特表 2023-543643 抗スクレロスチン構築体及びその使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-10-17

(54)【発明の名称】抗スクレロスチン構築体及びその使用

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/13 20060101AFI20231010BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20231010BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20231010BHJP

   C07K 16/28 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 15/62 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20231010BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20231010BHJP

   C12P 21/08 20060101ALI20231010BHJP

   C12P 21/02 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 47/68 20170101ALI20231010BHJP

   A61K 38/29 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 38/18 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 38/19 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 38/23 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 31/663 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 45/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 19/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 7/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 21/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 19/10 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 19/08 20060101ALI20231010BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20231010BHJP

   A61K 31/557 20060101ALI20231010BHJP

【ＦＩ】

C12N15/13

C07K16/18 ZNA

C07K16/46

C07K16/28

C12N15/62 Z

C12N15/63 Z

C12N5/10

C12N1/21

C12N1/19

C12N1/15

C12P21/08

C12P21/02 A

A61K39/395 N

A61K47/68

A61K38/29

A61K38/18

A61K38/19

A61K38/23

A61K31/663

A61K45/00

A61P19/00

A61P7/00

A61P21/00

A61P35/00

A61P19/10

A61P19/02

A61P19/08

A61P43/00 121

A61P43/00 111

A61K31/557

A61K39/395 D

A61K39/395 C

A61K39/395 L

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023543255

(86)(22)【出願日】2021-09-26

(85)【翻訳文提出日】2023-03-28

(86)【国際出願番号】 CN2021120612

(87)【国際公開番号】W WO2022063262

(87)【国際公開日】2022-03-31

(31)【優先権主張番号】PCT/CN2020/118387

(32)【優先日】2020-09-28

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】523114947

【氏名又は名称】アンジティア バイオメディスンズ リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110001519

【氏名又は名称】弁理士法人太陽国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】リウ、シアオフォン

(72)【発明者】

【氏名】リウ、クンフォン

(72)【発明者】

【氏名】ユアン、パオチー

(72)【発明者】

【氏名】リー、ムーユイ

(72)【発明者】

【氏名】コー、ホアチュー

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C076

4C084

4C085

4C086

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG26

4B064AG27

4B064CA19

4B064CC24

4B064DA01

4B065AA90X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA25

4B065CA44

4B065CA45

4C076AA95

4C076EE41

4C076EE59

4C084AA02

4C084AA03

4C084AA17

4C084BA44

4C084DA01

4C084DB31

4C084DB32

4C084DB57

4C084MA02

4C084NA05

4C084NA06

4C084NA13

4C084ZA511

4C084ZA512

4C084ZA941

4C084ZA942

4C084ZA961

4C084ZA962

4C084ZA971

4C084ZA972

4C084ZB261

4C084ZB262

4C084ZC412

4C084ZC75

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA21

4C085BB11

4C085BB33

4C085BB34

4C085BB35

4C085BB36

4C085BB37

4C085BB41

4C085BB42

4C085BB43

4C085CC01

4C085DD62

4C085EE01

4C085EE03

4C086AA01

4C086DA01

4C086DA34

4C086MA01

4C086MA02

4C086NA05

4C086NA06

4C086NA13

4C086ZA51

4C086ZA94

4C086ZA96

4C086ZA97

4C086ZB26

4C086ZC41

4C086ZC75

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA09

4H045DA75

4H045DA76

4H045EA20

4H045EA31

4H045FA74

(57)【要約】

本願は、スクレロスチンに結合する抗スクレロスチン分子（例えば、抗スクレロスチン抗体、例えば、二重特異性抗スクレロスチン抗体）、抗スクレロスチンアミノ酸配列をコードする核酸分子、当該核酸分子を含むベクター、当該ベクターを含む宿主細胞、抗スクレロスチン構築体の調製方法、抗スクレロスチン構築体を含む薬物組成物、及び、抗スクレロスチン構築体又は組成物の使用方法を提供する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、スクレロスチンのエピトープに結合し、前記エピトープは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６に示されるアミノ酸配列を含む、抗スクレロスチン構築体。

【請求項2】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１～４及び１２のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５～８及び１３のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９～１１及び１４のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、並びに、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５－１７、８５及び８６のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８及び１９のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０及び２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、抗スクレロスチン構築体。

【請求項3】

ａ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項4】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項5】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項6】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項7】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項8】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項9】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項10】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項11】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項12】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項13】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
ａ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｂ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｃ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｄ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｅ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｆ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｇ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、及び、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３、
ｈ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｉ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｊ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｋ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｌ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、或いは、
ｍ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、抗スクレロスチン構築体。

【請求項14】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０及び８７のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、及び／又は、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１及び８８～９０のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む、請求項１～１３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項15】

ａ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｈ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｉ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｊ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｋ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｌ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、或いは、
ｍ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む、請求項１４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項16】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗スクレロスチン抗体のヒト化抗体部分に由来し、
ａ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲ中の５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２００のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、或いは、
ｈ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は、１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、抗スクレロスチン構築体。

【請求項17】

前記抗体部分は、全長抗体、二重特異性抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（ｄｓｓｃＦｖ）、（ｄｓＦｖ）_２、Ｆｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリボディ（ｔｒｉｂｏｄｙ）及びテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）から選ばれる抗体又はその抗原結合断片である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項18】

前記構築体は、Ｆｃ断片を含む全長抗体である、請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項19】

前記抗体部分は、ｓｃＦｖ断片である、請求項１７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項20】

前記スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである、請求項１～１９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項21】

前記抗スクレロスチン構築体は、さらに第２の部分を含む、請求項１～１７及び１９～２０のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項22】

前記第２の部分は、抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、請求項２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項23】

前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む、請求項２２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項24】

前記抗原は、ＤＫＫ１である、請求項２２又は２３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項25】

前記ＤＫＫ１は、ヒトＤＫＫ１である、請求項２４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項26】

第２の抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－３）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－３）を含む第３の抗体部分と競合し、
ａ）前記Ｖ_Ｈ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｃ）前記Ｖ_Ｈ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項２４又は２５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項27】

前記Ｖ_Ｈ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項28】

前記Ｖ_Ｈ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項29】

前記Ｖ_Ｈ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項30】

前記抗原は、ＲＡＮＫＬである、請求項２２又は２３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項31】

前記抗原は、ヒトＲＡＮＫＬである、請求項３０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項32】

前記第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬの結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－３）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－３）を含む第３の抗体部分と競合し、
前記Ｖ_Ｈ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－３は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項３０又は３１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項33】

前記Ｖ_Ｈ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項３１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項34】

前記第２の抗体部分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）_２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、ミニチュア抗体、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）又はｓｄＡｂである、請求項２２～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項35】

前記第２の抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体であり、前記抗スクレロスチン抗体部分は、Ｖ_Ｌに融合されたＶ_Ｈを含む単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片である、請求項３４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項36】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖に融合する、請求項３５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項37】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の軽鎖に融合する、請求項３４～３６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項38】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する、請求項３６又は３７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項39】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する、請求項３６～３８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項40】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合する、請求項３６～３９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項41】

前記抗スクレロスチンの抗体部分は、リンカーを介せず前記全長抗体に融合する、請求項３６～３９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項42】

前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳリンカーである、請求項４０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項43】

前記Ｖ_Ｈは、第２のリンカーを介して前記Ｖ_Ｌに融合する、請求項３５～４２のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項44】

前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｈ、第２のリンカー及びＶ_Ｌを含む、請求項４３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項45】

前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｌ、第２のリンカー、Ｖ_Ｈ、及び、任意にＣ末端アラニン残基を含む、請求項４３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項46】

前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、請求項４３～４５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項47】

前記第２抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖ断片であり、そのうち、前記抗スクレロスチンの抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体である、請求項２３～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項48】

前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖に融合する、請求項４６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項49】

前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の軽鎖に融合する、請求項４７又は４８に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項50】

前記抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する、請求項４８又は４９に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項51】

前記抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する、 請求項４７～５０のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項52】

前記抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合する、請求項４７～５１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項53】

前記抗体部分は、リンカーを介せず前記全長抗体に融合する、請求項４７～５１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項54】

前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳ第１のリンカーである、請求項５２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項55】

前記Ｖ_Ｈ－２は、第２のリンカーを介して前記Ｖ_Ｌ－２に融合する、請求項４７～５４のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項56】

前記Ｖ_Ｈ－２は、リンカーを介せず前記Ｖ_Ｌ－２に融合する、請求項４７～５４のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項57】

前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｈ－２、第２のリンカー及びＶ_Ｌ－２を含む、請求項５５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項58】

前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｌ－２、第２のリンカー、Ｖ_Ｈ－２、及び、任意にＣ末端アラニン残基を含む、請求項５５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項59】

前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、請求項５５及び請求項５７～５８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項60】

前記ｓｃＦｖは、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（「ｄｓｓｃＦｖ」）である、請求項３５～５９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項61】

前記ｄｓｓｃＦｖは、
ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０の番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、
ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１の番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を含む、請求項６０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項62】

前記構築体は、
１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
９）、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１１）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１２）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含む軽鎖、
１３）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含２つのむ軽鎖、
１４）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１５）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１６）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１９）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２０）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２８）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２９）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、或いは、
３５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
を含む、請求項３５～６１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項63】

前記構築体は、
ａ）第１の軽鎖を含む第１のポリペプチドであって、前記第１の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＬドメイン」）を含む第１のポリペプチド、
ｂ）第１の重鎖を含む第２のポリペプチドであって、前記第１の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第２のポリペプチド、
ｃ）第２の重鎖を含む第３のポリペプチドであって、前記第２の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第３のポリペプチド、及び、
ｄ）第２の軽鎖を含む第４のポリペプチドであって、前記第２の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第４のポリペプチド、
を含み、第１のＦｃドメインと第２のＦｃドメインとはＦｃ断片を形成している、請求項２３～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項64】

第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインのいずれかは、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意にＳ３５４Ｃ突然変異を含み、
他のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異及び任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含み、番号は、ＥＵインデックスに基づくものである、請求項６３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項65】

ｉ）第１のＣＨ１ドメイン及び第１のＣＬドメイン、又は、ｉｉ）第２のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＬドメインは、いずれも
ａ）１４１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１１６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｂ）１６８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６４位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｃ）１２６位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１２１位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｄ）１２８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１１８位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｅ）１７０位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１７６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｆ）１７１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６２位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｇ）１７３位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６０位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
から選ばれるものであり、番号は、ＥＵインデックスに基づくものである、請求項６３又は６４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項66】

１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、
２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、
３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、
４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、
５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、
６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、
７）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、
８）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、
９）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、
１０）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、
１１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、
１２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、
１３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含む、
請求項６３～６５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項67】

前記第２の部分は、半減期延長の部分を含む、請求項２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項68】

前記半減期延長の部分は、Ｆｃ断片である、請求項６７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項69】

前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭのＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である、請求項１８、３５～６６及び６８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項70】

前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４のＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である、請求項６９に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項71】

前記Ｆｃ断片は、Ｈ４３５Ｒ突然変異及びＹ４３６Ｆ突然変異を含む、請求項６９又は７０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項72】

前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して低減されたエフェクター機能を有する、請求項６９～７１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項73】

前記Ｆｃ断片は、
ａ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたエフェクター機能、及び／又は、
ｂ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたＦｃＲｎ結合アフィニティ、
を有する、請求項６９～７１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項74】

前記構築体は、抗体－薬物コンジュゲート又は抗体融合タンパク質である、請求項２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項75】

前記第２の部分は、薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、請求項７４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項76】

請求項１～７５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体と競合してスクレロスチンに特異的に結合する、抗スクレロスチン構築体。

【請求項77】

請求項１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び薬学的に許容される担体を含む、薬物組成物。

【請求項78】

前記組成物は、さらに薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、請求項７７に記載の薬物組成物。

【請求項79】

請求項１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体をコードする、単離された核酸分子。

【請求項80】

請求項７９に記載の単離された核酸分子を含む、ベクター。

【請求項81】

請求項７９に記載の単離された核酸分子又は請求項８０に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。

【請求項82】

ａ）抗スクレロスチン構築体又はその一部を効果的に発現する条件で、請求項８１に記載の単離された宿主細胞を培養すること、及び、
ｂ）前記宿主細胞から発現された抗スクレロスチン構築体又はその一部を得ること、
を含む、抗スクレロスチン構築体を調製する方法。

【請求項83】

有効量の請求項１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び／又は請求項７７もしくは７８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含む、個体の疾患又は病状を治療及び／又は予防する方法。

【請求項84】

前記疾患又は病状は、骨関連疾患又は軟骨関連疾状、骨髄又は血液学的疾患、骨格筋系の希少疾患、筋肉関連疾患又は癌である、請求項８３に記載の方法。

【請求項85】

前記骨関連疾患は、骨形成不全、骨粗鬆症又は骨減少症（男性及び女性）、骨壊死、骨遅延癒合、骨折不癒合、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫関連骨疾患、原発性骨腫瘍、及び悪性腫瘍の骨転移、炎症性又は感染性骨疾患、骨軟化症、高カルシウム血症、パジェット病、不運動による骨喪失、グルココルチコイドによる骨喪失、関節炎誘導骨喪失を含む炎症誘導骨喪失、宇宙飛行士の骨粗鬆症／骨減少症及び無重力による骨喪失、又は、ａ）骨量喪失又は骨質喪失又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状を含む、請求項８４に記載の方法。

【請求項86】

前記骨関連疾患とは、骨粗鬆症又は骨減少症を指す、請求項８５に記載の方法。

【請求項87】

前記骨関連疾患とは、骨形成不全を指す、請求項８５に記載の方法。

【請求項88】

前記骨関連疾患とは、多発性骨髄腫及び多発性骨髄腫関連骨疾患を指す、請求項８５に記載の方法。

【請求項89】

前記軟骨疾患は、軟骨腫症、軟骨異形成症、軟骨形成不全症、異形成症骨端異形成、軟骨異栄養性筋強直症、皮質傍軟骨腫、膝関節軟骨裂傷、骨線維異形成症、骨関節炎、骨形成不全、低リン酸血症性くる病又は骨軟骨異栄養症を含む、請求項８４に記載の方法。

【請求項90】

前記筋肉関連疾患とは、筋肉減少症及び癌関連筋肉減少症を指す、請求項８４に記載の方法。

【請求項91】

有効量の請求項１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体、及び／又は、請求項７７又は７８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含む、個体における骨又は関節手術後の癒合を促進するための方法。

【請求項92】

前記抗スクレロスチン構築体が、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、経口又は非経口投与の方式で前記個体に投与される、請求項８３～９１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項93】

前記方法が、第２の薬物又は治療法を実施することをさらに含む、請求項８３～９２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項94】

前記第２の薬物又は治療法は、抗ＤＫＫ１抗体を含む、請求項９３に記載の方法。

【請求項95】

前記第２の薬物又は治療法は、抗ＲＡＮＫＬ抗体を含む、請求項９３に記載の方法。

【請求項96】

前記第２の薬物又は治療法は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬物を含む、請求項９３に記載の方法。

【請求項97】

前記個体がヒトを指す、請求項８３～９６のいずれか１項に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

＜クロスリファレンス＞
本願は、２０２０年９月２８日出願された出願番号がＰＣＴ／ＣＮ２０２０／１１８３８７である国際特許出願に基づく優先権を主張するものであり、当該出願は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

本開示は、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体）及びその使用に関する。
＜ＡＳＣＩＩテキストファイルでの配列表の提出＞

【0003】

以下に提出されるＡＳＣＩＩテキストファイルでの内容は、その全体が、参照により本明細書に組み込まれる：コンピュータ可読形式（ＣＲＦ）の配列表（ファイル名：２１０９１２０００２４１ＳＥＱＬＩＳＴ．ＴＸＴ、記録日：２０２１年９月２０日、サイズ：３８６，０６１ＫＢ）。

【背景技術】

【0004】

ヒト骨形成阻害剤としてのＳＯＳＴ遺伝子産物であるスクレロスチン（ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ）の機能は、遺伝子局在化研究によって発見され、当該研究では、高骨量（ＨＢＭ）骨硬化症の病原因子としてＳＯＳＴ遺伝子の機能不全突然変異を特定した（Ｂａｌｅｍａｎｓ等，２００１Ｈｕｍ．Ｍｏｌ．Ｇｅｎｅｔ．１０，５３７－５４３；Ｂｒｕｎｋｏｗ等，２００１ Ａｍ．Ｊ．Ｈｕｍ．Ｇｅｎｅｔ．６８，５７７－５８９）。マウスにおいて、骨形成が増やすため、ＳＯＳＴ遺伝子の欠失によって骨量と骨強度を増加させるが、ヒトスクレロスチントランスジェニックの過剰発現は、骨量の減少及び骨強度の低下に繋がる（Ｋｅ等，２０１２ Ｅｎｄｏｃｒ．Ｒｅｖ．３３，７４７－７８３．）。

【0005】

本明細書に引用されているすべての開示説明、特許、特許出願、及び発表された特許出願のすべての開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

【発明の概要】

【0006】

以下の内容は、説明するための内容に過ぎず、いかなる形で限定されるものではない。即ち、以下の内容は、本発明に係る抗スクレロスチン構築体の新規分子の利点、有益な効果、及びその使用を紹介するためのものである。従って、以下の内容は、保護しようとする主体の基本的な技術的特徴を限定することを目的とするものではなく、保護しようとする主体の範囲を決定するためのものでもない。

【0007】

一つの態様において、本願は、スクレロスチン（例えば、ヒトスクレロスチン）を特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗スクレロスチン構築体を提供し、例えば、本明細書に記載の任意の抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記抗体部分は、全長抗体、二重特異性抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、ｄｓｓｃＦｖ、（ｄｓＦｖ）_２、Ｆｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリボディ（ｔｒｉｂｏｄｙ）及びテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）から選ばれる抗体又はその抗原結合断片である。いくつかの実施形態において、当該構築体は、Ｆｃ断片を含む全長抗体である。いくつかの実施形態において、前記抗体部分は、ｓｃＦｖ断片である。

【0008】

もう１つの態様において、本願は、スクレロスチン（例えば、ヒトスクレロスチン）を特異的に認識する抗体部分及び第２の部分を含む、抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記第２の部分は、半減期延長部分（例えば、Ｆｃ断片）を含む。いくつかの実施形態において、前記第２の部分は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、血管内皮増殖因子（ＶＥＧＦ）、形質転換成長因子－β（ＴＧＦβ）、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれた１種である薬物を含む。

【0009】

いくつかの実施形態において、前記第２の部分は、抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を含む。いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分（本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体部分を含むが、これらに限られない）及びＤｉｃｋｋｏｐｆ－１（ＤＫＫ１）又は核因子κβリガンドの受容体活性化因子（Ｒｅｃｅｐｔｏｒ Ａｃｔｉｖａｔｏｒ ｏｆ Ｎｕｃｌｅａｒ Ｆａｃｔｏｒ Ｋａｐｐａ ｂｅｔａ Ｌｉｇａｎｄ、ＲＡＮＫＬ）を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、抗スクレロスチン構築体を提供する。ＤＫＫ１又はＲＡＮＫＬを認識する抗体部分は、任意の抗ＤＫＫ１抗体部分又は抗ＲＡＮＫＬ抗体部分（本明細書に記載の抗体部分を含むが、これに限定されない）であってもよい。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）_２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、ミニチュア抗体（ｎａｎｏｂｏｄｙ）、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）又はシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）である。いくつかの実施形態において、前記第２の抗体部分は、Ｆｃ断片を含む全長抗体であり、前記抗スクレロスチン抗体部分は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片である。いくつかの実施形態において、前記第２の抗体部分は、ｓｃＦｖ断片であり、前記抗スクレロスチン抗体部分は、Ｆｃ断片を含む全長抗体である。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖ断片は、（リンカーを介するか、又は、リンカーを介せず）全長抗体の重鎖及び／又は軽鎖（例えば、Ｎ末端及び／又はＣ末端）に融合する。いくつかの実施形態において、当該構築体は、ａ）第１の軽鎖を有する第１のポリペプチドであって、前記第１の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）を含む第１のポリペプチド、ｂ）第１の重鎖を有する第２のポリペプチドであって、Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）及びｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第２のポリペプチド、ｃ）第２の重鎖を有する第３のポリペプチドであって、前記第２の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）及びｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第３のポリペプチド、及び、ｄ）第２の軽鎖を有する第４のポリペプチドであって、前記第２の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第４のポリペプチドを含み、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成している。第１のＣＨ１又は第２のＣＨ１及び／又は第１のＦｃドメイン又は第２のＦｃドメインは、本発明の構想から逸脱することなく、いくつかの改変又は改良を行うことができる。

【0010】

もう一つの態様において、本願は、本明細書に記載の任意の抗スクレロスチン構築体と競合してスクレロスチンに特異的に結合する抗スクレロスチン構築体を提供する。

【0011】

もう一つの態様において、本願は、本明細書に記載の任意の抗スクレロスチン構築体及び薬学的に許容される担体を含む、薬物組成物を提供する。いくつかの実施形態において、当該組成物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬剤を含む。

【0012】

もう一つの態様において、本願は、本明細書に記載の任意の抗スクレロスチンの構築体又は前記抗スクレロスチン構築体の一部（例えば、その１種又は複数種のポリペプチド）をコードする、単離された核酸分子を提供する。

【0013】

もう一つの態様において、本願は、本明細書に記載の任意の単離された核酸分子のベクターを提供する。

【0014】

もう一つの態様において、本願は、本明細書に記載の任意の単離された核酸分子及び／又はベクターを含む、単離された宿主細胞を提供する。

【0015】

もう一つの態様において、本願は、ａ）抗スクレロスチン構築体又はその一部（例えば、その１種又は複数種のポリペプチド）を効果的に発現する条件で本明細書に記載の任意の単離された宿主細胞を培養すること、及び、ｂ）宿主細胞から発現された抗スクレロスチン構築体又はその一部を得ることを含む、抗スクレロスチン構築体を生成する方法を提供する。

【0016】

もう一つの態様において、本願は、有効量の抗スクレロスチンの構築体、例えば、本明細書に記載の任意の抗スクレロスチン構築体又は本明細書に記載の任意の薬物組成物を個体に投与することを含む、個体の疾患又は病状を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記疾患又は病状とは、骨関連病状を指す。いくつかの実施形態において、前記骨関連病状は、骨形成不全、骨硬化、骨粗鬆症（男性及び／又は女性）、老人性骨粗鬆症、骨遅延癒合、骨折遅延癒合又は不癒合、パジェット病、不運動による骨喪失、グルココルチコイド誘導骨粗鬆症、関節炎誘導骨喪失を含む炎症誘導骨喪失、又は、ａ）骨量喪失又は骨質喪失又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体又は薬物組成物を非経口的に個体の体内に投与する。いくつかの実施形態において、当該方法は、第２の薬物又は療法（例えば、抗ＤＫＫ１抗体又は抗ＲＡＮＫＬ抗体）を用いることを含む。いくつかの実施形態において、第２の薬物或療法は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから得られた１種である薬物を含む。いくつかの実施形態において、個体は、ヒトを指す。

【図面の簡単な説明】

【0017】

【図1】スクレロスチンとＬＤＬ受容体関連タンパク質６（ＬＲＰ６）との相互作用を説明するために、スクレロスチンの第２ループにおける「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフの配列及びコンフォメーションを示す。

【図2】スクレロスチンの第２ループにおける合成ペプチド断片を用いた、モノクローナル抗体（ｍＡｂ）９３Ｂ１Ｂ７のスクレロスチンエピトープへのマッピングを示す。

【図3】ロモソズマブ（Ｒｏｍｏｓｏｚｕｍａｂ）がモノクローナル抗体９３Ｂ１Ｂ７の結合するヒトスクレロスチンの第２のループに由来するペプチドを認識しないことを示す。

【図4】モノクローナル抗体９３Ｂ１Ｂ７及びロモソズマブが異なるスクレロスチンエピトープに結合し、互いのスクレロスチンへの結合を交差ブロックしないことを示す。

【図5】例示的な二重特異性抗体構造の概略図を示す。

【図6】ヒトスクレロスチン及びＤＫＫ１の二重特異性抗体への増加結合を証明する、Ｂｉｏ－Ｌａｙｅｒ Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｍｅｔｒｙ（ＢＬＩ）センサーグラムからの結果を示す。

【図7】３０ｍｇ／ｋｇの皮下投与を受けたカニクイザルの二重特異性抗体の血清濃度を示す。

【発明を実施するための形態】

【0018】

本願は、スクレロスチンに特異的に結合する新規な抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチンモノクローナル抗体又は多重特異性抗体）、抗スクレロスチン構築体の調製方法及び前記構築体の使用方法（例えば、疾患又は病状を治療する方法）を提供する。本明細書に記載の例示的な抗スクレロスチン構築体は、有益な効果が得られた。例えば、ロモソズマブと比較して、例示的な抗スクレロスチン分子は、スクレロスチンに対してより高い結合親和性を示す。実施例３、５及び６（表５、表７及び表８）を参照する。

【0019】

Ｉ． 定義

【0020】

「抗体」という用語は、最も広い意味で使用され、種々の抗体構造をカバーし、所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル、多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、全長抗体及びその抗原結合断片を含むが、これらに限定されない。「抗体部分」という用語は、全長抗体又はその抗原結合断片を指す。

【0021】

全長抗体は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む。前記軽鎖及び重鎖の可変領域は、抗原との結合を担う。前記重鎖及び軽鎖の可変領域は、「Ｖ_Ｈ」及び「Ｖ_Ｌ」とも呼ばれ、２つの鎖における可変領域は、通常、相補性決定領域（ＣＤＲｓ）と呼ばれる３つの超可変ループを含む（軽鎖（ＬＣ）ＣＤＲは、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含み、重鎖（ＨＣ）ＣＤＲは、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含む）。本明細書に開示された抗体及び抗原結合断片のＣＤＲセグメントは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ又はＡｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉの番号付け方式（Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ １９９７； Ｃｈｏｔｈｉａ １９８５；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７；Ｃｈｏｔｈｉａ １９８９、Ｋａｂａｔ １９８７；Ｋａｂａｔ １９９１）で定義又は同定することができる。重鎖又は軽鎖の３つのＣＤＲは、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる側面セグメントの間に挿入され、前記フレームワーク領域は、ＣＤＲよりも保存性が高く、超可変ループをサポートするブラケットを形成する。重鎖及び軽鎖の定常領域は、抗原結合に関与しないが、複数のエフェクター機能を示す。抗体は、抗体重鎖定常領域のアミノ酸配列によって分類される。抗体の５つの主なクラス又は同種は、それぞれα、δ、ε、γ及びμ重鎖を有することを特徴とするＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ及びＩｇＭであり、いくつかの主な抗体クラスは、例えば、ｌｇＧ１（γ１重鎖）、ｌｇＧ２（γ２重鎖）、ｌｇＧ３（γ３重鎖）、ｌｇＧ４（γ４重鎖）、ｌｇＡ１（α１重鎖）又はＩｇＧＡ２（α２重鎖）というサブクラスに分類される。

【0022】

本明細書に用いられる「抗原結合断片」という用語は、例えば、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、（ｄｓＦｖ）_２、二重特異性ｄｓＦｖ（ｄｓＦｖ－ｄｓＦｖ’）、ジスルフィド結合安定化ダイアボディ（ｄｓ ｄｉａｂｏｄｙ）、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、ｓｃＦｖ二量体（ｂｉｖａｌｅｎｔ ｄｉａｂｏｄｙ））、１つ又は複数のＣＤＲ含有抗体の一部からなる多重特異性抗体、ラクダ科シングルドメイン抗体、ナノ抗体、ドメイン抗体、二価ドメイン抗体又は抗原に結合するが完全な抗体構造を含まない任意の他の抗体断片を含む、抗体断片を指す。抗原結合断片は、親抗体又は親抗体断片（例えば、親ｓｃＦｖ）に結合する抗原と同じ抗原に結合することができる。いくつかの実施形態において、抗原結合断片は、１つ又は複数の異なるヒト抗体に由来するフレームワーク領域に移植された、特定のヒト抗体に由来する１つ又は複数のＣＤＲを含み得る。

【0023】

可変領域「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含む最小の抗体断片である。当該断片は、緊密に非共有結合されている１つの重鎖可変領域ドメインと１つの軽鎖可変領域ドメインとの二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みによって、抗原を結合するためのアミノ酸残基を含み、抗体に抗原結合特異性を与える、６つの超可変リープ（重鎖及び軽鎖のそれぞれ３つのリープ）を形成する。しかしながら、単一の可変ドメイン（又は抗原に対する特異性を有する３つのＣＤＲのみを含む半分のＦｖ）であっても、親和性が完全な可変ドメインより低いが、抗原を認識して結合する能力を持っている。

【0024】

「単鎖Ｆｖ」は、「ｓＦｖ」又は「ｓｃＦｖ」とも略され、単一のポリペプチド鎖に接続されたＶ_Ｈ及びＶ_Ｌ抗体ドメインを含む抗体断片である。いくつかの実施形態において、ｓｃＦｖポリペプチドは、Ｖ_ＨドメインとＶ_Ｌドメインとの間のポリペプチドリンカーをさらに含み、当該ポリペプチドリンカーにより、ｓｃＦｖが抗原に結合するために必要な構造を形成させることが可能になる。ｓｃＦｖの概説については、Ｐｌuｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ． ２６９－３１５（１９９４）を参照する。

【0025】

本明細書に使用される「ＣＤＲ」又は「相補性決定領域」という用語は、重鎖ポリペプチド及び軽鎖ポリペプチドの可変領域に見出される非連続抗原結合部位を指す。これらの特定の領域は、Ｋａｂａｔ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔ等，米国保健社会福祉省,「免疫学的に意味のあるタンパク質配列」（１９９１）； Ｃｈｏｔｈｉａ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）；Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ Ｂ．等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２７３：９２７－９４８（１９９７）；ＭａｃＣａｌｌｕｍ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）；Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）；Ｌｅｆｒａｎｃ Ｍ．Ｐ．等，Ｄｅｖ．Ｃｏｍｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，２７：５５－７７（２００３）；及び、Ｈｏｎｅｇｇｅｒ ａｎｄ Ｐｌuｃｋｔｈｕｎ， Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，３０９：６５７－６７０（２００１）に記載されており、互いに比較した場合のアミノ酸残基の重複又はサブセットは、その定義に含まれる。しかしながら、いずれかの定義が適用された抗体又は移植抗体又はその変異体ＣＤＲは、本明細書で定義・使用される用語の範囲内にある。比較として、前述した各参考文献で定義されたＣＤＲを含むアミノ酸残基は、下記の表１に挙げられている。ＣＤＲ予測アルゴリズム及びインターフェースは、当分野では既知であり、例えば、Ａｂｈｉｎａｎｄａｎ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，４５：３８３２－３８３９（２００８）；Ｅｈｒｅｎｍａｎｎ Ｆ．等，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，３８：Ｄ３０１－Ｄ３０７（２０１０）；及び、Ａｄｏｌｆ－Ｂｒｙｆｏｇｌｅ Ｊ．等，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．，４３：Ｄ４３２－Ｄ４３８（２０１５）を含む。本段落に引用された参考文献の内容は、本出願で使用されるように、並びに本願の１つ又は複数の特許請求の範囲に含まれることができるように、全体として本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態において、本明細書に提供されるＣＤＲ配列は、ＩＭＧＴ番号付けに基づいて定義されるものである。例えば、ＣＤＲ配列は、ＶＢＡＳＥ２ツール（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｖｂａｓｅ２．ｏｒｇ／ｖｂａｓｅ２．ｐｈｐ、又は、Ｒｅｔｔｅｒ Ｉ、Ａｌｔｈａｕｓ ＨＨ、Ｍuｎｃｈ Ｒ、Ｍuｌｌｅｒ Ｗ：ＶＢＡＳＥ２、統合されたＶ遺伝子データベース、『核酸研究』２００５年１月１日、３３（データベースの公開）：Ｄ６７１－４、その全内容は、参照により本明細書に組み込まれる）により特定することができる。

【0026】

本明細書に使用される「骨粗鬆症」という用語は、閉経前特発性骨粗鬆症（ｐｒｅｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）、閉経後骨粗鬆症（ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）、閉経期骨粗鬆症（ｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）、卵巣摘出術後骨粗鬆症（ｐｏｓｔｏｏｐｈｏｒｅｃｔｏｍｙ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）、廃用性骨粗鬆症（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｏｆ ｄｉｓｕｓｅ）、薬物誘発性骨粗鬆症（ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）、吸収不良による骨粗鬆症（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｄｕｅ ｔｏ ｍａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ）、術後吸収不良性骨粗鬆症（ｐｏｓｔ－ｓｕｒｇｉｃａｌ ｍａｌａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）及び／又は老人性骨粗鬆症（ｓｅｎｉｌｅ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ）を指す。

【0027】

本明細書に使用される「骨減少症」という用語は、閉経前特発性骨減少症（ｐｒｅｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）、閉経後骨減少症（ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）、老人性骨減少症（ｓｅｎｉｌｅ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）、薬物誘発性骨減少症（ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）、廃用性骨減少症（ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ ｏｆ ｄｉｓｕｓｅ）、新生児骨減少症（ｎｅｏｎａｔａｌ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ）及び／又は無重力による宇宙飛行士骨減少症（ｓｐａｃｅｆｌｉｇｈｔ ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｇｒａｖｉｔｙ）を指す。

【0028】

本明細書に使用される「代謝性骨疾患」という用語は、腎性骨異栄養症（ｒｅｎａｌ ｏｓｔｅｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、原発性及び続発性副甲状腺機能亢進症（ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍ）、ファミリー性副甲状腺機能亢進症候群（ｆａｍｉｌｉａｌ ｈｙｐｅｒｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍ ｓｙｎｄｒｏｍｅｓ）、副甲状腺疾患（ｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）、骨異栄養症（ｏｓｔｅｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、骨軟骨疾患（ｏｓｔｅｏｃｈｏｎｄｒｏｓｉｓ）、高ホスファターゼ症（ｈｙｐｅｒｐｈｏｓｐｈａｔａｓｉａ）を含むが、これらに限られない。

【0029】

本明細書に使用される「骨壊死」という用語は、骨の虚血性壊死（ａｖａｓｃｕｌａｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｏｆ ｂｏｎｅ）、潜水による虚血性壊死（ａｖａｓｃｕｌａｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｔｏ ｄｉｖｉｎｇ）、顎骨の骨壊死（ｏｓｔｅｏｎｅｃｒｏｓｉｓ ｏｆ ｊａｗ）を指す。

【0030】

本明細書に使用される「骨喪失」という用語は、閉経後骨喪失（ｐｏｓｔｍｅｎｏｐａｕｓａｌ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、不運動による骨喪失（Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、無重力による骨喪失（Ｗｅｉｇｈｔｌｅｓｓｎｅｓｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、疾患関連の顔の骨喪失（Ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｆａｃｉａｌ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、疾患関連頭蓋骨喪失（Ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｃｒａｎｉａｌ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、疾患関連顎骨の骨喪失（Ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ｊａｗ）、疾関連頭蓋骨の骨喪失（Ｄｉｓｅａｓｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ｏｆ ｔｈｅ ｓｋｕｌｌ）、空間旅行に起因する骨喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｐａｃｅ ｔｒａｖｅｌ）、グルココルチコイド誘発性骨喪失（ｇｌｕｃｏｃｏｒｔｉｃｏｉｄ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、薬物誘発性骨喪失（Ｄｒｕｇ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、臓器移植関連骨喪失（Ｏｒｇａｎ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、腎移植関連骨喪失（Ｋｉｄｎｅｙ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、ＨＩＶ関連骨喪失（ＨＩＶ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、成長ホルモン喪失関連骨喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｌｏｓｓ ｏｆ ｇｒｏｗｔｈ ｈｏｒｍｏｎｅ）、嚢胞性線維症関連骨喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、化学療法関連骨喪失（Ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、腫瘍誘発性骨喪失（Ｔｕｍｏｒ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、癌関連骨喪失（Ｃａｎｃｅｒ－ｒｅｌａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、ホルモン喪失による骨喪失（Ｈｏｒｍｏｎｅ ａｂｌａｔｉｖｅ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、口腔骨喪失（Ｏｒａｌ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、ヘパリン誘発性骨喪失（Ｈｅｐａｒｉｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、関節炎誘発性骨喪失（ａｒｔｈｒｉｔｉｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）を含む炎症誘発性骨喪失（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ）、又は、ａ）骨量喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ｏｆ ｑｕａｎｔｉｔｙ）又は骨質喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ）又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状、無重力による骨喪失（ｂｏｎｅ ｌｏｓｓ ｃａｕｓｅｄ ｂｙ ｒｅｄｕｃｅｄ ｇｒａｖｉｔｙ）を指す。

【0031】

本明細書に使用される「骨不連続（ｎｏｎｕｎｉｏｎ）」又は「骨遅延癒合（ｄｅｌａｙ ｂｏｎｅ ｈｅａｌｉｎｇ）」という用語は、骨折遅延癒合（ｄｅｌａｙｅｄ ｂｏｎｅ ｆｒａｃｔｕｒｅｓ）又は不癒合（ｎｏｎ－ｕｎｉｏｎ ｂｏｎｅ ｆｒａｃｔｕｒｅｓ）、股関節骨折（ｈｉｐ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、融合又は関節融合後の仮性関節炎（ｐｓｅｕｄｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｆｔｅｒ ｆｕｓｉｏｎ ｏｒ ａｒｔｈｒｏｄｅｓｉｓ）、骨溶解（ｏｓｔｅｏｌｙｓｉｓ）、術後溶骨（ｐｏｓｔｓｕｒｇｉｃａｌ ｏｓｔｅｏｌｙｓｉｓ）、脊柱融合後の骨不連続（ｎｏｎｕｎｉｏｎ ａｆｔｅｒ ｓｐｉｎａｌ ａｒｔｈｒｏｄｅｓｉｓ）、脊柱融合の増強／加速（ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ／ａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｐｉｎａｌ ｆｕｓｉｏｎ）、関節形成術後の慢性的な痛み（ｃｈｒｏｎｉｃ ｐａｉｎ ａｆｔｅｒ ａｒｔｈｒｏｐｌａｓｔｙ）を指す。

【0032】

本明細書に使用される「骨軟化症（ｏｓｔｅｏｍａｌａｃｉａ）」という用語は、ビタミンＤ抵抗性骨軟化症（Ｖｉｔａｍｉｎ－Ｄ－ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｏｓｔｅｏｍａｌａｃｉａ）、カルシウム欠乏症（ｃａｌｃｉｕｍ ｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ）、筋減少症（ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ）、癌関連筋減少症（ｃａｎｃｅｒ ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ）、腫瘍誘導性骨軟化症（ｔｕｍｏｒ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｏｓｔｅｏｍａｌａｃｉａ）を指す。

【0033】

本明細書に使用される「骨折」という用語は、圧縮的骨折（ｃｏｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、脆性骨折（ｆｒａｇｉｌｉｔｙ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、病理的骨折（ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、応力骨折（ｓｔｒｅｓｓ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、股関節骨折（ｈｉｐ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、大腿骨頚部骨折（ｆｒａｃｔｕｒｅ ｏｆ ｆｅｍｏｒａｌ ｎｅｃｋ）、非典型的股関節骨折（ａｔｙｐｉｃａｌ ｈｉｐ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、大腿骨粗隆間骨折（ｆｅｍｏｒａｌ ｉｎｔｅｒｔｒｏｃｈａｎｔｅｒ ｆｒａｃｔｕｒｅ）、腫瘍疾患に起因する骨折（ｆｒａｃｔｕｒｅ ｏｆ ｂｏｎｅ ｉｎ ｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ）を含むが、これらに限定されない。

【0034】

本明細書に使用される「高カルシウム血症（ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ）」という用語は、悪性腫瘍による高カルシウム血症（ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ ｏｆ ｍａｌｉｇｎａｎｃｙ）、高カルシウム血症によるミオパチー（ｍｙｏｐａｔｈｙ ｄｕｅ ｔｏ ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ）、慢性腎臓疾患による高カルシウム血症（ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ ｉｎ ｃｈｒｏｎｉｃ ｋｉｄｎｅｙ ｄｉｓｅａｓｅ）を含む。

【0035】

本明細書に使用される「多発性骨髄腫関連骨疾患（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ ｒｅｌａｔｅｄ ｂｏｎｅ ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）」という用語は、多発性骨髄腫性骨疾患（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）及び多発性骨髄腫症による骨粗鬆症（ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｉｎ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｍｙｅｌｏｍａｔｏｓｉｓ）を指す。

【0036】

本明細書に使用される「原発性骨腫瘍（ｐｒｉｍａｒｙ ｂｏｎｅ ｔｕｍｏｒ）」という用語は、骨肉腫（ｏｓｔｅｏｓａｒｃｏｍａ）、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｏｎｄｒｏｍａ）、骨芽細胞腫（ｏｓｔｅｏｂｌａｓｔｏｍａ）、骨軟骨粘液腫（ｏｓｔｅｏｃｈｏｎｄｒｏｍｙｘｏｍａ）、破骨細胞腫（ｏｓｔｅｏｃｌａｓｔｏｍａ）、骨腫（ｏｓｔｅｏｍａ）、骨様骨腫（ｏｓｔｅｏｉｄ ｏｓｔｅｏｍａ）、軟骨肉腫（ｃｈｏｎｄｒｏｓａｒｃｏｍａ）、軟骨芽細胞腫（ｃｈｏｎｄｒｏｂｌａｓｔｏｍａ）、軟骨様線維腫（ｃｈｏｎｄｒｏｍｙｘｏｉｄ ｆｉｂｒｏｍａ）、粘液様軟骨肉腫（ｍｙｘｏｉｄ ｃｈｏｎｄｒｏｓａｒｃｏｍａ）、肉腫（ｓａｒｃｏｍａ）、ユーイング肉腫（ｅｗｉｎｇ ｓａｒｃｏｍａ）、カポジ肉腫（ｋａｐｏｓｉ ｓａｒｃｏｍａ）、骨膜肉腫（ｐｅｒｉｏｓｔｅａｌ ｓａｒｃｏｍａ）、神経膠腫（ｇｌｏｍａｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）、巨細胞腫（ｇｉａｎｔ ｃｅｌｌ ｔｕｍｏｒ）、巨細胞肉腫（ｇｉａｎｔ ｃｅｌｌ ｓａｒｃｏｍａ）、巨細胞血管線維腫（ｇｉａｎｔ ｃｅｌｌ ａｎｇｉｏｆｉｂｒｏｍａ）、血管内皮肉腫（ｈａｅｍａｎｇｉｏｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｓａｒｃｏｍａ）、未分化肉腫（ｕｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｅｄ ｓａｒｃｏｍａ）、線維肉腫（ｆｉｂｒｏｓａｒｃｏｍａ）、骨嚢胞（ｂｏｎｅ ｃｙｓｔ）、動脈瘤（ａｎｅｕｒｙｓｍａｌ ｂｏｎｅ ｃｙｓｔ）、多発性内分泌腫瘍（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｎｅｏｐｌａｓｉａ）を含む。

【0037】

「悪性腫瘍骨転移」に使われる「悪性腫瘍」という用語は、乳がん、肺癌、肝臓がん、卵巣がん、膵臓がん、大腸がん、胃がん、前立腺がん、甲状腺がん、胸腺がんを含む。

【0038】

本明細書に使用される「炎症性又は感染性骨疾患（ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｏｒ ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）」という用語は、骨髄炎（ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）、化膿性骨髄炎（ｐｙｏｇｅｎｉｃ ｏｓｔｅｏｍｙｅｌｉｔｉｓ）、強直性脊椎炎（ａｎｋｙｌｏｓｉｎｇ ｓｐｏｎｄｙｌｉｔｉｓ）を指す。

【0039】

本明細書に使用される用語「骨髄又は血液学的疾患」とは、白血病、悪性リンパ腫、血液悪性腫瘍、血液疾患、骨髄疾患を指す。

【0040】

本明細書に使用される用語「筋肉骨格希少疾患（ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔａｌ ｒａｒｅ ｄｉｓｅａｓｅ）」とは、骨形成不全（Ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｍｐｅｒｆｅｃｔａ）、骨硬化症（Ａｌｂｅｒｓ－Ｓｃｈｏｎｂｅｒｇ ｄｉｓｅａｓｅ）、脛骨先天性偽関節（ｃｏｎｇｅｎｉｔａｌ ｐｓｅｕｄａｒｔｈｒｏｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔｉｂｉａ）、内生腫瘍症（ｅｎｃｈｏｎｄｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、線維異形成症（ｆｉｂｒｏｕｓ ｄｙｓｐｌａｓｉａ）、ゴーシェ病（Ｇａｕｃｈｅｒ’ｓ Ｄｉｓｅａｓｅ）、マルファン症候群（Ｍａｒｆａｎ’ｓ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、遺伝性多発外生骨疣贅（ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ｅｘｏｔｏｓｅｓ）、神経線維腫症（ｎｅｕｒｏｆｉｂｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、骨形成不全（ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉｍｐｅｒｆｅｃｔａ）、骨粗鬆症（ｏｓｔｅｏｐｅｔｒｏｓｉｓ）、骨斑点症（ｏｓｔｅｏｐｏｉｋｉｌｏｓｉｓ）、硬化性病変（ｓｃｌｅｒｏｔｉｃ ｌｅｓｉｏｎｓ）、偽関節病変（ｐｓｅｕｄｏａｒｔｈｒｏｓｉｓ）、足骨筋状肥大（ｍｅｌｏｒｈｅｏｓｔｏｓｉｓ）、若年性関節炎（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ ａｒｔｈｒｉｔｉｄｅｓ）、サラセミア（ｔｈａｌａｓｓｅｍｉａ）、ムコ多糖症（ｍｕｃｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｏｓｅｓ）、ターナー症候群（Ｔｕｒｎｅｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、パウン症候群（Ｐｏｗｎ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、クランフェルト症候群（Ｋｌｉｎｅｆｅｌｔｅｒ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、ハンセン病（ｌｅｐｒｏｓｙ）、ペテツ病（Ｐｅｒｔｈｅｓ’ Ｄｉｓｅａｓｅ）、若年性特発症性脊柱側弯症（ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｓｃｏｌｉｏｓｉｓ）、ウィンチェスター症候群（Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ Ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、メンケス病（Ｍｅｎｋｅｓ Ｄｉｓｅａｓｅ）、虚血性骨疾患（ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）（例えば、小児大腿骨の虚血性壊死（Ｌｅｇｇ－Ｃａｌｖｅ－Ｐｅｒｔｈｅｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、限局性遊走性骨粗鬆症（ｒｅｇｉｏｎａｌ ｍｉｇｒａｔｏｒｙ ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ））、特発性乳児高カルシウム血症（Ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ）、先端巨大症（Ａｃｒｏｍｅｇａｌｙ）、性腺機能低下症（Ｈｙｐｏｇｏｎａｄｉｓｍ）、アルストロム症候群（Ａｌｂｒｉｇｈｔ－ＭｃＣｕｎｅ－Ｓｔｅｒｎｂｅｒｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、アルミニウム関連骨疾患（Ａｌｕｍｉｎｉｕｍ ｂｏｎｅ ｄｉｓｅａｓｅ）、進行性基幹異形成症（Ｃａｍｕｒａｔｉ－Ｅｎｇｅｌｍａｎｎ ｄｉｓｅａｓｅ）、骨硬化症と乳児神経軸索ジストロフィー（Ｏｓｔｅｏｐｅｔｒｏｓｉｓ ａｎｄ ｉｎｆａｎｔｉｌｅ ｎｅｕｒｏａｘｏｎａｌ ｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）、異常骨硬化（Ｄｙｓｏｓｔｅｏｓｃｌｅｒｏｓｉｓ）、緻密性骨形成不全症（Ｐｙｃｎｏｄｙｓｏｓｔｏｓｉｓ）、Ｇｏｒｈａｍ－Ｓｔｏｕｔ症候群（Ｇｏｒｈａｍ－Ｓｔｏｕｔ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、嚢胞性血管腫症（Ｃｙｓｔｉｃ ａｎｇｉｏｍａｔｏｓｉｓ）、パジェット病（Ｐａｇｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、青少年パジェット病（Ｊｕｖｅｎｉｌｅ Ｐａｇｅｔ’ｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、骨粗鬆症－白眼症候群（Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ－ｏｃｕｌｏｃｕｔａｎｅｏｕｓ－ｈｙｐｏｐｉｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、典型的又は非典型的な嚢胞性繊維骨粗鬆症（Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ ｉｎ ｃｌａｓｓｉｃａｌ ｏｒ ａｔｙｐｉｃａｌ ｃｙｓｔｉｃ ｆｉｂｒｏｓｉｓ）、脛骨－橈骨異常－骨折（Ｂｏｗｅｄ ｔｉｂｉａｅ－ｒａｄｉａｌ ａｎｏｍａｌｉｅｓ－ｏｓｔｅｏｐｅｎｉａ－ｆｒａｃｔｕｒｅｓ）、Ｘ連鎖低リン酸塩骨軟化症（Ｘ－ｌｉｎｋｅｄ ｈｙｐｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｍｉｃ ｏｓｔｅｏｍａｌａｃｉａ）、ファミリー性骨異形成症（Ｆａｍｉｌｉａｌ ｅｘｐａｎｓｉｌｅ ｏｓｔｅｏｌｙｓｉｓ）、骨斑点症（Ｏｓｔｅｏｐｏｉｋｉｌｏｓｉｓ）、メロレオストーシス（Ｍｅｌｏｒｈｅｏｓｔｏｓｉｓ）、頭蓋骨幹端異形成症（Ｃｒａｎｉｏｍｅｔａｐｈｙｓｅａｌ ｄｙｓｐｌａｓｉａ）、神経膠腫症候群（Ｏｓｔｅｏｐｏｒｏｓｉｓ－ｐｓｅｕｄｏｇｌｉｏｍａ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、頭蓋骨鎖骨異形成症（Ｃｌｅｉｄｏｃｒａｎｉａｌ ｄｙｓｐｌａｓｉａ）、Ｈａｊｄｕ－Ｃｈｅｎｅｙ症候群（Ｈａｊｄｕ－Ｃｈｅｎｅｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ－Ｔｏｒｇ症候群（Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ－Ｔｏｒｇ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、Ｃｏｌｅ－Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ症候群（Ｃｏｌｅ－Ｃａｒｐｅｎｔｅｒ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、低リン酸塩血症（Ｈｙｐｏｐｈｏｓｐｈａｔａｓｉａ）、遺伝性高リン酸化症（Ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ｈｙｐｅｒｐｈｏｓｐｈａｔａｓｉａ）、進行性骨化性線維異形成症（Ｆｉｂｒｏｄｙｓｐｌａｓｉａ ｏｓｓｉｆｉｃａｎｓ ｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅ）、家族性低カルシウム血症（Ｆａｍｉｌｉａｌ ｈｙｐｏｃａｌｃｉｕｒｉｃ ｈｙｐｅｒｃａｌｃｅｍｉａ）、仮性甲状腺機能低下症（Ｐｓｅｕｄｏｈｙｐｏｐａｒａｔｈｙｒｏｉｄｉｓｍ）、肢端骨異形成症（Ａｃｒｏｄｙｓｏｓｔｏｓｉｓ）、エイケン症候群（Ｅｉｋｅｎ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）、多発性軟骨腫症（Ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｅｎｃｈｏｎｄｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、ビタミンＤヒドロキシ欠損性くる病（Ｖｉｔａｍｉｎ Ｄ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｔｉｏｎ－ｄｅｆｉｃｉｅｎｔ ｒｉｃｋｅｔｓ）、低リン酸血症性くる病（Ｈｙｐｏｐｈｏｓｐｈａｔｅｍｉｃ ｒｉｃｋｅｔｓ）を含む。

【0041】

本明細書に使用される「軟骨関連疾患（ｃａｒｔｉｌａｇｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）」という用語は、軟骨腫症（Ｃｈｏｎｄｒｏｍａｔｏｓｉｓ）、軟骨異形成症（Ｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｐｌａｓｉａ）、軟骨栄養不良性筋強直（Ｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｔｒｏｐｈｉｃ ｍｙｏｔｏｎｉａ）、皮質傍軟骨腫（Ｊｕｘｔａｃｏｒｔｉｃａｌ ｃｈｏｎｄｒｏｍａ）、膝関節軟骨裂断（Ｔｅａｒ ｏｆ ｃａｒｔｉｌａｇｅ ｏｆ ｋｎｅｅ）、骨関節炎（Ｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ）、骨軟骨異栄養症（Ｏｓｔｅｏｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｔｒｏｐｈｙ）を含むが、これらに限定されない。

【0042】

本明細書に使用される用語「筋肉関連疾患（ｍｕｓｃｌｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｄｉｓｏｒｄｅｒ）」は、筋肉減少症（ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ）及び癌関連筋肉減少症（ｃａｎｃｅｒ ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ）を含む。

【0043】

「骨や関節の手術後の癒合の促進（ｆａｃｉｌｉｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅａｌ ａｆｔｅｒ ｂｏｎｅ ｏｒ ｊｏｉｎｔ ｓｕｒｇｅｒｉｅｓ）」で使われる用語「手術（ｓｕｒｇｅｒｉｅｓ）」とは、整形外科（ｏｒｔｈｏｐｅｄｉｃ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）、歯科手術（ｄｅｎｔａｌ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ）、インプラント手術（ｉｍｐｌａｎｔ ｓｕｒｇｅｒｙ）、関節置換（ｊｏｉｎｔ ｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ）、関節を残す手術（ｊｏｉｎｔ－ｐｒｅｓｅｒｖｉｎｇ ｓｕｒｇｅｒｙ）、仮骨延長（Ｄｉｓｔｒａｃｔｉｏｎ Ｏｓｔｅｏｇｅｎｅｓｉｓ）、骨延長（ｂｏｎｅ ｌｅｎｇｔｈｅｎｉｎｇ）、骨移植（ｂｏｎｅ ｇｒａｆｔｉｎｇ）、骨美容手術及び骨修復（ｂｏｎｅ ｃｏｓｍｅｔｉｃ ｓｕｒｇｅｒｙ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｒｅｐａｉｒ）、例えば骨折癒合（ｆｒａｃｔｕｒｅ ｈｅａｌｉｎｇ）、骨不連癒合（ｎｏｎｕｎｉｏｎ ｈｅａｌｉｎｇ）、骨折遅延治癒（ｄｅｌａｙｅｄ ｕｎｉｏｎ ｈｅａｌｉｎｇ）、及び、頭蓋面回復（ｆａｃｉａｌ ｒｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ）を指す。

【0044】

【表1】

【0045】

「Ｋａｂａｔにおける可変ドメイン残基の番号付け」又は「Ｋａｂａｔにおけるアミノ酸位置の番号付け」及びその変異体とは、前文を参照すると、Ｋａｂａｔらの抗体アセンブリに使われる重鎖可変ドメイン又は軽鎖可変ドメインの番号付け方式を指す。当該番号付け方式を使用して、実際の線形アミノ酸配列は、可変ドメインのフレームワーク領域（ＦＲ）又は高可変領域（ＨＶＲ）の短縮又は挿入に対応する少ない又は追加のアミノ酸を含み得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２以降の単一アミノ酸の挿入（Ｋａｂａｔに基づく残基５２ａ）及び重鎖ＦＲ残基８２以降の挿入の残基（例えば、Ｋａｂａｔ番号付け方式に基づく残基８２ａ、８２ｂ及び８２ｃなど）を含み得る。所定の抗体のＫａｂａｔ残基の番号付けは、抗体配列の相同性領域で「標準」Ｋａｂａｔ番号付け配列とアラインすることで決定することができる。

【0046】

本明細書で特に明記されていない限り、前文を参照すると、免疫グロブリン重鎖における残基の番号付けは、ＫａｂａｔらのＥＵインデックスの番号付けである。「ＫａｂａｔのＥＵインデックス」とは、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体の残基の番号付けを指す。

【0047】

「フレームワーク」又は「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＣＤＲ残基を除く可変ドメイン残基を意味する。

【0048】

「ヒト化」形態の非ヒト（例えば、げっ歯類動物）抗体は、非ヒト抗体に由来する最小配列を含むキメラ抗体である。多くの場合、ヒト化抗体は、受容体超可変領域（ＨＶＲ）に由来の残基が、例えば、理想的な抗体特異性、親和性及び能力を持つマウス、ラット、ウサギ、又は非ヒト霊長類動物のような非ヒト種（ドナー抗体）に由来の超可変領域の残基に置換されたヒト免疫グロブリン（受容体抗体）である。ある場合において、ヒト免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基は、対応する非ヒト残基で置換される。さらに、ヒト化抗体は、受容体抗体又はドナー抗体に含まれない残基を含み得る。これらの改変は、抗体の性能をさらに改善させることを目的としている。一般的に、ヒト化抗体は、可変ドメインの実質的に全て、少なくとも１つ、典型的に２つを含み、全て又は実質的に全ての超可変ループは、非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、全て又は実質的に全てのＦＲは、ヒト免疫グロブリン配列である。任意に、ヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部、通常にヒト免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）をさらに含み得る。より詳しい内容は、Ｊｏｎｅｓ等，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ等，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及び、Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ、Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照する。

【0049】

「ヒト抗体」は、ヒト産生抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する、及び／又は、本明細書に開示の、ヒト抗体を産生する任意の技術を使用して調製された抗体である。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を明らか除く。ヒト抗体は、当分野で公知の様々な技術（ファージディスプレイライブラリーを含む）を用いて調製することができる。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）がある。ヒトモノクローナル抗体の調製は、Ｃｏｌｅ等，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ、Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）、及び、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５：３６８－７４（２００１）を使用することができる。ヒト抗体は、ランスジェニック動物へ抗原を投与することで調製されてもよい。ランスジェニック動物は、抗原刺激に応答してこのような抗体を産生するように改変されているが、その内因性部位が無効化されている、例えば、免疫化された異種マウス（ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ^ＴＭ技術について、例えば、米国特許ＵＳ６，０７５，１８１及びＵＳ６，１５０，５８４を参照する）である。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されたヒト抗体について、例えば、Ｌｉ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）を参照する。

【0050】

本明細書に確定されたポリペプチド及び抗体配列に対する「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」又は「相同性」は、いかなる保存的置換を配列同一性の一部として配列をアラインした後、比較されるポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である候補配列におけるアミノ酸残基のパーセントと定義される。アミノ酸配列同一性パーセントを確定するために、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮ、Ｍｅｇａｌｉｇｎ（ＤＮＡＳＴＡＲ）又はＭＵＳＣＬＥソフトウェアなどの公開された利用可能なコンピュータソフトウェアを使用し、当分野の範囲内の様々な方法でアライメントを行うことができる。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアラインメントを達成するために必要な任意のアルゴリズムを含む、アラインメントを測定するための適切なパラメータを決定することができる。しかしながら、本明細書では、配列アライン用コンピュータプログラムＭＵＳＣＬＥ（Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ３２（５）：１７９２－１７９７， ２００４；Ｅｄｇａｒ，Ｒ．Ｃ．，ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ５（１）：１１３，２００４）を使用し、アミノ酸配列同一性パーセント値を生成する。

【0051】

「相同」とは、２つのポリペプチドの間又は２つの核酸分子の間の配列類似性又は配列同一性を指す。比較される２つの配列の同じ位置が同じ塩基又はアミノ酸モノマーサブユニットに占められる場合、例えば、２つのＤＮＡ分子中の同じ位置がアデニンに占められる場合、この２つの分子はその位置で相同である。２つの配列間の相同性パーセントは、２つの配列が共有するマッチした位置又は相同位置の数を比較された位置の数で割って１００を掛けた関数である。例えば、２つの配列の１０つの位置のうち６つがマッチする、又は、相同である場合、この２つの配列の相同性は６０％である。例を挙げると、ＤＮＡ配列ＡＴＴＧＣＣとＴＡＴＧＧＣとは、５０％の相同性を有する。通常、２つの配列は、最大の相同性を得るようにアラインされた後、比較する。

【0052】

「定常ドメイン」という用語は、抗原結合部位を含有する免疫グロブリンの別の部分（可変ドメイン）に対してより保存的なアミノ酸配列を持つ免疫グロブリン分子の部分を指す。定常ドメインは、重鎖のＣ_Ｈ１、Ｃ_Ｈ２、Ｃ_Ｈ３ドメイン（Ｃ_Ｈと総称される）及び、軽鎖のＣＨＬ（又はＣ_Ｌ）ドメインを含む。

【0053】

任意の哺乳動物種の抗体（免疫グロブリン）の「軽鎖」は、その定常ドメインのアミノ酸配列によって、「κ」及び「λ」と呼ばれる、明らかに異なる２つのタイプの一つに帰属できる。

【0054】

「Ｃ_Ｈ１ドメイン」（「Ｈ１」ドメインの「Ｃ１」とも呼ばれる）は、通常、約第１１８位アミノ酸から約第２１５位アミノ酸（ＥＵ番号付け方式）まで伸びている。

【0055】

「ヒンジ領域」は、通常、ＩｇＧにおける、ヒトＩｇＧ１のＧｌｕ２１６～Ｐｒｏ２３０に対応する領域と定義される（Ｂｕｒｔｏｎ，Ｍｏｌｅｃ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：１６１－２０６（１９８５））。重鎖間Ｓ－Ｓ結合を形成する最初と最後のシステイン残基を同じ位置に配置することで、他のＩｇＧ同種のヒンジ領域をＩｇＧ１配列とアラインメントすることができる。

【0056】

ヒトＩｇＧ Ｆｃ領域（「Ｃ２」ドメインとも呼ばれる）の「Ｃ_Ｈ２ドメイン」は、通常、約第２３１位アミノ酸から約第３４０位アミノ酸まで伸びている。Ｃ_Ｈ２ドメインは、別の一つのドメインと非緊密的にペアする点で独特である。逆に、完全な天然ＩｇＧ分子の２つのＣ_Ｈ２ドメインの間に、Ｎ－で結合された２つの分岐炭水化物鎖が挿入されている。炭水化物は、ドメイン－ドメインのペアリングに対して代わりのものを提供し、Ｃ_Ｈ２ドメインの安定化に寄与する可能性があると推測されている。Ｂｕｒｔｏｎ，Ｍｏｌｅｃ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２２：１６１－２０６（１９８５）。

【0057】

「Ｃ_Ｈ３ドメイン」（「Ｃ３」ドメインとも呼ばれる）は、Ｆｃ領域におけるＣ_Ｈ２ドメインＣ末端残基への伸びを含む（即ち、約アミノ酸残基３４１から抗体配列のＣ末端まで、通常、ＩｇＧのアミノ酸残基４４６又は４４７にある）。

【0058】

本明細書における「Ｆｃ領域」又は「断片結晶化可能領域」という用語は、天然配列Ｆｃ領域及び変異体Ｆｃ領域を含む、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用される。免疫グロブリン重鎖Ｆｃ領域の境界は異なる場合があるが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基又はＰｒｏ２３０からそのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付け方式による残基４４７）は、例えば、抗体の製造又は精製過程中に除去することができ、又は、抗体重鎖をコードする核酸を組換え操作することで除去することができる。従って、完全抗体の組成は、すべてのＫ４４７残基が除去された抗体集団、Ｋ４４７残基が除去されない抗体集団、及び、Ｋ４４７残基を含む抗体とＫ４４７残基を含まない抗体との混合物を有する抗体集団を含み得る。本明細書に記載の抗体に適した天然配列Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２（ＩｇＧ２Ａ、ＩｇＧ２Ｂ）、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む。

【0059】

「Ｆｃ受容体」又は「ＦｃＲ」は、抗体Ｆｃ領域に結合する受容体を示す。ＦｃＲは、最も好ましくは天然配列ヒトＦｃＲである。また、ＦｃＲは、好ましくは、ＩｇＧ抗体（γ受容体）に結合するＦｃＲであり、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩなどのサブクラスの受容体を含み、対立遺伝子変異体及びこれらの受容体の選択的スプライス形態を含み、ＦｃγＲＩＩ受容体は、ＦｃγＲＩＩＡ（一つの「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（一つの「阻害性受容体」）を含み、これらは、類似したアミノ酸配列を有し、主にその細胞質間ドメインで異なる。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインにおいて免疫受容体チロシンに基づく活性化モチーフ（ＩＴＡＭ）を一つ含む。阻害性受容体ＦｃγＲＩＩＢは、その細胞質ドメインにおいて免疫受容体チロシンに基づく阻害モチーフ（ＩＴＩＭ）を１つ含む。（Ｍ． Ｄａe（ウムラウト付きe）ｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）を参照する。ＦｃＲの概説は、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ． Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－９２（１９９１），Ｃａｐｅｌ等，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）、及び、ｄｅ Ｈａａｓ等，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０－４１（１９９５）を参照する。未来で決定されるＦｃＲを含む他のＦｃＲも、本明細書の「ＦｃＲ」という用語に含まれる。）。

【0060】

本明細書に使用される「エピトープ」という用語は、抗体又は抗体部分に結合する抗原の特定の原子又はアミノ酸の基を指す。２つの抗体又は抗体部分が抗原に対して競合的な結合を示す場合、抗原内の同じエピトープに結合することができる。

【0061】

本明細書に使用されるように、第１の抗体又はその断片が等モル濃度で存在する場合、第１の抗体又はその断片がその断片の第２の抗体の標的抗原結合の少なくとも約５０％（例えば、５５％、６０％、６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）を阻害する場合、第１の抗体又はその断片は、標的抗原に「競合的に」結合し、その逆も同様である。ＰＣＴ公開公報ＷＯ０３／４８７３１には、その交差競合に基づく「結合」抗体のハイスループットプロセスが記載されている。

【0062】

ここで使用される「特異的に結合する」、「特異的に認識する」及び「に対する」という用語は、標的と抗体又は抗体部分との結合など測定可能で再現可能な相互作用を指し、生体分子を含むヘテロ分子群が存在する場合に標的が存在するかどうかを決定する。例えば、標的（エピトープであり得る）を特異的に識別する抗体又は抗体部分は、より大きな親和性、アフィニティでより容易及び／又は他の標的への結合よりも長い持続時間で当該標的に結合する抗体又は抗体部分である。いくつかの実施形態において、抗体の無関係な標的への結合程度は、例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定された抗体の標的への結合程度よりも約１０％小さい。いくつかの実施形態において、標的を特異的に結合する抗体は１０^－５ Ｍ以下、１０^－６ Ｍ以下、１０^－７ Ｍ以下、１０^－８ Ｍ以下、１０^－９ Ｍ以下、１０^－１０ Ｍ以下、１０^－１１ Ｍ以下、又は、１０^－１２ Ｍ以下の解離定数（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態において、抗体は、異なる種のタンパク質中の保存的タンパク質のエピトープに特異的に結合する。いくつかの実施形態において、特異的な結合は、排他的な結合を含み得るが、必要としない。抗体又は抗原結合ドメインの結合特異性は、当分野で知られている方法によって実験的に決定することができる。このような方法は、Ｗｅｓｔｅｒｎブロッティング、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＥＣＬ、ＩＲＭＡ、ＥＩＡ、ＢＬＩ、ＢＩＡＣＯＲＥ^ＴＭアッセイ及びペプチドスキャンを含むが、これらに限られない。

【0063】

「単離された」抗体（又は構築体）は、その生産される環境の組成成分から同定、単離及び／又は回収された抗体（例えば、天然的な抗体又は組換え抗体）である。好ましくは、単離されたポリペプチドは、その生産される環境からの他のすべての組成成分に結合しない。

【0064】

本明細書に記載の構築体、抗体又はその抗原結合断片をコードする「単離された」核酸分子は、少なくとも１種の汚染核酸分子から同定・単離された核酸分子であり、通常、当該汚染核酸分子とその生成される環境において関連している。好ましくは、単離された核酸は、その生成される環境に関連するすべての組成成分に結合しない。本明細書に記載のポリペプチド及び抗体をコードする単離された核酸分子の形態は、それらの自然界に見られる形態又は環境とは異なる。従って、単離された核酸分子は、本明細書に記載の細胞に自然的に存在するポリペプチド及び抗体をコードする核酸と異なる。単離された核酸は、通常、核酸分子を含有する細胞に含まれる核酸分子を含むが、核酸分子は、染色体外に存在しているか、又は、本来の染色体の位置と異なる染色体の位置に存在している。

【0065】

核酸は、他の核酸配列と機能的な関係にある場合、「作動可能に連結」されている。例えば、プレ配列又は分泌リーダー配列のＤＮＡがポリペプチドの分泌に関与するプレプレタンパク質として発現する場合、作動可能にポリペプチドのＤＮＡに連結されており、プロモーター又はエンハンサーが配列の転写に影響を与える場合、プロモーター又はエンハンサーは、コード配列に動作可能に連結されており、又は、リボソーム結合部位は、翻訳を容易にするように配置されている場合、コードする配列に動作可能に連結されている。通常、「作動可能に連結」とは、連結されているＤＮＡ配列が連続しており、分泌リーダー配列が存在する場合、連続して、かつ、リーディングフレームにあることを意味する。しかしながら、エンハンサーは必ずしも連結しているわけではない。連結は、好都合な制限的部位での連結によってなされる。そのような部位が存在しない場合、通常の操作プロトコールに従い、合成オリゴヌクレオチドアダプター又はリンカーを使用する。

【0066】

本明細書に使用される「ベクター」という用語は、それに連結された別の核酸を運搬することができる、核酸分子を指す。当該用語は、自己複製核酸構造としてのベクター、及び、それに導入された宿主細胞のゲノム中に組み込まれるベクターを含む。いくつかのベクターは、それに作動可能に連結された核酸の発現を指示することができる。このようなベクターは、本明細書において「発現ベクター」とも称される。

【0067】

本明細書に使用される「トランスフェクション」、「形質転換」又は「形質導入」という用語は、外因性核酸を宿主細胞に転移又は導入するプロセスを指す。「トランスフェクション」、「形質転換」又は「形質導入」された細胞は、外因性核酸にトランスフェクトされた、又は、形質転換又は形質導入された細胞である。この細胞には、初代被験者細胞及びその子孫が含まれる。

【0068】

「宿主細胞」、「宿主細胞株」及び「宿主細胞培養物」という用語は、互いに交換可能に用いられ、外因性核酸が導入された細胞（このような細胞の子孫を含む）を指す。宿主細胞は、「形質転換体」及び「形質転換細胞」を含み、初代形質転換細胞及び継代数によらずこの細胞に由来する子孫を含む。子孫は、核酸の含有量が親細胞と完全に同一でなく、突然変異を含んでいる可能性がある。本明細書において、初期の形質転換細胞からスクリーニング・選択された、同様な機能又は生物学的活性を有する変異体子孫も、含まれる。

【0069】

本明細書に使用される「治療」又は「治療」は、有益的な結果又は理想的な結果（臨床結果を含む）を得る方法である。本願において、有益的な臨床結果又は理想的な臨床結果は、疾患に引き起こされる１つ又は複数の症状の軽減、疾患の程度の軽減、疾患の安定化、疾患の伝播の防止又は遅延、疾患の再発の防止又は遅延、疾患の進行の遅延又は減速、疾患の状態の改善、疾患の緩和（部分的又は全体的に）、疾患の治療に必要な１種又は複数種の他の薬物の用量の減少、疾患の進行の遅延、生活の質の向上又は改善、体重の増加、及び／又は生存期間の延長から選ばれる１つ又は複数を含むが、これらに限られない。本願の方法では、これらの治療発想のいずれか１つ又は複数を想定している。

【0070】

用語「抑制」とは、任意の表現特徴の減少又は停止、或いはその特徴の発生率、程度又は可能性の減少又は停止を意味する。「減少」又は「抑制」とは、参考文献と比較して、活性、機能及び／又は量の低下、減少又は停止を意味する。いくつかの実施形態では、「減少」又は「阻害」によって全体の２０％又は２０％超えの減少を引き起こす能力を意味し、別の実施形態では、「減少」又は「阻害」によって全体の５０％又は５０％超えの減少を引き起こす能力を意味する。さらに別の実施形態では、「減少」又は「抑制」によって、全体の７５％、８５％、９０％、９５％又はこれら超えの減少を引き起こす能力を指す。

【0071】

本明細書で使用される「参照」とは、比較のために使用される任意のサンプル、対照、又はレベルを意味する。参照は、健常及び／又は非罹患のサンプルから得ることができる。いくつかの例において、参照は、治療を受けていないサンプルから得ることができる。いくつかの例において、参照は、個体からの非罹患サンプル又は治療を受けていないサンプルである。いくつかの例において、参照は、個体又は患者ではない１つ又は複数の健常な個体から得る。

【0072】

本明細書で使用される「病気の進行を遅延する」とは、病気の進行を延期させ、妨害し、減速させ、遅延させ、安定させ、抑制し、及び／又は遅らせることを意味する。この遅延は、病気の病歴及び／又は治療を受けている個体の状態によって異なる時間の長さを有する場合がある。当業者にとって、個体は病気を発症しないため、十分又は顕著な遅延が実際に予防を含み得ることは自明である。

【0073】

本明細書で使用される「予防」は、この病気にかかりやすい可能性があるが、まだ病気と診断されていない個体における病気の発生又は再発の予防を提供することを含む。

【0074】

本明細書で使用されるように、機能又は活性を「抑制」することは、注目の条件又はパラメータ以外、他の条件が同じである場合と比較し、又は、別の条件と比較すると、機能又は活性を低下させる。例えば、抗体が存在しない腫瘍の成長率と比較して、腫瘍の成長を阻害する抗体は、腫瘍の成長率を低下させる。

【0075】

「被験者」、「個体」及び「患者」という用語は、本明細書において、哺乳動物に交換可能に使用され、哺乳動物は、ヒト、ウシ、ウマ、ネコ、イヌ、げっ歯類動物又は霊長類動物を含むがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、個体は、ヒトを指す。

【0076】

薬物の「有效量」とは、所望の治療的結果又は予防的結果を達成するのに必要な用量及び期間で有効な量を指す。具体的な用量は、選択された特定の薬剤、従うべき投与方案、他の化合物と組み合わせて使用するか否か、投与時間、画像化される組織、及びそれを運ぶ物理的運搬システムから選ばれる１つ又は複数の状況に応じて変化する可能性があり得る。

【0077】

「医薬製剤」及び「医薬組成物」という用語は、有効成分の生物学的活性を有効にする形態で存在し、製剤を使用する個体に対して許容できない毒性を有する追加成分を含まない製剤を指す。このような製剤は無菌であってもよい。

【0078】

「薬学的に許容される担体」とは、当分野で治療薬物とともに用いられる汎用な毒性のない固体、半固体、又は、液体の充填剤、希釈剤、封入材料、製剤助剤又は担体を指し、前記薬物とともに個体に使用される「薬物組成物」を含む。薬学的に許容される担体は、レシピエントに対し、使用される用量及び濃度で非毒性であり、製剤の他の成分と相容性を有する。薬学的に許容される担体は、使用される製剤に好適である。薬学的に許容される担体又は助剤は、好ましくは、毒物学及び製造試験に必要な基準に該当するか、及び／又は、米国食品医薬品局に編集された不活性成分のガイドラインに含まれている。

【0079】

「無菌」製剤は、無菌であるか、又は、実質的に生きている微生物やその胞子がない。

【0080】

１種又は複数種のさらなる治療薬物との「併用」投与は、任意の順序で同時（合併）投与及び連続投与を含む。

【0081】

「同時」という用語は、本明細書において、２種又は複数種の治療薬物の使用を指すために使用され、少なくとも部分的な投与が時間で重複しているか、又は、一方の治療薬物の使用が、他方の治療薬物の使用に対して短時間である。例えば、２種又は複数種の治療薬を、約６０分以下、例えば、約３０分間以下、１５分間以下、１０分間以下、５分間以下、１分間以下の間隔で使用する。

【0082】

「順序」という用語は、本明細書において、１種又は複数種の薬物が、１つ又は複数の他の薬物が投与停止した後、それに引き続いて使用される、２種類又は複数種類の治療薬物の使用を指すために使用される。例えば、２種又は複数種の治療薬物を使用する間隔は、約１５分間を超え、例えば、約２０分間、３０分間、４０分間、５０分間又は６０分間、１日、２日、３日、１週間、２週間、１ヶ月又はそれより長い時間である。

【0083】

本明細書に使用される「結合」とは、別の治療方式に加えて、もう一つの治療方法を使用することを意味する。従って、「結合」とは、ある治療方法を個体に実施する前、中、又は後に別の治療方法を実施することを意味する。

【0084】

用語「薬品説明書」は、通常、治療製品の商業包装に含まれる説明を指し、このような治療製品の使用に関する適応症、使用、用量、投与、総合治療、禁忌症及び／又は警告の情報を含む。

【0085】

「製品」とは、少なくとも１つの試薬を含む任意の製品（例えば、包装又は容器）又はキットであり、例えば、疾患又は病状を治療するための薬物、又は本明細書に記載のバイオマーカーを特異的に検出するためのプローブである。いくつかの実施形態において、製品又はキットは、本明細書に記載の方法を実行するためのユニットとして宣伝、配布、又は販売される。

【0086】

本明細書に記載の応用される実施形態は、実施形態「からなる」及び／又は「実質的にからなる」を含むと理解すべきである。

【0087】

本明細書において、「約」の値又はパラメータへの引用（及び記載）には、その値又はパラメータ自体の変更が含まれる。例えば、「約Ｘ」に関する記載には、「Ｘ」に関する記載が含まれる。

【0088】

本明細書に使用される「約Ｘ－Ｙ」は、「約Ｘから約Ｙまで」と同じ意味を有する。

【0089】

本明細書及び添付の特許請求の範囲に使用されるように、文脈において明確的に断らない限り、単数形「一」、「又は」及び「前記」は、複数の引用を含む。

【0090】

ＩＩ． 抗スクレロスチン構築体

【0091】

本願は、抗スクレロスチン抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体を提供し、前記抗スクレロスチン抗体部分は、本明細書に記載のスクレロスチン（ＳＯＳＴ遺伝子発現タンパク質生成物）に特異的に結合する。

【0092】

スクレロスチンは、Ｃ末端システインノット様（ＣＴＣＫ）ドメインを持つ分泌型糖タンパク質であり、骨形態形成タンパク質（ＢＭＰ）拮抗薬のＤＡＮ（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ－ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｇｅｎｅ ａｂｅｒｒａｔｉｖｅ ｉｎ ｎｅｕｒｏｂｌａｓｔｏｍａ）ファミリーと配列類似性がある。この遺伝子の機能不全の突然変異は、進行性の骨の異常増殖を引き起こす可能な常染色体劣性遺伝性疾患である硬化症に関連する。この遺伝子下流の欠失は、ｖａｎ Ｂｕｃｈｅｍ病と呼ばれるより軽い病気に関連する、スクレロスチンの発現の低下に繋がる。

【0093】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分がスクレロスチンのエピトープに結合し、前記エピトープがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６に示されるアミノ酸配列を含む、抗スクレロスチン構築体を提供する。

【0094】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0095】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0096】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0097】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0098】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0099】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0100】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0101】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0102】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0103】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0104】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、抗体部分は、スクレロスチンの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0105】

いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１～４及び１２のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５～８及び１３のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９～１１及び１４のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５～１７のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８及び１９のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０及び２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。

【0106】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0107】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0108】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、又は、８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性のアミノ酸配列を有する変異体を含む。

【0109】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み、或いは、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0110】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性のアミノ酸配列を有する変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0111】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、或いは、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列を有する変異体を含む。

【0112】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性のアミノ酸配列を有する変異体を含む。

【0113】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性のアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0114】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み、或いは、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性のアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み、或いは、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0115】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８アミノ酸配列のＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0116】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８アミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0117】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
ａ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｂ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｃ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｄ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｅ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｆ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｇ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｈ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｉ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｊ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｋ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、
ｌ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、或いは、
ｍ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む、抗スクレロスチン構築体を提供する。

【0118】

いくつかの実施形態において、当該構築体は、全長抗体、二重特異性抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、ｄｓｓｃＦｖ、（ｄｓＦｖ）_２、Ｖ_ＨＨ、Ｆｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリボディ（ｔｒｉｂｏｄｙ）及びテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）から選ばれる抗体又はその抗原結合断片を含み、或いは、この抗体又はその抗原結合断片である。

【0119】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、全長抗体である。

【0120】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、ｓｃＦｖ又はｄｓｓｃＦｖである。

【0121】

いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチン抗体部分は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭ及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる免疫グロブリンのＦｃ断片を含む。いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチン抗体部分又は全長抗体は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる免疫グロブリンのＦｃ断片を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して低減されたエフェクター機能を有する。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたエフェクター機能を有する。

【0122】

いくつかの実施形態において、抗体部分は、本明細書に記載のいずれかの抗体部分のヒト化抗体を含む。

【0123】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗スクレロスチン融合タンパク質を含むか、或いは、抗スクレロスチン融合タンパク質である。

【0124】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、多重特異性抗スクレロスチン構築体（例えば、二重特異性抗体）を含むか、又は、多重特異性抗スクレロスチン構築体（例えば、二重特異性抗体）である。

【0125】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである。

【0126】

ａ）抗体親和性

【0127】

抗体部分の結合特異性は、当分野で知られている方法によって試験して決定することができる。このような方法は、Ｗｅｓｔｅｒｎブロッティング、ＥＬＩＳＡ、ＲＩＡ、ＥＣＬ、ＩＲＭＡ、ＥＩＡ、ＢＬＩ、ＢＩＡＣＯＲＥ^ＴＭアッセイ及びペプチドスキャンを含むが、これらに限られない。

【0128】

いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_Ｄは、約１０^－７Ｍ～約１０^－１２Ｍ、約１０^－７Ｍ～約１０^－８Ｍ、約１０^－８Ｍ～約１０^－９Ｍ、約１０^－９Ｍ～約１０^－１０Ｍ，約１０^－１０Ｍ～約１０^－１１Ｍ、約１０^－１１Ｍ～約１０^－１２Ｍ、約１０^－７Ｍ～約１０^－１２Ｍ、約１０^－８Ｍ～約１０^－１２Ｍ、約１０^－９Ｍ～約１０^－１２Ｍ、約１０^－１０Ｍ～約１０^－１２Ｍ，約１０^－７Ｍ～約１０^－１１Ｍ、約１０^－８Ｍ～約１０^－１１Ｍ、約１０^－９Ｍ～約１０^－１１Ｍ、約１０^－７Ｍ～約１０^－１０Ｍ、約１０^－８Ｍ～約１０^－１０Ｍ、又は、約１０^－７Ｍ～約１０^－９Ｍである。いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_Ｄは、約１０^－７Ｍ、約１０^－８Ｍ、約１０^－９Ｍ、約１０^－１０Ｍ、約１０^－１１Ｍ、又は、約１０^－１２Ｍのいずれかより高い。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、カニクイザルスクレロスチンである。

【0129】

いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_ｏｎは、約１０^３Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^８Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^３Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^４Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^４Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^５Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^５Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^６Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^６Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^７Ｍ^－１ｓ^－１、又は、約１０^７Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^８Ｍ^－１ｓ^－１である。いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_ｏｎは、約１０^３Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^５Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^４Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^６Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^５Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^７Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^６Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^８Ｍ^－１ｓ^－１、約１０^４Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^７Ｍ^－１ｓ^－１、又は、約１０^５Ｍ^－１ｓ^－１～約１０^８Ｍ^－１ｓ^－１である。いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_ｏｎは、１０^３Ｍ^－１ｓ^－１、１０^４Ｍ^－１ｓ^－１、１０^５Ｍ^－１ｓ^－１、１０^６Ｍ^－１ｓ^－１、１０^７Ｍ^－１ｓ^－１又は、１０^８Ｍ^－１ｓ^－１のいずれか以下。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、カニクイザルスクレロスチンである。

【0130】

いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_ｏｆｆは、約１ｓ^－１～約１０^－６ｓ^－１、約１ｓ^－１～約１０^－２ｓ^－１、約１０^－２ｓ^－１～約１０^－３ｓ^－１、約１０^－３ｓ^－１～約１０^－４ｓ^－１、約１０^－４ｓ^－１～約１０^－５ｓ^－１、約１０^－５ｓ^－１～約１０^－６ｓ^－１、約１ｓ^－１～約１０^－５ｓ^－１、約１０^－２ｓ^－１～約１０^－６ｓ^－１、約１０^－３ｓ^－１～約１０^－６ｓ^－１、約１０^－４ｓ^－１～約１０^－６ｓ^－１、約１０^－２ｓ^－１～約１０^－５ｓ^－１、又は、約１０^－３ｓ^－１～約１０^－５ｓ^－１である。いくつかの実施形態において、抗体部分とスクレロスチンとの間の結合のＫ_ｏｆｆは、約１ｓ^－１、約１０^－２ｓ^－１、約１０^－３ｓ^－１、約１０^－４ｓ^－１、約１０^－５ｓ^－１又は約１０^－６ｓ^－１から選ばれる少なくとも１つである。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである。いくつかの実施形態において、スクレロスチンは、カニクイザルスクレロスチンである。

【0131】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分又は抗スクレロスチン構築体の結合親和性は、（例えば、小さいＫ_Ｄ値を有する）従来の抗スクレロスチン抗体（例えば、ロモソズマブ）より高い。

【0132】

ｂ）キメラ抗体又はヒト化抗体

【0133】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、キメラ抗体である。いくつかのキメラ抗体は、例えば、米国特許ＵＳ４，８１６，５６７，及び、Ｍｏｒｒｉｓｏｎ等,Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－６８５５（１９８４）に記載されている。いくつかの実施形態において、キメラ抗体は、非ヒト可変領域（例えば、マウス由来の可変領域）及びヒト定常領域を含む。いくつかの実施形態において、キメラ抗体は、前記クラス又はサブクラスが親抗体に比較して変化した「クラス切り替え」の抗体である。キメラ抗体は、その抗原結合断片を含む。

【0134】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、ヒト化抗体である。通常、非ヒト抗体に対して、ヒトに対する免疫原性を低下させるために、ヒト化されているが、親の非ヒト抗体の特異性及び親和性は、保存されている。通常、ヒト化抗体は、１つ又は複数の可変ドメインを含み、ＨＶＲ、例えば、ＣＤＲ（又はその一部）は、非ヒト抗体に由来し、ＦＲ（又はその一部）は、ヒト抗体配列に由来する。ヒト化抗体は、任意にヒト定常領域の少なくとも一部をさらに含む。いくつかの実施形態において、ヒト化抗体におけるいくつかのＦＲ残基は、例えば、抗体の特異性又は親和性を回復・向上させるために、非ヒト抗体からの対応する残基（例えば、ＨＶＲ残基を誘導する抗体）で置換されている。

【0135】

ヒト化抗体及びその調製方法の概説は、例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照され、そのさらなる説明については、例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ等，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）； Ｑｕｅｅｎ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：１００２９－１００３３ （１９８９）；米国特許ＵＳ５，８２１，３３７、ＵＳ７，５２７，７９１、ＵＳ６，９８２，３２１、以及、ＵＳ７，０８７，４０９；Ｋａｓｈｍｉｒｉ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：２５－３４（２００５）（ＳＤＲ（ａ－ＣＤＲ）移植の説明）；Ｐａｄｌａｎ，Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２８：４８９－４９８（１９９１）（「再表面処理」の説明）；Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：４３－６０（２００５）（「ＦＲシャッフリング」の説明；及び、Ｏｓｂｏｕｒｎ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ３６：６１－６８ （２００５）及びＫｌｉｍｋａ等，Ｂｒ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ，８３：２５２－２６０（２０００）（ＦＲシャッフリングの「誘導選択」方法の説明）を参照する。

【0136】

ヒト化に用いられるヒトフレームワーク領域は、「最適なフィッティング」方法を用いて選択されたフレームワーク領域（例えば、Ｓｉｍｓ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５１：２２９６（１９９３）を参照）、軽鎖又は重鎖可変領域の特定のサブグループに由来するヒト抗体の共通配列のフレームワーク領域（例えば、Ｃａｒｔｅｒ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８９：４２８５（１９９２）；及び、Ｐｒｅｓｔａ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１５１：２６２３（１９９３）を参照）、ヒト成熟（体細胞の突然変異）フレームワーク領域又はヒト生殖系フレームワーク領域（例えば、Ａｌｍａｇｒｏ ａｎｄ Ｆｒａｎｓｓｏｎ，Ｆｒｏｎｔ．Ｂｉｏｓｃｉ．１３：１６１９－１６３３（２００８）を参照）、及び、スクリーニングＦＲライブラリーに由来するフレームワーク領域（例えば、Ｂａｃａ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７２：１０６７８－１０６８４（１９９７）、及び、Ｒｏｓｏｋ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７１：２２６１１－２２６１８（１９９６）を参照）を含むが、これらに限られない。

【0137】

マウス由来抗体のヒト化は、公知的な、通常に使用されている技術であることが理解されるべきである。従って、配列表に開示の抗スクレロスチン抗体のヒト化形態のいずれか及びすべては、前臨床又は臨床環境に使用可能であることが理解されるべきである。このような前臨床又は臨床環境において、引用された抗スクレロスチン抗体又はその抗原結合領域のヒト化形態のいずれかを使用する場合、その時点のヒト化形態は、元の非ヒト化形態と同様又は類似の生物学的活性及び特徴を有すると予想される。

【0138】

ｃ）ヒト抗体

【0139】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、ヒト抗体（ヒトドメイン抗体又はヒトｄＡｂと称される）である。ヒト抗体は、当分野で知られている様々な技術を使用して生成することができる。ヒト抗体の説明について、通常、ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１），Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｃｕｒｒ，Ｏｐｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０：４５０－４５９（２００８）、及び、Ｃｈｅｎ，ＭｏｌＩｍｍｕｎｏｌ．４７（４）：９１２－２１（２０１０）を参照する。完全ヒトシングルドメイン抗体（又はｓｄＡｂ）を産生することができるトランスジェニックマウス又はラットは、当分野で知られているものである。例えば、ＵＳ２００９０３０７７８７Ａ１、米国特許ＵＳ８，７５４，２８７、ＵＳ２０１５０２８９４８９Ａ１、ＵＳ２０１００１２２３５８Ａ１、及び、ＷＯ２００４０４９７９４を参照する。

【0140】

ヒト抗体（例えば、ヒトｄＡｂｓ）は、抗原誘発に対して完全なヒト抗体又はヒト可変領域を有する完全な抗体を産生するように、改変されたトランスジェニック動物に免疫原を投与することで調製することができる。これらの動物は、通常、ヒト免疫グロブリン部位の全部又は一部を含有し、内因性免疫グロブリン部位を置換するか、染色外部に存在するか、又は、動物染色体にランダムに組み込まれている。このようなランスジェニックマウスにおいて、内因性免疫グロブリン部位は、通常、不活化される。ランスジェニック動物からヒト抗体を得る方法についての概説は，Ｌｏｎｂｅｒｇ，Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．２３：１１１７－１１２５（２００５）を参照する。また、例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ^ＴＭという技術が記載された米国特許ＵＳ６，０７５，１８１及びＵＳ６，１５０，５８４、ＨｕＭａｂ（登録商標）という技術が記載された米国特許ＵＳ５，７７０，４２９、Ｋ－Ｍ ＭＯＵＳＥ（登録商標）という技術が記載された米国特許ＵＳ７，０４１，８７０、及び、ＶｅｌｏｃｉＭｏｕｓｅ（登録商標）という技術が記載された米国特許出願の公開公報ＵＳ２００７／００６１９００を参照する）。このような動物に産生された完全な抗体に由来するヒト可変領域は、例えば、異なるヒト定常領域に結合することで、さらに改変することができる。

【0141】

ヒト抗体（例えば、ヒトｄＡｂｓ）は、ハイブリドーマによる方法によって調製することができる。ヒトモノクローナル抗体を産生するためのヒト骨髄腫及びマウス－ヒト異種骨髄腫細胞株が記載されている（例えば、Ｋｏｚｂｏｒ Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ等，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１－６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７）、及び、Ｂｏｅｒｎｅｒ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７：８６（１９９１）を参照する）。ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術によって産生されたヒト抗体の記載について、Ｌｉ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）も参照してもよい。他の方法は、例えば、米国特許ＵＳ７，１８９，８２６（ハイブリドーマ細胞株を利用するヒトモノクローナルＩｇＭ抗体の産生の記述）及びＮｉ，Ｘｉａｎｄａｉ Ｍｉａｎｙｉｘｕｅ，２６（４）：２６５－２６８（２００６）（ヒト－ヒトハイブリドーマが記載される）に記載されている方法も参照してもよい。ヒトハイブリドーマ技術（Ｔｒｉｏｍａ技術）の記載は、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ，Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ，２０（３）：９２７－９３７（２００５）、及び、Ｖｏｌｌｍｅｒｓ ａｎｄ Ｂｒａｎｄｌｅｉｎ、Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｆｉｎｄｉｎｇｓ ｉｎ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２７（３）：１８５－９１（２００５）も参照してもよい。

【0142】

ヒト抗体（例えば、ヒトｄＡｂｓ）は、また、ヒトのファージディスプレイライブラリーから選択されるＦｖクローン可変ドメイン配列を単離することで生成され得る。その後、このような可変ドメイン配列を、理想的なヒト定常ドメインと組み合わせることができる。抗体ライブラリーからヒト抗体を選択する技術は、以下のとおりである。

【0143】

ｄ）ライブラリー由来抗体

【0144】

本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体部分は、コンビナトリアルライブラリーをスクリーニングすることで、所望の活性又は活性を有する抗体を単離することができる。例えば、理想的な結合特性を有する抗体を得るためにファージディスプレイライブラリーを作製し、このようなライブラリーをスクリーニングする様々な方法は。当分野で知られているものである。このような方法の概説は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ等．Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７（Ｏ’Ｂｒｉｅｎ等，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ、ＮＪ，２００１）を参照し、更なる記載は、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ等，Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２－５５４、Ｃｌａｃｋｓｏｎ等，Ｎａｔｕｒｅ ３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｍａｒｋｓ ａｎｄ Ｂｒａｄｂｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１６１－１７５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ、Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３）；Ｓｉｄｈｕ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－１２４７２（２００４）；及び、Ｌｅｅ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）を参照する。シングルドメイン抗体ライブラリーを構築する方法は、既に記載されており、例えば、米国特許ＵＳ７３７１８４９を参照する。

【0145】

いくつかのファージディスプレイ方法において、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ等，Ａｎｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１２：４３３－４５５（１９９４）に記載されるように、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によってＶ_Ｈ及びＶ_Ｌ遺伝子ライブラリーをそれぞれクローニングし、ファージライブラリーにおいてランダムに組換え、次いで、抗原結合ファージをスクリーニングする。ファージは、通常、ｓｃＦｖ断片又はＦａｂ断片の態様で抗体断片をディスプレイする。免疫由来ライブラリーは、ハイブリドーマの構築を必要とせず、免疫原に対する親和性の高い抗体を提供する。或いは、例えば、Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ等，ＥＭＢＯ Ｊ，１２：７２５－７３４（１９９３）に記載されるように、いかなる免疫を行わず、天然ライブラリー（例えば、ヒト）をクローニングし、広い範囲にある非自己抗原及び自己抗原に対する単一由来の抗体を提供する。最後に、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１－３８８（１９９２）に記載されるように、天然ライブラリーは、幹細胞から再配列されていないＶ遺伝子断片をクローニングし、ランダム配列を含むＰＣＲ引物を用い、超可変ＣＤＲ３区域をコードし、インビトロで再配列を完了することで合成することができる。ヒト抗体ファージライブラリーが記載された特許公開明細書は、例えば、米国特許ＵＳ５，７５０，３７３及び米国特許公開明細書ＵＳ２００５／００７９５７４、ＵＳ２００５／０１１９４５５、ＵＳ２００５／０２６６０００、ＵＳ２００７／０１１７１２６、ＵＳ２００７／０１６０５９８、ＵＳ２００７／０２３７７６４、ＵＳ２００７／０２９２９３６及びＵＳ２００９／０００２３６０を含む。

【0146】

ヒト抗体ライブラリーから単離された抗体又は抗体断片は、本明細書におけるヒト抗体又はヒト抗体断片であると見なされる。

【0147】

ｅ）置換、挿入、欠失及び変異体

【0148】

いくつかの実施形態において、１つ又は複数のアミノ酸置換を有する抗体変異体を提供する。注目すべき置換変異部位は、ＨＶＲ（又はＣＤＲ）及びＦＲを含む。保存的置換は、表２の「好ましい置換」の項に見られる。より実質的な変化は、表２の「例示的な置換」の項に提供され、以下、アミノ酸側鎖の種類を参照しながら詳しく説明する。アミノ酸置換を標的抗体に導入し、生成物に対して、理想的な活性のスクリーニング、例えば、抗原結合の保持／改善、免疫原性の低減、又は、ＡＤＣＣ或いはＣＤＣの改善を行うことができる。

【0149】

【表2】

【0150】

アミノ酸は、一般的な側鎖の性質に応じて下記の群に分けられる。（１）疎水性：ノルロイシン、Ｍｅｔ、Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；（２）中性親水性：Ｃｙｓ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；（３）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；（４）塩基性：Ｈｉｓ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ；（５）主鎖のコンフォメーションに影響を及ぼす残基：Ｇｌｙ、Ｐｒｏ；（６）芳香族：Ｔｒｐ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ。

【0151】

非保存的置換は、１クラスにおける１つのメンバーを別のクラスに置き換えることを必要とする。

【0152】

１つのタイプの置換変異体は、親抗体の１つ又は複数の超可変領域残基（例えば、ヒト化抗体又はヒト抗体）の置換に関する。通常、さらなる研究のために選択され、得られた変異体は、親抗体に対してある生物学的特性（例えば、親和性の増加、免疫原性の低下）を改変（例えば、改善）させ、及び／又は、親抗体のある生物学的特性を実質的に保持させた。例示的な置換変異体は、例えば、本明細書に記載のファージディスプレイに基づく親和性成熟技術を使用して生成しやすい、親和性成熟抗体である。要するに、１つ又は複数のＨＶＲ残基が突然変異し、ファージにディスプレイされ、並びに、特定の生物学的活性（例えば、結合親和性）に対して選択された変異体抗体である。

【0153】

改変（例えば、置換）は、ＨＶＲにおいて行ってもよく、例えば、抗体親和性を向上させることができる。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」、即ち、体細胞成熟過程中に高頻度で突然変異を生じるコドンにコードされる残基（例えば、Ｃｈｏｗｄｈｕｒｙ，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２０７：１７９－１９６（２００８）を参照する）、及び／又は、ＳＤＲ（ａ－ＣＤＲ）において行ってもよく、得られた変異体Ｖ_Ｈ又はＶ_Ｌの結合親和性を検出する。二次ライブラリーを構築し、このライブラリーから再選択することで親和性成熟を獲得することに関する記載は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ １７８：１－３７ （Ｏ’Ｂｒｉｅｎ等，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，（２００１）を参照する）。親和性成熟のいくつかの実施形態において、様々な方法（例えば、エラープローンＰＣＲ、チェーンシャッフリング、又は、オリゴヌクレオチド特異的突然変異誘発）のいずれかによって多様性を成熟のために選択された可変遺伝子に導入する。そして、二次ライブラリーを構築する。その後、二次ライブラリーをスクリーニングし、理想的な親和性を有する任意の抗体変異体を同定する。多様性を導入するためのもう１つの方法は、幾つかのＨＶＲ残基 （例えば、４～６個の残基ごと）がランダムに群に分けられる、ＨＶＲ配合法に関する。抗原結合に関与するＨＶＲ残基は、例えば、アラニンスキャニング突然変異誘発又はモデリングを用いて、特異的に同定され得る。特に、ＣＤＲ－Ｈ３及びＣＤＲ－Ｌ３は、通常、標的化されている。

【0154】

いくつかの実施形態において、置換、挿入又は欠失は、このような改変が抗体の抗原結合能力を著しく低下させない限り、１つ又は複数のＨＶＲにおいて生じ得る。例えば、保存的改変（例えば、本明細書に提供される保存的置換）は、結合親和性を著しく低下させず、ＨＶＲにおいて行うことができる。このような改変は、ＨＶＲ「ホットスポット」又はＣＤＲの外部にある可能性がある。

【0155】

突然変異誘発を標的とする可能性のある抗体残基又は領域を同定する１つの有用な方法は、「アラニンスキャニング突然変異誘発」と称され、例えば、Ｃｕｎｎｉｎｇｈａｍ ａｎｄ Ｗｅｌｌｓ（１９８９）Ｓｃｉｅｎｃｅ，２４４：１０８１－１０８５に記載されている。当該方法において、１つの残基又は１セットの標的残基（例えば、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ及びＧｌｕなどの荷電残基）が同定され、中性又は負帯電のアミノ酸（例えば、アラニン又はポリアラニン）に置換され、これにより、抗体と抗原との相互作用に影響を与えるかどうかを決定する。アミノ酸位置に更なる置換を導入し、最初の置換に対する機能的感受性を実証する。あるいは、又は、さらに、抗体と抗原との接触点を決定するために、抗原抗体複合体の結晶構造。これら接触残基及び隣接残基は、置換の候補として標的化され、又は、除去され得る。複数の変異体をスクリーニングして、これらが所望の特性を有するかどうかを決定することができる。

【0156】

アミノ酸配列挿入は、長さが１つの残基から１００つ又は複数の残基を含むポリペプチドまでのアミノ末端及び／又はカルボキシル末端の融合、及び、単一の又は複数のアミノ酸残基の配列内への挿入を含む。末端挿入の例としては、Ｎ末端メチオニル残基を有する抗体を含む。抗体分子の他の挿入変異体は、抗体と酵素のＮ末端又はＣ末端（例えば、ＡＤＥＰＴに対する）との融合、又は、抗体血清半減期を増加させるポリペプチドを含む。

【0157】

ｆ）グリコシル化変異体

【0158】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）が、構造的グリコシル化の程度を増加又は減少させるように変化される。アミノ酸配列を変化させて１つ又は複数のグリコシル化部位を作成又は削除させることで、抗体グリコシル化部位の付加又は削除の実現を容易にすることができる。

【0159】

抗体部分がＦｃ領域を含む場合、これに付着される炭水化物を変化させることができる。哺乳動物細胞から産生される天然抗体は、通常、分岐した二分岐のオリゴ糖を１つ含み、当該オリゴ糖は、通常、Ｎ－結合によってＦｃ領域Ｃ_Ｈ２ドメインのＡｓｎ２９７に付着される。例えば、Ｗｒｉｇｈｔ等．ＴＩＢＴＥＣＨ １５：２６－３２（１９９７）を参照する。オリゴ糖は、様々な炭水化物、例えば、マンノース、Ｎ－アセチルグルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）、ガラクトース及びシアル酸、及び二分岐のオリゴ糖構造における「ステム」に付着されるＧｌｃＮＡｃのフコースを含んでもよい。いくつかの実施形態において、改善されたある特性を有する抗体変異体を産生するために、抗体部分におけるオリゴ糖を改変させることができる。

【0160】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、Ｆｃ領域に（直接的又は間接的に）付着されたフコースを欠く炭水化物構造を有する。例えば、このような抗体におけるフコースの量は１％～８０％、１％～６５％、５％～６５％又は２０％～４０％であってもよい。例えば、ＷＯ２００８／０７７５４６に記載されるように、ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ質量分析法によって測定されたＡｓｎ２９７に付着されたすべての糖構造の総計（例えば、複合体、ヘテロ複合体及びハイマンノース構造）に対するＡｓｎ２９７糖鎖におけるフコースの平均量を計算することで、フコースの量を測定する。Ａｓｎ２９７とは、Ｆｃ領域の約２９７位に位置するアスパラギン残基（Ｆｃ領域における残基のＥＵ番号付け）を指し、しかしながら、Ａｓｎ２９７は、２９７位の上流又は下流の約±３つのアミノ酸の箇所に位置する可能性もあり、即ち、抗体の軽微な配列変動のため、２９４位と３００位の間にある。このようなフコシル化変異体は、改善されるＡＤＣＣ機能を有する可能性がある。米国特許公開公報ＵＳ ２００３／０１５７１０８（Ｐｒｅｓｔａ，Ｌ．）；ＵＳ２００４／００９３６２１（Ｋｙｏｗａ Ｈａｋｋｏ Ｋｏｇｙｏ Ｃｏ．，Ｌｔｄ）を参照する。「脱フコシル化」又は、「フコース欠損」抗体変異体に関する公開公報の例として、ＵＳ２００３／０１５７１０８；ＷＯ２０００／６１７３９；ＷＯ２００１／２９２４６；ＵＳ２００３／０１１５６１４；ＵＳ２００２／０１６４３２８；ＵＳ２００４／００９３６２１；ＵＳ２００４／０１３２１４０；ＵＳ２００４／０１１０７０４；ＵＳ２００４／０１１０２８２；ＵＳ２００４／０１０９８６５；ＷＯ２００３／０８５１１９；ＷＯ２００３／０８４５７０；ＷＯ２００５／０３５５８６；ＷＯ２００５／０３５７７７８；ＷＯ２００５／０５３７４２；ＷＯ２００２／０３１１４０；Ｏｋａｚａｋｉ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３６：１２３９－１２４９（２００４）；Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ等，Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）がある。脱フコシル化抗体を産生できる細胞株の例として、タンパク質フコシル化欠損Ｌｅｃ１３ ＣＨＯ細胞（Ｒｉｐｋａ等，Ａｒｃｈ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．２４９：５３３－５４５（１９８６）；米国特許出願ＵＳ２００３／０１５７１０８Ａ１；Ｐｒｅｓｔａ、Ｌ及びＷＯ２００４／０５６３１２Ａ１；Ａｄａｍｓ等，特に例１１）において、及びノックアウト細胞株、例えば、α－１，６－フコシルトランスフェラーゼ遺伝子、ＦＵＴ８、－ノックアウトＣＨＯ細胞（例えば、Ｙａｍａｎｅ－Ｏｈｎｕｋｉ等， Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏｅｎｇ．８７：６１４（２００４）； Ｋａｎｄａ、Ｙ．等， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｂｉｏｅｎｇ， ９４（４）：６８０－６８８（２００６）及びＷＯ２００３／０８５１０７を参照する）がある。

【0161】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、二分したオリゴ糖を有し、例えば、抗体のＦｃ領域に付着された二分岐のオリゴ糖がＧｌｃＮＡｃに二分されている。このような抗体変異体は、低下されたフコシル化及び／又は改善されたＡＤＣＣ機能を有し得る。このような抗体変異体の例示的な記載は、例えば、ＷＯ２００３／０１１８７８（Ｊｅａｎ－Ｍａｉｒｅｔ等）、米国特許ＵＳ６，６０２，６８４（Ｕｍａｎａ等）及びＵＳ２００５／０１２３５４６（Ｕｍａｎａ等）を参照する。さらにＦｃ領域に付着されたオリゴ糖に少なくとも１つのガラクトース残基を有する抗体変異体を提供する。このような抗体変異体は、改善されたＣＤＣ機能を備える可能性がある。このような抗体変異体の記述は、例えば、ＷＯ１９９７／３００８７（Ｐａｔｅｌ等）、ＷＯ１９９８／５８９６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）及びＷＯ１９９９／２２７６４（Ｒａｊｕ，Ｓ．）を参照する。

【0162】

ｇ）Ｆｃ領域変異体及び軽鎖定常領域変異体
いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、Ｆｃ断片を含む。

【0163】

「Ｆｃ領域」、「Ｆｃドメイン」、「Ｆｃ断片」又は「Ｆｃ」という用語は、定常領域の少なくとも一部を含む免疫グロブリン重鎖のＣ末端非抗原結合領域を指す。当該用語は、天然Ｆｃ領域及び変異体Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は、Ｃｙｓ２２６から重鎖のカルボキシル末端まで伸びる。しかしながら、Ｆｃ領域のＣ末端リジン（Ｌｙｓ４４７）は、Ｆｃ領域の構造又は安定性に影響を与えず、存在しても存在しなくてもよい。本明細書で特に断らない限り、ＩｇＧ又はＦｃ領域におけるアミノ酸残基の番号付けは、Ｋａｂａｔ等，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ， Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ， １９９１に記載の、ＥＵインデックスとも呼ばれる抗体のＥＵ番号付け方式に基づくものである。

【0164】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭのＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である免疫グロブリンに由来する。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である免疫グロブリンに由来する。

【0165】

いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して低減されたエフェクター機能を有する。（例えば、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）レベルによって測定される、少なくとも約３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、８５％、９０％又は９５％の低減したエフェクター機能）。

【0166】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片とは、ＩｇＧ１ Ｆｃ断片を指す。いくつかの実施形態において、ＩｇＧ１ Ｆｃ断片は、Ｌ２３４Ａ突然変異及び／又はＬ２３５Ａ突然変異を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片とは、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４ Ｆｃ断片を指す。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片とは、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ及び／又はＬ２３５Ａ突然変異を含むＩｇＧ４Ｆｃ断片を指す。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｎ２９７Ａ突然変異を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｎ２９７Ｇ突然変異を含む。

【0167】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ領域変異体を産生させるように、１種又は複数種のアミノ酸改変を抗体部分のＦｃ領域に導入してもよい。Ｆｃ領域変異体は、１つ又は複数のアミノ酸位置の１つアミノ酸改変（例えば、置換）を含むヒトＦｃ領域配列（例えば、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３又はＩｇＧ４ Ｆｃ領域）を含んでもよい。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、ラットＦｃ領域配列（例えば、ラットＩｇＧ２ Ｆｃ）又はマウスＦｃ領域配列（例えば、マウスＩｇＧ１ Ｆｃ）に由来する。

【0168】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域を含む。

【0169】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、及び、任意にＨ４３５、及び、任意にＹ４３６Ｆから選ばれる１つ又は複数（例えば、２つ、３つ又は４つ）の置換を含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。特に断らない限り、本明細書に記載の改変の番号付けは、ＥＵインデックスに基づくものである。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｆ１２６Ｃ、Ｌ１２８Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｆ１７０Ｃ、Ｐ１６１Ｃ、Ｖ１７３Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及び、Ｙ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５、及び、任意にＹ４３６Ｆから選ばれる１つ又は複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、又は、６つ）の置換を含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、ａ）Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ、ｂ）Ｆ１２６Ｃ、Ｌ１２８Ｃ、Ｆ１７０Ｃ、Ｐ１６１Ｃ及びＶ１７３Ｃから選ばれる１つの置換、及び、ｃ）任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｆ１２６Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆから選ばれる１つ又は複数（例えば、２つ、３つ、４つ、５つ、又は、６つ）の置換を含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｆ１２６Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、Ｌ１２８Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｃ１３１Ｓ、Ｆ１７０Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｃ１３１Ｓ、Ｖ１７３Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｆｃ断片は、Ｃ１３１Ｓ、Ｐ１７１Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、及びＹ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆを含む改変ヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含む。

【0170】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含む第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、ｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、を含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、ａ）Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、及び、任意にＨ４３５Ｒ、及び、任意にＹ４３６Ｆ、及びｂ）Ｆ１２６Ｃ、Ｌ１２８Ｃ、Ｆ１７０Ｃ、Ｐ１６１Ｃ及びＶ１７３Ｃから選ばれる一つの置換を含む。

【0171】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、及びｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、前記第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｆ１２６Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを含む。

【0172】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、及び、ｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、前記第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｌ１２８Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを含む。

【0173】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、及び、ｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、前記第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｃ１３１Ｓ、Ｆ１７０Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを含む。

【0174】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、及び、ｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、前記第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｃ１３１Ｓ、Ｖ１７３Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを含む。

【0175】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆｃ断片を含み、前記Ｆｃ断片は、ａ）第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域、及び、ｂ）第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、前記第１の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗを含み、前記第２の改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域は、Ｃ１３１Ｓ、Ｆ１７１Ｃ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ、Ｙ４０７Ｖ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを含む。

【0176】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆ１１８Ｃ、Ｓ１２１Ｃ、Ｑ１６０Ｃ、Ｓ１６２Ｃ、Ｓ１７６Ｃ及び／又はＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｓ１２１Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｆ１１８Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、Ｓ１７６Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチン構築体は、Ｑ１６０Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチン構築体は、Ｓ１６２Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0177】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、エフェクター機能の一部を保有しているが、エフェクター機能の全てを保有せず、これにより、いくつかの適用において、望ましい候補になる。これら適用において、抗体部分のインビボでの半減期が重要であるが、いくつかのエフェクター機能（例えば、補体及びＡＤＣＣ）が不要であるか、又は、有害である。ＣＤＣ及び／又はＡＤＣＣ活性の低下／枯渇を確認するために、インビトロ及び／又はインビボでの細胞毒性アッセイを実施することができる。例えば、抗体のＦｃγＲ結合を欠く（従って、ＡＤＣＣ活性を欠くおそれがある）が、ＦｃＲｎ結合能を保持することを確保するために、Ｆｃ受容体（ＦｃＲ）結合アッセイを実施することができる。ＡＤＣＣを媒介するための初代細胞であるＮＫ細胞は、ＦｃγＲＩＩＩのみを発現するが、単球は、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ及びＦｃγＲＩＩＩを発現する。造血細胞におけるＦｃＲ発現は、表２にまとめる（Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－４９２（１９９１）４６４ページ。標的分子のＡＤＣＣ活性を評価するためのインビトロアッセイの例は、米国特許第５，５００，３６２号（例えば、Ｈｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ．等， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８３：７０５９－７０６３（１９８６）を参照する）及びＨｅｌｌｓｔｒｏｍ，Ｉ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８２：１４９９－１５０２（１９８５）、５，８２１，３３７（Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ，Ｍ．等，Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．１６６：１３５１－１３６１（１９８７）を参照する）に記載されているが、これらに限定されない。又は、非放射性アッセイ方法（例えば、フローサイトメトリーのＡＣＴＩ^ＴＭによる非放射性細胞傷害アッセイ（Ｃｅｌｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｉｎｃ．Ｍｏｕｎｔａｉｎ Ｖｉｅｗ，ＣＡ、及び、ＣｙｔｏＴｏｘ９６（登録商標）による非放射性細胞傷害アッセイ（Ｐｒｏｍｅｇａ，Ｍａｄｉｓｏｎ，ＷＩ）を採用してもよい。このようなアッセイに使用されるエフェクター細胞は、末梢血単球（ＰＢＭＣ）及びナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含む。あるいは、又は、さらに、標的分子のＡＤＣＣ活性をインビボで、例えば、Ｃｌｙｎｅｓ等， Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９５：６５２－６５６（１９９８）に開示される動物モデルにおいて、評価することができる。さらに、抗体がＣ１ｑに結合することができないこと、及び、これによるＣＤＣ活性の欠如を確認するために、Ｃ１ｑ結合アッセイを実施することもできる。例えば、ＷＯ２００６／０２９８７９及びＷＯ２００５／１００４０２におけるＣ１ｑ及びＣ３ｃとＥＬＩＳＡとの結合を参照する。補体活性化を評価するために、ＣＤＣアッセイを行うことができる（例えば、Ｇａｚｚａｎｏ－Ｓａｎｔｏｒｏ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０２：１６３（１９９６）、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ．等， Ｂｌｏｏｄ １０１：１０４５－１０５２（２００３）、及び、Ｃｒａｇｇ，Ｍ．Ｓ． ａｎｄ Ｍ．Ｊ． Ｇｌｅｎｎｉｅ，Ｂｌｏｏｄ １０３：２７３８－２７４３（２００４）を参照する）。ＦｃＲｎ結合及びインビボでのクリアランス／半減期の測定は、当分野で知られている方法を使用して実施することもできる（例えば、Ｐｅｔｋｏｖａ，Ｓ．Ｂ．等，Ｉｎｔ’ｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１８（１２）：１７５９－１７６９（２００６）を参照する）。

【0178】

エフェクター機能の低下された抗体は、Ｆｃ領域における残基２３８、２６５、２６９、２７０、２９７、３２７及び３２９中の１つ又は複数が置換された抗体（米国特許ＵＳ第６，７３７，０５６号）を含む。このようなＦｃ突変異体は、アミノ酸２６５位、２６９位、２７０位、２９７位及び３２７位中の２つ又は複数が置換されたＦｃ突変異体を含み、残基２６５及び２９７がアラニンに置換された、いわゆる「ＤＡＮＡ」Ｆｃ突変異体（米国特許ＵＳ ７，３３２，５８１）を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｎ２９７Ａ突然変異を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｎ２９７Ｇ突然変異を含む。

【0179】

ＦｃＲに対する結合の改善又は減少された特定の抗体変異体が記載されている（例えば、米国特許６，７３７，０５６、ＷＯ２００４／０５６３１２、及び、Ｓｈｉｅｌｄｓ等，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）．を参照する）。

【0180】

いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片とは、ＩｇＧ１Ｆｃ断片を指す。いくつかの実施形態において、ＩｇＧ１Ｆｃ断片は、Ｌ２３４Ａ突然変異及び／又はＬ２３５Ａ突然変異を含む。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片とは、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４Ｆｃ断片を指す。いくつかの実施形態において、Ｆｃ断片は、Ｓ２２８Ｐ、Ｆ２３４Ａ及び／又はＬ２３５Ａ突然変異を含むＩｇＧ４Ｆｃ断片である。

【0181】

いくつかの実施形態において、抗体部分は、ＡＤＣＣが改善された１つ又は複数アミノ酸置換を有するＦｃ領域、例えば、Ｆｃ領域における２９８位、３３３位及び／又は３３４位の置換（残基のＥＵ番号付け）を含む。

【0182】

いくつかの実施形態において、例えば、米国特許ＵＳ６，１９４，５５１、ＷＯ９９／５１６４２及びＩｄｕｓｏｇｉｅ等， Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１６４：４１７８－４１８４（２０００）に記載されているように、Ｆｃ領域において、Ｃ１ｑ結合及び／又は補体依存性細胞毒性（ＣＤＣ）の改変（即ち、改善又は低減）を行う。

【0183】

いくつかの実施形態において、前記抗体部分変異体は、変異体Ｆｃ領域を含み、前記変異体Ｆｃ領域は、半減期を改変するアミノ酸置換、及び／又は、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合を改変するアミノ酸置換を含む。半減期を増加させ、新生児Ｆｃ受容体（ＦｃＲｎ）への結合を改善させた抗体は、ＵＳ２００５／００１４９３４Ａ１（Ｈｉｎｔｏｎ等）に記載されており、前記新生児Ｆｃ受容体は、母体のＩｇＧを胎児に転移することを担う（Ｇｕｙｅｒ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１１７：５８７ （１９７６）及びＫｉｍ等，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２４：２４９（１９９４））。これら抗体は、Ｆｃ領域とＦｃＲｎとの結合を変化させた、１つ又は複数の置換を有するＦｃ領域を含む。このようなＦｃ変異体は、２５０位、２５２位、２５４位、２５６位、３０７位、３０８位、４２８位、４３４位（米国特許ＵＳ７，３７１，８２６）の１つ又は複数のＦｃ領域残基の箇所に置換を有する変異体を含み、Ｍ４２８Ｌ及びＮ４３４Ｓを有する、いわゆる「ＬＳ」Ｆｃ突変異体（ＷＯ２００９／０８６３２０）を含み、並びに、Ｍ２５２Ｙ、Ｓ２５４Ｔ及びＴ２５６Ｅを有する、いわゆる「ＹＴＥ」Ｆｃ突変異体（ＷＯ ２００２／０６０９１９）を含む。

【0184】

また、Ｄｕｎｃａｎ ＆ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ ３２２：７３８－４０ （１９８８）、米国特許ＵＳ５，６４８，２６０、米国特許ＵＳ５，６２４，８２１、及び、Ｆｃ領域変異体に関する他の例であるＷＯ９４／２９３５１を参照する。

【0185】

ｈ）システイン操作抗体変異体

【0186】

いくつかの実施形態において、システイン操作抗体部分、例えば、抗体の１つ又は複数の残基がシステイン残基に置換された「ｔｈｉｏＭＡｂｓ」を産生する必要がある。具体的な実施形態において、置換される残基は、抗体の接近可能部位に位置する。システインでこれらの残基を置換することで、反応性チオール基は、抗体の接近可能部位に位置つけられさせ、本明細書にさらに記載するように、抗体－薬物コンジュゲートを生成するように、抗体を他の部分（例えば、薬物部分又はリンカー薬物部分）にカップリングすることができる。いくつかの実施形態において、重鎖のＡ１１８（ＥＵ番号付け）、及び、重鎖Ｆｃ領域のＳ４００（ＥＵ番号付け）という残基中の１つ又は複数は、システインに置換される。システイン操作抗体部分は、例えば、米国特許ＵＳ７，５２１，５４１に記載されるように生成される。

【0187】

ｉ）抗体誘導体

【0188】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗体部分は、当分野で公知であり、容易に入手可能な他の非タンパク質部分を含むように、さらに改変されてもよい。抗体誘導体化に適した部分は、水溶性ポリマーを含むが、これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例として、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、エチレングリコール／プロピレングリコールのコポリマー、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ－１，３－ジオキソラン、ポリ－１，３，６－トリオキサン、エチレン／無水マレイン酸コポリマー、ポリアミノ酸（ホモポリマー又はランダムコポリマー）、デキストラン又はポリ（Ｎ－ビニルピロリドン）ポリエチレングリコール、プロピレングリコールホモポリマー、プロピレングリコール／プロピレンオキシド／エチレンオキシドコポリマー、ポリオキシエチル化ポリオール（例えば、グリセロール）、ポリビニルアルコール及びその混合物を含むが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水における安定性のために、製造において利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量を有し得、分枝状又は非分枝状であってもよい。抗体に付着されるポリマーの数は、変わってもよく、１種以上のポリマーが付着されると、同一の分子であっても異なる分子であってもよい。一般的に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び／又は種類は、以下の基準に基づいて決定されてもよく、例えば、改善されるべき抗体の具体的な特性又は機能、抗体誘導体が規定の条件で診断に使用されるかどうかなどを含むが、これらに限定されない。

【0189】

いくつかの実施形態において、抗体部分は、１種又は複数の、生物学的活性を有するタンパク質、ポリペプチド又はその断片を含むように、さらに改変されてもよい。本明細書で互換的に使用される「生物学的活性」又は「生物学的活性な」とは、具体的な機能を実行するためにインビボで生物学的活性を発見することを指す。例えば、特定の生体分子、例えば、タンパク質、ＤＮＡなどに組み合わせ、このような生体分子の活性を促進又は阻害することを指す。いくつかの実施形態において、生物学的活性を有するタンパク質又はその断片は、活性を有する原薬として、疾患又は病状を予防又は治療をするために患者に投与されるタンパク質及びポリペプチド、及び診断をするためのタンパク質及びポリペプチド、例えば、診断・検査又はインビトロでの検出に用いられる酵素、及び、疾患の予防をするための患者に投与されるタンパク質及びポリペプチド（例えば、ワクチン）を含む。

【0190】

●多重特異性抗スクレロスチン構築体

【0191】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、本明細書に係る抗スクレロスチン抗体部分によれば、抗スクレロスチン抗体部分のいずれか及び第２の抗原を特異的に認識する第２の結合部分（例えば、第２の抗体部分）を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を含む。いくつかの実施形態において、前記多重特異性抗スクレロスチン分子は、抗スクレロスチン抗体部分及び第２の抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、免疫チェックポイント分子である。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＤＫＫ１（Ｄｉｃｋｋｏｐｆ Ｗｎｔシグナル経路阻害剤１）又はＲＡＮＫＬ（NF－κＢ受容体活性化因子リガンド）である。

【0192】

●スクレロスチン及びＲＡＮＫＬを標的とする多重特異性構築体

【0193】

本願は、スクレロスチン及びＲＡＮＫＬを標的とする多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、スクレロスチンとは、ヒトスクレロスチンを指す。いくつかの実施形態において、ＲＡＮＫＬとは、ヒトＲＡＮＫＬを指す。

【0194】

ＲＡＮＫＬ（NF－κＢ受容体活性化因子リガンド）は、腫瘍壊死因子リガンドスーパーファミリーメンバー１１（ＴＮＦＳＦ１１）とも称される、オステオプロテゲリンのリガンドであり、破骨細胞分化及び活性化の肝心な因子とする。このタンパク質は、Ｔ細胞依存性免疫応答の調節に関与する樹状細胞生存因子であると証明されている。Ｔ細胞活性化は、当該遺伝子の発現を誘導し、破骨細胞の産生及び骨喪失の増加を招致することが報告されている。このタンパク質は、ＳＲＣキナーゼ及び腫瘍壊死因子受容体関連因子（ＴＲＡＦ６）に関与するシグナル複合体により抗アポトーシスキナーゼＡＫＴ／ＰＫＢを活性化し、当該タンパク質が、アポトーシスの調節において役割を果たすことを示す。マウス関連遺伝子の標的化破壊は、重度の骨硬化及び破骨細胞の欠如を招致する。欠損マウスは、Ｔリンパ球及びＢリンパ球の早期分化欠損を示し、妊娠期間中、小葉腺胞乳房構（ｌｏｂｕｌｏ－ａｌｖｅｏｌａｒ ｍａｍｍａｒｙ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ）を形成できなかった。

【0195】

●例示的な抗ＲＡＮＫＬ抗体部分

【0196】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＲＡＮＫＬ抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、抗体部分は、ＲＡＮＫＬの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0197】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＲＡＮＫＬ抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、約８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0198】

いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ部分は、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３を含み、それぞれＶ_Ｈ鎖領域におけるＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２に示される配列を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含み、並びに、それぞれＶ_Ｌ鎖領域におけるＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３に示される配列を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含む。

【0199】

いくつかの実施形態において、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第１の抗体部分及びスクレロスチンを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、抗ＲＡＮＫＬシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）部分を含み、前記第２の抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）、第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）及びＦｃ断片を含む全長抗体を含む、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、Ｆｃ断片を含む全長抗体の２本の重鎖に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、全長抗体の２本の軽鎖に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、全長抗体の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、全長抗体の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、リンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介して全長抗体に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、リンカーを介せず、全長抗体に融合する。

【0200】

いくつかの実施形態において、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第１の抗体部分及びスクレロスチンを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、抗ＲＡＮＫＬシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）部分を含み、前記第２の抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、前記構築体は、ａ）各キメラ重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「Ｃ_Ｈ１ドメイン」）、ｉｉｉ）抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂ、及び、ｉｖ）Ｆｃドメインを含む２つのキメラ重鎖であって、前記２つのＦｃドメインがＦｃ断片を形成している２つのキメラ重鎖、ｂ）Ｖ_Ｌ及び軽鎖定常ドメイン（「Ｃ_Ｌドメイン」）を含む２本の軽鎖を含む、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、第１のリンカーを介してＦｃドメインに融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂは、第２のリンカーを介してＶ_Ｈに融合する。

【0201】

いくつかの実施形態において、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第１の抗体部分及びスクレロスチンを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、抗ＲＡＮＫＬシングルドメイン抗体（ｓｄＡｂ）部分を含み、前記第２の抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、ａ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）抗ＲＡＮＫＬｓｄＡｂ、及びｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第１の重鎖、ｂ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「Ｃ_Ｈ１ドメイン」）及びｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第２の重鎖、及び、ｃ）Ｖ_Ｌ及び軽鎖定常ドメイン（「Ｃ_Ｌドメイン」）を含む軽鎖を含み、前記第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成している、多重特異性構築体を提供する。

【0202】

いくつかの実施形態において、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインの一方は、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意にＳ３５４Ｃ突然変異を含み、他方のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異及び任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含む。

【0203】

いくつかの実施形態において、前記第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬの結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む第３の抗体部分と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0204】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）本明細書によれば、抗スクレロスチン抗体部分のいずれかに記載の抗スクレロスチン抗体部分、ｂ）ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分（抗ＲＡＮＫＬ抗体部分、例えば、本明細書に記載の抗ＲＡＮＫＬ抗体部分のいずれか）を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチンＶ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、前記抗スクレロスチンＶ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。

【0205】

いくつかの実施形態において、前記抗スクレロスチンＶ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、前記抗スクレロスチンＶ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。

【0206】

いくつかの実施形態において、前記アミノ酸置換は、本願の表２に示される「例示的な置換」に限られる。いくつかの実施形態において、アミノ酸置換は、本願の表２に示される「好ましい置換」に限られる。

【0207】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を有する抗スクレロスチン全長抗体であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗スクレロスチン全長抗体、ｂ）抗スクレロスチン全長抗体の少なくとも２本の重鎖に融合する抗ＲＡＮＫＬ抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分は、２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分は、２本の重鎖のＣ末端に融合する。

【0208】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を有する全長抗体を含む抗ＲＡＮＫＬ抗体部分であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分、ｂ）抗ＲＡＮＫＬ全長抗体の少なくとも１本又は２本の重鎖に融合する抗スクレロスチン抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体部分のいずれか）を含む多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の重鎖のＣ末端に融合する。

【0209】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を有する抗スクレロスチン全長抗体であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗スクレロスチン全長抗体、ｂ）抗スクレロスチン全長抗体の少なくとも２本の軽鎖に融合する抗ＲＡＮＫＬ抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分は、２本の軽鎖のＮ末端に融合さする。いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分は、２本の軽鎖のＣ末端に融合する。

【0210】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗スクレロスチン全長抗体であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗スクレロスチン全長抗体、ｂ）抗ＲＡＮＫＬ全長抗体の少なくとも２本の軽鎖に融合する抗スクレロスチン抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の軽鎖のＣ末端に融合する。

【0211】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を含み、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）、第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及びＦｃ断片を含む全長抗体である、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、第１のリンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介して全長抗体に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、リンカーを介せず、全長抗体に融合する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－１は、第２のリンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介してＶ_Ｌ－１に融合する。

【0212】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）、第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及びＦｃ断片を含む全長抗体であり、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を含む、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の重鎖又は軽鎖の２者のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、第１のリンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介して全長抗体に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体に融合する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－２は、ｓｃＦｖを正しく組み立てるように第２のリンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介してＶ_Ｌ－２に融合する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－２は、リンカーを介せず、Ｖ_Ｌ－２に融合する。

【0213】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分を含む、クレロスチン及びＲＡＮＫＬを特異的に認識するス多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、前記構築体は、ａ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－１、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）を含む第１の軽鎖を有する第１のポリペプチド、ｂ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－１、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）及びｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第１の重鎖を有する第２のポリペプチド、ｃ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）及びｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第２の重鎖を有する第３のポリペプチド、及び、ｄ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第２の軽鎖を有する第４のポリペプチドを含み、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成している、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識し、第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識し、第２の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識する。

【0214】

いくつかの実施形態において、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインの一方は、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意にＳ３５４Ｃ突然変異を含み、他方のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異及び任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含み、ここで、番号付けは、ＥＵインデックスに基づく。

【0215】

いくつかの実施形態において、ｉ）第１のＣＨ１ドメイン及び第１のＣＬドメイン、又は、ｉｉ）第２のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＬドメインは、いずれも、ａ）１４１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｂ）１６８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６４位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｃ）１２６位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４中）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１２１位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｄ）１２８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１８位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｅ）１７０位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１７６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｆ）１７１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６２位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｇ）１７３位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６０位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、から選ばれるものであり、ここで、番号付けは、ＥＵインデックスに基づく。

【0216】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、各重鎖が第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）を含み、各軽鎖が第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗スクレロスチン全長抗体であり、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗ＲＡＮＫＬ単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を含み、前記第２の抗体部分は、抗スクレロスチン全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0217】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分和第２の抗体部分を含み、スクレロスチン及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、前記構築体は、ａ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－１、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）を含む第１の軽鎖を有する第１のポリペプチド、ｂ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－１、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第１の重鎖を有する第２のポリペプチド，ｃ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第２の重鎖を有する第３のポリペプチド、及び、ｄ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第２の軽鎖を有する第４のポリペプチドを含み、ここで、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成しており、第１の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識し、第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0218】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を有する第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖、を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0219】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含む前記第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖、を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれかのアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0220】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む前記第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む前記第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖、を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0221】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖、を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0222】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を有する、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２的Ｃ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合している。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合している。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖的Ｃ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー，例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合している。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー，例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合している。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず融合している。

【0223】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0224】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0225】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0226】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0227】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0228】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性構築体を提供する。

【0229】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合している。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず融合している。いくつかの実施形態において、ｓｃＦｖは、Ｖ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異及びＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異からなるＨ４４－Ｌ１００ジスルフィド結合を有するｄｓｓｃＦｖに変換した。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合している。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介しするか、或いは、リンカーを介せず融合している。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合している。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず、融合している。

【0230】

いくつかの実施形態において、抗ＲＡＮＫＬ抗体部分及び抗スクレロスチン抗体部分は、リンカー（例えば、本明細書に記載の任意のリンカーのいずれか）を介して、結合部分の適切な役割を果たす可能な任意の作動可能な形態で互いに融合する。

【0231】

●スクレロスチン及びＤＫＫ１を標的とする多重特異性構築体

【0232】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、ａ）本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体部分のいずれかの抗スクレロスチン抗体部分、ｂ）ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分（抗ＤＫＫ１抗体部分）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体である。

【0233】

ＤＫＫ１（Ｄｉｃｋｋｏｐｆ関連タンパク質１）は、ｄｉｃｋｋｏｐｆタンパク質ファミリーの一つである。このファミリーのメンバーは、タンパク質－タンパク質相互作用を媒介する２つのシステインリッチドメインを特徴とする分泌タンパク質である。ＤＫＫ１は、ＬＲＰ６共受容体に結合し、β－カテニン依存的なＷｎｔシグナル伝達を阻害する。この遺伝子は、胚の発達に役割を果たし、成人の骨形成に重要な役割を果たす可能性がある。

【0234】

●例示的な抗ＤＫＫ１抗体部分

【0235】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0236】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0237】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えばｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗体又は抗体断片と競合し、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0238】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0239】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0240】

いくつかの実施形態において、多重特異性抗スクレロスチン構築体に使用される抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、ｓｃＦｖ）は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を有する抗体部分を含み、Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0241】

いくつかの実施形態において、抗ＤＫＫ１部分は、それぞれＶ_Ｈ鎖領域におけるＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０、６２又は６４に示される配列を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３、及び、それぞれＶ_Ｌ鎖領域におけるＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１、６３又は６５に示される配列を有するＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を含むＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0242】

いくつかの実施形態において、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗スクレロスチン全長抗体であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗スクレロスチン全長抗体、及び、ｂ）抗スクレロスチン全長抗体の少なくとも２本の重鎖に融合する抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗ＤＫＫ１抗体部分は、２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＤＫＫ１抗体部分は、２本の重鎖のＣ末端に融合する。

【0243】

いくつかの実施形態において、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を有する全長抗体を含む抗ＤＫＫ１抗体部分であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む、抗ＤＫＫ１抗体部分、ｂ）抗ＤＫＫ１全長抗体の少なくとも１本又は２本の重鎖に融合する抗スクレロスチン抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の重鎖のＣ末端に融合する。

【0244】

いくつかの実施形態において、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗スクレロスチン全長抗体であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗スクレロスチン全長抗体、ｂ）抗スクレロスチン全長抗体の少なくとも２つの重軽鎖に融合する抗ＤＫＫ１抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗ＤＫＫ１抗体部分は、２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗ＤＫＫ１抗体部分は、２本の軽鎖的Ｃ末端に融合する。

【0245】

いくつかの実施形態において、ａ）２本の重鎖及び２本の軽鎖を有する全長抗体を含む抗ＤＫＫ１抗体部分であって、各重鎖が重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）を含み、各軽鎖が軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗ＤＫＫ１抗体部分、ｂ）抗ＤＫＫ１全長抗体の少なくとも１本又は２本の軽鎖に融合する抗スクレロスチン抗体部分（例えば、本明細書に記載の抗体部分のいずれか）を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分は、２本の軽鎖のＣ末端に融合する。

【0246】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分及び抗ＤＫＫ１抗体部分は、リンカー（例えば、本明細書に記載のいずれかのリンカー）を介して、結合部分の適切な役割を果たす可能な任意の作動可能な形態で互いに融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分及び抗ＤＫＫ１抗体部分は、リンカーを介せず融合する。

【0247】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０、１６４又は１６６のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１、１６５又は１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６４のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６６のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ、Ｖ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず、融合する。

【0248】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0249】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0250】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0251】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0252】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0253】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0254】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0255】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0256】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0257】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0258】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0259】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0260】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0261】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0262】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0263】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0264】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0265】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0266】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0267】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0268】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０、１６４又は１６６のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１、１６５又は１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６４のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６６のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６７のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず融合する。いくつかの実施形態において、ｓｃＦｖは、Ｖ_Ｈ－１におけるＧ４４Ｃ突然変異及びＶ_Ｌ－１におけるＧ１００Ｃ突然変異からなるＨ４４－Ｌ１００ジスルフィド結合を有するｄｓｓｃＦｖに変換した。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず融合する。

【0269】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0270】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0271】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0272】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖と、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖とを含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0273】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず融合する。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず融合する。

【0274】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分と第２の抗体部分は、リンカーを介せず、融合する。

【0275】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第１の抗体部分、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む前記第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意にＶ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず、融合する。

【0276】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第１の抗体部分、及び、ｂ）第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分であって、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）抗スクレロスチン構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６４のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６５のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第２の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、前記Ｖ_Ｌ－２のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、任意に、Ｖ_Ｈ－２のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－２のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２及び前記Ｖ_Ｌ－２は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。いくつかの実施形態において、前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、全長抗体の２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第２の抗体部分は、２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む全長抗体であり、第１の抗体部分は、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１を含むｓｃＦｖである。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、前記Ｖ_Ｌ－１のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、任意にＶ_Ｈ－１のＣ末端に付着された単一のアラニンアミノ酸とともにＶ_Ｌ－１のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１及び前記Ｖ_Ｌ－１は、リンカーを介せず、融合する。前記ｓｃＦｖは、ｄｓｓｃＦｖであり、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を任意に含む。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＮ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の軽鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカー（例えば、ＧＳリンカー、例えば、（ＧＧＧＧＳ）４）を介して融合する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分は、リンカーを介せず、融合する。

【0277】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分を含み、スクレロスチンとＤＫＫ１を特異的に認識する多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み，前記構築体は、ａ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－１、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）を含む第１の軽鎖を有する第１のポリペプチド、ｂ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－１、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第１の重鎖を有する第２のポリペプチド、ｃ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第２の重鎖を有する第３のポリペプチド、及び、ｄ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第２の軽鎖を有する第４のポリペプチド、を含み、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成している、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識し、第２の抗体部分は、ＤＫＫ１を特異的に認識する。いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、ＤＫＫ１を特異的に認識し、第２の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識する。

【0278】

いくつかの実施形態において、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインの一方は、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意にＳ３５４Ｃ突然変異を含み、他方のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異、及び、任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含み、番号付けは、ＥＵインデックスに基づく。

【0279】

いくつかの実施形態において、ｉ）第１のＣＨ１ドメイン及び第１のＣＬドメイン、又は、ｉｉ）第２のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＬドメインは、いずれも、ａ）１４１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｂ）１６８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６４位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｃ）１２６位のアミノ酸がシステインに置換され、２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１２１位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｄ）１２８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１８位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｅ）１７０位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１７６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｆ）１７１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６２位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、ｇ）１７３位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６０位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、から選ばれるものであり、番号付けは、ＥＵインデックスに基づく。

【0280】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｆ１２６Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｓ１２１Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0281】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｆ１２６Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｓ１２１Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0282】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｌ１２８Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｆ１１８Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0283】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｌ１２８Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ及びＨ４３５Ｒを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｆ１１８Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0284】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｆ１７０Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｓ１７６Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0285】

いくつかの実施形態において、第１の重鎖は、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の重鎖は、Ｖ１７３Ｃ、Ｃ１３１Ｓ、Ｓ２２８Ｐ、Ｔ３６６Ｗ、Ｈ４３５Ｒ及びＹ４３６Ｆを有する改変したヒトＩｇＧ４重鎖Ｆｃ領域を含み、第２の軽鎖は、Ｑ１６０Ｃ及びＣ２１４Ｓを有する改変したヒトＩｇκ軽鎖定常領域を含む。

【0286】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識し、第２の抗体部分は、ＤＫＫ１を特異的に認識する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１６０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ａ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列のＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｂ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、ｃ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0287】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分は、ＤＫＫ１を特異的に認識し、第２の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を有し、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を有する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８又は１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７又は１６９のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９又は１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６８のアミノ酸配列を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７０のアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態において、ａ）前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｂ）前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、ｃ）前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１，ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0288】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、各重鎖が第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）を含み、各軽鎖が第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含む２本の重鎖及び２本の軽鎖を含む抗スクレロスチン全長抗体であり、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む抗ＤＫＫ１単鎖Ｆｖ断片（ｓｃＦｖ）を含み、前記第２の抗体部分は、抗スクレロスチン全長抗体の２本の重鎖のＣ末端に融合する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６アミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、又は、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0289】

いくつかの実施形態において、第１の抗体部分及び第２の抗体部分を含み、スクレロスチン及びＤＫＫ１を特異的に認識する多重特異性構築体であって、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）を含み、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ａ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－１、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）を含む第１の軽鎖を有する第１のポリペプチド、ｂ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－１、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第１の重鎖を有する第２のポリペプチド、ｃ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第２の重鎖を有する第３のポリペプチド、及び、ｄ）Ｎ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第２の軽鎖を有する第４のポリペプチドを含み、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成しており、第１の抗体部分は、スクレロスチンを特異的に認識し、第２の抗体部分は、ＤＫＫ１を特異的に認識する、多重特異性構築体を提供する。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－１は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。いくつかの実施形態において、前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性のアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％（例えば、８０％、８５％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％又は９９％から選ばれる少なくとも任意の１つ）の配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む。

【0290】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0291】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を含む第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２はＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0292】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0293】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0294】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0295】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0296】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0297】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0298】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0299】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0300】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0301】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む前記第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0302】

いくつかの実施形態において、ａ）第１の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の重鎖定常領域を有する第１の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含む第１の重鎖、ｂ）第１の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－１）及び第１の軽鎖定常領域を有する第１の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含む第１の軽鎖、ｃ）第２の可変重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の重鎖定常領域を有する第２の重鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含む第２の重鎖、及び、ｄ）第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）及び第２の軽鎖定常領域を有する第２の軽鎖であって、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含む第２の軽鎖を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体であって、Ｖ_Ｈ－１及びＶ_Ｌ－１は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分を含み、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２は、ＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、多重特異性（例えば、二重特異性）構築体を提供する。

【0303】

●抗スクレロスチン融合タンパク質又は抗体薬物コンジュゲート

【0304】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗スクレロスチン抗体部分（例えば、抗スクレロスチンｓｃＦｖ）及び第２の部分を含む融合タンパク質又は抗体薬物コンジュゲートである。

【0305】

いくつかの実施形態において、第２の部分は、半減期延長部分を含む。いくつかの実施形態において、半減期延長部分は、アルブミン結合部分（例えば、アルブミン結合抗体部分）である。

【0306】

いくつかの実施形態において、第２の部分は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、及び、カルシトニンから選ばれる１種である薬物を含む。

【0307】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分おいび第２の部分は、リンカー（例えば、「リンカー」一欄に記載のいずれかのリンカー）を介して融合する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン抗体部分及び第２の部分は、リンカーを介せず、融合する。

【0308】

●リンカー

【0309】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体は、２つの部分（例えば、前述した多重特異性構築体における、抗スクレロスチン抗体部分及び半減期延長部分、抗スクレロスチン抗体部分及び第２の結合部分）の間の１つ又は複数のリンカーを含む。抗スクレロスチン構築体に使用されるリンカーの長さ、柔軟性程度及び／又は他の特性は、特性にある程度の影響を及ぼす。親和性、１種又は複数種の特定抗原又はエピトープに対する特異性又は親和性を含むが、これらに限られない。例えば、２つの隣接するドメインが空間的に互いに干渉しないことを確保するために、長いリンカーを選択することができる。いくつかの実施形態では、リンカー（例えば、ペプチドリンカー）は、隣接するドメインが互いに自由に移動できるように、フレキシブル残基（例えば、グリシン及びセリン）を含む。例えば、グリシン－セリンビスコンジュゲートは、適切なペプチドリンカーであり得る。いくつかの実施形態において、リンカーは、非ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、ペプチドリンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、非開裂性リンカーである。いくつかの実施形態において、リンカーは、開裂性リンカーである。

【0310】

リンカーの他の注意すべき因子は、例えば、溶解度、親油性、親水性、疎水性、安定性（多少の安定度及び予定分解）、剛性、柔軟性、免疫原性、抗体結合への調節、ミセル又はリポソームに組み込む能力など、得られる化合物の物理的又は薬物動態学的特性に対する影響を含む。

【0311】

●ペプチドリンカー

【0312】

ペプチドリンカーは、天然的に存在する配列又は非天然的に存在する配列を有することができる。例えば、重鎖抗体のヒンジ領域のみに由来する配列をリンカーとして使用することができる（例えば、ＷＯ１９９６／３４１０３号を参照する）。

【0313】

ペプチドリンカーは、任意の適切な長さを有し得る。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、長さが１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、４０、５０、７５、１００、又は、より多いアミノ酸である。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーの長さは、１００以下、７５以下、５０以下、４０以下、３５以下、３０以下、２５以下、２０以下、１９以下、１８以下、１７以下、１６以下、１５以下、１４以下、１３以下、１２以下、１１以下、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、又は、より少ないアミノ酸である。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーの長さは、約１つのアミノ酸～約１０つのアミノ酸、約１つのアミノ酸～約２０つのアミノ酸、約１つのアミノ酸～約３０つのアミノ酸、約５つのアミノ酸～約１５つのアミノ酸、約１０つのアミノ酸～約２５つのアミノ酸中、約５つのアミノ酸～約３０つのアミノ酸、約１０つのアミノ酸～約３０つのアミノ酸、約３０つのアミノ酸～約５０つのアミノ酸、約５０つのアミノ酸～約１００つのアミノ酸、及び、約１つのアミノ酸～約１００つのアミノ酸から選ばれるいずれかである。

【0314】

このようなペプチドリンカーの基本的な技術的特徴の１つは、前記ペプチドリンカーがいかなる重合活性を含まないことである。当分野において公知であり、例えば、Ｄａｌｌ’Ａｃｑｕａ等（Ｂｉｏｃｈｅｍ．（１９９８）３７，９２６６－９２７３）、Ｃｈｅａｄｌｅ等（Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９９２）２９，２１－３０）、及び、Ｒａａｇ ａｎｄ Ｗｈｉｔｌｏｗ（ＦＡＳＥＢ（１９９５）９（１），７３－８０）に記載されているように、ペプチドリンカーの特徴は、二次構造を促進しないことを含む。「ペプチドリンカー」において、特に好ましいアミノ酸は、Ｇｌｙである。また、好ましくは、いかなる二次構造も促進しないペプチドリンカーである。前記ドメインの相互の連結は、例えば、実施例に記載される遺伝子操作によって提供することができる。融合され作動可能に連結された二重特異性一本鎖の構築体を調製し、それらを哺乳動物細胞又は細菌において発現させる方法は、当該技術分野でよく知られている（例えば、ＷＯ９９／５４４４０，Ａｕｓｕｂｅｌ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｇｒｅｅｎ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ａｓｓｏｃｉａｔｅｓ ａｎｄ Ｗｉｌｅｙ Ｉｎｔｅｒｓｃｉｅｎｃｅ，Ｎ．Ｙ．１９８９ ａｎｄ １９９４ 又は Ｓａｍｂｒｏｏｋ等，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．，２００１）。

【0315】

ペプチドリンカーは、プロテアーゼ、特にマトリックスメタロプロテアーゼ（ＭＭＰｓ）に開裂されない、安定なリンカーである。

【0316】

リンカーは、フレキシブルリンカーであってもよい。例示的なフレキシブルリンカーは、グリシンポリマー（Ｇ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７８）、グリシン－セリンポリマー（例えば、（ＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７９）、（ＧＳＧＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８０）、（ＧＧＧＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１）、及び、（ＧＧＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８２）を含み、各配列におけるｎは、１以上の整数である）、グリシン－アラニンポリマー、アラニン－セリンポリマー、及び、当分野で知られている他のフレキシブルリンカーを含む。グリシン及びグリシン－セリンポリマーは、比較的構造不定であるため、構成成分間の中性テザーとして機能することができる。グリシンは、アラニンに比べて、より多くのｐｈｉ－ｐｓｉ空間に入ることができ、側鎖が長い残基に比べて、制限がはるかに小さい（Ｓｃｈｅｒａｇａ， Ｒｅｖ．Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｃｈｅｍ．１１ １７３－１４２（１９９２）を参照する）。当業者に知られているように、抗体融合タンパク質の設計は、全体的又は部分的なフレキシブルリンカーを含み、その結果、必要な抗体融合タンパク質構造を提供するように、リンカーは、フレキシブルリンカーの一部、及び、弱いフレキシブル構造を与える１つ又は複数の部分を含む。

【0317】

また、例示的なリンカーは、更に、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８１）のアミノ酸配列（ｎは、１～８の整数である）、例えば、（ＧＧＧＧＳ）_３（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）、（ＧＧＧＧＳ）_４（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７７）或（ＧＧＧＧＳ）_６（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８３）を含む。いくつかの実施形態において、ペプチドリンカーは、（ＳＴＳＧＳＧＫＰＧＳＧＥＧＳ）_ｎ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８４）のアミノ酸配列（ｎは、１～３の整数である）を含む。

【0318】

●非ペプチドリンカー

【0319】

２つの部分のカップリングは、２つの部分がそれぞれの活性を保持する限り、即ち、当該抗スクレロスチン多重特異性抗体の２つの部分がそれぞれスクレロスチン及び第２の抗原に結合することができる限り、２つの分子を結合する任意の化学反応によって達成することができる。当該リンカーは、多くの化学的機構、例えば、共有結合、親和性結合、インターカレーション、配位結合及び複合体形成を含む。いくつかの実施形態において、結合とは、共有結合を指す。共有結合は、従来の側鎖の直接縮合または外部架橋分子の組み込みのいずれかによって達成することができる。この場合、多くの二価又は多価のリンカーは、タンパク質分子をカップリングすることに用いられる。例えば、代表的なカップリング剤としては、例えば、チオエステル、カルボジイミド、スクシンイミジルエステル、ジイソシアネート、グルタルアルデヒド、ジアゾベンゼン、ヘキサメチレンジアミンなどの有機化合物を含む。このリストは、当分野で知られている様々な種類のカップリング剤を網羅的に記載することを意図するものではなく、むしろより一般的なカップリング剤を表すものである。（Ｋｉｌｌｅｎ ａｎｄ Ｌｉｎｄｓｔｒｏｍ，Ｊｏｕｒ．Ｉｍｍｕｎ．１３３：１３３５－２５４９（１９８４）、Ｊａｎｓｅｎ等，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｓ ６２：１８５－２１６（１９８２）、及び、Ｖｉｔｅｔｔａ等，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３８：１０９８（１９８７）を参照する）。

【0320】

本願に用いられるリンカーは、参考文献の記載を参照する（例えば、Ｒａｍａｋｒｉｓｈｎａｎ，Ｓ．等，Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４４：２０１－２０８（１９８４）において、ＭＢＳ（Ｍ－マレイミドベンゾイル－Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドエステルの使用が記載されている）。いくつかの実施形態において、本明細書に使用される非ペプチドリンカーは、（ｉ）ＥＤＣ（１－エチル－３－（３－ジメチルアミノ－プロピル）カルボジイミド塩酸塩、（ｉｉ）ＳＭＰＴ（４－スクシンイミジルオキシ－α－メチル－α－（２－ピリミジニル－ジチオ）－トルエン（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．，Ｃａｔ．（２１５５８Ｇ）、（ｉｉｉ）ＳＰＤＰ（スクシンイミジル－６［３－（２－ピリジルジチオ）プロピオンアミド］ヘキサン酸エステル（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．，Ｃａｔ ＃２１６５１Ｇ）、（ｉｖ）スルホ－ＬＣ－ＳＰＤＰ（スルホスクシンイミジル－６［３－（２－ピリジル基ジチオ）－プロピオンアミド］ヘキサン酸エステル（Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ．Ｃｏ．Ｃａｔ．＃２１６５－Ｇ）、及び、（ｖ）ＥＤＣとカップリングされたスルホ－ＮＨＳ（Ｎ－ヒドロキシスルホ－スクシンイミド：Ｐｉｅｒｃｅ Ｃｈｅｍ． Ｃｏ．，Ｃａｔ．＃２４５１０）を含む。

【0321】

前記リンカーは、異なる特性を有する成分を含有し、従って、異なる物理化学的特性を有する結合体をもたらす。例えば、アルキルカルボキシレートのスルホ－ＮＨＳエステルは、芳香族カルボキシレートのスルホ－ＮＨＳエステルよりも安定である。ＮＨＳ－エステル含有リンカーは、スルホ－ＮＨＳエステルよりも可溶性が低い。さらに、リンカーＳＭＰＴは、立体障害ジスルフィド結合を含み、安定性が増加した抗体融合タンパク質を形成することができる。ジスルフィド結合は、他の結合よりも安定性が低いことは、ジスルフィド結合がインビトロで切断され、利用可能な抗体融合タンパク質が少なくなるためである。特にスルホ－ＮＨＳは、カルボジイミドカップリングの安定性を高めることができる。カルボジイミドカップリング（ＥＤＣなど）は、スルホ－ＮＨＳと共に使用される場合、カルボジイミドカップリング反応のみよりも加水分解に対してより耐性であるエステルを形成する。

【0322】

ＩＩＩ．調製方法

【0323】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンを特異的に結合する抗スクレロスチン構築体又は抗体部分、及び、抗スクレロスチン構築体又は抗体部分を調製する際に生成された組成物、例えば、ポリヌクレオチド、核酸構築体、ベクター、宿主細胞又は培地の調製方法を提供する。本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体又は抗体部分或いは組成物は、以下に一般的に説明され、かつ、例示においてより詳しく説明された様々な方法で調製される。

【0324】

●抗体の発現及び産生

【0325】

本明細書に記載の抗体（抗スクレロスチンモノクローナル抗体、抗スクレロスチン二重特異性抗体及び抗スクレロスチン抗体部分を含む）は、以下及び例示で説明する方法を含む、当分野で知られている任意の方法を使用して調製することができる。

【0326】

●モノクローナル抗体

【0327】

モノクローナル抗体は、基本的に同一な抗体集団から得られ、即ち、抗体集団を構成する個々の抗体は、少量の天然に生じ得る突然変異及び／又は翻訳後改変（例えば、異性化、アミド化）以外、同一である。従って、「モノクローナル」という修飾語は、抗体の特徴が離散抗体の混合物ではないと示している。例えば、モノクローナル抗体は、初めてＫｏｈｌｅｒ等，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５（１９７５）に記載されたハイブリドーマ法により調製されてもよく、また、組換えＤＮＡ方法（米国特許ＵＳ４，８１６，５６７）により調製されてもよい。ハイブリドーマ法において、前記のように、マウス、又は、ハムスター或いはラクダなどの他の適切な宿主動物を免疫して、免疫化に用いられるタンパク質に特異的に結合する抗体を産生すること又は産生することができるリンパ球を誘導する。又は、リンパ球はインビトロで免疫化されてもよい。その後、好適な融合剤（例えば、ポリエチレングリコール）でリンパ球を骨髄腫細胞に融合させ、ハイブリドーマ細胞を形成する（Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，ｐｐ．５９－１０３（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８６））。ラクダの免疫化について、例示１を参照する。

【0328】

免疫剤は、通常に抗原タンパク質又はその融合変異体を含む。免疫剤は、精製された全長又は切断したスクレロスチンポリペプチド或いはその変異体又は断片（即ち、ペプチド）からなる。このようなペプチドは、より大きいポリペプチドのタンパク質分解切断、分子組換え法により産生されてもよく、又は、本明細書に記載の方法及び当分野で知られている方法により化学的に合成されてもよい。ヒトスクレロスチンとＬＲＰ６との複合体の結晶構造（Ｋｉｍ，Ｊ．２０２０，Ｎａｔ Ｃｏｍｍｕｎ １１：５３５７－５３５７）に基づいて、「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６）を含有する第２のループ先端がスクレロスチンのＬＲＰ６の第１のプロペラドメインに対する結合の主な結合决定簇であると見出される。免疫剤として使用されるペプチドは、通常、本明細書に記載されるように、第２のループにおける「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを覆うスクレロスチンアミノ酸配列に由来する少なくとも７つの連続したアミノ酸からなるアミノ酸配列を有してもよく、好ましくは、少なくとも８、９、１０、１１、１２、１４、１５、１６、１８、１９、２０、２１、２２、２３又は２４つの連続したアミノ酸を有し、前記連続したアミノ酸は、「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを含む。他の好ましいペプチド製剤は、「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを覆うスクレロスチン配列における８つ以上且つ１２つ以下の連続したアミノ酸、又はより多い連続したアミノ酸を含み、しかも、他の好ましいペプチド製剤は、第２のループスクレロスチンポリペプチドにおける２４つの連続したアミノ酸を含む。他の好ましいペプチド製剤は、その第２のループにおける「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを覆う８～２４つの連続したアミノ酸の間のいずれかの整数のアミノ酸を含み、又は、全長スクレロスチン配列のポリペプチドを含む。一つの実施形態において、免疫剤は、全長ヒトスクレロスチであり、又は、好ましくは、その第２のループの一部であり、例えば、本明細書に記載されるように、スクレロスチンの第２のループにおける「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを特異的に認識する抗体を産生させるように、第２のループにおいて、アミノ酸１１０～１３３、又は、好ましくは１１９～１３０、又は、より好ましくは１１６～１２６、又は、より好ましくは１１８～１２５を覆うペプチドを合成する。一般的に、ヒト由来細胞が必要な場合、末梢血リンパ球（「ＰＢＬｓ」）が使用され、非ヒト哺乳動物由来が必要な場合、脾臓細胞又はリンパ節細胞が使用される。その後、適切な融合剤（例えば、ポリエチレングリコール）でリンパ球を不死化細胞株に融合させ、ハイブリドーマ細胞を形成する。Ｇｏｄｉｎｇ，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ（１９８６），ｐｐ．５９－１０３。

【0329】

不死化細胞株は、通常、形質転換した哺乳動物細胞であり、特にげっ歯類動物、ウシ及びヒト由来骨髄腫細胞である。通常、ラット又はマウス骨髄腫細胞株を用いる。このようにして調製されたハイブリドーマ細胞を、好適な培地に播種し、増殖させる。好ましくは、前記培地は、非融合親骨髄腫細胞の増殖又は生存を阻害する１種又は複数種の物質を含む。例えば、親骨髄腫細胞がヒポキサンチン－グアニンホスホリボシルトランスフェラーゼ（ＨＧＰＲＴ又はＨＰＲＴ）を欠くと、ハイブリドーマの培地において、通常、ＨＧＰＲＴ欠損細胞の増殖を阻害する物質であるヒポキサンチン、アミノプテリン及びチミジン（ＨＡＴ培地）を含む。

【0330】

不死化骨髄腫細胞は、好ましくは、効果的に融合し、選択される抗体生成細胞が安定して高レベルで抗体を産生することを維持し、培地（例えば、ＨＡＴ培地）に感受性がある細胞である。ここで、好ましくは、マウス骨髄腫細胞株、例えば、ＭＯＰＣ－２１及びＭＰＣ－１１マウス腫瘍に由来する細胞株であり、Ｓａｌｋ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ Ｃｅｌｌ Ｄｉｓｔｒｉｂｕｔｉｏｎ Ｃｅｎｔｅｒ（Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，Ｃａｌｉｆ．ＵＳＡ）から入手可能であり、ＳＰ－２細胞（及びその誘導体、例えばＸ６３－Ａｇ８－６５３）は、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．ＵＳＡ）から入手可能である。ヒト骨髄腫及びマウス－ヒト異種骨髄腫細胞株も、ヒトモノクローナル抗体の生成に用いられることが記載されている。（Ｋｏｚｂｏｒ，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３３：３００１（１９８４）、Ｂｒｏｄｅｕｒ等，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ，ｐｐ．５１－６３（Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８７））。

【0331】

当該抗原に対するモノクローナル抗体を生成するために、ハイブリドーマ細胞の増殖した培地を分析する。好ましくは、免疫沈降又はインビトロ結合アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）によりハイブリドーマ細胞に産生されたモノクローナル抗体の結合特異性を決定する。

【0332】

ハイブリドーマ細胞を培養する培地において、所望の抗原に対するモノクローナル抗体を存在するかどうかを分析してもよい。好ましくは、モノクローナル抗体の結合親和性及び特異性は、免疫沈降又はインビトロ結合アッセイ（例えば、ラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）又は酵素結合アッセイ（ＥＬＩＳＡ））により決定される。このような技術及び試験は、当分野で知られているものである。例えば、結合親和性は、Ｍｕｎｓｏｎ等，Ａｎａｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．，１０７：２２０（１９８０）におけるＳｃａｔｃｈａｒｄ分析により決定される。Ｗｎｔ活性を阻害するスクレロスチンの能力を特異的に中和するモノクローナル抗体を選択するために、得られたハイブリドーマをスクリーニングし、ＥＬＩＳＡ又はＢＬＩ法により全長ヒトスクレロスチン及び「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを含有する第２のループからのポリペプチドと反応する抗体の存在するかどうかを決定することができる。好ましくは、例３及び例４に記載されるように、全長スクレロスチン及びその「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフを含有するペプチドに特異的に結合するモノクローナル抗体を産生するハイブリドーマである。例７に記載されるように、ＨＥＫ２９３／ＴＣＦ／ＬＥＦ／Ｗｎｔ１レポーター遺伝子分析（Ｈａｎｎｏｕｓｈ ＲＮ．，２００８，ＰＬｏＳ ＯＮＥ，３：ｅ３４９８）により、全長ヒトスクレロスチンの、低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質ファミリーメンバー、例えば、ＬＲＰ５又はＬＲＰ６への結合を遮断、損傷又は阻害することができるモノクローナル抗体を選択する。

【0333】

所望の特異性、親和性及び／又は活性を備える抗体を産生するハイブリドーマ細胞を同定した後、クローンを限定希釈法によりサブクローニングし、標準的な方法（Ｇｏｄｉｎｇ、前記の内容を参照する）により増殖させる。このために、適用される培地は、例えば、Ｄ－ＭＥＭ又はＲＰＭＩ－１６４０培地を含む。また、ハイブリドーマ細胞は、哺乳動物の体内で腫瘍として増殖させる。

【0334】

通常の免疫グロブリン精製工程、例えば、タンパク質Ａ－アガロース、ヒドロキシアパタイトクロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、又は親和性クロマトグラフィーによって、培地、腹水、又は血清から、サブクローンに分泌されたモノクローナル抗体を適切に分離する。

【0335】

モノクローナル抗体も、前記に示さるように、組換えＤＮＡ法、例えば、米国特許ＵＳ４，８１６，５６７に記載の方法で調製される。通常の工程でモノクローナル抗体をコードするＤＮＡ（例えば、マウス抗体重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合するオリゴヌクレオチドプローブを使用することにより）を容易に単離することができる。ハイブリドーマ細胞は、このようなＤＮＡの好ましい供給源である。ＤＮＡを単離すると、それをベクターに導入し、そして、宿主細胞、例えば、大腸菌細胞、サルＣＯＳ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞又は骨髄腫細胞にトランスフェクトし、これら細胞は、他の方式で免疫グロブリンを産生しないため、このような組換え宿主細胞にモノクローナル抗体を合成することを可能にする。抗体をコードするＤＮＡの細菌における組換え・発現に関する概説は、Ｓｋｅｒｒａ 等，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．，５：２５６－２６２（１９９３）及びＰｌuｃｋｔｈｕｎ，Ｉｍｍｕｎｏｌ．Ｒｅｖｓ．１３０：１５１－１８８（１９９２）を含む。

【0336】

もう一つの実施形態において、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙ等，Ｎａｔｕｒｅ，３４８：５５２－５５４ （１９９０）に記載の技術で、生成された抗体ファージライブラリーから抗体を単離することができる。Ｃｌａｃｋｓｏｎ等，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）及びＭａｒｋｓ等，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１－５９７（１９９１）において、ファージライブラリーを用い、それぞれマウス抗体、ヒト抗体を単離することが記載されている。これに続いた開示には、チェーンシャフリングによる高親和性（ｎＭ範囲）を有するヒト抗体の生成（Ｍａｒｋｓ等，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，１０：７７９－７８３（１９９２））、並びに、極めて大きなファージライブラリーを構築するための戦略としてのコンビナトリアル感染及びインビボ組換え（Ｗａｔｅｒｈｏｕｓｅ等，Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．， ２１：２２６５－２２６６ （１９９３））が記載されている。従って、これら技術は、モノクローナル抗体を単離する伝統的なモノクローナル抗体ハイブリドーマ技術の可能な代替手段である。

【0337】

例えば、同種マウス配列の代わり、ヒト重鎖及び軽鎖定常ドメインのコード配列を用い、ＤＮＡを変化させ（米国特許ＵＳ４，８１６，５６７；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ等，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１（１９８４））、又は、免疫グロブリンコード配列に共有結合した非免疫グロブリンポリペプチドのコード配列のすべて又は一部により、ＤＮＡを変化させてもよい。通常、このような非免疫グロブリンポリペプチドは、抗原に対して特異性を有する１つの抗原結合部位、及び、異なる抗原に特異性を有するもう１つの抗原結合部位を有するキメラ二価抗体を産生するように、抗体の定常ドメインを置換するか、又は、抗体の１つの抗原結合部位の可変ドメインを置換する。

【0338】

本明細書に記載のモノクローナル抗体は、一価であってもよく、その調製方法は、当分野に知られるものである。例えば、免疫グロブリン軽鎖及び変化した重鎖の組換え・発現に関する方法がある。重鎖は、通常、重鎖の架橋を防止するためにＦｃ領域の任意の部位で切断される。或いは、関連するシステイン残基は、架橋を防止するために、もう１つのアミノ酸残基で置換されるか、又は、欠失される。インビトロ法も一価抗体の調製にも適用される。抗体の断片、特にＦａｂ断片を生成するための消化は、当分野で知られている従来技術を用い、行うことができる。

【0339】

キメラ又はハイブリッド抗体は、架橋剤を使用する方法を含む、合成タンパク質化学における公知の方法によりインビトロで調製されてもよく、例えば、免疫毒素は、ジスルフィド交換反応によって構築されるか、又は、チオエーテル結合を形成することによって構築され得る。この目的に適した試薬の例は、イミノチオレート塩及び４－メルカプトブチルピリミジンメチルを含む。

【0340】

抗体部分をコードする核酸分子

【0341】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体又は抗体部分のいずれか１種をコードするポリヌクレオチドを提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の方法のいずれか１種を使用して調製されたポリヌクレオチドを提供する。いくつかの実施形態において、核酸分子は、抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）の重鎖又は軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、核酸分子は、抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）の重鎖をコードするポリヌクレオチド及び軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、第１の核酸分子は、重鎖をコードする第１のポリヌクレオチドを含み、第２の核酸分子は、軽鎖をコードする第２のポリヌクレオチドを含む。

【0342】

いくつかの実施形態において、重鎖及び軽鎖は、１つの核酸分子又は２つの単独の核酸分子によって２つの単独のポリペプチドに発現される。いくつかの実施形態において、例えば、抗体がｓｃＦｖである場合、単一のポリヌクレオチドは、連結している重鎖及び軽鎖を含む単一のポリペプチドをコードする。

【0343】

いくつかの実施形態において、抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）の重鎖又は軽鎖をコードするポリヌクレオチドは、リーダー配列をコードするヌクレオチド配列を含み、翻訳する場合、リーダー配列は、重鎖又は軽鎖のＮ末端に位置する。前述したように、リーダー配列は、天然的な重鎖又は軽鎖のリーダー配列であってもよく、或は、別の異種リーダー配列であってもよい。

【0344】

いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチドとは、ＤＮＡを指す。いくつかの実施形態において、ポリヌクレオチドとは、ＲＮＡを指す。いくつかの実施形態において、ＲＮＡとは、ｍＲＮＡを指す。

【0345】

当分野で汎用な組換えＤＮＡ技術で核酸分子を構築することができる。いくつかの実施形態では、核酸分子は、選択された宿主細胞における発現に適した発現ベクターである。

【0346】

核酸構築体

【0347】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載のポリヌクレオチドのいずれか１種を含む核酸構築体を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれか方法で調製された核酸構築体を提供する。

【0348】

いくつかの実施形態において、前記核酸構築体は、さらに前記ポリヌクレオチドに動作可能に連結されたプロモーターを含む。いくつかの実施形態において、前記ポリヌクレオチドは、遺伝子に対応しており、前記プロモーターは、前記遺伝子の野生型プロモーターである。

【0349】

ベクター

【0350】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）のいずれか重鎖及び／又は軽鎖をコードする任意のポリヌクレオチド、又は、本明細書に記載の核酸構築体を含む、ベクターを提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれか方法で調製されたベクターを提供する。ベクターは、抗スクレロスチン構築体のいずれか１種をコードするポリヌクレオチド，例えば、抗体、ｓｃＦｖｓ、融合タンパク質、或いは、本明細書に記載の他の形態の構築体（例えば、抗スクレロスチンｓｃＦｖ）を含む。このようなベクターは、ＤＮＡベクター、ファージベクター、ウイルスベクター、レトロウイルスベクターなどを含むが、これらに限られない。いくつかの実施形態において、ベクターは、重鎖をコードする第１のポリヌクレオチド配列、及び、軽鎖をコードする第２のポリヌクレオチド配列を含む。いくつかの実施形態において、重鎖及び軽鎖は、ベクターから２つの単独のポリペプチドに発現される。いくつかの実施形態において、例えば、抗体がｓｃＦｖである場合、重鎖及び軽鎖は、単一のポリペプチドの一部に発現される。

【0351】

いくつかの実施形態において、第１のベクターは、重鎖をコードするポリヌクレオチドを含み、第２のベクターは、軽鎖をコードするポリヌクレオチドを含む。いくつかの実施形態において、第１のベクター及び第２のベクターを、類似の量（例えば、類似のモル量又は類似の質量）で宿主細胞にトランスフェクトする。いくつかの実施形態において、モル比又は質量比が５：１～１：５の間にある第１のベクター及び第２のベクターを宿主細胞にトランスフェクトする。いくつかの実施形態において、重鎖をコードするベクター及び軽鎖をコードするベクターを１：１～１：５の質量比で使用する。いくつかの実施形態において、重鎖をコードするベクター及び軽鎖をコードするベクターを１：２の質量比で使用する。

【0352】

いくつかの実施形態において、ＣＨＯ又はＣＨＯ由来の細胞、又はＮＳ０細胞におけるポリペプチドの発現のために最適化されたベクターを選択する。例示的なこのようなベクターの例示的な記載は、例えば、Ｒｕｎｎｉｎｇ Ｄｅｅｒ等，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ｐｒｏｇ．２０：８８０－８８９（２００４）に記載されている。

【0353】

●宿主細胞

【0354】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれかポリペプチド、核酸構築体及び／又はベクターを含む宿主細胞を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれか方法で調製された宿主細胞を提供する。いくつかの実施形態において、宿主細胞は、発酵の条件で本明細書に記載の抗体部分のいずれかを産生することができる。

【0355】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、原核細胞（例えば、細菌細胞）に発現され、又は、真核細胞、例えば、真菌細胞（例えば、酵母）、植物細胞、昆虫細胞及び哺乳動物細胞に発現される。このような発現は、当分野で知られている工程に従い、行うことができる。ポリペプチドを発現するための例示的な真核細胞は、ＣＯＳ７細胞を含むＣＯＳ細胞、２９３－６Ｅ細胞を含む２９３細胞、ＣＨＯ－Ｓ、ＤＧ４４．Ｌｅｃ１３ ＣＨＯ細胞及びＦＵＴ８ ＣＨＯ細胞を含むＣＨＯ細胞、ＰＥＲ．Ｃ６（登録商標）細胞（Ｃｒｕｃｅｌｌ）、及び、ＮＳ０細胞を含むが、これらに限られない。いくつかの実施形態において、本明細書に記載の抗体部分（例えば、抗スクレロスチン抗体部分）は、酵母で発現される。例えば、米国公開公報ＵＳ２００６／０２７００４５Ａ１を参照する。いくつかの実施形態において、具体的な真核宿主細胞は、その抗体部分の重鎖及び／又は軽鎖に対して所望の翻訳をした後、修飾を行う能力に基づいて選択される。例えば、いくつかの実施形態において、ＣＨＯ細胞に産生されたポリペプチドは、２９３細胞に産生された同様なポリペプチドに比べて、より高いレベルのシアル酸化を有する。

【0356】

任意の方法で１種又は複数種の核酸を所望の宿主細胞に導入することができる。リン酸カルシウムトランスフェクト、ＤＥＡＥ－デキストラン媒介性トランスフェクト、カチオン性脂質媒介性トランスフェクト、エレクトロポレーション、形質導入、感染などを含むが、これらに限られない。非限定的な例示的な方法の説明は、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ等，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，３^ｒｄ ｅｄ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ（２００１）を参照する。任意の適切な方法によれば、核酸は、所望の宿主細胞に一過性又は安定的にトランスフェクトされる。

【0357】

本願は、本明細書に記載のポリヌクレオチド又はベクターのいずれか１種を含む宿主細胞をさらに提供する。いくつかの実施形態において、本発明は、抗スクレロスチン抗体を含む宿主細胞を提供する。異種ＤＮＡを過剰発現できる任意の宿主細胞は、いずれも標的抗体、ポリペプチド又はタンパク質をコードする遺伝子の単離に使用される。哺乳動物の宿主細胞の非限定的な示例は、ＣＯＳ、ＨｅＬａ及びＣＨＯ細胞を含むが、これらに限られない。また、ＰＣＴ公開公報ＷＯ８７／０４４６２も参照する。好適な非哺乳動物の宿主細胞は、原核生物（例えば、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）又は枯草菌（Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｌｉｓ））及び酵母（例えば、サッカロミセス・セレビシエ（Ｓ．ｃｅｒｅｖｉｓａｅ，）、サッカロマイセスポンベ（Ｓ．ｐｏｍｂｅ）、又は、乳酸菌（Ｋ．ｌａｃｔｉｓ））を含む。

【0358】

いくつかの実施形態において、抗体部分は、無細胞システムに産生された。非限定的な例示的な無細胞システムの説明は、例えば、Ｓｉｔａｒａｍａｎ等，Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．４９８：２２９－４４（２００９）、Ｓｐｉｒｉｎ，Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２２：５３８－４５（２００４）、Ｅｎｄｏ等， Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．Ａｄｖ．２１：６９５－７１３（２００３）を参照する。

【0359】

●培地

【0360】

いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれかの抗体部分、ポリヌクレオチド、核酸構築体、ベクター及び／又は宿主細胞を含む培地を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のいずれかの方法で調製された培地を提供する。

【0361】

いくつかの実施形態において、培地は、ヒポキサンチン、アミノプテリン及び／又はチミジン（例えば、ＨＡＴ培地）を含む。いくつかの実施形態において、培地は、血清を含まない。いくつかの実施形態において、培地は、血清を含む。いくつかの実施形態において、培地とは、Ｄ－ＭＥＭ又はＲＰＭＩ－１６４０培地を指す。Ｒｏｍｏ

【0362】

抗体部分の精製

【0363】

抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチンモノクローナル抗体又は多重特異性抗体）は、任意の適切な方法で精製される。このような方法は、親和性マトリックス又は疎水相互作用クロマトグラフィーの使用を含むが、これらに限られない。適切な親和性リガンドは、ＲＯＲ１胞外ドメイン及び抗体定常領域に結合するリガンドを含む。例えば、タンパク質Ａ、タンパク質Ｇ、タンパク質Ａ／Ｇ又は抗体親和性カラムは、定常領域に結合し、Ｆｃ断片を含む抗スクレロスチン構築体を精製することに用いられる。疎水相互作用クロマトグラフィー、例えば、ブチルカラムやフェニルカラムは、いくつかのポリペプチド、例えば、抗体を精製することに適用される。イオン交換クロマトグラフィー（例えば、アニオン交換クロマトグラフィー及び／又はカチオン交換クロマトグラフィー）は、いくつかのポリペプチド、例えば、抗体の精製にも適用される。混合モデルクロマトグラフィー（例えば、逆相／アニオン交換、逆相／カチオン交換、親水相互作用／アニオン交換、親水相互作用／カチオン交換等）も、いくつかのポリペプチド、例えば、抗体の精製に適用される。ポリペプチドを精製する多くの方法は、当分野で知られているものである。

【0364】

ＩＶ． 治療方法

【0365】

いくつかの実施形態において、個体に有效量の本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体又は薬物組成物を投与することを含む、個体の疾患又は病状を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記疾患又は病状は、骨関連疾患又は軟骨関連疾患、骨髄又は血液学的疾患、骨格筋系の希少疾患、筋肉関連疾患又は癌である。

【0366】

本明細書に記載の方法は、任意の骨関連疾患又は病状に適用される。いくつかの実施形態において、骨形成不全、骨粗鬆症又は骨減少症（男性及び女性）、骨壊死、骨遅延癒合、骨折不癒合、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫関連骨疾患、原発性骨腫瘍、悪性腫瘍の骨転移、炎症性又は感染性骨疾患、骨軟化症、高カルシウム血症、パジェット病、不運動による骨喪失、グルココルチコイドによる骨喪失、関節炎誘導骨喪失を含む炎症誘導骨喪失、宇宙飛行士の骨粗鬆症／骨減少症及び無重力による骨喪失、又は、ａ）骨量喪失又は骨質喪失又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状を含む。いくつかの実施形態において、骨関連疾患とは、骨粗鬆症又は骨減少症を指す。いくつかの実施形態において、骨関連病状とは、骨形成不全を指す。いくつかの実施形態において、骨関連病状とは、多発性骨髄腫及び多発性骨髄腫関連骨疾患を指す。

【0367】

いくつかの実施形態において、疾患又は病状とは、軟骨疾状を指す。いくつかの実施形態において、軟骨病状は、軟骨腫症、軟骨異形成症（ｃｈｏｎｄｒｏｄｙｓｐｌａｓｉａ）、軟骨形成不全症（ａｃｈｏｎｄｒｏｐｌａｓｉａ）、異形成症骨端異形成、軟骨異栄養性筋強直症、皮質傍軟骨腫、膝関節軟骨裂傷、骨線維異形成症、骨関節炎、骨形成不全、低リン酸血症性くる病又は骨軟骨異栄養症を含む。

【0368】

いくつかの実施形態において、疾患又は病状とは、肌肉関連疾患を指す。いくつかの実施形態において、筋肉関連疾患とは、筋肉減少症及び癌症関連筋肉減少症を指す。

【0369】

いくつかの実施形態において、疾患又は病状とは、癌（例えば、血液悪性腫瘍，例えば、多発性骨髄腫）を指す。

【0370】

いくつかの実施形態において、有効量の抗スクレロスチン構築体（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体のいずれか）を個体に投与することを含む、個体の骨又は関節手術後の癒合を促進するための方法を提供する。

【0371】

いくつかの実施形態において、前記個体に効果的に組み立てる抗スクレロスチン構築体を投与することを含む、個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法であって、前記抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、Ｖ_Ｌは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、方法を提供する。

【0372】

いくつかの実施形態において、個体に有效量の多重特異性構築体を投与することを含む、個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法であって、前記多重特異性構築体は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分、及び、ＲＡＮＫＬを特異的に認識する第２の抗体部分を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（ＶＬ－１）を含み、Ｖ_Ｈ－１は、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、ＶＬ－１は、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１，ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0373】

いくつかの実施形態において、個体に有效量の多重特異性構築体を投与することを含む、前記個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法であって、前記多重特異性構築体は、スクレロスチンを特異的に認識する第１の抗体部分及びＤＫＫ１を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態において、前記第１の抗体部分は、第１の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－１）及び第１の軽鎖可変領域（ＶＬ－１）を含み、Ｖ_Ｈ－１は、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、ＶＬ－１は、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ－Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ａ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｂ）前記ＶＨ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１，ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或は、ｃ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１，ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0374】

いくつかの実施形態において、被験者は、哺乳動物（例えば、ヒト）である。

【0375】

抗スクレロスチン構築体の投与量と投与方法

【0376】

本明細書に記載の疾患又は病状を治療するための抗スクレロスチン構築体を個体に投与する投与レジメン（例えば、特定の用量及び頻度）は、具体的な抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチンモノクローナル抗体又は多重特異性抗体、例えば、抗スクレロスチン融合タンパク質）、投与方式及び治療されている疾患又は病状のタイプに応じて異なる。

【0377】

前述したいずれか点におけるいくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、抗スクレロスチンモノクローナル抗体又は多重特異性抗体）の有效量は、約０．００１μｇ／ｋｇ～約５００ｍｇ／ｋｇ総体重の範囲内であり、例えば、約０．００５μｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、約０．０１μｇ／ｋｇ～約５０ｍｇ／ｋｇ、又は、約０．０１μｇ／ｋｇ～約５ｍｇ／ｋｇである。

【0378】

いくつかの実施形態において、治療は、複数回の抗スクレロスチン構築体の投与（例えば、約２、３、４、５、６、７、８、９又は１０回の抗スクレロスチン構築体の投与）を含む。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、約日ごと、週こと、週ごとに２回、月ごとに１回、３ヶ月ごとに１回、６ヶ月ごとに１回、又は１年ごとに１回の頻度で投与する。

【0379】

抗スクレロスチン構築体は、様々な経路、例えば、静脈内、関節内、動脈内、腹腔内、肺内、経口、吸入、嚢内、筋肉内、気管内、皮下、眼内、髄腔内、経粘膜及び経皮によって個体（例えば、ヒト）に投与され得る。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、薬物組成物に含まれ、これとともに個体に投与される。いくつかの実施形態において、組成物の徐放性製剤を使用してもよい。いくつかの実施形態において、前記組成物は、静脈内に注射される。いくつかの実施形態において、前記組成物は、腹腔内に注射された。いくつかの実施形態において、前記組成物は、静脈内に注射される。いくつかの実施形態において、前記組成物は、腹腔内に注射された。いくつかの実施形態において、前記組成物は、筋肉内に注射される。いくつかの実施形態において、前記組成物は、皮下に注射される。いくつかの実施形態において、前記組成物は、静脈内に注射される。いくつかの実施形態において、前記組成物は、経口投与される。

【0380】

併用治療

【0381】

本願は、第２の薬物又は療法を実施することを含む、疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療するための抗スクレロスチン構築体を個体に投与する方法をさらに提供する。いくつかの実施形態において、第２の薬物又は療法は、疾患又は病状を治療するための標準的又は一般的な薬物又は療法である。

【0382】

いくつかの実施形態において、個体にａ）有效量の抗スクレロスチン構築体（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体のいずれか）、及び、ｂ）第２の療法又は薬物を実施することを含む、個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、第２の療法又は薬物は、抗ＤＫＫ１抗体又は抗ＲＡＮＫＬ抗体である。いくつかの実施形態において、第２の薬物又は療法は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬物を含む。

【0383】

いくつかの実施形態において、個体にａ）有效量の抗スクレロスチン構築体（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体のいずれか）、及び、ｂ）抗ＤＫＫ１抗体を投与することを含む、個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、ＶＬは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記抗ＤＫＫ１抗体は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0384】

いくつかの実施形態において、個体にａ）有效量の抗スクレロスチン構築体（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体のいずれか）、及び、ｂ）抗ＲＡＮＫＬ抗体を投与することを含む、個体の疾患又は病状（例えば、骨関連疾患）を治療する方法を提供する。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、抗体部分を含み、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（ＶＬ）を含み、Ｖ_Ｈは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、ＶＬは、ｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、ｉｉｉ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む。いくつかの実施形態において、前記抗ＲＡＮＫＬ抗体は、第２の重鎖可変領域（Ｖ－Ｈ－２）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含み、ａ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、ｂ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、ｃ）前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む。

【0385】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、第２の薬物又は療法とともに実施される。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、第２の薬物又は療法とともにに実施される。いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体は、第２の薬物又は療法と順に実施される。

【0386】

Ｖ．成分、キット及び製品

【0387】

本願は、さらに、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体又は抗スクレロスチン抗体部分、抗体部分をコードする核酸、抗体部分をコードする核酸のベクター、或いは、核酸又はベクターを含む宿主細胞を含む組成物（例えば、製剤、例えば、薬物組成物）を提供する。

【0388】

いくつかの実施形態において、抗スクレロスチン構築体（例えば、本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体のいずれか）及び薬学的に許容される担体を含む、薬物組成物を提供する。いくつかの実施形態において、当該組成物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬物をさらに含む。

【0389】

本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体の適切な製剤は、所望の純度を有する抗スクレロスチン構築体又は抗スクレロスチン抗体部分と、任意に選択される薬学的に許容される担体、賦形剤、又は安定剤とを混合することで得られ、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で存在する（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０））。許容される担体、補助剤、又は安定剤は、使用される用量及び濃度で被験体にとって無毒であり、以下のものを含む：リン酸塩、クエン酸塩、および他の有機酸などの緩衝液；アスコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；保存料（例えば、オクタデシルジメチルベンジル塩化アンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム；塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチル又はベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベンなどのアルキルパラベン；カテコール；レソルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾールなど）；低分子量（約１０残基未満）のポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチン、又は免疫グロブリンなどのタンパク質；ポリビニルピロリドンなどの親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン又はリジンなどのアミノ酸；グルコース、マンノース又はデキストリンを含む、単糖、二糖及び他の炭水化物；ＥＤＴＡなどのキレート剤；スクロース、マンニトール、トレハロース、ソルビトールなどの糖類；ナトリウムなどの塩形成対イオン類；金属錯体（例えば、Ｚｎ－タンパク質錯体）；及び／又は、例えばＴＷＥＥＮ^ＴＭ、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ^ＴＭ又はポリエチレングリコール（ＰＥＧ）などの非イオン性界面活性剤がある。皮下注射に適した凍結乾燥製剤は、例えば、ＷＯ９７／０４８０１に記載されている。このような凍結乾燥製剤は、適切な希釈剤で高タンパク質濃度まで再溶解させることができ、再溶解製剤は、画像化、診断、又は治療される個体に皮下注射することができる。

【0390】

体内投与のための製剤は、無菌でなければならない。これは、例えば、除菌濾過膜による濾過で容易に達成される。

【0391】

本明細書に記載の抗スクレロスチン構築体又は抗スクレロスチン抗体部分のいずれかを含むキットを提供する。当該キットは、本明細書に記載の調節用細胞組成物又は治療のいずれかの方法に用いられる。

【0392】

いくつかの実施形態において、スクレロスチンに特異的に結合する抗スクレロスチン構築体を含むキットを提供する。

【0393】

いくつかの実施形態において、当該キットは、抗スクレロスチン構築体を個体の体内に送達することができるデバイスをさらに含む。非経口送達などの用途のための装置は、組成物を被験者体内に注射するためのシリンジである。吸入デバイスも、特定の用途に使用されてもよい。

【0394】

いくつかの実施形態において、当該キットは、例えば、骨形成不全、骨硬化、又は、骨喪失関連疾患又は病状などの骨関連疾患のような、疾患又は病状を治療するための治療薬物をさらに含む。

【0395】

本願に係るキットは、適切な包装を採用する。適切な包装として、バイアル、ボトル、ジャー、可撓性の包装（例えば、密封マイラー又はプラスチックバッグ）等を含むが、これらに限られない。キットは、緩衝液や解釈情報などの他の構成要素を提供するように選択され得る。

【0396】

従って、本願は、さらに製品を提供する。前記製品は、容器と、容器上又は容器関連のラベル又は添付文書を含む。好適な容器は、バイアル（密封バイアル）、一般的なボトル、ジャー、可撓性の包装材などを含む。通常、容器は組成物を収容し、無菌の入口を有し得る（例えば、容器は、静脈内注射用溶液バッグ、又は皮下注射針で穿刺可能なストッパを有するバイアルであってもよい）。ラベル又は医薬品の添付文書は、組成物が、個体の具体的な病状を画像化、診断、又は治療するために使用されることを示す。ラベル又は医薬品の添付文書は、組成物を個体に適用するため、及び、個人を画像化するための説明も含む。ラベルは、再溶解及び／又は使用するための説明を含み得る。組成物を収容する容器は、再溶解製剤の繰り返し投与（例えば、２～６回の投与）を可能にする多用途バイアルであってもよい。医薬品の添付文書とは、通常に、市販された診断用製品の包装に含まれる添付文書を指し、このような診断用製品の使用に関する適応症、用法、用量、投与、禁忌症及び／又は警告情報を含む。さらに、前記製品は、薬学的に許容される緩衝液（例えば、滅菌注射用水（ＢＷＦＩ）、リン酸緩衝生理食塩水、リンゲル液、及び、グルコース溶液）を含む第２の容器も含んでもよい。商業的及び使用者の観点から、他の緩衝液、希釈剤、フィルタ、針、及びシリンジを含む、望ましい他の材料も含んでもよい。

【0397】

前記キット又は製品は、組成物の様々な単位用量及び添付文書を含んでもよく、薬局（例えば、病院薬局及び製剤薬局）での保存及び使用に十分な量で包装される。

【0398】

当業者は、本発明の発想の範囲内で、多くの実施形態が存在する可能性があると知っている。以下の非限定的な例を参照しながら、本発明をより詳しく説明する。以下の具体的な実施形態及び実施例は、本発明をさらに説明するが、本発明の範囲をいかなる方式においても限定するものと解釈されるべきではないと理解される。

【0399】

詳細な説明

【0400】

実施形態１：スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、スクレロスチンのエピトープに結合し、前記エピトープは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６に示されるアミノ酸配列を含む、抗スクレロスチン構築体。

【0401】

実施形態２：スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１～４及び１２のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５～８及び１３のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９～１１及び１４のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、並びに、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５－１７、８５及び８６のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８及び１９のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０及び２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、抗スクレロスチン構築体。

【0402】

実施形態３：ａ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0403】

実施形態４：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0404】

実施形態５：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0405】

実施形態６：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0406】

実施形態７：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0407】

実施形態８：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0408】

実施形態９：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0409】

実施形態１０：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0410】

実施形態１１：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0411】

実施形態１２：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0412】

実施形態１３：スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
ａ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｂ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｃ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｄ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｅ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｆ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｇ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、及び、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３、
ｈ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｉ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｊ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｋ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｌ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、或いは、
ｍ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ_ＨにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示される配列を有するＶ_ＬにおけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、抗スクレロスチン構築体。

【0413】

実施形態１４：前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０及び８７のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、及び／又は、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１及び８８～９０のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む、実施形態１～１３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0414】

実施形態１５：ａ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｈ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｉ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｊ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｋ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｌ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、或いは、
ｍ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む、実施形態１４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0415】

実施形態１６：スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗スクレロスチン抗体のヒト化抗体部分に由来し、
ａ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及びＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲ中の５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２００のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、或いは、
ｈ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は、１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、抗スクレロスチン構築体。

【0416】

実施形態１７：前記抗体部分は、全長抗体、二重特異性抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（ｄｓｓｃＦｖ）、（ｄｓＦｖ）２、Ｆｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリボディ（ｔｒｉｂｏｄｙ）及びテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）から選ばれる抗体又はその抗原結合断片である、実施形態１～１６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0417】

実施形態１８：前記構築体は、Ｆｃ断片を含む全長抗体である、実施形態１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0418】

実施形態１９：前記抗体部分は、ｓｃＦｖ断片である、実施形態１７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0419】

実施形態２０：前記スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである、実施形態１～１９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0420】

実施形態２１：前記抗スクレロスチン構築体は、さらに第２の部分を含む、実施形態１～１７及び１９～２０のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0421】

実施形態２２：前記第２の部分は、抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を含む、実施形態２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0422】

実施形態２３：前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－２）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－２）を含む、実施形態２２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0423】

実施形態２４：前記抗原は、ＤＫＫ１である、実施形態２２又は２３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0424】

実施形態２５：前記ＤＫＫ１は、ヒトＤＫＫ１である、実施形態２４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0425】

実施形態２６：第２の抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－３）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－３）を含む第３の抗体部分と競合し、
ａ）前記Ｖ_Ｈ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記ＶＬ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記ＶＬ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｃ）前記Ｖ_Ｈ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記ＶＬ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態２４又は２５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0426】

実施形態２７：前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0427】

実施形態２８：前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0428】

実施形態２９：前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態２６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0429】

実施形態３０：前記抗原は、ＲＡＮＫＬである、実施形態２２又は２３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0430】

実施形態３１：前記抗原は、ヒトＲＡＮＫＬである、実施形態３０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0431】

実施形態３２：前記第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬの結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ－３）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ－３）を含む第３の抗体部分と競合し、
前記Ｖ_Ｈ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記ＶＬ－３は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態３０又は３１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0432】

実施形態３３：前記Ｖ_Ｈ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ_Ｌ－２は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、実施形態３１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0433】

実施形態３４：前記第２の抗体部分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、ミニチュア抗体、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）又はｓｄＡｂである、実施形態２２～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0434】

実施形態３５：前記第２の抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体であり、前記抗スクレロスチン抗体部分は、Ｖ_Ｌに融合されたＶ_Ｈを含む単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片である、実施形態３４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0435】

実施形態３６：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖に融合する、実施形態３５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0436】

実施形態３７：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の軽鎖に融合する、実施形態３４～３６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0437】

実施形態３８：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する、実施形態３６又は３７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0438】

実施形態３９：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する、実施形態３６～３８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0439】

実施形態４０：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合する、実施形態３６～３９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0440】

実施形態４１：前記抗スクレロスチンの抗体部分は、リンカーを介せず、前記全長抗体にと融合する、実施形態３６～３９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0441】

実施形態４２：前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳリンカーである、実施形態４０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0442】

実施形態４３：前記Ｖ_Ｈは、第２のリンカーを介して前記Ｖ_Ｌに融合する、実施形態３５～４２のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0443】

実施形態４４：前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｈ、第２のリンカー及びＶ_Ｌを含む、実施形態４３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0444】

実施形態４５：前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｌ、第２のリンカー、Ｖ_Ｈ、及び、任意にＣ末端アラニン残基を含む、実施形態４３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0445】

実施形態４６：前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、実施形態４３～４５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0446】

実施形態４７：前記第２抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖ断片であり、前記抗スクレロスチンの抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体である、実施形態２３～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0447】

実施形態４８：前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖に融合する、実施形態４６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0448】

実施形態４９：前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の軽鎖に融合する、実施形態４７又は４８に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0449】

実施形態５０：前記抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合する、実施形態４８又は４９に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0450】

実施形態５１：前記抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合する、実施形態４７～５０のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0451】

実施形態５２：前記抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合する、実施形態４７～５１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0452】

実施形態５３：前記抗体部分は、リンカーを介せず、前記全長抗体に融合する、実施形態４７～５１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0453】

実施形態５４：前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳ第１のリンカーである、実施形態５２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0454】

実施形態５５：前記Ｖ_Ｈ－２は、第２のリンカーを介して前記Ｖ_Ｌ－２に融合する、実施形態４７～５４のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0455】

実施形態５６：前記Ｖ_Ｈ－２は、リンカーを介せず、前記Ｖ_Ｌ－２に融合する、実施形態４７～５４のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0456】

実施形態５７：前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｈ－２、第２のリンカー及びＶ_Ｌ－２を含む、実施形態５５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0457】

実施形態５８：前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ_Ｌ－２、第２のリンカー、Ｖ_Ｈ－２、及び、任意にＣ末端アラニン残基を含む、実施形態５５に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0458】

実施形態５９：前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、実施形態５５及び５７～５８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0459】

実施形態６０：前記ｓｃＦｖは、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（「ｄｓｓｃＦｖ」）である、実施形態３５～５９のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0460】

実施形態６１：前記ｄｓｓｃＦｖは、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０の番号付けによるＶ_Ｈ又はＶ_Ｈ－２におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１の番号付けによるＶ_Ｌ又はＶ_Ｌ－２におけるＧ１００Ｃ突然変異を含む、実施形態６０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0461】

実施形態６２：前記構築体は、
１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
９）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１１）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１２）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含む軽鎖、
１３）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含２つのむ軽鎖、
１４）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１５）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１６）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１９）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２０）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２８）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２９）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、或いは、
３５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
を含む、実施形態３５～６１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0462】

実施形態６３：前記構築体は、
ａ）第１の軽鎖を含む第１のポリペプチドであって、前記第１の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＬドメイン」）を含む第１のポリペプチド、
ｂ）第１の重鎖を含む第２のポリペプチドであって、前記第１の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第２のポリペプチド、
ｃ）第２の重鎖を含む第３のポリペプチドであって、前記第２の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第３のポリペプチド、及び、
ｄ）第２の軽鎖を含む第４のポリペプチドであって、前記第２の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第４のポリペプチド、
を含み、第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインは、Ｆｃ断片を形成している、実施形態２３～３３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0463】

実施形態６４：第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインのいずれかは、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意のＳ３５４Ｃ突然変異を含み、他のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異及び任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含み、番号は、ＥＵインデックスに基づくものである、実施形態６３に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0464】

実施形態６５：ｉ）第１のＣＨ１ドメイン及び第１のＣＬドメイン、又は、ｉｉ）第２のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＬドメインは、いずれも
ａ）１４１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｂ）１６８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６４位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｃ）１２６位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１２１位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｄ）１２８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１１８位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｅ）１７０位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１７６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｆ）１７１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６２位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｇ）１７３位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位（例えば、ＩｇＧ２又はＩｇＧ４において）又は２２０位（例えば、ＩｇＧ１において）のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、１６０位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、から選ばれるものであり、番号付けは、ＥＵインデックスに基づくものである、実施形態６３又は６４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0465】

実施形態６６：１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、
２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、
３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、
４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、
５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、
６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、
７）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、
８）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、
９）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、
１０）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、
１１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、
１２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、
１３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み、第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含み、第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含む、実施形態６３～６５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0466】

実施形態６７：前記第２の部分は、半減期延長の部分を含む、実施形態２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0467】

実施形態６８：前記半減期延長の部分は、Ｆｃ断片を指す、実施形態６７に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0468】

実施形態６９：前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭのＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である、実施形態１８、３５～６６及び６８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0469】

実施形態７０：前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４のＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種である、実施形態６９に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0470】

実施形態７１：前記Ｆｃ断片は、Ｈ４３５Ｒ突然変異及びＹ４３６Ｆ突然変異を含む、実施形態６９又は７０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0471】

実施形態７２：前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して低減されたエフェクター機能を有する、実施形態６９～７１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0472】

実施形態７３：前記Ｆｃ断片は、ａ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたエフェクター機能、及び／又は、ｂ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたＦｃＲｎ結合アフィニティ、を有する、実施形態６９～７１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0473】

実施形態７４：前記構築体は、抗体－薬物コンジュゲート又は抗体融合タンパク質である、実施形態２１に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0474】

実施形態７５：前記第２の部分は、薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、実施形態７４に記載の抗スクレロスチン構築体。

【0475】

実施形態７６：実施形態１～７５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体と競合してスクレロスチンに特異的に結合する、抗スクレロスチン構築体。

【0476】

実施形態７７：実施形態１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び薬学的に許容される担体を含む、薬物組成物。

【0477】

実施形態７８：前記組成物は、さらに薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、実施形態７７に記載の薬物組成物。

【0478】

実施形態７９：実施形態１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体をコードする、単離された核酸分子。

【0479】

実施形態８０：実施形態７９に記載の単離された核酸分子を含む、ベクター。

【0480】

実施形態８１：実施形態７９に記載の単離された核酸分子又は実施形態８０に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。

【0481】

実施形態８２：ａ）抗スクレロスチン構築体又はその一部を効果的に発現する条件で、実施形態８１に記載の単離された宿主細胞を培養すること、及び、ｂ）前記宿主細胞から発現された抗スクレロスチン構築体又はその一部を得ること、を含む、抗スクレロスチン構築体を調製する方法。

【0482】

実施形態８３：有効量の実施形態１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体、及び／又は、実施形態７７又は７８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含む、個体の疾患又は病状を治療及び／又は予防する方法。

【0483】

実施形態８４：前記疾患又は病状は、骨関連疾患又は軟骨関連疾状、骨髄又は血液学的疾患、骨格筋系の希少疾患、筋肉関連疾患又は癌である、実施形態８３に記載の方法。

【0484】

実施形態８５：前記骨関連疾患は、骨形成不全、骨粗鬆症又は骨減少症（男性及び女性）、骨壊死、骨遅延癒合、骨折不癒合、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫関連骨疾患、原発性骨腫瘍、悪性腫瘍の骨転移、炎症性又は感染性骨疾患、骨軟化症、高カルシウム血症、パジェット病、不運動による骨喪失、グルココルチコイドによる骨喪失、関節炎誘導骨喪失を含む炎症誘導骨喪失、宇宙飛行士の骨粗鬆症／骨減少症及び無重力による骨喪失、又は、ａ）骨量喪失又は骨質喪失又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状を含む、実施形態８４に記載の方法。

【0485】

実施形態８６：前記骨関連疾患とは、骨粗鬆症又は骨減少症を指す、実施形態８５に記載の方法。

【0486】

実施形態８７：前記骨関連疾患とは、骨形成不全を指す、実施形態８５に記載の方法。

【0487】

実施形態８８：前記骨関連疾患とは、多発性骨髄腫及び多発性骨髄腫関連骨疾患を指す、実施形態８５に記載の方法。

【0488】

実施形態８９：前記軟骨疾患は、軟骨腫症、軟骨異形成症、軟骨形成不全症、骨端異形成、軟骨異栄養性筋強直症、皮質傍軟骨腫、膝関節軟骨裂傷、骨線維異形成症、骨関節炎、骨形成不全、低リン酸血症性くる病又は骨軟骨異栄養症を含む、実施形態８４に記載の方法。

【0489】

実施形態９０：前記筋肉関連疾患とは、筋肉減少症及び癌関連筋肉減少症を指す、実施形態８４に記載の方法。

【0490】

実施形態９１：有効量の実施形態１～７６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体、及び／又は、実施形態７７又は７８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含む、個体における骨又は関節手術後の癒合を促進するための方法。

【0491】

実施形態９２：前記抗スクレロスチン構築体が、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、経口又は非経口投与の方式で前記個体に投与される、実施形態８３～９１のいずれか１項に記載の方法。

【0492】

実施形態９３：前記方法が、第２の薬物又は治療法を実施することをさらに含む、実施形態８３～９２のいずれか１項に記載の方法。

【0493】

実施形態９４：前記第２の薬物又は治療法は、抗ＤＫＫ１抗体を含む、実施形態９３に記載の方法。

【0494】

実施形態９５：前記第２の薬物又は治療法は、抗ＲＡＮＫＬ抗体を含む、実施形態９３に記載の方法。

【0495】

実施形態９６：前記第２の薬物又は治療法は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬物を含む、実施形態９３に記載の方法。

【0496】

実施形態９６：前記個体がヒトを指す、実施形態８３～９６のいずれか１項に記載の方法。

【0497】

実施例

【0498】

以下、実施例は、すべて適用の例示であり、従って、適用をいかなる方式で制限するものと考えられない。以下の実施例及び詳細な記載は、例示のためのものであり、限定するものではない。

【0499】

実施例１．抗スクレロスチンモノクローナル抗体の調製

【0500】

抗ヒトＳＯＳＴモノクローナル抗体は、免疫マウスにより産生されたものであった。試験用ＢＡＬＢ／ｃマウス（１８～２０ｇ、７～８週齢、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．）及びＣ５７マウス（１８～２０ｇ、７～８週齢、Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｖｉｔａｌ Ｒｉｖｅｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．）を用いた。これらの動物は、ＳＰＦ級実験室で１２／１２時間の明暗サイクル、温度２０～２５°Ｃ、湿度４０％～６０％で１週間飼育した。

【0501】

Ｈｉｓタグ（ＨＳＴ－Ｈ５２４５，Ａｃｒｏ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）付きヒトＳＯＳＴ組換えタンパク質を免疫原として用いた。専用アジュバント（ロッド番号２０２００１２０）で乳化させ、そして抗原に総体積３００μｌになるように等体積のアジュバントを添加した。抗原／アジュバント溶液を電気ミキサ―で乳化させ、多次元スピナーで混合した。７５％エタノールで消毒した後、抗原／アジュバント溶液を皮下注射した。抗原を乳化させ、０日目、１４日目、２８日目に播種した。脾臓細胞の融合する３日前に、生理食塩水で調製した抗原溶液５０μｇを各マウス腹腔（ＩＰ）に注射して免疫増強を行った。２２日目、３６日目及び４５日目に血液の滴度を測定した。３回目の免疫後、最も血液力価の高い２匹のプラトー傾向があるマウスを選択して脾臓細胞融合を行った。脾臓細胞を、電気細胞操作装置（ＢＴＸ、ＥＣＭ２００１）を用いて汎用な融合工程で骨髄腫Ｓｐ２／０細胞に融合させてハイブリドーマ細胞を得た。実施例３に記載のＥＬＩＳＡ法でマウス血清とヒトスクレロスチンとの結合活性を決定し、インビトロでの結合活性の良好なモノクローナルハイブリドーマ細胞株を選択した。結果を表５に示す。

【0502】

実施例２．抗スクレロスチンモノクローナル抗体のクローニング及びシーケンシング

【0503】

ハイブリドーマのシーケンシングは、以下のように行った。ＴＲＩｚｏｌ（登録商標）の試薬技術マニュアルに従い、ハイブリドーマ細胞から全ＲＮＡを単離した。そして、ＰｒｉｍｅＳｃｒｉｐｔ^ＴＭ第１鎖ｃＤＮＡ合成キットの技術マニュアルに従い、アイソタイプ特異的アンチセンスプライマー又はユニバーサルプライマーを使用して、全ＲＮＡをｃＤＮＡに逆転写した。ｃＤＮＡ末端高速増幅（ＲＡＣＥ）標準手順（ＳＯＰ）に従い、重鎖及び軽鎖の抗体断片を増幅した。増幅された抗体断片をそれぞれ標準的なクローニングベクターにクローニングした。コロニーＰＣＲを行い、適当なサイズのインサート断片のクローンをスクリーニングした。最終的にコンセンサス配列（ｃｏｎｓｅｎｓｕｓ ｓｅｑｕｅｎｃｅ）を提供する。

【0504】

配列分析

【0505】

すべての構築体のＤＮＡ配列データを分析し、重鎖及び軽鎖のコンセンサス配列を確定した。各種の抗体のＶ_Ｈ及びＶ_ＬＣＤＲ及びコンセンサス配列を表３及び表４に示す。

【0506】

【表3】

【0507】

【表4】

【0508】

実施例３．ＥＬＩＳＡ法による抗スクレロスチン抗体のスクレロスチンへの結合の決定

【0509】

スクレロスチンに特異的に結合する抗体の能力をＥＬＩＳＡ捕捉アッセイによって測定した。マウスＨｉｓタグ付きヒトスクレロスチン（ＮＣＢＩ参照番号：ＮＰ＿０７９５１３．１）［０．５μｇ／ｍｇ］のコーティング緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ ７．４）で９６ウェルの半面積に１００μｌ／ウェルでプレートをコーティングし、室温で１時間、或いは、４°Ｃで一晩インキュベートした。１００μｌ／ウェルの洗浄液（ＴＷＥＥＮ２０ ０．２％を含むＰＢＳ、ＢＩＯ－ＲＡＤ）でプレートを１回洗浄した。そして、プレートをブロッキング液（ＢＳＡ１％、ヤギ血清１％及びＴＷＥＥＮ ２０ ０．５％を含むＰＢＳ、１００μｌ／ウェル）において室温（ＲＴ）で１時間インキュベートした。そして、異なる濃度（１０００、３３３．３、１１１．１、３７．０、１２．３、４．１、１．４、０．５、０．１５、０．０５ ｎｇ／ｍｌ）の抗スクレロスチン抗体、陽性対照抗体であるロモソズマブ又は非スクレロスチン関連ＩｇＧ（ヒト又はマウスＩｇＧ、陰性対照）を２０μｌ／ウェルのブロッキング液として各ウェルに添加し、プレートを室温で１時間インキュベートした。各ウェル（２０ｍｌ／ウェル）にブロッキング液で（１：５０，０００希釈）希釈したＮｅｕｔｒＡｖｉｄｉｎ ＨＲＰ（Ｐｉｅｒｃｅ、カタログ番号３１００１）を加え、プレートを室温で１時間インキュベートし、そして１００ｍｌ／ウェルの洗浄液で３回洗浄した。プレートにＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ Ｆｅｍｔｏ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、カタログ番号３７０７４）作動溶液（２０ｍｌ／ウェル）を加えた。光度計を使用して４２５ｎｍにおけるシングルを読み取った。

【0510】

下記の表５に示されるように、検出された抗スクレロスチン抗体は、ロモソズマブと比較して、同等又はより優れたＥＣ_５０値を示した。具体的に、９３Ｂ１Ｂ７は、ロモソズマブと比較して、より優れたＥＣ_５０値を示した。

【0511】

【表5】

【0512】

実施例４． 抗スクレロスチン抗体結合エピトープの同定

【0513】

正確的なエピトープを標的とすることは、所望の作用機序を達成するためにモノクローナル抗体を選択する重要な工程である（Ｗｉｌｓｏｎ，ＰＣ，２０１２，Ｎａｔ． Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２，７０９－７１９）。抗Ｂ細胞エピトープに対して、合成のペプチドベースによる抗体の産生は、周知の技術分野において様々な疾患のための治療用抗体及びワクチンの開発に広く用いられており（Ｂｅｎ－Ｙｅｄｉｄｉａ Ｔ．， １９９７，Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏ ｔｅｃｈｎｏｌ ８：４４２－４４８；Ｂｉｊｋｅｒ ＭＳ，２００７，Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ Ｖａｃｃｉｎｅｓ ６：５９１－６０３）、得られた抗体の特異性の利点は、ただ特定のエピトープに限定された。ＮＭＲ及び結晶学的構造は、スクレロスチンにおける第２のループが低密度リポタンパク質受容体関連タンパク質ファミリーメンバー（例えば、ＬＲＰ５又はＬＲＰ６）と直接に相互作用し、ＬＲＰｓとＷｎｔファミリーメンバーとの間の相互作用を遮断することを実証した。ヒトスクレロスチンとＬＲＰ６との複合体の結晶構造（Ｋｉｍ，Ｊ．２０２０，Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．１１：５３５７－５３５７）によれば、図１に示される「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６）を含むループ先端は、スクレロスチンのＬＲＰ６の第１のプロペラドメインに結合する主な結合決定基であることが見出された。

【0514】

バイオフィルム干渉（Ｇａｔｏｒ，Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ）で化学的に合成されたペプチドへの抗体９３Ｂ１Ｂ７の結合を検出し、前記ペプチドは、図２に示されるヒト及びマウスのスクレロスチン第２のループに由来する配列を含む。ペプチドをビオチン化し（ＮＨＳ－ビオチン試薬、Ｔｈｅｒｍｏ、＃２１３４３）、０．５μｇ／ｍｌ溶液を用い、トレプトアビジン・バイオセンサーに固定した。分析物として５μｇ／ｍｌ ｍＡｂ ９３Ｂ１Ｂ７の動態緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、ＴＷＥＥＮ－２０ ０．０５％、ＢＳＡ０．２％）を用い、結合センサーグラムを図２に示す。９３Ｂ１Ｂ７は、高親和性でヒトスクレロスチンにおける同じ「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６）モチーフを有するｐｅｐ１（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８５）、ｐｅｐ５（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８７）及びｐｅｐ６（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８８）を認識する。逆に、図３に示したように、ロモソズマブは、これらのペプチドを認識できなかった。

【0515】

９３Ｂ１Ｂ７の結合エピトープがロモソズマブの結合エピトープと全く異なることを実証するために、ロモソズマブ５μｇ／ｍｌを抗ＨＦＣプローブに固定し、分析物としてヒトスクレロスチン２μｇ／ｍｌ及び９３Ｂ１Ｂ７ ５μｇ／ｍｌの動態緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ ７．４、０．０５％のＴＷＥＥＮ－２０、０．２％のＢＳＡ）を順に添加した。結合センサーグラムを図４に示し、ロモソズマブ及び９３Ｂ１Ｂ７は、異なる結合部位を占有することでスクレロスチンに同時に結合できるため、互いに交差ブロックしないことを示す。従って、当該結合エピトープ（「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフ、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６）は、本発明の抗体の特有なものであり、ロモソズマブの結合エピトープと重複しない。

【0516】

本明細書で見出される多くの抗スクレロスチン抗体は、非常に類似した結合活性及びＣＤＲ配列を有し（表３及び表４を参照する）、従って、これら抗体は同じ特異性及び結合エピトープを有すると考えられる。従って、本明細書で見出されるこれら抗体が「ＩＧＲＧＫＷＷＲ」モチーフ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６）を有するスクレロスチンにおける特異性エピトープに結合することが実証された。これにより、これら抗体は、スクレロスチンとＬＲＰ６との結合を完全に防ぐことを可能にし、他の抗スクレロスチン抗体（例えばロモソズマブ）よりも強いスクレロスチン中和を得る。これは、以下の例に記載されているように、本明細書に開示の抗体は、スクレロスチン結合及び中和活性の点でロモソズマブよりも優れるという観察の結果と一致する。

【0517】

実施例５． 抗スクレロスチン抗体のヒト化

【0518】

抗体９３Ｂ１Ｂ７は、相補性決定領域（ＣＤＲ）をヒト生殖系フレームワークに移植することでヒト化された。選択される軽鎖生殖系受容体配列は、ヒトＶＫ２ Ａ１９Ｖ領域、ＶＫ１ Ｏ１２Ｖ領域、及び、ＪＫ４ Ｊ領域である（Ｖ－ＢＡＳＥ，ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ２．ｍｒｃ－ｌｍｂ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｖｂａｓｅ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ２．ｐｈｐ）であった。選択される重鎖生殖系受容体配列は、ヒトＶ_Ｈ１ １－１８ Ｖ領域及びＪＨ４ Ｊ領域（Ｖ ＢＡＳＥ，ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ２．ｍｒｃ－ｌｍｂ．ｃａｍ．ａｃ．ｕｋ／ｖｂａｓｅ／ａｌｉｇｎｍｅｎｔｓ２．ｐｈｐ）である。ドナーから受容体配列へのＣＤＲ移植は、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ等、１９８７）の定義に従うが、Ｃｈｏｔｈｉａ／Ｋａｂａｔの定義を組み合わせるＣＤＲ－Ｈ１及びＨ２の使用を除いた。初期Ｖ領域配列を含む全長ＩｇＧ４Ｐ抗体をコードする遺伝子は、自動合成法（Ｖａｎｚｙｍｅ ｌｎｃ．）により構築され、オリゴヌクレオチド特異的変異誘発により最終的な移植バージョンを生成した。完全な活性及び高い熱安定性を維持するために、ヒト化重鎖（Ｋａｂａｔ番号付け）９３位（チロシン）及び９４位（セリン）のドナー残基を保持し、かつ、４３位の受容体残基（グルタミン）をリジンに変更したのは、リジンが当該位置でより多く現れるためである。同様に、ヒト化軽鎖（Ｋａｂａｔ番号付け）４６位（アルギニン）のドナー残基を維持した。また、軽鎖ＣＤＲ Ｌ１における１つの潜在的なアスパラギン酸異性化部位を除去するために、３０位のグリシン残基をセリンに突然変異させた。ヒト化抗スクレロスチン抗体ｈＡｂ－１、ｈＡｂ－２及びｈＡｂ－３を生成し、これらＣＤＲ、Ｖ_Ｈ及びＶ_Ｌ配列を表６に示す。

【0519】

【表6】

【0520】

実施例６． バイオフィルム干渉（ＢＬＩ）でヒト及びカニクイザルのスクレロスチンへのヒト化抗スクレロスチン抗体の結合動態の検出

【0521】

Ｇａｔｏｒ装置（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ）でバイオフィルム干渉を採用し、ヒト及びカニクイザルのスクレロスチンに対するヒト化抗スクレロスチン抗体の結合親和性を検出した。５μｇ溶液で抗体を抗ＨＦＣバイオセンサーに固定した。分析物として、動態緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、ＴＷＥＥＮ－２０ ０．０５％、ＢＳＡ０．２％、ビオチン１０μＭ）でヒトスクレロスチン及びカニクイザルスクレロスチンを４μｇ／ｍｌになるように連続的に２倍希釈した。Ｇａｔｏｒソフトウェアを使用し、データのグローバルフィット（１：１）に基づき、親和性（Ｋ_Ｄ）及び動態的パラメータ（Ｋ_ｏｎ及びＫ_ｏｆｆ）を計算した。

【0522】

結果を下記の表７に示す。対照品であるロモソズマブに比べて、ヒト化抗体ｈＡｂ－１及びｈＡｂ－２は、ヒト及びカニクイザルのスクレロスチンに対する親和性がより高い。

【0523】

【表7】

【0524】

実施例７．ＨＥＫ２９３／ＴＣＦ／ＬＥＦ／Ｗｎｔ１細胞における抗スクレロスチン抗体のスクレロスチン中和活性

【0525】

ＨＥＫ２９３によるアッセイによれば、抗体がスクレロスチンを中和し、Ｗｎｔ１によるＴＣＦ／ＬＥＦルシフェラーゼの活性を抑制することができると検出する。

【0526】

Ｗｎｔタンパク質は、分泌型糖タンパク質ファミリーであり、マウス及びヒトの骨芽細胞の分化及び活性の重要な調節因子である。Ｗｎｔシグナルは、Ｆｒｉｚｚｌｅｄ（Ｆｚｄ）ファミリーの７チャネル膜貫通のＧタンパク質共役受容体ファミリー及びＡｒｒｏｗ／ＬＲＰファミリーの共受容体、例えば、ＬＲＰ５及びＬＲＰ６、又はＲＹＫ又はＲＯＲ膜貫通チロシンキナーゼに伝導される。既知のＷｎｔのＦｚｄ受容体及び補助受容体に対する結合は、古典的なβ－カテニン依存性経路及び非古典的なβ－カテニン非依存性経路に歴史的に分けられる、複数の異なる細胞内シングルカスケード反応を活性化させた。β－カテニンは、Ｗｎｔシグナル伝達過程中の遺伝子転写を調節できる、重要な転写共活性化因子である。ＷｎｔとＦｚｄ受容体との複合体の結合は、ＬＲＰ５／６複合体のリン酸化を招致し、続いて細胞質におけるβ－カテニンを安定化させた。そして、安定化したβ－カテニンを核に転位させ、高移動度ファミリー（ＨＭＧ）型転写因子とリンバ淋巴増強因子／Ｔサイトカイン（ＬＥＦ／ＴＣＦ）ファミリーと相互作用し、標的遺伝子の発現を刺激した。

【0527】

Ｗｎｔシグナル経路拮抗薬及びその抗体遮断剤の研究において、細胞株ＨＥＫ２９３／ＴＣＦ／ＬＥＦ／Ｗｎｔ１は、Ａｓｋｇｅｎｅ（Ａｓｋｇｅｎｅ、ＣＡ）に由来する。ＴＣＦ／ＬＥＦホタルルシフェラーゼレポート遺伝子を発現するＨＥＫ２９３細胞株を用い、Ｗｎｔシグナル拮抗薬（例えば、スクレロスチン及びＤＫＫ１）の阻害活性を解析した。スクレロスチン又はＤＫＫ１を添加し、Ｗｎｔ１シグナルを拮抗し、ルシフェラーゼ活性を低下させることができる。逆に、スクレロスチン又はＤＫＫ１抗体を添加し、シグナルの低下を遮断し、ルシフェラーゼ活性を回復させることができる。入手してから、細胞をウシ胎児血清（ＦＢＳ）１０％、非必須アミノ酸、ピルビン酸ナトリウム、２－メルカプトエタノール、ペニシリン／ストレプトマイシン１％、Ｇ４１８ ４００μｇ／ｍｌ 及びピューロマイシン２μｇ／ｍｌを含むＬ－グルタミン（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＣＡ）でＲＰＭＩ１６４０培地に培養した。細胞を回収し、３０，０００細胞／ウェルの濃度で白色９６ウェアプレートに播種した。

【0528】

拮抗薬の阻害作用を検出する場合、培地を除去し、各ウェルにＬｉＣｌ １０ｍＭを含むアッセイ培地（Ｇ４１８、ピューロマイシンを含まない培地）５０μｌを添加した。検出されたスクレロスチン及びＤＫＫ１タンパク質を連続的に希釈し、アッセイプレートに等量の拮抗薬を添加し、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２で６時間培養した。その後、Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐホタルルシフェラーゼ（Ｐｉｅｒｃｅ，ＣＡ）試薬を１００μｌ／ウェルで添加し、ＢｉｏＴｅｋ Ｇｅｎ５発光マイクロプレートリーダー（Ｗｉｎｏｏｓｋｉ、ＶＴ）でルシフェラーゼ活性を検出した。抗体の中和活性を検出する際に、アッセイ培地において検出ための抗体及び対照抗体を連続的に希釈した。特定量のスクレロスチン又はＤＫＫ１タンパク質を添加し、１５分間インキュベートした。次に、培地５０μｌをアッセイプレートに移し、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２で６時間インキュベートし、ＢｉｏＴｅｋ Ｇｅｎ５発光マイクロプレートリーダーで解析した。

【0529】

結果を下記の表８に示す。表８に示されているように、６５Ｂ１２Ｃ９以外、すべてのマウス抗スクレロスチン抗体は、ロモソズマブ比較して、同等又はより優れたＥＣ_５０値を示す。ｈＡｂ－１、ｈＡｂ－２及びｈＡｂ－３という３つのヒト化抗体は、ロモソズマブと比較して、より優れたＥＣ５０値を示した。

【0530】

【表8】

【0531】

実施例８． ヒト化抗スクレロスチン抗体の溶解度及び安定性

【0532】

本発明に記載のヒト化抗ＳＯＳＴ抗体ｈＡｂ－１、ｈＡｂ－２及び対照抗体であるロモソズマブについて、順に濃度を増加させながら沈殿の形成について評価した。ｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液において、初期濃度は、１０ｍｇ／ｍｌであった。４°Ｃで細胞を限外ろ過濃縮チューブ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）に入れ、４０００ｒｐｍで遠心分離し、抗体濃度が３０ｍｇ／ｍｌ及び９０ｍｇ／ｍｌに達するまで、５～１０分間ごとに遠心分離を停止し、抗体濃度をサンプリングした。サンプルを４°Ｃで１４日間保存し、沈殿を目視で観察した。本発明に記載の抗体は、９０ｍｇ／ｍｌに逹しでも清澄溶液を維持したが、対照抗体であるロモソズマブは、この濃度で沈殿を形成して濁っていることは、ｈＡｂ－１及びｈＡｂ－２がｐＨ７．４のＰＢＳ緩衝液においてロモソズマブより安定で、より溶解しやすいことを示す。この結果は、本発明に記載の抗体が高濃度製剤（例えば９０ｍｇ／ｍｌ）において安定化を維持することができることを示す。

【0533】

【表9】

【0534】

実施例９． 二重特異性抗体の調製

【0535】

本発明は、スクレロスチン、及び、ＤＫＫ１又はＲＡＮＫＬを標的とする二重特異性抗体を調製した。ＤＫＫ１又はＲＡＮＫＬを標的とする例示的な抗体の配列を、表９及び表１０に示す。

【0536】

【表10】

【0537】

【表11】

【0538】

具体的に、下記のスクレロスチン／ＤＫＫ１及びスクレロスチン／ＲＡＮＫＬの対は、ｈＡｂ－１×１１Ｈ１０－Ｖ_Ｈ４４Ｖ_Ｌ３２、ｈＡｂ－２×１１Ｈ１０－Ｖ_Ｈ４４Ｖ_Ｌ３２、ｈＡｂ－１×Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ、ｈＡｂ－２×Ｄｅｎｏｓｕｍａｂから調製された。

【0539】

一つの実施形態（図５（Ａ）を参照する）において、抗ＤＫＫ１ １１Ｈ１０－Ｖ_Ｈ４４Ｖ_Ｌ３２（又は抗ＲＡＮＫＬ Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）のＦｖドメインは、（ＧＧＧＧＳ）_４リンカーを介して連結されるＶ_Ｈ及びＶ_Ｌの２種の異なる配向を有するｓｃＦｖに変換され、（ＧＧＧＧＳ）_４リンカーにより連結されている。例えば、Ｖ_ＨにおいてＧ１００Ｃ突然変異、並びに、Ｖ_ＬにおいてＧ４４Ｃ突然変異は、存在し、これにより、ｓｃＦｖｓの正確的な組み立てを促進することができる。２つの抗ＤＫＫ１（又は抗ＲＡＮＫＬ）のｓｃＦｖは、１つのＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ（ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６）リンカーを介して、それぞれヒト化抗スクレロスチン抗体の２つのＩｇＧ重鎖のＣ末端に連結し、二重特異性ＩｇＧ－ｓｃＦｖを形成した。

【0540】

もう１つの実施例（図５（Ｂ）を参照する）において、抗スクレロスチン抗体及び抗ＤＫＫ１ １１Ｈ１０－Ｖ_Ｈ４４Ｖ_Ｌ３２（又は抗ＲＡＮＫＬ Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）は、非対称ＩｇＧ構造である「ノブ・イン・ホール」（「Ｋｎｏｂ－ｉｎｔｏ－Ｈｏｌｅ」）を有する二重特異性抗体に変換された。抗ＤＫＫ１ １１Ｈ１０－Ｖ_Ｈ４４Ｖ_Ｌ３２（又は抗ＲＡＮＫＬ Ｄｅｎｏｓｕｍａｂ）のＣＬドメインは、Ｓ１７６Ｃ及びＣ２１４Ｓ突然変異を含み、ＣＨ１ドメインは、Ｆ１７０Ｃ及びＣ１３１Ｓなどの突然変異を含み、直交したＣＨ_１－ＣＫジスルフィド結合を形成し、軽鎖の正確な対形成を可能にする。

【0541】

各種の抗スクレロスチン二重特異性抗体の形態及び配列を下記の表１１に示す。

【0542】

【表12】

【表13】

【表14】

【表15】

【表16】

【表17】

【0543】

９６ウェルプレートにおいて、接着適応２９３ ６Ｅ細胞に二重特異性分子を一過性に発現させる。トランスフェクトの２４時間前に、ポリ－Ｄ－リジンでコーティングされた９６ウェル組織培養プレートにおいて、２５μｇ／ｍｌ及び５％ＦＢＳの無血清ＫＯＰ２９３培地（ＺＨＵＨＡＩ ＫＡＩＲＵＩ ＢＩＯＴＥＣＨ．ＬＴＤ．＃Ｋ０３２５２）に、１ウェル当たり５Ｅ４細胞で接着２９３ ６Ｅ細胞を播種し、３７°Ｃ、５％ＣＯ_２で一晩培養した。トランスフェクトの当日、各結合分子の相当する重鎖及び軽鎖ＤＮＡ１００ｎｇ（４０ｎｇ／μｌ）を一緒に混合した。ＤＮＡ混合物に無血清培地ＫＯＰ２９３ ２５μｌ／ウェルを添加した。室温で１５－３０分間インキュベートした後、このトランスフェクト混合物を、前日に播種した培養プレートに添加し、穏やかに振とうして混合した。培養プレートを３７°Ｃ、５％ＣＯ_２のインキュベーターに戻して一晩置いた。翌日、培地及びトランスフェクト混合物を吸引し取り出し、トリプトン０．５％を含む無血清培地１３０μｌに置換した。プレートをさらに６日インキュベートした。トランスフェクトした後の７日目に馴化培地（ＣＭ）を回収した。プレートを１０００ｒｐｍで５分間遠心分離して、すべての細胞残屑を沈殿させた。上清を慎重に滅菌ポリプロピレンブロックに移す。

【0544】

タンパク質Ａ親和性クロマトグラフィーにより抗体を精製し、ＰＢＳ（ｐＨ７．２）において緩衝液を交換した。理論的に測定した当該タンパク質の消光係数を使用し、２８０ｎｍにおける吸光度を読み取ることで、精製抗体の濃度を決定した。

【0545】

実施例１０． 抗スクレロスチン×抗ＤＫＫ１及び抗スクレロスチン×抗ＲＡＮＫＬ二重特異性抗体の結合動態及び親和性

【0546】

Ｇａｔｏｒ（Ｐｒｏｂｅ Ｌｉｆｅ）バイオフィルム干渉（ＢＬＩ）で抗スクレロスチン×抗ＤＫＫ１及び抗スクレロスチン×抗ＲＡＮＫＬ二重特異性抗体の結合動態及び親和性を測定した。溶液５μｇ／ｍｌで抗体を抗ＨＦＣバイオセンサーに固定した。分析物として、動態緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ ７．４、ＴＷＥＥＮ－２０ ０．０５％、ＢＳＡ０．２％）でスクレロスチン（１μｇ／ｍｌ）、ＤＫＫ１（２μｇ／ｍｌ）又はＲＡＮＫＬ（４μｇ／ｍｌ）を連続的に２倍希釈した。Ｇａｔｏｒソフトウェアを使用してデートのグローバルフィット（１：１）に基づき、親和性（Ｋ_Ｄ）及び動態的パラメータ（Ｋ_ｏｎ及びＫ_ｏｆｆ）を算出した。結果を表１２にまとめた。

【0547】

【表18】

【0548】

実施例１１．二重特異性抗体がヒトスクレロスチン及びＤＫＫ１と同時に結合できることが実証された

【0549】

ＢＬＩでヒトスクレロスチン及びＤＫＫ１が二重特異性抗体に同時に結合できることを実証した。二重特異性抗体構築体（５μｇ／ｍｌ）がＨＦＣプローブに捕捉され、次に、動態緩衝液（ＰＢＳ、ｐＨ ７．４、ＴＷＥＥＮ－２０ ０．０５％、ＢＳＡ０．２％）にヒトスクレロスチン（２μｇ／ｍｌ）及びＤＫＫ１（２μｇ／ｍｌ）を順に添加した。図６に示されるように、４種の二重特異性抗体において、２種の抗原の増加結合反応が観察されたが、ブラック緩衝液又は抗スクレロスチンモノクローナル抗体では増加結合反応が観察されず、二重特異性抗体は、スクレロスチン及びＤＫＫ１に同時に結合でき、一方の標的タンパク質への結合が他方の標的タンパク質への結合をブロックしないことを示す。

【0550】

実施例１２．ＨＥＫ２９３／ＴＣＦ／ＬＥＦ／Ｗｎｔ１細胞における二重特異性抗体のスクレロスチン／ＤＫＫ１中和活性

【0551】

例７に示されるように、ＷＮＴシグナル遮断アッセイを行い、それぞれヒトスクレロスチン及びＤＫＫ１を１μｇ／ｍｌ添加した。二重特異性抗体は、いずれもスクレロスチン及びＤＫＫ１からのＷＮＴ拮抗作用を用量依存的な方式で完全に中和することができる。ＥＣ_５０活性を表１３に示す。

【0552】

【表19-1】

【0553】

実施例１３．二重特異性抗体の薬物動態学的研究

【0554】

投与されていない雄のカニクイザルは、Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｈｕａｚｈｅｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄから購入する。動物の体重は、２．７ｋｇ～３．５ｋｇであり、投与開始時は、３～５歳である。動物を、４つの用量群（各群において、ｎ＝３）にランダムに分配した。投与当日、抗体３０ｍｇ／ｋｇを皮下注射した。１日目（投与前、投与後１２時間及び２４時間）、投与後２、３、５、７、１０、１４、１８、２１、２８日目に血液サンプルを採取する。本研究で使用されたＰＫサンプリングレジメンは、カニクイザルにおける他のヒトＩｇＧ治療性モノクローナル抗体の公知のＰＫプロファイルに基づいて設計されたものである。

【0555】

カニクイザル血清におけるｂｓＡｂの検出方法は、確認された適切なサンドイッチＥＬＩＳＡ法を採用する。高結合力の９６ウェルポリスチレンマイクロプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ）が特異的なヒトＩｇＧ重鎖及び軽鎖を有するサル吸着抗体でコーティングされた。標準品、品質管理用サンプル及び未知のサンプルをウェルに注入し、存在するヒト抗体のいずれも固定化抗体に結合する。すべての未結合物質を洗浄した後、ウェルにＥＬＩＳＡに用いられる特異的なヒトＩｇＧ重鎖及び軽鎖を有するサル吸着抗体コンジュゲートＨＲＰ及びＴＭＢ基質溶液を添加した。捕捉抗体及び検出抗体に結合するヒト二重特異性を有するサンプルのみは、４５０ｎｍにおいて吸収シグナルを生じる。生じたシグナルは、ヒト二重特異性抗体の存在量に比例する。サンプルにおける抗体の最低定量可能濃度（ＬＬＯＱ）は、０．１μｇ／ｍｌである。

【0556】

カニクイザル二重特異性抗体の血清濃度を図７に示す。データは、平均値±標準偏差で表され、ｎ＝３であった。算出された半減期範囲は、１７～２８６時間である。

【0557】

実施例１４． 二重特異性抗体の薬力学研究

【0558】

骨形成バイオマーカーであるタイプ１プロコラーゲンのＮ末端プロペプチド（Ｐ１ＮＰ）及び骨吸収バイオマーカーであるタイプ１コラーゲンのＣ末端ペプチド（ＣＴＸ－１）は、広く認められる２つの特異的な骨恒常性の指標である。二重特異性抗体の薬力学的効果を検出するために、正常な雄カニクイザルに上記の異なる二重特異性抗体を３０ｍｇ／ｋｇの用量で皮下注射した。注射した後の３日目に血液サンプルを採取した。その後、血清サンプルを遠心分離した。血清Ｐ１ＮＰ及びＣＴＸ－１レベルを、それぞれＰ１ＮＰキット（ＰＣ－００７、Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｐｈｉｃｏｎ Ｂｉｏｔｅｃｈ Ｃｏ．，Ｌｔｄ、中国広州）及びＳｅｒｕｍ ＣｒｏｓｓＬａｐｓ ＥＬＩＳＡキット（ＡＣ－０２１Ｆ１Ｒ，Ｉｍｍｕｎｏｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＵＫ）を使用し、メーカーの添付文書に従い、測定した。その結果、二重特異性抗体の投与が、ただ注射後の３日間という時刻で血清Ｐ１ＮＰレベルが顕著に増加することを示す。投与前のベースラインに比べて、異なる二重特異性抗体の３日目の血清Ｐ１ＮＰレベルの増加範囲は、１０４．５０±８．５％～２１２．７５±２０．６％の範囲（表１４）である。また、二重特異性抗体を注射してから３日後、ベースラインに比べて、異なる二重特異性抗体の血清ＣＴＸ－１レベルの低下範囲は、４６．７３±２．５％～９０．１１±６．８％の範囲（表１４）である。その結果、二重特異性抗体は、骨形成を顕著に増加させると共に骨吸収を低下させることができ、男性及び女性の骨量の低下又は骨粗鬆症、骨形成不全、多発性骨髄腫骨疾患等の骨量の低下又は骨質の劣りに関連する疾患又は病状を治療することに特異な治療効果を有することを示す。データを表１４に示す。

【0559】

【表19-2】

【0560】

また、偽手術（Ｓｈａｍ）又は長期卵巣摘出（ＯＶＸ）が行われた雌カニクイザル（試験に実証された良好な閉経後骨粗鬆症動物モデル）に対して、二重特異性抗体で治療する場合、１回の１０ｍｇ／ｋｇの二重特異性抗体を注射すると、血清Ｐ１ＮＰの顕著な増加及び血清ＣＴＸ－１レベルの減少を誘導することができる。投与前のベースラインに比べて、投与してから１４日、それぞれ、ＯＶＸサルの血清Ｐ１ＮＰレベルは、２４１．３６±６０．９％増加し、偽手術サルの血清Ｐ１ＮＰラベルは、１８２．６７±６０．１％増加する。また、投与してから１４日、それぞれ、ＯＶＸサルの血清ＣＴＸ－１は、－５２．１２±５．９％低下し、偽手術サルの血清ＣＴＸ－１は、－１７．４３±８．５％低下する。これらデータは、年齢関連又は閉経後骨粗鬆症において、本発明に係る抗体による骨形成の増加及び骨吸収の減少という治療效果をさらに実証する。

【0561】

実施例１５． 骨形成不全（ＯＩ）に罹る患者の骨折に対する二重特異性抗体の予防可能な効果

【0562】

骨の多重スケール階層構造（ｍｕｌｔｉｓｃａｌｅ ｈｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ）は、自然的に最適化されたものであるため、骨折に耐えることができる。骨形成の増強及び骨吸収の低減は、骨強度及び健康を維持する２つの重要なプロセスである。骨形成不全（ＯＩ）又は脆性骨疾患では、遺伝子突然変異は、コラーゲンの質量及び／又は数量に影響を及ぼし、骨折のリスクを顕著に増加させる。臨床的に、疾患の兆候は、低骨量及び低強度、極度の骨軟化症及び骨変形、並びに頻繁な骨折である。ＯＩの骨折発生率を低下させる治療は、臨床的改善の最終目標である。従って、Ｉ型コラーゲンのｐｒｏ－ａ２鎖の自然突然変異が骨量の悪化や骨量の低下を招致し、最終的に頻繁な脆性骨折を招致する、骨形成不全（ＯＩ）マウスモデル（ｏｉｍ／ｏｉｍ）における二重特異性抗体の効能を研究した。４週間齢の場合、ホモ接合型ｏｉｍ／ｏｉｍマウスの長骨が骨折を開始した。モノクローナル抗体又は二重特異性抗体の単独（２５ｍｇ／ｋｇ、各抗体は週１回）での皮下注射から６週間後、１０週齢の場合、抗体投与群の動物は溶媒投与動物に比べて、新たな骨折を発症する数量が顕著に少なくなった。溶媒投与対照群では、Ｘ線画像によれば４週齢から１０週齢（６週間観察期）まで、群内の各マウスの骨折の数量は、平均２．２７±０．７の箇所増加した。溶媒投与対照群に比べて、スクレロスチン抗体又はＤＫＫ１抗体の単独投与は、マウスあたりの平均骨折数の減少（それぞれ０．７５±０．２箇所及び１．４４±０．４箇所）を引き起こす。より注意すべきなことは、二重特異性抗体で治療されたｏｉｍ／ｏｉｍマウスは、新たに生じる骨折（４週間から１０週間まで、各マウスにおける０．００±０．５箇所の新たな骨折）を完全に予防することができ、任意の単剤療法に比べて、はるかに優れた。これらの結果は、二重特異性抗体がスクレロスチン及びＤＫＫ１を同時に中和することでさらなる骨折を防ぎ、相乗的な骨合成代謝の効果を達成することを示す。スクレロスチン及びＤＫＫ１のＷｎｔ受容体ＬＲＰ５／６に結合し、拮抗薬としてシグナル経路合成代謝を遮断する特性に鑑み、例えば、骨粗鬆症患者は、抗スクレロスチン抗体で治療された後、ＤＫＫ１のアップレギュレーション（Ｈｏｌｄｓｗｏｒｔｈ Ｇ，２０１８ Ｂｏｎｅ １０７，９３－１０３）が観察されたことに示されるように、特異性抗体で結合部位の１つを遮断すると、代償機構を介して他の拮抗薬のアップレギュレーションが引き起こされることは、注目すべきである。従って、本研究の前述した結果は、骨骼に対する相乗的な作用が更なる骨折を防ぐことができることを示す。この満足すべきな結果は、二重特異性抗体がＯＩ患者の満たされていないニーズを低減させ、繰り返し骨折の負担を低減できることを明らかに示す。

【0563】

実施例１６．二重特異性抗体によるＲＰＭＩ８２２６多発性骨髄腫細胞のインビトロでの増殖への抑制

【0564】

本発明は、さらにＲＰＭＩ８２２６ヒト多発性骨髄腫（ＭＭ）細胞において、二重特異性抗体の腫瘍細胞増殖を抑制する活性について、評価する。多くの科学的報告に示されるように、多発性骨髄腫患者は、ＤＫＫ１の発現レベルが上昇し、疾患の重症度に相関する（Ｆｕｌｃｉｎｉｔｉ Ｍ．等，Ｂｌｏｏｄ，２００９；１１４（２）：３７１－３７９．，Ｆｅｎｇ Ｙ等，Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｍａｒｋｅｒｓ．２０１８；１：１－７）。また、研究において、約８０％～９０％のＭＭ患者は、ＭＭ関連骨疾患（ＭＭＢＤ）を発症することが示される。ＭＭＢＤの主な臨床的兆候は、骨吸収活性の増加、及び、骨形成の阻害による骨溶性病変及び骨折である。従って、二重特異性抗体の性質は、骨吸収の阻害及びＤＫＫ１発現の阻害を提供することで、骨形成を増加させ、ＭＭＢＤ患者に利益をもたらす。本発明者らの初期研究は、この分子作用を経ったＭＭ細胞（ＲＰＭＩ ８２２６）のインビトロでの細胞培養において細胞表面マーカーであるＣＤ１３８のレベルの低下を示し、細胞がアポトーシス工程を受ける可能性が高いことを示す。また、ＣＣＫ８腫瘍成長解析は、腫瘍細胞数が用量依存的に減少することを示す。ＲＰＭＩ８２２６ ＭＭ細胞に対して、二重特異性抗体１００μｇ／ｍｌを投与してから４８時間後、生きる細胞数が約２８％減少した。これは、二重特異性抗体がＲＰＭＩ８２２６ＭＭ細胞のアポトーシスを引き起こし、腫瘍細胞の増殖を抑制することができると示す。その結果、このような治療適用は、骨病状の予防（例えば、実施例１４及び１５におけるデータに示されるように）のみならず、腫瘍成長を直接に阻害することでＭＭＢＤ及び腫瘍転移に関連する骨病状を治療することを示す。

【0565】

【表20】

【0566】

【表21】

【0567】

【表22】

【0568】

【表23】

【0569】

【表24】

【0570】

【表25】

【0571】

【表26】

【0572】

【表27】

【0573】

【表28】

【0574】

【表29】

【0575】

【表30】

【0576】

【表31】

【0577】

【表32】

【0578】

【表33】

【0579】

【表34】

【0580】

【表35】

【0581】

【表36】

【0582】

【表37】

【0583】

【表38】

【0584】

【表39】

【0585】

【表40】

【0586】

【表41】

【0587】

【表42】

【0588】

【表43】

【0589】

【表44】

【0590】

【表45】

【0591】

【表46】

【0592】

【表47】

【0593】

【表48】

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【図6】

【図7】

【配列表】

2023543643000001.app

【手続補正書】

【提出日】2023-04-11

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、スクレロスチンのエピトープに結合し、前記エピトープは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８６に示されるアミノ酸配列を含む、抗スクレロスチン構築体。

【請求項2】

スクレロスチンを特異的に認識する抗体部分を含む抗スクレロスチン構築体であって、前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含み、
前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１～４及び１２のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５～８及び１３のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９～１１及び１４のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、並びに、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５－１７、８５及び８６のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８及び１９のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０及び２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
好ましくは、
ａ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５又は１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｂ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ _Ｈ ）及び軽鎖可変領域（Ｖ _Ｌ ）を含み、
ａ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｂ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｃ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｄ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｅ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｆ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｇ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、及び、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３、
ｈ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｉ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｊ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｋ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、
ｌ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、或いは、
ｍ）ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２及びＨＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７に示される配列を有するＶ _Ｈ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有し、並びに、
ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２及びＬＣ－ＣＤＲ３は、それぞれＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０に示される配列を有するＶ _Ｌ におけるＣＤＲ１、ＣＤＲ２及びＣＤＲ３のアミノ酸配列を有する、抗スクレロスチン構築体。

【請求項3】

前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２、２４、２６、２８、３０、３２、３４、３６、３８、４０及び８７のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、及び／又は、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３、２５、２７、２９、３１、３３、３５、３７、３９、４１及び８８～９０のいずれか１項のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
好ましくは、
ａ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３２のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３３のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３４のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３５のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｈ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３６のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｉ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｊ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４１のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｋ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８８のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
ｌ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８９のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、或いは、
ｍ）前記Ｖ _Ｈ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８７のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含み、
前記Ｖ _Ｌ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９０のアミノ酸配列を含み、又は、少なくとも約８０％配列同一性を有するアミノ酸配列の変異体を含む、請求項１又は２に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項4】

前記抗体部分は、重鎖可変領域（Ｖ_Ｈ）及び第２の軽鎖可変領域（Ｖ_Ｌ）を含む抗スクレロスチン抗体のヒト化抗体部分に由来し、
ａ）前記Ｖ_Ｈは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｂ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲ中の５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｃ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｄ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｅ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｆ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２００のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
ｇ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２０のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、或いは、
ｈ）前記Ｖ_Ｈは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＨＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含み、
前記Ｖ_Ｌは、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、
ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２１のいずれか１項のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、又は、これらＬＣ－ＣＤＲにおいて５、４、３、２、又は、１個までのアミノ酸置換を有する変異体を含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項5】

前記抗体部分は、全長抗体、二重特異性抗体、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）_２、Ｆｖ断片、ジスルフィド結合安定化Ｆｖ断片（ｄｓＦｖ）、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（ｄｓｓｃＦｖ）、（ｄｓＦｖ）_２、Ｆｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｃ融合、ｓｃＦｖ－Ｆｖ融合、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）、トリボディ（ｔｒｉｂｏｄｙ）及びテトラボディ（ｔｅｔｒａｂｏｄｙ）から選ばれる抗体又はその抗原結合断片であり、
好ましくは、前記構築体は、Ｆｃ断片を含む全長抗体であり、
好ましくは、前記抗体部分は、ｓｃＦｖ断片であり、
好ましくは、前記スクレロスチンは、ヒトスクレロスチンである、請求項２～４のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項6】

前記抗スクレロスチン構築体は、さらに第２の部分を含み、
好ましくは、前記第２の部分は、抗原を特異的に認識する第２の抗体部分を含み、
好ましくは、前記第２の抗体部分は、第２の重鎖可変領域（ＶＨ－２）及び軽鎖可変領域（ＶＬ－２）を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項7】

前記抗原は、ＤＫＫ１であり、
好ましくは、前記ＤＫＫ１は、ヒトＤＫＫ１であり、
好ましくは、
第２の抗体部分は、ＤＫＫ１の結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ _Ｈ－３ ）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ _Ｌ－３ ）を含む第３の抗体部分と競合し、
ａ）前記Ｖ _Ｈ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
ｂ）前記Ｖ _Ｈ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、或いは、
ｃ）前記Ｖ _Ｈ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４３のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４６のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：４９のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５２のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：５９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項8】

前記抗原は、ＲＡＮＫＬであり、
好ましくは、前記抗原は、ヒトＲＡＮＫＬであり、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、ＲＡＮＫＬの結合エピトープについて第３の重鎖可変領域（Ｖ _Ｈ－３ ）及び第３の軽鎖可変領域（Ｖ _Ｌ－３ ）を含む第３の抗体部分と競合し、
前記Ｖ _Ｈ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－３ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含み、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３を含み、
前記Ｖ _Ｌ－２ は、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２、及び、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３を含む、請求項６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項9】

前記第２の抗体部分は、全長抗体、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、（Ｆａｂ’）_２、Ｆｖ、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片、ｓｃＦｖ－ｓｃＦｖ、ミニチュア抗体、ダイアボディ（ｄｉａｂｏｄｙ）又はｓｄＡｂであり、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体であり、前記抗スクレロスチン抗体部分は、Ｖ _Ｌ に融合されたＶ _Ｈ を含む単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）断片であり、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖に融合し、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の軽鎖に融合し、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合し、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、前記全長抗体の１本又は２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合し、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合し、
好ましくは、
前記抗スクレロスチンの抗体部分は、リンカーを介せず前記全長抗体に融合し、
好ましくは、
前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳリンカーであり、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ は、第２のリンカーを介して前記Ｖ _Ｌ に融合し、
好ましくは、
前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ _Ｈ 、第２のリンカー及びＶ _Ｌ を含み、
好ましくは、
前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ _Ｌ 、第２のリンカー、Ｖ _Ｈ、 及び、任意にＣ末端アラニン残基を含み、
好ましくは、
前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、請求項６～８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項10】

前記第２抗体部分は、Ｖ_Ｈ－２及びＶ_Ｌ－２を含むｓｃＦｖ断片であり、そのうち、前記抗スクレロスチンの抗体部分は、２本の重鎖、２本の軽鎖及びＦｃ断片を含む全長抗体であり、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖に融合し、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の軽鎖に融合し、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＮ末端に融合し、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、前記全長抗体の２本の重鎖又は軽鎖のＣ末端に融合し、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、第１のリンカーを介して前記全長抗体に融合し、
好ましくは、
前記第２の抗体部分は、リンカーを介せず前記全長抗体に融合し、
好ましくは、
前記第１のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７４～８４から選ばれるＧＳ第１のリンカーであり、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、第２のリンカーを介して前記Ｖ _Ｌ－２ に融合し、
好ましくは、
前記Ｖ _Ｈ－２ は、リンカーを介せず前記Ｖ _Ｌ－２ に融合し、
好ましくは、
前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ _Ｈ－２ 、第２のリンカー及びＶ _Ｌ－２ を含み、
前記ｓｃＦｖ断片は、Ｎ末端からＣ末端までＶ _Ｌ－２ 、第２のリンカー、Ｖ _Ｈ－２ 、及び、任意にＣ末端アラニン残基を含み、
好ましくは、
前記第２のリンカーは、ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：７６又は７７のアミノ酸配列を含む、請求項６～８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項11】

前記ｓｃＦｖは、ジスルフィド結合安定化ｓｃＦｖ（「ｄｓｓｃＦｖ」）であり、
好ましくは、
前記ｄｓｓｃＦｖは、ａ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６０の番号付けによるＶ _Ｈ 又はＶ _Ｈ－２ におけるＧ４４Ｃ突然変異、及び、ｂ）ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：６１の番号付けによるＶ _Ｌ 又はＶ _Ｌ－２ におけるＧ１００Ｃ突然変異を含む、請求項９又は１０に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項12】

前記構築体は、
１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９６のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：９９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１００のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
９）、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１１）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０７のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１２）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０６のアミノ酸配列を含む重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０８のアミノ酸配列を含む軽鎖、
１３）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１０のアミノ酸配列を含２つのむ軽鎖、
１４）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１０９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１５）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１３のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１６）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１２のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１４のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１５のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１８）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
１９）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２０）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１１９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２１のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２４のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２６のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２６）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２７）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２９のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２８）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３０のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
２９）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３１のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３０）各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３３のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３１）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７７のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３２）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２５のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３３）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７８のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
３４）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７９のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、或いは、
３５）前記抗スクレロスチンの抗体部分又は第２の抗体部分に融合し、各重鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１８０のアミノ酸配列を含む２本の重鎖、及び、各軽鎖がＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１２２のアミノ酸配列を含む２本の軽鎖、
を含む、請求項９～１１のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項13】

前記構築体は、ａ）第１の軽鎖を含む第１のポリペプチドであって、前記第１の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ、ｉｉ）第１の軽鎖定常ドメイン（「第１のＣＬドメイン」）を含む第１のポリペプチド、
ｂ）第１の重鎖を含む第２のポリペプチドであって、前記第１の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ、ｉｉ）第１の重鎖定常ドメイン（「第１のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第１のＦｃドメインを含む第２のポリペプチド、
ｃ）第２の重鎖を含む第３のポリペプチドであって、前記第２の重鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｈ－２、ｉｉ）第２の重鎖定常ドメイン（「第２のＣＨ１ドメイン」）、及び、ｉｉｉ）第２のＦｃドメインを含む第３のポリペプチド、及び、
ｄ）第２の軽鎖を含む第４のポリペプチドであって、前記第２の軽鎖がＮ末端からＣ末端までｉ）Ｖ_Ｌ－２、ｉｉ）第２の軽鎖定常ドメイン（「第２のＣＬドメイン」）を含む第４のポリペプチド、
を含み、第１のＦｃドメインと第２のＦｃドメインとはＦｃ断片を形成し、
好ましくは、
第１のＦｃドメイン及び第２のＦｃドメインのいずれかは、Ｔ３６６Ｗ突然変異及び任意にＳ３５４Ｃ突然変異を含み、
他のＦｃドメインは、Ｔ３６６Ｓ突然変異、Ｌ３６８Ａ突然変異、Ｙ４０７Ｖ突然変異及び任意にＹ３４９Ｃ突然変異を含み、番号は、ＥＵインデックスに基づくものであり、
好ましくは、
ｉ）第１のＣＨ１ドメイン及び第１のＣＬドメイン、又は、ｉｉ）第２のＣＨ１ドメイン及び第２のＣＬドメインは、いずれも
ａ）１４１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１１６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｂ）１６８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６４位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｃ）１２６位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１２１位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｄ）１２８位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１１８位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｅ）１７０位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１７６位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｆ）１７１位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６２位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
ｇ）１７３位のアミノ酸がシステインに置換され、１３１位又は２２０位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＨ１ドメイン、及び、
１６０位のアミノ酸がシステインに置換され、２１４位のシステインが非システインアミノ酸に置換されたＣＬドメイン、
から選ばれるものであり、番号は、ＥＵインデックスに基づくものであり、
好ましくは、
１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３７のアミノ酸配列を含み、
２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３９のアミノ酸配列を含み、
３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４１のアミノ酸配列を含み、
４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４３のアミノ酸配列を含み、
５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３５のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１３４のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４５のアミノ酸配列を含み、
６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４９のアミノ酸配列を含み、
７）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５１のアミノ酸配列を含み、
８）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５３のアミノ酸配列を含み、
９）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５５のアミノ酸配列を含み、
１０）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５７のアミノ酸配列を含み、
１１）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５８のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１５９のアミノ酸配列を含み、
１２）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６０のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６１のアミノ酸配列を含み、
１３）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４６のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１４）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７１のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７２のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１５）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７３のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７４のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含み、
１６）第１のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１４７のアミノ酸配列を含み、
第２のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７５のアミノ酸配列を含み、
第３のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１７６のアミノ酸配列を含み、
第４のポリペプチドがＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：１６３のアミノ酸配列を含む、
請求項６～８のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項14】

前記第２の部分は、半減期延長の部分を含み、
好ましくは、前記半減期延長の部分は、Ｆｃ断片である、
請求項６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項15】

前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＭのＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種であり、
好ましくは、
前記Ｆｃ断片は、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４のＦｃ断片及びこれらの組み合わせ及びハイブリッドから選ばれる１種であり、
好ましくは、
前記Ｆｃ断片は、Ｈ４３５Ｒ突然変異及びＹ４３６Ｆ突然変異を含み、
好ましくは、
前記Ｆｃ断片は、対応する野生型Ｆｃ断片と比較して低減されたエフェクター機能を有し、
好ましくは、
前記Ｆｃ断片は、
ａ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたエフェクター機能、及び／又は、
ｂ）対応する野生型Ｆｃ断片と比較して増強されたＦｃＲｎ結合アフィニティ、
を有する、請求項５、９～１３のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項16】

前記構築体は、抗体－薬物コンジュゲート又は抗体融合タンパク質であり、
好ましくは、前記第２の部分は、薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、請求項６に記載の抗スクレロスチン構築体。

【請求項17】

請求項１～１６のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体と競合してスクレロスチンに特異的に結合する、抗スクレロスチン構築体。

【請求項18】

請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び薬学的に許容される担体を含む組成物であって、
好ましくは、前記組成物は、さらに薬物を含み、前記薬物は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）、カルシトニン及びこれらの組み合わせから選ばれる１種又は複数種である、薬物組成物。

【請求項19】

請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体をコードする、単離された核酸分子。

【請求項20】

請求項１９に記載の単離された核酸分子を含む、ベクター。

【請求項21】

請求項１９に記載の単離された核酸分子又は請求項２０に記載のベクターを含む、単離された宿主細胞。

【請求項22】

ａ）抗スクレロスチン構築体又はその一部を効果的に発現する条件で、請求項２１に記載の単離された宿主細胞を培養すること、及び、
ｂ）前記宿主細胞から発現された抗スクレロスチン構築体又はその一部を得ること、
を含む、抗スクレロスチン構築体を調製する方法。

【請求項23】

有効量の請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び／又は請求項１８に記載の薬物組成物の、個体の疾患又は病状を治療及び／又は予防する医薬品の調製における使用であって、
有効量の請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び／又は請求項１８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含み、
好ましくは、
前記疾患又は病状は、骨関連疾患又は軟骨関連疾状、骨髄又は血液学的疾患、骨格筋系の希少疾患、筋肉関連疾患又は癌であり、
好ましくは、
前記骨関連疾患は、骨形成不全、骨粗鬆症又は骨減少症（男性及び女性）、骨壊死、骨遅延癒合、骨折不癒合、多発性骨髄腫、多発性骨髄腫関連骨疾患、原発性骨腫瘍、及び悪性腫瘍の骨転移、炎症性又は感染性骨疾患、骨軟化症、高カルシウム血症、パジェット病、不運動による骨喪失、グルココルチコイドによる骨喪失、関節炎誘導骨喪失を含む炎症誘導骨喪失、宇宙飛行士の骨粗鬆症／骨減少症及び無重力による骨喪失、又は、ａ）骨量喪失又は骨質喪失又はその両方、及び／又は、ｂ）骨構造及び骨質異常に関連する他の疾患又は病状を含み、
好ましくは、
前記骨関連疾患とは、骨粗鬆症又は骨減少症を指し、
好ましくは、
前記骨関連疾患とは、骨形成不全を指し、
好ましくは、
前記骨関連疾患とは、多発性骨髄腫及び多発性骨髄腫関連骨疾患を指し、
好ましくは、
前記軟骨疾患は、軟骨腫症、軟骨異形成症、軟骨形成不全症、異形成症骨端異形成、軟骨異栄養性筋強直症、皮質傍軟骨腫、膝関節軟骨裂傷、骨線維異形成症、骨関節炎、骨形成不全、低リン酸血症性くる病又は骨軟骨異栄養症を含み、
好ましくは、
前記筋肉関連疾患とは、筋肉減少症及び癌関連筋肉減少症を指す、使用。

【請求項24】

有効量の請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体及び／又は請求項１８に記載の薬物組成物の、個体における骨又は関節手術後の癒合を促進する医薬品の調製における使用であって、
有効量の請求項１～１７のいずれか１項に記載の抗スクレロスチン構築体、及び／又は、請求項１８に記載の薬物組成物を個体に投与することを含む、使用。

【請求項25】

前記抗スクレロスチン構築体が、皮下注射、静脈注射、筋肉内注射、経口又は非経口投与の方式で前記個体に投与される、請求項２３又は２４に記載の使用。

【請求項26】

前記使用が、第２の薬物又は治療法を実施することをさらに含む、
好ましくは、
前記第２の薬物又は治療法は、抗ＤＫＫ１抗体を含み、
好ましくは、
前記第２の薬物又は治療法は、抗ＲＡＮＫＬ抗体を含み、
好ましくは、
前記第２の薬物又は治療法は、副甲状腺ホルモン（ＰＴＨ）、選択的エストロゲン受容体モジュレーター（ＳＥＲＭ）、ビスフォスフォネート、プロスタグランジンＥ（ＰＧＥ）受容体アゴニスト、ＶＥＧＦ、ＴＧＦβ、成長因子（ミオスタチン）及びカルシトニンから選ばれる１種である薬物を含む、請求項２３～２５のいずれか１項に記載の使用。

【請求項27】

前記個体がヒトを指す、請求項２３～２６のいずれか１項に記載の使用。

【国際調査報告】