(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-08-08
(54)【発明の名称】ＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体共作動薬
(51)【国際特許分類】
C07K 14/605 20060101AFI20230801BHJP
A61K 38/26 20060101ALI20230801BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20230801BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20230801BHJP
【ＦＩ】
C07K14/605 ZNA
A61K38/26
A61P3/04
A61P3/10
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2022577749
(86)(22)【出願日】2021-07-22
(85)【翻訳文提出日】2023-01-23
(86)【国際出願番号】 EP2021070483
(87)【国際公開番号】W WO2022018185
(87)【国際公開日】2022-01-27
(31)【優先権主張番号】63/055,063
(32)【優先日】2020-07-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】20192415.6
(32)【優先日】2020-08-24
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】509091848
【氏名又は名称】ノヴォ ノルディスク アー／エス
(74)【代理人】
【識別番号】100108453
【弁理士】
【氏名又は名称】村山 靖彦
(74)【代理人】
【識別番号】100110364
【弁理士】
【氏名又は名称】実広 信哉
(74)【代理人】
【識別番号】100133400
【弁理士】
【氏名又は名称】阿部 達彦
(72)【発明者】
【氏名】クナー、パトリック、ジェイ．
(72)【発明者】
【氏名】フィナン、ブライアン
(72)【発明者】
【氏名】リウ、ファー
(72)【発明者】
【氏名】ディマルキ、リチャード
【テーマコード（参考）】
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084BA01
4C084DB34
4C084DB35
4C084NA14
4C084ZA70
4C084ZC35
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA10
4H045BA55
4H045BA56
4H045BA57
4H045CA40
4H045DA30
4H045EA20
4H045FA33
4H045FA59
4H045GA05
4H045GA25
(57)【要約】
ヒトＧＬＰ－１受容体とＧＩＰ受容体とのペプチド共作動薬、その長時間作用型誘導体、ならびに肥満、糖尿病、および／または肝臓疾患の治療および／または予防におけるそれらの医学的使用が記載される。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ペプチドおよび置換基を含む化合物であって、前記ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
前記置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して前記ペプチドに結合している、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。
【請求項2】
Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項4】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項5】
Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項6】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、請求項１に記載の化合物。
【請求項7】
前記ペプチドがＣ末端に前記アミド修飾を有する、請求項０に記載の化合物。
【請求項8】
前記置換基が１６Ｌｙｓを介して結合している、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項9】
前記置換基が以下から成る群から選択される、請求項１～１４のいずれか一項に記載の化合物。【化1】
【請求項10】
前記化合物が以下から成る群から選択される、請求項１に記載の化合物。【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【表1-5】
【表1-6】
【請求項11】
医薬として使用するための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項12】
糖尿病および／または肥満の予防および／または治療のための、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項13】
肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項14】
以下のアミノ酸配列を有するペプチドであって、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である、ペプチド。
【請求項15】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、請求項１４に記載のペプチド。【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、長期化作用プロファイルを有するグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体作動薬およびグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）受容体作動薬である化合物に関する。
【0002】
配列表の参照による組み込み
本出願は、電子形式の配列表とともに提出される。配列表の内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
本出願は、電子形式の配列表とともに提出される。配列表の内容全体が、参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0003】
グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）は、腸内分泌細胞由来のホルモンであり、２つの顕著な内因性生理学的インクレチンのうちの一方である。ＧＬＰ－１は、栄養素（グルコース）に応答してグルコース依存性インスリン分泌を刺激することによって血糖コントロールを改善し、膵α細胞からのグルカゴン分泌を阻害し、胃内容物排出を遅くし、主に食物消費量を減少させることによって体重減少を誘導する。もう一方の顕著なインクレチンであるグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド（ＧＩＰ）は、栄養素（脂肪、グルコース）に応答してインスリン分泌を刺激することによって血糖コントロールを改善する。さらに、ＧＩＰは、血漿脂質プロファイルを改善し、骨中のカルシウム蓄積を刺激するように見える。ＧＬＰ－１とは対照的に、ＧＩＰのインクレチン効果は２型糖尿病患者において大幅に減少するが、最近の研究は、これらの患者におけるＧＩＰ効率が治療後に取り戻されてグルコース管理を改善することができることを示唆している。それにもかかわらず、特にＧＩＰが動物モデルにおける脂肪量の増加を促進するＧＩＰ作用に関連するため、膵臓内分泌部での直接効果を超える全身代謝を調節するＧＩＰの役割は、依然として議論の余地がある。これらの結果は、ＧＩＰＲ拮抗作用が体重を改善することができるという確信を高めている。したがって、体重を改善する戦略としてＧＩＰ受容体で作用する化合物、特に、作動するか拮抗するかは、依然として徹底的な科学調査の主題である（Ｆｉｎａｎ ｅｔ ａｌ，ＴＲＥＮＤＳ Ｍｏｌ Ｍｅｄ，２０１６，２２（５）：３５９－３７６、Ｋｉｌｌｉｏｎ ｅｔ ａｌ，Ｅｎｄｏ Ｒｅｖ，２０２０，４１（１）：１－２１）。
【0004】
げっ歯類モデルにおいて、長期化ＧＩＰ類似体が体重を減少させ、血糖コントロールを改善することが示されているが、ＧＬＰ－１類似体と比較して体重を減少させるには強力ではない（Ｍｒｏｚ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｍｅｔａｂ，２０１９，２０：５１－６２）。さらに、ＧＩＰ類似体は、二剤投与時のＧＬＰ－１類似体との相加／相乗作用によって体重減少を誘導し（Ｆｉｎａｎ ｅｔ ａｌ，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ，２０１３，５（２０９）：２０９ｒａ１５１、Ｎｏｒｒｅｇａａｒｄ ｅｔ ａｌ，Ｄｉａｂｅｔｅｓ Ｏｂｅｓ Ｍｅｔａｂ，２０１８，２０（１）：６０－６８）、したがって、ＧＬＰ－１に基づく薬理の増幅に好適な候補に相当する。前臨床動物モデルで示されているように、ＧＩＰＲ作動作用を単一分子共作動薬としてＧＬＰ－１Ｒ作動作用の非冗長パートナーとして採用して、ＧＬＰ－１代謝利益、最も注目すべきことに、体重減少および血糖コントロールを増幅することができる（Ｆｉｎａｎ ｅｔ ａｌ，Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ，２０１３，５（２０９）：２０９ｒａ１５１、Ｃｏｓｋｕｎ ｅｔ ａｌ，Ｍｏｌ Ｍｅｔａｂ，２０１８，１８：３－１４）。強力な二重インクレチン受容体作動作用を有する２つの異なるペプチドが複数回投与臨床試験に進んだ。臨床結果ではベンチマークＧＬＰ－１特異的作動薬の同等の投与によって達成されるものを超える血糖コントロールおよび体重の改善が示され（Ｆｒｉａｓ ｅｔ ａｌ，Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂ，２０１７，２６（２）：３４３－３５２、Ｆｒｉａｓ ｅｔ ａｌ，Ｌａｎｃｅｔ，２０１８，３９２（１０１６０）：２１８０－２１９３、これは、ＧＬＰ－１受容体とＧＩＰ受容体との同時標的のトランスレーショナルな側面および治療的利益を実証する。
【0005】
ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬およびそれらの医学的使用の可能性は、ＷＯ２０１０／０１１４３９、ＷＯ２０１３／１６４４８３、ＷＯ２０１４／１９２２８４、ＷＯ２０１５／０６７７１５、ＷＯ２０１５／０２２４２０、ＷＯ２０１５／０８６７２８、ＷＯ２０１５／０８６７２９、ＷＯ２０１６／１１１９７１、ＷＯ２０２０／０２３３８６、ＵＳ９７４５３６０、ＵＳ２０１４／１６２９４５、およびＵＳ２０１４／０３５７５５２などのいくつかの特許出願に記載されている。しかしながら、いずれの共作動薬製品もこれまでに販売承認を得ていない。
【発明の概要】
【0006】
本発明は、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の両方と強力に反応し、かつヒトにおける週１回投与レジメンに好適な長期化プロファイルを呈する、ペプチドおよび置換基を含む単一分子共作動薬に関する。これは、ある特定のペプチド配列バリアントと、二酸系脂肪酸での単一部位アシル化による置換基との組み合わせによって達成される。
【0007】
本発明の一態様は、以下のアミノ酸配列を有するペプチドに関し、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である。
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である。
【0008】
本発明の一態様は、ペプチドおよび置換基を含む化合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関し、ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端アミノ酸残基に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱ、Ｒ、またはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基のイプシロン－アミノ基を介して結合している。
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端アミノ酸残基に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱ、Ｒ、またはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基のイプシロン－アミノ基を介して結合している。
【0009】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を調製する方法に関する。
【0010】
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬化合物を含む医薬組成物に関する。
【0011】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬の医学的使用に関する。
【0012】
一態様では、本発明は、糖尿病、肥満、および／または肝臓疾患の予防または治療のための、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬の使用に関する。
【図面の簡単な説明】
【0013】
【発明を実施するための形態】
【0014】
説明
以下において、ギリシャ文字は、それらの記号または対応する名称で表されてもよく、例えば、αがアルファであり、βがベータであり、εがイプシロンであり、γがガンマであり、ωがオメガであるといった具合である。また、μのギリシャ文字は「ｕ」で表されてもよく、例えば、μｌがｕｌであり、μＭがｕＭである。
以下において、ギリシャ文字は、それらの記号または対応する名称で表されてもよく、例えば、αがアルファであり、βがベータであり、εがイプシロンであり、γがガンマであり、ωがオメガであるといった具合である。また、μのギリシャ文字は「ｕ」で表されてもよく、例えば、μｌがｕｌであり、μＭがｕＭである。
【0015】
ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬
本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬または単に共作動薬とも称されるＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬である化合物に関する。
本発明は、ＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬または単に共作動薬とも称されるＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬である化合物に関する。
【0016】
「化合物」という用語は、分子実体を指すために本明細書で使用され、それ故に、「化合物」は、各化合物または化合物の群に対して定義される最小限の要素以外の異なる構造要素を有してもよい。化合物が定義された構造および／または機能的要素を含む限り、その化合物はペプチドまたはその誘導体であってもよいということになる。
【0017】
「化合物」という用語は、本明細書の薬学的に関連した形態、すなわち、本明細書で定義される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を包含するようにも意図されている。
【0018】
「類似体」という用語は、概して、配列に参照アミノ酸配列と比較して１つ以上のアミノ酸変化があるペプチドを指す。「類似体」は、Ｎ末端位置および／もしくはＣ末端位置にアミノ酸伸長、ならびに／またはＮ末端位置および／もしくはＣ末端位置に切断を含んでもよい。
【0019】
一般に、アミノ酸残基は、それらの完全な名称、それらの１文字コード、および／またはそれらの３文字コードによって特定され得る。これらの３つの方法は、完全に同等である。
【0020】
アミノ酸は、アミノ基およびカルボン酸基、ならびに任意選択で、しばしば側鎖と称される１つ以上の追加の基を含む分子である。
【0021】
「アミノ酸」という用語は、タンパク質原性（または天然）アミノ酸（とりわけ、２０個の標準アミノ酸）だけでなく、非タンパク質原性（または非天然）アミノ酸も含む。タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質に自然に組み込まれるものである。
【0022】
標準アミノ酸は、遺伝子コードによってコードされるアミノ酸である。非タンパク質原性アミノ酸は、タンパク質中に見出されないか、または標準細胞機構によって生成されないかのいずれかである（例えば、それらは、翻訳後修飾に供されていない場合がある）。非タンパク質原性アミノ酸の非限定的な例は、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸または２－アミノイソ酪酸）、ノルロイシン、ノルバリン、ならびにタンパク質原性アミノ酸のＤ異性体である。
【0023】
下文において、光学異性体が記載されていないペプチドの各アミノ酸は、（別段の指定がない限り）Ｌ異性体を意味すると理解されたい。
【0024】
本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、ペプチドおよび置換基を含むか、またはそれらから成る。いくつかの実施形態では、ペプチドは、ＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体を介して活性を最適化するように作製された合成ペプチドである。ＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の両方に対する好適な受容体結合活性を有する化合物は、本明細書の実施例で示されるように特定されている。
【0025】
本化合物は、脂肪酸基を含む置換基によって半減期の延長をさらに呈する。したがって、特定された化合物は、さらなる開発に好適な魅力的な分子とみなされる。
【0026】
いくつかの実施形態では、ペプチドのカルボキシ末端は、－ＣＯＯＨ基を保持する。いくつかの実施形態では、本化合物は、Ｃ末端にアミド基（Ｃ（＝Ｏ）－ＮＨ２）を任意選択で含んでもよく、これは、天然エキセンディン－４で見られるような－ＯＨを－ＮＨ２で置換する天然に存在する修飾である。
【0027】
ペプチド
本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、以下に記載されるようにペプチドおよび置換基を含み、ここで、置換基はアミノ酸残基を介してペプチド骨格に結合している。
本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、以下に記載されるようにペプチドおよび置換基を含み、ここで、置換基はアミノ酸残基を介してペプチド骨格に結合している。
【0028】
いくつかの実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、以下であり、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である。
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である。
【0029】
一実施形態では、Ｘ３９は不在である。一実施形態では、Ｘ３８およびＸ３９は不在である。一実施形態では、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９は不在である。一実施形態では、Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９は不在である。さらなるかかる実施形態では、Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５は、ＳＳＧＡである。
【0030】
そのさらなる実施形態では、ペプチドは、Ｃ末端にアミド修飾を有する。
【0031】
一実施形態では、ペプチドは、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である。
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である。
【0032】
一実施形態では、Ｘ１６は、Ｋである。一実施形態では、Ｘ１６は、Ｅである。一実施形態では、Ｘ１７は、Ｑである。一実施形態では、Ｘ１７は、Ｋである。一実施形態では、Ｘ２１は、Ｅである。一実施形態では、Ｘ２１は、Ｋである。一実施形態では、Ｘ２４は、Ｎである。一実施形態では、Ｘ２４は、Ｑである。一実施形態では、Ｘ２８は、Ａである。一実施形態では、Ｘ２８は、Ｅである。
【0033】
一実施形態では、Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１は、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される。一実施形態では、Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１は、ＫＱＡＡＡｉｂＥである。一実施形態では、Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１は、ＫＫＡＡＡｉｂＥである。一実施形態では、Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１は、ＫＱＡＡＡｉｂＫである。一実施形態では、Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１は、ＥＱＡＡＡｉｂＫである。
【0034】
さらなる実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである。一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである。
【0035】
一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号９である。
【0036】
一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号１０または１３である。
【0037】
一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号１０である。
【0038】
一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号１１または１４である。
【0039】
一実施形態では、ペプチドのアミノ酸配列は、配列番号７、８、９、および１２のうちのいずれか１つである。
【0040】
さらなるかかる実施形態では、ペプチドは、Ｃ末端にアミド修飾を有する。
【0041】
誘導体
いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬は、ペプチドに共有結合した以下に記載の置換基を含むか、またはそれらから成る。
いくつかの実施形態では、ＧＬＰ－１受容体作動薬およびＧＩＰ受容体作動薬は、ペプチドに共有結合した以下に記載の置換基を含むか、またはそれらから成る。
【0042】
かかる化合物は、置換基をペプチド骨格に共有結合することによって得られるため、ペプチドの誘導体と称され得る。
【0043】
本発明の一態様は、ペプチドおよび置換基を含む化合物、またはその薬学的に許容可能な塩に関し、ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介してペプチドに結合している。
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介してペプチドに結合している。
【0044】
さらなる実施形態では、ペプチドは、本明細書で上述されるように定義され得る。
【0045】
置換基
一実施形態では、本明細書に記載の置換基は、１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して本明細書に記載のペプチドに結合している。
一実施形態では、本明細書に記載の置換基は、１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して本明細書に記載のペプチドに結合している。
【0046】
一実施形態では、置換基は、リジンが１６位、１７位、または２１位に含まれている場合に、リジン（Ｋ）のイプシロン－アミノ基を介してペプチドに結合している。
【0047】
一実施形態では、置換基は、血漿アルブミンと非共有結合複合体を形成し、それ故に、共作動薬と血流の循環を促進することができ、かつ共作動薬とアルブミンの複合体が腎クリアランスによって緩徐に除去されるに過ぎないという事実に起因して、共作動薬の作用時間を長期化する効果を有することもできるペプチドに共有結合した化学構造である。
【0048】
一実施形態では、置換基は、脂肪酸基を含む。かかる一実施形態では、脂肪酸基は、少なくとも８個の連続した－ＣＨ２－基を含む炭素鎖を含む。一実施形態では、脂肪酸基は、少なくとも１０個の連続した－ＣＨ２－基、例えば、少なくとも１２個の連続した－ＣＨ２－基、少なくとも１４個の連続した－ＣＨ２－基、少なくとも１６個の連続した－ＣＨ２－基、少なくとも１８個の連続した－ＣＨ２－基を含む。
【0049】
一実施形態では、脂肪酸基は、８～２０個の連続した－ＣＨ２－基を含む。一実施形態では、脂肪酸基は、１０～１８個の連続した－ＣＨ２－基を含む。一実施形態では、脂肪酸基は、１２～１８個の連続した－ＣＨ２－基を含む。一実施形態では、脂肪酸基は、１４～１８個の連続した－ＣＨ２－基を含む。
【0050】
いくつかの実施形態では、置換基は、プロトラクター要素（ｐｒｏｔｒａｃｔｏｒ ｅｌｅｍｅｎｔ）および１つ以上のリンカー要素などのいくつかの要素から成る。一実施形態では、「プロトラクター」という用語は、化合物の半減期の延長に関与する置換基の末端部分である脂肪酸基を説明するために使用される。
【0051】
一実施形態では、プロトラクター（Ｐｒｏｔ）は、
化学式１：ＨＯＯＣ－（ＣＨ２）ｎ－ＣＯ－＊（式中、ｎが８～２０の範囲の整数である）によって定義されてもよく、また、Ｃ（ｎ＋２）二酸と称されてもよく、または
（式中、ｎが８～２０の範囲の整数である）として定義されてもよい。
化学式１：ＨＯＯＣ－（ＣＨ２）ｎ－ＣＯ－＊（式中、ｎが８～２０の範囲の整数である）によって定義されてもよく、また、Ｃ（ｎ＋２）二酸と称されてもよく、または
【化1】
【0052】
一実施形態では、置換基は、１つ以上のリンカー要素をさらに含む。いくつかの実施形態では、リンカー要素は、アミド結合によって互いにかつプロトラクターに連結され、「Ｚ」と称される（さらに以下を参照されたい）。
【0053】
本明細書でさらに以下に定義されるように、リンカー要素の数は、最大４つであり、－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－と称され得、式中、Ｚ１がプロトラクター（Ｐｒｏｔ－）と連結され、最後のＺ要素がペプチドと連結され、この場合、置換基は、Ｐｒｏｔ－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－と称され得る。したがって、上記の記号＊は、Ｚ１への結合点を示し、アミド結合を介して結合している場合、窒素である。一実施形態では、Ｚ１が結合である場合（以下を参照されたい）、記号＊は、隣接するＺ要素の窒素への結合点を示す。
【0054】
一実施形態では、置換基は、Ｐｒｏｔ－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－（式中、Ｐｒｏｔ－が化学式１、化学式１ｂから選択され、ｎが１６～２０の範囲の整数である）によって定義される。
【0055】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１４、１５、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【0056】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１４、１５、１６、１７、または１８である。
【0057】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１６または１８である。
【0058】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１６、１７、１８、１９、または２０である。
【0059】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１６、１８、または２０である。
【0060】
特定の実施形態では、化学式１または化学式１ｂ中、ｎは、１８または２０である。
【0061】
特定の実施形態では、プロトラクター（Ｐｒｏｔ）は、Ｃ１８二酸またはＣ２０二酸である。
【0062】
本明細書で使用される「結合」という用語は、共有結合を意味する。Ｚ１～Ｚ４のリンカー要素が結合として定義される場合、そのリンカー要素が不在である状況と同等である。Ｚ１～Ｚ４のうちのいずれかが結合であるという本明細書の以下の指示は、前のＺ要素が「結合」ではない（または不在ではない）次のＺ要素に共有結合するように、Ｚ１～Ｚ４のうちのいずれかが不在であると解されてもよい。
【0063】
いくつかの実施形態では、リンカー要素Ｚ１～Ｚ４は、Ｇｌｕ、γＧｌｕ（ガンマＧｌｕまたはｇＧｌｕとも呼ばれ、＊－ＮＨ－ＣＨ－（ＣＯＯＨ）－ＣＨ２－ＣＨ２－ＣＯ－＊によって定義される）、ε－Ｌｙｓ（イプシロンＬｙｓまたはｅＬｙｓとも呼ばれ、＊－ＮＨ－（ＣＨ２）４－ＣＨ（ＮＨ２）－ＣＯ－＊によって定義される）、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ａｄｏ、Ａｅｅｐ、およびＡｅｅｅｐなどのアミノ酸様部分、ならびに以下に記載のさらなる部分を含むアミド結合を形成することができる化学的部分から個別に選択される。
【0064】
一実施形態では、Ｚ１要素は、任意選択である。かかる一実施形態では、Ｚ１は、
化学式２：＊－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ６Ｈ１０）－ＣＯ－＊、または
および結合から選択される。
化学式２：＊－ＮＨ－ＣＨ２－（Ｃ６Ｈ１０）－ＣＯ－＊、または
【化2】
【0065】
化学式２は、トラネキサム酸またはトランス－４－（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸のＴｒｘと称されてもよく、ここで、化学式２が（１，２）形態、（１，３）形態、および（１，４）形態を包含する一方で、化学式２ｂは（１，４）形態を指定する。
【0066】
一実施形態では、Ｚ１は、Ｔｒｘまたは結合である。
【0067】
一実施形態では、Ｚ２は、γＧｌｕ、Ｇｌｕ、または結合から選択される。
【0068】
一実施形態では、Ｚ２は、γＧｌｕである。
【0069】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、Ｇｌｕ、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒ、Ａｄｏ、Ａｅｅｐ、Ａｅｅｅｐ、および結合から選択される。
【0070】
Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｔｈｒは、当該技術分野で周知のアミノ酸残基である。
【0071】
ε－Ｌｙｓは、化学式３：＊－ＮＨ－（ＣＨ２）４－ＣＨ（ＮＨ２）－ＣＯ－＊によって定義され、
で表されてもよい。
【化3】
【0072】
γＧｌｕは、化学式４：＊－ＮＨ－ＣＨ（ＣＯＯＨ）－（ＣＨ２）２－ＣＯ－＊によって定義され、
で表されてもよい。
【化4】
【0073】
Ａｄｏは、化学式５：＊－－ＮＨ－（ＣＨ２）２－Ｏ－（ＣＨ２）２－Ｏ－ＣＨ２－ＣＯ－＊によって定義され、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸と称されてもよく、
で表されてもよい。
【化5】
【0074】
Ａｅｅｐは、化学式６：＊ＮＨ－ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ＊によって定義され、
で表されてもよい。
【化6】
【0075】
Ａｅｅｅｐは、化学式７：＊ＮＨ－ＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＯＣＨ２ＣＨ２ＣＯ＊によって定義され、
で表されてもよい。
【化7】
【0076】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、Ｇｌｕ、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｄｏ、Ａｅｅｐ、Ａｅｅｅｐ、および結合から選択される。
【0077】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、Ｇｌｕ、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｄｏ、および結合から選択される。
【0078】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、Ｇｌｕ、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｄｏ、および結合から選択される。
【0079】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ａｄｏ、および結合から選択される。
【0080】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、互いに独立して、ε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ａｄｏ、および結合から選択される。
【0081】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、ε－ＬｙｓまたはＡｄｏである。
【0082】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、Ａｄｏである。
【0083】
一実施形態では、Ｚ３およびＺ４は、ε－Ｌｙｓである。
【0084】
一実施形態では、置換基は、以下のように定義される置換基Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、およびＧから選択される。
【表1】
【0085】
いくつかの実施形態では、置換基は、アシル化によって、すなわち、置換基のカルボン酸基とリジン残基のイプシロンアミノ基との間に形成されるアミド結合を介して、共作動薬のリジン残基に共有結合している。
【0086】
一実施形態では、置換基は、アシル化によって、すなわち、置換基のカルボン酸基とリジン残基のイプシロンアミノ基との間に形成されるアミド結合を介して、ペプチド骨格の１６位のリジン残基に共有結合している。
【0087】
一実施形態では、置換基は、アシル化によって、すなわち、置換基のカルボン酸基とリジン残基のイプシロンアミノ基との間に形成されるアミド結合を介して、ペプチド骨格の１７位のリジン残基に共有結合している。
【0088】
一実施形態では、置換基は、アシル化によって、すなわち、置換基のカルボン酸基とリジン残基のイプシロンアミノ基との間に形成されるアミド結合を介して、ペプチド骨格の２１位のリジン残基に共有結合している。
【0089】
共作動薬は、同じ分子式および結合原子の配列を有する異なる立体異性形態で存在してもよいが、空間におけるそれらの原子の三次元配向のみ異なる。例証された共作動薬の立体異性は、標準の命名法を使用して、実験の節、名称、ならびに構造に示されている。別段の定めのない限り、本発明は、具現化された誘導体のすべての立体異性形態に関する。
【0090】
機能的受容体活性化活性
本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体作動薬の機能活性は、本明細書の実施例２に記載されるようにインビトロで試験することができる。
本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体作動薬の機能活性は、本明細書の実施例２に記載されるようにインビトロで試験することができる。
【0091】
５０％効果濃度（ＥＣ５０）という用語は、概して、用量反応曲線を参照することにより、ベースラインと最大との中間の反応を誘発する濃度を指す。ＥＣ５０は、化合物の効力の尺度として使用され、その最大効果の５０％が観察される濃度を表す。
【0092】
したがって、化合物のインビトロ効力を本明細書に記載されるように決定することができ、ＥＣ５０を決定することができる。ＥＣ５０値がより低いほど、効力がより良好である。
【0093】
かかる化合物を特徴付けるために、各々の受容体の天然ホルモンに関連してインビトロ効力を考慮することがさらに関連し得る。
【0094】
インビトロ効力は、例えば、適切なＧＬＰ－１受容体および／またはＧＩＰ受容体を発現する膜を含む培地中で、および／または適切なＧＬＰ－１受容体および／またはＧＩＰ受容体を発現する全細胞を用いたアッセイで決定され得る。
【0095】
例えば、ヒトまたはマウスＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体の機能的応答は、受容体遺伝子アッセイで、例えば、ヒトまたはマウスＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体を発現し、かつプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株中で測定され得る。ＧＬＰ－１および／またはＧＩＰ受容体の活性化の結果としてｃＡＭＰが生成されると、次いで、ルシフェラーゼの発現がもたらされる。ルシフェラーゼは、ルシフェリンを添加することによって決定され得、これが酵素によってオキシルシフェリンに変換されて生物発光を生じ、これがインビトロ効力のレポーターとして測定される。かかるアッセイの一例が本明細書に記載の実施例２に記載される。本化合物がアルブミンに結合するように設計された置換基を含み得るため、受容体活性がアッセイ培地中のヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）の存在または不在に影響され得ることに留意することも重要である。ＨＳＡの不在下でのＥＣ５０と比較したＥＣ５０の増加によって示されるＨＳＡの存在下での本化合物の効力の減少は、本化合物とＨＳＡとの相互作用を示し、インビボでの長期化作用時間を予測する。
【0096】
一実施形態では、本化合物は、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体を活性化する強力なインビトロ効果を有する。
【0097】
一実施形態では、本化合物は、ＨＳＡなしで行われた場合、本明細書の実施例２に記載のＣＲＥルシフェラーゼレポーターアッセイにおいて、４０ｐＭ未満など、３０ｐＭ未満などの５０ｐＭ未満のＥＣ５０で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化することができる。
【0098】
一実施形態では、本化合物は、５０ｐＭ未満など、または２０ｐＭ未満などの１００ｐＭ以下のＥＣ５０に対応する実施例２の方法を使用して決定されるヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体でのインビトロ効力を有する。
【0099】
一実施形態では、ヒトＧＬＰ－１受容体アッセイおよびヒトＧＩＰ受容体アッセイにおけるＥＣ５０はいずれも、１～２５ｐＭなど、１～２０ｐＭなど、１～１５ｐＭなど、または１～１０ｐＭなどの１～３０である。
【0100】
一実施形態では、本化合物は、マウスＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体も活性化する強力なインビトロ効果を有する。いくつかの実施形態では、本化合物は、各々の受容体のそれぞれの天然ホルモンに正規化された場合、ヒトＧＬＰ－１受容体とマウスＧＬＰ－１受容体との間およびヒトＧＩＰ受容体とマウスＧＩＰ受容体との間でほぼ等しいインビトロ効力を有する。
【0101】
さらなる特定の実施形態では、誘導体は、５００ｐＭ以下、より好ましくは２００ｐＭ未満、または最も好ましくは１００ｐＭ未満のＥＣ５０に対応する実施例２の方法を使用して決定されるマウスＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体でのインビトロ効力を有する。
【0102】
さらなる特定の実施形態では、誘導体は、ヒトグルカゴン受容体よりもヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体を選択的に活性化することができる。グルカゴン受容体と比較したＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体の活性化に関して使用される場合、「選択的に」という用語は、インビトロで測定された場合、グルカゴン受容体と比較して少なくとも１０倍、例えば、少なくとも５０倍、少なくとも５００倍、または少なくとも１０００倍高いＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体に対する効力を呈する誘導体を指す。上述のように、ＣＲＥルシフェラーゼ機能的効力アッセイなどの受容体機能の効力アッセイ、および得られたＥＣ５０値を比較する。
【0103】
薬物動態特性
共作動性化合物の薬物動態特性は、薬物動態（ＰＫ）研究によりインビボでさらに決定され得る。マウス、ラット、サル、イヌ、またはブタなどの動物モデルを使用して、この特徴付けを行うことができる。
共作動性化合物の薬物動態特性は、薬物動態（ＰＫ）研究によりインビボでさらに決定され得る。マウス、ラット、サル、イヌ、またはブタなどの動物モデルを使用して、この特徴付けを行うことができる。
【0104】
かかる研究では、動物に、典型的には、関連する製剤で、薬物の単回投与により、静脈内投与されるか、皮下（ｓ．ｃ．）投与されるか、または経口（ｐ．ｏ．）投与されるかのいずれかが行われる。血液試料が投薬後の所定の時点で採取され、関連する定量アッセイを用いて薬剤の濃度について分析される。これらの測定値に基づいて、試験化合物の時間－血漿濃度プロファイルがプロットされ、データのいわゆるノンコンパートメント薬物動態解析が行われる。長い半減期が、低頻度での化合物の投与が可能であり得ることを示すため、終末相半減期が重要なパラメータである。静脈内投与後のインビボでの終末相半減期（ｔ１／２）は、実施例３に記載のミニブタで測定され得る。
【0105】
一実施形態では、終末相半減期は、例えば、本明細書の実施例３に記載されるように、静脈内投与後のミニブタにおけるインビボでの半減期（ｔ１／２）である。
【0106】
一実施形態では、ミニブタにおける終末相半減期は、少なくとも４０時間など、または少なくとも６０時間などの少なくとも２４時間である。
【0107】
生物学的活性
共作動性化合物の生物学的効果は、当該技術分野で公知の好適な動物モデルを使用してインビボで、かつ臨床試験でもさらに研究され得る。
共作動性化合物の生物学的効果は、当該技術分野で公知の好適な動物モデルを使用してインビボで、かつ臨床試験でもさらに研究され得る。
【0108】
食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスは好適な動物モデルの一例であり、体重、食物摂取量、および耐糖能に対する効果をこのモデルにおいて亜慢性投薬中に評価することができる。本発明の化合物の体重、食物摂取量、および耐糖能に対する効果は、例えば、本明細書の実施例４に記載されるように、かかるマウスにおいてインビボで決定され得る。
【0109】
一実施形態では、本化合物は、実施例４に記載されるように、ＤＩＯマウスにおける体重を減少させ、食物摂取量を減少させ、耐糖能を改善する能力を呈する。
【0110】
一実施形態では、本化合物は、ＤＩＯマウスにおける体重を減少させる。
【0111】
一実施形態では、本化合物は、ＤＩＯマウスにおける食物摂取量を減少させる。
【0112】
一実施形態では、本化合物は、ＤＩＯマウスにおける耐糖能を改善する。
【0113】
一実施形態では、本化合物は、ＤＩＯマウスにおいて、３ｎｍｏｌ／ｋｇの当該化合物を１０日間にわたって１日１回投与した後、体重を少なくとも２０％減少させる。
【0114】
一実施形態では、本化合物は、ＤＩＯマウスにおいて、３ｎｍｏｌ／ｋｇの当該化合物を１０日間にわたって１日１回投与した後、食物摂取量を少なくとも２０％減少させる。一実施形態では、本化合物は、ＩＰＧＴＴ（腹腔内糖負荷試験）で測定された場合、耐糖能を少なくとも２０％改善する。
【0115】
一実施形態では、本化合物は、以下から成る群から選択される。
【表2-1】
【表2-2】
【表2-3】
【表2-4】
【表2-5】
【表2-6】
【0116】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号１６、化合物番号１７、および化合物番号１９～３５から成る群から選択される。
【0117】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号２０、化合物番号２１、化合物番号２８、化合物番号２９、および化合物番号３３から成る群から選択される。
【0118】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号２２、化合物番号２３、化合物番号３０、化合物番号３１、化合物番号３４、および化合物番号３５から成る群から選択される。
【0119】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号３４および化合物番号３５から成る群から選択される。
【0120】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号１６、化合物番号１７、化合物番号１９、化合物番号２４、化合物番号２５、化合物番号２６、化合物番号２７、および化合物番号３２から成る群から選択される。
【0121】
一実施形態では、本化合物は、化合物番号１９、化合物番号２５、化合物番号２６、および化合物番号２７から成る群から選択される。
【0122】
薬学的に許容可能な塩
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の共作動薬は、薬学的に許容可能な塩の形態である。塩は、例えば、塩基と酸との間の化学反応、例えば、２ＮＨ３＋Ｈ２ＳＯ４→（ＮＨ４）２ＳＯ４によって形成される。塩は、塩基性塩であっても酸性塩であってもよく、またはどちらでもなくてもよい（すなわち、中性塩）。水中で、塩基性塩は水酸化物イオンを生成し、酸性塩はヒドロニウムイオンを生成する。本化合物の塩は、それぞれ、アニオン基の間またはカチオン基の間にカチオンまたはアニオンを付加することによって形成され得る。これらの基は、本化合物のペプチドおよび／または置換基に位置し得る。アニオン基の非限定的な例には、存在する場合、置換基中の任意の遊離カルボン酸基、ならびにペプチド中の遊離カルボン酸基が挙げられる。ペプチド部分は、存在する場合、Ｃ末端に遊離カルボン酸基、ならびにＡｓｐおよびＧｌｕなどの内部酸性アミノ酸残基の任意の遊離カルボキシル基を含み得る。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の共作動薬は、薬学的に許容可能な塩の形態である。塩は、例えば、塩基と酸との間の化学反応、例えば、２ＮＨ３＋Ｈ２ＳＯ４→（ＮＨ４）２ＳＯ４によって形成される。塩は、塩基性塩であっても酸性塩であってもよく、またはどちらでもなくてもよい（すなわち、中性塩）。水中で、塩基性塩は水酸化物イオンを生成し、酸性塩はヒドロニウムイオンを生成する。本化合物の塩は、それぞれ、アニオン基の間またはカチオン基の間にカチオンまたはアニオンを付加することによって形成され得る。これらの基は、本化合物のペプチドおよび／または置換基に位置し得る。アニオン基の非限定的な例には、存在する場合、置換基中の任意の遊離カルボン酸基、ならびにペプチド中の遊離カルボン酸基が挙げられる。ペプチド部分は、存在する場合、Ｃ末端に遊離カルボン酸基、ならびにＡｓｐおよびＧｌｕなどの内部酸性アミノ酸残基の任意の遊離カルボキシル基を含み得る。
【0123】
カチオン基の非限定的な例には、存在する場合、置換基中の任意の遊離アミノ基、ならびにペプチド中の遊離アミノ基が挙げられる。ペプチドは、存在する場合、Ｎ末端に遊離アミノ基、ならびにＨｉｓ、Ａｒｇ、およびＬｙｓなどの内部塩基性アミノ酸残基の任意の遊離イミダゾールまたはアミノ基を含み得る。
【0124】
特定の実施形態では、ペプチドまたは誘導体は、薬学的に許容可能な塩の形態である。
【0125】
生成プロセス
共作動薬は、例えば、ｔ－ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学反応または他の十分に確立された技法を使用した古典的なペプチド合成、例えば、固相ペプチド合成によって生成されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９９、Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ Ｚａｒａｇｏｚａ Ｄｏｒｗａｌｄ，“Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｎ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ，２０００、および“Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ ａｎｄ Ｐ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。
共作動薬は、例えば、ｔ－ＢｏｃもしくはＦｍｏｃ化学反応または他の十分に確立された技法を使用した古典的なペプチド合成、例えば、固相ペプチド合成によって生成されてもよく、例えば、Ｇｒｅｅｎｅ ａｎｄ Ｗｕｔｓ，“Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ，１９９９、Ｆｌｏｒｅｎｃｉｏ Ｚａｒａｇｏｚａ Ｄｏｒｗａｌｄ，“Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｎ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ”，Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ Ｖｅｒｌａｇ ＧｍｂＨ，２０００、および“Ｆｍｏｃ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ”，Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｗ．Ｃ．Ｃｈａｎ ａｎｄ Ｐ．Ｄ．Ｗｈｉｔｅ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００を参照されたい。
【0126】
あるいは、本化合物は、組換え法によって、例えば、ペプチド配列をコードするＤＮＡ配列を含み、かつペプチドを発現することができる宿主細胞を、ペプチドの発現を許容する条件下で、好適な栄養培地で培養することによって生成されてもよい。これらのペプチドの発現に好適な宿主細胞の非限定的な例は、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ、ならびに哺乳類ＢＨＫまたはＣＨＯ細胞株である。
【0127】
非天然アミノ酸および／または共有結合した置換基を含む共作動薬は、実験部分に記載されるように生成されてもよい。
【0128】
いくつかの共作動薬を調製する方法の特定の例は、実験部分に含まれる。
【0129】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載のペプチドを調製するための方法に関する。
【0130】
本発明のさらなる態様は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を調製する方法に関する。
【0131】
一実施形態では、本明細書に記載の化合物を調製するための方法は、固相ペプチド合成ステップを含む。置換基は、固相ペプチド合成の一部として連続して構築されてもよく、または別個に生成されてペプチド合成後にリジン残基を介して結合してもよい。
【0132】
一実施形態では、本化合物は、置換基が２つのペプチド断片の一方に結合した後にそれらのペプチド断片がライゲーションされる二段階プロセスによって生成される。
【0133】
医薬組成物
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を含む医薬組成物に関する。本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを含む組成物は、当該技術分野で公知のように調製され得る。
さらなる態様では、本発明は、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬を含む医薬組成物に関する。本発明の化合物またはその薬学的に許容可能な塩と、任意選択で１つ以上の薬学的に許容可能な賦形剤とを含む組成物は、当該技術分野で公知のように調製され得る。
【0134】
注射に好適な液体組成物は、必要に応じて成分を溶解させて混合して、所望の最終生成物をもたらすことを伴う医薬産業の従来の技法を使用して調製することができる。したがって、ある手順に従って、本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬は、好適なｐＨの好適な緩衝液中に溶解される。本組成物は、例えば、滅菌濾過によって滅菌され得る。
【0135】
「賦形剤」という用語は、活性治療成分以外の任意の成分を広範に指す。賦形剤は、非活性物質、不活性物質、および／または医薬的に活性でない物質であってもよい。賦形剤は、例えば、担体、ビヒクル、希釈剤、希釈剤、錠剤補助剤として様々な目的を果たしてもよく、かつ／または活性物質の投与を改善する役目を果たしてもよく、かつ／または活性物質の吸収を改善する役目を果たしてもよい。
【0136】
様々な賦形剤を有する薬学的に活性な成分の製剤は、当該技術分野で公知であり、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ（例えば、第１９版（１９９５年）および任意のそれ以降の版）を参照されたい。
【0137】
一実施形態では、医薬組成物は、水性製剤などの液体製剤である。
【0138】
医薬品の適応症
本発明のさらなる態様は、医薬としての本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬化合物の使用に関する。
本発明のさらなる態様は、医薬としての本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬化合物の使用に関する。
【0139】
一実施形態では、本明細書に記載の化合物は、以下の医学的処置における使用のためのものである：
（ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防、胃内容排出の遅延、身体的可動性の増加、ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持、すなわち、減量成功後の体重増加の予防。
（ｖ）脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎、または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療。
（ｉ）高血糖症、２型糖尿病、耐糖能障害、１型糖尿病、非インスリン依存性糖尿病、ＭＯＤＹ（若年発症成人型糖尿病）、妊娠糖尿病などのすべての形態の糖尿病の予防および／もしくは治療、ならびに／またはＨｂＡ１Ｃの低減、
（ｉｉ）２型糖尿病の進行などの糖尿病疾患の進行の遅延または予防、耐糖能障害（ＩＧＴ）からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、インスリン耐性の遅延または予防、および／またはインスリンを必要としない２型糖尿病からインスリンを必要とする２型糖尿病への進行の遅延、
（ｉｉｉ）例えば、食事量の減少、体重減少、食欲の抑制、満腹感の誘発による、肥満などの摂食障害の予防および／もしくは治療；過食性障害、神経性大食症、および／もしくは抗精神病薬もしくはステロイドの投与によって誘発された肥満の治療もしくは予防、胃内容排出の遅延、身体的可動性の増加、ならびに／または骨関節炎および／もしくは尿失禁などの肥満の共存疾患の予防および／もしくは治療、
（ｉｖ）（薬剤誘発性または食事と運動による）減量成功後の体重維持、すなわち、減量成功後の体重増加の予防。
（ｖ）脂肪肝、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、肝臓炎、または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療。
【0140】
一実施形態では、本化合物は、糖尿病および／または肥満を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。
【0141】
一実施形態では、本化合物は、糖尿病および／または肥満を治療するための方法に使用するためのものである。
【0142】
一実施形態では、本化合物は、２型糖尿病を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。
【0143】
一実施形態では、本化合物は、２型糖尿病を治療するための方法に使用するためのものである。
【0144】
一実施形態では、本化合物は、肥満を治療および／または予防するための方法に使用するためのものである。
【0145】
一実施形態では、本化合物は、肥満を治療するための方法に使用するためのものである。
【0146】
一実施形態では、本化合物は、体重を管理するための方法に使用するためのものである。一実施形態では、本化合物は、食欲を低下させるための方法に使用するためのものである。一実施形態では、本化合物は、食物摂取量を減少させるための方法に使用するためのものである。
【0147】
実施形態
１．ペプチドおよび置換基を含む化合物であって、当該ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端アミノ酸残基に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
当該置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して当該ペプチドに結合している、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。
２．Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、実施形態１に記載の化合物。
３．Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、実施形態１または２に記載の化合物。
４．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物。
５．当該ペプチドのアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、実施形態１に記載の化合物。
６．Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、実施形態１～５のいずれか１つに記載の化合物。
７．当該ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、実施形態１に記載の化合物。
８．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態７に記載の化合物。
９．当該化合物が、実施例２に記載されるようにＣＲＥルシフェラーゼ受容体アッセイにおいてＨＳＡなしで測定された場合、３０ｐＭ未満のＥＣ５０で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化する、実施形態１～８のいずれかに１つに記載の化合物。
１０．当該化合物が、ミニブタにおいて少なくとも６０時間の半減期を有する、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物。
１１．当該化合物が、ＤＩＯマウスにおいて、３ｎｍｏｌ／ｋｇを１０日間にわたって１日１回投与することによって、体重を少なくとも２０％減少させる、実施形態１～１０のいずれか１つに記載の化合物。
１２．当該置換基が１６Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１３．当該置換基が１７Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１４．当該置換基が２１Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１５．当該置換基がリジン（Ｋ）のイプシロン－アミノ基を介してペプチドに結合している、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
１６．当該置換基が少なくとも１つのプロトラクターを含む、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物。
１７．当該プロトラクターが脂肪酸基である、実施形態１６に記載の化合物。
１８．当該プロトラクターが、化学式１：ＨＯＯＣ－（ＣＨ２）ｎ－ＣＯ－（式中、ｎが、１２～２０の範囲の整数、例えば、ｎ＝１６または１８である）によって定義される二酸である、実施形態１６に記載の化合物。
１９．当該置換基が少なくとも１つのリンカー要素を含む、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の化合物。
２０．当該置換基が最大４つのリンカー要素を含む、実施形態１９に記載の化合物。
２１．当該置換基が－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－と称される最大４つのリンカー要素を含み、ここで、－Ｚ１－が当該プロトラクターと連結され、－Ｚ４－が当該ペプチドと連結される、実施形態１９に記載の化合物。
２２．当該置換基が、
Ｐｒｏｔ－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－
（式中、
ＰｒｏｔがＣ１８二酸またはＣ２０二酸であり、
Ｚ１がＴｒｘまたは結合であり、
Ｚ２がγＧｌｕ、Ｇｌｕ、または結合であり、
Ｚ３がε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、またはＡｄｏであり、
Ｚ４がε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、またはＡｄｏである）である、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
２３．－Ｚ１－が－Ｔｒｘ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２４．－Ｚ２－が－γＧｌｕ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２５．－Ｚ３－Ｚ４－が－Ａｄｏ－Ａｄｏ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２６．－Ｚ３－Ｚ４－が－εＬｙｓ－εＬｙｓ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２７．当該置換基が以下から成る群から選択される、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
２８．当該化合物が以下から成る群から選択される、実施形態１に記載の化合物。
２９．当該化合物が以下から成る群から選択される、実施形態１に記載の化合物。
３０．医薬として使用するための、実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物。
３１．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を含む、医薬組成物。
３２．当該組成物が水性液体製剤である、実施形態３１に記載の組成物。
３３．糖尿病および／または肥満の予防および／または治療のための、実施形態３１および３２のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３４．肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための、実施形態３１および３２のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３５．糖尿病および／または肥満を予防および／または治療するための方法であって、患者に、薬学的に活性な量の実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を投与することを含む、方法。
３６．肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害を予防および／または治療するための方法であって、患者に、薬学的に活性な量の実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を投与することを含む、方法。
３７．以下のアミノ酸配列を有するペプチドであって、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である、ペプチド。
３８．Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、実施形態３７に記載のペプチド。
３９．Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、実施形態３７に記載のペプチド。
４０．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態３７に記載のペプチド。
４１．当該ペプチドのアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、実施形態３７に記載のペプチド。
４２．当該ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、実施形態３７に記載のペプチド。
４３．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態３７に記載のペプチド。
４４．Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、実施形態３７～４３のいずれか１つに記載のペプチド。
４５．当該ペプチドが、実施例２に記載されるようにＣＲＥルシフェラーゼ受容体アッセイにおいてＨＳＡなしで測定された場合、２０ｐＭ未満のＥＣ５０で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化する、実施形態３７～４４のいずれかに１つに記載のペプチド。
４６．当該ペプチドのアミノ酸配列が配列番号１０および１４のうちのいずれか１つである、実施形態３７に記載のペプチド。
４７．Ｘ１６がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
４８．Ｘ１７がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
４９．Ｘ２０がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
５０．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を調製するための方法。
５１．実施形態３７～４９のいずれか１つに記載のペプチドを調製するための方法。
１．ペプチドおよび置換基を含む化合物であって、当該ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端アミノ酸残基に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
当該置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して当該ペプチドに結合している、化合物、
またはその薬学的に許容可能な塩。
２．Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、実施形態１に記載の化合物。
３．Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、実施形態１または２に記載の化合物。
４．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物。
５．当該ペプチドのアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、実施形態１に記載の化合物。
６．Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、実施形態１～５のいずれか１つに記載の化合物。
７．当該ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、実施形態１に記載の化合物。
８．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態７に記載の化合物。
９．当該化合物が、実施例２に記載されるようにＣＲＥルシフェラーゼ受容体アッセイにおいてＨＳＡなしで測定された場合、３０ｐＭ未満のＥＣ５０で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化する、実施形態１～８のいずれかに１つに記載の化合物。
１０．当該化合物が、ミニブタにおいて少なくとも６０時間の半減期を有する、実施形態１～９のいずれか１つに記載の化合物。
１１．当該化合物が、ＤＩＯマウスにおいて、３ｎｍｏｌ／ｋｇを１０日間にわたって１日１回投与することによって、体重を少なくとも２０％減少させる、実施形態１～１０のいずれか１つに記載の化合物。
１２．当該置換基が１６Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１３．当該置換基が１７Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１４．当該置換基が２１Ｌｙｓを介して結合している、実施形態１～１１のいずれか１つに記載の化合物。
１５．当該置換基がリジン（Ｋ）のイプシロン－アミノ基を介してペプチドに結合している、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
１６．当該置換基が少なくとも１つのプロトラクターを含む、実施形態１～１５のいずれか１つに記載の化合物。
１７．当該プロトラクターが脂肪酸基である、実施形態１６に記載の化合物。
１８．当該プロトラクターが、化学式１：ＨＯＯＣ－（ＣＨ２）ｎ－ＣＯ－（式中、ｎが、１２～２０の範囲の整数、例えば、ｎ＝１６または１８である）によって定義される二酸である、実施形態１６に記載の化合物。
１９．当該置換基が少なくとも１つのリンカー要素を含む、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の化合物。
２０．当該置換基が最大４つのリンカー要素を含む、実施形態１９に記載の化合物。
２１．当該置換基が－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－と称される最大４つのリンカー要素を含み、ここで、－Ｚ１－が当該プロトラクターと連結され、－Ｚ４－が当該ペプチドと連結される、実施形態１９に記載の化合物。
２２．当該置換基が、
Ｐｒｏｔ－Ｚ１－Ｚ２－Ｚ３－Ｚ４－
（式中、
ＰｒｏｔがＣ１８二酸またはＣ２０二酸であり、
Ｚ１がＴｒｘまたは結合であり、
Ｚ２がγＧｌｕ、Ｇｌｕ、または結合であり、
Ｚ３がε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、またはＡｄｏであり、
Ｚ４がε－Ｌｙｓ、γＧｌｕ、Ｇｌｙ、またはＡｄｏである）である、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
２３．－Ｚ１－が－Ｔｒｘ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２４．－Ｚ２－が－γＧｌｕ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２５．－Ｚ３－Ｚ４－が－Ａｄｏ－Ａｄｏ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２６．－Ｚ３－Ｚ４－が－εＬｙｓ－εＬｙｓ－である、実施形態２１に記載の化合物。
２７．当該置換基が以下から成る群から選択される、実施形態１～１４のいずれか１つに記載の化合物。
【化8】
【表3-1】
【表3-2】
【表3-3】
【表3-4】
【表3-5】
【表4】
３１．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を含む、医薬組成物。
３２．当該組成物が水性液体製剤である、実施形態３１に記載の組成物。
３３．糖尿病および／または肥満の予防および／または治療のための、実施形態３１および３２のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３４．肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための、実施形態３１および３２のいずれか１つに記載の医薬組成物。
３５．糖尿病および／または肥満を予防および／または治療するための方法であって、患者に、薬学的に活性な量の実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を投与することを含む、方法。
３６．肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害を予防および／または治療するための方法であって、患者に、薬学的に活性な量の実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を投与することを含む、方法。
３７．以下のアミノ酸配列を有するペプチドであって、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である、ペプチド。
３８．Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、実施形態３７に記載のペプチド。
３９．Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、実施形態３７に記載のペプチド。
４０．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態３７に記載のペプチド。
４１．当該ペプチドのアミノ酸配列が、
ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、実施形態３７に記載のペプチド。
４２．当該ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、実施形態３７に記載のペプチド。
４３．当該ペプチドがＣ末端に当該アミド修飾を有する、実施形態３７に記載のペプチド。
４４．Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、実施形態３７～４３のいずれか１つに記載のペプチド。
４５．当該ペプチドが、実施例２に記載されるようにＣＲＥルシフェラーゼ受容体アッセイにおいてＨＳＡなしで測定された場合、２０ｐＭ未満のＥＣ５０で、ヒトＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体をインビトロで活性化する、実施形態３７～４４のいずれかに１つに記載のペプチド。
４６．当該ペプチドのアミノ酸配列が配列番号１０および１４のうちのいずれか１つである、実施形態３７に記載のペプチド。
４７．Ｘ１６がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
４８．Ｘ１７がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
４９．Ｘ２０がＫである、実施形態３７～４５のいずれか１つに記載のペプチド。
５０．実施形態１～２９のいずれか１つに記載の化合物を調製するための方法。
５１．実施形態３７～４９のいずれか１つに記載のペプチドを調製するための方法。
【0148】
方法および実施例
略語リスト
以下の略語は、アルファベット順に、以下で使用される。
Ａｃ：アセチル
Ａｄｏ（ＯＥＧとも呼ばれる）：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸
Ａｉｂ：α－アミノイソ酪酸
ＡＰＩ：医薬品有効成分
ＡＰＩ－ＥＳ：大気圧イオン化－エレクトロスプレー
ＢＨＫ：ベビーハムスター腎臓
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル
ＢＷ：体重
Ｃｌ－ＨＯＢｔ：６－クロロ－１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＰＢＳ：ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ｅｑｕｉｖ：モル当量
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ：９－フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧｃｇＲ：グルカゴン受容体
ＧＩＰ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド
ＧＩＰＲ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ＧＬＰ－１：グルカゴン様ペプチド１
ＧＬＰ－１Ｒグルカゴン様ペプチド－１受容体
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＦＩＰ：１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ｈＧｃｇＲ：ヒトグルカゴン受容体
ｈＧＩＰＲ：ヒトグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ｈＧＬＰ－１Ｒ：ヒトグルカゴン様ペプチド１受容体
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ：ヒト血清アルブミン
ｉＡＵＣ：曲線下ベースライン減算面積
ｉ．ｐ．：腹腔内
ＩＰＧＴＴ：腹腔内糖負荷試験
ｉ．ｖ．：静脈内
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ｍＧＩＰＲ：マウスグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ｍＧＬＰ－１Ｒ：マウスグルカゴン様ペプチド１受容体
ｍＭ：ミリモル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
Ｍｔｔ：４－メチルトリチル
ＭＷ：分子量
ＮＭＰ：１－メチル－ピロリジン－２－オン
ＯＥＧ：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（Ａｄｏとも呼ばれる）
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチルエステル
Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）：シアノ－ヒドロキシイミノ－酢酸エチルエステル
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水
ＰＫ：薬物動態
ｐＭ：ピコモル
ＲＰ：逆相
ｒｐｍ：１分当たりのラウンド数
Ｒｔ：保持時間
ｓ．ｃ．：皮下
ＳＥＭ：標準誤差
ＳＰＰＳ：固相ペプチド合成
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：トリフェニルメチルまたはトリチル
Ｔｒｘ：トラネキサム酸
略語リスト
以下の略語は、アルファベット順に、以下で使用される。
Ａｃ：アセチル
Ａｄｏ（ＯＥＧとも呼ばれる）：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸
Ａｉｂ：α－アミノイソ酪酸
ＡＰＩ：医薬品有効成分
ＡＰＩ－ＥＳ：大気圧イオン化－エレクトロスプレー
ＢＨＫ：ベビーハムスター腎臓
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル
ＢＷ：体重
Ｃｌ－ＨＯＢｔ：６－クロロ－１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＤＣＭ：ジクロロメタン
ＤＩＣ：ジイソプロピルカルボジイミド
ＤＩＰＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＥＭ：ダルベッコ改変イーグル培地
ＤＰＢＳ：ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＥＬＩＳＡ：酵素結合免疫吸着アッセイ
ｅｑｕｉｖ：モル当量
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
Ｆｍｏｃ：９－フルオレニルメチルオキシカルボニル
ＧｃｇＲ：グルカゴン受容体
ＧＩＰ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド
ＧＩＰＲ：グルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ＧＬＰ－１：グルカゴン様ペプチド１
ＧＬＰ－１Ｒグルカゴン様ペプチド－１受容体
ｈ：時間
ＨＥＰＥＳ：４－（２－ヒドロキシエチル）－１－ピペラジンエタンスルホン酸
ＨＦＩＰ：１，１，１，３，３，３－ヘキサフルオロ－２－プロパノールまたはヘキサフルオロイソプロパノール
ｈＧｃｇＲ：ヒトグルカゴン受容体
ｈＧＩＰＲ：ヒトグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ｈＧＬＰ－１Ｒ：ヒトグルカゴン様ペプチド１受容体
ＨＰＬＣ：高速液体クロマトグラフィー
ＨＳＡ：ヒト血清アルブミン
ｉＡＵＣ：曲線下ベースライン減算面積
ｉ．ｐ．：腹腔内
ＩＰＧＴＴ：腹腔内糖負荷試験
ｉ．ｖ．：静脈内
ＬＣＭＳ：液体クロマトグラフィー質量分析
ＭｅＣＮ：アセトニトリル
ｍＧＩＰＲ：マウスグルコース依存性インスリン分泌刺激ポリペプチド受容体
ｍＧＬＰ－１Ｒ：マウスグルカゴン様ペプチド１受容体
ｍＭ：ミリモル
ｍｍｏｌ：ミリモル
ｍｉｎ：分
Ｍｔｔ：４－メチルトリチル
ＭＷ：分子量
ＮＭＰ：１－メチル－ピロリジン－２－オン
ＯＥＧ：８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（Ａｄｏとも呼ばれる）
ＯｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチルエステル
Ｏｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）：シアノ－ヒドロキシイミノ－酢酸エチルエステル
Ｐｂｆ：２，２，４，６，７－ペンタメチルジヒドロベンゾフラン－５－スルホニル
ＰＢＳ：リン酸緩衝生理食塩水
ＰＫ：薬物動態
ｐＭ：ピコモル
ＲＰ：逆相
ｒｐｍ：１分当たりのラウンド数
Ｒｔ：保持時間
ｓ．ｃ．：皮下
ＳＥＭ：標準誤差
ＳＰＰＳ：固相ペプチド合成
ｔＢｕ：ｔｅｒｔ－ブチル
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＩＳ：トリイソプロピルシラン
Ｔｒｔ：トリフェニルメチルまたはトリチル
Ｔｒｘ：トラネキサム酸
【0149】
一般的な調製方法
固相ペプチド合成法（ＳＰＰＳ法、アミノ酸の脱保護法、樹脂からのペプチドの切断法、およびその精製法を含む）、ならびに結果として得られたペプチドの検出法および特徴付け法（ＬＣＭＳ方法）を以下に記載する。
固相ペプチド合成法（ＳＰＰＳ法、アミノ酸の脱保護法、樹脂からのペプチドの切断法、およびその精製法を含む）、ならびに結果として得られたペプチドの検出法および特徴付け法（ＬＣＭＳ方法）を以下に記載する。
【0150】
Ｃ末端ペプチドアミドの調製に用いた樹脂は、Ｈ－Ｒｉｎｋ Ａｍｉｄｅ－ＣｈｅｍＭａｔｒｉｘ樹脂（例えば、０．５ｍｍｏｌ／ｇの負荷量）であった。別段の指定がない限り、使用したＦｍｏｃ保護アミノ酸誘導体は、例えば、ＡＡＰＰＴＥＣ、Ａｎａｓｐｅｃ、Ｂａｃｈｅｍ、ＣｈｅｍＩｍｐｅｘ、Ｉｒｉｓ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｍｉｄｗｅｓｔ Ｂｉｏｔｅｃｈ、Ｇｙｒｏｓ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、またはＮｏｖａｂｉｏｃｈｅｍから供給される、Ｆｍｏｃ－Ａｌａ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｒｇ（Ｐｂｆ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｃｙｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ（ＯｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｙ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｉｌｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｅｕ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｍｅｔ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｈｅ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｐｒｏ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｖａｌ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｌｙｓ（Ｍｔｔ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ａｉｂ－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｄ－Ｔｙｒ－（ｔＢｕ）－ＯＨなどの推奨標準品であった。他に何も指定がない場合、アミノ酸の天然Ｌ型を使用する。Ｎ末端アミノ酸がアセチル化されていなかった場合、Ｂｏｃ基を事前導入した試薬（例えば、Ｎ末端にＴｙｒを有するペプチドの場合、Ｂｏｃ－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－ＯＨ）を使用するか、またはペプチドＮ末端にアミノ酸を導入した後にＮ末端Ｆｍｏｃ保護基をＢｏｃ保護基と交換するかのいずれかを行うことによって、Ｎ末端アミノ酸のアルファ－アミノ基をＢｏｃ保護した。
【0151】
ＳＰＰＳを使用するモジュールアルブミン結合部分付着の場合、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（Ｆｍｏｃ－Ａｄｏ－ＯＨ）、Ｆｍｏｃ－トラネキサム酸（Ｆｍｏｃ－Ｔｒｘ－ＯＨ）、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、ノナデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、エイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、テトラデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、または４－（９－カルボキシノニロキシ）安息香酸ｔｅｒｔ－ブチルエステルなどであるが、これらに限定されない、好適に保護されたビルディングブロックを使用した。以下に記載のすべての操作を０．１～０．２ｍｍｏｌの合成スケール範囲内で行った。
【0152】
１．樹脂に結合した保護ペプチド骨格の合成
方法：ＳＰＰＳ＿Ａ
ＳＰＰＳを、製造業者から支給されたプロトコルに若干の変更を加えて、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学反応を使用して行った。混合を、時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下のステップ：１）ＤＭＦ中で樹脂を事前膨張させるステップ、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して２回の処理（各々１０分）でＦｍｏｃを脱保護するステップ、３）ＤＭＦで洗浄してピペリジンを除去するステップ、４）各々０．６Ｍ ＤＭＦ溶液としてＦｍｏｃ－アミノ酸（１２当量）およびＯｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）（１２当量）を添加し、その後、１．２Ｍ ＤＭＦ溶液としてＤＩＣ（１２当量）を添加し、その後、ＤＭＦを添加して、各々の成分の最終濃度を０．３Ｍに低下させ、その後、０．５～４時間混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸をカップリングするステップ、４）ＤＭＦで洗浄して過剰試薬を除去するステップ、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄するステップを使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間）でカップリングして、反応完了を確実にした。Ｎ末端アミノ酸のα－アミンにアセチル化を有するペプチドの場合、Ｎ末端Ｆｍｏｃ基を、上記のステップ２に記載されるように２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液で処理することによって除去した。その後、ペプチジル樹脂を合成装置から取り出し、１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ＤＩＰＥＡのＤＭＦ溶液で３０～６０分間手動で処理し、その後、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
方法：ＳＰＰＳ＿Ａ
ＳＰＰＳを、製造業者から支給されたプロトコルに若干の変更を加えて、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃに基づく化学反応を使用して行った。混合を、時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下のステップ：１）ＤＭＦ中で樹脂を事前膨張させるステップ、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液を使用して２回の処理（各々１０分）でＦｍｏｃを脱保護するステップ、３）ＤＭＦで洗浄してピペリジンを除去するステップ、４）各々０．６Ｍ ＤＭＦ溶液としてＦｍｏｃ－アミノ酸（１２当量）およびＯｘｙｍａ Ｐｕｒｅ（登録商標）（１２当量）を添加し、その後、１．２Ｍ ＤＭＦ溶液としてＤＩＣ（１２当量）を添加し、その後、ＤＭＦを添加して、各々の成分の最終濃度を０．３Ｍに低下させ、その後、０．５～４時間混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸をカップリングするステップ、４）ＤＭＦで洗浄して過剰試薬を除去するステップ、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄するステップを使用して行った。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を長時間の反応時間（例えば、４時間）でカップリングして、反応完了を確実にした。Ｎ末端アミノ酸のα－アミンにアセチル化を有するペプチドの場合、Ｎ末端Ｆｍｏｃ基を、上記のステップ２に記載されるように２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＤＭＦ溶液で処理することによって除去した。その後、ペプチジル樹脂を合成装置から取り出し、１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ＤＩＰＥＡのＤＭＦ溶液で３０～６０分間手動で処理し、その後、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【0153】
方法：ＳＰＰＳ＿Ｂ
保護ペプチジル樹脂を、製造業者から支給された一般的なＦｍｏｃプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ４３１Ａ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃ戦略に従って合成した。混合を、ボルテックスおよび時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下のステップ：１）１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＣｌ－ＨＯＢｔ（１０当量）中に固体Ｆｍｏｃ－アミノ酸（１０当量）を溶解させ、その後、１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＤＩＣ（１０当量）を添加し、その後、ステップ２～３と同時に混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸を活性化するステップ、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液を使用して１回目の処理（３分）、その後、２回目の処理（１５分）でＦｍｏｃを脱保護するステップ、３）ＮＭＰで洗浄してピペリジンを除去するステップ、４）活性化Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液を樹脂に添加し、その後、４５～９０分間混合するステップ、４）ＮＭＰで洗浄して過剰試薬を除去するステップ、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄するステップを使用して行った。上記の標準保護アミノ酸誘導体は、（例えば、Ｍｉｄｗｅｓｔ Ｂｉｏｔｅｃｈから）事前秤量カートリッジで供給されたものであり、非標準誘導体を手動で秤量した。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を「二重カップリング」して、つまり、最初のカップリング（例えば、４５分）後に樹脂を排出し、さらなる試薬を添加し（Ｆｍｏｃ－アミノ酸、ＤＩＣ、Ｃｌ－ＨＯＢｔ）、混合物を再び反応させる（例えば、４５分間）ことによって、反応完了を確実にした。Ｎ末端アミノ酸のα－アミンにアセチル化を有するペプチドの場合、Ｎ末端Ｆｍｏｃ基を、上記のステップ２に記載されるように２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液で処理することによって除去した。その後、ペプチジル樹脂を合成装置から取り出し、１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ピリジンのＤＭＦ溶液で３０～６０分間手動で処理し、その後、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
保護ペプチジル樹脂を、製造業者から支給された一般的なＦｍｏｃプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ４３１Ａ固相ペプチド合成装置でＦｍｏｃ戦略に従って合成した。混合を、ボルテックスおよび時折の窒素バブリングによって達成した。段階的構築を、以下のステップ：１）１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＣｌ－ＨＯＢｔ（１０当量）中に固体Ｆｍｏｃ－アミノ酸（１０当量）を溶解させ、その後、１Ｍ ＮＭＰ溶液としてＤＩＣ（１０当量）を添加し、その後、ステップ２～３と同時に混合することによってＦｍｏｃ－アミノ酸を活性化するステップ、２）２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液を使用して１回目の処理（３分）、その後、２回目の処理（１５分）でＦｍｏｃを脱保護するステップ、３）ＮＭＰで洗浄してピペリジンを除去するステップ、４）活性化Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液を樹脂に添加し、その後、４５～９０分間混合するステップ、４）ＮＭＰで洗浄して過剰試薬を除去するステップ、５）構築完了時にＤＣＭで最終洗浄するステップを使用して行った。上記の標準保護アミノ酸誘導体は、（例えば、Ｍｉｄｗｅｓｔ Ｂｉｏｔｅｃｈから）事前秤量カートリッジで供給されたものであり、非標準誘導体を手動で秤量した。立体障害アミノ酸（例えば、Ａｉｂ）に続くアミノ酸などであるが、これらに限定されないいくつかのアミノ酸を「二重カップリング」して、つまり、最初のカップリング（例えば、４５分）後に樹脂を排出し、さらなる試薬を添加し（Ｆｍｏｃ－アミノ酸、ＤＩＣ、Ｃｌ－ＨＯＢｔ）、混合物を再び反応させる（例えば、４５分間）ことによって、反応完了を確実にした。Ｎ末端アミノ酸のα－アミンにアセチル化を有するペプチドの場合、Ｎ末端Ｆｍｏｃ基を、上記のステップ２に記載されるように２０％（ｖ／ｖ）ピペリジンのＮＭＰ溶液で処理することによって除去した。その後、ペプチジル樹脂を合成装置から取り出し、１０％（ｖ／ｖ）無水酢酸／１０％（ｖ／ｖ）ピリジンのＤＭＦ溶液で３０～６０分間手動で処理し、その後、ＤＭＦおよびＤＣＭで洗浄した。
【0154】
２．樹脂結合保護ペプチド骨格への置換基の結合
方法：ＳＣ＿Ａ
Ｎ－イプシロン－リジン保護Ｍｔｔ保護基を、２回の処理（各々４５分）で樹脂を３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄し、その後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することによって除去した。アシル化を、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ－トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、およびエイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的添加を使用して、方法ＳＰＰＳ＿Ａに記載のプロトコルを使用して、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置で行った。
方法：ＳＣ＿Ａ
Ｎ－イプシロン－リジン保護Ｍｔｔ保護基を、２回の処理（各々４５分）で樹脂を３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄し、その後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することによって除去した。アシル化を、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ－トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、およびエイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的添加を使用して、方法ＳＰＰＳ＿Ａに記載のプロトコルを使用して、Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ＳｙｍｐｈｏｎｙＸ固相ペプチド合成装置で行った。
【0155】
方法：ＳＣ＿Ｂ
Ｎ－イプシロン－リジン保護Ｍｔｔ保護基を、２回の処理（各々４５分）で樹脂を３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄し、その後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することによって除去した。アシル化を、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ－トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、およびエイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的添加を使用して、方法ＳＰＰＳ＿Ｂに記載のプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ４３１Ａ固相ペプチド合成装置で行った。
Ｎ－イプシロン－リジン保護Ｍｔｔ保護基を、２回の処理（各々４５分）で樹脂を３０％ＨＦＩＰのＤＣＭ溶液で洗浄し、その後、ＤＣＭおよびＤＭＦで洗浄することによって除去した。アシル化を、Ｂｏｃ－Ｌｙｓ（Ｆｍｏｃ）－ＯＨ、Ｆｍｏｃ－８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸、Ｆｍｏｃ－トラネキサム酸、Ｆｍｏｃ－Ｇｌｕ－ＯｔＢｕ、オクタデカン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステル、およびエイコサン二酸モノ－ｔｅｒｔ－ブチルエステルなどであるが、これらに限定されないビルディングブロックの段階的添加を使用して、方法ＳＰＰＳ＿Ｂに記載のプロトコルを使用して、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ４３１Ａ固相ペプチド合成装置で行った。
【0156】
３．樹脂結合ペプチドの切断および精製：
方法：ＣＰ＿Ａ
側鎖合成完了後、ペプチジル樹脂をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ））でおよそ２時間処理し、その後、ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、好適な溶媒（例えば、２：１の水／ＭｅＣＮ）中に溶解させ、すべての不安定付加物が分解するまで放置した。精製を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ８（２）カラム（粒径１０μＭ、孔径１００Å、寸法２５０×２１．２ｍｍ）を用いて逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２５４５バイナリグラジエントモジュール、Ｗａｔｅｒｓ２４８９ ＵＶ／可視検出器、ＷａｔｅｒｓフラクションコレクターＩＩＩ）によって行った。不純物の分離および生成物の溶出を、０．１％ＴＦＡ含有水溶液中のＭｅＣＮのグラジエントを増加させることによって達成した。関連する分画を分析ＬＣＭＳによって同一性および純度について調べた。純粋な所望のペプチドを含む分画をプールし、凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドＴＦＡ塩を得た。
方法：ＣＰ＿Ａ
側鎖合成完了後、ペプチジル樹脂をＤＣＭで洗浄し、乾燥させ、その後、ＴＦＡ／水／ＴＩＳ（９５：２．５：２．５（ｖ／ｖ／ｖ））でおよそ２時間処理し、その後、ジエチルエーテルで沈殿させた。沈殿物をジエチルエーテルで洗浄し、好適な溶媒（例えば、２：１の水／ＭｅＣＮ）中に溶解させ、すべての不安定付加物が分解するまで放置した。精製を、Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ Ｃ８（２）カラム（粒径１０μＭ、孔径１００Å、寸法２５０×２１．２ｍｍ）を用いて逆相分取ＨＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ２５４５バイナリグラジエントモジュール、Ｗａｔｅｒｓ２４８９ ＵＶ／可視検出器、ＷａｔｅｒｓフラクションコレクターＩＩＩ）によって行った。不純物の分離および生成物の溶出を、０．１％ＴＦＡ含有水溶液中のＭｅＣＮのグラジエントを増加させることによって達成した。関連する分画を分析ＬＣＭＳによって同一性および純度について調べた。純粋な所望のペプチドを含む分画をプールし、凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドＴＦＡ塩を得た。
【0157】
４．ＴＦＡからナトリウム塩への塩交換：
方法：ＳＸ＿Ａ
方法ＣＰ＿Ａから単離した凍結乾燥ペプチドを、適切な水性緩衝液（例えば、４：１の水／ＭｅＣＮ、０．２Ｍ酢酸ナトリウム）中に溶解させて５～２０ｍｇ／ｍＬにし、必要に応じて１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ７～８に調整して、完全に溶解させた。ペプチドを含有する緩衝溶液を、Ｓｅｐ－Ｐａｋ Ｃ１８カートリッジ（０．５～２ｇ）を使用して塩交換した。カートリッジを最初に４カラム体積のイソプロパノール、その後、４カラム体積のＭｅＣＮ、その後、８カラム体積の水で平衡化した。ペプチド溶液をカートリッジに適用し、通過画分を再適用して、ペプチドの完全保持を確実にした。カートリッジを４カラム体積の水、その後、ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＡｃ、またはＮａ２ＨＰＯ４などを含むが、これらに限定されない１０カラム体積の緩衝溶液（例えば、ｐＨ７．５）で洗浄した。カラムを４カラム体積の水で洗浄し、ペプチドを５～２０カラム体積の５０～８０％ＭｅＣＮ水溶液で溶出した。ペプチドを含む溶離液を凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドナトリウム塩を得て、これをそのまま使用した。
方法：ＳＸ＿Ａ
方法ＣＰ＿Ａから単離した凍結乾燥ペプチドを、適切な水性緩衝液（例えば、４：１の水／ＭｅＣＮ、０．２Ｍ酢酸ナトリウム）中に溶解させて５～２０ｍｇ／ｍＬにし、必要に応じて１Ｍ ＮａＯＨでｐＨ７～８に調整して、完全に溶解させた。ペプチドを含有する緩衝溶液を、Ｓｅｐ－Ｐａｋ Ｃ１８カートリッジ（０．５～２ｇ）を使用して塩交換した。カートリッジを最初に４カラム体積のイソプロパノール、その後、４カラム体積のＭｅＣＮ、その後、８カラム体積の水で平衡化した。ペプチド溶液をカートリッジに適用し、通過画分を再適用して、ペプチドの完全保持を確実にした。カートリッジを４カラム体積の水、その後、ＮａＨＣＯ３、ＮａＯＡｃ、またはＮａ２ＨＰＯ４などを含むが、これらに限定されない１０カラム体積の緩衝溶液（例えば、ｐＨ７．５）で洗浄した。カラムを４カラム体積の水で洗浄し、ペプチドを５～２０カラム体積の５０～８０％ＭｅＣＮ水溶液で溶出した。ペプチドを含む溶離液を凍結乾燥させて、白色の固体としてペプチドナトリウム塩を得て、これをそのまま使用した。
【0158】
一般的な検出法および特徴付け法
ＬＣＭＳ法：
方法：ＬＣＭＳ＿Ａ
ＬＣＭＳ＿Ａを、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍおよびＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ６１２０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＭＳから成る装置で行った。溶離液：Ａ：０．０５％ＴＦＡ水溶液、Ｂ：０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液。
ＬＣＭＳ法：
方法：ＬＣＭＳ＿Ａ
ＬＣＭＳ＿Ａを、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍおよびＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ６１２０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＭＳから成る装置で行った。溶離液：Ａ：０．０５％ＴＦＡ水溶液、Ｂ：０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液。
【0159】
分析を、ＡおよびＢのグラジエントで溶出した適切な体積の試料をカラムに注入することによって室温（カラム温度３７Ｃ）で行った。カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ８、２．６μｍ、１００Å、４．６×７５ｍｍ。グラジエント実行時間：１．０ｍＬ／分の流量で１０分かけて線形１０～８０％Ｂ。検出：２１４ｎｍに設定したダイオードアレイ検出器。ＭＳイオン化モード：ＡＰＩ－ＥＳ、正極性。ＭＳスキャン質量範囲：５００～２０００ａｍｕ。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
【0160】
方法：ＬＣＭＳ＿Ｂ
ＬＣＭＳ＿Ｂを、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍおよびＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ６１２０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＭＳから成る装置で行った。溶離液：Ａ：０．０５％ＴＦＡ水溶液、Ｂ：０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液。
ＬＣＭＳ＿Ｂを、Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ Ｉｎｆｉｎｉｔｙ ｓｅｒｉｅｓ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍおよびＡｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ６１２０ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ ＭＳから成る装置で行った。溶離液：Ａ：０．０５％ＴＦＡ水溶液、Ｂ：０．０５％ＴＦＡの９：１ ＭｅＣＮ／水溶液。
【0161】
分析を、ＡおよびＢのグラジエントで溶出した適切な体積の試料をカラムに注入することによって室温（カラム温度３７Ｃ）で行った。カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｃ８、２．６μｍ、１００Å、４．６×７５ｍｍ。グラジエント実行時間：１．０ｍＬ／分の流量で１０分かけて線形２０～１００％Ｂ。検出：２１４ｎｍに設定したダイオードアレイ検出器。ＭＳイオン化モード：ＡＰＩ－ＥＳ、正極性。ＭＳスキャン質量範囲：５００～２０００ａｍｕ。各々のｍ／ｚの最も豊富な同位体が報告される。
【0162】
実施例１：化合物の合成
化合物は、Ａｉｂを除いて一文字アミノ酸コードを使用して記載した以下のものである。置換基を、それが結合しているリジン（Ｋ）残基の後に含める。
化合物は、Ａｉｂを除いて一文字アミノ酸コードを使用して記載した以下のものである。置換基を、それが結合しているリジン（Ｋ）残基の後に含める。
【0163】
化合物番号１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［ヘキサデカノイル］－ＮＨ２
Ｋ４０位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１。
置換基：Ｃ１６モノ酸、別名、ヘキサデカノイル
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４７３．０Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１４９１．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１１９．１
化合物番号２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［１７－カルボキシヘプタデカノイル］－ＮＨ２
Ｋ４０位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１。
置換基：Ｃ１８二酸、別名、１７－カルボキシヘプタデカノイル
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５３１．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１３３．６
化合物番号３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＮＨ２
Ｋ４０位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９５０．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２３８．３
化合物番号４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号２。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８２２．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０８．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．５
化合物番号５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号３。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８２１．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０７．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．１
化合物番号６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧ－ＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号３。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－γＧｌｕ－γＧｌｕ（Ｇ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７８９．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５９７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１９８．２
化合物番号７
Ａｃ－（Ｄ－Ｔｙｒ）－ＡＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号４。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８４９．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１３．１
化合物番号８
Ａｃ－（Ｄ－Ｔｙｒ）－ＡＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号４。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１５．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．６
化合物番号９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号３。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７８７．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５９６．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１９７．６
化合物番号１０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＮＨ２
Ｋ４０位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９１６．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３９．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２９．９
化合物番号１１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＩＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号５。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７９９．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６００．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２００．８
化合物番号１２
Ｈ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号６。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６９７．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５６６．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１７５．２
化合物番号１３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号３。
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１５．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．７
化合物番号１４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号３。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９５４．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２３９．５
化合物番号１５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号７。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８０１．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０１．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０１．１
化合物番号１６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号７。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６８．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．１
化合物番号１７
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号７。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００２．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．５
化合物番号１８
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号８。
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４２３．０Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１４７５．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１０６．６
化合物番号１９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号９。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．０
化合物番号２０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１６位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１０。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．３
化合物番号２１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１６位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１０。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．６
化合物番号２２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１１。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．８
化合物番号２３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１１。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．３
化合物番号２４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１２。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５０４０．８Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６８０．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２６１．０
化合物番号２５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号９。
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．７
化合物番号２６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号９。
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．０
化合物番号２７
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号９。
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．４
化合物番号２８
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１６位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１０。
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１０．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０８．６
化合物番号２９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１６位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１０。
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１６．８
化合物番号３０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１１
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．１
化合物番号３１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１１
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０８．７
化合物番号３２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
Ｋ２１位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号８
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６２４．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５４２．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１５６．９
化合物番号３３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
Ｋ１６位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１３
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６６３．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．４分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５５５．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１６６．８
化合物番号３４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１４
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５０４１．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６８１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２６１．３
化合物番号３５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
Ｋ１７位に置換基を有し、かつＣ末端アミド修飾を有する配列番号１４
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９０２．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３４．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２６．６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［ヘキサデカノイル］－ＮＨ２
【化9】
置換基：Ｃ１６モノ酸、別名、ヘキサデカノイル
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４７３．０Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１４９１．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１１９．１
化合物番号２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［１７－カルボキシヘプタデカノイル］－ＮＨ２
【化10】
置換基：Ｃ１８二酸、別名、１７－カルボキシヘプタデカノイル
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４５３１．１Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１３３．６
化合物番号３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＮＨ２
【化11】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９５０．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２３８．３
化合物番号４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化12】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８２２．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．１分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０８．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．５
化合物番号５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化13】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８２１．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０７．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．１
化合物番号６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ブタノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧ－ＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化14】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－γＧｌｕ－γＧｌｕ（Ｇ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７８９．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５９７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１９８．２
化合物番号７
Ａｃ－（Ｄ－Ｔｙｒ）－ＡＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化15】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ａ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８４９．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１３．１
化合物番号８
Ａｃ－（Ｄ－Ｔｙｒ）－ＡＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化16】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１５．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．６
化合物番号９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化17】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７８７．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５９６．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１９７．６
化合物番号１０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＮＨ２
【化18】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９１６．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３９．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２９．９
化合物番号１１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＩＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化19】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４７９９．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６００．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２００．８
化合物番号１２
Ｈ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＶＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化20】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６９７．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５６６．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１７５．２
化合物番号１３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化21】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８１５．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０５．８、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０４．７
化合物番号１４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＤＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化22】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ｂ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９５４．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２３９．５
化合物番号１５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化23】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８０１．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６０１．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０１．１
化合物番号１６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化24】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６８．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝８．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．１
化合物番号１７
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化25】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００２．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．５
化合物番号１８
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１７－カルボキシヘプタデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
【化26】
置換基：Ｃ１８二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｂ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４４２３．０Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ａ：保持時間＝７．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１４７５．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１０６．６
化合物番号１９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化27】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．８分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．０
化合物番号２０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化28】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．３
化合物番号２１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化29】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．６
化合物番号２２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化30】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．５分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．７、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．８
化合物番号２３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化31】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９６９．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６５７．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２４３．３
化合物番号２４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化32】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５０４０．８Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６８０．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２６１．０
化合物番号２５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化33】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５００３．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６６８．６、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２５１．７
化合物番号２６
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化34】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．９分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．０
化合物番号２７
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＥＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化35】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．７分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０６．４
化合物番号２８
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化36】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１０．５、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０８．６
化合物番号２９
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化37】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．４Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝７．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．３、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１６．８
化合物番号３０
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化38】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｃ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８６４．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６２２．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２１７．１
化合物番号３１
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化39】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ａ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４８３０．５Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．０分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６１１．０、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２０８．７
化合物番号３２
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫＱＡＡ－Ａｉｂ－Ｋ［２－［２－［２－［［２－［２－［２－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］アミノ］エトキシ］エトキシ］アセチル］－ＦＶＮＷＬＬＡＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
【化40】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－Ａｄｏ－Ａｄｏ（Ｅ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６２４．２Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．６分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５４２．２、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１５６．９
化合物番号３３
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＱＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡ－ＮＨ２
【化41】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：４６６３．３Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．４分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１５５５．１、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１１６６．８
化合物番号３４
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－［［４－［（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）メチル］シクロヘキサンカルボニル］アミノ］ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化42】
置換基：Ｃ２０二酸－Ｔｒｘ－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｆ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ
計算分子量（平均）：５０４１．７Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．３分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６８１．４、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２６１．３
化合物番号３５
Ｙ－Ａｉｂ－ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＥＫ－Ｋ［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（２Ｓ）－２－アミノ－６－［［（４Ｓ）－４－カルボキシ－４－（１９－カルボキシノナデカノイルアミノ）ブタノイル］アミノ］ヘキサノイル］アミノ］ヘキサノイル］－ＡＡ－Ａｉｂ－ＥＦＶＱＷＬＬＥＧＧＰＳＳＧＡＰＰＰＳ－ＮＨ２
【化43】
置換基：Ｃ２０二酸－γＧｌｕ－εＬｙｓ－εＬｙｓ（Ｄ）
合成法：ＳＰＰＳ＿Ａ、ＳＣ＿Ｂ、ＣＰ＿Ａ、ＳＸ＿Ａ
計算分子量（平均）：４９０２．６Ｄａ
ＬＣＭＳ＿Ｂ：保持時間＝６．２分、実測値［Ｍ＋３Ｈ］３＋１６３４．９、［Ｍ＋４Ｈ］４＋１２２６．６
【0164】
実施例２：インビトロ機能的効力（ＣＲＥルシフェラーゼ、全細胞）
この実施例の目的は、ヒトおよびマウスＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体、ならびにヒトグルカゴン受容体における本化合物の機能的活性または効力をインビトロで試験することである。インビトロ機能的効力は、全細胞アッセイにおける標的受容体活性化の尺度である。実施例１の誘導体の効力を以下に記載するように決定した。ヒトＧＬＰ－１（７－３７）（マウスＧＬＰ－１（７－３７）と同一）、ヒトＧＩＰ、マウスＧＩＰ、およびヒトグルカゴンを、比較のために適切なアッセイに含めた。
この実施例の目的は、ヒトおよびマウスＧＬＰ－１受容体およびＧＩＰ受容体、ならびにヒトグルカゴン受容体における本化合物の機能的活性または効力をインビトロで試験することである。インビトロ機能的効力は、全細胞アッセイにおける標的受容体活性化の尺度である。実施例１の誘導体の効力を以下に記載するように決定した。ヒトＧＬＰ－１（７－３７）（マウスＧＬＰ－１（７－３７）と同一）、ヒトＧＩＰ、マウスＧＩＰ、およびヒトグルカゴンを、比較のために適切なアッセイに含めた。
【0165】
原理
インビトロ機能的効力を、個別の細胞株におけるレポーター遺伝子アッセイにおいて標的受容体の応答を測定することによって決定した。このアッセイは、以下のＧタンパク質共役受容体：ヒトＧＬＰ－１受容体、ヒトＧＩＰ受容体、マウスＧＬＰ－１受容体、マウスＧＩＰ受容体、またはヒトグルカゴン受容体のうちの１つを発現し、かつ各々の細胞株がプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株で行った。それぞれの受容体が活性化されると、ｃＡＭＰが生成され、次いで、ルシフェラーゼタンパク質の発現がもたらされる。アッセイインキュベーションが完了した時点で、ルシフェラーゼ基質（ルシフェリン）を添加し、ルシフェリンのオキシルシフェリンへの酵素変換を引き起こし、生物発光を生じさせる。発光を本アッセイの読み取り値として測定する。
インビトロ機能的効力を、個別の細胞株におけるレポーター遺伝子アッセイにおいて標的受容体の応答を測定することによって決定した。このアッセイは、以下のＧタンパク質共役受容体：ヒトＧＬＰ－１受容体、ヒトＧＩＰ受容体、マウスＧＬＰ－１受容体、マウスＧＩＰ受容体、またはヒトグルカゴン受容体のうちの１つを発現し、かつ各々の細胞株がプロモーターに結合したｃＡＭＰ応答配列（ＣＲＥ）のＤＮＡおよびホタルルシフェラーゼ（ＣＲＥルシフェラーゼ）の遺伝子を含む安定にトランスフェクトされたＢＨＫ細胞株で行った。それぞれの受容体が活性化されると、ｃＡＭＰが生成され、次いで、ルシフェラーゼタンパク質の発現がもたらされる。アッセイインキュベーションが完了した時点で、ルシフェラーゼ基質（ルシフェリン）を添加し、ルシフェリンのオキシルシフェリンへの酵素変換を引き起こし、生物発光を生じさせる。発光を本アッセイの読み取り値として測定する。
【0166】
細胞培養および調製
これらのアッセイで使用した細胞株は、親細胞株としてＢＨＫＴＳ１３を有するＢＨＫ細胞であった。これらの細胞を、ＣＲＥルシフェラーゼ要素を含むクローンから得て、さらにそれぞれの受容体をトランスフェクトすることによって確立して、関連細胞株を得た。以下の細胞株を使用した：
細胞を、細胞培養培地中、３７℃／５％ＣＯ２で培養した。これらをアリコートし、液体窒素中に保存した。これらの細胞を連続培養し、各アッセイの前日に播種した。
これらのアッセイで使用した細胞株は、親細胞株としてＢＨＫＴＳ１３を有するＢＨＫ細胞であった。これらの細胞を、ＣＲＥルシフェラーゼ要素を含むクローンから得て、さらにそれぞれの受容体をトランスフェクトすることによって確立して、関連細胞株を得た。以下の細胞株を使用した：
【表5】
【0167】
材料
以下の化学物質をアッセイで使用した：Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８ １０％（Ｇｉｂｃｏ２４０４）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、Ｓｉｇｍａ Ａ９５１１）、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１６１４０－０７１）、ニワトリ卵白オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ Ａ５５０３）、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ２１０６３－０２９）、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ１２４３０－０５４）、１Ｍ Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ１５６３０）、Ｇｌｕｔａｍａｘ１００ｘ（Ｇｉｂｃｏ３５０５０）、Ｇ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１０１３１－０２７）、ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１０６８７－０１０）、およびｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ６０１６７５７）。
以下の化学物質をアッセイで使用した：Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８ １０％（Ｇｉｂｃｏ２４０４）、ヒト血清アルブミン（ＨＳＡ、Ｓｉｇｍａ Ａ９５１１）、１０％ウシ胎児血清（ＦＢＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１６１４０－０７１）、ニワトリ卵白オボアルブミン（Ｓｉｇｍａ Ａ５５０３）、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ２１０６３－０２９）、ＤＭＥＭ（Ｇｉｂｃｏ１２４３０－０５４）、１Ｍ Ｈｅｐｅｓ（Ｇｉｂｃｏ１５６３０）、Ｇｌｕｔａｍａｘ１００ｘ（Ｇｉｂｃｏ３５０５０）、Ｇ４１８（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１０１３１－０２７）、ハイグロマイシン（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ１０６８７－０１０）、およびｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ６０１６７５７）。
【0168】
緩衝液
ＧＬＰ－１ＲおよびＧｃｇＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、５００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。ＧＩＰＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、４００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。アッセイ緩衝液は、最終アッセイ濃度の２倍のＨＳＡを添加した、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１ｘ Ｇｌｕｔａｍａｘ、１％オボアルブミン、および０．１％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８から成った。アッセイ培地を、アッセイ緩衝液中、等体積の試験化合物と１：１で混合して、ＨＳＡの最終アッセイ濃度を得た。
ＧＬＰ－１ＲおよびＧｃｇＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、５００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。ＧＩＰＲ細胞培養培地は、１０％ＦＢＳ、４００μｇ／ｍＬのＧ４１８、および３００μｇ／ｍＬのハイグロマイシンを含むＤＭＥＭ培地から成った。アッセイ緩衝液は、最終アッセイ濃度の２倍のＨＳＡを添加した、フェノールレッドフリーＤＭＥＭ、１０ｍＭのＨｅｐｅｓ、１ｘ Ｇｌｕｔａｍａｘ、１％オボアルブミン、および０．１％Ｐｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ－６８から成った。アッセイ培地を、アッセイ緩衝液中、等体積の試験化合物と１：１で混合して、ＨＳＡの最終アッセイ濃度を得た。
【0169】
手順
１）細胞を５０００細胞／ウェルでプレーティングし、アッセイプレート中で一晩インキュベートした。
２）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
３）１００～３００μＭの範囲の濃度の試験化合物のストックおよび参照化合物のストックをアッセイ緩衝液中で１：１５０に希釈した。その後、化合物を９６ディープウェル希釈プレートの列１で１：１０に希釈し、その後、その行に移して、３．５倍、１２点希釈曲線を作成した。
４）ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ培地（５０μｌアリコート）をアッセイプレートの各ウェルに添加した。
５）化合物またはブランクの５０μｌアリコートを、希釈プレートから、ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ緩衝液を含むアッセイプレートに移した。
６）アッセイプレートを、５％ＣＯ２のインキュベーター内で、３７℃で３時間インキュベートした。
７）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
８）ＤＰＢＳの１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
９）ｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ試薬（感光性）の１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
１０）各アッセイプレートをアルミホイルで覆って遮光し、室温で３０分間にわたって２５０ＲＰＭで振盪した。
１１）各アッセイプレートをマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。
１）細胞を５０００細胞／ウェルでプレーティングし、アッセイプレート中で一晩インキュベートした。
２）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
３）１００～３００μＭの範囲の濃度の試験化合物のストックおよび参照化合物のストックをアッセイ緩衝液中で１：１５０に希釈した。その後、化合物を９６ディープウェル希釈プレートの列１で１：１０に希釈し、その後、その行に移して、３．５倍、１２点希釈曲線を作成した。
４）ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ培地（５０μｌアリコート）をアッセイプレートの各ウェルに添加した。
５）化合物またはブランクの５０μｌアリコートを、希釈プレートから、ＨＳＡを含むまたは含まないアッセイ緩衝液を含むアッセイプレートに移した。
６）アッセイプレートを、５％ＣＯ２のインキュベーター内で、３７℃で３時間インキュベートした。
７）細胞をＤＰＢＳで１回洗浄した。
８）ＤＰＢＳの１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
９）ｓｔｅａｄｙｌｉｔｅ ｐｌｕｓ試薬（感光性）の１００μｌアリコートをアッセイプレートの各ウェルに添加した。
１０）各アッセイプレートをアルミホイルで覆って遮光し、室温で３０分間にわたって２５０ＲＰＭで振盪した。
１１）各アッセイプレートをマイクロタイタープレートリーダーで読み取った。
【0170】
計算および結果
マイクロタイタープレートリーダーからのデータを最初にＥｘｃｅｌで回帰分析して、ｘ軸（対数スケール濃度）を個々の試験化合物のストック濃度および本アッセイの希釈に基づいて計算した。その後、このデータをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアに転送してグラフを作成し、統計分析を行った。このソフトウェアは非線形回帰を実行する（対数（作動薬）対応答）。このソフトウェアを用いて計算し、ｐＭ単位で報告したＥＣ５０を以下の表１および表２に示す。１試料当たり最低２つの複製を測定した。報告値は複製の平均値である。
表１：０％ＨＳＡおよび１％ＨＳＡの存在下でのヒトＧＬＰ－１ＲおよびＧＩＰＲにおける機能的効力。
表２：血漿タンパク質の不在下でのマウスＧＬＰ－１ＲおよびＧＩＰＲにおける機能的効力。
マイクロタイタープレートリーダーからのデータを最初にＥｘｃｅｌで回帰分析して、ｘ軸（対数スケール濃度）を個々の試験化合物のストック濃度および本アッセイの希釈に基づいて計算した。その後、このデータをＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍソフトウェアに転送してグラフを作成し、統計分析を行った。このソフトウェアは非線形回帰を実行する（対数（作動薬）対応答）。このソフトウェアを用いて計算し、ｐＭ単位で報告したＥＣ５０を以下の表１および表２に示す。１試料当たり最低２つの複製を測定した。報告値は複製の平均値である。
表１：０％ＨＳＡおよび１％ＨＳＡの存在下でのヒトＧＬＰ－１ＲおよびＧＩＰＲにおける機能的効力。
【表6】
【表7】
【0171】
本発明の化合物は、所与の条件下で、ヒトＧＬＰ－１Ｒ、ヒトＧＩＰＲ、マウスＧＬＰ－１Ｒ、およびマウスＧＩＰ受容体の強力な機能的活性化を呈する。マウス特異的受容体とヒト特異的受容体との間の効力の維持を可能にする改変は、マウスからヒトへのインビボ結果の翻訳により信頼性を与える。さらに、本化合物は、以下の表３に示すように、ヒトグルカゴン受容体の測定可能な機能的活性化を最小限にしか呈さないか、または全く呈さない。
表３：血漿タンパク質の不在下でのヒトグルカゴン受容体における効力。
表３：血漿タンパク質の不在下でのヒトグルカゴン受容体における効力。
【表8】
【0172】
本発明の化合物は、ヒトグルカゴン受容体の測定可能な機能的活性化を最小限にしか呈しないか、または全く呈さず、それ故に、ＧＬＰ－１ＲとＧＩＰＲの選択的共作動薬が提供される。
【0173】
実施例３：ミニブタにおける薬物動態研究
この実施例の目的は、ミニブタへの静脈内投与後の本発明の誘導体のインビボでの半減期、すなわち、体内でのそれらの時間の延長、ひいてはそれらの作用時間の延長を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の誘導体の終末相半減期を決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
この実施例の目的は、ミニブタへの静脈内投与後の本発明の誘導体のインビボでの半減期、すなわち、体内でのそれらの時間の延長、ひいてはそれらの作用時間の延長を決定することである。これを薬物動態（ＰＫ）研究で行い、問題の誘導体の終末相半減期を決定する。終末相半減期とは、概して、初期分布相の後に測定されるある特定の血漿濃度を半減するのにかかる期間を意味する。
【0174】
研究
雌ＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタをＥｌｌｅｇａａｒｄ Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ Ｍｉｎｉｐｉｇｓ（Ｄａｌｍｏｓｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）から入手し、およそ７～１４ヶ月齢であり、かつ体重およそ１６～３５ｋｇのミニブタを本研究で使用した。ミニブタを個別に収容し、ＳＤＳミニブタ食餌（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｄｉｅｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｅｓｓｅｘ，ＵＫ）を制限された状態で１日１回与えた。
雌ＧｏｔｔｉｎｇｅｎミニブタをＥｌｌｅｇａａｒｄ Ｇｏｔｔｉｎｇｅｎ Ｍｉｎｉｐｉｇｓ（Ｄａｌｍｏｓｅ、Ｄｅｎｍａｒｋ）から入手し、およそ７～１４ヶ月齢であり、かつ体重およそ１６～３５ｋｇのミニブタを本研究で使用した。ミニブタを個別に収容し、ＳＤＳミニブタ食餌（Ｓｐｅｃｉａｌ Ｄｉｅｔｓ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ、Ｅｓｓｅｘ，ＵＫ）を制限された状態で１日１回与えた。
【0175】
３週間順応させた後、２つの永久中心静脈カテーテルを各ミニブタの大静脈尾に埋め込んだ。ミニブタを外科処置後１週間回復させ、その後、誘導体連続投与の間に好適なウォッシュアウト期間を伴う反復薬物動態研究に使用した。
【0176】
ミニブタを、投薬前およそ１８時間および投薬後０～４時間絶食させたが、全期間中、水に自由にアクセスさせた。
【0177】
実施例１の化合物のナトリウム塩を、０．０２５％ポリソルベート２０、１０ｍＭリン酸ナトリウム、２５０ｍＭグリセロールを含む緩衝液（ｐＨ７．４）中で、２０～４０ｎｍｏｌ／ｍＬの濃度に溶解させた。化合物の静脈内注射（通常１．５～２ｎｍｏｌ／ｋｇに対応する体積、例えば、０．１ｍＬ／ｋｇ）を一方のカテーテルを通して与え、血液試料を投与後１４日までの所定の時点で（好ましくは他方のカテーテルを通して）採取した。血液試料（例えば、０．８ｍＬ）を８ｍＭ ＥＤＴＡ緩衝液中に採取し、その後、４℃および１９４２ｇで１０分間遠心分離した。
【0178】
サンプリングおよび分析
血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブ中にピペットで移し、ＥＬＩＳＡまたは類似の抗体ベースのアッセイまたはＬＣＭＳを使用して化合物の血漿濃度について分析するまで－２０℃で保持した。個々の血漿濃度－時間プロファイルを、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｖｅｒ．６．４．（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて分析し、結果として得られた終末相半減期（調和平均）を決定した。
血漿をドライアイス上のＭｉｃｒｏｎｉｃチューブ中にピペットで移し、ＥＬＩＳＡまたは類似の抗体ベースのアッセイまたはＬＣＭＳを使用して化合物の血漿濃度について分析するまで－２０℃で保持した。個々の血漿濃度－時間プロファイルを、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎＬｉｎ ｖｅｒ．６．４．（Ｐｈａｒｓｉｇｈｔ Ｉｎｃ．、Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて分析し、結果として得られた終末相半減期（調和平均）を決定した。
【0179】
結果
表４：ミニブタへの静脈内投与後に測定した終末相半減期
本発明の試験した化合物は、ヒトで測定されたｈＧＬＰ－１およびｈＧＩＰの半減期と比較して非常に長い半減期を有し、それぞれ、およそ２～４分および５～７分である（Ｍｅｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｄｉａｂｅｔｅｓ，２００４，５３（３）：６５４－６６２）。ミニブタで測定された半減期は、液体注射による少なくとも週１回の投与で十分であるヒトにおける半減期を予測する。
表４：ミニブタへの静脈内投与後に測定した終末相半減期
【表9】
【0180】
実施例４：食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける薬力学的研究研究
この実施例の目的は、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける薬力学的パラメータに対する選択化合物のインビボ効果を評価することである。マウスを皮下注射により試験化合物の液体製剤で１日１回処理して、体重、足摂取量、および耐糖能に対する効果を評価した。比較のために、公知のＧＬＰ－１Ｒ／ＧＩＰＲ共作動薬チルゼパチドおよびＧＬＰ－１Ｒ作動薬セマグルチドの代替物を参照として使用した。セマグルチド代替物は、セマグルチドと同じ薬理学的特性を有するが、置換基のγＧｌｕ元素がＬ異性体からＤ異性体に変化したわずかに修飾された構造を有する。セマグルチド代替物およびチルゼパチドを、当該技術分野で公知の方法を使用して、例えば、上記の実施例１の方法、ＷＯ２００６／０９７５３７の実施例４の方法、またはＷＯ２０１６／１１１９７１の実施例１の方法に記載されるように合成した。
この実施例の目的は、食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）マウスにおける薬力学的パラメータに対する選択化合物のインビボ効果を評価することである。マウスを皮下注射により試験化合物の液体製剤で１日１回処理して、体重、足摂取量、および耐糖能に対する効果を評価した。比較のために、公知のＧＬＰ－１Ｒ／ＧＩＰＲ共作動薬チルゼパチドおよびＧＬＰ－１Ｒ作動薬セマグルチドの代替物を参照として使用した。セマグルチド代替物は、セマグルチドと同じ薬理学的特性を有するが、置換基のγＧｌｕ元素がＬ異性体からＤ異性体に変化したわずかに修飾された構造を有する。セマグルチド代替物およびチルゼパチドを、当該技術分野で公知の方法を使用して、例えば、上記の実施例１の方法、ＷＯ２００６／０９７５３７の実施例４の方法、またはＷＯ２０１６／１１１９７１の実施例１の方法に記載されるように合成した。
【化44】
【化45】
【0181】
動物および食餌
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウスをおよそ８週齢でＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスを集団収容し、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ製の高脂肪高糖食餌（Ｄ１２３３１）を与えた。薬理学研究の開始前１２週間にわたってマウスにこの食餌を与え続けた。測定体重５０グラムを超えるマウスを食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）とみなし、薬理学研究に含めた。マウスを室温（２２℃）で制御された１２時間：１２時間の明暗サイクルに曝露し、食物および水に自由にアクセスさせた。研究は、シンシナティ大学の動物実験委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ）の承認を受け、そのガイドラインに従って行った。
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ雄マウスをおよそ８週齢でＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓから購入した。マウスを集団収容し、Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｄｉｅｔｓ製の高脂肪高糖食餌（Ｄ１２３３１）を与えた。薬理学研究の開始前１２週間にわたってマウスにこの食餌を与え続けた。測定体重５０グラムを超えるマウスを食餌誘発性肥満（ＤＩＯ）とみなし、薬理学研究に含めた。マウスを室温（２２℃）で制御された１２時間：１２時間の明暗サイクルに曝露し、食物および水に自由にアクセスさせた。研究は、シンシナティ大学の動物実験委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ ｏｆ ｔｈｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｉｎｃｉｎｎａｔｉ）の承認を受け、そのガイドラインに従って行った。
【0182】
投薬および製剤
マウスにビヒクルまたは試験化合物のいずれかを１日１回皮下投与した。すべて、体重１グラム当たり２～５マイクロリットルの固定体積で、明段階の最中に注射した。
マウスにビヒクルまたは試験化合物のいずれかを１日１回皮下投与した。すべて、体重１グラム当たり２～５マイクロリットルの固定体積で、明段階の最中に注射した。
【0183】
本研究のすべての化合物を、以下の緩衝液：５０ｍＭリン酸塩、７０ｍＭ塩化ナトリウム、０．０５％Ｔｗｅｅｎ－８０（ｐＨ７．４）中で配合した。投薬溶液をガラスバイアル中で配合し、２～８℃で保存した。投薬溶液を投与前に室温にし、投薬後に２～８℃に戻した。
【0184】
ＤＩＯマウスを、脂肪量および体重の平均および標準偏差の統計的変動が群間で最小限に抑えられるように、群に配分した（ｎ＝８／群）。マウスを以下のように群分けして処理した：ビヒクル、チルゼパチド、セマグルチド代替物、または本明細書に記載のＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬（ビヒクルは、５０ｍＭのリン酸塩、７０ｍＭの塩化ナトリウム、０．０５％Ｔｗｅｅｎ－８０、ｐＨ７．４である）。試験化合物をビヒクル中に溶解させて１００μＭのストック濃度にし、その後、ビヒクル中で５０～２００倍に希釈して、所望の投薬溶液濃度を得た。マウスに、所望の用量（例えば、０．３ｎｍｏｌ／ｋｇ、１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ、または３．０ｎｍｏｌ／ｋｇ）を達成するために必要に応じて体重１グラム当たり２～５μＬの体積で投薬溶液を毎日１日１回、午前中に皮下投与した。
【0185】
体重および食物摂取量
体重（ＢＷ）および食物摂取量を毎日投薬直前に測定した。各マウスの体の変化率を最初の注射前の初期体重に基づいて個別に計算した。
体重（ＢＷ）および食物摂取量を毎日投薬直前に測定した。各マウスの体の変化率を最初の注射前の初期体重に基づいて個別に計算した。
【0186】
ＩＰＧＴＴ（腹腔内糖負荷試験）
糖負荷試験の当日に、マウスを４時間絶食させた。食物を取り除き、マウスを新鮮なケージに移した。マウスを水にアクセスさせたが、食物にはアクセスさせなかった。尾血糖値を測定し、マウスに２ｇ／ｋｇの腹腔内（ｉ．ｐ．）糖負荷を行った（ｔ＝０）（グルコース溶液２００ｍｇ／ｍｌ、投薬体積１０ｍｌ／ｋｇ）。尾血糖値を、腹腔内糖負荷後、０、１５、３０、６０、９０、１２０分時点で測定した。ＩＰＧＴＴ中のマウスの層別化を、例えば、群１のマウス２匹に投与し、続いて、群２、３、４のマウス２匹に投与した後に、群１、２、３の次のマウス２匹に投与するといった具合になるように行った。これは、すべての群を通じて「時刻」の平等な配分を可能にするためであった。
糖負荷試験の当日に、マウスを４時間絶食させた。食物を取り除き、マウスを新鮮なケージに移した。マウスを水にアクセスさせたが、食物にはアクセスさせなかった。尾血糖値を測定し、マウスに２ｇ／ｋｇの腹腔内（ｉ．ｐ．）糖負荷を行った（ｔ＝０）（グルコース溶液２００ｍｇ／ｍｌ、投薬体積１０ｍｌ／ｋｇ）。尾血糖値を、腹腔内糖負荷後、０、１５、３０、６０、９０、１２０分時点で測定した。ＩＰＧＴＴ中のマウスの層別化を、例えば、群１のマウス２匹に投与し、続いて、群２、３、４のマウス２匹に投与した後に、群１、２、３の次のマウス２匹に投与するといった具合になるように行った。これは、すべての群を通じて「時刻」の平等な配分を可能にするためであった。
【0187】
結果：
ある研究では、ＤＩＯマウスに、化合物９またはセマグルチド代替物を０．３ｎｍｏｌ／ｋｇ、１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ、または３．０ｎｍｏｌ／ｋｇの用量で３０日間にわたって毎日皮下投与した。結果を表５に示す。いずれの化合物も、食物摂取量、体重、および耐糖能のすべてに用量依存的応答を示した。化合物９は、１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量および３．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量ですべてのパラメータにおいてセマグルチド代替物よりも優れた性能を示し、これらの結果に対する共作動作用の重要な効果を示している。
表５：指定用量で化合物９またはセマグルチド代替物で毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量、体重、および耐糖能に対する効果
結果は、平均±標準誤差、ｎ＝２（食物摂取量）またはｎ＝４－８（体重、ＩＰＧＴＴ）として表される。ｉＡＵＣ＝曲線下ベースライン減算面積。
ある研究では、ＤＩＯマウスに、化合物９またはセマグルチド代替物を０．３ｎｍｏｌ／ｋｇ、１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ、または３．０ｎｍｏｌ／ｋｇの用量で３０日間にわたって毎日皮下投与した。結果を表５に示す。いずれの化合物も、食物摂取量、体重、および耐糖能のすべてに用量依存的応答を示した。化合物９は、１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量および３．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量ですべてのパラメータにおいてセマグルチド代替物よりも優れた性能を示し、これらの結果に対する共作動作用の重要な効果を示している。
表５：指定用量で化合物９またはセマグルチド代替物で毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量、体重、および耐糖能に対する効果
【表10】
【0188】
別の研究では、ＤＩＯマウスに、８つのＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬のうちの１つを３．０ｎｍｏｌ／ｋｇで１０日間にわたって毎日皮下投与した。食物摂取量および体重への効果が観察された。以下の表１および表６に示すように、試験したすべての共作動薬は、ビヒクルと比較して、食物摂取量および体重を減少させる強力な効果を呈した。これらの結果は、マウス特異的受容体における効力の最適化により、この前臨床モデルにおける有効性の改善がもたらされる可能性があることを示す。
表６：３．０ｎｍｏｌ／ｋｇでＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬で毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量および体重に対する効果
結果は、平均±標準誤差、ｎ＝２（食物摂取量）またはｎ＝８（体重）として表される。
表６：３．０ｎｍｏｌ／ｋｇでＧＬＰ－１／ＧＩＰ受容体共作動薬で毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量および体重に対する効果
【表11】
【0189】
化合物１９および化合物２０を使用したさらなる研究は、１４日間にわたって毎日皮下投与した後のＤＩＯマウスにおいて、食物摂取量、体重、および耐糖能のすべてに対する用量依存的応答を示した。以下の表７に示すように、これらの両方の化合物の１．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量および３．０ｎｍｏｌ／ｋｇ用量での食物摂取量および体重を減少させる効果は、等価用量でチルゼパチドを超えた。これらの結果は、マウス特異的受容体における効力の最適化により、この前臨床モデルにおける有効性の改善がもたらされる可能性があることを示す。
表７：指定用量で化合物１９、化合物２０、またはチルゼパチドで毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量、体重、および耐糖能に対する効果
結果は、平均±標準誤差、ｎ＝２－３（食物摂取量）またはｎ＝５－８（体重、ＩＰＧＴＴ）として表される。
表７：指定用量で化合物１９、化合物２０、またはチルゼパチドで毎日処理したＤＩＯマウスにおける食物摂取量、体重、および耐糖能に対する効果
【表12】
【0190】
本発明のある特定の特徴が本明細書に例証および記載されているが、ここで、多くの修正、代用、変更、および等価物が当業者に想到されるであろう。したがって、添付の実施形態が、本発明の真の趣旨の範囲内に含まれるすべての修正および変更を包含するよう意図されていることが理解されたい。
【図1】
【配列表】
【手続補正書】
【提出日】2023-02-20
【手続補正1】
【補正対象書類名】特許請求の範囲
【補正対象項目名】全文
【補正方法】変更
【補正の内容】
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ペプチドおよび置換基を含む化合物であって、前記ペプチドのアミノ酸配列が以下であり、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である）
前記置換基が１６位、１７位、または２１位のリジン（Ｋ）残基を介して前記ペプチドに結合しており、前記置換基が以下から成る群から選択される、化合物、
【化1】
【請求項2】
Ｘ３６、Ｘ３７、Ｘ３８、およびＸ３９が不在である、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｘ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５がＳＳＧＡである、請求項１または２に記載の化合物。
【請求項4】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＳＳＧＡ（配列番号１６）
（式中、
Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＤまたはＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥである）である、請求項１に記載の化合物。
【請求項5】
Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１が、ＫＱＡＡＡｉｂＥ、ＫＫＡＡＡｉｂＥ、ＫＱＡＡＡｉｂＫ、およびＥＱＡＡＡｉｂＫから成る群から選択される、請求項１～４のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項6】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号２、３、７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、請求項１に記載の化合物。
【請求項7】
前記ペプチドがＣ末端に前記アミド修飾を有する、請求項６に記載の化合物。
【請求項8】
前記置換基が１６Ｌｙｓを介して結合している、請求項１～７のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項9】
前記化合物が以下から成る群から選択される、請求項１に記載の化合物。【表1-1】
【表1-2】
【表1-3】
【表1-4】
【表1-5】
【表1-6】
【請求項10】
以下の化合物番号２０である、化合物。【化2】
【請求項11】
医薬として使用するための、請求項１～１０のいずれか一項に記載の化合物。
【請求項12】
糖尿病および／または肥満の予防および／または治療のための、請求項１～１１のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項13】
肝臓脂肪症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）肝臓炎、および／または脂肪肝などの肝臓障害の予防および／または治療のための、請求項１～１２のいずれか一項に記載の化合物を含む医薬組成物。
【請求項14】
以下のアミノ酸配列を有するペプチドであって、ＹＸ２ＥＧＴＦＴＳＤＹＳＩＹＬＸ１５Ｘ１６Ｘ１７ＡＡＸ２０Ｘ２１ＦＶＸ２４ＷＬＬＸ２８ＧＧＰＸ３２Ｘ３３Ｘ３４Ｘ３５Ｘ３６Ｘ３７Ｘ３８Ｘ３９
（配列番号１５）
Ｃ末端に任意選択のアミド修飾を有し、
式中、Ｘ２がＡｉｂであり、
Ｘ１５がＥであり、
Ｘ１６がＥまたはＫであり、
Ｘ１７がＱまたはＫであり、
Ｘ２０がＡｉｂであり、
Ｘ２１がＥまたはＫであり、
Ｘ２４がＮまたはＱであり、
Ｘ２８がＡまたはＥであり、
Ｘ３２がＳまたは不在であり、
Ｘ３３がＳまたは不在であり、
Ｘ３４がＧまたは不在であり、
Ｘ３５がＡまたは不在であり、
Ｘ３６がＰまたは不在であり、
Ｘ３７がＰまたは不在であり、
Ｘ３８がＰまたは不在であり、
Ｘ３９がＳまたは不在である、ペプチド。
【請求項15】
前記ペプチドのアミノ酸配列が、配列番号７、８、９、１０、１１、１２、１３、および１４のうちのいずれか１つである、請求項１４に記載のペプチド。【国際調査報告】