特表 2023-541170 Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-09-28

(54)【発明の名称】Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/7105 20060101AFI20230921BHJP

   A61K 48/00 20060101ALI20230921BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20230921BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20230921BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230921BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20230921BHJP

   C12N 15/113 20100101ALI20230921BHJP

   C07K 14/47 20060101ALI20230921BHJP

   C07K 14/81 20060101ALI20230921BHJP

【ＦＩ】

A61K31/7105

A61K48/00

A61P1/16

A61P29/00

A61P35/00

A61P1/16 101

A61P43/00 105

C12N15/113 Z ZNA

C07K14/47

C07K14/81

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023516545

(86)(22)【出願日】2021-09-14

(85)【翻訳文提出日】2023-04-26

(86)【国際出願番号】 US2021050247

(87)【国際公開番号】W WO2022060721

(87)【国際公開日】2022-03-24

(31)【優先権主張番号】63/078,658

(32)【優先日】2020-09-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/180,487

(32)【優先日】2021-04-27

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】512219840

【氏名又は名称】アローヘッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100099759

【弁理士】

【氏名又は名称】青木 篤

(74)【代理人】

【識別番号】100123582

【弁理士】

【氏名又は名称】三橋 真二

(74)【代理人】

【識別番号】100117019

【弁理士】

【氏名又は名称】渡辺 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100141977

【弁理士】

【氏名又は名称】中島 勝

(74)【代理人】

【識別番号】100138210

【弁理士】

【氏名又は名称】池田 達則

(74)【代理人】

【識別番号】100134784

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 和美

(72)【発明者】

【氏名】ドーン クリスティアンソン

(72)【発明者】

【氏名】ジェイムズ シー．ハミルトン

(72)【発明者】

【氏名】ブルース ギブン

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4C084AA13

4C084NA14

4C084ZA75

4C084ZA76

4C084ZB11

4C084ZB21

4C084ZB26

4C086AA01

4C086AA02

4C086EA16

4C086MA01

4C086MA04

4C086NA14

4C086ZA75

4C086ZA76

4C086ZB11

4C086ZB21

4C086ZB26

4H045AA10

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA56

4H045EA20

(57)【要約】

アルファ－１アンチトリプシン（ＡＡＴ）のＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象において、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を含む医薬組成物を使用して肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法を記載する。本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を含む医薬組成物は、ＰｉＺＺ変異を有するヒト対象に投与された場合、可溶性及び不溶性Ｚ－ＡＡＴタンパク質の両方を含めた肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる。かかる低下により、ＡＡＴ欠乏症と関連する肝疾患、例えば、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、線維化、劇症肝不全、及び他の肝臓関連の疾患の治療につながり得る。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

アルファ－１アンチトリプシンのＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法であって、
ａ．前記対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物の初回投与を、前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて施すこと、
ｂ．前記対象に対して、前記初回投与の約４週または約１か月後に、前記医薬組成物の第二回投与を施すこと、及び
ｃ．前記対象に対して、前記第二回投与の約１２週または約３か月後に、前記医薬組成物の第三回投与を施すこと
を含む前記方法であり、前記投与が、皮下注射によって施される、前記方法。

【請求項2】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約２５ｍｇ～約３００ｍｇである、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約２５ｍｇ～約２００ｍｇである、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約１００ｍｇ～約２００ｍｇである、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約１００ｍｇである、請求項１に記載の方法。

【請求項6】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約２００ｍｇである、請求項１に記載の方法。

【請求項7】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約２００ｍｇ以下である、請求項１に記載の方法。

【請求項8】

可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項10】

不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル及び可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの両方が低下する、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

さらに、前記第三回投与の後にさらなる投与を施すことを含む、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法であって、前記さらなる投与が、その後約１２週ごとまたは約３か月ごとに施される、前記方法。

【請求項12】

前記肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、前記初回投与から６か月以内に低下する、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

前記肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、前記初回投与から約１年以内に低下する、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記３回のみの投与の施用後に低下する、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記肝臓が、線維化の悪化を示さないか、または改善を示す、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

肝臓酵素であるＡＬＴ、ＧＧＴ、またはその両方が低下する、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

線維形成マーカーであるＰｒｏ－Ｃ３が減少する、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

門脈性の肝炎が減少する、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

トランジェントエラストグラフィ（ＦｉｂｒｏＳｃａｎ（登録商標））による肝硬度の非侵襲的測定値が改善される、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

前記対象が、さらに、ＡＡＴＤの治療用のさらなる治療薬を投与される、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

前記対象が、さらに、内因的に分泌されるＡＡＴタンパク質の欠乏によって引き起こされる肺損傷、肺気腫、または他の肺疾患もしくは障害の治療のための治療薬を投与される、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

前記さらなる治療薬が、ヒトＡＡＴタンパク質、精製ヒトアルファ－１プロテイナーゼインヒビター、または組み換えＡＡＴタンパク質を含む、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

前記医薬組成物が、キット、容器、パック、ディスペンサー、プレフィルドシリンジ、またはバイアルに包装される、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記医薬組成物が、表３．１または表３．２に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含むか、それからなるか、またはそれから本質的になる、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記医薬組成物の前記１回以上の投与の施用が、前記対象によって行われる、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記医薬組成物の前記１回以上の投与の施用が、医療専門家によって行われる、請求項１～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

前記対象が、成人である、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

アルファ－１アンチトリプシンのＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象におけるＡＡＴＤの治療方法であって、
ａ．前記対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物の初回投与を、前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて施すこと、
ｂ．前記対象に対して、前記初回投与の約４週または約１か月後に、前記医薬組成物の第二回投与を施すこと、及び
ｃ．前記対象に対して、前記第二回投与の約１２週または約３か月後に、前記医薬組成物の第三回投与を施すこと
を含む前記方法であり、前記投与が、皮下注射によって施される、前記方法。

【請求項29】

前記ＡＡＴＤによって引き起こされる状態または疾患が、肝疾患である、請求項２８に記載の方法。

【請求項30】

前記肝疾患が、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、線維化、または劇症肝不全である、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約１００ｍｇ～約２００ｍｇである、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

前記ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記用量が、約２００ｍｇ以下である、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

モノマー（可溶性）の肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する、請求項２８～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する、請求項２８～３３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項35】

不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル及び可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの両方が低下する、請求項２８～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

さらに、前記第三回投与の後にさらなる投与を施すことを含む、請求項２８～３５のいずれか１項に記載の方法であって、前記さらなる投与が、その後約１２週ごとまたは約３か月ごとに施される、前記方法。

【請求項37】

前記肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、前記初回投与から約６か月以内に低下する、請求項２８～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

前記肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、前記初回投与から約１年以内に低下する、請求項２８～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

前記Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の前記３回のみの投与の施用後に低下する、請求項２８～３８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）を含む前記医薬組成物の前記ヒト対象への前記投与により、
（ｉ）線維化の低下、
（ｉｉ）門脈周囲肝細胞のレベルの低下、
（ｉｉｉ）血清Ｚ－ＡＡＴの低下、
（ｉｖ）全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、
（ｖ）可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、
（ｖｉ）不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、
（ｖｉｉ）ＡＬＴの低下、
（ｖｉｉｉ）ＧＧＴの低下、
（ｉｘ）Ｐｒｏ－Ｃ３の低下、
（ｘ）脂肪症の組織学的改善、または
（ｘｉ）それらの組み合わせ
がもたらされる、請求項１～３９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

前記血清Ｚ－ＡＡＴの低下が、少なくとも約７０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項42】

前記血清Ｚ－ＡＡＴの低下が、約７０％～約１００％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項43】

前記全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、少なくとも約７０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項44】

前記全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、約７０％～約１００％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項45】

前記可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、少なくとも約５０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項46】

前記可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、約５０％～約９７％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項47】

前記不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、少なくとも約４０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項48】

前記不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下が、約４０％～約９７％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項49】

前記ＡＬＴの低下が、少なくとも約３０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項50】

前記ＡＬＴの低下が、約３０％～約７５％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項51】

前記ＧＧＴの低下が、少なくとも約２５％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項52】

前記ＧＧＴの低下が、約２５％～約８５％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項53】

前記線維化の低下が、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）によって測定して、少なくとも約１５％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項54】

前記線維化の低下が、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）によって測定して、約１５％～約９０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項55】

前記Ｐｒｏ－Ｃ３の低下が、少なくとも約１５％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項56】

前記Ｐｒｏ－Ｃ３の低下が、約１５％～約９０％である、請求項４０に記載の方法。

【請求項57】

前記ヒト対象が、脂肪症の組織学的改善を有する、請求項４０に記載の方法。

【請求項58】

前記表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）を含む前記医薬組成物の前記ヒト対象への前記投与により、線維化、門脈炎症、インターフェイス肝炎、全門脈管病変、ＰＡＳ＋Ｄゾーン位置、ゾーン１「小球」門脈周辺病変、またはそれらの任意の組み合わせの改善がもたらされる、請求項１～５７のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本ＰＣＴ出願は、２０２０年９月１５日に出願された米国仮出願第６３／０７８，６５８号及び２０２１年４月２７日に出願された米国仮出願第６３／１８０，４８７号の優先権の利益を主張する。当該仮出願の両方は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。

【0002】

電子的に提出された配列表の参照
本出願とともに出願された、ＡＳＣＩＩテキストファイル（名称３８１７＿０８４ＰＣ０２＿ＳｅｑｕｅｎｃｅＬｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔ、サイズ：５，７２１バイト、及び作成日：２０２１年９月１２日）で電子的に提出された配列表の内容は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。

【0003】

本明細書に開示するのは、アルファ－１アンチトリプシン遺伝子の発現を阻害するＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）剤を含む医薬組成物を使用して、アルファ－１アンチトリプシン欠損症（ＡＡＴＤ）のＺ型変異を有するヒト対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法である。

【背景技術】

【0004】

アルファ－１アンチトリプシン（ＡＡＴ、α１－アンチトリプシン、またはＡ１ＡＴ）は、ＳＥＲＰＩＮＡ１遺伝子によってヒトにおいてコードされるセルピンスーパーファミリーに属するプロテアーゼインヒビターである。正常なＡＡＴタンパク質は、主に肝細胞によって肝臓で合成され、血中に分泌される血中糖タンパク質プロテアーゼインヒビターである。ＡＡＴの既知の生理学的機能は、好中球プロテアーゼを阻害することであり、これは、炎症時の非特異的損傷から宿主組織を保護する働きをする。

【0005】

ＡＡＴＤは、常染色体共優性遺伝性疾患であり、これにより、ＡＡＴの血中レベルが低くなり、成人で早期肺疾患、小児及び成人で肝疾患を引き起こす。ＡＡＴＤの有病率の範囲は、約１，５００～５，０００人に１人であり、ヨーロッパ系の人が最も多く罹患する。

【0006】

ＡＡＴＤの臨床的に最も重要で深刻な形態は、グルタミン酸をコードする一塩基多型が当該成熟タンパク質の３４２位でリジンに置換されている（Ｇｌｕ３４２Ｌｙｓ）Ｚ型変異（ＰｉＺＺ遺伝子型と呼ばれる）のホモ接合性によって引き起こされる。Ｚ型変異対立遺伝子は、単一点突然変異により、変異Ｚ型ＡＡＴタンパク質（「Ｚ－ＡＡＴタンパク質」）を、フォールディング異常を起こしやすい状態にし、肝細胞の小胞体（ＥＲ）での細胞内保持を引き起こす。よりまれな他の突然変異もまた、ミスフォールドして蓄積したタンパク質を肝細胞にもたらす。変異型Ｚ－ＡＡＴタンパク質モノマーは、「小球」と呼ばれることもあるポリマー凝集体を蓄積することができる。ポリマーのＺ－ＡＡＴは、ＥＲに圧力を加え、連続的な肝細胞の損傷と回復のサイクルを引き起こし、線維化、肝硬変、及び肝細胞癌のリスクの増加につながる。さらに、血中抗プロテアーゼ活性の欠如は、特に肺炎症の場合に、肺を好中球エラスターゼによる損傷に対して無防備な状態にし、呼吸器合併症、例えば、肺気腫または他の肺疾患の発症を引き起こす。

【0007】

ホモ接合性ＰｉＺＺ遺伝子型を有する患者は、機能性ＡＡＴが極端に欠乏している。精製ヒトＡＡＴを使用したＡＡＴ増強療法を毎週使用することが、罹患患者の肺損傷予防に役立つ。現在市販されているかかる製剤としては、例えば、ＰＲＯＬＡＳＴＩＮ（登録商標）－Ｃ、ＰＲＯＬＡＳＴＩＮ（登録商標）、ＧＬＡＳＳＩＡ（商標）、ＡＲＡＬＡＳＴ（登録商標）ＮＰ、及びＺＥＭＡＩＲＡ（登録商標）が挙げられる。しかしながら、精製ＡＡＴの投与は、内因的に分泌されるＡＡＴの欠如または低レベルによって引き起こされる肺損傷を改善または予防するのに役立ち得るが、ＡＡＴＤ患者（ポリマー形成をもたらすＡＡＴ変異を有する）は、過剰なフォールディング異常のＡＡＴタンパク質の堆積及び蓄積によって引き起こされる小胞体肝蓄積症を引き起こしやすいままである。肝細胞において「小球」コンフォメーションで蓄積されたＺ－ＡＡＴタンパク質は、ＡＡＴＤ肝疾患の周知の組織学的特徴であり、ＡＡＴＤ患者における肝臓細胞の損傷及び死ならびに慢性肝障害を含めた肝損傷の誘発に関与するタンパク質毒性効果につながると考えられている（例えば、Ｄ．Ｌｉｎｄｂｌａｄ ｅｔ ａｌ．，Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ ２００７，４６：１２２８－１２３５参照）。ＡＡＴを産生しないヌル／ヌル患者は重度の肺疾患を発症するが、正常な肝臓形態を有することが報告されており、血中ＡＡＴの欠如ではなく、変異型ＡＡＴの蓄積が肝疾患につながるという証拠を提供している（Ｆｅｌｄｍａｎ，Ｇ．ｅｔ ａｌ，Ｔｈｅ Ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ Ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ ｉｎ ａｌｐｈａ－１ ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｗｉｔｈ ｇｅｎｏｔｙｐｅ Ｐｉ＿，Ｇｕｔ．１９７５；１６：７９６－７９９）。

【0008】

ＡＡＴＤにより、小児及び成人の患者での肝疾患及び成人の患者での早期発症型の肺気腫が生じやすくなる。ＡＡＴＤ患者は、多くの場合肝疾患を発症し、幼年期であっても重篤または致命的になり得る。一部のＡＡＴＤ患者は、病初では検出を逃れるが、最終的に線維化が蓄積し、臨床的に明らかな肝疾患に至る。肝臓の損傷の臨床症状としては、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、線維化、さらには劇症肝不全が挙げられる。

【0009】

肝細胞におけるＺ－ＡＡＴタンパク質の蓄積は、ＡＡＴＤ患者の進行性肝疾患の原因として明確に特定されている。肝細胞における変異タンパク質蓄積の排除により、肝疾患の進行が停止する可能性がある。該変異タンパク質損傷の除去は、すでに存在する線維化の退行も可能にし得る。現在、ＡＡＴＤによって引き起こされる肝疾患の発症の予防、進行の遅延、または他の方法での治療のための臨床的に承認された治療法はない。

【0010】

ＲＮＡｉ剤は、ＡＡＴＤ患者を治療するための有望な手段として浮上している。投薬方法は、ＲＮＡｉ剤でＡＡＴＤを治療する際に考慮すべき重要事項である。低頻度の投与は、患者にとって大切であり、服薬順守の向上につながるとともに、投与量が少ないほど、当該薬物の全体的な安全性プロファイルに有利であり得る。したがって、ＡＡＴＤの治療のための低用量、低頻度の方法が必要とされている。

【発明の概要】

【0011】

本明細書に記載するのは、ＡＡＴＤのＺ型変異を有するヒト対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法である。１つの態様では、該方法は、表２に記載の組成物を含む医薬組成物（すなわち、本明細書ではＡＤＳ－００１とも呼ばれるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、またはその塩）を、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１、またはその塩）の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにてヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、投与間隔は、例えば、約１か月または約４週である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示する方法で使用される医薬組成物は、表３．１に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（本明細書ではＡＤＳ－００１－１とも呼ばれる、もしくはその塩）または表３．２の製剤（本明細書ではＡＤＳ－００１－２とも呼ばれる）を含むか、それからなるか、またはそれから本質的になる。本明細書で使用される場合、文脈に応じて、「約」または「およそ」という用語は、所与の値または範囲の５％以内、例えば、５％、４％、３％、２％、または１％以内を意味する。

【0012】

さらに、本明細書に記載するのは、ＡＡＴＤのＺ型変異を有するヒト対象におけるＺ－ＡＡＴ肝臓タンパク質のレベルを低下させる方法であり、該方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１、またはその塩）を含む医薬組成物を、用量約５ｍｇ～約２００ｍｇにて該ヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、投与間隔は、例えば、少なくとも約１か月（すなわち、約１か月に１回の投与）である。

【0013】

本明細書にさらに記載するのは、ＡＡＴＤの治療を必要とするヒト対象におけるその治療方法であり、該方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１、またはその塩）を含む医薬組成物を、用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて該ヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、投与間隔は、例えば、約３か月（すなわち、３か月ごとの投与）である。

【0014】

同様に本明細書に記載するのは、ＡＡＴＤの治療を必要とするヒト対象におけるその治療方法であり、該方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物を、用量約５ｍｇ～約２００ｍｇにて該ヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、投与間隔は、例えば、約３か月（すなわち、３か月ごとの投与）である。

【0015】

本明細書に記載するのは、ＡＡＴＤの治療を必要とするヒト対象におけるその治療方法であり、該方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物を、用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて該ヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、初回投与後に、例えば、第二回投与が約４週または約１か月後に続き、その後、それに続く投与に関しては、投与間隔は、例えば、約３か月である。

【0016】

本明細書に記載するのは、ＡＡＴＤの治療を必要とするヒト対象におけるその治療方法であり、該方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物を、用量約５ｍｇ～約２００ｍｇにて該ヒト対象に投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、例えば、皮下に投与され、初回投与後に、例えば、第二回投与が約１か月後に続き、その後、それに続く投与に関しては、投与間隔は、例えば、約３か月である。

【0017】

いくつかの実施形態では、各投与で施されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の用量は、例えば、約２５ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、各投与で施されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の用量は、約１００ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、各投与で施されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の用量は、約１００ｍｇである。いくつかの実施形態では、各投与で施されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の用量は、約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、各投与で施されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、２００ｍｇ以下である。

【0018】

本明細書に開示する治療方法は、ＡＡＴＤを有するヒト対象における肝疾患の進行を遅延または停止させることができ、これにより線維性組織の修復を可能にすることができる。本明細書に開示する方法は、いくつかの実施形態では、ＡＡＴＤによって引き起こされる線維化、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、慢性肝炎、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、劇症肝不全、ならびに他の肝臓関連の状態及び疾患を含めたＡＡＴＤ肝疾患を治療することができる。いくつかの態様では、本明細書に開示する方法は、本明細書に開示するＡＡＴＤ肝疾患を予防すること、その発症を遅延すること、またはその症状、合併症、及び／または後遺症を改善することができる。

【0019】

本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物をヒト対象に投与することで、該対象におけるアルファ－１アンチトリプシン遺伝子の発現を阻害することができる。いくつかの実施形態では、該対象は、以前にＡＡＴＤを有すると診断されたことがあるヒトである。

【0020】

本発明の別の態様は、アルファ－１アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）の治療を必要とするヒト対象におけるその治療のための表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の使用を提供し、該使用は、該対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物を、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、毎月１回、例えば、皮下注射によって投与される。

【0021】

本発明の別の態様は、アルファ－１アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）の治療を必要とするヒト対象におけるその治療のための表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）の使用を提供し、該使用は、該対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）を含む医薬組成物を、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて投与することを含み、ここで、該医薬組成物は、３か月に１回、例えば、皮下注射によって投与される。

【0022】

いくつかの態様では、本開示は、アルファ－１アンチトリプシンのＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルを低下させる方法を提供し、該方法は、（ｉ）該対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物の初回投与を、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて施すこと、（ｉｉ）該対象に対して、該初回投与の約４週または約１か月後に該医薬組成物の第二回投与を施すこと、及び（ｉｉｉ）該対象に対して、該第二回投与の約１２週または約３か月後に該医薬組成物の第三回投与を施すことを含み、ここで、これらの投与は、皮下注射によって施される。

【0023】

いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約２５ｍｇ～約３００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約２５ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約１００ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約１００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約２００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約２００ｍｇ以下である。いくつかの態様では、可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する。いくつかの態様では、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する。いくつかの態様では、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル及び可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの両方が低下する。

【0024】

いくつかの態様では、該方法はさらに、該第三回投与の後にさらなる投与を施すことを含み、該さらなる投与は、その後約１２週ごとまたは約３か月ごとに施される。いくつかの態様では、該肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、初回投与から６か月以内に低下する。いくつかの態様では、該肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、初回投与から約１年以内に低下する。いくつかの態様では、該Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の３回のみの投与の施用後に低下する。いくつかの態様では、該肝臓は、線維化の悪化を示さないか、または改善を示す。いくつかの態様では、肝臓酵素であるＡＬＴ（アラニンアミノトランスフェラーゼ）、ＧＧＴ（γ－グルタミルトランスフェラーゼ）、またはその両方が低下する。いくつかの態様では、線維形成マーカーであるＰｒｏ－Ｃ３が低下する。いくつかの態様では、門脈性の肝炎が減少する。いくつかの態様では、トランジェントエラストグラフィ（ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標））による肝硬度の非侵襲的測定値が改善される。

【0025】

いくつかの態様では、該対象はさらに、ＡＡＴＤの治療用のさらなる治療薬を投与される。いくつかの態様では、該対象はさらに、内因的に分泌されるＡＡＴタンパク質の欠乏によって引き起こされる肺損傷、肺気腫、または他の肺疾患もしくは障害の治療のための治療薬を投与される。いくつか態様では、該さらなる治療薬は、ヒトＡＡＴタンパク質、精製ヒトアルファ－１プロテイナーゼインヒビター、または組み換えＡＡＴタンパク質を含む。

【0026】

いくつかの態様では、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物は、キット、容器、パック、ディスペンサー、プレフィルドシリンジ、またはバイアルに包装される。いくつかの態様では、該医薬組成物は、表３．１または表３．２に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含むか、それからなるか、またはそれから本質的になる。いくつかの態様では、該医薬組成物の１回以上の投与の施用は、該対象によって行われる。いくつかの態様では、該医薬組成物の１回以上の投与の施用は、医療専門家によって行われる。いくつかの態様では、該対象は、成人である。

【0027】

本開示はまた、アルファ－１アンチトリプシンのＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象におけるＡＡＴＤの治療方法を提供し、該方法は、（ｉ）該対象に対して、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物の初回投与を、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量約５ｍｇ～約３００ｍｇにて施すこと、（ｉｉ）該対象に対して、該初回投与の約４週または約１か月後に該医薬組成物の第二回投与を施すこと、及び（ｉｉｉ）該対象に対して、該第二回投与の約１２週または約３か月後に該医薬組成物の第三回投与を施すことを含み、ここで、これらの投与は、皮下注射によって施される。いくつかの態様では、該ＡＡＴＤによって引き起こされる状態または疾患は、肝疾患である。いくつかの態様では、該肝疾患は、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、線維化、または劇症肝不全である。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約１００ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの態様では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の用量は、約２００ｍｇ以下である。

【0028】

本明細書に開示する方法のいくつかの態様では、モノマー（可溶性）の肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する。いくつかの態様では、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルが低下する。いくつかの態様では、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル及び可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの両方が低下する。本明細書に開示するアルファ－１アンチトリプシンのＰｉＺＺ遺伝子型を有するヒト対象におけるＡＡＴＤの治療方法のいくつかの態様では、該方法はさらに、該第三回投与の後にさらなる投与を施すことを含み、該さらなる投与は、その後約１２週ごとまたは約３か月ごとに施される。いくつかの態様では、該肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、初回投与から約６か月以内に低下する。いくつかの態様では、該肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、初回投与から約１年以内に低下する。いくつかの態様では、該Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の３回のみの投与の施用後に低下する。

【0029】

本明細書に開示する方法のいくつかの態様では、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）を含む医薬組成物のヒト対象への投与により、（ｉ）線維化の低下、（ｉｉ）門脈周囲肝細胞のレベルの低下、（ｉｉｉ）血清Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｉｖ）全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖ）可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖｉ）不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖｉｉ）ＡＬＴの低下、（ｖｉｉｉ）ＧＧＴの低下、（ｉｘ）Ｐｒｏ－Ｃ３の低下、（ｘ）脂肪症の組織学的改善、または（ｘｉ）それらの組み合わせがもたらされる。

【0030】

いくつかの態様では、該血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの態様では、該血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％～約１００％である。いくつかの実施形態では、該血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９７％、または約９９％である。いくつかの態様では、該全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの態様では、該全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％～約１００％である。いくつかの実施形態では、該全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９７％、または約９９％である。いくつかの態様では、該可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約５０％である。いくつかの態様では、該可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５０％～約９７％である。いくつかの実施形態では、該可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％である。いくつかの態様では、該不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約４０％である。いくつかの態様では、該不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約４０％～約９７％である。いくつかの実施形態では、該不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、または約９５％である。いくつかの態様では、該ＡＬＴの低下は、少なくとも約３０％である。いくつかの態様では、該ＡＬＴの低下は、約３０％～約７５％である。いくつかの実施形態では、該ＡＬＴの低下は、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、または約７０％である。いくつかの態様では、該ＧＧＴの低下は、少なくとも約２５％である。いくつかの態様では、該ＧＧＴの低下は、約２５％～約８５％である。いくつかの実施形態では、該ＧＧＴの低下は、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、または約８０％である。いくつかの態様では、該線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）によって測定して、少なくとも約１５％である。いくつかの態様では、該線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）によって測定して、約１５％～約９０％である。いくつかの実施形態では、該線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）によって測定して、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、または約８５％である。いくつかの態様では、該Ｐｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約１５％である。いくつかの態様では、該Ｐｒｏ－Ｃ３の低下は、約１５％～約９０％である。いくつかの態様では、該ヒト対象は、脂肪症の組織学的改善を有する。いくつかの実施形態では、該Ｐｒｏ－Ｃ３の低下は、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、または約８５％である。いくつかの態様では、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）を含む医薬組成物の該ヒト対象への投与により、線維化、門脈炎症、インターフェイス肝炎、全門脈管病変、ＰＡＳ＋Ｄゾーン位置、ゾーン１「小球」門脈周辺病変、またはそれらの任意の組み合わせの改善がもたらされる。

【0031】

上記のすべての変化は、所定の閾値、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与される前の対象におけるレベル、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与されていない対象におけるレベル、またはある集団で測定される対照レベルを基準とする。線維化、門脈周囲肝細胞、血清Ｚ－ＡＡＴ、肝臓Ｚ－ＡＡＴ、可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、ＡＬＴ、ＧＧＴ、Ｐｒｏ－Ｃ３、または脂肪症の測定は、本開示に記載の通りに、または当技術分野で既知の方法を使用して行われる。

【0032】

本発明の他の目的、特徴、態様、及び利点は、以下の発明を実施するための形態、添付の図面、及び特許請求の範囲から明らかになるであろう。

【図面の簡単な説明】

【0033】

【図1A】ナトリウム塩型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）。

【図1B】ナトリウム塩型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）。

【図1C】ナトリウム塩型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）。

【図1D】ナトリウム塩型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）。

【図1E】ナトリウム塩型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）。

【図2A】遊離酸型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現。

【図2B】遊離酸型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現。

【図2C】遊離酸型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現。

【図2D】遊離酸型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現。

【図2E】遊離酸型で示される、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の化学構造表現。

【図3】表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（本明細書ではＡＤＳ－００１と呼ばれる。すなわち、センス鎖の５’末端で標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミン基にコンジュゲートしたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）の修飾センス鎖及びアンチセンス鎖の概略図。図３では、以下の略語が使用されている：ａ、ｃ、ｇ、及びｕは、２’－Ｏ－メチル修飾ヌクレオチドであり、Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、及びＵｆは、２’－フルオロ（当技術分野では２’－デオキシ－２’－フルオロとも呼ばれる）修飾ヌクレオチドであり、ｏは、ホスホジエステル結合であり、ｓは、ホスホロチオエート結合であり、ｉｎｖＡｂは、反転脱塩基残基またはサブユニットであり、（ＮＡＧ３７）ｓは、以下の化学構造を有する標的指向性三座Ｎ－アセチル－ガラクトサミンリガンドである：

【化1】

（ナトリウム塩型で示される）、または

【化2】

（遊離酸型で示される）。

【図4】実施例２に記載の最終的な第Ｉ相試験デザイン及び第Ｉ相臨床試験の用量漸増スケジュール。

【図5】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または３５ｍｇのＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート１）を投与された健常ヒト志願者（ＮＨＶ）における血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。図５～１１に示す「活性物質」とは、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を指す（表３．１に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬として投与される）。

【図6】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または単回１００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート２ｂ）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図7】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または単回２００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート３ｂ）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図8】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または単回３００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート４ｂ）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図9】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または月１回投与の３回１００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート２）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図10】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または月１回投与の３回２００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート３）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図11】実施例２に記載の第Ｉ相臨床試験からのプラセボ（全コホート）または月１回投与の３回３００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート４）を投与されたＮＨＶにおける血清ＡＡＴレベルを示すグラフ。

【図12】実施例３に記載の第ＩＩ相臨床試験の第ＩＩ相試験デザイン及び用量漸増スケジュール。

【図13】実施例３に記載の第ＩＩ相臨床試験からの３回２００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート１）を投与されたＰｉＺＺ遺伝子型の被験者における血清Ｚ－ＡＡＴレベルを示すグラフ。ｘ軸の下向きの矢印は投与のタイミングを示す。ＬＬＯＱ：定量下限。

【図14】実施例３に記載の第ＩＩ相臨床試験からの３回１００ｍｇ用量のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（コホート２）を投与されたＰｉＺＺ遺伝子型の被験者における血清Ｚ－ＡＡＴレベルを示すグラフ。ｘ軸の下向きの矢印は投与のタイミングを示す。ＬＬＯＱ：定量下限。

【発明を実施するための形態】

【0034】

ＲＮＡｉ剤
本明細書に記載の方法は、ヒト対象への医薬組成物の投与を含み、ここで、該医薬組成物は、ＡＡＴ遺伝子の発現を阻害することが可能なＲＮＡｉ剤（本明細書及び当技術分野ではＲＮＡｉ剤またはＲＮＡｉトリガーと呼ばれる）、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む組成物を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、ヒト対象への医薬組成物の投与を含み、該医薬組成物は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１とも呼ばれる、またはその医薬的に許容される塩）を含む。本開示の文脈において、「その塩」及び「その医薬的に許容される塩」という用語は、同等及び同義であると考えられる。本明細書で使用される、「含む（ｉｎｃｌｕｄｅｓ）」及び「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」という用語は同義で使用され得る。

【0035】

本明細書に開示する方法での使用に適した組成物は、ヒト対象におけるＡＡＴ遺伝子の発現を阻害するＲＮＡｉ剤、及び標的指向性部分または標的指向性基で構成される。いくつかの実施形態では、該ＲＮＡｉ剤は、表１．１及び１．２に示されるヌクレオチド配列、例えば、配列番号２のアンチセンスオリゴヌクレオチド及び配列番号４のセンスオリゴヌクレオチドを含み、該ＲＮＡｉ剤のセンス鎖、例えば、配列番号４のセンスオリゴヌクレオチドはさらに、３つの標的指向性Ｎ－アセチル－ガラクトサミン部分を含む標的指向性基に連結またはコンジュゲートされる（例えば、表Ｂ参照）。ヒト対象におけるＡＡＴ遺伝子の発現を阻害するＲＮＡｉ剤は、「ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤」と呼ばれる。「連結される」及び「コンジュゲートされる」という用語は、２つの部分、例えば、配列番号４のセンスオリゴヌクレオチドと標的指向性部分（例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン等の標的指向性アシアロ糖タンパク質受容体部分）（例えば、ＮＡＧ３７）との間の共有結合を指す。いくつかの実施形態では、「連結される」または「コンジュゲートされる」とは、固相合成プロセス（ＳＰＳＳ）のステップとして、例えば、１つ以上のＮ－アセチル－ガラクトサミン部分を含むホスホロアミダイト化合物を使用した、標的指向性部分のオリゴヌクレオチド配列への結合を指す。いくつかの実施形態では、「連結される」または「コンジュゲートされる」とは、ＳＰＳＳ後の別のステップとして、例えば、二官能性試薬を使用した、配列番号４のセンスオリゴヌクレオチドと標的指向性部分（例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン等の標的指向性アシアロ糖タンパク質受容体部分）（例えば、ＮＡＧ３７）との共有結合を指す。本明細書で使用される、「連結される」及び「コンジュゲートされる」という用語は、同義で使用される。

【0036】

一般に、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、センス鎖（パッセンジャー鎖とも呼ばれる）及びアンチセンス鎖（ガイド鎖とも呼ばれる）を含み、これらがアニールされて二重鎖を形成する。本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、配列特異的にＡＡＴ ｍＲＮＡのメッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）転写物の翻訳を低下させることまたは阻害することが可能なＲＮＡまたはＲＮＡ様（例えば、化学的に修飾されたＲＮＡ）オリゴヌクレオチド分子を含む。本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、ＲＮＡ干渉メカニズム（すなわち、哺乳類細胞のＲＮＡ干渉経路機構（ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体またはＲＩＳＣ）との相互作用を通じてＲＮＡ干渉を誘発する）を通じて、または任意の代替メカニズム（複数可）または経路（複数可）によって作用し得る。ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、その用語が本明細書で使用される場合、主にＲＮＡ干渉メカニズムを通じて作用すると考えられるが、本開示のＲＮＡｉ剤は、いかなる特定の経路にも作用機序にも拘束されることも限定されることもない。ＲＮＡｉ剤は一般に、各々１６～４９ヌクレオチド長のセンス鎖及びアンチセンス鎖で構成され、短鎖または低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、低分子ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、及びダイサー基質を含むがこれらに限定されない。

【0037】

ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖の長さは、通常は１６～４９ヌクレオチド長であり、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖の長さは、通常は１８～４９ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、該センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、１７～２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、該センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、２１～２６ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、該センス鎖及びアンチセンス鎖は、独立して、２１～２４ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、該センス鎖及び／またはアンチセンス鎖は、独立して、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、または３０ヌクレオチド長である。いくつかの実施形態では、該センス鎖及び該アンチセンス鎖は両方、２１ヌクレオチド長である。該センス鎖及びアンチセンス鎖は、同じ長さの場合もあれば、異なる長さの場合もある。該センス鎖及びアンチセンス鎖はまた、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤の一端または両端にオーバーハングヌクレオチドを形成する場合もある。

【0038】

ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、ＡＡＴ遺伝子発現を阻害、サイレンシング、またはノックダウンする。本明細書で使用される、「サイレンシングする」、「低減する」、「阻害する」、「下方制御する」、または「ノックダウンする」という用語は、ＡＡＴの発現に言及する場合、当該遺伝子の発現が、該遺伝子から転写されるＲＮＡのレベルで測定して、または該遺伝子が転写される細胞、細胞群、組織、臓器、もしくは対象におけるｍＲＮＡから翻訳されるポリペプチド、タンパク質、もしくはタンパク質サブユニットのレベルで測定して、該細胞、細胞群、組織、臓器、もしくは対象が、該ＲＮＡｉ剤で処理された場合に、処理されていない第二の細胞、細胞群、組織、臓器、もしくは対象と比較して減少することを意味する。場合によっては、該遺伝子発現の減少は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を含む組成物の投与前のヒト対象におけるＡＡＴ ｍＲＮＡまたはＡＡＴタンパク質のベースラインのレベルを、該治療を施した後のＡＡＴ ｍＲＮＡまたはＡＡＴタンパク質のレベルと比較することによって測定される。

【0039】

ＡＡＴ遺伝子の阻害、サイレンシング、またはノックダウンは、当技術分野で知られている任意の適切なアッセイまたは方法で測定され得る。本明細書に記載の非限定的な実施例、及び参照により全体として本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第ＷＯ２０１８／１３２４３２号に記載の実施例は、ＡＡＴ遺伝子発現阻害を測定するための適切なアッセイのある特定の例を提供している。正常な野生型のヒトの参照ＡＡＴ ｍＲＮＡ遺伝子転写物（ＳＥＲＰＩＮＡ１）（転写物バリアント１と呼ばれる。ＧｅｎＢａｎｋ ＮＭ＿０００２９５．４）は、配列番号１に見出され得る。

【0040】

本明細書に開示する方法での使用に適したＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、１つ以上のＮ－アセチル－ガラクトサミン部分を含む標的指向性基、例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン等の標的指向性アシアロ糖タンパク質受容体部分を含む肝臓標的基に、共有結合またはコンジュゲートされ得る。実施形態では、本明細書に開示する方法での使用に適したＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、１つ以上のＮ－アセチル－ガラクトサミン部分を含む標的指向性基に共有結合またはコンジュゲートされ、それによって表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、すなわち、配列番号６のセンス鎖及び配列番号２のアンチセンス鎖を含む二重鎖ＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）を形成する。

【0041】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、すなわち、配列番号６のセンス鎖及び配列番号２のアンチセンス鎖を含む二重鎖ＲＮＡ（二本鎖ＲＮＡ）の投与を含む。表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、表１．１（配列番号２のアンチセンス鎖）及び表１．２（配列番号４のセンス鎖）に示されるＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を含む。該Ｎ－アセチル－ガラクトサミン部分は、肝細胞の表面に存在しやすいアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰｒ）へのＡＡＴ ＲＮＡｉ剤の標的化を促進し、これにより、エンドサイトーシスまたは他の手段によるＡＡＴ ＲＮＡｉ剤の内在化がもたらされる。

【0042】

本明細書に開示する方法での使用に適し得るＡＡＴ ＲＮＡｉ剤には、ＡＡＴ ｍＲＮＡ、すなわちＡＡＴ ｍＲＮＡ標的配列の少なくとも一部に相補的な領域を有するアンチセンス鎖が含まれる。本開示の方法での使用に適したＡＡＴ ＲＮＡｉ剤及びＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、国際特許出願公開第ＷＯ２０１８／１３２４３２号に記載されており、当該公開は、前述の通り、参照により全体として本明細書に組み込まれる。

【0043】

本明細書で使用される、「配列」及び「ヌクレオチド配列」という用語は、標準的な命名法を使用して文字の連続で記載される、核酸塩基またはヌクレオチドの並びまたは順序を意味する。特に明記しない限り、ヌクレオチド配列は、左から右に５’から３’の方向で書かれている。本明細書で使用される、「核酸塩基」及び「ヌクレオチド」という用語は、当技術分野で一般に理解されているものと同じ意味を有する。したがって、本明細書で使用される「ヌクレオチド」という用語は、糖部分、塩基部分、及び共有結合した基（結合基）、例えば、ホスフェートまたはホスホロチオエートのヌクレオシド間結合基を含むグリコシドを指し、天然に存在するヌクレオチド、例えば、ＤＮＡまたはＲＮＡ、及び修飾糖及び／または塩基部分を含む本明細書ではヌクレオチドアナログとも呼ばれる天然に存在しないヌクレオチドを網羅する。本明細書では、単一のヌクレオチドは、モノマーまたはユニットと呼ばれ得る。

【0044】

本明細書で使用される、第一のヌクレオチド配列（例えば、ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖）を第二のヌクレオチド配列（例えば、ＲＮＡｉ剤のセンス鎖または標的ｍＲＮＡ配列）との関連で示すために使用される場合の「相補的」という用語は、該第一のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチドが、該第二のヌクレオチド配列を含むオリゴヌクレオチドと、哺乳類の生理的条件（または他の適切な条件）下でハイブリダイズし（塩基対の水素結合を形成し）、ある特定の標準条件下で二重鎖または二重らせん構造を形成する能力を意味する。当業者には、ハイブリダイゼーション試験に最適な一連の条件を選択することが可能であろう。相補的配列には、ワトソン－クリック塩基対または非ワトソン－クリック塩基対が含まれ、少なくとも上記のハイブリダイゼーション要件が満たされる範囲で、天然もしくは修飾ヌクレオチドまたはヌクレオチド模倣物が含まれる。配列の同一性または相補性は、修飾とは無関係である。例えば、本明細書で定義される、ａ及びＡｆは、Ｕ（またはＴ）と相補的であり、同一性または相補性の決定においてはＡと同一である。

【0045】

本明細書で使用される、「完全に相補的」または「十分に相補的」とは、第一のオリゴヌクレオチドの連続した配列における塩基のすべて（１００％）が、第二のオリゴヌクレオチドの連続した配列における同数のヌクレオチドとハイブリダイズすることを意味する。該連続した配列は、第一または第二のヌクレオチド配列のすべてを含む場合もあれば、一部を含む場合もある。

【0046】

本明細書で使用される、「部分的に相補的」とは、ヌクレオチド配列のハイブリダイズした対において、第一のオリゴヌクレオチドの連続した配列における塩基のすべてではないが、少なくとも７０％が、第二のポリヌクレオチドの連続した配列における同数の塩基とハイブリダイズすることを意味する。

【0047】

本明細書で使用される、「実質的に相補的」とは、ヌクレオチド配列のハイブリダイズした対において、第一のオリゴヌクレオチドの連続した配列における塩基のすべてではないが、少なくとも８５％が、第二のポリヌクレオチドの連続した配列における同数の塩基とハイブリダイズすることを意味する。本明細書において、「相補的」、「十分に相補的」、「部分的に相補的」、及び「実質的に相補的」という用語は、ＲＮＡｉ剤のセンス鎖とアンチセンス鎖との間、またはＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖とＡＡＴ ｍＲＮＡの配列の間のヌクレオチドの一致に関して使用される。

【0048】

本明細書で使用される、核酸配列に適用される「実質的に同一」または「実質的に同一性」という用語は、ある核酸配列が、参照配列に対して、少なくとも約８５％以上の配列同一性、例えば、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％の同一性を有する配列を含むことを意味する。配列同一性のパーセンテージは、比較ウィンドウにわたって最適にアラインされた２つの配列を比較することによって決定される。該パーセンテージは、一致した位置の数を得るために両配列に同一の核酸塩基が生じる位置の数を測定し、一致した位置の数を比較ウィンドウ内の全位置数で除し、配列同一性のパーセンテージを得るためにその結果に１００をかけることによって計算される。本明細書に開示する本発明は、本明細書に開示するものと実質的に同一のヌクレオチド配列を包含する。

【0049】

本明細書に記載の化合物は、いくつかの不斉中心を含むことができ、光学的に純粋なエナンチオマー、エナンチオマーの混合物、例えば、ラセミ体、ジアステレオ異性体の混合物、ジアステレオ異性体のラセミ体、またはジアステレオ異性体のラセミ体の混合物の形態で存在し得る。いくつかの実施形態では、該不斉中心は、不斉炭素原子であり得る。

【0050】

２つ以上の核酸における「同一の」または「同一性」パーセントという用語は、配列同一性の一部として保存的置換を考慮に入れずに、最大一致のために比較及びアラインした場合（必要であればギャップを導入して）、同じである２つ以上の配列、または特定のパーセンテージの同じであるヌクレオチドを有する２つ以上の配列を指す。同一性パーセントは、配列比較ソフトウェアもしくはアルゴリズムを使用して、または目視検査によって測定され得る。ヌクレオチド配列のアラインメントを得るために使用され得る様々なアルゴリズム及びソフトウェアは、当技術分野で既知である。

【0051】

配列アラインメントは、ＭＡＦＦＴ、Ｃｌｕｓｔａｌ（ＣｌｕｓｔａｌＷ、Ｃｌｕｓｔａｌ ＸまたはＣｌｕｓｔａｌ Ｏｍｅｇａ）、ＭＵＳＣＬＥ等の当技術分野で既知の方法を使用して行うことができる。

【0052】

ポリヌクレオチド参照配列とアラインする単一のポリヌクレオチド標的配列内の異なる領域は、各々独自の配列同一性パーセントを有し得る。配列同一性パーセント値は、小数第２位で四捨五入されることが留意される。例えば、８０．１１、８０．１２、８０．１３、及び８０．１４は、８０．１に切り捨てられ、８０．１５、８０．１６、８０．１７、８０．１８、及び８０．１９は、８０．２に切り上げられる。長さの値は常に整数であることもまた留意される。

【0053】

ある特定の実施形態では、第一の核酸配列の第二の核酸配列に対する同一性パーセント（％ＩＤ）は、％ＩＤ＝１００×（Ｙ／Ｚ）で計算され、ここで、Ｙは、第一及び第二の配列のアラインメント（目視検査または特定の配列アラインメントプログラムによってアラインされたもの）において完全な一致として採点された核酸塩基の数であり、Ｚは、第二の配列における残基の合計数である。第一の配列の長さが第二の配列より長い場合、該第一の配列の該第二の配列に対する同一性パーセントは、該第二の配列の該第一の配列に対する同一性パーセントより高い。

【0054】

単位、接頭辞、及び記号は、国際単位系（ＳＩ）が認める形で示される。数値範囲は、該範囲を画定する数値を含む。値の範囲が列挙されている場合、列挙されたその範囲の上限と下限間の各介在整数値、及びその各分数もまた、かかる値間の部分的な範囲の各々とともに具体的に開示されることを理解されたい。任意の範囲の上限及び下限は、独立して、該範囲に含まれる場合も該範囲から除外される場合もあり、上下限のいずれかが含まれる場合、いずれも含まれない場合、または両方とも含まれる場合の各範囲もまた、本開示に包含される。したがって、本明細書に列挙される範囲は、列挙される端点を含め、該範囲内の値のすべてに対する省略であると理解される。例えば、１～１０の範囲は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、及び１０からなる群からの任意の数、数の組み合わせ、または部分範囲を含むと理解される。

【0055】

値が明示的に列挙される場合、該列挙された値とほぼ同じ量（ｑｕａｎｔｉｔｙ）または量（ａｍｏｕｎｔ）の値もまた、本開示の範囲に含まれることが理解される。組み合わせが開示される場合、その組み合わせの要素の部分的な組み合わせの各々もまた、具体的に開示され、本開示の範囲に含まれる。反対に、異なる要素または要素の群が個別に開示される場合、その組み合わせもまた開示される。ある開示の任意の要素が複数の選択肢を有して開示される場合、各選択肢が単独で、または他の選択肢と任意の組み合わせで除外されるその開示の例もまた、本明細書に開示される。ある開示の複数の要素がかかる除外を有する場合があり、かかる除外を有する要素のすべての組み合わせが本明細書に開示される。

【0056】

修飾ヌクレオチド及び修飾ヌクレオシド間結合
本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＡＴ ｍＲＮＡ転写物を標的とするｄｓＲＮＡは、修飾ヌクレオチドで構成される場合があり、該修飾ヌクレオチドは、ヒトにおいて、該ＲＮＡｉ剤の活性を維持することができると同時にその血清安定性を高め、インターフェロン活性を活性化する可能性を最小限に抑えることができる。本明細書で使用される、「修飾ヌクレオチド」は、リボヌクレオチド（２’－ヒドロキシルヌクレオチド）以外のヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、該ヌクレオチドの少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約１００％が修飾ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、該ヌクレオチドの約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約９５％、約９７％、約９８％、約９９％、または約１００％が修飾ヌクレオチドである。いくつかの実施形態では、該ヌクレオチドの約５０％～約６０％、約６０％～約７０％、約７０％～約８０％、約８０％～約９０％、約９０％～約９５％、または約９５％～約１００％が修飾ヌクレオチドである。本明細書で使用される、修飾ヌクレオチドとしては、当技術分野で既知の任意の既知の修飾ヌクレオチドが挙げられ、デオキシリボヌクレオチド、ヌクレオチド模倣物、２’－修飾ヌクレオチド、反転ヌクレオチド、修飾核酸塩基含有ヌクレオチド、架橋ヌクレオチド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、２’，３’－ｓｅｃｏヌクレオチド模倣物（アンロックド核酸塩基アナログ）、ロックドヌクレオチド、３’－Ｏ－メトキシ（２’ヌクレオシド間結合）ヌクレオチド、２’－Ｆ－アラビノヌクレオチド、５’－Ｍｅ，２’－フルオロヌクレオチド、モルホリノヌクレオチド、ビニルホスホネート含有ヌクレオチド、及びシクロプロピルホスホネート含有ヌクレオチドが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の修飾ヌクレオチドは、２’－修飾ヌクレオチド（すなわち、５員糖環の２’位にヒドロキシル基以外の基を有するヌクレオチド）である。２’－修飾ヌクレオチドとしては、２’－Ｏ－メチルヌクレオチド、２’－デオキシ－２’－フルオロヌクレオチド（一般には、単に２’－フルオロヌクレオチドと呼ばれる）、２’－デオキシヌクレオチド、２’－メトキシエチル（２’－Ｏ－２－メトキシエチル）ヌクレオチド、２’－アミノヌクレオチド、及び２’－アルキルヌクレオチドが挙げられるがこれらに限定されない。さらなる２’－修飾ヌクレオチドが当技術分野で既知である。所与のＲＮＡｉ剤のすべてのヌクレオチドが均一に修飾される必要はない。さらに、複数の修飾を単一のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤に組み込むこともできれば、その単一のヌクレオチドにさえ組み込むこともできる。ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖及びアンチセンス鎖は、当技術分野で既知の方法によって合成及び／または修飾され得る。一方のヌクレオチドの修飾は、他方のヌクレオチドの修飾とは無関係である。

【0057】

いくつかの実施形態では、核酸塩基（多くの場合、単に「塩基」と呼ばれる）が修飾され得る。当技術分野で一般に使用される、天然の核酸塩基としては、主要なプリン塩基であるアデニン及びグアニン、ならびに主要なピリミジン塩基であるシトシン、チミン、及びウラシルが挙げられる。核酸塩基を修飾して、これらに限定されないが、ユニバーサル塩基、疎水性塩基、無差別塩基、サイズ拡張塩基、及びフッ素化塩基を含めてもよい。例えば、Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｎｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓ ｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ，Ｐ．ｅｄ．Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，２００８を参照されたい。かかる修飾核酸塩基（修飾核酸塩基を含むホスホロアミダイト化合物等）の合成は、当技術分野で既知である。

【0058】

修飾核酸塩基としては、例えば、５－置換ピリミジン、６－アザピリミジンならびにＮ－２、Ｎ－６及びＯ－６置換プリン（例えば、２－アミノプロピルアデニン、５－プロピニルウラシル、または５－プロピニルシトシン）、５－メチルシトシン（５－ｍｅ－Ｃ）、５－ヒドロキシメチルシトシン、イノシン、キサンチン、ヒポキサンチン、２－アミノアデニン、アデニン及びグアニンの６－アルキル（例えば、６－メチル、６－エチル、６－イソプロピル、または６－ｎ－ブチル）誘導体、アデニン及びグアニンの２－アルキル（例えば、２－メチル、２－エチル、２－イソプロピル、または２－ｎ－ブチル）及び他のアルキル誘導体、２－チオウラシル、２－チオチミン、２－チオシトシン、５－ハロウラシル、シトシン、５－プロピニルウラシル、５－プロピニルシトシン、６－アゾウラシル、６－アゾシトシン、６－アゾチミン、５－ウラシル（プソイドウラシル）、４－チオウラシル、８－ハロ、８－アミノ、８－スルフヒドリル、８－チオアルキル、８－ヒドロキシならびに他の８－置換アデニン及びグアニン、５－ハロ（例えば、５－ブロモ）、５－トリフルオロメチル、ならびに他の５－置換ウラシル及びシトシン、７－メチルグアニン及び７－メチルアデニン、８－アザグアニン及び８－アザアデニン、７－デアザグアニン、７－デアザアデニン、３－デアザグアニン、ならびに３－デアザアデニンが挙げられる。

【0059】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のすべてまたは実質的にすべてのヌクレオチドは、修飾ヌクレオチドである。本明細書で使用される、存在するヌクレオチドの実質的にすべてが修飾ヌクレオチドであるＲＮＡｉ剤とは、センス鎖及びアンチセンス鎖の両方において４つ以下（すなわち、０、１、２、３、または４つ）のヌクレオチドがリボヌクレオチドである（すなわち、未修飾の）ＲＮＡｉ剤である。本明細書で使用される、存在するヌクレオチドの実質的にすべてが修飾ヌクレオチドであるセンス鎖とは、該センス鎖において２つ以下（すなわち、０、１、または２つ）のヌクレオチドがリボヌクレオチドであるセンス鎖である。本明細書で使用される、存在するヌクレオチドの実質的にすべてが修飾ヌクレオチドであるアンチセンス鎖とは、該センス鎖において２つ以下（すなわち、０、１、または２つ）のヌクレオチドがリボヌクレオチドであるアンチセンス鎖である。

【0060】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の１つ以上のヌクレオチドは、非標準的な結合または骨格（すなわち、修飾ヌクレオシド間結合または修飾骨格）によって連結される。修飾ヌクレオシド間結合または骨格としては、ホスホロチオエート基、キラルホスホロチオエート、チオホスフェート、ホスホロジチオエート、ホスホトリエステル、アミノアルキル－ホスホトリエステル、アルキルホスホネート（例えば、メチルホスホネートまたは３’－アルキレンホスホネート）、キラルホスホネート、ホスフィネート、ホスホロアミデート（例えば、３’－アミノホスホロアミデート、アミノアルキルホスホロアミデート、またはチオノホスホロアミデート）、チオノアルキル－ホスホネート、チオノアルキルホスホトリエステル、モルホリノ結合、通常の３’－５’結合を有するボラノホスフェート、ボラノホスフェートの２’－５’連結アナログ、またはヌクレオシド単位の隣接対が、３’－５’から５’－３’もしくは２’－５’から５’－２’に連結される反転極性を有するボラノホスフェートが挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオシド間結合または骨格は、リン原子を欠いている。リン原子を欠いている修飾ヌクレオシド間結合としては、短鎖アルキルまたはシクロアルキルの糖間結合、ヘテロ原子とアルキルもしくはシクロアルキルの混合糖間結合、または１つ以上の短鎖ヘテロ原子もしくはヘテロ環の糖間結合が挙げられるがこれらに限定されない。いくつかの実施形態では、修飾ヌクレオシド間骨格としては、シロキサン骨格、スルフィド骨格、スルホキシド骨格、スルホン骨格、ホルムアセチル及びチオホルムアセチル骨格、メチレンホルムアセチル及びチオホルムアセチル骨格、アルケン含有骨格、スルファメート骨格、メチレンイミノ及びメチレンヒドラジノ骨格、スルホネート及びスルホンアミド骨格、アミド骨格、ならびにＮ、Ｏ、Ｓ及びＣＨ_２の混合成分を有する他の骨格が挙げられるがこれらに限定されない。

【0061】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖は、１、２、３、４、５、もしくは６個のホスホロチオエート結合を含むことができるか、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖は、１、２、３、４、５、もしくは６個のホスホロチオエート結合を含むことができるか、または該センス鎖及びアンチセンス鎖の両方が、独立して、１、２、３、４、５、もしくは６個のホスホロチオエート結合を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖は、１、２、３、もしくは４個のホスホロチオエート結合を含むことができるか、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のアンチセンス鎖は、１、２、３、もしくは４個のホスホロチオエート結合を含むことができるか、または該センス鎖及びアンチセンス鎖の両方が、独立して、１、２、３、もしくは４個のホスホロチオエート結合を含むことができる。

【0062】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖は、少なくとも２つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合を含む。いくつかの実施形態では、該少なくとも２つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合は、センス鎖の３’末端からの位置１～３のヌクレオチド間にある。いくつかの実施形態では、該少なくとも２つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合は、センス鎖の５’末端からの位置１～３、２～４、３～５，４～６、４～５、または６～８のヌクレオチド間にある。いくつかの実施形態では、ホスホロチオエートのヌクレオシド間結合は、センス鎖の末端ヌクレオチドを、該ヌクレオチド配列の５’末端、３’末端、または５’及び３’の両末端に存在するキャッピング残基に連結するために使用される。いくつかの実施形態では、ホスホロチオエートのヌクレオシド間結合は、標的指向性基をセンス鎖に連結するために使用される。

【0063】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のアンチセンス鎖は、３つまたは４つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のアンチセンス鎖は、３つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合を含む。いくつかの実施形態では、該３つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合は、アンチセンス鎖の５’末端からの位置１～３のヌクレオチド間、及び該５’末端からの位置１９～２１、２０～２２、２１～２３、２２～２４、２３～２５、または２４～２６のヌクレオチド間にある。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、少なくとも２つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合をセンス鎖に含み、３つまたは４つのホスホロチオエートのヌクレオシド間結合をアンチセンス鎖に含む。

【0064】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、１つ以上の修飾ヌクレオチド及び１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合を含む。いくつかの実施形態では、２’－修飾ヌクレオシドは、修飾ヌクレオシド間結合と組み合わされる。

【0065】

キャッピング残基または部分
いくつかの実施形態では、該センス鎖は、当技術分野で「キャップ」、「末端キャップ」、または「キャッピング残基」と呼ばれることもある１つ以上のキャッピング残基または部分を含み得る。本明細書で使用される、「キャッピング残基」とは、本明細書に開示するＲＮＡｉ剤のヌクレオチド配列の１つ以上の末端に組み込むことができる非ヌクレオチド化合物または他の部分である。キャッピング残基は、場合によっては、ある特定の有益な特性、例えば、エキソヌクレアーゼ分解からの防御等をＲＮＡｉ剤に提供し得る。いくつかの実施形態では、反転脱塩基残基（ｉｎｖＡｂ）（当技術分野では「反転脱塩基部位」とも呼ばれる）が、キャッピング残基として付加される（表Ａ参照）。（例えば、Ｆ．Ｃｚａｕｄｅｒｎａ，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，２００３，３１（１１），２７０５－１６参照）。キャッピング残基としては、例えば、反転脱塩基残基及び末端Ｃ_３Ｈ_７（プロピル）、Ｃ_６Ｈ_１３（ヘキシル）、またはＣ_１２Ｈ_２５（ドデシル）基等の炭素鎖を挙げることができる。いくつかの実施形態では、キャッピング残基は、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の５’末端、３’末端、または５’及び３’の両末端に存在する。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の５’末端及び／または３’末端は、キャッピング残基として複数の反転脱塩基デオキシリボース部分を含み得る。

【0066】

いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基（ｉｎｖＡｂ）が、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の３’末端に付加される。いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基（ｉｎｖＡｂ）が、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の５’末端に付加される。いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基または反転脱塩基部位が、該標的指向性リガンドと本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖のヌクレオチド配列との間に挿入される。いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基または反転脱塩基部位を、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の末端（複数可）にまたはその近くに含むことにより、該ＲＮＡｉ剤の活性の向上または他の所望の特性の向上が可能になる。

【0067】

いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基（ｉｎｖＡｂ）が、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖の５’末端に付加される。いくつかの実施形態では、１つ以上の反転脱塩基残基が、該標的指向性リガンドと本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩のセンス鎖のヌクレオチド配列との間に挿入され得る。いくつかの実施形態では、該反転脱塩基残基は、ホスフェート、ホスホロチオエート（例えば、本明細書では（ｉｎｖＡｂ）ｓ）として示される）、または他のヌクレオシド間結合を介して結合され得る。反転脱塩基デオキシリボース残基の化学構造は、以下の表Ａ、ならびに図１Ａ～１Ｅ及び図２Ａ～２Ｅに示す化学構造に示されている。

【0068】

【表1】

【0069】

標的指向性部分及び標的指向性基
本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、標的指向性部分または標的指向性基が挙げられるがこれらに限定されない１つ以上の非ヌクレオチド基にコンジュゲートされたオリゴヌクレオチド配列、例えば、配列番号４のセンス配列を含み得る。標的指向性部分または標的指向性基は、ＲＮＡｉ剤の標的化または送達を増強することができる。いくつかの実施形態では、該標的指向性部分または標的指向性基は、例えば、肝臓標的化部分を含む。いくつかの実施形態では、該肝臓標的化部分は、アシアロ糖タンパク質受容体に特異的に結合することができる。いくつかの実施形態では、該アシアロ糖タンパク質受容体結合部分は、Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＮＡＧまたはＧａｌＮＡｃ）を含む。いくつかの実施形態では、該ＮＡＧは、ＮＡＧ３７である。本明細書に開示する３つの標的指向性Ｎ－アセチル－ガラクトサミン部分を含む本明細書の表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬で使用される標的指向性（ＮＡＧ３７）ｓ基の特定の例を表Ｂに示す。該標的指向性部分または標的指向性基は、該センス鎖（例えば、配列番号４のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖）及び／またはアンチセンス鎖（例えば、配列番号２のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖）のいずれかの３’及び／または５’末端に共有結合させることができる。いくつかの実施形態では、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、該センス鎖（例えば、配列番号４のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖）の３’及び／または５’末端に連結された標的指向性基を含む。いくつかの実施形態では、標的指向性基は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖（例えば、配列番号４のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖）の５’末端に連結される。いくつかの実施形態では、該標的指向性基は、構造（ＮＡＧ３７）ｓを含むか、それから本質的になるか、またはそれからなり、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖（例えば、配列番号４のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のセンス鎖）の５’末端に連結される。標的指向性基は、該ＲＮＡｉ剤に、直接またはリンカー／連結基を介して間接的に連結され得る。いくつかの実施形態では、標的指向性基は、該ＲＮＡｉ剤に、不安定な、切断可能な、または可逆的な結合またはリンカーを介して連結される。いくつかの実施形態では、標的指向性基は、該センス鎖の５’末端で、反転脱塩基残基に連結される。

【0070】

標的指向性基または標的指向性部分は、それらが結合しているコンジュゲートまたはＲＮＡｉ剤の薬物動態学的または生体内分布特性を増強して、該コンジュゲートまたはＲＮＡｉ剤の細胞特異的分布及び細胞特異的取り込みを改善することができる。いくつかの実施形態では、標的指向性基は、該ＲＮＡｉ剤のエンドサイトーシスを増強する。標的指向性基は、それが向けられる標的に対して、一価、二価、三価、四価であるか、またはより高い価数を有し得る。代表的な標的指向性基としては、細胞表面分子に親和性のある化合物、細胞受容体リガンド、ハプテン、抗体、モノクローナル抗体、抗体断片、及び細胞表面分子に親和性のある抗体模倣物が挙げられるがこれらに限定されない。

【0071】

いくつかの実施形態では、標的指向性基は、アシアロ糖タンパク質受容体リガンドを含む。いくつかの実施形態では、アシアロ糖タンパク質受容体リガンドは、１つ以上のガラクトース誘導体を含むか、またはそれからなる。本明細書で使用される、ガラクトース誘導体という用語は、ガラクトース、及び該アシアロ糖タンパク質受容体に対する親和性が、ガラクトースのものと等しいか、それより高いガラクトース誘導体の両方を含む。ガラクトース誘導体としては、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミルガラクトサミン、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン、Ｎ－プロピオニル－ガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイル－ガラクトサミン、及びＮ－イソ－ブタノイル－ガラクトサミンが挙げられるがこれらに限定されない（例えば、Ｓ．Ｔ．Ｉｏｂｓｔ ａｎｄ Ｋ．Ｄｒｉｃｋａｍｅｒ，Ｊ．Ｂ．Ｃ．，１９９６，２７１，６６８６参照）。オリゴヌクレオチド及び他の分子をインビボで肝臓に標的化するのに有用なガラクトース誘導体、及びガラクトース誘導体のクラスターは、当技術分野で既知である（例えば、Ｂａｅｎｚｉｇｅｒ ａｎｄ Ｆｉｅｔｅ，１９８０，Ｃｅｌｌ，２２，６１１－６２０、Ｃｏｎｎｏｌｌｙ ｅｔ ａｌ．，１９８２，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，２５７，９３９－９４５参照）。

【0072】

ガラクトース誘導体は、分子を、肝細胞の表面で発現するアシアロ糖タンパク質受容体への結合を介して、インビボで肝細胞に標的化するために使用されてきた。アシアロ糖タンパク質受容体リガンドのアシアロ糖タンパク質受容体（複数可）への結合は、肝細胞に対する細胞特異的標的化及び該分子の肝細胞へのエンドサイトーシスを促進する。アシアロ糖タンパク質受容体リガンドは、単量体（例えば、単一のガラクトース誘導体を有する）でも多量体（例えば、複数のガラクトース誘導体を有する）でもよい。該ガラクトース誘導体またはガラクトース誘導体の「クラスター」は、本明細書に開示するＲＮＡｉ剤のセンス鎖またはアンチセンス鎖の３’または５’末端に、当技術分野で既知の方法を使用して結合され得る。

【0073】

いくつかの実施形態では、標的指向性基は、ガラクトース誘導体のクラスターを含む。本明細書で使用される、ガラクトース誘導体のクラスターは、２～４つの末端ガラクトース誘導体を有する分子を含む。末端ガラクトース誘導体は、そのＣ－１炭素を介して分子に結合する。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、ガラクトース誘導体の三量体（三分岐ガラクトース誘導体または三価ガラクトース誘導体とも呼ばれる）である。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含む。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、３つのＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、ガラクトース誘導体の四量体（四分岐ガラクトース誘導体または四価ガラクトース誘導体とも呼ばれる）である。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、４つのＮ－アセチル－ガラクトサミンを含む。

【0074】

本明細書で使用される、ガラクトース誘導体の三量体は、３つのガラクトース誘導体を含み、その各々が中央の分岐点に連結されている。本明細書で使用される、ガラクトース誘導体の四量体は、４つのガラクトース誘導体を含み、その各々が中央の分岐点に連結されている。該ガラクトース誘導体は、該糖のＣ－１炭素を介して中央の分岐点に結合され得る。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体は、リンカーまたはスペーサーを介して該分岐点に連結される。いくつかの実施形態では、該リンカーまたはスペーサーは、柔軟な親水性スペーサー、例えば、ＰＥＧ基である（例えば、米国特許第５，８８５，９６８号、Ｂｉｅｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．１９９５ Ｖｏｌ．３９ ｐ．１５３８－１５４６参照）。該分岐点は、３つのガラクトース誘導体の結合を可能にし、さらに該分岐点の該ＲＮＡｉ剤への結合を可能にする任意の小分子であり得る。分岐点基の例は、ジリジンまたはジグルタミン酸である。該分岐点の該ＲＮＡｉ剤への結合は、リンカーまたはスペーサーを介して行うことができる。いくつかの実施形態では、該リンカーまたはスペーサーは、柔軟な親水性スペーサー、例えば、限定されないが、ＰＥＧスペーサーを含む。いくつかの実施形態では、該リンカーは、剛直なリンカー、例えば、環状基を含む。いくつかの実施形態では、ガラクトース誘導体は、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含むか、またはそれからなる。いくつかの実施形態では、該ガラクトース誘導体のクラスターは、ガラクトース誘導体の四量体から構成され、これは、例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミン四量体であり得る。

【0075】

標的指向性基、例えば、Ｎ－アセチル－ガラクトサミンを含むガラクトース誘導体クラスターの調製は、例えば、国際特許出願公開第ＷＯ２０１８／０４４３５０号（特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０２１１４７号）及び国際特許出願公開第ＷＯ２０１７／１５６０１２号（特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０２１１７５号）に記載されている。これら両公開の内容は、参照により全体として本明細書に組み込まれる。

【0076】

例えば、表１．１及び１．２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、すなわち、（ｉ）配列番号２を含む、それからなる、またはそれから本質的になるアンチセンス鎖及び（ｉｉ）配列番号４を含む、それからなる、またはそれから本質的になるセンス鎖を含むｄｓＲＮＡにコンジュゲートした標的指向性リガンドは、以下の表Ｂに示すように、化学構造（ＮＡＧ３７）ｓを有する。

【0077】

【表2】

【0078】

ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤及びＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）
いくつかの実施形態では、本明細書に開示する方法で使用されるＡＡＴ ＲＮＡｉ剤は、表２に示すＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩のヌクレオチド配列を有する。ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬に見出されるＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のヌクレオチド配列は、以下の表１．１に示す配列番号２に示されるアンチセンス鎖のヌクレオチド配列、及び以下の表１．２に示す配列番号４に示されるセンス鎖のヌクレオチド配列を含む。

【0079】

【表3】

【0080】

【表4】

【0081】

本明細書において表１．１、１．２、及び２で使用される、以下の表記法は、修飾ヌクレオチド、標的指向性基、及び連結基を示すために使用される：Ａ、Ｇ、Ｃ、及びＵは、それぞれ、アデノシン、シチジン、グアノシン、及びウリジンを表し、ａ、ｃ、ｇ、及びｕは、それぞれ、２’－Ｏ－メチルアデノシン、２’－Ｏ－メチルシチジン、２’－Ｏ－メチルグアノシン、及び２’－Ｏ－メチルウリジンを表し、Ａｆ、Ｃｆ、Ｇｆ、及びＵｆは、それぞれ、２’－フルオロアデノシン、２’－フルオロシチジン、２’－フルオログアノシン、及び２’－フルオロウリジンを表し、ｓは、ホスホロチオエート結合を表し、（ｉｎｖＡｂ）は、反転脱塩基デオキシリボース残基を表し（表Ａ参照）、（ＮＡＧ３７）ｓは、上記表Ｂに示す構造を表す。

【0082】

当業者には容易に理解されるように、配列によって（例えば、ホスホロチオエート結合「ｓ」等によって）別段の指示がない限り、センス鎖またはアンチセンス鎖に存在する場合、該ヌクレオチドモノマーは、５’－３’のホスホジエステル結合によって相互に連結される。当業者には明確に理解されるように、本明細書に開示する修飾ヌクレオチド配列に示されるホスホロチオエート結合を含むことにより、オリゴヌクレオチドに通常存在するホスホジエステル結合を置き換える。さらに、当業者には、所与のオリゴヌクレオチド配列の３’末端における末端ヌクレオチドが、エキソビボで、リン酸部分の代わりに、通常はヒドロキシル（－ＯＨ）基を、所与のモノマーのそれぞれの３’位に有することが容易に理解されよう。さらに、本明細書に開示する実施形態では、それぞれの鎖を５’→３’に見た場合、該反転脱塩基残基は、デオキシリボースの３’位が、それぞれの鎖の先行するモノマーの３’末端で連結されるように挿入される。さらに、当業者には容易に理解及び認識されるように、本明細書に示すホスホロチオエートの化学構造は通常その硫黄原子上にアニオンを示すが、本明細書に開示する本発明は、すべてのホスホロチオエート互変異性体（例えば、硫黄原子が二重結合を有し、アニオンが酸素原子上にある場合）を包含する。本明細書において別段の明確な指示がない限り、当業者のかかる理解は、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤及びＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を含む組成物を記載する際に使用される。

【0083】

各センス鎖及び／またはアンチセンス鎖は、該センス鎖及び／またはアンチセンス鎖のオリゴヌクレオチド配列の５’及び／または３’末端にコンジュゲートされた上記の任意の標的指向性基または連結基、及び他の標的指向性基または連結基を有し得る。

【0084】

本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤のアンチセンス鎖の配列、例えば、配列番号２のアンチセンス鎖は、正常及び変異の両ＡＡＴ遺伝子由来のＡＡＴ ｍＲＮＡ転写物を標的とするように設計され、それにより、ＡＡＴＤのヒト対象のＲＮＡ干渉メカニズムを使用して変異Ｚ－ＡＡＴタンパク質の翻訳をサイレンシングする。

【0085】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示する方法は、以下の表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を使用する。したがって、いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号６のセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）を含む。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号２のアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡを含む。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号６のセンス鎖及び配列番号２のアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡを含む。したがって、いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号６からなるセンス鎖を含む二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）を含む。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡを含む。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡを含む。

【0086】

【表5】

【0087】

【表6】

【0088】

ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の概略図を図３に示し、完全な化学構造の表現を図１Ａ～１Ｅ（ナトリウム塩型）及び図２Ａ～２Ｅ（遊離酸型）に示す。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１）は、塩、混合塩、または遊離酸として調製または提供される。いくつかの実施形態では、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１）は、ナトリウム塩として調製または提供される。

【0089】

医薬組成物及び製剤
本明細書に開示する方法での使用に適したＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、ヒト対象に投与するための医薬組成物または製剤として調製され得る。該医薬組成物は、ＡＡＴ ｍＲＮＡの発現の阻害またはＡＡＴタンパク質のレベルの低下が有効であろう疾患または障害を有する対象、例えば、ＡＡＴＤを有するヒト対象を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、該方法は、治療を必要とする対象に対して、本明細書に記載の標的指向性基または標的指向性リガンド、例えば、肝臓標的化ＮＡＧ部分に連結されたＡＡＴ ＲＮＡｉ剤を投与することを含む。いくつかの実施形態では、１つ以上の医薬的に許容される賦形剤（媒体、担体、希釈剤、及び／または送達ポリマー等）が、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む医薬組成物に添加され、それにより、ヒト対象へのインビボ送達に適した医薬製剤が形成される。

【0090】

本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む医薬組成物は、本明細書に開示する方法を使用してヒト対象に投与された場合、該対象におけるＡＡＴ ｍＲＮＡのレベルを低下させる。

【0091】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む本記載の医薬組成物は、ＡＡＴＤ、例えば、慢性肝炎、肝硬変、肝細胞癌のリスクの増加、高トランスアミナーゼ血症、胆汁うっ滞、線維化、さらには劇症肝不全の対象における臨床症状を治療するためまたは管理するために使用される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む治療有効量または予防有効量の１つ以上の医薬組成物が、かかる治療を必要とする対象に投与される。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の投与は、対象における疾患の症状の数、重症度、及び／または頻度を減少させるために使用され得る。

【0092】

本明細書で使用される「有効量」とは、ＡＡＴＤを有する対象を治療するために患者に投与された場合に、該疾患の治療を行う（例えば、既存の疾患または疾患もしくはそれに関連する併存疾患の１つ以上の症状を軽減すること、改善すること、または維持することによって）のに十分な薬剤または組成物の量を含むことを意図している。「有効量」は、当該薬剤または組成物、投与方法、当該疾患及びその重症度ならびに治療を受ける患者の病歴、年齢、体重、家族歴、遺伝子構造、ＡＡＴＤによって媒介される病理過程の段階、もしあれば先行または併用療法のタイプ、及び他の個別の特徴によって変化し得る。

【0093】

本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む本記載の医薬組成物は、ＡＡＴ ｍＲＮＡの発現の低下または阻害が有効であろう疾患または障害を有する対象における少なくとも１つの症状を治療するために使用され得る。いくつかの実施形態では、該対象は、該症状を治療する本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む１つ以上の医薬組成物の治療有効量の投与を受ける。他の実施形態では、該対象は、該少なくとも１つの症状を予防する１つ以上の本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の予防有効量の投与を受ける。

【0094】

本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、特定の経路に対して適切に調整された調製物で、任意の適切な経路を介して投与され得る。したがって、本明細書に記載の医薬組成物は、注射によって、例えば、静脈内または皮下に投与され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、皮下注射を介して投与される。

【0095】

本明細書で使用される、医薬組成物または薬剤は、薬理学的に有効な量の少なくとも１つの本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩、及び１つ以上の医薬的に許容される賦形剤を含む。医薬的に許容される賦形剤（賦形剤）とは、医薬品有効成分（ＡＰＩ、治療薬、例えば、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤）以外の物質であり、薬物送達システムに意図的に含まれる。賦形剤は、意図した投与量で治療効果を発揮せず、発揮することを意図もしない。賦形剤は、ａ）製造中の薬物送達システムの処理を支援するように、ｂ）ＡＰＩの安定性、バイオアベイラビリティ、または患者の受容性を保護、支持、または増強するように、ｃ）製剤の識別を支援するように、及び／またはｄ）保存中または使用中のＡＰＩの全体的な安全性、有効性、または送達の任意の他の属性を増強するように作用し得る。医薬的に許容される賦形剤は、不活性物質であってもなくてもよい。

【0096】

賦形剤としては、吸収促進剤、付着防止剤、消泡剤、酸化防止剤、結合剤、緩衝剤、担体、コーティング剤、着色剤、送達促進剤、送達ポリマー、デキストラン、デキストロース、希釈剤、崩壊剤、乳化剤、増量剤、充填剤、香料、流動促進剤、吸湿剤、滑沢剤、油、ポリマー、防腐剤、生理食塩水、塩、溶媒、糖、懸濁剤、徐放性マトリックス、甘味料、増粘剤、等張化剤、媒体、撥水剤、及び湿潤剤が挙げられ得るがこれらに限定されない。

【0097】

注射用途に適した医薬組成物としては、滅菌水溶液（水溶性の場合）が挙げられる。皮下投与または静脈内投与の場合、適切な担体としては、生理食塩水、静菌水、ＣＲＥＭＯＰＨＯＲ（登録商標）ＥＬＴＭ（ＢＡＳＦ，Ｐａｒｓｉｐｐａｎｙ，ＮＪ）またはリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）が挙げられ得る。これは、製造及び保存の条件下で安定であるべきであり、微生物、例えば、細菌及び真菌の汚染作用に対して保護されるべきである。該担体は、例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコール、及び液体ポリエチレングリコール）を含む溶媒または分散媒、ならびにそれらの適切な混合物であり得る。

【0098】

滅菌注射剤は、必要量の活性化合物を、適切な溶媒に、必要に応じて上記で列挙した成分の１つまたは組み合わせとともに入れ、その後濾過滅菌することによって調製され得る。一般に、分散液は、活性化合物を、基本的な分散媒及び上記で列挙したものから必要とされる他の成分を含む滅菌媒体に入れることによって調製される。

【0099】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示する方法での使用に適した医薬組成物は、以下の表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬で特定された成分を含む。

【0100】

投与の簡便性及び用量の均一性のため、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩は、組成物に投薬単位形態で製剤化され得る。投薬単位形態とは、治療を受ける対象用の単一の用量として適した物理的に別々の単位を指し、各単位は、必要な医薬担体と共同して所望の治療効果を生じるように計算された所定量の活性化合物を含む。

【0101】

いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約５ｍｇ～約３００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約２５ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約１００ｍｇ～約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約１００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬少なくとも約５ｍｇ、少なくとも約１０ｍｇ、少なくとも約１５ｍｇ、少なくとも約２０ｍｇ、少なくとも約２５ｍｇ、少なくとも約３０ｍｇ、少なくとも約３５ｍｇ、少なくとも約４０ｍｇ、少なくとも約４５ｍｇ、少なくとも約５０ｍｇ、少なくとも約５５ｍｇ、少なくとも約６０ｍｇ、少なくとも約６５ｍｇ、少なくとも約７０ｍｇ、少なくとも約７５ｍｇ、少なくとも約８０ｍｇ、少なくとも約８５ｍｇ、少なくとも約９０ｍｇ、少なくとも約９５ｍｇ、少なくとも約１００ｍｇ、少なくとも約１１０ｍｇ、少なくとも約１２０ｍｇ、少なくとも約１３０ｍｇ、少なくとも約１４０ｍｇ、少なくとも約１５０ｍｇ、少なくとも約１６０ｍｇ、少なくとも約１７０ｍｇ、少なくとも約１８０ｍｇ、少なくとも約１９０ｍｇ、または少なくとも約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、または約２００ｍｇである。いくつかの実施形態では、該投薬単位は、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、表３．１または表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬約５～約１０ｍｇ、約１０～約１５ｍｇ、約１５～約２０ｍｇ、約２０～約２５ｍｇ、約２５～約３０ｍｇ、約３０～約３５ｍｇ、約３５～約４０ｍｇ、約４０～約４５ｍｇ、約４５～約５０ｍｇ、約５０～約５５ｍｇ、約５５～約６０ｍｇ、約６０～約６５ｍｇ、約６５～約７０ｍｇ、約７０～約７５ｍｇ、約７５～約８０ｍｇ、約８０～約８５ｍｇ、約８５～約９０ｍｇ、約９０～約９５ｍｇ、約９５～約１００ｍｇ、約１００～約１１０ｍｇ、約１１０～約１２０ｍｇ、約１２０～約１３０ｍｇ、約１３０～約１４０ｍｇ、約１４０～約１５０ｍｇ、約１５０～約１６０ｍｇ、約１６０～約１７０ｍｇ、約１７０～約１８０ｍｇ、約１８０～約１９０ｍｇ、または約１９０～２００ｍｇである。

【0102】

医薬組成物は、医薬組成物に一般に見られる他のさらなる成分を含むことができる。かかるさらなる成分としては、鎮痒薬、収斂薬、局所麻酔薬、または抗炎症剤（例えば、抗ヒスタミン剤、ジフェンヒドラミン等）が挙げられるがこれらに限定されない。

【0103】

本明細書で使用される、「薬理学的に有効な量」、「治療有効量」、または単に「有効量」とは、ＲＮＡｉ剤が薬理学的、治療的または予防的な効果を生じる量を指す。

【0104】

本記載の医薬的に許容される製剤は、キット、容器、パック、またはディスペンサーに包装され得る。本明細書に記載の医薬組成物は、プレフィルドシリンジまたはバイアルに包装され得る。

【0105】

製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬
いくつかの実施形態では、表２に示すＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩）は、１つ以上の医薬的に許容される賦形剤とともに製剤化され、ヒト対象に対する投与に適した医薬組成物を形成する。

【0106】

いくつかの実施形態では、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、水性リン酸ナトリウム緩衝液（０．５ｍＭリン酸二水素ナトリウム、０．５ｍＭリン酸水素二ナトリウム）中、２３０ｍｇ／ｍＬで製剤化され、表３．１に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１－１）を形成する。

【0107】

【表7】

【0108】

いくつかの実施形態では、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、水性リン酸ナトリウム緩衝液（０．５ｍＭリン酸二水素ナトリウム、０．５ｍＭリン酸水素二ナトリウム）中、２００ｍｇ／ｍＬで製剤化され、表３．２に示す製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１－２）を形成する。

【0109】

【表8】

【0110】

いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、１５０ｍｇ～２５０ｍｇの本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、少なくとも約１５０ｍｇ、少なくとも約１６０ｍｇ、少なくとも約１７０ｍｇ、少なくとも約１８０ｍｇ、少なくとも約１９０ｍｇ、少なくとも約２００ｍｇ、少なくとも約２１０ｍｇ、少なくとも約２２０ｍｇ、少なくとも約２３０ｍｇ、少なくとも約２４０ｍｇ、または少なくとも約２５０ｍｇの本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２１０ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２３０ｍｇ、約２４０ｍｇ、または約２５０ｍｇの本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、約１５０ｍｇ～約１６０ｍｇ、約１６０ｍｇ～約１７０ｍｇ、約１７０ｍｇ～約１８０ｍｇ、約１８０ｍｇ～約１９０ｍｇ、約１９０ｍｇ～約２００ｍｇ、約２００ｍｇ～約２１０ｍｇ、約２１０ｍｇ～約２２０ｍｇ、約２２０ｍｇ～約２３０ｍｇ、約２３０ｍｇ～約２４０ｍｇ、または約２４０ｍｇ～約２５０ｍｇの本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む。

【0111】

いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり約０．１２０ｍｇの懸濁剤を含む。いくつかの実施形態では、該懸濁剤は、リン酸塩またはその組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、該懸濁剤は、リン酸ナトリウム塩またはその組み合わせを含む。いくつかの実施形態では、該懸濁剤は、リン酸二水素ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、該懸濁剤は、リン酸水素二ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、該懸濁剤は、リン酸二水素ナトリウム及びリン酸水素二ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、該リン酸二水素ナトリウムは、一水和リン酸二水素ナトリウムである。いくつかの実施形態では、該リン酸水素二ナトリウムは、無水リン酸水素二ナトリウムである。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、ほぼ等量の一水和リン酸二水素ナトリウム及び無水リン酸水素二ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、約０．０６１ｍｇの一水和リン酸二水素ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、約０．０６２ｍｇの無水リン酸水素二ナトリウムを含む。いくつかの実施形態では、本開示の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、１ｍＬあたり、約０．０６１ｍｇの一水和リン酸二水素ナトリウム及び約０．０６２ｍｇの無水リン酸水素二ナトリウムを含む。

【0112】

表３．１及び表３．２による製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、無菌製剤として調製される。いくつかの実施形態では、該製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、容器、例えば、ガラスバイアルに包装される。いくつかの実施形態では、該製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、容量約１．１ｍＬのガラスバイアルに包装され、投与に望ましい体積は、投与に望ましい用量レベルに基づいて計算され得る。

【0113】

いくつかの実施形態では、表３．１及び表３．２に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、本明細書に開示する方法を使用してヒト対象に投与される。

【0114】

キット
本明細書に記載の組成物のいずれか、例えば、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤またはＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）もしくはその塩の医薬組成物及び製剤、あるいは製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）は、キットに含まれ得る。非限定的な例では、該キットは、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩を含む。

【0115】

該キットはさらに、本明細書に記載の組成物を対象に使用するための試薬または使用説明書を含み得る。それはまた、１つ以上の緩衝剤も含み得る。

【0116】

いくつかの実施形態では、該キットはさらに、ＡＡＴＤの治療のための有効量のさらなる治療薬を含み得る。

【0117】

該キットの成分は、水性媒体または凍結乾燥形態のいずれかで包装され得る。該キットの容器手段は、一般に、少なくとも１つのバイアル、試験管、フラスコ、ボトル、シリンジまたは他の容器手段を含み、その中に成分が、好ましくは適切なアリコートにして配され得る。該キットに複数の成分が存在する場合（標識試薬及び標識が一緒に包装され得る）、該キットはまた、一般に、第二、第三またはその他のさらなる容器も含み、その中にさらなる成分が別々に配され得る。該キットはまた、無菌の医薬的に許容される緩衝剤及び／または他の希釈剤を収容するための第二の容器手段も含み得る。しかしながら、成分の様々な組み合わせがバイアルに含まれてもよい。本発明のキットはまた、通常、本発明の組成物、例えば、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩を収容するための手段、及び任意の他の試薬容器を、商用販売用に密閉して含む。

【0118】

該キットの成分が１つ及び／または複数の溶液で提供される場合、該溶液は、水溶液であり、特に好ましくは滅菌水溶液である。しかしながら、該キットの成分は、乾燥粉末（複数可）として提供され得る。試薬及び／または成分が乾燥粉末として提供される場合、該粉末は、適切な溶媒の添加によって再構成され得る。該溶媒はまた、別の容器手段で提供され得ることが想定される。

【0119】

プレフィルドシリンジ
本明細書に記載の組成物のいずれか、例えば、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩、ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤またはＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）もしくはその塩の医薬組成物及び製剤、あるいは製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）は、シリンジに包装され得る。非限定的な例では、該プレフィルドシリンジは、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）、またはその塩を含む。いくつかの実施形態では、該プレフィルドシリンジは、投薬単位に、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）を、例えば、約１００ｍｇまたは約２００ｍｇ含む。

【0120】

ＡＡＴＤのヒト対象及びＡＡＴＤの診断
本明細書に開示する方法は、アルファ－１アンチトリプシン欠乏症（ＡＡＴＤ）の治療を必要とするヒト対象におけるその治療を含み、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩、例えば、表２に記載のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む医薬組成物を使用した、該ヒト対象においてＡＡＴＤによって引き起こされる症状及び疾患の治療を含む。いくつかの実施形態では、該医薬組成物は、表３．１または表３．２に記載の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を含む。

【0121】

いくつかの実施形態では、該ヒト対象は、ＡＡＴＤと診断された後に投与を受ける。本明細書で述べた通り、ＡＡＴＤは、フォールディング異常を起こしやすいいくつかの変異型が、肝細胞における細胞内保持につながるＡＡＴタンパク質の変異型の翻訳をもたらす遺伝子転写物の突然変異によって引き起こされる遺伝性障害である。ＳＥＲＰＩＮＡ１遺伝子の様々な変異が特定されているが、ＡＡＴＤの最も一般的で重篤な形態であるＰｉＺＺ遺伝子型は、単一の塩基対置換によって引き起こされる。ＰｉＺＺ遺伝子型の対象では、血中ＡＡＴレベルは、多くの場合、健康なヒトのレベルの１５％未満であると報告される。多くの場合、対象は最初、根本原因が特定されることなくＣＯＰＤ、喘息、または他の肺疾患と診断される。時間の経過とともに、ミスフォールドした（「Ｚ－ＡＡＴ」）タンパク質の細胞間保持及び肝臓細胞から該タンパク質を適切に分泌することができないことに起因して、肝疾患、例えば、線維化及び肝硬変が発症し得る。小児対象は通常、無症候性の慢性肝炎、成長障害、食欲不振、または肝腫大及び脾腫を含み得る肝疾患の臨床症状を示す。ＡＡＴＤは、対象の血液サンプルの標準的な遺伝子型決定によって診断及び確認され得る。

【0122】

投与及びＡＡＴ遺伝子の発現阻害
一般に、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を必要とする対象に対して投与されるその有効量は、約０．１ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇ体重／投与の範囲、例えば、約０．２５ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ体重／投与の範囲である。

【0123】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の有効量は、投与あたり、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ体重の範囲である。

【0124】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の有効量は、投与あたり、体重の少なくとも約０．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約０．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約２．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約３．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約４．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約５．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約６．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約７．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約８．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９．２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９．４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９．６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約９．８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0125】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の有効量は、投与あたり、体重の約０．２ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ、約１．６ｍｇ／ｋｇ、約１．８ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ、約２．２ｍｇ／ｋｇ、約２．４ｍｇ／ｋｇ、約２．６ｍｇ／ｋｇ、約２．８ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ、約３．２ｍｇ／ｋｇ、約３．４ｍｇ／ｋｇ、約３．６ｍｇ／ｋｇ、約３．８ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ、約４．２ｍｇ／ｋｇ、約４．４ｍｇ／ｋｇ、約４．６ｍｇ／ｋｇ、約４．８ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ、約５．２ｍｇ／ｋｇ、約５．４ｍｇ／ｋｇ、約５．６ｍｇ／ｋｇ、約５．８ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ、約６．２ｍｇ／ｋｇ、約６．４ｍｇ／ｋｇ、約６．６ｍｇ／ｋｇ、約６．８ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ、約７．２ｍｇ／ｋｇ、約７．４ｍｇ／ｋｇ、約７．６ｍｇ／ｋｇ、約７．８ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ、約８．２ｍｇ／ｋｇ、約８．４ｍｇ／ｋｇ、約８．６ｍｇ／ｋｇ、約８．８ｍｇ／ｋｇ、約９ｍｇ／ｋｇ、約９．２ｍｇ／ｋｇ、約９．４ｍｇ／ｋｇ、約９．６ｍｇ／ｋｇ、約９．８ｍｇ／ｋｇ、約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0126】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の有効量は、投与あたり、体重の約１ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、約２ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、約３ｍｇ／ｋｇ～約４ｍｇ／ｋｇ、約４ｍｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇ、約５ｍｇ／ｋｇ～約６ｍｇ／ｋｇ、約６ｍｇ／ｋｇ～約７ｍｇ／ｋｇ、約７ｍｇ／ｋｇ～約８ｍｇ／ｋｇ、約８ｍｇ／ｋｇ～約９ｍｇ／ｋｇ、及び約９ｍｇ／ｋｇ～約１０ｍｇ／ｋｇである。

【0127】

いくつかの実施形態では、該有効量は、固定用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の５ｍｇ～３００ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の２５ｍｇ～２００ｍｇの固定用量が有効用量である。投与量は、総合的な対象の年齢及び健康状態、送達される化合物の相対的な生物学的効率、薬物の製剤、当該製剤における賦形剤の存在及びタイプ、ならびに投与経路等の可変要素に依存する可能性がある。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約１０ｍｇ、約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２６０ｍｇまたは約２８０ｍｇ～約１５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２０ｍｇ、約２４０ｍｇ、約２６０ｍｇ、約２８０ｍｇまたは約３００ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約２５ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約５０ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約７５ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約１００ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約１２５ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約１５０ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約１７５ｍｇの固定用量が有効用量である。いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約２００ｍｇの固定用量が有効用量である。

【0128】

また、最初に施用される投与量を、場合によっては、上記の上限レベルを超えて増加させ、所望の血中レベルまたは組織レベルを迅速に達成してもよいし、または該最初の投与量を、場合によっては、最適量より少なくしてもよいことが理解される。例えば、いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩の約２５ｍｇ～約２００ｍｇ、例えば、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ、約７５ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１７５ｍｇ、または約２００ｍｇの最初の用量が投与され、続いて約４週または１か月後に、約２５～２００ｍｇの２回目の用量が投与され、その後、さらなる用量（「維持用量」と同様の概念）が約１２週または約３か月ごとに１回（すなわち、約３か月に１回）投与される。

【0129】

疾患の治療または疾患の治療のための薬剤もしくは組成物の生成に関して、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む本明細書に記載の医薬組成物は、賦形剤、または第二のもしくは他のＲＮＡｉ剤、低分子薬物、抗体、抗体断片、ペプチド及び／またはアプタマーが挙げられるがこれらに限定されない第二の治療薬もしくは治療と組み合わせることができる。

【0130】

本明細書に開示する方法のいくつかの態様では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む医薬組成物のそれを必要とするヒト対象への投与により、（ｉ）線維化の低下、（ｉｉ）門脈周囲肝細胞のレベルの低下、（ｉｉｉ）血清Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｉｖ）全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖ）可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖｉ）不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下、（ｖｉｉ）ＡＬＴの低下、（ｖｉｉｉ）ＧＧＴの低下、（ｉｘ）Ｐｒｏ－Ｃ３の低下、または（ｘ）それらの組み合わせがもたらされ得る。

【0131】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩を含む医薬組成物のそれを必要とするヒト対象への投与により、線維化、門脈炎症、インターフェイス肝炎、全門脈管病変、ＰＡＳ＋Ｄゾーン位置、ゾーン１「小球」門脈周辺病変、またはそれらの任意の組み合わせの改善がもたらされ得る。

【0132】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与される対象におけるＡＡＴ遺伝子の遺伝子発現レベル及び／またはｍＲＮＡレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または９９％超低下する。該対象における遺伝子発現レベル及び／またはｍＲＮＡレベルは、該対象の細胞、細胞群、及び／または組織において低下する。いくつかの実施形態では、該対象における遺伝子発現レベル及び／またはｍＲＮＡレベルは、該対象の肝臓細胞、例えば、肝細胞、肝星細胞、肝臓細胞群、及び／または肝臓において低下する。

【0133】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与される対象におけるＡＡＴ遺伝子の遺伝子発現レベル及び／またはｍＲＮＡレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または９９％超低下する。

【0134】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与される対象におけるＡＡＴ遺伝子の遺伝子発現レベル及び／またはｍＲＮＡレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0135】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象におけるＡＡＴのタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約９９％超低下する。該対象におけるタンパク質のレベルは、該対象の細胞、細胞群、組織、血液、及び／または他の液体において低下する。いくつかの実施形態では、該対象におけるタンパク質のレベルは、該対象の肝臓細胞、例えば、肝細胞、肝星細胞、肝臓細胞群、及び／または肝臓において低下する。

【0136】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象におけるＡＡＴのタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超低下する。

【0137】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象におけるＡＡＴのタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0138】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または９９％超低下する。

【0139】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または９９％超低下する。

【0140】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0141】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約９９％超低下する。

【0142】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超低下する。

【0143】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与されたＡＡＴＤを有する対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0144】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９５％である。いくつかの実施形態では、該可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５０％～約９７％である。

【0145】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約９９％超低下する。

【0146】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超低下する。

【0147】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベルは、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0148】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約４０％～約９７％である。

【0149】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベル及び該Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルの両方は、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、少なくとも約５％、少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約４５％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、少なくとも約９９％、または約９９％超低下する。

【0150】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベル及び該Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルの両方は、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％、約１０％、約１５％、約２０％、約２５％、約３０％、約３５％、約４０％、約４５％、約５０％、約５５％、約６０％、約６５％、約７０％、約７５％、約８０％、約８５％、約９０％、約９５％、約９６％、約９７％、約９８％、約９９％、または約９９％超低下する。

【0151】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩が投与された対象における肝臓Ｚ－ＡＡＴの不溶性またはポリマータンパク質のレベル及び該Ｚ－ＡＡＴの可溶性またはモノマータンパク質のレベルの両方は、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、約５％～約１０％、約１０％～約１５％、約１５％～約２０％、約２０％～約２５％、約２５％～約３０％、約３０％～約３５％、約３５％～約４０％、約４０％～約４５％、約４５％～約５０％、約５０％～約５５％、約５５％～約６０％、約６０％～約６５％、約６５％～約７０％、約７０％～約７５％、約７５％～約８０％、約８０％～約８５％、約８５％～約９０％、または約９５％～１００％低下する。

【0152】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、血清Ｚ－ＡＡＴが少なくとも約７０％低下する。

【0153】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約１００％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の血清Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％～約１００％である。

【0154】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、全肝臓Ｚ－ＡＡＴが少なくとも約７０％低下する。

【0155】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、少なくとも約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約９５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約１００％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の全肝臓Ｚ－ＡＡＴの低下は、約７０％～約１００％である。

【0156】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、ＡＬＴが少なくとも約３０％低下する。

【0157】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、少なくとも約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、少なくとも約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、少なくとも約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＡＬＴの低下は、約３０％～約５０％である。

【0158】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、ＧＧＴが少なくとも約２５％低下する。

【0159】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、少なくとも約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、少なくとも約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、少なくとも約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、少なくとも約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＧＧＴの低下は、約２５％～約４５％である。

【0160】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、Ｐｒｏ－Ｃ３が少なくとも約１５％低下する。

【0161】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約１５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約１５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約２０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約２０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後のＰｒｏ－Ｃ３の低下は、約１５％～約９０％である。

【0162】

いくつかの実施形態では、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与することにより、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬が投与される前の該対象または該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けない対象に対して、線維化が、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約１５％低下する。

【0163】

いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約１５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約１５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約２０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約２０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約２５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約３０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約３５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約４０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約４５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約５０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約５５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約６０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約６５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約７０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約７５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約８０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約８５％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して少なくとも約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約９０％である。いくつかの実施形態では、ＡＤＳ－００１またはその塩をそれを必要とする対象に投与した後の線維化の低下は、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）で測定して約１５％～約９０％である。

【0164】

ＡＡＴ遺伝子の発現（ＰｉＺＺ遺伝子型を含む）、ＡＡＴ ｍＲＮＡ（ＰｉＺＺ遺伝子型を含む）、またはＡＡＴタンパク質のレベル（Ｚ－ＡＡＴタンパク質を含む）の低下は、当技術分野で既知の一般的な方法によって評価及び定量化され得る。本明細書に開示する実施例は、ＡＡＴ遺伝子の発現の阻害及びＡＡＴタンパク質のレベルの低下を評価するための一般に知られている方法を示す。該ＡＡＴ ｍＲＮＡのレベル及び／またはタンパク質のレベル（Ｚ－ＡＡＴの可溶性及び不溶性タンパク質のレベルを含む）の低下または減少は、本明細書では、ＡＡＴの低下もしくは減少、またはＡＡＴの発現の阻害もしくは低下と総称される。

【0165】

上記のすべての変化、例えば、門脈周囲肝細胞、血清Ｚ－ＡＡＴ、肝臓Ｚ－ＡＡＴ、可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、ＡＬＴ、ＧＧＴ、Ｐｒｏ－Ｃ３、または脂肪症の変化は、所定の閾値、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与される前の対象におけるレベル、該ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与されていない対象におけるレベル、またはある集団で測定される対照レベルを基準とする。上記、例えば、線維化、門脈周囲肝細胞、血清Ｚ－ＡＡＴ、肝臓Ｚ－ＡＡＴ、可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、不溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴ、ＡＬＴ、ＧＧＴ、Ｐｒｏ－Ｃ３、または脂肪症の測定のすべては、本開示に記載の通りに、または当技術分野で既知の方法を使用して行われる。

【0166】

本明細書で使用される、「肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質の量」、「肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル」、「肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質の負荷」という用語は、ヒト対象の肝臓で測定されるＺ－ＡＡＴタンパク質の量を指し、特に明記しない限り、かかる用語は本明細書では同義で使用される。本明細書における非限定的な実施例においてより完全に開示されるように、肝臓生検は、対象から採取することができ、それらのサンプルをホモジナイズした後、存在するＺ－ＡＡＴタンパク質の全量を評価することができる。存在する可溶性Ｚ－ＡＡＴタンパク質（主にモノマー形態のＺ－ＡＡＴタンパク質）の量を同様に定量化することができ、存在する不溶性（ポリマー）Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルは、合計から該可溶性量を差し引くことによって計算され得る。

【0167】

本明細書で使用される、「治療する」、「治療」等の用語は、対象における疾患の１つ以上の症状の数、重症度、及び／または頻度の軽減または緩和を提供するために行われる方法またはステップを意味する。本明細書で使用される、「治療する」及び「治療」とは、対象における疾患の１つ以上の症状の数、重症度、及び／または頻度の防止、管理、予防的治療、及び／または阻害を含み得る。

【0168】

本明細書で使用される、「月１回の投与」または「月１回」の投与とは、２８日ごとを意味する。本明細書で使用される、「３か月ごとの投与」または「３か月ごと」の投与とは、８４日ごとを意味する。月１回の投与に関連して使用される場合の「約」という用語は、月１回の投与＋／－３日を意味する。３か月ごとの投与に関連して使用される場合の「約」という用語は、３か月ごとの投与＋／－９日を意味する。投与の週数に関連して使用される場合の「約」という用語は、＋／－１週を意味する。

【0169】

本明細書で使用される、本明細書に開示するＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬、例えば、配列番号６からなるセンス鎖及び配列番号２からなるアンチセンス鎖を含むｄｓＲＮＡ、例えば、ＡＤＳ－００１またはその塩に言及する場合の「細胞に導入する」という句は、該ＲＮＡｉ剤を細胞に機能的に送達することを意味する。「機能的送達」という句は、該ＲＮＡｉ剤が期待される生物活性、例えば、遺伝子発現の配列特異的阻害を有するようにする方法で、該ＲＮＡｉ剤を細胞に送達することを意味する。

【0170】

特に明記しない限り、本明細書で使用される、記号

【0171】

【化3】

【0172】

の使用は、本明細書に記載の本発明の範囲に従って、任意の基（複数可）がそれに連結され得ることを意味する。

【0173】

本明細書で使用される場合、不斉中心が存在し、ひいてはエナンチオマー、ジアステレオマー、または他の立体異性コンフィギュレーションを生じさせる構造ごとに、構造中に特定のコンフォメーションを有するとして具体的に特定されない限り、本明細書に開示する各構造は、それらの光学的に純粋な型及びラセミ体を含め、すべてのかかる可能な異性体を表すことを意図している。例えば、本明細書に開示する構造は、単一の立体異性体だけでなく、ジアステレオマーの混合物もまた含むことを意図している。

【0174】

本明細書における特許請求の範囲で使用される、「～からなる」という句は、当該特許請求の範囲で指定されていない任意の要素、ステップ、または成分を除外する。本明細書における特許請求の範囲で使用される場合、「～から本質的になる」という句は、特許請求の範囲を、特定の材料またはステップならびに請求項にかかる基本的及び新規な特徴（複数可）に実質的に影響を与えないものに限定する。

【0175】

当業者には、本明細書に開示する化合物及び組成物が、ある特定の原子（例えば、Ｎ、Ｏ、またはＳ原子）を、該化合物または組成物が置かれる環境に応じて、プロトン化または脱プロトン化状態で有し得ることが容易に理解及び認識されよう。したがって、本明細書で使用される、本明細書に開示する構造は、ある特定の官能基、例えば、ＯＨ、ＳＨ、またはＮＨ等がプロトン化される場合も脱プロトン化される場合もあることを想定している。本明細書の開示は、当業者には容易に理解されるように、環境（ｐＨ等）に基づくプロトン化の状態に関係なく、本開示の化合物及び組成物を含むことを意図している。

【0176】

特に定義しない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、当業者によって一般に理解されるものと同じ意味を有する。本明細書に記載のものと類似または同等の方法及び材料が、本発明の実施または試験において使用され得るが、適切な方法及び材料を以下に記載する。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、及び他の参考文献は、参照により全体として組み込まれる。矛盾する場合には、定義を含め、本明細書が統制する。さらに、該材料、方法、及び実施例は例示にすぎず、限定することを意図していない。

【0177】

国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０／３６３５９号、表題Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｏｆ Ａｌｐｈａ－１ Ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ（ＡＡＴＤ）において、出願人は、健常志願者（ＨＢＶ）におけるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の第１相試験からのデータを記載した。完全を期すために、その情報を本明細書の実施例２及び図４～１１に示す。本出願において、出願人は、ＡＡＴＤと診断されたヒト対象における非盲検第２相試験からの初期データを記載する。驚くべきことにかつ予想外に、ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）をわずか６か月及び３回投与後に、肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下が明らかになった。

【0178】

上記に示した実施形態及び項目を、以下の非限定的な実施例によりここで説明する。

【実施例】

【0179】

実施例１．ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の合成及び製剤化
本明細書に開示する方法での使用に適したＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、当技術分野で既知の、固相オリゴヌクレオチド合成における標準的なホスホロアミダイト技術を使用して合成することができる。市販のオリゴヌクレオチド合成装置（例えば、ＭＥＲＭＡＤＥ９６Ｅ（登録商標）（Ｂｉｏａｕｔｏｍａｔｉｏｎ）またはＭＥＲＭＡＤＥ１２（登録商標）（Ｂｉｏａｕｔｏｍａｔｉｏｎ））を使用してもよい。合成は、コントロールド・ポア・ガラス（ＣＰＧ、５００Åまたは６００Å、Ｐｒｉｍｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ａｓｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡから入手）製の固体支持体上で行うことができる。それぞれの鎖の３’末端に配置されたモノマーが、合成の開始点としてこの固体支持体に結合され得る。すべてのＲＮＡ、２’－修飾ＲＮＡホスホロアミダイト、及び反転脱塩基ホスホロアミダイトは、商業的に入手することができる。センス鎖の５’末端への付加に適した標的指向性基含有ホスホロアミダイトを合成することができる。当技術分野で既知の標準的な切断、脱保護、精製、及びアニーリングステップを使用することができる。ＡＡＴ ＲＮＡｉ剤の合成に関するさらなる記載は、例えば、各々が参照により全体として本明細書に組み込まれる国際特許出願公開第ＷＯ２０１８／１３２４３２号（出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０１３１０２号）及びＷＯ２０１８／０４４３５０（ＰＣＴ／ＵＳ２０１７／０２１１４７）に見出され得る。ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、次に、当技術分野で一般に知られている標準的な医薬的に許容される賦形剤に溶解することによって製剤化され得る。例えば、表３．１及び３．２は、本明細書に開示する方法での使用に適した製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を示す。

【0180】

実施例２．健常ヒト志願者（ＮＨＶ）におけるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の第Ｉ相臨床試験
以下の例は、国際特許出願第ＰＣＴ／ＵＳ２０／３６３５９号、表題Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｏｒ Ｔｈｅ Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ Ｏｆ Ａｌｐｈａ－１ Ａｎｔｉｔｒｙｐｓｉｎ Ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ（ＡＡＴＤ）で以前に提示されたものであり、出願人は完全を期すためにその情報をここで繰り返すことを望む。

【0181】

健常志願者（ＮＨＶ）におけるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の安全性、忍容性、薬物動態、及び血清ＡＡＴレベルへの影響を評価するための第１相、単回及び複数回の用量漸増投与試験を行った。この試験の被験者集団には、１８～５２歳のＢＭＩが１９．０～３５．０ｋｇ／ｍ^２の健常成人男女を含めた。

【0182】

ＮＨＶ被験者を、合計７つのコホートに分けた。コホート１～４を、皮下注射として３５ｍｇ（コホート１）の単回漸増及び１００ｍｇ（コホート２）、２００ｍｇ（コホート３）及び３００ｍｇ（コホート４）の複数回漸増にて投与されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬またはプラセボ（活性物質４：プラセボ４）を受けるようにランダム化した。コホート１～４は二重盲検であった。コホート２ｂ、３ｂ及び４ｂは、１００、２００、及び３００ｍｇのＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の単回投与を受ける４人の被験者からなる非盲検であった。合計４４人の被験者が試験を完了した。図４は、第Ｉ相臨床試験の最終試験デザインを示す。試験パラメータを以下の表４に要約する。

【0183】

【表9-1】

【0184】

【表9-2】

【0185】

【表9-3】

【0186】

本試験の血清ＡＡＴの低下の結果は、３５～３００ｍｇの用量でＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与することで、プラセボと比較した場合に血清ＡＡＴが大幅に低下することを示した。当初、１用量あたり４００ｍｇのＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬でのコホートが、本臨床試験プロトコルの一部として提案された。しかしながら、３５、１００、２００、及び３００ｍｇの用量での予想外の効力を考慮して、４００ｍｇのコホートを本試験のプロトコルから外した。本第Ｉ相試験において、３５ｍｇ、１００ｍｇ、及び２００ｍｇの用量で血清ＡＡＴが大幅に低下し、１００ｍｇ及び２００ｍｇの両方で複数回投与後、平均血清ＡＡＴ低下が約９０％に達した。図５～１１は、本第Ｉ相試験における様々なコホートの血清ＡＡＴ低下について報告する。

【0187】

驚くべきことにかつ予想外に、１００ｍｇ及び２００ｍｇの用量レベルでは、かなりの（約９０％に達する）及びより高用量の３００ｍｇと同様のノックダウンが生じたことから、全用量レベルにわたって明確な用量依存反応はなかった。最低用量の３５ｍｇでもかなり活性であったが、単回投与として施用された１００ｍｇほど活性ではなく、ある程度の用量反応を示した。

【0188】

３５ｍｇの単回投与からの血清ＡＡＴ低下（＞５８％）の持続期間は、当初の予想よりも長く、用量投与後１６週まで続き、その後ベースラインに戻った。例えば、３５ｍｇの単回投与から３４週後、１人の被験者の血清ＡＡＴレベルは、９０ｍｇ／ｄＬ超に戻ったが、２人目の被験者の血清ＡＡＴレベルは、４０ｍｇ／ｄＬのままであった（ベースラインから６０．４％低下）。１００ｍｇ～３００ｍｇのＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の単回投与による反応持続期間に有意差はなく、単回投与後８週～１６週でベースラインに戻った。

【0189】

ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の複数回投与は、概して、単回投与よりも長期間にわたって血清ＡＡＴの大幅な低下を維持する。これらのデータは、２９日目（すなわち、初回投与から１か月後）に受けた２回目の投与が、血清ＡＡＴレベルをさらに低下させるか、または低下を維持する可能性があり、その後の投与は、血清ＡＡＴの最大の低下を維持するために１２週ごと（すなわち、３か月ごと）に施用してもよいことを示唆する。

【0190】

本第Ｉ相試験では、死亡も、重篤な有害事象（ＳＡＥ）も、及び強度が重度と評価された有害事象（ＡＥ）もなかった。ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けた被験者全体で２人の被験者が、３つのＡＥの強度が中等度であることを報告した（上気道感染症、鼻漏、胸痛全般）。プラセボを受けた被験者全体で３人の被験者が、３つのＡＥの強度が中等度であることを報告した（胃腸炎２、筋骨格系胸痛－左側）。他のすべてのＡＥは、軽度と報告されている。被験者の大多数は、試験治療に関連しないＡＥを報告した。ＡＡＴ投与中の被験者で生じた１つのＡＥは、治療の早期中止に至ったが、この被験者を引き続き試験で追跡した。少なくとも単回投与の製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けた２８人の被験者で、９４のＡＥが報告された。プラセボを受けた１７人の被験者では４６のＡＥが報告された。用量漸増に伴うＡＥの頻度または強度の増加に明確なパターンはない。

【0191】

全製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬のコホート全体で、６人の被験者で注射部位での６つのＡＥが生じ、そのすべてが薬物を受けた被験者で生じた。プラセボ被験者では、注射部位のＡＥはなかった。報告された注射部位反応には、注射部位の内出血、紅斑、及び疼痛が含まれた。注射部位でのこれらの複合ＡＥは、製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受けた被験者の２１．４％で報告された。製剤化ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の５０回の注射のうち６回、すなわち、１２％が、注射部位のＡＥをもたらした。単一の被験者で２回以上報告された注射部位のＡＥはなかった。すべての注射部位のＡＥは、強度が軽度であると見なされた。

【0192】

実施例３．ＡＡＴ関連肝疾患患者におけるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬（ＡＤＳ－００１）の第ＩＩ相臨床試験。
アルファ－１アンチトリプシン欠乏関連肝疾患（ＡＡＴＤ）患者におけるＡＲＯ－ＡＡＴの安全性及び有効性を評価するためのパイロット非盲検、複数回投与、第２相試験を行った。この試験の被験者集団には、１８～７５歳のＰｉＺＺ患者（ベースラインで完成した遺伝子型またはソース検証可能な文書からの遺伝子型に基づく）のＡＡＴ対象を含めた。

【0193】

ＰｉＺＺ被験者を、合計３つのコホートに分けた。すべての被験者は、初回投与前に肝生検を受ける必要があった。図１２は、第ＩＩ相臨床試験の試験デザインを示している。

【0194】

コホート１及び１ｂは、皮下注射として２００ｍｇ（コホート１）または１００ｍｇ（コホート１ｂ）のいずれかの合計３回にて投与されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受ける最大４人の被験者からなる。投与は、１日目、初回投与から４週後、及び２回目の投与から１２週後に施す。３回目の投与から２４週後（初回投与から約４０週または約６か月後）、２回目の生検を行う。

【0195】

コホート２は、皮下注射として２００ｍｇの合計５回にて投与されるＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を受ける最大８人の被験者からなる。投与は、１日目、初回投与から４週後、及び２回目の投与から１２週後、３回目の投与から１２週後、及び４回目の投与から１２週後（すなわち、１日目、ならびに４、１６、２８、及び４０週目）に施す。３回目の投与から４８週後（初回投与から約８８週または約１年後）、２回目の生検を行う。

【0196】

試験パラメータを、以下の表５に要約する。

【0197】

【表10-1】

【0198】

【表10-2】

【0199】

【表10-3】

【0200】

コホート１
コホート１では、血清Ｚ－ＡＡＴの低下の結果は、２００ｍｇの用量でＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与することで、血清及び全肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質の両レベルが大幅に低下することを示した（例えば、図１３参照）。

【0201】

血清Ｚ－ＡＡＴは、ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用してＺ－ＡＡＴ変異を含むトリプシンペプチドを介して定量的に測定した。全及び可溶性肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質もまた、ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用してＺ－ＡＡＴ変異を含むトリプシンペプチドを介して定量的に測定した。肝臓組織のホモジナイズ後、全Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルをＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して測定した。次いで、別のアリコートに対して遠心分離を行い、可溶性画分と不溶性画分を分離した。分離後、ＵＨＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して、可溶性画分のＺ－ＡＡＴタンパク質のレベルを評価した。測定されない画分（不溶性）は、測定された肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質の総量から測定された可溶性画分を差し引くことによって得た。

【0202】

別の方法として、ウエスタンブロットまたは半定量的免疫組織化学等の方法を使用して、Ｚ－ＡＡＴタンパク質に特異的なプローブまたは抗体を使用することにより、Ｚ－ＡＡＴタンパク質を定量的または半定量的に測定することができる。かかる方法は一般に知られており、試薬及びツールは市販されているか、他の場合には当業者の知識の範囲内である。

【0203】

以下の表６は、とりわけ、全肝臓（すなわち、肝臓内）Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、モノマー（可溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、ポリマー（不溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、ＡＬＴ酵素レベル、及びＧＧＴ酵素レベルを示す。ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）評価は、各被験者について投与前の肝生検及び２４週の両方で行い、追加の評価を各被験者について５２週目に行った。これらの結果も表６に示す。

【0204】

【表11】

【0205】

上記表６に示すように、各被験者は、全肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル（Δ％）の７０％超の低下及びモノマー（可溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの８０％超の低下を達成した。さらに、１人を除くすべての被験者がポリマー（不溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下を示し、４人のうち３人の被験者がＺ－ＡＡＴポリマー（不溶性）タンパク質の６８～９７％に及ぶレベルの低下を示した。

【0206】

肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下は、２４週目でベースラインと比較して、すべての被験者が３６～６６％に及ぶＡＬＴの低下を示し、すべての被験者が４３～５８％に及ぶＧＧＴの低下を示したことを含め、臨床的に関連するバイオマーカーの改善ももたらした。

【0207】

すべての被験者はさらに、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）スコアの改善を示し、４人のうち３人の被験者が２４週目でベースラインと比較して２０％超の低下を示した。さらに、４人のうち３人の患者で、２４週目に線維形成バイオマーカーであるＰｒｏ－Ｃ３の３１～５１％に及ぶ低下を示した。

【0208】

ベースライン及び２４週目の肝生検の組織学的評価を２人の病理学者によって行い、評価に不一致があった場合に３人目の病理学者が裁定者の役割を果たした。２４週目に、すべての被験者で、それぞれのベースラインの生検と比較した場合に少なくとも１つの組織学的パラメータ、例えば、門脈炎症、小葉炎症、インターフェイス肝炎、肝細胞死、及び線維化（Ｍｅｔａｖｉｒ）の改善が見られた。２人の被験者は線維化が改善し、２人の被験者は線維化の悪化がなかった。すべての被験者は、門脈炎症の悪化も改善も示さなかった。さらに、すべての被験者は、Ｚ－ＡＡＴ負荷の改善を示し、これは、以下の表７に示すように、ＰＡＳ＋Ｄ（過ヨウ素酸シッフプラスジアスターゼ）染色によって評価された。

【0209】

【表12】

５２週目にコホート１の被験者から採取した血清サンプルは、表６に示す２４週目のものと同様のＡＬＴ、ＧＧＴ、及び血清Ｚ－ＡＡＴレベルのベースラインからの低下が依然として維持されていることを示した。

【0210】

コホート２
コホート２では、５人の患者に関する１６週までの予備的な血清Ｚ－ＡＡＴの低下の結果を図１４に示し、コホート１の２４週でのものと同様のＺ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下が示されている。

【0211】

４８週目での以下の表８は、とりわけ、全肝臓（すなわち、肝臓内）Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、モノマー（可溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、ポリマー（不溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル、ＡＬＴ酵素レベル、及びＧＧＴ酵素レベルを４８週時点に達したコホート２の最初の５人の被験者に関して示す。ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）評価は、各被験者について投与前の肝生検及び４８週の両方で行った。これらの結果も表８に示す。

【0212】

【表13】

【0213】

上記表８に示すように、各報告された被験者は、全肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベル（Δ％）及びモノマー（可溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの７５％超の低下を達成した。さらに、すべての被験者がポリマー（不溶性）肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下を示し、報告された５人のうち４人の被験者がＺ－ＡＡＴポリマー（不溶性）タンパク質の８０～９７％に及ぶレベルの低下を示し、１人の被験者は４２．４％の低下を示した。

【0214】

肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質のレベルの低下は、４８週目でベースラインと比較して、すべての被験者が３４～６１％に及ぶＡＬＴの低下を示し、すべての被験者が２６～４４％に及ぶＧＧＴの低下を示したことを含め、臨床的に関連するバイオマーカーの改善ももたらした。

【0215】

報告されたすべての被験者は、それぞれ１７．７％、１７．０％、６７．８％、及び３５．６％の低下で、ＦＩＢＲＯＳＣＡＮ（登録商標）スコアの改善を示した（５人のうち４人の被験者のみが測定された）。さらに、５人すべての患者で、４８週目に線維形成バイオマーカーであるＰｒｏ－Ｃ３の１８～３７％に及ぶ低下を示した。

【0216】

４８週目に、５人中４人の被験者が線維化（ＭＥＴＡＶＩＲ）の少なくとも１ポイントの改善を示し、５番目の被験者では線維化の悪化は見られなかった。５人のうち３人の被験者で門脈炎症が改善し、他の２人の被験者では悪化が見られなかった。さらに、すべての被験者は、Ｚ－ＡＡＴ負荷の改善を示し、これは、ＰＡＳ＋Ｄ（過ヨウ素酸シッフプラスジアスターゼ）染色によって評価された。

【0217】

コホート１及び２の組織学的評価
２４週目（コホート１の場合）及び４８週目（コホート２の場合）の肝生検の組織学的評価は、２人の独立した病理学者によって（患者及び時点に対して）盲検化された方法で行われ、最初の２人の病理学者間で評価が分かれた場合に３人目の病理学者を参加させた。線維化の段階はＭＥＴＡＶＩＲによって採点し、Ｚ－ＡＡＴ小球負荷は、陽性ＰＡＳ＋Ｄ染色に基づいて、以下の各々について０～３（３が最も深刻または最大の負荷）で採点した：小球を含む門脈管の範囲、小球を含む門脈周囲肝細胞の範囲、及びゾーン位置。１ポイント以上改善された主な組織学的特徴を、以下の表９に報告する。

【0218】

【表14】

【0219】

コホート１及び２から入手可能なデータは、ＡＲＯ－ＡＡＴ処理により、Ｚ－ＡＡＴモノマーとＺ－ＡＡＴポリマーの両肝臓内Ｚ－ＡＡＴタンパク質の一貫した大幅な減少、組織学的小球負荷の一貫した減少、線維化の改善、及び肝臓の健康に関する他のバイオマーカーの改善に至ったことを示している。さらに、脂肪症の組織学的改善は、ベースラインの脂肪肝疾患を有する被験者で見られた。

【0220】

試験の安全性の要約
第ＩＩ相試験では、データ抽出日である２０２１年３月１５日までに、合計７１回（２００ｍｇが５９回、１００ｍｇが１２回）の投与を受けた被験者が１６人おり、有害事象による死亡も脱落もなかった。ＡＲＯ－ＡＡＴは、最長１年間の投与後、概して忍容性が良好であった。投与中に発生した有害事象（ＴＥＡＥ）に関連した試験薬の中止、投与の中断、または早期の試験離脱はなかった。ウイルス性心筋炎、憩室炎、及び呼吸困難という３つの重篤な有害事象（ＳＡＥ）が２００ｍｇのコホートで報告された。重症度はすべて中等度であり、すべて回復した。ウイルス性心筋炎は、ＥＢＶ感染に関連しており、憩室炎は、危険因子を有する、すなわち、ＰｉＺＺ遺伝子型を有し、虫垂切除術の既往を有する６３歳の被験者に発生し、呼吸困難は、非閉塞性肺気腫の病歴及び肺治療の遅れのある被験者に発生した。ＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬は、ベースラインから４８週まで、臨床的に意味のあるｐｐＦＥＶ１（１秒間努力呼気容量の予測パーセント）の低下が観察されないことを含め、決定的な安全性シグナルがなく良好な忍容性を示した。

【0221】

２０２１年８月３０日のデータ抽出日までのコホート１、２、及び１ｂのデータ要約のまとめの更新
上記のように、合計１６人のホモ接合型ＰｉＺＺ被験者が第２相臨床試験に参加した。コホート１及び１ｂは、２００ｍｇ（コホート１）または１００ｍｇ（コホート１ｂ）のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を皮下注射として、１日目、初回投与から４週後、及び２回目の投与から１２週後に施される投与の合計３回の投与を受ける４人の被験者で構成した。コホート２は、皮下注射として２００ｍｇで合計５回のＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬の投与を、１日目、初回投与から４週後、及び２回目の投与から１２週後、３回目の投与から１２週後、及び４回目の投与から１２週後（すなわち、１日目、ならびに４、１６、２８、及び４０週目）に受ける８人の被験者で構成した。平均年齢は、５２歳（範囲２０～６６歳）であり、１６人のうち１４人の被験者が男性であった。

【0222】

ベースライン時及びベースライン後（１群及び２群では２４週目及び４８週目、１ｂ群では２４週目）に収集された比較検討生検、及び２０２１年８月３０日のカットオフデータ抽出日の時点で、比較検討生検は１６人のうち１４人の被験者で利用可能であった。組織学は、被験者及び時点に対して盲検の３人の病理学者によって評価及び裁定された。主な評価項目には、ＭＥＴＡＶＩＲ線維化、肝臓Ｚ－ＡＡＴレベル、及び全小球負荷（門脈管の範囲及びゾーン１の門脈周囲肝細胞病変及びゾーン位置のＰＡＳ＋Ｄ染色の合計）を含めた。

【0223】

比較検討生検を行った１４人の被験者のうち、１１人はベースラインでＦ２以上のＭＥＴＡＶＩＲ線維化段階を有していた。ＡＲＯ－ＡＡＴは、初回投与後、すべての患者で血清Ｚ－ＡＡＴタンパク質を大幅に低下させ、これは観察を通じて持続した。全肝臓Ｚ－ＡＡＴタンパク質の平均低下パーセントは、２４週または４８週で８０％～８９％に及んだ。すべての患者で小球負荷が低下した（ベースラインで平均スコア７．３（最大９）が、２４週または４８週で平均スコア２．５に低下）。２００ｍｇのＡＡＴ ＲＮＡｉ原薬を投与された１１人の患者（すなわち、コホート１及びコホート２の被験者）のうち６人で線維化の改善（１段階以上）が達成されたが、１００ｍｇの用量を投与された３人（コホート１ｂ）のうち、改善を示した患者はなかった。コホート２の２人の患者は、ベースラインから４８週目まで線維化の悪化（両方ともＦ２からＦ３）を示したが、それにもかかわらず両被験者は小球負荷の大幅な減少を示し（ベースラインでのスコアはそれぞれ９及び４で、どちらも４８週時にはスコアは０を示し）、投与後にはＡＬＴレベル及びＧＧＴレベルは正常化した。

【0224】

すべての群は、ＡＬＴ及びＧＧＴの正常化を示した。平均低下パーセントは、ＡＬＴで４２％～５６％に及び、２８週と７２週の間で３３％～５４％に及んだ。

【0225】

ＡＲＯ－ＡＡＴの忍容性は良好で、ｐｐＦＥＶ１のベースラインから臨床的に意味のある持続的な変化はなく、試験または試験薬の中止につながる有害事象もなかった。ＥＢＶ関連の心筋炎、憩室炎、呼吸困難、及び前庭神経炎という４つのＳＡＥが報告された。

【0226】

ある特定の要約データを以下の表１０に示す。

【0227】

【表15】

【0228】

要するに、ＡＲＯ－ＡＡＴは、すべての患者で血清及び肝臓Ｚ－ＡＡＴならびに小球負荷を低下させた。これらのデータは、ＡＡＴＤ肝疾患の原因因子であるＺ－ＡＡＴの除去が疾患活動性を改善し、線維化の改善につながる可能性があることを示している。

【0229】

他の実施形態
本発明は、その発明を実施するための形態に関連して記載されてきたが、前述の記載は、本発明の範囲を示すことを意図し、限定するものではなく、それは添付の特許請求の範囲で定義されると理解されるべきである。他の態様、利点、及び修正は、以下の特許請求の範囲内である。

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図1D】

【図1E】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【図8】

【図9】

【図10】

【図11】

【図12】

【図13】

【図14】

【配列表】

2023541170000001.app

【国際調査報告】