特表 2023-538966 原発性脳腫瘍の処置のためのエンハンサーＲＮＡの標的化

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-09-12

(54)【発明の名称】原発性脳腫瘍の処置のためのエンハンサーＲＮＡの標的化

(51)【国際特許分類】

   C07H 21/02 20060101AFI20230905BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20230905BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230905BHJP

   A61K 35/76 20150101ALI20230905BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20230905BHJP

   A61K 31/7105 20060101ALI20230905BHJP

   A61K 31/7088 20060101ALI20230905BHJP

   C07H 21/00 20060101ALI20230905BHJP

   C12N 15/113 20100101ALI20230905BHJP

   C12N 15/86 20060101ALI20230905BHJP

【ＦＩ】

C07H21/02

A61P25/00

A61P35/00

A61K35/76

A61K48/00

A61K31/7105

A61K31/7088

C07H21/00

C12N15/113 Z ZNA

C12N15/86 Z

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023513948

(86)(22)【出願日】2021-09-01

(85)【翻訳文提出日】2023-04-26

(86)【国際出願番号】 US2021048671

(87)【国際公開番号】W WO2022051365

(87)【国際公開日】2022-03-10

(31)【優先権主張番号】63/073,177

(32)【優先日】2020-09-01

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】512241232

【氏名又は名称】ブラウン ユニバーシティ

(71)【出願人】

【識別番号】500430718

【氏名又は名称】ロード アイランド ホスピタル

(74)【代理人】

【識別番号】110000671

【氏名又は名称】ＩＢＣ一番町弁理士法人

(72)【発明者】

【氏名】タピノス，ニコラオス

(72)【発明者】

【氏名】アコブンドゥ，ブレッシング

【テーマコード（参考）】

4C057

4C084

4C086

4C087

【Ｆターム（参考）】

4C057BB02

4C057CC03

4C057DD01

4C057MM01

4C057MM02

4C084AA13

4C084MA65

4C084MA66

4C084NA13

4C084NA14

4C084ZA02

4C084ZB26

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA65

4C086MA66

4C086NA13

4C086NA14

4C086ZA02

4C086ZB26

4C087AA01

4C087AA02

4C087BC83

4C087NA13

4C087NA14

4C087ZA02

4C087ZB26

(57)【要約】

本発明は、グリオーマ幹細胞において特異的に発現され、その発現がグリオブラストーマを有する患者の生存の減少と相関する、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）を提供する。ｅＲＮＡは、例えば、ｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＲＴＰ５、またはｅＮＩＮＪ１から選択される。本発明はまた、ｅＲＮＡ発現をノックアウトする合成オリゴヌクレオチドを使用して、グリオーマ幹細胞ｅＲＮＡを標的とするＲＮＡ療法も提供する。本発明はさらに、ｅＲＮＡの発現を阻害するｓｈＲＮＡを送達するウイルスベクターを提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

脳腫瘍の処置において使用するための、本特許明細書において開示される、ＧａｐｍｅＲ。

【請求項2】

原発性脳腫瘍の処置において使用するための、請求項１に記載のＧａｐｍｅＲ。

【請求項3】

原発性脳腫瘍の処置のために、特定のｓｈＲＮＡを担持する合成オリゴヌクレオチドまたはレンチウイルスを使用して、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）を標的とする方法。

【請求項4】

前記合成オリゴヌクレオチドが、合成ＲＮＡオリゴヌクレオチドである、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記合成オリゴヌクレオチドが、合成ＲＮＡオリゴヌクレオチドである、請求項３に記載の方法。

【請求項6】

前記合成オリゴヌクレオチドが、本特許明細書において開示されるＧａｐｍｅＲである、請求項３に記載の方法。

【請求項7】

グリオーマ幹細胞において特異的に発現され、その発現がグリオブラストーマを有する患者の生存の減少と相関する、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）とハイブリダイズする、合成オリゴヌクレオチド。

【請求項8】

前記ｅＲＮＡが、ｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＲＴＰ５、およびｅＮＩＮＪ１からなる群から選択される、請求項７に記載の合成オリゴヌクレオチド。

【請求項9】

前記合成オリゴヌクレオチドが、本特許明細書において開示されるＧａｐｍｅＲである、請求項７に記載の合成オリゴヌクレオチド。

【請求項10】

グリオーマ幹細胞ｅＲＮＡの発現をノックアウトする合成オリゴヌクレオチドを使用して、グリオーマを処置する方法。

【請求項11】

前記合成オリゴヌクレオチドが、分解に対して耐性がある、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

投与が、全身または髄腔内である、請求項１０に記載の方法。

【請求項13】

ｅＲＮＡを標的としてその発現を阻害するｓｈＲＮＡを送達する、ウイルスベクター。

【請求項14】

前記ウイルスベクターが、レンチウイルスである、請求項１３に記載のウイルスベクター。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、概して、プロモーター領域の一部を形成しないエンハンサーである、転写に関連する特別なエレメントを有する、ベクター系に関する。
関連出願の相互参照
本特許出願は、２０２０年９月１日に出願された米国仮特許出願第６３／０７３，１７７号の優先権を主張する。

【背景技術】

【0002】

グリオブラストーマは、もっとも一般的な原発性脳腫瘍であり、もっとも侵攻性かつ致死性のがんの１つである。グリオブラストーマの処置には、外科手術による腫瘍塊の切除、それに続く放射線照射およびテモゾロミド投与が含まれる。Ｓｔｕｐｐ ｅｔ ａｌ．， Ｎ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．， ３５２，９８７－９９６（２００５）．しかしながら、この複数治療のアプローチを用いてでさえも、腫瘍の再発は回避できない。Ｓｔｕｐｐ＆Ｗｅｂｅｒ， Ｏｎｋｏｌｏｇｉｅ， ２８， ３１５－３１７（２００５）．グリオブラストーマに起因する侵攻性は、主として、高い遊走能、化学療法および放射線照射に対する耐性、を示し、続発性腫瘍を形成する能力を有する、腫瘍塊内のグリオーマ幹細胞（ＧＳＣ）集団によって駆動される。Ｓｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．， ６３， ５８２１－５８２８（２００３）；Ｓｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ， ４３２， ３９６－４０１（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ９， ３９１－４０３（２００６）；およびＳｉｎｇｈ ｅｔ ａｌ．， Ａｓｉａｎ Ｐａｃ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｅｖ．， １８， ２２１５－２２１９（２０１７）。

【0003】

グリオーマ幹細胞は、顕著な可変性を呈し、未成熟な段階と分化した段階とで切り替わることができ、腫瘍微小環境に応じて様々なマーカーを可逆的に発現し得る。Ｂｅｎ－Ｐｏｒａｔｈ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ， ４０， ４９９－５０７（２００８）；およびＪｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， ２３， １３５２－１３６１（２０１７）。

【0004】

グリオーマをより良好に処置するための組成物および方法が、当該技術分野において必要とされている。

【発明の概要】

【0005】

本発明は、グリオーマ幹細胞の可変性を制御し、グリオブラストーマの成長に影響を及ぼす、分子機序を標的とする。

【0006】

第１の実施形態において、本発明は、グリオーマ幹細胞において特異的に発現され、その発現がグリオブラストーマを有する患者の生存の減少と相関する、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）を提供する。第２の実施形態において、ｅＲＮＡは、以下の配列表に示されるように、ｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＲＴＰ５、およびｅＮＩＮＪ１からなる群から選択される。

【0007】

第３の実施形態において、本発明は、ＲＮＡ療法を提供する。この治療法は、ｅＲＮＡの発現をノックアウトする合成オリゴヌクレオチドを使用して、グリオーマ幹細胞ｅＲＮＡを標的とする。第４の実施形態において、合成オリゴヌクレオチドは、分解に対して耐性である。

【0008】

第５の実施形態において、本発明は、ｅＲＮＡを標的とし、その発現を阻害するｓｈＲＮＡを送達する、ウイルスベクターを提供する。第６の実施形態において、ウイルスベクターは、レンチウイルスである。

【0009】

本発明は、いくつかの利点を有する。第１の態様において、標的特異性に関して、標的とされるｅＲＮＡは、グリオーマ幹細胞において特異的に発現される。第２の態様において、薬物特異性に関して、合成されたオリゴヌクレオチドまたはウイルスベクターは、意図される標的ｅＲＮＡに特異的である。合成されたオリゴヌクレオチドまたはウイルスベクターは、他の遺伝子に対して実質的な作用を有さない。第３の態様において、分解に対する耐性に関して、オリゴヌクレオチドＲＮＡ治療薬は、分解に対して耐性となるように化学的に改変されている。オリゴヌクレオチドＲＮＡ治療薬は、インビボ適用で機能する。第４の態様において、グリオーマ幹細胞に対する特異的な作用に関して、標的ｅＲＮＡの阻害により、Ｎａｎｏｇ、Ｏｃｔ６、およびＳｏｘ２などのがん幹細胞表現型を定義する転写因子の発現の低減がもたらされる。この結果は、ｅＲＮＡ標的化が、がんの幹細胞性、腫瘍拡大、および侵攻に影響を及ぼし得ることを示す。

【0010】

全ゲノムデータ分析は、分化した細胞と比較して、グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡが、１５個存在することを示している。さらなる分析により、これらのｅＲＮＡが、少なくとも７個のグリオーマ幹細胞にわたって差次的に発現され、３つのｅＲＮＡの高い発現が、患者生存不良と有意に相関することが示されている。３つの臨床的に関連のあるｅＲＮＡのうちの１つの阻害に関する予備的な結果は、阻害が、グリオーマ幹細胞の必須遺伝子を調節するために重要であり得ることを示す。

【図面の簡単な説明】

【0011】

【図1】図１は、転写の調節に関するｅＲＮＡの概略図である。エンハンサー領域（青色の枠）は、Ｈ３Ｋ２７Ａｃによってマークされており、双方向様式でｅＲＮＡを産生するのを補助するように、転写因子（ＴＦ）およびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩがロードされている。プロモーター領域（紫色の枠）は、Ｈ３Ｋ４ｍｅ３および転写因子によってマークされている。コヒーシンおよび媒介因子複合体によって媒介されるエンハンサーのプロモーターへのルーピングにより、ｅＲＮＡをプロモーターに近接させ、標的遺伝子の転写が誘導される。

【図2】図２は、グリオーマ幹細胞および分化したグリオーマ細胞の特徴付けを示す。図２（Ａ）は、グリオーマ幹細胞が、幹細胞特異的転写産物であるＣＤ１３３、Ｓｏｘ２、およびＯｌｉｇ２を発現し、それらが、ＥＧＦ、ｂＦＧＦ、およびヘパリンの除去、ならびに１０％血清の添加によって、７日間の分化後に、完全に失われるか（ＣＤ１３３、Ｏｌｉｇ２）、または下方調節される（Ｓｏｘ２）ことを示す、棒グラフである。分化したグリオーマ細胞は、ＧＦＡＰの発現を獲得するが、これは、グリオーマ幹細胞においては発現されていなかった。棒グラフは、１つのグリオーマ幹細胞系から得られた代表的なＲＮＡ－ｓｅｑデータを提示する。分析は、すべてのグリオーマ幹細胞および分化したグリオーマ細胞に行った。図２（Ｂ）は、グリオーマ幹細胞の自己複製能力を判定するための限界希釈アッセイの結果を示すグラフである。アッセイを６回繰り返し、カイ二乗検定を用いて有意性を計算した（ｐ＜０．００８）。

【図3】図３は、３つのグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの高い発現を有する患者と低い発現を有する患者との生存期間の比較を示す。３つのカプランマイヤー生存曲線は、全体的な患者の生存を、ｅＴＭＥＭ８８Ｂ（Ａ）、ｅＲＴＰ５（Ｂ）、およびｅＮＩＮＪ１（Ｃ）ｅＲＮＡとの相関関係で示す。生存期間は、７０人のＩＤＨ野生型グリオブラストーマ患者（Ｒｈｏｄｅ Ｉｓｌａｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｓ ｏｆ Ｎｅｕｒｏｓｕｒｇｅｒｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ）の臨床データから収集した。これらのｅＲＮＡの高い発現は、グリオブラストーマを有する患者の生存の低さと有意に相関する（ｐ＜０．０５）。

【図4】図４は、ｅＴＭＥＭ８８ＢおよびＴＭＥＭ８８Ｂ遺伝子の阻害を示す棒グラフペアである。左側のグラフは、アンチセンスオリゴＧａｐｍｅＲでのｅＴＭＥＭ８８Ｂの阻害が、ＴＭＥＭ８８Ｂ、ＮＡＮＯＧ、ＯＣＴ４、およびＳＯＸ２発現の阻害をもたらすことを示す。右側のグラフは、ｓｉＲＮＡを使用したＴＭＥＭ８８Ｂ ｍＲＮＡの阻害が、ＴＭＥＭ８８Ｂ発現の阻害をもたらすが、ＮＡＮＯＧ、ＯＣＴ４、およびＳＯＸ２には影響を及ぼさないことを示す。

【図5】図５は、ｅＲＮＡ治療薬のインビボ有効性測定の開発の概略図である。

【図6】図６は、レンチウイルスベクターｐＲＳＧＥＰ－Ｕ６－ｓｇ－ＥＦ１－Ｐｕｒｏの概略図である。

【図7】図７は、Ｈ３Ｋ２７ＡｃおよびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩ ＣｈＩＰ－ｓｅｑ分析パイプラインを通じたグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの特定を示す円グラフのセットである。Ｈ３Ｋ２７ＡｃおよびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩピークは、ＮＩＮＪ１ ｅＲＮＡとオーバーラップしている。Ｈ３Ｋ２７Ａｃ ＣｈＩＰ－ｓｅｑにより、ＧＳＣ１およびＧＳＣ２において、それぞれ、３９，２４７個および５０，８８５個の部位が特定された。これらの部位を、ＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩシグナルの同時存在についてフィルタリングし、これにより、ＧＳＣ１およびＧＳＣ２において、４２８４個および５３４８個の推定上のｅＲＮＡ部位が得られた。図７（Ａ）を参照されたい。遺伝子と１：１の関係性を有し、遺伝子のアノテーションされたプロモーターの上流１０ｋｂ以内に位置する、ｅＲＮＡ部位を特異的に調べてこれらの部位をフィルタリングした。図７（Ｂ）を参照されたい。この分析により、ＧＳＣ１については２２９個のｅＲＮＡが得られ、ＧＳＣ２については２１３個のｅＲＮＡが得られた。これらのｅＲＮＡを、分化したグリオブラストーマ間質細胞において検出されたｅＲＮＡ（同じ分析パイプラインを通じて）と比較し、２人の患者において共通している１５個のグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡを発見した。図７（Ｃ）を参照されたい。

【図8】図８は、９個の患者由来のグリオーマ幹細胞および２つのヒト神経幹細胞サンプルにおけるｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＮＩＮＪ１、およびｅＲＴＰ５の発現を示す棒グラフである。

【図9】図９は、９個の患者由来のグリオーマ幹細胞および２つのヒト神経幹細胞サンプルにおけるＴＭＥＭ８８ｂ、ＮＩＮＪ１、およびＲＴＰ５遺伝子の発現を示す棒グラフである。

【図10】図１０は、ｅＮＩＮＪ１およびｅＴＭＥＭ８８Ｂを標的とするＧａｐｍｅＲでの患者由来のグリオーマ幹細胞の処置が、ｅＲＮＡ発現の５０％の阻害をもたらすことを示す棒グラフペアである。アッセイは、１人の患者のグリオーマ幹細胞において、独立して３回（ｎ＝３つの生物学的複製物）行った。

【図11】図１１は、５μＭのｅＴＭＥＭ８８Ｂ ＧａｐｍｅＲでの患者由来のグリオーマ幹細胞の処置が、がん幹細胞同一性遺伝子の有意な阻害をもたらすことを示す、棒グラフである。アッセイは、独立して２回行った（ｎ＝２つの生物学的複製物）。

【発明を実施するための形態】

【0012】

産業上の利用可能性
多形性グリオブラストーマは、依然として、処置がもっとも困難な疾患の１つである。現時点では、グリオブラストーマのためのグリオーマ幹細胞特異的治療法は存在しない。標準的な処置としては、外科手術、それに続く放射線療法および化学療法の組合せが挙げられる。従来的なＧＢＭ治療法は、一部の患者には有益となっているが、平均腫瘍再発時間は、７カ月である。

【0013】

ＤＮＡメチル化、ヒストン改変、および非コーディングＲＮＡなどのエピジェネティックな異常に関する情報が、多形性グリオブラストーマを含むがんの作動因子として評価されている。Ｆｅｎｇ ｅｔ ａｌ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．， １１６５， １１５－４３（２０１４）を参照されたい。

【0014】

最先端の全ゲノム技術、例えば、ＣｈＩＰ－ｓｅｑを使用して、グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡを特定することにより、ｅＲＮＡが、グリオーマ幹細胞維持に必須であることが示されている。本発明は、ｅＲＮＡを、多形性グリオブラストーマのための幹細胞特異的治療法とする手段を提供する。ロックド核酸ＧａｐｍｅＲを使用するｅＲＮＡの特異的標的は、グリオブラストーマ患者のための、グリオーマ幹細胞特異的な、ＲＮＡに基づく治療の選択肢を提供する。

【0015】

グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの操作の成功は、多形性グリオブラストーマ患者のための有望なグリオーマ幹細胞特異的なＲＮＡに基づく治療法の獲得に有益であり得る。本明細書は、多形性グリオブラストーマにおけるグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの機能的役割を判定する方法を示す。以下の実施例２を参照されたい。本明細書はまた、グリオーマ幹細胞におけるクロマチン状態の維持に対するｅＲＮＡの寄与を判定する方法も説明する。以下の実施例３を参照されたい。本明細書は、さらに、グリオーマ幹細胞特異的治療標的としてのｅＲＮＡの有効性を評価する方法も示す。以下の実施例４を参照されたい。

【0016】

定義
便宜上、本明細書、実施例、および添付の特許請求の範囲において使用されるいくつかの用語および語句の意味を、以下に列挙する。別途示されるかまたは文脈から暗に示されない限り、これらの用語および語句は、以下の意味を有する。これらの定義は、特定の実施形態を説明するのを補助するものであり、特許請求される発明を制限することを意図するものではない。別途定義されない限り、すべての技術用語および科学用語は、分子神経生物学分野もしくはバイオテクノロジー分野または両方の分野において当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。当該技術分野における用語の意味と、本明細書において提供される定義との間で明らかな相違がある場合には、本明細書において提供される意味が優先されるものとする。

【0017】

「ＡＴＡＣ－ｓｅｑ」またはシーケンシングを使用したトランスポサーゼがアクセス可能なクロマチンのアッセイ（Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｔｒａｎｓｐｏｓａｓｅ－Ａｃｃｅｓｓｉｂｌｅ Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｕｓｉｎｇ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）は、全ゲノムクロマチンアクセス可能性を評価する分子生物学技法である。Ｂｕｅｎｒｏｓｔｒｏｅｔ ａｌ．， Ｔｒａｎｓｐｏｓｉｔｉｏｎ ｏｆ ｎａｔｉｖｅ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｆｏｒ ｆａｓｔ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｅｐｉｇｅｎｏｍｉｃ ｐｒｏｆｉｌｉｎｇ ｏｆ ｏｐｅｎ ｃｈｒｏｍａｔｉｎ， ＤＮＡ－ｂｉｎｄｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎｓ， ａｎｄ ｎｕｃｌｅｏｓｏｍｅ ｐｏｓｉｔｉｏｎ．Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｔｈｏｄｓ， １０（１２）， １２１３－８（Ｄｅｃｅｍｂｅｒ ２０１３）を参照されたい。

【0018】

「脳腫瘍」は、脳の組織内またはそれに由来する異常な細胞の成長という、神経生物学分野において認識されている意味を有する。脳腫瘍は、良性（がんではない）または悪性（がん）であり得る。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｅｒｍｓを参照されたい。

【0019】

「ＣｈＩＰ－ｓｅｑ」または「ＣｈＩＰ－シーケンシング」は、ＤＮＡとのタンパク質相互作用を分析するために使用される方法である。ＣｈＩＰ－ｓｅｑは、クロマチン免疫沈降（ＣｈＩＰ）と、大規模並列ＤＮＡシーケンシングとを組み合わせて、ＤＮＡ関連タンパク質の結合部位を特定する。

【0020】

「分化したグリオーマ細胞」（ＤＧＣ）は、幹細胞から分化したグリオーマ細胞という、神経生物学分野において認識されている意味を有する。多形性グリオブラストーマの分子的および遺伝子的分類、ならびに多形性グリオブラストーマに対する処置アプローチは、主として、分化したグリオーマ細胞に依存している。研究室実務において、分化したグリオーマ細胞は、ＧＦＡＰの発現を獲得するが、このマーカーは、グリオーマ幹細胞においては発現されていなかった。Ｂｒａｍａｎｔｉ ｅｔ ａｌ．， Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ ｏｆ ｇｌｉａｌ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｉｎ ｃｕｌｔｕｒｅ． Ｆｒｏｎｔ． Ｂｉｏｓｃｉ．（Ｓｃｈｏｌ．Ｅｄ．）， ２， ５５８－７０（２０１０）を参照されたい。上記の図２（Ａ）の説明も参照されたい。

【0021】

「エンハンサーＲＮＡ」（ｅＲＮＡ）は、エンハンサー領域のＤＮＡ配列から転写される比較的短い非コーディングＲＮＡ分子（５０～２０００ヌクレオチド）のクラスのメンバーという、分子生物学分野において認識されている意味を有する。図１を参照されたい。幹細胞特異的ｅＲＮＡは、それらのもっとも近い遺伝子に従って命名され、本明細書全体を通じて、接頭辞「ｅ」を用いて表記される。

【0022】

「ＧａｐｍｅＲ」は、配列の両側にＲＮＡ様セグメントを有する短いＤＮＡアンチセンスオリゴヌクレオチド構造という、バイオテクノロジー分野において認識されている意味を有する。これらの線形遺伝子情報片は、ＲＮＡ標的片にハイブリダイズし、ＲＮａｓｅ Ｈ切断の誘導を通じて、遺伝子をサイレンシングするように設計される。標的へのｇａｐｍｅｒの結合は、改変されたＲＮＡ隣接領域、ならびにヌクレアーゼによる分解に対する耐性に起因して、高い親和性を有する。Ｓｔｅｉｎ ｅｔ ａｌ．， Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．， ３８（１）， ｅ３（２０１０）；Ｃｒｏｏｋｅ ｅｔ ａｌ．， Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ：ａｎ ｏｖｅｒｖｉｅｗ ａｎｄ ｐｒｏｓｐｅｃｔｕｓ．Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ， １－２７（Ｍａｒｃｈ ２４，２０２１）を参照されたい。

【0023】

「多形性グリオブラストーマ」脳腫瘍（ＧＢＭ）は、脳内の神経細胞の健康状態を補助する星形のグリア細胞（星状細胞および乏突起膠細胞）から生じ、高速で成長する、グリオーマという神経生物学分野において認識されている意味を有する。ＧＢＭは、グレードＩＶ星状細胞腫と称されることもある。Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃａｎｃｅｒ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（ＮＣＩ）Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｏｆ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｅｒｍｓを参照されたい。

【0024】

本明細書ではグリオブラストーマ幹細胞としても知られる「グリオーマ幹細胞」（ＧＳＣ）は、グリオブラストーマに存在し、腫瘍開始および治療耐性に寄与する、自己複製性腫瘍原性がん幹細胞という、神経生物学分野において認識されている意味を有する。グリオーマ幹細胞は、「表現型可変性」を示し、これは、異なる細胞状態の多形性グリオブラストーマ（幹細胞状態および分化した状態）が、分子神経生物学分野の当業者によって、腫瘍機序および侵攻に寄与すると考えられているため、重要である。研究室実務において、グリオーマ幹細胞の公知の幹細胞性のマーカーとしては、乏突起膠細胞転写因子（Ｏｌｉｇ２）、Ｓｏｘ２、およびプロミニン－１（ＣＤ１３３）が挙げられる。Ｙａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｓｔｅｍ－ｌｉｋｅ ｐｈｅｎｏｔｙｐｅ ｏｆ ｇｌｉｏｍａ ｃｅｌｌｓ ｔｈｒｏｕｇｈ ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ ｔｈｅ Ｈｅｄｇｅｈｏｇ ｐａｔｈｗａｙ．Ｊ． Ｐａｔｈｏｌ．， ２３４（１）， １１－２２（２０１４）を参照されたい。上記の図２（Ａ）の説明をも参照されたい。

【0025】

「Ｈ３Ｋ２７Ａｃ」は、ＤＮＡパッケージングタンパク質ヒストンＨ３に対するエピジェネティック改変という、分子生物学分野において認識されている意味を有する。これは、ヒストンＨ３タンパク質の２７番目のリジン残基のアセチル化を示すマークである。Ｈ３Ｋ２７ａｃは、転写のより高い活性化と関連しており、したがって、活性エンハンサーマークとして定義される。Ｈ３Ｋ２７ａｃは、転写開始部位（ＴＳＳ）の近位および遠位の両方の領域で見られる。

【0026】

「Ｈ３Ｋ４ｍｅ３」は、ＤＮＡパッケージングタンパク質ヒストンＨ３に対するエピジェネティック改変という、分子生物学分野において認識されている意味を有する。これは、ヒストンＨ３タンパク質の４番目のリジン残基におけるトリメチル化を示すマークであり、遺伝子発現を調節することに関与することが多い。この名称は、ヒストンＨ３タンパク質のリジン４に対する３つのメチル基の付加（トリメチル化）を示す。

【0027】

「レンチウイルスウイルスベクター」は、レンチウイルスに由来するＲＮＡまたはＤＮＡヌクレオチドの配列を含む、複製欠損性ウイルスベクターという、分子生物学分野において認識されている意味を有する。

【0028】

「ＮＩＮＪ１」または「ニンジュリン１」は、タンパク質コーディング遺伝子である。ＮＩＮＪ１と関連付けられている疾患としては、遺伝性感覚性ニューロパチーおよび非機能性膵内分泌性腫瘍が挙げられる。この遺伝子の重要なパラログは、ＮＩＮＪ２である。いくつかの識別番号としては、ＧＣＩＤ：ＧＣ０９Ｍ０９３１２１、ＨＧＮＣ：７８２４、Ｅｎｔｒｅｚ Ｇｅｎｅ：４８１４、Ｅｎｓｅｍｂｌ：ＥＮＳＧ０００００１３１６６９、ＯＭＩＭ：６０２０６２、およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｑ９２９８２がある。

【0029】

「非コーディングＲＮＡ」は、タンパク質の鋳型ではないＲＮＡ種という、分子生物学分野において認識されている意味を有し、これには、リボソームＲＮＡ（ｒＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、長い非コーディングＲＮＡ（ｌｎｃＲＮＡ）、およびゲノム内の異なる領域において産生される他の形態が挙げられる。Ｃｏｓｔａ， Ｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇ ＲＮＡｓ：Ｍｅｅｔ ｔｈｙ ｍａｓｔｅｒｓ．Ｂｉｏｅｓｓａｙｓ， ３２（７）， ５９９－６０８（２０１０）、およびＧｕｔｔｍａｎ ｅｔ ａｌ．， Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｓｉｇｎａｔｕｒｅ ｒｅｖｅａｌｓ ｏｖｅｒ ａ ｔｈｏｕｓａｎｄ ｈｉｇｈｌｙ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｌａｒｇｅ ｎｏｎ－ｃｏｄｉｎｇ ＲＮＡｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｓ．Ｎａｔｕｒｅ， ４５８（７２３５）， ２２３－７（２００９）を参照されたい。

【0030】

「原発性脳腫瘍」は、脳において発生する腫瘍という、分子神経生物学分野において認識されている意味を有する。原発性脳腫瘍は、種類および世界保健機関（ＷＨＯ）グレードによって分類される。医師は、コンピュータ断層撮影（ＣＴ）スキャンまたは磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）を行うことによって、原発性脳腫瘍を診断することが多い。完全な医学的検査も行われ得、医師が最良の管理過程を計画するために、詳細な病歴が考慮される。ヒト脳腫瘍が、重要な機能を有する脳の「ものを言う（ｅｌｏｑｕｅｎｔ）」部分（すなわち、発話および運動の領域）の近くにある場合、脳における腫瘍と機能との間の関係性をより良好に理解するために、神経放射線科医によって、より特化したＭＲＩが行われ得る。

【0031】

「ＲＴＰ５」または受容体トランスポータータンパク質５（推定上）は、タンパク質コーディング遺伝子である。ＲＴＰ５と関連付けられている疾患としては、静脈性血管腫および筋萎縮性側索硬化症７が挙げられる。その関連経路としては、とりわけ、ＧＰＣＲによるシグナル伝達および嗅覚伝達がある。この遺伝子の重要なパラログは、ＲＴＰ３である。いくつかの識別番号としては、ＧＣＩＤ：ＧＣ０２Ｐ２４１８６９、ＨＧＮＣ：２６５８５、Ｅｎｔｒｅｚ Ｇｅｎｅ：２８５０９３、Ｅｎｓｅｍｂｌ：ＥＮＳＧ０００００１８８０１１、およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｑ１４Ｄ３３がある。

【0032】

「ｓｈＲＮＡ」または短いヘアピンリボ核酸は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）を通じて標的遺伝子発現をサイレンシングすることができる、タイトなヘアピンカーブを有する人工ＲＮＡ分子という、分子生物学分野における意味を有する。Ｐａｄｄｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．， Ｇｅｎｅｓ＆Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ， １６（８）， ９４８－５８（Ａｐｒｉｌ ２００２）、Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐ ｅｔ ａｌ．， Ｓｃｉｅｎｃｅ， ２９６（５５６７）， ５５０－３（Ａｐｒｉｌ ２００２）。細胞におけるｓｈＲＮＡの発現は、典型的に、プラスミドの送達によって、またはウイルスもしくは細菌ベクターを通じて、達成される。ｓｈＲＮＡは、分解および代謝回転の速度が比較的低いことから、ＲＮＡｉの有益な媒介因子である。

【0033】

「ＴＭＥＭ８８Ｂ」または膜貫通タンパク質８８Ｂは、タンパク質コーディング遺伝子である。ＴＭＥＭ８８Ｂと関連付けられている疾患としては、アレキシサイミアが挙げられる。いくつかの識別番号としては、ＧＣＩＤ：ＧＣ０１Ｐ００１４２６、ＨＧＮＣ：３７０９９、Ｅｎｔｒｅｚ Ｇｅｎｅ：６４３９６５、Ｅｎｓｅｍｂｌ：ＥＮＳＧ０００００２０５１１６、およびＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ａ６ＮＫＦ７がある。

【0034】

「ウイルスベクター」は、少なくとも１つのウイルス起源のエレメントを含む、ウイルスベクター粒子にパッケージングすることができる核酸ベクターコンストラクトという、分子生物学分野において認識されている意味を有する。ウイルスベクターは、非必須ウイルス遺伝子の代わりに、ポリペプチドまたは核酸をコーディングする核酸を含み得る。ベクターまたは粒子は、インビトロまたはインビボのいずれかで、任意の核酸を細胞に移入することができる。多数のウイルスベクターが、分子生物学分野において公知である。

【0035】

材料および方法の案内
分子神経生物学分野の当業者であれば、本発明を作製および使用する場合に、以下の特許、特許出願、および科学参考文献を案内として使用して、結果を予測することができる。

【0036】

正確性および再現性を確保するために、本発明者らは、少なくとも３つの生物学的複製物を使用して、アッセイを繰り返す。

【0037】

ｅＲＮＡ阻害アッセイ。ｅＲＮＡ阻害の作用を、スクランブルＧａｐｍｅＲで処置したグリオーマ幹細胞と比較した。すべてのサブタイプの表示は、ＧａｐｍｅＲ ＲＮＡに基づく治療法から利益を得られる患者を特定するのに有用である。

【0038】

細胞死アッセイ。アポトーシス細胞死を、Ｉｎｃｕｃｙｔｅ生細胞分析システムを使用してカスパーゼ－３／７の切断を測定して、リアルタイムで定量する。このアッセイは、細胞膜を自由に横断する不活性非蛍光性基質を使用し、細胞膜で、活性化されたカスパーゼ－３／７によってそれが切断されて、緑色または赤色のいずれかのＤＮＡ結合蛍光標識が放出され得る。蛍光標識された核の出現により、アポトーシス細胞を特定する。

【0039】

増殖アッセイ。培養物における細胞の増殖速度を、Ｉｎｃｕｃｙｔｅ Ｃｅｌｌ－ｂｙ－Ｃｅｌｌ分析ソフトウェアモジュールを使用して、リアルタイムで定量する。この標識を用いない直接的な細胞計数は、位相物体の数を経時的に計数することによって、個々の細胞を特定することを可能にする。細胞は、サイズおよび形状などの特性に基づいて、部分集団に分類される。

【0040】

自己複製アッセイ。グリオーマ幹細胞が自己複製する能力を、インビトロ極度限界希釈分析（ＥＬＤＡ、ｅｘｔｒｅｍｅ ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｎａｌｙｓｉｓ）を使用して分析する。

【0041】

ルシフェラーゼレポーターアッセイ。いくつかのルシフェラーゼアッセイが、市販入手可能である。

【0042】

製造の方法
第７の商業的実施形態において、バイオテクノロジー分野の当業者であれば、Ｑｉａｇｅｎのオンラインアルゴリズムを使用して、アンチセンスオリゴヌクレオチドＧａｐｍｅＲを設計することができる。Ｑｉａｇｅｎ（Ｈｉｌｄｅｎ、Ｇｅｒｍａｎｙ）は、次いで、インビボ適用のためのカスタムＧａｐｍｅＲを合成することができる。Ｑｉａｇｅｎは、アンチセンスオリゴヌクレオチドが安定かつ分解耐性のままとなるように、独自の科学改変形態を合成することができる。

【0043】

処置の方法
処置の方法は、Ｓｏｕｔｈｗｅｌｌ ｅｔ ａｌ．， Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， １８（１１）（Ｎｏｖｅｍｂｅｒ ２０１２）および複数の他の文書の方法に基づく。治療法としてのオリゴヌクレオチドは、髄腔内注射、実質内、または脳脊髄液（ＣＳＧ）送達で、効率的かつ安全に送達することができる。

【0044】

第８の特定の実施形態において、脳へのＲＮＡ治療薬の投与は、髄腔内である。本発明者らの事例では、ヒトまたは霊長類における髄腔内注射が好ましい。齧歯動物モデルについては、本発明者らは、ＧａｐｍｅＲが脳脊髄液を通じて送達されるように、側脳室における注射を使用する。

【0045】

医薬組成物
医薬組成物およびリポソーム組成物（例えば、脂質ナノ粒子）のうちの１つまたは複数は、本明細書において開示される化合物のうちの１つまたは複数、および１つまたは複数の追加の脂質を含む。例えば、本明細書において開示される化合物のうちの１つまたは複数を含むか、またはそうでなければそれらが濃縮されている、脂質ナノ粒子は、さらに、ＤＯＴＡＰ（１，２－ジオレイル－３－トリメチルアンモニウムプロパン）、ＤＯＤＡＰ（１，２－ジオレイル－３－ジメジジルアンモニウムプロパン）、ＤＯＴＭＡ（１，２－ジ－０－オクタデカニル－３－ルリメチルアンモニウムプロパン（ｌｒｉｍｅｔｈｙｌａｍｍｏｎｉｕｍ ｐｒｏｐａｎｅ））、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＫＣ２－ＤＭＡ、ＣＩ２－２００、およびＩＣＥのうちの１つまたは複数を含み得る。第９の実施形態において、医薬組成物は、ＨＧＴ４００１、ＤＯＰＥ、およびＤＭＧ－ＰＥＧ２０００を含む脂質ナノ粒子を含む。第１０の実施形態において、医薬組成物は、ＨＧＴ４００３、ＤＯＰＥ、コレステロール、およびＤＭＧ－ＰＥＧ２０００を含む脂質ナノ粒子を含む。

【0046】

本明細書において記載される医薬組成物のうちの１つまたは複数は、１つまたは複数のＰＥＧ媒介型脂質を含み得る。例えば、本明細書において開示される化合物のうちの１つまたは複数を含むか、またはそうでなければそれらが濃縮されている、脂質ナノ粒子は、さらに、１つまたは複数のＣ_６－Ｃ_２０アルキルを含む脂質に共有結合で結合された、最大５ｋＤａの長さのポリ（エチレン）グリコール鎖を含むＰＥＧ改変脂質のうちの１つまたは複数を含み得る。

【0047】

同様に、医薬組成物（例えば、脂質ナノ粒子）は、本明細書において開示される化合物のうちの１つまたは複数を含み得るか、またはそうでなければそれらが濃縮されていてもよく、さらに、ＤＳＰＣ（１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン）、ＤＰＰＣ（１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン）、ＤＯＰＥ（１，２－ジオレイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＰＰＥ（１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＭＰＥ（１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＯＰＧ（，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－（１’－ｒａｃ－グリセロール））、ＤＯＰＥ（１，２－ジオレオイル－ｓｗグリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＳＰＥ（１，２－ジステアロイル－ｓ／ｉ－グリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＬＰＥ（１，２－ジラウロイルグリセロ－３－ホスホエタノールアミン）、ＤＰＰＳ（１，２－ジパルミトイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホ－Ｌ－セリン）、セラミド、スフィンゴミエリン、およびコレステロールからなる群から選択されるヘルパー脂質のうちの１つまたは複数を含み得る。

【0048】

以下の実施例は、本発明を例示するために提供されるものであり、その範囲を制限するとみなされるものではない。

【実施例1】

【0049】

標的ｅＲＮＡを阻害するオリゴヌクレオチドＧａｐｍｅＲ。

【0050】

グリオーマ幹細胞において特異的に発現されるｅＲＮＡを発見するために、本発明者らは、ＴＣＧＡに基づくＶｅｒｈａａｋ分類スキームの間葉（ＧＳＣ１）および前神経（ＧＳＣ２）サブタイプを表す、２つの患者由来のグリオーマ幹細胞を使用した。分化したグリオーマ細胞を得るために、本発明者らは、グリオーマ幹細胞を、７日間の分化プロセスに供した。本発明者らは、グリオーマ幹細胞マーカーおよび分化細胞マーカーについて、転写産物発現分析を行った。図２（Ａ）を参照されたい。すべてのグリオーマ幹細胞サンプルは、限界希釈アッセイ中に、自己複製能力を示した。図２（Ｂ）を参照されたい。免疫不全マウスへの移植後に、グリオーマ幹細胞は、腫瘍形成能力を示した。

【0051】

グリオーマ幹細胞がどのｅＲＮＡを特異的に発現するのかを特定するため、本発明者らは、活性なエンハンサーについてはＨ３Ｋ２７Ａｃに対するＣｈＩＰ検証済み抗体、および活性な転写についてはＲＮＡＰＩＩ（活性なモチーフ）を使用して、ＣｈＩＰ－ｓｅｑを行った。全ゲノム抗体結合を示すピークコーリングを、すべてのサンプルにおいて、Ｈ３Ｋ２７ＡｃおよびＲＮＡＰＩＩの両方について達成した。後続の分析としては、ｍＲＮＡ産生とのオーバーラップの除去；推定上のｅＲＮＡ産生領域としてのＲＮＡＰＩＩおよびＨ３Ｋ２７Ａｃピークのオーバーラップの関係性；個々のサンプル特異的ｅＲＮＡの特定；特定された推定上のｅＲＮＡ部位から上流および下流１０，０００ヌクレオチド（１０Ｋ）以内のピークは目的の遺伝子ともっとも良好に関係するため、これらの領域を選択すること；２つのグリオーマ幹細胞と分化したグリオーマ細胞サンプルとの間で共通のピークの単離；ならびに幹細胞サンプルおよび分化したサンプル内の固有のピークの発見が挙げられる。固有のピークを、ＲＮＡＰＩＩおよびＨ３Ｋ２７Ａｃのピークとして定義した。本発明者らは、ピークが、同じエンハンサーピーク境界内に正確にアライメントし、オーバーラップすることを観察した。計算によるフィルタリング分析により、結果を、２つのグリオーマ幹細胞に固有な１５個のｅＲＮＡ、および２つの分化したグリオーマ細胞に固有な２１個のｅＲＮＡに絞ることが可能であった。

【0052】

グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの発現を検証するために、本発明者らは、７個の追加の患者由来のグリオーマ幹細胞（ＧＳＣ）ならびに２つの神経幹細胞（ＮＳＣ）系（Ｈ９およびＨ１４誘導体）から単離したＲＮＡを使用して、ＲＴ－ｑＰＣＲを行った。個々のｅＲＮＡは、グリオーマ幹細胞サンプル内および全体で、変動する発現パターンを有した。

【0053】

本発明者らは、次に、１５個すべてのｅＲＮＡに対応する遺伝子の発現について調査した。本発明者らは、発現が、すべて、グリオーマ幹細胞において様々なレベルで増幅されたことを観察した。

【0054】

次に、本発明者らは、Ｒｈｏｄｅ Ｉｓｌａｎｄ ＨｏｓｐｉｔａｌのＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙから入手可能な７０個の多形性グリオブラストーマ組織サンプルにおいて、ｅＲＮＡの発現を判定した。ＲＴ－ｑＰＣＲの結果により、ｅＲＮＡのうちの１つ［ｅＤＡＰ３］が、様々なグリオーマ幹細胞サンプルにおいて低く発現されていたかまたは発現されていなかったことが示されたため、本発明者らは、１５個のｅＲＮＡではなく、１４個のｅＲＮＡを調査した。ＮａｎｏＳｔｒｉｎｇ ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙおよびそのｎＳｏｌｖｅｒ（商標）分析ソフトウェアを使用して、本発明者らは、７０個の多形性グリオブラストーマ組織サンプルについて、すべてのサンプルにわたって高（赤色で示される）および低（青色）で、ｅＲＮＡ発現ヒートマップを生成した。図５を参照されたい。本発明者らは、標準化対数順位統計および最大選択順位統計を使用して、ｅＲＮＡの組織発現を、患者の生存と相関付けた。

【0055】

高いｅＴＭＥＭ８８Ｂ（膜貫通タンパク質８８Ｂ）、ｅＲＴＰ５（受容体トランスポータータンパク質５）、およびｅＮＩＮＪ１（神経損傷誘導タンパク質）の発現を有する患者は、低い発現のものと比較して、統計学的に有意なレベルで、もっとも低い生存を示した。図３を参照されたい。

【実施例2】

【0056】

多形性グリオブラストーマについてのグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの機能的関連性の判定
本発明者らは、薬理学的アプローチを使用して、グリオーマ幹細胞のアポトーシス、増殖、自己複製、および分化に対するｅＲＮＡ阻害の作用を分析する。本発明者らは、臨床的に関連するｅＲＮＡを阻害し、次いで、阻害の効果を調べる。

【0057】

グリオーマ幹細胞に対する阻害の作用を調べるためのｅＲＮＡの阻害および機能性分析。実施例１において、１つのグリオーマ幹細胞サンプルおよび２つの濃度のロックド核酸ＧａｐｍｅＲを使用して、ｅＴＭＥＭ８８Ｂを標的は、濃度依存性様式でこのｅＲＮＡの有望なノックダウンを示している。本発明者らは、この阻害を、他の２つのｅＲＮＡ：ｅＲＴＰ５およびｅＮＩＮＪ１について、繰り返す。

【0058】

以下のアッセイにより、ｅＲＮＡの阻害が、グリオーマ幹細胞の生存性、増殖、自己複製、および分化に影響を及ぼすかどうかを示すことができる。

【0059】

グリオーマ幹細胞に対するｅＲＮＡの作用のさらなる機序。グリオーマ幹細胞におけるｅＲＮＡの機能的役割に関して、本発明者らは、報告されている機能が、ｅＲＮＡ自体に起因するのか、同種遺伝子ＴＭＥＭ８８Ｂに起因するのかを判定する。本発明者らは、別個の単独試験を行って、そこで、ＧａｐｍｅＲを使用したｅＴＭＥＭ８８Ｂ阻害、およびＴＭＥＭ８８Ｂ遺伝子の阻害時の、３つの必須幹細胞遺伝子（ＮＡＮＯＧ、ＯＣＴ４、ＳＯＸ２）の発現レベルを、ｓｉＲＮＡのプールを使用して調べた。これらの結果は、ｅＴＭＥＭ８８Ｂの阻害が、特に、５μＭの高い濃度において、同種遺伝子ＴＭＥＭ８８Ｂの有意なノックダウンをもたらすことを示した。さらに、本発明者らは、ＧａｐｍｅＲの用量に関係なく、ＮＡＮＯＧ、ＯＣＴ４、およびＳＯＸ２のわずかな阻害を観察した。ｓｉＲＮＡによるＴＭＥＭ８８Ｂ遺伝子のノックダウンは、ＮＡＮＯＧ、ＯＣＴ４、およびＳＯＸ２発現に影響を及ぼさない。図８を参照されたい。

【0060】

したがって、ｅＴＭＥＭ８８Ｂ発現は、グリオーマ幹細胞におけるその同種遺伝子だけでなく、幹細胞性遺伝子発現の制御においても、特異的な役割を有する。

【0061】

本発明者らは、ルシフェラーゼレポーターアッセイを使用して重要なプロモーター領域における変化を調べるなど、グリオーマ幹細胞に対するｅＲＮＡの作用の他のパラメーターも調査する。

【0062】

代替的な戦略。ＧａｐｍｅＲを使用した阻害は、ジムノーシスと称される直接的な細胞取り込み方法を含んだ。この方法は、約５０％のノックダウンしか示さなかった。したがって、本発明者らは、ＧａｐｍｅＲ取り込みを増加させ、すべてのｅＲＮＡ標的について、より高いノックダウンを達成するために、代替的な方法、例えば、最適化された脂質トランスフェクションを使用することができる。それぞれのグリオーマ幹細胞サンプルが、その固有な培養要件を有するため、本発明者らは、それぞれのサンプルについて実験的に、最適な条件を判定するために、それらのトランスフェクションプロトコールにトラブルシューティングを行うことができる。

【実施例3】

【0063】

グリオーマ幹細胞のクロマチン状態における変化に対するｅＲＮＡの寄与の判定
ｅＲＮＡの操作は、グリオーマ幹細胞のクロマチン状態をモジュレートし得る。本発明者らは、高スループットシーケンシングを伴うトランスポザーゼがアクセス可能なクロマチンについてのアッセイ（ＡＴＡＣ－ｓｅｑ、Ａｓｓａｙ ｆｏｒ Ｔｒａｎｓｐｏｓａｓｅ－Ａｃｃｅｓｓｉｂｌｅ Ｃｈｒｏｍａｔｉｎ ｗｉｔｈ ｈｉｇｈ－ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ）および高スループットシーケンシングを伴うクロマチン免疫沈降（ＣｈＩＰ－ｓｅｑ）の全ゲノムシーケンシングツールの組合せを使用して、この操作を試験する。この作業は、細胞可変性およびがん幹細胞性のエピジェネティック調節因子としてのｅＲＮＡの機能を判定するためのものである。

【0064】

研究アプローチ。クロマチンアクセシビリティに対するｅＲＮＡの効果。全ゲノムクロマチンアクセシビリティパターンを判定するために、本発明者らは、ｅＲＮＡの阻害後にグリオーマ幹細胞においてＡＴＡＣ－ｓｅｑを行い、対照グリオーマ幹細胞（スクランブルＧａｐｍｅＲで処置したもの）から得られたＡＴＡＣ－ｓｅｑデータと比較する。データ分析を行って、ｅＲＮＡ発現の阻害が、遺伝子制御領域にわたってグローバルクロマチンアクセシビリティにどのように影響を及ぼすかを見出す。本発明者らは、プロモーターおよびエンハンサー領域にわたってクロマチンアクセシビリティを判定し、差次的にアクセス可能なプロモーターおよびエンハンサーにもっとも近い遺伝子を機能的にクラスター化する。

【0065】

転写制御に対するｅＲＮＡの効果。高次真核生物ゲノム機能性アーキテクチャ構造およびそれらの関連する部分核コンパートメントは、ＤＮＡ転写を含む、核活性の多数の態様に寄与する重要な成分として、分子神経生物学分野の当業者に認識されている。科学刊行物により、ｅＲＮＡは、様々な一般的な補因子、例えば、ＣＢＰ、媒介因子、ＢＲＤ４、およびコヒーシンとの相互作用を通じて、遺伝子転写を増大させることが示されている。この転写機序におけるグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの役割を発見するために、本発明者らは、上述のように、オリゴヌクレオチドＧａｐｍｅＲでのｅＲＮＡ発現のノックダウン後に、媒介因子、コヒーシン、ならびにＣＢＰおよびＢＲＤ４のそれぞれについて、ＣｈＩＰ－ｓｅｑを行うことができる。

【0066】

代替的な戦略。分子神経生物学分野の当業者であれば、ＡＴＡＣ－ｓｅｑおよびＣｈＩＰ－ｓｅｑの実行および分析の経験を有する。分子神経生物学分野の当業者であれば、代替的な分析戦略、例えば、公的に入手可能なＣｈｒｏｍＨＭＭパッケージを用いて、グリオーマ幹細胞サンプルのゲノムにおいて、異なる「クロマチン状態」をアノテーションする経験も有する。ＣｈｒｏｍＨＭＭパッケージは、多変数隠れマルコフモデル、および入力として与えられたエピゲノミックマークを使用し、ゲノム領域におけるマーカーの不在または存在、ならびにこれらのマークの空間的関係性に基づいて、これらのクロマチン状態を特定する。

【実施例4】

【0067】

ＲＮＡ治療薬としてのｅＲＮＡの有効性の評価。

【0068】

多形性グリオブラストーマの治療法は、多数の課題、特に、薬物の血液脳関門（ＢＢＢ）の通過の妨害に直面している。本発明者らは、インビボで本発明者らの標的ｅＲＮＡを阻害する準備が整ったロックド核酸ＧａｐｍｅＲを化学的に改変し、安定化した。次に、本発明者らは、磁気共鳴イメージング（ＭＲＩ）を使用して腫瘍成長およびサイズに対する阻害の有効性を評価し、ＲＮＡ－ｓｅｑを使用して幹細胞必須遺伝子転写産物の変化を評価する。

【0069】

グリオーマ幹細胞の有望な治療薬としてのｅＲＮＡ阻害の有効性を判定するために、本発明者らは、ヒトグリオブラストーマの同所性異種移植片モデルを使用して、インビボ研究を行う。ｅＲＮＡは、グリオーマ幹細胞に存在し、それらの分化した子孫には存在しない特定のｅＲＮＡ群の同定に起因して、グリオーマ幹細胞の適切な治療標的であり得る。

【0070】

研究アプローチ。腫瘍生成およびｅＲＮＡ ＧａｐｍｅＲでの処置。本発明者らは、Ｚｅｐｅｃｋｉら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（２０１８）によって説明されているように、定位案内下において、患者由来のグリオーマ幹細胞（約２００，０００個の細胞／マウス）を、Ｎｕ／Ｊマウスに埋め込むことができる。本発明者らは、次いで、腫瘍を、１カ月間成長させ、浸透圧ポンプ（Ａｌｚｅｔ）に連結された側脳室に顕微カテーテルを挿入して、標的化ｅＲＮＡに対して、インビボで安定なＧａｐｍｅＲを継続的に送達する。図５を参照されたい。処置の有効性を比較するために、本発明者らは、非処置対照群には１２匹のマウス、スクランブルＧａｐｍｅＲ陰性対照群には１２匹のマウス、およびｅＲＮＡ標的化ＧａｐｍｅＲ処置群には１２匹のマウスを使用する。

【0071】

設計したアッセイ（それぞれのアッセイについて、１群当たり１２匹のマウス）。それぞれのｅＲＮＡの阻害を定量し、幹細胞マーカーおよび分化マーカーの発現を調べる。本発明者らは、ＲＴ－ｑＰＣＲを使用して、標的ｅＲＮＡの阻害の成功を調べ、幹細胞マーカーおよび分化マーカーの変化を試験する：ＣＤ４４およびＧＦＡＰは、それぞれ、インビボ分析が、ｅＲＮＡの阻害に起因することを確認するためのものである。

【0072】

腫瘍体積に対するｅＲＮＡ阻害の作用の判定。本発明者らは、Ｚｅｐｅｃｋｉら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ（２０１８）によって以前に示されているように、ＨｕＮｕ抗体（Ａｂｃａｍ）を用いてマウスの脳の連続切片を染色して、ヒトグリオーマ細胞を正確に検出し、腫瘍体積の３Ｄ再構成および定量を行う。

【0073】

本発明者らは、ｅＲＮＡを標的とするＧａｐｍｅＲで１カ月間処置した後、腫瘍を微細切片にし、ＲＮＡｓｅｑを行って、グリオブラストーマトランスクリプトームに対するｅＲＮＡ阻害の作用を判定する。実施例２において記載されるように、ｅＲＮＡのインビトロ阻害は、幹細胞性遺伝子発現の阻害をもたらす。処置した腫瘍は、対照腫瘍よりも低い進行性トランスクリプトームシグネチャーを示すはずである。

【0074】

多形性グリオブラストーマの治療法との関連性。治療用分子を中枢神経系に送達するための核酸改変および薬物担体は、開発中である。代替として、中枢神経系への治療用分子の送達は、ポンプを介した治療薬の脳室内送達、薬物の脳実質への対流増加送達を含む、外科的技法によって達成することができ、ウイルスまたは細胞の直接的な定位注射が、現在依然として選択されている技法である。

【0075】

多形性グリオブラストーマにおいて重要なｅＲＮＡの直接的な標的化は、いくつかの理由から有望である。第１には、ｍＲＮＡに対して細胞において発現されるｅＲＮＡのコピー数が低いことにより、ｅＲＮＡ阻害を達成するために必要な阻害性ＧａｐｍｅＲの数は、確実に少ない。第２には、ｅＲＮＡは、クロマチンアクセス可能性に影響を及ぼし、遺伝子発現パターンを改変する。第３には、ｅＲＮＡは、遺伝子発現パターンの変更に重要なノードを示す。第４には、ｅＲＮＡ発現パターンは、ＴＣＧＡおよび他の大きなＲＮＡ配列データベースにおいて、多形性グリオブラストーマ患者の臨床生存と関連付けられている。

【0076】

代替的な戦略。ＡｌｚｅｔポンプによるＧａｐｍｅＲの脳室内送達は、バルク腫瘍において治療レベルを達成することができない。Ｓｏｕｗｅｉｄａｎｅ ｅｔ ａｌ．， Ｔｈｅ Ｌａｎｃｅｔ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ， １９（８）， １０４０－５０（２０１８）によって示されるように、対流増加送達を必要とする可能性がある。本発明者らはまた、グリオーマ幹細胞サンプルにおいてこれらのｅＲＮＡの組合せ作用にアクセスするために、３つすべてのｅＲＮＡを一度に標的とする「カクテルＧａｐｍｅＲ」の選択肢も探究することができる。グリオーマ幹細胞特異的治療法としてのｅＲＮＡの有効性を探究するために、本発明者らは、それぞれのｅＲＮＡを様々な濃度でテモゾロミド（多形性グリオブラストーマの現時点の化学療法）と組み合わせ、次いで、グリオーマ幹細胞に対する作用を評価することができる。

【実施例5】

【0077】

グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡの特定
グリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡを特定するために、本発明者らは、２人の患者に由来するグリオーマ幹細胞および分化したグリオーマ細胞に、Ｈ３Ｋ２７Ａｃ ＣｈＩＰ－ｓｅｑおよびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩ ＣｈｉＰ－ｓｅｑを行った。Ｈ３Ｋ２７Ａｃは、活性なエンハンサーを特定するヒストンマークであり、ＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩは、活性な転写を示す。Ｈ３Ｋ２７ＡｃおよびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩが共に存在するゲノムにおけるオーバーラップするピークの検出が、ｅＲＮＡの存在を示すものである。Ｈ３Ｋ２７Ａｃ ＣｈＩＰ－ｓｅｑにより、ＧＳＣ１およびＧＳＣ２において、それぞれ、３９，２４７個および５０，８８５個の部位が特定された。これらの部位を、ＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩシグナルの同時存在についてフィルタリングし、これにより、ＧＳＣ１およびＧＳＣ２において、４２８４個および５３４８個の推定上のｅＲＮＡ部位が得られた。図７（Ａ）を参照されたい。本発明者らは、遺伝子と１：１の関係性を有し、遺伝子のアノテーションされたプロモーターの上流１０ｋｂ以内に位置する、ｅＲＮＡ部位を特異的に調べてこれらの部位をフィルタリングした。図７（Ｂ）を参照されたい。この分析により、ＧＳＣ１については２２９個のｅＲＮＡが得られ、ＧＳＣ２については２１３個のｅＲＮＡが得られた。本発明者らは、次いで、これらのｅＲＮＡを、分化したグリオブラストーマ間質細胞において検出されたｅＲＮＡ（同じ分析パイプラインを通じて）と比較し、２人の患者において共通している１５個のグリオーマ幹細胞特異的ｅＲＮＡを発見した。図７（Ｃ）を参照されたい。本発明者らは、ＮＩＮＪ１遺伝子のエンハンサー領域上のＨ３Ｋ２７ＡｃおよびＲＮＡ Ｐｏｌ ＩＩシグナルの存在を視覚化し、ＧＳＣ１およびＧＳＣ２においてＮＩＮＪ１ ｅＲＮＡの存在を示した。

【実施例6】

【0078】

グリオブラストーマを有する患者におけるｅＲＮＡの発現
ｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＮＩＮＪ１、およびｅＲＴＰ５（患者生存ともっとも有意に相関する１５個のＧＳＣ特異的ｅＲＮＡのうちの３つ）を、グリオブラストーマを有する９人の患者から単離したＧＳＣ、ならびに対照として２つのヒト神経幹細胞系（ＮＩＨに由来するＨ９およびＨ４誘導体）において試験した。図５を参照されたい。すべての患者が、変動レベルで３つのｅＲＮＡを発現する。ｅＴＭＥＭ８８ｂは、ＧＳＣおよび対照細胞において高い発現を示し、ｅＮＩＮＪ１は、ＧＳＣにおいて中等度のレベルで発現され、対照細胞においては検出されず、一方で、ｅＲＴＰ５は、ＧＳＣにおいても神経幹細胞においてもほとんど検出されない。図８を参照されたい。

【0079】

ｅＲＮＡは、通常、それらの同種遺伝子の発現を調節するため、本発明者らは、ＧＳＣおよび対照ヒト神経幹細胞におけるｅＲＮＡの同種遺伝子の発現を判定した。Ｎｉｎｊ１遺伝子は、９個すべてのＧＳＣサンプルおよび２つの神経幹細胞サンプルにおいて、変動するレベルで発現される。ＴＭＥＭ８８ｂは、９個のＧＳＣのうち２つにおいてほとんど発現を示さず、一方で、ＲＴＰ５は、ＧＳＣにおいて発現されない。図９を参照されたい。グリオブラストーマ腫瘍における３つのｅＲＮＡの発現を判定するために、本発明者らは、Ｒｈｏｄｅ Ｉｓｌａｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌにおいて手術を受けた７０人の患者に由来するグリオブラストーマ腫瘍サンプルにおいて、ナノストリング発現分析を行った。この結果は、ｅＮＩＮＪ１およびｅＴＭＥＭ８８ｂが、７０個すべてのグリオブラストーマ腫瘍サンプルにおいて、変動性であるが高い発現を有し、一方でｅＲＴＰ５は低い発現を示すことを示した。ｅＲＮＡのクラスタリングを、ユークリッド距離を使用して判定した。

【0080】

本発明者らは、標準化対数順位統計および最大選択順位統計を使用して、３つのｅＲＮＡの組織発現を、患者の生存と相関付けた。ｅＮＩＮＪ１の高い発現を有する患者は、生存の減少とのもっとも有意な相関を示し（ｐ＜０．００２）、一方でｅＴＭＥＭ８８ｂおよびｅＲＴＰ５の高い発現もまた、生存の減少と相関したが、相関は、ｅＮＩＮＪ１よりは低かった。図５を参照されたい。

【実施例7】

【0081】

ｅＮＩＮＪ１およびｅＴＭＥＭ８８ｂを標的とするオリゴヌクレオチドＧａｐｍｅＲの設計および合成
本発明者らは、ｅＮＩＮＪ１およびｅＴＭＥＭ８８ｂ配列の様々な領域を標的とするＬＮＡ改変オリゴヌクレオチドＧａｐｍｅＲを設計し、患者由来のＧＳＣにおいてそれらを試験して、ｅＲＮＡ発現の阻害を検証した。初期候補ＧａｐｍｅＲは、ｅＮＩＮＪ１およびｅＴＭＥＭ８８ｂ発現のわずかな阻害を示したが、最大で総ｅＲＮＡ発現の５０％でしかなかった。図１０を参照されたい。

【0082】

ＧａｐｍｅＲに誘導されるＮｉｎｊ１ ｅＲＮＡの阻害を増加させるために、本発明者らは、Ｎｉｎｊ１ ｅＲＮＡの配列全体にまたがる９６個の候補ＧａｐｍｅＲを設計した。ｅＮｉｎｊ１に対するｅＲＮＡ治療薬としてのさらなるインビトロおよびインビボ研究のための最良の阻害性ＧａｐｍｅＲを発見するために高スループットなインビトロアッセイにおいて使用しようとするＧａｐｍｅＲの配列のうちの一部については、表１を参照されたい。

【0083】

【表1】

【実施例8】

【0084】

ｅＴＭＥＭ８８Ｂの阻害は、グリオーマ幹細胞同一性遺伝子の阻害をもたらす。

【0085】

グリオブラストーマにおけるこれらの遺伝子の重要性は、以前に示されている。Ｎｏｔｃｈ１は、グリオブラストーマの成長、アポトーシスに対する耐性、およびＧＳＣ特性の維持を調節する。Ｎｏｔｃｈ１は、ＰＴＣＨ１、Ｓｏｘ２、およびＮａｎｏｇの発現を調節する。Ｋｌｆ４は、ＧＳＣの成長を調節し、化学療法でのグリオブラストーマの処置後に上方調節される。これらの遺伝子の変化倍数を、非標的化ＧａｐｍｅＲで処置したＧＳＣとの比較で計算し、ハウスキーピング遺伝子発現に対して正規化した。図１１を参照されたい。
配列表
ｅＴＭＥＭ８８Ｂ：第１番染色体（ＧＳＣ１－開始：１４３０２９２－ＧＳＣ２－終了：１４３０９６０）。長さ：６６８ヌクレオチド。
ATCTAGTACATCATATTGCCAGCAGGGCTCAGCCTGTGACCAGCAAGGTCTGGGCTCCGTCTGGGGCCAGGGTCAAGGCTCATTCCGTGGCCTTGAGCACAGCCTGGTGTGTGGCTGGGTCGAGTCCAGCAGAAGTCTCGGGGTTTTCCAGCCTCCATCCGAGTCCGGCTTTGATGCCTTTCCTGGTCAGACAGGAGCCGGGCCAGTGGCCAAGCTGCCAGGATGGCTTCCCCGGGGCCGCGGCCGCCTTCCTTCCCCTCCTGCCCGGGCTGGCTCTGGTCGCCACTAGGGGTTGAAGATGAGGGCTCTCCTGGGAAGCTCTTGGCTGAGGATCCGCCTGGTCCCGGAGCCGTGAAAACAACAGCTGGGCCTGGTGGGGGTGGGGAGGCTGAGCGGAGAGGCCAGCTCCCTTGGCTGCTGGGCAGGGTCTTCTGTCCACAGCTGCCTCAGGCGGCTGTTTCCAAAGGTGTTTCCAGCTTCCCAGGCCCACCCTGAGGCCCCGCACCGCCAGGGAGGTGGAAGGCACGGAGCAGCGAAGCCCGGCCCCGGCCCCGGCCGCCCGACCAGCTCACAGAGGAACACCTGTGGGGGGGCCTGTGGGCGGTTCACAGAGGGATGTAGGAACGTGCCTGTGGGAGGCCGTAGCCCCGGAGAGCAGAGGCCTGGCC [SEQ ID NO: 3].
ｅＲＴＰ５：第２番染色体（ＧＳＣ１－開始：２４２０８８５９３－ＧＳＣ２－終了：２４２０８８８８４）。長さ：２９１ヌクレオチド。
CGGCAGCAACACTGCCACGCGAATCCGCGCCGGCCAATCAGCATGGCCAGGGGCGGGGCTTCCCTGAGGCGCGCCGAGAGGCGGTGGCCCACTTCCGGCAATAATCGCCTGGTCGCCGTCAGGTGCCGGCCCAGGTGGCAGGCGCGCCCGTTGGGCACTGGGGGACGCGGGCGCGTCAGGTGAAGACTGGGGGCTGCAGGCGCGCTAGGTAGGTACGGGGTGCCGCGGGCGCGTCAGGTGAAGACTGGGCGCCGCAGGCGCCTTAGGTGAAGATTGGGGATCGCGGGCGCG [SEQ ID NO: 4].
ｅＮＩＮＪ１：第９番染色体（ＧＳＣ１－開始：９３１４３０５８－ＧＳＣ２－終了：９３１４４７８７）。長さ：１，８３２ヌクレオチド。
agaattgcctgaaccaggggttggaggttgcagcgggtggaaattttgccactgcactccagcctgggtgacagagtgagaccctgtctcaaagaaaaaaaaaaaaagaTACATCATCTGGGACAATAACCTTGAAAAGCAGGGGTCCCAGACGACCTTATTTGCAGAGAATGCGACTGCAGACGGCAAGCAGGGGGGCATGCCCTTCGCTCTCTGTCCTCTGCTCTTTGCCCCGGCCACTGTCGGCCTCATCTGAAGGCCACCTGTGCCTCACGGTCTGAAAACGCTGGTTTCCACAGCTGCTTCTCCTTCCAAATTTCCCTGGAGTCTTGCTTTGGTGGCGAACCTCTGGTTCTATTCCTTCCTTTTAACTGAAGCCTATAGGAAAAATTTGGAAGTTGAAATATGCCAGTCCAAGGAAGGTGGACGTGGAGTTCTGAGGGTGGGGGTGCTGCCAGGGAAGTGGCACTGTGCAGGGGACCGCCCCTGGGACCCCCTGGTTCCTGTCAAGAGCAGGTAGGggctgggcgcggtggctcacgcctataatcccagcactttgggaggtcaaggagagtggatcacctaaggtcaggagttcaagaccagctgaccaacatggtgaaaccccgtctctactaaaaatacaaaaattagctgggcgtggtggcaggcgcctataatcccaggtattcaggaggctgaggcaggagaatagcttgaacccaggaggcagaggttgcagtgagctgagatcgcaccactgcactccagcctgggcgacagagcgagactctgtctacacacacacacacacacacacagacacacacacacacacaGATCAGGTAGGATGTGAGGTGTGTCCTCATGGCCGGACATGGGGTGGGTGGGGCCAAACAACCACAGGGACTCGTCCTGTGGCCACTGCTGCTCAGGAAGTGGATCCCAAGGAGCAGAGTCGCCAGACCCCTCAGTTCCCAGCTCCACATTTAAGGCAGGTCTGGCCATGAGCCAGGCCTCTGCATGTGACCTGGGGCCTCACTGTGGCATGGCTGCCTGTCCCACCTGTGGATGTTGCCTGTGCTGTGTAGAAGCCACATAGCCTCCGGGGCGGCTCCCCAGAATGCCACATTTCCTGTCTCTGGCTCTGATGGCGTCTAGGCTGGCAGGGGTCCCGGCCCCAGCAGTACTGTTGCCGGGCAGAGCTCAGGGCCACGTGCAGTTGGGTCTGGCTGAGAGCATCTCATGGGTTTATGAGAACCCTTCCAGCACAAAGGGGCATTTATCAGGCAGGGATGGCATGTCTTGGTCTGAACACAGGAAACACAGAAATAGCCTTTCACAGAGTGCCAGCAGGGCTGGGCTCGCCTGCTGTGGAGGGTGTCGGCTTTCCAACTCCTTCTCCAAGCTGTGCGACCCGTCCATGTTCCCCTGTGAGTTGTTCTGTCCCAGACAGGGCATTCCCTGAGAACGCTCCTGCTGCAACTGgagggagagaggcagggaggggaaaggggaagacttgcagggagaaggaagaagggagacagatggagacagacagaaggagggatggaagaaatgagagagagagagggagggagaTGGAAACATAGATTGTCTCCACTGTGACACCCTGCCTCCATGGTTCTCCATGATGGGAATGGAATTCATGTCTCACCTGGCAGCAAGGGTCTCCACAATATGACTTCACCTTCTTTCTCTTAGTAAGGCGAGAGCAGACAGGCAGACACTCCAGGAAGTAACTGATGTGTCCCTGAAAATGCCTGTCTTTCCCAGCTTGTACAACTTTGCTTGTGTTATTTCTT [SEQ ID NO: 5].
標的ｅＲＮＡ配列（ｅＮＩＮＪ１）、１，８３２ヌクレオチドの非コーディングＲＮＡをスクリーニングして２０ヌクレオチドの長さの理想的／標的領域を見出すバイオインフォマティクス方法を使用して、以下の配列を生成した。理想的／標的領域は、ＧＣ含有量％（約３０～６０％）、ｍｉＲＮＡヒット数（スコア０を選択）、遺伝子ヒット（スコア１以下を選択）、および順位システム（標的配列が良好であるかそうでないかを示す、バイオインフォマティクスの賜物であった）などの基準を使用して選択した。上位（５０個）の標的領域を、ｅＮＩＮＪ１の選択された領域を標的とするＧａｐｍｅＲ（ＬＮＡおよび２’ＭＯＥ）の合成および生成に選択した。（ｌＮ）＃は、ＬＮＡヌクレオチドである。（ｅＮ）＃は、２’ＭＯＥヌクレオチドである。（ｄＮ）＃は、デオキシリボヌクレオチド（ＤＮＡ）である。

【0086】

ＬＮＣＲＮＡ＿２２＿ＬＮＡ。標的の２０ヌクレオチド（ｎｔ）（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＵＡＣＡＡＧＣＵＧＧＧＡＡＡＧＡＣＡ［配列番号６］。

【0087】

ＬＮＣＲＮＡ＿２２＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＵＣＵＵＵＣＣＣＡＧＣＵＵＧＵＡＣＡ［配列番号７］。

【0088】

ＬＮＣＲＮＡ＿２２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号８］。

【0089】

ＬＮＣＲＮＡ＿２２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号９］。

【0090】

ＬＮＣＲＮＡ＿３０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＵＧＧＧＡＡＡＧＡＣＡＧＧＣＡＵＵＵＵ［配列番号１０］。

【0091】

ＬＮＣＲＮＡ＿３０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＡＡＵＧＣＣＵＧＵＣＵＵＵＣＣＣＡＧ［配列番号１１］。

【0092】

ＬＮＣＲＮＡ＿３０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号１２］。

【0093】

ＬＮＣＲＮＡ＿３０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号１３］
ＬＮＣＲＮＡ＿４０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＡＧＧＣＡＵＵＵＵＣＡＧＧＧＡＣＡＣＡ［配列番号１４］。

【0094】

ＬＮＣＲＮＡ＿４０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＵＧＵＣＣＣＵＧＡＡＡＡＵＧＣＣＵＧ［配列番号１５］。

【0095】

ＬＮＣＲＮＡ＿４０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）［配列番号１６］。

【0096】

ＬＮＣＲＮＡ＿４０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）［配列番号１８］。

【0097】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＡＧＧＧＡＣＡＣＡＵＣＡＧＵＵＡＣＵ［配列番号１９］。

【0098】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＵＡＡＣＵＧＡＵＧＵＧＵＣＣＣＵＧＡ［配列番号２０］。

【0099】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号２１］。

【0100】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号２２］。

【0101】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＧＧＧＡＣＡＣＡＵＣＡＧＵＵＡＣＵＵＣ［配列番号２３］。

【0102】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＡＡＧＵＡＡＣＵＧＡＵＧＵＧＵＣＣＣＵ［配列番号２４］。

【0103】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）［配列番号２５］。

【0104】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）［配列番号２６］。

【0105】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０９＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＡＡＧＡＡＧＧＵＧＡＡＧＵＣＡＵＡＵＵ［配列番号２７］。

【0106】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０９＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＵＡＵＧＡＣＵＵＣＡＣＣＵＵＣＵＵＵ［配列番号２８］。

【0107】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）［配列番号２９］。

【0108】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）［配列番号３０］。

【0109】

ＬＮＣＲＮＡ＿１１８＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＧＡＡＧＵＣＡＵＡＵＵＧＵＧＧＡＧＡＣＣ［配列番号３１］。

【0110】

ＬＮＣＲＮＡ＿１１８＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＧＵＣＵＣＣＡＣＡＡＵＡＵＧＡＣＵＵＣ［配列番号３２］。

【0111】

ＬＮＣＲＮＡ＿１１８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）［配列番号３３］。

【0112】

ＬＮＣＲＮＡ＿１１８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）［配列番号３４］。

【0113】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＧＣＵＧＣＣＡＧＧＵＧＡＧＡＣＡＵＧＡＡ［配列番号３５］。

【0114】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＵＣＡＵＧＵＣＵＣＡＣＣＵＧＧＣＡＧＣ［配列番号３６］。

【0115】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）［配列番号３７］。

【0116】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）［配列番号３８］。

【0117】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＡＧＡＣＡＵＧＡＡＵＵＣＣＡＵＵＣＣ［配列番号３９］。

【0118】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＧＡＡＵＧＧＡＡＵＵＣＡＵＧＵＣＵＣＡ［配列番号４０］。

【0119】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号４１］。

【0120】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号４２］。

【0121】

ＬＮＣＲＮＡ＿１９６＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＵＣＡＣＡＧＵＧＧＡＧＡＣＡＡＵＣＵ［配列番号４３］。

【0122】

ＬＮＣＲＮＡ＿１９６＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＡＵＵＧＵＣＵＣＣＡＣＵＧＵＧＡＣＡ［配列番号４４］。

【0123】

ＬＮＣＲＮＡ＿１９６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号４５］。

【0124】

ＬＮＣＲＮＡ＿１９６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号４６］。
ＬＮＣＲＮＡ＿２５０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＵＵＣＣＡＵＣＣＣＵＣＣＵＵＣＵＧＵ［配列番号４７］。

【0125】

ＬＮＣＲＮＡ＿２５０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＣＡＧＡＡＧＧＡＧＧＧＡＵＧＧＡＡＧＡ［配列番号４８］。

【0126】

ＬＮＣＲＮＡ＿２５０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号４９］。

【0127】

ＬＮＣＲＮＡ＿２５０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号５０］。

【0128】

ＬＮＣＲＮＡ＿３７７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＵＧＧＧＡＣＡＧＡＡＣＡＡＣＵＣＡＣ［配列番号５１］。

【0129】

ＬＮＣＲＮＡ＿３７７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＵＧＡＧＵＵＧＵＵＣＵＧＵＣＣＣＡＧＡ［配列番号５２］。

【0130】

ＬＮＣＲＮＡ＿３７７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号５３］。

【0131】

ＬＮＣＲＮＡ＿３７７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号５４］。

【0132】

ＬＮＣＲＮＡ＿４８５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＵＧＵＧＡＡＡＧＧＣＵＡＵＵＵＣＵＧＵ［配列番号５５］。

【0133】

ＬＮＣＲＮＡ＿４８５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＣＡＧＡＡＡＵＡＧＣＣＵＵＵＣＡＣＡＧ［配列番号５６］。

【0134】

ＬＮＣＲＮＡ＿４８５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号５７］。

【0135】

ＬＮＣＲＮＡ＿４８５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号５８］。

【0136】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９１＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＡＧＧＣＵＡＵＵＵＣＵＧＵＧＵＵＵＣＣ［配列番号５９］。

【0137】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９１＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＡＡＵＡＧＣＣＵＵ［配列番号６０］。

【0138】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）［配列番号６１］。

【0139】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）［配列番号６２］。

【0140】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９９＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＣＵＧＵＧＵＵＵＣＣＵＧＵＧＵＵＣＡ［配列番号６３］。

【0141】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９９＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＡＡＣＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡＡ［配列番号６４］。

【0142】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号６５］。

【0143】

ＬＮＣＲＮＡ＿４９９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号６６］。

【0144】

ＬＮＣＲＮＡ＿５００＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＵＧＵＧＵＵＵＣＣＵＧＵＧＵＵＣＡＧ［配列番号６７］。

【0145】

ＬＮＣＲＮＡ＿５００＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＣＵＧＡＡＣＡＣＡＧＧＡＡＡＣＡＣＡＧＡ［配列番号６８］。

【0146】

ＬＮＣＲＮＡ＿５００＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号６９］。

【0147】

ＬＮＣＲＮＡ＿５００＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号７０］。

【0148】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＡＧＡＣＣＡＡＧＡＣＡＵＧＣＣＡＵＣＣ［配列番号７１］。

【0149】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＧＡＵＧＧＣＡＵＧＵＣＵＵＧＧＵＣＵＧ［配列番号７２］。

【0150】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）［配列番号７３］。

【0151】

ＬＮＣＲＮＡ＿５１７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）［配列番号７４］。

【0152】

ＬＮＣＲＮＡ＿５２７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＡＵＧＣＣＡＵＣＣＣＵＧＣＣＵＧＡＵＡ［配列番号７５］。

【0153】

ＬＮＣＲＮＡ＿５２７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＡＵＣＡＧＧＣＡＧＧＧＡＵＧＧＣＡＵＧ［配列番号７６］。

【0154】

ＬＮＣＲＮＡ＿５２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）［配列番号７７］。

【0155】

ＬＮＣＲＮＡ＿５２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）［配列番号７８］。

【0156】

ＬＮＣＲＮＡ＿５３６＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＣＵＧＣＣＵＧＡＵＡＡＡＵＧＣＣＣＣＵ［配列番号７９］。

【0157】

ＬＮＣＲＮＡ＿５３６＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＧＧＧＣＡＵＵＵＡＵＣＡＧＧＣＡＧＧ［配列番号８０］。

【0158】

ＬＮＣＲＮＡ＿５３６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）［配列番号８１］。

【0159】

ＬＮＣＲＮＡ＿５３６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）［配列番号８２］。

【0160】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＵＧＵＧＣＵＧＧＡＡＧＧＧＵＵＣＵＣ［配列番号８３］。

【0161】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＡＧＡＡＣＣＣＵＵＣＣＡＧＣＡＣＡＡＡ［配列番号８４］。

【0162】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号８５］。

【0163】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ Ｇａｐｍｅｒは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号８６］。

【0164】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５６＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＧＵＧＣＵＧＧＡＡＧＧＧＵＵＣＵＣＡ［配列番号８７］。

【0165】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５６＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＡＧＡＡＣＣＣＵＵＣＣＡＧＣＡＣＡＡ［配列番号８８］。

【0166】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号８９］。

【0167】

ＬＮＣＲＮＡ＿５５６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号９０］。

【0168】

ＬＮＣＲＮＡ＿５６９＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＧＵＵＣＵＣＡＵＡＡＡＣＣＣＡＵＧＡＧＡ［配列番号９１］。

【0169】

ＬＮＣＲＮＡ＿５６９＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＣＵＣＡＵＧＧＧＵＵＵＡＵＧＡＧＡＡＣ［配列番号９２］。

【0170】

ＬＮＣＲＮＡ＿５６９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）［配列番号９３］。

【0171】

ＬＮＣＲＮＡ＿５６９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）［配列番号９４］。

【0172】

ＬＮＣＲＮＡ＿５７１＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＵＣＡＵＡＡＡＣＣＣＡＵＧＡＧＡＵＧ［配列番号９５］。

【0173】

ＬＮＣＲＮＡ＿５７１＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＣＡＵＣＵＣＡＵＧＧＧＵＵＵＡＵＧＡＧＡ［配列番号９６］。

【0174】

ＬＮＣＲＮＡ＿５７１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号９７］。

【0175】

ＬＮＣＲＮＡ＿５７１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号９８］。

【0176】

ＬＮＣＲＮＡ＿９７２＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＣＵＣＡＣＡＵＣＣＵＡＣＣＵＧＡＵＣＵ［配列番号９９］。

【0177】

ＬＮＣＲＮＡ＿９７２＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＡＵＣＡＧＧＵＡＧＧＡＵＧＵＧＡＧＧ［配列番号１００］。

【0178】

ＬＮＣＲＮＡ＿９７２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）［配列番号１０１］。

【0179】

ＬＮＣＲＮＡ＿９７２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）［配列番号１０２］。

【0180】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０２７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＵＧＵＡＧＡＣＡＧＡＧＵＣＵＣＧＣＵ［配列番号１０３］。

【0181】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０２７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＣＧＡＧＡＣＵＣＵＧＵＣＵＡＣＡＣＡ［配列番号１０４］。

【0182】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号１０５］。

【0183】

ＬＮＣＲＮＡ＿１０２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号１０６］。

【0184】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２０７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＣＡＣＣＡＵＧＵＵＧＧＵＣＡＧＣＵＧ［配列番号１０７］。

【0185】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２０７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＣＡＧＣＵＧＡＣＣＡＡＣＡＵＧＧＵＧＡＡ［配列番号１０８］。

【0186】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２０７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１０９］。

【0187】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２０７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１１０］。

【0188】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２１６＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＧＧＵＣＡＧＣＵＧＧＵＣＵＵＧＡＡＣ［配列番号１１１］。

【0189】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２１６＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＵＵＣＡＡＧＡＣＣＡＧＣＵＧＡＣＣＡＡ［配列番号１１２］。

【0190】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２１６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１１３］。

【0191】

ＬＮＣＲＮＡ＿１２１６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１１４］。

【0192】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＵＵＧＧＡＣＵＧＧＣＡＵＡＵＵＵＣＡＡ［配列番号１１５］。

【0193】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＵＧＡＡＡＵＡＵＧＣＣＡＧＵＣＣＡＡＧ［配列番号１１６］。

【0194】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号１１７］。

【0195】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４１５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号１１８］。

【0196】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２１＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＵＧＧＣＡＵＡＵＵＵＣＡＡＣＵＵＣＣＡ［配列番号１１９］。

【0197】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２１＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＧＡＡＧＵＵＧＡＡＡＵＡＵＧＣＣＡＧ［配列番号１２０］。

【0198】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号１２１］。

【0199】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２１＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号１２２］。

【0200】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２２＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＧＣＡＵＡＵＵＵＣＡＡＣＵＵＣＣＡＡ［配列番号１２３］。

【0201】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２２＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＵＧＧＡＡＧＵＵＧＡＡＡＵＡＵＧＣＣＡ［配列番号１２４］。

【0202】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号１２５］。

【0203】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号１２６］。

【0204】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＡＵＵＵＣＡＡＣＵＵＣＣＡＡＡＵＵＵＵ［配列番号１２７］。

【0205】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＡＡＵＵＵＧＧＡＡＧＵＵＧＡＡＡＵＡ［配列番号１２８］。

【0206】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）［配列番号１２９］。

【0207】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４２７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）［配列番号１３０］。

【0208】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＵＣＣＵＡＵＡＧＧＣＵＵＣＡＧＵＵＡ［配列番号１３１］。

【0209】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＡＡＣＵＧＡＡＧＣＣＵＡＵＡＧＧＡＡＡ［配列番号１３２］。

【0210】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１３３］。

【0211】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１３４］。

【0212】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＣＵＡＵＡＧＧＣＵＵＣＡＧＵＵＡＡＡ［配列番号１３５］。

【0213】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＵＵＡＡＣＵＧＡＡＧＣＣＵＡＵＡＧＧＡ［配列番号１３６］。

【0214】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号１３７］。

【0215】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４４７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号１３８］。

【0216】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４６０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＧＵＵＡＡＡＡＧＧＡＡＧＧＡＡＵＡＧＡ［配列番号１３９］。

【0217】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４６０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＣＵＡＵＵＣＣＵＵＣＣＵＵＵＵＡＡＣＵ［配列番号１４０］。

【0218】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４６０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）［配列番号１４１］。

【0219】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４６０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）［配列番号１４２］。

【0220】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４８８＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＣＧＣＣＡＣＣＡＡＡＧＣＡＡＧＡＣＵ［配列番号１４３］。

【0221】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４８８＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＵＣＵＵＧＣＵＵＵＧＧＵＧＧＣＧＡＡ［配列番号１４４］。

【0222】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４８８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１４５］。

【0223】

ＬＮＣＲＮＡ＿１４８８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１４６］。

【0224】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５３２＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＧＣＵＧＵＧＧＡＡＡＣＣＡＧＣＧＵＵＵ［配列番号１４７］。

【0225】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５３２＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＡＣＧＣＵＧＧＵＵＵＣＣＡＣＡＧＣＵ［配列番号１４８］。

【0226】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５３２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）［配列番号１４９］。

【0227】

ＬＮＣＲＮＡ＿１５３２＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）［配列番号１５０］。

【0228】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６６４＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＣＵＣＵＧＣＡＡＡＵＡＡＧＧＵＣＧＵＣＵ［配列番号１５１］。

【0229】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６６４＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＡＣＧＡＣＣＵＵＡＵＵＵＧＣＡＧＡＧ［配列番号１５２］。

【0230】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６６４＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号１５３］。

【0231】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６６４＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号１５４］。

【0232】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６８３＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＧＧＡＣＣＣＣＵＧＣＵＵＵＵＣＡＡＧ［配列番号１５５］。

【0233】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６８３＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＣＵＵＧＡＡＡＡＧＣＡＧＧＧＧＵＣＣＣＡ［配列番号１５６］。

【0234】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６８３＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号１５７］。

【0235】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６８３＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号１５８］。

【0236】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６９５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＵＵＣＡＡＧＧＵＵＡＵＵＧＵＣＣＣＡ［配列番号１５９］。

【0237】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６９５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＵＧＧＧＡＣＡＡＵＡＡＣＣＵＵＧＡＡＡＡ［配列番号１６０］。

【0238】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６９５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１６１］。

【0239】

ＬＮＣＲＮＡ＿１６９５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１６２］。

【0240】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０６＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＵＵＧＵＣＣＣＡＧＡＵＧＡＵＧＵＡＵＣ［配列番号１６３］。

【0241】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０６＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＡＵＡＣＡＵＣＡＵＣＵＧＧＧＡＣＡＡＵ［配列番号１６４］。

【0242】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）［配列番号１６５］。

【0243】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０６＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）［配列番号１６６］。

【0244】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０７＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＵＧＵＣＣＣＡＧＡＵＧＡＵＧＵＡＵＣＵ［配列番号１６７］。

【0245】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０７＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＧＡＵＡＣＡＵＣＡＵＣＵＧＧＧＡＣＡＡ［配列番号１６８］。

【0246】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）［配列番号１６９］。

【0247】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０７＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）［配列番号１７０］。

【0248】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０８＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＧＵＣＣＣＡＧＡＵＧＡＵＧＵＡＵＣＵＵ［配列番号１７１］。

【0249】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０８＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＧＡＵＡＣＡＵＣＡＵＣＵＧＧＧＡＣＡ［配列番号１７２］。

【0250】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）［配列番号１７３］。

【0251】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０８＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）［配列番号１７４］。

【0252】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０９＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＧＵＣＣＣＡＧＡＵＧＡＵＧＵＡＵＣＵＵＵ［配列番号１７５］。

【0253】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０９＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＡＧＡＵＡＣＡＵＣＡＵＣＵＧＧＧＡＣ［配列番号１７６］。

【0254】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）［配列番号１７７］。

【0255】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７０９＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）［配列番号１７８］。

【0256】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７１０＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＵＣＣＣＡＧＡＵＧＡＵＧＵＡＵＣＵＵＵＵ［配列番号１７９］。

【0257】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７１０＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＡＡＡＡＧＡＵＡＣＡＵＣＡＵＣＵＧＧＧＡ［配列番号１８０］。

【0258】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７１０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）［配列番号１８１］。

【0259】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７１０＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）［配列番号１８２］。

【0260】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７７５＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＡＧＵＧＣＡＧＵＧＧＣＡＡＡＡＵＵＵＣＣ［配列番号１８３］。

【0261】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７７５＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＧＧＡＡＡＵＵＵＵＧＣＣＡＣＵＧＣＡＣＵ［配列番号１８４］。

【0262】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７７５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）［配列番号１８５］。

【0263】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７７５＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）［配列番号１８６］。

【0264】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７８３＿ＬＮＡ。標的の２０ｎｔ（５’－３’）は、ＧａｐｍｅＲ設計に選択されたもともとのｅＲＮＡ配列を含む（それぞれ２０ヌクレオチド）。ＧＧＣＡＡＡＡＵＵＵＣＣＡＣＣＣＧＣＵＧ［配列番号１８７］。

【0265】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７８３＿ＬＮＡ。ＡＳ配列（５’－３’）は、上記のｅＲＮＡ領域を標的とするアンチセンス配列を含む。アンチセンス配列は、ＲＮＡヌクレオチドとして提供される。ＣＡＧＣＧＧＧＵＧＧＡＡＡＵＵＵＵＧＣＣ［配列番号１８８］。

【0266】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７８３＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＣ）［配列番号１８９］。

【0267】

ＬＮＣＲＮＡ＿１７８３＿ＬＮＡ。５－１０－５ ＭＯＥ Ｇａｐｍｅｒは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＧ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＣ）［配列番号１９０］。

【0268】

ＭＡＬＡＴ１。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＧ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｌＧ）＃（ｌＣ）＃（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＧ）［配列番号１９１］。

【0269】

ＭＡＬＡＴ１。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＧ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＣ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｅＧ）＃（ｅＣ）＃（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＧ）［配列番号１９２］。

【0270】

ＮＴＣ＿ＬＮＡＧａｐｍｅｒ。５－１０－５ ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲは、ＬＮＡ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）ＬＮＡ配列に続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）ＬＮＡ配列。（ｌＴ）＃（ｌＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）＃（ｌＣ）＃（ｌＡ）＃（ｌＴ）［配列番号１９３］。

【0271】

ＮＴＣ＿ＬＮＡＧａｐｍｅｒ。５－１０－５ ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲは、２’ＭＯＥ ＧａｐｍｅＲ配列をこの構造順で含む：（５）２’ＭＯＥ配列、続いて、（１０）ＤＮＡ配列、最後に（５）２’ＭＯＥ配列。（ｅＴ）＃（ｅＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＡ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＴ）＃（ｄＧ）＃（ｄＴ）＃（ｄＣ）＃（ｄＡ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）＃（ｅＣ）＃（ｅＡ）＃（ｅＴ）［配列番号１９４］。

【0272】

実施形態の一覧
原発性脳腫瘍の処置のためにエンハンサーＲＮＡを標的とする特定の組成物および方法について、記載してきた。本明細書における詳細な説明は、例示であり、制限するものでも排他的なものでもない。詳細な説明は、本開示を、開示されている厳密な形態に限定することを意図するものではない。分子神経生物学分野における当業者には認識されるように、すでに記載されているもの以外の他の均等物および改変形態が、本明細書に記載される発明の概念から逸脱することなく可能である。本明細書または特許請求の範囲が、方法ステップまたは機能を、ある順序で記載している場合、代替的な実施形態では、機能が異なる順序で、または実質的に同時に、実行されてもよい。本発明の主題は、したがって、本開示の趣旨以外において、制限されるものではない。

【0273】

本開示を解釈する際、すべての用語は、文脈に一致する可能な限り広範な様式で解釈されるべきである。別途定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、分子神経生物学分野における当業者によって広く理解されているものと同じ意味を有する。本発明は、本明細書に記載されている特定の手法、プロトコール、試薬などに限定されず、したがって、実際に変動し得る。本明細書において使用される用語は、特許請求の範囲によってのみ定められる本発明の範囲を制限することを意図するものではない。

【0274】

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」および「含むこと（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、非排他的な様式で要素、構成要素、またはステップに言及すると解釈されるべきであり、参照される要素、構成要素、またはステップは、他の要素、構成要素、またはステップとともに存在し得るか、使用され得るか、または組み合わされ得る。単数形の「１つの（ａ）」、「１つの（ａｎ）」、および「その（ｔｈｅ）」という用語は、文脈により別途に示されない限り、複数形の参照物を含む。同様に、「または」という言葉は、文脈により別途示されない限り、「および」を包含する。「例えば（ｅ．ｇ．）」という略語は、非限定的な例を示すために使用され、「例えば（ｆｏｒ ｅｘａｍｐｌｅ）」という用語と同義である。

【0275】

値の範囲が提供される場合、文脈により別途に示されない限り、その範囲の上限値と下限値との間にある、下限値の単位の１０分の１までのそれぞれの介在値、およびその範囲内の任意の他の言及された値または介在値。

【0276】

記載される技術のいくつかの実施形態が、以下の番号付けされた段落に従って定義され得る。

【0277】

１．脳腫瘍の処置において使用するための、本特許明細書において開示されるＧａｐｍｅＲ。

【0278】

２．原発性脳腫瘍の処置において使用するための、本特許明細書において開示されるＧａｐｍｅＲ。

【0279】

３．原発性脳腫瘍の処置のための特定のｓｈＲＮＡを担持する合成オリゴヌクレオチドまたはレンチウイルスを使用して、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）を標的とする方法。

【0280】

４．合成オリゴヌクレオチドが、合成ＲＮＡオリゴヌクレオチドである、実施形態３に記載の方法。

【0281】

５．グリオーマ幹細胞において特異的に発現され、その発現がグリオブラストーマを有する患者の生存の減少と相関する、エンハンサーＲＮＡ（ｅＲＮＡ）とハイブリダイズする、合成オリゴヌクレオチド。

【0282】

６．ｅＲＮＡが、ｅＴＭＥＭ８８ｂ、ｅＲＴＰ５、およびｅＮＩＮＪ１からなる群から選択される、実施形態５に記載の合成オリゴヌクレオチド。

【0283】

７．グリオーマ幹細胞ｅＲＮＡの発現をノックアウトする合成オリゴヌクレオチドを使用して、グリオーマを処置する方法。

【0284】

８．合成オリゴヌクレオチドが、分解に対して耐性である、実施形態５に記載の方法。

【0285】

９．投与が、全身または髄腔内である、実施形態５に記載の方法。

【0286】

１０．ｅＲＮＡを標的とし、その発現を阻害するｓｈＲＮＡを送達する、ウイルスベクター。

【0287】

１１．ウイルスベクターが、レンチウイルスである、実施形態８に記載のウイルスベクター。
参考文献
分子神経生物学分野の当業者は、本発明を作製および使用する際の予測可能な結果に対する指針として、これらの特許、特許出願、および科学的参考文献を使用することができる。

【0288】

U.S. Pat. No. 10,160,977 B2 (Hnisz et al.), Super-enhancers and methods of use.この特許は細胞同一性、例えば、胚性幹細胞同一性の維持、または疾患状態（例えば、癌）の維持に必要とされる細胞型特異的遺伝子の発現を調節するのに有用なスーパーエンハンサーおよび関連する組成物、方法、および剤を開示する。

【0289】

U.S. Pat. Publ. 2015/0337376 A1 (Saint-Andre et al.), Core transcriptional circuitry in human cells and methods of use.この特許公報は、細胞または組織のコア調節回路または細胞識別プログラムを同定するための方法を開示する。この特許公報はまた、前記方法を用いて同定されたコア調節回路または細胞識別プログラムを含む、診断、スクリーニング、および治療の関連する方法を開示する。

【0290】

U.S. Pat. Publ. 2019/0062752 A1 (Young et al.), Transcription factor trapping by RNA in gene regulatory elements.この特許公報は、標的遺伝子の調節エレメントの少なくとも１つから転写されたリボ核酸（ＲＮＡ）と、ＲＮＡおよび調節エレメントの両方に結合する転写因子との間の結合を調節することによって、標的遺伝子の発現を調節するのに有用な方法を開示する。この特許公報はまた、調節エレメントの少なくとも１つから転写されたＲＮＡと、ＲＮＡおよび調節エレメントに結合する転写因子との間の結合を妨害する剤を同定するための方法およびアッセイを開示する。この特許公報は、凝縮物の形成、組成、維持、溶解、および制御を調節することによって遺伝子制御を調節するための組成物および方法をさらに開示する。

【0291】

PCT Pat. Publ. WO 2019/183552 A2 (Whitehead Institute for Biomedical Research), Methods and assays for modulating gene transcription by modulating condensates.この特許公報は、凝縮物の形成、組成、維持、溶解、および制御を調節することによって遺伝子制御を調節するための組成物および方法を開示する。

【0292】

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【0293】

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【0294】

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【0295】

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The Merck Manual of Diagnosis and Therapy, 19^th edition (Merck Sharp & Dohme Corp., 2018).
Pharmaceutical Sciences 23^rd edition (Elsevier, 2020).
本明細書を通して引用される全ての特許および刊行物は、本明細書に記載される技術と共に使用され得る材料および方法を開示および記載するために、参照により明示的に組み込まれる。論じられる刊行物は、出願日前のそれらの開示のためにのみ提供される。それらは、本発明者らが先行発明に基づいて、または任意の他の理由で、そのような開示に先行することができないという承認として解釈されるべきではない。以前の特許または刊行物と本明細書に提供される説明との間に明らかな矛盾がある場合、本明細書（任意の定義を含む）および特許請求の範囲が支配するものとする。日付に関するすべての陳述又はこれらの書類の内容に関する表現は出願人が利用可能な情報に基づいており、これらの書類の日付又は内容の正確さに関する承認を構成しない。本明細書において提供される刊行物の日付は、実際の刊行日と異なる場合がある。本明細書に提供される公開日と、発行者によって提供される実際の公開日との間に明らかな矛盾がある場合、実際の公開日が支配するものとする。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【配列表】

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【国際調査報告】