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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-11-10
(54)【発明の名称】健康寿命を延長し加齢性疾患を処置する方法
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20231102BHJP
A61P 3/02 20060101ALI20231102BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20231102BHJP
A61P 21/00 20060101ALI20231102BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20231102BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20231102BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20231102BHJP
A61P 9/12 20060101ALI20231102BHJP
A61P 13/12 20060101ALI20231102BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20231102BHJP
A61K 39/395 20060101ALI20231102BHJP
A61K 38/00 20060101ALI20231102BHJP
A61K 31/7088 20060101ALI20231102BHJP
C07K 16/24 20060101ALN20231102BHJP
C12N 15/113 20100101ALN20231102BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00 ZNA
A61P3/02
A61P3/04
A61P21/00
A61P3/06
A61P1/16
A61P9/00
A61P9/12
A61P13/12
A61P17/00
A61K39/395 D
A61K39/395 N
A61K38/00
A61K31/7088
C07K16/24
C12N15/113 120Z
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023526223
(86)(22)【出願日】2021-10-29
(85)【翻訳文提出日】2023-06-26
(86)【国際出願番号】 EP2021080202
(87)【国際公開番号】W WO2022090509
(87)【国際公開日】2022-05-05
(31)【優先権主張番号】2017244.1
(32)【優先日】2020-10-30
(33)【優先権主張国・地域又は機関】GB
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＲＩＴＯＮ
(71)【出願人】
【識別番号】507335687
【氏名又は名称】ナショナル ユニヴァーシティー オブ シンガポール
(71)【出願人】
【識別番号】516275941
【氏名又は名称】シンガポール ヘルス サーヴィシーズ プライベート リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】100118902
【弁理士】
【氏名又は名称】山本 修
(74)【代理人】
【識別番号】100106208
【弁理士】
【氏名又は名称】宮前 徹
(74)【代理人】
【識別番号】100196508
【弁理士】
【氏名又は名称】松尾 淳一
(74)【代理人】
【識別番号】100157923
【弁理士】
【氏名又は名称】鶴喰 寿孝
(72)【発明者】
【氏名】コーデン，ベンジャミン
(72)【発明者】
【氏名】ウィジャジャ，アニッサ
(72)【発明者】
【氏名】シェーファー，セバスチャン
(72)【発明者】
【氏名】クック，スチュアート
(72)【発明者】
【氏名】シン，ブリジェシュ・クマール
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084AA17
4C084BA44
4C084DA46
4C084NA14
4C084ZA361
4C084ZA421
4C084ZA701
4C084ZA751
4C084ZA811
4C084ZA891
4C084ZA941
4C084ZC211
4C084ZC331
4C084ZC412
4C084ZC521
4C085AA13
4C085AA14
4C085BB11
4C085BB17
4C085BB36
4C086AA01
4C086AA02
4C086EA16
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZA36
4C086ZA42
4C086ZA70
4C086ZA75
4C086ZA81
4C086ZA89
4C086ZA94
4C086ZC21
4C086ZC33
4C086ZC41
4C086ZC52
4H045BA10
4H045CA40
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA74
(57)【要約】
本開示は、加齢性疾患の診断、処置および予防、ならびに健康寿命を増加させることに関する。加齢性疾患／状態を処置または予防する方法、特に虚弱を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与することを含む方法が提供される。そのような方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤も提供される。そのような方法で使用するための医薬の製造におけるインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用もさらに提供される。
【選択図】図１
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
加齢性疾患／状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含み、前記加齢性疾患／状態は：虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患から選択される、方法。
【請求項2】
虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患：から選択される加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
【請求項3】
虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患：から選択される加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
【請求項4】
虚弱を処置または予防する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
【請求項5】
虚弱を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造におけるインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
【請求項6】
虚弱を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
【請求項7】
体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
【請求項8】
体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造におけるインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
【請求項9】
体組成の加齢性変化を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
【請求項10】
対象の健康寿命を延ばす方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
【請求項11】
対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための医薬の製造におけるインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
【請求項12】
対象の健康寿命を延ばす方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を前記対象に投与するステップを含む方法。
【請求項13】
前記薬剤が、抗体もしくはその抗原結合性断片、ポリペプチド、ペプチド、核酸、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは小分子：からなる群から選択される、請求項１、４、７または１０のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、請求項２、５、８または１１のいずれか一項に記載の使用、または請求項３、６、９または１２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項14】
前記薬剤が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）のインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）への結合を阻止または低減することが可能な薬剤である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項15】
前記薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）に結合することが可能である、請求項１～１４のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項16】
前記薬剤が抗体またはその抗原結合性断片である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項17】
前記薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニストまたはその抗原結合性断片である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項18】
前記薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニストまたはその抗原結合性断片である、請求項１～１６のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項19】
前記薬剤がＩＬ－１１のデコイ受容体である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項20】
前記薬剤がＩＬ－１１の競合的阻害剤である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項21】
前記薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現を阻止または低減することが可能である、請求項１～１３のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項22】
前記薬剤がＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項２１に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項23】
前記薬剤がＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、請求項２１に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【請求項24】
前記方法が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現が上方制御される対象に前記薬剤を投与するステップを含む、請求項１～２３のいずれか一項に記載の使用のための薬剤、使用または方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本開示は、加齢性疾患の診断、処置および予防、ならびに健康寿命を増加させることに関する。
【背景技術】
【0002】
機能における年齢関連の衰退は複数の臓器および生理系統にわたって普通であり、ストレッサーへの全体的に増加した脆弱さ、回復力の減少および虚弱をもたらす。虚弱の発現は健康寿命（すなわち、健康である生物体の生存期間）を短くする主要な因子である。虚弱への著しい寄与因子は、体脂肪量の増加と同時の筋肉量の加齢性減少である。老化細胞の蓄積は反応性酸素種を増加させ、無菌の炎症は加齢過程における重要な病理である。
【0003】
加齢の根底にある重要な病理は「加齢の特質」として分類されており、その９つがある（Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎら、２０１３）－具体的には、テロメア漸減、ゲノム不安定性、ミトコンドリア機能障害、細胞老化、幹細胞消耗、タンパク平衡の喪失、脱調節された栄養感知、後成的変化および変化した細胞間伝達。これらの中で、加齢関連の疾患を軽減するためにおよび／または寿命を延長するために、遺伝子的または治療的に操作することができる最も頑強な証拠を有する特質には、栄養感知（ＬｉｕおよびＳａｂａｔｉｎｉ、２０２０）、タンパク平衡の喪失（ＫａｕｓｈｉｋおよびＣｕｅｒｖｏ、２０１５）および細胞老化（Ｄｏｌｇｉｎ、２０２０）が含まれる。変化した細胞間伝達、特に増加した慢性炎症およびＩＬ６上方制御も、加齢過程を予防、処置し、および／または後退させるために標的にすることができる重要な特質である（Ｆｕｒｍａｎら、２０１９；ＦｅｒｒｕｃｃｉおよびＦａｂｂｒｉ、２０１８；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ、２０００）。
【0004】
加齢の特質の１つまたは複数を促進する経路および重要な遺伝子に関するデータの大半は、虫、ハエおよびマウスにおける遺伝子研究に由来している。種横断データは、インスリン／ＩＧＦ－１シグナル伝達（ＩＩＳ）、ラパマイシン１の哺乳動物標的（ｍＴＯＲＣ１）、ＡＭＰ活性化キナーゼ（ＡＭＰＫ）およびＭＥＫ／ＥＲＫ経路のための決定的な役割を指し示す（Ｓｌａｃｋら、２０１５；ＬｉｕおよびＳａｂａｔｉｎｉ、２０２０；Ｂｕｒｋｅｗｉｔｚ、ＺｈａｎｇおよびＭａｉｒ、２０１４）。老化だけを標的にすることが試みられたが、これは他の特質に対処せず、主な加齢経路（ＩＩＳ、ＥＲＫ、ｍＴＯＲＣ１、ＡＭＰＫ）に影響しない。
【0005】
インスリン、その受容体またはＩＲＳ１のレベルでのＩＩＳの治療的標的化は、主要な毒性と関連している。より少ないがなお顕著な毒性プロファイルを有する免疫抑制ラパマイシンを使用して、ＩＩＳ下流のｍＴＯＲＣ、栄養感知および他の加齢関連の過程の阻害が可能である。種を横断して、ラパマイシンおよびラパマイシン様薬物（ラパログ）は健康寿命を向上させ、寿命を延長することができる（Ｚｈａｎｇ、ＺｈａｎｇおよびＷａｎｇ、２０２１；ＦｅｒｎａｎｄｅｓおよびＤｅｍｅｔｒｉａｄｅｓ、２０２１）。メトホルミンを使用したＡＭＰＫの活性化は代わりのアプローチであり、それは健康寿命を向上させ、寿命を延長するために首尾よく使用されている（Ｂｕｒｋｅｗｉｔｚ、ＺｈａｎｇおよびＭａｉｒ、２０１４）。注目すべきは、メトホルミンは細胞エネルギー貯蔵を消耗させ、ＡＭＰＫ自体を直接的に活性化するよりもＡＭＰＫ上流の栄養感知ＬＫＢ１キナーゼを活性化する（Ｓｈａｗら、２００５）。ハエでの実験は、トリメチニブによるＭＥＫ／ＥＲＫシグナル伝達の治療的阻害が寿命を延長することができることを示した（Ｓｌａｃｋら、２０１５）。全体として、今日まで治療的介入は加齢に関与する個々の経路を標的にし、主要な副作用と関連している。全ての経路を阻害する薬物はない。
【0006】
加齢性の疾患および状態の処置および予防のための療法の開発への満たされていない臨床必要性がある。
【発明の概要】
【0007】
第１の態様では、本開示は、加齢性の疾患／状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与することを含み、加齢性の疾患／状態は：虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患から選択される、方法を提供する。
【0008】
本開示は：虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患から選択される加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤も提供する。
【0009】
本開示は：虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患から選択される加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
【0010】
本開示は虚弱を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤も提供する。
本開示は虚弱を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
本開示は虚弱を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
【0011】
本開示は、虚弱を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与することを含む方法も提供する。
【0012】
本開示は体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤も提供する。
本開示は体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
本開示は体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
【0013】
本開示は、体組成の加齢性変化を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与することを含む方法も提供する。
【0014】
本開示は対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤も提供する。
本開示は対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
本開示は対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用も提供する。
【0015】
本開示は、対象の健康寿命を延ばす方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与することを含む方法も提供する。
【0016】
一部の実施形態では、薬剤は：抗体もしくはその抗原結合性断片、ポリペプチド、ペプチド、核酸、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは小分子からなる群から選択される。
一部の実施形態では、薬剤は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）のインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）への結合を阻止または低減することが可能な薬剤である。
一部の実施形態では、薬剤は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）のインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）への結合を阻止または低減することが可能な薬剤である。
【0017】
一部の実施形態では、薬剤は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）に結合することが可能である。
一部の実施形態では、薬剤は抗体またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、薬剤は抗体またはその抗原結合性断片である。
【0018】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である。
【0019】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１のデコイ受容体である。
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１の競合的阻害剤である。
一部の実施形態では、薬剤は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現を阻止または低減することが可能である。
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１の競合的阻害剤である。
一部の実施形態では、薬剤は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現を阻止または低減することが可能である。
【0020】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである。
【0021】
一部の実施形態では、本方法は、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現が上方制御される対象に薬剤を投与することを含む。
【図面の簡単な説明】
【0022】
【図1】１１０週齢のマウスの虚弱に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。
【図2】１１０週齢のマウスの体温に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。
【図3】図３Ａは、体脂肪量の変化に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。図３Ｂは、除脂肪量の変化に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。
【図4】図４Ａは、体重の割合としてのヒラメ筋の質量に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。図４Ｂは、体重の割合として腓腹筋の質量に及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。
【図5】ウエスタンブロットによって決定したときの、３カ月齢マウスおよび２８カ月齢マウスから得られた肝臓におけるＩＬ－１１タンパク質のレベルを示す画像である。
【図6A】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＰ２１／Ｃｄｋｎ１ａのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体Ｘ２０９またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図6B】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＩｌ１ｂのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体Ｘ２０９またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図6C】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＩｌ１１のレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体Ｘ２０９またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図6D】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＴｇｆｂｍＲＮＡのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体Ｘ２０９またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図7A】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＰ２１／Ｃｄｋｎ１ａのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図7B】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＩｌ１ｂのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図7C】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＩｌ１１のレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図7D】細胞老化プログラムを経るように誘導されたＡＭＬ１２細胞の７日目のＴｇｆｂ ｍＲＮＡのレベルに及ぼす、抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフである。
【図8】ウエスタンブロットによって決定したときの、１１０週齢または１２週齢雌雄マウスの肝臓、心室（心臓）、腎臓、ヒラメ筋および腓腹筋におけるＩＬ－１１タンパク質のレベルを示す画像である。
【図9】血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（５１．３ｍｇ／ｄｌ）および雌（３１．８ｍｇ／ｄｌ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均ＢＵＮレベルを示す。
【図10】血清クレアチニンレベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（０．９２ｍｇ／ｄｌ）および雌（０．７７ｍｇ／ｄｌ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均血清クレアチニンレベルを示す。
【図11】血清トリグリセリドレベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（５４ｍｇ／ｄｌ）および雌（３７ｍｇ／ｄｌ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均血清トリグリセリドレベルを示す。
【図12】肝臓トリグリセリドレベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（１６５ｍｇ／ｇ）および雌（１３０ｍｇ／ｇ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均肝臓トリグリセリドレベルを示す。
【図13】血清コレステロールレベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（１４９ｍｇ／ｄｌ）および雌（９０ｍｇ／ｄｌ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均血清コレステロールレベルを示す。
【図14】血清β－ヒドロキシブチレートレベルに及ぼす、５５週齢からの抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体Ｘ２０３またはアイソタイプ一致対照ＩｇＧによる処置の影響を示すグラフおよび表である。点線は、１２週齢の雄（０．１５９ｍＭ）および雌（０．２３６ｍＭ）Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの平均血清β－ヒドロキシブチレートレベルを示す。
【図15】ＩＬ１１（１０ｎｇ／ｍｌ）で１５分間、２時間、４時間、６時間または２４時間刺激される一次ヒト心臓線維芽細胞におけるｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲのレベルを示すウエスタンブロット画像である。
【図16】ＩＬ－１１は、ＬＫＢ１セリン３２５（Ｓ３２５）のＥＲＫ媒介リン酸化およびＬＫＢ１セリン４２８（Ｓ４２８）のＰ９０ＲＳＫ媒介リン酸化を刺激し、その後ＡＭＰＫが不活性化され、ｍＴＯＲ、Ｐ７０ＲＳＫおよびＳ６ＲＰが活性化される。（１６Ａ）Ａ５４９細胞はヒトＬＫＢ１をコードするＡＡＶ８で２４時間感染させ（感染多重度＝２０）、次に、ＩＬ１１（１０ｎｇ／ｍｌ）により示した時間（１５分間、２時間、４時間、６時間または２４時間）刺激した。細胞溶解物は、示したタンパク質についてイムノブロットした。（１６Ｂ）ＩＬ－１１媒介シグナル伝達によるＥＲＫ（直接的）およびＰ９０ＲＳＫ（間接的）の活性化ならびに加齢の特質への下流の影響の模式図。Ｐまたはｐ；リン酸化されたアミノ酸。
【図17】ヒトＬＫＢ１をコードするＡＡＶ８でヒト肝星状細胞（１７Ａ）および肝細胞（１７Ｂ）を２４時間感染させ（感染多重度＝２０）、次に、ＩＬ１１（１０ｎｇ／ｍｌ）により２時間刺激した。細胞溶解物は、示したタンパク質についてイムノブロットした。
【図18】ＤＭＳＯ、ラパマイシン、ワートマニンまたはＵ０１２６の存在下での未刺激の（ＢＬ＋ＤＭＳＯ）またはＩＬ１１で２４時間刺激した一次ヒト心臓線維芽細胞におけるｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫのレベルを示すウエスタンブロット画像である。ＩＬ１１（１０ｎｇ／ｍｌ）、ラパマイシン（１０ｎＭ）、ワートマニン（１μＭ）、Ｕ０１２６（１０μＭ）。
【図19】Ｘ２０３、Ｘ２０９またはＩｇＧ（１１Ｅ１０）アイソタイプ対照の存在下での、未刺激の（ＢＬ）またはＩＬ１１もしくはＴＧＦβ１で２４時間刺激した一次ヒト心臓線維芽細胞におけるｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－Ｐ９０ＲＳＫ、Ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ＳＭＡおよびＧＡＰＤＨのレベルを示すウエスタンブロット画像である。ＩＬ１１／ＴＧＦβ１（１０ｎｇ／ｍｌ）、ＩｇＧ／Ｘ２０３／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）。
【図20】Ｘ２０３、Ｘ２０９またはＩｇＧ（１１Ｅ１０）アイソタイプ対照の存在下での、未刺激の（ＢＬ）またはＩＬ１１、０．５％ＢＳＡもしくはパルミテート（飽和脂肪酸）で２４時間刺激した一次ヒト肝細胞における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－Ｐ９０ＲＳＫ、Ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ｐ－ＡＣＣ）、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰのレベルを示すウエスタンブロット画像である。ＩＬ１１（１０ｎｇ／ｍｌ）、ＩｇＧ／Ｘ２０３／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）、６：１の比で遊離ＢＳＡ（０．５％ＢＳＡ溶液）中でコンジュゲートしたパルミテート（０．５ｍＭ）。
【図21】ＤＭＳＯまたはＵ０１２６（１０μＭ）の存在下での、未刺激の（ＢＬ＋ＤＭＳＯ）またはＩＬ１１で２４時間刺激した一次ヒト肝星状細胞におけるｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－Ｐ９０ＲＳＫ、Ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ＳＭＡおよびＧＡＰＤＨのレベルを示すウエスタンブロット画像である。
【図22】ＤＭＳＯまたはＵ０１２６（１０μＭ）の存在下での、未刺激の（ＢＬ＋ＤＭＳＯ）またはＩＬ１１で２４時間刺激した一次ヒト肝細胞における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－Ｐ９０ＲＳＫ、Ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰのレベルを示すウエスタンブロット画像である。
【図23】未刺激の（ＢＬ）またはＩＬ－１１もしくはＩＬ－６の増加する濃度（１．２５、２．５、５、１０または２０ｎｇ／ｍｌ）で２４時間刺激した一次ヒト肝細胞または一次ヒト肝星状細胞における、ｐ－ＬＫＢ１、ＬＫＢ１、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫのレベルを示すウエスタンブロット画像である。
【図24】（２４Ａ）Ｂ～Ｆに示すデータのための老化予防実験の模式図である。Ｔｒｉｐａｔｈｉら（２０２０）によって記載されるように、７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって、老化ＡＭＬ１２を生成させた。２３時間の回復期間中にＩｇＧ／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）を１０日間培養に加え；ＲＮＡ抽出および以降のｑＰＣＲ実験のために１０日目に細胞を採取した。（２４Ｂ）Ｃｄｋｎ２ａ（ｐ１６）、（２４Ｃ）Ｃｄｋｎ１ａ（ｐ２１）、（２４Ｄ）Ｉｌ１β、（２４Ｅ）Ｉｌ８および（２４Ｆ）Ｉｌ１１の相対的ｍＲＮＡ発現。
【図25】（２５Ａ）Ｂ～Ｄに示すデータのための老化逆転実験の模式図である。前記のように老化ＡＭＬ１２を７日間生成させた。７２時間の老化誘導期間の終わりにＩｇＧ／Ｘ２０３／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）を培養に加え；ＲＮＡ抽出および以降のｑＰＣＲ実験のために１０日目に細胞を採取した。（２５Ｂ）Ｃｄｋｎ１ａ（ｐ２１）、（２５Ｃ）Ｉｌ１βおよび（２５Ｄ）Ｉｌ１１の相対的ｍＲＮＡ発現。
【図26】高齢マウスの腎臓の細胞中のＩＬ－１１発現を示す図である。１１０週齢ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスの腎臓全体：皮質、髄質、乳頭突起および腎臓血管におけるＥＧＦＰ発現を示す画像（灰色；右欄）。野生型マウス（左欄）からの年齢を一致させた対照腎臓では、ＥＧＦＰ染色は見られなかった。スケールは、５０μｍを表す。
【図27】高齢マウスの心室および心房の細胞中のＩＬ－１１発現を示す図である。高齢（１１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス心臓でＥＧＦＰ発現（灰色）が見られる：特に間質および血管周囲で。心房では、高齢ＩＬ１１：ＥＧＦＰマウスの心外膜で特異な染色が見られる。年齢を一致させた対照または若齢（１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスでＥＧＦＰの染色は見られなかった。スケールは、５０μｍを表す。
【図28】高齢マウスの肺の細胞中のＩＬ－１１発現を示す図である。高齢（１１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスの肺でＥＧＦＰ発現（灰色）が見られる：特に細気管支周辺で。年齢を一致させた対照または若齢（１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスでＥＧＦＰの染色は見られなかった。スケールは、５０μｍを表す。
【図29】高齢マウスの脾臓の細胞中のＩＬ－１１発現を示す図である。高齢（１１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス脾臓細胞でＥＧＦＰ発現（灰色）が見られ、若齢（１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰ脾臓でもずっと低い程度で見られる。野生型マウスからの年齢を一致させた対照脾臓では、ＥＧＦＰ染色は見られなかった。
【図30】１２および１１０週齢の野生型雌雄マウスの腹部脂肪組織におけるＩＬ－１１のレベルを示すウエスタンブロット画像である。
【図31】高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの肝臓は、野生型マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有する。画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１０または１１０週齢雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスから得られた肝臓における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す（ｎ＝３／群）。
【図32】高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの腓腹筋は、野生型マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有する。画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１０または１１０週齢雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスから得られた腓腹筋における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図33】高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスのヒラメ筋は、野生型マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有する。画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１０または１１０週齢雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスから得られたヒラメ筋における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図34】高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの腹部脂肪は、野生型マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有する。画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１０または１１０週齢雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスから得られた腹部脂肪における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図35】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較してより少ない体重を有した。グラフおよび表は、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの体重を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図36】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較してより少ない体脂肪量を有した。グラフおよび表は、エコーＭＲＩによって決定された、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの脂肪パーセンテージ（％で表した体脂肪量（ｇ）／体重（ｇ））を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図37】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較してより多くの除脂肪筋肉質量パーセンテージを有した。グラフおよび表は、エコーＭＲＩによって決定された、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの除脂肪筋肉質量パーセンテージ（％で表した筋肉質量（ｇ）／体重（ｇ））を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図38】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較して低減された虚弱を示した。グラフおよび表は、Ｒｉｚｚｏら（２０１８）、Ｈｅａｌｔｈｓｐａｎ ａｎｄ ｌｉｆｅｓｐａｎ ｍｅａｓｕｒｅｓ ｉｎ ａｇｉｎｇ ｍｉｃｅ：Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｓｔｉｎｇ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、ｒｅｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ、ａｎｄ ｒａｔｅｒ ｒｅｌｉａｂｉｌｉｔｙ、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｕｓｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ、８、ｅ４５．ｄｏｉ：１０．１００２／ｃｐｍｏ．４５によって公開されたプロトコールを使用して盲検で実行された、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの虚弱スコアを示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図39】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較して低減された体温を示した。グラフおよび表は、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの体温を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図40】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較してより少ない腹部脂肪およびより多くの筋肉（ヒラメ筋および腓腹筋）を有した。グラフおよび表は、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの、体重の割合としての（４０Ａ）腹部脂肪、（４０Ｂ）ヒラメ筋および（４０Ｃ）腓腹筋の質量を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図41】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較して器官にわたってより少ない線維症を有した。グラフおよび表は、ヒドロキシプロリンアッセイによって決定した、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの（３８Ａ）腹部脂肪、（３８Ｂ）腓腹筋、（３８Ｃ）ヒラメ筋および（３８Ｄ）肝臓中のコラーゲン含有量を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図42】高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、野生型対照と比較して器官にわたってより少ない線維症を有した。グラフおよび表は、ヒドロキシプロリンアッセイによって決定した、１１０週齢の雌雄Ｉｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型、Ｉｌ１１ｒａ１を発現する）またはＩｌ１１ｒａ１－／－（Ｉｌ１１ｒａ１ノックアウト）マウスの（４２Ａ）心房、（４２Ｂ）心室、（４２Ｃ）腎臓および（４２Ｄ）肺におけるコラーゲン含有量を示す；２元配置ＡＮＯＶＡ。
【図43】画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１２週齢対照雄マウス（ｎ＝３）、ＩｇＧ（ｎ＝５）およびまたはＸ２０３（ｎ＝５）を受けた１１０週齢雄マウスから得られた肝臓における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図45】画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１２週齢対照雄マウス（ｎ＝３）、ＩｇＧ（ｎ＝５）およびまたはＸ２０３（ｎ＝５）を受けた１１０週齢雄マウスから得られた腓腹筋における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図47】画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１２週齢対照雄マウス（ｎ＝３）、ＩｇＧ（ｎ＝５）およびまたはＸ２０３（ｎ＝５）を受けた１１０週齢雄マウスから得られたヒラメ筋における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、ｐ－Ｓ６ＲＰ、Ｓ６ＲＰ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図49】画像は、ウエスタンブロットによって決定された、１２週齢対照雄マウス（ｎ＝３）、ＩｇＧ（ｎ＝５）およびまたはＸ２０３（ｎ＝５）を受けた１１０週齢雄マウスから得られた腹部脂肪における、ｐ－ＥＲＫ、ＥＲＫ、ｐ－ＬＫＢ、ＬＫＢ、ｐ－ＡＭＰＫ、ＡＭＰＫ、ｐ－ｍＴＯＲ、ｍＴＯＲ、ｐ１６、ｐ２１およびＧＡＰＤＨのレベルを示す。
【図51】中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの血清中のＩＬ－６タンパク質のレベルを低減する。グラフは、高齢（１１０週齢）雌雄マウスの血清ＩＬ－６レベルに及ぼす、抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）またはＩｇＧアイソタイプ対照による処置の影響を示す。点線は、１２週齢対照雄（０．１５９ｐｇ／ｍｌ）および雌（０．２３６ｐｇ／ｍｌ）マウスの平均血清ＩＬ－６レベルを示す。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
【図52】中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの腎臓中の複数の炎症マーカーを低減する。野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスは、５５週齢から１１０週齢まで抗ＩＬ１１（Ｘ２０３；４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）またはアイソタイプＩｇＧ対照（１１Ｅ１０、４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）の腹腔内注射で処置した。１１０週齢マウスを屠殺し、器官を採取し、急速冷凍し、標準手順を使用してＲＮＡを抽出した。試料は、Ｃｃｌ２、Ｃｃｌ５、Ｔｎｆα、Ｉｌ１β、Ｉｌ１１、Ｉｌ６またはＧａｐｄｈに特異的なプライマーを使用した定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）によって分析した。
【図53】中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの肝臓中の複数の炎症マーカーを低減する。野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスは、５５週齢から１１０週齢まで抗ＩＬ１１（Ｘ２０３；４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）またはアイソタイプＩｇＧ対照（１１Ｅ１０、４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）の腹腔内注射で処置した。１１０週齢マウスを屠殺し、器官を採取し、急速冷凍し、標準手順を使用してＲＮＡを抽出した。試料は、Ｃｃｌ２、Ｃｃｌ５、Ｔｎｆα、Ｉｌ１β、Ｉｌ１１、Ｉｌ６またはＧａｐｄｈに特異的なプライマーを使用した定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）によって分析した。
【図54】中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの骨格筋（ヒラメ筋）中の複数の炎症マーカーを低減する。野生型Ｃ５７ＢＬ６／Ｊマウスは、５５週齢から１１０週齢まで抗ＩＬ１１（Ｘ２０３；４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）またはアイソタイプＩｇＧ対照（１１Ｅ１０、４０ｍｇ／ｋｇ、３週間ごとに１回）の腹腔内注射で処置した。１１０週齢マウスを屠殺し、器官を採取し、急速冷凍し、標準手順を使用してＲＮＡを抽出した。試料は、Ｃｃｌ２、Ｃｃｌ５、Ｔｎｆα、Ｉｌ１β、Ｉｌ１１、Ｉｌ６またはＧａｐｄｈに特異的なプライマーを使用した定量的ＲＴ－ＰＣＲ（ＱＰＣＲ）によって分析した。
【発明を実施するための形態】
【0023】
インターロイキン１１およびＩＬ－１１の受容体
脂質生成阻害因子としても知られる、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）は、多面的なサイトカインであり、ＩＬ－６、ＩＬ－１１、ＩＬ－２７、ＩＬ－３１、オンコスタチン、白血病阻害因子（ＬＩＦ）、カルジオトロフィン－１（ＣＴ－１）、カルジオトロフィン様サイトカイン（ＣＬＣ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）およびニューロポエチン（ＮＰ－１）を含むＩＬ－６ファミリーのサイトカインのメンバーである。
脂質生成阻害因子としても知られる、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）は、多面的なサイトカインであり、ＩＬ－６、ＩＬ－１１、ＩＬ－２７、ＩＬ－３１、オンコスタチン、白血病阻害因子（ＬＩＦ）、カルジオトロフィン－１（ＣＴ－１）、カルジオトロフィン様サイトカイン（ＣＬＣ）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）およびニューロポエチン（ＮＰ－１）を含むＩＬ－６ファミリーのサイトカインのメンバーである。
【0024】
インターロイキン１１（ＩＬ－１１）は、様々な細胞型において発現される。ＩＬ－１１のゲノム配列は、第１９染色体および第７染色体のセントロメア領域上にマッピングされており、細胞からの効率的な分泌を確保する古典的シグナルペプチドと共に転写される。ＩＬ－１１のアクチベータタンパク質複合体、そのプロモーター配列内に位置するｃＪｕｎ／ＡＰ－１は、ＩＬ－１１の基本的転写調節にとって重要である（ＤｕおよびＷｉｌｌｉａｍｓ．、Ｂｌｏｏｄ １９９７、Ｖｏｌ ８９：３８９７～３９０８頁）。未成熟型のヒトＩＬ－１１は、１９９アミノ酸のポリペプチドであるが、成熟型のＩＬ－１１は、１７８アミノ酸残基のタンパク質をコードする（ＧａｒｂｅｒｓおよびＳｃｈｅｌｌｅｒ、Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２０１３；３９４（９）：１１４５～１１６１頁）。ヒトＩＬ－１１アミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ２０８０９（Ｐ２０８０９．１ ＧＩ：１２４２９４；配列番号１）の下で入手可能である。組換えヒトＩＬ－１１（オプレルベキン）も商業的に入手可能である。マウス、ラット、ブタ、ウシ、いくつかの種の硬骨魚および霊長類などの他の種に由来するＩＬ－１１も、クローニングおよび配列決定されている。
【0025】
本明細書では、「ＩＬ－１１」とは、任意の種に由来するＩＬ－１１を指し、任意の種に由来するＩＬ－１１のアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログを含む。好ましい実施形態では、種はヒト（ホモ・サピエンス）である。ＩＬ－１１のアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログは、必要に応じて、所与の種、例えば、ヒトに由来する未成熟または成熟ＩＬ－１１のアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有することを特徴としてもよい。ＩＬ－１１のアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログは、必要に応じて、ＩＬ－１１Ｒα（好ましくは、同じ種に由来する）に結合し、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現する細胞中でシグナル伝達を刺激する能力を特徴としてもよい（例えば、Ｃｕｒｔｉｓら、Ｂｌｏｏｄ、１９９７、９０（１１）；またはＫａｒｐｏｖｉｃｈら、Ｍｏｌ．Ｈｕｍ．Ｒｅｐｒｏｄ．２００３ ９（２）：７５～８０頁に記載されたように）。ＩＬ－１１の断片は、任意の長さ（アミノ酸の数で）のものであってよいが、必要に応じて、成熟ＩＬ－１１の長さの少なくとも２５％であってもよく、成熟ＩＬ－１１の長さの５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のうちの１つの最大の長さを有してもよい。ＩＬ－１１の断片は、１０アミノ酸の最小の長さ、および１５、２０、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、または１９５アミノ酸のうちの１つの最大の長さを有してもよい。
【0026】
ＩＬ－１１は、遍在的に発現される糖タンパク質１３０（ｇｐ１３０；糖タンパク質１３０、ＩＬ－６ＳＴ、ＩＬ－６－ベータまたはＣＤ１３０としても知られる）のホモ二量体を介してシグナル伝達する。ｇｐ１３０は、ＩＬ－６受容体ファミリーとＩ型サイトカイン受容体の１つのサブユニットを形成する膜貫通タンパク質である。シグナル伝達に直接関与しない個々のインターロイキン１１受容体サブユニットアルファ（ＩＬ－１１Ｒα）を介して特異性が得られるが、α－受容体への初期のサイトカイン結合事象は、ｇｐ１３０との最終的な複合体形成をもたらす。
【0027】
ヒトｇｐ１３０（２２アミノ酸シグナルペプチドを含む）は、９１８アミノ酸のタンパク質であり、成熟型は、５９７アミノ酸の細胞外ドメイン、２２アミノ酸の膜貫通ドメイン、および２７７アミノ酸の細胞内ドメインを含む８６６アミノ酸である。このタンパク質の細胞外ドメインは、ｇｐ１３０のサイトカイン結合モジュール（ＣＢＭ）を含む。ｇｐ１３０のＣＢＭは、ｇｐ１３０のＩｇ様ドメインＤ１、ならびにフィブロネクチンＩＩＩ型ドメインＤ２およびＤ３を含む。ヒトｇｐ１３０のアミノ酸配列は、ＵｎｉＰｒｏｔ受託番号Ｐ４０１８９－１（配列番号２）の下で入手可能である。
【0028】
ヒトＩＬ－１１Ｒαは、４２２アミノ酸のポリペプチド（ＵｎｉＰｒｏｔ Ｑ１４６２６；配列番号３）であり、マウスＩＬ－１１Ｒαとの約８５％のヌクレオチドおよびアミノ酸配列同一性を有する。細胞質ドメインが異なるＩＬ－１１Ｒαの２つのアイソフォームが報告されている（ＤｕおよびＷｉｌｌｉａｍｓ、上掲）。ＩＬ－１１受容体α鎖（ＩＬ－１１Ｒα）は、ＩＬ－６受容体α鎖（ＩＬ－６Ｒα）との多くの構造的および機能的類似性を有する。細胞外ドメインは、特徴的な保存されたＴｒｐ－Ｓｅｒ－Ｘ－Ｔｒｐ－Ｓｅｒ（ＷＳＸＷＳ）モチーフを含む２４％のアミノ酸同一性を示す。短い細胞質ドメイン（３４アミノ酸）は、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達経路の活性化に必要とされるＢｏｘ１および２領域を欠く。
【0029】
マウスＩＬ－１１上の受容体結合部位はマッピングされており、３つの部位（部位Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ）が同定されている。ｇｐ１３０への結合は、部位ＩＩ領域中の置換および部位ＩＩＩ領域中の置換によって低減される。部位ＩＩＩ変異体は、検出可能なアゴニスト活性を示さず、ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト活性を有する（Ｃｙｔｏｋｉｎｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ Ｃｈａｐｔｅｒ ８；Ｇｅｎｎａｒｏ ＣｉｌｉｂｅｒｔｏおよびＲｏｃｃｏ Ｓａｖｉｎｏ（編）、Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．２００１）。
【0030】
本明細書では、ＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）は、ＩＬ－１１に結合することができるポリペプチドまたはポリペプチド複合体を指す。一部の実施形態では、ＩＬ－１１受容体は、ＩＬ－１１に結合し、その受容体を発現する細胞中でシグナル伝達を誘導することができる。
【0031】
ＩＬ－１１受容体は、任意の種に由来するものであってよく、任意の種に由来するＩＬ－１１受容体のアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログを含む。好ましい実施形態では、種はヒト（ホモ・サピエンス）である。
【0032】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１受容体は、ＩＬ－１１Ｒαであってもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１の受容体は、ＩＬ－１１Ｒαを含むポリペプチド複合体であってもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１受容体は、ＩＬ－１１Ｒαとｇｐ１３０とを含むポリペプチド複合体であってもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１受容体は、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１が結合するｇｐ１３０を含む複合体であってもよい。
【0033】
ＩＬ－１１Ｒαのアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログは、必要に応じて、所与の種、例えば、ヒトに由来するＩＬ－１１Ｒαのアミノ酸配列に対して少なくとも７０％、好ましくは、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のうちの１つのアミノ酸配列同一性を有することを特徴としてもよい。ＩＬ－１１Ｒαのアイソフォーム、断片、バリアントまたはホモログは、必要に応じて、ＩＬ－１１（好ましくは、同じ種に由来する）に結合し、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現する細胞中でシグナル伝達を刺激する能力を特徴としてもよい（例えば、Ｃｕｒｔｉｓら、Ｂｌｏｏｄ、１９９７、９０（１１）；またはＫａｒｐｏｖｉｃｈら、Ｍｏｌ．Ｈｕｍ．Ｒｅｐｒｏｄ．２００３ ９（２）：７５～８０頁に記載されたように）。ＩＬ－１１受容体の断片は、任意の長さ（アミノ酸の数で）のものであってよいが、必要に応じて、成熟ＩＬ－１１Ｒαの長さの少なくとも２５％であってよく、成熟ＩＬ－１１Ｒαの長さの５０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％のうちの１つの最大の長さを有してもよい。ＩＬ－１１受容体断片の断片は、１０アミノ酸の最小の長さ、および１５、２０、２５、３０、４０、５０、１００、１１０、１２０、１３０、１４０、１５０、１６０、１７０、１８０、１９０、２００、２５０、３００、４００、または４１５アミノ酸のうちの１つの最大の長さを有してもよい。
【0034】
ＩＬ－１１シグナル伝達
ＩＬ－１１は低親和性でＩＬ－１１Ｒαに結合し（Ｋｄ約２２ｎＭ；Ｍｅｔｃａｌｆｅら、ＪＢＣ（２０２０）原稿ＲＡ１１９．０１２３５１、を参照する）、これらの結合パートナー間の相互作用だけでは生物学的シグナルを伝達するには不十分である。シグナル伝達を可能にする高親和性の受容体（約４００～８００ｐｍｏｌ／ＬのＫｄ）の生成には、ＩＬ－１１Ｒαとｇｐ１３０との同時発現が必要である（Ｃｕｒｔｉｓら、Ｂｌｏｏｄ １９９７；９０（１１）：４４０３～１２頁；Ｈｉｌｔｏｎら、ＥＭＢＯ Ｊ １３：４７６５頁、１９９４；Ｎａｎｄｕｒｋａｒら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １２：５８５頁、１９９６）。ＩＬ－１１の、細胞表面ＩＬ－１１Ｒαへの結合は、主に、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）カスケードおよびＪａｎｕｓキナーゼ／シグナル伝達因子および転写（Ｊａｋ／ＳＴＡＴ）経路のアクチベータを介して、ｇｐ１３０のヘテロ二量体化、チロシンリン酸化、活性化ならびに下流のシグナル伝達を誘導する（ＧａｒｂｅｒｓおよびＳｃｈｅｌｌｅｒ、上掲）。
ＩＬ－１１は低親和性でＩＬ－１１Ｒαに結合し（Ｋｄ約２２ｎＭ；Ｍｅｔｃａｌｆｅら、ＪＢＣ（２０２０）原稿ＲＡ１１９．０１２３５１、を参照する）、これらの結合パートナー間の相互作用だけでは生物学的シグナルを伝達するには不十分である。シグナル伝達を可能にする高親和性の受容体（約４００～８００ｐｍｏｌ／ＬのＫｄ）の生成には、ＩＬ－１１Ｒαとｇｐ１３０との同時発現が必要である（Ｃｕｒｔｉｓら、Ｂｌｏｏｄ １９９７；９０（１１）：４４０３～１２頁；Ｈｉｌｔｏｎら、ＥＭＢＯ Ｊ １３：４７６５頁、１９９４；Ｎａｎｄｕｒｋａｒら、Ｏｎｃｏｇｅｎｅ １２：５８５頁、１９９６）。ＩＬ－１１の、細胞表面ＩＬ－１１Ｒαへの結合は、主に、マイトジェン活性化タンパク質キナーゼ（ＭＡＰＫ）カスケードおよびＪａｎｕｓキナーゼ／シグナル伝達因子および転写（Ｊａｋ／ＳＴＡＴ）経路のアクチベータを介して、ｇｐ１３０のヘテロ二量体化、チロシンリン酸化、活性化ならびに下流のシグナル伝達を誘導する（ＧａｒｂｅｒｓおよびＳｃｈｅｌｌｅｒ、上掲）。
【0035】
原理的には、可溶型ＩＬ－１１Ｒαも、ＩＬ－１１との生物活性可溶型複合体を形成することができ（Ｐｆｌａｎｚら、１９９９、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ、４５０、１１７～１２２頁）、ＩＬ－６と同様、ＩＬ－１１が一部の例では、細胞表面ｇｐ１３０に結合する前に可溶型ＩＬ－１１Ｒαに結合することができる可能性を上昇させる（ＧａｒｂｅｒｓおよびＳｃｈｅｌｌｅｒ、上掲）。Ｃｕｒｔｉｓら（Ｂｌｏｏｄ １９９７ Ｄｅｃ １；９０（１１）：４４０３～１２頁）は、可溶型マウスＩＬ－１１受容体アルファ鎖（ｓＩＬ－１１Ｒ）の発現を記載し、ｇｐ１３０を発現する細胞中でのシグナル伝達を検査した。膜貫通型ＩＬ－１１Ｒではなく、ｇｐ１３０の存在下で、ｓＩＬ－１１Ｒは、膜貫通型ＩＬ－１１Ｒによるシグナル伝達と同様、Ｍ１白血病細胞のＩＬ－１１依存的分化およびＢａ／Ｆ３細胞中での増殖ならびにｇｐ１３０、ＳＴＡＴ３およびＳＨＰ２のリン酸化を含む初期の細胞内事象を媒介した。可溶型ＩＬ－１１Ｒアルファに結合したＩＬ－１１による細胞膜結合型ｇｐ１３０を介するシグナル伝達の活性化が、最近証明された（Ｌｏｋａｕら、２０１６、Ｃｅｌｌ Ｒｅｐｏｒｔｓ １４、１７６１～１７７３頁）。このいわゆるＩＬ－１１トランスシグナル伝達は疾患病因にとって重要である可能性があるが、ヒト疾患におけるその役割はまだ研究されていない。
【0036】
本明細書で使用される場合、「ＩＬ－１１のｔｒａｎｓシグナル伝達」は、ＩＬ－１１Ｒαに結合したＩＬ－１１の、ｇｐ１３０への結合によって誘発されるシグナル伝達を指す。ＩＬ１１は、非共有複合体としてＩＬ－１１Ｒαに結合してもよい。ｇｐ１３０は、膜結合型であり、シグナル伝達がＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合後に起こる細胞によって発現される。一部の実施形態では、ＩＬ－１１Ｒαは、可溶型ＩＬ－１１Ｒαであってもよい。一部の実施形態では、可溶型ＩＬ－１１Ｒαは、ＩＬ－１１Ｒαの可溶型（分泌型）アイソフォーム（例えば、膜貫通ドメインを欠く）である。一部の実施形態では、可溶型ＩＬ－１１Ｒαは、細胞膜に結合したＩＬ－１１Ｒαの細胞外ドメインのタンパク質分解的切断の遊離産物である。一部の実施形態では、ＩＬ－１１Ｒαは、細胞膜結合型であってよく、ｇｐ１３０を介するシグナル伝達は、細胞膜結合型ＩＬ－１１Ｒαに結合したＩＬ－１１の結合によって誘発され、「ＩＬ－１１のｃｉｓシグナル伝達」と呼ばれる。好ましい実施形態では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１媒介シスシグナル伝達を破壊することによって達成される。
【0037】
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達は、造血および血小板新生を刺激し、破骨細胞活性を刺激し、神経形成を刺激し、脂質生成を阻害し、炎症誘発性サイトカイン発現を低減し、細胞外マトリックス（ＥＣＭ）代謝をモジュレートし、胃腸上皮細胞の正常な増殖制御を媒介することが示されている（ＤｕおよびＷｉｌｌｉａｍｓ、前掲）。
【0038】
インターロイキン１１（ＩＬ－１１）の生理的役割は、不明なままである。ＩＬ－１１は、造血細胞の活性化と、および血小板生産と最も強く関連付けられている。ＩＬ－１１は、移植片対宿主疾患、炎症性関節炎および炎症性腸疾患に対する防御を付与することも示されており、ＩＬ－１１が抗炎症サイトカインと考えられるに至っている（ＰｕｔｏｃｚｋｉおよびＥｒｎｓｔ、Ｊ Ｌｅｕｋｏｃ Ｂｉｏｌ ２０１０、８８（６）：１１０９～１１１７頁）。しかし、ＩＬ－１１は炎症誘発性であると同時に抗炎症性、血管形成促進性であり、新生物にとって重要であることが示唆されている。近年の研究は、ＩＬ－１１がマウス関節炎モデルおよびがんにおけるウイルス誘導炎症の間に容易に検出可能であることを示し、ＩＬ－１１の発現を病理学的刺激が誘導することができることを示唆している。ＩＬ－１１は、新生物性胃腸上皮における腫瘍促進標的遺伝子のＳｔａｔ３依存性活性化に関連付けられてもいる（ＰｕｔｏｃｚｋｉおよびＥｒｎｓｔ、前掲）。
【0039】
本明細書で使用されるように、「ＩＬ－１１シグナル伝達」および「ＩＬ－１１媒介シグナル伝達」は、ＩＬ－１１または成熟ＩＬ－１１分子の機能を有するその断片の、ＩＬ－１１の受容体への結合によって媒介されるシグナル伝達を指す。「ＩＬ－１１シグナル伝達」および「ＩＬ－１１媒介シグナル伝達」は、ＩＬ－１１／その機能的断片によって、例えばＩＬ－１１の受容体への結合を通して開始されるシグナル伝達を指すことを理解される。「シグナル伝達」は、次に細胞活動を支配するシグナル伝達および他の細胞過程を指す。
【0040】
ＩＬ－１１の作用を阻害することが可能な薬剤
本開示の態様は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害を含む。
本明細書では、「阻害」は対照条件と比較した低減、低下または減弱を指す。例えば、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤によるＩＬ－１１の作用の阻害は、薬剤の不在下、および／または適当な対照薬剤の存在下でのＩＬ－１１媒介シグナル伝達の範囲／程度の低減、低下または減弱を指す。
本開示の態様は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害を含む。
本明細書では、「阻害」は対照条件と比較した低減、低下または減弱を指す。例えば、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤によるＩＬ－１１の作用の阻害は、薬剤の不在下、および／または適当な対照薬剤の存在下でのＩＬ－１１媒介シグナル伝達の範囲／程度の低減、低下または減弱を指す。
【0041】
阻害は、本明細書では中和または拮抗と呼ぶこともできる。すなわち、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達（例えばＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体によって媒介される相互作用、シグナル伝達または他の活性）を阻害することが可能な薬剤は、関連する機能または過程に関して「中和」または「拮抗」剤であると言うことができる。例えば、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を中和することができる薬剤と呼んでもよく、またはＩＬ－１１媒介性シグナル伝達のアンタゴニストと呼んでもよい。
【0042】
ＩＬ－１１シグナル伝達経路は、ＩＬ－１１シグナル伝達の阻害のための複数の経路を提供する。ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、例えば、ＩＬ－１１の受容体を通したシグナル伝達に関与するかまたは必要な１つまたは複数の因子の作用を阻害することを通してそうすることができる。
【0043】
例えば、ＩＬ－１１シグナル伝達の阻害を、ＩＬ－１１（またはＩＬ－１１含有複合体、例えば、ＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒαとの複合体）と、ＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ＩＬ－１１Ｒαを含む受容体複合体、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαとｇｐ１３０とを含む受容体複合体）との相互作用を破壊することによって達成することができる。一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、例えば、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０のうちの１つまたは複数の遺伝子またはタンパク質発現を阻害することによって達成される。
【0044】
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１受容体を発現する細胞による下流のシグナル伝達の活性化のために必要とされる多量体（例えば、六量体複合体）を形成するための、ＩＬ－１１：１１受容体複合体（すなわち、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα、またはＩＬ－１１およびｇｐ１３０、またはＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を含む複合体）の間の相互作用を破壊することによって達成することもできる。
【0045】
実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１媒介性ｔｒａｎｓシグナル伝達を破壊するのではなく、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓシグナル伝達を破壊することによって達成され、例えば、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、膜結合型ＩＬ－１１Ｒαを含むｇｐ１３０媒介性ｃｉｓ複合体を阻害することによって達成される。実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓシグナル伝達を破壊するのではなく、ＩＬ－１１媒介性ｔｒａｎｓシグナル伝達を破壊することによって達成され、すなわち、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、可溶型ＩＬ－１１Ｒαに結合したＩＬ－１１または可溶型ＩＬ－６Ｒに結合したＩＬ－６などのｇｐ１３０媒介性ｔｒａｎｓシグナル伝達複合体を阻害することによって達成される。実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓシグナル伝達およびＩＬ－１１媒介性ｔｒａｎｓシグナル伝達を破壊することによって達成される。本明細書に記載される任意の薬剤を使用して、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓおよび／またはｔｒａｎｓシグナル伝達を阻害することができる。
【0046】
他の例では、ＩＬ－１１シグナル伝達の阻害は、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１Ｒα／ｇｐ１３０の下流のシグナル伝達経路を破壊することによって達成することができる。すなわち、一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害／拮抗は、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１受容体複合体を通したシグナル伝達の下流のシグナル伝達経路／過程／因子の阻害を含む。
【0047】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害／拮抗は、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１受容体複合体によって活性化される細胞内シグナル伝達経路を通したシグナル伝達の阻害を含む。一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害／拮抗は、その発現／活性がＩＬ－１１／ＩＬ－１１受容体複合体を通したシグナル伝達の結果として上方制御される１つまたは複数の因子の阻害を含む。
【0048】
一部の実施形態では、本開示の方法は、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達を阻害することが可能な薬剤を用いる。一部の実施形態では、ＪＡＫ／ＳＴＡＴシグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＪＡＫ１、ＪＡＫ２、ＪＡＫ３、ＴＹＫ２、ＳＴＡＴ１、ＳＴＡＴ２、ＳＴＡＴ３、ＳＴＡＴ４、ＳＴＡＴ５Ａ、ＳＴＡＴ５Ｂおよび／またはＳＴＡＴ６の作用を阻害することができる。例えば、薬剤は、ＪＡＫ／ＳＴＡＴタンパク質の活性化を阻害する、ＪＡＫもしくはＳＴＡＴタンパク質と、細胞表面受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０との相互作用を阻害する、ＪＡＫタンパク質とＳＴＡＴタンパク質との相互作用を阻害する、ＳＴＡＴタンパク質のリン酸化を阻害する、ＳＴＡＴタンパク質の二量体化を阻害する、ＳＴＡＴタンパク質の細胞核への移行を阻害する、ＳＴＡＴタンパク質のＤＮＡへの結合を阻害する、ならびに／またはＪＡＫおよび／もしくはＳＴＡＴタンパク質の分解を促進することができてもよい。一部の実施形態では、ＪＡＫ／ＳＴＡＴ阻害剤は、ルキソリチニブ（Ｊａｋａｆｉ／Ｊａｋａｖｉ；Ｉｎｃｙｔｅ）、トファシチニブ（Ｘｅｌｊａｎｚ／Ｊａｋｖｉｎｕｓ；ＮＩＨ／Ｐｆｉｚｅｒ）、オクラシチニブ（Ａｐｏｑｕｅｌ）、バリシチニブ（Ｏｌｕｍｉａｎｔ；Ｉｎｃｙｔｅ／Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、フィルゴチニブ（Ｇ－１４６０３４／ＧＬＰＧ－０６３４；Ｇａｌａｐａｇｏｓ ＮＶ）、ガンドチニブ（ＬＹ－２７８４５４４；Ｅｌｉ Ｌｉｌｌｙ）、レスタウルチニブ（ＣＥＰ－７０１；Ｔｅｖａ）、モメロチニブ（ＧＳ－０３８７／ＣＹＴ－３８７；Ｇｉｌｅａｄ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ）、パクリチニブ（ＳＢ１５１８；ＣＴＩ）、ＰＦ－０４９６５８４２（Ｐｆｉｚｅｒ）、ウパダシチニブ（ＡＢＴ－４９４；ＡｂｂＶｉｅ）、ペフィシチニブ（ＡＳＰ０１５Ｋ／ＪＮＪ－５４７８１５３２；Ａｓｔｅｌｌａｓ）、フェドラチニブ（ＳＡＲ３０２５０３；Ｃｅｌｇｅｎｅ）、ククルビタシンＩ（ＪＳＩ－１２４）およびＣＨＺ８６８から選択される。
【0049】
一部の実施形態では、本開示の方法は、ＭＡＰＫ／ＥＲＫシグナル伝達を阻害することが可能な薬剤を用いる。一部の実施形態では、ＭＡＰＫ／ＥＲＫシグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＧＲＢ２の作用を阻害する、ＲＡＦキナーゼの作用を阻害する、ＭＥＫタンパク質の作用を阻害する、ＭＡＰ３Ｋ／ＭＡＰ２Ｋ／ＭＡＰＫおよび／もしくはＭｙｃの活性化を阻害する、ならびに／またはＳＴＡＴタンパク質のリン酸化を阻害することができる。一部の実施形態では、ＥＲＫシグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、ＥＲＫ ｐ４２／４４を阻害することが可能である。一部の実施形態では、ＥＲＫ阻害剤は、ＳＣＨ７７２９８４、ＳＣ１、ＶＸ－１１ｅ、ＤＥＬ－２２３７９、ソラフェニブ（Ｎｅｘａｖａｒ；Ｂａｙｅｒ／Ｏｎｙｘ）、ＳＢ５９０８８５、ＰＬＸ４７２０、ＸＬ２８１、ＲＡＦ２６５（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、エンコラフェニブ（ＬＧＸ８１８／Ｂｒａｆｔｏｖｉ；Ａｒｒａｙ ＢｉｏＰｈａｒｍａ）、ダブラフェニブ（Ｔａｆｉｎｌａｒ；ＧＳＫ）、ベムラフェニブ（Ｚｅｌｂｏｒａｆ；Ｒｏｃｈｅ）、コビメチニブ（Ｃｏｔｅｌｌｉｃ；Ｒｏｃｈｅ）、ＣＩ－１０４０、ＰＤ０３２５９０１、ビニメチニブ（ＭＥＫ１６２／ＭＥＫＴＯＶＩ；Ａｒｒａｙ ＢｉｏＰｈａｒｍａ）、セルメチニブ（ＡＺＤ６２４４；Ａｒｒａｙ／ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、およびトラメチニブ（ＧＳＫ１１２０２１２／Ｍｅｋｉｎｉｓｔ；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）から選択される。一部の実施形態では、本開示の方法は、ｃ－Ｊｕｎ Ｎ末端キナーゼ（ＪＮＫ）シグナル伝達／活性を阻害することが可能な薬剤を用いる。一部の実施形態では、ＪＮＫシグナル伝達／活性を阻害することが可能な薬剤は、ＪＮＫ（例えばＪＮＫ１、ＪＮＫ２）の作用および／またはリン酸化を阻害することが可能である。一部の実施形態では、ＪＮＫ阻害剤は、ＳＰ６００１２５、ＣＥＰ１３４７、ＴＣＳ ＪＮＫ ６ｏ、ｃ－Ｊｕｎペプチド、ＳＵ３３２７、ＡＥＧ ３４８２、ＴＣＳ ＪＮＫ ５ａ、ＢＩ７８Ｄ３、ＩＱ３、ＳＲ３５７６、ＩＱ１Ｓ、ＪＩＰ－１（１５３－１６３）およびＣＣ４０１二塩化水素化物から選択される。
【0050】
本実施例では、発明者はＮＯＸ４の発現および活性が、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１Ｒα／ｇｐ１３０を通したシグナル伝達によって上方制御されることを実証する。ＮＯＸ４はＮＡＤＰＨオキシダーゼであり、反応性酸素種（ＲＯＳ）の供給源である。Ｎｏｘ４の発現は肝細胞特異的なＩｌ１１発現を有するトランスジェニックマウスで上方制御され、ＩＬ１１で刺激した一次ヒト肝細胞はＮＯＸ４発現を上方制御する。
【0051】
一部の実施形態では、本開示は、ＮＯＸ４の発現（遺伝子またはタンパク質発現）または機能を阻害することが可能な薬剤を用いる。一部の実施形態では、本開示は、ＮＯＸ４発現／機能のＩＬ－１１媒介上方制御を阻害することが可能な薬剤を用いる。ＮＯＸ４の発現または機能を阻害することが可能な薬剤は、本明細書ではＮＯＸ４阻害剤と呼ぶことができる。例えば、ＮＯＸ４阻害剤は、ＮＯＸ４の発現（例えば遺伝子および／またはタンパク質発現）を低減すること、ＮＯＸ４をコードするＲＮＡのレベルを低減すること、ＮＯＸ４タンパク質のレベルを低減すること、および／またはＮＯＸ４活性のレベルを低減すること（例えば、ＮＯＸ４媒介ＮＡＤＰＨオキシダーゼ活性および／またはＮＯＸ４媒介ＲＯＳ生産を低減すること）が可能である。
【0052】
ＮＯＸ４阻害剤には、ＮＯＸ４結合分子およびＮＯＸ４発現を低減することが可能な分子が含まれる。ＮＯＸ４結合阻害剤には、ペプチド／核酸アプタマー、抗体（および抗体断片）、およびＮＯＸ４機能のアンタゴニストとしてふるまうＮＯＸ４の相互作用パートナーの断片、およびＮＯＸ４の小分子阻害剤が含まれる。ＮＯＸ４発現を低減することが可能な分子には、ＮＯＸ４へのアンチセンスＲＮＡ（例えば、ｓｉＲＮＡ、ｓｈＲＮＡ）が含まれる。一部の実施形態では、ＮＯＸ４阻害剤は、Ａｌｔｅｎｈｏｆｅｒら、Ａｎｔｉｏｘｉｄ Ｒｅｄｏｘ Ｓｉｇｎａｌ。（２０１５）２３（５）：４０６～４２７頁またはＡｕｇｓｂｕｒｄｅｒら、Ｒｅｄｏｘ Ｂｉｏｌ。（２０１９）２６：１０１２７２頁、に記載されるＮＯＸ４阻害剤、例えばＧＫＴ１３７８３１から選択される。
【0053】
結合剤
一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＩＬ－１１に結合してもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合してもよい。そのような薬剤の結合は、ＩＬ－１１がＩＬ－１１の受容体に結合する能力を低減させる／防止することによって、下流のシグナル伝達を阻害することにより、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる。そのような薬剤の結合は、ＩＬ－１１がＩＬ－１１の受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０に結合する能力を低減させる／防止することによって、下流のシグナル伝達を阻害することにより、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓおよび／またはｔｒａｎｓシグナル伝達を阻害することができる。薬剤は、ＩＬ－１１および可溶型ＩＬ－１１Ｒαなどのｔｒａｎｓシグナル伝達複合体に結合し、ｇｐ１３０媒介性シグナル伝達を阻害することができる。
一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＩＬ－１１に結合してもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる薬剤は、ＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合してもよい。そのような薬剤の結合は、ＩＬ－１１がＩＬ－１１の受容体に結合する能力を低減させる／防止することによって、下流のシグナル伝達を阻害することにより、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができる。そのような薬剤の結合は、ＩＬ－１１がＩＬ－１１の受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０に結合する能力を低減させる／防止することによって、下流のシグナル伝達を阻害することにより、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓおよび／またはｔｒａｎｓシグナル伝達を阻害することができる。薬剤は、ＩＬ－１１および可溶型ＩＬ－１１Ｒαなどのｔｒａｎｓシグナル伝達複合体に結合し、ｇｐ１３０媒介性シグナル伝達を阻害することができる。
【0054】
ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる薬剤は、任意の種類のものであってもよいが、一部の実施形態では、薬剤は、抗体、その抗原結合性断片、ポリペプチド、ペプチド、核酸、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは低分子であってもよい。薬剤を、単離もしくは精製された形態で提供するか、または医薬組成物もしくは医薬として製剤化することができる。
【0055】
抗体および抗原結合性断片
一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、抗体またはその抗原結合性断片である。一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、ポリペプチド、例えばデコイ受容体分子である。一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、アプタマーであってよい。
一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、抗体またはその抗原結合性断片である。一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、ポリペプチド、例えばデコイ受容体分子である。一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、アプタマーであってよい。
【0056】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、抗体またはその抗原結合性断片である。「抗体」は、本明細書で最も広い意味で使用され、それらが関連する標的分子への結合を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、単一特異性および多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、ならびに抗体断片を包含する。
【0057】
モノクローナル抗体技術と関連する今日の技術を考慮すると、多くの抗原に対する抗体を調製することができる。抗原結合部分は、抗体の一部（例えば、Ｆａｂ断片）または合成抗体断片（例えば、一本鎖Ｆｖ断片［ＳｃＦｖ］）であってもよい。選択された抗原に対するモノクローナル抗体を、公知の技術、例えば、「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ ｍａｎｕａｌ ｏｆ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ」、Ｈ Ｚｏｌａ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、１９８８）および「Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ ａｎｄ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ」、Ｊ Ｇ Ｒ Ｈｕｒｒｅｌｌ（ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、１９８２）に開示されたものによって調製することができる。キメラ抗体は、Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒら（１９８８、８ｔｈ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｙｍｐｏｓｉｕｍ Ｐａｒｔ ２、７９２～７９９頁）によって考察されている。モノクローナル抗体（ｍＡｂ）は本開示の方法で特に有益であり、抗原上の単一のエピトープを特異的に標的にする抗体の均一集団である。
【0058】
ポリクローナル抗体も、本開示の方法において有用である。単一特異性ポリクローナル抗体が好ましい。好適なポリクローナル抗体を、当業界で周知の方法を使用して調製することができる。
【0059】
抗体および抗体断片を遺伝子操作することができるため、ＦａｂおよびＦａｂ２断片などの抗体の抗原結合性断片を使用／提供することもできる。抗体の可変重鎖（ＶＨ）および可変軽鎖（ＶＬ）ドメインは、抗原認識に関与し、初期プロテアーゼ消化実験によって初めて認識された事実である。さらなる確認は、齧歯類抗体の「ヒト化」によって見出される。得られる抗体が齧歯類親抗体の抗原特異性を保持するように、齧歯類起源の可変ドメインを、ヒト起源の定常ドメインに融合することができる（Ｍｏｒｒｉｓｏｎら（１９８４）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｄ．ＵＳＡ ８１、６８５１～６８５５頁）。
【0060】
本開示による抗体および抗原結合性断片は、関連する標的分子（すなわち、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体／ＩＬ－１１の受容体）に結合することができる抗体の相補性決定領域（ＣＤＲ）を含む。
【0061】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１結合性抗体、またはそのＩＬ－１１結合性断片である。ＩＬ－１１に結合する抗体には、例えば、例えばＢｏｃｋｈｏｒｎら、Ｎａｔ．Ｃｏｍｍｕｎ．（２０１３）４（０）：１３９３、で使用されるモノクローナルマウス抗ヒトＩＬ－１１抗体クローン＃２２６２６；カタログ番号ＭＡＢ２１８（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ、ＭＮ、ＵＳＡ）、クローン６Ｄ９Ａ（Ａｂｂｉｏｔｅｃ）、クローンＫＴ８（Ａｂｂｉｏｔｅｃ）、クローンＭ３１０３Ｆ１１（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ）、クローン１Ｆ１（Ａｂｎｏｖａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、クローン３Ｃ６（Ａｂｎｏｖａ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ）、クローンＧＦ１（ＬｉｆｅＳｐａｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）、クローン１３４５５（Ｓｏｕｒｃｅ ＢｉｏＳｃｉｅｎｃｅ）、１１ｈ３／１９．６．１（Ｈｅｒｍａｎｎら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．（１９９８）４１（８）：１３８８～９７頁）、ＡＢ－２１８－ＮＡ（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、Ｘ２０３（Ｎｇら、Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１（５１１）ｐｉｉ：ｅａａｗ１２３７）および米国特許出願公開第２００９／０２０２５３３号、ＷＯ９９／５９６０８Ａ２、ＷＯ２０１８／１０９１７４Ａ２およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１で開示される抗ＩＬ－１１抗体が含まれる。
【0062】
特に、抗ＩＬ－１１抗体クローン２２６２６（ＭＡＢ２１８としても知られる）は、例えばＳｃｈａｅｆｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ（２０１７）５５２（７６８３）：１１０～１１５頁において、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストであることが示された。モノクローナル抗体１１ｈ３／１９．６．１は、Ｈｅｒｍａｎｎら、Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ．（１９９８）４１（８）：１３８８～９７頁で中和抗ＩＬ－１１ ＩｇＧ１であると開示されている。例えばＭｃＣｏｙら、ＢＭＣ Ｃａｎｃｅｒ（２０１３）１３：１６で使用されるＲ＆Ｄ ＳｙｓｔｅｍｓからのＡＢ－２１８－ＮＡは、中和抗ＩＬ－１１抗体の別の例である。ＷＯ２０１８／１０９１７４Ａ２およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のさらなる例示的抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニストを開示する。Ｎｇら、「ＩＬ－１１ ｉｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｆｉｂｒｏｓｉｓ。」ｂｉｏＲｘｉｖ ３３６５３７；ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／３３６５３７およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１で開示されるＸ２０３（Ｅｎｘ２０３とも呼ばれる）は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニストであり、ＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９２（本開示の配列番号２２）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９４（本開示の配列番号２３）によるＶＬ領域を含む。Ｘ２０３のヒト化バージョンがＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１に記載され、例えば、ＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号１１７（本開示の配列番号３０）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号１２２（本開示の配列番号３１）によるＶＬ領域を含むｈＥｎｘ２０３が含まれる。Ｅｎｘ１０８Ａは、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニストのさらなる例であり、ＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号８（本開示の配列番号２６）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号２０（本開示の配列番号２７）によるＶＬ領域を含む。
【0063】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１Ｒα結合性抗体、またはそのＩＬ－１１Ｒα結合性断片である。ＩＬ－１１Ｒαに結合する抗体には、例えばモノクローナル抗体クローン０２５（Ｓｉｎｏ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ）、クローンＥＰＲ５４４６（Ａｂｃａｍ）、クローン４７３１４３（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）、クローン８Ｅ２、８Ｄ１０および８Ｅ４、および米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号に記載される８Ｅ２の親和性成熟バリアント、Ｂｌａｎｃら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ。２０００年７月３１日；２４１（１－２）；４３～５９頁）に記載されるモノクローナル抗体、Ｘ２０９（Ｗｉｄｊａｊａら、「ＩＬ－１１ ｎｅｕｔｒａｌｉｓｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｔａｒｇｅｔ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ＮＡＳＨ。」ｂｉｏＲｘｉｖ ４７００６２；ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／４７００６２、としても公開されている、Ｗｉｄｊａｊａら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１９）１５７（３）：７７７～７９２頁）、ＷＯ２０１４１２１３２５Ａ１および米国特許出願公開第２０１３／０３０２２７７号で開示される抗体、ならびに米国特許出願公開第２００９／０２０２５３３号、ＷＯ９９／５９６０８Ａ２、ＷＯ２０１８／１０９１７０Ａ２およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１で開示される抗ＩＬ－１１Ｒα抗体が含まれる。
【0064】
特に、抗ＩＬ－１１Ｒα抗体クローン４７３１４３（ＭＡＢ１９７７としても知られる）は、例えばＳｃｈａｅｆｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ（２０１７）５５２（７６８３）：１１０～１１５頁において、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストであることが示された。米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号は、抗ヒトＩＬ－１１Ｒα抗体クローン８Ｅ２、８Ｄ１０および８Ｅ４の配列を提供し、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達に拮抗するそれらの能力を開示する－例えば米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号の［０４８９］～［０４９０］を参照する。米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号は、クローン８Ｅ２の追加の６２個の親和性成熟バリアントの配列情報をさらに提供し、そのうちの６１個はＩＬ－１１媒介シグナル伝達に拮抗すると開示されている－米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号の表３を参照する。ＷＯ２０１８／１０９１７０Ａ２およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のさらなる例示的抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニストを開示する。Ｗｉｄｊａｊａら、「ＩＬ－１１ ｎｅｕｔｒａｌｉｓｉｎｇ ｔｈｅｒａｐｉｅｓ ｔａｒｇｅｔ ｈｅｐａｔｉｃ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌ－ｉｎｄｕｃｅｄ ｌｉｖｅｒ ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ ａｎｄ ｆｉｂｒｏｓｉｓ ｉｎ ＮＡＳＨ。」ｂｉｏＲｘｉｖ ４７００６２；ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／４７００６２およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１で開示されるＸ２０９（Ｅｎｘ２０９とも呼ばれる）は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニストであり、ＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号７（本開示の配列番号２４）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号１４（本開示の配列番号２５）によるＶＬ領域を含む。Ｘ２０９のヒト化バージョンがＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１に記載され、例えば、ＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号１１（本開示の配列番号３２）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号１７（本開示の配列番号３３）によるＶＬ領域を含むｈＥｎｘ２０９が含まれる。
【0065】
当業者は、所定の種／対象での治療使用のために好適な抗体生産技術によく通じている。例えば、ヒトでの治療使用のために好適な抗体生産手順は、ＰａｒｋおよびＳｍｏｌｅｎ、Ａｄｖａｎｃｅｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ（２００１）５６：３６９～４２１頁（ここに参照により完全に組み込まれる）に記載される。
【0066】
所定の標的タンパク質（例えば、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα）に対する抗体はモデル種（例えば、齧歯動物、ウサギ）で作製し、その後所定の種／対象での治療使用のためのそれらの適性を向上させるために工学操作することができる。例えば、ヒト生殖細胞系免疫グロブリン配列により類似している抗体配列に到達するために（それによって抗体で処置したヒト対象で抗外因性抗体免疫応答の可能性を低減する）、モデル種の免疫化によって作製したモノクローナル抗体の１つまたは複数のアミノ酸を置換することができる。抗体可変ドメインでの改変は、抗体パラトープを保存するためにフレームワーク領域に焦点を合わせることができる。抗体ヒト化は抗体技術の分野におけるルーチン慣行の問題であり、例えばＡｌｍａｇｒｏおよびＦｒａｎｓｓｏｎ、Ｆｒｏｎｔｉｅｒｓ ｉｎ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ（２００８）１３：１６１９～１６３３頁、Ｓａｆｄａｒｉら、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｖｉｅｗｓ（２０１３）２９（２）：１７５～１８６頁およびＬｏら、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｓｐｅｃｔｒｕｍ（２０１４）２（１）でレビューされており、その全てはここに参照により完全に組み込まれる。そのような動物で作製した抗体が完全にヒトであるようにヒト免疫グロブリン遺伝子を発現するトランスジェニックモデル種で所定の標的タンパク質（例えばＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα）に対する抗体を作製することによって、ヒト化のための要件を回避することができる（例えば、ここに参照により完全に組み込まれる、Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎら、Ａｒｃｈ Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｔｈｅｒ Ｅｘｐ（Ｗａｒｓｚ）（２０１５）６３（２）：１０１～１０８頁に記載される）。
【0067】
所定の標的タンパク質（例えばＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα）に対する抗体の同定のためにファージディスプレイ技術を用いることもでき、それらは当業者に周知である。例えば、ヒト標的タンパク質に対する完全ヒト抗体の同定のためのファージディスプレイの使用は、例えば、Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．（２００５）２３、１１０５～１１１６頁およびＣｈａｎら、Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（２０１４）２６（１２）：６４９～６５７頁でレビューされ、それらはここに参照により完全に組み込まれる。
【0068】
抗体／断片は、ＩＬ－１１の生物活性を阻害する、または低減させるアンタゴニスト抗体／断片であってもよい。抗体／断片は、ＩＬ－１１の生物学的効果、例えば、ＩＬ－１１受容体による産生シグナル伝達を刺激するその能力を中和する、中和抗体であってもよい。中和活性を、Ｔ１１マウス形質細胞腫細胞系（Ｎｏｒｄａｎ，Ｒ．Ｐ．ら（１９８７）Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３９：８１３頁）においてＩＬ－１１誘導性増殖を中和する能力によって測定することができる。
【0069】
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα結合性抗体は、例えば、米国特許出願公開第２０１４／０２１９９１９号またはＢｌａｎｃら（Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０００年７月３１日；２４１（１～２）；４３～５９頁に記載されるアッセイを使用してＩＬ－１１媒介シグナル伝達に拮抗する能力のために評価することができる。簡潔には、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα結合性抗体は、適当な種からのＩＬ－１１による刺激に応答して、適当な種からのＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現するＢａ／Ｆ３細胞の増殖を阻害する能力のためにｉｎ ｖｉｔｒｏで評価することができる。あるいは、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα結合性抗体は、αＳＭＡ発現の評価によって、ＴＧＦβ１による線維芽細胞の刺激の後に線維芽細胞から筋線維芽細胞への移行を阻害する能力のためにｉｎ ｖｉｔｒｏで分析することができる（例えば、ＷＯ２０１８／１０９１７４Ａ２（実施例６）およびＷＯ２０１８／１０９１７０Ａ２（実施例６）、Ｎｇら、Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１（５１１）ｐｉｉ：ｅａａｗ１２３７およびＷｉｄｊａｊａら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１９）１５７（３）：７７７～７９２に記載されるように）。
【0070】
抗体は一般に、６つのＣＤＲを含む；軽鎖可変領域（ＶＬ）中の３つ：ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２、ＬＣ－ＣＤＲ３、および重鎖可変領域（ＶＨ）中の３つ：ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２およびＨＣ－ＣＤＲ３を含む。６つのＣＤＲは一緒になって、標的分子に結合する抗体の部分である、抗体のパラトープを規定する。ＶＨ領域およびＶＬ領域は各ＣＤＲのいずれかの側のフレームワーク領域（ＦＲ）を含み、それはＣＤＲのために足場を提供する。Ｎ末端からＣ末端にかけて、ＶＨ領域は以下の構造を含む：Ｎ項－［ＨＣ－ＦＲ１］－［ＨＣ－ＣＤＲ１］－［ＨＣ－ＦＲ２］－［ＨＣ－ＣＤＲ２］－［ＨＣ－ＦＲ３］－［ＨＣ－ＣＤＲ３］－［ＨＣ－ＦＲ４］－Ｃ項；ＶＬ領域は、以下の構造を含む：Ｎ項－［ＬＣ－ＦＲ１］－［ＬＣ－ＣＤＲ１］－［ＬＣ－ＦＲ２］－［ＬＣ－ＣＤＲ２］－［ＬＣ－ＦＲ３］－［ＬＣ－ＣＤＲ３］－［ＬＣ－ＦＲ４］－Ｃ項。
【0071】
Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、第５版、Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ、Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ、Ｂｅｔｈｅｓｄａ、ＭＤ（１９９１）、Ｃｈｏｔｈｉａら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１～９１７頁（１９８７）に記載されたもの、およびＲｅｔｔｅｒら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．（２００５）３３（ｓｕｐｐｌ １）：Ｄ６７１～Ｄ６７４頁に記載されたようなＶＢＡＳＥ２などの、抗体ＣＤＲおよびＦＲを定義するためのいくつかの異なる慣例がある。本明細書に記載される抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域のＣＤＲおよびＦＲは、カバットシステムによって規定される。
【0072】
一部の実施形態では、本開示による抗体またはその抗原結合性断片は、ＩＬ－１１に特異的に結合する抗体に由来する（例えば、Ｅｎｘ１０８Ａ、Ｅｎｘ２０３またはｈＥｎｘ２０３）。一部の実施形態では、本開示による抗体またはその抗原結合性断片は、ＩＬ－１１Ｒαに特異的に結合する抗体に由来する（例えば、Ｅｎｘ２０９またはｈＥｎｘ２０９）。
【0073】
本開示による抗体および抗原結合性断片は、好ましくはＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害する。そのような抗体／抗原結合性断片は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストであると記載することができ、および／またはＩＬ－１１媒介シグナル伝達を中和する能力を有すると記載することができる。
【0074】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片はＩＬ－１１に結合する抗体のＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、本明細書に記載されるＩＬ－１１結合性抗体（例えば、Ｅｎｘ１０８Ａ、Ｅｎｘ２０３またはｈＥｎｘ２０３）のＣＤＲまたはこのＣＤＲに由来するＣＤＲを含む。
【0075】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＨ領域を含む：
（１）
配列番号３４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号３５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号３６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３、
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（１）
配列番号３４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号３５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号３６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３、
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0076】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む：
（２）
配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号３８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号３９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（２）
配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号３８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号３９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0077】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＨ領域を含む：
（３）
配列番号４０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（３）
配列番号４０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0078】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む：
（４）
配列番号４３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号４４のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（４）
配列番号４３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号４４のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0079】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、（１）によるＣＤＲを組み込むＶＨ領域、および（２）によるＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、（３）によるＣＤＲを組み込むＶＨ領域、および（４）によるＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む。
【0080】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、ＩＬ－１１に結合する抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、本明細書に記載されるＩＬ－１１結合性抗体（例えばＥｎｘ１０８Ａ、Ｅｎｘ２０３またはｈＥｎｘ２０３）のＶＨ領域およびＶＬ領域、またはこのＶＨ領域およびＶＬ領域に由来するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。
【0081】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２６のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号２７のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。
【0082】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号２２のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号２３のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。
【0083】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号３０のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号３１のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。
【0084】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片はＩＬ－１１Ｒαに結合する抗体のＣＤＲを含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、本明細書に記載されるＩＬ－１１Ｒα結合性抗体（例えば、Ｅｎｘ２０９またはｈＥｎｘ２０９）のＣＤＲまたはこのＣＤＲに由来するＣＤＲを含む。
【0085】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＨ領域を含む：
（５）
配列番号４６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（５）
配列番号４６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３
または、ＨＣ－ＣＤＲ１、ＨＣ－ＣＤＲ２もしくはＨＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0086】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、以下のＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む：
（６）
配列番号４９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号５０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
（６）
配列番号４９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号５０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
または、ＬＣ－ＣＤＲ１、ＬＣ－ＣＤＲ２もしくはＬＣ－ＣＤＲ３のうちの１つまたは複数の中の１つもしくは２つもしくは３つのアミノ酸が別のアミノ酸で置換されるそのバリアント。
【0087】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、（５）によるＣＤＲを組み込むＶＨ領域、および（６）によるＣＤＲを組み込むＶＬ領域を含む。
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、ＩＬ－１１Ｒαに結合する抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、本明細書に記載されるＩＬ－１１Ｒα結合性抗体（例えば、Ｅｎｘ２０９またはｈＥｎｘ２０９）のＶＨ領域およびＶＬ領域、またはこのＶＨ領域およびＶＬ領域に由来するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、ＩＬ－１１Ｒαに結合する抗体のＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、本明細書に記載されるＩＬ－１１Ｒα結合性抗体（例えば、Ｅｎｘ２０９またはｈＥｎｘ２０９）のＶＨ領域およびＶＬ領域、またはこのＶＨ領域およびＶＬ領域に由来するＶＨ領域およびＶＬ領域を含む。
【0088】
参照アミノ酸配列（例えば、本明細書に記載されるＣＤＲ配列、ＶＨ領域配列またはＶＬ領域配列）の１つまたは複数のアミノ酸が別のアミノ酸で置換される本開示による実施形態では、置換は、例えば以下の表による保存的置換であってよい。一部の実施形態では、中央欄の同じブロック中のアミノ酸が置換される。一部の実施形態では、右端の欄の同じ行のアミノ酸が置換される：
【0089】
【表1】
【0090】
一部の実施形態では、置換（複数可）は機能的に保存的であってよい。すなわち、一部の実施形態では、置換は、同等の非置換分子と比較して置換を含む抗体／断片の１つまたは複数の機能的特性（例えば標的結合性）に影響を及ぼすことができない（または、実質的に影響を及ぼすことができない）。
【0091】
一部の実施形態では、参照ＶＨ領域またはＶＬ領域配列と比較した置換（複数可）は、ＶＨ領域またはＶＬ領域配列の特定の領域または複数の領域に集中させることができる。例えば、参照ＶＨ領域またはＶＬ領域配列からの変化は、フレームワーク領域（ＦＲ１、ＦＲ２、ＦＲ３および／またはＦＲ４）の１つまたは複数に集中させることができる。
【0092】
本開示による抗体および抗原結合性断片を、関連する標的分子に結合することができるモノクローナル抗体（ｍＡｂ）の配列を使用して設計および調製することができる。一本鎖可変断片（ｓｃＦｖ）、ＦａｂおよびＦａｂ２断片などの抗体の抗原結合領域を使用／提供することもできる。「抗原結合性領域」または「抗原結合性断片」は、所定の抗体が特異的である標的に結合することが可能である抗体の任意の断片である。
【0093】
一部の実施形態では、抗体／断片は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる抗体のＶＬおよびＶＨ領域を含む。抗体の抗原結合領域のＶＬおよびＶＨ領域は、一緒になってＦｖ領域を構成する。一部の実施形態では、抗体／断片は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる抗体のＦｖ領域を含むか、またはそれからなる。Ｆｖ領域を、一本鎖として発現させることができるが、ＶＨおよびＶＬ領域は、例えば、可撓性オリゴペプチドによって共有的に連結される。したがって、抗体／断片は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる抗体のＶＬおよびＶＨ領域を含むｓｃＦｖを含んでもよいか、またはそれからなってもよい。
【0094】
抗体の抗原結合領域のＶＬおよび軽鎖定常（ＣＬ）領域、ならびにＶＨ領域および重鎖定常１（ＣＨ１）領域は、一緒になってＦａｂ領域を構成する。一部の実施形態では、抗体／断片は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる抗体のＦａｂ領域を含むか、またはそれからなる。
【0095】
一部の実施形態では、抗体／断片は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる全抗体を含むか、またはそれからなる。「全抗体」とは、免疫グロブリン（Ｉｇ）の構造と実質的に類似する構造を有する抗体を指す。様々な種類の免疫グロブリンおよびその構造が、例えば、ＳｃｈｒｏｅｄｅｒおよびＣａｖａｃｉｎｉ Ｊ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２０１０）１２５（２０２）：Ｓ４１～Ｓ５２頁に記載されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。Ｇ型の免疫グロブリン（すなわち、ＩｇＧ）は、２つの重鎖と２つの軽鎖とを含む約１５０ｋＤａの糖タンパク質である。Ｎ末端からＣ末端に向かって、重鎖は、ＶＨ、次いで、３つの定常ドメイン（ＣＨ１、ＣＨ２、およびＣＨ３）を含む重鎖定常領域を含み、同様に軽鎖は、ＶＬ、次いで、ＣＬを含む。重鎖に応じて、免疫グロブリンを、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＥ、またはＩｇＭと分類することができる。軽鎖は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）であってもよい。
【0096】
一部の実施形態では、本開示の抗体／抗原結合性断片は免疫グロブリン重鎖定常配列を含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列はヒト免疫グロブリン重鎖定常配列であってよい。一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、ＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）、ＩｇＡ（例えば、ＩｇＡ１、ＩｇＡ２）、ＩｇＤ、ＩｇＥまたはＩｇＭ、例えばヒトＩｇＧ（例えば、ｈＩｇＧ１、ｈＩｇＧ２、ｈＩｇＧ３、ｈＩｇＧ４）、ｈＩｇＡ（例えば、ｈＩｇＡ１、ｈＩｇＡ２）、ｈＩｇＤ、ｈＩｇＥまたはｈＩｇＭの重鎖定常配列であるかまたはそれに由来する。一部では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、ヒトＩｇＧ１アロタイプ（例えば、Ｇ１ｍ１、Ｇ１ｍ２、Ｇ１ｍ３またはＧ１ｍ１７）の重鎖定常配列であるかまたはそれに由来する。
【0097】
一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、ヒト免疫グロブリンＧ１定常（ＩＧＨＧ１；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８５７－１、ｖ１）の定常領域配列であるかまたはそれに由来する。一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、置換Ｋ２１４Ｒ、Ｄ３５６ＥおよびＬ３５８Ｍを含む（すなわち、Ｇ１ｍ３アロタイプ）ヒト免疫グロブリンＧ１定常（ＩＧＨＧ１；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８５７－１、ｖ１）の定常領域配列であるかまたはそれに由来する。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号５２のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含む。
【0098】
一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、ヒト免疫グロブリンＧ４定常（ＩＧＨＧ４；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８６１、ｖ１）の定常領域配列であるかまたはそれに由来する。一部の実施形態では、免疫グロブリン重鎖定常配列は、置換Ｓ２４１Ｐおよび／またはＬ２４８Ｅを含むヒト免疫グロブリンＧ４定常（ＩＧＨＧ４；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８６１、ｖ１）の定常領域配列であるかまたはそれに由来する。Ｓ２４１Ｐ突然変異はヒンジ安定性であるが、Ｌ２４８Ｅ突然変異はＩｇＧ４の既に低いＡＤＣＣエフェクター機能をさらに低減する（ＤａｖｉｅｓおよびＳｕｔｔｏｎ、Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｒｅｖ．２０１５年１１月；２６８（１）：１３９～１５９頁；Ａｎｇａｌら、Ｍｏｌ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１９９３年１月；３０（１）：１０５～８頁）。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号５３のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含む。
【0099】
一部の実施形態では、本開示の抗体／抗原結合性断片は免疫グロブリン軽鎖定常配列を含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン軽鎖定常配列はヒト免疫グロブリン軽鎖定常配列であってよい。一部の実施形態では、免疫グロブリン軽鎖定常配列は、カッパ（κ）またはラムダ（λ）軽鎖、例えばヒト免疫グロブリンカッパ定常（ＩＧＫＣ；Ｃκ；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８３４－１、ｖ２）、またはヒト免疫グロブリンラムダ定常（ＩＧＬＣ；Ｃλ）、例えばＩＧＬＣ１（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０ＣＧ０４－１、ｖ１）、ＩＧＬＣ２（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０ＤＯＹ２－１、ｖ１）、ＩＧＬＣ３（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０ＤＯＹ３－１、ｖ１）、ＩＧＬＣ６（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０ＣＦ７４－１、ｖ１）、またはＩＧＬＣ７（ＵｎｉＰｒｏｔ：Ａ０Ｍ８Ｑ６－１、ｖ３）であるかまたはそれに由来する。
【0100】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は免疫グロブリン軽鎖定常配列を含む。一部の実施形態では、免疫グロブリン軽鎖定常配列は、ヒト免疫グロブリンカッパ定常（ＩＧＫＣ；Ｃκ；ＵｎｉＰｒｏｔ：Ｐ０１８３４－１、ｖ２；配列番号９０）であるかまたはそれに由来する。一部の実施形態では、免疫グロブリン軽鎖定常配列は、ヒト免疫グロブリンラムダ定常（ＩＧＬＣ；Ｃλ）、例えばＩＧＬＣ１、ＩＧＬＣ２、ＩＧＬＣ３、ＩＧＬＣ６またはＩＧＬＣ７である。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号５４のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含む。一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は、配列番号５５のアミノ酸配列と少なくとも７０％の配列同一性、より好ましくは少なくとも７５％、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含む。
【0101】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は以下を含む：（ｉ）配列番号２８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド、および（ｉｉ）配列番号２９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド。
【0102】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は以下を含む：（ｉ）配列番号５６のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド、および（ｉｉ）配列番号５７のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド。
【0103】
一部の実施形態では、抗体／抗原結合性断片は以下を含む：（ｉ）配列番号５８のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド、および（ｉｉ）配列番号５９のアミノ酸配列と少なくとも７０％、好ましくは７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％のアミノ酸配列同一性の１つを有するアミノ酸配列を含むかそれからなるポリペプチド。
【0104】
Ｆａｂ、Ｆｖ、ＳｃＦｖおよびｄＡｂ抗体断片を全て、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）中で発現させ、それから分泌させ、かくして、大量の前記断片の容易な産生を可能にすることができる。
【0105】
全抗体、およびＦ（ａｂ’）２断片は、「二価」である。「二価」とは、前記抗体およびＦ（ａｂ’）２断片が２つの抗原結合部位を有することを意味する。対照的に、Ｆａｂ、Ｆｖ、ＳｃＦｖおよびｄＡｂ断片は、ただ１つの抗原結合部位を有する一価である。ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる合成抗体を、当業界で周知のファージディスプレイ技術を使用して作製することもできる。
【0106】
抗体を、非改変親抗体と比較して、抗体の抗原に対する親和性が改善された、改変抗体が生成される親和性成熟のプロセスによって産生することができる。親和性成熟抗体を、当業界で公知の手順、例えば、Ｍａｒｋｓら、Ｒｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９～７８３頁（１９９２）；Ｂａｒｂａｓら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：３８０９～３８１３頁（１９９４）；Ｓｃｈｉｅｒら、Ｇｅｎｅ １６９：１４７～１５５頁（１９９５）；Ｙｅｌｔｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４～２００４頁（１９９５）；Ｊａｃｋｓｏｎら、Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１ ０－１５ ９（１９９５）；およびＨａｗｋｉｎｓら、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９～８９６頁（１９９２）に記載の手順によって産生することができる。
【0107】
抗体／断片には、例えば２種類の抗原に結合するように２つの異なる抗体の２つの異なる断片で構成される二重特異性抗体が含まれる。二重特異性抗体は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能である、本明細書に記載される抗体／断片を含む。抗体は、任意の所望の抗原であってもよい、第２の抗原に対する親和性を有する異なる断片を含有してもよい。二重特異性抗体の調製のための技術は、当業界で周知であり、例えば、Ｍｕｅｌｌｅｒ，Ｄ．ら、（２０１０ Ｂｉｏｄｒｕｇｓ ２４（２）：８９～９８頁）、Ｗｏｚｎｉａｋ－Ｋｎｏｐｐ Ｇ．ら、（２０１０ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ Ｄｅｓ ２３（４）：２８９～２９７頁）、およびＢａｅｕｅｒｌｅ，ＰＡ．ら、（２００９ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ ６９（１２）：４９４１～４９４４頁）を参照されたい。二重特異性抗体および二重特異性抗原結合性断片を、全体が参照により本明細書に組み込まれるＫｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＭＡｂｓ ２０１２、４（２）：１８２～１９７頁に記載された形式などの任意の好適な形式で提供することができる。例えば、二重特異性抗体または二重特異性抗原結合性断片は、二重特異性抗体コンジュゲート（例えば、ＩｇＧ２、Ｆ（ａｂ’）２もしくはＣｏｖＸ－Ｂｏｄｙ）、二重特異性ＩｇＧもしくはＩｇＧ様分子（例えば、ＩｇＧ、ｓｃＦｖ４－Ｉｇ、ＩｇＧ－ｓｃＦｖ、ｓｃＦｖ－ＩｇＧ、ＤＶＤ－Ｉｇ、ＩｇＧ－ｓＶＤ、ｓＶＤ－ＩｇＧ、２ ｉｎ １－ＩｇＧ、ｍＡｂ２、もしくはＴａｎｄｅｍａｂ ｃｏｍｍｏｎ ＬＣ）、非対称性二重特異性ＩｇＧもしくはＩｇＧ様分子（例えば、ｋｉｈ ＩｇＧ、ｋｉｈ ＩｇＧ ｃｏｍｍｏｎ ＬＣ、ＣｒｏｓｓＭａｂ、ｋｉｈ ＩｇＧ－ｓｃＦａｂ、ｍＡｂ－Ｆｖ、チャージペアもしくはＳＥＥＤ－ｂｏｄｙ）、低分子二重特異性抗体（例えば、ダイアボディ（Ｄｂ）、ｄｓＤｂ、ＤＡＲＴ、ｓｃＤｂ、ｔａｎｄＡｂ、タンデムｓｃＦｖ（ｔａＦｖ）、タンデムｄＡｂ／ＶＨＨ、トリプルボディ、トリプルヘッド、Ｆａｂ－ｓｃＦｖ、もしくはＦ（ａｂ’）２－ｓｃＦｖ２）、二重特異性ＦｃおよびＣＨ３融合タンパク質（例えば、ｔａＦｖ－Ｆｃ、ジ－ダイアボディ、ｓｃＤｂ－ＣＨ３、ｓｃＦｖ－Ｆｃ－ｓｃＦｖ、ＨＣＡｂ－ＶＨＨ、ｓｃＦｖ－ｋｉｈ－Ｆｃ、もしくはｓｃＦｖ－ｋｉｈ－ＣＨ３）、または二重特異性融合タンパク質（例えば、ｓｃＦｖ２－アルブミン、ｓｃＤｂ－アルブミン、ｔａＦｖ－トキシン、ＤＮＬ－Ｆａｂ３、ＤＮＬ－Ｆａｂ４－ＩｇＧ、ＤＮＬ－Ｆａｂ４－ＩｇＧ－サイトカイン２）であってもよい。特に、Ｋｏｎｔｅｒｍａｎｎ ＭＡｂｓ ２０１２、４（２）：１８２～１９頁の図２を参照されたい。
【0108】
二重特異性抗体を産生するための方法は、例えば、ＳｅｇａｌおよびＢａｓｔ、２００１．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１４：ＩＶ：２．１３：２．１３．１～２．１３．１６（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されたように、抗体または抗体断片を、例えば、還元性ジスルフィドまたは非還元性チオエーテル結合と化学的に架橋するステップを含む。例えば、Ｎ－スクシンイミジル－３－（－２－ピリジルジチオ）－プロピオン酸（ＳＰＤＰ）を使用して、例えば、ヒンジ領域ＳＨ－基を介してＦａｂ断片を化学的に架橋して、ジスルフィド結合した二重特異性Ｆ（ａｂ）２ヘテロ二量体を創出することができる。
【0109】
二重特異性抗体を産生するための他の方法は、例えば、Ｄ．Ｍ．およびＢａｓｔ，Ｂ．Ｊ．２００１．Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ．Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ．１４：ＩＶ：２．１３：２．１３．１～２．１３．１６に記載されたように、抗体産生ハイブリドーマを、例えば、ポリエチレングリコールと融合して、二重特異性抗体を分泌することができるクアドローマ細胞を産生するステップを含む。
【0110】
二重特異性抗体および二重特異性抗原結合性断片を、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ：Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、第２版（Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ、２０１２）、Ｃｈａｐｔｅｒ ４０：Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ Ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ｄｉａｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔａｎｄｅｍ ｓｃＦｖ（Ｈｏｒｎｉｎｇ ａｎｄ Ｆａｒｂｅｒ－Ｓｃｈｗａｒｚ）、またはＦｒｅｎｃｈ、Ｈｏｗ ｔｏ ｍａｋｅ ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ．Ｍｅｄ．２０００；４０：３３３～３３９頁に記載されたように、例えば、抗原結合分子のためのポリペプチドをコードする核酸構築物からの発現によって、組換え産生することもできる。
【0111】
例えば、２つの抗原結合ドメインのための軽鎖および重鎖可変ドメイン（すなわち、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる抗原結合ドメインのための軽鎖および重鎖可変ドメイン、ならびに別の標的タンパク質に結合することができる抗原結合ドメインのための軽鎖および重鎖可変ドメイン）をコードし、抗原結合ドメイン間に好適なリンカーまたは二量体化ドメインをコードする配列を含むＤＮＡ構築物を、分子クローニング技術によって調製することができる。その後、組換え二重特異性抗体を、好適な宿主細胞（例えば、哺乳動物宿主細胞）中での構築物の発現（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでの）によって産生させた後、発現された組換え二重特異性抗体を、必要に応じて精製することができる。
【0112】
本開示により使用されることが企図される抗体には、対象への投与の後に長期持続性を有する抗体が含まれる。抗体は、たまに、例えば約６カ月に１回、投与することができるような薬物動態特性を有することができる。例えば、本開示による抗体は、例えばここに参照により完全に組み込まれるＦｕｋｕｚａｗａら、ＳｃｉＲｅｐ．（２０１７）７（１）：１０８０頁に記載されるように、連続モノクローナル抗体再利用技術（ＳＭＡＲＴ－Ｉｇ）で工学操作することができる。抗体は、例えば、Ｉｇａｗａら、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（２０１０）２８：１２０３～１２０７頁またはＳａｍｐｅｉら、ＰＬｏＳ Ｏｎｅ（２０１８）１３（１２）：ｅ０２０９５０９（両方ともここに参照により完全に組み込まれる）に記載されているように工学操作された、ＳＭＡＲＴ再利用抗体またはＳＭＡＲＴ一掃抗体であってよい。
【0113】
デコイ受容体
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合することができるペプチドまたはポリペプチドベースの薬剤は、ＩＬ－１１受容体、例えば、ＩＬ－１１受容体のＩＬ－１１結合断片に基づくものであってもよい。
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合することができるペプチドまたはポリペプチドベースの薬剤は、ＩＬ－１１受容体、例えば、ＩＬ－１１受容体のＩＬ－１１結合断片に基づくものであってもよい。
【0114】
一部の実施形態では、結合剤は、ＩＬ－１１Ｒα鎖のＩＬ－１１結合断片を含んでもよく、好ましくは、可溶型であってよい、および／または膜貫通ドメインの１つもしくは複数、または全部を含まなくてもよい。一部の実施形態では、結合剤は、ｇｐ１３０のＩＬ－１１結合断片を含んでもよく、好ましくは、可溶型であってよい、および／または膜貫通ドメインの１つもしくは複数、または全部を含まなくてもよい。そのような分子は、デコイ受容体と記載することができる。そのような薬剤の結合は、ＩＬ－１１がＩＬ－１１の受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０に結合する能力を低減させる／防止することによって、下流のシグナル伝達を阻害することにより、ＩＬ－１１媒介性ｃｉｓおよび／またはｔｒａｎｓシグナル伝達を阻害することができる。
【0115】
Ｃｕｒｔｉｓら（Ｂｌｏｏｄ １９９７ Ｄｅｃ １；９０（１１）：４４０３～１２頁）は、可溶型マウスＩＬ－１１受容体アルファ鎖（ｓＩＬ－１１Ｒ）が、膜貫通型ＩＬ－１１Ｒおよびｇｐ１３０を発現する細胞上で試験した場合、ＩＬ－１１の活性と拮抗することができたと報告している。彼らは、ｓＩＬ－１１Ｒによる観察されたＩＬ－１１拮抗作用が、膜貫通型ＩＬ－１１Ｒを既に発現している細胞上のｇｐ１３０分子数の限定に依存すると提唱した。
【0116】
シグナル伝達の阻害および治療介入のための基礎としての可溶型デコイ受容体の使用は、他のシグナル伝達分子：受容体対、例えば、ＶＥＧＦとＶＥＧＦ受容体についても報告されている（Ｄｅ－Ｃｈａｏ Ｙｕら、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｔｈｅｒａｐｙ（２０１２）；２０ ５、９３８～９４７頁；ＫｏｎｎｅｒおよびＤｕｐｏｎｔ Ｃｌｉｎ Ｃｏｌｏｒｅｃｔａｌ Ｃａｎｃｅｒ ２００４ Ｏｃｔ；４ Ｓｕｐｐｌ ２：Ｓ８１～５頁）。
【0117】
そのため、一部の実施形態では、結合剤は、デコイ受容体、例えば、ＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１含有複合体の可溶型受容体であってもよい。デコイ受容体によって提供されるＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１含有複合体の競合は、ＩＬ－１１アンタゴニスト作用をもたらすと報告されている（Ｃｕｒｔｉｓら、上掲）。デコイＩＬ－１１受容体は、ＷＯ２０１７／１０３１０８Ａ１およびＷＯ２０１８／１０９１６８Ａ１にも記載されており、それらはその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0118】
デコイＩＬ－１１受容体は、好ましくは、ＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１含有複合体に結合し、それによって、これらの種が、ｇｐ１３０、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０：ＩＬ－１１Ｒα受容体に結合できないようにする。そのため、それらは、エタネルセプトがＴＮＦαのデコイ受容体として作用するのとほぼ同じ方法で、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１含有複合体のための「デコイ」受容体として作用する。ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達は、デコイ受容体の非存在下でのシグナル伝達のレベルと比較して低減する。
【0119】
デコイＩＬ－１１受容体は、好ましくは、１つまたは複数のサイトカイン結合モジュール（ＣＢＭ）を介してＩＬ－１１に結合する。ＣＢＭは、天然に存在するＩＬ－１１の受容体分子のＣＢＭであるか、またはそれから誘導されるか、またはそれと相同である。例えば、デコイＩＬ－１１受容体は、ｇｐ１３０および／またはＩＬ－１１ＲαのＣＢＭに由来する、それから誘導される、またはそれと相同である１つまたは複数のＣＢＭを含むか、またはそれからなってもよい。
【0120】
一部の実施形態では、デコイＩＬ－１１受容体は、ｇｐ１３０のサイトカイン結合モジュールに対応するアミノ酸配列を含んでもよい、またはそれからなってもよい。一部の実施形態では、デコイＩＬ－１１受容体は、ＩＬ－１１Ｒαのサイトカイン結合モジュールに対応するアミノ酸配列を含んでもよい。ここで、所与のペプチド／ポリペプチドの参照領域または配列に「対応する」アミノ酸配列は、参照領域／配列のアミノ酸配列に対して少なくとも６０％、例えば、少なくとも６５％、７０％、７５％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、または９９％の配列同一性のうちの１つを有する。
【0121】
一部の実施形態では、デコイ受容体は、例えば、少なくとも１００μＭ以下、必要に応じて、１０μＭ以下、１μＭ以下、１００ｎＭ以下、または約１～１００ｎＭのうちの１つの結合親和性で、ＩＬ－１１に結合することができてもよい。一部の実施形態では、デコイ受容体は、ＩＬ－１１結合ドメインの全部または一部を含んでもよく、必要に応じて、膜貫通ドメインの全部または一部を欠いてもよい。デコイ受容体を、必要に応じて、免疫グロブリン定常領域、例えば、ＩｇＧ Ｆｃ領域に融合することができる。
【0122】
阻害剤
本開示は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な阻害分子の使用を企図する。本開示は、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体に結合してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な阻害分子の使用も企図する。
本開示は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な阻害分子の使用を企図する。本開示は、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体に結合してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な阻害分子の使用も企図する。
【0123】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１の競合的阻害剤である。すなわち、一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１と競合してＩＬ－１１の作用を阻害する薬剤である。ＩＬ－１１の競合的阻害剤には、ＩＬ－１１受容体（すなわち、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体を含む受容体）への結合に関してＩＬ－１１と競合する薬剤が含まれる。
【0124】
ＩＬ－１１の競合的阻害剤は、ＩＬ－１１に基づくペプチドまたはポリペプチドに基づく結合性薬剤、例えばＩＬ－１１の突然変異体、バリアントまたは結合性断片であってよい。そのような薬剤は、ＩＬ－１１またはその断片のアミノ酸配列と高い配列同一性（例えば、７０％、７５％、８０％、８５％またはそれ以上）を有するアミノ酸配列を含むことができる。好適なペプチドまたはポリペプチドに基づく薬剤は、シグナル伝達の開始へ導かないかまたは最適以下のシグナル伝達（すなわち、野生型ＩＬ－１１の結合によって開始されるシグナル伝達のレベルと比較して低減されるシグナル伝達レベル）をもたらす方法で、ＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合することができる。ＩＬ－１１バリアントおよびこの種の断片は、内因性ＩＬ－１１の競合的阻害剤として作用することができる。
【0125】
例えば、Ｗ１４７Ａは、ＩＬ－１１のいわゆる「部位ＩＩＩ」を破壊する、アミノ酸１４７がトリプトファンからアラニンに突然変異されたＩＬ－１１アンタゴニストである。この変異体は、ＩＬ－１１Ｒαに結合することができるが、ｇｐ１３０ホモ二量体の咬合が失敗し、ＩＬ－１１シグナル伝達の効率的な遮断をもたらす（Ｕｎｄｅｒｈｉｌｌ－Ｄａｙら、２００３；Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ ２００３ Ａｕｇ；１４４（８）：３４０６～１４頁）。Ｌｅｅら（Ａｍ Ｊ ｒｅｓｐｉｒｅ Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．２００８ Ｄｅｃ；３９（６）：７３９～７４６頁）も、ＩＬ－１１のＩＬ－１１Ｒαへの結合を特異的に阻害することができるＩＬ－１１アンタゴニスト変異体（「変異タンパク質」）の生成を報告している。ＩＬ－１１変異タンパク質は、ＷＯ２００９／０５２５８８Ａ１にも記載されている。
【0126】
Ｍｅｎｋｈｏｒｓｔら（Ｂｉｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ Ｍａｙ１、２００９、ｖｏｌ．８０、ｎｏ．５、９２０～９２７頁）は、メスのマウスにおけるＩＬ－１１作用を阻害するのに有効である、ＰＥＧ化されたＩＬ－１１アンタゴニスト、ＰＥＧＩＬ１１Ａ（ＣＳＬ Ｌｉｍｉｔｅｄ、Ｐａｒｋｖｉｌｌ、Ｖｉｃｔｏｒｉａ、Ａｕｓｔｒａｌｉａ）を記載している。
【0127】
Ｐａｓｑｕａｌｉｎｉら、Ｃａｎｃｅｒ（２０１５）１２１（１４）：２４１１～２４２１頁は、ＩＬ－１１Ｒαに結合することができる、リガンド指向性のペプチド模倣薬、骨転移標的化ペプチド模倣体－１１（ＢＭＴＰ－１１）を記載している。
【0128】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１の受容体に結合することができる結合剤を、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体のうちの１つの低分子阻害剤の形態で提供することができる。一部の実施形態では、結合剤を、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体の低分子阻害剤、例えば、Ｌａｙら、Ｉｎｔ．Ｊ．Ｏｎｃｏｌ．（２０１２）；４１（２）：７５９～７６４頁（その全体が参照により本明細書に組み込まれる）に記載されたＩＬ－１１阻害剤の形態で提供することができる。
【0129】
アプタマー
一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合することができる薬剤は、アプタマーである。核酸／ペプチドリガンドとも呼ばれるアプタマーは、高い特異性および高い親和性で標的分子に結合する能力を特徴とする核酸またはペプチド分子である。今まで同定されたほぼ全てのアプタマーは、天然には存在しない分子である。
一部の実施形態では、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合することができる薬剤は、アプタマーである。核酸／ペプチドリガンドとも呼ばれるアプタマーは、高い特異性および高い親和性で標的分子に結合する能力を特徴とする核酸またはペプチド分子である。今まで同定されたほぼ全てのアプタマーは、天然には存在しない分子である。
【0130】
所与の標的（例えば、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体）に対するアプタマーを、Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ＥＸｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ（ＳＥＬＥＸ（商標））の方法によって、またはＳＯＭＡｍｅｒｓ（遅い解離速度の修飾アプタマー）（Ｇｏｌｄ Ｌら（２０１０）ＰＬｏＳ ＯＮＥ ５（１２）：ｅ１５００４）を開発することによって同定および／または産生することができる。アプタマーおよびＳＥＬＥＸは、ＴｕｅｒｋおよびＧｏｌｄ、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９９０）２４９（４９６８）：５０５～１０頁、およびＷＯ９１／１９８１３に記載されている。ＳＥＬＥＸおよびＳＯＭＡｍｅｒ技術の適用は、例えば、アプタマーの化学的多様性を拡張するためにアミノ酸側鎖を模倣する官能基を付加することを含む。結果として、標的のための高親和性アプタマーを富化し、同定することができる。
【0131】
アプタマーは、ＤＮＡまたはＲＮＡ分子であってもよく、一本鎖または二本鎖であってもよい。アプタマーは、例えば、糖および／またはリン酸および／または塩基が化学的に修飾された、化学的に修飾された核酸を含んでもよい。そのような修飾は、アプタマーの安定性を改善するか、またはアプタマーを、分解に対してより耐性にしてもよく、リボースの２’位に修飾を含んでもよい。
【0132】
アプタマーを、当業者には周知の方法によって合成することができる。例えば、アプタマーを、例えば、固相支持体上で化学的に合成することができる。固相合成は、ホスホロアミダイト化学を使用してもよい。簡単に述べると、固相支持されたヌクレオチドを脱トリチル化した後、好適に活性化されたヌクレオシドホスホロアミダイトとカップリングさせて、亜リン酸トリエステル結合を形成させる。次いで、キャッピングを行った後、酸化剤、典型的には、ヨウ素を用いた亜リン酸トリエステルの酸化を行うことができる。次いで、サイクルを繰り返して、アプタマーを集合させることができる（例えば、Ｓｉｎｈａ，Ｎ．Ｄ．；Ｂｉｅｒｎａｔ，Ｊ．；ＭｃＭａｎｕｓ，Ｊ．；Ｋｏｓｔｅｒ，Ｈ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９８４、１２、４５３９頁；およびＢｅａｕｃａｇｅ，Ｓ．Ｌ．；Ｌｙｅｒ，Ｒ．Ｐ．（１９９２）．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ ４８（１２）：２２２３頁を参照されたい）。
【0133】
好適な核酸アプタマーは、必要に応じて、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、または４０ヌクレオチドのうちの１つの最小の長さを有してもよい。好適な核酸アプタマーは、必要に応じて、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、または８０ヌクレオチドのうちの１つの最大の長さを有してもよい。好適な核酸アプタマーは、必要に応じて、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９、７０、７１、７２、７３、７４、７５、７６、７７、７８、７９、または８０ヌクレオチドのうちの１つの長さを有してもよい。
【0134】
アプタマーは、特定の標的分子に結合するように選択および操作されたペプチドであってもよい。ペプチドアプタマーならびにその生成および同定のための方法は、Ｒｅｖｅｒｄａｔｔｏら、Ｃｕｒｒ Ｔｏｐ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．（２０１５）１５（１２）：１０８２～１０１頁に概説されており、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。ペプチドアプタマーは、必要に応じて、２、３、４、５、６、７、８、９または１０アミノ酸のうちの１つの最小の長さを有してもよい。ペプチドアプタマーは、必要に応じて、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９または５０アミノ酸のうちの１つの最大の長さを有してもよい。好適なペプチドアプタマーは、必要に応じて、２～３０、２～２５、２～２０、５～３０、５～２５または５～２０アミノ酸のうちの１つの長さを有してもよい。
【0135】
アプタマーは、ｎＭまたはｐＭ範囲、例えば、５００ｎＭ、１００ｎＭ、５０ｎＭ、１０ｎＭ、１ｎＭ、５００ｐＭ、１００ｐＭ未満のうちの１つのＫＤを有してもよい。
ＩＬ－１１結合剤の特性
本開示によるＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、以下の特性の１つまたは複数を示すことができる：
・ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体への特異的結合；
・ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体への１０μＭ以下、好ましくは≦５μＭ、≦１μＭ、≦５００ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭまたは≦１００ｐＭのうちの１つのＫＤによる結合；
・ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒαの間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１およびｇｐ１３０の間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体複合体の間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体およびｇｐ１３０の間の相互作用の阻害；ならびに
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用の阻害（すなわち、そのような複合体の多量体化）。
ＩＬ－１１結合剤の特性
本開示によるＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤は、以下の特性の１つまたは複数を示すことができる：
・ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体への特異的結合；
・ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体への１０μＭ以下、好ましくは≦５μＭ、≦１μＭ、≦５００ｎＭ、≦１００ｎＭ、≦１０ｎＭ、≦１ｎＭまたは≦１００ｐＭのうちの１つのＫＤによる結合；
・ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒαの間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１およびｇｐ１３０の間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体複合体の間の相互作用の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体およびｇｐ１３０の間の相互作用の阻害；ならびに
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用の阻害（すなわち、そのような複合体の多量体化）。
【0136】
これらの特性を、関連薬剤の性能の、好適な対照薬剤との比較を含んでもよい好適なアッセイにおける前記薬剤の分析によって決定することができる。当業者であれば、所与のアッセイに関する適切な対照条件を同定することができる。
【0137】
例えば、試験抗体／抗原結合性断片がＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体／ＩＬ－１１の受容体に結合する能力の分析のための好適な陰性対照は、非標的タンパク質に対する抗体／抗原結合性断片（すなわち、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体／ＩＬ－１１の受容体に特異的ではない抗体／抗原結合性断片）であってもよい。好適な陽性対照は、既知の、検証された（例えば、市販の）ＩＬ－１１またはＩＬ－１１受容体に結合する抗体であってもよい。対照は、分析される推定ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体／ＩＬ－１１受容体結合抗体／抗原結合性断片と同じアイソタイプのものであってよく、例えば、同じ定常領域を有してもよい。
【0138】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に特異的に結合することができてもよい。所与の標的分子に特異的に結合する薬剤は、好ましくは、それが他の非標的分子に結合するよりも高い親和性、および／または長い持続期間で標的に結合する。
【0139】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－６サイトカインファミリー（例えばＩＬ－６、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、オンコスタチンＭ（ＯＳＭ）、カルジオトロフィン－１（ＣＴ－１）、毛様体神経栄養因子（ＣＮＴＦ）およびカルジオトロフィン様サイトカイン（ＣＬＣ））の１つまたは複数の他のメンバーへの結合の親和性より大きな親和性で、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合することができる。一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－６受容体ファミリーの１つまたは複数の他のメンバーに結合する親和性よりも高い親和性でＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０、またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）に結合してもよい。一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－６Ｒα、白血病抑制因子受容体（ＬＩＦＲ）、オンコスタチンＭ受容体（ＯＳＭＲ）、毛様体神経栄養因子受容体アルファ（ＣＮＴＦＲα）およびサイトカイン受容体様因子１（ＣＲＬＦ１）の１つまたは複数への結合の親和性より大きな親和性でＩＬ－１１Ｒαに結合することができる。
【0140】
一部の実施形態では、結合剤の非標的への結合の程度は、例えば、ＥＬＩＳＡ、ＳＰＲ、バイオレイヤー干渉法（ＢＬＩ）、マイクロスケール熱泳動法（ＭＳＴ）、またはラジオイムノアッセイ（ＲＩＡ）によって測定された場合、薬剤の標的への結合の約１０％未満である。あるいは、結合特異性は、結合剤が、別の非標的分子に対するＫＤよりも少なくとも０．１桁高い（すなわち、０．１ｘ１０ｎ（式中、ｎは桁を表す整数である））ＫＤで、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合する場合、結合親和性を単位として反映されてもよい。これは、必要に応じて、少なくとも０．２、０．３、０．４、０．５、０．６、０．７、０．８、０．９、１．０、１．５、または２．０のうちの１つであってもよい。
【0141】
所与の結合剤の、その標的に対する結合親和性は、その解離定数（ＫＤ）を単位として記載されることが多い。結合親和性は、ＥＬＩＳＡ、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ；例えば、Ｈｅａｒｔｙら、Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ（２０１２）９０７：４１１～４４２頁；またはＲｉｃｈら、Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ．２００８ Ｆｅｂ １；３７３（１）：１１２～２０頁を参照されたい）、バイオレイヤー干渉法（例えば、Ｌａｄら（２０１５）Ｊ Ｂｉｏｍｏｌ Ｓｃｒｅｅｎ ２０（４）：４９８～５０７頁；もしくはＣｏｎｃｅｐｃｉｏｎら、Ｃｏｍｂ Ｃｈｅｍ Ｈｉｇｈ Ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ Ｓｃｒｅｅｎ．２００９ Ｓｅｐ；１２（８）：７９１～８００頁を参照されたい）、マイクロスケール熱泳動（ＭＳＴ）分析（例えば、Ｊｅｒａｂｅｋ－Ｗｉｌｌｅｍｓｅｎら、Ａｓｓａｙ Ｄｒｕｇ Ｄｅｖ Ｔｅｃｈｎｏｌ．２０１１ Ａｕｇ；９（４）：３４２～３５３頁を参照されたい）、または放射標識抗原結合アッセイ（ＲＩＡ）などの、当業界で公知の方法によって測定することができる。
【0142】
一部の実施形態では、薬剤は、５０μＭ以下、好ましくは、１０μＭ以下、５μＭ以下、４μＭ以下、３μＭ以下、２μＭ以下、１μＭ、５００ｎＭ以下、１００ｎＭ以下、７５ｎＭ以下、５０ｎＭ以下、４０ｎＭ以下、３０ｎＭ以下、２０ｎＭ以下、１５ｎＭ以下、１２．５ｎＭ以下、１０ｎＭ以下、９ｎＭ以下、８ｎＭ以下、７ｎＭ以下、６ｎＭ以下、５ｎＭ以下、４ｎＭ以下、３ｎＭ以下、２ｎＭ以下、１ｎＭ以下、５００ｐＭ以下、４００ｐＭ以下、３００ｐＭ以下、２００ｐＭ以下、または１００ｐＭ以下のうちの１つのＫＤでＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体、またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる。
【0143】
一部の実施形態では、薬剤は、ＥＣ５０＝１０，０００ｎｇ／ｍｌ以下、好ましくは、５，０００ｎｇ／ｍｌ以下、１０００ｎｇ／ｍｌ以下、９００ｎｇ／ｍｌ以下、８００ｎｇ／ｍｌ以下、７００ｎｇ／ｍｌ以下、６００ｎｇ／ｍｌ以下、５００ｎｇ／ｍｌ以下、４００ｎｇ／ｍｌ以下、３００ｎｇ／ｍｌ以下、２００ｎｇ／ｍｌ以下、１００ｎｇ／ｍｌ以下、９０ｎｇ／ｍｌ以下、８０ｎｇ／ｍｌ以下、７０ｎｇ／ｍｌ以下、６０ｎｇ／ｍｌ以下、５０ｎｇ／ｍｌ以下、４０ｎｇ／ｍｌ以下、３０ｎｇ／ｍｌ以下、２０ｎｇ／ｍｌ以下、１５ｎｇ／ｍｌ以下、１０ｎｇ／ｍｌ以下、７．５ｎｇ／ｍｌ以下、５ｎｇ／ｍｌ以下、２．５ｎｇ／ｍｌ以下、または１ｎｇ／ｍｌ以下のうちの１つの結合の親和性（例えば、ＥＬＩＳＡによって決定された場合）で、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合する。そのようなＥＬＩＳＡを、例えば、Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ、ｖｏｌ．１（第２版）、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ（２０１０）、Ｐａｒｔ Ｖ、６５７～６６５頁に記載のように実施することができる。
【0144】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体の受容体、例えば、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαへの結合にとって重要である領域中でＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体に結合することによって、ＩＬ－１１もしくはＩＬ－１１含有複合体と、ＩＬ－１１の受容体との相互作用、および／または受容体を介するシグナル伝達を阻害する。一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体への結合にとって重要である領域中でＩＬ－１１の受容体に結合することによって、ＩＬ－１１もしくはＩＬ－１１含有複合体と、ＩＬ－１１の受容体との相互作用を阻害する、および／または受容体を介するシグナル伝達を阻害する。
【0145】
所与の結合剤（例えば、ＩＬ－１１／ＩＬ－１１含有複合体またはＩＬ－１１の受容体に結合することができる薬剤）が２つのタンパク質間の相互作用を阻害する能力を、例えば、結合剤の存在下での、または相互作用パートナーの一方もしくは両方の、結合剤とのインキュベーション後の相互作用の分析によって決定することができる。所与の結合剤が２つの相互作用パートナー間の相互作用を阻害することができるかどうかを決定するための好適なアッセイの例は、競合ＥＬＩＳＡである。
【0146】
所定の相互作用（例えば、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒαの間、またはＩＬ－１１およびｇｐ１３０の間、またはＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０の間、またはＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０の間、またはＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間）を阻害することが可能である結合性薬剤は、結合性薬剤の不在下での（または適当な対照結合性薬剤の存在下での）相互作用のレベルと比較した、結合性薬剤の存在下での－またはそれとの相互作用パートナーの片方または両方のインキュベーションの後の－相互作用パートナーの間の相互作用のレベルの低減／低下の観察によって同定される。好適な分析を、例えば、組換え相互作用パートナーを使用して、または相互作用パートナーを発現する細胞を使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏで実施することができる。相互作用パートナーを発現する細胞は、内因的にそうするか、または細胞中に導入された核酸からそうしてもよい。そのようなアッセイのために、相互作用パートナーおよび／または結合剤の一方または両方を、相互作用レベルを検出および／または測定するために検出可能な実体で標識するか、またはそれと共に使用することができる。例えば、薬剤を、放射性原子または着色された分子または蛍光分子または任意の他の方法で容易に検出することができる分子で標識することができる。好適な検出可能分子としては、蛍光タンパク質、ルシフェラーゼ、酵素基質、および放射標識が挙げられる。結合剤を、検出可能な標識で直接標識するか、またはそれを間接的に標識することができる。例えば、結合剤は未標識であってもよく、それ自体、標識されている別の結合剤によって検出することができる。あるいは、第２の結合剤は、それにビオチンを結合されていてもよく、標識されたストレプトアビジンのビオチンへの結合を使用して、第１の結合剤を間接的に標識することができる。
【0147】
結合剤が２つの結合パートナー間の相互作用を阻害する能力を、そのような相互作用の下流の機能的結果、例えば、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の分析によって決定することもできる。例えば、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０の間、またはＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０の間、またはＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用の下流の機能的結果には、例えばＩＬ－１１、または例えばＩＬ－１１の遺伝子／タンパク質発現によって媒介される過程を含めることができる。
【0148】
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体およびＩＬ－１１の受容体の間の相互作用の阻害は、３Ｈチミジン組込みおよび／またはＢａ／Ｆ３細胞増殖アッセイ、例えば、例えばＣｕｒｔｉｓら、Ｂｌｏｏｄ、１９９７、９０（１１）およびＫａｒｐｏｖｉｃｈら、Ｍｏｌ．Ｈｕｍ．Ｒｅｐｒｏｄ．２００３、９（２）：７５～８０頁に記載のものを使用して分析することができる。Ｂａ／Ｆ３細胞は、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を同時発現する。
【0149】
一部の実施形態では、結合性薬剤は、ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒαの間の相互作用を、結合性薬剤の不在下での（または適当な対照結合性薬剤の存在下での）ＩＬ－１１およびＩＬ－１１Ｒαの間の相互作用のレベルの１００％未満、例えば９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つまで阻害することが可能であってよい。一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒαとの相互作用レベルの１倍未満、例えば、０．９９倍以下、０．９５倍以下、０．９倍以下、０．８５倍以下、０．８倍以下、０．７５倍以下、０．７倍以下、０．６５倍以下、０．６倍以下、０．５５倍以下、０．５倍以下、０．４５倍以下、０．４倍以下、０．３５倍以下、０．３倍以下、０．２５倍以下、０．２倍以下、０．１５倍以下、０．１倍以下のうちの１つでＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒαとの相互作用を阻害することができてもよい。
【0150】
一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１とｇｐ１３０との相互作用レベルの１００％未満、例えば、９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つでＩＬ－１１とｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１とｇｐ１３０との相互作用レベルの１倍未満、例えば、０．９９倍以下、０．９５倍以下、０．９倍以下、０．８５倍以下、０．８倍以下、０．７５倍以下、０．７倍以下、０．６５倍以下、０．６倍以下、０．５５倍以下、０．５倍以下、０．４５倍以下、０．４倍以下、０．３５倍以下、０．３倍以下、０．２５倍以下、０．２倍以下、０．１５倍以下、０．１倍以下のうちの１つでＩＬ－１１とｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。
【0151】
一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０との相互作用レベルの１００％未満、例えば、９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つでＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０との相互作用レベルの１倍未満、例えば、０．９９倍以下、０．９５倍以下、０．９倍以下、０．８５倍以下、０．８倍以下、０．７５倍以下、０．７倍以下、０．６５倍以下、０．６倍以下、０．５５倍以下、０．５倍以下、０．４５倍以下、０．４倍以下、０．３５倍以下、０．３倍以下、０．２５倍以下、０．２倍以下、０．１５倍以下、０．１倍以下のうちの１つでＩＬ－１１とＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。
【0152】
一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下（または適切な対照結合剤の存在下）でのＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体とｇｐ１３０との相互作用レベルの１００％未満、例えば、９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つでＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体とｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。一部の実施形態では、結合剤は、結合剤の非存在下でのＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体とｇｐ１３０との相互作用レベルの１倍未満、例えば、０．９９倍以下、０．９５倍以下、０．９倍以下、０．８５倍以下、０．８倍以下、０．７５倍以下、０．７倍以下、０．６５倍以下、０．６倍以下、０．５５倍以下、０．５倍以下、０．４５倍以下、０．４倍以下、０．３５倍以下、０．３倍以下、０．２５倍以下、０．２倍以下、０．１５倍以下、０．１倍以下のうちの１つでＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体とｇｐ１３０との相互作用を阻害することができてもよい。
【0153】
一部の実施形態では、結合性薬剤は、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体（すなわち、そのような複合体の多量体化）の間の相互作用を、結合性薬剤の不在下での（または適当な対照結合性薬剤の存在下での）ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用のレベルの１００％未満、例えば９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つまで阻害することが可能であってよい。一部の実施形態では、結合性薬剤は、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用を、結合性薬剤の不在下でのＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の間の相互作用のレベルの１倍未満、例えば≦０．９９倍、≦０．９５倍、≦０．９倍、≦０．８５倍、≦０．８倍、≦０．７５倍、≦０．７倍、≦０．６５倍、≦０．６倍、≦０．５５倍、≦０．５倍、≦０．４５倍、≦０．４倍、≦０．３５倍、≦０．３倍、≦０．２５倍、≦０．２倍、≦０．１５倍、≦０．１倍のうちの１つまで阻害することが可能である。
【0154】
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１受容体の発現を低減することが可能な薬剤
本開示の態様では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数の発現を阻止または低減することが可能であってよい。
本開示の態様では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数の発現を阻止または低減することが可能であってよい。
【0155】
発現は遺伝子またはタンパク質の発現であってよく、本明細書に記載されるように、または当業者に周知である当技術分野の方法によって決定することができる。発現は、対象の細胞／組織／臓器／臓器系によるものであってもよい。
【0156】
好適な薬剤は、任意の種類のものであってもよいが、一部の実施形態では、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数の発現を防止するか、または低減することができる薬剤は、低分子またはオリゴヌクレオチドであってもよい。
【0157】
ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数の発現を防止する、または低減することができる薬剤は、例えば、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０をコードする遺伝子の転写を阻害すること、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０をコードするＲＮＡの転写後プロセッシングを阻害すること、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０をコードするＲＮＡの安定性を低減すること、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０をコードするＲＮＡの分解を促進すること、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０ポリペプチドの翻訳後プロセッシングを阻害すること、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０ポリペプチドの安定性を低減すること、またはＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０ポリペプチドの分解を促進することによって、そうしてもよい。
【0158】
Ｔａｋｉら、Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９９８）Ａｐｒ；１１２（１）：１３３～１３８頁は、インドメタシン、デキサメタゾンまたはインターフェロン－ガンマ（ＩＦＮγ）を用いた処置時のリウマチ滑膜細胞中でのＩＬ－１１の発現の低減を報告した。
【0159】
本開示は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現を阻止／低減するアンチセンス核酸の使用を企図する。一部の実施形態では、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現を阻止または低減することが可能な薬剤は、ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）によって発現の低減を引き起こすことができる。
【0160】
一部の実施形態では、薬剤は、限定されるものではないが、ｓｈＲＮＡまたはｓｉＲＮＡを含む、アンチセンスまたは低分子干渉ＲＮＡなどの阻害的核酸であってもよい。
一部の実施形態では、阻害性核酸はベクター中で提供される。例えば、一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数のためのｓｈＲＮＡをコードするレンチウイルスベクターであってもよい。
一部の実施形態では、阻害性核酸はベクター中で提供される。例えば、一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のうちの１つまたは複数のためのｓｈＲＮＡをコードするレンチウイルスベクターであってもよい。
【0161】
オリゴヌクレオチド分子、特に、ＲＮＡを用いて、遺伝子発現を調節することができる。これらのものは、オリゴヌクレオチド、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）によるｍＲＮＡの標的化された分解、転写後遺伝子サイレンシング（ＰＴＧ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）によるｍＲＮＡの発生調節された配列特異的翻訳抑制、および標的化された転写遺伝子サイレンシングを含む。
【0162】
アンチセンスオリゴヌクレオチドは、標的オリゴヌクレオチド、例えば、ｍＲＮＡを相補的配列結合によって標的化し、それに結合する、好ましくは一本鎖のオリゴヌクレオチドである。標的オリゴヌクレオチドがｍＲＮＡである場合、アンチセンスのｍＲＮＡへの結合は、ｍＲＮＡの翻訳および遺伝子産物の発現をブロックする。アンチセンスオリゴヌクレオチドを、センスゲノム核酸に結合し、標的ヌクレオチド配列の転写を阻害するように設計することができる。
【0163】
ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０のための既知の核酸配列（例えば、受託番号ＢＣ０１２５０６．１ ＧＩ：１５３４１７５４（ヒトＩＬ－１１）、ＢＣ１３４３５４．１ ＧＩ：１２６６３２００２（マウスＩＬ－１１）、ＡＦ３４７９３５．１ ＧＩ：１３５４９０７２（ラットＩＬ－１１）、ＮＭ＿００１１４２７８４．２ ＧＩ：３９１３５３３９４（ヒトＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿００１１６３４０１．１ ＧＩ：２５４２８１２６８（マウスＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿１３９１１６．１ ＧＩ：２０８０６１７２（ラットＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿００１１９０９８１．１ ＧＩ：３００２４４５３４（ヒトｇｐ１３０）、ＮＭ＿０１０５６０．３ ＧＩ：２２５００７６２４（マウスｇｐ１３０）、ＮＭ＿００１００８７２５．３ ＧＩ：３００２４４５７０（ラットｇｐ１３０）の下でＧｅｎＢａｎｋから入手可能な既知のｍＲＮＡ配列）を考慮して、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現を抑制するか、またはサイレンシングするようにオリゴヌクレオチドを設計することができる。
【0164】
そのようなオリゴヌクレオチドは任意の長さを有することができるが、好ましくは短く、例えば１００ヌクレオチド未満、例えば１０～４０ヌクレオチドまたは２０～５０ヌクレオチドであってよく、標的オリゴヌクレオチド、例えばＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０のｍＲＮＡ中の対応する長さのヌクレオチド配列と完全なまたはそれに近い相補性（例えば、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％、９９％または１００％の相補性）を有するヌクレオチド配列を含むことができる。ヌクレオチド配列の相補領域は、任意の長さを有してもよいが、好ましくは、少なくとも５、必要に応じて、５０以下のヌクレオチド長、例えば、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、または５０ヌクレオチドのうちの１つである。
【0165】
ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現の抑制は、好ましくは、細胞／組織／臓器／臓器系／対象によって発現されるＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の量の減少をもたらすと予想される。例えば、所与の細胞中での、好適な核酸の投与によるＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の抑制は、未処理の細胞と比較して、その細胞によって発現されるＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の量の減少をもたらすと予想される。抑制は、部分的であってもよい。好ましい抑制の程度は、少なくとも５０％、より好ましくは、少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％または９０％のうちの１つである。９０％～１００％の抑制のレベルは、発現または機能の「サイレンシング」と考えられる。
【0166】
ヘテロクロマチン複合体の標的化および特定の染色体遺伝子座でのエピジェネティックな遺伝子サイレンシングにおけるＲＮＡｉ機構および低分子ＲＮＡの役割は証明されている。ＲＮＡ干渉（ＲＮＡｉ）としても知られる、二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）依存的転写後サイレンシングは、ｄｓＲＮＡ複合体が短期間でサイレンシングのための特定の相同遺伝子を標的化することができる現象である。それは、配列同一性を有するｍＲＮＡの分解を促進するためのシグナルとして作用する。２０ｎｔのｓｉＲＮＡは、一般には遺伝子特異的サイレンシングを誘導するには十分に長いが、宿主応答を回避するには十分に短い。標的遺伝子産物の発現の減少は、広範囲に及んでもよく、９０％のサイレンシングが少ないｓｉＲＮＡ分子によって誘導される。ＲＮＡｉに基づく治療剤は、いくつかの適応症のための第Ｉ、ＩＩおよびＩＩＩ相臨床試験に進行している（Ｎａｔｕｒｅ ２００９ Ｊａｎ ２２；４５７（７２２８）：４２６～４３３頁）。
【0167】
当業界では、これらのＲＮＡ配列は、その起源に応じて、「短い、または低分子干渉ＲＮＡ」（ｓｉＲＮＡ）または「マイクロＲＮＡ」（ｍｉＲＮＡ）と呼ばれる。両方の型の配列を使用して、相補的ＲＮＡに結合し、ｍＲＮＡ除去を誘発する（ＲＮＡｉ）またはタンパク質へのｍＲＮＡ翻訳を停止させることによって、遺伝子発現を下方調節することができる。ｓｉＲＮＡは、長い二本鎖ＲＮＡのプロセッシングによって誘導され、天然に見出される場合、典型的には、外因性起源のものである。マイクロ干渉ＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）は、短いヘアピンのプロセッシングによって誘導される、内因性にコードされた低分子非コードＲＮＡである。ｓｉＲＮＡとｍｉＲＮＡは両方とも、ＲＮＡを切断することなく、部分的に相補的な標的配列を担持するｍＲＮＡの翻訳を阻害し、完全に相補的な配列を担持するｍＲＮＡを分解することができる。
【0168】
ｓｉＲＮＡリガンドは、典型的には、二本鎖であり、標的遺伝子の機能のＲＮＡ媒介性下方調節の有効性を最適化するためには、ｓｉＲＮＡ分子の長さは、ｍＲＮＡ標的のｓｉＲＮＡによる認識を媒介するＲＩＳＣ複合体によるｓｉＲＮＡの正確な認識を確保するように選択され、したがって、ｓｉＲＮＡは宿主応答を低減させるのに十分に短いのが好ましい。
【0169】
ｍｉＲＮＡリガンドは、典型的には、一本鎖であり、部分的に相補的であり、リガンドがヘアピンを形成するのを可能にする領域を有する。ｍｉＲＮＡは、ＤＮＡから転写されるが、タンパク質には翻訳されないＲＮＡ遺伝子である。ｍｉＲＮＡ遺伝子をコードするＤＮＡ配列は、ｍｉＲＮＡよりも長い。このＤＮＡ配列は、ｍｉＲＮＡ配列および近似逆相補体を含む。このＤＮＡ配列が一本鎖ＲＮＡ分子に転写される場合、ｍｉＲＮＡ配列およびその逆相補体は、塩基対を形成して、部分的二本鎖ＲＮＡセグメントを形成する。マイクロＲＮＡ配列の設計は、Ｊｏｈｎら、ＰＬｏＳ Ｂｉｏｌｏｇｙ、１１（２）、１８６２～１８７９頁、２００４に考察されている。
【0170】
典型的には、ｓｉＲＮＡまたはｍｉＲＮＡの効果を模倣するように意図されたＲＮＡリガンドは、１０～４０個のリボヌクレオチド（またはその合成アナログ）、より好ましくは、１７～３０個のリボヌクレオチド、より好ましくは、１９～２５個のリボヌクレオチド、最も好ましくは、２１～２３個のリボヌクレオチドを有する。二本鎖ｓｉＲＮＡを用いる一部の実施形態では、分子は、例えば、１または２個の（リボ）ヌクレオチドの、典型的には、ｄＴｄＴ３’突出部のＵＵの、対称性３’突出部を有してもよい。本明細書に提供される開示に基づいて、当業者であれば、例えば、Ａｍｂｉｏｎ ｓｉＲＮＡファインダーなどの資源を使用して、好適なｓｉＲＮＡおよびｍｉＲＮＡ配列を容易に設計することができる。ｓｉＲＮＡおよびｍｉＲＮＡ配列を合成的に産生し、外因的に付加して、遺伝子下方調節を引き起こすか、または発現系（例えば、ベクター）を使用して産生することができる。好ましい実施形態では、ｓｉＲＮＡは、合成される。
【0171】
より長い二本鎖ＲＮＡを、細胞中でプロセッシングして、ｓｉＲＮＡを産生してもよい（例えば、Ｍｙｅｒｓ（２００３）Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ２１：３２４～３２８頁を参照されたい）。より長いｄｓＲＮＡ分子は、例えば、１もしくは２個の（リボ）ヌクレオチドの、対称性３’もしくは５’突出部を有してもよいか、または平滑末端を有してもよい。より長いｄｓＲＮＡ分子は、２５ヌクレオチドまたはそれより長くてもよい。好ましくは、より長いｄｓＲＮＡ分子は、２５～３０ヌクレオチド長である。より好ましくは、より長いｄｓＲＮＡ分子は、２５～２７ヌクレオチド長である。最も好ましくは、より長いｄｓＲＮＡ分子は、２７ヌクレオチド長である。３０ヌクレオチド以上の長さのｄｓＲＮＡを、ベクターｐＤＥＣＡＰ（Ｓｈｉｎａｇａｗａら、Ｇｅｎｅｓ ａｎｄ Ｄｅｖ．、１７、１３４０～５頁、２００３）を使用して発現させることができる。
【0172】
別の選択肢は、細胞中での短いヘアピンＲＮＡ分子（ｓｈＲＮＡ）の発現である。ｓｈＲＮＡは、合成ｓｉＲＮＡよりも安定である。ｓｈＲＮＡは、小さいループ配列によって隔てられた短い逆方向反復からなる。１つの逆方向反復は、遺伝子標的と相補的である。細胞中で、ｓｈＲＮＡはＤＩＣＥＲによって、標的遺伝子のｍＲＮＡを分解し、発現を抑制するｓｉＲＮＡにプロセッシングされる。好ましい実施形態では、ｓｈＲＮＡは、ベクターからの転写によって内因的に（細胞内で）産生される。ヒトＨ１もしくは７ＳＫプロモーターなどのＲＮＡポリメラーゼＩＩＩプロモーターまたはＲＮＡポリメラーゼＩＩプロモーターの制御下で、ｓｈＲＮＡ配列をコードするベクターを細胞にトランスフェクトすることによって、ｓｈＲＮＡを細胞内で産生させることができる。あるいは、ｓｈＲＮＡを、ベクターからの転写によって外因的に（ｉｎ ｖｉｔｒｏで）合成することができる。次いで、ｓｈＲＮＡを、細胞中に直接導入することができる。好ましくは、ｓｈＲＮＡ分子は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の部分配列を含む。好ましくは、ｓｈＲＮＡ配列は、４０～１００塩基長、より好ましくは、４０～７０塩基長である。ヘアピンのステムは、好ましくは、１９～３０塩基対の長さである。ステムは、ヘアピン構造を安定化するためのＧ－Ｕ対を含有してもよい。
【0173】
ｓｉＲＮＡ分子、より長いｄｓＲＮＡ分子またはｍｉＲＮＡ分子を、好ましくは、ベクター内に含有される核酸配列の転写によって組換え的に作製することができる。好ましくは、ｓｉＲＮＡ分子、より長いｄｓＲＮＡ分子またはｍｉＲＮＡ分子は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の部分配列を含む。
【0174】
一実施形態では、ｓｉＲＮＡ、より長いｄｓＲＮＡまたはｍｉＲＮＡは、ベクターからの転写によって内因的に（細胞内で）産生される。ベクターは、当業界で公知の任意の方法で細胞中に導入してもよい。必要に応じて、ＲＮＡ配列の発現を、組織特異的（例えば、心臓、肝臓、または腎臓特異的）プロモーターを使用して調節することができる。さらなる実施形態では、ｓｉＲＮＡ、より長いｄｓＲＮＡまたはｍｉＲＮＡは、ベクターからの転写によって外因的（ｉｎ ｖｉｔｒｏで）産生される。
【0175】
好適なベクターは、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０抑制することができるオリゴヌクレオチド剤を発現するように構成されたオリゴヌクレオチドベクターであってもよい。そのようなベクターは、ウイルスベクターまたはプラスミドベクターであってもよい。治療的オリゴヌクレオチドを、ウイルスベクターのゲノム中に組み込み、調節配列、例えば、その発現を駆動するプロモーターに作動可能に連結することができる。用語「作動可能に連結されている」は、選択されたヌクレオチド配列および調節ヌクレオチド配列が、ヌクレオチド配列の発現を、調節配列の影響または制御下に置くような方法で共有的に連結される状況を含んでもよい。かくして、調節配列が、選択されたヌクレオチド配列の一部または全部を形成するヌクレオチド配列の転写を行うことができる場合、調節配列は選択されたヌクレオチド配列に作動可能に連結されている。
【0176】
プロモーターにより発現されるｓｉＲＮＡ配列をコードするウイルスベクターは、当業界で公知であり、治療的オリゴヌクレオチドの長期的発現の利益を有する。例としては、レンチウイルス（Ｎａｔｕｒｅ ２００９ Ｊａｎ ２２；４５７（７２２８）：４２６～４３３頁）、アデノウイルス（Ｓｈｅｎら、ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ ２００３ Ｍａｒ ２７；５３９（１～３）１１１～４頁）およびレトロウイルス（ＢａｒｔｏｎおよびＭｅｄｚｈｉｔｏｖ、ＰＮＡＳ Ｎｏｖｅｍｂｅｒ １２、２００２、ｖｏｌ．９９、ｎｏ．２３、１４９４３～１４９４５頁）が挙げられる。
【0177】
他の実施形態では、ベクターを、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現の抑制が必要とされる部位への治療的オリゴヌクレオチドの送達を補助するように構成することができる。そのようなベクターは、典型的には、オリゴヌクレオチドを、正に荷電したベクター（例えば、カチオン性細胞透過性ペプチド、カチオン性ポリマーおよびデンドリマー、ならびにカチオン性脂質）と複合体化すること；オリゴヌクレオチドを、低分子（例えば、コレステロール、胆汁酸、および脂質）、ポリマー、抗体、およびＲＮＡとコンジュゲートすること；またはオリゴヌクレオチドを、ナノ粒子製剤中に封入すること（Ｗａｎｇら、ＡＡＰＳ Ｊ．２０１０ Ｄｅｃ；１２（４）：４９２～５０３頁）を含む。
【0178】
一実施形態では、ＲＮＡとして発現された場合、センスおよびアンチセンスセクションが会合して二本鎖ＲＮＡを形成するように、ベクターは、センス配向とアンチセンス配向の両方の核酸配列を含んでもよい。
【0179】
あるいは、ｓｉＲＮＡ分子を、当業界で公知である標準的な固相または液相合成技術を使用して合成することができる。ヌクレオチド間の連結は、ホスホジエステル結合であってもよく、またはあるいは、例えば、式Ｐ（Ｏ）Ｓ、（チオエート）；Ｐ（Ｓ）Ｓ、（ジチオエート）；Ｐ（Ｏ）ＮＲ’２；Ｐ（Ｏ）Ｒ’；Ｐ（Ｏ）ＯＲ６；ＣＯ；もしくはＣＯＮＲ’２（式中、ＲはＨ（もしくは塩）またはアルキル（１～１２Ｃ）であり、Ｒ６はアルキル（１～９Ｃ）である）の連結基が、－Ｏ－もしくは－Ｓ－を介して隣接するヌクレオチドに連結される。
【0180】
修飾ヌクレオチド塩基を、天然に存在する塩基に加えて使用してもよく、それらは、それらを含有するｓｉＲＮＡ分子に対して有利な特性を付与してもよい。
例えば、修飾塩基は、ｓｉＲＮＡ分子の安定性を増大させることによって、サイレンシングにとって必要とされる量を低減することができる。修飾塩基の提供はまた、多かれ少なかれ、非修飾ｓｉＲＮＡよりも安定であるｓｉＲＮＡ分子を提供することもできる。
例えば、修飾塩基は、ｓｉＲＮＡ分子の安定性を増大させることによって、サイレンシングにとって必要とされる量を低減することができる。修飾塩基の提供はまた、多かれ少なかれ、非修飾ｓｉＲＮＡよりも安定であるｓｉＲＮＡ分子を提供することもできる。
【0181】
用語「修飾ヌクレオチド塩基」は、共有的に修飾された塩基および／または糖を有するヌクレオチドを包含する。例えば、修飾ヌクレオチドは、３’位でヒドロキシル基以外および５’位でリン酸基以外の低分子量有機基に共有的に結合される糖を有するヌクレオチドを含む。かくして、修飾ヌクレオチドはまた、２’－Ｏ－メチル－；２’－Ｏ－アルキル；２’－Ｏ－アリル；２’－Ｓ－アルキル；２’－Ｓ－アリル；２’－フルオロ－；２’－ハロまたはアジド－リボースなどの２’置換された糖、炭素環式糖アナログ、ａ－アノマー糖；アラビノース、キシロースまたはリキソースなどのエピマー糖、ピラノース糖、フラノース糖、およびセドヘプツロースを含んでもよい。
【0182】
修飾ヌクレオチドは、当業界で公知であり、アルキル化プリンおよびピリミジン、アシル化プリンおよびピリミジン、ならびに他の複素環を含む。これらのクラスのピリミジンおよびプリンは、当業界で公知であり、シュードイソシトシン、Ｎ４，Ｎ４－エタノシトシン、８－ヒドロキシ－Ｎ６－メチルアデニン、４－アセチルシトシン、５－（カルボキシヒドロキシメチル）ウラシル、５フルオロウラシル、５－ブロモウラシル、５－カルボキシメチルアミノメチル－２－チオウラシル、５－カルボキシメチルアミノメチルウラシル、ジヒドロウラシル、イノシン、Ｎ６－イソペンチル－アデニン、１－メチルアデニン、１－メチルシュードウラシル、１－メチルグアニン、２，２－ジメチルグアニン、２－メチルアデニン、２－メチルグアニン、３－メチルシトシン、５－メチルシトシン、Ｎ６－メチルアデニン、７－メチルグアニン、５－メチルアミノメチルウラシル、５－メトキシアミノメチル－２－チオウラシル、Ｄ－マンノシルケオシン、５－メトキシカルボニルメチルウラシル、５－メトキシウラシル、２－メチルチオ－Ｎ６－イソペンテニルアデニン、ウラシル－５－オキシ酢酸メチルエステル、シュードウラシル、２－チオシトシン、５－メチル－２－チオウラシル、２－チオウラシル、４－チオウラシル、５メチルウラシル、Ｎ－ウラシル－５－オキシ酢酸メチルエステル、ウラシル５－オキシ酢酸、ケオシン、２－チオシトシン、５－プロピルウラシル、５－プロピルシトシン、５－エチルウラシル、５エチルシトシン、５－ブチルウラシル、５－ペンチルウラシル、５－ペンチルシトシン、および２，６ジアミノプリン、メチルシュードウラシル、１－メチルグアニン、１－メチルシトシンが挙げられる。
【0183】
Ｃ．ｅｌｅｇａｎｓ、Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ、植物、および哺乳動物において遺伝子をサイレンシングするためのＲＮＡｉの使用に関する方法は、当業界で公知である（Ｆｉｒｅ Ａ．ら、１９９８ Ｎａｔｕｒｅ ３９１：８０６～８１１頁；Ｆｉｒｅ，Ａ．Ｔｒｅｎｄｓ Ｇｅｎｅｔ．１５、３５８～３６３頁（１９９９）；Ｓｈａｒｐ，Ｐ．Ａ．ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ２００１、Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．１５、４８５～４９０頁（２００１）；Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｓ．Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．２、１１０～１１１９頁（２００１）；Ｔｕｓｃｈｌ，Ｔ．Ｃｈｅｍ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２、２３９～２４５（２００１）；Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａ．ら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２８６、９５０～９５２頁（１９９９）；Ｈａｍｍｏｎｄ，Ｓ．Ｍ．ら、Ｎａｔｕｒｅ ４０４、２９３～２９６（２０００）；Ｚａｍｏｒｅ，Ｐ．Ｄ．ら、Ｃｅｌｌ １０１、２５～３３頁（２０００）；Ｂｅｒｎｓｔｅｉｎ，Ｅ．ら、Ｎａｔｕｒｅ ４０９、３６３～３６６頁（２００１）；Ｅｌｂａｓｈｉｒ，Ｓ．Ｍ．ら、Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖ．１５、１８８～２００頁（２００１）；ＷＯ０１２９０５８；ＷＯ９９３２６１９、およびＥｌｂａｓｈｉｒ Ｓ Ｍ．ら、２００１、Ｎａｔｕｒｅ ４１１：４９４～４９８頁）。
【0184】
したがって、本開示は、さもなければＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０を発現する哺乳動物、例えばヒトの細胞の中に適切に導入されるかまたはその中で発現されるときに、ＲＮＡｉによってＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現を抑制することが可能である核酸を提供する。
【0185】
ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０のための核酸配列（例えば、受託番号ＢＣ０１２５０６．１ ＧＩ：１５３４１７５４（ヒトＩＬ－１１）、ＢＣ１３４３５４．１ ＧＩ：１２６６３２００２（マウスＩＬ－１１）、ＡＦ３４７９３５．１ ＧＩ：１３５４９０７２（ラットＩＬ－１１）、ＮＭ＿００１１４２７８４．２ ＧＩ：３９１３５３３９４（ヒトＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿００１１６３４０１．１ ＧＩ：２５４２８１２６８（マウスＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿１３９１１６．１ ＧＩ：２０８０６１７２（ラットＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿００１１９０９８１．１ ＧＩ：３００２４４５３４（ヒトｇｐ１３０）、ＮＭ＿０１０５６０．３ ＧＩ：２２５００７６２４（マウスｇｐ１３０）、ＮＭ＿００１００８７２５．３ ＧＩ：３００２４４５７０（ラットｇｐ１３０）の下でＧｅｎＢａｎｋから入手可能な既知のｍＲＮＡ配列）のオリゴヌクレオチドを、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαまたはｇｐ１３０の発現を抑制するか、またはサイレンシングするように設計することができる。
【0186】
核酸は、例えば、ＧｅｎＢａｎｋ受託番号ＮＭ＿０００６４１．３ ＧＩ：３９１３５３４０５（ＩＬ－１１）、ＮＭ＿００１１４２７８４．２ ＧＩ：３９１３５３３９４（ＩＬ－１１Ｒα）、ＮＭ＿００１１９０９８９１．１ ＧＩ：３００２４４５３４（ｇｐ１３０）に定義された、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαもしくはｇｐ１３０ ｍＲＮＡの一部または前記ｍＲＮＡに対する相補配列に対する実質的な配列同一性を有してもよい。
【0187】
核酸は、二本鎖ｓｉＲＮＡであってもよい（当業者であれば理解できるように、また、以下でさらに説明されるように、ｓｉＲＮＡ分子は、短い３’ＤＮＡ配列をも含んでもよい）。
【0188】
あるいは、核酸は、哺乳動物細胞中で転写された場合、相補部分が互いにハイブリダイズする場合にＲＮＡがヘアピンの形態を採るような、スペーサーを介して連結された２つの相補部分を有するＲＮＡをもたらす、ＤＮＡ（通常は二本鎖ＤＮＡ）であってもよい。哺乳動物細胞中では、ヘアピン構造は、ＤＩＣＥＲ酵素によって分子から切断され、２つの異なるが、ハイブリダイズしたＲＮＡ分子をもたらしてもよい。
【0189】
一部の好ましい実施形態では、核酸は、配列番号４～７（ＩＬ－１１）の１つまたは配列番号８～１１（ＩＬ－１１Ｒα）の１つの配列に対して全体として標的化される。
ｍＲＮＡ転写物の一本鎖（すなわち、非自己ハイブリダイズ）領域のみが、ＲＮＡｉのための好適な標的であると予想される。したがって、配列番号４～７または８～１１の１つによって表される配列に、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα ｍＲＮＡ転写物中の非常に近い他の配列も、ＲＮＡｉのための好適な標的であり得ると提唱される。そのような標的配列は好ましくは長さが１７～２３ヌクレオチドであり、好ましくは配列番号４～７または８～１１のうちの１つが少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または全１９ヌクレオチドと重なる（配列番号４～７または８～１１のうちの１つのいずれかの末端で）。
ｍＲＮＡ転写物の一本鎖（すなわち、非自己ハイブリダイズ）領域のみが、ＲＮＡｉのための好適な標的であると予想される。したがって、配列番号４～７または８～１１の１つによって表される配列に、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα ｍＲＮＡ転写物中の非常に近い他の配列も、ＲＮＡｉのための好適な標的であり得ると提唱される。そのような標的配列は好ましくは長さが１７～２３ヌクレオチドであり、好ましくは配列番号４～７または８～１１のうちの１つが少なくとも１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８または全１９ヌクレオチドと重なる（配列番号４～７または８～１１のうちの１つのいずれかの末端で）。
【0190】
したがって、本開示は、さもなければＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒαを発現する哺乳動物細胞の中に適切に導入されるかまたはその中で発現されるときに、ＲＮＡｉによってＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒαの発現を抑制することが可能である核酸を提供し、ここで核酸は一般的に配列番号４～７または８～１１のうちの１つの配列を標的にする。
【0191】
「全体として標的化された」核酸は、配列番号４～７または８～１１と重複する配列を標的としてもよい。特に、核酸は、配列番号４～７または８～１１の１つよりもわずかに長いか、または短いが、その他は配列番号４～７または８～１１の１つと同一である、ヒトＩＬ－１１またはＩＬ－１１ＲαのｍＲＮＡ中の配列（好ましくは、１７～２３ヌクレオチド長）を標的としてもよい。
【0192】
本開示の核酸および標的配列の間の完全な同一性／相補性は好ましいけれども、必須でないと予想される。したがって、本開示の核酸は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１ＲαのｍＲＮＡと比較して単一のミスマッチを含むことができる。しかしながら、単一のミスマッチの存在であっても、効率の低下をもたらす可能性があるため、ミスマッチは存在しないのが好ましいと予想される。存在する場合、３’突出部を、ミスマッチの数の考慮から除外してもよい。
【0193】
用語「相補性」は、天然に存在するリボおよび／またはデオキシリボヌクレオチドからなる核酸間の従来の塩基対形成に限定されないだけでなく、ｍＲＮＡと、非天然ヌクレオチドを含む本開示の核酸との塩基対形成も含む。
【0194】
一実施形態では、核酸（本明細書では二本鎖ｓｉＲＮＡと呼ばれる）は、配列番号１２～１５に示される二本鎖ＲＮＡ配列を含む。別の実施形態では、核酸（本明細書では二本鎖ｓｉＲＮＡと呼ばれる）は、配列番号１６～１９に示される二本鎖ＲＮＡ配列を含む。
【0195】
しかしながら、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒα ｍＲＮＡの同じ領域を指向するわずかにより短いか、またはより長い配列も有効であることも予想される。特に、１７～２３ｂｐの長さの二本鎖配列も有効であると予想される。
【0196】
二本鎖ＲＮＡを形成する鎖は、ＤＮＡまたはＲＮＡであってもよい、短い３’ジヌクレオチド突出部を有してもよい。３’ＤＮＡ突出部の使用は、３’ＲＮＡ突出部と比較してｓｉＲＮＡ活性に対する効果を有しないが、核酸鎖の化学合成の費用を低減する（Ｅｌｂａｓｈｉｒら、２００１ｃ）。この理由から、ＤＮＡジヌクレオチドが好ましい場合がある。
【0197】
存在する場合、ジヌクレオチド突出部は、互いに対称的であってよいが、これは必須ではない。実際、センス（上）鎖の３’突出部は、ｍＲＮＡの認識および分解には参画しないため、ＲＮＡｉ活性とは無関係である（Ｅｌｂａｓｈｉｒら、２００１ａ、２００１ｂ、２００１ｃ）。
【0198】
ＤｒｏｓｏｐｈｉｌａにおけるＲＮＡｉ実験は、アンチセンス３’突出部がｍＲＮＡの認識および標的化に参画し得ることを示すが（Ｅｌｂａｓｈｉｒら、２００１ｃ）、３’突出部は哺乳動物細胞中でのｓｉＲＮＡのＲＮＡｉ活性にとって必要ではないと考えられる。３’突出部の不正確なアニーリングは、したがって、哺乳動物細胞においてはほとんど効果がないと考えられる（Ｅｌｂａｓｈｉｒら、２００１ｃ；Ｃｚａｕｄｅｒｎａら、２００３）。
【0199】
したがって、任意のジヌクレオチド突出部を、ｓｉＲＮＡのアンチセンス鎖において使用することができる。それにも拘わらず、ジヌクレオチドは、好ましくは、－ＵＵまたは－ＵＧ（または突出部がＤＮＡである場合、－ＴＴまたはＴＧ）、より好ましくは、－ＵＵ（または－ＴＴ）である。－ＵＵ（または－ＴＴ）ジヌクレオチド突出部は、最も有効であり、転写シグナル（終結シグナルはＴＴＴＴＴである）のＲＮＡポリメラーゼＩＩＩ末端と一致する（すなわち、その一部を形成することができる）。したがって、このジヌクレオチドが最も好ましい。ジヌクレオチドＡＡ、ＣＣおよびＧＧを使用してもよいが、有効性が低く、結果として、あまり好ましくはない。
【0200】
さらに、３’突出部を、ｓｉＲＮＡから完全に省略してもよい。
本開示はまた、好ましくは、３’突出部を有するが、必要に応じて、有しない、上記二本鎖核酸の一方の成分鎖からそれぞれなる一本鎖核酸（本明細書では、一本鎖ｓｉＲＮＡと称する）も提供する。本開示はまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏで互いにハイブリダイズして、上記二本鎖ｓｉＲＮＡを形成した後、細胞中に導入することができるそのような一本鎖核酸の対を含有するキットも提供する。
本開示はまた、好ましくは、３’突出部を有するが、必要に応じて、有しない、上記二本鎖核酸の一方の成分鎖からそれぞれなる一本鎖核酸（本明細書では、一本鎖ｓｉＲＮＡと称する）も提供する。本開示はまた、ｉｎ ｖｉｔｒｏで互いにハイブリダイズして、上記二本鎖ｓｉＲＮＡを形成した後、細胞中に導入することができるそのような一本鎖核酸の対を含有するキットも提供する。
【0201】
本開示は、哺乳動物細胞で転写させたときに、例えば配列番号１２～１５または１６～１９からなる群から選択される配列、または前記配列のいずれか１つと単一の塩基対置換で異なる配列を含む、自己ハイブリダイズして二本鎖モチーフを生成することが可能である２つの相補的部分を有するＲＮＡ（本明細書でｓｈＲＮＡとも呼ばれる）を与えるＤＮＡも提供する。
【0202】
相補部分は一般に、２つの相補部分を互いにハイブリダイズさせる好適な長さおよび配列を有するスペーサーによって連結されると予想される。２つの相補（すなわち、センスおよびアンチセンス）部分を、いずれかの順序で５’－３’に連結することができる。スペーサーは、典型的には、約４～１２ヌクレオチド、好ましくは、４～９ヌクレオチド、より好ましくは、６～９ヌクレオチドの短い配列と予想される。
【0203】
好ましくは、スペーサーの５’末端（上流の相補部分のすぐ３’側）は、ヌクレオチド－ＵＵ－または－ＵＧ－、再び好ましくは、－ＵＵ－からなる（しかし再度、これらの特定のジヌクレオチドの使用は必須ではない）。ＯｌｉｇｏＥｎｇｉｎｅ（Ｓｅａｔｔｌｅ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、ＵＳＡ）のｐＳｕｐｅｒ系における使用のために推奨される好適なスペーサーは、ＵＵＣＡＡＧＡＧＡである。このおよび他の場合では、スペーサーの末端は互いとハイブリダイズすること、例えば配列番号１２～１５または１６～１９の正確な配列を越えて二本鎖モチーフを少数（例えば１つまたは２つ）の塩基対分伸長させることができる。
【0204】
同様に、転写されるＲＮＡは、好ましくは、下流の相補部分に由来する３’突出部を含む。再度、これは、好ましくは、－ＵＵまたは－ＵＧ、より好ましくは、－ＵＵである。
次いで、そのようなｓｈＲＮＡ分子を、ＤＩＣＥＲ酵素によって哺乳動物細胞中で切断して、ハイブリダイズしたｄｓＲＮＡの一方またはそれぞれの鎖が３’突出部を含む、上記の二本鎖ｓｉＲＮＡを得ることができる。
次いで、そのようなｓｈＲＮＡ分子を、ＤＩＣＥＲ酵素によって哺乳動物細胞中で切断して、ハイブリダイズしたｄｓＲＮＡの一方またはそれぞれの鎖が３’突出部を含む、上記の二本鎖ｓｉＲＮＡを得ることができる。
【0205】
本開示の核酸の合成のための技術は、勿論、当業界で周知である。
当業者であれば、周知の技術および市販の材料を使用して、本開示のＤＮＡのための好適な転写ベクターを構築することができる。特に、ＤＮＡを、プロモーターおよび転写終結配列を含む制御配列と結合させる。
当業者であれば、周知の技術および市販の材料を使用して、本開示のＤＮＡのための好適な転写ベクターを構築することができる。特に、ＤＮＡを、プロモーターおよび転写終結配列を含む制御配列と結合させる。
【0206】
特に好適なものは、ＯｌｉｇｏＥｎｇｉｎｅ（Ｓｅａｔｔｌｅ、Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ、ＵＳＡ）の市販のｐＳｕｐｅｒおよびｐＳｕｐｅｒｉｏｒ系である。これらのものは、ポリメラーゼ－ＩＩＩプロモーター（Ｈ１）および転写物の３’末端で２個のＵ残基に寄与するＴ５転写終結配列を使用する（ＤＩＣＥＲプロセッシング後、ｓｉＲＮＡの一方の鎖の３’ＵＵ突出部を提供する）。
【0207】
別のポリメラーゼ－ＩＩＩプロモーター（Ｕ６）を使用する、別の好適な系は、Ｓｈｉｎら（ＲＮＡ、２００９ Ｍａｙ；１５（５）：８９８～９１０頁）に記載されている。
本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡは、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現を抑制するために、下記のように公知の技術を使用して哺乳動物細胞にｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで導入することができる。
本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡは、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現を抑制するために、下記のように公知の技術を使用して哺乳動物細胞にｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで導入することができる。
【0208】
同様に、本開示のＤＮＡを含有する転写ベクターは、同じくＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現を抑制するために、ＲＮＡの一時的または安定した発現のために、下記のように公知の技術を使用して腫瘍細胞にｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで導入することができる。
【0209】
したがって、本開示は、哺乳動物、例えばヒトの細胞で、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現を抑制する方法であって、細胞に本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡまたは本開示の転写ベクターを投与することを含む方法も提供する。
【0210】
同様に、本開示は、本明細書に記載される疾患／状態を処置する方法であって、対象に本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡまたは本開示の転写ベクターを投与することを含む方法をさらに提供する。
【0211】
本開示は、本開示による疾患／状態を処置／予防する方法で使用するための本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡおよび本開示の転写ベクターをさらに提供する。
本開示は、本明細書に記載される疾患／状態の処置／予防のための医薬の調製における、本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡおよび本開示の転写ベクターの使用をさらに提供する。
本開示は、本明細書に記載される疾患／状態の処置／予防のための医薬の調製における、本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡおよび本開示の転写ベクターの使用をさらに提供する。
【0212】
本開示は、本開示の二本鎖ｓｉＲＮＡまたは本開示の転写ベクターを含む組成物を、１つまたは複数の薬学的に許容される担体との混合物でさらに提供する。好適な担体は、細胞膜の透過を補助することができる、親油性担体またはベシクルを含む。
【0213】
本開示のｓｉＲＮＡ二重鎖およびＤＮＡベクターの投与にとって好適な材料および方法は、当業界で周知であり、ＲＮＡｉ技術の潜在能力を考慮した、改善された方法が開発中である。
【0214】
一般に、多くの技術が、核酸を哺乳動物細胞中に導入するために利用可能である。技術の選択は、核酸が、ｉｎ ｖｉｔｒｏで培養細胞中に、またはｉｎ ｖｉｖｏで患者の細胞中に移入されるかどうかに依存すると予想される。ｉｎ ｖｉｔｒｏでの核酸の哺乳動物細胞への移入にとって好適な技術としては、リポソーム、エレクトロポレーション、マイクロインジェクション、細胞融合、ＤＥＡＥ、デキストランおよびリン酸カルシウム沈降の使用が挙げられる。ｉｎ ｖｉｖｏでの遺伝子移入技術としては、ウイルス（典型的には、レトロウイルス）ベクターおよびウイルスコートタンパク質－リポソーム媒介性トランスフェクション（Ｄｚａｕら（２００３）Ｔｒｅｎｄｓ ｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １１、２０５～２１０頁）が挙げられる。
【0215】
特に、ｉｎ ｖｉｔｒｏとｉｎ ｖｉｖｏの両方での本開示の核酸の細胞投与のための好適な技術は、以下の論文に開示されている：
一般的概説：Ｂｏｒｋｈａｒｄｔ，Ａ．２００２．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ－ｎｅｗ ｈｏｐｅ ｆｏｒ ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ？Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．２：１６７～８頁。Ｈａｎｎｏｎ，Ｇ．Ｊ．２００２．ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｎａｔｕｒｅ．４１８：２４４～５１頁。ＭｃＭａｎｕｓ，Ｍ．Ｔ．およびＰ．Ａ．Ｓｈａｒｐ．２００２．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｍａｍｍａｌｓ ｂｙ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｇｅｎｅｔ．３：７３７～４７頁。Ｓｃｈｅｒｒ，Ｍ．、Ｍ．Ａ．Ｍｏｒｇａｎ、およびＭ．Ｅｄｅｒ．２００３ｂ．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ．Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１０：２４５～５６頁。Ｓｈｕｅｙ，Ｄ．Ｊ．、Ｄ．Ｅ．ＭｃＣａｌｌｕｓ、およびＴ．Ｇｉｏｒｄａｎｏ．２００２．ＲＮＡｉ：ｇｅｎｅ－ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ．７：１０４０～６頁。
一般的概説：Ｂｏｒｋｈａｒｄｔ，Ａ．２００２．Ｂｌｏｃｋｉｎｇ ｏｎｃｏｇｅｎｅｓ ｉｎ ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ－ｎｅｗ ｈｏｐｅ ｆｏｒ ａ ｈｉｇｈｌｙ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ？Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ．２：１６７～８頁。Ｈａｎｎｏｎ，Ｇ．Ｊ．２００２．ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｎａｔｕｒｅ．４１８：２４４～５１頁。ＭｃＭａｎｕｓ，Ｍ．Ｔ．およびＰ．Ａ．Ｓｈａｒｐ．２００２．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｍａｍｍａｌｓ ｂｙ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ．Ｎａｔ Ｒｅｖ Ｇｅｎｅｔ．３：７３７～４７頁。Ｓｃｈｅｒｒ，Ｍ．、Ｍ．Ａ．Ｍｏｒｇａｎ、およびＭ．Ｅｄｅｒ．２００３ｂ．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡｓ ｉｎ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ．Ｃｕｒｒ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１０：２４５～５６頁。Ｓｈｕｅｙ，Ｄ．Ｊ．、Ｄ．Ｅ．ＭｃＣａｌｌｕｓ、およびＴ．Ｇｉｏｒｄａｎｏ．２００２．ＲＮＡｉ：ｇｅｎｅ－ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｉｎ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖ Ｔｏｄａｙ．７：１０４０～６頁。
【0216】
リポソームを使用する全身送達：Ｌｅｗｉｓ，Ｄ．Ｌ．、Ｊ．Ｅ．Ｈａｇｓｔｒｏｍ，Ａ．Ｇ．Ｌｏｏｍｉｓ，Ｊ．Ａ．Ｗｏｌｆｆ、およびＨ．Ｈｅｒｗｅｉｊｅｒ．２００２．Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｉＲＮＡ ｆｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｍｉｃｅ．Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．３２：１０７～８頁。Ｐａｕｌ，Ｃ．Ｐ．、Ｐ．Ｄ．Ｇｏｏｄ、Ｉ．Ｗｉｎｅｒ、およびＤ．Ｒ．Ｅｎｇｅｌｋｅ．２００２．Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｃｅｌｌｓ．Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２０：５０５～８頁。Ｓｏｎｇ，Ｅ．、Ｓ．Ｋ．Ｌｅｅ、Ｊ．Ｗａｎｇ、Ｎ．Ｉｎｃｅ、Ｎ．Ｏｕｙａｎｇ、Ｊ．Ｍｉｎ、Ｊ．Ｃｈｅｎ、Ｐ．Ｓｈａｎｋａｒ、およびＪ．Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ．２００３．ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ Ｆａｓ ｐｒｏｔｅｃｔｓ ｍｉｃｅ ｆｒｏｍ ｆｕｌｍｉｎａｎｔ ｈｅｐａｔｉｔｉｓ．Ｎａｔ Ｍｅｄ．９：３４７～５１頁。Ｓｏｒｅｎｓｅｎ，Ｄ．Ｒ．、Ｍ．Ｌｅｉｒｄａｌ、およびＭ．Ｓｉｏｕｄ．２００３．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｂｙ ｓｙｓｔｅｍｉｃ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ ｓｉＲＮＡｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ｍｉｃｅ．Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ．３２７：７６１～６頁。
【0217】
ウイルス媒介性移入：Ａｂｂａｓ－Ｔｅｒｋｉ，Ｔ．、Ｗ．Ｂｌａｎｃｏ－Ｂｏｓｅ、Ｎ．Ｄｅｇｌｏｎ、Ｗ．Ｐｒａｌｏｎｇ、およびＰ．Ａｅｂｉｓｃｈｅｒ．２００２．Ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ＲＮＡ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ．Ｈｕｍ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ．１３：２１９７～２０１頁。Ｂａｒｔｏｎ，Ｇ．Ｍ．、およびＲ．Ｍｅｄｚｈｉｔｏｖ．２００２．Ｒｅｔｒｏｖｉｒａｌ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ ｉｎｔｏ ｐｒｉｍａｒｙ ｃｅｌｌｓ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．９９：１４９４３～５頁。Ｄｅｖｒｏｅ，Ｅ．、およびＰ．Ａ．Ｓｉｌｖｅｒ．２００２．Ｒｅｔｒｏｖｉｒｕｓ－ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ ｓｉＲＮＡ．ＢＭＣ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２：１５頁。Ｌｏｒｉ，Ｆ．、Ｐ．Ｇｕａｌｌｉｎｉ、Ｌ．Ｇａｌｌｕｚｚｉ、およびＪ．Ｌｉｓｚｉｅｗｉｃｚ．２００２．Ｇｅｎｅ ｔｈｅｒａｐｙ ａｐｐｒｏａｃｈｅｓ ｔｏ ＨＩＶ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ．Ａｍ Ｊ Ｐｈａｒｍａｃｏｇｅｎｏｍｉｃｓ．２：２４５～５２頁。Ｍａｔｔａ，Ｈ．、Ｂ．Ｈｏｚａｙｅｖ，Ｒ．Ｔｏｍａｒ、Ｐ．Ｃｈｕｇｈ、およびＰ．Ｍ．Ｃｈａｕｄｈａｒｙ．２００３．Ｕｓｅ ｏｆ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｇｅｒｉｎｇ ＲＮＡ．Ｃａｎｃｅｒ Ｂｉｏｌ Ｔｈｅｒ．２：２０６～１０頁。Ｑｉｎ，Ｘ．Ｆ．、Ｄ．Ｓ．Ａｎ、Ｉ．Ｓ．Ｃｈｅｎ、およびＤ．Ｂａｌｔｉｍｏｒｅ．２００３．Ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ＨＩＶ－１ ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ ａｇａｉｎｓｔ ＣＣＲ５．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ．１００：１８３～８頁。Ｓｃｈｅｒｒ，Ｍ．、Ｋ．Ｂａｔｔｍｅｒ、Ａ．Ｇａｎｓｅｒ、およびＭ．Ｅｄｅｒ．２００３ａ．Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｂｙ ｌｅｎｔｉｖｉｒａｌ－ｍｅｄｉａｔｅｄ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｍａｌｌ ｉｎｔｅｒｆｅｒｉｎｇ ＲＮＡ．Ｃｅｌｌ Ｃｙｃｌｅ．２：２５１～７頁。Ｓｈｅｎ，Ｃ．、Ａ．Ｋ．Ｂｕｃｋ、Ｘ．Ｌｉｕ、Ｍ．Ｗｉｎｋｌｅｒ、およびＳ．Ｎ．Ｒｅｓｋｅ．２００３．Ｇｅｎｅ ｓｉｌｅｎｃｉｎｇ ｂｙ ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ－ｄｅｌｉｖｅｒｅｄ ｓｉＲＮＡ．ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．５３９：１１１～４頁。
【0218】
ペプチド送達：Ｍｏｒｒｉｓ，Ｍ．Ｃ．、Ｌ．Ｃｈａｌｏｉｎ、Ｆ．Ｈｅｉｔｚ、およびＧ．Ｄｉｖｉｔａ．２０００．Ｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｎｇ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｕｓｅ ｆｏｒ ｇｅｎｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ．Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１１：４６１～６頁。Ｓｉｍｅｏｎｉ，Ｆ．、Ｍ．Ｃ．Ｍｏｒｒｉｓ、Ｆ．Ｈｅｉｔｚ、およびＧ．Ｄｉｖｉｔａ．２００３．Ｉｎｓｉｇｈｔ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｐｅｐｔｉｄｅ－ｂａｓｅｄ ｇｅｎｅ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｓｙｓｔｅｍ ＭＰＧ：ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｄｅｌｉｖｅｒｙ ｏｆ ｓｉＲＮＡ ｉｎｔｏ ｍａｍｍａｌｉａｎ ｃｅｌｌｓ．Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．３１：２７１７～２４頁。ｓｉＲＮＡの標的細胞への送達にとって好適であり得る他の技術は、米国特許第６，６４９，１９２Ｂ号および第５，８４３，５０９Ｂ号に記載されたものなどのナノ粒子またはナノカプセルに基づく。
【0219】
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害
本開示の実施形態では、ＩＬ－１１の作用を阻害することが可能な薬剤は、以下の機能的特性のうちの１つまたは複数を有することができる：
・ＩＬ－１１によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１のＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体複合体への結合によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合によって媒介されるシグナル伝達（すなわち、ＩＬ－１１トランスシグナル伝達）の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の多量体化によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１によって媒介される過程の阻害；
・ＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質の発現の阻害。
本開示の実施形態では、ＩＬ－１１の作用を阻害することが可能な薬剤は、以下の機能的特性のうちの１つまたは複数を有することができる：
・ＩＬ－１１によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１のＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体複合体への結合によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合によって媒介されるシグナル伝達（すなわち、ＩＬ－１１トランスシグナル伝達）の阻害；
・ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０複合体の多量体化によって媒介されるシグナル伝達の阻害；
・ＩＬ－１１によって媒介される過程の阻害；
・ＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質の発現の阻害。
【0220】
これらの特性を、関連薬剤の性能の、好適な対照薬剤との比較を含んでもよい好適なアッセイにおける前記薬剤の分析によって決定することができる。当業者であれば、所与のアッセイに関する適切な対照条件を同定することができる。
【0221】
ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達および／またはＩＬ－１１によって媒介されるプロセスは、ＩＬ－１１の断片およびＩＬ－１１またはその断片を含むポリペプチド複合体によって媒介されるシグナル伝達を含む。ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達は、ヒトＩＬ－１１および／またはマウスＩＬ－１１によって媒介されるシグナル伝達であってもよい。ＩＬ－１１によって媒介されるシグナル伝達は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体の、ＩＬ－１１または前記複合体が結合する受容体への結合後に起こってもよい。
【0222】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１含有複合体の生物活性を阻害することができてもよい。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含む受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０を介するシグナル伝達によって活性化される１つまたは複数のシグナル伝達経路のアンタゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含む１つまたは複数の免疫受容体複合体、例えば、ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０を介するシグナル伝達を阻害することができる。本開示の様々な態様では、本明細書で提供される薬剤は、ＩＬ－１１媒介のシスおよび／またはトランスシグナル伝達を阻害することが可能である。本開示の様々な態様による一部の実施形態では、本明細書で提供される薬剤はＩＬ－１１媒介のシスシグナル伝達を阻害することが可能である。
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含む受容体、例えば、ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０を介するシグナル伝達によって活性化される１つまたは複数のシグナル伝達経路のアンタゴニストである。一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含む１つまたは複数の免疫受容体複合体、例えば、ＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０を介するシグナル伝達を阻害することができる。本開示の様々な態様では、本明細書で提供される薬剤は、ＩＬ－１１媒介のシスおよび／またはトランスシグナル伝達を阻害することが可能である。本開示の様々な態様による一部の実施形態では、本明細書で提供される薬剤はＩＬ－１１媒介のシスシグナル伝達を阻害することが可能である。
【0223】
一部の実施形態では、薬剤は、薬剤の非存在下（または適切な対照薬剤の存在下）でのシグナル伝達のレベルの１００％未満、例えば、９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つでＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を阻害することができてもよい。一部の実施形態では、薬剤は、薬剤の非存在下（または適切な対照薬剤の存在下）でのシグナル伝達のレベルの１倍未満、例えば、０．９９倍以下、０．９５倍以下、０．９倍以下、０．８５倍以下、０．８倍以下、０．７５倍以下、０．７倍以下、０．６５倍以下、０．６倍以下、０．５５倍以下、０．５倍以下、０．４５倍以下、０．４倍以下、０．３５倍以下、０．３倍以下、０．２５倍以下、０．２倍以下、０．１５倍以下、０．１倍以下のうちの１つでＩＬ－１１媒介性シグナル伝達を低減させることができる。
【0224】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達は、ＩＬ－１１のＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体への結合によって媒介されるシグナル伝達であってもよい。そのようなシグナル伝達を、例えば、ＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現する細胞をＩＬ－１１で処理することによって、またはＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現する細胞中でＩＬ－１１産生を刺激することによって分析することができる。
【0225】
ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達の阻害のための薬剤のＩＣ５０を、例えば、ヒトＩＬ－１１および薬剤の存在下でＩＬ－１１Ｒαおよびｇｐ１３０を発現するＢａ／Ｆ３細胞を培養すること、ならびにＤＮＡ中への３Ｈチミジンの取込みを測定することによって決定することができる。一部の実施形態では、薬剤は、そのようなアッセイにおいて、１０μｇ／ｍｌ以下、好ましくは、５μｇ／ｍｌ以下、４μｇ／ｍｌ以下、３．５μｇ／ｍｌ以下、３μｇ／ｍｌ以下、２μｇ／ｍｌ以下、１μｇ／ｍｌ以下、０．９μｇ／ｍｌ以下、０．８μｇ／ｍｌ以下、０．７μｇ／ｍｌ以下、０．６μｇ／ｍｌ以下、または０．５μｇ／ｍｌ以下のうちの１つのＩＣ５０を示してもよい。
【0226】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１媒介性シグナル伝達は、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合によって媒介されるシグナル伝達であってもよい。一部の実施形態では、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体は、可溶型の、例えば、ＩＬ－１１ＲαとＩＬ－１１の細胞外ドメインの複合体、または可溶型ＩＬ－１１Ｒαアイソフォーム／断片と、ＩＬ－１１との複合体であってもよい。一部の実施形態では、可溶型ＩＬ－１１Ｒαは、ＩＬ－１１Ｒαの可溶型（分泌型）アイソフォームであるか、または細胞膜に結合したＩＬ－１１Ｒαの細胞外ドメインのタンパク質分解的切断の遊離産物である。
【0227】
一部の実施形態では、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体は、細胞に結合した、例えば、細胞膜に結合したＩＬ－１１ＲαとＩＬ－１１との複合体であってもよい。ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合によって媒介されるシグナル伝達は、ｇｐ１３０を発現する細胞をＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体、例えば、ペプチドリンカーによってＩＬ－１１Ｒαの細胞外ドメイン、例えばハイパーＩＬ－１１に連結されるＩＬ－１１を含む組換え融合タンパク質で処理することによって分析することができる。ハイパーＩＬ－１１は、ＩＬ－１１Ｒα（ドメイン１～３からなるアミノ酸残基１～３１７；ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｑ１４６２６）およびＩＬ－１１（ＵｎｉＰｒｏｔＫＢ：Ｐ２０８０９のアミノ酸残基２２～１９９）の断片を２０アミノ酸長のリンカー（配列番号２０）と使用して構築された。ハイパーＩＬ－１１のアミノ酸配列は、配列番号２１に示される。
【0228】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１：ＩＬ－１１Ｒα複合体のｇｐ１３０への結合によって媒介されるシグナル伝達を阻害することができてもよく、また、ＩＬ－１１のＩＬ－１１Ｒα：ｇｐ１３０受容体への結合によって媒介されるシグナル伝達を阻害することもできる。
【0229】
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１によって媒介される過程を阻害することが可能であってよい。
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質の発現を阻害することが可能であってよい。遺伝子および／またはタンパク質の発現は本明細書に記載される通りに、または当業者に周知となる当技術分野の方法によって測定することができる。
一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質の発現を阻害することが可能であってよい。遺伝子および／またはタンパク質の発現は本明細書に記載される通りに、または当業者に周知となる当技術分野の方法によって測定することができる。
【0230】
一部の実施形態では、薬剤は、ＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質発現を、薬剤の不在下での（または適当な対照薬剤の存在下での）発現のレベルの１００％未満、例えば９９％以下、９５％以下、９０％以下、８５％以下、８０％以下、７５％以下、７０％以下、６５％以下、６０％以下、５５％以下、５０％以下、４５％以下、４０％以下、３５％以下、３０％以下、２５％以下、２０％以下、１５％以下、１０％以下、５％以下、または１％以下のうちの１つまで阻害することが可能であってよい。一部の実施形態では、薬剤はＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの遺伝子／タンパク質の発現を、薬剤の不在下での（または適当な対照薬剤の存在下での）発現のレベルの１倍未満まで、例えば≦０．９９倍、≦０．９５倍、≦０．９倍、≦０．８５倍、≦０．８倍、≦０．７５倍、≦０．７倍、≦０．６５倍、≦０．６倍、≦０．５５倍、≦０．５倍、≦０．４５倍、≦０．４倍、≦０．３５倍、≦０．３倍、≦０．２５倍、≦０．２倍、≦０．１５倍、≦０．１倍のうちの１つまで阻害することが可能である。
【0231】
治療および予防適応症
本開示は、加齢性疾患／状態の処置／予防に広く関連する。本明細書で言及される加齢性疾患／状態は、年齢と共に増加する発生率を有する疾患／状態である。加齢性疾患および状態は、例えばＦｒａｎｃｅｓｃｈｉら、Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ（Ｌａｕｓａｎｎｅ）（２０１８）５：６１頁ならびにＪａｕｌおよびＢａｒｒｏｎ、Ｆｒｏｎｔ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ（２０１７）５：３３５頁に記載され、この両方はここに参照により完全に組み込まれる。
本開示は、加齢性疾患／状態の処置／予防に広く関連する。本明細書で言及される加齢性疾患／状態は、年齢と共に増加する発生率を有する疾患／状態である。加齢性疾患および状態は、例えばＦｒａｎｃｅｓｃｈｉら、Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ（Ｌａｕｓａｎｎｅ）（２０１８）５：６１頁ならびにＪａｕｌおよびＢａｒｒｏｎ、Ｆｒｏｎｔ Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ（２０１７）５：３３５頁に記載され、この両方はここに参照により完全に組み込まれる。
【0232】
加齢性疾患／状態は、組織構造の進行性の変性および／または生理的組織機能の進行性の衰退によって一般的に特徴付けられる。そのような疾患／状態の根底にある分子および細胞の機構には、脱調節自己貪食、ミトコンドリア機能障害、テロメア短縮、酸化ストレス、炎症、代謝機能障害および一般的に細胞老化のうちの１つまたは複数が含まれる。
【0233】
加齢は、多くの慢性疾患の主要なリスク因子である。肝臓では、加齢は急性肝損傷および肝線維症応答への感受性を増加させる（Ｋｉｍら、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ（２０１５）３１（３）：１８４～１９１頁；Ｈｕｎｔら、Ｃｏｍｐｕｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｊ（２０１９）１７：１１５１～１１６１頁、Ｆｅｒｒｕｃｃｉら、Ａｇｉｎｇ Ｃｅｌｌ（２０２０）１９（２）：ｅ１３０８０頁）。さらに、加齢は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性肝疾患、Ｃ型肝炎を含む様々な肝疾患のリスク増加および予後劣化と正に関連し、肝再生能力と負に関連している（Ｋｉｍら、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ（２０１５）３１（３）：１８４～１９１頁；Ｐａｐａｔｈｅｏｄｏｒｉｄｉら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０２０）７１（１）：３６３～３７４頁）。
【0234】
本明細書で使用されるように、「加齢性」疾患／状態または表現型は、「加齢関連」または「年齢／加齢関連」と呼ぶこともできる。本開示の態様および実施形態では、「加齢性」と記載される疾患／状態または表現型は、別の病因よりも関連する疾患／状態または表現型を有する対象の年齢の結果として起こることができる。一部の態様および実施形態では、「加齢性」疾患／状態または表現型は、細胞老化の結果として起こることができる。実例として、体組成中の「加齢性」変化は、対象の食事よりも対象の加齢および／または細胞老化の結果として起こる体組成中の変化を指すことができる。
【0235】
老化細胞の蓄積は、加齢における特質の１つである（Ｈｕｎｔら、Ｃｏｍｐｕｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｊ（２０１９）１７：１１５１～１１６１頁）。細胞老化は減少した複製能力によって特徴付けられ、老化関連の分泌表現型（ＳＡＳＰ）タンパク質を産生し、近隣細胞の慢性の低品質の炎症性環境をもたらす（Ｈｕｎｔら、Ｃｏｍｐｕｔ Ｓｔｒｕｃｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ Ｊ（２０１９）１７：１１５１～１１６１頁；Ｂｏｒｇｈｅｓａｎら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．（２０２０）３０（１０）：７７７～７９１頁）。病的ストレス状態の下で、影響を受けた組織中の老化細胞の過剰な蓄積は、様々な加齢性障害、例えばアルツハイマー病、がん、関節炎、白内障、骨粗しょう症、アテローム硬化症、高血圧、心血管疾患、２型糖尿病および慢性肝臓障害に似ることができる組織の再生能力および慢性炎症に悪影響を及ぼす（ＢａｋｅｒおよびＨａｙｎｅｓ、Ｔｒｅｎｄｓ Ｂｉｏｃｈｅｍ Ｓｃｉ（２０１１）３６（５）：２５４～２６１頁；Ｋｉｍら、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ（２０１５）３１（３）：１８４～１９１頁；Ｈｅｒｎａｎｄｅｚ－Ｓｅｇｕｒａら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ（２０１８）２８（６）：４３６～４５３頁；Ｓｔａｈｌら、Ｆｒｏｎｔ Ｉｍｍｕｎｏｌ（２０１８）９：２７９５頁；Ｂｅｌｉｋｏｖ、Ａｇｅｉｎｇ Ｒｅｓ Ｒｅｖ（２０１９）４９：１１～２６頁；Ｃａｍｐｉｓｉら、Ｎａｔｕｒｅ（２０１９）５７１（７７６４）：１８３～１９２頁；Ｇｏｒｇｏｕｌｉｓら、Ｃｅｌｌ（２０１９）１７９（４）：８１３～８２７頁；Ｓｃｈｍｅｅｒら、Ｃｅｌｌｓ（２０１９）８（１１）；Ｐａｐａｔｈｅｏｄｏｒｉｄｉら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ（２０２０）７１（１）：３６３～３７４頁）。したがって、細胞老化は、加齢性疾患の発達および進行における重要な生理過程であると考えられる（Ｂｏｒｇｈｅｓａｎら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ．（２０２０）３０（１０）：７７７～７９１頁；Ｐｉｇｎｏｌｏら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｍｏｌ Ｍｅｄ（２０２０）２６（７）：６３０～６３８頁）。
【0236】
一部の態様および実施形態では、本開示は細胞老化および細胞老化によって特徴付けられる疾患／状態の処置／予防を企図する。一部の態様および実施形態では、本開示の方法は細胞老化を阻害することを含む。一部の態様および実施形態では、本開示の方法は老化細胞を阻害することを含む。一部の態様および実施形態では、本方法は、老化細胞の数を低減すること、および／または老化細胞の活動を阻害することを含む。
【0237】
一部の実施形態では、老化細胞の数を低減することは、細胞老化の過程を阻害することを含む。すなわち、一部の実施形態では、老化細胞の数を低減することは、非老化前駆細胞からの老化細胞の発達を阻害することを含む。一部の実施形態では、老化細胞の数を低減することは、細胞老化の過程を覆すことを含む。すなわち、一部の実施形態では、老化細胞の数を低減することは、老化細胞の非老化表現型への復帰を促進することを含む。一部の実施形態では、老化細胞の数を低減することは、老化細胞を減少させることを含む。
【0238】
細胞老化は、例えば、Ｃｈｉｌｄｓら、Ｎａｔ Ｍｅｄ（２０１５）２１（１２）：１４２４～１４３５頁およびｖａｎ Ｄｅｕｒｓｅｎ、Ｎａｔｕｒｅ（２０１４）５０９（７５０１）：４３９～４４６頁に記載され、その両方はここに参照により完全に組み込まれる。細胞老化は、細胞分裂の停止（ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１およびｐ５３の活性化と関連する）、クロマチンリモデリング（例えば、ＤＮＡ傷害応答（ＤＤＲ）、前骨髄球性白血病タンパク質（ＰＭＬ）体の形成、および老化関連の異質染色質病巣（ＳＡＨＦ）を含む）、老化関連のβ－ガラクトシダーゼ活性、および老化関連分泌表現型（ＳＡＳＰ）と呼ばれる炎症誘発性因子の混合物の生成によって特徴付けられる。
【0239】
本開示により、老化細胞は、同じ細胞型の／同じ組織からの同等の非老化細胞と比較して以下のうちの１つまたは複数を提示することができる：ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１および／またはｐ５３の発現の増加；ＤＤＲのレベルの増加；ＰＭＬ体の数の増加；ＳＡＨＦの数の増加、老化関連β－ガラクトシダーゼの発現および／または活性の増加；１つまたは複数のＳＡＳＰ因子（例えばＩＬ－１ｂまたはＩＬ－８）の発現の増加。
【0240】
特定の態様および実施形態では、本開示は、細胞老化を含むおよび／またはそれによって特徴付けられる疾患／状態、すなわち細胞老化が病理学上結びつけられる疾患／状態の処置に関する。細胞老化が「病理学上結びつけられる」疾患／状態は、老化細胞の数／割合および／または活性がその疾患または状態と正に関連している疾患／状態である。
【0241】
細胞老化が「病理学上結びつけられる」疾患／状態は、老化細胞の数／割合および／または活性の増加（非病的な健康状態と比較して）が、その疾患／状態の開始、発達および／または進行と正に関連している疾患／状態であってよい。細胞老化が「病理学上結びつけられる」疾患／状態は、老化細胞の数／割合および／または活性の増加（非病的な健康状態と比較して）が、その疾患／状態の１つまたは複数の症状の重症度と正に関連している疾患／状態であってよい。細胞老化が「病理学上結びつけられる」疾患／状態は、老化細胞の数／割合および／または活性の増加（非病的な健康状態と比較して）が、その疾患／状態の開始、発達および／または進行のリスク因子である疾患／状態であってよい。
【0242】
本開示により処置／提示されることが企図される疾患／状態（例えば加齢性疾患／状態）には、例えば老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば、収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性が含まれる。
【0243】
老人病症候群は高齢患者で一般的な状態であり、例には虚弱、認知障害、精神錯乱、認知症、失禁、聴力障害、視覚障害、サルコペニア、メタボリックシンドローム、栄養失調、歩行障害、転倒および褥瘡性潰瘍が含まれる。
【0244】
本開示により処置／提示されることが企図されるさらなる例示的な疾患／状態には、虚弱、体脂肪量の加齢性増加、サルコペニア、加齢性高脂血症、加齢性高トリグリセリド血症、加齢性高コレステロール血症、加齢性肝臓脂肪症、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、加齢性非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）、加齢性非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、加齢性心血管疾患、加齢性高血圧、加齢性腎疾患および加齢性皮膚疾患が含まれる。
【0245】
疾患／状態が本明細書で「加齢性」と記載される場合、他の可能な病因と異なるような、対象の年齢の結果として起こる疾患／状態に言及される。例えば、「加齢性脂肪症」は、加齢過程の結果として起こる脂肪症の特定のサブタイプを指し、例えば食事の結果として起こる脂肪症とは異なる。
【0246】
特定の実施形態では、本開示により処置／予防される疾患／状態は、以下から選択される：骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、虚弱、認知障害、精神錯乱、認知症、失禁、聴力障害、視覚障害、栄養失調、歩行障害、転倒および褥瘡性潰瘍。
【0247】
一部の態様および実施形態では、本開示は虚弱の処置／予防を企図する。
虚弱は、Ｆｒｉｅｄら、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ（２００１）５６（３）：Ｍ１４６～５６（ここに参照により完全に組み込まれる）によって確立された表現型判定基準によって：低握力、低エネルギー、遅い歩行速度、低い身体活動および／または非意図的体重減少の３つ以上を有する対象として決定することができ、それは次に、Ｘｕｅ、Ｃｌｉｎ Ｇｅｒｉａｔｒ Ｍｅｄ（２０１１）２月；２７（１）：１～１５頁（ここに参照により完全に組み込まれる）の表１で要約されるように、女性の健康および加齢研究（Women's Health and Aging Studies）（ＷＨＡＳ）または心血管健康研究（Cardiovascular Health Study）（ＣＨＳ）の虚弱規定判定基準によって規定することができる。
虚弱は、Ｆｒｉｅｄら、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ（２００１）５６（３）：Ｍ１４６～５６（ここに参照により完全に組み込まれる）によって確立された表現型判定基準によって：低握力、低エネルギー、遅い歩行速度、低い身体活動および／または非意図的体重減少の３つ以上を有する対象として決定することができ、それは次に、Ｘｕｅ、Ｃｌｉｎ Ｇｅｒｉａｔｒ Ｍｅｄ（２０１１）２月；２７（１）：１～１５頁（ここに参照により完全に組み込まれる）の表１で要約されるように、女性の健康および加齢研究（Women's Health and Aging Studies）（ＷＨＡＳ）または心血管健康研究（Cardiovascular Health Study）（ＣＨＳ）の虚弱規定判定基準によって規定することができる。
【0248】
一部の態様および実施形態では、本開示は、体組成中の加齢性変化の処置／予防を企図する。
体組成中の加齢性変化は、例えばＳａｎｔａｎａｓｔｏら、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ．（２０１７）７２（４）：５１３～５１９頁およびＳｔ－ＯｎｇｅおよびＧａｌｌａｇｈｅｒ、Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ（２０１０）２６（２）：１５２～１５５頁、に記載され、その両方はここに参照により完全に組み込まれる。体組成中の加齢性変化には以下のものが含まれる：筋肉量の低減（すなわちサルコペニア）、骨量の低減（例えば骨粗しょう症につながる）、体脂肪量の増加、軟骨の変性（例えば骨関節炎につながる）、腎臓の変化（例えば腎臓機能障害（例えば糸球体濾過率における年齢依存性悪化）につながる）、呼吸系の器官の変化（例えば肺、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）につながる）、消化器系の器官の変化（例えば便秘につながる）、膀胱の変化（例えば尿失禁につながる）、歯および／または歯肉の変性（例えば歯周病につながる）、脱毛、皮膚脆弱性（例えば乾燥および／またはしわにつながる）、聴覚系の器官の変化（例えば難聴につながる）、および生殖器官への変化（例えば不能症または膣乾燥につながる）。
体組成中の加齢性変化は、例えばＳａｎｔａｎａｓｔｏら、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ．（２０１７）７２（４）：５１３～５１９頁およびＳｔ－ＯｎｇｅおよびＧａｌｌａｇｈｅｒ、Ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ（２０１０）２６（２）：１５２～１５５頁、に記載され、その両方はここに参照により完全に組み込まれる。体組成中の加齢性変化には以下のものが含まれる：筋肉量の低減（すなわちサルコペニア）、骨量の低減（例えば骨粗しょう症につながる）、体脂肪量の増加、軟骨の変性（例えば骨関節炎につながる）、腎臓の変化（例えば腎臓機能障害（例えば糸球体濾過率における年齢依存性悪化）につながる）、呼吸系の器官の変化（例えば肺、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）につながる）、消化器系の器官の変化（例えば便秘につながる）、膀胱の変化（例えば尿失禁につながる）、歯および／または歯肉の変性（例えば歯周病につながる）、脱毛、皮膚脆弱性（例えば乾燥および／またはしわにつながる）、聴覚系の器官の変化（例えば難聴につながる）、および生殖器官への変化（例えば不能症または膣乾燥につながる）。
【0249】
筋肉量の加齢性低減は、骨格筋肉量の低減を含むことができる。骨格筋肉はミトコンドリアへの年齢関連の変化を経て、より多くの反応性酸素種を放出する非効率的なミトコンドリアの形成につながる（Ｊｏｈｎｓｏｎら、Ｔｒｅｎｄｓ Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ．（２０１３）２４（５）：２４７～５６頁）。ミトコンドリアの機能障害は次に骨格筋肉のアポトーシスの活性化をもたらすと考えられ、骨格筋肉の萎縮をもたらす（Ｌｅｎｋら、Ｊ Ｃａｃｈｅｘｉａ Ｓａｒｃｏｐｅｎｉａ Ｍｕｓｃｌｅ．（２０１０）１（１）：９～２１頁）。
【0250】
骨量の加齢性低減は、例えば、Ｄｅｍｏｎｔｉｅｒｏら、Ｔｈｅｒ Ａｄｖ Ｍｕｓｃｕｌｏｓｋｅｌｅｔ Ｄｉｓ．（２０１２）４（２）：６１～７６頁に記載される。根底にある機構には、破骨細胞による骨吸収および骨芽細胞による骨組織の不十分な形成が含まれる。骨量の低減は骨粗しょう症をもたらすことができ、それは骨量およびマイクロアーキテクチャの悪化と規定され、脆弱性骨折のリスクを増加させる（ＲａｉｓｚおよびＲｏｄａｎ、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ Ｍｅｔａｂ Ｃｌｉｎ Ｎｏｒｔｈ Ａｍ．（２００３）３２（１）：１５～２４頁）。
【0251】
加齢は、体重および肥満度指数（ＢＭＩ）における一般的および生理的変動から独立した、総体脂肪量の増加によってしばしば特徴付けられる（Ｚｏｎｇら、Ｏｂｅｓｉｔｙ（２０１６）２４（１１）：２４１４～２４２１頁）。特に、脂肪滴（ＬＤ）の形での筋肉脂肪、内蔵脂肪および肝脂肪の蓄積は、年齢依存性の増加を示す（Ｒｅｉｎｄｅｒｓら、Ｃｕｒｒ Ｏｐｉｎ Ｃｌｉｎ Ｎｕｔｒ Ｍｅｔａｂ Ｃａｒｅ．（２０１７）２０（１）：１１～１５頁）。
【0252】
一部の実施形態では、本開示による体組成の加齢性変化は以下から選択される：筋肉量の加齢性低減、サルコペニア、骨量の加齢性低減、骨粗しょう症および体脂肪量の加齢性増加。一部の実施形態では、本開示による体組成の加齢性変化は以下から選択される：筋肉量の加齢性低減、サルコペニアおよび体脂肪量の加齢性増加。
【0253】
加齢は、血清脂質レベルの増加としばしば関連している。より高齢の成人は、トリグリセリドおよびコレステロールのより高い血清レベルを示し、一部の場合には、高脂血症（例えば、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症または複合的高脂血症（高トリグリセリド血症および高コレステロール血症の組合せ））を示す。高脂血症は次に、例えばアテローム硬化症および心血管疾患と一般的に関連している。
【0254】
高トリグリセリド血症は、例えばＢｅｒｇｌｕｎｄら、Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．（２０１２）９７（９）：２９６９～８９頁に記載され、≧１５０ｍｇ／ｄＬ（≧１．７ｍｍｏｌ／Ｌ）の血中トリグリセリドレベルによって規定される。高コレステロール血症は、例えばＢｈａｔｎａｇａｒら、ＢＭＪ（２００８）３３７：ａ９９３に記載される。ＵＫ ＮＨＳは高コレステロール血症を≧５ｍｍｏｌ／Ｌの血中総コレステロールレベル、または≧３ｍｍｏｌ／Ｌの血中低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）レベルと規定する。ＵＳ ＮＩＨは、高コレステロール血症を≧２４０ｍｇ／ｄＬの血中総コレステロールレベルと規定する。
【0255】
加齢は、例えばＮｇｕｙｅｎら、Ｃｅｌｌ Ｒｅｐ（２０１８）８月７日；２４（６）：１５９７～１６０９頁に記載されるように、肝臓脂肪症としばしば関連している。脂肪症は、細胞／組織／器官の中での脂質の異常な保持を指す。脂肪症は大顆粒または微小胞であってよく、一般的に肝臓に影響を及ぼす。加齢性脂肪症は、加齢性非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）に導くことがある。ＮＡＦＬＤは、例えば、ＢｅｎｅｄｉｃｔおよびＺｈａｎｇ、Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌ．（２０１７）９（１６）：７１５～７３２頁およびＡｌｂｈａｉｓｉら、バージョン１。Ｆ１０００Ｒｅｓ．（２０１８）７：Ｆ１０００ Ｆａｃｕｌｔｙ Ｒｅｖ－７２０でレビューされ、その両方はここに参照により完全に組み込まれる。ＮＡＦＬＤは、肝臓の、特に肝細胞の脂肪症によって特徴付けられる。ＮＡＦＬＤには、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）が含まれる。ＮＡＦＬは、肝細胞損傷の証拠のない、実質の５％より多くを巻き込む肝臓の脂肪症によって特徴付けられる。ＮＡＦＬは、炎症および／または線維症と合併した脂肪症であるＮＡＳＨへ進行することができる（脂肪肝炎）。
【0256】
特定の実施形態では、本開示により処置される疾患／状態は、以下の１つまたは複数を含むかまたはそれによって特徴付けることができる：虚弱、筋肉量の低減、体脂肪量の増加、血清脂質の増加（例えば高脂血症）、血清トリグリセリドの増加（例えば高トリグリセリド血症）、血清コレステロールの増加（例えば高コレステロール血症）、肝臓トリグリセリドの増加（例えば肝臓の脂肪症）および血清β－ヒドロキシブチレートの低減。低減／増加は非病的状態または状態の不在下と比較して決定されることが理解される。
【0257】
本開示の治療的および予防的効果は、例えば細胞、組織／器官／器官系／対象において、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害（すなわちＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗）を通して達成される。
【0258】
ＩＬ－１１は、雄および雌マウスにおいて全ての組織にわたって年齢と共に上方制御される。それはＥＲＫを活性化してリン酸化し、ＬＫＢ１（Ｓｅｒｉｎｅ３２５）の位置で直接的に、およびＰ９０ＲＳＫ（ＬＫＢ１（Ｓｅｒｉｎｅ４２８））を通して間接的にＬＫＢ１を不活性化する。ＬＫＢ１は、本明細書の発明者によるそのデモンストレーションにより、今日まで構成的に活性であってリン酸化によって調節されないと考えられていた。ＩＬ１１によって媒介されるＥＲＫリン酸化およびＬＫＢ１不活性化は、ＡＭＰＫからのＬＫＢ１の解離につながり、ＡＭＰＫは次に脱リン酸化され、不活性化される。不活性のＡＭＰＫは、ｍＴＯＲＣ１を阻害する作用をするＴＳＣ複合体のメンバーをもはや活性化することができない。このように、ｍＴＯＲＣ１は活性化される。活性化ｍＴＯＲＣ１は、Ｐ７０Ｓ６ＫおよびＲＰＳ６をリン酸化して活性化し、タンパク質合成およびタンパク平衡を害する自己貪食の阻害を含む多くの他の加齢促進経路を刺激する。このスキーマは、図１６Ｂで概説される。したがって、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害は、加齢に対して広く到達する大域的な治療的および予防的効果を有する。
【0259】
理論によって束縛されることを望まないが、ＩＬ－１１は、ＬＫＢ１に対するその上流の活性を通してＡＭＰＫを阻害してｍＴＯＲを活性化し、発明者は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、推定上の抗加齢性薬剤メトホルミンおよびラパマイシン併用と同等のまたは優れた効果を有し、ＡＭＰＫ活性を増加させ、ｍＴＯＲ活性を減少させることによって強力な抗加齢作用を発揮することを実証した。
【0260】
したがって、一部の実施形態では、本開示により処置または予防される疾患／状態は、ベースラインの健康な患者と比較して１つまたは複数の影響を受けた組織における増加したＩＬ－１１、減少したＡＭＰＫ、および／または増加したｍＴＯＲの機能、遺伝子および／またはタンパク質の発現もしくは活性と関連付けることができる。一部の実施形態では、本開示により処置または予防される疾患／状態は、１つまたは複数の影響を受けた組織におけるＩＬ－１１の機能獲得突然変異と関連付けることができる。実際、本明細書で概説される「加齢性」疾患／状態または表現型は、一部の実施形態では、１つまたは複数の影響を受けた組織におけるＩＬ－１１の機能獲得突然変異と関連付けることができる。
【0261】
一部の実施形態では、本開示により処置または予防される疾患／状態は、１つまたは複数の加齢の特質であってよいかまたはそれと関連付けることができる。Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎら、２０１３、に記載される「加齢の特質」は、以下からなる：テロメア漸減、ゲノム不安定性、ミトコンドリア機能障害、細胞老化、幹細胞消耗、タンパク平衡の喪失、脱調節された栄養感知、後成的変化および変化した細胞間伝達。一部の実施形態では、本開示により処置または予防される疾患／状態は、脱調節された栄養感知、タンパク平衡の喪失および／または細胞老化から選択される特質であるかまたはそれと関連する。
【0262】
本開示の治療的および予防的方法の有用性は、上に記載される疾患／状態によって引き起こされるか悪化する、または上に記載される疾患／状態が劣った予後を提供する疾患／状態に及ぶ。
【0263】
一部の実施形態では、本開示により処置／予防される疾患／状態は、例えば正常な器官／組織／対象（すなわち、疾患／状態がない場合）と比較したときの、その疾患／状態による影響を受ける器官／組織／対象におけるＩＬ－１１および／またはＩＬ－１１Ｒαの発現（すなわち、遺伝子および／またはタンパク質の発現）の増加によって特徴付けることができる。
【0264】
一部の実施形態では、疾患／状態は、ＩＬ－１１の上方制御、例えば疾患の症状が現れるかまたは起こるかもしれない細胞もしくは組織におけるＩＬ－１１の上方制御、または細胞外ＩＬ－１１もしくはＩＬ－１１Ｒαの上方制御と関連付けることができる。
【0265】
処置は、疾患／状態の発達または進行を低減／遅延／阻止／後退させるのに有効であってよい。処置は、疾患／状態の１つまたは複数の症状の悪化を低減／遅延／阻止／後退させるのに有効であってよい。処置は、疾患／状態の１つまたは複数の症状を向上させるのに有効であってよい。処置は、疾患／状態の１つまたは複数の症状の重症度を低減するのに、および／またはそれを後退させるのに有効であってよい。処置は、疾患／状態の作用を後退させるのに有効であってよい。
【0266】
予防は、疾患／状態の発達の予防、および／または疾患／状態の悪化の予防、例えば、疾患／状態の、例えば後の／慢性ステージへの進行の予防を指すことができる。
本開示の態様および実施形態は、健康寿命を向上／増加させることに関する。本開示は、対象の健康寿命を向上／増加させることを含む方法、およびそのような方法で使用するための物品（薬剤、組成物）を提供する。
本開示の態様および実施形態は、健康寿命を向上／増加させることに関する。本開示は、対象の健康寿命を向上／増加させることを含む方法、およびそのような方法で使用するための物品（薬剤、組成物）を提供する。
【0267】
本明細書で使用されるように、「健康寿命」は、加齢性疾患／状態のない生存期間と規定することができる。したがって、所定の対象の健康寿命は、対象が加齢性疾患／状態（例えば本明細書に記載される加齢性疾患）を有しない期間を指すことができる。対象は、彼らが関連する疾患状態を診断されるまで、所定の疾患／状態を有しないと考えることができる。
【0268】
向上した／増加した／延長された健康寿命を有する対象は、参照対象と比較してより長い期間加齢性疾患／状態のないままであることが理解される。本開示との関連で、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤を投与された対象は、同等の未処置の対象と比較して増加した健康寿命を有する。
【0269】
本開示の一部の実施形態では、対象の健康寿命は、対象が以下のうちの１つを有しない（すなわち診断されない）期間を指すことができる：老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性。
【0270】
あるいは、「健康寿命」は、対象が対象の組織、器官または器官系の機能で著しい加齢性悪化を示さない生存期間と規定することができる。機能の悪化は、加齢性疾患／状態の結果として起こることができる。所定の組織／器官／器官系の機能の悪化を示している対象は、関連する機能の悪化を経験していない同等の対象で観察されるレベルの１倍未満、例えば≦０．９９倍、≦０．９５倍、≦０．９倍、≦０．８５倍、≦０．８倍、≦０．７５倍、≦０．７倍、≦０．６５倍、≦０．６倍、≦０．５５倍、≦０．５倍、≦０．４５倍、≦０．４倍、≦０．３５倍、≦０．３倍、≦０．２５倍、≦０．２倍、≦０．１５倍または≦０．１倍のうちの１つである、関連する機能のレベルを示すことができる。
【0271】
本開示の様々な態様により、本方法は、以下の１つまたは複数（例えば本明細書に記載される疾患／状態の処置／予防との関連で）を含むことができる：
虚弱症状を低減すること；
除脂肪量を増加／維持すること；
除脂肪量の加齢性低減を阻害すること；
体脂肪量を低減／維持すること；
体脂肪量の加齢性増加を阻害すること；
代謝機能の加齢性衰退を低減すること；
加齢性高脂血症を低減すること；
加齢性高トリグリセリド血症を低減すること；
加齢性高コレステロール血症を低減すること；
加齢性脂肪症（例えば肝臓の）を低減すること；
脂肪酸の酸化および／またはケトン生産を増加／維持すること；
β－ヒドロキシブチレートの血清レベルを増加／維持すること；
老化病理的病巣の数／サイズおよび／または重症度を低減すること：
老化病理的病巣の発達を阻害すること；
加齢性線維症を低減すること；
加齢性線維症の発達を阻害すること；
細胞老化を阻害すること；
心機能を増加／維持すること；
心機能の加齢性悪化を阻害すること；
腎機能を増加／維持すること；
腎機能の加齢性悪化を阻害すること；
代謝機能を増加／維持すること；
代謝機能の加齢性悪化を阻害すること；
肝機能を増加／維持すること；
肝機能の加齢性悪化を阻害すること；
肺機能を増加／維持すること；
肺機能の加齢性悪化を阻害すること；
皮膚機能を増加／維持すること；および
皮膚機能の加齢性悪化を阻害すること。
虚弱症状を低減すること；
除脂肪量を増加／維持すること；
除脂肪量の加齢性低減を阻害すること；
体脂肪量を低減／維持すること；
体脂肪量の加齢性増加を阻害すること；
代謝機能の加齢性衰退を低減すること；
加齢性高脂血症を低減すること；
加齢性高トリグリセリド血症を低減すること；
加齢性高コレステロール血症を低減すること；
加齢性脂肪症（例えば肝臓の）を低減すること；
脂肪酸の酸化および／またはケトン生産を増加／維持すること；
β－ヒドロキシブチレートの血清レベルを増加／維持すること；
老化病理的病巣の数／サイズおよび／または重症度を低減すること：
老化病理的病巣の発達を阻害すること；
加齢性線維症を低減すること；
加齢性線維症の発達を阻害すること；
細胞老化を阻害すること；
心機能を増加／維持すること；
心機能の加齢性悪化を阻害すること；
腎機能を増加／維持すること；
腎機能の加齢性悪化を阻害すること；
代謝機能を増加／維持すること；
代謝機能の加齢性悪化を阻害すること；
肝機能を増加／維持すること；
肝機能の加齢性悪化を阻害すること；
肺機能を増加／維持すること；
肺機能の加齢性悪化を阻害すること；
皮膚機能を増加／維持すること；および
皮膚機能の加齢性悪化を阻害すること。
【0272】
投与
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の投与は、好ましくは「治療的に有効である」かまたは「予防的に有効である」量であり、これは対象への利益を示すのに十分である。
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の投与は、好ましくは「治療的に有効である」かまたは「予防的に有効である」量であり、これは対象への利益を示すのに十分である。
【0273】
投与される実際の量、ならびに投与の速度および時間経過は、疾患の性質および重症度ならびに薬剤の性質に依存すると予想される。処置の処方、例えば、用量に関する決定などは、一般開業医および他の医師の責任の範囲内にあり、典型的には、処置しようとする疾患／状態、個々の対象の状態、送達部位、投与方法および医師にとって公知の他の因子を考慮に入れる。上記の技術およびプロトコールの例は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第２０版、２０００、ｐｕｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓに見出すことができる。
【0274】
薬剤の複数の用量を提供することができる。用量の１つまたは複数、または各々は、別の治療剤の同時または連続的投与が付随してもよい。
複数の用量は所定時間間隔によって分離されてもよく、それは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３１日間、または１、２、３、４、５、６、８、１０もしくは１２カ月のうちの１つから選択することができる。例として、用量は７、１４、２１または２８日（プラスマイナス３、２または１日）ごとに１回与えることができる。
複数の用量は所定時間間隔によって分離されてもよく、それは１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０または３１日間、または１、２、３、４、５、６、８、１０もしくは１２カ月のうちの１つから選択することができる。例として、用量は７、１４、２１または２８日（プラスマイナス３、２または１日）ごとに１回与えることができる。
【0275】
治療適用では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤は、好ましくは、薬学的に許容される担体、アジュバント、賦形剤、希釈剤、フィラー、バッファー、保存剤、抗酸化剤、滑沢剤、安定剤、可溶化剤、界面活性剤（例えば、湿潤剤）、マスキング剤、着色剤、着香剤および甘味剤を限定されずに含む、当業者に周知である１つまたは複数の他の薬学的に許容される成分と一緒に医薬または医薬品として製剤化される。
【0276】
本明細書で使用される用語「薬学的に許容される」は、正当な医学的判断の範囲内で、合理的な利益／危険比に見合う、過度の毒性、刺激、アレルギー応答、または他の問題もしくは合併症なしに、問題の対象（例えば、ヒト）の組織との接触における使用にとって好適である、化合物、成分、材料、組成物、剤形などに関する。それぞれの担体、アジュバント、賦形剤などはまた、製剤の他の成分と適合する意味で「許容される」ものでなければならない。
【0277】
好適な担体、アジュバント、賦形剤などは、標準的な薬学の教科書、例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ、Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．、１９９０；およびＨａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ、第２版、１９９４に見出すことができる。
【0278】
製剤を、製薬業界における周知の任意の方法によって調製することができる。そのような方法は、活性化合物を、１つまたは複数の補助成分を構成する担体と会合させるステップを含む。一般に、製剤は、活性化合物を、担体（例えば、液体担体、微細に分割された固体担体など）と均一かつ密接に会合させること、次いで、必要に応じて、生成物を形状化することによって調製される。
【0279】
製剤は、処置する疾患／状態により好適な投与、例えば、局所、非経口、全身、静脈内、動脈内、筋肉内、クモ膜下、眼内、結膜内、皮下、経口、皮内または注射を含むことができる経皮投与経路のために調製することができる。注射用製剤は、選択された薬剤を無菌または等張性の媒体中に含むことができる。局所製剤は、クリームまたはローションとして提供することができる。製剤および投与様式は、薬剤および処置する疾患により選択することができる。
【0280】
ＩＬ－１１およびＩＬ－１１の受容体の検出
本開示の一部の態様および実施形態は、対象から得た試料中のＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の検出に関する。
本開示の一部の態様および実施形態は、対象から得た試料中のＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／もしくはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の検出に関する。
【0281】
一部の態様および実施形態では、本開示は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体のそれぞれをコードするタンパク質またはオリゴヌクレオチドとして）の発現の上方制御（過剰発現）、およびＩＬ－１１の作用を阻害することが可能な薬剤による、またはＩＬ－１１もしくはＩＬ－１１の受容体の発現を阻止もしくは低減することが可能な薬剤による処置への適合性の指標としてのそのような上方制御の検出に関する。
【0282】
上方制御される発現は、所定のタイプの細胞または組織で通常予想されるだろうものより大きいレベルでの発現を含む。上方制御は、細胞または組織中の関連する因子の発現レベルを測定することによって決定することができる。対象からの細胞または組織試料中の発現レベル、および関連因子の発現の参照レベル、例えば同じかまたは対応する細胞または組織タイプのための関連因子の発現の正常レベルを表す値または値の範囲の間で比較することができる。一部の実施形態では、参照レベルは、対照試料で、例えば健康対象からのまたは同じ対象の健康組織からの対応する細胞または組織で、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現を検出することによって決定することができる。一部の実施形態では、参照レベルは標準曲線またはデータセットから得ることができる。
【0283】
発現レベルは絶対比較のために定量化することができるか、または相対比較を行うことができる。
一部の実施形態では、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の上方制御は、試験試料中の発現レベルが参照レベルの少なくとも１．１倍であるとき、存在すると考えることができる。より好ましくは、発現レベルは、参照レベルのそれの少なくとも１．２、少なくとも１．３、少なくとも１．４、少なくとも１．５、少なくとも１．６、少なくとも１．７、少なくとも１．８、少なくとも１．９、少なくとも２．０、少なくとも２．１、少なくとも２．２、少なくとも２．３、少なくとも２．４少なくとも２．５、少なくとも２．６、少なくとも２．７、少なくとも２．８、少なくとも２．９、少なくとも３．０、少なくとも３．５、少なくとも４．０、少なくとも５．０、少なくとも６．０、少なくとも７．０、少なくとも８．０、少なくとも９．０または少なくとも１０．０倍のうちの１つから選択することができる。
一部の実施形態では、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の上方制御は、試験試料中の発現レベルが参照レベルの少なくとも１．１倍であるとき、存在すると考えることができる。より好ましくは、発現レベルは、参照レベルのそれの少なくとも１．２、少なくとも１．３、少なくとも１．４、少なくとも１．５、少なくとも１．６、少なくとも１．７、少なくとも１．８、少なくとも１．９、少なくとも２．０、少なくとも２．１、少なくとも２．２、少なくとも２．３、少なくとも２．４少なくとも２．５、少なくとも２．６、少なくとも２．７、少なくとも２．８、少なくとも２．９、少なくとも３．０、少なくとも３．５、少なくとも４．０、少なくとも５．０、少なくとも６．０、少なくとも７．０、少なくとも８．０、少なくとも９．０または少なくとも１０．０倍のうちの１つから選択することができる。
【0284】
発現レベルは、いくつかの公知のｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ技術の１つ、例えばＰＣＲをベースとしたアッセイ、ｉｎ ｓｉｔｕハイブリダイゼーションアッセイ、フローサイトメトリーアッセイ、免疫学的または免疫組織化学的アッセイによって決定することができる。
【0285】
例として、好適な技術は、試料をＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体に結合することが可能な薬剤と接触させ、薬剤およびＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の複合体の形成を検出することによって試料中のＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体のレベルを検出する方法を含む。薬剤は任意の好適な結合性分子、例えば抗体、ポリペプチド、ペプチド、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは小分子であってよく、形成される複合体の検出、例えば可視化を許すために場合により標識されてもよい。それらの検出のための好適な標識および手段は当業者に周知であり、蛍光標識（例えばフルオレセイン、ローダミン、エオシンおよびＮＤＢ、緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）、ユウロピウム（Ｅｕ）、テルビウム（Ｔｂ）およびサマリウム（Ｓｍ）などの希土類のキレート、テトラメチルローダミン、テキサスレッド、４－メチルウンベリフェロン、７－アミノ－４－メチルクマリン、Ｃｙ３、Ｃｙ５）、同位体マーカー、放射性同位体（例えば３２Ｐ、３３Ｐ、３５Ｓ）、化学発光標識（例えばアクリジニウムエステル、ルミノール、イソルミノール）、酵素（例えばペルオキシダーゼ、アルカリ性ホスファターゼ、グルコースオキシダーゼ、β－ガラクトシダーゼ、ルシフェラーゼ）、抗体、リガンドおよび受容体が含まれる。検出技術は当業者に周知であり、標識剤に対応するように選択することができる。好適な技術には、オリゴヌクレオチドタグのＰＣＲ増幅、質量分析、例えばレポータータンパク質による基質の酵素変換後の蛍光もしくは色の検出、または放射能検出が含まれる。
【0286】
アッセイは、試料中のＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の量を定量化するように構成することができる。試験試料からのＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の定量化された量は参照値と比較することができ、この比較は、選択された程度の統計的有意性まで参照値のそれより高いかまたはより低いＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の量を試験試料が含有するかどうか決定するために使用することができる。
【0287】
検出されたＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の定量化は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体をコードする遺伝子の上方もしくは下方制御または増幅を決定するために使用することができる。試験試料が線維性細胞を含有する場合、そのような上方制御、下方制御または増幅は、何らかの統計的有意差が存在するかどうか決定するために、参照値と比較することができる。
【0288】
対象から得られる試料は、いかなる種類のものであってよい。生体試料は、任意の組織または体液、例えば血液試料、血液由来の試料、血清試料、リンパ試料、精液試料、唾液試料、滑液試料からとることができる。血液由来の試料は、患者血液の選択された分画、例えば選択された細胞含有分画または血漿もしくは血清分画であってよい。試料は、組織試料または生検；または対象から単離された細胞を含むことができる。試料は、公知の技術、例えば生検または針吸引によって収集することができる。試料は、ＩＬ－１１発現レベルの以降の決定のために保存および／または処理することができる。
【0289】
試料は、試料がとられた対象におけるＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の上方制御を決定するために使用することができる。
一部の好ましい実施形態では、試料は本明細書に記載される疾患／状態による影響を受ける組織／器官からとられる組織試料、例えば生検であってよい。試料は、細胞を含有することができる。対象は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の上方制御されたレベルを対象が有するとの決定に基づいて、本開示による療法／予防のために選択することができる。ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の上方制御された発現は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置のために好適である、本明細書に記載される疾患／状態のマーカーの役割をすることができる。
一部の好ましい実施形態では、試料は本明細書に記載される疾患／状態による影響を受ける組織／器官からとられる組織試料、例えば生検であってよい。試料は、細胞を含有することができる。対象は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の上方制御されたレベルを対象が有するとの決定に基づいて、本開示による療法／予防のために選択することができる。ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の上方制御された発現は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置のために好適である、本明細書に記載される疾患／状態のマーカーの役割をすることができる。
【0290】
上方制御は、所定の組織、または所定の組織からの選択された細胞においてであってよい。ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現の上方制御は、循環する流体、例えば血液中で、または血液由来の試料で決定することもできる。上方制御は、細胞外ＩＬ－１１またはＩＬ－１１Ｒαのものであってよい。一部の実施形態では、発現は局所的に、または全身的に上方制御されてもよい。
【0291】
選択の後、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤を対象に投与することができる。
診断および予後診断
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の上方制御の検出は、本明細書に記載される疾患／状態を診断し、本明細書に記載される疾患／状態を起こす危険がある対象を同定する方法で、およびＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置への対象の応答を予後診断または予測する方法で使用することもできる。
診断および予後診断
ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体（例えば、ＩＬ－１１Ｒα、ｇｐ１３０またはＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０を含有する複合体）の発現の上方制御の検出は、本明細書に記載される疾患／状態を診断し、本明細書に記載される疾患／状態を起こす危険がある対象を同定する方法で、およびＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置への対象の応答を予後診断または予測する方法で使用することもできる。
【0292】
「発達する」、「発達」および「発達する」の他の形は、障害／疾患の開始、または障害／疾患の継続もしくは進行を指すことができる。
一部の実施形態では、対象は、例えば、対象の体もしくは対象の体の選択される細胞／組織における疾患／状態の指標となる他の症状の存在に基づいて、本明細書に記載される疾患／状態を有することもしくは患っていることが疑われてもよいか、または例えば遺伝的素因、もしくは疾患／状態のリスク因子であることが知られている環境条件への曝露のために、疾患／状態を起こす危険があると考えることができる。ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現の上方制御の決定は、診断または疑われる診断を確定することができるか、または対象が疾患／状態を起こす危険があることを確認することができる。この決定は、疾患／状態または素因を、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置に好適なものであると診断することもできる。
一部の実施形態では、対象は、例えば、対象の体もしくは対象の体の選択される細胞／組織における疾患／状態の指標となる他の症状の存在に基づいて、本明細書に記載される疾患／状態を有することもしくは患っていることが疑われてもよいか、または例えば遺伝的素因、もしくは疾患／状態のリスク因子であることが知られている環境条件への曝露のために、疾患／状態を起こす危険があると考えることができる。ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現の上方制御の決定は、診断または疑われる診断を確定することができるか、または対象が疾患／状態を起こす危険があることを確認することができる。この決定は、疾患／状態または素因を、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置に好適なものであると診断することもできる。
【0293】
このように、本明細書に記載される疾患／状態を有するかまたは有することが疑われる対象のために予後診断を提供する方法であって、対象から得られた試料中でＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現が上方制御されるかどうか決定すること、および、この決定に基づいてＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による対象の処置のための予後診断を提供することを含む方法を提供することができる。
【0294】
一部の態様では、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置への対象の応答の診断方法またはそれを予後診断もしくは予測する方法は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現の決定を必要としないが、発現または活性の上方制御を予測する対象中の遺伝因子の決定に基づくことができる。そのような遺伝因子は、ＩＬ－１１、ＩＬ－１１Ｒαおよび／またはｇｐ１３０における、遺伝子突然変異、一塩基多型（ＳＮＰ）または遺伝子増幅の決定を含むことができ、それらは発現もしくは活性および／またはＩＬ－１１媒介シグナル伝達の上方制御と相関し、および／またはそれを予測する。疾患状態への素因または処置への応答を予測する遺伝因子の使用は当技術分野で公知であり、例えば、Ｐｅｔｅｒ Ｓｔａｒｋｅｌ、Ｇｕｔ ２００８；５７：４４０～４４２頁；Ｗｒｉｇｈｔら、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．２０１０年３月、第３０巻６号１４１１～１４２０頁、を参照する。
【0295】
遺伝因子は、ＰＣＲをベースとしたアッセイ、例えば定量的ＰＣＲ、競合的ＰＣＲを含む当業者に公知である方法によって分析することができる。例えば対象から得られる試料で遺伝因子の存在を決定することによって、診断を確定することができ、および／または本明細書に記載される疾患／状態を起こす危険があると対象を分類することができ、および／またはＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置に好適であると対象を特定することができる。
【0296】
一部の方法は、ＩＬ－１１の分泌または本明細書に記載される疾患／状態の発達への感受性に関連した１つまたは複数のＳＮＰの存在の決定を含むことができる。ＳＮＰは通常二対立遺伝子であり、したがって、当業者に公知であるいくつかの従来のアッセイの１つを使用して容易に決定することができる（例えばＡｎｔｈｏｎｙ Ｊ．Ｂｒｏｏｋｅｓ．Ｔｈｅ ｅｓｓｅｎｃｅ ｏｆ ＳＮＰｓ．Ｇｅｎｅ 第２３４巻、２号、１９９９年７月８日、１７７～１８６頁；Ｆａｎら、Ｈｉｇｈｌｙ Ｐａｒａｌｌｅｌ ＳＮＰ Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ．Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂ Ｓｙｍｐ Ｑｕａｎｔ Ｂｉｏｌ ２００３．６８：６９～７８頁；Ｍａｔｓｕｚａｋｉら、Ｐａｒａｌｌｅｌ Ｇｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｏｆ Ｏｖｅｒ １０，０００ ＳＮＰｓ ｕｓｉｎｇ ｏｎｅ－ｐｒｉｍｅｒ ａｓｓａｙ ｏｎ ｈｉｇｈ－ｄｅｎｓｉｔｙ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ ａｒｒａｙ．Ｇｅｎｏｍｅ Ｒｅｓ．２００４．１４：４１４～４２５頁を参照する）。
【0297】
本方法は、どのＳＮＰ対立遺伝子が対象から得られた試料中に存在するか決定することを含むことができる。一部の実施形態では、劣性対立遺伝子の存在の決定は、増加したＩＬ－１１分泌または本明細書に記載される疾患／状態の発達への感受性に関連していてもよい。
【0298】
したがって、本開示の一態様では、対象をスクリーニングする方法であって、以下を含む方法が提供される：
対象から核酸試料を得ること；
試料中のＷＯ２０１７／１０３１０８Ａ１（本明細書に参照により組み込まれる）の図３３、図３４または図３５に掲載されるＳＮＰの１つまたは複数、または掲載されるＳＮＰの１つとｒ２≧０．８で連鎖不均衡にあるＳＮＰの多形性ヌクレオチド位置にどの対立遺伝子が存在するか決定すること。
対象から核酸試料を得ること；
試料中のＷＯ２０１７／１０３１０８Ａ１（本明細書に参照により組み込まれる）の図３３、図３４または図３５に掲載されるＳＮＰの１つまたは複数、または掲載されるＳＮＰの１つとｒ２≧０．８で連鎖不均衡にあるＳＮＰの多形性ヌクレオチド位置にどの対立遺伝子が存在するか決定すること。
【0299】
決定するステップは、劣性対立遺伝子が試料中の選択された多形性ヌクレオチド位置に存在するかどうかについて決定することを含むことができる。それは、０、１または２つの劣性対立遺伝子が存在するかについて決定することを含むことができる。
【0300】
スクリーニング方法は、本明細書に記載される疾患／状態の発達への対象の感受性を決定するための方法、または本明細書に記載される診断もしくは予後診断の方法であってよいかもしくはその一部を形成することができる。
【0301】
本方法は、例えば対象が多形性ヌクレオチド位置で劣性対立遺伝子を有すると決定される場合、本明細書に記載される疾患／状態を起こすことへの感受性またはその危険の増加を有すると対象を特定するステップをさらに含むことができる。本方法は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置のために対象を選択するステップ、および／または、対象において本明細書に記載される疾患／状態のための処置を提供するために、または対象において疾患／状態の発達もしくは進行を阻止するために、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤を対象に投与するステップをさらに含むことができる。
【0302】
一部の実施形態では、本明細書に記載される疾患／状態を診断し、本明細書に記載される疾患／状態を起こす危険がある対象を同定する方法、およびＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置への対象の応答を予後診断または予測する方法は、ＩＬ－１１またはＩＬ－１１の受容体の発現の上方制御の検出でも遺伝因子の検出でもない指標を用いる。
【0303】
一部の実施形態では、本明細書に記載される疾患／状態を診断し、疾患／状態を起こす危険がある対象を同定する方法、およびＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤による処置への対象の応答を予後診断または予測する方法は、疾患／状態の１つまたは複数の指標の検出、測定および／または同定に基づく。
【0304】
診断または予後診断の方法は、対象から得られる試料でｉｎ ｖｉｔｒｏで、または対象から得られる試料のプロセシングに続いて実行することができる。試料が収集されると、診断または予後診断のｉｎ ｖｉｔｒｏ方法を実行するために患者の存在は必要でなく、したがって、この方法はヒトの体でも動物の体でも実践されないものであってよい。本明細書で前記のように、対象から得られる試料はいかなる種類のものであってよい。
【0305】
診断もしくは予後診断の精度を増強するために、またはここで記載される試験を使用して得られる結果を確認するために、他の診断または予後診断試験をここで記載されるものと併用することができる。
【0306】
対象
対象は、動物またはヒトであってもよい。対象は、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトである。対象は、非ヒト哺乳動物であってよいが、より好ましくは、ヒトである。対象は、雄性または雌性であってもよい。対象は、患者であってもよい。患者は、本明細書に記載の疾患／状態を有してもよい。
対象は、動物またはヒトであってもよい。対象は、好ましくは哺乳動物、より好ましくはヒトである。対象は、非ヒト哺乳動物であってよいが、より好ましくは、ヒトである。対象は、雄性または雌性であってもよい。対象は、患者であってもよい。患者は、本明細書に記載の疾患／状態を有してもよい。
【0307】
対象は、本開示による治療的／予防的介入を必要とする対象であってよい。対象は、本開示による治療的／予防的介入から恩恵を受ける対象であってよい。
対象は、処置を必要とする本明細書に記載される疾患／状態を診断されていてもよく、そのような疾患／状態を有することが疑われてもよく、またはそのような疾患／状態を起こす危険があってもよい。
対象は、処置を必要とする本明細書に記載される疾患／状態を診断されていてもよく、そのような疾患／状態を有することが疑われてもよく、またはそのような疾患／状態を起こす危険があってもよい。
【0308】
本開示による実施形態では、対象は好ましくはヒト対象である。本開示による実施形態では、本明細書に記載される疾患／状態のある特定のマーカーのための特徴付けに基づいて、本方法による処置のために対象を選択することができる。
【0309】
配列同一性
２つ以上のアミノ酸または核酸配列間の同一性パーセントを決定するためのペアワイズおよびマルチ配列アラインメントを、例えば、ＣｌｕｓｔａｌＯｍｅｇａ（Ｓｏｄｉｎｇ，Ｊ．２００５、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２１、９５１～９６０頁）、Ｔ－ｃｏｆｆｅｅ（Ｎｏｔｒｅｄａｍｅら、２０００、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２０００）３０２、２０５～２１７頁）、Ｋａｌｉｇｎ（ＬａｓｓｍａｎｎおよびＳｏｎｎｈａｍｍｅｒ、２００５、ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ、６（２９８））およびＭＡＦＦＴ（ＫａｔｏｈおよびＳｔａｎｄｌｅｙ、２０１３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ
ａｎｄ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ、３０（４）、７７２～７８０頁）ソフトウェアなどの公共的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、当業者には公知の様々な方法で達成することができる。そのようなソフトウェアを使用する場合、好ましくは、例えば、ギャップペナルティおよび伸長ペナルティに関するデフォルトパラメータが使用される。
２つ以上のアミノ酸または核酸配列間の同一性パーセントを決定するためのペアワイズおよびマルチ配列アラインメントを、例えば、ＣｌｕｓｔａｌＯｍｅｇａ（Ｓｏｄｉｎｇ，Ｊ．２００５、Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ２１、９５１～９６０頁）、Ｔ－ｃｏｆｆｅｅ（Ｎｏｔｒｅｄａｍｅら、２０００、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．（２０００）３０２、２０５～２１７頁）、Ｋａｌｉｇｎ（ＬａｓｓｍａｎｎおよびＳｏｎｎｈａｍｍｅｒ、２００５、ＢＭＣ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ、６（２９８））およびＭＡＦＦＴ（ＫａｔｏｈおよびＳｔａｎｄｌｅｙ、２０１３、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ
ａｎｄ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ、３０（４）、７７２～７８０頁）ソフトウェアなどの公共的に利用可能なコンピュータソフトウェアを使用して、当業者には公知の様々な方法で達成することができる。そのようなソフトウェアを使用する場合、好ましくは、例えば、ギャップペナルティおよび伸長ペナルティに関するデフォルトパラメータが使用される。
【0310】
配列
【0311】
【表2-1】
【0312】
【表2-2】
【0313】
【表2-3】
【0314】
番号付けされた段落
以下の番号付けされた段落（ｐａｒａ）は、本発明に関連して企図される特徴および特徴の組合せのさらなる記述を提供する：
１．加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
２．加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
３．加齢性の疾患／状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
４．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
５．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
６．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を、それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
７．対象が、細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態を有する対象である、段落４による使用のための薬剤、段落５による使用、または段落６による方法。
８．細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態が加齢性の疾患または状態である、段落７による使用のための薬剤、使用または方法。
９．細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態が：老人病症候群、アルツハイマー病、心血管疾患、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病またはサルコペニアから選択される、段落７または段落８による使用のための薬剤、使用または方法。
１０．老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される、加齢性の疾患または状態を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１１．老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される、加齢性疾患または状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１２．加齢性の疾患または状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を、老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される加齢性疾患または状態を有する対象に投与するステップを含む方法。
１３．虚弱を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１４．虚弱を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１５．虚弱を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
１６．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１７．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１８．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
１９．体組成の加齢性変化が、筋肉量の低減、骨量の低減、体脂肪量の増加、軟骨の変性、腎臓の変化、呼吸系の器官の変化、消化器系の器官の変化、膀胱の変化、歯および／または歯肉の変性、脱毛、皮膚脆弱性、聴覚系の器官の変化および生殖器官の変化：から選択される、段落１６～１８のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２０．対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
２１．対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
２２．対象の健康寿命を延ばす方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
２３．薬剤が、抗体もしくはその抗原結合性断片、ポリペプチド、ペプチド、核酸、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは小分子：からなる群から選択される、段落１～２２のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２４．薬剤が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）のインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）への結合を阻止または低減することが可能な薬剤である、段落１～２３のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２５．薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）に結合することが可能である、段落１～２４のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２６．薬剤が抗体またはその抗原結合性断片である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２７．薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である、段落１～２６のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２８．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号３４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号３５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号３６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号３８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号３９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２７のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２９．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号４０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号４３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号４４のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２７のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３０．薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である、段落１～２６のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３１．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号４６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号４９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号５０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２６または段落３０のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３２．薬剤がＩＬ－１１のデコイ受容体である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３３．ＩＬ－１１のデコイ受容体が：（ｉ）ｇｐ１３０のサイトカイン結合性モジュールに対応するアミノ酸配列、および（ｉｉ）ＩＬ－１１Ｒαのサイトカイン結合性モジュールに対応するアミノ酸配列を含む、段落３２による使用のための薬剤、使用または方法。
３４．薬剤がＩＬ－１１の競合的阻害剤である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３５．薬剤がＩＬ－１１突然変異タンパク質である、段落３４による使用のための薬剤、使用または方法。
３６．ＩＬ－１１突然変異タンパク質がＷ１４７Ａである、段落３５による使用のための薬剤、使用または方法。
３７．薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現を阻止または低減することが可能である、段落１～２３のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３８．薬剤が、ＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、段落３７による使用のための薬剤、使用または方法。
３９．ＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能なアンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号１２、１３、１４または１５の配列を含むＩＬ１１を標的にするｓｉＲＮＡである、段落３８による使用のための薬剤、使用または方法。
４０．薬剤がＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、段落３７による使用のための薬剤、使用または方法。
４１．ＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能なアンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号１６、１７、１８または１９の配列を含むＩＬ１１ＲＡを標的にするｓｉＲＮＡである、段落４０による使用のための薬剤、使用または方法。
４２．方法が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現が上方制御される対象に薬剤を投与することを含む、段落１～４１のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
以下の番号付けされた段落（ｐａｒａ）は、本発明に関連して企図される特徴および特徴の組合せのさらなる記述を提供する：
１．加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
２．加齢性疾患／状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
３．加齢性の疾患／状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
４．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
５．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
６．それを必要とする対象において細胞老化を阻害する方法および／または老化細胞の活性を阻害する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を、それを必要とする対象に投与するステップを含む方法。
７．対象が、細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態を有する対象である、段落４による使用のための薬剤、段落５による使用、または段落６による方法。
８．細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態が加齢性の疾患または状態である、段落７による使用のための薬剤、使用または方法。
９．細胞老化によって特徴付けられる疾患または状態が：老人病症候群、アルツハイマー病、心血管疾患、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病またはサルコペニアから選択される、段落７または段落８による使用のための薬剤、使用または方法。
１０．老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される、加齢性の疾患または状態を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１１．老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される、加齢性疾患または状態を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１２．加齢性の疾患または状態を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を、老人病症候群、アルツハイマー病、がん、高脂血症、高トリグリセリド血症、高コレステロール血症、脂肪症（例えば肝臓の）、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝（ＮＡＦＬ）および非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、心血管疾患、高血圧（例えば収縮期、拡張期）、低減または保存された駆出分画による心不全、腎臓病（例えば慢性腎臓病）、アテローム硬化症、高血圧、黄斑症、加齢性黄斑変性症（ＡＭＤ）、白内障、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、関節炎、骨関節炎、骨減少症、骨粗しょう症、パーキンソン病、歯周炎、慢性関節リウマチ、真性糖尿病、ＩＩ型真性糖尿病、慢性肝疾患、サルコペニア、便秘、不能症、膣乾燥、脱毛、皮膚疾患および皮膚脆弱性：から選択される加齢性疾患または状態を有する対象に投与するステップを含む方法。
１３．虚弱を処置または予防する方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１４．虚弱を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１５．虚弱を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
１６．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するためのインターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
１７．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
１８．体組成の加齢性変化を処置または予防する方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
１９．体組成の加齢性変化が、筋肉量の低減、骨量の低減、体脂肪量の増加、軟骨の変性、腎臓の変化、呼吸系の器官の変化、消化器系の器官の変化、膀胱の変化、歯および／または歯肉の変性、脱毛、皮膚脆弱性、聴覚系の器官の変化および生殖器官の変化：から選択される、段落１６～１８のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２０．対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤。
２１．対象の健康寿命を延ばす方法で使用するための医薬の製造における、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の使用。
２２．対象の健康寿命を延ばす方法であって、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）媒介シグナル伝達を阻害することが可能な薬剤の治療的または予防的に有効な量を対象に投与するステップを含む方法。
２３．薬剤が、抗体もしくはその抗原結合性断片、ポリペプチド、ペプチド、核酸、オリゴヌクレオチド、アプタマーまたは小分子：からなる群から選択される、段落１～２２のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２４．薬剤が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）のインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）への結合を阻止または低減することが可能な薬剤である、段落１～２３のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２５．薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）に結合することが可能である、段落１～２４のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２６．薬剤が抗体またはその抗原結合性断片である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２７．薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である、段落１～２６のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２８．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号３４のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号３５のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号３６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号３７のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号３８のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号３９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２７のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
２９．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号４０のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４１のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４２のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号４３のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号４４のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号４５のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２７のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３０．薬剤がＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗ＩＬ－１１Ｒα抗体アンタゴニスト、またはその抗原結合性断片である、段落１～２６のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３１．抗体または抗原結合性断片が：
（ｉ）以下のＣＤＲを組み込む重鎖可変（ＶＨ）領域：
配列番号４６のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ１
配列番号４７のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ２
配列番号４８のアミノ酸配列を有するＨＣ－ＣＤＲ３；および
（ｉｉ）以下のＣＤＲを組み込む軽鎖可変（ＶＬ）領域：
配列番号４９のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ１
配列番号５０のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ２
配列番号５１のアミノ酸配列を有するＬＣ－ＣＤＲ３
を含む、段落１～２６または段落３０のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３２．薬剤がＩＬ－１１のデコイ受容体である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３３．ＩＬ－１１のデコイ受容体が：（ｉ）ｇｐ１３０のサイトカイン結合性モジュールに対応するアミノ酸配列、および（ｉｉ）ＩＬ－１１Ｒαのサイトカイン結合性モジュールに対応するアミノ酸配列を含む、段落３２による使用のための薬剤、使用または方法。
３４．薬剤がＩＬ－１１の競合的阻害剤である、段落１～２５のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３５．薬剤がＩＬ－１１突然変異タンパク質である、段落３４による使用のための薬剤、使用または方法。
３６．ＩＬ－１１突然変異タンパク質がＷ１４７Ａである、段落３５による使用のための薬剤、使用または方法。
３７．薬剤がインターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはインターロイキン１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現を阻止または低減することが可能である、段落１～２３のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
３８．薬剤が、ＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、段落３７による使用のための薬剤、使用または方法。
３９．ＩＬ－１１の発現を阻止または低減することが可能なアンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号１２、１３、１４または１５の配列を含むＩＬ１１を標的にするｓｉＲＮＡである、段落３８による使用のための薬剤、使用または方法。
４０．薬剤がＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能であるアンチセンスオリゴヌクレオチドである、段落３７による使用のための薬剤、使用または方法。
４１．ＩＬ－１１Ｒαの発現を阻止または低減することが可能なアンチセンスオリゴヌクレオチドが、配列番号１６、１７、１８または１９の配列を含むＩＬ１１ＲＡを標的にするｓｉＲＮＡである、段落４０による使用のための薬剤、使用または方法。
４２．方法が、インターロイキン１１（ＩＬ－１１）またはＩＬ－１１の受容体（ＩＬ－１１Ｒ）の発現が上方制御される対象に薬剤を投与することを含む、段落１～４１のいずれか１つによる使用のための薬剤、使用または方法。
【0315】
本開示は、記載される態様および好ましい特徴の組合せを含むが、そのような組合せが明らかに許容されないかまたは明白に回避される場合を除く。
前述の記載、または以下の請求項、または添付図において開示され、それらの特異的形で、または開示される機能を実行するための手段、または開示される結果を得るための方法もしくはプロセスで適宜表される特徴は、別々に、またはそのような特徴の任意の組合せで、本開示をその多様な形で実現するために利用することができる。
前述の記載、または以下の請求項、または添付図において開示され、それらの特異的形で、または開示される機能を実行するための手段、または開示される結果を得るための方法もしくはプロセスで適宜表される特徴は、別々に、またはそのような特徴の任意の組合せで、本開示をその多様な形で実現するために利用することができる。
【0316】
いかなる疑いも避けるために、本明細書で提供される任意の理論的な説明は、読者の理解を向上させるために提供される。発明者は、これらの理論的説明のいずれによっても縛られることを望まない。
【0317】
本明細書で使用されるいずれのセクション見出しも構成上の目的のためだけであり、記載される対象発明を限定するものと解釈されるべきでない。
後続の請求項を含むこの明細書全体で、文脈が別途要求しない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」ならびに「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの変異形は、明示される整数もしくはステップ、または整数もしくはステップの群が含まれるが、いかなる他の整数もしくはステップも整数もしくはステップの群も排除されないことを意味するものと理解される。
後続の請求項を含むこの明細書全体で、文脈が別途要求しない限り、単語「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」ならびに「含む（ｉｎｃｌｕｄｅ）」、ならびに「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」および「含んでいる（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」などの変異形は、明示される整数もしくはステップ、または整数もしくはステップの群が含まれるが、いかなる他の整数もしくはステップも整数もしくはステップの群も排除されないことを意味するものと理解される。
【0318】
本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、本文が別途明確に記述しない限り、複数の指示対象を含むことに留意する必要がある。範囲は、本明細書では、「約」１つの特定の値から、および／または「約」別の特定の値までと表すことができる。そのような範囲が表される場合、別の実施形態は、一方の特定の値から、および／または他方の特定の値までを含む。同様に、値が近似値として表される場合、先行詞「約」の使用により、特定の値は別の実施形態を形成することが理解されると予想される。数値に関する用語「約」は任意選択であり、例えば＋／－１０％を意味する。
【0319】
本明細書に開示される方法はｉｎ ｖｉｔｒｏ、ｅｘ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで実行すること、または生成物が存在することができる。用語「ｉｎ ｖｉｔｒｏ」は、検査室条件または培養での材料、生体物質、細胞および／または組織による実験を包含するものであるが、用語「ｉｎ ｖｉｖｏ」は、インタクトな多細胞生物体による実験および手順を包含するものである。一部の実施形態では、ｉｎ ｖｉｖｏで実行される方法は、非ヒト動物で実行することができる。「Ｅｘ ｖｉｖｏ」は生物体の外、例えばヒトまたは動物体の外に存在するか生じ、生物体からとられる組織（例えば器官全体）または細胞の上にあってもよい事物を指す。
【0320】
核酸配列が本明細書で開示される場合、その逆相補体も明白に企図される。
標準の分子生物学技術については、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｊ．、Ｒｕｓｓｅｌ、Ｄ．Ｗ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ．第３版２００１、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓを参照する。
標準の分子生物学技術については、Ｓａｍｂｒｏｏｋ、Ｊ．、Ｒｕｓｓｅｌ、Ｄ．Ｗ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ．第３版２００１、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓを参照する。
【0321】
本開示の態様および実施形態は、添付図に関してこれから議論される。さらなる態様および実施形態が、当業者に明らかになる。このテキストで指摘される全ての文書は、参照により本明細書に完全に組み込まれる。本開示は下記の例示的な実施形態と共に記載されているが、この開示を考慮して、多くの同等の修正変更が当業者に明らかになる。したがって、上で示される本開示の例示的な実施形態は、例示的であって限定するものでないとみなされる。本開示の精神および範囲から逸脱することなく、記載される実施形態に様々な変更を加えることができる。
【0322】
本開示の原理を例示する実施形態および実験は、添付図に関してこれから議論される。
【実施例】
【0323】
以下の実施例で、発明者はＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗が、虚弱を含む加齢性疾患ならびに体組成の加齢性変化の処置および予防のために有益であることを実証する。
実施例１：虚弱および体組成の加齢性変化を処置するＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストの能力の分析
発明者は、中和抗体を使用してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが、老齢のマウスで虚弱および体組成の加齢性変化を低減することができるかどうかについて調査しようと追求した。
実施例１：虚弱および体組成の加齢性変化を処置するＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストの能力の分析
発明者は、中和抗体を使用してＩＬ－１１媒介シグナル伝達を阻害することが、老齢のマウスで虚弱および体組成の加齢性変化を低減することができるかどうかについて調査しようと追求した。
【0324】
４６週齢Ｃ５７Ｂ１／６ＪマウスをＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから得、Ｘ２０３またはアイソタイプ対照ＩｇＧ抗体を受けるように１：１にランダム化した。
Ｘ２０３はマウス抗マウスＩＬ－１１ ＩｇＧであり、例えば、Ｎｇら、Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１（５１１）ｐｉｉ：ｅａａｗ１２３７（Ｎｇら、「ＩＬ－１１ ｉｓ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．」ｂｉｏＲｘｉｖ ３３６５３７；ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／３３６５３７、として公開されてもいる）に記載される。Ｘ２０３は、「Ｅｎｘ２０３」とも呼ばれる。Ｘ２０３は、ＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９２（本開示の配列番号２２）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９４（本開示の配列番号２３）によるＶＬ領域を含む。
Ｘ２０３はマウス抗マウスＩＬ－１１ ＩｇＧであり、例えば、Ｎｇら、Ｓｃｉ Ｔｒａｎｓｌ Ｍｅｄ．（２０１９）１１（５１１）ｐｉｉ：ｅａａｗ１２３７（Ｎｇら、「ＩＬ－１１ ｉｓ ａ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｔａｒｇｅｔ ｉｎ ｉｄｉｏｐａｔｈｉｃ ｐｕｌｍｏｎａｒｙ ｆｉｂｒｏｓｉｓ．」ｂｉｏＲｘｉｖ ３３６５３７；ｄｏｉ：ｈｔｔｐｓ：／／ｄｏｉ．ｏｒｇ／１０．１１０１／３３６５３７、として公開されてもいる）に記載される。Ｘ２０３は、「Ｅｎｘ２０３」とも呼ばれる。Ｘ２０３は、ＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９２（本開示の配列番号２２）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８２Ａ１の配列番号９４（本開示の配列番号２３）によるＶＬ領域を含む。
【0325】
５５週齢（ヒトの約４５歳（すなわち中年）に相当）から１１０週齢（ヒトの約７５歳に相当）まで、マウスは、Ｘ２０３またはアイソタイプマッチ対照ＩｇＧの４０ｍｇ／ｋｇを３週ごとに腹腔内注射を通して投与された。
【0326】
１１０週齢時に、ここに参照により完全に組み込まれる、Ｒｉｚｚｏら、Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｔｏｃ Ｍｏｕｓｅ Ｂｉｏｌ．（２０１８）８（２）：ｅ４５に記載されるマウス虚弱指数を使用して、虚弱を調査した。このプロトコールでは、マウスは重症度のレベルに基づいて各々０、０．５または１と評価される、２７の異なる特徴の有無および重症度について個々に観察され、評価される。虚弱指数スコアは、全ての測定の累積スコアとして計算される。虚弱の別個の測定として、コア体温を記録したが、その理由は、マウスではコア体温が虚弱の増加に伴って低下することが知られているからである（Ｒｅｙｎｏｌｄｓら、Ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ Ａｇｅｉｎｇ ａｎｄ Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ（１９８５）３０（２）：１４３～５２頁）。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
【0327】
結果は、図１および２に示す。Ｘ２０３による処置は虚弱指数の著しい低減を引き起こすことが見出され、著しくより高い体温とも関連付けられた。
虚弱に関する以前の研究（例えば、Ｓａｎｃｈｅｚ－Ａｌａｖｅｚら（２０１１）Ａｇｅ ３３（１）：８９～９９頁）により、雄マウスは雌マウスと比較して低い体温を有することも見出された。
虚弱に関する以前の研究（例えば、Ｓａｎｃｈｅｚ－Ａｌａｖｅｚら（２０１１）Ａｇｅ ３３（１）：８９～９９頁）により、雄マウスは雌マウスと比較して低い体温を有することも見出された。
【0328】
マウスは、ベースライン（５５週齢）および１０８～１０９週時にエコーＭＲＩによる体組成評価も受けた。これは、Ｘ２０３およびＩｇＧ対照処置群における体脂肪量および除脂肪（筋肉）質量の変化の計算を可能にした。１１０週齢時に腓腹筋およびヒラメ筋もマウスから採取し、それらの重量を記録した。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
【0329】
結果は、図３Ａ、３Ｂ、４Ａおよび４Ｂに示す。Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照処置群のマウスより有意に少ない体脂肪量の増加を有することが見出された（図３Ａ）。Ｘ２０３による処置は、ＩｇＧ対照抗体による処置と比較して、有意により大きな除脂肪質量と関連していることも見出された。この知見と一致して、Ｘ２０３で処置したマウスの腓腹筋およびヒラメ筋の重量（それらの体重の割合としての）は、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスからのそれらより大きかった（図４Ａおよび４Ｂ）。
【0330】
実施例２：加齢性疾患を処置するＩＬ－１１媒介シグナル伝達のアンタゴニストの能力のさらなる分析
２．１虚弱および加齢の挙動相関の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
２．１虚弱および加齢の挙動相関の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
【0331】
１１０週時に、握力メーターを使用してマウスを握力のために分析する。低下した握力は、マウスでは加齢関連の虚弱の頑強なマーカーである（ここに参照により完全に組み込まれる、Ｆｉｓｃｈｅｒら、Ａｇｉｎｇ（２０１６）８：２３７０～２３９１頁を参照する）。
【0332】
マウスはメーターに付けられたワイヤメッシュを両方の前肢で握り、次にメーターのベースプレートと平行の水平面で尾が静かに引っ張られる。握力は、示された最大の力として記録される。
【0333】
Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスより大きな握力を示す。
２．２ 老化病巣の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
２．２ 老化病巣の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
【0334】
１１０週時に、マウスを安楽死させ、心臓、肺、肝臓、脾臓、腎臓および骨格筋組織から切片を調製し、ヘマトキシリン－エオジンまたはマッソンの三重染色にかけ、光学顕微鏡検査によって分析する。組織切片は、Ｓｎｉｄｅｒら、Ｇｅｒｏｓｃｉｅｎｃｅ（２０１９）４０：９７～１０３頁およびＳｎｙｄｅｒら、Ｇｅｒｏｓｃｉｅｎｃｅ（２０１９）４１：４５５～４６５頁（ここに参照により完全に組み込まれる）に記載されているように、加齢関連の病巣のために評価する。分析は、処置群に盲検化された獣医病理学者によって実行される。
【0335】
Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して、より少ない、より小さいおよび／またはより発達していない老人病巣を示す。
２．３ 器官線維症の分析
加齢は複数の器官、特に心臓、肺、腎臓および骨格筋での進行性の線維症と関連している（例えば、その全てはここに参照により完全に組み込まれる、Ｍｕｒｔｈａら、Ａｇｉｎｇ Ｄｉｓ．（２０１９）１０：４１９～４２８頁、Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．（２０１７）２８：４０７～４２０頁およびＥｔｉｅｎｎｅら、Ｓｋｅｌｅｔ．Ｍｕｓｃｌｅ（２０２０）１０：４頁を参照する）。
２．３ 器官線維症の分析
加齢は複数の器官、特に心臓、肺、腎臓および骨格筋での進行性の線維症と関連している（例えば、その全てはここに参照により完全に組み込まれる、Ｍｕｒｔｈａら、Ａｇｉｎｇ Ｄｉｓ．（２０１９）１０：４１９～４２８頁、Ｏ’Ｓｕｌｌｉｖａｎら、Ｊ．Ａｍ．Ｓｏｃ．Ｎｅｐｈｒｏｌ．（２０１７）２８：４０７～４２０頁およびＥｔｉｅｎｎｅら、Ｓｋｅｌｅｔ．Ｍｕｓｃｌｅ（２０２０）１０：４頁を参照する）。
【0336】
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
【0337】
１１０週時に、ヒドロキシプロリンアッセイによって心臓、肺、腎臓および骨格筋組織で広域の組織コラーゲン含有量を評価する。これらの組織からの組織切片はさらにマッソンの三重染色にかけられ、光学顕微鏡検査によって分析される（処置群に盲検化される）。
【0338】
Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して、分析した組織でより少ない線維症を示す。
２．４ 細胞老化マーカーの分析
老化細胞の蓄積は加齢の特質であり、細胞老化の分子マーカーには、老化関連のβガラクトシダーゼ（ＳＡ－β－ｇａｌ）活性ならびに細胞周期調節因子ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１およびｐ５３のレベルが含まれる（ここに参照により完全に組み込まれる、Ｗａｎｇら、Ｆｒｏｎｔ．Ｇｅｎｅｔ．（２０１８）９：２４７頁を参照する）。
２．４ 細胞老化マーカーの分析
老化細胞の蓄積は加齢の特質であり、細胞老化の分子マーカーには、老化関連のβガラクトシダーゼ（ＳＡ－β－ｇａｌ）活性ならびに細胞周期調節因子ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１およびｐ５３のレベルが含まれる（ここに参照により完全に組み込まれる、Ｗａｎｇら、Ｆｒｏｎｔ．Ｇｅｎｅｔ．（２０１８）９：２４７頁を参照する）。
【0339】
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｇｍ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化する。
【0340】
１１０週時に、関連する組織のマウス細胞から組織を採取し、ｐ１６ＩＮＫ４ａ、ｐ２１ＣＩＰ１およびｐ５３の遺伝子および／またはタンパク質発現について、ならびにＳＡ－β－ｇａｌ活性について分析する。
【0341】
Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して、細胞老化マーカーのより低いレベルを示す。
２．５ 心臓および腎臓機能のマーカーの分析
心臓および腎臓機能の障害は、加齢の病理学的特質である（例えば、その全てはここに参照により完全に組み込まれる、Ｍｕｒｔｈａら、Ａｇｉｎｇ Ｄｉｓ．（２０１９）１０：４１９～４２８頁、ｄｅ Ｌｕｃｉａら、Ｊ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．Ａ Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．（２０１９）７４：４５５～４６１頁およびＦｅｒｉｄｏｏｎｉら、Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（２０１７）５９５：３７２１～３７４２頁を参照する）。心臓機能の加齢関連の障害は、一般的に左心室リモデリング／肥大および拡張期機能の障害として現れ、収縮期機能の低減も起こることがある。
２．５ 心臓および腎臓機能のマーカーの分析
心臓および腎臓機能の障害は、加齢の病理学的特質である（例えば、その全てはここに参照により完全に組み込まれる、Ｍｕｒｔｈａら、Ａｇｉｎｇ Ｄｉｓ．（２０１９）１０：４１９～４２８頁、ｄｅ Ｌｕｃｉａら、Ｊ．Ｇｅｒｏｎｔｏｌ．Ａ Ｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．Ｍｅｄ．Ｓｃｉ．（２０１９）７４：４５５～４６１頁およびＦｅｒｉｄｏｏｎｉら、Ｊ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．（２０１７）５９５：３７２１～３７４２頁を参照する）。心臓機能の加齢関連の障害は、一般的に左心室リモデリング／肥大および拡張期機能の障害として現れ、収縮期機能の低減も起こることがある。
【0342】
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｍｇ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化し、尿素アッセイキット（ａｂ８３３６２、Ａｂｃａｍ）およびクレアチニンアッセイキット（ａｂ６５３４０、Ａｂｃａｍ）を製造業者の使用説明書に従って使用した、血液尿素窒素（ＢＵＮ）およびクレアチニンの血清レベルの分析によって腎機能を評価した。ベースラインレベルを決定するために、ＢＵＮおよび血清クレアチニンのレベルを１２週齢の雌雄Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスでも分析した。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
【0343】
結果は、図９および１０に示す。
図９は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較してＢＵＮレベルの７９％および４２％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（５１．３ｍｇ／ｄｌ）および雌（３１．８ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均ＢＵＮレベルを使用した）。
図９は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較してＢＵＮレベルの７９％および４２％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（５１．３ｍｇ／ｄｌ）および雌（３１．８ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均ＢＵＮレベルを使用した）。
【0344】
図１０は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較してクレアチニンレベルの６０％および４３％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（０．９２ｍｇ／ｄｌ）および雌（０．７７ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均クレアチニンレベルを使用した）。
【0345】
したがって、Ｘ２０３で処置したマウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して、向上した腎機能を示した。
２．６ 代謝機能の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｍｇ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化し、血清トリグリセリド、肝臓トリグリセリド、血清コレステロールおよび血清β－ヒドロキシブチレートレベルを、トリグリセリドアッセイキット（ａｂ６５３３６、Ａｂｃａｍ）、コレステロールアッセイキット（ａｂ６５３９０、Ａｂｃａｍ）、およびβ－ヒドロキシブチレート比色アッセイキット（７００１９０；Ｃａｙｍａｎ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を製造業者の使用説明書に従って使用して測定した。ベースラインレベルを決定するために、血清トリグリセリド、肝臓トリグリセリド、血清コレステロールおよび血清β－ヒドロキシブチレートのレベルを１２週齢の雌雄Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスでも分析した。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
２．６ 代謝機能の分析
５５週齢から１１０週齢まで３週間ごとにＩＰ注射を通してＸ２０３またはＩｇＧ対照抗体を４０ｍｇ／ｋｇの用量で受けるように、Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスをランダム化し、血清トリグリセリド、肝臓トリグリセリド、血清コレステロールおよび血清β－ヒドロキシブチレートレベルを、トリグリセリドアッセイキット（ａｂ６５３３６、Ａｂｃａｍ）、コレステロールアッセイキット（ａｂ６５３９０、Ａｂｃａｍ）、およびβ－ヒドロキシブチレート比色アッセイキット（７００１９０；Ｃａｙｍａｎ ｃｈｅｍｉｃａｌｓ）を製造業者の使用説明書に従って使用して測定した。ベースラインレベルを決定するために、血清トリグリセリド、肝臓トリグリセリド、血清コレステロールおよび血清β－ヒドロキシブチレートのレベルを１２週齢の雌雄Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスでも分析した。データは、２元配置ＡＮＯＶＡによって分析した。
【0346】
結果は、図１１～１４に示す。
図１１は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して血清トリグリセリドレベルの６５％および４７％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（５４ｍｇ／ｄｌ）および雌（３７ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均血清トリグリセリドレベルを使用した）。
図１１は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して血清トリグリセリドレベルの６５％および４７％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（５４ｍｇ／ｄｌ）および雌（３７ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均血清トリグリセリドレベルを使用した）。
【0347】
図１２は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して肝臓トリグリセリドレベルの７１％および５４％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（１６５ｍｇ／ｇ）および雌（１３０ｍｇ／ｇ）マウスの平均肝臓トリグリセリドレベルを使用した）。
【0348】
図１３は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して血清コレステロールレベルの４５％および５１％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして、１２週齢の雄（１４９ｍｇ／ｄｌ）および雌（９０ｍｇ／ｄｌ）マウスの平均血清コレステロールレベルを使用した）。
【0349】
図１４は、Ｘ２０３で処置した雄雌マウスは、ＩｇＧ対照抗体で処置したマウスと比較して血清β－ヒドロキシブチレートレベルの６６％および２６％の低減をそれぞれ示したことを示す（ベースラインとして１２週齢の雄（０．１５９ｍＭ）および雌（０．２３６ｍＭ）マウスの平均血清β－ヒドロキシブチレートレベルを使用した）。
【0350】
したがって、Ｘ２０３による処置は、加齢関連の高トリグリセリド血症、脂肪症（肝臓脂肪蓄積）および高コレステロール血症を低減させることが見出された。Ｘ２０３による処置は、脂肪酸酸化およびケトン生産の末梢マーカーである循環β－ヒドロキシブチレートのレベルを増加させることが見出された。まとめると、これらのデータはＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗が代謝機能の加齢関連の衰退を低減することを示す。
【0351】
実施例３：ＩＬ－１１媒介シグナル伝達および老化の評価
３．１ 若齢および高齢マウスにおけるＩＬ－１１タンパク質のレベル
発明者は、２８カ月齢および３カ月齢のＣ５７Ｂ１／６Ｊマウスの肝臓におけるＩＬ－１１タンパク質の発現を評価した。
３．１ 若齢および高齢マウスにおけるＩＬ－１１タンパク質のレベル
発明者は、２８カ月齢および３カ月齢のＣ５７Ｂ１／６Ｊマウスの肝臓におけるＩＬ－１１タンパク質の発現を評価した。
【0352】
簡潔には、肝臓をマウスから採取し、プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）を含有する放射線免疫沈降アッセイ（ＲＩＰＡ）溶解および抽出バッファー（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）の中でホモジナイズし、続いて遠心分離して溶解液を透明にした。タンパク質濃度は、ブラッドフォードアッセイ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）によって決定した。等量のタンパク質溶解液をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分離し、ＰＶＤＦ膜に移し、３％ＢＳＡで１時間ブロックし、Ｘ２０３（１：２０００）または抗ＧＡＰＤＨ（１：１０００、ＣＳＴ）と一晩インキュベートした。ＥＣＬ検出システム（Ｐｉｅｒｃｅ）を適当な二次抗体：抗マウスＨＲＰおよび抗ウサギＨＲＰ（１：５０００、ＣＳＴ）と使用して、タンパク質バンドを可視化した。ＥＣＬ検出システム（Ｐｉｅｒｃｅ）を適当な二次抗体と使用して、タンパク質を可視化した。
【0353】
結果は、図５に示す。ＩＬ－１１タンパク質のレベルは、３カ月齢マウスと比較して２８カ月齢マウスの肝臓でより大きいことが見出された。
さらなる実験では、発明者は、１１０週齢および１２週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの肝臓、心室、腎臓、腓腹筋およびヒラメ筋におけるＩＬ－１１タンパク質の発現を評価した。ＲＩＰＡ溶解および抽出バッファー中の肝臓、心室、腎臓、腓腹筋およびヒラメ筋から全タンパク質を抽出し、前記のようにウエスタンブロットによって分析した。
さらなる実験では、発明者は、１１０週齢および１２週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスの肝臓、心室、腎臓、腓腹筋およびヒラメ筋におけるＩＬ－１１タンパク質の発現を評価した。ＲＩＰＡ溶解および抽出バッファー中の肝臓、心室、腎臓、腓腹筋およびヒラメ筋から全タンパク質を抽出し、前記のようにウエスタンブロットによって分析した。
【0354】
結果は、図８に示す。ＩＬ－１１タンパク質のレベルは、１２週齢マウスと比較して１１０週齢マウスの肝臓、心室、腎臓、腓腹筋およびヒラメ筋でより大きいことが見出された。
【0355】
３．２ 老化誘導のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルにおける細胞による老化マーカーの発現に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響
発明者は、Ｘ２０３またはＸ２０９を使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏで老化細胞による老化および炎症のマーカーの発現に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響を次に調査した。
発明者は、Ｘ２０３またはＸ２０９を使用して、ｉｎ ｖｉｔｒｏで老化細胞による老化および炎症のマーカーの発現に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響を次に調査した。
【0356】
Ｘ２０９はマウス抗マウスＩＬ－１１ＲαＩｇＧであり、例えばＷｉｄｊａｊａら、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ（２０１９）１５７（３：７７７～７９２頁）に記載される。Ｘ２０９は「Ｅｎｘ２０９」とも呼ばれ、ＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号７（本開示の配列番号２４）によるＶＨ領域、およびＷＯ２０１９／２３８８８４Ａ１の配列番号１４（本開示の配列番号２５）によるＶＬ領域を含む。
【0357】
Ｔｒｉｐａｔｈｉら、Ｓｔａｒ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（２０２０）１：１０００６４（ここに参照により完全に組み込まれる）に記載される通りに、老化肝マウス細胞をマウス肝細胞細胞系ＡＭＬ１２の細胞から生成した。
【0358】
簡潔には、ＡＭＬ１２細胞を５０％集密度まで増殖させ、合計７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化を誘導した（Ｔｒｉｐａｔｈｉら、Ｓｔａｒ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ（２０２０）１：１０００６４に記載される通り）。２日目以降、２３時間の回復期間中に、２μｇ／ｍｌのＸ２０９／Ｘ２０３またはアイソタイプマッチ対照ＩｇＧを培養に加えた。
【0359】
７日目に全ＲＮＡを単離し、ｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂ遺伝子発現のレベルをｑＲＴ－ＰＣＲによって評価した。簡潔には、Ｔｒｉｚｏｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）を使用し、続いてＲＮｅａｓｙカラム（Ｑｉａｇｅｎ）精製によって、全ＲＮＡを細胞溶解液から抽出した。製造業者の使用説明書に従ってｉＳｃｒｉｐｔ（商標）ｃＤＮＡ合成キット（Ｂｉｏ－Ｒａｄ）でｃＤＮＡを合成した。遺伝子発現分析は、４０サイクルにわたるＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＴシステム（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、ＴａｑＭａｎ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）またはｆａｓｔ ＳＹＢＲ ｇｒｅｅｎ（Ｑｉａｇｅｎ）で実行した。ｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの発現データをＧａｐｄｈ発現に正規化し、２－ΔΔＣｔ方法を使用して変化倍率を計算した。
【0360】
結果は、図６Ａ～６Ｄおよび図７Ａ～７Ｄに示す。
Ｘ２０９による処置は、老化誘導のプログラムを受けたＡＭＬ１２細胞による、ｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの遺伝子発現を有意に低減することが見出された（図６Ａ～６Ｄ）。
Ｘ２０９による処置は、老化誘導のプログラムを受けたＡＭＬ１２細胞による、ｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの遺伝子発現を有意に低減することが見出された（図６Ａ～６Ｄ）。
【0361】
【0362】
３．３ ヒト細胞を使用した老化誘導のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルにおける細胞による老化マーカーの発現に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響
一次ヒト肝細胞またはＡＭＬ１２細胞を５０％集密度まで増殖させ、合計７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化を誘導する。２日目以降、２３時間の回復期間中に、２μｇ／ｍｌのＸ２０９／Ｘ２０３またはアイソタイプマッチ対照ＩｇＧを培養に加える。
一次ヒト肝細胞またはＡＭＬ１２細胞を５０％集密度まで増殖させ、合計７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化を誘導する。２日目以降、２３時間の回復期間中に、２μｇ／ｍｌのＸ２０９／Ｘ２０３またはアイソタイプマッチ対照ＩｇＧを培養に加える。
【0363】
７日後、全ＲＮＡを細胞から単離し、実施例３．２に記載されているようにｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの、ならびにｐ１６およびｐ５３の発現を評価するために単離する。細胞は、細胞肥大および核拡大の表現型評価にもかける。細胞は、クロマチン凝縮、ＤＮＡ傷害、複製能力、ＲＯＳ生成および酸化的ストレス、ＳＡＳＰ遺伝子およびタンパク質発現、エネルギー表現型分析およびミトコンドリア活性／傷害、細胞性解糖について、ならびに自己貪食および栄養感知経路（ｍＴＯＲ、ＡＭＰＫなど）の活性についても分析される。
【0364】
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗体アンタゴニストによる処置は、ＩｇＧ対照抗体による処置と比較して細胞老化マーカーのレベルを低減することが示され、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗が細胞老化の誘導を阻害することができることを示す。
【0365】
３．４ ヒト細胞を使用した老化誘導のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルにおける細胞による老化マーカーの発現に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響
一次ヒト肝細胞またはＡＭＬ１２細胞を５０％集密度まで増殖させ、合計７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化を誘導する。
一次ヒト肝細胞またはＡＭＬ１２細胞を５０％集密度まで増殖させ、合計７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化を誘導する。
【0366】
７日目から、２μｇ／ｍｌのＸ２０９／Ｘ２０３またはアイソタイプマッチ対照ＩｇＧで細胞を処置する。
１４日後、全ＲＮＡを細胞から単離し、実施例３．２に記載されているようにｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの、ならびにｐ１６およびｐ５３の発現を評価するために単離する。細胞は、細胞肥大および核拡大の表現型評価にもかける。細胞は、クロマチン凝縮、ＤＮＡ傷害、複製能力、ＲＯＳ生成および酸化的ストレス、ＳＡＳＰ遺伝子およびタンパク質発現、エネルギー表現型分析およびミトコンドリア活性／傷害、細胞性解糖について、ならびに自己貪食および栄養感知経路（ｍＴＯＲ、ＡＭＰＫなど）の活性についても分析される。
１４日後、全ＲＮＡを細胞から単離し、実施例３．２に記載されているようにｐ２１（Ｃｄｋｎ１ａ）、Ｉｌ１ｂ、Ｉｌ１１およびＴｇｆｂの、ならびにｐ１６およびｐ５３の発現を評価するために単離する。細胞は、細胞肥大および核拡大の表現型評価にもかける。細胞は、クロマチン凝縮、ＤＮＡ傷害、複製能力、ＲＯＳ生成および酸化的ストレス、ＳＡＳＰ遺伝子およびタンパク質発現、エネルギー表現型分析およびミトコンドリア活性／傷害、細胞性解糖について、ならびに自己貪食および栄養感知経路（ｍＴＯＲ、ＡＭＰＫなど）の活性についても分析される。
【0367】
ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の抗体アンタゴニストによる処置は、ＩｇＧ対照抗体による処置と比較して細胞老化マーカーのレベルを低減することが示され、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗が細胞老化の誘導を逆転することが可能なことを示す。
【0368】
実施例４：加齢経路に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の影響のｉｎ ｖｉｔｒｏ評価
細胞老化は、９つの「加齢の特質」、加齢過程を促進する経路のうちの１つである（Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎら、２０１３、Ｃｅｌｌ １５３（６）：１１９４～１２１７頁）。
細胞老化は、９つの「加齢の特質」、加齢過程を促進する経路のうちの１つである（Ｌｏｐｅｚ－Ｏｔｉｎら、２０１３、Ｃｅｌｌ １５３（６）：１１９４～１２１７頁）。
【0369】
発明者は、加齢の重要な特質：栄養感知（ＬｉｕおよびＳａｂａｔｉｎｉ ２０２０、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２１（４）：１８３～２０３頁）、タンパク平衡の減少（ＫａｕｓｈｉｋおよびＣｕｅｒｖｏ ２０１５、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２１（１２）：１４０６～１５頁）および細胞老化（Ｄｏｌｇｉｎ ２０２０、Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ３８（１２）：１３７１～７７頁）に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の影響を調査した。これらの特質と関連する加齢経路は以下の通りである：インスリン／ＩＧＦ－１シグナル伝達（ＩＩＳ）、ラパマイシン１の哺乳動物標的（ｍＴＯＲＣ１）、ＡＭＰ活性化キナーゼ（ＡＭＰＫ）およびＭＥＫ／ＥＲＫ経路。
【0370】
４．１ ヒト心臓線維芽細胞における加齢経路に及ぼすＩＬ－１１の影響
一次ヒト心臓線維芽細胞をＩＬ－１１（１０ｎｇ／ｍｌ）で１５分間、２時間、４時間、６時間または２４時間刺激し、リン酸化されたＬＫＢ１（ｐ－ＬＫＢ１）、ＬＫＢ１、リン酸化されたｍＴＯＲ（ｐ－ｍＴＯＲ）およびｍＴＯＲのレベルをウエスタンブロットによって測定した。
一次ヒト心臓線維芽細胞をＩＬ－１１（１０ｎｇ／ｍｌ）で１５分間、２時間、４時間、６時間または２４時間刺激し、リン酸化されたＬＫＢ１（ｐ－ＬＫＢ１）、ＬＫＢ１、リン酸化されたｍＴＯＲ（ｐ－ｍＴＯＲ）およびｍＴＯＲのレベルをウエスタンブロットによって測定した。
【0371】
ＩＬ－１１による刺激は、リン酸化されたＬＫＢ１およびリン酸化されたｍＴＯＲのレベルを増加させる（図１５）。このデータは、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達がリン酸化を通したＬＫＢ１の不活性化において役割をすることを示唆し、これは次にｍＴＯＲＣ１の活性化につながる。発明者の知る限り、ＬＫＢ１は構成的に活性であってリン酸化によって調節されないと考えられていただけであるので、これは新規の知見である。
【0372】
４．２ ＩＬ－１１はＬＫＢ１のリン酸化を刺激する
ＩＬ－１１がＬＫＢ１のリン酸化を刺激する機構を決定するために、ヒトＬＫＢ１（図１６ＡのＡＡ８－ＬＫＢ１）を過剰発現するようにＡ５４９細胞を工学操作し、ＩＬ－１１で処置した。ウエスタンブロット分析は、ＩＬ－１１がＬＫＢ１セリン３２５（Ｓ３２５）のＥＲＫ媒介リン酸化およびＬＫＢ１セリン４２８（Ｓ４２８）のＰ９０ＲＳＫ媒介リン酸化を刺激することを明らかにした。
ＩＬ－１１がＬＫＢ１のリン酸化を刺激する機構を決定するために、ヒトＬＫＢ１（図１６ＡのＡＡ８－ＬＫＢ１）を過剰発現するようにＡ５４９細胞を工学操作し、ＩＬ－１１で処置した。ウエスタンブロット分析は、ＩＬ－１１がＬＫＢ１セリン３２５（Ｓ３２５）のＥＲＫ媒介リン酸化およびＬＫＢ１セリン４２８（Ｓ４２８）のＰ９０ＲＳＫ媒介リン酸化を刺激することを明らかにした。
【0373】
発明者は、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達がＥＲＫおよびＰ９０ＲＳＫを活性化してＬＫＢ１を二重リン酸化し、それはその不活性化を引き起こし、加齢の重要な特質を促進することを特定した。ＩＬ－１１の役割を概説する模式図を、図１６Ｂに示す。本明細書で開示される実施例は、中和抗体またはＩｌ１１ｒａの欠失によるＩＬ－１１媒介シグナル伝達の阻害がＥＲＫ活性化を阻止し、ＬＫＢ１／ＡＭＰＫを刺激し、ｍＴＯＲＣ１／Ｐ７０Ｓ６Ｋを阻害する間、老化のマーカー（Ｐ１６およびｐ２１）を減らし、それによってＩＬ－１１の阻害／不活性化は複数の決定的な加齢過程（代謝、炎症、タンパク質翻訳および老化）を同等に標的にすることを確認する。
【0374】
ヒト肝星状細胞（図１７Ａ）およびヒト肝細胞（図１７Ｂ）を、野生型ＬＫＢ１および二重突然変異体Ｓ３２５Ａ、Ｓ４２８Ａ（ＤＭ－ＬＫＢ１）を過剰発現するように工学操作した。図１７Ａおよび１７Ｂは、ＩＬ－１１による刺激がＷＴ ＬＫＢ１細胞のＳ４２８（ＥＲＫ部位）およびＳ３２５（Ｐ９０ＲＳＫ部位）でリン酸化を誘導することを確認する。予想されるように、リン酸化は二重突然変異体ＬＫＢ１細胞で観察されない。
【0375】
発明者は、ＬＫＢ１を過剰発現しない細胞（無）におけるＳ３２５リン酸化の無検出を抗体の低感受性によるものと考える。
４．３ ＩＬ－１１刺激ヒト心臓線維芽細胞に及ぼすラパマイシン、ワートマニンまたはＵ０１２６の影響
一次ヒト心臓線維芽細胞をＤＭＳＯ、ラパマイシン（ｍＴＯＲ阻害剤）、ワートマニン（ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤）またはＵ０１２６（ＭＥＫ１／２阻害剤）の存在下で２４時間ＩＬ－１１で刺激し、ｐ－ＬＫＢ１およびｐ－ＡＭＰＫのレベルをウエスタンブロットによって測定した（図１８）。
４．３ ＩＬ－１１刺激ヒト心臓線維芽細胞に及ぼすラパマイシン、ワートマニンまたはＵ０１２６の影響
一次ヒト心臓線維芽細胞をＤＭＳＯ、ラパマイシン（ｍＴＯＲ阻害剤）、ワートマニン（ホスホイノシチド３－キナーゼ（ＰＩ３Ｋ）阻害剤）またはＵ０１２６（ＭＥＫ１／２阻害剤）の存在下で２４時間ＩＬ－１１で刺激し、ｐ－ＬＫＢ１およびｐ－ＡＭＰＫのレベルをウエスタンブロットによって測定した（図１８）。
【0376】
ＩＬ－１１刺激線維芽細胞をラパマイシン、ワートマニンまたはＵ０１２６で処置するとき、ｐ－ＬＫＢ１のレベルが低下する一方でｐ－ＡＭＰＫのレベルは増加する。このデータは、ラパマイシン、ワートマニンまたはＵ０１２６の各々がＩＬ－１１によるＬＫＢ１のリン酸化および以降のＡＭＰＫの脱リン酸を部分的に阻止することを示し、したがって、ＩＬ－１１がＭＥＫ／ＥＲＫ、ＡＭＰＫおよびｍＴＯＲＣ１経路を促進することを確認する。
【0377】
４．４ ヒト心臓線維芽細胞における加齢経路に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響
一次ヒト心臓線維芽細胞をＩＬ１１またはＴＧＦβ１で刺激したか、刺激しなかった（ＢＬ）。図１９は、ウエスタンブロットによって決定された様々なマーカーのレベルを示す。
一次ヒト心臓線維芽細胞をＩＬ１１またはＴＧＦβ１で刺激したか、刺激しなかった（ＢＬ）。図１９は、ウエスタンブロットによって決定された様々なマーカーのレベルを示す。
【0378】
第１に、このデータは、ＬＫＢ１を直接的に、およびＰ９０ＲＳＫを通して間接的にＬＫＢ１をリン酸化および不活性化するＥＲＫの活性化剤としてのＩＬ－１１の役割をさらに確認する。実施例４．１で説明されるように、ＬＫＢ１は今日まで構成的に活性であってリン酸化によって調節されないと考えられていた。ＩＬ－１１誘導ｐ－ＥＲＫおよびｐ－ｐ９０ＲＳＫはＬＫＢ１をリン酸化および不活性化する作用をし、それは次にＡＭＰＫの不活性化（脱リン酸）につながる。不活性のＡＭＰＫは、ｍＴＯＲＣ１を阻害する作用をするＴＳＣ複合体のメンバーをもはや活性化することができない。このように、ｍＴＯＲＣ１は活性化される（リン酸化される）。活性化ｍＴＯＲＣ１はＰ７０Ｓ６ＫおよびＳ６－リボソームタンパク質（ＲＰＳ６またはＳ６ＲＰ）をリン酸化および活性化して、タンパク質合成およびタンパク平衡を害する自己貪食の阻害を含む多くの他の加齢促進経路を刺激する。
【0379】
Ｘ２０３（抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体）およびＸ２０９（抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体）の両方は、マーカーＥＲＫ、ｐ９０ＲＳＫ、ＬＫＢ１、ｍＴＯＲ、ｐ７０Ｓ６ＫおよびＳ６ＲＰのリン酸化のレベルを有意に低減する。Ｘ２０３またはＸ２０９による処置は、これらのマーカーに及ぼすＩＬ－１１／ＴＧＦβ１刺激の影響を未刺激対照で観察されるレベルへ本質的に逆転させる。
【0380】
４．５ ヒト肝細胞における加齢経路に及ぼすＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗の影響
一次ヒト肝細胞（ＩＬ－１１、ＢＳＡまたはパルミテートで刺激したかまたは刺激しなかった）を、Ｘ２０３（抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体）およびＸ２０９（抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体）で処置した。図２０は、Ｘ２０３またはＸ２０９による処置がリン酸化されたマーカーｐ－ＥＲＫ、ｐ－ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ｐ－ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋおよびｐ－Ｓ６ＲＰのレベルを低減するが、ｐ－ＡＭＰＫおよびｐ－ＡＣＣのレベルの増加によって証明されるように、ＡＭＰＫおよびアセチル補酵素Ａカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）を刺激することを示す。Ｘ２０３またはＸ２０９による処置は、これらのマーカーに及ぼすパルミテート刺激の影響を未刺激対照で観察されるレベルへ本質的に逆転させる。
一次ヒト肝細胞（ＩＬ－１１、ＢＳＡまたはパルミテートで刺激したかまたは刺激しなかった）を、Ｘ２０３（抗ＩＬ－１１アンタゴニスト抗体）およびＸ２０９（抗ＩＬ－１１Ｒαアンタゴニスト抗体）で処置した。図２０は、Ｘ２０３またはＸ２０９による処置がリン酸化されたマーカーｐ－ＥＲＫ、ｐ－ｐ９０ＲＳＫ、ｐ－ＬＫＢ１、ｐ－ｍＴＯＲ、ｐ－ｐ７０Ｓ６Ｋおよびｐ－Ｓ６ＲＰのレベルを低減するが、ｐ－ＡＭＰＫおよびｐ－ＡＣＣのレベルの増加によって証明されるように、ＡＭＰＫおよびアセチル補酵素Ａカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）を刺激することを示す。Ｘ２０３またはＸ２０９による処置は、これらのマーカーに及ぼすパルミテート刺激の影響を未刺激対照で観察されるレベルへ本質的に逆転させる。
【0381】
４．６ Ｕ０１２６の存在下での一次ヒト肝星状細胞およびヒト肝細胞における加齢経路に及ぼすＩＬ－１１の影響
一次ヒト肝星状細胞およびヒト肝細胞を、ＤＭＳＯまたはＵ０１２６の存在下でＩＬ－１１で２４時間刺激した。実施例４．４で議論されるように、発明者はＩＬ－１１処置がｐ－ｍＴＯＲ、ｐ－７０Ｓ６Ｋおよびｐ－Ｓ６ＲＰを刺激することを観察した。発明者の仮説と一致して、ＩＬ－１１刺激細胞へのＵ０１２６の投与は、ＩＬ１１誘導ｍＴＯＲＣ１／Ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化を停止するＬＫＢ１／ＡＭＰＫのＥＲＫ媒介不活性化を阻止する（それぞれ図２１および図２２）。
一次ヒト肝星状細胞およびヒト肝細胞を、ＤＭＳＯまたはＵ０１２６の存在下でＩＬ－１１で２４時間刺激した。実施例４．４で議論されるように、発明者はＩＬ－１１処置がｐ－ｍＴＯＲ、ｐ－７０Ｓ６Ｋおよびｐ－Ｓ６ＲＰを刺激することを観察した。発明者の仮説と一致して、ＩＬ－１１刺激細胞へのＵ０１２６の投与は、ＩＬ１１誘導ｍＴＯＲＣ１／Ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化を停止するＬＫＢ１／ＡＭＰＫのＥＲＫ媒介不活性化を阻止する（それぞれ図２１および図２２）。
【0382】
４．７ 一次ヒト肝星状細胞およびヒト肝細胞における加齢経路に及ぼすＩＬ－１１およびＩＬ－６の相対的影響
一次ヒト肝星状細胞（ＨＳＣ）およびヒト肝細胞を、ＩＬ－１１またはＩＬ－６の増加する濃度（１．２５～２０ｎｇ／ｍｌ）で２４時間刺激した。ＩＬ－１１と異なり、ＩＬ－６は最も高い濃度でさえＬＫＢ１の不活性化もＡＭＰＫの活性化も誘導しない（図２３）。これらのマーカーに及ぼすＩＬ－１１の影響は、ＨＳＣおよび肝細胞の両方で１．２５ｎｇ／ｍｌの低濃度で観察可能である。
一次ヒト肝星状細胞（ＨＳＣ）およびヒト肝細胞を、ＩＬ－１１またはＩＬ－６の増加する濃度（１．２５～２０ｎｇ／ｍｌ）で２４時間刺激した。ＩＬ－１１と異なり、ＩＬ－６は最も高い濃度でさえＬＫＢ１の不活性化もＡＭＰＫの活性化も誘導しない（図２３）。これらのマーカーに及ぼすＩＬ－１１の影響は、ＨＳＣおよび肝細胞の両方で１．２５ｎｇ／ｍｌの低濃度で観察可能である。
【0383】
４．８ 老化のｉｎ ｖｉｔｒｏモデルにおけるＸ２０９およびＸ２０３の影響
老化予防実験は、図２４Ａに示す通りに実行した。簡潔には、Ｔｒｉｐａｔｈｉら（２０２０）ＳＴＡＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ １（２）：１０００６４によって記載されるように、細胞をＨ２Ｏ２の致死性以下の濃度で処置することによって老化ＡＭＬ１２を作製した。２３時間の回復期間中にＩｇＧ／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）を１０日間培養に加えた。ｑＰＣＲによって測定されたＣｄｋｎ２ａ（ｐ１６）、Ｃｄｋｎ１ａ（ｐ２１）、Ｉｌ１β、Ｉｌ８およびＩｌ１１の相対的ｍＲＮＡ発現を、それぞれ図２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、２４Ｅおよび２４Ｆに示す。Ｘ２０９によるＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗を受けた細胞では、老化のマーカー（Ｐ１６およびｐ２１）および炎症のマーカー（ＩＬ－１ｂ、ＩＬ－１１およびＩＬ－６）は減少する。
老化予防実験は、図２４Ａに示す通りに実行した。簡潔には、Ｔｒｉｐａｔｈｉら（２０２０）ＳＴＡＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ １（２）：１０００６４によって記載されるように、細胞をＨ２Ｏ２の致死性以下の濃度で処置することによって老化ＡＭＬ１２を作製した。２３時間の回復期間中にＩｇＧ／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）を１０日間培養に加えた。ｑＰＣＲによって測定されたＣｄｋｎ２ａ（ｐ１６）、Ｃｄｋｎ１ａ（ｐ２１）、Ｉｌ１β、Ｉｌ８およびＩｌ１１の相対的ｍＲＮＡ発現を、それぞれ図２４Ｂ、２４Ｃ、２４Ｄ、２４Ｅおよび２４Ｆに示す。Ｘ２０９によるＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗を受けた細胞では、老化のマーカー（Ｐ１６およびｐ２１）および炎症のマーカー（ＩＬ－１ｂ、ＩＬ－１１およびＩＬ－６）は減少する。
【0384】
老化逆転実験は、図２５Ａに示す通りに実行した。簡潔には、前記の通りに老化ＡＭＬ１２を７日間作製したが、７２時間の老化誘導期間の終わりに、ＩｇＧ／Ｘ２０３／Ｘ２０９（２μｇ／ｍｌ）を培養に加えた。ＩＬ－１１媒介シグナル伝達のＸ２０３およびＸ２０９アンタゴニストは、老化マーカーｐ２１（図２５Ｂ）ならびに炎症マーカーＩＬ－１ｂ（図２５Ｃ）およびＩＬ－１１（図２５Ｄ）を有意に低減する。
【0385】
要約すると、老化のｉｎ ｖｉｔｒｏモデル（ＡＭＬ１２細胞）では、抗ＩＬ－１１または抗ＩＬ－１１ＲＡアンタゴニストは細胞老化を阻止し、逆転もさせる。
実施例５：ｉｎ ｖｉｖｏでの年齢に伴うＩＬ－１１上方制御の検出
５．１ 高齢ＥＧＦＰリポーターマウスの組織におけるＩＬ－１１上方制御
ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス（Ｉｌ１１－Ｅｇｆｐ＋／－；（Ｗｉｄｊａｊａら、２０２１、Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３（５９７）））を作製し、１１０週齢に到達させた。図２６は、野生型１１０週齢マウスと比較した「高齢」ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスの腎臓の免疫蛍光画像を示す。野生型マウスからの年齢を一致させた対照腎臓では、ＥＧＦＰ染色は検出されなかった。
実施例５：ｉｎ ｖｉｖｏでの年齢に伴うＩＬ－１１上方制御の検出
５．１ 高齢ＥＧＦＰリポーターマウスの組織におけるＩＬ－１１上方制御
ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス（Ｉｌ１１－Ｅｇｆｐ＋／－；（Ｗｉｄｊａｊａら、２０２１、Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３（５９７）））を作製し、１１０週齢に到達させた。図２６は、野生型１１０週齢マウスと比較した「高齢」ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスの腎臓の免疫蛍光画像を示す。野生型マウスからの年齢を一致させた対照腎臓では、ＥＧＦＰ染色は検出されなかった。
【0386】
心室および心房（図２７）、肺（図２８）および脾臓（図２９）の細胞におけるＩＬ－１１発現を、高齢（１１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスで観察した。年齢を一致させた対照または若齢（１０週）ＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウスで、ＥＧＦＰの染色は全く（または、ほとんど）見られなかった。ＩＬ－１１は高齢マウスの組織で上方制御され、これらの知見は加齢経路の促進におけるＩＬ－１１の役割を裏付ける。
【0387】
５．２ 高齢ＷＴマウスの腹部脂肪におけるＩＬ－１１上方制御
ウエスタンブロット分析（図３０）は、１１０週齢野生型マウスの腹部脂肪組織でＩＬ－１１が上方制御されることを実証する。
ウエスタンブロット分析（図３０）は、１１０週齢野生型マウスの腹部脂肪組織でＩＬ－１１が上方制御されることを実証する。
【0388】
実施例６：ＩＬ１１ＲＡ１ノックアウトマウスでのｉｎ ｖｉｖｏ研究
６．１ 加齢経路に及ぼすＩｌ１１ｒａ１欠失の影響
Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯ雄マウスを作製し、１０～１２週齢（若齢）および１１０週齢（高齢）に到達させた。図３１は、高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの肝臓が、野生型マウスおよび若齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有することを実証し、したがって加齢経路の促進におけるＩＬ－１１の役割を確認する。高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの腓腹筋（図３２）、ヒラメ筋（図３３）および腹部脂肪（図３４）で、同じ結果が観察される。
６．１ 加齢経路に及ぼすＩｌ１１ｒａ１欠失の影響
Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯ雄マウスを作製し、１０～１２週齢（若齢）および１１０週齢（高齢）に到達させた。図３１は、高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの肝臓が、野生型マウスおよび若齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスと比較してより少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有することを実証し、したがって加齢経路の促進におけるＩＬ－１１の役割を確認する。高齢Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウスの腓腹筋（図３２）、ヒラメ筋（図３３）および腹部脂肪（図３４）で、同じ結果が観察される。
【0389】
６．１ 表現型に及ぼすＩｌ１１ｒａ１欠失の影響
表現型研究は、高齢Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスが野生型対照と比較してより少ない体重（図３５）、より低い体脂肪パーセンテージ（図３６）およびより多くの除脂肪筋肉質量パーセンテージ（図３７）を有することを明らかにした。さらに、高齢Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスは野生型対照と比較して有意に低減した虚弱（図３８）、およびより高い体温（図３９）を示した。
表現型研究は、高齢Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスが野生型対照と比較してより少ない体重（図３５）、より低い体脂肪パーセンテージ（図３６）およびより多くの除脂肪筋肉質量パーセンテージ（図３７）を有することを明らかにした。さらに、高齢Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスは野生型対照と比較して有意に低減した虚弱（図３８）、およびより高い体温（図３９）を示した。
【0390】
Ｉｌ１１ｒａ１の欠失は、野生型対照と比較してより少ない腹部脂肪およびより多くの筋肉（ヒラメ筋および腓腹筋）を有する高齢マウスに導いた（図４０Ａ、４０Ｂおよび４０Ｃ）。
【0391】
腹部脂肪、腓腹筋、ヒラメ筋、肝臓、心房、心室、腎臓および肺の線維症を、野生型対照と比較した高齢Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスにおけるコラーゲン含有量に基づいて評価した（図４１Ａ～４１Ｄおよび図４２Ａ～４２Ｄ）。高齢Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯマウスは、これらの組織全体でより少ない線維症を有した。
【0392】
実施例６は、１１０週齢でＩｌ１１ｒａ１を欠失させたマウスが、Ｘ２０３の投与で観察された表現型（実施例１および図１、２、３、４Ａおよび４Ｂ）、すなわち、脂肪、グルコースのより優れた血清レベルによる向上した多罹患率、より少ない組織線維症、より優れた腎機能、低減された組織炎症、低減された肥満およびより少ない虚弱を写すことを実証する。それは、Ｉｌ１１ｒａ１－ＫＯマウスが組織を越えて若齢マウスにより類似した加齢シグナル伝達プロファイルを有することをさらに実証する。
【0393】
実施例７：ｉｎ ｖｉｖｏで加齢経路に及ぼすＩＬ－１１拮抗（Ｘ２０３）の影響
図４３および４４は、中和ＩＬ－１１抗体（Ｘ２０３）を受けた１１０週（齢）マウスの肝臓が、ＩｇＧ対照を受けた高齢マウスおよび若齢（１２週齢）マウスと比較して、より少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有することを実証する。Ｘ２０３で処置した高齢マウスの腓腹筋（図４５および４６）、ヒラメ筋（図４７および４８）および腹部脂肪（図４９および５０）で、同じ結果が観察される。
図４３および４４は、中和ＩＬ－１１抗体（Ｘ２０３）を受けた１１０週（齢）マウスの肝臓が、ＩｇＧ対照を受けた高齢マウスおよび若齢（１２週齢）マウスと比較して、より少ないＥＲＫ／ＬＫＢ１／ｍＴＯＲＣ１活性、より多くのＡＭＰＫ活性、および重要な老化マーカー（ｐ１６およびｐ２１）のより少ない発現を有することを実証する。Ｘ２０３で処置した高齢マウスの腓腹筋（図４５および４６）、ヒラメ筋（図４７および４８）および腹部脂肪（図４９および５０）で、同じ結果が観察される。
【0394】
要約すると、中和ＩＬ－１１抗体はＬＫＢ１／ＡＭＰＫ活性を回復し、ｍＴＯＲＣ１活性を低減し、高齢マウスの肝臓、骨格筋（ヒラメ筋および腓腹筋）および腹部脂肪における重要な老化マーカーｐ１６およびｐ２１の発現を阻害する。
【0395】
実施例８：ｉｎ ｖｉｖｏで炎症マーカーに及ぼすＩＬ－１１拮抗（Ｘ２０３）の影響
変化した細胞間伝達、特に増加した慢性炎症およびＩＬ６上方制御は、老化過程を予防、処置し、および／または逆転させるために標的にすることができる加齢の重要な特質である（Ｆｕｒｍａｎら、２０１９、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２５（１２）：１８２２～３２頁；ＦｅｒｒｕｃｃｉおよびＦａｂｂｒｉ、２０１８、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ １５（９）：５０５～２２頁；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ ２０００、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５１：２４５～７０頁）。
変化した細胞間伝達、特に増加した慢性炎症およびＩＬ６上方制御は、老化過程を予防、処置し、および／または逆転させるために標的にすることができる加齢の重要な特質である（Ｆｕｒｍａｎら、２０１９、Ｎａｔｕｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ２５（１２）：１８２２～３２頁；ＦｅｒｒｕｃｃｉおよびＦａｂｂｒｉ、２０１８、Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ．Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ １５（９）：５０５～２２頁；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ ２０００、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５１：２４５～７０頁）。
【0396】
８．１ ＩＬ－６の血清レベルに及ぼすＸ２０３の影響
ＩＬ－６は加齢と強く関連している（Ｍａｇｇｉｏら、２００６、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ．６１（６）：５７５～５８４頁；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ ２０００、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５１：２４５～７０頁）。図５０は、高齢（１１０週齢）雄雌マウスの血清ＩＬ－６レベルに及ぼす、抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）またはＩｇＧアイソタイプ対照による処置の影響を示す。Ｘ２０３中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの血清中のＩＬ－６タンパク質のレベルを有意に低減する。
ＩＬ－６は加齢と強く関連している（Ｍａｇｇｉｏら、２００６、Ｊ Ｇｅｒｏｎｔｏｌ Ａ Ｂｉｏｌ Ｓｃｉ Ｍｅｄ Ｓｃｉ．６１（６）：５７５～５８４頁；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ ２０００、Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ５１：２４５～７０頁）。図５０は、高齢（１１０週齢）雄雌マウスの血清ＩＬ－６レベルに及ぼす、抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）またはＩｇＧアイソタイプ対照による処置の影響を示す。Ｘ２０３中和ＩＬ－１１抗体は、高齢マウスの血清中のＩＬ－６タンパク質のレベルを有意に低減する。
【0397】
８．２ 肝臓、腎臓および筋肉における炎症マーカーに及ぼすＸ２０３の影響
高齢マウスへの中和抗ＩＬ－１１（Ｘ２０３）対ＩｇＧの投与は、炎症のマーカー（ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＴＮＦａ、ＩＬ－１ｂ、ＩＬ－１１およびＩＬ－６）を低減し、それは肝臓（図５２）、腎臓（図５３）および骨格筋（図５４）を含む組織にわたる加齢の変化した細胞間伝達特質に対応する。ＩＬ－６への影響は、さらにｑＰＣＲレベルで肝臓および腎臓で顕著である。
高齢マウスへの中和抗ＩＬ－１１（Ｘ２０３）対ＩｇＧの投与は、炎症のマーカー（ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＴＮＦａ、ＩＬ－１ｂ、ＩＬ－１１およびＩＬ－６）を低減し、それは肝臓（図５２）、腎臓（図５３）および骨格筋（図５４）を含む組織にわたる加齢の変化した細胞間伝達特質に対応する。ＩＬ－６への影響は、さらにｑＰＣＲレベルで肝臓および腎臓で顕著である。
【0398】
要約すると、本明細書に開示されるデータは、ＩＬ－１１媒介シグナル伝達の拮抗（例えば、抗ＩＬ－１１療法による）が、加齢の複数の特質：栄養感知、タンパク平衡の減少、細胞老化および変化した細胞間伝達（炎症）を低減することを実証する。これは、複数の加齢モジュールを並行して同時に標的にすることによって達成される：ＥＲＫ、ＡＭＰＫおよびｍＴＯＲＣ１。
【0399】
さらに、データは以下を開示する：
・ ＩＬ１１刺激細胞へのＭＥＫ１／２阻害剤Ｕ０１２６の投与は、ＩＬ１１誘導ｍＴＯＲＣ１／Ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化を停止するＬＫＢ１／ＡＭＰＫのＥＲＫ媒介不活性化を阻止する。
・ ＩＬ１１刺激細胞へのＭＥＫ１／２阻害剤Ｕ０１２６の投与は、ＩＬ１１誘導ｍＴＯＲＣ１／Ｐ７０Ｓ６Ｋ活性化を停止するＬＫＢ１／ＡＭＰＫのＥＲＫ媒介不活性化を阻止する。
【0400】
・ ５５～１１０週齢マウスへの抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）対ＩｇＧ対照の投与は、より少ないＥＲＫ活性化、ＬＫＢ１／ＡＭＰＫ活性の回復ならびに低減されたｍＴＯＲＣ１活性および老化マーカー（ｐ１６／ｐ２１）をもたらす。これは、組織を越えて見られる。
【0401】
・ １１０週齢のＩＬ１１ＲＡ１の欠失したマウスはＸ２０３投与で見られる影響を写し、組織を越えて若齢マウスにより類似したシグナル伝達プロファイルを有する。
・ 高齢マウスへのＸ２０３対ＩｇＧの投与は、脂肪、グルコースのより優れた血清レベルによる向上した多罹患率、より少ない組織線維症、より優れた腎機能、低減された組織炎症、低減された肥満およびより少ない虚弱を写す。
・ 高齢マウスへのＸ２０３対ＩｇＧの投与は、脂肪、グルコースのより優れた血清レベルによる向上した多罹患率、より少ない組織線維症、より優れた腎機能、低減された組織炎症、低減された肥満およびより少ない虚弱を写す。
【0402】
・ 高齢マウスへのＸ２０３対ＩｇＧの投与は、炎症のマーカー（ＣＣＬ２、ＣＣＬ５、ＴＮＦａ、ＩＬ１ｂ、ＩＬ１１およびＩＬ６）－加齢の変化した細胞間伝達特質－を、肝臓、腎臓および骨格筋を含む組織を越えて向上させる。加齢と強く関連するＩＬ－６への影響は、ＱＰＣＲレベルで肝臓および腎臓で顕著であり、ＩＬ６レベルは、抗ＩＬ１１投与の後の高齢マウスの血清で系統的により低い（Ｍａｇｇｉｏら、２００６；ＥｒｓｈｌｅｒおよびＫｅｌｌｅｒ ２０００）。
【0403】
・ １１０週齢のＩｌ１１ｒａ１欠失マウスでは、同腹仔対照と比較して、脂肪、グルコースのより優れた血清レベルによる低減された多罹患率、より少ない組織線維症、より優れた腎機能、低減された組織炎症、低減された肥満およびより少ない虚弱がある。
【0404】
・ 老化のｉｎ ｖｉｔｒｏモデル（ＡＭＬ１２細胞）では、抗ＩＬ１１または抗ＩＬ１１ＲＡは細胞老化を阻止し、逆転もさせる。
・ 認定された虚弱スコアリングシステム（Ｓｕｋｏｆｆ Ｒｉｚｚｏら、２０１８）を使用して、５５～１１０週の抗ＩＬ１１によるマウスの処置は、対照と比較して統計学的に有意により少ない虚弱と関連している。
・ 認定された虚弱スコアリングシステム（Ｓｕｋｏｆｆ Ｒｉｚｚｏら、２０１８）を使用して、５５～１１０週の抗ＩＬ１１によるマウスの処置は、対照と比較して統計学的に有意により少ない虚弱と関連している。
【0405】
・ 認定された虚弱スコアリングシステム（Ｓｕｋｏｆｆ Ｒｉｚｚｏら、２０１８）を使用して、ＩＬ１１ＲＡ１ ＫＯマウスは、野生型同腹仔対照と比較して統計学的に有意により少ない虚弱を有する。
【0406】
実施例９：実施例５～８で使用した材料および方法
化学物質
過酸化水素（Ｈ２Ｏ２、３１６４２、Ｓｉｇｍａ）、パルミテート（Ｐ５５８５、Ｓｉｇｍａ）、ラパマイシン（９９０４、ＣＳＴ）、Ｕ０１２６（９９０３、ＣＳＴ）。Ｕ０１２６は、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２、一種のＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼ、ワートマニン（９９５１、ＣＳＴ）の高度に選択的な阻害剤である。
化学物質
過酸化水素（Ｈ２Ｏ２、３１６４２、Ｓｉｇｍａ）、パルミテート（Ｐ５５８５、Ｓｉｇｍａ）、ラパマイシン（９９０４、ＣＳＴ）、Ｕ０１２６（９９０３、ＣＳＴ）。Ｕ０１２６は、ＭＥＫ１およびＭＥＫ２、一種のＭＡＰＫ／ＥＲＫキナーゼ、ワートマニン（９９５１、ＣＳＴ）の高度に選択的な阻害剤である。
【0407】
細胞培養
細胞は３７℃および５％ＣＯ２で増殖させ、維持した。増殖培地は２～３日ごとに更新し、細胞は標準のトリプシン処理技術を使用して８０％集密で継代させた。全ての実験は、低い細胞継代（＜Ｐ３）で実行した。細胞は、刺激の前に基礎培地中で一晩血清を絶食させた。図面凡例で概説されるように、細胞は異なる処置条件および期間で刺激した。刺激した細胞は、同じ条件下であるが刺激なしで同じ期間増殖させた未刺激細胞と比較した。
細胞は３７℃および５％ＣＯ２で増殖させ、維持した。増殖培地は２～３日ごとに更新し、細胞は標準のトリプシン処理技術を使用して８０％集密で継代させた。全ての実験は、低い細胞継代（＜Ｐ３）で実行した。細胞は、刺激の前に基礎培地中で一晩血清を絶食させた。図面凡例で概説されるように、細胞は異なる処置条件および期間で刺激した。刺激した細胞は、同じ条件下であるが刺激なしで同じ期間増殖させた未刺激細胞と比較した。
【0408】
一次ヒト心臓線維芽細胞（ＨＣＦ）
一次ＨＣＦ（６３３０、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、線維芽細胞培地２（２３３１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）、線維芽細胞増殖補助剤２（ＦＧＳ－２、２３８２、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）、５％ウシ胎児血清および１％ペニシリン－ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ、０３５３、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）を含有するＦＭ－２完全培地で増殖させ、維持した。
一次ＨＣＦ（６３３０、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、線維芽細胞培地２（２３３１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）、線維芽細胞増殖補助剤２（ＦＧＳ－２、２３８２、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）、５％ウシ胎児血清および１％ペニシリン－ストレプトマイシン（Ｐ／Ｓ、０３５３、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）を含有するＦＭ－２完全培地で増殖させ、維持した。
【0409】
一次ヒト肝星状細胞（ＨＳＣ）
ＨＳＣ（５３００、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、ポリ－Ｌ－リシンでコーティングされたプレート（２μｇ／ｃｍ２、０４０３、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）の星状細胞完全培地（５３０１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）で培養した。
ＨＳＣ（５３００、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、ポリ－Ｌ－リシンでコーティングされたプレート（２μｇ／ｃｍ２、０４０３、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）の星状細胞完全培地（５３０１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）で培養した。
【0410】
一次ヒト肝細胞
一次ヒト肝細胞（５２００、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、２％ウシ胎児血清、１％ペニシリン－ストレプトマイシンを追加した肝細胞培地（５２０１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）で、３７℃および５％ＣＯ２で維持した。
一次ヒト肝細胞（５２００、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）は、２％ウシ胎児血清、１％ペニシリン－ストレプトマイシンを追加した肝細胞培地（５２０１、ＳｃｉｅｎＣｅｌｌ）で、３７℃および５％ＣＯ２で維持した。
【0411】
ＡＭＬ１２
ＡＭＬ１２（ＡＴＣＣ）は、１０％ＦＢＳ、１０μｇ／ｍｌインスリン、５．５μｇ／ｍｌトランスフェリン、５ｎｇ／ｍｌセレンおよび４０ｎｇ／ｍｌデキサメタゾンを追加したＤＭＥＭ：Ｆ１２培地（３０－２００６、ＡＴＣＣ）で培養した。
ＡＭＬ１２（ＡＴＣＣ）は、１０％ＦＢＳ、１０μｇ／ｍｌインスリン、５．５μｇ／ｍｌトランスフェリン、５ｎｇ／ｍｌセレンおよび４０ｎｇ／ｍｌデキサメタゾンを追加したＤＭＥＭ：Ｆ１２培地（３０－２００６、ＡＴＣＣ）で培養した。
【0412】
老化誘導
記載される通り（Ｔｒｉｐａｔｈｉ、ＹｅｎおよびＳｉｎｇｈ、２０２０ ＳＴＡＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ１（２）：１０００６４）、７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化ＡＭＬ１２を作製した。予防試験のために、ＡＭＬ１２細胞を老化誘導段階（１日目から７日目）の回復期間中にＩｇＧまたはＸ２０９の２μｇ／ｍｌで処置し；１０日目に全ＲＮＡの収集のために細胞を採取した。逆転試験のために、老化を先ず７日間誘導し、その後２μｇ／ｍｌのＩｇＧ、Ｘ２０３またはＸ２０９で３日間処置し；１０日目に全ＲＮＡの収集のために細胞を採取した。
記載される通り（Ｔｒｉｐａｔｈｉ、ＹｅｎおよびＳｉｎｇｈ、２０２０ ＳＴＡＲ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ１（２）：１０００６４）、７日間にわたって各日に細胞をＨ２Ｏ２の致死量以下の濃度（０．７５ｍＭ）で１時間処置し、その後２３時間回復させることによって老化ＡＭＬ１２を作製した。予防試験のために、ＡＭＬ１２細胞を老化誘導段階（１日目から７日目）の回復期間中にＩｇＧまたはＸ２０９の２μｇ／ｍｌで処置し；１０日目に全ＲＮＡの収集のために細胞を採取した。逆転試験のために、老化を先ず７日間誘導し、その後２μｇ／ｍｌのＩｇＧ、Ｘ２０３またはＸ２０９で３日間処置し；１０日目に全ＲＮＡの収集のために細胞を採取した。
【0413】
動物モデル
抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）のｉｎ ｖｉｖｏ投与
４６週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入した。５５週齢から開始して３週間ごとに４０ｍｇ／ｋｇのＸ２０３またはアイソタイプ対照ＩｇＧ抗体（１１Ｅ１０）を受ける（ＩＰ）ように１：１でマウスをランダム化した。血液および組織収集のために、１１０週齢時にマウスを屠殺した。対照として使用した１２週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスは、Ｉｎｖｉｖｏｓ（Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ）から購入した。
抗ＩＬ１１（Ｘ２０３）のｉｎ ｖｉｖｏ投与
４６週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスを、Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入した。５５週齢から開始して３週間ごとに４０ｍｇ／ｋｇのＸ２０３またはアイソタイプ対照ＩｇＧ抗体（１１Ｅ１０）を受ける（ＩＰ）ように１：１でマウスをランダム化した。血液および組織収集のために、１１０週齢時にマウスを屠殺した。対照として使用した１２週齢の雄雌Ｃ５７Ｂ１／６Ｊマウスは、Ｉｎｖｉｖｏｓ（Ｓｉｎｇａｐｏｒｅ）から購入した。
【0414】
Ｉｌ１１ｒａ１欠失マウス（Ｉｌ１１ｒａ１ ＫＯ、Ｂ６．１２９Ｓ１－Ｉｌ１１ｒａｔｍ１Ｗｅｈｉ／Ｊ、Ｊａｃｋｓｏｎ’ｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ）
血液および組織の収集のために、１１０週齢時に雄雌のＩｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型）およびＩｌ１１ｒａ１－／－マウスを屠殺し；それぞれの遺伝子型の１０～１２週齢の雄雌マウスを対照として使用した。
血液および組織の収集のために、１１０週齢時に雄雌のＩｌ１１ｒａ１＋／＋（野生型）およびＩｌ１１ｒａ１－／－マウスを屠殺し；それぞれの遺伝子型の１０～１２週齢の雄雌マウスを対照として使用した。
【0415】
体組成のためのエコーＭＲＩ分析
エンドポイント全体脂肪量および除脂肪質量の測定は、４ｉｎ１ Ｂｏｄｙ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ ｆｏｒ Ｌｉｖｅ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌを使用したＥｃｈｏＭＲＩ分析によって屠殺の２日前に実行した。
エンドポイント全体脂肪量および除脂肪質量の測定は、４ｉｎ１ Ｂｏｄｙ Ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ Ａｎａｌｙｚｅｒ ｆｏｒ Ｌｉｖｅ Ｓｍａｌｌ Ａｎｉｍａｌを使用したＥｃｈｏＭＲＩ分析によって屠殺の２日前に実行した。
【0416】
虚弱スコアリング
エンドポイント虚弱スコアリングは、認定された虚弱スコアリングシステム（Ｓｕｋｏｆｆ Ｒｉｚｚｏら、２０１８、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｕｓｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ ８（２）：ｅ４５）を使用して、屠殺の２日前に実行した。
エンドポイント虚弱スコアリングは、認定された虚弱スコアリングシステム（Ｓｕｋｏｆｆ Ｒｉｚｚｏら、２０１８、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｕｓｅ Ｂｉｏｌｏｇｙ ８（２）：ｅ４５）を使用して、屠殺の２日前に実行した。
【0417】
イムノブロッティング
ウエスタンブロットは、一次ヒト心臓線維芽細胞（ＨＣＦ）、肝星状細胞（ＨＳＣ）、肝細胞、肝臓、腓腹筋、ヒラメ筋および腹部脂肪からの全タンパク質抽出物で実行した。プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）を含有するＲＩＰＡ溶解および抽出バッファー（８９９０１、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で、細胞または組織溶解液をホモジナイズした。タンパク質溶解液をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分離し、ＰＶＤＦ膜に移し、３％ＢＳＡで１時間ブロックし、ホスホ－ＡＣＣ（１１８１８、ＣＳＴ）、ＡＣＣ（３６７６、ＣＳＴ）、ホスホ－ＡＭＰＫ（２５３５、ＣＳＴ）、ＡＭＰＫ（５８３２、ＣＳＴ）、ホスホ－ＥＲＫ１／２（４３７０、ＣＳＴ）、ＥＲＫ１／２（４６９５、ＣＳＴ）、ＧＡＰＤＨ（２１１８、ＣＳＴ）、ホスホ－ＬＫＢ１ Ｓ４２８（３４８２、ＣＳＴ）、ホスホ－ＬＫＢ１（Ｓ３２５）、ＬＫＢ１（３０４７、ＣＳＴ）、ホスホ－ｍＴＯＲ（２９７１、ＣＳＴ）、ｍＴＯＲ（２９７２、ＣＳＴ）、ｐ１６（ａｂ２３２４０２、Ａｂｃａｍ）、ｐ２１（６４０１６、ＣＳＴ）、ホスホ－ｐ７０Ｓ６Ｋ（９２０５、ＣＳＴ）、ｐ７０Ｓ６Ｋ（２７０８、ＣＳＴ）、ホスホ－Ｓ６リボソームタンパク質（４８５８、ＣＳＴ）またはＳ６リボソームタンパク質（２２１７、ＣＳＴ）と一晩インキュベートした。全ての一次抗体は、１％ＢＳＡに１：１０００で希釈される。ＥＣＬ検出システム（Ｐｉｅｒｃｅ）を抗ウサギＨＲＰ（３％ＢＳＡに１：２０００、７０７４、ＣＳＴ）と使用して、タンパク質バンドを可視化した。
ウエスタンブロットは、一次ヒト心臓線維芽細胞（ＨＣＦ）、肝星状細胞（ＨＳＣ）、肝細胞、肝臓、腓腹筋、ヒラメ筋および腹部脂肪からの全タンパク質抽出物で実行した。プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（Ｒｏｃｈｅ）を含有するＲＩＰＡ溶解および抽出バッファー（８９９０１、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）で、細胞または組織溶解液をホモジナイズした。タンパク質溶解液をＳＤＳ－ＰＡＧＥによって分離し、ＰＶＤＦ膜に移し、３％ＢＳＡで１時間ブロックし、ホスホ－ＡＣＣ（１１８１８、ＣＳＴ）、ＡＣＣ（３６７６、ＣＳＴ）、ホスホ－ＡＭＰＫ（２５３５、ＣＳＴ）、ＡＭＰＫ（５８３２、ＣＳＴ）、ホスホ－ＥＲＫ１／２（４３７０、ＣＳＴ）、ＥＲＫ１／２（４６９５、ＣＳＴ）、ＧＡＰＤＨ（２１１８、ＣＳＴ）、ホスホ－ＬＫＢ１ Ｓ４２８（３４８２、ＣＳＴ）、ホスホ－ＬＫＢ１（Ｓ３２５）、ＬＫＢ１（３０４７、ＣＳＴ）、ホスホ－ｍＴＯＲ（２９７１、ＣＳＴ）、ｍＴＯＲ（２９７２、ＣＳＴ）、ｐ１６（ａｂ２３２４０２、Ａｂｃａｍ）、ｐ２１（６４０１６、ＣＳＴ）、ホスホ－ｐ７０Ｓ６Ｋ（９２０５、ＣＳＴ）、ｐ７０Ｓ６Ｋ（２７０８、ＣＳＴ）、ホスホ－Ｓ６リボソームタンパク質（４８５８、ＣＳＴ）またはＳ６リボソームタンパク質（２２１７、ＣＳＴ）と一晩インキュベートした。全ての一次抗体は、１％ＢＳＡに１：１０００で希釈される。ＥＣＬ検出システム（Ｐｉｅｒｃｅ）を抗ウサギＨＲＰ（３％ＢＳＡに１：２０００、７０７４、ＣＳＴ）と使用して、タンパク質バンドを可視化した。
【0418】
ヒドロキシプロリンアッセイ
マウス肝臓中の全ヒドロキシプロリン含有量を、Ｑｕｉｃｋｚｙｍｅ全コラーゲンアッセイキット（ＱＺＢｔｏｔｃｏ１５、Ｑｕｉｃｋｚｙｍｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して測定した。
マウス肝臓中の全ヒドロキシプロリン含有量を、Ｑｕｉｃｋｚｙｍｅ全コラーゲンアッセイキット（ＱＺＢｔｏｔｃｏ１５、Ｑｕｉｃｋｚｙｍｅ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を使用して測定した。
【0419】
酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）
マウス血清中のＩＬ６のレベルは、マウスＩＬ－６ Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡキット（Ｍ６０００Ｂ；Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して定量化した。
マウス血清中のＩＬ６のレベルは、マウスＩＬ－６ Ｑｕａｎｔｉｋｉｎｅ ＥＬＩＳＡキット（Ｍ６０００Ｂ；Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して定量化した。
【0420】
ＲＴ－ｑＰＣＲ
Ｔｒｉｚｏｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して、全ＲＮＡをＡＭＬ１２または急速冷凍組織から抽出した。ＰＣＲ増幅は、ｉＳｃｒｉｐｔ ｃＤＮＡ合成キット（Ｂｉｏｒａｄ）を使用して実行した。遺伝子発現分析は、Ｉｌ１１（Ｍｍ００４３４１６２）の場合はＴａｑＭａｎ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）により、またはＣｃｌ２、Ｃｃｌ５、Ｇａｐｄｈ、Ｉｌ１β、Ｉｌ６、Ｉｌ８、ｐ１６、ｐ２１、Ｔｎｆαの場合はＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓ（商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ）を使用したｆａｓｔ ＳＹＢＲ ｇｒｅｅｎ（Ｑｉａｇｅｎ）技術により、４０サイクルにわたって２反復試料で実行した。発現データはＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現に正規化し、変化倍率は２－ΔΔＣｔ方法を使用して計算した。
Ｔｒｉｚｏｌ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ）およびＲＮｅａｓｙミニキット（Ｑｉａｇｅｎ）を使用して、全ＲＮＡをＡＭＬ１２または急速冷凍組織から抽出した。ＰＣＲ増幅は、ｉＳｃｒｉｐｔ ｃＤＮＡ合成キット（Ｂｉｏｒａｄ）を使用して実行した。遺伝子発現分析は、Ｉｌ１１（Ｍｍ００４３４１６２）の場合はＴａｑＭａｎ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）により、またはＣｃｌ２、Ｃｃｌ５、Ｇａｐｄｈ、Ｉｌ１β、Ｉｌ６、Ｉｌ８、ｐ１６、ｐ２１、Ｔｎｆαの場合はＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓ（商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍ）を使用したｆａｓｔ ＳＹＢＲ ｇｒｅｅｎ（Ｑｉａｇｅｎ）技術により、４０サイクルにわたって２反復試料で実行した。発現データはＧＡＰＤＨ ｍＲＮＡ発現に正規化し、変化倍率は２－ΔΔＣｔ方法を使用して計算した。
【0421】
【表3】
【0422】
免疫蛍光染色
１１０週齢の野生型およびＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス（Ｉｌ１１－Ｅｇｆｐ＋／－；（Ｗｉｄｊａｊａら、２０２１、Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３（５９７））からの腎臓、心臓、肺および脾臓を採取し、４％パラホルムアルデヒドに固定し、１５％および３０％スクロースで脱水し、ＯＣＴ ｃｒｙｏｂｌｏｃｋに包埋した。切片（７μｍ）は、マウス－オン－マウスブロッキング（ＭＫＢ－２２１３－１、Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｓ）および５％正常ヤギ血清と組み合わせたメタノール：アセトン（１：１）および０．１％Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００中での固定によって標準方法を使用して調製した。腎臓切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ａｂ２９０、Ａｂｃａｍ（１：５００））およびαＳＭＡ（αＳＭＡ、ａｂ７８１７、Ａｂｃａｍ（１：２００））のために染色し；心臓（心房および心室）切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ｓｃ－９９６６、Ｓａｎｔａｃｒｕｚ（１：１００））およびαＳＭＡ（αＳＭＡ、ａｂ５６９４、Ａｂｃａｍ（１：５００））のために染色し；脾臓切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ｓｃ－９９６６、Ｓａｎｔａｃｒｕｚ（１：１００））のために染色した。組織切片はその後蛍光体とコンジュゲートしている適当な二次抗体：ヤギ抗ウサギＩｇＧ ＡＦ６４７（Ａ２７０４０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（１：５００））およびヤギ抗マウスＩｇＧ ＡＦ５５５（Ａ２８１８０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（１：５００））とインキュベートし、続いて７０％エタノール中の０．１％スーダンブラックＢによる自己蛍光クエンチングを行った。
１１０週齢の野生型およびＩＬ１１：ＥＧＦＰリポーターマウス（Ｉｌ１１－Ｅｇｆｐ＋／－；（Ｗｉｄｊａｊａら、２０２１、Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １３（５９７））からの腎臓、心臓、肺および脾臓を採取し、４％パラホルムアルデヒドに固定し、１５％および３０％スクロースで脱水し、ＯＣＴ ｃｒｙｏｂｌｏｃｋに包埋した。切片（７μｍ）は、マウス－オン－マウスブロッキング（ＭＫＢ－２２１３－１、Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｓ）および５％正常ヤギ血清と組み合わせたメタノール：アセトン（１：１）および０．１％Ｔｒｉｔｏｎ－Ｘ１００中での固定によって標準方法を使用して調製した。腎臓切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ａｂ２９０、Ａｂｃａｍ（１：５００））およびαＳＭＡ（αＳＭＡ、ａｂ７８１７、Ａｂｃａｍ（１：２００））のために染色し；心臓（心房および心室）切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ｓｃ－９９６６、Ｓａｎｔａｃｒｕｚ（１：１００））およびαＳＭＡ（αＳＭＡ、ａｂ５６９４、Ａｂｃａｍ（１：５００））のために染色し；脾臓切片は、ＥＧＦＰ（ＧＦＰ、ｓｃ－９９６６、Ｓａｎｔａｃｒｕｚ（１：１００））のために染色した。組織切片はその後蛍光体とコンジュゲートしている適当な二次抗体：ヤギ抗ウサギＩｇＧ ＡＦ６４７（Ａ２７０４０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（１：５００））およびヤギ抗マウスＩｇＧ ＡＦ５５５（Ａ２８１８０、ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ（１：５００））とインキュベートし、続いて７０％エタノール中の０．１％スーダンブラックＢによる自己蛍光クエンチングを行った。
【0423】
参考文献
以下の引用は、参照により完全に組み込まれる。
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Dolgin, Elie. 2020. “Send in the Senolytics.” Nature Biotechnology38 (12): 1371-77.
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Ferrucci, Luigi, and Elisa Fabbri. 2018. “Inflammageing: Chronic Inflammation in Ageing, Cardiovascular Disease, and Frailty.” Nature Reviews. Cardiology 15 (9): 505-22.
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Zhang, Yan, Jinjin Zhang, and Shixuan Wang. 2021. “The Role of Rapamycin in Healthspan Extension via the Delay of Organ Aging.” Ageing Research Reviews 70 (September): 101376.
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【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6A】
【図6B】
【図6C】
【図6D】
【図7A】
【図7B】
【図7C】
【図7D】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【図16】
【図17】
【図18】
【図19】
【図20】
【図21】
【図22】
【図23】
【図24】
【図25】
【図26】
【図27】
【図28】
【図29】
【図30】
【図31】
【図32】
【図33】
【図34】
【図35】
【図36】
【図37】
【図38】
【図39】
【図40】
【図41】
【図42】
【図43】
【図44】
【図45】
【図46】
【図47】
【図48】
【図49】
【図50】
【図51】
【図52】
【図53】
【図54】
【配列表】
【国際調査報告】