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特表2023-542136経口投与用のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-10-05
(54)【発明の名称】経口投与用のアンチセンスオリゴヌクレオチドを含む医薬組成物
(51)【国際特許分類】
A61K 47/61 20170101AFI20230928BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20230928BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20230928BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20230928BHJP
A61P 35/00 20060101ALI20230928BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20230928BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20230928BHJP
C12N 15/113 20100101ALI20230928BHJP
【ＦＩ】
A61K47/61
A61P3/06
A61P9/00
A61P1/16
A61P35/00
A61K31/7088
A61K47/12
C12N15/113 Z ZNA
C12N15/113 130Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023517311
(86)(22)【出願日】2021-09-16
(85)【翻訳文提出日】2023-04-07
(86)【国際出願番号】 EP2021075548
(87)【国際公開番号】W WO2022058465
(87)【国際公開日】2022-03-24
(31)【優先権主張番号】63/079,941
(32)【優先日】2020-09-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/114,232
(32)【優先日】2020-11-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】391008951
【氏名又は名称】アストラゼネカ・アクチエボラーグ
【氏名又は名称原語表記】ＡＳＴＲＡＺＥＮＥＣＡ ＡＫＴＩＥＢＯＬＡＧ
(71)【出願人】
【識別番号】593073230
【氏名又は名称】アイオニス・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド
【氏名又は名称原語表記】ＩＯＮＩＳ ＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳ，ＩＮＣ．
(74)【代理人】
【識別番号】100106518
【弁理士】
【氏名又は名称】松谷 道子
(74)【代理人】
【識別番号】100218268
【弁理士】
【氏名又は名称】及川 健太郎
(72)【発明者】
【氏名】ティヴェステーン，アンナ
(72)【発明者】
【氏名】ダヴィース，ニゲル
(72)【発明者】
【氏名】エレブリン，マリー
(72)【発明者】
【氏名】ゲンネマルク，ペータル
(72)【発明者】
【氏名】マルシー，マリアグラシア
(72)【発明者】
【氏名】クレーメンセン，ニクラス
(72)【発明者】
【氏名】マティク，ハンナ
(72)【発明者】
【氏名】プトラ，オーキ
(72)【発明者】
【氏名】ウパディヤイ，プラティク パンカジ
(72)【発明者】
【氏名】ヴァルテル，カトリン
(72)【発明者】
【氏名】ラデヴィク，アンドレアス
(72)【発明者】
【氏名】ティルマン，ロイド
(72)【発明者】
【氏名】デラメアリー，ルイス
【テーマコード（参考）】
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C076AA95
4C076BB01
4C076CC11
4C076CC16
4C076CC27
4C076CC41
4C076DD41
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
4C086MA03
4C086MA05
4C086MA52
4C086NA13
4C086NA14
4C086ZA36
4C086ZA75
4C086ZB26
4C086ZC33
(57)【要約】
Ａ）１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；Ｂ）１つ以上の浸透促進剤；Ｃ）１つ以上の任意選択の薬学的に許容される賦形剤；及びＤ）１つ以上の任意選択のコーティングを含む医薬組成物。対象におけるＰＣＳＫ９又はＰＮＰＬＡ３に関連する疾患の治療、予防、又は改善に使用するための前記組成物。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
Ａ）１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；Ｂ）１つ以上の浸透促進剤；
Ｃ）１つ以上の任意選択の薬学的に許容される賦形剤；及び
Ｄ）１つ以上の任意選択のコーティング
を含む医薬組成物。
【請求項2】
前記１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩が、少なくとも１つのＧａｌＮＡｃコンジュゲートを含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項3】
前記１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩が、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、配列番号１を含む核酸塩基配列を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項4】
前記ＡＳＯが、ＩＯＮ ８６３６３３及びＩＯＮ ８４８８３３から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項３に記載の医薬組成物。
【請求項5】
前記１つ以上の浸透促進剤が、中鎖脂肪酸及びそれらの塩から選択される、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項6】
前記１つ以上の浸透促進剤が、カプリル酸ナトリウム、カプリン酸ナトリウム、ラウリン酸ナトリウム、ミリスチン酸ナトリウム、パルミチン酸ナトリウム及びステアリン酸ナトリウムから選択される、請求項５に記載の医薬組成物。
【請求項7】
前記１つ以上の浸透促進剤が、カプリン酸ナトリウムである、請求項６に記載の医薬組成物。
【請求項8】
前記１つ以上の浸透促進剤が、形態Ａカプリン酸ナトリウムである、請求項７に記載の医薬組成物。
【請求項9】
前記組成物が、Ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ ８６３６３３及びＩＯＮ ８４８８３３から選択されるＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
Ｂ）約１０～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
Ｃ）約０～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
Ｄ）約０ｍｇ～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項10】
対象におけるＰＣＳＫ９に関連する疾患を治療、予防、又は改善する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項11】
前記疾患が、脂質異常症、混合型脂質異常症、及び高コレステロール血症から選択される心血管疾患である、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
ＰＣＳＫ９に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための、請求項１に記載の医薬組成物の使用。
【請求項13】
前記疾患が、脂質異常症、混合型脂質異常症、及び高コレステロール血症から選択される心血管疾患である、請求項１２に記載の使用。
【請求項14】
前記１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩が、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、配列番号２を含む核酸塩基配列を有する、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項15】
前記ＡＳＯが、ＩＯＮ ９７５６１６及びＩＯＮ ９１６３３３から選択される化合物又はその薬学的に許容される塩である、請求項１４に記載の医薬組成物。
【請求項16】
前記組成物が、Ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ ９７５６１６及びＩＯＮ ９１６３３３から選択されるＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
Ｂ）約１０～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
Ｃ）約０～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
Ｄ）約０ｍｇ～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む、請求項１に記載の医薬組成物。
【請求項17】
対象におけるＰＮＰＬＡ３に関連する疾患を治療、予防、又は改善する方法であって、請求項１に記載の医薬組成物を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項18】
前記疾患が、肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、肝硬変、肝細胞癌、アルコール性肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ＨＣＶ肝炎、慢性肝炎、遺伝性ヘモクロマトーシス、及び／又は原発性硬化性胆管炎から選択される、請求項１７に記載の方法。
【請求項19】
ＰＮＰＬＡ３に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための、請求項１に記載の医薬組成物の使用。
【請求項20】
前記疾患が、肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、肝硬変、肝細胞癌、アルコール性肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ＨＣＶ肝炎、慢性肝炎、遺伝性ヘモクロマトーシス、及び／又は原発性硬化性胆管炎から選択される、請求項１９に記載の使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、アンチセンスオリゴヌクレオチド又はその薬学的に許容される塩及び浸透促進剤の経口投与に好適な剤形における医薬組成物（このような製剤を使用した治療の方法を含む）に関する。
【背景技術】
【0002】
アンチセンスオリゴヌクレオチド（以後、ＡＳＯ）は、標的ｍＲＮＡに相補的である、約１２～８０塩基を含む核酸塩基配列を有する合成オリゴヌクレオチドである。ほとんどの従来の（小分子及び大型分子）治療法と異なり、ＡＳＯは、「創薬不可能な（ｕｎｄｒｕｇｇａｂｌｅ）」標的に到達し、細胞の細胞質に入って、標的ｍＲＮＡを下方制御し、それによって、様々な疾患過程に関与するタンパク質の産生を防止することができる。したがって、ＡＳＯは、有効な治療薬の合理的設計への興味深いアプローチを提供する。
【0003】
５つのみのＡＳＯが、様々な障害のための治療薬として現在承認されており、これらはいずれも、消化管の外部の標的組織への経口送達について承認されていない。ＡＳＯの経口送達は、それらが、本質的に低い腸内安定性及び透過性を有する高電荷の親水性高分子であり、したがって経口投与後にごく低い全身バイオアベイラビリティを有することが予想されるため、難題である（非特許文献１）。
【0004】
例えば、拘束メトキシエチル化学などの新しい化学が開発され、ＡＳＯに改善された消化管内安定性及び効力を与えた。さらに、組織標的が肝臓中である場合、三分岐Ｎ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）化学が、主に肝細胞において発現されて、単離された肝細胞内、並びにインビボの肝臓内で１０～３０倍増加した効力をもたらすアシアロ糖タンパク質（ＡＳＧＰ）受容体を介して肝臓取り込みを促進する（非特許文献２；非特許文献３；非特許文献４；非特許文献５）。
【0005】
ＡＳＯの標的組織が肝臓である場合、強力なコンジュゲートＡＳＯの送達は、初回通過肝抽出が利用され得るように、肝門脈への送達から利益を得られるであろう。肝門脈への直接の送達は、経口投与後に達成される。
【0006】
経口送達後のＡＳＯの全身バイオアベイラビリティが、ＡＳＯを一時的な浸透促進剤と共投与することによって達成され得ることが既に示されている（非特許文献６）。しかしながら、旧来のＡＳＯ化学では、体循環中のＡＳＯの治療レベルは、非常に高い用量のＡＳＯ及び浸透促進剤を含有する医薬組成物を用いてのみ達成され得、患者にとって不都合であり、望ましくない副作用のリスクを増加させる実行不可能な医薬組成物につながる。例えば、約１０％の全身バイオアベイラビリティが、５つの大型カプセルサイズ０００で投与される２’－Ｏ－（２－メトキシエチル）化学及び３．５ｇのカプリン酸ナトリウムを一緒に含む５００ｍｇのＡＳＯで実証された（非特許文献６）。したがって、治療効果、安全性及び利便性を損なわずに許容される全身バイオアベイラビリティを送達する経口剤形を患者に提供する必要性がある。
【先行技術文献】
【非特許文献】
【0007】
【非特許文献1】Ｍａｈｅｒ，ｅｔ ａｌ．Ａｄｖ Ｄｒｕｇ Ｄｅｌｉ Ｒｅｖ，１０６（Ｐｔ Ｂ）：２７７－３１９（２０１６）
【非特許文献2】Ｂｉｅｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｊ．，３４０（ＰＴ ３）：７８３－７９２（１９９９）
【非特許文献3】Ｐｒａｋａｓｈ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４２：８７９６－８８０７（２０１４）
【非特許文献4】Ｎａｉｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ａｍ Ｃｈｅｍ Ｓｏｃ，１３６：１６９５８－１６９６１（２０１４）
【非特許文献5】Ｃｒｏｏｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｔｈｅｒ．，（２０１８）
【非特許文献6】Ｔｉｌｌｍａｎ，ｅｔ ａｌ．，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，９７（１）：２２５－２３６（２００８）
【発明の概要】
【課題を解決するための手段】
【0008】
治療的に有効な用量での、肝臓、又は肝細胞へのＡＳＯの標的化送達を達成するために、本開示は、拘束メトキシエチル化学などの化学修飾オリゴヌクレオチド及びＧａｌＮＡｃコンジュゲーションなどの肝臓標的化コンジュゲートを、経口投与後の体内吸収を促進する浸透促進剤と組み合わせて含むＡＳＯを提供する。
【0009】
本開示によれば、経口投与用の医薬組成物及びそれを投与することを含む治療方法が提供され、ここで、経口投与用の医薬組成物は、固体剤形であってもよく、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩、及び１つ以上の浸透促進剤を含み得る。
【0010】
特定の実施形態において、本開示は、コンジュゲートＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、本開示は、ＡＳＯのＧａｌＮＡｃコンジュゲートを含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、コンジュゲートＡＳＯを含む医薬組成物は、肝臓及び肝細胞における増加した送達、取り込み及び活性をもたらす。特定の実施形態において、本開示は、核酸転写産物に相補的なコンジュゲートＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。
【0011】
特定の実施形態において、本開示は、少なくとも１つの修飾糖部分を含むＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、本開示は、２’－ＯＣＨ３を有する少なくとも１つの糖部分及び／又は２’－Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３を有する少なくとも１つの糖部分を含むＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、本開示は、拘束エチル（ｃＥｔ）を有する少なくとも１つの糖部分を含むＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。
【0012】
特定の実施形態において、本開示は、中鎖脂肪酸及びそれらの塩から選択される浸透促進剤を含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、本開示は、カプリン酸ナトリウムである浸透促進剤を含む医薬組成物を提供する。特定の実施形態において、本開示は、形態Ａカプリン酸ナトリウムを含む医薬組成物を提供する。本明細書において理解される際、「形態Ａカプリン酸ナトリウム」は、以下のうちの少なくとも１つによって特徴付けられるカプリン酸ナトリウムを意味することが理解される：
ｉ）０．１～０．１５Å－１の領域にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトル；
ｉｖ）４°２θにピークを含むＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトル；又は
ｖ）カール・フィッシャー滴定によって測定した際に約３．５％未満の含水量。
ｉ）０．１～０．１５Å－１の領域にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトル；
ｉｖ）４°２θにピークを含むＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトル；又は
ｖ）カール・フィッシャー滴定によって測定した際に約３．５％未満の含水量。
【0013】
特定の実施形態において、本開示は、本明細書に開示される医薬組成物を対象に投与することを含む治療方法を提供し、ここで、医薬組成物は、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩、及び疾患の治療のためのＡＳＯの経口投与用の１つ以上の浸透促進剤を含む。ある実施形態において、ＡＳＯの経口送達は、核酸転写産物の、様々な疾患過程に関与するタンパク質への翻訳を低減する。ある実施形態において、医薬組成物は、疾患の症状を予防、軽減若しくは改善するか又は治療される対象の生存期間を延長するために治療有効量の１つ以上のＡＳＯを含む。他の実施形態において、本開示は、２０１８年３月２３日に出願された国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１８／２３９３６号明細書（その開示内容が、参照により本明細書に援用される）に記載されるＡＳＯなどの、ＰＣＳＫ９核酸を標的とするＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。他の実施形態において、本開示は、２０１９年９月１８日に出願された国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１９／０５１７４３号明細書（その開示内容が、参照により本明細書に援用される）に記載されるＡＳＯなどの、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とするＡＳＯを含む医薬組成物を提供する。
【0014】
ある実施形態において、対象におけるＰＣＳＫ９に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための方法であって、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯを含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法が開示される。特定の実施形態において、対象は、心血管疾患を有する。特定の実施形態において、疾患は、脂質異常症である。特定の実施形態において、疾患は、混合型脂質異常症である。特定の実施形態において、疾患は、高コレステロール血症である。ＰＣＳＫ９に関連する疾患に罹患しているか、又は罹患するリスクがある対象におけるＬＤＬ－コレステロールレベル及び総コレステロールレベルを低下させるか又は阻害する方法であって、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯを含む医薬組成物を投与し、それによって、対象におけるＬＤＬ－コレステロールレベル及び総コレステロールレベルを低下させるか又は阻害することを含む方法も開示される。
【0015】
ある実施形態において、対象におけるＰＮＰＬＡ３に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための方法であって、ＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯを含む医薬組成物を対象に投与することを含む方法が開示される。特定の実施形態において、対象は、肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、肝硬変、肝細胞癌、アルコール性肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ＨＣＶ肝炎、慢性肝炎、遺伝性ヘモクロマトーシス、又は原発性硬化性胆管炎に罹患している。ＰＮＰＬＡ３に関連する疾に罹患しているか、又は罹患するリスクがある対象における、肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減又は阻害する方法であって、ＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯを含む医薬組成物を投与し、それによって、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減又は阻害することを含む方法も本明細書に開示される。
【0016】
特定の実施形態において、本明細書における医薬組成物は、
ａ）１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）１つ以上の浸透促進剤；
ｃ）１つ以上の任意選択の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）１つ以上の浸透促進剤；
ｃ）１つ以上の任意選択の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0017】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の浸透促進剤；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の浸透促進剤；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0018】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在するカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在するカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0019】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－８６３６３３又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－８６３６３３又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0020】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0021】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在するカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在するカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0022】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－９７５６１６又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－９７５６１６又はその薬学的に許容される塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【0023】
少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
ａ）約１～約１００ｍｇの範囲内の量で存在する、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩；
ｂ）約２００～約１０００ｍｇの範囲内の量で存在する形態Ａカプリン酸ナトリウム；
ｃ）約０ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で存在する１つ以上の薬学的に許容される賦形剤；及び
ｄ）約０ｍｇ～約２００ｍｇの範囲内の量で存在する１つ以上の任意選択のコーティング
を含む。
【図面の簡単な説明】
【0024】
【図1】形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤のための錠剤製造のフローチャートを示す。
【図2】形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤の溶解プロファイルを示す。
【図3】皮下注射と比較して、４週間後に１日１回イヌに経口投与された形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤のバイオアベイラビリティを示す。
【図4】ＳＣ又はＩＪ投与のいずれかとしてラットに投与された、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）又はＭａｌａｔ－１を標的とするラット特異的ツールＡＳＯの用量を示す。（Ａ）は、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の用量レベルと比べた、投与の４８時間後の非コンジュゲートＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の肝臓濃度を示し；（Ｂ）は、ＩＯＮ－７０４３６１の用量レベルと比べた、投与の４８時間後の非コンジュゲートＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の肝臓濃度を示し；（Ｃ）は、ＳＣ及びＩＪ投与のためのＩＯＮ－７０４３６１用量と比べた、肝臓における相対Ｍａｌａｔ－１ ｍＲＮＡ発現を示し；（Ｄ）は、用量に対してプロットされた（Ｃ）からの個々のデータを示す。
【図5】形態Ａカプリン酸ナトリウムについての広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）データを示す。
【図6】形態Ａカプリン酸ナトリウムについての小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）データを示す。
【図7】形態Ａカプリン酸ナトリウムについてのＸＲＰＤパターンを示す。
【図8】ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）錠剤の反復経口投与後の健康なサルにおけるＬＤＬ－コレステロール低下を示す（１４日間にわたって浸透促進剤と共にＡＺＤ８８２３を１日１回反復経口投与の後の投与前補正されたＬＤＬ－コレステロール時間プロファイル（群当たりＮ＝２）。データは、治療の開始の２及び１週間前にサンプリングされた２つの投与前値の平均に対するものである。エラーバーは、標本平均の標準誤差を示す）。
【発明を実施するための形態】
【0025】
本開示は、経口投与後に、コンジュゲートＡＳＯなどの１つ以上のＡＳＯを対象に投与することを含む、医薬組成物及び使用方法を提供する。特定の実施形態において、全身バイオアベイラビリティは、１つ以上のＡＳＯを含む本明細書に開示される医薬組成物の経口投与によって達成され得る。本明細書において使用される際、「全身バイオアベイラビリティ」は、体循環に到達する化合物の経口投与される用量の割合を意味することが理解される。さらなる実施形態において、全身曝露と比べた、ＡＳＯの強化された標的組織バイオアベイラビリティ（肝臓又は肝臓の肝細胞などにおける）は、本明細書において提供される医薬組成物及びＡＳＯの経口投与によって達成され得る。本明細書において使用される際、「組織バイオアベイラビリティ」は、標的器官／細胞に到達するＡＳＯの経口投与される用量の割合を意味することが理解される。特定の実施形態において、対象への開示される医薬組成物の投与は、最大で８％、例えば最大で５％の肝臓バイオアベイラビリティ、及び少なくとも３０％の肝細胞における生産的バイオアベイラビリティをもたらす。本明細書において使用される際、「生産的バイオアベイラビリティ」は、標的器官／細胞における標的エンゲージメントを誘導するＡＳＯの経口投与される用量の割合を意味することが理解される。本明細書において使用される際、「標的エンゲージメント」は、標的タンパク質の低下などの薬力学的効果を意味することが理解される。
【0026】
本開示の医薬組成物は、カプセル剤又は錠剤、ミニ錠剤、ペレット又は顆粒剤の形態であってもよく；上記の全ては、まとめて固体剤形と呼ばれ、１つ以上のＡＳＯ及び１つ以上の浸透促進剤を含むであろう。ミニ錠剤、ペレット又は顆粒剤は、錠剤若しくはカプセル剤中に充填されるか、又はサシェ若しくは他の好適な手段中に分配され得る。ある実施形態において、固体剤形は、カプセル剤であり、カプセル剤は、固体若しくは半固体外層を有する液体組成物を含み得るか、又は固体若しくは半固体外層を有する完全に固体の組成物を含み得ることが、本明細書において理解される。特定の実施形態において、本明細書において提供される医薬組成物は、即放性、放出調節型、又は遅延放出性固体剤形の形態であり得る。
【0027】
ある実施形態において、医薬組成物は、疾患の症状を予防、軽減若しくは改善する又は治療される対象の生存期間を延長するために治療有効量の１つ以上のＡＳＯを含む。本明細書において使用される際、「有効量」は、単回用量で又は一連の用量の一部としての対象へのその投与が、治療のために、すなわち、疾患若しくは障害（又はその１つ以上の症状）の重症度を低下させ、このような疾患若しくは障害の１つ以上の症状を改善し、このような疾患若しくは障害の進行を防ぎ、このような疾患若しくは障害の退縮を生じさせ、又は別の治療法の治療効果を強化若しくは改善するために有効である、ＡＳＯの量を意味することが理解される。特定の実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物中の１つ以上のＡＳＯの量は、約１ｍｇ～約１００ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約４０ｍｇ、例えば、約５ｍｇ～約４０ｍｇ、少なくとも１つの実施形態において、約５０ｍｇ～約２０ｍｇ、例えば、２０ｍｇの範囲であり得る。開示される医薬製剤中のＡＳＯの量は、単一の投与単位で投与される量に関するが、ミニ錠剤、ペレット又は顆粒剤を形成するために分割されてもよい。例えば、特定の実施形態において、本開示は、ミニ錠剤、ペレット又は顆粒剤に関し、ここで、錠剤又はカプセル剤中の各ペレット又は顆粒剤は、各ペレット又は顆粒剤中の各ＡＳＯの重量が一緒に加えられる場合、約１ｍｇ～約１００ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約２０ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約１０ｍｇ、少なくとも１つの実施形態において、約１ｍｇ～約５ｍｇ、例えば、３ｍｇの範囲の量に等しい、ＡＳＯのパーセンテージを有する。
【0028】
ある実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物は、全身曝露を達成する量の１つ以上の浸透促進剤を含む。特定の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤の量は、約２００ｍｇ～約１５００ｍｇ、例えば約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、例えば約６５０ｍｇ～約８５０ｍｇ、例えば、約７００ｍｇ～約８００ｍｇ、少なくとも１つの実施形態において、約７００ｍｇの範囲であり得る。開示される医薬製剤中の浸透促進剤の量は、単一の投与単位で投与される量に関するが、ミニ錠剤、ペレット又は顆粒剤を形成するために分割されてもよい。例えば、特定の実施形態において、本開示は、ミニ錠剤に関し、ここで、錠剤又はカプセル剤中の各ペレット又は顆粒剤は、各ペレット又は顆粒剤中の各浸透促進剤の重量が一緒に加えられる場合、約２００ｍｇ～約１５００ｍｇ、例えば約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、例えば約６５０ｍｇ～約８５０ｍｇ、例えば、約７００ｍｇ～約８００ｍｇ、少なくとも１つの実施形態において、約７００ｍｇの範囲の量に等しい、浸透促進剤のパーセンテージを有する。
【0029】
本開示の医薬組成物は、カプセル剤、錠剤、ミニ錠剤、ペレット、又は顆粒剤などの固体剤形の製造を可能にし、その性能／機能に影響を与えるために、１つ以上の許容される医薬品賦形剤を任意にさらに含むであろう。したがって、１つ以上の実施形態において、医薬組成物は、１つ以上のＡＳＯ、１つ以上の浸透促進剤、及び１つ以上の薬学的に許容される賦形剤を含む。ある実施形態において、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤は、希釈剤／充填剤、粘着防止剤、乳化剤、滑沢剤、流動剤（ｆｌｏｗ ａｇｅｎｔ）／滑剤、崩壊剤、可塑剤、可溶化剤、溶媒及びバインダーから選択される。ある実施形態において、医薬組成物の固体投与量は、機能的コーティング、例えば、外側保護胃耐性コーティングなどの１つ以上の任意選択のコーティングをさらに含み得る。
【0030】
本開示の医薬組成物は、様々なプロセス及び賦形剤の添加の順序によって調製され得る。固体剤形は、湿式造粒法、乾式造粒法、直接混合、錠剤化、カプセル剤充填、コーティング手順又は任意の他の薬学的に許容されるプロセス並びに必要に応じて混合及び乾燥工程によって製造され得る。これらの医薬組成物の有用性は、特定の剤形又は製造プロセスに限定されない。
【0031】
アンチセンスオリゴヌクレオチド
経口投与され得るＡＳＯが、本明細書において提供される。本開示の医薬組成物において使用される例示的なＡＳＯは、１つ以上の修飾を含んでいてもよく、例えば、ＡＳＯは、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合、修飾糖、及び／又は修飾核酸塩基を含み得る。他の実施形態において、ＡＳＯは、コンジュゲート基を組み込み得る。特定の実施形態において、ＡＳＯは、複数の修飾を含む。本明細書に含まれる例において任意の配列番号で記載される配列が、糖部分、ヌクレオシド間結合、又は核酸塩基に対するいずれの修飾とも無関係であることが理解される。したがって、配列番号によって規定される化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合、又は核酸塩基に対する１つ以上の修飾を含み得る。ＩＯＮ番号によって表される化合物は、核酸塩基配列、化学修飾、モチーフ、及び／又はコンジュゲートの組合せを示す。
経口投与され得るＡＳＯが、本明細書において提供される。本開示の医薬組成物において使用される例示的なＡＳＯは、１つ以上の修飾を含んでいてもよく、例えば、ＡＳＯは、１つ以上の修飾ヌクレオシド間結合、修飾糖、及び／又は修飾核酸塩基を含み得る。他の実施形態において、ＡＳＯは、コンジュゲート基を組み込み得る。特定の実施形態において、ＡＳＯは、複数の修飾を含む。本明細書に含まれる例において任意の配列番号で記載される配列が、糖部分、ヌクレオシド間結合、又は核酸塩基に対するいずれの修飾とも無関係であることが理解される。したがって、配列番号によって規定される化合物は、独立して、糖部分、ヌクレオシド間結合、又は核酸塩基に対する１つ以上の修飾を含み得る。ＩＯＮ番号によって表される化合物は、核酸塩基配列、化学修飾、モチーフ、及び／又はコンジュゲートの組合せを示す。
【0032】
特定の実施形態において、修飾オリゴヌクレオチドは、ホスホロチオエートヌクレオシド間結合などの少なくとも１つの修飾ヌクレオシド間結合を含む。
【0033】
１つ以上の実施形態において、ＡＳＯは、少なくとも１つの修飾糖を含む。特定の実施形態において、少なくとも１つの修飾糖は、２’－ＯＣＨ３（「ＯＭｅ」又は「Ｏ－メチル」）、及び／又は２’－Ｏ（ＣＨ２）２ＯＣＨ３（「ＭＯＥ」）を含む。他の実施形態において、少なくとも１つの修飾糖は、ｃＥｔ修飾糖部分であり、ここで、「ｃＥｔ」又は「拘束エチル」は、４’－炭素及び２’－炭素を連結する架橋を含む二環式フラノシル糖部分を意味し、ここで、架橋は、式：４’－ＣＨ（ＣＨ３）－Ｏ－２’で表される。特定の実施形態において、ＡＳＯは、修飾糖の混合物を含み、例えば、ＡＳＯは、少なくとも１つの２’－Ｏ－メトキシエチル基（ＭＯＥ）及び少なくとも１つのｃＥｔ修飾糖部分を含む。
【0034】
特定の実施形態において、ＡＳＯは、５－メチルシトシンなどの少なくとも１つの修飾核酸塩基を含む。
【0035】
本開示の医薬組成物において使用されるＡＳＯは、コンジュゲート基をさらに組み込み得る。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、限定はされないが、薬力学、薬物動態、安定性、結合、吸収、組織分布、細胞分布、細胞取り込み及びクリアランスを含む、結合されたＡＳＯの１つ以上の特性を調節する。
【0036】
特定の実施形態において、ＡＳＯは、細胞の表面において発現される受容体を標的とするために、リガンドにコンジュゲートされ得る。特定の実施形態において、リガンドは、肝臓へのＡＳＯの分配を促進する。他の実施形態において、リガンドは、肝細胞又は肝臓の他の細胞内の取り込みを促進する。特定の実施形態において、コンジュゲートは、多糖、ビタミン、抗体、ペプチド若しくはアプタマー、又は限定はされないが、トランスフェリン及び低比重リポタンパク受容体を含む、肝細胞において発現される受容体のための他のリガンドである。１つ以上の実施形態において、リガンドは、肝細胞において発現されるアシアロ糖タンパク質受容体のためのものである。特定の実施形態において、リガンドは、肝細胞において発現されるアシアロ糖タンパク質受容体と相互作用することが可能なＮ－アセチルガラクトサミン（ＧａｌＮＡｃ）である。
【0037】
コンジュゲート基は、１つ以上のコンジュゲート部分及びコンジュゲート部分をオリゴヌクレオチドに結合するコンジュゲートリンカーからなり得る。コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドのいずれかの末端若しくは両端に及び／又は任意の内部部分において結合され得る。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、修飾オリゴヌクレオチドのヌクレオシドの２’位に結合される。特定の実施形態において、オリゴヌクレオチドのいずれかの末端又は両端に結合されるコンジュゲート基は、末端基である。特定のこのような実施形態において、コンジュゲート基又は末端基は、オリゴヌクレオチドの３’及び／又は５’末端において結合される。特定のこのような実施形態において、コンジュゲート基（又は末端基）は、オリゴヌクレオチドの３’末端において結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの３’末端の近くに結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基（又は末端基）は、オリゴヌクレオチドの５’末端において結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、オリゴヌクレオチドの５’末端の近くに結合される。
【0038】
１つ以上の実施形態において、コンジュゲート基は、ＡＳＯの５’末端においてＡＳＯに結合される。他の実施形態において、コンジュゲート基は、ＡＳＯの３’末端においてＡＳＯに結合される。特定の実施形態において、コンジュゲート基は、１つ以上のＧａｌＮＡｃ糖単位、少なくとも２つのＧａｌＮＡｃ糖単位、又は少なくとも３つのＧａｌＮＡｃ糖単位を含む。
【0039】
本開示のＡＳＯは、１２～８０、１４～８０、１６～８０、１６～５０、１６～３０、１７～８０、１７～５０、１７～３０、１８～８０、１８～５０、１８～３０、１９～８０、１９～５０、１９～３０、２０～８０、２０～５０、又は２０～３０個の結合したヌクレオシド長であり得る。１つ以上の実施形態において、ＡＳＯは、１２～３０個の結合したヌクレオシドであり得、例えば、修飾ＡＳＯは、１６～２５個の結合したヌクレオシド、１つ以上の実施形態において、１６個の結合したヌクレオシドであり得る。
【0040】
１つ以上の実施形態において、ＡＳＯは、ＡＡＴＡＡＴＣＴＣＡＴＧＴＣＡＧ（配列番号１）の核酸塩基配列を含む。１つ以上の実施形態において、ＡＳＯは、ＣＴＴＴＡＴＴＣＡＡＴＧＴＧＧＣ（配列番号２）の核酸塩基配列を含む。
【0041】
特定の実施形態において、ＡＳＯは、配列番号１の配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチド１２～８０個の結合した核酸塩基長を含むか又はそれからなり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
少なくとも１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
少なくとも１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
【0042】
特定の実施形態において、ＡＳＯは、配列番号２の配列を含む核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチド１２～８０個の結合した核酸塩基長を含むか又はそれからなり、ここで、修飾オリゴヌクレオチドは、
少なくとも１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
少なくとも１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
【0043】
特定の実施形態において、本明細書において提供される医薬組成物は、ＡＳＯの薬学的に許容される塩を含む。特定の実施形態において、塩は、ナトリウム塩である。特定の実施形態において、塩は、カリウム塩である。
【0044】
特定の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＰＣＳＫ９核酸を標的とする。本明細書において使用される際、「ＰＣＳＫ９核酸」という用語は、ＰＣＳＫ９をコードする任意の核酸を意味する。例えば、特定の実施形態において、ＰＣＳＫ９核酸は、ＰＣＳＫ９をコードするＤＮＡ配列、ＰＣＳＫ９をコードするＤＮＡ（イントロン及びエクソンを含むゲノムＤＮＡを含む）から転写されるＲＮＡ配列及びＰＣＳＫ９をコードするｍＲＮＡ配列を含む。「ＰＣＳＫ９ ｍＲＮＡ」は、ＰＣＳＫ９タンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する。標的は、大文字又は小文字のいずれかで示され得る。特定の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とする。本明細書において使用される際、「ＰＮＰＬＡ３核酸」という用語は、ＰＮＰＬＡ３をコードする任意の核酸を意味する。例えば、特定の実施形態において、ＰＮＰＬＡ３核酸は、ＰＮＰＬＡ３をコードするＤＮＡ配列、ＰＮＰＬＡ３をコードするＤＮＡ（イントロン及びエクソンを含むゲノムＤＮＡを含む）から転写されるＲＮＡ配列及びＰＮＰＬＡ３をコードするｍＲＮＡ配列を含む。「ＰＮＰＬＡ３ ｍＲＮＡ」は、ＰＮＰＬＡ３タンパク質をコードするｍＲＮＡを意味する。標的は、大文字又は小文字のいずれかで示され得る。
【0045】
本開示の特定の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１８／２３９３６号明細書に記載されるＡＳＯを含む。例えば、ＡＳＯは、ＩＯＮ ８６３６３３及びＩＯＮ ８４８８３３、又はＩＯＮ ８６３６３３及びＩＯＮ ８４８８３３のいずれかの塩、並びにＩＯＮ ８６３６３３及びＩＯＮ ８４８８３３の組合せ及びその塩から選択される。少なくとも１つの実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ８４８８３３を含む。別の実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ８４８８３３の塩を含む。さらに別の実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ８４８８３３のナトリウム塩を含む。本開示の特定の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ１９／０５１７４３号明細書に記載されるＡＳＯを含む。例えば、ＡＳＯは、ＩＯＮ ９７５６１６及びＩＯＮ ９１６３３３、又はＩＯＮ ９７５６１６及びＩＯＮ ９１６３３３のいずれかの塩、並びにＩＯＮ ９７５６１６及びＩＯＮ ９１６３３３の組合せ及びその塩から選択される。少なくとも１つの実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ９７５６１６を含む。さらに別の実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ９７５６１６の塩を含む。別の実施形態において、ＡＳＯは、ＩＯＮ ９７５６１６のナトリウム塩を含む。
【0046】
特定の実施形態において、本明細書に記載される１つ以上のＡＳＯは、修飾され、コンジュゲート基をさらに含む。特定の実施形態において、修飾ＡＳＯは、ギャップマー又は完全修飾モチーフ及び１つ以上、２つ、又は３つのＧａｌＮＡｃリガンドを含むコンジュゲート基を含む。さらに別の実施形態において、本明細書に記載されるＡＳＯは、１つ以上のＧａｌＮＡｃにさらにコンジュゲートされたＰＣＳＫ９核酸を標的とするＡＳＯを含むか又はそれからなり、１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。さらに別の実施形態において、本明細書に記載されるＡＳＯは、１つ以上のＧａｌＮＡｃにさらにコンジュゲートされたＰＮＰＬＡ３核酸を標的とするＡＳＯを含むか又はそれからなり、１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。さらに別の実施形態において、本明細書に記載されるＡＳＯは、１つ以上のＧａｌＮＡｃにさらにコンジュゲートされたＰＮＰＬＡ３核酸を標的とするＡＳＯを含むか又はそれからなり、１０個の結合したデオキシヌクレオシドからなるギャップセグメント；
３つの結合したヌクレオシドからなる５’ウイングセグメント；及び
３つの結合したヌクレオシドからなる３’ウイングセグメントを含み；
ここで、ギャップセグメントは、５’ウイングセグメントと３’ウイングセグメントとの間に位置し、各ウイングセグメントの各ヌクレオシドが、ｃＥｔ糖を含み；各ヌクレオシド間結合が、ホスホロチオエート結合であり、各シトシンが、５－メチルシトシンである。
【0047】
１つ以上の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号１）：
を有する、ＩＯＮ ８６３６３３又はその塩を含むか又はそれからなる。
【化1】
【0048】
他の実施形態において、ＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号１）：
を有する、ＩＯＮ ８６３６３３、又はその塩を含むか又はそれからなる。
【化2】
【0049】
特定の実施形態において、ＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号１）：
を有する、ＩＯＮ ８６３６３３のナトリウム塩を含むか又はそれからなる。
【化3】
【0050】
１つ以上の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号２）：
を有する、ＩＯＮ ９７５６１６又はその塩を含むか又はそれからなる。
【化4】
【0051】
特定の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号２）：
を有する、ＩＯＮ ９７５６１６のナトリウム塩を含むか又はそれからなる。
【化5】
【0052】
１つ以上の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、以下の化学構造（配列番号２）：
を有する、ＩＯＮ ９７５６１６又はその塩を含むか又はそれからなる。
【化6】
【0053】
上記の実施形態のいずれかにおいて、ＡＳＯは、ＰＣＳＫ９をコードする核酸に対して少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、又は１００％相補的であり得る。
【0054】
本明細書に記載される医薬組成物は、特定の固体剤形用に製剤化され得る。投与計画は、最適応答を提供するために調整され得る。投与の容易さ及び投与の均一性のために投与単位形態で組成物を製剤化することが有用であり得る。本明細書において使用される際の投与単位形態は、治療される対象のための単位投与量として適した物理的に別個の単位を指し；各単位は、必要とされる医薬担体と共に治療効果を生じるように計算された所定の量の１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩を含有する。例えば、本明細書に開示される医薬組成物は、約０．１ｍｇ～約１００ｍｇ、ある実施形態において、約０．５ｍｇ～約４０ｍｇ、例えば、約１ｍｇ～約４０ｍｇ、例えば、約５ｍｇ～約４０ｍｇの範囲の量の１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩の用量を含み得る。ある実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、約０．１ｍｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約２ｍｇ、約３ｍｇ、約４ｍｇ、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約５５ｍｇ、約６０ｍｇ、約６５ｍｇ、約７０ｍｇ、約７５ｍｇ、約８０ｍｇ、約８５ｍｇ、約９０ｍｇ、約９５ｍｇ、及び約１００ｍｇの範囲の量で存在する。ある実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、固体剤形の約０．１重量％～約１２重量％の範囲の量である。
【0055】
浸透促進剤
本明細書において使用するのに好適な浸透促進剤の例としては、限定はされないが、中鎖脂肪酸（Ｃ６．２ｏ）及びそれらの塩、エステル又はエーテル；中鎖脂肪酸の誘導体；中鎖モノ－、ジ－及びトリグリセリド並びにその誘導体；ポリオキシルグリセリド；アシル化アミノ酸；有機酸；アシルカルニチン；アルキルサッカリド；胆汁塩；芳香族アルコール、キレート剤、ポリマー、混合ミセル、逆ミセル、及び自己乳化系（例えば、ＳＥＤＤＳ、ＳＭＥＤＤＳ、又はＳＮＥＤＤＳ）が；それらの混合物及び組合せと一緒に挙げられる。
本明細書において使用するのに好適な浸透促進剤の例としては、限定はされないが、中鎖脂肪酸（Ｃ６．２ｏ）及びそれらの塩、エステル又はエーテル；中鎖脂肪酸の誘導体；中鎖モノ－、ジ－及びトリグリセリド並びにその誘導体；ポリオキシルグリセリド；アシル化アミノ酸；有機酸；アシルカルニチン；アルキルサッカリド；胆汁塩；芳香族アルコール、キレート剤、ポリマー、混合ミセル、逆ミセル、及び自己乳化系（例えば、ＳＥＤＤＳ、ＳＭＥＤＤＳ、又はＳＮＥＤＤＳ）が；それらの混合物及び組合せと一緒に挙げられる。
【0056】
様々なタイプの浸透促進剤の非限定的な例が、以下の表１に列挙される。これらの浸透促進剤の多くは、いくつかの異なる商標及び品質並びにそれらの混合物で入手可能であり得る。
【0057】
【表1】
【0058】
特定の実施形態において、本開示は、形態Ａカプリン酸ナトリウムを含む医薬組成物を提供する。形態Ａカプリン酸ナトリウムは、以下のうちの少なくとも１つによって特徴付けられ得る：
ｉ）０．１～０．１５Å－１の領域にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトル；
ｉｖ）４°２θにピークを含むＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトル；又は
ｖ）カール・フィッシャー滴定によって測定した際に約３．５％未満の含水量。
ｉ）０．１～０．１５Å－１の領域にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトル；
ｉｉｉ）０．１２及び０．２３Å－１にピークを含む小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトル；
ｉｖ）４°２θにピークを含むＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）スペクトル；又は
ｖ）カール・フィッシャー滴定によって測定した際に約３．５％未満の含水量。
【0059】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）によって同定される。ある実施形態において、カプリン酸ナトリウム形態は、広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）によって同定される。ＳＡＸＳ及びＷＡＸＳは、試料中の電子密度中の振動によってＸ線が散乱される散乱技術である。したがって、ある実施形態において、ＳＡＸＳ及びＷＡＸＳは、結晶構造を決定するのに使用される。ＳＡＸＳは、典型的に、ＷＡＸＳより小さい角度で回折する（すなわち、試料と検出器との間の距離が、ＷＡＸＳよりＳＡＸＳについてより長い）。ＳＡＸＳ又はＷＡＸＳ実験設備を準備する方法は、当業者に公知である。図５は、形態Ａカプリン酸ナトリウムについての広角Ｘ線散乱（ＷＡＸＳ）スペクトルを示す。
【0060】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１～約０．１５Å－１の領域におけるＷＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１２～約０．２３Å－１の領域における２つ以上のＷＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１２Å－１におけるＷＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．２３Å－１におけるＷＡＸＳピークを含む。
【0061】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１～約０．１５Å－１の領域におけるＳＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１２～約０．２３Å－１の領域における２つ以上のＳＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．１２Å－１におけるＳＡＸＳピークを含む。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．２３Å－１におけるＳＡＸＳピークを含む。図６は、形態Ａカプリン酸ナトリウムについての小角Ｘ線散乱（ＳＡＸＳ）スペクトルを示す。
【0062】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウム形態は、Ｘ線粉末回折（ＸＲＰＤ）によって同定される。ＸＲＰＤは、回折方法、すなわち、規則的な結晶格子における面内の原子からの散乱である。一般に、ＸＲＰＤは、結晶構造内に存在する結晶学的単位格子の固有のフィンガープリントを検出するのに使用され得、単位格子の各タイプが、ＸＲＰＤパターンにおける特定の位置でピークとして現れる。したがって、結晶質は、回折パターンにおいて現れるピークの同定によってそれらの単位格子によって区別され得る。ＸＲＰＤ実験設備を準備する方法は、当業者に公知である。
【0063】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、図７に実質的に示されるＸＲＰＤパターンを有する。例えば、ＸＲＰＤパターンに言及する際の「に実質的に示される」という用語は、本明細書に示されるものと必ずしも同一であるわけではないが、当業者によって考慮される際に実験誤差又は偏差の限度内に含まれるパターンを指す。ＸＲＰＤについての様々な値が、本明細書に記載される。本開示全体を通して使用される際（明記されない限り）、全てのＸＲＰＤピーク位置の値は、±０．５°２θであるものと解釈されるべきである。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約４°２θにおけるＸＲＰＤピークを含む。
【0064】
ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムの含水量は、カール・フィッシャー滴定によって決定される。カール・フィッシャー滴定は、電量又は定量滴定を用いて、試料中の微量の水を測定する。カール・フィッシャー滴定を行う方法は、当業者に公知である。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、２％未満、１．９％未満、１．８％未満、１．７％未満、１．６％未満、１．５％未満、又は１．４％未満の、カール・フィッシャー滴定による含水量によって特徴付けられ得る。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約０．４％～約２．０％の含水量を有する。ある実施形態において、形態Ａカプリン酸ナトリウムは、約１％、約１．１％、約１．２％、約１．３％、約１．４％、約１．５％、約１．６％、約１．７％、約１．８％、約１．９％、又は約２．０％の含水量を有する。
【0065】
本明細書に開示される医薬組成物は、約２００ｍｇ～約１５００ｍｇの範囲の量の１つ以上の浸透促進剤を含み得る。ある実施形態において、浸透促進剤は、約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、例えば、約５２５ｍｇ、約５５０ｍｇ、約５７５ｍｇ、約６００ｍｇ、約６２５ｍｇ、約６５０ｍｇ、約６７５ｍｇ、約７００、ｍｇ、約７２５ｍｇ、約７５０ｍｇ、約７７５ｍｇ、約８００ｍｇ、約８２５ｍｇ、約８５０ｍｇ、約８７５ｍｇ、約９００ｍｇ、約９２５ｍｇ、約９５０ｍｇ、約９７５ｍｇ、及び約１０００ｍｇの範囲の量で存在する。
【0066】
薬学的に許容される賦形剤
本開示の医薬組成物は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤をさらに含み得る。特定の実施形態において、薬学的に許容される賦形剤は、経口送達に好適な医薬組成物に加えられる任意の化合物又は化合物の混合物であり得る。薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野において周知であり、任意の選択は、目的の用途及び医薬組成物の投与方法に依存する。当業者は、固体経口剤形の特定の所望の特性に関して、薬学的に許容される賦形剤の１つ以上を選択し得る。薬学的に許容される賦形剤としては、例えば希釈剤／充填剤、粘着防止剤、乳化剤、滑沢剤、流動剤／滑剤、崩壊剤、圧縮助剤（ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｉｄ）、バインダー、可塑剤、可溶化剤、溶媒、及び本明細書に開示される医薬組成物中で既に必要とされる浸透促進剤以外の浸透促進剤が挙げられる。本明細書における使用に好適な薬学的に許容される賦形剤としては、限定はされないが、以下に列挙される例が挙げられる。各賦形剤は、いくつかの異なる商標及び品質並びにそれらの混合物で入手可能であり得る。
本開示の医薬組成物は、１つ以上の薬学的に許容される賦形剤をさらに含み得る。特定の実施形態において、薬学的に許容される賦形剤は、経口送達に好適な医薬組成物に加えられる任意の化合物又は化合物の混合物であり得る。薬学的に許容される賦形剤は、当該技術分野において周知であり、任意の選択は、目的の用途及び医薬組成物の投与方法に依存する。当業者は、固体経口剤形の特定の所望の特性に関して、薬学的に許容される賦形剤の１つ以上を選択し得る。薬学的に許容される賦形剤としては、例えば希釈剤／充填剤、粘着防止剤、乳化剤、滑沢剤、流動剤／滑剤、崩壊剤、圧縮助剤（ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｉｄ）、バインダー、可塑剤、可溶化剤、溶媒、及び本明細書に開示される医薬組成物中で既に必要とされる浸透促進剤以外の浸透促進剤が挙げられる。本明細書における使用に好適な薬学的に許容される賦形剤としては、限定はされないが、以下に列挙される例が挙げられる。各賦形剤は、いくつかの異なる商標及び品質並びにそれらの混合物で入手可能であり得る。
【0067】
薬学的に許容される賦形剤の非限定的な例としては、微結晶性セルロース、リン酸二カルシウム、ラクトース、マンニトール、フマル酸ステアリルナトリウム（ＰＲＵＶ）、ステアリン酸マグネシウム、シリカコロイド水和物、クロスポビドン、クロスカルメロースナトリウム、炭酸水素ナトリウム、低置換度ヒドロキシプロピルセルロース（Ｌ－ＨＰＣ）、デンプングリコール酸ナトリウム、水、エタノール、イソプロピルアルコール又は他の溶媒、ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、ヒドロキシプロピルセルロース（ＨＰＣ）、ヒドロキシプロピルメチルセルロース（ＨＰＭＣ）、（トロメタミン）（ＴＲＩＳ）、カーボネート、ボレート、ホスフェート、酒石酸の任意の塩、水酸化マグネシウム、酸化マグネシウム、炭酸水素ナトリウム、没食子酸プロピル、α－トコフェロール、ブチル化ヒドロキシアニソール（ＢＨＡ）、アスコルビン酸、ソルトール（ｓｏｌｕｔｏｌ）、ポリソルベート８０、及びエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）が挙げられる。
【0068】
本明細書に開示される医薬組成物中の賦形剤の量は、当該技術分野における従来の範囲内で変化し得る。薬学的に許容される賦形剤は、約０．１ｍｇ～約６００ｍｇの範囲の量で本明細書に開示される医薬組成物中に存在し得る。特定の実施形態において、賦形剤の量は、固体剤形の重量基準のパーセントとして表され得る。例えば、ある実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物は、固体剤形の約０．００１重量％～約５０重量％の範囲の賦形剤を含み得る。
【0069】
コーティング
本明細書において提供される際、医薬組成物は、即放性、放出調節型又は遅延放出性製剤であり得る。本開示の例示的な放出調節型又は遅延放出性製剤は、１つ以上の胃耐性コーティング、例えば、水性／有機溶媒ベースのコーティングポリマー、例えば、ヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル（ＨＰＭＣＡＳ）、又はメタクリル酸コポリマー（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標））、特に、商標ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｓ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＬ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳコーティング材料で販売されるもの及びそれらの混合物を含み得る、外側胃耐性又は半透過性コーティングを含み得る。胃耐性コートは、例えば、医薬組成物が胃の厳しい低ｐＨ環境中で無傷なままであり、錠剤が腸の望ましい部分に達したときに溶解するのを可能にし得る。
本明細書において提供される際、医薬組成物は、即放性、放出調節型又は遅延放出性製剤であり得る。本開示の例示的な放出調節型又は遅延放出性製剤は、１つ以上の胃耐性コーティング、例えば、水性／有機溶媒ベースのコーティングポリマー、例えば、ヒプロメロース酢酸エステルコハク酸エステル（ＨＰＭＣＡＳ）、又はメタクリル酸コポリマー（例えば、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標））、特に、商標ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｌ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）Ｓ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＬ、ＥＵＤＲＡＧＩＴ（登録商標）ＲＳコーティング材料で販売されるもの及びそれらの混合物を含み得る、外側胃耐性又は半透過性コーティングを含み得る。胃耐性コートは、例えば、医薬組成物が胃の厳しい低ｐＨ環境中で無傷なままであり、錠剤が腸の望ましい部分に達したときに溶解するのを可能にし得る。
【0070】
さらに、例えばＨＰＭＣ又はタルクからなる１つ以上の保護コーティングは、錠剤コアと胃耐性コートとの間に適用され得る。本明細書において使用される際、「錠剤コア」は、いずれの外部コーティングも有さない本開示に係る医薬組成物を意味することが理解される。
【0071】
胃耐性コーティングは、約０ｍｇ～約２００ｍｇ、例えば約１ｍｇ～約１５０ｍｇ、例えば、約２０ｍｇ～約１００ｍｇ、例えば、約５ｍｇ～約８０ｍｇの範囲の量で本明細書に開示される医薬組成物中に存在し得る。特定の実施形態において、胃耐性コーティングは、固体剤形の重量基準のパーセント、例えば固体剤形の重量基準で約０．０％～約１０％、例えば、固体剤形の重量基準で約０．０１％～約１０％、例えば、固体剤形の重量基準で約０．０３％～約１０％、例えば、固体剤形の重量基準で約０．１％～約８％として表される。特定の実施形態において、胃耐性コーティングは、固体剤形の重量基準で約０．３％～約０．７％、例えば、約０．６％、ある実施形態において、約０．６４％である。他の実施形態において、胃耐性コーティングは、固体剤形の重量基準で約５．０％、又は約６．０％、又は約７．０％、ある実施形態において、約０．６４％である。保護コーティングを含む医薬組成物は、約０ｍｇ～約２００ｍｇの保護コーティングを含み得る。
【0072】
組成物の例
本開示の１つ以上の実施形態において、医薬組成物は、以下の表２及び表３に示される例を含むが、これらに限定されない。
本開示の１つ以上の実施形態において、医薬組成物は、以下の表２及び表３に示される例を含むが、これらに限定されない。
【0073】
【表2】
【0074】
【表3】
【0075】
１つ以上のＡＳＯを経口投与することによる治療方法
１つ以上のＡＳＯを経口投与する方法が、本明細書において提供される。少なくとも１つの実施形態において、対象を治療する方法であって、固体剤形における１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を、それを必要としている対象に経口投与することを含む方法が本明細書に開示される。
１つ以上のＡＳＯを経口投与する方法が、本明細書において提供される。少なくとも１つの実施形態において、対象を治療する方法であって、固体剤形における１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を、それを必要としている対象に経口投与することを含む方法が本明細書に開示される。
【0076】
特定の実施形態において、対象における様々な疾患過程に関与するタンパク質への核酸転写産物の翻訳を低減するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、医薬組成物は、を含む。
【0077】
特定の実施形態において、対象におけるＰＣＳＫ９に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0078】
本明細書において提供される方法を用いて治療可能、予防可能、及び／又は改善可能な、ＰＣＳＫ９に関連する疾患の例としては、心血管疾患、脂質異常症、混合型脂質異常症、高コレステロール血症、ＬＤＬコレステロールの低下、及びアテローム性アポリポタンパク質（ａ）［Ｌｐ（ａ）］の低下が挙げられる。
【0079】
特定の実施形態において、対象におけるＬＤＬ－コレステロールレベルを低下させるための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0080】
本開示に従って、対象におけるＬＤＬ－コレステロールレベルを低下させる治療に使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0081】
特定の実施形態において、対象におけるＬｐ（ａ）レベルを低下させるための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0082】
本開示に従って、対象におけるＬｐ（ａ）レベルを低下させるのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0083】
特定の実施形態において、対象におけるＬＤＬ受容体（ＬＤＬ－Ｒ）活性を誘導するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0084】
対象におけるＬＤＬ受容体（ＬＤＬ－Ｒ）活性を誘導するのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示され、本開示に係る医薬組成物を対象に経口投与することを含む。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0085】
特定の実施形態において、対象におけるＬＤＬ受容体－ＬＤＬ－コレステロール恒常性を調節するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0086】
対象におけるＬＤＬ受容体－ＬＤＬ－コレステロール恒常性を調節するのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示され、本開示に係る医薬組成物を対象に経口投与することを含む。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＣＳＫ９核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号１を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－８６３６３３のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0087】
特定の実施形態において、対象におけるＰＮＰＬＡ３に関連する疾患を治療、予防、又は改善するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0088】
本明細書において提供される方法を用いて、治療可能、予防可能、及び／又は改善可能な、ＰＮＰＬＡ３に関連する疾患の例としては、肝疾患、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、肝硬変、肝細胞癌、アルコール性肝疾患、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ＨＣＶ肝炎、慢性肝炎、遺伝性ヘモクロマトーシス、及び／又は原発性硬化性胆管炎が挙げられる。
【0089】
特定の実施形態において、本明細書において提供される方法を用いて、治療可能、予防可能、及び／又は改善可能な、ＰＮＰＬＡ３に関連する疾患としては、ＮＡＦＬＤ、脂肪症、ＮＡＳＨ、及び肝硬変が挙げられる。
【0090】
特定の実施形態において、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0091】
本開示に従って、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害する治療に使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0092】
特定の実施形態において、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0093】
本開示に従って、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害するのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0094】
特定の実施形態において、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0095】
対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を軽減及び／又は阻害するのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示され、本開示に係る医薬組成物を対象に経口投与することを含む。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0096】
特定の実施形態において、対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を制御するための方法であって、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物を対象に経口投与することを含む方法が開示される。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0097】
対象における肝臓障害、脂肪症、肝線維症、肝臓炎症、肝臓の瘢痕又は肝硬変、肝不全、肝肥大、トランスアミナーゼ上昇、又は肝脂肪蓄積を制御するのに使用するための、１つ以上のＡＳＯ、又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を含む医薬組成物も開示され、本開示に係る医薬組成物を対象に経口投与することを含む。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩は、ＰＮＰＬＡ３核酸を標的とし、核酸塩基配列の配列番号２を含む。別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、カプリン酸ナトリウムである。さらに別の実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６である。少なくとも１つの実施形態において、１つ以上のＡＳＯは、ＩＯＮ－９７５６１６のナトリウム塩である。さらに別の実施形態において、１つ以上の浸透促進剤は、形態Ａカプリン酸ナトリウムである。
【0098】
本明細書に記載される様々な方法に従って、１つ以上のＡＳＯ又はその薬学的に許容される塩及び１つ以上の浸透促進剤を経口投与され得る対象としては、哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、ネコ、霊長類などが挙げられる。少なくとも１つの実施形態において、対象は、ヒトである。
【0099】
特定の実施形態において、本明細書に開示される医薬組成物は、１日１回、経口投与され得る。特定の実施形態において、医薬製剤は、１日２回、経口投与される。
【実施例】
【0100】
本明細書に記載される特定の医薬組成物及び方法は、特定の実施形態に従って特異的に記載されているが、以下の実施例は、本明細書に記載される医薬組成物を例示する役割を果たすに過ぎず、それを限定することは意図されていない。本出願に列挙される参考文献のそれぞれは、全体が参照により本明細書に援用される。典型的又は例示されるプロセス条件（すなわち、反応温度、時間、溶媒、圧力など）が示される場合、特に記載されない限り、他のプロセス条件も使用され得ることが理解されるであろう。最適な反応条件は、使用される特定の反応剤又は溶媒により変化し得るが、このような条件は、当業者によって決定され得る。
【0101】
実施例１：形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤の調製
形態Ａカプリン酸ナトリウムの調製
デカン酸を、メタノールに溶解させた後、固体炭酸水素ナトリウム（ＩＰＣ ｐＨコントロール）を添加した。懸濁液を加熱還流させた。次に、得られた溶液を、周囲温度に冷まして、結晶化させた。固体を、遠心分離によって収集し、乾燥させ、最後に粉砕した。
形態Ａカプリン酸ナトリウムの調製
デカン酸を、メタノールに溶解させた後、固体炭酸水素ナトリウム（ＩＰＣ ｐＨコントロール）を添加した。懸濁液を加熱還流させた。次に、得られた溶液を、周囲温度に冷まして、結晶化させた。固体を、遠心分離によって収集し、乾燥させ、最後に粉砕した。
【0102】
形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤の調製
所要量のカプリン酸ナトリウム形態Ａ及びマンニトールを、６０Ｌの高せん断ミキサー中に量り入れた。２つの成分を、１６０ｒｐｍのインペラ速度で、高せん断ミキサー中で１分間にわたって乾式混合した。高せん断ミキサー中での連続混合中、エタノールを、適切な造粒度に達するまで加えた。造粒の後、湿潤した顆粒剤を、流動層乾燥機中に移し、顆粒剤の所定の乾燥減量に達するまで（＜１．８％）、７０℃の入口温度で乾燥させた。乾燥された顆粒剤を、１ｍｍのふるいサイズを有するコーンミルに通して粉砕した。次に、粉砕された顆粒剤を、３０ｒｐｍの回転速度で１１分間にわたって、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）、シリカコロイド水和物（０．５ｍｍのふるいサイズに通して）及びフマル酸ステアリルナトリウム（０．５ｍｍのふるいサイズに通して）と、１６０Ｌの拡散ミキサー中で混合した。最終的な混合された顆粒剤を、８ステーション回転錠剤プレスを用いて、非コートコア錠剤へと圧密化した。次に、非コート錠剤を、５０℃～６５℃の入口温度で、パンコーター（ドラムサイズ５ｋｇ）中で、胃耐性コーティング（ふるいサイズ０．２５ｍｍに通してふるいにかけられた）で被覆した。プロセスのフローチャートが、図１に概略的に示される。形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤の溶解プロファイルが、図２に示される。グラフは、最大吸収促進を可能にするｐＨ６．８（小腸条件を模倣する）で同時に錠剤からのＡＳＯ（ＡＺＤ６６１５は、この実施例においてＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）である）及び形態Ａカプリン酸ナトリウムの同時の放出（溶解）があることを示す。
所要量のカプリン酸ナトリウム形態Ａ及びマンニトールを、６０Ｌの高せん断ミキサー中に量り入れた。２つの成分を、１６０ｒｐｍのインペラ速度で、高せん断ミキサー中で１分間にわたって乾式混合した。高せん断ミキサー中での連続混合中、エタノールを、適切な造粒度に達するまで加えた。造粒の後、湿潤した顆粒剤を、流動層乾燥機中に移し、顆粒剤の所定の乾燥減量に達するまで（＜１．８％）、７０℃の入口温度で乾燥させた。乾燥された顆粒剤を、１ｍｍのふるいサイズを有するコーンミルに通して粉砕した。次に、粉砕された顆粒剤を、３０ｒｐｍの回転速度で１１分間にわたって、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）、シリカコロイド水和物（０．５ｍｍのふるいサイズに通して）及びフマル酸ステアリルナトリウム（０．５ｍｍのふるいサイズに通して）と、１６０Ｌの拡散ミキサー中で混合した。最終的な混合された顆粒剤を、８ステーション回転錠剤プレスを用いて、非コートコア錠剤へと圧密化した。次に、非コート錠剤を、５０℃～６５℃の入口温度で、パンコーター（ドラムサイズ５ｋｇ）中で、胃耐性コーティング（ふるいサイズ０．２５ｍｍに通してふるいにかけられた）で被覆した。プロセスのフローチャートが、図１に概略的に示される。形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）を含む錠剤の溶解プロファイルが、図２に示される。グラフは、最大吸収促進を可能にするｐＨ６．８（小腸条件を模倣する）で同時に錠剤からのＡＳＯ（ＡＺＤ６６１５は、この実施例においてＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）である）及び形態Ａカプリン酸ナトリウムの同時の放出（溶解）があることを示す。
【0103】
実施例２：イヌへの経口投与におけるＧａｌＮＡｃ ＡＳＯの血漿対肝臓曝露
血漿及び肝臓曝露を、ビーグル犬において７又は２８日間にわたって３又は２０ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）のいずれかと共に製剤化された７００ｍｇのカプリン酸ナトリウムを含有する錠剤の毎日の経口投与時に測定した。１ｍｇ／ｋｇの１日１回のＳＣ投与を対照として使用した。血漿バイオアベイラビリティが、２４時間にわたる血漿濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）に基づく一方、組織バイオアベイラビリティは、最後の投与の２４時間後に採取された試料に基づく。血漿対肝臓曝露についての以下の表４を参照されたい。
血漿及び肝臓曝露を、ビーグル犬において７又は２８日間にわたって３又は２０ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）のいずれかと共に製剤化された７００ｍｇのカプリン酸ナトリウムを含有する錠剤の毎日の経口投与時に測定した。１ｍｇ／ｋｇの１日１回のＳＣ投与を対照として使用した。血漿バイオアベイラビリティが、２４時間にわたる血漿濃度－時間曲線下面積（ＡＵＣ）に基づく一方、組織バイオアベイラビリティは、最後の投与の２４時間後に採取された試料に基づく。血漿対肝臓曝露についての以下の表４を参照されたい。
【0104】
【表4】
【0105】
結果：血漿／肝臓比が、経口投与後のより高い相対肝臓曝露の方へ、皮下投与と経口投与との間で推移される。データは、経口送達による門脈へのＡＳＯの直接送達が、初回通過抽出からさらなる利益を得ること、すなわち、化合物が、血漿と比べて標的組織／肝臓により効率的に分配されることを裏付ける（上記の表４に見られるように）。肝臓による選択的取り込みは、図３に示されるように、血漿バイオアベイラビリティと同じ範囲で、１～２％の限られた腎臓バイオアベイラビリティによってさらに裏付けられる。
【0106】
実験：ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ－８６３６３３）を、７又は２８日間にわたって経口錠剤として又はＳＣ溶液として、１９匹の雄ビーグル犬に毎日投与した。経口用量は、３（ｎ＝５）又は２０（ｎ＝１０）ｍｇ／日であり、ここで、高用量動物の半分は、７日間の投与後に中止された。ＳＣ用量は、１ｍｇ／日（ｎ＝４）であり、これらの動物の半分はまた、７日間の投与後に中止された。錠剤投与の３０分以下前に、０．１ＭのＨＣｌ／ＫＣｌの溶液を、３０ｍＬの体積でプラスチックシリンジに取り付けられた使い捨てカテーテルを用いて、強制経口投与によって投与した。投与時に、錠剤を、（指を用いて）できるだけ喉の奥に入れた後、錠剤の飲み込みを促すために、シリンジを用いて口に投与される水道水で流した（１０ｍＬ）。ＳＣ用量を、肩甲骨及び背中中央部位に注射した。投与の２４時間後までに頸静脈から血液試料を採取することによって、血漿曝露を、１、７及び２８日目に評価した。ＳＣ投与用の溶液は、ＰＢＳ ｐＨ７．４（１０ｍＭのホスフェート＋１５０ｍＭのＮａＣｌ）中のＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）１ｍｇ／ｍＬを含有していた。
【0107】
実施例３：初回通過抽出からの有益な効果を裏付けるラットデータ
ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）は、げっ歯類において活性でないため、本発明者らはまた、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）と同じ化学的性質のものであるラット特異的ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＭａｌａｔ－１ ＡＳＯ（Ｍａｌａｔ－１を標的とする１６量体ｃＥｔ ＧａｌＮＡｃ３－コンジュゲート；ＩＯＮ－７０４３６１）を使用して、ＡＳＯ及び浸透促進剤を含有する溶液の空腸内（ＩＪ）投与後のｍＲＮＡノックダウンの形態で標的エンゲージメントを確認した。以下の表５を参照されたい。
ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）は、げっ歯類において活性でないため、本発明者らはまた、ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）と同じ化学的性質のものであるラット特異的ＧａｌＮＡｃコンジュゲートＭａｌａｔ－１ ＡＳＯ（Ｍａｌａｔ－１を標的とする１６量体ｃＥｔ ＧａｌＮＡｃ３－コンジュゲート；ＩＯＮ－７０４３６１）を使用して、ＡＳＯ及び浸透促進剤を含有する溶液の空腸内（ＩＪ）投与後のｍＲＮＡノックダウンの形態で標的エンゲージメントを確認した。以下の表５を参照されたい。
【0108】
【表5】
【0109】
結果：データは、標的組織細胞生産的取り込みが、総肝臓組織曝露に基づいた肝臓バイオアベイラビリティからの判断と比較して、溶液のＩＪ投与後にさらに一層顕著であることを示す。これは、経口投与及び初回通過抽出が、ＧａｌＮＡｃ ＡＳＯについての肝臓への取り込みに有益であるという仮説を裏付ける。
【0110】
実験：本発明者らは、ラットＭａｌａｔ－１（ＩＯＮ－７０４３６１）又はヒトＰＣＳＫ９を標的とする同様の化学（１６量体ｃＥｔ ＧａｌＮＡｃ３コンジュゲートされた）と共にＡＳＯを使用した。ラット特異的ＡＳＯは、肝臓曝露及び標的エンゲージメント測定の両方を可能にした一方、肝臓曝露のみが、ヒト特異的ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）について観察された。外科的に埋め込まれたＩＪカテーテルを有する、６～８週齢及び体重２００～２５０ｇの雄スプラーグドーリーラットを、単回ＩＪ又はＳＣ用量（群当たりｎ＝４）を用いて、ＩＯＮ－７０４３６１又はＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）に曝露させた。全ての動物を、４８時間の時点で殺処分した。３００ｍｇ／ｋｇの用量のカプリン酸ナトリウムを、ＩＪ投与用の浸透促進剤として使用した。ＡＳＯ及びカプリン酸ナトリウムを、溶液として投与した。血漿及び肝臓組織試料を、４８時間の時点で収集した。ハイブリダイゼーションＥＬＩＳＡを、血漿について行い、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析を、組織について行った。それぞれ、ＩＯＮ－８６３６３３及びＩＯＮ－７０４３６１血漿ＬＬＯＱ：０．１５ｎＭ。非コンジュゲートＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８４８８３３）及びＩＯＮ－７０４３６１組織ＬＬＯＱ：０．０５４及び０．０２６９μｇ／ｇ。免疫組織化学、ヘマトキシリン及びエオシン染色、及びインサイチュハイブリダイゼーションを、全ての組織について行った。肝臓におけるＭａｌａｔ－１ ｍＲＮＡ発現及びノックダウンを、リアルタイムＰＣＲによって評価し、ＳＣ対照群と比べた相対レベルを報告した。
【0111】
生成されたデータを、以下の方法で分析した：ＩＪ対ＳＣのバイオアベイラビリティは、各投与経路について別々にデータの線形回帰に基づいており、肝臓曝露又は標的エンゲージメントの治療的に関連するレベルで計算された。図４Ａ、Ｂ及びＤにおいて、線形回帰が、点線によって示され、バイオアベイラビリティ計算についてのレベルが、実線によって示される。図４Ｃにおいて、エラーバーは、標準偏差を示し、水平バーは、テューキーの有意差検定（Ｔｕｋｅｙ’ｓ ｈｏｎｅｓｔｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｔｅｓｔ）について治療間の有意差（＊＊＊ｐ ≦ ０．００５）を示す。ＳＣと比較したＩＪの生産的バイオアベイラビリティは、２９％（１０％、１００％；５番目及び９５番目パーセンタイル）であった。図４Ｃにおいて、ｘ軸は、用量レベル０の対照群を含むことができるように破断されている。図４Ｄは、用量に対してプロットされた図４Ｃからの個々のデータを示す。パラメータ推定値の不確実性を、各実験内で置き換えにより単一の測定値をランダムにサンプリングするブートストラッピングによって決定した。
【0112】
実施例４：予測ヒト試験
固体剤形としてのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の臨床試験を、固体剤形の安全な及び許容される用量を確立するために患者において計画した。血漿曝露及びＰＣＳＫ９レベル（肝臓曝露と相関する）は、単回投与後並びにヒト対象における２８日間にわたる１日１回の反復投与後、５、１０、２０又は４０ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ－８６３６３３）のいずれかと共に製剤化された７００ｍｇのカプリン酸ナトリウムをそれぞれ含有する１～３個の錠剤の毎日の経口投与時に測定される。ＰＣＳＫ９ ＡＳＯの組織半減期は、約２週間である。したがって、単回投与は、ＰＣＳＫ９血漿中濃度を有意に低下させることは予想されないが、２８日間の投与は、肝臓中の薬物の蓄積並びに顕著なＰＣＫＳ９及びＬＤＬ低下をもたらすであろう。
固体剤形としてのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の臨床試験を、固体剤形の安全な及び許容される用量を確立するために患者において計画した。血漿曝露及びＰＣＳＫ９レベル（肝臓曝露と相関する）は、単回投与後並びにヒト対象における２８日間にわたる１日１回の反復投与後、５、１０、２０又は４０ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ－８６３６３３）のいずれかと共に製剤化された７００ｍｇのカプリン酸ナトリウムをそれぞれ含有する１～３個の錠剤の毎日の経口投与時に測定される。ＰＣＳＫ９ ＡＳＯの組織半減期は、約２週間である。したがって、単回投与は、ＰＣＳＫ９血漿中濃度を有意に低下させることは予想されないが、２８日間の投与は、肝臓中の薬物の蓄積並びに顕著なＰＣＫＳ９及びＬＤＬ低下をもたらすであろう。
【0113】
実施例５：形態Ａカプリン酸ナトリウム及びＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯ（ＩＯＮ ９７５６１６）を含む錠剤の調製
形態Ａカプリン酸ナトリウムの調製
メタノール（２３４Ｌ）及び水（１２．３Ｌ）を、予め融解されたデカン酸（２４．６ｋｇ、１４３ｍｏｌ）及び炭酸水素ナトリウム（１１．０ｋｇ、１３１ｍｏｌ）に加えた。反応混合物を、６５±５℃で加熱し、少なくとも１６時間撹拌した。反応が完了したとき（デカン酸≦３ｍｇ／ｍＬ）、反応溶液を、仕上げフィルタ（ｐｏｌｉｓｈ ｆｉｌｔｅｒ）に通してろ過した。温度を、５０±５℃に調整し、混合物を、（５℃／ｈで）２７±３℃に冷却し、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ、４９２リットル）を加えた。温度を、２５±５℃に調整し、少なくとも１２時間撹拌した。固体を、遠心分離によって収集し、ＴＭＢＥ（１２３リットル）で洗浄した。固体を、少なくとも１２時間にわたって５０±５℃で、減圧下で乾燥させて（乾燥減量、ＬｏＤ≦２．０％）、２０．９９ｋｇの目的生成物、収率８１．３％、ＬｏＤ ０．６％を得た。
形態Ａカプリン酸ナトリウムの調製
メタノール（２３４Ｌ）及び水（１２．３Ｌ）を、予め融解されたデカン酸（２４．６ｋｇ、１４３ｍｏｌ）及び炭酸水素ナトリウム（１１．０ｋｇ、１３１ｍｏｌ）に加えた。反応混合物を、６５±５℃で加熱し、少なくとも１６時間撹拌した。反応が完了したとき（デカン酸≦３ｍｇ／ｍＬ）、反応溶液を、仕上げフィルタ（ｐｏｌｉｓｈ ｆｉｌｔｅｒ）に通してろ過した。温度を、５０±５℃に調整し、混合物を、（５℃／ｈで）２７±３℃に冷却し、ｔｅｒｔ－ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ、４９２リットル）を加えた。温度を、２５±５℃に調整し、少なくとも１２時間撹拌した。固体を、遠心分離によって収集し、ＴＭＢＥ（１２３リットル）で洗浄した。固体を、少なくとも１２時間にわたって５０±５℃で、減圧下で乾燥させて（乾燥減量、ＬｏＤ≦２．０％）、２０．９９ｋｇの目的生成物、収率８１．３％、ＬｏＤ ０．６％を得た。
【0114】
実施例５Ａ（製剤１）：形態Ａカプリン酸ナトリウム、微結晶性セルロース、及びＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯ（ＩＯＮ ９７５６１６）を含む錠剤
１２００ｇのカプリン酸ナトリウム形態Ａを、集中的な混合機器に加え、インペラ速度２５０ｒｐｍ及びチョッパー速度１５００ｒｐｍで１分間乾式混合してから、６００ｇの無水エタノール（３０ｍＬ／分）を加えた。完全な添加の後、得られた材料を、さらに１分間混合した。材料を、＜ＬｏＤ１．５％になるまで、周囲温度で、ヒュームカップボード中で一晩乾燥させた。乾燥された材料を、２０００ｒｐｍで、０．０６１インチのグレータースクリード（ｇｒａｔｅｒ ｓｃｒｅｅｄ）及び角度付きインペラを備えたクワドロコーミル（Ｑｕａｄｒｏ ｃｏｍｉｌ）を用いて粉砕した。
１２００ｇのカプリン酸ナトリウム形態Ａを、集中的な混合機器に加え、インペラ速度２５０ｒｐｍ及びチョッパー速度１５００ｒｐｍで１分間乾式混合してから、６００ｇの無水エタノール（３０ｍＬ／分）を加えた。完全な添加の後、得られた材料を、さらに１分間混合した。材料を、＜ＬｏＤ１．５％になるまで、周囲温度で、ヒュームカップボード中で一晩乾燥させた。乾燥された材料を、２０００ｒｐｍで、０．０６１インチのグレータースクリード（ｇｒａｔｅｒ ｓｃｒｅｅｄ）及び角度付きインペラを備えたクワドロコーミル（Ｑｕａｄｒｏ ｃｏｍｉｌ）を用いて粉砕した。
【0115】
カプリン酸ナトリウム形態Ａ（４５．７ｇ）、微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ－１０２、２．５ｇ）及びＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯ（ＩＯＮ ９７５６１６）（１．８ｇ＠７７．９％）（２５０ｕｍのふるいに通過させた）を、１分間にわたって１Ｌの金属容器中で、スプーンによる手作業で予め混合した。さらなる混合を、１０分間にわたって撹拌ミキサー中で行った。材料を、１．４ＭＰａの引張り強さで錠剤プレス（７６６ｍｇ、８．５ｍｍ×１７ｍｍ）において「そのまま」圧密化した。
【0116】
実施例５Ｂ（製剤２）：形態Ａカプリン酸ナトリウム、マンニトール、微結晶性セルロース、フマル酸ステアリルナトリウム及びＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯ（ＩＯＮ ９７５６１６）を含む錠剤
カプリン酸ナトリウム形態Ａ（７７００ｇ）及びマンニトール（（Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ １００ＳＤ、３３００ｇ）を、６０Ｌの高せん断ミキサー中に量り入れた。２つの成分を、１４０ｒｐｍのインペラ速度で３分間にわたって乾式混合した。連続混合中、エタノール（４０５０ｇ）を、適切な造粒度に達するまで加えた。造粒の後、湿潤した顆粒剤を、流動層乾燥機中に移し、顆粒剤の所定の乾燥減量に達するまで（＜１．８％）、７０℃の入口温度で乾燥させた。乾燥された顆粒剤を、１．２７ｍｍのふるいサイズを有するコーンミルに通して粉砕した。粉砕後のＬｏＤは、０．５％－ｗ／ｗであった。
カプリン酸ナトリウム形態Ａ（７７００ｇ）及びマンニトール（（Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ １００ＳＤ、３３００ｇ）を、６０Ｌの高せん断ミキサー中に量り入れた。２つの成分を、１４０ｒｐｍのインペラ速度で３分間にわたって乾式混合した。連続混合中、エタノール（４０５０ｇ）を、適切な造粒度に達するまで加えた。造粒の後、湿潤した顆粒剤を、流動層乾燥機中に移し、顆粒剤の所定の乾燥減量に達するまで（＜１．８％）、７０℃の入口温度で乾燥させた。乾燥された顆粒剤を、１．２７ｍｍのふるいサイズを有するコーンミルに通して粉砕した。粉砕後のＬｏＤは、０．５％－ｗ／ｗであった。
【0117】
２５０ｕｍのふるいに通過させた、上記からの乾燥された顆粒剤（４７．８ｇ）、微結晶性セルロース（Ａｖｉｃｅｌ ＰＨ－１０２、２．５ｇ）、二酸化ケイ素（Ｓｙｌｏｉｄ ２４４ＦＰ、０．５ｇ）及びＰＮＰＬＡ３ ＡＳＯ（ＩＯＮ ９７５６１６）（１．２５ｇ＠７７．９％）を、スプーンによる手作業で１分間にわたって１Ｌの金属容器中で予め混合し、さらなる混合を、１０分間にわたって撹拌ミキサー中で行った。フマル酸ステアリルナトリウム（１．０ｇ）を、上記の約１０ｇの得られた混合物に加え、スプーンによる手作業で１分間にわたって予め混合し、上記の混合物の残りの量を加え、さらなる混合を、２分間にわたって、スプーンによる手作業で行った。材料を、２．０ＭＰａの引張り強さで錠剤プレス（１１１７ｍｇ、９．５ｍｍ×２０ｍｍ）中で「そのまま」圧密化した。
【0118】
実施例６：ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）の反復経口投与後のインビボサルデータ
毎日の経口投与後の健康なカニクイザルにおける高用量のＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）錠剤の忍容性を、１４日間の試験において調べた。ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）は、１日に２、３又は４個の錠剤の用量レベルで、カプリン酸ナトリウム（１４ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）＋５００ｍｇのカプリン酸ナトリウム）と共に腸溶コーティングされた錠剤中で製剤化された。図８は、血漿ＬＤＬ－コレステロールが、１４日目の時点で４５～５０％低下されたことを示す（平均投与前レベルは、５５±２．７ｍｇ／ｄＬ（平均±ＳＥＭ）であった）。低下は、用量レベルと無関係であり、これは、試験において使用される高用量を反映している。臨床観察、体重、摂餌量、血液学、凝固、臨床化学、臓器重量並びに総病理及び顕微鏡的病理における悪影響はなかった。嘔吐の稀な例が、全ての動物における投与が≧４２ｍｇ／日で投与された直後に観察された。嘔吐物中に存在する錠剤の証拠がなかったため、嘔吐の原因は、手続きに起因するものと考えられた。
毎日の経口投与後の健康なカニクイザルにおける高用量のＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）錠剤の忍容性を、１４日間の試験において調べた。ＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）は、１日に２、３又は４個の錠剤の用量レベルで、カプリン酸ナトリウム（１４ｍｇのＰＣＳＫ９ ＡＳＯ（ＩＯＮ ８６３６３３）＋５００ｍｇのカプリン酸ナトリウム）と共に腸溶コーティングされた錠剤中で製剤化された。図８は、血漿ＬＤＬ－コレステロールが、１４日目の時点で４５～５０％低下されたことを示す（平均投与前レベルは、５５±２．７ｍｇ／ｄＬ（平均±ＳＥＭ）であった）。低下は、用量レベルと無関係であり、これは、試験において使用される高用量を反映している。臨床観察、体重、摂餌量、血液学、凝固、臨床化学、臓器重量並びに総病理及び顕微鏡的病理における悪影響はなかった。嘔吐の稀な例が、全ての動物における投与が≧４２ｍｇ／日で投与された直後に観察された。嘔吐物中に存在する錠剤の証拠がなかったため、嘔吐の原因は、手続きに起因するものと考えられた。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【配列表】
【国際調査報告】