特表 2023-548424 改善されたオメガ－３含有組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-11-16

(54)【発明の名称】改善されたオメガ－３含有組成物

(51)【国際特許分類】

   C11B 1/04 20060101AFI20231109BHJP

   C11C 3/00 20060101ALI20231109BHJP

   C11B 11/00 20060101ALI20231109BHJP

   C11B 1/10 20060101ALI20231109BHJP

   A23L 33/115 20160101ALI20231109BHJP

【ＦＩ】

C11B1/04

C11C3/00

C11B11/00

C11B1/10

A23L33/115

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023530197

(86)(22)【出願日】2020-11-20

(85)【翻訳文提出日】2023-07-18

(86)【国際出願番号】 US2020061561

(87)【国際公開番号】W WO2022108595

(87)【国際公開日】2022-05-27

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】513267729

【氏名又は名称】ヌーター／エリクセン，インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100105957

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100068755

【弁理士】

【氏名又は名称】恩田 博宣

(74)【代理人】

【識別番号】100142907

【弁理士】

【氏名又は名称】本田 淳

(74)【代理人】

【識別番号】100152489

【弁理士】

【氏名又は名称】中村 美樹

(72)【発明者】

【氏名】グドール、ブライアン エル．

(72)【発明者】

【氏名】ククレフ、ドミトリー

(72)【発明者】

【氏名】ボスティック、グレン エル．

【テーマコード（参考）】

4B018

4H059

【Ｆターム（参考）】

4B018LB10

4B018MA01

4B018MA04

4B018MD08

4B018MD10

4B018MD12

4B018MD14

4B018MD89

4B018MF01

4B018MF04

4B018MF14

4H059BA30

4H059BA32

4H059BA83

4H059BB03

4H059BB05

4H059BB06

4H059BB07

4H059BC06

4H059BC41

4H059BC47

4H059CA13

4H059CA24

4H059EA03

(57)【要約】

本開示は、生体利用可能な油組成物に関し、ここで総脂質含量の少なくとも２０重量％は糖脂質又はリン脂質などの極性脂質を含み、前記極性脂質の少なくとも３０重量％は糖脂質を含み、前記油組成物の４重量％以下はクロロフィル種で構成される。藻類油又は抽出物から前記油組成物を含む製剤及び前記油組成物を製造する方法も開示されている。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも２０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分の重量％で約３０％より多くは糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の４％以下をクロロフィル濃縮物として含む、組成物。

【請求項2】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約７５％の総脂質濃縮物を有する、請求項１に記載の組成物。

【請求項3】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％の重量％で少なくとも約９０％の総脂質濃縮物を有する、請求項１に記載の組成物。

【請求項4】

重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも約５０％が極性脂質画分を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項5】

前記組成物が、その総重量％の約１．０％以下をクロロフィル濃縮物として含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項6】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総オメガ３をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項7】

前記組成物中の総オメガ３の重量％が、重量％で少なくとも約３０％を含む、請求項６に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総ＥＰＡをさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項9】

前記糖脂質が、その極性脂質の重量％として少なくとも約６０％を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物が重量で少なくとも約２０％の糖脂質を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物が重量で少なくとも約４０％の糖脂質を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物が、その極性脂質の重量％として、重量でその極性脂質の少なくとも約４０％を含む、リン脂質をさらに含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項13】

前記リン脂質が、重量でその極性脂質の少なくとも約６０％を含む、請求項１２に記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物が、重量で少なくとも約２０％のリン脂質を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項15】

前記組成物が、重量で少なくとも約４０％のリン脂質を含む、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物が、重量で約４％以下の多糖類を含む、請求項１に記載の組成物。

【請求項17】

前記組成物が、重量で約２％以下の多糖類を含む、請求項１６に記載の組成物。

【請求項18】

前記組成物が周囲光において透明から濃い琥珀色を呈する、請求項１に記載の組成物。

【請求項19】

前記組成物が約２１．１℃（７０°Ｆ）で粘稠～ワックス状のオイルテクスチャー（ｏｉｌ ｔｅｘｔｕｒｅ）を有することを特徴とする、請求項１に記載の組成物。

【請求項20】

総脂質濃縮物を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも５０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分は、その極性脂質画分の重量％として少なくとも４０％の糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の約１％以下をクロロフィル濃縮物として含む、組成物。

【請求項21】

総組成物が、重量で少なくとも約２０％の糖脂質を含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項22】

前記総組成物が、重量で少なくとも約４０％の糖脂質を含む、請求項２１に記載の組成物。

【請求項23】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約７５％の総脂質濃縮物を有する、請求項２０に記載の組成物。

【請求項24】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約９０％の総脂質濃縮物を有する、請求項２３に記載の組成物。

【請求項25】

重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも約７０％が極性脂質画分を含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項26】

前記組成物が、その総重量％の約０．１％以下をクロロフィル濃縮物として含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項27】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総オメガ３をさらに含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項28】

前記組成物中の総オメガ３の重量％が少なくとも約３０％を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項29】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総ＥＰＡをさらに含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項30】

前記組成物が、その極性脂質の重量で少なくとも約４０％のリン脂質をさらに含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項31】

前記リン脂質が、その極性脂質の重量％として少なくとも約６０％を含む、請求項３０に記載の組成物。

【請求項32】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％のリン脂質を含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項33】

前記組成物が、重量％で少なくとも約４０％のリン脂質を含む、請求項３２に記載の組成物。

【請求項34】

前記組成物が、重量％で約４％以下の多糖類を含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項35】

前記組成物が、重量で約１％以下の多糖類を含む、請求項３４に記載の組成物。

【請求項36】

前記組成物が周囲光において透明から濃い琥珀色を呈する、請求項２０に記載の組成物。

【請求項37】

前記組成物が約２１．１℃（７０°Ｆ）で粘稠～ワックス状のオイルテクスチャーを有する、請求項２０に記載の組成物。

【請求項38】

製剤であって、
総脂質濃縮物を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも２０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分の重量％で約３０％より多くは糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の４％以下をクロロフィル濃縮物として含む、組成物と、
その他のオメガ３含有油、抗酸化剤、ビタミン、及びカンナビノイドからなる群より選ばれる１つ以上の添加剤と、
を含む、製剤。

【請求項39】

前記抗酸化剤が、アスタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピン、α－カロテン、β－カロテン、及びクリプトキサンチンからなる群より選ばれる、請求項３８に記載の製剤。

【請求項40】

クロロフィル含量の低い油組成物の製造方法であって、前記方法は、
ａ．極性脂質画分及び非極性脂質画分の両方を含み、クロロフィル濃縮物を有する藻類油又は抽出物を得るステップと、
ｂ．前記藻類油又は抽出物における非極性成分から極性成分を分離するために極性脂質画分及び非極性脂質画分の極性特性を使用するステップと、
ｃ．非極性含有画分から実質的に全てのクロロフィル濃縮物を漂白するステップと、
ｄ．前記極性脂質画分及び非極性脂質画分を再結合して、クロロフィル含量の低い油組成物を生成するステップと、を含む、方法。

【請求項41】

クロロフィル含量の低い油組成物の製造方法であって、前記方法は、
ａ．藻類ペーストを得るステップと、
ｂ．前記藻類ペーストをアルコールで抽出して、水分含量の低い藻類脂質のアルコール抽出物を形成するステップと、
ｃ．前記アルコール抽出物を有機溶媒でさらに抽出して非極性脂質画分を分離することによって有機溶媒層中の非極性脂質画分を実質的に除去するステップと、
ｄ．色素及び極性脂質を含むアルコール層を分離するステップと、
ｅ．前記アルコール層に水を加え、前記有機溶媒を順次加えてさらに抽出することによって、色素画分が実質的に除去され、前記極性脂質を含む水－アルコール層を形成するステップと、
ｆ．蒸発によって前記水－アルコール層から極性脂質画分を分離するステップと、を含む、方法。

【請求項42】

前記有機溶媒がヘキサン又はヘプタンである、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記方法が色素含有画分の蒸発によって色素濃縮物を形成するステップをさらに含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項44】

前記色素濃縮物がカロテノイド及びクロロフィルを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記非極性脂質画分がトリグリセリドを含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項46】

前記極性脂質画分が糖脂質及びリン脂質を含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項47】

前記極性脂質画分がＥＰＡを含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項48】

前記極性脂質画分がパルミトレイン酸を含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項49】

前記極性脂質画分が、重量％で約４％以下のクロロフィルを含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項50】

前記極性脂質画分が、重量％で約１％以下のクロロフィルを含む、請求項４１に記載の方法。

【請求項51】

前記極性脂質画分が、重量％で約０．１％以下のクロロフィルを含む、請求項４１に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

［関連出願］
当該なし。

【0002】

［連邦後援研究又は開発に関する陳述］
当該なし。

【背景技術】

【0003】

今日、オメガ－３油は、養殖業、漁業、及びその他の海洋資源のみでヒトの消費のための年間約８０万トンのオメガ－３脂肪酸を供給できるため、需要が高い。これは、世界人口に毎日５００ｍｇのオメガ－３脂肪酸を供給するのに必要なヒトの栄養要求量である１４０万トンを下回っており、人口増加によってさらに悪化すると考えられる。オメガ－３脂肪酸の欠乏は、世界中で観察されており、特に北米、中央ヨーロッパ、中東、インド、ブラジル、及びイギリスに居住する人々に影響を及ぼしており、各国内では地域的及び社会経済的差が発見された。自然界には３つの主要なオメガ－３脂肪酸が発見される。１８個の炭素と３つの二重結合を有するα－リノレン酸（ａｌｐｈａ ｌｉｎｏｌｅｉｃ ａｃｉｄ；ＡＬＡ）は、例えば、亜麻仁、大豆油、及びオリーブなどに含まれている。乳児の発達に重要な２２個の炭素と６つの二重結合を有するドコサヘキサエン酸（ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ；ＤＨＡ）は、哺乳類（ヒトを含む）の母乳や魚油に含まれており、水生種（藻類）でのみ成長する。２０個の炭素と５つの二重結合を有するエイコサペンタエン酸（Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ；ＥＰＡ）は、ＤＨＡと同様に水生種（藻類）でのみ増え、藻類を食べるクリルオキアミや魚、あるいは藻類自体から抽出できる。

【0004】

「働く藻類（ｗｏｒｋｉｎｇ ａｌｇａｅ）」、すなわち、太陽光又は人工光及び光合成を使用して成長する藻類は、本質的に極性の脂質を含み、生体利用可能である一方、他の成分も含むが、これらの成分は前記藻類から抽出された油が全体的に非常に暗くてほぼ黒っぽく見えるようにし、また粘性が高く、タール状の黒い固体に似ている。

【0005】

栄養補助食品（ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌ）及び医薬品に使用するための、低粘度の、クロロフィル含量の低い、明るい琥珀色から濃い琥珀色の油として提供される、生体利用可能性（バイオアベイラビリティー）が高いＥＰＡ含有組成物は現在利用できないが、非常に望ましいものである。

【発明の概要】

【0006】

本開示は、バイオアベイラビリティーが高められたＥＰＡに富んだ組成物に関する。この組成物の出発物質は、一例として制限なく、藻類に由来し得る。一実施形態では、重量％で総脂質の少なくとも２０％の総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）の極性脂質画分を含む組成物が開示されており、ここで前記極性脂質画分は、重量で少なくとも３０％の糖脂質を含み、前記組成物は、前記組成物の重量％の４％以下をクロロフィル濃縮物として含む。本明細書の特定の実施形態では、前記組成物はさらに、前記組成物の重量％の４％以下を多糖類組成物として含む。バイオアベイラビリティーが増加し、組成物プロファイル及び結果的な属性が改善されたＥＰＡに富んだ組成物のさらなる実施形態も開示されている。

【0007】

上記の実施形態は、不透明度及び粘度の減少、ならびに他の有益な属性の点で、栄養補助食品及び医薬品分野の両方で使用するための魅力的な組成物を提供する。

【0008】

総脂質の少なくとも２０重量％が極性脂質画分であり、前記極性脂質の少なくとも３０重量％が糖脂質画分であるが、組成物においてクロロフィル画分は４重量％未満である、上記の組成物は、添加剤の非極性脂質及び／又はＤＨＡなどの栄養補助食品油、又は以下でより詳しく説明された他の有益な添加剤を含む製剤をさらに含むことができ、これはまた、バイオアベイラビリティーがさらに高く、栄養が豊富であり、色がより明るく、粘度がより低い油の特定の有益な組み合わせを提供するのに役立つ。

【0009】

本開示はまた、藻類ペーストを得るステップと、前記藻類ペーストをアルコールで抽出して、藻類脂質のアルコール抽出物を形成するステップと、得られたアルコール抽出物を、抽出（例えば、炭化水素ヘキサン又はヘプタンなどの有機溶媒で）して、非極性脂質画分を分離し、色素及び極性脂質を含むアルコール層を追加の加工段階に移動させるステップと、抽出された（例えば、ヘプタンで）アルコール層に水を添加した後、順次に抽出して（例えば、ヘプタンで）色素画分を抽出し、極性脂質画分を分離するステップと、を含むクロロフィル含量の低い油組成物を製造する方法を含む。続いて、極性脂質は、前記極性脂質を含む画分から蒸発によって得ることができ、色素もまた、前記色素を含む画分の蒸発によって得ることができる。多糖類は、前記多糖類を含む画分から、前記画分を短い防寒処置段階（ｓｈｏｒｔ ｗｉｎｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｓｔａｇｅ）に適用して得ることができる。また、クロロフィルは、適切な漂白物質を使用して前記クロロフィルを含む画分から除去できる。

【0010】

本開示はまた、極性脂質画分及び非極性脂質画分の両方を含み、またクロロフィル濃縮物を有する藻類油又は抽出物を得るステップを含むクロロフィル含量の低い油組成物を製造する代案的な方法を含む。前記方法は、非極性脂質画分と共にクロロフィル濃縮物を実質的に分離することを含み、藻類油又は抽出物中の非極性成分から極性成分を分離するために極性脂質画分及び非極性脂質画分の極性特性を使用するステップをさらに含む。追加のステップには、非極性含有画分から実質的に全てのクロロフィル濃縮物を漂白するステップと、極性脂質画分及び非極性脂質画分を再結合してクロロフィル含量の低い油組成物を生成するステップと、が含まれる。

【0011】

本開示のこれらの特徴及び他の特徴については、以下の詳細な説明でさらに詳しく説明する。

【図面の簡単な説明】

【0012】

【図1】本開示の実施形態の油を製造する例示的な方法に関する抽出及び漂白工程ステップの概略図を開示する。

【図2】油組成物の所望の標的極性脂質、糖脂質及びクロロフィル濃縮物、バイオアベイラビリティー、色、及び粘度を有する本開示の組成物の実施形態の写真描写であり、その実施形態は本明細書に開示されている。

【図3】例えば、本明細書に記載した方法の実施形態によって製造された粗エタノール藻類抽出物に含まれる多糖類を含む実質的に非脂質成分からなる本開示の方法の実施形態によって得られた粉末の写真描写である。

【図4】実施例１で論じたように、ナンノクロロプシス（Ｎａｎｎｏｃｈｌｏｒｏｐｓｉｓ）のエタノール抽出物及び色素除去後の生成物の実施形態に関するスペクトルキャラクタリゼーションを示すグラフである。

【図5】実施例２で論じたように、藻類抽出の実施形態に関する紫外可視スペクトルキャラクタリゼーションを示すグラフである。

【発明を実施するための形態】

【0013】

以下の詳細な説明は、特許請求の範囲に記載された開示を例として説明するものであり、限定するものではない。この説明は、当業者が特許請求の範囲に記載された開示を作成及び使用できるように明確に可能にし、特許請求の範囲に記載された開示のいくつかの実施形態、調整（ａｄａｐｔａｔｉｏｎ）、変形、代案、及び用途を説明する。さらに、特許請求の範囲に記載された開示は、以下の説明に具体的に記載、又は図面によって示された詳細及び組成物にのみこれを適用すると制限されないことを理解されたい。特許請求の範囲に記載された開示は、他の実施形態が可能であり、様々な方法で実行又は実施することができる。また、本明細書で使用される語句及び用語は説明を目的としたものであり、制限的なものとみなすべきではないことを理解されたい。

【0014】

本明細書に使用される「極性脂質」という用語は、親水性の頭部及び疎水性の尾部を有する両親媒性脂質を意味する。極性脂質の例としては、リン脂質及び糖脂質が含まれる。

【0015】

本明細書に使用される「非極性脂質」という用語は、電荷分布がほぼ均一であり、分子が正電荷末端及び負電荷末端を持たない脂肪分子を意味する。非極性脂質の例としては、油中の様々な脂肪酸のトリグリセリド（例えば、ＥＰＡ及びパルミトレイン酸など）が含まれる。

【0016】

油組成物の開示された実施形態を生成するために、暗緑色さらには黒色の高粘性油として提供される藻類抽出物を得ることができる。

【0017】

藻類バイオマス抽出物を得るための手順、及び藻類バイオマスを準備するための出発藻類及び抽出手順は、以下のステップを含むことができる。

【0018】

ナンノクロロプシス又はクロレラ（Ｃｈｌｏｒｅｌｌａ）藻類ペーストなどの藻類ペーストを得るステップと、エチルアルコールなどのアルコールで藻類ペーストを抽出して水分含量の低い藻類脂質のアルコール抽出物を形成するステップ（例えば、ナンノクロロプシス脂質のエタノール抽出物（以下、略して「ＥＥＮ」と称する）を形成するステップ）と、得られたＥＥＮを抽出（例えば、炭化水素ヘキサン又はヘプタンなどの有機溶媒で）して非極性脂質（例えば、トリグリセリド、ワックス、カロテン）画分を分離し、これによってヘプタン層に「非極性脂質画分（図１のＦ＃１）」を形成するステップと、を含む。アルコール層は色素及び極性脂質を含んでおり、追加の加工段階に移動することができる（図１を参照）。

【0019】

次の加工段階は、抽出された（例えば、ヘプタンで）アルコール層に水を加えた後、順次に抽出して（例えば、ヘプタンで）色素画分（図１を参照、ヘプタン層、Ｆ＃３）を抽出し、極性脂質画分（図１を参照、水－アルコール層、Ｆ＃２）を分離するステップを含むことができる。極性脂質は、Ｆ＃２画分から蒸発によって得ることができ、色素はＦ＃３画分の蒸発によって得ることができる。Ｆ＃１層には、所定量のクロロフィル及びカロテノイドが含まれることができ、これらは、当業者に公知の方法、例えば、食用油の生産について公知の方法によって除去することができる。これらの方法の例としては、シリカゲル、Ｂ８０、Ｔ４１などの漂白土（ｂｌｅａｃｈｉｎｇ ｃｌａｙ）、及び活性炭などを使用した吸着－濾過が含まれる。Ｆ＃１画分からクロロフィルを選択的に除去した結果、この実施形態では、赤色を含めてほぼ透明から濃い琥珀色を呈する多少液体ないし半固体の油を得ることができる。

【0020】

藻類油又は抽出物を得る代案的な方法は、米国特許第８，５９１，９１２ Ｂ１号（Ｋｉｒａｎ Ｋａｄａｍ及びＢｒｉａｎ Ｇｏｏｄａｌｌ）に開示されており、その内容は、いずれも本明細書に参照として組み込まれる。

【実施例】

【0021】

以下の実施例は、本発明を例示するものである。

【0022】

［実施例１］
２．１ この実施例に対するプロセスプロトコル（図１を参照）
１）ナンノクロロプシス藻類ペースト（水中固形分２２～２７％）１００ｇを秤量した。（ステップ１、図１）
２）前記藻類ペーストを２Ｌフラスコに入れ、アルコール８５０ｍｌを添加した。（ステップ１、図１）
３）前記藻類を７０℃の温度で４５分間激しく撹拌しながら抽出した。（ステップ１、図１）
４）前記エタノール抽出物から固体藻類残留物を濾過した（真空濾過）。（ステップ２、図１）
５）前のステップからのエタノール抽出物を分別漏斗（２Ｌ）に入れ、得られた抽出物にヘプタン３００ｍＬを添加し、２分間激しく撹拌し、層を分離し、最上層を慎重に選別して、別のフラスコに入れて約１２０ｍＬの緑色のヘプタン層を得た。（ステップ３、図１）
６）さらにヘプタン１００ｍＬをエタノール層に添加し、２分間激しく撹拌し、層を分離し（エタノール層－下層、及びヘプタン層－上層）、最上層を慎重に選別し、前のステップから得られたヘプタン層と合わせた（～２００－２２０ｍＬの合わせた緑色のヘプタン層が得られた、画分Ｆ＃１）。（ステップ４、図１）
７）得られた全ヘプタン層にシリカゲル１ｇを添加し、５分間激しく撹拌した後、スラリーをシリカゲル１ｇ層を介して濾過した（シリカゲルの代わりに、活性炭又はＴ４１漂白土が使用されてもよい）。様々なシリカゲル、活性炭、及び漂白土の特性差によって、工場では材料の実際の量が調整されるべきである。（ステップ８、図１）
８）このプロトコルのステップ６から下層（エタノール層）を取り出し、水３５０ｍＬとヘプタン２００ｍＬを加え、混合物を２分間激しく振盪した。分離した相を約５分間静置した後、最上層を慎重に選別して別のフラスコに入れた（このステップで～４００ｍＬの緑色のヘプタン層が得られた）。（ステップ５、図１）
９）ヘプタン２００ｍＬ（３×２００ｍＬ）を使用して上記ステップで下層を繰り返し抽出した。最上層を慎重に選別して前のステップから得られたヘプタン層と合わせた（～１０００－１０２０ｍＬの合わせた緑色のヘプタン層が得られた、画分Ｆ＃３）。（ステップ５、図１）
１０）抽出された下層は、浄化された極性脂質（Ｆ＃２）を含有した。この画分は、例えば、Ｈｅｌｉｘ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（１５ Ｅ．Ｐａｌａｎｔｉｎｅ Ｒｄ．＃１１８，Ｐｒｏｓｐｅｃｔ Ｈｅｉｇｈｔｓ，ＩＬ ６００７０；ｈｅｌｉｘｃｈｒｏｍ．ｃｏｍ）のＡｍａｚｅ－Ｎ漂白吸着剤又は同様の吸着剤（必要な場合）３ｇによって精製することができる。
１１）得られた画分を４５℃未満で加熱しながら真空中で蒸発させた。

【0023】

上記工程ステップと試験結果は、ナンノクロロプシス又はクロレラ脂質などの藻類抽出物からクロロフィルとカロテノイド画分を除去するための非常に効率的な液体－液体抽出方法であることを立証する。本開示の方法の上記実施形態を使用することによって、ナンノクロロプシスのエタノール抽出物から９９％を超えるクロロフィルａとｂ、及びフェオフィチンが除去されただけでなく、カロテノイド（中極性カロテノイド）の約２／３が除去された。下記テーブル２及びテーブル３を参照する。テーブル２：抽出質量均衡（組成）及びテーブル３：組成物の質量及び重量％分析のためのナンノクロロプシスエタノール抽出物の主成分。色素除去後のナンノクロロプシスエタノール抽出物のスペクトル特性については図４を参考する。

【0024】

【表1】

【0025】

【表2】

【0026】

粘度測定値は、温度、製剤中の様々な成分の組成濃度などの要因によって変わり得るが、本明細書に記載のように、２５℃で極性脂質画分と中性脂質画分を合わせた後、記載のように製造されたナンノクロロプシス抽出物の実施形態について測定された粘度読み取り値は、１６５，０００ｍＰａ．’ｓであると示された。

【0027】

要約すると、実施例１に示した生成物は、流入したナンノクロロプシスエタノール抽出物の３つの画分に分解できる。１）画分（Ｆ＃１）、非極性脂質、主にトリグリセリドと、２）画分（Ｆ＃２）、糖脂質及びリン脂質を含む極性脂質と、３）画分（Ｆ＃３）、ジグリセリド及びモノグリセリド、遊離脂肪酸（ＦＦＡ’ｓ）、カロテノイド及びクロロフィルを含む中極性画分と、に分解できる。浄化されたＦ＃１及びＦ＃２画分は、パルミトレイン酸及びエイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）を多く含む貴重な脂質源として使用できる。Ｆ＃３は、クロロフィル、アスタキサンチン、及びゼアキサンチンなどを含む天然色素の濃縮物であり、食品添加物としても価値がある。画分Ｆ＃１～Ｆ＃３は、それぞれ食品添加物として使用することができ、生物学的潜在力の高い貴重な原料である。

【0028】

［実施例２］
藻類バイオマスの暗緑色のペーストサンプルは、一般的に米国特許第８，５９１，９１２ Ｂ１（一般的に、第６欄、６２行目～第９欄、第３行目を参照）に説明された方法によって製造された。前記藻類バイオマスペーストは、熱無水エタノールで抽出された。具体的には、藻類ペースト６６ｇ、エタノール３×２５０ｍＬ、７５℃、３０’で、それぞれ５００ｒｐｍで撹拌し、４４５０ｒｐｍで１０分間遠心分離して藻類抽出液試料を得た。

【0029】

油抽出物についての分析を行った結果、藻類試料での主要極性脂質は、１）糖脂質（モノガラクトシルジグリセリド（ＭＧＤＧ）及びジガラクトシルジグリセリド（ＤＧＤＧ）及び２）リン脂質（ホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、及びホスファチジルイノシトール）であることを立証した（本明細書のテーブル４を参照）。

【0030】

【表3】

【0031】

本明細書で定量された本開示の生体利用可能な、低いクロロフィル含量の、極性脂質が豊富な油の実施形態は、以下の追加のステップを使用して前記出発物質から製造された。

【0032】

１）非極性脂質、クロロフィル、及びその他の成分の混合物から極性差に基づいて極性脂質を分離した。

【0033】

２）上記実施例１に記載したように、一般的に植物油漂白用のよく開発されたプロトコルを使用して、残りの非極性脂質成分からクロロフィルを漂白し、例えば、シリカゲル１ｇを得られた全ヘプタン層に添加し、５分間激しく撹拌した後、スラリーをシリカゲル１ｇ層を介して濾過した（シリカゲルの代わりに、活性炭又はＴ４１漂白土が使用されてもよい）。様々なシリカゲル、活性炭、及び漂白土の特性差によって、工場では材料の実際の量が通常調整されるべきである。

【0034】

３）上記ステップ（１）の極性脂質画分を、上記ステップ（２）の漂白された非極性脂質と組み合わせた。

【0035】

一般に粘度が低く、ほぼ透明から淡褐色を呈する、生体利用可能な極性脂質が豊富な低クロロフィル含有の油組成物が得られた。スペクトル分析については図５を参照する。前記組成物は、摂氏約２１．１（華氏７０度）の周囲温度でワックス状の固体であった。前記組成物は温めると溶け、トリグリセリドなどの他の油と混合すると低粘度を示す。

【0036】

本明細書に記載の上記工程を使用して製造された本開示の生体利用可能な油の実施形態の油組成物を分析した結果、テーブル１に示すように、以下の成分及び特徴（列１）、及び成分範囲（列２）を有する油が得られたことを立証した。

【0037】

【表4】

【0038】

本出願に開示される油の成分の重量％及びその他の特性のわずかな変化は、当業者に公知のように使用された工程を変更することによって得られる。しかし、好ましくは、生成された油の総脂質濃縮物中の極性脂質画分の重量％は２０重量％を超え、好ましくは、３０重量％を超え、より好ましくは、４０重量％を超え、よりさらに好ましくは、５０重量％を超え、なおさらに好ましくは、約７０重量％以上である。また、好ましくは、前記油生成物のうち、クロロフィル濃縮物の重量％は、総油生成物重量の４％未満、より好ましくは、３．０％未満、さらに好ましくは、２．０％未満、よりさらに好ましくは、１．０％未満、なおさらに好ましくは、約０．１％以下である。また、好ましくは、油生成物のうち、多糖類濃縮物の重量％は、総油生成物重量の約４％以下、より好ましくは、３．０％未満、さらに好ましくは、２．０％未満、よりさらに好ましくは、１．０％未満又はそれより低い。さらに、総極性脂質の重量％としての糖脂質の重量％は２０％を超え、好ましくは、３０％を超え、より好ましくは、約４０％を超え、さらに好ましくは、５０％を超え、よりさらに好ましくは、約６０％以上であり、総油組成物のうち、糖脂質の重量％は１０％を超え、より好ましくは、２０％を超え、さらに好ましくは、約２５％以上である。さらに、極性脂質の重量％としてのリン脂質の重量％は２０％を超え、より好ましくは、３０％を超え、さらに好ましくは、３５％を超え、総油組成物のうち、リン脂質の重量％は２０％を超え、より好ましくは、３０％を超え、さらに好ましくは、４０％を超える。いかなる特定の理論にも束縛されるものではないが、出願人は、油生成物中の非常に低いクロロフィル濃縮物を含む、これらの特性の組み合わせにより、魅力的で淡い色のほぼ透明な琥珀色からより濃い琥珀色まで生成されると考える。また、総油生成物含量中のＥＰＡ濃度は、少なくとも２０重量％、より好ましくは、少なくとも２５重量％であり、さらに好ましくは、少なくとも約３０重量％又はそれ以上が生成される。同様に、前記油生成物中のオメガ３含量は、少なくとも２０重量％、より好ましくは、少なくとも２５重量％であり、さらに好ましくは、少なくとも約３０重量％又はそれ以上が生成される。生成された油のバイオアベイラビリティーの向上も達成された。

【0039】

また、本開示の工程の実施形態では、粗エタノール藻類抽出物中の多糖類などの非脂質成分の粉末が得られる。図３を参照する。

【0040】

また、本開示のＥＰＡ含有高極性含量油の場合、以下のようなクロロフィルの重量％が大幅に減少していることにも留意すべきである。１）クロロフィルａ、２）プロトクロロフィルａ、及び３）メチルクロロフィリド。好ましくは、前記組成物中のクロロフィルの重量％は、前記組成物の総重量％の４％未満、好ましくは、３％未満、より好ましくは、２％未満、さらに好ましくは、１％未満、よりさらに好ましくは、０．５％未満、なおさらに好ましくは、約０．１％未満である。

【0041】

本開示の組成物の別の実施形態では、前記組成物は、カロテノイド、例えば、カロテン（α及びβ）、及びゼアキサンチン（黄色色素）、及びカンタキサンチン及びゼアキサンチン（赤色色素）を含むいくつかの他の成分の重量％が増加しており、総カロテノイドは抽出物の総重量の０．５％を超え、好ましくは、１％以上を構成する。

【0042】

本開示の他の代案的な実施形態では、本明細書に開示の実施形態である、生体利用可能な高極性脂質を含み、ＥＰＡを含むクロロフィル含量の低い油組成物は、他の有用な成分が添加される製剤として提供できる。これらの他の有用な成分は、単独、又は１つ以上の組み合わせ、例えば、他のエッセンシャルオイル、栄養補助食品、及び健康補助食品などとの組み合わせで添加できる。具体的な例としては、以下が挙げられるが、これらに制限されない。１）その他のオメガ３含有油又は成分、例えば、ＤＨＡ及びＥＰＡ（例えば、本発明の生成物として抽出される、又は外部から供給される中性脂質の形態）、本発明からのリゾ脂質（ｌｙｓｏｌｉｐｉｄ）、又は外部から供給されるＤＨＡ又はＥＰＡのエチルエステル、２）アスタキサンチン、ルテイン、ゼアキサンチン、リコピン、カロテン（α及びβ）、クリプトキサンチン、及びそれらの混合物を含むカロテノイド（本発明のカロテノイド画分を含む）などの抗酸化剤、３）ビタミンＣ及びＤなどのビタミン、４）カンナビジオール（ＣＢＤ）などのカンナビノイド、及び５）その他の組み合わせ。着色が少ない、及び／又は粘性の低い組成プロファイルを有するこれらの種のいくつかを含むそのような製剤は、本明細書に開示された方法の実施形態によって製造された高極性脂質、高糖脂質、及び低クロロフィル濃縮物を有する脂肪酸組成物を含む製剤の全般的な色プロファイル及び粘度を低下させることができると理解される。したがって、これは、例えば、元のバイオマスストック又は外部供給源から再添加される非極性脂質を含めることによって、又はそのような属性を示す製剤を製造することによって達成され得る。

【0043】

上述の極性ＥＰＡ画分とＤＨＡ（オメガ３）とのブレンドを含む栄養補助食品製剤の例は、有利には１０～９０ないし９０～１０の比率であり得、ここで、好ましいレベルの極性ＥＰＡ製剤成分が２０～５０％で混合される。このような製剤の用途には、心臓血管の健康、気分、抗うつなどのための主要な栄養補助食品／健康補助食品としての本質的な用途と共に製剤化する他の中性脂質及び成分のための送達システムとしての用途も含まれる。これは、ＤＨＡ、ＥＰＡの他の中性形態、又はそれらの混合物であり得る。１０～６０％レベルのアスタキサンチンも、純粋な極性ＥＰＡ脂質又はこれと中性ＥＰＡ及び／又はＥＰＡとのブレンドと共に好ましくは１０～３０％レベルで有利に製剤化することができる。このような製剤に有利に添加できる別の成分は、純粋又は前記製剤のいずれかにおける、極性ＥＰＡに対して約１～５０％、好ましくは、約２～２０％レベルのコエンザイムＱ１０である。

【0044】

他の属性に加えて、中性脂質が添加された製剤ブレンドは、例えば、５０，０００ｍＰａ・ｓ、好ましくは、１０，０００ｍＰａ・ｓ未満、より好ましくは、約２，０００ｍＰａ・ｓ未満、もっとも好ましくは、約３００ｍＰａ・ｓ以下などの様々な粘度レベルを目標とするのに有用であり得る。

【0045】

上記の観点で、本開示のいくつかの目的及び利点が達成され、他の有利な結果が得られたことが分かるであろう。

【0046】

本開示の範囲から逸脱することなく、上記の構成に様々な変更を加えることができるため、上記の説明に含まれる、又は添付図面に示されるすべての事項は、例示的なものとして解釈されるべきであり、制限的な意味として解釈されるべきではない。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5】

【手続補正書】

【提出日】2023-10-27

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも５０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分は、その極性脂質画分の重量％として少なくとも４０％の糖脂質を含み、前記組成物は、その総重量％の約０．１％以下をクロロフィル濃縮物として含む、組成物。

【請求項2】

総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも５０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分は、その極性脂質画分の重量％として少なくとも４０％の糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の約１％以下をクロロフィル濃縮物として含み、周囲光において透明から濃い琥珀色を呈する、組成物。

【請求項3】

総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも５０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分の重量％で約５０％より多くは糖脂質を含み、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも２５％はＥＰＡ濃縮物を含み、前記組成物の重量％の１％以下はクロロフィル濃縮物を含む、組成物。

【請求項4】

前記組成物が、その重量％の０．５％以下をクロロフィル濃縮物として含む、請求項３に記載の組成物。

【請求項5】

前記組成物が、その重量％の０．１％以下をクロロフィル濃縮物として含む、請求項４に記載の組成物。

【請求項6】

前記組成物が、重量％での約１％以下の多糖類を含む、請求項３に記載の組成物。

【請求項7】

前記組成物が周囲光において透明から濃い琥珀色を呈する、請求項３に記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物が、重量％で少なくとも約３０％の総脂質濃縮物をＥＰＡ濃縮物としてさらに含む、請求項３に記載の組成物。

【請求項9】

製剤であって、
総脂質濃縮物を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも２０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分の重量％で約３０％より多くは糖脂質を含み、前記製剤の前記組成物は、その重量％の０．１％以下をクロロフィル濃縮物として含む、組成物と、
１つ以上の添加剤と、を含み、
前記１つ以上の添加剤は、ＡＬＡ及びＤＨＡの一方又は両方を含む油からなる群より選ばれるオメガ３含有油と、抗酸化剤と、ビタミンと、カンナビノイドとからなる群より選ばれる、
製剤。

【請求項10】

総脂質濃縮物（ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ）を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも２０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分の重量％で約３０％より多くは糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の１．０％以下をクロロフィル濃縮物として含み、透明から濃い琥珀色を呈する、組成物。

【請求項11】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約７５％の総脂質濃縮物を有する、請求項１０に記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％の重量％で少なくとも約９０％の総脂質濃縮物を有する、請求項１０に記載の組成物。

【請求項13】

重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも約５０％が極性脂質画分を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総オメガ３をさらに含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項15】

前記組成物中の総オメガ３の重量％が、重量％で少なくとも約３０％を含む、請求項１４に記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総ＥＰＡをさらに含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項17】

前記糖脂質が、その極性脂質の重量％として少なくとも約６０％を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項18】

前記組成物が重量で少なくとも約２０％の糖脂質を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項19】

前記組成物が重量で少なくとも約４０％の糖脂質を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項20】

前記組成物が、その極性脂質の重量％として、重量でその極性脂質の少なくとも約４０％を含む、リン脂質をさらに含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項21】

前記リン脂質が、重量でその極性脂質の少なくとも約６０％を含む、請求項２０に記載の組成物。

【請求項22】

前記組成物が、重量で少なくとも約２０％のリン脂質を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項23】

前記組成物が、重量で少なくとも約４０％のリン脂質を含む、請求項２２に記載の組成物。

【請求項24】

前記組成物が、重量で約４％以下の多糖類を含む、請求項１０に記載の組成物。

【請求項25】

前記組成物が、重量で約２％以下の多糖類を含む、請求項２４に記載の組成物。

【請求項26】

前記組成物が約２１．１℃（７０°Ｆ）で粘稠～ワックス状のオイルテクスチャー（ｏｉｌ ｔｅｘｔｕｒｅ）を有することを特徴とする、請求項１０に記載の組成物。

【請求項27】

総脂質濃縮物を含む組成物であって、重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも５０％は極性脂質画分を含み、前記極性脂質画分は、その極性脂質画分の重量％として少なくとも４０％の糖脂質を含み、前記組成物は、その重量％の１．０％以下をクロロフィル濃縮物として含み、透明から濃い琥珀色を呈する、組成物。

【請求項28】

総組成物が、重量で少なくとも約２０％の糖脂質を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項29】

前記総組成物が、重量で少なくとも約４０％の糖脂質を含む、請求項２８に記載の組成物。

【請求項30】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約７５％の総脂質濃縮物を有する、請求項２７に記載の組成物。

【請求項31】

前記組成物が、前記組成物全体の重量％で少なくとも約９０％の総脂質濃縮物を有する、請求項３０に記載の組成物。

【請求項32】

重量％で前記総脂質濃縮物の少なくとも約７０％が極性脂質画分を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項33】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総オメガ３をさらに含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項34】

前記組成物中の総オメガ３の重量％が少なくとも約３０％を含む、請求項３３に記載の組成物。

【請求項35】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％の総ＥＰＡをさらに含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項36】

前記組成物が、その極性脂質の重量で少なくとも約４０％のリン脂質をさらに含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項37】

前記リン脂質が、その極性脂質の重量％として少なくとも約６０％を含む、請求項３６に記載の組成物。

【請求項38】

前記組成物が、重量％で少なくとも約２０％のリン脂質を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項39】

前記組成物が、重量％で少なくとも約４０％のリン脂質を含む、請求項３８に記載の組成物。

【請求項40】

前記組成物が、重量％で約４％以下の多糖類を含む、請求項２７に記載の組成物。

【請求項41】

前記組成物が、重量で約１％以下の多糖類を含む、請求項４０に記載の組成物。

【請求項42】

前記組成物が約２１．１℃（７０°Ｆ）で粘稠～ワックス状のオイルテクスチャーを有する、請求項２７に記載の組成物。

【請求項43】

クロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した油組成物の製造方法であって、前記方法は、
ａ．藻類バイオマスを得るステップと、
ｂ．前記藻類バイオマスをアルコールで抽出して、水分含量の低い藻類脂質のアルコール抽出物を形成するステップと、
ｃ．前記アルコール抽出物を有機溶媒でさらに抽出して非極性脂質画分を分離することによって有機溶媒層中の非極性脂質画分を実質的に除去するステップと、
ｄ．色素及び極性脂質を含むアルコール層を分離するステップと、
ｅ．前記アルコール層に水を加え、前記有機溶媒を順次加えてさらに抽出することによって、色素画分が実質的に除去され、前記極性脂質を含む水－アルコール層を形成するステップと、
ｆ．蒸発によって前記水－アルコール層から極性脂質画分を分離し、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した油組成物を分離するステップと、を含む、方法。

【請求項44】

前記アルコールがエタノールである、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記有機溶媒がヘキサン又はヘプタンである、請求項４３に記載の方法。

【請求項46】

前記方法が色素含有画分の蒸発によって色素濃縮物を形成するステップをさらに含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項47】

前記色素濃縮物がカロテノイド及びクロロフィルを含む、請求項４６に記載の方法。

【請求項48】

前記非極性脂質画分がトリグリセリドを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項49】

前記極性脂質画分が糖脂質及びリン脂質を含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項50】

前記極性脂質画分がＥＰＡを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項51】

前記極性脂質画分がパルミトレイン酸を含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項52】

前記極性脂質画分が、重量％で約４％以下のクロロフィルを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項53】

前記極性脂質画分が、重量％で約２％以下のクロロフィルを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項54】

前記極性脂質画分が、重量％で約１％以下のクロロフィルを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項55】

前記極性脂質画分が、重量％で約０．１％以下のクロロフィルを含む、請求項４３に記載の方法。

【請求項56】

前記藻類バイオマスは、ナンノクロロプシス又はクロレラ藻類から得られる、請求項４３に記載の方法。

【請求項57】

前記カロテノイドは、α－カロテン及びβ－カロテンを含む、請求項４７に記載の方法。

【請求項58】

前記カロテノイドは、ゼアキサンチン（黄色色素）を含む、請求項４７に記載の方法。

【請求項59】

前記カロテノイドは、カンタキサンチンを含む、請求項４７に記載の方法。

【請求項60】

前記カロテノイドは、前記抽出物の総重量の０．５％より多くを構成する、請求項４７に記載の方法。

【請求項61】

前記カロテノイドは、前記抽出物の総重量の１％より多くを構成する、請求項４７に記載の方法。

【請求項62】

分離された、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した前記油組成物の前記極性脂質画分は、重量％でその総脂質含量の２０％以上である、請求項４３に記載の方法。

【請求項63】

分離された、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した前記油組成物の前記極性脂質画分は、重量％で２０％以上の糖脂質を有する、請求項４３に記載の方法。

【請求項64】

分離された、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した前記油組成物の総脂質含量は、重量％で１０％以上の糖脂質を有する、請求項４３に記載の方法。

【請求項65】

分離された、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した前記油組成物は、重量％で少なくとも４０％の極性脂質画分を有し、該極性脂質画分は、重量％で３０％以上の糖脂質画分を有し、前記油組成物の総脂質含量は、重量％で２０％以上の糖脂質画分を有する、請求項４３に記載の方法。

【請求項66】

分離された、製造されたクロロフィル含量が低く極性脂質含量が増加した前記油組成物は、すべて重量％で、少なくとも７０％の総脂質の極性脂質画分と、少なくとも３０％の総オメガ３と、少なくとも２０％のＥＰＡ画分と、少なくとも３０％の総極性脂質の糖脂質画分と、少なくとも２０％の総油生成物の糖脂質画分と、少なくとも２０％の総極性脂質濃縮物のリン脂質画分と、少なくとも１５％の総油生成物の総リン脂質画分と、を有する、請求項４３に記載の方法。

【請求項67】

処理のいずれのステップにおいても無機の強酸の添加を含まない、請求項４３に記載の方法。

【国際調査報告】