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特表2023-533391トラボプロストを送達するための親水性分解性マイクロスフェア
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-08-02
(54)【発明の名称】トラボプロストを送達するための親水性分解性マイクロスフェア
(51)【国際特許分類】
A61K 31/5575 20060101AFI20230726BHJP
A61K 9/10 20060101ALI20230726BHJP
A61K 47/69 20170101ALI20230726BHJP
A61K 9/16 20060101ALI20230726BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20230726BHJP
A61P 27/06 20060101ALI20230726BHJP
【ＦＩ】
A61K31/5575
A61K9/10
A61K47/69
A61K9/16
A61P27/02
A61P27/06
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023525117
(86)(22)【出願日】2021-07-07
(85)【翻訳文提出日】2023-03-09
(86)【国際出願番号】 EP2021068911
(87)【国際公開番号】W WO2022008625
(87)【国際公開日】2022-01-13
(31)【優先権主張番号】20305777.3
(32)【優先日】2020-07-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523010018
【氏名又は名称】オクルジェル
【氏名又は名称原語表記】ＯＣＣＬＵＧＥＬ
(71)【出願人】
【識別番号】592236245
【氏名又は名称】サントル・ナシオナル・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・シアンティフィク
【氏名又は名称原語表記】ＣＥＮＴＲＥ ＮＡＴＩＯＮＡＬ ＤＥ ＬＡＲＥＣＨＥＲＣＨＥ ＳＣＩＥＮＴＩＦＩＱＵＥ
(71)【出願人】
【識別番号】520179305
【氏名又は名称】ユニヴェルシテ パリ－サクレー
【氏名又は名称原語表記】ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＥ ＰＡＲＩＳ－ＳＡＣＬＡＹ
(74)【代理人】
【識別番号】100145403
【弁理士】
【氏名又は名称】山尾 憲人
(74)【代理人】
【識別番号】100156144
【弁理士】
【氏名又は名称】落合 康
(72)【発明者】
【氏名】ベイユヴェール，アンヌ
(72)【発明者】
【氏名】コリュ，エメリーヌ
(72)【発明者】
【氏名】ブドゥエ，ローラン
(72)【発明者】
【氏名】モワンヌ，ロランス
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA16
4C076AA31
4C076AA94
4C076AA95
4C076BB11
4C076CC10
4C076EE45
4C076FF31
4C086AA01
4C086AA02
4C086DA01
4C086MA05
4C086MA21
4C086MA41
4C086MA66
4C086NA12
4C086NA13
4C086ZA33
(57)【要約】
本発明は、有効量のプロスタグランジンアナログ、架橋マトリックスを含む少なくとも１つの親水性分解性マイクロスフェアおよび注入投与のための薬学的に許容される担体を含む組成物であって、前記架橋マトリックスが、少なくとも、ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)の親水性モノマー；ｂ)０.１～３０ｍｏｌ％の式(II)の環状モノマー；およびｃ)５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の１つの分解性ブロックコポリマークロスリンカーを含む組成物であって、前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーが直鎖状または星型であり、その全ての末端に(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－基を有するものである、組成物に関する。本発明はまた、中程度の高眼圧症または緑内障を予防および／または処置するための、このような組成物に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
注入により投与するための、有効量のプロスタグランジン、架橋マトリックスを含む少なくとも１つの親水性分解性マイクロスフェアおよび薬学的に許容される担体を含む組成物であって、前記架橋マトリックスが、少なくとも：ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
の親水性モノマー；
ｂ)０.１ｍｏｌ％～３０ｍｏｌ％の式(II)：
【化1】
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはアリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー；および
ｃ)５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の、０.５０～１１.２０の分配係数Ｐ、または１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する直鎖状または星型の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、式：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)；
Ｗ(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
各Ｒ１１は独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基；
Ｘは独立して、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬ；
ｎおよびｋは独立して、１～１５０の整数であり；
ｐは１～１００の整数であり；
Ｗは炭素原子、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基または１～６個の炭素原子を含む基であり；
ｚはＰＥＧ分子のアーム数を表し、３～８の整数である〕
を有する、分解性ブロックコポリマークロスリンカー
に基づく架橋マトリックスであり、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表されるものである、組成物。
【請求項2】
分解性ブロックコポリマークロスリンカーｃ)が、一般式(IIIa)または(IIIc)の化合物、特に、Ｘ＝ＰＬＡ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝９およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＬＧＡ；ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝４；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２
である、一般式(IIIa)の化合物から成る群から選択されるものである、請求項１に記載の組成物。
【請求項3】
分解性ブロックコポリマークロスリンカーｃ)が、一般式(IIIa)または(IIIc)、特に、ＸがＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬを表す一般式(IIIa)のものである、請求項１に記載の組成物。
【請求項4】
分解性ブロックコポリマークロスリンカーｃ)が、総モル数に対して５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％、有利には１５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％の量で反応混合物中に存在するものである、請求項１～３のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項5】
環状モノマーｂ)が、２－メチレン－１，３－ジオキソラン、２－メチレン－１，３－ジオキサン、２－メチレン－１，３－ジオキセパン、２－メチレン－４－フェニル－１，３－ジオキソラン、２－メチレン－１，３，６－トリオキソカンおよび５，６－ベンゾ－２－メチレン－１，３－ジオキセパンから成る群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項6】
親水性モノマーａ)が、ｓｅｃ－ブチル アクリレート、ｎ－ブチル アクリレート、ｔ－ブチル アクリレート、ｔ－ブチル メタクリレート、メチルメタクリレート、Ｎ－ジメチル－アミノエチル (メチル)アクリレート、Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロピル－(メタ)アクリレート、ｔ－ブチルアミノエチル (メチル)アクリレート、Ｎ，Ｎ－ジエチルアミノアクリレート、アクリレート末端ポリ(エチレンオキシド)、メタクリレート末端ポリ(エチレンオキシド)、メトキシポリ(エチレンオキシド) メタクリレート、ブトキシポリ(エチレンオキシド)メタクリレート、アクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メタクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレート、ブトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレートから成る群から選択される、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項7】
親水性分解性マイクロスフェアの架橋マトリックスが、さらに鎖転移剤ｄ)に基づくものである、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項8】
１～６ｍｇ／ｍＬのプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロストを含む、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項9】
ブロックコポリマークロスリンカーｃ)が、ｐが７であり、Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬであり、ｎ＝１０であり、ｚが３である一般式式(IIIc)の化合物である、請求項１および４～８のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項10】
高眼圧症または緑内障の予防および／または処置に使用するための、請求項１～９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項11】
プロスタグランジンアナログが、少なくとも３週間、有利には３週間～６か月間の間放出されるものである、請求項１０に記載の使用のための組成物。
【請求項12】
処置を必要とする対象への有効量のプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロストの送達に使用するための親水性分解性マイクロスフェアであって、前記親水性分解性マイクロスフェアが請求項１～９のいずれか一項で定義されるとおりのものである、親水性分解性マイクロスフェア。
【請求項13】
プロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロストが、少なくとも３週間、有利には３週間～６か月間の間放出されるものである、請求項１２に記載の使用のための親水性分解性マイクロスフェア。
【請求項14】
ｉ)少なくとも１つの請求項１～９のいずれか一項で定義される親水性分解性マイクロスフェアとともに、注入による投与のための薬学的に許容される担体；ii)有効量のプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロスト；および
iii)場合により、注入デバイス
を含む医薬キットであって、
ここで、前記親水性分解性マイクロスフェアおよびトラボプロストは別個に包装されているものである、医薬キット。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、プロスタグランジンアナログを送達するための親水性分解性マイクロスフェアに関する。特に、本発明は、有効量のプロスタグランジンアナログおよび親水性分解性マイクロスフェアを含む組成物に関する。本発明はまた、高眼圧症または緑内障の予防および／または処置に使用するための前記組成物に関する。
【背景技術】
【0002】
緑内障は、目の視神経を損傷し、進行性で不可逆的な視野欠損につながる疾患である。緑内障は通常、眼球の前部に液体が溜まることで起こる。この余分な液体が眼圧を上昇させ、網膜神経節細胞ニューロンおよびそれらの軸索の細胞死を誘発し、時間の経過とともに視神経に損傷を与える。生じた損傷は不可逆性であり、緑内障は、世界第２位の失明の原因である。実際に、世界で約６０００万人が罹患しており、２０４０年には１億人が罹患すると予測されている(Yadav 2019, Materials Science & Engineering C: 103)。緑内障の経済的負担は重大であり、２００９年のメディケアへの全体的費用は７億４８００万ドルであった(Lambert 2015, Transl Vis Sci Technol. 4(1))。視野欠損のない緑内障患者の年間眼科医療関連費用は８１５７ドル(２００７年、米ドル)であり；これは中程度から重度の視野欠損では１４,２３７ドルに増加し、疾患による失明患者では１８,６７０ドルに達した。
【0003】
緑内障の主な２つのタイプは、原発性開放隅角緑内障および閉塞隅角緑内障である。原発性開放隅角緑内障は、疾患の最も一般的な形態である。角膜および虹彩により形成される隅角は開いたままであるが、海綿体網膜は部分的に閉塞される。これにより眼内の圧力が徐々に上昇する。この圧力により視神経が損傷し、徴候または症状を伴わない視野欠損をもたらし得る。
【0004】
閉塞隅角緑内障は閉塞角緑内障とも称され、虹彩が前方に膨らみ、角膜と虹彩で形成される隅角を狭めるか塞ぐときに発症する。結果として、眼内の液体が循環できず、圧力が上昇する。閉塞隅角緑内障は、突然(急性閉塞隅角緑内障)または徐々に(慢性閉塞隅角緑内障)起こり得る。
【0005】
早期に処置すれば、緑内障の進行は薬物治療、レーザー治療、手術などで進行を遅らせるか、停止させることができる。視神経を修復することは不可能であるため、これらの処置の目的は眼内圧を低下させることである。点眼薬は、原発性開放隅角緑内障の処置のために選択される。したがって、房水の排出を増大する、その生産を減少させる、またはその両方を目的として処置が行われる。房水の生成の低減は、炭酸脱水酵素阻害剤(ブリンゾラミド、ドルゾラミド)およびβ－ブロッカー(チモロール、レボブノロール、ベタキソロール、カルテオロール)を用いて達成される治療目標である。プロスタグランジンアナログ(ラタノプロスト、ビマトプロスト、トラボプロスト)などの他の薬剤も、房水の排泄を促進する。
【0006】
しかしながら、外用薬の患者アドヒアランスの問題が、点眼薬による緑内障処置の障害となる。眼内圧が１ｍｍＨｇ下がると緑内障の進行が１０％低減され得ると考えられるため、定期的な点眼が必須である。６か月後の処置中断が患者の５０％で報告され(Nordstrom et al; 2005, Am J Ophthalmol, 140:598-606)、最初の処方から１年後の患者の継続率は２２.５％、そして３年後の継続率は１１.５％に低下する(Quek et al; 2011. Arch Ophthalmol. 129:643-8)。さらに、多くの患者(１３％)が点眼薬を正しく使用できない(Brown et al; 1984. Can J Ophthalmol. 19:2-5)。処置のアドヒアランスが悪いと、患者の５０％で緑内障の進行が誘発される(Lambert 2015, Transl Vis Sci Technol. 4(1))。
【0007】
点眼薬による緑内障処置のノンアドヒアランスは、処置失敗の主な原因であり得る。抗緑内障薬を毎日適用することを可能にするために、新たな治療法を開発する必要がある。その一つが、持続的な局所投与のための薬物送達系(ＤＤＳ)の結膜下注射である。シンガポールでのある研究では、緑内障患者の７４％が３か月に１回の結膜下注射による緑内障処置の代替形態を許容する意思があることが分かった(Song et al; 2013. J Glaucoma. 22:190-4)。
【0008】
ヒトにおける結膜下注射は、多様な適応症に一般的に使用される技術である：眼内圧を低下させるためのマイトマイシンＣの注射(Gandolfi et al; 1995. Arch Ophthalmol. 113:582-5)、前部強膜炎(Sen et al; 2005. Br J Ophthalmol. 89: 917-8)または黄斑浮腫(Carbonniere et al; 2017. J Fr Ophtalmol. 40:177-86)の処置のためのコルチコステロイド注射。結膜には、前部強膜を覆う眼球結膜と瞼の内側を覆う眼瞼結膜がある。結膜は上皮層および実質層から成る、薄く透明な膜である。ヒト眼球結膜の平均的な全体の厚さは約２４０μｍであり、約５０μｍの上皮厚と約１９０μｍの間質厚を有する(Zhang et al; 2011. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52:7787-91)。結膜下注射は、眼球結膜と強膜の間で実施される。注入体積は通常、０.１～０.５ｍＬである(Subrizi et al; 2019, Drug Discovery Today, 24:1446-57)。
【0009】
単回結膜下注射後の持続的な薬物送達のために種々の組成物が試験された。それらの送達パフォーマンスを、インビトロおよびウサギまたはサルにおいてインビボで評価した。いくつかのＤＤＳは、チモロールマレイン酸塩(β－ブロッカー)を用いて調製した。チモロールマレイン酸塩は、ポリ(ラクチド－コ－カプロラクトン)のコポリマーから成る４０μｍの薄さを有するマイクロフィルムインプラント(４×６ｍｍ)に含まれた。その後、限定的に結膜を剥離したサルにおいて、チモロールを充填したマイクロフィルムを１枚挿入した後、結膜を縫合した。持続的な眼圧(ＩＯＰ)の低下が５か月間観測された(Ng et al; 2015. Drug Deliv. and Transl. Res. 5:469-79)。チモロールマレイン酸塩の封入もまた、ＰＬＧＡ分解性マイクロスフェア(平均直径１４μｍ)で実施された。チモロールの持続的な送達がインビトロで３か月間起こり、眼圧正常のウサギに結膜下注入後、持続的なＩＯＰ低下作用が３か月間測定された(Lavik et al; 2016. J Ocul Pharmacol Ther. 32:642-49)。Huangら(J Ocul Pharmacol Ther. 21:445-53; 2005)は、高眼圧のウサギの目袋に留置した後１週間のみＩＯＰを低下させる、ＰＬＧＡから成るチモロールマレイン酸塩ディスクを製造した。他のβ－ブロッカーである、ブリモニジン酒石酸塩は、ＰＬＧＡマイクロスフェア(平均直径７.４μｍ)に含まれた。ウサギでの単回結膜下注射(１５０μＬのＭＳ懸濁液)後１か月間、眼圧低下効果を測定した(Fedorchak et al; 2014. Exp Eye Res. 2014 Aug; 125: 210-6)。
【0010】
房水の分泌を減少させる炭酸脱水酵素阻害剤であるブリンゾラミドは、ＰＬＧＡのナノ粒子に封入された。正常眼圧のウサギへのそれらの結膜下注射は、１０日間眼圧低下をもたらした(Salama et al; 2017. AAPS PharmSciTech. 18:2517-28)。
【0011】
結膜下注射用のプロスタグランジンアナログの持続送達のための注射用ＤＤＳが記載された。Giarmoukakisら(Exp Eye Res. 112:29-36; 2013)は、ラタノプロストを含むＰＬＡ－ＰＥＧナノ粒子(８０ｎｍサイズ)の製造を報告した。インビトロでは１週間の放出が達成され、低侵襲結膜下注射後のインビボでは、最大８日間の有意な眼圧低下効果が正常眼圧のウサギで得られた。ラタノプロストはまた、１００ｎｍのリポソームに封入された。インビトロでは、薬物放出は１か月間持続し、非ヒト霊長類への単回結膜下注射後、持続的ＩＯＰ低下効果が４か月間観測された(Natarajan et al; 2014. ACS Nano. 8:419-29)。
【0012】
前臨床試験では、分解性マイクロフィルム、マイクロスフェア、リポソームまたはナノ粒子などの種々のＤＤＳの単回結膜下留置は、数週間または数か月間眼圧を低下させるのに有効であることが示されている。このようにＤＳＳに包含された降圧薬物の投与経路は効率的であると考えられる。上記のＤＤＳのいくつかは、ＰＬＧＡの固体インプラントのように、留置のために結膜を切開する必要があるなど、臨床的使用には不適切である。他のＤＤＳ(リポソーム、ナノスフェア、マイクロスフェア)は注入により最小限の侵襲性で留置され得る。それらの多くは、眼球結膜に存在する血管の直径(１６～２２μｍ)より小さなサイズを有する(Shu et al. 2019. Eye and Vision. 6:15)。結膜下注射の間は、網膜および脈絡膜の血管を誤って塞栓するリスクが排除できない。１μｍ～１０００μｍの結晶を含むステロイドの肋骨周囲注射後に、網膜中心動脈閉塞の例が記載されている(Li et al; 2018. Medicine 97:17; Benzon et al; 2007. Anesthesiology. 106:331-8)。そのメカニズムは、コルチコイドの不注意な動脈内注入に基づくものであり、顔面動脈系のびまん性吻合のため、眼または網膜中心動脈にグルココルチコイド結晶による逆行性塞栓を引き起こし、視力低下をもたらす可能性がある。結膜下注射後のこのような出来事を回避するために、結膜下注入後、抗緑内障薬を含むＤＤＳのサイズおよび形状が重要なパラメーターであると考えられる。理想的には、それらの大きさは、結膜組織の血管の直径よりも大きくあるべきであるが、細い針で注入するのに十分な柔軟性を有するべきである。
【0013】
緑内障を局所的に処置するために、本発明者らは、局所分解性送達系に注目した。
【0014】
第一の態様において、本発明は、注入により投与するための、有効量のプロスタグランジンアナログ、架橋マトリックスを含む少なくとも１つの親水性分解性マイクロスフェアおよび薬学的に許容される担体を含む組成物であって、前記架橋マトリックスが、少なくとも：
ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
の親水性モノマー；
ｂ)０.１～３０ｍｏｌ％の式(II)：
〔式中、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはリール基であり；
ｉおよびｊは、互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは、単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー；および
ｃ)５～９０ｍｏｌ％の、０.５０～１１.２０の分配係数Ｐ、または１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する直鎖状または星型の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、式：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)；または
Ｗ(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
各Ｒ１１は互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘは独立して、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬであり；
ｎおよびｋは独立して、１～１５０の整数であり；
ｐは１～１００の整数であり；
Ｗは炭素原子、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基または１～６個の炭素原子を含む基であり；
ｚはＰＥＧ分子のアーム数を表し；
ｚは３～８の整数である〕
を有する、分解性ブロックコポリマークロスリンカー
に基づく架橋マトリックスであり、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表されるものである、組成物に関する。
ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
の親水性モノマー；
ｂ)０.１～３０ｍｏｌ％の式(II)：
【化1】
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはリール基であり；
ｉおよびｊは、互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは、単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー；および
ｃ)５～９０ｍｏｌ％の、０.５０～１１.２０の分配係数Ｐ、または１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する直鎖状または星型の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、式：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)；または
Ｗ(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
各Ｒ１１は互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘは独立して、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬであり；
ｎおよびｋは独立して、１～１５０の整数であり；
ｐは１～１００の整数であり；
Ｗは炭素原子、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基または１～６個の炭素原子を含む基であり；
ｚはＰＥＧ分子のアーム数を表し；
ｚは３～８の整数である〕
を有する、分解性ブロックコポリマークロスリンカー
に基づく架橋マトリックスであり、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表されるものである、組成物に関する。
【0015】
第二の態様において、本発明は、高眼圧症または緑内障の予防または処置に使用するための、本発明の組成物に関する。
【0016】
第三の態様において、本発明は、必要とする対象への有効量のプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロストの送達に使用するための、本発明の親水性分解性マイクロスフェアに関する。
【0017】
第四の態様において、本発明は、
ｉ)薬学的に許容される担体を含む少なくとも１つの本発明の親水性分解性マイクロスフェア；
ii)有効量のプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロスト；および
iii)場合により、注入デバイス
を含む医薬キットであって、親水性分解性マイクロスフェアおよびトラボプロストが別個に包装された、医薬キットに関する。
ｉ)薬学的に許容される担体を含む少なくとも１つの本発明の親水性分解性マイクロスフェア；
ii)有効量のプロスタグランジンアナログ、有利にはトラボプロスト；および
iii)場合により、注入デバイス
を含む医薬キットであって、親水性分解性マイクロスフェアおよびトラボプロストが別個に包装された、医薬キットに関する。
【図面の簡単な説明】
【0018】
【図1】水中で室温で１時間のトラボプロスト充填に対するマイクロスフェア組成の影響。ノンパラメトリックのマン・ホイットニー検定を用いて、１ｍｇ／ｍＬ(＊)または２ｍｇ／ｍＬ(＃)の充填物について、５％のクロスリンカー(ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３またはＰＥＧ１３－ＰＣＬ８)でのマイクロスフェアに対して比較を実施した。有意差はｐ＜０.０５に設定した。データは平均値である。
【図2】乾燥マイクロスフェアを室温で１０分間、生理食塩水中で膨潤させたときの２つの薬物ペイロードについてのトラボプロスト放出に対するＭＳ組成の影響。凍結乾燥後、２つの薬物ペイロードについて、ＭＳを生理食塩水中、室温で１０分間インキュベートした。ノンパラメトリックのマン・ホイットニー検定を用いて、各群の比較を実施した。検定の有意差はｐ＜０.０５に設定した。ＮＳ：有意差なし。
【図3】１ｍｇ／ｍＬまたは２ｍｇ／ｍＬで充填されたマイクロスフェアを生理食塩水中で膨潤させたときのトラボプロストの溶出。Ａ：ノンパラメトリックのマン・ホイットニー(ＭＷ)検定を用いて、１ｍｇ／ｍＬのペイロードについて５％のクロスリンカー(ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３またはＰＥＧ１３－ＰＣＬ８)でのマイクロスフェアに対して比較を実施した(＃)。薬物放出に対する５ｍｏｌ％または３０ｍｏｌ％でのクロスリンカー組成の影響をノンパラメトリックのマン・ホイットニー検定を用いて分析した(＊)。Ｂ：２ｍｇ／ｍＬのペイロードについての３０ｍｏｌ％でのクロスリンカーのトラボプロスト溶出に対する影響を、ノンパラメトリックのマン・ホイットニー検定を用いて分析した。３０ｍｏｌ％のクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３のマイクロスフェア(ＭＳ２)に対して比較を実施した。ペイロードについて、クラスカル・ウォリス(ＫＷ)ノンパラメトリック検定を用いてトラボプロスト放出に対するＰＥＧ１３－ＰＣＬ８クロスリンカー含量の影響を比較した。検定の有意差はｐ＜０.０５に設定した。ＮＳ：有意差なし。データは平均値である。
【図4】１ｍｇ／ｍＬまたは２ｍｇ／ｍＬで充填されたマイクロスフェアのＰＢＳ中でのインキュベート２時間後のトラボプロストの溶出。ノンパラメトリックのマン・ホイットニー検定を用いて、３０ｍｏｌ％のクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３のマイクロスフェア(ＭＳ２)に対して比較を実施した(＊)。検定の有意差はｐ＜０.０５に設定した。ＮＳ：有意差なし。データは平均値である。
【図5】１ｍｇ／ｍＬでの、分解性マイクロスフェアからのインビトロトラボプロスト放出に対するクロスリンカー濃度および組成の影響。
【図6】２ｍｇ／ｍＬでの、分解性マイクロスフェアからのインビトロトラボプロスト放出に対するクロスリンカー濃度および組成の影響。
【図7】即時充填(室温で５分間)後の、６０日間のＭＳ５からのトラボプロストのインビトロ放出。
【図8】ＭＳ５上での即時充填に使用されるプロスタグランジンアナログ。
【図9】無菌ＭＳ５上での即時充填後の、５週間のラタノプロストおよびラタノプロステンブノドのＰＢＳ中でのインビトロ放出。
【図10】分解性マイクロスフェアＭＳ１(Ａ)およびＭＳ３(Ｂ)のサイズ分布。
【発明を実施するための形態】
【0019】
発明の詳細な説明
本発明者らは、驚くべきことに、トラボプロストなどのプロスタグランジンアナログと、架橋ヒドロゲルから成る親水性分解性マイクロスフェア、特に５０～１００μｍの範囲のサイズのマイクロスフェアとの強い相互作用を発見した。
本発明者らは、驚くべきことに、トラボプロストなどのプロスタグランジンアナログと、架橋ヒドロゲルから成る親水性分解性マイクロスフェア、特に５０～１００μｍの範囲のサイズのマイクロスフェアとの強い相互作用を発見した。
【0020】
プロスタグランジンアナログは、プロスタグランジン受容体に結合する薬物のクラスでである。プロスタグランジンアナログは、大部分の形態の緑内障の処置に使用される。処置が必須である正常眼圧緑内障または原発性開放隅角緑内障(ＰＯＡＧ)ならびに高眼圧症(ＯＨＴ)患者の両者で低い目標圧が要求されるときは常に、その化合物を使用すべきである。最も一般的に知られるプロスタグランジンアナログは、トラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロストである。
【0021】
他の薬剤では不十分であるとき、プロスタグランジンアナログであるトラボプロストが開放隅角緑内障を処置するために使用される。トラボプロストは、眼からの房水の流出を増加させることにより作用するプロスタグランジンＦ２αの合成アナログである。点眼薬中のトラボプロスト濃度は４０μｇ／ｍＬであり、そのため目の結膜嚢に１日１回、投与量は１滴(約５０μＬ)であり、約２μｇのトラボプロストが毎日、角膜に適用される。トラボプロストの局所ＤＤＳは、この量を毎日、数か月間放出することが可能でなければならない。
【0022】
本発明は、充填されたトラボプロスト(市販の局所トラボプロストより２５～５０倍高い)などのプロスタグランジンアナログの量およびある期間中のトラボプロスト放出などのプロスタグランジンアナログの流速を調節する可能性を提供する。さらに、先行技術と比較して相対的に大きな直径のマイクロスフェアは、結膜下注射中の網膜および脈絡膜血管の逆流障害の危険性を最小限にする。
【0023】
本発明者らは、眼球周囲の薬物送達のための生物的適合性の薬物担体として使用され得て、かつトラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロスト、ラタノプロステンブノドおよびタフルプロストなどの有効成分であるプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストとの親和性を示す親水性分解性マイクロスフェアを発見した。
【0024】
このように、本発明者らは、有機溶媒を含まず、１日から数か月での調整可能な分解時間を示し、充填が容易(室温で水中)であり、長期間の薬物放出を可能にし、かつ激しい炎症性反応を回避するプロスタグランジンアナログ送達系を発見した。
【0025】
定義
本明細書で使用される表現「に基づくマトリックス(matrix based on)」は、少なくとも成分(ａ)～(ｃ)の混合物を含むマトリックスおよび／または反応、特に少なくとも成分(ａ)～(ｃ)間の重合により生じたマトリックスを意味する。したがって、成分(ａ)～(ｃ)は、マトリックスの重合(例えば、不均一な媒体重合)に使用される出発成分として理解され得る。
本明細書で使用される表現「に基づくマトリックス(matrix based on)」は、少なくとも成分(ａ)～(ｃ)の混合物を含むマトリックスおよび／または反応、特に少なくとも成分(ａ)～(ｃ)間の重合により生じたマトリックスを意味する。したがって、成分(ａ)～(ｃ)は、マトリックスの重合(例えば、不均一な媒体重合)に使用される出発成分として理解され得る。
【0026】
本明細書で使用される表現「反応混合物」は、重合に関与するいずれかの成分を含む重合媒体を示す。反応混合物は、典型的に、少なくとも、特許請求の範囲および本明細書で定義される成分ａ)、ｂ)、ｃ)、場合により重合開始剤、例えば、ｔ－ブチルペルオキシド、過酸化ベンゾイル、アゾビスシアノ吉草酸(４，４'－アゾビス(４－シアノペンタン酸)とも称される)、ＡＩＢＮ(アゾビスイソブチロニトリル)または１，１’－アゾビス(シクロヘキサンカルボニトリル)、または場合により、１以上の光開始剤、例えば、２－ヒドロキシ－４'－(２－ヒドロキシエトキシ)－２－メチルプロピオフェノン(１０６７９７－５３－９)；２－ヒドロキシ－２－メチルプロピオフェノン(Ｄａｒｏｃｕｒ(登録商標)１１７３、７４７３－９８－５)；２，２－ジメトキシ－２－フェニルアセトフェノン(２４６５０－４２－８)；２，２－ジメトキシ－２－フェニルアセトフェノン(Ｉｒｇａｃｕｒｅ(登録商標)、２４６５０－４２－８)または２－メチル－４'－(メチルチオ)－２－モルホリノプロピオフェノン(Ｉｒｇａｃｕｒｅ(登録商標)、７１８６８－１０－５)、および少なくとも１種の溶媒、好ましくは、水性溶媒と非極性非プロトン性溶媒などの有機溶媒を含む溶媒混合物、例えば、水／トルエン混合物および場合により本明細書に記載の任意の適切な成分(例えば、ポリビニルアルコールなどの)安定化剤を含む。
【0027】
したがって、本明細書において、「[出発成分Ｘ]をＹＹ％～ＹＹＹＹ％の量で反応混合物に添加する」および「架橋マトリックスは、ＹＹ％～ＹＹＹＹ％の量の[出発成分Ｘ]に基づく」などの表現は、同様に理解される。同様に、「反応混合物は少なくとも[出発成分Ｘ]を含む」および「架橋マトリックスは、少なくとも[出発成分Ｘ]に基づく」などの表現も、同様に理解される。
【0028】
本発明の内容において、反応混合物の「有機相」は、有機溶媒および前記有機溶媒に可溶な化合物、特にモノマー、および重合開始剤を含む相を意味する。
【0029】
本明細書で使用される用語「(ＣＸ－ＣＹ)アルキル基」は、Ｘ～Ｙ個の炭素原子を含む直鎖または分岐の飽和一価炭化水素鎖を意味し、ここでＸおよびＹは、１～３６、好ましくは１～１８、特に１～６の整数である。例としては、メチル、エチル、プロピル、イソ－プロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ペンチルまたはヘキシル基が挙げられる。
【0030】
本明細書で使用される用語「アリール基」および「(ＣＸ－ＣＹ)アリール」は、好ましくはＸ～Ｙ個の炭素原子を有する芳香族炭化水素を意味し、ここでＸおよびＹは、６～３６、好ましくは６～１８、特に６～１０の整数である。アリール基は、単環式または多環式(縮合環)であり得る。例としては、フェニル基またはナフチル基が挙げられる。
【0031】
本明細書で使用される用語「分配係数Ｐ」は、平衡状態における２つの非混和溶媒：水および１－オクタノールの混合物中の化合物の濃度比を意味する。したがって、この比は、これらの２つの液体における溶質の溶解度を比較したものである。したがって、オクタノール／水分配係数は、化合物がどの程度親水性(オクタノール／水比＜１)または疎水性(オクタノール／水＞１)であるかを測定するものである。分配係数Ｐは、水中および１－オクタノール中の化合物の溶解度を測定することにより、オクタノールにおける溶解度／水における溶解度の比を計算することにより決定され得る。分配係数Ｐはまた、ＣｈｅｍＡｘｏｎにより提供されるＣｈｅｍｉｃａｌｉｚｅを用いて、イン・シリコで計算され得る。
【0032】
本明細書で使用される解性クロスリンカーの疎水性／親水性平衡Ｒは、次の式：
〔式中、Ｎは整数であり、単位の数を表す〕
に従って、疎水性単位の数と親水性単位の数の比により数値化され得る。
【数1】
に従って、疎水性単位の数と親水性単位の数の比により数値化され得る。
【0033】
例えば、本発明において使用され得るクロスリンカーについて、Ｒは：
〔式中、Ｎは整数であり、単位の数を表す〕
である。
【数2】
である。
【0034】
本明細書で使用される用語「分解性マイクロスフェア」は、マイクロスフェアが、腎臓ろ過の５０ｋｇ・ｍｏｌ－１の閾値を下回る分子量を有する低分子量の化合物および水溶性ポリマー鎖から成る分解生成物の混合物中で加水分解により分解または開裂することを意味する。
【0035】
本明細書で使用される表現「親水性分解性マイクロスフェア」は、水性媒体との良好な適合性および固体表面(シリンジ、針、カテーテル)への低付着性を可能にする親水性モノマーを１０％～９０％含む分解性マイクロスフェアを意味する。
【0036】
本明細書で使用される表現「Ｘ～Ｙ」(ＸおよびＹは数値である)は、ＸおよびＹを限定する数値範囲が含まれる。
【0037】
本明細書で使用される、有効成分の「即時放出(ＩＲ)」という表現は、製剤が投与されてすぐに、製剤から送達箇所へ有効成分が迅速に放出されることを意味する。
【0038】
本明細書で使用される、有効成分の「延長放出」という表現は、製剤から送達箇所まで所定の速度で長期間にわたって有効成分を「持続放出(ＳＲ)」または「制御放出(ＣＲ)」し、最小限の副作用で一定の有効成分レベルを維持することを意味する。制御放出(ＣＲ)は、ＣＲが一定の速度で持続的な期間にわたって薬物放出を維持し、持続放出(ＳＲ)が薬物放出を一定の速度ではなく持続的に放出する点で、ＳＲと相違する。
【0039】
本明細書で使用される、有効成分の「持続放出」という表現は、初回用量部分により、目的の組織中の薬物を治療濃度で特定の予め決定された時間維持するための、製剤から送達箇所への有効成分の延長放出(上記で定義される)を意味する。
【0040】
本明細書で使用される表現、有効成分の「制御放出(ＣＲ)」という表現は、時間的もしくは空間的な性質またはその両方を一部制御することを提供する、製剤から送達箇所への有効成分の延長放出(上記で定義される)を意味する。
【0041】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される」は、医薬組成物の製造に有用なもの、および医薬用途について一般に安全であり、非毒性のものを意味することが意図される。
【0042】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される塩」は、上記で定義されるとおり薬学的に許容され、かつ対応する化合物の薬理学的活性を有する化合物の塩を意味する。このような塩は、下記のものを含む：
(１)水和物および溶媒和物、
(２)塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸などの無機酸を用いて形成される；または酢酸、ベンゼンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフト酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２－ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、コハク、ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸、酒石酸、ｐ－トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸およびトリフルオロ酢酸などの有機酸を用いて形成される酸付加塩、および
(３)化合物中に存在する酸プロトンが、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンまたはアルミニウムイオンなどの金属イオンで置換されたとき；または有機または無機塩基と配位したときに形成される塩。許容される有機塩基は、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ－メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどを含む。許容される無機塩基は、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムを含む。
(１)水和物および溶媒和物、
(２)塩酸、臭化水素酸、硫酸、硝酸およびリン酸などの無機酸を用いて形成される；または酢酸、ベンゼンスルホン酸、フマル酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸、グルタミン酸、グリコール酸、ヒドロキシナフト酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、乳酸、マレイン酸、リンゴ酸、マンデル酸、メタンスルホン酸、ムコン酸、２－ナフタレンスルホン酸、プロピオン酸、コハク、ジベンゾイル－Ｌ－酒石酸、酒石酸、ｐ－トルエンスルホン酸、トリメチル酢酸およびトリフルオロ酢酸などの有機酸を用いて形成される酸付加塩、および
(３)化合物中に存在する酸プロトンが、アルカリ金属イオン、アルカリ土類金属イオンまたはアルミニウムイオンなどの金属イオンで置換されたとき；または有機または無機塩基と配位したときに形成される塩。許容される有機塩基は、ジエタノールアミン、エタノールアミン、Ｎ－メチルグルカミン、トリエタノールアミン、トロメタミンなどを含む。許容される無機塩基は、水酸化アルミニウム、水酸化カルシウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウムおよび水酸化ナトリウムを含む。
【0043】
モルパーセントは、本明細書においてｍｏｌ％と略記される。
【0044】
マイクロスフェア
本発明によれば、親水性分解性マイクロスフェアは、少なくとも次の成分：
ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
の親水性モノマー；
ｂ)０.１ｍｏｌ％～３０ｍｏｌ％の式(II)：
〔式中、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはリール基であり；
ｉおよびｊは、互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは、単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー；および
ｃ)５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の１個の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーが直鎖状または星型であり、その全ての末端に(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－基を有し、各Ｒ１１が互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり、かつ前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーが９－３～１１.２、典型的には、０.５０～１１.２０の分配係数Ｐ、または１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する、分解性ブロックコポリマークロスリンカー
に基づくものであり、好ましくは、少なくともこれらの成分の重合により生じる架橋マトリックスを含み、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表される。
本発明によれば、親水性分解性マイクロスフェアは、少なくとも次の成分：
ａ)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
の親水性モノマー；
ｂ)０.１ｍｏｌ％～３０ｍｏｌ％の式(II)：
【化2】
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはリール基であり；
ｉおよびｊは、互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは、単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー；および
ｃ)５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％の１個の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーが直鎖状または星型であり、その全ての末端に(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－基を有し、各Ｒ１１が互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり、かつ前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーが９－３～１１.２、典型的には、０.５０～１１.２０の分配係数Ｐ、または１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する、分解性ブロックコポリマークロスリンカー
に基づくものであり、好ましくは、少なくともこれらの成分の重合により生じる架橋マトリックスを含み、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表される。
【0045】
分配係数Ｐは、ＣｈｅｍＡｘｏｎにより提供された成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％を用いて、イン・シリコで決定される。
【0046】
親水性分解性マイクロスフェアがさらなるモノマー(下記モノマーｅ)を参照)に基づくものであるとき、成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)、ｃ)およびｅ)の総モル数に対して表される。
【0047】
用語「親水性モノマー」は、水に対して高い親和性を有する、すなわち、水に溶解しやすい、水と混合しやすい、水により湿潤しやすい、または重合後に水中で膨張することが可能なポリマーを生じさせるモノマーを意味する。
【0048】
ブロックコポリマークロスリンカーは、分解性ブロックコポリマークロスリンカー、すなわち、共有結合により結合した種々のブロックの直鎖状(または放射状)配置を有するポリマーである。分解性ブロックコポリマーにおいて、共有結合は、エステル結合、アミド結合、無水物結合、尿素結合またはポリサッカライド結合などの分解性のものであり、ここでは特にエステル結合である。
【0049】
Ｘが単結合であるとき、Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０基を有する炭素原子は、単結合を介して直接結合することを意味する。
【0050】
親水性分解性マイクロスフェアは、生理食塩水溶液(すなわち、通常の食塩水溶液)中で膨潤後に２０μｍ～１２００μｍの範囲の直径を有する、球状粒子の形態の膨潤分解性(すなわち、加水分解性)架橋ポリマーである。特に、本発明のポリマーは、少なくとも１つの上記で定義される重合化モノマーａ)、ｂ)およびｃ)の鎖で構成される。
【0051】
本発明の内容において、ポリマーは、液体、特に水を吸収する能力を有するならば、膨潤性である。したがって、「膨潤後のサイズ」という表現は、マイクロスフェアの大きさが、それらの製造中に生じる重合および滅菌の工程後に考慮されることを意味する。
【0052】
有利には、有利には、本発明のマイクロスフェアは、光学顕微鏡により決定して、生理食塩水溶液(すなわち、生理食塩水)中での膨潤後に２０μｍ～１００μｍ、４０μｍ～１５０μｍ、１００μｍ～３００μｍ、３００μｍ～５００μｍ、５００μｍ～７００μｍ、７００μｍ～９００μｍまたは９００μｍ～１２００μｍ、有利には２０μｍ～１００μｍ、４０μｍ～１５０μｍ、１００μｍ～３００μｍ、３００μｍ～５００μｍ、５００μｍ～７００μｍの直径を有する。マイクロスフェアは、有利には、数百マイクロメートル～一ミリメートル以上の範囲の内径を有する針、カテーテルまたはマイクロカテーテルにより注入するために十分小さな直径である。
【0053】
親水性モノマーａ)は、一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
のものである。
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－ＺまたはＮＨ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈ、(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３、－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨまたは－(ＣＨ２)ｍ－ＮＲ５Ｒ６であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５およびＲ６は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
のものである。
【0054】
有利には、親水性モノマーａ)は、ｓｅｃ－ブチル アクリレート、ｎ－ブチル アクリレート、ｔ－ブチル アクリレート、ｔ－ブチル メタクリレート、メチルメタクリレート、Ｎ－ジメチル－アミノエチル(メチル)アクリレート、Ｎ，Ｎ－ジメチルアミノプロピル－(メタ)アクリレート、ｔ－ブチルアミノエチル (メチル)アクリレート、Ｎ，Ｎ－ジエチルアミノアクリレート、アクリレート末端ポリ(エチレンオキシド)、メタクリレート末端ポリ(エチレンオキシド)、メトキシポリ(エチレンオキシド) メタクリレート、ブトキシポリ(エチレンオキシド) メタクリレート、アクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メタクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレート、ブトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレート；有利には、アクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メタクリレート末端ポリ(エチレングリコール)、メトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレート、ブトキシポリ(エチレングリコール) メタクリレートから成る群から選択される。
【0055】
いくつかの実施態様において、式(Ｉ)において、Ｚが－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３または－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨであるとき、ｍは好ましくは、１～６の整数である。
【0056】
いくつかの実施態様において、式(Ｉ)において、Ｚが－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＣＨ３であるとき、Ｚは好ましくは、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基である。
【0057】
いくつかの実施態様において、式(Ｉ)において、Ｚが－(ＣＲ２Ｒ３)ｍ－ＯＨであるとき、Ｒ２およびＲ３は好ましくは水素であり、ｍは１～６の整数である。
【0058】
いくつかの実施態様において、親水性モノマーａ)は、一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈまたは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチルである〕
のものである。
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈまたは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチルである〕
のものである。
【0059】
より有利には、親水性モノマーａ)は、ポリ(エチレングリコール)メチルエーテル メタクリレート(ｍ－ＰＥＧＭＡ)である。
【0060】
親水性モノマーａ)の量は、典型的に、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して(またはｅ)が存在するとき、成分ａ)、ｂ)、ｃ)およびｅ)の総モル数に対して、下記参照)１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％、好ましくは３０ｍｏｌ％～８５ｍｏｌ％、より好ましくは３０ｍｏｌ％～８０ｍｏｌ％の範囲である。
【0061】
親水性モノマーａ)は有利には、反応混合物中に、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して１０ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％、好ましくは３０ｍｏｌ％～８５ｍｏｌ％、より好ましくは３０ｍｏｌ％～８０ｍｏｌ％の量で存在する。
【0062】
成分ｂ)は、上記で定義される式(II)の環状モノマーであって：
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはアリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子、(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基またはアリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
【0063】
有利には、成分ｂ)は、上記で定義される式(II)の環状モノマーであって：
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～２から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
【0064】
有利には、成分ｂ)は、上記で定義される式(II)の環状モノマーであって：
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～１から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０が、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～１から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である
ものである、環状モノマーである。
【0065】
有利には、成分ｂ)は、２－メチレン－１，３－ジオキソラン、２－メチレン－１，３－ジオキサン、２－メチレン－１，３－ジオキセパン、２－メチレン－１，３，６－トリオキソカンおよびその誘導体、特にベンゾ誘導体およびフェニル置換誘導体から成る群から、有利には、２－メチレン－１，３－ジオキソラン、２－メチレン－１，３－ジオキサン、２－メチレン－１，３－ジオキセパン、２－メチレン－４－フェニル－１，３－ジオキソラン、２－メチレン－１，３，６－トリオキソカンおよび５，６－ベンゾ－２－メチレン－１，３－ジオキセパンから成る群から、より有利には、２－メチレン－１，３－ジオキセパン、５，６－ベンゾ－２－メチレン－１，３－ジオキセパンおよび２－メチレン－１，３，６－トリオキソカンから成る群から選択される。より有利には、成分ｂ)は、２－メチレン－１，３－ジオキセパンまたは２－メチレン－１，３，６－トリオキソカンである。
【0066】
成分ｂ)の量は、典型的に、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して(またはｅ)が存在するとき、成分ａ)、ｂ)、ｃ)およびｅ)の総モル数に対して、下記参照)に対して０.１ｍｏｌ％～３０ｍｏｌ％、好ましくは１ｍｏｌ％～２０ｍｏｌ％、および特に１ｍｏｌ％～１０ｍｏｌ％の範囲である。いくつかの実施態様において、成分ｂ)の量は、約１０ｍｏｌ％である。
【0067】
一般式(II)の環状モノマーｂ)は、有利には、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して０.１ｍｏｌ％～３０ｍｏｌ％、好ましくは１ｍｏｌ％～２０ｍｏｌ％、および特に５ｍｏｌ％～１５ｍｏｌ％または１ｍｏｌ％～１０ｍｏｌ％の範囲で、反応混合物中に存在する。いくつかの実施態様において、成分ｂ)の量は、約１０ｍｏｌ％である。
【0068】
成分ｃ)は分解性ブロックコポリマークロスリンカーであり、ここで前記分解性ブロックコポリマークロスリンカーは、直鎖状または星型であり、その全ての末端に(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－基を有し、各Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である。
【0069】
分解性ブロックコポリマークロスリンカーは、０.５～１１.２０、有利には３.００～９.００の分配係数Ｐを有する。または、分解性ブロックコポリマークロスリンカーは、１～２０、有利には３～１５の疎水性／親水性平衡Ｒを有する。
【0070】
本明細書で使用されるとおり、「コポリマークロスリンカー」という表現は、コポリマーが、複数のポリマー鎖を一緒に連結するためにその末端の少なくとも２つに二重結合を含む官能基を含むことを意味するために意図される。
【0071】
上記で定義されるクロスリンカーｃ)は、直鎖状または星型(有利には、３～８アーム)であり、その全ての末端に(すなわち、直鎖状の時はその２つの末端に、および星形の時は各アームの末端に)(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－基を有し、各Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチル基である。有利には、クロスリンカーｃ)は、その全ての末端に(ＣＨ２＝(ＣＲ１１))－ＣＯ－を示し、各Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチル基である。有利には、全てのＲ１１は同一であり、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチル基である。
【0072】
クロスリンカーｃ)は、下記の一般式(IIIa)または(IIIc)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)；
Ｗ－(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
各Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘは独立して、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬを表し；
ｎ、ｋおよびｐは各々、ＸおよびＰＥＧの重合度を表し、ｎおよびｋは独立して、１～１５０の整数であり、ｐは１～１００の整数であり；
Ｗは炭素原子、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基(好ましくはＣ１－Ｃ３－アルキル基)、または１～６個の炭素原子、好ましくは１～３個の炭素原子を含むエーテル基であり；
ｚは３～８の整数である〕
のものである。
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)；
Ｗ－(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
各Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘは独立して、ＰＬＡ、ＰＧＡ、ＰＬＧＡ、ＰＣＬまたはＰＬＡＰＣＬを表し；
ｎ、ｋおよびｐは各々、ＸおよびＰＥＧの重合度を表し、ｎおよびｋは独立して、１～１５０の整数であり、ｐは１～１００の整数であり；
Ｗは炭素原子、Ｃ１－Ｃ６－アルキル基(好ましくはＣ１－Ｃ３－アルキル基)、または１～６個の炭素原子、好ましくは１～３個の炭素原子を含むエーテル基であり；
ｚは３～８の整数である〕
のものである。
【0073】
式(IIIc)のクロスリンカーｃ)は、星型ポリマー、すなわち、中核部分に結合したいくつかの直鎖(アームとも称される)から成るポリマーである。式(IIIc)のクロスリンカーにおいて、Ｗは、星型ポリマーの中核であり、－(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２)は、星型ポリマーであり、ここでｚはアームの数である。
【0074】
有利には、クロスリンカーｃ)が一般式(IIIc)のものであるとき、ｎは、ＰＥＧの各アームにおいて同一でも異なってもよい。
【0075】
本発明の内容において、本明細書で使用される略語は、次の意味を有する：
【表1】
【0076】
上の表において、ｎ、ｐおよびｋは本明細書に記載の値を有する。
【0077】
有利には、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIa)または(IIIc)、特に式(IIIa)のものであり、ここでＸはＰＬＡＰＣＬまたはＰＣＬを表す。より有利には、クロスリンカーｃ)は、一般式(IIIa)または(IIIc)、特に式(IIIa)のものであり、ここでＸはＰＣＬを表す。
【0078】
有利には、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIa)または(IIIc)、特に式(IIIa)のものであり、ここでｎおよびｋは独立して、１～１５０、好ましくは１～２０、より好ましくは１～１０、さらに好ましくは４～７の整数である。好ましくは、ｎ＋ｋは５～１５または８～１４の範囲であり、ｐは１～１００、好ましくは１～２０の整数である。
【0079】
有利には、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIa)または(IIIc)、特に式(IIIa)のものであり、ここでＲ１１は同一であり、Ｈまたは(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である。
【0080】
有利には、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIa)または(IIIc)の化合物、特に式(IIIa)の化合物から成る群から選択され、ここで：
Ｘ＝ＰＬＡ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ８－ＰＣＬ２またはＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝９およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ４－ＰＣＬ５であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ２－ＰＣＬ６であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＧＡ；ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＧＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝４(例えば、ＰＥＧ４－ＰＣＬ１０であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)
である。
Ｘ＝ＰＬＡ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ８－ＰＣＬ２またはＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝９およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ４－ＰＣＬ５であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ２－ＰＣＬ６であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＬＧＡ；ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＧＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝４(例えば、ＰＥＧ４－ＰＣＬ１０であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)
である。
【0081】
これらの実施態様において、Ｒ１１は、好ましくは水素またはメチルである。
【0082】
いくつかの実施態様において、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIc)の化合物であり、ここでｐは７であり、Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬであり、ｎ＝１０であり、ｚは３であり、ここでＲ１１は、好ましくは水素またはメチルである(例えば、ＰＥＧ３アーム－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)。
【0083】
いくつかの実施態様において、クロスリンカーｃ)は、上記で定義される一般式(IIIa)の化合物から成る群から選択され、ここで：
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)
である。
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)
である。
【0084】
これらの実施態様において、Ｒ１１は、好ましくは水素またはメチルである。
【0085】
上記クロスリンカーｃ)の定義の範囲内で、ポリエチレングリコール(ＰＥＧ)は、１００～１００００ｇ／ｍｏｌ、好ましくは１００～２０００ｇ／ｍｏｌ、より好ましくは１００～１０００ｇ／ｍｏｌの高い平均分子量(Ｍｎ)を有する。
【0086】
クロスリンカーｃ)の量は、典型的に、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して(またはｅ)が存在するとき、成分ａ)、ｂ)、ｃ)およびｅ)の総モル数に対して、下記参照)５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％、好ましくは５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％、より好ましくは１５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％の量である。
【0087】
クロスリンカーｃ)は、有利には、反応混合物中に、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して５ｍｏｌ％～９０ｍｏｌ％、好ましくは５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％、より好ましくは１５ｍｏｌ％～６０ｍｏｌ％の範囲の量で存在する。
【0088】
架橋剤の量を増加させる、そうして得られるマイクロスフェアのメッシュサイズを減少させると、トラボプロストなどのプロスタグランジンアナログのマイクロスフェアへの充填、そしてトラボプロストなどのプロスタグランジンアナログの放出に影響する。１５ｍｏｌ％を超える量については、特にトラボプロストの大部分が直ちに放出されるのを妨げるため、トラボプロストの最適な放出が達成される。
【0089】
親水性分解性マイクロスフェアの架橋マトリックスは、有利には、鎖転移剤ｄ)に皿に基づくものであり、好ましくは、鎖転移剤ｄ)の存在下、成分ａ)、ｂ)およびｃ)の重合から生じる。
【0090】
本発明の目的のために、「転移剤」は、少なくとも１つの弱い化学結合を有する化学的化合物を意味する。この薬剤は、伸長するポリマー鎖のラジカル部位と反応し、鎖の伸長を妨げる。鎖転移過程において、ラジカルが一時的に転移剤へ移動し、別のポリマーまたはモノマーへラジカルを移動させることにより、伸長が再開する。
【0091】
有利には、鎖転移剤ｄ)は、一官能性または多官能性チオール、ハロゲン化アルキル、遷移金属塩または錯体、および２，４－ジフェニル－４－メチル－１－ペンテンなどの、フリーラジカル鎖転移過程で活性であることが知られている他の化合物から成る群から選択される。より有利には、鎖転移剤は、好ましくは２～２４個の炭素原子、より好ましくは２～１２個の炭素原子を有し、かつアミノ基、ヒドロキシ基およびカルボキシ基から選択されるさらなる官能基を有するまたは有さないシクロ脂肪族または脂肪族、チオールである。有利には、鎖転移剤ｄ)は、チオグリコール酸、２－メルカプトエタノール、ドデカンチオールおよびヘキサンチオールから成る群から選択される。
【0092】
鎖転移剤ｄ)の量は、典型的に、モノマーａ)のモル数に対して０.１～１０ｍｏｌ％、好ましくは２～５ｍｏｌ％の範囲である。
【0093】
鎖転移剤ｄ)は、有利には、モノマーａ)のモル数に対して、例えば０.１～１０ｍｏｌ％、好ましくは２～５ｍｏｌ％の量で反応混合物中に存在する。
【0094】
本発明の特定の態様において、架橋マトリックスは上記で定義される成分ａ)、ｂ)、ｃ)および場合によりｄ)からの開始にのみ基づき、上記の内容において、反応媒体に他の出発成分は添加されない。したがって、モノマー(成分(ａ)、(ｂ)および(ｃ))の上記内容物の合計は１００％でなければならないことが明らかである。
【0095】
いくつかの実施態様において、架橋マトリックスは、有利には、少なくとも１つのイオン化したまたはイオン化可能な一般式(Ｖ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１２)－Ｍ－Ｅ (Ｖ)、
〔式中、
Ｒ１２は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｍは単結合または１～２０個の炭素原子を有する二価ラジカル、有利には単結合であり；
Ｅはイオン化したまたはイオン化可能な基であり、有利には、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＯ－、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ３ －、－ＰＯ４Ｈ２、－ＰＯ４Ｈ－、－ＰＯ４ ２－、－ＮＲ１３Ｒ１４および－ＮＲ１５Ｒ１６Ｒ１７ ＋から成る群から選択され；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
のモノマーｅ)にさらに基づくものである。
(ＣＨ２＝ＣＲ１２)－Ｍ－Ｅ (Ｖ)、
〔式中、
Ｒ１２は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｍは単結合または１～２０個の炭素原子を有する二価ラジカル、有利には単結合であり；
Ｅはイオン化したまたはイオン化可能な基であり、有利には、－ＣＯＯＨ、－ＣＯＯ－、－ＳＯ３Ｈ、－ＳＯ３ －、－ＰＯ４Ｈ２、－ＰＯ４Ｈ－、－ＰＯ４ ２－、－ＮＲ１３Ｒ１４および－ＮＲ１５Ｒ１６Ｒ１７ ＋から成る群から選択され；Ｒ１３、Ｒ１４、Ｒ１５、Ｒ１６およびＲ１７は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基である〕
のモノマーｅ)にさらに基づくものである。
【0096】
本発明の内容において、イオン化したまたはイオン化可能な基は、荷電したまたは荷電し得る形態(イオン形態)である、すなわち媒体のｐＨに応じて少なくとも１つの正電荷または負電荷を有する基であると理解される。例えば、ＣＯＯＨ基は、ＣＯＯ－の形態にイオン化され得て、ＮＨ２基は、ＮＨ３
＋の形態の形態にイオン化され得る。
【0097】
イオン化したまたはイオン化可能なモノマーの反応媒体への導入は、得られたマイクロスフェアの親水性の増大を可能にし、それにより前記マイクロスフェアの膨潤率を増大させ、さらにカテーテルおよびマイクロカテーテルによるそれらの注入を容易にする。さらに、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーの存在により、活性物質のマイクロスフェアへの充填が改善される。
【0098】
有利な実施態様において、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)はカチオン性モノマーであり、有利には、２－(メタクリロイルオキシ)エチル ホスホリルコリン、２－(ジメチルアミノ)エチル (メタ)アクリレート、２－(ジエチルアミノ)エチル (メタ)アクリレートおよび２－((メタ)アクリロイルオキシ)エチル]トリメチル塩化アンモニウムから成る群から選択され、より有利には、前記カチオン性モノマーはジエチルアミノエチル (メタ)アクリレートである。有利には、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)は、モノマー(成分ａ)＋ｂ)＋ｃ)＋ｅ))の総モル数に対して０モル％～３０モル％、有利には１モル％～３０モル％、好ましくは１０モル％～１５モル％の量で反応混合物に存在する。したがって、モノマー(成分(ａ)、(ｂ)および(ｃ)および(ｅ))の上記内容物の合計は１００％でなければならないことが明らかである。
【0099】
別の有利な実施態様において、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)は、アクリル酸、メタクリル酸、２－カルボキシエチル アクリレート、２－カルボキシエチル アクリレートオリゴマー、３－スルホプロピル (メタ)アクリレートカリウム塩および２－(メタクリロイルオキシ)エチル]ジメチル－(３－スルホプロピル)水酸化アンモニウムから成る群から有利に選択されるアニオン性モノマーであり、より有利には、前記アニオン性モノマーはアクリル酸である。イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)の量は、典型的に、モノマー(成分ａ)＋ｂ)＋ｃ)＋ｅ))の総モル数に対して０または０.１モル％～３０モル％、好ましくは１０モル％～１５モル％の範囲の量である。このような場合、モノマー(成分(ａ)、(ｂ)および(ｃ)および(ｅ))の上記内容物の合計は、１００％でなければならないことが明らかである。有利には、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)は、モノマー(成分ａ)＋ｂ)＋ｃ)＋ｅ))の総モル数に対して０モル％～３０モル％、有利には１モル％～３０モル％好ましくは１０モル％～１５モル％の範囲の量で、反応混合物中に存在する。
【0100】
有利には、イオン化したまたはイオン化可能なモノマーｅ)はアクリル酸であり、有利には、モノマーの総モル数に対して０モル％～３０モル％、有利には０モル％～３０モル％、好ましくは１０モル％～１５モル％の量で、反応混合物中に存在する。
【0101】
いくつかの実施態様において、親水性分解性マイクロスフェアは、少なくとも下記成分：
１０～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈまたは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチルである〕
の親水性モノマー、好ましくはｍ－ＰＥＧＭＡ；
０.１～３０ｍｏｌ％の式(II)：
〔式中、
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～１から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー、好ましくは２－メチレン－１，３－ジオキセパン；および
５～９０ｍｏｌ％の式：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)または
Ｗ(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
Ｒ１１、Ｘ、Ｗ、ｎ、ｐ、ｋ、ｚは本明細書に記載されるとおりであり、
好ましくはここで、
Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘ＝ＰＬＡ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ８－ＰＣＬ２またはＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝９およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ４－ＰＣＬ５であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ２－ＰＣＬ６であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＧＡ；ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＧＡ１２でありＲ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝４(例えば、ＰＥＧ４－ＰＣＬ１０であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)である〕
の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、０.５～１１.２の分配係数Ｐまたは１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する分解性ブロックコポリマークロスリンカーの重合に基づくか、これらの重合から生じる架橋マトリックスを含み、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表される。
１０～９０ｍｏｌ％の一般式(Ｉ)：
(ＣＨ２＝ＣＲ１)－ＣＯ－Ｄ (Ｉ)
〔式中、
ＤはＯ－Ｚであり、ここでＺは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－Ｈまたは－(ＣＨ２－ＣＨ２－Ｏ)ｍ－ＣＨ３であり、ここでｍは１～３０の整数であり；
Ｒ１は水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基、好ましくはメチルである〕
の親水性モノマー、好ましくはｍ－ＰＥＧＭＡ；
０.１～３０ｍｏｌ％の式(II)：
【化3】
Ｒ７、Ｒ８、Ｒ９およびＲ１０は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ５－Ｃ７)アリール基であり；
ｉおよびｊは互いに独立して、０～１から選択される整数であり；
Ｘは単結合または酸素原子である〕
の環状モノマー、好ましくは２－メチレン－１，３－ジオキセパン；および
５～９０ｍｏｌ％の式：
(ＣＨ２＝ＣＲ１１)－ＣＯ－Ｘｎ－ＰＥＧｐ－Ｘｋ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２) (IIIa)または
Ｗ(ＰＥＧｐ－Ｘｎ－Ｏ－ＣＯ－(ＣＲ１１＝ＣＨ２))ｚ (IIIc)；
〔式中、
Ｒ１１、Ｘ、Ｗ、ｎ、ｐ、ｋ、ｚは本明細書に記載されるとおりであり、
好ましくはここで、
Ｒ１１は、互いに独立して、水素原子または(Ｃ１－Ｃ６)アルキル基であり；
Ｘ＝ＰＬＡ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ１２であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ８－ＰＣＬ２またはＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝９およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ４－ＰＣＬ５であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＡＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＡ２－ＰＣＬ６であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＬＧＡ；ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＬＧＡ１２でありＲ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ；ｎ＋ｋ＝８およびｐ＝１３(例えば、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１０およびｐ＝４(例えば、ＰＥＧ４－ＰＣＬ１０であり、Ｒ１１はメチルである)；または
Ｘ＝ＰＣＬ、ｎ＋ｋ＝１２およびｐ＝２(例えば、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２であり、Ｒ１１はメチルである)である〕
の分解性ブロックコポリマークロスリンカーであって、０.５～１１.２の分配係数Ｐまたは１～２０の疎水性／親水性平衡Ｒを有する分解性ブロックコポリマークロスリンカーの重合に基づくか、これらの重合から生じる架橋マトリックスを含み、ここで成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)およびｃ)の総モル数に対して表される。
【0102】
親水性分解性マイクロスフェアがさらなるモノマー(下記モノマーｅ)を参照)に基づく架橋マトリックスを含むとき、成分ａ)～ｃ)のｍｏｌ％は、化合物ａ)、ｂ)、ｃ)およびｅ)の総モル数に対して表される。
【0103】
成分ａ)、ｂ)およびｃ)の量は、本明細書に記載されるとおりであり得る。
【0104】
本発明のマイクロスフェアは、当分野で既知の多くの方法により容易に製造され得る。例として、本発明のマイクロスフェアは、下記および実施例において記載するとおり、直接または逆懸濁重合により、またはマイクロ流体により得られ得る。
【0105】
直接懸濁は、次のとおり進行し得る：
(１)(ｉ)少なくとも、上記で定義される成分ａ)、ｂ)およびｃ)；
(ii)１００重量部のモノマーに対して０.１～約２重量部の範囲の量で存在する重合開始剤；
(iii)１００重量部の水溶液に対して約５重量部を超えない、好ましくは約３重量部を超えない、および最も好ましくは０.５～１.５重量部の範囲の量の界面活性剤；
(iv)１００重量部の水溶液に対して、約１０重量部を超えない、好ましくは約５重量部を超えない、および最も好ましくは１～４重量部の範囲の量の塩；および
(ｖ)水中油懸濁液を形成するための水
を含む混合物を撹拌または激しく撹拌し；
(２)出発成分を重合させる。
(１)(ｉ)少なくとも、上記で定義される成分ａ)、ｂ)およびｃ)；
(ii)１００重量部のモノマーに対して０.１～約２重量部の範囲の量で存在する重合開始剤；
(iii)１００重量部の水溶液に対して約５重量部を超えない、好ましくは約３重量部を超えない、および最も好ましくは０.５～１.５重量部の範囲の量の界面活性剤；
(iv)１００重量部の水溶液に対して、約１０重量部を超えない、好ましくは約５重量部を超えない、および最も好ましくは１～４重量部の範囲の量の塩；および
(ｖ)水中油懸濁液を形成するための水
を含む混合物を撹拌または激しく撹拌し；
(２)出発成分を重合させる。
【0106】
このような直接懸濁重合において、界面活性剤は、ヒドロキシエチルセルロース、ポリビニルアルコール(ＰＶＡ)、ポリビニルピロリドン、ポリエチレンオキシド、ポリエチレングリコールおよびポリソルベート２０(Ｔｗｅｅｎ(登録商標)２０)から成る群から選択され得る。
【0107】
逆懸濁は、次のとおり進行し得る：
(１)(ｉ)少なくとも、上記で定義される成分ａ)、ｂ)およびｃ)；
(ii)１００重量部のモノマーに対して０.１～約２重量部の範囲の量で存在する重合開始剤；
(iii)１００重量部の油相に対して約５重量部を超えない、好ましくは約３重量部を超えない、および最も好ましくは０.５～１.５重量部の範囲の量の界面活性剤；および
(iv)油中水懸濁液を形成するための油；
を含む混合物を撹拌または激しく撹拌し；
(２)出発成分を重合させる。
(１)(ｉ)少なくとも、上記で定義される成分ａ)、ｂ)およびｃ)；
(ii)１００重量部のモノマーに対して０.１～約２重量部の範囲の量で存在する重合開始剤；
(iii)１００重量部の油相に対して約５重量部を超えない、好ましくは約３重量部を超えない、および最も好ましくは０.５～１.５重量部の範囲の量の界面活性剤；および
(iv)油中水懸濁液を形成するための油；
を含む混合物を撹拌または激しく撹拌し；
(２)出発成分を重合させる。
【0108】
このような逆懸濁法において、界面活性剤は、ソルビタンモノラウレート(Ｓｐａｎ(登録商標)２０)、ソルビタンモノパルミテート(Ｓｐａｎ(登録商標)４０)、ソルビタンモノオレート(Ｓｐａｎ(登録商標)８０)およびソルビタントリオレート(Ｓｐａｎ(登録商標)８５)などのソルビタンエステル、ヒドロキシエチルセルロース、グリセリルステアレートおよびＰＥＧステアレートの混合物(Ａｒｌａｃｅｌ(登録商標))ならびにセルロースアセテートから成る群から選択され得る。
【0109】
上記工程において、重合開始剤は、ｔ－ブチルペルオキシド、過酸化ベンゾイル、アゾビスシアノ吉草酸(４，４'－アゾビス(４－シアノペンタン酸としても知られる))、ＡＩＢＮ(アゾビスイソブチロニトリル)、または１，１’－アゾビス(シクロヘキサンカルボニトリル)または１以上の熱開始剤、例えば２－ヒドロキシ－４'－(２－ヒドロキシエトキシ)－２－メチルプロピオフェノン(１０６７９７－５３－９)；２－ヒドロキシ－２－メチルプロピオフェノン(Ｄａｒｏｃｕｒ(登録商標)１１７３、７４７３－９８－５)；２，２－ジメトキシ－２－フェニルアセトフェノン(２４６５０－４２－８)；２，２－ジメトキシ－２－フェニルアセトフェノン(Ｉｒｇａｃｕｒｅ(登録商標)、２４６５０－４２－８)または２－メチル－４'－(メチルチオ)－２－モルホリノプロピオフェノン(Ｉｒｇａｃｕｒｅ(登録商標)、７１８６８－１０－５)を含み得る。
【0110】
さらに、油は、パラフィン油、シリコーン油およびヘキサン、シクロヘキサン、酢酸エチルまたは酢酸ブチルなどの有機溶媒から選択され得る。
【0111】
トラボプロスト充填は、受動的吸着(薬物溶液中でのポリマーの膨潤)などの、当業者に既知の多くの方法により実施され得る。
【0112】
薬物充填量を増加させ、薬物放出速度を制御するために、非共有相互作用により薬物と相互作用することができる特定の化学部分をポリマー骨格に導入する概念が考案された。このような相互作用の例は、とりわけ、静電相互作用(以降に記載する)、疎水性相互作用、π－πスタッキングおよび水素結合を含む。
【0113】
薬物
組成物は、有効量のプロスタグランジンアナログ、例えばトラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロスト、特にトラボプロストを含む。
組成物は、有効量のプロスタグランジンアナログ、例えばトラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロスト、特にトラボプロストを含む。
【0114】
有利には、プロスタグランジンアナログは、トラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロストから選択される。有利には、プロスタグランジンアナログはトラボプロストである。
【0115】
有利には、本発明の組成物において、プロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストは、非共有相互作用により、上記で定義されるマイクロスフェアに充填／吸収される。薬物またはプロドラッグを封入するこの特定の方法は、物理的封入と称される。
【0116】
本発明のマイクロスフェアへのプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの充填は、マイクロスフェア製造後にプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストを目充填するなどの当業者に既知の多くの方法により実施され得る。
【0117】
有利には、本発明の組成物は、１～６ｍｇ／ｍＬ、より有利には２～４ｍｇ／ｍＬのプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストを含む。
【0118】
有利には、本発明の組成物は、破裂することなく、初日の間に１０％未満、その後、毎日初期充填量の１％～５％の一定の送達速度で、プロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストを放出する。
【0119】
有利には、生体への移植後、本発明の組成物は、破裂することなく、結膜下移植後の最初の１時間の間にプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストを涙液中で放出する。プロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの濃度は、房水中で１～７日間、有利には１～３０日間、好ましくは１～９０日間で２ｎｇ／ｍＬ～３ｎｇ／ｍＬの治療範囲に留まり得るか(Martinez-de-la-Casa et al; 2012. Eye. 26:972-75)、または好ましくは、点眼薬による局所治療(＜２５ｐｇ／ｍＬ)後に観測されるのと同様の低い血漿濃度で留置される。
【0120】
組成物
本発明の内容において、組成物は、有効量の(マイクロスフェアに対して０.１～０.６％の質量)のプロスタグランジンアナログ、例えばトラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロスト、特にトラボプロスト、少なくとも１つの上記で定義される親水性分解性マイクロスフェア、および薬学的に許容される担体を含む。担体は注入による投与に適切である。
本発明の内容において、組成物は、有効量の(マイクロスフェアに対して０.１～０.６％の質量)のプロスタグランジンアナログ、例えばトラボプロスト、ラタノプロスト、ビマトプロストおよびタフルプロスト、特にトラボプロスト、少なくとも１つの上記で定義される親水性分解性マイクロスフェア、および薬学的に許容される担体を含む。担体は注入による投与に適切である。
【0121】
プロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストおよび親水性分解性マイクロスフェアは、上記で定義されるとおりである。
【0122】
本発明によれば、薬学的に許容される担体は注入によるプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの投与を意図するものであり、有利には、注射用水、生理食塩水、グルコース、デンプン、ヒドロゲル、ポリビニルピロリドン、ポリサッカライド、ヒアルロン酸エステル、造影剤および血漿から成る群から選択される。
【0123】
製剤は、結膜下注射により投与され得る。親水性分解性マイクロスフェアの製剤はシリンジにより投与可能であり、マイクロスフェアのサイズおよび分布は、例えば図５に示される。これは２１～３４ゲージの針での投与を可能にする。
【0124】
本発明の組成物はまた、緩衝剤、防腐剤、ゲル化剤、界面活性剤またはこれらの混合物を含み得る。有利には、薬学的に許容される担体は、生理食塩水または注射用水である。
【0125】
本発明の組成物は、数時間から数か月の範囲の期間にわたるプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの持続放出を可能にする。有利には、本発明の組成物は、破裂することなく、少なくとも４週間、具体的には４週間～６か月、より具体的には４週間～３か月のプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの持続放出を可能にする。
【0126】
本発明の組成物は、例えば、モノマーａ)、ｂ)および／またはｃ)の性質および内容物、および充填されたプロスタグランジンアナログ、特にトラボプロストの量を調節することにより、上記で定義される持続放出の制御を可能にする。
【0127】
本発明はまた、高眼圧症または緑内障を局所送達により予防および／または処置するための、上記で定義される組成物に関する。
【0128】
本発明はまた、必要とする対象に有効量の上記で定義される組成物を投与することを含む、高眼圧症または緑内障を予防および／または処置する方法に関する。
【0129】
本発明はまた、局所送達により高眼圧症または緑内障を予防および／または処置するための薬物の製造のための、上記で定義される組成物の使用に関する。
【0130】
即座の充填
本発明の特定の実施態様において、トラボプロストは、乾燥無菌マイクロスフェアに即座に充填され得る。
本発明の特定の実施態様において、トラボプロストは、乾燥無菌マイクロスフェアに即座に充填され得る。
【0131】
したがって、本発明はまた、
ｉ)少なくとも１つの上記で定義される親水性分解性マイクロスフェア、および注入投与のための薬学的に許容される担体；
ii)有効量のトラボプロスト；および
iii)場合により、注入デバイス、
を含む医薬キットであって、親水性分解性マイクロスフェアおよびトラボプロストが別個に包装されたものである、キットに関する。
ｉ)少なくとも１つの上記で定義される親水性分解性マイクロスフェア、および注入投与のための薬学的に許容される担体；
ii)有効量のトラボプロスト；および
iii)場合により、注入デバイス、
を含む医薬キットであって、親水性分解性マイクロスフェアおよびトラボプロストが別個に包装されたものである、キットに関する。
【0132】
このような実施態様において、トラボプロストは、有利には、注入直前に親水性分解性マイクロスフェアに充填されることが意図される。
【0133】
本発明によれば、「注入デバイス」は、非経腸投与のためのいずれかのデバイスを意味する。有利には、注入デバイスは、予め満たされていてよい１以上のシリンジ、および／または１以上のカテーテルまたはマイクロカテーテルである。
【0134】
マイクロスフェアの使用
本発明はまた、必要とする対象への有効量のトラボプロストの局所送達、有利には持続送達のための、上記で定義される水性分解性マイクロスフェアの使用に関する。
本発明はまた、必要とする対象への有効量のトラボプロストの局所送達、有利には持続送達のための、上記で定義される水性分解性マイクロスフェアの使用に関する。
【0135】
有利には、トラボプロストの持続送達は、破裂することなく、数週間から数か月間、有利には、少なくとも４週間、具体的には４週間～６か月間、より具体的には４週間～３か月間の範囲の期間にわたるものである。
【0136】
本発明の組成物は、数時間から数か月間の範囲にわたってトラボプロストの持続放出を可能にする。有利には、本発明の組成物は、破裂することなく、少なくとも４週間、具体的には４週間～６か月間、より具体的には４週間～３か月間、トラボプロストの持続放出を可能にする。
【0137】
本発明を説明する実施例を下記に示すが、これはいかなる場合も本発明の範囲を限定するものではない。
【実施例】
【0138】
実施例１：未充填の本発明のマイクロスフェアの製造
マイクロスフェア合成のための出発成分、それらの含量および主要なパラメーターを表１ａおよび１ｂに要約する。
マイクロスフェア合成のための出発成分、それらの含量および主要なパラメーターを表１ａおよび１ｂに要約する。
【表2】
【表3】
【0139】
１ｗｔ％ ポリビニルアルコール(Ｍｗ＝１３０００～２３０００ｇ／ｍｏｌ)、３ｗｔ％ ＮａＣｌ脱イオン水溶液を含む水相溶液(９１７ｍＬ)を１ｄｍ３の反応器に入れ、５０℃に加熱した。
【0140】
有機相を三角フラスコに調製した。簡潔には、トルエン(３６.９ｇ)および２，２'－アゾビス(２－メチルプロピオニトリル)(ＡＩＢＮ)(０.２８ｗｔ％／有機相重量)を計量した。ＡＩＢＮを別のバイアルへ入れ、一定体積分率(約３０％)の計量したトルエンに溶解した。
【0141】
その後、分解性クロスリンカーを三角フラスコに計量した。ポリエチレングリコールメチルエーテル メタクリレート(Ｍｎ＝３００ｇ／ｍｏｌ)またはｔｅｒｔ－ブチル メタクリレート(Ｍｎ＝１４２.２ｇ／ｍｏｌ)、メタクリル酸および２－メチレン－１，３－ジオキセパン(ＭＤＯ)を計量し、三角フラスコに添加した。その後、トルエンの残量を添加し、モノマーを溶解した。マイクロピペットを用いて、ヘキサンチオール(３ｍｏｌ％／ｍ－ＰＥＧＭＡまたはｔｅｒｔ－ブチル メタクリレートのモル)を三角フラスコに添加した。ＡＩＢＮのトルエン溶液を、モノマーを含む三角フラスコに添加した。最後に、激しく撹拌することなく有機相を透明にし(モノマーおよび開始剤は完全に可溶化されなければならない)、その後、水相へ導入した。
【0142】
５０℃で、有機相を水相へ注いだ。その後、撹拌翼を用いて撹拌(２４０ｒｐｍ)した。４分後、温度を８０℃に昇温させた。８時間後、撹拌を停止し、４０μｍのふるい上でろ過することによりマイクロスフェアを回収し、アセトンおよび水で徹底的に洗浄した。その後マイクロスフェアをふるいのサイズを減少させながら、ふるいにかけた(１２５μｍ、１００μｍ、５０μｍ)。５０～１００μｍのサイズ範囲のＭＳを、薬物回収試験のために回収した。
【0143】
実施例２：トラボプロストを用いた実施例１によるマイクロスフェアへの充填(ＭＳ合成後の前充填)
ふるい分け工程後、実施例１で得られたマイクロスフェア(サイズ範囲５０～１００μｍ)２５０μＬを１５ｍＬのポリプロピレンバイアルに添加した。その後水(５００μＬまたは１ｍＬ)を加えた後、５００μＬまたは１ｍＬのトラボプロスト溶液(Ｓｉｇｍａ、ＰＨＲ１６２２－３ＭＬ、＃ＬＲＡＡ５２９２(水／アセトニトリル(７０／３０)中に０.４９９μｇ／ｍＬ)をそれぞれ添加した。
ふるい分け工程後、実施例１で得られたマイクロスフェア(サイズ範囲５０～１００μｍ)２５０μＬを１５ｍＬのポリプロピレンバイアルに添加した。その後水(５００μＬまたは１ｍＬ)を加えた後、５００μＬまたは１ｍＬのトラボプロスト溶液(Ｓｉｇｍａ、ＰＨＲ１６２２－３ＭＬ、＃ＬＲＡＡ５２９２(水／アセトニトリル(７０／３０)中に０.４９９μｇ／ｍＬ)をそれぞれ添加した。
【0144】
チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら、室温で１時間、充填工程を実施した。
【0145】
その後、蛍光測定(λｅｘ ２２０ｎｍ、λＥｍ ３１０ｎｍ)による結合していないトラボプロストの測定のために、上清を除去した。上清中のトラボプロストの量は、標準曲線(０.６～２０μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られ、初期量から最終的なラタノプロストの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するラタノプロスト充填量は、２５０μＬのＭＳに充填される量を４倍することにより得られた。減算により充填量を計算した。初期量から最終的なトラボプロストの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するトラボプロスト充填量は、０.２５ｍＬのＭＳに充填される量を４倍することにより得られた。充填効率は、次の式に従って計算した：充填効率＝((フィード中のトラボプロスト－上清中のトラボプロスト)／フィード中のトラボプロスト)×１００。ペレットを２ｍＬのグルコース(水に２.５％)で洗浄した後、凍結乾燥させた。
【0146】
【0147】
実施例１に従って合成された予め形成されたマイクロスフェアで、９０％を超える量でトラボプロストの充填量の増加を達成した。マイクロスフェア中のクロスリンカーが５％を超えるとき、充填効率は有意に改善した(表２および図１)。
【0148】
分解性クロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３を含むＭＳについて、各ペイロードに対する充填量はクロスリンカー含量とともに増加する(ＭＳ１およびＭＳ２)(図１)。直鎖状クロスリンカーの代わりに分解性３アームクロスリンカーをＭＳ組成物に導入しても、トラボプロスト充填を妨げなかった(ＭＳ７)。
【0149】
親水性モノマーであるｍ－ＰＥＧＭＡ他のモノマー、例えばｔｅｒｔ－ブチル メタクリレートに置き換えたとき、トラボプロスト充填は９０％を超える高い効率で可能であった(ＭＳ８)。
【0150】
より疎水性の高いクロスリンカー、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８について、トラボプロスト充填の効率はクロスリンカー含量とともに、５％(ＭＳ３)から５０％まで増加した(ＭＳ６) (図１)。トラボプロストの効率的な充填はまた、より疎水性が高いクロスリンカー、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２の含量が３０％の時に得られた(ＭＳ９)。ポリマー架橋度が高いと、分解性マイクロスフェアへの効率的な薬物充填が妨げられなかった。
【0151】
緑内障処置に４０μｇ／ｍＬで使用される点眼溶液(Ｔｒａｖａｒｔａｎ(登録商標))中のトラボプロスト濃度と比較して、２５倍または５０倍の点眼薬濃度に相当する顕著な量のトラボプロスト(約１または約２ｍｇ／ｍＬ)が、簡易な混合工程により合成された後の分解性マイクロスフェアへ充填された。実施例１のマイクロスフェアは、トラボプロスト分子を効率的に濃縮する。
【0152】
実施例３．実施例２によるマイクロスフェア充填からのトラボプロストのインビトロ放出試験
実施例２に記載の薬物充填および凍結乾燥後、１０ｍＬの０.９％ ＮａＣｌ食塩水溶液中で１０分間、マイクロスフェアの膨潤工程を実施した。生理食塩水を除去した後、５０ｍＬのＰＢＳ(Ｓｉｇｍａ Ｐ－５３６８；１０ｍＭ リン酸緩衝化食塩水；ＮａＣｌ ０.１３６Ｍ；ＫＣｌ ０.００２７Ｍ；ｐＨ ７.４)を添加した。薬物溶出は振盪(１５０ｒｐｍ)下、３７℃で起こり、チューブをオーブン内に水平に置いた。サンプル(１ｍＬ)を２時間、２４時間および２５については３日または４日ごとに採取した。各サンプリング時に、培地を新鮮ＰＢＳで完全に入れ替えた。生理食塩水およびＰＢＳ上清中の遊離のトラボプロストの量を、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２２２ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより決定した。
実施例２に記載の薬物充填および凍結乾燥後、１０ｍＬの０.９％ ＮａＣｌ食塩水溶液中で１０分間、マイクロスフェアの膨潤工程を実施した。生理食塩水を除去した後、５０ｍＬのＰＢＳ(Ｓｉｇｍａ Ｐ－５３６８；１０ｍＭ リン酸緩衝化食塩水；ＮａＣｌ ０.１３６Ｍ；ＫＣｌ ０.００２７Ｍ；ｐＨ ７.４)を添加した。薬物溶出は振盪(１５０ｒｐｍ)下、３７℃で起こり、チューブをオーブン内に水平に置いた。サンプル(１ｍＬ)を２時間、２４時間および２５については３日または４日ごとに採取した。各サンプリング時に、培地を新鮮ＰＢＳで完全に入れ替えた。生理食塩水およびＰＢＳ上清中の遊離のトラボプロストの量を、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２２２ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより決定した。
【0153】
生理食塩水中でのトラボプロストを充填したＭＳの水和中のトラボプロスト溶出に対するＭＳ組成の影響を、図２および３に記載する。
【0154】
２つのトラボプロストペイロードについて充填されたマイクロスフェアが膨潤する間の、クロスリンカーの疎水性は、５％のクロスリンカーのＭＳについての薬物放出に影響を与えなかった(ＭＳ１対ＭＳ３)。有意ではあるが僅かなクロスリンカー組成が、３０％のクロスリンカーのマイクロスフェアについて観測された(ＭＳ２対ＭＳ５)。トラボプロストが充填されたＭＳの水和中の薬物放出を制御する主要なパラメーターは、２つの薬物ペイロードについての各クロスリンカーの濃度である。生理食塩水中でのトラボプロスト放出は、５％を超えるクロスリンカー濃度で有意に減少した。高いクロスリンカー濃度(１５－３０－５０ｍｏｌ％)のマイクロスフェアについて、水和工程の間に溶出したトラボプロストの量は、約２％で同様であった。
【0155】
各ペイロードについて、トラボプロスト放出に対するクロスリンカー組成および濃度の影響を図３に示す。２つのペイロードについて、１５－３０－５０ｍｏｌ％のクロスリンカーの高度に架橋したＭＳでは薬物放出が減少した。トラボプロスト充填レベルは、生理食塩水中でのＭＳ膨潤の間、トラボプロスト放出にほとんど影響を与えなかった。Ｆ２ｍｇ／ｍＬでのペイロードについて、生理食塩水中での薬物溶出は、３０ｍｏｌ％の各クロスリンカー(ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８およびＰＥＧ２－ＰＣＬ１２)のＭＳについてのクロスリンカーの疎水性とともに、有意に減少した。
【0156】
その後、生理食塩水中での膨潤段階の後、３７℃でのトラボプロスト放出のために、マイクロスフェアをＰＢＳ中に移した。ｐＨ ７.４の生理食塩水緩衝培地中で充填されたマイクロスフェアを２時間インキュベートした後の薬物溶出を図４に示した。
【0157】
トラボプロストを充填したＭＳがＰＢＳでを通過することにより、５ｍｏｌ％のクロスリンカーのＭＳ(ＭＳ１およびＭＳ３)について重要な薬物放出：２時間で約３５％の薬物放出をもたらした。３０ｍｏｌ％の各分解性クロスリンカー、すなわちＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８およびＰＥＧ２－ＰＣＬ１２の高度に架橋したマイクロスフェアについて、ＰＢＳ中でのトラボプロスト溶出は約１０％に減少した。３０％のクロスリンカーのマイクロスフェア(ＭＳ２、ＭＳ５、ＭＳ９)からのトラボプロスト溶出は、ほぼ同量であった(図４)。５０ｍｏｌ％のクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＣＬ８のＭＳ６では、より低い放出量が得られた。先に生理食塩水中での膨潤の間に観測されたように、ＭＳの架橋度はＰＢＳ中でのインキュベートの最初の時間のトラボプロスト放出を制御する。
【0158】
ＰＢＳ中でのインキュベートの間のトラボプロスト放出の結果を、１ｍｇ／ｍＬでの薬物充填について表３に要約し、２ｍｇ／ｍＬでのペイロードについて表４に要約する。
【表5】
【0159】
１ｍｇ／ｍＬでのトラボプロストペイロードについて、５ｍｏｌ％のクロスリンカー組成(ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３またはＰＥＧ１３－ＰＣＬ８)は、ＰＢＳ中でのトラボプロスト溶出に影響を与えなかった(表３)。対照的に、ＭＳ中の２つのクロスリンカーの濃度を増加させると、種々の時点でのＰＢＳ中でのトラボプロスト放出が有意に減少した。１５ｍｏｌ％、３０ｍｏｌ％および５０ｍｏｌ％のクロスリンカーでは、ＰＢＳ中でのトラボプロストの流速は、５ｍｏｌ％のクロスリンカーのＭＳと比較して低下した。親水性ｍ－ＰＥＧＭＡをｔｅｒｔ－ブチル メタクリレートモノマーに置き換えることにより(ＭＳ８)、ＰＢＳ中でのトラボプロスト放出の低下がもたらされた。
【0160】
２ｍｇ／ｍＬでのトラボプロストペイロードについて、ＭＳ４、ＭＳ５およびＭＳ６においてクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＣＬ８含量が増加すると(１５ｍｏｌ％、３０ｍｏｌ％、５０ｍｏｌ％)、１日後、１週間後および１８日後のＰＢＳ中でのトラボプロストの放出は有意に減少した。他方で、５ｍｏｌ％の３アームクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３のＭＳ７は、５ｍｏｌ％の直鎖状クロスリンカーのＭＳ１について観測されたように、迅速にトラボプロスト分子を放出した(表４)。
【表6】
【0161】
３０ｍｏｌ％のクロスリンカーでは、ＰＢＳ中でのトラボプロスト放出は、３バッチのマイクロスフェアＭＳ２、ＭＳ５およびＭＳ９の間で有意な差異がなかった。これらの結果により、マイクロスフェアの架橋度とは異なり、クロスリンカーの疎水性は、トラボプロストの放出の制御に与える影響が低いことが確認された。
【0162】
【0163】
トラボプロストを迅速に放出する５ｍｏｌ％のクロスリンカーのマイクロスフェアと比較して、高度に架橋したマイクロスフェア(１５ｍｏｌ％、３０ｍｏｌ％、５０ｍｏｌ％)については薬物放出の重要性は低く、これは１ｍｇ／ｍＬの薬物充填目標についての薬物放出に対するヒドロゲルのメッシュサイズの影響を示す(図５)。
【0164】
２ｍｇ／ｍＬでのペイロードについて、１５または３０ｍｏｌ％のクロスリンカー(ＰＥＧ１３－ＰＬＡ７－ＰＣＬ３、ＰＥＧ１３－ＰＣＬ８、ＰＥＧ２－ＰＣＬ１２)のＭＳは、ＰＢＳ中で１か月間、同程度の流速でトラボプロストを放出する(図６)。５０ｍｏｌ％のクロスリンカーＰＥＧ１３－ＰＣＬ８のＭＳ６は、１５ｍｏｌ％または３０ｍｏｌ％のクロスリンカーのＭＳと比較して、低用量のトラボプロスト送達を提供した。結論として、１５ｍｏｌ％～５０ｍｏｌ％のクロスリンカー濃度によって、マイクロスフェアの水和後の破裂およびその後のトラボプロストの経時的な溶出速度を制御し、制御および持続放出を達成することが可能となる。
【0165】
実施例４．実施例１に従った無菌マイクロスフェアへのトラボプロストの即座の充填
ふるい分け工程後、２５０μＬのマイクロスフェアの２.５％(ｗ／ｖ)のマンニトールを含む溶液１５ｍＬの懸濁液を調製した。均一化後、マイクロスフェアを回収し、凍結乾燥させ、電子ビーム照射(１５～２５キログレイ)により滅菌した。
ふるい分け工程後、２５０μＬのマイクロスフェアの２.５％(ｗ／ｖ)のマンニトールを含む溶液１５ｍＬの懸濁液を調製した。均一化後、マイクロスフェアを回収し、凍結乾燥させ、電子ビーム照射(１５～２５キログレイ)により滅菌した。
【0166】
その後５００μＬまたは１ｍＬの水を添加した後に、５００μＬまたは１ｍＬのトラボプロスト溶液(Ｓｉｇｍａ、ＰＨＲ １６２２－３ｍＬ ロットＬＲＡＡ５２９２(水／アセトニトリル(７０／３０)中に０.４９９μｇ／ｍＬ)をそれぞれ添加した。
【0167】
チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら、室温で５分間、充填工程を実施した。その後、蛍光測定(λｅｘ ２２０ｎｍ、λＥｍ ３１０ｎｍ)による結合していないトラボプロストの測定のために、上清を除去した。トラボプロストの量は、標準曲線(０.６～２０μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られた。
【0168】
試験された種々の製剤の乾燥無菌ＭＳへの即座のトラボプロスト充填を表５に要約する。
【表7】
【0169】
その後、インビトロ薬物放出試験のために、トラボプロストを充填したマイクロスフェアにＰＢＳ(５０ｍＬ)を添加した(３７℃、１５０ｒｐｍ)。各サンプル回収の後、培地を新鮮ＰＢＳで完全に入れ替えた。ＰＢＳ上清中のトラボプロストの量を、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２２２ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより決定した。ＭＳ５からのインビトロ放出を図７に示す。
【0170】
乾燥無菌ＭＳへの充填後、初期のトラボプロストの破裂放出は遅く(３.５％)、少なくとも２か月間持続した(図７)。
【0171】
実施例５．実施例１による無菌マイクロスフェアへの他のプロスタグランジンアナログの即座の充填
ＭＳ５のふるい分け工程後、１００μＬまたは２５０μＬのペレットを、２.５％(ｗ／ｖ)のマンニトールを含む溶液５ｍＬに懸濁した。均一化後、マイクロスフェアを回収し、凍結乾燥させ、電子ビーム照射(２５キログレイ)により滅菌した。薬物充填試験のために使用されるプロスタグランジンアナログの構造を図８に示す。
ＭＳ５のふるい分け工程後、１００μＬまたは２５０μＬのペレットを、２.５％(ｗ／ｖ)のマンニトールを含む溶液５ｍＬに懸濁した。均一化後、マイクロスフェアを回収し、凍結乾燥させ、電子ビーム照射(２５キログレイ)により滅菌した。薬物充填試験のために使用されるプロスタグランジンアナログの構造を図８に示す。
【0172】
ラタノプロスト充填
マイクロスフェアの乾燥無菌ペレット(２５０μＬ)に、アセトニトリル／水混合物(７０／３０)に２ｍｇ／ｍＬのラタノプロスト溶液(ＴＲＣ－Ｌ１７７２８０－１０ＭＧ)を５００μＬ添加した。チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら室温で５分間混合した後、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２１０ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより結合していないラタノプロストを測定するために、上清を除去した。上清中のラタノプロストの量は、標準曲線(０.５～２０μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られた。初期量から最終的なラタノプロストの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するラタノプロスト充填量は、２５０μＬのＭＳに充填される量を４倍することにより得られた。
マイクロスフェアの乾燥無菌ペレット(２５０μＬ)に、アセトニトリル／水混合物(７０／３０)に２ｍｇ／ｍＬのラタノプロスト溶液(ＴＲＣ－Ｌ１７７２８０－１０ＭＧ)を５００μＬ添加した。チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら室温で５分間混合した後、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２１０ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより結合していないラタノプロストを測定するために、上清を除去した。上清中のラタノプロストの量は、標準曲線(０.５～２０μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られた。初期量から最終的なラタノプロストの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するラタノプロスト充填量は、２５０μＬのＭＳに充填される量を４倍することにより得られた。
【0173】
ラタノプロステンブノド充填
ラタノプロステンブノドは、開放隅角緑内障または高眼圧症を有する患者における眼圧の低減に対して承認された一酸化窒素(ＮＯ)供与性プロスタグランジンＦ２αアナログである。マイクロスフェアの乾燥無菌ペレット(１００μＬ)に、アセトニトリル／水混合物(７０／３０％)中１ｍｇ／ｍＬのラタノプロステンブノド(ＴＲＣ－Ｌ１７７３３５－２.５ＭＧ)溶液を７００μＬ添加した。チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら室温で５分間混合した後、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２１０ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより結合していない薬物を測定するために、上清を除去した。上清中のラタノプロステンブノドの量は、標準曲線(０.２５～２５μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られた。初期量から最終的なラタノプロステンブノドの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するラタノプロステンブノド充填量は、１００μＬのＭＳに充填される量を１０倍することにより得られた。
ラタノプロステンブノドは、開放隅角緑内障または高眼圧症を有する患者における眼圧の低減に対して承認された一酸化窒素(ＮＯ)供与性プロスタグランジンＦ２αアナログである。マイクロスフェアの乾燥無菌ペレット(１００μＬ)に、アセトニトリル／水混合物(７０／３０％)中１ｍｇ／ｍＬのラタノプロステンブノド(ＴＲＣ－Ｌ１７７３３５－２.５ＭＧ)溶液を７００μＬ添加した。チューブ回転機(約３０ｒｐｍ)で撹拌しながら室温で５分間混合した後、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上でアセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、２１０ｎｍでＲＰ－ＨＰＬＣにより結合していない薬物を測定するために、上清を除去した。上清中のラタノプロステンブノドの量は、標準曲線(０.２５～２５μｇ／ｍＬ)からの外挿により得られた。初期量から最終的なラタノプロステンブノドの量を減算することで、充填量を計算した。１ｍＬのビーズに対するラタノプロステンブノド充填量は、１００μＬのＭＳに充填される量を１０倍することにより得られた。
【0174】
ＭＳ５の乾燥無菌ペレットへのラタノプロストおよびラタノプロステンブノドの充填値を表６に要約する。ラタノプロストおよびトラボプロストは低用量で(４０～５０μｇ／ｍＬ)効果的な、強力な抗緑内障薬物である。対照的に、ラタノプロステンブノドは高濃度(２４０μｇ／ｍＬ)で有効であり、これは単回結膜下注射後数週間、治療用量を持続放出するための高い薬物ペイロードを得ることを示唆する。
【表8】
【0175】
短時間(室温で５分間)混合した後の無菌ＭＳ５バッチへの各プロスタグランジンアナログの充填は効率的であった(収量＞９０％)。少なくとも６.５ｍｇのラタノプロステンブノドが分解性マイクロスフェアに充填されるため、プロスタグランジンアナログを含むＭＳ５のペイロードは重要である。この迅速な充填は、実施例１のマイクロスフェアに製剤化された分解性ポリマー１と緑内障処置のために使用されるいくつかのプロスタグランジンアナログとの間に存在する親和性を確認するものである。
【0176】
そして、充填工程の直後、インビトロ薬物放出のために、ラタノプロストまたはラタノプロステンブノドを充填したマイクロスフェアに、５０ｍＬのＰＢＳ(Ｓｉｇｍａ Ｐ－５３６８；１０ｍＭ リン酸緩衝化食塩水；ＮａＣｌ ０.１３６Ｍ；ＫＣｌ ０.００２７Ｍ；ｐＨ ７.４)を添加した(３７℃、１５０ｒｐｍ)。各サンプルの回収(１０分、２時間、２４時間および５週間については３～４日毎)後、培地を新鮮ＰＢＳで完全に入れ替えた。ＰＢＳ上清中のプロスタグランジンアナログは、Ｃ１８カラム(４６×１５０ｍｍ)上で、アセトニトリル／０.１％ ＴＦＡを含む水(６０：４０、ｖ／ｖ)から成る移動相を用いて、定組成モードで、２５℃、流速１ｍＬ／分で、ラタノプロストおよびラタノプロステンブノドについて２１０ｎｍで、ＲＰ－ＨＰＬＣにより決定した。各薬物についての結果を表７および図９に要約する。
【表9】
【0177】
インビトロ溶出試験は、無菌ＭＳ５への迅速な即座の充填後に、インビトロで５週間プロスタグランジンアナログの送達を達成することが可能であり、薬物放出の程度はプロスタグランジンアナログに依存することを示す。ＰＢＳ中での最初の１０分間のインキュベートの間、２つの薬物の放出は同様であったが(表７)、ＰＢＳ中で２４時間後には、薬物放出値は２つの薬物間で異なり、ラタノプロストの溶出がラタノプロステンブノドの溶出より早かった。ラタノプロストおよびラタノプロステンブノドの溶出は実際には、インキュベート５週間後に完了するが(図９)、トラボプロストの溶出は低い流速で起こる(図７)。
【0178】
プロスタグランジンアナログと分解性マイクロスフェアの間の相互作用は、薬物の構造に応じて変化する。緑内障処置のためのプロスタグランジンアナログの制御された持続的な薬物送達には、マイクロスフェアの架橋度のみがパラメーターとして関与しているわけではない。薬物の分子量や、トラボプロストのフッ素やラタノプロステンブノドの窒素のような特定の原子の存在は、分子の架橋ポリマーへの親和性に影響を与える可能性がある。薬物の分子量またはトラボプロストのフッ素もしくはラタノプロステンブノドの窒素などの特定の原子の存在が、架橋ポリマーへの分子の親和性に影響を与え得る。
【0179】
インビトロでは、ＤＤＳからのプロスタグランジンアナログの放出は、先に示されるインビボ条件と比較して加速され得る(Natarajan et al., 2014. ACS Nano. 8: 419-29)。
ラタノプロストを含むリポソームでは、ＰＢＳ中３０日で６０％の薬物放出でプラトーが得られたが、非ヒト霊長類におけるリポソームの単回結膜下注射後、眼内圧の低下が１２０日間測定された。主な説明として、著者らは、リポソームからのラタノプロストの放出が眼内ではより遅く、これは、結膜下腔の液体の体積が少なく、シンク条件が適用できなくなり、薬物の放出が遅くなったためであると考えている。もう一つの仮説において、著者はリポソームから放出されたラタノプロストが眼球から速やかに排出されず、眼球滞留時間が長いと考えている。
ラタノプロストを含むリポソームでは、ＰＢＳ中３０日で６０％の薬物放出でプラトーが得られたが、非ヒト霊長類におけるリポソームの単回結膜下注射後、眼内圧の低下が１２０日間測定された。主な説明として、著者らは、リポソームからのラタノプロストの放出が眼内ではより遅く、これは、結膜下腔の液体の体積が少なく、シンク条件が適用できなくなり、薬物の放出が遅くなったためであると考えている。もう一つの仮説において、著者はリポソームから放出されたラタノプロストが眼球から速やかに排出されず、眼球滞留時間が長いと考えている。
【0180】
これらの観測は、実施例１のマイクロスフェアに充填されたプロスタグランジンアナログは、単回結膜下注射後に、インビボで十分に長く溶出し、数か月間眼内圧を低減し得ることを示唆する。
【0181】
実施例６：生理食塩水中での膨潤後の無菌親水性マイクロスフェア(ＭＳ３およびＭＳ４)のサイズ分布
種々の疎水性を有するクロスリンカーを用いた２つのバッチからの無菌マイクロスフェアは、同様のサイズ分布を有する。マン・ホイットニー・ノンパラメトリック検定によれば、サイズによる差異は見られなかった(ｐ＝０.２４９３)。(図１０Ａおよび１０Ｂを参照)。
種々の疎水性を有するクロスリンカーを用いた２つのバッチからの無菌マイクロスフェアは、同様のサイズ分布を有する。マン・ホイットニー・ノンパラメトリック検定によれば、サイズによる差異は見られなかった(ｐ＝０.２４９３)。(図１０Ａおよび１０Ｂを参照)。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10A】
【図10B】
【国際調査報告】