(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-10-30
(54)【発明の名称】血液障害を処置するための組成物及び方法
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20231023BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20231023BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20231023BHJP
A61K 48/00 20060101ALI20231023BHJP
A61P 7/00 20060101ALI20231023BHJP
A61P 7/02 20060101ALI20231023BHJP
A61P 7/04 20060101ALI20231023BHJP
A61P 7/06 20060101ALI20231023BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20231023BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20231023BHJP
A61P 31/00 20060101ALI20231023BHJP
A61P 31/12 20060101ALI20231023BHJP
A61P 31/18 20060101ALI20231023BHJP
A61P 31/14 20060101ALI20231023BHJP
A61P 37/02 20060101ALI20231023BHJP
C07K 16/18 20060101ALN20231023BHJP
C12N 15/09 20060101ALN20231023BHJP
C12N 15/113 20100101ALN20231023BHJP
C12N 15/115 20100101ALN20231023BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00
A61K31/7088
A61K39/395 D
A61K39/395 N
A61K48/00
A61P7/00
A61P7/02
A61P7/04
A61P7/06
A61P11/00
A61P13/12
A61P31/00
A61P31/12
A61P31/18
A61P31/14
A61P37/02
C07K16/18 ZNA
C12N15/09 100
C12N15/113 Z
C12N15/115 Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023522978
(86)(22)【出願日】2021-10-15
(85)【翻訳文提出日】2023-04-21
(86)【国際出願番号】 US2021055216
(87)【国際公開番号】W WO2022081997
(87)【国際公開日】2022-04-21
(31)【優先権主張番号】63/093,029
(32)【優先日】2020-10-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】516008350
【氏名又は名称】アネクソン，インコーポレーテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002572
【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】イェドノック，テッド
(72)【発明者】
【氏名】サンカラナラヤナン，セテュ
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA13
4C084AA17
4C084MA17
4C084MA65
4C084MA66
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA51
4C084ZA53
4C084ZA54
4C084ZA55
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4C084ZA81
4C084ZB07
4C084ZB31
4C084ZB33
4C084ZC55
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085BB31
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4C085BB43
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE01
4C085GG01
4C085GG02
4C085GG03
4C085GG04
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
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4C086MA04
4C086MA17
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4C086NA05
4C086NA14
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4C086ZA54
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4C086ZA81
4C086ZB07
4C086ZB31
4C086ZB33
4C086ZC55
4H045BA10
4H045CA50
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本開示は一般に、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、冷式抗体溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ））、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）、自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、新生児同種免疫性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、感染症、または薬物誘導性血液学的障害）を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法に関する。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
血液障害を予防し、その発症リスク（ｒｉｓｋ ｏｆ ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇ）を低下させ、またはその処置をする方法であって、Ｃ１ｑ阻害剤を対象に投与することを含む、前記方法。
【請求項2】
前記Ｃ１ｑ阻害剤は、抗体、アプタマー、アンチセンス核酸または遺伝子編集剤である、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記阻害剤は、抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項１に記載の方法。
【請求項4】
前記抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害する、請求項３に記載の方法。
【請求項5】
前記抗Ｃ１ｑ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進する、請求項３に記載の方法。
【請求項6】
前記抗Ｃ１ｑ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有する、請求項３～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する、請求項３～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記抗体は、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記抗体は、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する抗Ｃ１ｑ抗体である、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記抗体は、Ｃ１ｑに特異的に結合し、その生物学的活性を中和する、請求項３～９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
前記生物学的活性は、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ＩｇＭに対するＣ１ｑ結合、（５）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（６）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（７）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（８）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（９）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（１０）ベータ－アミロイドに対するＣ１ｑ結合、（１１）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合、（１２）アポトーシス細胞に対するＣ１ｑ結合、または（１３）Ｂ細胞に対するＣ１ｑ結合である、請求項１０に記載の方法。
【請求項12】
前記生物学的活性は、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化である、請求項１０または１１に記載の抗体。
【請求項13】
前記ＣＨ５０溶血は、ヒトＣＨ５０溶血を含む、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
前記抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～約１００％を中和することが可能である、請求項１２または１３に記載の方法。
【請求項15】
前記抗体は、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能である、請求項１２～１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
前記抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、抗体断片、またはその抗体誘導体である、請求項３～１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
前記抗体は、抗体断片であり、前記抗体断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子である、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインを含む、請求項３～１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインを含む、請求項３～１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項３～１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
前記軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２０に記載の方法。
【請求項22】
前記抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む、請求項３～２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項23】
前記重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２２に記載の方法。
【請求項24】
前記抗体は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗体断片である、請求項３～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項25】
前記抗体は、非経口注射または注入によって投与される、請求項３～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項26】
前記非経口注射または注入は、皮下または筋肉内注射である、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
前記非経口注射または注入は、静脈内注射または注入である、請求項２５に記載の方法。
【請求項28】
前記抗体は、全長抗体である、請求項３～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項29】
前記抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって前記対象に投与される、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
前記抗体は、７５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって前記対象に投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
前記抗体は、週１回投与される、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項32】
前記抗体は、２週に１回投与される、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項33】
前記抗体は、月１回投与される、請求項２８～３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項34】
前記抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって前記対象に投与される、請求項２８に記載の方法。
【請求項35】
前記抗体は、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって前記対象に投与される、請求項３４に記載の方法。
【請求項36】
前記抗体は、毎日投与される、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項37】
前記抗体は、２日に１回投与される、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項38】
前記抗体は、週１回投与される、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項39】
前記抗体は、２週に１回投与される、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項40】
前記抗体は、月１回投与される、請求項３４または３５に記載の方法。
【請求項41】
前記抗体は、抗体断片である、請求項３～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項42】
前記抗体断片は、静脈内注射または注入によって前記対象に投与される、請求項４１に記載の方法。
【請求項43】
前記抗体断片は、筋肉内注射によって前記対象に投与される、請求項４１に記載の方法。
【請求項44】
前記抗体断片は、皮下注射によって前記対象に投与される、請求項４１に記載の方法。
【請求項45】
前記抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される、請求項４１～４４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項46】
前記抗体断片は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される、請求項４５に記載の方法。
【請求項47】
前記抗体断片は、毎日投与される、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項48】
前記抗体断片は、２日に１回投与される、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項49】
前記抗体断片は、週１回投与される、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項50】
前記抗体断片は、２週に１回投与される、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項51】
前記抗体断片は、月１回投与される、請求項４１～４６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項52】
前記抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回の用量よりも高い初期予備用量で投与される、請求項４７～５１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項53】
前記初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である、請求項５２に記載の方法。
【請求項54】
前記初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇの間である、請求項５３に記載の方法。
【請求項55】
前記抗体断片は、その対応する全長抗体と比較してより短い半減期を有する、請求項４１～５４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項56】
前記抗体断片は、急速に消失し、それにより前記対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存する、請求項４１～５５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項57】
前記抗体は、前記対象の血液腔内のＣ１ｑを選択的に阻害し、それにより前記対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存する、請求項４１～５６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項58】
前記血液腔は、血管内に限定される、請求項５７に記載の方法。
【請求項59】
前記血管は、動脈、細動脈、毛細血管、小静脈、または静脈である、請求項５８に記載の方法。
【請求項60】
前記血液腔は、血清、血小板、内皮細胞、血液細胞、または造血細胞を含む、請求項５７～５９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項61】
前記対象の血液腔内のＣ１ｑの阻害は、非常に血管に富む組織における組織損傷を減少させる、請求項５７～６０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項62】
前記非常に血管に富む組織は、腎臓、肺胞、毛細血管床、または糸球体である、請求項６１に記載の方法。
【請求項63】
前記血液障害は、補体媒介性血液障害である、請求項１～６２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項64】
前記血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、冷式抗体溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、感染症、または薬物誘導性血液学的障害である、請求項１～６３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項65】
前記感染症は、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、またはコロナウイルスである、請求項６４に記載の方法。
【請求項66】
前記コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ、ＨＫＵ１、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２から選択される、請求項６５に記載の方法。
【請求項67】
前記コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である、請求項６６に記載の方法。
【請求項68】
前記対象は、気道または血液試料から逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）によって確認されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を有する、請求項６７に記載の方法。
【請求項69】
前記血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）である、請求項６４に記載の方法。
【請求項70】
前記血液障害は、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）である、請求項６４に記載の方法。
【請求項71】
前記血液障害は、ループス腎炎である、請求項６４に記載の方法。
【請求項72】
前記血液障害は、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）である、請求項６４に記載の方法。
【請求項73】
前記血液障害は、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）である、請求項６４に記載の方法。
【請求項74】
前記血液障害は、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）である、請求項６４に記載の方法。
【請求項75】
前記薬物誘導性血液学的障害は、再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、または血小板減少症である、請求項６４に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
この特許出願は、２０２０年１０月１６日に出願された米国仮特許出願番号６３／０９３，０２９の利益を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
この特許出願は、２０２０年１０月１６日に出願された米国仮特許出願番号６３／０９３，０２９の利益を主張し、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
血液障害は、年齢、人種、性別、及び社会経済的状態の垣根を越えて、毎年世界中で何百万人もの人々に影響を及ぼしている。あらゆる背景の男性、女性、及び小児がこれらの病態に関連する合併症を抱えながら生活しており、その多くは潜在的に生命を脅かす。一般的に血液学的障害と称される血液障害は、処置が困難であり、また、死亡率及び患者のケアの費用の両方の観点から健康上の関心が高まっている。深部静脈血栓症（ＤＶＴ）からの合併症により、毎年、乳癌、自動車事故、ＨＩＶの合計よりも多くの人々が死亡していると推定される。
【0003】
血液障害は、血液の３つの主要な成分：赤血球、白血球、または血小板のいずれかに影響を及ぼし得る。血液障害はまた、血漿として知られている血液の液体部分に影響を及ぼし得る。いくつかの血液障害は、血液中の細胞の数を減少させる。例えば、白血球減少症に罹患した個人は、白血球の数が減少し、感染症にかかりやすくなる。血液傷害を処置するための新たな療法が必要とされている。
【0004】
現在、血液障害のための治療法は存在しない。血液細胞ホメオスタシスの分子メカニズム及び血液障害の病理は不明である。よって、血液障害を予防し、血液障害の発症リスクを低下させ、血液障害を処置するための新たな療法が必要とされている。
【発明の概要】
【0005】
本開示は一般に、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法を対象とする。
【0006】
血液障害は、血液学的障害と称され得る。血液学的障害には多様な病因が存在するが、いくつかは、補体制御タンパク質を不活性化する変異及び／または自己抗体、ならびに補体カスケードを直接的に活性化する変異によって引き起こされる可能性がある。例えば、補体変異は典型的には、阻害されない補体活性化を引き起こして、血小板、好中球、単球、及びその集合物、ならびに赤血球及び内皮細胞で発生する。これらの細胞での補体活性化は、補体及び組織因子を発現し得る細胞由来微小胞の放出をもたらし、これにより炎症を促進する。赤血球上の補体沈着は、溶血及び血栓形成促進性である赤血球由来微小胞の放出を引き起こす。補体沈着はまた、血管系内の細胞、例えば、内皮細胞上で、または非常に血管に富む組織内で、例えば、毛細血管床、糸球体、肺胞などで発生し得、これは多くの器官において血管損傷をもたらし得る。補体活性化は、補体カスケードの活性化を阻止する阻害剤によって防止され得る。そのような阻害剤は、血液細胞における、または関連する細胞及び血管に富む組織における特定の補体タンパク質の発現を阻止し、補体活性化を誘導するシグナル伝達分子を妨害し、血液細胞における、または関連する細胞及び血管に富む組織における補体阻害剤の発現を上方制御し、またはそうでなければ血液障害または血液学的障害における補体の役割を妨害し得る。
【0007】
したがって、補体活性化経路の阻害は、補体活性化経路を含む補体活性化の早期段階を阻害するための抗体を使用して、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をするための有望な治療方策であり得る。具体的には、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、及び抗Ｃ１ｓ抗体は、自己抗体が補体活性化を引き起こすことを防止し得る。
【0008】
本開示は一般に、古典的補体活性化を阻害することによって、例えば、補体因子Ｃｌｑ、Ｃｌｒ、またはＣｌｓを、例えば、これらの補体因子のうちの１つ以上に結合するモノクローナル、キメラ、ヒト化抗体、ヒト抗体、抗体断片、抗体誘導体などの抗体の投与を介して阻害することによって、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法を対象とする。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。
【0009】
いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓなどの補体因子の活性が阻害されて、古典的補体経路の活性化が阻止され、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を遅らせ、または予防する。古典的補体経路の阻害は、レクチン補体経路及び代替補体経路をインタクトなままとして、それらの正常な免疫機能を発揮する。血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））におけるＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓなどの補体因子を中和することに関する方法が本明細書に開示される。
【0010】
ある特定の態様では、本明細書では、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法が開示される。
【0011】
本明細書では、血液障害における補体活性化を阻害する方法であって、有害な補体活性化に罹患している患者に抗Ｃｌｑ抗体、抗Ｃｌｒ抗体、または抗Ｃｌｓ抗体などの抗体を投与することを含む、方法が開示される。方法は、治療剤の投与をさらに含み得る。ある特定の好ましい実施形態では、抗体は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合し、補体活性化を阻害する。
【0012】
いくつかの態様では、血液障害を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法が開示される。そのような方法には、Ｃ１ｑ阻害剤を対象に投与することが含まれる。本明細書に記載の本発明の任意の態様に適用され得る多数の実施形態がさらに提供される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ阻害剤は、抗体、アプタマー、アンチセンス核酸または遺伝子編集剤である。いくつかの実施形態では、阻害剤は、抗Ｃ１ｑ抗体である。抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得、または循環もしくは組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進し得る。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論、６：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論、または２．５：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。抗体は、Ｃ１ｑに特異的に結合し、その生物学的活性、例えば、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ＩｇＭに対するＣ１ｑ結合、（５）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（６）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（７）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（８）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（９）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（１０）ベータ－アミロイドに対するＣ１ｑ結合、（１１）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合、（１２）アポトーシス細胞に対するＣ１ｑ結合、もしくは（１３）Ｂ細胞に対するＣ１ｑ結合、または（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化を中和し得る。いくつかの実施形態では、ＣＨ５０溶血は、ヒトＣＨ５０溶血を含む。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能であり得る。
【0013】
いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、もしくは抗体断片、またはその抗体誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。抗体断片の例は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、及び一本鎖抗体分子である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗体断片である。抗体は、皮下もしくは筋肉内注射、または静脈内注射もしくは注入などの非経口注射または注入によって投与され得る。
【0014】
いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ～６０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ～７０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ～９０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～１１０ｍｇ／ｋｇ、１１０ｍｇ／ｋｇ～１２０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ～１３０ｍｇ／ｋｇ、１３０ｍｇ／ｋｇ～１４０ｍｇ／ｋｇ、または１４０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ、７５ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ、１１０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ、１３０ｍｇ／ｋｇ、１４０ｍｇ／ｋｇ、または１５０ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。抗体は、週１回、２週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。抗体は、週１回、２週に１回、３週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週毎に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、または７ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、３週に１回、または月１回投与される。
【0015】
いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、静脈内注射もしくは注入によって、筋肉内注射によって、または皮下注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回の用量よりも高い初期予備用量で投与される。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、その対応する全長抗体と比較してより短い半減期を有し、例えば、抗体断片は、急速に消失し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存し、または抗体は、対象の血液腔内のＣ１ｑを選択的に阻害し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存する。いくつかの実施形態では、血液腔は、動脈、細動脈、毛細血管、小静脈、または静脈などの血管内に限定される。血液腔は、血清、血小板、内皮細胞、血液細胞、または造血細胞を含み得る。いくつかの実施形態では、対象の血液腔内のＣ１ｑの阻害は、非常に血管に富む組織における組織損傷を減少させる。非常に血管に富む組織の例は、腎臓、肺胞、毛細血管床、または糸球体である。
【0016】
いくつかの実施形態では、血液障害は、補体媒介性血液障害である。いくつかの実施形態では、血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、冷式抗体溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、感染症、または薬物誘導性血液学的障害である。感染症は、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、またはコロナウイルスであり得る。コロナウイルスの例は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ、ＨＫＵ１、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２から選択される。いくつかの実施形態では、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。いくつかの実施形態では、対象は、気道または血液試料から逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）によって確認されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を有する。血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、ループス腎炎、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、または免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）であり得る。薬物誘導性血液学的障害の例は、再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、及び血小板減少症である。
【0017】
いくつかの態様では、血液障害を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法が開示される。そのような方法は、古典的補体経路の阻害剤を対象に投与することを含み、対象は、血液腔を含み、阻害剤は、対象の血液腔内の古典的補体経路を選択的に阻害し、それにより組織内の補体活性を温存する。本明細書に記載の本発明の任意の態様に適用され得る多数の実施形態がさらに提供される。
【図面の簡単な説明】
【0018】
【図1A】抗Ｃ１ｑ抗体（Ｍａｂ１）が、ＣＡＤにおいて血管内及び血管外の両方のＲＢＣ溶解に関連するプロセスを有効に停止させることを示している。抗Ｃ１ｑ抗体が、ＣＡＤを有する患者からの血清の存在下でＲＢＣ表面上でＣ１ｑ、Ｃ４ｄ、及びＣ３ｂ結合／活性化を阻害して血管外溶解を防止することを示している。
【図1B】抗Ｃ１ｑ抗体（Ｍａｂ１）が、ＣＡＤにおいて血管内及び血管外の両方のＲＢＣ溶解に関連するプロセスを有効に停止させることを示している。抗Ｃ１ｑ抗体が、ＣＡＤ患者からの血清によって開始した赤血球のＣ５－Ｃ９媒介性溶解を阻止して血管内溶解を防止することを示している。
【図2A】図２Ａ及び図２Ｂは、抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、Ｍａｂ１）及び抗Ｃ１ｓ（例えば、ＴＮＴ００９）抗体が補体媒介性溶血を阻害することを示している。図２Ａは、抗Ｃ１ｑ抗体及びＴＮＴ００９の両方が赤血球の抗体／補体誘導性溶解を阻害することを示している。図２Ｂは、抗Ｃ１ｑ抗体のみが標的細胞に対するＣ１ｑの上流結合を阻害することを示している。ＲＢＣに対するＣ１ｑ結合は、ＴＮＴ００９によって影響を受けない。Ｃ１ｑは、赤血球に沈着した３つの主要なオプソニン／免疫細胞リガンドのうちの１つである。
【図2B】図２Ａ及び図２Ｂは、抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、Ｍａｂ１）及び抗Ｃ１ｓ（例えば、ＴＮＴ００９）抗体が補体媒介性溶血を阻害することを示している。図２Ａは、抗Ｃ１ｑ抗体及びＴＮＴ００９の両方が赤血球の抗体／補体誘導性溶解を阻害することを示している。図２Ｂは、抗Ｃ１ｑ抗体のみが標的細胞に対するＣ１ｑの上流結合を阻害することを示している。ＲＢＣに対するＣ１ｑ結合は、ＴＮＴ００９によって影響を受けない。Ｃ１ｑは、赤血球に沈着した３つの主要なオプソニン／免疫細胞リガンドのうちの１つである。
【図3】抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、Ｍａｂ１）が、古典的補体カスケードを選択的に阻害し、抗Ｃ５とは異なり、レクチン経路及び代替経路をインタクトなままとして、正常な免疫機能を発揮することを示している。
【図4】ＣＡＤ患者における補体枯渇／消費の血清バイオマーカーを示している。Ｃ５ではなくＣ４及びＣ２の減少は、早期補体成分の消費と共に早期補体カスケードの過剰活性化を示している。
【図5】霊長類における抗Ｃ１ｑ抗体断片（例えば、ＦａｂＡ）の皮下投与でのＲＢＣ溶解の阻害を示している。
【図6A】ＣＡＤ患者からのサンプルにおける抗Ｃ１ｑ抗体（Ｍａｂ２）及びＦａｂＡでの血清溶血及び補体沈着の用量依存性阻害を示している。Ｍａｂ２の効果を示している。
【図6B】ＣＡＤ患者からのサンプルにおける抗Ｃ１ｑ抗体（Ｍａｂ２）及びＦａｂＡでの血清溶血及び補体沈着の用量依存性阻害を示している。ＦａｂＡの効果を示している。
【図7A】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。異なるインキュベーション条件における補体活性化を示すグラフである。健康ドナーからの血漿をＥＤＴＡ（１０ｍＭ）もしくはＥＧＴＡ（１０ｍＭ）±ＭｇＣｌ２（１０ｍＭ）と共にまたは緩衝液と共にインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンと共にインキュベーションし、補体活性化を抗原～Ｃ３ｅ捕捉ＥＬＩＳＡアッセイによって測定した。＊＊＊ｐ＜０．０００１。３つの異なる場合について試験された３つのドナーを含む代表的な実験からの結果が示されている。
【図7B】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。異なるインキュベーション条件における補体活性化を示すグラフである。健康ドナーからの血漿をＣｌ－阻害剤（１０及び２０ＩＵ／ｍＬ）と共にまたは伴わずにインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンと共にインキュベーションし、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を抗原－Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡアッセイによって決定した。＊＊＊ｐ＜０ ０００１。
【図7C】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。様々なインキュベーション条件におけるＢ細胞に対する抗ＰＦ４／ヘパリン（ＫＫＯ）の結合を示すヒストグラムである。重複ピークは、緩衝液対照（縞線）と、それに続くＰＦ４、ＰＦ４／ヘパリン＋ＥＤＴＡ、ＰＦ４／ヘパリン＋ＥＧＴＡ＋ＭｇＣｌ２、及びＰＦ４／ヘパリン＋ＥＧＴＡを表す。ピーク１は、ＰＦ４／ヘパリンを表す。
【図7D】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。様々なインキュベーション条件におけるＢ細胞に対する抗Ｃ３ｅの結合を示すヒストグラムである。重複ピークは、ＰＦ４／ヘパリン＋ＥＤＴＡ、ＰＦ４／ヘパリン＋ＥＧＴＡ、ＰＦ４／ヘパリン＋ＥＧＴＡ＋ＭｇＣｌ２、及び緩衝液対照（縞線）、及びＰＦ４を表す。ピーク１は、ＰＦ４／ヘパリンを表す。
【図7E】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。様々な抗体の存在下での補体活性化を示すグラフである。健康ドナーからの血漿を様々な濃度の抗Ｃｌｑ抗体、抗ＭＢＬ抗体または対照抗体（０～１００ｕｇ／ｍＬ）と共にインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンを添加し、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を抗原－Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡアッセイによって決定した。抗体が添加されなかった条件と比較して、＊ｐ＜０．０５、＊＊ｐ＜０．００１、＊＊＊ｐ＜０．０００１。３つの異なる場合について試験された３つのドナーを含む代表的な実験からの結果が示されている。
【図7F】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。様々なインキュベーション条件におけるＢ細胞に対する抗ＰＦ４／ヘパリンの結合を示すヒストグラムである。ピークは、緩衝液対照（縞線）、抗Ｃｌｑ＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク１）、抗ＭＢＬ＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク２）、ＰＦ４／ヘパリン（ピーク３）、及びＭＳ ＩｇＧ１＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク４）を表す。
【図7G】ＰＦ４／ヘパリンが古典的経路によって補体を活性化させることを示している。様々なインキュベーション条件におけるＢ細胞に対する抗Ｃ３ｃの結合を示すヒストグラムである。ピークは、緩衝液対照（縞線）、抗Ｃｌｑ＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク１）、抗ＭＢＬ＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク２）、ＰＦ４／ヘパリン（ピーク３）、及びＭＳ ＩｇＧ１＋ＰＦ４／ヘパリン（ピーク４）を表す。
【図8】ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化が血漿／血清ＩｇＭレベルと相関することを示している。図８は、異なるドナーによるＰＦ４／ヘパリン誘導性Ｃ’活性化（ＥＬＩＳＡベースの抗原捕捉アッセイによって決定される）及びそれらの血漿ＩｇＭレベル（プロテオミクス分析によって定量される）を示すグラフである。ｘ軸上の各点について、左の棒はＣ３ｅを表し、右の棒はＩｇＭを表す。
【図9】５＋１ｍｇ／ｋｇ及び５＋２ｍｇ／ｋｇで投薬された動物における血清遊離ＦａｂＡレベルを示している。定量の下限＝５ｎｇ／ｍＬ。
【図10】５＋２ｍｇ／ｋｇのＦａｂＡで処置された動物からの血漿における遊離Ｃ１ｑの減少を示している。定量の下限＝１．１μｇ／ｍＬ。
【図11】ＦａｂＡの毎日の反復皮下投薬の後に血清溶血が阻害されたことを示している。
【図12A】Ｍａｂ１及びＦａｂＡについてのクリアランスデータを示している。Ｍａｂ１ １５ｍｐｋ ＩＶが２５０，０００ｎｇ／ｍＬのピーク血清遊離Ｍａｂ１レベルをもたらすことを示している。遊離薬物レベルは、４日目まで上昇したままであり、５日目に検出未満のレベルまで消失する。
【図12B】Ｍａｂ１及びＦａｂＡについてのクリアランスデータを示している。ＦａｂＡ １０ｍｐｋ ＩＶが、１２０００ｎｇ／ｍＬのピーク薬物レベルをもたらし、８時間までに検出限度未満まで低下する薬物レベルで非常に急速に消失することを示している。Ｆａｂ分子の推定半減期は２～３時間である。
【図12C】Ｍａｂ１及びＦａｂＡについてのクリアランスデータを示している。ＦａｂＡ ３ｍｐｋ ＳＣが、遊離薬物レベルの極めて緩やかな増加を示し、単回投薬後２４時間の時点で測定可能であることを示している。
【図13】ｗＡＩＨＡ患者からのサンプルにおける補体沈着及び抗Ｃ１ｑ抗体（Ｍａｂ２）での沈着の阻害を示している。
【発明を実施するための形態】
【0019】
総論
本開示は一般に、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法に関する。
本開示は一般に、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法に関する。
【0020】
本発明の血液障害の中には様々な病因が存在する；しかしながら、本発明の血液障害は通常、血液成分及び細胞、ならびに血管系及び非常に血管に富む組織内の関連する細胞での阻害されない補体活性化によって特性化される。これらの細胞での補体活性化は、免疫細胞の動員及び攻撃につながり得る補体成分の沈着をもたらす。それはまた、補体及び組織因子を発現し得る細胞由来微小胞の放出をもたらし、これにより炎症を促進し得る。赤血球上の補体沈着は、血管内または血管外溶血及び／または血栓形成促進性である赤血球由来微小胞の放出を引き起こし得る。補体沈着はまた、血管系内の細胞、例えば、内皮細胞上で、または非常に血管に富む組織内で、例えば、毛細血管床、糸球体、肺胞などで発生し得、これは多くの器官において血管損傷をもたらし得る。赤血球上の補体沈着はまた、血管外クリアランスの向上をもたらし得る。補体活性化は、補体カスケードの活性化を阻止する阻害剤によって防止され得る。そのような阻害剤は、血液細胞における、または血管系の関連する細胞及び非常に血管に富む組織における特定の補体タンパク質の発現を阻止し、補体活性化を誘導するシグナル伝達分子を妨害し、血液細胞における、または関連する細胞及び血管に富む組織における補体阻害剤の発現を上方制御し、またはそうでなければ血液障害または血液学的障害における補体の役割を妨害し得る。
【0021】
例えば、慢性溶血性疾患患者にはしばしば、重度の貧血が現れる。寒冷凝集素症（ＣＡＤ）及び温式自己免疫性溶血性貧血（ｗＡＩＨＡ）において、赤血球（ＲＢＣ）に対する自己反応性抗体は、Ｃ１ｑ結合及び古典的補体活性化を引き起こす。補体活性化は、ＲＢＣクリアランスを引き起こし、慢性貧血をもたらす。補体媒介性赤血球損傷は、Ｃ１ｑが赤血球に結合した自己抗体を認識し、古典的経路を誘発させて赤血球を活性化した補体成分（Ｃ１ｑ、Ｃ４ｂ、Ｃ３ｂ）で被覆し、補体で被覆されたＲＢＣが循環から除去された場合に生じ、貧血をもたらす。ＣＡＤ及びｗＡＩＨＡにおいて、ＲＢＣは、「血管外溶解」を介してＲＢＣクリアランスを促進する３つの主要な古典的補体「オプソニン」であるＣ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂで被覆される。Ｃ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂは、ＲＢＣ除去のための細網内皮系によって脾臓及び肝臓において認識される。また、ＣＡＤ及びｗＡＩＨＡでは、ＲＢＣはＣ５ｂで被覆されて、赤血球の膜侵襲複合体（ＭＡＣ）媒介性溶解を開始させ、直接的な血管内ＲＢＣ溶解を引き起こす。抗Ｃ１ｑは、ＣＡＤにおけるＲＢＣ溶解に関連する血管内及び血管外の両方のプロセスを有効に停止させる（図１Ａ～図１Ｂ）。抗Ｃ１ｑ抗体は、補体カスケードの主要な「オプソニン」／免疫細胞リガンド（Ｃ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂ）の沈着を阻害し得る。抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号３の重鎖可変ドメイン及び配列番号７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ１抗体）及び抗Ｃ１ｓ（例えば、ＴＮＴ００９）抗体はいずれとも、直接補体媒介性溶血を阻害する（血管内溶解の阻害と一致する）（図２Ａ）一方で、抗Ｃ１ｑ抗体のみが、血管外溶解に関与するオプソニンである、標的細胞に対するＣ１ｑの上流結合を阻害する（図２Ｂ）。抗Ｃ１ｓ抗体はＣ１ｑ結合を阻止しないが、抗Ｃ３は、ＲＢＣに対するＣ１ｑまたはＣ４ｂの結合を阻止せず、抗Ｃ５は、ＲＢＣに対するＣ１ｑ、Ｃ４ｂまたはＣ３ｂ結合を阻害しないであろう。抗Ｃ１ｑのみが、血管外溶血に関与する３つすべてのオプソニンによるＲＢＣの被覆を阻害する。
【0022】
補体経路を（例えば、抗Ｃ１ｑ抗体によって）阻害することにより、血管系内または非常に血管に富む組織内の細胞上の補体沈着が停止する。血液障害において、Ｃ１ｑは、損傷組織にまたは損傷組織によって曝露された成分に結合し、細胞表面上のＣ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂ沈着及びさらなる損傷と共に補体活性化を引き起こす。血液腔内または非常に血管に富む組織内の細胞にＣ１ｑが結合することを阻止することにより、それは、組織または器官に対するさらなる補体媒介性損傷を阻止する。例えば、ループス腎炎は、血液濾過が行われる腎臓の非常に血管に富む部分内の細胞の表面上でのＣ１ｑ活性化を阻止することによって処置され得る。
【0023】
抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号３の重鎖可変ドメイン及び配列番号７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ１抗体）は、古典的経路を選択的に阻害して、レクチン経路及び代替経路の正常な免疫機能を温存する（図３）。対照的に、抗Ｃ５は、抗Ｃ３と同じように、３つすべての経路の溶血活性を阻害する（図３）。抗Ｃ３及び抗Ｃ５抗体とは異なり、抗Ｃ１ｑ抗体は、レクチン経路及び代替経路をそのままにして、正常な免疫機能を発揮する。ＣＡＤ患者における補体枯渇／消費の血清バイオマーカーは、追加の評価を提供する。Ｃ５ではなくＣ４及びＣ２の減少は、早期補体成分の消費と共に早期補体カスケードの慢性過剰活性化と一致する（図４）。ＣＡＤは、霊長類におけるＲＢＣ溶解を阻害するために抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ ＦａｂであるＦａｂＡ）の皮下投与によって処置され得る（図５）。
【0024】
Ｃ１ｑに対するＦａｂ対完全抗体（ｗｈｏｌｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ）の投与間の差異は、全身性Ｃ１ｑ阻害の程度である。全長抗体の長い半減期を考慮すると、抗体は、全長抗体の投与後に長い時間（例えば、数日）、血液腔内に留まる。これにより、抗体は、組織に浸透し、全身にわたってＣ１ｑ活性を阻害することが可能となる。例えば、１０ｍｇ／ｋｇの全長抗体は、血液腔内で数日間持続し、組織に浸透して全身にわたってＣ１ｑを阻害するための時間を有するであろう。いくつかの状況では、他の場所ではＣ１ｑ機能を許容しつつ、血管疾患の処置（疾患のための本質的「局所処置」）のためにＣ１ｑ阻害を血管部分に限定することが好ましい場合がある。この目的のため、高い親和性及びより短い半減期を有するＦａｂ断片は、皮下または静脈内に投与される。例えば、１０ｍｇ／ｋｇ（または０．３ｍｇ／Ｋｇ～２０ｍｇ／Ｋｇ）のＦａｂがＩＶで与えられる場合、遊離薬物は急速に消失する（≦８時間）－しかしながら、循環中のＣ１ｑに結合した薬物は存続するので、Ｃ１ｑは、それが置き換わるまで約２４時間阻害されたままである。
【0025】
１つのそのような用途では、ＣＡＤは、慢性であるが、通常は生命を脅かさない疾患であり、概ね高齢者で生じる。そのような場合、血管腔におけるＣ１ｑを選択的に阻害してＲＢＣを保護する一方で、Ｃ１ｑがその正常な免役機能を身体の他の場所で発揮することが可能になるという安全上の利点が存在し得る。この目的は、抗Ｃ１ｑ一価Ｆａｂ（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片（「ＦａｂＡ」））の皮下自己投与によって達成され得る。一価Ｆａｂの極めて高い親和性（１０ｐＭ）により、薬物は、Ｃ１ｑが循環中で移動している間、Ｃ１ｑにしっかりと結合したままである。遊離薬物（Ｃ１ｑに結合していない）は、循環から急速に消失し、組織に入らない。循環Ｃ１ｑの機能は、血液中のＣ１ｑのターンオーバー（２４～４８時間）で元に戻る（図５）。抗Ｃ１ｑ一価Ｆａｂは、例えば、毎日、皮下投薬され得る。抗Ｃ１ｑ一価Ｆａｂは、２４時間毎に（または、Ｆａｂコンストラクトがどのくらいの速さで皮膚から吸収されるかに応じて、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回）０．３～１０ｍｇ／ｋｇで皮下に投薬され、循環中のＲＢＣ表面での補体活性化を十分に阻害し、それにより血管内及び血管外の両方のＲＢＣ溶解を防止し得る（ＣＡＤにおいて、「血管外」溶解は、補体で被覆された循環ＲＢＣのクッパー細胞の捕捉によって肝臓で生じる）。しかしながら、投与後、抗Ｃ１ｑ一価Ｆａｂ（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片）は、血液腔中のＣ１ｑを選択的に阻害し、それにより循環ＲＢＣ上の補体沈着を防止する一方で、組織Ｃ１ｑが正常な免疫機能を保持することを可能とする。
【0026】
短い循環半減期を有する、Ｃ１ｑに対する高親和性抗体のＦａｂ断片は、毎日の皮下投与で２４時間、血液腔中のＣ１ｑの活性を十分に抑制し得る。その短い循環半減期は、全身性阻害（すなわち、組織におけるＣ１ｑの阻害）の程度を制限し、それにより血液腔外のＣ１ｑの機能を温存するであろう。
【0027】
Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓなどの補体因子の活性の中和は、古典的補体活性を阻害し、血管部分の補体媒介性障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＣＯＶＩＤ））、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を遅らせ、または予防する。古典的補体経路の阻害は、レクチン補体経路及び代替補体経路をインタクトなままとして、それらの正常な免疫機能を発揮する。血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））におけるＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓなどの補体因子を中和することに関する方法が本明細書に開示される。
【0028】
本開示で挙げられるすべての配列は、米国特許出願番号１４／９３３，５１７、米国特許出願番号１４／８９０，８１１、米国特許番号８，８７７，１９７、米国特許番号９，７０８，３９４、米国特許出願番号１５／３６０，５４９、米国特許番号９，５６２，１０６、米国特許番号１０，４５０，３８２、米国特許番号１０，４５７，７４５、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０２２４６２（これらの各々は、それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0029】
ある特定の態様では、本明細書では、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法であって、補体経路の阻害剤を対象に投与することを含む、方法が開示される。
【0030】
全長抗体は、組換えＤＮＡ操作技術の使用によって調製され得る。そのような操作バージョンには、例えば、天然抗体のアミノ酸配列内にまたはアミノ酸配列への挿入、欠失または変化によって天然抗体可変領域から作製されるものが含まれる。このタイプの特定の例には、１つ目の抗体からの少なくとも１つのＣＤＲ及び任意に１つ以上のフレームワークアミノ酸及び２つ目の抗体からの可変領域ドメインの残りを含有するそれらの操作された可変領域ドメインが含まれる。抗体をコードするＤＮＡは、全長抗体をコードするＤＮＡの所望の部分以外のすべてを欠失させることによって調製され得る。キメラ化抗体をコードするＤＮＡは、ヒト定常領域を実質的にまたは独占的にコードするＤＮＡ、及びヒト以外の哺乳動物の可変領域の配列に実質的にまたは独占的に由来する可変領域をコードするＤＮＡを組み換えることによって調製され得る。ヒト化抗体をコードするＤＮＡは、対応するヒト抗体領域に実質的にまたは独占的に由来する定常領域及び相補性決定領域（ＣＤＲ）以外の可変領域をコードするＤＮＡ、及びヒト以外の哺乳動物に実質的にまたは独占的に由来するＣＤＲをコードするＤＮＡを組み換えることによって調製され得る。
【0031】
抗体をコードするＤＮＡ分子の好適な供給源には、全長抗体を発現するハイブリドーマなどの細胞が含まれる。例えば、抗体は、抗体の重鎖及び／または軽鎖をコードする発現ベクターを発現する宿主細胞から単離され得る。
【0032】
抗体断片及び／または抗体誘導体はまた、抗体可変及び定常領域をコードするＤＮＡの操作及び再発現を含む組換えＤＮＡ操作技術の使用によって調製され得る。標準的な分子生物技術は、所望により、さらなるアミノ酸またはドメインを改変、付加または欠失させるために使用され得る。可変または定常領域に対する任意の変化は、依然として、本明細書で使用される用語「可変」及び「定常」領域に包含される。いくつかの例では、ＣＨ１ドメインの翻訳が鎖間システインで停止するように、ＣＨ１の鎖間システインをコードするコドンの直後に終止コドンを導入することによって抗体断片を生成するためにＰＣＲが使用される。好適なＰＣＲプライマーを設計するための方法は当該技術分野でよく知られており、抗体ＣＨ１ドメインの配列は容易に利用可能である。いくつかの実施形態では、終止コドンは、部位特異的変異誘発技術を使用して導入され得る。
【0033】
本開示の抗体は、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥならびにそのサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む）を含む任意の抗体アイソタイプ（「クラス」）に由来し得る。ある特定の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び軽鎖は、ＩｇＧに由来する。抗体の重鎖及び／または軽鎖は、マウスＩｇＧまたはヒトＩｇＧに由来し得る。ある特定の他の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び／または軽鎖は、ヒトＩｇＧ１に由来する。さらに他の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び／または軽鎖は、ヒトＩｇＧ４に由来する。
【0034】
いくつかの実施形態では、阻害剤は、抗Ｃｌｑ抗体、抗Ｃｌｒ抗体、または抗Ｃｌｓ抗体などの抗体である。抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間、またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得る。抗Ｃ１ｒ抗体は、Ｃ１ｒとＣ１ｑとの間、またはＣ１ｒとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得る。抗Ｃ１ｒ抗体は、Ｃ１ｒの触媒活性を阻害し得、または抗Ｃ１ｒ抗体は、ｐｒｏ－Ｃ１ｒの活性プロテアーゼへの処理を阻害し得る。抗Ｃ１ｓ抗体は、Ｃ１ｓとＣ１ｑとの間、またはＣ１ｓとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｓとＣ２もしくはＣ４との間の相互作用を阻害し得、または抗Ｃ１ｓ抗体は、Ｃ１ｓの触媒活性を阻害し得、またはそれは、ｐｒｏ－Ｃ１ｓの活性プロテアーゼへの処理を阻害し得る。いくつかの例では、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑ、Ｃ１ｒまたはＣ１ｓのクリアランスを引き起こす。
【0035】
本明細書で開示される抗体は、例えば、哺乳動物Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ、好ましくはヒトＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合する、モノクローナル抗体であり得る。抗体は、マウス抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、抗体断片、またはその抗体誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。抗体は、ヒトへの投与に好適な十分なヒト配列を有するキメラ抗体であり得る。抗体は、グリコシル化または非グリコシル化であり得；いくつかの実施形態では、抗体は、例えば、ＣＨＯ細胞における翻訳後修飾によって生成されるグリコシル化パターンで、グリコシル化される。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｅ．ｃｏｌｉで生成される。
【0036】
本開示の抗体はまた、治療剤、例えば、抗炎症タンパク質、神経治療剤、抗ウイルス剤、抗寄生虫剤、抗細菌剤、内分泌薬、代謝薬、マイトトキシン、化学療法薬、またはｓｉＲＮＡに共有結合され得る。
【0037】
いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、赤血球上へのＣ３沈着を減少させる；例えば、いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、ＲＢＣ上へのＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着を減少させる。いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、補体媒介性赤血球溶解を阻害する。本明細書に開示される抗体は、血小板上へのＣ３沈着を減少させ得る；例えば、いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、血小板上へのＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着を減少させる。
【0038】
本開示の抗体は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合し、その生物学的活性を阻害し得る。例えば、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（５）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（６）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（７）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（８）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（９）Ｂアミロイドに対するＣ１ｑ結合、または（１０）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合。他の実施形態では、Ｃ１ｑの生物学的活性は、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化である。
【0039】
いくつかの実施形態では、ＣＨ５０溶血は、ヒト、マウス、及び／またはラットＣＨ５０溶血を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～少なくとも約９５％を中和することが可能である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＨ５０溶血の５０％、６０％、７０％、８０、９０％、または１００％を中和することが可能である。抗体はまた、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能であり得る。
【0040】
補体活性を測定するための他のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイには、補体活性化中に形成する補体成分または複合体の分割生成物の測定のためのＥＬＩＳＡアッセイが含まれる。古典的経路を介する補体活性化は、血清中のＣ４ｄ及びＣ４のレベルを追跡することによって測定され得る。代替経路の活性化は、循環におけるＢｂまたはＣ３ｂＢｂＰ複合体のレベルを評価することによってＥＬＩＳＡで測定され得る。ｉｎ ｖｉｔｒｏ抗体媒介性補体活性化アッセイもまた、Ｃ３ａ生成の阻害を評価するために使用され得る。
【0041】
本開示の抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、多重特異性抗体、その抗体断片、またはその誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。
【0042】
本開示の抗体はまた、抗体断片、例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子であり得る。
【0043】
本明細書では、第２の薬剤、例えば、第２の抗体または第２の阻害剤を対象に投与する方法が開示される。抗体は、抗Ｃｌｑ抗体、抗Ｃｌｒ抗体、または抗Ｃｌｓ抗体であり得る。阻害剤は、抗体依存性細胞傷害、代替補体活性化経路の阻害剤；及び／または自己抗体と自己抗原との間の相互作用の阻害剤であり得る。
【0044】
いくつかの実施形態では、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を発症する対象のリスクを決定する方法であって、（ａ）抗体（すなわち、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体）を対象に投与することであって、抗体は、検出可能な標識に連結されている、投与すること；（ｂ）検出可能な標識を検出して、対象におけるＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの量または位置を測定すること；及び（ｃ）Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの１つ以上の量または位置を参照と比較することを含み、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を発症するリスクは、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの１つ以上の量または位置と参照との比較に基づいて特性化される、方法が提供される。検出可能な標識は、核酸、オリゴヌクレオチド、酵素、放射性同位体、ビオチンまたは蛍光標識を含み得る。いくつかの例では、抗体は、ビオチン化のプロセスを使用してビオチンなどの補酵素で標識され得る。ビオチンが標識として使用される場合、抗体の検出は、アビジンまたはその細菌性対応物であるストレプトアビジンなどのタンパク質の添加によって達成される（そのいずれかが、検出可能なマーカー、例えば、前述した色素、蛍光マーカー、例えば、フルオレセイン、放射性同位体または酵素、例えば、ペルオキシダーゼに結合され得る）。いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’－ＳＨ、Ｆｖ、ｓｃＦｖ、またはＦ（ａｂ’）２断片）またはその抗体誘導体である。
【0045】
本明細書に開示される抗体はまた、標識基、例えば、放射性同位体、放射性核種、酵素基、ビオチニル基、核酸、オリゴヌクレオチド、酵素、または蛍光標識に連結され得る。標識基は、潜在的立体障害を減少させるために任意の好適な長さのスペーサー腕部を介して抗体に連結され得る。タンパク質を標識するための様々な方法が当該技術分野で知られており、そのような標識抗体を調製するために使用され得る。
【0046】
様々な投与経路が企図される。そのような投与方法には、局所、非経口、皮下、腹腔内、肺内、髄腔内、鼻腔内、及び病巣内投与が含まれるがこれらに限定されない。非経口注入には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、または皮下投与が含まれる。好適な抗体には、補体成分Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合する抗体が含まれる。そのような抗体には、モノクローナル抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、抗体断片、及び／またはその抗体誘導体が含まれる。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。
【0047】
いくつかの実施形態では、抗体は、組換え手段によって調製、発現、生成または単離され得るヒトモノクローナル抗体、例えば、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子またはそれから調製されるハイブリドーマのトランスジェニックまたはトランス染色体である動物（例えば、マウス）から単離された抗体（以下にさらに記載される）、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から単離された抗体、例えば、トランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、及び（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む任意の他の手段によって調製、発現、生成または単離された抗体である。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列及び／または非生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する。しかしながら、ある特定の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、ｉｎ ｖｉｔｒｏ変異誘発（または、ヒトＩｇ配列に対してトランスジェニックな動物が使用される場合、ｉｎ ｖｉｖｏ体細胞変異誘発）を受けてもよく、したがって、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、関連しているが、ｉｎ ｖｉｖｏでヒト抗体生殖系列レパートリー内に自然に存在しなくてもよい配列である。
【0048】
いくつかの実施形態では、抗体は、齧歯類（例えば、マウス、ラット、ハムスター及びモルモット）を（１）ヒト血漿または血清からの精製された補体成分の酵素消化に由来する天然補体成分（例えば、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ）、または（２）真核生物系または原核生物系のいずれかによって発現した組換え補体成分、またはその誘導断片で免疫することによって樹立され得るヒト化及び／またはキメラモノクローナル抗体である。他の動物、例えば、非ヒト霊長類、ヒト免疫グロブリンを発現するトランスジェニックマウス、及びヒトＢリンパ球が移植された重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスが免疫のために使用され得る。
【0049】
ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体は、病原体に対する免疫系の反応において免疫グロブリン（Ｉｇ）分子として天然に生成される。ヒト血清において８ｍｇ／ｍｌの濃度を有する優勢的な形式である約１５０ｋＤａのＩｇＧ１分子は、２つの同一の約５０ｋＤａの重鎖及び２つの同一の約２５ｋＤａの軽鎖から構成される。
【0050】
ハイブリドーマは、免疫された動物からのＢリンパ球をミエローマ細胞と融合させることによって従来の手順によって生成され得る。また、抗Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ抗体は、ファージディスプレイシステムにおいてヒトＢリンパ球からの組換え一本鎖ＦｖまたはＦａｂライブラリをスクリーニングすることによって生成され得る。ヒトＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに対するＭＡｂの特異性は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンイムノブロッティング、または他の免疫化学的技術によって試験され得る。
【0051】
スクリーニングプロセスにおいて同定された抗体の補体活性化に対する阻害活性は、代替補体経路の場合は未感作ウサギまたはモルモットＲＢＣ、または古典的補体経路の場合は感作ニワトリまたはヒツジＲＢＣを使用して溶血アッセイによって評価され得る。古典的補体経路に特異的な阻害活性を示すそれらのハイブリドーマは、限界希釈によってクローニングされる。抗体は、上述したアッセイによってヒトＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに対する特異性についての特性化のために精製される。
【0052】
抗Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ抗体の可変領域の分子構造に基づいて、分子モデリング及び合理的分子設計が使用されて、抗体の結合領域の分子構造を模倣し、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの活性を阻害する小分子が生成され、スクリーニングされ得る。これらの小分子は、ペプチド、ペプチド模倣物、オリゴヌクレオチド、または有機化合物であり得る。模倣分子は、炎症症状及び自己免疫疾患において補体活性化の阻害剤として使用され得る。代替的には、コンビナトリアル化合物のライブラリから好適な小分子を単離するためにその分野で一般的に使用される大規模スクリーニング手順が使用され得る。
【0053】
好適な投薬量は、動物モデル及び臨床試験を使用し、次いで最適な投薬量を決定するための従来の方法論に従うこと、すなわち、様々な投薬量を投与し、どの用量が望ましくない副作用を伴わずに好適な有効性を提供するのかを決定することを含む、多様なよく知られている方法論を使用して当業者によって決定され得る。
【0054】
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名づけられた。
【0055】
Ｆａｂ分子は、定常ドメインＣＨ２及びＣＨ３を欠く重鎖を有するＩｇ分子の人工の約５０ｋＤａの断片である。２つの異好性（ＶＬ－ＶＨ及びＣＬ－ＣＨ１）ドメイン相互作用は、Ｆａｂ分子の２つの鎖の構造の基礎にあり、これはＣＬとＣＨ１との間のジスルフィド架橋によってさらに安定化される。Ｆａｂ及びＩｇＧは、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶＬ及びＶＨに由来する（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３））によって形成される同一の抗原結合部位を有する。ＣＤＲは、抗体の超可変抗原結合部位を画定する。最も高い配列バリエーションは、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３に見られ、これは天然免疫系では、それぞれＶＬ及びＪＬ遺伝子またはＶＨ、ＤＨ及びＪＨ遺伝子の再編成によって生成される。ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３は典型的には、抗原結合部位のコアを形成する。６つのＣＤＲを接続し、提示する保存領域は、フレームワーク領域と称される。可変ドメインの三次元構造において、フレームワーク領域は、外側では超可変ＣＤＲループによって及び内側では保存ジスルフィド架橋によって連結された２つの対向する逆平行β－シートのサンドイッチを形成する。
【0056】
本明細書では、血液障害、例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症）に罹患している個体を防御または処置するための方法が開示される。血液及び内皮細胞での補体活性化は、血小板、単球、好中球、赤血球ならびに血栓性及び炎症性損傷を促進する内皮細胞を活性化する。これらの知見は、多様な臨床的病態、特に補体活性化が関与する血液障害について広い関連性を有する。補体活性化は、補体タンパク質を補体経路の阻害剤またはアンタゴニストと接触させることによって阻害される。例えば、阻害剤は、補体カスケードの活性化を阻止し得、血液細胞における特定の補体タンパク質の発現を阻止し得、補体活性化を誘導するシグナル伝達分子を妨害し得、血液細胞における補体阻害剤の発現を上方制御し得、また、そうでなければ血液障害における補体の役割を妨害する。補体活性化を防止する能力は、多様な血液障害における正常な血液機能を維持することについて重要な関連性を有する。
【0057】
本開示はまた、ａ）実施形態のいずれかからの抗体を対象に投与することであって、抗体は、検出可能な標識に連結されている、投与すること；（ｂ）検出可能な標識を検出して、対象における抗体の量または位置を測定すること；及び（ｃ）抗体の量または位置を参照と比較することであって、補体活性化に関連する血液障害を発症するリスクは、参照と比較した抗体の量の比較に基づいて特性化される、比較することによって個体における補体活性化を検出する方法を提供する。例えば、検出可能な標識は、核酸、オリゴヌクレオチド、酵素、放射性同位体、ビオチン、または蛍光標識（例えば、フルオレセイン、ローダミン、シアニン色素またはＢＯＤＩＰＹ）を含み得る。検出可能な標識は、ｘ線、ＣＴ、ＭＲＩ、超音波、ＰＥＴ及びＳＰＥＣＴのための造影剤を使用して検出され得る。
【0058】
本明細書に記載の様々な実施形態の特性のうちの１つ、いくつかまたはすべては、本明細書で提供される組成物及び方法の他の実施形態を形成するために組み合わされ得ることが理解されるべきである。本発明に関連する実施形態のすべての組み合わせは、本発明によって具体的に包含され、ありとあらゆる組み合わせが個別にかつ明確に開示されたかのように本明細書に開示される。加えて、様々な実施形態及びそれらの要素のすべての副次的組み合わせも本発明によって具体的に包含され、ありとあらゆるそのような副次的組み合わせが個別にかつ明確に本明細書に開示されたかのように本明細書に開示される。本明細書で提供される組成物及び方法のこれらの及び他の態様は、当業者に明らかになる。
【0059】
本明細書で論述される刊行物は、本出願の出願日前のそれらの開示に対してのみ提供される。本明細書におけるいずれの内容も、本発明が先行発明によりそのような刊行物に先行する資格がないことを認めるものと解釈されるべきではない。さらに、提供される出版物の日付は、実際の出版日とは異なる場合があり、別々に確認する必要があり得る。
【0060】
抗補体Ｃ１ｑ抗体
本明細書で開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑの強力な阻害剤であり、任意の期間にわたってＣ１ｑ機能の継続的阻害のために投薬され、次いでその活性が重要であり得る時点で正常なＣ１ｑ機能の回復を可能にするために任意に停止され得る。動物研究において本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体で得られた結果は、ヒト化またはヒト抗体、ならびにその断片及び／または誘導体を用いて臨床に容易に進展させることができる。
本明細書で開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑの強力な阻害剤であり、任意の期間にわたってＣ１ｑ機能の継続的阻害のために投薬され、次いでその活性が重要であり得る時点で正常なＣ１ｑ機能の回復を可能にするために任意に停止され得る。動物研究において本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体で得られた結果は、ヒト化またはヒト抗体、ならびにその断片及び／または誘導体を用いて臨床に容易に進展させることができる。
【0061】
Ｃ１ｑは、１８個のポリペプチド鎖（６個のＣ１ｑのＡ鎖、６個のＣ１ｑのＢ鎖、及び６個のＣ１ｑのＣ鎖）からなる４６０ｋＤａの大型多量体タンパク質である。Ｃ１ｒ及びＣ１ｓ補体タンパク質は、Ｃ１ｑ尾部領域に結合してＣ１複合体（Ｃ１ｑｒ２ｓ２）を形成する。
【0062】
本開示の抗体は、古典的補体活性化経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑを特異的に認識する。結合した補体因子は、限定されないが、任意の哺乳動物生物、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタを含む補体系を有する任意の生物に由来し得る。
【0063】
本明細書で使用される場合、「Ｃ１複合体」は、限定されないが、１つのＣ１ｑタンパク質、２つのＣ１ｒタンパク質、及び２つのＣ１ｓタンパク質を含み得るタンパク質複合体（例えば、Ｃ１ｑｒ２ｓ２）を指す。
【0064】
本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１複合体形成を阻害し得る。
【0065】
本明細書で使用される場合、「補体因子Ｃ１ｑ」は、野生型配列及び天然に存在するバリアント配列の両方を指す。
【0066】
本開示の抗体によって認識される補体因子Ｃ１ｑの非限定的な例は、３つのポリペプチド鎖Ａ、Ｂ、及びＣを含むヒトＣ１ｑである：
【0067】
Ｃ１ｑ，鎖Ａ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿０５７０７５．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿０１５９９１：
＞ｇｉ｜７７０５７５３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０５７０７５．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＡ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号１）
ＭＥＧＰＲＧＷＬＶＬＣＶＬＡＩＳＬＡＳＭＶＴＥＤＬＣＲＡＰＤＧＫＫＧＥＡＧＲＰＧＲＲＧＲＰＧＬＫＧＥＱＧＥＰＧＡＰＧＩＲＴＧＩＱＧＬＫＧＤＱＧＥＰＧＰＳＧＮＰＧＫＶＧＹＰＧＰＳＧＰＬＧＡＲＧＩＰＧＩＫＧＴＫＧＳＰＧＮＩＫＤＱＰＲＰＡＦＳＡＩＲＲＮＰＰＭＧＧＮＶＶＩＦＤＴＶＩＴＮＱＥＥＰＹＱＮＨＳＧＲＦＶＣＴＶＰＧＹＹＹＦＴＦＱＶＬＳＱＷＥＩＣＬＳＩＶＳＳＳＲＧＱＶＲＲＳＬＧＦＣＤＴＴＮＫＧＬＦＱＶＶＳＧＧＭＶＬＱＬＱＱＧＤＱＶＷＶＥＫＤＰＫＫＧＨＩＹＱＧＳＥＡＤＳＶＦＳＧＦＬＩＦＰＳＡ。
データベース：ＮＰ＿０５７０７５．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿０１５９９１：
＞ｇｉ｜７７０５７５３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０５７０７５．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＡ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号１）
ＭＥＧＰＲＧＷＬＶＬＣＶＬＡＩＳＬＡＳＭＶＴＥＤＬＣＲＡＰＤＧＫＫＧＥＡＧＲＰＧＲＲＧＲＰＧＬＫＧＥＱＧＥＰＧＡＰＧＩＲＴＧＩＱＧＬＫＧＤＱＧＥＰＧＰＳＧＮＰＧＫＶＧＹＰＧＰＳＧＰＬＧＡＲＧＩＰＧＩＫＧＴＫＧＳＰＧＮＩＫＤＱＰＲＰＡＦＳＡＩＲＲＮＰＰＭＧＧＮＶＶＩＦＤＴＶＩＴＮＱＥＥＰＹＱＮＨＳＧＲＦＶＣＴＶＰＧＹＹＹＦＴＦＱＶＬＳＱＷＥＩＣＬＳＩＶＳＳＳＲＧＱＶＲＲＳＬＧＦＣＤＴＴＮＫＧＬＦＱＶＶＳＧＧＭＶＬＱＬＱＱＧＤＱＶＷＶＥＫＤＰＫＫＧＨＩＹＱＧＳＥＡＤＳＶＦＳＧＦＬＩＦＰＳＡ。
【0068】
Ｃ１ｑ，鎖Ｂ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿０００４８２．３；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿０００４９１．３：
＞ｇｉ｜８７２９８８２８｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０００４８２．３｜補体Ｃｌｑ
サブコンポーネントサブユニットＢ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号２）
ＭＭＭＫＩＰＷＧＳＩＰＶＬＭＬＬＬＬＬＧＬＩＤＩＳＱＡＱＬＳＣＴＧＰＰＡＩＰＧＩＰＧＩＰＧＴＰＧＰＤＧＱＰＧＴＰＧＩＫＧＥＫＧＬＰＧＬＡＧＤＨＧＥＦＧＥＫＧＤＰＧＩＰＧＮＰＧＫＶＧＰＫＧＰＭＧＰＫＧＧＰＧＡＰＧＡＰＧＰＫＧＥＳＧＤＹＫＡＴＱＫＩＡＦＳＡＴＲＴＩＮＶＰＬＲＲＤＱＴＩＲＦＤＨＶＩＴＮＭＮＮＮＹＥＰＲＳＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＴＹＨＡＳＳＲＧＮＬＣＶＮＬＭＲＧＲＥＲＡＱＫＶＶＴＦＣＤＹＡＹＮＴＦＱＶＴＴＧＧＭＶＬＫＬＥＱＧＥＮＶＦＬＱＡＴＤＫＮＳＬＬＧＭＥＧＡＮＳＩＦＳＧＦＬＬＦＰＤＭＥＡ。
データベース：ＮＰ＿０００４８２．３；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿０００４９１．３：
＞ｇｉ｜８７２９８８２８｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０００４８２．３｜補体Ｃｌｑ
サブコンポーネントサブユニットＢ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号２）
ＭＭＭＫＩＰＷＧＳＩＰＶＬＭＬＬＬＬＬＧＬＩＤＩＳＱＡＱＬＳＣＴＧＰＰＡＩＰＧＩＰＧＩＰＧＴＰＧＰＤＧＱＰＧＴＰＧＩＫＧＥＫＧＬＰＧＬＡＧＤＨＧＥＦＧＥＫＧＤＰＧＩＰＧＮＰＧＫＶＧＰＫＧＰＭＧＰＫＧＧＰＧＡＰＧＡＰＧＰＫＧＥＳＧＤＹＫＡＴＱＫＩＡＦＳＡＴＲＴＩＮＶＰＬＲＲＤＱＴＩＲＦＤＨＶＩＴＮＭＮＮＮＹＥＰＲＳＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＴＹＨＡＳＳＲＧＮＬＣＶＮＬＭＲＧＲＥＲＡＱＫＶＶＴＦＣＤＹＡＹＮＴＦＱＶＴＴＧＧＭＶＬＫＬＥＱＧＥＮＶＦＬＱＡＴＤＫＮＳＬＬＧＭＥＧＡＮＳＩＦＳＧＦＬＬＦＰＤＭＥＡ。
【0069】
Ｃ１ｑ，鎖Ｃ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース：ＮＰ＿００１１０７５７３．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿００１１１４１０１．１：
＞ｇｉ｜１６６２３５９０３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００１１０７５７３．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＣ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号３）
ＭＤＶＧＰＳＳＬＰＨＬＧＬＫＬＬＬＬＬＬＬＬＰＬＲＧＱＡＮＴＧＣＹＧＩＰＧＭＰＧＬＰＧＡＰＧＫＤＧＹＤＧＬＰＧＰＫＧＥＰＧＩＰＡＩＰＧＩＲＧＰＫＧＱＫＧＥＰＧＬＰＧＨＰＧＫＮＧＰＭＧＰＰＧＭＰＧＶＰＧＰＭＧＩＰＧＥＰＧＥＥＧＲＹＫＱＫＦＱＳＶＦＴＶＴＲＱＴＨＱＰＰＡＰＮＳＬＩＲＦＮＡＶＬＴＮＰＱＧＤＹＤＴＳＴＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＶＹＨＡＳＨＴＡＮＬＣＶＬＬＹＲＳＧＶＫＶＶＴＦＣＧＨＴＳＫＴＮＱＶＮＳＧＧＶＬＬＲＬＱＶＧＥＥＶＷＬＡＶＮＤＹＹＤＭＶＧＩＱＧＳＤＳＶＦＳＧＦＬＬＦＰＤ。
データベース：ＮＰ＿００１１０７５７３．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：ＮＭ＿００１１１４１０１．１：
＞ｇｉ｜１６６２３５９０３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００１１０７５７３．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＣ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号３）
ＭＤＶＧＰＳＳＬＰＨＬＧＬＫＬＬＬＬＬＬＬＬＰＬＲＧＱＡＮＴＧＣＹＧＩＰＧＭＰＧＬＰＧＡＰＧＫＤＧＹＤＧＬＰＧＰＫＧＥＰＧＩＰＡＩＰＧＩＲＧＰＫＧＱＫＧＥＰＧＬＰＧＨＰＧＫＮＧＰＭＧＰＰＧＭＰＧＶＰＧＰＭＧＩＰＧＥＰＧＥＥＧＲＹＫＱＫＦＱＳＶＦＴＶＴＲＱＴＨＱＰＰＡＰＮＳＬＩＲＦＮＡＶＬＴＮＰＱＧＤＹＤＴＳＴＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＶＹＨＡＳＨＴＡＮＬＣＶＬＬＹＲＳＧＶＫＶＶＴＦＣＧＨＴＳＫＴＮＱＶＮＳＧＧＶＬＬＲＬＱＶＧＥＥＶＷＬＡＶＮＤＹＹＤＭＶＧＩＱＧＳＤＳＶＦＳＧＦＬＬＦＰＤ。
【0070】
したがって、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質のポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合し得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑまたはそのホモログ、例えば、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタＣ１ｑのポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはその断片またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。
【0071】
好適な抗体には、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法のための、補体Ｃ１ｑタンパク質に結合する抗体（すなわち、本明細書で抗Ｃ１ｑ抗体及びＣ１ｑ抗体とも称される抗補体Ｃ１ｑ抗体）及びそのような抗体をコードする核酸分子が含まれる。
【0072】
以下の２０段落で挙げられるすべての配列は、米国特許番号９，７０８，３９４（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0073】
抗体Ｍ１（Ｍａｂ２）の軽鎖及び重鎖可変ドメイン配列
標準的な技術を使用して、抗体Ｍ１の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードする核酸及びアミノ酸配列を決定した。抗体Ｍ１の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
標準的な技術を使用して、抗体Ｍ１の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードする核酸及びアミノ酸配列を決定した。抗体Ｍ１の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
【0074】
【0075】
軽鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。いくつかの実施形態では、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ１は配列ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ２は配列ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ３は配列ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を有する。
【0076】
抗体Ｍ１の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
【0077】
【0078】
重鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。いくつかの実施形態では、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ１は配列ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ２は配列ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ３は配列ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を有する。
【0079】
軽鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、
ＧＡＴＧＴＣＣＡＧＡＴＡＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＴＴＡＴＣＴＴＧＣＴＧＣＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＧＡＡＡＣＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＣＡＧＧＧＣＡＡＧＴＡＡＧＡＧＣＡＴＴＡＡＣＡＡＡＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＡＡＡＣＴＡＡＴＡＡＧＣＴＴＣＴＴＡＴＣＴＡＣＴＣＴＧＧＡＴＣＣＡＣＴＴＴＧＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＴＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＡＣＡＴＡＡＴＧＡＡＴＡＣＣＣＧＣＴＣＡＣＧＴＴＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＡＡ（配列番号１２）
と決定した。
ＧＡＴＧＴＣＣＡＧＡＴＡＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＴＴＡＴＣＴＴＧＣＴＧＣＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＧＡＡＡＣＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＣＡＧＧＧＣＡＡＧＴＡＡＧＡＧＣＡＴＴＡＡＣＡＡＡＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＡＡＡＣＴＡＡＴＡＡＧＣＴＴＣＴＴＡＴＣＴＡＣＴＣＴＧＧＡＴＣＣＡＣＴＴＴＧＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＴＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＡＣＡＴＡＡＴＧＡＡＴＡＣＣＣＧＣＴＣＡＣＧＴＴＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＡＡ（配列番号１２）
と決定した。
【0080】
重鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、
ＣＡＧＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＡＧＴＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＴＣＴＴＣＴＧＧＣＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＣＡＡＧＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＴＡＡＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＡＧＡＣＡＡＡＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＣＡＡＣＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＴＣＧＧＣＧＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号１３）
と決定した。
ＣＡＧＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＡＧＴＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＴＣＴＴＣＴＧＧＣＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＣＡＡＧＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＴＡＡＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＡＧＡＣＡＡＡＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＣＡＡＣＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＴＣＧＧＣＧＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号１３）
と決定した。
【0081】
物質の寄託
以下の物質は、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ Ｐａｔｅｎｔ Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０－２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された：
以下の物質は、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ Ｐａｔｅｎｔ Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０－２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された：
【0082】
培養物の入手が特許出願の係属中及び３０年間、または最新の請求から５年後、または特許の有効期間のうち長い方まで利用可能となることを保証する条件下でＭ１抗体を生成するハイブリドーマ細胞株（マウスハイブリドーマＣ１ｑＭ１ ７７８８－１（Ｍ）０５１６１３）がＡＴＣＣに寄託された。寄託物は、その期間中に生存できなくなった場合に置き換えられる。寄託物は、本出願の対応出願、またはその子孫が出願された国における外国特許法によって要求されるように利用可能である。しかしながら、寄託物の利用可能性は、政府の措置によって付与された特許権を逸脱して本発明を実施するためのライセンスを構成するものではないことが理解されるべきである。
【0083】
本明細書では、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含む抗Ｃ１ｑ抗体を投与する方法が開示される。抗体は、少なくともヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、またはラットＣ１ｑに結合し得る。抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはヒト抗体であり得る。抗体は、モノクローナル抗体、その抗体断片、及び／またはその抗体誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。軽鎖可変ドメインは、アクセッション番号ＰＴＡ－１２０３９９で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって生成されるモノクローナル抗体Ｍ１のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む。重鎖可変ドメインは、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３９９で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって生成されるモノクローナル抗体Ｍ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0084】
いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、ＨＶＲ－Ｌ１の配列番号５、ＨＶＲ－Ｌ２の配列番号６、ＨＶＲ－Ｌ３の配列番号７、ＨＶＲ－Ｈ１の配列番号９、ＨＶＲ－Ｈ２の配列番号１０、及びＨＶＲ－Ｈ３の配列番号１１のうちの１つ以上を含む。
【0085】
抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。
【0086】
本明細書では、Ｃ１ｑと自己抗体との間の相互作用を阻害する抗Ｃ１ｑ抗体を投与する方法が開示される。好ましい実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを引き起こす。
【0087】
いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間及びＣ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと別の抗体、例えば、自己抗体との間の相互作用を阻害する。好ましい実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを引き起こす。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２．５：１；２．０：１；１．５：１；または１．０：１未満の化学量論でそれぞれの相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ抗体は、およそ等モルの濃度のＣ１ｑ及び抗Ｃ１ｑ抗体で、Ｃ１ｑ－Ｃ１ｓ相互作用などの相互作用を阻害する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１未満；１９．５：１未満；１９：１未満；１８．５：１未満；１８：１未満；１７．５：１未満；１７：１未満；１６．５：１未満；１６：１未満；１５．５：１未満；１５：１未満；１４．５：１未満；１４：１未満；１３．５：１未満；１３：１未満；１２．５：１未満；１２：１未満；１１．５：１未満；１１：１未満；１０．５：１未満；１０：１未満；９．５：１未満；９：１未満；８．５：１未満；８：１未満；７．５：１未満；７：１未満；６．５：１未満；６：１未満；５．５：１未満；５：１未満；４．５：１未満；４：１未満；３．５：１未満；３：１未満；２．５：１未満；２．０：１未満；１．５：１未満；または１．０：１未満の化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｒ及びＣ１ｓの両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間、及び／またはＣ１ｑとＣ１ｒ及びＣ１ｓの両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖に結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＢ鎖に結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＣ鎖に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｃ１ｑのＢ鎖及び／またはＣ１ｑのＣ鎖に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｂ鎖、及び／またはＣ鎖の球状ドメインに結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｃ１ｑのＢ鎖、及び／またはＣ１ｑのＣ鎖のコラーゲン様ドメインに結合する。
【0088】
本開示の抗体が２つ以上の補体因子間の相互作用、例えば、Ｃ１ｑ及びＣ１ｓの相互作用、またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する場合、抗体の存在下で生じる相互作用は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％減少し得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、２つ以上の補体因子間の相互作用を５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％減少させる。ある特定の実施形態では、抗体の存在下で生じる相互作用は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて少なくとも３０％～少なくとも９９％の範囲の量だけ減少する。
【0089】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％～少なくとも９９％の範囲の量だけ、Ｃ２またはＣ４切断を阻害する。Ｃ２またはＣ４切断を測定するための方法は、当該技術分野でよく知られている。Ｃ２またはＣ４切断に関して本開示の抗体のＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、およそ等モル濃度のＣ１ｑ及びそれぞれの抗Ｃ１ｑ抗体でＣ２またはＣ４切断を阻害する。
【0090】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％～少なくとも９９％の範囲の量だけ、自己抗体依存性及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を阻害する。自己抗体依存性及び補体依存性細胞傷害の阻害に関して本開示の抗体のＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。
【0091】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％～少なくとも９９％の範囲の量だけ、補体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＣＤＣＣ）を阻害する。ＣＤＣＣを測定するための方法は、当該技術分野でよく知られている。ＣＤＣＣ阻害に関して本開示の抗体のＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、ＣＤＣＣを阻害するが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を阻害しない。
【0092】
ヒト化抗補体Ｃ１ｑ抗体
本開示のヒト化抗体は、古典的補体経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑタンパク質に特異的に結合する。ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑ、ヒト及びマウスＣ１ｑ、ラットＣ１ｑ、またはヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、及びラットＣ１ｑに特異的に結合し得る。
本開示のヒト化抗体は、古典的補体経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑタンパク質に特異的に結合する。ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑ、ヒト及びマウスＣ１ｑ、ラットＣ１ｑ、またはヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、及びラットＣ１ｑに特異的に結合し得る。
【0093】
以下の１６段落で挙げられるすべての配列は、米国特許出願番号１４／９３３，５１７（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0094】
いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むヒトＩｇＧ４重鎖定常領域である。ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域は、Ｋａｂａｔ番号付けに従って１つ以上の改変及び／またはアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含み得る。そのような場合では、Ｆｃ領域は、位置２４８におけるロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、位置２４１におけるセリンからプロリンへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。
【0095】
ヒトＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ Ｌ２４８Ｅ）重鎖定常ドメインのアミノ酸配列は、
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４７）
である。
ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４７）
である。
【0096】
抗体は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み得、重鎖可変ドメインは、配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定のそのような実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。
【0097】
重鎖可変ドメインバリアント１（ＶＨ１）のアミノ酸配列は、
【0098】
【0099】
重鎖可変ドメインバリアント２（ＶＨ２）のアミノ酸配列は、
【0100】
【0101】
重鎖可変ドメインバリアント３（ＶＨ３）のアミノ酸配列は、
【0102】
【0103】
重鎖可変ドメインバリアント４（ＶＨ４）のアミノ酸配列は、
【0104】
【0105】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント１（Ｖκ１）のアミノ酸配列は、
【0106】
【0107】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント２（Ｖκ２）のアミノ酸配列は、
【0108】
【0109】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント３（Ｖκ３）のアミノ酸配列は、
【0110】
【0111】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント４（Ｖκ４）のアミノ酸配列は、
【0112】
【0113】
抗体は、ＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号３５～３８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号３１～３４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。
【0114】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３５の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３４の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。
【0115】
いくつかの実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｆａｂ領域を含有する重鎖可変領域及びＦｃ領域を含有する重鎖定常領域を含み、Ｆａｂ領域は本開示のＣ１ｑタンパク質に特異的に結合するが、Ｆｃ領域はＣ１ｑタンパク質に結合することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプに由来する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、補体活性を誘導することが不可能であり、及び／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、限定されないが、アミノ酸置換を含む、１つ以上の改変を含む。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、Ｋａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８に対応する位置で、及び／またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１に対応する位置でアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、ロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換である。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、セリンからプロリンへのアミノ酸置換である。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。
【0116】
抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ断片
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名づけられた。Ｆａｂ分子をＩｇＧ分子と比較した場合、Ｆａｂは、それらのより高い移動性及び組織浸透能力、それらの減少した循環半減期、抗体エフェクター機能を媒介することなく一価で抗原に結合するそれらの能力、ならびにそれらのより低い免疫原性のため、ある特定のｉｎ ｖｉｖｏ用途についてＩｇＧよりも優れていることが見出された。
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名づけられた。Ｆａｂ分子をＩｇＧ分子と比較した場合、Ｆａｂは、それらのより高い移動性及び組織浸透能力、それらの減少した循環半減期、抗体エフェクター機能を媒介することなく一価で抗原に結合するそれらの能力、ならびにそれらのより低い免疫原性のため、ある特定のｉｎ ｖｉｖｏ用途についてＩｇＧよりも優れていることが見出された。
【0117】
Ｆａｂ分子は、定常ドメインＣＨ２及びＣＨ３によって短縮された重鎖を有するＩｇ分子の人工の約５０ｋＤａの断片である。２つの異好性（ＶＬ－ＶＨ及びＣＬ－ＣＨ１）ドメイン相互作用は、Ｆａｂ分子の２つの鎖の構造の基礎にあり、これはＣＬとＣＨ１との間のジスルフィド架橋によってさらに安定化される。Ｆａｂ及びＩｇＧは、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶＬ及びＶＨに由来する（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３））によって形成される同一の抗原結合部位を有する。ＣＤＲは、抗体の超可変抗原結合部位を画定する。最も高い配列バリエーションは、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３に見られ、これは天然免疫系では、それぞれＶＬ及びＪＬ遺伝子またはＶＨ、ＤＨ及びＪＨ遺伝子の再編成によって生成される。ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３は典型的には、抗原結合部位のコアを形成する。６つのＣＤＲを接続し、提示する保存領域は、フレームワーク領域と称される。可変ドメインの三次元構造において、フレームワーク領域は、外側では超可変ＣＤＲループによって及び内側では保存ジスルフィド架橋によって連結された２つの対向する逆平行β－シートのサンドイッチを形成する。Ｆａｂ及びＩｇＧの抗原結合部位の安定性及び汎用性のこの独自の組み合わせは、疾患の診断、モニタリング、予防、及び処置のための臨床業務においてその成功を強調する。
【0118】
すべての抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片配列は、米国特許出願番号１５／３６０，５４９（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0119】
ある特定の実施形態では、本開示は、重鎖（ＶＨ／ＣＨ１）及び軽鎖（ＶＬ／ＣＬ）を含むＣ１ｑタンパク質に結合する抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片であって、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片は、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶＬ及びＶＨに由来する）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、及びＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を有する、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片を提供する。抗体Ｆａｂ断片の重鎖は、ＩｇＧ１の第１の重鎖ドメインの後で切断され（配列番号３９）、以下のアミノ酸配列を含む：
【0120】
【0121】
配列番号１の相補性決定領域（ＣＤＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。
【0122】
抗体Ｆａｂ断片の軽鎖ドメインは、以下のアミノ酸配列（配列番号４０）を含む：
【0123】
【0124】
配列番号２の相補性決定領域（ＣＤＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。
【0125】
抗補体Ｃ１ｓ抗体
好適な阻害剤には、補体Ｃ１ｓタンパク質に結合する抗体（すなわち、本明細書で抗Ｃ１ｓ抗体及びＣ１ｓ抗体とも称される抗補体Ｃ１ｓ抗体）及びそのような抗体をコードする核酸分子が含まれる。補体Ｃ１ｓは、補体カスケードにおいて上流にあり、狭い範囲の基質特異性を有するので魅力的な標的である。さらに、活性化形態のＣ１ｓに特異的に結合する抗体（例えば、限定されないが、モノクローナル抗体）を得ることが可能である。
好適な阻害剤には、補体Ｃ１ｓタンパク質に結合する抗体（すなわち、本明細書で抗Ｃ１ｓ抗体及びＣ１ｓ抗体とも称される抗補体Ｃ１ｓ抗体）及びそのような抗体をコードする核酸分子が含まれる。補体Ｃ１ｓは、補体カスケードにおいて上流にあり、狭い範囲の基質特異性を有するので魅力的な標的である。さらに、活性化形態のＣ１ｓに特異的に結合する抗体（例えば、限定されないが、モノクローナル抗体）を得ることが可能である。
【0126】
以下の２段落で挙げられるすべての配列は、米国特許出願番号１４／８９０，８１１（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0127】
ある特定の態様では、本明細書では、抗Ｃ１ｓ抗体を投与する方法が開示される。抗体は、マウス抗体、ヒト化抗体、またはキメラ抗体であり得る。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、重鎖は、５／１５／２０１３にＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞株またはその子孫（ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３５１）によって生成されるマウス抗ヒトＣ１ｓモノクローナル抗体５Ａ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、ＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含み、重鎖可変ドメインは、５／１５／２０１３にＡＴＣＣに寄託されたハイブリドーマ細胞株またはその子孫（ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３５２）によって生成されるマウス抗ヒトＣ１ｓモノクローナル抗体５Ｃ１２のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0128】
いくつかの実施形態では、抗体は、Ｃ１ｓまたはＣ１ｓプロ酵素に特異的に結合し、その生物学的活性、例えば、Ｃ１ｑに対するＣ１ｓ結合、Ｃ１ｒに対するＣ１ｓ結合、またはＣ２もしくはＣ４に対するＣ１ｓ結合を阻害する。生物学的活性は、Ｃ１ｓのタンパク質分解酵素活性、Ｃ１ｓプロ酵素の活性プロテアーゼへの変換、またはＣ２もしくはＣ４のタンパク質分解切断であり得る。ある特定の実施形態では、生物学的活性は、古典的補体活性化経路の活性化、抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、またはＣ１Ｆ溶血である。
【0129】
以下の６２段落におけるすべての配列は、Ｖａｎ Ｖｌａｓｓｅｌａｅｒ、米国特許番号８，８７７，１９７（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0130】
本明細書では、補体成分Ｃ１ｓのドメインＩＶ及びＶを包含する領域内のエピトープに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体を投与する方法が開示される。いくつかの場合では、抗体は、補体成分４（Ｃ４）に対するＣ１ｓの結合を阻害し、及び／またはＣ１ｓのプロテアーゼ活性を阻害しない。いくつかの実施形態では、方法は、高いアビディティでＣ１複合体における補体成分Ｃ１ｓに結合するヒト化モノクローナル抗体を投与することを含む。
【0131】
本明細書では、アミノ酸配列配列番号５７を含む抗体軽鎖可変領域の相補性決定領域（ＣＤＲ）の１つ以上及び／またはアミノ酸配列配列番号５８を含む抗体重鎖可変領域のＣＤＲの１つ以上を有する抗Ｃ１ｓ抗体を投与する方法が開示される。抗Ｃ１ｓ抗体は、ヒトまたはラット補体Ｃ１ｓタンパク質に結合し得る。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、補体Ｃ１ｓタンパク質によって切断される少なくとも１つの基質の切断を阻害する。
【0132】
ある特定の実施形態では、抗体は、ａ）配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、及び配列番号５６から選択されるアミノ酸配列を有する相補性決定領域（ＣＤＲ）；及び／またはｂ）配列番号６２、配列番号６３、配列番号５３、配列番号６４、配列番号６５：及び配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む。
【0133】
抗体は、アミノ酸配列配列番号５１を有するＣＤＲ－Ｌ１、アミノ酸配列配列番号５２を有するＣＤＲ－Ｌ２、アミノ酸配列配列番号５３を有するＣＤＲ－Ｌ３、アミノ酸配列配列番号５４を有するＣＤＲ－Ｈ１、アミノ酸配列配列番号５５を有するＣＤＲ－Ｈ２、及びアミノ酸配列配列番号５６を有するＣＤＲ－Ｈ３を含み得る。
【0134】
他の実施形態では、抗体は、配列番号６７のアミノ酸配列を有する可変領域の軽鎖ＣＤＲ、及び／または配列番号６８のアミノ酸配列を有する可変領域の重鎖ＣＤＲを含み得る。
【0135】
抗体は、補体成分Ｃ１ｓに特異的に結合するヒト化抗体であって、その抗体は、エピトープとの結合についてアミノ酸配列配列番号５７または配列番号６７を含む抗体軽鎖可変領域のＣＤＲの１つ以上、及び／またはアミノ酸配列配列番号５８または配列番号６８を含む抗体重鎖可変領域のＣＤＲの１つ以上を含む抗体と競合する、ヒト化抗体であり得る。
【0136】
他の例では、抗体は、補体Ｃ１ｓに特異的に結合するヒト化抗体であり得、その抗体は、ａ）補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合するヒト化抗体であって、抗体が、エピトープとの結合について配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、及び配列番号５６から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む抗体と競合する、ヒト化抗体；及びｂ）補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合するヒト化抗体であって、抗体が、エピトープとの結合について配列番号６２、配列番号６３、配列番号５３、配列番号６４、配列番号６５、及び配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む抗体と競合する、ヒト化抗体から選択される。いくつかの場合では、抗体は、エピトープとの結合についてａ）配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号６９、配列番号５５、及び配列番号５６；またはｂ）配列番号６２、配列番号６３、配列番号５３、配列番号６４、配列番号６５、及び配列番号６６を含む重鎖及び軽鎖ＣＤＲを含む抗体と競合する。
【0137】
抗体は、別々のポリペプチドに存在する軽鎖領域及び重鎖領域を含み得る。抗体は、Ｆｃ領域を含み得る。
【0138】
本明細書では、アミノ酸配列配列番号５７と９０％同一のアミノ酸配列の軽鎖可変領域、及びアミノ酸配列配列番号５８と９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む抗Ｃ１ｓ抗体が開示される。
【0139】
抗Ｃ１ｓ抗体は、抗原結合断片、Ｉｇモノマー、Ｆａｂ断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｄ断片、ｓｃＦｖ、ｓｃＡｂ、ｄＡｂ、Ｆｖ、シングルドメイン重鎖抗体、シングルドメイン軽鎖抗体、単一特異性抗体、二重特異性抗体、または多重特異性抗体から選択され得る。
【0140】
本明細書では、抗体ＩＰＮ００３（本明細書で「ＩＰＮ－Ｍ３４」または「Ｍ３４」または「ＴＮＴ００３」とも称される）が結合するエピトープへの結合について競合する抗体、例えば、抗体ＩＰＮ００３などの抗体ＩＰＮ００３の可変ドメインを含む抗体を投与する方法が開示される。
【0141】
いくつかの実施形態では、方法は、補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合する抗体を投与することを含む。いくつかの実施形態では、単離された抗Ｃ１ｓ抗体は、活性化したＣ１ｓタンパク質に結合する。いくつかの実施形態では、単離された抗Ｃ１ｓ抗体は、不活性形態のＣ１ｓに結合する。他の例では、単離された抗Ｃ１ｓ抗体は、活性化したＣ１ｓタンパク質及び不活性形態のＣ１ｓの両方に結合する。
【0142】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ４の切断を阻害するモノクローナル抗体を投与することを含み、単離されたモノクローナル抗体は、Ｃ２の切断を阻害しない。いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ２の切断を阻害するモノクローナル抗体を投与することを含み、単離されたモノクローナル抗体は、Ｃ４の切断を阻害しない。いくつかの場合では、単離されたモノクローナル抗体は、ヒト化されている。いくつかの場合では、抗体は、古典的補体経路の成分を阻害する。いくつかの場合では、抗体によって阻害される古典的補体経路の成分はＣ１ｓである。本開示はまた、Ｃ４の切断を阻害する単離されたモノクローナル抗体、または単離されたモノクローナル抗体を含む薬学的組成物をそれを必要とする個体に投与することによって、補体媒介性疾患または障害を処置する方法であって、単離されたモノクローナル抗体は、Ｃ２の切断を阻害しない、方法を提供する。
【0143】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１ｓによるＣ２またはＣ４の切断を阻害する、すなわち、Ｃ２またはＣ４のＣ１ｓ媒介性タンパク質分解切断を阻害するモノクローナル抗体を投与することを含む。いくつかの場合では、モノクローナル抗体は、ヒト化されている。いくつかの場合では、抗体は、Ｃ１ｓに対するＣ２またはＣ４の結合を阻害することによってＣ１ｓによるＣ２またはＣ４の切断を阻害する；例えば、いくつかの場合では、抗体は、Ｃ１ｓのＣ２またはＣ４結合部位に対するＣ２またはＣ４の結合を阻害することによってＣ２またはＣ４のＣ１ｓ媒介性切断を阻害する。よって、いくつかの場合では、抗体は、競合阻害剤として機能する。本開示はまた、Ｃ１ｓによるＣ２またはＣ４の切断を阻害する、すなわち、Ｃ２またはＣ４のＣ１ｓ媒介性タンパク質分解切断を阻害する単離されたモノクローナル抗体をそれを必要とする個体に投与することによって、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を処置する方法を提供する。
【0144】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１ｓによるＣ４の切断を阻害するモノクローナル抗体を投与することを含み、抗体は、Ｃ１ｓによる補体成分Ｃ２の切断を阻害せず；すなわち、抗体は、Ｃ４のＣ１ｓ媒介性切断を阻害するが、Ｃ２のＣ１ｓ媒介性切断を阻害しない。いくつかの場合では、モノクローナル抗体は、ヒト化されている。いくつかの場合では、モノクローナル抗体は、Ｃ１ｓに対するＣ４の結合を阻害するが、Ｃ１ｓに対するＣ２の結合を阻害しない。いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１ｓによるＣ４の切断を阻害する単離されたモノクローナル抗体をそれを必要とする個体に投与することによって、補体媒介性疾患または障害を処置することを含み、抗体は、Ｃ１ｓによる補体成分Ｃ２の切断を阻害せず；すなわち、抗体は、Ｃ４のＣ１ｓ媒介性切断を阻害するが、Ｃ２のＣ１ｓ媒介性切断を阻害しない。方法のいくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化されている。
【0145】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１ｓのドメインＩＶ及びＶを包含する領域内のエピトープに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体を投与することを含む。例えば、ヒト化モノクローナル抗体は、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のエピトープに特異的に結合する。いくつかの場合では、ヒト化モノクローナル抗体は、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のエピトープに特異的に結合し、Ｃ１ｓに対するＣ４の結合を阻害する。いくつかの実施形態では、方法は、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のエピトープに特異的に結合し、Ｃ１ｓに対するＣ４の結合を阻害するヒト化モノクローナル抗体をそれを必要とする個体に投与することによって、補体媒介性疾患または障害を処置することを含む。
【0146】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１ｓのドメインＩＶ及びＶを包含する領域内のコンフォメーションエピトープに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体を投与することを含む。例えば、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のコンフォメーションエピトープに特異的に結合するヒト化モノクローナル抗体。いくつかの場合では、ヒト化モノクローナル抗体は、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のコンフォメーションエピトープに特異的に結合し、Ｃ１ｓに対するＣ４の結合を阻害する。いくつかの実施形態では、方法は、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を含み、方法は、図１に図示され、配列番号７０に示されるアミノ酸配列のアミノ酸２７２～４２２内のコンフォメーションエピトープに特異的に結合し、Ｃ１ｓに対するＣ４の結合を阻害するヒト化モノクローナル抗体をそれを必要とする個体に投与することを含む。
【0147】
いくつかの実施形態では、方法は、Ｃ１複合体における補体成分Ｃ１ｓに結合するモノクローナル抗体を投与すること含む。Ｃ１複合体は、６分子のＣ１ｑ、２分子のＣ１ｒ、及び２分子のＣ１ｓから構成される。いくつかの場合では、モノクローナル抗体は、ヒト化されている。よって、いくつかの場合では、Ｃ１複合体における補体成分Ｃ１ｓに結合するヒト化モノクローナル抗体。いくつかの場合では、抗体は、高いアビディティでＣ１複合体に存在するＣ１ｓに結合する。
【0148】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体（例えば、補体Ｃ１ｓタンパク質におけるエピトープに特異的に結合する対象抗体）は、ａ）ＩＰＮ００３抗体の１、２、または３つのＶＬ ＣＤＲを含む軽鎖領域；及びｂ）ＩＰＮ００３抗体の１、２、または３つのＶＨ ＣＤＲを含む重鎖領域を含み、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ（Ｋａｂａｔ １９９１）によって定義されるとおりである。
【0149】
他の実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体（例えば、補体Ｃ１ｓタンパク質におけるエピトープに特異的に結合する対象抗体）は、ａ）ＩＰＮ００３抗体の１、２、または３つのＶＬ ＣＤＲを含む軽鎖領域；及びｂ）ＩＰＮ００３抗体の１、２、または３つのＶＨ ＣＤＲを含む重鎖領域を含み、ＶＨ及びＶＬ ＣＤＲは、Ｃｈｏｔｈｉａ（Ｃｈｏｔｈｉａ １９８７）によって定義されるとおりである。
【0150】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体（例えば、補体Ｃ１ｓタンパク質におけるエピトープに特異的に結合する対象抗体）は、ａ）配列番号５１、配列番号５２、及び配列番号５３から選択される１、２、または３つのＣＤＲを含む軽鎖領域；及びｂ）配列番号５４、配列番号５５、及び配列番号５６から選択される１、２、または３つのＣＤＲを含む重鎖領域を含む。これらの実施形態の一部において、抗Ｃ１ｓ抗体は、ヒト化ＶＨ及び／またはＶＬフレームワーク領域を含む。
【0151】
配列番号５１：ＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱ；
配列番号５２：ＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰ；
配列番号５３：ＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴ；
配列番号５４：ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶ；
配列番号５５：ＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹ；
配列番号５６：ＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹ。
配列番号５２：ＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰ；
配列番号５３：ＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴ；
配列番号５４：ＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶ；
配列番号５５：ＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹ；
配列番号５６：ＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹ。
【0152】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号５１、配列番号５２、配列番号５３、配列番号５４、配列番号５５、及び配列番号５６から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む。
【0153】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５１、配列番号５２、及び配列番号５３を含む軽鎖可変領域を含む。
【0154】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５４、配列番号５５、及び配列番号５６を含む重鎖可変領域を含む。
【0155】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５１を有するＣＤＲ－Ｌ１、アミノ酸配列配列番号５２を有するＣＤＲ－Ｌ２、アミノ酸配列配列番号５３を有するＣＤＲ－Ｌ３、アミノ酸配列配列番号５４を有するＣＤＲ－Ｈ１、アミノ酸配列配列番号５５を有するＣＤＲ－Ｈ２、及びアミノ酸配列配列番号５６を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む。
【0156】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号５７に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0157】
配列番号５７：
ＤＩＶＭＴＱＴＴＡＩＭＳＡＳＬＧＥＲＶＴＭＴＣＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＦＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ。
ＤＩＶＭＴＱＴＴＡＩＭＳＡＳＬＧＥＲＶＴＭＴＣＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＦＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ。
【0158】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号５８に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0159】
配列番号５８：
ＱＶＫＬＥＥＳＧＧＡＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＩＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＤＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴ。
ＱＶＫＬＥＥＳＧＧＡＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＩＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＤＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴ。
【0160】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５７と９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0161】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５８と９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0162】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５７を含む軽鎖可変領域を含む。
【0163】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５８を含む重鎖可変領域を含む。
【0164】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５７と９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及びアミノ酸配列配列番号５８と９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0165】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５７を含む軽鎖可変領域及びアミノ酸配列配列番号５８を含む重鎖可変領域を含む。
【0166】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合し、抗体は、エピトープとの結合についてアミノ酸配列配列番号５７を含む抗体軽鎖可変領域の軽鎖ＣＤＲ及びアミノ酸配列配列番号５８を含む抗体重鎖可変領域の重鎖ＣＤＲを含む抗体と競合する。
【0167】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号５７を含む抗体軽鎖可変領域の軽鎖ＣＤＲ及びアミノ酸配列配列番号５８を含む抗体重鎖可変領域の重鎖ＣＤＲを含む。
【0168】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体（例えば、補体Ｃ１ｓタンパク質におけるエピトープに特異的に結合する対象抗体）は、ａ）配列番号６２、配列番号６３、及び配列番号５３から選択される１、２、または３つのＣＤＲを含む軽鎖領域；及びｂ）配列番号６４、配列番号６５、及び配列番号６６から選択される１、２、または３つのＣＤＲを含む重鎖領域を含む。
【0169】
配列番号６２：ＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨ；
配列番号６３：ＳＴＳＮＬＡＳ；
配列番号５３：ＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴ；
配列番号６４：ＮＹＡＭＳ；
配列番号６５：ＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧ；
配列番号６６：ＬＦＴＧＹＡＭＤＹ
配列番号６３：ＳＴＳＮＬＡＳ；
配列番号５３：ＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴ；
配列番号６４：ＮＹＡＭＳ；
配列番号６５：ＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧ；
配列番号６６：ＬＦＴＧＹＡＭＤＹ
【0170】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号６２、配列番号６３、配列番号５３、配列番号６４、配列番号６５、及び配列番号６６から選択されるアミノ酸配列を有するＣＤＲを含む。
【0171】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６２、配列番号６３、及び配列番号５３を含む軽鎖可変領域を含む。
【0172】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６４、配列番号６５、及び配列番号６６を含む重鎖可変領域を含む。
【0173】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６２を有するＣＤＲ－Ｌ１、アミノ酸配列配列番号６３を有するＣＤＲ－Ｌ２、アミノ酸配列配列番号５３を有するＣＤＲ－Ｌ３、アミノ酸配列配列番号６４を有するＣＤＲ－Ｈ１、アミノ酸配列配列番号６５を有するＣＤＲ－Ｈ２、及びアミノ酸配列配列番号６６を有するＣＤＲ－Ｈ３を含む。
【0174】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号６７に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0175】
配列番号６７：
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＬＧＥＲＶＴＭＴＣＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＦＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ。
ＱＩＶＬＴＱＳＰＡＩＭＳＡＳＬＧＥＲＶＴＭＴＣＴＡＳＳＳＶＳＳＳＹＬＨＷＹＱＱＫＰＧＳＳＰＫＬＷＩＹＳＴＳＮＬＡＳＧＶＰＡＲＦＳＧＳＧＳＧＴＦＹＳＬＴＩＳＳＭＥＡＥＤＤＡＴＹＹＣＨＱＹＹＲＬＰＰＩＴＦＧＡＧＴＫＬＥＬＫ。
【0176】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号６８に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0177】
配列番号６８：
ＥＶＭＬＶＥＳＧＧＡＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＩＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＤＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ。
ＥＶＭＬＶＥＳＧＧＡＬＶＫＰＧＧＳＬＫＬＳＣＡＡＳＧＦＴＦＳＮＹＡＭＳＷＶＲＱＩＰＥＫＲＬＥＷＶＡＴＩＳＳＧＧＳＨＴＹＹＬＤＳＶＫＧＲＦＴＩＳＲＤＮＡＲＤＴＬＹＬＱＭＳＳＬＲＳＥＤＴＡＬＹＹＣＡＲＬＦＴＧＹＡＭＤＹＷＧＱＧＴＳＶＴＶＳＳ。
【0178】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７と９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0179】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６８と９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0180】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７を含む軽鎖可変領域を含む。
【0181】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６８を含む重鎖可変領域を含む。
【0182】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７と９０％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及びアミノ酸配列配列番号６８と９０％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0183】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７と９５％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域及びアミノ酸配列配列番号６８と９５％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0184】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７を含む軽鎖可変領域及びアミノ酸配列配列番号６８を含む重鎖可変領域を含む。
【0185】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合し、抗体は、エピトープとの結合についてアミノ酸配列配列番号６７を含む抗体軽鎖可変領域の軽鎖ＣＤＲ及びアミノ酸配列配列番号６８を含む抗体重鎖可変領域の重鎖ＣＤＲを含む抗体と競合する。
【0186】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、アミノ酸配列配列番号６７を含む抗体軽鎖可変領域の軽鎖ＣＤＲ及びアミノ酸配列配列番号６８を含む抗体重鎖可変領域の重鎖ＣＤＲを含む。
【0187】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号６７に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含む。
【0188】
いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号６８に示されるアミノ酸配列と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含む。
【0189】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号７９に示され、図２に図示されるアミノ酸配列（ＶＨバリアント１）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【0190】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８０に示され、図３に図示されるアミノ酸配列（ＶＨバリアント２）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【0191】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８１に示され、図４に図示されるアミノ酸配列（ＶＨバリアント３）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【0192】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８２に示され、図５に図示されるアミノ酸配列（ＶＨバリアント４）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を含み得る。
【0193】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８３に示され、図６に図示されるアミノ酸配列（ＶＫバリアント１）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【0194】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８４に示され、図７に図示されるアミノ酸配列（ＶＫバリアント２）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【0195】
抗Ｃ１ｓ抗体は、配列番号８５に示され、図８に図示されるアミノ酸配列（ＶＫバリアント３）と８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％、または１００％同一のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み得る。
【0196】
抗Ｃ１ｓ抗体は、表３（図９）に示される、ＩＰＮ００３親抗体ＦＲアミノ酸配列に対して、フレームワーク（ＦＲ）アミノ酸置換のうちの１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２個を含む重鎖可変領域を含み得る。
【0197】
定義
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味し得る。本明細書において請求項（複数可）で使用される場合、用語「含む」と併せて使用される場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味し得る。例えば、「抗体」に対する言及は、１つから多くの抗体の言及である。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも第２のまたはそれ以上を意味し得る。
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味し得る。本明細書において請求項（複数可）で使用される場合、用語「含む」と併せて使用される場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味し得る。例えば、「抗体」に対する言及は、１つから多くの抗体の言及である。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも第２のまたはそれ以上を意味し得る。
【0198】
本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せた」投与は、同時投与及び／または異なる時点での投与を含む。併せた投与はまた、異なる投薬頻度または間隔、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用することを含む、共製剤としての投与または別々の組成物としての投与を包含する。
【0199】
「補体媒介性血液障害」は、循環Ｃ１ｑ及び補体活性化によって引き起こされる血管部分または非常に血管に富む組織の障害である。補体活性化は、古典的経路を介して開始し得る。古典的経路は、補体タンパク質Ｃ１ｑと表面結合抗体または表面タンパク質のパッチとの直接的結合によって活性化され得る。
【0200】
用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書で「抗体」と互換的に使用される。本明細書における用語「抗体」は、最も広義に使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つのインタクトな抗体から形成される多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、生物学的活性を示す場合に限り抗体断片、及び抗体誘導体を具体的に包含する。
【0201】
基本的な４鎖抗体単位は、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である。ＶＨ及びＶＬが一緒に対合すると、単一の抗原結合部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ Ｅｄ．，Ｄａｎｉｅｌ Ｐ．Ｓｔｉｔｅｓ，Ａｂｂａ Ｉ．Ｔｅｒｒ ａｎｄ Ｔｒｉｓｔｒａｍ Ｇ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ ＆ Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐａｇｅ ７１ ａｎｄ Ｃｈａｐｔｅｒ ６を参照されたい。
【0202】
任意の脊椎動物種に由来するＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てられ得る。それらの重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てられ得る。５つのクラスの免疫グロブリンが存在する：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ（アルファ（「α」）、デルタ（「δ」）、イプシロン（「ε」）、ガンマ（「γ」）及びミュー（「μ」）と標記される重鎖をそれぞれ有する）。γ及びαクラスは、ＣＨ配列及び機能の比較的小さな相違に基づいてサブクラス（アイソタイプ）にさらに分類され、例えば、ヒトは、次のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元構成はよく知られており、一般に、例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．，２０００）に記載されている。
【0203】
「全長抗体」は通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖を含む約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されている一方で、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖は、規則的間隔の鎖内ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）と、それに続くいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。
【0204】
「単離された」分子または細胞は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入分子または細胞から同定及び分離された分子または細胞である。好ましくは、単離された分子または細胞は、生成環境に関連するすべての成分と会合しない。単離された分子または細胞は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された分子は、細胞に天然に存在する分子とは区別され；単離された細胞は、組織、器官、または個体に天然に存在する細胞とは区別される。いくつかの実施形態では、単離された分子は、本開示の抗Ｃ１ｓ、抗Ｃ１ｑ、または抗Ｃ１ｒ抗体である。他の実施形態では、単離された細胞は、本開示の抗Ｃ１ｓ、抗Ｃ１ｑ、または抗Ｃ１ｒ抗体を生成する宿主細胞またはハイブリドーマ細胞である。
【0205】
「単離された」抗体は、その生成環境（例えば、天然または組換え）の成分から同定、分離、及び／または回収されたものである。好ましくは、単離されたポリペプチドは、その生成環境からのすべての他の混入成分と会合しない。組換えトランスフェクション細胞に起因するものなどのその生成環境からの混入成分は、抗体の研究、診断的または治療的使用を典型的に妨げるであろう物質であり、これには酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が含まれ得る。ある特定の好ましい実施形態では、ポリペプチドは、（１）例えば、ローリー法によって決定される、抗体の９５重量％超、いくつかの実施形態では、９９重量％超になるまで、（２）スピニングカップシークエネーターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クマシーブルー、または好ましくはシルバー染色を使用して、非還元または還元条件下でＳＤＳ－ＰＡＧＥによって均質性が得られるまで、精製されるであろう。単離された抗体には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換えＴ細胞内でｉｎ ｓｉｔｕの抗体が含まれる。しかしながら、通常、単離されたポリペプチドまたは抗体は、少なくとも１つの精製工程を含むプロセスによって調製される。
【0206】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ「ＶＨ」及び「ＶＬ」と称され得る。これらのドメインは通常、抗体の最も可変性の高い部分であり（同じクラスの他の抗体と比べて）、抗原結合部位を含有する。
【0207】
用語「可変」は、可変ドメインのある特定のセグメントが、抗体によって配列が大幅に異なるという事実を指す。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体の、その特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変ドメイン全体に均等に分布しているわけではない。むしろ、それは、軽鎖及び重鎖の両方の可変ドメインの両方において、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然重鎖及び軽鎖の可変ドメインはそれぞれ、ベータ－シート構造を接続し、いくつかの場合では、ベータ－シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続されたベータ－シート立体配置を大いに採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖内のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して互いに結び付いており、他方の鎖のＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照されたい）。定常ドメインは、抗原に対する抗体の結合に直接的に関与しないが、様々なエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞毒性における抗体の関与を示す。
【0208】
本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重鎖及び軽鎖の両方のポリペプチドの可変領域内に見られる非連続的抗原結合部位を意味することが意図されている。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書ではＫａｂａｔ １９９１とも称される）；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）（本明細書ではＣｈｏｔｈｉａ １９８７とも称される）；及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）（定義には、互いに対して比較した場合にアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる）に記載されている。それにもかかわらず、抗体もしくはグラフト抗体またはそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれの定義の適用も、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図されている。
【0209】
本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｌ１」、「ＣＤＲ－Ｌ２」、及び「ＣＤＲ－Ｌ３」は、それぞれ、軽鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｈ１」、「ＣＤＲ－Ｈ２」、及び「ＣＤＲ－Ｈ３」は、それぞれ、重鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－１」、「ＣＤＲ－２」、及び「ＣＤＲ－３」は、それぞれ、いずれかの鎖の可変領域の第１、第２及び第３ＣＤＲを指す。
【0210】
用語「モノクローナル抗体」は、本明細書で使用される場合、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指す、すなわち、その集団の個々の抗体は、微量で存在し得る天然に存在する変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化）を除き、同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して仕向けられている。異なる決定基（エピトープ）に対して仕向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して仕向けられている。それらの特異性に加え、モノクローナル抗体は、典型的にはハイブリドーマ培養によって合成され、他の免疫グロブリンが混入されていないので有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団として得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本開示に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ方法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５－９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３－２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、リコンビナントＤＮＡ法（例えば、米国特許番号４，８１６，５６７参照）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－４７２（２００４）；及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）参照）、及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を生成するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許番号５，５４５，８０７；５，５４５，８０６；５，５６９，８２５；５，６２５，１２６；５，６３３，４２５；及び５，６６１，０１６；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；及びＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）参照）を含む多様な技術によって生成され得る。
【0211】
用語「全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「完全抗体」は、抗体断片または抗体誘導体とは対照的に、実質的にインタクトな形態の抗体を指すために互換的に使用される。具体的には、完全抗体は、Ｆｃ領域を含む重鎖及び軽鎖を有するものを含む。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。いくつかの場合では、インタクトな抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有し得る。
【0212】
抗体の「抗体断片」または「抗原結合断片」または「機能的断片」は、インタクトな抗体の一部、好ましくはインタクトな抗体の抗原結合及び／または可変領域または改変されたＦｃＲ結合能力を保持するまたは有する抗体のＦ領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片；ダイアボディ；及び線状抗体が含まれる（米国特許５，６４１，８７０、実施例２；Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２（１９９５）参照）。抗体断片の追加の例には、抗体誘導体、例えば、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。
【0213】
「抗体誘導体」は、抗体の抗原結合領域を含む任意のコンストラクトである。抗体誘導体の例には、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。
【0214】
抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片と、容易に結晶化する能力を反映して表記される１つの残留「Ｆｃ」断片とが生成される。Ｆａｂフラグメントは、Ｌ鎖全体に加えて、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、ならびに１つの重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）からなる。各Ｆａｂフラグメントは、抗原結合に関しては一価である、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、単一の大型Ｆ（ａｂ’）２断片をもたらし、これは、異なる抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合したＦａｂ断片にほぼ対応し、依然として抗原を架橋することができる。Ｆａｂ’断片は、ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む、いくつかのさらなる残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における呼称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成された。抗体フラグメントの他の化学的カップリングも既知である。
【0215】
Ｆｃフラグメントは、ジスルフィドによって一緒に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端部分を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列によって決定され、この領域はまた、ある特定の細胞型に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される。
【0216】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義するために使用され、天然配列のＦｃ領域及びバリアントＦｃ領域が含まれる。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムによると残基４４７）は、例えば、抗体の生成もしくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって、除去されてもよい。したがって、インタクトな抗体の組成物は、全Ｋ４４７残基が除去された抗体母集団、除去されたＫ４４７残基がない抗体母集団、及びＫ４４７残基を有する抗体と有しない抗体との混合物を有する抗体母集団を含んでもよい。本開示の抗体における使用に好適な天然配列のＦｃ領域には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が含まれる。
【0217】
「天然配列Ｆｃ領域」は、天然で見られるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域、及び天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、ならびにそれらの天然に存在するバリアントが含まれる。
【0218】
「バリアントＦｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸改変、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）によって天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、バリアントＦｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域中または親ポリペプチドのＦｃ領域中に約１～約１０個のアミノ酸置換、及び好ましくは約１～約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書におけるバリアントＦｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、ならびに最も好ましくは、それらと少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、それらと少なくとも約９５％の相同性を保有する。
【0219】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）と結合し、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これらの受容体の対立遺伝子バリアント及び選択的スプライシング形態を含むものであり、ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは主にその細胞質ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（「ＩＴＡＭ」）を含む。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（「ＩＴＩＭ」）をその細胞質性ドメインに含有する。（例えば、Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）参照）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－９２（１９９１）；Ｃａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）；及びｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ．Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０－４１（１９９５）でレビューされている。将来特定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書における「ＦｃＲ」という用語に包含される。ＦｃＲは、抗体の血清半減期を増加させ得る。
【0220】
ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボでのＦｃＲｎへの結合及び血清中半減期は、例えば、ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウスもしくはトランスフェクトヒト細胞株において、またはバリアントＦｃ領域を有するポリペプチドが投与される霊長類においてアッセイすることができる。ＷＯ２００４／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）は、ＦｃＲへの結合が改善また低減された抗体バリアントについて記載している。例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照されたい。
【0221】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含有する最小の抗体フラグメントである。このフラグメントは、１つの重鎖可変領域ドメインと１つの軽鎖可変領域ドメインが、非共有結合で緊密に結合した二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みにより、抗原結合のためのアミノ酸残基を提供し、抗原結合特異性を抗体に与える、６つの超可変ループ（Ｈ鎖及びＬ鎖からそれぞれ３つのループ）が生じる。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性であるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的なＨＶＲを３つしか含まないＦｖの半分）でさえも、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。
【0222】
「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも短縮される「一本鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖に結合されるＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、ＶＨ及びＶＬドメイン間にポリペプチドリンカーをさらに含んでおり、ｓＦｖが抗原結合に所望される構造を形成することを可能にする。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照されたい。
【0223】
「ダイアボディ」という用語は、鎖内ではなく鎖間のＶドメイン対合を達成し、それによって二価フラグメント、すなわち、２つの抗原結合部位を有するフラグメントが得られるように、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に短いリンカー（約５～１０個の残基）を用いてｓＦｖフラグメント（前の段落を参照されたい）を構築することによって調製された小さな抗体フラグメントを指す。二重特異性ダイアボディは、２つの抗体のＶＨ及びＶＬドメインが異なるポリペプチド鎖に存在している、２つの「交差」ｓＦｖフラグメントのヘテロ二量体である。ダイアボディは、例えば、ＥＰ ４０４，０９７；ＷＯ １９９３／０１１１６１；ＷＯ／２００９／１２１９４８；ＷＯ／２０１４／１９１４９３；Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－４８（１９９３）においてより詳細に記載されている。
【0224】
本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、重鎖及び／または軽鎖の一部が、特定の種に由来するか、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体内の対応する配列と同一または相同である一方で、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来するか、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である抗体（免疫グロブリン）、ならびにそのような抗体の断片を指し、これは、それらが所望される生物学的活性を呈する限りにおいてである（米国特許番号４，８１６，５６７；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－５５（１９８４））。本明細書における対象となるキメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、ここで、この抗体の抗原結合領域は、例えば、マカクザルに目的の抗原で免疫付与を行うことによって生成される抗体に由来する。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、「キメラ抗体」のサブセットである。
【0225】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲからの残基が、所望される特異性、親和性、及び／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲからの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基に置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの改変は、結合親和性などの抗体の性能をさらに改良するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的にすべてを含むことになり、ここで、超可変ループのすべてまたは実質的にすべてが、非ヒト免疫グロブリン配列のものに対応し、ＦＲ領域のすべてまたは実質的にすべてが、ヒト免疫グロブリン配列のものであるが、ＦＲ領域には、結合親和性、異性体化、免疫原性などの抗体の性能を向上させる１つ以上の個々のＦＲ残基置換が含まれてもよい。ＦＲにおけるこれらのアミノ酸置換の数は典型的には、Ｈ鎖では６以下、及びＬ鎖では３以下である。ヒト化抗体はまた、任意に、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンのものを含む。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；及びＰｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照されたい。例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）；ならびに米国特許番号６，９８２，３２１及び７，０８７，４０９も参照されたい。
【0226】
「ヒト抗体」は、ヒトによって生成された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製する技術のうちの任意のものを用いて作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む当該技術分野で既知の種々の技術を使用して生成され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載の方法も、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）も参照されたい。ヒト抗体は、抗原攻撃に応答してそのような抗体を生成するように改変されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化異種マウス（ｘｅｎｏｍｉｃｅ）に抗原を投与することにより調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関しては、米国特許番号６，０７５，１８１及び６，１５０，５８４を参照されたい）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体についても、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）を参照されたい。
【0227】
本明細書で使用される場合、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、かつ／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。概して、抗体は、６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体において、Ｈ３及びＬ３は、これらの６つのＨＶＲのうちで最も高い多様性を呈し、特にＨ３が、抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）；Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｗｕ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３））を参照されたい。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科抗体は、軽鎖の不在下で機能的であり、安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）及びＳｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ． Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照されたい。
【0228】
いくつかのＨＶＲ描写が本明細書で使用され、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＨＶＲは、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．）。Ｃｈｏｔｈｉａは、そうではなく、構造的ループの位置を指す（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。ＡｂＭ ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を示し、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基が以下に記載される。
【0229】
【0230】
ＨＶＲは、以下のように「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおける２４～３６または２４～３４（Ｌ１）、４６～５６または５０～５６（Ｌ２）、及び８９～９７または８９～９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおける２６～３５（Ｈ１）、５０～６５または４９～６５（好ましい実施形態）（Ｈ２）、及び９３～１０２、９４～１０２、または９５～１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの伸長ＨＶＲの定義の各々について上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．に従って番号付けされる。
【0231】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【0232】
「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置番号付け」という語句、及びそれらの変形は、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．における抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含有し得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従って残基５２ａ）を、そして重鎖ＦＲ残基８２後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従って残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含んでもよい。残基のＫａｂａｔ番号付けは、所与の抗体に対して、抗体の配列と「標準の」Ｋａｂａｔによって番号付けされた配列との相同領域での整合によって決定され得る。
【0233】
Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（大体、軽鎖の１～１０７残基及び重鎖の１～１１３残基）に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵ指標」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基に言及する際に使用される（例えば、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．で報告されているＥＵ指標）。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」は、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。本明細書に別途述べられない限り、抗体の可変ドメインにおける残基番号への言及は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する。本明細書で別途述べられない限り、抗体の定常ドメインにおける残基番号への言及は、ＥＵ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する（例えば、米国特許公開番号２０１０－２８０２２７参照）。
【0234】
「アクセプターヒトフレームワーク」は、本明細書で使用される場合、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク由来のＶＬフレームワークまたはＶＨフレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、それと同じアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは既存のアミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態では、既存のアミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。既存のアミノ酸変化がＶＨに存在する場合、好ましいそれらの変化が位置７１Ｈ、７３Ｈ、及び７８Ｈのうちの３つ、２つ、または１つにのみ存在し、例えば、それらの位置のアミノ酸残基は、７１Ａ、７３Ｔ、及び／または７８Ａであり得る。いくつかの実施形態では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、配列において、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
【0235】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を代表する、フレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループから行われる。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）にあるようなサブグループである。例には、ＶＬに関するものが含まれ、サブグループは、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．にあるようなサブグループカッパＩ、カッパＩＩ、カッパＩＩＩ、またはカッパＩＶであり得る。さらに、ＶＨについては、サブグループは、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．にあるようなサブグループＩ、サブグループＩＩ、またはサブグループＩＩＩであり得る。
【0236】
指定された位置における「アミノ酸改変」は、指定された残基の置換もしくは欠失、または指定された残基に隣接する少なくとも１個のアミノ酸残基の挿入を指す。指定された残基に「隣接する」挿入は、その１～２個の残基内への挿入を意味する。挿入は、指定された残基のＮ末端側またはＣ末端側であり得る。本明細書における好ましいアミノ酸改変は、置換である。
【0237】
「親和性成熟」抗体は、その１つ以上のＨＶＲに１つ以上の変化を有し、これらの変化が、それらの変化（複数可）を有しない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性の向上をもたらすものである。いくつかの実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で公知の手順によって生成される。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟について記載している。ＨＶＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異誘発は、例えば、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：３８０９－３８１３（１９９４）；Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅ １６９：１４７－１５５（１９９５）；Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４－２００４（１９９５）；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０－９（１９９５）；及びＨａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９－８９６（１９９２）に記載されている。
【0238】
本明細書で使用される場合、用語「特異的に認識する」または「特異的に結合する」は、生物学的分子を含む分子の異種集団の存在下で標的の存在を決定する、標的と抗体との間の引力または結合などの測定可能な及び再生可能な相互作用を指す。例えば、標的またはエピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、他の標的または標的の他のエピトープに結合する場合よりも高い親和性、アビディティで、より容易に、及び／またはより長い持続時間でこの標的またはエピトープに結合する抗体である。例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部位）は、第２の標的に特異的または優先的に結合する場合があり、または結合しない場合があることも理解される。このように、「特異的結合」または「優先的結合」は、排他的な結合を（含み得るが）かならずしも必要とするわけではない。標的に特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０３Ｍ－１または１０４Ｍ－１、時に約１０５Ｍ－１または１０６Ｍ－１、他の例では約１０６Ｍ－１または１０７Ｍ－１、約１０８Ｍ－１～１０９Ｍ－１、または約１０１０Ｍ－１～１０１１Ｍ－１またはそれ以上の結合定数を有し得る。特定のタンパク質と特異的免疫反応性の抗体を選択するために多様なイムノアッセイ形式が使用され得る。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的免疫反応性のモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用される。特異的免疫反応性を決定するために使用され得るイムノアッセイ形式及び条件の説明については、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい。
【0239】
「同一性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で同一であることを示す。「類似性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で類似するタイプのものであることを示す。例えば、ロイシンは、イソロイシンまたはバリンの代わりに用いられ得る。しばしば互いに置換され得る他のアミノ酸には、
－フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；
－リジン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパルテート及びグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；及び
－システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）
が含まれるがこれらに限定されない。
－フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；
－リジン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパルテート及びグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；及び
－システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）
が含まれるがこれらに限定されない。
【0240】
同一性及び類似性の程度は容易に計算され得る（例えば、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ．Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．，ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９３；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．，ａｎｄ Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．，ｅｄｓ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，１９９４；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７；及びＳｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．ａｎｄ Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｄｓ．，Ｍ Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１参照）
【0241】
本明細書で使用される場合、補体タンパク質と第２のタンパク質との間の「相互作用」は、限定されないが、タンパク質－タンパク質相互作用、物理的相互作用、化学的相互作用、結合、共有結合、及びイオン結合を包含する。本明細書で使用される場合、抗体が２つのタンパク質間の相互作用を破壊し、減少させ、または完全に排除する場合、抗体は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。抗体またはその断片が２つのタンパク質のうちの１つに結合する場合、本開示の抗体、またはその断片は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。
【0242】
「遮断」抗体、「アンタゴニスト」抗体、「阻害」抗体、または「中和」抗体は、それが結合する抗原の１つ以上の生物学的活性、例えば、１つ以上のタンパク質との相互作用を阻害または減少させる抗体である。いくつかの実施形態では、遮断抗体、アンタゴニスト抗体、阻害抗体、または「中和」抗体は、抗原の１つ以上の生物学的活性または相互作用を実質的にまたは完全に阻害する。
【0243】
用語「阻害剤」は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子、例えば、ｍＲＮＡまたはタンパク質の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指す。阻害剤は、抗体、小分子、または核酸分子であり得る。用語「アンタゴニスト」は、受容体に結合し、受容体の生物学的反応を阻止または減衰させる化合物を指す。用語「阻害剤」はまた、「アンタゴニスト」を指し得る。
【0244】
抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列バリアントＦｃ領域）に起因するそれらの生物学的活性を指し、抗体アイソタイプによって異なる。
【0245】
本明細書で使用される場合、用語「親和性」は、２つの物質（例えば、抗体及び抗原）の可逆的結合についての平衡定数を指し、解離定数（ＫＤ）として表される。親和性は、非関連アミノ酸配列に対する抗体の親和性よりも少なくとも１倍高く、少なくとも２倍高く、少なくとも３倍高く、少なくとも４倍高く、少なくとも５倍高く、少なくとも６倍高く、少なくとも７倍高く、少なくとも８倍高く、少なくとも９倍高く、少なくとも１０倍高く、少なくとも２０倍高く、少なくとも３０倍高く、少なくとも４０倍高く、少なくとも５０倍高く、少なくとも６０倍高く、少なくとも７０倍高く、少なくとも８０倍高く、少なくとも９０倍高く、少なくとも１００倍高く、または少なくとも１，０００倍高く、またはそれ以上であり得る。標的タンパク質に対する抗体の親和性は、例えば、約１００ナノモル濃度（ｎＭ）～約０．１ｎＭ、約１００ｎＭ～約１ピコモル濃度（ｐＭ）、または約１００ｎＭ～約１フェムトモル濃度（ｆＭ）またはそれ以上であり得る。本明細書で使用される場合、用語「アビディティ」は、２つ以上の物質の複合体が希釈後に解離することに対する抵抗性を指す。用語「免疫反応性」及び「優先的に結合する」は、抗体及び／または抗原結合断片に関して本明細書で互換的に使用される。
【0246】
用語「結合」は、例えば、塩架橋及び水架橋などの相互作用を含む、共有結合性、静電気性、疎水性、及びイオン性及び／または水素結合相互作用による、２つの分子間の直接的会合を指す。例えば、対象抗Ｃ１ｓ抗体は、補体Ｃ１ｓタンパク質内のエピトープに特異的に結合する。「特異的結合」は、少なくとも約１０－７Ｍ以上、例えば、５×１０－７Ｍ、１０－８Ｍ、５×１０－８Ｍ、及びそれ以上の親和性での結合を指す。「非特異的結合」は、約１０－７Ｍ未満の親和性、例えば、１０－６Ｍ、１０－５Ｍ、１０－４Ｍなどの親和性での結合を指す。
【0247】
用語「ｋｏｎ」は、本明細書で使用される場合、抗原に対する抗体の会合についての速度定数を指すことが意図されている。
【0248】
用語「ｋｏｆｆ」は、本明細書で使用される場合、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての速度定数を指すことが意図されている。
【0249】
用語「ＫＤ」は、本明細書で使用される場合、抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指すことが意図されている。
【0250】
本明細書で使用される場合、ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に関して、「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列同一性最大パーセントを達成するために、配列を整合させ、必要に応じてギャップを導入した後の、配列同一性の一部としていずれの保存的置換も考慮しない、特定のペプチドもしくはポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の割合を指す。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、例えば、公共に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、当該技術分野における技術内の様々な方法で達成され得る。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要な当該技術分野で知られている任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するのための適切なパラメータを決定し得る。
【0251】
「生物学的サンプル」は、個体から得られる多様なサンプルタイプを包含し、診断またはモニタリングアッセイにおいて使用され得る。その定義は、血液及び生物学的起源の他の液体サンプル、固体組織サンプル、例えば、生検試料または組織培養物またはそれに由来する細胞及びその子孫を包含する。その定義にはまた、それらの調達後に任意の方法で、例えば、ポリヌクレオチドなどのある特定の成分について試薬での処置、可溶化、または濃縮によって操作されたサンプルが含まれる。用語「生物学的サンプル」は、臨床サンプルを包含し、培養細胞、細胞上清、細胞ライセート、血清、血漿、生体液、及び組織サンプルも含む。用語「生物学的サンプル」には、尿、唾液、脳脊髄液、間質液、眼液、滑液、血液分画、例えば、血漿及び血清などが含まれる。用語「生物学的サンプル」にはまた、固体組織サンプル、組織培養サンプル、及び細胞サンプルが含まれる。
【0252】
「血液腔」は、その用語が本明細書で使用される場合、血清、血小板、内皮細胞、血液細胞及び他の造血細胞、ならびに対象の循環系を介して自然に流れる他の物質を含む、対象の心血管系の内容物を指す。血液腔を標的とすることは、非常に血管に富む組織、例えば、腎臓、肺胞、毛細血管床、または糸球体に対する効果を有し得る。
【0253】
「単離された」核酸分子は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入核酸分子から同定及び分離された核酸分子である。好ましくは、単離された核酸は、生成環境に関連するすべての成分と会合しない。本明細書におけるポリペプチド及び抗体をコードする単離された核酸分子は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された核酸分子は、細胞において天然に存在する本明細書における任意のポリペプチド及び抗体をコードする核酸とは区別される。
【0254】
用語「ベクター」は、本明細書で使用される場合は、それが連結された別の核酸を輸送することが可能な核酸分子を指すことが意図されている。ベクターの１つのタイプは、「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡを指す。ベクターの別のタイプは、ファージベクターである。ベクターの別のタイプは、ウイルスベクターであり、この場合、追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノム内にライゲーションされ得る。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞において自己複製が可能である（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞に導入すると宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、それにより宿主ゲノムと共に複製される。さらに、ある特定のベクターは、それらが機能可能に連結された遺伝子の発現を指示することが可能である。そのようなベクターは、本明細書で「組換え発現ベクター」、または単純に「発現ベクター」と称される。通常、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターはしばしば、プラスミドの形態である。本明細書において、「プラスミド」及び「ベクター」は、プラスミドが最も一般的に使用される形態のベクターであるため互換的に使用され得る。
【0255】
本明細書で互換的に使用される「ポリヌクレオチド」、または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、改変ヌクレオチドまたは塩基、及び／またはそれらのアナログ、またはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによってまたは合成反応によってポリマーに組み込まれ得る任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、改変ヌクレオチド、例えば、メチル化ヌクレオチド及びそれらのアナログを含み得る。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する改変は、ポリマーのアセンブリの前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって隔てられていてもよい。ポリヌクレオチドは、合成後に生成される改変（複数可）、例えば、標識へのコンジュゲーションを含み得る。他のタイプの改変には、例えば、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上をアナログと置換する「キャップ」、ヌクレオチド間改変、例えば、非電荷性結合（例えば、メチルホスホン酸塩、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）によるもの、及び電荷性結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）によるもの、例えば、タンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ－Ｌ－リジンなど）などの懸垂部位を含むもの、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラーレンなど）によるもの、キレート剤（例えば、金属、放射活性金属、ホウ素、酸化金属など）を含むもの、アルキル化剤を含むもの、改変結合（例えば、アルファアノマー核酸など）によるもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）の未改変形態が含まれる。さらに、糖内に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかは、例えば、ホスホン酸基、リン酸基により置き換えられるか、標準的な保護基により保護されるか、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドへの追加の結合を生成してもよく、または固体もしくは半固体支持体にコンジュゲーションされてもよい。５’及び３’末端ＯＨは、リン酸化され、またはアミンもしくは１～２０個の炭素原子の有機キャッピング基部位と置換され得る。他のヒドロキシルもまた、標準的な保護基に誘導体化され得る。ポリヌクレオチドは、例えば、２’－Ｏ－メチル－、２’－Ｏ－アリル、２’－フルオロ－または２’－アジド－リボース、炭素環糖アナログ、α－アノマー糖、エピマー糖、例えば、アラビノース、キシロースまたはリキソース、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、アクリル酸アナログ、及び塩基性ヌクレオシドアナログ、例えば、メチルリボシドを含む、当該技術分野において一般的に知られているリボースまたはデオキシリボース糖のアナログ形態を含み得る。１つ以上のホスホジエステル結合は、代替連結基によって置き換えられ得る。これらの代替連結基には、ホスフェートがＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、またはＣＨ２（「ホルムアセタール」）（式中、各ＲまたはＲ’は、独立して、Ｈ、またはエーテル（－Ｏ－）結合を任意に含有する置換もしくは非置換アルキル（１～２０Ｃ）、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルまたはアラルキルである）によって置き換えられた実施形態が含まれるがこれらに限定されない。ポリヌクレオチドにおけるすべての結合が同一である必要はない。先述の記載は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及されるすべてのポリヌクレオチドに適用される。
【0256】
「宿主細胞」には、ポリヌクレオチド挿入物の組み込みのためのベクター（複数可）のためのレシピエントであり得、レシピエントとなっている個々の細胞または細胞培養物が含まれる。宿主細胞には、単一の宿主細胞の子孫が含まれ、子孫は、天然、突然、または意図的変異のため、必ずしも元の親細胞と（形態においてまたはゲノムＤＮＡ相補体において）完全に同一である必要はない場合がある。宿主細胞には、本開示のポリヌクレオチド（複数可）でｉｎ ｖｉｖｏでトランスフェクションされた細胞が含まれる。
【0257】
本明細書で使用される「担体」は、用いられる投薬量及び濃度でそれに曝露されている細胞または哺乳動物に対して非毒性の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定剤が含まれる。しばしば、生理的に許容可能な担体は、水性ｐＨ緩衝液である。生理的に許容可能な担体の例には、緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）が含まれる。
【0258】
用語「予防」は、当該技術分野で認識されており、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））などの病態に関連して使用される場合、当該技術分野でよく理解されており、組成物を摂取しない対象と比べて対象における医学的病態の１つ以上の症状の頻度または重症度を減少させ、またはその開始を遅延させる組成物の投与を含む。よって、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））の予防は、例えば、療法を受けなかった対照集団と比べて療法を受けている患者の集団における血小板数を、例えば、統計的に及び／または臨床的に有意な量増加させることを含む。同様に、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））の予防は、療法を受けている患者が血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））または関連する症状を発症する可能性を、療法を受けていない患者と比べて低下させることを含む。
【0259】
用語「対象」は、本明細書で使用される場合、生存している哺乳動物を指し、用語「患者」と互換的に使用され得る。哺乳動物の例には、哺乳動物クラスの任意のメンバー：ヒト、非ヒト霊長類、例えば、チンパンジー、及び他の類人猿及びサル種；牧場動物、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ；家庭動物、例えば、ウサギ、イヌ、及びネコ；齧歯類、例えば、ラット、マウス及びモルモットを含む実験動物などが含まれるがこれらに限定されない。その用語は、特定の年齢または性別を示さない。
【0260】
本明細書で使用される場合、用語「処置すること」または「処置」は、病態の症状、臨床的兆候、または根底にある病理を減少、停止、または逆行させて、対象の病態を安定化または改善することまたは対象の病態が対象が処置を受けなかった場合と同じ程度悪化する可能性を低下させることを含む。
【0261】
対象の処置方法に関して化合物の「治療的有効量」という用語は、（哺乳動物、好ましくはヒトに対する）所望の投薬レジメンの一部として投与される場合、例えば、任意の医学的処置に適用可能な妥当な利益／リスク比で、疾患または病態が処置されるために、または化粧品目的のために臨床的に許容可能な標準に従う、症状を軽減する、病態を改善する、または疾患病態の発症を遅らせる調製物における化合物（複数可）の量を指す。本明細書における治療的有効量は、患者の疾患状態、年齢、性別、及び体重、ならびに個体において所望の反応を引き起こすための抗体の能力などの要因に応じて変わり得る。
【0262】
本明細書で使用される場合、特定の疾患、障害、または病態を発症する「リスクのある」個体は、検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよく、また、本明細書に記載の処置方法の前に検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよい。「リスクのある」は、個体が、当該技術分野で知られているように、特定の疾患、障害、または病態の発症と相関する測定可能なパラメータである、１つ以上のリスク因子を有することを意味する。これらのリスク因子のうちの１つ以上を有する個体は、これらのリスク因子のうちの１つ以上を有さない個体よりも特定の疾患、障害、または病態を発症する可能性が高い。
【0263】
「慢性」投与は、初期の治療効果（活性）を長期間維持するように、急性様式とは対照的に連続した医薬品（複数可）の投与を指す。「間欠的」投与は、中断することなく連続的に投与されるのではなく、事実上周期的／定期的である処置を指す。
【0264】
本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せた」投与は、同時投与及び／または異なる時点での投与を含む。併せた投与はまた、異なる投薬頻度または間隔、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用することを含む、共製剤としての投与または別々の組成物としての投与を包含する。
【0265】
別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者が一般に理解する意味と同一の意味を有する。本明細書に記載のもの類似または同等の任意の方法及び物質も本発明の実践または試験において使用され得るが、好ましい方法及び物質をこれより説明する。本明細書で挙げられるすべての刊行物は、参照により本明細書に組み込まれて、刊行物が引用される方法及び／または物質、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ３ｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，（２００３））；ｔｈｅ ｓｅｒｉｅｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）：ＰＣＲ ２：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｍ．Ｊ．ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ ａｎｄ Ｇ．Ｒ．Ｔａｙｌｏｒ ｅｄｓ．（１９９５）），Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ａｎｄ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．（１９８７））；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ，ｅｄ．，１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．Ｍａｔｈｅｒ ａｎｄ Ｐ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ Ｄ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ，ｅｄｓ．，１９９３－８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ；Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ ａｎｄ Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）；Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）；ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）；Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９９）；Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．Ｊａｎｅｗａｙ ａｎｄ Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ，１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ，１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．，ｅｄ．，ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，１９８８－１９８９）；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．Ｓｈｅｐｈｅｒｄ ａｎｄ Ｃ．Ｄｅａｎ，ｅｄｓ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００）；Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｄ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９９）；Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．Ｚａｎｅｔｔｉ ａｎｄ Ｊ．Ｄ．Ｃａｐｒａ，ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９５）；及びＣａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｖ．Ｔ．ＤｅＶｉｔａ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）に記載されている広く利用されている方法論を開示し、記載する。
【0266】
核酸、ベクター及び宿主細胞
本開示の方法において使用するのに好適な抗体は、例えば、米国特許番号４，８１６，５６７に記載されているように、組換え方法及び組成物を使用して生成され得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び／またはＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸を含有する１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。そのような核酸を含有する宿主細胞も提供され得る。宿主細胞は、（１）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有し得る（例えば、形質導入されている）。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌である。
本開示の方法において使用するのに好適な抗体は、例えば、米国特許番号４，８１６，５６７に記載されているように、組換え方法及び組成物を使用して生成され得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び／またはＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸を含有する１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。そのような核酸を含有する宿主細胞も提供され得る。宿主細胞は、（１）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有し得る（例えば、形質導入されている）。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌である。
【0267】
抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体を作製する方法が本明細書に開示される。方法は、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体をコードする核酸を含有する本開示の宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養することを含む。いくつかの実施形態では、抗体はその後、宿主細胞（または宿主細胞培地）から回収される。
【0268】
本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体の組換え生成のため、抗体をコードする核酸は単離され、宿主細胞においてさらなるクローニング及び／または発現のための１つ以上のベクターに挿入される。そのような核酸は、慣用の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、シーケンシングされ得る。
【0269】
ある特定の実施形態では、本開示は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｓ、及びＣ１ｒタンパク質にそれぞれ結合する抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片、抗Ｃ１ｓ抗体Ｆａｂ断片、及び抗Ｃ１ｒ抗体Ｆａｂ断片を提供する。これらの抗体の高親和性Ｆａｂ断片は、血液腔内の補体活性化を選択的に阻害するのに好適である。これらの抗体の高親和性Ｆａｂ断片は、投与、例えば、皮下、筋肉内及び血管内投与に好適である。
【0270】
本開示の抗体、または本明細書に記載のその断片ポリペプチド（抗体を含む）のいずれかをコードする核酸配列を含有する好適なベクターには、限定されないが、クローニングベクター及び発現ベクターが含まれる。好適なクローニングベクターは、標準的な技術に従って構築され得、または当該技術分野で利用可能な多数のクローニングベクターから選択され得る。選択されるクローニングベクターは、使用されることが意図された宿主細胞に応じて変わり得る一方で、有用なクローニングベクターは通常、自己複製する能力を有し、特定の制限エンドヌクレアーゼのための単一の標的を保有し得、及び／またはベクターを含有するクローンを選択する際に使用され得るマーカーのための遺伝子を有し得る。好適な例には、プラスミド及び細菌ウイルス、例えば、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（例えば、ｐＢＳ ＳＫ＋）及びその誘導体、ｍｐｌ８、ｍｐｌ９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡ、及びシャトルベクター、例えば、ｐＳＡ３及びｐＡＴ２８が含まれる。これらの及び多くの他のクローニングベクターがＢｉｏＲａｄ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、及びＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎなどの商業的ベンダーから利用可能である。
【0271】
対象となる核酸を含有するベクターは、エレクトロポレーション、塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥ－デキストラン、または他の物質を用いるトランスフェクション；微粒子銃；リポフェクション；及び感染（例えば、ベクターはワクシニアウイルスなどの感染性物質である）を含む、多数の適切な手段のいずれかによって宿主細胞に導入され得る。ベクターまたはポリヌクレオチドを導入する選択はしばしば、宿主細胞の特徴に依存する。いくつかの実施形態では、ベクターは、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体をコードする１つ以上のアミノ酸配列を含有する核酸を含有する。
【0272】
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞には、原核生物または真核細胞が含まれる。例えば、本開示の抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合、細菌において生成され得る。細菌における抗体断片及びポリペプチドの発現について（例えば、米国特許番号５，６４８，２３７、５，７８９，１９９、及び５，８４０，５２３；ならびにＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４（Ｅ．ｃｏｌｉにおける抗体断片の発現について記載している））。他の実施形態では、本開示の抗体は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）において生成され得る（例えば、米国特許出願番号１４／２６９，９５０、米国特許番号８，９８１，０７１、Ｅｕｒ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９１ Ｊａｎ １；１９５（１）：２３５－４２）。発現後、抗体は、可溶性画分における細菌細胞ペーストから単離され得、さらに精製され得る。
【0273】
抗体スクリーニング
候補抗体は、補体活性化を調整する能力についてスクリーニングされ得る。そのようなスクリーニングは、ｉｎ ｖｉｔｒｏモデル、遺伝子変化した細胞もしくは動物、または精製タンパク質を使用して実施され得る。ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養システムなどの多様なアッセイがこの目的のために使用され得る。
候補抗体は、補体活性化を調整する能力についてスクリーニングされ得る。そのようなスクリーニングは、ｉｎ ｖｉｔｒｏモデル、遺伝子変化した細胞もしくは動物、または精製タンパク質を使用して実施され得る。ｉｎ ｖｉｔｒｏ培養システムなどの多様なアッセイがこの目的のために使用され得る。
【0274】
候補抗体はまた、結合アッセイなどによってコンピュータベースのモデリングを使用して同定され得る。抗体が結合するかどうか、またはそうでなければ補体活性に影響を及ぼすかどうかを決定するために様々なｉｎ ｖｉｔｒｏモデルが使用され得る。そのような候補抗体は、健康ドナーからの血漿を接触させ、補体活性化を（例えば、抗原Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡによって）決定することによって試験され得る。そのような抗体は、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））に対する効果についてｉｎ ｖｉｖｏモデルでさらに試験され得る。
【0275】
通常、複数のアッセイの混合は、様々な濃度に対する異なった反応を得るために異なる抗体濃度で並行して実行される。典型的には、これらの濃度のうちの１つは、陰性対照として、すなわち、ゼロ濃度または検出レベル未満で機能する。
【0276】
薬学的組成物及び投与
本開示の補体阻害剤（例えば、抗体）は、薬学的組成物の形態で投与され得る。
本開示の補体阻害剤（例えば、抗体）は、薬学的組成物の形態で投与され得る。
【0277】
本開示の阻害剤（例えば、抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体）の治療製剤は、所望の純度を有する阻害剤を任意の薬学的に許容可能な担体、賦形剤または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．［１９８０］）と混合することによって保存のために凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製され得る。許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性であり、これには緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖類、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。
【0278】
リポフェクションまたはリポソームもまた、抗体または抗体断片、または抗体誘導体を細胞に送達するために使用され得、標的タンパク質の結合ドメインに特異的に結合するエピトープまたは最小断片が好ましい。
【0279】
阻害剤はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル内に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、及びナノカプセル）中、またはマクロ乳濁液中に取り込まれ得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
【0280】
投与のために使用される製剤は無菌であり得る。これは、滅菌濾過膜を介する濾過によって容易に達成される。
【0281】
持続放出調製物が調製され得る。持続放出調製物の好適な例には、阻害剤を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが含まれ、これらのマトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。持続放出マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許番号３，７７３，９１９）、Ｌ－グルタミン酸とγエチル－Ｌ－グルタミン酸エステルのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、分解性乳酸－グリコール酸コポリマー、例えば、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸－グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）、及びポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。エチレン－酢酸ビニル及び乳酸－グリコール酸などのポリマーが１００日間にわたる分子の放出を可能にする一方で、ある特定のヒドロゲルは、より短い期間にわたってタンパク質を放出する。
【0282】
本開示の抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体ならびに組成物は典型的には、局所、非経口、皮下、腹腔内、肺内、鼻腔内、及び病巣内投与を含むがこれらに限定されない様々な経路によって投与される。非経口投与経路には、筋肉内、静脈内、動脈内、腹腔内、髄腔内、または皮下投与が含まれる。
【0283】
薬学的組成物はまた、所望の製剤に応じて、動物またはヒト投与のための薬学的組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、希釈剤の薬学的に許容可能な非毒性担体を含み得る。希釈剤は、組み合わせの生物学的活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、緩衝水、生理的生理食塩水、ＰＢＳ、リンゲル液、デキストロース溶液、及びハンクス溶液である。また、薬学的組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、非免疫原性安定化剤、賦形剤などを含み得る。組成物はまた、おおよその生理的条件のための追加の物質、例えば、ｐＨ調整及び緩衝剤、毒性調整剤、湿潤剤及び洗浄剤を含み得る。
【0284】
組成物はまた、例えば、抗酸化剤などの多様な安定化剤のいずれかを含み得る。薬学的組成物がポリペプチドを含む場合、ポリペプチドは、ポリペプチドのｉｎ ｖｉｖｏ安定性を向上させるか、またはそうでなければその薬理学的特性を向上させる（例えば、ポリペプチドの半減期を増加させる、その毒性を低下させる、他の薬物動態及び／または薬力学的特性を向上させる、または溶解性もしくは取り込みを向上させる）様々なよく知られている化合物と複合体化され得る。そのような改変または錯化剤の例には、スルフェート、グルコネート、シトレート及びホスフェートが含まれる。組成物のポリペプチドはまた、それらのｉｎ ｖｉｖｏ属性を向上させる分子と複合体化され得る。そのような分子には、例えば、炭水化物、ポリアミン、アミノ酸、他のペプチド、イオン（例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン）、及び脂質が含まれる。様々なタイプの投与に好適な製剤に関するさらなる指針は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，１７ｔｈ ｅｄ．（１９８５）で見ることができる。薬物送達のための方法の簡潔なレビューについては、Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７－１５３３（１９９０）を参照されたい。
【0285】
活性成分の毒性及び治療的有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な用量）及びＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な用量）を決定することを含む、細胞培養及び／または実験動物における標準的な薬学的手順に従って決定され得る。毒性と治療効果との間の用量比は治療指数であり、それは比ＬＤ５０／ＥＤ５０として表され得る。高い治療指数を示す化合物が好ましい。
【0286】
細胞培養及び／または動物研究及び／またはヒト臨床試験から得られたデータは、ヒトのための投薬量の範囲を策定する際に使用され得る。活性成分の投薬量は典型的には、低い毒性でＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内に収まる。投薬量は、用いられる投薬形態及び利用される投与経路に応じてこの範囲内で変わり得る。
【0287】
本明細書に記載の薬学的組成物は、多様な異なる方法で投与され得る。例には、経口、鼻腔内、直腸、局所、腹腔内、静脈内、筋肉内、皮下、真皮下、経皮、髄腔内、及び頭蓋内方法を介して薬学的に許容可能な担体を含有する組成物を投与することが含まれる。
【0288】
非経口投与に好適な製剤には、抗酸化剤、緩衝液、静菌剤、及び製剤を意図されるレシピエントの血液と等張にする溶質を含有し得る水性及び非水性の等張性滅菌注射溶液、ならびに懸濁剤、可溶化剤、増粘剤、安定化剤、及び防腐剤を含み得る水性及び非水性滅菌懸濁液が含まれる。
【0289】
薬学的組成物を製剤化するために使用される成分は、好ましくは、高純度のものであり、潜在的に有害な混入物質を実質的に含まない（例えば、少なくとも国の食品（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄ）グレード、通常は少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも薬学的グレード）。さらに、非経口的使用のために意図される組成物は通常、無菌である。所与の化合物が使用前に合成されなければならない限り、得られる生成物は、合成または精製プロセスの間に存在し得る任意の潜在的に毒性の物質、特に任意のエンドトキシンは典型的には実質的に含まれない。非経口投与のための組成物もまた、典型的には実質的に等張性であり、ＧＭＰ条件下で生成される。
【0290】
本開示の組成物は、任意の医学的に適切な手順、例えば、血管内（静脈内、動脈内、毛細血管内）投与、筋肉内、または皮下を使用して投与され得る。組成物は、自動注入機または注入デバイス、例えば、ミニポンプまたはオンボディ注入機を介して投与され得る。
【0291】
特定の患者に与えられる治療組成物の有効量は、多様な要素に依存し得、そのいくつかは患者毎に異なり得る。適任の臨床医は、患者に投与するための治療剤の有効量を決定することができる。薬剤の投薬量は、処置、投与経路、治療剤の特質、患者の治療剤に対する感受性などに依存する。ＬＤ５０動物データ、及び他の情報を利用して、臨床医は、投与経路に応じて、個体のための最大安全用量を決定し得る。通常の技術を利用して、適任の臨床医は、日常的な臨床試験の過程で特定の治療組成物の投薬量を最適化することができる。組成物は、一連の複数回の投与で対象に投与され得る。治療組成物に関して、定期的な周期的投与が時に必要とされる場合があり、または望ましい場合がある。治療レジメンは薬剤に応じて変わる；例えば、いくつかの薬剤は、１日１回または１日２回のベースで長期間摂取され得る一方で、より選択的な薬剤は、例えば、１、２、３日またはそれ以上、１週以上、１ヶ月以上などのより規定された期間で１日１回、１日２回、週２回、週１回などで摂取されるように投与され得る。
【0292】
いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ～６０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ～７０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ～９０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～１１０ｍｇ／ｋｇ、１１０ｍｇ／ｋｇ～１２０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ～１３０ｍｇ／ｋｇ、１３０ｍｇ／ｋｇ～１４０ｍｇ／ｋｇ、または１４０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。抗体は、週１回、２週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。抗体は、週１回、２週に１回、３週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週毎に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、または７ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回投与される。
【0293】
いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、静脈内注射または注入によって、筋肉内注射によって、または皮下注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回の用量よりも高い初期予備用量で投与される。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、その対応する全長抗体と比較してより短い半減期を有し、例えば、抗体断片は、急速に消失し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存し、または抗体は、対象の血液腔内のＣ１ｑを選択的に阻害し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存する。いくつかの実施形態では、血液腔は、動脈、細動脈、毛細血管、小静脈、または静脈などの血管内に限定される。血液腔は、血清、血小板、内皮細胞、血液細胞、または造血細胞を含み得る。いくつかの実施形態では、対象の血液腔内のＣ１ｑの阻害は、非常に血管に富む組織における組織損傷を減少させる。非常に血管に富む組織の例は、腎臓、肺胞、毛細血管床、または糸球体である。
【0294】
製剤は、血液腔内を含む、身体内での保持及び安定化のために最適化され得る。いくつかの実施形態では、薬剤が血液腔に投与される場合、薬剤は、血液腔内で保持され、拡散しないことまたはそうでなければ血管外に（例えば、周囲組織に）分布しないことが望ましい。安定化技術には、分子量の増加を達成するために、架橋、多量体化、またはポリエチレングリコール、ポリアクリルアミド、中性タンパク質担体などの基への連結が含まれる。
【0295】
保持を増加させるための他のストラテジーには、生分解性または生体内分解性埋込物における薬剤の取り込みが含まれる。治療的活性剤の放出の速度は、ポリマー性マトリックスを介する輸送速度、及び埋込物の生分解によって制御される。ポリマー障壁を介する薬物の輸送はまた、化合物溶解性、ポリマー親水性、ポリマー架橋の程度、ポリマー障壁が薬物に対してより透過性となるような水吸収時のポリマーの膨張、埋込物の形状などによって影響を受ける。埋込物は、埋込の部位として選択された領域のサイズ及び形状にふさわしい寸法のものである。埋込物は、粒子、シート、パッチ、プラーク、繊維、マイクロカプセルなどであり得、選択された挿入部位と適合する任意のサイズまたは形状のものであり得る。
【0296】
埋込物は、モノリシック（すなわち、ポリマーマトリックスを介して均一に分布した活性剤を有する）であり、または封入され得る（活性剤のリザーバがポリマーマトリックスによって封入される）。用いられるポリマー組成物の選択は、投与の部位、所望の処置期間、患者忍容性、処置される疾患の特質などに応じて異なる。ポリマーの特性には、埋込の部位での生分解性、対象となる薬剤との相溶性、封入の容易性、生理的環境における半減期が含まれる。
【0297】
用いられ得る生分解性ポリマー組成物は、分解された場合にモノマーを含む生理的に許容可能な分解生成物をもたらす有機エステルまたはエーテルであり得る。無水物、アミド、オルトエステルなどが、それ自体でまたは他のモノマーと組み合わせて利用され得る。ポリマーは、縮合ポリマーであり得る。ポリマーは、架橋されていても架橋されていなくてもよい。特に興味深いものは、ヒドロキシ脂肪族カルボン酸のポリマー（ホモポリマーまたはコポリマーのいずれか）、及び多糖類である。対象となるポリエステルには、Ｄ－乳酸、Ｌ－乳酸、ラセミ乳酸、グリコール酸のポリマー、ポリカプロラクトン、及びそれらの組み合わせが含まれる。Ｌ－乳酸またはＤ－乳酸を用いることにより、徐々に生分解するポリマーが達成される一方で、分解はラセミ体で実質的に促進される。グリコール酸及び乳酸のコポリマーが特に興味深く、その場合、生分解の速度が乳酸に対するグリコール酸の比によって制御される。最も急速に分解するコポリマーは、おおよそ等量のグリコール酸及び乳酸を有し、いずれのホモポリマーも分解に対してより抵抗性である。乳酸に対するグリコール酸の比はまた、埋込物の脆さに影響を与え、より柔軟性のある埋込物がより大きな形状にとって望ましい。対象となる多糖類には、アルギン酸カルシウム、及び官能化セルロース、特に水不溶性であり、分子量が約５ｋＤ～５００ｋＤであることによって特性化されるカルボキシメチルセルロースエステルなどがある。生分解性ヒドロゲルも本開示の埋込物に用いられ得る。ヒドロゲルは典型的には、液体を吸収する能力によって特性化されるコポリマー物質である。用いられ得る例示的な生分解性ヒドロゲルは、Ｈｅｌｌｅｒ ｉｎ：Ｈｙｄｒｏｇｅｌｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｎ．Ａ．Ｐｅｐｐｅｓ ｅｄ．，Ｖｏｌ．ＩＩＩ，ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ，Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ，Ｆｌａ．，１９８７，ｐｐ １３７－１４９に記載されている。
【0298】
キット
本開示はまた、薬学的組成物の成分の１つ以上が充填された１つ以上の容器を含む薬学的パックまたはキットを提供する。医薬品または生物学的製品の製造、使用、または販売を規制する政府当局が定めた形式の通知が、そのような容器（複数可）に付属し得、この通知は、ヒトへの投与に対する製造、使用または販売の当局による承認を反映する。
本開示はまた、薬学的組成物の成分の１つ以上が充填された１つ以上の容器を含む薬学的パックまたはキットを提供する。医薬品または生物学的製品の製造、使用、または販売を規制する政府当局が定めた形式の通知が、そのような容器（複数可）に付属し得、この通知は、ヒトへの投与に対する製造、使用または販売の当局による承認を反映する。
【0299】
本開示のキットは、精製された抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒまたは抗Ｃ１ｓ抗体を含む１つ以上の容器及び当該技術分野で知られている方法に従って使用するための指示書を含み得る。通常、これらの指示書は、当該技術分野で知られている任意の方法に従って、疾患を処置または診断するための阻害剤の投与の説明を含む。キットは、個体が血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を有するかどうかの同定に基づいて処置に好適な個体を選択する説明をさらに含み得る。
【0300】
指示書は通常、意図された処置のための投薬量、投薬スケジュール、及び投与経路に関する情報を含む。容器は、単位用量、バルクパッケージ（例えば、複数用量パッケージ）または副次単位用量であり得る。本開示のキットにおいて供給される指示書は典型的には、ラベルまたはパッケージ挿入物（例えば、キットに含まれる紙シート）上の書面による指示書であるが、機械が読み取り可能な指示書（例えば、磁気または光学的保存ディスク上に保持される指示書）も許容可能である。
【0301】
ラベルまたはパッケージ挿入物は、組成物が血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を処置するために使用されることを示し得る。指示書は、本明細書に記載の方法のいずれかを実施するために提供され得る。
【0302】
本開示のキットは、好ましくは好適な包装内に配置される。好適な包装には、バイアル、ボトル、瓶、フレキシブル包装（例えば、密閉マイラーまたはプラスチックバッグ）などが含まれるがこれらに限定されない。特定のデバイス、例えば、吸入具、鼻投与デバイス（例えば、噴霧器）、自動注入機、または注入デバイス、例えば、ミニポンプまたはオンボディ注入機と組み合わせて使用するためのパッケージも企図される。キットは、滅菌アクセスポート（例えば、容器は、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈用溶液袋またはバイアルであり得る）を有し得る。容器はまた、滅菌アクセスポート（例えば、容器は、皮下注射針によって穿刺可能なストッパーを有する静脈用溶液袋またはバイアルであり得る）を有し得る。組成物における少なくとも１つの活性剤は、古典的補体経路の阻害剤である。容器は、第２の薬学的活性剤をさらに含み得る。
【0303】
キットは、追加の成分、例えば、緩衝液及び説明情報を任意に提供し得る。通常、キットは、容器及び容器上のまたは容器に関連するラベルまたはパッケージ挿入物（複数可）を含む。
【0304】
対象となる病態
対象となる代表的な病態には、多様な血液障害及び他の血液学的疾患が含まれる。
対象となる代表的な病態には、多様な血液障害及び他の血液学的疾患が含まれる。
【0305】
用語「血液障害」または「血液学的疾患」は、最も広い意味で使用され、それには急性または慢性血液病態を含む任意の病理学的状態が含まれる。そのような疾患は通常、血栓症、炎症及び溶血によって特性化される。
【0306】
補体成分Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合する抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体を投与することを含む、血液障害を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする本方法のための対象となる様々な血液状態。そのような病態には、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症）が含まれる。
【0307】
自己免疫性溶血性貧血（Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ ａｎｅｍｉａ）（または「免疫性溶血性貧血」とも称される自己免疫性溶血性貧血（ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｈｅｍｏｌｙｔｉｃ ａｎａｅｍｉａ）（ＡＩＨＡ））は、対象自身の赤血球（ＲＢＣ）に対して仕向けられた抗体がそれらを破裂（溶解）させ、不十分な血漿濃度をもたらす場合に生じる。ＲＢＣの寿命は、正常な１００～１２０日から重症例ではわずか数日に減少する。ＲＢＣの細胞内成分は、循環血液及び組織に放出され、この病態の特徴的症状の一部をもたらす。抗体は通常、高頻度抗原に対して仕向けられ、一般的に同種異系ＲＢＣ（本人以外に由来するＲＢＣ、例えば、輸血の場合）に作用する。ＡＩＨＡは、温式自己免疫性溶血性貧血または寒冷自己免疫性溶血性貧血（寒冷凝集素症及び発作性寒冷ヘモグロビン尿症を含む）のいずれかとして分類される。これらの分類は、疾患の発病に関与する自己抗体の特性に基づく。各々は、根底にある異なる原因、管理、及び予後を有し、ＡＩＨＡを有する患者を処置する場合に分類が重要となる。
【0308】
寒冷凝集素症は、身体の免疫系がそれ自身の赤血球を誤って攻撃し、破壊するタイプの自己免疫性溶血性貧血である。罹患したヒトの血液が低温（３２°～５０°Ｆ）に曝露された場合、細菌を正常に攻撃するある特定のタンパク質（ＩｇＭ抗体）は、それら自体を赤血球に付着させ、それらを互いに結合させて塊とする（凝集）。これは最終的に、赤血球を時期尚早に破壊し（溶血）、貧血ならびに他の関連する兆候及び症状をもたらす。寒冷凝集素症は、原発性（未知の原因）または感染症、別の自己免疫疾患、もしくはある特定のがんなどの根底にある病態に起因する二次性であり得る。処置は、病態の重症度、各ヒトに存在する兆候及び症状、ならびに根底にある原因を含む多くの要素に依存する。
【0309】
兆候及び症状には、例えば、疼痛、疲労感、レイノー症候群、リベド皮膚変化、皮膚潰瘍、発熱、蒼白、黄疸、じんましん皮膚発疹、ヘモグロビン尿症、ヘモグロビン血症、貧血、及び腎臓疾患または急性腎不全が含まれる。症状は、低温への曝露後に生じ得る。
【0310】
対象は、赤血球上の「Ｉ抗原」に結合する凝集性自己抗体の存在または量（力価）を検出するためのアッセイを使用してＣＡＤを有するものとして同定され得る。抗体は、モノクローナル（例えば、モノクローナルＩｇＭまたはＩｇＡ）またはポリクローナルであり得る。対象はまた、完全血球算定（ＣＢＣ）、尿検査、生化学的研究、及び血液における溶血を試験するためのクームス試験のうちの１つ以上を使用してＣＡＤを有するものとして診断され得る。例えば、生化学的研究は、ラクターゼデヒドロゲナーゼレベルの上昇、非抱合ビリルビンレベルの上昇、低いハプトグロビンレベル、及び／または遊離血漿ヘモグロビンの存在を検出するために使用され得、これらのすべては急性溶血の指標であり得る。ＣＡＤを検出するために使用され得る他の試験には、血清における補体レベルを検出することが含まれる。例えば、溶血の急性期中の消費のため、測定される血漿補体レベル（例えば、Ｃ２、Ｃ３、及びＣ４）は、ＣＡＤで減少する。
【0311】
温暖凝集素溶血性貧血は、自己抗体による健康な赤血球の早期破壊によって特性化される自己免疫性障害である。ほとんどの場合、温式抗体溶血性貧血の原因は未知である。これらの場合は、原発性温式抗体溶血性貧血または特発性温式抗体溶血性貧血と称され得る。障害はまた、より大きな障害の一部として生じ得る。そのような場合は、二次的温式抗体溶血性貧血として知られている。生じる特定の症状は、発症の速度、健康な赤血球の破壊の速度及び根底にある障害の存在によって変化し得、それに依存し得る。一部の個体、特に貧血の発症が緩やかなものは、いかなる明らかな症状も有さない場合がある（無症候性）。罹患した個体は最終的に、皮膚の異常な青白さ（蒼白）、疲労感、労作時の呼吸困難、めまい及び動悸を発症し得る。皮膚及び白目の黄変（黄疸）ならびに脾臓の肥大（脾腫）もまた、温式抗体溶血性貧血を有する個体における一般的な所見である。脾腫により、罹患した個体は、腹部における膨満感または満腹感を有することになり得る。場合により、肝臓の肥大（肝腫大）も一部の症例で生じ得る。重度の症例を有する個体、特に急速（急性）発症を有する個体では、意識の喪失（気絶）、胸部疼痛（狭心症）、異常に急速な心拍（頻拍）、及び心不全を含む、より重篤な合併症を発症し得る。一部の個体は、（ＩｇＧ抗体によって引き起こされるより一般的な形態とは対照的に）ＩｇＭ抗体によって引き起こされる稀な形態の温式抗体溶血性貧血を有する。
【0312】
自己免疫性血小板減少症（ＩＴＰ）は通常、正常な骨髄を有し、血小板減少症の他の原因がない、孤立性血小板数減少（血小板減少症）として知られている。それは、特徴的な紫斑発疹及び出血傾向の増加を引き起こす。２つの異なる臨床的症候群が小児における急性病態及び成人における慢性病態として現れる。急性形態はしばしば、感染症の後に生じ、２ヶ月以内に自然治癒する。慢性免疫性血小板減少症は、６ヶ月よりも長く持続し、具体的な原因は不明である。
【0313】
ＩＴＰは、完全血球算定（一般的な血液検査）において少ない血小板数によって診断される。しかしながら、診断は、少ない血小板数の他の原因の除外に依存するので、骨髄生検などの追加の調査が一部の症例で必要であり得る。
【0314】
軽度の症例では、慎重な観察のみが必要とされ得るが、極めて低い数または有意な出血は、コルチコステロイド、静脈内免疫グロブリン、抗Ｄ免疫グロブリン、または免疫抑制薬での処置を駆り立て得る。難治性ＩＴＰ（従来の処置に対して反応性ではない）は、脾臓摘出を必要とし得る。極めて低い数を伴う重度の出血では血小板輸血が使用され得る。時に身体は、異常に大きな血小板を生成することによって補う場合がある。
【0315】
兆候には、あざ（紫斑病）及び点状出血（小さなあざ）の自然形成、特に四肢のもの、鼻孔及び／または歯肉からの出血、ならびに月経過多（過剰な月経出血）が含まれ、これらのいずれかは、血小板数が１μｌ当たり２０，０００未満である場合に生じ得る。極めて低い数（１μｌ当たり＜１０，０００）は、口内または他の粘膜上の血腫（血液の塊）の自然形成をもたらし得る。軽度の裂傷または剥離からの出血時間は通常、長くなる。極端に低い数（１μｌ当たり＜５，０００）による重度で致命的な可能性がある合併症には、くも膜下出血または脳内出血（頭蓋骨または脳内の出血）、下部消化管出血または他の内部出血が含まれる。極端に低い数を有するＩＴＰ患者は、自動車事故で経験され得るように、鈍的腹部外傷によって引き起こされる内部出血を起こしやすい。これらの合併症は、血小板数が１μｌ当たり２０，０００を超える場合は可能性が低い。
【0316】
ドナース・ランドスタイナー試験陽性溶血性貧血としても知られている発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）は、ＩｇＧ自己抗体媒介補体活性化によって誘発される赤血球の血管内破壊によって引き起こされる自己免疫性溶血性貧血である。典型的な症状は、感染性物質への曝露後に小児において生じ、悪寒、発熱、倦怠感、腹痛、背中または脚におけるうずく痛み、吐き気、黄疸、及び暗色尿などの兆候及び症状からなる。
【0317】
ＰＣＨは、ドナース・ランドスタイナー試験と呼ばれる特別な試験で診断され、その場合、患者の血清が低温で３０分間インキュベートされ、続いて体温まで上昇され、これはｉｎ ｖｉｔｒｏで赤血球の溶血を引き起こす。それは通常、自己回復する急性病態である。しかしながら、ある特定の場合では、急性溶血性発病またはさらに慢性溶血が生じ、ステロイド、免疫抑制剤、または生物学的薬剤、例えば、リツキシマブでの療法を必要とし得る。
【0318】
ヒューズ症候群とも称される抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）は、一般に抗リン脂質抗体によって引き起こされる自己免疫性の凝固亢進状態である。ＡＰＳは、動脈及び静脈における血栓（血栓症）ならびに妊娠関連合併症、例えば、流産、死産、早産、及び重度の妊娠高血圧腎症を誘発する。
【0319】
診断基準は、１つの臨床的事象、すなわち、血栓症または妊娠合併症、及びループス抗凝固因子、または抗β２－糖タンパク質－Ｉのいずれかの存在を確認する典型的には少なくとも３ヶ月間隔の２回の抗体血液検査を必要とし、β２－糖タンパク質－Ｉ抗体は、抗カルジオリピン抗体のサブセットであるため、抗カルジオリピンアッセイは、あまり特異的ではない代用として実施され得る。
【0320】
抗リン脂質症候群は、原発性または二次性であり得る。原発性抗リン脂質症候群は、任意の他の関連する疾患の非存在下で生じる。二次性抗リン脂質症候群は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）などの他の自己免疫疾患と共に生じる。稀な症例では、ＡＰＳは、全身性血栓症により急速な器官不全をもたらす；これは、「劇症型抗リン脂質症候群」（ＣＡＰＳ）と称され、高い死亡リスクと関連する。抗リン脂質症候群はしばしば、血栓症のさらなる発症のリスクを低下させ、妊娠の予後を改善するために、ヘパリンなどの抗凝固薬での処置を必要とする。
【0321】
エバンス症候群は、典型的には自己免疫性溶血性貧血と免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）との同時または逐次的な関連性によって特性化される慢性血液学的障害である。その症候群は、小児期または成人期の両方で現れ得る。血小板減少症の発症は、ＡＩＨＡの発症に先行し、または同時に生じ、または後に続く場合がある。症状の重症度及びＡＩＨＡ及び／またはＩＴＰの発症間の遅延は様々である。成人の非同時症例では、発症間の遅延は、平均で４年である。ＩＴＰはしばしば、鼻血、点状出血、紫斑病、及び斑状出血を伴う皮膚粘膜出血によって明らかになる。重度の血小板減少症の場合、血尿、消化管出血及び／または脳髄膜出血が稀な症例で観察され得る。
【0322】
エバンス症候群は、非交差反応性自己抗体が、赤血球、血小板、及び時に好中球上の異なる抗原決定基に対して標的化される自己免疫性障害である；しかしながら、正確な病態生理学的メカニズムは不明である。Ｔヘルパーの減少及びＴサプレッサーリンパ球集団の増加の観察により、血球減少症は、Ｔ細胞異常に関連し得ることが示唆される。エバンス症候群はしばしば、他の疾患、例えば、全身性エリテマトーデス、抗リン脂質症候群、自己免疫性リンパ球増殖性症候群、及び分類不能型免疫不全症に関連する。
【0323】
診断は、好中球減少症（好中球数＜１５００／マイクロＬ）と関連するまたはしない、貧血（ヘモグロビンレベル＜１２ｇ／ｄＬ）及び血小板減少症（血小板数＜１００，０００／マイクロＬ）を示す完全血球算定に基づく。上昇した乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）及び／または直接ビリルビンレベル、及び低下したハプトグロビンレベルは、溶血を示している場合がある。直接抗グロブリン試験（クームス試験）の陽性は、赤血球（ＲＢＣ）抗原を標的とする抗体の存在を確認する。血小板及び好中球の両方を標的とする自己抗体の存在も観察され得る。
【0324】
鑑別診断には主に、微小血管障害（例えば、血栓性または血小板減少性紫斑病）が含まれる。ほとんどの症例は散発性である。家族性の症例は、主に根底にある原発性免疫不全の背景で例外的に観察された。
【0325】
免疫抑制療法は、ＩＴＰのための静脈内免疫グロブリンと組み合わされ得、第一選択の処置を構成する。コルチコステロイド（プレドニゾン）の投与が処置の主力であるが、リツキシマブ、シクロスポリン、アザチオプリン、シクロホスファミド、及びダナゾールなどの他の薬物が難治性症例のために処方され得る。脾臓摘出は第三選択の処置として実施される；しかしながら、長期寛解は頻繁ではなくなり、患者は高い敗血症リスクを示す。重度の症例では、造血幹細胞移植が必要とされ得る。エバンス症候群は、処置にかかわらずＡＩＨＡ及び／またはＩＴＰの寛解及び再燃の交互期間を有し得、これは、重度の血小板減少症及び好中球減少症の場合、重度の出血及び感染症のため、有意な罹患率及び死亡率に関連し得る。
【0326】
胎児及び新生児同種免疫性血小板減少症（ＦＮＡＩＴ）とも称される新生児同種免疫性血小板減少症（ＮＡＩＴ）は、血小板数が減少する（血小板減少症）、胎児及び新生児に影響を及ぼす血液障害である。血小板抗原は、父親及び母親の両方から受け継がれる。ＦＮＡＩＴは典型的には、父親から受け継がれ、母親には存在しない血小板抗原に特異的な抗体によって引き起こされる。胎児母体輸血（または胎児母体出血）により、これらの抗原は母親の免疫系によって非自己として認識されるようになり、その後、胎盤を通過する同種反応性抗体の生成を伴う。ＮＡＩＴは通常、母親血小板特異的同種抗体及び稀にヒト白血球抗原（ＨＬＡ）同種抗体（血小板によって発現する）が、血小板が対応する抗原を発現する胎児に胎盤通過することよって引き起こされる。
【0327】
通常、血小板減少症は軽度であり、罹患した新生児は概ね無症候のままである。これらの場合、治療的介入は適用されない。重度の血小板減少症では、新生児は、出産時または出産後数時間で出血性合併症を示し得る。最も重度の合併症は頭蓋内出血であり、症例のおよそ１０％で死亡または２０％で神経性後遺症をもたらす。
【0328】
ＮＡＩＴの症例の約８０％は血小板抗原ＨＰＡ－１ａに対する抗体によって、１５％は抗ＨＰＡ－５ｂによって、５％は他の抗体（例えば、ＨＰＡ－１ｂ、ＨＰＡ－１５、ＨＰＡ－３及びＨＰＡ－９ｂ）によって引き起こされる。ＨＰＡ－１ａは、米国の集団の９８％に存在し、ＨＰＡ－１ａ陰性である女性のおよそ２％は、妊娠中にＦＮＡＩＴのリスクがあり得ることを示唆している。
【0329】
胎児及び新生児の溶血性疾患（ＨＤＦＮ）とは異なり、ＮＡＩＴは、症例の最大で５０％において最初の妊娠中に生じ、罹患した胎児は、妊娠中に極めて早期（血小板抗原の発達と一致する妊娠２０週程度の早期、及び子宮における時間の大部分）に重度の血小板減少症（＜５０，０００／μＬ）を発症し得る。通常、血小板減少症は、妊娠が進展するにつれて増加する。最初の妊娠中、ＮＡＩＴはしばしば、新生児が点状出血、打撲傷または頭蓋内出血を含む血小板減少症の典型的な症状を示す場合、出生するまで検出されない。子宮内頭蓋内出血は、罹患した症例の約１０％～３０％で生じる。ＮＡＩＴは、血小板減少症による頭蓋内出血の症例の大部分において根底にある原因と考えられる。出血のリスクは血小板数と逆相関し、血小板数が１００，０００／μＬ未満である場合にリスクが最も高い。
【0330】
ＮＡＩＴの再発は、不適合胎児の後続妊娠（すなわち、標的血小板抗原も保有する後続妊娠）において８０％超と推定されている。ＮＡＩＴの後続の症例は、同等またはより重度であり得る。ＦＮＡＩＴに対する胎児の反応は様々であり、代償的髄外造血を含み得る。稀に、胎児水腫が発症し得る。胎児貧血（赤血球不適合性の非存在下）も生じ得る。
【0331】
処置方法
補体活性化を阻害する薬剤を投与することによって、血液細胞上の補体の沈着が防止される。そのような薬剤には、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体阻害剤が含まれる。他の薬剤には、天然補体の発現を上方制御する阻害剤、または血小板もしくは血液細胞（例えば、赤血球、単球、好中球）におけるＣ１ｑ、Ｃ１ｒまたはＣ１ｓ合成を下方制御する薬剤、補体活性化を阻止する薬剤、補体活性化のためのシグナルを阻止する薬剤などが含まれ得る。
補体活性化を阻害する薬剤を投与することによって、血液細胞上の補体の沈着が防止される。そのような薬剤には、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体阻害剤が含まれる。他の薬剤には、天然補体の発現を上方制御する阻害剤、または血小板もしくは血液細胞（例えば、赤血球、単球、好中球）におけるＣ１ｑ、Ｃ１ｒまたはＣ１ｓ合成を下方制御する薬剤、補体活性化を阻止する薬剤、補体活性化のためのシグナルを阻止する薬剤などが含まれ得る。
【0332】
いくつかの態様では、血液障害を予防し、その発症リスクを低下させ、またはその処置をする方法が開示される。そのような方法は、Ｃ１ｑ阻害剤を対象に投与することを含む。本明細書に記載の本発明の任意の態様に適用され得る多数の実施形態がさらに提供される。例えば、いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ阻害剤は、抗体、アプタマー、アンチセンス核酸または遺伝子編集剤である。いくつかの実施形態では、阻害剤は、抗Ｃ１ｑ抗体である。抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得、または循環もしくは組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進し得る。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論、６：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論、または２．５：１～１．０：１もしくは１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。
【0333】
方法は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの生物学的活性を阻害する。例えば、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（５）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（６）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（７）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（８）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（９）Ｂアミロイドに対するＣ１ｑ結合、または（１０）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合。他の実施形態では、Ｃ１ｑの生物学的活性は、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化である。
【0334】
いくつかの実施形態では、ＣＨ５０溶血は、ヒトＣＨ５０溶血を含む。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能であり得る。
【0335】
いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、もしくは抗体断片、またはその抗体誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。抗体断片の例は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、及び一本鎖抗体分子である。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインを含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗体断片である。抗体は、皮下もしくは筋肉内注射、または静脈内注射もしくは注入などの非経口注射または注入によって投与され得る。
【0336】
いくつかの実施形態では、抗体は、全長抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１０ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇ、５０ｍｇ／ｋｇ～６０ｍｇ／ｋｇ、６０ｍｇ／ｋｇ～７０ｍｇ／ｋｇ、７０ｍｇ／ｋｇ～８０ｍｇ／ｋｇ、８０ｍｇ／ｋｇ～９０ｍｇ／ｋｇ、９０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ、１００ｍｇ／ｋｇ～１１０ｍｇ／ｋｇ、１１０ｍｇ／ｋｇ～１２０ｍｇ／ｋｇ、１２０ｍｇ／ｋｇ～１３０ｍｇ／ｋｇ、１３０ｍｇ／ｋｇ～１４０ｍｇ／ｋｇ、または１４０ｍｇ／ｋｇ～１５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの間の用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に投与される。抗体は、週１回、２週に１回、３週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、７５ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に週１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に２週毎に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に３週に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１００ｍｇ／ｋｇの用量で静脈内注射または注入によって対象に月１回投与される。抗体は、週１回、２週に１回、または月１回投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、１ｍｇ／ｋｇ～３ｍｇ／ｋｇ、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～７ｍｇ／ｋｇ、または７ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で皮下または筋肉内注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回投与される。
【0337】
いくつかの実施形態では、抗体は、抗体断片である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、静脈内注射もしくは注入によって、筋肉内注射によって、または皮下注射によって対象に投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．１ｍｇ／ｋｇ～１ｍｇ／ｋｇ、１ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、０．３ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇの間の用量で投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体断片は、毎日、２日に１回、週１回、２週に１回、または月１回の用量よりも高い初期予備用量で投与される。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇ、５ｍｇ／ｋｇ～１０ｍｇ／ｋｇ、１０ｍｇ／ｋｇ～１５ｍｇ／ｋｇ、１５ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、２０ｍｇ／ｋｇ～２５ｍｇ／ｋｇ、２５ｍｇ／ｋｇ～３０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／ｋｇ～３５ｍｇ／ｋｇ、３５ｍｇ／ｋｇ～４０ｍｇ／ｋｇ、４０ｍｇ／ｋｇ～４５ｍｇ／ｋｇ、または４５ｍｇ／ｋｇ～５０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、初期予備用量は、３ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇの間である。いくつかの実施形態では、抗体断片は、その対応する全長抗体と比較してより短い半減期を有し、例えば、抗体断片は、急速に消失し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存し、または抗体は、対象の血液腔内のＣ１ｑを選択的に阻害し、それにより対象の血液腔外のＣ１ｑ活性を温存する。いくつかの実施形態では、血液腔は、動脈、細動脈、毛細血管、小静脈、または静脈などの血管内に限定される。血液腔は、血清、血小板、内皮細胞、血液細胞、または造血細胞を含み得る。いくつかの実施形態では、対象の血液腔内のＣ１ｑの阻害は、非常に血管に富む組織における組織損傷を減少させる。非常に血管に富む組織の例は、腎臓、肺胞、毛細血管床、または糸球体である。
【0338】
いくつかの実施形態では、血液障害は、補体媒介性血液障害である。いくつかの実施形態では、血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、冷式抗体溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、糸球体腎炎、抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、感染症、または薬物誘導性血液学的障害である。感染症は、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、またはコロナウイルスであり得る。コロナウイルスの例は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ、ＨＫＵ１、及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２から選択される。いくつかの実施形態では、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２である。いくつかの実施形態では、対象は、気道または血液試料から逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（ＲＴ－ＰＣＲ）によって確認されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染症を有する。血液障害は、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、温式自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、ループス腎炎、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、または免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）であり得る。薬物誘導性血液学的障害の例は、再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、及び血小板減少症である。
【0339】
方法は、補体活性化に関連する血液学的状態において血液細胞活性化の改善された維持を促進する。血液機能の維持は、未処置の患者に対する血液学的障害における機能的改善を提供する。補体阻害剤（例えば、Ｃ１ｑ阻害剤、例えば、抗Ｃ１ｑ抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体）は、対象における全身性補体阻害を維持するのに有効な量及び頻度で投与され得る。
【0340】
組成物は、ｉｎ ｖｉｖｏ使用のために医師の指導の下で得られ、使用され得ることが企図される。治療製剤の投薬量は、疾患の特質、投与の頻度、投与の様式、宿主からの薬剤のクリアランスなどに応じて広く変わり得る。
【0341】
本明細書で使用される場合、「慢性投与される」、「慢性処置」、「慢性的に処置すること」、またはその類似する文法的類型は、長期間にわたって患者における全身性補体活性を完全にまたは実質的に抑制するために、患者の血液における治療剤のある特定の閾値濃度を維持するために用いられる処置レジメンを指す。したがって、補体阻害剤で慢性的に処置される患者は、２週以上（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、または５２週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヶ月；または１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、または１２年または患者の人生の残りの間）の期間、患者における全身性補体活性を阻害するまたは実質的に阻害する患者の血液における阻害剤の濃度を維持するのに十分な量の阻害剤及び投薬頻度で処置され得る。いくつかの実施形態では、補体阻害剤は、２０％以下（例えば、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、またはさらに５％未満）で血清溶血活性を維持するのに有効な量及び頻度でそれを必要とする患者に慢性投与され得る。いくつかの実施形態では、補体阻害剤は、ＬＤＨについて正常な範囲の少なくとも２０％以内（例えば、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、またはさらに５％未満）で血清乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）レベルを維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与され得る。
【0342】
いくつかの実施形態では、補体阻害剤は、５５０ＩＵ／Ｌ未満（例えば、５４０、５３０、５２０、５１０、５００、４９０、４８０、４７０、４６０、４５０、４３０、４２０、４１０、４００、３９０、３８０、３７０、３６０、３５０、３４０、３３０、３２０、３１０、３００、２９０、２８０未満、または２７０ＩＵ／Ｌ未満）の血清ＬＤＨレベルを維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与される。患者における全身性補体阻害を維持するために、補体阻害剤は、例えば、週１回、２週に１回、週２回、１日１回、月１回、または３週に１回、患者に慢性投与され得る。本明細書に記載の方法のいずれかのいくつかの実施形態では、補体阻害剤（例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体）は、患者の血液中のＣ１ｑ分子毎につき少なくとも０．７（例えば、少なくとも０．８、０．９、１、２、３、４、５、６、７、８、９、または１０以上）の濃度の二価Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害分子（複数可）（例えば、完全抗Ｃ１ｑ抗体）を維持するのに有効な投与の量及び頻度で患者に投与され得る。Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤に関して「二価（ｄｉｖａｌｅｎｔ）」または「二価（ｂｉｖａｌｅｎｔ）」は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ分子に対する少なくとも２つの結合部位を含有するＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤を指す。Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤が一価（例えば、一本鎖抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、もしくは抗Ｃ１ｓ抗体またはＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、もしくはＣ１ｓに結合するＦａｂ）である場合、阻害剤は、血液中のＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ分子毎につき少なくとも１．５（例えば、少なくとも２、２．５、３、３．５、４、４．５、もしくは５またはそれ以上）の一価Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤の濃度を維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与され得る。いくつかの実施形態では、一価Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤は、少なくとも２：１（例えば、少なくとも３：１、少なくとも４：１、少なくとも５：１、もしくは少なくとも６：１またはそれ以上）のＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに対する一価Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ阻害剤の比を維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与され得る。いくつかの実施形態では、完全（二価）抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、患者の血液１ミリリットル当たり少なくとも４０μｇ（例えば、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、もしくは１２０μｇまたはそれ以上）の抗体の濃度を維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与される。好ましい実施形態では、完全抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、患者の血液１ミリリットル当たり少なくとも５０μｇの濃度で抗体を維持するための量及び頻度で投与される。好ましい実施形態では、完全抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、患者の血液１ミリリットル当たり少なくとも１００μｇの濃度で抗体を維持するための量及び頻度で投与される。いくつかの実施形態では、一価抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体（例えば、一本鎖抗体またはＦａｂ断片）は、患者の血液１ミリリットル当たり少なくとも８０μｇ（例えば、８１、８２、８３、８４、８５、８６、８７、８８、８９、９０、９１、９２、９３、９４、９５、９６、９７、９８、９９、１００、１１０、１１５、１２０、１２５、１３０、１３５、１４０、１４５、１５０、１５５、１６０、１６５、もしくは１７０μｇまたはそれ以上）の抗体の濃度を維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与され得る。
【0343】
特定の患者に与えられる治療組成物の有効量は、多様な要素に依存し得、そのいくつかは患者毎に異なり得る。通常の技術を利用して、適任の臨床医は、日常的な臨床試験の過程で特定の治療用または画像化組成物の投薬量を調整することができる。
【0344】
治療剤、例えば、補体の阻害剤、遺伝子発現の活性化剤などは、適切な薬学的に許容可能な担体または希釈剤との組み合わせによって治療投与のための多様な製剤に組み込まれ得、固体、半固体、液体または気体形態の調製物、例えば、錠剤、カプセル、粉末、顆粒、軟膏、溶液、座剤、注射剤、吸入剤、ゲル、マイクロスフィア、及びエアロゾルに製剤化され得る。したがって、化合物の投与は、経口、口腔内、直腸、非経口、皮下、腹腔内、皮内、経皮、髄腔内、鼻、気管内などの投与を含む様々な方法で達成され得る。活性剤は、投与後に全身的になり得、または局所的投与、壁内投与の使用、または埋込部位で活性用量を保持するように作用する埋込物の使用によって局在化され得る。
【0345】
組み合わせ処置
本開示の補体阻害剤は、限定されないが、血液障害を処置するための免疫抑制療法などの任意の追加の処置と併せて使用され得る。
本開示の補体阻害剤は、限定されないが、血液障害を処置するための免疫抑制療法などの任意の追加の処置と併せて使用され得る。
【0346】
いくつかの実施形態では、本明細書で開示される抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体は、補体活性化の代替経路の阻害剤と組み合わせて投与される。そのような阻害剤には、限定されないが、Ｂ因子阻害抗体、Ｄ因子阻害抗体、可溶性、膜結合型、タグ付きまたは融合タンパク質形態のＣＤ５９、ＤＡＦ、ＣＲ１、ＣＲ２、ＣｒｒｙまたはＣ３の切断を阻止するコンプスタチン様ペプチド、非ペプチドＣ３ａＲアンタゴニスト、例えば、ＳＢ２９０１５７、コブラ毒因子または非特異的補体阻害剤、例えば、ナファモスタットメシル酸塩（ＦＵＴＨＡＮ；ＦＵＴ－１７５）、アプロチニン、Ｋ－７６モノカルボン酸（ＭＸ－１）及びヘパリン（例えば、Ｔ．Ｅ．Ｍｏｌｌｎｅｓ ＆ Ｍ．Ｋｉｒｓｃｈｆｉｎｋ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ４３（２００６）１０７－１２１参照）が含まれ得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、自己抗体とその自己抗原との間の相互作用の阻害剤と組み合わせて投与される。そのような阻害剤には、精製された可溶形態の自己抗原、または抗原模倣物、例えば、ペプチドまたはＲＮＡ由来ミモトープ（ＡＱＰ４抗原のミモトープを含む）が含まれ得る。代替的には、そのような阻害剤には、古典的補体経路を引き起こさずに、自己抗原を認識し、自己抗体の結合を防止する遮断薬が含まれ得る。そのような遮断薬には、例えば、自己抗原結合ＲＮＡアプタマーまたはＦｃドメインにおいてＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓ結合部位を欠く抗体（例えば、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合しないように操作されたＦａｂ断片または抗体）が含まれ得る。
【0347】
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の補体の阻害剤（例えば、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの阻害剤、例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、もしくは抗Ｃ１ｓ抗体もしくは抗原結合断片、またはその抗体誘導体）は、血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を処置し、またはそれらの症状を改善するのに有用な１つ以上の追加の活性剤と共に製剤化され得る。例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体は、降圧剤、抗凝固剤、及び／またはステロイド（例えば、コルチコステロイド）と共に製剤化され得る。抗凝固剤の例には、例えば、ワルファリン（クマジン）、アスピリン、ヘパリン、フェニンジオン、フォンダパリヌクス、イドラパリヌクス、及びトロンビン阻害剤（例えば、アルガトロバン、レピルジン、ビバリルジン、またはダビガトラン）が含まれる。Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの阻害剤（例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体）はまた、線維素溶解剤（例えば、アンクロド、ε－アミノカプロン酸、抗プラスミン－ａｉ、プロスタサイクリン、及びデフィブロチド）、シクロホスファミド、または抗サイトカイン剤と共に製剤化され得る。抗サイトカイン剤には、例えば、サイトカイン（例えば、ＩＬ－１３などの炎症誘発性サイトカイン）に結合し、その活性を調節する抗体または可溶性受容体が含まれる。いくつかの実施形態では、阻害剤は、抗ＣＤ２０剤、例えば、リツキシマブ（Ｒｉｔｕｘａｎ（商標）；Ｂｉｏｇｅｎ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ，ＭＡ）と共に、またはそれと使用するために製剤化され得る。いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの阻害剤は、静脈内免疫グロブリン療法（ＩＶＩＧ）または血漿交換と共に対象に投与するために製剤化され得る。
【0348】
Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの阻害剤が第２の活性剤と組み合わせて（例えば、併せて）使用される場合、またはＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの２つ以上の阻害剤が使用される場合（例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体）、薬剤は、別々にまたは一緒に製剤化され得る。例えば、それぞれの薬学的組成物は、例えば、投与の直前に混合され、一緒に投与され得、または別々に、例えば、同じまたは異なる回数で投与され得る。
【0349】
組成物は、治療的有効量のＣ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの阻害剤（例えば、抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、もしくは抗Ｃ１ｓ抗体もしくは抗原結合断片、またはその抗体誘導体）を含むように抗Ｃ１ｑ、抗Ｃ１ｒ、または抗Ｃ１ｓ抗体を含めて製剤化され得、または組成物は、合計した成分が血液障害（例えば、寒冷凝集素溶血性貧血（寒冷凝集素症）、溶血性貧血、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、温暖凝集素溶血性貧血、温式抗体溶血性貧血、温式抗体自己免疫性溶血性貧血（ＷＡＩＨＡ）、自己免疫性溶血性貧血（ＡＩＨＡ）自己免疫性血小板減少症、発作性寒冷ヘモグロビン尿症（ＰＣＨ）、抗リン脂質症候群（ＡＰＳ）、エバンス症候群、ＡＢＯ不適合性急性溶血性反応、新生児同種免疫性血小板減少症、赤血球同種免疫、フェルティ症候群、抗体媒介性血小板減少症、ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）、ヘパリン誘導性血小板減少症及び血栓症（ＨＩＴＴ）、血栓性血小板減少性紫斑病（ＴＴＰ）、免疫性血小板減少性紫斑病（ＩＴＰ）、血小板減少症、血栓症、血管炎、ループス腎炎、糸球体腎炎、及び／または抗リン脂質抗体症候群（ＡＰＳ）、自己免疫性障害（例えば、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、クローン病、潰瘍性結腸炎）、感染症（例えば、肺炎、マイコプラズマ、単核球症、Ｃ型肝炎、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、コロナウイルス）、免疫複合体病（例えば、クリオグロブリン血症、血清病、糸球体腎炎）、または薬物誘導性血液学的障害（例えば、ペニシリン、キニーネ、またはヘパリンなどの薬物に由来する再生不良性貧血、無顆粒球症、巨赤芽球性貧血、溶血性貧血、血小板減少症））を処置するのに治療的に有効となるように、副次的治療量の阻害剤及び副次的治療量の１つ以上の追加の活性剤を含むように製剤化され得る。いくつかの実施形態では、組成物は、阻害剤が合計で血液障害を処置するために治療的に有効な濃度となるように、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓの２つ以上の阻害剤をそれぞれ副次的治療用量で含むように製剤化され得る。治療的有効用量（例えば、抗Ｃ５抗体の治療的有効用量）を決定するための方法は、当該技術分野で知られており、本明細書に記載されている。
【0350】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、血液障害のための他の療法と組み合わせて投与され得る。例えば、組成物は、プラスマフェレーシス、ＩＶＩＧ療法、血漿注入、または血漿交換と同時、その前、またはその後に対象に投与され得る。
【実施例】
【0351】
実施例１：抗Ｃ１ｑ抗体は、ＣＡＤからの血液サンプルにおける補体媒介性溶血を阻害する
個々のＣＡＤ血清サンプルを、抗Ｃ１ｑ抗体漸増を用いた溶血及びＦＡＣｓ実験のために一緒にプールした。溶血は、プールされたＣＡＤ血清でＲＢＣを感作することによって実施した（４℃で１時間－１０μＬ血清＋１０μＬのＲＢＣ）。溶解は、３７℃で３５分間、２００μＬの２０ｘの正常ヒト血清を添加して引き起こした。溶解後、上清を除去し、ｈＲＢＣを抗Ｃ３抗体（ＣＴ－Ｃ３）、抗Ｃ１ｑ抗体、及び抗Ｃ４抗体で３０分間染色し、１回洗浄し、ＦＡＣＳ分析のための蛍光二次抗ヤギ抗体で染色した。
個々のＣＡＤ血清サンプルを、抗Ｃ１ｑ抗体漸増を用いた溶血及びＦＡＣｓ実験のために一緒にプールした。溶血は、プールされたＣＡＤ血清でＲＢＣを感作することによって実施した（４℃で１時間－１０μＬ血清＋１０μＬのＲＢＣ）。溶解は、３７℃で３５分間、２００μＬの２０ｘの正常ヒト血清を添加して引き起こした。溶解後、上清を除去し、ｈＲＢＣを抗Ｃ３抗体（ＣＴ－Ｃ３）、抗Ｃ１ｑ抗体、及び抗Ｃ４抗体で３０分間染色し、１回洗浄し、ＦＡＣＳ分析のための蛍光二次抗ヤギ抗体で染色した。
【0352】
ＣＡＤにおいて、ＲＢＣは、「血管外溶解」を介してＲＢＣクリアランスを誘導する３つの主要な古典的補体「オプソニン」であるＣ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂで被覆される。Ｃ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂは、ＲＢＣ除去のための細網内皮系によって脾臓及び肝臓において認識される。また、ＣＡＤにおいて、ＲＢＣは、直接的「血管内」ＲＢＣ溶解のための膜侵襲複合体の形成を引き起こすＣ５ｂで被覆される。抗Ｃ１ｑ抗体は、ＣＡＤ血清サンプルにおいて血管内及び血管外の両方のＲＢＣ溶解プロセスを有効に停止させる。抗Ｃ１ｑは、補体カスケードのすべての主要な「オプソニン」／免疫細胞リガンド（Ｃ１ｑ、Ｃ４ｂ及びＣ３ｂ）の沈着を阻害する（図１Ａ）。全長抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号３３の重鎖可変ドメイン及び配列番号３７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ１抗体）及び抗Ｃ１ｓ（例えば、ＴＮＴ００９）抗体は、補体媒介性溶血を阻害する（図１Ｂ）。抗Ｃ１ｑ抗体は、溶血の阻害のためのＴＮＴ００９と少なくとも同等の効力であり（図２Ａ）、その一方で抗Ｃ１ｑ抗体のみが、標的細胞に対するＣ１ｑの上流結合を阻害する（図２Ｂ）。抗Ｃ１ｓ抗体は、ＲＢＣに対するＣ１ｑ結合を阻害しない。Ｃ１ｑを選択的に阻害することにより、古典的経路によって誘導される溶血が十分に阻害されるが、レクチン経路及び代替経路を介して誘導される溶血は温存される。対照的に、抗Ｃ５は、３つすべての経路の溶血活性を阻害する。（図３）。ＣＡＤ患者における補体枯渇／消費の血清バイオマーカーは、追加の評価を提供する。Ｃ５ではなくＣ４及びＣ２の減少は、早期補体成分の消費と共に早期補体カスケードの過剰活性化を示している（図４）。ＣＡＤは、霊長類におけるＲＢＣ溶解を阻害するために、抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片であるＦａｂＡ）の皮下投与によって処置され得る（図５）。
【0353】
実施例２：抗Ｃ１ｑ抗体は、ＣＡＤ患者からの血液サンプルにおける溶血及び補体沈着を阻害する
ＣＡＤ及び対照血漿サンプル
８人の対象からのヒトＣＡＤ血漿サンプルをＩＲＢ承認プロトコル下で入手した。対照血清及び血漿サンプルをＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｎｏｖｉ，ＭＩ）から入手した。
ＣＡＤ及び対照血漿サンプル
８人の対象からのヒトＣＡＤ血漿サンプルをＩＲＢ承認プロトコル下で入手した。対照血清及び血漿サンプルをＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｎｏｖｉ，ＭＩ）から入手した。
【0354】
ヒトＲＢＣのｅｘ ｖｉｖｏ感作
ヒトＲＢＣ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ＭＩ）を洗浄し、ＧＶＢ＋＋緩衝液（Ｃｏｍｐｔｅｃｈ，ＴＸ）（２ｍＬのＧＶＢ＋＋緩衝液における８０μＬのＲＢＣパック）に浮遊させた。２５μＬのヒトＲＢＣを２５μＬの５倍希釈されたＣＡＤまたは正常血清と混合し、４Ｃで３０分間インキュベーションした。この工程により、ＣＡＤ対象からの寒冷凝集素抗体がヒトＲＢＣ表面抗原に結合することが可能となる。
ヒトＲＢＣ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ＭＩ）を洗浄し、ＧＶＢ＋＋緩衝液（Ｃｏｍｐｔｅｃｈ，ＴＸ）（２ｍＬのＧＶＢ＋＋緩衝液における８０μＬのＲＢＣパック）に浮遊させた。２５μＬのヒトＲＢＣを２５μＬの５倍希釈されたＣＡＤまたは正常血清と混合し、４Ｃで３０分間インキュベーションした。この工程により、ＣＡＤ対象からの寒冷凝集素抗体がヒトＲＢＣ表面抗原に結合することが可能となる。
【0355】
３人の対象は強固なＩｇＧ沈着を示した一方で、７人の対象は強固なＩｇＭ沈着を示した。１人の対象は、細胞表面ＩｇＧ及びＩｇＭの両方について低いシグナルを示した。
【0356】
溶血アッセイ
ＣＡＤ感作ＲＢＣへの正常ヒト血清の添加は、補体動員及び活性化をもたらす。正常ヒト血清（ＧＶＢ＋＋緩衝液に２０倍希釈された）を、ＧＶＢ＋＋またはＧＶＢ－ＥＤＴＡ緩衝液中の感作ヒトＲＢＣに添加した。薬理学研究のため、抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号８の重鎖可変ドメイン及び配列番号４の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体）及びＦａｂＡ（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含むＦａｂ断片）を、１００ｕｇ／ｍＬ～０．３ｕｇ／ｍＬの濃度の範囲で血清に滴加した。ＲＢＣを３７Ｃで３０分間インキュベーションして、ヒトＲＢＣでの古典的補体カスケードのＣ１ｑ動員及び活性化を可能とした。
ＣＡＤ感作ＲＢＣへの正常ヒト血清の添加は、補体動員及び活性化をもたらす。正常ヒト血清（ＧＶＢ＋＋緩衝液に２０倍希釈された）を、ＧＶＢ＋＋またはＧＶＢ－ＥＤＴＡ緩衝液中の感作ヒトＲＢＣに添加した。薬理学研究のため、抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、配列番号８の重鎖可変ドメイン及び配列番号４の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体）及びＦａｂＡ（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含むＦａｂ断片）を、１００ｕｇ／ｍＬ～０．３ｕｇ／ｍＬの濃度の範囲で血清に滴加した。ＲＢＣを３７Ｃで３０分間インキュベーションして、ヒトＲＢＣでの古典的補体カスケードのＣ１ｑ動員及び活性化を可能とした。
【0357】
ＧＶＢ－ＥＤＴＡ緩衝液（Ｃｏｍｐｔｅｃｈ，ＴＸ）で希釈された血清中でインキュベーションされた感作ＲＢＣは、ＥＤＴＡが補体カスケードを介して溶血の完全阻害をもたらすので、陰性対照であった。水中でインキュベーションされたＲＢＣは、ＲＢＣの各々の調製及び実験実行において可能な最大溶解を定義するための陽性対照であった。
【0358】
３７Ｃで３０分間のインキュベーションの後、細胞を遠心分離機において２０００ｒｐｍで５分間遠沈した。上清を透明底９６ウェルプレートに移し、４１５ｎｍにおける吸光度（ヘモグロビンに特異的な吸光度）をプレートリーダー（Ｓｐｅｃｔｒａｍａｘ，ＣＡ）で読み取って溶血を定量した。古典的補体カスケードによって特異的に作動する溶解の指標を提供するために、ＧＶＢ－ＥＤＴＡ緩衝液中の血清を有するウェルからの吸光度シグナルをすべての他のウェルから差し引いた。ＥＤＴＡで補正された吸光度シグナルをプロットし、評価した。薬理学研究のため、各ウェルにおけるシグナルをまた、抗Ｃ１ｑ抗体を欠くウェルに対して正規化して、シグナルの変化％をプロットした（図６Ａ及び６Ｂ）。４ＰＬ－ロジスティックフィットを実施して、抗Ｃ１ｑ ＭＡＢ２及びＦａｂＡでの溶血阻害についてのＩＣ５０を決定した。溶血の阻害についての相対ＩＣ５０は、抗Ｃ１ｑ ＭＡＢ２及びＦａｂＡの両方について約１０ｎＭであった。
【0359】
ヒトＲＢＣ上の補体沈着を評価するためのフローサイトメトリー
上記反応で溶解しなかったヒトＲＢＣを１％ＢＳＡ及び２ｍＭのＥＤＴＡ（ＦＡＣＳ緩衝液）を含有するｄＰＢＳで洗浄し、次いで抗Ｃ４ヤギポリクローナル抗体（Ａｂｃａｍ Ａｂ４７７８８）及び抗Ｃ３ｄ特異的ポリクローナルウサギ抗体（Ａｇｉｌｅｎｔ Ａ００６３）で氷上で３０分間染色した。次いで細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、遠沈し、次いで二次抗体である抗ヤギＡｌｅｘａ ６４７コンジュゲート及び抗ウサギＡｌｅｘａ ４８８コンジュゲート（Ｔｈｅｒｍｏ，ＣＡ）で染色した。氷上で３０分間のインキュベーション後、細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、次いでフローサイトメーター（Ｎｏｖｏｃｙｔｅ ｓｙｓｔｅｍ，ＡＣＥＡ，ＣＡ）に入れた。
上記反応で溶解しなかったヒトＲＢＣを１％ＢＳＡ及び２ｍＭのＥＤＴＡ（ＦＡＣＳ緩衝液）を含有するｄＰＢＳで洗浄し、次いで抗Ｃ４ヤギポリクローナル抗体（Ａｂｃａｍ Ａｂ４７７８８）及び抗Ｃ３ｄ特異的ポリクローナルウサギ抗体（Ａｇｉｌｅｎｔ Ａ００６３）で氷上で３０分間染色した。次いで細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、遠沈し、次いで二次抗体である抗ヤギＡｌｅｘａ ６４７コンジュゲート及び抗ウサギＡｌｅｘａ ４８８コンジュゲート（Ｔｈｅｒｍｏ，ＣＡ）で染色した。氷上で３０分間のインキュベーション後、細胞をＦＡＣＳ緩衝液で洗浄し、次いでフローサイトメーター（Ｎｏｖｏｃｙｔｅ ｓｙｓｔｅｍ，ＡＣＥＡ，ＣＡ）に入れた。
【0360】
ＣＡＤ感作工程の後、個々のＣＡＤ対象における抗ＲＢＣ抗体の特質を理解するために、ＲＢＣ細胞表面ＩｇＧ及びＩｇＭを、それぞれの蛍光タグ化抗ヒトＩｇＧ／ＩｇＭ抗体で検出した。
【0361】
ＲＢＣのフロー分析のため、前方散乱（ＦＳＣ）及び側方散乱シグナル（ＳＳＣ）を使用してＲＢＣ集団を同定した。シングルセルＲＢＣ集団を、ＦＳＣ面積対ＦＳＣ幅プロットの斜線に沿って細胞を選択することによって単離した。緑色（４８８ｎｍ）及び遠赤色（６４７ｎｍ）チャネルにおける蛍光シグナルについて陽性のシングルセルＲＢＣを使用して、細胞表面Ｃ４及びＣ３ｄについて陽性標識された細胞をそれぞれ定義した。Ｃ４及びＣ３ｄ染色についてＧＶＢ－ＥＤＴＡ緩衝液を差し引いた％標識細胞を、ＣＡＤと対照対象との間の差のために評価した。薬理学研究のため、ＭＡＢ２またはＦａｂＡを含有するウェルにおける標識細胞％を抗Ｃ１ｑ抗体を欠くウェルに対して正規化し、変化率としてプロットした（図６Ａ及び６Ｂ）。４ＰＬ－ロジスティックフィットを実施して、これらの研究におけるＭＡＢ２及びＦａｂＡでのＣ４及びＣ３ｄ沈着の阻害のＩＣ５０を決定した。補体沈着の阻害についての相対ＩＣ５０は、抗Ｃ１ｑ ＭＡＢ２及びＦａｂＡの両方について約１０ｎＭであった。
【0362】
実施例３：ヘパリン誘導性血小板減少症（ＨＩＴ）を有する患者からの血漿における古典的経路を介するＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化
ＨＩＴにおいて、患者において内因性循環タンパク質ＰＦ４と組み合わされた治療投与されたヘパリンに対する抗体が作られた場合、ＲＢＣは溶解する。この溶解が代替経路ではなく古典的経路によって媒介されることを確認するために、ＥＤＴＡ及びＥＧＴＡを使用した特異的キレート化研究をＨＩＴ患者からの血漿を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで実施した。Ｍｇ２＋に対して感受性である代替経路は、ＥＤＴＡによって阻害されるが、ＥＧＴＡによっては阻害されない。図７Ａに示されているように、ＰＦ４／ヘパリンの添加前の血漿へのＥＤＴＡまたはＥＧＴＡの添加は、補体活性化を排除した。さらに、ＥＧＴＡで処置された血漿のＭｇ２＋補充は、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を救済しなかった。健康ドナーからの血漿をＣ１阻害剤（１０及び２０ＩＵ／ｍＬ）と共にまたは伴わずにインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンと共にインキュベーションし、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を抗原－Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡアッセイによって決定した。図７Ｂに示されているように、補体活性化は、Ｃ１エステラーゼ阻害剤を使用して低下した。フローサイトメトリーを使用して全血アッセイにおいて同様の結果が得られた（図７Ｃ～７Ｄ）。健康ドナーからの全血をＥＤＴＡ（１０ｍＭ）またはＥＧＴＡ（１０ｍＭ）±ＭｇＣｌ２（１０ｍＭ）と共にまたは伴わずにインキュベーションしてから、緩衝液または抗原（ＰＦ４；２５μｇ／ｍＬ±ヘパリン；０．２５Ｕ／ｍＬ）と共にインキュベーションし、Ｂ細胞に対するＰＦ４／ヘパリン及びＣ３ｃの結合をフローサイトメトリーによって決定した。
ＨＩＴにおいて、患者において内因性循環タンパク質ＰＦ４と組み合わされた治療投与されたヘパリンに対する抗体が作られた場合、ＲＢＣは溶解する。この溶解が代替経路ではなく古典的経路によって媒介されることを確認するために、ＥＤＴＡ及びＥＧＴＡを使用した特異的キレート化研究をＨＩＴ患者からの血漿を用いてｉｎ ｖｉｔｒｏで実施した。Ｍｇ２＋に対して感受性である代替経路は、ＥＤＴＡによって阻害されるが、ＥＧＴＡによっては阻害されない。図７Ａに示されているように、ＰＦ４／ヘパリンの添加前の血漿へのＥＤＴＡまたはＥＧＴＡの添加は、補体活性化を排除した。さらに、ＥＧＴＡで処置された血漿のＭｇ２＋補充は、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を救済しなかった。健康ドナーからの血漿をＣ１阻害剤（１０及び２０ＩＵ／ｍＬ）と共にまたは伴わずにインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンと共にインキュベーションし、ＰＦ４／ヘパリンによる補体活性化を抗原－Ｃ３ｃ捕捉ＥＬＩＳＡアッセイによって決定した。図７Ｂに示されているように、補体活性化は、Ｃ１エステラーゼ阻害剤を使用して低下した。フローサイトメトリーを使用して全血アッセイにおいて同様の結果が得られた（図７Ｃ～７Ｄ）。健康ドナーからの全血をＥＤＴＡ（１０ｍＭ）またはＥＧＴＡ（１０ｍＭ）±ＭｇＣｌ２（１０ｍＭ）と共にまたは伴わずにインキュベーションしてから、緩衝液または抗原（ＰＦ４；２５μｇ／ｍＬ±ヘパリン；０．２５Ｕ／ｍＬ）と共にインキュベーションし、Ｂ細胞に対するＰＦ４／ヘパリン及びＣ３ｃの結合をフローサイトメトリーによって決定した。
【0363】
レクチン経路及び古典的経路の関与を調べるために、健康ドナーからの血漿または全血を様々な濃度のＣｌｑに対するモノクローナル抗体（抗Ｃ１ｑ Ｍａｂ、Ｃｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗｂｕｒｙｐｏｒｔ，ＭＡ）またはＭＢＬもしくはマウスアイソタイプ対照（０～１００μｇ／ｍＬ）と共にプレインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンを添加した。ＰＦ４／ヘパリンに対する補体活性化反応を、イムノアッセイ（図７Ｅ）またはフローサイトメトリー（図７Ｆ～７Ｇ）によって評価した。フローサイトメトリー実験のため、健康ドナーからの全血を、１００μｇ／ｍＬのマウスＩｇＧ１または抗ＭＢＬ抗体または抗Ｃｌｑ抗体と共にインキュベーションしてから、ＰＦ４／ヘパリンと共にインキュベーションした。Ｂ細胞に対するＰＦ４／ヘパリン及びＣ３ｃの結合をフローサイトメトリーによって決定した。
【0364】
抗Ｃｌｑ Ｍａｂは、ＰＦ４／Ｈによる補体活性化を濃度依存的に阻害した一方で、抗ＭＢＬ抗体またはマウスアイソタイプ対照はそうではなかった。また、示されていないデータにおいて、ＰＦ４／ヘパリン複合体による補体活性化における個々のレクチンタンパク質であるフィコリン２及び３の関与が排除された。図８に付随する質量分析データは、レクチンタンパク質と補体活性化表現型との相関関係を示さず、イムノアッセイにおいて補体活性化の喪失に関連するフィコリン２の機能的阻害も示さなかった。
【0365】
これらの研究は、補体が古典的補体経路を介してＰＦ４／ヘパリンによって活性化されることを確立する。また、研究は、循環ＩｇＭレベルの有意なドナー変動が、免疫活性化に対する宿主感受性に寄与し、ＨＩＴを予防するための治療的介入の標的を提供し得ることを実証している。
【0366】
実施例４：抗Ｃ１ｑは、レーザー微小血管損傷モデルにおけるＫＫＯ誘導性血栓形成を防止する
ヒト血小板ＦｃγＲＩＩＡ及びｈＰＦ４の両方を発現するヘパリン誘導性血小板減少症／血栓症トランスジェニックマウスモデルがＲｅｉｌｌｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００１ Ｏｃｔ １５；９８（８）：２４４２－７に記載されており、この実験で使用される。抗Ｃ１ｑ抗体（抗Ｃ１ｑ Ｍａｂ１、Ｍａｂ２、及びＦａｂならびにアイソタイプ対照）をトランスジェニックマウスに静脈内注射する。抗Ｃ１ｑ Ｍａｂ１、Ｍａｂ２、Ｆａｂまたはアイソタイプ対照のいずれかと、それに続くＫＫＯを摂取したマウスにおける蛍光標識された血小板の結合に基づいて血栓サイズの変化率を測定する。
ヒト血小板ＦｃγＲＩＩＡ及びｈＰＦ４の両方を発現するヘパリン誘導性血小板減少症／血栓症トランスジェニックマウスモデルがＲｅｉｌｌｙ，ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ．２００１ Ｏｃｔ １５；９８（８）：２４４２－７に記載されており、この実験で使用される。抗Ｃ１ｑ抗体（抗Ｃ１ｑ Ｍａｂ１、Ｍａｂ２、及びＦａｂならびにアイソタイプ対照）をトランスジェニックマウスに静脈内注射する。抗Ｃ１ｑ Ｍａｂ１、Ｍａｂ２、Ｆａｂまたはアイソタイプ対照のいずれかと、それに続くＫＫＯを摂取したマウスにおける蛍光標識された血小板の結合に基づいて血栓サイズの変化率を測定する。
【0367】
実施例５：抗Ｃ１ｑ抗体は、ｗＡＩＨＡ患者からの血液サンプルにおける補体沈着を阻害する
２人の対象からのヒトｗＡＩＨＡ血漿サンプルをＩＲＢ承認プロトコル下で入手した。対照血清及び血漿サンプルをＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ＭＩから入手した。
２人の対象からのヒトｗＡＩＨＡ血漿サンプルをＩＲＢ承認プロトコル下で入手した。対照血清及び血漿サンプルをＩｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ＭＩから入手した。
【0368】
ヒトＲＢＣ（Ｉｎｎｏｖａｔｉｖｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，ＭＩ）をＧＶＢ＋＋緩衝液（Ｃｏｍｐｔｅｃｈ，ＴＸ）（１０ｍＬのＧＶＢ＋＋緩衝液中の０．５ｍＬのタイプＯ＋単一ドナー洗浄ＲＢＣ）に浮遊させ、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離し、上清をデカンテーションした。細胞をＧＶＢ＋＋で０．５ｍＬまで再浮遊させ、１ｍＬのｄＰＢＳ中の０．５％ブロメライン（ｗ／ｖ）を添加した。細胞を３７Ｃで１０分間インキュベーションし、次いで１０ｍＬのＧＶＢ＋＋緩衝液を添加し、２０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清をデカンテーションし、細胞をＧＶＢ＋＋で０．５ｍＬまで再浮遊させた。５ｕＬの再浮遊細胞を９９５ｕＬのＧＶＢ＋＋に添加することによって０．５％ＲＢＣ溶液を作製した。
【0369】
透明底９６ウェルプレートを使用し、各ウェルにおいて、以下の試薬を添加した：健康ドナー血清（３７．５μＬ）；ＧＶＢ＋＋中の２００μｇ／ｍＬエクリズマブ（３７．５μＬ）；患者血清（７．５μＬ）；薬物を有さないまたは３００ｕｇ／ｍＬの最終濃度のためのＭＡＢ２（１０５８ｕｇ／ｍＬ）を有するＧＶＢ＋＋（４２．５μＬ）；及びＧＶＢ＋＋中の０．５％ＲＢＣ（２５μＬ）。
【0370】
３７Ｃで２時間のインキュベーション後、フロー緩衝液の洗浄液（１％ＢＳＡｗ／ｖ、２ｍＭのＥＤＴＡ、ｄＰＢＳ）を添加し、遠心分離機において細胞を２０００ｒｐｍで５分間遠沈した。上清を除去し、ペレットを１００μＬのフロー染色溶液（１：２０００のフルオレセインがコンジュゲーションされた抗Ｃ１ｑ（Ｄａｋｏ）、１：１５００のフィコエリトリンがコンジュゲーションされた抗Ｃ３ｄ（Ｄａｋｏ）、１：１０００のアロフィコシアニンがコンジュゲーションされた抗Ｃ４（Ａｂｃａｍ））に再浮遊させ、暗所で４Ｃで３０分間染色した。インキュベーション後、１５０ｕＬのフロー緩衝液の洗浄液を添加し、細胞を２０００ｒｐｍで５分間遠心分離した。上清を除去し、細胞を１２５ｕＬのフロー緩衝液に再浮遊させた。
【0371】
ＲＢＣのフロー分析のため、前方散乱（ＦＳＣ）及び側方散乱シグナル（ＳＳＣ）を使用してＲＢＣ集団を同定した。シングルセルＲＢＣ集団を、ＦＳＣ面積対ＦＳＣ幅プロットの斜線に沿って細胞を選択することによって単離した。遠赤色（６４７ｎｍ）チャネルにおける蛍光シグナルについて陽性のシングルセルＲＢＣを使用して、細胞表面Ｃ４について陽性標識された細胞を定義した。ＧＶＢ ＥＤＴＡサンプルを補体沈着についての陰性対照として使用した。薬理学研究のため、ＭＡＢ２を含有するウェルにおける標識細胞％を、抗Ｃ１ｑ抗体を欠くウェルと比較し、変化率としてプロットした（図１３）。この図は、ｗＡＩＨＡを有する患者からの血清が、補体活性化及び沈着（Ｃ４によって測定される）を引き起こすＲＢＣに対する抗体を含有することを示している。Ｍａｂ１は、Ｃ１ｑの活性化及びＣ４の沈着を十分に防止した。
【0372】
実施例６：温式自己免疫性溶血性貧血（ｗＡＩＨＡ）を有する患者における抗Ｃ１ｑモノクローナル抗体（ＭＡＢ１）の臨床試験。
この臨床試験の主な目的は、温式自己免疫性溶血性貧血（ｗＡＩＨＡ）を有する対象におけるＭａｂ１（３０、５０、７５または１００ｍｇ／ｋｇ）の２回の週１回静脈内注入の安全性、忍容性、及び有効性を評価することである。
この臨床試験の主な目的は、温式自己免疫性溶血性貧血（ｗＡＩＨＡ）を有する対象におけるＭａｂ１（３０、５０、７５または１００ｍｇ／ｋｇ）の２回の週１回静脈内注入の安全性、忍容性、及び有効性を評価することである。
【0373】
研究設計：これは、ｗＡＩＨＡを有する成人男性及び女性対象における反復投薬臨床試験である。この研究は、ｗＡＩＨＡを有する対象におけるＭａｂ１の安全性、忍容性、及び有効性を評価するように設計する。対象は、１日目及び８日目にＭａｂ１（３０、５０、７５または１００ｍｇ／ｋｇ）のＩＶ注入を受ける。
【0374】
方法論：合計で６～１２人のｗＡＩＨＡを有する対象を各コホート（すなわち、３０、５０、７５及び１００ｍｇ／ｋｇ Ｍａｂ１）に登録する。すべての対象は、１日目にＩＶ注入を受け、８日目に２回目のＩＶ注入を受ける。
【0375】
スクリーニング来訪（－６週目及び－２週目）：すべての対象は、Ｍａｂ１での投薬前の４２日以内に研究スクリーニング手順を受ける。スクリーニングは、インフォームドコンセントの取得、病歴及び研究適格性の評価、ワクチン接種歴のレビュー、ベースラインの健康状態、ＦＡＣＩＴ疲労質問表の実施、ならびにＤＡＴ及び溶血のマーカー（網状赤血球数、ハプトグロビン、ＬＤＨ及び間接ビリルビン）を含む臨床検査を含む。研究来訪：対象は、１日目及び８日目に３０、５０、７５または１００ｍｇ／ｋｇのＭａｂ１の静脈内注入を受ける。
【0376】
３日目及び４日目に安全性、ＰＫ、及びＰＤのための研究評価をクリニック内または自宅のいずれかで完了させ得る。対象は、１５、２２、２９、３６、４３、５０、５７及び７１日目に安全性、ＰＫ、及びＰＤのための研究評価を受けるためにクリニックに戻る。
【0377】
研究評価：薬物動態パラメータを連続血清サンプリングによって評価し、薬力学的パラメータを、ＣＨ５０及びＣ４、及び血液中の他の補体バイオマーカーの測定、補体成分についての血液細胞フローサイトメトリーならびに疾患関連バイオマーカー（例えば、ヘモグロビン、網状赤血球数、ハプトグロビン、ラクターゼデヒドロゲナーゼ、ビリルビンなど）の減少によって評価する。
【0378】
実施例７：カニクイザルにおける抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片（「ＦａｂＡ」）の毎日の皮下投薬
カニクイザル（２匹の雌／群）に抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片（配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む）（「ＦａｂＡ」）を肩甲骨間の空間に１週間皮下に１回投薬した（１日目に５ｍｇ／ｋｇ及び６日間連続で２ｍｇ／Ｋｇ）。以下の時点で血液を採取し、Ｋ２Ｅｄｔａ血漿及び血清について処理した：予備投薬、投薬後１、３、６、１２、及び２４時間、ならびに３、４、５、６、７、８、９、及び１０日目。２～７日目の血液採取は、それらの日の投薬前に行った。
カニクイザル（２匹の雌／群）に抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片（配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む）（「ＦａｂＡ」）を肩甲骨間の空間に１週間皮下に１回投薬した（１日目に５ｍｇ／ｋｇ及び６日間連続で２ｍｇ／Ｋｇ）。以下の時点で血液を採取し、Ｋ２Ｅｄｔａ血漿及び血清について処理した：予備投薬、投薬後１、３、６、１２、及び２４時間、ならびに３、４、５、６、７、８、９、及び１０日目。２～７日目の血液採取は、それらの日の投薬前に行った。
【0379】
ＰＫ及びＰＤ ＥＬＩＳＡアッセイ：
血清遊離ＦａｂＡ（ＰＫ）、血漿遊離Ｃ１ｑ（ＰＤ）及び血漿総Ｃ１ｑ（ＰＤ）のレベルをサンドイッチＥＬＩＳＡを使用して測定した。黒色９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３９２５）を重炭酸緩衝液（ｐＨ９．４）中の７５μＬのそれぞれの捕捉タンパク質／抗体（表１）で４Ｃで一晩被覆した。翌日、プレートをｄＰＢＳ ｐＨ７．４（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水）で洗浄し、次いで３％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するｄＰＢＳ緩衝液でブロッキングした。アッセイ緩衝液（０．３％ＢＳＡ及び０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳ）中の精製タンパク質（表１）で標準曲線を作成した。研究血清または血漿サンプルをそれぞれの希釈でアッセイ緩衝液中で調製した。ブロッキング緩衝液をタッピングによってプレートから除去した。標準及びサンプルを１ウェル当たり７５μＬで二連で添加し、ＰＫ測定のために３００ｒｐｍで室温で１時間振盪しながらインキュベーションし、その後、Ｃ１ｑアッセイのために４Ｃで一晩、続いて３７Ｃで３０分間及び室温で１時間インキュベーションした。プレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳで３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼがコンジュゲーションされた二次抗体（表１）をすべてのウェルに添加した。プレートを室温で振盪しながら１時間インキュベーションした。プレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳで３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼ基質（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｔ２２１４）を使用して展開した。室温で２０分後、プレートをルミノメーターを使用して読み取った。標準を４ＰＬロジスティックフィットを使用してフィッティングし、未知の濃度を決定した。分析物レベルを希釈について補正し、次いでＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを使用してプロットした。
血清遊離ＦａｂＡ（ＰＫ）、血漿遊離Ｃ１ｑ（ＰＤ）及び血漿総Ｃ１ｑ（ＰＤ）のレベルをサンドイッチＥＬＩＳＡを使用して測定した。黒色９６ウェルプレート（Ｃｏｓｔａｒ＃３９２５）を重炭酸緩衝液（ｐＨ９．４）中の７５μＬのそれぞれの捕捉タンパク質／抗体（表１）で４Ｃで一晩被覆した。翌日、プレートをｄＰＢＳ ｐＨ７．４（ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水）で洗浄し、次いで３％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含有するｄＰＢＳ緩衝液でブロッキングした。アッセイ緩衝液（０．３％ＢＳＡ及び０．１％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳ）中の精製タンパク質（表１）で標準曲線を作成した。研究血清または血漿サンプルをそれぞれの希釈でアッセイ緩衝液中で調製した。ブロッキング緩衝液をタッピングによってプレートから除去した。標準及びサンプルを１ウェル当たり７５μＬで二連で添加し、ＰＫ測定のために３００ｒｐｍで室温で１時間振盪しながらインキュベーションし、その後、Ｃ１ｑアッセイのために４Ｃで一晩、続いて３７Ｃで３０分間及び室温で１時間インキュベーションした。プレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳで３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼがコンジュゲーションされた二次抗体（表１）をすべてのウェルに添加した。プレートを室温で振盪しながら１時間インキュベーションした。プレートを０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有するｄＰＢＳで３回洗浄し、７５μＬのアルカリホスファターゼ基質（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｔ２２１４）を使用して展開した。室温で２０分後、プレートをルミノメーターを使用して読み取った。標準を４ＰＬロジスティックフィットを使用してフィッティングし、未知の濃度を決定した。分析物レベルを希釈について補正し、次いでＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍを使用してプロットした。
【0380】
【表1】
【0381】
すべての処置された動物の血清サンプルにおいて遊離ＦａｂＡレベルを測定した（図９）。処置された動物からの血漿サンプルにおいてＦａｂＡに結合していないＣ１ｑの量を示す血漿遊離Ｃ１ｑレベルを測定した（図１０）。
【0382】
ｅｘ－ｖｉｖｏ溶血アッセイ：
カニクイザルからの血清サンプルを補体の供給源として使用して、抗体感作ヒツジ赤血球（ＲＢＣ）に対する補体媒介性溶解活性を追跡した。抗ＲＢＣ抗体（ＣｏｍｐＴｅｃｈ＃Ｂ２００）で事前感作したヒツジＲＢＣを、カルシウム及びマグネシウムを含有するゼラチンベロナール緩衝生理食塩水（ＧＶＢ＋＋）（ＣｏｍｐＴｅｃｈ＃Ｂ１０２）に浮遊させた。ＲＢＣをＧＶＢ＋＋で３回洗浄して、４～６Ｃで２０００ｒｐｍで５分間遠沈することによって、事前溶解したＲＢＤからの任意の非特異的シグナルを除去した。細胞を約２億細胞／ｍＬの最終濃度でＧＶＢ＋＋に再浮遊させ、氷上で維持した。ベースライン時及びＦａｂＡでの投薬後に採取されたカニクイザル血清サンプルをＧＶＢ＋＋に５０倍希釈し、５０μＬをそれぞれ丸底透明プレートに添加した。溶解反応を、５０μＬのＲＢＣを血清サンプルに添加することによって引き起こし、３７Ｃで２０分間インキュベーションした。次いでプレートを２０００ｒｐｍで５分間遠沈し；上清を透明平底９６ウェルプレートに移し、吸光度を４１５ｎｍでプレートリーダーで読み取った。対照サンプルを、血清を有さない緩衝液対照またはＥＤＴＡを含有するＧＶＢ緩衝液中で調製された血清サンプルを用いてバックグラウンドシグナルを推定するために実行した。サンプルシグナルからバックグラウンドを差し引き、ベースラインに対して正規化し、次いでベースラインのパーセントとしてプロットして、溶血の時間経過及びＦａｂＡの投薬後の溶血の相対的阻害を決定した。
カニクイザルからの血清サンプルを補体の供給源として使用して、抗体感作ヒツジ赤血球（ＲＢＣ）に対する補体媒介性溶解活性を追跡した。抗ＲＢＣ抗体（ＣｏｍｐＴｅｃｈ＃Ｂ２００）で事前感作したヒツジＲＢＣを、カルシウム及びマグネシウムを含有するゼラチンベロナール緩衝生理食塩水（ＧＶＢ＋＋）（ＣｏｍｐＴｅｃｈ＃Ｂ１０２）に浮遊させた。ＲＢＣをＧＶＢ＋＋で３回洗浄して、４～６Ｃで２０００ｒｐｍで５分間遠沈することによって、事前溶解したＲＢＤからの任意の非特異的シグナルを除去した。細胞を約２億細胞／ｍＬの最終濃度でＧＶＢ＋＋に再浮遊させ、氷上で維持した。ベースライン時及びＦａｂＡでの投薬後に採取されたカニクイザル血清サンプルをＧＶＢ＋＋に５０倍希釈し、５０μＬをそれぞれ丸底透明プレートに添加した。溶解反応を、５０μＬのＲＢＣを血清サンプルに添加することによって引き起こし、３７Ｃで２０分間インキュベーションした。次いでプレートを２０００ｒｐｍで５分間遠沈し；上清を透明平底９６ウェルプレートに移し、吸光度を４１５ｎｍでプレートリーダーで読み取った。対照サンプルを、血清を有さない緩衝液対照またはＥＤＴＡを含有するＧＶＢ緩衝液中で調製された血清サンプルを用いてバックグラウンドシグナルを推定するために実行した。サンプルシグナルからバックグラウンドを差し引き、ベースラインに対して正規化し、次いでベースラインのパーセントとしてプロットして、溶血の時間経過及びＦａｂＡの投薬後の溶血の相対的阻害を決定した。
【0383】
血清溶血は、ＦａｂＡの毎日の反復皮下投薬後に阻害された（図１１）。
【0384】
サルにおける５ｍｇ／Ｋｇと、それに続く２ｍｇ／ＫｇでのＦａｂＡの１日１回の皮下投薬は、最後の投薬後少なくとも１日まで両方の動物群において測定可能な遊離薬物レベルで強固なＰＫをもたらした。遊離Ｃ１ｑレベルは、５ｍｇ／Ｋｇ投薬の後に十分に阻害され、１日１回の２ｍｇ／Ｋｇの反復投薬では、遊離Ｃ１ｑレベルは、投薬の期間にわたって及び最後の投薬後少なくとも１日まで６０～９０％の範囲で阻害された。血漿総Ｃ１ｑレベルは、両方の用量群においてこの研究の期間にわたって未変化であり、ＦａｂＡがＣ１ｑターンオーバーに有意に影響を及ぼさないことを示差している。これらの結果は、２ｍｇ／ｋｇ以上でのＦａｂＡの複数のＳＣ投薬が血液における強固な遊離薬物レベルをもたらすことができ、サルにおける遊離Ｃ１ｑ及び血清溶血活性を阻害することができることを確認する。
【0385】
実施例８：抗Ｃ１ｑ阻害剤の血液対組織分布の評価
規定用量の抗Ｃ１ｑ阻害剤（例えば、抗Ｃ１ｑ抗体Ｍａｂ１、Ｍａｂ２またはＦａｂＡ）の毎日の皮下（ＳＣ）投与が、静脈内注入または注射で送達される抗Ｃ１ｑ阻害剤と比較して、組織部分（すなわち、血管外腔）におけるＣ１ｑを完全に飽和させ、または阻害するのに十分ではなく、血液（すなわち、血管内腔）におけるＣ１ｑの完全飽和及び阻害をもたらすことを実証するためにこの実施例を使用する。
規定用量の抗Ｃ１ｑ阻害剤（例えば、抗Ｃ１ｑ抗体Ｍａｂ１、Ｍａｂ２またはＦａｂＡ）の毎日の皮下（ＳＣ）投与が、静脈内注入または注射で送達される抗Ｃ１ｑ阻害剤と比較して、組織部分（すなわち、血管外腔）におけるＣ１ｑを完全に飽和させ、または阻害するのに十分ではなく、血液（すなわち、血管内腔）におけるＣ１ｑの完全飽和及び阻害をもたらすことを実証するためにこの実施例を使用する。
【0386】
動物種。抗Ｃ１ｑ阻害剤（複数可）が高い親和性でＣ１ｑに結合し、血清における古典的補体カスケードの完全な機能的阻害を示す動物種をまず同定する。
【0387】
抗Ｃ１ｑ阻害剤の用量選択：動物をまず、１、３、５及び１０ｍｇ／Ｋｇの用量の抗Ｃ１ｑ ＦａｂＡ（例えば、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ）、及び／または３、５、７及び１０ｍｇ／Ｋｇの用量の抗Ｃ１ｑモノクローナル抗体（例えば、配列番号８の重鎖可変ドメイン及び配列番号４の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体または配列番号３３の重鎖可変ドメイン及び配列番号３７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体）で単回ＳＣ注射を介して処置する。並行して、さらなる動物を、比較分子（すなわち、配列番号８の重鎖可変ドメイン及び配列番号４の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体または配列番号３３の重鎖可変ドメイン及び配列番号３７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ２抗体）で１００ｍｇ／Ｋｇ ＩＶの用量で処置する。血漿サンプルをベースライン、３０分、１、４、８時間ならびに２、３、４、５、及び８日目の時点で採取する。血液サンプルを、抗Ｃ１ｑ阻害剤／比較分子のレベルならびにＣ１ｑ及び血清溶血活性の阻害について評価する。遊離薬物レベルが少なくとも２４時間の遊離Ｃ１ｑの完全阻害と共に血液において測定可能であるＳＣ用量を決定する。比較抗Ｃ１ｑモノクローナル抗体の１００ｍｇ／ＫｇでのＩＶ投薬は、単回投薬後少なくとも５～８日間、Ｃ１ｑの完全阻害をもたらす。
【0388】
抗Ｃ１ｑ阻害剤のＳＣ用量の組織分布：次に、動物を、選択された用量で抗Ｃ１ｑ阻害剤の単回ＳＣ注射で処置し、これは、最初の用量選択研究において２４時間の血液中のＣ１ｑの十分な飽和をもたらす。並行して、さらなる動物を１００ｍｇ／Ｋｇ ＩＶの用量で比較分子で処置する。動物を８時間、２、３、及び４日目の時点で安楽死させる。各時点で血液を採取する。次いで動物を滅菌生理食塩水で灌流して、血管部分から出た血液を完全にフラッシュする。皮膚、皮下脂肪、肝臓、肺及び筋肉を含む組織を採取する。各時点で血液サンプルを抗Ｃ１ｑ阻害剤／比較分子のレベルならびにＣ１ｑ及び血清溶血活性の阻害について評価する。組織サンプル（血液を欠く）をホモジナイズし、各時点で抗Ｃ１ｑ阻害剤／比較分子のレベル及び組織Ｃ１ｑの阻害について評価する。抗Ｃ１ｑ阻害剤の単回ＳＣ投与は、２４時間（２日目まで）血液中のＣ１ｑの完全飽和及び阻害を示すが、３日目及び４日目では示さない。組織サンプルにおいて、遊離薬物レベルは定量限度未満であり、いずれの時点でも遊離Ｃ１ｑの阻害は観察されない。これらの結果は、抗Ｃ１ｑ阻害剤の単回皮下投薬後、薬物レベルが血液では測定可能であるが、組織サンプルでは測定可能ではないことを示している。また、Ｃ１ｑは、血液では十分に阻害されるが、組織サンプルでは阻害されない。
【0389】
抗Ｃ１ｑ阻害剤の複数の毎日の固定ＳＣ用量の組織分布：選択された用量で１日１回７日間抗Ｃ１ｑ阻害剤の単回ＳＣ注射で動物を処置する。さらなる動物を、１００ｍｇ／Ｋｇ ＩＶの単回用量で抗Ｃ１ｑ比較分子で処置する。動物を２、３、７及び９日目（最後の投薬から２日後）に安楽死させる。各時点で血液を採取する。次いで動物を滅菌生理食塩水で灌流して、血管部分から出た血液を完全にフラッシュする。皮膚、皮下脂肪、肝臓、肺及び筋肉を含む組織を採取する。各時点で血液サンプルを抗Ｃ１ｑ阻害剤／比較分子のレベルならびにＣ１ｑ及び血清溶血活性の阻害について評価する。組織サンプル（血液を欠く）をホモジナイズし、各時点で抗Ｃ１ｑ阻害剤／比較分子のレベル及び組織Ｃ１ｑの阻害について評価する。抗Ｃ１ｑ阻害分子の単回ＳＣ投与は、９日目のサンプル（最後の投薬から２日後に採取された）を除くすべての時点で血液中のＣ１ｑの完全飽和及び阻害を示す。組織サンプルでは、遊離薬物レベルは定量限度未満であり、すべての時点で遊離Ｃ１ｑの阻害は観察されない。これらの結果は、抗Ｃ１ｑ阻害分子の複数の毎日のＳＣ投与後、薬物レベルが血液では測定可能であるが、組織サンプルでは測定可能ではないことを示している。また、Ｃ１ｑは、規定の用量での抗Ｃ１ｑ阻害分子の１日１回のＳＣ投薬で、血液では十分に阻害されるが、組織サンプルではそうではない。
【0390】
実施例９：Ｍａｂ１及びＦａｂＡクリアランスの評価
以下は、Ｍａｂ１ １５ｍｐｋ ＩＶ、ＦａｂＡ １０ｍｐｋ ＩＶ及びＦａｂＡ ３ｍｐｋ ＳＣからの図である。
以下は、Ｍａｂ１ １５ｍｐｋ ＩＶ、ＦａｂＡ １０ｍｐｋ ＩＶ及びＦａｂＡ ３ｍｐｋ ＳＣからの図である。
【0391】
カニクイザルにＭａｂ１ １５ｍｐｋ ＩＶ、ＦａｂＡ １０ｍｐｋ ＩＶ及びＦａｂＡ ３ｍｐｋ ＳＣの単回用量で投薬した。経時的に血液サンプルを採取し、血清について処理した。血清の遊離薬物レベルを測定し、以下に示す。Ｍａｂ１ １５ｍｐｋ ＩＶは、２５０，０００ｎｇ／ｍＬのピーク血清遊離Ｍａｂ１レベルをもたらす（図１２Ａ）。遊離薬物レベルは、４日目まで上昇したままであるが、５日目では検出未満のレベルまで消失する。ＦａｂＡ １０ｍｐｋ ＩＶは、１２０００ｎｇ／ｍＬのピーク薬物レベルをもたらし、８時間までに検出限度未満まで低下する薬物レベルで非常に急速に消失する（図１２Ｂ）。Ｆａｂ分子の推定半減期は２～３時間である。ＦａｂＡ ３ｍｐｋ ＳＣは、遊離薬物レベルの極めて緩やかな増加を示し、単回投薬後２４時間の時点で測定可能であった（図１２Ｃ）。
【0392】
これらの結果は、ＩＶで投薬された完全ＩｇＧ分子のＭａｂ１が、約２５０ｕｇ／ｍＬの血清ピーク薬物レベルを示し、数日の時間枠で徐々に消失したことを実証している。ＩＶで投薬されたＦａｂＡは、８時間で完全に消失する約１２ｕｇ／ｍＬのピーク血清薬物レベルを示す。対照的に、ＳＣで投薬されたＦａｂＡは、血清遊離薬物レベルが徐々に緩やかに増加して２４時間でピークとなり、約４８時間までに消失することを示している。
【0393】
急速なクリアランスは、遊離血清全長抗体レベルと比較して増加した遊離血清Ｆａｂ断片レベルのクリアランスを指す（図１２）。その長い半減期のため、遊離血清全長抗体レベルは、投与後数日上昇したままである。対照的に、その短い半減期のため、遊離血清Ｆａｂレベルは、数時間以内に極めて急速に低下する。すなわち、それは急速に消失する。
【0394】
参照による組み込み
本明細書で引用される特許、公開された特許出願、及び非特許文献の各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書で引用される特許、公開された特許出願、及び非特許文献の各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0395】
均等物
当業者らは、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または単なる通常の実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。
当業者らは、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または単なる通常の実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。
【図1A】
【図1B】
【図2A】
【図2B】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【図7E】
【図7F】
【図7G】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12A】
【図12B】
【図12C】
【図13】
【配列表】
【国際調査報告】