特表 2023-529599 植物を刺激するための化合物及び方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-07-11

(54)【発明の名称】植物を刺激するための化合物及び方法

(51)【国際特許分類】

   A01N 43/16 20060101AFI20230704BHJP

   A01N 25/02 20060101ALI20230704BHJP

   A01P 21/00 20060101ALI20230704BHJP

   A01N 25/00 20060101ALI20230704BHJP

   A01G 7/06 20060101ALI20230704BHJP

【ＦＩ】

A01N43/16 C

A01N25/02

A01P21/00

A01N25/00 102

A01G7/06 A

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2022574108

(86)(22)【出願日】2021-06-03

(85)【翻訳文提出日】2023-01-31

(86)【国際出願番号】 US2021035770

(87)【国際公開番号】W WO2021247915

(87)【国際公開日】2021-12-09

(31)【優先権主張番号】63/034,228

(32)【優先日】2020-06-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】516122405

【氏名又は名称】サウンド アグリカルチャー カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】110000659

【氏名又は名称】弁理士法人広江アソシエイツ特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】バイヤー，トラヴィス エス．

(72)【発明者】

【氏名】シュワルツ，アリソン

(72)【発明者】

【氏名】イバラ，クリスチャン

(72)【発明者】

【氏名】チャダ，シャイラジャ

【テーマコード（参考）】

2B022

4H011

【Ｆターム（参考）】

2B022EA01

4H011AB03

4H011BB09

4H011DA16

4H011DD03

(57)【要約】

植物の成長を増大させるための化合物又はその塩、及びその組成物が本明細書に開示される。本明細書に開示される化合物、塩又は組成物を使用して植物栄養素のレベルを増加させる方法も開示される。本明細書に記載の化合物、塩又は組成物を含むキットも本明細書に開示される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

液体組成物であって、
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化1】

であって、
式中、
Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであり、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化2】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、あるいは、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成し、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨである、化合物又はその塩と、
（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体と、
を含み、
（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、
（ｉｉ）前記培養の７２時間後に、生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株から液体培養物の試料を採取すること、及び、
（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて前記液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、
を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量を生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株と接触させた後の、その接触前に生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、
（ｂ）（ｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、
（ｉｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、前記培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、
（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光がレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によるより高い窒素固定度に対応する、発光レベルを定量すること、
を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量をレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株と接触させた後の、その接触前にレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、
（ｃ）それらの任意の組み合わせ、
を生じさせるのに少なくとも部分的に有効な前記化合物又はその塩の量を含む、液体組成物。

【請求項2】

液体組成物であって、
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化3】

であって、
式中、
Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであり、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化4】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、あるいは、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成し、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨである、化合物又はその塩と、
（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体と、
を含み、
前記化合物又はその塩が、前記組成物中に約０．１μＭから３０μＭの濃度で存在する、液体組成物。

【請求項3】

液体組成物であって、
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化5】

であって、
式中、
Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであり、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化6】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、あるいは、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成し、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨである、化合物又はその塩と、
（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体と、
を含み、
（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きた微生物を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、
（ｉｉ）前記培養の７２時間後に、前記生きた微生物から液体培養物の試料を採取すること、及び、
（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて前記液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、
を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量を前記生きた微生物と接触させた後の、その接触前に前記生きた微生物によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、
（ｂ）（ｉ）前記生きた微生物を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、前記生きた微生物は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、
（ｉｉ）前記生きた微生物を、前記培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、
（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光が前記生きた微生物によるより高い窒素固定度に対応する、発光レベルを定量すること、を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量を前記生きた微生物と接触させた後の、その接触前に前記生きた微生物によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、
（ｃ）それらの任意の組み合わせ、
を生じさせるのに少なくとも部分的に有効である前記化合物又はその塩の量を含む、液体組成物。

【請求項4】

前記化合物又はその塩が約０．１μＭから約２０μＭの濃度で存在する、請求項１～３のいずれか一項に記載の液体組成物。

【請求項5】

前記希釈剤を含み、前記希釈剤が農業的に許容される、請求項１～４のいずれか一項に記載の液体組成物。

【請求項6】

前記希釈剤が植物油を含む、請求項５に記載の液体組成物。

【請求項7】

前記植物油が、ヒマワリ油、キャノーラ油、アボガド種子油、ブドウ種子油、アーモンド油、ココアバター、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、亜麻仁油、麻油、オリーブ油、パーム核油、ピーナッツ油、カボチャ種子油、米ぬか油、サフラワー油、ゴマ種子油、大豆油、クルミ油、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項６に記載の液体組成物。

【請求項8】

前記化合物又はその塩が、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、又はＩｄ：

【化7】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４が請求項１に定義される通りである、請求項１～７のいずれか一項に記載の液体組成物。

【請求項9】

前記化合物又はその塩が式Ｉａであり、

【化8】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項８に記載の液体組成物。

【請求項10】

前記化合物又はその塩が式Ｉｂであり、

【化9】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項８に記載の液体組成物。

【請求項11】

前記化合物又はその塩が、式Ｉｃ又はその塩である、請求項８に記載の液体組成物。

【請求項12】

前記化合物又はその塩が、

【化10】

の構造を有する式Ｉｄのものである、請求項８に記載の液体組成物。

【請求項13】

前記化合物又はその塩が、式ＩＩａ：

【化11】

であり、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４が、請求項１に定義される通りである、請求項１～７のいずれか一項に記載の液体組成物。

【請求項14】

前記化合物又はその塩が、

【化12】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項１３に記載の液体組成物。

【請求項15】

前記化合物又はその塩が式ＩＩＩａ：

【化13】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０が請求項１に定義される通りである、請求項１～７のいずれか一項に記載の液体組成物。

【請求項16】

前記化合物又はその塩が、

【化14】

又はその塩である、請求項１５に記載の液体組成物。

【請求項17】

前記生きた微生物が土壌中に存在する、請求項３に記載の液体組成物。

【請求項18】

前記生きた微生物が、細菌株、放線菌、真菌、原虫、又はそれらの任意の組み合わせである、請求項１７に記載の液体組成物。

【請求項19】

前記生きた微生物が、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アゾバクター（Ａｚｏｂａｃｔｅｒ）．シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ニトロバクター（Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属、クロストロジウム（Ｃｌｏｓｔｒｏｄｉｕｍ）属の細菌株、又はそれらの任意の組み合わせである、請求項１８に記載の液体組成物。

【請求項20】

前記生きた微生物が、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・バリイコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｖａｒｉｉｃｏｌａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項１７に記載の液体組成物。

【請求項21】

組成物を生きた微生物と接触させることを含む方法であって、前記組成物が、
（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化15】

であって、
式中、
Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであり、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化16】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、あるいは、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成し、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨである、化合物又はその塩と、
（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体と、
を含み、
前記接触させることが、
（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、
（ｉｉ）前記培養の７２時間後に、生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株から液体培養物の試料を採取すること、及び、
（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて前記液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、
を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量を生きた微生物と接触させた後の、その接触前に生きた微生物によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、
（ｂ）（ｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、
（ｉｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、前記培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、
（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光がレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によるより高い窒素固定度に対応する、発光レベルを定量すること、
を含むインビトロアッセイによって決定される、前記化合物又はその塩の量を生きた微生物と接触させた後の、その接触前に生きた微生物によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、
（ｃ）それらの任意の組み合わせ、
を生じさせるのに十分である、方法。

【請求項22】

前記希釈剤を含み、前記希釈剤が農業的に許容される、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記希釈剤が植物油を含む、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

前記植物油が、ヒマワリ油、キャノーラ油、アボガド種子油、ブドウ種子油、アーモンド油、ココアバター、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、亜麻仁油、麻油、オリーブ油、パーム核油、ピーナッツ油、カボチャ種子油、米ぬか油、サフラワー油、ゴマ種子油、大豆油、クルミ油、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記化合物又はその塩が、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、又はＩｄ：

【化17】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４が請求項２１に定義される通りである、請求項２１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

前記化合物又はその塩が式Ｉａであり、

【化18】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項２５に記載の方法。

【請求項27】

前記化合物又はその塩が式Ｉｂであり、

【化19】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項２５に記載の方法。

【請求項28】

前記化合物又はその塩が、式Ｉｃのもの又はその塩である、請求項２５に記載の方法。

【請求項29】

前記式Ｉｄの化合物が、

【化20】

又はその塩である、請求項２５に記載の方法。

【請求項30】

前記化合物又はその塩が、式ＩＩａ：

【化21】

であり、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４が、請求項２１に定義される通りである、請求項２１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記化合物又はその塩が、

【化22】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

前記化合物又はその塩が式ＩＩＩａ：

【化23】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０が請求項２１に定義される通りである、請求項２１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

前記化合物又はその塩が、

【化24】

又はその塩である、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記生きた微生物が土壌中に存在する、請求項２１～３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項35】

前記生きた微生物が、細菌株、放線菌、真菌、原虫、又はそれらの任意の組み合わせである、請求項３３に記載の方法。

【請求項36】

前記生きた微生物が、バチルス属、アゾバクター（Ａｚｏｂａｃｔｅｒ）．シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ニトロバクター（Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属、クロストロジウム（Ｃｌｏｓｔｒｏｄｉｕｍ）属の細菌株、又はそれらの任意の組み合わせである、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

前記生きた微生物が、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・バリイコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｖａｒｉｉｃｏｌａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される、請求項３５に記載の方法。

【請求項38】

前記接触させることが、２４時間の期間で少なくとも約１、２、３、４、５、又は６回行われる、請求項２１～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項39】

前記接触させることが、１週間に少なくとも約１、２、３、４、５、６、又は７回行われる、請求項２１～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項40】

植物の健康を改善する方法であって、生きた微生物を含む土壌中に存在する植物を請求項１～２０のいずれか一項に記載の液体組成物と接触させることを含み、前記接触させることが、同程度の時間成長し、前記組成物と接触していない同様の植物のバイオマス又は青味の量と比較して、前記植物のバイオマス又は青味の量を増加させるのに十分であり、それにより前記植物の健康を改善する方法。

【請求項41】

前記接触させることが、前記植物の葉を接触させることを含む、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記接触させることが、前記植物の茎を接触させることを含む、請求項４０に記載の方法。

【請求項43】

前記接触させることが、前記植物の根を接触させることを含む、請求項４０に記載の方法。

【請求項44】

前記接触させることが、前記同等の植物の青味の量と比較して、前記植物の青味の量をより長期間にわたって実質的に維持する、請求項４０に記載の方法。

【請求項45】

植物を作製する方法であって、
（ａ）植物種子を、式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの外因性化合物又はその塩：

【化25】

であって、
式中、
Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであり、
Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであり、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化26】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであり、あるいは、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成し、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、
Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨである、外因性化合物又はその塩と接触させること、及び、
（ｂ）前記植物種子を生きた微生物を含む土壌に植えることによって、植物を作製すること、を含む方法。

【請求項46】

前記接触させることが、前記組成物と接触せず、同等の時間成長した種子から生じた同様の植物のバイオマスに対して、前記植物のバイオマスを増加させるのに十分である、請求項４３に記載の方法。

【請求項47】

前記接触させることが、前記組成物と接触せず、同等の時間成長した種子から生じた同様の植物の青味の量に対して、前記植物の青味の量を増加させるのに十分である、請求項４５又は４６に記載の方法。

【請求項48】

前記化合物又はその塩が、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、又はＩｄ：

【化27】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４が請求項４５に定義される通りである、請求項４５～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

前記化合物又はその塩が式Ｉａであり、

【化28】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項４８に記載の方法。

【請求項50】

前記化合物又はその塩が式Ｉｂのものであり、

【化29】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項４８に記載の方法。

【請求項51】

前記化合物又はその塩が、式Ｉｃのもの又はその塩である、請求項４８に記載の方法。

【請求項52】

前記化合物又はその塩が、式Ｉｄ：

【化30】

である、請求項４８に記載の方法。

【請求項53】

前記化合物又はその塩が、式ＩＩａ：

【化31】

であり、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４が、請求項４５に定義される通りである、請求項４５～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項54】

前記化合物又はその塩が、

【化32】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択される、請求項５３に記載の方法。

【請求項55】

前記化合物又はその塩が式ＩＩＩａ：

【化33】

であり、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０が請求項４５に定義される通りである、請求項４５～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記化合物又はその塩が、

【化34】

又はその塩である、請求項５５に記載の方法。

【請求項57】

請求項１～２０のいずれか一項に記載の液体組成物を含む、単離された植物種子。

【請求項58】

容器中に請求項１～２０のいずれか一項に記載の液体組成物を含むキット。

【請求項59】

前記容器が、スプレーボトル、シリンジ、バイアル、又はバケットである、請求項５８に記載のキット。

【請求項60】

容器中に請求項５７に記載の単離された植物種子を含むキット。

【請求項61】

前記容器がパウチである、請求項６０に記載のキット。

【請求項62】

土壌、肥料、又はそれらの組み合わせをさらに含む、請求項５８～６１のいずれか一項に記載のキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２０年６月３日に出願された米国仮特許出願第６３／０３４，２２８号の利益を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0003】

【課題を解決するための手段】

【0004】

一態様では、（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化1】

であって、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化2】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい、化合物又はその塩と、（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体とを含み得る液体組成物が本明細書で開示され、ここで、液体組成物は、（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）菌株を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、（ｉｉ）上記培養の７２時間後に、生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株から液体培養物の試料を採取すること、及び、（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、を含み得るインビトロアッセイによって決定される、上記化合物又はその塩の量を生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株と接触させた後の、その接触前に生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、（ｂ）（ｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、（ｉｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光がレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によるより高い窒素固定度に対応し得る、発光レベルを定量すること、を含み得るインビトロアッセイによって決定される、上記化合物又はその塩の量をレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株と接触させた後の、その接触前にレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、（ｃ）それらの任意の組み合わせ、を少なくとも部分的に刺激することができる上記化合物又はその塩の量を含むことができる。

【0005】

別の態様では、（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化3】

であって、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化4】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい、化合物又はその塩と、（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体とを含み得る液体組成物が本明細書で開示され、ここで、上記化合物又はその塩は、上記組成物中に約０．１μＭから３０μＭの濃度で存在する。

【0006】

別の態様では、（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化5】

であって、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化6】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであり、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい、化合物又はその塩と、（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体とを含み得る液体組成物が本明細書で開示され、ここで、液体組成物は、（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きた微生物を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、（ｉｉ）上記培養の７２時間後に、生きた微生物から液体培養物の試料を採取すること、及び、（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、を含むインビトロアッセイによって決定される、上記化合物又はその塩の量を生きた微生物と接触させた後の、その接触前に生きた微生物によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、（ｂ）（ｉ）生きた微生物を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、生きた微生物は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、（ｉｉ）生きた微生物を、培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光が生きた微生物によるより高い窒素固定度に対応する、発光レベルを定量すること、を含み得るインビトロアッセイによって決定される、上記量の化合物又はその塩をレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株と接触させた後の、その接触前にレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、それらの任意の組み合わせ、を生じさせるのに少なくとも部分的に有効である上記化合物又はその塩の量を含む。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、約０．１μＭから約２０μＭの濃度で存在し得る。いくつかの実施形態では、組成物は希釈剤を含むことができる。いくつかの実施形態では、希釈剤は農業的に許容され得る。いくつかの実施形態では、希釈剤は植物油を含むことができる。いくつかの実施形態では、植物油は、ヒマワリ油、キャノーラ油、アボガド種子油、ブドウ種子油、アーモンド油、ココアバター、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、亜麻仁油、麻油、オリーブ油、パーム核油、ピーナッツ油、カボチャ種子油、米ぬか油、サフラワー油、ゴマ種子油、大豆油、クルミ油、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩を含む液体組成物は、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ、又はＩｄ：

【化7】

であり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉａのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化8】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｂのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化9】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｃのもの又はその塩であり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｄのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｄ：

【化10】

のものである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩａ：

【化11】

のものであり得、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化12】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩＩａ：

【化13】

のものであり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化14】

又はその塩のものであり得る。いくつかの実施形態では、生きた微生物は土壌中に存在する。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、細菌株、放線菌、真菌、原虫、又はそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アゾバクター（Ａｚｏｂａｃｔｅｒ）．シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ニトロバクター（Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属、クロストロジウム（Ｃｌｏｓｔｒｏｄｉｕｍ）属の細菌株、又はそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・バリイコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｖａｒｉｉｃｏｌａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0007】

組成物を生きた微生物と接触させることを含み得る方法も本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、組成物は、（ａ）式Ｉ、式ＩＩ、又は式ＩＩＩの化合物又はその塩：

【化15】

を含み得、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化16】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、あるいは、式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい、化合物又はその塩と、（ｂ）賦形剤、希釈剤又は担体とを含み得る液体組成物が本明細書で開示され、ここで、接触させることは、（ａ）（ｉ）６００ｎｍの光学密度（ＯＤ_６００）が０．０２の生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株を最終濃度約５０ｍＭのリン酸三カルシウムと共に培養すること、（ｉｉ）上記培養の７２時間後に、生きたバチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）細菌株から液体培養物の試料を採取すること、及び、（ｉｉｉ）マラカイトグリーン法を用いて液体培養物中のオルトリン酸塩のレベルを定量すること、を含み得るインビトロアッセイによって決定される、上記化合物又はその塩の量を生きた微生物と接触させた後の、その接触前に生きた微生物によって産生された可溶性オルトリン酸塩のレベルと比較した、少なくとも約２０％の可溶性オルトリン酸塩のレベル上昇、あるいは、（ｂ）（ｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、窒素を含まない培地中、０．０２のＯＤ_６００で好気的に培養することであって、レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株は、窒素固定に応答してより高いレベルの発光を生じるように構成されたルシフェラーゼレポータープラスミドで形質転換される、培養すること、（ｉｉ）レポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株を、培養の２４時間後にルシフェリンと接触させること、及び、（ｉｉｉ）ルミノメーターを使用して発光レベルを定量することであって、より高いレベルの発光がレポーター・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）細菌株によるより高い窒素固定度に対応する、発光レベルを定量すること、を含み得るインビトロアッセイによって決定される、上記化合物又はその塩の量を生きた微生物と接触させた後の、その接触前に生きた微生物によって産生される窒素固定のレベルと比較した、窒素固定のレベルの上昇、あるいは、（ｃ）それらの任意の組み合わせ、を生じさせるのに十分である。いくつかの実施形態では、組成物は希釈剤を含むことができる。いくつかの実施形態では、希釈剤は農業的に許容され得る。いくつかの実施形態では、希釈剤は植物油を含むことができる。いくつかの実施形態では、植物油は、ヒマワリ油、キャノーラ油、アボガド種子油、ブドウ種子油、アーモンド油、ココアバター、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、亜麻仁油、麻油、オリーブ油、パーム核油、ピーナッツ油、カボチャ種子油、米ぬか油、サフラワー油、ゴマ種子油、大豆油、クルミ油、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ又はＩｄ：

【化17】

であり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉａのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化18】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｂのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化19】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｃのもの又はその塩であり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｄのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｄ：

【化20】

のものである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩａ：

【化21】

のものであり得、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化22】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩＩａ：

【化23】

のものであり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化24】

又はその塩のものであり得る。いくつかの実施形態では、生きた微生物は土壌中に存在し得る。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、細菌株、放線菌、真菌、原虫、又はそれらの任意の組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アゾバクター（Ａｚｏｂａｃｔｅｒ）．シュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、ニトロバクター（Ｎｉｔｒｏｂａｃｔｅｒ）属、クロストロジウム（Ｃｌｏｓｔｒｏｄｉｕｍ）属の細菌株、又はそれらの任意の組み合わせである。いくつかの実施形態では、生きた微生物は、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・バリイコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｖａｒｉｉｃｏｌａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。いくつかの実施形態では、接触させることは、２４時間の期間に少なくとも約１、２、３、４、５、又は６回行うことができる。いくつかの実施形態では、接触させることは、１週間に少なくとも約１、２、３、４、５、６、又は７回行うことができる。

【0008】

植物の健康を改善する方法も本明細書に開示される。方法は、生きた微生物を含み得る土壌中に存在する植物を本明細書に記載の組成物と接触させることを含むことができる。いくつかの実施形態では、接触させることは、同程度の時間成長した本組成物と接触していない同様の植物のバイオマス又は青味の量と比較して、植物のバイオマス又は植物の青味の量を増加させるのに十分であり得、それによって植物の健康を改善する。いくつかの実施形態では、接触させることは、植物の葉に接触させることを含むことができる。いくつかの実施形態では、接触させることは、植物の茎を接触させることを含むことができる。いくつかの実施形態では、接触させることは、植物の根を接触させることを含むことができる。いくつかの実施形態では、接触させることは、同様の植物の青味の量と比較して、植物の青味の量をより長期間にわたって実質的に維持することができる。

【0009】

植物を作製する方法も本明細書に開示される。方法は、（ａ）植物種子を式Ｉ、式ＩＩ又は式ＩＩＩの外因性化合物又はその塩：

【化25】

と接触させることであって、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化26】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、あるいは、式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい、接触させること、及び、上記植物種子を生きた微生物を含む土壌に植えることによって植物を作製すること、を含み得る。いくつかの実施形態では、接触させることは、組成物と接触せず、同等の時間成長した種子から生じた同様の植物のバイオマスと比較して、植物のバイオマスを増加させるのに十分であり得る。いくつかの実施形態では、接触させることは、組成物と接触せず、同等の時間成長した種子から生じた同様の植物の青味の量に対して、植物の青味の量を増加させるのに十分であり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉａ、Ｉｂ、Ｉｃ又はＩｄ：

【化27】

であり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_２、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉａのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化28】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｂのものであり得る。いくつかの実施形態では、化合物は、

【化29】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｃのもの又はその塩であり得る。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式Ｉｄのものであり得る。いくつかの実施形態では、式Ｉｄの化合物は、

【化30】

又はその塩である。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩａ：

【化31】

のものであり得、
式中、Ｒ_２、Ｒ_４、Ｒ_６、Ｙ_３及びＹ_４は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化32】

又はこれらのいずれかの塩からなる群から選択することができる。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、式ＩＩＩａ：

【化33】

のものであり得、
式中、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８及びＵ_１０は先に定義される通りである。いくつかの実施形態では、化合物又はその塩は、

【化34】

又はその塩のものであり得る。

【0010】

本明細書に記載の液体組成物を含むことができる単離された植物種子も本明細書に開示される。

【0011】

本明細書に記載の液体組成物を容器内に含むことができるキットも本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、容器は、スプレーボトル、シリンジ、バイアル、又はバケットであり得る。

【0012】

本明細書に記載の単離された植物種子を容器内に含むことができるキットも本明細書に開示される。いくつかの実施形態では、容器はパウチであり得る。いくつかの実施形態では、キットは、土壌、肥料、又はそれらの組み合わせをさらに含むことができる。

【0013】

参照による組み込み
本明細書で言及されるすべての刊行物、特許、及び特許出願は、あたかも各個々の刊行物、特許、又は特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されているのと同程度に、参照により本明細書に組み込まれる。

【図面の簡単な説明】

【0014】

例示的な実施形態の新規な特徴は、添付の特許請求の範囲に詳細に記載されている。この特徴及び利点のより良い理解は、例示的な実施形態の原理が利用される例示的な実施形態を記載する以下の詳細な説明、及び添付の図面を参照することによって得られるであろう。

【0015】

【図1】本明細書に記載の例示的化合物を使用したモデル細菌株におけるリン酸塩可溶化の刺激を図示する。

【図2】本明細書に記載の例示的化合物を使用した土壌コンソーシアムにおけるリン酸塩可溶化の刺激を図示する。

【図3】細菌株を本明細書に記載の例示的化合物と接触させた後のレポーター細菌株における窒素固定遺伝子クラスターの誘導を図示する。

【図4】植物を本明細書に記載の化合物と接触させた後の植物バイオマスの増加を図示する。植物を接触させると、化合物と接触していない植物と比較して、植物バイオマスが有意に増加した。

【図5】バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）中の式Ｉｄによって誘導されるリン酸塩可溶化活性を示す。リン酸塩レベルを処理の４日後に測定した。２つ星印（＊＊）はｐ＜０．０１で有意差を示す。各上清から得られた３つの技術的複製物を試験した。オルトリン酸は、マラカイトグリーンホスフェート法を用いて測定した。

【図6】式ＩｄによるｎｉｆＨ_ｐｒｏ：：ルシフェラーゼバイオリポーターの活性化を示す。ｎｉｆＨ_ｐｒｏ：：ルシフェラーゼバイオリポーターは過剰対照で活性化され、自由生活性窒素固定細菌であるアゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）におけるニトロゲナーゼ遺伝子発現の増加を示した。

【図7】式Ｉｄによるリン酸塩可溶化の刺激を図示する。それは植物の葉にスプレーとして塗布した場合に刺激された。Ｂ７３トウモロコシ植物をＶ３成長段階まで成長させ、ポッティング土壌から取り出し、すすぎ、水道水に１．５週間入れて栄養ストレスを誘導した。植物に葉面処理（指先噴霧器を使用して３ｍＬ／植物）を施し、５０ｍＬのＮＢＲＩＰ増殖培地（［５３ｍＭ］Ｃａ_３（ＰＯ_４）_２）及び５００ｍｇの２ｍｍ粒子サイズの圃場土壌が入った２５０ｍＬバッフル付きフラスコに入れた。処理されたコーン及び滅菌された泡キャップを有するフラスコを、蛍光灯下、室温で１日間、１００ＲＰＭのオービタルシェーカーに置いた。オルトリン酸は、マラカイトグリーンホスフェート法を用いて測定した。

【発明を実施するための形態】

【0016】

発明の詳細な説明
植物に利用可能な栄養素（例えば、可溶性オルトリン酸塩又は窒素）の産生を増加させるための化合物、その塩、及び化合物又はその塩を含有する組成物が本明細書で開示される。植物に利用可能な栄養素の産生を増加させるために、本明細書に記載の化合物、塩又は組成物を使用する方法も本明細書に開示される。本明細書に記載の化合物、塩、又は組成物を容器に含むことができるキットも本明細書に開示される。

【0017】

いくつかの態様では、植物に栄養素を提供する土壌の能力を改善する標準化された方法のための可能な解決策である、農学的に重要な活性を増加させるための天然微生物への普遍的なシグナルとして機能し得る小分子化合物（例えば、５００ダルトン未満の分子量）が本明細書に開示される。場合によっては、小分子はフラボノイドであり得る。場合によっては、小分子は土壌改良剤として作用し、微生物のリン酸可溶化及び窒素固定活性を刺激し得る。場合によっては、小分子は、モデル微生物系及び土壌微生物の多様なコンソーシアムにおいて細菌のリン酸塩可溶化及び窒素固定の増加を引き起こし得る。場合によっては、小分子は、いくつかのメトリクスにわたって植物の成長を改善することができる。場合によっては、小分子は、植物に有益であることが知られている微生物活性を増強し、植物の健康を改善するための土壌微生物叢の化学的リプログラミングに関する手段となり得る。

【0018】

場合によっては、オルトリン酸塩の量は、本明細書に記載の化合物、塩又は製剤の添加の有無にかかわらず、レポーター細菌株（バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）など）の液体培養物中で決定することができる。７２時間で、オルトリン酸塩の平均濃度は、化合物、塩又は製剤との接触により、化合物、塩又は製剤と接触しなかった対照培養物と比較して有意に増加した。

【0019】

場合によっては、窒素固定の量は、本明細書に記載の化合物、塩又は製剤の添加の有無にかかわらず、レポーター細菌株の液体培養物中で決定することができる。レポーター細菌株は、ルシフェリンと接触すると、窒素固定の量に比例し得る発光を生じ得るルシフェラーゼレポーター遺伝子を含み得る。２４時間で、窒素固定量は、化合物、塩又は製剤と接触させることにより、化合物、塩又は製剤と接触させなかった対照培養物と比較して有意に増加し得る。

【0020】

場合によっては、本明細書に開示される化合物、組成物、方法又はキットは、土壌に結合した栄養素を放出して植物の成長に利用可能にし、接種活性並びに内因性土壌微生物の活性を増強することができる。このような植物栄養の向上は、より高い生産力をもたらす。

【0021】

場合によっては、本明細書に開示される化合物、組成物、方法又はキットは、栄養素（窒素及びリン）を必要とするシグナル伝達化合物を土壌微生物に放出するように植物を強化することができる。樹枝状菌根菌（ＡＭＦ）及びリン酸可溶化微生物（ＰＳＭ）は、これらのシグナルを感知し、リン酸可溶化及び根の共生を増加させることができる。その結果、窒素及びリンが土壌から遊離し、植物が取り込めるようになる。

【0022】

場合によっては、本明細書に開示される化合物、組成物、方法又はキットは、フラボノイドに構造的に類似し得る。場合によっては、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットは、微生物の非存在下で植物に影響を及ぼさない可能性がある。

【0023】

場合によっては、合成生物学、ハイスループットスクリーニング、及びビッグデータ分析を使用して分子入力を迅速に同定及び最適化して収量ギャップを縮める、農業のための創薬アプローチが本明細書に開示される。本明細書に開示される研究分野は、光合成、シュート構造、水捕捉及び効率、栄養素の取り込み、並びに根構造を含む。トウモロコシ、ダイズ、及び穀類などのブロードエーカー作物、並びにトマト及びレタスなどの特殊作物に関する独立した圃場試験及び内部圃場試験の両方の４シーズンにあっては、データは、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットが効果的で信頼性の高い収量増幅剤であり、気候変動に強い作物を生産することを示す。

【0024】

場合によっては、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットは、トウモロコシ、ダイズ及びコムギなどのブロードエーカー作物が、（本明細書中の化合物、組成物、方法又はキットの助けのない）対照植物が以前はアクセスできなかった栄養素にアクセスすることを可能にすることができる。場合によっては、本明細書に開示される化合物、組成物、方法又はキットは、収量性能を向上させるだけでなく、より健康的な植物及びより大きな高品質の作物、例えば、トウモロコシをもたらす。アイオワ州バッキンガムのトウモロコシ圃場試験は、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットが窒素欠乏の損傷作用を軽減し、健康な植物成長及び穂の成長を促進するのに役立つことを示した。植物の窒素含有量は、組織試料を用いて定量することができる。窒素を施用しない植物の標準的な組織試料試験では、本化合物、組成物、方法又はキットは、より高い窒素含有量をもたらし得る。同じ効果は、タッセリング期のトウモロコシの大規模ストリップ試験にわたるドローン画像において見ることができる。例えば、本明細書に記載の化合物、塩又は製剤で処理された区画は、処理されたストリップにわたってより健康的な植物を示し得る。例えば、栄養ストレスを受けた基質上の小麦を用いた実験室試験は、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットで処理された植物が、対照植物が利用できない栄養素にアクセスすることができることを示す。栄養ストレスにさらされたときに成長する植物の能力は、活発な発芽及び出芽を支援する。

【0025】

場合によっては、本明細書の化合物、組成物、方法又はキットを組み込むことにより、収率の増加に加えて、収穫時におけるより大きな農産物の割合が高くなる。

【0026】

定義

【0027】

別段の定義がない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。特に明記しない限り、本明細書で使用又は企図される技術は、標準的な方法である。材料、方法及び実施例は例示にすぎず、限定するものではない。

【0028】

１つ以上の実施形態の詳細は、添付の図面、特許請求の範囲、及び本明細書の説明に記載されている。本明細書に開示及び企図される本発明の実施形態の他の特徴、目的、及び利点は、明示的に除外されない限り、任意の他の実施形態と組合わせることができる。

【0029】

例えば「含む（ｃｏｎｔａｉｎ）」、「含む（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などのオープンな用語は、含むことを意味する場合がある。

【0030】

本明細書で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈が明確に別段の指示をしない限り、複数の言及を含み得る。

【0031】

別段の指示がない限り、本明細書のいくつかの例は、数値範囲を意図する。数値範囲が提供される場合、別段の指示がない限り、その範囲は範囲の終点を含むことができる。別段の指示がない限り、数値範囲は、あたかも明示的に書き出されているかのように、その中のすべての値及び部分範囲を含むことができる。

【0032】

参照数値に関する「約」という用語は、その値に対してプラスマイナス１０％の値の範囲を含むことができる。例えば、「約１０」という量は、９から１１の量を含み、参照数として９、１０、及び１１を含む。参照数値に関する「約」という用語はまた、その値に対してプラスマイナス１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、又は１％の値の範囲を含むことができる。

【0033】

「化合物」という用語は、本明細書に開示される一般式によって包含される化合物、それらの一般式の任意の亜属、及びそれらの一般式又は亜一般式内の任意の特定の化合物を指す場合がある。化合物は、それらの化学構造及び／又は化学名のいずれかによって同定される特定の種、亜属又はより大きな属であり得る。さらに、化合物はまた、本明細書に記載されるそのような種、亜属又は属のいずれかの置換又は修飾も含む。化学構造と化学名が矛盾する場合、化学構造が化合物の正体を決定し得る。化合物は、１つ以上のキラル中心及び／又は二重結合を含むことができ、したがって、立体異性体、異性体、エナンチオマー又はジアステレオマーとして存在することができる。したがって、本明細書の範囲内の化学構造は、立体異性的な不純物が混じっていない形態（例えば、幾何学的な不純物が混じっていない、エナンチオマー的な不純物が混じっていない、又はジアステレオマー的な不純物が混じっていない）及び、鏡像異性体及び立体異性体の混合物を含む、例示された化合物の全ての可能な鏡像異性体及び立体異性体を包含する。さらに、化合物の部分構造を示す場合、アスタリスクは分子の残りの部分構造との結合点を示す。エナンチオマーの混合物及び立体異性体の混合物は、当業者に周知の分離技術又はキラル合成技術を使用して、そのエナンチオマー成分又は立体異性体成分に分割することができる。化合物は、化合物の任意の塩形態又は溶媒和物形態を含むことができる。化合物は、化合物の任意の誘導体を含むことができる。

【0034】

「誘導体」という用語は、「類似体」という用語と互換的に使用することができる。化合物Ａの１、２、３、４、又は５個の原子が別の原子又は官能基（例えば、アミノ、ハロ、置換若しくは非置換アルキル、置換若しくは非置換アリール、置換若しくは非置換ヘテロアルキル、置換若しくは非置換アリールアルキル、置換若しくは非置換ヘテロアリール、置換若しくは非置換ヘテロアリールアルキル、置換若しくは非置換シクロアルキル、又は置換若しくは非置換ヘテロシクロアルキル）で置換されて化合物Ｂを形成する場合、化合物Ａは化合物Ｂの誘導体又は類似体であり得る。「誘導体」という用語はまた、別のものと構造的に類似しているが、組成がわずかに異なる化学化合物を指し得る（１個の原子が異なる元素の原子で置換されているか、又は特定の官能基が存在する場合のように）。

【0035】

「単離された」という用語は、混合物、例えば、土壌から単離された形態、または実質的に精製された形態、例えば、水以外のすべての成分またはすべての活性成分の８０％以上の高い含有量を指す場合がある。

【0036】

「溶媒和物」という用語は、化合物の活性及び／又は特性の１つ以上を保持し、かつ、望ましくないものではない溶媒和物を含み得るが、これに限定されない。溶媒和物の例としては、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、酢酸エチル、酢酸、エタノールアミン、又はそれらの組合わせと組合わせた化合物が挙げられるが、これらに限定されない。

【0037】

「塩」という用語は、遊離酸及び遊離塩基の活性及び特性の１つ以上を保持し、かつ、望ましくないものではない塩を含み得るが、これらに限定されない。塩の例示的な例としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸水素塩、リン酸二水素塩、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物、臭化物、ヨウ化物、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソブチレート、カプロン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオレート、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベレート、セバケート、フマレート、マレイン酸塩、ブチン－１，４－ジオエート、ヘキシン－１，６－ジオエート、安息香酸塩、クロロベンゾエート、メチルベンゾエート、ジニトロベンゾエート、ヒドロキシベンゾエート、メトキシベンゾエート、フタレート、スルホネート、キシレンスルホネート、フェニルアセタート、フェニルプロピオネート、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、ｙ－ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン－１－スルホン酸塩、ナフタレン－２－スルホン酸塩、及びマンデル酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。

【0038】

別段の指示がない限り、化学構造は、その化学構造を有する任意の化合物を指す場合がある。

【0039】

別段の指示がない限り、本明細書の製剤は粉末状であり得る。

【0040】

別段の指示がない限り、本明細書の粉末製剤は、製剤の重量基準で、約０重量％から約１５重量％、例えば、０～１０重量％、０～５重量％、又は０～１重量％の量の水を含有し得、又は、約１重量％、２重量％、３重量％、４重量％、５重量％、６重量％、７重量％、８重量％、９重量％、１０重量％、１１重量％、１２重量％、１３重量％、１４重量％、１５重量％、２０重量％、２５重量％、３０重量％、３５重量％、４０重量％、４５重量％、５０重量％、５５重量％、６０重量％、６５重量％、７０重量％、７５重量％、８０重量％、８５重量％、９０重量％、又は９９重量％の水を含有し得る。

【0041】

別段の指示がない限り、本明細書中に開示又は例示される構造中に立体中心が存在するときはいつでも、立体中心は、それぞれの場合においてＲ又はＳであり得る。

【0042】

別段の指示がない限り、本明細書中の分子構造の一部として使用される場合、記号

【化35】

があるときはいつでも、単結合を指すことができる。

【0043】

「アミノ」という用語は、孤立電子対を持つ塩基性窒素原子を含む官能基を指す場合がある。例えば、アミノは、ラジカル

【化36】

を含むことができ、ここで、各Ｒ’は、独立して、Ｈ、ハロ、アルキル、アリール、ヘテロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル又はヘテロシクロアルキルである。

【0044】

「ハロ」又は「ハロゲン」という用語は、フッ素、塩素、臭素若しくはヨウ素又はそのラジカルを指す場合がある。

【0045】

「アルキル」という用語は、親アルカン、アルケン又はアルキンの単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される飽和又は不飽和、分岐、直鎖又は環状の一価炭化水素基を指す場合がある。典型的なアルキル基としては、メチル；エチル、例えば、エタニル、エテニル、エチニル；プロピル、例えば、プロパン－１－イル、プロパン－２－イル、シクロプロパン－１－イル、プロパ－１－エン－１－イル、プロパ－１－エン－２－イル、プロパ－２－エン－１－イル（アリル）、シクロプロパ－１－エン－１－イル；シクロプロパ－２－エン－１－イル、プロパ－１－イン－１－イル、プロパ－２－イン－１－イル；ブチル、例えば、ブタン－１－イル、ブタン－２－イル、２－メチル－プロパン－１－イル、２－メチル－プロパン－２－イル、シクロブタン－１－イル、ブタ－１－エン－１－イル、ブタ－１－エン－２－イル、２－メチル－プロパ－１－エン－１－イル、ブタ－２－エン－１－イル、ブタ－２－エン－２－イル、ブタ－１，３－ジエン－１－イル、ブタ－１，３－ジエン－２－イル、シクロブタ－１－エン－１－イル、シクロブタ－１－エン－３－イル、シクロブタ－１，３－ジエン－１－イル、ブタ－１－イン－１－イル、ブタ－１－イン－３－イル、ブタ－３－イン－１－イル；などが挙げられるが、これに限定されない。

【0046】

「アリール」という用語は、親芳香環系の単一の炭素原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価芳香族炭化水素基を指す場合がある。典型的なアリール基としては、アセアントリレン、アセナフチレン、アセフェナントリレン、アントラセン、アズレン、ベンゼン、クリセン、コロネン、フルオランテン、フルオレン、ヘキサセン、ヘキサフェン、ヘキサレン、ａｓ－インダセン、ｓ－インダセン、インダン、インデン、ナフタレン、オクタセン、オクタフェン、オクタレン、オバレン、ペンタ－２，４－ジエン、ペンタセン、ペンタレン、ペンタフェン、ペリレン、フェナレン、フェナントレン、ピセン、プレイアデン、ピレン、ピラントレン、ルビセン、トリフェニレン、トリナフタレンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の場合において、アリール基は、６個から２０個の炭素原子を含む。

【0047】

「ヘテロアルキル、ヘテロアルカニル、ヘテロアルケニル、ヘテロアルキニル」という用語は、それぞれ、１個以上の炭素原子（及び任意の関連する水素原子）がそれぞれ独立して同じ又は異なるヘテロ原子基で置き換えられている、アルキル、アルカニル、アルケニル及びアルキニル基を指す。典型的なヘテロ原子基としては、限定するものではないが、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｏ－Ｏ’、－Ｓ－Ｓ－、－Ｏ－Ｓ－、－ＮＲ’－、＝Ｎ－Ｎ＝、－Ｎ＝Ｎ－、－Ｎ＝Ｎ－ＮＲ’－、－ＰＨ－、－Ｐ（Ｏ）_２－、－Ｏ－Ｐ（Ｏ）_２－、－Ｓ（Ｏ）－、－Ｓ（Ｏ）_２－、－ＳｎＨ_２－などが挙げられ、式中、Ｒ’は、水素、アルキル、置換アルキル、シクロアルキル、置換シクロアルキル、アリール又は置換アリールである。

【0048】

「ヘテロアリール」という用語は、親ヘテロ芳香族環系の単一の原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価のヘテロ芳香族基を指す場合がある。典型的なヘテロアリール基としては、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β－カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の場合において、ヘテロアリール基は、５～２０員のヘテロアリールであり、他の場合においては、５～１０員のヘテロアリールである。ある特定の場合において、ヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンから誘導されるものである。

【0049】

「アリールアルキル」という用語は、炭素原子、典型的には末端又はｓｐ^３炭素原子に結合した水素原子の１つがアリール基で置き換えられている非環式アルキル基を指す場合がある。典型的なアリールアルキル基としては、ベンジル、２－フェニルエタン－１－イル、２－フェニルエテン－１－イル、ナフチルメチル、２－ナフチルエタン－１－イル、２－ナフチルエテン－１－イル、ナフトベンジル、２－ナフトフェニルエタン－１－イルなどが挙げられるが、これらに限定されない。特定のアルキル部分が意図される場合、アリールアルカニル、アリールアルケニル及び／又はアリールアルキニルという命名法が使用される。ある特定の場合において、アリールアルキル基は、（Ｃ_６～Ｃ_３０）アリールアルキルであり、例えば、アリールアルキル基のアルカニル、アルケニル又はアルキニル部分は、（Ｃ_１～Ｃ_１０）であり、アリール部分は、（Ｃ_６～Ｃ_２０）である。

【0050】

「ヘテロアリール」という用語は、親ヘテロ芳香族環系の単一の原子から１個の水素原子を除去することによって誘導される一価のヘテロ芳香族基を指す場合がある。典型的なヘテロアリール基としては、アクリジン、アルシンドール、カルバゾール、β－カルボリン、クロマン、クロメン、シンノリン、フラン、イミダゾール、インダゾール、インドール、インドリン、インドリジン、イソベンゾフラン、イソクロメン、イソインドール、イソインドリン、イソキノリン、イソチアゾール、イソオキサゾール、ナフチリジン、オキサジアゾール、オキサゾール、ペリミジン、フェナントリジン、フェナントロリン、フェナジン、フタラジン、プテリジン、プリン、ピラン、ピラジン、ピラゾール、ピリダジン、ピリジン、ピリミジン、ピロール、ピロリジン、キナゾリン、キノリン、キノリジン、キノキサリン、テトラゾール、チアジアゾール、チアゾール、チオフェン、トリアゾール、キサンテンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の場合において、ヘテロアリール基は、５～２０員のヘテロアリールであり、他の場合においては、５～１０員のヘテロアリールである。ある特定の場合において、ヘテロアリール基は、チオフェン、ピロール、ベンゾチオフェン、ベンゾフラン、インドール、ピリジン、キノリン、イミダゾール、オキサゾール及びピラジンから誘導されるものである。

【0051】

「ヘテロアリールアルキル」という用語は、炭素原子、典型的には末端又はｓｐ^３炭素原子に結合した水素原子の１つがヘテロアリール基で置き換えられている非環式アルキル基を指す場合がある。特定のアルキル部分が意図される場合、ヘテロアリールアルカニル、ヘテロアリールアルケニル及び／又はヘテロアリールアルキニルという命名法が使用される。ある特定の場合において、ヘテロアリールアルキル基は、６～３０員のヘテロアリールアルキルであり、例えば、ヘテロアリールアルキルのアルカニル、アルケニル又はアルキニル部分は、１～１０員であり、ヘテロアリール部分は、５～２０員のヘテロアリールである。

【0052】

「シクロアルキル」という用語は、飽和又は不飽和環状アルキル基を指す場合がある。特定の飽和レベルが意図される場合、「シクロアルカニル」又は「シクロアルケニル」という命名法が使用される。典型的なシクロアルキル基としては、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。ある特定の場合において、シクロアルキル基は、（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキルであり、又はある特定の場合においては、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキルである。

【0053】

「ヘテロシクロアルキル」という用語は、１個以上の炭素原子（及び任意の関連する水素原子）が独立して同じ又は異なるヘテロ原子で置き換えられている飽和又は不飽和環状アルキル基を指す場合がある。炭素原子を置換する典型的なヘテロ原子としては、Ｎ、Ｐ、Ｏ、Ｓ及びＳｉが挙げられるが、これらに限定されない。典型的なヘテロシクロアルキル基としては、エポキシド、イミダゾリジン、モルホリン、ピペラジン、ピペリジン、ピラゾリジン、ピロリジン、キヌクリジンなどから誘導される基が挙げられるが、これらに限定されない。

【0054】

「ジアステレオマー過剰率」（ＤＥ）という用語は、２つのジアステレオマーの相対的存在量との差を指す場合がある。例えば、２つのジアステレオマーが存在し、それらのモル又は重量百分率がＡ及びＢである場合、ＤＥは、ＤＥ＝［（Ａ－Ｂ）／（Ａ＋Ｂ）］＊１００％として計算することができる。例えば、混合物が一方のジアステレオマーを７５％、他方のジアステレオマーを２５％含有する場合、ジアステレオマー過剰率は５０％である。別の例では、一方のジアステレオマーが９５％の混合物の場合、ジアステレオマー過剰率は９０％である。

【0055】

「鏡像体過剰率」（ＥＥ）という用語は、２つの鏡像体の相対的存在量との差を指す場合がある。例えば、２つのエナンチオマーが存在し、それらのモル又は重量百分率がＡ及びＢである場合、ＥＥは、ＥＥ＝［（Ａ－Ｂ）／（Ａ＋Ｂ）］＊１００％として計算することができる。例えば、混合物が一方のエナンチオマーを７５％、他方のエナンチオマーを２５％含有する場合、エナンチオマー過剰率は５０％である。別の例では、一方のエナンチオマーが９５％の混合物の場合、エナンチオマー過剰率は９０％である。

【0056】

「置換された」という用語は、１個以上の水素原子がそれぞれ独立して同じ又は異なる置換基で置き換えられている基を指す場合がある。典型的な置換基としては、ハロ、アルキル、アリール、ヘテロアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリール、ヘテロアリールアルキル、シクロアルキル及びヘテロシクロアルキルが挙げられるが、これらに限定されない。

【0057】

別段の指示がない限り、「処理した」は、「接触した」を指し得る。同様に、「未処理」は、「未接触」を指す場合がある。

【0058】

「実質的に同じ植物」という用語は、先に言及された植物と同じ種の植物を指す場合がある。例えば、実質的に同じであるが、未接触の植物は、接触した植物と同じ種に属する。実質的に同じであるが未接触の植物は、接触した植物の約８０％～１２０％の高さ（周囲の土壌から植物の最高点まで測定した場合）を有することができ、かつ／又は、接触した植物の約８０％～１２０％の質量を有することができる。

【0059】

「干ばつ」という用語は、過去１２か月以内に２０インチ、１５インチ、１０インチ、又は５インチ未満の降雨量しかない状態を意味することができる。用語「干ばつ」はまた、－１．０未満のＰａｌｍｅｒ Ｄｒｏｕｇｈｔ Ｓｅｖｅｒｉｔｙ Ｉｎｄｅｘ（ＰＤＳＩ）を有する状態を意味し得る。「十分に潅水された状態」という用語は、過去１２ヶ月以内に２０インチを超える降雨量がある状態を意味することができる。「十分に潅水された状態」という用語は、－１．０を超えるＰＤＳＩを有する状態を意味することができる。

【0060】

「植物」という用語は、「作物」という用語と互換的に使用することができ、食品、衣類、家畜飼料、バイオ燃料、医薬品、又は他の用途のために収穫され得る任意の作物、栽培植物、真菌、又は藻類を挙げられるが、これらに限定されない。例えば、植物としては、畑作物及び温室作物が挙げられ、ブロードエーカー作物、果実及び野菜、多年生木本作物、及び観賞植物が挙げられるが、これらに限定されない。植物としては、サトウキビ、カボチャ、トウモロコシ（コーン）、コムギ、イネ、キャッサバ、ダイズ、ヘイ、ジャガイモ、ワタ、トマト、アルファルファ及び緑藻類が挙げられるが、これらに限定されない。植物としては、また、キャベツ、カブ、カブ、ニンジン、パースニップ、ビート根、レタス、マメ、そらまめ、エンドウ豆、ジャガイモ、ナス、トマト、キュウリ、カボチャ（ｐｕｍｐｋｉｎ）、カボチャ（ｓｑｕａｓｈ）、タマネギ、ニンニク、ニラ、トウガラシ、ホウレンソウ、ヤマノイモ、サツマイモ、及びキャッサバなどの任意の野菜が挙げられるが、これらに限定されない。

【0061】

序論

【0062】

リン及び窒素は、農業システムにおける植物にとって重要な要素又は制限要素である。農耕用土壌にはリン及び窒素に富む肥料が頻繁に補充されているが、これらの重要な要素の大部分は、不動化、浸出、分解又は固定によって植物にすぐに利用できなくなる。肥料からの過剰な栄養素は、水路を汚染し、再生不可能な資源に依存し、環境に温室効果ガスをもたらす。したがって、持続可能な農業の将来は、収量を維持又は増加させながら肥料投入量を減少させる新しい技術にかかっている。土壌微生物は、リン及び窒素などの植物が必要とする栄養素を土壌から植物に送達するにあたって主要な役割を果たす。これらの微生物に基づく栄養移動プロセスは、現代の大規模農業では十分に利用されておらず、今日まで、土壌中のオルトリン酸塩及び固定窒素を増加させる土壌の生来の能力を改善するための拡張可能で効果的な解決策は、ブロードエーカー農業のためにまだ開発されていない（Ｌｕｃｙ ２００４）。

【0063】

細菌のリン酸可溶化の主な方法は、有機酸の分泌である。この自然のプロセスは、現代の大規模農業ではほとんど利用されておらず、今日まで、土壌の生来の微生物オルトリン酸生産を改善するための信頼できる効果的な解決策は、ブロードエーカー農業のためにまだ開発されていない。土壌中の利用可能なオルトリン酸塩のプールを増強する細菌能力が増加すると、農業システムでは、高価で非効率的な化学肥料の施用を制限しながら、植物の成長が向上する。単離された液体培養物中の土壌細菌及び土壌の生来の微生物群の両方において、土壌微生物のリン酸塩可溶化の有意な増加を引き起こす化合物及び製剤が本明細書に開示される。

【0064】

土壌中の細菌リン酸塩可溶化及び窒素固定を改善するための努力は、土壌への微生物接種剤の導入に依存してきた。この戦略は、ブロードエーカー農業では効果がなく、以下のいくつかの欠点、すなわち、１．）生きた微生物の生存率は、瓶詰めされ、適切な増殖条件で維持されないときに低下し、２．）多くの有益な土壌微生物を培養することができず、３．）添加された土壌微生物の持続性及び生物活性は、天然の確立された土壌微生物集団に負けて低い場合があり、４．）環境へ微生物を導入することには複雑な規制要件及び制限がある、という欠点がある。

【0065】

微生物接種剤に対する直交的アプローチは、内因性土壌微生物叢の能力を利用して植物成長促進活性を増強することである。根と土壌微生物叢との間の共生は、小分子シグナル伝達によって開始され、維持される。農学的に重要な活性を増加させるために天然微生物に対する普遍的なシグナルとして働くことができる小分子は、植物に栄養素を提供する土壌の能力を改善する標準化された方法のための可能な解決策である。植物は、その組織及び器官内で化学シグナル伝達を使用して、光、水、栄養素、有益な微生物、及び病原性微生物などの環境信号を伝達し、応答する。プラントが使用する化学シグナルの様々なカテゴリ／クラスがある。化学シグナルは、植物の水路を通って根とシュートとの間を移動することができ、土壌の中に、場合によってはなんと空気中のガスとして排出される場合がある。

【0066】

本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物、及び／又は製剤は、土壌又は植物に（例えば、植物の種子、根又は林冠に）施用することができる。本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物及び／又は製剤は、リン酸可溶化細菌の活性を刺激することによって、土壌中の利用可能なリン酸塩の増加をもたらし得る。本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物及び／又は製剤は、窒素固定細菌の活性を刺激することによって、土壌中の利用可能な窒素の増加をもたらし得る。利用可能な土壌リン酸塩及び窒素を改善することができる化合物及び製剤が本明細書に開示される。本化合物及び／又は製剤を作製する方法、並びに本化合物及び／又は製剤を使用する方法も本明細書に開示される。

【0067】

本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物、及び／又は製剤は、微生物（例えば、細菌、放線菌、真菌又は原虫）と共に存在することができる。場合によっては、微生物は、単離された（例えば、精製された、又は実質的に精製された）細菌を含む。場合によっては、微生物は、接種又は培養された土壌由来の細菌を含む。場合によっては、微生物は、農業製剤１グラム当たり少なくとも約１０（例えば、少なくとも約１００又は少なくとも約１０００）のコロニー形成単位で存在する。場合によっては、微生物は野生型細菌を含む。場合によっては、微生物は遺伝子操作された細菌を含む。場合によっては、微生物は、リン酸可溶化細菌、窒素固定細菌、又はそれらの組み合わせを含む。場合によっては、リン酸塩可溶化細菌は、バチルス属の細菌株を含む。場合によっては、バチルス属の細菌株はバチルス・メガタリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔａｒｉｕｍ）を含む。場合によっては、窒素固定細菌は、アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｌａｎｄｉｉ）を含む。場合によっては、微生物は、少なくとも１つのグラム陰性細胞を含む。場合によっては、少なくとも１つのグラム陰性細胞は、グラム陰性球菌、グラム陰性桿菌、又はそれらの組み合わせを含む。場合によっては、微生物は少なくとも１つのグラム陽性細胞を含む。場合によっては、少なくとも１つのグラム陽性細胞は、グラム陽性球菌、グラム陽性桿菌、又はそれらの組み合わせを含む。場合によっては、微生物は、クラミジア、緑色非硫化細菌、アシノバクテリア、プラントマイセス、スピロヘータ、フソバクテリア、シアノバクテリア、好熱性細菌、アシドバクテリア、プロテオバクテリア、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、及びそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される少なくとも１つのメンバーを含む。

【0068】

化合物

【0069】

式Ｉの化合物又はその塩：

【化37】

又はその任意の塩若しくは溶媒和物が本明細書に開示され、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、ＣＯＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化38】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい。

【0070】

式ＩＩの化合物又はその塩：

【化39】

又はその任意の塩若しくは溶媒和物もまた本明細書に開示され、
式中、Ａ_１及びＡ_２は、独立して、Ｏ又はＳであってもよく、Ｒ^１及びＲ^２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、ＣＯＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化40】

であり、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、Ｒ_３、Ｒ_４、Ｒ_５及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい。

【0071】

式ＩＩの化合物又はその塩：

【化41】

又はその任意の塩若しくは溶媒和物もまた本明細書に開示され、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化42】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、
Ｕ_１、Ｕ_２、Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_５、Ｕ_６、Ｕ_７、Ｕ_８、Ｕ_９、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであってもよい。

【0072】

場合によっては、化合物は、式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ又は式Ｉｄ：

【化43】

のものであり得、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、ＣＯＯＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル又はＣ_３～Ｃ_６シクロアルキルであってもよく、Ｙ_３及びＹ_４は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、Ｒ_４及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい。

【0073】

場合によっては、化合物又はその塩は式Ｉａのものであり得る。場合によっては、式Ｉａの化合物は、

【化44】

又はこれらのいずれかの塩を含み得る。

【0074】

場合によっては、化合物は、式Ｉｂの化合物又はその塩であり得る。場合によっては、式Ｉｂの化合物は、

【化45】

又はこれらのいずれかの塩を含み得る。

【0075】

場合によっては、化合物は、式Ｉｃの化合物又はその塩：

【化46】

であり得る。

【0076】

場合によっては、化合物は、式Ｉｄの化合物又はその塩であり得る。場合によっては、式Ｉｄの化合物は、

【化47】

又はこの塩を含み得る。

【0077】

場合によっては、化合物又はその塩は、式ＩＩａ：

【化48】

のものであり得、式中、Ｒ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル又はＣ_３～Ｃ_６シクロアルキルであってもよく、Ｙ_３及びＹ_４は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、Ｒ_４及びＲ_６は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ又は－ＳＨであってもよい。

【0078】

場合によっては、式ＩＩａの化合物又はその塩は、

【化49】

又はこれらのいずれかの塩を含み得る。

【0079】

場合によっては、化合物又はその塩は、式ＩＩＩａ：

【化50】

のもの、又はその任意の塩若しくは溶媒和物であり得、
式中、Ｒ_１及びＲ_２は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、ＣＯＯＨ、－ＳＨ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル、又は－Ｘ_ｐであってもよく、ここで、－Ｘ_ｐは、

【化51】

であってもよく、
式中、Ｙ_１、Ｙ_２、Ｙ_３、Ｙ_４、及びＹ_５は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、又は－Ｏ－Ｚ_１であり、ここで、Ｚ_１は、Ｃ_１～Ｃ_４アルキルであってもよく、又は式中、Ｒ_１及びＲ_２は、それらを連結する炭素原子と共に、５若しくは６員のシクロアルキル環若しくはシクロアルケニル環、又は５若しくは６員のアリール環を形成することができ、
Ｕ_３、Ｕ_４、Ｕ_８、及びＵ_１０は、独立して、－Ｈ、－ＯＨ、－ＣＯＯＨ、－ＳＨ、－Ｆ、－Ｃｌ、－Ｂｒ、－Ｉ、－ＣＯＯ－Ｚ_１、又は－Ｏ－Ｚ_１であってもよく、ここで、Ｚ_１はＣ_１～Ｃ_４アルキルであってもよい。

【0080】

場合によっては、式ＩＩＩａの化合物又はその塩は、

【化52】

又はその塩若しくは溶媒和物を含み得る。

【0081】

場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、任意の異性体を含み得る。場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、任意の立体異性体を含み得る。場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、本明細書に開示される化合物、塩又は溶媒和物の互変異性体であり得る。

【0082】

場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、ジアステレオ異性体であり得る。場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％又は少なくとも約５０％から１００％のジアステレオマー過剰率を有するジアステレオ異性体であり得る。本明細書に開示される化合物、塩、又は溶媒和物は、少なくとも約１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％のジアステレオマー過剰率を有し得る。本明細書に開示される化合物、塩又は溶媒和物は、１５％～９９％、２０％～９９％、３０％～９９％、４０～９９％、５０～９９％、６０～９９％、７０～９９％、８０～９９％、９０～９９％、１５％～９０％、２０％～９０％、３０％～９０％、４０～９０％、５０～９０％、６０～９０％、７０～９０％、８０～９０％、１５％～８０％、２０％～８０％、３０％～８０％、４０～８０％、５０～８０％、６０～８０％、７０～８０％、１５％～７０％、２０％～７０％、３０％～７０％、４０～７０％、５０～７０％、６０～７０％、１５％～６０％、２０％～６０％、３０％～６０％、４０～６０％、５０～６０％、１５％～５０％、２０％～５０％、３０％～５０％、４０～５０％、１５％～４０％、２０％～４０％、３０％～４０％、１５％～３０％、２０％～３０％、又は１５～２０％のジアステレオマー過剰率を有し得る。場合によっては、本明細書に開示される化合物、塩又は溶媒和物は、少なくとも約５０％から１００％のジアステレオマー過剰率を有し得る。

【0083】

場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、その任意のエナンチオマーを含み得る。場合によっては、化合物、塩又は溶媒和物は、少なくとも約５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は少なくとも約５０％から１００％の鏡像体過剰率を有する鏡像体であり得る。本明細書に開示される化合物、塩、又は溶媒和物は、少なくとも約１５％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９９％の鏡像体過剰率を有し得る。本明細書に開示される化合物、塩又は溶媒和物は、１５％～９９％、２０％～９９％、３０％～９９％、４０～９９％、５０～９９％、６０～９９％、７０～９９％、８０～９９％、９０～９９％、１５％～９０％、２０％～９０％、３０％～９０％、４０～９０％、５０～９０％、６０～９０％、７０～９０％、８０～９０％、１５％～８０％、２０％～８０％、３０％～８０％、４０～８０％、５０～８０％、６０～８０％、７０～８０％、１５％～７０％、２０％～７０％、３０％～７０％、４０～７０％、５０～７０％、６０～７０％、１５％～６０％、２０％～６０％、３０％～６０％、４０～６０％、５０～６０％、１５％～５０％、２０％～５０％、３０％～５０％、４０～５０％、１５％～４０％、２０％～４０％、３０％～４０％、１５％～３０％、２０％～３０％、又は１５～２０％の鏡像体過剰率を有し得る。場合によっては、本明細書に開示される化合物、塩又は溶媒和物は、少なくとも約５０％から１００％の鏡像体過剰率を有し得る。

【0084】

組成物

【0085】

本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含むことができる組成物も本明細書に開示される。場合によっては、組成物は固体組成物であり得る。場合によっては、組成物は液体組成物であり得る。組成物は、種子処理、土壌灌注、顆粒製剤又は葉面散布の形で使用して、多種多様な作物の生産性を向上させることができる。

【0086】

本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含有する本明細書に記載の組成物は、土壌中のリン酸塩可溶化の量を増加させることができる。例えば、組成物は、土壌中に存在する１つ以上の生きた微生物によって不溶性リン酸塩源（例えば、リン酸三カルシウム又は同等物）から産生される可溶性オルトリン酸塩の量を増加させるのに十分な量の化合物、塩又は溶媒和物を含み得る。本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含有する本明細書に記載の組成物は、土壌中の利用可能な窒素の量を増加させることができる。例えば、組成物は、土壌中に存在する１つ以上の生きた微生物からの窒素固定量を増加させるのに十分な量の化合物、塩又は溶媒和物を含み得る。本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含有する本明細書に記載の組成物は、植物の収穫量を増加させることができる。本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含有する本明細書に記載の組成物は、植物のバイオマスを増加させることができる。本明細書に記載の１つ以上の化合物、塩又は溶媒和物を含有する本明細書に記載の組成物は、植物の青味のレベルを増加させることができる。

【0087】

組成物は、少なくとも約０．１％（ｗ／ｗ）の組成物、塩又は溶媒和物を含み得、例えば、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．４％、少なくとも約０．５％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％の組成物、塩、又は溶媒和物を含み得る。

【0088】

組成物は、約９５％（ｗ／ｗ）未満の組成物、塩又は溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％未満、約０．２％未満、約０．３％未満、約０．４％未満、約０．５％未満、約１％未満、約２％未満、約３％未満、約４％未満、約５％未満、約６％未満、約７％未満、約８％未満、約９％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、約３５％未満、約４０％未満、約４５％未満、約５０％未満、約５５％未満、約６０％未満、約６５％未満、約７０％未満、約７５％未満、約８０％未満、約８５％未満、約９０％未満、又は約９５％未満の組成物、塩又は溶媒和物を含み得る。

【0089】

組成物は、約０．１％～１００％（ｗ／ｗ）のＡＢ組成物、塩又は溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％～１％、０．１％～５％、約０．１～１０％、約０．１％～２０％、約０．５％～１％、約０．５％～５％、約０．５％～１０％、約０．５％～２０％、約１％～５％、約１％～１０％、約１％～２０％、約５％～１０％、約５％～２０％、約１０％～２０％、約１０％～３０％、約２０％～３０％、約２０％～４０％、約３０％～４０％、約３０％～５０％、約４０％～５０％、約４０％～６０％、約５０％～６０％、約５０％～７０％、約６０％～７０％、約６０％～８０％、約７０％～８０％、約７０％～９０％、約８０％～９０％、約８０％～９５％、約９０％～９５％、約９０％～９９％、約９０％～１００％、約９５％～９９％、又は約９９％～１００％のＡＢ組成物、塩又は溶媒和物を含み得る。

【0090】

組成物は、少なくとも約０．１％（ｗ／ｗ）の本明細書に記載の式Ｉ、式ＩＩ、もしくは式ＩＩＩの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．４％、少なくとも約０．５％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％の化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0091】

組成物は、約９５％（ｗ／ｗ）未満の式Ｉ、式ＩＩ、もしくは式ＩＩＩの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％未満、約０．２％未満、約０．３％未満、約０．４％未満、約０．５％未満、約１％未満、約２％未満、約３％未満、約４％未満、約５％未満、約６％未満、約７％未満、約８％未満、約９％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、約３５％未満、約４０％未満、約４５％未満、約５０％未満、約５５％未満、約６０％未満、約６５％未満、約７０％未満、約７５％未満、約８０％未満、約８５％未満、約９０％未満、又は約９５％未満の式Ｉ、式ＩＩ、もしくは式ＩＩＩの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0092】

組成物は、約０．１％～１００％（ｗ／ｗ）の式Ｉ、式ＩＩ、もしくは式ＩＩＩの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和を含み得、例えば、約０．１％～１％、０．１％～５％、約０．１～１０％、約０．１％～２０％、約０．５％～１％、約０．５％～５％、約０．５％～１０％、約０．５％～２０％、約１％～５％、約１％～１０％、約１％～２０％、約５％～１０％、約５％～２０％、約１０％～２０％、約１０％～３０％、約２０％～３０％、約２０％～４０％、約３０％～４０％、約３０％～５０％、約４０％～５０％、約４０％～６０％、約５０％～６０％、約５０％～７０％、約６０％～７０％、約６０％～８０％、約７０％～８０％、約７０％～９０％、約８０％～９０％、約８０％～９５％、約９０％～９５％、約９０％～９９％、約９０％～１００％、約９５％～９９％、又は約９９％～１００％の式Ｉ、式ＩＩ、もしくは式ＩＩＩの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和を含み得る。

【0093】

組成物は、少なくとも約０．１％（ｗ／ｗ）の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．４％、少なくとも約０．５％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0094】

組成物は、約９５％（ｗ／ｗ）未満の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％未満、約０．２％未満、約０．３％未満、約０．４％未満、約０．５％未満、約１％未満、約２％未満、約３％未満、約４％未満、約５％未満、約６％未満、約７％未満、約８％未満、約９％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、約３５％未満、約４０％未満、約４５％未満、約５０％未満、約５５％未満、約６０％未満、約６５％未満、約７０％未満、約７５％未満、約８０％未満、約８５％未満、約９０％未満、又は約９５％未満の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0095】

組成物は、約０．１％～１００％（ｗ／ｗ）の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和を含み得、例えば、約０．１％～１％、０．１％～５％、約０．１～１０％、約０．１％～２０％、約０．５％～１％、約０．５％～５％、約０．５％～１０％、約０．５％～２０％、約１％～５％、約１％～１０％、約１％～２０％、約５％～１０％、約５％～２０％、約１０％～２０％、約１０％～３０％、約２０％～３０％、約２０％～４０％、約３０％～４０％、約３０％～５０％、約４０％～５０％、約４０％～６０％、約５０％～６０％、約５０％～７０％、約６０％～７０％、約６０％～８０％、約７０％～８０％、約７０％～９０％、約８０％～９０％、約８０％～９５％、約９０％～９５％、約９０％～９９％、約９０％～１００％、約９５％～９９％、又は約９９％～１００％の式Ｉａ、式Ｉｂ、式Ｉｃ、もしくは式Ｉｄの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和を含み得る。

【0096】

組成物は、少なくとも約０．１％（ｗ／ｗ）の式ＩＩａの化合物、又はその任意の塩若しくは溶媒和物を含み得、例えば、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．４％、少なくとも約０．５％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％の式ＩＩａの化合物、又はその任意の塩若しくは溶媒和物を含み得る。

【0097】

組成物は、約９５％（ｗ／ｗ）未満の式ＩＩａの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％未満、約０．２％未満、約０．３％未満、約０．４％未満、約０．５％未満、約１％未満、約２％未満、約３％未満、約４％未満、約５％未満、約６％未満、約７％未満、約８％未満、約９％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、約３５％未満、約４０％未満、約４５％未満、約５０％未満、約５５％未満、約６０％未満、約６５％未満、約７０％未満、約７５％未満、約８０％未満、約８５％未満、約９０％未満、又は約９５％未満の式ＩＩａの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0098】

組成物は、約０．１％～１００％（ｗ／ｗ）の式ＩＩａの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％～１％、０．１％～５％、約０．１～１０％、約０．１％～２０％、約０．５％～１％、約０．５％～５％、約０．５％～１０％、約０．５％～２０％、約１％～５％、約１％～１０％、約１％～２０％、約５％～１０％、約５％～２０％、約１０％～２０％、約１０％～３０％、約２０％～３０％、約２０％～４０％、約３０％～４０％、約３０％～５０％、約４０％～５０％、約４０％～６０％、約５０％～６０％、約５０％～７０％、約６０％～７０％、約６０％～８０％、約７０％～８０％、約７０％～９０％、約８０％～９０％、約８０％～９５％、約９０％～９５％、約９０％～９９％、約９０％～１００％、約９５％～９９％、又は約９９％～１００％の式ＩＩａの化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0099】

組成物は、少なくとも約０．１％（ｗ／ｗ）の式：

【化53】

の化合物、又はその任意の塩若しくは溶媒和物を含み得、例えば、少なくとも約０．１％、少なくとも約０．２％、少なくとも約０．３％、少なくとも約０．４％、少なくとも約０．５％、少なくとも約１％、少なくとも約２％、少なくとも約３％、少なくとも約４％、少なくとも約５％、少なくとも約６％、少なくとも約７％、少なくとも約８％、少なくとも約９％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％の化合物、又はその任意の塩若しくは溶媒和物を含み得る。

【0100】

組成物は、約９５％（ｗ／ｗ）未満の式：

【化54】

の化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％未満、約０．２％未満、約０．３％未満、約０．４％未満、約０．５％未満、約１％未満、約２％未満、約３％未満、約４％未満、約５％未満、約６％未満、約７％未満、約８％未満、約９％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、約３０％未満、約３５％未満、約４０％未満、約４５％未満、約５０％未満、約５５％未満、約６０％未満、約６５％未満、約７０％未満、約７５％未満、約８０％未満、約８５％未満、約９０％未満、又は約９５％未満の化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0101】

組成物は、約０．１％～１００％（ｗ／ｗ）の式：

【化55】

の化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得、例えば、約０．１％～１％、０．１％～５％、約０．１～１０％、約０．１％～２０％、約０．５％～１％、約０．５％～５％、約０．５％～１０％、約０．５％～２０％、約１％～５％、約１％～１０％、約１％～２０％、約５％～１０％、約５％～２０％、約１０％～２０％、約１０％～３０％、約２０％～３０％、約２０％～４０％、約３０％～４０％、約３０％～５０％、約４０％～５０％、約４０％～６０％、約５０％～６０％、約５０％～７０％、約６０％～７０％、約６０％～８０％、約７０％～８０％、約７０％～９０％、約８０％～９０％、約８０％～９５％、約９０％～９５％、約９０％～９９％、約９０％～１００％、約９５％～９９％、又は約９９％～１００％の化合物、またはその任意の塩もしくは溶媒和物を含み得る。

【0102】

リン酸塩可溶化細菌

【0103】

リン酸塩可溶化細菌（ＰＳＢ）は、不溶性化合物から無機リンを可溶化することができる有益な細菌を指す場合がある。多数の属及び種のリン酸塩可溶化細菌について説明がなされている。例えば、Ｙ．Ｐ．Ｃｈｅｎ、Ｐ．Ｄ．Ｒｅｋｈａ、Ａ．Ｂ．Ａｒｕｎ、Ｆ．Ｔ．Ｓｈｅｎ、Ｗ．Ａ．Ｌａｉ、Ｃ．Ｃ．Ｙｏｕｎｇ（２００６）．´´Ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ ｂａｃｔｅｒｉａ ｆｒｏｍ ｓｕｂｔｒｏｐｉｃａｌ ｓｏｉｌ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｔｒｉｃａｌｃｉｕｍ ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ´´．Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｏｉｌ Ｅｃｏｌｏｇｙ．３４（１）：３３－４１．を参照されたい。場合によっては、リン酸塩可溶化細菌は、内因性土壌コンソーシアムのメンバーを指す。場合によっては、リン酸塩可溶化細菌は、非天然リン酸塩可溶化細菌を指す。場合によっては、非天然リン酸塩可溶化細菌は組換えである。場合によっては、非天然リン酸塩可溶化細菌は、非組換えリン酸塩可溶化細菌と比較して増加したリン酸塩可溶化活性を有する。

【0104】

場合によっては、農業製剤又は組成物は、農業製剤１グラム当たり約１０^３～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^４～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^５～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^７～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^８～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^９～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^１０～１０^１１ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^１０ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^９ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^８ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^７ｃｆｕのリン酸塩可溶化細菌を含み得る。

【0105】

ＰＳＢ株による無機リン酸塩可溶化の機構は、低分子量有機酸の放出を含み得、それを介してそれらのヒドロキシル基及びカルボキシル基がリン酸塩に結合したカチオンをキレート化し、それによってそれを可溶性形態に変換する。

【0106】

場合によっては、リン酸塩可溶化細菌はバチルス属から選択され得る。場合によっては、リン酸塩可溶化細菌は、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）種から選択される株であり得る。

【0107】

窒素固定細菌

【0108】

窒素固定細菌は、大気中の窒素をアンモニア又は他の生物が利用可能な他の分子に変換することができる細菌を指す場合がある。窒素固定細菌は、ダイズ、クローバー、アルファルファ、ナタネ及びエンドウ豆などのマメ科植物の根毛に感染することができる。その感染は、遊離窒素が結合窒素に変換される小結節の形成をもたらす（窒素固定）。窒素固定細菌は、シアノバクテリア（例えば、非常に有意なトリコデスミウム（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｓｍｉｕｍ）及びシアノテース（Ｃｙａｎｏｔｈｅｃｅ））、並びに緑色硫黄細菌、アゾトバクテリア（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒａｃｅａｅ）科、根粒菌及びフランキア（Ｆｒａｎｋｉａ）を含むドメイン細菌内に広く分布している。場合によっては、窒素固定細菌は、内因性土壌コンソーシアムのメンバーを指す。場合によっては、窒素固定細菌は、非天然窒素固定細菌を指す。場合によっては、非天然窒素固定細菌は組換えである。場合によっては、非天然窒素固定細菌は、非組換え窒素固定細菌と比較して窒素固定活性が増加している。

【0109】

場合によっては、農業製剤又は組成物は、農業製剤１グラム当たり約１０^３～１０^１１のコロニー形成単位（ｃｆｕ）の窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^４～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^５～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^７～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^８～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^９～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^１０～１０^１１ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^１０ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^９ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^８ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。場合によっては、農業製剤は、農業製剤１グラム当たり約１０^６～１０^７ｃｆｕの窒素固定細菌を含み得る。

【0110】

賦形剤、希釈剤及び担体

【0111】

本明細書に開示される組成物は、１つ以上の賦形剤、希釈剤、又は担体をさらに含むことができる。賦形剤、希釈剤、又は担体は、１つ以上の農薬、１つ以上の安定剤、１つ以上の添加剤、１つ以上の担体、１つ以上の分散剤、１つ以上の肥料、又はそれらの任意の組合わせであり得る。一例では、１つ以上の賦形剤は、アセトンを含む。

【0112】

本明細書中に開示される組成物は、１つ以上の殺有害生物剤をさらに含むことができる。農薬は、バイオ農薬であり得る。バイオ農薬は、微生物又は天然産物に基づくことができる農薬の形態であり得る。バイオ農薬には、有害生物を防除する天然に存在する物質（バイオケミカル農薬）、有害生物を防除する微生物（マイクロバイオ農薬）、及び遺伝物質（植物に組み込まれた保護物質）又はＰＩＰを添加した植物によって産生される農薬物質が含まれ得る。バイオ農薬の例としては、グルコシノレート、キトサン、スピノサド、アルカロイド、テルペノイド、フェノール類、ピレスロイド、ロテノイド、ニコチノイド、ストリキニン、シリロシド、キャノーラ油及び重曹が挙げられ得るが、これらに限定されない。農薬は、有機リン系農薬、カルバメート系農薬、有機塩素系殺虫剤、ピレスロイド系農薬、スルホニル尿素系農薬、又はそれらの組合わせであり得る。農薬は、除草剤、殺藻剤、殺鳥剤、殺菌剤、殺真菌剤、殺虫剤、殺ダニ剤、軟体動物駆除剤、殺線虫剤、殺鼠剤、殺ウイルス剤、又はそれらの組合わせであり得る。

【0113】

組成物は、１つ以上の安定剤、ポリマー、又は他の添加剤をさらに含み得る。安定剤、ポリマー又は添加剤には、浸透剤、接着剤、固化防止剤、染料、分散剤、湿潤剤、乳化剤、消泡剤、抗菌剤、不凍液、顔料、着色剤、緩衝剤及び担体が含まれ得るが、これらに限定されない。組成物は、界面活性剤及び／又はアジュバントをさらに含み得る。

【0114】

組成物は、１つ以上の希釈剤を含み得る。希釈剤は、農業的に許容される希釈剤であり得る。場合によっては、農業的に許容される希釈剤は、標準的な量で植物と接触した場合に、植物の成長を阻害しないか又は植物を死滅させない希釈剤を指す場合がある。場合によっては、希釈剤は植物油であり得る。植物油は、ヒマワリ油、キャノーラ油、アボガド種子油、ブドウ種子油、アーモンド油、ココアバター、ヤシ油、トウモロコシ油、綿実油、亜麻仁油、麻油、オリーブ油、パーム核油、ピーナッツ油、カボチャ種子油、米ぬか油、サフラワー油、ゴマ種子油、大豆油、クルミ油、及びそれらの任意の組み合わせを含み得る。

【0115】

組成物は、１つ以上の担体を含むことができる。担体の例としては、固体担体、スポンジ、織物及び合成材料が挙げられるが、これらに限定されない。合成材料は、多孔質合成材料であってもよい。追加の担体としては、ワックス、リノリン、パラフィン、デキストロース顆粒、スクロース顆粒、及びマルトース－デキストロース顆粒などの有機担体を挙げることができる。あるいは、担体は、天然粘土、カオリン、パイロフィライト、ベントナイト、アルミナ、モンモリロナイト、珪藻土、チョーク、珪藻土、リン酸カルシウム、炭酸カルシウム及び炭酸マグネシウム、硫黄、石灰、小麦粉、又はタルクなどの無機担体であり得る。組成物を担体に吸着させることができる。担体は、化合物、塩、溶媒和物又は製剤の放出を可能にすることによいって特徴付けられ得る。

【0116】

組成物は、１つ以上の分散剤をさらに含むことができる。分散剤は、負に帯電したアニオン分散剤であってもよい。分散剤は、非イオン性分散剤であってもよい。

【0117】

組成物は、肥料をさらに含むことができる。肥料は、化学肥料であってもよい。肥料は、有機肥料であってもよい。肥料は、無機肥料であってもよい。肥料は、粒状又は粉末状の肥料であってもよい。肥料は、液体肥料であってもよい。肥料は、徐放性肥料であってもよい。

【0118】

本明細書に開示される組成物は、乾燥噴霧可能製剤として製剤化することができる。乾燥噴霧可能製剤の例としては、水和剤及び水分散性顆粒が挙げられ得るが、これらに限定されない。湿潤性粉末は、微イオン化されて粉末形態になった化合物、塩、溶媒和物を含み得る。水に分散させた後、水和剤を懸濁粒子として利用してもよい。水分散性顆粒は、水の中で崩壊又は分散させてから利用する顆粒から構成され得る。水分散性顆粒は、０．２～４ｍｍの範囲内の粒子を含み得る。水分散性顆粒は、凝集、噴霧乾燥又は押出技術によって形成され得る。

【0119】

組成物は、液体噴霧可能な製剤として製剤化することができる。液体噴霧可能製剤の例としては、可溶性濃縮物、懸濁濃縮物、乳化性濃縮物、マイクロエマルション、油分散物、及びマイクロカプセル化粒子を挙げることができるが、これらに限定されない。懸濁濃縮物は、通常、使用前に水で希釈することが意図される、化合物、塩、溶媒和物又は製剤を流体に懸濁した安定な懸濁液を含み得る。乳化性濃縮物は、水に添加するとエマルションを形成する水不溶性有機溶媒和物中に、乳化剤と共に化合物、塩、溶媒和物又は製剤を含み得る。マイクロエマルションは、水に添加すると溶液／エマルションを形成する水不溶性有機溶媒和物中に、乳化剤と共に化合物、塩、溶媒和物、又は製剤を含み得る。場合によっては、本明細書の液体製剤は、酸化防止剤、界面活性剤又は乳化剤（例えば、エトキシレート、エトキシル化エステル、エトキシル化ソルビトールエステル、ポリオールアルコキシル化エステル、ソルビトール系界面活性剤、又はアルコールエトキシレート）、油、水、潤滑剤（例えば、ポリアルキレングリコール）、凍結防止剤、消泡剤エマルジョン、保存剤、増粘剤、又はそれらの任意の組み合わせを含み得る。

【0120】

組成物は、乾燥展延性顆粒製剤として製剤化することができる。乾燥展延性顆粒製剤は、不活性又は肥料担体上に土壌使用された顆粒を含み得る。

【0121】

組成物は、種子処理又は種子粉衣の形で製剤化することができる。

【0122】

迅速な放出を目的として組成物を製剤化することができる。組成物は、徐放を目的として製剤化することができる。

【0123】

キット

【0124】

本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物又は組成物を容器に含むことができるキットも本明細書に開示される。場合によっては、キットは、使用説明書をさらに含み得る。そのような説明書は、本明細書に記載の方法の任意のステップを実行するための説明書を含むことができる。例えば、説明書は、化合物、塩、溶媒和物又は組成物を植物、その一部、その種子又は土壌に施用することを含み得る。

【0125】

容器は、本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物、又は組成物を保存するための任意の適切な容器を含み得る。容器はまた、本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物、又は組成物を分注するための任意の適切な容器を含み得る。容器は、スプレーボトル、シリンジ、アンプル、バイアル、チューブ、バケット、バッグ、パウチなどを含み得る。

【0126】

場合によっては、キットは、農業で使用される他の構成要素をさらに含み得る。例えば、キットは、本明細書に記載の土壌、肥料、農薬、植物種子、除草剤、又は生きた微生物を含み得る。場合によっては、キットは、本明細書に記載の任意の微生物を含み得る。場合によっては、微生物は生きた微生物であり得る。本明細書に記載のキット中の生きた微生物は、有益な微生物、窒素固定微生物、リン酸可溶化微生物、又はそれらの任意の組み合わせであり得る。場合によっては、キットは、胞子又は不活性微生物を含み得る。場合によっては、キットは、栄養微生物を含み得る。

【0127】

栄養素の利用可能性を高める方法

【0128】

土壌栄養素の利用可能性を増加させる方法、及び／又は植物の収量を増加させる方法（例えば、植物のバイオマスを増加させる方法、又は植物の青味を増加させる方法）も本明細書に開示される。この方法は、土壌又は植物を本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることを含み得る。

【0129】

場合によっては、本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、土壌の天然微生物コンソーシアム（細菌株、放線菌、真菌、原虫、及びそれらの任意の組み合わせを含む）のリン酸塩可溶化活性を直接刺激し、植物成長のためにより多くのリンを提供することができる。場合によっては、本明細書に開示されるリン酸可溶化微生物は、不溶性の植物が利用できないリン酸を可溶性の植物が利用できるリン酸に変換することができる。窒素固定細菌（マメ科植物）は、大気中の窒素を植物が利用可能な形態の窒素に変換することができる。

【0130】

場合によっては、本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、土壌の天然微生物コンソーシアム（細菌株、放線菌、真菌、原虫、及びそれらの任意の組み合わせを含む）の窒素固定を誘導することができる。このように土壌中の窒素固定を活性化することによって、本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、植物利用可能な追加の栄養を提供することができる。場合によっては、本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、窒素制限環境で作物の健康及び収量を有意に高めることができる。

【0131】

土壌の天然微生物叢は、任意の数の細菌株、放線菌、真菌、原虫、又はそれらの組み合わせを含み得る。場合によっては、微生物コンソーシアムは生きた微生物を含み得る。場合によっては、微生物コンソーシアムは死んだ微生物を含み得る。場合によっては、微生物コンソーシアムは、アゾトバクター・クロオコッカム（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｃｈｒｏｏｃｏｃｃｕｍ）、シュードモナス・スタッツェリ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｔｕｔｚｅｒｉ）、シュードモナス・シュードアルカリゲネス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｓｅｕｄｏａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｅｓｈａｎｅｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｅｒｉｌａｔａ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｕｔｉｄａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、バチルス・ナイアシニ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｉａｃｉｎｉ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｗｉｅｄｍａｎｎｉｉ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｂｒｅｖｉｔａｌｅａ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｅｌｅｒ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｏｙｏｎｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｔｉｔｉｄｉｓ、シュードモナス・シトロネロリス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｉｔｒｏｎｅｌｌｏｌｉｓ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｑｉｎｌｉｎｇｅｎｓｉｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｓｏｌｉｓｉｌｖａｅ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｅｒｒａｅ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｒａｍｙｃｏｉｄｅｓ、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｕｒｅａ、バチルス・アシディコーラ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｃｉｄｉｃｏｌａ）、Ｐａｎｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｇｉｎｏｌｙｔｉｃｕｓ、バチルス・ナバリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｎｏｖａｌｉｓ）、シュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、バチルス・ハルマパルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｈａｌｍａｐａｌｕｓ）Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｋｎａｃｋｍｕｓｓｉｉ、クレブシエラ・ニューモニエ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）、クレブシエラ・バリイコーラ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｖａｒｉｉｃｏｌａ）、クレブシエラ・オキシトカ（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｏｘｙｔｏｃａ）、シュードモナス・アエルギノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）、セラチア・マルセセンス（Ｓｅｒｒａｔｉａ ｍａｒｃｅｓｃｅｎｓ）、バチルス・アミロリケファシエンス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｍｙｌｏｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）、グルコンアセトバクター・ジアゾトロフィカス（Ｇｌｕｃｏｎａｃｅｔｏｂａｃｔｅｒ ｄｉａｚｏｔｒｏｐｈｉｃｕｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｒｖｉ、マシリア・アグリ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ａｇｒｉ）、マシリア・ピニルス（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｐｉｎｉｓｏｌｉ）、バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）、バチルス・バタビエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｂａｔａｖｉｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｃｈｌｏｒｏａｃｅｔｉｍｉｄｉｖｏｒａｎｓ、バチルス・マイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｙｃｏｉｄｅｓ）、バチルス・フレクス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｌｅｘｕｓ）、バチルス・シンプレックス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｉｍｐｌｅｘ）、シュードモナス・バレアリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｂａｌｅａｒｉｃａ）、シュードモナス・プレコアレリカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｐｌｅｃｏｇｌｏｓｓｉｃｉｄａ）、Ｃａｂａｌｌｅｒｏｎｉａ ｔｕｒｂａｎｓ、Ｐｓｙｃｈｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｌａｓｉｉｃａｐｔｉｓ、バチルス・ソリ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｏｌｉ）、バチルス・コーニイ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｈｎｉｉ）、キュープリアビダス・カムピネンシス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ ｃａｍｐｉｎｅｎｓｉｓ）、ブレビバクテリウム・フリゴリトレランス（Ｂｒｅｖｉｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｆｒｉｇｏｒｉｔｏｌｅｒａｎｓ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｏｃｈｅｏｎｅｎｓｉｓ、シュードモナス・モンテイリイ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｍｏｎｔｅｉｌｉｉ）、バチルス・ビレティ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｖｉｒｅｔｉ）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐａｃｉｆｉｃｕｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｔａｉｈｕｅｎｓｉｓ、アゾトバクター・ベイジェリンキイ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｂｅｉｊｅｒｉｎｃｋｉｉ）、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｏｎｔａｍｉｎａｎｓ、バチルス・ドレンテンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｄｒｅｎｔｅｎｓｉｓ）、バチルス・チューリンギエンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ）、バチルス・ファーマス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｆｉｒｍｕｓ）、バチルス・セレウス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ）、バチルス・モビリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｏｂｉｌｉｓ）、バチルス・ルシフェレンシス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｌｕｃｉｆｅｒｅｎｓｉｓ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｎｉａｓｔｅｎｓｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｕｃｕｍｉｓ、シュードモナス・フラベッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌａｖｅｓｃｅｎｓ）、マシリア・チモナエ（Ｍａｓｓｉｌｉａ ｔｉｍｏｎａｅ）、Ｍａｓｓｉｌｉａ ｋｙｏｎｇｇｉｅｎｓｉｓ、シュードモナス・インディカ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｉｎｄｉｃａ）、バチルス・フィルロスファエラエ（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｈｙｌｌｏｓｐｈａｅｒａｅ）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｇｕｇｕａｎｅｎｓｉｓ、Ｐａｅｎｉｂａｃｉｌｌｕｓ ｂｅｉｊｉｎｇｅｎｓｉｓ、バチルス・シュードマイコイデス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｐｓｅｕｄｏｍｙｃｏｉｄｅｓ）、Ａｄｈａｅｒｉｂａｃｔｅｒ ｔｅｒｒｅｕｓ、Ｍｉｃｒｏｖｉｒｇａ ｚａｍｂｉｅｎｓｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。

【0132】

本明細書に開示される本化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、農業に使用することができる。本化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、植物の成長を促進するために使用することができる。本明細書に開示される本化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、植物のシュート安定性を高めるために使用することができる。本化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、植物における輸送能力を高めるために使用することができる。本化合物、塩、溶媒和物及び組成物は、植物の干ばつ耐性を高めるために使用することができる。

【0133】

化合物、塩又は溶媒和物を含む組成物（例えば、液体組成物）を植物（例えば、植物の葉、根、茎、又は他の部分）又はその種子に施用し、それによって農業を改善することを含む、農業を改善する方法が本明細書でさらに開示される。農業を改善することは、植物の成長を促進することを含み得る。農業を改善することは、植物におけるシュートの安定性を高めることを含み得る。農業を改善することは、植物における輸送能力を高めることを含み得る。農業を改善することは、干ばつ耐性を高めることを含み得る。農業を改善することは、１つ以上の農薬の施用を減少させることを含み得る。農業を改善することは、１つ以上の農薬の施用を終了することを含み得る。農業を改善することは、植物に使用される給水量を減少させることを含み得る。農業を改善することは、植物への給水頻度を減少させることを含み得る。農業を改善することは、植物病原性真菌を防除することを含み得る。農業を改善することは、望ましくない植物の成長を防除することを含み得る。農業を改善することは、望ましくない昆虫又はダニの侵入を防除することを含み得る。農業を改善することは、植物の成長を調節することを含み得る。農業を改善することは、１つ以上の真菌の活性を促進又は刺激することを含み得る。

【0134】

本明細書に記載の化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物成長を少なくとも約５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約１０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約１５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約２０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約２５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約３０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約５０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％又はそれ以上増加させることができる。

【0135】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、４０、５０倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約１．５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約２倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約３倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を少なくとも約１０倍又はそれ以上増加させることができる。植物成長又は組成物は、二次植物成長を含み得る。

【0136】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約５％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約１０％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約１５％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約２０％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約２５％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約３０％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約５０％促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％又はそれ以上促進することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュート成長を少なくとも約１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、４０、５０倍又はそれ以上促進することができる。

【0137】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュートの成長を少なくとも約１．５倍又はそれ以上高めることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュートの成長を少なくとも約２倍又はそれ以上高めることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュートの成長を少なくとも約３倍又はそれ以上高めることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュートの成長を少なくとも約５倍又はそれ以上高めることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シュートの成長を少なくとも約１０倍又はそれ以上高めることができる。

【0138】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約１０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約１５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約２０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約２５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約３０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約５０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％又はそれ以上増加させることができる。

【0139】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、４０、５０倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約１．５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約２倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約３倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物における輸送能力を少なくとも約１０倍又はそれ以上増加させることができる。

【0140】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約１０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約１５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約２０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約２５％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約３０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約５０％増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、１００％又はそれ以上増加させることができる。

【0141】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約１．５、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、４０、５０倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約１．５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約２倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約３倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約５倍又はそれ以上増加させることができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の干ばつ耐性を少なくとも約１０倍又はそれ以上増加させることができる。

【0142】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１つ以上の農薬の施用を減少させることができる。１つ以上の農薬の施用を低減することは、植物に使用される１つ以上の農薬の量を低減することを含み得る。植物に使用される１つ以上の農薬の量は、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％低減し得る。植物に使用される１つ以上の農薬の量は、少なくとも約１０％低減し得る。植物に使用される１つ以上の農薬の量は、少なくとも約２０％低減し得る。植物に使用される１つ以上の農薬の量は、少なくとも約３０％低減し得る。植物に使用される１つ以上の農薬の量は、少なくとも約５０％低減し得る。

【0143】

代替的又は追加的に、１つ以上の農薬の施用を低減することは、１つ以上の農薬が植物に使用される頻度を低減することを含み得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％又は１００％低減し得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約１０％低減し得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約２０％低減し得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約３０％低減し得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約４０％低減し得る。１つ以上の農薬が植物に使用される頻度は、少なくとも約５０％低減し得る。

【0144】

化合物、塩、溶媒和物の使用は、植物に施用される水の量の減少を可能にし得る。植物に使用される水の量は、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％低減し得る。植物に使用される水の量は、少なくとも約１０％低減し得る。植物に使用される水の量は、少なくとも約２０％低減し得る。植物に使用される水の量は、少なくとも約３０％低減し得る。植物に使用される水の量は、少なくとも約５０％低減し得る。

【0145】

化合物、塩、溶媒和物又は組成物の使用は、水が植物に施用される頻度の減少を可能にし得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、又は１００％低減し得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約１０％低減し得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約２０％低減し得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約３０％低減し得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約４０％低減し得る。水が植物に使用される頻度は、少なくとも約５０％低減し得る。

【0146】

本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物、組成物は、植物病原性真菌を防除するために使用され得る。農業を改善することは、望ましくない植物の成長を防除することを含み得る。望ましくない植物の成長を防除することは、望ましくない植物の発芽活性を刺激することを含み得る。望ましくない植物は、寄生植物であってもよい。望ましくない植物は、根寄生植物であってもよい。寄生植物の例としては、ウィッチウィード（ストリガ種）、ハマウツボ（オロバンケ種、Ｐｈｅｌｉｐａｎｃｈｅ種）、アレクトラ、ドッダー及びヤドリギを挙げることができるが、これらに限定されない。望ましくない植物は、オオバコ科に属し得る。望ましくない植物は、ウィッチウィードであってもよい。望ましくない植物は、オロバンケ（Ｏｒｏｂａｎｃｈｅ）種であってもよい。化合物、塩、溶媒和物又は製剤は、望ましくない植物に直接使用され得る。化合物、塩、溶媒和物又は製剤は、望ましくない植物に間接的に使用され得る。

【0147】

本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、望ましくない昆虫又はダニのまん延を防除するために使用することができる。昆虫及びダニの例としては、クモ、ブナ、コナカイガラムシ、コナヒョウダニ、天敵ダニ、クモダニ及びアブラムシが挙げられるが、これらに限定されない。

【0148】

本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の成長を調節するために使用することができる。植物成長を調節することは、植物育種を調節することを含み得る。植物成長を調節することは、シュートの分岐を阻害することを含み得る。植物成長を調節することは、１つ以上の植物産物を調節することを含み得る。植物成長を調節することは、根の発達を阻害することを含み得る。

【0149】

本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、真菌の活性を促進又は刺激するために使用することができる。化合物、塩、溶媒和物又は製剤は、１つ以上の真菌の菌糸分岐活性を刺激し得る。化合物、塩、溶媒和物又は製剤は、１つ以上の真菌の胞子発芽を誘導し得る。１つ以上の真菌は、樹枝状菌根（ＡＭ）真菌であり得る。

【0150】

さらに、植物の寿命を維持又は延長する方法が本明細書に開示される。一般に、本方法は、植物（例えば、葉、茎、根、又は植物の任意の部分）を本明細書に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることを含み得る。植物の寿命を維持又は延長するのに使用するための本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、本明細書に開示される方法のいずれかによって製造することができる。

【0151】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、切断された植物の寿命を維持又は延長するために使用することができる。切断された植物は花であり得る。切断された植物は木であり得る。切断された植物は、ブッシュ又は低木であり得る。切断された植物は野菜であり得る。本化合物、塩、溶媒和物又は製剤は、切断されていない植物の寿命を維持又は延長するために使用され得る。切断されていない植物は花であり得る。切断されていない植物は木であり得る。切断されていない植物は、ブッシュ又は低木であり得る。切断されていない植物は、野菜であり得る。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、鉢植え植物の寿命を維持又は延長するために使用され得る。鉢植え植物は花であり得る。植え付けられた植物は木であり得る。鉢植え植物は、ブッシュ又は低木であり得る。鉢植え植物は野菜であり得る。

【0152】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、花の寿命を維持又は延長するために使用することができる。花の例としては、ユリ、ヒナギク、バラ、マリーゴールド、キダチチョウセンアサガオ、フロックス、ビンカ、キンギョソウ、ホソバウンラン、ラン、シダ、ブラック・アイド・スーザン、ハエマンツス・コッキネウス、ブルーロベリア、アサガオ、ケシ、カレンジュラ、ゼラニウム、インパチェンス、ランタナ、ヒエンソウ、阿蘭陀海芋、ヒヤシンス、アザレア、ポインセチア、及びベゴニアを挙げることができるが、これらに限定されない。

【0153】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、ブッシュ又は低木の寿命を維持又は延長するために使用することができる。ブッシュ及び低木の例としては、レンギョウ、フクシア、ハイビスカス、スグリ、ライラック、バラ、アジサイ、ヤナギ、モクレン、タイム、セッコウボク、ハナミズキ、及びモチノキが挙げられるが、これらに限定されない。

【0154】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、樹木の寿命を維持又は延長するために使用することができる。樹木の例としては、ヒノキ、ポインセチア、ヤシ、モミ、マツ、トウヒ、スギ、オーク、クワ、クリ、サンザシ、ポプラ及びカエデが挙げられるが、これらに限定されない。木はモミの木であり得る。モミの木は、ダグラスモミ、バルサムモミ、又はフレーザーモミの木であり得る。木は、松の木であり得る。松の木は、スコッチパイン、又はホワイトパインの木であり得る。木は、トウヒの木であり得る。トウヒの木は、ホワイトトウヒ、ノルウェートウヒ、又はブルートウヒの木であり得る。木は、スギの木であり得る。スギの木は、ヒマラヤスギ、又はイースタンレッドシダーであり得る。木は、ヒノキの木であり得る。ヒノキの木は、アリゾナヒノキ、又はリーランドヒノキの木であり得る。

【0155】

植物を、本明細書中に開示される化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させ、それにより、植物の寿命を延ばすか又は保存することができる。植物を本化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることは、本化合物、塩、溶媒和物又は組成物をスプレーとして投与することを含み得る。植物を本化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることは、植物成長物質を植物の灌水水に添加することを含み得る。植物を本化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることは、本化合物、塩、溶媒和物又は組成物を植物の生息地に施用することを含み得る。植物を本化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることは、本化合物、塩、溶媒和物又は組成物を植物容器（例えば、花瓶）に添加し、植物をその植物容器に入れることを含み得る。植物を本化合物、塩、溶媒和物又は組成物と接触させることは、本化合物、塩、溶媒和物又は組成物を土壌に添加することを含み得る。

【0156】

植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９７％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約２０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約３０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約４０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約５０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約５５％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約６０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約６５％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約７０％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約７５％延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約８０％延長され得る。植物の寿命は、植物の種子の最初の植え付けから植物の死までの成長時間を測定することによって決定することができる。

【0157】

植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約６、１２、２４、３０、３６、４２、４８、５４、６０、６６、７２、７８、８４、９０、９６，１０２，１０８，１１４、又は１２０時間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約２４時間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約３６時間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約４８時間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約７２時間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して少なくとも約９６時間延長され得る。

【0158】

植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、又は７日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１日延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約２日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約２．５日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約３日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約３．５日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約４日間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約４．５日間延長され得る。

【0159】

植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、又は７週間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０週間延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、又は７ヶ月延長され得る。植物の寿命は、未処理の植物と比較して、少なくとも約８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０ヶ月延長され得る。

【0160】

植物の寿命を維持又は延長することは、植物のしおれを低減することを含み得る。植物のしおれを低減することは、植物の花又は葉の巻き込みを低減することを含み得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９７％低減され得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約１０％低減され得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約３０％低減され得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約５０％低減され得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約７０％低減され得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約８０％低減され得る。

【0161】

植物ストレスの徴候は、植物のしおれを含み得る。例えば、ストレスを受けた植物は、葉又は花弁の巻き込みが生じる場合がある。本明細書に開示される植物成長材料は、植物のしおれを減少させることによって植物の寿命を延ばすことができる。植物のしおれを低減することは、未処理の植物と比較して、植物のしおれを遅らせることを含み得る。例えば、未処理の切断植物は、切断されてから３６時間以内にしおれの兆候を示すことがあるが、植物成長材料で処理された切断された植物は、しおれが遅れることがある。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、又は２４時間遅延させることができる。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約１２時間遅延し得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約２４時間遅延し得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約３６時間遅延し得る。植物のしおれは、未処理の植物と比較して、少なくとも約４８時間遅延し得る。

【0162】

植物ストレスのさらなる徴候は、膨らみの低下を含み得る。膨らみは、細胞の外側の低溶質濃度の領域から細胞の液胞への水の浸透流によって引き起こされる圧力を指し得る。膨らみを維持するために植物によって剛性が使用され得る。多くの場合、健康な植物は膨らんでいるが、不健康な植物は膨らみが少ない。植物の寿命を維持又は延長することは、植物の膨らみを延長又は維持することを含み得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみよりも少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９７％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約１０％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約１５％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約２５％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約３５％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約４５％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約６０％大きくなり得る。植物の膨らみは、未処理の植物の膨らみより少なくとも約７５％大きくなり得る。

【0163】

ストレスを受けた植物は、膨らんだ状態の減少も示し得る。膨らんだ状態は、植物がその剛性を維持する期間を指す場合がある。植物の剛性は、植物の茎の剛性を指す場合がある。例えば、切断された植物が枯れると、その植物の茎の剛性が低下し、それによって切断された植物が倒れたり曲がったりすることがある。ストレスを受けた植物は、それ自体を直立させることができない場合がある。植物の寿命を維持又は延長することは、植物が膨らんだ状態を延長することを含み得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９７％増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約２０％増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約３０％増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約４０％増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約５０％増加し得る。

【0164】

植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、又は２４時間増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約６時間増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約１２時間増加し得る。植物が膨らんだ状態は、未処理の植物と比較して、少なくとも約２４時間増加し得る。

【0165】

ストレスを受けた植物は、葉又は花弁を失うことがある。植物を植物成長材料と接触させることにより、植物の１つ以上の花弁又は葉の喪失を減少又は遅延させることができる。例えば、未処理の植物が、その葉又は花弁の５０％を失い得るのに対し、処理した植物は、その葉又は花弁の１０～２５％を失い得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、又は９７％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約１０％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約２０％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約３５％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約５０％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約６０％減少し得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約７０％減少し得る。

【0166】

植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、又は２４時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５又は１００時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約６時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約１２時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約１８時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約３６時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約４８時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約６０時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約７２時間遅延され得る。植物の１つ以上の花弁の喪失は、未処理の植物の１つ以上の花弁の喪失と比較して、少なくとも約９６時間遅延され得る。

【0167】

ストレスを受けた植物は変色の兆候を示すことがある。ストレスを受けた植物は茶色がかって見えることがある。代替的又は追加的に、ストレスを受けた植物は、緑色の葉の外観の減少を示す。ストレスを受けた植物のクロロフィル含有量も減少し得る。植物の寿命を維持又は延長することは、植物のクロロフィル含有量を維持することを含み得る。例えば、未処理の植物のクロロフィル含有量の減少は、切断されてから４８時間以内に現れ得る。しかし、処理した植物のクロロフィル含有量の減少は、切断の６０時間後に現れ得る。植物のクロロフィル含有量は、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、又は２４時間維持され得る。植物のクロロフィル含有量は、少なくとも約６時間維持され得る。植物のクロロフィル含有量は、少なくとも約１２時間維持され得る。植物のクロロフィル含有量は、少なくとも約２４時間維持され得る。葉の枯死（早期黄変）などの変色は、栄養素の可用性が低い結果として起こり得、植物の健康状態が悪いことの指標となり得る。例えば、葉の枯死は、窒素欠乏の結果であり得る。

【0168】

植物の寿命を維持又は延長することは、植物のクロロフィル含有量の喪失を低減又は遅延させることを含み得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物のクロロフィル含有量よりも多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、又は５０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％又は９７％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約２０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約３０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約４０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約５０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約６０％多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、８、９、又は１０倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量よりも少なくとも約１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５又は１００倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量より少なくとも約２倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量より少なくとも約３倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量より少なくとも約４倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量より少なくとも約５倍多くなり得る。植物のクロロフィル含有量は、未処理の植物の含有量より少なくとも約１０倍多くなり得る。

【0169】

植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、又は２４時間遅延し得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約３０、３５、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、又は１００時間遅延し得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約６時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約１２時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約２４時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約３６時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約４８時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約６０時間遅延され得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失と比較して、少なくとも約７２時間遅延され得る。

【0170】

植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約１％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、５０％、５５％、又は６０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約６５％、７０％、７２％、７５％、７７％、８０％、８５％、９０％、９２％、９５％、又は９７％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約５％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約１０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約２０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約３０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約４０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約５０％少なくなり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失よりも少なくとも約６０％少なくなり得る。

【0171】

植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／１．５、１／２、１／２．５、１／３、１／３．５、１／４、１／４．５、１／５、１／５．５、１／６、１／６．５、１／７、１／７．５、１／８、１／８．５、１／９、１／９．５、又は１／１０倍であり得る。植物のクロロフィル含有量の喪失は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／１１、１／１２、１／１３、１／１４、１／１５、１／１６、１／１７、１／１８、１／１９、１／２０、１／２５、１／３０、１／３５、１／４０、１／４５、１／５０、１／５５、１／６０、１／６５、１／７０、１／７５、１／８０、１／８５、１／９０、１／９５、又は１／１００倍であり得る。植物のクロロフィル含有量の減少は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／２倍であり得る。植物のクロロフィル含有量の減少は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／３倍であり得る。植物のクロロフィル含有量の減少は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／５倍であり得る。植物のクロロフィル含有量の減少は、未処理の植物のクロロフィル含有量の喪失の少なくとも約１／１０倍であり得る。

【0172】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物に直本接施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、植物の１つ以上の部分に施用することができる。植物の１つ以上の部分は、末端芽、花、側芽、葉身、葉軸、節、節間、葉柄、一次根、側根、根毛、根冠、又はそれらの組合わせを含み得る。本組成物は、植物の葉身に施用することができる。本組成物は、植物の根に施用することができる。

【0173】

代替的又は追加的に、本化合物、塩、溶媒和物又は組成物を土壌に施用することができる。本組成物は、植物の周りの領域に施用することができる。植物の周りの領域は、土壌を含んでもよい。植物の周りの領域は、隣接する植物を含んでいてもよい。本組成物は、植物又は種子を土壌に入れる前に土壌に施用することができる。本組成物は、土壌中に存在する細菌コンソーシアムに施用することができる。本組成物は、土壌中の天然細菌コンソーシアムを補うために追加の細菌と共に施用することができる。

【0174】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、寄生雑草の影響を受けやすい植物に施用することができる。植物の例としては、トウモロコシ、イネ、モロコシ、キビ及びサトウキビが挙げられるが、これらに限定されない。植物はトウモロコシであり得る。植物はタバコであり得る。植物はイネであり得る。

【0175】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、シードコーティングの形で施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、種子処理の形で施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、種子粉衣の形で施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、スプレーの形で施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、葉面スプレーの形で施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、粉末の形で施用することができる。この粉末は、水和剤であってもよい。

【0176】

本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１日に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回又はそれ以上施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１日１回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１日２回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１週間に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回又はそれ以上施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１週間に１回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１週間に２回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１週間に３回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１週間に４回施用することができる。本組成物は、１ヶ月に１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０回又はそれ以上施用することができる。本組成物は、月に１回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１ヶ月に２回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１ヶ月に３回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、１ヶ月に４回施用することができる。本組成物は、月に１０回施用することができる。本化合物、塩、溶媒和物又は組成物は、月に１５回施用することができる。本組成物は、月に２０回施用することができる。

【0177】

場合によって、本明細書に記載の測定は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、又は４０℃の温度で行うことができる。

【実施例】

【0178】

実施例１ 試験化合物は土壌細菌の純粋分離株のリン酸可溶化活性を刺激する

【0179】

Ｂ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）の５ｍＬ培養物を単一コロニーからＮｕｔｒｉｅｎｔ Ｂｒｏｔｈ（ＮＢ）に播種し、３０℃振盪機内で一晩増殖させた。細胞ペレットを遠心分離によって回収し、２回洗浄し、水に再懸濁した。Ｂ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）の濃度は、Ｎａｎｏｄｒｏｐ ＯＤ_６００読み取り値を用いて測定した。Ｂ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）を、その唯一のリン源として不溶性リン酸三カルシウム［５３ｍＭ］Ｃａ_３（ＰＯ_４）_２）を含有する液体ＮＢＲＩＰ培地に接種した。ＮＢＲＩＰ培地中のＢ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）の最終濃度はＯＤ_６００＝０．０２（３×１０^３ＣＦＵ／ｍＬ）であった。ＮＢＲＩＰ培地に、１％ＤＭＳＯ溶液中の試験化合物を最終濃度１００μｇ／ｍＬまで添加した。本化合物及びＤＭＳＯを０．２μＭフィルターで濾過滅菌した。

【0180】

実験開始時と７２時間の増殖後に、培養チューブから１ｍＬの培養物を収集した。上清を遠心分離（１３，０００ｒｐｍで５分間）によって回収した。清澄化した上清を分子グレードの水で１：００に希釈し、マラカイトグリーン法によるオルトリン酸分析に使用した。残りの４ｍＬの上清を遠心分離によって回収し、ｐＨの読み取りに使用した。

【0181】

図１は、例示的な化合物であるケルセチン（ＱＣ）が、Ｂ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）レポーター株と接触した場合に可溶性オルトリン酸の産生を刺激することを示す。実際、細菌をＱＣと接触させると、ＱＣと接触させていない細菌と比較して、可溶性オルトリン酸塩の濃度が有意に増加する。

【0182】

実施例２ 試験化合物は土壌コンソーシアムにおけるリン酸塩可溶化を刺激する

【0183】

試験化合物ＱＣが土壌の天然微生物群におけるリン酸塩可溶化を変化させるかどうかを調べるために、乾燥させ、ふるい分けした土壌を、ＱＣありとＱＣなしのＮＢＲＩＰ培地における細菌接種材料として使用した。図２に示すように、処理は、ＱＣと接触させなかった土壌と比較して、土壌接種培養物の増殖培地中の検出可能なオルトリン酸の量を増加させた。さらに、５０μｇ／ｍＬのＱＣは２５μｇ／ｍＬのＱＣよりも大幅にリン酸塩可溶化を増加させるように見受けられることから、刺激の量は用量依存的であると思われる。

【0184】

実施例３ 試験化合物が窒素固定遺伝子クラスターを誘導する

【0185】

アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）（ｎｉｆＨｐｒｏ）のｎｉｆＨＤＫのＡＴＧの３００塩基対の上流を、ｐＶＳＰ６１（ｋａｎＲ）中のルシフェラーゼの上流にインフレームでクローニングした。アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）（Ｌｉｐｍａｎ ＡＴＣＣ（登録商標）ＢＡＡ－１３０３）を、三親交配を用いてレポータープラスミドで形質転換し、形質転換体を窒素非含有カナマイシンプレートで選択し、ＰＣＲ及び配列決定で確認した。

【0186】

５ミリリットルのｎｉｆＨｐｒｏ：：ルシフェラーゼバイオリポーター株Ｎｏ．１７１を、滅菌５０ｍＬフラスコ中、オートクレーブした、出発ＯＤ_６００＝０．０２の、１ｕｇ／ｍＬのカナマイシンを含む窒素不含培地（Ｂｕｒｋｓ、ＨｉＭｅｄｉａ Ｍ７０７）中で一晩増殖させた。化学処理を１００％ＥｔＯＨに溶解し、体積を一定に保ちながら適切な濃度で添加した。溶媒は最終培養体積の２％以下であり、溶媒のみの対照を各実験に含めた。

【0187】

２４時間後、各培養物の増殖密度を透明な平底マイクロプレートの中で、各ウェルに１８０μｌを添加し（フラスコを三連で測定）、マイクロプレートリーダーで６００ｎｍの吸光度を測定することによって読み取った。試料を黒色の不透明な底のマイクロプレートに移し、１０ｍＭのルシフェリン（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号８８２９４）２０μｌを１ｍＭの最終濃度を目指して加えた。試料をピペッティングによって十分に混合し、室温で１０分間インキュベートした。

【0188】

各ウェルの発光をｉＤ３プレートリーダー（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ）で読み取った。培養密度を調整するために、各ウェルの発光（ＲＬＵ、相対光単位として記録された）をそのＯＤ_６００で割った。

【0189】

図３に示すように、アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）レポーター細菌を試験化合物ＱＣと培養すると、ＱＣと接触していない対照細菌と比較して、窒素固定の量が有意に増加する。具体的には、細菌株を１μＭのＱＣと接触させると、ＱＣと接触させていない対照細菌と比較して発光が有意に増加し、それによってＱＣによる窒素固定の有意な増加を示した。

【0190】

実施例４ 本明細書に記載の化合物で植物を処理することによって、より健康的な植物が生産される。

【0191】

種子処理及び植付

【0192】

本明細書に記載される式の様々な化合物を、植物バイオマスの増加をもたらす能力についてスクリーニングした。本化合物をアセトンに溶解することによって、活性成分溶液を０．１ｍＭで作製した。活性成分を含まないアセトンのみの用量（０ｍＭ）を対照として使用した。各用量溶液の最終体積は３．７５ｍｌであり、これを約３６０個の小麦種子（品種Ｐａｔｗｉｎ）（ＵＣ Ｄａｖｉｓ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ Ｓｅｅｄ Ｐｒｏｇｒａｍ）を含むガラスシンチレーションバイアルに入れた。種子を処理溶液と共に激しく混合し、２４時間乾燥させた。

【0193】

処理した種子及び対照の種子を、底部の給水を可能にするために８オンスの食事調製トレイ（Ｅｚ Ｐｒｅｐａ（商標））（６つのインサート／トレイ）に保持された標準的な植え付けインサートに植えた。使用した増殖培地は、不活性焼成粘土であるＴｕｒｆａｃｅ（商標）（Ｐｒｏｆｉｌｅ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ＬＬＣ、バッファローグローブ、イリノイ州）であった。各インサートに約４０ｍｌのＴｕｒｆａｃｅ（商標）を充填した。単一細胞インサート（２．３５インチ×２．１５インチ×２．３３インチ）が１つの実験の代表を構成し、そこに約４８個の種子が植えられた。植え付けは、噴霧ボトルからの水ミストで湿らせた後、増殖培地の上に種子を均一に広げることによって行った。次いで、インサートを２５０ｍｌの水で底部を湿らし、ホイルで覆い、暗所で４８時間インキュベートした。次いで、ホイルを取り出し、インサートを含むトレイを１週間の増殖期間にわたって増殖照明下に置いた。水１００ｍｌを添加することによって底部を水で湿すことを毎日行った。実生を最初に均一な種子発芽及び真菌汚染についてモニタリングした。０．００１ｍＭ、０．０１ｍＭ、０．１ｍＭ、１ｍＭ及び１０ｍＭの用量曲線をそれぞれ６回繰り返して使用し、対応する対照（０ｍＭ）を１２回繰り返して使用して各化合物を試験した。全ての実験の繰り返し及び対照を成長光下で無作為化し、それらの位置を３日ごとに変更した。

【0194】

化合物評価のための植物表現型分析

【0195】

植物を、３６５ＰＰＦ（μｍｏｌ／秒）の光強度を有するＬＥＤ光（Ｎｅｘｔ Ｌｉｇｈｔ（商標）、シンシナティ、オハイオ州）を使用して、２４℃で１６時間／Ｌ及び２０℃で８時間／Ｄの明／暗（Ｌ／Ｄ）サイクルの下で育成室で３週間生育した。

【0196】

図４は、化合物を欠く対照溶液と接触させた対照植物と比較した、試験した化合物と接触させた植物間の植物バイオマスの変化倍率を示す。図に示すように、いくつかの化合物は、対照植物と比較して植物のバイオマスを有意に増加させることができ、対照植物と比較して約１倍から約２倍の範囲の増加であった。

【0197】

本明細書には例示的な実施形態を示して説明しているが、かかる実施形態は単なる例である。例示的な実施形態に対して、多数の変形、変更、及び置換を行うことができる。本明細書に記載の実施形態に対する様々な代替形態が使用され得ることを理解されたい。

【0198】

実施例５ 土壌細菌（バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ））の純粋分離株のリン酸可溶化活性の刺激

【0199】

バチルス・メガテリウム（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）は、リン酸塩可溶化活性を有することが知られている一般的な土壌細菌である。リンの不溶性形態のＣａ_３（ＰＯ_４）_２のみを含有する固体培地（ＮＢＲＩＰ＋寒天）上で増殖させた場合の、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）コロニー周辺のクリアゾーン（又はハロ）を観察することによって、Ｂ．メガテリウム（Ｂ．ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）株をアイオワ州の土壌から単離し、そのリンを可溶化する能力を確認した。

【0200】

次いで、Ｂ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）の培養物を、式Ｉｄあり及び式Ｉｄなしの液体ＮＢＲＩＰ（不溶性Ｃａ_３（ＰＯ_４）_２のみを含有する）中で増殖させた。増殖培地上清を、増殖後４日目に、マラカイトグリーン定量法によってオルトリン酸について分析した。

【0201】

未処理培養物と比較して、式Ｉｄで処理したＢ．メガテリウム（ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ）培養物におけるリン酸塩可溶化の統計学的に有意な増加が処理４日後に観察された（図５）。

【0202】

実施例６ モデル窒素固定遊離土壌ジアゾトローフ（アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ））におけるｎｉｆＨｐｒｏの刺激

【0203】

ｎｉｆＨｐｒｏ：：ルシフェラーゼ・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）レポーター株の作製

【0204】

Ｇｉｂｓｏｎ Ａｓｓｅｍｂｌｙを使用して、ルシフェラーゼ遺伝子（ＩＤＴから配列）をｐＥ＿Ｇｍにクローニングし、ＬＲをｐＶＳＰ６１にクローニングした（ＵＣ ＢｅｒｋｅｌｅｙのＳｔａｓｋａｗｉｃｚ ＬａｂのＤｏｕｇ Ｄａｈｌｂｅｃｋによって提供されたプラスミド）。（ＵＣ ＢｅｒｋｅｌｅｙのＳｔａｓｋａｗｉｃｚ ＬａｂのＤｏｕｇ Ｄａｈｌｂｅｃｋによって提供された）ｐＲＫ６００による標準的な三親交配を用いて、レポータープラスミドで形質転換されたアゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）の最終レポーター株を得た。

【0205】

ｎｉｆＨｐｒｏ：：ルシフェラーゼ・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）レポーター株によるニトロゲナーゼ（ｎｉｆＨ）活性のアッセイ

【0206】

ｎｉｆＨｐｒｏ：：ルシフェラーゼ・アゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）を、１ｎｇ／μＬのカナマイシンを含む５０ｍＬの液体Ｂｕｒｋｓ－Ｎ培地（ＨｉＭｅｄｉａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）中、１００ＲＰＭで振盪しながらライトの下、約３０℃で２４時間増殖させた。２４時間後、上清を１２０００Ｇで２分間遠心して細胞を回収した。上清を除去した後、細胞を透明化したＢｕｒｋｓ－Ｎ液体培地上清で洗浄し、再懸濁し、１２０００Ｇで再度遠心分離した。このプロセスを繰り返し、合計で２回洗浄した。

【0207】

再懸濁した細胞を１ｎｇ／μＬのカナマイシンを含むＢｕｒｋｓ－Ｎ培地と組み合わせて、ＯＤ０．１の新鮮な培養物を得た。次いで、５０ｍＬ振盪フラスコに、以下のスキームで５ｍＬのこの培養物と適切な化学物質を接種した。ケルセチンのストック溶液をＤＭＳＯ中で作製した。ＤＭＳＯ中の１０μＭ、５μＭ、１μＭ、０．１μＭ及び０．００１μＭの式Ｉｄの１０個の生物学的複製物、並びに１０個の対照複製物を、５０ｍＬ振盪フラスコ中で調製した。フラスコを固定し、ライトの下、約３０℃で、１００ＲＰＭで２１時間振盪した。

【0208】

２１時間後、５０ｍＬのフラスコをシェーカーから取り出した。各フラスコから上清試料を取り出し、ＯＤ０．３に対して正規化した。ｎｉｆＨ／ルシフェラーゼの活性を測定するために、各試料から得られた３つの技術的複製物（それぞれ１８０μＬ）を黒色丸底９６ウェルプレートにプレーティングし、１０ｍＭのルシフェリン２０μＬと共に５分間インキュベートした。プレートをプレートリーダーに挿入し、各ウェルの発光を分析した。このデータの収集後、Ｐｒｉｓｍグラフソフトウェアを使用して濃度－発光応答グラフを生成した。

【0209】

反復実験室実験（ｎ＝９）では、式Ｉｄは対照よりもｎｉｆＨｐｒｏ：：ルシフェラーゼバイオリポーターを活性化し、自由生活性窒素固定細菌であるアゾトバクター・ビネランディ（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ ｖｉｎｅｌａｎｄｉｉ）におけるニトロゲナーゼ遺伝子発現の増加を示した（図６）。

【0210】

実施例７トウモロコシに葉面スプレーの形で施用した場合の微生物リン酸可溶化の刺激

【0211】

植物に施用した場合と土壌に直接施用した場合のリン酸塩可溶化効果を刺激する式Ｉｄの能力を試験するために、３週齢のトウモロコシ植物を屋外土壌コンソーシアム培養物に導入した。

【0212】

実験の約２週間前に、トウモロコシを土壌から取り出し、根から培養土を取り除いた。植物は、水道水中に放置して栄養ストレスを誘導されると、リン酸欠乏に関連する表現型の徴候である紫色の縞模様を示した。トウモロコシの葉に式Ｉｄを噴霧し（噴霧施用中は根をホイルで保護）、根をＮＢＲＩＰ液体培地及び土壌接種剤のフラスコに入れた。フラスコを蛍光灯下の低速オービタルシェーカーに置き、２４時間後に培地上清をリン酸塩濃度について試験した。

【0213】

Ｂ７３トウモロコシ植物をＶ３成長段階まで成長させ、ポッティング土壌から取り出し、すすぎ、水道水に１．５週間入れて栄養ストレスを誘導した。植物に葉面処理（指先噴霧器を使用して３ｍＬ／植物）を施し、５０ｍＬのＮＢＲＩＰ増殖培地（［５３ｍＭ］Ｃａ３（ＰＯ_４）_２）及び５００ｍｇの２ｍｍ粒子サイズの圃場土壌が入った２５０ｍＬバッフル付きフラスコに入れた。処理されたコーン及び滅菌された泡キャップを有するフラスコを、蛍光灯下、室温で１日間、１００ＲＰＭのオービタルシェーカーに置いた。オルトリン酸は、マラカイトグリーンホスフェート法を用いて測定した。

【0214】

図７に示すように、水対照と比較した場合、葉面スプレーの形でトウモロコシの葉に施用された式Ｉｄ処理に応答して、リン酸塩可溶化の統計学的に有意な増加が観察された。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4-1】

【図4-2】

【図5】

【図6】

【図7】

【国際調査報告】