特表 2023-541253 癌標的のＣＡＲ－Ｔ細胞を含む併用療法と、それを癌治療に使用する方法

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-09-29

(54)【発明の名称】癌標的のＣＡＲ－Ｔ細胞を含む併用療法と、それを癌治療に使用する方法

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/12 20150101AFI20230922BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20230922BHJP

   A61K 35/768 20150101ALI20230922BHJP

   A61K 35/76 20150101ALI20230922BHJP

   A61K 35/17 20150101ALI20230922BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20230922BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20230922BHJP

   C12N 7/01 20060101ALI20230922BHJP

   C07K 19/00 20060101ALI20230922BHJP

   C12N 15/13 20060101ALN20230922BHJP

   C12N 15/12 20060101ALN20230922BHJP

   C12N 5/0783 20100101ALN20230922BHJP

   C07K 16/28 20060101ALN20230922BHJP

【ＦＩ】

A61K35/12

A61P35/00

A61K35/768

A61K35/76

A61K35/17

C12N15/62 Z

C12N5/10

C12N7/01

C07K19/00

C12N15/13 ZNA

C12N15/12

C12N5/0783

C07K16/28

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023515784

(86)(22)【出願日】2021-09-09

(85)【翻訳文提出日】2023-04-27

(86)【国際出願番号】 US2021049597

(87)【国際公開番号】W WO2022056085

(87)【国際公開日】2022-03-17

(31)【優先権主張番号】63/076,805

(32)【優先日】2020-09-10

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522348169

【氏名又は名称】ムスタング バイオ，インコーポレイテッド

(71)【出願人】

【識別番号】598004424

【氏名又は名称】シティ・オブ・ホープ

【氏名又は名称原語表記】Ｃｉｔｙ ｏｆ Ｈｏｐｅ

(74)【代理人】

【識別番号】100149076

【弁理士】

【氏名又は名称】梅田 慎介

(74)【代理人】

【識別番号】100119183

【弁理士】

【氏名又は名称】松任谷 優子

(74)【代理人】

【識別番号】100173185

【弁理士】

【氏名又は名称】森田 裕

(74)【代理人】

【識別番号】100162503

【弁理士】

【氏名又は名称】今野 智介

(74)【代理人】

【識別番号】100144794

【弁理士】

【氏名又は名称】大木 信人

(74)【代理人】

【識別番号】100204582

【弁理士】

【氏名又は名称】大栗 由美

(72)【発明者】

【氏名】ニス，ヌット

(72)【発明者】

【氏名】カッシム，サディク エイチ．

(72)【発明者】

【氏名】ブラウン，クリスティーン イー．

(72)【発明者】

【氏名】フォーマン，スティーブン ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】バダイ，ベナム

【テーマコード（参考）】

4B065

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA90X

4B065AA95X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA44

4C087BB37

4C087BB63

4C087BC83

4C087MA02

4C087MA66

4C087NA05

4C087ZB26

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045BA41

4H045CA40

4H045DA50

4H045DA76

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

ＣＡＲ－Ｔ免疫療法および腫瘍溶解性ウイルス療法を利用する二重アプローチ法を用いて悪性神経膠腫などの固形腫瘍を治療するための改善された方法が記載されている。
【選択図】図１

【特許請求の範囲】

【請求項1】

対象における多形膠芽腫（ＧＢＭ）を治療する方法であって、ＧＢＭを有する対象に（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞集団、および（ｉｉ）腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、方法。

【請求項2】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団および前記腫瘍溶解性ウイルスが同時投与される、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団および前記腫瘍溶解性ウイルスが順次投与される、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が最初に投与され、前記腫瘍溶解性ウイルスが二番目に投与される、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記腫瘍溶解性ウイルスが最初に投与され、前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が二番目に投与される、請求項３に記載の方法。

【請求項6】

前記対象が、原発性ＧＢＭ腫瘍および／または転移性腫瘍を除去するための外科手術を以前に受けている、請求項１～５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項7】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が、Ｔ細胞を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項8】

前記Ｔ細胞が、セントラルメモリーＴ細胞である、請求項７に記載の方法。

【請求項9】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が、ＮＫ細胞を含む、請求項１～６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項10】

前記ＣＡＲが、結合ドメイン、スペーサードメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項11】

前記ＣＡＲがＩＬ－１３Ｒα２またはＨＥＲ２に選択的に結合する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記結合ドメインがＧＰＶＰＰＳＴＡＬＲＹＬＩＥＥＬＶＮＩＴＱＮＱＫＡＰＬＣＮＧＳＭＶＷＳＩＮＬＴＡＧＭＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧＣＳＡＩＥＫＴＱＲＭＬＳＧＦＣＰＨＫＶＳＡＧＱＦＳＳＬＨＶＲＤＴＫＩＥＶＡＱＦＶＫＤＬＬＬＨＬＫＫＬＦＲＥＧＲＦＮ（配列番号１）またはＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＧＳＴＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を含む、請求項１０または１１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項13】

前記スペーサードメインが、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインを含む、請求項１０～１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項14】

前記ＩｇＧ４ Ｆｃドメインが、
（ｉ）
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１０）、
（ｉｉ）ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＧＧＧＳＳＧＧＧＳＧＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号２）、
（ｉｉｉ）ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＱＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号３）、
（ｉｖ）ＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＱＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶ ＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４）、または
（ｖ）ＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号５）を含む、請求項１３に記載の方法。

【請求項15】

前記膜貫通ドメインが、ＣＤ４膜貫通ドメインまたはＣＤ８膜貫通ドメインを含む、請求項１０～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

前記ＣＤ４膜貫通ドメインが、ＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦ（配列番号６）を含むか、または前記ＣＤ８膜貫通ドメインが、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴ（配列番号１１）、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹ（配列番号１２）、またはＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ（配列番号１３）を含む、請求項１５に記載の方法。

【請求項17】

前記共刺激ドメインが、４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む、請求項１０～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

前記４－１ＢＢ共刺激ドメインがＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ（配列番号７）を含む、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記ＣＡＲが、ＧＰＶＰＰＳＴＡＬＲＹＬＩＥＥＬＶＮＩＴＱＮＱＫＡＰＬＣＮＧＳＭＶＷＳＩＮＬＴＡＧＭＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧＣＳＡＩＥＫＴＱＲＭＬＳＧＦＣＰＨＫＶＳＡＧＱＦＳＳＬＨＶＲＤＴＫＩＥＶＡＱＦＶＫＤＬＬＬＨＬＫＫＬＦＲＥＧＲＦＮＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＧＧＧＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ（配列番号８）、または
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＧＳＴＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＧＧＧＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ（配列番号１４）を含む、請求項１～１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が、選択タグも発現する、請求項１～１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項21】

前記選択タグが、切断型ＣＤ１９配列（ＣＤ１９ｔ）または切断型上皮成長因子受容体配列（ＥＧＦＲｔ）であり、任意選択的に、前記ＣＤ１９ｔまたは前記ＥＧＦＲｔが、Ｔ２Ａスペーサー配列によって前記ＣＡＲから分離される、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記腫瘍溶解性ウイルスが、遺伝子操作された単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ－１）である、請求項１～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記腫瘍溶解性ウイルスに複製能力がある、請求項１～２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項24】

ＩＣＰ３４．５遺伝子が前記腫瘍溶解性ウイルスの前記ゲノムから欠失され、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）ＩＲＳ１遺伝子をコードする遺伝子が、前記腫瘍溶解性ウイルスの前記ゲノム内に導入される、請求項２２または２３に記載の方法。

【請求項25】

前記腫瘍溶解性ウイルスがＣ１３４である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団が、セントラルメモリーＴ細胞であり、前記ＣＡＲが、配列番号８または配列番号１４を含み、前記腫瘍溶解性ウイルスがＣ１３４である、請求項１～２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団および前記腫瘍溶解性ウイルスが、同じ投与経路で投与される、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

前記ＣＡＲを発現する前記細胞集団および前記腫瘍溶解性ウイルスが、異なる投与経路で投与される、請求項１～２６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

前記投与経路が、脳室内、腫瘍内、くも膜下腔内、および切除された腫瘍空洞内から成る群から選択される、請求項２７または２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

前記ＣＡＲを発現する細胞集団および前記腫瘍溶解性ウイルスが、前記対象の前記中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与される、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

（関連出願の相互参照）
本出願は、米国特許法（３５ Ｕ．Ｓ．Ｃ．）第１１９（ｅ）項に基づき、２０２０年９月１０日に出願された米国仮出願第６３／０７６，８０５号に対する優先権を主張するものであり、その内容全体は参照により本明細書に組み込まれる。

【0002】

本開示は、腫瘍免疫療法、特に悪性神経膠腫ＣＡＲ－Ｔ療法の分野に関する。

【0003】

（配列表に関する記述）
本出願に関連する配列表は、紙のコピーの代わりにテキスト形式で提供され、参照により本明細書に組み込まれる。配列リストを含むテキストファイルの名前は１１８１８０－０６００＿ＳＴ２５．ｔｘｔである。テキストファイルは約２８ｋＢで、２０２０年９月８日に作成され、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に提出されている。

【背景技術】

【0004】

免疫受容体を発現するように操作されたＴ細胞を使用した新しい治療は、癌や自己免疫疾患を含む広範囲の難治性疾患に対する有望な免疫療法をもたらしてきた。

【0005】

癌はヒトの健康に対する顕著な脅威であり、生活の質の低下につながり、大抵は死亡につながる。様々な形態の癌の治療および予防にあたり国、地域、および現地の医療機関に課せられる負担は、必要な資源および人員という点で大きい。ヒトが疾患と闘うために持つ主要な武器の一つは、機能する免疫系である。変異型抗原を含む抗原は、例えばマウスにおいて、腫瘍破壊の強力な標的であり、これらの抗原を標的とする腫瘍浸潤性リンパ球は、患者において耐久力のある腫瘍退縮を引き起こすことができる。

【0006】

高親和性インターロイキン－１３受容体α２（ＩＬ１３Ｒα２）は、多形膠芽腫（ＧＢＭ）によって、また他の腫瘍型でも高頻度で選択的に発現される。この腫瘍特異的受容体を標的化するための一つのアプローチは、細胞傷害性分子にコンジュゲートされた同族リガンド（ＩＬ－１３）を利用する。しかしながら、ＩＬ－１３のためのより低い親和性の受容体（ＩＬ１３Ｒα１）は非癌組織において広く発現されるため、このアプローチは特異性に欠ける。ヒト上皮成長因子受容体２（ＨＥＲ２）は、いくつかの種類の癌、特に乳癌において検証された癌標的であるが、最近になって、ＨＥＲはＧＢＭの最大８０％で発現するものの、正常な出生後のニューロンまたはグリアでは発現しないことが判明した。

【0007】

多くのヒト癌には、癌性組織上または癌性組織中に予想通りに存在し、Ｔ細胞などの免疫細胞による効果的な軽減の標的としての役目を果たす能力があるような、特異的抗原がない。それぞれの癌細胞型は、異なる腫瘍特異的抗原を引き起こす固有の一連の変異を宿す。養子免疫療法における有効な固有の抗原の特定や、自己Ｔ細胞の形質導入のための適切なＴ細胞受容体の単離は、当該技術分野の進歩にもかかわらず、引き続き困難である。しかしながら、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）および二重特異性Ｔ細胞係合タンパク質（ＢｉＴＥ）を用いた養子Ｔ細胞免疫療法の利用の成功は、主に腫瘍性血液疾患に限定されている。固形腫瘍の治療における養子免疫療法を困難にしている多数の要因は、主にＴ細胞に対する好ましくない腫瘍微小環境に起因する。

【0008】

したがって、固形腫瘍、特にＧＢＭを治療するための養子免疫療法を特定する必要性がある。本開示はこの必要性に対処する。

【発明の概要】

【0009】

一部の態様では、本開示は一般的に、対象における多形膠芽腫（ＧＢＭ）を治療する方法であって、ＧＢＭを有する対象に（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞集団、および（ｉｉ）腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、方法に関する。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスが同時投与される。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスが順次投与される。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団が最初に投与され、腫瘍溶解性ウイルスが二番目に投与される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスが最初に投与され、ＣＡＲを発現する細胞集団が二番目に投与される。一部の態様では、対象は、原発性ＧＢＭ腫瘍および／または転移性腫瘍を除去するための外科手術を以前に受けている。

【0010】

一部の態様では、当該ＣＡＲを発現する細胞集団はＴ細胞を含む。一部の態様では、Ｔ細胞は、セントラルメモリーＴ細胞である。一部の態様では、当該ＣＡＲを発現する細胞集団はＮＫ細胞を含む。

【0011】

一部の態様では、ＣＡＲは、結合ドメイン、スペーサードメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。一部の態様では、ＣＡＲはＩＬ－１３Ｒα２に選択的に結合する。一部の態様では、結合ドメインは配列番号１を含む。一部の態様では、スペーサードメインはＩｇＧ４ Ｆｃドメインを含む。一部の態様では、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインは、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５を含む。

【0012】

一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ４膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、ＣＤ４膜貫通ドメインは、ＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦ（配列番号６）を含む。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、またはＣＤ８膜貫通ドメインは、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴ（配列番号１１）、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹ（配列番号１２）、またはＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ（配列番号１３）を含む。一部の態様では、共刺激ドメインは、４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む。一部の態様では、４－１ＢＢ共刺激ドメインは、配列番号７を含む。一部の態様では、ＣＡＲは、配列番号８または配列番号１４を含む。

【0013】

一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団はまた、選択タグを発現する。一部の態様では、選択タグは、切断型ＣＤ１９配列（ＣＤ１９ｔ）または切断型上皮成長因子受容体配列（ＥＧＦＲｔ）である。一部の態様では、ＣＤ１９ｔ配列またはＥＧＦＲｔ配列は、Ｔ２Ａスペーサー配列によってＣＡＲから分離される。

【0014】

一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは、遺伝子操作された単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ－１）である。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは複製能力がある。一部の態様では、ＩＣＰ３４．５遺伝子が腫瘍溶解性ウイルスのゲノムから欠失され、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）ＩＲＳ１遺伝子をコードする遺伝子が腫瘍溶解性ウイルスのゲノム内に導入される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスはＣ１３４である。

【0015】

一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団は、セントラルメモリーＴ細胞であり、ＣＡＲは配列番号８または配列番号１４を含み、ここで腫瘍溶解性ウイルスはＣ１３４である。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、同じ投与経路で投与される。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、異なる投与経路で投与される。

【0016】

一部の態様では、投与経路は、脳室内、腫瘍内、くも膜下腔内、および切除された腫瘍空洞内から成る群から選択される。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与される。

【0017】

本明細書で説明し、特許請求の範囲対象となる発明は、発明の概要および以下の図面の簡単な説明および発明を実施するための形態に規定または記載または参照されたものを含むがこれらに限定されない、多くの属性および実施形態を有する。全てを網羅することは意図されておらず、本明細書に説明し、特許請求の範囲対象となる発明は、発明の概要で特定される特徴または実施形態に限定、もしくはそれらによって限定されるものではなく、例示のみを目的としており、制限を目的としない。追加の実施形態は、以下の発明を実施するための形態で開示されうる。

【図面の簡単な説明】

【0018】

【図1】図１は、実施例４で実施される投与およびアッセイの例示的なスキームのグラフィカル表現を示す。

【発明を実施するための形態】

【0019】

本開示は、ＩＬ－１３Ｒα２またはＨＥＲ２を発現または提示する細胞によって特徴付けられる広範な癌を、（１）ＩＬ－１３Ｒα２またはＨＥＲ２と特異的に相互作用（例えば、それらに結合）するキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する免疫学的細胞と（２）腫瘍溶解性ウイルスとの組み合わせを投与することによって治療する方法に関する。

【0020】

Ｉ．定義
以下の用語は、当業者によって十分に理解されると考えられるが、本開示の主題の説明を容易にするために以下の定義が記載されている。

【0021】

「ａ」または「ａｎ」という用語は、その主体のうちの一つまたは複数を指してもよく、すなわち複数の指示対象を指してもよい。そのため、「ａ」または「ａｎ」、「一つ以上」および「少なくとも一つ」という用語は、本明細書では互換的に使用される。さらに、不定冠詞「ａ」または「ａｎ」による「要素」への言及は、文脈上、要素の一つのみが存在することが明確に要求されない限り、複数の要素が存在する可能性を排除するものではない。

【0022】

本明細書全体を通して、「一つの実施形態」、「実施形態」、「一つの態様」、または「態様」は、実施形態に関連して説明される特定の特徴、構造、または特性が、本開示の少なくとも一つの実施形態に含まれることを意味する。したがって、本明細書全体を通して様々な場所における「一つの実施形態では」または「実施形態では」という語句の外観は、必ずしもすべて同じ実施形態を指すとは限らない。さらに、特定の特徴、構造、または特性は、一つ以上の実施形態で、任意の適切な様式で組み合わせることができる。

【0023】

本明細書で使用される場合、数値に先行する「約」または「およそ」という用語は、数値の±１０％の範囲の値を示す。例えば、「約１０」は「１０」および「９～１１」として理解されるべきである。

【0024】

当業者によって理解されることになるように、すべての目的のために、特に、記載された説明を提供するという観点から、本明細書に開示されるすべての範囲はまた、可能性のあるすべての部分範囲とその部分範囲の組み合わせとを包含する。列挙されたいかなる範囲も、十分に記載されて同じ範囲を少なくとも均等な半分、三分の一、四分の一、五分の一、十分の一などに分割できるものとして、容易に認識され得る。非限定的な例として、本明細書で議論された各範囲は、下位三分の一、中位三分の一、および上位三分の一などに容易に分けることができる。また当業者によって理解されることになるように、「最大」、「少なくとも」、「より大きい」、「より小さい」などのすべての言葉遣いは、上記で議論されたような部分範囲にその後分割できる範囲を記載し指示する数を含む。最後に、当業者によって理解されることになるように、範囲は、それぞれの個別のメンバーを含む。したがって、例えば、１～３個の細胞を有する群は、１個、２個、または３個の細胞を有する群を指す。同様に、１～５個の細胞を有する群は、１個、２個、３個、４個、または５個の細胞を有する群などを指す。

【0025】

本開示の様々な態様を、範囲形式で提示することができる。範囲形式の記載は、単に便宜上および簡潔にするためのものであり、本発明の範囲に対する融通性のない制限として解釈されるべきではないことが理解されるべきである。したがって、範囲の記載は、すべての可能性のある部分範囲、ならびにその範囲内の個々の数値を具体的に開示したとみなされるべきである。例えば、１～６などの範囲の記載は、１～３、１～４、１～５、２～４、２～６、３～６などの部分範囲、ならびにその範囲内の個々の数、例えば、１、２、２．７、３、４、５、５．３、６を具体的に開示したとみなされるべきである。これは、範囲の広がりに関係なく適用される。

【0026】

概して、本明細書に記載される細胞および組織培養、分子生物学、免疫学、微生物学、遺伝学およびタンパク質ならびに核酸化学ならびにハイブリダイゼーションに関連して使用される命名法は周知であり、当該技術分野で一般的に使用される。本明細書に提供される方法および技術は、通常、当該技術分野で周知の従来的な方法に従って、また別段の示唆がない限り、本明細書全体を通して引用および考察される様々な一般的およびより具体的な参考文献に記載されるように実施される。酵素反応および精製技術は、当該技術分野で一般的に達成されるかまたは本明細書に記載されるように、製造業者の仕様に従って実施される。本明細書に記載される分析化学、合成有機化学、および医薬および医薬化学に関連して使用される命名法は、当該技術分野で周知であり、一般的に使用されているものである。標準技術は、化学合成、化学分析、医薬調製、製剤、および送達、ならびに患者の治療に使用される。

【0027】

本明細書で使用される場合、「対照」は、比較目的で実験で使用される代替的な試料である。対照は、「陽性」または「陰性」とすることができる。本明細書で使用される場合、「対照試料」または「参照試料」とは、実験試料と比較するための対照として機能する試料または参照を指す。例えば、実験試料は、バイアル中に化合物Ａ、Ｂ、およびＣを含み、対照は、実験試料と同一に処理されたものであるが、化合物Ａ、Ｂ、またはＣのうちの一つ以上を欠く、同じタイプの試料であってもよい。

【0028】

本明細書で使用される場合、「ポリヌクレオチド」という用語は、ヌクレオチドの鎖として定義される。さらに、核酸はヌクレオチドのポリマーである。したがって、本明細書で使用される核酸およびポリヌクレオチドは互換性がある。当業者であれば、核酸がポリヌクレオチドであり、単量体である「ヌクレオチド」内に加水分解され得るという一般知識を有する。単量体であるヌクレオチドを、ヌクレオシドに加水分解することができる。ポリヌクレオチドには、当該技術分野で利用可能な任意の手段によって取得されるすべての核酸配列が含まれるがこれらに限定されず、これには、組み換え手段、すなわち、通常のクローニング技術およびポリメラーゼ連鎖反応などを使用した組み換えライブラリーまたは細胞ゲノムからの核酸配列のクローニング、および合成的な手段が含まれるが、これらに限定されない。

【0029】

本明細書で使用される場合、「ペプチド」、「ポリペプチド」、および「タンパク質」という用語は互換的に使用され、ペプチド結合によって共有結合したアミノ酸残基から成る化合物を指す。タンパク質またはペプチドは、少なくとも二つのアミノ酸を含有する必要があり、タンパク質配列またはペプチド配列を構成しすることができるアミノ酸の最大数に制限はない。ポリペプチドは、ペプチド結合によって互いに結合された二つ以上のアミノ酸を含む任意のペプチドまたはタンパク質を含む。本明細書で使用される場合、この用語は、当該技術分野において一般に、例えばペプチド、オリゴペプチド、およびオリゴマーとも呼ばれる短い連鎖と、当該技術分野において一般にタンパク質と呼ばれ、多くの種類がある、より長い連鎖の両方を指す。「ポリペプチド」には、例えば、とりわけ、生物学的に活性の断片、実質的に相同的なポリペプチド、オリゴペプチド、ホモ二量体、ヘテロ二量体、ポリペプチドの変異体、修飾ポリペプチド、誘導体、類似体、融合タンパク質が含まれる。ポリペプチドは、天然ペプチド、組み換えペプチド、合成ペプチド、またはそれらの組み合わせを含む。

【0030】

本明細書で使用される場合、「組成物」という用語は、任意選択的に指定量での指定成分（例えば、本明細書に提供される腫瘍溶解性ウイルス）を含有する生成物、ならびに任意選択的に指定量での指定成分の組み合わせから直接的または間接的にもたらされる任意の生成物を包含することが意図される。

【0031】

本明細書で使用される場合、「ベクター」という用語は、単離された核酸を含み、単離された核酸を細胞の内部に送達するために使用できる組成物を指す。数多くのベクターが当該技術分野で周知であり、これには、直鎖ポリヌクレオチド、イオン性化合物または両親媒性化合物に関連するポリヌクレオチド、プラスミド、およびウイルスが含まれるが、これらに限定されない。したがって、「ベクター」という用語は、自己複製するプラスミドまたはウイルスを含む。この用語はまた、例えば、ポリリシン化合物、リポソームなどの細胞への核酸の輸送を促進する非プラスミドおよび非ウイルス性化合物を含むと解釈されるべきである。ウイルスベクターの例としては、センダイウイルスベクター、アデノウイルスベクター、アデノ関連ウイルスベクター、ＨＳＶベクター、レトロウイルスベクター、レンチウイルスベクターなどが挙げられるが、これらに限定されない。

【0032】

本明細書で使用される場合、「発現ベクター」という用語は、発現されるヌクレオチド配列に動作可能に連結された発現制御配列を含む、組み換えポリヌクレオチドを含むベクターを指す。発現ベクターは、発現のための十分なシス作用性要素を含み、発現のための他の要素は、宿主細胞によって、またはインビトロ発現系内で供給され得る。発現ベクターは、組み換えポリヌクレオチドを組み込む、コスミド、プラスミド（例えば、ネイキッド、またはリポソーム内に含有される）、およびウイルス（例えば、センダイウイルス、レンチウイルス、レトロウイルス、アデノウイルス、およびアデノ関連ウイルス）など、当該技術分野で周知の全てのものを含む。

【0033】

本明細書で使用される場合、「発現」という用語は、そのプロモーターによって駆動される特定のヌクレオチド配列の転写および／または翻訳として定義される。

【0034】

本明細書で使用される場合、「エピトープ」という用語は、免疫応答を誘発し、Ｂ細胞応答および／またはＴ細胞応答を誘発することができる抗原上の小さな化学分子として定義される。抗原は、一つ以上のエピトープを有し得る。ほとんどの抗原は、多くのエピトープを有する、すなわち、多価である。一般に、エピトープは、およそ約１０個のアミノ酸および／または糖のサイズである。好ましくは、エピトープは、約４～１８個のアミノ酸、より好ましくは約５～１６個のアミノ酸、さらにより好ましくは６～１４個のアミノ酸、より好ましくは約７～１２個のアミノ酸、最も好ましくは約８～１０個のアミノ酸である。当業者であれば、分子の特異的な直鎖状配列ではなく全体的な三次元構造が概して抗原特異性の主な基準であり、従って一つのエピトープを別のエピトープから区別することを理解している。本開示に基づいて、本発明のペプチドはエピトープとすることができる。

【0035】

別段の指定がない限り、「アミノ酸配列をコードするヌクレオチド配列」は、互いの縮重バージョンであり、かつ同じアミノ酸配列をコードする、全てのヌクレオチド配列を含む。「タンパク質またはＲＮＡをコードするヌクレオチド配列」という語句はまた、一部のバージョンでタンパク質をコードするヌクレオチド配列がイントロンを含有し得る程度までイントロンを含んでもよい。

【0036】

本明細書で使用される場合、「自己」という用語は、後にその個体に再導入されるのと同じ個体に由来する任意の材料を指すことを意味する。

【0037】

本明細書で使用される場合、「同種異系」とは、同じ種の異なる動物に由来する任意の材料を指す。「異種」は、異なる種の動物に由来する任意の材料を指す。

【0038】

本明細書で使用される場合、「キメラ抗原受容体」または「ＣＡＲ」という用語は、免疫細胞上に発現され、標的タンパク質または抗原に特異的に結合するように操作された人工受容体を指す。ＣＡＲは、養子細胞移植を用いた療法として使用されてもよく、ここでは、Ｔ細胞が患者から除去され、ＣＡＲを発現するように改変され、次いで患者に再導入される。一部の実施形態では、ＣＡＲは、選択された標的、例えば、前立腺特異的膜抗原を発現する細胞に対する特異性を有する。ＣＡＲはまた、細胞内活性化ドメイン、膜貫通ドメイン、および腫瘍関連抗原結合領域を含む細胞外ドメインを含んでもよい。

【0039】

本明細書で使用される場合、「共刺激リガンド」という語句は、同族の共刺激分子をＴ細胞上に特異的に結合し、それにより、例えば、ペプチドに装填されたＭＨＣ分子とのＴＣＲ／ＣＤ３複合体の結合により提供される一次シグナルに加えて、増殖、活性化、分化等を含むがこれらに限定されないＴ細胞応答を媒介するシグナルを提供する、抗原提示細胞（例えば、人工ＡＰＣ（ａＡＰＣ）、樹状細胞、Ｂ細胞など）上の分子を含む。共刺激リガンドには、ＣＤ７、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ－Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ）、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ－Ｇ、ＭＩＣＡ、ＭＩＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＨＶＥＭ、Ｔｏｌｌリガンド受容体を結合する作動薬もしくは抗体、またはＢ７－Ｈ３に特異的に結合するリガンドを含むが、これらに限定されない。共刺激リガンドはまた、とりわけ、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、０Ｘ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－ｌ、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原ｌ（ＬＦＡ－ｌ）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、およびＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどの、Ｔ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体を包含する。

【0040】

本明細書で使用される場合、「共刺激分子」とは、共刺激リガンドと特異的に結合し、それによって増殖を含むがこれに限定されない、Ｔ細胞による共刺激応答を媒介する、Ｔ細胞上の同族の結合パートナーを指す。共刺激分子には、ＭＨＣクラスＩ分子、ＢＴＬＡ、およびＴｏｌｌリガンド受容体が含まれるが、これらに限定されない。

【0041】

本明細書で使用される場合、「共刺激シグナル」とは、ＴＣＲ／ＣＤ３ライゲーションなどの一次シグナルと組み合わせたシグナルを指し、Ｔ細胞増殖および／または主要分子の上方制御または下方制御をもたらす。

【0042】

本明細書で使用される場合、「有効量」および「治療有効量」という語句は互換的に使用され、特定の生物学的結果を達成する、または治療的な利益もしくは予防的な利益を提供するために有効な、本明細書に記載される化合物、製剤、材料、または組成物の量を指す。こうした結果には、哺乳動物（例えば、ヒト患者）に投与された時に、腫瘍サイズ、数、または体積の減少、癌／腫瘍細胞死、および／または腫瘍退縮を引き起こす量が含まれてもよいが、これらに限定されない。当業者であれば、本明細書で投与される組成物の量は、治療対象の癌、治療対象の哺乳動物の年齢や健康、身体状態、癌の段階／疾患の重症度、投与される特定の化合物などの多くの要因に基づいて変化し、容易に決定できることを理解するであろう。

【0043】

本明細書で使用される場合、ＣＡＲまたはその抗原結合ドメインに関して「特異的に結合する」という語句は、ＣＡＲは特定の抗原を認識するが、試料中の他の分子を実質的には認識または結合しないことを意味する。例えば、一つの種に由来する抗原に特異的に結合するＣＡＲは、一つ以上の種に由来するその抗原に結合してもよい。しかし、こうした交差反応性自体は、抗体の分類を特異的なものとして変えるものではない。別の例では、抗原に特異的に結合するＣＡＲは、抗原の異なる対立遺伝子型に結合してもよい。しかし、こうした交差反応性自体は、分類を特異的なものとして変えるものではない。

【0044】

ＩＩ．キメラ抗原受容体
一部の態様では、本開示は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を含む、改変免疫細胞またはその前駆体、例えば、Ｔ細胞またはナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）のための組成物および方法を提供する。したがって、一部の態様では、免疫細胞は、ＣＡＲを発現するように遺伝子改変されている。一部の態様では、本開示のＣＡＲは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、ヒンジドメイン、および細胞内シグナル伝達ドメインを含む。一部の態様では、ＣＡＲは、抗原結合ドメイン、スペーサードメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびシグナル伝達ドメインを含む。

【0045】

一部の態様では、抗原結合ドメインは、細胞内での発現のために、本明細書の別の箇所で記載される膜貫通ドメインおよび／または細胞内ドメインなどのＣＡＲの別のドメインに動作可能に連結されてもよい。一部の態様では、抗原結合ドメインをコードする第一の核酸配列は、膜貫通ドメインをコードする第二の核酸に動作可能に連結され、さらに細胞内ドメインをコードする第三の核酸配列に動作可能に連結される。

【0046】

一部の態様では、本明細書に記載される抗原結合ドメインは、本明細書に記載される膜貫通ドメインのいずれか、本明細書に記載される細胞内ドメインもしくは細胞質ドメインのいずれか、または本発明のＣＡＲに含まれうる本明細書に記載される他のドメインのいずれかと組み合わせることができる。一部の態様では、ＣＡＲはまた、本明細書に記載されるようにスペーサードメインを含んでもよい。一部の態様では、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、および細胞内ドメインの各々は、リンカーによって分離される。

【0047】

抗原結合ドメイン
ＣＡＲの抗原結合ドメインは、タンパク質、炭水化物、および糖脂質を含む特定の標的抗原に結合するためのＣＡＲの細胞外領域である。一部の態様では、ＣＡＲは、標的細胞上の標的抗原との親和性を含む。標的抗原は、標的細胞と関連付けられた任意のタイプのタンパク質またはそのエピトープを含んでもよい。例えば、ＣＡＲは、標的細胞の特定の病態を示す標的細胞上の標的抗原との親和性を含んでもよい。

【0048】

例示的な態様では、標的細胞抗原は、細胞表面上に発現されるＩＬ－１３Ｒα２である。一部の態様では、ＣＡＲは、ＩＬ－１３Ｒα２、ＩＬ－１３Ｒα２エピトープ、ＩＬ－１３Ｒα２変異体、および／またはＩＬ－１３Ｒα２断片に対する親和性または特異性を有する。

【0049】

別の例示的な態様では、標的細胞抗原は、細胞表面上に発現されるＨＥＲ２である。一部の態様では、ＣＡＲは、ＨＥＲ２、ＨＥＲ２エピトープ、ＨＥＲ２変異体、および／またはＨＥＲ２断片に対する親和性または特異性を有する。

【0050】

本明細書に記載されるように、標的細胞上の特定の標的抗原に対する親和性を有する本開示のＣＡＲは、標的特異的結合ドメインを含んでもよい。一部の実施形態では、標的特異的結合ドメインは、マウス標的特異的結合ドメインであり、例えば、標的特異的結合ドメインは、マウス起源である。一部の実施形態では、標的特異的結合ドメインは、ヒト標的特異的結合ドメインであり、例えば、標的特異的結合ドメインは、ヒト起源である。例示的な実施形態では、標的細胞上のＩＬ－１３Ｒα２またはＨＥＲ２との親和性を有する本開示のＣＡＲは、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインまたはＨＥＲ２結合ドメインを含んでもよい。一部の実施形態では、結合ドメインは、マウス結合ドメインであり、例えば、結合ドメインは、マウス起源である。一部の実施形態では、結合ドメインは、ヒト結合ドメインであり、例えば、ＩＬ結合ドメインは、ヒト起源である。

【0051】

一部の態様では、本開示のＣＡＲは、一つ以上の標的細胞上の一つ以上の標的抗原に対して親和性を有してもよい。一部の態様では、ＣＡＲは、標的細胞上の一つ以上の標的抗原に対して親和性を有してもよい。こうした態様では、ＣＡＲは二重特異性ＣＡＲ、または多重特異性ＣＡＲである。一部の態様では、ＣＡＲは、一つ以上の標的抗原に親和性を与える一つ以上の標的特異的結合ドメインを含む。一部の態様では、ＣＡＲは、同じ標的抗原に親和性を与える一つ以上の標的特異的結合ドメインを含む。例えば、同じ標的抗原に対する親和性を有する一つ以上の標的特異的結合ドメインを含むＣＡＲは、標的抗原の別個のエピトープを結合することができる。複数の標的特異的結合ドメインがＣＡＲ中に存在する場合、結合ドメインは縦一列に配置されてもよく、リンカーペプチドによって分離されてもよい。例えば、二つの標的特異的結合ドメインを含むＣＡＲにおいて、結合ドメインは、オリゴリンカーもしくはポリペプチドリンカー、Ｆｃヒンジ領域、または膜ヒンジ領域を介して、単一のポリペプチド鎖上で互いに共有結合される。

【0052】

一部の態様では、抗原結合ドメインは、抗体、抗原結合断片（Ｆａｂ）、および単鎖可変断片（ｓｃＦｖ）から成る群から選択される。一部の実施形態では、本発明のＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインまたはＨＥＲ２結合ドメインは、ＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的な抗体、ＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的なＦａｂ、およびＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的なｓｃＦｖから成る群から選択される。一つの実施形態では、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインまたはＨＥＲ２結合ドメインは、ＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的な抗体である。一つの実施形態では、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインまたはＨｅｒ２結合ドメインは、ＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的なＦａｂである。一つの実施形態では、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインまたはＨＥＲ２結合ドメインは、ＩＬ－１３Ｒα２特異的もしくはＨＥＲ２特異的なｓｃＦｖである。一部の態様では、抗原結合ドメインは、ＩＬ－１３サイトカインまたはその変異体、バリアント、または断片（すなわち、「ゼータカイン」）である。例えば、一部の実施形態では、抗原結合ドメインは、ＩＬ１３ Ｅ１３Ｙムテインを含んでもよい。

【0053】

抗原結合ドメインは、抗原に結合する任意のドメインを含むことができ、また、ＩＬ－１３Ｒα２に結合することのできるＩＬ－１３タンパク質、ポリペプチド、バリアント、変異体、もしくはその断片、またはＨＥＲ２に結合することのできるタンパク質もしくはポリペプチド、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、合成抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、非ヒト抗体、ならびにその任意の断片またはｓｃＦｖを含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、抗原結合ドメイン部分は、哺乳動物抗体またはその断片を含む。抗原結合ドメインの選択は、標的細胞の表面上に存在する抗原の種類および数に依存してもよい。本明細書で使用される場合、「単鎖可変断片」または「ｓｃＦｖ」という用語は、ＶＨ：：ＶＬヘテロ二量体を形成するために共有結合された免疫グロブリン（例えば、マウスまたはヒト）の重鎖（ＶＨ）および軽鎖（ＶＬ）の可変領域の融合タンパク質である。重鎖（ＶＨ）および軽鎖（ＶＬ）は、直接結合されるか、またはペプチドをコードするリンカーによって結合され、これはＶＨのＮ末端をＶＬのＣ末端に、またはＶＨのＣ末端をＶＬのＮ末端に接続する。一部の実施形態では、抗原結合ドメイン（例えば、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメイン）は、Ｎ末端からＣ末端へ、ＶＨ－リンカー－ＶＬの構成を有するｓｃＦｖを含む。一部の実施形態では、抗原結合ドメイン（例えば、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメイン）は、Ｎ末端からＣ末端へ、ＶＬ－リンカー－ＶＨの構成を有するｓｃＦｖを含む。当業者であれば、本発明で使用するための適切な構成を選択することができるであろう。ｓｃＦｖのリンカーは通常、柔軟性のためにグリシンが豊富であり、また溶解性のためにセリンまたはトレオニンが豊富である。リンカーは、細胞外抗原結合ドメインの重鎖可変領域および軽鎖可変領域を連結することができる。リンカーの非限定的な例は、米国特許第２０１４／０８７０１０号に開示されている。

【0054】

一部の態様では、抗原結合ドメインは、ＧＰＶＰＰＳＴＡＬＲＹＬＩＥＥＬＶＮＩＴＱＮＱＫＡＰＬＣＮＧＳＭＶＷＳＩＮＬＴＡＧＭＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧＣＳＡＩＥＫＴＱＲＭＬＳＧＦＣＰＨＫＶＳＡＧＱＦＳＳＬＨＶＲＤＴＫＩＥＶＡＱＦＶＫＤＬＬＬＨＬＫＫＬＦＲＥＧＲＦＮ（配列番号１）を含む。

【0055】

一部の態様では、抗原結合ドメインは、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＧＳＴＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号９）を含む。

【0056】

一部の態様では、結合ドメインにおいて、ＩＬ－１３Ｒα２への結合を維持しつつ、耐容性があるバリエーションは、当業者であれば周知となるであろう。一部の態様では、ＩＬ－１３Ｒα２結合ドメインは、配列番号１または配列番号９との、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0057】

スペーサードメイン
一部の態様では、ＣＡＲはスペーサードメインを含む。一部の態様では、スペーサードメインは、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびシグナル伝達ドメインのうちの一つ以上を、抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびシグナル伝達ドメインのうちの一つ以上に連結するように機能するオリゴペプチドまたはポリペプチドである。一部の態様では、スペーサードメインは、２個、３個、４個、５個、６個、７個、８個、９個または１０個のアミノ酸の長さを含む短いアミノ酸リンカーであってもよい。例えば、グリシン－セリンのダブレットである。一部の態様では、スペーサードメインは、ＣＡＲの細胞内ドメインと膜貫通ドメインとの間に発生する。一部の態様では、スペーサードメインは、細胞外ドメインと膜貫通ドメインとの間に発生する。一部の態様では、スペーサードメインは、最大３００個のアミノ酸、例えば、１０～１００個のアミノ酸、または２５～５０個のアミノ酸を含んでもよい。

【0058】

リンカーの非限定的な例は、ＷＯ ２０１５／１０５５２２号に開示されている。

【0059】

一部の態様では、スペーサードメインは免疫グロブリンＦｃドメインを含む。一部の態様では、スペーサードメインはＩｇＧ Ｆｃドメインを含む。一部の態様では、スペーサードメインはＩｇＧ４ Ｆｃドメインを含む。一部の態様では、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインは、以下のうちの一つを含む：
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号１０）、
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＧＧＧＳＳＧＧＧＳＧＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号２）、
ＥＳＫＹＧＰＰＣＰＳＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＱＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号３）、
ＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＱＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶ ＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４）、または
ＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号５）。

【0060】

一部の態様では、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインにおいて耐容性があるバリエーションは、当業者であれば周知となるであろう。一部の態様では、ＩｇＧ４ Ｆｃドメインは、配列番号２～５または配列番号１０のうちの一つとの、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0061】

ヒンジドメイン
一部の態様では、ＣＡＲはヒンジドメインを含む。ＣＡＲのヒンジドメインは、抗原結合ドメインと膜貫通ドメインとの間に位置付けられることができる親水性領域である。一部の態様では、このドメインは、数ある機能の中でも、ＣＡＲに対する適切なタンパク質フォールディングを促進してもよい。ヒンジドメインは、ＣＡＲの任意選択的な構成要素である。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ヒンジドメインをさらに含む。ヒンジドメインは、抗体のＦｃ断片、抗体のヒンジ領域、抗体のＣＨ２領域、抗体のＣＨ３領域、人工ヒンジ配列、またはそれらの組み合わせから選択されるドメインを含んでもよい。ヒンジドメインの例としては、ＣＤ８ａヒンジ、３個のグリシン（Ｇｌｙ）と同程度に小さいポリペプチドでできた人工ヒンジ、ならびにＩｇＧ（ヒトＩｇＧ４など）のＣＨ１ドメインおよびＣＨ３ドメインが挙げられるが、これらに限定されない。

【0062】

一部の態様では、ＣＡＲは、抗原結合ドメインを膜貫通ドメインに接続するヒンジドメインを含み、これは次に細胞内ドメインに接続する。ヒンジドメインは、抗原結合ドメインを支持して、標的細胞上の標的抗原を認識し結合することができることが好ましい。一部の態様では、ヒンジドメインは柔軟性のあるドメインであり、したがって、抗原結合ドメインが、腫瘍細胞などの細胞上の標的抗原の特定の構造および密度を最適に認識する構造を有することを可能にする。ヒンジドメインの柔軟性により、ヒンジ領域は多くの異なる立体構造を採用することができる。

【0063】

一部の実施形態において、ヒンジドメインは、免疫グロブリン重鎖ヒンジ領域である。一部の実施形態では、ヒンジドメインは、受容体（例えば、ＣＤ８由来ヒンジ領域）に由来するポリペプチドである。

【0064】

一部の態様では、ヒンジドメインは、約４個のアミノ酸～約５０個のアミノ酸、例えば、約４ａａ～約１０ａａ、約１０ａａ～約１５ａａ、約１５ａａ～約２０ａａ、約２０ａａ～約２５ａａ、約２５ａａ～約３０ａａ、約３０ａａ～約４０ａａ、または約４０ａａ～約５０ａａの長さを有してもよい。

【0065】

一部の態様では、ヒンジドメインは、容易に選択することができ、１個のアミノ酸（例えば、Ｇｌｙ）～２０個のアミノ酸、２個のアミノ酸～１５個のアミノ酸、３個のアミノ酸～１２個のアミノ酸、４個のアミノ酸から１０個のアミノ酸、５個のアミノ酸から９個のアミノ酸、６個のアミノ酸から８個のアミノ酸、または７個のアミノ酸～８個のアミノ酸などの適切な長さの数であってもよく、また１個、２個、３個、４個、５個、６個、または７個のアミノ酸であってもよい。

【0066】

膜貫通ドメイン
一部の態様では、本開示のＣＡＲは、ＣＡＲの抗原結合ドメインをＣＡＲの細胞内ドメインに接続する膜貫通ドメインを含んでもよい。対象のＣＡＲの膜貫通ドメインは、細胞（例えば、免疫細胞またはその前駆体）の原形質膜の全範囲にわたることができる領域である。膜貫通ドメインは、細胞膜、例えば、真核細胞膜への挿入用である。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＡＲの抗原結合ドメインと細胞内ドメインとの間にはさまれる。

【0067】

一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＡＲの一つ以上のドメインと自然に関連付けられる。一部の態様では、膜貫通ドメインは、こうしたドメインが同一または異なる表面膜タンパク質の膜貫通ドメインに結合するのを回避し、受容体複合体の他のメンバーとの相互作用を最小化するために、一つ以上のアミノ酸置換によって選択または改変されることができる。膜貫通ドメインは、自然源または合成源のいずれに由来してもよい。自然源である場合、ドメインは、任意の膜結合タンパク質または膜貫通タンパク質、例えば、Ｉ型膜貫通タンパク質に由来してもよい。合成源である場合、膜貫通ドメインは、細胞膜、例えば、人工疎水性配列へのＣＡＲの挿入を容易にする任意の人工配列であってもよい。一部の態様では、膜貫通ドメインは、Ｔ細胞受容体、ＣＤ２８、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ４５、ＣＤ４、ＣＤ５、ＣＤ７、ＣＤ８、ＣＤ９、ＣＤ１６、ＣＤ２２、ＣＤ３３、ＣＤ３７、ＣＤ６４、ＣＤ８０、ＣＤ８６、ＣＤ１３４（ＯＸ－４０）、ＣＤ１３７（４－１ＢＢ）、ＣＤ１５４（ＣＤ４０Ｌ）、Ｔｏｌｌ様受容体１（ＴＬＲ１）、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、およびＴＬＲ９のα鎖、β鎖またはζ鎖に由来する（すなわち、少なくともその膜貫通領域を含む）膜貫通ドメインである。一部の態様では、膜貫通ドメインは合成であってもよく、その場合、これはロイシンおよびバリンなどの主に疎水性残基を含む。好ましくは、フェニルアラニン、トリプトファン、およびバリンのトリプレットが、合成膜貫通ドメインの各末端に見出される。

【0068】

一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ４膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、ＣＤ４膜貫通ドメインは、ＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦ（配列番号６）を含む。一部の態様では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８膜貫通ドメインを含む。一部の態様では、ＣＤ８膜貫通ドメインは、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴ（配列番号１１）、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹ（配列番号１２）、またはＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ（配列番号１３）を含む。

【0069】

一部の態様では、膜貫通ドメインにおいて耐容性があるバリエーションは、当業者であれば周知となるであろう。一部の態様では、膜貫通ドメインは、配列番号６または配列番号１３との、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0070】

共刺激ドメイン
一部の態様では、堅牢なＣＡＲ－Ｔ細胞の増殖、機能、持続性、および抗腫瘍活性を達成するために、共刺激シグナルが必要である。これらは、一つ以上のＴ細胞共刺激分子からの一つ以上の共刺激ドメインを組み込むことによって提供されてもよい。一部の態様では、共刺激ドメインは、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、０Ｘ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－ｌ、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原ｌ（ＬＦＡ－ｌ）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３またはその断片と特異的に結合するリガンドの共刺激分子から選択される。

【0071】

一部の態様では、共刺激ドメインは、４－１ＢＢ共刺激ドメインを含む。一部の態様では、４－１ＢＢ共刺激ドメインは、ＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬ（配列番号７）を含む。

【0072】

一部の態様では、共刺激ドメインにおける耐容性があるバリエーションは、当業者であれば周知であろう。一部の態様では、共刺激ドメインは、配列番号７との、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0073】

細胞内シグナル伝達ドメイン
一部の態様では、ＣＡＲは細胞内シグナル伝達ドメインも含む。「細胞内シグナル伝達ドメイン」および「細胞内ドメイン」という用語は、本明細書では互換的に使用される。ＣＡＲの細胞内シグナル伝達ドメインは、ＣＡＲが発現される細胞のエフェクター機能（例えば、免疫細胞）の少なくとも一つの活性化を担う。細胞内シグナル伝達ドメインは、エフェクター機能シグナルを形質導入し、細胞（例えば、免疫細胞）に対し、例えば、標的細胞に害を及ぼし、および／または破壊するなどの、その特殊な機能を実施するよう指示する。

【0074】

一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、表面受容体、共刺激分子、またはＴ細胞におけるシグナル形質導入を開始するために協調して機能する任意の分子の細胞質部分であるほか、これらの要素の任意の誘導体またはバリアントや、同じ機能的能力を有する任意の合成配列である。

【0075】

一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、Ｔ細胞受容体複合体のｚ鎖、またはその任意の相同体（例えば、ｈ鎖、ＦｃｓＲｆｙおよびｂ鎖、ＭＢ１（ＩｇＡ）鎖、Ｂ２９（Ｉｇ）鎖）、ヒトＣＤ３ ζ鎖、ＣＤ３ポリペプチド（Ａ、ｄおよびｅ）、ｓｙｋファミリーのチロシンキナーゼ（Ｓｙｋ、ＺＡＰ ７０など）、ｓｒｃファミリーのチロシンキナーゼ（Ｌｃｋ、Ｆｙｎ、Ｌｙｎなど）、およびＴ細胞形質導入に関与するその他の分子（ＣＤ２、ＣＤ５、ＣＤ２８など）である。一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ヒトＣＤ３ ζ鎖、ＦｃｙＲＩＩＩ、ＦｃｓＲＩ、Ｆｃ受容体の細胞質尾部、細胞質受容体を有する免疫受容活性化チロシンモチーフ（ＩＴ ＡＭ）、およびそれらの組み合わせであってもよい。

【0076】

一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＴＣＲ、ＣＤ３ゼータ、ＣＤ３ガンマ、ＣＤ３デルタ、ＣＤ３イプシロン、ＣＤ８６、共通ＦｃＲガンマ、ＦｃＲベータ（Ｆｃイプシロン Ｒｉｂ）、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ、ＦｃガンマＲｌｌａ、ＤＡＰ １０、ＤＡＰ １２、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、ＣＤ８、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ９、０Ｘ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－ｌ、ＩＣＯＳ、ＫＩＲファミリータンパク質、リンパ球機能関連抗原ｌ（ＬＦＡ－ｌ）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、ＣＤ８３と特異的に結合するリガンド、ＣＤＳ、ＩＣＡＭ－ｌ、ＧＩＴＲ、ＢＡＦＦＲ、ＨＶＥＭ（ＬＩＧＨＴＲ）、ＳＬＡＭＦ７、ＮＫｐ８０（ＫＬＲＦ１）、ＣＤ１２７、ＣＤ１６０、ＣＤ１９、ＣＤ４、ＣＤ８アルファ、ＣＤ８ベータ、ＩＬ２Ｒベータ、ＩＬ２Ｒガンマ、ＩＬ７Ｒアルファ、ＩＴＧＡ４、ＶＬＡ１、ＣＤ４９ａ、ＩＴＧＡ４、ＩＡ４、ＣＤ４９Ｄ、ＩＴＧＡ６、ＶＬＡ－６、ＣＤ４９ｆ、ＩＴＧＡＤ、ＣＤ１ ＩＤ、ＩＴＧＡＥ、ＣＤ１０３、ＩＴＧＡＬ、ＣＤ１１ａ、ＬＦＡ－ｌ、ＩＴＧＡＭ、ＣＤ ｌｉｂ、ＩＴＧＡＸ、ＣＤ ｌ ｌｃ、ＩＴＧＢ１、ＣＤ２９、ＩＴＧＢ２、ＣＤ １８、ＬＦＡ－１、ＩＴＧＢ７、ＴＮＦＲ２、ＴＲＡＮＣＥ／ＲＡＮＫＬ、ＤＮＡＭ１（ＣＤ２２６）、ＳＬＡＭＦ４（ＣＤ２４４、２Ｂ４）、ＣＤ８４、ＣＤ ９６（Ｔａｃｔｉｌｅ）、ＣＥＡＣＡＭ１、ＣＲＴ ＡＭ、Ｌｙ９（ＣＤ２２９）、ＣＤ１６０（ＢＹ５５）、ＰＳＧＬ１、ＣＤ １００（ＳＥＭＡ４Ｄ）、ＣＤ６９、ＳＬＡＭＦ６（ＮＴＢ－Ａ、Ｌｙｌ０８）、ＳＬＡＭ（ＳＬＡＭＦ１、ＣＤ１５０、ＩＰＯ－３）、ＢＬＡＭＥ（ＳＬＡＭＦ８）、ＳＥＬＰＬＧ（ＣＤ １６２）、ＬＴＢＲ、ＬＡＴ、ＧＡＤＳ、ＳＬＰ－７６、ＰＡＧ／Ｃｂｐ、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４６、ＮＫＧ２Ｄ、Ｔｏｌｌ様受容体１（ＴＬＲ１）、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３、ＴＬＲ４、ＴＬＲ５、ＴＬＲ６、ＴＬＲ７、ＴＬＲ８、ＴＬＲ９、本明細書に記載される他の共刺激分子、その任意の誘導体、バリアント、またはその断片、および同じ機能的能力を有する共刺激分子の任意の合成配列、およびそれらの任意の組み合わせを含むがこれらに限定されない、一つ以上の分子または受容体の断片またはドメインを含む。

【0077】

一部の態様では、細胞内シグナル伝達ドメインは、ＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ（配列番号１５）などのＣＤ３ζシグナル伝達ドメインである。

【0078】

一部の態様では、本開示のＣＡＲは、ＧＰＶＰＰＳＴＡＬＲＹＬＩＥＥＬＶＮＩＴＱＮＱＫＡＰＬＣＮＧＳＭＶＷＳＩＮＬＴＡＧＭＹＣＡＡＬＥＳＬＩＮＶＳＧＣＳＡＩＥＫＴＱＲＭＬＳＧＦＣＰＨＫＶＳＡＧＱＦＳＳＬＨＶＲＤＴＫＩＥＶＡＱＦＶＫＤＬＬＬＨＬＫＫＬＦＲＥＧＲＦＮＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＧＧＧＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ（配列番号８）を含む、または同左から成る。

【0079】

一部の態様では、本開示のＣＡＲは、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＤＶＮＴＡＶＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＳＡＳＦＬＹＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＲＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＨＹＴＴＰＰＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＧＳＴＳＧＧＧＳＧＧＧＳＧＧＧＧＳＳＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＮＩＫＤＴＹＩＨＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＡＲＩＹＰＴＮＧＹＴＲＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＡＤＴＳＫＮＴＡＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＳＲＷＧＧＤＧＦＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＱＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＫＲＧＲＫＫＬＬＹＩＦＫＱＰＦＭＲＰＶＱＴＴＱＥＥＤＧＣＳＣＲＦＰＥＥＥＥＧＧＣＥＬＧＧＧＲＶＫＦＳＲＳＡＤＡＰＡＹＱＱＧＱＮＱＬＹＮＥＬＮＬＧＲＲＥＥＹＤＶＬＤＫＲＲＧＲＤＰＥＭＧＧＫＰＲＲＫＮＰＱＥＧＬＹＮＥＬＱＫＤＫＭＡＥＡＹＳＥＩＧＭＫＧＥＲＲＲＧＫＧＨＤＧＬＹＱＧＬＳＴＡＴＫＤＴＹＤＡＬＨＭＱＡＬＰＰＲ（配列番号１４）を含む、または同左から成る。

【0080】

一部の態様では、ＣＡＲにおける耐容性があるバリエーションは、当業者であれば周知であろう。一部の態様では、ＣＡＲは、配列番号８または配列番号１４との、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約８６％、少なくとも約８７％、少なくとも約８８％、少なくとも約８９％、少なくとも約９０％、少なくとも約９１％、少なくとも約９２％、少なくとも約９３％、少なくとも約９４％、少なくとも約９５％、少なくとも約９６％、少なくとも約９７％、少なくとも約９８％、または少なくとも約９９％の配列同一性を有するアミノ酸配列を含む。

【0081】

一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞は、当業者に周知の任意の手段によって宿主細胞内に導入される。発現ベクターは、必要に応じて、トランスフェクションのためのウイルス配列を含んでもよい。あるいは、発現ベクターは、融合、エレクトロポレーション、バイオリステック法、トランスフェクション、リポフェクションなどによって導入されてもよい。宿主細胞は、発現ベクターの導入前に培養物中で増殖させて、その後にベクターの導入および統合のための適切な処理を行ってもよい。次いで、宿主細胞は増殖され、ベクター中に存在するマーカーによってスクリーニングされてもよい。使用され得る様々なマーカーは、当該技術分野で周知であり、ｈｐｒｔ、ネオマイシン耐性、チミジンキナーゼ、ヒグロマイシン耐性などを含んでもよい。本明細書で使用される場合、「細胞」、「細胞株」、および「細胞培養」という用語は、互換的に使用され得る。一部の実施形態では、宿主細胞は、免疫細胞またはその前駆体、例えば、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、またはＮＫ Ｔ細胞である。

【0082】

ＣＡＲがインビボで発現される場合、ＣＡＲはリーダー配列またはＧＭＣＳＦＲａシグナルペプチド、例えば、ＭＬＬＬＶＴＳＬＬＬＣＥＬＰＨＰＡＦＬＬＩＰ（配列番号１６）を一時的に含んでもよく、これは最終的に成熟ＣＡＲから切り離される。

【0083】

本開示はまた、ＣＡＲまたは本開示を含み安定的に発現する、遺伝子操作された細胞を提供する。一部の態様では、操作された細胞は、本開示のドミナントネガティブ受容体および／またはスイッチ受容体、ならびに／または二重特異性抗体、および／またはそれらの組み合わせを発現する。一部の態様では、遺伝子操作された細胞は、遺伝子操作されたＴリンパ球（Ｔ細胞）、ナイーブＴ細胞（ＴＮ）、メモリーＴ細胞（例えば、セントラルメモリーＴ細胞（ＴＣＭ）、エフェクターメモリー細胞（ＴＥＭ））、ナチュラルキラー細胞（ＮＫ細胞）、および治療に関連する子孫を生じさせることができるマクロファージである。一部の態様では、遺伝子操作された細胞は自己細胞である。改変細胞（例えば、対象のＣＡＲ、ドミナントネガティブ受容体および／またはスイッチ受容体を含む、および／または二重特異性抗体および／またはそれらの組み合わせを発現および／または分泌する）は、本開示の核酸を含む発現ベクターを有する宿主細胞を安定的に形質移入することによって産生されてもよい。本開示の改変細胞を生成するための追加の方法には、化学的変換方法（例えば、リン酸カルシウム、デンドリマー、リポソームおよび／またはカチオン性ポリマーを使用）、非化学的変換方法（例えば、エレクトロポレーション、光学変換、遺伝子の電気泳動転写および／または流体力学的送達）、および／または粒子ベースの方法（例えば、遺伝子銃および／またはマグネトフェクションを使用した遺伝子導入法）が含まれるが、これらに限定されない。本開示の対象のＣＡＲ、ドミナントネガティブ受容体および／またはスイッチ受容体、ならびに／または二重特異性抗体、および／またはそれらの組み合わせを発現する形質移入された細胞は、エクスビボで増殖されてもよい。

【0084】

一部の態様では、本開示は、ＣＡＲを発現する改変免疫細胞の集団に関する。一部の態様では、集団は、Ｔ細胞、ＮＫ細胞、および／またはマクロファージの一つ以上の亜集団を含む。

【0085】

一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団は、選択タグをさらに発現する。一部の態様では、選択タグは、切断型ＣＤ１９配列（ＣＤ１９ｔ）（例えば、ＣＧＤＶＥＥＮＰＧＰＲＭＰＰＰＲＬＬＦＦＬＬＦＬＴＰＭＥＶＲＰＥＥＰＬＶＶＫＶＥＥＧＤＮＡＶＬＱＣＬＫＧＴＳＤＧＰＴＱＱＬＴＷＳＲＥＳＰＬＫＰＦＬＫＬＳＬＧＬＰＧＬＧＩＨＭＲＰＬＡＩＷＬＦＩＦＮＶＳＱＱＭＧＧＦＹＬＣＱＰＧＰＰＳＥＫＡＷＱＰＧＷＴＶＮＶＥＧＳＧＥＬＦＲＷＮＶＳＤＬＧＧＬＧＣＧＬＫＮＲＳＳＥＧＰＳＳＰＳＧＫＬＭＳＰＫＬＹＶＷＡＫＤＲＰＥＩＷＥＧＥＰＰＣＶＰＰＲＤＳＬＮＱＳＬＳＱＤＬＴＭＡＰＧＳＴＬＷＬＳＣＧＶＰＰＤＳＶＳＲＧＰＬＳＷＴＨＶＨＰＫＧＰＫＳＬＬＳＬＥＬＫＤＤＲＰＡＲＤＭＷＶＭＥＴＧＬＬＬＰＲＡＴＡＱＤＡＧＫＹＹＣＨＲＧＮＬＴＭＳＦＨＬＥＩＴＡＲＰＶＬＷＨＷＬＬＲＴＧＧＷＫＶＳＡＶＴＬＡＹＬＩＦＣＬＣＳＬＶＧＩＬＨＬＱＲＡＬＶＬＲＲＫＲ（配列番号１７））である。一部の態様では、選択タグは、切断型上皮成長因子受容体配列（ＥＧＦＲｔ）である。一部の態様では、ＣＡＲを発現する細胞集団は、ＣＡＲ発現細胞の単離および精製を可能にするタグを含む。ＣＤ１９ｔおよびＥＧＦＲｔなどのタグは、Ｔ２Ａスキップ配列（例えば、ＬＥＧＧＧＥＧＲＧＳＬＬＴ（配列番号１８））によって成熟ＣＡＲ配列から分離されてもよい。

【0086】

ＩＩＩ．腫瘍溶解性ウイルス
腫瘍溶解性ウイルスは、癌細胞に特異的に感染して破壊するためにウイルスを利用する免疫療法の一形態である。これらのウイルスの一部は自然発生的であり、一部は合成または改変されたものであるが、いくつかの理由から、癌を治療する有望なアプローチとなっている。癌細胞は、感染に対する感受性を高める抗ウイルス防御が低下していることが多い。自然発生的な腫瘍溶解性ウイルスは、健康な細胞への感染能力を低下させるなど、有利な特性を与えるように改変され得る。感染後、これらのウイルスは、癌細胞を溶解させ、癌細胞を死滅させ、癌細胞抗原を放出させることができる。その後、これらの抗原は免疫応答を刺激し、それが免疫系の抗癌活性を増強することができる。

【0087】

一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは、レオウイルス、ニューカッスル病ウイルス（ＮＤＶ）、水疱性口内炎ウイルス（ＶＳＶ）、麻疹ウイルス、インフルエンザウイルス、シンビスウイルス、アデノウイルス、ポックスウイルス、およびヘルペスウイルス（ＨＳＶ）から選択される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは、アデノウイルス、ヘルペスウイルス、ポックスウイルス、ピコルナウイルス、ポリオウイルス、パラミキソウイルス、レオウイルス、パルボウイルス、およびラブドウイルスから選択される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスはワクシニアウイルスである。

【0088】

世界的には、Ｔ－ＶＥＣとＨ１０１のウイルス２種について規制当局の承認が得られている。Ｈ１０１は、全身化学療法と組み合わせた上咽頭癌の治療のために中国で承認された、遺伝子改変腫瘍溶解性アデノウイルスである。Ｔ－Ｖｅｃは、手術不能な局所進行性または転移性悪性の黒色腫に対する、組換え顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）含有のヒト単純ヘルペスＩ型ウイルス（ＨＳＶ－１）である。

【0089】

本開示の目的のため、開示された坑ＩＬ－１３Ｒα２ ＣＡＲとの組み合わせにあたっては、腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルスが好ましい。腫瘍溶解性単純ヘルペスウイルス（ｏＨＳＶ）Ｉ型構築物は、悪性神経膠腫を含む様々な悪性腫瘍に対する抗腫瘍薬である。これまで臨床試験から、ＣＮＳに直接投与された場合でも、これらの薬剤の安全性が支持されている。これらの薬剤に対する従来の米国食品医薬品局（ＦＤＡ）の臨床前毒性試験には、マウスおよび霊長類の研究を含む２種の使用が含まれた。特に、キメラｏＨＳＶ構築物であるＣ１３４は、いくつかのモデルシステムで安全かつ有効であることが示された。Ｃ１３４は、神経毒性があり、腫瘍溶解性第二世代であり、複製能力があり、組み換えおよび遺伝子操作された単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ－１）で、これにおいてＩＣＰ３４．５の遺伝子が欠失し、またヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）、タンパク質キナーゼＲ（ＰＫＲ）回避タンパク質ＩＲＳ１をコードする遺伝子が、潜在的な腫瘍溶解性活性および免疫賦活性を有する。腫瘍内投与をすると、腫瘍溶解性ＨＳＶ－１ Ｃ１３４は、急速に分裂するグリオーマ細胞内で特異的に感染・複製し、それによって腫瘍細胞を直接溶解する。次いで、放出されたウイルス粒子は、隣接する腫瘍細胞に感染・複製し、それによって腫瘍細胞をさらに死滅させる。溶解された腫瘍細胞から放出された腫瘍抗原はまた、免疫系を活性化して、腫瘍特異的全身免疫および細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）応答を誘導し、それによって、近くの非感染腫瘍細胞を死滅させる。ＩＣＰ３４．５をコードする遺伝子の欠失は、健康な細胞における複製を防止することによって、腫瘍の選択性を付与する。ＩＲＳ１発現は、ウイルスが腫瘍内で複製することを可能にするが、ウイルスの広がりは制限される。

【0090】

一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは遺伝子改変される。一部の態様では、ウイルス中で一つ以上の遺伝子が破壊されている。一部の態様では、ウイルス中で一つ以上の遺伝子が欠失している。一部の態様では、ウイルスに対して異種の一つ以上の遺伝子がウイルスに導入される。一部の態様では、遺伝子改変ウイルスはＨＳＶ－１である。一部の態様では、ＨＳＶ－１は、ＩＣＰ３４．５遺伝子が破壊または欠失されるように改変される。一部の態様では、ＨＳＶ－１は、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）ＩＲＳ１遺伝子がウイルスゲノム内に導入されるように改変される。一部の態様では、ＨＳＶ－１ウイルスはＣ１３４である。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスは複製能力がある。

【0091】

ＩＶ．医薬組成物
本発明の医薬組成物は、一つ以上の薬学的または生理学的に許容可能な担体、希釈剤、アジュバント、または賦形剤と組み合わせた、本明細書に記載される遺伝子改変免疫細胞を含んでもよい。こうした組成物は、緩衝剤（中性緩衝食塩水、リン酸緩衝食塩水など）、炭水化物（グルコース、マンノース、スクロース、またはデキストランなど）、マンニトール、タンパク質、ポリペプチド、またはアミノ酸（グリシンなど）、抗酸化剤、キレート剤（ＥＤＴＡまたはグルタチオンなど）、アジュバント（例えば、水酸化アルミニウム）、および保存料を含んでもよい。一部の態様では、本発明の組成物は、静脈内投与のために製剤化されることが好ましい。一部の態様では、本発明の医薬組成物は、中枢神経系への投与のために製剤化されることが好ましい。一部の態様では、レトロウイルス（例えば、レンチウイルス）ベクターを含む医薬組成物は、哺乳動物、好ましくはヒトに投与するのに好適である。

【0092】

Ｖ．治療方法
一部の態様では、必要とする患者は、（１）ＣＡＲを発現する細胞集団、および（２）腫瘍溶解性ウイルスの両方を投与される。一部の態様では、必要とする患者は、癌患者である。一部の態様では、癌は、ＩＬ－１３Ｒα２および／またはＨＥＲ２を発現する細胞を含む。一部の実施形態では、癌は多形膠芽腫（ＧＢＭ）である。

【0093】

一部の態様では、必要とする患者は女性である。一部の態様では、必要とする患者は男性である。一部の態様では、患者は成人（１８歳以上）である。一部の態様では、患者は子供である。一部の態様では、子供の年齢は、２歳超、３歳超、４歳超、５歳超、６歳超、７歳超、８歳超、９歳超、１０歳超、１１歳超、１２歳超、１３歳超、１４歳超、１５歳超、または１６歳超である。一部の態様では、患者は、５０歳超、５５歳超、６０歳超、６５歳超、７０歳超、７５歳超、８０歳超、８５歳超、９０歳超、９５歳超、１００歳超、または１０５歳超の成人である。

【0094】

一部の態様では、患者は、少なくとも６か月、少なくとも９か月、少なくとも１２か月、少なくとも１８か月、少なくとも２４か月、少なくとも３６か月、少なくとも４８か月、少なくとも５年、少なくとも６年、少なくとも７年、少なくとも８年、少なくとも９年、または少なくとも１０年という緩解期の後に、癌が再発または再燃した。

【0095】

一部の態様では、患者は、固形腫瘍を除去するための外科手術を受けている。一部の態様では、固形腫瘍は、本明細書に記載される癌のうちのいずれか一つである。一部の態様では、固形腫瘍は転移性腫瘍である。一部の態様では、外科手術は原発性膠芽腫の除去であった。一部の態様では、膠芽腫は多形膠芽腫である。一部の態様では、患者の癌は、腫瘍溶解療法単独には無応答であった。一部の態様では、患者の癌は、ＣＡＲ－Ｔ療法単独には無応答であった。

【0096】

一部の態様では、患者に、ＣＡＲを含む細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスが同時投与される。一部の態様では、患者に、ＣＡＲを含む細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスが別々に投与される。一部の態様では、患者に、ＣＡＲを含む細胞集団が最初に、腫瘍溶解性ウイルスが二番目に投与される。一部の態様では、患者に、腫瘍溶解性ウイルスが最初に、ＣＡＲを含む細胞集団が二番目に投与される。

【0097】

一部の態様では、患者に、腫瘍溶解性ウイルスおよびＣＡＲを含む細胞集団の少なくとも一回の用量が投与される。一部の態様では、患者に、腫瘍溶解性ウイルスおよびＣＡＲを含む細胞集団のそれぞれの少なくとも二回の用量が投与される。一部の態様では、患者に、腫瘍溶解性ウイルスおよびＣＡＲを含む細胞集団のそれぞれの少なくとも三回の用量が投与される。一部の態様では、患者に、腫瘍溶解性ウイルスの少なくとも一回の用量およびＣＡＲを含む細胞集団の少なくとも二回の用量が投与される。一部の態様では、患者に、ＣＡＲを含む細胞集団の少なくとも一回の用量および腫瘍溶解性ウイルスの少なくとも二回の用量が投与される。

【0098】

一部の態様では、ＣＡＲを含む細胞集団が最初に投与され、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、または３０日の期間が経過してから、腫瘍溶解性ウイルスが投与される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルスが最初に投与され、１日、２日、３日、４日、５日、６日、７日、８日、９日、１０日、１１日、１２日、１３日、１４日、１５日、１６日、１７日、１８日、１９日、２０日、２１日、２２日、２３日、２４日、２５日、２６日、２７日、２８日、２９日、または３０日の期間が経過してから、ＣＡＲを含む細胞集団が投与される。

【0099】

一部の態様では、ＣＡＲを含む細胞集団が最初に投与され、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも８日、少なくとも９日、少なくとも１０日、少なくとも１１日、少なくとも１２日、少なくとも１３日、少なくとも１４日、少なくとも１５日、少なくとも１６日、少なくとも１７日、少なくとも１８日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２１日、少なくとも２２日、少なくとも２３日、少なくとも２４日、少なくとも２５日、少なくとも２６日、少なくとも２７日、少なくとも２８日、少なくとも２９日または少なくとも３０日の期間が経過してから、腫瘍溶解性ウイルスが投与される。一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルス最初に投与され、少なくとも１日、少なくとも２日、少なくとも３日、少なくとも４日、少なくとも５日、少なくとも６日、少なくとも７日、少なくとも８日、少なくとも９日、少なくとも１０日、少なくとも１１日、少なくとも１２日、少なくとも１３日、少なくとも１４日、少なくとも１５日、少なくとも１６日、少なくとも１７日、少なくとも１８日、少なくとも１９日、少なくとも２０日、少なくとも２１日、少なくとも２２日、少なくとも２３日、少なくとも２４日、少なくとも２５日、少なくとも２６日、少なくとも２７日、少なくとも２８日、少なくとも２９日または少なくとも３０日の期間が経過してから、ＣＡＲを含む細胞集団が投与される。

【0100】

一部の態様では、腫瘍溶解性ウイルス、およびＣＡＲを含む細胞集団は、脳室内経路を介して、腫瘍内経路を介して、くも膜下腔内経路を介して、切除された腫瘍空洞内に、頭蓋内経路を介して、または中枢神経系に直接的に、投与される。

【0101】

ＶＩ．癌
一部の態様では、本明細書に記載される治療に反応する癌は、ＩＬ－１３Ｒα２が発現される癌を含む。一部の態様では、こうした癌は、癌腫および肉腫などの固形腫瘍を含む。癌腫には、上皮細胞に由来する悪性新生物が含まれ、周囲の組織に浸潤して、転移をもたらす。腺癌は、腺組織、または認識可能な腺構造を形成する組織に由来する癌腫である。一部の態様では、癌は、肉腫および線維肉腫を含み、これらは、その細胞が胎生結合組織などの線維性物質または均質物質に埋め込まれた腫瘍である。一部の態様では、癌は、白血病、リンパ腫、および典型的には腫瘍塊として存在しないが、一般的に血管系またはリンパ管系に分布する他の癌などの骨髄性癌またはリンパ性癌を含む。一部の態様では、癌は、成人、子供、男性、および／または女性に特有の、または概して固有の癌を含む。一部の態様では、癌は、原発性癌、二次癌、前転移性癌、後転移性癌、急性癌、慢性癌、良性癌、悪性癌、概して解剖学的位置に局在する癌を含む。

【0102】

一部の態様では、治療され得る癌は、副腎皮質癌、細葉細胞癌、腺房細胞癌、小葉癌、腺嚢癌腫、腺様嚢胞癌、腺様扁平上皮癌、腺腫癌、腺扁平上皮癌、付属器癌、副腎皮質癌、アルドステロン産生癌、アルドステロン分泌癌、肺胞癌、肺胞細胞癌、エナメル上皮癌、膨大部癌、甲状腺未分化癌、アポクリン癌、基底細胞癌、基底細胞癌、肺胞上皮癌、面疱型基底細胞癌、嚢胞性基底細胞癌、斑状強皮症型基底細胞癌、多発性基底細胞癌、結節潰瘍型基底細胞癌、色素性基底細胞癌、硬化性基底細胞癌、表在性基底細胞癌、類基底細胞癌、基底有棘細胞癌、胆管癌、肝外胆管癌、肝内胆管癌、気管支肺胞上皮癌、細気管支癌、細気管支肺胞上皮癌，気管支肺胞癌、気管支肺胞細胞癌、気管支原性癌、脳状癌、胆管細胞性癌、絨毛膜癌、脈絡叢癌、明細胞癌、肛門管類基底細胞癌、膠様癌、面疱型癌、子宮体癌、子宮体癌、コルチゾール産生癌、篩状癌、円柱癌、円柱細胞癌、腺管癌、腺管癌、前立腺管癌、非浸潤性乳管癌（ＤＣＩＳ）、エクリン腺癌、胚性癌、よろい状癌、子宮内膜癌、子宮内膜癌、類内膜癌、類表皮癌、混合腫瘍由来癌、多形腺腫由来癌、外方性癌、線維層状型癌、線維性癌、甲状腺濾胞性癌、胃癌、ゼラチン形態癌、膠様癌、巨細胞癌、甲状腺巨細胞癌、巨細胞癌、腺癌、顆粒膜細胞癌、肝細胞癌、ヒュルトレ細胞癌、副腎様癌、胎児性癌、島細胞癌、炎症性乳癌、上皮内癌（ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｓｉｔｕ）、腺管内癌、表皮内癌、上皮内癌（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ）、若年性胎児性癌、クルチツキー細胞癌、大細胞癌、軟膜癌、小葉癌、浸潤性小葉癌、浸潤性小葉癌、上皮内小葉癌（ＬＣＩＳ）、リンパ上皮癌、髄様癌、髄様癌、甲状腺髄様癌、甲状腺髄様癌、黒色癌、髄膜癌、メルケル細胞、変型性細胞癌、微小乳頭状癌、軟性癌、粘液性癌、粘液腺癌、粘液細胞性癌、粘表皮癌、粘膜癌、粘液癌、上咽頭癌、皮膚神経内分泌癌、非浸潤性癌、非小細胞癌、非小細胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）、燕麦細胞癌、化骨性癌、類骨癌、骨または乳房のパジェット病、乳頭癌、甲状腺乳頭癌、膨大部領域癌、前浸潤癌、有棘細胞癌、原発性骨内癌、腎細胞癌、瘢痕癌、住血吸虫感染膀胱癌、シュナイダー乳頭腫、スキルス癌、皮脂腺癌、印環細胞癌、単純癌、小細胞癌、小細胞肺癌（ＳＣＬＣ）、紡錘細胞癌、海綿癌、扁平上皮癌、扁平上皮細胞癌、終末乳管癌、未分化甲状腺癌、濾胞性甲状腺癌、甲状腺髄様癌、甲状腺乳頭癌、皮膚索状癌、移行細胞癌、管状腺癌、甲状腺未分化癌、子宮体癌、いぼ状癌、絨毛状癌、絨毛癌、卵黄嚢癌、特に頭頸部の扁平上皮細胞癌、食道扁平上皮細胞癌、口腔癌を含む。

【0103】

一部の態様では、治療され得る肉腫は、脂肪性肉腫、胞巣状軟部肉腫、エナメル上皮線維肉腫、トリ肉腫、ブドウ状肉腫、ブドウ状肉腫、トリ肉腫、緑色腫様肉腫、軟骨形成型肉腫、腎明細胞肉腫、胎児性肉腫、子宮内膜間質肉腫、類上皮肉腫、ユーイング肉腫、筋膜肉腫、線維芽細胞性骨肉腫、家禽肉腫、巨細胞肉腫、顆粒球性肉腫、血管内皮肉腫、ホジキンリンパ腫、特発性多発性色素性出血性肉腫、Ｂ細胞免疫芽球肉腫、Ｔ細胞免疫芽球肉腫、イエンセン肉腫、カポジ肉腫、クッパー細胞肉腫、白血球性肉腫、リンパ性肉腫、黒色肉腫、混合細胞肉腫、多発性肉腫、リンパ管肉腫、特発性出血性肉腫、多能性原発性骨肉腫、通常型骨肉腫、骨形成肉腫、傍骨性骨肉腫、多形性肉腫、カポジ肉腫様肉腫、細網肉腫、脳細網肉腫、横紋筋肉腫、ラウス肉腫、軟部組織肉腫、紡錘細胞肉腫、滑膜肉腫、血管拡張性骨肉腫、肉腫（骨肉腫）／骨悪性線維性組織球腫、軟部組織肉腫を含む。

【0104】

一部の態様では、治療され得るリンパ腫は、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、非ホジキンリンパ腫、ホジキンリンパ腫、Ｔ細胞白血病／リンパ腫、アフリカリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、単球様Ｂ細胞リンパ腫、ウシ悪性リンパ腫、バーキットリンパ腫、中心細胞リンパ腫、皮膚リンパ腫、びまん性リンパ腫、びまん性大細胞リンパ腫、びまん性混合型・小細胞および大細胞型リンパ腫、びまん性・小開裂細胞型リンパ腫、濾胞性リンパ腫、濾胞中心細胞リンパ腫、濾胞性・小開裂細胞大細胞混合型リンパ腫、濾胞性・大細胞優位型リンパ腫、濾胞性・小開裂細胞優位型リンパ腫、巨大濾胞性リンパ腫、巨大濾胞性リンパ腫、肉芽腫性リンパ腫、組織球性リンパ腫、大細胞リンパ腫、免疫芽球性リンパ腫、大細胞開裂型リンパ腫、大細胞非開裂型リンパ腫、レンネルトリンパ腫、リンパ芽球性リンパ腫、リンパ球性リンパ腫、中間型リンパ腫、リンパ球性リンパ腫、中間分化型リンパ腫、形質細胞様リンパ腫、リンパ球型・低分化型リンパ腫、小リンパ球型リンパ腫、リンパ球型・高分化型リンパ腫、ウシリンパ腫、ＭＡＬＴリンパ腫、マントル細胞リンパ腫、マントル帯リンパ腫、辺縁帯リンパ腫、地中海リンパ腫（リンパ球-組織球混合型）、結節性リンパ腫、形質細胞様リンパ腫、多形型リンパ腫、原発性中枢神経系リンパ腫、原発性滲出液リンパ腫、小Ｂ細胞性リンパ腫、小細胞開裂型リンパ腫、小細胞非開裂型リンパ腫、Ｔ細胞リンパ腫、回旋細胞型Ｔ細胞リンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、小リンパ球性Ｔ細胞リンパ腫、未定義のリンパ腫、未定義細胞リンパ腫、未分化リンパ腫、ＡＩＤＳ関連リンパ腫、中枢神経系リンパ腫、皮膚Ｔ細胞性リンパ腫、滲出液（体腔液性）リンパ腫、胸腺リンパ腫、および皮膚Ｔ細胞性リンパ腫を含む。

【0105】

一部の態様では、治療され得る白血病および他の血液細胞悪性腫瘍は、急性リンパ芽球性白血病、急性骨髄性白血病、リンパ球白血病、慢性骨髄性白血病、有毛細胞白血病、リンパ芽球性白血病、骨髄性白血病、リンパ性白血病、骨髄性白血病、白血病、有毛細胞白血病、Ｔ細胞白血病、単球性白血病、骨髄芽球性白血病、顆粒球性白血病、グロス白血病、手鏡形細胞白血病、好塩基球性白血病、血芽球性白血病、組織球性白血病、白血球減少性白血病、リンパ性白血病、シリング型白血病、幹細胞性白血病、骨髄単球性白血病、前リンパ球性白血病、小骨髄芽球性白血病、巨核芽球性白血病、巨核球性白血病、リーダー細胞性白血病、ウシ白血病、非白血性白血病、肥満細胞性白血病、骨髄性白血病、形質細胞性白血病、亜白血性白血病、多発性骨髄腫、非リンパ性白血病、および慢性骨髄性白血病を含む。

【0106】

一部の態様では、治療され得る脳・中枢神経系（ＣＮＳ）癌および腫瘍は、星状細胞腫（小脳星状細胞腫と脳星状細胞腫を含む）、神経膠腫（悪性神経膠腫、神経膠芽腫、脳幹神経膠腫、視経路神経膠腫および視床下部神経膠腫を含む）、脳腫瘍、上衣細胞腫、髄芽細胞腫、テント上原始性神経外胚葉性腫瘍、原発性中枢神経系リンパ腫、頭蓋外生殖細胞腫瘍、骨髄異形成症候群、乏突起膠腫、骨髄異形成／骨髄増殖性疾患、骨髄性白血病、骨髄性白血病、骨髄性骨髄腫、多発性骨髄腫、骨髄増殖性疾患、神経芽細胞腫、形質細胞腫／多発性骨髄腫、中枢神経系リンパ腫、内因性脳腫瘍、星状細胞脳腫瘍、および中枢神経系内での転移性腫瘍細胞の浸潤を含む。

【0107】

一部の態様では、治療され得る胃腸癌は、肝外胆管癌、結腸癌、結腸・直腸癌、結腸直腸癌、胆嚢癌、胃癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、膀胱癌、島細胞癌（膵内分泌腫瘍）、膵臓癌、膵島細胞癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、小腸癌、結腸癌、および結腸直腸新生物に関連するポリープを含む。

【0108】

一部の態様では、治療され得る骨癌は、骨肉腫および悪性線維性組織球腫、骨髄癌、骨転移、骨肉腫／骨悪性線維性組織球腫、ならびに骨腫および骨肉腫を含む。

【0109】

一部の態様では、治療され得る乳癌は、小細胞癌および乳管癌を含む。

【0110】

一部の態様では、治療され得る肺癌および呼吸器癌は、気管支腺腫／カルチノイド、食道癌、食道癌、下咽頭癌、喉頭癌、下咽頭癌、肺カルチノイド腫瘍、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、小細胞肺癌、中皮腫、鼻腔・副鼻腔癌、上咽頭癌、上咽頭癌、口腔癌、口腔・口唇癌、口腔咽頭癌、副鼻腔・鼻腔癌、および胸膜肺芽腫を含む。

【0111】

一部の態様では、治療され得る尿路・生殖器癌は、子宮頸癌、子宮内膜癌、上皮性卵巣癌、性腺外胚細胞腫瘍、頭蓋外胚細胞腫瘍、性腺外胚細胞腫瘍、卵巣胚細胞腫瘍、妊娠性絨毛性腫瘍、脾臓腫瘍、腎臓癌、卵巣癌、上皮性卵巣癌、卵巣胚細胞腫瘍、卵巣低悪性度腫瘍、陰茎癌、腎細胞癌（癌腫を含む）、腎細胞癌、腎盂および尿管の癌（移行細胞癌）、腎盂および尿管の移行上皮癌、妊娠性絨毛性腫瘍、精巣癌、腎盂および尿管の癌、移行細胞癌、尿道癌、子宮内膜癌、子宮肉腫、膣癌、外陰癌、卵巣癌、原発性腹膜上皮新生物、子宮頸癌、卵胞内の子宮癌および固形腫瘍、表在性膀胱腫瘍、膀胱の浸潤性移行細胞癌、筋層侵襲性膀胱癌を含む。

【0112】

一部の態様では、治療され得る皮膚癌および黒色腫は、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、眼内黒色腫、ヒト表皮角化細胞の腫瘍進行、基底細胞癌、および扁平上皮癌を含む。標的とされ得る肝臓癌は、肝外胆管癌、および肝細胞癌を含む。標的とされ得る眼癌は、眼内黒色腫、網膜芽細胞腫、および眼内黒色腫を含む。標的とされ得るホルモン性癌は、副甲状腺癌、松果体およびテント上原始性神経外胚葉性腫瘍、下垂体腫瘍、胸腺腫および胸腺癌、胸腺腫、胸腺癌、甲状腺癌、副腎皮質癌、およびＡＣＴＨ産生腫瘍を含む。

【0113】

一部の態様では、治療され得る他の癌は、進行癌、ＡＩＤＳ関連癌、肛門癌、副腎癌、皮質癌、再生不良性貧血、アニリン、ベテルやブヨほお癌、脳状癌、煙突掃除人癌、土管状癌、膠様癌、接触癌、嚢胞癌、樹状細胞癌、同棲癌、腺管癌、染料業者癌、脳様癌、鎧状癌、子宮内膜癌、内皮癌、上皮癌、腺癌、上皮内癌、カングリ（ｋａｎｇ、ｋａｎｇｒｉ）癌、潜伏癌、髄様癌、黒色癌、ミュール紡績工癌、非小細胞肺癌、非顕性癌、パラフィン癌、コールタール作業者癌、瘢痕癌、住血吸虫感染膀胱癌、硬性癌、リンパ節癌、小細胞肺癌、軟性癌、すす（ｓｏｏｔ）癌、紡錘細胞癌、沼地癌、タール癌、管状腺癌、カルチノイド（胃腸および気管支）、キャッスルマン病、慢性骨髄増殖性疾患、腱鞘の明細胞肉腫、ユーイング腫瘍ファミリー、頭頸部癌、口唇および口腔癌、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、潜在性原発性を伴う転移性頸部扁平上皮癌、多発性内分泌腫瘍症候群、多発性骨髄腫／形質細胞腫瘍、ウィルムス腫瘍、菌状息肉症、褐色細胞腫、セザリー症候群、テント上原始性神経外胚葉性腫瘍、原発部位未明の癌、腹水癌、悪性胸水、栄養膜腫瘍、血管周皮細胞腫を含む。

【0114】

一部の態様では、治療され得る癌は、ＩＬ－１３Ｒα２が発現される、前述の癌のうちのいずれか一つである。一部の態様では、ＩＬ－１３Ｒα２は、癌細胞の細胞外表面上に発現される。一部の態様では、癌は多形膠芽腫である。

【0115】

一部の態様では、治療され得る癌は、ＨＥＲ２が発現される、前述の癌のうちのいずれか一つである。一部の態様では、ＨＥＲ２は、癌細胞の細胞外表面上に発現される。一部の態様では、癌は多形膠芽腫である。

【0116】

癌に加えて、本開示の組成物、使用、および方法は、軟膜疾患を治療することができる。軟膜疾患（ＬＭＤ、また軟膜転移または癌性髄膜炎とも呼ばれる）は、固形腫瘍、最も一般的には肺癌、乳癌、および黒色腫（数ある中でも特に脳癌）からの進行癌の希少ながらも深刻なことが多い合併症である。患者は、頭蓋脊髄軸の複数領域の同時併発により、広範な兆候や症状を呈する可能性がある。診断にはしばしば高度の指標が必要となり、神経画像処理および脳脊髄液（ＣＳＦ）解析によって確認される。ＬＭＤ患者は複雑なニーズがあり、急速に悪化するリスクがある。患者はしばしば、最適な症状管理と生活の質を達成するために、チーム医療を必要とする。多巣性の神経学的な兆候や症状に加え、患者は、水頭症、発作、および視床下部－下垂体軸の機能障害を有することがある。

【0117】

したがって、さらなる態様では、本開示は、ＧＢＭを有する対象に、（ｉ）キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）を発現する細胞集団、および（ｉｉ）腫瘍溶解性ウイルスを投与することを含む、ＬＭＤの治療を提供する。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、同時投与される。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、順次投与される。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団が最初に投与され、腫瘍溶解性ウイルスが二番目に投与される。一部の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスが最初に投与され、ＣＡＲを発現する細胞集団が二番目に投与される。一部の実施形態では、対象は、原発性ＧＢＭ腫瘍および／または転移性腫瘍を除去するための外科手術を以前に受けている。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団は、セントラルメモリーＴ細胞などのＴ細胞を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団はＮＫ細胞を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、結合ドメイン、スペーサードメイン、膜貫通ドメイン、共刺激ドメイン、およびＣＤ３ζシグナル伝達ドメインを含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、ＩＬ－１３Ｒα２に選択的に結合してもよく、例えば、結合ドメインは、配列番号１を含んでもよい。一部の実施形態では、スペーサードメインは、ＩｇＧ４ Ｆｃドメイン（例えば、配列番号２、配列番号３、配列番号４、または配列番号５を含むＩｇＧ４ Ｆｃドメイン）を含む。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ４膜貫通ドメイン（例えば、ＭＡＬＩＶＬＧＧＶＡＧＬＬＬＦＩＧＬＧＩＦＦ（配列番号６）を含むＴＭドメイン）を含む。一部の実施形態では、膜貫通ドメインは、ＣＤ８膜貫通ドメイン（例えば、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴ（配列番号１１）、ＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹ（配列番号１２）、またはＩＹＩＷＡＰＬＡＧＴＣＧＶＬＬＬＳＬＶＩＴＬＹＣ（配列番号１３）を含むＴＭドメイン）を含む。一部の実施形態では、共刺激ドメインは、４－１ＢＢ共刺激ドメイン（例えば、配列番号７を含む共刺激ドメイン）を含む。一部の実施形態では、ＣＡＲは、配列番号８または配列番号１４を含む。一部の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、遺伝子操作された単純ヘルペスウイルス１型（ＨＳＶ－１）である。一部の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスは、複製能力がある。一部の実施形態では、ＩＣＰ３４．５遺伝子は、腫瘍溶解性ウイルスのゲノムから欠失され、ヒトサイトメガロウイルス（ＨＣＭＶ）ＩＲＳ１遺伝子をコードする遺伝子は、腫瘍溶解性ウイルスのゲノム内に導入される。一部の実施形態では、腫瘍溶解性ウイルスはＣ１３４である。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団は、セントラルメモリーＴ細胞であり、ＣＡＲは配列番号８または配列番号１４を含み、腫瘍溶解性ウイルスはＣ１３４である。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、同じ投与経路で投与される。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、異なる投与経路で投与される。一部の実施形態では、投与経路は、脳室内、腫瘍内、くも膜下腔内、および切除された腫瘍空洞内から成る群から選択される。一部の実施形態では、ＣＡＲを発現する細胞集団および腫瘍溶解性ウイルスは、対象の中枢神経系（ＣＮＳ）に直接投与される。

【0118】

本技術は、本出願に記載される特定の態様に関して限定されるものではなく、本技術の個々の態様の単一の図解として意図される。当業者にとって明らかであるように、本技術の数多くの改変および変形は、その趣旨および範囲を逸脱することなく行うことができる。本明細書に列挙されるものに加えて、本技術の範囲内の機能的に等価な方法および装置は、前述の記載から当業者には明らかとなろう。そのような改変および変形は、本技術の範囲の範囲内にあることが意図されている。本技術は、特定の方法、試薬、化合物組成物、または生物学的システムに限定されないが、当然のことながら変化する可能性があることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の態様を記載する目的のために過ぎず、限定を意図しないことも理解されたい。

【実施例1】

【0119】

Ｕ８７無胸腺マウスモデルにおけるＣＡＲ－Ｔ治療
一部の態様では、無胸腺ヌードマウスを利用した異種移植モデルが使用された。無胸腺ヌードマウスは胸腺の異常な発達を示し、これが重度のＴ細胞機能障害をもたらすが、マウスは生得的な免疫系成分（好中球および樹状細胞（ＤＣ）、ＮＫ細胞）およびＢ細胞をなおも有する。Ｇｏｌｄｍａｎ ｅｔ ａｌ． １９９８． Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ， １０３（２）：３３５－３４２を参照。ヒト異種移植片を作製するための最も古くかつ広範な動物の一つは、ヒト腫瘍細胞が移植される無胸腺ヌードマウスである。このモデルは、特に腫瘍が同所移植される場合、ゲノムの不均一性、腫瘍の構造、および微小環境因子を含め、腫瘍の自然な進展によって媒介される複雑性を正確に反映する。Ｗａｎｇ ｅｔ ａｌ． ２０１７． Ｉｎｔ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ， １４０（３）：６６２－６７３およびＨｏｆｆｍａｎ ２０１５． Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｃａｎｃｅｒ， １５（８）：４５１－４５２を参照。造血器腫瘍およびリンパ組織腫瘍の異種移植マウスモデルは、様々な腫瘍を標的とした新しいＣＡＲ Ｔ細胞療法を評価・開発するために積極的に使用される。Ｔｅｎｇ ｅｔ ａｌ． ２０１９． Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒ， ４２（２）：３３－４２およびＺａｈ ｅｔ ａｌ． ２０１７． Ｃａｎｃｅｒ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｓ， ４（６）：４９８－５０８を参照。

【0120】

Ｕ８７は、脳癌研究で一般的に使用されるヒト原発性膠芽腫細胞株である。さらに、Ｕ８７細胞株は、腫瘍溶解性ＨＳＶ感染に対して非常に許容的であった。Ｇｈｏｎｉｍｅ ｅｔ ａｌ． ２０１８． Ｔｒａｎｓｌ Ｏｎｃｏｌ， １１（１）：８６－９３およびＳｈａｈ ｅｔ ａｌ． ２００７． Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ， １４（１３）：１０４５－１０５４を参照。

【0121】

Ｕ８７ヒト原発性膠芽腫細胞株を含む腫瘍が、マウスに同所性移植された、無胸腺ヌードマウスを利用した異種移植マウスモデルが使用される。移植後約２０日経過してから、ＣＡＲ－Ｔ細胞がマウスに投与される。

【0122】

ＩＬ－１３Ｒα２またはＨＥＲ２に選択的に結合するものを含め、本開示のＣＡＲ－Ｔは、各実験において０．５×１０^６～１．０×１０^６ ＣＡＲ－Ｔ細胞を含む用量で、Ｕ８７無胸腺マウスに頭蓋内注射される。

【0123】

各実験は、各試料時点に対してメスマウス３匹およびオスマウス３匹を含む。時点は、ＣＡＲ－Ｔ投与後０日目（Ｄ０）、１日目（Ｄ１）、４日目（Ｄ４）、８日目（Ｄ８）、および１４日目（Ｄ１４）である。各試料について、マウスの脳および血液が採取される。脳が切片化され、切片が免疫組織化学および免疫蛍光分析にかけられる。この分析では、様々な蛍光分子にコンジュゲートされた坑ＣＤ８、坑ＩＬ－１３Ｒα２または坑ＨＥＲ２、坑ＰＤ１、および対応する二次抗体などの抗体を利用する。

【0124】

ＣＡＲ－Ｔの持続性が、各時点について腫瘍内および周辺部で評価される。さらに、腫瘍のサイズが移植時の腫瘍のサイズと比較して評価される。

【実施例2】

【0125】

Ｕ８７無胸腺マウスモデルにおける腫瘍溶解性ウイルス
本開示の腫瘍溶解性ウイルスは、Ｕ８７ヒト原発性膠芽腫細胞を含む移植された腫瘍を含むＵ８７無胸腺マウスに脳内投与される。移植後約２０日経過してから、ＣＡＲ－Ｔ細胞がマウスに投与される。

【0126】

各実験は、各試料時点に対してメスマウス３匹およびオスマウス３匹を含む。時点は、腫瘍移植後の０日目（Ｄ０）、１日目（Ｄ１）、４日目（Ｄ４）、８日目（Ｄ８）、および１４日目（Ｄ１４）である。各試料について、マウスの脳および血液が採取される。各時点で、マウスについて、腫瘍からの腫瘍溶解性ウイルスの回収、および移植時の腫瘍のサイズと比較した腫瘍のサイズが評価された。

【0127】

インビボでのウイルス回収は、限界希釈アッセイおよびＴＡＱＭＡＮ定量的ＰＣＲによって測定される。腫瘍回収試験については、Ｕ８７－ＭＧ腫瘍をＳＣＩＤマウスに誘導し、Ｃ１３４組み換えウイルスで処置した。接種後１日目、２日目、４日目、および８日目に、各治療コホートから３匹の動物を犠牲にし、それらの脳について回収、計量、凍結融解、均質化による機械的な破壊を行い、試料が、ＱｉａｇｅｎバイオロボットおよびＱｉａｇｅｎ ＥＺ１組織キットを使用したＤＮＡ抽出の後、限界希釈プラークアッセイまたはＴＡＱＭＡＮ定量的ＰＣＲによって回収されたウイルスを定量化する前に、超音波処理される。

【0128】

ウイルスの平均回収量および標準偏差が、試験した各ウイルスおよび時点について計算される。同様の方法が、非悪性ＣＮＳからのインビボ回収試験に使用される。５週齢のＣＢＡ／Ｊマウスのコホートに、等価用量（５×１０^５ ＰＦＵ）のＣ１３０またはＣ１０１を注射する。２日目、４日目、６日目、および８日目に、動物を犠牲にし、脳を回収し、限界希釈プラークアッセイを使用して感染性ウイルスを測定する。

【実施例3】

【0129】

Ｕ８７無胸腺マウスモデルにおける腫瘍溶解性ウイルスとＣＡＲ－Ｔの併用療法
この試験では、（１）腫瘍のみ（標識化）、（２）ＣＡＲ－Ｔのみ（ＣＡＲ－Ｔの最適用量）、（３）Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスのみ（１×１０^６ｐｆｕ）、および（４）腫瘍溶解性ウイルスＣ１３４の後にＣＡＲ－Ｔというマウスの４つの群がある。

【0130】

Ｕ８７ヒト原発性膠芽腫細胞を含む腫瘍が、無胸腺マウスに移植される。後の時点で、マウスに（１）ＣＡＲ－Ｔのみ、（２）腫瘍溶解性ウイルスのみ、または（３）腫瘍溶解性ウイルスの後にＣＡＲ－Ｔが注射される。

【0131】

各実験は、各群および各試料時点に対してメスマウス３匹およびオスマウス３匹を含む。時点は、Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスおよび／またはＣＡＲ－Ｔの投与後０日目（Ｄ０）、３日目（Ｄ３）、５日目（Ｄ５）、および７日目（Ｄ７）である。Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスおよびＣＡＲ－Ｔ試料の組み合わせについては、腫瘍溶解性ウイルスとＣＡＲ－Ｔの投与間での様々な時点が利用される。各試料は、腫瘍溶解性ウイルスおよび／またはＣＡＲ－Ｔが投与されなかった陰性対照と比較した、ライブイメージングを介した腫瘍の評価を含む。

【実施例4】

【0132】

Ｕ８７無胸腺マウスモデルにおける腫瘍溶解性ウイルスとＣＡＲ－Ｔの３か月間の併用療法
この試験では、（１）腫瘍のみ（標識化）、（２）ＣＡＲ－Ｔのみ、（３）Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスのみ（１×１０^６ｐｆｕ）、および（４）腫瘍溶解性ウイルスＣ１３４の後にＣＡＲ－Ｔというマウスの４つの群がある。

【0133】

Ｕ８７ヒト原発性膠芽腫細胞を含む腫瘍が、無胸腺マウスに移植される。後の時点で、マウスに（１）ＣＡＲ－Ｔのみ、（２）腫瘍溶解性ウイルスのみ、または（３）腫瘍溶解性ウイルスの後にＣＡＲ－Ｔが注射される。

【0134】

各実験は、各群および各試料時点に対してメスマウス５匹およびオスマウス５匹を含む。時点は、Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスおよび／またはＣＡＲ－Ｔの投与後０日目（Ｄ０）、３日目（Ｄ３）、５日目（Ｄ５）、および７日目（Ｄ７）である。Ｃ１３４腫瘍溶解性ウイルスおよびＣＡＲ－Ｔ試料の組み合わせについては、腫瘍溶解性ウイルスとＣＡＲ－Ｔの投与間での様々な時点が利用される。

【0135】

各試料採取には、（１）ＣＡＲ－Ｔ持続性、（２）Ｃ１３４持続性、（３）炎症誘発性サイトカインの存在、（４）ライブイメージングを介した腫瘍、（５）生存、および（６）罹患率の評価を含む。さらに、毎日の臨床観察が行われ、これには体重測定が含まれる。各試料採取について、犠牲後に、全血／血清、脳、脳脊髄液、肝臓、および脾臓のそれぞれを採取する。投与およびアッセイのグラフィカル表現を図１に示す。一部の実施形態において、ＣＡＲ Ｔ細胞およびＯＶ注射の投与順序は入れ替わってもよいこと（すなわち、Ｄ４にＣＡＲ Ｔ注射で、Ｄ７にＯＶ注射）が注目されるべきである。

【0136】

本明細書に例示的に記載される方法は、本明細書に具体的に開示されていない任意の一つまたは複数の要素、一つまたは複数の限定の不在下で、適切に実践され得る。それゆえに、例えば「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「含有する（ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ）」などの用語は、拡張的に限定なく読まれるものとする。加えて、本明細書で用いられる用語および表現は、限定ではなく説明の用語として使用されていて、そのような用語および表現の使用において、示され記載された特徴またはその一部のいかなる均等物も除外する意図はない。本開示の範囲内で、様々な改変が可能であることを認識されたい。それゆえに、本開示は好適な態様および随意の特徴によって具体的に開示されているが、本開示で具現化され、本明細書に開示された本開示の改変および変形は、当業者によって用いられる場合があること、またこうした改変および変形は、本開示の範囲内であるとみなされることが理解されるべきである。

【0137】

本開示は、本明細書で広範にかつ一般的に説明されている。一般的な開示の範囲に入るより狭い種および亜属の分類のそれぞれも、方法の一部を形成する。これには、切除された材料が本明細書に具体的に記載されているかどうかにかかわらず、その部類から任意の主題を除去するという条件または否定的な限定を伴う、方法の一般的な説明が含まれる。本技術は、本出願に記載される特定の態様に関して限定されるものではなく、本技術の個々の態様の単一の図解として意図される。当業者にとって明らかであるように、本技術の数多くの改変および変形は、その趣旨および範囲を逸脱することなく行うことができる。本明細書に列挙されるものに加えて、本技術の範囲内の機能的に等価な方法および装置は、前述の記載から当業者には明らかとなろう。そのような改変および変形は、本技術の範囲の範囲内にあることが意図されている。本技術は、特定の方法、試薬、化合物組成物、または生物学的システムに限定されないが、当然のことながら変化する可能性があることを理解されたい。また、本明細書で使用される用語は、特定の態様を記載する目的のために過ぎず、限定を意図しないことも理解されたい。

【0138】

本明細書に引用されるすべての参考文献、論文、出版物、特許、特許出版物、および特許出願は、すべての目的に対し、その全体が参照により組み込まれる。

【図1】

【配列表】

2023541253000001.app

【国際調査報告】