特表 2023-534012 ペプシノーゲンＩＩの水準を測定する製剤を含む初期びまん型胃がんの予測又は診断用組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-08-07

(54)【発明の名称】ペプシノーゲンＩＩの水準を測定する製剤を含む初期びまん型胃がんの予測又は診断用組成物

(51)【国際特許分類】

   G01N 33/68 20060101AFI20230731BHJP

【ＦＩ】

G01N33/68

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023501817

(86)(22)【出願日】2020-09-17

(85)【翻訳文提出日】2023-03-09

(86)【国際出願番号】 KR2020012575

(87)【国際公開番号】W WO2022014776

(87)【国際公開日】2022-01-20

(31)【優先権主張番号】10-2020-0086191

(32)【優先日】2020-07-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(31)【優先権主張番号】10-2020-0115244

(32)【優先日】2020-09-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】KR

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】504314133

【氏名又は名称】ソウル ナショナル ユニバーシティ ホスピタル

(74)【代理人】

【識別番号】110000729

【氏名又は名称】弁理士法人ユニアス国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】キム、ナヨン

【テーマコード（参考）】

2G045

【Ｆターム（参考）】

2G045AA26

2G045CA01

2G045DA36

(57)【要約】

本発明は、初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーとしてペプシノーゲンＩＩを発掘し、被験者から測定された前記ペプシノーゲンＩＩの水準によって初期びまん型胃がんを予測又は診断することができる組成物、キット、及び情報提供方法に関し、本発明の一側面に係る組成物、キット、及び情報提供方法は、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であると、高い感度及び特異度で初期びまん型胃がんを予測又は診断することができ、さらには、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かとヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であるか否かによって被験者の初期びまん型胃がんに対する危険度を分類することができるところ、血清ペプシノーゲンＩＩの水準を測定することができる製剤、又はこれと共にヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態を検出することができる製剤を含む組成物、及びキット、並びにこれを用いた情報提供方法は、内視鏡検査の前に行い得る非侵襲的な手段として有用に活用することができるという優れた効果を奏する。
【選択図】図３ｄ

【特許請求の範囲】

【請求項1】

４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用組成物。

【請求項2】

前記被験者は女性である、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記サンプルは、血清、血漿、全血、小便、唾液、及び涙からなる群より選択された一つ以上である、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

前記サンプルは血清である、請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

当該組成物は、ヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

４０歳未満の女性の血清からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤及びヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用組成物。

【請求項7】

請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物を含む、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ） 胃がんの予測又は診断用キット。

【請求項8】

当該キットは被験者の血清に適用されるものである、請求項７に記載のキット。

【請求項9】

当該キットは、被験者のサンプルから得られたペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上である場合に初期びまん型胃がんと予測又は診断するものである、請求項７に記載のキット。

【請求項10】

当該キットは、ヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤を含む組成物を含み、
前記ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤は、組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上の検査のための製剤であり、
前記組織学的試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対する染色試験であり、
前記培養試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対するヘリコバクター・ピロリ菌培養試験であり、
前記血清検査は、前記被験者の血清からヘリコバクター・ピロリ菌に対する抗体である兔疫グロブリンＧ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ、ＩｇＧ）を測定することである、請求項７に記載のキット。

【請求項11】

前記血清検査は、細菌凝集反応（ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ）、補体結合（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｆｉｘａｔｉｏｎ）、間接免疫蛍光（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｔｅｓｔ）、及び免疫測定法（ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上である、請求項１０に記載のキット。

【請求項12】

前記免疫測定法は、酵素結合免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｅｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ、ＥＬＩＳＡ）、化学発光免疫測定法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）、及び放射免疫測定法（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上である、請求項１１に記載のキット。

【請求項13】

当該キットは、被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態の陽性又は陰性の分類基準が下記の通りである、請求項１０に記載のキット。
ｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；
ｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、及び迅速ウレアーゼ試験がいずれも陰性であり、且つ前記血清検査が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；
ｉｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴有りであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；及び
ｉｖ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴無しであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陰性。

【請求項14】

当該キットは、初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群、及び低危険群の分類基準が下記の通りである、請求項１３に記載のキット。
ａ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であると、初期びまん型胃がんの高危険群；
ｂ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上及びヘリコバクター・ピロリ状態が陽性のいずれか一つだけに該当すると、初期びまん型胃がんの中危険群；及び
ｃ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ未満であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陰性であると、初期びまん型胃がんの低危険群。

【請求項15】

４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）水準を測定する段階；を含む、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断のための情報提供方法。

【請求項16】

前記被験者は女性である、請求項１５に記載の情報提供方法。

【請求項17】

前記サンプルは血清である、請求項１５に記載の情報提供方法。

【請求項18】

当該情報提供方法は、前記ペプシノーゲンＩＩ水準が２０μｇ／Ｌであると、初期びまん型胃がんと予測又は診断する、請求項１５に記載の情報提供方法。

【請求項19】

当該情報提供方法は、前記被験者のヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）感染の有無を測定する段階；をさらに含む、請求項１５に記載の情報提供方法。

【請求項20】

前記ヘリコバクター・ピロリ菌感染の有無の測定は、組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上を含み、
前記組織学的試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対する染色試験であり、
前記培養試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対するヘリコバクター・ピロリ菌培養試験であり、
前記血清検査は、前記被験者の血清からヘリコバクター・ピロリ菌に対する抗体である兔疫グロブリンＧ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ、ＩｇＧ）を測定することである、請求項１９に記載の情報提供方法。

【請求項21】

当該情報提供方法は、被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態を下記のような基準に従い陽性又は陰性と分類し：
ｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；
ｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、及び迅速ウレアーゼ試験がいずれも陰性であり、且つ前記血清検査が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；
ｉｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴有りであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；及び
ｉｖ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴無しであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陰性、
前記被験者のペプシノーゲンＩＩの水準及びヘリコバクター・ピロリ状態に応じて被験者が初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群、及び低危険群のいずれか一つであると予測又は診断する、請求項２０に記載の情報提供方法。
ａ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であると、初期びまん型胃がんの高危険群；
ｂ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上及びヘリコバクター・ピロリ状態が陽性のいずれか一つだけに該当すると、初期びまん型胃がんの中危険群；及び
ｃ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ未満であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陰性であると、初期びまん型胃がんの低危険群。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０２０年７月１３日に出願された大韓民国特許出願第１０-２０２０-００８６１９１号に基づく優先権を主張し、この出願内容全体が本出願に参照として組み込まれる。また、本出願は、２０２０年９月９日に出願された大韓民国特許出願第１０-２０２０-０１１５２４４号に基づく優先権を主張し、この出願内容全体が本出願に参照として組み込まれる。

【0002】

本明細書には、初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーとしてペプシノーゲンＩＩを発掘し、被験者から測定された前記ペプシノーゲンＩＩの水準によって初期びまん型胃がんを予測又は診断することができる組成物、キット、及び情報提供方法が開示される。

【背景技術】

【0003】

胃がん（ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ、ＧＣ）は、その有病率が全世界で過去４０年の間実質的に減少したものの、依然として５番目に最も頻繁に診断された悪性腫瘍であって世界的にがん死亡の３番目の主な原因である。とりわけ、韓国を含む東アジアでは発生率が顕著に高いのに対し、北米と北欧では発生率が一般的に低い［Ｂｒａｙ Ｆ, Ｆｅｒｌａｙ Ｊ, Ｓｏｅｒｊｏｍａｔａｒａｍ Ｉ, Ｓｉｅｇｅｌ ＲＬ, Ｔｏｒｒｅ ＬＡ, Ｊｅｍａｌ Ａ. Ｇｌｏｂａｌ ｃａｎｃｅｒ ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ２０１８：ＧＬＯＢＯＣＡＮ ｅｓｔｉｍａｔｅｓ ｏｆ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ａｎｄ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｗｏｒｌｄｗｉｄｅ ｆｏｒ ３６ ｃａｎｃｅｒｓ ｉｎ １８５ ｃｏｕｎｔｒｉｅｓ. ＣＡ Ｃａｎｃｅｒ Ｊ Ｃｌｉｎ ２０１８；６８：３９４-４２４］。非特異的症状のため進行期（ａｄｖａｎｃｅｄ ｓｔａｇｅ）で胃がんと診断されることが多いので、胃がんを治療可能なより早期に発見するための検診戦略が重要な問題として台頭された。内視鏡を中心とした胃がんに対する韓国がん検診プログラム（Ｋｏｒｅａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｐｒｏｇｒａｍ）は２０世紀後半に始まり、がん関連死亡率を大きく減少させた［Ｊｕｎ ＪＫ, Ｃｈｏｉ ＫＳ, Ｌｅｅ ＨＹ, ｅｔ ａｌ. Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｎｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｋｏｒｅａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｐｒｏｇｒａｍ ｉｎ ｒｅｄｕｃｉｎｇ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ. Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２０１７；１５２：１３１９-１３２８］。

【0004】

代案的な方法として、血清ペプシノーゲン（ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ、ｓＰＧ）を用いた非侵襲的な質量スクリーニング方法が日本で注目を集めている。血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）と血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は胃粘膜の異なる部分で生成される［Ｓａｍｌｏｆｆ ＩＭ. Ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎｓ, ｐｅｐｓｉｎｓ, ａｎｄ ｐｅｐｓｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ. Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９７１；６０：５８６-６０４］。すなわち、血清ペプシノーゲンＩは胃底腺（ｆｕｎｄｉｃ ｇｌａｎｄｓ）で主細胞（ｃｈｉｅｆ ｃｅｌｌ）のみから分泌されるのに対し、血清ペプシノーゲンＩＩは胃底腺だけでなく前庭部（ａｎｔｒｕｍ）の幽門腺（ｐｙｌｏｒｉｃ ｇｌａｎｄｓ）及び十二指膓（ｄｕｏｄｅｎａｌ）粘膜からも分泌される。従来の研究によれば、低いｓＰＧＩ（＜７０μｇ／Ｌ）と低いｓＰＧＩ／ＩＩの比率（＜３）は進行萎縮性胃炎（ａｄｖａｎｃｅｄ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ）の指標であって、これは胃がんの高い危険度と関連がある［Ｓａｍｌｏｆｆ ＩＭ. Ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎｓ, ｐｅｐｓｉｎｓ, ａｎｄ ｐｅｐｓｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ. Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９７１；６０：５８６-６０４］［Ｋｏｄｏｉ Ａ, Ｙｏｓｈｉｈａｒａ Ｍ, Ｓｕｍｉｉ Ｋ, Ｈａｒｕｍａ Ｋ, Ｋａｊｉｙａｍａ Ｇ. Ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｉｎ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ １９９５；３０：４５２-４６０］。ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）感染によって胃粘膜に炎症が生じると、血清ペプシノーゲンＩの生成は萎縮性粘膜で減少し血清ペプシノーゲンＩＩが増加する。したがって、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率は、進行性萎縮性胃炎において低いｓＰＧＩ及びｓＰＧＩＩの増加に伴いさらに減少する［Ｓａｍｌｏｆｆ ＩＭ, Ｖａｒｉｓ Ｋ, Ｉｈａｍａｋｉ Ｔ, Ｓｉｕｒａｌａ Ｍ, Ｒｏｔｔｅｒ ＪＩ. Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ ａｍｏｎｇ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ I、ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａｌ ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：ａ ｓｔｕｄｙ ｉｎ ｒｅｌａｔｉｖｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｅｒｎｉｃｉｏｕｓ ａｎｅｍｉａ. Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ １９８２；８３：２０４-２０９］。しかし、かかる基準は、Ｃｏｒｒｅａ連鎖反応（ｃａｓｃａｓｄｅ）を伴う腸型胃がん（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｙｐｅ ＧＣ、ＩＧＣ）に適用することができるが、発がん機転の異なるびまん型胃がん（ｄｉｆｆｕｓｅ ｔｙｐｅ ＧＣ、ＤＧＣ）に適用することができるかについては疑問が残っている［Ｕｅｍｕｒａ Ｎ, Ｏｋａｍｏｔｏ Ｓ, Ｙａｍａｍｏｔｏ Ｓ, ｅｔ ａｌ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ ２００１；３４５：７８４-７８９］。また、萎縮性胃炎の場合、血清ペプシノーゲンＩ及び血清ペプシノーゲンＩとＩＩの比率（ｓＰＧＩ／ＩＩ）が低く、日本では胃がんの検診に効果的なバイオマーカーとして活用されているが、このような日本の標準カットオフ値を韓国又は韓国を含む各国における胃がんの検診に適用するには血清ペプシノーゲンの役割に論難の余地があった。すなわち、血清ペプシノーゲンＩの低い特異度は従来の研究で予測したことよりも低い予測能力を示すという問題があった［Ｋａｎｇ ＪＭ, Ｋｉｍ Ｎ, Ｙｏｏ ＪＹ, ｅｔ ａｌ. Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｋｏｒｅａ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ２００８；１３：１４６-１５６］。本発明の発明者は、高危険度のＯＬＧＡ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｃ ａｔｒｏｐｈｙ）及びＯＬＧＩＭ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｅｔａｐｌａｓｉａ）段階が腸型胃がんだけではなく、びまん型胃がんの胃がんに対する重要な予測マーカーであると報告したことがある［Ｙｕｎ ＣＹ, Ｋｉｍ Ｎ, Ｌｅｅ Ｊ, ｅｔ ａｌ. Ｕｓｅｆｕｌｎｅｓｓ ｏｆ ＯＬＧＡ ａｎｄ ＯＬＧＩＭ ｓｙｓｔｅｍ ｎｏｔ ｏｎｌｙ ｆｏｒ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｔｙｐｅ ｂｕｔ ａｌｓｏ ｆｏｒ ｄｉｆｆｕｓｅ ｔｙｐｅ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ, ａｎｄ ｎｏ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ａｍｏｎｇ ｔｈｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｒｉｓｋ ｆａｃｔｏｒｓ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ２０１８；２３：e１２５４２］。韓国においてびまん型胃がんは胃がん全体で相対的に高い比率（４２．１％）を占めており、日本における研究とは相当な差異がある［Ｋａｎｇ ＪＭ, Ｋｉｍ Ｎ, Ｙｏｏ ＪＹ, ｅｔ ａｌ. Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｋｏｒｅａ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ２００８；１３：１４６-１５６］。したがって、びまん型胃がんに有用なバイオマーカーがあれば、韓国で非常に有用であるといえる。これまで、血清ペプシノーゲンＩＩの高い力価とびまん型胃がんとの連関性を提案した研究があった［Ｋｉｋｕｃｈｉ Ｓ, Ｗａｄａ Ｏ, Ｍｉｋｉ Ｋ, ｅｔ ａｌ. Ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｓ ａ ｎｅｗ ｍａｒｋｅｒ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｍｏｎｇ ｙｏｕｎｇ ａｄｕｌｔｓ. Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｇｒｏｕｐ ｏｎ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ Ｇａｓｔｒｉｃ Ｃａｒｃｉｎｏｍａ ａｍｏｎｇ Ｙｏｕｎｇ Ａｄｕｌｔｓ. Ｃａｎｃｅｒ １９９４；７３：２６９５-２７０２］［Ｙａｎａｏｋａ Ｋ, Ｏｋａ Ｍ, Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ Ｎ, ｅｔ ａｌ. Ｒｉｓｋ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ, ｍｉｄｄｌｅ－ａｇｅｄ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｓｕｂｊｅｃｔｓ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｌｅｖｅｌｓ. Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２００８；１２３：９１７-９２６］［Ｉｔｏ Ｍ, Ｙｏｓｈｉｈａｒａ Ｍ, Ｔａｋａｔａ Ｓ, ｅｔ ａｌ. Ｓｅｒｕｍ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｇｒｏｕｐ ｆｏｒ ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅ ｄｉｆｆｕｓｅ ｔｙｐｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ Ｊａｐａｎｅｓｅ. Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｈｅｐａｔｏｌ ２０１２；２７：５９８-６０２］。

【0005】

血清ペプシノーゲンＩＩの水準は、胃粘膜においてヘリコバクター・ピロリ感染による炎症の程度を反映する組織学的変化と関連があると知られている。すなわち、血清ペプシノーゲンＩＩは、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）に関連する非萎縮性胃炎においてその水準がより高く、萎縮性胃炎においてより低く、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）を除菌することで血清ペプシノーゲンＩＩの水準を逆転させることができた［Ｐｌｅｂａｎｉ Ｍ, Ｂａｓｓｏ Ｄ, Ｃａｓｓａｒｏ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｓｅｒｏｌｏｇｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ. Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ １９９６；９１：９５４-９５８.］［Ｍεrｄｈ Ｅ, Ｍεrｄｈ Ｓ, Ｍεrｄｈ Ｂ, Ｂｏｒｃｈ Ｋ. Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｅｓ. Ｃｌｉｎ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ ２００２；３２０：１７-２７.］［Ｐｉｌｏｔｔｏ Ａ, Ｄｉ Ｍａｒｉｏ Ｆ, Ｆｒａｎｃｅｓｃｈｉ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｃｕｒｅ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｄｅｒｌｙ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｍａｒｋｅｒｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ １９９６；１０：１０２１-１０２７.］［Ｋａｗａｉ Ｔ, Ｍｉｋｉ Ｋ, Ｉｃｈｉｎｏｓｅ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｊａｐａｎ. Ｉｎｆｌａｍｍｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２００７；１５：３１-３５.］。従来の研究でもペプシノーゲンＩＩの発現水準が胃粘膜の悪性である場合に顕著に減少し、ヘリコバクター・ピロリ感染によってペプシノーゲンＩＩ発現の陽性率が調節されることが明らかになった［Ｎｉｎｇ ＰＦ, Ｌｉｕ ＨＪ, Ｙｕａｎ Ｙ. Ｄｙｎａｍｉｃ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｃ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ, ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｌｅｓｉｏｎｓ ａｎｄ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｄｉｓｅａｓｅｓ. Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００５；１１：２５４５-２５４８.］。

【0006】

したがって、胃がんの発病、特に、内視鏡検査を受けなければならない患者を階層化するためのびまん型胃がんのバイオマーカーとしての有用性に関連して、血清ペプシノーゲンの役割についてあらためて定義する必要がある。これは中国や韓国を含む東アジアの胃がん関連死亡率をさらに減少させるのに寄与するはずである。このような背景の下で、本発明者は、これまでは胃がんに対する魅力的なバイオマーカーが確立されていないという点に注目して、あまりよく報告されていない血清ペプシノーゲンＩＩの曖昧な役割に重点をおいて胃がんの発病に係る血清ペプシノーゲンの役割を研究し、その結果、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が≧２０μｇ／Ｌであることが、びまん型胃がん、特に大きなコホートで高齢ではない被験者における初期びまん型胃がんの発病と関連があることを確認して本発明を完成した。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0007】

本発明者は、胃異形成症群、胃がん群、及び対照群として合計約３,０００名の被験者を対象に研究を行い、胃がん、具体的にびまん型胃がんのバイオマーカーとして血清ペプシノーゲンＩＩを発掘し、また被験者のサンプルから測定されたペプシノーゲンＩＩの水準に基づいて初期びまん型胃がんの危険度を高い感度及び特異度で予測又は診断することができ、且つ前記ペプシノーゲンＩＩの水準を外れた場合でも被験者のヘリコバクター・ピロリ感染履歴に基づいて被験者のびまん型胃がんの危険度を分類することができることを検証した。

【0008】

したがって、一側面において、本発明の目的は、初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーを提供することである。

【0009】

他の側面において、本発明の目的は、４０歳未満の被験者から初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーを提供することである。

【0010】

また他の側面において、本発明の目的は、被験者の初期びまん型胃がんの危険度を予測又は診断するためのバイオマーカーを提供することである。

【課題を解決するための手段】

【0011】

一側面において、本発明は、４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用組成物を提供する。

【0012】

他の一側面において、本発明は、４０歳未満の被験者の血清からペプシノーゲンＩＩの水準を測定する製剤及びヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤を含む初期びまん型胃がんの予測又は診断用組成物を提供する。

【0013】

また他の一側面において、本発明は、前記組成物を含む初期びまん型胃がんの予測又は診断用キットを提供する。

【0014】

また他の一側面において、本発明は、４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩの水準を測定する段階；を含む、初期びまん型胃がんの予測又は診断のための情報提供方法を提供する。

【発明の効果】

【0015】

本発明の一側面において、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が、対照群に比べて、初期びまん型胃がんの被験者、特に４０歳未満の初期びまん型胃がんの被験者のほうが高く、且つ初期びまん型胃がんの被験者は現在ヘリコバクター・ピロリに感染されている又は過去にヘリコバクター・ピロリに感染された履歴がある（ＨＰ状態陽性）ことを確認したところ、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であると、高い感度及び特異度で初期びまん型胃がんを予測又は診断することができ、さらには、血清ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かとＨＰ状態が陽性であるか否かは被験者の初期びまん型胃がんに対する危険度を分類することができる基準になることを確認した。これにより、血清ペプシノーゲンＩＩの水準を測定することができる製剤、又はこれと共にヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態を検出することができる製剤を含む組成物、及びこれを含むキットは、内視鏡検査の前に行うことができる非侵襲的な手段として有用に活用することができるという優れた効果を奏する。

【図面の簡単な説明】

【0016】

【図1】本発明の一側面に係る登録された胃がん群、胃異形成症群、及び対照群の分類を示した図である。図１中の略語は次の通りである：ＭＡＬＴ（粘膜－関連リンパ組織；ｍｕｃｏｓａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ）、ＧＩＳＴ（消化管間質腫瘍；ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｔｕｍｏｒ）。

【図2a-2d】本発明の一側面に係る被験者の血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）の水準とＯＬＧＡ／ＯＬＧＩＭ段階におけるヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態との関係を示したグラフである。図２ａ及び図２ｂは、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態に関連する血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）の水準と組織学的特徴とを比較した結果であって、ＨＰ状態が陽性である被験者はＨＰ状態が陰性である被験者に比べて、血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）（図２ａ）及び血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）（図２ｂ）の水準が高く、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率は低かった（図２ｃ）（いずれもｐ＜０．００１）。また、図２ｄは、ＯＬＧＡ段階及びＯＬＧＩＭ段階との関係を示し、ＨＰ状態が陽性である被験者が、ＨＰ状態が陰性である被験者に比べてＯＬＧＡ段階及びＯＬＧＩＭ段階が高かった（図２ｄ）。図２ａ～図２ｄ中、データは数字（％）又は中央値±標準誤差で表され、略語は次の通りである：ＯＬＧＡ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ａｔｒｏｐｈｙ、ＯＬＧＩＭ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｅｔａｐｌａｓｉａ）。

【図3a-3d】及び

【図4】本発明の一実施例に係る初期びまん型胃がんの予測又は診断のためのバイオマーカーとしての血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の有用性を確認するためのＡＵＣ（Ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ）を計算した結果に関するものであって、胃がん（ＧＣ）の診断のための血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）のＲＯＣ曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ）及び対応するＡＵＣを示したグラフである。図３ａ及び図３ｂによれば、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）に対するＡＵＣは胃がん全体（ＧＣ）（図３ａ）及びびまん型胃がん全体（ＤＧＣ）（図３ｂ）に対して有意な感度及び特異度を示さなかった。一方、図３ｃ及び図３ｄによれば、初期びまん型胃がんの被験者を４０歳を基準に分類したとき、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は、４０歳以上の初期びまん型胃がんの被験者（図３ｃ）よりも４０歳未満の初期びまん型胃がんの被験者に対して有意に高い診断力を示した（ＡＵＣ ０．７６６、感度７５．０％、特異度７４．２％）（図３ｄ）。また、図４によれば、被験者が４０歳未満の女性であるとき、より高い感度及び特異度で初期びまん型胃がんを診断することができることを示した（ＡＵＣ ０．８２４、感度８１．３％、特異度７８．１％）（図４）。図３ａ～図３ｄ及び図４で略語は次の通りである：ＡＵＣ（曲線下面積；Ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ）、ｓＰＧ（血清ペプシノーゲン；ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ）、ＤＧＣ（びまん型胃がん；ｄｉｆｆｕｓｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ）。

【発明を実施するための形態】

【0017】

以下、本発明を詳細に説明する。

【0018】

本発明の一側面において、「初期びまん型胃がんの予測」とは、被験者に対して初期びまん型胃がんが発病する可能性があるか、初期びまん型胃がんが発病する可能性が相対的に高いか、初期びまん型胃がんの原因因子が何か、又は初期びまん型胃がんが既に発病したか否かを予測又は診断することを意味することであってよい。また、本発明の一側面において、「初期びまん型胃がんの診断」とは、被験者に対して病理状態の存在又は特徴を確認することを意味し、本発明の一側面に係る目的上、診断は、初期びまん型胃がんの発病の有無を確認することを意味することであってよい。本発明の一側面に係る組成物、キット、又は方法は、任意の特定の患者を初期びまん型胃がんの発病の危険度の高い患者として特別且つ適切な管理を行うことで発病の時期を遅らせるか発病しないようにするのに用いることができる。また、本発明の一側面に係る組成物、キット、又は方法は、初期びまん型胃がんを早期に診断して最も適切な治療方式を選択できるようにすることから治療を決定するために臨床的に用いることができる。

【0019】

本発明の一側面において、初期びまん型胃がんを予測又は診断するための「ペプシノーゲンＩＩの水準」又は「ペプシノーゲンＩＩの検出量」の単位又は基準は、ペプシノーゲンＩＩ、具体的に血清ペプシノーゲンＩＩの水準を測定する方法に応じて単位が異なってよい。より具体的に、ラテックス増強免疫比濁法（ｌａｔｅｘ－ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）（Ｌ－ＴＩＡ；ＨＢｉ Ｃｏｒｐ, Ｓｅｏｕｌ, Ｋｏｒｅａ, ｉｍｐｏｒｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｈｉｍａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ, Ｔｏｋｙｏ, Ｊａｐａｎ）によってペプシノーゲンＩＩの水準を測定又は検出する場合、ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるときに初期びまん型胃がんと予測又は診断することができるが、他の測定方法によって測定されたペプシノーゲンＩＩの水準が前記ラテックス増強免疫比濁法によって測定された２０μｇ／Ｌ以上のペプシノーゲンＩＩに相当する水準であれば、初期びまん型胃がんと予測又は診断することができるので、前記数値に限定されるものではない。

【0020】

一側面において、本発明は、４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用組成物を提供する。

【0021】

本発明の一側面に係る組成物は、ペプシノーゲンＩＩの水準を測定する製剤を含んでよく、具体的に、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ｓＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤を含んでよい。血清ペプシノーゲンＩＩの水準は、胃粘膜においてヘリコバクター・ピロリ感染による炎症の程度を反映する組織学的変化と関連があり、血清ペプシノーゲンＩＩの水準は、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）に関連する非萎縮性胃炎では高く、萎縮性胃炎では低く、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）の除菌によって血清ペプシノーゲンＩＩの水準は逆転され得る［Ｐｌｅｂａｎｉ Ｍ, Ｂａｓｓｏ Ｄ, Ｃａｓｓａｒｏ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｓｅｒｏｌｏｇｙ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｃｈｒｏｎｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ. Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ １９９６；９１：９５４-９５８.］［Ｍεrｄｈ Ｅ, Ｍεrｄｈ Ｓ, Ｍεrｄｈ Ｂ, Ｂｏｒｃｈ Ｋ. Ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｂｙ ｍｅａｎｓ ｏｆ ａ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｅｓ. Ｃｌｉｎ Ｃｈｉｍ Ａｃｔａ ２００２；３２０：１７-２７.］［Ｐｉｌｏｔｔｏ Ａ, Ｄｉ Ｍａｒｉｏ Ｆ, Ｆｒａｎｃｅｓｃｈｉ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｃｕｒｅ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｅｌｄｅｒｌｙ：ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌ ｍａｒｋｅｒｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ １９９６；１０：１０２１-１０２７.］［Ｋａｗａｉ Ｔ, Ｍｉｋｉ Ｋ, Ｉｃｈｉｎｏｓｅ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｒｅｓｕｌｔ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ｊａｐａｎ. Ｉｎｆｌａｍｍｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ２００７；１５：３１-３５.］。本発明の一実施例によれば、初期びまん型胃がんの被験者で血清ペプシノーゲンＩＩの水準が高かく（実施例４及び表２）、被験者の血清ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上である場合に初期びまん型胃がんを高い感度及び特異度で予測又は診断することができることを確認した（実施例６及び７、表３及び図３）。

【0022】

本発明の一側面に係るペプシノーゲンＩＩの水準の測定製剤は、細菌凝集反応（ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ）、補体結合（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｆｉｘａｔｉｏｎ）、間接免疫蛍光テスト（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｔｅｓｔ）及び免疫測定法（ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上の検査で用いられる製剤であってよく、具体的に、前記免疫測定法は、酵素結合免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅ ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｅｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ、ＥＬＩＳＡ）、化学発光免疫測定法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）、及び放射免疫測定法（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上であってよく、より具体的に、前記酵素結合免疫吸着測定法は、ラテックス増強免疫比濁法（ｌａｔｅｘ－ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）であってよいが、被験者からペプシノーゲンＩＩの水準を測定することができる製剤であれば、その種類は制限されない。ただし、検査毎にその単位が異なることがあり、ラテックス増強免疫比濁法（ｌａｔｅｘ－ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）（Ｌ－ＴＩＡ；ＨＢｉ Ｃｏｒｐ, Ｓｅｏｕｌ, Ｋｏｒｅａ, ｉｍｐｏｒｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｓｈｉｍａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ, Ｔｏｋｙｏ, Ｊａｐａｎ）による血清ペプシノーゲンＩＩの検査では２０μｇ／Ｌが基準であり、他の検査の場合はその基準が異なってよい。

【0023】

本発明の一側面に係る被験者は４０歳未満であってよい。胃がんの発生率は４０歳未満の患者では非常に低く、胃がんに対する韓国がん検診プログラムでは４０歳以上に限り無料内視鏡検査を提供しており、４０歳未満のびまん型胃がん患者の大半は疾病の初期段階では症状を示さなくて早期診断に困難がある。本発明の一実施例によれば、４０歳未満の被験者からの血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は４０歳以上の被験者からのそれよりも遥かに高い感度及び特異度を示したところ（ＡＵＣ ０．７６６、感度７５．０％、特異度７４．２％）（実施例７、及び図３のＣ及びＤ）、これにより、本発明の一側面に係る組成物は、４０歳未満の被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができるという優れた効果を奏することが分かった。

【0024】

又は、具体的に、本発明の一側面に係る被験者は４０歳未満の女性であってよい。従来知られたびまん型胃がんの力学的特徴と同様に［Ｂｅｄｉｋｉａｎ ＡＹ, Ｋｈａｎｋｈａｎｉａｎ Ｎ, Ｈｅｉｌｂｒｕｎ ＬＫ, Ｂｏｄｅｙ ＧＰ, Ｓｔｒｏｅｈｌｅｉｎ ＪＲ, Ｖａｌｄｉｖｉｅｓｏ Ｍ. Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｙｏｕｎｇ ａｄｕｌｔｓ. Ｓｏｕｔｈ Ｍｅｄ Ｊ １９７９；７２：６５４-６５６.］［Ｉｓｏｂｅ Ｔ, Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ Ｋ, Ｋｉｚａｋｉ Ｊ, ｅｔ ａｌ. Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｙｏｕｎｇ ｐａｔｉｅｎｔｓ. Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｐ ２０１３；３０：４３-４９.４１］、４０歳以上の女性よりも４０歳未満の女性がびまん型胃がんの危険度が高く、びまん型胃がんの比率は女性が男性よりも高い。本発明の一実施例によれば、４０歳未満の女性被験者からの血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は４０歳以上の被験者、及び４０歳未満の男性及び女性をいずれも含む被験者からのそれよりも遥かに高い感度及び特異度を示したところ（ＡＵＣ ０．８２４、感度８１．３％、特異度７８．１％）（実施例７、及び図４）、これにより、本発明の一側面に係る組成物は、４０歳未満の女性被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができるという優れた効果を奏することが分かった。また、血清ペプシノーゲンＩＩの数値が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かは、４０歳未満の女性の被験者が初期びまん型胃がんであるか否かを判断することができる有意なバイオマーカーであることを確認した（実施例８及び表４）。これにより、本発明の一側面に係る組成物は、４０歳未満の女性の被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができ、内視鏡検査の前に前記組成物を用いた検査により初期びまん型胃がんと予測又は診断された被験者はそれ以降慎重な内視鏡追跡観察を行うことができるという優れた効果を奏する。

【0025】

本発明の一側面に係る組成物は、初期びまん型胃がんを予測又は診断するための組成物であってよい。びまん型胃がんは、胃がん全体の約４０％を占めるが、比較的若い年齢層で発生し、予後が肺がんよりも良くなく、その大半は進行した状態で診断されるため手術時期を逃して治療が相当難しい場合が多い。したがって、初期段階のびまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーを発掘する必要がある。従来、胃がんバイオマーカーとしてのペプシノーゲンは血清ペプシノーゲンＩ及び血清ペプシノーゲンＩとＩＩの比率（ｓＰＧＩ／ＩＩ）が主に用いられたが、本発明の一実施例によれば、血清ペプシノーゲンＩの水準及び血清ペプシノーゲンＩとＩＩの比率（ｓＰＧＩ／ＩＩ）は、びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーとして適切ではない（実施例６及び表３）。一方、本発明の一実施例によれば、腸型胃がんの被験者のうち初期胃がんの被験者が７３．９％であることを考慮すると、びまん型胃がんの被験者のうち初期胃がん（ｅａｒｌｙ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ、ＥＧＣ）の被験者は４５．５％であって、びまん型胃がんのうち初期びまん型胃がんの比率が相当低い。びまん型胃がんの発病が可能な機転はヘリコバクター・ピロリによって誘導された炎症が胃粘膜において幾つかの遺伝的変化を起こすことと考えられ［Ｎａｒｄｏｎｅ Ｇ, Ｒｏｃｃｏ Ａ, Ｍａｌｆｅｒｔｈｅｉｎｅｒ Ｐ. Ｒｅｖｉｅｗ ａｒｔｉｃｌｅ：Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００４；２０：２６１-２７０］［Ｃｏｒｒｅａ Ｐ. Ｄｏｅｓ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｃａｕｓｅ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｖｉａ ｏｘｉｄａｔｉｖｅ ｓｔｒｅｓｓ? Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２００６；３８７：３６１-３６４］、例えば、ヘリコバクター・ピロリ感染はＤＮＡメチル化によるＣｐＧ島メチル化及びＥ－カドヘリン遺伝子不活性化を誘導する［Ｋａｎｇ ＧＨ, Ｌｅｅ Ｓ, Ｋｉｍ ＪＳ、 Ｊｕｎｇ ＨＹ. Ｐｒｏｆｉｌｅ ｏｆ ａｂｅｒｒａｎｔ ＣｐＧ ｉｓｌａｎｄ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ａｌｏｎｇ ｔｈｅ ｍｕｌｔｉｓｔｅｐ Ｐａｔｈｗａｙ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ. Ｌａｂ Ｉｎｖｅｓｔ ２００３；８３：６３５-６４１］［Ｃｈａｎ ＡＯ, Ｌａｍ ＳＫ, Ｗｏｎｇ ＢＣ, ｅｔ ａｌ. Ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｏｆ Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ ｇｅｎｅ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｇｕｔ ２００３；５２：５０２-５０６.］［Ｍａｅｋｉｔａ Ｔ, Ｎａｋａｚａｗａ Ｋ, Ｍｉｈａｒａ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｈｉｇｈ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ａｂｅｒｒａｎｔ ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ－ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａｅ ａｎｄ ｉｔｓ ｐｏｓｓｉｂｌｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｒｉｓｋ. Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ２００６；１２：９８９-９９５.］［Ｔａｍｕｒａ Ｇ, Ｙｉｎ Ｊ, Ｗａｎｇ Ｓ, ｅｔ ａｌ. Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｈｙｐｅｒｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｐｒｉｍａｒｙ ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａｓ. Ｊ Ｎａｔｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔ ２０００；９２：５６９-５７３］。また、ヘリコバクター・ピロリによって誘導された細胞毒素（ｃｙｔｏｔｏｘｉｎ）が酸素フリーラジカル及び過酸化物のような発がん物質を生成してペプシノーゲン遺伝子で突然変異を誘発することがあり、このような突然変異が細胞増殖、分化及びアポトーシス（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）間の均衡に影響を及ぼし、結果として、びまん型胃がんにつながることがある［Ｋｕｗａｈａｒａ Ｙ, Ｋｏｎｏ Ｓ, Ｅｇｕｃｈｉ Ｈ, Ｈａｍａｄａ Ｈ, Ｓｈｉｎｃｈｉ Ｋ, Ｉｍａｎｉｓｈｉ Ｋ. Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｓｅｒｏｌｏｇｉｃａｌｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ, Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ａｎｄ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｍｅｎ. Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２０００；３５：４７６-４８１.］［Ｂａｃｋｅｒｔ Ｓ, Ｓｃｈｗａｒｚ Ｔ, Ｍｉｅｈｌｋｅ Ｓ, ｅｔ ａｌ. Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃａｇ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｉｓｌａｎｄ ｉｎ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｓｏｌａｔｅｓ ｆｒｏｍ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ, ｐｅｐｔｉｃ ｕｌｃｅｒ, ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ２００４；７２：１０４３-１０５６.］［Ｋｕｎｉｙａｓｕ Ｈ, Ｋｉｔａｄａｉ Ｙ, Ｍｉｅｎｏ Ｈ, Ｙａｓｕｉ Ｗ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｏｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｓ ｃｌｏｓｅｌｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｅｌｏｍｅｒｅ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ. Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２００３；６５：２７５-２８２］。本発明の一実施例によれば、血清ペプシノーゲンＩＩの数値が胃がん全体、又はびまん型胃がん全体よりは初期びまん型胃がんであるか否かを判断することができる有意なバイオマーカーであることを確認した（実施例７及び図３）。これにより、本発明の一側面に係る組成物は、被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができ、内視鏡検査の前に前記組成物を用いた検査により初期びまん型胃がんと予測又は診断された被験者は、それ以降慎重な内視鏡追跡観察を行うことができるという優れた効果を奏する。

【0026】

本発明の一側面に係るサンプルは、血清、血漿、全血、小便、唾液、及び涙からなる群より選択された一つ以上であってよく、具体的に血清であってよい。

【0027】

本発明の一側面に係る組成物は、ヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤をさらに含んでよく、前記ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤は、組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上の検査のための製剤であってよい。具体的に、前記組織学的試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対する染色試験であってよく、前記培養試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対するヘリコバクター・ピロリ菌培養試験であってよく、前記血清検査は、前記被験者の血清からヘリコバクター・ピロリ菌に対する抗体である兔疫グロブリンＧ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ、ＩｇＧ）を測定することであってよい。

【0028】

より具体的に、前記免疫測定法は、酵素結合免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｅｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ、ＥＬＩＳＡ）、化学発光免疫測定法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）、及び放射免疫測定法（ｒａｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上であってよいが、これらに制限されない。ヘリコバクター・ピロリは、胃粘膜で慢性炎症を誘発して、慢性活性胃炎、萎縮、腸内転移、異形成症、及び胃がんの順につながると知られている。このような連鎖反応は、胃発がん、特に腸型胃がんの主な過程と見なされる［Ｎａｒｄｏｎｅ Ｇ, Ｒｏｃｃｏ Ａ, Ｍａｌｆｅｒｔｈｅｉｎｅｒ Ｐ. Ｒｅｖｉｅｗ ａｒｔｉｃｌｅ：Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００４；２０：２６１-２７０.］［Ｃｏｒｒｅａ Ｐ. Ｈｕｍａｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ：ａ ｍｕｌｔｉｓｔｅｐ ａｎｄ ｍｕｌｔｉｆａｃｔｏｒｉａｌ ｐｒｏｃｅｓｓ--Ｆｉｒｓｔ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｓｏｃｉｅｔｙ Ａｗａｒｄ Ｌｅｃｔｕｒｅ ｏｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ. Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １９９２；５２：６７３５-６７４０.］［Ｃｏｒｒｅａ Ｐ, Ｈｏｕｇｈｔｏｎ Ｊ. Ｃａｒｃｉｎｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ. Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ２００７；１３３：６５９-６７２.］。しかし、西洋の国家では胃がん全体の２０％～３０％が非萎縮性粘膜で発生し、背景胃粘膜（ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ）は、日本における研究で胃がん事例の２０％～４０％で広範囲な萎縮を見せない結果を示した［Ｎａｒｄｏｎｅ Ｇ, Ｒｏｃｃｏ Ａ, Ｍａｌｆｅｒｔｈｅｉｎｅｒ Ｐ. Ｒｅｖｉｅｗ ａｒｔｉｃｌｅ：Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００４；２０：２６１-２７０.］［Ｖａｕｈｋｏｎｅｎ Ｍ, Ｖａｕｈｋｏｎｅｎ Ｈ, Ｓｉｐｐｏｎｅｎ Ｐ. Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｂｅｓｔ Ｐｒａｃｔ Ｒｅｓ Ｃｌｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００６；２０：６５１-６７４.］［Ｙａｎａｏｋａ Ｋ, Ｏｋａ Ｍ, Ｍｕｋｏｕｂａｙａｓｈｉ Ｃ, ｅｔ ａｌ. Ｃａｎｃｅｒ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｓｕｂｊｅｃｔｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ｂｙ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔｓ：ｏｕｔｃｏｍｅｓ ａｆｔｅｒ １０－ｙｅａｒ ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐ ｉｎ ａｓｙｍｐｔｏｍａｔｉｃ ｍｉｄｄｌｅ－ａｇｅｄ ｍａｌｅｓ. Ｃａｎｃｅｒ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ Ｐｒｅｖ ２００８；１７：８３８-８４５.］［Ｏｈａｔａ Ｈ, Ｏｋａ Ｍ, Ｙａｎａｏｋａ Ｋ, ｅｔ ａｌ. Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ ａ ｈｉｇｈ－ｒｉｓｋ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ Ｊａｐａｎ ｕｓｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ａｎｄ ｂａｒｉｕｍ ｄｉｇｉｔａｌ ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｙ. Ｃａｎｃｅｒ Ｓｃｉ ２００５；９６：７１３-７２０.］。

【0029】

また、本発明の一実施例によれば、ヘリコバクター・ピロリによって誘導された活性炎症がＣｏｒｒｅａ’ｓ連鎖反応を経ることなくびまん型胃がんを直接誘導するという従来の仮説と一致した［Ｓｉｐｐｏｎｅｎ Ｐ, Ｋｏｓｕｎｅｎ ＴＵ, Ｖａｌｌｅ Ｊ, Ｒｉｉｈｅｌδ Ｍ, Ｓｅｐｐδｌδ Ｋ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈｒｏｎｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｊ Ｃｌｉｎ Ｐａｔｈｏｌ １９９２；４５：３１９-３２３.］［Ｎａｒｄｏｎｅ Ｇ, Ｒｏｃｃｏ Ａ, Ｍａｌｆｅｒｔｈｅｉｎｅｒ Ｐ. Ｒｅｖｉｅｗ ａｒｔｉｃｌｅ：Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｄ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｅｖｅｎｔｓ ｉｎ ｐｒｅｃａｎｃｅｒｏｕｓ ｇａｓｔｒｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ. Ａｌｉｍｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｏｌ Ｔｈｅｒ ２００４；２０：２６１-２７０.］［Ｃｏｒｒｅａ Ｐ. Ｐｒｅｃｕｒｓｏｒｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ａｎｄ ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ. Ｃａｎｃｅｒ １９８２；５０：２５５４-２５６５.］［Ｌａｕｒιｎ Ｐ. Ｈｉｓｔｏｇｅｎｅｓｉｓ ｏｆ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ａｎｄ ｄｉｆｆｕｓｅ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ. Ｓｃａｎｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ Ｓｕｐｐｌ １９９１；１８０：１６０-１６４.］。

【0030】

本発明の一実施例によれば、被験者の初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーとして過去又は現在のヘリコバクター・ピロリ感染の有無を活用することができ、被験者のペプシノーゲンＩＩの水準と共にヘリコバクター・ピロリ感染の有無をバイオマーカーとして一緒に用いると、被験者の初期びまん型胃がんに対する危険度を判断することができる。具体的に、前記ペプシノーゲンＩＩの水準測定製剤及びヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤は測定又は検出のためのサンプルとして被験者の血清を同一に用いることで一つのサンプルを用いて前記二つのバイオマーカーを同時に測定又は検出して過程を単純化し、単一段階を行って時間及びコスト効率よく被験者の初期びまん型胃がんを予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0031】

より具体的に、次のような基準で被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態を陽性又は陰性に分類し：ｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、及び迅速ウレアーゼ試験がいずれも陰性であり、且つ前記血清検査が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴有りであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；及びｉｖ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性。

【0032】

前記被験者のペプシノーゲンＩＩの水準と共にヘリコバクター・ピロリ状態に応じて、下記のような基準で被験者を初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群、及び低危険群と判断することができる：ａ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であると、初期びまん型胃がんの高危険群；ｂ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上及びヘリコバクター・ピロリ状態が陽性のいずれか一つだけに該当すると、初期びまん型胃がんの中危険群；及びｃ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ未満であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陰性であると、初期びまん型胃がんの低危険群。

【0033】

本発明の一実施例に係る被験者は、萎縮性胃炎（ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ）ではない被験者であってよい。

【0034】

他の側面において、本発明は、４０歳未満の女性の血清からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する製剤及びヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用組成物を提供する。前記被験者、４０才未満、女性、血清、ペプシノーゲンＩＩの水準測定製剤、ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤、初期びまん型胃がんについての説明は上述した通りである。

【0035】

本発明の一側面に係る組成物は、前記ペプシノーゲンＩＩの水準測定製剤及びヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤は測定又は検出のためのサンプルとして被験者の血清を同一に用いることで一つのサンプルを用いて前記二つのバイオマーカーを同時に測定又は検出して過程を単純化し、単一段階を行って時間及びコスト効率よく被験者の初期びまん型胃がんを予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0036】

また他の側面において、本発明は、前記初期びまん型胃がんの予測又は診断用組成物を含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断用キットを提供する。前記被験者、４０才未満、血清、ペプシノーゲンＩＩの水準測定製剤、ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤、初期びまん型胃がんについての説明は上述した通りである。

【0037】

本発明の一側面に係るキットは、被験者の血清に適用されるものであってよい。

【0038】

本発明の一側面に係るキットは、被験者のサンプルから得られたペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上である場合に初期びまん型胃がんと予測又は診断するものであってよい。

【0039】

例示として、本発明の一側面に係るキットは、説明書又は情報提供部をさらに含み、前記説明書又は情報提供部は、被験者のサンプルから得られたペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上である場合に初期びまん型胃がんと予測又は診断するとする記載又は情報を提供するものであってよい。

【0040】

なお、本段落及び以降の段落を含む本明細書において情報提供部の「部」という用語は、ハードウェアだけではなく、当該ハードウェアによって駆動されるソフトウェアとの組み合わせを指すことがある。例えば、ハードウェアは、ＣＰＵ又は他のプロセッサ（ｐｒｏｃｅｓｓｏｒ）を含むデータ処理機器であってよい。また、ハードウェアによって駆動されるソフトウェアは、実行中のプロセス、客体（ｏｂｊｅｃｔ）、実行ファイル（ｅｘｅｃｕｔａｂｌｅ）、実行スレッド（ｔｈｒｅａｄ ｏｆ ｅｘｅｃｕｔｉｏｎ）、計算プログラム（ｐｒｏｇｒａｍ）などのプログラムであってよいが、これらに制限されない。

【0041】

本発明の一実施例によれば、ＲＯＣ曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ、ＲＯＣ ｃｕｒｖｅ）による感度６２．９％及び特異度６１．２％で初期びまん型胃がんの予測又は診断のための最適の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）水準のカットオフ値は２０μｇ／Ｌであり（ＡＵＣ ０．６３６）（実施例７及び図３）、初期びまん型胃がんの危険度は血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が２０μｇ／Ｌ以上であるときに有意に増加したところ（ＯＲ、３．１２）（実施例８及び表４）、本発明の一側面に係るキットは、被験者のペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるときに高い感度及び特異度で初期びまん型胃がんと予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0042】

本発明の一側面に係るキットは、ヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）検出製剤を含む組成物を含み、前記ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤は、組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上の検査のための製剤であってよく、前記組織学的試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対する染色試験であってよく、前記培養試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対するヘリコバクター・ピロリ菌培養試験であってよく、前記血清検査は、前記被験者の血清からヘリコバクター・ピロリ菌に対する抗体である兔疫グロブリンＧ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ、ＩｇＧ）を測定することであってよい。具体的に、前記血清検査は、細菌凝集反応（ｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｇｇｌｕｔｉｎａｔｉｏｎ）、補体結合（ｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔ ｆｉｘａｔｉｏｎ）、間接免疫蛍光テスト（ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｔｅｓｔ）、及び免疫測定法（ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上であってよく、より具体的に、前記免疫測定法は、酵素結合免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｅｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ、ＥＬＩＳＡ）、化学発光免疫測定法（ｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｔ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）、及び放射免疫測定法（radioｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）からなる群より選択された一つ以上であってよいが、ヘリコバクター・ピロリ菌を検出することができる製剤であればその種類に制限はない。前記ヘリコバクター・ピロリ菌検出製剤についての説明は上述した通りである。

【0043】

本発明の一側面に係るキットは、被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態の陽性又は陰性の分類を下記のような基準で行うことができる：ｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、及び迅速ウレアーゼ試験がいずれも陰性であり、且つ前記血清検査が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴有りであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｖ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴無しであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陰性。

【0044】

前述した被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態の陽性又は陰性の分類の基準は、キットにおける、例えば説明書又は情報提供部によって提供されてよい。

【0045】

また、本発明の一側面に係るキットは、初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群、及び低危険群の分類を下記のような基準で行うことができる：ａ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であると、初期びまん型胃がんの高危険群；ｂ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上及びヘリコバクター・ピロリ状態が陽性のいずれか一つだけに該当すると、初期びまん型胃がんの中危険群；及びｃ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ未満であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陰性であると、初期びまん型胃がんの低危険群。

【0046】

前述した被験者の初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群、及び低危険群の分類の基準も、キットにおける、例えば説明書又は情報提供部によって提供されてよい。

【0047】

本発明の一実施例によれば、初期びまん型胃がんの危険度は、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であるとき（ＯＲ、３．０３）に有意に増加し、血清ペプシノーゲンＩＩの水準とヘリコバクター・ピロリ状態の二つの条件が共に存在すると、オッズ比（ＯＲ）は１２．７６であることを確認したところ（実施例８及び表４）、本発明の一側面に係るキットは、被験者のペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かとヘリコバクター・ピロリ状態が陽性又は陰性であるか否かの基準によって被験者の初期びまん型胃がんに対する危険度を予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0048】

また他の側面において、本発明は、４０歳未満の被験者のサンプルからペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定する段階；を含む、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断のための情報提供方法を提供する。前記４０才未満、サンプル、ペプシノーゲンＩＩ、初期びまん型胃がんについての説明は上述した通りである。

【0049】

本発明の一側面に係る被験者は女性であってよい。本発明の一実施例によれば、４０歳未満の女性被験者からの血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は４０歳以上の被験者、及び４０歳未満の男性及び女性をいずれも含む被験者からのそれよりも遥かに高い感度及び特異度を示したところ（ＡＵＣ ０．８２４、感度８１．３％、特異度７８．１％）（実施例７、及び図４）、これにより、本発明の一側面に係る組成物は、４０歳未満の女性被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができるという優れた効果を奏することが分かった。また、血清ペプシノーゲンＩＩの数値が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かは、４０歳未満の女性の被験者が初期びまん型胃がんであるか否かを判断することができる有意なバイオマーカーであることを確認した（実施例８及び表４）。これにより、本発明の一側面に係る情報提供方法は、４０歳未満の女性の被験者のサンプルから初期びまん型胃がんを高い診断力で予測又は診断することができ、内視鏡検査の前に前記組成物を用いた検査によって初期びまん型胃がんと予測又は診断された被験者はそれ以降慎重な内視鏡追跡観察を行うことができるという優れた効果を奏する。

【0050】

本発明の一側面に係るサンプルは血清であってよい。

【0051】

本発明の一側面に係る情報提供方法は、前記ペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であると、初期びまん型胃がんと予測又は診断することであってよい。本発明の一実施例によれば、ＲＯＣ曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ、ＲＯＣ ｃｕｒｖｅ）による感度６２．９％及び特異度６１．２％で初期びまん型胃がんの予測又は診断のための最適の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）水準のカットオフ値は２０μｇ／Ｌであり（ＡＵＣ ０．６３６）（実施例７及び図３）、初期びまん型胃がんの危険度は、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が２０μｇ／Ｌ以上であるときに有意に増加したところ（ＯＲ、３．１２）（実施例８及び表４）、本発明の一側面に係る情報提供方法は、被験者のペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるときに高い感度及び特異度で初期びまん型胃がんと予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0052】

本発明の一側面に係る情報提供方法は、前記被験者のヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）感染の有無を測定する段階；をさらに含んでよく、前記ヘリコバクター・ピロリ菌感染の有無の測定は、 組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上を含んでよい。具体的に、前記組織学的試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対する染色試験であってよく、前記培養試験は、前記被験者の胃から分離された生検標本に対するヘリコバクター・ピロリ菌培養試験であってよく、前記血清検査は、前記被験者の血清からヘリコバクター・ピロリ菌に対する抗体である兔疫グロブリンＧ（ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎ Ｇ、ＩｇＧ）を測定することであってよい。前記ヘリコバクター・ピロリ菌感染の有無の測定は上述した通りである。

【0053】

本発明の一側面に係る情報提供方法は、被験者のヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）状態を下記のような基準によって陽性又は陰性に分類することができる：ｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査からなる群より選択された一つ以上が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、及び迅速ウレアーゼ試験がいずれも陰性であり、且つ前記血清検査が陽性であると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；ｉｉｉ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴有りであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陽性；及びｉｖ）前記組織学的試験、培養試験、迅速ウレアーゼ試験、及び血清検査が陰性であり、且つ被験者がヘリコバクター・ピロリ除菌履歴無しであると、ヘリコバクター・ピロリ状態は陰性。また、前記情報提供方法は、前記被験者のペプシノーゲンＩＩの水準及びヘリコバクター・ピロリ状態によって被験者が初期びまん型胃がんの高危険群、中危険群及び低危険群のいずれかであると予測又は診断することができる：ａ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陽性であると、初期びまん型胃がんの高危険群；ｂ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ以上及びヘリコバクター・ピロリ状態が陽性のいずれか一つだけに該当すると、初期びまん型胃がんの中危険群；及びｃ）前記ペプシノーゲンＩＩの検出量が２０μｇ／Ｌ未満であり且つヘリコバクター・ピロリ状態が陰性であると、初期びまん型胃がんの低危険群。本発明の一実施例によれば、ＲＯＣ曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ、ＲＯＣ ｃｕｒｖｅ）による感度６２．９％及び特異度６１．２％で初期びまん型胃がんの予測又は診断のための最適の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）水準のカットオフ値は２０μｇ／Ｌであり（ＡＵＣ ０．６３６）（実施例７及び図３）、初期びまん型胃がんの危険度は、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が２０μｇ／Ｌ以上であるとき（ＯＲ、３．１２）とヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であるとき（ＯＲ、３．０３）に有意に増加し、血清ペプシノーゲンＩＩの水準とヘリコバクター・ピロリ状態の二つの条件が共に存在すると、オッズ比（ＯＲ）は１２．７６であることを確認したところ（実施例８及び表４）、本発明の一側面に係る情報提供方法は、被験者のペプシノーゲンＩＩの水準が２０μｇ／Ｌ以上であるか否かとヘリコバクター・ピロリ状態が陽性又は陰性であるか否かの基準によって被験者の初期びまん型胃がんに対する危険度を予測又は診断することができるという優れた効果を奏する。

【0054】

本発明は、他の観点において、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断が必要な４０歳未満の被験者からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定することを含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断方法に関するものであってよい。

【0055】

本発明は、また他の観点において、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断が必要な４０歳未満の被験者からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定することを含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断のための非侵襲的方法に関するものであってよい。

【0056】

本発明は、また他の観点において、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断が必要な４０歳未満の被験者からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定し且つヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）を検出することを含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断方法に関するものであってよい。

【0057】

本発明は、また他の観点において、初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断が必要な４０歳未満の被験者からペプシノーゲンＩＩ（ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ＰＧＩＩ）の水準を測定し且つヘリコバクター・ピロリ菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ）を検出することを含む初期びまん型（ｄｉｆｆｕｓｅ－ｔｙｐｅ）胃がんの予測又は診断のための非侵襲的方法に関するものであってよい。

【実施例】

【0058】

以下、実施例を挙げて本発明の構成及び効果をより具体的に説明する。なお、下記の実施例は本発明についての理解を助けるための目的から例示したものであるに過ぎず、本発明の範疇及び範囲がそれらによって制限されるものではない。

【0059】

［実施例１］胃がんバイオマーカーの発掘のための被験者の登録及び検査
本発明の一側面に係る胃がんバイオマーカーを発掘するために、下記のような方法で被験者を募集し、各被験者のペプシノーゲンＩＩの水準及びヘリコバクター・ピロリ菌の状態を検査した。

【0060】

［実施例１-１］被験者の登録
２００６年２月から２０１７年３月までの間に盆唐ソウル大学病院を訪問した２５～８０歳の２,９４０名を被験者として登録した。これらの被験者のうち、１,１２４名の患者が胃がん（ＧＣ）と診断され、３５３名が組織学的分析によって胃異形成症（ｇａｓｔｒｉｃ ｄｙｓｐｌａｓｉａ）と診断された。全体的に、以前に胃腸手術又は他の悪性腫瘍の病歴がない１,４６３名の被験者は健康な対照群と登録された。手術又は内視鏡的粘膜下剥離術（ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｓｕｂｍｕｃｏｓａｌ ｄｉｓｓｅｃｔｉｏｎ）を受けた胃がん患者についての病理記録を詳細に検討した。胃がんはＬａｕｒｅｎ分類法によって分類され、リンパ節転移に関係なく、粘膜下に深く浸潤していないと初期胃がんと定義された（Ｔ１、任意のＮ）［Ｌａｕｒｅｎ Ｐ. Ｔｈｅ ｔｗｏ ｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃａｌ ｍａｉｎ ｔｙｐｅｓ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ｄｉｆｆｕｓｅ ａｎｄ ｓｏ－ｃａｌｌｅｄ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ－ｔｙｐｅ ｃａｒｃｉｎｏｍａ. ａｎ ａｔｔｅｍｐｔ ａｔ ａ ｈｉｓｔｏ－ｃｌｉｎｉｃａｌ ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ. Ａｃｔａ Ｐａｔｈｏｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ Ｓｃａｎｄ １９６５；６４：３１-４９］。３０名の胃がんケースは腸型又はびまん型に分類し難かった。消化不良症状のあるすべての対照群の被験者は胃内視鏡検査によって胃粘膜関連リンパ組織リンパ腫（ｇａｓｔｒｉｃ ｍｕｃｏｓａ－ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｌｙｍｐｈｏｉｄ ｔｉｓｓｕｅ ｌｙｍｐｈｏｍａ）、消化管間質腫瘍（ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｓｔｒｏｍａｌ ｔｕｍｏｒ）、カルチノイド腫瘍（ｃａｒｃｉｎｏｉｄ ｔｕｍｏｒ）、悪性リンパ腫（ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｌｙｍｐｈｏｍａ）、及び食道がん（ｅｓｏｐｈａｇｅａｌ ｃａｎｃｅｒ）を含む他の局所の胃疾患を排除した。また、ヘリコバクター・ピロリ（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、ＨＰ）検査が検証された。胃底腺肥厚症（ｆｕｎｄｉｃ ｇｌａｎｄ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｉａ）、胃の過形成性ポリープ（ｇａｓｔｒｉｃ ｈｙｐｅｒｐｌａｓｔｉｃ ｐｏｌｙｐ）、軽度胃炎（ｍｉｌｄ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ）、逆流性食道炎（ｒｅｆｌｕｘ ｅｓｏｐｈａｇｉｔｉｓ）、又は非侵食性逆流疾患（ｎｏｎｅｒｏｓｉｖｅ ｒｅｆｌｕｘ ｄｉｓｅａｓｅ）のような陽性疾患のある被験者を対照群として分類した。経験の多い進行者が患者らによるアンケート紙の作成が円滑に進むように助力し、内視鏡検査の当日に血液サンプルを採取した。研究プロトコルは盆唐ソウル大学病院臨床試験審査委員会（ＩＲＢ番号：Ｂ－１６１０－３６８－１０６）によって承認され、Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｔｒｉａｌｓ. ｇｏｖ（ＮＣＴ０３３８００５２）に登録された。ヘルシンキ宣言（Ｄｅｃｌａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｈｅｌｓｉｎｋｉ）の倫理的原則に従いすべての被験者に対して書面同意を得た。

【0061】

［実施例１-２］血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ｓＰＧＩＩ）水準の測定
前記実施例１-１の被験者から収得した空腹時血液サンプルを直ちに遠心分離機に入れて－７０℃で保管した。ｓＰＧＩ及びｓＰＧＩＩの血清水準をラテックス増強免疫比濁法（ｌａｔｅｘ－ｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｕｒｂｉｄｉｍｅｔｒｉｃ ｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ）（Ｌ－ＴＩＡ；ＨＢｉ Ｃｏｒｐ、韓国、ソウル、日本の東京所在のＳｈｉｍａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから輸入）を用いて測定した。

【0062】

［実施例１-３］ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態の測定
前記実施例１-１の被験者のヘリコバクター・ピロリ状態を測定するために、先ず、各被験者毎に上部内視鏡検査の間に胃前庭部（ａｎｔｒｕｍ）及び胃体部（ｃｏｒｐｕｓ）から１０個の生検標本を収得した。これらのサンプルを用いて、ヘリコバクター・ピロリ感染の有無を確認するために３種の診断方法で診断を行った。具体的に、１０個の生検標本のうちの、１０％中性緩衝ホルマリンに固定されパラフィン包埋した（ｐａｒａｆｆｉｎ－ｅｍｂｅｄｄｅｄ）４個の標本を、変形されたギムザ液（Ｇｉｅｍｓａ）、ヘマトキシリン（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）、及びエオシン（ｅｏｓｉｎ）で染色してヘリコバクター・ピロリの存在を評価した。また、残りの標本のうちの４個の標本を、微好気（ｍｉｃｒｏａｅｒｏｂｉｃ）条件下、３７℃で３～５日間ヘリコバクター・ピロリに対して培養した。最後の２個の標本に対しては、迅速ウレアーゼ試験（ｒａｐｉｄ ｕｒｅａｓｅ ｔｅｓｔｉｎｇ）（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ－ｌｉｋｅ ｏｒｇａｎｉｓｍ ｔｅｓｔ、ＣＬＯ ｔｅｓｔ）を行った［Ｄｉｘｏｎ ＭＦ, Ｇｅｎｔａ ＲＭ, Ｙａｒｄｌｅｙ ＪＨ, Ｃｏｒｒｅａ Ｐ. Ｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｇｒａｄｉｎｇ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ. Ｔｈｅ ｕｐｄａｔｅｄ Ｓｙｄｎｅｙ Ｓｙｓｔｅｍ. Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｗｏｒｋｓｈｏｐ ｏｎ ｔｈｅ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｇａｓｔｒｉｔｉｓ, Ｈｏｕｓｔｏｎ １９９４. Ａｍ Ｊ Ｓｕｒｇ Ｐａｔｈｏｌ １９９６；２０：１１６１-１１８１］［Ｌｏｆｆｅｌｄ ＲＪ, Ｓｔｏｂｂｅｒｉｎｇｈ Ｅ, Ｆｌｅｎｄｒｉｇ ＪＡ, Ａｒｅｎｄｓ ＪＷ. Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｂｉｏｐｓｙ ｓｐｅｃｉｍｅｎｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ, ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｇｉｅｍｓａ ｓｔａｉｎ, ａｎｄ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ. Ａ ｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｓｔｕｄｙ. Ｊ Ｐａｔｈｏｌ １９９１；１６５：６９-７３］［Ｃｈｅｙ ＷＤ, Ｗｏｎｇ ＢＣ；Ｐｒａｃｔｉｃｅ Ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ. Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ｇｕｉｄｅｌｉｎｅ ｏｎ ｔｈｅ ｍａｎａｇｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ. Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ ２００７；１０２：１８０８-１８２５］。

【0063】

また、ヘリコバクター・ピロリ状態の測定のために前記実施例１-１の被験者の血清検査も行った。具体的に、前記実施例１-２の被験者から収得した血液サンプルを用いて、韓国人の人口において９７．９％の感度と９２．０％の特異度を有するヘリコバクター・ピロリに対する兔疫グロブリンＧ抗体で酵素結合免疫吸着測定法（ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ）（Ｇｅｎｅｄｉａ ＨＰ ＥＬＩＳＡ；Ｇｒｅｅｎ Ｃｒｏｓｓ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｃｏｒｐ, ソウル、竜仁）にてヘリコバクター・ピロリ感染の有無を検査した［Ｌｅｅ ＪＹ, Ｋｉｍ Ｎ, Ｋｉｍ ＭＳ, ｅｔ ａｌ. Ｆａｃｔｏｒｓ ａｆｆｅｃｔｉｎｇ ｆｉｒｓｔ－ｌｉｎｅ ｔｒｉｐｌｅ ｔｈｅｒａｐｙ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ＣＹＰ２Ｃ１９ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ａｎｄ ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ. Ｄｉｇ Ｄｉｓ Ｓｃｉ ２０１４；５９：１２３５-１２４３.］。

【0064】

前記組織学、培養、又は迅速ウレアーゼ試験（ＣＬＯ ｔｅｓｔ）のいずれかに対する陽性を、現在被験者がヘリコバクター・ピロリ感染が確実であると定義した。また、特に前記組織学、培養、及び迅速ウレアーゼ試験の３件のヘリコバクター・ピロリ検査結果が陰性である場合、すべての被験者のヘリコバクター・ピロリ除菌（ｅｒａｄｉｃａｔｉｏｎ）履歴は前記血清検査、すなわち抗ＨＰ（ヘリコバクター・ピロリ）抗体試験を定性的推定として用いた。このとき、前記ヘリコバクター・ピロリに対する血清検査が陽性であるかヘリコバクター・ピロリ除菌履歴のある被験者は過去にヘリコバクター・ピロリ感染があったことを示す。

【0065】

結論として、被験者が現在ヘリコバクター・ピロリに感染されている又は過去にヘリコバクター・ピロリへの感染履歴があると、いずれもヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であると見なし、現在と過去ともヘリコバクター・ピロリに感染されたことがないと、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陰性であると見なした。

【0066】

［実施例１-４］被験者の胃組織学的分類
前記実施例１-３で収得した１０個の生検標本のうちのパラフィン包埋した標本を変形されたギムザ液（Ｇｉｅｍｓａ）、ヘマトキシリン（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ）、及びエオシン（ｅｏｓｉｎ）で染色して各被験者の胃組織のＯＬＧＡ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｃ ａｔｒｏｐｈｙ）及びＯＬＧＩＭ（ｏｐｅｒａｔｉｖｅ ｌｉｎｋ ｏｎ ｇａｓｔｒｉｃ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｅｔａｐｌａｓｉａ）の段階を評価した。

【0067】

［実施例２］統計分析
前記実施例１で収得した被験者に対するデータを用いてスチューデントのＴ検定（Ｓｔｕｄｅｎｔ Ｔ－ｔｅｓｔ）及び1元配置分散分析（ｏｎｅ－ｗａｙ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｖａｒｉａｎｃｅ）を用いて各グループの基準線の特徴を比較し、その結果は下記実施例３～８で具体的に説明した。曲線下面積（Ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ、ＡＵＣ）及び受信者操作特徴曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ、ＲＯＣ ｃｕｒｖｅ）を計算して対照群と比較して胃がん及び胃異形成症の検出のためのｓＰＧの最適のカットオフ値（ｃｕｔｏｆｆ ｖａｌｕｅｓ）を見出した。ＡＵＣが０．７以上、感度及び特異度が７０％以上であるときに有意なものと見なした。次いで、血清ペプシノーゲンＩ（ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ I、ｓＰＧＩ）、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ＩＩ、ｓＰＧＩＩ）及びｓＰＧＩ／ＩＩ比率を二つの範疇に分けた。多変量ロジスティック回帰分析（ｍｕｌｔｉｖａｒｉａｔｅ ｌｏｇｉｓｔｉｃ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）を用いて、９５％の信頼区間（ｃｏｎｆｉｄｅｎｃｅ ｉｎｔｅｒｖａｌｓ、Ｃｉｓ）のオッズ比（ｏｄｄｓ ｒａｔｉｏｓ、ＯＲｓ）を計算した。ＳＰＳＳ ｖｅｒｓｉｏｎ ２２.０（ＩＢＭ Ｃｏｒｐ., Ａｒｍｏｎｋ, ｎｙ, ＵＳＡ）を用いて分析を行った。ｐ－値が０．０５以下である場合、結果は有意なものと見なされた。

【0068】

［実施例３］被験者のベースライン特性（ｂａｓｅｌｉｎｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ）
前記実施例１から収得した被験者のベースライン特性は下記表１の通りである。

【0069】

【表1】

【0070】

前記表１は、胃異形成症（ｎ＝３５３）、胃がん（ｎ＝１,１２４）及び対照群（ｎ＝１,４６３）のベースライン特性を表す。対照群の平均年齢は５３．４±１３．０歳であり、これは胃がん（５９．７５±１１．６歳）及び胃異形成症（６２．６３±９．４歳）グループよりも有意に低かった。合算された1元配置分散分析は、対照群、胃異形成症郡及び胃がん群の３つのグループ間において、性別、喫煙／飲酒履歴、塩辛い／辛い献立、家族歴、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態、ｓＰＧＩ、ｓＰＧＩＩ、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率、ＯＬＧＡ段階及びＯＬＧＩＭ段階で有意な差を示した（表１）。胃がんを組織学的に腸型又はびまん型に分類したとき、３０名の胃がん患者は腸型又はびまん型に分類し難かった（図１）。よって、残りの１,０９４名の患者は腸型胃がん（ＩＧＣ）群及びびまん型胃がん（ＤＧＣ）群に分類され、６４８名は腸型胃がん（ＩＧＣ）群（５９．２％）、４４６名はびまん型胃がん（ＤＧＣ）群（４０．８％）に分類された。性別、年齢、喫煙／飲酒履歴、塩辛い献立、ｓＰＧＩ及びｓＰＧＩＩ、ＯＬＧＡ段階、及びＯＬＧＩＭ段階の差が胃がん下位群で示された（表１）。

【0071】

［実施例４］胃がん病期に関連した血清学的及び組織学的特徴の比較
前記実施例３の胃がん群に属する被験者の実施例１-２～１-４の血清学的及び組織学的特徴を比較し、その結果は下記表２の通りである。

【0072】

【表2】

【0073】

先ず、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態及び血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）に関しては、初期胃がん群（ｅａｒｌｙ－ｓｔａｇｅ ＧＣ）及び進行胃がん群（ａｄｖａｎｃｅｄ－ｓｔａｇｅ ＧＣ）間において統計的に有意な差が観察されなかった（表２）。組織学的類型によって胃がんを分類しても、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態は依然として差がなかった。しかし、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は、初期腸型胃がん群に比べて進行した腸型胃がん群の方か高く（ｐ＝０．００１）、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率は腸型胃がん群の方か低かった（ｐ＝０．００５）。びまん型胃がん（ＤＧＣ）の場合、初期段階の患者は、進行段階にある患者よりも血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）（ｐ＝０．００３）及び血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）（ｐ＝０．００３）の数値が高かった。組織学的特徴に関して、進行腸型胃がん群は初期腸型胃がん群よりも萎縮性胃炎及び腸上皮化生が進行した結果を示した（表２）。

【0074】

前記表２に表されたように、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は、びまん型胃がんとは異なり、腸型胃がんでは初期段階よりも進行段階にある被験者で高かった。Ｓｔｅｍｍｅｒｍａｎｎ及びＮｏｍｕｒａの研究で［Ｓｔｅｍｍｅｒｍａｎｎ ＧＮ, Ｎｏｍｕｒａ ＡＭ. Ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｇｒｏｕｐ ＩＩ（ＰＧＩＩ） ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｔｏ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｍｅｔａｐｌａｓｉａ ａｎｄ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ２００６；４９：４５-５１］、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は、腸上皮化生がややあるか全く腸上皮化生のない被験者よりは中間又は広範囲な腸上皮化生のある患者で発現する可能性が高かった。前記研究で、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）を発現したがんは、そうでないがんよりも高い段階であることが明らかになり、腸内分泌腺（ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｉｚｅｄ ｇｌａｎｄｓ）で発生するがんが、以降で胃の表現型に戻り得ると仮定した。そこで、本発明者は、進行段階の腸型胃がんでの高い血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は腸内細胞から胃の表現型への誘導後復帰（ｐｏｓｔｉｎｄｕｃｔｉｏｎ ｒｅｖｅｒｓｉｏｎ）で派生され得ると仮説を立てたが、初期腸型胃がんで、このような現象は血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）があまり高くないと確認された。

【0075】

［実施例５］ヘリコバクター・ピロリ状態と血清ペプシノーゲン（ｓＰＧ）及びＯＬＧＡ／ＯＬＧＩＭ段階の関係
被験者の実施例１-２～１-４の血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）の水準とＯＬＧＡ／ＯＬＧＩＭ段階におけるヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態との関係を確認し、その結果は図２の通りである。

【0076】

図２ａ～図２ｃに示したように、被験者のヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態で血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）は相当な差を示し、ＨＰ状態が陽性である被験者はＨＰ状態が陰性である被験者よりも血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）及び血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の数値は高く（図２ａ及び図２ｂ）、ｓＰＧＩ／ＩＩの比率は低かった（図２ｃ）（全てｐ＜０．００１）。また、萎縮性胃炎及び腸上皮化生の指標であるＨＰ状態が陽性である被験者の方が高かった（ｐ<０．００１）（図２ｄ）。

【0077】

［実施例６］血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）及びヘリコバクター・ピロリ状態と胃異形成症又は胃がんとの相関関係
被験者の実施例１-２～１-４の血清ペプシノーゲン（ｓＰＧｓ）の水準及びヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態と胃異形成症と胃がんの危険度の関係を表３に表した。

【0078】

【表3】

【0079】

表３に表されたように、ｓＰＧＩ/／ＩＩ比率が３未満のグループのオッズ比（ｏｄｄｓ ｒａｔｉｏ、ＯＲ）が胃異形成症郡は２．７７、胃がん群は２．２５であった。胃がんの亜型のうち、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率が３未満であるときの腸型胃がん群（ＩＧＣ）のオッズ比はびまん型胃がん群（ＤＧＣ）のオッズ比よりも高く（ＯＲ、２．５０；ｐ＜０．００１）、特に進行胃がん被験者で最も高かった（ＯＲ、３．４０；ｐ＜０．００１）。対照的に、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が２０μｇ／Ｌ以上である場合は、びまん型胃がん群（ＤＧＣ）でより高く（ＯＲ、１．７８；ｐ＜０．００１）、特に初期胃がん被験者でより高かったが（ＯＲ、３．１２；ｐ＜０．００１）、腸型胃がん群（ＩＧＣ）では高くなかった。血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）の水準が７０μｇ／Ｌ未満であるときは、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率と比較して、胃異形成症郡（ＯＲ、２．０６；ｐ＜０．００１）及び腸型胃がん群（ＩＧＣ）で類似した結果を示したが（ＯＲ、１．６８；ｐ＜０．００１）、全体のオッズ比は低かった。また、血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）の水準は全体の胃がんとは関連がなかったがものの、高い血清ペプシノーゲンＩ（ｓＰＧＩ）の水準はびまん型胃がん（ＤＧＣ）と関連があった。ＨＰ状態の意味を調べたとき、ＨＰ状態が陽性であることは、胃異形成症（ＯＲ、２．５６；ｐ＜０．００１）及び胃がん（ＯＲ、２．０６；ｐ＜０．００１）の危険増加と関連があった。胃がんの類型のうち、ＨＰ状態が陽性であるとき、腸型胃がん（ＩＧＣ）よりもびまん型胃がん（ＤＧＣ）の危険度が高かった（ＯＲ、２．５４；ｐ＜０．００１）。

【0080】

従来の胃がんバイオマーカーとしてのペプシノーゲンは血清ペプシノーゲンＩ及び血清ペプシノーゲンＩとＩＩの比率（ｓＰＧＩ／ＩＩ）が主に用いられた点を考慮するとき、前記結果は血清ペプシノーゲンＩ及び血清ペプシノーゲンＩとＩＩの比率（ｓＰＧＩ／ＩＩ）は初期びまん型胃がんを予測又は診断するバイオマーカーとしては不向きであることを示す。具体的に、対照群と比較した血清ペプシノーゲンＩ水準の胃がんに対するオッズ比（ｏｄｄ ｒａｔｉｏ、ＯＲ）は韓国で胃がんの検診時のバイオマーカーとして有意ではなかった（ＯＲ、１．００）。胃がんを腸型胃がんと限定してみると、オッズ比は１．６８であったが（初期胃がんは１．６８、進行胃がんは１．８４）、従来の日本での研究と比較したときは、依然として胃がん診断のためのバイオマーカーとして用いるには十分ではない［Ｙｏｓｈｉｈａｒａ Ｍ, Ｓｕｍｉｉ Ｋ, Ｈａｒｕｍａ Ｋ, ｅｔ ａｌ. Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｒａｔｉｏ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ Ｉ ａｎｄ ＩＩ ｗｉｔｈ ｐｒｅｖａｌｅｎｃｅ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ａｄｅｎｏｍａ ｉｎ Ｊａｐａｎｅｓｅ ｓｕｂｊｅｃｔｓ. Ａｍ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ １９９８；９３：１０９０-１０９６.］［Ｍｉｋｉ Ｋ. Ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｍｅｔｈｏｄ. Ｇａｓｔｒｉｃ Ｃａｎｃｅｒ ２００６；９：２４５-２５３.］［Ｋｉｔａｈａｒａ Ｆ, Ｋｏｂａｙａｓｈｉ Ｋ, Ｓａｔｏ Ｔ, Ｋｏｊｉｍａ Ｙ, Ａｒａｋｉ Ｔ, Ｆｕｊｉｎｏ ＭＡ. Ａｃｃｕｒａｃｙ ｏｆ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｕｓｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ. Ｇｕｔ １９９９；４４：６９３-６９７.］［Ｄｉｎｉｓ－Ｒｉｂｅｉｒｏ Ｍ, Ｙａｍａｋｉ Ｇ, Ｍｉｋｉ Ｋ, Ｃｏｓｔａ－Ｐｅｒｅｉｒａ Ａ, Ｍａｔｓｕｋａｗａ Ｍ, Ｋｕｒｉｈａｒａ Ｍ. Ｍｅｔａ－ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｔｈｅ ｖａｌｉｄｉｔｙ ｏｆ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｒｃｉｎｏｍａ, ｄｙｓｐｌａｓｉａ ｏｒ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ. Ｊ Ｍｅｄ Ｓｃｒｅｅｎ ２００４；１１：１４１-１４７.］［Ｈａｔｔｏｒｉ Ｙ, Ｔａｓｈｉｒｏ Ｈ, Ｋａｗａｍｏｔｏ Ｔ, Ｋｏｄａｍａ Ｙ. Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ ｏｆ ｍａｓｓ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｆｏｒ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｍｅｎｔ ｏｆ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎs. Ｊｐｎ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ １９９５；８６：１２１０-１２１５］。このような結果は、腸型胃がんとびまん型胃がんの比率の差、ヘリコバクター・ピロリ感染率、ヘリコバクター・ピロリ除菌率及び試験装備での差のような種々の要因のためであると推定される［Ｏｉｓｈｉ Ｙ, Ｋｉｙｏｈａｒａ Ｙ, Ｋｕｂｏ Ｍ, ｅｔ ａｌ. Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｔｅｓｔ ａｓ ａ ｐｒｅｄｉｃｔｏｒ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ：ｔｈｅ Ｈｉｓａｙａｍａ ｓｔｕｄｙ. Ａｍ Ｊ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌ ２００６；１６３：６２９-６３７.］［Ｏｈａｔａ Ｈ, Ｋｉｔａｕｃｈｉ Ｓ, Ｙｏｓｈｉｍｕｒａ Ｎ, ｅｔ ａｌ. Ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｈｒｏｎｉｃ ａｔｒｏｐｈｉｃ ｇａｓｔｒｉｔｉｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｒｉｓｋ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ. Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ ２００４；１０９：１３８-１４３.］［Ｗａｔａｂｅ Ｈ, Ｍｉｔｓｕｓｈｉｍａ Ｔ, Ｙａｍａｊｉ Ｙ, ｅｔ ａｌ. Ｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｇａｓｔｒｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｆｒｏｍ ｃｏｍｂｉｎｉｎｇ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ ｓｅｒｕｍ ｐｅｐｓｉｎｏｇｅｎ ｓｔａｔｕｓ：ａ ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ ｅｎｄｏｓｃｏｐｉｃ ｃｏｈｏｒｔ ｓｔｕｄｙ. Ｇｕｔ ２００５；５４：７６４-７６８］。また、ＰＧＩ／ＩＩ比率の３未満のカットオフは胃異形成症で２．７７、胃がんで２．２５のオッズ比を有するが、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率は、びまん型胃がんよりも腸型胃がんで、初期胃がんよりも進行胃がんで、バイオマーカーとしてより適合し、特に進行腸型胃がんで最も適切である結果を示した（ＯＲ、３．４０）。このような結果は、組織学的類型及び段階に応じて異なる等級の萎縮性胃炎及び腸上皮化生と関連があると考えられる。また、ＯＬＧＡ及びＯＬＧＩＭ段階が実際にびまん型胃がんよりも腸型胃がんで、そして初期胃がんよりも進行胃がんでより高かったところ、ｓＰＧＩ／ＩＩ比率は萎縮性胃炎に対する適切なバイオマーカーであり且つ腸型胃がんと密接な関連があることを確認した。

【0081】

［実施例７］胃がんの予測又は診断のための血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の検出歴確認
前記実施例６から高い水準の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）が初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーになり得ることを確認したところ、その有用性を確認するためにＡＵＣ（Ａｒｅａ ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｕｒｖｅ）を計算し、その結果は図３及び図４に示した。

【0082】

図３及び図４に示したように、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）は胃がん全体（図３ａ）及びびまん型胃がん全体（図３ｂ）に対する感度及び特異度を有する有意なＡＵＣを示さなかった。しかし、びまん型胃がんを初期及び進行がんに分けると、初期びまん型胃がんでＡＵＣが増加した。ＲＯＣ曲線（ｒｅｃｅｉｖｅｒ ｏｐｅｒａｔｉｎｇ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｃｕｒｖｅ、ＲＯＣ ｃｕｒｖｅ）によると、感度６２．９％及び特異度６１．２％で初期びまん型胃がんの予測又は診断のための最適の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）水準のカットオフ値は２０μｇ／Ｌであった（ＡＵＣ ０．６３６）。初期びまん型胃がんの被験者を４０歳を基準に分類したとき、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は４０歳以上の被験者よりも４０歳未満の被験者でより有意に高い診断力を示した（図３ｃ及び図３ｄ）（ＡＵＣ ０．７６６、感度７５．０％、特異度７４．２％）。また、４０歳未満の女性被験者での血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準は、４０歳以上の被験者、及び４０歳未満の男性及び女性をいずれも含む被験者よりも遥かに高い感度及び特異度を示した（ＡＵＣ ０．８２４、感度８１．３％、特異度７８．１％）（図４）。

【0083】

［実施例８］びまん型胃がんの予測又は診断に対する血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）とヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態の相関関係
実施例１～７までの結果を総合してびまん型胃がんの予測又は診断のための最も強力なモデルを見出すために、危険階層分析（ｒｉｓｋ ｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ）を行い、その結果は表４の通りである。

【0084】

【表4】

【0085】

表４に表したように、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態と血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が２０μｇ／Ｌであるか否かに応じて、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陰性で血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）が２０μｇ／Ｌ未満であると低危険群、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であるか又は血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）が２０μｇ／Ｌ以上であると中危険群、ヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であり且つ血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）が２０μｇ／Ｌ以上であると高危険群に分けた。低危険群に比べて高危険群のびまん型胃がんのオッズ比は３．４４であった（ｐ＜０．００１）。また、初期びまん型胃がん群（ＯＲ、５．２０；ｐ＜０．００１）は、進行びまん型胃がん群（ＯＲ、１．９２；ｐ＝０．０１３）に比べて高危険群とより高い連関性を示した。一方、被験者の年齢と性別にて下位グループを分析したとき、高危険群で４０歳以下の初期びまん型胃がんのオッズ比は１２．７６（ｐ＝０．００１）であって、初期びまん型胃がんのオッズ比は４０歳未満の女性で最も高い結果を示した（ＯＲ、２１．００；ｐ＝０．００６）。

【0086】

すなわち、初期びまん型胃がんの危険度は、血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準が ２０μｇ／Ｌ以上（ＯＲ、３．１２）でヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態が陽性であるとき（ＯＲ、３．０３）に有意に増加し、この二つの条件が共に存在すると、オッズ比（ＯＲ）は１２．７６であることを確認した。

【0087】

総合的に、本発明の一実施例によれば、被験者の血清ペプシノーゲンＩＩ（ｓＰＧＩＩ）の水準を測定することができる製剤を含む組成物は、初期びまん型胃がんを予測又は診断することができ、さらには、前記血清ペプシノーゲンＩＩの水準と共にヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）に現在ヘリコバクター・ピロリに感染されている又は過去に感染された履歴があるか否かは、初期びまん型胃がんを高い感度及び特異度で予測又は診断することができることを確認した。特に、びまん型胃がんの危険度が高い４０歳未満の女性では血清ペプシノーゲンＩＩの水準とヘリコバクター・ピロリ（ＨＰ）状態は内視鏡検査の前に行い得る非侵襲的なマーカーとして有用に活用することができることが分かった。

【産業上の利用可能性】

【0088】

本発明の一側面において、初期びまん型胃がんを予測又は診断するためのバイオマーカーとして血清ペプシノーゲンＩＩを発掘したところ、内視鏡検査の前に非侵襲的な手段として血清ペプシノーゲンＩＩを測定することで初期びまん型胃がんの有無を高い感度及び特異度で予測又は診断することができ、さらには、同一のサンプル、例えば血清で血清ペプシノーゲンＩＩ水準とヘリコバクター・ピロリ感染履歴を同時に測定又は検出することで過程を単純化させ、単一段階の実施によって時間及びコスト効率よく被験者の初期びまん型胃がんを予測又は診断するのに用いることができる。

【図1】

【図2a】

【図2b】

【図2c】

【図2d】

【図3a】

【図3b】

【図3c】

【図3d】

【図4】

【国際調査報告】