(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-12-12
(54)【発明の名称】眼の疾患を治療するための組成物及び方法
(51)【国際特許分類】
A61K 39/395 20060101AFI20231205BHJP
A61P 27/02 20060101ALI20231205BHJP
A61P 27/06 20060101ALI20231205BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20231205BHJP
C07K 16/18 20060101ALI20231205BHJP
C12N 15/13 20060101ALN20231205BHJP
【ＦＩ】
A61K39/395 N
A61P27/02 ZNA
A61P27/06
A61K39/395 Y
A61K39/395 D
A61K9/08
C07K16/18
C12N15/13
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023533830
(86)(22)【出願日】2021-12-03
(85)【翻訳文提出日】2023-07-14
(86)【国際出願番号】 US2021061755
(87)【国際公開番号】W WO2022120137
(87)【国際公開日】2022-06-09
(31)【優先権主張番号】63/121,629
(32)【優先日】2020-12-04
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】516008350
【氏名又は名称】アネクソン，インコーポレーテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110002572
【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】グローバー，アニタ
(72)【発明者】
【氏名】テイラー，ロリ
(72)【発明者】
【氏名】イェドノック，テッド
【テーマコード（参考）】
4C076
4C085
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB11
4C076BB24
4C076CC10
4C076FF12
4C076FF14
4C085AA13
4C085AA14
4C085AA16
4C085BB31
4C085BB33
4C085BB34
4C085BB35
4C085BB36
4C085BB37
4C085BB41
4C085BB43
4C085CC22
4C085CC23
4C085DD62
4C085EE01
4C085GG01
4H045AA11
4H045AA20
4H045AA30
4H045DA76
4H045EA20
4H045FA72
4H045FA74
(57)【要約】
本開示は、概して、眼の疾患（例えば、緑内障または加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法に関連する。加齢黄斑変性症は、地図状萎縮であってよい。
【選択図】なし
【選択図】なし
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ヒト患者における眼の疾患を治療する方法であって、約１ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含む組成物を、硝子体注射を介して前記患者に投与することを含み、前記抗体が、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む、前記方法。
【請求項2】
前記抗体が、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、前記軽鎖可変ドメインが、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記軽鎖可変ドメインが、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項２に記載の方法。
【請求項4】
前記抗体が、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、前記重鎖可変ドメインが、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記重鎖可変ドメインが、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
前記抗体が、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、抗体断片またはそれらの抗体誘導体である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
前記抗体が抗体断片であり、前記抗体断片が、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子である、請求項６に記載の方法。
【請求項8】
前記Ｆａｂ断片が、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記抗体が週１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
前記抗体が隔週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
前記抗体が３週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項12】
前記抗体が月１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項13】
前記抗体が４週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項14】
前記抗体が６週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項15】
前記抗体が８週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
前記抗体が隔月毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
前記抗体が１０週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記抗体が１２週毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記抗体が３ヵ月毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記抗体が４ヵ月毎に１回投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
前記抗体が、少なくとも３ヵ月間、少なくとも４ヵ月間、少なくとも６ヵ月間、少なくとも７ヵ月間、少なくとも８ヵ月間、少なくとも９ヵ月間、少なくとも１０ヵ月間、少なくとも１１ヵ月間、または少なくとも１２ヵ月間投与される、請求項９～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項22】
前記抗体が１２ヵ月間投与される、請求項９～２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項23】
前記投与される組成物が、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇ、または約１０ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項24】
前記組成物が、約１ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項25】
前記組成物が、約２．５ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項26】
前記組成物が、約５ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項27】
前記組成物が、約２ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項28】
前記組成物が、約５ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項29】
前記組成物が、約１０ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項30】
前記組成物が、約１ｍｇ～約２．５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約５ｍｇ、約５ｍｇ～約７．５ｍｇ、または約７．５ｍｇ～約１０ｍｇの前記抗Ｃ１ｑ抗体を投与することを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項31】
前記眼の疾患が、緑内障または加齢黄斑変性症である、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項32】
前記加齢黄斑変性症が地図状萎縮である、請求項３１に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本特許出願は、２０２０年１２月４日に出願された米国仮特許出願第６３／１２１，６２９号に対する優先権を主張するものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
本特許出願は、２０２０年１２月４日に出願された米国仮特許出願第６３／１２１，６２９号に対する優先権を主張するものであり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【背景技術】
【0002】
緑内障及び加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）は、全世界で、不可逆的な失明の主要な原因である。萎縮型ＡＭＤまたは進行した萎縮型ＡＭＤとしても知られる地図状萎縮（ＧＡ）は、進行したＡＭＤの形態である。４０～８０歳の人口についての世界的な緑内障有病率は、３．５４％（９５％ＣｒＩ、２．０９－５．８２）である。有病率は、２０４０年までに世界で１億１，２００万人、北米で４７０万人に増加すると予測されている。現在承認されている緑内障の治療は、眼圧（ＩＯＰ）を低下させることに限られている。手術、レーザー治療またはＩＯＰ下降剤は、全て一般に用いられている。しかし、投薬または手術によってＩＯＰをよく管理した場合であっても、多くの緑内障患者は進行性の視力障害を経験し続ける。さらに、ＧＡの承認された処置または治療法は存在しない。したがって、ＩＯＰの管理では、進行性かつ不可逆的な視力障害につながる神経節細胞、軸索またはシナプスの欠損を予防するために不十分である患者のための神経保護処置という、重要な満たされていないニーズが存在する。それゆえ、眼の疾患（例えば、緑内障、及び地図状萎縮などのＡＭＤ）を予防する、発生リスクを低減する、及び治療するための新規療法が必要とされている。
【発明の概要】
【0003】
本開示は、概して、ヒト患者における眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法を対象とする。そのような方法は、患者に、約１ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含む組成物を、硝子体注射を介して投与することを含み、上記抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインであって、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインであって、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、を含む。抗体は、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、抗体断片またはそれらの抗体誘導体であってよい。抗体断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディまたは一本鎖抗体分子であってよい。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ断片は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む。
【0004】
いくつかの実施形態では、抗体は、１週間に１回、隔週毎に１回、３週間毎に１回、１ヵ月に１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、８週間毎に１回、隔月毎に１回、１０週間毎に１回、１２週間毎に１回、３ヵ月毎に１回、または４ヵ月毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、少なくとも６ヵ月間、少なくとも７ヵ月間、少なくとも８ヵ月間、少なくとも９ヵ月間、少なくとも１０ヵ月間、少なくとも１１ヵ月間または少なくとも１２ヵ月間投与される。
【0005】
いくつかの実施形態では、投与される組成物は、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇ、または約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含む。投与される組成物は、約１ｍｇ～約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１ｍｇ～約２．５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約５ｍｇ、約５ｍｇ～約７．５ｍｇ、または約７．５ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。
【0006】
いくつかの実施形態では、眼の疾患は、緑内障、または地図状萎縮などの加齢黄斑変性症である。
【図面の簡単な説明】
【0007】
【図1】ヒトＣ１ｑ結合アッセイを示す。片側ＥＬＩＳＡ（ｏｎｅ－ｓｉｄｅｄ ＥＬＩＳＡ）で、ヒトＣ１ｑに、Ｍａｂ２－Ｆａｂ、ＦａｂＡ及びＭａｂ２を結合させる。酵素を標識した抗ヒトＦｃまたは抗ヒトカッパ抗体、その後、酵素基質を用いて、結合した抗体またはＦａｂ分子を検出した。抗体は、ヒトＣ１ｑに対して同等の結合親和性を示した。Ｍａｂ２－Ｆａｂ、ＦａｂＡ及びＭａｂ２のＥＣ５０は、それぞれ４．４、２．５及び４．９ｎｇ／ｍＬ（３４～９５ｐＭの範囲）であった。
【図2】ＦａｂＡは古典的経路を阻害するが、レクチン経路及び補体副経路を阻害しないことを示す。ＦａｂＡ及びＭａｂ２を、古典的経路、レクチン経路及び補体副経路を阻害する能力について、ＥｕｒｏｄｉａｇｎｏｓｔｉｃａからのＥＬＩＳＡベースのアッセイキット（Ｗｅｉｓｌａｂ［商標］）を用いて評価した。ウエルを、古典的経路（ＩｇＭ）、レクチン経路（マンナン）または副経路（リポ多糖体）の、特定の活性化剤でコーティングし、Ｃ５ｂ－９末端複合体検出抗体を用いて全経路の活性化を評価した。Ｃ５の阻害抗体を、陽性対照として使用した。ＦａｂＡ及びＭａｂ２は古典的経路を選択的に遮断し、ＩＣ５０＝０．３μｇ／ｍＬであり、一方で抗Ｃ５は３経路全てを阻害する。
【図3】ヒト血清における、ＩｇＭ被覆ＲＢＣの溶血の阻害を示す。表面反応性ポリクローナルＩｇＭ抗体を用いて予め感作処理したヒツジＲＢＣを、３７℃で、２０～３０分間、ヒト血清（１００ｘに希釈）と共培養した。ヘモグロビンの放出を測定することでＲＢＣ溶血を定量化し、無治療によって引き起こされる溶血のパーセンテージで表す。
【図4】Ｍａｂ１－Ｆａｂ、Ｍａｂ１またはＭａｂ２で処置した眼の視神経における、損傷した軸索数の減少を示す。各動物の片眼において、１日目に前眼房に、１μｌの６μｍポリスチレンビーズ、１μｌの１０μｍポリスチレンビーズ（Ｐｏｌｙｂｅａｄ Ｍｉｃｒｏｓｐｈｅｒｅｓ；Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｗａｒｒｉｎｇｔｏｎ，ＰＡ，ＵＳＡ）、及び１μｌの粘弾性溶液（１０ｍｇ／ｍＬのヒアルロン酸ナトリウム；Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｏｐｔｉｃｓ Ｉｎｃ．，ＵＳＡ）を注射して、ＩＯＰの上昇を誘発した。反対側の眼は、対照として機能させるために無処置のままにした。抗体Ｍａｂ２、Ｍａｂ１及びＭａｂ１－Ｆａｂ（Ｍａｂ１の酵素消化由来のＦａｂ）、対生理食塩水を、硝子体内にミクロビーズを注入した眼に、ミクロビーズ注入の１日前及び１週間後に投与した（０日目及び７日目、各注入について２μＬの１０ｍｇ／ｍＬ抗体食塩水、対生理食塩水単独）。損傷の２週間後、動物から視神経を収集し（生理食塩水及び４％のパラホルムアルデヒドによって灌流）、４％のパラホルムアルデヒド及び１％のオスミウムによって後固定し、上昇アルコール濃度において脱水し、１％の酢酸ウラニル／エタノール中に置いた。神経をエポキシ樹脂内に埋め込み、半薄切片（１ｕｍ）を切り取った。ＳｔｅｒｅｏＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｏｒソフトウェア（ＭｉｃｒｏＢｒｉｇｈｔｆｉｅｌｄ，Ｉｎｃ，ＶＴ，ＵＳＡ）を使用して、変性した軸索の合計数を推定した。スケールバー＝２０ｕｍ。Ｍａｂ１－Ｆａｂ及びＭａｂ２はいずれも、視神経における損傷した軸索の形成を大幅に低下させ、一方で抗体Ｍａｂ１も同様の傾向を示した。
【図5A】マウス光損傷モデルにおいて、Ｍａｂ１抗体を用いた視細胞神経欠損及び網膜機能の保護を示す。マウスの７日間の光損傷モデル、続いてＭａｂ１抗体の硝子体投与（ＩＶＴ）、及び１４日目における網膜機能及び組織学の評価を示す。７日目に、１μＬの７．５ｍｇ／ｍＬのＭａｂ１またはアイソタイプ対照抗体を、ＩＶＴ投与を介してマウスに投与した。
【図5B】マウス光損傷モデルにおいて、Ｍａｂ１抗体を用いた視細胞神経欠損及び網膜機能の保護を示す。Ｍａｂ１処置は、アイソタイプ対照と比較したとき、網膜の外顆粒層のＴｕｎｅｌ陽性視細胞の著しい低下をもたらしたことを示す。
【図5C】マウス光損傷モデルにおいて、Ｍａｂ１抗体を用いた視細胞神経欠損及び網膜機能の保護を示す。Ｍａｂ１処置は、アイソタイプ対照と比較したとき、外顆粒層における視細胞列の数の増加をもたらしたことを示す。
【図5D】マウス光損傷モデルにおいて、Ｍａｂ１抗体を用いた視細胞神経欠損及び網膜機能の保護を示す。Ｍａｂ１抗体処置は、アイソタイプ対照抗体と比較したとき、１４日目の網膜電図におけるＡ波及びＢ波の著しい上昇をもたらしたことを示す。
【図6】単回ＩＶＴ注射後の、房水中の遊離Ｃ１ｑを示す。
【発明を実施するための形態】
【0008】
総論
本開示は、概して、眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法を対象とする。
本開示は、概して、眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法を対象とする。
【0009】
本明細書にて開示されるのは、レクチン経路または補体副経路に影響を及ぼさずに古典的補体カスケードを阻害する、組換えヒト化免疫グロブリンＧ（ＩｇＧ１）抗原結合断片（Ｆａｂ）である。抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ（例えばＦａｂＡ、すなわち配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ）は、眼科的疾患、例えば緑内障、及び地図状萎縮（ＧＡ）などのＡＭＤの治療のための、硝子体内（ＩＶＴ）に投与する試薬として開発される。マウス抗体Ｍ１（配列番号３の重鎖可変ドメイン及び配列番号７の軽鎖可変ドメインを含むＭａｂ１抗体）に由来する超可変領域は、ヒトＩｇＧ１ Ｆａｂ断片コンストラクト（ＦａｂＡ）として記載した。Ｍａｂ１に由来する超可変領域を含む、完全長ヒトＩｇＧ４抗体（Ｍａｂ２、すなわち配列番号８の重鎖可変ドメイン及び配列番号４の軽鎖可変ドメインを含む抗体）も記載した。Ｍａｂ１及びＭａｂ２、さらにそれらのＦａｂ（Ｍａｂ１－Ｆａｂ及びＭａｂ２－Ｆａｂ）は、薬理学試験においてＦａｂＡの代用分子として使用した。ＦａｂＡは、Ｆｃ重鎖定常ドメイン２及び３（ＣＨ２及びＣＨ３）を欠く一価のＦａｂコンストラクトであるため、Ｆｃドメインとの相互作用を介してＣ１ｑに結合することができない。さらに、ＦａｂＡは単一の抗原結合アームしか持たないため、広範囲のＦａｂＡ濃度にわたって、Ｃ１ｑについてアゴニスト性活性を示さない。
【0010】
補体カスケードは先天性免疫の重要な要素であり、異なる３経路、すなわち古典的経路、レクチン経路及び副経路を介して活性化されることができる。３経路全てが補体成分Ｃ３の活性化につながり、これにより免疫細胞のリクルート、炎症、膜侵襲複合体を介した細胞膜溶解、及び細胞死へと最終的に導かれる。
【0011】
古典的補体カスケードを開始させる分子であるＣ１ｑは、神経変性疾患、例えば緑内障、及びＧＡなどのＡＭＤの開始及び拡大と関連があると考えられている。Ｃ１ｑを阻害することで、古典的補体カスケードの開始を遮断し、神経細胞細胞膜への損傷を直接的に低減させ、また補体活性化の結果による炎症を低減させることによって、神経細胞及びシナプスの損傷を遅らせる可能性がある。
【0012】
Ｍａｂ２－Ｆａｂ及び／またはＦａｂＡは、Ｂｉａｃｏｒｅ（＜１０ｐＭ）、及び酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）（４０～５０ｐＭ、図１）によって測定されるように、ヒトＣ１ｑに対して高い親和性の結合を示す。Ｍａｂ１は、Ｃ１ｑの分離した球状頭部ドメインに結合するが、Ｃ１ｑのコラーゲン尾部には結合しない（ＥＬＩＳＡによって決定）。この所見と一致して、Ｍａｂ１は、Ｃ１ｑの球状頭部ドメインによって媒介される基質相互作用（ＩｇＭ、Ｃ反応性タンパク質［ＣＲＰ］及びホスファチジルセリン）を阻害し、ＦａｂＡは、Ｃ１ｑの、免疫グロブリンＭ（ＩｇＭ）被覆赤血球（ＲＢＣ）との機能的相互作用を阻害する（溶血の遮断、図３）。抗体Ｍａｂ１は、Ｃ１ｑを特異的に認識し、その他の補体成分（Ｃ３ｂ及びＣ５）、またはＴＮＦをはじめとするその他のＣ１ｑ／腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）スーパーファミリーメンバー、及びアディポネクチン、すなわちＣ１ｑと球状頭部ドメインで最も高い配列同一性を共有するタンパク質への結合を示さない。これらの結果と一致して、ＦａｂＡは、マンノース結合レクチン（ＭＢＬ、別のＣ１ｑ／ＴＮＦスーパーファミリーメンバー）によって開始されるレクチン補体経路を阻害せず、また補体活性化副経路（Ｃ３ｂによって開始される）も阻害しない（図２）。
【0013】
緑内障は、視神経に損傷を与え、最終的に視力喪失につながる、一連の進行性の眼の障害を含む。原発性開放隅角緑内障では、視神経損傷の主な要因は眼圧（ＩＯＰ）の上昇であり、これにより、視野検査での特徴的な視力喪失が経時的に引き起こされる。この視力喪失は、（１）網膜神経節細胞（ＲＧＣ）層の網膜神経細胞または神経節細胞の進行性変性、（２）網膜神経線維層（ＲＮＦＬ）の網膜神経細胞または神経節細胞の軸索の進行性変性、及び（３）主に網膜内網状層における神経細胞シナプスの数の減少によるものである。
【0014】
現在承認されている緑内障の治療は、眼圧（ＩＯＰ）を低下させることに限られている。手術、レーザー治療またはＩＯＰ下降剤は、全て一般に用いられている。しかし、投薬または手術によってＩＯＰをよく管理した場合であっても、多くの緑内障患者は進行性の視力障害を経験し続ける。共同初期緑内障試験（ＣＩＧＴＳ）では、緑内障患者を、線維柱帯切除術（手術）または局所的投薬を用いた初期治療に無作為化した。試験過程において、投薬群での１７．１～１８．３ｍｍＨｇまたは手術群での１３．８～１４．４ｍｍＨｇの範囲の平均ＩＯＰにもかかわらず、実質的に悪化した患者の割合（ハンフリー視野検査［ＨＶＦ］による３ｄＢ以上の平均偏差）は、９年でそれぞれ２３．１％及び３４．１％であった。早期発症緑内障試験では、患者を、局所用β遮断薬と組み合わせたアルゴンレーザー線維柱帯形成術群と、進行が観察されるまで治療しない群に無作為化した。初期治療に無作為化された群では、ＩＯＰがベースラインから２５％低下したにもかかわらず、４５％の患者が、ＨＶＦまたは視神経検査を基準として６年で進行した。これらのデータは、ＩＯＰの管理では、進行性かつ不可逆的な視力障害につながる神経節細胞、軸索またはシナプスの欠損を予防するために不十分である患者のための神経保護処置という、重要な満たされていないニーズが存在することを立証している。
【0015】
Ｃ１ｑは、ある種の病原体、自己抗原の変性、抗原結合抗体または細胞表面における特定の分子を認識する。正常な老化では、Ｃ１ｑはシナプス上に蓄積するが、おそらく年齢または神経細胞へのストレスによってこれが弱まり、続いて様々な病態生理学的刺激が古典的補体カスケードの活性化を誘発し、シナプスの不適当な排除につながる可能性がある。シナプス除去を伴うこの異常な炎症反応は、補体媒介神経変性（ＣＭＮＤ）と称される。ＣＭＮＤは、アルツハイマー病、統合失調症、ハンチントン病、前頭側頭型認知症脊髄筋萎縮症及び緑内障に関与している。網膜において変性ストレスがあると、Ｃ１ｑ活性化によりシナプス排除がもたらされ、ＲＧＣ及び視神経の欠損に寄与する。Ｃ１ｑ増加及び補体活性化は、ヒト緑内障の網膜において観察され、プロテオミクス分析及び組織学的染色によって示されている。ＣＭＮＤは、また緑内障モデルのラット、マウス及びイヌでも報告されている。慢性的、自然発生的な緑内障マウスモデル（ＤＢＡ／２Ｊマウス）では、疾患進行の早い段階で網膜のＣ１ｑ蓄積及びシナプス喪失が発生し、一方でＣ１ｑの遺伝子欠損モデルでは保護され、ＲＧＣ喪失及び視神経変性が著しく遅くなる。これらの結果は、前眼房へのミクロビーズ注入によるＩＯＰの急上昇を伴う、別のマウスモデルでも再現された。Ｃ１ｑの遺伝子欠損、または眼への補体阻害剤の直接的な注入を用いた薬理学的阻害のいずれの場合でも、神経細胞欠損及び網膜変性から保護された。別の試験では、ＩＯＰの短期的な超上昇によって誘発された、一過性虚血に続く網膜変性を検討し、ここでもＲＧＣ喪失及び網膜菲薄化は、Ｃ１ｑノックアウトマウスでは改善された。
【0016】
加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）は、全世界で失明の主要な原因である。萎縮型ＡＭＤまたは進行した萎縮型ＡＭＤとしても知られているＧＡは、ＡＭＤの進行した形態であり、網膜中心視細胞、網膜色素上皮及び脈絡毛細管の進行性かつ不可逆的欠損に至り、視力障害をもたらす。現在のところ、ＧＡの承認された処置または治療法は存在しない。
【0017】
補体は、補体経路活性を変更できる６種の異なるタンパク質で識別される多型とともに、ＡＭＤと遺伝的に連結しているようである。ＦａｂＡによって行うように、Ｃ１ｑの標的結合頭部の相互作用を阻害することによって、古典的経路の活性を完全に阻害し、レクチン経路及び補体活性化副経路を無処置のままにすることができる。Ｃ１ｑ／古典的補体経路は、発生において望ましくないシナプスの排除を媒介する。成人では、Ｃ１ｑはシナプス上に蓄積し、加齢及び疾患があると、シナプス排除、神経炎症及び変性を異常に誘発する場合がある。Ｃ１ｑの阻害は、神経変性の多数のモデルにおいて保護的である。
【0018】
古典的補体カスケードを開始させる分子であるＣ１ｑは、ＧＡの開始及び拡大と関連があると考えられている。Ｃ１ｑは、加齢とともに、２つの異なる、重要なＧＡ関連疾患の過程において、外網状層の視細胞神経細胞シナプス及びドルーゼン上に蓄積する。ドルーゼンは、変性している視細胞外節からの、脂質及びタンパク質で構成される細胞外蓄積であり、この大きさ及び領域が増加すると、ＡＭＤ発病のリスクを伴う。古典的経路及び補体活性化副経路両方の活性化が視細胞外節上で明白であり、ＧＡにおける網膜萎縮を引き起こすことが示されている。光損傷により誘発したＧＡマウスモデルでは、異常なＣ１ｑ／古典的経路活性は、視細胞の欠損と関連している。網膜ミクログリア／マクロファージにより産生された局所的なＣ１ｑが、インフラマソーム活性化及び炎症の元凶であることが示されてきた。このモデルにおいてＦａｂＡを用いて網膜のＣ１ｑを阻害すると、網膜萎縮が遅くなり、視細胞欠損が減少し、網膜厚みが上昇し、網膜の機能が保たれた。ＦａｂＡは、ＧＡをはじめとする補体媒介性の網膜変性の治療のために、新規アプローチを提供する。
【0019】
本開示で挙げられる全ての配列は、米国特許出願番号１４／９３３，５１７、米国特許出願番号１４／８９０，８１１、米国特許番号８，８７７，１９７、米国特許番号９，７０８，３９４、米国特許出願番号１５／３６０，５４９、米国特許番号９，５６２，１０６、米国特許番号１０，４５０，３８２、米国特許番号１０，４５７，７４５、国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ２０１８／０２２４６２（これらの各々は、それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0020】
全長抗体は、組換えＤＮＡ修飾技術の使用によって調製され得る。そのような修飾バージョンには、例えば、天然抗体のアミノ酸配列内にまたはアミノ酸配列への挿入、欠失または変化によって天然抗体可変領域から作製されるものが含まれる。このタイプの特定の例には、１つ目の抗体からの少なくとも１つのＣＤＲ及び任意に１つ以上のフレームワークアミノ酸及び２つ目の抗体からの可変領域ドメインの残りを含有するそれらの修飾された可変領域ドメインが含まれる。抗体をコードするＤＮＡは、全長抗体をコードするＤＮＡの所望の部分以外の全てを欠失させることによって調製され得る。キメラ化抗体をコードするＤＮＡは、ヒト定常領域を実質的にまたは独占的にコードするＤＮＡ及びヒト以外の哺乳動物の可変領域の配列に実質的にまたは独占的に由来する可変領域をコードするＤＮＡを組み換えることによって調製され得る。ヒト化抗体をコードするＤＮＡは、対応するヒト抗体領域に実質的にまたは独占的に由来する定常領域及び相補性決定領域（ＣＤＲ）以外の可変領域をコードするＤＮＡ、及びヒト以外の哺乳動物に実質的にまたは独占的に由来するＣＤＲをコードするＤＮＡを組み換えることによって調製され得る。
【0021】
抗体をコードするＤＮＡ分子の好適な供給源には、全長抗体を発現するハイブリドーマなどの細胞が含まれる。例えば、抗体は、抗体の重鎖及び／または軽鎖をコードする発現ベクターを発現する宿主細胞から単離され得る。
【0022】
Ｆａｂ断片が挙げられるがこれらに限定されない抗体断片、及び／または抗体誘導体はまた、抗体可変及び定常領域をコードするＤＮＡの操作及び再発現を含む組換えＤＮＡ修飾技術の使用によって調製され得る。標準的な分子生物技術は、所望により、さらなるアミノ酸またはドメインを改変、付加または欠失させるために使用され得る。可変または定常領域に対する任意の変化は、依然として、本明細書で使用される用語「可変」及び「定常」領域に包含される。いくつかの例では、ＣＨ１ドメインの翻訳が鎖間システインで停止するように、ＣＨ１の鎖間システインをコードするコドンの直後に終止コドンを導入することによって抗体断片を生成するためにＰＣＲが使用される。好適なＰＣＲプライマーを設計するための方法は当該技術分野でよく知られており、抗体ＣＨ１ドメインの配列は容易に利用可能である。いくつかの実施形態では、終止コドンは、部位特異的変異誘発技術を使用して導入され得る。
【0023】
本開示の抗体は、例えば、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥならびにそのサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３及びＩｇＧ４を含む）を含む任意の抗体アイソタイプ（「クラス」）に由来し得る。ある特定の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び軽鎖は、ＩｇＧに由来する。抗体の重鎖及び／または軽鎖は、マウスＩｇＧまたはヒトＩｇＧに由来し得る。ある特定の他の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び／または軽鎖は、ヒトＩｇＧ１に由来する。さらに他の好ましい実施形態では、抗体の重鎖及び／または軽鎖は、ヒトＩｇＧ４に由来する。
【0024】
本開示の抗体は、Ｃ１ｑ、Ｃ１ｒ、またはＣ１ｓに結合し、その生物学的活性を阻害し得る。例えば、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（５）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（６）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（７）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（８）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（９）Ｂアミロイドに対するＣ１ｑ結合、または（１０）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合である。他の実施形態では、Ｃ１ｑの生物学的活性は、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化である。
【0025】
いくつかの実施形態では、ＣＨ５０溶血は、ヒト、マウス、及び／またはラットＣＨ５０溶血を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～少なくとも約９５％を中和することが可能である。いくつかの実施形態では、抗体は、ＣＨ５０溶血の５０％、６０％、７０％、８０、９０％、または１００％を中和することが可能である。抗体はまた、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の用量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能であり得る。
【0026】
補体活性を測定するための他のインビトロアッセイには、補体活性化中に形成する補体成分または複合体の分割生成物の測定のためのＥＬＩＳＡアッセイが含まれる。古典的経路を介する補体活性化は、血清中のＣ４ｄ及びＣ４のレベルを追跡することによって測定され得る。副経路の活性化は、循環におけるＢｂまたはＣ３ｂＢｂＰ複合体のレベルを評価することによってＥＬＩＳＡで測定され得る。インビトロ抗体媒介性補体活性化アッセイもまた、Ｃ３ａ生成の阻害を評価するために使用され得る。
【0027】
本開示の抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、多重特異性抗体、その抗体断片、またはその誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。
【0028】
本開示の抗体はまた、抗体断片、例えば、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、または一本鎖抗体分子であり得る。いくつかの実施形態では、抗体断片はＦａｂ断片である。
【0029】
いくつかの実施形態では、抗体は、組換え手段によって調製、発現、生成または単離され得るヒトモノクローナル抗体、例えば、（ａ）ヒト免疫グロブリン遺伝子またはそれから調製されるハイブリドーマのトランスジェニックまたはトランス染色体である動物（例えば、マウス）から単離された抗体（以下にさらに記載される）、（ｂ）抗体を発現するように形質転換された宿主細胞から単離された抗体、例えば、トランスフェクトーマから単離された抗体、（ｃ）組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリから単離された抗体、及び（ｄ）ヒト免疫グロブリン遺伝子配列の他のＤＮＡ配列へのスプライシングを含む任意の他の手段によって調製、発現、生成または単離された抗体である。そのような組換えヒト抗体は、ヒト生殖系列及び／または非生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変領域及び定常領域を有する。しかしながら、ある特定の実施形態では、そのような組換えヒト抗体は、インビトロ変異誘発（または、ヒトＩｇ配列に対してトランスジェニックな動物が使用される場合、インビボ体細胞変異誘発）を受けてもよく、したがって、組換え抗体のＶＨ及びＶＬ領域のアミノ酸配列は、ヒト生殖系列ＶＨ及びＶＬ配列に由来し、関連しているが、インビボでヒト抗体生殖系列レパートリー内に自然に存在しなくてもよい配列である。
【0030】
いくつかの実施形態では、抗体は、齧歯類（例えば、マウス、ラット、ハムスター及びモルモット）を（１）ヒト血漿または血清からの精製された補体成分の酵素消化に由来する天然補体成分（例えば、Ｃ１ｑ）、または（２）真核生物系または原核生物系のいずれかによって発現した組換え補体成分、またはその誘導断片で免疫することによって樹立され得るヒト化及び／またはキメラモノクローナル抗体である。他の動物、例えば、非ヒト霊長類、ヒト免疫グロブリンを発現するトランスジェニックマウス、及びヒトＢリンパ球が移植された重症複合免疫不全（ＳＣＩＤ）マウスが免疫のために使用され得る。
【0031】
ポリクローナル抗体及びモノクローナル抗体は、病原体に対する免疫系の反応において免疫グロブリン（Ｉｇ）分子として天然に生成される。ヒト血清において８ｍｇ／ｍｌの濃度を有する優勢的な形式である約１５０ｋＤａのＩｇＧ１分子は、２つの同一の約５０ｋＤａの重鎖及び２つの同一の約２５ｋＤａの軽鎖から構成される。
【0032】
ハイブリドーマは、免疫された動物からのＢリンパ球をミエローマ細胞と融合させることによって従来の手順によって生成され得る。また、抗Ｃ１ｑ抗体は、ファージディスプレイシステムにおいてヒトＢリンパ球からの組換え一本鎖ＦｖまたはＦａｂライブラリをスクリーニングすることによって生成され得る。ヒトＣ１ｑに対するＭＡｂの特異性は、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）、ウエスタンイムノブロッティング、または他の免疫化学的技術によって試験され得る。
【0033】
スクリーニングプロセスにおいて同定された抗体の補体活性化に対する阻害活性は、補体副経路の場合は未感作ウサギまたはモルモットＲＢＣ、または古典的補体経路の場合は感作ニワトリまたはヒツジＲＢＣを使用して溶血アッセイによって評価され得る。古典的補体経路に特異的な阻害活性を示すそれらのハイブリドーマは、限界希釈によってクローニングされる。抗体は、上述したアッセイによってヒトＣ１ｑに対する特異性についての特性化のために精製される。
【0034】
定義
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味し得る。本明細書において請求項（複数可）で使用される場合、用語「含む」と併せて使用される場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味し得る。例えば、「抗体」に対する言及は、１つから多くの抗体の言及である。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも第２のまたはそれ以上を意味し得る。
本明細書で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」は、１つ以上を意味し得る。本明細書において請求項（複数可）で使用される場合、用語「含む」と併せて使用される場合、用語「ａ」または「ａｎ」は、１つまたは複数を意味し得る。例えば、「抗体」に対する言及は、１つから多くの抗体の言及である。本明細書で使用される場合、「別の」は、少なくとも第２のまたはそれ以上を意味し得る。
【0035】
本明細書で使用される場合、別の化合物または組成物と「併せた」投与は、同時投与及び／または異なる時点での投与を含む。併せた投与はまた、異なる投薬頻度または間隔、及び同じ投与経路または異なる投与経路を使用することを含む、共製剤としての投与または別々の組成物としての投与を包含する。
【0036】
用語「免疫グロブリン」（Ｉｇ）は、本明細書で「抗体」と互換的に使用される。本明細書における用語「抗体」は、最も広義に使用され、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、少なくとも２つのインタクトな抗体から形成される多重特異性抗体（例えば、二重特異性抗体）、生物学的活性を示す場合に限り抗体断片、及び抗体誘導体を具体的に包含する。
【0037】
基本的な４鎖抗体単位は、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖から構成されるヘテロ四量体糖タンパク質である。ＶＨ及びＶＬが一緒に対合すると、単一の抗原結合部位が形成される。異なるクラスの抗体の構造及び特性については、例えば、Ｂａｓｉｃ ａｎｄ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，８ｔｈ Ｅｄ．，Ｄａｎｉｅｌ Ｐ．Ｓｔｉｔｅｓ，Ａｂｂａ Ｉ．Ｔｅｒｒ ａｎｄ Ｔｒｉｓｔｒａｍ Ｇ．Ｐａｒｓｌｏｗ（ｅｄｓ．），Ａｐｐｌｅｔｏｎ ＆ Ｌａｎｇｅ，Ｎｏｒｗａｌｋ，ＣＴ，１９９４，ｐａｇｅ ７１ ａｎｄ Ｃｈａｐｔｅｒ ６を参照。
【0038】
任意の脊椎動物種に由来するＬ鎖は、それらの定常ドメインのアミノ酸配列に基づいて、カッパ（「κ」）及びラムダ（「λ」）と呼ばれる２つの明確に異なるタイプのうちの１つに割り当てられ得る。それらの重鎖の定常ドメイン（ＣＨ）のアミノ酸配列に応じて、免疫グロブリンは、異なるクラスまたはアイソタイプに割り当てられ得る。５つのクラスの免疫グロブリンが存在する：ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、及びＩｇＭ（アルファ（「α」）、デルタ（「δ」）、イプシロン（「ε」）、ガンマ（「γ」）及びミュー（「μ」）と標記される重鎖をそれぞれ有する）。γ及びαクラスは、ＣＨ配列及び機能の比較的小さな相違に基づいてサブクラス（アイソタイプ）にさらに分類され、例えば、ヒトは、次のサブクラス：ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、及びＩｇＡ２を発現する。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造及び三次元構成はよく知られており、一般に、例えば、Ａｂｂａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｃｅｌｌｕｌａｒ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，４ｔｈ ｅｄ．（Ｗ．Ｂ．Ｓａｕｎｄｅｒｓ Ｃｏ．，２０００）に記載されている。
【0039】
「全長抗体」は通常、２つの同一の軽（Ｌ）鎖及び２つの同一の重（Ｈ）鎖を含む約１５０，０００ダルトンのヘテロ四量体糖タンパク質である。各軽鎖は、１つの共有ジスルフィド結合によって重鎖に連結されている一方で、ジスルフィド結合の数は、異なる免疫グロブリンアイソタイプの重鎖間で異なる。各重鎖及び軽鎖は、規則的間隔の鎖内ジスルフィド架橋も有する。各重鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＨ）と、それに続くいくつかの定常ドメインを有する。各軽鎖は、一端に可変ドメイン（ＶＬ）を有し、その他端に定常ドメインを有し、軽鎖の定常ドメインは、重鎖の第１の定常ドメインと整列し、軽鎖の可変ドメインは、重鎖の可変ドメインと整列している。特定のアミノ酸残基が軽鎖可変ドメインと重鎖可変ドメインとの間に界面を形成すると考えられている。
【0040】
「単離された」分子または細胞は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入分子または細胞から同定及び分離された分子または細胞である。好ましくは、単離された分子または細胞は、生成環境に関連する全ての成分と会合しない。単離された分子または細胞は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された分子は、細胞に天然に存在する分子とは区別され；単離された細胞は、組織、器官、または個体に天然に存在する細胞とは区別される。いくつかの実施形態では、単離された分子は、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体である。他の実施形態では、単離された細胞は、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体を生成する宿主細胞またはハイブリドーマ細胞である。
【0041】
「単離された」抗体は、その生成環境（例えば、天然または組換え）の成分から同定、分離、及び／または回収されたものである。好ましくは、単離されたポリペプチドは、その生成環境からの全ての他の混入成分と会合しない。組換えトランスフェクション細胞に起因するものなどのその生成環境からの混入成分は、抗体の研究、診断的または治療的使用を典型的に妨げるであろう物質であり、これには酵素、ホルモン、及び他のタンパク質性または非タンパク質性の溶質が含まれ得る。ある特定の好ましい実施形態では、ポリペプチドは、（１）例えば、ローリー法によって決定される、抗体の９５重量％超、いくつかの実施形態では、９９重量％超になるまで、（２）スピニングカップシークエネーターを使用して、Ｎ末端または内部アミノ酸配列の少なくとも１５個の残基を得るのに十分な程度まで、または（３）クマシーブルー、または好ましくはシルバー染色を使用して、非還元または還元条件下でＳＤＳ－ＰＡＧＥによって均質性が得られるまで、精製されるであろう。単離された抗体には、抗体の天然環境の少なくとも１つの成分が存在しないため、組換えＴ細胞内でｉｎ ｓｉｔｕの抗体が含まれる。しかしながら、通常、単離されたポリペプチドまたは抗体は、少なくとも１つの精製工程を含むプロセスによって調製される。
【0042】
抗体の「可変領域」または「可変ドメイン」は、抗体の重鎖または軽鎖のアミノ末端ドメインを指す。重鎖及び軽鎖の可変ドメインは、それぞれ「ＶＨ」及び「ＶＬ」と称され得る。これらのドメインは通常、抗体の最も可変性の高い部分であり（同じクラスの他の抗体と比べて）、抗原結合部位を含有する。
【0043】
用語「可変」は、可変ドメインのある特定のセグメントが、抗体によって配列が大幅に異なるという事実を指す。Ｖドメインは、抗原結合を媒介し、特定の抗体の、その特定の抗原に対する特異性を定義する。しかしながら、可変性は、可変ドメイン全体に均等に分布しているわけではない。むしろ、それは、軽鎖及び重鎖の両方の可変ドメインの両方において、超可変領域（ＨＶＲ）と呼ばれる３つのセグメントに集中している。可変ドメインのより高度に保存された部分は、フレームワーク領域（ＦＲ）と呼ばれる。天然重鎖及び軽鎖の可変ドメインはそれぞれ、ベータ－シート構造を接続し、いくつかの場合では、ベータ－シート構造の一部を形成するループを形成する３つのＨＶＲによって接続されたベータ－シート立体配置を大いに採用する４つのＦＲ領域を含む。各鎖内のＨＶＲは、ＦＲ領域によって近接して互いに結び付いており、他方の鎖のＨＶＲと共に、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する（Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，Ｆｉｆｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）を参照）。定常ドメインは、抗原に対する抗体の結合に直接的に関与しないが、様々なエフェクター機能、例えば、抗体依存性細胞毒性における抗体の関与を示す。
【0044】
本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ」または「相補性決定領域」は、重鎖及び軽鎖の両方のポリペプチドの可変領域内に見られる非連続的抗原結合部位を意味することが意図されている。ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２５２：６６０９－６６１６（１９７７）；Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｕ．Ｓ．Ｄｅｐｔ．ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ ａｎｄ Ｈｕｍａｎ Ｓｅｒｖｉｃｅｓ，“Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｔｅｒｅｓｔ”（１９９１）（本明細書ではＫａｂａｔ １９９１とも称される）；Ｃｈｏｔｈｉａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７）（本明細書ではＣｈｏｔｈｉａ １９８７とも称される）；及びＭａｃＣａｌｌｕｍ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２６２：７３２－７４５（１９９６）（定義には、互いに対して比較した場合にアミノ酸残基の重複またはサブセットが含まれる）に記載されている。それにもかかわらず、抗体もしくはグラフト抗体またはそのバリアントのＣＤＲを指すためのいずれの定義の適用も、本明細書で定義及び使用される用語の範囲内であることが意図されている。
【0045】
本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｌ１」、「ＣＤＲ－Ｌ２」、及び「ＣＤＲ－Ｌ３」は、それぞれ、軽鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－Ｈ１」、「ＣＤＲ－Ｈ２」、及び「ＣＤＲ－Ｈ３」は、それぞれ、重鎖可変領域における第１、第２、及び第３ＣＤＲを指す。本明細書で使用される場合、用語「ＣＤＲ－１」、「ＣＤＲ－２」、及び「ＣＤＲ－３」は、それぞれ、いずれかの鎖の可変領域の第１、第２及び第３ＣＤＲを指す。
【0046】
用語「モノクローナル抗体」は、本明細書で使用される場合、実質的に同種の抗体の集団から得られる抗体を指す、すなわち、その集団の個々の抗体は、微量で存在し得る天然に存在する変異及び／または翻訳後修飾（例えば、異性化、アミド化）を除き、同一である。モノクローナル抗体は、高度に特異的であり、単一の抗原部位に対して仕向けられている。異なる決定基（エピトープ）に対して仕向けられた異なる抗体を典型的に含むポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して仕向けられている。それらの特異性に加え、モノクローナル抗体は、典型的にはハイブリドーマ培養によって合成され、他の免疫グロブリンが混入されていないので有利である。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に同種の抗体集団として得られるという抗体の特徴を示し、任意の特定の方法による抗体の生成を必要とするものと解釈されるべきではない。例えば、本開示に従って使用されるモノクローナル抗体は、例えば、ハイブリドーマ方法（例えば、Ｋｏｈｌｅｒ ａｎｄ Ｍｉｌｓｔｅｉｎ．，Ｎａｔｕｒｅ，２５６：４９５－９７（１９７５）；Ｈｏｎｇｏ ｅｔ ａｌ．，Ｈｙｂｒｉｄｏｍａ，１４（３）：２５３－２６０（１９９５），Ｈａｒｌｏｗ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，２ｄ ｅｄ．１９８８）；Ｈａｍｍｅｒｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，ｉｎ：Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｔ－Ｃｅｌｌ Ｈｙｂｒｉｄｏｍａｓ ５６３－６８１（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ，Ｎ．Ｙ．，１９８１））、リコンビナントＤＮＡ法（例えば、米国特許番号４，８１６，５６７参照）、ファージディスプレイ技術（例えば、Ｃｌａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，３５２：６２４－６２８（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２２：５８１－５９７（１９９２）；Ｓｉｄｈｕ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３３８（２）：２９９－３１０（２００４）；Ｌｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．３４０（５）：１０７３－１０９３（２００４）；Ｆｅｌｌｏｕｓｅ，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ １０１（３４）：１２４６７－４７２（２００４）；及びＬｅｅ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ２８４（１－２）：１１９－１３２（２００４）参照）、及びヒト免疫グロブリン配列をコードするヒト免疫グロブリン遺伝子座または遺伝子の一部または全部を有する動物においてヒトまたはヒト様抗体を生成するための技術（例えば、ＷＯ１９９８／２４８９３；ＷＯ１９９６／３４０９６；ＷＯ１９９６／３３７３５；ＷＯ１９９１／１０７４１；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：２５５１（１９９３）；Ｊａｋｏｂｏｖｉｔｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６２：２５５－２５８（１９９３）；Ｂｒｕｇｇｅｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｙｅａｒ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．７：３３（１９９３）；米国特許番号５，５４５，８０７；５，５４５，８０６；５，５６９，８２５；５，６２５，１２６；５，６３３，４２５；及び５，６６１，０１６；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）；Ｌｏｎｂｅｒｇ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８５６－８５９（１９９４）；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ，Ｎａｔｕｒｅ ３６８：８１２－８１３（１９９４）；Ｆｉｓｈｗｉｌｄ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８４５－８５１（１９９６）；Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｎａｔｕｒｅ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．１４：８２６（１９９６）；及びＬｏｎｂｅｒｇ ａｎｄ Ｈｕｓｚａｒ，Ｉｎｔｅｒｎ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３：６５－９３（１９９５）参照）を含む多様な技術によって生成され得る。
【0047】
用語「全長抗体」、「インタクトな抗体」及び「完全抗体」は、抗体断片または抗体誘導体とは対照的に、実質的にインタクトな形態の抗体を指すために互換的に使用される。具体的には、完全抗体は、Ｆｃ領域を含む重鎖及び軽鎖を有するものを含む。定常ドメインは、天然配列定常ドメイン（例えば、ヒト天然配列定常ドメイン）またはそのアミノ酸配列バリアントであり得る。いくつかの場合では、インタクトな抗体は、１つ以上のエフェクター機能を有し得る。
【0048】
抗体の「抗体断片」または「抗原結合断片」または「機能的断片」は、インタクトな抗体の一部、好ましくはインタクトな抗体の抗原結合及び／または可変領域または改変されたＦｃＲ結合能力を保持し、または有する抗体のＦ領域を含む。抗体断片の例には、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２及びＦｖ断片；ダイアボディ；及び線状抗体が含まれる（米国特許５，６４１，８７０、実施例２；Ｚａｐａｔａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｅｎｇ．８（１０）：１０５７－１０６２（１９９５）参照）。抗体断片の追加の例には、抗体誘導体、例えば、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。
【0049】
「抗体誘導体」は、抗体の抗原結合領域を含む任意のコンストラクトである。抗体誘導体の例には、抗体断片から形成される一本鎖抗体分子、一価抗体及び多重特異性抗体が含まれる。
【0050】
抗体のパパイン消化により、「Ｆａｂ」断片と呼ばれる２つの同一の抗原結合断片と、容易に結晶化する能力を反映して表記される１つの残留「Ｆｃ」断片とが生成される。Ｆａｂ断片は、Ｌ鎖全体に加えて、Ｈ鎖の可変領域ドメイン（ＶＨ）、ならびに１つの重鎖の第１の定常ドメイン（ＣＨ１）からなる。各Ｆａｂ断片は、抗原結合に関しては一価である、すなわち、単一の抗原結合部位を有する。抗体のペプシン処理は、単一の大型Ｆ（ａｂ’）２断片をもたらし、これは、異なる抗原結合活性を有する２つのジスルフィド結合したＦａｂ断片にほぼ対応し、依然として抗原を架橋することができる。Ｆａｂ’断片は、ＣＨ１ドメインのカルボキシ末端に、抗体ヒンジ領域からの１つ以上のシステインを含む、いくつかのさらなる残基を有することにより、Ｆａｂ断片とは異なる。Ｆａｂ’－ＳＨは、定常ドメインのシステイン残基（複数可）が遊離チオール基を持つＦａｂ’の本明細書における呼称である。Ｆ（ａｂ’）２抗体断片は、元来、間にヒンジシステインを有するＦａｂ’断片の対として生成された。抗体断片の他の化学的カップリングも既知である。
【0051】
Ｆｃ断片は、ジスルフィドによって一緒に保持された両方のＨ鎖のカルボキシ末端を含む。抗体のエフェクター機能は、Ｆｃ領域における配列によって決定され、この領域はまた、ある特定の細胞型に見られるＦｃ受容体（ＦｃＲ）によって認識される。
【0052】
本明細書における「Ｆｃ領域」という用語は、免疫グロブリン重鎖のＣ末端領域を定義して使用され、天然配列のＦｃ領域及びバリアントＦｃ領域が含まれる。免疫グロブリン重鎖のＦｃ領域の境界は様々であり得るが、ヒトＩｇＧ重鎖Ｆｃ領域は通常、Ｃｙｓ２２６位のアミノ酸残基から、またはＰｒｏ２３０から、そのカルボキシル末端まで伸びると定義される。Ｆｃ領域のＣ末端リジン（ＥＵ番号付けシステムによると残基４４７）は、例えば、抗体の生成もしくは精製の間に、または抗体の重鎖をコードする核酸を組換え操作することによって、除去されてもよい。したがって、インタクトな抗体の組成物は、全Ｋ４４７残基が除去された抗体母集団、除去されたＫ４４７残基がない抗体母集団、及びＫ４４７残基を有する抗体と有しない抗体との混合物を有する抗体母集団を含んでもよい。本開示の抗体における使用に好適な天然配列のＦｃ領域には、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、及びＩｇＧ４が含まれる。
【0053】
「天然配列Ｆｃ領域」は、天然で見られるＦｃ領域のアミノ酸配列と同一のアミノ酸配列を含む。天然配列ヒトＦｃ領域には、天然配列ヒトＩｇＧ１ Ｆｃ領域（非Ａ及びＡアロタイプ）、天然配列ヒトＩｇＧ２ Ｆｃ領域、天然配列ヒトＩｇＧ３ Ｆｃ領域、及び天然配列ヒトＩｇＧ４ Ｆｃ領域、ならびにそれらの天然に存在するバリアントが含まれる。
【0054】
「バリアントＦｃ領域」は、少なくとも１つのアミノ酸改変、好ましくは１つ以上のアミノ酸置換（複数可）によって天然配列Ｆｃ領域のものとは異なるアミノ酸配列を含む。好ましくは、バリアントＦｃ領域は、天然配列Ｆｃ領域または親ポリペプチドのＦｃ領域と比較して少なくとも１つのアミノ酸置換、例えば、天然配列Ｆｃ領域中または親ポリペプチドのＦｃ領域中に約１～約１０個のアミノ酸置換、及び好ましくは約１～約５個のアミノ酸置換を有する。本明細書におけるバリアントＦｃ領域は、好ましくは、天然配列Ｆｃ領域及び／または親ポリペプチドのＦｃ領域と少なくとも約８０％の相同性、ならびに最も好ましくは、それらと少なくとも約９０％の相同性、より好ましくは、それらと少なくとも約９５％の相同性を保有する。
【0055】
「Ｆｃ受容体」または「ＦｃＲ」は、抗体のＦｃ領域に結合する受容体を表す。好ましいＦｃＲは、天然配列ヒトＦｃＲである。さらに、好ましいＦｃＲは、ＩｇＧ抗体（ガンマ受容体）と結合し、ＦｃγＲＩ、ＦｃγＲＩＩ、及びＦｃγＲＩＩＩサブクラスの受容体を含み、これらの受容体の対立遺伝子バリアント及び選択的スプライシング形態を含むものであり、ＦｃγＲＩＩ受容体には、ＦｃγＲＩＩＡ（「活性化受容体」）及びＦｃγＲＩＩＢ（「阻害受容体」）が含まれ、これらは主にその細胞質ドメインが異なる類似のアミノ酸配列を有する。活性化受容体ＦｃγＲＩＩＡは、その細胞質ドメインに免疫受容体チロシンベースの活性化モチーフ（「ＩＴＡＭ」）を含む。阻害受容体ＦｃγＲＩＩＢは、免疫受容体チロシンベース阻害モチーフ（「ＩＴＩＭ」）をその細胞質性ドメインに含有する。（例えば、Ｍ．Ｄａｅｒｏｎ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５：２０３－２３４（１９９７）参照）。ＦｃＲは、Ｒａｖｅｔｃｈ ａｎｄ Ｋｉｎｅｔ，Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：４５７－９２（１９９１）；Ｃａｐｅｌ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｏｍｅｔｈｏｄｓ ４：２５－３４（１９９４）；及びｄｅ Ｈａａｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｌａｂ． Ｃｌｉｎ．Ｍｅｄ．１２６：３３０－４１（１９９５）でレビューされている。将来特定されるものを含む他のＦｃＲは、本明細書における「ＦｃＲ」という用語に包含される。ＦｃＲは、抗体の血清半減期を増加させ得る。
【0056】
ヒトＦｃＲｎ高親和性結合ポリペプチドのインビボでのＦｃＲｎへの結合及び血清中半減期は、例えば、ヒトＦｃＲｎを発現するトランスジェニックマウスもしくはトランスフェクトヒト細胞株において、またはバリアントＦｃ領域を有するポリペプチドが投与される霊長類においてアッセイすることができる。ＷＯ２００４／４２０７２（Ｐｒｅｓｔａ）は、ＦｃＲへの結合が改善また低減された抗体バリアントについて記載している。例えば、Ｓｈｉｅｌｄｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．９（２）：６５９１－６６０４（２００１）を参照。
【0057】
「Ｆｖ」は、完全な抗原認識部位及び抗原結合部位を含有する最小の抗体断片である。この断片は、１つの重鎖可変領域ドメインと１つの軽鎖可変領域ドメインが、非共有結合で緊密に結合した二量体からなる。これらの２つのドメインの折り畳みにより、抗原結合のためのアミノ酸残基を提供し、抗原結合特異性を抗体に与える、６つの超可変ループ（Ｈ鎖及びＬ鎖からそれぞれ３つのループ）が生じる。しかしながら、全結合部位よりも低い親和性であるが、単一の可変ドメイン（または抗原に特異的なＨＶＲを３つしか含まないＦｖの半分）でさえも、抗原を認識し、それに結合する能力を有する。
【0058】
「ｓＦｖ」または「ｓｃＦｖ」とも短縮される「一本鎖Ｆｖ」は、単一のポリペプチド鎖に結合されるＶＨ及びＶＬ抗体ドメインを含む抗体断片である。好ましくは、ｓＦｖポリペプチドは、ＶＨ及びＶＬドメイン間にポリペプチドリンカーをさらに含んでおり、ｓＦｖが抗原結合に所望される構造を形成することを可能にする。ｓＦｖの概説については、Ｐｌｕｃｋｔｈｕｎ ｉｎ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｖｏｌ．１１３，Ｒｏｓｅｎｂｕｒｇ ａｎｄ Ｍｏｏｒｅ ｅｄｓ．，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ－Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ｐｐ．２６９－３１５（１９９４）を参照。
【0059】
「ダイアボディ」という用語は、鎖内ではなく鎖間のＶドメイン対合を達成し、それによって二価断片、すなわち、２つの抗原結合部位を有する断片が得られるように、ＶＨドメインとＶＬドメインとの間に短いリンカー（約５～１０個の残基）を用いてｓＦｖ断片（前の段落を参照）を構築することによって調製された小さな抗体断片を指す。二重特異性ダイアボディは、２つの抗体のＶＨ及びＶＬドメインが異なるポリペプチド鎖に存在している、２つの「交差」ｓＦｖ断片のヘテロ二量体である。ダイアボディは、例えば、ＥＰ ４０４，０９７；ＷＯ １９９３／０１１１６１；ＷＯ／２００９／１２１９４８；ＷＯ／２０１４／１９１４９３；Ｈｏｌｌｉｎｇｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：６４４４－４８（１９９３）においてより詳細に記載されている。
【0060】
本明細書で使用される場合、「キメラ抗体」は、重鎖及び／または軽鎖の一部が、特定の種に由来するか、または特定の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体内の対応する配列と同一または相同である一方で、鎖（複数可）の残りが、別の種に由来するか、または別の抗体クラスもしくはサブクラスに属する抗体における対応する配列と同一または相同である抗体（免疫グロブリン）、ならびにそのような抗体の断片を指し、これは、それらが所望される生物学的活性を呈する限りにおいてである（米国特許番号４，８１６，５６７；Ｍｏｒｒｉｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ’ｌ Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８１：６８５１－５５（１９８４））。本明細書における対象となるキメラ抗体には、ＰＲＩＭＡＴＩＺＥＤ（登録商標）抗体が含まれ、ここで、この抗体の抗原結合領域は、例えば、マカクザルに目的の抗原で免疫付与を行うことによって生成される抗体に由来する。本明細書で使用される場合、「ヒト化抗体」は、「キメラ抗体」のサブセットである。
【0061】
非ヒト（例えば、マウス）抗体の「ヒト化」形態は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小配列を含むキメラ抗体である。いくつかの実施形態では、ヒト化抗体は、レシピエントのＨＶＲからの残基が、所望される特異性、親和性、及び／または能力を有するマウス、ラット、ウサギ、または非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）のＨＶＲからの残基で置き換えられている、ヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。いくつかの例では、ヒト免疫グロブリンのＦＲ残基は、対応する非ヒト残基に置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にもドナー抗体にも見られない残基を含み得る。これらの改変は、結合親和性などの抗体の性能をさらに改良するために行われ得る。一般に、ヒト化抗体は、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含むことになり、ここで、超可変ループの全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリン配列のものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリン配列のものに対応するが、ＦＲ領域には、結合親和性、異性体化、免疫原性などの抗体の性能を向上させる１つ以上の個々のＦＲ残基置換が含まれてもよい。ＦＲにおけるこれらのアミノ酸置換の数は典型的には、Ｈ鎖では６以下、及びＬ鎖では３以下である。ヒト化抗体はまた、任意に、免疫グロブリン定常領域の少なくとも一部（Ｆｃ）、典型的にはヒト免疫グロブリンの少なくとも一部を含む。さらなる詳細については、例えば、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２－５２５（１９８６）；Ｒｉｅｃｈｍａｎｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３－３２９（１９８８）；ａｎｄ Ｐｒｅｓｔａ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｓｔｒｕｃｔ．Ｂｉｏｌ．２：５９３－５９６（１９９２）を参照。例えば、Ｖａｓｗａｎｉ ａｎｄ Ｈａｍｉｌｔｏｎ，Ａｎｎ．Ａｌｌｅｒｇｙ，Ａｓｔｈｍａ ＆ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１：１０５－１１５（１９９８）；Ｈａｒｒｉｓ，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｔｒａｎｓａｃｔｉｏｎｓ ２３：１０３５－１０３８（１９９５）；Ｈｕｒｌｅ ａｎｄ Ｇｒｏｓｓ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．５：４２８－４３３（１９９４）；及び米国特許番号６，９８２，３２１及び７，０８７，４０９も参照。
【0062】
「ヒト抗体」は、ヒトによって生成された抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有する抗体、及び／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製する技術のうちの任意のものを用いて作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を具体的に除外する。ヒト抗体は、ファージディスプレイライブラリを含む当該技術分野で既知の種々の技術を使用して生成され得る。Ｈｏｏｇｅｎｂｏｏｍ ａｎｄ Ｗｉｎｔｅｒ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２７：３８１（１９９１）；Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．，２２２：５８１（１９９１）。Ｃｏｌｅ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ａｌａｎ Ｒ．Ｌｉｓｓ，ｐ．７７（１９８５）；Ｂｏｅｒｎｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１４７（１）：８６－９５（１９９１）に記載の方法も、ヒトモノクローナル抗体の調製に利用可能である。ｖａｎ Ｄｉｊｋ ａｎｄ ｖａｎ ｄｅ Ｗｉｎｋｅｌ，Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．５：３６８－７４（２００１）も参照。ヒト抗体は、抗原攻撃に応答してそのような抗体を生成するように改変されているが、その内因性遺伝子座が無効化されているトランスジェニック動物、例えば、免疫化異種マウスに抗原を投与することにより調製され得る（例えば、ＸＥＮＯＭＯＵＳＥ（商標）技術に関しては、米国特許番号６，０７５，１８１及び６，１５０，５８４を参照）。例えば、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術により生成されるヒト抗体についても、Ｌｉ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，１０３：３５５７－３５６２（２００６）を参照。
【0063】
本明細書で使用される場合、「超可変領域」、「ＨＶＲ」、または「ＨＶ」という用語は、配列が超可変性であり、かつ／または構造的に定義されたループを形成する抗体可変ドメインの領域を指す。概して、抗体は、６つのＨＶＲを含み、３つがＶＨにあり（Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３）、３つがＶＬにある（Ｌ１、Ｌ２、Ｌ３）。天然抗体において、Ｈ３及びＬ３は、これらの６つのＨＶＲのうちで最も高い多様性を呈し、特にＨ３が、抗体に優れた特異性を与える上で特有の役割を果たすと考えられている。例えば、Ｘｕ ｅｔ ａｌ．，Ｉｍｍｕｎｉｔｙ １３：３７－４５（２０００）；Ｊｏｈｎｓｏｎ ａｎｄ Ｗｕ ｉｎ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ２４８：１－２５（Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３））を参照。実際には、重鎖のみからなる天然に存在するラクダ科抗体は、軽鎖の不在下で機能的であり、安定している。例えば、Ｈａｍｅｒｓ－Ｃａｓｔｅｒｍａｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ ３６３：４４６－４４８（１９９３）ａｎｄ Ｓｈｅｒｉｆｆ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ Ｓｔｒｕｃｔ． Ｂｉｏｌ．３：７３３－７３６（１９９６）を参照。
【0064】
いくつかのＨＶＲ描写が本明細書で使用され、本明細書に包含される。Ｋａｂａｔ相補性決定領域（ＣＤＲ）であるＨＶＲは、配列可変性に基づくものであり、最も一般的に使用されている（上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．） Ｃｈｏｔｈｉａは、そうではなく、構造的ループの位置を指す（Ｃｈｏｔｈｉａ及びＬｅｓｋ Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．１９６：９０１－９１７（１９８７））。ＡｂＭ ＨＶＲは、Ｋａｂａｔ ＣＤＲとＣｈｏｔｈｉａ構造的ループとの間の妥協案を示し、Ｏｘｆｏｒｄ ＭｏｌｅｃｕｌａｒのＡｂＭ抗体モデリングソフトウェアにより使用される。「接触」ＨＶＲは、利用可能な複合体結晶構造の分析に基づく。これらのＨＶＲの各々由来の残基が以下に記載される。
【0065】
【表1】
【0066】
ＨＶＲは、以下のように「伸長ＨＶＲ」を含み得る：ＶＬにおける２４～３６または２４～３４（Ｌ１）、４６～５６または５０～５６（Ｌ２）、及び８９～９７または８９～９６（Ｌ３）、ならびにＶＨにおける２６～３５（Ｈ１）、５０～６５または４９～６５（好ましい実施形態）（Ｈ２）、及び９３～１０２、９４～１０２、または９５～１０２（Ｈ３）。可変ドメイン残基は、これらの伸長ＨＶＲの定義の各々について上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．に従って番号付けされる。
【0067】
「フレームワーク」または「ＦＲ」残基は、本明細書に定義されるＨＶＲ残基以外の可変ドメイン残基である。
【0068】
「Ｋａｂａｔにあるような可変ドメイン残基番号付け」または「Ｋａｂａｔにあるようなアミノ酸位置番号付け」という語句、及びそれらの変形は、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．における抗体の編集物の重鎖可変ドメインまたは軽鎖可変ドメインに使用される番号付けシステムを指す。この番号付けシステムを使用して、実際の直鎖状アミノ酸配列は、可変ドメインのＦＲもしくはＨＶＲの短縮、またはそれへの挿入に対応するより少ないアミノ酸または追加のアミノ酸を含有し得る。例えば、重鎖可変ドメインは、Ｈ２の残基５２後に単一のアミノ酸挿入（Ｋａｂａｔに従って残基５２ａ）を、そして重鎖ＦＲ残基８２後に挿入された残基（例えば、Ｋａｂａｔに従って残基８２ａ、８２ｂ、及び８２ｃ等）を含んでもよい。残基のＫａｂａｔ番号付けは、所与の抗体に対して、抗体の配列と「標準の」Ｋａｂａｔによって番号付けされた配列との相同領域での整合によって決定され得る。
【0069】
Ｋａｂａｔナンバリングシステムは、一般に、可変ドメイン内の残基（大体、軽鎖の１～１０７残基及び重鎖の１～１１３残基）に言及する際に使用される（例えば、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ．５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍｄ．（１９９１））。「ＥＵ番号付けシステム」または「ＥＵ指標」は、一般に、免疫グロブリン重鎖定常領域内の残基に言及する際に使用される（例えば、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．で報告されているＥＵ指標）。「ＫａｂａｔにあるようなＥＵ指標」は、ヒトＩｇＧ１ ＥＵ抗体の残基番号付けを指す。本明細書に別途述べられない限り、抗体の可変ドメインにおける残基番号への言及は、Ｋａｂａｔ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する。本明細書で別途述べられない限り、抗体の定常ドメインにおける残基番号への言及は、ＥＵ番号付けシステムによる残基番号付けを意味する（例えば、米国特許公開番号２０１０－２８０２２７参照）。
【0070】
「アクセプターヒトフレームワーク」は、本明細書で使用される場合、ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク由来のＶＬフレームワークまたはＶＨフレームワークのアミノ酸配列を含むフレームワークである。ヒト免疫グロブリンフレームワークまたはヒトコンセンサスフレームワーク「に由来する」アクセプターヒトフレームワークは、それと同じアミノ酸配列を含んでもよく、またはそれは既存のアミノ酸配列変化を含有してもよい。いくつかの実施形態では、既存のアミノ酸変化の数は、１０以下、９以下、８以下、７以下、６以下、５以下、４以下、３以下、または２以下である。既存のアミノ酸変化がＶＨに存在する場合、好ましいそれらの変化が位置７１Ｈ、７３Ｈ、及び７８Ｈのうちの３つ、２つ、または１つにのみ存在する場合、例えば、それらの位置のアミノ酸残基は、７１Ａ、７３Ｔ、及び／または７８Ａであり得る。いくつかの実施形態では、ＶＬアクセプターヒトフレームワークは、配列において、ＶＬヒト免疫グロブリンフレームワーク配列またはヒトコンセンサスフレームワーク配列と同一である。
【0071】
「ヒトコンセンサスフレームワーク」は、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨフレームワーク配列の選択において最も一般的に生じるアミノ酸残基を代表する、フレームワークである。一般に、ヒト免疫グロブリンＶＬまたはＶＨ配列の選択は、可変ドメイン配列のサブグループから行われる。一般に、配列のサブグループは、Ｋａｂａｔ ｅｔ ａｌ．，Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ｏｆ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｉｎｔｅｒｅｓｔ，５ｔｈ Ｅｄ．Ｐｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｓｅｒｖｉｃｅ，Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ（１９９１）にあるようなサブグループである。例には、ＶＬに関するものが含まれ、サブグループは、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．にあるようなサブグループカッパＩ、カッパＩＩ、カッパＩＩＩ、またはカッパＩＶであり得る。さらに、ＶＨについては、サブグループは、上記のＫａｂａｔ ｅｔ ａｌ．にあるようなサブグループＩ、サブグループＩＩ、またはサブグループＩＩＩであり得る。
【0072】
指定された位置における「アミノ酸改変」は、指定された残基の置換もしくは欠失、または指定された残基に隣接する少なくとも１個のアミノ酸残基の挿入を指す。指定された残基に「隣接する」挿入は、その１～２個の残基内への挿入を意味する。挿入は、指定された残基のＮ末端側またはＣ末端側であり得る。本明細書における好ましいアミノ酸改変は、置換である。
【0073】
「親和性成熟」抗体は、その１つ以上のＨＶＲに１つ以上の変化を有し、これらの変化が、それらの変化（複数可）を有しない親抗体と比較して、抗原に対する抗体の親和性の向上をもたらすものである。いくつかの実施形態では、親和性成熟抗体は、標的抗原に対するナノモルまたはさらにはピコモルの親和性を有する。親和性成熟抗体は、当該技術分野で公知の手順によって生成される。例えば、Ｍａｒｋｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ １０：７７９－７８３（１９９２）は、ＶＨ及びＶＬドメインシャッフリングによる親和性成熟について記載している。ＨＶＲ及び／またはフレームワーク残基のランダム変異誘発は、例えば、Ｂａｒｂａｓ ｅｔ ａｌ．Ｐｒｏｃ Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９１：３８０９－３８１３（１９９４）；Ｓｃｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅ １６９：１４７－１５５（１９９５）；Ｙｅｌｔｏｎ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５５：１９９４－２００４（１９９５）；Ｊａｃｋｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５４（７）：３３１０－９（１９９５）；及びＨａｗｋｉｎｓ ｅｔ ａｌ，Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２２６：８８９－８９６（１９９２）に記載されている。
【0074】
本明細書で使用される場合、用語「特異的に認識する」または「特異的に結合する」は、生物学的分子を含む分子の異種集団の存在下で標的の存在を決定する、標的と抗体との間の引力または結合などの測定可能な及び再生可能な相互作用を指す。例えば、標的またはエピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、他の標的または標的の他のエピトープに結合する場合よりも高い親和性、アビディティで、より容易に、及び／またはより長い持続時間でこの標的またはエピトープに結合する抗体である。例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部位）は、第２の標的に特異的または優先的に結合する場合があり、または結合しない場合があることも理解される。このように、「特異的結合」または「優先的結合」は、排他的な結合を（含み得るが）必ずしも必要とするわけではない。標的に特異的に結合する抗体は、少なくとも約１０３Ｍ－１または１０４Ｍ－１、時に約１０５Ｍ－１または１０６Ｍ－１、他の例では約１０６Ｍ－１または１０７Ｍ－１、約１０８Ｍ－１～１０９Ｍ－１、または約１０１０Ｍ－１～１０１１Ｍ－１またはそれ以上の結合定数を有し得る。特定のタンパク質と特異的免疫反応性の抗体を選択するために多様なイムノアッセイ形式が使用され得る。例えば、固相ＥＬＩＳＡイムノアッセイは、タンパク質と特異的免疫反応性のモノクローナル抗体を選択するために日常的に使用される。特異的免疫反応性を決定するために使用され得るイムノアッセイ形式及び条件の説明については、例えば、Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照。
【0075】
「同一性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で同一であることを示す。「類似性」は、本明細書で使用される場合、アライメントされた配列における任意の特定の位置でアミノ酸残基が配列間で類似するタイプのものであることを示す。例えば、ロイシンは、イソロイシンまたはバリンの代わりに用いられ得る。しばしば互いに置換され得る他のアミノ酸には、
－フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；
－リジン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパルテート及びグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；及び
－システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）が含まれるがこれらに限定されない。
－フェニルアラニン、チロシン及びトリプトファン（芳香族側鎖を有するアミノ酸）；
－リジン、アルギニン及びヒスチジン（塩基性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパルテート及びグルタメート（酸性側鎖を有するアミノ酸）；
－アスパラギン及びグルタミン（アミド側鎖を有するアミノ酸）；及び
－システイン及びメチオニン（硫黄含有側鎖を有するアミノ酸）が含まれるがこれらに限定されない。
【0076】
同一性及び類似性の程度は容易に計算され得る（例えば、Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｌｅｓｋ，Ａ．Ｍ．，ｅｄ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９８８；Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ． Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ，Ｓｍｉｔｈ，Ｄ．Ｗ．，ｅｄ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９３；Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １，Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ａ．Ｍ．，ａｎｄ Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｈ．Ｇ．，ｅｄｓ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ，１９９４；Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｇ．，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７；及びＳｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ，Ｇｒｉｂｓｋｏｖ，Ｍ．ａｎｄ Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｊ．，ｅｄｓ．，Ｍ Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１参照）。
【0077】
本明細書で使用される場合、補体タンパク質と第２のタンパク質との間の「相互作用」は、限定されないが、タンパク質－タンパク質相互作用、物理的相互作用、化学的相互作用、結合、共有結合、及びイオン結合を包含する。本明細書で使用される場合、抗体が２つのタンパク質間の相互作用を破壊し、減少させ、または完全に排除する場合、抗体は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。抗体またはその断片が２つのタンパク質のうちの１つに結合する場合、本開示の抗体、またはその断片は、２つのタンパク質間の「相互作用を阻害する」。
【0078】
「遮断」抗体、「アンタゴニスト」抗体、「阻害」抗体、または「中和」抗体は、それが結合する抗原の１つ以上の生物学的活性、例えば、１つ以上のタンパク質との相互作用を阻害または減少させる抗体である。いくつかの実施形態では、遮断抗体、アンタゴニスト抗体、阻害抗体、または「中和」抗体は、抗原の１つ以上の生物学的活性または相互作用を実質的にまたは完全に阻害する。
【0079】
用語「阻害剤」は、標的生体分子の活性または発現を減少させることによるものかどうかにかかわらず、標的生体分子、例えば、ｍＲＮＡまたはタンパク質の生物学的機能を阻害する能力を有する化合物を指す。阻害剤は、抗体、小分子、または核酸分子であり得る。用語「アンタゴニスト」は、受容体に結合し、受容体の生物学的反応を阻止または減衰させる化合物を指す。用語「阻害剤」はまた、「アンタゴニスト」を指し得る。
【0080】
抗体「エフェクター機能」は、抗体のＦｃ領域（天然配列Ｆｃ領域またはアミノ酸配列バリアントＦｃ領域）に起因するそれらの生物学的活性を指し、抗体アイソタイプによって異なる。
【0081】
本明細書で使用される場合、用語「親和性」は、２つの物質（例えば、抗体及び抗原）の可逆的結合についての平衡定数であり、解離定数（ＫＤ）として表される。親和性は、非関連アミノ酸配列に対する抗体の親和性よりも少なくとも１倍高く、少なくとも２倍高く、少なくとも３倍高く、少なくとも４倍高く、少なくとも５倍高く、少なくとも６倍高く、少なくとも７倍高く、少なくとも８倍高く、少なくとも９倍高く、少なくとも１０倍高く、少なくとも２０倍高く、少なくとも３０倍高く、少なくとも４０倍高く、少なくとも５０倍高く、少なくとも６０倍高く、少なくとも７０倍高く、少なくとも８０倍高く、少なくとも９０倍高く、少なくとも１００倍高く、または少なくとも１，０００倍高く、またはそれ以上であり得る。標的タンパク質に対する抗体の親和性は、例えば、約１００ナノモル濃度（ｎＭ）～約０．１ｎＭ、約１００ｎＭ～約１ピコモル濃度（ｐＭ）、または約１００ｎＭ～約１フェムトモル濃度（ｆＭ）またはそれ以上であり得る。本明細書で使用される場合、用語「アビディティ」は、２つ以上の物質の複合体が希釈後に解離することに対する抵抗性を指す。用語「免疫反応性」及び「優先的に結合する」は、抗体及び／または抗原結合断片に関して本明細書で互換的に使用される。
【0082】
用語「結合」は、例えば、塩架橋及び水架橋などの相互作用を含む、共有結合性、静電気性、疎水性、及びイオン性及び／または水素結合相互作用による、２つの分子間の直接的会合を指す。例えば、対象抗Ｃ１ｑ抗体は、補体Ｃ１ｑタンパク質内のエピトープに特異的に結合する。「特異的結合」は、少なくとも約１０－７Ｍ以上、例えば、５×１０－７Ｍ、１０－８Ｍ、５×１０－８Ｍ、及びそれ以上の親和性での結合を指す。「非特異的結合」は、約１０－７Ｍ未満の親和性、例えば、１０－６Ｍ、１０－５Ｍ、１０－４Ｍなどの親和性での結合を指す。
【0083】
用語「ｋｏｎ」は、本明細書で使用される場合、抗原に対する抗体の会合についての速度定数を指すことが意図されている。
【0084】
用語「ｋｏｆｆ」は、本明細書で使用される場合、抗体／抗原複合体からの抗体の解離についての速度定数を指すことが意図されている。
【0085】
用語「ＫＤ」は、本明細書で使用される場合、抗体－抗原相互作用の平衡解離定数を指すことが意図されている。
【0086】
本明細書で使用される場合、ペプチド、ポリペプチド、または抗体配列に関して、「アミノ酸配列同一性パーセント（％）」及び「相同性」は、配列同一性最大パーセントを達成するために、配列を整合させ、必要に応じてギャップを導入した後の、配列同一性の一部としていずれの保存的置換も考慮しない、特定のペプチドもしくはポリペプチド配列におけるアミノ酸残基と同一である、候補配列におけるアミノ酸残基の割合を指す。アミノ酸配列同一性パーセントを決定する目的のためのアライメントは、例えば、公共に利用可能なコンピュータソフトウェア、例えば、ＢＬＡＳＴ、ＢＬＡＳＴ－２、ＡＬＩＧＮまたはＭＥＧＡＬＩＧＮ（商標）（ＤＮＡＳＴＡＲ）ソフトウェアを使用して、当該技術分野における技術内の様々な方法で達成され得る。当業者は、比較される配列の全長にわたって最大のアライメントを達成するのに必要な当該技術分野で知られている任意のアルゴリズムを含む、アライメントを測定するための適切なパラメータを決定し得る。
【0087】
「生物学的サンプル」は、個体から得られる多様なサンプルタイプを包含し、診断またはモニタリングアッセイにおいて使用され得る。その定義は、血液及び生物学的起源の他の液体サンプル、固体組織サンプル、例えば、生検サンプルまたは組織培養物またはそれに由来する細胞及びその子孫を包含する。その定義にはまた、それらの調達後に任意の方法で、例えば、ポリヌクレオチドなどのある特定の成分について試薬での処置、可溶化、または濃縮によって操作されたサンプルが含まれる。用語「生物学的サンプル」は、臨床サンプルを包含し、培養細胞、細胞上清、細胞ライセート、血清、血漿、生体液、及び組織サンプルも含む。用語「生物学的サンプル」には、尿、唾液、脳脊髄液、間質液、眼液、滑液、血液分画、例えば、血漿及び血清などが含まれる。用語「生物学的サンプル」にはまた、固体組織サンプル、組織培養サンプル、及び細胞サンプルが含まれる。
【0088】
「単離された」核酸分子は、それが生成された環境において通常関連する少なくとも１つの混入核酸分子から同定及び分離された核酸分子である。好ましくは、単離された核酸は、生成環境に関連する全ての成分と会合しない。本明細書におけるポリペプチド及び抗体をコードする単離された核酸分子は、天然に見られる形態または状況以外の形態である。そのため、単離された核酸分子は、細胞において天然に存在する本明細書における任意のポリペプチド及び抗体をコードする核酸とは区別される。
【0089】
用語「ベクター」は、本明細書で使用される場合は、それが連結された別の核酸を輸送することが可能な核酸分子を指すことが意図されている。ベクターの１つのタイプは、「プラスミド」であり、これは、追加のＤＮＡセグメントがライゲーションされ得る環状二本鎖ＤＮＡを指す。ベクターの別のタイプは、ファージベクターである。ベクターの別のタイプは、ウイルスベクターであり、この場合、追加のＤＮＡセグメントがウイルスゲノム内にライゲーションされ得る。ある特定のベクターは、それらが導入される宿主細胞において自己複製が可能である（例えば、細菌の複製起点を有する細菌ベクター及びエピソーム哺乳動物ベクター）。他のベクター（例えば、非エピソーム哺乳動物ベクター）は、宿主細胞に導入すると宿主細胞のゲノムに組み込まれ得、それにより宿主ゲノムと共に複製される。さらに、ある特定のベクターは、それらが機能可能に連結された遺伝子の発現を指示することが可能である。そのようなベクターは、本明細書で「組換え発現ベクター」、または単純に「発現ベクター」と称される。通常、組換えＤＮＡ技術において有用な発現ベクターはしばしば、プラスミドの形態である。本明細書において、「プラスミド」及び「ベクター」は、プラスミドが最も一般的に使用される形態のベクターであるため互換的に使用され得る。
【0090】
本明細書で互換的に使用される「ポリヌクレオチド」、または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを指し、ＤＮＡ及びＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、改変ヌクレオチドまたは塩基、及び／またはそれらのアナログ、またはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによってまたは合成反応によってポリマーに組み込まれ得る任意の基質であり得る。ポリヌクレオチドは、改変ヌクレオチド、例えば、メチル化ヌクレオチド及びそれらのアナログを含み得る。存在する場合、ヌクレオチド構造に対する改変は、ポリマーのアセンブリの前または後に付与され得る。ヌクレオチドの配列は、非ヌクレオチド成分によって隔てられていてもよい。ポリヌクレオチドは、合成後に生成される改変（複数可）、例えば、標識へのコンジュゲーションを含み得る。他のタイプの改変には、例えば、天然に存在するヌクレオチドのうちの１つ以上をアナログと置換する「キャップ」、ヌクレオチド間改変、例えば、非電荷性結合（例えば、メチルホスホン酸塩、ホスホトリエステル、ホスホアミデート、カルバメートなど）によるもの、及び電荷性結合（例えば、ホスホロチオエート、ホスホロジチオエートなど）によるもの、例えば、タンパク質（例えば、ヌクレアーゼ、毒素、抗体、シグナルペプチド、ポリ－Ｌ－リジンなど）の懸垂部位を含むもの、挿入剤（例えば、アクリジン、ソラーレンなど）によるもの、キレート剤（例えば、金属、放射活性金属、ホウ素、酸化金属など）によるもの、アルキル化剤を含むもの、改変結合（例えば、アルファアノマー核酸など）によるもの、ならびにポリヌクレオチド（複数可）の未改変形態が含まれる。さらに、糖内に通常存在するヒドロキシル基のうちのいずれかは、例えば、ホスホン酸基、リン酸基により置き換えられるか、標準的な保護基により保護されるか、もしくは活性化されて追加のヌクレオチドへの追加の結合を生成してもよく、または固体もしくは半固体支持体にコンジュゲーションされてもよい。５’及び３’末端ＯＨは、リン酸化され、またはアミンもしくは１～２０個の炭素原子の有機キャッピング基部位と置換され得る。他のヒドロキシルもまた、標準的な保護基に誘導体化され得る。ポリヌクレオチドは、例えば、２’－Ｏ－メチル－、２’－Ｏ－アリル、２’－フルオロ－または２’－アジド－リボース、炭素環糖アナログ、α－アノマー糖、エピマー糖、例えば、アラビノース、キシロースまたはリキソース、ピラノース糖、フラノース糖、セドヘプツロース、アクリル酸アナログ、及び塩基性ヌクレオシドアナログ、例えば、メチルリボシドを含む、当該技術分野において一般的に知られているリボースまたはデオキシリボース糖のアナログ形態を含み得る。１つ以上のホスホジエステル結合は、代替連結基によって置き換えられ得る。これらの代替連結基には、ホスフェートがＰ（Ｏ）Ｓ（「チオエート」）、Ｐ（Ｓ）Ｓ（「ジチオエート」）、（Ｏ）ＮＲ２（「アミデート」）、Ｐ（Ｏ）Ｒ、Ｐ（Ｏ）ＯＲ’、ＣＯ、またはＣＨ２（「ホルムアセタール」）（式中、各ＲまたはＲ’は、独立して、Ｈ、またはエーテル（－Ｏ－）結合を任意に含有する置換もしくは非置換アルキル（１～２０Ｃ）、アリール、アルケニル、シクロアルキル、シクロアルケニルまたはアラルキルである）によって置き換えられた実施形態が含まれるがこれらに限定されない。ポリヌクレオチドにおける全ての結合が同一である必要はない。先述の記載は、ＲＮＡ及びＤＮＡを含む、本明細書で言及される全てのポリヌクレオチドに適用される。
【0091】
「宿主細胞」には、ポリヌクレオチド挿入物の組み込みのためのベクター（複数可）のためのレシピエントであり得、レシピエントとなっている個々の細胞または細胞培養物が含まれる。宿主細胞には、単一の宿主細胞の子孫が含まれ、子孫は、天然、突然、または意図的変異のため、必ずしも元の親細胞と（形態においてまたはゲノムＤＮＡ相補体において）完全に同一である必要はない場合がある。宿主細胞には、本開示のポリヌクレオチド（複数可）でインビボでトランスフェクションされた細胞が含まれる。
【0092】
本明細書で使用される「担体」は、用いられる投薬量及び濃度でそれに曝露されている細胞または哺乳動物に対して非毒性の薬学的に許容可能な担体、賦形剤、または安定剤が含まれる。しばしば、生理的に許容可能な担体は、水性ｐＨ緩衝液である。生理的に許容可能な担体の例には、緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸を含む抗酸化剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖アルコール、例えば、マンニトールまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）及びＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）が含まれる。
【0093】
用語「予防する」は、当該技術分野において認知されており、例えば眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）または関連する症状などの状態に関連して用いられる場合、治療を受けていない患者に対するものである。
【0094】
用語「対象」は、本明細書で使用される場合、生存している哺乳動物を指し、用語「患者」と互換的に使用され得る。哺乳動物の例には、哺乳動物クラスの任意のメンバー：ヒト、非ヒト霊長類、例えば、チンパンジー、及び他の類人猿及びサル種；牧場動物、例えば、ウシ、ウマ、ヒツジ、ヤギ、ブタ；家庭動物、例えば、ウサギ、イヌ、及びネコ；齧歯類、例えば、ラット、マウス及びモルモットを含む実験動物などが含まれるがこれらに限定されない。その用語は、特定の年齢または性別を示さない。
【0095】
本明細書で使用される場合、用語「処置すること」または「処置」は、病態の症状、臨床的兆候、または根底にある病理を減少、停止、または逆行させて、対象の病態を安定化または改善することまたは対象の病態が対象が処置を受けなかった場合と同じ程度悪化する可能性を低下させることを含む。
【0096】
対象の処置方法に関して化合物の「治療的有効量」という用語は、（哺乳動物、好ましくはヒトに対する）所望の投薬レジメンの一部として投与される場合、例えば、任意の医学的処置に適用可能な妥当な利益／リスク比で、疾患または病態が処置されるために、または化粧品目的のために臨床的に許容可能な標準に従う、症状を軽減する、病態を改善する、または疾患病態の発症を遅らせる調製物における化合物（複数可）の量を指す。本明細書における治療的有効量は、患者の疾患状態、年齢、性別、及び体重、ならびに個体において所望の反応を引き起こすための抗体の能力などの要因に応じて変わり得る。
【0097】
本明細書で使用される場合、特定の疾患、障害、または病態を発症する「リスクのある」個体は、検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよく、また、本明細書に記載の処置方法の前に検出可能な疾患または疾患の症状を示してもいなくてもよい。「リスクのある」は、個体が、当該技術分野で知られているように、特定の疾患、障害、または病態の発症と相関する測定可能なパラメータである、１つ以上のリスク因子を有することを意味する。これらのリスク因子のうちの１つ以上を有する個体は、これらのリスク因子のうちの１つ以上を有さない個体よりも特定の疾患、障害、または病態を発症する可能性が高い。
【0098】
「慢性」投与は、初期の治療効果（活性）を長期間維持するように、急性様式とは対照的に連続した医薬品（複数可）の投与を指す。「間欠的」投与は、中断することなく連続的に投与されるのではなく、事実上周期的／定期的である処置を指す。
【0099】
別途定義されない限り、本明細書で使用される全ての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者が一般に理解する意味と同一の意味を有する。本明細書に記載のもの類似または同等の任意の方法及び物質も本発明の実践または試験において使用され得るが、好ましい方法及び物質をこれより説明する。本明細書で挙げられる全ての刊行物は、参照により本明細書に組み込まれて、刊行物が引用される方法及び／または物質、例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋ ｅｔ ａｌ．，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ ３ｄ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００１）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，Ｎ．Ｙ．；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌ，ｅｔ ａｌ．ｅｄｓ．，（２００３））；ｔｈｅ ｓｅｒｉｅｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）：ＰＣＲ ２：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｍ．Ｊ．ＭａｃＰｈｅｒｓｏｎ，Ｂ．Ｄ．Ｈａｍｅｓ ａｎｄ Ｇ．Ｒ．Ｔａｙｌｏｒ ｅｄｓ．（１９９５）），Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．（１９８８）Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，ａｎｄ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ，ｅｄ．（１９８７））；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ，ｅｄ．，１９８４）；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ，ｅｄ．，１９９８）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．Ｍａｔｈｅｒ ａｎｄ Ｐ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ，１９９８）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．Ｇｒｉｆｆｉｔｈｓ，ａｎｄ Ｄ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ，ｅｄｓ．，１９９３－８）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ；Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ ａｎｄ Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）；Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ ａｎｄ Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）；ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）；Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，１９９９）；Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．Ｊａｎｅｗａｙ ａｎｄ Ｐ．Ｔｒａｖｅｒｓ，１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ，１９９７）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ．，ｅｄ．，ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ，１９８８－１９８９）；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．Ｓｈｅｐｈｅｒｄ ａｎｄ Ｃ．Ｄｅａｎ，ｅｄｓ．，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，２０００）；Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ（Ｅ．Ｈａｒｌｏｗ ａｎｄ Ｄ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，１９９９）；Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．Ｚａｎｅｔｔｉ ａｎｄ Ｊ．Ｄ．Ｃａｐｒａ，ｅｄｓ．，Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ，１９９５）；及びＣａｎｃｅｒ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ（Ｖ．Ｔ．ＤｅＶｉｔａ ｅｔ ａｌ．，ｅｄｓ．，Ｊ．Ｂ．Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９３）に記載されている広く利用されている方法論を開示し、記載する。
【0100】
抗補体Ｃ１ｑ抗体
本明細書で開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑの強力な阻害剤であり、任意の期間にわたってＣ１ｑ機能の継続的阻害のために投薬され、次いでその活性が重要であり得る時点で正常なＣ１ｑ機能の回復を可能にするために任意に停止され得る。動物研究において本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体で得られた結果は、ヒト化またはヒト抗体、ならびにその断片及び／または誘導体を用いて臨床に容易に進展させることができる。
本明細書で開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑの強力な阻害剤であり、任意の期間にわたってＣ１ｑ機能の継続的阻害のために投薬され、次いでその活性が重要であり得る時点で正常なＣ１ｑ機能の回復を可能にするために任意に停止され得る。動物研究において本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体で得られた結果は、ヒト化またはヒト抗体、ならびにその断片及び／または誘導体を用いて臨床に容易に進展させることができる。
【0101】
Ｃ１ｑは、１８個のポリペプチド鎖（６個のＣ１ｑのＡ鎖、６個のＣ１ｑのＢ鎖、及び６個のＣ１ｑのＣ鎖）からなる４６０ｋＤａの大型多量体タンパク質である。Ｃ１ｒ及びＣ１ｓ補体タンパク質は、Ｃ１ｑ尾部領域に結合してＣ１複合体（Ｃ１ｑｒ２ｓ２）を形成する。
【0102】
本開示の抗体は、古典的補体活性化経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑを特異的に認識する。結合した補体因子は、限定されないが、任意の哺乳動物生物、例えば、ヒト、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタを含む補体系を有する任意の生物に由来し得る。
【0103】
本明細書で使用される場合、「Ｃ１複合体」は、限定されないが、１つのＣ１ｑタンパク質、２つのＣ１ｒタンパク質、及び２つのＣ１ｓタンパク質を含み得るタンパク質複合体（例えば、Ｃ１ｑｒ２ｓ２）を指す。
【0104】
本明細書に開示される抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１複合体形成を阻害し得る。
【0105】
本明細書で使用される場合、「補体因子Ｃ１ｑ」は、野生型配列及び天然に存在するバリアント配列の両方を指す。
【0106】
本開示の抗体によって認識される補体因子Ｃ１ｑの非限定的な例は、３つのポリペプチド鎖Ａ、Ｂ、及びＣを含むヒトＣ１ｑである：
Ｃ１ｑ，鎖Ａ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース： ＮＰ＿０５７０７５．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号： ＮＭ＿０１５９９１：
＞ｇｉ｜７７０５７５３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０５７０７５．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＡ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号１）
ＭＥＧＰＲＧＷＬＶＬＣＶＬＡＩＳＬＡＳＭＶＴＥＤＬＣＲＡＰＤＧＫＫＧＥＡＧＲＰＧＲＲＧＲＰＧＬＫＧＥＱＧＥＰＧＡＰＧＩＲＴＧＩＱＧＬＫＧＤＱＧＥＰＧＰＳＧＮＰＧＫＶＧＹＰＧＰＳＧＰＬＧＡＲＧＩＰＧＩＫＧＴＫＧＳＰＧＮＩＫＤＱＰＲＰＡＦＳＡＩＲＲＮＰＰＭＧＧＮＶＶＩＦＤＴＶＩＴＮＱＥＥＰＹＱＮＨＳＧＲＦＶＣＴＶＰＧＹＹＹＦＴＦＱＶＬＳＱＷＥＩＣＬＳＩＶＳＳＳＲＧＱＶＲＲＳＬＧＦＣＤＴＴＮＫＧＬＦＱＶＶＳＧＧＭＶＬＱＬＱＱＧＤＱＶＷＶＥＫＤＰＫＫＧＨＩＹＱＧＳＥＡＤＳＶＦＳＧＦＬＩＦＰＳＡ。
Ｃ１ｑ，鎖Ａ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース： ＮＰ＿０５７０７５．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号： ＮＭ＿０１５９９１：
＞ｇｉ｜７７０５７５３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０５７０７５．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＡ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号１）
ＭＥＧＰＲＧＷＬＶＬＣＶＬＡＩＳＬＡＳＭＶＴＥＤＬＣＲＡＰＤＧＫＫＧＥＡＧＲＰＧＲＲＧＲＰＧＬＫＧＥＱＧＥＰＧＡＰＧＩＲＴＧＩＱＧＬＫＧＤＱＧＥＰＧＰＳＧＮＰＧＫＶＧＹＰＧＰＳＧＰＬＧＡＲＧＩＰＧＩＫＧＴＫＧＳＰＧＮＩＫＤＱＰＲＰＡＦＳＡＩＲＲＮＰＰＭＧＧＮＶＶＩＦＤＴＶＩＴＮＱＥＥＰＹＱＮＨＳＧＲＦＶＣＴＶＰＧＹＹＹＦＴＦＱＶＬＳＱＷＥＩＣＬＳＩＶＳＳＳＲＧＱＶＲＲＳＬＧＦＣＤＴＴＮＫＧＬＦＱＶＶＳＧＧＭＶＬＱＬＱＱＧＤＱＶＷＶＥＫＤＰＫＫＧＨＩＹＱＧＳＥＡＤＳＶＦＳＧＦＬＩＦＰＳＡ。
【0107】
Ｃ１ｑ，鎖Ｂ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース： ＮＰ＿０００４８２．３；ＧｅｎＢａｎｋ番号： ＮＭ＿０００４９１．３：
＞ｇｉ｜８７２９８８２８｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０００４８２．３｜補体Ｃｌｑ
サブコンポーネントサブユニットＢ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号２）
ＭＭＭＫＩＰＷＧＳＩＰＶＬＭＬＬＬＬＬＧＬＩＤＩＳＱＡＱＬＳＣＴＧＰＰＡＩＰＧＩＰＧＩＰＧＴＰＧＰＤＧＱＰＧＴＰＧＩＫＧＥＫＧＬＰＧＬＡＧＤＨＧＥＦＧＥＫＧＤＰＧＩＰＧＮＰＧＫＶＧＰＫＧＰＭＧＰＫＧＧＰＧＡＰＧＡＰＧＰＫＧＥＳＧＤＹＫＡＴＱＫＩＡＦＳＡＴＲＴＩＮＶＰＬＲＲＤＱＴＩＲＦＤＨＶＩＴＮＭＮＮＮＹＥＰＲＳＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＴＹＨＡＳＳＲＧＮＬＣＶＮＬＭＲＧＲＥＲＡＱＫＶＶＴＦＣＤＹＡＹＮＴＦＱＶＴＴＧＧＭＶＬＫＬＥＱＧＥＮＶＦＬＱＡＴＤＫＮＳＬＬＧＭＥＧＡＮＳＩＦＳＧＦＬＬＦＰＤＭＥＡ。
データベース： ＮＰ＿０００４８２．３；ＧｅｎＢａｎｋ番号： ＮＭ＿０００４９１．３：
＞ｇｉ｜８７２９８８２８｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿０００４８２．３｜補体Ｃｌｑ
サブコンポーネントサブユニットＢ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号２）
ＭＭＭＫＩＰＷＧＳＩＰＶＬＭＬＬＬＬＬＧＬＩＤＩＳＱＡＱＬＳＣＴＧＰＰＡＩＰＧＩＰＧＩＰＧＴＰＧＰＤＧＱＰＧＴＰＧＩＫＧＥＫＧＬＰＧＬＡＧＤＨＧＥＦＧＥＫＧＤＰＧＩＰＧＮＰＧＫＶＧＰＫＧＰＭＧＰＫＧＧＰＧＡＰＧＡＰＧＰＫＧＥＳＧＤＹＫＡＴＱＫＩＡＦＳＡＴＲＴＩＮＶＰＬＲＲＤＱＴＩＲＦＤＨＶＩＴＮＭＮＮＮＹＥＰＲＳＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＴＹＨＡＳＳＲＧＮＬＣＶＮＬＭＲＧＲＥＲＡＱＫＶＶＴＦＣＤＹＡＹＮＴＦＱＶＴＴＧＧＭＶＬＫＬＥＱＧＥＮＶＦＬＱＡＴＤＫＮＳＬＬＧＭＥＧＡＮＳＩＦＳＧＦＬＬＦＰＤＭＥＡ。
【0108】
Ｃ１ｑ，鎖Ｃ（ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ），アクセッション番号 タンパク質
データベース： ＮＰ＿００１１０７５７３．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：
ＮＭ＿００１１１４１０１．１：
＞ｇｉ｜１６６２３５９０３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００１１０７５７３．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＣ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号３）
ＭＤＶＧＰＳＳＬＰＨＬＧＬＫＬＬＬＬＬＬＬＬＰＬＲＧＱＡＮＴＧＣＹＧＩＰＧＭＰＧＬＰＧＡＰＧＫＤＧＹＤＧＬＰＧＰＫＧＥＰＧＩＰＡＩＰＧＩＲＧＰＫＧＱＫＧＥＰＧＬＰＧＨＰＧＫＮＧＰＭＧＰＰＧＭＰＧＶＰＧＰＭＧＩＰＧＥＰＧＥＥＧＲＹＫＱＫＦＱＳＶＦＴＶＴＲＱＴＨＱＰＰＡＰＮＳＬＩＲＦＮＡＶＬＴＮＰＱＧＤＹＤＴＳＴＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＶＹＨＡＳＨＴＡＮＬＣＶＬＬＹＲＳＧＶＫＶＶＴＦＣＧＨＴＳＫＴＮＱＶＮＳＧＧＶＬＬＲＬＱＶＧＥＥＶＷＬＡＶＮＤＹＹＤＭＶＧＩＱＧＳＤＳＶＦＳＧＦＬＬＦＰＤ。
データベース： ＮＰ＿００１１０７５７３．１；ＧｅｎＢａｎｋ番号：
ＮＭ＿００１１１４１０１．１：
＞ｇｉ｜１６６２３５９０３｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００１１０７５７３．１｜補体Ｃ１ｑ
サブコンポーネントサブユニットＣ前駆体［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］
（配列番号３）
ＭＤＶＧＰＳＳＬＰＨＬＧＬＫＬＬＬＬＬＬＬＬＰＬＲＧＱＡＮＴＧＣＹＧＩＰＧＭＰＧＬＰＧＡＰＧＫＤＧＹＤＧＬＰＧＰＫＧＥＰＧＩＰＡＩＰＧＩＲＧＰＫＧＱＫＧＥＰＧＬＰＧＨＰＧＫＮＧＰＭＧＰＰＧＭＰＧＶＰＧＰＭＧＩＰＧＥＰＧＥＥＧＲＹＫＱＫＦＱＳＶＦＴＶＴＲＱＴＨＱＰＰＡＰＮＳＬＩＲＦＮＡＶＬＴＮＰＱＧＤＹＤＴＳＴＧＫＦＴＣＫＶＰＧＬＹＹＦＶＹＨＡＳＨＴＡＮＬＣＶＬＬＹＲＳＧＶＫＶＶＴＦＣＧＨＴＳＫＴＮＱＶＮＳＧＧＶＬＬＲＬＱＶＧＥＥＶＷＬＡＶＮＤＹＹＤＭＶＧＩＱＧＳＤＳＶＦＳＧＦＬＬＦＰＤ。
【0109】
したがって、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑタンパク質のポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合し得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑまたはそのホモログ、例えば、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、ウシ、ウマ、ラクダ、ヒツジ、ヤギ、またはブタＣ１ｑのポリペプチド鎖Ａ、ポリペプチド鎖Ｂ、及び／またはポリペプチド鎖Ｃに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはその断片またはその誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。
【0110】
以下の２０段落で挙げられる全ての配列は、米国特許番号９，７０８，３９４（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0111】
抗体Ｍ１（Ｍａｂ１）の軽鎖及び重鎖可変ドメイン配列
標準的な技術を使用して、抗体Ｍ１の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードする核酸及びアミノ酸配列を決定した。抗体Ｍ１の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
標準的な技術を使用して、抗体Ｍ１の軽鎖可変及び重鎖可変ドメインをコードする核酸及びアミノ酸配列を決定した。抗体Ｍ１の軽鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
【0112】
【0113】
軽鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。いくつかの実施形態では、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ１は配列ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ２は配列ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）を有し、Ｍ１軽鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｌ３は配列ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を有する。
【0114】
抗体Ｍ１の重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、
【0115】
【0116】
重鎖可変ドメインの超可変領域（ＨＶＲ）は、太字かつ下線の文字で示されている。いくつかの実施形態では、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ１は配列ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ２は配列ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）を有し、Ｍ１重鎖可変ドメインのＨＶＲ－Ｈ３は配列ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を有する。
【0117】
軽鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、
ＧＡＴＧＴＣＣＡＧＡＴＡＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＴＴＡＴＣＴＴＧＣＴＧＣＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＧＡＡＡＣＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＣＡＧＧＧＣＡＡＧＴＡＡＧＡＧＣＡＴＴＡＡＣＡＡＡＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＡＡＡＣＴＡＡＴＡＡＧＣＴＴＣＴＴＡＴＣＴＡＣＴＣＴＧＧＡＴＣＣＡＣＴＴＴＧＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＴＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＡＣＡＴＡＡＴＧＡＡＴＡＣＣＣＧＣＴＣＡＣＧＴＴＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＡＡ（配列番号１２）と決定した。
ＧＡＴＧＴＣＣＡＧＡＴＡＡＣＣＣＡＧＴＣＴＣＣＡＴＣＴＴＡＴＣＴＴＧＣＴＧＣＡＴＣＴＣＣＴＧＧＡＧＡＡＡＣＣＡＴＴＡＣＴＡＴＴＡＡＴＴＧＣＡＧＧＧＣＡＡＧＴＡＡＧＡＧＣＡＴＴＡＡＣＡＡＡＴＡＴＴＴＡＧＣＣＴＧＧＴＡＴＣＡＡＧＡＧＡＡＡＣＣＴＧＧＧＡＡＡＡＣＴＡＡＴＡＡＧＣＴＴＣＴＴＡＴＣＴＡＣＴＣＴＧＧＡＴＣＣＡＣＴＴＴＧＣＡＡＴＣＴＧＧＡＡＴＴＣＣＡＴＣＡＡＧＧＴＴＣＡＧＴＧＧＣＡＧＴＧＧＡＴＣＴＧＧＴＡＣＡＧＡＴＴＴＣＡＣＴＣＴＣＡＣＣＡＴＣＡＧＴＡＧＣＣＴＧＧＡＧＣＣＴＧＡＡＧＡＴＴＴＴＧＣＡＡＴＧＴＡＴＴＡＣＴＧＴＣＡＡＣＡＡＣＡＴＡＡＴＧＡＡＴＡＣＣＣＧＣＴＣＡＣＧＴＴＣＧＧＴＧＣＴＧＧＧＡＣＣＡＡＧＣＴＧＧＡＧＣＴＧＡＡＡ（配列番号１２）と決定した。
【0118】
重鎖可変ドメインをコードする核酸配列は、
ＣＡＧＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＡＧＴＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＴＣＴＴＣＴＧＧＣＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＣＡＡＧＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＴＡＡＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＡＧＡＣＡＡＡＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＣＡＡＣＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＴＣＧＧＣＧＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号１３）と決定した。
ＣＡＧＧＴＣＣＡＡＣＴＧＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＧＡＧＣＴＧＧＴＡＡＡＧＣＣＴＧＧＧＧＣＴＴＣＡＧＴＧＡＡＧＴＴＧＴＣＣＴＧＣＡＡＧＴＣＴＴＣＴＧＧＣＴＡＣＣＡＴＴＴＣＡＣＣＡＧＣＴＡＣＴＧＧＡＴＧＣＡＣＴＧＧＧＴＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＣＴＧＧＡＣＡＡＧＧＣＣＴＴＧＡＧＴＧＧＡＴＴＧＧＡＧＴＧＡＴＴＣＡＴＣＣＴＡＡＴＡＧＴＧＧＴＡＧＴＡＴＴＡＡＣＴＡＣＡＡＴＧＡＧＡＡＧＴＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＣＣＡＣＡＣＴＧＡＣＴＧＴＡＧＡＣＡＡＡＴＣＣＴＣＣＡＧＣＡＣＡＧＣＣＴＡＣＡＴＧＣＡＡＣＴＣＡＧＣＡＧＣＣＴＧＡＣＡＴＣＴＧＡＧＧＡＣＴＣＧＧＣＧＧＴＣＴＡＴＴＡＴＴＧＴＧＣＡＧＧＡＧＡＧＡＧＡＧＡＴＴＣＴＡＣＧＧＡＧＧＴＴＣＴＣＣＣＴＡＴＧＧＡＣＴＡＣＴＧＧＧＧＴＣＡＡＧＧＡＡＣＣＴＣＡＧＴＣＡＣＣＧＴＣＴＣＣＴＣＡ（配列番号１３）と決定した。
【0119】
物質の寄託
以下の物質は、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ Ｐａｔｅｎｔ Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０－２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された：
以下の物質は、ブダペスト条約に従ってＡｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ，ＡＴＣＣ Ｐａｔｅｎｔ Ｄｅｐｏｓｉｔｏｒｙ，１０８０１ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｂｌｖｄ．，Ｍａｎａｓｓａｓ，Ｖａ．２０１１０－２２０９，ＵＳＡ（ＡＴＣＣ）に寄託された：
【0120】
【表2】
【0121】
培養物の入手が特許出願の係属中及び３０年間、または最新の請求から５年後、または特許の有効期間のうち長い方まで利用可能となることを保証する条件下でＭ１抗体を生成するハイブリドーマ細胞株（マウスハイブリドーマＣ１ｑＭ１ ７７８８－１（Ｍ）０５１６１３）がＡＴＣＣに寄託された。寄託物は、その期間中に生存できなくなった場合に置き換えられる。寄託物は、本出願の対応出願、またはその子孫が出願された国における外国特許法によって要求されるように利用可能である。しかしながら、寄託物の利用可能性は、政府の措置によって付与された特許権を逸脱して本発明の実施するためのライセンスを構成するものではないことが理解されるべきである。
【0122】
本明細書では、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインを含む抗Ｃ１ｑ抗体を投与する方法が開示される。抗体は、少なくともヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、またはラットＣ１ｑに結合し得る。抗体は、ヒト化抗体、キメラ抗体、またはヒト抗体であり得る。抗体は、モノクローナル抗体、その抗体断片、及び／またはその抗体誘導体であり得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。軽鎖可変ドメインは、アクセッション番号ＰＴＡ－１２０３９９で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって生成されるモノクローナル抗体Ｍ１のＨＶＲ－Ｌ１、ＨＶＲ－Ｌ２、及びＨＶＲ－Ｌ３を含む。重鎖可変ドメインは、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ－１２０３９９で寄託されたハイブリドーマ細胞株によって生成されるモノクローナル抗体Ｍ１のＨＶＲ－Ｈ１、ＨＶＲ－Ｈ２、及びＨＶＲ－Ｈ３を含む。
【0123】
いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメイン及び重鎖可変ドメインのアミノ酸配列は、ＨＶＲ－Ｌ１の配列番号５、ＨＶＲ－Ｌ２の配列番号６、ＨＶＲ－Ｌ３の配列番号７、ＨＶＲ－Ｈ１の配列番号９、ＨＶＲ－Ｈ２の配列番号１０、及びＨＶＲ－Ｈ３の配列番号１１のうちの１つ以上を含む。
【0124】
抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。
【0125】
本明細書では、Ｃ１ｑと自己抗体との間の相互作用を阻害する抗Ｃ１ｑ抗体を投与する方法が開示される。好ましい実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを引き起こす。
【0126】
いくつかの実施形態では、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間及びＣ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと別の抗体、例えば、自己抗体との間の相互作用を阻害する。好ましい実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、循環または組織からのＣ１ｑのクリアランスを引き起こす。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２．５：１；２．０：１；１．５：１；または１．０：１未満の化学量論でそれぞれの相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、Ｃ１ｑ抗体は、およそ等モルの濃度のＣ１ｑ及び抗Ｃ１ｑ抗体で、Ｃ１ｑ－Ｃ１ｓ相互作用などの相互作用を阻害する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１未満；１９．５：１未満；１９：１未満；１８．５：１未満；１８：１未満；１７．５：１未満；１７：１未満；１６．５：１未満；１６：１未満；１５．５：１未満；１５：１未満；１４．５：１未満；１４：１未満；１３．５：１未満；１３：１未満；１２．５：１未満；１２：１未満；１１．５：１未満；１１：１未満；１０．５：１未満；１０：１未満；９．５：１未満；９：１未満；８．５：１未満；８：１未満；７．５：１未満；７：１未満；６．５：１未満；６：１未満；５．５：１未満；５：１未満；４．５：１未満；４：１未満；３．５：１未満；３：１未満；２．５：１未満；２．０：１未満；１．５：１未満；または１．０：１未満の化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。ある特定の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｒ及びＣ１ｓの両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑとＣ１ｒとの間、Ｃ１ｑとＣ１ｓとの間、及び／またはＣ１ｑとＣ１ｒ及びＣ１ｓの両方との間の相互作用を阻害する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖に結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＢ鎖に結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＣ鎖に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｃ１ｑのＢ鎖及び／またはＣ１ｑのＣ鎖に結合する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｂ鎖、及び／またはＣ鎖の球状ドメインに結合する。他の実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑのＡ鎖、Ｃ１ｑのＢ鎖、及び／またはＣ１ｑのＣ鎖のコラーゲン様ドメインに結合する。
【0127】
本開示の抗体が２つ以上の補体因子間の相互作用、例えば、Ｃ１ｑ及びＣ１ｓの相互作用、またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間の相互作用を阻害する場合、抗体の存在下で生じる相互作用は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて少なくとも１０％、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％減少し得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、２つ以上の補体因子間の相互作用を５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、または１００％減少させる。ある特定の実施形態では、抗体の存在下で生じる相互作用は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて少なくとも３０％～少なくとも９９％の範囲の量減少する。
【0128】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％から少なくとも９９％の範囲の量、Ｃ２またはＣ４切断を阻害する。Ｃ２またはＣ４切断を測定するための方法は、当該技術分野でよく知られている。それぞれのＣ２またはＣ４切断での本開示の抗体についてのＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、およそ等モル濃度のＣ１ｑ及びそれぞれの抗Ｃ１ｑ抗体でＣ２またはＣ４切断を阻害する。
【0129】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％から少なくとも９９％の範囲の量、自己抗体依存性及び補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）を阻害する。自己抗体依存性及び補体依存性細胞傷害の阻害に関して本開示の抗体のＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。
【0130】
いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、本開示の抗体が非存在の対照と比べて、少なくとも２０％、少なくとも３０％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも６０％、少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、もしくは少なくとも９９％、または少なくとも３０％から少なくとも９９％の範囲の量、補体依存性細胞媒介性細胞傷害（ＣＤＣＣ）を阻害する。ＣＤＣＣを測定するための方法は、当該技術分野でよく知られている。ＣＤＣＣ阻害に関して本開示の抗体のＥＣ５０値は、３μｇ／ｍｌ；２．５μｇ／ｍｌ；２．０μｇ／ｍｌ；１．５μｇ／ｍｌ；１．０μｇ／ｍｌ；０．５μｇ／ｍｌ；０．２５μｇ／ｍｌ；０．１μｇ／ｍｌ；０．０５μｇ／ｍｌ未満であり得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体は、ＣＤＣＣを阻害するが、抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を阻害しない。
【0131】
ヒト化抗補体Ｃ１ｑ抗体
本開示のヒト化抗体は、古典的補体経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑタンパク質に特異的に結合する。ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑ、ヒト及びマウスＣ１ｑ、ラットＣ１ｑ、またはヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、及びラットＣ１ｑに特異的に結合し得る。
本開示のヒト化抗体は、古典的補体経路のＣ１複合体における補体因子Ｃ１ｑ及び／またはＣ１ｑタンパク質に特異的に結合する。ヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、ヒトＣ１ｑ、ヒト及びマウスＣ１ｑ、ラットＣ１ｑ、またはヒトＣ１ｑ、マウスＣ１ｑ、及びラットＣ１ｑに特異的に結合し得る。
【0132】
以下の１６段落で挙げられる全ての配列は、米国特許出願番号１４／９３３，５１７（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0133】
いくつかの実施形態では、ヒト重鎖定常領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７と少なくとも７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含むヒトＩｇＧ４重鎖定常領域である。ヒトＩｇＧ４重鎖定常領域は、Ｋａｂａｔ番号付けに従って１つ以上の改変及び／またはアミノ酸置換を有するＦｃ領域を含み得る。そのような場合では、Ｆｃ領域は、位置２４８におけるロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、位置２４１におけるセリンからプロリンへのアミノ酸置換を含み、そのような置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。
【0134】
ヒトＩｇＧ４（Ｓ２４１Ｐ Ｌ２４８Ｅ）重鎖定常ドメインのアミノ酸配列は、ＡＳＴＫＧＰＳＶＦＰＬＡＰＣＳＲＳＴＳＥＳＴＡＡＬＧＣＬＶＫＤＹＦＰＥＰＶＴＶＳＷＮＳＧＡＬＴＳＧＶＨＴＦＰＡＶＬＱＳＳＧＬＹＳＬＳＳＶＶＴＶＰＳＳＳＬＧＴＫＴＹＴＣＮＶＤＨＫＰＳＮＴＫＶＤＫＲＶＥＳＫＹＧＰＰＣＰＰＣＰＡＰＥＦＥＧＧＰＳＶＦＬＦＰＰＫＰＫＤＴＬＭＩＳＲＴＰＥＶＴＣＶＶＶＤＶＳＱＥＤＰＥＶＱＦＮＷＹＶＤＧＶＥＶＨＮＡＫＴＫＰＲＥＥＱＦＮＳＴＹＲＶＶＳＶＬＴＶＬＨＱＤＷＬＮＧＫＥＹＫＣＫＶＳＮＫＧＬＰＳＳＩＥＫＴＩＳＫＡＫＧＱＰＲＥＰＱＶＹＴＬＰＰＳＱＥＥＭＴＫＮＱＶＳＬＴＣＬＶＫＧＦＹＰＳＤＩＡＶＥＷＥＳＮＧＱＰＥＮＮＹＫＴＴＰＰＶＬＤＳＤＧＳＦＦＬＹＳＲＬＴＶＤＫＳＲＷＱＥＧＮＶＦＳＣＳＶＭＨＥＡＬＨＮＨＹＴＱＫＳＬＳＬＳＬＧＫ（配列番号４７）である。
【0135】
抗体は、重鎖可変ドメイン及び軽鎖可変ドメインを含み得、重鎖可変ドメインは、配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３１～３４のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。ある特定のそのような実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列、または配列番号３５～３８のいずれか１つから選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９０％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。
【0136】
重鎖可変ドメインバリアント１（ＶＨ１）のアミノ酸配列は、
【0137】
【0138】
重鎖可変ドメインバリアント２（ＶＨ２）のアミノ酸配列は、
【0139】
【0140】
重鎖可変ドメインバリアント３（ＶＨ３）のアミノ酸配列は、
【0141】
【0142】
重鎖可変ドメインバリアント４（ＶＨ４）のアミノ酸配列は、
【0143】
【0144】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント１（Ｖκ１）のアミノ酸配列は、
【0145】
【0146】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント２（Ｖκ２）のアミノ酸配列は、
【0147】
【0148】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント３（Ｖκ３）のアミノ酸配列は、
【0149】
【0150】
カッパ軽鎖可変ドメインバリアント４（Ｖκ４）のアミノ酸配列は、
【0151】
【0152】
抗体は、ＨＶＲ－Ｌ１ ＲＡＳＫＳＩＮＫＹＬＡ（配列番号５）、ＨＶＲ－Ｌ２ ＳＧＳＴＬＱＳ（配列番号６）、及びＨＶＲ－Ｌ３ ＱＱＨＮＥＹＰＬＴ（配列番号７）を保持しつつ、配列番号３５～３８と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。抗体は、好ましくはＨＶＲ－Ｈ１ ＧＹＨＦＴＳＹＷＭＨ（配列番号９）、ＨＶＲ－Ｈ２ ＶＩＨＰＮＳＧＳＩＮＹＮＥＫＦＥＳ（配列番号１０）、及びＨＶＲ－Ｈ３ ＥＲＤＳＴＥＶＬＰＭＤＹ（配列番号１１）を保持しつつ、配列番号３１～３４と少なくとも８５％、９０％、または９５％同一の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含み得る。
【0153】
いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３５の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３１の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３６の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３２の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３７の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３３の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号３８の軽鎖可変ドメインアミノ酸配列及び配列番号３４の重鎖可変ドメインアミノ酸配列を含む。
【0154】
いくつかの実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｆａｂ領域を含有する重鎖可変領域及びＦｃ領域を含有する重鎖定常領域を含み、Ｆａｂ領域は本開示のＣ１ｑタンパク質に特異的に結合するが、Ｆｃ領域はＣ１ｑタンパク質に結合することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、ヒトＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、またはＩｇＧ４アイソタイプに由来する。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、補体活性を誘導することが不可能であり、及び／または抗体依存性細胞傷害（ＡＤＣＣ）を誘導することが不可能である。いくつかの実施形態では、Ｆｃ領域は、限定されないが、アミノ酸置換を含む、１つ以上の改変を含む。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、Ｋａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４８に対応する位置で、及び／またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１またはＫａｂａｔ番号付け慣例に従う位置２４１に対応する位置でアミノ酸置換を含む。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、Ｆｃ領域がＦｃ受容体と相互作用することを阻害する。いくつかの実施形態では、位置２４８または位置２４８に対応する位置でのアミノ酸置換は、ロイシンからグルタメートへのアミノ酸置換である。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、抗体におけるアームスイッチを防止する。いくつかの実施形態では、位置２４１または位置２４１に対応する位置でのアミノ酸置換は、セリンからプロリンへのアミノ酸置換である。ある特定の実施形態では、本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体のＦｃ領域は、配列番号４７のアミノ酸配列、または配列番号４７のアミノ酸配列と少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、または少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む。
【0155】
抗Ｃ１ｑ Ｆａｂ断片
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名づけられた。Ｆａｂ分子をＩｇＧ分子と比較した場合、Ｆａｂは、それらのより高い移動性及び組織浸透能力、それらの減少した循環半減期、抗体エフェクター機能を媒介することなく一価で抗原に結合するそれらの能力、ならびにそれらのより低い免疫原性のため、ある特定のインビボ用途についてＩｇＧよりも優れていることが見出された。
組換えＤＮＡ技術の出現の前は、抗体分子の構造を切断し、分子のどの部分がその様々な機能を担っているのかを決定するために、ポリペプチド配列を切断するタンパク質分解酵素（プロテアーゼ）が使用されていた。プロテアーゼパパインでの限定消化は、抗体分子を３つの断片に切断する。Ｆａｂ断片として知られている２つの断片は同一であり、抗原結合活性を含有する。Ｆａｂ断片は、抗体分子の２つの同一の腕部に対応し、その各々は、重鎖のＶＨ及びＣＨ１ドメインと対合した完全軽鎖からなる。他の断片は、抗原結合活性を含まないが、容易に結晶化することが当初観察され、この理由からＦｃ断片（結晶化可能断片）と名づけられた。Ｆａｂ分子をＩｇＧ分子と比較した場合、Ｆａｂは、それらのより高い移動性及び組織浸透能力、それらの減少した循環半減期、抗体エフェクター機能を媒介することなく一価で抗原に結合するそれらの能力、ならびにそれらのより低い免疫原性のため、ある特定のインビボ用途についてＩｇＧよりも優れていることが見出された。
【0156】
Ｆａｂ分子は、定常ドメインＣＨ２及びＣＨ３によって短縮された重鎖を有するＩｇ分子の人工の約５０ｋＤａの断片である。２つの異好性（ＶＬ－ＶＨ及びＣＬ－ＣＨ１）ドメイン相互作用は、Ｆａｂ分子の２つの鎖の構造の基礎にあり、これはＣＬとＣＨ１との間のジスルフィド架橋によってさらに安定化される。Ｆａｂ及びＩｇＧは、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶＬ及びＶＨに由来する（ＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３））によって形成される同一の抗原結合部位を有する。ＣＤＲは、抗体の超可変抗原結合部位を画定する。最も高い配列バリエーションは、ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３に見られ、これは天然免疫系では、それぞれＶＬ及びＪＬ遺伝子またはＶＨ、ＤＨ及びＪＨ遺伝子の再編成によって生成される。ＬＣＤＲ３及びＨＣＤＲ３は典型的には、抗原結合部位のコアを形成する。６つのＣＤＲを接続し、提示する保存領域は、フレームワーク領域と称される。可変ドメインの三次元構造において、フレームワーク領域は、外側では超可変ＣＤＲループによって及び内側では保存ジスルフィド架橋によって連結された２つの対向する逆平行β－シートのサンドイッチを形成する。Ｆａｂ及びＩｇＧの抗原結合部位の安定性及び汎用性のこの独自の組み合わせは、疾患の診断、モニタリング、予防、及び処置のための臨床業務においてその成功を強調する。
【0157】
全ての抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片配列は、米国特許出願番号１５／３６０，５４９（それが開示する抗体及び関連する組成物について参照により本明細書に組み込まれる）から参照により組み込まれる。
【0158】
ある特定の実施形態では、本開示は、重鎖（ＶＨ／ＣＨ１）及び軽鎖（ＶＬ／ＣＬ）を含むＣ１ｑタンパク質に結合する抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片であって、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片は、６つの相補性決定領域（ＣＤＲ）（３つはそれぞれＶＬ及びＶＨに由来する）（ＨＣＤＲ１、ＨＣＤＲ２、ＨＣＤＲ３、及びＬＣＤＲ１、ＬＣＤＲ２、ＬＣＤＲ３）を有する、抗Ｃ１ｑ抗体Ｆａｂ断片を提供する。抗体Ｆａｂ断片の重鎖は、ＩｇＧ１の第１の重鎖ドメインの後で切断され（配列番号３９）、以下のアミノ酸配列を含む：
【0159】
【0160】
抗体Ｆａｂ断片の軽鎖ドメインは、以下のアミノ酸配列（配列番号４０）を含む：
【0161】
【0162】
核酸、ベクター及び宿主細胞
本開示の方法において使用するのに好適な抗体は、例えば、米国特許番号４，８１６，５６７に記載されているように、組換え方法及び組成物を使用して生成され得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗Ｃ１ｑ抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び／またはＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸を含有する１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。そのような核酸を含有する宿主細胞も提供され得る。宿主細胞は、（１）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有し得る（例えば、形質導入されている）。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌である。
本開示の方法において使用するのに好適な抗体は、例えば、米国特許番号４，８１６，５６７に記載されているように、組換え方法及び組成物を使用して生成され得る。いくつかの実施形態では、本開示の抗体のいずれかをコードするヌクレオチド配列を有する単離された核酸が提供される。そのような核酸は、抗Ｃ１ｑ抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び／またはＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードし得る。いくつかの実施形態では、そのような核酸を含有する１つ以上のベクター（例えば、発現ベクター）が提供される。そのような核酸を含有する宿主細胞も提供され得る。宿主細胞は、（１）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有するベクター、または（２）抗体のＶＬ／ＣＬを含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第１のベクター及び抗体のＶＨ／ＣＨ１を含有するアミノ酸配列をコードする核酸を含有する第２のベクターを含有し得る（例えば、形質導入されている）。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、真核、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）である。いくつかの実施形態では、宿主細胞は、Ｅ．ｃｏｌｉなどの細菌である。
【0163】
抗Ｃ１ｑ抗体を作製する方法が本明細書に開示される。本方法は、抗Ｃ１ｑ抗体をコードする核酸を含有する本開示の宿主細胞を、抗体の発現に好適な条件下で培養することを含む。いくつかの実施形態では、抗体はその後、宿主細胞（または宿主細胞培地）から回収される。
【0164】
本開示のヒト化抗Ｃ１ｑ抗体の組換え生成のため、抗体をコードする核酸は単離され、宿主細胞においてさらなるクローニング及び／または発現のための１つ以上のベクターに挿入される。そのような核酸は、慣用の手順を使用して（例えば、抗体の重鎖及び軽鎖をコードする遺伝子に特異的に結合可能であるオリゴヌクレオチドプローブを使用することによって）、容易に単離され、シーケンシングされ得る。
【0165】
本開示の抗体、または本明細書に記載のその断片ポリペプチド（抗体を含む）のいずれかをコードする核酸配列を含有する好適なベクターには、限定されないが、クローニングベクター及び発現ベクターが含まれる。好適なクローニングベクターは、標準的な技術に従って構築され得、または当該技術分野で利用可能な多数のクローニングベクターから選択され得る。選択されるクローニングベクターは、使用されることが意図された宿主細胞に応じて変わり得る一方で、有用なクローニングベクターは通常、自己複製する能力を有し、特定の制限エンドヌクレアーゼのための単一の標的を保有し得、及び／またはベクターを含有するクローンを選択する際に使用され得るマーカーのための遺伝子を有し得る。好適な例には、プラスミド及び細菌ウイルス、例えば、ｐＵＣ１８、ｐＵＣ１９、Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（例えば、ｐＢＳ ＳＫ＋）及びその誘導体、ｍｐｌ８、ｍｐｌ９、ｐＢＲ３２２、ｐＭＢ９、ＣｏｌＥ１、ｐＣＲ１、ＲＰ４、ファージＤＮＡ、及びシャトルベクター、例えば、ｐＳＡ３及びｐＡＴ２８が含まれる。これらの及び多くの他のクローニングベクターがＢｉｏＲａｄ、Ｓｔｒａｔａｇｅｎｅ、及びＩｎｖｉｔｒｏｇｅｎなどの商業的ベンダーから利用可能である。
【0166】
対象となる核酸を含有するベクターは、エレクトロポレーション、塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥ－デキストラン、または他の物質を用いるトランスフェクション；微粒子銃；リポフェクション；及び感染（例えば、ベクターはワクシニアウイルスなどの感染性物質である）を含む、多数の適切な手段のいずれかによって宿主細胞に導入され得る。ベクターまたはポリヌクレオチドを導入する選択はしばしば、宿主細胞の特徴に依存する。いくつかの実施形態では、ベクターは、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体をコードする１つ以上のアミノ酸配列を含有する核酸を含有する。
【0167】
抗体をコードするベクターのクローニングまたは発現に好適な宿主細胞には、原核生物細胞または真核生物細胞が含まれる。例えば、本開示の抗Ｃ１ｑ抗体は、特にグリコシル化及びＦｃエフェクター機能が必要とされない場合、細菌において生成され得る。細菌における抗体断片及びポリペプチドの発現について（例えば、米国特許番号５，６４８，２３７、５，７８９，１９９、及び５，８４０，５２３；ならびにＣｈａｒｌｔｏｎ，Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．２４８（Ｂ．Ｋ．Ｃ．Ｌｏ，ｅｄ．，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，Ｔｏｔｏｗａ，ＮＪ，２００３），ｐｐ．２４５－２５４（Ｅ．ｃｏｌｉにおける抗体断片の発現について記載している））。他の実施形態では、本開示の抗体は、真核細胞、例えば、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞またはリンパ細胞（例えば、Ｙ０、ＮＳ０、Ｓｐ２０細胞）において生成され得る（例えば、米国特許出願番号１４／２６９，９５０、米国特許番号８，９８１，０７１、Ｅｕｒ Ｊ Ｂｉｏｃｈｅｍ．１９９１ Ｊａｎ １；１９５（１）：２３５－４２）。発現後、抗体は、可溶性画分における細菌細胞ペーストから単離され得、さらに精製され得る。
【0168】
薬学的組成物及び投与
本開示の抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、ＦａｂＡ）は、薬学的組成物の形態で投与され得る。
本開示の抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、ＦａｂＡ）は、薬学的組成物の形態で投与され得る。
【0169】
本開示の抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体の治療製剤は、所望の純度を有する抗体を任意の薬学的に許容可能な担体、賦形剤または安定化剤（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．［１９８０］）と混合することによって保存のために凍結乾燥製剤または水溶液の形態で調製され得る。許容可能な担体、賦形剤、または安定化剤は、用いられる投薬量及び濃度でレシピエントに対して非毒性であり、これには緩衝液、例えば、リン酸塩、クエン酸塩、及び他の有機酸；アスコルビン酸及びメチオニンを含む抗酸化剤；防腐剤（例えば、オクタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロリド；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；アルキルパラベン、例えば、メチルまたはプロピルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３－ペンタノール；及びｍ－クレゾール）；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；タンパク質、例えば、血清アルブミン、ゼラチン、または免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えば、ポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えば、グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリジン；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖、及び他の炭水化物；キレート剤、例えば、ＥＤＴＡ；糖類、例えば、スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトール；塩形成対イオン、例えば、ナトリウム；金属複合体（例えば、Ｚｎ－タンパク質複合体）；及び／または非イオン性界面活性剤、例えば、ＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）が含まれる。
【0170】
リポフェクションまたはリポソームもまた、抗体または抗体断片、または抗体誘導体を細胞に送達するために使用され得、標的タンパク質の結合ドメインに特異的に結合するエピトープまたは最小断片が好ましい。
【0171】
抗体はまた、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、それぞれ、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチンマイクロカプセル及びポリ－（メチルメタクリレート）マイクロカプセル内に、コロイド薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフェア、マイクロ乳濁液、ナノ粒子、及びナノカプセル）中、またはマクロ乳濁液中に取り込まれ得る。そのような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。
【0172】
投与のために使用される製剤は無菌であり得る。これは、滅菌濾過膜を介する濾過によって容易に達成される。
【0173】
持続放出調製物が調製され得る。持続放出調製物の好適な例としては、抗体を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリックスが挙げられ、これらのマトリックスは、成形物品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。持続放出マトリックスの例には、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２－ヒドロキシエチル－メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール））、ポリラクチド（米国特許番号３，７７３，９１９）、Ｌ－グルタミン酸とγエチル－Ｌ－グルタミン酸エステルのコポリマー、非分解性エチレン－酢酸ビニル、分解性乳酸－グリコール酸コポリマー、例えば、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸－グリコール酸コポリマー及び酢酸ロイプロリドから構成される注射用ミクロスフェア）、及びポリ－Ｄ－（－）－３－ヒドロキシ酪酸が含まれる。エチレン－酢酸ビニル及び乳酸－グリコール酸などのポリマーが１００日間にわたる分子の放出を可能にする一方で、ある特定のヒドロゲルは、より短い期間にわたってタンパク質を放出する。
【0174】
本開示の抗体、抗体断片及び／または抗体誘導体ならびに組成物は、典型的には硝子体投与によって投与される。
【0175】
薬学的組成物はまた、所望の製剤に応じて、動物またはヒト投与のための薬学的組成物を製剤化するために一般的に使用されるビヒクルとして定義される、希釈剤の薬学的に許容可能な非毒性担体を含み得る。希釈剤は、組み合わせの生物学的活性に影響を及ぼさないように選択される。そのような希釈剤の例は、蒸留水、緩衝水、生理的生理食塩水、ＰＢＳ、リンゲル液、デキストロース溶液、及びハンクス溶液である。また、薬学的組成物または製剤は、他の担体、アジュバント、または非毒性、非治療性、非免疫原性安定化剤、賦形剤などを含み得る。組成物はまた、おおよその生理的条件のための追加の物質、例えば、ｐＨ調整及び緩衝剤、毒性調整剤、湿潤剤及び洗浄剤を含み得る。
【0176】
組成物はまた、例えば、抗酸化剤などの多様な安定化剤のいずれかを含み得る。薬学的組成物がポリペプチドを含む場合、ポリペプチドは、ポリペプチドのインビボ安定性を向上させるか、またはそうでなければその薬理学的特性を向上させる（例えば、ポリペプチドの半減期を増加させる、その毒性を低下させる、他の薬物動態及び／または薬力学的特性を向上させる、または溶解性または取り込みを向上させる）様々なよく知られている化合物と複合体化され得る。そのような改変または錯化剤の例には、スルフェート、グルコネート、シトレート及びホスフェートが含まれる。組成物のポリペプチドはまた、それらのインビボ属性を向上させる分子と複合体化され得る。そのような分子には、例えば、炭水化物、ポリアミン、アミノ酸、他のペプチド、イオン（例えば、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン）、及び脂質が含まれる。様々なタイプの投与に好適な製剤に関するさらなる指針は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｍａｃｅ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ，Ｐａ．，１７ｔｈ ｅｄ．（１９８５）で見ることができる。薬物送達のための方法の簡潔なレビューについては、Ｌａｎｇｅｒ，Ｓｃｉｅｎｃｅ ２４９：１５２７－１５３３（１９９０）を参照。
【0177】
活性成分の毒性及び治療的有効性は、例えば、ＬＤ５０（集団の５０％に対して致死的な投与量）及びＥＤ５０（集団の５０％において治療的に有効な投与量）を決定することを含む、細胞培養及び／または実験動物における標準的な薬学的手順に従って決定され得る。毒性と治療効果との間の投与量比は治療指数であり、それは比ＬＤ５０／ＥＤ５０として表され得る。高い治療指数を示す化合物が好ましい。
【0178】
細胞培養及び／または動物研究及び／またはヒト臨床試験から得られたデータは、ヒトのための投薬量の範囲を策定する際に使用され得る。活性成分の投薬量は典型的には、低い毒性でＥＤ５０を含む循環濃度の範囲内に収まる。投薬量は、用いられる投薬形態及び利用される投与経路に応じてこの範囲内で変わり得る。
【0179】
薬学的組成物を製剤化するために使用される成分は、好ましくは、高純度のものであり、潜在的に有害な混入物質を実質的に含まない（例えば、少なくとも国の食品（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｏｄ）グレード、通常は少なくとも分析グレード、より典型的には少なくとも薬学的グレード）。さらに、非経口的使用のために意図される組成物は通常、無菌である。所与の化合物が使用前に合成されなければならない限り、得られる生成物は、合成または精製プロセスの間に存在し得る任意の潜在的に毒性の物質、特に任意のエンドトキシンは典型的には実質的に含まれない。非経口投与のための組成物もまた、典型的には実質的に等張性であり、ＧＭＰ条件下で生成される。
【0180】
本開示の組成物は、任意の医学的に適切な手順、例えば硝子体注射を用いて、投与されてよい。
【0181】
治療方法
本開示は、概して、ヒト患者における眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法を対象とする。そのような方法は、患者に、硝子体注射を介して、約１ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇまたは約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体）を含む組成物を投与することを含む。そのような方法はまた、患者に、約１ｍｇ～約１０ｍｇ（例えば、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇまたは約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体）の抗Ｃ１ｑ抗体を含む組成物を、硝子体注射を介して投与することを含み、上記抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。投与される組成物は、約１ｍｇ～約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１ｍｇ～約２．５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約５ｍｇ、約５ｍｇ～約７．５ｍｇ、または約７．５ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインであって、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインであって、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、抗体断片またはそれらの抗体誘導体であってよい。抗体断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディまたは一本鎖抗体分子であってよい。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ断片は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む。
本開示は、概して、ヒト患者における眼の疾患（例えば、緑内障または、地図状萎縮を含むＡＭＤなどの加齢黄斑変性症）を予防する、発生リスクを低減する、または治療する組成物及び方法を対象とする。そのような方法は、患者に、硝子体注射を介して、約１ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体（例えば、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇまたは約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体）を含む組成物を投与することを含む。そのような方法はまた、患者に、約１ｍｇ～約１０ｍｇ（例えば、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇまたは約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体）の抗Ｃ１ｑ抗体を含む組成物を、硝子体注射を介して投与することを含み、上記抗体は、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。投与される組成物は、約１ｍｇ～約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１ｍｇ～約２．５ｍｇ、約２．５ｍｇ～約５ｍｇ、約５ｍｇ～約７．５ｍｇ、または約７．５ｍｇ～約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約５ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。投与される組成物は、約１０ｍｇの抗Ｃ１ｑ抗体を含んでよい。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインを含み、軽鎖可変ドメインは、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む。いくつかの実施形態では、軽鎖可変ドメインは、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインを含み、重鎖可変ドメインは、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む。いくつかの実施形態では、重鎖可変ドメインは、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインであって、配列番号５のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｌ１、配列番号６のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ２、及び配列番号７のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｌ３を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列と少なくとも約９５％の相同性を有するアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインであって、配列番号９のアミノ酸配列を有するＨＶＲ－Ｈ１、配列番号１０のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ２、及び配列番号１１のアミノ酸を有するＨＶＲ－Ｈ３を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、配列番号４及び３５～３８から選択されるアミノ酸配列を含む軽鎖可変ドメインと、配列番号８及び３１～３４から選択されるアミノ酸配列を含む重鎖可変ドメインと、を含む。いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、抗体断片またはそれらの抗体誘導体であってよい。抗体断片は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディまたは一本鎖抗体分子であってよい。いくつかの実施形態では、Ｆａｂ断片は、配列番号３９の重鎖Ｆａｂ断片及び配列番号４０の軽鎖Ｆａｂ断片を含む。
【0182】
いくつかの実施形態では、抗体は、１週間に１回、隔週毎に１回、３週間毎に１回、１ヵ月に１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、８週間毎に１回、隔月毎に１回、１０週間毎に１回、１２週間毎に１回、３ヵ月毎に１回、または４ヵ月毎に１回投与される。いくつかの実施形態では、抗体は、少なくとも６ヵ月間、少なくとも７ヵ月間、少なくとも８ヵ月間、少なくとも９ヵ月間、少なくとも１０ヵ月間、少なくとも１１ヵ月間または少なくとも１２ヵ月間投与される。
【0183】
いくつかの実施形態では、眼の疾患は、緑内障、または地図状萎縮などの加齢黄斑変性症である。
【0184】
特定の好ましい実施形態では、ＦａｂＡは、２．５ｍｇ／眼の投与量で、毎月１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、または隔月毎に１回、ＩＶＴ注射として投与される。
【0185】
特定の好ましい実施形態では、ＦａｂＡは、５ｍｇ／眼の投与量で、毎月１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、または隔月毎に、ＩＶＴ注射として投与される。
【0186】
特定の好ましい実施形態では、ＦａｂＡは、５ｍｇ／眼の投与量で、毎月１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、または隔月毎に１回、ＩＶＴ注射として投与される。
【0187】
特定の好ましい実施形態では、ＦａｂＡは、１０ｍｇ／眼の投与量で、毎月１回、４週間毎に１回、６週間毎に１回、または隔月毎に１回、ＩＶＴ注射として投与される。
【0188】
ＦａｂＡの注射は、ＩＶＴ注射を実行する訓練を行い、資格を得た医師が、無菌技術を使用して完了する。
【0189】
抗Ｃ１ｑ抗体は、Ｃ１ｑと自己抗体との間またはＣ１ｑとＣ１ｒとの間、またはＣ１ｑとＣ１ｓとの間の相互作用を阻害し得、または循環もしくは組織からのＣ１ｑのクリアランスを促進し得る。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、１００ｎＭ～０．００５ｎＭまたは０．００５ｎＭ未満の範囲の解離定数（ＫＤ）を有する。いくつかの実施形態では、抗Ｃ１ｑ抗体は、２０：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論、６：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論、または２．５：１～１．０：１または１．０：１未満の範囲の結合化学量論でＣ１ｑに結合する。
【0190】
本方法は、Ｃ１ｑの生物学的活性を阻害する。例えば、（１）自己抗体に対するＣ１ｑ結合、（２）Ｃ１ｒに対するＣ１ｑ結合、（３）Ｃ１ｓに対するＣ１ｑ結合、（４）ホスファチジルセリンに対するＣ１ｑ結合、（５）ペントラキシン－３に対するＣ１ｑ結合、（６）Ｃ反応性タンパク質（ＣＲＰ）に対するＣ１ｑ結合、（７）球状Ｃ１ｑ受容体（ｇＣ１ｑＲ）に対するＣ１ｑ結合、（８）補体受容体１（ＣＲ１）に対するＣ１ｑ結合、（９）Ｂアミロイドに対するＣ１ｑ結合、または（１０）カルレチキュリンに対するＣ１ｑ結合である。他の実施形態では、Ｃ１ｑの生物学的活性は、（１）古典的補体活性化経路の活性化、（２）溶解の減少及び／またはＣ３沈着の減少、（３）抗体及び補体依存性細胞傷害の活性化、（４）ＣＨ５０溶血、（５）赤血球溶解の減少、（６）赤血球貪食の減少、（７）樹状細胞浸潤の減少、（８）補体媒介性赤血球溶解の阻害、（９）リンパ球浸潤の減少、（１０）マクロファージ浸潤の減少、（１１）抗体沈着の減少、（１２）好中球浸潤の減少、（１３）血小板貪食の減少、（１４）血小板溶解の減少、（１５）移植片生存の改善、（１６）マクロファージ媒介性貪食の減少、（１７）自己抗体媒介性補体活性化の減少、（１８）輸血反応による赤血球破壊の減少、（１９）同種抗体による赤血球溶解の減少、（２０）輸血反応による溶血の減少、（２１）同種抗体媒介性血小板溶解の減少、（２２）貧血の改善、（２３）好酸球増多症の減少、（２４）赤血球上のＣ３沈着の減少（例えば、ＲＢＣ上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２５）血小板上のＣ３沈着の減少（例えば、血小板上のＣ３ｂ、ｉＣ３ｂなどの沈着の減少）、（２６）アナフィラトキシン生成の減少、（２７）自己抗体媒介性発疹形成の減少、（２８）自己抗体誘導性エリテマトーデスの減少、（２９）輸血反応による赤血球破壊の減少、（３０）輸血反応による血小板溶解の減少、（３１）肥満細胞活性化の減少、（３２）肥満細胞ヒスタミン放出の減少、（３３）血管透過性の減少、（３４）移植片内皮上の補体沈着の減少、（３５）Ｂ細胞抗体生成、（３６）樹状細胞成熟、（３７）Ｔ細胞増殖、（３８）サイトカイン生成、（３９）ミクログリア活性化、（４０）アルツス反応、（４１）移植片内皮におけるアナフィラトキシン生成の減少、または（４２）補体受容体３（ＣＲ３／Ｃ３）発現細胞の活性化である。
【0191】
いくつかの実施形態では、ＣＨ５０溶血は、ヒトＣＨ５０溶血を含む。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の少なくとも約５０％～約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、ヒトＣＨ５０溶血の約５０％、約６０％、約７０％、約８０％、約９０％、約１００％を中和することが可能であり得る。抗体は、１５０ｎｇ／ｍｌ未満、１００ｎｇ／ｍｌ未満、５０ｎｇ／ｍｌ未満、または２０ｎｇ／ｍｌ未満の投与量でＣＨ５０溶血の少なくとも５０％を中和することが可能であり得る。
【0192】
いくつかの実施形態では、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、組換え抗体、ヒト化抗体、ヒト抗体、キメラ抗体、一価抗体、多重特異性抗体、もしくは抗体断片、またはその抗体誘導体である。いくつかの実施形態では、抗体は、ヒト化抗体である。いくつかの実施形態では、抗体は、Ｆａｂ断片などの抗体断片である。抗体断片の例は、Ｆａｂ断片、Ｆａｂ’断片、Ｆ（ａｂ’）２断片、Ｆｖ断片、ダイアボディ、及び一本鎖抗体分子である。
【0193】
組成物は、インビボ使用のために医師の指導の下で得られ、使用され得ることが企図される。治療製剤の投薬量は、疾患の特質、投与の頻度、投与の様式、宿主からの薬剤のクリアランスなどに応じて広く変わり得る。
【0194】
本明細書で使用される場合、「慢性投与される」、「慢性処置」、「慢性的に処置すること」、またはその類似する文法的類型は、長期間にわたって患者における全身性補体活性を完全にまたは実質的に抑制するために、患者の眼における治療剤の所定閾値濃度を維持するために用いられる処置レジメンを指す。したがって、抗体で慢性的に処置される患者は、２週以上（例えば、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、または５２週；１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、または１２ヵ月；または１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、５．５、６、６．５、７、７．５、８、８．５、９、９．５、１０、１０．５、または１２年または患者の人生の残りの間）の期間、患者における全身性補体活性を阻害するまたは実質的に阻害する患者の眼における抗体の濃度を維持するのに十分な量の抗体及び投薬頻度で処置され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、２０％以下（例えば、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、またはさらに５％未満）で血清溶血活性を維持するのに有効な量及び頻度でそれを必要とする患者に慢性投与され得る。いくつかの実施形態では、抗体は、ＬＤＨについて正常な範囲の少なくとも２０％以内（例えば、１９、１８、１７、１６、１５、１４、１３、１２、１１、１０、９、８、７、６、またはさらに５％未満）で血清乳酸脱水素酵素（ＬＤＨ）レベルを維持するのに有効な量及び頻度で患者に投与され得る。
【0195】
治療剤、例えば抗Ｃ１ｑ抗体は、適切な、薬学的に許容可能な担体または希釈剤と組み合わせることによって、治療的投与のための種々の製剤中に組み込むことができる。
【実施例】
【0196】
実施例１：非臨床試験におけるＦａｂＡの評価
ＦａｂＡ医薬品は、ＩＶＴ注射用の無菌等張液である。
ＦａｂＡ医薬品は、ＩＶＴ注射用の無菌等張液である。
【0197】
ＦａｂＡは、ＩＶＴ注射用の無菌単回投与バイアルとして提供する。
【0198】
ＦａｂＡを用いて、広範囲にわたる一連のインビトロ及びインビボ薬理学試験を実施した。
【0199】
抗体Ｍａｂ１、Ｍａｂ１－Ｆａｂ及びＭａｂ２は、急性の緑内障マウスモデルにおいて活性であり、網膜神経節細胞及び／または神経線維を欠損から保護した。光酸化光誘発損傷モデルのマウスでは、硝子体内に投与したＭａｂ１は、眼内における視細胞欠損及び網膜の機能的結合性に対する保護効果があった。
【0200】
ＦａｂＡのＧＬＰ試験は、単回投与ラット眼毒性試験、及び３回の反復投与カニクイザル眼毒性試験からなる。毒性試験のための投与経路は、ＩＶＴ注射であった。単回投与及び２回投与（毎月１回）のＩＶＴ ＧＬＰ試験において、カニクイザルにおける毎月１回、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）、及び単回投与ラット試験における０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の無毒性量（ＮＯＡＥＬ）では、ＦａｂＡは有害な眼毒性の根拠を示していない。カニクイザルにおける２６週間慢性眼毒性試験では、有害な眼の変化を、２回の注射手順と関連付け、及び／または抗薬剤抗体（ＡＤＡ）媒介のものであり、ＦａｂＡ ＩＶＴ投与の直接的な作用ではないと決定した。
【0201】
ラット及びカニクイザルの血清及び硝子体におけるＦａｂＡの薬動力学評価を実施した。硝子体内のＣ１ｑ濃度を、サルにおけるＦａｂＡのＣ１ｑ阻害のＰＤマーカーとして測定した。サルにおけるＰＫ／ＰＤ試験及びＴＫ／ＰＤ試験により、硝子体におけるＦａｂＡ薬剤曝露レベルと一致して、確固たる眼へのＰＤ作用が示された。
【0202】
ＦａｂＡ及び前駆体分子の、ヒトＣ１ｑへの結合及び親和性
ＦａｂＡ及び前駆体分子の、Ｃ１ｑへの結合親和性も、ＥＬＩＳＡによって調査した。全ての分子（Ｍａｂ２－Ｆａｂ、ＦａｂＡ、及びＭａｂ２、Ｍａｂ１及びＭａｂ１－Ｆａｂ）は、ヒトＣ１ｑに対する親和性を示し、２．２～４．９ｎｇ／ｍＬ（２０～９５ｐＭ）の範囲の５０％効果濃度（ＥＣ５０）を有した。Ｃ１ｑへのＦａｂＡ結合のＥＣ５０は、２．５ｎｇ／ｍＬである。
ＦａｂＡ及び前駆体分子の、Ｃ１ｑへの結合親和性も、ＥＬＩＳＡによって調査した。全ての分子（Ｍａｂ２－Ｆａｂ、ＦａｂＡ、及びＭａｂ２、Ｍａｂ１及びＭａｂ１－Ｆａｂ）は、ヒトＣ１ｑに対する親和性を示し、２．２～４．９ｎｇ／ｍＬ（２０～９５ｐＭ）の範囲の５０％効果濃度（ＥＣ５０）を有した。Ｃ１ｑへのＦａｂＡ結合のＥＣ５０は、２．５ｎｇ／ｍＬである。
【0203】
ＩｇＭ媒介性赤血球溶血への作用
ヒト血清中のＩｇＭによりオプソニン化したＲＢＣの古典的補体依存の溶血を機能的に阻害するＦａｂＡ、Ｍａｂ２及びＭａｂ２－Ｆａｂの活性を測定した（図３）。３分子はほとんど同一の力価を示し、これは同等の結合親和性と一致している。ＩｇＭ被覆ＲＢＣ溶血に対する、ＦａｂＡ阻害の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、０．６２μｇ／ｍＬ（約１２ｎｍ）である。
ヒト血清中のＩｇＭによりオプソニン化したＲＢＣの古典的補体依存の溶血を機能的に阻害するＦａｂＡ、Ｍａｂ２及びＭａｂ２－Ｆａｂの活性を測定した（図３）。３分子はほとんど同一の力価を示し、これは同等の結合親和性と一致している。ＩｇＭ被覆ＲＢＣ溶血に対する、ＦａｂＡ阻害の５０％阻害濃度（ＩＣ５０）は、０．６２μｇ／ｍＬ（約１２ｎｍ）である。
【0204】
インビボ薬理学試験
急性の緑内障マウスモデルにおける、抗Ｃ１ｑ抗体処置の視覚神経損傷予防
マウスにおいて、前眼房内へのポリスチレンビーズの注射によって、２週間にわたって、ＩＯＰの急上昇、網膜の神経節細胞の欠損、及び視神経損傷を引き起こす。ＩＯＰ上昇の前日及び７日後に、マウスに、Ｍａｂ１、Ｍａｂ１－Ｆａｂ及びＭａｂ２を硝子体投与した。各時点で、２μＬの１０ｍｇ／ｍＬ抗体、または生理食塩水を投与した。マウスの眼の５～１０μｌの硝子体体積を基準として、抗体の濃度は、２０００～４０００μｇ／ｍＬであった。損傷後２週間で視神経を収集し、無傷の軸索、及び損傷を受けた軸索の数を定量化した。抗Ｃ１ｑ抗体処置は、この緑内障誘発マウスモデルにおいて、ＲＧＣ欠損及び／または網膜の神経線維損傷に対する保護をもたらした（図４）。
急性の緑内障マウスモデルにおける、抗Ｃ１ｑ抗体処置の視覚神経損傷予防
マウスにおいて、前眼房内へのポリスチレンビーズの注射によって、２週間にわたって、ＩＯＰの急上昇、網膜の神経節細胞の欠損、及び視神経損傷を引き起こす。ＩＯＰ上昇の前日及び７日後に、マウスに、Ｍａｂ１、Ｍａｂ１－Ｆａｂ及びＭａｂ２を硝子体投与した。各時点で、２μＬの１０ｍｇ／ｍＬ抗体、または生理食塩水を投与した。マウスの眼の５～１０μｌの硝子体体積を基準として、抗体の濃度は、２０００～４０００μｇ／ｍＬであった。損傷後２週間で視神経を収集し、無傷の軸索、及び損傷を受けた軸索の数を定量化した。抗Ｃ１ｑ抗体処置は、この緑内障誘発マウスモデルにおいて、ＲＧＣ欠損及び／または網膜の神経線維損傷に対する保護をもたらした（図４）。
【0205】
光酸化光誘発損傷モデルにおける、抗Ｃ１ｑ抗体処置の視細胞損傷からの保護
マウスを、天然白色ＬＥＤの１００Ｋｌｕｘに１～７日間曝露したとき、光酸化損傷により網膜の視細胞欠損がもたらされた。このモデルでは、視細胞死及びミクログリア／マクロファージリクルートメントと相関する、３～７日にわたる時間依存的なＣ１ｑａ遺伝子発現の増大があった。Ｃ１ｑａ－／－マウスは、光損傷誘発の７日後には示さなかったが、１４日後の時点で、より少ない視細胞死、視細胞損傷に対するミクログリア／マクロファージリクルートメントの低下、及びより高い視覚機能を示した。光損傷後７日目におけるＭａｂ１抗体のＩＶＴ投与は、網膜電図（図５）で測定したように、視細胞欠損を減少させ、網膜機能を維持した。マウスに７．５ｍｇ／ｍＬの抗体１μＬを投与した。これは硝子体内での７５０～１５００ｕｇ／ｍＬの濃度に相当する。これに対して、０、４及び８日目における、１００ｍｇ／ｋｇでのＭａｂ１の全身送達は、視細胞の欠損または機能に効果がなかった。網膜Ｃ１ｑは、初期のＡＭＤにおける外側の網膜、及びマウス網膜に位置する網膜下のミクログリア／マクロファージによって主に発現した。したがって、抗Ｃ１ｑ抗体による保護は、ヒト疾患のＧＡの病因における、視細胞損傷及び古典的補体カスケードの開始についてのＣ１ｑの明確な役割を示唆している。
マウスを、天然白色ＬＥＤの１００Ｋｌｕｘに１～７日間曝露したとき、光酸化損傷により網膜の視細胞欠損がもたらされた。このモデルでは、視細胞死及びミクログリア／マクロファージリクルートメントと相関する、３～７日にわたる時間依存的なＣ１ｑａ遺伝子発現の増大があった。Ｃ１ｑａ－／－マウスは、光損傷誘発の７日後には示さなかったが、１４日後の時点で、より少ない視細胞死、視細胞損傷に対するミクログリア／マクロファージリクルートメントの低下、及びより高い視覚機能を示した。光損傷後７日目におけるＭａｂ１抗体のＩＶＴ投与は、網膜電図（図５）で測定したように、視細胞欠損を減少させ、網膜機能を維持した。マウスに７．５ｍｇ／ｍＬの抗体１μＬを投与した。これは硝子体内での７５０～１５００ｕｇ／ｍＬの濃度に相当する。これに対して、０、４及び８日目における、１００ｍｇ／ｋｇでのＭａｂ１の全身送達は、視細胞の欠損または機能に効果がなかった。網膜Ｃ１ｑは、初期のＡＭＤにおける外側の網膜、及びマウス網膜に位置する網膜下のミクログリア／マクロファージによって主に発現した。したがって、抗Ｃ１ｑ抗体による保護は、ヒト疾患のＧＡの病因における、視細胞損傷及び古典的補体カスケードの開始についてのＣ１ｑの明確な役割を示唆している。
【0206】
安全性薬理学
２６週間のカニクイザルへの、慢性ＩＶＴ投与に続く全身曝露は、８６．３ｎｇ／ｍＬを超えず、一方で２６週間のカニクイザル試験における、毎週１回のＩＶ投与による同一ＣＤＲを有するＭａｂ２の全身曝露は、２００ｍｇ／ｋｇのＮＯＡＥＬで１ｍｇ／ｍＬを超えた。
２６週間のカニクイザルへの、慢性ＩＶＴ投与に続く全身曝露は、８６．３ｎｇ／ｍＬを超えず、一方で２６週間のカニクイザル試験における、毎週１回のＩＶ投与による同一ＣＤＲを有するＭａｂ２の全身曝露は、２００ｍｇ／ｋｇのＮＯＡＥＬで１ｍｇ／ｍＬを超えた。
【0207】
したがって、ＩＶ投与後の全長抗体、Ｍａｂ２の安全性薬理学エンドポイントは、サルでの４週間反復投与ＧＬＰ毒性試験において毎週最大２００ｍｇ／ｋｇ、及びサルでの２６週間反復投与毒性試験において毎週最大２００ｍｇ／ｋｇであり、心臓血管系、呼吸器系、または神経系エンドポイントへの治療関連作用の根拠はなく、ＩＶＴ投与したＦａｂＡの全身安全性を裏付けた。
【0208】
さらに、ＳＣ投与後のＦａｂＡの安全性薬理学エンドポイントは、サルでの４週間反復投与ＧＬＰ毒性試験において毎日最大２０ｍｇ／ｋｇであり、心臓血管系、呼吸器系、または神経系エンドポイントへの治療関連作用の根拠はなく、ＩＶＴ投与したＦａｂＡの全身安全性を裏付けた。
【0209】
動物における薬物動態
ＦａｂＡのＰＫ、ＴＫ及びＰＤを特性決定するように設計した非臨床試験を、ラット及びカニクイザルにおいて実施した。これらの試験には、ＦａｂＡを用いた、ラット及びカニクイザルにおける単回投与ＩＶＴ ＰＫ試験と、カニクイザルにおける反復投与ＴＫ／ＰＤ試験とが含まれる。より大規模なＴＫ／ＰＤ試験をサルにおいて実施し、ラットまたはサルのいずれの単回投与試験においても眼毒性はなかった。
ＦａｂＡのＰＫ、ＴＫ及びＰＤを特性決定するように設計した非臨床試験を、ラット及びカニクイザルにおいて実施した。これらの試験には、ＦａｂＡを用いた、ラット及びカニクイザルにおける単回投与ＩＶＴ ＰＫ試験と、カニクイザルにおける反復投与ＴＫ／ＰＤ試験とが含まれる。より大規模なＴＫ／ＰＤ試験をサルにおいて実施し、ラットまたはサルのいずれの単回投与試験においても眼毒性はなかった。
【0210】
薬物動態／毒物動態／薬力学分析
硝子体内のＦａｂＡの薬物動態
ラットに、０．０１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、または０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、両側のＩＶＴにＦａｂＡを単回投与し、その後、両方の投与量レベルで、薬剤は、約１２時間の半減期と一致して硝子体から比較的早く排除された。カニクイザルでも両側のＩＶＴにＦａｂＡを投与した。薬剤は、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の両方の投与群で、約３日の半減期を伴い、ラットと比較してゆっくりと硝子体から分配された。
硝子体内のＦａｂＡの薬物動態
ラットに、０．０１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、または０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、両側のＩＶＴにＦａｂＡを単回投与し、その後、両方の投与量レベルで、薬剤は、約１２時間の半減期と一致して硝子体から比較的早く排除された。カニクイザルでも両側のＩＶＴにＦａｂＡを投与した。薬剤は、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の両方の投与群で、約３日の半減期を伴い、ラットと比較してゆっくりと硝子体から分配された。
【0211】
両方の種において、ＦａｂＡのＩＶＴ ＰＫは、投与量に対して線形であった。ＦａｂＡを、１．０ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、または５．０ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、２８日の期間にわたって２回投与した、カニクイザルにおける眼毒性試験からのデータは、屠殺時（すなわち、２回目の投与後１５日及び３０日）の硝子体濃度が、単回ＩＶＴ投与からのデータと通常一致していたことを示している。
【0212】
ＦａｂＡを、毎月２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、毎月５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）、または隔週で５ｍｇ／眼（いずれの５ｍｇ／眼の投与量も、その後２．５ｍｇ／眼に減らし、５／２．５ｍｇ／眼と称する）でＩＶＴに投薬したカニクイザルにおける２６週間慢性眼毒性試験では、硝子体液ＦａｂＡ濃度は、１６９日目を通してＦａｂＡを受けた全ての動物では、１８４日目に定量化可能であり、全ての動物において、１０週間の投与のない回復期間後の２４２／２４３日目には、定量化限界（ＢＱＬ）より低かった。硝子体液ＦａｂＡ濃度は、高い変動性を示し、投与群間または性別間で明確な差または傾向はなかった。
【0213】
血清中のＦａｂＡの薬物動態
単回ＩＶＴ投与後、血清濃度は硝子体液濃度よりもはるかに低く、Ｃｍａｘ血清／Ｃｍａｘ硝子体は、ラットにおいて約０．００３、カニクイザルにおいて０．０００００１であった。２８日の期間にわたって両側のＩＶＴにＦａｂＡを２回投与したカニクイザルでは、血清濃度は低く、最も高い平均値ピーク濃度（Ｃｍａｘ）は１０．１ｎｇ／ｍＬであり、それは２回目の５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のＩＶＴ投与後に観察された。ＦａｂＡが硝子体から血清コンパートメントに分配されるとき、ＦａｂＡは、Ｃ１ｑに結合する、または遊離形態のままでアッセイで定量化可能であることができ、１ｍｇ／眼群では定量化できない（すなわち、＜１．２５ｎｇ／ｍＬ）、ならびに２．５及び５．０ｍｇ／眼の群ではそれぞれ３．３及び１０．１ｎｇ／ｍＬの平均Ｃｍａｘである、低いＦａｂＡ血清濃度をもたらす。
単回ＩＶＴ投与後、血清濃度は硝子体液濃度よりもはるかに低く、Ｃｍａｘ血清／Ｃｍａｘ硝子体は、ラットにおいて約０．００３、カニクイザルにおいて０．０００００１であった。２８日の期間にわたって両側のＩＶＴにＦａｂＡを２回投与したカニクイザルでは、血清濃度は低く、最も高い平均値ピーク濃度（Ｃｍａｘ）は１０．１ｎｇ／ｍＬであり、それは２回目の５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のＩＶＴ投与後に観察された。ＦａｂＡが硝子体から血清コンパートメントに分配されるとき、ＦａｂＡは、Ｃ１ｑに結合する、または遊離形態のままでアッセイで定量化可能であることができ、１ｍｇ／眼群では定量化できない（すなわち、＜１．２５ｎｇ／ｍＬ）、ならびに２．５及び５．０ｍｇ／眼の群ではそれぞれ３．３及び１０．１ｎｇ／ｍＬの平均Ｃｍａｘである、低いＦａｂＡ血清濃度をもたらす。
【0214】
これに対して、１０ｍｇ／ｋｇの投与量でのＦａｂＡのＩＶ投与後には、試験した２匹のカニクイザルで、ＦａｂＡ最大濃度は１３８００及び１７０００ｎｇ／ｍＬであり、濃度はその後、Ｆａｂ断片で予期したように、約２時間の半減期と一致して極めて迅速に低下した。
【0215】
４週間にわたって週１回、２００ｍｇ／ｋｇの投与量でＭａｂ２の全身ＩＶ投与を行った後に対して、２８日の期間にわたって２回の両側のＩＶＴ投与（５ｍｇ／眼）後の血清ＦａｂＡ濃度を比較すると、ＦａｂＡ血清曝露は著しく低かった（０．０００００７０１のＦａｂＡ／Ｍａｂ２のＣｍａｘ比率）。
【0216】
カニクイザルにおける２６週間の慢性眼毒性試験では、ＦａｂＡを、毎月２．５ｍｇ／眼、毎月５／２．５ｍｇ／眼、または隔月で５／２．５ｍｇ／眼の投与量でＩＶＴに投薬した。血清中のＦａｂＡ全身性曝露は低く、局所的投与経路と一致した。８５日目のＦａｂＡ血清濃度は８６．３ｎｇ／ｍＬを超えず、最後の投与後の１６９日目においては、ＦａｂＡ血清濃度は６０．８ｎｇ／ｍＬを超えなかった。投与量レベル／レジメン及び評価日を問わず、投与後２４～４８時間で最大血清ＦａｂＡ濃度を観察した。血清中のＦａｂＡの半減期（Ｔ１／２）値は、隔週５／２．５ｍｇ／眼の投与群の動物における少数の例においてのみ算出可能／報告可能であり、全ての評価日で４９．９～１４３時間の範囲であり、眼の腔から血清への分配の可能性を表している。２．５ｍｇ／眼での毎月の反復ＩＶＴ投与では、血清中のＦａｂＡの蓄積はほとんどなかった。しかしこの群では、１日目以降の後続の各評価日に、算出可能なＦａｂＡ血清濃度が上昇した。その他のどの群においても、５７日目以降に投与量レベルを変化させるために、１日目からの蓄積を決定できなかった。１６９日目／８５日目の時間「ｔ」に対する曲線下面積（ＡＵＣ［０－ｔ］）比率は、毎月１回の５／２．５ｍｇ／眼を投与した雄及び雌では０．０４０７～０．６６４の範囲であり、隔週の５／２．５ｍｇ／眼を投与した雄及び雌では０．１３２～７．１５の範囲であった。カニクイザルにおける慢性２６週間投与後のＦａｂＡ及びＭａｂ２の性別を合わせた平均全身性曝露を比較するとき、隔週５／２．５ｍｇ／眼での両側のＩＶＴ投与後のＦａｂＡ曝露ＡＵＣ０－ｔ（１，２３０ｈｒ＊ｎｇ／ｍＬまたは１．２３ｈｒ＊μｇ／ｍＬ）は、Ｍａｂ２の毎週１回の全身性ＩＶ投与後に得られた、２００ｍｇ／ｋｇのＡＵＣ０－ｔ（３，１５０，０００ｈｒ＊μｇ／ｍＬ）と比較して、ＦａｂＡ血清曝露は著しく低かった（０．０００００００７３のＦａｂＡ／Ｍａｂ２のＣｍａｘ比率、０．００００００３９のＡＵＣ０－ｔ比率）。
【0217】
眼のＣ１ｑの薬力学
対照動物における平均硝子体遊離Ｃ１ｑ濃度は、４０．３ｎｇ／ｍＬであり、一方で１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、または５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のいずれかのＦａｂＡのＩＶＴ単回投与を受けたカニクイザルの硝子体では、遊離Ｃ１ｑ濃度は、試験期間（３０日）の間、検出限界（＜１．９５３ｎｇ／ｍＬ）より低く、完全なＣ１ｑ抑制を示した。ＦａｂＡを、合計２回の投与で２８日毎に受けたサルでは、２回目の投与後、３種の投与量（すなわち、１、２．５及び５ｍｇ／眼を２８日毎に２回投与）全てにおいて、Ｃ１ｑは１５日間抑制されたままであった。２回目のＦａｂＡ投与の３０日後、Ｃ１ｑは、全ての眼ではないが、一部の眼で検出限界より低いままであった。
対照動物における平均硝子体遊離Ｃ１ｑ濃度は、４０．３ｎｇ／ｍＬであり、一方で１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、または５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のいずれかのＦａｂＡのＩＶＴ単回投与を受けたカニクイザルの硝子体では、遊離Ｃ１ｑ濃度は、試験期間（３０日）の間、検出限界（＜１．９５３ｎｇ／ｍＬ）より低く、完全なＣ１ｑ抑制を示した。ＦａｂＡを、合計２回の投与で２８日毎に受けたサルでは、２回目の投与後、３種の投与量（すなわち、１、２．５及び５ｍｇ／眼を２８日毎に２回投与）全てにおいて、Ｃ１ｑは１５日間抑制されたままであった。２回目のＦａｂＡ投与の３０日後、Ｃ１ｑは、全ての眼ではないが、一部の眼で検出限界より低いままであった。
【0218】
２回目の５ｍｇ／眼のＩＶＴ投与の１５日後、Ｃ１ｑの＞８０％は、網膜、脈絡膜及び視神経乳頭内のＦａｂＡに結合していた。２回目の５ｍｇ／眼の投与の３０日後、Ｃ１ｑは、網膜及び脈絡膜においてのみ抑制されたままであった。
【0219】
カニクイザルにおける２６週間の慢性眼毒性試験では、ＦａｂＡを、毎月２．５ｍｇ／眼、毎月５／２．５ｍｇ／眼、または隔週５／２．５ｍｇ／眼でＩＶＴに投薬した。ＦａｂＡを受けた全ての群において、屠殺剖検で硝子体液Ｃ１ｑ濃度の低下があった。投与の休みを設けた及び／または１０週間の投与のない回復期間後の動物はそれぞれ、屠殺剖検及び回復後の剖検で、硝子体液Ｃ１ｑ濃度が回復し、対照群と同等だった。
【0220】
血清Ｃ１ｑ及び血清溶血の阻害
カニクイザルへの５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の両側のＩＶＴ投与後に、Ｃ１ｑ依存性血清溶血は約５０～８０％阻害され、１回目のＩＶＴ投与後、約２４～４８時間持続し、２回目のＦａｂＡ投与後、最大９６時間持続し、その後ベースラインに戻った。
カニクイザルへの５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の両側のＩＶＴ投与後に、Ｃ１ｑ依存性血清溶血は約５０～８０％阻害され、１回目のＩＶＴ投与後、約２４～４８時間持続し、２回目のＦａｂＡ投与後、最大９６時間持続し、その後ベースラインに戻った。
【0221】
カニクイザルへの１０ｍｇ／ｋｇの単回ＩＶ投与後、１時間で、最大のＣ１ｑ依存性血清溶血の阻害に達した。最大阻害は約２４時間維持され、ＦａｂＡ投与の１２０時間後、ベースラインに戻った。無血清Ｃ１ｑも迅速に減少したが、１２０時間までにベースライン値に戻らず、それにより、一部のＦａｂＡは、この時間枠を通じて循環しているＣ１ｑに結合したままだったことが示唆される。
【0222】
毒性学
ＦａｂＡの安全性は、臨床試験におけるＩＶＴ投与用のＦａｂＡ使用を裏付けるように設計された、包括的な非臨床的眼毒性学プログラムによって裏付けされる。ラット及びカニクイザルで、ＦａｂＡを用いた初回の単回投与試験を実施し、これらの種のいずれにおいても眼毒性は観察されなかった。ラット及びサルでの同様の所見、及びインビトロ薬理学データ、サルがラットよりも重要であることを示した及び配列相同性データに基づいて、ＦａｂＡの反復投与眼毒性試験にカニクイザルを選択した。
ＦａｂＡの安全性は、臨床試験におけるＩＶＴ投与用のＦａｂＡ使用を裏付けるように設計された、包括的な非臨床的眼毒性学プログラムによって裏付けされる。ラット及びカニクイザルで、ＦａｂＡを用いた初回の単回投与試験を実施し、これらの種のいずれにおいても眼毒性は観察されなかった。ラット及びサルでの同様の所見、及びインビトロ薬理学データ、サルがラットよりも重要であることを示した及び配列相同性データに基づいて、ＦａｂＡの反復投与眼毒性試験にカニクイザルを選択した。
【0223】
反復投与眼毒性試験には、検眼（ＯＥ）、ＩＯＰ、網膜電図（ＥＲＧ）、眼の組織病理学、ならびにＴＫ分析用の血清及び硝子体内のＦａｂＡ測定が含まれた。さらに、ＦａｂＡのＰＤ特性は、硝子体内のＣ１ｑ（全て反復投与試験）、及び眼組織（２回投与試験）、及び血清中のＣ１ｑ依存性溶血の阻害（２回投与試験）の測定によって決定した。
【0224】
単回投与の毒性
ＦａｂＡのＩＶＴ投与は、単回投与（ラット及びカニクイザル）眼毒性試験における忍容性が良好であった。これらの試験において、ラット及びカニクイザルのＮＯＡＥＬは、それぞれ０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）であると考えられ、これらは各試験において評価した最大投与量であり、硝子体体積（ラット０．０２ｍＬ、サル２ｍＬ）用に補正した場合と同等（２．５ｍｇ／ｍＬ）である。
ＦａｂＡのＩＶＴ投与は、単回投与（ラット及びカニクイザル）眼毒性試験における忍容性が良好であった。これらの試験において、ラット及びカニクイザルのＮＯＡＥＬは、それぞれ０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）であると考えられ、これらは各試験において評価した最大投与量であり、硝子体体積（ラット０．０２ｍＬ、サル２ｍＬ）用に補正した場合と同等（２．５ｍｇ／ｍＬ）である。
【0225】
スプラーグドーリーラットにおける、硝子体注射によるＦａｂＡのＧＬＰ単回投与眼毒性試験
この単回投与ＧＬＰラット眼毒性試験では、若年成体の雄ラットに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、０．０１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、及び０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に１回投与した。ＦａｂＡ処置済み動物を、１日目（投与の６時間後）、３日目、７日目、１０日目、２０日目、３０日目に屠殺し、全てのビヒクル対照動物を３０日目に屠殺した。全ての動物は予定の剖検まで生存した。
この単回投与ＧＬＰラット眼毒性試験では、若年成体の雄ラットに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、０．０１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、及び０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に１回投与した。ＦａｂＡ処置済み動物を、１日目（投与の６時間後）、３日目、７日目、１０日目、２０日目、３０日目に屠殺し、全てのビヒクル対照動物を３０日目に屠殺した。全ての動物は予定の剖検まで生存した。
【0226】
この試験には、標準的な安全性パラメータが含まれた。血液サンプルを屠殺時に収集し、ＴＫ分析用に屠殺時の硝子体サンプルを得た。さらに、ＩＯＰを含む眼科検査（ＯＥ）、及び眼の組織病理学を評価した。
【0227】
ＯＥ、ＩＯＰ及び眼の組織病理学を含む、評価を行ったいかなる安全性パラメータにおいても、ＦａｂＡに関連する変化は認められなかった。
【0228】
ＦａｂＡへの硝子体曝露を、０．０１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、及び０．０５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の両方で、投与後６時間（初回の収集）～１４４時間、処置した動物において、ＴＫで確認した。ＦａｂＡへの血清曝露を、０．０１及び０．０５ｍｇ／眼で処置した動物（投与後２～４８時間のみ）において、ＴＫで確認した。
【0229】
ＦａｂＡに関連すると考えられる副作用は、この試験において観察した、評価した最大投与量である０．０５ｍｇ／眼を含め、いかなる投与量レベルにおいても観察されなかった。これらの結果に基づき、ＮＯＡＥＬは、０．０５ｍｇ／眼（硝子体内の２．５ｍｇ／ｍＬ）であった。
【0230】
カニクイザルにおける、硝子体注射によるＦａｂＡの非ＧＬＰ単回投与眼毒性試験
この単回投与非ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に投与した。ＦａｂＡ処置済み動物を、１日目（投与の６時間後）、３日目、７日目、１０日目、２０日目、３０日目に屠殺した。全てのビヒクル対照動物を３０日目に屠殺し、全ての動物は予定の剖検まで生存した。
この単回投与非ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）、及び５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に投与した。ＦａｂＡ処置済み動物を、１日目（投与の６時間後）、３日目、７日目、１０日目、２０日目、３０日目に屠殺した。全てのビヒクル対照動物を３０日目に屠殺し、全ての動物は予定の剖検まで生存した。
【0231】
この試験では、ＯＥ、ＩＯＰ及び眼の組織病理学を含む標準的な安全性パラメータを評価した。さらに試験全体にわたって血液サンプルを収集し、ＴＫ及びＰＤのために、屠殺時の硝子体サンプルを分析した。
【0232】
ＦａｂＡに関連する変化は、炎症を伴わない、有害でない所見に限られていた。これらの所見には、１ｍｇ／眼の投与群での、ブドウ膜における組織球浸潤及び軽度の好塩基球増加が含まれた。５ｍｇ／眼の投与量での所見は、ブドウ膜における組織球浸潤及び最小から軽度の好塩基球増加で構成された。
【0233】
ＯＥ及びＩＯＰにおいては、ＦａｂＡに関連する変化は観察されなかった。この試験において、ＦａｂＡに関連すると考えられる副作用は、５ｍｇ／眼（評価した最大投与量）を含め、いかなる投与量レベルにおいても観察されなかった。これらの結果に基づき、ＮＯＡＥＬは、５ｍｇ／眼（硝子体内の２．５ｍｇ／ｍＬ）であると考えられた。
【0234】
硝子体におけるＦａｂＡへの曝露を、全ての処置動物において、試験の間（３０日目を通して）、ＴＫで確認した。ＦａｂＡへの血清曝露は、１ｍｇ／眼では存在せず、５ｍｇ／眼では低いかつ一時的現象であり、６ｎｇ／ｍＬ（ＬＬＯＱ１．２５ｎｇ／ｍＬ）を超えなかった。Ｃｌｑは、全てのＦａｂＡ処置動物の硝子体内に、３０日目を通して存在しなかった。
【0235】
反復投与毒性試験
反復投与眼毒性試験では、少なくとも４週間毎に１回、ＩＶＴ注射によってＦａｂＡを投与した。カニクイザルにおけるＦａｂＡの反復投与は、忍容性が良好であった。初回の反復投与ＧＬＰ眼毒性試験では、カニクイザルのＮＯＡＥＬは、評価した最大投与量である、毎月の２回投与での５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）であった。カニクイザルにおける２６週間慢性眼毒性試験では、有害な眼の変化を、２回の注射手順と関連付け、及び／またはＡＤＡ媒介のものであり、ＦａｂＡのＩＶＴ投与の直接的な作用ではないと決定した。したがって、ＮＯＡＥＬは、カニクイザルにおける隔週または毎月１回、それぞれ１３回または７回の投与で、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）であると決定した。
反復投与眼毒性試験では、少なくとも４週間毎に１回、ＩＶＴ注射によってＦａｂＡを投与した。カニクイザルにおけるＦａｂＡの反復投与は、忍容性が良好であった。初回の反復投与ＧＬＰ眼毒性試験では、カニクイザルのＮＯＡＥＬは、評価した最大投与量である、毎月の２回投与での５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）であった。カニクイザルにおける２６週間慢性眼毒性試験では、有害な眼の変化を、２回の注射手順と関連付け、及び／またはＡＤＡ媒介のものであり、ＦａｂＡのＩＶＴ投与の直接的な作用ではないと決定した。したがって、ＮＯＡＥＬは、カニクイザルにおける隔週または毎月１回、それぞれ１３回または７回の投与で、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）であると決定した。
【0236】
カニクイザルにおける、硝子体注射によるＦａｂＡの６週間ＧＬＰ反復投与眼毒性試験
この試験には標準的な安全性パラメータが含まれ、試験を通じて血液サンプルを収集した。ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の硝子体サンプルと、ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の視神経切片も同様に収集した。さらに、ＯＥ、ＩＯＰ、ＥＲＧ及び眼の組織病理学も評価した。
この試験には標準的な安全性パラメータが含まれ、試験を通じて血液サンプルを収集した。ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の硝子体サンプルと、ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の視神経切片も同様に収集した。さらに、ＯＥ、ＩＯＰ、ＥＲＧ及び眼の組織病理学も評価した。
【0237】
有害でないと決定したＦａｂＡの所見は、１回の高い投与量（２．５ｍｇ／眼）（ヒト投与量５ｍｇに相当する）の雌に限られており、この雌は、炎症を伴わない硝子体の最小の好塩基性／青色染色を有した（好塩基球増加と呼ばれる）。重要なことに、ＯＥ、ＩＯＰ及びＥＲＧでは、ＦａｂＡに関連する変化は認められなかった。全ての処置動物の硝子体におけるＦａｂＡへの曝露を、試験及び回復の間（最後の投与から３０日目後）、ＴＫによって確認した。
【0238】
血清曝露は、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）では測定可能ではなく、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）では低くかつ一時的（最初の投与から１２～４８時間後、最後の投与から６～１６８時間後）であり、８ｎｇ／ｍＬ（ＬＬＯＱ１．２５ｎｇ／ｍＬ）を超えなかった。ＦａｂＡ濃度が約１００ｎｇ／ｍＬであったとき、全ての処置動物の硝子体内にＣ１ｑが存在しないことを、ＰＤによって確認した。ＦａｂＡのＡＤＡを、１ｍｇ／眼（ヒト投与量２ｍｇに相当する）（１２匹の動物のうちの６匹）及び２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）（１２匹の動物のうちの７匹）の投与量の動物において検出したが、血清または硝子体内のＦａｂＡ曝露への、ＡＤＡの明確な影響はなかった。
【0239】
カニクイザルにおける、硝子体注射によるＦａｂＡの６週間ＧＬＰ反復投与眼毒性試験
この６週間ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雄及び雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、４週間毎（１日目及び２９日目）にＩＶＴ注射によって両側に投与し、続いて４週間の回復期間を与えた。全ての主要な試験動物を４４日目に屠殺し、全ての回復動物を５９／６０日目に屠殺した。全ての主要な試験動物及び回復動物は予定の剖検まで生存した。
この６週間ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雄及び雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量で、４週間毎（１日目及び２９日目）にＩＶＴ注射によって両側に投与し、続いて４週間の回復期間を与えた。全ての主要な試験動物を４４日目に屠殺し、全ての回復動物を５９／６０日目に屠殺した。全ての主要な試験動物及び回復動物は予定の剖検まで生存した。
【0240】
この試験には標準的な安全性パラメータが含まれ（全身の組織病理学を除く）、試験を通じて血液サンプルを収集し、ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の硝子体サンプルも同様に収集した。ＡＤＡ及び房水のサンプルを収集し、保存した。さらに、ＯＥ、ＩＯＰ、ＥＲＧ及び眼の組織病理学も評価した。
【0241】
ＯＥ、ＩＯＰ、ＥＲＧ及び眼の組織病理学を含む、評価を行ったいかなる安全性パラメータにおいても、ＦａｂＡに関連する変化は認められなかった。炎症を伴わない、硝子体の最小から軽度の好塩基性／青色染色（好塩基球増加と呼ばれる）を処置動物及び対照動物の両方で観察し、したがってＦａｂＡに関連しないと見なした。
【0242】
全ての処置動物の硝子体におけるＦａｂＡへの曝露を、試験及び回復の間（最後の投与から３０日目後）、ＴＫによって確認した。対照動物の血清及び硝子体には、ＦａｂＡが存在しないことを確認した。全ての処置済みの主要な試験動物において、４４日目に硝子体内にＣ１ｑが存在しないことをＰＤによって確認した。５９日目に、回復動物４匹のうち２匹は、硝子体内に測定可能なＣ１ｑを有した。ＦａｂＡのＡＤＡを、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与群の動物（１０匹の動物のうちの９匹）において検出したが、血清または硝子体内のＦａｂＡ曝露への、ＡＤＡの明確な影響はなかった。
【0243】
Ｃ１ｑ依存性溶血の＞８０％阻害は、ＦａｂＡ投与の２４～４８時間後に達成され、その後ベースラインに戻った。
【0244】
４４日目に、網膜、脈絡膜及び視神経乳頭内のＣ１ｑ濃度も大きく低下し、５９日目には網膜及び脈絡膜内で低減し続けたが、視神経乳頭では低減しなかった。
【0245】
この試験において、ＦａｂＡに関連すると考えられる副作用は、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）（評価した最大投与量）を含め、いかなる投与量レベルにおいても観察されなかった。これらの結果に基づき、ＮＯＡＥＬは、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）（硝子体内の２．５ｍｇ／ｍＬ）であった。
【0246】
カニクイザルにおける、１０週間の回復期間を設けた、硝子体注射によるＦａｂＡの２６週間ＧＬＰ反復投与眼毒性試験
この２６週間ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雄及び雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、毎月１回、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、毎月１回、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）及び隔週で１回、５ｍｇ／眼の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に投与し、続いて１０週間の回復期間を与えた。２．５ｍｇ／眼に相当した５０μｌの単回注射、あるいは合計１００μＬとなる２回注射（１０分間隔の２回の５０μＬ注射は、５ｍｇ／眼に相当した）は、２週間毎（１３回の投与期間）または４週間毎（７回の投与期間）に行った。全ての主要な試験動物を１８４日目に屠殺し、全ての回復動物を２４２／２４３日目に屠殺した。全ての主要な試験動物及び回復動物は予定の剖検まで生存した。
この２６週間ＧＬＰカニクイザル眼毒性試験では、若年成体の雄及び雌カニクイザルに、ビヒクルまたはＦａｂＡを、毎月１回、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、毎月１回、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）及び隔週で１回、５ｍｇ／眼の投与量で、ＩＶＴ注射によって両側に投与し、続いて１０週間の回復期間を与えた。２．５ｍｇ／眼に相当した５０μｌの単回注射、あるいは合計１００μＬとなる２回注射（１０分間隔の２回の５０μＬ注射は、５ｍｇ／眼に相当した）は、２週間毎（１３回の投与期間）または４週間毎（７回の投与期間）に行った。全ての主要な試験動物を１８４日目に屠殺し、全ての回復動物を２４２／２４３日目に屠殺した。全ての主要な試験動物及び回復動物は予定の剖検まで生存した。
【0247】
対照群、毎月１回の５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与群、及び隔週の５ｍｇ／眼の投与群の動物に、投与しない日または投与停止が発生した。これらの群における２回注射は、ＯＥにより検出された有害な所見のために停止し、これは手順及び高い投与量体積に関連すると見なした。試験の７１日目から、毎月１回、５ｍｇ／眼の投与群に、毎月１回、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）を投与し（毎月１回、５／２．５ｍｇ／眼と称する）、さらに隔週、５ｍｇ／眼の投与群に、隔週で２．５ｍｇ／眼を投与した（隔週で５／２．５ｍｇ／眼と称する）。これらの投与群（対照群を含む）において、２回注射を停止した後、投与しない日を継続した。２回注射の停止は、後述のように手順及び／またはＡＤＡに関連した。毎月１回、２．５ｍｇ／眼の投与群（低投与量群）には投与しない日はなかった。
【0248】
この試験には標準的な安全性パラメータが含まれ（全身の組織病理学を除く）、試験を通じて血液サンプルを収集し、ＴＫ及びＰＤ分析用に屠殺時の硝子体サンプルも同様に収集した。ＡＤＡ及び房水のサンプルを収集し、保存した。さらに、ＯＥ、ＩＯＰ、ＥＲＧ、眼の組織病理学、及び眼球内に沈着した免疫複合体検出のための免疫組織化学（ＩＨＣ）を評価した。
【0249】
体重、摂餌量、網膜電図検査、眼圧測定及び臨床上の病態において、ＦａｂＡ関連の変化は認められなかった。
【0250】
ＦａｂＡに関連すると考えられる眼の臨床上の兆候及び眼の検査所見は、眼球の混濁（おそらく、前眼房、水晶体包被膜及び／または後眼房における混濁のため）ならびに細胞及び／または色素の存在に限定されていた。血清中にＡＤＡが検出されなかった動物（群２動物１２匹のうちの４匹、群３動物１２匹のうち２匹及び群４動物１２匹のうち２匹）におけるこれらの所見の存在は、ＦａｂＡとの関連を示している。ＡＤＡ及び潜在的に免疫複合体沈着に関連すると見なされる所見は、より重度となる傾向があり、房水フレア、及び硝子体混濁の存在、瞳孔対光反射の変化、及び網膜血管の減衰が含まれた。
【0251】
雄及び雌のサルへのＦａｂＡのＩＶＴ投与後に、血清ＦａｂＡ濃度で測定される全身曝露は一時的で低く、８５日目の投与後に８６．３ｎｇ／ｍＬ、または１６９日目の最後の投与後に６０．８１ｎｇ／ｍＬを超えなかった。ＦａｂＡを受けたほとんど全ての処置動物において、１６９日目を通して、ＦａｂＡへの曝露をＴＫによって確認したが、これは投与しない日を設けた一部の動物を除いて、硝子体Ｃ１ｑが検出可能でないことと一致した。１０週間の投与のない回復期間後の２４２／２４３日目に、ＦａｂＡ硝子体濃度は測定可能でなく、全ての処置投与群においてＣ１ｑ濃度は検出可能だった。対照動物の血清及び硝子体にはＦａｂＡが存在しないことを確認した。
【0252】
血清サンプル中の抗ＦａｂＡ抗体の存在を、群１（対照）動物１２匹のうちの４匹、群２動物１２匹のうちの８匹、群３動物１２匹のうちの１０匹、及び群４動物１２匹のうちの１０匹で確認した。２匹の群１動物の陽性を、１日目の後の動物当たり１回の時点で確認し、一方でＦａｂＡ処置動物のＡＤＡ陽性を、３回または４回以上の時点で特定した（主要な試験動物及び回復動物について、それぞれ合計４個または５個のサンプルを収集した）。血清または硝子体内のＦａｂＡ曝露への、ＡＤＡの明確な影響はなかった。
【0253】
１８４日目の最終的な安楽死で、ＦａｂＡへのＡＤＡ媒介性免疫応答に一致する顕微鏡的変化を、毎月及び隔週の５／２．５ｍｇ／眼の投与群（それぞれ中程度及び高い投与量群）の右眼で観察した。炎症に関連した眼内の変化には、毛様体及び硝子体腔の軽度の混合細胞浸潤、硝子体腔内の最小から中程度の線維化（投与頻度に比例した重症度）、及び最小から軽度の後方水晶体の変性（投与頻度に比例した重症度）が含まれた。隔週及び毎月の５／２．５ｍｇ／眼の処置群のそれぞれ１匹の雌において、後方の網膜内で最小の血管周囲の単核球浸潤も観察した。隔週及び毎月、５／２．５ｍｇ／眼を投与した動物の眼球周囲の角膜輪部内で、最小から中程度の単核球浸潤も観察し、重症度は投与頻度に比例した。
【0254】
２４２／２４３日目の回復後の安楽死において、ＦａｂＡに対するＡＤＡ媒介性免疫応答に関連した右眼の顕微鏡的変化は、毎月の５／２．５ｍｇ／眼の投与群では、限定的で軽度だったが、一方で隔週の５／２．５ｍｇ／眼の投与群では、さらに変化が持続した、または発生した。硝子体腔及びブドウ膜の最小の組織球浸潤、ならびに硝子体腔の好塩基球増加の高まりは、隔週及び／または毎月のＦａｂＡ５／２．５ｍｇ／眼を投与した動物の、回復期において限定的だった。これらの変化は、最終的な剖検での対照動物で観察された変化に類似しており、これらの変化は、ＩＶＴ注射手順に付随する前方の硝子体の、軽度の炎症／破壊に関連すると見なされた。しかしながら、回復期間後のこれらの変化の持続、回復期の対照動物ではこれらの変化が解消したこと、及び隔週及び毎月の５／２．５ｍｇ／眼のＦａｂＡを投与した動物の最終的な剖検での、より重度の炎症性変化の存在は、回復期のこれらの変化が、注射手順の影響が残っているというよりはむしろ、ＦａｂＡに対するＡＤＡ媒介性免疫応答に関連する炎症を解消していることを示している可能性があると示した。眼球周囲の角膜輪部の、最小の単核球浸潤は、隔週及び毎月の５／２．５ｍｇ／眼を投与した両方の群で持続した。
【0255】
隔週の５／２．５ｍｇ／眼の投与群では、硝子体腔の、最小の混合細胞浸潤及び線維化が持続し、一方で網膜の細胞性の穏やかな低下、及びヘモシデリン色素が発生した。また隔週の５／２．５ｍｇ／眼の投与群では、網膜の、視神経円板での最小の血管周囲の単核球浸潤も観察した。これらの変化は、ＦａｂＡに対するＡＤＡ媒介性応答の続発性であると見なした。
【0256】
病理学的に有害な顕微鏡的変化は、ＡＤＡ媒介性炎症の続発性であると見なし、隔週及び毎月の５／２．５ｍｇ／眼の投与群では、硝子体腔内の線維化、水晶体変性、及び網膜の細胞性の低下が含まれた。
【0257】
毎月の２．５ｍｇ／眼の群では、最終的または回復後の安楽死のいずれにおいても、ＦａｂＡに関連した顕微鏡的変化は認められなかった。
【0258】
群１、群３及び群４からの、それぞれ１２匹のうち２匹、１２匹のうち４匹、及び１２匹のうち６匹の動物について、免疫組織化学を実施した。ＩＨＣに選択した、中程度の投与量、すなわち毎月５／２．５ｍｇ／眼の群（動物４匹のうち２匹）、及び高投与量、すなわち隔週の５／２．５ｍｇ／眼の投与群（６匹の動物のうちの２匹）の処置動物１０匹のうちの４匹の左眼内で、免疫組織化学的に検出した、ＦａｂＡ、サルＩｇＧ、ＩｇＭ及び／またはＣ３を含有する顆粒状沈着の存在が、評価により明らかとなった。これらの血管壁内沈着は、右眼のヘマトキシリン‐エオジン評価によって観察した沈着に類似して、血管周囲の炎症性細胞浸潤に関連して存在した。右眼内で観察したその他の顕微鏡的変化は、サルにおける、このＦａｂＡに対する免疫応答に伴う続発性変化と一致した。血清ＡＤＡ陰性の一部の動物も含め、免疫組織化学に選択した全ての動物において眼の免疫複合体沈着が観察されたわけではなかったが、これは沈着の識別が組織の切片化によって変動し得るため、また血清ＡＤＡが、顕微鏡的根拠を有する動物において、免疫複合体の病態と一致して常に存在するわけではないため、予想外ではなかった。さらに、投与がない日を複数回設けた一部の動物では、分析前にＡＤＡ及び／または免疫複合体が排出されている可能性もある。免疫組織化学的に確認した沈着物の存在は、動物のサブセットにおいてさえ、右眼で観察された、類似の病原的に一致した病態が、ＦａｂＡの免疫応答に関連するようであるという、最も説得力がある根拠の重みであると見なした。
【0259】
カニクイザルにおける、この２６週間慢性眼毒性試験では、有害な眼の変化を、２回の注射手順と関連付け、及び／またはＡＤＡ媒介のものであり、ＦａｂＡのＩＶＴ投与の直接的な作用ではないと決定した。したがって、ＮＯＡＥＬは、カニクイザルにおける隔週または毎月１回、それぞれ１３回または７回の投与で、２．５ｍｇ／眼（ヒト投与量５ｍｇに相当する）であると決定した。
【0260】
実施例２：臨床試験におけるＦａｂＡの評価
ＦａｂＡ医薬品は、ＩＶＴ注射用の無菌等張液である。フェーズ１：ファースト・イン・ヒューマン、非盲検、用量漸増試験（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１）を実施して、原発性開放隅角緑内障を有する患者における、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ注射の初期の安全性及び忍容性を評価した。
ＦａｂＡ医薬品は、ＩＶＴ注射用の無菌等張液である。フェーズ１：ファースト・イン・ヒューマン、非盲検、用量漸増試験（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１）を実施して、原発性開放隅角緑内障を有する患者における、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ注射の初期の安全性及び忍容性を評価した。
【0261】
フェーズ１ｂ：無作為化、二重盲検試験（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２）を実施して、原発性開放隅角緑内障を有する患者における、ＦａｂＡの反復ＩＶＴ注射の安全性及び忍容性を評価した。
【0262】
両方の試験の結果、ＦａｂＡのＩＶＴによる単回投与（１～５ｍｇ／眼）（ヒト投与量２～１０ｍｇに相当する）及び反復投与（２．５及び５ｍｇ／眼、４週間間隔で２回投与）は、緑内障患者において忍容性が良好であることが見出され、重篤または重大な有害事象（ＡＥ）は報告されなかった。これらの試験で、ＦａｂＡで治療した患者における眼のＡＥには、結膜充血、結膜出血及び眼刺激症状が含まれ、治療眼においてのみ生じた。フェーズ１ｂ試験では、シャム群の患者における眼のＡＥには、眼痛、眼の異物感、眼の充血及び霧視が含まれた。ＦａｂＡのＩＶＴ処置に関連すると考えられる全身性ＡＥは発生しなかった。
【0263】
ＦａｂＡ２．５ｍｇ（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、及び５ｍｇ（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の単回ＩＶＴ注射は、房水中の遊離Ｃ１ｑを少なくとも２９日間阻害した（試験ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２）。
【0264】
ヒトにおける薬物動態及び薬力学
眼の薬物動態及び薬力学
ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２は、房水を採取してＰＫ及びＰＤを評価したフェーズ１ｂ試験である。対象に、シャム、２．５ｍｇ／眼のＦａｂＡ（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、または５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のＦａｂＡの、２回のＩＶＴ注射を２９日間隔で投与した。この試験では、投与前及び最初のＦａｂＡ投与から２９日後、２回目の投与前に房水を採取した。２９日目（Ｄ２９）に、全ての治療患者の房水中で遊離ＦａｂＡを検出した。同時に、ＦａｂＡの２．５ｍｇ／眼及び５ｍｇ／眼の両投与量レベルが、房水中の遊離Ｃ１ｑを少なくとも２９日間阻害した（図６）。
眼の薬物動態及び薬力学
ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２は、房水を採取してＰＫ及びＰＤを評価したフェーズ１ｂ試験である。対象に、シャム、２．５ｍｇ／眼のＦａｂＡ（ヒト投与量５ｍｇに相当する）、または５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）のＦａｂＡの、２回のＩＶＴ注射を２９日間隔で投与した。この試験では、投与前及び最初のＦａｂＡ投与から２９日後、２回目の投与前に房水を採取した。２９日目（Ｄ２９）に、全ての治療患者の房水中で遊離ＦａｂＡを検出した。同時に、ＦａｂＡの２．５ｍｇ／眼及び５ｍｇ／眼の両投与量レベルが、房水中の遊離Ｃ１ｑを少なくとも２９日間阻害した（図６）。
【0265】
全身の薬物動態及び薬力学
ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１は、投与前及び投与後３時間で血清ＦａｂＡ及びＣ１ｑを採取した、単回投与フェーズ１試験である。ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２は、２９日間隔での２回の投与それぞれの投与前及び投与後３時間において血清及びＦａｂＡ及びＣ１ｑを採取した、複数回投与フェーズ１ｂ試験である。フェーズ１またはフェーズ１ｂ臨床試験で試験したいずれの投与量レベルにおいても、単回または反復ＩＶＴ注射後、ＦａｂＡは体循環において通常検出可能ではなかった。同様に、いずれの試験においても、循環遊離Ｃ１ｑの変化は検出されなかった。
ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１は、投与前及び投与後３時間で血清ＦａｂＡ及びＣ１ｑを採取した、単回投与フェーズ１試験である。ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２は、２９日間隔での２回の投与それぞれの投与前及び投与後３時間において血清及びＦａｂＡ及びＣ１ｑを採取した、複数回投与フェーズ１ｂ試験である。フェーズ１またはフェーズ１ｂ臨床試験で試験したいずれの投与量レベルにおいても、単回または反復ＩＶＴ注射後、ＦａｂＡは体循環において通常検出可能ではなかった。同様に、いずれの試験においても、循環遊離Ｃ１ｑの変化は検出されなかった。
【0266】
後述のように、５ｍｇ／眼（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）の投与量レベルは、ＦａｂＡ臨床試験における単回または２９日間隔での２回の投与の場合、忍容性が良好であった。上述のように、フェーズ１ｂ試験において、ＦａｂＡの２．５ｍｇ（ヒト投与量５ｍｇに相当する）及び５ｍｇ（ヒト投与量１０ｍｇに相当する）での単回投与は、房水中の遊離Ｃ１ｑを、少なくとも２９日間阻害した（図６）。
【0267】
安全性及び有効性
フェーズ１用量漸増試験（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１）
これは、原発性開放隅角緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ注射の安全性／忍容性及びＰＫを評価する、フェーズ１、非盲検、用量漸増試験であった。適格患者は、試験眼において、Ｈｕｍｐｈｒｅｙ Ｆｉｅｌｄ Ａｎａｌｙｚｅｒ－Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ（ＨＦＡ－ＳＩＴＡ）の２４－２の速いアルゴリズムを用いて、固視不良のカットオフが３３％及び偽陽性反応率のカットオフが３３％である、信頼性が高い視野検査を行うことができた、信頼性が高い視野検査で３～１８ｄＢの平均偏差を有し、投与前の≧４週間の間、安定なＩＯＰ治療レジメンにおいて、試験眼で＜２１ｍｍＨｇのＩＯＰを有した成人であった。９名の患者を、以下のようにコホート毎に３名の患者を登録して、３つのコホートに割り当てた。
・コホート１＝１．０ｍｇ／眼、単回投与（０．０２ｍＬ）×１回投与
・コホート２＝２．５ｍｇ／眼、単回投与（０．０５ｍＬ）×１回投与
・コホート３＝５．０ｍｇ／眼、単回投与（０．１０ｍＬ）×１回投与
スクリーニングの後、３名の適格患者を最も低いオープンコホートに登録し、前述の低い投与量で忍容性及び短期安全性が示された後にのみ開始される、次のコホートに登録した。各コホートの全患者は、最低１５日の安全性観察期間を完了する必要があり、その後、次のコホートの患者に注射することが可能となった。試験中に、用量制限毒性（ＤＬＴ）は報告されなかった。
フェーズ１用量漸増試験（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０１）
これは、原発性開放隅角緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ注射の安全性／忍容性及びＰＫを評価する、フェーズ１、非盲検、用量漸増試験であった。適格患者は、試験眼において、Ｈｕｍｐｈｒｅｙ Ｆｉｅｌｄ Ａｎａｌｙｚｅｒ－Ｓｗｅｄｉｓｈ Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｖｅ Ｔｈｒｅｓｈｏｌｄ Ａｌｇｏｒｉｔｈｍ（ＨＦＡ－ＳＩＴＡ）の２４－２の速いアルゴリズムを用いて、固視不良のカットオフが３３％及び偽陽性反応率のカットオフが３３％である、信頼性が高い視野検査を行うことができた、信頼性が高い視野検査で３～１８ｄＢの平均偏差を有し、投与前の≧４週間の間、安定なＩＯＰ治療レジメンにおいて、試験眼で＜２１ｍｍＨｇのＩＯＰを有した成人であった。９名の患者を、以下のようにコホート毎に３名の患者を登録して、３つのコホートに割り当てた。
・コホート１＝１．０ｍｇ／眼、単回投与（０．０２ｍＬ）×１回投与
・コホート２＝２．５ｍｇ／眼、単回投与（０．０５ｍＬ）×１回投与
・コホート３＝５．０ｍｇ／眼、単回投与（０．１０ｍＬ）×１回投与
スクリーニングの後、３名の適格患者を最も低いオープンコホートに登録し、前述の低い投与量で忍容性及び短期安全性が示された後にのみ開始される、次のコホートに登録した。各コホートの全患者は、最低１５日の安全性観察期間を完了する必要があり、その後、次のコホートの患者に注射することが可能となった。試験中に、用量制限毒性（ＤＬＴ）は報告されなかった。
【0268】
９名の患者が登録され、治療を受け、試験を完了した。
【0269】
安全性
眼の試験治療下での有害事象（ＴＥＡＥ）には、結膜充血（全ての投与量レベル）、結膜出血（２．５ｍｇ／眼のみ）及び眼刺激症状（１ｍｇ／眼のみ）が含まれ、試験眼においてのみ生じた。
眼の試験治療下での有害事象（ＴＥＡＥ）には、結膜充血（全ての投与量レベル）、結膜出血（２．５ｍｇ／眼のみ）及び眼刺激症状（１ｍｇ／眼のみ）が含まれ、試験眼においてのみ生じた。
【0270】
この試験で経験された唯一の全身性ＴＥＡＥは、副鼻腔炎であった。
・全てのＴＥＡＥの重症度は軽度であった。
・重篤または重大なＴＥＡＥは認められなかった。
・ＴＥＡＥのために治療を中止したり、試験から離脱した患者はいなかった。
・９名の患者のうちの９名で、３０分以内にＩＯＰが正常（注射直前のＩＯＰの５ｍｍＨｇ以内、または＜２１ｍｍＨｇ）に戻った。
・抗ＦａｂＡ抗体の何らかの根拠を示した患者はいなかった。
・全てのＴＥＡＥの重症度は軽度であった。
・重篤または重大なＴＥＡＥは認められなかった。
・ＴＥＡＥのために治療を中止したり、試験から離脱した患者はいなかった。
・９名の患者のうちの９名で、３０分以内にＩＯＰが正常（注射直前のＩＯＰの５ｍｍＨｇ以内、または＜２１ｍｍＨｇ）に戻った。
・抗ＦａｂＡ抗体の何らかの根拠を示した患者はいなかった。
【0271】
全体的な概要／結論：
この試験では、安定な緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ投与は、最大５ｍｇ／眼まで忍容性が良好だった。報告された眼のＡＥは、承認された薬剤のＩＶＴ投与で報告されたＡＥと類似していた。ＦａｂＡに関する安全性シグナルは観察されなかった。
この試験では、安定な緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの単回ＩＶＴ投与は、最大５ｍｇ／眼まで忍容性が良好だった。報告された眼のＡＥは、承認された薬剤のＩＶＴ投与で報告されたＡＥと類似していた。ＦａｂＡに関する安全性シグナルは観察されなかった。
【0272】
ＦａｂＡは、体循環において通常検出可能ではなく、単回ＩＶＴ投与後、循環する遊離Ｃ１ｑの変化は検出されなかった。
【0273】
フェーズ１ｂ（ＦａｂＡ－ＧＬＡ－０２）
これは、原発性開放隅角緑内障を有する患者において、反復ＩＶＴ注射として投与されるＦａｂＡの２回の投与量レベル対シャム注射を評価するための、二重盲検、無作為化、シャム対照試験であった。適格患者は、試験眼において、ＨＦＡ－ＳＩＴＡの速いアルゴリズムを用いて、固視不良のカットオフが３３％及び偽陽性反応率のカットオフが３３％である、信頼性が高い視野検査を行うことができた、信頼性が高い視野検査で、試験眼において－３～－２４ｄＢの平均偏差を有し、スクリーニング時及び１日目に＜２１ｍｍＨｇのＩＯＰを有し、注射前に、≧４週間の安定なＩＯＰ治療レジメンにあり、試験中にＩＯＰ治療レジメンに予期された変化がなかった成人であった。患者は、４週間間隔で２回の注射を受け、安全性、忍容性、ＰＫ、ＰＤ、免疫原性の評価及び継続中の探索的評価のために、合計１２週間追跡された。患者を、以下のように３つのコホートのうち１つ（コホート毎に５名の患者という計画）に、無作為に割り当てた（１：１：１）。
・投与量レベル１＝２．５ｍｇ／眼、単回投与量（０．０５ｍＬ）×２回投与
・投与量レベル２＝５．０ｍｇ／眼、単回投与量（０．１０ｍＬ）×２回投与
・シャム＝０ｍｇ／眼×２回投与
１８名の患者を無作為化（７名を２．５ｍｇのＦａｂＡ群、５名を５．０ｍｇのＦａｂＡ群、及び６名をシャム群）し、１７名の患者に処置を行った。２．５ｍｇの投与群の患者１名は、無作為化されたが、処置を行わなかった。１６名の患者が試験を完了した。
これは、原発性開放隅角緑内障を有する患者において、反復ＩＶＴ注射として投与されるＦａｂＡの２回の投与量レベル対シャム注射を評価するための、二重盲検、無作為化、シャム対照試験であった。適格患者は、試験眼において、ＨＦＡ－ＳＩＴＡの速いアルゴリズムを用いて、固視不良のカットオフが３３％及び偽陽性反応率のカットオフが３３％である、信頼性が高い視野検査を行うことができた、信頼性が高い視野検査で、試験眼において－３～－２４ｄＢの平均偏差を有し、スクリーニング時及び１日目に＜２１ｍｍＨｇのＩＯＰを有し、注射前に、≧４週間の安定なＩＯＰ治療レジメンにあり、試験中にＩＯＰ治療レジメンに予期された変化がなかった成人であった。患者は、４週間間隔で２回の注射を受け、安全性、忍容性、ＰＫ、ＰＤ、免疫原性の評価及び継続中の探索的評価のために、合計１２週間追跡された。患者を、以下のように３つのコホートのうち１つ（コホート毎に５名の患者という計画）に、無作為に割り当てた（１：１：１）。
・投与量レベル１＝２．５ｍｇ／眼、単回投与量（０．０５ｍＬ）×２回投与
・投与量レベル２＝５．０ｍｇ／眼、単回投与量（０．１０ｍＬ）×２回投与
・シャム＝０ｍｇ／眼×２回投与
１８名の患者を無作為化（７名を２．５ｍｇのＦａｂＡ群、５名を５．０ｍｇのＦａｂＡ群、及び６名をシャム群）し、１７名の患者に処置を行った。２．５ｍｇの投与群の患者１名は、無作為化されたが、処置を行わなかった。１６名の患者が試験を完了した。
【0274】
安全性
ＦａｂＡで処置した患者が経験した眼のＴＥＡＥには、結膜充血（２．５及び５ｍｇ／眼）、結膜出血（５ｍｇ／眼のみ）、及び眼刺激症状（５ｍｇ／眼のみ）が含まれた。これらのＴＥＡＥのいずれも、シャム群の患者は経験しなかった。シャム群の患者における眼のＴＥＡＥには、眼痛、眼の異物感、眼の充血及び霧視が含まれ、それぞれ１名の患者で発生した。
ＦａｂＡで処置した患者が経験した眼のＴＥＡＥには、結膜充血（２．５及び５ｍｇ／眼）、結膜出血（５ｍｇ／眼のみ）、及び眼刺激症状（５ｍｇ／眼のみ）が含まれた。これらのＴＥＡＥのいずれも、シャム群の患者は経験しなかった。シャム群の患者における眼のＴＥＡＥには、眼痛、眼の異物感、眼の充血及び霧視が含まれ、それぞれ１名の患者で発生した。
【0275】
全身性ＴＥＡＥが試験中に認められたが、研究者が試験治療に関連すると認めたものはなかった。
・全てのＴＥＡＥの重症度は軽度であった。
・報告されたＴＥＡＥのうち１件を除く全ては、最初の投与後、試験治療の２回目の投与前に発生した。
・重篤または重大なＴＥＡＥは認められなかった。
・ＴＥＡＥのために治療を中止したり、試験から離脱した患者はいなかった。
・ＩＯＰは、１７名のうち１６名の患者についてはＩＶＴ注射の３０分以内に、残りの患者については４５分以内に正常（＜２１ｍｍＨｇ）に戻った。
・ＦａｂＡを硝子体内に投薬した１１名の患者のうち、試験した６名の患者は、少なくとも１時点の間、陽性であった。１名の患者は、ＡＤＡ陽性で、力価が時間の経過とともに穏やかに上昇し、残りの５名の患者は、投与前を含め全ての時点で陽性であり、時間の経過とともに力価が変化することはなかった。１名のシャム患者は、投与前を含め、全ての時点でＡＤＡ陽性であり、時間の経過とともに力価が変化することはなかった。まとめると、これらのデータによって、ＡＤＡ測定値とＦａｂＡ投与の関係は不明であると示唆される。
・全てのＴＥＡＥの重症度は軽度であった。
・報告されたＴＥＡＥのうち１件を除く全ては、最初の投与後、試験治療の２回目の投与前に発生した。
・重篤または重大なＴＥＡＥは認められなかった。
・ＴＥＡＥのために治療を中止したり、試験から離脱した患者はいなかった。
・ＩＯＰは、１７名のうち１６名の患者についてはＩＶＴ注射の３０分以内に、残りの患者については４５分以内に正常（＜２１ｍｍＨｇ）に戻った。
・ＦａｂＡを硝子体内に投薬した１１名の患者のうち、試験した６名の患者は、少なくとも１時点の間、陽性であった。１名の患者は、ＡＤＡ陽性で、力価が時間の経過とともに穏やかに上昇し、残りの５名の患者は、投与前を含め全ての時点で陽性であり、時間の経過とともに力価が変化することはなかった。１名のシャム患者は、投与前を含め、全ての時点でＡＤＡ陽性であり、時間の経過とともに力価が変化することはなかった。まとめると、これらのデータによって、ＡＤＡ測定値とＦａｂＡ投与の関係は不明であると示唆される。
【0276】
全体的な概要／結論：
安定な緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの４週間間隔の２回のＩＶＴ投与は、最大５ｍｇ／眼まで忍容性が良好だった。報告された眼のＡＥは、承認された薬剤のＩＶＴ投与で報告されたＡＥと類似していた。この試験では、ＦａｂＡに関する安全性シグナルは観察されなかった。
安定な緑内障を有する患者において、ＦａｂＡの４週間間隔の２回のＩＶＴ投与は、最大５ｍｇ／眼まで忍容性が良好だった。報告された眼のＡＥは、承認された薬剤のＩＶＴ投与で報告されたＡＥと類似していた。この試験では、ＦａｂＡに関する安全性シグナルは観察されなかった。
【0277】
ＦａｂＡのＩＶＴ単回投与（２．５及び５ｍｇ／眼）は、房水中の遊離Ｃ１ｑを少なくとも２９日間阻害した。
【0278】
実施例３：加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）に続発する地図状萎縮（ＧＡ）を有する患者における、硝子体注射によって投与するＦａｂＡの効能、安全性及び忍容性の、フェーズ２、多施設、無作為化、平行群間、二重盲検、４アーム、シャム対照試験
根拠
概要
この試験は、ＡＭＤに続発するＧＡを有する患者において実施する。試験の目的は、毎月１回（ＥＭ）または隔月１回（ＥＯＭ）、１２ヵ月間のＦａｂＡの硝子体（ＩＶＴ）注射が、ＧＡ病変の増殖率を低下させるかどうかを決定することである。試験は、３０日のスクリーニング期間及び１２ヵ月の治療期間、その後の６ヵ月の（治療はなし）追跡期間から構成される。患者の参加期間は合計１９ヵ月である。患者は、１２ヵ月の治療期間中、治療及び／または安全評価のために、毎月診療所を訪れる。
根拠
概要
この試験は、ＡＭＤに続発するＧＡを有する患者において実施する。試験の目的は、毎月１回（ＥＭ）または隔月１回（ＥＯＭ）、１２ヵ月間のＦａｂＡの硝子体（ＩＶＴ）注射が、ＧＡ病変の増殖率を低下させるかどうかを決定することである。試験は、３０日のスクリーニング期間及び１２ヵ月の治療期間、その後の６ヵ月の（治療はなし）追跡期間から構成される。患者の参加期間は合計１９ヵ月である。患者は、１２ヵ月の治療期間中、治療及び／または安全評価のために、毎月診療所を訪れる。
【0279】
約２４０名の患者を登録し、約２０４人の患者を、１２月目に主要分析（主要分析は、修正した治療意図［ＩＴＴ］を基準としている）について評価可能であるように、４つの治療アームの１つに無作為に割り当てた。
【0280】
介入群及び継続期間：
試験介入の割り当ては、無作為化を基準とした（２：２：１：１）。患者を以下の治療アームのいずれかに割り当てた。投与量レベルは固定され、変更されない。
・アーム１＝ＦａｂＡ５．０ｍｇ／眼（０．１０ｍＬ）を月１回（ＥＭ）、１２ヵ月間（１２回投与）
・アーム２＝ＦａｂＡ５．０ｍｇ／眼（０．１０ｍＬ）を隔月１回（ＥＯＭ）、１２ヵ月間（６回投与）
・アーム３＝シャム注射をＥＭで１２ヵ月間（１２回のシャム注射）
・アーム４＝シャム注射をＥＯＭで１２ヵ月間（６回のシャム注射）
試験介入の割り当ては、無作為化を基準とした（２：２：１：１）。患者を以下の治療アームのいずれかに割り当てた。投与量レベルは固定され、変更されない。
・アーム１＝ＦａｂＡ５．０ｍｇ／眼（０．１０ｍＬ）を月１回（ＥＭ）、１２ヵ月間（１２回投与）
・アーム２＝ＦａｂＡ５．０ｍｇ／眼（０．１０ｍＬ）を隔月１回（ＥＯＭ）、１２ヵ月間（６回投与）
・アーム３＝シャム注射をＥＭで１２ヵ月間（１２回のシャム注射）
・アーム４＝シャム注射をＥＯＭで１２ヵ月間（６回のシャム注射）
【0281】
注射
ＦａｂＡ／シャム投与は、注射を行う医師が、無菌技術を使用して完了する。
ＦａｂＡ／シャム投与は、注射を行う医師が、無菌技術を使用して完了する。
【0282】
ＦａｂＡに無作為化された全ての患者は、５．０ｍｇ／眼のＩＶＴ投与（０．１０ｍＬの固定した体積）を、毎月１回または隔月１回で、１２ヵ月間受ける。
【0283】
注射後
薬剤投与の直後に、注射を行う医師は、手動弁の視力、または網膜中心動脈灌流を見ることができるかを評価する。必要に応じて、硝子体出血などの視力障害のその他の原因を排除する。必要であれば、手動弁の視力または網膜中心動脈灌流が観察されるまで、デジタルマッサージを実行する、さらに局所用／経口のＩＯＰ下降薬剤を投与する。
薬剤投与の直後に、注射を行う医師は、手動弁の視力、または網膜中心動脈灌流を見ることができるかを評価する。必要に応じて、硝子体出血などの視力障害のその他の原因を排除する。必要であれば、手動弁の視力または網膜中心動脈灌流が観察されるまで、デジタルマッサージを実行する、さらに局所用／経口のＩＯＰ下降薬剤を投与する。
【0284】
ＩＯＰ（眼圧測定）を、薬剤投与の３０分後に試験眼でのみ評価し、上昇している場合は、ＩＯＰ＜２５ｍｍＨｇになるまで、その後１５分毎に評価する。
【0285】
薬物動態、薬力学及び免疫原性
ＰＫ評価（ＦａｂＡ血清濃度）及びＰＤ評価（血清Ｃ１ｑ濃度及びその他のバイオマーカーの血漿中濃度）用の血液サンプルを、患者訪問時に、投与前３０分及び投与後３時間（±１５分）以内に収集する。
ＰＫ評価（ＦａｂＡ血清濃度）及びＰＤ評価（血清Ｃ１ｑ濃度及びその他のバイオマーカーの血漿中濃度）用の血液サンプルを、患者訪問時に、投与前３０分及び投与後３時間（±１５分）以内に収集する。
【0286】
患者の診療所訪問の間、注射前に、免疫原性試験（ＡＤＡ）用のサンプルを収集する。さらに、ＡＤＡ用のサンプルを、２週目に、診療所または家庭訪問時に収集する。
【0287】
薬物動態：この試験には血清が必要である。ＦａｂＡの血清濃度を測定するために、血液サンプルを収集する。
【0288】
薬力学：この検査には血清及び血漿が必要である。Ｃ１ｑの血清濃度と探索的補体バイオマーカーの血漿濃度を分析する。
【0289】
免疫原性：この試験には血清が必要である。免疫原性は、血清の抗薬物（ＦａｂＡ）抗体（ＡＤＡ）の分析によって評価する。
【0290】
硝子体注射の手順
ＦａｂＡの調製
ＦａｂＡの無菌のバイアルから、１９ゲージＸ１－１／２インチ、５マイクロメートルのフィルター針を備えた、無菌の１．０ｃｃのシリンジを用いて、ＦａｂＡの全体体積（約０．３ｍＬ）を引き出す。
ＦａｂＡの調製
ＦａｂＡの無菌のバイアルから、１９ゲージＸ１－１／２インチ、５マイクロメートルのフィルター針を備えた、無菌の１．０ｃｃのシリンジを用いて、ＦａｂＡの全体体積（約０．３ｍＬ）を引き出す。
【0291】
フィルター針を、３０ゲージＸ１／２インチの注射針と置き換える。注射の直前に、シリンジからＦａｂＡの余剰体積を排出して、シリンジ内に必要とされる注入量のみを残す。
【0292】
ＦａｂＡの投与体積は０．１０ｍＬに固定し、毎月１回（ＥＭ）で１２ヵ月間（１２回の投与）、または隔月に１回（ＥＯＭ）で１２ヵ月間（６回の投与）とする。
【0293】
硝子体注射の準備
１．試験眼を検査する。
２．注射前に、試験眼の術前眼圧（ＩＯＰ）を測定して、記録する。試験眼のみ眼圧測定を実施する。続行するには、ＩＯＰは≦２１ｍｍＨｇでなければならない。＞２１ｍｍＨｇである場合、研究者の裁量でＦａｂＡ注射の予定を変更し、ＩＯＰを管理する。
３．注射後、後極の視覚化が可能となるように、必要に応じて、注射３０分前に、試験眼に局所用塩化フェニレフリン点眼剤２．５％を１滴適用する。
４．注射直前：
・患者に、首が十分に支えられた状態で、検査椅子に横たわってもらう。
１．試験眼を検査する。
２．注射前に、試験眼の術前眼圧（ＩＯＰ）を測定して、記録する。試験眼のみ眼圧測定を実施する。続行するには、ＩＯＰは≦２１ｍｍＨｇでなければならない。＞２１ｍｍＨｇである場合、研究者の裁量でＦａｂＡ注射の予定を変更し、ＩＯＰを管理する。
３．注射後、後極の視覚化が可能となるように、必要に応じて、注射３０分前に、試験眼に局所用塩化フェニレフリン点眼剤２．５％を１滴適用する。
４．注射直前：
・患者に、首が十分に支えられた状態で、検査椅子に横たわってもらう。
【0294】
硝子体注射
１．注射には、手洗い、無菌手袋及びサージカルマスクが必要である。
２．試験眼に、局所用プロパラカイン０．５％を適用する。
３．まつげ及び眼瞼の縁に、ポビドンヨード１０％を適用する。注射前または注射後のいずれも、マイボーム腺の表出を避けるために、眼瞼の広範囲なマッサージは避ける。
４．手順の間、目的の注射部位から眼瞼を引き離す。顕微鏡の使用が推奨される。
５．目的の注射部位を含め、結膜表面に、ポビドンヨード５％を適用する。
６．ＦａｂＡの注射：角膜輪部の３．５～４ｍｍ後方、垂直直筋と水平直筋の間に、強膜に対して垂直に針を挿入する。針を引き抜いた直後に、注入部位上に無菌綿棒アプリケーターを適用して、硝子体の逆流を低減させる。
７．シャム注射：シャム注射の調製及び注射後手入れは、ＦａｂＡを用いた注射と同じである。典型的な硝子体注射の位置で、空のシリンジの鈍針を針なしで用いて、圧力を眼に適用することでシャム注射を実施する。
１．注射には、手洗い、無菌手袋及びサージカルマスクが必要である。
２．試験眼に、局所用プロパラカイン０．５％を適用する。
３．まつげ及び眼瞼の縁に、ポビドンヨード１０％を適用する。注射前または注射後のいずれも、マイボーム腺の表出を避けるために、眼瞼の広範囲なマッサージは避ける。
４．手順の間、目的の注射部位から眼瞼を引き離す。顕微鏡の使用が推奨される。
５．目的の注射部位を含め、結膜表面に、ポビドンヨード５％を適用する。
６．ＦａｂＡの注射：角膜輪部の３．５～４ｍｍ後方、垂直直筋と水平直筋の間に、強膜に対して垂直に針を挿入する。針を引き抜いた直後に、注入部位上に無菌綿棒アプリケーターを適用して、硝子体の逆流を低減させる。
７．シャム注射：シャム注射の調製及び注射後手入れは、ＦａｂＡを用いた注射と同じである。典型的な硝子体注射の位置で、空のシリンジの鈍針を針なしで用いて、圧力を眼に適用することでシャム注射を実施する。
【0295】
硝子体注射後
１．患者は、注射後、眼の評価及び安全性追跡調査のために、診療所内に留まることになっている。
２．直ちに手動弁の視力または網膜中心動脈灌流を評価し、硝子体出血などの視力障害のその他の原因を排除する。他の原因が見つからなければ、手動弁の視力または網膜中心動脈灌流が観察されるまで、デジタルマッサージを実行する、さらに局所用／経口のＩＯＰ下降薬剤を投与する。
３．試験眼で、注射後３０分でのみＩＯＰ測定値を得て、上昇している場合、ＩＯＰ＜２５ｍｍＨｇになるまで１５分毎に測定する。眼圧が１５分を超えて３０ｍｍＨｇを上回る場合、医師の裁量で治療するべきである。
４．局所用抗生物質は必要ない。
１．患者は、注射後、眼の評価及び安全性追跡調査のために、診療所内に留まることになっている。
２．直ちに手動弁の視力または網膜中心動脈灌流を評価し、硝子体出血などの視力障害のその他の原因を排除する。他の原因が見つからなければ、手動弁の視力または網膜中心動脈灌流が観察されるまで、デジタルマッサージを実行する、さらに局所用／経口のＩＯＰ下降薬剤を投与する。
３．試験眼で、注射後３０分でのみＩＯＰ測定値を得て、上昇している場合、ＩＯＰ＜２５ｍｍＨｇになるまで１５分毎に測定する。眼圧が１５分を超えて３０ｍｍＨｇを上回る場合、医師の裁量で治療するべきである。
４．局所用抗生物質は必要ない。
【0296】
参照による組み込み
本明細書で引用される特許、公開された特許出願、及び非特許文献の各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本明細書で引用される特許、公開された特許出願、及び非特許文献の各々は、それらの全体が参照により本明細書に組み込まれる。
【0297】
均等物
当業者らは、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または単なる通常の実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。
当業者らは、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態に対する多くの均等物を認識するか、または単なる通常の実験のみを使用して確認することができるであろう。そのような均等物は、以下の特許請求の範囲に包含されることが意図されている。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5A】
【図5B】
【図5C】
【図5D】
【図6】
【配列表】
【国際調査報告】