特表 2023-537944 ＣＦＴＲモジュレーターの結晶形態

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-09-06

(54)【発明の名称】ＣＦＴＲモジュレーターの結晶形態

(51)【国際特許分類】

   C07D 513/22 20060101AFI20230830BHJP

   A61P 3/00 20060101ALI20230830BHJP

   A61P 3/12 20060101ALI20230830BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20230830BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230830BHJP

   A61K 31/404 20060101ALI20230830BHJP

   A61K 31/47 20060101ALI20230830BHJP

   A61K 31/439 20060101ALI20230830BHJP

【ＦＩ】

C07D513/22 CSP

A61P3/00

A61P3/12

A61K45/00

A61P43/00 111

A61P43/00 121

A61K31/404

A61K31/47

A61K31/439

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023509506

(86)(22)【出願日】2021-08-12

(85)【翻訳文提出日】2023-03-13

(86)【国際出願番号】 US2021045691

(87)【国際公開番号】W WO2022036060

(87)【国際公開日】2022-02-17

(31)【優先権主張番号】63/065,057

(32)【優先日】2020-08-13

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＰＬＵＲＯＮＩＣ

(71)【出願人】

【識別番号】598032106

【氏名又は名称】バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】ＶＥＲＴＥＸ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ ＩＮＣＯＲＰＯＲＡＴＥＤ

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】イエムペルマル， サティシュ クマール

(72)【発明者】

【氏名】ペレシープキン， アンドレイ

(72)【発明者】

【氏名】シー， イー

(72)【発明者】

【氏名】シュレスタ， ムナ

【テーマコード（参考）】

4C072

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C072AA01

4C072AA03

4C072BB04

4C072CC05

4C072CC16

4C072EE19

4C072FF03

4C072GG07

4C072GG08

4C072HH07

4C072JJ09

4C084AA19

4C084MA02

4C084MA35

4C084MA52

4C084NA03

4C084NA05

4C084ZC011

4C084ZC012

4C084ZC211

4C084ZC212

4C084ZC751

4C084ZC752

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA03

4C086BC13

4C086BC29

4C086CB26

4C086GA02

4C086GA07

4C086GA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA35

4C086MA52

4C086NA03

4C086NA05

4C086ZC01

4C086ZC21

4C086ZC75

(57)【要約】

化合物Ｉの塩の結晶形態が開示される。それらを含む医薬組成物、それらを使用して嚢胞性線維症を治療する方法、及びそれを作製するための方法も開示される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

実質的に結晶性の化合物Ｉであって、

【化31】

前記結晶性の化合物Ｉが、実質的に純粋な化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ、及び化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａから選択される、実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項2】

化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態にある、請求項１に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項3】

化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態にある、請求項１に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項4】

化合物Ｉの５％未満が、非晶質形態にある、請求項１に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項5】

化合物Ｉの１００％が、結晶性である、請求項１に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項6】

Ｘ線粉末ディフラクトグラム（ＸＲＰＤ）によって特徴付けられた、請求項１～５のいずれか一項に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項7】

請求項１～６のいずれか一項に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉを含む、医薬組成物。

【請求項8】

１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、請求項７に記載の医薬組成物。

【請求項9】

少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物が、ＣＦＴＲ増強因子である、請求項８に記載の医薬組成物。

【請求項10】

少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物が、ＣＦＴＲ補正因子である、請求項８又は９に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、（ａ）化合物ＩＩ、及び（ｂ）化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄから選択される、請求項１０に記載の医薬組成物。

【請求項12】

嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、請求項１～６のいずれか一項に記載の化合物Ｉの実質的に結晶性の形態の、使用。

【請求項13】

前記医薬品が、１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、請求項１２に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉの使用。

【請求項14】

前記１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、（ａ）化合物ＩＩ及び（ｂ）化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄから選択される、請求項１２に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉの使用。

【請求項15】

嚢胞性線維症を治療する方法であって、請求項１～６のいずれか一項に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ又は請求項７～１１のいずれか一項に記載の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、方法。

【請求項16】

前記実質的に結晶性の化合物Ｉが、１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物とともに投与される、請求項１５に記載の嚢胞性線維症を治療する方法。

【請求項17】

前記１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、（ａ）化合物ＩＩ、及び（ｂ）化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄから選択される、請求項１６に記載の嚢胞性線維症を治療する方法。

【請求項18】

前記嚢胞性線維症の治療に使用するための、請求項１～６のいずれか一項に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉ又は請求項７～１１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項19】

前記実質的に結晶性の化合物Ｉが、１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物の前、その後、又はそれと同時の投与のために製剤化される、請求項１８に記載の嚢胞性線維症の治療に使用するための実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項20】

前記１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、（ａ）化合物ＩＩ、及び（ｂ）化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄから選択される、請求項１９に記載の嚢胞性線維症の治療に使用するための実質的に結晶性の化合物Ｉ。

【請求項21】

請求項１～６のいずれか一項に記載の実質的に結晶性の化合物Ｉを調製する方法であって、
（ａ）化合物Ｉ遊離酸をエタノール中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを得ること、
（ｂ）化合物Ｉ遊離酸をＴＨＦ中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを得ること、
（ｃ）化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを得ること、
（ｄ）化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のｐ－トルエンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを得ること、又は
（ｅ）化合物Ｉ遊離酸を、１，４－ジオキサン及び水の混合物中の塩化マグネシウム及び水酸化ナトリウムとスラリー化し、前記混合物を凍結乾燥させ、アセトン及び水を添加し、周囲温度～４０℃で前記混合物を温度循環させ、固体を濾過し、真空下で乾燥させて、実質的に結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを得ることを含む、方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本出願は、２０２０年８月１３日に出願された米国仮出願第６３／０６５，０５７号の利益を主張するものであり、その内容は、参照によりその全体が組み込まれる。

【背景技術】

【0002】

嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子（ＣＦＴＲ）のモジュレーター、それらのモジュレーターを含有する医薬組成物、それらのモジュレーター及び組成物を用いて嚢胞性線維症を治療する方法、並びにモジュレーターを作製するためのプロセスが、本明細書に開示される。

【0003】

嚢胞性線維症（ＣＦ）は、世界中でおよそ７０，０００人の子供及び成人に影響を及ぼす劣性遺伝子疾患である。ＣＦの治療は進歩しているにもかかわらず、治癒法は存在しない。

【0004】

ＣＦを有する患者において、呼吸器上皮に内因的に発現されるＣＦＴＲの変異は、頂端アニオン分泌を低減し、イオン及び流体輸送（ｔｒａｎｓｐｏｒｔ）の不均衡を引き起こす。結果として生じるアニオン輸送の減少は、肺内の過剰な粘液蓄積、及びＣＦ患者において最終的に死を引き起こす随伴する微生物感染の一因となる。呼吸器疾患に加えて、ＣＦ患者は、典型的には、消化器障害及び膵臓機能不全に罹患しており、治療されないままだと、死に至る。更に、嚢胞性線維症を有する男性の大部分は不妊であり、嚢胞性線維症を有する女性では受胎能力は低い。

【0005】

ＣＦＴＲ遺伝子の配列分析により、多様な疾患を引き起こす変異が明らかにされている（Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４６：３６６－３６９、Ｄｅａｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１：８６３：８７０、及びＫｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０７３－１０８０、Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：８４４７－８４５１）。これまでに、ＣＦ遺伝子における２０００個を超える変異が同定されており、現在、ＣＦＴＲ２データベースは、これらの同定された変異のうちの４１２個のみに関する情報を含み、３４６個の変異が疾患を引き起こすと定義するのに十分な証拠がある。最も高頻度に見られる疾患を引き起こす変異は、ＣＦＴＲアミノ酸配列の５０８位のフェニルアラニンの欠失であり、一般にＦ５０８ｄｅｌ変異と呼ばれる。この変異は、嚢胞性線維症の近似的に多くの症例で発生し、重症疾患を伴う。

【0006】

ＣＦＴＲにおける残基５０８の欠失は、新生タンパク質が正確に折りたたまれるのを妨げる。これにより、変異タンパク質が小胞体（ＥＲ）を出て、原形質膜に輸送されることが不可能となる。結果として、膜内に存在するアニオン輸送のためのＣＦＴＲチャネルの数は、野生型ＣＦＴＲ、すなわち変異を有しないＣＦＴＲを発現する細胞において観察されるものよりもはるかに少なくなる。輸送（ｔｒａｆｆｉｃｋｉｎｇ）障害に加えて、Ｆ５０８ｄｅｌ変異は、チャネルゲーティングの欠陥をもたらす。合わせて、膜におけるチャネルの数の減少及び欠陥ゲーティングは、上皮を通過するアニオン及び流体輸送の減少につながる。（Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９－２７２７）。Ｆ５０８ｄｅｌ変異のために欠陥があるチャネルは、野生型ＣＦＴＲチャネルよりも機能は低いが、依然として機能的である。（Ｄａｌｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６－５２８、Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７－５０）。Ｆ５０８ｄｅｌに加えて、欠陥のある輸送、合成、及び／又はチャネルゲーティングをもたらすＣＦＴＲにおける他の疾患を引き起こす変異は、上方又は下方制御されて、アニオン分泌を変化させ、疾患進行及び／又は重症度を修正することができる。

【0007】

ＣＦＴＲは、吸収及び分泌上皮細胞を含む、様々な細胞型において発現されるｃＡＭＰ／ＡＴＰ媒介性アニオンチャネルであり、それは、膜を通過するアニオンフラックス、並びに他のイオンチャネル及びタンパク質の活性を制御する。上皮細胞において、ＣＦＴＲの正常な機能は、呼吸器及び消化組織を含む、全身の電解質輸送を維持するために重要である。ＣＦＴＲは、１４８０個のアミノ酸から構成されており、これらは、６回膜貫通ヘリックス及びヌクレオチド結合ドメインをそれぞれ含有する膜貫通ドメインのタンデムリピートから構成されるタンパク質をコードする。２つの膜貫通ドメインは、チャネル活性及び細胞輸送を制御する複数のリン酸化部位を有する、大きな極性制御（Ｒ）ドメインによって連結されている。

【0008】

塩化物輸送は、頂端膜上に存在するＥＮａＣ及びＣＦＴＲ、並びに細胞の側底面上に発現されるＮａ^＋－Ｋ^＋－ポンプ及びＣｌ^－チャネルの活性の協調によって生じる。管腔側からの塩化物の二次的能動輸送により、細胞内塩化物が蓄積し、次いで塩化物は、Ｃｌ^－チャネルを介して細胞から受動的に離れて、一定方向に輸送され得る。側底面上のＮａ^＋／２Ｃｌ^－／Ｋ^＋共輸送体、Ｎａ^＋－Ｋ^＋－ＡＴＰａｓｅポンプ及び側底膜Ｋ^＋チャネルの配置、並びに管腔側上のＣＦＴＲは、管腔側上のＣＦＴＲを介して塩化物の分泌を調整する。水は、おそらくそれ自体では決して能動的に輸送されないので、上皮を通過する水の流れは、ナトリウム及び塩化物の全体的な流れによって生じるわずかな経上皮浸透圧勾配に依存する。
いくつかのＣＦＴＲ調節化合物が最近同定された。しかしながら、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ媒介性疾患、特にこれらの疾患のより重篤な形態の重症度を治療又は低減させることができる化合物が依然として必要とされている。

【先行技術文献】

【非特許文献】

【0009】

【非特許文献1】Ｃｕｔｔｉｎｇ，Ｇ．Ｒ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｎａｔｕｒｅ ３４６：３６６－３６９

【非特許文献2】Ｄｅａｎ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｃｅｌｌ ６１：８６３：８７０

【非特許文献3】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４５：１０７３－１０８０

【非特許文献4】Ｋｅｒｅｍ，Ｂ－Ｓ ｅｔ ａｌ．（１９９０）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８７：８４４７－８４５１

【非特許文献5】Ｑｕｉｎｔｏｎ，Ｐ．Ｍ．（１９９０），ＦＡＳＥＢ Ｊ．４：２７０９－２７２７

【非特許文献6】Ｄａｌｅｍａｎｓ ｅｔ ａｌ．（１９９１），Ｎａｔｕｒｅ Ｌｏｎｄ．３５４：５２６－５２８

【非特許文献7】Ｐａｓｙｋ ａｎｄ Ｆｏｓｋｅｔｔ（１９９５），Ｊ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２７０：１２３４７－５０

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0010】

したがって、本開示の一態様は、ＣＦＴＲ調節化合物（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）の固体形態、及びその薬学的に許容される塩を提供する。化合物Ｉは、以下の構造を有するものとして描写され得る。

【化1】

【0011】

化合物Ｉは、最初にＷＯ ２０１９／１６１０７８（参照により本明細書に組み込まれる）に、非晶質（遊離形態）固体として、かつ非晶質カルシウム塩、ナトリウム塩、及びカリウム塩として記載された。

【0012】

結晶形態は、活性成分の結晶形態の制御が望ましいか、又は必要とさえし得る、製薬産業において興味深い。異なる結晶形態は、異なる特性を有し得るため、特定の結晶形態を有する化合物を高純度で生成するための再現性のあるプロセスは、医薬品に使用されることが意図される化合物にとって望ましくあり得る。例えば、異なる結晶形態は、異なる化学的、物理的、及び／又は薬学的特性を有し得る。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される１つ以上の結晶形態は、ＷＯ ２０１９／１６１０７８で生成された形態と比較して、より高いレベルの純度、化学的安定性、及び／又は物理的安定性を示し得る。特定の結晶形態（例えば、化合物Ｉの結晶遊離形態、結晶塩、結晶塩溶媒和物、及び結晶塩水和物形態（集合的に「結晶形態」と称される）は、ＷＯ ２０１９／１６１０７８で生成された形態よりも低い吸湿性を示し得る。したがって、本開示の結晶形態は、ＷＯ ２０１９／１６１０７８で生成された非晶質形態より優れた原薬の製造、保管、及び取り扱い中の利点を提供し得る。したがって、化合物Ｉの薬学的に許容される結晶形態は、ＣＦＴＲ媒介性疾患の治療のための薬物の産生に特に有用であり得る。

【0013】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂである。化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉマグネシウム塩結晶Ａである。

【0014】

本開示の他の態様は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれかにある化合物Ｉを含む、医薬組成物を提供し、その組成物は、少なくとも１つの追加の活性医薬成分及び／又は少なくとも１つの担体を更に含み得る。本開示の更に他の態様は、任意選択的に、少なくとも１つの追加の成分（担体又は追加の活性剤など）を含む医薬組成物の一部として、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれかにある化合物Ｉを、それを必要とする対象に投与することを含む、ＣＦＴＲ媒介性疾患の嚢胞性線維症を治療する方法である。本開示の更なる態様は、本明細書に開示される化合物Ｉの結晶形態を作製するプロセスを提供する。

【0015】

一実施形態は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つとして、（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）を単独で、あるいは（Ｒ）－１－（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）－Ｎ－（１－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－２－（１－ヒドロキシ－２－メチルプロパン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）シクロプロパンカルボキサミド（化合物ＩＩ）、及び／若しくはＮ－［２，４－ビス（１，１－ジメチルエチル）－５－ヒドロキシフェニル］－１，４－ジヒドロ－４－オキソキノリン－３－カルボキサミド（化合物ＩＩＩ）若しくはＮ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミド（化合物ＩＩＩ－ｄ）と組み合わせて投与することを含む、ＣＦＴＲ媒介性疾患の嚢胞性線維症を治療する方法を提供する。

【0016】

ある特定の実施形態では、ＣＦＴＲ媒介性疾患の嚢胞性線維症を治療する方法は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つにある化合物Ｉを、化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄと組み合わせて投与することを含む。

【0017】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つにある化合物Ｉは、化合物ＩＩ及び化合物ＩＩＩと同じ組成物中で投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つにある化合物Ｉは、化合物ＩＩ及び化合物ＩＩＩ－ｄと同じ組成物中で投与される。

【0018】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つにある化合物Ｉを含む組成物は、化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩを含む別個の組成物と同時投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちの１つにある化合物Ｉを含む組成物は、化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩ－ｄを含む別個の組成物と同時投与される。

【図面の簡単な説明】

【0019】

【図1】結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＸＲＰＤパターンを示す。

【図2】化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＴＧＡ分析を示す。

【図3】結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＤＳＣ分析を示す。

【図4】結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＢのＸＲＰＤパターンを示す。

【図5】化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＢのＴＧＡ／ＤＳＣ分析を示す。

【図6】結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＣのＸＲＰＤパターンを示す。

【図7】化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＣのＴＧＡ／ＤＳＣ分析を示す。

【図8】結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＸＲＰＤパターンを示す。

【図9】化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＴＧＡ分析を示す。

【図10】結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＤＳＣ分析を示す。

【図11】結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＸＲＰＤパターンを示す。

【図12】化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＴＧＡ分析を示す。

【図13】結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＤＳＣ分析を示す。

【発明を実施するための形態】

【0020】

定義
本開示全体を通して使用される場合、「化合物Ｉ」は、（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオンであり、これは、以下の構造を有するものとして描写され得る。

【化2】

【0021】

化合物Ｉは、ラセミ混合物、又は異性体のエナンチオ濃縮（例えば、９０％ ｅｅ超、９５％ ｅｅ超、９８％ ｅｅ超）混合物であってもよい。化合物Ｉは、薬学的に許容される塩、溶媒和物、及び／又は水和物の形態にあり得る。化合物Ｉ、並びに化合物Ｉを作製及び使用するための方法は、参照により本明細書に組み込まれるＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０１８０４２に開示されている。

【0022】

本開示全体を通して使用される場合、「化合物ＩＩ」は、（Ｒ）－１－（２，２－ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール－５－イル）－Ｎ－（１－（２，３－ジヒドロキシプロピル）－６－フルオロ－２－（１－ヒドロキシ－２－メチルプロパン－２－イル）－１Ｈ－インドール－５－イル）シクロプロパンカルボキサミドを指し、これは、以下の構造を有するものとして描写され得る。

【化3】

【0023】

化合物ＩＩは、薬学的に許容される塩の形態にあってもよい。化合物ＩＩ、並びに化合物ＩＩを作製及び使用する方法は、各々が参照により本明細書に組み込まれるＷＯ ２０１０／０５３４７１、ＷＯ ２０１１／１１９９８４、及びＷＯ ２０１５／１６０７８７に開示されている。

【0024】

本開示全体を通して使用される場合、「化合物ＩＩＩ」は、Ｎ－［２，４－ビス（１，１－ジメチルエチル）－５－ヒドロキシフェニル］－１，４－ジヒドロ－４－オキソキノリン－３－カルボキサミド（Ｎ－（５－ヒドロキシ－２，４－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－フェニル）－４－オキソ－１Ｈ－キノリン－３－カルボキサミドとしても知られる）を指し、これは、以下の構造を有するものとして描写され得る。

【化4】

【0025】

化合物ＩＩＩはまた、薬学的に許容される塩の形態にあってもよい。化合物ＩＩＩ、並びに化合物ＩＩＩを作製及び使用する方法は、各々参照により本明細書に組み込まれるＷＯ ２００６／００２４２１、ＷＯ ２００７／０７９１３９、及びＷＯ ２０１０／０１９２３９に開示されている。

【0026】

いくつかの実施形態では、化合物ＩＩＩ（化合物ＩＩＩ－ｄ）の重水素化誘導体が、本明細書に開示される組成物及び方法に利用される。化合物ＩＩＩ－ｄの化学名は、Ｎ－（２－（ｔｅｒｔ－ブチル）－５－ヒドロキシ－４－（２－（メチル－ｄ３）プロパン－２－イル－１，１，１，３，３，３－ｄ６）フェニル）－４－オキソ－１，４－ジヒドロキノリン－３－カルボキサミドであり、これは、以下の構造を有するものとして描写され得る。

【化5】

【0027】

化合物ＩＩＩ－ｄは、薬学的に許容される塩の形態にあってもよい。化合物ＩＩＩ－ｄ、並びに化合物ＩＩＩ－ｄを作製及び使用する方法は、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ ２０１２／１５８８８５及びＷＯ ２０１４／０７８８４２に開示されている。

【0028】

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲ」は、嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子を意味する。

【0029】

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲモジュレーター」及び「ＣＦＴＲ調節化合物」という用語は、ＣＦＴＲの活性を増加させる化合物を互換的に指す。ＣＦＴＲモジュレーターから生じる活性の増加には、ＣＦＴＲを補正する、強化する、安定化する、及び／又は増幅させる化合物が含まれるが、これらに限定されない。

【0030】

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲ補正因子」という用語は、細胞表面におけるＣＦＴＲの量を増加させるためにＣＦＴＲの処理及び輸送を促進する化合物を指す。本明細書に開示される化合物Ｉ及びＩＩは、ＣＦＴＲ補正因子である。

【0031】

本明細書で使用される場合、「ＣＦＴＲ増強因子」という用語は、細胞表面に位置するＣＦＴＲタンパク質のチャネル活性を増加させ、イオン輸送を増強する化合物を指す。本明細書に開示される化合物ＩＩＩ及びＩＩＩ－ｄは、ＣＦＴＲ増強因子である。化合物Ｉ及び他の特定のＣＦＴＲ調節剤の組み合わせの説明が本明細書に提供される場合、その組み合わせに関連する「化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ」への言及は、化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄの両方ではなくいずれかが、その組み合わせに含まれることを意味することが理解されるであろう。

【0032】

本明細書で使用される場合、「活性医薬成分」又は「治療剤」（「ＡＰＩ」）という用語は、生物学的に活性な化合物を指す。

【0033】

本明細書で使用される場合、「薬学的に許容される結晶形態」という用語は、化合物Ｉの結晶形態（例えば、結晶遊離形態、結晶塩、結晶塩溶媒和物、及び結晶塩水和物）が、非毒性であり、医薬組成物における使用に適している、本開示の化合物Ｉの結晶形態を指す。

【0034】

「患者」及び「対象」という用語は、交換可能に使用され、ヒトを含む動物を指す。

【0035】

本明細書で使用される場合、「治療」、「治療すること」などという用語は、概して、対象におけるＣＦ若しくはその症状のうちの１つ以上の改善、又はＣＦ若しくはその症状のうちの１つ以上の重症度の軽減を意味する。本明細書で使用される場合、「治療」は、以下を含むが、これらに限定されない：対象の成長の増加、体重増加の増加、肺内の粘膜の減少、膵臓及び／若しくは肝臓機能の改善、胸部感染の減少、並びに／又は咳若しくは息切れの減少。これらの症状のいずれかの改善又は重症度の軽減は、当該技術分野において公知の標準的な方法及び技術に従って容易に評価され得る。

【0036】

本明細書で使用される場合、「と組み合わせて」という用語は、２つ以上の化合物、薬剤、又は追加の活性医薬成分を指す場合、２つ以上の化合物、薬剤、又は活性医薬成分の、互いの前、同時、又は後の患者への投与を意味する。

【0037】

「約」及び「およそ」という用語は、組成物又は剤形の成分の用量、量、又は重量パーセントと関連して使用される場合、特定の用量、量、又は重量パーセントにより得られるのと等しい薬理効果を提供する、当業者に認識される特定の用量、量、若しくは重量パーセントの値、又は用量、量、若しくは重量パーセントの範囲を含む。「約」及び「およそ」という用語は、当業者により決定される特定の値について許容可能な誤差を指すこともあり、これは、一部では、どのようにその値が測定又は決定されるかに依存する。いくつかの実施形態では、「約」及び「およそ」という用語は、所与の値又は範囲の１５％、１０％、５％、４％、３％、２％、１％、又は０．５％以内を意味する。

【0038】

本明細書で使用される場合、「非晶質」という用語は、その分子の位置において長距離秩序を有しない固体材料を指す。非晶質固体は、明確に画定された配置、例えば、分子充填が存在せず、また、長距離秩序が存在しないように、分子が無作為に配置されている、概して過冷却された液体である。非晶質固体は、概して等方的であり、すなわち、全ての方向において同様の特性を示し、確実な融点を有しない。例えば、非晶質材料は、そのＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンにおいて、鋭い特徴的な結晶性のピークを有しない（すなわち、ＸＲＰＤによって決定される結晶性ではない）固体材料である。代わりに、そのＸＲＰＤパターンにおいて１つ以上の幅広いピーク（例えば、ハロ）が見られる。幅広いピークは、非晶質固体の特徴である。非晶質材料及び結晶性材料のＸＲＰＤの比較については、ＵＳ ２００４／０００６２３７を参照されたい。いくつかの実施形態では、固体材料は、非晶質化合物を含んでもよく、例えば、材料は、そのＸＲＰＤスペクトルにおける鋭い特徴的な結晶性のピークの欠如によって特徴付けられてもよい（すなわち、材料は、ＸＲＰＤによって決定されるように、結晶性ではないが非晶質である）。代わりに、材料のＸＲＰＤパターンにおいて１つ以上の幅広いピーク（例えば、ハロ）が見られ得る。非晶質材料及び結晶性材料のＸＲＰＤの比較については、ＵＳ ２００４／０００６２３７を参照されたい。非晶質化合物を含む固体材料は、例えば、純粋な結晶性固体の溶融の範囲と比較して、固体材料の溶融のより幅広い温度範囲によって特徴付けられ得る。例えば、固体ＮＭＲなどの他の技術を使用して、結晶形態又は非晶質形態を特徴付けてもよい。

【0039】

本明細書で使用される場合、「結晶形態（ｃｒｙｓｔａｌ ｆｏｒｍ）」、「結晶形態（ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｅ ｆｏｒｍ）」、及び「形態」という用語は、結晶格子内に特定の分子充填配置を有する結晶構造（又は多形）を互換的に指す。結晶形態は、例えば、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）、単結晶Ｘ線回折、及び^１３Ｃ固体核磁気共鳴（^１３Ｃ ｓｓＮＭＲ）を含む、１つ以上の特徴決定技術によって識別され、互いから区別され得る。したがって、本明細書で使用される場合、「化合物（Ｉ）の結晶形態［Ｘ］」及び「化合物（Ｉ）の結晶形態［Ｃ］カリウム塩は、例えば、ＸＲＰＤ、単結晶Ｘ線回折、及び^１３Ｃ ｓｓＮＭＲを含む１つ以上の特徴決定技術によって、識別され、互いから区別され得る、固有の結晶形態を指す。いくつかの実施形態では、新規結晶形態は、１つ以上の特定の２シータ値（°２θ）の１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0040】

本明細書で使用される場合、「遊離形態」という用語は、固体状態にある化合物の非イオン化型を指す。遊離形態の例としては、遊離塩基及び遊離酸が挙げられる。

【0041】

本明細書で使用される場合、「溶媒和物」という用語は、本開示の化合物の１つ以上の分子を含み、かつ結晶格子に組み込まれた、化学量論量又は非化学量論量の溶媒の１つ以上の分子を含む結晶形態を指す。溶媒が水である場合、溶媒和物は、「水和物」と称される。

【0042】

いくつかの実施形態では、固体材料は、結晶性固体及び非晶質固体の混合物を含んでもよい。非晶質化合物を含む固体材料はまた、例えば、最大３０％の結晶性固体を含有してもよい。いくつかの実施形態では、非晶質化合物を含むように調製された固体材料はまた、例えば、最大２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又は２％の結晶性固体を含有してもよい。固体材料が結晶性固体及び非晶質固体の混合物を含有する実施形態では、ＸＲＰＤなどの特徴決定データは、結晶性固体及び非晶質固体の両方の指標を含有してもよい。いくつかの実施形態では、本開示の結晶形態は、最大３０％の非晶質化合物を含有してもよい。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶性調製物は、最大２５％、２０％、１５％、１０％、５％、又は２％の非晶質固体を含有してもよい。

【0043】

本明細書で使用される場合、「実質的に非晶質」という用語は、その分子の位置においてほとんど又は全く長距離秩序を有しない固体材料を指す。例えば、実質的に非晶質な材料は、１５％未満の結晶化度（例えば、１０％未満の結晶化度、５％未満の結晶化度、又は２％未満の結晶化度）を有する。「実質的に非晶質」という用語は、記述語「非晶質」を含み、これは、結晶化度が全くない（０％）材料を指すことにも留意されたい。

【0044】

本明細書で使用される場合、「実質的に結晶性」という用語は、非晶質分子がほとんど又は全くない固体材料を指す。例えば、実質的に結晶性の材料は、１５％未満の非晶質分子（例えば、１０％未満の非晶質分子、５％未満の非晶質分子、又は２％未満の非晶質分子）を有する。また、「実質的に結晶性」という用語は、記述語「結晶性」を含み、これは、１００％結晶形態である材料を指すことにも留意されたい。

【0045】

本明細書で使用される場合、結晶形態は、定量ＸＲＰＤなどの当該技術分野に従った方法によって決定される、試料中の全ての固体形態の合計の９０％以上の重量での量を占める場合、「実質的に純粋」である。いくつかの実施形態では、固体形態は、試料中の全ての固体形態の合計の９５％以上の重量での量を占める場合、「実質的に純粋」である。いくつかの実施形態では、固体形態は、試料中の全ての固体形態の合計の９９％以上の重量での量を占める場合、「実質的に純粋」である。

【0046】

本明細書で使用される場合、「ＸＲＰＤ」という用語は、Ｘ線粉末回折の分析的特徴付け方法を指す。本明細書に開示されるＸＲＰＤパターンは、回折計を使用して、透過又は反射形状において周囲条件で記録され得る。

【0047】

本明細書で使用される場合、「周囲条件」という用語は、室温、外気条件、及び制御されていない湿度条件を意味する。「室温」及び「周囲温度」という用語は、１５℃～３０℃を意味する。

【0048】

本明細書で使用される場合、「Ｘ線粉末ディフラクトグラム」、「Ｘ線粉末回折パターン」、「ＸＲＰＤパターン」、及び「ＸＲＰＤスペクトル」という用語は、シグナル強度（縦座標上）に対してシグナル位置（横座標上）をプロットする実験的に取得されたパターンを互換的に指す。非晶質材料については、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは、１つ以上の幅広いシグナルを含んでもよく、結晶性物質については、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは、１つ以上のシグナルを含んでもよく、各々は、「…度２シータのシグナル」、「…の［ａ］２シータ値のシグナル」、及び／又は「…から選択される少なくとも…２シータ値のシグナル」として表され得る、Ｘ線粉末ディフラクトグラムの横座標上に示される、度２θ（°２θ）において測定されるその角度値によって識別される。

【0049】

本明細書で使用される場合、「シグナル」又は「ピーク」は、カウントで測定された強度が局所最大値にある、ＸＲＰＤパターンにおける点を指す。当業者は、ＸＲＰＤパターンにおける１つ以上のシグナル（又はピーク）が、重複する場合があり、例えば、肉眼では明らかではない場合があることを認識するであろう。実際に、当業者は、いくつかの当該技術分野で認識されている方法は、シグナルがＲｉｅｔｖｅｌｄ精密化などのパターンで存在するかどうかを決定する能力があり、かつ好適であることを認識するであろう。

【0050】

本明細書で使用される場合、「．．．度２シータのシグナル」は、Ｘ線粉末回折実験で測定及び観察されるＸ線反射位置（°２θ）を指す。

【0051】

測定された角度値の再現性は、±０．２°２θの範囲内であり、すなわち、角度値は、列挙された角度値＋０．２度２シータ、角度値－０．２度２シータ、又はそれらの２つの終点（角度値＋０．２度２シータ及び角度値－０．２度２シータ）の間の任意の値にあり得る。

【0052】

「シグナル強度」及び「ピーク強度」という用語は、所与のＸ線粉末ディフラクトグラム内の相対的シグナル強度を互換的に指す。相対的シグナル強度又はピーク強度に影響を与え得る要因は、試料の厚さ及び好ましい配向を含む（例えば、結晶性粒子はランダムに分布しない）。

【0053】

本明細書で使用される場合、Ｘ線粉末ディフラクトグラムは、２つのディフラクトグラム中のシグナルの少なくとも９５％、少なくとも９８％、又は少なくとも９９％などの、少なくとも９０％が重複する場合、「［特定の］図のものと実質的に類似」する。「実質的な類似性」を決定する際に、当業者は、同じ結晶形態であってもＸＲＰＤディフラクトグラムの強度及び／又はシグナル位置における変動が存在し得ることを理解するであろう。したがって、当業者は、ＸＲＰＤディフラクトグラムにおける（度２シータにおける）シグナル最大値は、値が、当該技術分野が認識した分散である報告された値の±０．２度２シータとして識別されることを一般に意味することを理解するであろう。

【0054】

本明細書で使用される場合、「．．．２シータ値のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラム」という用語は、Ｘ線粉末回折実験において測定及び観察されるＸ線反射位置（°２シータ）を含有するＸＲＰＤパターンを指す。

【0055】

本明細書で使用される場合、「ＴＧＡ」という用語は、熱重量分析を指し、「ＴＧＡ／ＤＳＣ」は、熱重量分析及び示差走査熱量測定（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｃｎｎｉｎｇ ｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｙ）を指す。

【0056】

本明細書で使用される場合、「ＤＳＣ」という用語は、示差走査熱量測定の分析方法を指す。

【0057】

本明細書で使用される場合、「溶媒」という用語は、生成物が少なくとも部分的に可溶性である任意の液体（生成物の溶解度＞１ｇ／ｌ）を指す。

【0058】

本明細書で使用される場合、「分散体」という用語は、１つの物質である分散相が、第２の物質（連続相又はビヒクル）全体にわたって別個の単位で分布されている分散系を指す。分散相のサイズは、大幅に変動し得る（例えば、ナノメートル寸法から数ミクロンのサイズまでのコロイド粒子）。概して、分散相は、固体、液体、又は気体であり得る。固体分散体の場合、分散相及び連続相が両方とも固体である。薬学的用途において、固体分散体は、非晶質ポリマー（連続相）中に結晶薬物（分散相）、又は代替的には、非晶質ポリマー（連続相）中に非晶質薬物（分散相）を含み得る。いくつかの実施形態では、固体分散体は、分散相を構成するポリマーを含み、薬物は、連続相を構成する。又は、固体分散体は、分散相を構成する薬物、及び連続相を構成するポリマーを含む。

【0059】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ
いくつかの実施形態では、本発明は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを提供する。図１は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＸ線粉末ディフラクトグラムを提供する。

【0060】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に純粋な結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、Ｃｕ Ｋα放射の入射ビームを用いたＸ線粉末回折分析によって生成されたＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0061】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、及び１６．４±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、及び１６．４±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0062】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0063】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、（ａ）６．６±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0064】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、６．６±０．２度シータ、１０．３±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、２２．４±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0065】

いくつかの実施形態では、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａは、図１に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0066】

本発明の他の態様は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ａを作製する方法を提供し、方法は、化合物Ｉ遊離酸をエタノール中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ａを得ることを含む。

【0067】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ
いくつかの実施形態では、本発明は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを提供する。図４は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＢのＸ線粉末ディフラクトグラムを提供する。

【0068】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に純粋な結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、Ｃｕ Ｋα放射の入射ビームを用いたＸ線粉末回折分析によって生成されたＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0069】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0070】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ ３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0071】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0072】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、１５．２±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0073】

いくつかの実施形態では、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂは、図４に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0074】

本発明の他の態様は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｂを作製する方法を提供し、方法は、化合物Ｉ遊離酸及びテトラヒドロフラン中のベネゼンスルホン酸（ｂｅｎｅｚｅｎｅｓｕｌｆｏｎｉｃ ａｃｉｄ）をビーズ粉砕して、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｂを得ることを含む。

【0075】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ
いくつかの実施形態では、本発明は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを提供する。図６は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＣのＸ線粉末ディフラクトグラムを提供する。

【0076】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に純粋な結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、Ｃｕ Ｋα放射の入射ビームを用いたＸ線粉末回折分析によって生成されたＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0077】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0078】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0079】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0080】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、５．０±０．２度シータ、６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、２６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0081】

いくつかの実施形態では、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃは、図６に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0082】

本発明の他の態様は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｃを作製する方法を提供し、方法は、化合物Ｉ遊離酸及び酢酸イソプロピル中のベンゼンスルホン酸をビーズ粉砕して、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｃを得ることを含む。

【0083】

化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ
いくつかの実施形態では、本発明は、結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを提供する。図８は、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＸ線粉末ディフラクトグラムを提供する。

【0084】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に純粋な化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に結晶性の化合物Ｉのｐ－トルエンスルホン形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉのｐ－トルエンスルホン形態Ａは、Ｃｕ Ｋα放射の入射ビームを用いたＸ線粉末回折分析によって生成されたＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0085】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0086】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0087】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0088】

いくつかの実施形態では、結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａは、図８に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0089】

本発明の他の態様は、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを作製する方法を提供し、方法は、化合物Ｉ遊離酸及び酢酸イソプロピル中のｐ－トルエンスルホン酸をビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを提供することを含む。

【0090】

化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ
いくつかの実施形態では、本発明は、結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを提供する。図１１は、化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＸ線粉末ディフラクトグラムを提供する。

【0091】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に純粋な化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉは、実質的に結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａである。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、Ｃｕ Ｋα放射の入射ビームを用いたＸ線粉末回折分析によって生成されたＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0092】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0093】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの４つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0094】

いくつかの実施形態では、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0095】

いくつかの実施形態では、結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａは、図１１に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられる。

【0096】

本発明の他の態様は、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを作製する方法を提供し、方法は、化合物Ｉ遊離酸を、水中の塩化マグネシウム及び水酸化ナトリウムとスラリー化し、１，４－ジオキサンを添加し、混合物を凍結乾燥させ、アセトン及び水を添加してスラリーを形成し、周囲温度～４０℃で混合物を温度循環させ、固体を濾過し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを得ることを含む。

【0097】

治療方法
本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉは、ＣＦＴＲモジュレーターとして作用し、すなわち、それは、体内のＣＦＴＲ活性を調節する。ＣＦＴＲをコードする遺伝子の変異に悩まされている個体は、ＣＦＴＲモジュレーターの受容から利益を受け得る。ＣＦＴＲ変異は、ＣＦＴＲ量、すなわち、細胞表面におけるＣＦＴＲチャネルの数に影響を及ぼし得るか、又はＣＦＴＲ機能、すなわち、各チャネルが開いてイオンを輸送する機能的能力に影響を及ぼし得る。ＣＦＴＲ量に影響を及ぼす変異には、欠陥合成を引き起こす変異（クラスＩ欠陥）、欠陥プロセシング及び輸送を引き起こす変異（クラスＩＩ欠陥）、ＣＦＴＲの合成の低下を引き起こす変異（クラスＶ欠陥）、並びにＣＦＴＲの表面安定性を低下させる変異（クラスＶＩ欠陥）が含まれる。ＣＦＴＲ機能に影響を及ぼす変異には、欠陥ゲーティングを引き起こす変異（クラスＩＩＩ欠陥）及び欠陥コンダクタンスを引き起こす変異（クラスＩＶ欠陥）が含まれる。いくつかのＣＦＴＲ変異は、複数のクラスの特徴を示す。ＣＦＴＲ遺伝子のある特定の変異は、嚢胞性線維症をもたらす。

【0098】

したがって、いくつかの実施形態では、本発明は、患者における嚢胞性線維症を治療するか、嚢胞性線維症の重症度を軽減するか、又は嚢胞性線維症を対症的に治療する方法を提供し、方法は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある有効量の化合物Ｉを、単独で、又は別のＣＦＴＲ調節剤などの別の活性成分と組み合わせて、患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、患者は、Ｆ５０８ｄｅｌ／最小機能（ＭＦ）遺伝子型、Ｆ５０８ｄｅｌ／Ｆ５０８ｄｅｌ遺伝子型（Ｆ５０８ｄｅｌ変異についてホモ接合性）、Ｆ５０８ｄｅｌ／ゲーティング遺伝子型、又はＦ５０８ｄｅｌ／残存機能（ＲＦ）遺伝子型を有する。いくつかの実施形態では、患者は、ヘテロ接合性であり、１つのＦ５０８ｄｅｌ変異を有する。いくつかの実施形態では、患者は、Ｎ１３０３Ｋ変異についてホモ接合性である。

【0099】

いくつかの実施形態では、患者は、ヘテロ接合性であり、一方の対立遺伝子にＦ５０８ｄｅｌ変異を有し、他方の対立遺伝子に表１から選択される変異を有する。

【表1-1】

【表1-2】

【0100】

いくつかの実施形態では、本発明は、患者における嚢胞性線維症を治療するか、嚢胞性線維症の重症度を軽減するか、又は嚢胞性線維症を対症的に治療する方法を提供し、方法は、有効量の化合物Ｉを、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａとして患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを利用する。いくつかの実施形態では、患者における嚢胞性線維症を治療するか、嚢胞性線維症の重症度を軽減するか、又は嚢胞性線維症を対症的に治療する方法は、有効量の化合物Ｉを、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃとして患者に投与することを含む。

【0101】

いくつかの実施形態では、患者における嚢胞性線維症を治療するか、嚢胞性線維症の重症度を軽減するか、又は嚢胞性線維症を対症的に治療する方法は、有効量の化合物Ｉを、結晶性の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａとして患者に投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、化合物Ｉを、結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａとして利用する。

【0102】

併用療法
本明細書に開示される一態様は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉを、ＣＦＴＲ調節剤を含む他の薬学的に活性な薬剤と組み合わせて用いて、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ媒介性疾患を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉは、例えば、ＣＦＴＲ調節剤などの少なくとも１つの追加の活性医薬成分と組み合わせて投与され得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の活性医薬成分は、（ａ）化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩、並びに（ｂ）化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄ及び化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩＩ－ｄの薬学的に許容される塩から選択される。したがって、いくつかの実施形態では、本明細書に提供される併用療法は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉと、化合物ＩＩ、（化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ）、及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に提供される併用療法は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物と、（化合物ＩＩＩ若しくはＩＩＩ－ｄ）、及び／又はその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、を含む。

【0103】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、化合物ＩＩ又はその薬学的に許容される塩、並びに化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と組み合わせて投与される。

【0104】

化合物Ｉ、ＩＩ、及びＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄの各々、並びにそれらの薬学的に許容される塩は独立して、１日１回、１日２回、又は１日３回投与され得る。いくつかの実施形態では、化合物Ｉ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。

【0105】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。

【0106】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日１回投与され、化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、１日２回投与される。

【0107】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、５ｍｇ～１００ｍｇの量で投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、１日５ｍｇ～６０ｍｇの量で投与される。

【0108】

化合物Ｉ、ＩＩ、（ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ）、及び／又はそれらの薬学的に許容される塩は、単一の医薬組成物又は別個の医薬組成物中で投与され得る。そのような医薬組成物は、１日１回又は１日２回などの１日に複数回投与され得る。本明細書で使用される場合、所与の量のＡＰＩ（例えば、化合物Ｉ、ＩＩ、（ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ）、又はそれらの薬学的に許容される塩）が、１日又は１日当たり１回又は２回投与されるという語句は、その所与の量が、１投薬につき１日１回又は２回投与されることを意味する。例えば、５０ｍｇの化合物ＩＩ又はその薬学的に許容される塩が、１日又は１日当たり２回投与されるという語句は、５０ｍｇの化合物ＩＩ又は同等量のその薬学的に許容される塩が、１投薬につき１日当たり２回投与される（例えば、５０ｍｇの化合物ＩＩ又は同等量のその薬学的に許容される塩が、朝に投与され、５０ｍｇの化合物ＩＩ又は同等量のその薬学的に許容される塩が、夜に投与される）ことを意味する。

【0109】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、第１の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第２の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第３の医薬組成物中で投与される。

【0110】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、第１の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第２の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第３の医薬組成物中で投与される。

【0111】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、第１の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第２の医薬組成物中で投与される。

【0112】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物は、第１の医薬組成物中で投与され、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ又はＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第２の医薬組成物中で投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、化合物ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ、及びそれらの薬学的に許容される塩から選択される該少なくとも１つの化合物の１日用量の半分を含み、化合物ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ、及びそれらの薬学的に許容される塩から選択される該少なくとも１つの化合物の残りの半分は、第３の医薬組成物中で投与される。

【0113】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物、化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物、並びに化合物ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ、及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物は、第１の医薬組成物中で投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は、患者に１日２回投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は、１日１回投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は、１日１回投与され、化合物ＩＩＩのみを含む第２の組成物は、１日１回投与される。

【0114】

任意の好適な医薬製剤は、化合物Ｉ（本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つにある）、化合物ＩＩ、化合物ＩＩＩ、化合物ＩＩＩ－ｄ、及びそれらの薬学的に許容される塩に使用され得る。化合物Ｉのいくつかの例示的な医薬組成物が、実施例に記載される。化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩のいくつかの例示的な医薬組成物は、参照により本明細書に組み込まれる、ＷＯ２０１１／１１９９８４及びＷＯ２０１４／０１４８４１に見出すことができる。化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容される塩のいくつかの例示的な医薬組成物は、ＷＯ ２００７／１３４２７９、ＷＯ ２０１０／０１９２３９、ＷＯ ２０１１／０１９４１３、ＷＯ ２０１２／０２７７３１、及びＷＯ ２０１３／１３０６６９に見出すことができ、化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩のいくつかの例示的な医薬組成物は、ＵＳ ８，８６５，９０２、ＵＳ ９，１８１，１９２、ＵＳ ９，５１２，０７９、ＷＯ ２０１７／０５３４５５、及びＷＯ ２０１８／０８０５９１に見出すことができ、これらの全ては、参照により本明細書に組み込まれる。

【0115】

いくつかの実施形態では、本発明の併用療法に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、併用療法は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを利用する。いくつかの実施形態では、併用療法は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを利用する。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、本発明の併用療法に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、本発明の併用療法に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａである。

【0116】

医薬組成物
本発明の別の態様は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つとして化合物Ｉを含む、医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、本発明は、少なくとも１つの追加の活性医薬成分と組み合わせて、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれかとして化合物Ｉを含む、医薬組成物を提供する。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の活性医薬成分は、ＣＦＴＲモジュレーターである。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の活性医薬成分は、ＣＦＴＲ補正因子である。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の活性医薬成分は、ＣＦＴＲ増強因子である。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つとしての化合物Ｉと、少なくとも２つの追加の活性医薬成分（そのうちの１つは、ＣＦＴＲ補正因子であり、そのうちの１つは、ＣＦＴＲ増強因子である）と、を含む。

【0117】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの追加の活性医薬成分は、粘液溶解剤、気管支拡張剤、抗生物質、抗感染剤、及び抗炎症剤から選択される。

【0118】

いくつかの実施形態では、本発明は、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つとしての化合物Ｉから選択される少なくとも１つの化合物と、少なくとも１つの薬学的に許容される担体と、を含む医薬組成物を提供する。

【0119】

いくつかの実施形態では、本発明は、（ａ）５ｍｇ～６０ｍｇの化合物Ｉ（化合物Ｉは、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つである）と、（ｂ）化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｃ）少なくとも１つの薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を提供する。

【0120】

いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）５ｍｇ～６０ｍｇの化合物Ｉ（化合物Ｉは、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つである）と、（ｂ）化合物ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ、及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｃ）少なくとも１つの薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を提供する。

【0121】

いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）５ｍｇ～６０ｍｇの化合物Ｉ（化合物Ｉは、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つである）と、（ｂ）化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｃ）化合物ＩＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｄ）少なくとも１つの薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を提供する。

【0122】

いくつかの実施形態では、本開示は、（ａ）５ｍｇ～６０ｍｇの化合物Ｉ（化合物Ｉは、本明細書に開示される薬学的に許容される結晶形態のうちのいずれか１つである）と、（ｂ）化合物ＩＩ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｃ）化合物ＩＩＩ－ｄ及びその薬学的に許容される塩から選択される少なくとも１つの化合物と、（ｄ）少なくとも１つの薬学的に許容される担体と、を含む、医薬組成物を提供する。

【0123】

本明細書に開示される任意の医薬組成物は、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を含み得る。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの薬学的に許容される担体は、薬学的に許容されるビヒクル及び薬学的に許容されるアジュバントから選択される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの薬学的に許容されるものは、薬学的に許容される充填剤、崩壊剤、界面活性剤、結合剤、滑沢剤から選択される。

【0124】

いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、併用療法は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを利用する。いくつかの実施形態では、併用療法は、結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを利用する。いくつかの実施形態では、化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａである。いくつかの実施形態では、本発明の医薬組成物に使用される化合物Ｉの結晶形態は、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａである。

【0125】

本明細書に記載される医薬組成物は、嚢胞性線維症及び他のＣＦＴＲ媒介性疾患を治療するために有用である。

【0126】

上記のように、本明細書に開示される医薬組成物は、任意に、少なくとも１つの薬学的に許容される担体を更に含み得る。少なくとも１つの薬学的に許容される担体は、アジュバント及びビヒクルから選択され得る。本明細書で使用される場合、少なくとも１つの薬学的に許容される担体には、所望の特定の剤形に適した、任意及び全ての溶媒、希釈剤、他の液体ビヒクル、分散補助剤、懸濁補助剤、表面活性剤、等張剤、増粘剤、乳化剤、防腐剤、固体結合剤、及び滑沢剤が含まれる。Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２１ｓｔ ｅｄｉｔｉｏｎ，２００５，ｅｄ． Ｄ．Ｂ．Ｔｒｏｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ、及びＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｅｄｓ． Ｊ．Ｓｗａｒｂｒｉｃｋ ａｎｄ Ｊ．Ｃ．Ｂｏｙｌａｎ，１９８８－１９９９，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋは、医薬組成物の製剤化に使用される種々の担体及びその調製のための公知の技術を開示している。任意の従来の担体が、何らかの望ましくない生物学的効果を生じるか、又は別様に医薬組成物の任意の他の成分と有害な様式で相互作用することなどによって、本開示の化合物と不適合であることを除いて、その使用は、本開示の範囲内であると企図される。好適な薬学的に許容される担体の非限定的な例には、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、血清タンパク質（ヒト血清アルブミンなど）、緩衝物質（リン酸、グリシン、ソルビン酸、及びソルビン酸カリウムなど）、飽和植物脂肪酸の部分的グリセリド混合物、水、塩、及び電解質（硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、及び亜鉛塩など）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、ポリアクリレート、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレン－ブロックポリマー、羊毛脂、糖（ラクトース、グルコース及びスクロースなど）、デンプン（コーンスターチ及びジャガイモデンプンなど）、セルロース及びその誘導体（カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及びセルロースアセテートなど）、粉末トラガカント、麦芽、ゼラチン、タルク、賦形剤（カカオバター及び坐薬ワックスなど）、油（ピーナツ油、綿実油、ベニバナ油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油及びダイズ油など）、グリコール（プロピレングリコール及びポリエチレングリコールなど）、エステル（オレイン酸エチル及びラウリン酸エチルなど）、寒天、緩衝剤（水酸化マグネシウム及び水酸化アルミニウムなど）、アルギン酸、発熱性物質除去水、等張食塩水、リンガー溶液、エチルアルコール、リン酸緩衝液、非毒性適合性滑沢剤（ラウリル硫酸ナトリウム（ｔｓｏｄｉｕｍ ｌａｕｒｙｌ ｓｕｌｆａｔｅ）及びステアリン酸マグネシウムなど）、着色剤、放出剤、コーティング剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤、並びに抗酸化剤が含まれるが、これらに限定されない。
例示的な実施形態の非限定的なリスト
１．化合物Ｉであって、

【化6】

実質的に結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａとしての（すなわち、化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの５％未満が非晶質形態である）、化合物Ｉ。
２．化合物Ｉが、１００％結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａである、実施形態１に記載の化合物Ｉ。
３．実質的に純粋な化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
４．６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、及び／又は１６．４±０．２度２シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
５．６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、及び１６．４±０．２度２シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
６．６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
７．６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
８．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
９．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１０．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１１．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１２．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１３．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１４．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１５．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの４つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１６．（ａ）６．６±０．２度２シータ、１１．０±０．２度２シータ、１６．４±０．２度２シータ、及び２２．４±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．３±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのうちの５つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１７．６．６±０．２度シータ、１０．３±０．２度シータ、１１．０±０．２度シータ、１２．１±０．２度シータ、１３．７±０．２度シータ、１６．４±０．２度シータ、１７．５±０．２度シータ、２０．８±０．２度シータ、２２．４±０．２度シータ、及び２５．７±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１８．図１に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
１９．図２に実質的に類似するＴＧＡデータによって特徴付けられた、実施形態１～１８のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
２０．図３に実質的に類似するＤＳＣ分析によって特徴付けられた、実施形態１～１９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
２１．化合物Ｉ遊離酸をエタノール中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ａを得ることを含むプロセスによって調製された、実施形態１～２０のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ。
２２．実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを含み、任意選択的に１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、医薬組成物。
２３．１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、又は
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、である、実施形態２２に記載の医薬組成物。
２４．嚢胞性線維症の治療に使用するための、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態２２若しくは２３に記載の医薬組成物。
２５．嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態２２若しくは２３に記載の組成物の、使用。
２６．実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態２２若しくは２３の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、嚢胞性線維症を治療する方法。
２７．実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａが、少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物と組み合わせて投与される、実施形態２４に記載の使用のための化合物、実施形態２５に記載の使用、又は実施形態２６に記載の方法。
２８．実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａが、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ、又は
ｃ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ－ｄ、と組み合わせて投与される、実施形態２７に記載の組成物、使用、又は方法。
２９．化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩが、固体分散体の形態にある、実施形態２３に記載の組成物、又は実施形態２８に記載の化合物、使用、若しくは方法。
３０．化合物Ｉ遊離酸をエタノール中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ａを得ることを含む、実施形態１～２１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを調製する方法。
３１．実質的に結晶性のベンゼンスルホン酸形態Ｂとしての（すなわち、化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの５％未満が非晶質形態である）、化合物Ｉ。
３２．化合物Ｉが、１００％結晶性の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂである、実施形態１に記載の化合物Ｉ。
３３．実質的に純粋な化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３４．８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３５．８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３６．８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３７．８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３８．８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
３９．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４０．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４１．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４２．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４３．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４４．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４５．（ａ）８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、及び１５．２±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）３．８±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４６．３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１２．６±０．２度シータ、１５．２±０．２度シータ、１７．１±０．２度シータ、及び２３．２±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４７．図４に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態３１～３３のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４８．図５に実質的に類似するＴＧＡ／ＤＳＣデータによって特徴付けられた、実施形態３１～４７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
４９．化合物Ｉ遊離酸をＴＨＦ中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｂを得ることを含むプロセスによって調製された、実施形態３１～４８のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ。
５０．実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを含み、任意選択的に１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、医薬組成物。
５１．１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、又は
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、である、実施形態５０に記載の医薬組成物。
５２．嚢胞性線維症の治療に使用するための、実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ、又は実施形態５０若しくは５１に記載の医薬組成物。
５３．嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ、又は実施形態５０若しくは５１に記載の組成物の、使用。
５４．実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ、又は実施形態５０若しくは５１の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、嚢胞性線維症を治療する方法。
５５．実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂが、少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物と組み合わせて投与される、実施形態５２に記載の使用のための化合物、実施形態５３に記載の使用、又は実施形態５４に記載の方法。
５６．実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂが、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ、又は
ｃ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ－ｄ、と組み合わせて投与される、実施形態５５に記載の組成物、使用、又は方法。
５７．化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩが、固体分散体の形態にある、実施形態５１に記載の組成物、又は実施形態５３に記載の化合物、使用、若しくは方法。
５８．化合物Ｉ遊離酸をＴＨＦ中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｂを得ることを含む、実施形態３１～４９のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを調製する方法。
５９．実質的に結晶性のベンゼンスルホン酸形態Ｃとしての（すなわち、化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの５％未満が非晶質形態である）、化合物Ｉ。
６０．化合物Ｉが、１００％結晶性のベンゼンスルホン酸形態Ｃである、実施形態１に記載の化合物Ｉ。
６１．実質的に純粋な化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６２．５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６３．５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６４．５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６５．５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６６．５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６７．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６８．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
６９．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７０．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７１．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７２．（ａ）８５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７３．（ａ）５．０±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、及び２６．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７４．５．０±０．２度シータ、６．８±０．２度シータ、１１．４±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、１６．６±０．２度シータ、２４．９±０．２度シータ、２６．６±０．２度シータ、及び２７．３±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７５．図６に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態５９～６１のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７６．図７に実質的に類似するＴＧＡ／ＤＳＣデータによって特徴付けられた、実施形態５９～７５のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７７．化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｃを得ることを含むプロセスによって調製された、実施形態５９～７６のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ。
７８．実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを含み、任意選択的に１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、医薬組成物。
７９．１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、又は
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、である、実施形態７８に記載の医薬組成物。
８０．嚢胞性線維症の治療に使用するための、実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ、又は実施形態７８若しくは７９に記載の医薬組成物。
８１．嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ、又は実施形態７８若しくは７９に記載の組成物の、使用。
８２．実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ、又は実施形態７８若しくは７９の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、嚢胞性線維症を治療する方法。
８３．実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃが、少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物と組み合わせて投与される、実施形態８０に記載の使用のための化合物、実施形態８１に記載の使用、又は実施形態８２に記載の方法。
８４．実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃが、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ、又は
ｃ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ－ｄ、と組み合わせて投与される、実施形態８３に記載の組成物、使用、又は方法。
８５．化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩが、固体分散体の形態にある、実施形態７９に記載の組成物、又は実施形態８４に記載の化合物、使用、若しくは方法。
８６．化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のベンゼンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸結晶形態Ｃを得ることを含む、実施形態５９～７７のいずれか１つに記載の化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態を調製する方法。
８７．実質的に結晶性のｐ－トルエンスルホン酸形態Ａとしての（すなわち、化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの５％未満が非晶質形態である）、化合物Ｉ。
８８．化合物Ｉが、１００％結晶性のｐ－トルエンスルホン酸形態Ａである、実施形態１に記載の化合物Ｉ。
８９．実質的に純粋な化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９０．３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び／又は１０．７±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９１．３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９２．３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９３．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９４．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９５．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９６．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９７．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９８．（ａ）３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、及び１０．７±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）９．４±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
９９．３．８±０．２度シータ、８．４±０．２度シータ、９．４±０．２度シータ、１０．７±０．２度シータ、１８．９±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
１００．図８に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態８７～８９のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
１０１．図９に実質的に類似するＴＧＡデータによって特徴付けられた、実施形態８７～１００のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
１０２．図１０に実質的に類似するＤＳＣ分析によって特徴付けられた、実施形態８７～１０１のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
１０３．化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のｐ－トルエンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸結晶形態Ａを得ることを含むプロセスによって調製された、実施形態８７～１０２のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ。
１０４．実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを含み、任意選択的に１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、医薬組成物。
１０５．１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、又は
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、である、実施形態１０４に記載の医薬組成物。
１０６．嚢胞性線維症の治療に使用するための、実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態１０４若しくは１０５に記載の医薬組成物。
１０７．嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態１０４若しくは１０５に記載の組成物の、使用。
１０８．実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ、又は実施形態１０４若しくは１０５の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、嚢胞性線維症を治療する方法。
１０９．実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａが、少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物と組み合わせて投与される、実施形態１０６に記載の使用のための化合物、実施形態１０７に記載の使用、又は実施形態１０８に記載の方法。
１１０．実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａが、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ、又は
ｃ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ－ｄ、と組み合わせて投与される、実施形態１０９に記載の組成物、使用、又は方法。
１１１．化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩが、固体分散体の形態にある、実施形態１０５に記載の組成物、又は実施形態１１０に記載の化合物、使用、若しくは方法。
１１２．化合物Ｉ遊離酸を酢酸イソプロピル中のｐ－トルエンスルホン酸とビーズ粉砕し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸結晶形態Ａを得ることを含む、実施形態８７～１０３のいずれか１つに記載の化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを調製する方法。
１１３．実質的に結晶性のマグネシウム塩形態Ａとしての（すなわち、化合物Ｉの１５％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの１０％未満が、非晶質形態である、化合物Ｉの５％未満が非晶質形態である）、化合物Ｉ。
１１４．化合物Ｉが、１００％結晶性のマグネシウム塩形態Ａである、実施形態１に記載の化合物Ｉ。
１１５．実質的に純粋な化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１１６．４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び／又は１４．６±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１１７．４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び／１４．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１１８．４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１１９．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２０．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２１．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２２．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの１つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２３．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの２つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２４．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの３つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２５．（ａ）４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、及び１４．６±０．２度シータのシグナル、並びに（ｂ）１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのうちの４つ以上のシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２６．４．３±０．２度シータ、９．９±０．２度シータ、１０．４±０．２度シータ、１４．３±０．２度シータ、１４．６±０．２度シータ、１８．１±０．２度シータ、１９．８±０．２度シータ、及び２０．１±０．２度シータのシグナルを有するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２７．図１１に実質的に類似するＸ線粉末ディフラクトグラムによって特徴付けられた、実施形態１１３～１１５のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２８．図１２に実質的に類似するＴＧＡデータによって特徴付けられた、実施形態１１３～１２７のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１２９．図１３に実質的に類似するＤＳＣ分析によって特徴付けられた、実施形態１１３～１２８のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１３０．化合物Ｉ遊離酸を、１，４－ジオキサン及び水の混合物中の塩化マグネシウム及び水酸化ナトリウムとスラリー化し、混合物を凍結乾燥させ、アセトン及び水を添加し、周囲温度～４０℃で混合物を温度循環させ、固体を濾過し、真空下で乾燥させて、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを得ることを含むプロセスによって調製された、実施形態１１３～１２９のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ。
１３１．実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを含み、任意選択的に１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物を更に含む、医薬組成物。
１３２．１つ以上の追加のＣＦＴＲ調節化合物が、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、又は
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、である、実施形態１３１に記載の医薬組成物。
１３３．嚢胞性線維症の治療に使用するための、実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ、又は実施形態１３１若しくは１３２に記載の医薬組成物。
１３４．嚢胞性線維症の治療のための医薬品の製造における、実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ、又は実施形態１３１若しくは１３２に記載の組成物の、使用。
１３５．実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ、又は実施形態１３１若しくは１３２の医薬組成物を、それを必要とする対象に投与することを含む、嚢胞性線維症を治療する方法。
１３６．実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａが、少なくとも１つの追加のＣＦＴＲ調節化合物と組み合わせて投与される、実施形態１３３に記載のための使用の化合物、実施形態１３４に記載の使用、又は実施形態１３５に記載の方法。
１３７．実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａが、
ａ．（ａ）化合物ＩＩＩ若しくは化合物ＩＩＩ－ｄ、
ｂ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ、又は
ｃ．（ｉ）化合物ＩＩ及び（ｉｉ）化合物ＩＩＩ－ｄ、と組み合わせて投与される、実施形態１３６に記載の組成物、使用、又は方法。
１３８．化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩが、固体分散体の形態にある、実施形態１３２に記載の組成物、又は実施形態１３７に記載の化合物、使用、若しくは方法。
１３９．実施形態１１３～１３０のいずれか１つに記載の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを調製する方法であって、化合物Ｉ遊離酸を、１，４－ジオキサン及び水の混合物中の塩化マグネシウム及び水酸化ナトリウムとスラリー化し、混合物を凍結乾燥させ、アセトン及び水を添加し、周囲温度～４０℃で混合物を温度循環させ、固体を濾過し、真空下で乾燥させて、結晶性の化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを得ることを含む、方法。

【0127】

化合物及び形態を調製する方法
一般的実験手順
以下の実施例のある特定の略語の定義を下に要約する。

【表A】

【0128】

化合物ＩＩ、ＩＩＩ、ＩＩＩ－ｄ、及びＩＶは、当該技術分野、例えば、ＰＣＴ公開第２０１１／１３３７５１号、同第２０１１／１３３９５１号、同第２０１５／１６０７８７号及び米国特許第８，８６５，９０２号における任意の好適な方法によって調製され得る。

【0129】

固体ＮＭＲ実験（全ての結晶形態に適用される）： Ｂｒｕｋｅｒ－Ｂｉｏｓｐｉｎ ４ｍｍ ＨＦＸプローブを備えたＢｒｕｋｅｒ－Ｂｉｏｓｐｉｎ ４００ＭＨｚワイドボア分光計を使用した。試料を、４ｍｍのローターに充填し、１２．５ｋＨｚの典型的なスピン速度を含む磁気角度スピニング（ＭＡＳ）条件下でスピンした。プロトン緩和時間を、^１Ｈ ＭＡＳ Ｔ_１飽和回復緩和実験から推定し、^１３Ｃ交差分極（ＣＰ）ＭＡＳ実験の適切なリサイクル遅延を設定するために使用した。ＣＰＭＡＳ実験のＣＰ接触時間を、２ｍｓに設定した。直線ランプ（５０％～１００％）を有するＣＰプロトンパルスを用いた。アダマンタンの炭素共鳴を２９．５ｐｐｍに設定するように磁界を調整することによって、全てのスペクトルを外部から参照した。ＴＰＰＭ１５プロトンデカップリング配列を、およそ１００ｋＨｚの電界強度で使用した。

【実施例】

【0130】

実施例１：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）の合成
試薬及び出発物質は、特に明記しない限り、商業的供給源によって得られ、精製することなく使用した。

【0131】

プロトン及び炭素ＮＭＲスペクトル（実施例１に適用されるような）を、それぞれ、４００及び１００ＭＨｚの^１Ｈ及び^１３Ｃ共振周波数で動作するＢｒｕｋｅｒ Ｂｉｏｓｐｉｎ ＤＲＸ ４００ＭＨｚ ＦＴＮＭＲ分光計、又は３００ＭＨｚ ＮＭＲ分光計のいずれかで取得した。１次元プロトン及び炭素スペクトルは、それぞれ、０．１８３４及び０．９０８３Ｈｚ／Ｐｔのデジタル分解能で２０Ｈｚの試料回転でブロードバンド観察（ＢＢＦＯ）プローブを使用して取得した。全てのプロトン及び炭素スペクトルは、標準的な、以前に公開されたパルスシーケンス及びルーチン処理パラメータを使用して、３０℃での温度制御で取得した。
パートＡ：２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸の合成

【化7】

ステップ１：７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン

【化8】

【0132】

１０００ｍＬの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、冷却浴、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素吸気口／排気口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、トリフェニルホスフィン（１０２．７ｍＬ、４４３．２ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（１Ｌ）を充填し、これにより、透明な無色の溶液を得た。撹拌を開始し、冷却浴にアセトンを充填した。－１５℃のポット温度が得られるまでドライアイスを冷却浴に少量ずつに分けて添加した。添加漏斗に臭素（２２．８２ｍＬ、４４３．０ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（２２０ｍＬ、１０ｍＬ／ｇ）溶液を充填し、その後、これを１時間にわたって滴加した。ポット温度を－１５℃に維持するために、添加中にドライアイスを冷却浴に少量ずつに分けて添加した。臭素の添加が完了した後、淡黄色の懸濁液を－１５℃で１５分間撹拌し続け、その時点で、懸濁液を－３０℃に冷却した。添加漏斗に、ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルメタノール（５０ｇ、４０２．６ｍｍｏｌ）、ピリジン（３５．８２ｍＬ、４４２．９ｍｍｏｌ）、及びジクロロメタン（２５０ｍＬ、５ｍＬ／ｇ）の溶液を充填した。次いで、ポット温度を－３０℃に維持しながら、透明な淡黄色の溶液を１．５時間にわたって滴加した。結果として生じた透明な淡黄色の反応混合物を、－５℃のポット温度に徐々に加温させ、次いで、－５℃で１時間撹拌し続けた。次いで、反応混合物をヘキサン（２０００ｍＬ）中に注ぎ、これにより、沈殿物が形成された。懸濁液を室温で３０分間撹拌し、次いで、２０ｍｍのセライト層を有するガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、黄色の油を得たが、いくらかの沈殿物が存在した。油をいくらかのヘキサンで希釈し、室温で１５分間静置させ、次いで、２０ｍｍのセライト層を有するガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、透明な黄色の油として７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン（７０ｇ、９３％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ３．４９（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，２Ｈ），１．９０（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），１．０６－０．８４（ｍ，４Ｈ），０．７１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．１，５．１，４．０Ｈｚ，２Ｈ），０．５４（ｄｄｄｄ，Ｊ＝８．６，４．８，３．８，１．０Ｈｚ，２Ｈ）．
ステップ２：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル

【化9】

【0133】

１０００ｍＬの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、二次格納容器として使用した冷却浴、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素吸気口／排気口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、７－（ブロモメチル）ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン（３５ｇ、１８７．１ｍｍｏｌ）及びジメチルスルホキシド（２４５ｍＬ）を充填し、これにより、透明な琥珀色の溶液を得た。撹拌を開始し、ポット温度を１９℃で記録した。次いで、容器にシアン化ナトリウム（１１．４６ｇ、２３３．８ｍｍｏｌ）を充填し、固体として一度に添加し、これにより、濃色の溶液が生じ、１５分間にわたって徐々に発熱して４９℃になった。数分後、ポット温度が低下し始め、混合物を室温で一晩（約１５時間）撹拌し続けた。濃色の反応混合物を氷冷飽和炭酸ナトリウム溶液（５００ｍＬ）でクエンチし、次いで、分液漏斗に移し、ジエチルエーテル（５００ｍＬ）で分配した。有機層を除去し、残りの水層をジエチルエーテル（２×２５０ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を水（５００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（２００ｇ）で乾燥させ、次いで、ガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。透明な琥珀色の濾液を減圧下で濃縮して（水浴温度２０℃）、透明な濃琥珀色の油として２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル（２１ｇ、８４％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ２．４２（ｄ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，２Ｈ），１．６９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），１．０２－０．８８（ｍ，４Ｈ），０．７９－０．７０（ｍ，２Ｈ），０．６６－０．５５（ｍ，２Ｈ）．
ステップ３：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸

【化10】

【0134】

２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルアセトニトリル（２．１ｇ、１４．１９ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３２ｍＬ）溶液に、水酸化ナトリウム（５．１２ｇ、１２８．０ｍｍｏｌ）、続いて、水（１３ｍＬ）を添加し、結果として生じた溶液を撹拌し、一晩にわたって７０℃に加熱した。次いで、混合物を室温に冷却し、水で希釈し、ジエチルエーテルで抽出した。６Ｎ塩酸を添加して水相をｐＨ１に調整し（濁った沈殿物が生じた）、ジエチルエーテル（３回）で抽出した。有機相を乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、濃縮して、オレンジ色の固体として２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸（２．１９ｇ、９９％収率、９８％純度）を得て、これを更に精製することなく次のステップに使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ２．４４（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６７（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，１Ｈ），０．９１（ｄｄｄ，Ｊ＝９．０，５．２，３．９Ｈｚ，２Ｈ），０．８１（ｄｄｄｄ，Ｊ＝８．９，５．２，３．９，０．５Ｈｚ，２Ｈ），０．６９（ｄｄｄ，Ｊ＝８．９，５．２，３．９Ｈｚ，２Ｈ），０．５６－０．４４（ｍ，２Ｈ）．
ステップ４：２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール

【化11】

【0135】

氷／水浴中で冷却したテトラヒドロフラン（３３．７１ｍＬ）中に溶解した水素化アルミニウムリチウム（８２７．４ｍｇ、９０２．３μＬ、２１．８０ｍｍｏｌ）に、テトラヒドロフラン（７．４７０ｍＬ）中２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル酢酸（２．５５２ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）を１５分間にわたって滴加し、反応温度を２０℃未満に保った。混合物を合計１８時間撹拌させ、周囲温度に徐々に加温した。混合物を氷／水浴で冷却し、水（８３８．４ｍｇ、８３８．４μＬ、４６．５４ｍｍｏｌ）、続いて、水酸化ナトリウム（１．００６ｍＬの５Ｍ、５．０３１ｍｍｏｌ）、次いで、水（２．４９３ｇ、２．４９３ｍＬ、１３８．４ｍｍｏｌ）を緩徐に添加して順次にクエンチし、白色の粒状スラリーを得て、これをセライトで濾過した。濾過した固体をジエチルエーテルで洗浄した。濾液を約３００ミリバールの真空中及び３０℃の水浴中で濃縮した。残渣をジエチルエーテルで希釈し、乾燥させ（硫酸マグネシウム）、濾過し、約３００ミリバールの真空中及び３０℃の水浴中で濃縮し、続いて、約３０秒間の真空下で、
２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール（２．３１８ｇ、１００％）を得て、これを更に精製することなく、その後のステップに直接使用した。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ３．６４（ｓ，２Ｈ），１．６８（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），１．３９（ｓ，１Ｈ），１．３１（ｓ，１Ｈ），０．８２（ｄ，Ｊ＝１４．０Ｈｚ，４Ｈ），０．６５（ｓ，２Ｈ），０．５０（ｄ，Ｊ＝３．６Ｈｚ，２Ｈ）．
ステップ５：３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化12】

【0136】

５－オキソ－１Ｈ－ピラゾール－２－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２．９４２ｇ、１５．９７ｍｍｏｌ）及び２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエタノール（２．３１８ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（３６．７８ｍＬ）溶液に、トリフェニルホスフィン（４．３９９ｇ、１６．７７ｍｍｏｌ）を添加した。混合物にアゾジカルボン酸ジイソプロピル（３．３９１ｇ、３．３０２ｍＬ、１６．７７ｍｍｏｌ）を１０分間にわたって緩徐に滴加した（軽度の発熱が認められた）。反応混合物を室温で３０分間、次いで、５０℃で３０分間撹拌した。テトラヒドロフランを真空中で除去した。粗残渣にトルエン（２３．５４ｍＬ）を添加し、混合物を一晩撹拌し、沈殿物が徐々に結晶化した。セライトでスラリー化し、次いで、沈殿物を濾去し、トルエン（８．７０５ｍＬ）で洗浄し、トルエン（８．７０５ｍＬ）で再度洗浄した。濾液を真空中で濃縮した。粗生成物を、１００％ヘキサンから１００％酢酸エチルへの緩やかな勾配を使用したシリカゲルクロマトグラフィーにより精製して、３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．４４９ｇ、７１％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値３０４．１７８６８、実測値３０５．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．８２分（ＬＣ法Ａ）．
ステップ６： ３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール

【化13】

【0137】

３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．３０４ｇ、１７．４３ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（２９．８１ｇ、２０．１４ｍＬ、２６１．４ｍｍｏｌ）とともにジクロロメタン（５３．０４ｍＬ）中に溶解し、反応物を室温で１２０分間撹拌した。反応物を蒸発させ、結果として生じた油を酢酸エチルと飽和重炭酸ナトリウム溶液との間に分配し、層を分離した。水性部分を酢酸エチルで更に２回抽出し、次いで、有機層を合わせ、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濾過し、蒸発させて、油として３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール（３．５６ｇ、１００％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値２０４．１２６２７、実測値２０５．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．５９分（ＬＣ法Ａ）．
ステップ７：２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化14】

【0138】

２，６－ジクロロピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．３２２ｇ、１７．４２ｍｍｏｌ）、３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）－１Ｈ－ピラゾール（３．５５９ｇ、１７．４２ｍｍｏｌ）、及び炭酸カリウム（２．８９１ｇ、２０．９２ｍｍｏｌ）を無水ジメチルスルホキシド（７１．１８ｍＬ）中で合わせた。１，４－ジアザビシクロ［２．２．２］オクタン（３９１．１ｍｇ、３．４８７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を窒素下室温で１６時間撹拌した。反応混合物を水（１３６．９ｍＬ）で希釈し、１５分間撹拌した。結果として生じた白色の固体を濾過し、水で洗浄した。固体をジクロロメタン中に溶解し、硫酸マグネシウムで乾燥させた。混合物を濾過し、蒸発させて、白色の固体として２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．６９ｇ、７９％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ８．３５（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），８．１８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），５．９４（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２５（ｓ，２Ｈ），１．９０（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，２Ｈ），１．６２（ｓ，９Ｈ），１．４９（ｔ，Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），０．８５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，４Ｈ），０．６５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，２Ｈ），０．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ）． ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値４１５．１６６２６、実測値３６０．０（Ｍ－ｔＢｕ）＋；保持時間：２．０９分（ＬＣ法Ｂ）．
ステップ８： ２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸

【化15】

【0139】

２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．８５ｇ、１４．０７ｍｍｏｌ）をトリフルオロ酢酸（１６．２６ｍＬ、２１１．１ｍｍｏｌ）とともにジクロロメタン（５８．５ｍＬ）中に溶解し、反応物を室温で１６時間撹拌した。反応物を蒸発させ、結果として生じた固体にエーテルを添加し、次いで、エーテルを減圧下で除去した。このエーテルからの蒸発を更に２回繰り返して、白色の固体で２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸（５．０６ｇ、１００％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ ８．４１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），５．９７（ｄ，Ｊ＝２．９Ｈｚ，１Ｈ），４．２７（ｓ，２Ｈ），１．９１（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ），１．５０（ｓ，１Ｈ），０．８５（ｄ，Ｊ＝１．５Ｈｚ，４Ｈ），０．７１－０．６２（ｍ，２Ｈ），０．５２（ｄ，Ｊ＝１．１Ｈｚ，２Ｈ）． ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値３５９．１０３６７、実測値３６０．２（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．１６分（ＬＣ法Ｂ）．
パートＢ：（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチルの合成

【化16】

ステップ１：（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）

【化17】

【0140】

５Ｌの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／制御器及び窒素入口／出口を装着した。容器に、窒素雰囲気下で水素化ナトリウム（６０％ｗ／ｗの５９．９１ｇ、１．４９８ｍｏｌ）、続いてヘプタン（１．５Ｌ）を充填し、灰色の懸濁液を得た。撹拌を開始し、ポット温度を１９℃で記録した。次いで、シリンジによって添加したエチルアルコール（３．４５１ｇ、７４．９１ｍｍｏｌ）を容器に充填すると、ガスが発生した。添加漏斗に、テトラヒドロピラン－２－オン（１５０ｇ、１．４９８ｍｏｌ）及びギ酸エチル（１１１ｇ、１．５０ｍｏｌ）の透明な淡黄色の溶液を充填した。溶液を１時間にわたって滴加し、ガス発生をもたらし、徐々に発熱して４５℃になった。次いで、結果として生じた濃い白色の懸濁液を６５℃に２時間加熱し、次いで、室温に冷却させた。混合物を室温で一晩（約１０時間）撹拌し続けた。反応混合物を、窒素流下で、ガラスフリットブフナー漏斗（中程度の多孔性）を通して真空濾過した。濾過ケーキをヘプタン（２×２５０ｍＬ）で置換洗浄し、数分間吸引した。わずかにヘプタンで湿ったケーキをガラストレイに移し、真空オーブン中で、４５℃で１５時間乾燥させて、所望の生成物、（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）として白色の固体（２０５ｇ、１．３６ｍｏｌ、９１％収率）を得た。
ステップ２：３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オン

【化18】

【0141】

５Ｌの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／制御器及び窒素入口／出口を装着した。この容器に、窒素雰囲気下で、（Ｅ）－（２－オキソテトラヒドロピラン－３－イリデン）メタノラート（ナトリウム塩）（２０５ｇ、１．３６６ｍｏｌ）（２０５ｇ、１．３６６ｍｏｌ）及びテトラヒドロフラン（１６４０ｍＬ）を充填し、これにより、白色の懸濁液を得た。撹拌を開始し、ポット温度を１９℃で記録した。次いで、一度に固体として添加したパラホルムアルデヒド（１３６．６ｇ、４．５４９ｍｏｌ）を容器に充填した。得られた懸濁液を６３℃に加熱し、条件を１５時間維持した。加熱すると、反応混合物はわずかにゼラチン質になった。白色ゼラチン質の混合物を減圧下で濃縮して、テトラヒドロフランのほとんどを除去した。残っている残留物を、分液漏斗中に酢酸エチル（１０００ｍＬ）、飽和塩化ナトリウム（５００ｍＬ）、及び飽和炭酸水素ナトリウム（５００ｍＬ）で分配した。有機物を除去し、残留水溶液を酢酸エチル（５×３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機物を、硫酸ナトリウム（５００ｇ）上で乾燥させ、次いで、２０ｍｍのセライト層を有するガラスフリットブフナー漏斗を通して真空濾過した。濾過ケーキを酢酸エチル（２５０ｍＬ）で置換洗浄した。透明な濾液を減圧下で濃縮して、所望の粗生成物として透明な淡黄色の油（１３５ｇ）を得た。この物質を、１時間にわたる１００％ヘキサンからヘキサン中６０％酢酸エチルへの勾配で溶出するシリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィー（液体ロード）により精製し、４５０ｍＬの画分を収集した。生成物を、３：１のヘキサン／酢酸エチルで溶出するシリカゲルでのＴＬＣ分析によって検出し、ＵＶ下で可視化した。生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮して、所望の生成物、３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オンとして透明な無色の油（１３２ｇ、１．１８ｍｏｌ、７２％収率、ＮＭＲにより１６重量％の残留酢酸エチル含有）を得た。１_{Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ}６）δ ６．１８（ｑ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），５．６０（ｑ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），４．４０－４．２６（ｍ，２Ｈ），２．６１（ｄｄｔ，Ｊ＝７．０，６．３，２．０Ｈｚ，２Ｈ），１．９０－１．７５（ｍ，２Ｈ）．
ステップ３：３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オン

【化19】

【0142】

５０００ｍＬの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、二次格納容器として使用した冷却浴、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、添加漏斗、及び窒素吸気口／排気口を装着した。容器に、窒素雰囲気下で２－ニトロプロパン（１０４．９ｇ、１．１７７ｍｏｌ）を充填した。撹拌を開始し、ポット温度を１９℃で記録した。次いで、容器に１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（２２．４１ｇ、１４７．２ｍｍｏｌ）を一度にそのままで添加して充填し、透明な淡黄色の溶液を得た。発熱は観察されなかった。添加漏斗に、アセトニトリル（１１００ｍＬ）中の３－メチレンテトラヒドロピラン－２－オン（１１０ｇ、９８１．０ｍｍｏｌ）の溶液を１時間にわたって滴加して充填し、透明な淡黄色の溶液を得、徐々に発熱して２４℃になった。反応混合物を、室温で３．５時間撹拌し続け、次いで減圧下で濃縮した。残りの残留物をジクロロメタン（１０００ｍＬ）中に溶解し、１モルのクエン酸溶液／飽和塩化ナトリウム溶液の３：２混合物５００ｍＬで分配した。結果として生じた有機相は、透明な淡青色の溶液であり、水相は、わずかに濁った非常に淡い青色の溶液であった。有機層を除去し、残りの水層をジクロロメタン（３００ｍＬ）で抽出した。合わせた有機層を飽和塩化ナトリウム溶液（３００ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（２５０ｇ）で乾燥させ、次いで、ガラスフリットブフナー漏斗に通して濾過した。濾液を減圧下で約２００ｍＬの体積まで濃縮した。透明な淡い青色のジクロロメタン溶液をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、濁った溶液を減圧下で約２００ｍＬの体積まで濃縮し、懸濁液を得た。混合物を再びメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、減圧下で約２５０ｍＬの体積まで濃縮した。得られた懸濁液を、一晩（約１２時間）室温で静置させた。固体をガラスフリットブフナー漏斗内での真空濾過により収集し、濾過ケーキを冷メチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（２×１５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで、３０分間吸引した。この物質を更に真空オーブン中で、４５℃で５時間乾燥させて、所望の生成物、３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オンとして白色の固体（１６０ｇ、０．７９５ｍｏｌ、８１％収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ ４．３４（ｄｄｄ，Ｊ＝１１．１，９．３，４．３Ｈｚ，１Ｈ），４．２０（ｄｔ，Ｊ＝１１．１，５．１Ｈｚ，１Ｈ），２．７５－２．６２（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｄｄ，Ｊ＝１４．９，５．２Ｈｚ，１Ｈ），２．０１－１．８９（ｍ，２Ｈ），１．８９－１．６７（ｍ，２Ｈ），１．５５（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，６Ｈ），１．４４（ｄｄｄｄ，Ｊ＝１２．８，１１．５，８．１，６．６Ｈｚ，１Ｈ）．
ステップ４：３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オン

【化20】

【0143】

１０００ｍＬの三つ口丸底フラスコに、Ｔｅｆｌｏｎ（登録商標）撹拌棒、加熱マントル、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／コントローラ、及びゴムセプタムを装着した。容器に、３－（２－メチル－２－ニトロ－プロピル）テトラヒドロピラン－２－オン（２５ｇ、１２４．２ｍｍｏｌ）及びエチルアルコール（３７５ｍＬ）を充填し、白色懸濁液を得た。撹拌を開始し、懸濁液を４０℃に１０分間加熱し、透明な無色の溶液を得た。次いで、容器にガス分散チューブを装着し、溶液を１５分間にわたって窒素で脱気した。次いで、容器にラネーニッケル（８．０１９ｇの５０ｗ／ｗ％、６８．３１ｍｍｏｌ）を充填し、次いで、容器にセプタムを装着した。容器を排気し、水素雰囲気下に置いた。このプロセスを３サイクル繰り返した。次いで、容器を１雰囲気の水素下に置き、反応混合物を徐々に６０℃に加熱した。反応物を、６０℃で２４時間撹拌した。室温に冷却した後、容器にガス分散チューブを装着し、反応混合物を１５分間にわたって窒素で脱気した。混合物を、２０ｍｍのセライト層を有するガラスフリットブフナー漏斗に通して真空濾過した。濾過ケーキをエタノール（２×１００ｍＬ）で置換洗浄し、わずかにエチルアルコールが湿潤するまで吸引し、次いで水で湿らせ、使用したラネーニッケル触媒を水中に捨てた。透明な淡い琥珀色の濾液を減圧下で濃縮して、透明な粘性の淡い琥珀色の油を得た。油をメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、濁った溶液を、約１５０ｍＬの体積まで減圧下で濃縮して懸濁液を得た。混合物を再びメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（１５００ｍＬ）で希釈し、減圧下で約１５０ｍＬの体積まで濃縮した。得られた懸濁液を、一晩（約１２時間）室温で静置させた。固体を、ガラスフリットブフナー漏斗内で真空濾過によって収集し、濾過ケーキを、冷たいメチルｔｅｒｔ－ブチルエーテル（２×５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで３０分間吸引した。この物質を、４５℃において３時間、真空オーブン中で更に乾燥させて、生成物、３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オンとして白色の固体（１９ｇ、０．１１１ｍｏｌ、８９％収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ７．６３（ｓ，１Ｈ），３．３８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．３７（ｔｄｄ，Ｊ＝９．８，８．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ），２．０２（ｄｄ，Ｊ＝１２．３，８．６Ｈｚ，１Ｈ），１．７２（ｔｄｄ，Ｊ＝９．６，７．５，４．４Ｈｚ，１Ｈ），１．５２－１．３２（ｍ，３Ｈ），１．２８－１．０３（ｍ，７Ｈ）。
ステップ５： ３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オール

【化21】

【0144】

５Ｌの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、加熱マントル、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ／制御器及び窒素入口／出口を装着した。容器に、水素化アルミニウムリチウムペレット（１９．３９ｇ、５１０．９ｍｍｏｌ）を窒素雰囲気下で充填した。次いで容器にテトラヒドロフラン（５００ｍＬ、２０ｍＬ／ｇ）を充填した。撹拌を開始し、ポット温度を２０℃で記録した。混合物を室温で０．５時間撹拌させ、ペレットを溶解させた。得られた灰色懸濁液のポット温度を２４℃で記録した。添加漏斗に、テトラヒドロフラン（５００ｍＬ）中の３－（３－ヒドロキシプロピル）－５，５－ジメチル－ピロリジン－２－オン（２５ｇ、１４６．０ｍｍｏｌ）の溶液を充填し、透明な淡黄色の溶液を９０分にわたって滴加した。均質性を達成するために、わずかな加熱が必要であった。添加完了後、得られた灰色懸濁液のポット温度を２４℃で記録した。次いで、混合物を６５℃のポット温度に加熱し、条件を７２時間維持した。この時点での反応混合物の分析により、いくらかの残留出発材料が依然として残っており、生成物形成に変化がなかったことが示された。反応はその後、この時点で停止した。加熱マントルを取り外し、容器に冷却浴を取り付けた。懸濁液を粉砕した氷／水冷却浴で０℃に冷却し、次いで水（１９．９３ｍＬ）の非常にゆっくりとした滴加によってクエンチし、続いて１５重量％の水酸化ナトリウム溶液（１９．９３ｍＬ）を添加し、次いで最後に水（５９．７９ｍＬ）でクエンチした。得られた白色懸濁液のポット温度を５℃で記録した。冷却浴を取り外し、容器に再び加熱マントルを取り付けた。懸濁液を６０℃に加温し、その条件を３０分間維持した。温かい懸濁液を、２０ｍｍのセライト層を有するガラスフリットブフナー漏斗を通して真空濾過した。次いで、濾過ケーキを６０℃のテトラヒドロフラン（２×２５０ｍＬ）で置換洗浄し、次いで３０分間吸引した。透明な濾液を減圧下で濃縮して、所望の生成物、３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オールとして透明な淡黄色の粘性油（２３．５ｇ、０．１４９ｍｏｌ、９９％収率）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ３．３７（ｄｔ，Ｊ＝８．３，６．４Ｈｚ，３Ｈ），２．９５（ｄｄ，Ｊ＝１０．６，７．６Ｈｚ，１Ｈ），２．４０（ｄｄ，Ｊ＝１０．７，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．０４（ｄｔ，Ｊ＝１６．１，８．１Ｈｚ，１Ｈ），１．６９（ｄｄ，Ｊ＝１２．２，８．２Ｈｚ，１Ｈ），１．５０－１．２４（ｍ，５Ｈ），１．１１－０．９４（ｍ，７Ｈ）。
ステップ６：４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化22】

【0145】

１Ｌの三つ口丸底フラスコに、機械的撹拌器、冷却浴、添加漏斗、Ｊ－Ｋｅｍ温度プローブ、及び窒素入口／出口を装着した。容器に、３－（５，５－ジメチルピロリジン－３－イル）プロパン－１－オール（１５ｇ、９５．３９ｍｍｏｌ）及びジクロロメタン（２２５ｍＬ、１５ｍＬ／ｇ）を窒素雰囲気下で充填し、透明な淡黄色の溶液を得た。撹拌を開始し、ポット温度を１９℃で記録した。冷却浴に粉砕した氷／水を充填し、ポット温度を０℃に下げた。添加漏斗にトリエチルアミン（１２．５５ｇ、１２４．０ｍｍｏｌ）を充填し、続いて５分にわたって均一に滴加した。発熱は観察されなかった。次いで添加漏斗に、ジクロロメタン（２２５ｍＬ）中に溶解した二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル（２２．８９ｇ、１０４．９ｍｍｏｌ）を充填した。次いで透明な淡黄色の溶液を３０分にわたって滴加し、穏やかなガス発生が生じた。発熱は観察されなかった。冷却浴を除去し、結果として生じた透明な薄黄色の溶液を室温に加温させ、室温で３時間撹拌し続けた。反応混合物を分液漏斗に移し、水（７５ｍＬ）で分配した。有機物を除去し、飽和塩化ナトリウム溶液（７５ｍＬ）で洗浄し、硫酸ナトリウム（１５０ｇ）上で乾燥させ、次いでガラスフリットブフナー漏斗を通して濾過した。濾液を減圧下で濃縮して、所望の粗生成物として透明な淡黄色の油（３０ｇ）を得た。この物質を、ジクロロメタン中の１００％ジクロロメタンからジクロロメタン中の１０％メチルアルコールの勾配で６０分にわたって溶出するシリカゲルカラムフラッシュクロマトグラフィー（ジクロロメタンによる液体充填）により精製して５０ｍＬの画分を収集した。所望の生成物画分を合わせ、減圧下で濃縮して、４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（２２ｇ、０．０８５５ｍｏｌ、９０％収率）を透明な淡黄色の粘性油として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６_６）δ４．３８（ｔｄ，Ｊ＝５．２，１．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ｄｔ，Ｊ＝１０．３，６．７Ｈｚ，１Ｈ），３．３８（ｔｄ，Ｊ＝６．６，３．５Ｈｚ，２Ｈ），２．７６（ｑ，Ｊ＝１０．３Ｈｚ，１Ｈ），２．０７（ｔｄ，Ｊ＝１１．６，５．７Ｈｚ，１Ｈ），１．８７（ｄｄｄ，Ｊ＝１６．７，１２．１，６．０Ｈｚ，１Ｈ），１．３７（ｄｄ，Ｊ＝１４．２，１０．４Ｈｚ，１７Ｈ），１．２４（ｓ，３Ｈ）。
ステップ７：２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化23】

【0146】

４－（３－ヒドロキシプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５０．５ｇ、１９６．２２ｍｍｏｌ）及びトリエチルアミン（３９．７１１ｇ、５４．６９８ｍＬ、３９２．４４ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（５００ｍＬ）中に溶解し、結果として生じた溶液を氷水浴中で３０分間冷やした。塩化メシル（２４．７２５ｇ、１６．７０６ｍＬ、２１５．８４ｍｍｏｌ）を３０分間にわたって滴加し、次いで、氷浴を除去し、混合物を室温で１時間撹拌した。次いで、反応物を飽和炭酸水素ナトリウム溶液（２００ｍＬ）でクエンチした。相を分離し、有機相を飽和炭酸水素ナトリウム（２００ｍＬ）及び水（２×１００ｍＬ）で抽出した。水相を捨て、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６４．２ｇ、９３％）を淡黄色の油として得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値３３５．１７６６、実測値３３６．４（Ｍ＋１）^＋；保持時間：５．５４分（ＬＣ法Ｑ）．
ステップ８：４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化24】

【0147】

２，２－ジメチル－４－（３－メチルスルホニルオキシプロピル）ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６４．２ｇ、１９１．３８ｍｍｏｌ）をジオキサン（６５０ｍＬ）中に溶解し、次いで、水酸化アンモニウム（６５０ｍＬ）を添加し、結果として生じた混合物を１８時間にわたって４５℃に加熱した。１８時間後、反応物を室温に冷却した。溶液を１Ｍ水酸化ナトリウム（２００ｍＬ）で希釈し、次いでジエチルエーテル（３×６５０ｍＬ）で抽出した。水相を捨て、合わせた有機相を水（２×２００ｍＬ）で抽出した。水相を捨て、有機相を硫酸ナトリウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮して、４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４８．９ｇ、９５％）を淡黄色の油として得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値２５６．２１５１、実測値２５７．３（Ｍ＋１）^＋；保持時間：３．７０分（ＬＣ法Ｑ）．
ステップ９：２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化25】

【0148】

ジメチルスルホキシド（７５ｍＬ）中の４－（３－アミノプロピル）－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（８．９１ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）及び６－フルオロピリジン－２－スルホンアミド（６．１３ｇ、３４．８ｍｍｏｌ）に、炭酸カリウム（４．９１ｇ、３５．５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を１００℃で１２時間撹拌し、次いで周囲温度に冷却し、更に４時間（合計１６時間）撹拌した。反応混合物を、水（２００ｍＬ）中の塩酸（１Ｍの３５ｍＬ、３５．００ｍｍｏｌ）にゆっくりと注ぎ（いくらか泡立つ）、酢酸エチル（２５０ｍＬ）で希釈した。有機相を分離し、１００ｍＬのブラインで洗浄した。有機相を、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、セライト上で濾過し、真空中で濃縮して、暗黄色の油を得た。粗生成物を、ヘキサン中の０％～１００％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって精製した。純粋物（９．０ｇ）及び不純物（３ｇ）の両方の画分を収集した。ヘキサン中の０％～１００％の酢酸エチルで溶出するシリカゲルクロマトグラフィーによって不純物画分を精製して、全体で、２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（１０．０ｇ、６９％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ７．５２（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０７（ｓ，２Ｈ），６．９５（ｄｄ，Ｊ＝７．２，０．７Ｈｚ，２Ｈ），６．６１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），３．５５（ｑ，Ｊ＝９．１Ｈｚ，１Ｈ），３．３２－３．２４（ｍ，２Ｈ），２．７９（ｑ，Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），２．１３（ｄ，Ｊ＝１６．１Ｈｚ，１Ｈ），１．９６－１．８２（ｍ，１Ｈ），１．５１（ｄｔ，Ｊ＝１８．０，９．３Ｈｚ，２Ｈ），１．３７（ｄｄ，Ｊ＝１２．９，１０．６Ｈｚ，１５Ｈ），１．２４（ｓ，３Ｈ）。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値４１２．２１４４２、実測値４１３．１（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．３４分（ＬＣ法Ｄ）．
ステップ１０：（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化26】

【0149】

ラセミ体２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（７ｇ、１６．９７ｍｍｏｌ）を、１１．０分にわたって７０ｍＬ／分で４０％メタノール／６０％二酸化炭素移動相（注入量＝メタノール中の３２ｍｇ／ｍＬ溶液の５００μＬ）を用いてＣｈｉｒａｌＰａｋ ＩＧ（２５０×２１．２ｍｍカラム、５μｍ粒径）を使用してＳＦＣクロマトグラフィーによるキラル分離に供して、第１のピークとして溶出する（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（３．４４８１ｇ、９９％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値４１２．２１４４２、実測値４１３．２（Ｍ＋１）^＋；保持時間：０．６３分（ＬＣ法Ａ）．
パートＣ：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）の合成

【化27】

ステップ１：（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル

【化28】

【0150】

２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボン酸（５．２ｇ、１４．４５ｍｍｏｌ）のテトラヒドロフラン（１００ｍＬ）溶液にカルボニルジイミダゾール（２．８ｇ、１６．５１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１時間撹拌した。この混合物に、テトラヒドロフラン（１５ｍＬ）中（４Ｓ）－２，２－ジメチル－４－［３－［（６－スルファモイル－２－ピリジル）アミノ］プロピル］ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（６．０ｇ、１４．５４ｍｍｏｌ）、続いて、１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン（６．５ｍＬ、４３．４７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１６時間撹拌した。反応物を水（１５０ｍＬ）で希釈し、混合物を塩酸水溶液（１５ｍＬの６Ｍ、９０．００ｍｍｏｌ）で酸性化した。混合物を酢酸エチル（３００ｍＬ）で抽出し、有機相を分離した。有機相をブラインで洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、セライト上で濾過し、真空中で濃縮して、白色の沈殿物を得た。沈殿物をアセトニトリルでスラリー化し、中型ガラスフリットを使用した濾過により固体を収集し、アセトニトリルで洗浄した。濾液を真空中で濃縮して、黄色の油を得た。粗油をアセトニトリル及びいくらかのＮ－メチル－２－ピロリドンで希釈し、４１５ｇの逆相Ｃ_１８カラム上でクロマトグラフし、水中５０％～１００％のアセトニトリルで溶出して、（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（４．５ｇ、４１％）を得た。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値７５３．３０７５６、実測値７５４．４（Ｍ＋１）^＋；保持時間：３．７９分（ＬＣ法Ｄ）．
ステップ２：２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）

【化29】

【0151】

（４Ｓ）－４－［３－［［６－［［２－クロロ－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボニル］スルファモイル］－２－ピリジル］アミノ］プロピル］－２，２－ジメチル－ピロリジン－１－カルボン酸ｔｅｒｔ－ブチル（５．９ｇ、７．８２１ｍｍｏｌ）のジクロロメタン（３０ｍＬ）及びトルエン（１５ｍＬ）溶液に、トリフルオロ酢酸（６．０ｍＬ、７７．８８ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を周囲温度で１８時間撹拌した。溶媒を、浴温度を４５℃に設定して真空中で除去し、濃い黄色い油を得た。油をトルエン（１２５ｍＬ）で希釈し、溶媒を、浴温度を４５℃に設定して真空中で除去した。油をトルエンで希釈し、溶媒を真空中で除去して、濃い粘性の黄色い油、２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）（６．０ｇ、１００％）を得て、これを更に精製することなく、次のステップに使用した。ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値６５３．２５５１、実測値６５４．３（Ｍ＋１）^＋；保持時間：２．６分（ＬＣ法Ｂ）．
ステップ３：（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）

【化30】

【0152】

２－クロロ－Ｎ－［［６－［３－［（３Ｓ）－５，５－ジメチルピロリジン－３－イル］プロピルアミノ］－２－ピリジル］スルホニル］－６－［３－（２－ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イルエトキシ）ピラゾール－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（トリフルオロ酢酸塩）（６．０ｇ、７．８１０ｍｍｏｌ）のＮＭＰ（１４０ｍＬ）溶液に、炭酸カリウム（５．３ｇ、３８．３５ｍｍｏｌ）を添加した。混合物に窒素を５分間パージした。次いで、混合物を１５０℃で２２時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、水（３００ｍＬ）に添加し、オフホワイト色の固体沈殿物を得た。混合物を塩酸水溶液（１２ｍＬの６Ｍ、７２．００ｍｍｏｌ）で注意深く酸性化し、発泡スラリーを得た。中型ガラスフリットを使用した濾過により固体を収集した。湿潤フィルターケーキを酢酸エチル（５００ｍＬ）中に溶解し、２００ｍＬのブラインで洗浄した。水相はわずかに混濁していたため、少量の６Ｎ塩酸で酸性化し、有機相に戻した。水相を分離し、有機相を硫酸マグネシウム上で乾燥させ、濾過し、真空中で濃縮し、淡黄色の油を得た。この粗生成物をアセトニトリルで希釈し、４１５ｇのＣ_１８逆相カラム上でクロマトグラフし、水中５０％～１００％のアセトニトリルで溶出した。生成物を、クリーム色の発泡体として単離した。発泡体を４８時間４５℃において真空中で乾燥させ、（１４Ｓ）－８－［３－（２－｛ジスピロ［２．０．２．１］ヘプタン－７－イル｝エトキシ）－１Ｈ－ピラゾール－１－イル］－１２，１２－ジメチル－２λ６－チア－３，９，１１，１８，２３－ペンタアザテトラシクロ［１７．３．１．１１１，１４．０５，１０］テトラコサ－１（２２），５，７，９，１９（２３），２０－ヘキサエン－２，２，４－トリオン（化合物Ｉ）（３．３２ｇ、６８％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ジメチルスルホキシド－ｄ_６）δ １２．４８（ｓ，１Ｈ），８．２０（ｄ，Ｊ＝２．８Ｈｚ，１Ｈ），７．８１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｄｄ，Ｊ＝８．５，７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０５（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７１（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），６．０８（ｄ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），４．２１（ｔｄ，Ｊ＝６．７，１．３Ｈｚ，２Ｈ），３．９２（ｄ，Ｊ＝１２．０Ｈｚ，１Ｈ），３．１６（ｓ，１Ｈ），２．９５（ｄ，Ｊ＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７８－２．６６（ｍ，１Ｈ），２．０７（ｓ，１Ｈ），１．９２－１．７２（ｍ，４Ｈ），１．６０（ｓ，６Ｈ），１．５１（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，１Ｈ），１．３１（ｑ，Ｊ＝１２．２Ｈｚ，１Ｈ），０．８９－０．７７（ｍ，４Ｈ），０．６９－０．６１（ｍ，２Ｈ），０．５３－０．４５（ｍ，２Ｈ）． ＥＳＩ－ＭＳ ｍ／ｚ計算値６１７．２７８４４、実測値６１８．４（Ｍ＋１）^＋；保持時間：１０．２９分（ＬＣ法Ｆ）．

【0153】

実施例２：化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａ
およそ５００ｍｇの化合物Ｉ（遊離酸）を、１５ｍＬのビーズ粉砕バイアルに計量して入れた。１当量のベンゼンスルホン酸及び２１４μＬのエタノールを添加した。調製物を５０００ｒｐｍで、各間隔の間に１０秒間の中断を伴い１０×６０秒間粉砕した。次いで、調製物を上記のように合計６サイクル粉砕し、ＸＲＰＤ及びＴＧＡ／ＤＳＣによって分析した。次いで固体を、周囲条件下でおよそ２３時間、真空下で乾燥させて、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを得た。

【0154】

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤ分析を、ＰＩＸｃｅｌ検出器（１２８チャネル）を用いてＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ Ｘ’ｐｅｒｔ ｐｒｏで実施し、３～３５°２θで試料を走査した。材料を穏やかに粉末状にして、いかなる凝集体も放出し、Ｋａｐｔｏｎ又はＭｙｌａｒポリマーフィルムを有するマルチウェルプレート上に装填して、試料を支持した。次いで、マルチウェルプレートを回折計に入れ、４０ｋＶ／４０ｍＡの発電機設定を使用して、透過モード（ステップサイズ０．０１３０°２θ、ステップ時間１８．８７秒）で動作するＣｕ Ｋ放射（α１ λ＝１．５４０６０Å、α２＝１．５４４４３Å、β＝１．３９２２５Å、α１：α２比＝０．５）を使用して分析した。ＨｉｇｈＳｃｏｒｅ Ｐｌｕｓ ４．７デスクトップアプリケーション（ＰＡＮａｌｙｔｉｃａｌ、２０１７）を使用して、データを可視化し、画像を生成した。

【0155】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＸＲＰＤディフラクトグラムを図１に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表２に要約する。

【表2】

【0156】

Ｂ．熱重量分析（ＴＧＡ）
およそ５～１０ｍｇの化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを、秤量された開放アルミニウムパンに添加し、ＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＳＤＴ ６５０ Ａｕｔｏ－Ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ＤＳＣに装填し、室温で保持した。次いで試料を、１０℃／分の速度で３０℃から４００℃に加熱し、その間、試料重量の変化を熱流応答（ＤＳＣ）とともに記録した。窒素を２００ｃｍ^３／分の流量で、試料パージガスとして使用した。

【0157】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＴＧＡデータは、図２に提供され、周囲温度から２００℃までの約２％の重量損失を示す。

【0158】

Ｃ．示差走査熱量測定分析（ＤＳＣ）
およそ１～５ｍｇの化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａを、アルミニウムＤＳＣパンに計量して入れ、アルミニウム蓋で非密封シールした。次いで試料パンを、ＲＣ９０冷却器を備えたＴＡ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ＤＳＣ ２５００示差走査熱量計に装填した。試料及び参照を１０℃／分の走査速度で３００℃に加熱し、結果として生じる熱流応答を監視した。試料を２０℃に再冷却し、次いで、再び２０５℃に再加熱した（全て１０℃／分で）。窒素を５０ｃｍ^３／分の流量で、パージガスとして使用した。

【0159】

化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＡのＤＳＣデータは、図３に提供され、７５及び１７５℃で吸熱を示す。

【0160】

実施例３：化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂ
およそ１５ｍｇの化合物Ｉ遊離酸／ベンゼンスルホン酸（１．０５当量）を、２ｍＬのビーズ粉砕バイアルに計量して入れた。５μＬのＴＨＦ及び２～３個の金属ビーズを添加した。調製物を７５００ｒｐｍで、各間隔の間に１０秒間の中断を伴い５×６０秒間粉砕した。固体を単離して、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｂを得た。

【0161】

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤ分析を、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて記載したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＢのＸＲＰＤディフラクトグラムを図４に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表３に要約する。

【表3】

【0162】

Ｂ．熱重量／示差走査熱量測定分析
ＴＧＡ／ＤＳＣを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＢのＴＧＡデータは、図５に提供され、周囲温度から１５０℃までのおよそ４％の重量損失、及びおよそ１４０℃の吸熱を示す。

【0163】

実施例４．化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃ
およそ１５ｍｇの化合物Ｉ遊離酸／ベンゼンスルホン酸（１．０５当量）を、２ｍＬのビーズ粉砕バイアルに計量して入れた。５μＬの酢酸イソプロピル及び２～３個の金属ビーズを添加した。調製物を７５００ｒｐｍで、各間隔の間に１０秒間の中断を伴い５×６０秒間粉砕して、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ｃを得た。

【0164】

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤ分析を、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて記載したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＣのＸＲＰＤディフラクトグラムを図６に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表４に要約する。

【表4】

【0165】

Ｂ．熱重量／示差走査熱量測定分析
ＴＧＡ／ＤＳＣを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態ＣのＴＧＡデータは、図７に提供され、周囲温度から１６２℃までのおよそ４％の重量損失を示し、およそ５０℃の吸熱を示す。

【0166】

実施例５：化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａ
およそ５００ｍｇの化合物Ｉ遊離酸を、１５ｍＬのビーズ粉砕バイアルに計量して入れた。１．０５当量のｐ－トルエンスルホン酸を添加した。２２１μＬの酢酸イソプロピルを添加した。調製物を５０００ｒｐｍで、各間隔の間に１０秒間の中断を伴い１０×６０秒間粉砕した。３サイクルを実施し、次いで、調製物を上記のように更に３サイクル粉砕した。次いで固体を、周囲温度においておよそ２３時間、真空下で乾燥させて、化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態Ａを得た。

【0167】

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤ分析を、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて記載したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＸＲＰＤディフラクトグラムを図８に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表５に要約する。

【表5】

【0168】

Ｂ．熱重量分析
ＴＧＡを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＴＧＡデータは、図９に提供され、周囲温度から２００℃までのおよそ６％の重量損失を示す。

【0169】

Ｃ．示差走査熱量測定分析
ＤＳＣを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述した手順に従って実施した。化合物Ｉ ｐ－トルエンスルホン酸形態ＡのＤＳＣデータは、図１０に提供され、７１及び１６５℃で吸熱を示す。

【0170】

実施例６：化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａ
およそ１ｇの化合物Ｉ遊離酸を２０バイアルに計量して入れた。水（１０ｍＬ）を添加して、スラリーを生成した。塩化マグネシウム（０．５３当量）及び水酸化ナトリウム（１．０５当量）を、各々１ｍＬの水中の溶液として添加した。５０ｍＬの水を添加した（かつＤｕｒａｎボトルに移した）。溶解は得られなかった。７５ｍＬの１，４－ジオキサンを添加して溶解を得て、１，４－ジオアン（ｄｉｏａｎｅ）：水、５９：４１ｖ／ｖを得た。溶液を凍結乾燥機のチャンバー内で凍結させ、約７１時間凍結乾燥させた。得られた固体についてＸＲＰＤ分析を実施した。２ｍＬのアセトン及び２滴の水を添加して、スラリーを生成した。スラリーは最初に流動性であり、次いで、非流動性になることが観察された。更に１ｍＬのアセトンを添加して、流動性スラリーを生成した。約３時間の温度サイクルの後、２ｍＬのアセトンを添加して、流動性スラリーを維持した。調製物を約４８時間、４時間サイクルで、周囲温度と４０℃との間で温度循環させた。調製物を、グレード１の濾紙を使用したブフナー濾過により単離し、周囲温度において約７０時間、真空下で乾燥させて、化合物Ｉマグネシウム塩形態Ａを得た。

【0171】

Ａ．Ｘ線粉末回折
ＸＲＰＤ分析を、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて記載したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＸＲＰＤディフラクトグラムを図１１に提供し、ＸＲＰＤデータを以下の表６に要約する。

【表6】

【0172】

Ｂ．熱重量分析
ＴＧＡを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述したのと同じ手順に従って実施した。化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＴＧＡデータは、図１２に提供され、周囲温度から１１５℃までのおよそ４％の重量損失を示す。

【0173】

Ｃ．示差走査熱量測定分析
ＤＳＣを、化合物Ｉベンゼンスルホン酸形態Ａについて上述した手順に従って実施した。化合物Ｉマグネシウム塩形態ＡのＤＳＣデータは、図１３に提供され、１２５℃で吸熱を示す。

【0174】

実施例７：５ｍｇの化合物Ｉを含有する錠剤の調製
微結晶セルロースをステンレス鋼スクリーン（３０メッシュ）に通し、２１０．１ｇを１０ＬのＢｏｈｌｅ Ｂｉｎに充填した。化合物Ｉをステンレス鋼スクリーン（３０メッシュ）に通し、２１０．０ｇを１０ＬのＢｏｈｌｅ Ｂｉｎに充填した。ビンをシールし、成分を３２ＲＰＭの速度で２分間をブレンドして、微結晶セルロース／化合物Ｉブレンドを得た。微結晶セルロース／化合物Ｉブレンドをステンレス鋼容器に排出した。以下の材料を、ステンレス鋼３０メッシュスクリーンを通してふるいにかけ、この順序で１０ＬのＢｏｈｌｅビンに添加する：ラクトース（１０２２．２ｇのおよそ半分）、微結晶セルロース（８１２ｇのおよそ半分）、微結晶セルロース／化合物Ｉブレンド、ポリビニルピロリドン／酢酸ビニル（２１０．１ｇ）、クロスカルメロースナトリウム（１３３ｇ）、微結晶セルロース（８１２ｇ量の残りの半分）、及びラクトース（１０２２．２ｇ量の残りの半分）。ビンをシールし、成分を３２ｒｐｍの速度で１８．５分間ブレンドした。ステアリルフマル酸ナトリウムｐｒｕｖ（登録商標）を６０メッシュステンレス鋼に通し、５３．１ｇをＢｏｈｌｅビンに充填した。ビンをシールし、成分を３２ｒｐｍの速度で４分間ブレンドした。ビンを均一性について試験した。ブレンドをＰｉｃｃｏｌａ Ｔａｂｌｅｔプレスに添加し、６７．０ｍｇの重量の錠剤に圧縮した。

【表7】

【0175】

実施例８：生物活性アッセイ
溶液
基礎培地（ＡＤＦ＋＋＋）は、Ａｄｖａｎｃｅｄ ＤＭＥＭ／ＨＡＭ’ｓ Ｆ１２、２ｍＭのＧｌｕｔａｍａｘ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１μ／ｍｌのペニシリン／ストレプトマイシンから構成された。

【0176】

腸内エンテロイド維持培地（ＩＥＭＭ）は、ＡＤＦ＋＋＋、１×Ｂ２７サプリメント、１×Ｎ_２サプリメント、１．２５ｍＭのＮ－アセチルシステイン、１０ｍＭのニコチンアミド、５０ｎｇ／ｍＬのｈＥＧＦ、１０ｎＭのガストリン、１μｇ／ｍＬのｈＲ－スポンジン－１、１００ｎｇ／ｍＬのｈＮｏｇｇｉｎ、ＴＧＦ－ｂ１型阻害剤Ａ－８３－０１、１００μｇ／ｍＬのＰｒｉｍｏｃｉｎ、１０μＭのＰ３８ＭＡＰＫ阻害剤ＳＢ２０２１９０から構成された。

【0177】

浴１の緩衝液は、１ｍＭのＭｇＣｌ_２、１６０ｍＭのＮａＣｌ、４．５ｍＭのＫＣｌ、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコース、２ｍＭのＣａＣｌ_２から構成された。

【0178】

塩化物を含まない緩衝液は、１ｍＭのグルコン酸マグネシウム、２ｍＭのグルコン酸カルシウム、４．５ｍＭのグルコン酸カリウム、１６０ｍＭのグルコン酸ナトリウム、１０ｍＭのＨＥＰＥＳ、１０ｍＭのグルコースから構成された。

【0179】

浴１の色素溶液は、浴１の緩衝液、０．０４％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ１２７、２０μＭのメチルオキソノール、３０μＭのＣａＣＣｉｎｈ－Ａ０１、３０μＭのＣｈｉｃａｇｏ Ｓｋｙ Ｂｌｕｅから構成された。

【0180】

塩化物を含まない色素溶液は、塩化物を含まない緩衝液、０．０４％のＰｌｕｒｏｎｉｃ Ｆ１２７、２０μＭのメチルオキソノール、３０μＭのＣａＣＣｉｎｈ－Ａ０１、３０μＭのＣｈｉｃａｇｏ Ｓｋｙ Ｂｌｕｅから構成された。

【0181】

塩化物を含まない色素刺激溶液は、塩化物を含まない色素溶液、１０μＭのフォルスコリン、１００μＭのＩＢＭＸ、及び３００ｎＭの化合物ＩＩＩから構成された。

【0182】

細胞培養
ヒト腸管上皮エンテロイド細胞を、Ｈｕｂｒｅｃｈｔ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｓｔｅｍ Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、Ｕｔｒｅｃｈｔ、オランダから入手し、前述のようにＴ－フラスコ内で増殖させた（Ｄｅｋｋｅｒｓ ＪＦ，Ｗｉｅｇｅｒｉｎｃｋ ＣＬ，ｄｅ Ｊｏｎｇｅ ＨＲ，Ｂｒｏｎｓｖｅｌｄ Ｉ，Ｊａｎｓｓｅｎｓ ＨＭ，ｄｅ Ｗｉｎｔｅｒ－ｄｅ Ｇｒｏｏｔ ＫＭ，Ｂｒａｎｄｓｍａ ＡＭ，ｄｅ Ｊｏｎｇ ＮＷＭ，Ｂｉｊｖｅｌｄｓ ＭＪＣ，Ｓｃｈｏｌｔｅ ＢＪ，Ｎｉｅｕｗｅｎｈｕｉｓ ＥＥＳ，ｖａｎ ｄｅｎ Ｂｒｉｎｋ Ｓ，Ｃｌｅｖｅｒｓ Ｈ，ｖａｎ ｄｅｒ Ｅｎｔ ＣＫ，Ｍｉｄｄｅｎｄｏｒｐ Ｓ ａｎｄ Ｍ Ｂｅｅｋｍａｎ ＪＭ。一次嚢胞性線維症腸オルガノイドを使用した機能性ＣＦＴＲアッセイは、Ｎａｔ Ｍｅｄ．２０１３ Ｊｕｌ；１９（７）：９３９－４５に記載されている。

【0183】

エンテロイド細胞の採取及び播種
細胞を細胞回収溶液中で回収し、４℃で５分間６５０ｒｐｍでの遠心分離によって収集し、ＴｒｙＰＬＥ中に再懸濁し、３７℃で５分間インキュベートした。次いで、細胞を６５０ｒｐｍで５分間４℃での遠心分離によって収集し、１０μＭのＲＯＣＫ阻害剤（ＲＩ）を含有するＩＥＭＭ中に再懸濁した。細胞懸濁液を４０μｍのセルストレーナーに通し、１０μＭのＲＩを含有するＩＥＭＭ中で１×１０６細胞／ｍＬで再懸濁した。細胞を５０００細胞／ウェルでマルチウェルプレートに播種し、アッセイの前に、３７℃、９５％湿度及び５％ＣＯ_２で一晩インキュベートした。

【0184】

膜電位色素アッセイ
エンテロイド細胞を、３７℃、９５％湿度及び５％ＣＯ_２で１８～２４時間、ＩＥＭＭ中の試験化合物とインキュベートした。化合物のインキュベーション後、１０μＭのフォルスコリン及び３００ｎＭの化合物ＩＩＩの急速添加後のＣＦＴＲ媒介性塩化物輸送に対する試験化合物の効力及び有効性を直接測定するために、ＦＬＩＰＲ Ｔｅｔｒａを使用した膜電位色素アッセイを用いた。簡単に述べると、細胞を浴１の緩衝液中で５回洗浄した。浴１の色素溶液を添加し、細胞を室温で２５分間インキュベートした。色素インキュベーション後、細胞を塩化物を含まない色素溶液中で３回洗浄した。塩化物輸送を、塩化物を含まない色素刺激溶液の添加によって開始し、蛍光シグナルを１５分間読み取った。急性フォルスコリン及び３００ｎＭの化合物ＩＩＩ刺激に対する蛍光応答のＡＵＣから、各状態についてのＣＦＴＲ媒介性塩化物輸送を決定した。次いで、塩化物輸送を、３μＭの化合物Ｉ、３μＭの化合物ＩＩ、及び３００ｎＭの急速化合物ＩＩＩの三重の組み合わせ対照（活性％）で処理した後の、塩化物輸送の割合として表した。

【0185】

以下は、表８のデータを表す。
最大活性：＋＋＋は６０％超であり、＋＋は３０～６０％であり、＋は３０％未満である。ＥＣ_５０：＋＋＋は１μＭ未満であり、＋＋は１～３μＭであり、＋は３μＭ超であり、ＮＤは「未決定」である。

【表8】

【0186】

実施例９：化合物Ｉは、Ｆ５０８ｄｅｌ／Ｆ５０８ｄｅｌ ＨＢＥ及びＦ５０８ｄｅｌ／ＭＦ ＨＢＥにおいて、単独で、並びに化合物ＩＩ及び／又は化合物ＩＩＩと組み合わせて、塩化物輸送を増加させる
Ｕｓｓｉｎｇチャンバー試験を実施して、３つのＦ５０８ｄｅｌホモ接合性ドナー及び５つのＦ５０８ｄｅｌ／ＭＦドナー（Ｇ５４２Ｘ、３つのドナー；Ｅ５８５Ｘ、１つのドナー；３９０５ＩｎｓＴ、１つのドナー）に由来するＨＢＥ細胞におけるＦ５０８ｄｅｌ ＣＦＴＲ媒介性塩化物輸送を測定した。正の対照として、最大有効濃度のＮ－（ベンゼンスルホニル）－６－［３－［２－［１－（トリフルオロメチル）シクロプロピル］エトキシ］ピラゾール－１－イル］－２－［（４Ｓ）－２，２，４－トリメチルピロリジン－ｌ－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（ＷＯ ２０１８／０６４６３２を参照されたい）、及びＮ－［（６－アミノ－２－ピリジル）スルホニル］－６－（３－フルオロ－５－イソブトキシ－フェニル）－２－［（４Ｓ）－２，２，４－トリメチルピロリジン－１－イル］ピリジン－３－カルボキサミド（ＷＯ ２０１６／０５７５７２を参照されたい）を、化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩと組み合わせて、各実験に含んだ。

【0187】

これらのＣＦ細胞株では、ＣＦＴＲ媒介性塩化物輸送は、ＣＦＴＲモジュレーターの非存在下では低く、これは、細胞表面にＣＦＴＲがほとんど又は全くないことと一致する。化合物Ｉ単独での１６～２４時間の処理は、Ｆ５０８ｄｅｌ／Ｆ５０８ｄｅｌ ＨＢＥ細胞及びＦ５０８ｄｅｌ／ＭＦ ＨＢＥ細胞の両方で、塩化物輸送のわずかな増加を引き起こした。化合物Ｉ及び化合物ＩＩの組み合わせは、化合物Ｉ単独と比較して塩化物輸送を更に増加させ、化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩと類似していた。化合物ＩＩＩの添加は、化合物Ｉの存在下で、又は化合物Ｉ／化合物ＩＩと組み合わせて、塩化物輸送を強く増強した。相乗効果分析は、化合物Ｉの効果が、化合物ＩＩＩ又は化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩの固定濃度と非常に相乗的であり、化合物ＩＩの固定の組み合わせと多少相乗的であったことを示した。最大の化合物Ｉ濃度において、化合物Ｉ／化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩは、化合物Ｉ／化合物ＩＩ又は化合物Ｉ／化合物ＩＩＩよりも塩化物輸送を増加させた。しかしながら、化合物Ｉ／化合物ＩＩＩ及び化合物Ｉ／化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩの有効性は、それぞれのＥＣ_９０値で類似していた。化合物Ｉ／化合物ＩＩＩ及び化合物Ｉ／化合物ＩＩ／化合物ＩＩＩに対するＣＦＴＲを最大に活性化する条件下でのそれぞれのＥＣ_９０値は、Ｆ５０８ｄｅｌ／Ｆ５０８ｄｅｌ ＨＢＥでは０．８４８μＭ及び０．１５２μＭであり、Ｆ５０８ｄｅｌ／ＭＦ ＨＢＥでは１．１５μＭ及び０．１２２μＭであった。

【0188】

雄の動物における化合物Ｉの単回経口投与後に、化合物Ｉの平均ｔ_ｍａｘ値は、ラットでは９時間、イヌでは４時間、及びサルでは３時間であった。平均経口バイオアベイラビリティ（Ｆ）は、ラット（７６．９％）、イヌ（４９．７％）、及びサル（１２．９％）において低～中等度であった。

【表B】

【0189】

用量が増加すると、化合物Ｉの全身曝露は、ラット及びイヌにおいて用量比例的よりも大きく増加した。用量正規化された曝露は、雄のラットよりも雌のラットにおいて高かった。イヌでは、化合物Ｉへの全身曝露は、両方の性別で類似していた。ラット及びイヌにおける化合物Ｉの２８日間の反復経口投与後に、化合物Ｉ曝露の蓄積が観察された。２８日目の化合物Ｉへの全身曝露は、１日目よりも高かった（２８日目／１日目のＡＵＣ_０２４ｈ比は、雄のラットでは１．６３～２．７０、雌のラットでは５．０１～８．２６、雄のイヌでは１．７３～２．６４、及び雌のイヌでは１．８２～２．２３の範囲であった）。

【0190】

実施例１０：化合物Ｉの安全性及び有効性の試験
継続中の臨床試験の安全性分析を、単剤療法として、及び化合物ＩＩ又は化合物ＩＩＩとの三重の組み合わせの一部として、少なくとも１用量の治験薬（化合物Ｉ又はプラセボ）に曝露された、コホートＡ１～Ａ５の３７名の対象、コホートＢの３３名の対象、及びコホートＣの１７名の対象に対して実施した。化合物Ｉは概して安全であり、単剤療法における１日１回６０ｍｇ、並びに化合物ＩＩ及び化合物ＩＩＩとの三重の組み合わせにおける１日１回２０ｍｇの用量まで忍容性良好であった。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【国際調査報告】