▶ フェス・セラピューティクス，インコーポレーテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-07-06
(54)【発明の名称】がんを処置する個別化された方法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/198 20060101AFI20230629BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20230629BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230629BHJP
A61K 31/4172 20060101ALI20230629BHJP
A61K 31/405 20060101ALI20230629BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230629BHJP
A61K 31/132 20060101ALI20230629BHJP
A23L 33/20 20160101ALI20230629BHJP
【ＦＩ】
A61K31/198
A61K45/00 101
A61P35/00
A61K31/4172
A61K31/405
A61P43/00 121
A61K31/132
A23L33/20 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022575209
(86)(22)【出願日】2021-06-03
(85)【翻訳文提出日】2023-02-06
(86)【国際出願番号】 US2021035780
(87)【国際公開番号】W WO2021247923
(87)【国際公開日】2021-12-09
(31)【優先権主張番号】63/034,679
(32)【優先日】2020-06-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522472855
【氏名又は名称】フェス・セラピューティクス，インコーポレーテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100196508
【弁理士】
【氏名又は名称】松尾 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100122644
【弁理士】
【氏名又は名称】寺地 拓己
(74)【代理人】
【識別番号】100220098
【弁理士】
【氏名又は名称】宮脇 薫
(72)【発明者】
【氏名】マドックス，オリバー・ディー・ケイ
【テーマコード（参考）】
4B018
4C084
4C086
4C206
【Ｆターム（参考）】
4B018LB10
4B018MD94
4B018ME08
4B018MF14
4C084AA19
4C084NA05
4C084ZB261
4C084ZB262
4C084ZC751
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC14
4C086BC38
4C086MA52
4C086NA05
4C086NA14
4C086ZB26
4C086ZC75
4C206AA01
4C206AA02
4C206FA01
4C206FA53
4C206MA01
4C206MA02
4C206MA04
4C206MA72
4C206NA05
4C206NA14
4C206ZB26
4C206ZC75
(57)【要約】
がんを処置することにおける使用のための、実質的に少なくともシステインまたはその塩を欠く食事組成物が本明細書に開示される。本開示の食事組成物および方法は、単独でまたはがん療法と組み合わせて、ＭＴＡＰ－欠乏であるがんを処置するために使用することができる。
【選択図】図２
【選択図】図２
【特許請求の範囲】
【請求項1】
がんを処置することを必要とする対象において、それを処置するための方法であって、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品が、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）含み、
対象が、がんのためのがん療法を受けており、
食事療法製品を対象に投与することが、がん療法を受けているが食事療法製品を受けていない同等の対象におけるがん療法の有効性と比較して、少なくとも約１０％は対象におけるがん療法の有効性を高める、方法。
【請求項2】
がんが、乳がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
がんが、結腸直腸がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
がんが、膵がんである、請求項１に記載の方法。
【請求項5】
がんが、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有している、請求項１に記載の方法。
【請求項6】
がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、請求項１に記載の方法。
【請求項7】
がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、請求項１に記載の方法。
【請求項8】
投与が、経口である、請求項１に記載の方法。
【請求項9】
食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、請求項１に記載の方法。
【請求項10】
食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、請求項１に記載の方法。
【請求項11】
食事療法製品が、システインまたはシスチン、セリン、およびグリシンを欠く、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
食事療法製品が、約７．５％（ｗ／ｗ）超のメチオニンを含む、請求項１に記載の方法。
【請求項14】
がん療法が、放射線療法である、請求項１に記載の方法。
【請求項15】
がん療法が、化学療法である、請求項１に記載の方法。
【請求項16】
がん療法が、抗がん剤の治療有効量の対象への投与を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項17】
抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
ポリアミン、その前駆物質、もしくは類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、請求項１７に記載の方法。
【請求項19】
約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、請求項１に記載の方法。
【請求項20】
低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、請求項１に記載の方法。
【請求項21】
がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、
がんが、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有し、
食事療法製品の対象への投与が、食事療法製品を投与されていない同等の対象におけるがん細胞増殖の減少と比較して、がん細胞増殖を少なくとも約２０％は低下させる、方法。
【請求項22】
がんが、乳がんである、請求項２１に記載の方法。
【請求項23】
がんが、結腸直腸がんである、請求項２１に記載の方法。
【請求項24】
がんが、膵がんである、請求項２１に記載の方法。
【請求項25】
がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、請求項２１に記載の方法。
【請求項26】
投与が、経口である、請求項２１に記載の方法。
【請求項27】
食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、請求項２１に記載の方法。
【請求項28】
食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、請求項２１に記載の方法。
【請求項30】
食事療法製品が、セリンおよびグリシンをさらに欠く、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、請求項３０に記載の方法。
【請求項32】
食事療法製品が、約７．５％（ｗ／ｗ）超のメチオニンを含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項33】
がん療法を施すステップをさらに含む、請求項２１に記載の方法。
【請求項34】
がん療法が、放射線療法である、請求項３３に記載の方法。
【請求項35】
がん療法が、化学療法である、請求項３３に記載の方法。
【請求項36】
抗がん剤の治療有効量を投与するステップをさらに含む、請求項３３に記載の方法。
【請求項37】
抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、請求項３６に記載の方法。
【請求項38】
ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、請求項３７に記載の方法。
【請求項39】
低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインまたはその塩を提供する、請求項２１に記載の方法。
【請求項40】
少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を投与するステップをさらに含む、請求項２１に記載の方法。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願の相互参照
[0001]本出願は、２０２０年６月４日出願の米国仮第６３／０３４，６７９号の優先権の利益を主張し、これを、参照により本明細書に組み込む。
[0001]本出願は、２０２０年６月４日出願の米国仮第６３／０３４，６７９号の優先権の利益を主張し、これを、参照により本明細書に組み込む。
【0002】
配列表
[0002]本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットでコンピュータを用いて提出されている配列表を含み、その全体を、参照により本明細書に組み込む。２０２１年６月３日に創出された前記ＡＳＣＩＩコピーは、５７６３０－７０５．６０１＿ＳＬ．ｔｘｔと名前を付けられ、サイズが９８０バイトである。
[0002]本出願は、ＡＳＣＩＩフォーマットでコンピュータを用いて提出されている配列表を含み、その全体を、参照により本明細書に組み込む。２０２１年６月３日に創出された前記ＡＳＣＩＩコピーは、５７６３０－７０５．６０１＿ＳＬ．ｔｘｔと名前を付けられ、サイズが９８０バイトである。
【背景技術】
【0003】
[0003]がん細胞は、がん細胞の成長および増殖の速度の強化を補助する代謝性順応を獲得する。特に、がん細胞は、非必須アミノ酸の需要が高く、非必須アミノ酸は、細胞生存および増殖を補助するタンパク同化および抗酸化経路のための前駆物質である。アミノ酸を中止することによって、がん細胞増殖を妨害し、細胞死をもたらすことができる。
【0004】
参照による援用
[0004]本明細書で言及されるすべての刊行物、特許、および特許出願は、あたかも各個々の刊行物、特許、または特許出願が具体的かつ個別に示されるように、参照により援用されるのと同じ程度まで参照により援用される。
[0004]本明細書で言及されるすべての刊行物、特許、および特許出願は、あたかも各個々の刊行物、特許、または特許出願が具体的かつ個別に示されるように、参照により援用されるのと同じ程度まで参照により援用される。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0005】
[0005]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置するための方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品が、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）を含み、対象が、がんのためのがん療法を受けており、食事療法製品を対象に投与することが、がん療法を受けているが、食事療法製品を受けていない同等の対象におけるがん療法の有効性と比較して、対象におけるがん療法の有効性を少なくとも約１０％は高める、方法が本明細書に開示される。
【0006】
[0006]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、がんが、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有しており、食事療法製品の対象への投与が、食事療法製品を投与されていない同等の対象におけるがん細胞増殖の減少と比較して、がん細胞増殖を少なくとも約２０％は減少させる、方法が本明細書に開示される。
【0007】
[0007]一部の実施形態では、ある状態の処置を必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法が、ａ）対象から生体試料中の代謝物のレベルを決定するステップと；ｂ）治療有効量の食事療法製品を、代謝物のレベルに少なくとも基づいて対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、グリシン、セリン、アラニン、プロリン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、チロシン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも１種の非必須アミノ酸を最大約０．５％（ｗ／ｗ）含む、方法が本明細書に開示される。
【0008】
[0008]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品の治療有効量が、ａ）グルコースを欠く食事療法製品の治療有効量；ｂ）セリンおよびグリシンを欠く食事療法製品の治療有効量；ならびにｃ）リシンを欠く食事療法製品の治療有効量のうちの少なくとも１つと比較して、がんの処置の場合に低い、方法が本明細書に開示される。
【図面の簡単な説明】
【0009】
【図1】[0009]システイン飢餓（－システイン、右パネル）の細胞増殖に対する効果を、十分に供給された状態（対照、左パネル）と比較して示す図である。
【図2】[0010]ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞における主な栄養素の飢餓している細胞の効果を示す図である。
【図3】[0011]システイン飢餓のシステイン、シスチン、γ－ＧＣおよびＧＳＨレベルに対する効果を示す図である。
【図4】[0012]システイン飢餓および外因性ＧＳＨの、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－２１３およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞における細胞死に対する効果を示す図である。
【図5】[0013]ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成での、システイン飢餓に対する応答とＴｓＰ酵素の発現との間の関係を例証する図である。
【図6】[0014]Ｓ－アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＡＨＣＹ）；シスタチオニン（ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｅ）β－シンターゼ（ＣＢＳ）；シスタチオニンγ－リアーゼ（ＣＳＥ）の酵素発現を比較する散乱プロット、またはＣＢＳ＋ＣＳＥ対システイン飢餓後の細胞数を示す図である。
【図7】[0015]パネルＡは、０．２ｍＭホモシステイン（ＨＣ）または０．２ｍＭシスタチオニン（ＣＴＨ）の添加により、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞系における生存および増殖のかなりの回復が引き起こされることを示す図である。パネルＢは、０．８ｍＭホモシステイン（ＨＣ）の補充により、細胞増殖が復元するが、０．８ｍＭメチオニンの補充では回復が生じないことを示す図である。
【図8】[0016]ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞においてメチオニンがトランススルフレーション経路に入り、標識がホモシステイン、シスタチオニンおよびホモセリンで検出されることを示す図である。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞では、きわめて少量の標識しかホモシステイン、シスタチオニン、およびホモセリンで検出されない。
【図9】[0017]パネルＡは、細胞外ＭＴＡレベルが、飢餓への感受性に強く相関していたことを示す図である。パネルＢは、ＭＴＡＰタンパク質発現が、システイン飢餓応答に相関していたことを示す図である。
【図10】[0018]横列Ａは、耐性細胞系ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、および ＭＤＡ－ＭＢ－４６８が、ポリアミンの存在下で高度に増感したことを示す図である。横列Ｂは、より感受性の細胞（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）における、より多いスペルミジンおよびスペルミンと同時に生じるより少ないプトレシンでの、一貫した傾向を示す図である。
【図11】[0019]パネルＡは、システイン飢餓中のＴｓＰに対する、ポリアミン経路の活性を評価する、ホモシステイン、シスタチオニン、スペルミジンまたはスペルミンが補充されたＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞のＬＣ－ＭＳ分析を示す図である。パネルＢは、ＡＭＤ１阻害剤（サルドモジド）での細胞の処置により、システイン飢餓に応答する細胞死が防止されたことを示す図である。
【図12】[0020]システイン飢餓の、また、１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンまたは３４Ｓ１－メチオニンで増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３２１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞のＬＣ－ＭＳ分析を示す図である。
【図13】[0021]活性酸素種（ＲＯＳ）過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）を生成するポリアミン代謝の反応を例証する図である。
【図14】[0022]ＳＭＯＸ阻害剤を用いてＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞の処置の効果を示して、これらのＲＯＳ－生成反応の、システイン飢餓への細胞の応答に対する影響を評価する図である。
【図15】[0023]横列Ａは、平均ＣｅｌｌＲＯＸ染色強度での、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞に対する、システイン飢餓および／またはＳＭＯＸ阻害剤での処置の効果を示す図である。横列Ｂは、システイン飢餓、ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤、スペルミジンまたはスペルミンでの処置の、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する効果を示す図である。横列Ｃは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞での、平均ＣｅｌｌＲＯＸ染色強度に対するシステイン飢餓および／またはＡＭＤ１阻害の効果を示す図である。
【図16】[0024]横列Ａは、システイン飢餓、ならびに組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓の、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞の細胞生存に対する効果を示す図である。横列Ｂは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞生存における、外因性メチオニンを有する、または有さないシステイン飢餓の効果を示す図である。
【図17】[0025]メチオニンの中止のシステイン代謝に対する影響を検査する、システイン飢餓－感受性細胞系のＬＣ－ＭＳ分析を示す図である。
【図18】[0026]パネルＡは、ＭＴＡＰ－欠失に対するシステイン飢餓の効果およびフェロスタチンを用いた回復を示す図である。パネルＢは、ＡＭＤ１阻害剤を用いた細胞の処置により、システイン飢餓に応答して細胞生存が復元したことを示す図である。パネルＣは、ＮＴＣ－およびＭＴＡＰ－欠失細胞の、システインの制限への応答は、ｉｎ ｖｉｖｏで著しく異なることを示す図である。
【図19】[0027]パネルＡは、ＡＭＤ１発現におけるＭＴＡＰ喪失の効果を実証するウエスタンブロットを示す図である。パネルＢは、ポリアミン経路活性の増大を示すメチオニン－依存性ｄｃ－ＳＡＭ標識の劇的な増加につながるＡＭＤ１アップレギュレートのＬＣ－ＭＳ分析を示す図である。パネルＣは、ＭＴＡＰ－欠失ＨＣＴ１１６細胞が、ＭＴＡＰ－発現細胞に対する、システイン飢餓に応答する細胞ＲＯＳレベル増加の増大を示したことを示す。パネルＤは、ＭＴＡＰ－欠失細胞が、ポリアミンスペルミジンにおいて実質的により高いメチオニン依存性標識を有していたこと、およびＴｓＰ中間体の標識において一貫した差はなかったことを示すＬＣ－ＭＳ分析を示す図である。
【図20】[0028]横列Ａは、システイン飢餓中に、ＳＭＯＸ阻害剤、ＰＡＯＸ阻害剤およびＭＴＯＢ補充でのポリアミン代謝の阻害は、ＭＴＡＰ発現細胞にほとんど影響を及ぼさなかったが、ＭＴＡＰ－欠失細胞の細胞生存を回復したことを示す図である。横列Ｂは、メチオニンの存在が、システイン飢餓中にＭＴＡＰ発現細胞に有利であり、メチオニンのレベルが一層低いと、ＭＴＡＰ欠失細胞の生存能力を阻害することを示す図である。
【図21】[0029]がん細胞のシステイン飢餓に対する敏感性に影響を与えるプロセスを例証する図である。
【図22】[0030]パネルＡは、所定の栄養素が欠落した完全培地または適合培地中で２４時間増殖させた細胞系を示す図である。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１データは、他の細胞系との比較のために図２から複写される。パネルＢは、２４時間および７２時間で、システインを有する（Ｃｔｒ）、またはシステインを有さない（－Ｃｙｓ）およびフェロスタチン（＋Ｆ）１μＭで増殖させた細胞系を示す。
【図23】[0031]すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、または５ｍＭグルタチオンを有しシステインが欠落している（－Ｃｙｓ＋ＧＳＨ）、もしくはグルタチオンを有さずシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す図である。
【図24】[0032]パネルＡは、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、または０．８ｍＭホモシステインを有するシステインが欠落している（－Ｃｙｓ＋ＨＣ）、もしくはホモシステインを有さない適合培地（－Ｃｙｓ）中で２４時間増殖させた結腸直腸がん細胞（ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０）および乳がん細胞（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）を示す。パネルＢは、２４時間で、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（＋）またはシステインが欠落している（－）適合培地中で増殖させた細胞を示す。
【図25】[0033]パネルＡは、ビヒクル（Ｖｅｈ）が補充された、０．２ｍＭホモシステイン（ＨＣ）が補充された、または０．２ｍＭシスタチオニン（ＣＴＨ）が補充された、システインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す図である。パネルＢは、ビヒクル（Ｖｅｈ）が補充された、または０．２ｍＭもしくは０．８ｍＭホモシステイン（ＨＣ）が補充された、システインが欠落している培地中で８時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す図である。
【図26】[0034]パネルＡは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞の、ＭＴＡＰ欠失に対する影響を示す図である。パネルＢは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞を示す図である。細胞溶解物は、ウエスタンブロットによりＡＭＤ１およびＯＣＤ１酵素発現について精査され、ＬｉＣｏｒスキャナーで定量された。
【図27】[0035]細胞系１１種のシステイン飢餓への感受性に対する、ある範囲の生物学的パラメーターについての相関係数（Ｒ２）を示す図である。
【図28】[0036]完全培地（０．４ｍＭ、セリンに代わる１３Ｃ３
１５Ｎ１－セリンを有する）中で４８時間増殖させた細胞を示す図である。
【図29】[0037]パネルＡは、図２８に示されるピーク面積データを使用して、ＧＳＨレベルを合計ＧＳＨプールの％合計として示す図である。パネル上段では、すべてのアイソトポログが示される。パネル下段では、システインに由来するアイソトポログ（ｍ＋４およびｍ＋７）のみが示される。パネルＢは、（Ｖｅｈ）を有さない、または０．５ｍＭもしくは１ｍＭのＣＳＥ阻害剤ベータ－シアノ－Ｌ－アラニンを有する完全（Ｃｔｒ）、または、システインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間増殖させた細胞を示す図である。
【図30】[0038]増加量のＭＴＡを有するすべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で２０時間および７２時間増殖させた細胞を示す図である。
【図31】[0039]パネルＡは、ビヒクルまたは５００μＭ ＭＴＡを有する完全培地中で２４時間増殖させた細胞を示す図である。代謝産物が抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。パネルＢの上列は、２０μＭプトレシン（＋プトレシン）、２０μＭスペルミジン（＋スペルミジン）、もしくは２０μＭスペルミン（＋スペルミン）を含有する、または作用剤を有さない（＋ビヒクル）完全培地中で増殖させた細胞を示す。パネルＢの下列は、２０μＭプトレシン（＋プトレシン）、２０μＭスペルミジン（＋スペルミジン）、もしくは２０μＭスペルミン（＋スペルミン）を含有する、または作用剤を有さない（＋ビヒクル）、システインを有さない培地中で増殖させた細胞を示す。
【図32】[0040]パネルＡは、０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地中で１６時間増殖させた、次いで、０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で３２時間増殖させた細胞を示す。パネルＢは、メチオニンに代わる０．２ｍＭ１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地中で５時間増殖させた細胞を示す。
【図33】[0041]パネルＡは、完全培地（メチオニンに代わる０．２ｍＭ ２３Ｓ１－メチオニンを有する）中で２４時間増殖させ、次いで、２０μＭのＡＭＤ１阻害剤サルドモジドで２時間、４時間および８時間処置したＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す図である。パネルＢは、２０μＭのＡＭＤ１阻害剤サルドモジドを有する、または有さない、完全培地（メチオニンに代わる０．２ｍＭ ３４Ｓ１－メチオニンを有する）中で１６時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（左）およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞（右）を示す図である。
【図34】[0042]１０μＭ、４０μＭ、または８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、または有する完全培地中で１６時間増殖させた、次いで完全培地（Ｃｔｒ）、または１０μＭ、４０μＭ、もしくは８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、もしくは有するシステインが欠落している適合培地中で２４時間増殖させた細胞を示す図である。
【図35】[0043]パネルＡは、５０μＭのＳＭＯＸ阻害剤ＭＤＬ７２５２７を有する（＋ＳＭＯＸｉ）、またはＳＭＯＸ阻害剤を有さない（＋ビヒクル）完全培地中で増殖させ、次いで完全培地（Ｃｔｒ）、または５０μＭのＳＭＯＸ阻害剤を有する、または有さない、システインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す図である。ＲＯＳは、ＣｅｌｌＲＯＸ ｄｅｅｐ ｒｅｄで処置された生細胞において、Ｏｐｅｒｅｔｔａ自動顕微鏡によりリアルタイムで検出された。ＲＯＳ染色強度は、１６時間時点について示される。パネルＢは、正常酸素状態（Ｎｏｒ）または低酸素状態（Ｈｙｐ）；１％酸素下で完全培地、システインが欠落している培地中で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す図である。パネルＣは、完全培地（Ｃｔｒ）、または２０μＭのＡＭＤ１阻害剤を有する、もしくはＡＭＤ１阻害剤を有さないシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す。
【図36】[0044]横列Ａは、システインを有さず、増加濃度（１から１ｍＭ）のメチオニンを含有する培地中で２０時間増殖させたシステイン飢餓に高度に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す図である。横列Ｂは、システインを有さず、増加濃度（０から１０μＭ）のメチオニンを含有する培地中で１７時間増殖させたシステイン飢餓に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す図である。横列Ｃは、システインを有さず、増加濃度のメチオニン（０から１０μＭ）を含有する培地中で４１時間増殖させたシステイン飢餓に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す。
【図37】[0045]所定の濃度で、メチオニン（Ｍｅｔ）を有する、または有さない、完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す図である。
【図38】[0046]様々なレベルの１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンが補充された、メチオニンが欠落している培地中で５時間増殖させたＰＡＮＣ－１細胞を示す図である。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析される。
【図39】[0047]パネルＡは、図１７および図３８に示される実験からの、ＬＣ－ＭＳデータを使用して評価されたアミノ酸のレベルを示す図である。パネルＢは、ＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ中で２週間培養したＭＩＡＰａＣａ－２細胞を示す図である。
【図40】[0048]パネルＡは、メチオニンに代わる０．２ｍＭ １３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する）完全培地中で３０時間増殖させたＭＴＡＰ陽性（親／Ｐａｒ、ＮＴＣ）および陰性（Ｍ１、Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞を示す図であり、代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析される。パネルＢは、ＭＴＡＰ－陽性（ＮＴＣ）およびＭＴＡＰ－枯渇（Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞が注入されたＣＤ－１ヌードマウスから得られるデータを示す図である。パネルＣは、ＭＴＡレベルについてＬＣ－ＭＳ分析を施した異種移植片腫瘍および血清から抽出された代謝産物を示す図である。
【図41】[0049]パネルＡは、空ベクター（クローンＭ２．ＥＶ１およびＭ２．ＥＶ２）またはＭＴＡＰ発現ではプラスミド（クローンＭ２．ＭＸ１およびＭ２．ＭＸ２）で安定的にトランスフェクトされたＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９（Ｍ２）によりＭＴＡＰが欠失したＨＣＴ１１６細胞を示す図である。パネルＢは、ｘＣＴ阻害剤および１０μＭフェロトーシス誘発物質エラスチンを有する、または有さない、完全培地中で１８時間増殖させたＨＣＴ１１６クローンを示す図である。パネルＣは、完全培地中で３０時間増殖させた（メチオニンに代わる０．２ｍＭ １３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する）ＭＴＡＰ－発現（ＮＴＣおよびＭ２．ＭＸ２）およびＭＴＡＰ－欠失（Ｍ２およびＭ２．ＥＶ１）ＨＣＴ１１６細胞を示す図である。
【図42】[0050]パネルＡは、２４ウェルプレートにおける完全培地中である範囲の細胞密度で播種したＭＴＡＰ－発現（ＮＴＣおよびＭ２．ＭＸ２）およびＭＴＡＰ－欠失（Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞を示す図である。パネルＢは、完全培地中で２４時間増殖させた膠芽腫（ＧＢＭ）細胞系を示す図である。細胞溶解物は、ウエスタンブロットによりＭＴＡＰ、ＡＭＤ１およびアクチン発現について精査され、ＬｉＣｏｒスキャナーで定量された。
【図43】[0051]パネルＡは、完全培地（Ｃｔｒ）またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間増殖させたＧＢＭ細胞系を示す図である。パネルＢは、対照（Ｃｔｒ）またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間または７２時間増殖させた乳がん細胞系ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（高度に感受性）およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８（耐性）を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0010】
[0052]がん細胞は、がん細胞の成長および増殖の速度の強化を補助する代謝性順応を獲得する。代謝性順応は、より高いタンパク同化のアウトプットを補助し、抗酸化防御を支えるために、代謝を調整するのに役立つ一方、代謝性順応は、代謝柔軟性を低下させ、ｄｅ ｎｏｖｏ合成に対する栄養の取込みに対する依存の増加をも課し得る。がん細胞は、非必須アミノ酸（ＮＥＡＡ）の需要が高く、ＮＥＡＡは、細胞生存および増殖を補助するタンパク同化および抗酸化経路のための前駆物質である。
【0011】
[0053]ホモ二量体シスチンとして存在することができる、システインは、がん細胞の成長および増殖を補助する必須の外因性の栄養素として必要とされるＮＥＡＡである。がん細胞は、システインを消費し、システインの欠乏によって、細胞死を誘導することができる。いくつかの状況においてシステインを中止することによって、がん細胞増殖を単に妨害するのでなく、フェロトーシスと名付けられた脂質過酸化が関与している細胞死の異なる鉄－依存の形態を誘発することができる。がん遺伝子発現によって、システインの制限に対する感度を促進することができ、システインの酵素の枯渇によって、マウスのがんモデルにおいて腫瘍成長を制限することができる。腫瘍においてアップレギュレートされる、ｘＣＴ輸送体を介したシスチンの取込みの阻害によって、フェロトーシスを誘導することもできる。
【0012】
[0054]システイン、グリシン、およびグルタメートが、主な細胞抗酸化グルタチオン（ＧＳＨ）を合成するために使用されるため、システイン、グリシン、およびグルタメートは、がん細胞の代謝において重要である。がん細胞中で、制御されない増殖を補助する、アップレギュレートされる代謝過程は、活性酸素種（ＲＯＳ）のレベルの上昇をもたらし、細胞抗酸化経路への需要を高める。ＧＳＨ合成および代謝回転の適切なレベルは、がん細胞の生存および増殖を補助することにおいて重要である。ＮＲＦ２経路の活性化は、がんにおいて一般に見られ、シスチンの取込みの増加および細胞システインの上昇への代謝性順応を含めた、抗酸化応答を促進する。シスチンの取込みの上昇の重要な推論は、グルタミノリシスへの依存性の増加である。さらに、システインは、タンパク質およびタンパク質補因子、例えば、鉄－硫黄クラスターの合成のためにやはり必須であり、これらは、がん細胞におけるＲＯＳ－センシングにとって重要である。
【0013】
[0055]がん細胞は、逆含硫基移動（ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｓｕｌｆｕｒａｔｉｏｎ）としても知られる、含硫基移動経路（ＴｓＰ）を介して、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成のための酵素の発現を損ない得る。いくつかのがん細胞は、ＴｓＰ酵素をアップレギュレートして、システインの制限中の生存を改善することができる。ＴｓＰの究極の上流前駆物質は、必須アミノ酸メチオニンである。Ｓ－アデノシルメチオニン（ＳＡＭ）およびＳ－アデノシルホモシステイン（ＳＡＨ）への変換を介するメチオニンは、ホモシステインをＴｓＰに供給する。
【0014】
[0056]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置するための方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品が、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）含み、がん療法を受けており、食事療法製品を対象に投与することが、がん療法を受けているが、食事療法製品を受けていない同等の対象におけるがん療法の有効性と比較して、対象におけるがん療法の有効性を少なくとも約１０％は高める、方法が本明細書に開示される。
【0015】
[0057]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、がんが、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有しており、食事療法製品の対象への投与が、食事療法製品を投与されていない対象におけるがん細胞増殖の減少と比較して、がん細胞増殖を少なくとも約２０％は低下させる、方法が本明細書に開示される。
【0016】
[0058]一部の実施形態では、食事療法製品を必要とする対象においてある状態を処置する方法であって、方法が、ａ）対象から生体試料中の代謝物のレベルを決定するステップと；ｂ）治療有効量の食事療法製品を、代謝物のレベルに少なくとも基づいて対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、グリシン、セリン、アラニン、プロリン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、チロシン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも１種の非必須アミノ酸を最大約０．５％（ｗ／ｗ）含む、方法が本明細書に開示される。
【0017】
[0059]一部の実施形態では、がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法が、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品の治療有効量が、ａ）グルコースを欠く食事療法製品の治療有効量；ｂ）セリンおよびグリシンを欠く食事療法製品の治療有効量；ならびにｃ）リシンを欠く食事療法製品の治療有効量のうちの少なくとも１つと比較して、がんの処置の場合に低い、方法が本明細書に開示される。
【0018】
[0060]一部の実施形態では、食事療法製品を必要とする対象を同定する方法であって、方法が、ａ）対象から得られた生体試料中のメチルチオアデノシン（ＭＴＡ）のレベルを決定するステップと；ｂ）生体試料中のＭＴＡのレベルが参照レベルを上回る場合、食事療法製品を必要としている対象を同定するステップと；ｃ）食事療法製品を対象に投与するステップとを含み、食事療法製品が、最大約０．５％のシステインまたはシスチンを含む、方法が本明細書に開示される。
【0019】
アミノ酸組成物
[0061]アミノ酸組成物を使用して、ある状態を処置する方法が、が本明細書に開示される。一部の実施形態では、本組成物は、食事療法製品として使用される。本開示の組成物は、少なくとも１０種のアミノ酸または任意のそのアミノ酸の塩を含むことができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、または１９個のアミノ酸またはその塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１０個のアミノ酸またはその塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１４個のアミノ酸またはその塩を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、１８種のアミノ酸またはその塩を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、１９種のアミノ酸またはその塩を含む。本明細書において開示されるアミノ酸の塩は、薬学的に許容される塩であり得る。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステインを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシスチンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン（ｃｙｔｓｔｉｎｅ）、およびセリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン、セリン、およびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く。
[0061]アミノ酸組成物を使用して、ある状態を処置する方法が、が本明細書に開示される。一部の実施形態では、本組成物は、食事療法製品として使用される。本開示の組成物は、少なくとも１０種のアミノ酸または任意のそのアミノ酸の塩を含むことができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、または１９個のアミノ酸またはその塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１０個のアミノ酸またはその塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１４個のアミノ酸またはその塩を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、１８種のアミノ酸またはその塩を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、１９種のアミノ酸またはその塩を含む。本明細書において開示されるアミノ酸の塩は、薬学的に許容される塩であり得る。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステインを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシスチンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン（ｃｙｔｓｔｉｎｅ）、およびセリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン、セリン、およびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は実質的に、少なくともシステイン、シスチン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く。
【0020】
[0062]いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１、２、３、４、５、６、７、８、または９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は７、８、または９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は８個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともヒスチジンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともイソロイシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともロイシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともリシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともメチオニンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともフェニルアラニンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともスレオニンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともトリプトファンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともバリンを欠く。本明細書において開示される任意の組成物は、システイン、Ｌ－システイン、シスチン、またはＬ－シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、システインの代わりに、シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、Ｌ－システインの代わりに、Ｌ－シスチンを使用することができる。
【0021】
[0063]いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は７、８、９、１０、または１１個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は７個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は８個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は９個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともアラニン、アルギニン、アスパラギン、アスパラギン酸、シスチン、またはシステインを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともグルタミン酸、グルタミン、グリシン、またはプロリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともセリンまたはチロシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシステインを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシスチンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシステインおよびセリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシスチンおよびセリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシステイン、セリン、およびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシスチン、セリン、およびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシステイン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く。一部の実施形態では、本明細書において開示される組成物は、少なくともシスチン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く。
【0022】
[0064]本開示の組成物は必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含むことができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は１、２、３、４、５、６、７、８、または９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、または１１個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は７、８、または９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および６、７、８、または９個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は８または９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および８または９個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および７個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および８個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は９個の必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩および９個の非必須アミノ酸またはそのいずれかのアミノ酸の塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。
【0023】
[0065]いくつかの実施形態において、本開示の組成物はヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、メチオニン、システイン、フェニルアラニン、チロシン、トレオニン、トリプトファン、バリン、アルギニン、グルタミン、アラニン、アスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸またはプロリンを含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はＬ－ヒスチジン、Ｌ－イソロイシン、Ｌ－ロイシン、Ｌ－リシン、Ｌ－メチオニン、Ｌ－システイン、Ｌ－フェニルアラニン、Ｌ－チロシン、Ｌ－トレオニン、Ｌ－トリプトファン、Ｌ－バリン、Ｌ－アルギニン、Ｌ－グルタミン、Ｌ－アラニン、Ｌ－アスパラギン酸、Ｌ－アスパラギン、Ｌ－グルタミン酸、またはＬ－プロリンを含む。本明細書において開示される任意のアミノ酸は、その水和物またはその塩であり得る。
【0024】
[0066]いくつかの実施形態において、組成物はヒスチジンまたはその塩、例えばＬ－ヒスチジンまたはＬ－ヒスチジン塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はイソロイシンまたはその塩、例えばＬ－イソロイシン、Ｌ－イソロイシンメチルエステル塩酸塩、またはＬ－イソロイシンエチルエステル塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はロイシンまたはその塩、例えばＬ－ロイシン、Ｌ－ロイシンメチルエステル塩酸塩、またはＬ－ロイシンエチルエステル塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はリシンまたはその塩、例えばＬ－リシン、Ｌ－リシン塩酸塩、またはＬ－リシン二塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はメチオニンまたはその塩、例えばＬ－メチオニン、Ｌ－メチオニンメチルエステル塩酸塩、またはＬ－メチオニン塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。本明細書において開示される任意のアミノ酸は、その水和物またはその塩であり得る。
【0025】
[0067]いくつかの実施形態において、本開示の組成物はシステインまたはその塩、例えばＬ－システイン、Ｌ－システイン塩酸塩、Ｌ－システインメチルエステル塩酸塩、またはＬ－システインエチルエステル塩酸塩を含む。本明細書において開示される任意の組成物は、システイン、Ｌ－システイン、シスチン、またはＬ－シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、システインの代わりに、シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、Ｌ－システインの代わりに、Ｌ－シスチンを使用することができる。いくつかの実施形態において、組成物はシスチンまたはその塩、例えばＬ－シスチンを開示する。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はフェニルアラニンまたはその塩、例えばＬ－フェニルアラニン、ＤＬ－フェニルアラニン、またはＬ－フェニルアラニンメチルエステル塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はチロシンまたはその塩、例えばＬ－チロシンまたはＬ－チロシン塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はトレオニンまたはその塩、例えばＬ－トレオニンまたはＬ－トレオニンメチルエステル塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はＬ－トリプトファンを含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はバリンまたはその塩、例えばＬ－バリン、Ｌ－バリンメチルエステル塩酸塩、またはＬ－バリンエチルエステル塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。本明細書において開示される任意のアミノ酸は、その水和物またはその塩であり得る。
【0026】
[0068]いくつかの実施形態において、本開示の組成物はアルギニンまたはその塩、例えばＬ－アルギニンまたはＬ－アルギニン塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はグルタミンまたはその塩、例えばＬ－グルタミンまたはＬ－グルタミン塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はアラニンまたはその塩、例えばＬ－アラニンまたはβ－アラニンを含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はアスパラギン酸またはその塩、例えばＬ－アスパラギン酸、Ｄ－アスパラギン酸、Ｌ－もしくはＤ－アスパラギン酸カリウム塩、Ｌ－もしくはＤ－アスパラギン酸塩酸塩；Ｌ－もしくはＤ－アスパラギン酸マグネシウム塩、またはＬ－もしくはＤ－アスパラギン酸カルシウム塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はＬ－アスパラギンを含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はグルタミン酸またはその塩、例えばＬ－グルタミン酸またはＬ－グルタミン酸塩酸塩を含む。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はプロリンまたはその塩、例えばＬ－プロリン、Ｌ－プロリン塩酸塩、Ｌ－プロリンメチルエステル塩酸塩、またはＬ－プロリンエチルエステル塩酸塩を含む。本明細書に開示されるアミノ酸の塩は薬学的に許容される塩であることができる。
【0027】
[0069]本開示の組成物は実質的に、少なくともシステインを欠き得る。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約２％、最大約１．８％、最大約１．６％、最大約１．４％、最大約１．２％、最大約１．０％、最大約０．８％、最大約０．７％、最大約０．６％、最大約０．５％、最大約０．４％、最大約０．３％、最大約０．２％、または最大約０．１％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．４％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．３％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．２％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．１％のシステインまたはその塩を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、いかなるシステインまたはその塩をも含まない。
【0028】
[0070]一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約２％、最大約１．８％、最大約１．６％、最大約１．４％、最大約１．２％、最大約１．０％、最大約０．８％、最大約０．７％、最大約０．６％、最大約０．５％、最大約０．４％、最大約０．３％、最大約０．２％、または最大約０．１％のグリシンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、グリシンを欠く。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約２％、最大約１．８％、最大約１．６％、最大約１．４％、最大約１．２％、最大約１．０％、最大約０．８％、最大約０．７％、最大約０．６％、最大約０．５％、最大約０．４％、最大約０．３％、最大約０．２％、または最大約０．１％のセリンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、セリンを欠く。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約２％、最大約１．８％、最大約１．６％、最大約１．４％、最大約１．２％、最大約１．０％、最大約０．８％、最大約０．７％、最大約０．６％、最大約０．５％、最大約０．４％、最大約０．３％、最大約０．２％、または最大約０．１％のプロリンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のプロリンまたはその塩をさらに含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、プロリンを欠く。
【0029】
[0071]一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステインおよび最大約０．５％のグリシンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインおよびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステインおよび最大約０．５％のセリンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインおよびセリンを欠く。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％のグリシン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システイン、セリン、およびグリシンを欠く。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％のグリシン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のプロリンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システイン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く。本明細書において開示される任意の組成物は、システイン、Ｌ－システイン、シスチン、またはＬ－シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、システインの代わりに、シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、Ｌ－システインの代わりに、Ｌ－シスチンを使用することができる。
【0030】
[0072]本開示の組成物は、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸の量を増加させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、メチオニンの量を増加させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、少なくとも約５％、少なくとも約５．５％、少なくとも約６．０％、少なくとも約６．５％、少なくとも約７．０％、少なくとも約７．５％、少なくとも約８．０％、少なくとも約８．５％、少なくとも約９．０％、少なくとも約９．５％、または少なくとも約１０．０％のメチオニンを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、少なくとも約７．５％のメチオニンを含むことができる。
【0031】
[0073]一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステインならびにメチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステインおよび少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインを欠き、少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインおよびセリンを欠き、少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシン、および少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインおよびグリシンを欠き、少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システイン、グリシン、およびセリンを欠き；少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約０．５％のシステイン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のプロリンを、および少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンを有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システイン、グリシン、セリン、およびプロリンを欠き；少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）のメチオニンまたはそれらの塩を含む。本明細書において開示される任意の組成物は、システイン、Ｌ－システイン、シスチン、またはＬ－シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、システインの代わりに、シスチンを使用することができる。本明細書において開示される任意の組成物は、Ｌ－システインの代わりに、Ｌ－シスチンを使用することができる。
【0032】
医薬組成物
[0074]本開示の医薬組成物は、例えば、別の医薬品による、例えば、対象の処置前、処置中または処置後に使用することができる。
[0074]本開示の医薬組成物は、例えば、別の医薬品による、例えば、対象の処置前、処置中または処置後に使用することができる。
【0033】
[0075]対象は、例えば、高齢者、成人、思春期、思春期前、小児、幼児、乳児、新生児、および非ヒト動物であり得る。一部の実施形態では、対象は、患者である。
[0076]本開示の医薬組成物は、他の化学成分、例えば、担体、安定剤、希釈剤、分散化剤、懸濁化剤、増粘剤、および／または賦形剤との、本明細書中に記載される任意の組成物または食事療法製品の組合せであり得る。医薬組成物は、食事療法製品の生物への投与を容易にする。医薬組成物は、例えば、静脈内、皮下、筋肉内、経口、非経口、眼部、皮下、経皮、経鼻、腟内、および局所投与を含めた、様々な形態および経路により、医薬組成物として治療有効量で投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物または食事療法製品は、経口投与される。
[0076]本開示の医薬組成物は、他の化学成分、例えば、担体、安定剤、希釈剤、分散化剤、懸濁化剤、増粘剤、および／または賦形剤との、本明細書中に記載される任意の組成物または食事療法製品の組合せであり得る。医薬組成物は、食事療法製品の生物への投与を容易にする。医薬組成物は、例えば、静脈内、皮下、筋肉内、経口、非経口、眼部、皮下、経皮、経鼻、腟内、および局所投与を含めた、様々な形態および経路により、医薬組成物として治療有効量で投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物または食事療法製品は、経口投与される。
【0034】
[0077]医薬組成物は、局所方式で、例えば、臓器への食事療法製品の直接の注射は、必要に応じて、デポーまたは徐放製剤または留置用剤の形態で投与することができる。医薬組成物は、急速放出製剤の形態で、延長放出製剤の形態で、または中間型放出（ｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅ ｒｅｌｅａｓｅ）製剤の形態で、提供することができる。急速放出形態は、即時放出を提供することができる。延長放出製剤は、制御放出または持続遅延放出を提供することができる。
【0035】
[0078]経口投与の場合、医薬組成物は、本開示の活性組成物または食事療法製品を、薬学的に許容される担体または賦形剤と組み合わせることによって、製剤化することができる。かかる担体は、対象による経口摂取用に、液体、ゲル、シロップ、エリキシル、スラリ、または懸濁液を製剤化するために使用することができる。経口溶解可能製剤中で用いられる溶媒の限定されない例は、水、エタノール、イソプロパノール、食塩水、生理食塩水、ＤＭＳＯ、ジメチルホルムアミド、リン酸カリウム緩衝液、リン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）、リン酸ナトリウム緩衝液、４－２－ヒドロキシエチル－１－ピペラジンエタンスルホン酸緩衝液（ＨＥＰＥＳ）、３－（Ｎ－モルフォリノ）プロパンスルホン酸緩衝液（ＭＯＰＳ）、ピペラジン－Ｎ，Ｎ’－ｂｉｓ（２－エタンスルホン酸）緩衝液（ＰＩＰＥＳ）、および生理食塩水クエン酸ナトリウム（ｓａｌｉｎｅ ｓｏｄｉｕｍ ｃｉｔｒａｔｅ）緩衝液（ＳＳＣ）を含むことができる。経口溶解可能製剤中で用いられる共溶媒の限定されない例は、スクロース、尿素、ｃｒｅｍａｐｈｏｒ、ＤＭＳＯ、およびリン酸カリウム緩衝液を含むことができる。
【0036】
[0079]医薬組成物は、静脈内投与用に製剤化することができる。医薬組成物は、油性または水性ビヒクル中の無菌の懸濁液、溶液またはエマルションとして、非経口注射に適した形態であり得、配合剤（ｆｏｒｍｕｌａｔｏｒｙ ａｇｅｎｔ）、例えば、懸濁化剤、安定化剤および／または分散化剤などを含有することができる。非経口投与用の医薬組成物には、水溶性の形態で活性食事療法製品の水溶液を含む。活性食事療法製品の懸濁液は、油性注射懸濁液として調製することができる。適当な親油性溶媒またはビヒクルは、脂肪油、例えば、ゴマ油など、または合成脂肪酸エステル、例えば、オレイン酸エチルまたはトリグリセリド、またはリポソームを含む。懸濁液は、適当な安定剤または食事療法製品の溶解性を高めて、高濃度溶液の調製を可能にする薬剤を含有することもできる。あるいは、有効成分は、使用前の、適当なビヒクル、例えば、無菌の発熱物質なしの水を用いた構成用の、粉末の形態であり得る。
【0037】
[0080]本明細書中で示される処置または使用の方法を実行することにおいて、本明細書中に記載される食事療法製品の治療有効量は、医薬組成物の形態で、疾患または状態を有する対象に投与されて、処置される。一部の実施形態では、対象は、哺乳動物、例えば、ヒトである。治療有効量は、疾患の重症度、対象の年齢および相対的な健康、使用される食事療法製品の効力、ならびに他の因子に応じて広範に変わり得る。食事療法製品は、単独でまたは混合物の構成成分として１種もしくは複数の治療剤と組み合わせて使用することができる。
【0038】
[0081]医薬組成物は、賦形剤および補助剤を含む、１種または複数の生理的に許容される担体を用いて製剤化することができ、これは、薬学的に使用することができる調製への活性食事療法製品の処理を容易にする。製剤は、選択される投与の経路に応じて修正することができる。本明細書中に記載される食事療法製品を含む医薬組成物は、例えば、混合、溶解、乳化、カプセル化、封入、または圧縮過程により、製造することができる。
【0039】
[0082]医薬組成物は、少なくとも１種の薬学的に許容される担体、希釈剤、または賦形剤および遊離塩基または薬学的に許容される塩の形態として本明細書中に記載される食事療法製品を含むことができる。医薬組成物は、可溶化剤、安定剤、張度強化剤、緩衝液および保存剤を含有することができる。
【0040】
[0083]本明細書中に記載される食事療法製品を含む組成物の調製のための方法は、１種もしくは複数の不活性な、薬学的に許容される賦形剤または担体と共に食事療法製品を調製して、固体、半固体、または液体組成物を形成するステップを含む。固体組成物は、例えば、粉末、錠剤、分散性粒剤、カプセル、およびカシェ剤を含む。液体組成物は、例えば、食事療法製品が溶解される溶液、食事療法製品を含むエマルション、またはリポソームを含む溶液、ミセル、または本明細書において開示される食事療法製品を含むナノ粒子を含む。半固体組成物は、例えば、ゲル、懸濁液およびクリームを含む。組成物は、液体溶液または懸濁液、使用前の液体中で溶液または懸濁液に適した固体の形態、またはエマルションとしてであり得る。これらの組成物は、微量の非毒性の、補助物質、例えば、湿潤剤または乳化剤、ｐＨ緩衝化剤、および他の薬学的に許容される添加物を含有することもできる。
【0041】
[0084]本開示中の使用に適した剤形の限定されない例は、液体、粉末、ゲル、ナノ懸濁液、ナノ粒子、マイクロゲル、水性または油性懸濁液、エマルション、および任意のその組合せを含む。
【0042】
[0085]本開示中の使用に適した薬学的に許容される賦形剤の限定されない例は、結合剤、崩壊剤、接着防止剤（ａｎｔｉ－ａｄｈｅｒｅｎｔ）、帯電防止剤、界面活性剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、可塑剤、保存剤、懸濁化剤、乳化剤、抗菌剤、球形化剤（ｓｐｈｅｒｏｎｉｚａｔｉｏｎ ａｇｅｎｔ）、および任意のその組合せを含む。
【0043】
[0086]接着防止剤：本開示の組成物は、接着防止剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ステアリン酸マグネシウムなどの付着防止剤を含むことができる。
【0044】
[0087]結合剤：本開示の組成物は、本組成物を一緒に保持する少なくとも１種の結合剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、糖、タンパク質、または合成ポリマーなどの結合剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、二糖（例えば、スクロースもしくはラクトース）、多糖もしくは多糖誘導体（例えば、デンプン、セルロース、修飾セルロース、セルロースエーテル）、または糖アルコール（例えば、キシリトール、ソルビトール、もしくはマンニトール）を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ゼラチンなどのタンパク質結合剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの合成ポリマー結合剤を含むことができる。
【0045】
[0088]保存剤：本開示の組成物は、少なくとも１種の保存剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は酸化防止剤または抗菌剤を含むことができる。酸化防止剤は、酸化メカニズムによる組成物の劣化を遅延させるかまたは防止する。抗菌剤は、組成物中の腐敗または病原性微生物の増殖を阻害する。
【0046】
[0089]抗酸化剤：一部の実施形態では、抗酸化剤は、組成物に加えて、不飽和脂肪酸の自動酸化または酵素－触媒酸化を遅延するまたは防止する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アスコルビン酸、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、ブチル化ヒドロキシトルエン（ＢＨＴ）、クエン酸、亜硫酸塩、第三級ブチルヒドロキノン（ＴＢＨＱ）、またはトコフェロールのうちの少なくとも１つを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アスコルビン酸を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ＢＨＴを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、クエン酸を含む。
【0047】
[0090]一部の実施形態では、本開示の組成物は、約１００ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ、約３００ｍｇ／ｋｇ、約４００ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ、約６００ｍｇ／ｋｇ、約７００ｍｇ／ｋｇ、約８００ｍｇ／ｋｇ、約９００ｍｇ／ｋｇ、または約１０００ｍｇ／ｋｇの酸化防止剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約１００ｍｇ／ｋｇ、最大約２００ｍｇ／ｋｇ、最大約３００ｍｇ／ｋｇ、最大約４００ｍｇ／ｋｇ、最大約５００ｍｇ／ｋｇ、最大約６００ｍｇ／ｋｇ、最大約７００ｍｇ／ｋｇ、最大約８００ｍｇ／ｋｇ、最大約９００ｍｇ／ｋｇ、または最大約１０００ｍｇ／ｋｇの酸化防止剤を含む。
【0048】
[0091]抗菌剤：一部の実施形態では、抗菌剤を本組成物に加えて、本組成物中の損傷物または病原微生物の増殖を遅延するまたは防止する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、酢酸、安息香酸、ナタマイシン、ナイシン、硝酸塩、亜硝酸塩、プロピオン酸、ソルビン酸、亜硫酸塩、または二酸化硫黄のうちの少なくとも１つを含む。
【0049】
[0092]一部の実施形態では、本開示の組成物は、約１００ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ、約３００ｍｇ／ｋｇ、約４００ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ、約６００ｍｇ／ｋｇ、約７００ｍｇ／ｋｇ、約８００ｍｇ／ｋｇ、約９００ｍｇ／ｋｇ、または約１０００ｍｇ／ｋｇの抗菌剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約１００ｍｇ／ｋｇ、最大約２００ｍｇ／ｋｇ、最大約３００ｍｇ／ｋｇ、最大約４００ｍｇ／ｋｇ、最大約５００ｍｇ／ｋｇ、最大約６００ｍｇ／ｋｇ、最大約７００ｍｇ／ｋｇ、最大約８００ｍｇ／ｋｇ、最大約９００ｍｇ／ｋｇ、または最大約１０００ｍｇ／ｋｇの抗菌剤を含む。
【0050】
[0093]着色剤：本開示の組成物は、少なくとも１種の着色剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、天然着色剤または合成着色剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、天然着色剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アントシアニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、イチゴ（フラガリア（Ｆｒａｇａｒｉａ）種）から得られるペラルゴニジン－３－グルコシドまたはブドウ（ヴィティス（Ｖｉｔｉｓ）種）から得られるマルビジン－３－グルコシドなどのアントシアニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ベタシアニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビートの根（ベータ・ブルガリス（Ｂｅｔａ ｖｕｌｇａｒｉｓ））から得られるベタニンなどのベタシアニンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、カロテノイドを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、カロテノイド、例として、アナトー（ビクサ・オレラナ（Ｂｉｘａ Ｏｒｅｌｌａｎａ））から得られるビキシン；サフラン（クロッカス・サティヴァス（Ｃｒｏｃｕｓ ｓａｔｉｖｕｓ））から得られるクロシン；パプリカ（カプシカム・アンヌム（Ｃａｐｓｉｃｕｍ ａｎｎｕｕｍ））から得られるカプサンチン；ニンジン（ダウカス・カロタ（Ｄａｕｃｕｓ ｃａｒｏｔａ））から得られるベータカロチン；またはキノコ（カンタレルス・キナバリヌス（Ｃａｎｔｈａｒｅｌｌｕｓ ｃｉｎｎａｂａｒｉｎｕｓ））から得られるカンタキサンチンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、フェノール類を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ウコン（クルクマ・ロンガ（Ｃｕｙｃｕｍａ ｌｏｎｇａ））から得られるクルクミンなどのフェノール類を含む。
【0051】
[0094]一部の実施形態では、本開示の組成物は、合成着色料を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アルラレッドＡＣ、ブリリアントブルーＦＣＦ、エリスロシン、ファストグリーンＦＣＦ、インジゴカルミン（ｉｎｄｉｃｏ ｃａｒｍｉｎｅ）、サンセットイエローＦＣＦ、またはタートラジンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ＦＤ＆Ｃ赤色４０号、ＦＤ＆Ｃ青色１号、ＦＤ＆Ｃ赤色３号、ＦＤ＆Ｃ緑色３号、ＦＤ＆青色２号、ＦＤ＆Ｃ黄色６号、またはＦＤ＆Ｃ黄色５号を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、Ｅ１３３、Ｅ１２７、Ｅ１３２、Ｅ１１０、またはＥ１０２を含む。
【0052】
[0095]香味料：本開示の組成物は、少なくとも１種の香味剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、天然の香味物質、天然の同等な香味物質、または人工の香味物質を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、スパイス、フルーツジュース、または野菜ジュースなどの天然の香味物質を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、バニリンなどの天然同一の香味物質を含むことができる。
【0053】
[0096]一部の実施形態では、本開示の組成物は、人工香味物質、例えば、アリルピラジン、メトキシピラジン、２－イソ－ブチル－３－メトキシピラジン、アセチル－Ｌ－ピラジン、２－アセトキシピラジン、アルデヒド、アルコール、エステル、ケトン、ピラジン、フェノール類、またはテルペノイドを含むことができる。
【0054】
[0097]甘味料：本開示の組成物は、少なくとも１種の甘味料を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、スクロース、グルコース、フルクトース、コーンシロップ、高フルクトースコーンシロップ、または糖アルコールを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ソルビトール、マンニトール、またはキシリトールなどの糖アルコールを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、フルクトースを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、合成甘味剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、サッカリン、シクラメート、アスパルテーム、またはアセスルファムＫを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アスパルテームを含む。
【0055】
[0098]一部の実施形態では、本開示の組成物は、甘味剤を、約０．５ｇ／給仕、約１ｇ／給仕、約１．５ｇ／給仕、約２ｇ／給仕、約２．５ｇ／給仕、約３ｇ／給仕、約３．５ｇ／給仕、約４ｇ／給仕、約４．５ｇ／給仕ｇ／給仕、約５ｇ／給仕、約５．５ｇ／給仕、約６ｇ／給仕、約６．５ｇ／給仕、約７ｇ／給仕、約７．５ｇ／給仕、約８ｇ／給仕、約８．５ｇ／給仕、約９ｇ／給仕、約９．５ｇ／給仕、または約１０ｇ／給仕の量で含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、約１ｇ／給仕の甘味剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、約２．５ｇ／給仕の甘味剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、約５ｇ／給仕の甘味剤を含むことができる。
【0056】
[0099]加工剤：本開示の組成物は、少なくとも１種の加工用添加物を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、固化防止剤、漂白剤、キレート化剤、清澄剤、コンディショニング剤、乳化剤、保湿剤、ｐＨ制御剤、安定化剤、または増粘剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、アルミノケイ酸ナトリウムなどの固化防止剤、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）などのキレート化剤、臭素酸カリウムなどのコンディショニング剤、またはクエン酸もしくは乳酸などのｐＨ制御剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、グリセロールなどの保湿剤、または安定化剤および増粘剤、例としてペクチン、ゼラチン、カラギーナン、もしくはグアーガムを含むことができる。
【0057】
[0100]薬学的に許容される賦形剤の限定されない例は、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第１９版（Ｅａｓｔｏｎ， Ｐａ．：Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、１９９５年）；Ｈｏｏｖｅｒ、Ｊｏｈｎ Ｅ．、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、Ｅａｓｔｏｎ、Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ １９７５年；Ｌｉｂｅｒｍａｎ， Ｈ．Ａ．およびＬａｃｈｍａｎ， Ｌ．編、Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｃｋｅｒ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｎ．Ｙ．、１９８０年；ならびにＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ、第７版（Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ１９９９年）において見出すことができ、そのそれぞれは、その全体を参照により本明細書に組み込む。
【0058】
[0101]本開示の組成物は、例えば、即時放出形態または制御放出製剤であり得る。即時放出製剤は、食事療法製品を速やかに作用させるために製剤化することができる。即時放出製剤の非限定的な例には、容易に溶解可能な製剤が含まれる。制御放出製剤は、活性剤の放出速度および放出プロファイルが生理学的および経時治療的要件に一致できるように適合された、またはプログラムされた速度で活性剤の放出をもたらすように製剤化された医薬製剤であり得る。制御放出製剤の非限定的な例としては、顆粒、遅延放出顆粒、ヒドロゲル（例えば、合成または天然起源のもの）、他のゲル化剤（例えば、ゲル形成食物繊維）、マトリックスベースの製剤（例えば、少なくとも１つの活性成分が分散したポリマー材料を含む製剤）、マトリックス内の顆粒、ポリマー混合物、および顆粒塊、が挙げられる。
【0059】
[0102]一部では、制御放出製剤は、遅延放出形態である。遅延放出形態は、長時間食事療法製品の作用を遅延するために製剤化することができる。遅延放出形態は、１種または複数の食事療法製品の有効な投与量の放出を、例えば、約４、約８、約１２、約１６、または約２４時間遅延するために製剤化することができる。
【0060】
[0103]制御放出製剤は、徐放の形態であり得る。徐放の形態は、長時間にわたって、例えば、食事療法製品の作用を持続するために製剤化することができる。徐放の形態は、約４、約８、約１２、約１６または約２４時間にわたって、有効な投与量の本明細書中に記載される任意の食事療法製品を提供する（例えば、生理学的に－有効な血液プロファイルを提供する）ために製剤化することができる。
【0061】
[0104]本明細書中に記載される医薬組成物は、正確な用量の単回投与に適した単位剤形であり得る。単位剤形において、製剤は、１種または複数の食事療法製品の適切な含量を含有する単位投与量に分けられる。単位用量は、製剤の別個の含量を含有するパッケージの形態であり得る。限定されない例は、注射液、バイアル、またはアンプルに包装される。水性懸濁液組成物は、単回用量の再密閉不可能な容器中に包装することができる。多回の再密閉可能な容器は、例えば、保存剤と組み合わせてまたは組み合わせずに使用することができる。注射用の製剤は、単位剤形、例えば、アンプルの形態で、または保存剤を含む多回容器の形態で提示することができる。
【0062】
[0105]投与の初期のモードに応じて、医薬組成物は、固体、半固体または液体剤形の形態、例えば、錠剤、坐薬、丸薬、カプセル、粉末、液体、懸濁液、ローション剤、クリーム、またはゲルで、例えば、正確な用量の単回投与に適した単位剤形であり得る。
【0063】
[0106]固体組成物の場合、非毒性の固体担体は、例えば、医薬用のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、および炭酸マグネシウムを含む。
【0064】
[0107]本開示中の使用に適した剤形の限定されない例は、液体、エリキシル剤、ナノ懸濁液、水性または油性懸濁液、液滴、シロップ、および任意のその組合せを含む。本開示中の使用に適した薬学的に許容される賦形剤の限定されない例は、顆粒化剤、結合剤、潤滑剤、崩壊剤、甘味剤、流動促進剤、接着防止剤、帯電防止剤、界面活性剤、抗酸化剤、ゴム、コーティング剤、着色剤、香味剤、コーティング剤、可塑剤、保存剤、懸濁化剤、乳化剤、植物セルロース由来物質および球形化剤、および任意のその組合せを含む。
【0065】
[0108]本開示の組成物は、付着防止剤、結合剤、コーティング、着色剤、崩壊剤、風味剤、保存料、吸着剤、甘味剤、またはビヒクルなどの少なくとも１つの医薬賦形剤を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、着色剤および風味剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、着色剤、風味剤、および甘味剤を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、風味剤、甘味剤、および保存料を含む。
【0066】
[0109]サプリメント：本開示の組成物は、少なくとも１種のサプリメントを投与される対象に投与することができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はエネルギー補給食（ｅｎｅｒｇｙ ｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔ）と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はエネルギー補給食、例えばカフェイン、ガラナ、朝鮮人参（Ａｓｉａｎ ｇｉｎｓｅｎｇ）、ビタミンＢ１２、または補酵素Ｑ１０と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はエネルギー補給食、例えばカフェイン、チロシン、ピロロキノリンキノン（ＰＱＱ）、テアニン、補酵素Ｑ１０、アセチル－Ｌ－カルニチン（ＡＬＣＡＲ）、アルファ－リポ酸（ＡＬＡ）、シチコリン、クレアチン、シトルリン、ビートの根粉末、アシュワガンダ、またはイワベンケイ（Ｒｈｏｏｄｉｏｌａ ｒｏｓｅａ）と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は補酵素Ｑ１０と共に対象に投与される。
【0067】
[0110]いくつかの実施形態において、本開示の組成物は微量栄養素補給物と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はマルチビタミンと共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はビタミン補給剤、例えばビタミンＣまたはビタミン補助食品と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物はミネラルサプリメント、例えば鉄または亜鉛補助食品と共に対象に投与される。
【0068】
[0111]いくつかの実施形態において、本開示の組成物はエネルギー補給食および微量栄養素補給物と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は補酵素Ｑ１０およびマルチビタミンと共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は補酵素Ｑ１０およびミネラルサプリメントと共に対象に投与される。
【0069】
[0112]ビタミン：本開示の組成物は、１つまたは複数の必須ビタミンを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、およびビタミンＢを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、チアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ナイアシン（ビタミンＢ３）、パントテン酸（ビタミンＢ５）、ピロキシジン（ｐｙｒｏｘｉｄｉｎｅ）（ビタミンＢ６）、ビオチン（ビタミンＢ７）、葉酸（ビタミンＢ９）、またはコバラミン（ビタミンＢ１２）を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、またはビタミンＫなどの脂溶性ビタミンを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビタミンＣおよびビタミンＢなどの水溶性ビタミンを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、水溶性ビタミン、例としてチアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ナイアシン（ビタミンＢ３）、パントテン酸（ビタミンＢ５）、ピロキシジン（ビタミンＢ６）、ビオチン（ビタミンＢ７）、葉酸（ビタミンＢ９）、またはコバラミン（ビタミンＢ１２）などのビタミンＢを含むことができる。
【0070】
[0113]一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、およびビタミンＥを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、チアミン（ビタミンＢ１）、リボフラビン（ビタミンＢ２）、ナイアシン（ビタミンＢ３）、パントテン酸（ビタミンＢ５）、ピロキシジン（ビタミンＢ６）、ビオチン（ビタミンＢ７）、葉酸（ビタミンＢ９）およびコバラミン（ビタミンＢ１２）を含むことができる。
【0071】
[0114]本開示の組成物は、成人男性におけるビタミンの推奨栄養所要量（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｄｉｅｔａｒｙ ａｌｌｏｗａｎｃｅ）を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性におけるビタミンの推奨栄養所要量：ビタミンＡ、９００μｇ；ビタミンＣ、９０ｍｇ；ビタミンＤ、１５μｇ；ビタミンＥ、１５ｍｇ；ビタミンＫ、１２０μｇ；チアミン、１．２ｍｇ；リボフラビン、１．３ｍｇ；ナイアシン、１６ｍｇ；パントテン酸、５ｍｇ；ピロキシジン、１．３ｍｇ；ビオチン、３０μｇ；葉酸、４００μｇ；およびコリン、５５０ｍｇを含む。本開示の組成物は、成人女性におけるビタミンの推奨栄養所要量を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性におけるビタミンの推奨栄養所要量：ビタミンＡ、７００μｇ；ビタミンＣ、７５ｍｇ；ビタミンＤ、１５μｇ；ビタミンＥ、１５ｍｇ；ビタミンＫ、９０μｇ；チアミン、１．１ｍｇ；リボフラビン、１．１ｍｇ；ナイアシン、１４ｍｇ；パントテン酸、５ｍｇ；ピロキシジン、１．３ｍｇ；ビオチン、３０μｇ；葉酸、４００μｇ；およびコリン、４２５ｍｇを含む。
【0072】
[0115]本開示の組成物は、成人男性または女性におけるビタミンのいずれかの推奨栄養所要量の約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性におけるビタミンのいずれかの推奨栄養所要量の約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、または約６０％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性におけるビタミンのいずれかの推奨栄養所要量の約３０％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性におけるビタミンのいずれかの推奨栄養所要量の約５０％を含むことができる。
【0073】
[0116]ミネラル：本開示の組成物は、１つまたは複数のミネラルまたは元素を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、カルシウム、クロム、銅、フッ化物、ヨウ化物、鉄、マグネシウム、マンガン、モリブデン、リン、セレン、亜鉛、カリウム、ナトリウム、または塩化物を含むことができる。
【0074】
[0117]本開示の組成物は、成人男性における元素またはミネラルの１日当たり推奨摂取量（ｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄ ｄａｉｌｙ ａｌｌｏｗａｎｃｅ）を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性における元素またはミネラルの１日当たり推奨摂取量：カルシウム、１０００ｍｇ；クロム、３５μｇ；銅、９００μｇ；フッ化物、４ｍｇ；ヨウ化物、１５０μｇ；鉄、８ｍｇ；マグネシウム、４００ｍｇ；マンガン、２．３ｍｇ；モリブデン、４５μｇ；リン、７００ｍｇ；セレン、５５μｇ；亜鉛、１１ｍｇ；カリウム、３４００ｍｇ；ナトリウム、１５００ｍｇ；または塩化物、２．３ｇを含む。本開示の組成物は、成人女性における元素またはミネラルの１日当たり推奨摂取量を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人女性における元素またはミネラルの１日当たり推奨摂取量：カルシウム、１０００ｍｇ；クロム、２５μｇ；銅、９００μｇ；フッ化物、３ｍｇ；ヨウ化物、１５０μｇ；鉄、１８ｍｇ；マグネシウム、３１０ｍｇ；マンガン、１．８ｍｇ；モリブデン、４５μｇ；リン、７００ｍｇ；セレン、５５μｇ；亜鉛、８ｍｇ；カリウム、２６００ｍｇ；ナトリウム、１５００ｍｇ；または塩化物、２．３ｇを含む。
【0075】
[0118]本開示の組成物は、成人男性または女性における元素またはミネラルのいずれかの推奨栄養所要量の約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、または約１００％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性における元素またはミネラルのいずれかの推奨栄養所要量の約２０％、約３０％、約４０％、約５０％、または約６０％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性における元素またはミネラルのいずれかの推奨栄養所要量の約３０％を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、成人男性または女性における元素またはミネラルのいずれかの推奨栄養所要量の約５０％を含むことができる。
【0076】
[0119]脂質：本開示の組成物は、脂肪を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の医薬組成物は、飽和脂肪、トランス脂肪、多価不飽和脂肪、または一価不飽和脂肪を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、飽和脂肪、トランス脂肪、多価不飽和脂肪、および一価不飽和脂肪を含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、合計脂肪含有量のうちの約１ｇ、約２ｇ、約３ｇ、約４ｇ、約５ｇ、約６ｇ、約７ｇ、約８ｇ、約９ｇ、または約１０ｇを含むことができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、合計脂肪含有量のうちの約５ｇを含むことができる。
【0077】
[0120]一部の実施形態では、本開示の組成物は、コレステロールを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、約１００ｍｇ／給仕のコレステロールを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、約５０ｍｇ／給仕のコレステロールを含む。
【0078】
[0121]炭水化物：一部の実施形態では、本開示の組成物は、糖、デンプン、または複合糖質などの炭水化物を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、コーンシロップ、フルクトース、ガラクトース、グルコース、高フルクトースコーンシロップ、ラクトース、マルトース、またはスクロースなどの糖を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、糖アルコールを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、デンプンを含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、エンバク、米、豆果、生のジャガイモデンプン、グリーンバナナ、またはＨｉ－Ｍａｉｚｅ（登録商標）粉などの難消化性デンプンを含む。
【0079】
[0122]一部の実施形態では、本開示の組成物は、繊維などの複合糖質を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、可溶性繊維を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、オートミール、亜麻仁、大麦、乾燥エンドウ豆、リンゴ、またはニンジンなどの食物源から得られる可溶性繊維を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、不溶性繊維を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、種子、ナッツ、暗緑色葉物野菜、または小麦ふすまなどの食物源から得られる不溶性繊維を含む。一部の実施形態では、本開示の組成物は、イヌリン、メチルセルロース、オオバコ、または小麦デキストリンなどの繊維を含む。
【0080】
[0123]いくつかの実施形態において、本開示の組成物は栄養的に完全な製品として対象に投与される。いくつかの実施形態において、組成物は完全食セーキまたは粉末として投与される。いくつかの実施形態において、組成物は経腸栄養チューブを介して投与される。一部の実施形態では、組成物は、静脈内トピラマートとして投与される。
【0081】
投薬
[0124]本明細書中に記載される医薬組成物は、正確な用量の単回投与に適した単位剤形であり得る。単位剤形において、製剤は、１種または複数の食事療法製品の適切な含量を含有する単位投与量に分けられる。単位用量は、製剤の別個の含量を含有するパッケージの形態であり得る。限定されない例は、バイアルまたはアンプル中の液体である。水性懸濁液組成物は、単回用量の再密閉不可能な容器中に包装することができる。多回の再密閉可能な容器は、例えば、保存剤と組み合わせて使用することができる。非経口注射用の製剤は、単位剤形、例えば、アンプルの形態で、または保存剤を含む多回容器の形態で提示することができる。
[0124]本明細書中に記載される医薬組成物は、正確な用量の単回投与に適した単位剤形であり得る。単位剤形において、製剤は、１種または複数の食事療法製品の適切な含量を含有する単位投与量に分けられる。単位用量は、製剤の別個の含量を含有するパッケージの形態であり得る。限定されない例は、バイアルまたはアンプル中の液体である。水性懸濁液組成物は、単回用量の再密閉不可能な容器中に包装することができる。多回の再密閉可能な容器は、例えば、保存剤と組み合わせて使用することができる。非経口注射用の製剤は、単位剤形、例えば、アンプルの形態で、または保存剤を含む多回容器の形態で提示することができる。
【0082】
[0125]投与量は、対象の質量によって割った薬物の量、例えば、対象の体重キログラム当たり薬物ミリグラムに関して表すことができる。
[0126]本明細書に記載される組成物は対象により摂取される食事を補足するために施すことができる。本明細書に記載される組成物は完全食（ｍｅａｌ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）として施すことができる。本明細書に記載される組成物は食事の直前または直後に施すことができる。ここに記載される組成物は食事の前または後約５分、約１０分、約１５分、約２０分、約２５分、約３０分、約４０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、または約６時間以内に施すことができる。
[0126]本明細書に記載される組成物は対象により摂取される食事を補足するために施すことができる。本明細書に記載される組成物は完全食（ｍｅａｌ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）として施すことができる。本明細書に記載される組成物は食事の直前または直後に施すことができる。ここに記載される組成物は食事の前または後約５分、約１０分、約１５分、約２０分、約２５分、約３０分、約４０分、約１時間、約２時間、約３時間、約４時間、約５時間、または約６時間以内に施すことができる。
【0083】
[0127]本明細書に記載される組成物は正確な投薬量の単回投与に適した単位剤形とすることができる。単位剤形において、製剤は適当な量の組成物を含有する単位用量に分割される。いくつかの実施形態において、単位投薬量は離散量の製剤を含有するパッケージの形態であることができる。いくつかの実施形態において、本開示の製剤は一回限りの小袋に入った単位剤形として供給することができる。いくつかの実施形態において、本開示の製剤は単一用量の再閉鎖できない容器に入れて供給することができる。いくつかの実施形態において、本開示の製剤は再閉鎖可能な容器に入れて供給することができ、対象は単一用量の一服を分配するように考案されたさじまたはスプーンを用いて製剤の単一用量の一服を得ることができる。いくつかの実施形態において、本開示の製剤は再閉鎖可能な容器に入れて供給することができ、対象は半分の用量の一服分配するように考案されたさじまたはスプーン（すなわち、一服量を分配するために２さじ）を用いて製剤の単一用量の一服を得ることができる。
【0084】
[0128]本明細書に記載される組成物は約１ｇ～約２ｇ、約２ｇ～約３ｇ、約３ｇ～約４ｇ、約４ｇ～約５ｇ、約５ｇ～約６ｇ、約６ｇ～約７ｇ、約７ｇ～約８ｇ、約８ｇ～約９ｇ、約９ｇ～約１０ｇ、約１０ｇ～約１１ｇ、約１１ｇ～約１２ｇ、約１２ｇ～約１３ｇ、約１３ｇ～約１４ｇ、約１４ｇ～約１５ｇ、約１５ｇ～約１６ｇ、約１６ｇ～約１７ｇ、約１７ｇ～約１８ｇ、約１８ｇ～約１９ｇ、約１９ｇ～約２０ｇ、約２０ｇ～約２１ｇ、約２１ｇ～約２２ｇ、約２２ｇ～約２３ｇ、約２３ｇ～約２４ｇ、または約２４ｇ～約２５ｇの範囲の単位用量の一服として存在することができる。
【0085】
[0129]本明細書に記載される組成物は約１ｇ、約２ｇ、約３ｇ、約４ｇ、約５ｇ、約６ｇ、約７ｇ、約８ｇ、約９ｇ、約１０ｇ、約１１ｇ、約１２ｇ、約１３ｇ、約１４ｇ、約１５ｇ、約１６ｇ、約１７ｇ、約１８ｇ、約１９ｇ、約２０ｇ、約２１ｇ、約２２ｇ、約２３ｇ、約２４ｇ、または約２５ｇの量で単位用量の一服として存在することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約１０ｇ、１２ｇ、１５ｇ、２０ｇ、または２４ｇの量で単位用量の一服として存在する。
【0086】
[0130]いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約１２ｇの量で単位用量の一服として存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約１２ｇの量で小袋中に単位用量の一服として存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約１５ｇの量で単位用量の一服として存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約１５ｇの量で小袋中に単位用量の一服として存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約２４ｇの量で単位用量の一服として存在する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は約２４ｇの量で小袋中に単位用量の一服として存在する。
【0087】
[0131]いくつかの実施形態において、本開示の組成物の用量は対象の質量で割った薬物の量、例えば、対象の体重１キログラム当たりの薬物のグラム数で表することができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の治療有効量は約０．１ｇ／ｋｇ／日～約０．２ｇ／ｋｇ／日、約０．２ｇ／ｋｇ／日～約０．３ｇ／ｋｇ／日、約０．３ｇ／ｋｇ／日～約０．４ｇ／ｋｇ／日、約０．４ｇ／ｋｇ／日～約０．５ｇ／ｋｇ／日、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約０．６ｇ／ｋｇ／日、約０．６ｇ／ｋｇ／日～約０．７ｇ／ｋｇ／日、約０．７ｇ／ｋｇ／日～約０．８ｇ／ｋｇ／日、約０．８ｇ／ｋｇ／日～約０．９ｇ／ｋｇ／日、約０．９ｇ／ｋｇ／日～約１０ｇ／ｋｇ／日、約１０ｇ／ｋｇ／日～約１１ｇ／ｋｇ／日、約１１ｇ／ｋｇ／日～約１２ｇ／ｋｇ／日、約１２ｇ／ｋｇ／日～約１３ｇ／ｋｇ／日、約１３ｇ／ｋｇ／日～約１４ｇ／ｋｇ／日、または約１４ｇ／ｋｇ／日～約１５ｇ／ｋｇ／日である。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の治療有効量は約０．４ｇ／ｋｇ／日～約０．５ｇ／ｋｇ／日である。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の治療有効量は約０．６ｇ／ｋｇ／日～約０．７ｇ／ｋｇ／日である。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の治療有効量は約０．８ｇ／ｋｇ／日～約０．９ｇ／ｋｇ／日である。
【0088】
[0132]一部の実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約０．１ｇ／ｋｇ／日、約０．２ｇ／ｋｇ／日、約０．３ｇ／ｋｇ／日、約０．４ｇ／ｋｇ／日、約０．５ｇ／ｋｇ／日、約０．６ｇ／ｋｇ／日、約０．７ｇ／ｋｇ／日、約０．８ｇ／ｋｇ／日、約０．９ｇ／ｋｇ／日、約１．０ｇ／ｋｇ／日、約１．１ｇ／ｋｇ／日、約１．２ｇ／ｋｇ／日、約１．３ｇ／ｋｇ／日、約１．４ｇ／ｋｇ／日、約１．５ｇ／ｋｇ／日、約１．６ｇ／ｋｇ／日、約１．７ｇ／ｋｇ／日、約１．８ｇ／ｋｇ／日、約１．９ｇ／ｋｇ／日、または約２．０ｇ／ｋｇ／日である。一部の実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約０．６ｇ／ｋｇ／日である。一部の実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約０．７ｇ／ｋｇ／日である。一部の実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約０．８ｇ／ｋｇ／日である。一部の実施形態では、本開示の組成物の治療有効量は、約０．９ｇ／ｋｇ／日である。
【0089】
[0133]本明細書に記載される組成物は対象の単位体重当たりタンパク質のある量を達成するように対象に提供することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は対象の体重１ｋｇ当たり約０．２ｇタンパク質／ｋｇ～約０．４ｇタンパク質／ｋｇ、約０．４ｇタンパク質／ｋｇ～約０．６ｇタンパク質／ｋｇ、約０．６ｇタンパク質／ｋｇ～約０．８ｇタンパク質／ｋｇ、または約０．８ｇタンパク質／ｋｇ～約１ｇタンパク質／ｋｇの範囲を達成するように対象に提供することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物は対象の体重１ｋｇ当たり約０．６ｇタンパク質／ｋｇ～約０．８ｇタンパク質／ｋｇの範囲を達成するように対象に提供することができる。
【0090】
[0134]本明細書に記載される組成物は１日に付き１以上の一服として対象に提供することができる。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物の１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２回分の一服が１日で対象に提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物の３回分の一服が１日で対象に提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物の６回分の一服が１日で対象に提供される。いくつかの実施形態において、本明細書に記載される組成物の９回分の一服が１日で対象に提供される。
【0091】
投与の方法
[0135]本開示の組成物は対象に投与することができ、投与は少なくとも１種のアミノ酸が少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与は１種のアミノ酸が少ないかまたは実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与はセリンが少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与はグリシンが少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、システインが不十分であるまたは実質的にシステインを欠く食物ベースの食事により同時に行う。
[0135]本開示の組成物は対象に投与することができ、投与は少なくとも１種のアミノ酸が少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われることができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与は１種のアミノ酸が少ないかまたは実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与はセリンが少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物の投与はグリシンが少ないかまたはそれを実質的に欠く食品ベースの食事に伴われる。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、システインが不十分であるまたは実質的にシステインを欠く食物ベースの食事により同時に行う。
【0092】
[0136]一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくとも２種のアミノ酸または任意のそのアミノ酸の塩が不十分であるまたは実質的に少なくとも２種のアミノ酸または任意のそのアミノ酸の塩を欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくともシステインおよびグリシンが不十分であるまたは実質的に少なくともシステインおよびグリシンを欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくともシステインおよびセリンが不十分であるまたは実質的に少なくともシステインおよびセリンを欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくともシステインおよびプロリンが不十分であるまたは実質的に少なくともシステインおよびプロリンを欠く食物ベースの食事により同時に行う。
【0093】
[0137]一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくとも３種のアミノ酸もしくは任意のそのアミノ酸の塩が不十分であるまたは実質的に少なくとも３種のアミノ酸もしくは任意のそのアミノ酸の塩を欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくともセリン、グリシン、およびシステインが不十分であるまたは実質的に少なくともセリン、グリシン、およびシステインを欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくとも４種のアミノ酸もしくは任意のそのアミノ酸の塩が不十分であるまたは実質的に少なくとも４種のアミノ酸もしくは任意のそのアミノ酸の塩を欠く食物ベースの食事により同時に行う。一部の実施形態では、本開示の組成物の投与は、少なくともシステイン、セリン、グリシン、およびプロリンが不十分であるまたは実質的に少なくともシステイン、セリン、グリシン、およびプロリンを欠く食物ベースの食事により同時に行う。本明細書において開示されるアミノ酸の塩は、薬学的に許容される塩であり得る。
【0094】
[0138]本開示の組成物はダイエット中の対象に投与することができる。いくつかの実施形態において、本開示の組成物が対象に投与され、対象は低タンパク質の食事を摂る。いくつかの実施形態において、本開示の組成物が対象に投与され、対象は低炭水化物の食事を摂る。いくつかの実施形態において、本開示の組成物が対象に投与され、対象は高脂肪低炭水化物食（例えばケトン体型の食事）を摂る。いくつかの実施形態において、本開示の組成物が対象に投与され、対象は菜食主義の食事を摂る。いくつかの実施形態において、本開示の組成物が対象に投与され、対象はビーガン食を摂る。一部の実施形態では、本開示の組成物は、高メチオニン食と共に投与される。
【0095】
[0139]一部の実施形態では、本開示の組成物は、低システインまたは低シスチン食と共に投与される。一部の実施形態では、低システインまたは低シスチン食は、最大約５０ｍｇ／日、最大約１００ｍｇ／日、最大約１５０ｍｇ／日、最大約２００ｍｇ／日、最大約２５０ｍｇ／日、最大約３００ｍｇ／日、最大約３５０ｍｇ／日、最大約４００ｍｇ／日、最大約４５０ｍｇ／日、最大約５００ｍｇ／日、最大約５５０ｍｇ／日、最大約６００ｍｇ／日、最大約６５０ｍｇ／日、最大約７００ｍｇ／日、最大約７５０ｍｇ／日、最大約８００ｍｇ／日、最大約８５０ｍｇ／日、最大約９００ｍｇ／日、最大約９５０ｍｇ／日、または最大約１０００ｍｇ／日のシステインまたはシスチンを提供する。一部の実施形態では、低システインまたは低シスチン食は、最大約２５０ｍｇ／日のシステインまたはシスチンを提供する。一部の実施形態では、低システインまたは低シスチン食は、最大約５００ｍｇ／日のシステインまたはシスチンを提供する。
【0096】
[0140]一部の実施形態では、本開示の組成物は、高メチオニン食と共に投与される。一部の実施形態では、高メチオニン食は、少なくとも約１００ｍｇ／日、少なくとも約２５０ｍｇ／日、少なくとも約５００ｍｇ／日、少なくとも約７５０ｍｇ／日、少なくとも約１０００ｍｇ／日、少なくとも約１２５０ｍｇ／日、少なくとも約１５００ｍｇ／日、少なくとも約１７５０ｍｇ／日、少なくとも約２０００ｍｇ／日、少なくとも約５ｇ／日、少なくとも約１０ｇ／日、少なくとも約１５ｇ／日、または少なくとも約２０ｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する。一部の実施形態では、高メチオニン食は、少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する。一部の実施形態では、高メチオニン食は、少なくとも約２ｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する。一部の実施形態では、高メチオニン食は、少なくとも約５ｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する。
【0097】
[0141]一部の実施形態では、本開示の組成物は、低システインおよび高メチオニン食と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約５０ｍｇ／日、最大約１００ｍｇ／日、最大約１５０ｍｇ／日、最大約２００ｍｇ／日、最大約２５０ｍｇ／日、最大約３００ｍｇ／日、最大約３５０ｍｇ／日、最大約４００ｍｇ／日、最大約４５０ｍｇ／日、最大約５００ｍｇ／日、最大約５５０ｍｇ／日、最大約６００ｍｇ／日、最大約６５０ｍｇ／日、最大約７００ｍｇ／日、最大約７５０ｍｇ／日、最大約８００ｍｇ／日、最大約８５０ｍｇ／日、最大約９００ｍｇ／日、最大約９５０ｍｇ／日、または最大約１０００ｍｇ／日のシステインまたはシスチンを提供する食事；および少なくとも約１００ｍｇ／日、少なくとも約２５０ｍｇ／日、少なくとも約５００ｍｇ／日、少なくとも約７５０ｍｇ／日、少なくとも約１０００ｍｇ／日、少なくとも約１２５０ｍｇ／日、少なくとも約１５００ｍｇ／日、少なくとも約１７５０ｍｇ／日、少なくとも約２０００ｍｇ／日、少なくとも約５ｇ／日、少なくとも約１０ｇ／日、少なくとも約１５ｇ／日、または少なくとも約２０ｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事と共に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約３００ｍｇ／日のシステインまたはシスチン；および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事と共に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、最大約５００ｍｇ／日のシステインまたはシスチン；および少なくとも約５ｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事と共に投与することができる。
【0098】
[0142]一部の実施形態では、本開示の組成物は、メチオニンサプリメントと共に投与される。一部の実施形態では、メチオニンサプリメントは、約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を提供することができる。一部の実施形態では、約１００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約５００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７５０ｍｇ、約７５０ｍｇ～約１０００ｍｇ、約１０００ｍｇ～約１２５０ｍｇ、約１２５０ｍｇ～約１５００ｍｇ、約１５００ｍｇ～約１７５０ｍｇ、または約１７５０ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンサプリメントは、メチオニンまたはその塩を提供することができる。一部の実施形態では、メチオニンサプリメントは、約１００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約１０００ｍｇ、約１２５０ｍｇ、約１５００ｍｇ、約１７５０ｍｇ、または約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を提供することができる。一部の実施形態では、約５００ｍｇのメチオニンサプリメントは、メチオニンまたはその塩を提供することができる。一部の実施形態では、メチオニンサプリメントは、約１０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を提供することができる。一部の実施形態では、メチオニンサプリメントは、約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を提供することができる。
【0099】
[0143]一部の実施形態では、本明細書において開示されるは、ポリアミンが多い食事により本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法である。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、少なくとも約１００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約２００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約２５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約３００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約３５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約４００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約４５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約５００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約５５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約６００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約６５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約７００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約７５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約８００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約８５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約９００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約９５０ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１０００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１１００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１２００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１３００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１４００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１５００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１６００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１７００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１８００ｎｍｏｌ／ｇ、少なくとも約１９００ｎｍｏｌ／ｇ、または少なくとも約２０００ｎｍｏｌ／ｇである、食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が少なくとも約３００ｎｍｏｌ／ｇである食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が少なくとも約５００ｎｍｏｌ／ｇである食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が少なくとも約７５０ｎｍｏｌ／ｇである食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が少なくとも約１０００ｎｍｏｌ／ｇである食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体が少なくとも約１５００ｎｍｏｌ／ｇである食品全体を含む食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法が、本明細書に開示される。
【0100】
[0144]一部の実施形態では、本開示の組成物は、少なくとも１種の非必須アミノ酸が少ないように設計されている低タンパク質食中である対象に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、セリンおよびグリシンが少ないように設計されている低タンパク質食中である対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は約２ｇ／日、約１．７５ｇ／日、約１．５ｇ／日、約１．２５ｇ／日、約１ｇ／日、約０．７５ｇ／日、または約０．５ｇ／日未満の低タンパク質食事を摂る対象に投与される。いくつかの実施形態において、本開示の組成物は約５００ｍｇ／日、約４５０ｍｇ／日、約４００ｍｇ／日、約３５０ｍｇ／日、約３００ｍｇ／日、約２５０ｍｇ／日、約２００ｍｇ／日、約１５０ｍｇ／日、約１００ｍｇ／日、または約５０ｍｇ／日未満の低タンパク質食事を摂る対象に投与される。
【0101】
[0145]多数の治療剤が任意の順に、または同時に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、別の治療剤と組み合わせて、別の治療剤との処置前または処置後に投与される。同時の場合、多数の治療剤は単一の一体形態で、または多数の形態で、例えば多数の別々の丸剤として提供することができる。薬剤は一緒または別々に単一のパッケージまたは複数のパッケージに包装することができる。１つまたはすべての治療剤は多数の服用で施すことができる。同時でない場合、多数の服用間のタイミングは約１月ほども変化することができる。
【0102】
[0146]本明細書に記載される治療剤は疾患または状態の発生の前、発生中、またはその後に投与することができ、治療剤を含有する組成物を投与するタイミングは変化することができる。例えば、組成物は予防薬として使用することができ、疾患または状態の発生の可能性を低下させるために状態または疾患に罹る傾向をもつ対象に連続的に投与することができる。組成物は症状の開始の間またはその後できるだけ早く対象に投与することができる。
【0103】
[0147]本明細書に開示される組成物は、疾患または状態の開始が検出されたかまたは疑われた後実務と同様に早く、疾患の処置に必要な長さの時間投与することができる。いくつかの実施形態において、疾患の処置に必要な時間の長さは約１２時間、約２４時間、約３６時間、または約４８時間である。いくつかの実施形態において、疾患の処置に必要な時間の長さは約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約７日、約８日、約９日、約１０日、約１１日、約１２日、約１３日、約１４日、または約１５日である。いくつかの実施形態において、疾患の処置に必要な時間の長さは約１週、約２週、約３週、約４週、約５週、約６週、約７週、約８週、約９週、約１０週、約１１週、約１２週、約１３週、約１４週、約１５週、約１６週、約１７週、約１８週、約１９週、または約２０週である。いくつかの実施形態において、疾患の処置に必要な時間の長さは約１月、約２月、約３月、約４月、約５月、約６月、約７月、約８月、約９月、約１０月、約１１月、約１２月、約１３月、約１４月、約１５月、約１６月、約１７月、約１８月、約１９月、約２０月、約２１月、約２２月、約２３月、または約２４月である。
【0104】
[0148]いくつかの実施形態において、化合物が投与することができる時間の長さは約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日、約１週、約２週、約３週、約４週、約１月、約５週、約６週、約７週、約８週、約２月、約９週、約１０週、約１１週、約１２週、約３月、約１３週、約１４週、約１５週、約１６週、約４月、約１７週、約１８週、約１９週、約２０週、約５月、約２１週、約２２週、約２３週、約２４週、約６月、約７月、約８月、約９月、約１０月、約１１月、約１年、約１３月、約１４月、約１５月、約１６月、約１７月、約１８月、約１９月、約２０月、約２１月、約２２月、約２３月、約２年、約２．５年、約３年、約３．５年、約４年、約４．５年、約５年、約６年、約７年、約８年、約９年、または約１０年であることができる。処置の長さは各々の対象に対して変化することができる。
【0105】
[0149]本開示の組成物は、処置期間を通して連続的に単独で投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、治療剤、例えば、放射線療法または化学療法の投与と同時に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物単独は、少なくとも１日１回、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、または２１日間投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物単独は、少なくとも１日１回、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約１カ月、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約２カ月、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約３カ月、約１３週間、約１４週間、約１５週間、約１６週間、約４カ月、約１７週間、約１８週間、約１９週間、約２０週間、約５カ月、約２１週間、約２２週間、約２３週間、約２４週間、約６カ月、約７カ月、約８カ月、約９カ月、約１０カ月、約１１カ月、または約１年間投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、少なくとも１日１回、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、または２１日間投与することができ、治療剤は、適切な処置レジメン後の処置期間を通して投与することができる。一部の実施形態では、本開示の組成物は、少なくとも１日１回、約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約１カ月、約５週間、約６週間、約７週間、約８週間、約２カ月、約９週間、約１０週間、約１１週間、約１２週間、約３カ月、約１３週間、約１４週間、約１５週間、約１６週間、約４カ月、約１７週間、約１８週間、約１９週間、約２０週間、約５カ月、約２１週間、約２２週間、約２３週間、約２４週間、約６カ月、約７カ月、約８カ月、約９カ月、約１０カ月、約１１カ月、または約１年間投与することができ、治療剤は、適切な処置レジメン後の処置期間を通して投与することができる。
【0106】
[0150]本開示の組成物は、処置期間を通して断続的に投与することができる。一部の実施形態では、対象は、処置期間中、本開示の組成物で処置することができ、次いで、無－処置期間、処置を停止する。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の長さは、同一である。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の長さは、異なる。一部の実施形態では、処置期間の長さは、無－処置期間より長い。一部の実施形態では、処置期間の長さは、無－処置期間より短い。
【0107】
[0151]一部の実施形態では、処置期間の長さは、５日であり、無－処置期間の長さは、２日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、４日であり、無－処置期間の長さは、３日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、３日であり、無－処置期間の長さは、４日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、２日であり、無－処置期間の長さは、５日である。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の周期は、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、または１６週間反復される。
【0108】
[0152]一部の実施形態では、対象は、本開示の組成物で処置することができ、次いで、治療剤は、組成物および治療剤によるその後の処置周期を開始する前に処置を停止する。一部の実施形態では、治療剤は、放射線療法である。一部の実施形態では、治療剤は、放射線療法である。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の長さは、同一である。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の長さは、異なる。一部の実施形態では、処置期間の長さは、無－処置期間より長い。一部の実施形態では、処置期間の長さは、無－処置期間より短い。一部の実施形態では、処置期間の長さは、５日であり、無－処置期間の長さは、２日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、４日であり、無－処置期間の長さは、３日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、３日であり、無－処置期間の長さは、４日である。一部の実施形態では、処置期間の長さは、２日であり、無－処置期間の長さは、５日である。一部の実施形態では、処置期間および無－処置期間の周期は、１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、または１６週間反復される。
【0109】
[0153]本明細書に記載される組成物は正確な投薬量の単回投与に適した単位剤形であることができる。単位剤形において、製剤は１種以上の化合物の適当な量を含有する単位用量に分割される。単位投薬量は離散量の製剤を含有するパッケージの形態であることができる。水性懸濁組成物は単一用量再閉鎖できない容器内に包装することができる。多数回投与用の再閉鎖可能な容器は、例えば、保存剤と共に、または保存剤なしで使用することができる。
【0110】
[0154]いくつかの実施形態において、組成物は１日中対象に投与される。いくつかの実施形態において、組成物は食事と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、組成物は軽食と共に対象に投与される。いくつかの実施形態において、組成物は食事なしで対象に投与される。いくつかの実施形態において、組成物は１日中等間隔で対象に投与される。いくつかの実施形態において、第１の一服は朝食の前に投与され、第２の一服は朝食と共に投与され、第３の一服は昼食と共に投与され、第４および第５の一服は夕食と共に投与され、第６の一服は就寝前に投与される。
【0111】
[0155]本発明により提供される組成物は他の治療法、例えば、化学療法、放射線、手術、抗炎症薬、免疫療法、生物製剤、および選択されたビタミンと共に投与することができる。他の薬剤は本医薬組成物の前、後、またはそれと同時に投与することができる。
【0112】
[0156]一部の実施形態では、本開示の組成物は、高脂肪食と共に投与される。一部の実施形態では、高脂肪食は、１日のカロリーの約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、または約９０％超を脂肪から得られる食事である。一部の実施形態では、本開示の組成物は、低炭水化物食と共に投与される。一部の実施形態では、低糖質食は、１日のカロリーの約５０％、約４０％、約３０％、約２０％、約１０％、または約５％未満を糖質から得られる食事である。一部の実施形態では、本開示の組成物は、低タンパク質食と共に投与される。一部の実施形態では、低タンパク質食は、１日のカロリーの約１５％、約１４％、約１３％、約１２％、約１１％、約１０％、約９％、約８％、約７％、約６％、約５％、約４％、約３％、約２％、または約１％未満を全タンパク質から得られる食事である。一部の実施形態では、低タンパク質食は、約５０ｇ／日、約４０ｇ／日、約３０ｇ／日、約２０ｇ／日、または約１０ｇ／日未満の全タンパク質量を有する。一部の実施形態では、本開示の組成物は、高脂肪、低糖質、および低タンパク質食と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、正常食と共に投与される。
【0113】
[0157]一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインが少ない食事と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、メチオニンが多い食事と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、ポリアミンが多い食事と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインが少なく、メチオニンが多い食事と共に投与される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、システインが少なく、メチオニンが多く、ポリアミンが多い食事と共に投与される。
【0114】
[0158]一部の実施形態では、システインが少ない食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法であって、対象が、ＭＴＡＰ－欠乏であるがんを有する、方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、システインが多い食事により本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法であって、対象が、ＭＴＡＰレベルが上昇するがんを有する、方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、システインが少ない食事により、本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法であって、対象が、ポリアミン代謝が調節不全であるがんを有する、方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、システインが少なく、メチオニンが多い食事により本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法であって、対象が、ＭＴＡＰ－欠乏であるがんを有する、が本明細書に開示される。一部の実施形態では、システインが少なく、メチオニンが多い食事により本開示の組成物をがんの処置を必要とする対象に投与するステップを含む、それを処置する方法であって、対象が、ポリアミン代謝が調節不全であるがんを有する、方法が本明細書に開示される。
【0115】
併用療法
[0159]多数の治療剤は、任意の順序でまたは同時に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の食事療法製品は、別の治療剤と組み合わせて、別の治療剤との処置前または処置後に投与される。同時の場合、多数の治療剤は、単回の、統一した形態で、または多回形態で、例えば、複数の別々の丸薬として提供することができる。これらの薬剤は、単一のパッケージにまたは複数のパッケージに一緒にまたは別々に包装することができる。治療剤のうちの１種またはすべては、複数回の投与量で投与することができる。同時でない場合、複数回の投与量間のタイミングは、約１カ月程度まで変わり得る。
[0159]多数の治療剤は、任意の順序でまたは同時に投与することができる。一部の実施形態では、本開示の食事療法製品は、別の治療剤と組み合わせて、別の治療剤との処置前または処置後に投与される。同時の場合、多数の治療剤は、単回の、統一した形態で、または多回形態で、例えば、複数の別々の丸薬として提供することができる。これらの薬剤は、単一のパッケージにまたは複数のパッケージに一緒にまたは別々に包装することができる。治療剤のうちの１種またはすべては、複数回の投与量で投与することができる。同時でない場合、複数回の投与量間のタイミングは、約１カ月程度まで変わり得る。
【0116】
[0160]治療剤は、本明細書中に記載されるのは、疾患または状態の出現前、出現中、または出現後投与することができ、治療剤を含有する組成物を投与するタイミングは変わり得る。例えば、組成物は、予防薬として使用することができ、疾患または状態の出現の可能性を減少させるために、状態または疾患の傾向がある対象に、連続的に投与することができる。組成物は、症状の開始中または症状の開始後できる限り速く、対象に投与することができる。治療剤の投与は、症状の開始の最初の４８時間以内に、症状の開始の最初の２４時間以内に、症状の開始の最初の６時間以内に、または症状の開始の３時間以内に開始することができる。初回の投与は、例えば、本明細書中に記載される任意の製剤を用いて、本明細書中に記載される任意の経路により、実用的な任意の経路を介してであり得る。
【0117】
[0161]ポリアミンは、本開示の食事療法製品が、状態、例えば、がんを処置する能力を高めることができる。一部の実施形態では、ポリアミンは、ポリアミン代謝を変更するために投与することができる。一部の実施形態では、本開示の食事療法製品は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体と共に投与することができる。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与することによって、がん細胞中のＲＯＳレベルを増加させることができる。一部の実施形態では、ポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与すること；本開示の食事療法製品；およびがん療法は、がん処置の有効性を増加させることができる。一部の実施形態では、ポリアミンは、トリアミンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、テトラアミンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、スペルミジンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、スペルミンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、プトレシンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、カダベリンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、合成ポリアミン、例えば、ジエチレントリアミン（ＤＥＴＡ）、トリエチレンテトラミン（ＴＥＴＡ）、テトラエチレンペンタミン（ＴＥＰＡ）、またはペンタエチレンヘキサミン（ＰＥＨＡ）である。一部の実施形態では、ポリアミンは、大環状ポリアミン、例えば、１，４，７－トリアザシクロノナンまたはサイクレンである。一部の実施形態では、ポリアミンは、分枝状ポリアミン、例えば、トリス（２－アミノエチル）アミンである。
【0118】
[0162]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約１ｍｇ～約２５ｍｇ、約２５ｍｇ～約５０ｍｇ、約５０ｍｇ～約７５ｍｇ、約７５ｍｇ～約１００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１５０ｍｇ、約１５０ｍｇ～約２００ｍｇ、約２００ｍｇ～約２５０ｍｇ、約２５０ｍｇ～約３００ｍｇ、約３００ｍｇ～約３５０ｍｇ、約３５０ｍｇ～約４００ｍｇ、約４００ｍｇ～約４５０ｍｇ、または約４５０ｍｇ～約５００ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約１ｍｇ～約２５ｍを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約２５ｍｇ～約５０ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約５０ｍｇ～約７５ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約７５ｍｇ～約１００ｍｇを投与することができる。
【0119】
[0163]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約１ｍｇ、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約３００ｍｇ、約３２５ｍｇ、約３５０ｍｇ、約３７５ｍｇ、約４００ｍｇ、約４２５ｍｇ、約４５０ｍｇ、約４７５ｍｇ、または約５００ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約２５ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約５０ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約１００ｍｇを投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、ポリアミン、その前駆物質、または類似体約１５０ｍｇを投与することができる。
【0120】
[0164]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１ｇ、約１．５ｇ、約２ｇ、約２．５ｇ、約３ｇ、約３．５ｇ、約４ｇ、約４．５ｇ、約５ｇ、約５．５ｇ、約６ｇ、約６．５ｇ、約７ｇ、約７．５ｇ、約８ｇ、約８．５ｇ、約９ｇ、約９．５ｇ、約１０ｇ、約１１ｇ、約１２ｇ、約１３ｇ、約１４ｇ、約１５ｇ、約１６ｇ、約１７ｇ、約１８ｇ、約１９ｇ、約２０ｇ、約２１ｇ、約２２ｇ、約２３ｇ、約２４ｇ、約２５ｇ、約２６ｇ、約２７ｇ、約２８ｇ、約２９ｇ、または約３０ｇのポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与することができる。
【0121】
[0165]シスチナーゼ（システイナーゼ）は、細胞外Ｌ－システインまたはＬ－シスチンの持続性の枯渇を媒介する酵素である。シスチナーゼ（システイナーゼ）による処置は、細胞周期の停止ならびに細胞内ＧＳＨの枯渇および次のＲＯＳの上昇によるがん細胞の死を選択的に引き起こす。一部の実施形態では、本開示の食事療法製品は、ポリアミンまたはその類似体と共に投与することができる。
【0122】
[0166]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１０ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ～約７５ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ～約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ～約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ～約１７５ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ～約２００ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ～約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２２５ｍｇ／ｋｇ～約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２５０ｍｇ／ｋｇ～約３００ｍｇ／ｋｇ、約３００ｍｇ／ｋｇ～約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３５０ｍｇ／ｋｇ～約４００ｍｇ／ｋｇ、約４００ｍｇ／ｋｇ～約４５０ｍｇ／ｋｇ、約４５０ｍｇ／ｋｇ～約５００ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ～約５５０ｍｇ／ｋｇ、約５５０ｍｇ／ｋｇ～約６００ｍｇ／ｋｇ、約６００ｍｇ／ｋｇ～約６５０ｍｇ／ｋｇ、約６５０ｍｇ／ｋｇ～約７００ｍｇ／ｋｇ、約７００ｍｇ／ｋｇ～約７５０ｍｇ／ｋｇ、約７５０ｍｇ／ｋｇ～約８００ｍｇ／ｋｇ、約８００ｍｇ／ｋｇ～約８５０ｍｇ／ｋｇ、約８５０ｍｇ／ｋｇ～約９００ｍｇ／ｋｇ、約９００ｍｇ／ｋｇ～約９５０ｍｇ／ｋｇ、または約９５０ｍｇ／ｋｇ～約１０００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１０ｍｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約５０ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１００ｍｇ／ｋｇ～約２５０ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。
【0123】
[0167]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋｇ、約５０ｍｇ／ｋｇ、約７５ｍｇ／ｋｇ、約１００ｍｇ／ｋｇ、約１２５ｍｇ／ｋｇ、約１５０ｍｇ／ｋｇ、約１７５ｍｇ／ｋｇ、約２００ｍｇ／ｋｇ、約２２５ｍｇ／ｋｇ、約２５０ｍｇ／ｋｇ、約２７５ｍｇ／ｋｇ、約３００ｍｇ／ｋｇ、約３２５ｍｇ／ｋｇ、約３５０ｍｇ／ｋｇ、約３７５ｍｇ／ｋｇ、約４００ｍｇ／ｋｇ、約４２５ｍｇ／ｋｇ、約４５０ｍｇ／ｋｇ、約４７５ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ／ｋｇ、約５５０ｍｇ／ｋｇ、約６００ｍｇ／ｋｇ、約６５０ｍｇ／ｋｇ、約７００ｍｇ／ｋｇ、約７５０ｍｇ／ｋｇ、約８００ｍｇ／ｋｇ、約８５０ｍｇ／ｋｇ、約９００ｍｇ／ｋｇ、約９５０ｍｇ／ｋｇ、または約１０００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約５０ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約１５０ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約２００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、約５００ｍｇ／ｋｇのシスチナーゼ（システイナーゼ）を投与することができる。
【0124】
[0168]一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、少なくとも約５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約１５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約２５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約３０ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約３５ｍｇ／ｋｇ／日、少なくとも約４５ｍｇ／ｋｇ／日、または少なくとも約５０ｍｇ／ｋｇ／日のメチオニンまたは薬学的に許容されるその塩を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇ／日のメチオニンまたは薬学的に許容されるその塩を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、少なくとも約２０ｍｇ／ｋｇ／日のメチオニンまたは薬学的に許容されるその塩を投与することができる。一部の実施形態では、本明細書において開示される方法は、少なくとも約２５ｍｇ／ｋｇ／日のメチオニンまたは薬学的に許容されるその塩を投与することができる。
【0125】
[0169]一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、システイナーゼと共に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメントと共に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメントおよびポリアミンと共に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメントと共に投与されるが、ポリアミンと共に投与されない。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメント、ポリアミン、およびシステイナーゼと共に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、ポリアミンおよびシステイナーゼと共に投与されるが、メチオニンサプリメントと共に投与されない。
【0126】
[0170]一部の実施形態では、少なくともシステインを欠く、本開示の食事療法製品は、ＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に投与される。一部の実施形態では、少なくともシステインを欠く、本開示の食事療法製品およびメチオニンサプリメントは、ＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメントおよびポリアミンと共にＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、ＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に、メチオニンサプリメントと共に投与されるが、ポリアミンと共に投与されない。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、メチオニンサプリメント、ポリアミン、およびシステイナーゼと共にＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に投与される。一部の実施形態では、実質的に少なくともシステインを欠く、本明細書において開示される食事療法製品は、ＭＴＡＰ－欠失腫瘍を伴う対象に、ポリアミンおよびシステイナーゼと共に投与されるが、メチオニンサプリメントと共に投与されない。
【0127】
[0171]一部の実施形態では、放射線療法は、本開示の方法または組成物と組み合わせて使用して、原発性悪性腫瘍を除去する手術の後、腫瘍再発の可能性を防止するまたは低下させることができる。一部の実施形態では、放射線療法および化学療法は、本開示の方法または組成物と組み合わせて使用することができる。一部の実施形態では、本開示の方法および組成物は、放射線療法と組み合わせて投与して、がんを処置することができる。一部の実施形態では、本開示の方法および組成物は、放射線療法と組み合わせて投与して、がんの症状を軽減させることができる。一部の実施形態では、本開示の方法および組成物は、放射線療法と組み合わせて投与して、がんの成長を遅くすることができる。
【0128】
[0172]一部の実施形態では、放射線療法は、外部照射療法（ｅｘｔｅｒｎａｌ ｂｅａｍ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）である。外部照射療法は、放射線をがんに局所的に当てる機械を使用する。一部の実施形態では、放射線療法は、内部照射療法（ｉｎｔｅｒｎａｌ ｂｅａｍ ｒａｄｉａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ）である。一部の実施形態では、疼痛、呼吸困難、または腸もしくは膀胱の制御の喪失を処置するために、外部照射を使用して、腫瘍を収縮することができる。一部の実施形態では、外部照射療法は、三次元原体照射療法（３Ｄ－ＣＲＴ）である。一部の実施形態では、外部照射療法は、強度変調放射線療法（ＩＭＲＴ）である。一部の実施形態では、外部照射療法は、陽子ビーム処置である。一部の実施形態では、外部照射療法は、画像誘導放射線療法（ＩＧＲＴ）である。一部の実施形態では、外部照射療法は、定位放射線療法（ＳＲＴ）である。
【0129】
[0173]内部照射療法は、対象の体内に放射線の発生源を入れる処置である。一部の実施形態では、放射線の発生源は、液体である。一部の実施形態では、放射線の発生源は、固体である。一部の実施形態では、内部放射線療法は、恒久の留置用剤を使用する。一部の実施形態では、内部放射線療法は、一時的内部放射線療法、例えば、針、管、またはアプリケーターである。一部の実施形態では、放射線の固体発生源は、密封小線源処置において用いられる。一部の実施形態では、放射線発生源を含有するシード、リボン、またはカプセルは、対象の体内に入れる。一部の実施形態では、放射線療法は、処置を要する領域の内側またはその隣に入れる密封小線源処置である。一部の実施形態では、放射線療法は、骨髄移植用の調製における全身照射（ＴＢＩ）である。
【0130】
[0174]一部の実施形態では、放射線療法は、術中照射（ＩＯＲＴ）である。一部の実施形態では、放射線療法は、全身放射線療法である。一部の実施形態では、放射線療法は、放射免疫療法である。一部の実施形態では、放射線療法は、放射線増感剤または放射線防護用具を使用する。
【0131】
[0175]一部の実施形態では、密封小線源処置は、頭部、頸部、乳房、子宮頸部、前立腺、または眼のがんを処置するために使用される。一部の実施形態では、全身放射線療法、例えば、放射性ヨード、またはＩ－１３１などを使用して、甲状腺がんを処置することができる。一部の実施形態では、標的放射性核種療法を使用して、進行型前立腺がんまたは膵消化管神経内分泌腫瘍（ＧＥＰ－ＮＥＴ）を処置することができる。一部の実施形態では、加工された放射線ビームは、正常組織を残しながら、腫瘍に交差する曝露のいくつかの角度から目標とすることができる。一部の実施形態では、腫瘍は、周囲の健康な組織が吸収するよりも放射線のはるかに多くの線量を吸収する。
【0132】
[0176]一部の実施形態では、本開示のアミノ酸飢餓療法は、化学療法レジメンと組み合わせて使用することができる。一部の実施形態では、化学療法レジメンは、免疫療法である。一部の実施形態では、免疫療法は、抗体療法である。一部の実施形態では、抗体療法は、アレムツズマブ、リタキシマブ、イブリツモマブチウキセタン、またはオファツムマブによる処置である。一部の実施形態では、免疫療法は、インターフェロンである。一部の実施形態では、インターフェロンは、インターフェロンアルファである。一部の実施形態では、免疫療法は、インターロイキン、例えば、ＩＬ－２である。一部の実施形態では、免疫療法は、インターロイキン阻害剤、例えば、ＩＲＡＫ４阻害剤である。
【0133】
[0177]一部の実施形態では、免疫療法は、がんワクチンである。一部の実施形態では、がんワクチンは、予防薬ワクチンである。一部の実施形態では、がんワクチンは、処置ワクチンである。一部の実施形態では、がんワクチンは、ＨＰＶワクチン、例えば、Ｇａｒｄｉｓｉｌ（商標）、サーバリックス、オンコファージ、またはシプロイセル－Ｔである。一部の実施形態では、免疫療法は、ｇｐ１００である。一部の実施形態では、免疫療法は、樹状細胞－系ワクチン、例えば、Ａｄ．ｐ５３ ＤＣである。一部の実施形態では、免疫療法は、Ｔｏｌｌ様受容体モジュレーター、例えば、ＴＬＲ－７またはＴＬＲ－９である。一部の実施形態では、免疫療法は、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、またはＣＴＬ４－Ａモジュレーター、例えば、ニボルマブである。一部の実施形態では、免疫療法は、ＩＤＯ阻害剤、例えば、インドキシモド（ｉｎｄｏｘｉｍｏｄ）である。一部の実施形態では、免疫療法は、抗ＰＤ－１モノクローナル抗体、例えば、ＭＫ３４７５またはニボルマブである。一部の実施形態では、免疫療法は、抗ＰＤ－Ｌ１モノクローナル抗体、例えば、ＭＥＤＩ－４７３６またはＲＧ－７４４６である。一部の実施形態では、免疫療法は、抗ＰＤ－Ｌ２モノクローナル抗体である。一部の実施形態では、免疫療法は、抗ＣＴＬ１－４抗体、例えば、イピリムマブ（ｉｐｉｌｕｍｕｍａｂ）である。
【0134】
[0178]一部の実施形態では、本開示の組成物または食事療法製品は、ＭＴＡＰ阻害剤と共に投与することができる。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ阻害剤は、ＭＴ－ＤＡＤＭｅ－ＩｍｍＡまたはメチルチオ－ＤＡＤＭｅ－イムニシリン（Ｉｍｍｕｎｉｃｉｌｌｉｎ）Ａとしても公知のＭＴＤＩＡである。
【0135】
治療効果
[0179]がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の本開示の組成物を投与することを含む、方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、細胞増殖を減少させる、腫瘍の大きさを減少する、または少なくとも１種のアミノ酸の量を減少させることができる。
[0179]がんを処置する方法であって、それを必要とする対象に、治療的有効量の本開示の組成物を投与することを含む、方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、本開示の組成物は、細胞増殖を減少させる、腫瘍の大きさを減少する、または少なくとも１種のアミノ酸の量を減少させることができる。
【0136】
[0180]本開示の組成物は、対象における細胞増殖を減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、食事組成物を投与されていない対象と比較して、対象における細胞増殖を、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約７５％、約７５％～約１００％、約１００％～約１２５％、約１２５％～約１５０％、約１５０％～約１７５％、または約１７５％～約２００％減少させることができる。一部の実施形態では、開示の組成物を投与することにより、食事療法組成物が投与されない対象と比較して、対象における細胞増殖を約２０％～約２５％減少させることができる。一部の実施形態では、開示の組成物を投与することにより、食事療法組成物が投与されない対象と比較して、対象における細胞増殖を約５０％～約７５％減少させることができる。
【0137】
[0181]一部の実施形態では、開示の組成物を投与することにより、食事療法組成物が投与されない対象と比較して、対象における細胞増殖を約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、または約２００％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、食事組成物を投与されていない対象と比較して、対象における細胞増殖を約２０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、食事組成物を投与されていない対象と比較して、対象における細胞増殖を約３０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、食事組成物を投与されていない対象と比較して、対象における細胞増殖を約５０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、食事組成物を投与されていない対象と比較して、対象における細胞増殖を約７０％減少させることができる。
【0138】
[0182]一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約７５％、約７５％～約１００％、約１００％～約１２５％、約１２５％～約１５０％、約１５０％～約１７５％、または約１７５％～約２００％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約２０％～約２５％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約４５％～約５０％減少させることができる。
【0139】
[0183]一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約７５％、約１００％、約１２５％、約１５０％、約１７５％、または約２００％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約２０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約３０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における腫瘍の大きさを約５０％減少させることができる。
【0140】
[0184]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、対象の血清、血漿、または血液における循環システインまたはシスチンの量を、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象の血清、血漿、または血液における循環システインまたはシスチンの量を、少なくとも約７５％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象の血清、血漿、または血液における循環システインまたはシスチンの量を、少なくとも約８０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象の血清、血漿、または血液における循環システインまたはシスチンの量を、少なくとも約８５％減少させることができる。
【0141】
[0185]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを、組織試料のＬＣ－ＭＳ分析により測定して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを、少なくとも約７５％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを、少なくとも約８０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを、少なくとも約８５％減少させることができる。
【0142】
[0186]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物、および少なくとも１種の追加のアミノ酸を投与することにより、対象における循環システインもしくはシスチンまたは少なくとも１種の追加のアミノ酸の量を、組織試料のＬＣ－ＭＳ分析により測定して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における循環システインもしくはシスチンまたは少なくとも１種の追加のアミノ酸の量を、少なくとも約７５％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における循環システインもしくはシスチンまたは少なくとも１種の追加のアミノ酸の量を、少なくとも約８０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における循環システインもしくはシスチンまたは少なくとも１種の追加のアミノ酸の量を、少なくとも約８５％減少させることができる。
【0143】
[0187]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物、および少なくとも１種の追加のアミノ酸を投与することにより、対象における組織のシステインもしくはシスチン、または少なくとも１種の追加のアミノ酸のレベルを、組織試料のＬＣ－ＭＳ分析により測定して、少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、または少なくとも約９８％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織のシステインもしくはシスチン、または少なくとも１種の追加のアミノ酸のレベルを、少なくとも約７５％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織のシステインもしくはシスチン、または少なくとも１種の追加のアミノ酸のレベルを、少なくとも約８０％減少させることができる。一部の実施形態では、本開示の組成物を投与することにより、対象における組織のシステインもしくはシスチン、または少なくとも１種の追加のアミノ酸のレベルを、少なくとも約８５％減少させることができる。
【0144】
[0188]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、組織試料のＬＣ－ＭＳ分析により測定して、少なくとも約２時間、少なくとも約４時間、少なくとも約６時間、少なくとも約８時間、少なくとも約１０時間、少なくとも約１２時間、少なくとも約１４時間、少なくとも約１６時間、少なくとも約１８時間、少なくとも約２０時間、少なくとも約２２時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約２日、少なくとも約３日、少なくとも約４日、少なくとも約５日、少なくとも約６日、少なくとも約７日、少なくとも約８日、少なくとも約９日、少なくとも約１０日、少なくとも約１１日、少なくとも約１２日、少なくとも約１３日、または少なくとも約１４日、対象における循環システインまたはシスチンの量を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約８時間、対象における循環システインまたはシスチンの量を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１２時間、対象における循環システインまたはシスチンの量を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１８時間、対象における循環システインまたはシスチンの量を減少させることができる。
【0145】
[0189]一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、組織試料のＬＣ－ＭＳ分析により測定して、少なくとも約２時間、少なくとも約４時間、少なくとも約６時間、少なくとも約８時間、少なくとも約１０時間、少なくとも約１２時間、少なくとも約１４時間、少なくとも約１６時間、少なくとも約１８時間、少なくとも約２０時間、少なくとも約２２時間、少なくとも約２４時間、少なくとも約２日、少なくとも約３日、少なくとも約４日、少なくとも約５日、少なくとも約６日、少なくとも約７日、少なくとも約８日、少なくとも約９日、少なくとも約１０日、少なくとも約１１日、少なくとも約１２日、少なくとも約１３日、または少なくとも約１４日、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約８時間、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１２時間、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１８時間、対象における組織システインまたはシスチンのレベルを減少させることができる。
【0146】
[0190]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、対象の全生存期間を増加させることが出来る。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％対象の全生存期間を増加させることが出来る。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％対象の全生存期間を増加させることが出来る。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％対象の全生存期間を増加させることが出来る。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％対象の全生存期間を増加させることが出来る。
【0147】
[0191]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、対象の無進行生存を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％対象の無進行生存を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％対象の無進行生存を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％対象の無進行生存を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％対象の無進行生存を増加させることができる。
【0148】
[0192]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、がん細胞死のパーセンテージを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、がん細胞死のパーセンテージを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％、がん細胞死のパーセンテージを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％、がん細胞死のパーセンテージを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％、がん細胞死のパーセンテージを増加させることができる。
【0149】
[0193]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、腫瘍細胞におけるフェロトーシスを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％腫瘍細胞におけるフェロトーシスを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％腫瘍細胞におけるフェロトーシスを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％腫瘍細胞におけるフェロトーシスを増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％腫瘍細胞におけるフェロトーシスを増加させることができる。
【0150】
[0194]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、対象におけるがん治療に対する感受性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、対象におけるがん治療に対する感受性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％、対象におけるがん治療に対する感受性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％、対象におけるがん治療に対する感受性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％、対象におけるがん治療に対する感受性を高めることができる。
【0151】
[0195]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、治療剤の処置応答率を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、治療剤の処置応答率を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約１０％、治療剤の処置応答率を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約２０％、治療剤の処置応答率を増加させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を投与することにより、少なくとも約３０％、治療剤の処置応答率を増加させることができる。
【0152】
[0196]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と投与することにより、本開示の組成物のみで処置された対象と比較して、対象における治療剤の有効性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に投与することにより、本開示の組成物のみで処置された対象と比較して、少なくとも約少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、対象における治療剤の有効性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に投与することにより、本開示の組成物のみで処置された対象と比較して、少なくとも約少なくとも約１０％、対象における治療剤の有効性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に投与することにより、本開示の組成物のみで処置された対象と比較して、少なくとも約少なくとも約２０％、対象における治療剤の有効性を高めることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に投与することにより、本開示の組成物のみで処置された対象と比較して、少なくとも約少なくとも約３０％、対象における治療剤の有効性を高めることができる。
【0153】
[0197]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、治療剤単独で処置された対象と比較して、治療剤の用量を減少させて、同じ結果を達成することができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、治療剤単独で処置された対象と比較して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、治療剤の必要とされる用量を減少させて、同じ結果を達成することができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、治療剤単独で処置された対象と比較して、少なくとも約１０％、治療剤の必要とされる用量を減少させて、同じ結果を達成することができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、治療剤単独で処置された対象と比較して、少なくとも約２０％、治療剤の必要とされる用量を減少させて、同じ結果を達成することができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、治療剤単独で処置された対象と比較して、少なくとも約３０％、治療剤の必要とされる用量を減少させて、同じ結果を達成することができる。
【0154】
[0198]少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、追加の治療単独で処置された対象と比較して、追加の治療に関連する有害事象を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、追加の治療単独で処置された対象と比較して、追加の治療に関連する有害事象を、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％、追加の治療に関連する有害事象を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、追加の治療単独で処置された対象と比較して、追加の治療に関連する有害事象を、少なくとも約１０％、追加の治療に関連する有害事象を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、追加の治療単独で処置された対象と比較して、追加の治療に関連する有害事象を、少なくとも約２０％、追加の治療に関連する有害事象を減少させることができる。一部の実施形態では、少なくともシステインまたはシスチンを欠く本開示の組成物を、治療剤と共に対象に投与することにより、追加の治療単独で処置された対象と比較して、追加の治療に関連する有害事象を、少なくとも約３０％、追加の治療に関連する有害事象を減少させることができる。
【0155】
使用する方法
[0199]本開示は、対象を処置するための方法を提供する。本明細書に開示される組成物は、任意疾患の処置に使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に開示される組成物は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置するために使用される。対象の食事および栄養を変えることによって、所望の健康上の利益が生じ、疾患の処置に効果的である可能性がある。
[0199]本開示は、対象を処置するための方法を提供する。本明細書に開示される組成物は、任意疾患の処置に使用することができる。一部の実施形態では、本明細書に開示される組成物は、がんの処置を必要とする対象においてがんを処置するために使用される。対象の食事および栄養を変えることによって、所望の健康上の利益が生じ、疾患の処置に効果的である可能性がある。
【0156】
[0200]特定の疾患および／または患者の必要性に基づいて、本開示は、対象に対する一般化された処置推奨のための方法、ならびに対象固有の処置推奨のための方法を提供する。処置方法は、以下のステップ、すなわち、対象の栄養素のレベルを決定するステップと；決定に基づいて対象における疾患の存在または非存在を検出するステップと、疾患の症状を改善するための少なくとも１つの一般化されたまたは対象固有の処置を対象に推奨するステップ、のうちの１つを含むことができる。
【0157】
[0201]一部の実施形態では、本明細書に開示される組成物を使用して、食事介入によって疾患または状態を管理することができる。一部の実施形態では、本明細書に開示される組成物は、特定の疾患または状態の処置計画の一部として使用することができる。
【0158】
[0202]一部の実施形態では、対象はがんを有する。がんは、腫瘍細胞の制御不能な増殖によって引き起こされ、隣接組織や遠隔組織への浸潤を引き起こし、死に至る。がん細胞には、ゲノムのコード領域と調節領域の両方に影響を与える遺伝的異常またはエピジェネティックな異常が、多くの場合根底にある。がん細胞の遺伝的異常によって、タンパク質の構造、動的および発現レベルが変化する可能性があり、その結果、がん細胞の細胞代謝が変化する。細胞周期の変化により、がん細胞は、正常な細胞よりもはるかに速い速度で増殖する可能性がある。代謝率および増殖の増加により、がん組織は、正常な組織と比較してはるかに高い栄養需要を有する。
【0159】
[0203]がん細胞は栄養要求性を有し、正常細胞と比較してはるかに高い栄養需要を有する。増加した栄養需要を満たすための適応として、がん細胞は細胞膜上のグルコースおよびアミノ酸輸送体をアップレギュレートして、循環からより多くの栄養素を得ることができる。がん細胞はまた、解糖およびグルタミノリシスを強化して代謝経路を再配線し、より高速のＡＴＰ産生またはエネルギー供給を維持することもできる。グルコースおよびアミノ酸は、がん細胞において非常に必要とされる栄養素である。一部のがん細胞型および腫瘍組織は、特定のアミノ酸に対して栄養要求性であることが知られている。様々なアミノ酸に対するがんの栄養要求性により、このがんの型がアミノ酸飢餓処置に対して脆弱になる可能性がある。
【0160】
[0204]哺乳動物細胞がアミノ酸飢餓を経験すると、細胞は、アミノ酸不足に対する恒常性応答を受ける。アミノ酸欠乏によって、細胞の資源およびエネルギーを、膜輸送体、成長ホルモン、およびアミノ酸恒常性のための代謝酵素の発現にシフトすることを伴う、一般的なアミノ酸制御経路が誘発される可能性がある。膜輸送体のアップレギュレーションによって、アミノ酸の取り込みが促進され、代謝酵素のアップレギュレーションによって、アミノ酸合成が促進される。細胞はまた、タンパク質およびオルガネラを再利用して、オートファジーによって非必須アミノ酸を再生することもできる。一般的なアミノ酸制御経路およびオートファジーによって、細胞はアミノ酸の恒常性を維持しようとする。腫瘍組織はまた、血管新生を強化してより多くの栄養供給を得ることにより、アミノ酸飢餓を克服することもできる。
【0161】
[0205]重度のアミノ酸飢餓によりホメオスタシスを達成できない場合、がん細胞は、タンパク質合成を阻害し、増殖を抑制し、またはプログラム細胞死を起こす可能性がある。アミノ酸飢餓の細胞死メカニズムは、カスパーゼ依存性アポトーシス、オートファジー細胞死、またはフェロトーシス細胞死である可能性がある。アミノ酸輸送体、代謝酵素、オートファジー関連タンパク質、およびアミノ酸飢餓を使用して、がんの増殖を制御することができる。
【0162】
[0206]本明細書に開示される方法は、対象による栄養消費を監視することができる。栄養消費は、対象から生体試料を採取することによって測定することができる。生体試料は、例えば、全血、血清、血漿、粘膜、唾液、頬スワブ、尿、便、細胞、組織、体液、汗、息、リンパ液、ＣＮＳ液、および病変浸出液であり得る。生体試料の組合せは、本開示の方法と共に使用することができる。
【0163】
[0207]本開示の組成方法によって、がん細胞株の増殖を遅らせるか、またはがん細胞を死滅させることができる。本開示の化合物によって処置することができるがんの非限定的な例には、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、副腎皮質癌、エイズ関連がん、エイズ関連リンパ腫、肛門がん、虫垂がん、星細胞腫、基底細胞癌、胆管がん、膀胱がん、骨がん、小脳星細胞腫などの脳腫瘍、大脳星細胞腫／悪性神経膠腫、上衣腫、髄芽腫、テント上原始神経外胚葉性腫瘍、視覚経路および視床下部神経膠腫、乳がん、気管支腺腫、バーキットリンパ腫、原発不明の癌種、中枢神経系リンパ腫、小脳星細胞腫、子宮頸がん、小児がん、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄増殖性障害、結腸がん、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、線維形成性小円形細胞腫瘍、子宮内膜がん、上衣腫、食道がん、ユーイング肉腫、胚細胞腫瘍、胆嚢がん、胃がん、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、神経膠腫、有毛細胞白血病、頭頸部がん、心臓がん、肝細胞（肝臓）がん、ホジキンリンパ腫、下咽頭がん、眼内黒色腫、膵島細胞癌、カポジ肉腫、腎臓がん、喉頭がん、口唇および口腔がん、脂肪肉腫、肝臓がん、非小細胞および小細胞肺がんなどの肺がん、リンパ腫、白血病、マクログロブリン血症、骨悪性線維性組織球腫／骨肉腫、髄芽腫、黒色腫、中皮腫、原発不明転移性扁平上皮頸部がん、口腔がん、多発性内分泌腫瘍症候群、骨髄異形成症候群、骨髄性白血病、鼻腔がんおよび副鼻腔がん、鼻咽頭癌、神経芽細胞腫、非ホジキンリンパ腫、非小細胞肺がん、口腔がん、中咽頭がん、骨肉腫／骨悪性線維性組織球腫、卵巣がん、卵巣上皮がん、卵巣胚細胞腫瘍、膵がん、膵島細胞がん、副鼻腔および鼻腔がん、副甲状腺がん、陰茎がん、咽頭がん、褐色細胞腫、松果体星状細胞腫、松果体胚細胞腫、下垂体腺腫、胸膜肺芽細胞腫、形質細胞腫瘍、原発性中枢神経系リンパ腫、前立腺がん、直腸がん、腎細胞癌、腎盂および尿管移行上皮細胞がん、網膜芽細胞腫、横紋筋肉腫、唾液腺がん、肉腫、皮膚がん、皮膚のメルケル細胞癌、小腸がん、軟部肉腫、扁平上皮細胞癌、胃がん、Ｔ細胞リンパ腫、咽頭がん、胸腺腫、胸腺癌、甲状腺がん、絨毛性腫瘍（妊娠性）、原発部位不明のがん、尿道がん、子宮肉腫、膣がん、外陰がん、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、およびウィルムス腫瘍、が含まれる。
【0164】
[0208]一部の実施形態では、本開示の方法を使用して、乳がんを処置することができる。一部の実施形態では、本開示の方法を使用して、結腸直腸がんを処置することができる。一部の実施形態では、本開示の方法を使用して、膵がんを処置することができる。
【0165】
キット
[0209]本開示の組成物は、キットとしてパッケージ化することができる。一部の実施形態では、キットは、組成物の投与／使用に関する使用説明書を含む。書面資料は、例えば、ラベルであり得る。書面資料は、投与の条件方法を示唆することができる。使用説明書により、治療の投与から最適な臨床転帰を達成するための最良のガイダンスが対象および監督医師に提供されている。書面資料は、ラベルであり得る。一部の実施形態では、ラベルは、規制機関、例えば、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）、欧州医薬品庁（ＥＭＡ）、または他の規制機関によって承認され得る。
[0209]本開示の組成物は、キットとしてパッケージ化することができる。一部の実施形態では、キットは、組成物の投与／使用に関する使用説明書を含む。書面資料は、例えば、ラベルであり得る。書面資料は、投与の条件方法を示唆することができる。使用説明書により、治療の投与から最適な臨床転帰を達成するための最良のガイダンスが対象および監督医師に提供されている。書面資料は、ラベルであり得る。一部の実施形態では、ラベルは、規制機関、例えば、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）、欧州医薬品庁（ＥＭＡ）、または他の規制機関によって承認され得る。
【0166】
システイン枯渇に対する患者層別の方法
[0210]一部の実施形態では、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定する方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。一部の実施形態では、方法は、患者のＡＭＤ１ステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。一部の実施形態では、方法は、患者のポリアミン代謝ステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。
[0210]一部の実施形態では、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定する方法が本明細書に開示される。一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。一部の実施形態では、方法は、患者のＡＭＤ１ステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。一部の実施形態では、方法は、患者のポリアミン代謝ステータスを判定して、患者集団を群に層別して、システイン枯渇治療に応答しやすい患者群を判定することを含む。
【0167】
[0211]一部の実施形態では、食事療法製品を必要とする対象における状態を処置する方法であって：ａ）対象からの生物学的試料における代謝産物のレベルを判定すること；およびｂ）少なくとも代謝産物のレベルに基づいて、治療的有効量の食事療法製品を対象に投与することを含み、食事療法製品が：グリシン、セリン、アラニン、プロリン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、チロシンおよびアルギニンからなる群から選択される、最大約０．５％（ｗ／ｗ）の少なくとも１種の非必須アミノ酸を含む、方法が、本明細書に開示される。一部の実施形態では、代謝産物は、ＭＴＡである。一部の実施形態では、代謝産物は、ポリアミンである。一部の実施形態では、代謝産物は、Ｓ－アデノシルメチオニン、Ｓ－アデノシルホモシステイン、ホモシステイン、ガンマ－グルタミルシステイン、ＧＳＨまたはＧＳＳＨである。一部の実施形態では、代謝産物は、ＧＳＨである。一部の実施形態では、代謝産物は、ＧＳＳＨである。
【0168】
[0212]一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定することを含み、ＭＴＡＰ－枯渇患者は、少なくともシステインを実質的に欠く本開示の組成物で処置される。一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定することを含み、増加したＭＴＡＰレベルを有する患者は、システインが多い組成物で処置される。一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定することを含み、ＭＴＡＰ－枯渇患者は、システイン阻害剤で処置される。一部の実施形態では、方法は、患者のＭＴＡＰステータスを判定することを含み、ＭＴＡＰ－枯渇患者は、システイナーゼ酵素で処置される。
【0169】
[0213]一部の実施形態では、非腫瘍組織またはＭＴＡＰ－欠損がない腫瘍の代謝産物レベルより高い代謝産物レベルを含む腫瘍組織試料を有する患者は、本明細書に開示される組成物または方法で処置され得る。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも約２倍、少なくとも約３倍、少なくとも約４倍、少なくとも約５倍、少なくとも約６倍、少なくとも約７倍、少なくとも約８倍、少なくとも約９倍、少なくとも約１０倍、少なくとも約１１倍、少なくとも約１２倍、少なくとも約１３倍、少なくとも約１４倍、少なくとも約１５倍、少なくとも約１６倍、少なくとも約１７倍、少なくとも約１８倍、少なくとも約１９倍、少なくとも約２０倍、少なくとも約２５倍、少なくとも約３０倍、少なくとも約３５倍、少なくとも約４０倍、少なくとも約４５倍、少なくとも約５０倍、少なくとも約６０倍、少なくとも約７０倍、少なくとも約８０倍、少なくとも約９０倍、少なくとも約１００倍、少なくとも約１５０倍、少なくとも約２００倍、少なくとも約２５０倍、少なくとも約３００倍、少なくとも約３５０倍、少なくとも約４００倍、少なくとも約４５０倍、少なくとも約５００倍、少なくとも約５５０倍、少なくとも約６００倍、少なくとも約７００倍、少なくとも約８００倍、少なくとも約９００倍、または少なくとも約１０００倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも約２倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも約５倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも約１０倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも２０倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも５０倍高い。一部の実施形態では、ＭＴＡＰ－欠損腫瘍組織試料の代謝産物レベルは、非がん性である、またはＭＴＡＰ－欠損ではない組織試料の代謝産物レベルより少なくとも１００倍高い。
【実施例】
【0170】
実施例１：実験方法
ａ．細胞培養
[0214]ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＡｓＰＣ－１、ＢｘＰＣ－３、ＣＦＰＡＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＰＡＮＣ－１、Ｐａｎｃ１０．０５、ＳＷ１９９０、Ｕ－２５１、ＬＮ－１８、ＬＮ－２２９、Ｔ９８Ｇ、Ｕ－３４３、Ａ－１７２細胞が使用された。細胞系は、ショートタンデムリピート（ＳＴＲ）プロファイリングを使用して認証され、マイコプラズマに対してテストされた。結腸直腸および乳がん細胞系は、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で増殖させ、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）細胞系は、ロズウェルパーク記念研究所（ＲＰＭＩ）１６４０中で増殖させた。すべての細胞系に、ペニシリン－ストレプトマイシン、アムホテリシン、２ｍＭ Ｌ－グルタミンおよび１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）が補充された。細胞は、３７℃にて、５％ＣＯ２下の加湿した細胞培養インキュベーター中で保持された。システイン、シスチン、メチオニンおよびセリンが欠落している調製された培地は、実験培地を作り出すベースとして使用された。ベース培地調製物は、０．２ｍＭ Ｌ－ヒスチジン、０．４ｍＭ Ｌ－イソロイシン、０．４ｍＭ Ｌ－ロイシン、０．４ｍＭ Ｌ－リシン、０．２ｍＭ Ｌ－フェニルアラニン、０．４ｍＭ Ｌ－トレオニン、０．０８ｍＭ Ｌ－トリプトファン、０．４ｍＭ Ｌ－バリン、０．２ｍＭ Ｌ－アルギニン、２ｍＭ Ｌ－グルタミン、０．２ｍＭ Ｌ－チロシン、０．４ｍＭ Ｌ－アラニン、０．３ｍＭ Ｌ－プロリン、０．１５ｍＭ Ｌ－グルタミン酸、０．１ｍＭ Ｌ－アスパラギン酸、０．２ｍＭ Ｌ－アスパラギンおよび０．４ｍＭグリシンを含有していた。ベース培地は、１０％透析ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシンおよびアムホテリシンが補充された。ビタミンＢ６（ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成に重大な補因子）の十分な供給を確実にするために、ベース培地に、追加の２０μＭビタミンＢ６が補充される。対照実験培地は、０．４ｍＭ Ｌ－システイン、０．２ｍＭ Ｌ－メチオニンおよび０．４ｍＭ Ｌ－セリンが補充されたベース培地であった。システイン飢餓（－Ｃｙｓ）実験培地は、０．２ｍＭ Ｌ－メチオニンおよび０．４ｍＭ Ｌ－セリンが補充されたベース培地であった。
ａ．細胞培養
[0214]ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＡｓＰＣ－１、ＢｘＰＣ－３、ＣＦＰＡＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＰＡＮＣ－１、Ｐａｎｃ１０．０５、ＳＷ１９９０、Ｕ－２５１、ＬＮ－１８、ＬＮ－２２９、Ｔ９８Ｇ、Ｕ－３４３、Ａ－１７２細胞が使用された。細胞系は、ショートタンデムリピート（ＳＴＲ）プロファイリングを使用して認証され、マイコプラズマに対してテストされた。結腸直腸および乳がん細胞系は、ダルベッコ改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）中で増殖させ、膵管腺癌（ＰＤＡＣ）細胞系は、ロズウェルパーク記念研究所（ＲＰＭＩ）１６４０中で増殖させた。すべての細胞系に、ペニシリン－ストレプトマイシン、アムホテリシン、２ｍＭ Ｌ－グルタミンおよび１０％ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）が補充された。細胞は、３７℃にて、５％ＣＯ２下の加湿した細胞培養インキュベーター中で保持された。システイン、シスチン、メチオニンおよびセリンが欠落している調製された培地は、実験培地を作り出すベースとして使用された。ベース培地調製物は、０．２ｍＭ Ｌ－ヒスチジン、０．４ｍＭ Ｌ－イソロイシン、０．４ｍＭ Ｌ－ロイシン、０．４ｍＭ Ｌ－リシン、０．２ｍＭ Ｌ－フェニルアラニン、０．４ｍＭ Ｌ－トレオニン、０．０８ｍＭ Ｌ－トリプトファン、０．４ｍＭ Ｌ－バリン、０．２ｍＭ Ｌ－アルギニン、２ｍＭ Ｌ－グルタミン、０．２ｍＭ Ｌ－チロシン、０．４ｍＭ Ｌ－アラニン、０．３ｍＭ Ｌ－プロリン、０．１５ｍＭ Ｌ－グルタミン酸、０．１ｍＭ Ｌ－アスパラギン酸、０．２ｍＭ Ｌ－アスパラギンおよび０．４ｍＭグリシンを含有していた。ベース培地は、１０％透析ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシンおよびアムホテリシンが補充された。ビタミンＢ６（ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成に重大な補因子）の十分な供給を確実にするために、ベース培地に、追加の２０μＭビタミンＢ６が補充される。対照実験培地は、０．４ｍＭ Ｌ－システイン、０．２ｍＭ Ｌ－メチオニンおよび０．４ｍＭ Ｌ－セリンが補充されたベース培地であった。システイン飢餓（－Ｃｙｓ）実験培地は、０．２ｍＭ Ｌ－メチオニンおよび０．４ｍＭ Ｌ－セリンが補充されたベース培地であった。
【0171】
ｂ．ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９およびＭＴＡＰ再発現を使用したＭＴＡＰ－ＫＯ細胞の生成
[0215]ＨＣＴ１１６細胞は、Ｃａｓ９およびｇＲＮＡ［ＮＴＣ（配列番号１）：ＡＡＡＡＴＡＧＣＡＧＴＡＡＡＣＴＣＡＡＣ、ＭＴＡＰ ＫＯ ｓｅｑ １（配列番号２）：ＧＴＴＴＴＧＣＣＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＡＧ、ＭＴＡＰ ＫＯ ｓｅｑ ２（配列番号３）：ＧＣＣＴＧＧＴＡＧＴＴＧＡＣＣＴＴＴＧＡ］の両方を発現するｐＳｐＣａｓ９（ＢＢ）－２Ａ－ｐｕｒｏ（ＰＸ４５９）Ｖ２．０で、脂質ベーストランスフェクション方法を使用してトランスフェクトされた。正しくトランスフェクトされた細胞は、ピューロマイシンに対して選択され、クローンのコロニーとして増殖させた。クローンは、最初に、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により測定されたＭＴＡ流出量に基づいて選択された。最大のＭＴＡ流出量を有するクローンが選択され、メチルチオアデノシンホスホリラーゼノックアウト（ＭＴＡＰ－ＫＯ）が、次いでウエスタンブロットにより確認された。ＭＴＡＰ－ＫＯ ＨＣＴ１１６細胞は、ハイグロマイシンＢを使用して選択されたｐＣＭＶ－Ｈｙｇｒｏ－ＭＴＡＰおよびｐＣＭＶ－Ｈｙｇｒｏ－陰性対照ベクターでトランスフェクトされ、クローンのコロニーとして増殖させた。クローンは、最初に、ＬＣ－ＭＳにより測定されたＭＴＡ流出量に基づいて選択された。ＭＴＡ流出量が少ないクローンが選択され、次いでＭＴＡＰ再発現がウエスタンブロットにより確認された。
[0215]ＨＣＴ１１６細胞は、Ｃａｓ９およびｇＲＮＡ［ＮＴＣ（配列番号１）：ＡＡＡＡＴＡＧＣＡＧＴＡＡＡＣＴＣＡＡＣ、ＭＴＡＰ ＫＯ ｓｅｑ １（配列番号２）：ＧＴＴＴＴＧＣＣＣＣＡＡＡＡＣＧＡＧＡＧ、ＭＴＡＰ ＫＯ ｓｅｑ ２（配列番号３）：ＧＣＣＴＧＧＴＡＧＴＴＧＡＣＣＴＴＴＧＡ］の両方を発現するｐＳｐＣａｓ９（ＢＢ）－２Ａ－ｐｕｒｏ（ＰＸ４５９）Ｖ２．０で、脂質ベーストランスフェクション方法を使用してトランスフェクトされた。正しくトランスフェクトされた細胞は、ピューロマイシンに対して選択され、クローンのコロニーとして増殖させた。クローンは、最初に、液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣ－ＭＳ）により測定されたＭＴＡ流出量に基づいて選択された。最大のＭＴＡ流出量を有するクローンが選択され、メチルチオアデノシンホスホリラーゼノックアウト（ＭＴＡＰ－ＫＯ）が、次いでウエスタンブロットにより確認された。ＭＴＡＰ－ＫＯ ＨＣＴ１１６細胞は、ハイグロマイシンＢを使用して選択されたｐＣＭＶ－Ｈｙｇｒｏ－ＭＴＡＰおよびｐＣＭＶ－Ｈｙｇｒｏ－陰性対照ベクターでトランスフェクトされ、クローンのコロニーとして増殖させた。クローンは、最初に、ＬＣ－ＭＳにより測定されたＭＴＡ流出量に基づいて選択された。ＭＴＡ流出量が少ないクローンが選択され、次いでＭＴＡＰ再発現がウエスタンブロットにより確認された。
【0172】
ｃ．細胞計数実験
[0216]細胞は、ウェル当たり６×１０４細胞で２４ウェルプレートにおいて、関連性がある完全培地中に播種され（状態ごとに３通りのウェル）、全２４時間の期間接着させた。「時間－０」のプレートは、スタート時の細胞数を記録して、比較の細胞数を計算するために含まれていた。細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄されてから、これを特定のアミノ酸、代謝産物、または薬物を含有または欠落する実験培地が受ける。所定の時点で、培地が除去され、細胞が４％ホルマリン－ＰＢＳ溶液中で固定された。細胞が次いで洗浄され、ＰＢＳ中で保存されてから、４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール（ＤＡＰＩ）－Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ１００－ＰＢＳ溶液で１時間染色され、続いてさらなる分析まで４℃にてＰＢＳ中で保存された。ＤＡＰＩ－染色された細胞核は、顕微鏡法を介して検出された。
[0216]細胞は、ウェル当たり６×１０４細胞で２４ウェルプレートにおいて、関連性がある完全培地中に播種され（状態ごとに３通りのウェル）、全２４時間の期間接着させた。「時間－０」のプレートは、スタート時の細胞数を記録して、比較の細胞数を計算するために含まれていた。細胞は、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）で１回洗浄されてから、これを特定のアミノ酸、代謝産物、または薬物を含有または欠落する実験培地が受ける。所定の時点で、培地が除去され、細胞が４％ホルマリン－ＰＢＳ溶液中で固定された。細胞が次いで洗浄され、ＰＢＳ中で保存されてから、４’，６－ジアミジノ－２－フェニルインドール（ＤＡＰＩ）－Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ１００－ＰＢＳ溶液で１時間染色され、続いてさらなる分析まで４℃にてＰＢＳ中で保存された。ＤＡＰＩ－染色された細胞核は、顕微鏡法を介して検出された。
【0173】
[0217]ホモシステイン、シスタチオニン、グルタチオン、プトレシン、スペルミン、スペルミジン、ＧＰＸ４阻害剤 ＭＬ２１０、ＳＭＯＸ阻害剤 ＭＤＬ ７２５２７、ＰＡＯＸ阻害剤ジミナゼンアセチュレート、フェロスタチン－１およびエラスチンが使用された。ＡＭＤ１阻害剤サルドモジド／ＳＡＭ４８６Ａ、ＧＰＸ４阻害剤ＲＳＬ３およびＣＳＥ阻害剤ベータ－シアノ－Ｌ－アラニンが使用された。サルドモジドを使用した実験では、細胞は上記のように播種された。システイン飢餓前に、細胞に、所定の濃度のサルドモジドが補充された完全培地が供給された。１６時間後、培地が除去され、細胞はＰＢＳで洗浄された。完全培地またはシステインなしの培地（サルドモジドを一切含まない）が次いで添加され、細胞は所定の時間インキュベーションされてから、細胞を固定して、細胞計数を行った。
【0174】
[0218]スペルミンオキシダーゼ（ＳＭＯＸ）およびポリアミンオキシダーゼ（ＰＡＯＸ）阻害剤またはＭＴＯＢを使用した実験では、細胞は、完全培地中において、所定の濃度で１６時間事前処置された。事前処置後、細胞はＰＢＳ中で洗浄され、処置は、完全またはシステインなしの培地中で所定の時間続けられた。処置が終了した後で、上記のように細胞は固定され、染色された。ＭＴＡ、ポリアミン、ＧＰＸ４およびＣＳＥ阻害剤を使用した実験では、処置は、システイン飢餓と同時にスタートした。低酸素状態条件を伴う実験では、細胞は正常酸素状態条件下で播種され、２４時間接着させてから、対照およびシステイン飢餓培地が添加され、細胞は、所定の時間、２０％Ｏ２（正常酸素状態）で３７℃にセットされた加湿した細胞培養インキュベーター、または１％Ｏ２（低酸素状態）で３７℃にセットされた低酸素状態チャンバに直ちに移された。細胞は上記のように直ちに固定され、染色された。
【0175】
[0219]システイン飢餓実験を通して、栄養素の中止に対する敏感性に細胞密度の低さが相関していることが観察された（図４２のパネルＡ）。低い播種密度は、システイン飢餓に対するすべての細胞の感受性を高め、高い細胞密度は、すべての細胞のシステイン飢餓に対する細胞感受性を減少させる。例えば、細胞は、システイン飢餓に比較的耐性であり、例えばＨＣＴ１１６は、低い集密度でより感受性になった。より飢餓感受性の細胞、例えばＭＩＡＰａＣａ－２は、高い集密度で細胞死により耐性になった。細胞計数実験における交絡因子を制限するために、細胞は、飢餓の時間で、２０～３０％の集密度に、すなわち増殖状態になるのに、また、実質的な接触阻害をきたさないのに十分なほど低いが、栄養素の制限に対して明らかに増感させないのに十分なほど高くなるように播種された。実験、例えばＬＣ－ＭＳ分析では、細胞は、細胞生存を延長し、標識を可能として（例えば１３Ｃ３
１５Ｎ１－セリンでＧＳＨ中、図２９のパネルＡ）、４８時間までシステインが欠乏した細胞で評価するために、より高い密度で意図的に播種された。
【0176】
ｄ．ウエスタンブロッティング
[0220]タンパク質は、プロテアーゼおよびホスフェート阻害剤カクテルが補充されたＲＩＰＡ緩衝液中で溶菌により全細胞から抽出された。溶解物は遠心分離を使用して清澄化され、４～１２％ビス－トリスプレキャストゲル上に分解され、ニトロセルロース膜に移された。使用される一次抗体は、ＭＴＡＰ、ＡＭＤ１、ＯＤＣ１、ＧＰＸ４、ＡＨＣＹ、ＣＢＳ、ＣＳＥおよび同一のブロットでローディング対照としてのアクチンであった。使用される二次抗体は、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷ抗マウス、ＩＲＤｙｅ６８０ＲＤ抗マウス、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷ抗ウサギおよびＩＲＤｙｅ６８０ＲＤ抗ウサギであった。タンパク質バンドは、赤外スキャナーおよび画像化ソフトウェアを使用して検出され、定量された。
[0220]タンパク質は、プロテアーゼおよびホスフェート阻害剤カクテルが補充されたＲＩＰＡ緩衝液中で溶菌により全細胞から抽出された。溶解物は遠心分離を使用して清澄化され、４～１２％ビス－トリスプレキャストゲル上に分解され、ニトロセルロース膜に移された。使用される一次抗体は、ＭＴＡＰ、ＡＭＤ１、ＯＤＣ１、ＧＰＸ４、ＡＨＣＹ、ＣＢＳ、ＣＳＥおよび同一のブロットでローディング対照としてのアクチンであった。使用される二次抗体は、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷ抗マウス、ＩＲＤｙｅ６８０ＲＤ抗マウス、ＩＲＤｙｅ８００ＣＷ抗ウサギおよびＩＲＤｙｅ６８０ＲＤ抗ウサギであった。タンパク質バンドは、赤外スキャナーおよび画像化ソフトウェアを使用して検出され、定量された。
【0177】
ｅ．生細胞でのＣｅｌｌＲＯＸアッセイ
[0221]細胞は上記のように播種された。生細胞は、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２核染色で２０分染色された。培地は除去され、細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｇｒｅｅｎ ＣＭＦＤＡ色素およびＨｏｅｃｈｓｔ染色を含有する１００μｌ培地中で４０分染色された。細胞を次いでＰＢＳで洗浄し、３００μｌの関連性がある実験培地を１時間添加した。次いで、ＣｅｌｌＲＯＸ（登録商標）Ｄｅｅｐ Ｒｅｄは、培地中でスパイクされ、細胞は４０分インキュベーションされた。培地は除去され、細胞は、ＰＢＳで洗浄され、ＣｅｌｌＲＯＸを含む新たな関連性がある実験培地が添加された。細胞は、毎時間５％ＣＯ２で３７℃にセットされたＯｐｅｒｅｔｔａ自動顕微鏡プラットフォームを１６～２４時間使用して画像化された。Ｉ
ｆ．固定した細胞でのマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）染色
[0222]細胞は播種され、上記のように処置および固定された。ブロッキングは、ＰＢＳ中の５％ロバ血清、および０．３％Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ１００中で４℃にて１時間行われた。染色は、ＭＤＡ抗体 １：６００を含むブロッキング緩衝液を、振とう機において４℃にて終夜使用して行われた。細胞は、ＰＢＳで洗浄され、ブロッキング溶液中の二次抗体Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５６８、ヤギ抗ウサギおよび０．２ｎＭ Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭが、ＲＴにて暗中で１～２時間添加された。細胞は、ＰＢＳで再度洗浄され、顕微鏡を使用して画像化された。
[0221]細胞は上記のように播種された。生細胞は、Ｈｏｅｃｈｓｔ ３３３４２核染色で２０分染色された。培地は除去され、細胞は、ＣｅｌｌＴｒａｃｋｅｒ（商標）Ｇｒｅｅｎ ＣＭＦＤＡ色素およびＨｏｅｃｈｓｔ染色を含有する１００μｌ培地中で４０分染色された。細胞を次いでＰＢＳで洗浄し、３００μｌの関連性がある実験培地を１時間添加した。次いで、ＣｅｌｌＲＯＸ（登録商標）Ｄｅｅｐ Ｒｅｄは、培地中でスパイクされ、細胞は４０分インキュベーションされた。培地は除去され、細胞は、ＰＢＳで洗浄され、ＣｅｌｌＲＯＸを含む新たな関連性がある実験培地が添加された。細胞は、毎時間５％ＣＯ２で３７℃にセットされたＯｐｅｒｅｔｔａ自動顕微鏡プラットフォームを１６～２４時間使用して画像化された。Ｉ
ｆ．固定した細胞でのマロンジアルデヒド（ＭＤＡ）染色
[0222]細胞は播種され、上記のように処置および固定された。ブロッキングは、ＰＢＳ中の５％ロバ血清、および０．３％Ｔｒｉｔｏｎ（商標）Ｘ１００中で４℃にて１時間行われた。染色は、ＭＤＡ抗体 １：６００を含むブロッキング緩衝液を、振とう機において４℃にて終夜使用して行われた。細胞は、ＰＢＳで洗浄され、ブロッキング溶液中の二次抗体Ａｌｅｘａ Ｆｌｕｏｒ（登録商標）５６８、ヤギ抗ウサギおよび０．２ｎＭ Ｃａｌｃｅｉｎ ＡＭが、ＲＴにて暗中で１～２時間添加された。細胞は、ＰＢＳで再度洗浄され、顕微鏡を使用して画像化された。
【0178】
ｇ．定常状態の代謝産物測定
[0223]メタボロミクス実験は、以下のように行われた。細胞は６ウェルプレート（５×１０５～１．５×１０６細胞／ｍＬ、時間－経過に応じて、状態ごとに３通りのウェル）中の完全培地中に播種され、終夜接着させた。細胞は、ＰＢＳで洗浄され、関連性がある実験培地を所定の時間添加した。複製ウェルが細胞計数に使用された。細胞計数は、代謝産物の抽出前に、溶菌液の体積を標準化するために使用された（２×１０６細胞／ｍＬ）。細胞はＰＢＳ中で迅速に洗浄され、次いで氷冷した溶菌液（メタノール５０％、アセトニトリル３０％、水２０％）が添加され、細胞が氷上で削り落とされた。溶解物が氷上の１．５ｍＬ管に移され、ボルテックスされ、次いで遠心分離により１５，０００ｒｐｍで４℃にて１０分スピンされた。上澄みが収集され、ＬＣ－ＭＳ分析のために－８０℃にて保存された。
[0223]メタボロミクス実験は、以下のように行われた。細胞は６ウェルプレート（５×１０５～１．５×１０６細胞／ｍＬ、時間－経過に応じて、状態ごとに３通りのウェル）中の完全培地中に播種され、終夜接着させた。細胞は、ＰＢＳで洗浄され、関連性がある実験培地を所定の時間添加した。複製ウェルが細胞計数に使用された。細胞計数は、代謝産物の抽出前に、溶菌液の体積を標準化するために使用された（２×１０６細胞／ｍＬ）。細胞はＰＢＳ中で迅速に洗浄され、次いで氷冷した溶菌液（メタノール５０％、アセトニトリル３０％、水２０％）が添加され、細胞が氷上で削り落とされた。溶解物が氷上の１．５ｍＬ管に移され、ボルテックスされ、次いで遠心分離により１５，０００ｒｐｍで４℃にて１０分スピンされた。上澄みが収集され、ＬＣ－ＭＳ分析のために－８０℃にて保存された。
【0179】
[0224]スペルミン分析では、Ｓｅｑｕａｎｔ（登録商標）ＺＩＣ（登録商標）－ＨＩＬＩＣカラムガード（２０ｍｍ×２．１ｍｍ）は、スペルミンを、Ａ＝水中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸およびＢ＝アセトニトリル中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸を使用する移動相で分離するために使用された。流量は２００μＬ／分にセットされ、注入体積は２０μＬであった。分離は、８０％Ａおよび２０％Ｂのアイソクラティックプログラムを使用して、合計実行時間３分で行われた。Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計は、ポジティブモードにて、５０，０００の分解能で、５０～８００ｍ／ｚの質量範囲にわたってフルスキャンモードで作動させた。
【0180】
ｈ．代謝産物の炭素－１３標識
[0225]標識メチオニンを使用した実験では、同一の基本的プロトコールが、上記の定常状態代謝産物測定について記載されるように使用された。メチオニンまたはセリン（上記の）が欠落し、所定の濃度の１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニン、１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンまたは３４Ｓ１－メチオニンが補充された実験培地が調製された。代謝産物は、上記のように抽出された。
[0225]標識メチオニンを使用した実験では、同一の基本的プロトコールが、上記の定常状態代謝産物測定について記載されるように使用された。メチオニンまたはセリン（上記の）が欠落し、所定の濃度の１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニン、１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンまたは３４Ｓ１－メチオニンが補充された実験培地が調製された。代謝産物は、上記のように抽出された。
【0181】
ｉ．ＬＣ－ＭＳ分析およびデータ加工
[0226]調製された試料は、Ａｃｃｅｌａ（商標）６００ＬＣ系およびＥｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計からなるＬＣ－ＭＳプラットフォームで分析された。Ｓｅｑｕａｎｔ（登録商標）ＺＩＣ（登録商標）－ＨＩＬＩＣカラム（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、３．５μｍ）は、代謝産物を、Ａ＝水中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸およびＢ＝アセトニトリル中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸を使用する移動相で分離するために使用された。２０％Ａでスタートし、３０分で８０％に直線的に増加する勾配プログラム、続いて洗浄（９２％のＡで５分）および再平衡（２０％のＡ、１０分）ステップを使用した。方法の全体の実行時間は、４５分であった。ＬＣストリームは、脱溶媒和し、ＨＥＳＩプローブでイオン化された。Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計は、極性切替して、５０，０００の分解能で、７０～１，２００ｍ／ｚの質量範囲にわたってフルスキャンモードで作動させた。ＬＣ－ＭＳ生データは、ＰｒｏｔｅｏＷｉｚａｒｄを使用することによりｍｚＭＬファイルに変換され、ピーク抽出および試料整列のためにＭＺＭｉｎｅ ２．１０にインポートされた。関連性がある代謝産物のすべての考えられる１３Ｃおよび１５Ｎ同位体ｍ／ｚ値を含む社内データベースが、ＬＣＭＳシグナルの割り当てに使用された。最終的にピーク面積が、比較の定量に使用された。
[0226]調製された試料は、Ａｃｃｅｌａ（商標）６００ＬＣ系およびＥｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計からなるＬＣ－ＭＳプラットフォームで分析された。Ｓｅｑｕａｎｔ（登録商標）ＺＩＣ（登録商標）－ＨＩＬＩＣカラム（４．６ｍｍ×１５０ｍｍ、３．５μｍ）は、代謝産物を、Ａ＝水中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸およびＢ＝アセトニトリル中０．１％（ｖ／ｖ）ギ酸を使用する移動相で分離するために使用された。２０％Ａでスタートし、３０分で８０％に直線的に増加する勾配プログラム、続いて洗浄（９２％のＡで５分）および再平衡（２０％のＡ、１０分）ステップを使用した。方法の全体の実行時間は、４５分であった。ＬＣストリームは、脱溶媒和し、ＨＥＳＩプローブでイオン化された。Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計は、極性切替して、５０，０００の分解能で、７０～１，２００ｍ／ｚの質量範囲にわたってフルスキャンモードで作動させた。ＬＣ－ＭＳ生データは、ＰｒｏｔｅｏＷｉｚａｒｄを使用することによりｍｚＭＬファイルに変換され、ピーク抽出および試料整列のためにＭＺＭｉｎｅ ２．１０にインポートされた。関連性がある代謝産物のすべての考えられる１３Ｃおよび１５Ｎ同位体ｍ／ｚ値を含む社内データベースが、ＬＣＭＳシグナルの割り当てに使用された。最終的にピーク面積が、比較の定量に使用された。
【0182】
ｊ．多価不飽和リン脂質のＬＣ－ＭＳ分析
[0227]細胞は、ウェル当たり３×１０５細胞として６ウェルプレート（状態ごとに３通りのウェル）中に播種され、完全培地中で４８時間培養された。脂質抽出では、細胞試料は、氷冷したイソプロパノール（ＩＰＡ）が溶菌液として使用されることを除いて、上記のように調製された。ＬＣ－ＭＳによるリン脂質測定では、２０μｌの溶解物溶液が、Ａｃｃｅｌａ（商標）６００ＬＣ系およびＥｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計からなるＬＣ－ＭＳプラットフォーム中に注入された。ＡＣＥシリカゲルカラム（３ｍｍ×１５０ｍｍ×３μｍ）は、順相モードにて脂質を、Ａ＝２０ｍＭ酢酸アンモニウム／ＩＰＡ（８０：２０、ｖ／ｖ）およびＢ＝ＡＣＮ／ＩＰＡ（８０：２０、ｖ／ｖ）を使用する移動相で分離するために使用された。０．３ｍＬ／分の流量での勾配プログラムが使用され；８％のＡ、１分でスタートし、Ａを１～５分で９％に、５～１０分で２０％に、１０～１６分で２５％に、および１６～２３分で３５％に直線的に増加させ、最終的に２６～４０分に再平衡のために８％のＡに戻された。Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計は、極性切替して、５０，０００の分解能で、１００～１，２００ｍ／ｚの質量範囲にわたってフルスキャンモードで作動させた。ＬＣ－ＭＳ生データは、ＰｒｏｔｅｏＷｉｚａｒｄを使用してｍｚＭＬファイルに変換され、ピーク抽出および試料整列のためにＭＺＭｉｎｅ ２．１０にインポートされた。リン脂質は、脂質分類、ならびに炭素および二重結合の数を含む詳述されている脂肪族アシルの情報を用いて、ＭＺＭｉｎｅ ２．１０で、ｉｎ ｓｉｌｉｃｏアルゴリズム（脂質調査）により同定された。ピーク面積は、比較分析に使用された。
[0227]細胞は、ウェル当たり３×１０５細胞として６ウェルプレート（状態ごとに３通りのウェル）中に播種され、完全培地中で４８時間培養された。脂質抽出では、細胞試料は、氷冷したイソプロパノール（ＩＰＡ）が溶菌液として使用されることを除いて、上記のように調製された。ＬＣ－ＭＳによるリン脂質測定では、２０μｌの溶解物溶液が、Ａｃｃｅｌａ（商標）６００ＬＣ系およびＥｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計からなるＬＣ－ＭＳプラットフォーム中に注入された。ＡＣＥシリカゲルカラム（３ｍｍ×１５０ｍｍ×３μｍ）は、順相モードにて脂質を、Ａ＝２０ｍＭ酢酸アンモニウム／ＩＰＡ（８０：２０、ｖ／ｖ）およびＢ＝ＡＣＮ／ＩＰＡ（８０：２０、ｖ／ｖ）を使用する移動相で分離するために使用された。０．３ｍＬ／分の流量での勾配プログラムが使用され；８％のＡ、１分でスタートし、Ａを１～５分で９％に、５～１０分で２０％に、１０～１６分で２５％に、および１６～２３分で３５％に直線的に増加させ、最終的に２６～４０分に再平衡のために８％のＡに戻された。Ｅｘａｃｔｉｖｅ（商標）質量分析計は、極性切替して、５０，０００の分解能で、１００～１，２００ｍ／ｚの質量範囲にわたってフルスキャンモードで作動させた。ＬＣ－ＭＳ生データは、ＰｒｏｔｅｏＷｉｚａｒｄを使用してｍｚＭＬファイルに変換され、ピーク抽出および試料整列のためにＭＺＭｉｎｅ ２．１０にインポートされた。リン脂質は、脂質分類、ならびに炭素および二重結合の数を含む詳述されている脂肪族アシルの情報を用いて、ＭＺＭｉｎｅ ２．１０で、ｉｎ ｓｉｌｉｃｏアルゴリズム（脂質調査）により同定された。ピーク面積は、比較分析に使用された。
【0183】
ｋ．誘導結合プラズマ発光分光法（ＩＣＰ－ＯＥＳ）の鉄アッセイ
[0228]細胞系は、上記のように適切な培地を有する６ウェルプレートに播種された（５ウェルに各系）。２４時間後、２ウェルの細胞が計数され、平均数は１００万／ｍＬでＴ＝０時間として使用される。残り３ウェルにおける細胞は、１．５ｍＬの完全培地で培養した。７２時間後、１ｍＬの使用された培地が採られ、鉄測定のため、ＩＣＰ－ＯＥＳを使用して４ｍＬの脱イオン水で希釈された。細胞が計数され、１００万／ｍＬの平均数がＴ＝７２時間として使用された。希釈した培地は、Ｏｐｔｉｍａ（登録商標）７３００ ＤＶ ＩＣＰ－ＯＥＳを使用して分析された。各細胞系の３通りの試料からのｐｐｍの鉄レベルは平均化され、次いで比較分析のために、Ｔ＝０時間とＴ＝７２時間との間における細胞数の差について標準化された。
[0228]細胞系は、上記のように適切な培地を有する６ウェルプレートに播種された（５ウェルに各系）。２４時間後、２ウェルの細胞が計数され、平均数は１００万／ｍＬでＴ＝０時間として使用される。残り３ウェルにおける細胞は、１．５ｍＬの完全培地で培養した。７２時間後、１ｍＬの使用された培地が採られ、鉄測定のため、ＩＣＰ－ＯＥＳを使用して４ｍＬの脱イオン水で希釈された。細胞が計数され、１００万／ｍＬの平均数がＴ＝７２時間として使用された。希釈した培地は、Ｏｐｔｉｍａ（登録商標）７３００ ＤＶ ＩＣＰ－ＯＥＳを使用して分析された。各細胞系の３通りの試料からのｐｐｍの鉄レベルは平均化され、次いで比較分析のために、Ｔ＝０時間とＴ＝７２時間との間における細胞数の差について標準化された。
【0184】
ｌ．異種移植片実験
[0229]ＣＤ１－ヌード（Ｃｒｌ：ＣＤ１－Ｆｏｘｎ１ｎｕ）６～８週齢雌マウスは、環境エンリッチメントに積極的なバリア施設に収容された。実験の食事療法の修正前に、マウスに通常の固形飼料食および水が自由に供給された。ＨＣＴ１１６－ＮＴＣおよびＨＣＴ１１６－ＭＴＡＰ－ＫＯ細胞（４×１０６／側腹部）が片側皮下注入により留置された。注入部位は、視認可能で測定可能な腫瘍（長さおよそ５ｍｍ）が形成されるまで毎日モニターされた。腫瘍を有するマウスは、すべての必須アミノ酸を含有するが、すべての非必須アミノ酸が欠落している実験食を与えられた。食事は、以下の原料：スクロース１５％、トウモロコシデンプン４９．７６％、トウモロコシ油７．８９％、アミノ酸プレミックス１６％、ビタミンミックス０．２％、ミネラルミックス１０％、重炭酸ナトリウム１％、ＤＬ－アルファ酢酸トコフェロール０．００４％、エトキシキン（保存料）０．０１９％、有色色素０．０３％からなっていた。アミノ酸プレミックス（合計調製物の重量％）：Ｌ－ヒスチジン－ＨＣｌ １．３３％、Ｌ－イソロイシン１．７８％、Ｌ－ロイシン２．６７％、Ｌ－リシンＨＣｌ ３．１１％、Ｌ－メチオニン１．３３％、Ｌ－フェニルアラニン１．７８％、Ｌ－トレオニン１．７８％、Ｌ－トリプトファン０．４４％およびＬ－バリン１．７８％。飲料水は、システインおよびシスチンを含有または欠落しており、他の非必須アミノ酸すべてが添加された。
[0229]ＣＤ１－ヌード（Ｃｒｌ：ＣＤ１－Ｆｏｘｎ１ｎｕ）６～８週齢雌マウスは、環境エンリッチメントに積極的なバリア施設に収容された。実験の食事療法の修正前に、マウスに通常の固形飼料食および水が自由に供給された。ＨＣＴ１１６－ＮＴＣおよびＨＣＴ１１６－ＭＴＡＰ－ＫＯ細胞（４×１０６／側腹部）が片側皮下注入により留置された。注入部位は、視認可能で測定可能な腫瘍（長さおよそ５ｍｍ）が形成されるまで毎日モニターされた。腫瘍を有するマウスは、すべての必須アミノ酸を含有するが、すべての非必須アミノ酸が欠落している実験食を与えられた。食事は、以下の原料：スクロース１５％、トウモロコシデンプン４９．７６％、トウモロコシ油７．８９％、アミノ酸プレミックス１６％、ビタミンミックス０．２％、ミネラルミックス１０％、重炭酸ナトリウム１％、ＤＬ－アルファ酢酸トコフェロール０．００４％、エトキシキン（保存料）０．０１９％、有色色素０．０３％からなっていた。アミノ酸プレミックス（合計調製物の重量％）：Ｌ－ヒスチジン－ＨＣｌ １．３３％、Ｌ－イソロイシン１．７８％、Ｌ－ロイシン２．６７％、Ｌ－リシンＨＣｌ ３．１１％、Ｌ－メチオニン１．３３％、Ｌ－フェニルアラニン１．７８％、Ｌ－トレオニン１．７８％、Ｌ－トリプトファン０．４４％およびＬ－バリン１．７８％。飲料水は、システインおよびシスチンを含有または欠落しており、他の非必須アミノ酸すべてが添加された。
【0185】
[0230]対照飲料水（ｐＨ７）は、グリシン、Ｌ－アラニン、Ｌ－アスパラギン、Ｌ－アスパラギン酸、Ｌ－グルタミン酸、Ｌ－プロリン、Ｌ－セリン、Ｌ－グルタミン、Ｌ－アルギニン、Ｌ－システイン塩酸塩一水和物（すべて１６ｍＭ）、Ｌ－チロシン二ナトリウム塩水和物（３ｍＭ）およびＤ－グルコース（２５ｍＭ）を含有していた。システインなしの飲料水（ｐＨ７）は、Ｌ－アラニン、Ｌ－アスパラギン、Ｌ－アスパラギン酸、Ｌ－グルタミン酸、Ｌ－プロリン、Ｌ－グルタミン、Ｌ－アルギニン（すべて１８．３ｍＭ）、グリシンおよびＬ－セリン（１６ｍＭ）、Ｌ－チロシン二ナトリウム塩水和物（３ｍＭ）およびＤ－グルコース（２５ｍＭ）を含有していた。食事および飲料水の両方を自由に摂らせた。
【0186】
[0231]腫瘍は、キャリパーで週に３回測定され、体積は、式：体積＝（長さ×幅２）／２を使用して計算された。最大の許容される腫瘍の大きさ（長さまたは幅＝１５ｍｍ）に達したら、または腫瘍が潰瘍を生じるようになったら、マウスは人道的に屠殺された。
【0187】
ｍ．データの提示および統計値
[0232]データの各セットでは、ｎ－数およびエラーバーが、図の説明文で示される。個々の測定の平均値が示される場合、バーは標準偏差（ＳＤ）であり、平均値の平均が示される場合、バーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。Ｉｎ ｖｉｔｒｏデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均として呈示され、各図の説明文で言及される。腫瘍の大きさは、１週間に３回測定され、腫瘍体積は、食事が変化したときのスタート体積と比較した体積の変化（パーセンテージとして）に変換された。データは、ＳＥＭを示すバーを伴う週平均腫瘍体積として提示される。
[0232]データの各セットでは、ｎ－数およびエラーバーが、図の説明文で示される。個々の測定の平均値が示される場合、バーは標準偏差（ＳＤ）であり、平均値の平均が示される場合、バーは平均の標準誤差（ＳＥＭ）である。Ｉｎ ｖｉｔｒｏデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均として呈示され、各図の説明文で言及される。腫瘍の大きさは、１週間に３回測定され、腫瘍体積は、食事が変化したときのスタート体積と比較した体積の変化（パーセンテージとして）に変換された。データは、ＳＥＭを示すバーを伴う週平均腫瘍体積として提示される。
【0188】
[0233]システインなしの食事のＮＴＣおよびＭＴＡＰ－ＫＯ細胞に対する相対的な効果を比較するために、システインなしの食事での個々の腫瘍と、対照食での平均腫瘍体積との間における週平均腫瘍体積の差（パーセンテージとして）が計算された。複数群間の統計的比較は、Ｓｉｄａｋの複数比較検定を用いた通例の一元ＡＮＯＶＡにより行われた。図４０のパネルＣでは、２群のみが比較される場合、両側独立Ｔ検定が行われた。Ｐ－値は、３小数位まで示され、統計学的有意性は、Ｐ＜０．０５とされた。
【0189】
実施例２：システイン飢餓への細胞感受性
[0234]結腸直腸がん（ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０）、乳がん（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）および膵がん（ＡｓＰＣ－１、ＢｘＰＣ－３、ＣＦＰＡＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＰＡＮＣ－１、Ｐａｎｃ１０．５およびＳＷ１９９０）からなる細胞系のパネルは、システイン飢餓の、ある範囲のがん細胞に対する影響を評価するために使用された。すべての実験では、システインが除去された場合、ホモ二量体シスチンも存在しなくなった。
[0234]結腸直腸がん（ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０）、乳がん（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）および膵がん（ＡｓＰＣ－１、ＢｘＰＣ－３、ＣＦＰＡＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＰＡＮＣ－１、Ｐａｎｃ１０．５およびＳＷ１９９０）からなる細胞系のパネルは、システイン飢餓の、ある範囲のがん細胞に対する影響を評価するために使用された。すべての実験では、システインが除去された場合、ホモ二量体シスチンも存在しなくなった。
【0190】
[0235]図１は、システイン飢餓（－システイン、右パネル）の細胞増殖に対する効果を、十分に供給された状態（対照、左パネル）と比較して示す。システイン飢餓の３日後、細胞系１１種すべてが、完全に供給された状態と比較して、ひどく損なわれた増殖を示した。いくつかの細胞系は、飢餓中におよそ同一の細胞数を維持し（例えばＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８およびＡｓＰＣ－１）、細胞が生存したことを示した。他の細胞系、特に ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１は、細胞死を示す、（スタート時の細胞数に対して）それを下回る相対細胞数を有していた。
【0191】
[0236]ある範囲の他の主な栄養素に対する細胞のシステイン飢餓への応答が判定された。図２は、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞における主な栄養素の飢餓している細胞の効果を示す。図２２のパネルＡは、完全培地、または所定の栄養素が欠落している適合培地中で２４時間増殖させた細胞系を示す。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１データは、他の細胞系との比較のために図２から複写される。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１細胞は、重要な非必須アミノ酸（すなわち、セリンおよびグリシンまたはグルタミン）、必須アミノ酸（リシン）、または完全なブドウ糖除去よりシステインの中止に感受性であった。対照的に、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８は、システインの中止に、他の栄養素、例えばブドウ糖およびリシンに対してと同様の感受性を有していた。
【0192】
[0237]システイン飢餓の基本的代謝効果は、ＬＣ－ＭＳ分析を使用して判定された。細胞内システインおよびシスチンのレベルは、外因性システインの除去で実質的に枯渇した。これらの変化は、グルタチオン（ＧＳＨ）およびシステインに由来する前駆体γ－グルタミルシステインが減少するまで平行であった。図３は、システイン飢餓の、システイン、シスチン、γ－ＧＣおよびＧＳＨのレベルに対する効果を示す。
【0193】
[0238]図２３は、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、または５ｍＭグルタチオンを有する（－Ｃｙｓ＋ＧＳＨ）、またはグルタチオンを有さない（－Ｃｙｓ）、システインが欠落している適合培地中で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す。代謝産物が抽出され、ＬＣ－ＭＳを使用して分析された。外因性ＧＳＨの添加は、システインおよびγ－グルタミルシステインの部分的回復と共に、細胞内ＧＳＨレベルを十分に復元し、これにより、細胞死が防止され、増殖が復元された。図４は、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－２１３およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞におけるシステイン飢餓および外因性ＧＳＨの細胞死に対する効果を示す。
【0194】
[0239]フェロスタチンは、システイン飢餓によって引き起こされる鉄－依存性細胞死の強力な阻害剤であり、これは、脂質過酸化を防止するラジカル捕捉抗酸化剤として作用する。図２２のパネルＢは、システインを有する（Ｃｔｒ）または有さない（－Ｃｙｓ）、およびフェロスタチン（＋Ｆ）１μＭで２４時間および７２時間増殖させた細胞系を示す。感受性の細胞では、フェロスタチンは、システイン飢餓に応答する細胞死を防止し、より耐性の細胞に対してほとんど影響を示さなかった。ＧＳＨと対照的に、フェロスタチンは増殖を復元しなかったが、これは、フェロスタチンがＧＳＨとは異なり代謝産物変化の下流で作用し、システイン依存代謝経路を直接的に補うことができないことを反映する。
【0195】
実施例３：システイン飢餓に対する高い感受性は、トランススルフレーション経路の酵素発現と相関せず、過剰なメチオニンにより回復されない
[0240]システイン飢餓への応答とｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成でのＴｓＰ酵素の発現との間の関係が調査された（図５）。システイン飢餓後の細胞数に対する酵素発現を比較する散乱プロットは、飢餓応答と、Ｓ－アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＡＨＣＹ）、シスタチオニン（ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｅ）β－シンターゼ（ＣＢＳ）、またはシスタチオニンγ－リアーゼ（ＣＳＥ）の発現との間に相関がなかったことを示す。
[0240]システイン飢餓への応答とｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成でのＴｓＰ酵素の発現との間の関係が調査された（図５）。システイン飢餓後の細胞数に対する酵素発現を比較する散乱プロットは、飢餓応答と、Ｓ－アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＡＨＣＹ）、シスタチオニン（ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｅ）β－シンターゼ（ＣＢＳ）、またはシスタチオニンγ－リアーゼ（ＣＳＥ）の発現との間に相関がなかったことを示す。
【0196】
[0241]図６は、システイン飢餓後の細胞数に対する、Ｓ－アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＡＨＣＹ）；シスタチオニン（ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｅ）β－シンターゼ（ＣＢＳ）；シスタチオニンγ－リアーゼ（ＣＳＥ）またはＣＢＳ＋ＣＳＥの酵素発現を比較する散乱プロットを示す。図２４のパネルＡは、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、または０．８ｍＭホモシステインを有するシステインが欠落している（－Ｃｙｓ＋ＨＣ）、もしくはホモシステインを有さない適合培地（－Ｃｙｓ）中で２４時間増殖させた、結腸直腸がん（ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０）および乳がん（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）細胞を示す。細胞溶解物は、ウエスタンブロットにより、トランススルフレーション経路の酵素発現について精査された。パネルＢは、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（＋）またはシステインが欠落している（－）適合培地中で２４時間増殖させた細胞を示す。細胞溶解物は、ウエスタンブロットにより、トランススルフレーション経路の酵素発現について精査された。バンドは、ＬｉＣｏｒスキャナーで定量され、アクチン補正バンド強度（任意の単位）が示される。
【0197】
[0242]ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成の達成において、前駆体の可用性が制限的因子かどうかを判定するために、システイン飢餓中に、細胞にホモシステイン（ＨＣ）またはシスタチオニン（ＣＴＨ）が補充された。図７のパネルＡは、さほど感受性ではない（ＳＷ４８０）または高度に感受性（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１）の細胞系において、０．２ｍＭのいずれかの前駆体を添加すると、生存率／増殖に対してかなり回復が生じることを示す。図７のパネルＢは、より高い濃度のホモシステイン（０．８ｍＭ）は、さらに増殖を復元することが可能であったことを示す。しかし、同一の濃度のメチオニン（０．８ｍＭ、正常細胞の培養培地より４～８倍高い）を用いた補充では、回復は生じなかった。
【0198】
[0243]外因性ホモシステインおよびシスタチオニンが、トランススルフレーション中間体ならびにシステイン、γ－グルタミルシステインおよびＧＳＨの細胞内レベルを増加させる能力は、ＬＣ－ＭＳ分析を使用して評価された。図２５のパネルＡは、ビヒクル（Ｖｅｈ）が補充された、０．２ｍＭホモシステイン（ＨＣ）が補充された、または０．２ｍＭシスタチオニン（ＣＴＨ）が補充されたシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。パネルＢは、ビヒクル（Ｖｅｈ）が補充された、または０．２ｍＭもしくは０．８ｍＭホモシステイン（ＨＣ）が補充されたシステインが欠落している培地中で８時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。図２３、ならびに図２５のパネルＡおよびパネルＢにおける統計的な比較は、Ｓｉｄａｋの複数比較検定を用いた通例の一元ＡＮＯＶＡにより行われた。ウエスタンブロット以外に、すべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤ単位である。
【0199】
[0244]細胞内ホモシステインおよびシスタチオニンレベルは、０．２ｍＭホモシステインまたはシスタチオニンを培養培地に添加することにより著しく増加し、システインレベルにおける中等度の増加、また、γ－グルタミルシステインおよびＧＳＨにおけるより顕著な増加を引き起こす。システイン、γ－グルタミルシステインおよびＧＳＨにおける増加は、代謝産物レベルを、供給された状態下で見られた代謝産物レベルに復元するのに必要とされるスケールではなかった（図３）。飢餓状態において経路の代謝回転が速いと、代謝産物の蓄積が防止され得る。
【0200】
[0245]細胞の増殖を復元させ、生存を延長させる０．８ｍＭホモシステインの添加により、システインレベルに著しい増加がもたらされた（０．２ｍＭホモシステインとは異なる）。これにより、増加したＧＳＨは、ＲＯＳに対処することで生存の誘導に必要とされることが示唆される。定常状態のシステインレベルにおける増加は、細胞を増殖させるのに重要になり得る（例えばタンパク質合成を補助することにより）。
【0201】
[0246]図２４のパネルＡは、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、または０．８ｍＭホモシステインを有するシステインが欠落している（－Ｃｙｓ＋ＨＣ）、もしくはホモシステインを有さない適合培地（－Ｃｙｓ）中で２４時間増殖させた結腸直腸がん（ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０）および乳がん（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）細胞を示す。細胞にホモシステインを補充することは、飢餓単独によって引き起こされるものを超えたトランススルフレーション経路の酵素発現に対してほとんど影響を示さなかった。外因性ホモシステインおよびシスタチオニンが、増殖を回復する能力は、トランススルフレーション酵素レベルが細胞系の間でかなり変動し得る一方、トランススルフレーション酵素の発現および活性は、近位の前駆体が十分多量に存在すればシステインを作るのに十分であることを示唆する。
【0202】
実施例４：システイン飢餓への感受性と相関するメチルチオアデノシン流出量
[0247]必須アミノ酸メチオニンは、システイン合成に最適な上流前駆体（図５）であり、トランススルフレーション経路に使用するのに十分なレベルのホモシステインを供給するはずである。高度に感受性のＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞、ならびにさほど感受性ではないＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞におけるメチオニンの動態は、重炭素－および窒素－標識メチオニン（１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニン）を使用して判定された。図８は、メチオニンが、ホモシステイン、シスタチオニンおよびホモセリンで検出される標識を用いて、ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞におけるトランススルフレーション経路に進入したことを示す。しかし、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞において、ホモシステイン、シスタチオニンおよびホモセリンではきわめてわずかな標識しか検出されなかった。
[0247]必須アミノ酸メチオニンは、システイン合成に最適な上流前駆体（図５）であり、トランススルフレーション経路に使用するのに十分なレベルのホモシステインを供給するはずである。高度に感受性のＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞、ならびにさほど感受性ではないＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞におけるメチオニンの動態は、重炭素－および窒素－標識メチオニン（１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニン）を使用して判定された。図８は、メチオニンが、ホモシステイン、シスタチオニンおよびホモセリンで検出される標識を用いて、ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞におけるトランススルフレーション経路に進入したことを示す。しかし、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞において、ホモシステイン、シスタチオニンおよびホモセリンではきわめてわずかな標識しか検出されなかった。
【0203】
[0248]トランススルフレーション経路を除いて、メチオニンは、ポリアミン合成に使用され得る。ポリアミンは、重要かつ多様な細胞機能を有し得、がん細胞は、上昇したポリアミン経路活性を呈示することが多い。高度にシステイン飢餓－感受性ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、ポリアミンであるスペルミジンにおいて比較的高いレベルのメチオニンに由来する標識を有していた。ポリアミン経路の副生成物５－メチルチオアデノシン（ＭＴＡ、Ｓ－アデノシルメチオニンに由来する）も、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞において増加したレベルおよび標識を示した。ＨＣＴ１１６およびＳＷ４８０細胞とは異なり、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、メチオニンに由来する標識されたＭＴＡの実質的外因性プールを有していた。
【0204】
[0249]ＭＴＡ流出量は、ＭＴＡＰ発現およびポリアミン経路活性の両方の機能的測定値である。細胞系のパネル全体の細胞外ＭＴＡのレベルは、ＬＣ－ＭＳを使用して、また、システイン飢餓で生存する能力に対するＭＴＡレベルのプロッティングにより検査された。トランススルフレーション酵素発現とは異なり、図６は、システイン飢餓後の細胞数に対する、Ｓ－アデノシルホモシステインヒドロラーゼ（ＡＨＣＹ）；シスタチオニン（ｃｙｓｔａｔｈｉｏｎｅ）β－シンターゼ（ＣＢＳ）；シスタチオニンγ－リアーゼ（ＣＳＥ）またはＣＢＳ＋ＣＳＥの酵素発現を比較する散乱プロットを示す。
【0205】
[0250]図９パネルＡは、細胞外ＭＴＡレベルと飢餓への感受性との間における明らかな相関が存在したことを示す。最高のＭＴＡ流出量を示した細胞が、システイン飢餓に一貫して最も感受性であった。ＭＴＡは、ＭＴＡＰの直接的な基質であり、メチオニンサルベージ経路において重要な酵素である。図９のパネルＢは、ＭＴＡＰタンパク質発現が、システイン飢餓応答との相関を、ＭＴＡ流出量より低い程度ではあるが示したことを示す。図２６のパネルＡは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞を示す。細胞溶解物は、ウエスタンブロットによりＭＴＡＰ発現について精査され、ＬｉＣｏｒスキャナーで定量された。
【0206】
実施例５：システイン飢餓への感受性に相関するポリアミン経路活性
[0251]多数の細胞のプロセスは、システイン飢餓への感受性に影響を与える能力を有する。幅広いさらなる細胞の因子が、細胞系パネルにおけるシステイン飢餓感受性との相関についてテストされた。以下が分析に含まれた：システイン、メチオニン、ＳＡＭ、デカルボキシ－ＳＡＭ（ｄｃ－ＳＡＭ）、ＭＴＡ、シスタチオニン、ホモシステイン、γ－グルタミルシステイン、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＮＡＤＰ＋およびＮＡＤＰＨに対する代謝産物レベル；ＧＳＨ／ＧＳＳＧおよびＮＡＤＰ＋／ＮＡＤＰＨの代謝産物比；ＧＰＸ４、ＣＢＳ、ＣＳＥ、ＡＨＣＹ、組み合わせたＣＢＳ＋ＣＳＥ、ＡＭＤ１、ＯＤＣ１および組み合わせたＡＭＤ１＋ＯＤＣ１での酵素発現；脂質ＲＯＳレベル（マロニルジアルデヒド－ＭＤＡ染色）；ＬＣ－ＭＳにより検出される多価不飽和脂肪族アシルでのリン脂質のレベル（ＰＵＦＡ－ＰＬｓ；ＲＯＳ／Ｆｅ２＋依存性脂質過酸化の標的）；定常状態ＲＯＳレベル（ＣｅｌｌＲＯＸ染色）；誘導結合プラズマ－発光分光法により判定される細胞の鉄取込み量；ならびにＧＰＸ４阻害剤のＩＣ５０値。
[0251]多数の細胞のプロセスは、システイン飢餓への感受性に影響を与える能力を有する。幅広いさらなる細胞の因子が、細胞系パネルにおけるシステイン飢餓感受性との相関についてテストされた。以下が分析に含まれた：システイン、メチオニン、ＳＡＭ、デカルボキシ－ＳＡＭ（ｄｃ－ＳＡＭ）、ＭＴＡ、シスタチオニン、ホモシステイン、γ－グルタミルシステイン、ＧＳＨ、ＧＳＳＧ、ＮＡＤＰ＋およびＮＡＤＰＨに対する代謝産物レベル；ＧＳＨ／ＧＳＳＧおよびＮＡＤＰ＋／ＮＡＤＰＨの代謝産物比；ＧＰＸ４、ＣＢＳ、ＣＳＥ、ＡＨＣＹ、組み合わせたＣＢＳ＋ＣＳＥ、ＡＭＤ１、ＯＤＣ１および組み合わせたＡＭＤ１＋ＯＤＣ１での酵素発現；脂質ＲＯＳレベル（マロニルジアルデヒド－ＭＤＡ染色）；ＬＣ－ＭＳにより検出される多価不飽和脂肪族アシルでのリン脂質のレベル（ＰＵＦＡ－ＰＬｓ；ＲＯＳ／Ｆｅ２＋依存性脂質過酸化の標的）；定常状態ＲＯＳレベル（ＣｅｌｌＲＯＸ染色）；誘導結合プラズマ－発光分光法により判定される細胞の鉄取込み量；ならびにＧＰＸ４阻害剤のＩＣ５０値。
【0207】
[0252]テストされる＞６０の因子のうち、最大の相関を示す６つの因子（細胞外ＭＴＡ［Ｃｔｒ］、細胞ＭＴＡ［Ｃｔｒ］、組み合わせたＯＤＣ１＋ＡＭＤ１発現［Ｃｔｒ］、細胞ＭＴＡ［－Ｃｙｓ］、デカルボキシ－ＳＡＭ［Ｃｔｒ］およびＡＭＤ１発現［Ｃｔｒ］（Ｒ２値＝０．６５３５６～０．３９６３０）はすべて、ポリアミン経路活性の指標である。
【0208】
[0253]図２６のパネルＢは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞を示す。細胞溶解物は、ウエスタンブロットによりＡＭＤ１およびＯＣＤ１酵素発現について精査され、ＬｉＣｏｒスキャナーで定量された。図２７は、細胞系１１種のシステイン飢餓への感受性に対する、ある範囲の生物学的パラメーターについての相関係数（Ｒ２）を示す。代謝産物レベルは、「細胞外ＭＴＡ」を除いてすべて細胞内である。複数のパラメーターは、供給（Ｃｔｒ）およびシステイン－飢餓（－Ｃｙｓ）状態下で評価された。すべての代謝産物レベルは、細胞数に標準化された。タンパク質発現は、ＬｉＣｏｒスキャナーを使用してウエスタンブロットにより定量され、すべてアクチンに標準化された。鉄取込み量は、ＩＣＰ－ＯＥＳにより評価された。定常状態ＲＯＳレベルは、ＣｅｌｌＲＯＸ染色の生細胞画像化により検出され、定常状態の脂質過酸化レベルは、マロンジアルデヒド（ＭＤＡ）の免疫細胞化学染色により見積もられ、いずれも自動顕微鏡を使用して定量された。
【0209】
[0254]システイン飢餓中のＣＢＳおよびＣＳＥの組み合わせた発現（ＣＢＳ＋ＣＳＥ発現［－Ｃｙｓ］）は、ＴｓＰ活性の役割を補助するリストのトップ１５以内に存在していたが、相関は、ポリアミン経路活性のものより著しく低かった（Ｒ２＝０．２０９９６）。ＧＰＸ４阻害剤ＩＣ５０値も、リストのトップ１５に表される。予測可能な相関は、システイン飢餓およびＧＰＸ４阻害が、同一の機構、すなわちフェロトーシスにより細胞を死滅させることを示す。システイン飢餓－感受性の細胞は、低いＧＰＸ４レベルを有することにより、感受性についてプライミングされ得るが、ＧＰＸ４発現は、システイン飢餓感受性への相関をほとんど示さなかった［Ｒ２ ＧＰＸ４ Ｃｔｒ＝０．０３２１３、Ｒ２ ＧＰＸ４－Ｃｙｓ＝０．０５７８０］。データは、ポリアミン経路活性と、システイン飢餓への細胞感受性との間の相関を実証する。
【0210】
実施例６：ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成とシステイン飢餓への高感受性との間の相関がないこと
[0255]ＴｓＰ活性およびｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成をより綿密に調べるために、細胞に１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンが補充され、これは、１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニンと異なり、ＴｓＰにより利用される場合、標識されたシステインを生じる（図８）。測定可能な細胞内定常状態レベルの高度に細胞透過性の栄養素を検出することは、培地から除去された場合、困難になり得る。飢餓状態下で、新たに合成された需要が高い栄養素、例えばセリンおよびシステインは、下流代謝産物に急速に変換され、これにより、蓄積することが困難な検出可能な定常状態レベルになった。図２８は、完全培地（０．４ｍＭ、セリンに代わる１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンを有する）中で４８時間増殖させた細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。
[0255]ＴｓＰ活性およびｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成をより綿密に調べるために、細胞に１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンが補充され、これは、１３Ｃ５ １５Ｎ１－メチオニンと異なり、ＴｓＰにより利用される場合、標識されたシステインを生じる（図８）。測定可能な細胞内定常状態レベルの高度に細胞透過性の栄養素を検出することは、培地から除去された場合、困難になり得る。飢餓状態下で、新たに合成された需要が高い栄養素、例えばセリンおよびシステインは、下流代謝産物に急速に変換され、これにより、蓄積することが困難な検出可能な定常状態レベルになった。図２８は、完全培地（０．４ｍＭ、セリンに代わる１３Ｃ３ １５Ｎ１－セリンを有する）中で４８時間増殖させた細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。
【0211】
[0256]標識された代謝産物が変換された下流代謝産物における標識により、検出することが可能となる。システインのケースでは、下流代謝産物ＧＳＨが検出され得る。セリンに由来する炭素および窒素をＧＳＨ中に組み込む：グリシン合成を介する、およびシステイン合成を介する２つの考えられる経路が存在する。質量＋３（ｍ＋３、１３Ｃ２
１５Ｎ１）ＧＳＨは、セリン＞グリシン＞ＧＳＨ標識を示す一方、ｍ＋４（１３Ｃ３
１５Ｎ１）ＧＳＨは、セリン＞システイン＞ＧＳＨ標識を示す。ｍ＋７ ＧＳＨピークは、ＧＳＨに同時に組み込まれるセリンに由来するグリシン（ｍ＋３）およびセリンに由来するシステイン（ｍ＋４）を示す。
【0212】
[0257]Ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成は、システイン飢餓への応答と相関しなかった。図２９のパネルＡは、図２８に示されるピーク面積データを使用して、ＧＳＨレベルを合計ＧＳＨプールの％合計として示した。パネル上段では、すべてのアイソトポログが示される。パネル下段では、システインにのみ由来するアイソトポログ（ｍ＋４およびｍ＋７）が示される。すべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤ単位である。ＨＣＴ１１６、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞はすべて、飢餓の４８時間後のｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成の証拠を示したが、システイン合成は、より耐性の細胞で、より高くなかった。ＨＣＴ１１６（より耐性）およびＭＤＡ－ＭＢ－２３１（より感受性）は、システイン飢餓中に同等の低レベルのｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成を示し、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８（より耐性）およびＭＩＡＰａＣａ－２（より感受性）は、システイン飢餓中に同等の高レベルのｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成を示した。
【0213】
[0258]タンパク質発現およびＬＣ－ＭＳデータは、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成が、システイン飢餓への感受性の優性決定因子ではなかったことを示唆した。ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成の基本的な根底にある重要性は、細胞をＣＳＥ阻害剤、ベータ－シアノ－Ｌ－アラニンで処置することにより確認された。図２９のパネルＢは、（Ｖｅｈ）を有さない、または０．５ｍＭもしくは１ｍＭのＣＳＥ阻害剤ベータ－シアノ－Ｌ－アラニンを有する完全（Ｃｔｒ）またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間増殖させた細胞を示す。データは、図２７の根底にある相関係数の分析を含有する。すべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤ単位である。予想されるように、ＣＳＥ阻害剤の処置は、耐性細胞系ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８のシステイン飢餓への感受性を増加させ、システイン産生におけるＴｓＰの基本的役割が立証された。ＨＣＴ１１６細胞は、ＣＳＥ阻害への穏当な応答しか有しておらず、これは、図２９のパネルＡに示される低レベルのＴｓＰ活性を反映する。本明細書に開示されるデータは、ＴｓＰ活性が、細胞がシステイン飢餓に適応するのを助ける明確な機能的役割を有する一方、ＴｓＰ活性は、必ずしも、どの細胞系が最も高度な感受性を有するか判定する際の優性因子ではないことを示す。
【0214】
[0259]ｄｅ ｎｏｖｏ合成とシステイン飢餓感受性との間の相関がないため、ポリアミン代謝のシステイン飢餓感受性に対する効果が、細胞にポリアミン経路代謝産物を補充することによりにより調査された。図３０は、増加量のＭＴＡを有するすべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で２０時間および７２時間増殖させた細胞を示す。図３１のパネルＡは、ビヒクルまたは５００μＭ ＭＴＡを有する完全培地中で２４時間増殖させた細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。高レベルのＭＴＡは、供給された細胞の増殖を減少させたが、ＭＴＡは、細胞をシステイン飢餓に増感させなかった。ＭＴＡは、感受性細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１）の少なくとも１つが、システイン飢餓からの短期的な保護をも得る傾向も示した。結果は、ＭＴＡが、細胞をシステイン飢餓に増感させないことを示した。
【0215】
[0260]次に、細胞に、ポリアミンであるプトレシン、スペルミジンおよびスペルミンが直接的に補充された。ＭＴＡおよびプトレシンと対照的に、スペルミジンおよびスペルミンは、システイン飢餓感受性に対して劇的な影響を有していた。図１０横列Ａは、耐性細胞系ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８が、ポリアミンの存在下で高度に増感したことを示す。パネルＢの上列は、２０μＭプトレシン（＋プトレシン）、２０μＭスペルミジン（＋スペルミジン）、もしくは２０μＭスペルミン（＋スペルミン）を含有する、または作用剤を有さない（＋ビヒクル）完全培地中で増殖させた細胞を示す。パネルＢの下列は、２０μＭプトレシン（＋プトレシン）、２０μＭスペルミジン（＋スペルミジン）、もしくは２０μＭスペルミン（＋スペルミン）を含有する、または作用剤を有さない（＋ビヒクル）、システインを有さない培地中で増殖させた細胞を示す。活性酸素種（ＲＯＳ）は、ＣｅｌｌＲＯＸ ｄｅｅｐ ｒｅｄで処置された生細胞において、Ｏｐｅｒｅｔｔａ自動顕微鏡によりリアルタイムで検出された。ポリアミンが補充された生細胞におけるＲＯＳレベルでの染色は、スペルミジンおよびスペルミンが、システイン飢餓の細胞におけるＲＯＳレベルの迅速な増加を引き起こし、きわめて迅速に広範な細胞死をきたすことを示した。ＬＣ－ＭＳ分析は、対照条件下で細胞におけるポリアミンレベルを直接的に評価するために使用された。図１０の横列Ｂは、より感受性の細胞（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）における、より多いスペルミジンおよびスペルミンと同時に生じるより少ないプトレシンでの一貫した傾向が存在したことを示し、これにより、ｄｅ ｎｏｖｏスペルミジン／スペルミン合成量がより高いことが示唆される。１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを用いた短い（３時間）標識期間は、一般的に、スペルミジンおよびスペルミンにおける制限された標識を示し、ｄｃ－ＳＡＭ中に、ただしＭＴＡＰ欠損、システイン飢餓感受性細胞系においてのみ明確な標識上流が存在した。ｄｃ－ＳＡＭは、ＡＭＤ１－触媒脱炭酸によりＳＡＭから生成され、ｄｃ－ＳＡＭがＭＴＡに変換される間のスペルミジンおよびスペルミンの合成に必要とされる。結果は、ＭＴＡＰ－欠失細胞系が、ｄｃ－ＳＡＭのより多くの生成を示し、システイン飢餓感受性に寄与し得るポリアミン、例えばスペルミジンおよびスペルミンの合成の増加を引き起こすことを示す。
【0216】
[0261]図１１のパネルＡは、ホモシステイン、シスタチオニン、スペルミジンまたはスペルミンが補充されたＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞のＬＣ－ＭＳ分析を示して、システイン飢餓中のＴｓＰに対する、ポリアミン経路の活性を評価する。１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを用いた長い（１６時間）インキュベーション時間は、高い比率のポリアミンおよび標識されたＴｓＰ中間体をもたらす。ポリアミン標識は、一般的に維持され、または飢餓中に増加さえし、これにより、ポリアミン合成は、飢餓中に活性なままであることが示唆される。
【0217】
[0262]低下したポリアミン経路活性が、細胞を飢餓から回復できるかどうかを評価するために、経路を阻害する２つの方法が用いられた。デカルボキシラーゼがＳＡＭからｄｃ－ＳＡＭへの変換に応答するように、ＡＭＤ１は、ポリアミン合成の調節において重要な役割を有する。図１１のパネルＢは、ＡＭＤ１阻害剤（サルドモジド）を用いた細胞の処置が、システイン飢餓に応答した細胞死を防止することを示す。
【0218】
[0263]図３２のパネルＡは、０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地中で１６時間増殖させた、次いで０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で３２時間増殖させた細胞を示す。図３２のパネルＢは、メチオニンに代わる０．２ｍＭ１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する０．１ｍＭ ＭＴＯＢを有する、または有さない完全培地中で５時間増殖させた細胞を示す）。ＡＭＤ１阻害と同様に、４－メチルチオ－２－オキソ酪酸（ＭＴＯＢ）の補充は、細胞をシステイン飢餓から回復させた。方法（ＡＭＤ１阻害剤／ＭＴＯＢ補充）を用いた、とりわけＡＭＤ１阻害剤を用いた回復は、一時的であった。
【0219】
[0264]図１２は、システインの飢餓の、１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンまたは３４Ｓ１－メチオニンで増殖させた、ＭＤＡ－ＭＢ－２３２１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞のＬＣ－ＭＳ分析を示す。図３３のパネルＡは、完全培地（メチオニンに代わる０．２ｍＭ２３Ｓ１－メチオニンを有する）中で２４時間増殖させ、次いで２０μＭのＡＭＤ１阻害剤サルドモジドで２時間、４時間および８時間処置したＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す。パネルＢは、２０μＭのＡＭＤ１阻害剤サルドモジドを有する、または有さない完全培地（メチオニンに代わる０．２ｍＭ３４Ｓ１－メチオニンを有する）中で１６時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（左）およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞（右）を示す。すべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤである。本明細書に開示されるデータは、ＡＭＤ１阻害およびＭＴＯＢ補充が、ポリアミン合成の顕著な阻害を引き起こしたことを示し、減少したｄｃ－ＳＡＭおよびポリアミン標識として呈示され、これはＡＭＤ１阻害剤で特に強かった。本明細書に開示されるデータは、メチオニンのポリアミン経路への進入防止は、ＴｓＰ中間体のレベルを目立って増加させなかったことも示す。
【0220】
実施例７：ポリアミン代謝の阻害は、高度に感受性の細胞をシステイン飢餓から保護する
[0265]活性酸素種である過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）を生成するポリアミン代謝の複数の反応が存在し、これにより、スペルミジンおよびスペルミンがＲＯＳレベルを増加させ、細胞を飢餓に増感させる能力が潜在的に説明される（図１３）。これらの反応は、スペルミンオキシダーゼ（ＳＭＯＸ）およびポリアミンオキシダーゼ（ＰＡＯＸ）により媒介される。図１４は、ＳＭＯＸ阻害剤を用いてＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞の処置の効果を示して、これらのＲＯＳ－生成反応の、システイン飢餓への細胞の応答に対する影響を評価する。図３４は、１０μＭ、４０μＭ、または８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、または有する完全培地中で１６時間増殖させた、次いで完全培地（Ｃｔｒ）、または１０μＭ、４０μＭ、または８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、もしくは有するシステインが欠落している適合培地中で２４時間増殖させた細胞を示す。ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸの阻害は、飢餓感受性細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１）における細胞死を防止した。飢餓耐性細胞系（ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）では、ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤により、システイン飢餓中に追加の利点がほとんど得られなかった、または得られなかった。
[0265]活性酸素種である過酸化水素（Ｈ２Ｏ２）を生成するポリアミン代謝の複数の反応が存在し、これにより、スペルミジンおよびスペルミンがＲＯＳレベルを増加させ、細胞を飢餓に増感させる能力が潜在的に説明される（図１３）。これらの反応は、スペルミンオキシダーゼ（ＳＭＯＸ）およびポリアミンオキシダーゼ（ＰＡＯＸ）により媒介される。図１４は、ＳＭＯＸ阻害剤を用いてＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１、ＭＩＡＰａＣａ－２、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞の処置の効果を示して、これらのＲＯＳ－生成反応の、システイン飢餓への細胞の応答に対する影響を評価する。図３４は、１０μＭ、４０μＭ、または８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、または有する完全培地中で１６時間増殖させた、次いで完全培地（Ｃｔｒ）、または１０μＭ、４０μＭ、または８０μＭのＰＡＯＸ阻害剤を有さない、もしくは有するシステインが欠落している適合培地中で２４時間増殖させた細胞を示す。ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸの阻害は、飢餓感受性細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１）における細胞死を防止した。飢餓耐性細胞系（ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８）では、ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤により、システイン飢餓中に追加の利点がほとんど得られなかった、または得られなかった。
【0221】
[0266]図１５の横列Ａは、平均ＣｅｌｌＲＯＸ染色強度での、システイン飢餓および／またはＳＭＯＸ阻害剤での処置の、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞に対する効果を示す。図３５のパネルＡは、５０μＭのＳＭＯＸ阻害剤ＭＤＬ７２５２７を有する（＋ＳＭＯＸｉ）、またはＳＭＯＸ阻害剤を有さない（＋ビヒクル）完全培地中で増殖させ、次いで完全培地（Ｃｔｒ）、または５０μＭのＳＭＯＸ阻害剤を有する、または有さない、システインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す。ＲＯＳは、ＣｅｌｌＲＯＸ ｄｅｅｐ ｒｅｄで処置された生細胞において、Ｏｐｅｒｅｔｔａ自動顕微鏡によりリアルタイムで検出された。ＲＯＳ染色強度は、１６時間時点について示される。ＲＯＳレベルの分析は、システイン飢餓中のＳＭＯＸの阻害は、細胞がより低いＲＯＳレベルを維持することを可能にしたことを確認した。
【0222】
[0267]ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ反応が酸素（Ｏ２）を必要とすることを考慮して、酸素レベルは、システイン飢餓への応答をモジュレートし得るかどうかが調査された。図３５のパネルＢは、正常酸素状態（Ｎｏｒ）または低酸素状態（Ｈｙｐ）；１％酸素下で完全培地、システインが欠落している培地中で所定の時間増殖させたＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞を示す。低酸素状態条件（１％Ｏ２）での増殖は、システイン飢餓の２４時間後の細胞死を防止した。しかし、この回復は一時的であり、３２時間までに細胞死が発生した。
【0223】
[0268]次に、ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害は、飢餓耐性細胞をスペルミジンおよびスペルミン処置の増感効果から回復させ得るかどうかがテストされた。図１５の横列Ｂは、システイン飢餓、ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤、スペルミジンまたはスペルミンでの処置の、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞に対する効果を示す。ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤は、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞生存、およびシステイン飢餓と同時に生じるポリアミン処置下での増殖を復元した。図１５の横列Ｃは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞における、システイン飢餓および／またはＡＭＤ１阻害の、平均ＣｅｌｌＲＯＸ染色強度に対する効果を示す。図３５のパネルＣは、完全培地（Ｃｔｒ）、または２０μＭのＡＭＤ１阻害剤を有する、もしくはＡＭＤ１阻害剤を有さないシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す。ＲＯＳは、ＣｅｌｌＲＯＸ ｄｅｅｐ ｒｅｄで処置された生細胞において、顕微鏡によりリアルタイムで検出された。ＲＯＳ染色強度は、１６時間時点について示される。ＳＭＯＸ阻害と同様に、ＡＭＤ１阻害は、ＲＯＳレベルを減少させ、これは、システイン飢餓中に、ポリアミン代謝がＲＯＳを増加させることを実証する。
【0224】
実施例８：メチオニンの中止は、高度に感受性の細胞をシステイン飢餓から保護する
[0269]メチオニンは、ポリアミンおよびシステインの合成の両方で前駆体である。メチオニンレベルのモジュレーティングが、システイン飢餓への応答に直接的に影響し得るかどうかが、メチオニンの中止は、細胞を飢餓にさらに増感させ得るという仮定で、テストされた。図１６の横列Ａは、システイン飢餓、ならびに組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓の、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞の細胞生存に対する効果を示す。システイン飢餓により耐性である細胞系では、組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓は、細胞増殖を穏やかに（ＳＷ４８０およびＭＩＡＰａＣａ－２）または強く（ＨＣＴ１１６）阻害した。組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓は、より感受性の細胞系において、システイン飢餓単独よりはるかに優れた耐容性を示した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１細胞はすべて、メチオニンおよびシステインなしの条件下で、細胞死がないことおよびある程度の増殖さえ呈示した。これらの結果は、ポリアミン代謝は、細胞系がシステイン飢餓に高度に感受性であるかどうかの判定において、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成より優勢であることを示す。
[0269]メチオニンは、ポリアミンおよびシステインの合成の両方で前駆体である。メチオニンレベルのモジュレーティングが、システイン飢餓への応答に直接的に影響し得るかどうかが、メチオニンの中止は、細胞を飢餓にさらに増感させ得るという仮定で、テストされた。図１６の横列Ａは、システイン飢餓、ならびに組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓の、ＨＣＴ１１６、ＳＷ４８０、ＭＤＡ－ＭＢ－４６８、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞の細胞生存に対する効果を示す。システイン飢餓により耐性である細胞系では、組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓は、細胞増殖を穏やかに（ＳＷ４８０およびＭＩＡＰａＣａ－２）または強く（ＨＣＴ１１６）阻害した。組み合わせたメチオニンおよびシステイン飢餓は、より感受性の細胞系において、システイン飢餓単独よりはるかに優れた耐容性を示した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１細胞はすべて、メチオニンおよびシステインなしの条件下で、細胞死がないことおよびある程度の増殖さえ呈示した。これらの結果は、ポリアミン代謝は、細胞系がシステイン飢餓に高度に感受性であるかどうかの判定において、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成より優勢であることを示す。
【0225】
[0270]細胞培養培地は、超生理学的メチオニンレベル（１００μＭ～２００μＭ）を含有する。より低く、より生理学的なメチオニンレベルのシステイン飢餓感受性に対する効果が調査された。成人では、血液中のメチオニンの濃度は、１０μＭ～４５μＭの範囲であり、平均値は２９μＭである。図３６の横列Ａは、システインを有さず、増加濃度（１～１ｍＭ）のメチオニンを含有する培地中で２０時間増殖させたシステイン飢餓に高度に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す。横列Ｂは、システインを有さず、増加濃度（０～１０μＭ）のメチオニンを含有する培地中で１７時間増殖させたシステイン飢餓に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す。横列Ｃは、システインを有さず、増加濃度（０～１０μＭ）のメチオニンを含有する培地中で４１時間増殖させたシステイン飢餓に感受性の細胞系（ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２）を示す。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＭＩＡＰａＣａ－２およびＰＡＮＣ－１細胞はすべて、１０μＭ～１０００μＭの範囲でシステイン飢餓に高度に感受性のままであった。メチオニン濃度のさらなる減少は、細胞が５μＭメチオニンまで、システイン飢餓に感受性のままであることを示した。システインおよびメチオニンが完全に存在しない場合、持続可能な細胞生存および増殖は不可能であるが、メチオニン除去によりもたらされる回復は、４０時間かけて続く耐久性があった。
【0226】
[0271]図１６の横列Ｂは、ＭＤＡ－ＭＢ－２３１、ＰＡＮＣ－１およびＭＩＡＰａＣａ－２細胞生存における、外因性メチオニンを有する、または有さないシステイン飢餓の効果を示す。図３７は、所定の濃度で、メチオニン（Ｍｅｔ）を有する、または有さない、完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた細胞系を示す。ＲＯＳは、ＣｅｌｌＲＯＸ ｄｅｅｐ ｒｅｄで処置された生細胞において、自動顕微鏡によりリアルタイムで検出された。ＲＯＳ染色強度は、１８時間の観点で示される。図３５のパネルＡ、パネルＢ、パネルＣおよび図３７における統計的な比較は、Ｓｉｄａｋの複数比較検定を用いた通例の一元ＡＮＯＶＡにより行われたにより行われた。すべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤ単位である。システイン飢餓状態下で、ＭＴＡＰ欠失細胞において、ＲＯＳレベルは、メチオニン濃度に応答する用量依存的手段で増加した。
【0227】
[0272]図１７は、メチオニンの中止のシステイン代謝に対する影響を検査する、システイン飢餓－感受性細胞系のＬＣ－ＭＳ分析を示す。図３８は、様々なレベルの１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンが補充された、メチオニンが欠落している培地中で５時間増殖させたＰＡＮＣ－１細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。メチオニン飢餓は、前駆体のＴｓＰおよびポリアミン合成経路への進入を劇的に減少させた。これらの変化は、システインおよびシスチンレベルの増加、ならびにＧＳＳＧレベルの減少、ならびにＧＳＳＧ／ＧＳＨ比の減少を伴った。
【0228】
[0273]変化が、システインに特定か、またはメチオニンの中止のアミノ酸に対する一般的影響かどうかを評価するために、他のすべてのアミノ酸での変化が分析された。図３９のパネルＡは、図１７および図３８に示される実験からのＬＣ－ＭＳデータを使用して評価されるアミノ酸のレベルを示す。相対量（ピーク面積、５０μＭ条件に対して）は、各アミノ酸について示される。パネルＢは、ＤＭＥＭまたはＲＰＭＩ中で２週間培養されたＭＩＡＰａＣａ－２細胞を示す。実験は、完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で細胞を３２時間および４８時間増殖させることにより行われた。メチオニンの制約は、合計の細胞のアミノ酸レベルを増加させた。効果は、システイン、グリシンおよびセリン（ＧＳＨのすべての前駆体）；ならびにアスパラギン（タンパク質合成に、またセリンの取込み交換因子（ｕｐｔａｋｅ ｅｘｃｈａｎｇｅ ｆａｃｔｏｒ）として使用される）で最も劇的であった。メチオニン飢餓に応答するシステインレベルの逆説的な増加、および付随するＧＳＳＧの減少は、減少したポリアミン経路活性は、ＭＴＡＰ欠失細胞における酸化負荷を緩和する仮説をさらに補助する。異なる細胞培養培地の間におけるメチオニンレベルの差（例えばＤＭＥＭ約２００μｍ、ＲＰＭＩ１６４０約１００μＭ）を考慮すると、異なる培地における細胞維持の、システイン飢餓への感受性に対する効果が判定された。維持培地に基づき、感受性における差は観察されなかった。
【0229】
実施例９：急激なＭＴＡＰ欠失および復元は、ポリアミン経路活性および細胞のシステイン飢餓への感受性をモジュレートし得る
[0274]図２６のパネルＡは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞の、ＭＴＡＰ欠失に対する効果を示す。ＨＣＴ１１６細胞は、比較的高いレベルのＭＴＡＰを発現し、システイン飢餓に感受性であった。ＨＣＴ１１６細胞は、細胞死に他の細胞系より耐性であった（図１）。ＭＴＡＰ欠失の影響を評価するために、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９が、ＨＣＴ１１６細胞からのＭＴＡＰ欠失に使用された。図１８のパネルＡは、ＭＴＡＰ－欠失に対するシステイン飢餓の効果およびフェロスタチンを用いた回復を示す。ＭＴＡＰ－欠失は、細胞のシステイン飢餓への感受性を増加させ、これは、フェロトーシス阻害剤フェロスタチンを用いた処置により回復した。
[0274]図２６のパネルＡは、システインを有して（＋）または有さずに（－）２４時間増殖させた細胞の、ＭＴＡＰ欠失に対する効果を示す。ＨＣＴ１１６細胞は、比較的高いレベルのＭＴＡＰを発現し、システイン飢餓に感受性であった。ＨＣＴ１１６細胞は、細胞死に他の細胞系より耐性であった（図１）。ＭＴＡＰ欠失の影響を評価するために、ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９が、ＨＣＴ１１６細胞からのＭＴＡＰ欠失に使用された。図１８のパネルＡは、ＭＴＡＰ－欠失に対するシステイン飢餓の効果およびフェロスタチンを用いた回復を示す。ＭＴＡＰ－欠失は、細胞のシステイン飢餓への感受性を増加させ、これは、フェロトーシス阻害剤フェロスタチンを用いた処置により回復した。
【0230】
[0275]図４０のパネルＡは、メチオニンに代わる０．２ｍＭ１３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する）完全培地中で３０時間増殖させたＭＴＡＰ－陽性（親／Ｐａｒ、ＮＴＣ）および陰性（Ｍ１、Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞を示し、代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。パネルＢは、ＭＴＡＰ－陽性（ＮＴＣ）およびＭＴＡＰ－枯渇（Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞が注入されたＣＤ－１ヌードマウスから得られるデータを示す。測定可能な異種移植片腫瘍が形成されたら、マウスはすべてのアミノ酸（完全）を含有する、またはシステインおよびシスチンが欠落しているが、他のすべてのアミノ酸を含有する（－Ｃｙｓ）食事および飲料水レジメンに移された。データは平均であり、バーはＳＥＭである。ＮＴＣ対照食ｎ＝８；ＮＴＣ－Ｃｙｓ食ｎ＝７、ＭＴＡＰ－ＫＯ２対照食ｎ＝９；ＭＴＡＰ－ＫＯ２－Ｃｙｓ ｎ＝１０。パネルＣは、ＭＴＡレベルについてＬＣ－ＭＳ分析を施した異種移植片腫瘍および血清から抽出された代謝産物を示す。データは平均であり、バーは、ＳＤ、両側独立Ｔ－検定である。ＮＴＣ ｎ＝１６；ＭＴＡＰ ＫＯ ｎ＝１９。図４０のパネルＢおよびパネルＣを除くすべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーは、ＳＤを示す。ＬＣ－ＭＳ分析は、ＭＴＡＰ欠失が、メチオニンサルベージ（ｍ＋１メチオニンにより表される）を防止し、細胞内蓄積およびＭＴＡの流出を引き起こしたことを確認した。内因性ＭＴＡＰ欠失を有する細胞系と同様に、図１８のパネルＢは、ＡＭＤ１阻害剤を用いた細胞の処置は、システイン飢餓に応答して細胞生存を復元したことを示す。
【0231】
[0276]ｉｎ ｖｉｔｒｏ観察がｉｎ ｖｉｖｏに転換できるかどうかをテストするために、非標的対照およびＭＴＡＰ－欠失ＨＣＴ１１６細胞を用いて異種移植片実験が行われた。図１８のパネルＣは、ｉｎ ｖｉｖｏのＮＴＣ－およびＭＴＡＰ－枯渇細胞のシステイン制限に対する応答は、著しく異なっていたことを示す。図４０のパネルＢは、ＭＴＡＰ－陽性（ＮＴＣ）およびＭＴＡＰ－枯渇（Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞が注入されたＣＤ－１ヌードマウスから得られるデータを示す。ＭＴＡＰ－発現ＮＴＣ細胞は、一般的に、システイン飢餓に応答して増加した腫瘍成長を示したが、ＭＴＡＰ－欠失細胞は、ＮＴＣ細胞と比較して減少した腫瘍体積を呈示した。ＭＴＡレベルのＬＣ－ＭＳ分析は、ＭＴＡＰ－欠失腫瘍組織は、ＮＴＣ腫瘍に対して、ＭＴＡでより著しく高かったことを確認した。図４０のパネルＣは、ＭＴＡレベルについてＬＣ－ＭＳ分析を施した異種移植片腫瘍および血清から抽出された代謝産物を示す。ＭＴＡＰ－欠失腫瘍組織におけるＭＴＡの増加は、より高い血清ＭＴＡに転換しなかった。結果は、血清ではなく腫瘍生検組織におけるＭＴＡレベルの分析は、ＭＴＡＰ欠失を検出する生存能力のあるバイオマーカーであり得ることを示唆する。
【0232】
[0277]図４１のパネルＡは、空ベクター（クローンＭ２．ＥＶ１およびＭ２．ＥＶ２）またはＭＴＡＰ発現ではプラスミド（クローンＭ２．ＭＸ１およびＭ２．ＭＸ２）で安定的にトランスフェクトされたＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９（Ｍ２）によりＭＴＡＰが欠失したＨＣＴ１１６細胞を示す。ＭＴＡＰ発現は、ウエスタンブロットにより有効であった。細胞は、すべてのアミノ酸を含有する完全培地（Ｃｔｒ）、またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）適合培地中で増殖させた。２０時間後、細胞は固定され、染色され、計数された。パネルＢは、ｘＣＴ阻害剤および１０μＭフェロトーシス誘発物質エラスチンを有する、または有さない、完全培地中で１８時間増殖させたＨＣＴ１１６クローンを示す。パネルＣは、完全培地（メチオニンに代わる０．２ｍＭ １３Ｃ５
１５Ｎ１－メチオニンを有する）中で３０時間増殖させたＭＴＡＰ－発現（ＮＴＣおよびＭ２．ＭＸ２）およびＭＴＡＰ－欠失（Ｍ２およびＭ２．ＥＶ１）ＨＣＴ１１６細胞を示す。代謝産物は、抽出され、ＬＣ－ＭＳにより分析された。ＭＴＡＰ－欠失ＨＣＴ１１６細胞におけるＭＴＡＰの安定な再発現は、システイン飢餓、およびシステイン－取込み阻害剤エラスタチン（システムｘＣＴ阻害剤およびフェロトーシス誘導剤）を用いた処置中に細胞が生存する能力を復元した。ＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞（内因性ＭＴＡＰ欠失）では、ＭＴＡＰの過剰発現は、感受性を回復せず（示されていない）、これは、長期間ＭＴＡＰ欠失をきたした細胞におけるＭＴＡＰ発現に急激に再適応することができなくなる適応プロセスが発生することを示唆する。ＬＣ－ＭＳ分析は、ＭＴＡＰ－欠失ＨＣＴ１１６細胞におけるＭＴＡＰ再発現が、ＭＴＡ流出を防止したこと、およびこれらの細胞がＭＴＡからメチオニンをサルベージする能力を復元したことを確認した。
【0233】
[0278]図４２のパネルＡは、２４ウェルプレートにおける完全培地中である範囲の細胞密度で播種したＭＴＡＰ－発現（ＮＴＣおよびＭ２．ＭＸ２）およびＭＴＡＰ－欠失（Ｍ２）ＨＣＴ１１６細胞を示す。２４時間後、細胞は、ＰＢＳで洗浄され、培地は、システインが欠落している培地またはすべてのアミノ酸を含有する完全培地に変化させた。２０時間後、細胞は固定され、染色され、計数された。細胞集密度は一貫して、飢餓への応答に対する影響を示した。まばらに播種された細胞は、集密細胞より感受性であったが、ＭＴＡＰ欠失／復元の効果は、幅広い細胞密度全体で一貫していた。
【0234】
[0279]図１９は、パネルＡは、ＡＭＤ１発現におけるＭＴＡＰ喪失の効果を実証するウエスタンブロットを示す。ウエスタンブロットは、ＭＴＡＰ喪失が、ＡＭＤ１発現の増加を３倍促進した一方、ＭＴＡＰ復元は、ＡＭＤ１を基底レベルに減少させたことを示す。図１９のパネルＢは、ポリアミン経路活性の増大を示すメチオニン－依存性ｄｃ－ＳＡＭ標識の劇的な増加につながるＡＭＤ１アップレギュレートのＬＣ－ＭＳ分析を示す。図１９のパネルＣは、ＭＴＡＰ－欠失ＨＣＴ１１６細胞が、ＭＴＡＰ－発現細胞に対する、システイン飢餓に応答する細胞ＲＯＳレベル上昇の増大を示したことを示す。
【0235】
[0280]図１９のパネルＤは、ＭＴＡＰ－欠失細胞が、ｄｃ－ＳＡＭ標識の増加に従って、ポリアミンであるスペルミジンにおいて実質的により高いメチオニン依存性標識を有していたこと、およびＴｓＰ中間体の標識において一貫した差はなかったことを示すＬＣ－ＭＳ分析を示す。
【0236】
[0281]ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸ阻害剤ならびにＭＴＯＢ補充を使用して、ポリアミン合成と、ＭＴＡＰ－欠失／復元ＨＣＴ１１６細胞におけるシステイン飢餓への感受性との間の関係をさらに評価した。図２０横列Ａは、ＳＭＯＸ阻害剤、ＰＡＯＸ阻害剤およびＭＴＯＢ補充を用いたポリアミン代謝の阻害は、ＭＴＡＰ発現細胞に対してほとんど影響を示さなかったが、システイン飢餓中にＭＴＡＰ－欠失細胞における細胞生存を回復したことを示す。メチオニンの中止の、ＭＴＡＰ－欠失対復元ＨＣＴ１１６細胞に対する効果における劇的な相違が観察された。図２０の横列Ｂは、メチオニンの存在が、システイン飢餓中にＭＴＡＰ発現細胞に有利であり、メチオニンのレベルが一層低いと、ＭＴＡＰ欠失細胞の生存能力を阻害することを示す。
【0237】
[0282]膠芽腫（ＧＢＭ）は、比較的高頻度でＭＴＡＰ欠失を有する。ＧＢＭ細胞系のパネルは、システイン飢餓への感受性についてテストされた。図４３のパネルＡは、完全培地（Ｃｔｒ）またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間増殖させたＧＢＭ細胞系を示す。パネルＢは、対照（Ｃｔｒ）またはシステインが欠落している（－Ｃｙｓ）培地中で４８時間または７２時間増殖させた乳がん細胞系ＭＤＡ－ＭＢ－２３１（高度に感受性）およびＭＤＡ－ＭＢ－４６８（耐性）を示す。この時点での細胞が固定および計数された。同一手段で処置された他の細胞が、さらに４８時間完全培地に再度供給されて（Ｃｔｒ＋４８時間、－Ｃｙｓ ４８時間）から、細胞が計数された。ウエスタンブロットを除くすべてのデータは、ｎ＝３の生物学的反復の平均である。エラーバーはＳＤである。ＭＴＡＰ－欠失系は、ＡＭＤ１の最高の発現を示し、飢餓への最も感受性であった。細胞がシステイン飢餓からリカバーする、また、システイン飢餓後に増殖する能力もテストされた。システイン飢餓に高度に感受性のＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、生存またはリカバーしなかった一方、より耐性のＭＤＡ－ＭＢ－４６８細胞は、生存および増殖することが可能であった。
【0238】
[0283]ｉｎ ｖｉｖｏデータは、食事療法システイン制限が、腫瘍遺伝子型に応じて腫瘍形成を促進し得る、または減少させ得ることを示唆する。システイン取込み（シスチンとして）は、重要な代謝前駆体グルタメートの著しい流出を引き起こし得、このプロセスは、代謝フレキシビリティを減少させ得る。
【0239】
実施例１０：結果の考察
[0284]外因性システインは、ある範囲の乳がん、結腸直腸がんおよび膵臓がん細胞系にわたって、最大増殖の補助に重要であった。がん細胞のサブセットは、システイン飢餓への敏感性があることを見出し、これは、ブドウ糖の完全な中止より一層有害になり得る。テストされた細胞のパネルでは、ＴｓＰ酵素発現は、システイン飢餓中の生存する能力と相関しなかった。ＣＢＳまたはＣＳＥの発現が比較的低い細胞さえ、酵素基質ホモシステインおよびシスタチオニンの補充により飢餓に誘導される細胞死から回復した。さらに、ＣＢＳおよびＣＳＥ発現が高く、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成に適する細胞、例えばＭＩＡＰａＣａ－２は、システイン飢餓に応答した細胞死に至った。
[0284]外因性システインは、ある範囲の乳がん、結腸直腸がんおよび膵臓がん細胞系にわたって、最大増殖の補助に重要であった。がん細胞のサブセットは、システイン飢餓への敏感性があることを見出し、これは、ブドウ糖の完全な中止より一層有害になり得る。テストされた細胞のパネルでは、ＴｓＰ酵素発現は、システイン飢餓中の生存する能力と相関しなかった。ＣＢＳまたはＣＳＥの発現が比較的低い細胞さえ、酵素基質ホモシステインおよびシスタチオニンの補充により飢餓に誘導される細胞死から回復した。さらに、ＣＢＳおよびＣＳＥ発現が高く、ｄｅ ｎｏｖｏシステイン合成に適する細胞、例えばＭＩＡＰａＣａ－２は、システイン飢餓に応答した細胞死に至った。
【0240】
[0285]ホモシステインおよびシスタチオニンが細胞をシステイン飢餓から回復させる能力を考慮すると、これらの代謝産物に対して最適な前駆体である過剰なメチオニンは、回復させることが不可能であった。この結果に基づき、最初の仮説は、メチオニンは代替代謝経路に転用され、これがＴｓＰと効率的に拮抗するというものであった。ポリアミン合成経路は、メチオニンに由来する前駆体ｄｃ－ＳＡＭを使用して、ポリアミンであるスペルミンおよびスペルミジンを生成する。ポリアミンは真核細胞の増殖に必須であり、そこで、また、膜および微小管において、ミリモル濃度で存在し、ＤＮＡ安定化、遺伝子発現の規制を含む種々の役割を有する。アップレギュレートされたポリアミン合成は、がん細胞で観察され得、古典的ｍｙｃ－標的ＯＤＣ１によりプトレシンの形成が触媒される。炭素－１３標識メチオニンの動態は、ＬＣ－ＭＡ分析を使用してトレースされ、炭素－１３－標識メチオニンは、ポリアミン経路に直ちに進入し、ポリアミンおよびメチオニンに由来する副産物ＭＴＡを標識すると見出された。一方、ＭＴＡは、メチオニンサルベージ経路を介してメチオニンにリサイクルされ得、ＬＣ－ＭＳ分析は、ある細胞が著しいＭＴＡ流出を呈示することを明らかにし、これにより、メチオニンサルベージがないことが例証される。
【0241】
[0286]染色体上で腫瘍抑制遺伝子ｐ１６と同じ場所に位置する、ＭＴＡ代謝酵素であるＭＴＡＰの遺伝子の欠失は、がんにおいて一般の事象であり、「バイスタンダー／パッセンジャー」遺伝子の欠失として発生する。ＭＴＡＰの喪失は、メチオニンリサイクルを防止し、これは、新たなメチオニンの一定供給が、ＭＴＡＰ欠失細胞におけるポリアミン合成に進入するのに必要とされることを意味する。外因性ＭＴＡのレベル（ポリアミン合成およびＭＴＡＰステータスを組み合わせた測定）は、システイン飢餓への感受性と強く相関した。１３Ｃ３
１５Ｎ１－セリンを用いた標識実験は、飢餓に感受性のＭＴＡＰ－欠失細胞が、より耐性のＭＴＡＰ陽性細胞より低いシステイン合成を必ずしも示さなかったことを示した。ＭＴＡＰ－欠失細胞をシステイン飢餓から回復させるポリアミン経路の阻害は、メチオニンに由来する前駆体の、ＴｓＰへの進入を増加させなかった。
【0242】
[0287]ＬＣ－ＭＳ分析は、ＭＴＡＰ－欠失細胞が、ポリアミン合成前駆体ｄｃ－ＳＡＭにおいて、はるかに高いメチオニンに由来する標識と、より高いポリアミン定常状態レベルおよびより高いメチオニンに由来するポリアミンの標識を有していたことを明らかにした。ポリアミンであるスペルミジンまたはスペルミンの補充は、細胞のＲＯＳレベルを増加させ、細胞をシステイン飢餓に劇的に増感させた。ポリアミン合成の阻害またはポリアミン内部変換の阻害（ＳＭＯＸおよびＰＡＯＸによる媒介）は、細胞のＲＯＳレベルを減少させ、ＭＴＡＰ－欠失細胞をシステイン飢餓から回復させた。ポリアミン代謝の循環性の性質（図１３）を考慮すると、上昇したｄｃ－ＳＡＭレベルに関連するＳＭＯＸ／ＰＡＯＸに依存性のＲＯＳ生成の可能性は、理論上きわめて高いと思われる。
【0243】
[0288]メチオニンの中止は、細胞を増感させずにシステイン飢餓から回復させた。本明細書に開示されるデータは、がん細胞に、システイン合成に利用できる、メチオニンに由来する前駆体が不足していること、およびＴｓＰ活性は、細胞にシステインの中止で生存させるのに重要であることを示す。本明細書に開示されるデータも、ポリアミン代謝が、これらの因子を無効にし得ること、およびがん細胞を、細胞死へと誘導されるシステイン飢餓に急激に増感させることを示す。
【0244】
[0289]細胞がＴｓＰ酵素発現、およびシステイン飢餓に応答する活性を効率的にアップレギュレートする能力は、細胞生存を改善し得る。データは、ＴｓＰ酵素発現が、システイン飢餓に応答してアップレギュレートされたこと、およびＴｓＰ活性の直接的阻害が、細胞をシステイン飢餓に増感させたことを示す。しかし、ポリアミン代謝の影響は、ここでテストされる細胞系での急激なシステイン飢餓の感受性の判定において、ＴｓＰ酵素発現に対して優性であった。とりわけ、ＴｓＰ酵素の低発現およびＭＴＡＰ－欠失の両方を呈示するＭＤＡ－ＭＢ－２３１細胞は、最高のシステイン飢餓への感受性を示した。
【0245】
[0290]この開示は、乳がん、結腸直腸がんおよび膵がんを含むがん細胞系のパネルにおいて、ＴｓＰ酵素発現が、システイン飢餓に最も感受性の細胞がどれか予測しなかったことを示す。外因性ホモシステインは、細胞をシステイン飢餓から回復させることが可能であったが、メチオニンは不可能であった。本開示のデータは、メチオニンのＴｓＰへの進入が制限されたが、このポリアミン代謝が、がん細胞が急激なシステイン飢餓への感受性を呈示し得る理由を説明できることを示す。図２１は、がん細胞のシステイン飢餓への敏感性に影響を与えるプロセスを例証する。
【0246】
[0291]メチオニンの他の動態は、ポリアミン合成のための利用である。この開示は、がん細胞により取り入れられるメチオニンの多くは、ポリアミン合成経路に進入し、これは、スペルミジンおよびスペルミンの合成を通して、ＳＡＭを消費し、５－メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）を生成することを示す。ＭＴＡの細胞の流出量（ＭＴＡＰ欠失の代謝の結果）と、システイン飢餓感受性との間に強い相関が観察された。ＭＴＡＰ欠失（がんで頻繁に発生）を示す細胞は、ポリアミン経路活性を増大させた。詳述される代謝の分析は、上昇したポリアミン代謝が、システイン飢餓中に、ＴｓＰと無関係に代謝不安定性になり得ることを明らかにした。
【0247】
[0292]この開示は、システイン合成のための酵素の発現も、主要な前駆体であるメチオニンの可用性も、システイン飢餓への感受性と関連しなかったことを示す。メチオニンに由来する代謝産物メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）の流出量と、システイン飢餓感受性との間の強い相関が観察された。ＭＴＡ流出は、メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ、がんにおいて頻繁に欠失する）の遺伝子の欠失に由来した。ＭＴＡＰ喪失は、ポリアミン代謝をアップレギュレートし、これは、システインの中止と同時に生じ、ＲＯＳの上昇および細胞生存の防止を促進した。
【0248】
実施例１１：システインが少なく、メチオニンが多い食事療法製品
[0293]表１は、シスチン、セリンおよびグリシンを欠くアミノ酸混合物を含む製剤１を示す。
[0293]表１は、シスチン、セリンおよびグリシンを欠くアミノ酸混合物を含む製剤１を示す。
【0249】
【表1】
【0250】
[0294]表２は、セリン、グリシンおよびシステインを欠き、通常のメチオニンレベルを有するアミノ酸混合物を含む製剤２を示す。
【0251】
【表2】
【0252】
[0295]表３は、セリン、グリシンおよびシステインを欠き、高いメチオニンレベルを有するアミノ酸混合物を含む製剤３を示す。
【0253】
【表3】
【0254】
[0296]表４は、システインを欠き、通常のメチオニンレベルを有するアミノ酸混合物を含む製剤４を示す。
【0255】
【表4】
【0256】
[0297]表５は、システインを欠き、高いメチオニンレベルを有するアミノ酸混合物を含む製剤５を示す。
【0257】
【表5】
【0258】
実施例１２：がんを処置する放射線療法の使用
[0298]がんを伴う第１の対象は、がんを処置する短期間の放射線療法で処置される。第１の対象は、実質的にシステインを欠き、少なくとも１種のメチオニンサプリメントおよびポリアミン、前駆体、または類似物を有する２日間の食事を受けてから（すなわち－２日）、放射線療法処置をスタートする。アミノ酸－枯渇食は、処置の２日前にスタートして、処置の４日後までの合計１０日投与される（すなわち、－２日目から８日目まで）。第１の対象は、１日５Ｇｙで５日間処置される。第１の対象は、８日目の後で、または放射線処置後４日で通常の習慣的食事へ戻す。第１の対象が、放射線療法後に化学療法で処置される場合、第１の対象は、化学療法を通じてサイクル化した食事を受ける。サイクルの食事は、第１の対象に、化学療法処置期間を通じて、５日間のアミノ酸－枯渇食（例えば月曜日～金曜日）、続いて２日間の習慣的食事（例えば土曜日、日曜日）の切り替えを受けさせる。表６は、がんを処置する短期間の放射線療法を示す。
[0298]がんを伴う第１の対象は、がんを処置する短期間の放射線療法で処置される。第１の対象は、実質的にシステインを欠き、少なくとも１種のメチオニンサプリメントおよびポリアミン、前駆体、または類似物を有する２日間の食事を受けてから（すなわち－２日）、放射線療法処置をスタートする。アミノ酸－枯渇食は、処置の２日前にスタートして、処置の４日後までの合計１０日投与される（すなわち、－２日目から８日目まで）。第１の対象は、１日５Ｇｙで５日間処置される。第１の対象は、８日目の後で、または放射線処置後４日で通常の習慣的食事へ戻す。第１の対象が、放射線療法後に化学療法で処置される場合、第１の対象は、化学療法を通じてサイクル化した食事を受ける。サイクルの食事は、第１の対象に、化学療法処置期間を通じて、５日間のアミノ酸－枯渇食（例えば月曜日～金曜日）、続いて２日間の習慣的食事（例えば土曜日、日曜日）の切り替えを受けさせる。表６は、がんを処置する短期間の放射線療法を示す。
【0259】
【表6】
【0260】
[0299]がんを伴う第２の対象は、がんを処置する長期間の放射線療法で処置される。第２の対象は、実質的にシステインを欠き、少なくとも１種のメチオニンサプリメントおよびポリアミン、前駆体、または類似物を有する２日間の食事を受けてから（すなわち－２日）、放射線療法処置をスタートする。アミノ酸－枯渇食は、処置の２日前にスタートして、処置期間までの合計７日間投与される（すなわち、－２日目から４日目まで）。第２の対象は、１日２Ｇｙで５日間処置される。第２の対象は、追加ラウンドの放射線療法をスタートする前の２日間、通常の習慣的食事へ戻す。後続の放射線療法サイクルは、５日間のアミノ－酸枯渇食と５日間の２Ｇｙの放射線、続いて２日間の習慣的食事を投与する。サイクルは、必要に応じて繰り返される。
【0261】
[0300]第２の対象が、放射線療法後の化学療法で処置される場合、第２の対象は、化学療法を通してサイクル化した食事を受ける。サイクルの食事は、第２の対象に、化学療法処置期間を通じて、交互の５日間のアミノ酸－枯渇食（例えば月曜日～金曜日）、続いて２日間の習慣的食事（例えば土曜日、日曜日）を受けさせる。表７は、がんを処置する長期間の放射線療法処置を示す。
【0262】
【表7-1】
【0263】
【表7-2】
【0264】
実施形態
[0301]以下の非限定的実施形態は、本開示の実例を提供するものであるが、本開示の範囲を限定するものではない。
[0301]以下の非限定的実施形態は、本開示の実例を提供するものであるが、本開示の範囲を限定するものではない。
【0265】
[0302]実施形態１．がんを処置することを必要とする対象において、それを処置するための方法であって、方法は、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品は、メチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）含み、対象は、がんのためのがん療法を受けており、食事療法製品を対象に投与することは、がん療法を受けているが、食事療法製品を受けていない同等の対象におけるがん療法の有効性と比較して、対象におけるがん療法の有効性を少なくとも約１０％は高める。
【0266】
[0303]実施形態２．がんが、乳がんである、実施形態１の方法
[0304]実施形態３．がんが、結腸直腸がんである、実施形態１の方法。
[0305]実施形態４．がんが、膵がんである、実施形態１の方法。
[0304]実施形態３．がんが、結腸直腸がんである、実施形態１の方法。
[0305]実施形態４．がんが、膵がんである、実施形態１の方法。
【0267】
[0306]実施形態５．がんが、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有している、実施形態１～４のいずれか１つの方法。
[0307]実施形態６．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態１～４のいずれか１つの方法。
[0307]実施形態６．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態１～４のいずれか１つの方法。
【0268】
[0308]実施形態７．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態１～４のいずれか１つの方法。
[0309]実施形態８．投与が経口である、実施形態１～７のいずれか１つの方法。
[0309]実施形態８．投与が経口である、実施形態１～７のいずれか１つの方法。
【0269】
[0310]実施形態９．食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１～８のいずれか１つの方法。
[0311]実施形態１０．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１～９のいずれか１つの方法。
[0311]実施形態１０．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１～９のいずれか１つの方法。
【0270】
[0312]実施形態１１．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態１～１０のいずれか１つの方法。
[0313]実施形態１２．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンをさらに含む、実施形態１～１１のいずれか１つの方法。
[0313]実施形態１２．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンをさらに含む、実施形態１～１１のいずれか１つの方法。
【0271】
[0314]実施形態１３．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態１～１２のいずれか１つの方法。
[0315]実施形態１４．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンをさらに含む、実施形態１～１３のいずれか１つの方法。
[0315]実施形態１４．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンをさらに含む、実施形態１～１３のいずれか１つの方法。
【0272】
[0316]実施形態１５．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態１～１４のいずれか１つの方法。
[0317]実施形態１６．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１～１０のいずれか１つの方法。
[0317]実施形態１６．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１～１０のいずれか１つの方法。
【0273】
[0318]実施形態１７．食事療法製品が、システインまたはシスチン、セリン、およびグリシンを欠く、実施形態１～１６のいずれか１つの方法。
[0319]実施形態１８．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態１～１７のいずれか１つの方法。
[0319]実施形態１８．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態１～１７のいずれか１つの方法。
【0274】
[0320]実施形態１９．食事療法製品が、アルギニンをさらに欠く、実施形態１～１８のいずれか１つの方法。
[0321]実施形態２０．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態１～１９のいずれか１つの方法。
[0321]実施形態２０．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態１～１９のいずれか１つの方法。
【0275】
[0322]実施形態２１．食事療法製品が、メチオニンの約７．５％（ｗ／ｗ）超を含む、実施形態１～２０のいずれか１つの方法。
[0323]実施形態２２．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態１～２１のいずれか１つの方法。
[0323]実施形態２２．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態１～２１のいずれか１つの方法。
【0276】
[0324]実施形態２３．がん療法が、放射線療法である、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
[0325]実施形態２４．がん療法が、化学療法である、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
[0325]実施形態２４．がん療法が、化学療法である、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
【0277】
[0326]実施形態２５．がん療法が、免疫療法である、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
[0327]実施形態２６．がん療法が、抗がん剤の対象への投与を含む、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
[0327]実施形態２６．がん療法が、抗がん剤の対象への投与を含む、実施形態１～２２のいずれか１つの方法。
【0278】
[0328]実施形態２７．抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、実施形態２６の方法。
[0329]実施形態２８．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態２７の方法。
[0329]実施形態２８．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態２７の方法。
【0279】
[0330]実施形態２９．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミジンである、実施形態２７の方法。
[0331]実施形態３０．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態２７の方法
[0332]実施形態３１．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態２７の方法。
[0331]実施形態３０．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態２７の方法
[0332]実施形態３１．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態２７の方法。
【0280】
[0333]実施形態３２．生体試料が腫瘍生検組織である、実施形態３１の方法。
[0334]実施形態３３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態３１の方法。
[0334]実施形態３３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態３１の方法。
【0281】
[0335]実施形態３４．メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）阻害剤を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３３のいずれか１つの方法。
[0336]実施形態３５．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３４のいずれか１つの方法。
[0336]実施形態３５．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３４のいずれか１つの方法。
【0282】
[0337]実施形態３６．低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、実施形態１～３５のいずれか１つの方法。
【0283】
[0338]実施形態３７．少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３６のいずれか１つの方法。
[0339]実施形態３８．低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システインまたは低シスチン食、および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を対象に提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３７のいずれか１つの方法。
[0339]実施形態３８．低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システインまたは低シスチン食、および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を対象に提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態１～３７のいずれか１つの方法。
【0284】
[0340]実施形態３９．最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンならびにメチオニン、ヒスチジン、イソロイシン、ロイシン、リシン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、およびバリンからなる群から選択される少なくとも１種の必須アミノ酸を少なくとも約７．５％（ｗ／ｗ）含まない同等の食事療法製品の治療有効量と比較して、食事療法製品の治療有効量が、がんの処置の場合に低い、実施形態１～３８のいずれか１つの方法。
【0285】
[0341]実施形態４０．食事療法製品の治療有効量が、食事療法製品を投与し、がん療法を施行しないものと比較して、その方法の場合少ない、実施形態１の方法。
[0342]実施形態４１．食事療法製品の治療有効量が、食事療法製品を投与し、ポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与しないものと比較して、その方法の場合少ない、実施形態４０の方法。
[0342]実施形態４１．食事療法製品の治療有効量が、食事療法製品を投与し、ポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与しないものと比較して、その方法の場合少ない、実施形態４０の方法。
【0286】
[0343]実施形態４２．食事療法製品の治療有効量が、食事療法製品を投与し、がん療法を施行しないものと比較して、その方法の場合少なくとも約１５％少ない、実施形態４０の方法である。
【0287】
[0344]実施形態４３．食事療法製品の治療有効量が、食事療法製品を投与し、がん療法を施行しないものと比較して、その方法の場合少なくとも約３０％少ない、実施形態４０の方法である。
【0288】
[0345]実施形態４４．がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、本方法は、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、がんは、ダウンレギュレートされた５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現を有しており、食事療法製品の対象への投与は、食事療法製品を投与されていない同等の対象におけるがん細胞増殖の減少と比較して、がん細胞増殖を少なくとも約２０％は低下させる。
【0289】
[0346]実施形態４５．がんが、乳がんである、実施形態４４の方法。
[0347]実施形態４６．がんが、結腸直腸がんである、実施形態４４の方法。
[0348]実施形態４７．がんが、膵がんである、実施形態４４の方法。
[0347]実施形態４６．がんが、結腸直腸がんである、実施形態４４の方法。
[0348]実施形態４７．がんが、膵がんである、実施形態４４の方法。
【0290】
[0349]実施形態４８．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態４４～４７のいずれか１つの方法。
[0350]実施形態４９．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態４４～４７のいずれか１つの方法。
[0350]実施形態４９．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態４４～４７のいずれか１つの方法。
【0291】
[0351]実施形態５０．投与が経口である、実施形態４４～４９のいずれか１つの方法。
[0352]実施形態５１．食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、実施形態４４～５０のいずれか１つの方法。
[0352]実施形態５１．食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、実施形態４４～５０のいずれか１つの方法。
【0292】
[0353]実施形態５２．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態４４～５１のいずれか１つの方法。
[0354]実施形態５３．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態４４～５２のいずれか１つの方法。
[0354]実施形態５３．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態４４～５２のいずれか１つの方法。
【0293】
[0355]実施形態５４．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンをさらに含む、実施形態４４～５３のいずれか１つの方法。
[0356]実施形態５５．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態４４～５４のいずれか１つの方法。
[0356]実施形態５５．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態４４～５４のいずれか１つの方法。
【0294】
[0357]実施形態５６．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンをさらに含む、実施形態４４～５５のいずれか１つの方法。
[0358]実施形態５７．食事療法製品が、セリンを欠く、実施形態４４～５６のいずれか１つの方法。
[0358]実施形態５７．食事療法製品が、セリンを欠く、実施形態４４～５６のいずれか１つの方法。
【0295】
[0359]実施形態５８．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態４４～５７のいずれか１つの方法。
【0296】
[0360]実施形態５９．食事療法製品が、システインまたはシスチン、セリン、およびグリシンを欠く、実施形態４４～５８のいずれか１つの方法。
[0361]実施形態６０．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態４４～５９のいずれか１つの方法。
[0361]実施形態６０．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態４４～５９のいずれか１つの方法。
【0297】
[0362]実施形態６１．食事療法製品が、アルギニンをさらに欠く、実施形態４４～６０のいずれか１つの方法。
[0363]実施形態６２．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態４４～６１のいずれか１つの方法。
[0363]実施形態６２．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態４４～６１のいずれか１つの方法。
【0298】
[0364]実施形態６３．食事療法製品が、約７．５％（ｗ／ｗ）超のメチオニンをさらに含む、実施形態４４～６２のいずれか１つの方法。
[0365]実施形態６４．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態４４～６３のいずれか１つの方法。
[0365]実施形態６４．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態４４～６３のいずれか１つの方法。
【0299】
[0366]実施形態６５．食事療法製品を投与することによって、がん細胞増殖を少なくとも約３０％は減少させる、実施形態４４～６４のいずれか１つの方法。
[0367]実施形態６６．がん療法を施すステップをさらに含む、実施形態４４～６５のいずれか１つの方法。
[0367]実施形態６６．がん療法を施すステップをさらに含む、実施形態４４～６５のいずれか１つの方法。
【0300】
[0368]実施形態６７．がん療法が、放射線療法である、実施形態６６の方法。
[0369]実施形態６８．がん療法が、化学療法である、実施形態６６の方法。
[0370]実施形態６９．がん療法が、免疫療法である、実施形態６６の方法。
[0369]実施形態６８．がん療法が、化学療法である、実施形態６６の方法。
[0370]実施形態６９．がん療法が、免疫療法である、実施形態６６の方法。
【0301】
[0371]実施形態７０．がん療法が、抗がん剤である、実施形態６６の方法。
[0372]実施形態７１．抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、実施形態７０の方法。
[0372]実施形態７１．抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、実施形態７０の方法。
【0302】
[0373]実施形態７２．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態７１の方法。
[0374]実施形態７３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミジンである、実施形態７１の方法。
[0374]実施形態７３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミジンである、実施形態７１の方法。
【0303】
[0375]実施形態７４．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態７１の方法
[0376]実施形態７５．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態７１の方法。
[0376]実施形態７５．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態７１の方法。
【0304】
[0377]実施形態７６．生体試料が腫瘍生検組織である、実施形態７５の方法。
[0378]実施形態７７．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態７５の方法。
[0378]実施形態７７．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態７５の方法。
【0305】
[0379]実施形態７８．メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）阻害剤を投与するステップをさらに含む、実施形態４４～７７のいずれか１つの方法。
[0380]実施形態７９．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態４４～７８のいずれか１つの方法。
[0380]実施形態７９．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態４４～７８のいずれか１つの方法。
【0306】
[0381]実施形態８０．低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、実施形態４４～７９のいずれか１つの方法。
【0307】
[0382]実施形態８１．少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態４４～８０のいずれか１つの方法。
[0383]実施形態８２．低システイン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システインまたは低シスチン食、および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を対象に投与するステップをさらに含む、実施形態４４～８１のいずれか１つの方法。
[0383]実施形態８２．低システイン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システインまたは低シスチン食、および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を対象に投与するステップをさらに含む、実施形態４４～８１のいずれか１つの方法。
【0308】
[0384]実施形態８３．ある状態の処置を必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法は、ａ）対象から生体試料中の代謝物のレベルを決定するステップと；ｂ）治療有効量の食事療法製品を、代謝物のレベルに少なくとも基づいて対象に投与するステップを含み、食事療法製品は、グリシン、セリン、アラニン、プロリン、グルタミン、グルタミン酸、アスパラギン、アスパラギン酸、システイン、チロシン、およびアルギニンからなる群から選択される少なくとも１種の非必須アミノ酸を最大約０．５％（ｗ／ｗ）含む。
【0309】
[0385]実施形態８４．状態ががんである、実施形態８３の方法。
[0386]実施形態８５．がんが、乳がんである、実施形態８４の方法。
[0387]実施形態８６．がんが、結腸直腸がんである、実施形態８４の方法。
[0386]実施形態８５．がんが、乳がんである、実施形態８４の方法。
[0387]実施形態８６．がんが、結腸直腸がんである、実施形態８４の方法。
【0310】
[0388]実施形態８７．がんが、膵がんである、実施形態８４の方法。
[0389]実施形態８８．がんが、５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現のダウンレギュレートを示す、実施形態８４～８７のいずれか１つの方法。
[0389]実施形態８８．がんが、５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現のダウンレギュレートを示す、実施形態８４～８７のいずれか１つの方法。
【0311】
[0390]実施形態８９．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態８４～８８のいずれか１つの方法。
[0391]実施形態９０．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態８４～８９のいずれか１つの方法。
[0391]実施形態９０．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態８４～８９のいずれか１つの方法。
【0312】
[0392]実施形態９１．代謝物が、メチルチオアデノシン（ＭＴＡ）である、実施形態８３～９０のいずれか１つの方法。
[0393]実施形態９２．代謝物が、ポリアミン、その前駆物質、または類似体である、実施形態８３～９０のいずれか１つの方法。
[0393]実施形態９２．代謝物が、ポリアミン、その前駆物質、または類似体である、実施形態８３～９０のいずれか１つの方法。
【0313】
[0394]実施形態９３．生体試料が、腫瘍である、実施形態８３～９２のいずれか１つの方法。
[0395]実施形態９４．腫瘍が、固形腫瘍である、実施形態９３の方法。
[0395]実施形態９４．腫瘍が、固形腫瘍である、実施形態９３の方法。
【0314】
[0396]実施形態９５．腫瘍が、液体腫瘍である、実施形態９３の方法。
[0397]実施形態９６．生体試料が、血液である、実施形態８３～９２のいずれか１つの方法。
[0397]実施形態９６．生体試料が、血液である、実施形態８３～９２のいずれか１つの方法。
【0315】
[0398]実施形態９７．食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、実施形態８３～９６のいずれか１つの方法。
[0399]実施形態９８．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態９７の方法。
[0399]実施形態９８．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態９７の方法。
【0316】
[0400]実施形態９９．生体試料が、ＭＴＡＰ－欠乏腫瘍であり、代謝物のレベルが、ＭＴＡＰ－欠乏腫瘍でない生体試料中の代謝物のレベルよりも少なくとも約２－倍高い、実施形態８３～９８のいずれか１つの方法。
【0317】
[0401]実施形態１００．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含む、実施形態８３～９９のいずれか１つの方法。
[0402]実施形態１０１．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態８３～１００のいずれか１つの方法。
[0402]実施形態１０１．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態８３～１００のいずれか１つの方法。
【0318】
[0403]実施形態１０２．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態８３～１０１のいずれか１つの方法。
[0404]実施形態１０３．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態８３～１０２のいずれか１つの方法。
[0404]実施形態１０３．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態８３～１０２のいずれか１つの方法。
【0319】
[0405]実施形態１０４．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンを含む、実施形態８３～１０３のいずれか１つの方法。
[0406]実施形態１０５．食事療法製品が、セリンを欠く、実施形態８３～１０４のいずれか１つの方法。
[0406]実施形態１０５．食事療法製品が、セリンを欠く、実施形態８３～１０４のいずれか１つの方法。
【0320】
[0407]実施形態１０６．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態８３～１０５のいずれか１つの方法。
【0321】
[0408]実施形態１０７．食事療法製品が、システインまたはシスチン、セリン、およびグリシンを欠く、実施形態８３～１０６のいずれか１つの方法。
[0409]実施形態１０８．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態８３～１０７のいずれか１つの方法。
[0409]実施形態１０８．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態８３～１０７のいずれか１つの方法。
【0322】
[0410]実施形態１０９．食事療法製品が、アルギニンをさらに欠く、実施形態８３～１０７のいずれか１つの方法。
[0411]実施形態１１０．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態８３～１０９のいずれか１つの方法。
[0411]実施形態１１０．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態８３～１０９のいずれか１つの方法。
【0323】
[0412]実施形態１１１．食事療法製品が、約７．５％（ｗ／ｗ）超のメチオニンをさらに含む、実施形態８３～１１０のいずれか１つの方法。
[0413]実施形態１１２．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態８３～１１１のいずれか１つの方法。
[0413]実施形態１１２．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態８３～１１１のいずれか１つの方法。
【0324】
[0414]実施形態１１３．がん療法を施すステップをさらに含む、実施形態８３～１１２のいずれか１つの方法。
[0415]実施形態１１４．がん療法が、放射線療法である、実施形態１１３の方法。
[0415]実施形態１１４．がん療法が、放射線療法である、実施形態１１３の方法。
【0325】
[0416]実施形態１１５．がん療法が、化学療法である、実施形態１１３の方法。
[0417]実施形態１１６．がん療法が、免疫療法である、実施形態１１３の方法。
[0418]実施形態１１７．がん療法が、抗がん剤である、実施形態１１３の方法。
[0417]実施形態１１６．がん療法が、免疫療法である、実施形態１１３の方法。
[0418]実施形態１１７．がん療法が、抗がん剤である、実施形態１１３の方法。
【0326】
[0419]実施形態１１８．抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、実施形態１１７の方法。
[0420]実施形態１１９．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態１１８の方法。
[0420]実施形態１１９．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態１１８の方法。
【0327】
[0421]実施形態１２０．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミジンである、実施形態１１８の方法。
[0422]実施形態１２１．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態１１８の方法。
[0422]実施形態１２１．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態１１８の方法。
【0328】
[0423]実施形態１２２．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態１１８の方法。
【0329】
[0424]実施形態１２３．生体試料が腫瘍生検組織である、実施形態１２２の方法。
[0425]実施形態１２４．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態１２２の方法。
[0425]実施形態１２４．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態１２２の方法。
【0330】
[0426]実施形態１２５．メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）阻害剤を投与するステップをさらに含む、実施形態８３～１２４のいずれか１つの方法。
[0427]実施形態１２６．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態８３～１２５のいずれか１つの方法。
[0427]実施形態１２６．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態８３～１２５のいずれか１つの方法。
【0331】
[0428]実施形態１２７．低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、実施形態８３～１２６のいずれか１つの方法。
【0332】
[0429]実施形態１２８．少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態８３～１２７のいずれか１つの方法。
【0333】
[0430]実施形態１２９．低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システインまたは低シスチン食、ならびに少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を対象に投与するステップをさらに含む、実施形態８３～１２８のいずれか１つの方法。
【0334】
[0431]実施形態１３０．がんを処置することを必要とする対象において、それを処置する方法であって、方法は、治療有効量の食事療法製品を対象に投与するステップを含み、食事療法製品は、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチンを含み、食事療法製品の治療有効量は、ａ）グルコースを欠く食事療法製品の治療有効量；ｂ）セリンおよびグリシンを欠く食事療法製品の治療有効量；ならびにｃ）リシンを欠く食事療法製品の治療有効量のうちの少なくとも１つと比較して、がんの処置の場合に低い。
【0335】
[0432]実施形態１３１．がんが、乳がんである、実施形態１３０の方法。
[0433]実施形態１３２．がんが、結腸直腸がんである、実施形態１３０の方法。
[0434]実施形態１３３．がんが、膵がんである、実施形態１３０の方法。
[0433]実施形態１３２．がんが、結腸直腸がんである、実施形態１３０の方法。
[0434]実施形態１３３．がんが、膵がんである、実施形態１３０の方法。
【0336】
[0435]実施形態１３４．がんが、５－メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）発現のダウンレギュレートを示す、実施形態１３０～１３３のいずれか１つの方法。
[0436]実施形態１３５．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態１３０～１３４のいずれか１つの方法。
[0436]実施形態１３５．がんが、アップレギュレートされたアデノシルメチオニン脱炭酸酵素１（ＡＭＤ１）発現を有している、実施形態１３０～１３４のいずれか１つの方法。
【0337】
[0437]実施形態１３６．がんが、調節不全なポリアミン代謝を示す、実施形態１３０～１３５のいずれか１つの方法。
[0438]実施形態１３７．投与が経口である、実施形態１３０～１３６のいずれか１つの方法。
[0438]実施形態１３７．投与が経口である、実施形態１３０～１３６のいずれか１つの方法。
【0338】
[0439]実施形態１３８．食事療法製品の治療有効量が、約０．５ｇ／ｋｇ／日～約１ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１３０～１３７のいずれか１つの方法。
[0440]実施形態１３９．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１３０～１３８のいずれか１つの方法。
[0440]実施形態１３９．食事療法製品の治療有効量が、約０．８ｇ／ｋｇ／日である、実施形態１３０～１３８のいずれか１つの方法。
【0339】
[0441]実施形態１４０．食事療法製品が、システインまたはシスチンを欠く、実施形態１３０～１３９のいずれか１つの方法。
[0442]実施形態１４１．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１３０～１４０のいずれか１つの方法。
[0442]実施形態１４１．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１３０～１４０のいずれか１つの方法。
【0340】
[0443]実施形態１４２．食事療法製品が、グリシンを欠く、実施形態１３０～１４１のいずれか１つの方法。
[0444]実施形態１４３．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンを含む、実施形態１３０～１４２のいずれか１つの方法。
[0444]実施形態１４３．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリンを含む、実施形態１３０～１４２のいずれか１つの方法。
【0341】
[0445]実施形態１４４．食事療法製品が、セリンを欠く、実施形態１３０～１４３のいずれか１つの方法。
[0446]実施形態１４５．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１３０～１４４のいずれか１つの方法。
[0446]実施形態１４５．食事療法製品が、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のシステインまたはシスチン、最大約０．５％（ｗ／ｗ）のセリン、および最大約０．５％（ｗ／ｗ）のグリシンを含む、実施形態１３０～１４４のいずれか１つの方法。
【0342】
[0447]実施形態１４６．食事療法製品が、システインまたはシスチン、セリン、およびグリシンを欠く、実施形態１３０～１４５のいずれか１つの方法。
[0448]実施形態１４７．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態１３０～１４６のいずれか１つの方法。
[0448]実施形態１４７．食事療法製品が、チロシンをさらに欠く、実施形態１３０～１４６のいずれか１つの方法。
【0343】
[0449]実施形態１４８．食事療法製品が、アルギニンをさらに欠く、実施形態１３０～１４７のいずれか１つの方法。
[0450]実施形態１４９．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態１３０～１４８のいずれか１つの方法。
[0450]実施形態１４９．食事療法製品が、チロシンおよびアルギニンをさらに欠く、実施形態１３０～１４８のいずれか１つの方法。
【0344】
[0451]実施形態１５０．食事療法製品が、約７．５％（ｗ／ｗ）超のメチオニンをさらに含む、実施形態１３０～１４９のいずれか１つの方法。
[0452]実施形態１５１．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態１３０～１５０のいずれか１つの方法。
[0452]実施形態１５１．食事療法製品が、約１％～約１０％（ｗ／ｗ）のポリアミン、その前駆物質、または類似体をさらに含む、実施形態１３０～１５０のいずれか１つの方法。
【0345】
[0453]実施形態１５２．がん療法を施すステップをさらに含む、実施形態１３０～１５１のいずれか１つの方法。
[0454]実施形態１５３．がん療法が、放射線療法である、実施形態１５１の方法。
[0454]実施形態１５３．がん療法が、放射線療法である、実施形態１５１の方法。
【0346】
[0455]実施形態１５４．がん療法が、化学療法である、実施形態１５１の方法。
[0456]実施形態１５５．がん療法が、免疫療法である、実施形態１５１の方法。
[0457]実施形態１５６．がん療法が、抗がん剤の投与を含む、実施形態１５１の方法。
[0456]実施形態１５５．がん療法が、免疫療法である、実施形態１５１の方法。
[0457]実施形態１５６．がん療法が、抗がん剤の投与を含む、実施形態１５１の方法。
【0347】
[0458]実施形態１５７．抗がん剤が、ポリアミン、またはその前駆物質、もしくは類似体である、実施形態１５５の方法。
[0459]実施形態１５８．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態１５６の方法。
[0459]実施形態１５８．ポリアミン、その前駆物質、または類似体が、プトレシンである、実施形態１５６の方法。
【0348】
[0460]実施形態１５９．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミジンである、実施形態１５６の方法。
[0461]実施形態１６０．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態１５６の方法
[0462]実施形態１６１．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態１３０の方法。
[0461]実施形態１６０．ポリアミン、その前駆物質、または類似体がスペルミンである、実施形態１５６の方法
[0462]実施形態１６１．食事療法製品の治療有効量の投与およびポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量を投与することが、食事療法製品を投与されているがポリアミン、その前駆物質、または類似体を投与されていない同等の対象から得られた同等の生体試料中のがん細胞増殖の減少と比較して、対象から得られた生体試料中のがん細胞増殖の大きな減少をもたらす、実施形態１３０の方法。
【0349】
[0463]実施形態１６２．生体試料が腫瘍生検組織である、実施形態１５７の方法。
[0464]実施形態１６３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態１５７の方法。
[0464]実施形態１６３．ポリアミン、その前駆物質、または類似体の治療有効量が、約１００ｍｇ～約５０００ｍｇである、実施形態１５７の方法。
【0350】
[0465]実施形態１６４．メチルチオアデノシンホスホリラーゼ（ＭＴＡＰ）阻害剤を投与するステップをさらに含む、実施形態１３０～１６３のいずれか１つの方法。
[0466]実施形態１６５．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態１３０～１６４のいずれか１つの方法。
[0466]実施形態１６５．約１００ｍｇ～約２０００ｍｇのメチオニンまたはその塩を投与するステップをさらに含む、実施形態１３０～１６４のいずれか１つの方法。
【0351】
[0467]実施形態１６６．低システインまたは低シスチン食を対象に投与するステップをさらに含み、低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、実施形態１３０～１６５のいずれか１つの方法。
【0352】
[0468]実施形態１６７．少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を投与するステップをさらに含む、実施形態１３０～１６６のいずれか１つの方法。
【0353】
[0469]実施形態１６８．低システインまたは低シスチン食が、最大約５００ｍｇ／日のシステインもしくはシスチンまたはそれらの塩を提供する、低システイン食、および少なくとも約５００ｍｇ／日のメチオニンまたはその塩を提供する食事を対象に投与するステップをさらに含む、実施形態１３０～１６７のいずれか１つの方法。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【図37】
【図38】
【図39】
【図40】
【図41】
【図42】
【図43】
【配列表】
【国際調査報告】