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特表2023-541852急性呼吸窮迫症候群の治療に使用するための組換えアルカリホスファターゼ
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-10-04
(54)【発明の名称】急性呼吸窮迫症候群の治療に使用するための組換えアルカリホスファターゼ
(51)【国際特許分類】
C12N 9/16 20060101AFI20230927BHJP
A61K 38/46 20060101ALI20230927BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20230927BHJP
A61P 31/04 20060101ALI20230927BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20230927BHJP
C12N 15/55 20060101ALN20230927BHJP
【ＦＩ】
C12N9/16 B ZNA
A61K38/46
A61P11/00
A61P31/04
A61P31/12
C12N15/55
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023515657
(86)(22)【出願日】2021-09-09
(85)【翻訳文提出日】2023-05-08
(86)【国際出願番号】 NL2021050547
(87)【国際公開番号】W WO2022055350
(87)【国際公開日】2022-03-17
(31)【優先権主張番号】20195269.4
(32)【優先日】2020-09-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(31)【優先権主張番号】21178892.2
(32)【優先日】2021-06-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】EP
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】509296052
【氏名又は名称】アーエム－ファルマ ベー．フェー．
【氏名又は名称原語表記】ＡＭ－Ｐｈａｒｍａ Ｂ．Ｖ．
【住所又は居所原語表記】Ｓｔａｄｓｐｌａｔｅａｕ ６ Ｕｔｒｅｃｈｔ Ｔｈｅ Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ
(74)【代理人】
【識別番号】110001519
【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】エラッサイス－シャープ，イェルン
(72)【発明者】
【氏名】ファン デン ベルヒ，エリック ヤン
【テーマコード（参考）】
4C084
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084DC22
4C084MA66
4C084NA14
4C084ZA59
4C084ZB33
4C084ZB35
(57)【要約】
本開示は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の症状の予防、治療、治癒、又は改善のための、アルカリホスファターゼ、特にＲｅｃＡＰなどの改良されたアルカリホスファターゼの使用に関する。本明細書はまた、肺機能を維持し、機械的換気療法の期間を短縮し、Ｐ／Ｆ比を増加させる方法にも関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）であって、前記対象が中等症又は重症のＡＲＤＳを有する、使用のためのＡＰ。
【請求項2】
前記対象が、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）を使用して測定した場合のＰ／Ｆ比が≦２００ｍｍＨｇである中等症又は重症のＡＲＤＳを有する、請求項１に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項3】
前記対象が、前記ＡＰによる治療の前に、Ｐ／Ｆ比が≦１００ｍｍＨｇである重症ＡＲＤＳを有する、請求項２に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項4】
前記対象が、前記ＡＰによる治療の前に、Ｐ／Ｆ比が＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇである中等症ＡＲＤＳを有する、請求項２に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項5】
前記ＡＰが、少なくとも１回の５００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される、請求項１～請求項４のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項6】
前記ＡＲＤＳが敗血症に関連するか、又は敗血症に起因する、請求項１～請求項５のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項7】
前記ＡＲＤＳがウイルス感染に関連するか、又はウイルス感染によるものである、請求項１～請求項６のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項8】
前記ＡＰがヒトＡＰである、請求項１～請求項７のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項9】
前記ＡＰが組換えＡＰであり、好ましくは前記組換えＡＰがキメラである、請求項１～請求項８のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項10】
前記ＡＰが、ＲｅｃＡＰのアミノ酸配列（配列番号１）に対して、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有する、請求項１～請求項９のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項11】
前記ＡＰの投与が呼吸機能の増加をもたらし、好ましくは、前記呼吸機能の増加は、前記ＡＰによる治療を行っていない場合の前記対象のＰ／Ｆ比と比べての前記対象のＰ／Ｆ比の増加を含む、請求項１～請求項１０のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項12】
前記ＡＰ治療が、ＡＲＤＳの検出後４８時間以内に開始される、請求項１～請求項１１のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項13】
前記ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、機械的換気療法を受けている対象における機械的換気療法の期間の短縮又は中止をもたらす、請求項１～請求項１２のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項14】
ＡＰが１日１回投与される、請求項１～請求項１３のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項15】
ＡＰが静脈内投与される、請求項１～請求項１４のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項16】
ＡＰが１日３回用量で投与される、請求項１～請求項１５のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項17】
前記ＡＰの用量が０．８ｍｇ／ｋｇ又は１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰである、請求項１～請求項１６のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項18】
前記ＡＰの用量が５００Ｕ／ｋｇ又は１０００Ｕ／ｋｇのＲｅｃＡＰである、請求項１～請求項１７のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項19】
前記ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、前記対象におけるＰ／Ｆ比の維持又は増加をもたらす、請求項１～請求項１８のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項20】
前記ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、前記対象の死亡リスクの減少をもたらす、請求項１～請求項１９のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【請求項21】
前記ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、前記対象を含む対象群の死亡率の低下をもたらす、請求項１～請求項１９のいずれか一項に記載の使用のためのＡＰ。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、医学分野に関する。特に、本発明は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の症状の予防、治療、治癒、又は改善のための、アルカリホスファターゼ、特にＲｅｃＡＰなどの改良されたアルカリホスファターゼの使用に関する。本発明はまた、肺機能を維持し、機械的換気療法の期間を短縮し、Ｐ／Ｆ比を増加させる方法にも関する。
【背景技術】
【0002】
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、肺の広範な炎症を特徴とする、肺の呼吸機能の機能不全である。症状としては、息切れ、呼吸促拍、皮膚の蒼白化などが挙げられる（Fan, E; Brodie, D; Slutsky, AS （20 February 2018）. "Acute Respiratory Distress Syndrome: Advances in Diagnosis and Treatment". JAMA. 319 （7）: 698-710）。ＡＲＤＳの全体的な予後は不良であり、死亡率は約４０％である（Lewis, Sharon R.; Pritchard, Michael W.; Thomas, Carmel M.; Smith, Andrew F. （July 23, 2019）. "Pharmacological agents for adults with acute respiratory distress syndrome". The Cochrane Database of Systematic Reviews. 7: CD004477）。ＡＲＤＳを生き延びた人にとって、生活の質の低下はよくあることである（Matthay, MA; Zemans, RL; Zimmerman, GA; Arabi, YM; Beitler, JR; Mercat, A; Herridge, M; Randolph, AG; Calfee, CS （14 March 2019）. "Acute respiratory distress syndrome". Nature Reviews. Disease Primers. 5 （1）: 18）。
【0003】
世界中で、年間３００万人以上がＡＲＤＳに罹患している（Fan E et al （2018））。「成人呼吸窮迫症候群」という用語は、ＡＲＤＳを新生児の「乳児呼吸窮迫症候群」と区別するために使用されることがあるが、国際的なコンセンサスでは、ＡＲＤＳは全年齢の人々が罹患し得るため、「急性呼吸窮迫症候群」が最適な用語である（Bernard G, Artigas A, Brigham K, Carlet J, Falke K, Hudson L, Lamy M, Legall J, Morris A, Spragg R （1994）. "The American-European Consensus Conference on ARDS. Definitions, mechanisms, relevant outcomes, and clinical trial coordination". Am J Respir Crit Care Med. 149 （3 Pt 1）: 818-24）。小児及び資源に乏しい地域の人々には、別々の診断基準がある（Matthay MA et al （2019））。
【0004】
ＡＲＤＳの年間発生率は、通常、一般集団１０万人当たり１３～２３人である。ＡＲＤＳは、急性肺損傷で機械的換気を受けている人によく見られる（Lewandowski K, Lewandowski M （2006）. "Epidemiology of ARDS". Minerva Anestesiol. 72 （6）: 473-7）。ＣＯＶＩＤ－１９により、２０２０年にＡＲＤＳ発生率が上昇した（Guo, YR; Cao, QD; Hong, ZS; Tan, YY; Chen, SD; Jin, HJ; Tan, KS; Wang, DY; Yan, Y （13 March 2020）. "The origin, transmission and clinical therapies on coronavirus disease 2019 （COVID-19） outbreak - an update on the status". Military Medical Research. 7 （1）: 11; Solaimanzadeh, I （20 March 2020）. "Acetazolamide, Nifedipine and Phosphodiesterase Inhibitors: Rationale for Their Utilization as Adjunctive Countermeasures in the Treatment of Coronavirus Disease 2019 （COVID-19）". Cureus. 12 （3）: e7343）。
【0005】
世界中で、ＣＯＶＩＤ－１９などのウイルスパンデミックがない場合、重度の敗血症が、ＡＲＤＳを引き起こす最も一般的な要因である（Goldman, Lee （2011）. Goldman's Cecil Medicine （24th ed.）. Philadelphia: Elsevier Saunders. p. 635. ISBN 978-1437727883）。その他の要因としては、機械的換気、肺炎、ギルクリスト病、溺死、循環ショック、誤嚥、外傷（特に肺挫傷）、大手術、大量輸血（Laar, Alexander P. J.; Binnekade, Jan M.; Prins, David; van Stein, Danielle; Hofstra, Jorrit J.; Schultz, Marcus J.; Juffermans, Nicole P. （March 2010）. "Risk factors and outcome of transfusion-related acute lung injury in the critically ill: A nested case-control study*". Critical Care Medicine. 38 （3）: 771-778）、煙の吸入、薬物反応又は過剰摂取、肺移植又は肺塞栓切除後の脂肪塞栓及び再灌流肺水腫などが挙げられる。
【0006】
抗生物質、抗ウイルス薬、抗炎症薬などの根本原因の治療に続いて、ＡＲＤＳは通常、集中治療室（ＩＣＵ）で機械的換気により治療される。機械的換気は、通常、口腔から挿入され気道に固定された硬いチューブ（気管内挿管）を通して、又は長期間の換気（２週間以上）が必要な場合は気管切開によって行われる。非侵襲的換気の役割は、疾患の非常に初期の段階、又はＡＲＤＳを発症するリスクのある非定型肺炎、肺挫傷、若しくは大手術患者の呼吸困難の悪化を防ぐ目的に限定される。３５％～５０％の間であるＡＲＤＳの死亡率（Fan E et al （2018））を改善する公知の特定の機械的換気モードは知られていない。したがって、ＡＲＤＳの治療法が必要とされている。
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0007】
本開示は、有効量のアルカリホスファターゼ（ＡＰ）を対象に投与することを含む、アルカリホスファターゼの投与を必要とする対象において急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を治療する方法を提供する。好ましい実施形態では、ＡＰは、少なくとも１回の５００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される。
【0008】
ＡＲＤＳの重症度は通常、「軽症」ＡＲＤＳ、「中等症」ＡＲＤＳ、及び「重症」ＡＲＤＳに分類される。軽症ＡＲＤＳ、中等症ＡＲＤＳ、及び重症ＡＲＤＳは、以下の基準によって定義される：
ＰａＯ２／ＦｉＯ２比（ＰａＯ２／ＦｉＯ２比は、動脈酸素分圧（ｍｍＨｇ単位のＰａＯ２）と吸入酸素分圧（ＦｉＯ２は割合ではなく分数として表される）との比であり、Ｐ／Ｆ比とも称される）の減少：
＞２００ｍｍＨｇかつ≦３００ｍｍＨｇ（＞２６．６６ｋＰａかつ≦４０．００ｋＰａ）：軽症ＡＲＤＳ；
＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇ（＞１３．３３ｋＰａかつ≦２６．６６ｋＰａ）：中等症ＡＲＤＳ；
≦１００ｍｍＨｇ（≦１３．３３ｋＰａ）：重症ＡＲＤＳ；
ここで、Ｐ／Ｆ比は、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）を使用して測定される。
ＰａＯ２／ＦｉＯ２比（ＰａＯ２／ＦｉＯ２比は、動脈酸素分圧（ｍｍＨｇ単位のＰａＯ２）と吸入酸素分圧（ＦｉＯ２は割合ではなく分数として表される）との比であり、Ｐ／Ｆ比とも称される）の減少：
＞２００ｍｍＨｇかつ≦３００ｍｍＨｇ（＞２６．６６ｋＰａかつ≦４０．００ｋＰａ）：軽症ＡＲＤＳ；
＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇ（＞１３．３３ｋＰａかつ≦２６．６６ｋＰａ）：中等症ＡＲＤＳ；
≦１００ｍｍＨｇ（≦１３．３３ｋＰａ）：重症ＡＲＤＳ；
ここで、Ｐ／Ｆ比は、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）を使用して測定される。
【0009】
いくつかの態様では、対象は、ＡＰによる治療の前に、上記の定義に従って重症又は中等症ＡＲＤＳを有する（すなわち、５ｃｍＨ２Ｏの最小ＰＥＥＰを用いたＰ／Ｆ比が≦２００ｍｍＨｇ）。いくつかの態様では、対象は、ＡＰによる治療の前に、重症ＡＲＤＳを有する（すなわち、５ｃｍＨ２Ｏの最小ＰＥＥＰを用いたＰ／Ｆ比が≦１００ｍｍＨｇ）。いくつかの態様では、対象は、ＡＰによる治療の前に、中等症ＡＲＤＳを有する（すなわち、５ｃｍＨ２Ｏの最小ＰＥＥＰを用いたＰ／Ｆ比が１００～２００ｍｍＨｇ）。いくつかの態様では、ＡＲＤＳは、敗血症に関連している及び／又は敗血症が原因である。他の態様では、ＡＲＤＳは、ウイルス感染、好ましくはコロナウイルスによる感染、より好ましくは重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルスによる感染に関連する及び／又はそれらが原因である。いくつかの態様では、ＡＰは、ヒトＡＰである。いくつかの態様では、ＡＰは、組換えＡＰである。いくつかの態様では、組換えＡＰは、キメラである。いくつかの態様では、キメラＡＰが、ＲｅｃＡＰ（配列番号１）に対して、７０％以上、７５％以上、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有する。
【0010】
いくつかの態様では、呼吸機能の増加は、治療を行っていない場合の対象のＰ／Ｆ比と比べての対象のＰ／Ｆ比の増加を含む。いくつかの態様では、対象の敗血症は、ＡＰの投与前９６時間以内に検出される。いくつかの態様では、敗血症は、ＡＲＤＳの検出前７２時間以内に検出される。
【0011】
いくつかの態様では、本発明に係る治療は、対象の敗血症の検出後２４時間以内に開始される。いくつかの態様では、本発明に係る治療は、対象のＡＲＤＳの検出後２４時間以内に開始される。いくつかの態様では、ＡＰは、１日１回投与される。いくつかの態様では、ＡＰは、静脈内投与される。いくつかの態様では、ＡＰは、１日３回用量で投与される。いくつかの態様では、ＡＰ用量は、０．８ｍｇ／ｋｇ又は１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ、例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰである。いくつかの態様では、ＡＰ用量は、５００Ｕ／ｋｇ又は１０００Ｕ／ｋｇのＲｅｃＡＰ、例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰである。
【0012】
いくつかの態様では、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、機械的換気療法を受けている対象における機械的換気療法の期間の短縮又は中止をもたらす。いくつかの態様では、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、対象におけるＰ／Ｆ比の維持又は増加をもたらす。
【図面の簡単な説明】
【0013】
【図1】提案されるＲｅｃＡＰ用量群を示す表を示した図である。
【図2】ＲｅｃＡＰアミノ酸配列（配列番号１）を示した図である。
【図3】ＡＵＣ１－７、ＲＲＴ発生率、並びに死亡率及びＭＡＫＥを決定するための投薬計画及び時間枠を含む、ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究のタイムラインを示した図である。
【図4】治験における患者の登録、無作為化、及び追跡調査を示すフローチャートを示した図である。略語：ＡＫＩ（急性腎障害）、ＡＵＣ（時間補正曲線下面積）、ＥＣＣ（内因性クレアチニンクリアランス）、ＩＣＦ（インフォームドコンセントフォーム）、ＩＴＴ（治療意図）、ＩＶ（静脈内）、ＭＡＫＥ（主要な腎有害事象）、ＮＳ（明記せず）、ＲｅｃＡＰ（配列番号１の配列を有するヒト組換えアルカリホスファターゼ）、ＲＲＴ（腎代替療法）、ＳＡ－ＡＫＩ（敗血症関連急性腎障害）、ＳＣｒ（血清クレアチニン）。
【図5】治験における全ての群の人口統計学的特性及びベースライン特性を示す表を示した図であり、いずれのベースライン特性においても、群間に有意差はなかったことを示している。欠損データのある変数の場合、要約データは調整された数値に基づいている。体格指数（ＢＭＩ）は、体重（ｋｇ）を身長（ｍ）の二乗で割ったものである。Ａｃｕｔｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ＩＩ（ＡＰＡＣＨＥ ＩＩ）のスコアは、０～７１の範囲内でスコアが高いほど疾患の重症度が高いことを示す。Ｓｃｏｒｅｓ ｏｎ ｔｈｅ Ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ Ｏｒｇａｎ Ｆａｉｌｕｒｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＳＯＦＡ）のスコアは、０～２４の範囲内でスコアが高いほど機能障害がより重症であることを示す。Ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ Ａｃｕｔｅ Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ Ｓｃｏｒｅ（ＳＡＰＳ）のスコアは、０～１６３の範囲内でスコアが高いほど疾患の重症度が高いことを示す。推定糸球体濾過率（ｅＧＦＲ）は、ＣＫＤ－ＥＰＩ（Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ）の式に従って計算した：１４１＊ｍｉｎ（Ｓｃｒ／κ，１）α＊ｍａｘ（Ｓｃｒ／κ，１）－１．２０９＊０．９９３年齢＊１．０１８［女性の場合］ ＊１．１５９ ［黒人の場合］。Ｓｃｒは血清クレアチニン（ｍｇ／ｄＬ）、κは女性の場合は０．７、男性の場合は０．９、αは女性の場合は－０．３２９、男性の場合は－０．４１１、ｍｉｎはＳｃｒ／κの最小値又は１、及びｍａｘはＳｃｒ／κの最大値又は１を指す。（www.kidney.org/content/ckd-epi-creatinine-equation-2009）。急性腎障害（ＡＫＩ）のステージは、ＡＫＩ－Ｎｅｔｗｏｒｋ（www.akinet.org/akinstudies.php）の定義に従って層別化した。中央値及び四分位値、又は数及び割合が示されている。
【図6】ＲｅｃＡＰ濃度の線形増加を示すＡＵＣ対用量グラフを示した図である。ＳＴＯＰ－ＡＫＩ臨床試験における患者の暴露は、健康な対象と比較してわずかに高くなっている。用量範囲（０．４～１．６ｍｇ／ｋｇ）にわたって用量直線性及び比例性が観察された。
【図7】主要評価項目及び副次的評価項目を示す表（プラセボ群及び０．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ群）を示した図である。ＡＵＣ１-７は、１日目～７日目までのＥＣＣ曲線下の面積を７で割って提供される、時間補正されたクリアランス（ｍＬ／分）を示す。略称：ＣＩ（信頼区間）、ＣＫＤ－ＥＰＩ（Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｋｉｄｎｅｙ Ｄｉｓｅａｓｅ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌａｂｏｒａｔｉｏｎ）、ＥＣＣ（内因性クレアチニンクリアランス）、ｅＧＦＲ（推定糸球体濾過率）、ＩＣＵ（集中治療室）、ＩＱＲ（四分位範囲）、ＭＡＫＥ（主要な腎有害事象）、ＲＲＴ（腎代替療法）、ＳＯＦＡ（Ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ Ｏｒｇａｎ Ｆａｉｌｕｒｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ）。§ ＲＲＴ発生率は、無作為化後にＲＲＴを必要とした患者の割合を示す。|| 最後の観察を進めた。＊ ＭＡＫＥ２８：２８日目より前又は２８日目にＲＲＴを受けたか、２８日目より前又は２８日目に死亡した。基準のうちの少なくとも１つを満たした割合。† ＭＡＫＥ６０：６０日目より前又は６０日目の血清クレアチニン又は必要な慢性ＲＲＴに基づくＣＫＤ－ＥＰＩ式によって推定された６０日目のｅＧＦＲが６０ｍＬ／分未満、又は６０日目より前若しくは６０日目に死亡した。基準の少なくとも１つを満たした割合。‡ ＭＡＫＥ９０：９０日目ＲＲＴ前又は９０日目の血清クレアチニン又は必要な慢性ＲＲＴに基づくＣＫＤ－ＥＰＩ式によって推定された９０日目のｅＧＦＲが６０ｍＬ／分未満、９０日目より前若しくは９０日目に新しいＡＫＩエピソードによる入院、又は９０日目より前若しくは９０日目に死亡した。基準の少なくとも１つを満たした割合。§§ 絶対差を表す（連続変数の場合）。†† オッズ比を示す（カテゴリ変数の場合）。‡‡ ハザード比を表す（事象の場合）。
【図8】全ての治療群の主要評価項目及び副次的評価項目（０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、又は１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ用量又はプラセボ）を示した図である。
【図9A】ＩＣＵ（左図）及び９０日目（右図）のＥｕｒｏＱｏＬ（ＥＱ５Ｄ）スコアで測定した生活の質（ＱｏＬ）評価を示した図である。
【図9B】１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ用量群及びプラセボ群について、肺機能パラメータ（Ｐ／Ｆ比、１回換気量、及びＰＥＥＰ）を中央値として示した図である。グラフの下に数値が表示されている。
【図9C】１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ用量群及びプラセボ群について、肝機能パラメータ（アラニンアミノトランスフェラーゼ活性及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ活性）を中央値として示した図である。グラフの下に数値が表示されている。
【図10】事後多変量解析の結果を示した図である。
【図11】ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験中に観察された治療緊急性のある有害事象を示した図である。
【図12】（２９日目を含む）２９日目までにプラセボ又は高用量ｒｅｃＡＰのいずれかに無作為化された、測定可能なスクリーニング又は１日目の値を有する対象集団でのＳＴＯＰ－ＡＫＩにおけるＰ／Ｆ比値を示した図である。数字は、治療アームごとの特定の時点での患者数を示す。平均値は、ブートストラップされた９５％信頼区間（ＣＬ）と共に表示されている。ＣＬの識別力を高めるために、治療群ごとに時間をわずかにずらした。
【図13】（２９日目を含む）２９日目までにプラセボ又は高用量ｒｅｃＡＰのいずれかに無作為化された、測定可能なスクリーニング又は１日目の値を有する対象集団でのＳＴＯＰ－ＡＫＩにおけるＰ／Ｆ比値の倍率変化を示した図である。数字は、治療アームごとの特定の時点での患者数を示す。平均値は、ブートストラップされた９５％信頼区間と共に表示されている。ＣＬの識別力を高めるために、治療群ごとに時間をわずかにずらした。
【図14】（２９日目を含む）２９日目までにプラセボ又は高用量ｒｅｃＡＰのいずれかに無作為化された、測定可能なスクリーニング又は１日目の値を有する対象集団でのＳＴＯＰ－ＡＫＩにおけるＰ／Ｆ比値の倍率変化を示した図である。数字は、治療アームごとの特定の時点での患者数を示す。平均値は、ブートストラップされた９５％信頼区間と共に表示されている。ＣＬの識別力を高めるために、治療群ごとに時間をわずかにずらした。グループ分けしたＡＲＤＳ基準に従ってＭｅａｎＢａｓｅ値のデータが異なるパネルに表示されている。
【図15】（２９日目を含む）２９日目までにプラセボ又は高用量ｒｅｃＡＰのいずれかに無作為化されたＳＴＯＰ－ＡＫＩにおける患者の生存率を示した図である。ベースラインで重症から中等症のＡＲＤＳを有する患者のプラセボ群又は高用量ＡＰ群について、０日目と比較して生存していた患者の割合が示されている。０日目の患者数は、プラセボ群で４０人、高用量ｒｅｃＡＰ群で４２人であった。
【発明を実施するための形態】
【0014】
本開示の目的は、特に対象が急性呼吸器症候群（ＡＲＤＳ）に罹患しているか又はそのリスクがある場合に、対象の呼吸機能を維持又は改善する方法を提供することである。本開示の別の目的は、機械的換気療法を防ぐ若しくはその期間短縮し、対象のＰ／Ｆ比を維持若しくは増加させ、及び／又は生存率を増加させることである。
【0015】
したがって、本開示は、ＡＲＤＳを有する対象又はＡＲＤＳのリスクがある対象における呼吸機能を維持又は改善するためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）、例えばＲｅｃＡＰの使用に関する。本開示は、例えば、対象にＲｅｃＡＰなどのＡＰを投与することを含む、重症から中等症のＡＲＤＳを有する対象を治療するための方法を提供する。いくつかの態様では、対象に投与されるＡＰの各用量は５００Ｕ／ｋｇ（使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰの場合０．８ｍｇ／ｋｇ）以上を含む。いくつかの特定の態様において、各ＡＰ用量は、１，０００Ｕ／ｇ（使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰの場合１．６ｍｇ／ｋｇ）以上である。いくつかの態様において、ＡＲＤＳは敗血症関連ＡＲＤＳである。他の態様では、ＡＲＤＳはウイルス感染、好ましくはコロナウイルス又はオルソミクソウイルス感染、より好ましくは重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルス感染（例えば、２０２０年のＣＯＶＩＤ－１９パンデミックの原因となった呼吸器疾患である２０１９年型コロナウイルス病（ＣＯＶＩＤ－１９）を引き起こすコロナウイルス株である、重症急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）など）によって引き起こされるか又は悪化する。オルソミクソウイルス感染の場合、感染は、好ましくは、Ａ型、Ｂ型、Ｃ型、又はＤ型インフルエンザ、より好ましくはＡ型又はＢ型インフルエンザなどのインフルエンザウイルスによって引き起こされる。
【0016】
ＲｅｃＡＰは、小腸型ＡＰ及び胎盤型ＡＰの２つのヒトアイソザイムの特性を組み合わせたキメラＡＰである（Kiffer-Moreira et al. PLoS One 2014;9:e89374）。（２つの中で最も生物学的に活性なアイソザイムである）小腸型ＡＰのクラウンドメインを（半減期が最も長い）胎盤型ＡＰのクラウンドメインで置換すると、非常に安定した生物学的に活性な酵素が生成される（Kiffer-Moreira et al. PLoS One 2014;9:e89374）。例えば、それらの開示が参照により全体が本明細書に援用される米国特許出願公開第２０１７０００９２１６号及び同第２０１６０２５０２９９号を参照。
【0017】
いくつかの態様では、ＡＲＤＳが認められ、ＡＲＤＳが中等症又は重症であると判断された場合、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）が対象に投与される。したがって、本開示のいくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、対象が中等症ＡＲＤＳ又は重症ＡＲＤＳに罹患しているかどうかを判断するために、ＡＰによる治療の前に、例えば、Ｐ／Ｆ比を決定することによって、ＡＲＤＳの重症度を測定することを含む。
【0018】
病態生理学の理解が進むにつれて、ＡＲＤＳの診断基準は経時的に変化してきた。ＡＲＤＳの国際コンセンサス基準は２０１２年に更新され、「２０１２年ベルリン定義（2012 Berlin definition）」として公知である（Ranieri VM, Rubenfeld GD, Thompson BT, Ferguson ND, Caldwell E, Fan E, Camporota L, Slutsky AS （Jun 2012）. "Acute respiratory distress syndrome: the Berlin Definition. ARDS Definition Task Force". JAMA. 307 （23）: 2526-33; Ferguson ND, Fan E, Camporota L, Antonelli M, Anzueto A, Beale R, Brochard L, Brower R, Esteban A, et al. （Oct 2012）. "The Berlin definition of ARDS: an expanded rationale, justification, and supplementary material". Intensive Care Med. 38 （10）: 1573-82）。概して、診断閾値を広げることに加えて、先立つ１９９４年のコンセンサス基準（1994 consensus criteria）からのその他の注目すべき変更（Bernard G, Artigas A, Brigham K, Carlet J, Falke K, Hudson L, Lamy M, Legall J, Morris A, Spragg R （1994）. "The American-European Consensus Conference on ARDS. Definitions, mechanisms, relevant outcomes, and clinical trial coordination". Am J Respir Crit Care Med. 149 （3 Pt 1）: 818-24）には、「急性肺損傷」という用語の使用を控えること、及び血液中の酸素含有量の減少の程度に応じてＡＲＤＳ重症度のグレードを定義することが含まれる。
【0019】
２０１２年ベルリン定義によれば、成人ＡＲＤＳは以下を特徴とする：
・明らかな臨床的発作から１週間以内であり呼吸器症状の進行を伴う急性発症の肺損傷
・他の肺の病理学によって説明されない（例えば、胸水、葉／肺虚脱、又は結節）胸部画像（胸部Ｘ線写真又はＣＴ）での両側性陰影
・心不全又は体液量過剰過負荷によって説明されない呼吸不全
・ＰａＯ２／ＦｉＯ２比の減少（ＰａＯ２／ＦｉＯ２比の減少は、利用可能な吸入ガスからの動脈酸素供給の減少を示す）：
・軽症ＡＲＤＳ：＞２００ｍｍＨｇかつ≦３００ｍｍＨｇ（＞２６．６６ｋＰａかつ≦４０．００ｋＰａ）；
・中等症ＡＲＤＳ：＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇ（＞１３．３３ｋＰａかつ≦２６．６６ｋＰａ）；
・重症ＡＲＤＳ：≦１００ｍｍＨｇ（≦１３．３３ｋＰａ）。
ベルリン定義では、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を考慮するために、最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）が５ｃｍＨ２Ｏである必要がある。この程度のＰＥＥＰは、軽症ＡＲＤＳを診断するために、持続気道陽圧法（ＣＰＡＰ）を使用して非侵襲的に提供されてもよい。
・明らかな臨床的発作から１週間以内であり呼吸器症状の進行を伴う急性発症の肺損傷
・他の肺の病理学によって説明されない（例えば、胸水、葉／肺虚脱、又は結節）胸部画像（胸部Ｘ線写真又はＣＴ）での両側性陰影
・心不全又は体液量過剰過負荷によって説明されない呼吸不全
・ＰａＯ２／ＦｉＯ２比の減少（ＰａＯ２／ＦｉＯ２比の減少は、利用可能な吸入ガスからの動脈酸素供給の減少を示す）：
・軽症ＡＲＤＳ：＞２００ｍｍＨｇかつ≦３００ｍｍＨｇ（＞２６．６６ｋＰａかつ≦４０．００ｋＰａ）；
・中等症ＡＲＤＳ：＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇ（＞１３．３３ｋＰａかつ≦２６．６６ｋＰａ）；
・重症ＡＲＤＳ：≦１００ｍｍＨｇ（≦１３．３３ｋＰａ）。
ベルリン定義では、ＰａＯ２／ＦｉＯ２比を考慮するために、最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）が５ｃｍＨ２Ｏである必要がある。この程度のＰＥＥＰは、軽症ＡＲＤＳを診断するために、持続気道陽圧法（ＣＰＡＰ）を使用して非侵襲的に提供されてもよい。
【0020】
この点に関して、本明細書で使用されるＡＲＤＳ及び急性肺損傷（ＡＬＩ）は、当技術分野で公知（Hernu, R., Wallet, F., Thiolliere, F. et al. An attempt to validate the modification of the American-European consensus definition of acute lung injury/acute respiratory distress syndrome by the Berlin definition in a university hospital. Intensive Care Med 39, 2161-2170 （2013））であるように、上記の定義の境界内で交換可能に使用可能である、すなわち、Ｐ／Ｆ境界及び２０１２年ベルリン定義のさらなる基準を使用して軽症疾患、中等症疾患、及び重症疾患を区別することに留意されたい。
【0021】
本開示のいくつかの態様では、ベースラインＰ／Ｆ比が≦１００ｍｍＨｇである場合、ＡＲＤＳは重症であると分類される。いくつかの態様では、ベースラインのＰ／Ｆ比が＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇの場合、ＡＲＤＳは中等症に分類される。他の態様では、ＡＲＤＳの重症度を決定するために他の診断測定を使用することができる。本開示のいくつかの態様では、ＡＲＤＳが軽症又は存在しないと判断される場合（例えば、ベースラインＰ／Ｆ比が＞２００ｍｍＨｇである場合）、ＡＰは対象に投与されない。
【0022】
いくつかの態様では、ＡＰ、例えばＲｅｃＡＰは、予防的に投与される。いくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、少なくとも１回用量のＡＰ、例えばＲｅｃＡＰを対象に投与することを含み、各用量は、少なくとも５００Ｕ／ｋｇ（使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰの場合は０．８ｍｇ／ｋｇ）又は１０００Ｕ／ｋｇ（使用した臨床グレードのＲｅｃＡＰの場合は１．６ｍｇ／ｋｇ）である。いくつかの特定の態様では、投薬計画は、０．５ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇのＡＰ、例えばＲｅｃＡＰを、静脈内注入により、１日用量で、少なくとも３日間投与することを含む。いくつかの特定の態様では、投薬計画は、０．５ｍｇ／ｋｇ～２ｍｇ／ｋｇのＡＰ、例えばＲｅｃＡＰを、静脈内注入により、１日用量で、少なくとも３日間投与することを含む。
【0023】
本開示をより容易に理解できるようにするために、特定の用語を最初に定義する。追加の定義は、「発明を実施するための形態」全体に記載されている。
【0024】
Ｉ．定義
本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」、及び「前記（ｔｈｅ）」は、文脈が明確に別の指示をしない限り、複数の指示対象を含む。「１つ（ａ）」（又は「１つ（ａｎ）」）という用語、並びに「１又は複数」及び「少なくとも１つ」という用語は、本明細書では交換可能に使用することができる。
本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形「１つ（ａ）」、「１つ（ａｎ）」、及び「前記（ｔｈｅ）」は、文脈が明確に別の指示をしない限り、複数の指示対象を含む。「１つ（ａ）」（又は「１つ（ａｎ）」）という用語、並びに「１又は複数」及び「少なくとも１つ」という用語は、本明細書では交換可能に使用することができる。
【0025】
さらに、本明細書で使用される場合、「及び／又は」は、２つの指定された特徴又は構成要素の一方を含む又は含まない各々の特定の開示とみなされるべきである。したがって、本明細書で「Ａ及び／又はＢ」などの語句で使用される「及び／又は」という用語は、「Ａ及びＢ」、「Ａ又はＢ」、「Ａ」（単独）、及び「Ｂ」（単独）を含むことを意図している。同様に、「Ａ、Ｂ、及び／又はＣ」などの語句で使用される「及び／又は」という用語は、以下の態様：Ａ、Ｂ、及びＣ；Ａ、Ｂ、又はＣ；Ａ又はＣ；Ａ又はＢ；Ｂ又はＣ；Ａ及びＣ；Ａ及びＢ；Ｂ及びＣ；Ａ（単独）；Ｂ（単独）；及びＣ（単独）のそれぞれを包含することを意図している。
【0026】
本明細書で態様が「含む」という言葉で記載されている場合は常に、「からなる」及び／又は「から本質的になる」に関して記載される類似の態様も提供される。
【0027】
本明細書及び特許請求の範囲を通じて数値に関連して使用される「約」という用語は、当業者によく知られており、許容できる精度の範囲を示す。概して、このような精度の間隔は±１５％である。
【0028】
別段の定義がない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本開示が関連する当業者によって通常に理解されるものと同じ意味を有する。
【0029】
単位、接頭辞、及び記号は、国際単位系（ＳＩ）で承認された形式で示されている。
【0030】
数値範囲には、範囲を定義する数値が含まれる。値の範囲が記載されている場合、その範囲の記載された上限と下限との間の介在する各整数値及びその各分数も、そのような値の間の各部分範囲とともに具体的に開示されていることを理解されたい。任意の範囲の上限及び下限は、独立して範囲に含まれるか、範囲から除外され、いずれか又は両方の限界が含まれない各範囲も本発明に包含される。下限の値の前に「＞」が付いている場合、範囲の下限は範囲から除外される。上限の値の前に「＜」が付いている場合、範囲の上限は範囲から除外される。下限の値の前に「≧」が付いている場合、範囲の下限は範囲に含まれる。上限値の前に「≦」が付いている場合、範囲の上限は範囲に含まれる。値が明示的に記載されている場合、記載された値とほぼ同じ数量又は量である値も本発明の範囲内にあることを理解されたい。組み合わせ（コンビネーション）が開示されている場合、その組み合わせの要素の各副次的組み合せ（サブコンビネーション）も具体的に開示されており、本発明の範囲内である。逆に、異なる要素又は要素群が個別に開示されている場合、それらの組み合わせも開示されている。発明のいずれかの要素が複数の代替案を有するものとして開示されている場合、各代替案が単独で、又は他の代替案との任意の組み合わせで除外されている発明の例も本明細書に開示されており、発明の２つ以上の要素がそのような除外を有することができ、そのような除外を有する要素の全ての組み合わせが本明細書に開示される。
【0031】
本明細書で使用される場合、「治療する」、「治療」、又は「～の治療」という用語は、（ｉ）疾患又は障害、例えばＡＲＤＳの可能性又はリスクを低減すること、（ｉｉ）疾患又は障害、例えばＡＲＤＳの発生を低減すること、（ｉｉｉ）疾患又は障害、例えばＡＲＤＳの重症度の軽減（例えば、症状の改善）、又は（ｉｖ）それらの組み合わせを意味する。
【0032】
例えば、治療することは、対象に投与された場合に、ＡＲＤＳに起因又は関連する肺損傷のリスクを予防又は軽減する、及び／又は肺損傷、例えばＡＲＤＳの症状、徴候、若しくは原因を治癒又は緩和する治療の能力を意味し得る。治療することは、未治療（又はプラセボ治療）群と比較した場合に、少なくとも１つの臨床症状を軽減若しくは減少させること、及び／又は症状の進行を抑制若しくは遅延させること、及び／又は疾患若しくは病気の発症を予防若しくは遅延させることも意味する。したがって、「治療する」、「治療すること」、又は「～の治療」という用語（又は文法的に同等の用語）は、ＡＲＤＳによって引き起こされるか又はＡＲＤＳに関連する肺損傷を（さらに）予防し得るＡＲＤＳの治療処置計画を意味する。呼吸器疾患の場合、対象は、本明細書に開示される方法によりＡＰで治療された後、ＡＰで治療されていない対象と比較して、呼吸機能が改善する又は呼吸機能の低下が少ないことが好ましい。
【0033】
本明細書で使用する用語「維持する」は、肺機能の低下を防止する、低下を遅くする、低下を停止する、及び／又は肺機能の低下を少なくとも部分的に元に戻すことを含む。「増加する」という用語は、呼吸機能を、治療が行われる前の値と同等又はそれ以上の値まで増加させることに必ずしも限定されない。これには、呼吸機能の部分的な回復が含まれる。
【0034】
本明細書で使用される「対象」又は「患者」という用語は、肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）の治療又は予後が望まれる任意の対象、特に哺乳動物対象を意味する。本明細書で使用される用語「対象」又は「患者」としては、任意のヒト又はヒト以外の動物が挙げられる。本明細書で使用される場合、「ＡＲＤＳを有する患者」又は「敗血症を有する患者」などの語句は、本明細書に開示されるように、ＡＰを用いた治療の実施から恩恵を受ける哺乳動物対象などの対象を含む。
【0035】
本開示のいくつかの態様では、対象は未処置の対象である。未処置の対象は、治療、例えば治療剤を投与されていない対象である。いくつかの態様では、未処置の対象は、ＡＲＤＳなどの肺損傷又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば、敗血症）と診断される前に、治療剤による治療を受けていない。
【0036】
別の態様では、対象は、肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷及び／又はＡＲＤＳに至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば、敗血症）を有すると診断される前に、治療及び／又は１又は複数の用量の治療剤を受けている。
【0037】
いくつかの態様では、対象のベースラインＰ／Ｆ比が所定のＰ／Ｆ比閾値レベル未満である場合、又はベースラインＰ／Ｆ比が所定の範囲内にある場合、対象は少なくとも１回の治療有効用量のＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）を投与され得る。
【0038】
本明細書で使用される用語「治療剤」及び「薬物」はまた、疾患若しくは障害、例えば肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば敗血症）を有する対象に投与され、望ましい、通常は有益な効果をもたらす任意の治療活性物質を意味する。治療剤はまた、対象に投与された場合に望ましい治療活性物質に代謝するプロドラッグであり得る。いくつかの態様では、治療剤は予防薬である。また、治療剤は薬学的に処方されてもよい。治療剤はまた、光若しくは超音波エネルギーなどの他の形態のエネルギーによって、又は全身投与可能な他の循環分子によって活性化される放射性同位体又は薬剤を含み得る。
【0039】
本開示のいくつかの態様では、肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）の症状、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば、敗血症）の治療、予防、又は改善のための治療剤は、肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）の症状、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば、敗血症）の治療に通常使用される、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）単独又は１又は複数の標準的な治療剤と組み合わせたものを含み得る。
【0040】
本明細書で使用される「治療上有効」量は、疾患若しくは障害、例えば肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば敗血症）を有する対象にいくらかの改善又は利益をもたらす治療剤の量である。したがって、「治療上有効」量は、疾患若しくは障害、例えば肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば敗血症）の少なくとも１つの臨床症状をいくらか緩和、軽減、及び／又は減少させる量である。
【0041】
本開示の特定の投薬計画としての組成物や方法によって治療することができる肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば、敗血症）に関連する臨床症状は、当業者に周知である。さらに、当業者は、何らかの利益が対象に提供される限り、治療効果が完全又は治癒的である必要がないことを理解するであろう。いくつかの態様では、「治療上有効」という用語は、必要とする患者においてＰ／Ｆ比などのバイオマーカーレベルを変更できる治療剤の量を意味する。
【0042】
本明細書で使用される場合、疾患若しくは障害、例えば肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性のある疾患若しくは症状（例えば敗血症）を有する患者において特定の結果を達成するのに「十分な量」又は「～するのに十分な量」とは、治療効果（すなわち、治療有効量の投与による）であってもよい望ましい効果を生み出すのに有効な治療剤（例えば、ＲｅｃＡＰなどのＡＰ）の量を意味する。いくつかの態様では、そのような特定の結果は、肺機能の改善である。
【0043】
本明細書で使用される場合、用語「医療提供者」は、生存対象（例えば、ヒト患者）に直接関わって投与を行う個人又は機関を意味する。医療提供者の非限定的な例としては、一般医療、専門医療、外科、及び／又はその他の種類の治療、評価、維持、療法、投薬、及び／又はアドバイスを含むがこれらに限定されない、患者の健康状態の全部又は任意の部分に関連する一般的及び／又は専門的な治療、評価、維持、療法、投薬、及び／又はアドバイスを提供する医師、看護師、技術者、セラピスト、薬剤師、カウンセラー、代替医療従事者、医療施設、診療所、病院、緊急治療室、診療所、緊急治療センター、代替医療クリニック／施設、並びに任意のその他の組織が挙げられる。
【0044】
本明細書で使用される「臨床検査室」という用語は、生存対象（例えば、ヒト）に由来する物質を検査又は処理するための施設を指す。処理の非限定的な例としては、生存対象（例えば、ヒト）の任意の疾患若しくは障害の、例えば、診断、予防、治療、又は健康状態の評価のための情報提供を目的とした、人体由来物質の生物学的、生化学的、血清学的、化学的、免疫血液学的、血液学的、生物物理学的、細胞学的、病理学的、遺伝学的、又はその他の検査が挙げられる。これらの検査には、試料を採取又はその他の方法で得る手順、生存対象（例えば、ヒト）の体内における様々な物質又は生存対象（例えば、ヒト）から得られた試料を準備する手順、決定する手順、測定する手順、又はその他の方法で存在又は非存在を記述する手順も含まれ得る。
【0045】
本明細書で使用される場合、「医療給付提供者」という用語は、全部又は一部を提供すること、提示すること、提案すること、支払うこと、あるいは１又は複数の医療給付、給付計画、健康保険、及び／又は医療費勘定プログラムへのアクセスを患者に与えることに関連している、個々の当事者、組織、又はグループを包含する。
【0046】
いくつかの態様では、医療提供者は、疾患又は障害、例えば肺損傷（例えば、ＡＲＤＳ）、又は肺損傷に至る可能性がある疾患又は症状（例えば、敗血症）の症状を予防、治療、又は改善するための治療を実施すること、又は実施することを別の医療提供者に指示することができる。医療提供者は、以下の対応、すなわち、試料を取得する、試料を処理する、試料を提出する、試料を受け取る、試料移動させる、試料を分析又は測定する、試料を定量する、試料を分析／測定／定量した後に得られた結果を提供する、試料を分析／測定／定量化した後に得られた結果を受け取る、１又は複数の試料を分析／測定／定量化した後に得られた結果を比較／スコア化する、１又は複数の試料から比較／スコアを提供する、１又は複数の試料から比較／スコアを取得する、治療（例えば、ＲｅｃＡＰなどのＡＰ）を実施する、治療の実施を開始する、治療の実施を中止する、治療の実施を継続する、治療の実施を一時的に中断する、投与される治療剤の量を増やす、投与される治療剤の量を減らす、ある量の治療剤の投与を継続する、治療剤の投与回数を増やす、治療剤の投与回数を減らす、治療剤の投与回数を同じに維持する、治療又は治療剤を少なくとも別の治療又は治療剤に置き換える、治療又は治療剤を少なくとも別の治療又は追加の治療剤と組み合わせることを実施すること又は別の医療提供者若しくは患者に実施するように指示することができる。
【0047】
いくつかの態様では、医療給付提供者は、例えば、試料の収集、試料の処理、試料の提出、試料の受け取り、試料の移動、試料の分析又は測定、試料の定量化、試料を分析／測定／定量した後に得られた結果の提供、試料を分析／測定／定量した後に得られた結果の転送、１又は複数の試料を分析／測定／定量した後に得られた結果の比較／スコア化、１又は複数の試料からの比較／スコアの転送、治療又は治療剤の実施／投与、治療又は治療剤の実施／投与の開始、治療又は治療剤の実施／投与の中止、治療又は治療剤の実施／投与の継続、治療又は治療剤の実施／投与の一時的な中断、治療剤の投与量の増加、治療剤の投与量の減少、ある量の治療剤の投与の継続、治療剤の投与回数の増加、治療剤の投与回数の減少、治療剤の同じ投与回数の維持、治療又は治療剤の少なくとも別の治療又は治療剤への置換、又は治療若しくは治療剤の少なくとも別の治療若しくは追加の治療剤との組み合わせを、許可又は拒否することができる。
【0048】
さらに、医療給付提供者は、例えば、治療の処方を許可又は拒否すること、治療の保険適用を許可又は拒否すること、治療費の払い戻しを許可又は拒否すること、治療の適格性を判断又は拒否することなどができる。
【0049】
いくつかの態様では、臨床検査室は、例えば、試料を採取又は取得する、試料を処理する、試料を提出する、試料を受け取る、試料を移動させる、試料を分析又は測定する、試料を定量する、試料を分析／測定／定量した後に得られた結果を提供する、試料を分析／測定／定量化した後に得られた結果を受け取る、１又は複数の試料を分析／測定／定量化した後に得られた結果を比較／スコア化する、１又は複数の試料から比較／スコアを提供する、１又は複数の試料から比較／スコアを取得する、又は他の関連の行動を行うことができる。
【0050】
ＩＩ．ＡＰによるＡＲＤＳの治療
特定の態様では、本開示は、ＡＰによる治療に特に良好に反応することが決定された対象集団、特にＡＲＤＳ患者の肺機能を維持又は改善するための方法に関する。
特定の態様では、本開示は、ＡＰによる治療に特に良好に反応することが決定された対象集団、特にＡＲＤＳ患者の肺機能を維持又は改善するための方法に関する。
【0051】
Pickkers et al（Pickkers P, Mehta RL, Murray PT, et al. Effect of Human Recombinant Alkaline Phosphatase on 7-Day Creatinine Clearance in Patients With Sepsis-Associated Acute Kidney Injury: A Randomized Clinical Trial. JAMA. 2018;320（19）:1998-2009）に広く記述されているＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究からのデータの最近の分析では、ＡＲＤＳの重症度に対応する閾値と肺機能の改善との間に統計的に有意な相関関係があることが確認されている（プラセボに対するＰ／Ｆ比の改善によって証明されている）。肺機能のマーカー、特にＰ／Ｆ比に従ってＳＴＯＰ－ＡＫＩ臨床試験で患者を層別化すると、驚くべきことに、特定のサブグループに対するＡＰ投与の特定の効果が特定された。これらのサブグループのそれぞれを定義するパラメータ又は複数のパラメータ（例えば、Ｐ／Ｆ比閾値などの一連の閾値）を使用して、例えば、ＡＰ療法を特定のサブグループ、治療のために選択された患者に合わせて個別化し、ＡＰ治療について決定する（例えば、投薬又は投薬スケジュールを変更する）、又は陽性転帰の可能性を評価することができる。
【0052】
したがって、いくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、対象にＲｅｃＡＰなどのＡＰを投与することを含む、中等症又は重症のＡＲＤＳのいずれかを有すると判断された対象へのＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の投与に関する。対象のＡＲＤＳ重症度を中等症又は重症に分類する方法は、当業者に周知である。上記のとおり、２０１２年ベルリン定義では、Ｐ／Ｆが＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇを中等症ＡＲＤＳ、Ｐ／Ｆが≦１００ｍｍＨｇ（≦１３．３３ｋＰａ）を重症ＡＲＤＳと分類している。したがって、中等症又は重症のＡＲＤＳ有する人のＰ／Ｆ比は≦２００ｍｍＨｇである。ベルリン定義では、Ｐ／Ｆ比を考慮するために、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）がさらに必要である。したがって、好ましい実施形態では、本発明により、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）が提供され、ここで、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）を使用してＰ／Ｆ比が測定された場合に、対象は、Ｐ／Ｆ比が≦２００ｍｍＨｇである中等症又は重症のＡＲＤＳを有する。ＡＰの投与は、中等症から重症のＡＲＤＳを有する対象に５００Ｕ／ｋｇ以上の用量で投与される場合に特に効果的である。ＡＰは、１，０００Ｕ／ｋｇ以上の用量で投与すると特に効果的である。
【0053】
いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）は、投与量当たり約５００Ｕ／ｋｇ以上、約６００Ｕ／ｋｇ以上、約７００Ｕ／ｋｇ以上、約８００Ｕ／ｋｇ以上、約９００Ｕ／ｋｇ以上、約１０００Ｕ／ｋｇ以上、約１１００Ｕ／ｋｇ以上、約１２００Ｕ／ｋｇ以上、約１３００Ｕ／ｋｇ以上、約１４００Ｕ／ｋｇ以上、約１５００Ｕ／ｋｇ以上、約１６００Ｕ／ｋｇ以上、約１７００Ｕ／ｋｇ以上、約１８００Ｕ／ｋｇ以上、約１９００Ｕ／ｋｇ以上、又は約２０００Ｕ／ｋｇ以上の用量で投与される。いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）は、投与量当たり２０００Ｕ／ｋｇを超える用量で投与される。いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）は、投与量当たり５００Ｕ／ｋｇ未満の用量で投与される。
【0054】
いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）は、約５００Ｕ／ｋｇ～約１５００Ｕ／ｋｇ、約６００Ｕ／ｋｇ～約１４００Ｕ／ｋｇ、約７００Ｕ／ｋｇ～約１３００Ｕ／ｋｇ、約８００Ｕ／ｋｇ～約１２００Ｕ／ｋｇ、又は約９００Ｕ／ｋｇ～約１１００Ｕ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの特定の態様では、ＡＰは約１０００Ｕ／ｋｇの用量で投与される。
【0055】
いくつかの態様では、ＡＰは、ヒトＡＰである。いくつかの態様では、ＡＰは、組換えＡＰである。いくつかの態様では、ＡＰは、キメラＡＰである。特定の態様では、キメラＡＰは、ＲｅｃＡＰ（配列番号１）である。いくつかの態様では、本明細書に開示されるＡＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して約７０％以上、約７５％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上、約９８％以上、又は約９９％以上の配列同一性を有する。いくつかの態様では、ＡＰは、機能的断片（すなわち、ＡＰの断片、例えば対応する全長ＡＰのＡＰ活性の約１０％以上、約２０％以上、約３０％以上、約４０％以上、約５０％以上、約６０％以上、７０％以上、約８０％以上、又は約９０％以上を維持するＡＰ）である。いくつかの態様では、ＡＰは、本明細書に開示されるＡＰのバリアント又は誘導体である。本明細書で開示されるように使用され得る他のＡＰについては、以下で詳細に論じる。
【0056】
いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）であり、投与量当たり約０．１ｍｇ／ｋｇ以上、約０．２ｍｇ／ｋｇ以上、約０．３ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ以上、約０．５ｍｇ／ｋｇ以上、約０．６ｍｇ／ｋｇ以上、約０．７ｍｇ／ｋｇ以上、約０．８ｍｇ／ｋｇ以上、約０．９ｍｇ／ｋｇ以上、約１ｍｇ／ｋｇ以上、約１．１ｍｇ／ｋｇ以上、約１．３ｍｇ／ｋｇ以上、約１．４ｍｇ／ｋｇ以上、約１．５ｍｇ／ｋｇ以上、約１．６ｍｇ／ｋｇ以上、約１．７ｍｇ／ｋｇ以上、約１．８ｍｇ／ｋｇ以上、約１．９ｍｇ／ｋｇ以上、約２ｍｇ／ｋｇ以上、約２．１ｍｇ／ｋｇ以上、約２．２ｍｇ／ｋｇ以上、約２．３ｍｇ／ｋｇ以上、又は約２．４／ｋｇ以上の用量で投与される。いくつかの態様では、ＡＰは、投与量当たり２．４ｍｇ／ｋｇを超える用量で投与される。いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）であり、約１００Ｕ／ｋｇ以上、約２００Ｕ／ｋｇ以上、約３００Ｕ／ｋｇ以上、約４００Ｕ／ｋｇ以上、約５００Ｕ／ｋｇ以上、約６００Ｕ／ｋｇ以上、約７００Ｕ／ｋｇ以上、約８００Ｕ／ｋｇ以上、約９００Ｕ／ｋｇ以上、約１０００Ｕ／ｋｇ以上、約１１００Ｕ／ｋｇ以上、約１２００Ｕ／ｋｇ以上、約１３００Ｕ／ｋｇ以上、約１４００Ｕ／ｋｇ以上、約１５００Ｕ／ｋｇ以上、約１６００Ｕ／ｋｇ以上、約１７００Ｕ／ｋｇ以上、約１８００Ｕ／ｋｇ以上、約１９００Ｕ／ｋｇ以上、又は約２０００Ｕ／ｋｇ以上の用量で投与される。ＡＰはＲｅｃＡＰであり、１００Ｕ／ｋｇ未満の用量で投与される。ＡＰはＲｅｃＡＰであり、２０００Ｕ／ｋｇを超える用量で投与される。
【0057】
いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）であり、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ～約２．３ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ／ｋｇ～約２．２ｍｇ／ｋｇ、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２．１ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ～約１．９ｍｇ／ｋｇ、約１．４ｍｇ／ｋｇ～約１．８ｍｇ／ｋｇ、又は約１．５ｍｇ／ｋｇ～約１．７ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。いくつかの特定の態様では、ＡＰは約１．６ｍｇ／ｋｇの用量で投与される。
【0058】
いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）であり、約１００Ｕ／ｍｇ以上、約２００Ｕ／ｍｇ以上、約３００Ｕ／ｍｇ以上、約４００Ｕ／ｍｇ以上、約５００Ｕ／ｍｇ以上、約６００Ｕ／ｍｇ以上、約７００Ｕ／ｍｇ以上、約８００Ｕ／ｍｇ以上、約９００Ｕ／ｍｇ以上、約１０００Ｕ／ｍｇ以上、約１１００Ｕ／ｍｇ以上、約１２００Ｕ／ｍｇ以上、約１３００Ｕ／ｍｇ以上、約１４００Ｕ／ｍｇ以上、約１５００Ｕ／ｍｇ以上、約１６００Ｕ／ｍｇ以上、約１７００Ｕ／ｍｇ以上、約１８００Ｕ／ｍｇ以上、約１９００Ｕ／ｍｇ以上、又は約２０００Ｕ／ｍｇ以上の比活性度を有する。
【0059】
いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）であり、約１０００Ｕ：１．６ｍｇの比活性度を有する。いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰであり、約６００Ｕ／ｍｇ～約７００Ｕ／ｍｇ、約５００Ｕ／ｍｇ～約８００Ｕ／ｍｇ、約４００Ｕ／ｍｇ～約９００Ｕ／ｍｇ、約３００Ｕ／ｍｇ～約１０００Ｕ／ｍｇ、約２００Ｕ／ｍｇ～約１１００Ｕ／ｍｇ、又は１００Ｕ／ｍｇ～約１２００Ｕ／ｍｇの比活性度を有する。いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰであり、１００Ｕ／ｍｇ未満の比活性度を有する。いくつかの態様では、ＡＰは、ＲｅｃＡＰであり、１２００Ｕ／ｍｇを超える比活性度を有する。
【0060】
いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）は１回の治療につき１回の用量のみ投与される（例えば、１日１回の用量で１～７日間）。他の態様では、ＡＰの２回以上の用量が投与される。いくつかの態様では、２回、３回、４回、５回、６回、７回、８回、９回、１０回、１１回、１２回、１３回、１４回、１５回、１６回、１７回、１８回、１９回、２０回、又は２１回のＡＰの用量が投与される（例えば、少なくとも１日２回用量で１～７日間）。
【0061】
いくつかの態様では、ＡＰ用量は毎日投与される。他の態様では、ＡＰ用量は、２日、３日、４日、５日、６日、又は７日ごとに投与される。
【0062】
いくつかの態様では、単回用量が毎日投与される。いくつかの態様では、２回、３回、又はそれ以上の用量が毎日投与される。
【0063】
いくつかの態様では、ＡＰによる治療は約４日未満である。いくつかの態様では、ＡＰによる治療は３日未満、２日未満、又は１日未満である。
【0064】
特定の態様では、ＡＰは、３日間連続して投与される約１０００Ｕ／ｋｇの１日用量として投与される。いくつかの特定の態様では、ＡＰがＲｅｃＡＰである場合、ＡＰは、３日間連続して投与される１．６ｍｇ／ｋｇの１日用量として投与される。いくつかの態様では、各ＡＰ、例えばＲｅｃＡＰ（例えば、本開示で使用される臨床グレードのＲｅｃＡＰ）の用量は、約０．１０ｍｇ／ｋｇ～約３ｍｇ／ｋｇ、約０．２０ｍｇ／ｋｇ～約２．９ｍｇ／ｋｇ、約０．３ｍｇ／ｋｇ～約２．８ｍｇ／ｋｇ、約０．４ｍｇ／ｋｇ～約２．７ｍｇ／ｋｇ、約０．５ｍｇ／ｋｇ～約２．６ｍｇ／ｋｇ、約０．６ｍｇ／ｋｇ～約２．５ｍｇ／ｋｇ、約０．７ｍｇ／ｋｇ～約２．４ｍｇ／ｋｇ、約０．８ｍｇ／ｋｇ～約２．３ｍｇ／ｋｇ、約０．９ｍｇ／ｋｇ～約２．２ｍｇ／ｋｇ、約１ｍｇ～約２．１ｍｇ／ｋｇ、約１．１ｍｇ／ｋｇ～約２ｍｇ／ｋｇ、約１．２ｍｇ／ｋｇ～約１．９ｍｇ／ｋｇ、約１．３ｍｇ／ｋｇ～約１．８ｍｇ／ｋｇ、又は約１．４ｍｇ／ｋｇ～約１．７ｍｇ／ｋｇである。いくつかの態様では、各ＡＰ、例えば、ＲｅｃＡＰの用量は、約０．１ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．２ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．３ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．４ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．５ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．６以上ｍｇのＡＰ／ｋｇ、約０．７ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．８ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約０．９ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．１ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．２ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．３ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．４ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．５ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．６ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．７ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．８ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約１．９ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．１ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．２ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．３ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．４ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．５ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．６ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．６ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．７ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．８ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、約２．９ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇ、又は約３ｍｇ以上のＡＰ／ｋｇを含む。
【0065】
ＡＰは、例えば静脈内、直腸内、気管支内、又は経口などの異なる経路を介して投与され得る。いくつかの特定の態様において、ＡＰは、例えば静脈内注入を介して静脈内に投与される。いくつかの態様では、ＡＰは持続注入により静脈内投与される。
【0066】
肺機能の短期間の維持は、即時の救命結果をもたらし得るが、肺機能に対するＡＰの効果は長期間持続することが好ましい。
【0067】
Ｐ／Ｆ比は、当技術分野で公知の方法によって決定することができる。動脈血液ガス（ＡＢＧ）によって測定される動脈ｐＯ２は、Ｐ／Ｆ比を計算するための好ましい方法である。ただし、ＡＢＧが利用できないためにｐＯ２が不明な場合は、以下の表に示すように、パルスオキシメトリーで測定されたＳｐＯ２を使用してｐＯ２を概算できる。ＳｐＯ２が９８％～１００％の場合は、ＳｐＯ２からｐＯ２の推定が信頼できなくなることに注意しなくてはならない。
例：４０％酸素を使用している患者のパルスオキシメトリーＳｐＯ２が９５％であると仮定する。上記の表を参照すると、ＳｐＯ２の９５％は、ｐＯ２の８０ｍｍＨｇに相当する。Ｐ／Ｆ比＝８０÷０．４０＝２００。患者は、４０％酸素の供給で安定する場合もあるが、依然として急性呼吸不全を有する。患者を室内空気下で酸素を中断した場合、ｐＯ２はわずか４０ｍｍＨｇとなる（室内空気下での急性呼吸不全のカットオフ値６０ｍｍＨｇよりはるかに低い）。
【表1】
例：４０％酸素を使用している患者のパルスオキシメトリーＳｐＯ２が９５％であると仮定する。上記の表を参照すると、ＳｐＯ２の９５％は、ｐＯ２の８０ｍｍＨｇに相当する。Ｐ／Ｆ比＝８０÷０．４０＝２００。患者は、４０％酸素の供給で安定する場合もあるが、依然として急性呼吸不全を有する。患者を室内空気下で酸素を中断した場合、ｐＯ２はわずか４０ｍｍＨｇとなる（室内空気下での急性呼吸不全のカットオフ値６０ｍｍＨｇよりはるかに低い）。
【0068】
酸素補給は、マスク又は鼻カニューレ（「ＮＣ」）のいずれかによって投与され得る。ベンチュリー（Ｖｅｎｔｕｒｉ）マスク（ベンチマスク）は、２４％、２８％、３１％、３５％、４０％、又は５０％の特定の固定濃度（ＦＩＯ２）の酸素の制御流を供給する。ノンリブリーザー（「ＮＲＢ」）マスクは、約１００％の酸素を供給するように設計されている。４０％以上の酸素補給を提供することは、急性呼吸不全の患者だけがそれだけの量の酸素を必要とすることから、医師が急性呼吸不全を治療していることを意味する。鼻カニューレは、１分当たりの酸素のリットル（Ｌ／分又は「ＬＰＭ」）で調整可能な流量で酸素を提供する。鼻カニューレによって供給される実際のＦＩＯ２（パーセント酸素）は、マスクを使用した場合よりも多少変動し、信頼性が低くなるが、以下の表に示すように推定できる。鼻カニューレの流量から得られたＦＩＯ２を使用して、Ｐ／Ｆ比を計算することができる。
例：患者は、５Ｌ／分の酸素を受けるとＡＢＧで８５ｍｍＨｇのｐＯ２を有する。５Ｌ／分は４０％酸素（０．４０のＦＩＯ２）であるため、Ｐ／Ｆ比＝８５÷０．４０＝２１２．５となる。
【表2】
例：患者は、５Ｌ／分の酸素を受けるとＡＢＧで８５ｍｍＨｇのｐＯ２を有する。５Ｌ／分は４０％酸素（０．４０のＦＩＯ２）であるため、Ｐ／Ｆ比＝８５÷０．４０＝２１２．５となる。
【0069】
いくつかの態様では、本明細書に開示される対象へのＡＰの投与は、対象におけるＰ／Ｆ比、動脈血酸素飽和度（ｐＯ２）、脈拍酸素飽和度（ＳｐＯ２）、酸素化指数、及び／又は呼吸指数などの多くの呼吸機能関連パラメータを改善することができる。
【0070】
いくつかの態様では、対象へのＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の投与は、治療を行っていない対象のＰ／Ｆ比と比べてのＰ／Ｆ比の増加をもたらす。いくつかの態様では、Ｐ／Ｆ比の増加は、治療を行っていない対象のＰ／Ｆ比に対して、５ｍｍＨｇ以上、１０ｍｍＨｇ以上、２０ｍｍＨｇ以上、３０ｍｍＨｇ以上、４０ｍｍＨｇ以上、５０ｍｍＨｇ以上、６０ｍｍＨｇ以上、７０ｍｍＨｇ以上、８０ｍｍＨｇ以上、９０ｍｍＨｇ以上、１００ｍｍＨｇ以上、１１０ｍｍＨｇ以上、１２０ｍｍＨｇ以上、１３０ｍｍＨｇ以上、１４０ｍｍＨｇ以上、１５０ｍｍＨｇ以上、１６０ｍｍＨｇ以上、１７０ｍｍＨｇ以上、１８０ｍｍＨｇ以上、１９０ｍｍＨｇ以上、又は２００ｍｍＨｇ以上である。
【0071】
いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）を対象に投与すると、ベースラインＰ／Ｆ比と比べての対象Ｐ／Ｆ比が増加する。いくつかの態様では、対象のＰ／Ｆ比の増加は、ベースラインＰ／Ｆ比に対して、５ｍｍＨｇ以上、１０ｍｍＨｇ以上、２０ｍｍＨｇ以上、３０ｍｍＨｇ以上、４０ｍｍＨｇ以上、５０ｍｍＨｇ以上、６０ｍｍＨｇ以上、７０ｍｍＨｇ以上、８０ｍｍＨｇ以上、９０ｍｍＨｇ以上、１００ｍｍＨｇ以上、１１０ｍｍＨｇ以上、１２０ｍｍＨｇ以上、１３０ｍｍＨｇ以上、１４０ｍｍＨｇ以上、１５０ｍｍＨｇ以上、１６０ｍｍＨｇ以上、１７０ｍｍＨｇ以上、１８０ｍｍＨｇ以上、１９０ｍｍＨｇ以上、又は２００ｍｍＨｇ以上である。いくつかの態様では、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）をＡＲＤＳ患者に投与すると、ＡＲＤＳの重症度が、「重症」から「中等症」、「中等症」から「軽度」、「重症」から「軽症」、又は「中等症」若しくは「重症」から「ＡＲＤＳなし」（すなわちＰ／Ｆが＞３００ｍｍＨｇ）に緩和される。
【0072】
この文脈内で、ベースラインＰ／Ｆ比は、治療開始前又は開始前後のＰ／Ｆ比として定義される。ベースラインＰ／Ｆ比は、好ましくは－２日目、－１日目、０日目、又は１日目に、すなわち、好ましくはＡＰによる治療の開始前４８時間以内及びＡＰによる治療の開始後２４時間以内に決定される。より好ましくは、ベースラインＰ／Ｆ比は、ＡＰによる治療の開始前２４時間以内及びＡＰによる治療の開始後１２時間以内に、より好ましくは、ＡＰによる治療開始の１２時間前からＡＰによる治療開始後６時間までの間に、より好ましくは、ＡＰによる治療の開始の１２時間前からＡＰによる治療の開始までの間に、最も好ましくは、ＡＰによる治療開始の６時間前からＡＰによる治療の開始までの間に決定される。ＡＰ治療は、好ましくはＰ／Ｆ比が少なくとも２００以上になるまで、より好ましくは３００以上になるまで、最も好ましくは対象がもはやＡＲＤＳを有していないと考えられるまで継続される。
【0073】
いくつかの態様では、肺機能の増加、例えばＰ／Ｆ比の増加が、ＡＰ投与後１日目、２日目、３日目、４日目、５日目、６日目、７日目、８日目、９日目、１０日目、１１日目、１２日目、１３日目、１４日目、１５日目、１６日目、１７日目、１８日目、１９日目、２０日目、２１日目、２２日目、２３日目、２４日目、２５日目、２６日目、２７日目、又は２８日目に観察される。
【0074】
本開示のいくつかの態様では、対象のＡＲＤＳは、敗血症若しくはウイルス感染を伴うか、又はそれらによるものである。いくつかの態様では、対象のＡＲＤＳが敗血症若しくはウイルス感染を伴うか、又はそれらによるものであり、敗血症又はウイルス感染が治療開始の決定前９６時間以内に判定された場合にのみ、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）が対象に投与される。他の態様では、対象のＡＲＤＳが敗血症若しくはウイルス感染を伴うか、又はそれらによるものであり、敗血症又はウイルス感染がＡＲＤＳ検出の７２時間以内に判定された場合にのみ、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）が対象に投与される。
【0075】
本開示のいくつかの態様では、対象のＡＲＤＳは、敗血症若しくはウイルス感染を伴うか、又はそれらによるものであり、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による対象の治療は、敗血症又はウイルス感染の判定後２４時間以内に開始される。敗血症の存在は、例えば、ＳＩＲＳ又はＳＯＦＡなどの敗血症を判定するために開発された基準を使用することによって検出され得る。「敗血症」の定義は、１９９２年に最初に定義されて以来、感染に対する宿主の全身性炎症反応症候群（ＳＩＲＳ）が敗血症の原因であるという当時広まっていいた見解に焦点を当てて、何回か再評価されてきた（Bone RC, Balk RA, Cerra FB, et al. American College of Chest Physicians/Society of Critical Care Medicine Consensus Conference: definitions for sepsis and organ failure and guidelines for the use of innovative therapies in sepsis. Crit Care Med. 1992;20（6）:864-874）。２００１年に、診断基準のリストが拡張されたが、代替基準は提供されなかった（Levy MM, Fink MP, Marshall JC, et al. International Sepsis Definitions Conference. 2001 SCCM/ESICM/ACCP/ATS/SIS International Sepsis Definitions Conference. Intensive Care Med. 2003;29（4）:530-538）。２０１６年には、現在広く使用されている「ＳＥＰＳＩＳ－３」基準が推奨され、ＳＩＲＳ基準は使用されなくなった。代わりに、Ｓｅｑｕｅｎｔｉａｌ［Ｓｅｐｓｉｓ－ｒｅｌａｔｅｄ］ Ｏｒｇａｎ Ｆａｉｌｕｒｅ Ａｓｓｅｓｓｍｅｎｔ（ＳＯＦＡ）が敗血症の診断に使用されている（Singer M, Deutschman CS, Seymour CW, et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock （Sepsis-3）. JAMA. 2016;315（8）:801-810. doi:10.1001/jama.2016.0287）。実施例に記載されているＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究は、２０１４年～２０１７年に実施され、敗血症患者を特定及び／又は階層化するためにＳＩＲＳ及びＳＯＦＡスコアの両方を利用した。本明細書で使用される「敗血症」の定義及び判断について、ＳＯＦＡスコアに基づき、Singer et al（Singer M, Deutschman CS, Seymour CW, et al. The Third International Consensus Definitions for Sepsis and Septic Shock （Sepsis-3）. JAMA. 2016;315（8）:801-810. doi:10.1001/jama.2016.0287）に詳しく説明されているＳＥＰＳＩＳ－３基準を使用することが好ましい。
【0076】
本開示のいくつかの態様では、ＡＰは、肺機能の低下を防ぐために、敗血症のリスクのある対象に投与される。
【0077】
いくつかの態様では、ＡＲＤＳの検出後４８時間以内に、対象のＡＰ治療が開始される。好ましい実施形態では、対象のＡＰ治療は、中等症又は重症のＡＲＤＳの検出後４８時間以内、好ましくは２４時間以内、より好ましくは１２時間以内、最も好ましくは６時間以内に開始される。
【0078】
本明細書に開示される方法のいくつかの態様では、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、機械的換気療法を受けている対象における機械的換気療法の期間の短縮又は中止をもたらす。
【0079】
本明細書に開示される方法のいくつかの態様では、ＡＰの投与は、肺機能の増加をもたらすか、又は臨界閾値未満への肺機能の低下を防止する。したがって、いくつかの態様において、ＡＰ投与は、臨界閾値未満の肺機能の低下を防止することができる。よって、いくつかの態様では、対象の肺機能が特定の閾値レベル未満に低下するリスクを判定するために、肺機能を維持するためにＡＰを投与する前に、肺機能の指標（例えば、Ｐ／Ｆ比）が決定される。
【0080】
いくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、肺機能のマーカー（例えば、Ｐ／Ｆ比）の変化を単独で、又は１つ、２つ、３つ、又はそれ以上のバイオマーカーのレベルの変化の検出と組み合わせて検出することを含む。
【0081】
いくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、検出された肺機能パラメータ（例えば、ベースラインＰ／Ｆ比）に基づいて、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による療法に対する臨床反応の増加を予測することを含む。いくつかの態様では、本開示の方法は、肺機能パラメータ（例えば、ベースラインＰ／Ｆ比）が特定の範囲内にあるかどうか、又はそれが特定の閾値（例えば、ＡＲＤＳの重症度に対するＰ／Ｆ比閾値）を超えるか又は下回るかを評価することを含む。よって、例えば、肺機能パラメータ（例えば、ベースラインＰ／Ｆ比）が、単独で、又は他のバイオマーカーと組み合わせて、患者がＡＰによる療法から恩恵を受けることを示している場合は、療法を開始するか、維持するか、又は変更すること（例えば、投与量を増やす若しくは減らすこと、又は投与回数を増やす若しくは減らすこと）ができる。
【0082】
逆に、例えば、肺機能パラメータ（例えば、ベースラインＰ／Ｆ比）が、単独で、又は他のバイオマーカーと組み合わせて、患者がＡＰによる療法から恩恵を受けないことを示している場合は、療法を中止するか、一旦中断するか、又は変更すること（例えば、投与量を増やす若しくは減らすこと、又は投与回数を増やす若しくは減らすこと）などができる。
【0083】
換言すれば、肺機能パラメータ（例えば、ベースラインのＰ／Ｆ比）の特定のレベルは、単独で、又は他の分子若しくは臨床バイオマーカーと組み合わせて、ＡＰ療法の臨床効果と相関し、敗血症及び／又はＡＲＤＳに罹患した患者の特定の集団における臨床転帰を予測するのに役立つ。
【0084】
一部の法域では、本発明は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）が提供され、前記対象は≦２００ｍｍＨｇのＰ／Ｆ比を有する。さらに、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療するための薬剤を製造するためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）の使用が提供され、前記対象は≦２００ｍｍＨｇのＰ／Ｆ比を有する。
【0085】
本発明はまた、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）が提供され、ここで、前記方法は有効量のアルカリホスファターゼ（ＡＰ）を前記対象に投与することを含み、
（ｉ）前記対象がＡＰによる治療の前に中等症又は重症のＡＲＤＳを有しており、及び
（ｉｉ）前記ＡＰは少なくとも１回の３００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される。
（ｉ）前記対象がＡＰによる治療の前に中等症又は重症のＡＲＤＳを有しており、及び
（ｉｉ）前記ＡＰは少なくとも１回の３００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される。
【0086】
中等症又は重症のＡＲＤＳでは、２０１２年ベルリン定義によると、５ｃｍＨ２Ｏの最小呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）を使用して測定した場合、Ｐ／Ｆ比は≦２００ｍｍＨｇである。
【0087】
好ましい実施形態では、対象が、ＡＰによる治療の前にＰ／Ｆ比が＞１００ｍｍＨｇかつ≦２００ｍｍＨｇである中等症ＡＲＤＳを有する。他の好ましい実施形態では、対象が、ＡＰによる治療前にＰ／Ｆ比が＜１００ｍｍＨｇである重症ＡＲＤＳを有する。
【0088】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ここで、前記ＡＰはヒトＡＰである。
【0089】
いくつかの好ましい実施形態では、ＡＰは組換えＡＰであり、好ましくはキメラＡＰであり、より好ましくはＲｅｃＡＰのアミノ酸配列（配列番号１）に対して、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有するＡＰである。いくつかの好ましい実施形態では、前記ＡＰは、ＲｅｃＡＰのアミノ酸配列（配列番号１）に対して、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有する組換えＡＰであり、但し、２７９位のアミノ酸はロイシン（Ｌ）、３２８位のアミノ酸はバリン（Ｖ）、４７８位のアミノ酸はロイシン（Ｌ）である。
【0090】
好ましい実施形態では、本発明に係る使用又は本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記ＡＰの投与は対象の肺機能の増加をもたらす。前記肺機能の増加は、好ましくは、治療を行っていない場合の対象のＰ／Ｆ比と比べての前記対象のＰ／Ｆ比の増加を含む。
【0091】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ＡＲＤＳは敗血症に関連するか又は敗血症によるものである。好ましくは、敗血症はＡＰの投与前９６時間以内に検出される。
【0092】
より好ましい実施形態では、本発明に係る使用又は本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、ＡＲＤＳは敗血症に関連するか又は敗血症によるものであり、及びＡＲＤＳの検出前７２時間以内に敗血症が検出される。好ましくは、ＡＰ治療は、敗血症が検出された後、及び／又はＡＲＤＳが検出された後、２４時間以内に開始される。
【0093】
他の好ましい実施形態では、本発明に係る使用又は本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、ＡＲＤＳはウイルス感染に関連するか又はウイルス感染によるものである。ウイルス感染は、好ましくはコロナウイルスウイルス感染、より好ましくは重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）関連コロナウイルスによる感染を含む。いくつかの好ましい実施形態では、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。
【0094】
好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ここで、ＡＰは１日１回投与される。好ましい実施形態では、ＡＰは静脈内投与される。好ましい実施形態では、ＡＰは１日３回用量で投与される。
【0095】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ここで、前記ＡＰはＲｅｃＡＰであり、ＲｅｃＡＰの用量は０．６ｍｇ／ｋｇ（又は３７５Ｕ／ｋｇ）～３．２ｍｇ／ｋｇ（又は２，０００Ｕ／ｋｇ）であり、好ましくは０．８ｍｇ／ｋｇ（又は５００Ｕ／ｋｇ）～２．０ｍｇ／ｋｇ（又は１２５０Ｕ／ｋｇ）、より好ましくは約１．６ｍｇ／ｋｇ（又は１０００Ｕ／ｋｇ）である。
【0096】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ここで、前記ＡＰは、少なくとも１回の５００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される。好ましくは、ＡＰ用量は、５００Ｕ／ｋｇ又は１０００Ｕ／ｋｇのＲｅｃＡＰである。いくつかの好ましい実施形態では、ＡＰ用量は、０．８ｍｇ／ｋｇ又は１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰである。
【0097】
好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰ又は本発明に係る使用が提供され、ここで、ＡＰの少なくとも１回用量の投与は、対象におけるＰ／Ｆ比の維持又は増加をもたらす。好ましくは、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、機械的換気療法を受けている対象における機械的換気療法の期間の短縮又は中止をもたらす。
【0098】
本明細書で使用される「バイオマーカー」という用語は、生物学的プロセス、生物学的事象、及び／又は病理学的状態の特徴的な指標である因子、例えば、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による治療に対する臨床反応の予測因子を指す。本明細書において、バイオマーカーという用語は、臨床マーカー及び分子バイオマーカー（生物学的マーカー）の両方を包含する。したがって、本開示の文脈において、「バイオマーカー」という用語は、例えば、「生物学的バイオマーカー」又は「分子バイオマーカー」を包含する。いくつかの態様では、肺機能を評価するために使用される生物学的又は分子バイオマーカーには、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）、又はインターロイキン８（ＩＬ－８）などの炎症のマーカーが含まれる。ＡＲＤＳの診断及び転帰に関連するより具体的なバイオマーカーは、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、並びに３－メチルヘプタンである。概して、これらは上皮又は内皮の損傷に対して細胞特異的であるか、炎症又は感染反応に関与している（Garcia-Laorden MI, Lorente JA, Flores C, Slutsky AS, Villar J. Biomarkers for the acute respiratory distress syndrome: how to make the diagnosis more precise.Ann Transl Med. 2017;5 (14):283）。
【0099】
上記で開示したように、「バイオマーカー」という用語は、生物学的療法に対する反応、例えば、性別、年齢、併用薬、喫煙状態、体格指数（ＢＭＩ）などを予測することができる「臨床状態マーカー」とも称される、「臨床バイオマーカー」も包含する。
【0100】
上記のように、ベースラインＰ／Ｆ値に基づくカットオフアプローチを適用して、ＡＲＤＳを「重症ＡＲＤＳ」又は「中等症ＡＲＤＳ」に分類する。例えば、「重症ＡＲＤＳ」、「中等症から重症のＡＲＤＳ」、又は「軽症ＡＲＤＳ」の対象で観察されたＰ／Ｆレベルの差は、患者がＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）で治療された場合の臨床転帰の予測に適用できる。したがって、対象のＰ／Ｆ比が特定の閾値（例えば、２００ｍｍＨｇ）を下回る場合、その対象は特定のＡＰ療法（例えば、ＲｅｃＡＰの１又は複数回用量の投与を含む特定のＡＰレジメンによる療法）の候補となる。
【0101】
いくつかの態様では、Ｐ／Ｆ比が所定の閾値レベル未満であるという単なる判定は、対象を特定のＡＰ療法（例えば、ＲｅｃＡＰによる療法による治療）の候補として識別するのに十分である。したがって、本明細書で開示される方法のいくつかの態様では、Ｐ／Ｆ比率を単独で使用することができる。しかしながら、他の態様では、Ｐ／Ｆ比率は、肺機能の他の測定（例えば、スパイロメトリーを使用すること）及び／又は、例えば、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８（ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－８）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、並びに３－メチルヘプタンからなる群から選択されるマーカーなど、分子バイオマーカー若しくは臨床バイオマーカーと組み合わせることができる。
【0102】
これらの知見は、例えば、（例えば、患者を特定のＡＰ療法の候補として選択することによって）新たな治療法を決定する方法、肺機能の低下を治療する、肺機能の低下を予防する、肺機能を高める、若しくは（例えば、ＡＲＤＳを治療するために）肺機能を維持する方法、ＡＰ治療の有効性をモニタリングする方法、又は製剤、投薬計画、若しくは投与経路を調整する方法に適用することができる。
【0103】
本明細書に開示される方法は、上述のように対象のＰ／Ｆ比のみに基づいて、又は１若しくは複数の追加のバイオマーカーと組み合わせて通常は分類される、ＡＲＤＳの重症度に基づいて、予防及び／又は治療を処方、開始、及び／又は変更することを含む
【0104】
本開示では、ＡＰの投与を含む治療レジメンでＡＲＤＳを有する患者を治療するかどうかを決定する方法が提供され、ここで、前記方法は、（ａ）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、及び所望により患者から採取した試料において、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなどの追加のバイオマーカーのレベルを測定すること又は臨床検査室に測定を指示すること、並びに（ｂ）患者が、所定の閾値レベルと比較して、及び／又は対照におけるＰ／Ｆ比若しくは別の肺機能パラメータと比較して、より高い又はより低いＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を有し、並びに所望により、各バイオマーカーの所定の閾値レベルと比較して、あるいは１又は複数の対照における各バイオマーカーレベルと比較して、試料において、より高いレベル又はより低いレベルの追加のバイオマーカー（例えば、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなど）を有すると判定された場合に、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の投与を含む治療レジメンによって患者を治療すること若しくは医療提供者に患者の治療を指示すること、治療を中断すること、治療を開始しないこと、治療を拒否すること、あるいは医療提供者に治療を中断する、開始しない、又は拒否するように指示することを含む。
【0105】
ある態様では、本開示により、ＡＰの投与を含む治療レジメンでＡＲＤＳを有する患者を治療するかどうかを決定する方法が提供され、ここで、前記方法は、（ａ）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、及び所望により患者から採取した試料において、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８（ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－８）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなどの追加のバイオマーカーのレベルを測定すること又は臨床検査室に測定を指示すること、並びに（ｂ）患者が、所定の閾値レベルと比較して、及び／又は対照におけるＰ／Ｆ比若しくは別の肺機能パラメータと比較して、より高い又は減少しているＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を有する、並びに所望により、所定のバイオマーカー閾値レベルと比較して、あるいは１又は複数の対照におけるバイオマーカーレベルと比較して、試料において、より高い又はより低いレベルの任意の追加のバイオマーカーのうちの少なくとも１つを有すると判定された場合に、ＡＰの投与を含む治療レジメンによって患者を治療すること又は医療提供者に治療を指示することを含む。
【0106】
ある態様では、本開示により、ＡＰの投与を含む治療レジメンでＡＲＤＳを有する患者を治療するかどうかを決定する方法が提供され、ここで、前記方法は、（ａ）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、及び所望により患者から採取した試料において、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８（ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－８）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなどの追加のバイオマーカーのレベルを測定すること又は臨床検査室に測定を指示すること、並びに（ｂ）患者が、所定の閾値レベルと比較して、及び／又は対照におけるＰ／Ｆ比若しくは別の肺機能パラメータと比較して、より高い又は増加しているＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を有する、並びに所望により、所定のバイオマーカー閾値レベルと比較して、あるいは１又は複数の対照におけるバイオマーカーレベルと比較して、試料において、より高い又はより低いレベルの任意の追加のバイオマーカーのうちの少なくとも１つを有すると判定された場合に、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の患者への投与を含む治療レジメンによる治療を中断すること、治療を開始しないこと、治療を拒否すること、あるいは医療提供者に治療を中断する、開始しない、又は拒否するように指示することを含む。
【0107】
ＡＲＤＳと診断された患者をＡＰによる治療の候補として選択する方法もまた提供され、ここで、前記方法は、（ａ）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、及び所望により患者から採取した試料において、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８（ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－８）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなどの追加のバイオマーカーのレベルを測定すること又は臨床検査室に測定を指示すること、並びに（ｂ）患者が、所定の閾値レベルと比較して、及び／又は対照におけるＰ／Ｆ比若しくは別の肺機能パラメータと比較して、より高い又は減少しているＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を有する、並びに所望により、所定の閾値レベルと比較して、あるいは１又は複数の対照におけるバイオマーカーレベルと比較して、試料において、より高い又はより低いレベルの任意の追加のバイオマーカーのうちの少なくとも１つを有すると判定された場合に、ＡＰによって患者を治療すること又は医療提供者に治療を指示することを含む。
【0108】
ＡＲＤＳと診断された患者をＡＰによる治療の候補として選択する方法もまた提供され、ここで、前記方法は、（ａ）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、及び所望により患者から採取した試料において、Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）、フィブリノーゲン、インターロイキン６（ＩＬ－６）若しくはインターロイキン８（ＩＬ－８）、終末糖化産物受容体（ＲＡＧＥ）、アンギオポエチン－２（Ａｎｇ－２）、界面活性タンパク質Ｄ（ＳＰ－Ｄ）、インターロイキン－８（ｉｎｔｅｌｅｕｋｉｎ－８）、Ｆａｓ及びＦａｓリガンド、プロコラーゲンペプチド（ＰＣＰ）Ｉ及びＩＩＩ、オクタン、アセトアルデヒド、及び／又は３－メチルヘプタンなどの追加のバイオマーカーのレベルを測定すること又は臨床検査室に測定を指示すること、並びに（ｂ）患者が、所定の閾値レベルと比較して、及び／又は対照におけるＰ／Ｆ比若しくは別の肺機能パラメータと比較して、より高い又は増加しているＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を有する、並びに所望により、所定の閾値レベルと比較して、あるいは１又は複数の対照におけるバイオマーカーレベルと比較して、試料において、より低い又は減少しているレベルの任意の追加バイオマーカーのうちの少なくとも１つを有すると判定された場合に、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による患者の治療を中断すること、治療を開始しないこと、治療を拒否すること、あるいは医療提供者に治療を中断する、開始しない、又は拒否するように指示することを含む。
【0109】
いくつかの態様では、開示された方法は、１又は複数の追加のアッセイを指示すること及び／又は実施すること伴い得る。例えば、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）決定アッセイは、偽陰性の結果を除外するために繰り返される場合があり、及び／又は対象の状態をモニタリングするために、１又は複数の追加のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）決定アッセイを実施してもよい。一方で、偽陽性の結果を除外するために、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）決定アッセイを繰り返すことが望ましい場合もある。
【0110】
いくつかの態様では、ＡＲＤＳを有する患者において所定の閾値レベルを超えるか又は下回るＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の存在を、敗血症に特異的であるか、又は敗血症を伴うか若しくは敗血症が原因であるＡＲＤＳに罹患した患者において敗血症に至る特定の感染症に特異的な１又は複数の臨床バイオマーカー若しくは分子バイオマーカーと組み合わせて使用することができる。
【0111】
当業者は、治療、診断、及びモニタリング方法を含むがこれらに限定されない本明細書に開示される方法に従って、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）がポジティブセレクター（ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｏｒ）として使用され得ること、すなわち、患者におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルを下回るか上回る場合、又はＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が１又は複数の対照におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）に対して増加又は減少している場合に、特定の措置（例えば、患者を治療すること）が取られることを理解するであろう。
【0112】
当業者は、治療、診断、及びモニタリング方法を含むがこれらに限定されない本明細書に開示される方法に従って、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）がネガティブセレクター（ｎｅｇａｔｉｖｅ ｓｅｌｅｃｔｏｒ）として使用され得ること、すなわち、患者におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルを下回るか上回る場合、又はＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が１又は複数の対照におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）に対して増加又は減少している場合に、特定の措置（例えば、患者を治療すること）が取られないことを理解するであろう。
【0113】
ある態様では、本開示は、患者がＡＰによる治療から恩恵を受けるかどうかに関して、医療提供者、医療給付提供者、又は臨床検査室による決定を容易にする方法を含む。
【0114】
ある態様では、本明細書に開示される方法は、患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）に少なくとも部分的に基づいて、鑑別診断であり得る診断を行うことを含む。いくつかの態様では、本明細書に開示される方法は、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）決定アッセイの結果及び／又はＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）に少なくとも部分的に基づく診断の結果を対象に通知することを含む。患者は、口頭で、書面で、及び／又は電子的に通知を受けることができる。この診断は、患者の医療記録にも記録され得る。
【0115】
「医療記録」又は「患者の医療記録」という用語は、患者の検査及び／又は治療の説明を指し、通常は、患者の病歴及び病状、医師による身体所見、診断検査及び処置の結果、並びに患者の投薬及び治療処置のうちの１又は複数が含まれる。医療記録は、通常、１又は複数の医師及び／又は医師の助手によって作成され、医療を必要とする様々な病気又は傷害、及び／又は予防接種、及び／又はアレルギー、及び／又は治療、及び／又は予後、及び／又はしばしば両親、兄弟姉妹、及び／又は職業に関する健康情報についての書面、転写、又はその他の方法で記録された記録及び／又は履歴である。記録は、状態を診断する際に医師によって再検討され得る。
【0116】
医療記録は、紙媒体であってもよく、及び／又はコンピュータ可読媒体で維持されてもよい。医療記録は、検査室、診療所、病院、医療維持組織、保険会社、及び／又は個人の医療記録ウェブサイトによって維持され得る。いくつかの態様では、決定されたＰ／Ｆ比に少なくとも部分的に基づく診断は、カード、着用物品、及び／又は無線周波数識別（ＲＦＩＤ）タグなどの医療警告物品上又は医療警告物品中に記録される。本明細書で使用される「着用物品」という用語は、タグ、ブレスレット、ネックレス、アームバンド、又はヘッドバンドを含むがこれらに限定されない、対象者の身体に着用できる任意の物品を指す。
【0117】
本明細書で使用される「診断」という用語は、疾患を検出すること、又は疾患の病期若しくは程度を決定することを意味する。通常、疾患の診断は、疾患を示す１又は複数の要因及び／又は症状の評価に基づいて行われる。すなわち、診断は、疾患又は障害の存在又は非存在を示す因子の存在、非存在、又は量に基づいてを行うことができる。特定の疾患の診断の指標であると考えられる各要因又は症状は、特定の疾患にのみ関連している必要はなく、例えば、診断要因又は症状から推測できる鑑別診断がある場合がある。同様に、特定の疾患を示す要因又は症状が、特定の疾患を有さない個人に存在する場合もある。
【0118】
「診断」という用語はまた、薬物療法（例えば、ＡＰ療法）の治療効果を決定すること、又は薬物療法に対する反応のパターンを予測することを包含する。診断方法は、独立して、又は特定の疾患について医学分野で公知である他の診断及び／又は病期分類方法と組み合わせて使用されてもよい。
【0119】
本明細書で使用される「鑑別診断」という用語は、臨床データの分析に基づいて、同様の症状を有する２以上の疾患のどれが対象の症状の原因である可能性が高いかを決定することを指す。この用語は、決定された患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が、所定の閾値レベルを上回っているか下回っているか、あるいは１又は複数の対照のレベルと比較して上昇しているか低下しているかに応じて、患者がＡＰによる治療の影響を受けやすいかどうかの決定を指すためにも使用される。
【0120】
本明細書で使用される「予後」という用語は、臨床症状又は疾患（例えば、敗血症又はＡＲＤＳ）の起こり得る経過及び転帰の予測を指す。予後は、通常、疾患の経過又は転帰が好ましいか好ましくないかの指標である疾患の要因又は症状を評価することによって決定されてもよい。本明細書で使用される「予後を決定する」という語句は、当業者が患者の症状の経過又は転帰を予測できるプロセスを指す。「予後」という用語は、１００％の精度で症状の経過又は転帰を予測する能力を指すものではない。代わりに、当業者は、「予後」という用語が、特定の経過又は転帰が生じ得る確率の増加を指すことを理解する。すなわち、特定の症状を示す患者では、その症状を示さない個人と比較して、経過又は転帰が生じる可能性が高くなる。
【0121】
本明細書で使用される用語「良好予後」及び「陽性予後」、又は「予後不良」及び「陰性予後」は、症状又は疾患（例えば、敗血症又はＡＲＤＳ）の可能性のある経過及び／又は起こりそうな転帰の予測に関する相対的な用語である。良好予後及び陽性予後は、不良予後及び陰性予後よりも症状のより良い転帰を予測する。一般的な意味では、「良好予後」とは、特定の症状に関連し得る他の多くの可能性のある予後よりも比較的良好な転帰であるのに対し、不良予後とは、特定の症状に関連し得る他の多くの可能性のある予後よりも比較的悪い転帰を予測するものである。良好予後及び陽性予後の典型的な例としては、肺機能の増加、肺機能の維持、及びＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の増加などが挙げられる。
【0122】
本開示は、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の発現の変化に基づいて、対象においてＡＲＤＳを治療する方法、又は対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰを含む。本開示により、ＡＲＤＳを有する患者を治療する方法、又は患者のＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記方法は、所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１又は複数の対照におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）と比較して、前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が低いか又は減少していると判断された場合に、ＡＰを前記患者に投与することを含む。
【0123】
本開示により、ＡＲＤＳを有する患者を治療する方法、又は患者のＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記方法は、（ａ）ｐＯ２及びＦｉＯ２を測定して（又は別の測定可能な肺機能パラメータからｐＯ２及びＦｉＯ２を導き出して）Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、並びに（ｂ）所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数の対照におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）と比較して、前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が低いか又は減少している場合に、ＡＰを前記患者に投与することを含む。
【0124】
またＡＲＤＳを有する患者を治療する方法、又は患者のＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記方法は、（ａ）前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、並びに（ｂ）所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数のコントロールのＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）のレベルと比較して、前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が高いか又は増加している場合に、前記患者へのＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の投与を中断するか又は開始しないことを含む。
【0125】
また、本開示により、ＡＲＤＳを有する患者の治療方法又は患者のＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記方法は、（ａ）患者のｐＯ２及びＦｉＯ２を測定して（又は別の測定可能な肺機能パラメータからｐＯ２及びＦｉＯ２を導き出して）患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、並びに（ｂ）所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、Ｐ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が高いか増加しているか、又は低いか減少しているかを判断することを含む。いくつかの態様では、前記方法は、所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数の対照のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）レベルと比較して、患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が低いか又は減少していると判断された場合に、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）を患者に投与すること又は投与することを医療提供者に助言すること、あるいは所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数の対照のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）レベルと比較して、患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が高いか又は増加していると判断された場合に、ＡＰの投与を中断又は拒否することを行うこと又は中断又は拒否することを医療提供者に助言することをさらに含む。
【0126】
また、ＡＲＤＳを有する患者の治療方法又は患者のＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのＡＰが提供され、ここで、前記方法は、（ａ）患者のｐＯ２及びＦｉＯ２を測定して（又は別の測定可能な肺機能パラメータからｐＯ２及びＦｉＯ２を導き出して）患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）を決定すること、並びに（ｂ）所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数の対照のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）レベルと比較して、患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が低いか又は減少していると判断された場合に、ＡＰを患者に投与すること、あるいは所定のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の閾値レベルと比較して、又は１若しくは複数の対照のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）レベルと比較して、患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）が高いか又は増加していると判断された場合に、ＡＰの患者への投与を中断すること、開始しないこと、又は拒否することを含む。
【0127】
本開示はまた、（ａ）前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の１回目の判定を行うこと、（ｂ）ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）を投与すること、並びに（ｃ）前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の２回目の判定を行うことを含み、１回目の判定における患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）と比較した２回目の判定におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の増加は、患者がＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による治療に反応していることを示す、ＡＲＤＳと診断された患者におけるＡＰの有効性又は薬力学を測定する方法を提供する。
【0128】
本開示はまた、（ａ）前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の１回目の判定を行うこと、（ｂ）ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）を投与すること、並びに（ｃ）前記患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の２回目の判定を行うことを含み、１回目の判定における患者のＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）と比較した２回目の判定におけるＰ／Ｆ比（又は別の肺機能パラメータ）の減少は、患者がＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）による治療に反応していることを示す、ＡＲＤＳと診断された患者におけるＡＰの有効性又は薬力学を測定する方法を提供する。
【0129】
いくつかの態様では、２回目の判定は、ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の投与後１日目、２日目、３日目、４日目、５日目、６日目、７日目、８日目、９日目、１０日目、１１日目、１２日目、１３日目、１４日目、１５日目、１６日目、１７日目、１８日目、１９日目、２０日目、２１日目、２２日目、２３日目、２４日目、２５日目、２６日目、２７日目、若しくは２８日目、１週目、２週目、３週目、４週目、５週目、６週目、７週目、８週目、９週目、１０週目、１１週目、１２週目、１３週目、１４週目、１５週目、若しくは１６週目、又はその間の時点において行われる。
【0130】
特定の態様では、本明細書に開示される全ての治療方法において、ＡＰの「負荷」用量を投与して、患者の肺機能の望ましいレベルを達成する。ＡＰ負荷用量が患者の肺機能に大きな影響を与えない場合は、（例えば、代替療法に切り替えるために）治療を中止する決定を下すことができる。
【0131】
負荷用量が患者の肺機能の増加をもたらす場合、ＡＰ用量サイズ又は投与回数を「維持」用量に減らす決定を下すことができる。本明細書で提供される方法は、医療提供者が治療を実施するためのガイドラインであり、最終的な治療決定は医療提供者の健全な判断に基づくことに留意することが重要である。
【0132】
ＡＰ（例えば、ＲｅｃＡＰ）の処方、投薬計画、及び投与経路は、本明細書に開示される方法に従って最適な治療応答のための有効量を提供するように調整され得る。ＡＰの投与に関して、ＡＰは、当技術分野で公知の任意の適切な手段、組成物、及び経路を介して投与されてもよい。投薬計画に関しては、治療状況の緊急性によって示されるように、単回ボーラスを投与するか、数回に分けて投与するか、又は用量を比例的に減少又は増加させることができる。
【0133】
ＩＩＩ．アルカリホスファターゼ（ＡＰ）
アルカリホスファターゼ（ＡＰ；ＩＵＢＭＢ酵素命名法によるＥＣ ３．１．３．１）は、ホスファターゼモノエステル及びＨ２Ｏからアルコール及びリン酸塩への反応を触媒する酵素である。ＡＰの別名は、アルカリホスホモノエステラーゼ、ホスホモノエステラーゼ、グリセロホスファターゼ、アルカリホスホヒドロラーゼ、アルカリフェニルホスファターゼ、オルトリン酸モノエステルホスホヒドロラーゼ（アルカリ最適）である。ＡＰの系統名はリン酸モノエステルホスホヒドロラーゼ（アルカリ最適）である。
アルカリホスファターゼ（ＡＰ；ＩＵＢＭＢ酵素命名法によるＥＣ ３．１．３．１）は、ホスファターゼモノエステル及びＨ２Ｏからアルコール及びリン酸塩への反応を触媒する酵素である。ＡＰの別名は、アルカリホスホモノエステラーゼ、ホスホモノエステラーゼ、グリセロホスファターゼ、アルカリホスホヒドロラーゼ、アルカリフェニルホスファターゼ、オルトリン酸モノエステルホスホヒドロラーゼ（アルカリ最適）である。ＡＰの系統名はリン酸モノエステルホスホヒドロラーゼ（アルカリ最適）である。
【0134】
ＡＰは広い特異性を有する酵素であり、トランスリン酸化も触媒する。ヒト及び他の哺乳動物では、少なくとも４種類の、異なるが関連するＡＰが公知である。それらは、腸型、胎盤型、胎盤様、及び肝臓／骨／腎臓型（又は組織非特異的）ＡＰである。最初の３種類は２番染色体に一緒に位置し、組織の非特異的な形態は１番染色体に位置する。
【0135】
「本開示のＡＰ」という用語は、そのスプライスバリアント、アイソフォーム、及び多形体を含む、単離されたアルカリホスファターゼを指す。組換えＡＰ及びキメラＡＰも含まれる。特定の態様において、ＡＰはＲｅｃＡＰである。ＲｅｃＡＰのアミノ酸配列を図２に示す。いくつかの態様では、本明細書で用いられるＡＰは、配列番号１のアミノ酸配列に対して、約７０％以上、約７５％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上、約９８％以上、約９９％以上、又は１００％の配列同一性を有する。いくつかの態様では、ＡＰは、機能的断片（すなわち、前記ＡＰの断片、例えば対応する全長ＡＰのＡＰ活性の約１０％以上、約２０％以上、約３０％以上、約４０％以上、約５０％以上、約６０％以上、７０％以上、約８０％以上、又は約９０％以上を維持しているＡＰ）である。いくつかの態様では、前記ＡＰは、本明細書に開示されるＡＰのバリアント又は誘導体である。
【0136】
本開示に係る使用のためのＡＰは、市販のＡＰ酵素、又はＡＰ酵素を含む任意の組成物、及び本発明の文脈において機能的ＡＰ酵素を産生することができる任意の手段、例えば、ＡＰタンパク質をコードするＤＮＡ又はＲＮＡ核酸などであり得る。
【0137】
ＡＰをコードする核酸は、プラスミド、ファージミド、ファージ、（レトロ）ウイルス、トランスポゾン、遺伝子治療ベクター、及びＡＰの産生を誘導又は付与することができる他のベクターなどの適切なベクターに埋め込まれてもよい。また、細菌、真菌、原生動物、及び酵母などの天然又は組換え微生物も、本開示の文脈においてＡＰの供給源として適用され得る。
【0138】
本開示に係る使用のためのＡＰ含有組成物は、真核生物ＡＰ（例えば、哺乳動物ＡＰ）を含むことができ、これは、肝臓／骨又は腎臓型などの組織非特異的ＡＰ、又は胎盤型ＡＰ、腸型ＡＰ、及び胎盤様ＡＰなどの組織特異的ＡＰのタイプであり得る。生殖細胞ＡＰとしても公知である後者は、精巣、胸腺、及び特定の胚細胞腫瘍に局在し、ＡＰの胎盤型及び腸型の両方に密接に関連している。
【0139】
いくつかの態様では、哺乳動物ＡＰは、ヒトＡＰ又はウシＡＰである。ヒトＡＰ配列の非限定的な例としては、ＮＣＢＩ（Ｇｅｎｐｅｐｔ）コレクションに見ることができ、ＮＰ＿００１６２２（腸型ＡＰ）、ＮＰ＿００１６２３（胎盤型ＡＰ）、ＮＰ＿１１２６０３（胎盤様ＡＰ）、又はＮＰ＿０００４６９（組織非特異的ＡＰ）が挙げられる。いくつかの態様では、ＡＰは多型を含む。いくつかの態様では、ＡＰは、胎盤型ＡＰ、胎盤様ＡＰ、腸型ＡＰ、肝臓／骨／腎臓型ＡＰ、又はそれらの組み合わせである。いくつかの態様では、ＡＰは組換えＡＰである。
【0140】
立体構造の観点から、ＡＰは大まかにクラウンドメイン及び活性部位ドメインの２つのドメインからなる。活性部位ドメインは、触媒残基及び３つの金属イオン部位（Ｚｎ１、Ｚｎ２、Ｍｇ３）のように別々の部分に分けることができる。一次構造の観点から、クラウンドメインは、活性部位ドメインを形成するアミノ酸に隣接している。ＡＰのアミノ酸配列並びに触媒ドメイン及びクラウンドメインの相対位置は、当業者に公知である。
【0141】
本開示のいくつかの態様では、ＡＰは、クラウンドメイン及び触媒ドメインを含む単離ＡＰ又は組換えＡＰであり、クラウンドメイン及び触媒ドメインは異なるＡＰから得られ、異なるホスファターゼの少なくとも１つはヒトホスファターゼである。いくつかの態様では、前記ＡＰは、例えば、ＥＣＡＰ（大腸菌ＡＰ）、又は７種類の公知ＢＩＡＰ（ウシ腸ＡＰ）のうちの１種類である。
【0142】
いくつかの態様では、ＡＰは、クラウンドメイン及び触媒ドメインを含む単離ＡＰ又は組換えＡＰであり、クラウンドメイン及び触媒ドメインは異なるＡＰから得られ、異なるＡＰはヒトＡＰである。これは、改変ホスファターゼがその後ヒトの療法に使用される場合に特に有用である。開示された方法における使用のためのＡＰは、免疫原性がない又は免疫原性が弱いヒト起源の改変（例えば、遺伝子改変）ＡＰであってもよい。
【0143】
本明細書に開示される改変ＡＰは、例えば、「インビトロ」又は「エクスビボ」の診断又は治療において使用することができる。そのような改変ホスファターゼは、例えば、ヒトＡＰ及び大腸菌ＡＰを含むことができ、又はウシＡＰ及び大腸菌ＡＰから構成されてもよい。
【0144】
本開示のいくつかの態様では、ＡＰは、クラウンドメイン及び触媒ドメインを含む単離ＡＰ又は組換えＡＰであり、クラウンドメイン及び触媒ドメインは異なるＡＰから得られ、クラウンドメインは胎盤型ＡＰのクラウンドメイン（ＡＬＰＰ）であり、触媒ドメインは腸型ＡＰの触媒ドメイン（ＡＬＰＩ）である。いくつかの態様では、異なるＡＰのうちの少なくとも１つはヒトホスファターゼである。他の態様では、異なるＡＰは両方ともヒトホスファターゼである。
【0145】
ヒトＡＰに基づく、本明細書に開示される方法に適したドメイン交換変異体を表１に列挙する。
【0146】
【表3】
【0147】
いくつかの態様では、ＡＰは、ＥＣＡＰの触媒ドメイン又はヒト型（ＡＬＰＩ、ＡＬＰＰ、ＧＣＡＰ、又はＴＮＡＰ）のいずれかの触媒ドメインとＢＩＡＰのクラウンドメインとの組み合わせである。さらに、ＢＩＡＰの触媒ドメインとヒト型のいずれかのクラウンドメインとの組み合わせも生成され得る。
【0148】
いくつかの態様では、改変ＡＰは、自然条件下ではグリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカーを介して細胞膜に結合しているが、細胞膜に結合しないように改変されたＡＰである。全てのアイソザイムは細胞膜で機能的に活性であり、ＧＰＩアンカー欠損型は検出可能なレベルで自然には存在しない。血清ＡＰ活性が実証されているが、酵素は分離された膜画分又は膜小胞に依然として存在することが一般に認められている。乳中のＡＰ活性は、膜小胞を含む画分にも存在する。ＧＰＩアンカーは前駆体分子として細胞内に保存され、そこでトランスアミダーゼを介して結合部位に結合する。ＧＰＩアンカーの骨格は哺乳動物と同じであるが、細胞型に依存した改変が知られている。
【0149】
いくつかの態様では、ヒト対象の治療の場合、ＡＰはヒトである。これは、他の種から得られたＡＰ型がヒト対象において免疫原性である可能性があり、治療が免疫学的反応及び病理学的副作用を誘発し得るという事実のために好ましい。一部の対象では、致死的な副作用（すなわち、アナフィラキシーショック）が発生する可能性があり、したがって免疫学的副作用のリスクは、ヒトＡＰ型の使用によって最小限に抑えることが好ましい。
【0150】
ヒト由来ＡＰの単離は実用的ではないため、ＡＰタンパク質のヒト組換え型は、様々な組換え発現プラットフォームで日常的に生成され得る。しかし、ＧＰＩ改変タンパク質及び膜アンカー型タンパク質の発現及び精製は非常に困難である。ＧＰＩタンパク質は、膜からの分離が難しく、単離及び精製が困難である。よって、いくつかの態様では、組換えＡＰは、ＧＰＩシグナル配列に改変を含み、この改変は、分泌型ＡＰをもたらす、すなわち、前記ＡＰは細胞膜に結合していない。
【0151】
ＧＰＩアンカーの結合に関与する一般的な配列はないが、以下のいくつかの特定のコンセンサス特性がある。
（ｉ）Ｃ末端のアミノ酸の疎水性ストレッチ（少なくとも１１個のアミノ酸、好ましくは１１個以上のアミノ酸）；
（ｉｉ）疎水性領域の上流、親水性アミノ酸（５～１２アミノ酸）のスペーサー；
（ｉｉｉ）ＧＰＩは小さなアミノ酸であるグリシン、アスパラギン酸、アスパラギン、アラニン、セリン、又はシステインに結合する；及び
（ｉｖ）ＧＰＩ結合部位の下流にある２つの後続のアミノ酸は小さなアミノ酸である必要があり、ほとんどの場合、それらはグリシン、アスパラギン酸、アスパラギン、アラニン、セリン、又はシステインから選択される。
（ｉ）Ｃ末端のアミノ酸の疎水性ストレッチ（少なくとも１１個のアミノ酸、好ましくは１１個以上のアミノ酸）；
（ｉｉ）疎水性領域の上流、親水性アミノ酸（５～１２アミノ酸）のスペーサー；
（ｉｉｉ）ＧＰＩは小さなアミノ酸であるグリシン、アスパラギン酸、アスパラギン、アラニン、セリン、又はシステインに結合する；及び
（ｉｖ）ＧＰＩ結合部位の下流にある２つの後続のアミノ酸は小さなアミノ酸である必要があり、ほとんどの場合、それらはグリシン、アスパラギン酸、アスパラギン、アラニン、セリン、又はシステインから選択される。
【0152】
いくつかの態様では、組換えＡＰは、ＧＰＩシグナル配列に改変を含み、この改変は、生物学的に活性な分泌型ＡＰをもたらす、すなわち、生物学的に関連する基質に対して活性を示す。いくつかの態様では、分泌型ＡＰはヒトＡＰである。いくつかの態様では、分泌型ヒトＡＰは、ヒト肝臓／腎臓／骨型ホスファターゼ、ヒト腸型ＡＰ、又はヒト胎盤様アルカリホスファターゼである。
【0153】
上記のコンセンサス特性に基づいて、当業者は、例えば、コンセンサスの一部を破壊して、ＧＰＩアンカーを結合できないＡＰをもたらす１又は複数のアミノ酸を挿入することにより、改変を導入することができる。したがって、いくつかの態様では、組換えＡＰは、分泌型ＡＰをもたらすＧＰＩシグナル配列の改変を含み、この改変は、コンセンサスＧＰＩシグナル配列を包含する配列中の少なくとも１つのアミノ酸の変異又は欠失を含む。
【0154】
いくつかの態様では、ＡＰは、米国特許第８，５５７，５４５号に記載のＡＰである。いくつかの態様では、ＡＰは、キメラＡＰ又はキメラＡＰ様タンパク質であり、例えば、米国特許出願公開第２０１７／０００９２１６号及び同第２０１４／０１９３３８８号に記載されている。好ましくは、ＡＰは、ＡＬＰＩ（腸型アルカリホスファターゼ）の触媒ドメイン及びＡＬＰＰ（胎盤型アルカリホスファターゼ）のクラウンドメインを含む組換えアルカリホスファターゼである。より好ましくは、ＡＰは、ＲｅｃＡＰ（配列番号１に対応し、米国特許出願公開第２０１７／０００９２１６号に記載）である。
【0155】
いくつかの態様では、本開示のＡＰは、（ｉ）ヒトＡＬＰＰのクラウンドメインに対して約７０％以上、約７５％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上、約９８％以上、又は９９％以上の配列同一性を有する配列、及び（ｉｉ）ヒトＡＬＰＩの触媒ドメインに対して約７０％以上、約７５％以上、約８０％以上、約８５％以上、約９０％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上、約９８％以上、又は９９％以上の配列同一性を有する配列を含む。
【0156】
いくつかの態様では、ＡＬＰＰのクラウンドメインと配列同一性を有する前記配列は、本発明に係るタンパク質において、天然のＡＬＰＰタンパク質におけるＡＬＰＰのクラウンドメインとほぼ同じ位置に位置する。
【0157】
アミノ酸配列又は核酸配列の同一性の割合、すなわち、用語「配列同一性（％）」は、最大パーセントの同一性を達成するために、必要に応じて２つの配列をアラインメントさせてギャップを導入した後の、参照配列中の残基と同一である候補アミノ酸配列又は候補核酸配列中の残基の割合として本明細書で定義される。好ましい実施形態では、前記配列同一性の割合の計算は、ギャップを導入することなく行われる。アラインメントのための方法及びコンピュータプログラムは、当技術分野で周知であり、例えば、「Ａｌｉｇｎ ２」又は国立バイオテクノロジー情報センター（ＮＣＢＩ）のＢＬＡＳＴサービスである。
【0158】
いくつかの実施形態では、本発明は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）の治療を必要とする対象においてＡＲＤＳを治療する方法における使用のためのアルカリホスファターゼ（ＡＰ）が提供され、ここで、前記方法は有効量のアルカリホスファターゼ（ＡＰ）を前記対象に投与することを含み、前記対象はＡＰによる治療の前に中等症又は重症のＡＲＤＳを有しており、前記ＡＰの投与は呼吸機能の増加をもたらす。好ましい実施形態では、前記対象は、ＡＰによる治療の前に重症のＡＲＤＳを有する。別の好ましい実施形態では、前記対象は、ＡＰによる治療の前に中等症ＡＲＤＳを有する。
【0159】
いくつかの好ましい実施形態では、ＡＰは、少なくとも１回の５００Ｕ／ｋｇ～２，０００Ｕ／ｋｇ用量で投与される。好ましくは、ＡＲＤＳは敗血症に関連する若しくは敗血症によるものである、又はＡＲＤＳはウイルス感染に関連する若しくはウイルス感染によるものである。ＡＲＤＳが敗血症に関連する若しくは敗血症によるものである場合、ＡＰの投与前９６時間以内、より好ましくはＡＲＤＳの検出前７２時間以内に敗血症が検出されることが好ましい。敗血症の検出後２４時間以内に治療を開始することが好ましい。
【0160】
いくつかの好ましい実施形態では、ＡＰはヒトＡＰである、及び／又はＡＰは組換えＡＰである。ＡＰが組換え体である場合、キメラＡＰであることが好ましい。好ましくは、キメラＡＰが、ＲｅｃＡＰのアミノ酸配列（配列番号１）に対して、８０％以上、８５％以上、９０％以上、９５％以上、９６％以上、９７％以上、９８％以上、９９％以上、又は１００％の配列同一性を有する。
【0161】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、呼吸機能の増加は、ＡＰによる治療を行っていない場合のＰ／Ｆ比と比べてのＰ／Ｆ比の増加を含む。
【0162】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、ＡＲＤＳの検出後２４時間以内に治療が開始される。
【0163】
いくつかの好ましい実施形態では、ＡＰは、１日１回投与され、及び／又は静脈内投与される。好ましくは、ＡＰは、１日３回用量で投与される。好ましくは、各ＡＰ用量は約０．８ｍｇ／ｋｇ又は約１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰであり、及び／又はＡＰ用量は約５００Ｕ／ｋｇ又は約１０００Ｕ／ｋｇのＲｅｃＡＰである。この文脈における「約」は、示された用量の±２０％、好ましくは±１０％、最も好ましくは±５％を意味する。平均的な人（体重６０～８０ｋｇ程度の人など）の場合、各用量は、約３０，０００Ｕ～約１６０，０００Ｕ、好ましくは約３０，０００Ｕ～約８０，０００Ｕ、より好ましくは約６０，０００Ｕ～約８０，０００Ｕである。「ｍｇ」単位での用量は、約４８ｍｇ～約２５６ｍｇ、好ましくは４８ｍｇ～約１２８ｍｇ、より好ましくは９６～１２８ｍｇになる。さらに、本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、前記用量は、約３０，０００Ｕ～約１６０，０００Ｕ、好ましくは約３０，０００Ｕ～約８０，０００Ｕ、より好ましくは約６０，０００Ｕ～約８０，０００Ｕである。前記用量が約４８ｍｇ～約２５６ｍｇ、好ましくは４８ｍｇ～約１２８ｍｇ、より好ましくは９６～１２８ｍｇである、本発明に係る使用のためのＡＰもまた提供される。
【0164】
いくつかの好ましい実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、機械的換気療法を受けている対象における機械的換気療法の期間の短縮又は中止をもたらす。
【0165】
好ましくは、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、対象におけるＰ／Ｆ比の維持又は増加をもたらす。より具体的には、本発明に係る使用するためのＡＰは、対象の死亡リスクの低下をもたらす。中等症又は重症の急性呼吸窮迫症候群に罹患している対象群の一部である１又は複数の対象の治療は、前記対象群の死亡率の低下をもたらす。
【0166】
本出願は、同じ実施形態の一部として、又は別個の実施形態の一部として特徴を説明する場合があるが、本発明の範囲には、本明細書に記載された特徴の全て又は一部の任意の組み合わせを含む実施形態も含まれる。
【0167】
本発明は、以下の実施例においてさらに説明される。これらの実施例は、本発明の範囲を限定するものではなく、単に本発明を明確にするのに役立つものである。
【実施例】
【0168】
実施例１
急性呼吸窮迫症候群に対するヒト組換えアルカリホスファターゼ
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、長期の肺転帰及び生存率に悪影響を及ぼす。解毒酵素アルカリホスファターゼの投与は、前臨床研究で肺炎症パラメータを改善した。発明者らは、ＡＲＤＳ患者におけるヒト組換えアルカリホスファターゼ（ＲｅｃＡＰ）の有効性及び安全性を調べた（図２）。
急性呼吸窮迫症候群に対するヒト組換えアルカリホスファターゼ
急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）は、長期の肺転帰及び生存率に悪影響を及ぼす。解毒酵素アルカリホスファターゼの投与は、前臨床研究で肺炎症パラメータを改善した。発明者らは、ＡＲＤＳ患者におけるヒト組換えアルカリホスファターゼ（ＲｅｃＡＰ）の有効性及び安全性を調べた（図２）。
【0169】
ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験の適応第２ａ／２ｂ相のパート１では、最適用量を確立するために、０．４ｍｇ／ｋｇ、０．８ｍｇ／ｋｇ、若しくは１．６ｍｇ／ｋｇのＲｅｃＡＰ、又はプラセボを、１日１回、３日間投与する群に患者を無作為に割り付けた。
【0170】
パート２では、この用量をプラセボと比較した。主要評価項目は、１～７日目の内因性クレアチニンクリアランスの時間補正曲線下面積（ＡＵＣ１－７ ＥＣＣ）であり、主要な副次的評価項目として腎代替療法（ＲＲＴ）とした。肺機能も分析した。全体で、３０１人の患者を登録した。ＲｅｃＡＰとプラセボとの間で（重篤な）有害事象の差は、群間で観察されなかった。ＲｅｃＡＰは安全かつ忍容性が高いように見えた。
【0171】
方法
ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験のデザイン及び参加者
ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験は、敗血症関連の急性腎障害を有する重篤な成人患者を対象に実施された、国際的な無作為化二重盲検プラセボ対照４群並行群用量設定適応第２ａ／２ｂ相試験であった。ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究のプロトコル及び主な結果は以前に公開された（Pickkers P, Mehta RL, Murray PT, et al. Effect of Human Recombinant Alkaline Phosphatase on 7-Day Creatinine Clearance in Patients With Sepsis-Associated Acute Kidney Injury: A Randomized Clinical Trial. JAMA. 2018;320（19）:1998-2009）。
ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験のデザイン及び参加者
ＳＴＯＰ－ＡＫＩ試験は、敗血症関連の急性腎障害を有する重篤な成人患者を対象に実施された、国際的な無作為化二重盲検プラセボ対照４群並行群用量設定適応第２ａ／２ｂ相試験であった。ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究のプロトコル及び主な結果は以前に公開された（Pickkers P, Mehta RL, Murray PT, et al. Effect of Human Recombinant Alkaline Phosphatase on 7-Day Creatinine Clearance in Patients With Sepsis-Associated Acute Kidney Injury: A Randomized Clinical Trial. JAMA. 2018;320（19）:1998-2009）。
【0172】
敗血症と診断された（Levy et al. Crit Care Med 2003;31:1250-6）及びＡＫＩと最初に診断された（Mehta et al. Crit Care 2007;11:R31）１８歳以上のＩＣＵ患者は、研究参加に適格であった。選択基準及び除外基準並びに主な結果が、Pickkers et al （JAMA 2018）記載されている。
【0173】
結果の測定
この研究の主な目的は、ＲｅｃＡＰの最適な治療用量を調査し、腎機能への効果を評価することであった。肺などの他の臓器への効果も調査した。
この研究の主な目的は、ＲｅｃＡＰの最適な治療用量を調査し、腎機能への効果を評価することであった。肺などの他の臓器への効果も調査した。
【0174】
安全性、忍容性、薬物動態（最初の１２０人の患者）、免疫原性、全身及び尿のバイオマーカー、並びにＳＡ－ＡＫＩ患者の生活の質に対するＲｅｃＡＰの効果及びその他の腎臓以外のパラメータも調査した。肺機能解析については、以下で詳しく説明する。
・機械的換気患者の動脈血酸素分圧（ＰａＯ２）／吸気酸素分圧（ＦｉＯ２）（Ｐ／Ｆ比）、Ｃａｒｒｉｃｏ指数、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）、及び一回換気量で評価される肺機能。
・人工呼吸器非使用日数：無作為化から２８日目までの機械的換気に依存しない生存日数（総数）。人工呼吸器非使用日は、患者が機械的換気（侵襲的又は非侵襲的な機械的換気）を使用していない日と定義した。
・人工呼吸器使用日数：この期間の開始時に人工呼吸器を使用していた患者について、試験薬の初回投与開始から人工呼吸器を離脱するまでの日数（１日目～２８日目まで、総数）。
・機械的換気患者の動脈血酸素分圧（ＰａＯ２）／吸気酸素分圧（ＦｉＯ２）（Ｐ／Ｆ比）、Ｃａｒｒｉｃｏ指数、呼気終末陽圧（ＰＥＥＰ）、及び一回換気量で評価される肺機能。
・人工呼吸器非使用日数：無作為化から２８日目までの機械的換気に依存しない生存日数（総数）。人工呼吸器非使用日は、患者が機械的換気（侵襲的又は非侵襲的な機械的換気）を使用していない日と定義した。
・人工呼吸器使用日数：この期間の開始時に人工呼吸器を使用していた患者について、試験薬の初回投与開始から人工呼吸器を離脱するまでの日数（１日目～２８日目まで、総数）。
【0175】
統計分析
インフォームドコンセントが得られ、無作為に治療群に割り付けられた患者について、治療意図の原理に従ってデータを分析した。サンプルサイズの計算に関する詳細を以下に記載する。
インフォームドコンセントが得られ、無作為に治療群に割り付けられた患者について、治療意図の原理に従ってデータを分析した。サンプルサイズの計算に関する詳細を以下に記載する。
【0176】
サンプルサイズの計算
サンプルサイズは、パート１の治療群当たりｎ１＝３０人の患者を計画し、パート２の最適なＲｅｃＡＰ用量及びプラセボ治療群に追加のｎ２＝８５人の患者を採用した（ｎ＝２９０人の患者の合計サンプルサイズ）。ＳＡＳソフトウェアＶ．９．２を使用してカスタムプログラムされたシミュレーションを実行し、選択されたサンプルサイズ及びデザインの検出力及びタイプＩエラー率を、様々な用量反応シナリオで決定した。各シナリオでは、主要評価項目の標準偏差を４９ｍＬ／分、プラセボ群の反応を６０ｍＬ／分、ＲｅｃＡＰ投与群の反応を６０ｍＬ／分（治療効果なし）～７９ｍＬ／分（強力な治療効果）と仮定した。
サンプルサイズは、パート１の治療群当たりｎ１＝３０人の患者を計画し、パート２の最適なＲｅｃＡＰ用量及びプラセボ治療群に追加のｎ２＝８５人の患者を採用した（ｎ＝２９０人の患者の合計サンプルサイズ）。ＳＡＳソフトウェアＶ．９．２を使用してカスタムプログラムされたシミュレーションを実行し、選択されたサンプルサイズ及びデザインの検出力及びタイプＩエラー率を、様々な用量反応シナリオで決定した。各シナリオでは、主要評価項目の標準偏差を４９ｍＬ／分、プラセボ群の反応を６０ｍＬ／分、ＲｅｃＡＰ投与群の反応を６０ｍＬ／分（治療効果なし）～７９ｍＬ／分（強力な治療効果）と仮定した。
【0177】
５０，０００回のシミュレーションを実行し、片側タイプＩエラー率が２．４％であることが示された（したがって、片側２．５％の有意水準で充分に制御されている）。検出力は、１又は複数のＲｅｃＡＰ投与群が、６９．５ｍＬ／分の反応として定義される治療効果を有する場合に、帰無仮説（治療群間で差がない）を棄却する確率として定義した。これは、７つのシナリオにわたって調査し、それぞれについて１０，０００回のシミュレーションを実行した。選択されたデザインは、ＲｅｃＡＰの中用量群及び高用量群の強力な治療効果を有するシナリオで７９％～８６％の検出力を達成した。低用量群の反応は様々であり、高用量群のみが強力な治療効果を示した場合、６６％～６７％であった。サンプルサイズの決定は、治療意図（ＩＴＴ）分析に必要な患者数に基づいていたため、無作為に割り当てられた後で研究の完了前に中止された患者を置き換えることはしなかった。
【0178】
プロトコルごとの分析では、統計分析計画に詳述されているように、研究プロトコルに従って試験薬を投与され、１～７日目までのＥＣＣ値の欠損が２以下であった患者について、介入群及びプラセボ群を比較した。
【0179】
記述統計の場合、連続変数は、分布に応じて、標準偏差の平均又は四分位範囲の中央値として表示される。正規分布変数は、スチューデントのｔ検定を使用して比較した。マン・ホイットニーのＵ検定を使用して、非正規分布変数を比較した。カテゴリ（及びバイナリ）変数は、割合付きの数値として表示され、カイ２乗検定を使用して分析される。カプラン・マイヤー曲線による生存分析は、グラフ表示に使用した。コックス比例ハザード回帰分析を使用して、ＲｅｃＡＰ対プラセボを用いた試験１～２８日目における生存率のハザード比、並びにＲＲＴ、ショック、及び人工呼吸器非使用日数のハザード比を推定した。
【0180】
主要有効性評価項目の分析は、分散分析によって実施した。副次的評価項目で実施した全ての分析は探索目的のみであったため、多重度の調整は必要なかった。ＲｅｃＡＰ効果の堅牢性を確立するために、事後多変量解析を実施した。全ての統計検定（ＳＡＳソフトウェアバージョン９．４、SAS Institute Inc.社、米国ノースカロライナ州ケーリー）は、治療意図集団に対して実施し、５％の有意水準を使用して両側分析を行った。
【0181】
結果
参加者
欧州連合及び北米の１１か国の５３箇所で、一次スクリーニングに合格した３２６人の患者のうち、３０１人の患者が登録された（図４）。患者は、ＲｅｃＡＰを０．４ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３０）、０．８ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３２）、１．６ｍｇ／ｋｇ（パート１ではｎ＝２９、パート２ではｎ＝８２）、又はプラセボ（パート１ではｎ＝３０、パート２ではｎ＝８６）を投与された。無作為化により、群間の腎機能のわずかなベースラインの差異を除いて、バランスの取れた人口統計学的特性及び患者特性が得られた（図５）。
参加者
欧州連合及び北米の１１か国の５３箇所で、一次スクリーニングに合格した３２６人の患者のうち、３０１人の患者が登録された（図４）。患者は、ＲｅｃＡＰを０．４ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３０）、０．８ｍｇ／ｋｇ（ｎ＝３２）、１．６ｍｇ／ｋｇ（パート１ではｎ＝２９、パート２ではｎ＝８２）、又はプラセボ（パート１ではｎ＝３０、パート２ではｎ＝８６）を投与された。無作為化により、群間の腎機能のわずかなベースラインの差異を除いて、バランスの取れた人口統計学的特性及び患者特性が得られた（図５）。
【0182】
安全性
ＲｅｃＡＰを１．６ｍｇ／ｋｇ投与された患者の４３％と、プラセボを投与された患者の５０％で、治療緊急性のある重篤な有害事象が報告された。図１１を参照。有害事象（ＡＥ）の発生率及び性質にＲｅｃＡＰの用量依存性は認められなかった。抗薬物抗体価は、ＲｅｃＡＰで治療された９人の患者で検出限界をわずかに上回っていた。
ＲｅｃＡＰを１．６ｍｇ／ｋｇ投与された患者の４３％と、プラセボを投与された患者の５０％で、治療緊急性のある重篤な有害事象が報告された。図１１を参照。有害事象（ＡＥ）の発生率及び性質にＲｅｃＡＰの用量依存性は認められなかった。抗薬物抗体価は、ＲｅｃＡＰで治療された９人の患者で検出限界をわずかに上回っていた。
【0183】
検討
ＳＡ－ＡＫＩ患者を対象としたこの多国籍二重盲検無作為化比較試験では、標準治療へのＲｅｃＡＰの追加が生存率に大きな影響を与え、腎機能の改善及び持続的な回復、並びに複合ＭＡＫＥ評価項目を含む長期的な臨床転帰に関連していることが観察された。これは用量設定による原理証明の第２相試験であるため、腎機能障害（例えば、短期ＥＣＣ）及びより患者中心の長期的な臨床転帰（例えば、ＭＡＫＥ６０－９０日目、生存率）の両方に関連する評価項目を含むようにデザインされた。
ＳＡ－ＡＫＩ患者を対象としたこの多国籍二重盲検無作為化比較試験では、標準治療へのＲｅｃＡＰの追加が生存率に大きな影響を与え、腎機能の改善及び持続的な回復、並びに複合ＭＡＫＥ評価項目を含む長期的な臨床転帰に関連していることが観察された。これは用量設定による原理証明の第２相試験であるため、腎機能障害（例えば、短期ＥＣＣ）及びより患者中心の長期的な臨床転帰（例えば、ＭＡＫＥ６０－９０日目、生存率）の両方に関連する評価項目を含むようにデザインされた。
【0184】
結論として、ＲｅｃＡＰ療法は安全で忍容性が高いと考えられた。ＡＫＩを伴う敗血症患者では、ＲｅｃＡＰ治療により、長期的な腎機能、ＭＡＫＥ６０－９０日目、及び生存率が大幅に改善されることが観察された。
【0185】
実施例２
ＲｅｃＡＰ酵素活性及びタンパク質濃度の決定
活性アッセイ：
ｒｅｃＡＰ酵素活性の決定は、４－ニトロフェノールリン酸の４－ニトロフェノール（黄色）への変換（加水分解）に基づいていた。単位時間当たりの４０５ｎｍでの光学密度の変化は、アルカリホスファターゼ活性の尺度である。アッセイバッファーは、２ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍＭのＺｎＣｌ２、及び８．５ｍＭの４－ニトロフェノールホスフェートを含む２５℃の０．２５Ｍのグリシンバッファー（ｐＨ９．６）からなるものとした。
ＲｅｃＡＰ酵素活性及びタンパク質濃度の決定
活性アッセイ：
ｒｅｃＡＰ酵素活性の決定は、４－ニトロフェノールリン酸の４－ニトロフェノール（黄色）への変換（加水分解）に基づいていた。単位時間当たりの４０５ｎｍでの光学密度の変化は、アルカリホスファターゼ活性の尺度である。アッセイバッファーは、２ｍＭのＭｇＣｌ２、０．１ｍＭのＺｎＣｌ２、及び８．５ｍＭの４－ニトロフェノールホスフェートを含む２５℃の０．２５Ｍのグリシンバッファー（ｐＨ９．６）からなるものとした。
【0186】
Ｕ／ｍＬで表されるｒｅｃＡＰの単位（Ｕ）の定義は、ｐＨ９．６及び２５℃で１分当たり１μｍｏｌの４－ニトロフェノールホスフェートの加水分解を引き起こす酵素の量である。
【0187】
タンパク質濃度：
ＲｅｃＡＰの原薬及び製剤中の総タンパク質濃度の決定は、ＵＶ／Ｖｉｓ分析によって行った。ＲｅｃＡＰ溶液は２８０ｎｍで分析され、吸光度は下記式を使用してタンパク質含有量（ｍｇ／ｍＬ）の尺度となる：
濃度（ｍｇ／ｍＬ）＝［Ａ／（ａ×ｂ）］×ＤＦ（Ａ＝Ａ２８０、ｂ＝光路長、ａ＝１．０１ｍＬ ｍｇ－１ ｃｍ－１の質量吸光係数、ＤＦは希釈係数である）。
＊＊＊
ＲｅｃＡＰの原薬及び製剤中の総タンパク質濃度の決定は、ＵＶ／Ｖｉｓ分析によって行った。ＲｅｃＡＰ溶液は２８０ｎｍで分析され、吸光度は下記式を使用してタンパク質含有量（ｍｇ／ｍＬ）の尺度となる：
濃度（ｍｇ／ｍＬ）＝［Ａ／（ａ×ｂ）］×ＤＦ（Ａ＝Ａ２８０、ｂ＝光路長、ａ＝１．０１ｍＬ ｍｇ－１ ｃｍ－１の質量吸光係数、ＤＦは希釈係数である）。
＊＊＊
【0188】
実施例３
Ｐ／Ｆ比の探索
ＣＯＶＩＤ－１９の治療における可能性のある有益な効果に関する研究の準備において、ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究（実施例１及びPickkers et al （JAMA 2018）に記載）で観察されたように、関連するバイオマーカー又は評価項目に対するｒｅｃＡＰ（組換えアルカリホスファターゼ）の効果を調査することは興味深い。関連する評価項目の１つは、動脈血酸素分圧及び吸気酸素分圧の比率であるＰ／Ｆ比である。したがって、現在の調査の目的は、ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究で観察されたように、Ｐ／Ｆ比に対するｒｅｃＡＰの可能性のある影響を調査することである。
Ｐ／Ｆ比の探索
ＣＯＶＩＤ－１９の治療における可能性のある有益な効果に関する研究の準備において、ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究（実施例１及びPickkers et al （JAMA 2018）に記載）で観察されたように、関連するバイオマーカー又は評価項目に対するｒｅｃＡＰ（組換えアルカリホスファターゼ）の効果を調査することは興味深い。関連する評価項目の１つは、動脈血酸素分圧及び吸気酸素分圧の比率であるＰ／Ｆ比である。したがって、現在の調査の目的は、ＳＴＯＰ－ＡＫＩ研究で観察されたように、Ｐ／Ｆ比に対するｒｅｃＡＰの可能性のある影響を調査することである。
【0189】
ＡＭ－Ｐｈａｒｍａ社が提供するＡｎａｌｙｓｉｓ Ｄａｔａ Ｍｏｄｅｌ（ＡＤａＭ）データセットの関連テーブル、具体的にはＡｄｖｅｒｓｅ Ｄｒｕｇ Ｒｅａｃｔｉｏｎ（ＡＤＲｅ）データセットを統計分析プログラムＲ（r-project.org; version 3.4.4 （2018-03-15））に読み込んだ。Ｐ／Ｆ比を決定したプラセボ又は１．６ｍｇ／ｋｇのｒｅｃＡＰのいずれかを投与された治療群に無作為に割り付けられた患者集団が含まれた。Ｐ／Ｆ比測定値が３００以下であった全ての患者のでは、ＰＥＥＰは、２０１２年ベルリン定義で規定されているように、５ｃｍＨ２Ｏ以上であった。サンプルのスクリーニングで決定されたＰ／Ｆ比値のベースラインと、１日目に採取されたサンプルとを平均して値の安定性を高め、欠損値の発生を減らし、ＭｅａｎＢａｓｅとしてラベル付けした。ＭｅａｎＢａｓｅ値が欠損している患者は分析から除外された。絶対値及び正規化された値は、最初の投与後の時間の関数としてプロットされる。ＭｅａｎＢａｓｅ値の三分位数にサブセット化した後も、グラフによる探索を繰り返した。平均値は、ブートストラップされた信頼区間と共にプロットした。これらのプロットで観察された傾向は、線形回帰を使用して、ノンパラメトリック検定を使用して関連する時点でチェックした。
【0190】
治療開始後の経時的な動脈血酸素分圧及び吸入酸素分圧の比率であるＰ／Ｆ比の推移を図１２～図１４に示す。完全なデータセットが考慮されている場合、絶対Ｐ／Ｆ比は経時的に特定の方法で変化することはなく、プラセボと治療との間に明らかな差異はない。図１２を参照。患者数は、死亡又は他の理由による研究の中止により、研究の時間と共に減少し、ブートストラップ信頼区間の幅はそれに応じて増加する。しかし、各患者のＰ／Ｆ比がベースライン値に対する「倍率変化」として決定される場合、ｒｅｃＡＰを投与された患者は、プラセボで治療された患者と比較して、経時的に増加を示す（図１３）。
【0191】
図１４に見られるように、ｒｅｃＡＰ治療を受けた患者とプラセボ治療を受けた患者との間のこの差異は、ベースラインで２００ｍｍＨｇ未満のＰ／Ｆ比を示す患者（すなわち、中等症～重症のＡＲＤＳ患者）に大きく起因する一方で、軽症のＡＲＤＳ群（２００ｍｍＨｇ＜Ｐ／Ｆ比＜３００ｍｍＨｇ）及びベースラインでＡＲＤＳを示さなかった患者群（Ｐ／Ｆ比＞３００ｍｍＨｇ）では、わずかな一過性の差異のみが見られる。結論として、ベースラインで中等症から重症のＡＲＤＳ（Ｐ／Ｆ比＜２００ｍｍＨｇ）を示す患者は、ｒｅｃＡＰ治療から最も恩恵を受ける。
【0192】
図１５に見られるように、ベースラインで中等症から重症のＡＲＤＳ（Ｐ／Ｆ比＜２００ｍｍＨＧ）を有する患者群では、アルカリホスファターゼによる治療は、Ｐ／Ｆ比＜２００ｍｍＨｇを有するプラセボ治療患者と比較して、死亡率の有意な低下をもたらした。したがって、ある実施形態では、本発明に係る使用のためのＡＰが提供され、ここで、ＡＰの少なくとも１回用量の投与は、対象における死亡リスクの減少をもたらす。好ましい実施形態では、この減少は全死因死亡リスクの減少である。好ましくは、対象の死亡リスクは、対象がＡＰで治療されなかった場合と比較して減少する。また、ＡＰの少なくとも１回用量の投与が、前記対象群における死亡率の低下をもたらす、本発明に係る使用のためのＡＰも提供される。好ましい実施形態では、この低下は全死因死亡率の低下である。好ましくは、ＡＰで治療された対象群における死亡率は、ＡＰで治療されていない重症から中等症のＡＲＤＳを有する対象群と比較して低下する。
【0193】
死亡率、死亡リスク、全死因死亡率、及び全死因死亡リスクは、本発明の文脈においてそれらの通常の意味を有する。本明細書の文脈における死亡率又は全死因死亡率は、特定の期間における集団の全ての死因による死亡率を意味する。この文脈での死亡リスク又は全死因死亡リスクは、特定の期間における個人の全死因による死亡のリスクを意味する。
【0194】
発明の概要及び要約のセクションではなく、発明を実施するための形態のセクションが請求項を解釈するために使用されることを意図していることを理解されたい。発明の概要及び要約のセクションは、発明者によって考えられるように、本発明の全てではないが１又は複数の例示的な実施形態を説明し得るものであり、したがって、本発明及び添付の特許請求の範囲を決して限定することを意図するものではない。
【0195】
本発明は、特定の機能及びそれらの関係の実施を示す機能的構成要素を活用して上記で説明されている。これらの機能的構成要素の境界は、説明の便宜上、本明細書において任意に定義されている。特定の機能及びそれらの関係が適切に実行される限り、別の境界を定義することができる。
【0196】
特定の実施形態の前述の説明は、本発明の全般的性質を充分に明らかにするので、当業者は当技術分野の範囲内の知識を適用することによって、過度の実験を行うことなく、本発明の全般的概念から逸脱することなく、特定の実施形態などの様々な用途に容易に変更及び／又は適応させることが可能である。したがって、そのような適応及び変更は、本明細書で提示される教示及びガイダンスに基づいて、開示された実施形態の均等物の意味及び範囲内にあることが意図される。本明細書の表現又は用語は、本明細書の用語又は表現が教示及びガイダンスに照らして当業者によって解釈されるように、限定ではなく説明を目的としていることが理解されるべきである。
【0197】
本発明の広さ及び範囲は、上記の例示的な実施形態のいずれによっても限定されるべきではなく、特許請求の範囲及びそれらの均等物に従ってのみ定義されるべきである。
【0198】
本出願で引用された全ての刊行物、特許、特許出願、及び／又は他の文書は、個々の刊行物、特許、特許出願、及び／又は他の文書が全ての目的のために参照により援用されることが示された場合と同程度に、全ての目的のためにその全体が参照により援用される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4-1】
【図4-2】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9A】
【図9B】
【図9C】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【配列表】
【国際調査報告】