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特表2023-554524非アルコール性脂肪性肝炎の治療のための酸素含有構造強化脂肪酸を含む組合せ療法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2023-12-27
(54)【発明の名称】非アルコール性脂肪性肝炎の治療のための酸素含有構造強化脂肪酸を含む組合せ療法
(51)【国際特許分類】
A61K 31/19 20060101AFI20231220BHJP
A61K 45/00 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/519 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/575 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/22 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/421 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/357 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/336 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/4453 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/621 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/616 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/609 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/606 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/351 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/27 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/165 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/16 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/164 20060101ALI20231220BHJP
A61K 31/26 20060101ALI20231220BHJP
A61P 1/16 20060101ALI20231220BHJP
A61K 38/26 20060101ALI20231220BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20231220BHJP
【ＦＩ】
A61K31/19
A61K45/00
A61K31/519
A61K31/575
A61K31/22
A61K31/421
A61K31/357
A61K31/336
A61K31/4453
A61K31/621
A61K31/616
A61K31/609
A61K31/606
A61K31/351
A61K31/27
A61K31/165
A61K31/16
A61K31/164
A61K31/26
A61P1/16
A61K38/26
A61P43/00 121
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023537995
(86)(22)【出願日】2021-12-21
(85)【翻訳文提出日】2023-08-15
(86)【国際出願番号】 IB2021062115
(87)【国際公開番号】W WO2022137125
(87)【国際公開日】2022-06-30
(31)【優先権主張番号】63/128,996
(32)【優先日】2020-12-22
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】520456789
【氏名又は名称】ノースシー セラピューティクス ベスローテン フェンノートシャップ
(74)【代理人】
【識別番号】100149076
【弁理士】
【氏名又は名称】梅田 慎介
(74)【代理人】
【識別番号】100119183
【弁理士】
【氏名又は名称】松任谷 優子
(74)【代理人】
【識別番号】100173185
【弁理士】
【氏名又は名称】森田 裕
(74)【代理人】
【識別番号】100162503
【弁理士】
【氏名又は名称】今野 智介
(74)【代理人】
【識別番号】100144794
【弁理士】
【氏名又は名称】大木 信人
(74)【代理人】
【識別番号】100204582
【弁理士】
【氏名又は名称】大栗 由美
(72)【発明者】
【氏名】フレイザー，ディヴィッド アラン
【テーマコード（参考）】
4C084
4C086
4C206
【Ｆターム（参考）】
4C084AA02
4C084AA19
4C084BA01
4C084BA19
4C084BA23
4C084CA59
4C084DB35
4C084MA02
4C084NA05
4C084NA14
4C084ZA751
4C084ZC541
4C084ZC751
4C086AA01
4C086AA02
4C086BA02
4C086BA07
4C086BA12
4C086BC21
4C086BC69
4C086CB29
4C086DA11
4C086DA17
4C086MA02
4C086MA04
4C086NA05
4C086NA14
4C086NA15
4C086ZA75
4C086ZC75
4C206AA01
4C206AA02
4C206DA02
4C206DB03
4C206DB43
4C206GA04
4C206GA22
4C206GA26
4C206GA28
4C206GA37
4C206HA18
4C206HA22
4C206KA17
4C206MA02
4C206MA04
4C206NA05
4C206NA14
4C206NA15
4C206ZA75
4C206ZC54
4C206ZC75
(57)【要約】
本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療における使用のための組合せ療法であって、β－位に取り込まれた酸素およびα－置換基を有する不飽和脂肪酸ならびにグルカゴン様ペプチド１受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ阻害剤およびファルネソイドＸ受容体アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）【化1】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物、
ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤
を含む組合せ療法。
【請求項2】
前記第１の化合物が、式（Ｉ）のものであり、Ｒ２、Ｒ３、およびＸが、式（ＩＩ）【化2】
のために定義した通りである、請求項１に記載の使用のための請求項１に記載の組合せ療法。
【請求項3】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである、
非アルコール性脂肪性肝炎の治療における使用のための
請求項１に記載の使用のための請求項１もしくは２に記載の組合せ療法またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
【請求項4】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる、請求項１に記載の使用のための請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項5】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である、請求項１に記載の使用のための請求項１から３のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項6】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項１に記載の使用のための請求項１から４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項7】
前記第１の化合物に関してＸがカルボン酸である、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項8】
前記第１の化合物に関してＸがＣ１－Ｃ６アルキルエステルである、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項9】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる、請求項１に記載の使用のための請求項８に記載の組合せ療法。
【請求項10】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステルおよびエチルエステルの群から選択される、請求項１に記載の使用のための請求項１、８または９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項11】
前記第１の化合物に関してＸが、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリドおよび２－モノグリセリドから選ばれるグリセリドである、請求項１に記載の使用のための請求項１から６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項12】
前記第１の化合物が、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項１に記載の使用のための請求項１から１１のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項13】
前記第１の化合物が、そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項１に記載の使用のための請求項１２に記載の組合せ療法。
【請求項14】
前記第１の化合物が、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、【化3】
である、請求項１に記載の使用のための請求項１または２に記載の組合せ療法。
【請求項15】
前記第１の化合物が、用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項１に記載の使用のための請求項１から１４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項16】
前記第１の化合物が毎日１回投与される、請求項１に記載の使用のための請求項１から１５のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項17】
前記追加の活性薬剤が、セマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸（ＯＣＡ）から選ばれる、請求項１に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項18】
前記追加の活性薬剤がセマグルチドである、請求項１に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項19】
前記追加の活性薬剤がフィルソコスタットである、請求項１に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項20】
前記使用が、ＮＡＳＨを治療するまたは好転させる、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項21】
前記使用が、ＮＡＳＨを有する対象における肝線維症の発症を軽減するまたは既存の肝線維症を軽減する、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項22】
前記使用が、ＮＡＳＨを有する対象における肝炎症の発症を軽減するまたは既存の肝炎症を軽減する、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項23】
前記使用が、ＮＡＳＨを有する対象における脂肪性肝炎の発症を軽減するまたは既存の脂肪性肝炎を軽減する、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項24】
アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）【化4】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物、
ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤
を含む組合せ療法。
【請求項25】
前記第１の化合物が、式（Ｉ）のものであり、Ｒ２、Ｒ３、およびＸが、式（ＩＩ）【化5】
のために定義した通りである、請求項２４に記載の使用のための請求項２４に記載の組合せ療法。
【請求項26】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである、
非アルコール性脂肪性肝炎の治療における使用のための
請求項２４に記載の使用のための請求項２４または２５に記載の組合せ療法またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
【請求項27】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項28】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項29】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２７のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項30】
前記第１の化合物に関してＸがカルボン酸である、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項31】
前記第１の化合物に関してＸがＣ１－Ｃ６アルキルエステルである、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項32】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる、請求項２４に記載の使用のための請求項３１に記載の組合せ療法。
【請求項33】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステルおよびエチルエステルの群から選択される、請求項２４に記載の使用のための請求項２４、３１および３２のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項34】
前記第１の化合物に関してＸが、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリドおよび２－モノグリセリドから選ばれたグリセリドである、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から２９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項35】
前記第１の化合物がエナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から３４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項36】
前記第１の化合物がそのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項２４に記載の使用のための請求項３５に記載の組合せ療法。
【請求項37】
前記第１の化合物が、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、【化6】
である、請求項２４に記載の使用のための請求項２４または２５に記載の組合せ療法。
【請求項38】
前記第１の化合物が用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から３７のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項39】
前記第１の化合物が毎日１回投与される、請求項２４に記載の使用のための請求項２４から３８のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項40】
前記追加の活性薬剤が、セマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸（ＯＣＡ）から選ばれる、請求項２４に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項41】
前記追加の活性薬剤がセマグルチドである、請求項２４に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項42】
前記追加の活性薬剤がフィルソコスタットである、請求項２４に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項43】
前記使用が、ＡＳＨを治療するまたは好転させる、請求項２４から４２のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項44】
前記使用が、ＡＳＨを有する対象における肝線維症の発症を軽減するまたは既存の肝線維症を軽減する、請求項２４から４３のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項45】
前記使用が、ＡＳＨを有する対象における肝炎症の発症を軽減するまたは既存の肝炎症を軽減する、請求項２４から４４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項46】
前記使用が、ＡＳＨを有する対象における脂肪性肝炎の発症を軽減するまたは既存の脂肪性肝炎を軽減する、請求項２４から４５のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項47】
前記第１の化合物が組成物に製剤化されている、請求項１または２４に記載の使用のための先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項48】
前記組成物が、経口投与用に製剤化されている、請求項１に記載の使用のための請求項４７に記載の組合せ療法。
【請求項49】
前記薬学的組成物が、少なくとも１種の結合剤、賦形剤、希釈剤もしくは酸化防止剤またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項１または２４に記載の使用のための請求項４７から４８のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項50】
前記化合物が２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸である、請求項１または２４に記載の使用のための請求項４７から４９のいずれか一項に記載の組成物。
【請求項51】
それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）を治療する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：【化7】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物；ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる薬学的有効量の少なくとも１種の追加の活性薬剤を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項52】
前記第１の化合物が、式（Ｉ）：【化8】
のものである、請求項５１に記載の方法。
【請求項53】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグであり、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物である、請求項５１または５２に記載の方法。
【請求項54】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる、請求項５１から５３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項55】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である、請求項５１から５４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項56】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項５１から５５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項57】
前記第１の化合物に関してＸがカルボン酸である、請求項５１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項58】
前記第１の化合物に関してＸがＣ１－Ｃ６アルキルエステルである、請求項５１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項59】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる、請求項５１に記載の方法。
【請求項60】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステルおよびエチルエステルから選ばれる、請求項５１、５８または５９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項61】
前記第１の化合物に関してＸが、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリドおよび２－モノグリセリドから選ばれたグリセリドである、請求項５１から５６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項62】
前記第１の化合物が、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項５１から６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項63】
前記第１の化合物が、そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項６２に記載の方法。
【請求項64】
前記第１の化合物が、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、【化9】
である、請求項５１に記載の方法。
【請求項65】
前記化合物が、用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項５１から６４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項66】
前記化合物が毎日１回投与される、請求項５１から６５のいずれか一項に記載の方法。
【請求項67】
前記追加の活性薬剤が、セマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸（ＯＣＡ）から選ばれる、請求項５１から６６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項68】
前記追加の活性薬剤がセマグルチドである、請求項５１から６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項69】
前記追加の活性薬剤がフィルソコスタットである、請求項５１から６７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項70】
ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを治療するまたは好転させる、請求項５１から６９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項71】
ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを予防的に治療することを含む、請求項５１から７０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項72】
肝線維症の発症を軽減するもしくは予防的に治療するまたは既存の肝線維症を軽減する、請求項５１から７１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項73】
使用が、脂肪性肝炎の発症を軽減するまたは既存の脂肪性肝炎を軽減する、請求項５１から７２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項74】
前記第１の化合物が、薬学的組成物として製剤化されている、請求項５１から７３のいずれか一項に記載の方法。
【請求項75】
前記薬学的組成物が、経口投与用に製剤化されている、請求項７４に記載の方法。
【請求項76】
前記薬学的組成物が、少なくとも１種の結合剤、賦形剤、希釈剤もしくは酸化防止剤またはそれらの任意の組合せをさらに含む、請求項７４または７５に記載の方法。
【請求項77】
前記第１の化合物が２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸である、請求項５１から７６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項78】
治療の前記方法が予防的である、請求項５１から７７のいずれか一項に記載の方法。
【請求項79】
前記第１の化合物および少なくとも１種の追加の活性薬剤が、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せにより共投与される、請求項５１から７８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項80】
少なくとも１種のさらなる追加の活性薬剤を共投与することをさらに含む、請求項５１から７９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項81】
前記第１の化合物が約６００ｍｇの投与量で毎日投与される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項82】
前記化合物が約３００ｍｇの投与量で毎日投与される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項83】
肝炎症細胞が３０～５０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項84】
肝炎症細胞が６０～８０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項85】
脂肪肝面積が７０～９０％縮小される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項86】
脂肪滴を有する肝細胞の割合が７０～９０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項87】
ＮＡＦＬＤ活動性（ＮＡＳ）スコアが低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項88】
脂肪症スコアが低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項89】
肝臓ヒドロキシプロリン含量が２０～４０％低減される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項90】
ピクロシリウスレッド染色により決定される肝線維化面積が３０～５０％縮小される、先行する請求項のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項91】
脂肪肝疾患の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）【化10】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物、
ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤
を含む組合せ療法。
【請求項92】
前記第１の化合物が、式（Ｉ）のものであり、Ｒ２、Ｒ３、およびＸが、式（ＩＩ）【化11】
のために定義した通りである、請求項９１に記載の使用のための請求項９１に記載の組合せ療法。
【請求項93】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグ、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１または９２に記載の組合せ療法。
【請求項94】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９３のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項95】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項96】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９５のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項97】
前記第１の化合物に関してＸがカルボン酸である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項98】
前記第１の化合物に関してＸがＣ１－Ｃ６アルキルエステルである、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項99】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる、請求項９１に記載の使用のための請求項９８に記載の組合せ療法。
【請求項100】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステルおよびエチルエステルの群から選択される、請求項９１に記載の使用のための請求項９１、９８および９９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項101】
前記第１の化合物に関してＸが、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリドおよび２－モノグリセリドから選ばれるグリセリドである、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から９６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項102】
前記第１の化合物が、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０１のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項103】
前記第１の化合物が、そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項９１に記載の使用のための請求項１０２に記載の組合せ療法。
【請求項104】
前記第１の化合物が、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、【化12】
である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１または９２に記載の組合せ療法。
【請求項105】
前記第１の化合物が、用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項106】
前記第１の化合物が毎日１回投与される、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０５のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項107】
前記追加の活性薬剤が、セマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸（ＯＣＡ）から選ばれる、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項108】
前記追加の活性薬剤がセマグルチドである、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項109】
前記追加の活性薬剤がフィルソコスタットである、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１０６のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項110】
前記使用が、脂肪肝疾患を治療するまたは好転させる、請求項９１から１０９のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項111】
前記使用が、脂肪症を軽減するまたは好転させる、請求項９１から１１０のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項112】
前記脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項９１から１１１のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項113】
前記脂肪肝疾患がアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＤ）である、請求項９１から１１１のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項114】
前記脂肪肝疾患が、炎症反応および細胞傷害を伴わない、請求項９１から１１３のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項115】
前記化合物が２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸である、請求項９１に記載の使用のための請求項９１から１１４のいずれか一項に記載の組合せ療法。
【請求項116】
それを必要とする対象における脂肪肝疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：【化13】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物；ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる薬学的有効量の少なくとも１種の追加の活性薬剤を前記対象に投与することを含む方法。
【請求項117】
前記第１の化合物が、式（Ｉ）：【化14】
のものである、請求項１１６に記載の方法。
【請求項118】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、Ｘが、カルボン酸またはその誘導体であり、前記誘導体が、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグ、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物である、請求項１１６または１１７に記載の方法。
【請求項119】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３が、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる、請求項１１６から１１８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項120】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３がいずれも独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である、請求項１１６から１１９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項121】
前記第１の化合物に関してＲ２およびＲ３の一方が水素原子であり、他方がエチル基である、請求項１１６から１２０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項122】
前記第１の化合物に関してＸがカルボン酸である、請求項１１６から１２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項123】
前記第１の化合物に関してＸがＣ１－Ｃ６アルキルエステルである、請求項５１から１２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項124】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる、請求項１１６に記載の方法。
【請求項125】
前記第１の化合物に関してＸが、メチルエステルおよびエチルエステルから選ばれる、請求項１１６、１２３または１２４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項126】
前記第１の化合物に関してＸが、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリドおよび２－モノグリセリドから選ばれるグリセリドである、請求項１１６から１２１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項127】
前記第１の化合物が、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物の形態で存在する、請求項１１６から６１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項128】
前記第１の化合物が、そのＲ体で、そのＳ体でまたはラセミ体で存在する、請求項１２７に記載の方法。
【請求項129】
前記第１の化合物が、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）またはその薬学的に許容される塩もしくはエステルであり、式が、【化15】
である、請求項１１６に記載の方法。
【請求項130】
前記化合物が、用量当たり約５ｍｇから約４ｇの間の用量で投与される、請求項１１６から１２９のいずれか一項に記載の方法。
【請求項131】
前記化合物が毎日１回投与される、請求項１１６から１３０のいずれか一項に記載の方法。
【請求項132】
前記追加の活性薬剤が、セマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸（ＯＣＡ）から選ばれる、請求項１１６から１３１のいずれか一項に記載の方法。
【請求項133】
前記追加の活性薬剤がセマグルチドである、請求項１１６から１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項134】
前記追加の活性薬剤がフィルソコスタットである、請求項１１６から１３２のいずれか一項に記載の方法。
【請求項135】
脂肪肝疾患を治療するまたは好転させる、請求項１１６から１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項136】
脂肪肝疾患を予防的に治療することを含む、請求項１１６から１３４のいずれか一項に記載の方法。
【請求項137】
前記脂肪肝疾患が非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である、請求項１１６から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項138】
前記脂肪肝疾患がアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＤ）である、請求項１１６から１３６のいずれか一項に記載の方法。
【請求項139】
前記脂肪肝疾患が、炎症反応および細胞傷害を伴わない、請求項１１６から１３８のいずれか一項に記載の方法。
【請求項140】
前記第１の化合物が２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸である、請求項１３９に記載の方法。
【請求項141】
前記第１の化合物が約６００ｍｇの投与量で毎日投与される、請求項９１から１４０のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項142】
前記化合物が約３００ｍｇの投与量で毎日投与される、請求項９１から１４１のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項143】
脂肪肝面積が７０～９０％縮小される、請求項９１から１４２のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項144】
脂肪滴を有する肝細胞の割合が７０～９０％低減される、請求項９１から１４３のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項145】
ＮＡＦＬＤ活動性（ＮＡＳ）スコアが低減される、請求項９１から１４４のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【請求項146】
脂肪症スコアが低減される、請求項９１から１４５のいずれか一項に記載の組合せ療法および方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本出願は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる、２０２０年１２月２２日に出願された米国仮特許出願第６３／１２８，９９６号の優先権の利益を主張する。
【0002】
本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ならびに線維症および／または肝炎症によって特徴付けられる他の肝障害を治療するための組合せ療法に関する。さらに、本開示は、かかる組合せ療法を使用してそれを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、アルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）、ならびに線維症および／または肝炎症によって特徴付けられる他の肝障害を治療する方法に関する。組合せ療法は、β－位に取り込まれた酸素およびα－置換基を有する不飽和脂肪酸を含む。
【背景技術】
【0003】
単独肝脂肪症（組織学的に５％超の肝細胞）を含むはるかに広範囲の肝臓疾患をＮＡＦＬＤが包含するにも関わらず、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）および非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）はしばしば同義で使用される。肝脂肪症は、炎症反応および細胞傷害を伴わないとき、比較的良性の障害である可能性が最も高い。しかし、ＮＡＦＬＤ患者のサブグループは、肝脂肪症に加えて肝細胞損傷および炎症を有し、これは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）として既知の状態である。ＮＡＳＨは、組織学的にアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）とほとんど区別できない。ＮＡＦＬＤにおいて見られる単純な脂肪症は短期の罹患率または死亡率の増加と相関しないが、ＮＡＳＨは肝硬変、肝不全および肝細胞癌（ＨＣＣ）のリスクを劇的に高める。ＮＡＳＨに起因する肝硬変は、肝臓移植の理由として頻度がますます高くなっている。肝臓が原因の罹患率および死亡率はＮＡＳＨの患者において大きく増加するが、それらは心血管疾患による罹患率および死亡率とさらにいっそう強く相関する。
【0004】
ＮＡＳＨの診断およびステージ分類の統一基準はまだ議論されている。ＮＡＳＨの鍵となる組織学的要素は脂肪症、肝細胞の風船様腫大および小葉炎症であり、線維症はＮＡＳＨの組織学的定義の一部ではない。しかし、肝生検における線維症の程度（ステージ）は予後の予測に役に立つが、肝生検における炎症および壊死の程度（グレード）は役に立たない。
【0005】
ＮＡＳＨと同じく、アルコール性脂肪肝疾患としても既知のアルコール性肝臓疾患（ＡＬＤ）は、脂肪肝または単純な脂肪症からアルコール性肝炎（すなわち、ＡＳＨ）への移行、最終的には肝線維症または肝硬変を伴う慢性肝炎への移行を表す組織学的ステージにグループ化することができる。したがって、ＡＳＨおよびＮＡＳＨの起源は異なるかもしれないが、それぞれの慢性侵襲に対する肝反応には、マクロファージ活性化およびサイトカイン産生ならびにその結果生じる活性化星細胞、すなわち増殖性の筋線維芽細胞が関与する炎症促進および線維化促進カスケードを含む多くの類似点がある。（例えば、Ｆｒｉｅｄｍａｎ，ＳＬ；Ａｌｃｏｈｏｌｉｓｍ： Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ．１９９９ Ｍａｙ；２３（５）：９０４－９１０を参照されたい。）
【0006】
様々な組織学的要素に関して、オメガ－３脂肪酸による治療がＮＡＦＬＤの患者において肝脂肪症を効果的に軽減することが明らかになっている（Ｓｃｏｒｌｅｔｔｉ Ｅ，ら、Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ ａｎｄ ｄｏｃｏｓａｈｅｘａｎｏｉｃ ａｃｉｄｓ ｉｎ ｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃ ｆａｔｔｙ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ： Ｒｅｓｕｌｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ＊ＷＥＬＣＯＭＥ ｓｔｕｄｙ、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ．２０１４ Ｏｃｔ；６０（４）：１２１１－２）かかる研究は、疾患の初期のステージで治療が確立された場合、それはおそらく、後のより重篤な疾患のステージへの進行を遅らせるであろうことを示唆する。しかし、オメガ－３脂肪酸が、顕著な組織学的変化／炎症性変化が起きたＮＡＳＨを治療するかつ／または好転させるのに十分に強力であるかどうか疑わしい（Ｓａｎｙａｌ ＡＪ，ら；ＥＰＥ－Ａ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ、Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ．２０１４ Ａｕｇ；１４７（２）：３７７－８４．ｅ１）。
【0007】
特に、肝線維症は肝硬変にさらに進行する可能性があり、ひいては罹患率および死亡率の大幅な増加に関連するため、ＮＡＳＨおよびＡＳＨの線維症要素を標的にすることは、これらの適応症の進行形態の治療の成功に関連する。それは、慢性肝臓疾患の臨床研究における主要ハードエンドポイントも表す。例えば、明らかになりつつあるデータは、ＮＡＳＨそれ自体ではなく線維症が肝臓関連死および非肝臓関連死の両方の最も重要な組織学的予測因子であることを示唆する。加えて、肝硬変は原発性肝臓がんの有力な補助因子である。
【0008】
ＷＯ２０１６１７３９２３Ａ１には、２－エチル－２－（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエニルチオ）ブタン酸（化合物Ｎ）のような硫黄含有構造修飾脂肪酸がＮＡＳＨの治療において有用であり得ることが開示されている。これは、食餌誘発性肝線維症の防止において、化合物Ｎが、ＰＰＡＲ－ガンマアゴニストであるロシグリタゾンよりも優れているという知見に基づいていた。肝臓への炎症細胞の流入を化合物Ｎが防いだことも示された。非常に軽度の肝線維化反応を起こすモデルであるＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰマウスにおいて線維症（ヒドロキシプロリン／プロリン比により測定される）の軽減に化合物Ｎが有効であったことが示された。
【0009】
その内容が参照により本明細書に組み込まれる、ＢＡＳＦ ＡＳのＷＯ２０１９１１１０４８には、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）のような酸素含有構造修飾脂肪酸がＮＡＳＨおよびＡＳＨの治療において有用であり得ることが開示されている。化合物Ａは、脂肪肝、炎症および線維症を含むＮＡＳＨの複数の側面に対処することが判明した。これらの知見は、ＡＰＯＥ＊３Ｌｅｉｄｅｎ．ＣＥＴＰ高脂肪食マウスモデル、肥満食誘発性ＮＡＳＨマウスモデル（ｏｂ／ｏｂ ＡＭＬＮ高脂肪給餌）、ストレプトゾトシン注射／高脂肪食誘発性ＮＡＳＨ（ＳＴＡＭ）マウスモデル、ならびにメチオニンおよびコリン欠乏食誘発性ＮＡＳＨ（ＣＤＡＡ／高脂肪食）マウスモデルを含む、炎症および線維症の重症度が様々である複数のげっ歯類ＮＡＳＨモデルにおいて再現された。
【0010】
ＮＡＳＨのヒトモデルおよび動物モデルの両方における研究は、単独肝脂肪症とは対照的に、脂肪性肝炎および線維症の発症に関与する複数の因子が存在することを説得力をもって示した。これらの因子には、インスリン抵抗性、酸化ストレス、炎症、腸由来の内毒素ならびに過剰な肝コレステロールおよび胆汁酸が含まれる。これらの因子のすべてが、遺伝的に感受性の高い個体において寄与する重要な役割を果たすことが明らかになっており、したがって、これらの経路を標的にする薬物がＮＡＳＨの治療のために開発中である。ＮＡＳＨの疾病原因の複雑さは肝外臓器の関与にも関連する。例えば、腸由来の炎症性サイトカイン／内毒素は、強力な炎症促進性刺激となり得る。加えて、インスリン抵抗性の内臓脂肪および末梢脂肪のいずれも、既に感受性の肝臓を遊離脂肪酸および炎症促進性アディポカインで溢れさせ得る。
【発明の概要】
【発明が解決しようとする課題】
【0011】
ＮＡＳＨおよびＡＳＨの複雑さに基づいて、組合せ療法剤が、これらの疾患に寄与する異なる経路を標的にするのに望ましいであろう。
【課題を解決するための手段】
【0012】
本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療のための、酸素および１種または複数種の追加の活性薬剤を含む構造強化脂肪酸を含む組合せ療法を提供する。同じく、本開示は、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを治療する方法であって、酸素含有構造修飾脂肪酸および少なくとも１種の追加の活性薬剤を投与することを含む方法を提供する。
【0013】
本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）
【0014】
【化1】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基の群から選択され、Ｒ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物、ならびに
グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を提供する。
【0015】
同じく、本開示は、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを治療する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：
【0016】
【化2】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、上述の通り定義される）
の第１の化合物を対象に投与することを含み、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を投与することをさらに含む方法に関する。
【0017】
いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコール酸（ＯＣＡ）である。
【0018】
いくつかの実施形態において、第１の化合物においてＲ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、アルキル基、アルコキシ基、アルケニル基からなる置換基の群から選択されてもよく；またはＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物である。
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物である。
【0019】
本開示は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの療法的および／または予防的治療における使用のための、式（Ｉ）：
【0020】
【化3】
（式中、Ｒ２およびＲ３およびＸは、式ＩＩと同様に定義される。とりわけ、
Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体であり、誘導体は、カルボン酸エステル、グリセリドまたはリン脂質である）
の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物、
ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤
を含む組合せ療法にも関する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコール酸（ＯＣＡ）である。
【0021】
同じく、本開示は、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを治療する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）：
【0022】
【化4】
（式中、Ｒ２およびＲ３およびＸは、上述の通り定義される）の第１の化合物を投与することを含み、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を投与することをさらに含む方法に関する。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）：
【0023】
【化5】
である。
【0024】
本開示はまた、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの療法的および／または予防的治療における使用のための、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）：
【0025】
【化6】
またはその薬学的に許容される塩もしくはエステル、
ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤
を含む組合せ療法も提供する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコール酸（ＯＣＡ）である。
【0026】
本開示は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを有する対象における組合せ療法の効果にも関する。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における血漿および／または肝臓トリグリセリドのレベルを低下させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における血漿および／または肝臓コレステロールのレベルを低下させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における脂肪肝を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における肝炎症を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における肝線維症を軽減する。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における脂肪性肝炎を好転させる。
【図面の簡単な説明】
【0027】
【図1】図１Ａ～図１Ｂは、ＣＤＡＡ／高脂肪食マウスモデルにおける相対的体重（図１Ａ）および肝重量（図１Ｂ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの８週間の投与の影響を示す図である。同じ実験条件が、残りの図に示される結果に適用される。
【図2】図２Ａ～図２Ｂは、血漿アラニントランスアミナーゼ（ＡＬＴ）のレベル（図２Ａ）および血漿アスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）のレベル（図２Ｂ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図3】図３Ａ～図３Ｂは、血漿トリグリセリド（ＴＧ）（図３Ａ）および血漿総コレステロール（ＴＣ）（図３Ｂ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコステート、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図5】図５Ａ～図５Ｂは、脂肪肝面積（肝臓脂質の相対レベル）（図５Ａ）および脂肪滴を有する肝細胞の割合（図５Ｂ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図6】脂肪肝スコアに対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図9】図９Ａ～図９Ｂは、肝臓ヒドロキシプロリン（ＨＰ）の相対レベル（図９Ａ）およびガレクチン－３発現の肝面積（図９Ｂ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図10-1】図１０Ａ～図１０Ｃは、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）により決定される肝線維化面積（図１０Ａ）、ＰＳＲにより決定される肝類洞線維化面積（図１０Ｂ）およびＰＳＲにより決定される肝門脈周囲線維化面積（図１０Ｃ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【図10-2】図１０Ａ～図１０Ｃは、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）により決定される肝線維化面積（図１０Ａ）、ＰＳＲにより決定される肝類洞線維化面積（図１０Ｂ）およびＰＳＲにより決定される肝門脈周囲線維化面積（図１０Ｃ）に対する化合物Ａ、セマグルチド、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびそれらの組合せの影響を示す図である。
【発明を実施するための形態】
【0028】
本開示の１つの態様の文脈において記載される実施形態および特徴は本開示の他の態様にも適用されることに留意されたい。特に、本開示による非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール脂肪性肝炎を治療する方法に適用される実施形態は、本開示による非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール脂肪性肝炎すべての治療における使用のための化合物および／または組合せ療法を対象とする態様にも適用される。
【0029】
本開示の特定の態様を以下でより詳しく説明する。本出願において使用され、本明細書において明らかにされる用語および定義は、本開示内における意味を表すことを意図する。
【0030】
単数形「ａ」、「ａｎ」および「ｔｈｅ」は、文脈により定められていない限り、複数の指示対象を含む。
【0031】
「およそ」および「約」という用語は、示した数または値とほぼ同じであることを意味する。本明細書において使用されるとき、「およそ」および「約」という用語は、他に指定されていない限り、指定の量、頻度または値の±５％を包含すると一般に理解されるべきである。
【0032】
「治療する」、「治療すること」および「治療」という用語は、ヒトまたは非ヒト哺乳動物に恩恵をもたらし得る任意の療法的または予防的適用を含む。ヒトの治療および獣医学的治療の両方が本開示の範囲内である。治療は既存の状態に対して応答的であり得るかまたは予防的、すなわち防止的であり得る。
【0033】
「を防止することおよび／または治療すること」および「の療法的および／または予防的治療」という用語は同義で使用することができる。典型的には、本開示の化合物および／または組合せ療法は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨの治療、すなわち療法治療のために使用される。しかし、場合によって、例えば、患者がＮＡＳＨもしくはＡＳＨに関連する１つまたは複数の危険因子を有する場合、組成物がＮＡＳＨまたはＡＳＨの予防的治療のために使用されることも予見される。
【0034】
「好転させる」および「縮小する」という用語ならびにそれらの変種（例えば、好転、縮小）は、治療の開始時のレベルよりも有利なレベルまで既存の状態の重症度を軽減するまたはその状態のパラメータを減少させる治療に関して本明細書において使用される。
【0035】
本明細書において使用される「投与する」、「投与」および「投与すること」という用語は、（１）保健医もしくはその指定代理人のいずれかによりまたはその指示の下で、本開示による化合物および／もしくは組合せ療法を提供すること、与えること、投薬することおよび／または処方すること、ならびに（２）ヒト患者もしくはその本人または非ヒト哺乳動物により、本開示による組成物を投入すること、摂取することまたは消費することを指す。
【0036】
「組み合わせて投与される」および「共投与（ｃｏ－ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」または「共投与（ｃｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）」という用語は同義で使用され、（ａ）式（Ｉ）もしくは（ＩＩ）の化合物または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物の投与；および（ｂ）調和して一緒に、少なくとも１種の追加の活性薬剤の投与を指す。例えば、共投与は、同時投与、順次投与、重複投与、間隔投与、継続投与またはそれらの組合せであり得る。投与方法は、化合物および（１種または複数種の）追加の薬剤において異なっていてもよく、共投与は、経口、皮下、舌下、経粘膜、非経口、静脈内、動脈内、腹腔内、頬側、舌下、局所、膣、直腸、眼、耳、経鼻、吸入および経皮、またはそれらの組合せなど、任意の投与方法を含む。非経口投与の例には、静脈内（ＩＶ）投与、動脈内投与、筋肉内投与、皮下投与、骨内投与、髄腔内投与またはそれらの組合せが含まれるが、これらに限定されない。式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物および追加の活性薬剤は独立して投与することができて、例えば、経口的または非経口的に投与することができる。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物および追加の活性薬剤はいずれも経口的に投与される。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は経口的に投与され、追加の活性薬剤は非経口的に投与される。非経口投与は注射または注入により実施することができる。いくつかの実施形態において、本開示の方法および／または使用は、少なくとも２種の異なる活性薬剤、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物および追加の活性薬剤をそれぞれ使用するＮＡＳＨもしくはＡＳＨの療法的および／または予防的治療を対象とする。少なくとも２種の活性薬剤は、薬剤が例えば別々に充填され、両方の薬剤が最適な所期の効果を実現することが必要とされる「組合せ生成物」または「組合せ療法」として見ることができる。
【0037】
「薬学的有効量」という用語は、所望の薬理効果および／または治療効果を実現するのに十分な量、すなわち、その所期の目的に有効な開示されている化合物の量を意味し、「治療的有効量」という用語と交換可能である。個々の対象／患者のニーズは様々であり得るが、開示されている化合物の有効量の最適な範囲の決定は当業者の技能の範囲内である。一般に、本発明に開示されている化合物および／または組合せ療法で疾患および／または状態を治療するための投与計画は、対象／患者のタイプ、年齢、重量、性別、食事などの様々な因子および／または病状に従って決定することができる。
【0038】
「薬学的組成物」という用語は、医学的使用に適した任意の形態の本開示による化合物または化合物の組合せを意味する。
【0039】
本開示の式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、エナンチオマー、ジアステレオマーまたはそれらの混合物を含む様々な立体異性体で存在し得る。本開示は、式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物のすべての光学異性体ならびにそれらの混合物を包含することが理解されるであろう。したがって、ジアステレオマー、ラセミ体および／またはエナンチオマーとして存在する本開示の式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は本開示の範囲内である。
【0040】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および／またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）
【0041】
【化7】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択されてもよく、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物；および
少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む。
【0042】
同じく、本開示は、脂肪肝疾患の療法的および／または予防的治療における使用のための、式（ＩＩ）
【0043】
【化8】
（式中、Ｒ１は、３～６個の二重結合を有するＣ１０－Ｃ２２アルケニルから選択され、
Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、水素原子、ヒドロキシ基、アルキル基、ハロゲン原子、アルコキシ基、アシルオキシ基、アシル基、アルケニル基、アルキニル基、アリール基、アルキルチオ基、アルコキシカルボニル基、カルボキシ基、アルキルスルフィニル基、アルキルスルホニル基、アミノ基およびアルキルアミノ基からなる置換基の群から選択されてもよく、ここでＲ２およびＲ３は、シクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタンまたはシクロヘキサンのようなシクロアルカンを形成するように接続していてもよく、
Ｘは、カルボン酸またはその誘導体を表し、誘導体は、カルボン酸エステルなどのカルボキシレート；グリセリド；無水物；カルボキサミド；リン脂質；もしくはヒドロキシメチル；またはそれらのプロドラッグである）の第１の化合物またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物；および
少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を対象とする。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は、炎症反応および細胞傷害を伴わない。
【0044】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選択される。
【0045】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、ＧＬＰ－１受容体アゴニストから選択される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、ＡＣＣ阻害剤から選択される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、ＦＸＲアゴニストから選択される。
【0046】
いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドである。いくつかの実施形態において、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットである。いくつかの実施形態において、ＦＸＲアゴニストはオベチコール酸（ＯＣＡ）である。
【0047】
いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤はセマグルチドである。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤はフィルソコスタットである。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤はオベチコール酸（ＯＣＡ）である。
【0048】
いくつかの実施形態において、第１の化合物に関してＲ１は、５個または６個の二重結合など、３～６個の二重結合を有するＣ１８－Ｃ２２アルケニルである。いくつかの実施形態において、１個の二重結合はオメガ－３位にある。
【0049】
好ましい実施形態において、第１の化合物に関してＲ２およびＲ３は、水素原子ならびに直鎖、分岐鎖および／または環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれる。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの少なくとも１つは、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ブチル基およびペンチル基から選ばれる。
【0050】
いくつかの実施形態において、第１の化合物に関してＸは、カルボン酸またはカルボン酸エステル；またはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物を表す。
【0051】
いくつかの実施形態において、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨを治療する方法であって、薬学的有効量の式（ＩＩ）：
【0052】
【化9】
（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、上述の通り定義される）の第１の化合物；またはそれらのプロドラッグまたはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物；および少なくとも１種の追加の活性薬剤を対象に投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選択される。
【0053】
いくつかの実施形態において、本開示は、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎またはアルコール性脂肪性肝炎を治療する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）：
【0054】
【化10】
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、式（ＩＩ）と同様に定義される）の第１の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を対象に投与することを含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコリンである。
【0055】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
【0056】
同様に、本開示は、それを必要とする対象における脂肪肝疾患を治療する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）または（ＩＩ）（式中、Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、上述の通り定義される）の第１の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を対象に含む方法を提供する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコリンである。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は、炎症反応および細胞傷害を伴わない。
【0057】
いくつかの実施形態において、本開示は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの治療における使用のための、式（Ｉ）：
【0058】
【化11】
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、式（ＩＩ）と同様に定義される）の第１の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を提供する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコリンである。
【0059】
いくつかの実施形態において、本開示は、脂肪肝疾患の治療における使用のための、式（Ｉ）：
【0060】
【化12】
（式中、Ｒ２、Ｒ３およびＸは、式（ＩＩ）と同様に定義される）の第１の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を提供する。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはオベチコリンである。いくつかの実施形態において、いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は、炎症反応および細胞傷害を伴わない。
【0061】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、水素原子または直鎖、分岐鎖および／もしくは環状Ｃ１－Ｃ６アルキル基から独立して選ばれ、
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
Ｘは、カルボン酸またはカルボン酸エステルであり；または前述のいずれかの薬学的に許容される塩、溶媒和物、またはかかる塩の溶媒和物。
【0062】
Ｒ２およびＲ３が異なる場合、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は立体異性体で存在することができる。本開示は、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物のすべての光学異性体ならびにそれらの混合物を包含することが理解されるであろう。
【0063】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、水素原子、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、イソプロピル基、ブチル基およびペンチル基の群から独立して選択される。
【0064】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、水素原子、メチル基およびエチル基の群から独立して選択される。
【0065】
少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、Ｒ２およびＲ３のうちの他の１つは、Ｃ１－Ｃ３アルキル基から選ばれる。１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、Ｒ２およびＲ３のうちの他の１つは、メチル基およびエチル基から選択される。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つは水素原子であり、他の１つはエチル基である。
【0066】
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の両方の化合物に関して、Ｒ２およびＲ３は、いくつかの実施形態において、独立してＣ１－Ｃ６アルキル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３の両方がＣ１－Ｃ３アルキル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は、同じかまたは異なり、それぞれは、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基およびイソプロピル基から独立して選ばれる。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３は同じであり、一対のメチル基、一対のエチル基、一対のｎ－プロピル基および一対のイソプロピル基から選択される。少なくとも１つの実施形態において、Ｒ２およびＲ３はエチル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つはメチル基であり、他の１つはエチル基である。いくつかの実施形態において、Ｒ２およびＲ３のうちの１つはエチル基であり、他の１つはｎ－プロピル基である。
【0067】
少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、エナンチオマー（ＲまたはＳ）、ジアステレオマーまたはそれらの混合物など、それらの様々な立体異性体で存在する。少なくとも１つの実施形態において、化合物はラセミ体で存在する。
【0068】
式（Ｉ）または（ＩＩ）による化合物が、少なくとも１つの立体中心を有する対イオンの塩または少なくとも１つの立体中心を有するアルコールのエステルである場合、化合物は複数の立体中心を有し得る。それらの状況では、本開示の化合物はジアステレオマーとして存在し得る。したがって、少なくとも１つの実施形態において、本開示の化合物は少なくとも１つのジアステレオマーとして存在する。
【0069】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、フィルソコスタットと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、ＯＣＡと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、セマグルチドと組み合わせて投与される。
【0070】
少なくとも１つの実施形態において、本開示の式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）：
【0071】
【化13】
である。
【0072】
少なくとも１つの実施形態において、本開示の式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、式：
【0073】
【化14】
により表される、そのＳ体および／またはＲ体で存在する２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）である。
【0074】
いくつかの実施形態において、２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）は、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびセマグルチドから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤と組み合わせて投与される。
【0075】
いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルコソスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸（化合物Ａ）である。
【0076】
いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における血漿および／または肝臓トリグリセリドのレベルを低下させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における血漿および／または肝臓コレステロールのレベルを低下させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における脂肪肝を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における肝炎症を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、対象における肝線維症を軽減する。いくつかの実施形態において、組合せ療法の使用は、脂肪性肝炎を好転させる。
【0077】
先述の通り、複数の非依存的および相互依存的な代謝要素、炎症性要素、最終的に線維化要素は、ヒトＮＡＳＨの発症に収束する。いかなる治療の成功も、ＮＡＳＨの複数の側面に、例えば上流の代謝／炎症標的を介して対処することが必要になる可能性がある。しかし、線維症発症は臨床転帰に関連するため、ＮＡＳＨ治療法は、炎症性要素を標的にすべきであり、さらに、線維症の発症を軽減するまたは予防的に治療するべきである。含まれる例は、化合物Ａなどの酸素含有構造修飾脂肪酸を含む組合せ療法の驚くべきかつ予想外に強力な抗炎症効果および抗線維化効果ならびに脂肪症に対する強力な効果を示す。これらの知見は、ヒト対象におけるＮＡＳＨおよびＡＳＨの療法的および／または予防的治療における使用のための組合せ療法における本開示の酸素含有化合物の使用を支持する。
【0078】
化合物Ａならびにフィルソコスタット、オベチコリン酸（ＯＣＡ）およびセマグルチドのうちの少なくとも１種を含む組合せ療法が、線維症の発症の軽減または予防的治療および肝線維症のマーカーの好転、例えば、ＣＤＡＡ－ＨＦＤ（コリン欠乏高脂肪食）、食餌誘発性ＮＡＳＨマウスモデルにおけるピクロシリウスレッド染色の組織学的評価により測定される線維化面積において化合物Ａ単独よりも高い有効性を有することが判明したのは驚くべきことであった。例えば、化合物Ａおよびセマグルチドの組合せは、ビヒクルと比較して、ならびに化合物Ａおよびセマグルチド単独の両方と比較して、ピクロシリウスレッド（ＰＳＲ）を用いて決定される肝臓の線維化面積および線維化類洞面積を有意に縮小した（図１０Ａおよび図１０Ｂ）。化合物ＡおよびＯＣＡの組合せは、ビヒクルならびに化合物ＡおよびＯＣＡ単独と比べて、α－ＳＭＡを発現させる肝面積を有意に縮小した（図１１Ｂ）。驚くべきことに、化合物ＡもＯＣＡもビヒクルと比較してα－ＳＭＡ肝臓含量に有意に影響しないにも関わらず、この組合せは有意な影響を与えた。
【0079】
化合物Ａおよびセマグルチドの組合せならびに化合物Ａおよびフィルソコスタットの組合せは、予想外にも、ガレクチン－３を発現させる肝面積を、療法を開始する前に存在したベースラインレベル未満に縮小した（図９Ｂ）。セマグルチデューもフィルソコスタットもビヒクルと比較してガレクチン－３肝臓含量に対して有意な影響を与えないことを鑑みると、これは驚くべきことであった。ガレクチン－３は、線維症および炎症の肝マーカーである。
【0080】
ＮＡＳＨ関連罹患率および死亡率における線維症の重要性を考えると、本明細書に記載のＣＤＡＡ誘発性ＮＡＳＨモデルの結果は、本明細書に提示の組合せ療法がＮＡＳＨ関連合併症の治療において有効であるという考えを支持する。この知見はまた、炎症反応に対する組合せ療法の効果、ならびに脂肪症に対する効果によって支持された。驚くべきことに、フィルソコスタットと組み合わせた化合物Ａ、セマグルチドと組み合わせた化合物ＡおよびＯＣＡと組み合わせた化合物Ａはすべて、炎症細胞および炎症性病巣の数を、療法を開始する前に存在したベースラインレベル未満まで低減させた（図７Ａおよび図７Ｂ）。化合物Ａ単独も、炎症のこれらの指標をベースラインレベル未満に低減させた。セマグルチド単独がビヒクルと比べて有意な影響を与えないにも関わらず、化合物Ａおよびセマグルチドの組合せは、驚くべきことに、化合物Ａ単独よりもはるかに多くの炎症細胞および炎症性病巣を低減させた。
【0081】
組合せ療法はまた、脂肪症を有意に軽減した。例えば、フィルソコスタットと組み合わせた化合物Ａ、セマグルチドと組み合わせた化合物ＡおよびＯＣＡと組み合わせた化合物Ａによる治療はすべて、これらの個々の化合物の単剤療法で治療された群と比べて肝臓トリグリセリドレベルのより大きい低下を示す（図４Ｂ）。特に、セマグルチド単独がビヒクルと比べて肝臓トリグリセリドレベルに有意に影響しないにも関わらず、化合物Ａおよびセマグルチドの組合せの結果、いずれかの薬剤単独よりも肝臓トリグリセリドのレベルが有意に低くなった。加えて、化合物Ａおよびフィルソコステートの組合せが、いずれかの薬剤単独と比べて肝臓トリグリセリドレベルを大きくかつ有意に低減させることは予想外であった。
【0082】
化合物Ａおよびセマグルチドの組合せならびに化合物およびフィルソコスタットの組合せそれぞれにより得られた驚くべき結果が、脂肪肝面積（図５Ａ）および脂肪滴を有する肝細胞の割合（図５Ｂ）に対する影響において同様に示された。具体的には、セマグルチド単独がビヒクルと比較していずれのパラメータにも有意に影響しないにも関わらず、化合物Ａおよびセマグルチドの組合せは、脂肪肝面積および脂肪滴を有する肝細胞の割合を、化合物Ａ単独が低下させるよりもさらに有意に低下させた。化合物Ａおよびフィルソコスタットの組合せは、肝臓脂質含量および脂肪滴を有する肝細胞の割合を、化合物Ａまたはフィルソコスタット単独のいずれかよりもはるかに大きい程度に有意に低下させた。これらの組合せの優れた効果は、脂肪症（図６）およびＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）（図８Ｂ）の改善にさらに反映される。
【0083】
式（ＩＩ）または式（Ｉ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む本開示の組合せ療法は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、または脂肪肝、線維症および／もしくは炎症によって特徴付けられる他の肝障害を治療するかつ／または好転させるために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＮＡＳＨの治療は予防的であり得る。さらに、化合物は、ＮＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子を治療するために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＮＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子の治療は予防的であり得る。
【0084】
ＮＡＳＨとアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）との間の炎症促進および線維化促進機序における類似性を鑑み、ＮＡＳＨモデルにおける本明細書に記載の開示されている化合物の抗炎症効果および抗線維化効果は、すなわち、ＡＳＨの治療および／または好転に関連し、特に、進行の防止ならびに進行したＡＳＨおよび関連線維症の縮小の誘発に関連する。
【0085】
したがって、式（ＩＩ）または式（Ｉ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、ＡＳＨを治療するかつ／または好転させるために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＡＳＨの治療は予防的であり得る。さらに、化合物は、ＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子を治療するために投与することができる。いくつかの実施形態において、ＡＳＨに関連する少なくとも１つの疾患、状態または危険因子の治療は予防的であり得る。
【0086】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における血漿トリグリセリドおよび／またはコレステロールのレベルを低下させるために使用される。
【0087】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪肝を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における相対的肝トリグリセリドおよび／またはコレステロールレベルを低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝臓脂質の脂肪肝面積を縮小する。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪滴を有する肝細胞の割合を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪症スコアを低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。
【0088】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、療法治療を受けていない脂肪肝疾患を有する対象と比較して、脂肪肝疾患を有する対象における脂肪肝を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていない脂肪肝疾患を有する対象と比較して、脂肪肝疾患を有する対象における相対的肝トリグリセリドおよび／またはコレステロールレベルを低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていない脂肪肝疾患を有する対象と比較して、脂肪肝疾患を有する対象における肝臓脂質の脂肪肝面積を縮小する。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、脂肪肝疾患を有する対象における脂肪滴を有する肝細胞の割合を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていない脂肪肝疾患を有する対象と比較して、脂肪肝疾患を有する対象における脂肪症スコアを低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患はアルコール性脂肪肝疾患（ＡＬＦＤ）である。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は、炎症反応および細胞傷害を伴わない。
【0089】
対象の脂肪症スコアは、ＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）の要素として、かつ本明細書の生物学的実施例に記載の通り、Ｋｌｅｉｎｅｒら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５；４１に概説された基準により決定される。具体的には、そして実施例の表３に示す通り、ＮＡＳは、脂肪滴を有する肝細胞の割合により決定される脂肪症、炎症性病巣の数により決定される小葉炎症、および風船様腫大変性の定量的評価を評価する複合スコアである。炎症反応および細胞傷害を伴わない脂肪肝疾患は、ＮＡＳ評価の下で評価される小葉炎症も風船様腫大変性も有さない。脂肪肝面積は、生物学的実施例に記載の通り決定される。
【0090】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝炎症を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝炎症細胞の数および／または肝炎症性病巣の数を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。
【0091】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。
【0092】
対象のＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）は、Ｋｌｅｉｎｅｒら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５；４１に概説の通り、そして本明細書の生物学的実施例に記載の通り決定される。
【0093】
いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝線維症を低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における相対的肝臓ガレクチン－３のレベルを低減させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、対象における肝臓ヒドロキシプロリン含量を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるＰＳＲにより決定される肝線維化面積を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるＰＳＲにより決定される肝類洞線維化面積を減少させる。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、療法治療を受けていないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比較して、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるα－平滑筋アクチンを発現させる肝面積を縮小する。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。
【0094】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法は、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ－１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ－アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）－２１アゴニスト、抗ＣＤ３ ｍＡｂ、ガレクチン－３阻害剤、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１ Ιβ－ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ι Ιβ－ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ－Ιβアンタゴニスト、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－１０アゴニスト、ＩＬ－１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５－リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ－３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン－２タンパク質（ＰＲＦ－１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体－２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ－１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子ａ（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）から独立して選ばれる第３またはそれ以上の追加の活性薬剤（１種または複数種）をさらに含む。
【0095】
いくつかの実施形態において、それを必要とする対象における非アルコール性脂肪性肝炎および／またはアルコール性脂肪性肝炎を治療する方法であって、式（ＩＩ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト１から選択される少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法を対象に投与することを含む方法が提供される。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびセマグルチドを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびフィルソコスタットを含む。いくつかの実施形態において、組合せ療法は、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物およびＯＣＡを含む。いくつかの実施形態において、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は化合物Ａである。
【0096】
いくつかの実施形態において、本開示の方法における組合せ療法の投与は同時投与による。いくつかの実施形態において、本開示の方法における組合せ療法の投与は順次投与による。いくつかの実施形態において、本開示の方法における組合せ療法の投与は重複投与による。いくつかの実施形態において、本開示の方法における組合せ療法の投与は間隔投与による。いくつかの実施形態において、本開示の方法における組合せ療法の投与は継続投与による。
【0097】
本開示はまた、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの療法的および／または予防的治療における記載された組合せ療法の使用も対象とする。本開示は同じく、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの療法的および／または予防的治療のための医薬の製造における記載された組合せ療法の使用を対象とする。
【0098】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における血漿トリグリセリドレベルを約２０％、２５％、３０％、３５％または４０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、血漿トリグリセリドレベルを２０～３０％、３０～４０％または１０～４０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における血漿総コレステロールレベルを約１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％または８０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、血漿総コレステロールレベルを２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％、７０～７５％または７５～８０％低減させる。
【0099】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝臓総コレステロールレベルを約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象と比べて、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象における肝臓総コレステロールレベルを約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、いずれの対象も、炎症反応および細胞傷害を伴わない脂肪肝疾患を有する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、肝臓総コレステロールレベルを２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～９０％、８０～８５％または８５～９０％低減させる。
【0100】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝臓トリグリセリドレベルを約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象と比べて、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象における肝臓トリグリセリドレベルを約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、いずれの対象も、炎症反応および細胞傷害を伴わない脂肪肝疾患を有する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、肝臓トリグリセリドレベルを２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％、７０～９０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～９０％、８０～８５％または８５～９０％低減させる。
【0101】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪肝面積を約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象と比べて、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤ疾患を有する対象における脂肪肝面積を約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％減少させる。いくつかの実施形態において、いずれの対象も、炎症反応および細胞傷害を伴わない脂肪肝疾患を有する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、脂肪肝面積を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％、７０％～９０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～９０％、８０～８５％または８５～９０％減少させる。
【0102】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪滴を有する肝細胞の割合を約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象と比べて、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象における脂肪滴を有する肝細胞の割合を約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％または９０％低減させる。いくつかの実施形態において、いずれの対象も、炎症反応および細胞傷害を伴わない脂肪肝疾患を有する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、脂肪滴を有する肝細胞の割合を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％、７０～９０％、７０～７５％、７５～８０％、８０～９０％、８０～８５％または８５～９０％低減させる。
【0103】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における炎症細胞を約１０％、２０％、３０％、４０％または４５％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、炎症細胞を１０～２０％、１０～１５％、１５～２０％、２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～５０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％または４０～４５％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における炎症性病巣を約２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％または７５％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、炎症性病巣を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％、４５～５０％、５０～６０％、５０～５５％、５５～６０％、６０～７０％、６０～８０％、６０～６５％、６５～７０％、７０～８０％または７０～７５％低減させる。
【0104】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるガレクチン－３を発現させる肝面積を約２０％、３０％、４０％または５０％縮小する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、ガレクチン－３を発現させる肝面積を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％または４５～５０％縮小する。
【0105】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝臓ヒドロキシプロリンレベルを約２０％、３０％または４０％低減させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、肝臓ヒドロキシプロリンレベルを２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、２０～４０％、３０～４０％、３０～３５％または３５～４０％低減させる。
【0106】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるＰＳＲにより決定される肝線維化面積を約２０％、３０％、４０％または５０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、ＰＳＲにより決定される肝線維化面積を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～５０％、３０～３５％、３５～４０％、４０～５０％、４０～４５％または４５～５０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、ＰＳＲにより決定される肝類洞線維化面積を約２０％、３０％または４０％減少させる。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、ＰＳＲによる肝線維化類洞線維化面積を２０～３０％、２０～２５％、２５～３０％、３０～４０％、３０～３５％または３５～４０％減少させる。
【0107】
いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、治療を受けないＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象と比べて、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象におけるα－ＳＭＡを発現させる肝面積を約５％、１０％、２０％または３０％縮小する。いくつかの実施形態において、本開示の組合せ療法は、α－ＳＭＡを発現させる肝面積を５～１０％、１０～２０％、１０～１５％、１５～２０％、２０～３０％、２０～２５％または２５～３０％縮小する。
【0108】
いくつかの実施形態は、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象における脂肪肝の好転における使用のための単剤療法としての式（ＩＩ）の化合物に関する。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、ＮＡＦＬＤまたはＡＬＤを有する対象における脂肪肝面積を好転させる。いくつかの実施形態において、脂肪肝疾患は、炎症反応および細胞傷害を伴わない。
【0109】
いくつかの実施形態は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪肝および炎症の好転における使用のための単剤療法としての式（ＩＩ）の化合物に関する。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における脂肪肝面積を好転させる。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、ＮＡＳＨまたはＡＳＨを有する対象における肝炎症を好転させる。
【0110】
式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ２００９／０６１２０８、ＷＯ２０１０／１２８４０１、ＷＯ２０１１／０８９５２９、ＷＯ２０１６／１５６９１２、ＷＯ２０１９／１１１０４８に記載の通り、かつ以下の実施例に従って調製することができる。加えて、化合物Ａは、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ２０１０／１２８４０１、ＷＯ２０１４／１３２１３５、およびＷＯ２０１９／１１１０４８に記載の通り、かつ以下の実施例２に従って調製することができる。これらの刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。
式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ２００９／０６１２０８、ＷＯ２０１０／１２８４０１、ＷＯ２０１１／０８９５２９、ＷＯ２０１６／１５６９１２、ＷＯ２０１９／１１１０４８に記載の通り、かつ以下の実施例に従って調製することができる。加えて、化合物Ａは、例えば、ＰＣＴ出願ＷＯ２０１０／１２８４０１、ＷＯ２０１４／１３２１３５、およびＷＯ２０１９／１１１０４８に記載の通り、かつ以下の実施例２に従って調製することができる。これらの刊行物は、参照により本明細書に組み込まれる。
【0111】
以下に記載される実施例は例示であり、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の範囲内の他の化合物に達するためにこれらの一般的な方法を適用する方法を当業者なら理解するであろう。本開示の化合物は、薬学的に許容される塩またはエステルの形態であり得る。例えば、式（Ｉ）および式（ＩＩ）の化合物は、リン脂質、グリセリドまたはＣ１－Ｃ６－アルキルエステルなどのエステルの形態であり得る。少なくとも１つの実施形態において、エステルは、グリセリドまたはＣ１－Ｃ６－アルキルエステルから選ばれる。少なくとも１つの実施形態において、エステルは、トリグリセリド、１，２－ジグリセリド、１，３－ジグリセリド、１－モノグリセリド、２－モノグリセリド、メチルエステル、エチルエステル、プロピルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルおよびｔｅｒｔ－ブチルエステルから選ばれる。少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、メチルエステル、エチルエステル、イソプロピルエステル、ｎ－ブチルエステルまたはｔｅｒｔ－ブチルエステルとして、例えばメチルエステルまたはエチルエステルとして存在する。典型的には、式（Ｉ）により表されるエステル（例えば、エチルエステル）は消化管内で加水分解される。
【0112】
本開示に適した塩には、ＮＨ４＋；Ｌｉ＋、Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｍｇ２＋またはＣａ２＋などの金属イオン；ｔｅｒｔブチルアンモニウム、（３Ｓ，５Ｓ，７Ｓ）－アダマンタン－１－アンモニウム、１，３－ジヒドロキシ－２－（ヒドロキシメチル）プロパン－２－アンモニウム、プロトン化アミノピリジン（例えば、ピリジン－２－アンモニウム）などのプロトン化一級アミン；ジエチルアンモニウム、２，３，４，５，６－ペンタヒドロキシ－Ｎ－メチルヘキサン－１－アンモニウム、Ｎ－エチルナフタレン－１－アンモニウムなどのプロトン化二級アミン、４－メチルモルホリン－４－イウムなどのプロトン化三級アミン、２－ヒドロキシ－Ｎ，Ｎ，Ｎ－トリメチルエタン－１－アミニウムなどのプロトン化四級アミンおよびアミノ（（４－アミノ－４－カルボキシブチル）アミノ）メタンイミニウムなどのプロトン化グアニジンまたは１Ｈ－イミダゾール－３－イウムなどのプロトン化複素環の塩が含まれるが、これらに限定されない。適した塩の追加の例には、エタン－１，２－ジアンモニウムまたはピペラジン－１，４－ジイウムなどのジプロトン化ジアミンの塩が含まれる。本開示による他の塩には、プロトン化キトサン：
【0113】
【化15】
が含まれ得る。
【0114】
少なくとも実施形態において、塩は、ナトリウム塩、カルシウム塩およびコリン塩から選ばれる。１つの実施形態において、塩は、ナトリウム塩またはカルシウム塩である。
【0115】
本開示は、それを必要とする対象におけるＮＡＳＨまたはＡＳＨを治療する方法であって、薬学的有効量の式（Ｉ）または式（ＩＩ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を対象に共投与することを含む方法を提供する。対象はヒトまたは非ヒト哺乳動物であり得る。本発明に開示されている化合物は、薬学的組成物中の医薬など、医薬として共投与することができる。１つの実施形態は、非アルコール性脂肪性肝炎の治療における使用のための、化合物Ａなどの、式（ＩＩ）または式（Ｉ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む薬学的組成物を提供する。本発明に開示されている組成物は、少なくとも１つの非活性薬学的成分、すなわち、賦形剤を任意選択でさらに含み得る。非活性成分は、色、香味および／またはファッション活性成分が使用に安全であり得、好都合であり得かつ／またはさもなければ許容され得るように、それらを適用可能かつ効果的な製剤に可溶化、懸濁、増粘、希釈、乳化、安定化、保存、保護することができる。賦形剤の例には、溶媒、担体、希釈剤、結合剤、充填剤、甘味料、芳香剤、ｐＨ調整剤、粘度調整剤、酸化防止剤、増量剤、保水剤、崩壊剤、溶解遅延剤、吸収促進剤、湿潤剤、吸収剤、滑沢剤、着色剤、分散剤および保存剤が含まれるが、これらに限定されない。賦形剤は、１つを超える役割もしくは機能を有し得、または１つを超える群に分類され得る；分類は、単に説明のためのものであり、限定するためのものではない。いくつかの実施形態において、例えば、少なくとも１種の賦形剤は、コーンスターチ、ラクトース、グルコース、微結晶セルロース、ステアリン酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、クエン酸、酒石酸、水、エタノール、グリセロール、ソルビトール、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、セチルステアリルアルコール、カルボキシメチルセルロースおよびハードファットなどの脂肪性物質またはそれらの適した混合物から選ばれ得る。いくつかの実施形態において、本発明に開示されている組成物は、少なくとも１種の薬学的に許容される酸化防止剤、例えば、アルファ－トコフェロール、ベータ－トコフェロール、ガンマ－トコフェロールおよびデルタ－トコフェロールなどのトコフェロールまたはそれらの混合物、２－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソールおよび３－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシアニソールなどのＢＨＡまたはそれらの混合物ならびにＢＨＴ（３，５－ジ－ｔｅｒｔ－ブチル－４－ヒドロキシトルエン）またはその混合物とをさらに含む。
【0116】
本発明に開示されている式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物は、１つまたは複数の経口投与形態、例えば、錠剤またはゼラチン軟もしくは硬カプセルに製剤化され得る。剤形は、球形、卵形、楕円、立方体形、規則的および／または変則的な形など、経口投与に適した任意の形状のものにすることができる。当技術分野において既知の従来の製剤技術を使用して本開示による化合物を処方することができる。いくつかの実施形態において、組成物は、ゼラチンカプセル剤または錠剤の形態であり得る。
【0117】
組合せ生成物の第１の要素、すなわち、式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、上述のいずれかの方法で投与または製剤化され得る。組合せ生成物の第２の要素、追加の活性薬剤は、薬剤のタイプに適するように製剤化され得、薬剤の投与方法を含むいくつかの因子に依存する。
【0118】
いくつかの実施形態において、組合せ療法の共投与は同時投与による。いくつかの実施形態において、共投与は順次投与による。いくつかの実施形態において、共投与は重複投与による。いくつかの実施形態において、共投与は間隔投与による。いくつかの実施形態において、共投与は継続投与による。
【0119】
投与量
本開示は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの治療における使用のための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物および少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法に関する。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる。
本開示は、ＮＡＳＨおよび／またはＡＳＨの治療における使用のための、式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物および少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む組合せ療法に関する。いくつかの実施形態において、少なくとも１種の追加の活性薬剤は、ＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選ばれる。
【0120】
式（Ｉ）の化合物または式（ＩＩ）の化合物の適した１日投与量は、約５ｍｇから約２ｇなど、約５ｍｇから約４ｇの範囲であり得る。例えば、いくつかの実施形態において、一日量は、約１０ｍｇから約１．５ｇ、約５０ｍｇから約１ｇ、約１００ｍｇから約１ｇ、約１５０ｍｇから約９００ｍｇ、約５０ｍｇから約８００ｍｇ、約１００ｍｇから約８００ｍｇ、約１００ｍｇから約６００ｍｇ、約１５０から約５５０ｍｇまたは約２００から約５００ｍｇの範囲である。少なくとも１つの実施形態において、一日量は、約２００ｍｇから約６００ｍｇの範囲である。少なくとも１つの実施形態において、一日量は、約５０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１５０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２５０ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、約５００ｍｇ、約５５０ｍｇ、約６００ｍｇ、約６５０ｍｇ、約７００ｍｇ、約７５０ｍｇ、約８００ｍｇ、約８５０ｍｇまたは約９００ｍｇである。（１種または複数種の）化合物は、例えば、１日当たり１回、２回または３回投与することができる。
【0121】
少なくとも１つの実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、用量当たり約２００ｍｇから約８００ｍｇの範囲の量で投与される。少なくとも１つの実施形態において、化合物は、１日当たり１回投与される。少なくとも１つの実施形態において、化合物は、７５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、５００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、３００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、２５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、３００ｍｇまたは６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。
【0122】
少なくとも１つの実施形態において、式（ＩＩ）の化合物は、用量当たり約２００ｍｇから約８００ｍｇの範囲の量で投与される。少なくとも１つの実施形態において、化合物は、１日当たり１回投与される。少なくとも１つの実施形態において、化合物は、７５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、５００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、３００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、２５０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、化合物は、３００ｍｇまたは６００ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。
【0123】
いくつかの実施形態において、開示されている組合せ療法の少なくとも１種の追加の活性薬剤はＧＬＰ－１受容体アゴニストである。ＧＬＰ－１受容体アゴニストまたはインクレチンミメティクスはグルカゴン様ペプチド－１受容体のアゴニストである。このクラスの薬物は、典型的には２型糖尿病の治療のために使用される。ＧＬＰ－アゴニストの非限定的な例のリストには、エキセナチド、リラグルチド、リキシセナチド、アルビグルチド、デュラグルチド、タスポグルチドおよびセマグルチドが含まれる。好ましい実施形態において、組合せ療法の少なくとも１種の追加の活性薬剤はセマグルチドである。
【0124】
ヒト等価用量は、前臨床マウスモデルにおいて使用される用量から、マウスからヒトへの１２．３の倍数を使用することにより計算することができる（Ｎａｉｒら、Ｊ Ｂａｓｉｃ Ｃｌｉｎ Ｐｈａｒｍ、２０１６、７：２７～３１）。
【0125】
いくつかの実施形態において、組合せ療法の少なくとも１種の追加の薬剤はセマグルチドである。いくつかの実施形態において、セマグルチドの一日量は、約５０μｇから約５００μｇ、約７５μｇから約２５０μｇ、約７５μｇから約１５０μｇ、約１００μｇから約１５０μｇ、約０．１ｍｇから約１０ｍｇ、約０．２ｍｇから約８ｍｇ、約０．５ｍｇから約７ｍｇ、または約１ｍｇから約５ｍｇの範囲である。いくつかの実施形態において、セマグルチドは、約０．１ｍｇから約０．２ｍｇの一日量で投与される。いくつかの実施形態において、セマグルチドは、約７５μｇから約１５０μｇの一日量で投与される。いくつかの実施形態において、セマグルチドは、約７５μｇから約１２５μｇの一日量で投与される。セマグルチドは、例えば、１日当たり１回、２回または３回投与することができる。いくつかの実施形態において、セマグルチドは、１日当たり１回投与される。
【0126】
いくつかの実施形態において、セマグルチドの一日量は、約５０μｇ、約７５μｇ、約１００μｇ、約１２５μｇ、約１５０μｇ、約０．２ｍｇ、約０．３ｍｇ、約０．４ｍｇ、約０．５ｍｇ、約０．６ｍｇ、約０．７ｍｇ、約０．８ｍｇ、約０．９ｍｇ、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇ、または約１０ｍｇである。いくつかの実施形態において、セマグルチドは、０．５ｍｇ、１ｍｇ、２ｍｇ、３ｍｇ、４ｍｇ、５ｍｇ、６ｍｇ、７ｍｇ、８ｍｇ、９ｍｇまたは１０ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。
【0127】
いくつかの実施形態において、開示されている組合せ療法の少なくとも１種の追加の活性薬剤はＡＣＣ阻害剤である。好ましい実施形態において、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットである。
【0128】
いくつかの実施形態において、組合せ療法の少なくとも１種の追加の薬剤はフィルソコスタットである。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約５ｍｇから約３ｇ、約５０ｍｇから約２．５ｇ、約１００ｍｇから約２ｇ、約５００ｍｇから約３ｇ、約１ｇから約２．５ｇ、約１．５ｇから約２．５ｇ、約５ｍｇから約５００ｍｇ、約１０ｍｇから約３００ｍｇ、約２０ｍｇから約２００ｍｇまたは約５０ｍｇから１００ｍｇの範囲である。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約１０ｍｇ／ｋｇから約５０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約１５ｍｇ／ｋｇから約４０ｍｇ／ｋｇである。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約２０ｍｇ／ｋｇから約３０ｍｇ／ｋｇである。フィルソコスタットは、例えば、１日当たり１回、２回または３回投与することができる。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットは、１日当たり１回投与される。
【0129】
いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約５ｍｇ、約６ｍｇ、約７ｍｇ、約８ｍｇ、約９ｍｇ、約１０ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約３０ｍｇ、約３５ｍｇ、約４０ｍｇ、約４５ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、約２００ｍｇ、約２２５ｍｇ、約２５０ｍｇ、約２７５ｍｇ、約３００ｍｇ、約３５０ｍｇ、約４００ｍｇ、約４５０ｍｇ、または約５００ｍｇである。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットの一日量は、約１ｇ、約１．５ｇ、約２ｇまたは約２．５ｇである。いくつかの実施形態において、フィルソコスタットは、約１５ｍｇ／ｋｇ、約２０ｍｇ／ｋｇ、約２５ｍｇ／ｋ、約３０ｍｇ／ｋｇ、約５００ｍｇ、約１．５ｇ、約２ｇまたは約２．５ｇの用量で１日当たり１回投与される。
【0130】
いくつかの実施形態において、開示されている組合せ療法の少なくとも１種の追加の活性薬剤はＦＸＲ阻害剤である。好ましい実施形態において、ＦＸＲ阻害剤はオベチコール酸である。
【0131】
いくつかの実施形態において、組合せ療法の少なくとも１種の追加の薬剤はＯＣＡである。いくつかの実施形態において、ＯＣＡの一日量は、約０．５ｍｇから約２５０ｍｇ、約２ｍｇから約２５０ｍｇ、約５ｍｇから約２００ｍｇ、約５０ｍｇから約２００ｍｇ、約１００ｍｇから約２００ｍｇ、約１５０ｍｇから約２００ｍｇ、または約５ｍｇから２０ｍｇの範囲である。いくつかの実施形態において、ＯＣＡは、約１７０ｍｇの一日量で投与される。ＯＣＡは、例えば、１日当たり１回、２回または３回投与することができる。いくつかの実施形態において、ＯＣＡは、１日当たり１回投与される。
【0132】
いくつかの実施形態において、ＯＣＡの一日量は、約０．５ｍｇ、約１ｍｇ、約１．５ｍｇ、約２ｍｇ、約２．５ｍｇ、約３ｍｇ、約３．５ｍｇ、約４ｍｇ、約４．５ｍｇ、約５ｍｇ、約５．５ｍｇ、約６ｍｇ、約６．５ｍｇ、約７ｍｇ、約７．５ｍｇ、約８ｍｇ、約８．５ｍｇ、約９ｍｇ、約９．５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１０．５ｍｇ、約１１ｍｇ、約１２ｍｇ、約１３ｍｇ、約１４ｍｇ、約１５ｍｇ、約１６ｍｇ、約１７ｍｇ、約１８ｍｇ、約１９ｍｇ、約２０ｍｇである。いくつかの実施形態において、ＯＣＡは、２．５ｍｇ、５ｍｇ、７．５ｍｇ、１０ｍｇまたは１５ｍｇの用量で１日当たり１回投与される。いくつかの実施形態において、ＯＣＡは、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１１０ｍｇ、約１２０ｍｇ、約１３０ｍｇ、約１４０ｍｇ、約１５０ｍｇ、約１６０ｍｇ、約１７０ｍｇ、約１８０ｍｇ、約１９０ｍｇ、または約２００ｍｇの一日量で投与される。いくつかの実施形態において、ＯＣＡは、１日当たり１回投与される。
【0133】
追加の組合せ
本開示によれば、式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の第２の活性薬剤を含む組合せ療法は、第３またはそれ以上のさらなる追加の活性薬剤と共投与することができる。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはＯＣＡである。
本開示によれば、式（Ｉ）または（ＩＩ）の少なくとも１つの化合物ならびにＧＬＰ－１受容体アゴニスト、ＡＣＣ阻害剤およびＦＸＲアゴニストから選択される少なくとも１種の第２の活性薬剤を含む組合せ療法は、第３またはそれ以上のさらなる追加の活性薬剤と共投与することができる。いくつかの実施形態において、ＧＬＰ－１受容体アゴニストはセマグルチドであり、ＡＣＣ阻害剤はフィルソコスタットであり、ＦＸＲアゴニストはＯＣＡである。
【0134】
いくつかの実施形態において、第３またはそれ以上の活性薬剤は、アンジオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤、アポトーシスシグナル制御キナーゼ－１（ＡＳＫ１）阻害剤、カスパーゼ阻害剤、カテプシンＢ阻害剤、ＣＣＲ２ケモカインアンタゴニスト、ＣＣＲ５ケモカインアンタゴニスト、クロライドチャネル刺激剤、コレステロール可溶化剤、ジアシルグリセロールＯ－アシルトランスフェラーゼ１（ＤＧＡＴ１）阻害剤、ジペプチジルペプチダーゼＩＶ（ＤＰＰ ＩＶ）阻害剤、線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）－２１アゴニスト、抗ＣＤ３ ｍＡｂ、ガレクチン－３阻害剤、グルタチオン前駆体、Ｃ型肝炎ウイルスＮＳ３プロテアーゼ阻害剤、ＨＭＧ ＣｏＡ還元酵素阻害剤、１ Ιβ－ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ（Ι Ιβ－ＨＳＤＩ）阻害剤、熱ショックタンパク質（Ｈｓｐ）４７阻害剤、ＩＬ－Ιβアンタゴニスト、ＩＬ－６アンタゴニスト、ＩＬ－１０アゴニスト、ＩＬ－１７アンタゴニスト、回腸ナトリウム胆汁酸共輸送体阻害剤、レプチンアナログ、５－リポキシゲナーゼ阻害剤、ＬＰＬ遺伝子刺激剤、リシルオキシダーゼホモログ２（ＬＯＸＬ２）阻害剤、リゾホスファチジン酸１（ＬＰＡ１）受容体アンタゴニスト、オメガ－３脂肪酸、ＰＤＥ３阻害剤、ＰＤＥ４阻害剤、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤、ＰＰＡＲａアゴニスト、ＰＰＡＲｙアゴニスト、ＰＰＡＲ５アゴニスト、組換えヒトペントラキシン－２タンパク質（ＰＲＦ－１）、Ｒｈｏ関連プロテインキナーゼ２（ＲＯＣＫ２）阻害剤、セミカルバジド感受性アミンオキシダーゼ（ＳＳＡＯ）阻害剤、ナトリウムグルコース輸送体－２（ＳＧＬＴ２）阻害剤、ステアロイルＣｏＡデサチュラーゼ－１阻害剤、甲状腺ホルモン受容体βアゴニスト、腫瘍壊死因子α（ＴＮＦα）リガンド阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤、トランスグルタミナーゼ阻害剤前駆体および低分子活性化ＲＮＡ（ｓａＲＮＡ）から選ばれる。
【0135】
いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、フィルソコスタットおよびＯＣＡと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、フィルソコスタットおよびセマグルチドと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、ＯＣＡおよびセマグルチドと組み合わせて投与される。いくつかの実施形態において、式（ＩＩ）または（Ｉ）の化合物は、フィルソコスタット、ＯＣＡおよびセマグルチドと組み合わせて投与される。
【0136】
いくつかの実施形態において、第３またはそれ以上の活性薬剤はジペプチジルペプチダーゼ阻害剤（ＤＰＰ－４アンタゴニスト）である。ＤＰＰ－４アンタゴニストは、ＤＰＰ－４（ＤＰＰ－ＩＶ）を遮断する経口血糖降下薬の一クラスである。それらは２型真性糖尿病を治療するために使用することができる。グルカゴンは血糖値を上昇させ、ＤＰＰ－４阻害剤はグルカゴン値および血糖値を低下させる。ＤＰＰ－４阻害剤の機序は、インクレチンレベル（ＧＬＰ－１およびＧＩＰ）を上昇させ、これがグルカゴン放出を阻害し、ひいてはインスリン分泌を増加させ、胃内容排出を減少させ、血糖値を低下させるというものである。ジペプチジルペプチダーゼ阻害剤の非限定的な例のリストには、シタグリプチン、ビルダグリプチン、サキサグリプチン、リナグリプチン、ゲミグリプチン、アナグリプチン、テネリグリプチン、アログリプチン、トレラグリプチン、オマリグリプチン、エボグリプチン、ズトグリプチンが含まれる。
【0137】
いくつかの実施形態において、第３またはそれ以上の追加の薬剤はオメガ－３脂肪酸である。第３の追加の活性薬剤がオメガ－３脂肪酸であるとき、オメガ－３脂肪酸は、典型的には長鎖多価不飽和オメガ－３脂肪酸（ＬＣ ｎ－３ ＰＵＦＡ）である。好ましくは、これは、（全Ｚオメガ－３）－５，８，１１，１４，１７－エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）および（全Ｚオメガ－３）－４，７，１０，１３，１６，１９－ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）またはそれらの誘導体のうちの少なくとも１つを含む。ＥＰＡおよびＤＨＡを含むｎ－３ ＰＵＦＡは異なる形態であり得、遊離脂肪酸型；Ｃ１－Ｃ４アルキルエステルなどのエステル化型、好ましくはエチルエステル；リン脂質；モノ／ジ／トリグリセリド；およびそれらの塩のうちの少なくとも１つで提供される。オメガ－３脂肪酸は、経口投与用組成物などの組成物の形態で提供され得る。かかる組成物は、少なくとも５０％、６０％、７０％または８０％など、少なくとも４０％の活性オメガ－３脂肪酸を含み得る。いくつかの実施形態において、第３またはそれ以上の追加の活性薬剤は、ＥＰＡおよびＤＨＡのうちの少なくとも１つを、好ましくはエチルエステル型で少なくとも７０％の濃度で含む組成物である。
【0138】
いくつかの実施形態において、第３またはそれ以上の追加の活性薬剤は、アセチルサリチル酸、アリポジーンチパルボベック、アラムコール、アトルバスタチン、ＢＩ １４６７３３５、ＢＬＸ－１００２、ＢＭＳ－９８６０３６、ＢＭＳ－９８６０２０、セニクリビロック、コビプロストン、コレセベラム、エムリカサン、エナラプリル、フォラムラブ（ｆｏｒａｍｕｌａｂ）、ＧＦＴ－５０５、ＧＲ－ＭＤ－０２、ＧＳ－０９７６、ＧＳ－９６７４、ヒドロクロロチアジド、イコサペントエチルエステル（エイコサペンタエン酸エチル、ＥＰＡエチルエステル）、ＩＭＭ－１２４Ｅ、ＩＶＡ３３７、Ｋ－８７７、ＫＤ－０２５、リナグリプチン、リラグルチド、メルカプタミン、ＭＧＬ－３１９６、ＮＤ－Ｌ０２－ｓ０２０１、オベチコール酸、オレソキシム、ｐｅｇ－イロデカキン、ピオグリタゾン、ＰＲＭ－１５１、ＰＸ－１０２、レモグリフロジンエタボネート、セロンセルチブ、シムツズマブ、ＳＨＰ－６２６、ソリスロマイシン、チペルカスト、ＴＲＸ－３１８、ウルソデオキシコール酸およびＶＢＹ－３７６の群から独立して選択される。
【0139】
組合せ療法の第３またはそれ以上の薬剤は、薬剤のタイプに適するように製剤化され、薬剤の投与方法を含むいくつかの因子に依存する。第３またはそれ以上の追加の活性薬剤の用量は、選択された薬剤のタイプに依存し、特定の薬剤に認可された量に従うべきである。
【0140】
式（ＩＩ）または式（Ｉ）の化合物ならびにグルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤を含む本開示の組合せ療法は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）またはアルコール性脂肪性肝炎（ＡＳＨ）を治療するかつ／または好転させるために投与することができる。
【0141】
本発明者らは、グルカゴン様ペプチド１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト、アセチル－ＣｏＡカルボキシラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤およびファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニストから選ばれる少なくとも１種の追加の活性薬剤と共投与される２－（（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イル）オキシ）ブタン酸などの式（Ｉ）の化合物を含む組合せ療法が著しく良好な薬学的活性を有することを見出した。開示されている組合せ療法は、活性薬剤の単剤療法と比べて、ＮＡＳＨ関連肝線維症、炎症および脂肪症を治療するための予想外に改善された生物活性を示す。
【実施例】
【0142】
本開示は、以下の非限定的な例によりさらに説明され、そこでは、適切な場合、当業者に既知の標準的な技術およびこれらの例に記載の技術と類似の技術が使用され得る。本明細書に記載の本開示と一貫した追加の実施形態を当業者なら想定するであろうことが理解される。
【0143】
他に記載されていない限り、反応は、室温で、典型的には１８～２５℃の間の範囲内で無水条件下、ＨＰＬＣグレードの溶媒を用いて行った。蒸発は真空中で回転蒸発により行った。カラムクロマトグラフィーは、シリカゲル４０～６３μｍ（Ｍｅｒｃｋ）によるフラッシュ法により、またはプレパックシリカゲルカラム「ＭｉｎｉＶａｒｉｏＦｌａｓｈ（商標）」、「ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＦｌａｓｈ（商標）」、「ＳｕｐｅｒＶａｒｉｏＰｒｅｐ（商標）」もしくは「ＥａｓｙＶａｒｉｏＰｒｅｐ（商標）」（Ｍｅｒｃｋ）を使用するＡｒｍｅｎ Ｓｐｏｔ Ｆｌａｓｈにより実施した。核磁気共鳴（ＮＭＲ）シフト値は、Ｂｒｕｋｅｒ Ａｖａｎｃｅ（商標） ＤＰＸ ２００または３００装置で以下に記載のピーク多重度を用いて記録した：ｓ、一重線；ｄ、二重線；ｄｄ、二重二重線；ｔ、三重線；ｑ、四重線；ｐ、五重線；ｍ、多重線；ｂｒ、ブロード。質量スペクトルはＬＣ／ＭＳ分光装置を用いて記録した。分離は、Ａｇｉｌｅｎｔ １１００シリーズモジュールを使用して、Ｅｃｌｉｐｓｅ ＸＤＢ－Ｃ１８ ２．１×１５０ｍｍカラムで勾配溶離により実施した。溶離液として０．０１％トリフルオロ酢酸または０．００５％ギ酸ナトリウムを含む緩衝液中の５～９５％アセトニトリルの勾配を使用した。質量スペクトルは、Ｇ１９５６Ａ質量分析計（エレクトロスプレー、３０００Ｖ）を用いて正および負イオン化モードを切り替えて記録した。報告される収率は例示であり、必ずしも達成可能な最大収率を表さない。
【実施例1】
【0144】
ｔｅｒｔ－ブチル２－（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イルオキシ）ブタノエートの調製
【0145】
【化16】
テトラブチルアンモニウムクロリド（０．５５ｇ、１．９８ｍｍｏｌ）を、窒素下室温のトルエン（３５ｍＬ）中の（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－オール（３．５０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。水酸化ナトリウムの水性溶液（５０％（ｗ／ｗ）、１１．７ｍＬ）を室温で激しく撹拌しながら加え、続いてｔ－ブチル２－ブロモブチレート（５．４１ｇ、２４．３ｍｍｏｌ）を加えた。生じた混合物を５０℃まで加熱し、追加のｔブチル２－ブロモブチレートを１．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）、３．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）および４．５時間後（２．７０ｇ、１２．１ｍｍｏｌ）に加え、合計１２時間撹拌した。室温まで冷却した後、氷水（２５ｍＬ）を加え、生じた２つの相を分離した。有機相をＮａＯＨ（５％）および塩水の混合物で洗い、乾燥（ＭｇＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタンおよび酢酸エチルの極性漸増混合物（１００：０→９５：５）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーにより残留物を精製した。適切な画分を濃縮して、１．８７ｇ（収率３６％）の表題化合物をオイルとして得た。1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.85-1.10 (m, 6H), 1.35-1.54 (m, 11H), 1.53-1.87 (m, 4H), 1.96-2.26 (m, 4H), 2.70-3.02 (m, 8H), 3.31 (dt, 1H), 3.51-3.67 (m, 2H), 5.10-5.58 (m, 10H).
【実施例2】
【0146】
２－（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエニルオキシ）ブタン酸（化合物Ａ）の調製
【0147】
【化17】
ｔｅｒｔ－ブチル２－（（５Ｚ，８Ｚ，１１Ｚ，１４Ｚ，１７Ｚ）－イコサ－５，８，１１，１４，１７－ペンタエン－１－イルオキシ）ブタノエート（１９．６ｇ、４５．５ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（２００ｍＬ）に溶解し、窒素下に置いた。トリフルオロ酢酸（５０ｍＬ）を加え、反応混合物を室温で１時間撹拌した。水を加え、水性相をジクロロメタンで２回抽出した。合わせた有機抽出物を塩水で洗い、乾燥（Ｎａ２ＳＯ４）し、濾過し、濃縮した。ヘプタン、酢酸エチルおよびギ酸の極性漸増混合物（９０：１０：１→８０：２０：１）を溶離液として使用して、シリカゲルによるフラッシュクロマトグラフィーに残留物をかけた。適切な画分を濃縮して、１２．１ｇ（収率７１％）の表題化合物をオイルとして得た。1H-NMR (300 MHz, CDCl3): δ 0.90-1.00 (m, 6H), 1.50 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.80 (m, 2H), 2.10 (m, 4H), 2.80-2.90 (m, 8H), 3.50 (m, 1H), 3.60 (m, 1H), 3.75 (t, 1H), 5.30-5.50 (m, 10H); MS (エレクトロスプレー): 373.2 [M-H]-.
【0148】
本開示の式Ｉおよび式ＩＩの追加の化合物の調製は、ＰＣＴ公開番号ＷＯ ２０１９／１１１０４８に記載の方法に従って調製することができる。例えば、以下の例示的な化合物は、参照により本明細書に組み込まれるＷＯ ２０１９／１１１０４８の２９～８７ページに実施例３～７９として挙げられた公開された手順に従って調製することができる。
【0149】
【表1】
【0150】
生物学的実施例
使用される略語：
α－ＳＭＡ：アルファ－平滑筋アクチン
ＡＬＴ：アラニントランスアミナーゼ
ＡＳＴ：アスパラギン酸トランスアミナーゼ
ＢＷ：体重
ＣＤＡＡ／ＨＦＤ：コリン欠乏高脂肪食
Ｃｏｌ１ａ１：コラーゲン１ａ１
ＦＩ：食物摂取
Ｇａｌ－３：ガレクチン－３
ＨＥまたはＨ＆Ｅ：ヘマトキシリンおよびエオシン
ＨＰ：ヒドロキシプロリン
ＩＨＣ：免疫組織化学
ＰＳＲ：Ｐｉｃｒｏｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄまたはｐｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄ
ＰＯ：経口胃管栄養法による
ＱＤ：１日に１回
ＱＷ：１週間に１回
ＳＣ：皮下
ＳＥＭ：平均の標準誤差
ＴＣ：総コレステロール
ＴＧ：トリグリセリド
使用される略語：
α－ＳＭＡ：アルファ－平滑筋アクチン
ＡＬＴ：アラニントランスアミナーゼ
ＡＳＴ：アスパラギン酸トランスアミナーゼ
ＢＷ：体重
ＣＤＡＡ／ＨＦＤ：コリン欠乏高脂肪食
Ｃｏｌ１ａ１：コラーゲン１ａ１
ＦＩ：食物摂取
Ｇａｌ－３：ガレクチン－３
ＨＥまたはＨ＆Ｅ：ヘマトキシリンおよびエオシン
ＨＰ：ヒドロキシプロリン
ＩＨＣ：免疫組織化学
ＰＳＲ：Ｐｉｃｒｏｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄまたはｐｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ ｒｅｄ
ＰＯ：経口胃管栄養法による
ＱＤ：１日に１回
ＱＷ：１週間に１回
ＳＣ：皮下
ＳＥＭ：平均の標準誤差
ＴＣ：総コレステロール
ＴＧ：トリグリセリド
【0151】
食餌誘発性ＮＡＳＨマウスモデル（ＣＤＡＡ／高脂肪食）における化合物Ａ単独ならびにセマグルチド、フィルソコスタットおよびオベチコール酸と組み合わせた化合物Ａの評価動物モデル
前臨床薬物開発においてＮＡＳＨの発症および治療を研究するためのメチオニンおよび／コリンが欠乏しているマウスモデル（それぞれＭＣＤおよびＣＤＡＡ）が十分確立されている。ホスファチジルコリン合成のための前駆体として、食事からのメチオニン／コリンの摂取が不足すると、トリグリセリドを排出するための肝リポタンパク質の合成ができなくなり、その結果、重篤な脂肪肝、炎症および線維症を招く。
前臨床薬物開発においてＮＡＳＨの発症および治療を研究するためのメチオニンおよび／コリンが欠乏しているマウスモデル（それぞれＭＣＤおよびＣＤＡＡ）が十分確立されている。ホスファチジルコリン合成のための前駆体として、食事からのメチオニン／コリンの摂取が不足すると、トリグリセリドを排出するための肝リポタンパク質の合成ができなくなり、その結果、重篤な脂肪肝、炎症および線維症を招く。
【0152】
広く使用されるメチオニン－コリン欠乏（ＭＣＤ）食は、マウスにおいて重篤なＮＡＳＨ様肝炎症および線維症を一貫して再現するが、重篤な体重減少（骨格筋および体脂肪量の両方の減少）にも関連する。これは、死亡リスクの増加に関連し、長期的な線維化実験の主要な問題となる。準最適用量のメチオニン（０．１％）を加えることによって、ＣＤＡＡ食モデルはこれらの問題を克服し、マウスおよびラットの両方において体重減少があまり重篤にならずに脂肪性肝炎、肝線維症および肝臓がんを順次引き起こすことによりヒトＮＡＳＨを模倣することを示した。現在の調査において、コリン欠乏高脂肪食（脂肪からの４５％の総カロリー；「ＣＤＡＡ／高脂肪」または「ＣＤＡＡ－ＨＦＤ」）を雄マウス（Ｃ５７Ｂｌ／６ＪＲｊ株）に与えた。治療およびＮＡＳＨパラメータの好転を評価するために、活性薬剤の投与開始の６週間前にＮＡＳＨ誘発食を開始した。示された活性薬剤およびそれらの組合せの８週間の投与の間、ＮＡＳＨ誘発ＣＤＡＡ－ＨＦＤを継続した。
【0153】
この調査の狙いは、代謝パラメータ、肝病理に対する、および雄ＣＤＡＡ－ＨＦＤマウスにおける線維症ステージを含むＮＡＦＬＤ活動性スコアに対する化合物Ａ、ＯＣＡ、セマグルチドおよびフィルソコスタット単独ならびに組合せの８週間の投与の影響を評価することであった。
【0154】
活性化剤の投与前に、動物を体重に基づいて治療群にランダムに分けた。ＣＤＡＡ－ＨＦＤ食で６週間後、調査開始時にベースライン群（ｎ＝１２）を終了した。ビヒクル、化合物Ａ（１１２ｍｇ／ｋｇ）、ＯＣＡ（３０ｍｇ／ｋｇ）、セマグルチド（３０ｎｍｏｌ／ｋｇ ＳＣ）、フィルソコスタット（５ｍｇ／ｋｇ）、化合物Ａ＋セマグルチド（１１２ｍｇ／ｋｇ＋３０ｎｍｏｌ／ｋｇ）、化合物Ａ＋ＯＣＡ（１１２ｍｇ／ｋｇ＋３０ｍｇ／ｋｇ）および化合物Ａ＋フィルソコスタット（１１２ｍｇ／ｋｇ＋５ｍｇ／ｋｇ）による治療をＣＤＡＡ－ＨＦＤ給餌マウス（群当たりｎ＝１０～１２）に経口（ＰＯ）により８週間毎日施した。最終肝生検を病理組織学的スコアに関して分析した。最終定量的エンドポイントは、血漿／肝臓生化学および肝臓組織形態計測を含んだ。
【0155】
【表2】
【0156】
ＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）および線維症ステージスコア
Ｋｌｅｉｎｅｒら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５；４１により概説された臨床基準を使用して、ヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）またはＰｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ Ｒｅｄ（ＰＳＲ）で染色された肝臓サンプルをＮＡＳ要素（脂肪症、小葉炎症および風船様腫大変性）および線維症ステージそれぞれに関してスコア化した。総ＮＡＳは、脂肪症、炎症および風船様腫大のスコアの合計を表し、かつ０～８の範囲である。
Ｋｌｅｉｎｅｒら、Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ、２００５；４１により概説された臨床基準を使用して、ヘマトキシリンおよびエオシン（Ｈ＆Ｅ）またはＰｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ Ｒｅｄ（ＰＳＲ）で染色された肝臓サンプルをＮＡＳ要素（脂肪症、小葉炎症および風船様腫大変性）および線維症ステージそれぞれに関してスコア化した。総ＮＡＳは、脂肪症、炎症および風船様腫大のスコアの合計を表し、かつ０～８の範囲である。
【0157】
【表3】
【0158】
ＤＩＯ－ＮＡＳＨマウスモデルにおける疾患のステージ分類のためのより正確かつ客観的な方法のために、ＶＩＳソフトウェア（Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ（登録商標）、デンマーク）を使用して、Ｇｕｂｒａ（デンマーク）により開発された深層学習アプリケーションによりＮＡＳおよび線維症ステージを決定した。
【0159】
脂肪症、炎症および風船様腫大変性：
スキャンされたＨ＆Ｅ染色スライドを以下のいくつかのステップで分析した：
１．低倍率での組織検出、続いて倍率１０倍での門脈三管および中心静脈の深層学習ベースの検出。
２．倍率２０倍での脂肪滴を有する肝細胞、脂質を含まない肝細胞、風船様腫大化肝細胞および炎症細胞の別の深層学習アプリケーション検出核。炎症性病巣を３個超の炎症細胞のクラスターと定義した。
３．肝臓組織サンプルの炎症スコアは、すべて２０倍の視野の平均スコアであった。脂肪滴を有する肝細胞の割合として脂肪症スコアを計算した。
スキャンされたＨ＆Ｅ染色スライドを以下のいくつかのステップで分析した：
１．低倍率での組織検出、続いて倍率１０倍での門脈三管および中心静脈の深層学習ベースの検出。
２．倍率２０倍での脂肪滴を有する肝細胞、脂質を含まない肝細胞、風船様腫大化肝細胞および炎症細胞の別の深層学習アプリケーション検出核。炎症性病巣を３個超の炎症細胞のクラスターと定義した。
３．肝臓組織サンプルの炎症スコアは、すべて２０倍の視野の平均スコアであった。脂肪滴を有する肝細胞の割合として脂肪症スコアを計算した。
【0160】
線維症ステージ：
スキャンされたＰＳＲ染色スライドを以下のいくつかのステップで分析した：
１．低倍率での組織検出、続いて倍率１０倍での門脈三管および中心静脈の深層学習ベースの検出。門脈周囲帯を門脈三管の周囲１００μｍと定義した。
２．門脈周囲帯および類洞帯において線形ベイジアン画像解析法を使用して線維症線維を検出した。
３．多項式局所線形フィルター機能に基づいて閾値画像解析を使用して架橋を検出した。
４．２つの帯における線維症および架橋線維症の両方のサイズ、形状および結合性の異なる尺度をＸＧＢｏｏｓｔ分類器において使用して、線維症ステージを予測した。
スキャンされたＰＳＲ染色スライドを以下のいくつかのステップで分析した：
１．低倍率での組織検出、続いて倍率１０倍での門脈三管および中心静脈の深層学習ベースの検出。門脈周囲帯を門脈三管の周囲１００μｍと定義した。
２．門脈周囲帯および類洞帯において線形ベイジアン画像解析法を使用して線維症線維を検出した。
３．多項式局所線形フィルター機能に基づいて閾値画像解析を使用して架橋を検出した。
４．２つの帯における線維症および架橋線維症の両方のサイズ、形状および結合性の異なる尺度をＸＧＢｏｏｓｔ分類器において使用して、線維症ステージを予測した。
【0161】
免疫反応性および組織化学的染色の定量的評価
ＶＩＳソフトウェア（Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ（登録商標）、デンマーク）を使用した画像解析により、以下の２つのステップを使用して免疫組織化学（ＩＨＣ）陽性染色を定量化した：
１．低倍率（１倍対物）での組織の検出（肝臓被膜を除く）；および
２．ＩＨＣ陽性染色の検出。
ＩＨＣ陽性染色の定量化は、以下の通り面積部分として計算される：
ＶＩＳソフトウェア（Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ（登録商標）、デンマーク）を使用した画像解析により、以下の２つのステップを使用して免疫組織化学（ＩＨＣ）陽性染色を定量化した：
１．低倍率（１倍対物）での組織の検出（肝臓被膜を除く）；および
２．ＩＨＣ陽性染色の検出。
ＩＨＣ陽性染色の定量化は、以下の通り面積部分として計算される：
【0162】
【数1】
【0163】
ＩＨＣ面積割合定量化をガレクチン－３、コラーゲン１Ａ１およびα－平滑筋アクチンに関して評価した。
【0164】
同じ方法を使用して、ピクロシリウスレッド染色による肝面積割合評価を決定した。
【0165】
生物学的実施例１
相対的体重および相対的肝重量
図１Ａに示す通り、ＯＣＡ、セマグルチドおよび化合物Ａ＋ＯＣＡおよび化合物Ａ＋セマグルチドを施した実験群は、ビヒクルと比べて最後に記録された相対的体重を減少させた。図１Ｂに示す通り、化合物Ａ、セマグルチド、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群は、未治療ビヒクル群と比べて肝重量を減少させた。
相対的体重および相対的肝重量
図１Ａに示す通り、ＯＣＡ、セマグルチドおよび化合物Ａ＋ＯＣＡおよび化合物Ａ＋セマグルチドを施した実験群は、ビヒクルと比べて最後に記録された相対的体重を減少させた。図１Ｂに示す通り、化合物Ａ、セマグルチド、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群は、未治療ビヒクル群と比べて肝重量を減少させた。
【0166】
図１Ａおよび図１Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝９～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
【0167】
生物学的実施例２
血漿ＡＳＴおよびＡＬＴレベル
化合物Ａ、ＯＣＡ、セマグルチド、フィルソコスタットおよび組合せ療法の８週間の投与後、血漿アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）（図２Ａ）およびアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）（図２Ｂ）を測定した。
血漿ＡＳＴおよびＡＬＴレベル
化合物Ａ、ＯＣＡ、セマグルチド、フィルソコスタットおよび組合せ療法の８週間の投与後、血漿アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）（図２Ａ）およびアスパラギン酸トランスアミナーゼ（ＡＳＴ）（図２Ｂ）を測定した。
【0168】
図２Ａおよび図Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝９～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
【0169】
生物学的実施例３
血漿トリグリセリドおよび総コレステロール
図３Ａに示す通り、化合物ＡおよびＯＣＡが投与された群ならびに組合せ療法群のすべてが、血漿トリグリセリドのレベルを有意に低下させた。総コレステロールの血漿レベルの場合、図３Ｂに示す通り、ＯＣＡによる単剤療法は、組合せ療法の化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋ＯＣＡのように、血漿コレステロールを有意に低下させた。
血漿トリグリセリドおよび総コレステロール
図３Ａに示す通り、化合物ＡおよびＯＣＡが投与された群ならびに組合せ療法群のすべてが、血漿トリグリセリドのレベルを有意に低下させた。総コレステロールの血漿レベルの場合、図３Ｂに示す通り、ＯＣＡによる単剤療法は、組合せ療法の化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋ＯＣＡのように、血漿コレステロールを有意に低下させた。
【0170】
図３Ａおよび図３Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝７～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５、＆＆＝Ｐ＜０．０１および＆＆＆＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいてそれらのそれぞれの追加の活性薬剤とも比較（例えば、セマグルチドに対する化合物Ａ＋セマグルチド）し、ここで、＾＝Ｐ＜０．０５、＾＾＝Ｐ＜０．０１および＾＾＝Ｐ＜０．００１である。
【0171】
生物学的実施例４
脂肪肝
肝臓総コレステロールおよびトリグリセリド
図４Ａに示す通り、化合物Ａ、ＯＣＡ、化合物Ａ＋フィルソコスタット、化合物Ａ＋ＯＣＡおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群は、未治療ビヒクル群と比べて肝臓総コレステロールの相対レベル（肝重量に規格化）の有意な低下を示した。組合せ療法群はすべて、単一化合物による治療を施す群よりも有意に大きい低下を示した。特に、セマグルチド単独は、ビヒクル対照と比べて相対的肝臓総コレステロールレベルに有意に影響しなかったが、化合物Ａ＋セマグルチドの組合せは、化合物Ａ単独と比べて相対的肝臓総コレステロールレベルに対して有意により大きい影響を与えた。
脂肪肝
肝臓総コレステロールおよびトリグリセリド
図４Ａに示す通り、化合物Ａ、ＯＣＡ、化合物Ａ＋フィルソコスタット、化合物Ａ＋ＯＣＡおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群は、未治療ビヒクル群と比べて肝臓総コレステロールの相対レベル（肝重量に規格化）の有意な低下を示した。組合せ療法群はすべて、単一化合物による治療を施す群よりも有意に大きい低下を示した。特に、セマグルチド単独は、ビヒクル対照と比べて相対的肝臓総コレステロールレベルに有意に影響しなかったが、化合物Ａ＋セマグルチドの組合せは、化合物Ａ単独と比べて相対的肝臓総コレステロールレベルに対して有意により大きい影響を与えた。
【0172】
図４Ｂに示す通り、化合物Ａ、ＯＣＡ、化合物Ａ＋フィルソコスタット、化合物Ａ＋ＯＣＡおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群は、未治療群と比べて肝臓トリグリセリドの相対レベル（肝重量に規格化）の有意な低下を示した。化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットを施す群のいずれも、化合物Ａのみまたはそれぞれの追加の活性薬剤（すなわち、セマグルチドまたはフィルソコスタットそれぞれ）のみを施す群と比べて肝臓トリグリセリドレベルの有意により大きい低下を示す。
【0173】
図４Ａおよび図４Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝７～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５、＆＆＝Ｐ＜０．０１および＆＆＆＝Ｐ＜０．００１である。図４Ｂにおいて、組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいてそれらのそれぞれの追加の活性薬剤とも比較（例えば、セマグルチドに対する化合物Ａ＋セマグルチド）し、ここで、＾＝Ｐ＜０．０５、＾＾＝Ｐ＜０．０１および＾＾＝Ｐ＜０．００１である。
【0174】
肝臓脂質
ＶＩＳソフトウェア（Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ（登録商標）、デンマーク）を使用した画像解析により、Ｈ＆Ｅ染色スライド上で脂肪肝面積（相対的肝臓脂質）を定量化した。ＶＩＳプロトコールは、以下の２つのステップでバーチャルスライドを分析するように設計される：
１．低倍率（１倍対物）での組織検出；ならびに
２．高倍率（２０倍対物）での脂肪症および組織の検出。
ＶＩＳソフトウェア（Ｖｉｓｉｏｐｈａｒｍ（登録商標）、デンマーク）を使用した画像解析により、Ｈ＆Ｅ染色スライド上で脂肪肝面積（相対的肝臓脂質）を定量化した。ＶＩＳプロトコールは、以下の２つのステップでバーチャルスライドを分析するように設計される：
１．低倍率（１倍対物）での組織検出；ならびに
２．高倍率（２０倍対物）での脂肪症および組織の検出。
【0175】
脂肪症の定量的推定値を、以下の通り面積部分として計算した：
【0176】
【数2】
【0177】
図５Ａに示す通り、化合物Ａ、ＯＣＡおよびそれぞれの組合せ療法が投与された群は、未治療ビヒクル群と比べて脂肪肝面積の有意な相対的減少を示した。組合せ療法群のすべてが、単一化合物で治療された群と比べて有意により大きい減少を示した。特に、化合物Ａ＋フィルソコスタットは、化合物単独のいずれよりもはるかに大きい程度、脂肪肝面積を有意に縮小した。加えて、セマグルチドは、ビヒクルと比べて脂肪肝面積に対して有意な影響を与えなかったが、化合物Ａ＋セマグルチドの組合せの結果、化合物Ａ単独よりも脂肪肝面積が有意に小さくなった。
【0178】
図５Ａに示す通り、ビヒクル対照群は、ベースラインと比べて有意により小さい脂肪肝面積を有し、組合せ療法ならびに化合物Ａ、ＯＣＡおよびフィルソコスタット単独により得られた減少はすべて、未治療ビヒクル群よりも有意に大きかった。
【0179】
図５Ｂに示す通り、化合物Ａ、フィルソコスタットが投与された群および組合せ療法群のすべてが、未治療ビヒクル群と比べて脂肪滴を有する肝細胞の割合を有意に減少させた。深層学習ベースの画像解析を使用して、脂肪滴を有する肝細胞の割合を決定した。
【0180】
化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットを施す群は、それぞれの個々の薬剤単独を施す群よりも、脂肪滴を有する肝細胞の割合が有意に大きく減少した。特に、セマグルチド単独は、ビヒクル対照と比べて脂肪滴を有する肝細胞の割合に有意に影響しなかったが、化合物Ａ＋セマグルチドの組合せは、化合物Ａ単独よりも有意により大きい影響を与えた。加えて、化合物Ａ＋フィルソコスタットの組合せは、いずれかの薬剤単独よりも、脂肪滴を有する肝細胞の割合に対してはるかに大きい影響を与えた。
【0181】
図５Ａおよび図５Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝７～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５、＆＆＝Ｐ＜０．０１および＆＆＆＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいてそれらのそれぞれの追加の活性薬剤とも比較（例えば、セマグルチドに対する化合物Ａ＋セマグルチド）し、ここで、＾＝Ｐ＜０．０５、＾＾＝Ｐ＜０．０１および＾＾＝Ｐ＜０．００１である。
【0182】
組織病理学的解析－脂肪症スコア
図６に示す通り、化合物Ａ、フィルソコスタット、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドで治療された群は、未治療ビヒクル群と比べて低下した脂肪症スコアを示した。図６に示された各群について、各スコア（１、２または３）を有する動物の数が、ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定における積み上げ棒の高さにより示されており、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
図６に示す通り、化合物Ａ、フィルソコスタット、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドで治療された群は、未治療ビヒクル群と比べて低下した脂肪症スコアを示した。図６に示された各群について、各スコア（１、２または３）を有する動物の数が、ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定における積み上げ棒の高さにより示されており、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
【0183】
ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定（＆＆＆＝Ｐ＜０．００１）において化合物Ａのみを施す治療群に対して組合せ療法治療群を比較するためにデータを解析したとき、化合物Ａ＋フィルソコスタットが投与された群は、化合物Ａ単独を施す群と比べて脂肪症スコアの有意な低下を示した。
【0184】
生物学的実施例６
肝炎症
深層学習ベースの画像解析により、炎症細胞および炎症性病巣の数を決定した。図７Ａに示す通り、化合物Ａが投与された群および３つすべての組合せ療法群は、ベースラインレベルと比べたときだけでなく、未治療ビヒクル群と比べて炎症細胞の数（１ｍｍ２当たり）が有意に減少した。セマグルチド単独がビヒクルおよびベースラインと比べて有意な影響を与えないにも関わらず、化合物Ａ＋セマグルチドで治療された群は、化合物Ａ単独が投与された群と比べて炎症細胞が有意により大きく減少した。
肝炎症
深層学習ベースの画像解析により、炎症細胞および炎症性病巣の数を決定した。図７Ａに示す通り、化合物Ａが投与された群および３つすべての組合せ療法群は、ベースラインレベルと比べたときだけでなく、未治療ビヒクル群と比べて炎症細胞の数（１ｍｍ２当たり）が有意に減少した。セマグルチド単独がビヒクルおよびベースラインと比べて有意な影響を与えないにも関わらず、化合物Ａ＋セマグルチドで治療された群は、化合物Ａ単独が投与された群と比べて炎症細胞が有意により大きく減少した。
【0185】
図７Ｂは、化合物Ａおよび組合せ療法が投与された群では、未治療ビヒクル群およびベースラインレベルと比べて炎症性病巣（１ｍｍ２当たり）が有意に低下したことを示す。セマグルチド単独がビヒクルおよびベースラインと比べて有意な影響を与えないにも関わらず、化合物Ａ＋セマグルチドで治療された群は、化合物Ａ単独が投与された群と比べて炎症性病巣が有意により大きく減少した。
【0186】
ベースラインと比べた化合物Ａおよび組合せ療法のそれぞれに対する炎症細胞および炎症性病巣の数の著しい変化は、化合物Ａ単独のまたは組合せ療法としての投与前に発症した炎症の縮小効果または好転を示す。
【0187】
図７Ａおよび図７Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝７～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１であり、ここで、ベースラインレベルと比べて＃＝Ｐ＜０．０５、＃＃＝Ｐ＜０．０１および＃＃＃＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５、＆＆＝Ｐ＜０．０１および＆＆＆＝Ｐ＜０．００１である。
【0188】
組織病理学的解析－小葉炎症およびＮＡＦＬＤ活動性スコア
図８Ａは、治療群のすべての臨床小葉炎症スコアを示す。図８Ｂは、化合物Ａ、フィルソコスタット、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群が、未治療ビヒクル群と比べてＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）を有意に低下させたことを示す。組合せ療法群を、化合物Ａのみを施す群と比較したとき、化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットを施す群は、化合物Ａ群よりもＮＡＦＬＤスコアの有意に大きい低下を示した。
図８Ａは、治療群のすべての臨床小葉炎症スコアを示す。図８Ｂは、化合物Ａ、フィルソコスタット、化合物Ａ＋フィルソコスタットおよび化合物Ａ＋セマグルチドが投与された群が、未治療ビヒクル群と比べてＮＡＦＬＤ活動性スコア（ＮＡＳ）を有意に低下させたことを示す。組合せ療法群を、化合物Ａのみを施す群と比較したとき、化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットを施す群は、化合物Ａ群よりもＮＡＦＬＤスコアの有意に大きい低下を示した。
【0189】
図８Ａおよび図８Ｂにおいて、各群について、各スコアに対する動物の数が、ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定における積み上げ棒の高さにより示されている。図８Ａにおいて、０．０５の有意水準で差はなかった。図８Ｂにおいて、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＝Ｐ＜０．０１である。
【0190】
生物学的実施例７
肝線維症
線維症マーカー
図９Ａに示す通り、ＯＣＡが投与された群を除く治療群のすべてが、未治療ビヒクル群と比べて相対的肝臓ヒドロキシプロリン含量（肝重量に規格化）の有意な低下を示した。組合せ療法の化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットは、それぞれの薬剤単独のいずれかよりも相対的肝臓ヒドロキシプロリン含量が有意により大きく減少した。
肝線維症
線維症マーカー
図９Ａに示す通り、ＯＣＡが投与された群を除く治療群のすべてが、未治療ビヒクル群と比べて相対的肝臓ヒドロキシプロリン含量（肝重量に規格化）の有意な低下を示した。組合せ療法の化合物Ａ＋セマグルチドおよび化合物Ａ＋フィルソコスタットは、それぞれの薬剤単独のいずれかよりも相対的肝臓ヒドロキシプロリン含量が有意により大きく減少した。
【0191】
肝炎症および線維症のマーカーであるガレクチン－３を発現させる肝面積を組織学的定量的評価により決定した。図９Ｂに示す通り、化合物Ａが投与された群および組合せ療法群のすべてが、未治療ビヒクル群と比べてガレクチン－３肝面積割合を有意に縮小した。セマグルチド単独がビヒクルと比べて有意な影響を与えないにも関わらず、化合物Ａ＋セマグルチド組合せ療法群は、化合物Ａ単独と比較して、ガレクチン－３を発現させる肝面積割合が有意により大きく縮小した。加えて、セマグルチド群がベースラインと比べてガレクチン－３発現面積を有意に増加させたにも関わらず、この組合せは、それが相対的ガレクチン－３面積をベースラインのそれ未満に有意に縮小するような縮小効果を示した。化合物Ａおよびフィルソコスタットの組合せはまた、相対的ガレクチン－３発現面積をベースライン未満に有意に縮小した。
【0192】
図９Ａおよび図９Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝７～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５、＆＆＝Ｐ＜０．０１および＆＆＆＝Ｐ＜０．００１である。図９Ａにおいて、組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいてそれぞれの追加の活性薬剤と比較し、ここで、＾＾＝Ｐ＜０．０１および＾＾＾＝Ｐ＜０．００１である。図９Ｂにおいて、各群をダネット検定一因子線形モデルにおいてベースラインレベルと比較し、ここで、＃＝Ｐ＜０．０５、＃＃＝Ｐ＜０．０１および＃＃＃＝Ｐ＜０．００１である。
【0193】
肝線維化面積－ＰＳＲ
コラーゲンに結合するピクロサイラスレッド（ＰＳＲ）での染色および組織学的定量的評価により肝線維化面積を決定した。
コラーゲンに結合するピクロサイラスレッド（ＰＳＲ）での染色および組織学的定量的評価により肝線維化面積を決定した。
【0194】
図１０Ａに示す通り、化合物Ａおよび組合せ療法が投与された群は、未治療ビヒクル群と比べてＰＳＲ染色により決定される肝線維化面積を有意に縮小した。組合せ療法の化合物Ａ＋セマグルチドにより得られた肝線維化面積の縮小は、化合物Ａ単独により得られたものよりも有意に大きかった。セマグルチド単独は、肝線維化面積に有意に影響しなかった。
【0195】
ＰＳＲおよび組織学的定量的評価および深層学習画像解析を使用して類洞および門脈周囲線維化面積を決定した。図１０Ｂに示す通り、化合物Ａ＋セマグルチドは、未治療ビヒクル群と比べて類洞線維化面積を有意に縮小した。化合物単独は有意な影響を与えなかった。図１０Ｃは、様々な実験群の門脈周囲線維化面積を示す。
【0196】
図１０Ａ、図１０Ｂおよび図１０Ｃにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝９～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＝Ｐ＜０．０５、＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。図１０Ａおよび図１０Ｂにおいて、組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＆＝Ｐ＜０．０１である。図１０Ａにおいて、組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいてそれぞれの追加の活性薬剤と比較し、ここで、＾＾＾＝Ｐ＜０．００１である。
【0197】
肝線維症の追加のマーカー
図１１Ａは、様々な実験群のコラーゲン－１（Ｃｏｌ１ａ１）発現の面積割合を示す。
図１１Ａは、様々な実験群のコラーゲン－１（Ｃｏｌ１ａ１）発現の面積割合を示す。
【0198】
図１１Ｂは、様々な実験群の相対的α－平滑筋アクチン（α－ＳＭＡ）発現の面積割合を示す。組合せ療法の化合物Ａ＋ＯＣＡは、未治療ビヒクル群および化合物Ａ単独と比べて肝臓α－ＳＭＡを有意に縮小した。
【0199】
図１１Ａおよび図１１Ｂにおいて、値は、ダネット検定一因子線形モデルにおけるｎ＝９～１２の平均＋ＳＥＭで表され、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＝Ｐ＜０．０１および＊＊＊Ｐ＜０．００１である。組合せ療法をダネット検定一因子線形モデルにおいて化合物Ａ単独と比較し、ここで、＆＝Ｐ＜０．０５および＆＆＝Ｐ＜０．０１である。
【0200】
線維症ステージ
図１２は、治療群のそれぞれの線維症ステージスコアリングを示す。各群について、各スコアに対する動物の数が、ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定における積み上げ棒の高さにより示されており、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
図１２は、治療群のそれぞれの線維症ステージスコアリングを示す。各群について、各スコアに対する動物の数が、ボンフェローニ補正によるマン・ホイットニーＵ検定における積み上げ棒の高さにより示されており、ここで、未治療ビヒクル群と比べて＊＊＊＝Ｐ＜０．００１である。
【0201】
生物学的実施例１２
肝臓形態
図１３Ａ～図１３Ｉは、Ｐｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ Ｒｅｄで染色されたときの終了時の様々な治療群の肝臓形態の代表的な画像を示す。図１４Ａ～図１４Ｉは、Ｈ＆Ｅ染色による終了時の様々な治療群の肝臓形態の代表的な画像を示す。画像を倍率２０倍で撮影した。
肝臓形態
図１３Ａ～図１３Ｉは、Ｐｉｃｒｏ Ｓｉｒｉｕｓ Ｒｅｄで染色されたときの終了時の様々な治療群の肝臓形態の代表的な画像を示す。図１４Ａ～図１４Ｉは、Ｈ＆Ｅ染色による終了時の様々な治療群の肝臓形態の代表的な画像を示す。画像を倍率２０倍で撮影した。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10-1】
【図10-2】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【国際調査報告】