特表 2023-544399 抗体精製方法における宿主細胞タンパク質含有量を減少させるための方法及び宿主細胞タンパク質含有量を減少させた抗体組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-10-23

(54)【発明の名称】抗体精製方法における宿主細胞タンパク質含有量を減少させるための方法及び宿主細胞タンパク質含有量を減少させた抗体組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/395 20060101AFI20231016BHJP

   C07K 16/18 20060101ALI20231016BHJP

   C07K 16/46 20060101ALI20231016BHJP

   A61K 47/42 20170101ALI20231016BHJP

   C12P 21/08 20060101ALN20231016BHJP

【ＦＩ】

A61K39/395 N

C07K16/18 ZNA

C07K16/46

A61K39/395 D

A61K47/42

C12P21/08

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023520389

(86)(22)【出願日】2021-10-04

(85)【翻訳文提出日】2023-05-09

(86)【国際出願番号】 US2021053407

(87)【国際公開番号】W WO2022072934

(87)【国際公開日】2022-04-07

(31)【優先権主張番号】63/086,915

(32)【優先日】2020-10-02

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．テフロン

(71)【出願人】

【識別番号】594197872

【氏名又は名称】イーライ リリー アンド カンパニー

(74)【代理人】

【識別番号】100145403

【弁理士】

【氏名又は名称】山尾 憲人

(74)【代理人】

【識別番号】100126778

【弁理士】

【氏名又は名称】品川 永敏

(74)【代理人】

【識別番号】100162684

【弁理士】

【氏名又は名称】呉 英燦

(72)【発明者】

【氏名】ボウズ，ブライアン デイビッド

(72)【発明者】

【氏名】ホアン，リホア

(72)【発明者】

【氏名】クレブス，ララ エレン

(72)【発明者】

【氏名】プリクタ，スティーブン エイ

(72)【発明者】

【氏名】リチャー，サラ エム

【テーマコード（参考）】

4B064

4C076

4C085

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG26

4B064AG27

4B064CA19

4B064CC24

4B064CE10

4B064CE12

4B064DA01

4C076EE41

4C085AA13

4C085AA14

4C085AA16

4C085BB11

4C085BB36

4C085DD33

4H045AA10

4H045AA11

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA75

4H045DA76

4H045FA74

4H045GA21

4H045GA26

(57)【要約】

本開示は、患者への投与を意図した抗体の製造プロセスにおいて、宿主細胞内で組換えによって産生された抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させるための方法に関する。開示された方法は、宿主細胞タンパク質を減少させた治療用抗体調製物を調製するために実施され得る。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、前記方法が、
ａ．前記タンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供するステップと、
ｂ．弱酸及び強酸を含む酸の組み合わせを用いて前記クロマトグラフィーカラムから前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出して、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液を得るステップと、
ｃ．前記溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０超に上昇させるステップと、
ｄ．前記溶出液をデプスフィルターに供して、濾過されたタンパク質調製物を得るステップとを含む、方法。

【請求項2】

前記クロマトグラフィーカラムが、プロテインＡ、プロテインＧ又はプロテインＬアフィニティークロマトグラフィーカラムを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記弱酸及び前記強酸が、約ｐＨ７．３までの一価の酸である、請求項１に記載の方法。

【請求項4】

前記弱酸が、酢酸であり、前記強酸が、リン酸又は乳酸である、請求項１に記載の方法。

【請求項5】

前記酢酸の濃度が、約２０ｍＭであり、前記強酸が、リン酸であり、前記リン酸の濃度が、約５ｍＭ～約１０ｍＭである、請求項４に記載の方法。

【請求項6】

前記酢酸の濃度が、約２０ｍＭであり、前記強酸が、乳酸であり、前記乳酸の濃度が、約５ｍＭである、請求項４に記載の方法。

【請求項7】

ウイルス不活性化を行うステップを更に含む、請求項１に記載の方法。

【請求項8】

ウイルス不活性化を行うステップであって、前記クロマトグラフィーカラムからタンパク質を溶出する前記ステップからの前記溶出液の前記ｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することを含み、前記溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、ステップを更に含む、請求項１に記載の方法。

【請求項9】

前記溶出液の前記ｐＨを調整する前記ステップが、前記溶出液の前記ｐＨを約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に調整することを含む、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

前記溶出液の前記ｐＨが、約ｐＨ３．５に調整される、請求項９に記載の方法。

【請求項11】

前記溶出液の前記ｐＨを調整することが、ＨＣｌ、リン酸、又は酢酸及びリン酸の組み合わせのうちのいずれか１つを添加することを含む、請求項８～１０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項12】

前記溶出液の前記ｐＨを上昇させる前記ステップが、前記ｐＨを約ｐＨ６．５～約ｐＨ７．５に上昇させることを含む、請求項１に記載の方法。

【請求項13】

前記溶出液の前記ｐＨが、約ｐＨ７．０に上昇される、請求項１２に記載の方法。

【請求項14】

前記溶出液の前記ｐＨを上昇させる前記ステップが、トリスを添加することを含む、請求項１２又は１３に記載の方法。

【請求項15】

前記ｐＨを約５．０超に上昇させる前記ステップにおける前記溶出液が、約１０ｍＭ～約４５ｍＭのイオン強度を有する、請求項１～１４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項16】

デプスフィルター処理された前記タンパク質調製物を、以下の精製及び／又は研磨ステップ：ウイルス不活性化、イオン交換クロマトグラフィー、ウイルス濾過、タンジェンシャルフロー濾過のうちの１つ以上に供して、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む原薬調製物を得ることを更に含む、請求項１～１５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項17】

前記デプスフィルターが、セルロース／珪藻土ベースのフィルターである、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項18】

前記デプスフィルターが、Ｂ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、又はＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（ＺＢ Ｍｅｄｉａ）フィルターである、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記デプスフィルターが、合成フィルターである、請求項１～１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項20】

前記デプスフィルターが、Ｃ０ＳＰフィルター、Ｘ０ＳＰフィルター、又はＥｍｐｈａｚｅ ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒフィルターである、請求項１９に記載の方法。

【請求項21】

前記デプスフィルターが、Ｘ０ＳＰフィルターである、請求項２０に記載の方法。

【請求項22】

前記デプスフィルターの孔径が、少なくとも約９μ～約０．１μである、請求項１７～２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項23】

前記デプスフィルターの孔径が、少なくとも約２μ～約０．１μである、請求項２２に記載の方法。

【請求項24】

前記デプスフィルターの孔径が、約０．１μである、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約５．０である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項26】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約６．０である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項27】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約７．０である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項28】

前記哺乳動物細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項１～２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項29】

前記タンパク質調製物が、採取した細胞の培養液、捕捉プール、又は回収タンパク質プールを含む、請求項１～２８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項30】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である、請求項１～２９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項31】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）である、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項33】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）である、請求項３２に記載の方法。

【請求項34】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）である、請求項３２又は３３に記載の方法。

【請求項35】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、請求項３４に記載の方法。

【請求項36】

前記濾過されたタンパク質調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項３２～３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項37】

前記濾過されたタンパク質調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項３２～３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項38】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７又は３８に記載の方法。

【請求項40】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項41】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項42】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項43】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項44】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項45】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項46】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項47】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項48】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項49】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項３７～４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項50】

前記原薬調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項３２～３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項51】

前記原薬調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項３２～３５及び５０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項52】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１に記載の方法。

【請求項53】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１又は５２に記載の方法。

【請求項54】

前記原薬調製物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項55】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項56】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項57】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項58】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項59】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項60】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～５９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項61】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～６０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項62】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項63】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項５１～６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項64】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）であり。ＬＣＤＲ３が、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）である、請求項１～３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項65】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）である、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）である、請求項６４又は６５に記載の方法。

【請求項67】

前記濾過されたタンパク質調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項６４～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項68】

前記濾過されたタンパク質調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項６４～６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項69】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８に記載の方法。

【請求項70】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８又は６９に記載の方法。

【請求項71】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項72】

前記濾過されたタンパク質が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項73】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項74】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項75】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項76】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項77】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項78】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項79】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項80】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のコーニフィンアルファ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項６８～７９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項81】

前記原薬調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項６４～６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項82】

前記原薬調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項６４～６６及び８１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項83】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２に記載の方法。

【請求項84】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２又は８３に記載の方法。

【請求項85】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項86】

前記原薬が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項87】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項88】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項89】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項90】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～８９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項91】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～９０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項92】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～９１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項93】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～９２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項94】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のコーニフィンアルファ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項８２～９３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項95】

請求項１～９４のいずれか一項に記載の方法によって産生された、組成物。

【請求項96】

哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、前記方法が、
ａ）前記タンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供するステップと、
ｂ）前記クロマトグラフィーカラムから前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出して、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液を得るステップと、
ｃ）必要に応じて、前記溶出液のｐＨをｐＨ５．０～ｐＨ７．５に調整し、前記溶出液をデプスフィルターに供し、濾過されたタンパク質調製物を得るステップであって、前記デプスフィルターが、完全合成デプスフィルターであるステップとを含む、方法。

【請求項97】

前記クロマトグラフィーカラムが、プロテインＡ、プロテインＧ又はプロテインＬアフィニティークロマトグラフィーカラムを含む、請求項９６に記載の方法。

【請求項98】

前記デプスフィルターの孔径が、少なくとも約９μ～約０．１μである、請求項９６又は９７に記載の方法。

【請求項99】

前記デプスフィルターの孔径が、少なくとも約２μ～約０．１μである、請求項９８に記載の方法。

【請求項100】

前記デプスフィルターの孔径が、約０．１μである、請求項９９に記載の方法。

【請求項101】

前記デプスフィルターが、Ｘ０ＳＰフィルターである、請求項９６～１００のいずれか一項に記載の方法。

【請求項102】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約５．０である、請求項９６～１０１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項103】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約６．０である、請求項９６～１０１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項104】

前記デプスフィルター上の前記溶出液の前記ｐＨが、約７．０である、請求項９６～１０１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項105】

前記哺乳動物細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項９６～１０４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項106】

前記タンパク質調製物が、採取した細胞の培養液、捕捉プール、又は回収タンパク質プールを含む、請求項９６～１０５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項107】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である、請求項９６～１０６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項108】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項１０７に記載の方法。

【請求項109】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）である、請求項９６～１０８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項110】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）である、請求項１０９に記載の方法。

【請求項111】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）である、請求項１０９又は１１０に記載の方法。

【請求項112】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、請求項１１１に記載の方法。

【請求項113】

前記濾過されたタンパク質調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項１０９～１１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項114】

前記濾過されたタンパク質調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１０９～１１３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項115】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４に記載の方法。

【請求項116】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４又は１１５に記載の方法。

【請求項117】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１１６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項118】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１１７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項119】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１１８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項120】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１１９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項121】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項122】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項123】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項124】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項125】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項126】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１１４～１２５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項127】

原薬調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項１０９～１１２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項128】

前記原薬調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、ペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１０９～１１２及び１２７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項129】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８に記載の方法。

【請求項130】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８又は１２９に記載の方法。

【請求項131】

前記原薬調製物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項132】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項133】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項134】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項135】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項136】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項137】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項138】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項139】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項140】

前記原薬調製物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１２８～１３９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項141】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）であり。ＬＣＤＲ３が、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）である、請求項９６～１０８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項142】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）である、請求項１４１に記載の方法。

【請求項143】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）である、請求項１４１又は１４２に記載の方法。

【請求項144】

前記濾過されたタンパク質調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項１４１～１４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項145】

前記濾過されたタンパク質調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１４１～１４４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項146】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５に記載の方法。

【請求項147】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５又は１４６に記載の方法。

【請求項148】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１４７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項149】

組成物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１４８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項150】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１４９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項151】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項152】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項153】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項154】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項155】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項156】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項157】

前記濾過されたタンパク質調製物が、約１ｐｐｍ未満のコーニフィンアルファ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１４５～１５６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項158】

前記原薬調製物中の前記宿主細胞タンパク質含有量が、１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項１４１～１４３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項159】

前記原薬調製物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１４１～１４３及び１５８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項160】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５９に記載の方法。

【請求項161】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８又は１６０に記載の方法。

【請求項162】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６１のいずれか一項に記載の方法。

【請求項163】

前記原薬が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６２のいずれか一項に記載の方法。

【請求項164】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６３のいずれか一項に記載の方法。

【請求項165】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６４のいずれか一項に記載の方法。

【請求項166】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６５のいずれか一項に記載の方法。

【請求項167】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６６のいずれか一項に記載の方法。

【請求項168】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６７のいずれか一項に記載の方法。

【請求項169】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６８のいずれか一項に記載の方法。

【請求項170】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１６９のいずれか一項に記載の方法。

【請求項171】

前記原薬調製物が、約１ｐｐｍ未満のコーニフィンアルファ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１５８～１７０のいずれか一項に記載の方法。

【請求項172】

請求項９６～１７１のいずれか一項に記載の方法によって産生された、組成物。

【請求項173】

ヒトＮ３ｐＧｌｕ Ａβに結合する抗体（抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体）を含む医薬組成物であって、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、哺乳動物宿主細胞から前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ抗体を精製することを含むプロセスによって調製され、前記組成物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の総含有量が、約１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、医薬組成物。

【請求項174】

前記哺乳動物細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項１７３に記載の医薬組成物。

【請求項175】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である、請求項１７３又は１７４に記載の医薬組成物。

【請求項176】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項１７５に記載の医薬組成物。

【請求項177】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）である、請求項１７３～１７６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項178】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）である、請求項１７７に記載の医薬組成物。

【請求項179】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）である、請求項１７７又は１７８に記載の医薬組成物。

【請求項180】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、請求項１７９に記載の医薬組成物。

【請求項181】

前記組成物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１７３～１８０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項182】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１に記載の医薬組成物。

【請求項183】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１又は１８２に記載の医薬組成物。

【請求項184】

前記組成物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項185】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項186】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８５のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項187】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項188】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８７のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項189】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項190】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１８９のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項191】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１９０のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項192】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１９１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項193】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１８１～１９２のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項194】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）であり。ＬＣＤＲ３が、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）である、請求項１７３～１７６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項195】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）である、請求項１９４に記載の医薬組成物。

【請求項196】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＬＣが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体の前記ＨＣが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）である、請求項１９４又は１９５に記載の医薬組成物。

【請求項197】

前記組成物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の前記総含有量が、約１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）である、請求項１９４～１９６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項198】

前記組成物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項１９７に記載の医薬組成物。

【請求項199】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８に記載の医薬組成物。

【請求項200】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８又は１９９に記載の医薬組成物。

【請求項201】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２００のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項202】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０１のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項203】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０２のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項204】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０３のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項205】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０４のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項206】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０５のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項207】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０６のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項208】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０７のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【請求項209】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１９８～２０８のいずれか一項に記載の医薬組成物。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は、組換えタンパク質製造の分野に関する。より具体的には、本発明は、治療用若しくは診断用抗体、又はその抗原結合断片などの、患者への投与を意図したタンパク質の製造方法において、宿主細胞内で組換えによって産生されたタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させるための方法を提供する。開示された方法は、宿主細胞タンパク質含有量を減少させた抗体組成物を産生するために実施され得る。

【背景技術】

【0002】

宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）は、細胞の維持及び増殖、並びにタンパク質の合成及びプロセシングに関与する宿主細胞のタンパク質である。しかしながら、治療用又は診断用タンパク質の領域では、ＨＣＰの存在は、凝集、触媒活性による生成物の断片化、及び／又は免疫原性などの問題を引き起こし、製品の品質及び患者の安全を脅かす。したがって、ＨＣＰは、タンパク質製剤の重要品質特性（ＣＱＡ）として特定されている。望ましくない凝集体の形成及び生成物の断片化は、ＨＣＰを減少させる／除去するための追加の精製ステップを必要とし、これらの追加の精製ステップは、多くの場合、所望のタンパク質の収量を減少させ、全体的な製造コストを増加させる。

【0003】

製造方法からＨＣＰを排除するという課題、及びＨＣＰを減少させる方法を改善する試みが、例えば、Ｇｉｌｇｕｎｎ ｅｔ ａｌ；Ｇｏｅｙ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ａｄｖａｎｃｅｓ ３６（２０１８）１２２３－１２３７、及びＣｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ２０１８，２２：９８－１０６に開示されている。しかしながら、ＨＣＰを除去するためのこれらの方法には限界がある。例えば、場合によっては、これらの開示は、ＨＣＰの不完全な除去、凝集につながるＨＣＰの除去における方法の不一致、所望のタンパク質及びＨＣＰの同時精製、製品機能の低下、患者における免疫原性の懸念、及び／又は半減期などの薬物動態特性の低下のうちの１つ以上を示している。更に、ＨＣＰを除去するために開発された方法は、多くの場合、例えば、作業量が多く、追加の精製ステップを必要とし、製造コストが増加し、収率が低下することが多い。場合によっては、この方法の適用可能性は、特定の分子及び／又は形態に限定される。そのため、治療用又は診断用タンパク質の精製方法においてＨＣＰを減少させる代替方法が必要とされている。このような代替方法は、好ましくは、最終的に製品の品質を維持するために、製品の安定性、収率、又はコストに影響を与えることなくＨＣＰを減少させ、大規模な製造に適しており、患者の安全を保障する。

【発明の概要】

【0004】

したがって、本発明は、治療用若しくは診断用タンパク質、又はその抗原結合断片の調製においてＨＣＰを減少させる代替方法を提供することによって、上記の問題のうちの１つ以上に対応する。本発明の方法は、ＨＣＰの除去に非常に効果的である一方で、抗体の安定性を維持し、凝集を低減し、生成物の収率を維持し、免疫原性のリスクを低下させる可能性を有する、再現可能な方法を提供する。そのような方法は、抗体調製量を増加する必要なく、ＨＣＰを効果的に除去することができる。驚くべきことに、本発明の方法は、＜１００ｐｐｍの業界許容基準を十分に下回るＨＣＰ数を達成した。驚くべきことに、本発明の他の実施形態は、タンパク質の安定性を維持し、凝集を低減し、生成物の収率を維持しながら、＜５０ｐｐｍのＨＣＰ数を達成した。更に驚くべきことに、本発明の他の実施形態は、タンパク質の安定性を維持し、凝集を低減し、生成物の収率を維持しながら、＜２０ｐｐｍ、＜１０ｐｐｍ、＜５ｐｐｍ、＜１ｐｐｍ、又は約０ｐｐｍのＨＣＰ数を達成した。更に、本発明の実施形態は、広範囲の分子に適用可能なＨＣＰ除去の方法を提供する。本発明の他の実施形態は、追加の精製ステップの排除を可能にし、バッチ処理時間の短縮、及び製造コストの削減をもたらす。開示された方法は、宿主細胞含有量を減少させた抗体組成物を産生するために実施することができ、抗体組成物の宿主細胞含有量は、＜１００ｐｐｍ、＜５０ｐｐｍ、＜１０ｐｐｍ、＜５ｐｐｍ、＜１ｐｐｍ、又は約０ｐｐｍである。

【発明を実施するための形態】

【0005】

したがって、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体（「抗Ｎ３ｐＧ抗体」）調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法が提供される。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、チャイニーズハムスター卵巣細胞宿主細胞などの哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生される。

【0006】

したがって、特定の実施形態では、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生されたタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約５０ｐｐｍ未満、約２０ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0007】

したがって、特定の実施形態では、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生されたタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することと、ウイルス不活性化を行うことと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、タンパク質を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むを含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約５０ｐｐｍ未満、約２０ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0008】

したがって、特定の実施形態では、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法が提供される。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約５０ｐｐｍ未満、約２０ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0009】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸であり、酢酸の濃度が、約２０ｍＭであり、リン酸の濃度が、約５ｍＭ～約１０ｍＭである、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約５０ｐｐｍ未満、約２０ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0010】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、乳酸であり、酢酸の濃度が、約２０ｍＭであり、乳酸の濃度が、約５ｍＭである、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約５０ｐｐｍ未満、約２０ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0011】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、溶出液のｐＨを調整する当該ステップが、約２０ｍＭのＨＣｌを溶出液に添加することを含み、溶出液のｐＨが、約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に調整され、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0012】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、溶出液のｐＨを調整する当該ステップが、約２０ｍＭのＨＣｌを溶出液に添加することを含み、溶出液のｐＨが、約ｐＨ３．５に調整され、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ３．５に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０以上に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0013】

いくつかの特定の実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇させることであって、約２５０ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む、上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０超～約ｐＨ７．５に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0014】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ７．０に上昇させることであって、約２５０ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む、上昇させることと、抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、濾過された抗体調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ６．５～約ｐＨ７．５（例えば、約ｐＨ７．０）に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ６．５～約ｐＨ７．５（例えば、約ｐＨ７．０）に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0015】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることであって、デプスフィルターに供される溶出液が、約１０ｍＭ～約４５ｍＭのイオン強度を有する、得ることと、を含む、方法を提供する。好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0016】

特定の実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸、又は乳酸である、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整することであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持され、ウイルス不活性化が達成される、調整することと、を含む、方法を提供する。

【0017】

本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供することと、弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出することであって、弱酸が、約２０ｍＭの濃度で酢酸を含み、強酸が、リン酸、ギ酸、又は乳酸のうちのいずれか１つを含み、強酸の濃度が、約５ｍＭ～約１０ｍＭである、溶出することと、クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、溶出液のｐＨを調整する当該ステップが、ＨＣｌ、リン酸、クエン酸、酢酸、又はそれらの組み合わせ（例えば、酢酸とリン酸の組み合わせ、又は酢酸及びクエン酸の組み合わせ）のうちのいずれか１つを溶出液に添加することを含み、ｐＨが、約ｐＨ４．０未満に調整され、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、調整することと、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、ｐＨを約ｐＨ５．０～約７．５に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。

【0018】

好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0019】

更なる実施形態では、溶出ステップは、酢酸及びリン酸、酢酸及び乳酸、又は酢酸及びギ酸のうちのいずれか１つの組み合わせを含む溶出緩衝液を含み、ｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整するステップは、ＨＣｌ、リン酸、クエン酸、酢酸、又はそれらの組み合わせ（例えば、酢酸とリン酸の組み合わせ、又は酢酸及びクエン酸の組み合わせ）のうちのいずれか１つを添加することを含む。更なる実施形態では、溶出ステップは、約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのギ酸のうちのいずれか１つの組み合わせを含む溶出緩衝液を含み、ｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整するステップは、約２０ｍＭのＨＣｌ、約１５ｍＭ～約２００ｍＭのリン酸、約１０００ｍＭのクエン酸、又は約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸の組み合わせのうちのいずれか１つを添加するステップを含む。そのような実施形態では、ｐＨを約６．０超のｐＨに上昇させるステップからの溶出液のイオン強度は、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである。

【0020】

本発明の一態様では、本発明は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、
哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供するステップと、
弱酸及び強酸の組み合わせを含む緩衝液を用いてクロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出するステップであって、弱酸が、酢酸であり、強酸が、リン酸又は乳酸である、ステップと、
クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出する当該ステップからの抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液のｐＨを約ｐＨ４．０未満に調整するステップであって、溶出液が、約０分～約１８０分間約ｐＨ４．０未満に維持される、ステップと、
溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０以上（例えば、約ｐＨ６．０以上、又は約ｐＨ７．０以上）に上昇させるステップと、
抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供するステップと、
抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得るステップと、を含む、方法を提供する。

【0021】

好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は減少する。より好ましくは、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満、約１０ｐｐｍ未満、約５ｐｐｍ未満、又は約１ｐｐｍ未満まで減少する。

【0022】

本発明の更なる実施形態では、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、方法が、
ａ）タンパク質調製物をアフィニティークロマトグラフィーカラムに供するステップと、
ｂ）クロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を溶出して、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む溶出液を得るステップと、
ｃ）必要に応じて、溶出液のｐＨをｐＨ５．０～ｐＨ７．５に調整し、溶出液をデプスフィルターに供し、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含む濾過されたタンパク質調製物を得るステップであって、デプスフィルターが、完全合成デプスフィルターである、ステップと、を含む、方法が提供される。

【0023】

好ましくは、クロマトグラフィーカラムは、プロテインＡ、プロテインＧ又はプロテインＬアフィニティークロマトグラフィーカラムを含む。更に好ましくは、デプスフィルターの孔径は、少なくとも約９μ（ミクロン）～約０．１μである。なお更に好ましくは、デプスフィルターの孔径は、少なくとも約２μ～約０．１μである。なお更に好ましくは、デプスフィルターの孔径は、約０．１μである。なお更に好ましくは、デプスフィルターは、Ｘ０ＳＰフィルターである。本発明の代替の実施形態では、デプスフィルター上の溶出液のｐＨは、約５．０である。本発明の更に代替の実施形態では、デプスフィルター上の溶出液のｐＨは、約６．０である。本発明の更に代替の実施形態では、デプスフィルター上の溶出液のｐＨは、約７．０である。

【0024】

この特定の実施形態は、酢酸、クエン酸、リン酸、塩酸、ギ酸、及び乳酸を含むが、これらに限定されない、任意の一般的に使用される弱酸又は強酸を用いて、アフィニティークロマトグラフィーカラムから抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出する方法を包含する。

【0025】

フィルター上の溶液のｐＨが、５．０～７．０での完全合成フィルターの使用は、多くの従来のセルロース／珪藻土ベースのフィルターと比較して、ＨＣＰの減少及び／又は除去に非常に効果的であることが見出された。

【0026】

開示された方法は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体又はその抗原結合断片を含む調製物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）を減少させて、ＨＣＰ含有量を減少させた抗体組成物を得るために実施され得る。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、ＩｇＧ１抗体であるか、又はＩｇＧ１抗体のＦｃ部分を含有する。本明細書に開示されるのは、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体である。

【0027】

開示された方法及び開示された方法によって産生された組成物のいくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ドナネマブである。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）のアミノ酸配列中に存在するＬＨ相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＬＨ）を含み、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、アミノ酸配列ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）中に存在するＶＨ相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。

【0028】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）のＬＣＤＲ１、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）のＬＣＤＲ２、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）のＬＣＤＲ３、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）のＨＣＤＲ１、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）のＨＣＤＲ２、及びＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）のＨＣＤＲ３を含む。

【0029】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＬＣ）、及びＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＨＣ）を含む。

【0030】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）、及びＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）を含む。

【0031】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ｇａｔａｔｔｇｔｇａｔｇａｃｔｃａｇａｃｔｃｃａｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｃｇｔｃａｃｃｃｃｔｇｇａｃａｇｃｃｇｇｃｃｔｃｃａｔｃｔｃｃｔｇｃａａｇｔｃａａｇｔｃａｇａｇｃｃｔｃｔｔａｔａｔａｇｔｃｇｃｇｇａａａａａｃｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｃｔｃｃｔｇｃａｇａａｇｃｃａｇｇｃｃａａｔｃｔｃｃａｃａｇｃｔｃｃｔａａｔｔｔａｔｇｃｇｇｔｇｔｃｔａａａｃｔｇｇａｃｔｃｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｇａｃａｇａｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃａｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃａｃｔｇａａａａｔｃａｇｃａｇｇｇｔｇｇａｇｇｃｃｇａａｇａｔｇｔｔｇｇｇｇｔｔｔａｔｔａｃｔｇｃｇｔｇｃａａｇｇｔａｃａｃａｔｔａｃｃｃａｔｔｃａｃｇｔｔｔｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｃｔｇｇａｇａｔｃａａａｃｇａａｃｔｇｔｇｇｃｔｇｃａｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｔｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｃ（配列番号３３）のＤＮＡ配列によってコードされたアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）、及びｃａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｃａｇｔｃｔｇｇｇｇｃｔｇａｇｇｔｇａａｇａａｇｃｃｔｇｇｇｔｃｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｔｔｔｃｃｔｇｃａａｇｇｃａｔｃｔｇｇｔｔａｃｇａｃｔｔｃａｃｔａｇａｔａｃｔａｔａｔａａａｃｔｇｇｇｔｇｃｇａｃａｇｇｃｃｃｃｔｇｇａｃａａｇｇｇｃｔｔｇａｇｔｇｇａｔｇｇｇａｔｇｇａｔｔａａｔｃｃｔｇｇａａｇｃｇｇｔａａｔａｃｔａａｇｔａｃａａｔｇａｇａａａｔｔｃａａｇｇｇｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｃｇｃｇｇａｃｇａａｔｃｃａｃｇａｇｃａｃａｇｃｃｔａｃａｔｇｇａｇｃｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇａｇａｔｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｇａａｇｇｃａｔｃａｃｇｇｔｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｃｃｔｃｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｇｇｔｃｔｔｃｃｃｇｃｔａｇｃａｃｃｃｔｃｃｔｃｃａａｇａｇｃａｃｃｔｃｔｇｇｇｇｇｃａｃａｇｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｃｃａｇａｃｃｔａｃａｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇａａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａａａｇｔｔｇａｇｃｃｃａａａｔｃｔｔｇｔｇａｃａａａａｃｔｃａｃａｃａｔｇｃｃｃａｃｃｇｔｇｃｃｃａｇｃａｃｃｔｇａａｃｔｃｃｔｇｇｇｇｇｇａｃｃｇｔｃａｇｔｃｔｔｃｃｔｃｔｔｃｃｃｃｃｃａａａａｃｃｃａａｇｇａｃａｃｃｃｔｃａｔｇａｔｃｔｃｃｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａｃａｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｃｇｔｇａｇｃｃａｃｇａａｇａｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａａｇｔｔｃａａｃｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｃｇｇｃｇｔｇｇａｇｇｔｇｃａｔａａｔｇｃｃａａｇａｃａａａｇｃｃｇｃｇｇｇａｇｇａｇｃａｇｔａｃａａｃａｇｃａｃｇｔａｃｃｇｔｇｔｇｇｔｃａｇｃｇｔｃｃｔｃａｃｃｇｔｃｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｃｔｇｇｃｔｇａａｔｇｇｃａａｇｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｃｔｃｃａａｃａａａｇｃｃｃｔｃｃｃａｇｃｃｃｃｃａｔｃｇａｇａａａａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇｃｃａａａｇｇｇｃａｇｃｃｃｃｇａｇａａｃｃａｃａｇｇｔｇｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃａｔｃｃｃｇｇｇａｃｇａｇｃｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｃａｇｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａａｇｇｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇｃｇａｃａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａｇｔｇｇｇａｇａｇｃａａｔｇｇｇｃａｇｃｃｇｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃｃａｃｇｃｃｃｃｃｃｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｃｔｔｃｔｔｃｃｔｃｔａｔａｇｃａａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇａｇｃａｇｇｔｇｇｃａｇｃａｇｇｇｇａａｃｇｔｃｔｔｃｔｃａｔｇｃｔｃｃｇｔｇａｔｇｃａｔｇａｇｇｃｔｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃｇｃａｇａａｇａｇｃｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｃｇｇｇｔ（配列番号３４）のＤＮＡ配列によってコードされたアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）を含む。

【0032】

開示された方法及び開示された方法によって産生された組成物のいくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、米国特許第１０，６４７，７５９号において「抗体２０１ｃ」と称される抗体であり、その内容は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）のアミノ酸配列中に存在するＬＨ相補性決定領域１（ＬＣＤＲ１）、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域（ＬＨ）を含み、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）のアミノ酸配列中に存在するＶＨ相補性決定領域１（ＨＣＤＲ１）、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む。

【0033】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）のＬＣＤＲ１、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）のＬＣＤＲ２、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）のＬＣＤＲ３、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）のＨＣＤＲ１、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）のＨＣＤＲ２、及びＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）のＨＣＤＲ３を含む。

【0034】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）、及びＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）を含む。

【0035】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）、及びＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）を含む。

【0036】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体は、ｇａｃａｔｃｃａｇａｔｇａｃｃｃａｇｔｃｔｃｃｔｔｃｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｃｔｔｇｇｔａａｃｔｇｇｔｔｇｇｃｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｃａｇｇｃｇｔｃｔａｃｔｔｔａｇａａｔｃｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃａａｇａｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｇｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａｔｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｃｃａａｃａｔｔａｔａａａｇｇｔｔｃｔｔｔｔｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａｃｇｇａｃｃｇｔｇｇｃｔｇｃａｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｔｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｃ（配列番号３５）のＤＮＡ配列によってコードされたアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）、及びｇａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｔｔｇｇｔａｃａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｔａｇｃａｇｃｔａｔｃｃｔａｔｇａｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｇｃｔａｔｔａｇｔｇｇｔａｇｔｇｇｔｇｇｔａｇｃａｃａｔａｃｔａｃｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇｇｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａｇａｇａｃａａｔｔｃｃａａｇａａｃａｃｇｃｔｇｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｇａｇｇｇｇｇｇｃｔｃａｇｇｇａｇｔｔａｔｔａｔａａｃｇｇｃｔｔｔｇａｔｔａｔｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｃｃｔｃｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｇｇｔｃｔｔｃｃｃｇｃｔａｇｃａｃｃｃｔｃｃｔｃｃａａｇａｇｃａｃｃｔｃｔｇｇｇｇｇｃａｃａｇｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｃｃａｇａｃｃｔａｃａｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇａａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａａａｇｔｔｇａｇｃｃｃａａａｔｃｔｔｇｔｇａｃａａａａｃｔｃａｃａｃａｔｇｃｃｃａｃｃｇｔｇｃｃｃａｇｃａｃｃｔｇａａｃｔｃｃｔｇｇｇｇｇｇａｃｃｇｔｃａｇｔｃｔｔｃｃｔｃｔｔｃｃｃｃｃｃａａａａｃｃｃａａｇｇａｃａｃｃｃｔｃａｔｇａｔｃｔｃｃｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａｃａｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｃｇｔｇａｇｃｃａｃｇａａｇａｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａａｇｔｔｃａａｃｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｃｇｇｃｇｔｇｇａｇｇｔｇｃａｔａａｔｇｃｃａａｇａｃａａａｇｃｃｇｃｇｇｇａｇｇａｇｃａｇｔａｃａａｃａｇｃａｃｇｔａｃｃｇｔｇｔｇｇｔｃａｇｃｇｔｃｃｔｃａｃｃｇｔｃｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｃｔｇｇｃｔｇａａｔｇｇｃａａｇｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｃｔｃｃａａｃａａａｇｃｃｃｔｃｃｃａｇｃｃｃｃｃａｔｃｇａｇａａａａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇｃｃａａａｇｇｇｃａｇｃｃｃｃｇａｇａａｃｃａｃａｇｇｔｇｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃａｔｃｃｃｇｇｇａｃｇａｇｃｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｃａｇｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａａｇｇｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇｃｇａｃａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａｇｔｇｇｇａｇａｇｃａａｔｇｇｇｃａｇｃｃｇｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃｃａｃｇｃｃｃｃｃｃｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｃｔｔｃｔｔｃｃｔｃｔａｔａｇｃａａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇａｇｃａｇｇｔｇｇｃａｇｃａｇｇｇｇａａｃｇｔｃｔｔｃｔｃａｔｇｃｔｃｃｇｔｇａｔｇｃａｔｇａｇｇｃｔｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃｇｃａｇａａｇａｇｃｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｃｇｇｇｔ（配列番号３６）のＤＮＡ配列によってコードされたアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）を含む。

【0037】

本発明の別の態様において、本発明は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、
宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、アフィニティークロマトグラフィーカラム、例えば、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィーカラムに供するステップと、
抗Ｎ３ｐＧ抗体を、酢酸及びリン酸の組み合わせ、又は酢酸及び乳酸の組み合わせを含む緩衝液で溶出するステップと、
約２０ｍＭ ＨＣｌの添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整するステップであって、ｐＨが約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に調整され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に維持される、ステップと、
約２５０ｍＭのトリス緩衝液の添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを上昇させるステップであって、ｐＨが約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇される、ステップと、
抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供し、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を得るステップと、を含み、
深層濾過後の抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍまで減少し、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、方法を提供する。

【0038】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、プロテインＡクロマトグラフィーカラムに供することと、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭの乳酸の組み合わせを含む緩衝液を用いて、クロマトグラフィーカラムからの抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出することと、約２０ｍＭ ＨＣｌの添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、ｐＨが約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に低下され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に維持される、調整することと、約２５０ｍＭのトリス緩衝液の添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを上昇させることであって、ｐＨが約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇される、上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を得ることであって、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍであり、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。

【0039】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、プロテインＡクロマトグラフィーカラムに供することと、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭの乳酸の組み合わせを含む緩衝液を用いて、クロマトグラフィーカラムからの抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出することと、約２０ｍＭ ＨＣｌを用いて抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、ｐＨが約ｐＨ３．５に調整され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．５に維持される、調整することと、約２５０ｍＭのトリス緩衝液を用いて抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを上昇させることであって、ｐＨが約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇される、上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を得ることとであって、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍであり、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ５．０～約ｐＨ７．５に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。

【0040】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、プロテインＡクロマトグラフィーカラムに供することと、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭの乳酸の組み合わせを含む緩衝液を用いて、クロマトグラフィーカラムからの抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出することと、約２０ｍＭ ＨＣｌの添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、ｐＨが約ｐＨ３．５に低下され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．５に維持され、ウイルス不活性化が達成される、調整することと、を含む、方法を提供する。

【0041】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、プロテインＡクロマトグラフィーカラムに供することと、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約１０ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭの乳酸の組み合わせを含む緩衝液を用いて、クロマトグラフィーカラムからの抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出することと、約２０ｍＭ ＨＣｌの添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、ｐＨが約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に低下され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．３～約ｐＨ３．７に維持される、調整することと、約２５０ｍＭのトリス緩衝液により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを上昇させることであって、ｐＨが約ｐＨ７．２５に上昇される、上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を得ることであって、抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍであり、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ７．２５に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。

【0042】

本発明のいくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を、プロテインＡクロマトグラフィーカラムに供することと、約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭのリン酸の組み合わせを含む緩衝液、又は約２０ｍＭの酢酸及び約５ｍＭの乳酸の組み合わせを含む緩衝液を用いて、クロマトグラフィーカラムからの抗Ｎ３ｐＧ抗体を溶出することと、約２０ｍＭ ＨＣｌの添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを調整することであって、ｐＨが約ｐＨ３．５に低下され、溶出液が約０分～約１８０分間約ｐＨ３．５に維持される、調整することと、約２５０ｍＭのトリス緩衝液の添加により抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨを上昇させることであって、ｐＨが約ｐＨ７．２５に上昇される、上昇させることと、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液をデプスフィルターに供することと、濾過された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物を得ることであって、抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍであり、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、得ることと、を含む、方法を提供する。いくつかの実施形態では、溶出液のｐＨを約ｐＨ７．２５に上昇させることは、約１００ｍＭ～約１０００ｍＭのトリス緩衝液を溶出液に添加することを含む。

【0043】

いくつかの実施形態では、本発明は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供する、

【0044】

開示された方法及び開示された方法によって産生された抗体組成物のいくつかの実施形態では、抗体は、突然急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のスパイクタンパク質に対する抗体である。いくつかの実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、チャイニーズハムスター卵巣細胞などの哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生される。好適な抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体には、バムラニビマブ、エテセビマブ、及びベブテロビマブが含まれ得るが、これらに限定されない。いくつかの実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗体は、バムラニビマブである。いくつかの実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号１のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）と、配列番号２のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）と、を含む。いくつかの実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号３のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号４のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む。他の実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、エテセビマブである。更に他の実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）と、配列番号６のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）と、を含む。なおも更なる実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号７のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号８のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む。いくつかの実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、ベブテロビマブである。更に他の実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を含む可変重鎖（ＶＨ）と、配列番号１０のアミノ酸配列を含む可変軽鎖（ＶＬ）と、を含む。なおも更なる実施形態では、抗ＳＡＲＳ－ＣＯＶ－２抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含む重鎖（ＨＣ）と、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖（ＬＣ）と、を含む。

【0045】

いくつかの実施形態では、治療用又は診断用抗体は、哺乳動物細胞において産生される。いくつかの実施形態では、哺乳動物細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、又はベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、マウスハイブリドーマ細胞、又はマウス骨髄腫細胞である。

【0046】

いくつかの実施形態では、本発明は、デプスフィルターに供した後に宿主細胞内で組換えによって産生された抗体調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法が、更なる精製及び／又は研磨ステップに更に供されて、原薬調製物を得る、方法を提供する。原薬は、疾患の診断、治癒、緩和、治療、若しくは予防において薬理活性若しくはその他の直接的な効果をもたらすこと、又は人体の構造若しくはいずれかの機能に影響を与えることを目的とした有効成分としてＦＤＡによって定義されているが、このような成分の合成に使用される中間体を含まない。製剤は、一般に、しかし必ずしもそうではないが、１つ以上の他の成分と関連して、原薬を含有する、ヒト患者への投与に好適な完成した剤形、例えば、錠剤、カプセル、又は溶液である。いくつかの実施形態では、更なる精製及び／又は研磨ステップは、以下：ウイルス不活性化の実施、イオン交換クロマトグラフィーの実施、ウイルス濾過の実施、及び／又はタンジェンシャルフロー濾過の実施のうちの１つ以上を含む。

【0047】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0048】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、ＰＬＢＬ２を含み、ＰＬＢＬ２含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ＰＬＢＬ２含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ＰＬＢＬ２含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ＰＬＢＬ２含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、ＰＬＢＬ２含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0049】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、リソソーム保護タンパク質を含み、リソソーム保護タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、リソソーム保護タンパク質含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、リソソーム保護タンパク質含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、リソソーム保護タンパク質含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、リソソーム保護タンパク質含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0050】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、タンパク質Ｓ１００－Ａ６を含み、タンパク質Ｓ１００－Ａ６含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ６含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ６含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ６含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ６含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0051】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１を含み、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１のタンパク質含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0052】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａを含み、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0053】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、カリクレイン－１１を含み、カリクレイン－１１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、カリクレイン－１１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、カリクレイン－１１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、カリクレイン－１１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、カリクレイン－１１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0054】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１を含み、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0055】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、補体Ｃ１ｒ小成分を含み、補体Ｃ１ｒ小成分含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、補体Ｃ１ｒ小成分含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、補体Ｃ１ｒ小成分含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、補体Ｃ１ｒ小成分含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、補体Ｃ１ｒ小成分含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0056】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１を含み、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0057】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質を含み、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0058】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、ポリユビキチンを含み、ポリユビキチン含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ポリユビキチン含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ポリユビキチン含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ポリユビキチン含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、ポリユビキチン含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0059】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、ペルオキシレドキシン－１を含み、ペルオキシレドキシン－１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ペルオキシレドキシン－１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ペルオキシレドキシン－１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ペルオキシレドキシン－１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、ペルオキシレドキシン－１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0060】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１を含み、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0061】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８を含み、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0062】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、チオレドキシンアイソフォームＸ１を含み、チオレドキシンアイソフォームＸ１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、チオレドキシンアイソフォームＸ１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、チオレドキシンアイソフォームＸ１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、チオレドキシンアイソフォームＸ１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、チオレドキシンアイソフォームＸ１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0063】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１を含み、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0064】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質を含み、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0065】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、ガレクチン－１を含み、ガレクチン－１含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ガレクチン－１含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ガレクチン－１含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、ガレクチン－１含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、ガレクチン－１含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0066】

いくつかの実施形態では、本開示は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量は、コーニフィンアルファを含み、コーニフィンアルファ含有量は、約１００ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、コーニフィンアルファ含有量は、約５０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、コーニフィンアルファ含有量は、約２０ｐｐｍ未満に減少する。他の実施形態では、コーニフィンアルファ含有量は、約１０ｐｐｍ未満、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍに減少する。他の実施形態では、コーニフィンアルファ含有量は、約０ｐｐｍに減少する。

【0067】

いくつかの実施形態では、本発明は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む宿主細胞タンパク質含有量のタンパク質調製物を減少させる方法を提供し、タンパク質調製物は、深層濾過に供される。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物は、デプスフィルターに供され、デプスフィルターは、Ｂ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＳＰフィルター、Ｃ０ＳＰフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、Ｅｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒフィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（ＺＢ Ｍｅｄｉａ）フィルター（Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（６０ＺＢ０５Ａ）フィルター、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０５Ａ）フィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０８Ａ）フィルターなど）、又はＢ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＳＰフィルター、Ｃ０ＳＰフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、Ｅｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒフィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（ＺＢ Ｍｅｄｉａ）フィルター（Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（６０ＺＢ０５Ａ）フィルター、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０５Ａ）フィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０８Ａ）フィルターなど）のうちのいずれかと同じ性能特性を有するデプスフィルターのうちの１つ以上である。

【0068】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物は、デプスフィルターに供され、デプスフィルターは、Ｂ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（ＺＢ Ｍｅｄｉａ）フィルター（Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（６０ＺＢ０５Ａ）フィルター、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０５Ａ）フィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０８Ａ）フィルターなど）、又はＢ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（ＺＢ Ｍｅｄｉａ）フィルター（Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（６０ＺＢ０５Ａ）フィルター、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０５Ａ）フィルター、若しくはＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０８Ａ）フィルターなど）のうちのいずれかと同じ性能特性を有するデプスフィルターのうちの１つ以上である。

【0069】

いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物は、デプスフィルターに供され、デプスフィルターは、Ｘ０ＳＰフィルター、Ｃ０ＳＰフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、若しくはＥｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒフィルター、又はＸ０ＳＰフィルター、Ｃ０ＳＰフィルター、若しくはＥｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒフィルターのうちのいずれかと同じ性能特性を有するデプスフィルターのうちの１つ以上である。

【0070】

開示された方法のいくつかの実施形態では、方法で利用されるデプスフィルターは、完全合成フィルター媒体を含む完全合成デプスフィルターである。いくつかの実施形態では、デプスフィルターの孔径は、約９ミクロン～約０．１ミクロンである。いくつかの実施形態では、デプスフィルターの孔径は、約２ミクロン～約０．１ミクロンである。いくつかの実施形態では、デプスフィルターの孔径は、約０．１ミクロンである。

【0071】

開示された方法のいくつかの実施形態では、深層濾過に供される抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物のｐＨは約５．０であり、かつ／又は深層濾過後の抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨは約５．０である。他の実施形態では、深層濾過に供される抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物のｐＨは約６．０であり、かつ／又は深層濾過後の抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨは約６．０である。他の実施形態では、深層濾過に供される抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物のｐＨは約７．０であり、かつ／又は深層濾過後の抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む溶出液のｐＨは約７．０である。

【0072】

いくつかの実施形態では、本開示は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、ｐＨを約５．０以上（例えば、約６．０又は約７．０）に上昇させるステップからの溶出液のイオン強度が、約１０ｍＭ～約４５ｍＭである、方法を提供する。いくつかの実施形態では、イオン強度は、約３０ｍＭ未満である。いくつかの実施形態では、イオン強度は、約２０ｍＭ未満である。他の実施形態では、イオン強度は、約１５ｍＭ未満である。

【0073】

いくつかの実施形態では、本発明は、哺乳動物宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物が、クロマトグラフィーカラムに供される方法を提供する。いくつかの実施形態では、クロマトグラフィーカラムは、アフィニティーカラム、イオン交換カラム、疎水性相互作用カラム、ヒドロキシアパタイトカラム、又は混合モードカラムのうちの１つ以上である。いくつかの実施形態では、アフィニティークロマトグラフィーカラムは、プロテインＡカラム、プロテインＧカラム、又はプロテインＬカラムである。他の実施形態では、イオン交換クロマトグラフィーカラムは、陰イオン交換カラム又は陽イオン交換カラムである。いくつかの実施形態では、本発明は、ＨＣＰが最終生成物から十分に除去される方法を提供する。

【0074】

いくつかの実施形態では、本発明は、宿主細胞内で組換えによって産生された抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物中の宿主細胞タンパク質含有量を減少させる方法であって、抗Ｎ３ｐＧ抗体が、治療用又は診断用抗体である、方法を提供する。更なる実施形態では、治療用又は診断用抗Ｎ３ｐＧ抗体は、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である。

【0075】

別の態様では、抗Ｎ３ｐＧ抗体を含むタンパク質調製物を含む医薬組成物が本明細書に提供される。更なる態様では、本開示は、本明細書に記載の方法によって生成される組成物を提供する。更に他の実施形態では、本開示は、本明細書に記載の方法によって産生された組成物であって、組成物中の宿主細胞タンパク質含有量が、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍである、組成物を提供する。

【0076】

「宿主細胞タンパク質」（ＨＣＰ）という用語は、細胞の維持及び増殖、並びにタンパク質の合成及びプロセシングに関与する宿主細胞のタンパク質である。特定のＨＣＰは患者の免疫原性の懸念に関連しており、規制当局は免疫原性の懸念を最小限に抑えるためにＨＣＰを減少させることを望んでいる。免疫原性分析の強力な手法の１つは、免疫情報学ツールに依存しており、バイオ医薬品及びワクチンの両方の設計において有用で、検証された信頼性の高い予測を行うことが示されている。ＨＣＰにより駆動される免疫原性に特に関連するのは、抗原提示細胞が、外来タンパク質を構成ペプチドにプロセシングするＴ細胞経路であり、その一部（「エピトープ」）は主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）クラスＩＩタンパク質によって認識され、Ｔ細胞による検査のために細胞表面にもたらされる。３成分のＭＨＣ：エピトープ：Ｔ細胞受容体複合体の形成は、初期のナイーブ応答を駆動し、その後のＢ細胞の活性化及び成熟を刺激することができる。したがって、多くの免疫情報学研究は、推定Ｔ細胞エピトープの信頼性の高い予測に向けられており（Ｄｅ Ｇｒｏｏｔ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００９ Ｍａｙ；１３１（２）：１８９－２０１、これはその全体が参照により本明細書に組み込まれる）、ＥｐｉＭａｔｒｉｘシステムは、ペプチド：ＭＨＣ結合プロファイルに基づく１つの高度に検証された方法である。ＥｐｉＭａｔｒｉｘは、タンパク質内の個々のエピトープを特定するだけでなく、次いで、ベンチマークタンパク質と比較したエピトープ密度に従って、タンパク質の全体的な免疫原性リスクを評価することもできる（Ｄｅ Ｇｒｏｏｔ ａｎｄ Ｍａｒｔｉｎ，２００９）。ＥｐｉＭａｔｒｉｘツールを使用して免疫原性を予測する際の一般的な経験則は、スコアが＋２０以上のものは免疫原性のリスクが高いため、最終調製物からそのようなＨＣＰを減少させるか、又は排除することが望ましいことである。

【0077】

そのようなＨＣＰには、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞由来のもの、例えば、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＰＬＢＬ２）（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９７５０５）、Ｓ１００－Ａ６（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４７８９７８）、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９００１６）、リソソーム保護タンパク質（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４７６７３８）、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４８３６８６）、カリクレイン－１１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２１７４５５）、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２２２２１９）、補体Ｃ１ｒ小成分（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５１８３０２５）、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２０６８６０）、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５０５３９８２３）、ペルオキシレドキシン－１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５０５３７９４５）、ポリユビキチン（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３４６９８６３０９）、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４５０５８６８）、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２１８２２４）、チオレドキシンアイソフォームＸ１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２０９４３１）、基底膜特異的ヘパリン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５２０１３５２）、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号６２５１８８４７２）、アクチン、部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９７２８２）、ガレクチン－１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９６４０８）、コーニフィンアルファ（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４５０４８８７）が含まれる。開示された方法のいくつかの実施形態では、抗体調製物中で減少しているＨＣＰの含有量は、Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１、並びにそれらの組み合わせから選択されるＨＣＰの含有量である。開示された方法を利用して、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、２ｐｐｍ、及び１ｐｐｍである含有量の、Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ以上を有する抗体組成物を調製することができる。

【0078】

免疫原性のリスクが高いために、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＰＬＢＬ２）（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９７５０５）、Ｓ１００－Ａ６（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４７８９７８）、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４９００１６）、リソソーム保護タンパク質（ＧｅｎＢａｎｋ登録番号３５４４７６７３８）などの、＋２０のＥｐｉＭａｔｒｉｘスコアを有するこれらのＨＣＰを除去することが特に望ましい。ペリレドキシン－１などの他のＨＣＰは、目的のタンパク質又は抗体と共溶出する傾向があるため、非常に残留性が高く、除去が困難である。

【0079】

「弱酸」という用語は、約４より大きい最低ｐＫａを有する酸を指す。弱酸の例としては、酢酸、コハク酸、及び２－（Ｎ－モルホリノ）エタンスルホン酸が挙げられるが、これらに限定されない。

【0080】

「強酸」という用語は、約４未満の最低ｐＫａを有する酸を指す。強酸の例としては、リン酸、乳酸、ギ酸、リンゴ酸、マロン酸、グリコール酸、クエン酸、酒石酸、及び塩酸が挙げられるが、これらに限定されない。

【0081】

「原子価」という用語は、原子の結合能力を指す。原子が化合物の一部として形成できる結合の数は、元素の原子価で表される。「一価」という用語は、原子、イオン、又は化学基を指し、原子価が１であるため、１つの共有結合を形成できる。

【0082】

「デプスフィルター」という用語は、媒体の表面だけでなく、媒体全体（媒体内及び媒体上）に粒子を保持する多孔性濾過媒体を使用するフィルター要素を指す。デプスフィルターは、それらが構成される材料の化学的特性に起因する吸着能力を更に有し得る。市販のデプスフィルターの例としては、Ｂ１ＨＣフィルター、Ｘ０ＳＰフィルター、Ｃ０ＳＰフィルター、Ｘ０ＨＣフィルター、Ｅｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒ、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（６０ＺＢ０５Ａ）フィルター、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０５Ａ）フィルター、及びＺｅｔａ Ｐｌｕｓ（９０ＺＢ０８Ａ）フィルターが挙げられるが、これらに限定されない。デプスフィルターは、完全合成フィルター媒体を含む完全合成デプスフィルターであってもよい。デプスフィルターは、約９ミクロン～約０．１ミクロン、約２ミクロン～約０．１ミクロン、又は約０．１ミクロンの孔径を有し得る。「深層濾過」という用語は、不均一又は均一であり得る液体材料をデプスフィルターに通過させる行為を指す。

【0083】

溶液に言及する場合の「イオン強度」という用語は、その溶液中のイオン濃度の尺度である。イオン強度（Ｉ）は、全ての種について、種濃度ｃ_ｉ及び正味電荷ｚ_ｉの関数である。イオン強度を決定するために、式Ｉが使用される。

【数1】

【0084】

「抗体調製物」は、目的の治療用又は診断用抗体又はその抗原結合断片を含有し、また様々な不純物を含有し得る、精製プロセス又は方法のために提供される材料又は溶液である。非限定的な例としては、例えば、採取細胞培養液（ＨＣＣＦ）、採取細胞培養材料、浄化細胞培養液、浄化細胞培養材料、１つ以上の遠心分離ステップ、及び／又は濾過ステップ後に目的の治療用若しくは診断用抗体を含有する捕捉プール、回収プール、及び／又は収集プールを挙げることができ、この捕捉プール、回収プール及び／又は収集プールは、１つ以上の精製ステップ後に目的の治療用若しくは診断用抗体を含有する。

【0085】

「不純物」という用語は、所望の抗Ｎ３ｐＧ抗体製品とは異なる材料を指す。不純物としては、宿主細胞タンパク質、ＣＨＯＰなどの宿主細胞材料；浸出したプロテインＡ；核酸；所望の抗体の変異体、サイズ変異体、断片、凝集体又は誘導体；エンドトキシン；ウイルス汚染物質；細胞培養培地成分などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0086】

「タンパク質」及び「ポリペプチド」という用語は、本明細書では、任意の長さのアミノ酸のポリマーを指すために交換可能に使用される。ポリマーは線状又は分枝状であってもよく、それは修飾されたアミノ酸を含んでもよく、それは非アミノ酸によって中断されてもよい。この用語はまた、自然に、又は介入、例えば、ジスルフィド結合形成、グリコシル化、脂質化、アセチル化、リン酸化、若しくは任意の他の操作若しくは修飾、例えば、標識成分とのコンジュゲーションによって修飾されているアミノ酸ポリマーも包含する。また、定義には、例えば、アミノ酸の１つ以上の類似体（例えば、非天然アミノ酸などを含む）、及び当該技術分野で既知の他の修飾を含有するタンパク質も含まれる。タンパク質の例としては、抗体、ペプチド、酵素、受容体、ホルモン、調節因子、抗原、結合剤、サイトカイン、Ｆｃ融合タンパク質イムノアドヘシン分子などが挙げられるが、これらに限定されない。

【0087】

本明細書で使用される場合、「抗体」という用語は、抗原に結合する免疫グロブリン分子を指す。抗体の実施形態には、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、二重特異性若しくは多重特異性抗体、又はコンジュゲート抗体が含まれる。抗体は、任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ）、及び任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）であってもよい。

【0088】

本開示の例示的な抗体は、４つのポリペプチド鎖：鎖間ジスルフィド結合を介して架橋される２つの重鎖（ＨＣ）及び２つの軽鎖（ＬＣ）から構成された、免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ）型抗体である。４つのポリペプチド鎖の各々のアミノ末端部分は、抗原認識に主に関与する約１００～１２５個以上のアミノ酸の可変領域を含む。４つのポリペプチド鎖の各々のカルボキシ末端部分は、エフェクター機能に主に関与する定常領域を含有する。各重鎖は、重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域から構成される。各軽鎖は、軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域から構成される。ＩｇＧアイソタイプは、サブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４）に更に分割され得る。

【0089】

ＶＨ及びＶＬ領域は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる、より保存されている領域が散在する、相補性決定領域（ＣＤＲ）と呼ばれる、超可変領域に更に細分され得る。ＣＤＲはタンパク質の表面上に露出しており、抗原結合特異性のための抗体の重要な領域である。各ＶＨ及びＶＬは、３つのＣＤＲ及び４つのＦＲから構成されており、ＦＲ１、ＣＤＲ１、ＦＲ２、ＣＤＲ２、ＦＲ３、ＣＤＲ３、ＦＲ４の順序でアミノ末端からカルボキシ末端へと配置される。本明細書では、重鎖の３つのＣＤＲを「ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３」と称し、軽鎖の３つのＣＤＲを「ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３」と称する。ＣＤＲは、抗原との特異的相互作用を形成する残基の大部分を含有する。アミノ酸残基のＣＤＲへの割り当ては、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ”，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，“Ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｈｙｐｅｒｖａｒｉａｂｌｅ ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，１９６，９０１－９１７（１９８７）、Ａｌ－Ｌａｚｉｋａｎｉ ｅｔ ａｌ．，“Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｃａｎｏｎｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｇｌｏｂｕｌｉｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，２７３，９２７－９４８（１９９７））、Ｎｏｒｔｈ（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ”，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６，２２８－２５６（２０１１））、又はＩＭＧＴ（ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇで利用可能な国際的なＩｍＭｕｎｏＧｅｎｅＴｉｃｓデータベース；Ｌｅｆｒａｎｃ ｅｔ ａｌ．，Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９９９；２７：２０９－２１２を参照のこと）に記載されているものを含む、周知のスキームに従って行われ得る。

【0090】

本開示の実施形態はまた、本明細書で使用される場合、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ断片、ｓｃＦｖ抗体断片、ｓｃＦａｂ、ジスルフィド結合Ｆｖ（ｓｄＦｖ）、Ｆｄ断片などの、抗原又は抗原のエピトープと特異的に相互作用する能力を保持する抗体の少なくとも一部を含む、抗体断片又は抗原結合断片を含む。

【0091】

開示された方法は、原薬調製物を調製するために実施され得る。

【0092】

開示された方法及び組成物は、Ｎｐ３Ｇｌｕアミロイドベータペプチドに対する抗体（「抗Ｎｐ３Ｇ抗体」）を利用し得るか、又はそれを含み得る。抗Ｎｐ３Ｇ抗体は、アミロイドベータ（Ａβ）ペプチド凝集に関連する疾患の治療に使用することができる。アミロイド前駆体タンパク質（ＡＰＰ）の切断により、サイズが３８～４３アミノ酸の範囲のＡβペプチドが得られる。可溶性形態から高βシート含有量を有する不溶性形態へのＡβの変換、及び脳内の神経突起及び脳血管プラークとしてのこれらの不溶性形態の沈着は、アルツハイマー病（ＡＤ）、ダウン症候群、及び脳アミロイド血管障害（ＣＡＡ）を含む、多くの病気に関連している。プラークに見られる沈着物は、Ａβペプチドの不均一な混合物で構成されている。Ｎ３ｐＥ、ｐＥ３－Ｘ、又はＡβ_ｐ３－Ｘとも称されるＮ３ｐＧｌｕ Ａβは、ＡβペプチドのＮ末端切断型であり、主にプラークに見出される。Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβは、ヒトＡβのＮ末端に最初の２つのアミノ酸残基がなく、３番目のアミノ酸位置にグルタミン酸に由来するピログルタメートを持っている。Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβペプチドは脳に沈着したＡβの微量成分であるが、研究により、Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβペプチドは強い凝集特性を持ち、沈着カスケードの初期に蓄積することが示されている。Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβに対する抗体は、当該技術分野において既知である。例えば、米国特許第８，６７９，４９８号は、ヒトＮ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体（例えば、Ｂ１２Ｌ、ＬＹ３００２８１３としても既知である）及びアルツハイマー病などの疾患を当該抗体で治療する方法を開示している。米国特許第１０，６４７，７５９号は、「抗体２０１ｃ」を含むＮ３ｐＧ Ａｂ抗体、及び当該抗体を用いてアルツハイマー病などの疾患を治療する方法を開示している。開示された方法及び組成物の抗Ｎｐ３Ｇｌｕ抗体は、Ｐｙｒ－ＥＦＲＨＤＳＧＹＥＶＨＨＱＫ（すなわち、ｐＥ３－１６）であるＡｂ内に存在するエピトープに特異的に結合し得る。

【0093】

開示された方法及び組成物は、突発性急性呼吸器症候群コロナウイルス２（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）のスパイクタンパク質に対する抗体を利用又は含むことができる。本明細書で使用される「抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗体」という用語は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のスパイク（Ｓ）タンパク質に結合する抗体を指す。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２スパイク（Ｓ）タンパク質のアミノ酸配列は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ登録番号：ＹＰ＿００９７２４３９０．１に記載されている。

【0094】

「限外濾過」又は「濾過」という用語は、静水圧が液体を半透膜に押し付ける膜濾過の一形態である。水及び低分子量の溶質が膜を通過する間、高分子量の浮遊物質及び溶質は保持される。いくつかの例では、限外濾過膜は、１μｍ～１００μｍの範囲の孔径を有する。「限外濾過膜」、「限外濾過フィルター」、「濾過膜」及び「濾過フィルター」という用語は、交換可能に使用され得る。濾過膜の例としては、ポリフッ化ビニリデン（ＰＶＤＦ）膜、酢酸セルロース、硝酸セルロース、ポリテトラフルオロエチレン（ＰＴＦＥ、テフロン）、塩化ポリビニル、ポリエーテルスルホン、ガラス繊維、又はｃＧＭＰ製造環境での使用に好適な他の濾過材料が挙げられるが、これらに限定されない。

【0095】

本明細書で使用される場合、数値範囲には、範囲を定義する数値が含まれる。

【0096】

当該技術分野で認識されている「ＥＵ番号付け」という用語は、免疫グロブリン分子のアミノ酸残基の番号付けシステムを指す。ＥＵ番号付けは、例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ．（１９９１）、Ｅｄｅｌｍａｎ，Ｇ．Ｍ，ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．ＵＳＡ，６３，７８－８５（１９６９）、及びｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｉｍｇｔ．ｏｒｇ／ＩＭＧＴＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃＣｈａｒｔ／Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇ／Ｈｕ＿ＩＧＨＧｎｂｅｒ．ｈｔｍｌ＃ｒｅｆｓに記載されている。「Ｋａｂａｔ番号付け」という用語は、重鎖及び軽鎖可変領域内の他のアミノ酸残基よりも可変的である（すなわち、超可変的）アミノ酸残基を番号付けするシステムを指すものとして当該技術分野で認識されている（例えば、Ｋａｂａｔ，ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ．ＮＹ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．１９０：３８２－９３（１９７１）、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，ＮＩＨ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ Ｎｏ．９１－３２４２（１９９１）を参照のこと）。「Ｎｏｒｔｈ番号付け」という用語は、重鎖及び軽鎖可変領域内の他のアミノ酸残基よりも可変的である（すなわち、超可変的）アミノ酸残基を番号付けするシステムを指し、少なくとも部分的に、（Ｎｏｒｔｈ ｅｔ ａｌ．，Ａ Ｎｅｗ Ｃｌｕｓｔｅｒｉｎｇ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｙ ＣＤＲ Ｌｏｏｐ Ｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｓ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，４０６：２２８－２５６（２０１１）に記載される多数の結晶構造との親和性伝播クラスター化に基づく。

【0097】

本明細書で使用される場合、「アフィニティークロマトグラフィー」という用語は、生体分子間の特異的な可逆的相互作用に基づいて生化学的混合物（例えば、タンパク質と望ましくない生体分子種）を分離するためのクロマトグラフィー法を指す。アフィニティークロマトグラフィーの例示的な実施形態には、プロテインＡアフィニティー、プロテインＧアフィニティー、プロテインＬアフィニティー、カッパアフィニティーリガンドクロマトグラフィー（ＣａｐｔｕｒｅＳｅｌｅｃｔ（商標）、ＫａｐｐａＸＬ（商標）、ＫａｐｐａＳｅｌｅｃｔ（商標）、ＫａｐｐａＸＰ（商標）など）又はラムダアフィニティーリガンドクロマトグラフィーが含まれる。

【0098】

本開示のタンパク質は、当該技術分野で周知の方法によって調製することができ、かつ、本開示のタンパク質と、１つ以上の薬学的に許容される担体及び／又は希釈剤とを含む医薬組成物に組み込むことができる（例えば、一般に開業医に既知である製剤化技術の概要を提供する、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，２２^ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｌｏｙｄ Ｖ．，Ｅｄ．，Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ，２０１２）。医薬組成物に好適な担体には、タンパク質と組み合わせたときに、分子の活性を保持し、かつ患者の免疫系とは非反応性である、任意の材料が含まれる。

【0099】

操作可能に連結されている遺伝子の発現を導くことができる発現ベクターは、当該技術分野において周知である。発現ベクターは、宿主細胞からのポリペプチドの分泌を促進するシグナルペプチドをコードすることができる。シグナルペプチドは、免疫グロブリンシグナルペプチド又は異種性シグナルペプチドであり得る。発現されたポリペプチドの各々は、１つのベクター内でそれらが操作可能に連結している異なるプロモーターから独立して発現され得るか、又は代替的に複数のベクター内でそれらが操作可能に連結している異なるプロモーターから独立して発現され得る。発現ベクターは、典型的には、エピソーム、又は宿主染色体ＤＮＡの一体化した部分のいずれかとして、宿主生物中で複製可能である。一般に、発現ベクターは、所望のＤＮＡ配列で形質転換されたそれらの細胞の検出を可能にするために、選択マーカー、例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、及びジヒドロ葉酸レダクターゼを含む。

【0100】

宿主細胞は、本開示の１つ以上のタンパク質を発現する１つ以上の発現ベクターで安定に又は一過性にトランスフェクト、形質転換、形質導入又は感染された細胞を指す。本開示のタンパク質を産生する宿主細胞株の作製及び単離は、当該技術分野で既知の標準的な技術を用いて達成され得る。哺乳動物細胞は、本開示のタンパク質の発現に好ましい宿主細胞である。具体的な哺乳動物細胞は、ＨＥＫ２９３、ＮＳ０、ＤＧ－４４、及びＣＨＯを含む。好ましくは、タンパク質は、宿主細胞が培養される培地中に分泌され、そこからタンパク質が、例えば従来の技術を用いて回収又は精製され得る。例えば、培地は、プロテインＡアフィニティークロマトグラフィーカラム及び／又はカッパアフィニティーリガンド若しくはラムダアフィニティーリガンドクロマトグラフィーカラムに適用され、そこから溶出され得る。可溶性凝集体及び多量体を含む望ましくない生体分子種は、サイズ排除、疎水性相互作用、イオン交換、又はヒドロキシアパタイトクロマトグラフィーを含む、一般的な技術によって効率的に除去することができる。生成物を、例えば、－７０℃で直ちに凍結してもよく、冷蔵してもよく、又は凍結乾燥してもよい。タンパク質精製の様々な方法が採用され得、そのような方法は、当該技術分野において既知であり、例えば、Ｄｅｕｔｓｃｈｅｒ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ １８２：８３－８９（１９９０）、及びＳｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，３ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ，ＮＹ（１９９４）に記載される。

【0101】

抗体又はその抗原結合断片が、哺乳動物宿主細胞から抗体を精製することを含む方法によって調製された、抗体又はその抗原結合断片を含む医薬組成物も本明細書に開示される。抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の総含有量は、典型的には、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍ（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）である。開示された医薬組成物のいくつかの実施形態では、開示された医薬組成物の抗体は、ヒトＮ３ｐＧｌｕ Ａβ（抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体）に結合する。いくつかの実施形態では、哺乳動物細胞は、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞である。

【0102】

開示された医薬組成物は、典型的には、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体であり得る、抗体又はその抗原結合断片を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＩｇＧ１抗体である。

【0103】

開示された医薬組成物は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み得る。いくつかの実施形態では、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体は、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）である。

【0104】

開示された医薬組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み、抗体が、ＬＣＶＲ及びＨＣＶＲを含み、ＬＣＶＲが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）であり、ＨＣＶＲが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）である。

【0105】

開示された医薬組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）であり、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）である。

【0106】

開示された組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、ドナネマブを含む。

【0107】

いくつかの実施形態では、開示される組成物は、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含む抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み、軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）である。ＬＣＤＲ３が、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）である。

【0108】

開示された医薬組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み、抗体が、ＬＣＶＲ及びＨＣＶＲを含み、ＬＣＶＲが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）であり、ＨＣＶＲが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）である。

【0109】

開示された医薬組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体を含み、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）であり、抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）である。

【0110】

開示された組成物のいくつかの実施形態では、組成物は、米国特許第１０，６４７，７５９号で参照される抗体２０１ｃを含む。

【0111】

ドナネマブなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ抗体を含み得る抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、医薬組成物は、減少した総含有量の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）を有し得る。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのＨＣＰ（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、以下のＨＣＰ及びそれらの組み合わせから選択される約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのＨＣＰを含む：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、ペルオキシレドキシン－１。

【0112】

抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのタンパク質Ｓ１００－Ａ６（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのホスホリパーゼＢ様２タンパク質（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのリソソーム保護タンパク質（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのカリクレイン－１１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍの補体Ｃ１ｒ小成分（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのアクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍの熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのペルオキシレドキシン－１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。

【0113】

抗体２０１ｃなどの抗Ｎ３ｐＧｌｕ抗体を含み得る、抗体を含む開示された医薬組成物において、医薬組成物は、減少した総含有量の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）を有し得る。いくつかの実施形態では、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのＨＣＰ（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、以下のＨＣＰ及びそれらの組み合わせから選択される約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのＨＣＰを含む：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファ。

【0114】

抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのポリユビキチン（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのリソソーム保護タンパク質（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍの４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのチオレドキシンアイソフォームＸ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍの基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍの尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのガレクチン－１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのペルオキシレドキシン－１（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。抗Ｎ３ｐＧ抗体を含む開示された医薬組成物において、組成物は、約１００ｐｐｍ未満、５０ｐｐｍ、２０ｐｐｍ、１０ｐｐｍ、５ｐｐｍ、又は１ｐｐｍのコーニフィンアルファ（例えば、ＬＣＭＳにより測定した場合）を含み得る。

【実施例】

【0115】

ＬＣＭＳによる宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の測定：以下の実施例において宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）レベルに対する精製の影響を評価するために、例えば、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ質量分析計に連結された超高速液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ）によるペプチドマッピング／ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ ＨＣＰプロファイリングによって試料を分析する。ＨＣＰを検出するための方法は、当該技術分野で開示されている。（例えば、Ｈｕａｎｇ ｅｔ ａｌ．，“Ａ Ｎｏｖｅｌ Ｓａｍｐｌｅ Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｆｏｒ Ｓｈｏｔｇｕｎ Ｐｒｏｔｅｏｍｉｃｓ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ＨＣＰｓ ｉｎ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，”Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．２０１７，８９，５４３６－５４４４を参照されたい。）この分析では、試料をトリプシンによる消化に供し、ジチオスレイトール（ＤＴＴ）で還元／沈殿させた後、ＬＣ－ＭＳ／ＭＳ分析用のＨＰＬＣバイアルに上清を移して酸性化する。ＬＣ－ＭＳ／ＭＳデータは、Ｐｒｏｔｅｏｍｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｒによって、抗体、スパイク、及び対照タンパク質配列を追加したＣＨＯ－Ｋ１タンパク質データベースに対して分析される。ＨＣＰ濃度は、総ＨＣＰ含有量（例えば、製品１ｍｇ当たりのＨＣＰのｎｇ）に対する試料当たりのＨＣＰの百万分率（ｐｐｍ）の合計として報告される。更に、特定のＨＣＰ（例えば、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＰＬＢＬ２）及びリソソーム保護タンパク質）の濃度も提供される。

【0116】

ＥＬＩＳＡによるＨＣＰ測定：試料中のＨＣＰレベル濃度は、以下の実施例において、Ｇｙｒｏｌａｂ（登録商標）ＣＨＯ－ＨＣＰキット１（Ｃｙｇｎｕｓ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、製造者の指示に従って実施）を使用するＥＬＩＳＡアッセイによっても評価される。ＨＣＰの結果の濃度は、総ＨＣＰ含有量に対する試料当たりのＨＣＰの百万分率（ｐｐｍ）の合計として報告される。

【0117】

実施例１－ｍＡｂ１（エテセビマブ）精製プロセスにおけるＨＣＰの減少
タンパク質捕捉ステップ：殺菌したプロテインＡカラム（ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅプロテインＡ媒体）を平衡化し、ｍＡｂ１（エテセビマブ）無細胞バイオリアクターの回収物をプロテインＡカラムに負荷し、最終洗浄として２０ｍＭトリス（ｐＨ７．０）を使用してプロテインＡカラムの洗浄を３回行う。５カラム体積（ＣＶ）の２０ｍＭ酢酸＋５ｍＭリン酸を使用して、ｍＡｂ１をカラムから溶出する。前面及び背面での吸光度に基づくピークカットを用いて、主要な生成物画分を単一のバルク画分に回収する。

【0118】

低ｐＨウイルス不活性化ステップ及び中和ステップ：ｍＡｂ１を含有する主要な生成物画分（タンパク質捕捉溶出液バルク画分）のｐＨを、低ｐＨウイルス不活性化のために２０ｍＭのＨＣｌを添加することによって３．３０～３．６０のｐＨに調整する。混合物を１８℃～２５℃で約１８０分間インキュベートする。次いで、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用して、混合物をｐＨ７．０に中和する。

【0119】

深層濾過ステップ：デプスフィルター（Ｘ０ＳＰ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を注射用水（ＷＦＩ）で洗い流す。低ｐＨウイルス不活性化ステップ及び中和ステップから得られたｍＡｂ１混合物を、１２００ｇ／ｍ^２（デプスフィルター膜面積１ｍ^２当たりのｍＡｂのグラム数）の負荷量でデプスフィルターに適用する。負荷されたデプスフィルターをＷＦＩで洗い流す。デプスフィルターからの濾液は、任意選択的に負荷後のＷＦＩ洗浄液を含んでおり、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用してｐＨ８．０に中和される。

【0120】

陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィーステップ：殺菌したカラム（Ｑ Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ陰イオン交換クロマトグラフィー媒体、又はＱＦＦ）を２ＣＶの２０ｍＭトリス（ｐＨ８．０）で平衡化する。深層濾過ステップから得られたｍＡｂ１溶液を、樹脂１リットル当たり２５～１００ｇの負荷量でカラムに負荷し、平衡緩衝液で追加の洗浄を行う。ｍＡｂ１は、非結合画分と追加の洗浄によって形成されたピーク領域の前面及び背面での吸光度に基づくピークカットによって回収される。

【0121】

結果：記載した精製プロセスを用いて、ＬＣ－ＭＳで測定された総ＨＣＰレベルは以下のとおりである：
●プロテインＡ溶出後 ２３２９９ｐｐｍ、
●Ｘ０ＳＰ深層濾過後 １３ｐｐｍ、
●ＡＥＸクロマトグラフィー後 ２ｐｐｍ。

【0122】

ｍＡｂ１のためのデプスフィルターセット１の評価：ｍＡｂ１を、本質的に上記のようなプロテインＡ、低ｐＨウイルス不活性化、中和、及び深層濾過ステップによって処理する。４つの異なるデプスフィルター：Ｅｍｐｈａｚｅ（商標）ＡＥＸ Ｈｙｂｒｉｄ Ｐｕｒｉｆｉｅｒ、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ ＢＣ２５－６０ＺＢ０５Ａ、Ｚｅｔａ Ｐｌｕｓ ＢＣ２５－９０ＺＢ０５Ａ、及びＺｅｔａ Ｐｌｕｓ ＢＣ２５－９０ＺＢ０８Ａ（３Ｍ）を、表１に示すように２０００ｇ／ｍ^２の負荷量で試験する。表１の結果は、プロテインＡの溶出後に観察された総ＨＣＰ含有量と比較した場合、試験した４つのデプスフィルターで、ＬＣＭＳ及び／又はＥＬＩＳＡによる深層濾過後に総ＨＣＰ含有量が有意に減少したことを示している。

【表1】

【0123】

実施例２－ｍＡｂ２（バムラニビマブ）精製プロセスにおけるＨＣＰの減少
プロテインＡ溶出緩衝液の比較：ｍＡｂ２は、以下の例外を除き、本質的に実施例１のｍＡｂ１について記載したように調製される：１）低ｐＨウイルス不活性化の後、かつ深層濾過の前に、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用して、溶液を７．０の代わりに７．２５のｐＨに中和する、２）ｍＡｂ２は、表２に列挙した緩衝液の組み合わせを使用してプロテインＡ捕捉カラムから溶出される、かつ３）ＡＥＸクロマトグラフィーは、Ｐｏｒｏｓ ＸＱ樹脂を使用して行う。ＨＣＰ含有量（総ＨＣＰレベルとＰＬＢＬ２レベルの両方）は、表２及び表３に列挙される精製単位操作の後に、ＬＣＭＳによって評価される。表２及び３の結果は、深層濾過ステップの後、試験した３つの緩衝液の組み合わせ全てで、ＨＣＰ及びＰＬＢＬ２の総含有量が減少することを示す。具体的には、２０ｍＭ酢酸＋５ｍＭリン酸及び２０ｍＭ酢酸＋５ｍＭ Ｌ－乳酸が、２０ｍＭ酢酸＋５ｍＭクエン酸の組み合わせと比較して、深層濾過後に総ＨＣＰ及びＰＬＢＬ２を２０ｐｐｍ未満まで大幅に減少させたことを示した。

【表2】

【表3】

【0124】

デプスフィルターセット２の評価：ｍＡｂ２は、以下の例外を除いて、本質的にｍＡｂ１について記載したように調製される：１）低ｐＨウイルス不活性化の後、かつ深層濾過の前に、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用して、溶液のｐＨを７．０ではなく７．２５のｐＨに中和する、かつ２）深層濾過は、表４に示すデプスフィルターを用いて行う。表４は、１５００ｇ／ｍ^２の負荷量で様々なデプスフィルターを使用した深層濾過後のＨＣＰ及びＰＬＢＬ２の総含有量を示す。試験した３つのセットの２デプスフィルターの全て（Ｘ０ＳＰ、Ｃ０ＳＰ、Ｘ０ＨＣ、（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ））は、深層濾過後、２０ｐｐｍ未満の総ＨＣＰ及びＰＬＢＬ２含有量の大幅な減少を示す。

【表4】

【0125】

実施例３．ｍＡｂ３（ベブテロビマブ）精製プロセスにおけるＨＣＰの減少
ｍＡｂ３は、９００ｇ／ｍ^２の負荷量でＸ０ＳＰデプスフィルターを使用することを除いて、本質的に実施例１でｍＡｂ１について記載したように、タンパク質捕捉、低ｐＨウイルス不活性化、中和、及び深層濾過ステップを用いて調製される。記載した精製プロセスを用いて、ＬＣＭＳで測定された総ＨＣＰレベルは以下のとおりである：
●プロテインＡ溶出後 １７９９６４ｐｐｍ、
●Ｘ０ＳＰ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）深層濾過後 ７７ｐｐｍ。

【0126】

実施例４．二重特異性抗体（ｍＡｂ４）精製プロセスにおけるＨＣＰの減少
二重特異性抗体ｍＡｂ４は、プロテインＬアフィニティー捕捉カラム（Ｃｙｔｉｖａ）を使用し、表５に示される緩衝系で溶出することを除いて、本質的に実施例１でｍＡｂ１について記載したように、タンパク質捕捉ステップを用いて調製される。総ＨＣＰ含有量は、約１３００～約２５００ｐｐｍの範囲が得られるＥＬＩＳＡによって測定される。タンパク質の捕捉に続いて、表５に列挙される滴定剤を使用することを除いて、本質的に実施例１でｍＡｂ１について記載したように低ｐＨウイルス不活性化を行い、続いて、５００ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用してｐＨ７．０まで中和する。次に、Ｘ０ＳＰデプスフィルターを１２００ｇ／ｍ^２の負荷量で使用して、実施例１のｍＡｂ１について記載したように深層濾過ステップを行う_。ＨＣＰ含有量は、ＥＬＩＳＡによる深層濾過後に測定される。

【0127】

表５の結果は、深層濾過後に、エントリー１～７の総ＨＣＰ含有量が、５０ｐｐｍ未満まで有意に減少し、デプスフィルターに適用された混合物のイオン強度が４５ｍＭ未満であったことを示している。加えて、デプスフィルターに適用された混合物のイオン強度と、深層濾過後の総ＨＣＰ含有量との間の相関関係。更に、エントリー２は、緩衝液を希釈することによりイオン強度を低下させることができ、深層濾過後に低ＨＣＰ含有量をもたらすことができるが、希釈による体積の増加は製造プロセスに不利になる可能性があることを示している。

【表5】

【0128】

実施例５．ｍＡｂ５（ドナネマブ）精製プロセスにおけるＨＣＰの減少
ｍＡｂ５調製物は、本質的に以下に記載したステップを使用して調製される：タンパク質の捕捉、低ｐＨウイルス不活性化及び中和、深層濾過、陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィー、陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィー、ウイルス濾過、並びにタンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）。

【0129】

タンパク質捕捉ステップ：
残留ＨＣＰ及び残留ＤＮＡなどのプロセス関連の不純物を減少させることにより、抗体を捕捉及び精製する。殺菌したプロテインＡカラム（ＭａｂＳｅｌｅｃｔプロテインＡ媒体）を平衡化し、モノクローナル抗体（ＣＨＯ細胞から発現したｍＡｂ５（ドナネマブ））の無細胞バイオリアクターの採取物を、プロテインＡカラムに負荷し、プロテインＡカラムの３回の洗浄を、最後の洗浄として２０ｍＭトリス（ｐＨ７．０）を使用して行う。抗体は、５カラム体積（ＣＶ）の２０ｍＭ酢酸＋５ｍＭクエン酸を使用してカラムから溶出される。前面及び背面での吸光度に基づくピークカットを用いて、主要な生成物画分を単一のバルク画分に回収する。

【0130】

低ｐＨウイルス不活性化ステップ及び中和ステップ：
低ｐＨ感受性ウイルスを不活性化し、残留ＨＣＰ、残留プロテインＡ、残留ＤＮＡ、及び総凝集体を減少させる。ウイルスの不活性化は、２０ｍＭ酢酸、５ｍＭクエン酸の添加により、ｍＡｂを含有する収集された主要な生成物画分（タンパク質捕捉溶出液バルク画分）のｐＨを３．３０～３．６０のｐＨに調整することによって行われる。混合物を１８℃～２５℃で約１８０分間インキュベートする。次いで、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用して、混合物を５～７．０のｐＨ、好ましくはｐＨ５．０に中和する。

【0131】

深層濾過ステップ：
各試験条件（Ｂ１ＨＣでｐＨ ５）について、別個のデプスフィルター（Ｂ１ＨＣ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）を、注射用水（ＷＦＩ）で洗い流す。低ｐＨウイルス不活性化ステップ及び中和ステップから得られたｍＡｂ混合物を、約５００～１５００ｇ／ｍ^２（デプスフィルター膜面積１ｍ^２当たりのｍＡｂのグラム数）の目標負荷量でデプスフィルターに適用する。負荷されたデプスフィルターをＷＦＩで洗い流す。デプスフィルターからの濾液は、任意選択的に負荷後のＷＦＩ洗浄液を含んでおり、２５０ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用してｐＨ７．２５に中和される。計算した体積の２０ｍＭトリス、１Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ７．０の緩衝液を添加して、５０ｍＭの最終ＮａＣｌ濃度にする。

【0132】

陰イオン交換（ＡＥＸ）クロマトグラフィーステップ：
潜在的なウイルス汚染物質を減少させる。殺菌したＰｏｒｏｓ ＸＱ（又はＳａｒｔｏｂｉｎｄ Ｑ若しくはＰｏｒｏｓ ＨＱ）陰イオン交換（ＡＥＸ）カラム（は、２ＣＶの２０ｍＭトリス、１Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ７．０の緩衝液、続いて３ＣＶの平衡緩衝液の２０ｍＭトリス ５０ｍＭ ＮａＣｌ、（ｐＨ７．２５）で事前に平衡化されている。デプスフィルター条件のその各々からのｍＡｂ溶液を、デプスフィルター条件に基づいて個別の実行でＡＥＸカラムを通して流し、深層濾過ステップから得、樹脂１リットル当たり約１００ｇ～２００ｇ（例えば、樹脂１リットル当たり約１５０ｇ）の負荷量でカラムに負荷し、平衡化緩衝液で追加の洗浄を行う。ｍＡｂは、負荷の開始から洗浄の終了まで収集される。

【0133】

陽イオン交換（ＣＥＸ）クロマトグラフィーステップ：
総凝集体を減少させ、残留ＨＣＰを減少させ、残留プロテインＡを減少させる。異なるＡＥＸ中間体のｐＨを、０．１Ｎ酢酸を加えて約７．２５～５．０に調整した後、平衡化した（２０％移動相Ｂ又は２０ｍＭ酢酸ナトリウム、２００ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ５．０に相当）ＣＥＸクロマトグラフィー樹脂（ＰＯＲＯＳ（商標）ＨＳ又はＵＮＯｓｐｈｅｒｅ Ｓ）上に負荷した。ｐＨ５．０のＡＥＸプロセス中間体は、ＣＥＸカラム上に負荷する時点で１５％移動相Ｂ（１９３ｍＭ塩化ナトリウムに相当）と混合する。カラム負荷は、樹脂１リットル当たり約２５グラムのｍＡｂであった。負荷後、カラムを２０％移動相Ｂ（２０ｍＭ酢酸ナトリウム、２００ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ５．０に相当）で洗浄して、結合していない不純物の除去を促進する。次いで、ｍＡｂは、２０％～５５％の移動相Ｂの直線勾配を１０カラム体積にわたって用いてカラムから溶出される（２０ｍＭ酢酸ナトリウム、ｐＨ５．０緩衝液中の２００～５５０ｍＭ塩化ナトリウム勾配）。生成物の完全な溶出を確実にするために、直線勾配の後に５５％移動相Ｂ（２０ｍＭ酢酸ナトリウム、５５０ｍＭ塩化ナトリウム、ｐＨ５．０に相当）でアイソクラチックを保持することができる。溶出中、ＮＬＴ ４．８ ＡＵ／ｃｍでの正面のＵＶベースのカットは、ＣＥＸ溶出液の収集を開始し、裏面カットがＮＬＴ ２．４ ＡＵ／ｃｍで行われるまでピーク頂点が続く。カラムを再生し、１Ｎ水酸化ナトリウム溶液で殺菌する。カラムは、０．０１Ｎ水酸化ナトリウム中で保存することができる。次に、ＬＣＭＳを使用してＨＣＰ含有量について調製物を分析する。

【0134】

ウイルス濾過：
潜在的なウイルス汚染物質を除去する。ウイルス濾過は、Ｖｉｒｅｓｏｌｖｅ Ｐｒｏ、Ｐｌａｎｏｖａ ２０Ｎ、又はＰｌａｎｏｖａ ＢｉｏＥＸ膜を通して行う。

【0135】

タンジェンシャルフロー濾過（ＴＦＦ）：
ウイルス濾液プロセス中間体を、最終原薬（ＤＳ）調製用の適切なマトリックスに交換し、最終ＤＳ調製用の適切な範囲に抗体を濃縮する。ＴＦＦは、３０ｋＤａのＰＥＳ又は３０ｋＤａの再生セルロース膜で行う。

【0136】

原薬調剤：
ＴＦＦの後、原薬製剤を完成させるために界面活性剤が添加され、医薬品製造前に適切な温度で保管及び輸送するために承認された容器閉鎖システムに分配される。

【0137】

ＬＣ－ＭＳによるＨＣＰ含有量の測定
ＨＣＰ含有量は、以下に記載するようにＬＣ－ＭＳによって測定した。ｍＡｂ５バッチ１及びｍＡｂ５バッチ２について、ＨＣＰ含有量は、タンパク質捕捉ステップ後、低ｐＨウイルス不活性化後、ＡＥＸ後、及びＣＥＸ後に測定した。ｍＡｂ５バッチ３～５については、原薬調剤前にＨＣＰ含有量を測定した。結果を、以下の表６ａ及び６ｂ、並びに表７に示す。

【0138】

試料調製
各試料又は対照の約１ｍｇのタンパク質を含有するアリコートを純水に加えて１９３ｍＬにした。溶液を、５．０ｍＬの１Ｍトリス－ＨＣｌ緩衝液、ｐＨ８、４つのタンパク質混合物の１．０ｍＬアリコートと混合し、次に１ｍＬの２．５ｍｇ／ｍＬのｒ－トリプシンで３７℃で一晩処理した。各消化物を、２．０ｍＬの５０ｍｇ／ｍＬのＤＴＴ溶液と混合し、９０℃で１５分間加熱した。沈殿物が観察された。試料を、２×３０秒間激しくボルテックスした。各試料を、１３２００ｒｐｍで３分間遠心分離し、１２０ｍＬの上清を、ＨＰＬＣバイアルに移した。次いで、ＬＣ／ＭＳ分析のために、ＨＰＬＣバイアル中の試料を、Ｈ_２Ｏ中の５．０μＬの２０％ＴＦＡと混合した。

【0139】

ＬＣ／ＭＳ／ＭＳ法
調製したトリプシンペプチドは、ＵＰＬＣ－ＭＳ／ＭＳを使用して分析した。試料を、５０μＬの体積で、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ ＣＳＨ Ｃ１８（Ｍｉｌｆｏｒｄ、ＭＡ，Ｕ．Ｓ．Ａ．）（２．１×５０ｍｍ、粒径１．７μｍ）上に直接注入した。分析中、カラムを６０℃に加熱した。分離は、Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣシステムで、水中の０．１％ギ酸からなる移動相Ａ、及び０％移動相Ｂで平衡化してアセトニトリル中の０．１％ギ酸からなる移動相Ｂを用いて、２００μＬ／分で２分間、５０μＬ／分の流量で２３分かけて０％から１０％まで、５７分かけて２０％Ｂまで、３０分かけて３０％まで直線的に増加させて行い、続いて４００μＬ／分の流量で複数回のジグザグ洗浄サイクルを行った。質量分析は、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｑ Ｅｘａｃｔｉｖｅ Ｐｌｕｓ質量分析計（Ｂｒｅｍｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）で行った。データ依存型ＭＳ／ＭＳは次のように行った。最初のイベントは、サーベイポジティブマススキャン（２３０～１５００のｍ／ｚ範囲）であり、その後、最初のイベントからの１０個の最も豊富なイオンに対する１０個のＨＣＤイベント（２８％ＮＣＥ）が続いた。イオンは、１５のシースガス流量、５の補助ガス流量、４ｋＶのスプレー電圧、３２０℃のキャピラリー温度、及び５０のＳ－レンズＲＦレベルを使用して生成した。解像度は、サーベイスキャン及びＭＳ／ＭＳイベントに対して、それぞれ、３５０００（５Ｅ６のＡＧＣ標的）及び１７５００（５Ｅ４のＡＧＣ標的）に設定した。最大イオン注入時間は、サーベイスキャンで２５０ｍｓ、その他のスキャンで３００ｍｓであった。６０秒の動的除外時間は、単一の繰り返し回数で使用した。

【0140】

ＨＣＰの特定及び定量化
ＣＨＯ－Ｋ１＿ｒｅｆｓｅｑ＿２０１４ Ｐｒｏｔｅｉｎ．ｆａｓｔａデータベース（ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｈｏｇｅｎｏｍｅ．ｏｒｇから２０１４年８月２３日にダウンロード）から取得した配列で構成されるカスタマイズされたタンパク質データベースは、ＭＳ／ＭＳデータからＨＣＰの同一性を予測するために開発された。ＭＳ／ＭＳデータを、１０ｐｐｍ及び０．０２Ｄａの質量許容差で検索し、Ｓｅｑｕｅｓｔ ＨＴ検索を備えたＰｒｏｔｅｏｍｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｅｒソフトウェアパッケージ、バージョン１．４又は２．３（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、Ｂｒｅｍｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用したこのデータベースに対して厳格な偽発見率（ＦＤＲ）は１％以下であった。０のスコア及び単一のスペクトルヒットのタンパク質、又は単一のスペクトルヒット、及び１０ｐｐｍ以上、及び汚染されたヒトタンパク質を除外することにより、更なるペプチド／タンパク質フィルタリングを行った。各ＨＣＰについて上位３つのペプチド（可能な場合）からのタンパク質面積、及びスパイクされた３つのタンパク質、ｒ－トリプシン、ＰＣＳＫ９、及びＡＤＨ１についての面積を使用して、個々のＨＣＰ濃度（ｐｐｍ又はｎｇ ＨＣＰ／ｍｇ ｍＡｂ）を計算した。

【表6-1】

【表6-2】

【表7】

【表8】

【0141】

実施例６．ｍＡｂ７におけるＨＣＰの減少
（米国特許第１０，６４７，７５９号の抗体２０１ｃ”）精製プロセス
ｍＡｂ７（米国特許第１０，６４７，７５９号の抗体２０１ｃ”）（ＬＣは配列番号２５である、ＨＣは配列番号２６である）調製物は、ｍＡｂ５に関して上記で本質的に記載されたステップを使用して調製されるが、以下の少しの違いがある。
タンパク質捕捉：
プロテインＡカラム：ＭａｂＳｅｌｅｃｔ ＳｕＲｅ
負荷：２０～４０ｇ／Ｌ
溶出：２０ｍＭ酢酸／５ｍＭクエン酸
低ｐＨウイルス不活性化及び中和：
滴定剤：２０ｍＭ酢酸／５ｍＭクエン酸、ｐＨ３．４５
時間：１８０分
中和：ｐＨ５．０、５００ｍＭトリス塩基
ＡＥＸクロマトグラフィー：
樹脂：ＰＯＲＯＳ ５０ ＸＱ、
負荷：１００～２００ｇ／Ｌ負荷
ｐＨ：７．０
ＣＥＸクロマトグラフィー：
樹脂：ＰＯＲＯＳ ５０ ＨＳ
負荷：２０～４０ｇ／Ｌ

【0142】

ＨＣＰ含有量は、実施例５に記載されるようにＬＣ－ＭＳによって測定した。ｍＡｂ７バッチ１及びｍＡｂ７バッチ２について、ＨＣＰ含有量は、タンパク質捕捉ステップ後、低ｐＨウイルス不活性化後、ＡＥＸ後、ＣＥＸ後、及びＴＦＦ後に測定した。結果を、表８ａ及び８ｂに示す

【表9】

【表10】

【0143】

実施例７．深層濾過中のＨＣＰ減少に対するデプスフィルターの種類及びｐＨの影響－ｍＡｂ５（ドナネマブ）及びｍＡｂ６
パートＡ－ＨＣＰ減少に対するｐＨの影響
２つの抗体（ｍＡｂ５及びｍＡｂ６）は、溶出ステップが表９に示される緩衝系で行われることを除いて、本質的に実施例１でｍＡｂ１について記載したように、タンパク質捕捉ステップを用いて調製される。総ＨＣＰ含有量は、約２８００～約３２００ｐｐｍの範囲が得られるＥＬＩＳＡによって測定される。タンパク質捕捉に続いて、本質的に実施例１でｍＡｂ１について記載したように低ｐＨウイルス不活性化ステップを行い、続いて５００ｍＭトリス塩基ｐＨ未調整緩衝液を使用してｐＨ５．０又はｐＨ７．０のいずれかで中和ステップを行う。Ｘ０ＳＰデプスフィルターを１０００ｇ／ｍ^２の負荷量で使用して、実施例１のｍＡｂ１について記載したように深層濾過ステップを行う_。深層濾過ステップ後のＨＣＰ含有量はＥＬＩＳＡによって測定される。

【0144】

表９の結果は、デプスフィルターに適用される混合物のｐＨが、ｐＨ７．０である場合、深層濾過後に、両方の抗体についての総ＨＣＰ含有量が５０ｐｐｍ未満まで有意に減少したことを示している。デプスフィルターに適用される混合物のｐＨがｐＨ５．０である場合、総ＨＣＰ含有量はそれほど減少しない。

【表11】

【0145】

パートＢ：ｍＡｂ５についてのＨＣＰ減少に対するデプスフィルター及びｐＨの影響
ｍＡｂ５は、本質的に実施例５に記載されるようにタンパク質捕捉ステップを使用して調製される。溶出液は、本質的に実施例５に記載されるように、低ｐＨウイルス不活性化及び中和に供される。深層濾過ステップでは、４つの異なるｐＨ及びデプスフィルターの設定を評価した。
（ｉ）Ｂ１ＨＣフィルター＋ｐＨ５．１
（ｉｉ）Ｘ０ＳＰフィルター＋ｐＨ５．１
（ｉｉｉ）Ｘ０ＳＰフィルター＋ｐＨ６．２
（ｉｖ）Ｘ０ＳＰフィルター＋ｐＨ７．３

【0146】

（ｉ）Ｂ１ＨＣフィルター＋ｐＨ５．１
ｍＡｂ５は、本質的に実施例５に記載されるようにタンパク質捕捉ステップを使用して調製される。５００ｍｌをガラスビーカーに入れ、テフロン撹拌子で混合する。プロテインＡ溶出液のタンパク質濃度は、１２．５ｍｇ／ｍｌである。ビーカーに５００ｍｌを入れると、総タンパク質含有量は、６２５０ｍｇ（１２．５ｍｇ／ｍｌ×５００ｍｌ＝６２５０ｍｇ）になる。

【0147】

ビーカー内の溶液の開始時のｐＨは、３．９８（温度＝１８．１Ｃ）である。ｐＨを、２０ｍＭ酢酸／５ｍＭクエン酸で３．４５に調整して、本質的に実施例５に記載されるように低ｐＨウイルス不活性化ステップを行う。

【0148】

低ｐＨのウイルス不活性化ステップが進行している間、Ｂ１ＨＣフィルター（マイクロポッド又は２３ｓｑ ｃｍ、ロットＣＰ７ＮＡ７７７９８、部品ＭＢ１ＨＣ２３ＣＬ３）が設定される。ＯＨＡＵＳ Ｓｃｏｕｔスケール、Ｋ４３４６９６からＫ４３４６９９）とともにＰｅｎｄｏＴｅｃｈ Ｆｉｌｔｅｒ Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ Ｐｅｒｉｓｔａｌｔｉｃポンプシステム（Ｋ４３４６９４）を備えたサイズ１４の白金硬化シリコンチューブを使用する。全てのフィルターは、２３ｍｌ／分（約６００ＬＭＨ）のＰＷＴＲで、フィルター当たり２３０ｍｌ、又は１００Ｌ／ｓｑｍで洗い流される。

【0149】

ｐＨ５．０への中和は、０．２５Ｍトリス塩基で達成される（ＥＬ１９５６２－３６８、ＬＢ２１３、ＥＸＰ４／１５／２０２０）。ｐＨが５に達すると溶液は濁り、最終的なｐＨは５．０９（５．１）と測定される。濃度は、７．２７ｍｇ／ｍｌ（ｐＨ５で６２５０ｍｇ／８６０ｍｌ）と計算される。ｐＨ５の溶液を撹拌しながら、９９７ｇ／ｓｑｍの負荷でＢ１ＨＣフィルターを通した濾過を開始する（３０９ｍｌ×７．２７ｍｇ／ｍｌ＝２．２４６ｇ／０．００２３ｓｑｍ＝９９７ｇ／ｓｑｍ。Ｂ１ＨＣフィルターは、４５ｍｌのＰＷＴＲで回収フラッシュされる。フィルターは本質的に、回収フラッシュ後にポンプで乾燥される。Ｂ１ＨＣの最終体積は、５．１３ｍｇ／ｍｌで３７５．５ｍｌであり、１．９２６ｇの８５．８％収率が得られる。

【0150】

（ｉｉ）Ｘ０ＳＰフィルター＋ｐＨ５．１又はｐＨ６．３又はｐＨ７．２
ｍＡｂ５は、本質的に実施例５に記載されるようにタンパク質捕捉ステップを使用して調製される。５００ｍｌをガラスビーカーに入れ、テフロン撹拌子で混合する。プロテインＡ溶出液のタンパク質濃度は、１５．７５ｍｇ／ｍｌである。ビーカーに５００ｍｌを入れると、総タンパク質含有量は、７８７５ｍｇ（１５．７５ｍｇ／ｍｌ×５００ｍｌ＝７８７５ｍｇ）になる。

【0151】

ビーカー内の溶液の開始時のｐＨは、４．０５（温度＝１８．１Ｃ）である。ｐＨを、２０ｍＭ酢酸／５ｍＭクエン酸で３．４５に調整して、本質的に実施例５に記載されるように低ｐＨウイルス不活性化ステップを行う。

【0152】

低ｐＨのウイルス不活性化ステップが進行している間、３つのＸ０ＳＰフィルター（マイクロポッド又は２３ｓｑ ｃｍ、ロットＣＰ９ＡＡ９３２５１、ｃａｔ ＭＸ０ＳＰ２３ＣＬ３）が設定され、上記のように別々に洗い流される。

【0153】

０．２５Ｍトリス塩基を使用して達成した中和Ｉ（ＥＬ１９５６２－３６８、ＬＢ２１３、ＥＸＰ ４／１５／２０２０）：

【0154】

第１のビーカーは、２０ｍｌの２５０ｍＭトリス塩基でｐＨを５．１に調整した。計算された濃度は、９．０４ｍｇ／ｍｌである。

【0155】

第２のビーカーは、２７ｍｌの２５０ｍＭトリス塩基でｐＨを６．３に調整した。計算された濃度は、８．８２ｍｇ／ｍｌである。

【0156】

第３のビーカーは、３２ｍｌの２５０ｍＭトリス塩基でｐＨを７．２に調整した。計算された濃度は、８．６７ｍｇ／ｍｌである。

【0157】

ｐＨ６．３及び７．２の沈殿物は、ぬるぬるしているように見え（濾過の終わりに向かってガラスの底に付着するため）、ｐＨ５．１よりサイズが大きい可能性がある。

【0158】

３つの溶液を撹拌しながら、Ｘ０ＳＰフィルターによる濾過を開始する。

【0159】

ｐＨ５．０ Ｘ０ＳＰは、２０３ｍｌの負荷で２５ｐｓｉに達し、その後、水回収フラッシュに切り替えた。負荷は、７９８ｇ／ｓｑｍ（９．０４ｍｇ／ｍｌ×２０３ｍｌ＝１．８３５ｇ／０．００２３ ｓｑ ｍ＝７９８ｇ／ｓｑ ｍ）として計算される。

【0160】

フィルターは、約４５ｍｌのＰＷＴＲで回収フラッシュされる。フィルターは本質的に、回収フラッシュ後にポンプで乾燥される。

【0161】

Ｘ０ＳＰ ｐＨ５．１の最終体積＝５．８９ｍｇ／ｍｌで２７８ｍｌ＝１．６３７ｇ収量＝１．６３７ｇ／１．８３５＝８９．２％

【0162】

Ｘ０ＳＰ ｐＨ６．３の最終体積＝５．７６ｍｇ／ｍｌで３６５ｍｌ＝１．ｇ収量＝２．１０２ｇ／２．５８＝８１．５％

【0163】

Ｘ０ＳＰ ｐＨ７．２の最終体積＝５．５２ｍｇ／ｍｌで３６５ｍｌ＝２．０１５ｇ／２．５８＝７８．１％

【0164】

（ｉｉｉ）ＡＥＸクロマトグラフィー
深層濾過調製物の各々は、本質的に実施例５に記載されるようにＡＥＸに供される。全てのＡＥＸ充填調製物について、ｐＨ５の濾液及びｐＨ６の濾液（７．２の濾液ではない）を、２５０ｍＭトリス塩基（ロットＥＬ１９５６２－３６８、ＬＢ２１３、ｅｘｐ ４－１５－２０、開発用途のため）でｐＨを７．２５に調整し、次いで、ｐＨ７．２５で０．０５２６×体積で、２０ｍＭトリス、１Ｍ ＮａＣｌ、ｐＨ７．０（ＥＬ１９５６２－８６２ ＬＢ１９８、ｅｘｐ ９－３０－２０２０）を使用して５０ｍＭの最終濃度にＮａＣｌを添加した。全ての充填調製物は、撹拌子付きのガラスビーカーで行う。同量のＡＥＸを負荷するために、６００ｍｇの各濾液を使用した。全てのＡＥＸ充填物のｐＨは、７．１～７．３であり、全ての導電率は、６．５＋／－０．２ｍＳであった。

【0165】

最終的なＡＥＸ ＭＳ（ｐＨ５での）体積、ｍＡｂ５濃度、総ｍｇ、及び収量は次のとおりであった。
１．Ｂ１ＨＣ材料－３．９１ｍｇ／ｍｌで１５５ｍｌ＝６０６．１ｍｇ又は１０１％
２．ｐＨ５．１のＸ０ＳＰ－５．００ｍｇ／ｍｌで１２０ｍｌ＝６００ｍｇ又は１００％
３．ｐＨ６．３のＸ０ＳＰ－４．９６ｍｇ／ｍｌで１２１ｍｌ＝６００．２ｍｇ又は１００％
４．ｐＨ７．２のＸ０ＳＰ－４．７９ｍｇ／ｍｌで１２６ｍｌ＝６０３．５ｍｇ又は１００．６％

【0166】

（ｉｉｉ）ＣＥＸクロマトグラフィー
ＡＥＸ調製物の各々は、本質的に実施例５に記載されるように、ＣＥＸクロマトグラフィーに供される。ＣＥＸ樹脂上の実際の負荷は、次のとおりである。
（ｉ）３．９１ｍｇ／ｍｌ×負荷体積１３０ｍｌ×０．８５＝１１０．５ｍｌ＝４３２．１／１７．２８＝２５．０ｍｇ／ｍｌのＢ１ＨＣ調製物
（ｉｉ）５．００ｍｇ／ｍｌ 負荷体積１０１．７ｍｌ×０．８５％＝８６．４ｍｌ＝４３２／１７．２８＝２５．０ｍｇ／ｍｌのｐＨ５でのＸ０ＳＰ
（ｉｉｉ）４．９６ｍｇ／ｍｌ 負荷体積＝１０２．５×０．８５＝８７．１ｍｌ＝４３２．０／１７．２８ｍｌ＝２５．０ｍｇ／ｍｌのｐＨ６．３でのＸ０ＳＰ
（ｉｖ）４．７９ｍｇ／ｍｌ 負荷体積＝１０６．１×０．８５＝９０．２ｍｌ＝４３２．１／１７．２８＝２５．０ｍｇ／ｍｌのｐＨ７．２でのＸ０ＳＰ

【0167】

各条件についてのＣＥＸメインストリーム体積、濃度、及び収率は、次のとおりである。
（ｉ）５．８３ｍｇ／ｍｌ×ＭＳ体積＝６４．１ｍｌ ＭＳ体積＝３７３ｍｇ／４３２．１ｍｇ＝８６．３％のｐＨ５．０でのＢ１ＨＣ
（ｉｉ）５．８３ｍｇ／ｍｌ×６４．８ｍｌ ＭＳ体積＝３７７．８ｍｇ／４３２ｍｇ＝８７．５％のｐＨ５でのＸ０ＳＰ
（ｉｉｉ）５．８０ｍｇ／ｍｌ＝６４．８ｍｌ ＭＳ体積＝３７５．８ｍｇ／４３２．０ｍｇ＝８７．０％のｐＨ６．３でのＸ０ＳＰ
（ｉｖ）５．８０ｍｇ／ｍｌ＝６４．７ｍｌ ＭＳ体積＝３７５．３ｍｇ／４３２．１ｍｇ＝８６．９％のｐＨ７．２でのＸ０ＳＰ

【0168】

（ｖ）ＬＣ－ＭＳによるＨＣＰ含有量の分析
本質的に実施例５に記載されるように、ＬＣＭを使用して、ＣＥＸ調製物をＨＣＰ含有量について分析する。ＬＣ－ＭＳデータを表１０に示す。

【表12】

【0169】

表１０のデータは、試験した全てのｐＨでＸ０ＳＰフィルターを用いた深層濾過後に、総ＨＣＰ含有量が、５０ｐｐｍ未満に大幅に減少したことを示している。これは、Ｂ１ＨＣフィルターを用いた深層濾過後のＨＣＰ含有量の減少に有利に匹敵する。深層濾過ステップ後の収率は、低いｐＨ５．１と比較して、ｐＨ６．３及び７．２で低いことも注目すべきである。したがって、高ｐＨでのＨＣＰ含有量の減少は、収率の損失によって相殺される可能性がある。最適な性能は、ｐＨ５．０でのＸ０ＳＰフィルターで見られる。

【0170】

実施例８．生体分子精製プロセス中のイオン強度の決定方法
ここでは、生体分子精製単位プロセス中に既知の緩衝液組成に基づいてイオン強度を推定する方法について説明する。溶液のイオン強度（Ｉ）は、その溶液中のイオンの濃度の尺度であり、全ての種について、種濃度ｃ_ｉ及び正味電荷ｚ_ｉの関数である。イオン強度を決定するために、式Ｉが使用される。

【数2】

【0171】

強電解質：低濃度（例えば、５０ｍＭ未満）の強電解質の場合、完全な解離が想定される。完全な解離では、組成が容易に算出され、イオン強度の計算が単純になる。例えば、５０ｍＭ ＮａＣｌの溶液が解離すると、０．５×［５０ｍＭ×１^２＋５０ｍＭ×（－１）^２］＝５０ｍＭのイオン強度を有する、各々５０ｍＭのＮａ^＋及びＣｌ^－がもたらされる。別の例として、５０ｍＭ Ｎａ_２ＳＯ_４が解離すると、０．５×［１００ｍＭ×１^２＋５０ｍＭ×（－２）^２］＝１５０ｍＭのイオン強度を考慮して、１００ｍＭのＮａ^＋及び５０ｍＭのＳＯ_４ ^２－がもたらされる。緩衝種がない場合、これらの計算では中性に近いｐＨが予想されるため、水の解離によるイオン濃度はイオン強度に大きく寄与しない。水の解離定数は、［Ｈ_＋］＝１０^－ｐＨでＫ^ｗ＝［Ｈ^＋］［ＯＨ^－］＝１０^－１４であるとみなされる（角括弧は濃度を示す）。ここでの計算のために、（例えば、ヒドロニウムイオンとは対照的に）Ｈ^＋イオンの物理的解釈は必要ではなく、同様に、Ｈ^＋濃度と活性を区別する必要もない。

【0172】

緩衝系：緩衝系の場合、完全な解離を想定することはできない。緩衝液の酸解離定数を使用して、酸及び塩基形態の緩衝液の割合を決定する必要がある。Ｈ^＋及びＡ^－に解離する一般的な酸であるＨＡの場合、式２は酸解離定数Ｋ_ａ及び種濃度に関連している。

【数3】

【0173】

酸解離定数は、多くの場合、ｐＫ_ａ＝－ｌｏｇ_１０（Ｋ_ａ）の対数形式で使用される。ｐＫ_ａ，０として示される熱力学的ｐＫ_ａは、目的の多くの緩衝液について文献において入手可能である。しかしながら、活量係数が１から逸脱するため、非常に希薄な溶液を除いて、緩衝液の有効ｐＫ_ａは熱力学的値からそれる。本開示で考慮される適度に希薄な溶液については、拡張デバイ・ヒュッケル式又はデービス式を使用して、１ではない活量係数を説明した。文献に見られる定数のいくつかの値は若干異なる場合があるが、本開示における目的のイオン強度値の範囲で同様の結果が得られる。拡張デバイ・ヒュッケル式は、式３として提供される：

【数4】

【0174】

デービス式は式４として提供される：

【数5】

式中、ｎ＝２ｚ－１であり、ｚはｎを算出するための酸性緩衝液形態の正味の電荷である（Ｓｃｏｐｅｓ，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅｓ，２０１３）。

【0175】

ｐＫ_ａはイオン強度の関数であるため、組成とイオン強度は独立して決定することはできないが、方程式系の一部である。方程式系には、前述のイオン強度、各緩衝液の酸解離定数、及び各緩衝液のｐＫ_ａの方程式が含まれ、また、各緩衝液の電気的中性条件と全種のバランスも含まれる。この方程式系を用いて、いくつかの値を推定することができる。例えば、既知の溶液のｐＨを用いて緩衝液製剤の酸／塩基比を推定することができ、逆に、酸／塩基比を用いて溶液のｐＨ及び対応する滴定量を推定することができる。これらの用途のいずれにおいても、イオン強度を推定して、溶離液及び滴定剤のオプションを合理的に選択するのに役立てることができる。

【0176】

本開示の緩衝系に関連するイオン強度、例えば、深層濾過用の供給材料のイオン強度を算出するためには、溶液の緩衝液組成が必要である。この組成は、プロセスで使用される緩衝液及び滴定剤の量と組成に基づいて合理的に推定することができる。本分野で既知のイオン測定技術も、組成を推定するために使用することができる。

【0177】

溶液組成を推定するための出発点として、考えられる方法の１つは、アフィニティーカラムの溶出液プールが、溶出液プールの測定されたｐＨで緩衝されることを除いて、溶離液と同じ緩衝液組成を有すると想定することである。例えば、目的のタンパク質がプロテインＡカラムから２０ｍＭ酢酸、５ｍＭ乳酸で溶出され、溶出液プールが４．２の測定ｐＨを有する場合、溶出液プールの緩衝液組成は、２０ｍＭ酢酸塩、５ｍＭ乳酸塩、及びｐＨを４．２にするのに十分なＮａＯＨ（これは約８．２ｍＭ ＮａＯＨに相当する）であると仮定される。ナトリウム陽イオンＮａ^＋の総含有量のみが計算に重要であるため、溶出液のナトリウム含有量が酢酸ナトリウム、リン酸ナトリウム、水酸化ナトリウム、又はそれらの組み合わせに由来すると想定するかどうかは問題ではなく、便宜上、ナトリウムをＮａＯＨに帰属させるという慣習が用いられる。

【0178】

溶離液の組成及び溶出液のｐＨを用いて溶出液の緩衝液組成を推定した後、溶液の滴定を検討する。例えば、２０ｍＭ酢酸塩、５ｍＭ乳酸塩、ｐＨ４．２で約８．２ｍＭのＮａＯＨの推定溶出液組成では、ウイルス不活性化のためにｐＨを標的値の３．４５に低下させるのに必要な２０ｍＭ ＨＣｌの体積が開始体積の０．３０５倍に等しい場合、ｐＨ３．４５でのそのプロセス中間体の組成は希釈から分かるであろう。酢酸塩、乳酸塩、及びＮａＯＨは、滴定剤中に、それぞれの初期値の１／１．３０５倍（すなわち、約１５．３ｍＭ酢酸塩、約３．８ｍＭ乳酸塩、及び約６．２ｍＭのＮａＯＨ）で存在し、ＨＣｌは、その値の０．３０５／１．３０５（約４．７ｍＭ ＨＣｌ）で存在する。同様に、２５０ｍＭトリス塩基による中和の場合、ｐＨを標的であるｐＨ７．０に上昇させるための比率がｐＨ３．４５溶液の体積の０．０７４３倍である場合、１／１．０７４３と０．０７４３／１．０７４３の比率を適用して中和溶液の最終濃度を求める（約１４．３ｍＭの酢酸塩、約３．６ｍＭの乳酸塩、約５．８ｍＭのＮａＯＨ、約４．４ｍＭのＨＣｌ、約１７．３ｍＭのトリス）。全ての既知の値は、イオン強度を算出するために方程式系（式５～１５）に代入される。

【数6】

【数7】

【数8】

【数9】

【数10】

【数11】

【数12】

【数13】

【数14】

【数15】

【数16】

トリス、酢酸塩、及び乳酸塩のそれぞれのｐＫ_ａ，ｏ値は、２２℃で８．１５、４．７６、及び３．８６であるとみなされた。深層濾過供給材料のイオン強度について得られた推定値は２２．１ｍＭである。

【0179】

本明細書に記載されているように、タンパク質製品の緩衝能力は直接モデル化されていない。したがって、滴定に強酸又は強塩基を使用する場合、計算及び経験的滴定結果の間に多少の偏差が生じる可能性がある。例えば、プロテインＡ溶出液をウイルス不活性化のための低いｐＨまで滴定する場合、緩衝液の計算は通常、必要な２０ｍＭ ＨＣｌの経験的量を過小評価する。必要な経験的量は、算出される推定値よりも５０％程度多くなる場合がある。この違いを説明する１つの方法は、より高いｐＨでアフィニティーカラム溶出液をモデル化し、推定滴定量が実験値と一致するまで経験的に値を調整することである。例えば、上記の例で、２０ｍＭ ＨＣｌの量が最初に推定された０．３０５の比率よりも５０％多かった場合、プロテインＡ溶出液はｐＨ４．２ではなく約ｐＨ４．４５としてモデル化される。モデル化にこの経験的な変更を加えると、この例の推定イオン強度は一方向に低下するが、それはごくわずかであり、最初の推定値である２２．１ｍＭから２１．９ｍＭに低下する。したがって、本開示の好ましい実施形態を導くためのイオン強度を推定するためには、どちらのアプローチでも十分であると結論付けられる。

【0180】

代替方法：イオン含有量測定方法を用いて、深層濾過供給材料の緩衝液組成を決定し、イオン強度を算出することができる。これには、測定値が、添加される滴定剤の量などの任意の既知の量と一貫性のある結果をもたらすことを確認する必要がある。アフィニティーカラム溶出液の緩衝液組成は、溶離液の緩衝液組成と同等であると想定されるが、異なるｐＨであるため、実際の組成の違いは、イオン含有量測定値によって決定することができる。例えば、溶離液の組成に基づく量又は測定値のいずれかを使用して、溶離液中の緩衝液成分のイオン強度を算出することができる。

【0181】

参照による組み込み
本明細書で参照される全ての特許及び刊行物は、参照によりそれらの全体が本明細書に組み込まれる。本明細書で論じる刊行物は、本出願の出願日より前の開示のためにのみ提供される。本明細書のいかなる内容も、本発明が先行発明によりそのような刊行物に先行する権利を有していないことを認めるものと解釈されるべきではない。

【0182】

配列
以下の核酸配列及び／又はアミノ酸配列が本開示において言及され、参照のために以下に提供される。
配列番号１－バムラニビマブ可変重鎖（ＶＨ）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩＰＩＬＧＩＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＹＹＥＡＲＨＹＹＹＹＹＡＭＤＶＷＧＱＧＴＡＶＴＶＳＳ
配列番号２－バムラニビマブ可変軽鎖（ＶＬ）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＳＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＴＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号３－バムラニビマブ重鎖（ＨＣ）
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＧＴＦＳＮＹＡＩＳＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＲＩＩＰＩＬＧＩＡＮＹＡＱＫＦＱＧＲＶＴＩＴＡＤＫＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＧＹＹＥＡＲＨＹＹＹＹＹＡＭＤＶＷＧＱＧＴＡＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号４－バムラニビマブ軽鎖（ＬＣ）
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＳＹＬＳＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＴＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＲＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号５－エテセビマブ可変重鎖（ＶＨ）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＶＳＳＮＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＹＳＧＧＳＴＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＭＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＬＰＭＹＧＤＹＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号６－エテセビマブ可変軽鎖（ＶＬ）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＲＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＰＥＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶ
配列番号７－エテセビマブ重鎖（ＨＣ）
ＥＶＱＬＶＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＶＳＳＮＹＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＶＩＹＳＧＧＳＴＦＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＭＮＴＬＦＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＶＬＰＭＹＧＤＹＬＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＡＡＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号８－エテセビマブ軽鎖（ＬＣ）
ＤＩＶＭＴＱＳＰＳＳＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＩＳＲＹＬＮＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＡＡＳＳＬＱＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＥＤＦＡＴＹＹＣＱＱＳＹＳＴＰＰＥＹＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号９－ベブテロビマブ可変重鎖（ＶＨ）
ＱＩＴＬＫＥＳＧＰＴＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＩＳＧＶＧＶＧＷＬＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＬＩＹＷＤＤＤＫＲＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＫＭＴＮＩＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＨＨＳＩＳＴＩＦＤＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号１０－ベブテロビマブ可変軽鎖（ＶＬ）
ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＡＴＳＳＤＶＧＤＹＮＹＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＦＥＶＳＤＲＰＳＧＩＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＴＴＳＳＡＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬ
配列番号１１－ベブテロビマブ重鎖（ＨＣ）
ＱＩＴＬＫＥＳＧＰＴＬＶＫＰＴＱＴＬＴＬＴＣＴＦＳＧＦＳＬＳＩＳＧＶＧＶＧＷＬＲＱＰＰＧＫＡＬＥＷＬＡＬＩＹＷＤＤＤＫＲＹＳＰＳＬＫＳＲＬＴＩＳＫＤＴＳＫＮＱＶＶＬＫＭＴＮＩＤＰＶＤＴＡＴＹＹＣＡＨＨＳＩＳＴＩＦＤＨＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧＫ
配列番号１２－ベブテロビマブ軽鎖（ＬＣ）
ＱＳＡＬＴＱＰＡＳＶＳＧＳＰＧＱＳＩＴＩＳＣＴＡＴＳＳＤＶＧＤＹＮＹＶＳＷＹＱＱＨＰＧＫＡＰＫＬＭＩＦＥＶＳＤＲＰＳＧＩＳＮＲＦＳＧＳＫＳＧＮＴＡＳＬＴＩＳＧＬＱＡＥＤＥＡＤＹＹＣＳＳＹＴＴＳＳＡＶＦＧＧＧＴＫＬＴＶＬＧＱＰＫＡＡＰＳＶＴＬＦＰＰＳＳＥＥＬＱＡＮＫＡＴＬＶＣＬＩＳＤＦＹＰＧＡＶＴＶＡＷＫＡＤＳＳＰＶＫＡＧＶＥＴＴＴＰＳＫＱＳＮＮＫＹＡＡＳＳＹＬＳＬＴＰＥＱＷＫＳＨＲＳＹＳＣＱＶＴＨＥＧＳＴＶＥＫＴＶＡＰＴＥＣＳ
配列番号１３－ドナネマブのＬＣＶＲ
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ
配列番号１４－ドナネマブのＨＣＶＲ
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ
配列番号１５－ドナネマブのＬＣ
ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号１６－ドナネマブのＨＣ
ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
配列番号１７－ドナネマブのＬＣＤＲ１
ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ
配列番号１８－ドナネマブのＬＣＤＲ２
ＡＶＳＫＬＤＳ
配列番号１９－ドナネマブのＬＣＤＲ３
ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ
配列番号２０－ドナネマブのＨＣＤＲ１
ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ
配列番号２１－ドナネマブのＨＣＤＲ２
ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ
配列番号２２－ドナネマブのＨＣＤＲ３
ＥＧＩＴＶＹ
配列番号２３－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＬＣＶＲ
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ
配列番号２４－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＨＣＶＲ
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ
配列番号２５－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＬＣ
ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ
配列番号２６－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＨＣ
ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ
配列番号２７－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＬＣＤＲ１
ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ
配列番号２８－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＬＣＤＲ２
ＹＱＡＳＴＬＥＳ
配列番号２９－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＬＣＤＲ３
ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ
配列番号３０－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＨＣＤＲ１
ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ
配列番号３１－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＨＣＤＲ２
ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ
配列番号３２－抗体２０１ｃ（ｍＡｂ７）のＨＣＤＲ３
ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ
配列番号３３－ドナネマブのＬＣ ＤＮＡ配列
ｇａｔａｔｔｇｔｇａｔｇａｃｔｃａｇａｃｔｃｃａｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｃｇｔｃａｃｃｃｃｔｇｇａｃａｇｃｃｇｇｃｃｔｃｃａｔｃｔｃｃｔｇｃａａｇｔｃａａｇｔｃａｇａｇｃｃｔｃｔｔａｔａｔａｇｔｃｇｃｇｇａａａａａｃｃｔａｔｔｔｇａａｔｔｇｇｃｔｃｃｔｇｃａｇａａｇｃｃａｇｇｃｃａａｔｃｔｃｃａｃａｇｃｔｃｃｔａａｔｔｔａｔｇｃｇｇｔｇｔｃｔａａａｃｔｇｇａｃｔｃｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｇａｃａｇａｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇｇｔｃａｇｇｃａｃａｇａｔｔｔｃａｃａｃｔｇａａａａｔｃａｇｃａｇｇｇｔｇｇａｇｇｃｃｇａａｇａｔｇｔｔｇｇｇｇｔｔｔａｔｔａｃｔｇｃｇｔｇｃａａｇｇｔａｃａｃａｔｔａｃｃｃａｔｔｃａｃｇｔｔｔｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｃｔｇｇａｇａｔｃａａａｃｇａａｃｔｇｔｇｇｃｔｇｃａｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｔｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｃ
配列番号３４－ドナネマブのＨＣ ＤＮＡ配列
ｃａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｇｔｇｃａｇｔｃｔｇｇｇｇｃｔｇａｇｇｔｇａａｇａａｇｃｃｔｇｇｇｔｃｃｔｃａｇｔｇａａｇｇｔｔｔｃｃｔｇｃａａｇｇｃａｔｃｔｇｇｔｔａｃｇａｃｔｔｃａｃｔａｇａｔａｃｔａｔａｔａａａｃｔｇｇｇｔｇｃｇａｃａｇｇｃｃｃｃｔｇｇａｃａａｇｇｇｃｔｔｇａｇｔｇｇａｔｇｇｇａｔｇｇａｔｔａａｔｃｃｔｇｇａａｇｃｇｇｔａａｔａｃｔａａｇｔａｃａａｔｇａｇａａａｔｔｃａａｇｇｇｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｔａｃｃｇｃｇｇａｃｇａａｔｃｃａｃｇａｇｃａｃａｇｃｃｔａｃａｔｇｇａｇｃｔｇａｇｃａｇｃｃｔｇａｇａｔｃｔｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔｇｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｇａａｇｇｃａｔｃａｃｇｇｔｃｔａｃｔｇｇｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａｃｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｃｃｔｃｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｇｇｔｃｔｔｃｃｃｇｃｔａｇｃａｃｃｃｔｃｃｔｃｃａａｇａｇｃａｃｃｔｃｔｇｇｇｇｇｃａｃａｇｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｃｃａｇａｃｃｔａｃａｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇａａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａａａｇｔｔｇａｇｃｃｃａａａｔｃｔｔｇｔｇａｃａａａａｃｔｃａｃａｃａｔｇｃｃｃａｃｃｇｔｇｃｃｃａｇｃａｃｃｔｇａａｃｔｃｃｔｇｇｇｇｇｇａｃｃｇｔｃａｇｔｃｔｔｃｃｔｃｔｔｃｃｃｃｃｃａａａａｃｃｃａａｇｇａｃａｃｃｃｔｃａｔｇａｔｃｔｃｃｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａｃａｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｃｇｔｇａｇｃｃａｃｇａａｇａｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａａｇｔｔｃａａｃｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｃｇｇｃｇｔｇｇａｇｇｔｇｃａｔａａｔｇｃｃａａｇａｃａａａｇｃｃｇｃｇｇｇａｇｇａｇｃａｇｔａｃａａｃａｇｃａｃｇｔａｃｃｇｔｇｔｇｇｔｃａｇｃｇｔｃｃｔｃａｃｃｇｔｃｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｃｔｇｇｃｔｇａａｔｇｇｃａａｇｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｃｔｃｃａａｃａａａｇｃｃｃｔｃｃｃａｇｃｃｃｃｃａｔｃｇａｇａａａａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇｃｃａａａｇｇｇｃａｇｃｃｃｃｇａｇａａｃｃａｃａｇｇｔｇｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃａｔｃｃｃｇｇｇａｃｇａｇｃｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｃａｇｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａａｇｇｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇｃｇａｃａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａｇｔｇｇｇａｇａｇｃａａｔｇｇｇｃａｇｃｃｇｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃｃａｃｇｃｃｃｃｃｃｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｃｔｔｃｔｔｃｃｔｃｔａｔａｇｃａａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇａｇｃａｇｇｔｇｇｃａｇｃａｇｇｇｇａａｃｇｔｃｔｔｃｔｃａｔｇｃｔｃｃｇｔｇａｔｇｃａｔｇａｇｇｃｔｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃｇｃａｇａａｇａｇｃｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｃｇｇｇｔ
配列番号３５－抗体２０１ｃのＬＣ ＤＮＡ配列
ｇａｃａｔｃｃａｇａｔｇａｃｃｃａｇｔｃｔｃｃｔｔｃｃａｃｃｃｔｇｔｃｔｇｃａｔｃｔｇｔａｇｇａｇａｃａｇａｇｔｃａｃｃａｔｃａｃｔｔｇｃｃｇｇｇｃｃａｇｔｃａｇａｇｔｃｔｔｇｇｔａａｃｔｇｇｔｔｇｇｃｃｔｇｇｔａｔｃａｇｃａｇａａａｃｃａｇｇｇａａａｇｃｃｃｃｔａａａｃｔｃｃｔｇａｔｃｔａｔｃａｇｇｃｇｔｃｔａｃｔｔｔａｇａａｔｃｔｇｇｇｇｔｃｃｃａｔｃａａｇａｔｔｃａｇｃｇｇｃａｇｔｇｇａｔｃｔｇｇｇａｃａｇａｇｔｔｃａｃｔｃｔｃａｃｃａｔｃａｇｃａｇｃｃｔｇｃａｇｃｃｔｇａｔｇａｔｔｔｔｇｃａａｃｔｔａｔｔａｃｔｇｃｃａａｃａｔｔａｔａａａｇｇｔｔｃｔｔｔｔｔｇｇａｃｇｔｔｃｇｇｃｃａａｇｇｇａｃｃａａｇｇｔｇｇａａａｔｃａａａｃｇｇａｃｃｇｔｇｇｃｔｇｃａｃｃａｔｃｔｇｔｃｔｔｃａｔｃｔｔｃｃｃｇｃｃａｔｃｔｇａｔｇａｇｃａｇｔｔｇａａａｔｃｔｇｇａａｃｔｇｃｃｔｃｔｇｔｔｇｔｇｔｇｃｃｔｇｃｔｇａａｔａａｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇａｇａｇｇｃｃａａａｇｔａｃａｇｔｇｇａａｇｇｔｇｇａｔａａｃｇｃｃｃｔｃｃａａｔｃｇｇｇｔａａｃｔｃｃｃａｇｇａｇａｇｔｇｔｃａｃａｇａｇｃａｇｇａｃａｇｃａａｇｇａｃａｇｃａｃｃｔａｃａｇｃｃｔｃａｇｃａｇｃａｃｃｃｔｇａｃｇｃｔｇａｇｃａａａｇｃａｇａｃｔａｃｇａｇａａａｃａｃａａａｇｔｃｔａｃｇｃｃｔｇｃｇａａｇｔｃａｃｃｃａｔｃａｇｇｇｃｃｔｇａｇｃｔｃｇｃｃｃｇｔｃａｃａａａｇａｇｃｔｔｃａａｃａｇｇｇｇａｇａｇｔｇｃ
配列番号３６－抗体２０１ｃのＨＣ ＤＮＡ配列
ｇａｇｇｔｇｃａｇｃｔｇｔｔｇｇａｇｔｃｔｇｇｇｇｇａｇｇｃｔｔｇｇｔａｃａｇｃｃｔｇｇｇｇｇｇｔｃｃｃｔｇａｇａｃｔｃｔｃｃｔｇｔｇｃａｇｃｃｔｃｔｇｇａｔｔｃａｃｃｔｔｔａｇｃａｇｃｔａｔｃｃｔａｔｇａｇｃｔｇｇｇｔｃｃｇｃｃａｇｇｃｔｃｃａｇｇｇａａｇｇｇｇｃｔｇｇａｇｔｇｇｇｔｃｔｃａｇｃｔａｔｔａｇｔｇｇｔａｇｔｇｇｔｇｇｔａｇｃａｃａｔａｃｔａｃｇｃａｇａｃｔｃｃｇｔｇａａｇｇｇｃｃｇｇｔｔｃａｃｃａｔｃｔｃｃａｇａｇａｃａａｔｔｃｃａａｇａａｃａｃｇｃｔｇｔａｔｃｔｇｃａａａｔｇａａｃａｇｃｃｔｇａｇａｇｃｃｇａｇｇａｃａｃｇｇｃｃｇｔａｔａｔｔａｃｔｇｔｇｃｇａｇａｇａｇｇｇｇｇｇｃｔｃａｇｇｇａｇｔｔａｔｔａｔａａｃｇｇｃｔｔｔｇａｔｔａｔｔｇｇｇｇｃｃａｇｇｇａａｃｃｃｔｇｇｔｃａｃｃｇｔｃｔｃｃｔｃａｇｃｃｔｃｃａｃｃａａｇｇｇｃｃｃａｔｃｇｇｔｃｔｔｃｃｃｇｃｔａｇｃａｃｃｃｔｃｃｔｃｃａａｇａｇｃａｃｃｔｃｔｇｇｇｇｇｃａｃａｇｃｇｇｃｃｃｔｇｇｇｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａｇｇａｃｔａｃｔｔｃｃｃｃｇａａｃｃｇｇｔｇａｃｇｇｔｇｔｃｇｔｇｇａａｃｔｃａｇｇｃｇｃｃｃｔｇａｃｃａｇｃｇｇｃｇｔｇｃａｃａｃｃｔｔｃｃｃｇｇｃｔｇｔｃｃｔａｃａｇｔｃｃｔｃａｇｇａｃｔｃｔａｃｔｃｃｃｔｃａｇｃａｇｃｇｔｇｇｔｇａｃｃｇｔｇｃｃｃｔｃｃａｇｃａｇｃｔｔｇｇｇｃａｃｃｃａｇａｃｃｔａｃａｔｃｔｇｃａａｃｇｔｇａａｔｃａｃａａｇｃｃｃａｇｃａａｃａｃｃａａｇｇｔｇｇａｃａａｇａａａｇｔｔｇａｇｃｃｃａａａｔｃｔｔｇｔｇａｃａａａａｃｔｃａｃａｃａｔｇｃｃｃａｃｃｇｔｇｃｃｃａｇｃａｃｃｔｇａａｃｔｃｃｔｇｇｇｇｇｇａｃｃｇｔｃａｇｔｃｔｔｃｃｔｃｔｔｃｃｃｃｃｃａａａａｃｃｃａａｇｇａｃａｃｃｃｔｃａｔｇａｔｃｔｃｃｃｇｇａｃｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａｃａｔｇｃｇｔｇｇｔｇｇｔｇｇａｃｇｔｇａｇｃｃａｃｇａａｇａｃｃｃｔｇａｇｇｔｃａａｇｔｔｃａａｃｔｇｇｔａｃｇｔｇｇａｃｇｇｃｇｔｇｇａｇｇｔｇｃａｔａａｔｇｃｃａａｇａｃａａａｇｃｃｇｃｇｇｇａｇｇａｇｃａｇｔａｃａａｃａｇｃａｃｇｔａｃｃｇｔｇｔｇｇｔｃａｇｃｇｔｃｃｔｃａｃｃｇｔｃｃｔｇｃａｃｃａｇｇａｃｔｇｇｃｔｇａａｔｇｇｃａａｇｇａｇｔａｃａａｇｔｇｃａａｇｇｔｃｔｃｃａａｃａａａｇｃｃｃｔｃｃｃａｇｃｃｃｃｃａｔｃｇａｇａａａａｃｃａｔｃｔｃｃａａａｇｃｃａａａｇｇｇｃａｇｃｃｃｃｇａｇａａｃｃａｃａｇｇｔｇｔａｃａｃｃｃｔｇｃｃｃｃｃａｔｃｃｃｇｇｇａｃｇａｇｃｔｇａｃｃａａｇａａｃｃａｇｇｔｃａｇｃｃｔｇａｃｃｔｇｃｃｔｇｇｔｃａａａｇｇｃｔｔｃｔａｔｃｃｃａｇｃｇａｃａｔｃｇｃｃｇｔｇｇａｇｔｇｇｇａｇａｇｃａａｔｇｇｇｃａｇｃｃｇｇａｇａａｃａａｃｔａｃａａｇａｃｃａｃｇｃｃｃｃｃｃｇｔｇｃｔｇｇａｃｔｃｃｇａｃｇｇｃｔｃｃｔｔｃｔｔｃｃｔｃｔａｔａｇｃａａｇｃｔｃａｃｃｇｔｇｇａｃａａｇａｇｃａｇｇｔｇｇｃａｇｃａｇｇｇｇａａｃｇｔｃｔｔｃｔｃａｔｇｃｔｃｃｇｔｇａｔｇｃａｔｇａｇｇｃｔｃｔｇｃａｃａａｃｃａｃｔａｃａｃｇｃａｇａａｇａｇｃｃｔｃｔｃｃｃｔｇｔｃｔｃｃｇｇｇｔ

【配列表】

2023544399000001.app

【手続補正書】

【提出日】2023-05-09

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ヒトＮ３ｐＧｌｕ Ａβに結合する抗体（抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体）を含む医薬組成物であって、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、哺乳動物宿主細胞から前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ抗体を精製することを含むプロセスによって調製されたものであって、前記組成物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の総含有量が、約１００ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）であり、前記組成物が、以下の宿主細胞タンパク質：タンパク質Ｓ１００－Ａ６、タンパク質Ｓ１００－Ａ１１、ホスホリパーゼＢ様２タンパク質、リソソーム保護タンパク質、ユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ、カリクレイン－１１、セリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１、補体Ｃ１ｒ小成分、アクチン、大動脈平滑筋アイソフォームＸ１、熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質、及びペルオキシレドキシン－１のうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、医薬組成物。

【請求項2】

前記哺乳動物細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項3】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である、請求項１又は２に記載の医薬組成物。

【請求項4】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項３に記載の医薬組成物。

【請求項5】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮ（配列番号１７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＡＶＳＫＬＤＳ（配列番号１８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＶＱＧＴＨＹＰＦＴ（配列番号１９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮ（配列番号２０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧ（配列番号２１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＥＧＩＴＶＹ（配列番号２２）である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項6】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫ（配列番号１３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳ（配列番号１４）である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項7】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＤＩＶＭＴＱＴＰＬＳＬＳＶＴＰＧＱＰＡＳＩＳＣＫＳＳＱＳＬＬＹＳＲＧＫＴＹＬＮＷＬＬＱＫＰＧＱＳＰＱＬＬＩＹＡＶＳＫＬＤＳＧＶＰＤＲＦＳＧＳＧＳＧＴＤＦＴＬＫＩＳＲＶＥＡＥＤＶＧＶＹＹＣＶＱＧＴＨＹＰＦＴＦＧＱＧＴＫＬＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号１５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＱＶＱＬＶＱＳＧＡＥＶＫＫＰＧＳＳＶＫＶＳＣＫＡＳＧＹＤＦＴＲＹＹＩＮＷＶＲＱＡＰＧＱＧＬＥＷＭＧＷＩＮＰＧＳＧＮＴＫＹＮＥＫＦＫＧＲＶＴＩＴＡＤＥＳＴＳＴＡＹＭＥＬＳＳＬＲＳＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＩＴＶＹＷＧＱＧＴＴＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号１６）である、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項8】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ドナネマブである、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項9】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ６（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項10】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のタンパク質Ｓ１００－Ａ１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項11】

前記組成物が、約１０ｐｐｍ未満のホスホリパーゼＢ様２タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項12】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項13】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のユビキチン－４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２７ａ（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項14】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のカリクレイン－１１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項15】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のセリンプロテアーゼＨＴＲＡ１アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項16】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満の補体Ｃ１ｒ小成分（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項17】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のアクチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項18】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満の大動脈平滑筋アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項19】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満の熱ショック同族７１ｋＤａタンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項20】

前記組成物が、約５ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項１に記載の医薬組成物。

【請求項21】

ヒトＮ３ｐＧｌｕ Ａβに結合する抗体（抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体）を含む医薬組成物であって、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、哺乳動物宿主細胞から前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ抗体を精製することを含むプロセスによって調製されたものであって、前記組成物中の宿主細胞タンパク質（ＨＣＰ）の総含有量が、約１０ｐｐｍ未満（ＬＣＭＳにより測定した場合）であり、前記組成物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、医薬組成物。

【請求項22】

前記組成物が、以下の宿主細胞タンパク質：ポリユビキチン、リソソーム保護タンパク質、グルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１、４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８、チオレドキシンアイソフォームＸ１、基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１、尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質、アクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２、ガレクチン－１、ペルオキシレドキシン－１、及びコーニフィンアルファのうちの１つ、組み合わせ、又は全てを含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項23】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のポリユビキチン（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項24】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のリソソーム保護タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項25】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のグルタチオンＳ－トランスフェラーゼＹ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項26】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の４０Ｓリボソームタンパク質Ｓ２８（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項27】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のチオレドキシンアイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項28】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の基底膜特異的ヘパラン硫酸プロテオグリカンコアタンパク質アイソフォームＸ１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項29】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満の尿細管間質性腎炎抗原様タンパク質（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項30】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のアクチン－部分細胞質２アイソフォームＸ２（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項31】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のガレクチン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項32】

前記組成物が、約１ｐｐｍ未満のペルオキシレドキシン－１（ＬＣＭＳにより測定した場合）を含む、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項33】

前記哺乳動物細胞が、ＣＨＯ細胞である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項34】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、モノクローナル抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、二重特異性抗体、又は抗体断片である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項35】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、ＩｇＧ１抗体である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項36】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体が、重鎖（ＨＣ）及び軽鎖（ＬＣ）を含み、前記軽鎖が、軽鎖可変領域（ＬＣＶＲ）を含み、前記重鎖が、重鎖可変領域（ＨＣＶＲ）を含み、前記ＬＣＶＲが、アミノ酸配列ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、及びＬＣＤＲ３を含み、前記ＨＣＶＲが、アミノ酸配列ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、及びＨＣＤＲ３を含み、ＬＣＤＲ１が、ＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡ（配列番号２７）であり、ＬＣＤＲ２が、ＹＱＡＳＴＬＥＳ（配列番号２８）であり、ＬＣＤＲ３が、ＱＨＹＫＧＳＦＷＴ（配列番号２９）であり、ＨＣＤＲ１が、ＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳ（配列番号３０）であり、ＨＣＤＲ２が、ＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧ（配列番号３１）であり、ＨＣＤＲ３が、ＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹ（配列番号３２）である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項37】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＬＣＶＲを含み、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＨＣＶＲを含み、前記ＬＣＶＲが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫ（配列番号２３）であり、前記ＨＣＶＲが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳ（配列番号２４）である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【請求項38】

前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＬＣが、ＤＩＱＭＴＱＳＰＳＴＬＳＡＳＶＧＤＲＶＴＩＴＣＲＡＳＱＳＬＧＮＷＬＡＷＹＱＱＫＰＧＫＡＰＫＬＬＩＹＱＡＳＴＬＥＳＧＶＰＳＲＦＳＧＳＧＳＧＴＥＦＴＬＴＩＳＳＬＱＰＤＤＦＡＴＹＹＣＱＨＹＫＧＳＦＷＴＦＧＱＧＴＫＶＥＩＫＲＴＶＡＡＰＳＶＦＩＦＰＰＳＤＥＱＬＫＳＧＴＡＳＶＶＣＬＬＮＮＦＹＰＲＥＡＫＶＱＷＫＶＤＮＡＬＱＳＧＮＳＱＥＳＶＴＥＱＤＳＫＤＳＴＹＳＬＳＳＴＬＴＬＳＫＡＤＹＥＫＨＫＶＹＡＣＥＶＴＨＱＧＬＳＳＰＶＴＫＳＦＮＲＧＥＣ（配列番号２５）であり、前記抗Ｎ３ｐＧｌｕ Ａβ抗体のＨＣが、ＥＶＱＬＬＥＳＧＧＧＬＶＱＰＧＧＳＬＲＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＳＹＰＭＳＷＶＲＱＡＰＧＫＧＬＥＷＶＳＡＩＳＧＳＧＧＳＴＹＹＡＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＳＫＮＴＬＹＬＱＭＮＳＬＲＡＥＤＴＡＶＹＹＣＡＲＥＧＧＳＧＳＹＹＮＧＦＤＹＷＧＱＧＴＬＶＴＶＳＳＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＳＳＫＳＴＳＧＧＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＱＴＹＩＣＮＶＮＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＫＶＥＰＫＳＣＤＫＴＨＴＣＰＰＣＰＡＰＥＬＬＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＨＥＤＰＥＶＫＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＹＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＡＬＰＡＰＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＲＤＥＬＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＫＬＴＶＤＫＳＲＷＱＱＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＰＧ（配列番号２６）である、請求項２１に記載の医薬組成物。

【国際調査報告】