(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-08-17
(54)【発明の名称】ＧＬＰ－１受容体アンタゴニスト
(51)【国際特許分類】
C07K 5/09 20060101AFI20230809BHJP
C07K 5/06 20060101ALI20230809BHJP
A61K 38/16 20060101ALI20230809BHJP
A61P 3/08 20060101ALI20230809BHJP
A61P 3/00 20060101ALI20230809BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20230809BHJP
【ＦＩ】
C07K5/09
C07K5/06
A61K38/16
A61P3/08
A61P3/00
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023505826
(86)(22)【出願日】2021-07-27
(85)【翻訳文提出日】2023-03-27
(86)【国際出願番号】 GB2021051921
(87)【国際公開番号】W WO2022023723
(87)【国際公開日】2022-02-03
(31)【優先権主張番号】2011604.2
(32)【優先日】2020-07-27
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】514120896
【氏名又は名称】ヘプタレス セラピューティクス リミテッド
【氏名又は名称原語表記】Ｈｅｐｔａｒｅｓ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｌｉｍｉｔｅｄ
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100196508
【弁理士】
【氏名又は名称】松尾 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100106080
【弁理士】
【氏名又は名称】山口 晶子
(72)【発明者】
【氏名】ブラウン，ジャイルズ・アルバート
(72)【発明者】
【氏名】コングリーヴ，マイルズ・スチュアート
(72)【発明者】
【氏名】スカリー，コナー
【テーマコード（参考）】
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084AA07
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA18
4C084BA19
4C084BA28
4C084CA59
4C084DB70
4C084NA14
4C084ZC211
4C084ZC212
4C084ZC351
4C084ZC352
4C084ZC411
4C084ZC412
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA11
4H045BA12
4H045EA25
4H045FA10
4H045FA33
4H045FA61
4H045GA21
(57)【要約】
本明細書における開示は、式（１）：
［式中、Ｒ１、ＡＡ１、ＡＡ２、ＬｙｓＲ、Ｘ及びＹは本明細書中に定義の通り］の新規内部環化ペプチド化合物及びそれらの塩、ならびにグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）受容体と関連する障害の治療、予防、改善、制御又はリスク低減におけるそれらの使用に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
式（１）の配列：【化1】
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨＲ２又はＣＨ２Ｒ２であり；ここで、Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール及び（ＣＨ２）ｎヘテロアリールから選ばれ；ここで、ｎは１～６であり；
ＡＡ１は、－Ｌｅｕ－又は－Ｎｌｅ－であり；
ＡＡ２は、－ＮＨＣＲ３ａＲ３ｂＣＯ－であり；ここで、Ｒ３ａは、水素又はＣ１－３アルキル基であるか、又はＲ３ｂと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；そしてＲ３ｂは、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール、（ＣＨ２）ｎＯＨ又は（ＣＨ２）ｎＯＲ４であるか、又はＲ３ａと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；ここで、Ｒ４は、Ｃ１－６アルキルであり、ｎは１～６であり；
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換されていてもよい置換リシン残基であり；
Ｘは、配列－Ｇｌｎ－ＡＡ３－Ｇｌｕ－ＡＡ４－Ｇｌｕ－ＡＡ５－Ｖａｌ－ＡＡ６－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－ＡＡ７－ＡＡ８－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－ＡＡ９－ＡＡ１０－であり；
上記式中、ＡＡ３は、－Ｍｅｔ－又は－Ｎｌｅ－であり；ここで、ＡＡ３が－Ｍｅｔ－の場合、ＬｙｓＲはＮ－置換リシン残基であり；
ＡＡ４は、－Ｇｌｕ－又は－Ｇｌｎ－であり；
ＡＡ５は、－Ｓｅｒ－又は－Ａｌａ－であり；
ＡＡ６は、－Ａｒｇ－又は－ＤＡｒｇ－であり；
ＡＡ７は、基－ＮＨＣＨＲ５ＣＯ－であり；ここで、Ｒ５はＣ１－６アルキル基であり；
ＡＡ８は、ラクタム架橋を介してＡＡ９に結合している－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ９は、ラクタム架橋を介してＡＡ８に結合している－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１０は、－Ｇｌｙ－、－Ｓｅｒ－、－ＤＡｌａ－又は－βＡｌａ－であり；
Ｙは、存在しないか又は配列－ＡＡ１１－ＡＡ１２－ＡＡ１３－ＡＡ１４－ＡＡ１５－ＡＡ１６－ＡＡ１７－ＡＡ１８－ＡＡ１９－ＡＡ２０－ＡＡ２１－であり；
上記式中、ＡＡ１１は、－Ｇｌｙ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１２は、－Ｐｒｏ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１３は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－又は－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１４は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｌｙｓ－又は－Ｐｈｅ－であり；
ＡＡ１５は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｇｌｙ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１６は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ａｌａ－、－Ｌｙｓ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ１７は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１８は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｌｙｓ－もしくは－ＬｙｓＲ－であり；
ＡＡ１９は、存在しないか又は－Ｐｒｏ－もしくは－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ２０は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ２１は、存在しないか又は－Ｇｌｕ－であり；
ここで、Ｘ又はＹのＣ末端は、カルボキシル基又はカルボキサミド基であるか、又は任意の天然もしくは非天然アミノ酸配列又は任意のその他の部分、官能基（一つ又は複数）に隣接している］を含む化合物、又はその互変異性体もしくは立体化学的異性体、又はそのプロドラッグ、塩もしくは双性イオン。
【請求項2】
Ｒ１が、Ｈ、ＮＨ２、ＮＨＢｎ及びＣＨ２Ｂｎから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項3】
Ｒ１がＮＨＢｎである、請求項２に記載の化合物。
【請求項4】
式（１ａ）：【化2】
【請求項5】
式（１ｂ）：【化3】
【請求項6】
式（１ｃ）：【化4】
【請求項7】
ＡＡ１が－Ｌｅｕ－である、請求項１～６のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項8】
Ｒ３ａが水素又はメチルであり、Ｒ３ｂが、メチル、エチル、イソブチル、ｎ－ブチル、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＣＨ２－シクロプロピル、Ｂｎ、ＣＨ２Ｂｎ又はＣＨ２ＣＨ２Ｂｎから選ばれる、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項9】
Ｒ３ａとＲ３ｂが、シクロブチル又はオキセタニル環を形成する、請求項１～７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項10】
ＡＡ２が、【化5】
【請求項11】
ＡＡ２が、【化6】
【請求項12】
ＡＡ２が、【化7】
【請求項13】
基ＬｙｓＲが非置換リシン残基である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項14】
ＬｙｓＲがＮ－置換リシン残基であり、その場合のＮ－置換基が、－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＨ３；－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＯ２Ｈ；－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２；－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨ３；－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＯ２Ｈ及び－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２から選ばれ；ここで、ｑは１～２２である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項15】
ＬｙｓＲがＮ－置換リシン残基であり、その場合のＮ－置換基が基－Ｌ－Ｇであり；前記Ｌが、【化8】
【化9】
上記式中、ｍは１～２３であり；
ｐは１～３であり；
ｒは１～２０であり；
ｓは０～３であり；
ｔは０～４であり；
そしてｗは０～４である、請求項１～１２のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項16】
基ＬｙｓＲが、【化10】
【請求項17】
基ＬｙｓＲが、【化11】
【請求項18】
ＡＡ８とＡＡ９がラクタム架橋を介して結合している、請求項１～１７のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項19】
Ｘ又はＹのＣ末端がカルボキサミド基である、請求項１～１８のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項20】
実施例１～３３のいずれか一つから選ばれる、請求項１に記載の化合物。
【請求項21】
実施例１５：【化12】
【化13】
【化14】
【請求項22】
ＧＬＰ－１受容体アンタゴニスト活性を有する、請求項１～２１のいずれか１項に記載の化合物。
【請求項23】
請求項１～２２のいずれか１項に定義の化合物と、薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物。
【請求項24】
説明のつかない症候性高インスリン血症状態及び／又は合併する低血糖状態の治療に使用するための、請求項１～２３のいずれか１項に記載の化合物又は組成物。
【請求項25】
前記状態が、ロイシン感受性に伴う高インスリン血症による低血糖、非悪性インスリノーマ、手術不能な膵島アデノーマ又はカルシノーマ、又は膵外悪性腫瘍に伴う高インスリン血症による低血糖、多嚢胞性卵巣症候群における高インスリン血症と低血糖、Ｔ２ＤＭにおけるスルホニルウレア誘発毒性、プラダー・ウィリ症候群、副腎機能障害及びアジソン病、ベックウィズ・ヴィーデマン症候群、ソトス症候群、コステロ症候群、ティモシー症候群、歌舞伎症候群、先天性グリコシル化障害、後期ダンピング症候群、糖尿病母の反応性低血糖児、トリソミー１３、中枢性低換気症候群、妖精症（インスリン抵抗症候群）、モザイクターナー症候群、アッシャー症候群、非インスリノーマ膵臓由来低血糖、虚偽性低血糖、インスリン遺伝子受容体変異、インスリン自己免疫症候群、非膵島細胞腫瘍低血糖（ＮＩＣＴＨ）ならびにアルコール及びその他の常習性物質からの離脱症状などの状態の範囲の、説明のつかない症候性高インスリン血症及び／又は合併する低血糖から選ばれる、請求項２４に記載の化合物。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、内部ラクタム架橋を含有する新規ペプチド化合物のクラス、それらの塩、それらを含有する医薬組成物、及び人体の治療におけるそれらの使用に関する。特に、本発明は、グルカゴン様ペプチド（ＧＬＰ）受容体のアンタゴニストである化合物のクラスに向けられる。さらに詳しくは、本発明は、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）受容体のアンタゴニストである化合物に向けられる。本発明はまた、ＧＬＰ受容体が関与する疾患の予防又は治療におけるこれらの化合物及び組成物の製造及び使用にも関する。
【背景技術】
【0002】
消化管ホルモンであるグルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）は、腸のＬ細胞から食後に放出され、膵臓ｂ細胞に対して直接的かつ強力なグルコース依存性インスリン分泌促進作用を発揮する。
【0003】
ＧＬＰ－１は、腸内でプログルカゴンの翻訳後プロセシングによって合成される。腸のＬ細胞にしか発現していないプロホルモン転換酵素１／３によってプログルカゴンが切断されることにより、インクレチンペプチドのＧＬＰ－１及びＧＬＰ－２が放出される。分泌されたＧＬＰ－１はユビキタス酵素ジペプチジルペプチドＩＶによって迅速に分解されるため、ＧＬＰ－１の半減期は約２分と極めて短い。
【0004】
ＧＬＰ－１は、クラスＢのＧタンパク質共役型受容体ファミリーに属するグルカゴン様ペプチド－１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）という特異的受容体を介して作用する。ＧＬＰ－１受容体は、膵島、脳、心臓、腎臓及び消化管に広く分布している。ＧＬＰ－１がその同源受容体(cognate receptor)に結合すると、刺激Ｇタンパク質Ｇａｓを介してアデニル酸シクラーゼが活性化され、細胞内ｃＡＭＰレベルの形成、膜の脱分極、細胞内カルシウム濃度の上昇及び膵臓ｂ細胞に存在するインスリン含有顆粒のエキソサイトーシス（開口放出）促進がもたらされる。ＧＬＰ－１が媒介する持続的なｃＡＭＰ濃度上昇も膵臓ｂ細胞増殖を刺激し、膵管上皮の前駆細胞からの新しいベータ細胞の分化を促進する。
【0005】
ＧＬＰ－１は、血漿グルコースの制御に重要な他のホルモンの分泌にも直接影響を与える。膵臓ａ細胞は、ソマトスタチンのパラクライン作用を通じてグルカゴン分泌を強力に抑制するＧＬＰ－１の持続性抑制制御(tonic inhibitory control)下にある。ＧＬＰ－１活性を介してグルカゴンが抑制されると肝のグルコース産生が減少するので、食後血糖変動の制御に対する全体的なＧＬＰ－１効果に寄与する。
【0006】
要するに、ＧＬＰ－１は、グルコース刺激による膵臓からのインスリン分泌増加と、その結果の末梢組織におけるグルコース取込み増加を通じて、強力な抗糖尿病効果を有することが示されている。ＧＬＰ－１は、胃内容排出と幽門洞十二指腸(antroduodenal)運動の抑制、少量で満腹感創出及び食物摂取の減少ならびに体重減少にも主要な役割を果たしている。
【0007】
上述したＧＬＰ－１の顕著な効果から、ＧＬＰ－１の過剰な血漿中濃度、ＧＬＰ－１シグナリングの増大及び／又はＧＬＰ－１Ｒレベルの増加と関連する臨床徴候は、低血糖を招く高インスリン血症（過剰なグルコース依存性インスリン分泌）や胃腸障害の証拠をもたらすだろうという仮説が導かれた。従って、高インスリン血症及び低血糖症などの状態は、ＧＬＰ－１Ｒの活性化を遮断／拮抗することによって治療できると思われる。
【0008】
特異的ＧＬＰ－１受容体アンタゴニストであるエキセンジン（９－３９）アミド［Ｅｘ（９－３９）］は、当初アメリカドクトカゲ(Heloderma suspectum)の毒から単離され、ＧＬＰ－１とある程度の配列相同性を共有している。Ｅｘ（９－３９）は、ＧＬＰ－１受容体の選択的競合的ペプチドアンタゴニストで、インビトロ及びインビボでＧＬＰ－１媒介性のインスリン分泌を遮断し、ヒト及び齧歯類モデルでＧＬＰ－１の内因性及び外因性投与に応答する耐糖能を障害する。Ｅｘ（９－３９）はまた、ＧＬＰ－１レベルの増加がなくてもインスリン分泌を抑制するので、Ｅｘ（９－３９）はＧＬＰ－１受容体のインバースアゴニスト（逆作動薬）であることが示唆される。これらのデータから、ＧＬＰ－１受容体の存在のみが膵臓β細胞のグルコース受容能力 (glucose-competent status)の維持に重要であることが示唆される。
【0009】
膵島β細胞に対するＧＬＰ－１の影響は大きい。ＧＬＰ－１は、インスリン放出、プロインスリンの発現、インスリンの生合成及びｍＲＮＡ安定性を促進する。ＧＬＰ－１はまた、膵島δ細胞からのソマトスタチン分泌を引き起こし、膵島α細胞からのグルカゴン分泌を抑制する。グルカゴンの作用はインスリンのそれとは反対で、肝臓に直接働きかけてグリコーゲン分解とグルコース新生を増大させることにより、血流中のグルコース濃度を上昇させる。このことは、ＧＬＰ－１系の遮断は、インスリン分泌に直接影響するだけでなく、肝臓によるグルコース産生の増加を促進するグルカゴン分泌に対する抑制も解除することを示唆している。
【0010】
健常状態下では、ＧＬＰ－１のインスリン分泌作用は通常、高度にグルコース依存性で、過剰なＧＬＰ－１分泌や感受性が低血糖を招くことはない。しかしながら、非グルコース依存性のインスリン分泌促進剤（例えば、ＫＡＴＰチャネルに作用するスルホニルウレア）の存在下でＧＬＰ－１の投与を用いたり又はさらには超生理学的レベルのＧＬＰ－１を正常被験者に直接注入する臨床研究は、低血糖のリスク増大と関連する。
【0011】
糖尿病と関連しない低血糖は稀な臨床障害である。それは、通常、静脈血漿中グルコースが＜５５ｍｇ／ｍｌの場合に診断され、ウィップルの三徴の存在によって裏付けられる。本願の主題であるＧＬＰ－１Ｒアンタゴニストは、高インスリン血症及び／又は低血糖をもたらすＧＬＰ－１の過剰な血漿中濃度、ＧＬＰ－１シグナリングの増大及び／又はＧＬＰ－１Ｒレベルの増加、及び／又は胃腸障害の証拠と関連する一連の状態を治療できる可能性を有している。これらの状態には、低血糖の対症療法が含まれるほか、細胞増殖及び分化に対するＧＬＰ－１の作用に基づいて、疾患進行過程に影響する可能性も含まれるであろう。
【0012】
規制当局の承認を得た高インスリン血性低血糖症（ＨＨ）治療用の新薬は２０年以上なく、すべての現行治療には重大な欠陥がある。このため、希少疾患への適応を始めとして、新生児室への満期産児入院(term admission)のおよそ１０％に必要とされる短期的要件から、胃バイパス手術を受ける成人の０．２～１％にまで及ぶ著しく満たされない医療ニーズが生じている。この機序を特異的に標的にすることの有効性が、最近、二つの異なる臨床集団でＧＬＰ－１受容体アンタゴニストペプチドＥｘ９－３９を用いて臨床的に検証された。
【0013】
先天性高インスリン血症（ＣＨＩ）は、新生児及び小児における重症持続性ＨＨの最も多い原因で、英国では出生児(live birth)のおよそ１／４０，０００に発生している。ＣＨＩにおけるＧＬＰ－１Ｒアンタゴニストの潜在的利益は、高インスリン血症の齧歯類モデルで実証されている。これらの知見を拡大して、ＫＡＴＰチャネルの不活化変異のためにＣＨＩを有するヒト成人対象でＥｘ９－３９の試験が行われた。ＧＬＰ－１受容体アンタゴニスト治療を導入すれば、多くのＣＨＩ患者が取り返しのつかない膵切除術実施のプレッシャーから解放されると予測される。これには、ＧＬＰ－１の分泌過剰が不適切なインスリン放出の根本原因であるという証拠が集まりつつあるＣＨＩ患者も含まれる。ＧＬＰ－１アンタゴニスト治療は、持続的な応答プロファイルを持ち、すべての患者に有効であり、そして用量調整（漸増・漸減）や他の薬理学的治療の導入に起因する薬物相互作用の調整をする必要なく成人で継続できると予測される。
【0014】
肥満治療手術後低血糖（ＰＢＨＳ）。胃バイパス手術は、病的肥満の２型糖尿病患者の治療にますます使用されており、ＧＬＰ－１分泌レベルを大きく増加させることが実証されている。この治療は、比較的少数ではあるが臨床的に重要な数の患者に、術後出現しうる深刻な食後高インスリン血性低血糖状態を招くことがあり、グルコース濃度が、けいれん、精神状態の変化、意識喪失、認知機能障害、身体障害、及び死亡を引き起こすほど低くなる（２０～４０ｍｇ／ｄＬ）。重度の症状を呈するこれらの患者に対する有効な治療法はない。本発明は、彼らが肥満治療手術後高インスリン血症を患った場合に彼らを大きく保護できる治療介入機会を提供する。最近、Ｓａｌｅｈｉと同僚は、胃バイパス患者におけるこの重度の食後低血糖は、ＧＬＰ－１アンタゴニストＥｘ（９－３９）の注入によって補正できることを報告したが、これは、この機序におけるＧＬＰ－１とその受容体の基本的役割と整合性がとれている。
【0015】
低血糖の対症療法に対する満たされない医療ニーズは、ＣＨＩ及びＰＢＳＨ以外にも広がっている。高インスリン血性低血糖には、膵臓β細胞からのインスリン分泌の調節異常とその結果の低血糖を主な特徴とするいくつかの異種障害も包含され、ＧＬＰ１－Ｒアンタゴニストで効果的に治療できる。これらに含まれるものとして、小児（例えば、新生児低血糖、胃瘻造設に続発する低血糖、病因不明の食後低血糖）及び成人（例えば、インスリノーマ、胃バイパス手術性低血糖）の低血糖の適応が挙げられるが、これらに限定されない。
【0016】
説明のつかない一過性の低血糖は新生児学で遭遇する最も一般的で重要な医療問題の一つである。英国では、我々の治療センターの内部監査によれば、新生児室への満期産児入院のおよそ１０％は単に原因不明の低血糖によるものであることが示唆されている。２０１２年の出生数が８００，０００人であるとすると、年間新たに約８，０００例の発生数が示唆される。同様の数字は、極端な体重を有する新生児の新生児低血糖に関する米国ベースの研究からも導き出すことができる。本発明に記載されるような安全で有効な治療法は、この患者集団に治療的利益の可能性を提供する。
【0017】
高インスリン血症及び／又は低血糖は、一部の‘ダンピング症候群’患者にも観察され（例えば、胃バイパス手術や胃／食道手術などの外科的処置の合併症として）、非常に迅速な胃内容排出とインスリンの過剰放出を示す。現在の仮説は、急速な食後グルコースフラックス、ＧＬＰ－１分泌及び高インスリン血症との間の関連性を示唆している。
【0018】
腫瘍性の低血糖（ＴＨ）は稀な臨床状態で、膵島ｂ細胞腫瘍（インスリノーマ）による正所性インスリン分泌又は非膵島細胞腫瘍（例えば、これらに限定されないが、気管支カルチノイド及び消化管間質腫瘍など）による異所性腫瘍インスリン分泌の結果として発生しうる。インスリノーマは稀な腫瘍で、発生率は年間約０．４／１００，０００人で、通常、小さな散発性膵内良性腫瘍である。
【0019】
最後に、アンタゴニストＥｘ（９－３９）を用いた臨床データは、上昇したＧＬＰ－１レベル及びインスリンレベルの結果を遮断する能力を一貫して示している。本発明の他の態様は、説明のつかない症候性高インスリン血症及び／又は合併する低血糖の治療を含み、その病態の範囲は、ロイシン感受性に伴う高インスリン血症による低血糖、非悪性インスリノーマ、手術不能な膵島アデノーマ又はカルシノーマ、又は膵外悪性腫瘍に伴う高インスリン血症による低血糖、多嚢胞性卵巣症候群における高インスリン血症と低血糖、Ｔ２ＤＭにおけるスルホニルウレア誘発毒性、プラダー・ウィリ(Prader-Willi)症候群、副腎機能障害及びアジソン病、ベックウィズ・ヴィーデマン(Beckwith-Wiedemann)症候群、ソトス(Soto’s)症候群、コステロ(Costello)症候群、ティモシー(Timothy)症候群、歌舞伎症候群、先天性グリコシル化障害、後期ダンピング症候群、糖尿病母の反応性低血糖児、トリソミー１３、中枢性低換気症候群、妖精症（インスリン抵抗症候群）、モザイクターナー症候群、アッシャー(Usher)症候群、非インスリノーマ膵臓由来低血糖、虚偽性低血糖、インスリン遺伝子受容体変異、インスリン自己免疫症候群、非膵島細胞腫瘍低血糖（ＮＩＣＴＨ）ならびにアルコール及びその他の常習性物質からの離脱症状などである。
【発明の概要】
【0020】
本発明は、ＧＬＰ－１受容体においてアンタゴニスト活性を有する新規化合物、これらを含む医薬組成物、及び疾患の治療用医薬の製造のための該化合物の使用に関する。
【0021】
そこで、一態様において、本発明は、式（１）の化合物：
式（１）の配列：
式（１）の配列：
【0022】
【化1】
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨＲ２又はＣＨ２Ｒ２であり；ここで、Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール及び（ＣＨ２）ｎヘテロアリールから選ばれ；ここで、ｎは１～６であり；
ＡＡ１は、－Ｌｅｕ－又は－Ｎｌｅ－であり；
ＡＡ２は、－ＮＨＣＲ３ａＲ３ｂＣＯ－であり；ここで、Ｒ３ａは、水素又はＣ１－３アルキル基であるか、又はＲ３ｂと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；そしてＲ３ｂは、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール、（ＣＨ２）ｎＯＨ又は（ＣＨ２）ｎＯＲ４であるか、又はＲ３ａと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；ここで、Ｒ４は、Ｃ１－６アルキルであり、ｎは１～６であり；
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換されていてもよい置換リシン残基であり；
Ｘは、配列－Ｇｌｎ－ＡＡ３－Ｇｌｕ－ＡＡ４－Ｇｌｕ－ＡＡ５－Ｖａｌ－ＡＡ６－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－ＡＡ７－ＡＡ８－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－ＡＡ９－ＡＡ１０であり；
上記式中、ＡＡ３は、－Ｍｅｔ－又は－Ｎｌｅ－であり；ここで、ＡＡ３が－Ｍｅｔ－の場合、ＬｙｓＲはＮ－置換リシン残基であり；
ＡＡ４は、－Ｇｌｕ－又は－Ｇｌｎ－であり；
ＡＡ５は、－Ｓｅｒ－又は－Ａｌａ－であり；
ＡＡ６は、－Ａｒｇ－又は－ＤＡｒｇ－であり；
ＡＡ７は、基－ＮＨＣＨＲ５ＣＯ－であり；ここで、Ｒ５はＣ１－６アルキル基であり；
ＡＡ８は、ラクタム架橋を介してＡＡ９に結合している－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ９は、ラクタム架橋を介してＡＡ８に結合している－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１０は、－Ｇｌｙ－、－Ｓｅｒ－、－ＤＡｌａ－又は－βＡｌａ－であり；
Ｙは、存在しないか又は配列－ＡＡ１１－ＡＡ１２－ＡＡ１３－ＡＡ１４－ＡＡ１５－ＡＡ１６－ＡＡ１７－ＡＡ１８－ＡＡ１９－ＡＡ２０－ＡＡ２１－であり；
上記式中、ＡＡ１１は、－Ｇｌｙ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１２は、－Ｐｒｏ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１３は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－又は－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１４は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｌｙｓ－又は－Ｐｈｅ－であり；
ＡＡ１５は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｇｌｙ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１６は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ａｌａ－、－Ｌｙｓ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ１７は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１８は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｌｙｓ－もしくは－ＬｙｓＲ－であり；
ＡＡ１９は、存在しないか又は－Ｐｒｏ－もしくは－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ２０は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ２１は、存在しないか又は－Ｇｌｕ－であり；
ここで、Ｘ又はＹのＣ末端は、カルボキシル基又はカルボキサミド基であるか、又は任意の天然もしくは非天然アミノ酸配列又は任意のその他の部分、官能基（一つ又は複数）に隣接している］を含む化合物、又はその互変異性体もしくは立体化学的異性体、又はそのプロドラッグ、塩もしくは双性イオンを提供する。
【0023】
特別な化合物は、式（１ａ）：
【0024】
【化2】
【0025】
特別な化合物は、式（１ｂ）：
【0026】
【化3】
【0027】
特別な化合物は、式（１ｃ）：
【0028】
【化4】
【0029】
特別な化合物は、式（１ｄ）：
【0030】
【化5】
【0031】
本明細書中の化合物は、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）受容体のアンタゴニストとして使用できる。本化合物は医薬の製造に使用できる。本化合物又は医薬は、例えば、ロイシン感受性に伴う高インスリン血症による低血糖、非悪性インスリノーマ、手術不能な膵島アデノーマ又はカルシノーマ、又は膵外悪性腫瘍に伴う高インスリン血症による低血糖、多嚢胞性卵巣症候群における高インスリン血症と低血糖、Ｔ２ＤＭにおけるスルホニルウレア誘発毒性、プラダー・ウィリ症候群、副腎機能障害及びアジソン病、ベックウィズ・ヴィーデマン症候群、ソトス症候群、コステロ症候群、ティモシー症候群、歌舞伎症候群、先天性グリコシル化障害、後期ダンピング症候群、糖尿病母の反応性低血糖児、トリソミー１３、中枢性低換気症候群、妖精症（インスリン抵抗症候群）、モザイクターナー症候群、アッシャー症候群、非インスリノーマ膵臓由来低血糖、虚偽性低血糖、インスリン遺伝子受容体変異、インスリン自己免疫症候群、非膵島細胞腫瘍低血糖（ＮＩＣＴＨ）ならびにアルコール及びその他の常習性物質からの離脱症状などの病態の範囲の、説明のつかない症候性高インスリン血症及び／又は合併する低血糖を含むＧＬＰ－１受容体と関連する障害の治療、予防、改善、制御、又はリスクの低減に使用できる。
【図面の簡単な説明】
【0032】
【発明を実施するための形態】
【0033】
本発明は新規化合物に関する。本発明はまた、ＧＬＰ－１受容体のアンタゴニストとしての新規化合物の使用にも関する。本発明はさらに、ＧＬＰ－１受容体アンタゴニストとして使用するため又はＧＬＰ－１受容体に関連する障害を治療するための医薬の製造における新規化合物の使用にも関する。本発明はさらに、他のＧＬＰ受容体サブタイプに対してＧＬＰ－１受容体の選択的アンタゴニストである化合物、組成物及び医薬にも関する。
【0034】
本発明はさらに、説明のつかない症候性高インスリン血症状態及び／又は合併する低血糖状態、例えば、ロイシン感受性に伴う高インスリン血症による低血糖、非悪性インスリノーマ、手術不能な膵島アデノーマ又はカルシノーマ、又は膵外悪性腫瘍に伴う高インスリン血症による低血糖、多嚢胞性卵巣症候群における高インスリン血症と低血糖、Ｔ２ＤＭにおけるスルホニルウレア誘発毒性、プラダー・ウィリ症候群、副腎機能障害及びアジソン病、ベックウィズ・ヴィーデマン症候群、ソトス症候群、コステロ症候群、ティモシー症候群、歌舞伎症候群、先天性グリコシル化障害、後期ダンピング症候群、糖尿病母の反応性低血糖児、トリソミー１３、中枢性低換気症候群、妖精症（インスリン抵抗症候群）、モザイクターナー症候群、アッシャー症候群、非インスリノーマ膵臓由来低血糖、虚偽性低血糖、インスリン遺伝子受容体変異、インスリン自己免疫症候群、非膵島細胞腫瘍低血糖（ＮＩＣＴＨ）ならびにアルコール及びその他の常習性物質からの離脱症状などの治療に有用な化合物、組成物及び医薬にも関する。
【0035】
そこで、一態様において、本発明は、式（１）の配列：
【0036】
【化6】
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨＲ２又はＣＨ２Ｒ２であり；ここで、Ｒ２は、Ｈ、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール及び（ＣＨ２）ｎヘテロアリールから選ばれ；ここで、ｎは１～６であり；
ＡＡ１は、－Ｌｅｕ－又は－Ｎｌｅ－であり；
ＡＡ２は、－ＮＨＣＲ３ａＲ３ｂＣＯ－であり；ここで、Ｒ３ａは、水素又はＣ１－３アルキル基であるか、又はＲ３ｂと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；そしてＲ３ｂは、Ｃ１－６アルキル、（ＣＨ２）ｎアリール、（ＣＨ２）ｎＯＨ又は（ＣＨ２）ｎＯＲ４であるか、又はＲ３ａと結合して、Ｎ及びＯから選ばれる一つ又は複数のヘテロ原子を含有していてもよい３～６員環を形成し；ここで、Ｒ４は、Ｃ１－６アルキルであり、ｎは１～６であり；
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換されていてもよい置換リシン残基であり；
Ｘは、配列－Ｇｌｎ－ＡＡ３－Ｇｌｕ－ＡＡ４－Ｇｌｕ－ＡＡ５－Ｖａｌ－ＡＡ６－Ｌｅｕ－Ｐｈｅ－ＡＡ７－ＡＡ８－Ｔｒｐ－Ｌｅｕ－Ｌｙｓ－ＡＡ９－ＡＡ１０－であり；
上記式中、ＡＡ３は、－Ｍｅｔ－又は－Ｎｌｅ－であり；ここで、ＡＡ３が－Ｍｅｔ－の場合、ＬｙｓＲはＮ－置換リシン残基であり；
ＡＡ４は、－Ｇｌｕ－又は－Ｇｌｎ－であり；
ＡＡ５は、－Ｓｅｒ－又は－Ａｌａ－であり；
ＡＡ６は、－Ａｒｇ－又は－ＤＡｒｇ－であり；
ＡＡ７は、基－ＮＨＣＨＲ５ＣＯ－であり；ここで、Ｒ５はＣ１－６アルキル基であり；
ＡＡ８は、ラクタム架橋を介してＡＡ９に結合している－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ９は、ラクタム架橋を介してＡＡ８に結合している－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１０は、－Ｇｌｙ－、－Ｓｅｒ－、－ＤＡｌａ－又は－βＡｌａ－であり；
Ｙは、存在しないか又は配列－ＡＡ１１－ＡＡ１２－ＡＡ１３－ＡＡ１４－ＡＡ１５－ＡＡ１６－ＡＡ１７－ＡＡ１８－ＡＡ１９－ＡＡ２０－ＡＡ２１－であり；
上記式中、ＡＡ１１は、－Ｇｌｙ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１２は、－Ｐｒｏ－又は－Ｓｅｒ－であり；
ＡＡ１３は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－又は－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１４は、－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｌｙｓ－又は－Ｐｈｅ－であり；
ＡＡ１５は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｇｌｙ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１６は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ａｌａ－、－Ｌｙｓ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ１７は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｇｌｕ－もしくは－Ｌｙｓ－であり；
ＡＡ１８は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－、－ＤＳｅｒ－、－Ｐｒｏ－、－Ｌｙｓ－もしくは－ＬｙｓＲ－であり；
ＡＡ１９は、存在しないか又は－Ｐｒｏ－もしくは－Ｇｌｕ－であり；
ＡＡ２０は、存在しないか又は－Ｓｅｒ－もしくは－Ｔｙｒ－であり；
ＡＡ２１は、存在しないか又は－Ｇｌｕ－であり；
ここで、Ｘ又はＹのＣ末端は、カルボキシル基又はカルボキサミド基であるか、又は任意の天然もしくは非天然アミノ酸配列又は任意のその他の部分、官能基（一つ又は複数）に隣接している］を含む化合物、又はその互変異性体もしくは立体化学的異性体、又はそのプロドラッグ、塩もしくは双性イオンを提供する。
【0037】
Ｒ１は、Ｈ、ＮＨ２、ＮＨＢｎ又はＣＨ２Ｂｎでありうる。Ｒ１はＨでありうる。Ｒ１は水素でありうる。Ｒ１はＮＨ２でありうる。Ｒ１はＮＨＢｎでありうる。Ｒ１はＣＨ２Ｂｎでありうる。Ｒ１はＮＨ－ベンジルでありうる。Ｒ１はＣＨ２－ベンジルでありうる。
【0038】
Ｒ２はＨでありうる。Ｒ２は水素でありうる。Ｒ２はＢｎでありうる。Ｒ２はベンジルでありうる。
【0039】
ＡＡ１は、－Ｌｅｕ－でありうる。ＡＡ１は、－Ｎｌｅ－でありうる。
【0040】
ＡＡ２は、－ＮＨＣＲ３ａＲ３ｂＣＯ－であり得；ここで、Ｒ３ａは、水素又はメチルであり、Ｒ３ｂは、メチル、エチル、イソブチル、ｎ－ブチル、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＣＨ２－シクロプロピル、Ｂｎ、ＣＨ２Ｂｎ又はＣＨ２ＣＨ２Ｂｎから選ばれる。
【0041】
Ｒ３ａは、水素又はメチルでありうる。Ｒ３ａは水素でありうる。Ｒ３ａはメチルでありうる。
【0042】
Ｒ３ｂは、メチル、エチル、イソブチル、ｎ－ブチル、ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＣＨ２ＯＨ、ＣＨ２ＯＣＨ３、ＣＨ２－シクロプロピル、Ｂｎ、ＣＨ２Ｂｎ又はＣＨ２ＣＨ２Ｂｎから選ぶことができる。
【0043】
Ｒ３ａとＲ３ｂは、結合して環を形成することができる。Ｒ３ａとＲ３ｂは、結合してシクロブチル又はオキセタニル環を形成できる。
【0044】
ＡＡ２は、
【0045】
【化7】
【0046】
ＡＡ２は、
【0047】
【化8】
【0048】
ＬｙｓＲは、非置換リシン残基でありうる。
【0049】
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換リシン残基であり得、その場合のＮ－置換基は、－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＨ３；－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＯ２Ｈ；－ＣＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２；－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨ３；－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＯ２Ｈ及び－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２から選ばれ；ここで、ｑは１～２２である。
【0050】
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換リシン残基であり得、その場合のＮ－置換基は、－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２であり；ここで、ｑは１～２２である。
【0051】
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換リシン残基であり得、その場合のＮ－置換基は、－ＣＯＯ（ＣＨ２）ｑＣＨＣＨ２であり；ここで、ｑは１である。
【0052】
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換リシン残基であり得、その場合のＮ－置換基は、－ＣＯＯＣＨ２ＣＨＣＨ２である。
【0053】
ＬｙｓＲは、
【0054】
【化9】
【0055】
ＬｙｓＲは、Ｎ－置換リシン残基であり得、その場合のＮ－置換基は、基－Ｌ－Ｇであり；ここで、Ｌは、
【0056】
【化10】
【0057】
【化11】
上記式中、ｍは１～２３であり；
ｐは１～３であり；
ｒは１～２０であり；
ｓは０～３であり；
ｔは０～４であり；
そしてｗは０～４である。
【0058】
ＬｙｓＲは、
【0059】
【化12】
【0060】
ＬｙｓＲは、
【0061】
【化13】
【0062】
ＡＡ３は、－Ｍｅｔ－でありうる。ＡＡ３は、－Ｎｌｅ－でありうる。ＡＡ３が－Ｍｅｔ－の場合、ＬｙｓＲは置換リシン残基である。
【0063】
ＡＡ４は、－Ｇｌｕ－でありうる。ＡＡ４は、－Ｇｌｎ－でありうる。
【0064】
ＡＡ５は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ５は、－Ａｌａ－でありうる。
【0065】
ＡＡ６は、－Ａｒｇ－でありうる。ＡＡ６は、－ＤＡｒｇでありうる。
【0066】
ＡＡ７は、基－ＮＨＣＨＲ５ＣＯ－であり得；ここで、Ｒ５は、イソプロピル、ｓｅｃ－ブチル及びネオペンチルから選ばれる。Ｒ５はイソプロピルでありうる。Ｒ５はｓｅｃ－ブチルでありうる。Ｒ５はネオペンチルでありうる。
【0067】
ＡＡ７は、－Ｉｌｅ－でありうる。ＡＡ７は、－Ｖａｌ－でありうる。ＡＡ７は、ｔｅｒｔ－ブチルアラニン残基でありうる。
【0068】
ＡＡ１０は、－Ｇｌｙ－でありうる。ＡＡ１０は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１０は、－ＤＡｌａ－でありうる。ＡＡ１０は、－βＡｌａ－でありうる。
【0069】
ＡＡ８とＡＡ９は、ラクタム架橋を介して結合できる。
【0070】
Ｙは、不在又は存在でありうる。Ｙは不在でありうる。Ｙは存在でありうる。
【0071】
ＡＡ１１は、－Ｇｌｙ－でありうる。ＡＡ１１は、－Ｓｅｒ－でありうる。
【0072】
ＡＡ１２は、－Ｐｒｏ－でありうる。ＡＡ１２は、－Ｓｅｒ－でありうる。
【0073】
ＡＡ１３は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１３は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１３は、－Ｌｙｓ－でありうる。
【0074】
ＡＡ１４は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１４は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１４は、－Ｌｙｓ－でありうる。ＡＡ１４は、－Ｐｈｅ－でありうる。
【0075】
ＡＡ１５は不在でありうる。ＡＡ１５は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１５は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１５は、－Ｇｌｙ－でありうる。ＡＡ１５は、－Ｇｌｕ－でありうる。ＡＡ１５は、－Ｌｙｓ－でありうる。
【0076】
ＡＡ１６は不在でありうる。ＡＡ１６は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１６は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１６は、－Ａｌａ－でありうる。ＡＡ１６は、－Ｌｙｓ－でありうる。ＡＡ１６は、－Ｔｙｒ－でありうる。
【0077】
ＡＡ１７は不在でありうる。ＡＡ１７は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１７は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１７は、－Ｐｒｏ－でありうる。ＡＡ１７は、－Ｇｌｕ－でありうる。ＡＡ１７は、－Ｌｙｓ－でありうる。
【0078】
ＡＡ１８は不在でありうる。ＡＡ１８は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ１８は、－ＤＳｅｒ－でありうる。ＡＡ１８は、－Ｐｒｏ－でありうる。ＡＡ１８は、－Ｌｙｓ－でありうる。ＡＡ１８は、－ＬｙｓＲ－でありうる。
【0079】
ＡＡ１９は不在でありうる。ＡＡ１９は、－Ｐｒｏ－でありうる。ＡＡ１９は、－Ｇｌｕ－でありうる。
【0080】
ＡＡ２０は不在でありうる。ＡＡ２０は、－Ｓｅｒ－でありうる。ＡＡ２０は、－Ｔｙｒ－でありうる。
【0081】
ＡＡ２１は不在でありうる。ＡＡ２１は、－Ｇｌｕ－でありうる。
【0082】
Ｙが存在しない場合、ＸのＣ末端はカルボキサミド基でありうる。Ｙが存在しない場合、ＸのＣ末端はカルボキシル基でありうる。Ｙが存在しない場合、ＸのＣ末端は、任意の天然もしくは非天然アミノ酸配列又は任意のその他の部分、官能基（一つ又は複数）に隣接できる。
【0083】
ＹのＣ末端はカルボキサミド基でありうる。ＹのＣ末端はカルボキシル基でありうる。ＹのＣ末端は、任意の天然もしくは非天然アミノ酸配列又は任意のその他の部分、官能基（一つ又は複数）に隣接できる。
【0084】
本化合物は、Ｒ１がＮＨＢｎであり、ＡＡ１が－Ｌｅｕ－であり、ＡＡ２が－Ｄ－ＨｏｍｏＰｈｅ－であり、ＬｙｓＲが－Ｌｙｓ－であり、ＡＡ３が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ４が－Ｇｌｕ－であり、ＡＡ５が－Ａｌａ－であり、ＡＡ６が－ＤＡｒｇ－であり、ＡＡ７が－Ｉｌｅ－であり、そしてＡＡ１０が－Ｇｌｙ－である化合物でありうる。この場合、ＸのＣ－末端はカルボキサミド基である
本化合物は、Ｒ１がＮＨＢｎであり、ＡＡ１が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ２が－Ａｉｂ－であり、ＬｙｓＲが－Ｌｙｓ－であり、ＡＡ３が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ４が－Ｇｌｕ－であり、ＡＡ５が－Ａｌａ－であり、ＡＡ６が－ＤＡｒｇ－であり、ＡＡ７が－Ｉｌｅ－であり、そしてＡＡ１０が－Ｇｌｙ－である化合物でありうる。この場合、ＸのＣ－末端はカルボキサミド基である
本化合物は、Ｒ１がＮＨＢｎであり、ＡＡ１が－Ｌｅｕ－であり、ＡＡ２が－Ｄ－Ａｌａ－であり、ＬｙｓＲが－Ｌｙｓ－であり、ＡＡ３が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ４が－Ｇｌｕ－であり、ＡＡ５が－Ａｌａ－であり、ＡＡ６が－ＤＡｒｇ－であり、ＡＡ７が－Ｉｌｅ－であり、ＡＡ１０が－Ｇｌｙ－であり、ＡＡ１１が－Ｇｌｙ－であり、ＡＡ１２が－Ｐｒｏ－であり、ＡＡ１３が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１４が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１５が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１６が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１７が－Ｓｅｒ－であり、そしてＡＡ１８が－Ｓｅｒ－である化合物でありうる。この場合、ＹのＣ－末端はカルボキサミド基である。
本化合物は、Ｒ１がＮＨＢｎであり、ＡＡ１が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ２が－Ａｉｂ－であり、ＬｙｓＲが－Ｌｙｓ－であり、ＡＡ３が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ４が－Ｇｌｕ－であり、ＡＡ５が－Ａｌａ－であり、ＡＡ６が－ＤＡｒｇ－であり、ＡＡ７が－Ｉｌｅ－であり、そしてＡＡ１０が－Ｇｌｙ－である化合物でありうる。この場合、ＸのＣ－末端はカルボキサミド基である
本化合物は、Ｒ１がＮＨＢｎであり、ＡＡ１が－Ｌｅｕ－であり、ＡＡ２が－Ｄ－Ａｌａ－であり、ＬｙｓＲが－Ｌｙｓ－であり、ＡＡ３が－Ｎｌｅ－であり、ＡＡ４が－Ｇｌｕ－であり、ＡＡ５が－Ａｌａ－であり、ＡＡ６が－ＤＡｒｇ－であり、ＡＡ７が－Ｉｌｅ－であり、ＡＡ１０が－Ｇｌｙ－であり、ＡＡ１１が－Ｇｌｙ－であり、ＡＡ１２が－Ｐｒｏ－であり、ＡＡ１３が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１４が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１５が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１６が－Ｓｅｒ－であり、ＡＡ１７が－Ｓｅｒ－であり、そしてＡＡ１８が－Ｓｅｒ－である化合物でありうる。この場合、ＹのＣ－末端はカルボキサミド基である。
【0085】
本化合物は、式（１ａ）：
【0086】
【化14】
【0087】
本化合物は、式（１ｂ）：
【0088】
【化15】
【0089】
本化合物は、式（１ｃ）：
【0090】
【化16】
【0091】
本化合物は、式（１ｄ）：
【0092】
【化17】
【0093】
本化合物は、
実施例１５：
実施例１５：
【0094】
【化18】
【0095】
【化19】
【0096】
【化20】
【0097】
本化合物は、表１に示されている実施例１～３３のいずれか一つから選ぶことができる。
【0098】
【表1-1】
【0099】
【表1-2】
【0100】
【表1-3】
【0101】
本発明の化合物は、本発明の化合物と薬学的に許容可能な賦形剤とを含む医薬組成物に使用することができる。
【0102】
本発明の化合物は医薬に使用できる。
【0103】
本発明の化合物は、ＧＬＰ－１受容体と関連する障害の治療に使用することができる。
【0104】
本発明の化合物は、説明のつかない症候性高インスリン血症状態及び／又は合併する低血糖状態、例えば、ロイシン感受性に伴う高インスリン血症による低血糖、非悪性インスリノーマ、手術不能な膵島アデノーマ又はカルシノーマ、又は膵外悪性腫瘍に伴う高インスリン血症による低血糖、多嚢胞性卵巣症候群における高インスリン血症と低血糖、Ｔ２ＤＭにおけるスルホニルウレア誘発毒性、プラダー・ウィリ症候群、副腎機能障害及びアジソン病、ベックウィズ・ヴィーデマン症候群、ソトス症候群、コステロ症候群、ティモシー症候群、歌舞伎症候群、先天性グリコシル化障害、後期ダンピング症候群、糖尿病母の反応性低血糖児、トリソミー１３、中枢性低換気症候群、妖精症（インスリン抵抗症候群）、モザイクターナー症候群、アッシャー症候群、非インスリノーマ膵臓由来低血糖、虚偽性低血糖、インスリン遺伝子受容体変異、インスリン自己免疫症候群、非膵島細胞腫瘍低血糖（ＮＩＣＴＨ）ならびにアルコール及びその他の常習性物質からの離脱症状などの治療に使用することができる。
【0105】
定義
本願においては、別段の指示がない限り、下記の定義が適用される。
本願においては、別段の指示がない限り、下記の定義が適用される。
【0106】
用語“アルキル”、“アリール”、及び“ヘテロアリール”は、別段の指示がない限り、それらの従来の意味で使用される(例えば、ＩＵＰＡＣ Ｇｏｌｄ Ｂｏｏｋに定義のような）。
【0107】
式（１）の化合物を含む本明細書中に記載の化合物のいずれかの使用に関連して、用語“治療”は、問題の疾患又は障害に罹患している、又は罹患するリスクがある、又は潜在的に罹患するリスクがある対象に化合物を投与する何らかの形態の介入を記載するために使用される。従って、用語“治療”は予防的(preventative,prophylactic)治療と、疾患又は障害の測定可能な又は検出可能な症状が呈示されている場合の治療の両方をカバーする。
【0108】
本明細書中で使用されている用語“有効治療量”(例えば、障害、疾患又は状態の治療法との関連で）は、所望の治療効果を生ずるために有効な化合物の量のことを言う。例えば、状態が疼痛の場合、有効治療量は、所望レベルの疼痛緩和を提供するのに足る量である。所望レベルの疼痛緩和は、例えば、疼痛の完全除去又は疼痛の重症度の軽減でありうる。
【0109】
記載されている任意の化合物がキラル中心を有する限り、本発明は、そのような化合物のすべての光学異性体にまで及び、それがラセミ化合物の形態であるか又は分割されたエナンチオマーの形態であるかを問わない。本明細書中に記載されている発明は、開示化合物のいずれかのすべての結晶形、溶媒和物及び水和物に関する（どのように製造されようとも）。本明細書中に開示された任意の化合物がカルボン酸又はアミノ基などの酸又は塩基中心を有する限り、前記化合物のすべての塩形は本発明に包含される。製薬学的用途の場合、その塩は薬学的に許容可能な塩と見なされるべきである。
【0110】
言及されうる塩又は薬学的に許容可能な塩は、酸付加塩及び塩基付加塩を含む。そのような塩は従来手段によって形成できる。例えば、化合物の遊離酸又は遊離塩基形を、１当量以上の適当な酸又は塩基と、任意に溶媒中、又は塩が不溶性の媒体中で反応させた後、前記溶媒又は前記媒体を標準技術を用いて（例えば、真空下で、凍結乾燥により、又はろ過により）除去することによる。塩は、塩の形態の化合物の対イオンを、例えば適切なイオン交換樹脂を用いて、別の対イオンと交換することによって製造することもできる。
【0111】
薬学的に許容可能な塩の例は、鉱酸及び有機酸から誘導される酸付加塩、及びナトリウム、マグネシウム、カリウム及びカルシウムなどの金属から誘導される塩を含む。
【0112】
酸付加塩の例は、酢酸、２，２－ジクロロ酢酸、アジピン酸、アルギン酸、アリールスルホン酸（例えば、ベンゼンスルホン酸、ナフタレン－２－スルホン酸、ナフタレン－１，５－ジスルホン酸及びｐ－トルエンスルホン酸）、アスコルビン酸（例えばＬ－アスコルビン酸）、Ｌ－アスパラギン酸、安息香酸、４－アセトアミド安息香酸、ブタン酸、（＋）樟脳酸、樟脳－スルホン酸、（＋）－（１Ｓ）－樟脳－１０－スルホン酸、カプリン酸、カプロン酸、カプリル酸、桂皮酸、クエン酸、シクラミン酸、ドデシル硫酸、エタン－１，２－ジスルホン酸、エタンスルホン酸、２－ヒドロキシエタンスルホン酸、ギ酸、フマル酸、ガラクタル酸、ゲンチシン酸、グルコヘプトン酸、グルコン酸（例えばＤ－グルコン酸）、グルクロン酸（例えばＤ－グルクロン酸）、グルタミン酸（例えばＬ－グルタミン酸）、α－オキソグルタル酸、グリコール酸、馬尿酸、臭化水素酸、塩酸、ヨウ化水素酸、イセチオン酸、乳酸（例えば（＋）－Ｌ－乳酸及び（±）－ＤＬ－乳酸）、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸（例えば（－）－Ｌ－リンゴ酸）、マロン酸、（±）－ＤＬ－マンデル酸、メタリン酸、メタンスルホン酸、１－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸、ニコチン酸、硝酸、オレイン酸、オロチン酸、シュウ酸、パルミチン酸、パモ酸、リン酸、プロピオン酸、Ｌ－ピログルタミン酸、サリチル酸、４－アミノ－サリチル酸、セバシン酸、ステアリン酸、コハク酸、硫酸、タンニン酸、酒石酸（例えば（＋）－Ｌ－酒石酸）、チオシアン酸、ウンデシレン酸及び吉草酸と形成される酸付加塩を含む。
【0113】
化合物の任意の溶媒和物及びそれらの塩も包含される。好適な溶媒和物は、本発明の化合物の固体構造（例えば結晶構造）に、非毒性の薬学的に許容可能な溶媒（以下、溶媒和溶媒と呼ぶ）の分子を組み込むことによって形成される溶媒和物である。そのような溶媒の例は、水、アルコール（例えば、エタノール、イソプロパノール及びブタノール）及びジメチルスルホキシドなどである。溶媒和物は、本発明の化合物を溶媒又は溶媒和溶媒を含有する溶媒の混合物で再結晶化することによって製造できる。溶媒和物が任意の所与の場合に形成されたかどうかは、化合物の結晶を、熱重量分析（ＴＧＡ）、示差走査熱量測定（ＤＳＣ）及びＸ線結晶構造解析などの周知の標準的な技術を用いて分析に付すことによって決定できる。
【0114】
溶媒和物は、化学量論的又は非化学量論的溶媒和物でありうる。特別な溶媒和物は水和物であり得、水和物の例は、半水和物、一水和物及び二水和物を含む。溶媒和物ならびにその製造及び特徴付けに使用される方法のより詳細な解説については、Ｂｒｙｎら、Ｓｏｌｉｄ－Ｓｔａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｄｒｕｇｓ、第２版、出版ＳＳＣＩ，Ｉｎｃ，米国インディアナ州ウェストラファイエット、１９９９、ＩＳＢＮ ０－９６７－０６７１０－３参照。
【0115】
本発明の文脈において、用語“医薬組成物”は、活性薬を含み、追加的に一つ又は複数の薬学的に許容可能な担体も含む組成物を意味する。前記組成物はさらに、投与様式及び剤形の性質に応じて、例えば、希釈剤、アジュバント、賦形剤、ビヒクル、保存剤、充填剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、フレーバー剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤及び分散剤から選ばれる成分も含有しうる。前記組成物は、例えば、錠剤、糖衣錠、散剤、エリキシル剤、シロップ剤、懸濁液を含む液体製剤、スプレー剤、吸入剤、錠剤、トローチ剤、エマルション剤、溶液剤、カシェ剤、顆粒剤、カプセル剤及び坐剤、ならびにリポソーム製剤を含む注射用液体製剤の形態をとりうる。
【0116】
本発明の化合物は一つ又は複数の同位体置換を含有していてもよく、特定の元素への言及は、その元素のすべての同位体をその範囲内に含む。例えば、水素への言及は、１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、及び３Ｈ（Ｔ）をその範囲内に含む。同様に、炭素及び酸素への言及は、それぞれ１２Ｃ、１３Ｃ及び１４Ｃならびに１６Ｏ及び１８Ｏをそれらの範囲内に含む。同様に、特定の官能基への言及も、文脈上別の指示がない限り、同位体変化をその範囲内に含む。例えば、エチル基などのアルキル基又はメトキシ基などのアルコキシ基への言及も、例えば、全５個の水素原子がジュウテリウム同位体形であるエチル基（ペルジュウテロエチル基）又は全３個の水素原子がジュウテリウム同位体形であるメトキシ基（トリジュウテロメトキシ基）のように、基内の１個又は複数個の水素原子がジュウテリウム又はトリチウム同位体の形態である変化をカバーする。同位体は放射性でも又は非放射性でもよい。
【0117】
治療用量は、患者の要件、治療される状態の重症度、及び使用される化合物に応じて変動しうる。特定の状況に対する適正な用量は当該技術分野の技能の範囲内である。一般的に、治療は、化合物の最適用量より少ない用量で開始される。その後、用量は、状況下での最適効果に到達するまで少しずつ増量される。便宜上、総日用量は、所望であれば、その一日の中で分割し、分割量で投与されてもよい。
【0118】
化合物の有効量の大きさは、当然ながら、治療される状態の重症度の性質、ならびに特定の化合物及びその投与経路に応じて変動する。適切な投与量の選択は、過度の負担なく当業者の能力の範囲内である。一般に、日用量範囲は、ヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約１０μｇ～約３０ｍｇ、好ましくはヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約５０μｇ～約３０ｍｇ、例えばヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約５０μｇ～約１０ｍｇ、例えばヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約１００μｇ～約３０ｍｇ、例えばヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約１００μｇ～約１０ｍｇ、最も好ましくはヒト及びヒト以外の動物の体重１ｋｇあたり約１００μｇ～約１ｍｇでありうる。
【0119】
医薬製剤
活性化合物は、単独で投与することも可能であるが、医薬組成物（例えば製剤）として提供するのが好ましい。
活性化合物は、単独で投与することも可能であるが、医薬組成物（例えば製剤）として提供するのが好ましい。
【0120】
そこで、本発明の別の態様において、上記定義の式（１）の少なくとも一つの化合物と共に少なくとも一つの薬学的に許容可能な賦形剤を含む医薬組成物を提供する。
【0121】
本組成物は、注射に適切な組成物でありうる。注射は、静脈内（ＩＶ）又は皮下でありうる。本組成物は、無菌緩衝液に入れて供給されても又は注射用の無菌緩衝液中に懸濁又は溶解できる固体として供給されてもよい。
【0122】
薬学的に許容可能な賦形剤（一つ又は複数）は、例えば、担体（例えば、固体、液体又は半固体の担体)、アジュバント、希釈剤（例えば、充填剤又は増量剤などの固体希釈剤；溶媒及び共溶媒などの液体希釈剤)、造粒剤、バインダ、流動助剤、コーティング剤、放出制御剤（例えば、放出遅延(retarding又はdelaying)ポリマー又はワックス）、結合剤、崩壊剤、緩衝剤、滑沢剤、保存剤、抗真菌剤及び抗菌剤、抗酸化剤、緩衝剤、張度調整剤、増粘剤、フレーバー剤、甘味剤、色素、可塑剤、味マスキング剤、安定剤、又は医薬組成物に従来使用される任意のその他の賦形剤から選ぶことができる。
【0123】
本明細書中で使用されている用語“薬学的に許容可能な”とは、健全な医学的判断の範囲内で、過剰の毒性、刺激、アレルギー反応、又はその他の問題もしくは合併症なしに対象（例えばヒト対象）の組織と接触させて使用するのに適切な、合理的な利益／リスク比に見合う化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を意味する。各賦形剤は、製剤のその他の成分とも適合性があるという意味においても“許容可能”でなければならない。
【0124】
式（１）の化合物を含有する医薬組成物は公知技術に従って製剤化できる。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ（米国ペンシルベニア州イーストン）参照。
【0125】
適切な製剤は、典型的には、０～２０％（ｗ／ｗ）の緩衝液、０～５０％（ｗ／ｗ）の共溶媒、及び／又は０～９９％（ｗ／ｗ）の注射用水（ＷＦＩ）を含有する（用量に応じて、及び凍結乾燥されている場合）。筋肉内デポ製剤は０～９９％（ｗ／ｗ）のオイルも含有しうる。
【0126】
式（１）の化合物は、一般的に単一剤形中に提供され、従って典型的には所望の生物活性レベルを提供するのに足る化合物を含有する。例えば、製剤は、１ナノグラム～２グラムの活性成分、例えば１ナノグラム～２ミリグラムの活性成分を含有しうる。これらの範囲内で化合物の特定の部分範囲は、０．１ミリグラム～２グラムの活性成分（より通常的には１０ミリグラム～１グラム、例えば５０ミリグラム～５００ミリグラム）、又は１マイクログラム～２０ミリグラム（例えば１マイクログラム～１０ミリグラム、例えば０．１ミリグラム～２ミリグラムの活性成分）である。
【0127】
活性化合物は、それを必要とする患者（例えばヒト又は動物患者）に、所望の治療効果を達成するのに足る量（有効量）で投与される。投与される化合物の正確な量は、標準的な手順に従って監督医師が決定できる。
【実施例】
【0128】
次に、本発明を、以下の実施例に記載された特定の態様を参照することにより、非限定的に説明する。
【0129】
実施例１～３３
上記表１に示されている実施例１～３３の化合物を調製した。それらのＬＣＭＳ特性及びそれらの調製に使用された方法を表２に示す。各実施例の出発物質は、別段の指示がない限り市販品である。
上記表１に示されている実施例１～３３の化合物を調製した。それらのＬＣＭＳ特性及びそれらの調製に使用された方法を表２に示す。各実施例の出発物質は、別段の指示がない限り市販品である。
【0130】
一般的手順
調製経路が含まれていない場合、当該中間体は市販品である。市販試薬は更なる精製をせずに利用した。室温（ｒｔ）はおよそ２０～２７℃を指す。
調製経路が含まれていない場合、当該中間体は市販品である。市販試薬は更なる精製をせずに利用した。室温（ｒｔ）はおよそ２０～２７℃を指す。
【0131】
分析法
化合物のＬＣＭＳ分析はエレクトロスプレー条件下で実施した。
化合物のＬＣＭＳ分析はエレクトロスプレー条件下で実施した。
【0132】
分析法Ａ
ＭＳイオンは、エレクトロスプレー条件下で下記のＬＣＭＳ法を用いて決定し、ＨＰＬＣのリテンションタイム（ＲＴ）は、下記のＨＰＬＣ法を用いて決定し、純度は、特に明記されない限りＨＰＬＣにより＞９５％。
ＭＳイオンは、エレクトロスプレー条件下で下記のＬＣＭＳ法を用いて決定し、ＨＰＬＣのリテンションタイム（ＲＴ）は、下記のＨＰＬＣ法を用いて決定し、純度は、特に明記されない限りＨＰＬＣにより＞９５％。
【0133】
ＬＣＭＳ：Ａｇｉｌｅｎｔ １２００ ＨＰＬＣ＆６４１０Ｂ トリプル四重極、カラム：Ｘｂｒｉｄｇｅ Ｃ１８ ３．５ｕｍ ２．１＊３０ｍｍ。グラジエント［時間（分）／溶媒Ｂ（％）］：０．０／１０、０．９／８０、１．５／９０、８．５／５、１．５１／１０。（溶媒Ａ＝１０００ｍＬの水中１ｍＬのＴＦＡ；溶媒Ｂ＝１０００ｍＬのＭｅＣＮ中１ｍＬのＴＦＡ）；注入量５μＬ（変動あり）；ＵＶ検出 ２２０ｎｍ ２５４ｎｍ ２１０ｎｍ；カラム温度２５℃；１．０ｍＬ／分。
【0134】
ＨＰＬＣ：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ １２００、カラム：Ｇｅｍｉｎｉ－ＮＸ Ｃ１８ ５ｕｍ １１０Ａ １５０＊４．６ｍｍ。グラジエント［時間（分）／溶媒Ｂ（％）］：０．０／３０、２０／６０、２０．１／９０、２３／９０。（溶媒Ａ＝１０００ｍＬの水中１ｍＬのＴＦＡ；溶媒Ｂ＝１０００ｍＬのＭｅＣＮ中１ｍＬのＴＦＡ）；注入量５μＬ（変動あり）；ＵＶ検出 ２２０ｎｍ ２５４ｎｍ；カラム温度２５℃；１．０ｍＬ／分。
【0135】
分析法Ｂ
機器：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｏｒｂｉｔｒａｐ Ｆｕｓｉｏｎ；カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ １００Å、２．６μｍ、２．１×５０ｍｍ；グラジエント［時間（分）／溶媒Ａ中Ｂ（％）］：０．００／１０、０．３０／１０、０．４０／６０、１．１０／９０、１．７０／９０、１．７５／１０、１．９９／１０、２．００／１０；溶媒：溶媒Ａ＝０．１％ギ酸水溶液；溶媒Ｂ＝アセトニトリル中０．１％ギ酸；注入量５μＬ；カラム温度２５℃；流速０．８ｍＬ／分。
機器：Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｏｒｂｉｔｒａｐ Ｆｕｓｉｏｎ；カラム：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｋｉｎｅｔｅｘ Ｂｉｐｈｅｎｙｌ １００Å、２．６μｍ、２．１×５０ｍｍ；グラジエント［時間（分）／溶媒Ａ中Ｂ（％）］：０．００／１０、０．３０／１０、０．４０／６０、１．１０／９０、１．７０／９０、１．７５／１０、１．９９／１０、２．００／１０；溶媒：溶媒Ａ＝０．１％ギ酸水溶液；溶媒Ｂ＝アセトニトリル中０．１％ギ酸；注入量５μＬ；カラム温度２５℃；流速０．８ｍＬ／分。
【0136】
中間体及び化合物の合成
下記実施例は、本発明の好適な側面を例示するために提供されるのであって、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。すべてのＦｍｏｃ－アミノ酸は市販品である。
下記実施例は、本発明の好適な側面を例示するために提供されるのであって、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。すべてのＦｍｏｃ－アミノ酸は市販品である。
【0137】
実施例１～３３の合成
標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を用いて直鎖ペプチドを合成した後、樹脂から切断し、精製した。
標準的なＦｍｏｃ固相ペプチド合成（ＳＰＰＳ）を用いて直鎖ペプチドを合成した後、樹脂から切断し、精製した。
【0138】
一般的なペプチド合成法：
方法ａ－実施例２５の合成により例示
ペプチド合成
１）ＤＣＭをＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（ｓｕｂ：０．３５ｍｍｏｌ／ｇ、０．３ｍｍｏｌ、０．８６ｇ）入り容器に加え、２時間膨潤。
方法ａ－実施例２５の合成により例示
ペプチド合成
１）ＤＣＭをＲｉｎｋ Ａｍｉｄｅ ＭＢＨＡ樹脂（ｓｕｂ：０．３５ｍｍｏｌ／ｇ、０．３ｍｍｏｌ、０．８６ｇ）入り容器に加え、２時間膨潤。
【0139】
２）排水後、ＤＭＦで洗浄（５回、洗浄ごとに排水）。
【0140】
３）ＤＭＦ中２０％ピペリジン溶液を加え、Ｎ２通気しながら３０分間撹拌。
【0141】
４）排水し、ＤＭＦで洗浄（５回、洗浄ごとに排水）。
【0142】
５）Ｆｍｏｃ－アミノ酸溶液（ＤＭＦ中３．０当量）を加え、３０秒間混合後、活性化緩衝液（ＤＭＦ中ＨＢＴＵ（２．８５当量）及びＤＩＥＡ（６当量））を加え、Ｎ２通気しながら１時間撹拌。
【0143】
６）カップリング反応をニンヒドリン試験によってモニター。
【0144】
７）効率の悪いカップリングが発生した場合、必要であれば、同じアミノ酸カップリングについて工程４～６を反復。
【0145】
８）次のアミノ酸カップリングについて工程２～６を反復。
【0146】
注：以下の表中の酸については異なる保護基及び／又はカップリング剤が使用された。
【表A】
【0147】
ペプチド側鎖脱保護環化：
１）ＤＣＭを樹脂に加え、Ｎ２通気しながら撹拌した後、ＰｈＳｉＨ３（１０当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２当量）を加え、Ｎ２と共に１５分間３回撹拌。
１）ＤＣＭを樹脂に加え、Ｎ２通気しながら撹拌した後、ＰｈＳｉＨ３（１０当量）、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４（０．２当量）を加え、Ｎ２と共に１５分間３回撹拌。
【0148】
２）樹脂をＤＣＭで３回洗浄した後、ＤＭＦで３回洗浄。
【0149】
３）樹脂を０．５％ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム三水和物ＤＭＦ及びＤＭＦ中０．５％ＤＩＥＡで１０回洗浄。
【0150】
４）ＨＡＴＵ（２当量）及びＤＩＥＡ（４当量）をＤＭＦ中の樹脂に加え、Ｎ２通気しながら１時間撹拌。
【0151】
５）樹脂をＭｅＯＨで３回洗浄し、真空下で乾燥。
【0152】
ペプチドの切断と精製：
１）切断緩衝液（９２．５％ＴＦＡ／２．５％ＥＤＴ／２．５％ＴＩＳ／２．５％Ｈ２Ｏ）を、樹脂上の側鎖保護ペプチド入りフラスコに室温で加え、３時間撹拌。
１）切断緩衝液（９２．５％ＴＦＡ／２．５％ＥＤＴ／２．５％ＴＩＳ／２．５％Ｈ２Ｏ）を、樹脂上の側鎖保護ペプチド入りフラスコに室温で加え、３時間撹拌。
【0153】
２）ペプチド溶液をろ過し、回収。
【0154】
３）ペプチドを冷ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルで沈殿させ、遠心分離（３０００ｒｐｍで３分間）。
【0155】
４）残渣をｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテルで洗浄（２回）。
【0156】
５）粗ペプチドを真空下で２時間乾燥。
【0157】
６）粗ペプチドを分取ＨＰＬＣで精製。分取ＨＰＬＣ条件：機器：Ｇｉｌｓｏｎ ２８１。溶媒：Ａ－Ｈ２Ｏ中０．１％ＴＦＡ、Ｂ－アセトニトリル、カラム：Ｌｕｎａ Ｃ１８（２００×２５ｍｍ；１０μｍ）及びＧｅｍｉｎｉ Ｃ１８（１５０＊３０ｍｍ；５μｍ）を直列配置。グラジエント［時間（分）／溶媒Ｂ（％）］：２０ｍＬ／分で、０．０／１５、６０．０／５５、６０．１／９０、７０／９０、７０．１／１０、ＵＶ検出（波長＝２１５／２５４ｎｍ）後、凍結乾燥し、実施例２５（３２．１ｍｇ、収率４．０６％）を得た。
【0158】
表２ － 実施例１～３３によって示される精製ペプチドのＨＲＭＳ及びＬＣＭＳ特性
【0159】
【表2-1】
【0160】
【表2-2】
下記実施例は、本発明の好適な側面を例示するために提供されるのであって、本発明の範囲を限定することを意図したものではない。
【0161】
実施例Ａ．ＧＬＰ－１ペプチドのインビトロ薬理学的特徴付け － ヒトＧＬＰ１受容体の機能的アンタゴニズム、ｃＡＭＰ蓄積アッセイ
ＧＬＰ－１Ｒをアゴニストリガンド（ＧＬＰ－１（７－３６）アミドペプチド、Ｔｏｃｒｉｓ）で刺激した時のｃＡＭＰ産生のアンタゴニスト阻害を、ＨｉＲａｎｇｅ ｃＡＭＰキット（Ｃｉｓｂｉｏ）を用いて評価した。方法は、キットに提供されている２段階プロトコルに従った。簡潔に述べると、１％ｖ／ｖ ＧＬＰ－１Ｒ Ｂａｃｍａｍに２４時間感染させたＨＥＫ細胞を、細胞剥離液（Ｇｉｂｃｏ）を用いて収穫し、遠心分離してアッセイ緩衝液（０．５ｍＭのＩＢＭＸ（Ｔｏｃｒｉｓ）を補給したＨＢＳＳ（Ｌｏｎｚａ））中に再懸濁した。試験化合物のＤＭＳＯストックをアッセイ緩衝液中に段階希釈し、９６ウェルハーフエリア白色プレート（Ｃｏｓｔａｒ）に加えた。アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は０．３％であった。プレートにウェルあたり２０Ｋ個の細胞を加えた後、３０分間インキュベーションした（加湿空気（５％ＣＯ２）、３７℃）。次に、ＥＣ８０濃度に等しいＧＬＰ－１（７－３６）ペプチドを添加することにより、細胞をさらに３０分間刺激した（加湿空気（５％ＣＯ２）、３７℃）。ｃＡＭＰの細胞内蓄積を、キットに提供されている溶解緩衝液中ＨＴＲＦ検出試薬の添加により停止させた。室温で１時間のインキュベーション後、プレートをＰｈｅｒａｓｔａｒ ＦＳ（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）で読み取った。Ｄｏｔｍａｔｉｃｓ Ｓｔｕｄｉｅｓソフトウェアを用い、データを４パラメーター濃度反応曲線にあてはめた。算出されたＩＣ５０値は、Ｃｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を適応してアゴニスト濃度について補正され、機能的ｐＫｂ値：
ＧＬＰ－１Ｒをアゴニストリガンド（ＧＬＰ－１（７－３６）アミドペプチド、Ｔｏｃｒｉｓ）で刺激した時のｃＡＭＰ産生のアンタゴニスト阻害を、ＨｉＲａｎｇｅ ｃＡＭＰキット（Ｃｉｓｂｉｏ）を用いて評価した。方法は、キットに提供されている２段階プロトコルに従った。簡潔に述べると、１％ｖ／ｖ ＧＬＰ－１Ｒ Ｂａｃｍａｍに２４時間感染させたＨＥＫ細胞を、細胞剥離液（Ｇｉｂｃｏ）を用いて収穫し、遠心分離してアッセイ緩衝液（０．５ｍＭのＩＢＭＸ（Ｔｏｃｒｉｓ）を補給したＨＢＳＳ（Ｌｏｎｚａ））中に再懸濁した。試験化合物のＤＭＳＯストックをアッセイ緩衝液中に段階希釈し、９６ウェルハーフエリア白色プレート（Ｃｏｓｔａｒ）に加えた。アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は０．３％であった。プレートにウェルあたり２０Ｋ個の細胞を加えた後、３０分間インキュベーションした（加湿空気（５％ＣＯ２）、３７℃）。次に、ＥＣ８０濃度に等しいＧＬＰ－１（７－３６）ペプチドを添加することにより、細胞をさらに３０分間刺激した（加湿空気（５％ＣＯ２）、３７℃）。ｃＡＭＰの細胞内蓄積を、キットに提供されている溶解緩衝液中ＨＴＲＦ検出試薬の添加により停止させた。室温で１時間のインキュベーション後、プレートをＰｈｅｒａｓｔａｒ ＦＳ（ＢＭＧ Ｌａｂｔｅｃｈ，Ｉｎｃ．）で読み取った。Ｄｏｔｍａｔｉｃｓ Ｓｔｕｄｉｅｓソフトウェアを用い、データを４パラメーター濃度反応曲線にあてはめた。算出されたＩＣ５０値は、Ｃｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を適応してアゴニスト濃度について補正され、機能的ｐＫｂ値：
【0162】
【数1】
【表B】
【0163】
実施例Ｂ．ＧＬＰ－１ペプチドのインビトロ薬理学的特徴付け － マウスＧＬＰ１受容体の機能的アンタゴニズム、ｃＡＭＰ蓄積アッセイ
ＧＬＰ－１Ｒをアゴニストリガンドで刺激した時のｃＡＭＰ産生のアンタゴニスト阻害を、ＨｉｔＨｕｎｔｅｒ ｃＡＭＰアッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）を用いて評価した。方法は、キットに提供されているアンタゴニスト手順工程に従った。簡潔に述べると、マウスＧＬＰ－１Ｒを安定的に発現しているＣＨＯ－Ｋ１細胞を解凍し、ウェルあたり１０Ｋ個の細胞を、総容量２０μｌのＣＰ０５試薬入りの白色ウォール３８４ウェルプレートにプレーティイングし、Ｃｙｔｏｍａｔ中３７℃で一晩インキュベートした。アッセイ当日、培地を１５μｌのＨＢＳＳ／１０ｍＭ ＨＥＰＥＳと交換した。試験化合物のＤＭＳＯストックをＤＭＳＯ中に段階希釈した後、さらにＨＢＳＳ／１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ中に希釈し、各濃度５μｌをプレートに加え、続いて３７℃で３０分間インキュベートした。アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は１％であった。ＥＣ８０濃度に等しいエキセンジン－４の添加により、細胞を３７℃でさらに３０分間刺激した。ｃＡＭＰの細胞内蓄積を、キットに提供されている溶解緩衝液中ＨｉｔＨｕｎｔｅｒ検出試薬の添加により停止させた。室温で１時間、暗所でインキュベーション後、プレートをＥｎｖｉｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。Ｄｏｔｍａｔｉｃｓ Ｓｔｕｄｉｅｓソフトウェアを用い、データを４パラメーター濃度反応曲線にあてはめた。算出されたＩＣ５０値は、Ｃｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を適応してアゴニスト濃度について補正され、機能的ｐＫｂ値：
ＧＬＰ－１Ｒをアゴニストリガンドで刺激した時のｃＡＭＰ産生のアンタゴニスト阻害を、ＨｉｔＨｕｎｔｅｒ ｃＡＭＰアッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅｒＸ）を用いて評価した。方法は、キットに提供されているアンタゴニスト手順工程に従った。簡潔に述べると、マウスＧＬＰ－１Ｒを安定的に発現しているＣＨＯ－Ｋ１細胞を解凍し、ウェルあたり１０Ｋ個の細胞を、総容量２０μｌのＣＰ０５試薬入りの白色ウォール３８４ウェルプレートにプレーティイングし、Ｃｙｔｏｍａｔ中３７℃で一晩インキュベートした。アッセイ当日、培地を１５μｌのＨＢＳＳ／１０ｍＭ ＨＥＰＥＳと交換した。試験化合物のＤＭＳＯストックをＤＭＳＯ中に段階希釈した後、さらにＨＢＳＳ／１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ中に希釈し、各濃度５μｌをプレートに加え、続いて３７℃で３０分間インキュベートした。アッセイにおける最終ＤＭＳＯ濃度は１％であった。ＥＣ８０濃度に等しいエキセンジン－４の添加により、細胞を３７℃でさらに３０分間刺激した。ｃＡＭＰの細胞内蓄積を、キットに提供されている溶解緩衝液中ＨｉｔＨｕｎｔｅｒ検出試薬の添加により停止させた。室温で１時間、暗所でインキュベーション後、プレートをＥｎｖｉｓｉｏｎ（Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ）で読み取った。Ｄｏｔｍａｔｉｃｓ Ｓｔｕｄｉｅｓソフトウェアを用い、データを４パラメーター濃度反応曲線にあてはめた。算出されたＩＣ５０値は、Ｃｈｅｎｇ－Ｐｒｕｓｏｆｆ式を適応してアゴニスト濃度について補正され、機能的ｐＫｂ値：
【0164】
【数2】
【表C】
【0165】
実施例Ｃ．正常マウスにおけるＩＰＧＴＴ試験
本研究の目的は、エキセンジン－４（ＧＬＰ－１受容体アゴニスト）による痩せ型雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの耐糖能の改善を遮断／縮小／拮抗することに対するリードＧＬＰ１アンタゴニストペプチドの静脈内投与の効果を評価することである。グルコースは腹腔内経路で投与された。
本研究の目的は、エキセンジン－４（ＧＬＰ－１受容体アゴニスト）による痩せ型雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊマウスの耐糖能の改善を遮断／縮小／拮抗することに対するリードＧＬＰ１アンタゴニストペプチドの静脈内投与の効果を評価することである。グルコースは腹腔内経路で投与された。
【0166】
材料及び方法
痩せ型雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ ＪＡＸマウスを、到着後すぐ、そして研究期間中、ポリプロピレン製ケージに入れ、正常の１２時間明暗サイクル（０７：００に点灯）で単独飼育した。相対湿度は典型的には５５±１５％で、４０％ＲＨを下回る又は７０％ＲＨを上回る期間が長期化しないようにした。動物は研究期間中、特に明記しない限り、標準的な維持食と水道水を自由に摂取できた。
痩せ型雄Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ ＪＡＸマウスを、到着後すぐ、そして研究期間中、ポリプロピレン製ケージに入れ、正常の１２時間明暗サイクル（０７：００に点灯）で単独飼育した。相対湿度は典型的には５５±１５％で、４０％ＲＨを下回る又は７０％ＲＨを上回る期間が長期化しないようにした。動物は研究期間中、特に明記しない限り、標準的な維持食と水道水を自由に摂取できた。
【0167】
実験手順
動物を動物ユニットと食餌に約２週間馴化させ、研究開始前５日間は投与プロトコルに動物を慣れさせるために毎日ハンドリングした。動物を体重に基づいて無作為化し、平均体重についてグループ間のバランスがなるべく均衡するようにした。
動物を動物ユニットと食餌に約２週間馴化させ、研究開始前５日間は投与プロトコルに動物を慣れさせるために毎日ハンドリングした。動物を体重に基づいて無作為化し、平均体重についてグループ間のバランスがなるべく均衡するようにした。
【0168】
ｉｐＧＴＴの前日、全動物を確実に絶食させた（水の自由な摂取は維持）。実験当日、動物を別の部屋に移した。処置１の前にベースラインの血液サンプルを全動物から採取した（グルコース投与２０分前）。５分後、マウスに処置１を静脈内経路により投与した（グルコース投与１５分前）。処置２（エキセンジン－４又はビヒクル）をグルコース負荷１０分前に投与した（全群）。処置２の投与１０分後、動物に腹腔内経路によりＤ－グルコースによるグルコース負荷を投与した（２．０ｇ／ｋｇ、４００ｍｇ／ｍｌの濃度のものを５ｍｌ／ｋｇの容量で）。血液サンプルをグルコース投与３分前ならびにグルコース投与１０、３０、６０、９０及び１２０分後に採取した。その後、血漿サンプルを１０分時点でグルコースとインスリンについて１連で(as single replicate)アッセイし、データをロバスト回帰によって分析し、ＡＵＣ０～１２０分をグルコースデータについて（全ＡＵＣ及びベースラインからのＡＵＣ）台形公式により計算し、同じ方法論によって分析した。
【図1】
【図2】
【国際調査報告】