＤＶＥＥＮＰＧＰ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含むリンカーが、α鎖定常領域とβ鎖可変領域との間に配置された。提供されたような配列は、コドン最適化されている。

【0226】

クローニングを可能にするために、Ｎ－末端シグナルペプチド内の２番目のアミノ酸はアラニンに変更された（Ａ）。この例は、５’ＴＣＲβからＴＣＲαの３’方向へのバイシストロンベクターの合成を説明しているが、ＴＣＲβからＴＣＲαの順序は逆にすることができる。

【0227】

ＴＣＲα鎖及びβ鎖可変領域のアミノ酸配列を表１１に示す。ＣＤＲには下線を引いてある。

【0228】

【表11-1】

【0229】

【表11-2】

【0230】

実施例１９
本実施例は、ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＰＯＴ（実施例１８の４３９４形質転換（Ｔｄ）ＴＣＲＡ及びＴＣＲＢ）を用いたアッセイを提示する。

【0231】

４３９４ ＴＣＲＡ－及び ４３９４ ＴＣＲＢ－ トランスダクション ＰＢＬ を、ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８、ＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８のＷＴ配列）、ＲＡＳ ＬＰ（Ｇ１２Ｖ又はＷＴ）、又はＲＡＳ ＷＴ ＦＬ又はＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＦＬ ｍＲＮＡを導入した自己のＤＣと共培養させた。ＤＭＳＯで処理したＤＣと共培養した細胞は、ネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＰＢＬをポジティブコントロールとした。

【0232】

反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１４Ａ）及びＣＤ４へのゲーティング（図１４Ｂ）及びＣＤ８へのゲーティング（図１４Ｃ）による４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーによって試験された。

【0233】

実施例２０
本実施例は、ＦＡＣＳ及びＥＬＩＳＰＯＴ（実施例１８の４３９４ ＴＣＲＡで形質転換（Ｔｄ）した健康なドナーＰＢＬ）を用いた滴定アッセイを提示するものである。

【0234】

４３９４ ＴＣＲＡ 導入 ＰＢＬ を、異なる濃度の ＲＡＳ Ｇ１２Ｖ ＭＥ８ 又は ＲＡＳ ＭＥ ＷＴ４（ＭＥ８ の ＷＴ 配列）を負荷した ４３９４ ＤＣ と共培養した。ＤＭＳＯで単独培養したＰＢＬをネガティブコントロールとした。抗ＣＤ３／抗ＣＤ２８ Ｄｙｎａｂｅａｄｓ材料との共培養により非特異的に刺激されたＰＢＬをポジティブコントロールとした。
反応性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴ（図１５Ａ）、及びＣＤ４へのゲーティング（図１５Ｂ）及びＣＤ８へのゲーティング（図１５Ｃ）による４１ＢＢ／ＯＸ４０フローサイトメトリーによって試験された。

【0235】

刊行物、特許出願及び特許を含む、本明細書に引用した全ての参考文献は、それぞれの参考文献が参照によって組込まれることが個々に且つ具体的に示されているのと同程度及びその全体が本明細書に記載されているのと同程度まで、参照によって本明細書に組込まれる。

【0236】

本発明の説明に関して（特に、以下の特許請求の範囲に関して）、用語「ａ」及び「ａｎ」及び「ｔｈｅ」及び「少なくとも１」並びに同様の指示対象の使用は、本明細書に特記しないか文脈と明らかに矛盾しない限り、単数形及び複数形の両方をカバーすると解釈すべきである。１以上の事項の列挙の後での用語「少なくとも１」の使用（例えば、「Ａ及びＢのうち少なくとも１」）は、本明細書に特記しないか又は文脈と明らかに矛盾しない限り、列挙した事項から選択された１の事項（Ａ若しくはＢ）又は列挙した事項のうち２以上の任意の組合せ（Ａ及びＢ）を意味すると解釈すべきである。用語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「有する（ｈａｖｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」及び「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」は、特記しない限り、オープンエンドの用語（即ち、「～を含むがそれらに限定されない」を意味する）と解釈すべきである。本明細書の値の範囲の記述は、本明細書に特記しない限り、その範囲内に入る各個別の値に個々に言及する省略方法として働くことのみを意図しており、各個別の値は、それが本明細書に個々に記述されているかのように本明細書に組込まれる。本明細書に記載の全ての方法は、本明細書に特記しないか又は文脈と特に明らかに矛盾しない限り、任意の好適な順序で実施できる。本明細書に提供される任意の及び全ての例又は例示的語句（例えば、「等（ｓｕｃｈ ａｓ）」）の使用は、本発明をよりよく説明することのみを意図しており、特段特許請求されない限り、本発明の範囲に限定を課すものではない。本明細書の全ての語句は、特許請求されていない任意の要素を本発明の実施に必須のものとして示していると解釈すべきではない。

【0237】

発明を実施するための、発明者が知る最良の形態を含む、本発明の好ましい実施形態が本明細書に記載される。これらの好ましい実施形態のバリエーションは、上述の説明を読めば当業者に明らかとなり得る。本発明者らは、当業者がかかるバリエーションを適宜使用することを予期しており、本発明者らは、本明細書に具体的に記載されたのとは異なる方法で本発明が実施されることを意図している。従って、本発明は、適用法によって許容されるとおり、本明細書に添付した特許請求の範囲に記載の主題の全ての改変及び均等物を含む。更に、その全ての可能なバリエーションでの上記要素の任意の組合せが、本明細書に特記しないか又は文脈と特に明らかに矛盾しない限り、本発明によって包含される。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図2A】

【図2B】

【図3】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図4D】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図8A】

【図8B】

【図9A】

【図9B】

【図9C】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図11A】

【図11B】

【図11C】

【図12A】

【図12B】

【図12C】

【図13A】

【図13B】

【図14A】

【図14B】

【図14C】

【図15A】

【図15B】

【図15C】

【配列表】

2023526149000001.app

【国際調査報告】