特表 2023-528543 抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法とそれを含有した化粧料組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-07-04

(54)【発明の名称】抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法とそれを含有した化粧料組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 36/899 20060101AFI20230627BHJP

   A61K 36/75 20060101ALI20230627BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20230627BHJP

   A61P 31/10 20060101ALI20230627BHJP

   A61P 17/10 20060101ALI20230627BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20230627BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/185 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/78 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/484 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/66 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/60 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/23 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 36/82 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 8/9789 20170101ALI20230627BHJP

   A61K 8/9794 20170101ALI20230627BHJP

   A61Q 19/00 20060101ALI20230627BHJP

   A61K 125/00 20060101ALN20230627BHJP

   A61K 127/00 20060101ALN20230627BHJP

【ＦＩ】

A61K36/899

A61K36/75

A61P31/04

A61P31/10

A61P17/10

A61P17/00 101

A61P43/00 121

A61K36/185

A61K36/78

A61K36/484

A61K36/66

A61K36/60

A61K36/23

A61K36/82

A61K8/9789

A61K8/9794

A61Q19/00

A61K125:00

A61K127:00

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023515547

(86)(22)【出願日】2020-12-09

(85)【翻訳文提出日】2022-11-22

(86)【国際出願番号】 KR2020017904

(87)【国際公開番号】W WO2021235638

(87)【国際公開日】2021-11-25

(31)【優先権主張番号】10-2020-0061403

(32)【優先日】2020-05-22

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522457601

【氏名又は名称】ダムヤン ジャクスン ファーミング アソシエーション コーポレーション

(74)【代理人】

【識別番号】110000419

【氏名又は名称】弁理士法人太田特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】パク ヨン ス

(72)【発明者】

【氏名】ヨ サン－ヘ

(72)【発明者】

【氏名】クウォン セ ファン

(72)【発明者】

【氏名】キム サン オ

(72)【発明者】

【氏名】チェ ジュン ホ

(72)【発明者】

【氏名】ロザレ デイジー

(72)【発明者】

【氏名】チェ ヒュン チャン

【テーマコード（参考）】

4C083

4C088

【Ｆターム（参考）】

4C083AA032

4C083AA082

4C083AA111

4C083AA112

4C083AA122

4C083AB032

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4C083AC092

4C083AC112

4C083AC122

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4C083AD492

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4C083CC22

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4C083DD22

4C083DD23

4C083DD31

4C083EE14

4C088AB12

4C088AB34

4C088AB35

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4C088AB45

4C088AB47

4C088AB60

4C088AB62

4C088AB73

4C088AC05

4C088AC11

4C088BA08

4C088CA03

4C088MA07

4C088NA14

4C088ZA90

4C088ZB35

4C088ZC75

(57)【要約】

本発明は竹マルチコンプレックスを含有する抗菌及び化粧料組成物に関するもので、特にタケノコ皮マルチコンプレックスを含有する抗菌抗炎症及び化粧料組成物に関するものであり、タケノコ皮、竹瀝、ニレの根、ドクダミ、甘草、枳實（若いカラタチ）、クサノオウ、ハリグワ根、ハリグワ葉、ツボクサ、三白草、発酵緑茶、竹抽出物を含む抗菌、抗炎症及び化粧料組成物に関するものである。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

竹熱分解過程で加熱炉温度９０℃～２８０℃以内の発生ガスを冷却して得られる酢液を蒸留し、これを３年以上静置して竹抽出液を製造する段階；
タケノコ皮を８０～１２０℃で蒸熟処理してから１５～８０℃の温度で２０～８０時間の間低温乾燥した後、低温発酵された原物を用いて熱水抽出してタケノコ皮抽出物を製造する段階；
砂糖と原物を０．５：１の割合で混合して３ヶ月以上熟成した後抽出した糖化枳實抽出物を製造する段階；及び
減圧抽出後濃縮して減圧濃縮した植物抽出物を製造する段階を含む抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法。

【請求項2】

前記竹抽出液、タケノコ皮抽出物、糖化枳實抽出物、及び減圧濃縮した植物抽出物を含むことを特徴とする請求項１に記載の抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法。

【請求項3】

前記減圧濃縮した植物抽出物は竹抽出物、ニレの根抽出物、ギョセイソウ抽出物、甘草抽出物、クサノオウ抽出物、ハリグワ根抽出物、ハリグワ葉抽出物、ツボクサ抽出物、三白草抽出物、及び発酵緑茶抽出物から選択される少なくとも１種以上を添加することを特徴とする請求項１に記載の抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法。

【請求項4】

前記タケノコ皮抽出物は低温乾燥後に水又は３～５０％（ｖ／ｖ）濃度の酒精を溶媒で加え、８０～１００℃温度で３～５時間処理した酒精抽出物であることを特徴とする請求項１に記載の抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法。

【請求項5】

請求項１に記載の製造方法で製造された竹マルチコンプレックスを有効成分とする抗菌及び美容機能を有する化粧料組成物。

【請求項6】

前記竹マルチコンプレックスは竹抽出液、タケノコ皮抽出物、糖化枳實抽出物、及び減圧濃縮した植物抽出物が混合されたことを特徴とする請求項５に記載の化粧料組成物。

【請求項7】

前記化粧料組成物は水分クリーム、水分ミスト、及びエッセンスからなる群から選択される少なくとも１つの剤形であることを特徴とする請求項５に記載の抗菌及び美容機能を有する化粧料組成物。

【請求項8】

前記化粧料組成物はボディ専用洗浄剤、頭皮専用洗浄剤からなる群から選択される少なくとも１つの剤形で、液状、クリーム状、ペースト状、及び固状から選択されるいずれかの性状を有することを特徴とする請求項５に記載の抗菌及び美容機能を有する化粧料組成物。

【請求項9】

前記化粧料組成物はボディ専用抗菌剤、ボディ専用抗炎剤、頭皮専用抗菌剤、及び頭皮専用抗菌剤からなる群から選択される少なくとも１つの剤形で、液状、クリーム状、ペースト状、及び固状から選択されるいずれかの性状を有することを特徴とする請求項５に記載の抗菌及び美容機能を有する化粧料組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は竹マルチコンプレックスを含有する抗菌、抗炎症及び化粧料組成物に関するもので、特にタケノコ皮抽出物、竹抽出物、ニレの根、ギョセイソウ、甘草、枳實（若いカラタチ）、クサノオウ、ハリグワ根、ハリグワ葉、ツボクサ、三白草、及び発酵緑茶抽出物を含有した竹マルチコンプレックスの製造方法とそれを用いた化粧料組成物に関するものである。

【背景技術】

【0002】

現在、抗菌製品は多くの種類が製品化されて病気の予防及び治療目的に広く使用されている。

【0003】

抗菌剤は抗菌力によって抗真菌剤及び抗細菌剤に分けることができ、抗真菌剤はカビなどのような真菌細胞を有する高等生物の成長を抑制又は殺菌する機能を有する。また、抗細菌剤はバクテリア（細菌類）などのような原核細胞を有する下等生物の成長を抑制又は殺菌する機能を有する抗生剤をいう。現在までは、主に抗菌剤（抗真菌、抗細菌剤）はカビなどから得られたり、又は化学的に合成して得られている。

【0004】

これらの抗真菌剤としては例えば、アムホテリシンＢ（Ａｍｐｏｔｅｒｉｃｉｎ Ｂ）、クロトリマゾール（Ｃｌｏｔｒｉｍａｚｏｌｅ）、クリニパンＡＤ（Ｃｒｉｎｉｐａｎ ＡＤ）、フルコナゾール（Ｆｌｕｃｏｎａｚｏｌｅ）、グリセオフルビン（Ｇｒｉｓｅｏｆｕｌｖｉｎ）、ハロプロギン（Ｈａｌｏｐｒｏｇｉｎ）、ヘキサクロロフェン（Ｈｅｘａ ｃｈｌｏｒｏｐｈｅｎｅ）、イクチオール（Ｉｃｈｔｈｙｏｌ）、イトラコナゾール（Ｉｔｒａｃｏｎａｚｏｌｅ）、ケトコナゾール（Ｋｅｔｏｃｏｎａｚｏｌｅ）、マイコナゾール（Ｍｉｃｏｎａｚｏｌｅ）、ナイスタチン（Ｎｙｓｔａｔｉｎ：マイコスタチン（Ｍｙｃｏｓｔａｔｉｎ））、ピマリシン（Ｐｉｍａｒｉｃｉｎ： ナタマイシン（Ｎａｔａｍｙｃｉｎ））、テルビナパイン（Ｔｅｒｂｉｎａｆｉｎｅ）などがある。
また、抗細菌剤としては例えば、アダパレンゲル（Ａｄａｐａｌｅｎｅ ｇｅｌ）、ベンゾイルペルオキシド（Ｂｅｎｚｏｙｌ ｐｅｒｏｘｉｄｅ）、フシジン酸（Ｆｕｓｉｄｉｃ ａｃｉｄ）、レゾキノール（Ｒｅｓｏｒｃｉｎｏｌ）、レチノン酸（Ｒｅｔｉｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、サリチル酸（Ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ）、スルホンアミド（Ｓｕｌｆｏｎａｍｉｄｅ）、テトラサイクリン（Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ）、トリクロサン（Ｔｒｉｃｈｌｏｓａｎ）、ペニシリン（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎ）などがある。

【0005】

しかし、このような合成抗真菌及び抗細菌剤は製造コストが高く、精製過程などが難しいと共に、製品化して使用する際には、微生物の耐性が増加する副作用があった。また、美容機能に対する部分が検討されていないため、外用剤（軟膏剤）などとして皮膚に塗布する場合、望ましくない皮膚トラブル（接触皮膚炎）や副作用が伴う。そのため、多くの研究者により副作用がなく、目的とする抗真菌及び抗細菌機能を有する抗生剤の開発が進行中であることが知られている。

【先行技術文献】

【特許文献】

【0006】

【特許文献1】ＫＲ１０－０４６５８３１ Ｂ

【特許文献2】ＫＲ１０－２００９－０００４２９５ Ａ

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

前述した問題を解決するために、本発明は竹マルチコンプレックスを含有する抗菌及び化粧料組成物を提供し、特にタケノコ皮マルチコンプレックスを含有する抗菌性抗炎症及び化粧料組成物を提供することにその目的がある。

【0008】

また、本発明はタケノコ皮抽出物、竹抽出物、ニレの根、ギョセイソウ、甘草、枳實（若いカラタチ）、クサノオウ、ハリグワ根、ハリグワ葉、ツボクサ、三白草、及び発酵緑茶抽出物を含有する竹マルチコンプレックスを製造する方法を提供することにその目的がある。

【課題を解決するための手段】

【0009】

前述の目的を達成するために、本発明の抗菌及び美容機能を有する竹マルチコンプレックスの製造方法は、竹熱分解過程で加熱炉温度９０℃～２８０℃以内の発生ガスを冷却して得られる酢液を蒸留し、これを３年以上静置して竹抽出液を製造する段階；タケノコ皮を８０～１２０℃で蒸熟処理してから１５～８０℃の温度で２０～８０時間の間低温乾燥した後、低温発酵された原物を用いて熱水抽出してタケノコ皮抽出物を製造する段階；砂糖と原物を０．５：１の割合で混合して３ヶ月以上熟成した後抽出した糖化枳實抽出物を製造する段階；及び減圧抽出後濃縮して減圧濃縮した植物抽出物を製造する段階を含む。

【0010】

前記竹抽出液、タケノコ皮抽出物、糖化枳實抽出物、及び減圧濃縮した植物抽出物が混合されることを特徴とする。

【0011】

前記減圧濃縮した植物抽出物は竹抽出物、ニレの根抽出物、ギョセイソウ抽出物、甘草抽出物、クサノオウ抽出物、ハリグワ根抽出物、ハリグワ葉抽出物、ツボクサ抽出物、三白草抽出物、及び発酵緑茶抽出物から選択される少なくとも１種以上を添加することを特徴とする。

【0012】

前記タケノコ皮抽出物は低温乾燥後に水又は３～５０％（ｖ／ｖ）濃度の酒精を溶媒で加え、８０～１００℃温度で３～５時間処理した酒精抽出物であることを特徴とする。

【0013】

また、本発明は竹マルチコンプレックスを有効成分とする抗菌及び美容機能を有する化粧料組成物を特徴とする。

【0014】

前記竹マルチコンプレックスは竹抽出液、タケノコ皮抽出物、糖化枳實抽出物、及び減圧濃縮した植物抽出物が混合されたことを特徴とする。

【0015】

前記化粧料組成物は水分クリーム、水分ミスト、及びエッセンスからなる群から選択される少なくとも１つの剤形であることを特徴とする。

【0016】

前記化粧料組成物は水分クリーム、水分ミスト、及びエッセンスからなる群から選択される少なくとも１つの剤形に製造されることを特徴とする。

【0017】

前記化粧料組成物はボディ専用洗浄剤、頭皮専用洗浄剤からなる群から選択される少なくとも１つの剤形で、液状、クリーム状、ペースト状、及び固状から選択されるいずれかの性状を有することを特徴とする。

【0018】

前記化粧料組成物はボディ専用抗菌剤、ボディ専用抗炎剤、頭皮専用抗菌剤、及び頭皮専用抗菌剤からなる群から選択される少なくとも１つの剤形で、液状、クリーム状、ペースト状、及び固状から選択されるいずれかの性状を有することを特徴とする。

【発明の効果】

【0019】

前述したように本発明によれば、タケノコ皮抽出物、竹抽出物、ニレの根、ギョセイソウ、甘草、枳實（若いカラタチ）、クサノオウ、ハリグワ根、ハリグワ葉、ツボクサ、三白草、及び発酵緑茶抽出物を含有する竹マルチコンプレックスを製造して抗菌組成物及び化粧料組成物を提供することができる。

【0020】

また、本発明は竹抽出物、特にタケノコ皮抽出物を含有する抗菌、抗真菌用美容化粧製品に適用される化粧料組成物を提供することができる。

【図面の簡単な説明】

【0021】

【図1】タケノコ皮５％酒精抽出物の細胞毒性を評価した結果を示す。

【発明を実施するための最良の形態】

【0022】

別の方式で定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術的及び科学的な用語は本発明が属する技術分野で熟練した専門家が通常的に理解するものと同じ意味を持っている。一般的に、本明細書で使用される命名法は当技術分野で周知であり、通常的に使用されるものである。

【0023】

用語「約」とは、参照量、レベル、値、数、頻度、パーセント、寸法、サイズ、量、重量又は長さに対して３０、２５、２０、２５、１０、９、８、７、６、５、４、３、２、又は１％程度に変化する量、レベル、値、数、頻度、パーセント、寸法、サイズ、量、重量又は長さを意味する。本明細書を通して、文脈で別に必要でないと、「含んだ」及び「含む」という用語は提示された段階や構成要素、又は段階や構成要素の群を含むが、任意の他の段階や構成要素、又は段階や構成要素の群が排除されないことを包含することと理解すべきである。

【0024】

本発明において、「タケノコ」とは、それが得られる竹の種類を問わず、分類学上竹に分類される植物、即ちイネ目イネ科に属する竹から得られた全てのものを含む意味である。竹の種類を問わず、マダケ属（Ｐｈｙｌｌｏｓｔａｃｈｙｓ）に属する竹から得られたタケノコであれ、アズマザサ属（Ａｒｕｎｄｉｎａｒｉａ）に属する竹から得られたタケノコであれ、ササ属（Ｓａｓａ）に属する竹から得られたタケノコであれ、又は ヤダケ属（Ｐｓｅｕｄｏｓａｓａ）に属する竹から得られたタケノコであっても関係なく、全て本発明で使用することができる。

【0025】

以下、本発明を具体的に説明する。
本発明の竹マルチコンプレックスには竹熱分解過程で加熱炉温度９０℃～２８０℃以内の発生ガスを冷却して得られる酢液を蒸留し、これを３年以上静置して竹抽出液と、タケノコ皮抽出物、糖化枳實抽出物、減圧濃縮した植物抽出物を含むことを特徴とする。前記本発明の竹マルチコンプレックスはタケノコ皮抽出物、竹抽出物、ニレの根抽出物、ギョセイソウ抽出物、甘草抽出物、枳實（若いカラタチ）抽出物、クサノオウ抽出物、ハリグワ根抽出物、ハリグワ葉抽出物、及びツボクサ発酵緑茶抽出物を含む。

【0026】

前記竹抽出液の製造方法は竹乾燥段階（Ｓ１１０）、加熱抽出段階（Ｓ１２０）、竹瀝熟成段階（Ｓ１３０）、及び竹瀝濾過段階（Ｓ１４０）を含む。

【0027】

竹乾燥段階（Ｓ１１０）は竹を乾燥及び加熱に適した長さに切断する段階である。前記加熱抽出段階（Ｓ１２０）は竹を加熱し、加熱された竹から噴出されるエキスを得る段階である。この時、竹の加熱は間接加熱方式で行い、加熱炉の温度が９０～２８０℃の時に発生したガスを冷却して得られる酢液を貯蔵する。前記竹瀝熟成段階（Ｓ１３０）は製造した酢液を少なくとも３年以上自然熟成及び酸化させる。前記竹瀝濾過段階（Ｓ１４０）はカーボンフィルター（ｃａｒｂｏｎ ｆｉｌｔｅｒ）や医療用フィルター（ｍｅｄｉｃａｌ ｆｉｌｔｅｒ）を用いて精密濾過する段階である。

【0028】

前記タケノコ皮抽出物の製造方法では低温発酵した原物を用いて熱水抽出することを特徴とする。前記タケノコ皮抽出物の製造方法ではタケノコ原料から表皮を剥がしたものを用いる。タケノコ皮抽出物の製造方法は材料準備段階（Ｓ２１０）、乾燥段階（Ｓ２２０）及び抽出物分離段階（Ｓ２３０）を含む。

【0029】

前記材料準備段階（Ｓ２１０）は通常の方法によってタケノコ皮を洗浄して切断、乾燥又は粉砕して準備する。この時、洗浄、切断、乾燥は順に行うことができ、切断後乾燥段階（Ｓ２２０）の前に滅菌又は滅菌すると共に、原料の機能性を調節するために８０～１２０℃で蒸熟処理することを含む。また、前記蒸熟処理は蒸熟器を通じて行うことができ、タケノコのえぐ味を出す刺激性物質であるシュウ酸による効果を中和することができる。また、前記蒸熟処理は蒸熟器で５～１０分間処理することを含む。

【0030】

前記乾燥段階（Ｓ２２０）は自然乾燥、熱風乾燥、低温乾燥又は凍結乾燥のいずれか１つの方法で行うことができる。前記蒸熟処理した材料の場合、１５～８０℃の温度で２０～８０時間の間低温乾燥することを含む。

【0031】

前記抽出物分離段階（Ｓ２３０）において、タケノコ皮抽出物の分離方法は特に限定されないが、抽出物を製造するために当業界で通常に用いる方法を採用することができる。例えば、熱水抽出、酒精抽出、浸漬抽出、還流冷却抽出、超臨界抽出、亜臨界抽出、高温抽出、高圧抽出、超音波抽出などの抽出装置を用いる方法、又はＸＡＤ及びＨＰ－２０を含む吸着樹脂を用いる方法などを使用することができるが、これに限定されるものではない。好ましくは、原料に抽出溶媒を処理し、加熱して抽出した後、減圧濃縮して抽出物を得ることができる。

【0032】

前記抽出溶媒としては極性溶媒を用いることができる。極性溶媒としては例えば、水、アルコール、酢酸、ＤＭＦＯ（ｄｉｍｅｔｈｙｌ－ｆｏｒｍａｍｉｄｅ）及びＤＭＳＯ（ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ）からなる群から選択される少なくとも１つを含むことができるが、これらに限定されるものではない。前記アルコールとしては例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、ブタノール、ノーマルプロパノール、イソプロパノール、ノーマルブタノール、１－ペンタノール、２－ブトキシエタノール及びエチレングリコールからなる群から選択される少なくとも１つを用いることができるが、これに限定されるものではない。好ましくは、人体に対する安定性及び皮膚に適用される効果を考慮して、前記極性溶媒として水又は酒精を用いることが好ましい。前記酒精は水に混合された希釈酒精を使用することができる。好ましくは、前記組成物の皮膚における抗酸化及び保湿効果を極大化するために、前記極性溶媒に３～５０％（ｖ／ｖ）濃度の酒精を用いることがよく、より好ましくは、分離されるタケノコ皮抽出物の有効性を極大化するために、３～１０％（ｖ／ｖ）の濃度の酒精を用いることがよい。タケノコの皮を抽出原料として用いる場合、抽出収率を向上させて生産性を増大させるための側面において、前記極性溶媒としては３～３０％（ｖ／ｖ）濃度の酒精を用いることがよく、抽出収率と皮膚に対する適用効果を全て考慮すると、３～１０％（ｖ／ｖ）濃度の酒精を用いることがよい。好ましくは、前記酒精はプロエタノールであることがよい。

【0033】

前記糖化枳實抽出物は砂糖と原物を０．５：１の割合で混合して３ヶ月以上熟成した後抽出した糖化抽出物であることを特徴とする。

【0034】

前記減圧濃縮した植物抽出物は減圧抽出後濃縮したことを特徴とする。

【0035】

以下、本発明の理解を助けるために、本発明を実施例に基づいてより詳細に説明する。ただし、これらの実施例は本発明を例示するものに過ぎず、添付した特許請求の範囲を制限するものではない。これらの実施例に対し、本発明の範疇及び技術思想の範囲内で種々の変更及び修正を加えることが可能であることは当業者にとって明らかであり、これらの変形及び修正が添付した特許請求の範囲に属することも当然のことである。

【0036】

試験１（細胞毒性試験）－タケノコ皮の５％酒精抽出物
抽出溶媒として５％（ｖ／ｖ）発酵酒精を用いた。タケノコの細断乾燥皮原料に対して、原料重量を基準に２０倍数で抽出溶媒を処理してから１００℃温度で４時間抽出した後、濃縮器で３０Ｂｒｉｘ以上になるように濃縮した。その後、凍結乾燥して収率２２％の粉末状抽出物を得た。

【0037】

図１はタケノコ皮５％酒精抽出物の細胞毒性を評価した結果を示す。

【0038】

また、下記表１はタケノコ皮５％酒精抽出物の細胞毒性を評価するために、ＣＣＤ－９８６ＳＫ（Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ）細胞を用いて細胞毒性試験（ＭＴＴ ａｓｓａｙ）を行ったことを示す。

【0039】

【表1】

【0040】

細胞分注の場合は、９６ウェルプレートに細胞を３×１０^４（１００μＬ／ｗｅｌｌ）で分注し、３７℃、５％ＣＯ_２培養器で２４時間培養した。試験物質の処理のために、試験物質が濃度別に希釈された無血清培地に交換し、３７℃、５％ＣＯ２培養器で２４時間培養した。

【0041】

ＭＴＴ ａｓｓａｙはＰＢＳで２回洗浄し、ＭＴＴ溶液（０．５ｍｇ／ｍＬ、無血清培地）を２００μＬ／ｗｅｌｌ分注し、３７℃、５％ＣＯ_２培養器で３時間培養した。

【0042】

吸光度測定の場合は、培養が終了してから培地を除去し、ＤＭＳＯ溶液を２００μＬ／ｗｅｌｌに入れてｐｌａｔｅ ｓｈａｋｅｒで２０～３０分抽出した。その後、５７０ｎｍ波長でＥＬＩＳＡを用いて吸光度を測定した。

【0043】

結果処理において、細胞生存率が試料無添加群の７０％未満に減少した場合に潜在的に細胞毒性があると判明した。なお、細胞生存率は下記数式１によって算出した。

【0044】

【数1】

【0045】

実験結果はＳＰＳＳ（Ｖｅｒ． １９）統計プログラムを用いてｔ－ｔｅｓｔ（ｐａｉｒｅｄ ｔ－ｔｅｓｔ、両側検証）を行うことで、有意性を確認した。

【0046】

【表2】

【0047】

細胞毒性試験の結果、タケノコ皮５％酒精抽出物の場合、０．１％、０．２％、０．５％、１．０％、．０％濃度で１１６．９８±７．２７％、１２７．８１±７．２５％、１６１．０８±１５．５６％、８３．４７±８．８５％、４５．４７±６．４６％の細胞生存率が観察された。

【0048】

即ち、タケノコ皮５％酒精抽出物は１．０％以下の濃度で７０％以上の細胞生存率が観察された。細胞生存率が試料無添加群の７０％未満に減少する場合は、潜在的に細胞毒性があると判定するので、タケノコ皮抽出物５％酒精抽出物は１．０％以下濃度で細胞毒性がないように見える。

【0049】

本発明者らは既存の抗菌剤（抗真菌、抗細菌）とは異なり、前記複合抽出物を抽出、精製した後、皮膚トラブル誘発菌（にきび、水虫、皮膚常在菌）に適用して有意な結果を導き出した。本試験は試験公認機関である韓国化学融合試験研究院（ＫＴＲ）に試験を依頼して行った。

【0050】

竹熱分解過程で加熱炉温度９０℃～２８０℃以内の発生ガスを冷却して得られる酢液を蒸留し、これを３年以上静置して得られた竹抽出液を試料として用いて試験を行った。

【0051】

試験に使用した病原性微生物（皮膚トラブル誘発菌）は以下の通りである。
(1)にきび誘発菌（１種）：Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ（グラム陽性）
(2)水虫（白癬）誘発菌（１種）：Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ
(3)皮膚常在菌（２種）：Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ

【0052】

試験２（抗菌及び抗真菌効果）
試験菌の前培養においては、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ菌株をＳａｂｏｕｒａｕｄ ｄｅｘｔｒｏｓｅ ａｇａｒに接種し、（２５±１）℃で１０～１４日間培養した。Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ菌株をＲｅｉｎｆｏｒｃｅｄ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ（ＲＣＭ）ｂｒｏｔｈに接種し、（３５±１）℃で３日間培養した。

【0053】

培養した菌液を新しいＲＣＭ ｂｒｏｔｈに接種し、前記と同じ条件で培養した後、この過程を更に１回繰り返した。菌株の全ての過程で滅菌液体パラフィンを用いて嫌気的条件を維持させた。

【0054】

試験菌液の調製のために、Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍが育った固体培地上に０．０５％ ｐｏｌｙｓｏｒｂａｔｅ ８０ ｓｏｌｕｔｉｏｎを分注し、ｓｐｒｅａｄｅｒを用いて胞子を剥がした後、ガーゼを通過させて菌糸を除去した。このようにして調製したｓｐｏｒｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎを（１．０～９．９）×１０^７ ｓｐｏｒｅｓ／ｍＬになるように滅菌生理食塩水で調整して試験菌液として使用した。培養したＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ菌液を生菌数が（１．０～９．９）×１０^７ ＣＦＵ／ｍＬになるように滅菌生理食塩水で希釈して試験菌液として使用した。

【0055】

試料（濃度：原液）２０ｍＬに試験菌液０．２ｍＬを添加して混合した後、常温でＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍは２４時間、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｏｍ ａｃｎｅｓは２時間放置した。その後、生菌数を測定して各対照群の減少率を調べてみた。最初の希釈はＤ／Ｅ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ｂｒｏｔｈを用いて行った。中和した試験液を段階別に希釈し、各濃度当たりＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈ２枚に１ｍＬずつ分注した。Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍは予め準備したＳａｂｏｕｒａｕｄ ｄｅｘｔｒｏｓｅ ａｇａｒをＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈに１５～２５ｍＬ分注し、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓはＲｅｉｎｆｏｒｃｅｄ ｃｌｏｓｔｒｉｄｉａｌ ｍｅｄｉｕｍ ａｇａｒを用いて室温で凝固させた。凝固されたＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ ｄｉｓｈを（２５±１）℃で１０～１４日間培養し、Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ Ｐｅｔｒｉ ｄｉｓｈを（３５±１）℃で３日間嫌気培養した。初期及び対照生菌数の測定は滅菌生理食塩水を用いて行った。

【0056】

表３はＴｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍ抗真菌試験結果を示し、表４はＰｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓ抗菌試験結果を示す。

【0057】

【表3】

【0058】

初期接種菌数は６．０×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ、２４時間後の対照群菌数は５．５×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ、２４時間後の試験群菌数は＜１０ＣＦＵ／ｍＬで観察された。

【0059】

【表4】

【0060】

初期接種菌数は５．７×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ、２時間後の対照群菌数は５．０×１０^５ＣＦＵ／ｍＬ、２時間後の試験群菌数は＜１０ＣＦＵ／ｍＬで観察された。

【0061】

培養後、真菌の観察は（８～８０）個、細菌は（３０～３００）個を示すＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈを選択して行った。最低希釈段階でのみ生菌数が観察される場合には、観察範囲に関係なく計数した。菌が増殖する場合、培地上の菌数に希釈倍数を掛けて算出した。培地で菌が増殖していない場合は、中和段階で行われた希釈倍数を掛けて「１０未満」（＜１０）と示した。

【0062】

生菌数の計算はＮ（生菌数）＝Ｃ（集落数、２枚の集落数平均値）×Ｄ（希釈倍数）で測定した。

【0063】

減少率（％）の場合、Ｌｏｇ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ（ＬＲ）＝ｌｏｇ（Ａ）－ｌｏｇ（Ｂ）で測定した。
（Ａ：対照群における一定時間後の生菌数の対数値、Ｂ：試験群における一定時間後の生菌数の対数値）

【0064】

【表5】

【0065】

試験結果、抗真菌試験Ｔｒｉｃｈｏｐｈｙｔｏｎ ｒｕｂｒｕｍに対して＞４．７４であり、抗菌試験Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｃｎｅｓに対して＞４．７０で現れた。Ｌｏｇ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎが３以上であれば９９．９％であり、４以上であれば９９．９９％以上を意味する。

【0066】

試験３（抗菌効果）
試験菌の前培養においては、試験菌株を斜面培地から採取し、Ｔｒｙｐｔｉｃ ｓｏｙ ｂｒｏｔｈに接種して３５±１℃で１８～２４時間の間培養した。
試験菌液の調製においては、生菌数が（１～９．９）×１０^８ＣＦＵ／ｍＬになるように滅菌生理食塩水に希釈して得られたものを試験菌液として使用した。

【0067】

試料（原液）２０ｍＬに試験菌液０．２ｍＬを添加して混合した後、（２２±２）℃で６０分及び９０分間放置した。

【0068】

試験菌株Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗菌効果試験のため、最初の希釈はＤ／Ｅ ｎｅｕｔｒａｌｉｚｉｎｇ ｂｒｏｔｈを用いて行った。中和した試験液を段階別に希釈して各濃度当たりＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈ２枚に１ｍＬずつ分注した。予め準備した（４５～５０）℃のＴｒｙｐｔｉｃ ｓｏｙ ａｇａｒをＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈに（１５～２５）ｍＬ分注し、室温で凝固させた。凝固されたＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈを逆にして（３５±１）℃で（２４～４８）時間の間培養した。試験は各菌株当たり２回繰り返して行い、初期及び対照生菌数の測定は滅菌生理食塩水を用いて行った。

【0069】

培養後、生菌数の観察は（３０～３００）個を示すＰｅｔｒｉ ｄｉｓｈを選択して行った。最低希釈段階でのみ生菌数が観察される場合には、観察の範囲に関係なく計数した。細菌が増殖した場合、培地上の菌数に希釈倍数を掛けて算出した。培地で細菌が増殖していない場合は、中和段階で行われた希釈倍数を掛けて「１０未満」（＜１０）と表した。

【0070】

下記表６はＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ａｕｒｅｕｓの抗菌試験結果を示す。

【0071】

【表6】

【0072】

初期接種菌数は３．１×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ、６０分及び９０分後対照菌数はそれぞれ３．２×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ及び４．５×１０^６ＣＦＵ／ｍＬで観察された。６０分及び９０分後試験菌数は、２回の反復試験でいずれも＜１０ＣＦＵ／ｍＬで観察された。

【0073】

下記表７はＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓの抗菌試験結果を示す。

【0074】

【表7】

【0075】

初期接種菌数は３．２×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ、６０分及び９０分後対照菌数はそれぞれ３．５×１０^６ＣＦＵ／ｍＬ及び３．７×１０^６ＣＦＵ／ｍＬで観察された。６０分及び９０分後試験菌数は２回の反復試験でいずれも＜１０ＣＦＵ／ｍＬで観察された。

【0076】

下記表８は表６及び表７の抗菌試験結果の総合を示すものである。（単位：ｍｅａｍ ｌｏｇ）

【0077】

【表8】

【0078】

ＬＲ^＊ ＝ Ｌｏｇ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ試験結果、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ａｕｒｅｕｓに対する抗菌試験値は６０分、９０分それぞれ＞５．４９、＞５．４９であり、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｏｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓに対する抗菌試験値は６０分、９０分それぞれ＞５．５１、＞５．５１で現れた。Ｌｏｇ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎが４以上であれば９９．９９％以上、５以上であれば９９．９９９％を意味する。

【0079】

竹マルチコンプレックスを有効成分とし、表９の添加物を添加してボディウォッシュ製品を製造した。

【0080】

【表9】

【0081】

また、竹抽出物２．０％、複合抽出物２．５％を含有し、表１０の添加物を添加してシャンプーを製造した。下記表１０において、添加比率は添加率の総量重量１００ｗｔ％を基準とした時、各成分が含まれる含量ｗｔ％を意味する。

【0082】

【表10】

【0083】

また、表１１の成分構成でフェイシャルクリームを製造した。下記表１１において、ＲＭ ｏｒ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ％ｉｎｆｌａは原料含量を意味し、ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ％ｉｎＲＭは原料中の成分含量を意味する。

【0084】

【表11】

【0085】

以上、本発明内容の特定の部分を詳細に説明したが、図面に例示したものに限定されるものではなく、当業界の通常の知識を有する者において、このような具体的な技術は単に好ましい実施形態に過ぎず、これにより本発明の範囲が制限されるものではないことは明らかである。従って、本発明の実質的な範囲は添付した請求項とそれらの等価物によって定義すべきであろう。

【図1】

【国際調査報告】