▶ パフォームズ ソチエタ レスポンサビリタ リミタータの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-08-04
(54)【発明の名称】親油性活性成分を送達するための処方
(51)【国際特許分類】
A61K 31/164 20060101AFI20230728BHJP
A61K 9/10 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/14 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/06 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/12 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/107 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/48 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/16 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/02 20060101ALI20230728BHJP
A61K 9/70 20060101ALI20230728BHJP
A61P 17/06 20060101ALI20230728BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20230728BHJP
A61P 17/10 20060101ALI20230728BHJP
A61P 17/04 20060101ALI20230728BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20230728BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20230728BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20230728BHJP
A61P 9/10 20060101ALI20230728BHJP
A61P 11/06 20060101ALI20230728BHJP
A61P 19/02 20060101ALI20230728BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20230728BHJP
A61P 1/04 20060101ALI20230728BHJP
A61P 27/06 20060101ALI20230728BHJP
A61K 31/25 20060101ALI20230728BHJP
A61K 47/06 20060101ALI20230728BHJP
A61K 47/14 20170101ALI20230728BHJP
A61K 47/26 20060101ALI20230728BHJP
A61K 47/28 20060101ALI20230728BHJP
A61K 47/10 20170101ALI20230728BHJP
A61K 47/42 20170101ALI20230728BHJP
A61K 8/42 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/37 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/31 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/63 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/86 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/65 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/34 20060101ALI20230728BHJP
A61K 8/35 20060101ALI20230728BHJP
A61Q 19/00 20060101ALI20230728BHJP
A23L 33/10 20160101ALI20230728BHJP
【ＦＩ】
A61K31/164
A61K9/10
A61K9/14
A61K9/06
A61K9/12
A61K9/107
A61K9/48
A61K9/20
A61K9/16
A61K9/02
A61K9/70 401
A61P17/06
A61P17/00
A61P17/10
A61P17/04
A61P31/04
A61P11/00
A61P29/00
A61P9/10 101
A61P11/06
A61P19/02
A61P29/00 101
A61P25/00
A61P1/04
A61P27/06
A61K31/25
A61K47/06
A61K47/14
A61K47/26
A61K47/28
A61K47/10
A61K47/42
A61K8/42
A61K8/37
A61K8/31
A61K8/63
A61K8/86
A61K8/65
A61K8/34
A61K8/35
A61Q19/00
A23L33/10
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023501648
(86)(22)【出願日】2021-07-07
(85)【翻訳文提出日】2023-01-10
(86)【国際出願番号】 IB2021056096
(87)【国際公開番号】W WO2022009118
(87)【国際公開日】2022-01-13
(31)【優先権主張番号】102020000016411
(32)【優先日】2020-07-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】IT
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】523010133
【氏名又は名称】パフォームズ ソチエタ レスポンサビリタ リミタータ
(74)【代理人】
【識別番号】100099759
【弁理士】
【氏名又は名称】青木 篤
(74)【代理人】
【識別番号】100123582
【弁理士】
【氏名又は名称】三橋 真二
(74)【代理人】
【識別番号】100117019
【弁理士】
【氏名又は名称】渡辺 陽一
(74)【代理人】
【識別番号】100141977
【弁理士】
【氏名又は名称】中島 勝
(74)【代理人】
【識別番号】100138210
【弁理士】
【氏名又は名称】池田 達則
(74)【代理人】
【識別番号】100182730
【弁理士】
【氏名又は名称】大島 浩明
(72)【発明者】
【氏名】エレオノーラ マレッティ
(72)【発明者】
【氏名】エリアナ グラツィア レオ
(72)【発明者】
【氏名】ビルジニア ブリゲンティ
【テーマコード（参考）】
4B018
4C076
4C083
4C206
【Ｆターム（参考）】
4B018LE01
4B018LE02
4B018LE05
4B018MD07
4B018MD08
4B018MD10
4B018MD18
4B018MD20
4B018MD30
4B018MD42
4B018ME14
4B018MF02
4C076AA01
4C076AA06
4C076AA09
4C076AA16
4C076AA22
4C076AA24
4C076AA30
4C076AA31
4C076AA36
4C076AA53
4C076AA93
4C076BB01
4C076BB24
4C076BB31
4C076CC01
4C076CC10
4C076CC11
4C076CC15
4C076CC16
4C076CC18
4C076CC20
4C076CC32
4C076DD08F
4C076DD08N
4C076DD08Q
4C076DD09F
4C076DD09M
4C076DD09Q
4C076DD34F
4C076DD34N
4C076DD34Q
4C076DD67
4C076DD68F
4C076DD68N
4C076DD68Q
4C076DD70F
4C076DD70N
4C076DD70Q
4C076EE23F
4C076EE23N
4C076EE23Q
4C076EE42F
4C076EE42N
4C076EE42Q
4C076FF11
4C076FF16
4C076FF34
4C076FF36
4C076FF63
4C076GG41
4C083AC021
4C083AC022
4C083AC101
4C083AC102
4C083AC211
4C083AC212
4C083AC421
4C083AC422
4C083AC441
4C083AC442
4C083AC641
4C083AC642
4C083AD041
4C083AD042
4C083AD221
4C083AD222
4C083AD411
4C083AD412
4C083AD531
4C083AD532
4C083BB01
4C083CC02
4C083DD08
4C083DD12
4C083DD14
4C083DD15
4C083DD16
4C083DD17
4C083DD22
4C083DD23
4C083DD31
4C083DD39
4C083DD41
4C083EE01
4C083EE03
4C083EE11
4C083EE13
4C083EE14
4C083FF05
4C206AA01
4C206AA02
4C206DB47
4C206GA26
4C206MA03
4C206MA05
4C206MA33
4C206MA42
4C206MA43
4C206MA48
4C206MA51
4C206MA52
4C206MA55
4C206MA57
4C206MA61
4C206MA63
4C206MA72
4C206MA78
4C206MA83
4C206NA02
4C206NA11
4C206NA13
4C206ZA01
4C206ZA33
4C206ZA45
4C206ZA59
4C206ZA68
4C206ZA89
4C206ZA94
4C206ZA96
4C206ZB15
4C206ZB35
(57)【要約】
本発明は、親油性活性成分の送達のための技術的プラットフォームに関する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記工程を含む、親油性活性成分のナノ構造製剤の調製方法であって、１）スクアレン及び第１の界面活性剤の存在下で前記親油性活性成分を水混和性溶媒に溶解する工程；
２）このようにして得られた溶液を第２の界面活性剤の存在下で水相に滴下する工程、ここで前記活性成分がエンドカンナビノイドのクラスの化合物である場合、前記第１及び前記第２の界面活性剤はステロイド構造を有する界面活性剤ではない、方法。
【請求項2】
前記親油性活性成分が、オレオイルエタノールアミド（ＯＥＡ）、アナンダミド（ＡＥＡ）、２－アラキドノイルグリセロール（２－ＡＧ）、ステアロイルエタノールアミド（ＳＥＡ）、ドコサヘキサエノイルエタノールアミド（ＤＨＥＡ）、リノレオイルエタノールアミド（ＬＥＡ）、アデルミドロール、パルミトイルエタノールアミド（ＰＥＡ）を含む群から選択され、そして 好ましくはパルミトイルエタノールアミドである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記水混和性溶媒が、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトン、及びアセトニトリルを含む群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項4】
工程１）において、前記第１の界面活性剤が、ＨＢＬ＜１０を有する界面活性剤である、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
工程１）において、前記界面活性剤が、グリセリルモノステアレート又はソルビタンモノステアレートによって表される界面活性剤である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
工程２）において、前記界面活性剤が、ＨＢＬ≧１０を有する界面活性剤である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
工程２）において、前記第２の界面活性剤が、トリテルペノイドサポニン又はその混合物、ポリソルベート、ポロキサマー、ゼラチン、ポリエチレングリコール誘導体、パルミチン酸スクロースを含む群から選択される、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
工程１）の界面活性剤及び工程２）の界面活性剤が、約１：０．２５～１：１．７５の親油性活性成分：全界面活性剤の比率が得られるように、合計重量で添加される、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
工程２）において、フコース又はマンノース、又はモノマー、オリゴマー、又はポリマー形態のその誘導体、又はメチルアルファ－Ｄ－マンノピラノシド、又は脂肪酸、タンパク質又はＮ－アセチルグルコサミンを含む群から選択されたフコシル化化合物又はマンノシラートから選択された化合物がさらに添加される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
請求項１～９のいずれか１項に記載の方法に従って得られるナノ構造製剤。
【請求項11】
前記製剤が、約２５０～３５０ｎｍ、好ましくは約２８０～３２０ｎｍの直径を特徴とするナノ粒子を含む、請求項１０に記載のナノ構造製剤。
【請求項12】
懸濁液又は乾燥粉末の形態である、請求項１０又は１１に記載のナノ構造製剤。
【請求項13】
請求項１０又は１１又は１２に記載のナノ構造製剤を含む、医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項14】
クリーム、ジェル、スプレー、エマルジョン、泡、乾燥粉末又は吸入用懸濁液、カプセル、錠剤、顆粒、坐薬、点眼薬、水性懸濁液、経皮パッチの形で請求項１０～１２のいずれか１項に記載ナノ構造製剤を含む、医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項15】
医療への使用のための、請求項１０～１２のいずれか１項に記載ナノ構造製剤、又は請求項１３又は１４に記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項16】
乾癬、皮膚炎、湿疹、にきび、毛嚢炎、粃糠疹、肺の感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群からの状態の治療への使用のための、請求項１０～１２のいずれか１項に記載ナノ構造製剤、又は請求項１３又は１４に記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項17】
乾癬、皮膚炎、湿疹、にきび、毛嚢炎、粃糠疹、肺の感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群からの状態の治療方法であって、そのような状態に苦しんでいる患者に、請求項１０～１２のいずれか１項に記載ナノ構造製剤、又は請求項１３又は１４に記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品を投与する工程を含む方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、医療、製薬、栄養補助食品、及び化粧品の分野に適用され、そして特に、活性成分を送達するための新規なプラットフォームに関する。
【背景技術】
【0002】
ＰＥＡ（その構造は図１に示されている）は、パルミチン酸とエタノールアミンの間のアミドであり、中枢神経系に豊富に含まれている。
【0003】
ＰＥＡ はグリア細胞によって顕著に産生され、そして中枢及び末梢の両方で作用する重要なメディエーターである。
【0004】
パルミトイルエタノールアミド (ＰＥＡ) は、痛みや炎症と闘うために体内で生成される。 多くの動物や植物も ＰＥＡ を生成する。 大豆レシチン、大豆、卵黄、ピーナッツに最も多く含まれている。 この脂肪酸は、内因性カンナビノイドを増加させ、全身の神経を保護する可能性がある。
【0005】
その利点は、治療が困難なさまざまな障害にとって心強いものである。
【0006】
約 ２５ 年前、その構造類似体の １つであるアナンダミド (ＡＥＡ) が、マリファナに見られる Δ９－テトラヒドロカンナビノールの標的であるカンナビノイド受容体の内因性リガンドであることが発見された。
【0007】
良く知られている抗炎症作用に加えて、ＰＥＡ は鎮痛を誘発し、神経保護効果を発揮し、食物摂取を抑制し、腸の運動性と癌細胞の増殖を抑制し、そして心虚血の場合に血管内皮を保護することができる。
【0008】
他の研究では、この内因性アシルエタノールアミドがマスト細胞の脱顆粒と炎症を末梢レベルで阻害できること、マクロファージによる一酸化窒素産生の変化、及び誘導性一酸化窒素合成酵素 (ｉＮＯＳ) 及びシクロオキシゲナーゼ－２ (ＣＯＸ－２) などの炎症性タンパク質の発現の変化を伴う効果が示された。
【0009】
ＰＥＡ は、細胞核内の受容体 (核内受容体) に結合し、慢性的な痛みや炎症に関連するさまざまな生物学的機能を発揮することが示されている。 ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体アルファ (ＰＰＡＲ－α) が主要な標的であると考えられている。 しかし、パルミトイルエタノールアミドやその他の構造的に関連する Ｎ－アシル エタノールアミンの存在は、いわゆる「側近効果」を通じてアナンダミドの活性を高めることが知られている。
【0010】
ＰＥＡ は、Ｔ 細胞とマクロファージが関与する深刻な炎症反応に関連する神経障害のモデルである、末梢損傷、慢性狭窄損傷の動物モデルにおける炎症の程度を軽減することもできる。 神経損傷後、ＰＥＡ は、高レベルの一酸化窒素、スーパーオキシドラジカル、及び炎症誘発性サイトカインの産生に関与する ＣＤ８６＋ 細胞の量によって評価される、浮腫及びマクロファージ浸潤を減少させる。
【0011】
従って、ＰＥＡ の抗痛覚過敏及び神経保護特性は、その抗炎症効果及びマクロファージの神経への浸潤を防止する能力だけに関連するものではない。 まとめると、この証拠は、炎症反応と組織損傷を引き起こす病理学的刺激の間、細胞の恒常性を維持する上で ＰＥＡ が重要な役割を果たしていることを示唆している。
【0012】
その臨床的可能性にもかかわらず、ＰＥＡ 及び全てのエンドカンナビノイドには深刻な可溶化の問題がある。
【0013】
ＰＥＡ は、水、油、及びほとんどの一般的な有機溶媒に実質的に不溶である。 ＰＥＡ は、メタノール、エタノール、イソプロピル アルコールにはほとんど溶けない。
【0014】
市場に出回っているＰＥＡは、栄養補助食品として非常に高用量 (1 用量当たり６００ｍｇ) で、微粉化された形でも経口で使用される。
【0015】
米国特許出願ＵＳ２０１１／０４６２２５号は、パルミトイルエタノールアミドとステアリルエタノールアミドの混合物を、これらの化合物のエンドカンナビノイド型の特性から利益を得ることができる状態の相乗的治療に使用することを記載している。
【0016】
Diana Tronino らによる出版物 (「Nanoparticles prolong N-palmitoylethanolamide in vivo での抗炎症及び鎮痛効果」、COLLOIDS AND SURFACES B:BIOINTERFACES、VOL. 141、2016 年 2 月 1 日、311 ～ 317 ページ、XP029465877)は、コンプリトールＡＴＯ（ベヘン酸トリグリセリド、ＨＬＢ２）ナノ粒子を記載しており、ここでパルミトイルエタノールアミドは、ミグリオール（中鎖トリグリセリド、ＭＣＴ）及びルトロールＦ６８（高ＨＬＢ界面活性剤）を使用して組み込まれている。調製物は、脂質を事前に融解し、パルミトイルエタノールアミドを融解した脂質に溶解した後、高温均質化によって得られる。
【0017】
先行技術文献ＣＮ １０８ ４５１ ９０５ Ｂは、２つの安定化界面活性剤の使用によって得られるガンボギン酸ナノエマルションを記載している。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0018】
本特許出願の発明者らは、水不溶性化合物のナノスケール製剤を調製するための技術プラットフォームを開発した。
【課題を解決するための手段】
【0019】
このプラットフォームは、特に、溶解度が非常に低い活性成分の製剤に利用されてきた。
【図面の簡単な説明】
【0020】
【0021】
【0022】
【図3】図 ３ は、スクアレンの非存在下での製剤の走査型電子顕微鏡画像 (倍率 ２８，０００ 倍) を示す。
【0023】
【0024】
【0025】
【0026】
【0027】
【発明を実施するための形態】
【0028】
本発明の主題
本発明の第１の主題は、活性成分を送達するための製剤を調製する方法によって表される。
本発明の第１の主題は、活性成分を送達するための製剤を調製する方法によって表される。
【0029】
本発明の好ましい側面によれば、活性成分は親油性である。
【0030】
第２の主題は、本発明の方法に従って得られる製剤によって表される。
【0031】
本発明の第３の主題は、記載された製剤を含む医薬品又は栄養補助食品又は化粧品の調製物によって代表される。
【0032】
本発明の第４の主題は、本発明の製剤の医学的使用によって代表される。
【0033】
本発明の好ましい側面によれば、乾癬、皮膚炎、湿疹、座瘡、毛包炎、粃糠疹を含む群から選択される状態の治療のための医学的使用が記載される。
【0034】
本発明のさらなる側面によれば、肺感染及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群から選択される状態の治療のための医学的使用が記載されている。
【0035】
さらなる側面によれば、本発明の製剤又は調製物は、化粧品及び栄養補助食品の用途について記載されている。
【0036】
本発明の第５の主題では、乾癬、皮膚炎、湿疹、座瘡、毛包炎、粃糠疹を含む群から選択される状態を治療するための方法が記載される。
【0037】
本発明の詳細な説明
本発明の第１の主題は、活性成分を送達するための製剤を調製する方法によって表される。
本発明の第１の主題は、活性成分を送達するための製剤を調製する方法によって表される。
【0038】
本特許出願の目的のために、前記活性成分は好ましくは親油性である。
【0039】
特に好ましい側面によれば、前記活性成分はパルミトイルエタノールアミドである。
【0040】
特に、本発明の方法は、以下の工程を含む：
１）親油性活性成分を、スクアレン及び第１の界面活性剤の存在下で水と混和可能な溶媒に溶解する工程
２）得られた溶液を第２の界面活性剤の存在下で水相に滴下する工程。
１）親油性活性成分を、スクアレン及び第１の界面活性剤の存在下で水と混和可能な溶媒に溶解する工程
２）得られた溶液を第２の界面活性剤の存在下で水相に滴下する工程。
【0041】
特定の１つの側面によれば、送達される親油性活性成分は、アラキドン酸又はエタノールアミドの誘導体である。
【0042】
本発明の目的のために、活性成分は内因性カンナビノイドの１つであり得、又は内因性カンナビノイドの１つでなくてもよい。
【0043】
この親油性の活性物質は、オレオイルエタノールアミド（ＯＥＡ）、アナンダミド（ＡＥＡ）、２－アラキドノイルグリセロール（２－ＡＧ）、ステアロイルエタノールアミド（ＳＥＡ）、ドコサヘキサエノイルエタノールアミド（ＤＨＥＡ）、リノレオイルエタノールアミド（ＬＥＡ）、アデルミドロールを含む群から選択することができる。
【0044】
工程１）において、親油性活性成分は、好ましくはパルミトイルエタノールアミドである。
【0045】
本発明の１つの側面によれば、使用される溶媒は、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトン、アセトニトリルを含む群から選択される。
【0046】
本発明の１つの側面によれば、工程１）で使用される第１の界面活性剤は、ＨＬＢ＜１０を有する界面活性剤である。
【0047】
本発明の好ましい側面によれば、前記第１の界面活性剤はグリセリルモノステアレート（ＧＭＳ）又はソルビタンモノステアレートである。
【0048】
本発明の１つの側面によれば、工程１）の溶液は、約０．０５～５％（ｗ／ｖ）の濃度の親油性活性成分を使用することによって得られる。
【0049】
本発明の１つの側面によれば、工程１）の溶液は、約０．０５～５％（ｗ／ｖ）のスクアレン濃度を使用することによって得られる。
【0050】
工程２）に関して、使用される第２の界面活性剤は、ＨＢＬ≧１０を有する界面活性剤である。
【0051】
本発明の目的のために、第２の界面活性剤は、トリテルペノイドサポニン又はその混合物、ポリソルベート、ポロキサマー、ゼラチン、ポリエチレングリコール誘導体、スクロースパルミテートを含む群から選択される。
【0052】
本発明の好ましい側面によれば、前記界面活性剤はスクロースパルミテートである。
【0053】
本発明の１つの側面によれば、工程２）は機械的撹拌下で実施される。
【0054】
工程２）の溶媒は、好ましくは水である。
【0055】
本発明の好ましい側面によれば、工程１）の界面活性剤及び工程２）の界面活性剤は、合計重量で添加され、これにより、約１：０．２５～１：１．７５の親油性活性成分：全界面活性剤の比が得られる（すなわち、工程１の界面活性剤の重量＋工程２）の界面活性剤の重量）。
【0056】
従って、本発明の特定の側面によれば、工程１）の界面活性剤及び工程２）の界面活性剤は、合計重量で添加され、これにより、約１：０．２５～１：１．７５のＰＥＡ：全界面活性剤の比率が得られる（すなわち、工程１の界面活性剤の重量＋工程２）の界面活性剤の重量）。
【0057】
工程２）の後、溶媒が完全に蒸発するまで混合物を蒸発させる。
【0058】
本発明の１つの側面によれば、蒸発は磁気攪拌によって達成される。
【0059】
本発明の１つの側面によれば、工程２）において、以下から選択される化合物が続いて添加される：
－ 単量体、オリゴマー、及びポリマー形態のマンノース又はその誘導体; 又は
－ モノマー、オリゴマー、及びポリマー形態のフコース又はその誘導体。
－ 単量体、オリゴマー、及びポリマー形態のマンノース又はその誘導体; 又は
－ モノマー、オリゴマー、及びポリマー形態のフコース又はその誘導体。
【0060】
本発明の目的のために、マンノース誘導体には、例えば、メチルα－Ｄ－マンノピラノシド、又は例えば、脂肪酸、タンパク質、又はＮ－アセチルグルコサミンを含む群から選択されるマンノシル化化合物が含まれる。
【0061】
本発明の目的のために、フコース誘導体には、例えば、脂肪酸、タンパク質、又はＮ－アセチルグルコサミンを含む群から選択されるフコシル化化合物が含まれる。
【0062】
本発明の好ましい側面によれば、フコースが添加される。
【0063】
本発明の１つの側面によれば、マンノース又はフコース又はそれらの誘導体は、親水性界面活性剤に対して１：１のモル比で添加される。
【0064】
本発明に従って得られる製剤は、ナノ構造タイプのものである。
【0065】
これは、方法がナノ構造のＰＥＡ懸濁液の形成につながることを意味する。
【0066】
特に、得られたナノ構造ＰＥＡ懸濁液は、光散乱によって決定された、約２００～３５０ｎｍ、好ましくは約２８０～３２０ｎｍ、より好ましくは約２９０～３１０ｎｍ又は約３００ｎｍのサイズを有する。
【0067】
上述のように、本特許出願の方法は、親油性活性成分を送達するためのナノ構造製剤を得るために実施することができる。
【0068】
１つの特定の側面によれば、送達される親油性活性成分は、アラキドン酸又はエタノールアミドの誘導体である。
【0069】
本発明の目的のために、活性成分は内因性カンナビノイドの１つであり得、又は内因性カンナビノイドの１つでなくてもよい。
【0070】
前記親油性活性成分は、オレイルエタノールアミド（ＯＥＡ）、アナンダミド（ＡＥＡ）、２－アラキドノイルグリセロール（２－ＡＧ）、ステアロイルエタノールアミド（ＳＥＡ）、ドコサヘキサエノイルエタノールアミド（ＤＨＥＡ）、リノレオイルエタノールアミド（ＬＥＡ）、アデルミドロールを含む群から選択され得る。
【0071】
本発明の第２の主題は、上記の方法に従って得られる製剤である。
【0072】
そのような製剤は、好ましくは懸濁液又は乾燥粉末である。
【0073】
好ましい側面によれば、記載された製剤は、約０．３～１．５％（ｗ／ｖ）の濃度でナノ構造形態のＰＥＡを含む。
【0074】
本発明の第３の主題は、記載された製剤を含む医薬品又は化粧品である。
【0075】
本発明の目的のために、前記調製物は、皮膚、経口、眼、吸入、全身（静脈内、筋肉内、又は皮下又は関節内）経路によって投与されるように調製される。
【0076】
例えば、本発明の調製物は、クリーム、ゲル、スプレー、エマルション、フォーム、吸入用の乾燥粉末又は懸濁液、カプセル、錠剤、顆粒、坐剤、点眼剤、水性懸濁液、経皮パッチのいずれかの形態であってよい。
【0077】
本発明の第四の主題は、本発明の製剤又は調製物の医学的使用である。
【0078】
本発明の好ましい側面によれば、乾癬、皮膚炎、湿疹、座瘡、毛包炎、粃糠疹を含む群から選択される状態の治療のための医学的使用が記載される。
【0079】
本発明のさらなる側面によれば、肺感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群から選択される状態の治療のための医学的使用が記載されている。
【0080】
具体的には、本発明の製剤は、１日２回、１４日間局所投与される。
【0081】
さらなる主題によれば、前述の本発明の製剤又は調製物は、化粧品及び栄養補助食品としての使用について記載されている。
【0082】
本発明の第５の主題によれば、乾癬、皮膚炎、湿疹、にきび、毛嚢炎、粃糠疹、肺の感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群からの状態の治療するために、そのような状態を患っている患者に、本発明のナノ構造製剤又は医薬品又は栄養補助食品又は化粧品を投与する工程を含む方法が記載される。
【0083】
好ましい側面によれば、前記投与は局所的である。
【0084】
好ましい側面によれば、前記投与は１４日間にわたって繰り返される。
【0085】
前記投与は、１日２回行うことができる。
【0086】
活性成分がエンドカンナビノイドのクラスに属する化合物であり、そして前記第１及び前記第２の界面活性剤がステロイド(シクロペンタノペルヒドロフェナントレニック)構造を有する界面活性剤である場合、上記の方法、処方、調製、医学的使用、及び治療方法が本特許出願の目的から除外される。
【0087】
以下の本発明の非限定的な実施例を参照して、本発明をさらに説明する。
【実施例】
【0088】
実施例１
製剤の調製
パルミトイルエタノールアミド（ＰＥＡ）、スクアレン、及びＨＢＬ＜１０を有する第１の界面活性剤を、本発明の量的比率に従ってエタノールに溶解した。 得られた溶液を、ＨＢＬ≧１０の第２の界面活性剤とマンノース誘導体を添加した水相に攪拌しながら滴下した。
製剤の調製
パルミトイルエタノールアミド（ＰＥＡ）、スクアレン、及びＨＢＬ＜１０を有する第１の界面活性剤を、本発明の量的比率に従ってエタノールに溶解した。 得られた溶液を、ＨＢＬ≧１０の第２の界面活性剤とマンノース誘導体を添加した水相に攪拌しながら滴下した。
【0089】
得られた混合物を、溶媒が完全に蒸発するまで電磁攪拌により攪拌した。
【0090】
実施例２
溶解度アッセイ及び可溶化率
未処理のＰＥＡと比較して、実施例１に従って得られた懸濁液について溶解度試験を実施した。
溶解度アッセイ及び可溶化率
未処理のＰＥＡと比較して、実施例１に従って得られた懸濁液について溶解度試験を実施した。
【0091】
本発明の未加工ＰＥＡ及びナノ構造化ＰＥＡの溶解度試験を、化合物の溶解度の変化を決定するために、以下の溶解媒体で実施した:
－ 脱塩水、
－ リン酸緩衝液 ｐＨ ７．４、
－ 模擬腸液 (ｐＨ ６．８)、及び
－ 模擬肺液 (ｐＨ ７．４)。溶解度は、２４時間後に磁気攪拌下で異なる溶解媒体中２５℃で測定された。具体的には、過剰量の未加工ＰＥＡ（１７ｍｇ）及び実施例１（６ｍＬ、１７ｍｇのナノ構造ＰＥＡに相当）を上記の異なる溶液に別々に添加し、１２ｍＬの最終容量を得た。 ２４ 時間後、アリコートを採取し、０．２ μｍ シリンジ フィルターで濾過し、最後に ＨＰＬＣ で分析した。
－ 脱塩水、
－ リン酸緩衝液 ｐＨ ７．４、
－ 模擬腸液 (ｐＨ ６．８)、及び
－ 模擬肺液 (ｐＨ ７．４)。溶解度は、２４時間後に磁気攪拌下で異なる溶解媒体中２５℃で測定された。具体的には、過剰量の未加工ＰＥＡ（１７ｍｇ）及び実施例１（６ｍＬ、１７ｍｇのナノ構造ＰＥＡに相当）を上記の異なる溶液に別々に添加し、１２ｍＬの最終容量を得た。 ２４ 時間後、アリコートを採取し、０．２ μｍ シリンジ フィルターで濾過し、最後に ＨＰＬＣ で分析した。
【0092】
データを以下の表Ｉに示す。
【表1】
【0093】
溶解率の変化を評価するために、１％ コール酸ナトリウム水溶液を使用して実験を行った。
【0094】
１０ｍＬの１％ｗ／ｖコール酸ナトリウム溶液（最終総濃度は３０μｇ／ｍＬである）に懸濁された、実施例１に従って得られた０．３ｍｇの未加工又はナノ構造のＰＥＡの懸濁液から始めて、ＰＥＡの溶解率を経時的に評価した。
【0095】
溶解データを表 II に示す。
【表2】
【0096】
ＨＰＬＣ 法
分析される溶液（実施例２）中のＰＥＡ濃度は、ＨＰＬＣ－ＵＶ／Ｖｉｓ分析によって決定された。使用するシステムは、２ つの PU-2080 Plus ポンプ、HG-980-30 溶媒混合モジュール、Degasys DG-1210 脱気モジュール (Uniflows Co., Ltd., Tokyo, Japan)、及び UV-VIS UV-2075 Plus検出器 で構成されている。データは、Hercule Lite Chromatography Interface と Borwin Software (Jasco Corporation, Tokyo, Japan) をそれぞれ使用して記録及び処理された。Purospher C18プレカラム（４．０×４．０ ｍｍ; ５．０μｍ）（Merck Darmstadt、Germany）を備えたPurospher RP-18eカラム（１２５×４．０ｍｍ; ５．０μｍ）でクロマトグラフィー分析を実施し、両方とも３０℃に温度調節されている。クロマトグラムの記録は ２１０ｎｍで行った。 使用される移動相は、１８：８２ (ｖ/ｖ) Ｈ２Ｏ:アセトニトリル混合物で構成され、流量 １ｍＬ/分 で定組成的に溶出される。 上記の分析条件では、ＰＥＡ の保持時間は４．６ 分であった。
分析される溶液（実施例２）中のＰＥＡ濃度は、ＨＰＬＣ－ＵＶ／Ｖｉｓ分析によって決定された。使用するシステムは、２ つの PU-2080 Plus ポンプ、HG-980-30 溶媒混合モジュール、Degasys DG-1210 脱気モジュール (Uniflows Co., Ltd., Tokyo, Japan)、及び UV-VIS UV-2075 Plus検出器 で構成されている。データは、Hercule Lite Chromatography Interface と Borwin Software (Jasco Corporation, Tokyo, Japan) をそれぞれ使用して記録及び処理された。Purospher C18プレカラム（４．０×４．０ ｍｍ; ５．０μｍ）（Merck Darmstadt、Germany）を備えたPurospher RP-18eカラム（１２５×４．０ｍｍ; ５．０μｍ）でクロマトグラフィー分析を実施し、両方とも３０℃に温度調節されている。クロマトグラムの記録は ２１０ｎｍで行った。 使用される移動相は、１８：８２ (ｖ/ｖ) Ｈ２Ｏ:アセトニトリル混合物で構成され、流量 １ｍＬ/分 で定組成的に溶出される。 上記の分析条件では、ＰＥＡ の保持時間は４．６ 分であった。
【0097】
実施例１に従って得られたが、マンノース誘導体を含まない調製物は、同様の溶解度及び可溶化率を示した。
【0098】
実施例３
粒子の寸法および形態学的特徴付け
実施例１に従って得られたナノ構造ＰＥＡ懸濁液を光散乱によって分析して、ナノ粒子のサイズを評価した。
粒子の寸法および形態学的特徴付け
実施例１に従って得られたナノ構造ＰＥＡ懸濁液を光散乱によって分析して、ナノ粒子のサイズを評価した。
【0099】
結果を以下の表IIIに示す。
【表3】
【0100】
形態学的には、両方の形態の走査型電子顕微鏡 (ＳＥＭ) 分析が行われた。 図 ２の画像から、未加工のＰＥＡ が不規則な巨視的凝集体 (数十ミクロン) の形であることがわかり、 一方、本発明によるナノ構造ＰＥＡは、明確なナノメートル構造を含むことが示されている。
【0101】
実施例１に従って得られたが、マンノース誘導体を含まない調製物が特徴付けられ、結果は実施例３のものと同様である。
【0102】
実施例４
比較アッセイ
実施例１のプロセスに従って、同様の製剤を調製したが、特定の成分を１つずつ省略した：
1) スクアレンの不在、
２）スクワランからスクワランへの置換
３)工程 １ 及び ２の界面活性剤が存在しない。
比較アッセイ
実施例１のプロセスに従って、同様の製剤を調製したが、特定の成分を１つずつ省略した：
1) スクアレンの不在、
２）スクワランからスクワランへの置換
３)工程 １ 及び ２の界面活性剤が存在しない。
【0103】
１）実施された試験は、スクアレンが存在しない場合、製剤が不安定であり、目に見える肉眼で見える凝集物がないことを示した；ただし、ＳＥＭ 分析 (図３を参照) により、明確なナノ構造が存在せず、微視的な凝集体が存在することが観察される。この製剤の １％ コール酸ナトリウム溶液でのＰＥＡ可溶化率は、３０ 分後に １５．５２ μｇ/ｍ であることがわかる (表Ｉを参照のこと)。
【0104】
２）スクアレンの水素化形態であるスクアランの使用は、ＰＥＡとスクアレンとの間の選択的親和性を仮定すると、ナノ構造ＰＥＡの同じ取得を可能にしない。 これは、ＰＥＡ＋スクアラン及びＰＥＡ＋スクアレンの実施例１に従ってアルコール溶液中で調製された混合物のＤＳＣ分析（図５）によって確認され、前者の場合、未加工ＰＥＡの場合のように、ＰＥＡの３つの多形形態が存在し 、 一方、後者の場合、準安定多形 II という単一の形態が安定化される。
【0105】
３）実施された試験は、第１及び第２の界面活性剤が存在しない場合、製剤が不安定に見えることを示した。 ナノ構造 ＰＥＡ が得られなかったことを示す肉眼で見える凝集体は、光学顕微鏡 (図 ４ を参照のこと) と肉眼の両方で見ることができる。
【0106】
実施例５
乾癬の動物モデルの治療
乾癬のマウスモデル (８週齢の Ｃ５７ｂｌ/６ メス) を予備研究に使用して、ナノ構造ＰＥＡの活性を未加工ＰＥＡ 及び市販のコルチコステロイド薬と比較した。 ナノ構造 ＰＥＡ と未加工ＰＥＡ は、主にアーモンド オイル、植物性乳化剤、カプリル酸/カプリン酸トリグリセリドで構成される水中油型ベース クリームに別々に添加された。乾癬は、その使いやすさ、便利さ、及び紅斑、鱗屑形成、表皮肥厚などの急性乾癬に似た皮膚表現型の生成のために、前臨床薬開発で広く使用されている化合物であるイミキモドによって誘発された。 具体的には、２日間のイミキモド塗布後に治療が開始された。 さまざまなクリームを動物の背中に毎日８日間塗布した。動物を 以下の５つのグループに分けた: (１) ビヒクルクリーム、(２) ビヒクルクリーム ＋未加工ＰＥＡ ０．４％、(３) ビヒクルクリーム ＋ ナノ構造 ＰＥＡ ０．４％、(４) ビヒクルクリーム ＋ ナノ構造 ＰＥＡ ０．８％、及び (５) 市販のコルチコステロイド製品であるジプロピオン酸ベタメタゾンクリーム。研究期間中 (１０ 日間)、マウスを毎日モニターし、ストレス、体重減少、食欲不振、運動能力の低下などのさまざまな指標を評価した。 おそらくコルチコステロイド薬の初期毒性のために、治療の最後の２日間に最初の苦痛の兆候が現れたグループ（５）を除いて、これらの指標の変化は確認されなかった。乾癬の指標パラメータとして、紅斑、落屑、病変の厚さを毎日評価した。
乾癬の動物モデルの治療
乾癬のマウスモデル (８週齢の Ｃ５７ｂｌ/６ メス) を予備研究に使用して、ナノ構造ＰＥＡの活性を未加工ＰＥＡ 及び市販のコルチコステロイド薬と比較した。 ナノ構造 ＰＥＡ と未加工ＰＥＡ は、主にアーモンド オイル、植物性乳化剤、カプリル酸/カプリン酸トリグリセリドで構成される水中油型ベース クリームに別々に添加された。乾癬は、その使いやすさ、便利さ、及び紅斑、鱗屑形成、表皮肥厚などの急性乾癬に似た皮膚表現型の生成のために、前臨床薬開発で広く使用されている化合物であるイミキモドによって誘発された。 具体的には、２日間のイミキモド塗布後に治療が開始された。 さまざまなクリームを動物の背中に毎日８日間塗布した。動物を 以下の５つのグループに分けた: (１) ビヒクルクリーム、(２) ビヒクルクリーム ＋未加工ＰＥＡ ０．４％、(３) ビヒクルクリーム ＋ ナノ構造 ＰＥＡ ０．４％、(４) ビヒクルクリーム ＋ ナノ構造 ＰＥＡ ０．８％、及び (５) 市販のコルチコステロイド製品であるジプロピオン酸ベタメタゾンクリーム。研究期間中 (１０ 日間)、マウスを毎日モニターし、ストレス、体重減少、食欲不振、運動能力の低下などのさまざまな指標を評価した。 おそらくコルチコステロイド薬の初期毒性のために、治療の最後の２日間に最初の苦痛の兆候が現れたグループ（５）を除いて、これらの指標の変化は確認されなかった。乾癬の指標パラメータとして、紅斑、落屑、病変の厚さを毎日評価した。
【0107】
これらすべてのパラメーターについて、治療動物のグループ４(ナノ構造 ＰＥＡ ０．８％) は、動物の陽性対照グループ (市販のコルチコステロイド薬) と同様の値を有する唯一の動物であった。 最後に、ＰＡＳＩ 指標が計算された (図 ６)。 ＰＡＳＩ は乾癬の面積と重症度の指標であり、乾癬の臨床評価で乾癬様病変の重症度を監視するために使用される。この指標は、治療中に測定されたプラーク パラメータ、紅斑、落屑、厚さのすべての値を電子ノギスで平均することによって計算される。 最高用量のナノ構造 ＰＥＡ を投与された動物のグループ (グループ ４) は、コルチコステロイドを投与されたグループ (グループ５) と非常によく似た反応を示し、有害な副作用の兆候はほとんど見られなかった。
【0108】
実施例６
乾癬斑の治療
実施例１に従って得られたナノ構造ＰＥＡの懸濁液を、０．２％局所用ナノ構造ＰＥＡクリームの調製に使用した。
乾癬斑の治療
実施例１に従って得られたナノ構造ＰＥＡの懸濁液を、０．２％局所用ナノ構造ＰＥＡクリームの調製に使用した。
【0109】
クリームは、軽度の乾癬患者（約 １５ 人）の皮膚に １日２ 回、１５ 日間塗布された。
【0110】
ボランティアによって確認されたように、膝への塗布後の図７と足への塗布後の図 ８の画像で示されるように、わずか １～２週間後に皮膚乾癬プラークの顕著な改善が見られた。
【0111】
前述の説明から、本発明の多くの利点が当業者には明らかであろう。
【0112】
特に、技術的観点から、本発明の製剤は、腸及び肺の媒体において、生理的ｐＨで少なくとも水及びリン酸緩衝液に有利に溶解する。
【0113】
上記に加えて、記載された方法は、既知の制限及び欠点を除いて、そうでなければ投与できない、親油性の他の及び異なる活性成分の送達のための製剤を得ることを可能にする。
【0114】
得られた製剤はナノ構造タイプのものであり、エマルジョンではなく； 実際には、成分とそれを得るための方法は、水と混和性の溶媒の使用を伴うため、エマルションのものとは異なる。
【0115】
さらに、驚くべきことに、スクアレンの使用は、非常に類似しているが、他の分子で代用できないことが注目されている。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【手続補正書】
【提出日】2023-01-17
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
下記工程を含む、親油性活性成分のナノ構造懸濁物の調製方法であって、１）スクアレン及びＨＢＬ＜１０を有する第１の界面活性剤の存在下で前記親油性活性成分を水混和性溶媒に溶解する工程；
２）このようにして得られた溶液をＨＢＬ≧１０を有する第２の界面活性剤の存在下で水相に滴下する工程、ここで前記活性成分がエンドカンナビノイドのクラスの化合物である場合、前記第１及び前記第２の界面活性剤はステロイド構造を有する界面活性剤ではない、方法。
【請求項2】
前記親油性活性成分が、オレオイルエタノールアミド（ＯＥＡ）、アナンダミド（ＡＥＡ）、２－アラキドノイルグリセロール（２－ＡＧ）、ステアロイルエタノールアミド（ＳＥＡ）、ドコサヘキサエノイルエタノールアミド（ＤＨＥＡ）、リノレオイルエタノールアミド（ＬＥＡ）、アデルミドロール、パルミトイルエタノールアミド（ＰＥＡ）を含む群から選択され、そして 好ましくはパルミトイルエタノールアミドである、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記水混和性溶媒が、エタノール、メタノール、イソプロパノール、アセトン、及びアセトニトリルを含む群から選択される、請求項１又は２に記載の方法。
【請求項4】
工程１）において、前記界面活性剤が、グリセリルモノステアレート又はソルビタンモノステアレートである、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
工程２）において、前記第２の界面活性剤が、トリテルペノイドサポニン又はその混合物、ポリソルベート、ポロキサマー、ゼラチン、ポリエチレングリコール誘導体、パルミチン酸スクロースを含む群から選択される、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
工程１）の界面活性剤及び工程２）の界面活性剤が、約１：０．２５～１：１．７５の親油性活性成分：全界面活性剤の比率が得られるように、合計重量で添加される、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
工程２）において、フコース又はマンノース、又はモノマー、オリゴマー、又はポリマー形態のその誘導体、又はメチルアルファ－Ｄ－マンノピラノシド、又は脂肪酸、タンパク質又はＮ－アセチルグルコサミンを含む群から選択されたフコシル化化合物又はマンノシラートから選択された化合物がさらに添加される、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
請求項１～７のいずれか１項に記載の方法に従って得られるナノ構造懸濁物。
【請求項9】
前記製剤が、約２５０～３５０ｎｍ、好ましくは約２８０～３２０ｎｍの直径を特徴とするナノ粒子を含む、請求項８に記載のナノ構造懸濁物。
【請求項10】
懸濁液又は乾燥粉末の形態である、請求項８又は９のいずれかに記載のナノ構造懸濁物。
【請求項11】
請求項８～１０のいずれか１項に記載のナノ構造懸濁物を含む、医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項12】
クリーム、ジェル、スプレー、エマルジョン、泡、乾燥粉末又は吸入用懸濁液、カプセル、錠剤、顆粒、坐薬、点眼薬、水性懸濁液、経皮パッチの形で請求項８～１０のいずれか１項に記載ナノ構造懸濁物を含む、医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項13】
医療への使用のための、請求項８～１０のいずれか１項に記載ナノ構造懸濁物、又は請求項１１若しくは１２のいずれかに記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項14】
乾癬、皮膚炎、湿疹、にきび、毛嚢炎、粃糠疹、肺の感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群からの状態の治療への使用のための、請求項８～１０のいずれか１項に記載ナノ構造懸濁物、又は請求項１１若しくは１２のいずれかに記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品。
【請求項15】
乾癬、皮膚炎、湿疹、にきび、毛嚢炎、粃糠疹、肺の感染症及び炎症、アテローム性動脈硬化症、喘息、関節リウマチ、多発性硬化症、神経変性疾患、クローン病、大腸炎、及び緑内障を含む群からの状態の治療方法であって、そのような状態に苦しんでいる患者に、請求項８～１０のいずれか１項に記載ナノ構造懸濁物、又は請求項１１若しくは１２のいずれかに記載の医薬品又は栄養補助食品又は化粧品を投与する工程を含む方法。
【国際調査報告】