特表 2023-540981 ＡＫ３２８７製剤及びその製造方法並びに使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-09-27

(54)【発明の名称】ＡＫ３２８７製剤及びその製造方法並びに使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/437 20060101AFI20230920BHJP

   A61K 9/107 20060101ALI20230920BHJP

   A61K 47/06 20060101ALI20230920BHJP

   A61K 47/10 20170101ALI20230920BHJP

   A61K 47/14 20170101ALI20230920BHJP

   A61P 17/02 20060101ALI20230920BHJP

【ＦＩ】

A61K31/437

A61K9/107

A61K47/06

A61K47/10

A61K47/14

A61P17/02

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023514920

(86)(22)【出願日】2021-09-02

(85)【翻訳文提出日】2023-03-22

(86)【国際出願番号】 CN2021116114

(87)【国際公開番号】W WO2022048580

(87)【国際公開日】2022-03-10

(31)【優先権主張番号】202010916364.X

(32)【優先日】2020-09-03

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521299961

【氏名又は名称】スージョウ アーク バイオファーマシューティカル カンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100120891

【弁理士】

【氏名又は名称】林 一好

(74)【代理人】

【識別番号】100165157

【弁理士】

【氏名又は名称】芝 哲央

(74)【代理人】

【識別番号】100205659

【弁理士】

【氏名又は名称】齋藤 拓也

(74)【代理人】

【識別番号】100126000

【弁理士】

【氏名又は名称】岩池 満

(74)【代理人】

【識別番号】100185269

【弁理士】

【氏名又は名称】小菅 一弘

(72)【発明者】

【氏名】ペン チェン

(72)【発明者】

【氏名】リー ユーピン

(72)【発明者】

【氏名】チョウ チュンヤン

(72)【発明者】

【氏名】ゾウ ガン

(72)【発明者】

【氏名】ユアン ハイチン

(72)【発明者】

【氏名】ウー チェン ジム

【テーマコード（参考）】

4C076

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C076AA17

4C076BB31

4C076CC19

4C076DD09F

4C076DD34

4C076DD37

4C076DD37R

4C076DD39N

4C076EE23F

4C076FF12

4C076FF16

4C076FF34

4C076FF39

4C076FF43

4C076GG41

4C086AA01

4C086AA02

4C086AA10

4C086CB05

4C086MA03

4C086MA05

4C086MA22

4C086MA63

4C086NA10

4C086ZA89

4C086ZB11

(57)【要約】

ＡＫ３２８７製剤及びその製造方法並びに使用であって、前記製剤は、質量百分率で、ＡＫ３２８７ ０．０５～２０％と、吸収促進剤０～３０％と、油相物質５～９９．９５％と、乳化剤０～２５％と、防腐剤０～５％と、水０～７０％とを含み、ＡＫ３２８７の構造は、図示のとおりである。前記製剤中のＡＫ３２８７分子は皮膚における曝露量が高く、前記製剤は、瘢痕部の皮膚の厚さ、及び瘢痕部の皮膚の最大厚さと正常な皮膚の厚さの比を低減するとともに、皮膚におけるＴＧＦ－β及びＩ型コラーゲンの相対密度を低減することができる。
【化１】

【選択図】図４

【特許請求の範囲】

【請求項1】

質量百分率で、ＡＫ３２８７ ０．０５～２０％と、吸収促進剤０～３０％と、油相物質５～９９．９５％と、乳化剤０～２５％と、防腐剤０～５％と、水０～７０％とを含み、ＡＫ３２８７の構造は

【化1】

であることを特徴とするＡＫ３２８７製剤。

【請求項2】

ＡＫ３２８７ ０．１～２０％と、吸収促進剤２～３０％と、油相物質１０～３５％と、乳化剤５～２５％と、防腐剤０．１～５％と、水３０～７０％とを含み、
好ましくは、ＡＫ３２８７ ０．５～１５％と、吸収促進剤５～１５％と、油相物質１０～３０％と、乳化剤８～２０％と、防腐剤０．７５～２％と、水４０～６０％とを含み、
又は、ＡＫ３２８７ ０．５～１５％と、吸収促進剤５～１５％と、油相物質１５～３０％と、乳化剤１０～２０％と、防腐剤０．２～２％と、水４０～６０％とを含むことを特徴とする請求項１に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項3】

ＡＫ３２８７ ２～１０％と、吸収促進剤６～１２％と、油相物質１２～２２％と、乳化剤１０～１６％と、防腐剤０．５～１．５％と、水４５～５５％とを含み、
又は、ＡＫ３２８７ ２～８％と、吸収促進剤６～１０％と、油相物質１５～２５％と、乳化剤１２～１６％と、防腐剤０．２～１％と、水４５～５５％とを含むことを特徴とする請求項１に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項4】

前記吸収促進剤は、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルスルホキシド及びラウロカプラムから選ばれ、好ましくは、ジエチレングリコールモノエチルエーテルであることを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項5】

前記油相物質は、流動パラフィン、オクタデカノール、ヘキサデカノール、ワセリン、シリコーン、ジメチコン及びミツロウのうちの１つ以上であり、好ましくは、前記油相物質は、流動パラフィンとオクタデカノールの組み合わせであり、前記流動パラフィンとオクタデカノールの質量比は、１．５～３：１であり、好ましくは、２～３：１であることを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項6】

前記乳化剤は、ポリエチレングリコール－７ステアレート、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン（２１）ステアリルエーテル、セテアリルグルコシド及びポリソルベート－８０のうちの１つ以上であり、好ましくは、ポリエチレングリコール－７ステアレートであることを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項7】

前記防腐剤は、ベンジルアルコール、メチルパラベン、エチルパラベン、塩化ベンザルコニウム及びクロレトンのうちの１つ以上であり、好ましくは、ベンジルアルコールであることを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項8】

前記製剤は、エマルションであることを特徴とする請求項１～３のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤。

【請求項9】

水及び吸収促進剤を量り取り、均一に混合し、６０～８５℃に、好ましくは、６０～７０℃に加熱し、均質化速度を１０００～１００００ｒｐｍに、好ましくは２０００～６０００ｒｐｍに設定し、ＡＫ３２８７を加え、３～１０分間均質化して、薬物含有水相溶液を得るステップ（１）と、
油相物質及び乳化剤を量り取り、６０～８０℃に加熱し、均一に混合して、油相溶液を得るステップ（２）と、
均質化速度を１５００～５０００ｒｐｍ、好ましくは、４０００～５０００ｒｐｍに設定し、ステップ（２）で得られた油相溶液を、ステップ（１）で得られた薬物含有水相溶液に加え、５～２０分間、好ましくは、５～１０分間均質化し、加熱を停止し、撹拌速度を５０～５００ｒｐｍに、好ましくは、２００～５００ｒｐｍ設定して持続的に撹拌し、材料温度が４０～６０℃に下がる時に防腐剤を加え、材料が室温に冷却するまで持続的に撹拌して、ＡＫ３２８７製剤を得るステップ（３）とを含む請求項１～８のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤の製造方法。

【請求項10】

肥厚性瘢痕又はケロイドを予防又は治療するための薬物の製造における請求項１～８のいずれか１項に記載のＡＫ３２８７製剤の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本発明は、２０２０年９月３日に中国で提出された、名称が「ＡＫ３２８７製剤及びその製造方法並びに使用」で、出願番号が２０２０１０９１６３６４．Ｘである発明特許出願の優先権を主張し、当該特許出願を全体として参照により本明細書に組み込む。

【0002】

本発明は、薬物製剤に関し、具体的には、肥厚性瘢痕を予防又は治療するためのＡＫ３２８７製剤及びその製造方法並びに使用に関する。

【背景技術】

【0003】

線維症は、いろんな組織（肝臓（例えば、非アルコール性脂肪肝炎、糖原病ＩＸ型、肝硬変）、肺（例えば、慢性間質性肺疾患、塵肺症、珪肺症、肺気腫、肺線維症、特発性肺線維症、非特異性間質性肺炎、特発性器質化肺炎）、脈管系（例えば、びまん性間質性線維症、アテローム性動脈硬化）、心臓（例えば、心臓線維症（ｃａｒｄｉａｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、心房線維症、心内膜心筋線維症）、皮膚（例えば、ケロイド、腎性全身性線維症、強皮症）、関節及び間質性組織（例えば、関節線維症、デュピュイトラン拘縮（Ｄｕｐｕｙｔｒｅｎ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、膵臓（例えば、膵炎）、口（例えば、口腔の線維増殖性変化）、腸（例えば、クローン病関連の線維化狭窄）、脳（グリア瘢痕、細菌性髄膜炎関連の軟膜線維症）を含む）の多くの病状に関係する病原性マーカーである。線維症は、環境的傷害又は様々な損傷、例えば、電離放射線への曝露（例えば、がん治療期間中）、乳腺における嚢胞性破裂（乳腺組織の中で触知可能な病変を引き起こす）、及び、一般に創傷又は組織損傷後（例えば、損傷又は手術後）のコラーゲンの過剰な沈着によって引き起こされる。従来の抗線維化治療薬はピルフェニドン（ｐｉｒｆｅｎｉｄｏｎｅ）、ニンテダニブ（ｎｉｎｔｅｄａｎｉｂ）を含み、しかし、様々な線維症の不可逆という特性及び従来の治療法の治療効果が限られていることで、このような病状には新たな治療薬又は他の治療方法がなおも必要である。

【0004】

肥厚性瘢痕（Ｈｙｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ Ｓｃａｒ、ＨＳ）は、深刻な皮膚の線維性疾患であり、その形成は異常な創傷癒合によって引き起こされ、病理学的なプロセスである。肥厚性瘢痕は主に手術、皮膚外傷、炎症などの回復後に形成され、一般的な瘢痕の１つである。肥厚性瘢痕の中では線維芽細胞が異常に活発しており、大量に増殖することで、コラーゲンが過剰に合成され、細胞外基質の中に沈着され、線維芽細胞の移動は患者の患部に耐え難い痒みと痛みを引き起こす。不完全な統計によると、世界中に、瘢痕の影響を受けている者は毎年８０００万人を超えている。米国だけでも、毎年４００万以上の人は深刻な外傷を受け、２００万以上の人は火傷を負わされる。火傷後肥厚性瘢痕の発生率は約９２％であり、肥厚性瘢痕は患者の損傷部の皮膚隆起、赤み、痒み、痛みを引き起こし、ひいては腱拘縮又は関節脱臼が生じることで、運動機能障害と精神障害を引き起こして、患者の容貌、筋肉機能及びメンタルヘルスに深刻な影響を与えるため、患者の生活の質に影響を与える最大の要因の１つであり、家庭と社会に重い負担をもたらす。現在、臨床では、予防的療法及び治療的療法を含め様々な方法による単独又は併用治療が行われているが、効果がまだ優れない。予防的療法は、主に圧迫療法、フラボン療法を含む。圧迫療法では、患者の患部に包帯を巻き付けるため、患者に苦しみを与える。フラボン療法では、体内のホルモン分泌障害を引き起こす可能性があり、治療的療法は、ステロイドホルモンの注射、瘢痕の手術切除、凍結、照射、及びレーザー治療などを含む。そのうち、ホルモン療法は、患者のホルモン分泌を取り乱し、手術切除、凍結は、患者に二次的な痛みを与え、これらの治療法には、色素沈着性変化、毛細血管拡張、局所皮膚の萎縮壊死などの他の副作用もある。したがって、肥厚性瘢痕を予防又は治療することができる薬物又は治療方法を開発することは急遽必要である。

【発明の概要】

【発明が解決しようとする課題】

【0005】

本発明は、前記技術的課題を解決するために、瘢痕の外観を著しく改善し、瘢痕の形成を減少することができ、皮膚の肥厚性瘢痕線維症に有意な治療効果がある、ＡＫ３２８７低分子を含有する製剤を提供する。

【課題を解決するための手段】

【0006】

本発明は、前記技術的課題を解決するために、質量百分率で、ＡＫ３２８７ ０．０５～２０％と、吸収促進剤０～３０％と、油相物質５～９９．９５％と、乳化剤０～２５％と、防腐剤０～５％と、水０～７０％とを含み、ＡＫ３２８７の構造は

【化1】

であることを特徴とするＡＫ３２８７製剤を提供する。

【0007】

好ましくは、前記製剤は、ＡＫ３２８７ ０．１～２０％と、吸収促進剤２～３０％と、油相物質１０～３５％と、乳化剤５～２５％と、防腐剤０．１～５％と、水３０～７０％とを含む。

【0008】

より好ましくは、前記製剤は、ＡＫ３２８７ ０．５～１５％と、吸収促進剤５～１５％と、油相物質１０～３０％と、乳化剤８～２０％と、防腐剤０．７５～２％と、水４０～６０％とを含む。

【0009】

又は、より好ましくは、前記製剤は、ＡＫ３２８７ ０．５～１５％と、吸収促進剤５～１５％と、油相物質１５～３０％と、乳化剤１０～２０％と、防腐剤０．２～２％と、水４０～６０％とを含む。

【0010】

さらに好ましくは、前記製剤は、ＡＫ３２８７ ２～１０％と、吸収促進剤６～１２％と、油相物質１２～２２％と、乳化剤１０～１６％と、防腐剤０．５～１．５％と、水４５～５５％とを含む。

【0011】

又は、さらに好ましくは、前記製剤は、ＡＫ３２８７ ２～８％と、吸収促進剤６～１０％と、油相物質１５～２５％と、乳化剤１２～１６％と、防腐剤０．２～１％と、水４５～５５％とを含む。

【0012】

好ましくは、前記吸収促進剤は、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルスルホキシド及びラウロカプラムから選ばれ、好ましくは、ジエチレングリコールモノエチルエーテルである。

【0013】

好ましくは、前記油相物質は、流動パラフィン、オクタデカノール、ヘキサデカノール、ワセリン、シリコーン、ジメチコン及びミツロウのうちの１つ以上である。より好ましくは、前記油相物質は、流動パラフィンとオクタデカノールの組み合わせであり、前記流動パラフィンとオクタデカノールの質量比は、１．５～３：１であり、好ましくは、２～３：１である。

【0014】

好ましくは、前記乳化剤は、ポリエチレングリコール－７ステアレート（すなわち、ステアリン酸ＰＥＧ－７）、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン（２１）ステアリルエーテル、セテアリルグルコシド及びポリソルベート－８０のうちの１つ以上である。より好ましくは、ポリエチレングリコール－７ステアレートである。

【0015】

好ましくは、前記防腐剤は、ベンジルアルコール、メチルパラベン、エチルパラベン、塩化ベンザルコニウム及びクロレトンのうちの１つ以上である。より好ましくは、ベンジルアルコールである。

【0016】

好ましくは、前記製剤は、エマルションである。

【0017】

本発明は、さらに、前記いずれかのＡＫ３２８７製剤の製造方法を提供し、前記方法は、
水及び吸収促進剤を量り取り、均一に混合し、６０～８５℃（好ましくは、６０～７０℃）に加熱し、均質化速度を１０００～１００００ｒｐｍ（好ましくは、２０００～６０００ｒｐｍ）に設定し、ＡＫ３２８７を加え、３～１０分間均質化して、薬物含有水相溶液を得るステップ（１）と、
油相物質及び乳化剤を量り取り、６０～８０℃に加熱し、均一に混合して、油相溶液を得るステップ（２）と、
均質化速度を１５００～５０００ｒｐｍ（好ましくは、４０００～５０００ｒｐｍ）に設定し、ステップ（２）で得られた油相溶液を、ステップ（１）で得られた薬物含有水相溶液に加え、５～２０分間（好ましくは、５～１０分間）均質化し、加熱を停止し、撹拌速度を５０～５００ｒｐｍ（好ましくは、２００～５００ｒｐｍ）に設定して持続的に撹拌し、材料温度が４０～６０℃に下がる時に防腐剤（好ましくは、ベンジルアルコール）を加え、材料が室温に冷却するまで持続的に撹拌して、ＡＫ３２８７製剤を得るステップ（３）とを含む。

【0018】

本発明は、さらに、肥厚性瘢痕又はケロイドを予防又は治療するための薬物の製造における前記いずれかのＡＫ３２８７製剤の使用を提供する。

【発明の効果】

【0019】

本発明によって提供されるＡＫ３２８７低分子を含有する製剤では、ＡＫ３２８７の皮膚における曝露量が高く、瘢痕部の皮膚の厚さ、及び瘢痕部の皮膚の最大厚さと正常な皮膚の厚さの比を有意に低減することができ、瘢痕の外観を著しく改善し、瘢痕の形成を減少することができる。また、本発明のＡＫ３２８７製剤は、皮膚におけるＴＧＦ－β及びＩ型コラーゲンの相対密度を有意に低減することができ、皮膚の肥厚性瘢痕線維症に有意な治療効果がある。

【図面の簡単な説明】

【0020】

【図1】ブタの体重の変化を示す。

【図2】ＡＫ３２８７の血漿におけるＰＫ分析を示す。

【図3】ＡＫ３２８７の皮膚におけるＰＫ分析を示す。

【図4】デュロック種ブタの瘢痕部の皮膚の厚さの百分率の変化を示す。

【図5】瘢痕部の皮膚の最大厚さと正常な皮膚の厚さの比を示す。

【図6】皮膚におけるＴＧＦ－βの相対密度を示す。

【図7】皮膚におけるＩ型コラーゲンの相対密度を示す。

【発明を実施するための形態】

【0021】

本発明は、質量百分率で、ＡＫ３２８７ ０．０５～２０％と、吸収促進剤０～３０％と、油相物質５～９９．９５％と、乳化剤０～２５％と、防腐剤０～５％と、水０～７０％とを含むＡＫ３２８７製剤を提供する。

【0022】

好ましい一実施形態において、前記製剤は、質量百分率で、ＡＫ３２８７ ０．１～２０％と、吸収促進剤２～３０％と、油相物質１０～３５％と、乳化剤５～２５％と、防腐剤０．１～５％と、水３０～７０％とを含む。

【0023】

好ましい一実施形態において、前記ＡＫ３２８７の質量百分率での含有量は、０．０５％、０．１％、０．２％、０．５％、１％、２％、４％、５％、８％、１０％、１５％、１８％又は２０％であり、好ましくは、０．２％、０．５％、１％、２％、４％、５％、８％、１０％又は１５％である。より好ましくは、０．５％、１％、２％、４％、５％、８％又は１０％であり、さらに好ましくは、２％、４％、５％又は８％である。

【0024】

好ましい一実施形態において、前記吸収促進剤は、ジエチレングリコールモノエチルエーテル、ジメチルスルホキシド又はラウロカプラムであってもよく、好ましくは、ジエチレングリコールモノエチルエーテルであり、吸収促進剤の質量百分率での含有量は、０％、０．５％、１％、２％、５％、８％、１０％、１５％、２０％、２５％又は３０％であり、好ましくは、２％、５％、６％、８％、１０％、１２％、１５％又は２０％である。より好ましくは、５％、６％、８％、１０％又は１２％である。

【0025】

好ましい一実施形態において、前記油相物質は、流動パラフィン、オクタデカノール、ヘキサデカノール、ワセリン、シリコーン、ジメチコン及びミツロウのうちの１つ以上であってもよく、前記油相物質の質量百分率での含有量は、５％、１０％、１２％、１５％、１８％、２０％、２２％、２５％、３０％、３５％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％、９９．９％又は９９．９５％であり、好ましくは、１２％、１５％、１８％、２０％、２２％、２５％、３０％又は３５％である。より好ましくは、１２％、１５％、１８％、２２％又は２５％であり、そのうち、流動パラフィンは、パラフィン油とも呼ばれ、鉱油の一つであり、原油から分留された無色無臭の混合物であり、主成分はＣ、Ｈで、化学元素表示はＣ_ｘＨ_ｙである。オクタデカノールは、１－オクタデカノール又はステアリルアルコールとも呼ばれる。好ましくは、前記油相物質は、流動パラフィンとオクタデカノールの組み合わせであり、前記流動パラフィンとオクタデカノールの質量比は、１．５～３：１であり、好ましくは、２～３：１である。

【0026】

前記乳化剤は、ポリエチレングリコール－７ステアレート、ドデシル硫酸ナトリウム、ポリオキシエチレン（２１）ステアリルエーテル、セテアリルグルコシド及びポリソルベート－８０のうちの１つ以上であってもよく、好ましくは、ポリエチレングリコール－７ステアレートであり、前記乳化剤の質量百分率での含有量は、０％、１％、２％、５％、８％、１０％、１２％、１４％、１５％、１６％、１８％、２０％又は２５％であり、好ましくは、５％、８％、１０％、１２％、１４％、１５％、１６％、１８％、２０％又は２５％である。より好ましくは、１０％、１２％、１４％、１５％、１６％、１８％又は２０％である。

【0027】

好ましい一実施形態において、前記水の質量百分率での含有量は、０％、１０％、２０％、３０％、４０％、４５％、５０％、５１．５％、５３．５％、５５％、６０％、６５％又は７０％であり、好ましくは、４５％、５０％、５１．５％、５３．５％、５５％又は６０％である。

【0028】

好ましい一実施形態において、前記防腐剤は、ベンジルアルコール、メチルパラベン、エチルパラベン、塩化ベンザルコニウム及びクロレトンのうちの１つ以上であってもよく、好ましくは、ベンジルアルコールであり、前記ベンジルアルコールの質量百分率での含有量は、０％、０．１％、０．２％、０．５％、０．７５％、１％、１．５％、２％又は５％であり、好ましくは、０．１％、０．２％、０．５％、０．７５％、１％、１．５％、２％又は５％であり、より好ましくは０．７５％、０．２％、０．５％、１％、１．５％又は２％である。

【0029】

好ましい一実施形態において、前記製剤は、エマルションである。

【0030】

本発明は、さらに、前記いずれかのＡＫ３２８７製剤の製造方法を提供し、前記方法は、
水及び吸収促進剤を量り取り、均一に混合し、６０～８５℃（好ましくは、６０～７０℃）に加熱し、均質化速度を１０００～１００００ｒｐｍ（好ましくは、２０００～６０００ｒｐｍ）に設定し、ＡＫ３２８７を加え、３～１０分間均質化して、薬物含有水相溶液を得るステップ（１）、
油相物質及び乳化剤を量り取り、６０～８０℃に加熱し、均一に混合して、油相溶液を得るステップ（２）、
均質化速度を１５００～５０００ｒｐｍ（好ましくは、４０００～５０００ｒｐｍ）に設定し、ステップ（２）で得られた油相溶液を、ステップ（１）で得られた薬物含有水相溶液に加え、５～２０分間（好ましくは、５～１０分間）均質化し、加熱を停止し、撹拌速度を５０～５００ｒｐｍ（好ましくは、２００～５００ｒｐｍ）に設定して持続的に撹拌し、材料温度が４０～６０℃に下がる時に防腐剤を加え、材料が室温に冷却するまで持続的に撹拌してＡＫ３２８７製剤を得るステップ（３）とを含む。

【0031】

最後に、本発明は、さらに、肥厚性瘢痕又はケロイドを予防又は治療するための薬物の製造における前記いずれかのＡＫ３２８７製剤の使用を提供する。

【実施例】

【0032】

下記のいくつかの実施例は、例を挙げて説明するためのものに過ぎず、ここで提供される特許請求の範囲を限定するものではない。

【0033】

（実施例１～３）
ＡＫ３２８７を異なる比率で含有するエマルションであって、実施例１～３の具体的な配合は、それぞれ、以下の表１～表３に示すとおりである。

【表1】

【表2】

【表3】

【0034】

実施例１～３のＡＫ３２８７含有エマルションの製造方法であって、具体的には、以下のステップを含む。
１．薬物含有水相溶液の調製
実施例１～３の配合比率で、それぞれ、適量の水及びジエチレングリコールモノエチルエーテルを量り取り、均一に混合し、６０～７０℃に加熱し、均質化速度を２０００～６０００ｒｐｍに設定し、配合量のＡＫ３２８７を加えながら均質化し、均質化は３～１０分間である。
２．油相溶液の調製
配合量の流動パラフィン／オクタデカノール／ポリエチレングリコール－７ステアレートを量り取り、７０℃に加熱し、材料が溶解した後、均一に混合する。
３．乳化成形
均質化速度を４０００～５０００ｒｐｍに設定し、油相を薬物含有水相にゆっくりと加え、５～１０分間均質化し、加熱を停止し、撹拌速度を３００ｒｐｍに設定して持続的に撹拌し、材料温度が５０℃に下がる時に配合量のベンジルアルコールを加えて、材料が室温に冷却するまで持続的に撹拌する。

【0035】

（実施例４）
動物モデル：肥厚性瘢痕のあるデュロック種ブタモデル
１．赤デュロック種ブタの割り付けと全層皮膚切除創傷モデルの作成
約２０ｋｇの雌デュロック種ブタ１２匹を、４つの群に分け、割り付け情報は表４に示すとおりである。７日間飼育して適応させた後、いずれも明らかな異常が観察されないため、実験に組み入れる。

【0036】

採皮刀を用いてデュロック種ブタの背骨の左右両側に４ｃｍ×４ｃｍの正方形の創傷面を各３箇所作り、左右両側において採皮刀で切開する深さは、それぞれ、０．０４５インチ、０．０６０インチである。各創傷面間の間隔は４ｃｍ以上である。

【0037】

２．投与方式と用量
表４通りに創傷面毎に１ｍＬのＡＫ３２８７エマルション又は溶媒を与え、創傷に均一に塗布する。前記投与処理は１日１回である。薬物処理時間は、３日目から開始し、２１日目に終了する。

【表4】

【0038】

３．ＰＫサンプルと分析
それぞれ、４日目、９日目、１５日目、２１日目（初回投与後１日目、６日目、１２日目、１８日目）に薬物を塗布する前に、動物を麻酔した後、皮膚生検装置（１０ｍｍ）を用いて前記４つの時点でそれぞれ手術により円形の皮膚を切り落とし、頸静脈から採血して血漿を調製する。皮膚サンプルは合計４８個であり、血漿サンプルは合計で４８個であり、ＬＣ／ＭＳ法でＰＫ分析を行う。

【0039】

４．研究指標とサンプルの収集
１）２週毎に動物の体重を秤量する。

【0040】

２）０日目、１日目、３日目、５日目、７日目、１４日目、２１日目、２８日目、４２日目、５６日目、８４日目、１１２日目、１４０日目に創傷を撮影し、ソフトウェア描画で潰瘍創傷の面積を測定し、創傷の癒合所要時間を記録する。

【0041】

３）動物を安楽死させた後、創傷部の皮膚を採取し、被測定皮膚をホルマリンに入れて、ＨＥ染色で癒合状況を評価する。

【0042】

４）免疫組織化学染色でトランスフォーミング増殖因子－β（ＴＧＦ－β）及びＩ型コラーゲンの発現を評価する。

【0043】

５．結果
１）全ての投与群のブタは体重が溶媒群と有意差がなく（図１）、行動は正常である。

【0044】

２）ＰＫ分析は、ＡＫ３２８７が少量で血液に入るが（図２）、殆どが皮膚組織に保持されており（図３）、且つ高用量群は皮膚における曝露量がより高いことを示す。

【0045】

３）０．０６インチの創傷面では、溶媒群と比べて、８％ ＡＫ３２８７エマルションは、瘢痕部の皮膚の厚さの百分率変化（図４）及び最大厚さと正常な皮膚の厚さの比を有意に低減することができ、それぞれ、２４．４％、２５．０％低減している（図５）。

【0046】

４）０．０６インチの創傷面では、溶媒群と比べて、８％ ＡＫ３２８７エマルションは、皮膚におけるＴＧＦ－β及びＩ型コラーゲンの相対密度を有意に低減することができ、それぞれ、４３．５％、５４．１％低減している（図６、図７）。

【0047】

前記各図でいずれもｐ＜０．０５は有意差があることを表し、＊はｐ＜０．０５を、＊＊はｐ＜００１を、＊＊＊はｐ＜０．００１を表す。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【国際調査報告】