特表 2023-548976 ＡＡＶの体内分布を制限するための方法および組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2023-11-21

(54)【発明の名称】ＡＡＶの体内分布を制限するための方法および組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 35/76 20150101AFI20231114BHJP

   A61K 39/395 20060101ALI20231114BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20231114BHJP

   C07K 16/08 20060101ALN20231114BHJP

   C12N 7/01 20060101ALN20231114BHJP

【ＦＩ】

A61K35/76

A61K39/395 D

A61K39/395 N

A61P43/00

C07K16/08 ZNA

C12N7/01

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023552153

(86)(22)【出願日】2021-11-09

(85)【翻訳文提出日】2023-07-06

(86)【国際出願番号】 US2021058572

(87)【国際公開番号】W WO2022099179

(87)【国際公開日】2022-05-12

(31)【優先権主張番号】63/256,437

(32)【優先日】2021-10-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/111,496

(32)【優先日】2020-11-09

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】521384588

【氏名又は名称】アフィニア セラピューティクス インコーポレイテッド

【氏名又は名称原語表記】Ａｆｆｉｎｉａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｉｎｃ．

【住所又は居所原語表記】４３ Ｆｏｕｎｄｒｙ Ａｖｅｎｕｅ， Ｓｕｉｔｅ １２０， Ｗａｌｔｈａｍ， Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ ０２４５３， Ｕｎｉｔｅｄ Ｓｔａｔｅｓ

(71)【出願人】

【識別番号】511140770

【氏名又は名称】マサチューセッツ アイ アンド イヤー インファーマリー

(71)【出願人】

【識別番号】502144235

【氏名又は名称】ザ スキーペンズ アイ リサーチ インスティチュート インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】100078282

【弁理士】

【氏名又は名称】山本 秀策

(74)【代理人】

【識別番号】100113413

【弁理士】

【氏名又は名称】森下 夏樹

(74)【代理人】

【識別番号】100181674

【弁理士】

【氏名又は名称】飯田 貴敏

(74)【代理人】

【識別番号】100181641

【弁理士】

【氏名又は名称】石川 大輔

(74)【代理人】

【識別番号】230113332

【弁護士】

【氏名又は名称】山本 健策

(72)【発明者】

【氏名】カルセド デル オヨ， ロベルト

(72)【発明者】

【氏名】ヴァンデンベルグ， ルーク エイチ．

【テーマコード（参考）】

4B065

4C085

4C087

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B065AA95X

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA01

4B065CA23

4B065CA44

4C085AA13

4C085AA14

4C085BB36

4C085BB41

4C085BB43

4C085BB44

4C085CC22

4C085CC23

4C085EE03

4C085GG02

4C087AA01

4C087AA02

4C087BC83

4C087MA02

4C087MA55

4C087MA56

4C087MA58

4C087MA65

4C087NA05

4C087NA07

4C087ZC80

4H045AA11

4H045AA30

4H045DA75

4H045EA22

(57)【要約】

本開示は、非全身投与された組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を全身投与を介して患者に補助的に投与することにより、患者をｒＡＡＶで処置する改善された方法に関する。本開示は、併用治療のためのキットをさらに提供する。本開示は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を、全身投与を介して患者に補助的に投与することにより、患者をｒＡＡＶで処置する改善された方法に関する。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）の標的部位への非全身投与によって患者を処置する方法において、前記改善が、
前記非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体を含む組成物を全身投与によって前記患者に補助的に投与するステップ
を含む方法。

【請求項2】

前記少なくとも１つの抗体が、前記ｒＡＡＶの少なくとも１つのカプシドタンパク質に結合する、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を有する、請求項１～２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項4】

前記少なくとも１つの抗体がＩｇＧ抗体である、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記組成物が、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩからから選択されるｒＡＡＶを中和する能力をもつ、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記組成物がモノクローナル抗体を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項7】

前記組成物が、モノクローナル抗体の混合物を含むポリクローナル抗体を含む、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

前記組成物が、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項9】

前記組成物が、少なくとも５００人、少なくとも１０００人、少なくとも５０００人、または少なくとも１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項６に記載の方法。

【請求項10】

前記組成物が静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）である、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項11】

前記ＩＶＩＧが、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである、請求項１０に記載の方法。

【請求項12】

前記組成物が組換えポリクローナル抗体を含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項13】

前記組成物が組換えＩＶＩＧ（ｒＩＶＩＧ）を含む、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記少なくとも１つの抗体が、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択される抗原結合フラグメントである、請求項１～３または５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記組成物が、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、およびユニボディを含む、請求項１～３または５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項16】

前記組成物が、静脈内注射または注入によって投与される、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項17】

前記組成物がＩＶＩＧであり、前記ＩＶＩＧが１～２０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記ＩＶＩＧが、１～２ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される、請求項１７に記載の方法。

【請求項19】

前記ＩＶＩＧが、１～１０ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される、請求項１７に記載の方法。

【請求項20】

前記ＩＶＩＧが、１～４ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される、請求項１７に記載の方法。

【請求項21】

ＩＶＩＧが単回用量として投与される、請求項１７に記載の方法。

【請求項22】

前記ＩＶＩＧが毎日投与される、請求項１７～２１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項23】

前記ＩＶＩＧが、１日２回、１日３回、または１日４回投与される、請求項１７～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

前記ＩＶＩＧが、１日２回、１日３回、または１日４回投与される、請求項１７～２３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項25】

前記ＩＶＩＧが１週間以内の間に投与される、請求項１９～２４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項26】

前記ＩＶＩＧが、少なくとも５分間、少なくとも１０分間、少なくとも１５分間、少なくとも２０分間、少なくとも２５分間、または少なくとも３０分間投与される、請求項１７～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与する前に投与される、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項28】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与する少なくとも３０分前、少なくとも１時間前、少なくとも２時間前、少なくとも４時間前、少なくとも６時間前、または少なくとも２４時間前に投与される、請求項２７に記載の方法。

【請求項29】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与する１週間前までに投与される、請求項２７に記載の方法。

【請求項30】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与した後に投与される、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項31】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与してから３０分以内、少なくとも１時間後、少なくとも２時間後、少なくとも４時間後、少なくとも６時間後、少なくとも２４時間後、または１週間以内に投与される、請求項３０に記載の方法。

【請求項32】

前記組成物が、前記ｒＡＡＶを前記患者に投与する日と同じ日に投与される、請求項１～３１２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項33】

前記組成物が、前記患者への投与後に前記ｒＡＡＶの体内分布を変化させるのに十分な量で投与される、請求項１～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

ｒＡＡＶの体内分布を変化させることにより、肝細胞の感染を減少させる、請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

ｒＡＡＶの体内分布を変化させることにより、前記標的部位以外の細胞の感染を減少させる、請求項３３に記載の方法。

【請求項36】

前記組成物が、前記患者への投与後に前記ｒＡＡＶの肝毒性を軽減するのに十分な量で投与される、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項37】

前記組成物が、前記患者への投与後に前記標的部位以外でｒＡＡＶの毒性を軽減するのに十分な量で投与される、請求項１～３５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

前記組成物が、前記標的部位から放出されたｒＡＡＶを中和するのに十分な量で投与される、請求項１～３７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項39】

前記標的部位が、前記患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される、請求項１～３８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

前記標的部位が、前記患者の中枢神経系内にない、請求項１～３９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項41】

患者を処置する方法であって、
組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物を前記患者の標的部位に非全身的に投与するステップと；
前記非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体を含む第２の医薬組成物を全身投与によって前記患者に補助的に投与するステップと
を含む、方法。

【請求項42】

前記少なくとも１つの抗体が、前記ｒＡＡＶのカプシドタンパク質に結合する、請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

前記ｒＡＡＶが、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；Ａｎｃ８０ＤＩ；およびそのバリアントから選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を有する、請求項４１～４２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項44】

前記ＡＡＶが、ＡＡＶ８またはＡＡＶ９である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

前記ＡＡＶが、ｒｈ．１０である、請求項４３に記載の方法。

【請求項46】

前記ＡＡＶが、ｈｕ．６８である、請求項４３に記載の方法。

【請求項47】

前記ＡＡＶが、Ａｎｃ８０Ｌ６５である、請求項４３に記載の方法。

【請求項48】

前記抗体がＩｇＧ抗体である、請求項４１～４７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項49】

前記第２の医薬組成物が、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶを中和する能力をもつ、請求項４１～４８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項50】

前記少なくとも１つの抗体がモノクローナル抗体である、請求項４０～４９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項51】

前記第２の医薬組成物が、モノクローナル抗体の混合物を含むポリクローナル抗体を含む、請求項４０～５０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項52】

前記第２の医薬組成物が、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項４１～５１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項53】

前記第２の医薬組成物が、少なくとも５００人、１０００人、５０００人、または１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項５２に記載の方法。

【請求項54】

前記第２の医薬組成物が静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む、請求項４１～５３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項55】

前記ＩＶＩＧが、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである、請求項５５に記載の方法。

【請求項56】

前記第２の医薬組成物が組換えポリクローナル抗体を含む、請求項４１～５５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項57】

前記第２の医薬組成物が組換えＩＶＩＧ（ｒＩＶＩＧ）を含む、請求項４１～５５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項58】

前記少なくとも１つの抗体が、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択される抗原結合フラグメントを含む、請求項４１～５７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項59】

前記少なくとも１つの抗体が、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、ユニボディ、およびダイアボディを含む、請求項４１～５８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記第１の医薬組成物が局所投与される、請求項４１～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項61】

前記標的部位が中枢神経系内にある、請求項６０に記載の方法。

【請求項62】

前記標的部位が、前記患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される、請求項６１に記載の方法。

【請求項63】

前記第１の医薬組成物が、髄腔内注射もしくは注入、眼内注射、硝子体内注射もしくは注入、内耳注射もしくは注入、脳室内注射もしくは注入、大槽内注射（ＩＣＭ）もしくは注入、網膜下注射もしくは注入、または筋肉内注射もしくは注入によって投与される、請求項６１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項64】

髄腔内注射もしくは注入が、腰椎注射もしくは注入である、請求項６３に記載の方法。

【請求項65】

前記第１の医薬組成物が、脳内、髄腔内、頭蓋内、脳室内、または大槽投与によって前記脳または脊髄に投与される、請求項６１に記載の方法。

【請求項66】

前記第２の医薬組成物が全身投与される、請求項４１～６５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項67】

前記第２の医薬組成物が静脈内注射または注入によって投与される、請求項６６に記載の方法。

【請求項68】

前記第２の医薬組成物がＩＶＩＧを含み、前記ＩＶＩＧが１～２０００ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される、請求項４１～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項69】

前記ＩＶＩＧが、１～２ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される、請求項６８に記載の方法。

【請求項70】

前記ＩＶＩＧが、１～１０ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される、請求項６８に記載の方法。

【請求項71】

前記ＩＶＩＧが、１～４ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される、請求項６８に記載の方法。

【請求項72】

ＩＶＩＧが単回用量として投与される、請求項６８に記載の方法。

【請求項73】

前記ＩＶＩＧが毎日投与される、請求項６８～７２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項74】

前記ＩＶＩＧが１日に少なくとも２回投与される、請求項６８～７２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項75】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物を前記患者に投与する前に投与される、請求項４１～７４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項76】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物の前記患者への投与の少なくとも３０分前、少なくとも１時間前、または少なくとも２時間前に投与される、請求項７５に記載の方法。

【請求項77】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物の前記患者への投与の少なくとも１日前、少なくとも１週間前、または少なくとも２週間前に投与される、請求項７５に記載の方法。

【請求項78】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物を前記患者に投与した後に投与される、請求項４１～７４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項79】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物の前記患者への投与の少なくとも３０分後、少なくとも１時間後、または少なくとも２時間後に投与される、請求項７８に記載の方法。

【請求項80】

前記第２の医薬組成物が、前記第１の医薬組成物の前記患者への投与の少なくとも１日後、少なくとも２日後、または少なくとも１週間後に投与される、請求項７８に記載の方法。

【請求項81】

前記第１の医薬組成物および前記第２の医薬組成物が、同じ日に投与される、請求項４１～７４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項82】

前記第２の医薬組成物が、前記患者への投与後に前記ｒＡＡＶの体内分布を変化させるのに十分な量で投与される、請求項４１～８１のいずれか１項に記載の方法。

【請求項83】

ＡＡＶの体内分布を変化させることにより、肝細胞のｒＡＡＶ感染が減少する、請求項８２に記載の方法。

【請求項84】

ＡＡＶの体内分布を変化させることにより、前記標的部位以外の細胞のｒＡＡＶ感染を減少させる、請求項８２に記載の方法。

【請求項85】

前記第２の医薬組成物が、前記患者への投与後に前記ｒＡＡＶの肝毒性を軽減するのに十分な量で投与される、請求項４１～８４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項86】

前記第２の医薬組成物が、前記患者への投与後に前記標的部位以外で前記ｒＡＡＶの毒性を軽減するのに十分な量で投与される、請求項４１～８５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項87】

前記標的部位が、前記患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される、請求項８３～８５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項88】

前記標的部位が、前記中枢神経系内にない、請求項４１～８７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項89】

併用治療のためのキットであって、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物と、非全身投与された前記第１の医薬組成物のｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体を含む第２の医薬組成物とを含む、キット。

【請求項90】

前記少なくとも１つの抗体が、前記ｒＡＡＶのカプシドタンパク質に結合する、請求項８９に記載のキット。

【請求項91】

ＡＡＶの前記カプシドタンパク質が、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択される、請求項８９～９０のいずれか１項に記載のキット。

【請求項92】

前記少なくとも１つの抗体がＩｇＧを含む、請求項８９のいずれか１項に記載のキット。

【請求項93】

前記第２の医薬組成物が、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶを中和する能力をもつ、請求項８９～９２のいずれか１項に記載のキット。

【請求項94】

前記少なくとも１つの抗体がモノクローナル抗体である、請求項８９～９３のいずれか１項に記載のキット。

【請求項95】

前記第２の医薬組成物が、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項８９～９４のいずれか１項に記載のキット。

【請求項96】

前記第２の医薬組成物が、少なくとも５００人、１０００人、５０００人、または１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む、請求項９５に記載のキット。

【請求項97】

前記第２の医薬組成物が静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む、請求項８９～９６のいずれか１項に記載のキット。

【請求項98】

前記第２の医薬組成物が、組換え静脈内免疫グロブリン（ｒＩＶＩＧ）を含む、請求項８９～９６のいずれか１項に記載のキット。

【請求項99】

前記ＩＶＩＧが、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである、請求項９８に記載のキット。

【請求項100】

前記第２の医薬組成物が組換えポリクローナル抗体を含む、請求項８９～９９のいずれか１項に記載のキット。

【請求項101】

前記第２の医薬組成物が、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択されるＡＡＶ中和抗原結合フラグメントを含む、請求項８９～１００のいずれか１項に記載のキット。

【請求項102】

前記第２の医薬組成物が、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、ユニボディ、およびダイアボディを含む、請求項８９～１０１のいずれか１項に記載のキット。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

１．関連出願の相互参照
本願は、２０２０年１１月９日付で出願された米国特許仮出願第６３／１１１，４９６号、および２０２１年１０月１５日付で出願された同第６３／２５６，４３７号の利益を主張し、それらの開示は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

【0002】

２．配列表
本願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出されたて配列表を含み、この配列表はその全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２１年ＸＸ月に作成された前記ＡＳＣＩＩコピーの名前は４７２９９ＷＯ＿ＣＲＦ＿ｓｅｑｕｅｎｃｅｌｉｓｔｉｎｇ．ｔｘｔであり、サイズはＸＸＸバイトである。

【背景技術】

【0003】

３．背景
アデノ随伴ウイルス（ＡＡＶ）は、インビボ遺伝子治療に最適なベクター系となっている。治療用核酸を送達するように設計された組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）の種類は増加しており、非ヒト霊長類およびヒトにおいて開発および試験されている。最近、ＦＤＡは２つのｒＡＡＶ遺伝子治療製品の商品化を承認した。

【0004】

ＡＡＶベクターは他のウイルスよりも安全で炎症性が低いが、遺伝子治療のための高用量のｒＡＡＶの投与後に毒性が生じている。ヒト以外の霊長類の研究では血小板減少症および高トランスアミナーゼ血症の急性発症ならびに肝臓損傷が観察されており、ヒトの臨床研究では肝機能障害、肝臓酵素の急激な上昇および血小板の減少が観察されている。最近、遺伝性神経筋障害の処置のためのｒＡＡＶ遺伝子治療の臨床試験において、数件の死亡が報告された。

【0005】

標的組織または器官へのｒＡＡＶの局所投与は、ターゲティングを改善し、全身毒性を軽減するために使用されてきたが、完全な局在化は不可能であり、ＡＡＶのいくつかの血清型は、注射部位から遠位の組織において形質導入を示し、全身毒性の危険性があった。

【0006】

したがって、全身循環および肝臓などの非標的組織および器官の形質導入を低減または排除しながら、局所または局部投与後に標的組織および器官へのＡＡＶの体内分布を制限する方法が必要とされている。

【発明の概要】

【課題を解決するための手段】

【0007】

４．概要
本開示は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を、全身投与を介して患者に補助的に投与することにより、患者をｒＡＡＶで処置する改善された方法に関する。

【0008】

補助的に投与される中和抗体は、非標的器官および組織内のＡＡＶを中和することにより、標的組織および器官へのｒＡＡＶの体内分布を制限することができる。この補助的な中和抗体の全身投与は、標的器官および組織を逃れる非全身投与ｒＡＡＶの非標的形質導入を減少させ、全身毒性を軽減し、ｒＡＡＶによって形質導入された標的組織および器官に移動する全身性免疫応答を低減する。

【0009】

本開示の態様には、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）の非全身投与によって患者を処置する改善された方法が含まれる。この改善は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を、全身投与によって患者に補助的に投与することを含む。

【0010】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体または抗原結合フラグメントは、ｒＡＡＶの少なくとも１つのカプシドタンパク質に結合する。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を有する。

【0011】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体はＩｇＧ抗体である。

【0012】

いくつかの実施形態では、組成物は、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるｒＡＡＶを中和する能力をもつ。

【0013】

いくつかの実施形態では、組成物はモノクローナル抗体を含む。

【0014】

いくつかの実施形態では、組成物は、モノクローナル抗体の混合物を含むポリクローナル抗体を含む。

【0015】

いくつかの実施形態では、組成物は、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。いくつかの実施形態では、ポリクローナル抗体は、少なくとも５００人、少なくとも１０００人、少なくとも５０００人、または少なくとも１０，０００人のドナーから得られる。

【0016】

いくつかの実施形態では、組成物は静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）である。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである。

【0017】

いくつかの実施形態では、組成物は組換えポリクローナル抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物は組換えＩＶＩＧ（ｒＩＶＩＧ）を含む。

【0018】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択される抗原結合フラグメントである。いくつかの実施形態では、組成物は、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、およびユニボディを含む。

【0019】

いくつかの実施形態では、組成物は静脈内注射または注入によって投与される。

【0020】

いくつかの実施形態では、組成物はＩＶＩＧであり、ＩＶＩＧは１～２０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～２ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～１０ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～４ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、単回用量として投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは毎日投与される。

【0021】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１日２回、１日３回、または１日４回投与される。

【0022】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１日２回、１日３回、または１日４回投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１週間以内の間に投与される。

【0023】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、少なくとも５分間、少なくとも１０分間、少なくとも１５分間、少なくとも２０分間、少なくとも２５分間、または少なくとも３０分間投与される。

【0024】

いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与する前に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与する少なくとも３０分前、少なくとも１時間前、少なくとも２時間前、少なくとも４時間前、少なくとも６時間前、少なくとも１２時間前、または少なくとも２４時間前に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与する３０分前、１時間前、２時間前、４時間前、６時間前、１２時間前、または２４時間前に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与する１週間前までに投与される。

【0025】

いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与した後に投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与してから３０分以内、少なくとも１時間後、少なくとも２時間後、少なくとも４時間後、少なくとも６時間後、少なくとも２４時間後、または１週間以内に投与される。

【0026】

いくつかの実施形態では、組成物は、ｒＡＡＶを患者に投与した日と同じ日に投与される。

【0027】

いくつかの実施形態では、組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの体内分布を変化させるのに十分な量で投与される。

【0028】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶの体内分布を変化させると、肝細胞の感染が減少する。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶの体内分布を変化させると、標的部位以外の細胞の感染が減少する。

【0029】

いくつかの実施形態では、組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの肝毒性を軽減するのに十分な量で投与される。いくつかの実施形態では、組成物は、患者への投与後に標的部位以外でｒＡＡＶの毒性を軽減するのに十分な量で投与される。

【0030】

いくつかの実施形態では、組成物は、標的部位から放出されたｒＡＡＶを中和するのに十分な量で投与される。

【0031】

いくつかの実施形態では、標的部位は、患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される。いくつかの実施形態では、標的部位は患者の中枢神経系内にはない。

【0032】

本開示の態様には、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物を患者の標的部位に非全身的に投与するステップと；非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体を含む第２の医薬組成物を全身投与によって患者に補助的に投与するステップとを含む、患者を処置する方法が含まれる。

【0033】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、ｒＡＡＶのカプシドタンパク質に結合する。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を有する。いくつかの実施形態では、ＡＡＶは、ＡＡＶ８またはＡＡＶ９である。いくつかの実施形態では、ＡＡＶは、ｒｈ．１０である。いくつかの実施形態では、ＡＡＶは、ｈｕ．６８である。

【0034】

いくつかの実施形態では、抗体はＩｇＧ抗体である。

【0035】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶを中和する能力をもつ。

【0036】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体はモノクローナル抗体である。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、モノクローナル抗体の混合物を含むポリクローナル抗体を含む。

【0037】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも５００人、１０００人、５０００人、または１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。

【0038】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである。

【0039】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は組換えポリクローナル抗体を含む。

【0040】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、組換えＩＶＩＧ（ｒＩＶＩＧ）を含む。いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択される抗原結合フラグメントを含む。

【0041】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、ユニボディ、およびダイアボディを含む。

【0042】

いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は局所投与される。

【0043】

いくつかの実施形態では、標的部位は中枢神経系内にある。いくつかの実施形態では、標的部位は、患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される。

【0044】

いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は、髄腔内注射もしくは注入、眼内注射、硝子体内注射もしくは注入、内耳注射もしくは注入、脳室内注射もしくは注入、大槽内注射（ＩＣＭ）もしくは注入、網膜下注射もしくは注入、または筋肉内注射もしくは注入によって投与される。いくつかの実施形態では、髄腔内注射もしくは注入は腰椎注射もしくは注入である。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物は、脳内、髄腔内、頭蓋内、脳室内、または大槽投与によって脳または脊髄に投与される。

【0045】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は全身投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は静脈内注射または注入によって投与される。

【0046】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物はＩＶＩＧを含み、ＩＶＩＧは１～２０００ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される。

【0047】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～２ｍｇ／ｋｇの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～１０ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～４ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、単回用量として投与される。

【0048】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは毎日投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは少なくとも１日２回投与される。

【0049】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物を患者に投与する前に投与される。

【0050】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物を患者に投与する少なくとも３０分前、少なくとも１時間前、少なくとも２時間少なくとも６時間（at least 2 at least 6 hours）、少なくとも１２時間または少なくとも２４時間前に投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物を患者に投与する３０分前、１時間前、２時間、６時間、１２時間または２４時間前に投与される。

【0051】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物を患者に投与する少なくとも１日前、少なくとも１週間前、または少なくとも２週間前に投与される。

【0052】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物を患者に投与した後に投与される。

【0053】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも３０分後、少なくとも１時間後、または少なくとも２時間後に投与される。

【0054】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも１日後、少なくとも２日後、または少なくとも１週間後に投与される。

【0055】

いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物は、同じ日に投与される。

【0056】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの体内分布を変化させるのに十分な量で投与される。

【0057】

いくつかの実施形態では、ＡＡＶの体内分布を変化させると、肝細胞のｒＡＡＶ感染が減少する。いくつかの実施形態では、ＡＡＶの体内分布を変化させると、標的部位以外の細胞のｒＡＡＶ感染が減少する。

【0058】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの肝毒性を軽減するのに十分な量で投与される。

【0059】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、患者への投与後に標的部位以外でｒＡＡＶの毒性を軽減するのに十分な量で投与される。

【0060】

いくつかの実施形態では、標的部位は、患者の脳、脊髄、筋肉、眼、および耳から選択される。

【0061】

いくつかの実施形態では、標的部位は中枢神経系内にない。

【0062】

本開示の態様には、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物と、非全身投与された第１の医薬組成物のｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体を含む第２の医薬組成物とを含む、併用治療のためのキットが含まれる。

【0063】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、ｒＡＡＶのカプシドタンパク質に結合する。いくつかの実施形態では、ＡＡＶのカプシドタンパク質は、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択される。

【0064】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体はＩｇＧを含む。

【0065】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶを中和する能力をもつ。

【0066】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体はモノクローナル抗体である。

【0067】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも５００人、１０００人、５０００人、または１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。

【0068】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む。

【0069】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、組換え静脈内免疫グロブリン（ｒＩＶＩＧ）を含む。

【0070】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から得られた抗体のプールである。

【0071】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は組換えポリクローナル抗体を含む。

【0072】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択されるＡＡＶ中和抗原結合フラグメントを含む。

【0073】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、ユニボディ、およびダイアボディを含む。

【0074】

５．図面のいくつかの図の簡単な説明
本発明のこれらおよび他の特徴、態様、および利点は、以下の説明および添付の図面に関してよりよく理解される。

【図面の簡単な説明】

【0075】

【図1-1】図１Ａ～図１Ｇは、ｄｄＰＣＲによって測定された、ＩＶＩＧ投与を伴うまたは伴わない、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置したマウスの様々な組織におけるベクターゲノムコピーの体内分布を示す。Ｙ軸は、ＲＰＰ３０のＤＮＡコピー数に対するｅＧＦＰ ＤＮＡのコピー数の比を表し、ｘ軸は処置条件を表す。各グラフは、脳（図１Ａ）、肝臓（図１Ｂ）、脾臓（図１Ｃ）、頸部ＤＲＧ（図１Ｄ）、腰部ＤＲＧ（図１Ｅ）、心臓（図１Ｆ）、または腎臓（図１Ｇ）におけるｅＧＦＰ発現を示す。データポイントは個々の動物を示し、線は平均を示す。統計は、一元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して実施した。

【図1-2】同上。

【図1-3】同上。

【図1-4】同上。

【0076】

【図2-1】図２Ａ～図２Ｇは、ＲＴ－ｄｄＰＣＲによって測定された、ＩＶＩＧ投与を伴うまたは伴わない、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置したマウスの様々な組織におけるｅＧＦＰ ｍＲＮＡ発現を示す。Ｙ軸は、ＲＰＰ３０転写物に対するｅＧＦＰ転写物の比を表し、ｘ軸は処置条件を表す。各グラフは、脳（図２Ａ）、肝臓（図２Ｂ）、脾臓（図２Ｃ）、頸部／胸部ＤＲＧ（図２Ｄ）、腰部ＤＲＧ（図２Ｅ）、心臓（図２Ｆ）、または腎臓（図２Ｇ）におけるｅＧＦＰ発現を示す。データポイントは個々の動物を示し、線は平均を示す。統計は、一元配置分散分析およびテューキーの多重比較検定を使用して実施した。

【図2-2】同上。

【図2-3】同上。

【図2-4】同上。

【0077】

【図3A】図３Ａ～図３Ｇは、ＩＶＩＧによる処置を伴うまたは伴わない、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置したマウスの様々な組織における抗ＧＦＰ免疫組織化学データを示す。抗ＧＦＰ免疫組織化学は、生理食塩水；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶと２時間のＩＶＩＧ；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰと２４時間のＩＶＩＧ；またはＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＶを形質導入した動物の脳（図３Ａ）、肝臓（図３Ｂ）、脾臓（図３Ｃ）、頸部／胸部ＤＲＧ（図３Ｄ）、腰部ＤＲＧ（図３Ｅ）、心臓（図３Ｆ）、または腎臓（図３Ｇ）の断面で実施した。ＧＦＰ陽性細胞は褐色に染色される（図３Ａ～３Ｇでは濃い灰色の細胞として示されている）。ＤＲ－後根。ＤＲＧ－後根神経節。

【図3B】同上。

【図3C】同上。

【図3D】同上。

【図3E】同上。

【図3F】同上。

【図3G】同上。

【発明を実施するための形態】

【0078】

６．詳細な説明
６．１．定義
別に定義されない限り、本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、本発明が属する分野の当業者が一般に理解する意味を有する。本明細書で使用される場合、以下の用語は、それらについて以下に記載される意味を有する。

【0079】

本明細書において使用される「ｒＡＡＶ」という用語は、ＡＡＶキャプシドに封入された組換え核酸構築物を含むビリオンを指す。組換え構築物は、ＡＡＶ逆方向末端反復配列の間に位置するポリヌクレオチドペイロードを含む。ペイロードは、タンパク質（例えば、治療用タンパク質）をコードする発現可能なポリヌクレオチドまたはＣＲＩＳＰＲなどの遺伝子編集機構のためのｍｉＲＮＡ、ｓｉＲＮＡもしくはガイドＲＮＡであり得る。ペイロードは、遺伝子編集によって促進される相同組換え修復のためのＤＮＡ相同性構築物であり得る。

【0080】

本明細書で使用される「中和する」または「中和」という用語は、ＡＡＶの毒性および／または循環レベルの測定可能な減少を指す。「中和抗体」という用語は、ＡＡＶの毒性および／または循環レベルを低下させる能力をもつ抗体を指す。中和抗体は、感染を遮断する、受容体との相互作用を遮断する、ゲノムの脱外被を阻害する、ウイルスを凝集する、カプシドにおける構造変化を誘導する、ウイルスの解離（disassembly）および脱外被（ＤＮＡを放出するのに必要なステップ）を防止するなどの方法でウイルスに結合することができる。中和抗体の中には、これらの効果をいくつか持つものがある。

【0081】

「抗体」という用語（「免疫グロブリン」とも交換可能にされる）は、ポリクローナル、モノクローナル、および同種異系の抗体調製物を包含し、この抗体は、目的のクラス（例えば、ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ、およびそれらのサブクラス）のいずれか、ならびにハイブリッド抗体、改変抗体、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメント、Ｆ（ａｂ）分子、Ｆｖフラグメント、ファージ上に提示される単鎖可変領域フラグメント（ｓｃＦｖ）、ナノボディ、単鎖抗体、単一ドメイン抗体、キメラ抗体、ヒト化抗体、および親抗体分子の免疫学的結合特性を示すそれらの機能的フラグメントをはじめとする調製物であってもよい。抗体は、他の部分にコンジュゲートされていてもよく、かつ／またはポリスチレンプレートもしくはビーズ、試験ストリップなどの支持体（例えば、固体支持体）に結合されていてもよい。

【0082】

本開示の抗体およびフラグメントは、二重特異性または多重特異性であるものを包含する。本明細書中に記載される方法において有用な二重特異性抗体または多重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープに対する結合特異性を有していてよく、その少なくとも１つはｒＡＡＶのエピトープである。ｒＡＡＶ結合抗体およびフラグメントは、ヘテロ抗体であってもよい。ヘテロ抗体は、互いに連結された２またはそれを超える抗体または抗体結合フラグメント（例えば、Ｆａｂ）であり、各抗体またはフラグメントは異なる特異性を有する。

【0083】

抗体に言及する場合、「に結合する」、「に特異的に結合する」または「と特異的に免疫反応性である」という語句は、タンパク質および他の生物製剤の異種集団の存在下でタンパク質の存在を決定する結合反応を指す。したがって、指定されたイムノアッセイ条件下では、指定された抗体は特定のタンパク質に結合し、試料中に存在する他のタンパク質に有意な量で結合しない。そのような条件下でのタンパク質またはビリオンへの特異的結合には、特定のタンパク質に対するその特異性について選択された抗体が必要となる場合がある。例えば、ＡＡＶ中和抗体は、ＡＡＶ７に対して産生させることができ、ＡＡＶ７ビリオンに特異的に結合して、組織、器官または体液中に存在する他のビリオンには結合しない。様々なイムノアッセイ形式を使用して、特定のタンパク質と特異的に免疫反応性である抗体を選択することができる。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的に免疫反応性であるモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用されている。

【0084】

本明細書で使用される「体内分布」という用語は、投与後のＡＡＶの広がり、ならびに組織、体液または器官におけるその局在化および持続性を指す。例えば、ＡＡＶの体内分布には、肝臓または他の器官の細胞へのベクターの取り込みおよび形質導入の量、ならびに、導入遺伝子、ＲＮＡまたはＤＮＡを発現するポリヌクレオチドなどの発現可能なポリヌクレオチドの発現が含まれ得る。いくつかの実施形態では、体内分布分析には、限定されるものではないが、ｑＰＣＲおよびディープシーケンシングによるウイルスゲノムの発現の定量、ならびにＡＡＶ感染が含まれる。

【0085】

本明細書で使用される「ＡＡＶカプシドタンパク質」という用語は、天然に存在するＡＡＶ血清型のＶＰ１、ＶＰ２、またはＶＰ３カプシドタンパク質あるいは当技術分野で利用可能または公知の天然に存在しないＶＰ１、ＶＰ２、またはＶＰ３カプシドタンパク質を指す。

【0086】

「補助的投与」または「補助的に投与する」という用語は、効果を提供するために一方の治療剤を他方の治療剤に時間的に十分に近接して投与することを指す。補助的投与には、一方の治療剤を、他方の治療剤の投与と同時に（同時に）、逐次に（異なる時間であるが、同じ日に、例えば、同じ患者の来診中に）、またはそれとは別個に（別の日に）投与することが含まれる。

【0087】

本明細書で使用される「ＩＶＩＧ」または「静脈内免疫グロブリン」という用語は、臨床分野で一般に理解されている意味を有する。ＩＶＩＧには、多くの抗原に対する抗体の濃縮された多様なコレクションが含まれる。ＩＶＩＧは、通常、被験体に静脈内投与されるが、異なる経路で投与することができる。

【0088】

本明細書で使用される「ポリクローナル抗体」という用語は、通常は異なるＢ細胞クローンによって産生される異種抗体の集団を指す。それらは、単一の抗原または多くの抗原の多くの異なるエピトープを認識して結合することができる。ポリクローナル抗体は、単一特異性または多特異性のいずれかであり得る。ポリクローナル抗体は、限定されるものではないが、モノクローナル抗体の混合物であってよい。

【0089】

本明細書で使用される「組換えポリクローナル抗体」という用語は、組換え構築物のライブラリによって産生される異種抗体の集団を指し、各組換え構築物は抗体または抗原結合フラグメントのコード配列を含む。組換えポリクローナル抗体は、単一抗原の多くの異なるエピトープを認識して結合することができる。いくつかの実施形態では、組換えポリクローナル抗体は、多くの異なる抗原を認識して結合する。

【0090】

本明細書で使用される「標的部位」という用語は、組成物が投与される細胞、組織、器官または身体部分を指す。

【0091】

本明細書および特許請求の範囲を通して、「組成物」および「医薬組成物」は交換可能に使用される。

【0092】

本明細書および特許請求の範囲を通して、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」という単語または「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」もしくは「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」などの変形形態は、記載された整数または整数群を含むが、任意の他の整数または整数群を除外しないことを意味すると理解される。

【0093】

本発明をさらに説明する前に、本発明は、説明された特定の実施形態に限定されず、したがって当然のことながら変化し得ることを理解されたい。また、本発明の範囲は、添付の特許請求の範囲によってのみ限定されるため、本明細書で使用される用語は、特定の実施形態を説明することのみを目的としており、限定することを意図するものではないことも理解されたい。

【0094】

値の範囲が提供されている場合、文脈上明らかに別段の記載がない限り、その範囲の上限と下限の間の、下限の単位の１０分の１までの各中間値（intervening value）、およびその記載された範囲内の他の記載された値または中間値は、本発明内に包含されることが理解される。これらのより小さい範囲の上限および下限は、独立してより小さい範囲に含まれてよく、同様に、記載された範囲内の任意の具体的に除外された限界にしたがって、本発明内に包含される。記載された範囲が限界の一方または両方を含む場合、それらの含まれる限界の一方または両方を除いた範囲も本発明に含まれる。

【0095】

本明細書に記載されるものと類似または同等の方法および材料を本方法および組成物（composition of matter）の実践または試験に使用することができるが、適した方法および材料は以下に記載される。さらに、材料、方法、および実施例は例示にすぎず、限定することを意図するものではない。本明細書で言及されるすべての刊行物、特許出願、特許、および他の参考文献は、参照によりその全文が組み込まれる。

【0096】

本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される、単数形の「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈上明らかに別段の指示がない限り、複数の指示対象を含むことに留意されたい。したがって、例えば、「抗体または抗原結合フラグメント」への言及には、複数のそのような抗体および抗原結合フラグメントが含まれ、「組換えアデノ随伴ウイルス」への言及には、１またはそれを超える組換えアデノ随伴ウイルスおよび当業者に公知のその等価物などへの言及が含まれる。特許請求の範囲は、あらゆる任意の要素を除外するように起草され得ることにさらに留意されたい。したがって、この記述は、特許請求の範囲の要素の列挙に関連して「もっぱら」、「のみ」などの排他的な用語を使用したり、「否定的な」限定を使用したりする際の先行詞ととして働くことが意図されている。

【0097】

明確にするために別個の実施形態の文脈で説明されている本発明の特定の特徴は、単一の実施形態において組み合わせて提供されてもよいことが理解される。逆に、簡潔にするために単一の実施形態の文脈で説明されている本発明の様々な特徴は、個別にまたは任意の適したサブコンビネーションで提供されてもよい。本発明に関連する実施形態のすべての組み合わせは、本発明によって具体的に包含され、どの組み合わせも個別に明示的に開示されているかのように、本明細書に開示される。さらに、様々な実施形態およびその要素のすべてのサブコンビネーションもまた、本発明に具体的に包含され、そのようなどのサブコンビネーションも個別に明示的に本明細書に開示されているかのように、本明細書に開示される。

【0098】

本明細書で考察される刊行物は、本出願の提出日以前のその開示のためにのみ提供される。本明細書中のいかなるものも、本発明が先行発明によってかかる刊行物に先行する権利がないことを認めるものとして解釈されるべきではない。さらに、提供された公開日が実際の公開日と異なる場合があり、独立して確認する必要があり得る。
６．２．他の解釈規則

【0099】

本明細書に列挙された範囲は、列挙された端点を含む、範囲内のすべての値の簡略表記であると理解される。例えば、１から５０の範囲は、１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、および５０からなる群の任意の数、数の組み合わせ、または部分範囲を含むと理解される。
６．３．処置方法

【0100】

第１の態様では、本開示は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）の非全身投与によって患者を処置する改善された方法を提供する。この改善は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を、全身投与によって患者に補助的に投与することを含む。

【0101】

抗体またはその抗原結合フラグメントは、非全身投与されたｒＡＡＶ、特に投与部位を出て全身区画に入るｒＡＡＶを中和することができる。患者の全身区画には、限定されるものではないが、非標的器官もしくは非標的組織、または標的部位以外の患者の循環系内の位置が含まれ得る。

【0102】

補助的に投与された抗体組成物は、投与部位から逃れて全身循環に到達するｒＡＡＶによる組織の形質導入を低減または排除する。特に、抗体または抗原結合フラグメントの全身投与は、患者において全身的に循環するｒＡＡＶによる非標的（例えば、肝臓）形質導入を減少させ、毒性（例えば、肝毒性）を低減または排除する。補助的に投与された抗体組成物は、ｒＡＡＶに対する全身免疫応答の誘導を低減または排除することもできる。

【0103】

本開示の別の態様では、患者を処置する方法が提供される。本方法は、組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物を患者に非全身的に投与するステップと；非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物を全身投与によって患者に補助的に投与するステップとを含む。

【0104】

いくつかの実施形態では、患者は、本明細書に記載の方法で処置される前にｒＡＡＶを含む治療で処置されたことがない。いくつかの実施形態では、患者は、本明細書に記載の方法で処置される前にｒＡＡＶを含む治療で処置されたことがある。
６．３．１．組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）

【0105】

本明細書に記載の方法では、組換えＡＡＶ（ｒＡＡＶ）を含む第１の組成物は、非全身投与される。

【0106】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶ組換え核酸構築物のペイロードは発現可能なポリヌクレオチドである。ある特定の実施形態では、発現可能なポリヌクレオチドは、タンパク質をコードする（例えば、治療用タンパク質をコードする）。ある特定の実施形態では、発現可能なポリヌクレオチドを転写して、ガイドＲＮＡ、トランス活性化ＣＲＩＳＰＲ ＲＮＡ（ｔｒａｃｒＲＮＡ）、メッセンジャーＲＮＡ（ｍＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、またはｓｈＲＮＡを提供することができる。

【0107】

いくつかの実施形態では、ペイロードは、相同組換え修復のためのＤＮＡ相同性構築物を提供する。

【0108】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、Ｚｏｌｇｅｎｓｍａ、Ｌｕｘｔｕｒｎａ、他の治療用に開発されたｒＡＡＶ薬物、またはその変形形態であり、

【0109】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、天然に存在するＡＡＶ血清型のＶＰ１、ＶＰ２、および／またはＶＰ３カプシドタンパク質を含む。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、天然に存在しないＶＰ１、ＶＰ２、および／またはＶＰ３カプシドタンパク質を含む。これらの実施形態の特定のものでは、天然に存在しないＶＰ１、ＶＰ２、および／またはＶＰ３カプシドタンパク質は、天然に存在するカプシドとは一次アミノ酸配列が異なる。特定の実施形態では、天然に存在しないカプシドには、一次アミノ酸配列の変化以外に、またはそれに加えて、天然に存在するＡＡＶカプシドタンパク質の生物学的または化学的変化または変形形態が含まれる。

【0110】

様々な実施形態では、カプシドタンパク質は、ＡＡＶ１、ＡＡＶ２、ＡＡＶ３Ｂ、ＡＡＶ５、ＡＡＶ６、ＡＡＶ８、またはＡＡＶ９の天然に存在するＡＡＶ血清型のカプシドタンパク質である。様々な実施形態では、カプシドタンパク質は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれるＰＣＴ／ＵＳ２０１４／０６０１６３号、ＵＳＰ９６９５２２０号、ＰＣＴ／ＵＳ２０１６／０４４８１９号、ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０３２１６６号、ＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０３１８５１号、およびＰＣＴ／ＵＳ２０１９／０４７５４６号に開示されるカプシドタンパク質から選択される。

【0111】

いくつかの実施形態では、カプシドタンパク質は、ＡＡＶ９（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＳ９９２６４．１）、ＡＡＶ１（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＤ２７７５７．１）、ＡＡＶ２（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＣ０３７８０．１）、ＡＡＶ３（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＣ５５０４９．１）、ＡＡＶ３ｂ（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＦ０２８７０５．１）、ＡＡＶ４（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＣ５８０４５．１）、ＡＡＶ５（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＤ１３７５６．１）、ＡＡＶ６（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＦ０２８７０４．１）、ＡＡＶ７（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＮ０３８５５．１）、ＡＡＶ ８（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＮ０３８５７．１）、ＡＡＶ１０（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＴ４６３３７．１）、ＡＡＶｒｈ１０（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＹ２４３０１５．１）、ＡＡＶ１１（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＡＴ４６３３９．１）、ＡＡＶ１２（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＢＩ１６６３９．１）、ＡＡＶ１３（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＡＢＺ１０８１２．１）、またはＡＡＶｐｏｌ（Ｇｅｎｂａｎｋ受入番号：ＦＪ６８８１４７．１）のカプシドタンパク質である。

【0112】

様々な実施形態では、ＡＡＶカプシドタンパク質は、：ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；およびｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩ、またはそれらのバリアントからなる群から選択されるＡＡＶのＶＰ１、ＶＰ２またはＶＰ３カプシドタンパク質である。

【0113】

いくつかの実施形態では、カプシドタンパク質は、配列番号５４（ＡＡＶ１（ＡＡＤ２７７５７））、配列番号５５（ＡＡＶ２（ＡＡＣ０３７８０））、配列番号５６（ＡＡＶ３（ＡＡＣ５５０４９））、配列番号５７（ＡＡＶ５（ＡＡＤ１３７５６））、配列番号５８（ＡＡＶ６（ＡＡＢ９５４５０））、配列番号５９（ＡＡＶ７（ＡＦ５１３８５１＿２））、配列番号６０（ＡＡＶ８（ＡＦ５１３８５２＿２））、配列番号６１（ＡＡＶ９（ＡＡＳ９９２６４））、配列番号６２（ＡＡＶ１０（ＡＡＴ４６３３７））、配列番号６３（ＡＡＶ ｈｕ．６８）、配列番号６４（ＡＡＶ ＬＫ０３）、配列番号６５（ＡＡＶ ｈｕ．１（ＡＡＳ９９２６０））、配列番号６６（ＡＡＶ ｈｕ．２（ＡＡＳ９９２７０））、配列番号６７（ＡＡＶ ｈｕ．３（ＡＡＳ９９２８０））、配列番号６８（ＡＡＶ ｈｕ．４（ＡＡＳ９９２８７））、配列番号６９（ＡＡＶ ｈｕ．６（ＡＡＳ９９３０６））、配列番号７０（ＡＡＶ ｈｕ．７（ＡＡＳ９９３１３））、配列番号７１（ＡＡＶ ｈｕ．９（ＡＡＳ９９３１４））、配列番号７２（ＡＡＶ ｈｕ．１０（ＡＡＳ９９２６１））、配列番号７３（ＡＡＶ ｈｕ．１１（ＡＡＳ９９２６２））、配列番号７４（ＡＡＶ ｈｕ．１５（ＡＡＳ９９２６５））、配列番号７５（ＡＡＶ ｈｕ．１６（ＡＡＳ９９２６６））、配列番号７６（ＡＡＶ ｈｕ．１７（ＡＡＳ９９２６７））、配列番号７７（ＡＡＶ ｈｕ．１８（ＡＡＳ９９２６８））、配列番号７８（ＡＡＶ ｈｕ．２０（ＡＡＳ９９２７１））、配列番号７９（ＡＡＶ ｈｕ．２１（ＡＡＳ９９２７２））、配列番号８０（ＡＡＶ ｈｕ．２２（ＡＡＳ９９２７３））、配列番号８１（ＡＡＶ ｈｕ．２３（ＡＡＳ９９２７４））、配列番号８２（ＡＡＶ ｈｕ．２５（ＡＡＳ９９２７６））、配列番号８３（ＡＡＶ ｈｕ．２７（ＡＡＳ９９２７７））、配列番号８４（ＡＡＶ ｈｕ．２８（ＡＡＳ９９２７８））、配列番号８５（ＡＡＶ ｈｕ．２９（ＡＡＳ９９２７９））、配列番号８６（ＡＡＶ ｈｕ．３１（ＡＡＳ９９２８１））、配列番号８７（ＡＡＶ ｈｕ．３２（ＡＡＳ９９２８２））、配列番号８８（ＡＡＶ ｈｕ．３４（ＡＡＳ９９２８３））、配列番号８９（ＡＡＶｈｕ．３７（ＡＡＳ９９２８５））、配列番号９０（ＡＡＶ ｈｕ．３９（ＡＡＳ９９２８６））、配列番号９１（ＡＡＶ ｈｕ．４１（ＡＡＳ９９２８９））、配列番号９２（ＡＡＶ ｈｕ．４２（ＡＡＳ９９２９０））、配列番号９３（ＡＡＶ ｈｕ．４３（ＡＡＳ９９２９１））、配列番号９４（ＡＡＶ ｈｕ．４４（ＡＡＳ９９２９２））、配列番号９５（ＡＡＶ ｈｕ．４５（ＡＡＳ９９２９３））、配列番号９６（ＡＡＶ ｈｕ．４６（ＡＡＳ９９２９４））、配列番号９７（ＡＡＶ ｈｕ．４７（ＡＡＳ９９２９５））、配列番号９８（ＡＡＶ ｈｕ．４８（ＡＡＳ９９２９６））、配列番号９９（ＡＡＶ ｈｕ．５１（ＡＡＳ９９２９８））、配列番号１００（ＡＡＶ ｈｕ．５２（ＡＡＳ９９２９９））、配列番号１０１（ＡＡＶ ｈｕ．５３（ＡＡＳ９９３００））、配列番号１０２（ＡＡＶ ｈｕ．５４（ＡＡＳ９９３０１））、配列番号１０３（ＡＡＶ ｈｕ．５５（ＡＡＳ９９３０２））、配列番号１０４（ＡＡＶ ｈｕ．５６（ＡＡＳ９９３０３））、配列番号１０５（ＡＡＶ ｈｕ．５７（ＡＡＳ９９３０４））、配列番号１０６（ＡＡＶ ｈｕ．６０（ＡＡＳ９９３０７））、配列番号１０７（ＡＡＶ ｈｕ．６１（ＡＡＳ９９３０８））、配列番号１０８（ＡＡＶ ｈｕ．６３（ＡＡＳ９９３０９））、配列番号１０９（ＡＡＶ ｈｕ．６６（ＡＡＳ９９３１１））、配列番号１１０（ＡＡＶ ｈｕ．６７（ＡＡＳ９９３１２））、配列番号１１１（ＡＡＶ ｒｈ．１０（ＡＡＯ８８２０１））、配列番号１１２（ＡＡＶ ｒｈ．１３（ＡＡＯ８８１９９））、配列番号１１３（ＡＡＶ ｒｈ．１９（ＡＡＯ８８１９４））、配列番号１１４（ＡＡＶ ｒｈ．２２（ＡＡＯ８８１９２））、配列番号１１５（ＡＡＶ ｒｈ．２３（ＡＡＯ８８１９１））、配列番号１１６（ＡＡＶ ｒｈ．２４（ＡＡＯ８８１９０））、配列番号１１７（ＡＡＶ ｒｈ．３５（ＡＡＯ８８１８６））、配列番号１１８（ＡＡＶ ｒｈ．４３（ＡＡＳ９９２４５））、配列番号１１９（ＡＡＶ ｒｈ．４８（ＡＡＳ９９２４６））、配列番号１２０（ＡＡＶ ｒｈ．４９（ＡＡＳ９９２４７））、配列番号１２１（ＡＡＶ ｒｈ．５０（ＡＡＳ９９２４８））、配列番号１２２（ＡＡＶ ｒｈ．５１（ＡＡＳ９９２４９））、配列番号１２３（ＡＡＶ ｒｈ．５２（ＡＡＳ９９２５０））、配列番号１２４（ＡＡＶ ｒｈ．５３（ＡＡＳ９９２５１））、配列番号１２５（ＡＡＶ ｒｈ．５４（ＡＡＳ９９２５２））、配列番号１２６（ＡＡＶ ｒｈ．５５（ＡＡＳ９９２５３））、配列番号１２７（ＡＡＶ ｒｈ．５７（ＡＡＳ９９２５４））、配列番号１２８（ＡＡＶ ｒｈ．５８（ＡＡＳ９９２５５））、配列番号１２９（ＡＡＶ ｒｈ．６２（ＡＡＳ９９２５８））、配列番号１３０（ＡＡＶ ｒｈ．６４（ＡＡＳ９９２５９））、配列番号１３１（ＡＡＶ ｒｈ．５６（ＪＡ４００１６４））、配列番号１４３（Ａｎｃ８０Ｌ１）、配列番号１４４（Ａｎｃ８０Ｌ２７）、配列番号１４５（Ａｎｃ８０Ｌ３３）、配列番号１４６（Ａｎｃ８０Ｌ３６）、配列番号１４７（Ａｎｃ８０Ｌ４４）、配列番号１４８（Ａｎｃ８０Ｌ５９）、配列番号１４９（Ａｎｃ８０Ｌ６０）、配列番号１５０（Ａｎｃ８０Ｌ６２）、配列番号１５１（Ａｎｃ８２ＤＩ）、および配列番号１５２（ＡＡＶ ｒｈ．７４）から選択される配列を有するｖｐ１カプシドタンパク質である。

【0114】

いくつかの実施形態では、タンパク質は、配列番号１３２（Ａｎｃ８０）、配列番号１３３（Ａｎｃ８１（ＡＫＵ８９５９６））、配列番号１３４（Ａｎｃ８２（ＡＫＵ８９５９７））、配列番号１３５（Ａｎｃ８３（ＡＫＵ８９５９８））、配列番号１３６（Ａｎｃ８４（ＡＫＵ８９５９９））、配列番号１３７（Ａｎｃ９４）配列番号１３８（Ａｎｃ１１０（ＡＫＵ８９６００））、配列番号１３９（Ａｎｃ１１３（ＡＫＵ８９６０１））、配列番号１４０（Ａｎｃ１２６（ＡＫＵ８９６０２））、配列番号１４１（Ａｎｃ１２７（ＡＫＵ８９６０３））、および配列番号１４２（Ａｎｃ８０Ｌ６５（ＡＫＵ８９５９５））から選択される配列を有するｖｐ１カプシドタンパク質である。

【0115】

ＡＡＶカプシドタンパク質は、ｖｐ１配列の１つの一部を有するｖｐ２またはｖｐ３タンパク質であってよい。例えば、ｖｐ２タンパク質は、ＡＡＶ９ ｖｐ１のアミノ酸１３８～７３６に対応する配列を有することができ、ｖｐ３タンパク質は、ＡＡＶ９ ｖｐ１タンパク質についてのアミノ酸１３８～７３６に対応する配列を有することができる。ライブラリ配列の配列番号が本開示で使用される場合、それはライブラリのいずれか１つのメンバーの配列を指す。いくつかの実施形態では、ＡＡＶカプシドタンパク質は、本明細書に記載のｖｐ１、ｖｐ２、またはｖｐ３タンパク質のバリアントである。

【0116】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは第１の組成物で投与される。第１の医薬組成物は、治療有効量のｒＡＡＶおよび生理学的に適合する担体を含む。適した担体としては、生理食塩水、人工脳脊髄液、および局所または局部投与用に設計された他の担体が挙げられる。

【0117】

対象に投与されるウイルスベクターの用量は、主に、処置される臨床状態、投与経路、ならびに対象の年齢、体重、および健康状態などの要因に依存する。例えば、ヒト対象に投与されるウイルスベクターの治療有効投与量は、一般に、ウイルスベクターを含有する溶液０．１ｍｌ～約１０ｍｌの範囲内である。治療有効投与量は、約１×１０^１～２×１０^１６ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルス（例えば、約１×１０^１～１×１０^１６；約１×１０^３～１×１０^１５；約１×１０^３～１×１０^１４ＧＣなど）を含むことができる。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^９～１×１０^１５ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１０～１×１０^１６ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１２～１×１０^１６ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１２～１×１０^１４ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１３～１×１０^１４ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１３～１×１０^１８ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。いくつかの実施形態では、患者あたり１×１０^１３～１×１０^２０ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルスが投与される。

【0118】

ある特定の実施形態では、ヒト対象に投与されるウイルスベクターの治療有効投与量は、一般に、約１×１０^１～２×１０^１６ゲノムコピー（ＧＣ）のウイルス（例えば、約１×１０^１～１×１０^１６；約１×１０^３～１×１０^１５；約１×１０^３～１×１０^１４ＧＣなど）を含有する約０．１ｍｌ～約１０ｍｌの溶液の範囲内である。

【0119】

導入遺伝子の形質導入および／または発現は、ＤＮＡ、ＲＮＡまたはタンパク質アッセイによる投与後の様々な時点でモニターすることができる。場合によっては、導入遺伝子の発現レベルをモニタリングして、投与頻度および／または投与量を決定することができる。治療目的のために記載されたものと同様またはそれより低い投与計画を免疫のために利用することができる。
６．３．２．ＡＡＶ中和抗体

【0120】

本開示で提供される方法は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む組成物を全身投与するステップを含む。

【0121】

様々な実施形態では、非全身投与されたｒＡＡＶには、セクション５．３．１に記載のＡＡＶのカプシドタンパク質が含まれ、組成物は、セクション５．３．１に記載のＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体または抗原結合フラグメントを含む。

【0122】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体を含む組成物は、少なくとも２個の抗体、少なくとも３個の抗体、少なくとも４個の抗体、少なくとも５個の抗体、少なくとも６個の抗体、少なくとも７個の抗体、少なくとも８個の抗体、少なくとも９個の抗体、または少なくとも１０個の抗体を含む。様々な実施形態では、組成物は、少なくとも１０個の抗体、少なくとも５０個の抗体、少なくとも１００個の抗体、少なくとも１５０個の抗体、少なくとも２００個の抗体、少なくとも２５０個の抗体、少なくとも３００個の抗体、少なくとも３５０個の抗体、少なくとも４００個の抗体、少なくとも４５０個の抗体、少なくとも５００個の抗体、少なくとも７５０個の抗体、少なくとも１０００個の抗体、少なくとも１５００個の抗体、少なくとも２０００個の抗体、少なくとも２５００個の抗体、少なくとも３０００個の抗体、少なくとも３５００個の抗体、少なくとも４０００個の抗体、少なくとも４５００個の抗体、少なくとも５０００個の抗体、少なくとも５５００個の抗体、少なくとも６０００個の抗体、少なくとも６５００個の抗体、少なくとも７０００個の抗体、少なくとも７５００個の抗体、少なくとも８０００個の抗体、少なくとも８５００個の抗体、少なくとも９０００個の抗体、少なくとも９５００個の抗体、または少なくとも１０，０００個の抗体を含む。様々な実施形態では、組成物は、少なくとも５００個の抗体、少なくとも１０００個の抗体、少なくとも５０００個の抗体、少なくとも１０，０００個の抗体、少なくとも１５，０００個の抗体、少なくとも２０，０００個の抗体、少なくとも２５，０００個の抗体、少なくとも３０，０００個の抗体、少なくとも３５，０００個の抗体、少なくとも４０，０００個の抗体、少なくとも４５，０００個の抗体、少なくとも５０，０００個の抗体、少なくとも５５，０００個の抗体、少なくとも６０，０００個の抗体、少なくとも６５，０００個の抗体、または少なくとも７０，０００個の抗体を含む。

【0123】

典型的な実施形態では、組成物は１個のポリクローナル抗体を含む。ある特定の実施形態では、組成物は複数のポリクローナル抗体を含む。

【0124】

いくつかの実施形態では、ポリクローナル抗体はヒト抗体である。典型的な実施形態では、ヒト抗体はレシピエントに対して同種異系である。いくつかの実施形態では、ポリクローナル抗体は異種であるが、異種抗体としての認識を低減、緩和、または回避するように設計されている。ある特定のこれらの実施形態では、抗体はヒト化抗体である。

【0125】

いくつかの実施形態では、組成物はＩｇＧ（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４）抗体を含む。いくつかの実施形態では、組成物はＩｇＡ抗体を含む。

【0126】

ある特定の実施形態では、プールされたヒト血漿由来の免疫グロブリンが使用される。これらの実施形態では、免疫グロブリンは、１０またはそれを超える個体、１００またはそれを超える個体、１０００またはそれを超える個体、またはそれより多くを含む任意の数の個体（例えば、ドナー）からプールすることができる。ある特定の実施形態では、組成物には、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体の混合物が含まれる。ある特定の実施形態では、組成物には、少なくとも５００人のドナー、少なくとも１０００人のドナー、少なくとも５０００人のドナー、少なくとも１０，０００人のドナー、少なくとも１５，０００人のドナー、少なくとも２０，０００人のドナー、少なくとも２５，０００人のドナー、少なくとも３０，０００人のドナー、少なくとも３５，０００人のドナー、少なくとも４０，０００人のドナー、少なくとも４５，０００人のドナー、少なくとも５０，０００人のドナー、少なくとも５５，０００人のドナー、少なくとも６０，０００人のドナー、少なくとも６５，０００人のドナー、または少なくとも７０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体の混合物が含まれる。

【0127】

いくつかの実施形態では、抗体は、使用前に血清から単離または精製される。精製は、異なる個体由来の抗体をプールする前または後に行うことができる。

【0128】

いくつかの実施形態では、プールされた免疫グロブリンは、１またはそれを超えるｒＡＡＶカプシド血清型に対する中和抗体を含有することが投与前に決定されている。いくつかの実施形態では、組成物は、特定の血清型のＡＡＶまたは特定のカプシドタンパク質を含有するｒＡＡＶを中和する能力のある少なくとも１つの抗体を含有することが事前に決定された１または複数の個体由来の免疫グロブリンをプール内に含む。

【0129】

いくつかの実施形態では、ポリクローナル組成物は、少なくとも１つの組換え抗体を含む。ある特定の実施形態では、組成物には、組換え抗体の混合物が含まれる。ある特定の実施形態では、組換え抗体の混合物には、２またはそれを超える、３またはそれを超える、４またはそれを超える、５またはそれを超える、６またはそれを超える、７またはそれを超える、８またはそれを超える、９またはそれを超える、または１０またはそれを超える、１００またはそれを超える、１０００またはそれを超える、１０，０００またはそれを超える、または１００、０００またはそれを超える種の組換え抗体が含まれる。

【0130】

いくつかの実施形態では、組換えポリクローナル抗体の混合物は、２またはそれを超えるモノクローナル抗体または抗原結合フラグメントのコード配列を含有する組換え構築物のライブラリから生成された抗体を含む。いくつかの実施形態では、組換えポリクローナル抗体は、それぞれが抗体または抗原結合フラグメントをコードする複数の組換え構築物から生成された抗体を混合して組み合わせることによって生成される。いくつかの実施形態では、組換えポリクローナル抗体は、単一抗原の異なるエピトープを認識して結合する。いくつかの実施形態では、組換えポリクローナル抗体は、異なる抗原を認識して結合する。

【0131】

ある特定の実施形態では、少なくとも１つの抗体はモノクローナル抗体である。これらの後者の実施形態では、モノクローナル抗体の結合特異性は、投与されたｒＡＡＶを中和するその能力に基づいて選択される。

【0132】

いくつかの実施形態では、少なくとも１つの抗体は、定義されたサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、またはＩｇＡ２）のモノクローナル抗体である。抗体の組み合わせを使用する場合、抗体は同じサブクラスに由来するものでも、異なるサブクラスに由来するものでもよい。例えば、抗体はＩｇＧ１抗体であり得る。当業者であれば、異なるサブクラスの様々な組み合わせを、異なる相対比率で得ることができる。

【0133】

いくつかの実施形態では、抗体は、ＡＡＶ、または、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩから選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を含有するｒＡＡＶに対するモノクローナル抗体である。

【0134】

様々な実施形態では、抗体は、抗ＡＡＶ２抗体；抗ＡＡＶ１抗体；抗ＡＡＶ６抗体；抗ＡＡＶ３抗体；抗ＡＡＶ ＬＫ０３抗体；抗ＡＡＶ７抗体；抗ＡＡＶ８抗体；抗ＡＡＶ ｈｕ．３７抗体；抗ＡＡＶ ｒｈ．１０抗体；抗ＡＡＶ９抗体；抗ＡＡＶ ｈｕ．６８抗体；抗ＡＡＶ１０抗体；抗ＡＡＶ５抗体；抗ＡＡＶ３－３抗体；抗ＡＡＶ４－４抗体；抗ＡＡＶ１－Ａ抗体；抗ｈｕ．４６－Ａ抗体；抗ｈｕ．４８－Ａ抗体；抗ｈｕ．４４－Ａ抗体；抗ｈｕ．４３－Ａ抗体；抗ＡＡＶ６－Ａ抗体；抗ｈｕ．３４－Ｂ抗体；抗ｈｕ．４７－Ｂ抗体；抗ｈｕ．２９－Ｂ抗体；抗ｒｈ．６３－Ｂ抗体；抗ｈｕ．５６－Ｂ抗体；抗ｈｕ．４５－Ｂ抗体；抗ｒｈ．５７－Ｂ抗体；抗ｒｈ．３５－Ｂ抗体；抗ｒｈ．５８－Ｂ抗体；抗ｒｈ．２８－Ｂ抗体；抗ｒｈ．５１－Ｂ抗体；抗ｒｈ．１９－Ｂ抗体；抗ｒｈ．４９－Ｂ抗体；抗ｒｈ．５２－Ｂ抗体；抗ｒｈ．１３－Ｂ抗体；抗ＡＡＶ２－Ｂ抗体；抗ｒｈ．２０－Ｂ抗体；抗ｒｈ．２４－Ｂ抗体；抗ｒｈ．６４－Ｂ抗体；抗ｈｕ．２７－Ｂ抗体；抗ｈｕ．２１－Ｂ抗体；抗ｈｕ．２２－Ｂ抗体；抗ｈｕ．２３－Ｂ抗体；抗ｈｕ．７－Ｃ抗体；抗ｈｕ．６１－Ｃ抗体；抗ｒｈ．５６－Ｃ抗体；抗ｈｕ．９－Ｃ抗体；抗ｈｕ．５４－Ｃ抗体；抗ｈｕ．５３－Ｃ抗体；抗ｈｕ．６０－Ｃ抗体；抗ｈｕ．５５－Ｃ抗体；抗ｈｕ．２－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１８－Ｃ抗体；抗ｈｕ．３－Ｃ抗体；抗ｈｕ．２５－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１５－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１６－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１１－Ｃ抗体；抗ｈｕ．１０－Ｃ抗体；抗ｈｕ．４－Ｃ抗体；抗ｒｈ．５４－Ｄ抗体；抗ｒｈ．４８－Ｄ抗体；抗ｒｈ．５５－Ｄ抗体；抗ｒｈ．６２－Ｄ抗体；抗ＡＡＶ７－Ｄ抗体；抗ｒｈ．５２－Ｅ抗体；抗ｒｈ．５１－Ｅ抗体；抗ｈｕ．３９－Ｅ抗体；抗ｒｈ．５３－Ｅ抗体；抗ｈｕ．３７－Ｅ抗体；抗ｒｈ．４３－Ｅ抗体；抗ｒｈ．５０－Ｅ抗体；抗ｒｈ．４９－Ｅ抗体；抗ｒｈ．６１－Ｅ抗体；抗ｈｕ．４１－Ｅ抗体；抗ｒｈ．６４－Ｅ抗体；抗ｈｕ．４２－Ｅ抗体；抗ｒｈ．５７－Ｅ抗体；抗ｒｈ．４０－Ｅ抗体；抗ｈｕ．６７－Ｅ抗体；抗ｈｕ．１７－Ｅ抗体；抗ｈｕ．６－Ｅ抗体；抗ｈｕ．６６－Ｅ抗体；抗ｒｈ．３８－Ｅ抗体；抗ｈｕ．３２－Ｆ抗体；抗ＡＡＶ９／ｈｕ抗体；抗ｈｕ．３１－Ｆ抗体；抗Ａｎｃ８０抗体；抗Ａｎｃ８１抗体；抗Ａｎｃ８２抗体；抗Ａｎｃ８３抗体；抗Ａｎｃ８４抗体；抗Ａｎｃ９４抗体；抗Ａｎｃ１１３抗体；抗Ａｎｃ１２６抗体；抗Ａｎｃ１２７抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ２７抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ５９抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ６０抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ６２抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ６５抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ３３抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ３６抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ４４抗体；抗Ａｎｃ８０Ｌ１抗体；抗Ａｎｃ１１０抗体；および抗Ａｎｃ８０ＤＩ抗体から選択されるモノクローナル抗体である。

【0135】

いくつかの実施形態では、組成物は少なくとも１つの二重特異性抗体を含む。ある特定の実施形態では、二重特異性抗体は、少なくとも２つの異なるエピトープ（その少なくとも１つはｒＡＡＶのエピトープである）に対して結合特異性を有する。

【0136】

いくつかの実施形態では、抗体は単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）である。いくつかの実施形態では、抗体はダイアボディ（Ｄｂ）である。いくつかの実施形態では、抗体はナノボディである。いくつかの実施形態では、抗体はユニボディ、またはダイアボディである。

【0137】

いくつかの実施形態では、抗体は、第２の医薬組成物で投与される。いくつかの実施形態では、第２の組成物は、ヒト血清から精製された、または組換え構築物から生成されたポリクローナル抗体を含む。
６．３．２．１．ＩＶＩＧ

【0138】

現在好ましい実施形態では、中和抗体を含む組成物は静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）である。ある特定の実施形態では、ＩＶＩＧは、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から選択される。

【0139】

いくつかの実施形態では、組換え構築物から生成された組換えＩＶＩＧ（ｒＩＶＩＧ）が使用される。これらの実施形態では、ＩＶＩＧは、ドナー血漿から抽出されるのではなく、組換え細胞で産生される。これらの実施形態では、初代Ｂ細胞を数千人のヒトドナーから収集して、ｒＩＶＩＧを発現する構築物または細胞株のライブラリを作製する。本発明のいくつかの実施形態では、次に、タンパク質発現構築物のライブラリを細胞集団に導入して、数百、数千、または数百万の抗体タンパク質のライブラリを発現する操作された細胞のライブラリを作製する。いくつかの実施形態では、これらの抗体タンパク質は、元の初代Ｂ細胞によって産生される抗体と実質的に等価である。

【0140】

いくつかの実施形態では、超並列ＤＮＡシークエンシングを使用して、Ｂ細胞、タンパク質発現構築物のライブラリ、および／または操作された宿主細胞の多様性を決定する。ｒＩＶＩＧを作製する方法は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる米国特許出願公開（ＵＳ ＰｒｅＧｒａｎｔ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ）第２０１６／０３６２４７０号に見出すことができる。

【0141】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧまたはｒＩＶＩＧは、第２の医薬組成物で投与される。
６．３．２．２．ＡＡＶ中和抗原結合フラグメント

【0142】

いくつかの実施形態では、第２の組成物は、ＡＡＶ中和抗原結合フラグメントを含む。

【0143】

いくつかの実施形態では、第２の組成物は、ＡＡＶ中和抗原結合フラグメントの混合物を含む。ある特定の実施形態では、混合物は、１個またはそれを超える、２個またはそれを超える、３個またはそれを超える、４個またはそれを超える、５個またはそれを超える、６個またはそれを超える、７個またはそれを超える、８個またはそれを超える、９個またはそれを超える、１０個またはそれを超える、１１個またはそれを超える、１２個またはそれを超える、１３個またはそれを超える、１４個またはそれを超える、１５個またはそれを超える、１６個またはそれを超える、１７個またはそれを超える、１８個またはそれを超える、１９個またはそれを超える、２０個またはそれを超える、１００個またはそれを超える、１０００個またはそれを超える、１０，０００個またはそれを超える、または１００，０００個またはそれを超えるＡＡＶ中和抗原結合フラグメントを含む。

【0144】

ある特定の実施形態では、抗原結合フラグメントは、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ’）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択される。

【0145】

ある特定の実施形態では、抗原結合フラグメントはｓｃＦｖである。ある特定の実施形態では、抗原結合フラグメントは（ｓｃＦｖ）_２である。

【0146】

ある特定の実施形態では、抗原結合フラグメントはＦａｂである。ある特定の実施形態では、抗原結合フラグメントは（Ｆａｂ’）_２である。

【0147】

いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、第２の組成物で投与される。いくつかの実施形態では、第２の組成物は、第２の医薬組成物である。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ抗体またはその抗原結合フラグメントと、薬学的に許容され得る担体とを含む。

【0148】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも１０、少なくとも１００個、少なくとも１０００個、少なくとも１０，０００個または少なくとも１００，０００個の抗原結合フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも１０個、少なくとも１００個、少なくとも１０００個、少なくとも１０，０００個または少なくとも１００，０００個の抗原結合フラグメントを含む。
６．３．３．投与経路および投与スケジュール

【0149】

本開示は、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物を投与すること、および、ｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物を補助的に投与することを含む方法を提供する。ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物は非全身投与される。非全身投与されたｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物は全身投与される。

【0150】

いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物は、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物を投与する前に患者に投与される。

【0151】

ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも３０分前、少なくとも１時間前、少なくとも２時間前、少なくとも４時間前、少なくとも６時間前、少なくとも８時間前、少なくとも１０時間前、少なくとも１２時間前、少なくとも１４時間前、少なくとも１６時間前、少なくとも１８時間前、少なくとも２０時間前、少なくとも２２時間前、または少なくとも２４時間前に投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも１日前、２日前、３日前、４日前、５日前、６日前、または７日前に投与される。

【0152】

ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも１日前、少なくとも１週間前、または少なくとも２週間前に投与される。いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物は、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物を患者に投与した後に投与される。

【0153】

ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも３０分後、少なくとも１時間後、少なくとも２時間後、少なくとも４時間後、少なくとも６時間後、少なくとも８時間後、少なくとも１０時間後、少なくとも１２時間後、少なくとも１４時間後、少なくとも１６時間後、少なくとも１８時間後、少なくとも２０時間後、少なくとも２２時間後、または少なくとも２４時間後に投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の３０分後、１時間後、２時間後、４時間後、６時間後、８時間後、１０時間後、１２時間後、１４時間後、１６時間後、１８時間後、２０時間後、２２時間後、または２４時間後に投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも１日後、少なくとも１週間後、少なくとも２週間後、または少なくとも１か月後に投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、第１の医薬組成物の患者への投与の少なくとも１日後、少なくとも２日後、少なくとも３日後、少なくとも４日後、少なくとも５日後、少なくとも６日後、または少なくとも７日後に投与される。

【0154】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物および、抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物は同じ日に投与される。

【0155】

いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの体内分布を変化させるのに十分な量で投与される。第２の医薬組成物の投与は、非標的組織、細胞および／または器官のｒＡＡＶ感染を減少させる。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物の投与は、肝細胞、骨格筋細胞、心筋細胞、肺組織、またはｒＡＡＶが投与された非全身区画以外の他の非標的器官細胞のｒＡＡＶ感染を減少させる。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの非全身区画以外で肝毒性または他の非標的器官への毒性を軽減するのに十分な量で投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、後根神経節（ＤＲＧ）における毒性を軽減するのに十分な量で投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、患者への投与後にｒＡＡＶの全身毒性を軽減するのに十分な量で投与される。

【0156】

いくつかの実施形態では、本方法は、ｒＡＡＶを含むさらなる医薬組成物を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、追加の医薬組成物は、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物の投与の前に投与される。いくつかの実施形態では、追加の医薬組成物は、第１の医薬組成物および第２の医薬組成物の投与の後に投与される。いくつかの実施形態では、追加の医薬組成物は、少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む医薬組成物とともに投与される。

【0157】

したがって、ｒＡＡＶを含む第３の医薬組成物を投与すること、およびｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第４の医薬組成物を補助的に投与することを含む方法も本明細書で提供される。第３の医薬組成物中のｒＡＡＶは、第１の医薬組成物中のｒＡＡＶと同じであっても異なっていてもよい。いくつかの実施形態では、第３の医薬組成物は、第１の医薬組成物と同一である。いくつかの実施形態では、第３の医薬組成物は、第１の医薬組成物とは異なる。いくつかの実施形態では、第４の医薬組成物は、第２の医薬組成物と同一である。いくつかの実施形態では、第４の医薬組成物は、第２の医薬組成物とは異なる。

【0158】

ある特定の実施形態では、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物の第１の用量を投与された患者は、治療有効量のｒＡＡＶが患者に投与されるために、第１の医薬組成物の第２の用量（第３の用量、第４の用量、または第５またはそれを超える用量）を必要とし得る。そのような実施形態では、第２の医薬組成物を第１の医薬化合物の第２の用量の前に、同時に（例えば、同じ日に）、または後に投与することにより、治療有効量の第１の医薬組成物を患者送達することが可能になる。

【0159】

いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された第１の医薬組成物の第１の用量よりも低い用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された医薬組成物の第１の用量よりも高い用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された医薬組成物の第１の用量と同じ用量で患者に投与される。

【0160】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された第２の医薬組成物の第１の用量よりも低い用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された第２の医薬組成物の第１の用量よりも高い用量で患者に投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物の第２の用量は、患者に投与された第２の医薬組成物の第１の用量と同じ用量で患者に投与される。

【0161】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物の第１または第２の用量は、第１の医薬組成物の第１または第２の用量を患者に投与する前に（例えば、本明細書に記載される例示的なタイミングで）投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物の第１または第２の用量は、第１の医薬組成物の第１または第２の用量を患者に投与した後に（例えば、本明細書に記載される例示的なタイミングで）投与される。いくつかの実施形態では、第１の医薬組成物の第１または第２の用量および第２の医薬組成物の第２の用量は、同じ日に患者に投与される。

【0162】

また、本明細書では、ｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物の第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、第１０、またはそれを超える用量を投与すること、および、ｒＡＡＶを中和する能力をもつ少なくとも１つの抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物の第２、第３、第４、第５、第６、第７、第８、第９、第１０、またはそれを超える用量を補助的に投与することを含む方法も提供される。
６．３．３．１．ｒＡＡＶの非全身投与

【0163】

本明細書に記載されるように、ｒＡＡＶまたはｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物は、患者への非全身投与経路を介して投与される。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶまたはｒＡＡＶを含む組成物は、局所または局部送達によって脳、脊髄、筋肉、眼、耳、または任意の他の器官に投与される。

【0164】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶまたは第１の医薬組成物は、髄腔内投与、脳室内投与、または大槽内投与によって中枢神経系に非全身投与される。ある特定の実施形態では、ｒＡＡＶまたはｒＡＡＶを含む第１の医薬組成物は、脳、脊髄、網膜、嗅上皮、眼または耳に投与される。特定の実施形態では、標的器官は脳である。

【0165】

ある特定の実施形態では、ｒＡＡＶまたは第１の医薬組成物は、海馬、皮質、視床（視床中部を含む）、感覚皮質、腹側被蓋野（ＶＴＡ）、前頭前野（ＰＦＣ）、側坐核（ＮＡｃ）、扁桃体、黒質、腹側淡蒼球、淡蒼球（global pallidus）、背側線条体、腹側線条体、視床下核、歯状回、帯状回、嗅内皮質、嗅覚皮質、一次運動皮質、および小脳から選択される標的組織に投与される。ある特定の実施形態では、脳内の標的組織は、海馬、皮質、扁桃体、および大脳基底核からなる群から選択される。

【0166】

ある特定の実施形態では、標的器官は眼である。

【0167】

ある特定の実施形態では、標的器官は筋肉である。

【0168】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶまたは第１の医薬組成物は局所に（例えば、非全身的に）投与される。ある特定の実施形態では、ｒＡＡＶまたは第１の医薬組成物は、髄腔内注射もしくは注入、眼内注射、硝子体内注射もしくは注入、内耳注射もしくは注入、脳室内注射もしくは注入、大槽内注射（ＩＣＭ）もしくは注入、網膜下注射もしくは注入、筋肉内注射もしくは注入、または他の非全身投与経路によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は、関節内注射もしくは注入、心臓内注射もしくは注入、真皮内もしくは皮内注射、または髄腔内注射もしくは注入によって投与される。

【0169】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は髄腔内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は髄腔内注入によって投与される。

【0170】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は眼内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は眼内注入によって投与される。

【0171】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は硝子体内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は硝子体内注入によって投与される。

【0172】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は脳室内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は脳室内注入によって投与される。

【0173】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は網膜下注射または注入によって投与される。

【0174】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は大槽内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は大槽内注入によって投与される。

【0175】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は内耳注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は内耳注入によって投与される。

【0176】

ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は筋肉内注射によって投与される。ある特定の実施形態では、第１の医薬組成物は筋肉内注入によって投与される。
６．３．３．２．中和抗体の全身投与

【0177】

本明細書に記載の方法では、第２の医薬組成物は、全身投与経路を介して投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、筋肉内注射、骨内注射、気管内注射、静脈内注射、または皮下注射によって投与される。ある特定の実施形態では、全身投与経路は、静脈内注射または注入である。いくつかの実施形態では、全身投与経路は、限定されるものではないが、または経粘膜、舌下、または直腸投与である。

【0178】

第２の医薬組成物は、標的組織および器官を逃れて患者内で全身循環しているｒＡＡＶを中和および／または除去する目的で、本方法において全身投与される。例えば、ｒＡＡＶは、非標的組織および器官を含む全身区画、または中枢神経系以外の患者内の場所に逃げることができる。

【0179】

いくつかの実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、１～２０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の投与量で投与される。ある特定の実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、１～２ｍｇ／ｋｇ、１～３ｍｇ／ｋｇ、１～５ｍｇ／ｋｇ、１～６ｍｇ／ｋｇ、１～７ｍｇ／ｋｇ、１～８ｍｇ／ｋｇ、または１～９ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。ある特定の実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、少なくとも１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１１ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１３ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１４ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１６ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１７ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１８ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１９ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。

【0180】

いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～２０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～２００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～１００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～５０ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～１０ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは、１～２ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～１０ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、ＩＶＩＧは１～４ｍｇ／ｍｌの範囲の用量で投与される。

【0181】

ある特定の実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、少なくとも２０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７０ｋｇ／ｍｇ／、少なくとも８０ｋｇ／ｍｇ、少なくとも９０ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも１００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。ある特定の実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、少なくとも１１０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも２７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも３７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも４７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも６７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも７７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８３５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも８７５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９２５ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９５０ｍｇ／ｋｇ、少なくとも９７５ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも１０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。

【0182】

ある特定の実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、少なくとも１１００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１２００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１３００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１４００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１５００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１６００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１７００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１８００ｍｇ／ｋｇ、少なくとも１９００ｍｇ／ｋｇ、または少なくとも２０００ｍｇ／ｋｇ（患者体重）の用量で投与される。

【0183】

いくつかの実施形態では、中和抗体またはそのフラグメントは、１～１０ｇ、１００ｍｇ～１ｇ、１～１００ｍｇ、１～７５ｍｇ、１～５０ｍｇ、１～２５ｍｇ、１～１０ｍｇ、１～５ｍｇ、１～４ｍｇ、または１～２ｍｇの範囲の用量で投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、中和抗体またはそのフラグメントを１～１０ｇ／ｍｌ、１００ｍｇ／ｍｌ～１ｇ／ｍｌ、１～１００ｍｇ／ｍｌ、１～７５ｍｇ／ｍｌ、１～５０ｍｇ／ｍｌ、１～２５ｍｇ／ｍｌ、１～１０ｍｇ／ｍｌ、１～５ｍｇ／ｍｌ、１～４ｍｇ／ｍｌ、または１～２ｍｇ／ｍｌの範囲の濃度で含む。

【0184】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は単回用量として投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は毎日投与される。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、１日１回、１日２回、１日３回、１日４回、１日５回、１日６回または１日７回投与される。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、１週間以内、６日以内、５日以内、４日以内、３日以内、または２日以内に投与される。

【0185】

ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物の投与は、少なくとも１分、少なくとも２分、少なくとも３分、少なくとも４分、少なくとも５分、少なくとも６分、少なくとも７分、少なくとも８分、少なくとも９分、少なくとも１０分、少なくとも１５分、少なくとも２０分、少なくとも２５分、少なくとも３０分、少なくとも４５分、少なくとも５０分、または少なくとも６０分かかる。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物の投与は、１分、２分、３分、４分、５分、６分、７分、８分、９分、１０分、１５分、２０分、２５分、３０分、４５分、５０分、６０分、７０分、８０分、９０分、１００分、１１０分、または１２０分かかる。
６．３．４．中和抗体の有効量

【0186】

好ましい実施形態では、有効量のＡＡＶ中和抗体または抗原結合フラグメントは、全身投与によって患者に補助的に投与される。本明細書で提供される有効量とは、標的組織または標的器官以外でＡＡＶまたはｒＡＡＶの体内分布を減少させるのに十分な量を指す。

【0187】

いくつかの実施形態では、有効量は、肝臓、脾臓、頸部ＤＲＧ、腰部ＤＲＧ、心臓および／または腎臓におけるＡＡＶまたはｒＡＡＶの検出を低下させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、有効量は、肝臓、脾臓、および／または心臓におけるＡＡＶまたはｒＡＡＶの検出を低下させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、有効量は、ＤＲＧにおけるＡＡＶまたはｒＡＡＶの検出を低下させるのに十分な量である。

【0188】

いくつかの実施形態では、有効量は、血清中のレベルと比較して、脳脊髄液（ＣＳＦ）中でＡＡＶまたはｒＡＡＶに対して発生する結合抗体（ＢＡｂ）（例えば、ＩｇＧおよび／またはＩｇＭ）のレベルを低下させるのに十分な量である。いくつかの実施形態では、有効量は、血清中のレベルと比較して、ＣＳＦ中でＡＡＶまたはｒＡＡＶに対して発生するＩｇＭおよび／またはＩｇＧ抗体のレベルを低下させるのに十分な量である。

【0189】

ｒＡＡＶの体内分布は、実験動物において、ｒＡＡＶゲノムの存在、ｒＡＡＶ感染、または発現可能なポリヌクレオチドの発現を測定することによって試験することができる。いくつかの実施形態では、ターゲティングは、非ヒト霊長類（ＮＨＰ）、マウス、ラット、鳥類、ウサギ、モルモット、ハムスター、農場動物（ブタおよびヒツジを含む）、イヌまたはネコにおいて測定される。

【0190】

いくつかの実施形態では、組織または器官へのｒＡＡＶの特異的および非特異的ターゲティングは、ｒＡＡＶの非全身投与後に、かつ／あるいはｒＡＡＶの非全身投与および中和抗体またはその抗原結合フラグメントの全身投与後に測定することができる。いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶのターゲティングは、ｒＡＡＶの非全身投与後、およびｒＡＡＶを中和する能力をもつ抗体または抗原結合フラグメントの全身投与後に測定される。
６．４．キット

【0191】

一態様では、本開示は、本明細書に記載の組換えアデノ随伴ウイルス（ｒＡＡＶ）を含む第１の医薬組成物；および本明細書に記載のＡＡＶ中和抗体またはその抗原結合フラグメントを含む第２の医薬組成物を含む、併用治療のためのキットを提供する。

【0192】

いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントは、セクション５．３．１に記載されているように、ｒＡＡＶのカプシドタンパク質に結合する。

【0193】

いくつかの実施形態では、抗体またはその抗原結合フラグメントはＩｇＧである。

【0194】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物はｒＡＡＶを中和する能力をもつ。ある特定の実施形態では、第２の医薬組成物は、ＡＡＶ２；ＡＡＶ１；ＡＡＶ６；ＡＡＶ３；ＡＡＶ ＬＫ０３；ＡＡＶ７；ＡＡＶ８；ＡＡＶ ｈｕ．３７；ＡＡＶ ｒｈ．１０；ＡＡＶ９；ＡＡＶ ｈｕ．６８；ＡＡＶ１０；ＡＡＶ５；ＡＡＶ３－３；ＡＡＶ４－４；ＡＡＶ１－Ａ；ｈｕ．４６－Ａ；ｈｕ．４８－Ａ；ｈｕ．４４－Ａ；ｈｕ．４３－Ａ；ＡＡＶ６－Ａ；ｈｕ．３４－Ｂ；ｈｕ．４７－Ｂ；ｈｕ．２９－Ｂ；ｒｈ．６３－Ｂ；ｈｕ．５６－Ｂ；ｈｕ．４５－Ｂ；ｒｈ．５７－Ｂ；ｒｈ．３５－Ｂ；ｒｈ．５８－Ｂ；ｒｈ．２８－Ｂ；ｒｈ．５１－Ｂ；ｒｈ．１９－Ｂ；ｒｈ．４９－Ｂ；ｒｈ．５２－Ｂ；ｒｈ．１３－Ｂ；ＡＡＶ２－Ｂ；ｒｈ．２０－Ｂ；ｒｈ．２４－Ｂ；ｒｈ．６４－Ｂ；ｈｕ．２７－Ｂ；ｈｕ．２１－Ｂ；ｈｕ．２２－Ｂ；ｈｕ．２３－Ｂ；ｈｕ．７－Ｃ；ｈｕ．６１－Ｃ；ｒｈ．５６－Ｃ；ｈｕ．９－Ｃ；ｈｕ．５４－Ｃ；ｈｕ．５３－Ｃ；ｈｕ．６０－Ｃ；ｈｕ．５５－Ｃ；ｈｕ．２－Ｃ；ｈｕ．１－Ｃ；ｈｕ．１８－Ｃ；ｈｕ．３－Ｃ；ｈｕ．２５－Ｃ；ｈｕ．１５－Ｃ；ｈｕ．１６－Ｃ；ｈｕ．１１－Ｃ；ｈｕ．１０－Ｃ；ｈｕ．４－Ｃ；ｒｈ．５４－Ｄ；ｒｈ．４８－Ｄ；ｒｈ．５５－Ｄ；ｒｈ．６２－Ｄ；ＡＡＶ７－Ｄ；ｒｈ．５２－Ｅ；ｒｈ．５１－Ｅ；ｈｕ．３９－Ｅ；ｒｈ．５３－Ｅ；ｈｕ．３７－Ｅ；ｒｈ．４３－Ｅ；ｒｈ．５０－Ｅ；ｒｈ．４９－Ｅ；ｒｈ．６１－Ｅ；ｈｕ．４１－Ｅ；ｒｈ．６４－Ｅ；ｈｕ．４２－Ｅ；ｒｈ．５７－Ｅ；ｒｈ．４０－Ｅ；ｈｕ．６７－Ｅ；ｈｕ．１７－Ｅ；ｈｕ．６－Ｅ；ｈｕ．６６－Ｅ；ｒｈ．３８－Ｅ；ｈｕ．３２－Ｆ；ＡＡＶ９／ｈｕ；ｈｕ．３１－Ｆ；Ａｎｃ８０；Ａｎｃ８１；Ａｎｃ８２；Ａｎｃ８３；Ａｎｃ８４；Ａｎｃ９４；Ａｎｃ１１３；Ａｎｃ１２６；Ａｎｃ１２７；Ａｎｃ８０Ｌ２７；Ａｎｃ８０Ｌ５９；Ａｎｃ８０Ｌ６０；Ａｎｃ８０Ｌ６２；Ａｎｃ８０Ｌ６５；Ａｎｃ８０Ｌ３３；Ａｎｃ８０Ｌ３６；Ａｎｃ８０Ｌ４４；Ａｎｃ８０Ｌ１；Ａｎｃ１１０；およびＡｎｃ８０ＤＩまたはその変形形態から選択されるＡＡＶのカプシドタンパク質を含有するＡＡＶまたはｒＡＡＶを中和する能力をもつ。

【0195】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも１００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、少なくとも５００人、少なくとも１０００人、少なくとも５０００人、または少なくとも１０，０００人のドナーから得られたポリクローナル抗体を含む。

【0196】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、静脈内免疫グロブリン（ＩＶＩＧ）を含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、組換え静脈内免疫グロブリン（ｒＩＶＩＧ）を含む。ある特定の実施形態では、ＩＶＩＧは、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｌｉｑｕｉｄ（登録商標）（バクスター・ヘルスケア株式会社）、Ｇａｍｍａｇａｒｄ（商標）Ｓ／Ｄ、Ｇａｍｍａｐｌｅｘ（商標）、Ｂｉｖｉｇａｍ（商標）、Ｃａｒｉｍｕｎｅ（商標）ＮＦ、Ｇａｍｕｎｅｘ－Ｃ、Ｇａｍｍａｋｅｄ（商標）、Ｆｌｅｂｏｇａｍｍａ（商標）ＤＩＦ、Ｏｃｔａｇａｍ（商標）、およびＰｒｉｖｉｇｅｎ（商標）から選択される。

【0197】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は組換えポリクローナル抗体を含む。

【0198】

いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、単鎖Ｆｖ（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂ、（Ｆａｂ”）_２、および（ｓｃＦｖ）_２から選択されるＡＡＶ中和抗原結合フラグメントを含む。いくつかの実施形態では、第２の医薬組成物は、二重特異性抗体、単一ドメイン抗体（ｄＡｂ）、ダイアボディ（Ｄｂ）、ナノボディ、ユニボディ、およびダイアボディを含む。

【0199】

いくつかの実施形態では、ｒＡＡＶは、セクション５．３．１に記載のＡＡＶのカプシドタンパク質を有する。

【実施例】

【0200】

６．５．実施例
以下の実施例は、限定ではなく例示として提供される。
６．５．１．実施例１：ｒＡＡＶの非全身投与を伴うＩＶＩＧの補助投与

【0201】

この実験は、ＩＶＩＧの全身投与がＩＣＶ投与されたＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰの体内分布を制限するという仮説を試験するために行われた。特に、この実験は、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰをＩＣＶ投与する前にＩＶＩＧを投与することにより、ＣＮＳから肝臓、心臓、および腎臓などの末梢器官へのＡＡＶベクターの伝播が制限されるかどうかを評価するように設計された。ＡＡＶのＩＣＶ投与後、ベクターは、肝臓などの末梢器官ならびにＤＲＧに見られることが多い。ベクターがどのようにＣＮＳから逃れるのかは不明である。ＩＶＩＧは、数千人の健康なドナーから得られたＩｇＧの精製混合物で、ＡＡＶ９を含む多くのＡＡＶ血清型に対する中和抗体を含有する。この仮説は、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の前のＩＶＩＧの全身投与が、ＣＮＳから逃れるベクターを中和し、肝臓などの末梢器官の形質導入を妨げるというものであった。以下に示すように、この実験は、ＩＶＩＧ投与がＣＮＳから末梢器官へのベクターの伝播を制限することを証明した。
６．５．１．１．実験デザイン

【0202】

処置するマウスを５つの処置群（群１～５）に分けた。群１には、ＩＣＶ生理食塩水注射を投与し、ビヒクル対照としての役割を果たした。群２には、ＩＣＶ注射によってＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与した。群３には、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ注射の２時間前に、ＩＶ注射によって２０ｍｇのＩＶＩＧ（１０ｍｇのＩＶＩＧ／血液ｍＬ）を投与した。群４には、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ注射の２４時間前に、ＩＶ注射によって２０ｍｇのＩＶＩＧを投与した。群５には、末梢器官のベクター形質導入の対照として、同じ用量のＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰをＩＶ注射によって投与した。表１は、群１～５についての実験条件を含む実験デザインの概要を提供する。

【表1】

【0203】

剖検時（１４日目）に組織を収集して、ベクターの体内分布（ＡＡＶゲノムＤＮＡ）およびｅＧＦＰ発現（ｅＧＦＰ ｍＲＮＡ）を評価した。さらに、ベクター投与の前（０日目）に血液を採取し、中和抗体（ＮＡｂ）力価アッセイによってＩＶＩＧ投与を検証した。血液およびＣＳＦも剖検時に収集した。採取したら、組織を直ちに保存液ＲＮＡｌａｔｅｒに入れ、その後ＲＮＡｌａｔｅｒを取り除き、組織を急速凍結するか、またはＤＮＡ単離のためにプロテイナーゼＫを含む溶解緩衝液に入れた。同じ組織からさらなる組織材料を固定し、切片化および免疫組織化学（ＩＨＣ）による抗ＧＦＰ染色のために包埋した。
６．５．１．２．中和抗体力価の分析

【0204】

中和抗体（ＮＡｂ）力価の分析は、インビトロＮＡｂアッセイを使用して研究動物由来の血清に対して行った。ＡＡＶ ＮＡｂ試験は、以前に記載されたように、ペンシルバニア大学の遺伝子治療プログラムの免疫学コアによって実施された（Ｃａｌｃｅｄｏら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１８ Ａｐｒ；２９（２）：８６～９５、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる）。

【0205】

表１に示すように、マウスはＡＡＶに対する既存の抗体を持たず、研究登録前は血清陰性であった。ベクター投与の日（１日目、該当する群ではＩＶＩＧ投与後２時間、または２４時間）に、血清試料をベクター投与前に収集し、ＮＡｂについて評価した。ＮＡｂ力価を表２に示す。ＩＶＩＧを投与した動物、動物ＩＤ＃７～＃１６は、ＩＶＩＧ対照（動物に投与されていない新鮮なＩＶＩＧ試料）と同様のＮＡｂ力価を示しした。予想通り、ＩＶＩＧを投与されなかった動物のＮＡｂ力価は、検出閾値を下回っていた。

【表2】

^１ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６およびＩＶＩＧ試料タイプ（下の２行）は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。
^２値は、数値は、相対発光単位（ＲＬＵ）がウイルス対照ウェル（試験試料なし）と比較して５０％減少した血清逆希釈である。検出限界は１／５希釈。
^＊検出限界は１／１０希釈－１／５希釈では利用可能な十分な血清がない。
^＊＊検出限界は１／４０希釈－１／５希釈では利用可能な十分な血清がない。
６．５．１．３．結合抗体価の分析

【0206】

マウスＢ細胞応答は、インビトロ結合抗体（ＢＡｂ）ＥＬＩＳＡを使用して血清およびＣＳＦ中で評価した。１４日目（剖検）に、インビトロＢＡｂ ＥＬＩＳＡアッセイを使用して、研究動物からの血清および脳脊髄液についてＢＡｂ力価分析を実施した。ＡＡＶ９ ＢＡｂ試験は、以前に記載されたように（Ｃａｌｃｅｄｏら、Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅ Ｔｈｅｒ Ｍｅｔｈｏｄｓ．２０１８ Ａｐｒ；２９（２）：８６～９５）、抗マウスＩｇＭ－ＨＲＰ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号３１４５６）または抗マウスＩｇＧ－ＨＲＰ（Ｐｒｏｍｅｇａ、カタログ番号Ｗ４０２Ｂ）を使用して行った。血清およびＣＳＦ中のＩｇＧの分析のために群をプールした。

【0207】

個々の動物についてのＩｇＭ ＢＡｂ力価を表３に示す。

【表3】

【0208】

プールされた群からのＩｇＧ ＢＡｂ力価を表４に示す。

【表4】

【0209】

表３および表４に示すように、ＡＡＶの投与前にＩＶＩＧで処置したマウスは、血清中のＩｇＭおよび／またはＩｇＧ抗体のレベルと比較して、ＣＳＦ中でＡＡＶに対してより低いレベルのＩｇＭおよび／またはＩｇＧ抗体を発現した。このことは、ＩＶＩＧが、投与されたＡＡＶカプシドに対する高レベルのＩｇＭおよび／またはＩｇＧ抗体の発現からＣＮＳを保護することを示唆している。
６．５．１．４．ベクターゲノムの体内分布

【0210】

様々な組織におけるベクターゲノム分布（すなわち、ＡＡＶベクターゲノムＤＮＡ）を、ｄｄＰＣＲによって測定し、細胞あたりのベクターゲノムコピーの大まかな指標である、ＲＰＰ３０のＤＮＡコピー数に対するｅＧＦＰのＤＮＡコピー数の比（ｅＧＦＰ／ＲＰＰ３０）として示した。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ注射の１４日後に組織を採取し、ＤＮＡを単離した。ＤＮＡは、Ｂｉｏ－Ｒａｄ ｄｄＰＣＲ Ｓｕｐｅｒｍｉｘ ｆｏｒ Ｐｒｏｂｅｓ（ｄＵＴＰなし）（Ｂｉｏ－Ｒａｄ １８６３０２４）を、ｅＧＦＰ導入遺伝子をコードするＤＮＡおよび非ヒト霊長類ＲＰＰ３０リファレンスをコードするＤＮＡに特異的なプライマーおよびプローブと組み合わせて使用して分析した。プライマーおよびプローブは、混入ＲＮＡがベクターゲノムの正確な定量を妨げるのを防ぐために、イントロン配列を含むように設計した。サーマルサイクリングの後、Ｂｉｏ－Ｒａｄ ＱＸ２００ Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｒｅａｄｅｒ装置でＡｂｓｏｌｕｔｅ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎプログラムを使用して試料を分析した。

【0211】

ベクターゲノムの体内分布測定の結果を、図１Ａ（脳）、２Ｂ（肝臓）、２Ｃ（脾臓）、２Ｄ（頸部ＤＲＧ）、２Ｅ（腰部ＤＲＧ）、２Ｆ（心臓）、および２Ｇ（腎臓）に示す。例えば、ｅＧＦＰ導入遺伝子をコードするＤＮＡのコピー（ｃｐ）／μＬ量を、ＲＰＰ３０リファレンスをコードするＤＮＡのｃｐ／μＬ量に対して正規化し、１００を掛けて、ＲＰＰ３０のＤＮＡコピー数に対するｅＧＦＰのＤＮＡについてのコピー数の比を生成した。各組織について、３つの生物学的反復からの結果を各処置について提供した。統計学的有意差は、Ｐ値を用いた一元配置分散分析検定によって決定し、アスタリスクで示した。^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．００２；^＊＊＊Ｐ＜０．００１；^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、ｎｓ＝有意でない。

【0212】

図１Ａは、脳におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡのコピー数の比を示す。いずれの処置群間でも有意差は観察されなかった。

【0213】

図１Ｂは、肝臓におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡコピー数の比を示す。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与すると、ベクター形質導入が減少した。

【0214】

図１Ｃは、脾臓におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡコピー数の比を示す。尾静脈ＩＶ注射を介してＡＡＶ９を投与された動物は、ＩＣＶ注射対照と比較して、同様のベクターゲノムのコピーを有していた。このことは、ベクターがＣＮＳから循環に逃げていることを示唆している。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間前にＩＶＩＧを投与された動物は、ベクターゲノムの有意な増加をもたらしたが、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２４時間前にＩＶＩＧを投与された群は、ベクターゲノムの増加は示したが、有意な増加ではなかった。これはおそらく、２４時間処置における、ベクター投与前の循環中の一部のＩＶＩＧのクリアランスまたは分解に起因する。抗体に結合したカプシドは循環中の食細胞による貪食の標的となるため、この結果は予想される。したがって、脾臓におけるベクターゲノムのこの増加は、剖検の時点（１４日目）に脾臓に存在するマクロファージ、好中球、および樹状細胞集団のＡＡＶベクターが不活性化された可能性がある。

【0215】

図１Ｄ～１Ｅは、頸部ＤＲＧ（図１Ｄ）および腰部ＤＲＧ（図１Ｅ）におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡのコピー数の比を示す。

【0216】

図１Ｆは、心臓におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡのコピー数の比を示す。ＩＣＶまたはＩＶ注射を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、心筋に同様のベクター形質導入を示した。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物は、心臓においてベクター形質導入が減少し（すなわち、細胞あたりのベクターゲノムコピーが減少）、これは２４時間で統計学的に有意であった。

【0217】

図１Ｇは、腎臓におけるｅＧＦＰとＲＰＰ３０のＤＮＡのコピー数の比を示す。ＩＣＶまたはＩＶを介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、同様のベクター形質導入を示した。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物は、腎臓においてベクター形質導入が有意に減少した（すなわち、細胞あたりのベクターゲノムコピーがより少ない）。
６．５．１．５．遺伝子発現

【0218】

様々な組織におけるｅＧＦＰ ｍＲＮＡ発現をＲＴ－ｄｄＰＣＲによって測定し、細胞あたりのｅＧＦＰ ｍＲＮＡコピーの大まかな指標である、ＲＰＰ３０転写物に対するｅＧＦＰ転写物の比（ｅＧＦＰ／ＲＰＰ３０）として示した。注射の１４日後に組織を採取し、ＲＮＡを単離した。試料からのＲＮＡは、Ｂｉｏ－Ｒａｄ Ｏｎｅ－Ｓｔｅｐ ＲＴ－ｄｄＰＣＲ Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｋｉｔ ｆｏｒ Ｐｒｏｂｅｓ（Ｂｉｏ－Ｒａｄ１８６４０２２）を、ｅＧＦＰ導入遺伝子および非ヒト霊長類ＲＰＰ３０リファレンス遺伝子に特異的なプライマーおよびプローブと組み合わせて使用して分析した。両標的についてのリバースプライマーは、逆転写ステップのための逆転写プライマーとして作用した。可能であれば、混入ＤＮＡとの交差反応性を防止するために、プライマーおよびプローブはエクソン－エクソン接合部をまたぐように設計された。サーマルサイクリングの後、ＱＸ２００ Ｄｒｏｐｌｅｔ Ｒｅａｄｅｒ装置でＡｂｓｏｌｕｔｅ Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｏｎプログラムを使用して試料を分析した。

【0219】

ｅＧＦＰ ｍＲＮＡの発現測定の結果を、図２Ａ（脳）、２Ｂ（肝臓）、２Ｃ（脾臓）、２Ｄ（頸部／胸部ＤＲＧ）、２Ｅ（腰部ＤＲＧ）、２Ｆ（心臓）、および２Ｇ（腎臓）に示す。例えば、ｅＧＦＰ導入遺伝子についてのｃｐ／μＬ量を、ＲＰＰ３０リファレンス遺伝子のｃｐ／μＬ量に対して正規化し、１００を掛けて、ＲＰＰ３０転写物に対するｅＧＦＰ転写物の比（ｅＧＦＰ／ＲＰＰ３０）を生成した。各組織について、３つの生物学的反復からの結果を各条件について提供した。統計学的有意差は、Ｐ値を用いた一元配置分散分析検定によって決定し、アスタリスクで示した。^＊Ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．００２；^＊＊＊Ｐ＜０．００１；^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１、ｎｓ＝有意でない。

【0220】

図２Ａは、脳におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。ＩＶＩＧで処置された動物は、ＩＣＶ投与を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物と比較して、ｅＧＦＰ ｍＲＮＡ発現に差を示さなかった。

【0221】

図２Ｂは、肝臓におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。ＩＣＶを介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、ＩＶ尾静脈注射を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物と同様のレベルのｅＧＦＰ ｍＲＮＡ発現を示した。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与した動物は、ｅＧＦＰ ｍＲＮＡ発現の有意な低下を示した。この発現データは、ベクターゲノムの体内分布データと一致している。

【0222】

図２Ｃは、脾臓におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。ＩＣＶ投与によりＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、ＩＶ投与によりＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物と比較して、ＧＦＰの発現が低下した。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与した動物は、ＩＣＶ単独投与群と比較してＧＦＰ発現のわずかな減少を示したが、この減少は統計学的に有意ではなかった。

【0223】

図２Ｄ～２Ｅは、頸部／胸部ＤＲＧ（図２Ｄ）および腰部ＤＲＧ（図２Ｅ）におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。頸部／胸部ＤＲＧ群と腰部ＤＲＧ群の両方で、ＩＣＶ投与を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与前にＩＶＩＧで処置された動物と比較して、ｅＧＦＰ ｍＲＮＡの発現に差を示さなかった。ＩＣＶ投与を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物は、ＩＶ投与を介してＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰを投与された動物と比較して、ＧＦＰ発現がわずかに増加した（しかし、統計学的に有意ではない）。

【0224】

図２Ｆは、心臓におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物は、ＧＦＰ発現が減少したが、統計学的に有意ではなかった。

【0225】

図２Ｇは、腎臓におけるｅＧＦＰ転写物とＲＰＰ３０転写物の比を示す。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の２時間前または２４時間前にＩＶＩＧを投与した動物は、ＧＦＰ発現の有意な低下を示した。
６．５．１．６．タンパク質の発現

【0226】

ＩＨＣ分析のための組織試料をベクター投与後１４日目に収集し、直ちに１０％中性緩衝ホルマリンに約４８時間入れ、その後７０％エタノールに移した。エタノール中の試料を周囲温度でＨｉｓｔｏｓｅｒｖ（メリーランド州ゲルマンタウン）に輸送した。手短に言えば、組織試料をトリミングし、パラフィンに包埋した。得られたブロックをミクロトームによって切片化し、スライドガラスに取り付け、ＧＦＰを検出するために染色した。手短に言えば、スライドを５５～６５℃で１５分間焼成してパラフィンを除去し、Ｍｏｎｅｔ Ｂｌｕｅ希釈液中１：１，０００のＧｅｎｅＴｅｘ、ＧＴＸ２０２９０ ＧＦＰ抗体、および抗ウサギＨＲＰ標識二次抗体（Ｂｉｏｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃａｌ、ＢＲＲ４００９）を使用して染色した。ベタゾイドＤＡＢ（Ｂｉｏｃａｒｅ Ｍｅｄｉｃａｌ、ＢＤＢ２００４）を現像に使用し、マイヤーのヘマトキシリン（ＳｔａｔＬａｂ、ＨＸＭＭＨＰＴ）を対比染色に使用した。各条件（すなわち、生理食塩水；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶと２時間のＩＶＩＧ；ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰと２４時間のＩＶＩＧ；またはＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＶ）からの代表的な画像を図３Ａ（脳）、３Ｂ（肝臓）、３Ｃ（脾臓）、３Ｄ（頸部／胸部ＤＲＧ）、３Ｅ（腰部ＤＲＧ）、３Ｆ（心臓）、および３Ｇ（腎臓）に示す。

【0227】

図３Ａは、抗ＧＦＰ ＩＨＣの後に得られた脳断面の代表的な画像を示す。図３Ａは、予想通り、ＩＣＶ投与動物の脳におけるｅＧＦＰ発現を示す。ＩＶ注射を介して投与された脳ではｅＧＦＰの発現はほとんどまたは全くなく、生理食塩水対照ではバックグラウンドがなかった。表５は、各動物についてのＧＦＰ^＋脳細胞の割合の要約を提供する。

【表5-1】

【表5-2】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【0228】

図３Ｂは、抗ＧＦＰ ＩＨＣの後に得られた肝臓断面の代表的な画像を示す。ＧＦＰ発現は、ＩＣＶまたはＩＶ注射のいずれかで、ＡＡＶ単独を投与された群で明らかであった。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物では、ＧＦＰ発現は肝臓で検出されず、生理食塩水を注射した対照と同様であった。１つの例外は、２４時間ＩＶＩＧ処置群の動物＃１５であり、ＧＦＰ陽性細胞がほとんどなかった（表６参照）。この動物はまた、ＲＴ－ｄｄＰＣＲによって測定した場合、群内の他の動物と比較してより高い量のＧＦＰ発現を有した。表６は、各動物のＧＦＰ^＋肝細胞の割合の要約を提供する。

【表6】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【0229】

図３Ｃは、抗ＧＦＰ ＩＨＣの後に得られた脾臓断面の代表的な画像を示す。ＧＦＰ発現の差は、いずれの処置群間でも検出されなかった。脾臓の性質のために、生理食塩水を注射された動物には高度のバックグラウンドが存在する。表７は、各動物についてのＧＦＰ^＋脾臓細胞の割合の要約を提供する。

【表7】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【0230】

図３Ｄ～３Ｅは、抗ＧＦＰ ＩＨＣ後に得られた頸部／胸部ＤＲＧ断面（図３Ｄ）および腰部ＤＲＧ断面（図３Ｅ）の代表的な画像を示す。表８および表９は、頸部／胸部ＤＲＧ（表８）および腰部ＤＲＧ（表９）におけるＧＦＰ^＋細胞の割合の要約を提供する。

【表8-1】

【表8-2】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【表9】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【0231】

図３Ｆは、抗ＧＦＰ ＩＨＣの後に得られた心臓断面の代表的な画像を示す。ＧＦＰ発現は、ＩＣＶまたはＩＶ投与のいずれかによってＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置された群の心臓で観察された。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物では、ＧＦＰ発現は心臓で検出されず、生理食塩水を注射した対照と同様であった。表１０は、各動物のＧＦＰ^＋心臓細胞の割合の要約を提供する。

【表10】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。

【0232】

図３Ｇは、抗ＧＦＰ ＩＨＣの後に得られた腎臓断面の代表的な画像を示す。ＧＦＰ発現は、ＩＣＶまたはＩＶ投与のいずれかによってＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置された群の腎臓で観察された。ＧＦＰ発現は糸球体に隣接する尿細管に限定されており、緻密斑を表す上皮細胞で特異的に発現することが示唆された。ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰ ＩＣＶ投与の２時間または２４時間前にＩＶＩＧを投与された動物では、ＧＦＰ発現は腎臓で検出されず、生理食塩水を注射した対照と同様であった。表１１は、各動物のＧＦＰ^＋腎細胞の割合の要約を提供する。

【表11-1】

【表11-2】

^＊ＭＲ－１８－７～ＭＲ－１８－１６は、陽性のＮＡｂ応答を有し、ＭＲ－１８－２～ＭＲ－１８－６およびＭＲ－１８－１７～ＭＲ－１８－１９は陰性のＮＡｂ応答を有した。
６．５．１．７．結論

【0233】

この実験は、ＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰのＩＣＶ投与の前にＩＶＩＧを全身投与すると、ＣＮＳを逃れたＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰによる末梢器官の形質導入が制限されるという仮説を試験するために設計された。

【0234】

ベクターゲノムは、ＩＣＶまたはＩＶ投与のいずれかによってＡＡＶ９．ＣＡＧ．ＧＦＰで処置された群の肝臓、心臓、および腎臓で観察された。末梢器官にベクターゲノムが存在することは、ＡＡＶがＩＣＶ注射後にＣＮＳから逃れるのに熟達していることを示唆している。ＩＣＶのみを投与された動物と比較して、ＡＡＶのＩＣＶ投与前にＩＶＩＧで処置された動物は、肝臓、心臓および腎臓において形質導入および発現の有意な減少を示した。脾臓は、ＩＶＩＧで前処置した動物においてベクターゲノムの増加を示したが、これは、真正の形質導入ではなく、循環食細胞による抗体結合カプシドの貪食に起因する可能性がある。これを裏付けるように、ＧＦＰ発現データ（ＩＨＣまたはＲＴ－ｄｄＰＣＲ）は、ＩＶＩＧを投与した群とＩＶＩＧを投与せずにＡＡＶを投与した群との間で有意な変化を示さなかった。全体として、ＡＡＶ ＩＣＶ投与の前のＩＶＩＧ投与は、肝臓、心臓、および腎臓を含む末梢組織におけるＡＡＶ形質導入を制限した。
７．参照による組み込み

【0235】

本出願で引用されたすべての刊行物、特許、特許出願および他の文書は、あたかも個々の刊行物、特許、特許出願または他の文書があらゆる目的のために参照により組み込まれることが個別に示されているのと同程度に、あらゆる目的のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。
８．等価物

【0236】

様々な具体的な実施形態を図示し説明したが、上記の明細書は限定的なものではない。本発明の精神および範囲から逸脱することなく、様々な変更を行うことができることが理解されよう。本明細書を検討すると、多くの変形形態が当業者に明らかになる。

【化1-1】

【化1-2】

【化1-3】

【化1-4】

【化1-5】

【化1-6】

【化1-7】

【化1-8】

【化1-9】

【化1-10】

【化1-11】

【化1-12】

【化1-13】

【化1-14】

【化1-15】

【化1-16】

【化1-17】

【化1-18】

【化1-19】

【化1-20】

【化1-21】

【化1-22】

【化1-23】

【化1-24】

【化1-25】

【化1-26】

【図1-1】

【図1-2】

【図1-3】

【図1-4】

【図2-1】

【図2-2】

【図2-3】

【図2-4】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図3D】

【図3E】

【図3F】

【図3G】

【配列表】

2023548976000001.app

【国際調査報告】