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特表2024-500324ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲ均衡アゴニストを使用した血糖および／または体重を低下させるための治療レジメンおよび方法
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-01-09
(54)【発明の名称】ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲ均衡アゴニストを使用した血糖および／または体重を低下させるための治療レジメンおよび方法
(51)【国際特許分類】
A61K 38/26 20060101AFI20231226BHJP
A61K 9/08 20060101ALI20231226BHJP
A61P 3/04 20060101ALI20231226BHJP
A61P 3/06 20060101ALI20231226BHJP
A61P 3/10 20060101ALI20231226BHJP
C07K 14/605 20060101ALN20231226BHJP
【ＦＩ】
A61K38/26
A61K9/08
A61P3/04
A61P3/06
A61P3/10
C07K14/605 ZNA
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023534386
(86)(22)【出願日】2021-12-07
(85)【翻訳文提出日】2023-08-04
(86)【国際出願番号】 US2021062286
(87)【国際公開番号】W WO2022125598
(87)【国際公開日】2022-06-16
(31)【優先権主張番号】63/122,117
(32)【優先日】2020-12-07
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/211,157
(32)【優先日】2021-06-16
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/249,468
(32)【優先日】2021-09-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】522316696
【氏名又は名称】スピットファイア ファーマ エルエルシー
(74)【代理人】
【識別番号】110003797
【氏名又は名称】弁理士法人清原国際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】クリシュナン，ヴィジャヤンティ
(72)【発明者】
【氏名】ジェームズ，ジョイス
(72)【発明者】
【氏名】オルハヤ，オマー
(72)【発明者】
【氏名】ハリス，マシュー スコット
【テーマコード（参考）】
4C076
4C084
4H045
【Ｆターム（参考）】
4C076AA12
4C076BB16
4C076CC21
4C076CC50
4C076DD09F
4C076DD38F
4C076DD49F
4C076DD51F
4C076EE23F
4C076FF16
4C076FF43
4C084AA02
4C084AA03
4C084BA01
4C084BA08
4C084BA19
4C084BA28
4C084BA36
4C084CA59
4C084DB35
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4C084MA66
4C084NA06
4C084ZA701
4C084ZA702
4C084ZC331
4C084ZC332
4C084ZC351
4C084ZC352
4H045AA10
4H045AA20
4H045AA30
4H045BA18
4H045CA40
4H045EA27
4H045FA34
4H045FA72
4H045FA74
(57)【要約】
【解決手段】
本開示は、配列番号１のデュアルアゴニストペプチド産物を含むが、これに限定されない、デュアルＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲアゴニストの週１回の投与レジメン、製剤、ならびに慢性的な体重管理、肥満、および／または血糖管理の処置のためのそれの使用方法に関する。
【選択図】図１
本開示は、配列番号１のデュアルアゴニストペプチド産物を含むが、これに限定されない、デュアルＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲアゴニストの週１回の投与レジメン、製剤、ならびに慢性的な体重管理、肥満、および／または血糖管理の処置のためのそれの使用方法に関する。
【選択図】図１
【特許請求の範囲】
【請求項1】
ヒトの血糖を低下させ、体重を低下させ、および／または肝脂肪を低減する方法であって、ヒトに、治療有効量の、配列番号１を含む医薬用量製剤を週１回投与することを含み、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して１つまたは複数の有害事象の発生が減少し、前記有害事象が、前記ヒトへの投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される、方法。
【請求項2】
前記方法が、ａ）ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、１つまたは複数の有害事象の発生率を低減し、前記有害事象が、ヒトへの投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択され、
ｂ）ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドが投与される方法と比較して、投与の約４８もしくは９６時間後に約５０％低い血糖、投与の約７２時間後に約１００％低い血糖、および／または投与の約１２０時間後に低い血糖をもたらし、
ｃ）全身体重減少を誘導し、および／または肝脂肪消失を誘導し、
ｄ）ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドが投与される方法と比較して、
低いＣｍａｘ、または任意選択的に約５０％低いＣｍａｘをもたらし、
ほぼ等しいかもしくは高いＴｍａｘ、または任意選択的に約１００％高いＴｍａｘをもたらし、
同様のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）、または任意選択的に約８５～９３％のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）をもたらし、
ほぼ等しいかもしくはそれ未満のＴ１／２（ｈｒ）、または任意選択的に約５０～７５％のＴ１／２（ｈｒ）をもたらし；
延長したＭＲＴ（ｈｒ）、または任意選択的に少なくとも約２５％長いＭＲＴ（ｈｒ）をもたらし、
持続性ＰＫ／ＰＤプロファイルをもたらし、等しいかまたは高い糖調節作用を示し；
高い全身体重減少、もしくは任意選択的に約２倍の全身体重減少をもたらし；
低い体脂肪量、任意選択的に約１００％低い体脂肪量をもたらし；ならびに／または
方法が非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）および／もしくは非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）を処置する場合、増加した全身体重低減、肝臓重量減少、改善されたＮＡＳスコア、改善された脂肪肝、改善されたバルーン化、改善されたｃｏｌ１Ａ１染色善、改善されたＡＬＴ、改善された肝ＴＧ／ＴＣ、および改善された血漿ＴＧ／ＴＣをもたらし、
ｅ）ほぼ等モルの用量で投与されるセマグルチドと比較して、製剤の投与の約１４日後までに高い体重の減少、任意選択的に、約１５％高い減少をもたらす；および／または、製剤の投与の約２０～２８日後までに高い体重の減少、任意選択的に、約２５％高い減少をもたらし、ならびに／または
ｆ）ヒトの体重を痩せ型の正常なヒトの正常な体重範囲に戻すのに十分な肥満のヒトにおける体重減少をもたらす、
請求項１に記載の方法。
【請求項3】
肥満の処置である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項4】
血糖管理の処置である、請求項１または２に記載の方法。
【請求項5】
医薬用量製剤の治療用量を決めるための処置開始フェーズを含まない、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項6】
血糖管理、肥満、ＮＡＦＬＤ、ＮＡＳＨ、および／または脂肪症の一次治療である、請求項１～５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項7】
食事および／または運動を用いた補助処置である、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記ヒトが、２型糖尿病を有し、任意選択的に、前記ヒトがまた、確立された心血管疾患を呈する、請求項１～７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項9】
前記医薬用量製剤が、約２週間～約８週間、またはそれ以上、約毎週投与される、請求項１～８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項10】
前記医薬用量製剤を前記ヒトに、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、毎週の用量として約４～約８週間、任意選択的に、約６週間投与することが、前記ヒトへの投与の約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、または約７週間後に、高い全身体重減少をもたらす、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
前記医薬用量製剤が、約１、８、１５、２２、２９、および３６日目に投与される、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項12】
ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、前記ヒトへの単回用量の投与が、投与の約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日または約７日後に、低い血糖をもたらす、請求項１～１１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項13】
ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、ヒトへの約４～約８週間、任意選択的に約６週間の毎週の用量の投与が、投与の約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間または約７週間後に、高い全身体重減少をもたらす、請求項１～１２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項14】
ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、前記ヒトへの単回用量の投与が、投与の約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日または約７日後に、低いＣｍａｘを示す、請求項１～１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項15】
前記医薬用量製剤を１週間当たり約０．５～約１０ｍｇ、任意選択的に、１週間当たり約１～約７ｍｇ、１週間当たり約１～約５ｍｇ、１週間当たり約１～約２ｍｇ、１週間当たり約１．２ｍｇ、または１週間当たり約１．８ｍｇのいずれかで投与することを含む、請求項１～１４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項16】
医薬用量製剤が、約週１回または２週間に１回、任意選択的に、少なくとも１ヶ月間投与され、任意選択的に、各用量が、前記配列番号１のほぼ同じものを含む、請求項１～１５のいずれか１項に記載の方法。
【請求項17】
治療用量に達するまでの時間が、約４週間以下である、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項18】
前記医薬用量製剤が、第１の用量で、毎週、１週間以上投与され、続いて、より高い第２の用量で、毎週、１週間以上投与される、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
前記医薬用量製剤の投与が、約４００～約１３００ｎｇ／ｍｌのＣｍａｘ、約１０～約３６時間のＴｍａｘ、および／または約１５，０００～４５，０００ｈ＊ｎｇ／ｍＬのＡＵＣ０－４８を示す、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項20】
前記ヒトにおける前記体重減少が、少なくとも５％、少なくとも１０％、または約１％～約２０％、もしくは約５％～約１０％（ｗ／ｗ）である、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項21】
ヒトへのその投与が、前記ヒトを痩せ型の正常なヒトの正常な体重範囲に戻すのに十分な、肥満のヒトにおける体重減少をもたらす、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。
【請求項22】
前記医薬用量製剤が、皮下投与される、請求項１～２１のいずれか１項に記載の方法。
【請求項23】
前記医薬用量製剤が、ポリソルベート２０、アルギニン、またはマンニトールのうちの１つまたは複数を含む水性製剤である、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項24】
前記医薬用量製剤が、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中約０．０２５～０．０７５％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．２～０．５％（ｗ／ｗ）アルギニン、約３～６％（ｗ／ｗ）マンニトール、任意選択的に、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中約０．０５０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．３４８％（ｗ／ｗ）アルギニン、約４．２６０％（ｗ／ｗ）マンニトールを含む、請求項１～２３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項25】
約１．８ｍｇの配列番号１を含む医薬用量製剤が、前記ヒトに、週１回、少なくとも６週間投与され、少なくとも約３～５％の全身体重減少、任意選択的に、５％を超える全身体重減少をもたらす、請求項１～２４のいずれか１項に記載の方法。
【請求項26】
プラセボと比較した全身体重減少の正味の変化が、少なくとも約６％、任意選択的に、約６．３％である、請求項２５に記載の方法。
【請求項27】
約１．２ｍｇの配列番号１を含む医薬用量製剤が、前記ヒトに、週１回、少なくとも６週間投与され、少なくとも約２％の全身体重減少、任意選択的に、約１．８％の全身体重減少をもたらす、請求項１～２６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項28】
プラセボと比較した全身体重減少の正味の変化が、少なくとも約３％、任意選択的に、約２．７％である、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記医薬用量製剤が、皮下投与される、請求項２５～２８のいずれか１項に記載の方法。
【請求項30】
少なくとも２５の肥満度指数（ＢＭＩ ｋｇ／ｍ２）を有するヒトにおいて体重減少を誘導することによる、前記ヒトの慢性的な体重管理のための処置の方法であって、前記ヒトに、週１回、治療有効量の、配列番号１を含む医薬用量製剤を投与することを含み、前記ヒトの前記体重が、１２週目にベースラインから少なくとも５％低減される、方法。
【請求項31】
前記ヒトの前記体重が、１２週目にベースラインから少なくとも６％、１２週目にベースラインから少なくとも７％、１２週目にベースラインから少なくとも８％、１２週目にベースラインから少なくとも９％、または１２週目にベースラインから少なくとも１０％低減される、請求項３０に記載の方法。
【請求項32】
配列番号１を含む前記医薬用量製剤の前記週１回の治療有効量が、配列番号１約１．８ｍｇである、請求項３０に記載の方法。
【請求項33】
前記処置が、身体活動の増加および／またはカロリー低減食を伴う補助処置である、請求項３０に記載の方法。
【請求項34】
前記処置が、身体活動の増加および／またはカロリー低減食と組み合わされていない、請求項３０に記載の方法。
【請求項35】
前記ヒトの前記ＢＭＩが、少なくとも３０ｋｇ／ｍ２である、請求項３０に記載の方法。
【請求項36】
０週目での前記ヒトが糖尿病でない、請求項３０に記載の方法。
【請求項37】
前記医薬用量製剤が、ヒトに皮下投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項38】
前記医薬用量製剤が、ヒトに週１回、少なくとも６週間投与され、少なくとも約３％の全身体重減少をもたらす、請求項３２に記載の方法。
【請求項39】
肝脂肪を低減する、請求項１～３８のいずれか１項に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
関連出願
本出願は、２０２０年１２月７日出願された米国仮特許出願第６３／１２２，１１７号、２０２１年６月１６日に出願された米国仮特許出願第６３／２１１，１５７号、および２０２１年９月２８日に出願された米国仮特許出願第６３／２４９，４６８号の優先権を主張し、そのそれぞれが、その全体が参照により本出願に組み込まれる。
本出願は、２０２０年１２月７日出願された米国仮特許出願第６３／１２２，１１７号、２０２１年６月１６日に出願された米国仮特許出願第６３／２１１，１５７号、および２０２１年９月２８日に出願された米国仮特許出願第６３／２４９，４６８号の優先権を主張し、そのそれぞれが、その全体が参照により本出願に組み込まれる。
【0002】
配列表
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２１年１２月７日に作成された、当該ＡＳＣＩＩコピーは、ＭＥＤ００８ＰＣＴ＿ＳＴ２５．ＴＸＴと名付けられ、サイズ８４５３バイトである。
本出願は、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介してＡＳＣＩＩフォーマットで電子的に提出された配列表を含み、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。２０２１年１２月７日に作成された、当該ＡＳＣＩＩコピーは、ＭＥＤ００８ＰＣＴ＿ＳＴ２５．ＴＸＴと名付けられ、サイズ８４５３バイトである。
【0003】
技術分野
本開示は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲアゴニスト、製剤、ならびにその使用方法の分野に関する。
本開示は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲアゴニスト、製剤、ならびにその使用方法の分野に関する。
【背景技術】
【0004】
肥満、糖尿病、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）およびその進行した形態である非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）の増加する有病率は、患者の罹患率および死亡率の主な原因であり、ならびに主な経済的負担である多発している世界的な健康危機である。肥満は、２型糖尿病およびＮＡＳＨの重要なリスク因子であり、２型糖尿病を有する患者のおよそ９０％が、過体重または肥満である。肥満は、世界的に急速に増加している問題であり、現在米国では成人の６５％より多くが過体重である（Ｈｅｄｌｅｙ， Ａ．Ａ．ら（２００４） ＪＡＭＡ ２９１： ２８４７－２８５０）。ＮＡＳＨは近い将来、肝移植の主要な原因になると予想されている。肥満および糖尿病のための安全かつ有効な医薬処置の開発が必要とされている。本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）および多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）などの、肥満または／および糖尿病と関連する障害の処置のための改良されたペプチド医薬を提供する。
【0005】
米国（ＵＳ）では、ＮＡＳＨは、末期の肝疾患または肝移植の主な原因となっている。肥満は、ＮＡＳＨの主な原因であり、体重減少は、肝脂肪の低減およびＮＡＳＨの改善をもたらす。ＮＡＳＨを有する個体の８０％より多くが、過体重または肥満であり、現在、米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した体重減少を誘導する、利用可能な薬理学的選択肢はないため、治療の大部分は、体重減少を達成するための生活習慣への介入に基づく。しかし、生活習慣の改善だけで長期的な体重減少を達成し維持することは困難である。
【0006】
グルカゴン様ペプチド－１受容体アゴニスト（ＧＬＰ－１ＲＡ）は、承認された用量で適度な体重減少を伴い、これらの薬剤は、ＮＡＳＨを有する患者の治療選択肢として浮上してきた。最近の臨床試験では、１日１回のＧＬＰ－１ＲＡであるリラグルチドは、ＮＡＳＨの消失と関連し、肝線維症の改善傾向を示した。しかし、患者は、体重の５．５％を失ったのみであった。ある研究では、１０％以上の体重減少が、最適なＮＡＳＨの消失に必要であった。体重減少のレベルが高いほど、ＮＡＳＨ患者が直面する最も深刻な合併症を表す、心血管疾患および非肝臓悪性腫瘍の発生率の低下とも関連する。
【0007】
ＧＬＰ－１ＲＡは、食欲および摂食に対する中枢作用を示し、一方、ＧＣＲアゴニストは、動物モデルおよびヒトにおいてエネルギー消費を増加させる。ＧＣＲアゴニストおよびＧＬＰ－１ＲＡの作用は、ＧＬＰ－１ＲＡ単独と比較して、相乗的に体重減少を促進することが示されている。ＧＣＲはまた、脂肪分解を強化し、肝脂肪の合成を抑制し、これにより、肝脂肪の低減およびＮＡＳＨの消失のさらなる経路がもたらされる。
【0008】
デュアルアゴニストは、同一分子中でＧＣＲをＧＬＰ－１ＲＡと結合させたものである。肥満非ヒト霊長類において、ＧＬＰ－１Ｒ／ＧＣＲデュアルアゴニストの慢性投与は、ＧＬＰ－１ＲＡモノアゴニストと比較して、より大きな程度まで、体重を低減し、耐糖能を改善した。ＧＬＰ－１のグルカゴン活性に対する５：１のバイアスのＧＬＰ－１／ＧＣＲデュアルアゴニストであるコタデュチドの臨床試験は、わずか６週間で肝脂肪含有量が３９％と顕著に低減し、リラグルチド単独よりＮＡＳＨに関連したアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）低減のより大きな改善を示した。しかし、２６週間にわたるコタデュチド投与による体重減少の程度は、リラグルチドと同等であり（５．４％対５．５％）、これは、５：１の比が、肝脂肪低減には許容できるが、体重低減には最適ではないことを示唆していた。均衡のとれた（１：１）アゴニズムは、一方のアゴニストが他方のアゴニストより好ましいバイアスのかかった比よりも、より大きな体重減少と代謝作用と関連することが示されている。均衡のとれたデュアルアゴニストであるＪＮＪ ６４５６５１１１を用いた最近の試験では、わずか１２週間で体重が８％低減するという驚くべき結果が得られた（ＮＣＴ０３５８６８３０）。
【0009】
残念なことに、ＧＬＰ－１ＲＡは、高い確率で悪心、嘔吐および下痢を伴う。これらの薬剤はまた、副作用を低減するために長期間にわたって漸増されなければならず、忍容性と投与レジメンを改善した薬剤が必要とされる。したがって、胃腸の副作用がなく、治療レベルに達するまで漸増する必要のない、血糖を制御し、および／または体重減少を誘導するための治療用量を用いた好適な投薬（例えば、毎日ではなく毎週）が依然として必要とされている。
【発明の概要】
【課題が解決しようとする課題】
【0010】
デュアルアゴニストペプチドおよびその産物（例えば、製剤）ならびにインスリン抵抗性または／および肥満、例えば、２型糖尿病、メタボリックシンドローム、心血管疾患（アテローム性動脈硬化症および心筋梗塞などの冠動脈疾患を含む）、高血圧、ＮＡＳＨ、慢性腎疾患、慢性的な体重管理ならびにＰＣＯＳを含むが、これらに限定されない、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）の機能と関連する障害を処置するためのその使用ならびにこのような障害と関連する状態の処置におけるその使用が、本明細書に記載される。このようなデュアルアゴニストペプチドは、ＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲの両方に対する親和性を有し、これは、例えば、本明細書に記載される細胞アッセイによって、またはこのような決定を行うための別のアッセイを使用して決定することができる。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、配列番号１～１０のいずれか１つ、またはその誘導体、例えば、その保存的に置換された誘導体、および／もしくはその組み合わせである。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対するほぼ等しい親和性を示し、これは、前述の細胞アッセイを使用して決定することができ、好ましい実施形態では、配列番号１、またはその誘導体である。
【課題を解決するための手段】
【0011】
一部の実施形態では、本開示は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有する（例えば、セマグルチド）か、または過度に高い最高濃度（Ｃｍａｘ）を有するアゴニストと比較して、１つまたは複数の有害事象を低減して血糖を制御するように構成された、このようなデュアルアゴニストペプチド（複数可）の医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、本開示は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、１つまたは複数の有害事象の低減を伴う慢性的な体重管理のための体重減少を誘導するように構成された、このようなデュアルアゴニストペプチド（複数可）の医薬用量製剤を提供する。有害事象は、一部の実施形態では、哺乳動物への投与の際の悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される。これらの有害事象は、典型的には、循環への迅速な進入を伴う（デュアル）アゴニストの投与後に観察され、過度に高いＣｍａｘをもたらす。一部の実施形態では、本明細書に開示されるデュアルアゴニストペプチド（複数可）（例えば、配列番号１～１０またはその誘導体）の投与は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニスト（例えば、セマグルチド）と比較して、他の結果（例えば、体重減少、脂肪減少、脂質プロファイル）および／または薬物動態（ＰＫ）パラメーターの改善をもたらし得る。
【0012】
好ましい実施形態では、本開示は、ヒトの血糖を低下させ、および／または体重を低下させる方法であって、ヒトに、配列番号１を含む医薬用量製剤を投与することを含み、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して１つまたは複数の有害事象の発生が減少し、有害事象が、ヒトへの投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される、方法を提供する。
【0013】
ある特定の実施形態では、本開示は、慢性的な体重管理の処置のために構成されたこのようなデュアルアゴニストペプチド（複数可）の医薬用量製剤を提供する。実施形態では、少なくとも２５の肥満度指数（ＢＭＩ ｋｇ／ｍ２）を有するヒトにおいて体重減少を誘導することによる、前記ヒトの慢性的な体重管理のための処置が提供され、この方法は、ヒトに、治療有効量の配列番号１を含む医薬用量製剤を週１回投与することを含み、ヒトの体重は、１２週目にベースラインから少なくとも５％（好ましくは、少なくとも約５％～約１０％）低減される。
【0014】
本開示の他の態様はまた、当業者が同じことから理解するように、企図されている。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】４３日間にわたり測定したプラセボと比較した、用量１．２ｍｇおよび１．８ｍｇでのＡＬＴ－８０１（本明細書においてペムビジュチドとしても言及される）の投与後の体重減少の結果を説明する（表７も参照）。
【図2】異なる用量群（１．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇ）対プラセボ群にまたがる６および１２週間の処置後のＡＬＴ－８０１（ペムビジュチド）の毎週の投与後の体重減少の結果を説明する。
【図3】１．８ｍｇで、１２週間、毎週のＡＬＴ－８０１対プラセボの投与後の個々の対象の体重減少の結果を説明する。
【図4】２．４ｍｇで、１２週間、毎週のＡＬＴ－８０１対プラセボの投与後の個々の対象の体重減少の結果を説明する。
【図6】すべての測定可能な対象における処置前対処置後（１．２、１．８、または２．４ｍｇでのＡＬＴ－８０１）肝脂肪レベルを説明し、ここで、１番目の棒が、スクリーニング時（ベースライン）の測定値であり、２番目の棒が、６週目での測定値である。
【図7】プラセボと比較した、すべての測定可能な対象におけるＡＬＴ－８０１を用いた処置（１．２、１．８または２．４ｍｇでの処置）の６週間後の肝脂肪レベルの絶対的変化を説明する。
【図8】プラセボと比較した、すべての測定可能な対象におけるＡＬＴ－８０１を用いた処置（１．２、１．８または２．４ｍｇでの処置）の６週間後の肝脂肪レベルの相対変化を説明する。
【図9】プラセボと比較した、すべての脂肪症対象におけるＡＬＴ－８０１を用いた処置（１．８または２．４ｍｇでの処置）の６週間後の肝脂肪レベルの絶対的変化を説明する
【図10】プラセボと比較した、すべての脂肪症対象におけるＡＬＴ－８０１を用いた処置（１．８または２．４ｍｇでの処置）の６週間後の肝脂肪レベルの相対変化を説明する
【図11】ＡＬＴ－８０１を用いた６週間の処置（用量１．８および２．４ｍｇ）後のＭＲＩ－ＰＤＦＦ（磁気共鳴画像プロトン密度脂肪分画）による検出不可能なレベルへの肝脂肪の９０％より大きな低減を示し、ここで、それぞれの対象は、それぞれ、ベースライン肝脂肪含有量１９．５％、１７％および１２．５％を有していた。用量１．８ｍｇまたは２．４ｍｇのＡＬＴ－８０１を用いた毎週の処置により、肝脂肪含有量（ＬＦＣ）を検出不可能なレベル（ＬＯＤ（検出限界）未満）まで減少させた。
【図12】プラセボと比較したＡＬＴ－８０１（用量１．２、１．８および２．４ｍｇ）を用いた１２週間の処置後のすべての群における、心血管系のリスクのバイオマーカーとしての、血圧の改善を説明し、ここで、それぞれの群における１番目の棒が、収縮期圧であり、２番目の棒が、拡張気圧である。ＡＬＴ－８０１を用いた毎週の処置が、すべての用量群（１．２ｍｇ、１．８ｍｇまたは２．４ｍｇ）にわたり血圧を改善した。
【図13】１２週間の処置後のプラセボと比較した、すべての用量群（用量１．２、１．８および２．４ｍｇ）にわたる心血管系のリスクのバイオマーカー（総コレステロール（「Ｔｏｔ． Ｃｈｏｌ．」）、高密度リポタンパク質（「ＨＤＬ Ｃｈｏｌ．」）、低密度リポタンパク質（「ＬＤＬ Ｃｈｏｌ．」）、およびトリグリセリド））としての血清脂質レベルの改善を説明する。
【図14】プラセボと比較した、ベースライン（スクリーニング）および毎週の用量１．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇでのＡＬＴ－８０１を用いた処置の１２週間後（８５日目）に測定したＢＭＩ（肥満度指数）を示す。すべての処置群がＢＭＩを低減し、用量１．８ｍｇおよび２．４ｍｇの処置群が、プラセボと比較して有意な低減を示していた。
【図15】プラセボと比較した、早期満腹感および毎週の用量１．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇでのＡＬＴ－８０１を用いた処置の１２週間後に測定した食欲抑制を示す。すべての処置群が、食欲不振および用量応答を示した。
【発明を実施するための形態】
【0016】
本開示は、デュアルアゴニストペプチド（複数可）、ならびにそれを含む医薬用量製剤、およびそれを使用する方法に関する。デュアルアゴニストペプチドは、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対する親和性、好ましい実施形態では、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対するほぼ等しい親和性を有し、これは、細胞アッセイを使用して決定され得る。一部の実施形態では、本開示は、血糖を制御するように構成された医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、血糖は、選択的（例えば、セマグルチド）および／または不均衡なアゴニストと比較して、デュアルアゴニストペプチドの投与後、より良好に制御される（例えば、低下し安定化される）。一部の実施形態では、本開示は、慢性的な体重管理の処置のためのものを含む、体重減少を誘導するように構成された医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、体重減少は、選択的（例えば、セマグルチド）および／または不均衡なアゴニストと比較して、デュアルアゴニストペプチドの投与後に改善される（例えば、低下し安定化される）。一部の実施形態では、このような医薬用量製剤は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して選択的（例えば、セマグルチド）および／または不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、有害事象の低減を示す。一部の実施形態では、有害事象は、典型的には、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニスト（例えば、セマグルチド）の哺乳動物への投与後または投与の際に観察される悪心、嘔吐、下痢、腹痛および／または便秘を含み得る。一部の実施形態では、本開示は、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）をもたらす、根底にある代謝機能不全を処置するように設計された、新規のペプチドベースのデュアルＧＬＰ－１／グルカゴン受容体アゴニストを提供する。
【0017】
一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、配列番号１～１０、またはその誘導体のいずれか１つである。好ましい実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、表１に示される、ＥＵ－Ａ１８７３（配列番号１）、ＥＵ－Ａ１５８８（配列番号２）、ＥＵ－Ａ１８７１（配列番号３）、ＥＵ－Ａ１８７２（配列番号４）である。
【0018】
【表1】
１Ｈｉｓ－２Ａｉｂ－３Ｇｌｎ－４Ｇｌｙ－５Ｔｈｒ－６Ｐｈｅ－７Ｔｈｒ－８Ｓｅｒ－９Ａｓｐ－１０Ｔｙｒ－１１Ｓｅｒ－１２Ｌｙｓ－１３Ｔｙｒ－１４Ｌｅｕ－１５Ａｓｐ－１６Ｇｌｕ＊－１７Ｌｙｓ＃－１８Ａｌａ－１９Ａｌａ－２０Ｌｙｓ＊－２１Ｇｌｕ－２２Ｐｈｅ－２３Ｉｌｅ－２４Ｇｌｎ－２５Ｔｒｐ－２６Ｌｅｕ－２７Ｌｅｕ－２８Ｇｌｎ－２９Ｔｈｒ－ＮＨ２、
（式中、＊は、ラクタム架橋が、Ｇｌｕ１６とＬｙｓ２０の間で形成されていることを示し、１７Ｌｙｓ＃は、グルクロン酸Ｃ－１８＊の結合部位を示す（ＥｕＰｏｒｔ Ｇ、Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）。別に説明すると、配列番号１は、１７Ｌｙｓに結合した２９個のアミノ酸残基およびグルクロン酸／Ｃ１８二酸部分からなるペプチドアミドであり、ここで、１６Ｇｌｕおよび２０Ｌｙｓの側鎖は、以下に示す分子内サイクルを形成している：
【0019】
【化1】
【0020】
一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、
1) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Gln Thr（配列番号６）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｎ－オメガ（１－（１７－カルボキシル－ヘプタデシルオキシ）ベータ－Ｄ－グルクロニル））、またはＬｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体；
2) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号７）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｍｅ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｍｅ１７ＣＯ２Ｈは、ベータ－Ｄ－メロビオウラニル－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体；
3) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Xaa3 Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号８）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成し；Ｘａａ３は、Ｌｙｓ（Ｚ１５ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１５ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１５－カルボキシヘプタデカンである）である）；もしくはその誘導体；
4) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Xaa4 Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号９）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成し；Ｘａａ４は、Ｌｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）である）；もしくはその誘導体；
または、
5) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Xaa5 Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号１０）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｎ－オメガ（１－（１７－カルボキシル－ヘプタデシルオキシ）ベータ－Ｄ－グルクロニル））またはＬｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｘａａ５は、Ａｒｇであり、Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０はそれぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体のいずれかであり得る。
1) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Gln Thr（配列番号６）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｎ－オメガ（１－（１７－カルボキシル－ヘプタデシルオキシ）ベータ－Ｄ－グルクロニル））、またはＬｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体；
2) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号７）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｍｅ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｍｅ１７ＣＯ２Ｈは、ベータ－Ｄ－メロビオウラニル－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体；
3) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Xaa3 Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号８）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成し；Ｘａａ３は、Ｌｙｓ（Ｚ１５ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１５ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１５－カルボキシヘプタデカンである）である）；もしくはその誘導体；
4) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Lys Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Gln Ala Ala Lys Glu Phe Ile Xaa4 Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号９）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン）であり；Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０は、それぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成し；Ｘａａ４は、Ｌｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）である）；もしくはその誘導体；
または、
5) His Xaa1 Gln Gly Thr Phe Thr Ser Asp Tyr Ser Xaa5 Tyr Leu Asp Glu
1 5 10 15
Xaa2 Ala Ala Lys Glu Phe Ile Gln Trp Leu Leu Gln Thr（配列番号１０）
20 25
（式中、Ｘａａ１は、任意のアミノ酸、好ましくは、Ａｉｂ（α－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン））であり；Ｘａａ２は、Ｌｙｓ（Ｎ－オメガ（１－（１７－カルボキシル－ヘプタデシルオキシ）ベータ－Ｄ－グルクロニル））またはＬｙｓ（Ｚ１７ＣＯ２Ｈ）（式中、Ｚ１７ＣＯ２Ｈは、（ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル）－１－オキサ）１７－カルボキシヘプタデカンである）であり；Ｘａａ５は、Ａｒｇであり、Ｇｌｕ１６およびＬｙｓ２０はそれぞれの側鎖を介して互いに環化されて、ラクタム結合を形成する）；もしくはその誘導体のいずれかであり得る。
【0021】
好ましい実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、配列番号１～１０、またはその誘導体のいずれか１つのアミノ酸配列を有するものである。好ましい実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、配列番号１である。実施形態では、本明細書においてＡＬＴ－８０１と称される水性バッファー溶液中の配列番号１の医薬製剤が本明細書において提供される。配列番号１を含む、本明細書におけるデュアルアゴニストペプチド産物は、アミノ酸側鎖アミド結合（ラクタム架橋）、および脂肪酸側鎖に連結されたグルクロン酸からなるＥｕＰｏｒｔ側鎖を含む。リンカーアミノ酸を介してペプチドに共有結合した親水性糖類基、および疎水性アルキル鎖部分からなる界面活性剤である側鎖は、皮下（ＳＣ）注射後にミセルの形成をもたらし、これにより、循環への進入が遅くなる。進入が遅くなることに伴い、最高濃度（Ｃｍａｘ）がより低くなり、結果、ＧＩ副作用の低下および良好な忍容性をもたらす。この後者の特徴はまた、血漿タンパク質への結合を強化し、代謝安定性を改善し、半減期（ｔ１／２）を延長する。配列番号１の設計により、約４０ｐＭの両方の受容体での等価の（１：１）活性および１００％活性を有するコアゴニストを得るのに成功した。
【0022】
デュアルアゴニストペプチド（例えば、配列番号１～１０、またはその誘導体）の合成は、本明細書（例えば、実施例１）およびその全体が本開示に参照により組み込まれる、米国特許第９，８５６，３０６Ｂ２号に記載されている。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、本明細書に記載される１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得る。好ましい実施形態では、配列番号１は、１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得るが、好ましくは、アミノ酸残基１６、１７、または２０での１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含まない。好ましい実施形態では、配列番号２は、１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得るが、好ましくは、アミノ酸残基１６、１７、または２０での１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含まない。好ましい実施形態では、配列番号３は、１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得るが、好ましくは、アミノ酸残基１６、２０、または２４での１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含まない。好ましい実施形態では、配列番号４は、１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得るが、好ましくは、アミノ酸残基１６、２０、または２４での１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含まず、配列番号５は、１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含み得るが、好ましくは、アミノ酸残基１２、１６、１７、または２０での１つまたは複数の保存的に置換されたアミノ酸を含まない。
【0023】
配列番号１～１０のペプチドは、それぞれが、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対するアゴニストであるので、本明細書において「デュアルアゴニストペプチド」としてまとめて（または「デュアルアゴニストペプチド」として個別に）言及することができる。一部の実施形態では、ペプチドは、本明細書の実施例２に記載されるものなどの細胞アッセイによって決定することができる、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲのデュアルアゴニストである。簡単に言うと、一部の実施形態では、細胞アッセイは、ヒトＧＬＰ－１ＲまたはＧＣＧＲが発現されているＣＨＯ細胞におけるｃＡＭＰ刺激またはアレスチン活性化を測定することによって行うことができる（（ＬｅａｄＨｕｎｔｅｒアッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ））。配列番号１～１０のデュアルアゴニストペプチドは、血清アルブミンに非常に強固に結合し（＞９９％）、結果を歪め得る（例えば、本明細書の実施例２を参照）ため、好ましくは、このようなアッセイは、典型的であり得る０．１％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）と比較して、０．１％卵白アルブミンの存在下で行われる。一部の実施形態では、このようなアッセイを使用して決定される通り、デュアルアゴニストペプチドは、ＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲの両方に対する親和性を有し、好ましい実施形態では、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対するほぼ等しい親和性を有し得る。「ほぼ等しい親和性」は、デュアルアゴニストペプチドが、このような細胞アッセイによって決定され得る、他方に対する親和性と、約２～３倍以下、好ましくは、２倍以下のＧＬＰ－１ＲまたはＧＣＧＲに対する親和性を有することを意味する。例えば、本明細書の実施例に示す通り、デュアルアゴニストペプチド配列番号１（ＥＵ－Ａ１８７３）は、驚くべきことに、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対するほぼ等しい親和性を有するデュアルアゴニストペプチドであることが見出された（例えば、ＧＬＰ－１Ｒに対して約３９ｐｍのＥＣ５０（１１５％固有活性）およびＧＣＧＲに対して４４ｐｍのＥＣ５０（１１５％固有活性））。これは、ＧＬＰ－１Ｒに強くバイアスのかかった、もしくはＧＬＰ－１Ｒのみに対して親和性を示す、セマグルチドおよびエキセンディン－４を含む、ＧＬＰ－１「特異的」化合物、またはＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲの両方に対して高い、もしくはほぼ等しい親和性を示さない、強くＧＣＧＲバイアスのかかったホルモンであるグルカゴンと異なる。天然のホルモンであるオキシントモジュリンは、ＧＬＰ－１とグルカゴン受容体の両方でのアゴニスト作用を有するが、この活性は、強力ではなく、均衡がとれていない。当業者は、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対する親和性が、本明細書に記載されるもの以外の方法および／またはアッセイによって決定することができること、ならびに親和性を決定するためのこのような方法および／またはアッセイが、本明細書において企図される（例えば、ほぼ等しい親和性の決定は、このような他の方法および／またはアッセイによってなされ得る）ことを理解するだろう。
【0024】
実施形態では、本明細書において使用される「グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対してほぼ等しい親和性を有するデュアルアゴニストペプチド」は、このような細胞アッセイによって決定され得る、他方に対する親和性と、約２倍以下のＧＬＰ－１ＲまたはＧＣＧＲに対する親和性を有するデュアルアゴニストペプチドを意味する。実施形態では、他方と比較される一方の受容体に対する本デュアルアゴニストペプチドの結合親和性は、公知の細胞アッセイによって決定され得るように、１．９、１．８、１．６、１．５、１．４、または１．２倍以下である。実施形態では、本明細書において使用される「ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニスト」は、公知の細胞アッセイによって決定され得るように、他方に対する親和性と、少なくとも約１．５倍のＧＬＰ－１ＲまたはＧＣＧＲに対する親和性を有するアゴニストペプチドを意味する。実施形態では、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストの結合親和性は、公知の細胞アッセイによって決定され得るように、少なくとも１．６、１．８、２、２．５、３、５、７．５、１０、２０倍以上である。
【0025】
「ペプチド」（例えば、デュアルアゴニストペプチド）は、典型的には、ペプチド結合を介して連結された２個以上の天然または／および非天然のアミノ酸残基を含む。このようなアミノ酸は、天然のアミノ酸の天然に存在する構造バリアント、天然に存在する非タンパク原性アミノ酸、または／および合成の天然に存在しないアナログを含み得る。用語「ペプチド」および「ポリペプチド」は、本明細書において互換的に使用される。ペプチドは、短いペプチド（約２～２０のアミノ酸）、中程度の長さのペプチド（約２１～５０のアミノ酸）および長いペプチド（「タンパク質」とも呼ばれる、＞約５０のアミノ酸）を含む。一部の実施形態では、ペプチド産物は、約５０、４０または３０以下のアミノ酸のペプチドに共有結合で安定的に結合した界面活性剤部分を含む。合成ペプチドは、例えば自動ペプチド合成装置を使用して合成することができる。ペプチドは、ペプチドをコードする核酸配列を発現している細胞において組換え的に産生することもできる。従来の表示法を本明細書において使用して、ペプチド配列を示し、ペプチド配列の左側の端は、アミノ（Ｎ）末端であり、ペプチド配列の右側の端は、カルボキシル（Ｃ）末端である。共通のアミノ酸の標準的な１文字および３文字略語が、本明細書において使用される。別段Ｄ－もしくはＤＬ－と指定されないか、またはアミノ酸がアキラルでない限り、本明細書に開示されるアミノ酸配列において使用される略語は、Ｌ－アミノ酸を表すが、対応するＤ－異性体は、一般的に、任意の位置で使用され得る（例えば、タンパク分解性の分解に抵抗するため）。本明細書において使用される他のアミノ酸についての略語は、Ａｉｂ＝ａ－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣａ－メチルアラニン）；Ｘａａ：典型的には、式中で具体的に定義される、任意のアミノ酸を含む。本明細書に記載される通り使用され得る他のアミノ酸についての略語は、Ａｃ３ｃ＝１－アミノシクロプロパン－１－カルボン酸；Ａｃ４ｃ＝１－アミノシクロブタン－１－カルボン酸；Ａｃ５ｃ＝１－アミノシクロペンタン－１－カルボン酸；Ａｃ６ｃ＝１－アミノシクロヘキサン－１－カルボン酸；Ａｉｂ＝アルファ－アミノイソ酪酸（または２－メチルアラニンもしくはＣアルファ－メチルアラニン）；Ｂｉｐ＝３－（ビフェニル－４－イル）アラニン；Ｂｉｐ２Ｅｔ＝３－（２’－エチルビフェニル－４－イル）アラニン；Ｂｉｐ２ＥｔＭｅＯ＝３－（２’－エチル－４’－メトキシビフェニル－４－イル）アラニン；Ｃｉｔ＝シトルリン；Ｄｅｇ＝２，２－ジエチルグリシン；Ｄｍｔ＝（２，６－ジメチル）チロシン；２ＦＰｈｅ＝（２－フルオロフェニル）アラニン；２ＦＭｅＰｈｅまたは２ＦａＭｅＰｈｅ＝Ｃａ－メチル－（２－フルオロフェニル）アラニン；ｈＡｒｇ＝ホモアルギニン；ＭｅＬｙｓまたはａＭｅＬｙｓ＝Ｃａ－メチルリジン；ＭｅＰｈｅまたはａＭｅＰｈｅ＝Ｃａ－メチルフェニルアラニン；ＭｅＰｒｏまたはａＭｅＰｒｏ＝Ｃａ－メチルプロリン；ＮａｌｌまたはＮａｌ（ｌ）＝３－（１－ナフチル）アラニン；Ｎａｌ２またはＮａｌ（２）＝３－（２－ナフチル）アラニン；Ｎｌｅ＝ノルロイシン；Ｏｍ＝オルニチン；およびＴｍｐ＝（２，４，６－トリメチルフェニル）アラニンを含み、残基（Ｔｉｃ－Ψ［ＣＦｌ２－ＮＦｌ］－Ψ－Ｐｈｅと命名される）間のアミド結合の低減を有する１，２，３，４－テトラヒドロイソキノリン－３－カルボン酸（Ｔｉｃ）およびＴｉｃ－Ｐｈｅジペプチド部分は、以下の構造：
【0026】
【化2】
【0027】
別段具体的に示されないか、または文脈が別段示さない限り、本開示は、デュアルアゴニストペプチドが、合成的（例えば、ペプチド合成装置を使用して）または細胞によって（例えば、組換え産生によって）産生されるかどうかに関わらず、産生され得るデュアルアゴニストペプチドの任意およびすべての形態を包含する。デュアルアゴニストペプチドのこのような形態は、１つまたは複数の修飾が、計画的であるかどうかに関わらず、１つまたは複数の翻訳後修飾などの、ペプチドの合成または細胞産生中になされ得る１つまたは複数の修飾を含むことができる。デュアルアゴニストペプチドは、２つ以上の異なる場所に同じタイプの修飾を有することができるか、または／および２つ以上の異なるタイプの修飾を有することができる。化学および翻訳後修飾を含む、デュアルアゴニストペプチドの合成または細胞産生の経過中になされ得る修飾は、グリコシル化（例えば、Ｎ結合グリコシル化およびＯ結合グリコシル化）、脂質化、リン酸化、硫酸化、アセチル化（例えば、Ｎ末端のアセチル化）、アミド化（例えば、Ｃ末端のアミド化）、ヒドロキシル化、メチル化、分子内または分子間ジスルフィド結合の形成、２つの側鎖間でのラクタムの形成、ピログルタミン酸の形成、およびユビキチン化を含むが、これらに限定されない。デュアルアゴニストペプチドは、Ｎ末端、Ｃ末端、１つもしくは複数のアミノ酸側鎖、またはデュアルアゴニストペプチド骨格、あるいはその任意の組み合わせなどの、任意の場所に１つまたは複数の修飾を有することができる。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、Ｎ末端でアセチル化され、または／およびＣ末端にカルボキサミド（－ＣＯＮＨ２）基を有し、それが、デュアルアゴニストペプチドの安定性を増加させることができる。
【0028】
デュアルアゴニストペプチドの可能性のある修飾はまた、１つまたは複数のアミノ酸の欠失、１つまたは複数の天然もしくは／および非天然のアミノ酸の付加／挿入、あるいは１つまたは複数の天然もしくは／および非天然のアミノ酸での置換、あるいはその任意の組み合わせまたはすべてを含む。置換は、保存的または非保存的であり得る。このような修飾は、部位特異的変異誘発を介して、またはデュアルアゴニストペプチドの化学合成においてなど、計画的であってもよいか、またはデュアルアゴニストペプチドを産生する宿主細胞において生じる変異を介して、またはＰＣＲ増幅に起因するエラーを介してなど、偶発的であってもよい。非天然のアミノ酸は、対応する天然アミノ酸と同じ化学構造を有するが、Ｄ立体化学を有することができるか、またはそれは、異なる化学構造およびＤまたはＬ立体化学を有することができる。非天然のアミノ酸を利用して、例えば、デュアルアゴニストペプチドのヘリックス形成を促進するか、または／および安定性を増加させる（例えば、タンパク分解性分解に抵抗する）ことができる。参照デュアルアゴニストペプチドに対して１つまたは複数の修飾を有するデュアルアゴニストペプチドは、必要に応じて、参照デュアルアゴニストペプチドの「アナログ」または「バリアント」と呼ばれてもよい。「アナログ」は、典型的には、参照デュアルアゴニストペプチドの１つまたは複数の必須の特性（例えば、受容体結合、受容体もしくは酵素の活性化、受容体もしくは酵素の阻害、または他の生物学的活性）を保持している。「バリアント」は、参照デュアルアゴニストペプチドの生物学的活性を保持していても、もしくは保持していなくてもよく、または／および異なる生物学的活性を有していてもよい。このようなバリアントは、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲのアゴニストとして作用するその能力を維持し、より好ましい実施形態では、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対してほぼ等しい親和性を有することが好ましい。一部の実施形態では、参照ペプチドのアナログまたはバリアントは、参照デュアルアゴニストペプチドと異なるアミノ酸配列を有する。
【0029】
用語「保存的置換」は、デュアルアゴニストペプチド中のアミノ酸の、機能的、構造的または化学的に類似の天然または非天然のアミノ酸での置換を指す。ある特定の実施形態では、以下の群：１）グリシン（Ｇｌｙ／Ｇ）、アラニン（Ａｌａ／Ａ）；２）イソロイシン（Ｉｌｅ／Ｉ）、ロイシン（Ｌｅｕ／Ｌ）、メチオニン（Ｍｅｔ／Ｍ）、バリン（Ｖａｌ／Ｖ）；３）フェニルアラニン（Ｐｈｅ／Ｆ）、チロシン（Ｔｙｒ／Ｙ）、トリプトファン（Ｔｒｐ／Ｗ）；４）セリン（Ｓｅｒ／Ｓ）、スレオニン（Ｔｈｒ／Ｔ）、システイン（Ｃｙｓ／Ｃ）；５）アスパラギン（Ａｓｎ／Ｎ）、グルタミン（Ｇｌｎ／Ｑ）；６）アスパラギン酸（Ａｓｐ／Ｄ）、グルタミン酸（Ｇｌｕ／Ｅ）；および７）アルギニン（Ａｒｇ／Ｒ）、リジン（Ｌｙｓ／Ｋ）、ヒスチジン（Ｈｉｓ／Ｈ）はそれぞれ、互いに保存的置換である天然のアミノ酸を含有する。さらなる実施形態では、以下の群はそれぞれ、互いに保存的置換である天然のアミノ酸：１）非極性：Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ（プロリン／Ｐ）、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ；２）疎水性：Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ；３）脂肪族：Ａｌａ、Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ；４）芳香族性：Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ；５）荷電していない極性または親水性：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｔｙｒ；６）脂肪族ヒドロキシルまたはスルフヒドリル含有：Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ；７）アミド含有：Ａｓｎ、Ｇｌｎ；８）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；９）塩基性：Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ；ならびに１０）小さい：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｓｅｒ、Ｃｙｓを含有する。他の実施形態では、アミノ酸は、以下に示される保存的置換：１）疎水性：Ｖａｌ、Ｌｅｕ、Ｉｌｅ、Ｍｅｔ、Ｐｈｅ、Ｔｒｐ；２）芳香族性：Ｐｈｅ、Ｔｙｒ、Ｔｒｐ、Ｈｉｓ；３）天然の親水性：Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｃｙｓ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ；４）酸性：Ａｓｐ、Ｇｌｕ；５）塩基性：Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ｈｉｓ；および６）骨格の向きに影響を与える残基：Ｐｒｏとしてグループ化されてもよい。
【0030】
非天然または非タンパク原性アミノ酸の例としては、アラニンアナログ（例えば、α－エチルＧｌｙ［α－アミノ酪酸またはＡｂｕ］、α－ｎ－プロピルＧｌｙ［ノルバリンまたはＮｖａ］、α－ｔｅｒｔ－ブチルＧｌｙ［Ｔｂｇ］、α－ビニルＧｌｙ［ＶｇまたはＶｌｇ］、α－アリルＧｌｙ［Ａｌｇ］、α－プロパルギルＧｌｙ［Ｐｒｇ］、３－シクロプロピルＡｌａ［Ｃｐａ］およびＡｉｂ）、ロイシンアナログ（例えば、ノル－ロイシン、Ｎｌｅ）、プロリンアナログ（例えば、α－ＭｅＰｒｏ）、フェニルアラニンアナログ（例えば、Ｐｈｅ（２－Ｆ）、Ｐｈｅ（２－Ｍｅ）、Ｔｍｐ、Ｂｉｐ、Ｂｉｐ（２’－Ｅｔ－４’－ＯＭｅ）、Ｎａｌ１、Ｎａｌ２、Ｔｉｃ、α－ＭｅＰｈｅ、α－ＭｅＰｈｅ（２－Ｆ）およびα－ＭｅＰｈｅ（２－Ｍｅ））、チロシンアナログ（例えば、Ｄｍｔおよびα－ＭｅＴｙｒ）、セリンアナログ（例えば、ホモセリン［イソスレオニンまたはｈＳｅｒ］）、グルタミンアナログ（例えば、Ｃｉｔ）、アルギニンアナログ（例えば、ｈＡｒｇ、Ｎ，Ｎ’－ｇ－ジアルキル－ｈＡｒｇ）、リジンアナログ（例えば、ホモリジン［ｈＬｙｓ］、Ｏｒｎおよびα－ＭｅＬｙｓ）、α，α－二置換アミノ酸（例えば、Ａｉｂ、α，α－ジエチルＧｌｙ［Ｄｅｇ］、α－シクロヘキシルＡｌａ［２－Ｃｈａ］、Ａｃ３ｃ、Ａｃ４ｃ、Ａｃ５ｃおよびＡｃ６ｃ）、ならびにＡで開示される他の非天然のアミノ酸が挙げられるが、これらに限定されない。Ｓａｎｔｏｐｒｅｔｅら， Ｐｅｐｔ． Ｓｃｉ．， １７：２７０－２８０ （２０１１）。α，α－二置換アミノ酸は、立体構造制限または／およびａ－ヘリックス安定化をもたらし得る。２つの残基の間（例えば、Ｔｉｃ－Ψ［ＣＦｌ２－ＮＦｌ］－Ψ－Ｐｈｅ中）のアミド結合の低減は、タンパク質分解酵素抵抗性を増加させ、例えば、受容体結合を変更させ得る。本開示は、正の正味の電荷を有するもの、負の正味の電荷を有するもの、および正味の電荷を有さないものを含む、デュアルアゴニストペプチドのすべての医薬的に許容される塩を包含する。
【0031】
「アルキル」基は、脂肪族炭化水素基を指す。アルキル基は、飽和または不飽和であることができ、直鎖（線状）、分岐または環状であることができる。一部の実施形態では、アルキル基は、環状ではない。一部の実施形態では、アルキル基は、１～３０、６～３０、６～２０または８～２０個の炭素原子を含有する。「置換された」アルキル基は、１つまたは複数の置換基で置換される。一部の実施形態では、１つまたは複数の置換基は、ハロゲン、ニトロ、シアノ、オキソ、ヒドロキシ、アルコキシ、ハロアルコキシ、アリールオキシ、チオール、アルキルチオ、アリールチオ、アルキルスルホキシド、アリールスルホキシド、アルキルスルホン、アリールスルホン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、アルコイル、カルボキシル、カルボキシレート、エステル、アミド、カーボネート、カルバメート、ウレア、アルキル、ハロアルキル、フルオロアルキル、アラルキル、アシル基を含有するアルキル鎖、ヘテロアルキル、ヘテロアリ－環状、アリール、アルコキシアリール、ヘテロアリール、疎水性天然化合物（例えば、ステロイド）などから独立して選択される。一部の実施形態では、置換基としてのアルキル基は、「低級アルキル」と呼ばれ得る、直鎖又は分岐Ｃｉ－Ｃ６アルキルである。低級アルキル基の非限定的な例としては、メチル、エチル、プロピル（ｎ－プロピルおよびイソプロピルを含む）、ブチル（ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチルおよび／ｅｒ／－ブチルなどのすべての異性体形態を含む）、ペンチル（ｎ－ペンチルなどのすべての異性体形態を含む）、ならびにヘキシル（ｎ－ヘキシルなどのすべての異性体形態を含む）が挙げられる。一部の実施形態では、アルキル基は、ペプチドの残基（例えば、ＴｙｒまたはＤｍｔ）のＮａ－原子に結合される。ある特定の実施形態では、Ｎ－アルキル基は、直鎖もしくは分岐のＣ１－Ｃ１０アルキル、またはベンジル、フェニルエチルなどのアリール置換アルキルである。１つまたは２つアルキル基は、Ｎ末端の残基のＮａ原子に結合することができる。一部の実施形態では、アルキル基は、グリコシド結合（例えば、Ｏ－、Ｓ－、Ｎ－またはＣ－グリコシド結合）を介して糖類（例えば、グルコース）のＣ１位置に結合している１－アルキル基である。一部の実施形態では、このような１－アルキル基は、非置換または置換Ｃ１－Ｃ３０、Ｃ６－Ｃ３０、Ｃ６－Ｃ２０またはＣ８－Ｃ２０アルキル基である。一部の実施形態では、アルキル基（例えば、１－アルキル基）は、アリール、－ＯＨ、－ＯＲ１、－ＳＨ、－ＳＲ１、－ＮＨ２、－ＮＨＲ１、－Ｎ（Ｒ１）２、オキソ（＝Ｏ）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ２、カルボキシル（－ＣＯ２Ｈ）、カルボキシレート（－ＣＯ２－）、－Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ１、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｒ３、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ１）２、－ＮＲ４Ｃ（＝Ｏ）Ｒ３、－ＯＣ（＝Ｏ）ＯＲ５、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ１）２、－ＮＲ４Ｃ（＝Ｏ）ＯＲ５、および－ＮＲ４Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（Ｒ１）２（式中、Ｒ１は、それぞれの発生で独立して、水素、アルキルもしくはアリールであるか、またはＲ１とそれが結合している窒素原子の両方の発生により、複素環またはヘテロアリール環を形成し；Ｒ２は、それぞれの発生で独立して、アルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ３は、それぞれの発生で独立して、水素、アルキル、複素環、アリールまたはヘテロアリールであり；Ｒ４は、それぞれの発生で独立して、水素またはアルキルであり；Ｒ５は、それぞれの発生で独立して、アルキルまたはアリールである）から独立して選択される１つまたは複数（例えば、２または３個）の基で置換されている。一部の実施形態では、アルキル基（例えば、１－アルキル基）は、カルボキシル／カルボキシレート基、アリール基または－Ｏ－アリール基で内部または／および末端で置換されている。ある特定の実施形態では、アルキル基（例えば、１－アルキル基）は、アルキル基の遠位末端でカルボキシルまたはカルボキシレート基で置換されている。さらなる実施形態では、アルキル基（例えば、１－アルキル基）は、アルキル基の遠位末端でアリール基で置換されている。他の実施形態では、アルキル基（例えば、１－アルキル基）は、アルキル基の遠位末端で－Ｏ－アリール基で置換されている。用語「ハロゲン」、「ハロゲン化物」および「ハロ」は、フッ化物、塩化物、臭化物およびヨウ化物を指す。用語「アシル」は、－Ｃ（＝Ｏ）Ｒ（式中、Ｒは、飽和または不飽和であり得、線状、分岐または環状であり得る脂肪族基である）を指す。ある特定の実施形態では、Ｒは、１～２０、１～１０または１～６個の炭素原子を含有する。アシル基は、任意選択的に、ハロゲン、オキソ、ヒドロキシル、アルコキシ、チオール、アルキルチオ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、シクロアルキル、アリール、アシル、カルボキシル、エステル、アミド、疎水性の天然化合物（例えば、ステロイド）などの１つまたは複数の基で置換することができる。用語「複素環」および「ヘテロ環」は、単環式の非芳香族基または少なくとも１個の非芳香環を含有する多環状基を指し、ここで、少なくとも１個の非芳香環は、Ｏ、ＮおよびＳから独立して１つまたは複数のヘテロ原子を含有する。１つまたは複数のヘテロ原子を含有する非芳香環は、１つまたは複数の飽和、部分的に不飽和または芳香環に結合されるか、または融合されてもよい。ある特定の実施形態では、複素環または複素環基は、３～１５、または３～１２、または３～１０、または３～８、または３～６個の環原子を有する。複素環または複素環基は、アジリジニル、アゼチジニル、ピロリジニル、ピペリジニル、モルホリニル、ピペラジニル、アゼパニル、アゾカニル、オキシラニル、オキセタニル、テトラヒドロフラニル（オキソラニル）、テトラヒドロピラニル、オキセパニルおよびオキソカニルを含むが、これらに限定されない。用語「アリール」は、単環式の芳香族炭化水素基または少なくとも１個の芳香族炭化水素環を含有する多環状基を指す。ある特定の実施形態では、アリール基は、６～１５、または６～１２、または６～１０個の環原子を有する。アリール基は、フェニル、ナフタレニル（ナフチル）、フルオレニル、アズレニル、アントリル、フェナントリル、ビフェニルおよびテルフェニルを含むが、これらに限定されない。アリール基の芳香族炭化水素環は、１つまたは複数の飽和、部分的に不飽和または芳香環、例えば、ジヒドロナフチル、インデニル、インダニルおよびテトラヒドロナフチル（テトラリニル）に結合するか、または融合されてもよい。アリール基は、任意選択的に、ハロゲン（－Ｆおよび－Ｃｌを含む）、シアノ、ニトロ、ヒドロキシル、アルコキシ、チオール、アルキルチオ、アルキルスルホキシド、アルキルスルホン、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アルキル、ハロアルキル（トリフルオロメチルなどのフルオロアルキルを含む）、アシル、カルボキシル、エステル、アミドなどから独立して選択される１つまたは複数（例えば、２または３個）の置換基で置換することができる。用語「ヘテロアリール」は、単環式の芳香族基または少なくとも１個の芳香環を含有する多環状基を指し、ここで、少なくとも１個の芳香環は、Ｏ、ＮおよびＳから独立して選択される１個または複数のヘテロ原子を含有する。ヘテロ芳香環は、炭素原子のみを含有し得るか、または１個もしくは複数のヘテロ原子を含有し得る１個もしくは複数の飽和、部分的に不飽和または芳香環に結合するか、または融合されてもよい。ある特定の実施形態では、ヘテロアリール基は、５～１５、または５～１２、または５～１０個の環原子を有する。単環式のヘテロアリール基は、ピロリル、ピラゾリル、ピラゾリニル、イミダゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル、イソチアゾリル、フラニル、チエニル（チオフェニル）、オキサジアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、ピリドニル、ピラジニル、ピリミジニル、ピリダジニル、ピリダジノイルおよびトリアジニルを含むが、これらに限定されない。二環式のヘテロアリール基の例としては、インドリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾオキサゾリル、ベンゾイソオキサゾリル、ベンゾチエニル（ベンゾチオフェニル）、キノリニル、テトラヒドロイソキノリニル、イソキノリニル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、インドリジニル、ベンゾフラニル、イソベンゾフラニル、クロモニル、クマリニル、シノリニル、キナゾリニル、キノキサリニル、インダゾリル、ナフチリジニル、フタラジニル、キナゾリニル、プリニル、ピロルオピリジニル、フロピリジニル、チエノピリジニル、ジヒドロイソインドリルおよびテトラヒドロキノリニルが挙げられるが、これらに限定されない。
【0032】
一部の実施形態では、例えば、デュアルアゴニストペプチドは、医薬的に許容される組成物または凍結乾燥物内などで糖類と結合することができる。糖類は、単糖、二糖およびオリゴ糖（例えば、三糖類、四糖類など）を含む。還元糖類は、平衡で環形態または鎖状形態で存在し、一般的に、環形態が好ましい。界面活性剤部分の官能基化された糖類は、デュアルアゴニストペプチドのアミノ酸と安定な共有結合を形成するのに適した官能基を有する。
【0033】
用語「医薬的に許容される」は、過度の刺激、アレルギー応答、免疫原性および毒性なしで対象の組織および器官と接触しての使用に適当であり、妥当な利益／リスク比に妥当であり、その意図される使用に有効である物質（例えば、有効成分または賦形剤）を指す。医薬組成物の「医薬的に許容される」賦形剤または担体はまた、組成物の他の成分と適合する。一実施形態では、デュアルアゴニストペプチドを製剤化することができる医薬的に許容される組成物は、蒸留（ＤＩ）水中にポリソルベート２０（例えば、約０．０５０％（ｗ／ｗ））；任意選択的に、メチルパラベン（例えば、約０．３００％（ｗ／ｗ））；アルギニン（約０．３４８％（ｗ／ｗ））、およびマンニトール（例えば、約４．２６０％（ｗ／ｗ））を含む。
【0034】
用語「治療有効量」は、対象に投与したとき、処置されている医療状態を予防するか、発症するリスクを低減するか、発病を遅延させるか、進行を遅くするか、もしくは退縮を引き起こすか、またはその化合物を摂取する対象の少なくとも一部の分画において、医療状態またはその状態の１つもしくは複数の症状もしくは合併症をある程度まで緩和するのに十分である化合物の量を指す。用語「治療有効量」はまた、医師または臨床医によって求められるヒトの細胞、組織、器官の生物学的または医学的応答を誘発するのに十分である化合物の量を指す。
【0035】
用語「処置する」、「処置すること」および「処置」は、医療状態またはその状態と関連する１つもしくは複数の症状もしくは合併症を軽減すること、回復させること、進行を阻害すること、逆転させるか、または抑制すること、および状態の１つもしくは複数の原因を軽減すること、回復させることまたは根絶することを含む。医療状態の「処置」への言及は、状態の予防を含む。用語「予防する」、「予防すること」および「予防」は、医療状態またはその状態と関連する１つもしくは複数の症状もしくは合併症の発病を排除すること、発症のリスクを低減すること、および発病を遅延させることを含む。用語「医療状態」（または簡潔には、「状態」）は、疾患および障害を含む。用語「疾患」および「障害」は、本明細書において互換的に使用される。
【0036】
本開示はまた、本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチド産物またはその医薬的に許容される塩、および１つまたは複数の医薬的に許容される担体または賦形剤を含む
医薬組成物を提供する。医薬組成物は、治療上有効量のペプチド産物またはその適当な分画を含有する。組成物は、任意選択的に、さらなる治療剤を含有することができる。一部の実施形態では、ペプチド産物は、少なくとも約９０％、９５％または９８％純粋である。医薬的に許容される賦形剤および担体は、医薬的に許容される物質、材料およびビークルを含む。賦形剤のタイプの非限定的な例としては、液体および固体の充填剤、希釈剤、結合剤、滑沢剤、滑剤、界面活性剤、分散剤、崩壊剤、乳化剤、湿潤剤、懸濁化剤、増粘剤、溶媒、等調化剤、緩衝液、ｐＨ調整剤、吸収遅延剤、安定剤、酸化防止剤、保存剤、抗微生物剤、抗菌剤、抗真菌剤、キレート剤、アジュバント、甘味剤、香味剤、着色剤、カプセル化剤およびコーティング剤が挙げられる。医薬製剤におけるこのような賦形剤の使用は、当該技術分野で公知である。例えば、従来のビークルおよび担体は、油（例えば、オリーブ油およびゴマ油などの植物油）、水性溶媒（例えば、生理食塩水、緩衝生理食塩水（例えば、リン酸緩衝生理食塩水［ＰＢＳ］）および等調溶液（例えば、リンゲル液））、ならびに有機溶媒（例えば、ジメチルスルホキシドならびにアルコール［例えば、エタノール、グリセロールおよびプロピレングリコール］）を含むが、これらに限定されない。従来の賦形剤または担体が、ペプチド産物と不適合である場合を除き、本開示は、ペプチド産物を含有する製剤における従来の賦形剤および担体の使用を包含する。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， ２ｌｓｔ Ｅｄ．， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ （Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ） （２００５）； Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ， ５ｔｈ Ｅｄ．， Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｈ， Ｅｄｓ．， Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ （２００５）； Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ， ３ｒｄ Ｅｄ．， Ａｓｈ ａｎｄ Ａｓｈ， Ｅｄｓ．， Ｇｏｗｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ． （２００７）；およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅ－ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ， Ｇｉｂｓｏｎ， Ｅｄ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ （Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， Ｆｌｏｒｉｄａ） （２００４）を参照のこと。
医薬組成物を提供する。医薬組成物は、治療上有効量のペプチド産物またはその適当な分画を含有する。組成物は、任意選択的に、さらなる治療剤を含有することができる。一部の実施形態では、ペプチド産物は、少なくとも約９０％、９５％または９８％純粋である。医薬的に許容される賦形剤および担体は、医薬的に許容される物質、材料およびビークルを含む。賦形剤のタイプの非限定的な例としては、液体および固体の充填剤、希釈剤、結合剤、滑沢剤、滑剤、界面活性剤、分散剤、崩壊剤、乳化剤、湿潤剤、懸濁化剤、増粘剤、溶媒、等調化剤、緩衝液、ｐＨ調整剤、吸収遅延剤、安定剤、酸化防止剤、保存剤、抗微生物剤、抗菌剤、抗真菌剤、キレート剤、アジュバント、甘味剤、香味剤、着色剤、カプセル化剤およびコーティング剤が挙げられる。医薬製剤におけるこのような賦形剤の使用は、当該技術分野で公知である。例えば、従来のビークルおよび担体は、油（例えば、オリーブ油およびゴマ油などの植物油）、水性溶媒（例えば、生理食塩水、緩衝生理食塩水（例えば、リン酸緩衝生理食塩水［ＰＢＳ］）および等調溶液（例えば、リンゲル液））、ならびに有機溶媒（例えば、ジメチルスルホキシドならびにアルコール［例えば、エタノール、グリセロールおよびプロピレングリコール］）を含むが、これらに限定されない。従来の賦形剤または担体が、ペプチド産物と不適合である場合を除き、本開示は、ペプチド産物を含有する製剤における従来の賦形剤および担体の使用を包含する。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ： Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ， ２ｌｓｔ Ｅｄ．， Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ Ｗｉｌｌｉａｍｓ ＆ Ｗｉｌｋｉｎｓ （Ｐｈｉｌａｄｅｌｐｈｉａ， Ｐｅｎｎｓｙｌｖａｎｉａ） （２００５）； Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ， ５ｔｈ Ｅｄ．， Ｒｏｗｅ ｅｔ ａｈ， Ｅｄｓ．， Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅｓｓ ａｎｄ ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ （２００５）； Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ａｄｄｉｔｉｖｅｓ， ３ｒｄ Ｅｄ．， Ａｓｈ ａｎｄ Ａｓｈ， Ｅｄｓ．， Ｇｏｗｅｒ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ． （２００７）；およびＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐｒｅ－ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ， Ｇｉｂｓｏｎ， Ｅｄ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ （Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， Ｆｌｏｒｉｄａ） （２００４）を参照のこと。
【0037】
実施形態では、医薬製剤は、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中にペプチド産物および約０．０２５～０．０７５％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．２～０．５％（ｗ／ｗ）アルギニン、約３～６％（ｗ／ｗ）マンニトール；任意選択的に、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中に約０．０５０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．３４８％（ｗ／ｗ）アルギニン、約４．２６０％（ｗ／ｗ）マンニトールを含む。ある特定の実施形態では、本医薬製剤は、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中に配列番号１および約０．０５０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．３４８％（ｗ／ｗ）アルギニン、約４．２６０％（ｗ／ｗ）マンニトールを含む。ある特定の実施形態では、医薬製剤は、配列番号１を含み、毎週の治療用量の皮下投与用に構成されている。
【0038】
適切または適当な製剤は、選択される投与経路などの様々な要因に依存し得る。ペプチド産物を含む医薬組成物の投与の可能性のある経路は、経口、非経口（皮内、皮下、筋肉内、血管内、静脈内、動脈内、腹腔内、腔内および局所を含む）、ならびに局所（経皮、経粘膜、鼻腔内（例えば、鼻スプレーまたは滴下による）、眼内（例えば、点眼による）、肺内（例えば、経口吸入または鼻吸入による）、口腔、舌下、直腸（例えば、座剤）、および膣内（例えば、座剤による））を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、本デュアルアゴニストペプチド産物は、非経口（例えば、皮下、静脈内または筋肉内）投与される。他の実施形態では、ペプチド産物は、経口吸入または鼻吸入もしくはガス注入によって投与される。一部の実施形態では、担体は、非経口（例えば、皮下、静脈内または筋肉内）製剤中などの、水性ベースの担体である。他の実施形態では、担体は、非水性ベースの担体である。ある特定の実施形態では、非水性ベースの担体は、経口吸入もしくは鼻吸入またはガス注入による投与用の製剤中などに、ヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ）またはサブミクロン無水ａ－ラクトースまたは／および他の賦形剤を含み得るＨＦＡ様溶媒である。
【0039】
一部の実施形態では、ペプチド産物は、注射によって非経口（例えば、皮下、静脈内または筋肉内）投与される。非経口投与は、胃の強酸性環境、胃腸（ＧＩ）吸収および初回通過代謝をバイパスする。非経口製剤を調製するために使用することができる賦形剤および担体は、溶媒（例えば、水、生理食塩水、生理学的生理食塩水、緩衝生理食塩水［例えば、ＰＢＳ］、平衡塩類溶液［例えば、リンゲルＢＳＳ］および水性デキストロース溶液などの水性溶媒）、等張／等張剤（例えば、塩類［例えば、ＮａＣｌ、ＫＣ１およびＣａＣｌ２］ならびに糖類［例えば、スクロース］）、緩衝剤およびｐＨ調整剤（例えば、リン酸二水素ナトリウム［リン酸二水素ナトリウム］／リン酸水素二ナトリウム［リン酸二ナトリウム］、クエン酸／クエン酸ナトリウムおよびＬ－ヒスチジン／Ｌ－ヒスチジンＨＣ１）、ならびに乳化剤（例えば、ポリソルベート［例えば、ポリソルベート２０および８０］ならびにポロクサマー［例えば、ポロクサマー１８８］などの非イオン性界面活性剤）を含むが、これらに限定されない。ペプチド製剤および送達システムは、例えば、Ａ． Ｊ． Ｂａｎｇａ， Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ Ｐｅｐｔｉｄｅｓ ａｎｄ Ｐｒｏｔｅｉｎｓ： Ｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎ， Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ， ａｎｄ Ｄｅｌｉｖｅｒｙ Ｓｙｓｔｅｍｓ， ３ｒｄ Ｅｄ．， ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ （Ｂｏｃａ Ｒａｔｏｎ， Ｆｌｏｒｉｄａ） （２０１５）において考察されている。賦形剤は、任意選択的に、ペプチド安定性を増加させ、ペプチド溶解性を増加させ、ペプチド凝集を阻害するか、もしくは溶液粘度を低減するか、またはその任意の組み合わせもしくは全ての１つまたは複数の物質を含むことができる。この様な物質は、親水性アミノ酸（例えば、アルギニンおよびヒスチジン）、ポリオール（例えば、ミオ－イノシトール、マンニトールおよびソルビトール）、糖類（例えば、グルコース（Ｄ－グルコース［デキストロース］を含む）、ラクトース、スクロースおよびトレハロース）、浸透圧調節物質（例えば、トレハロース、タウリン、アミノ酸［例えば、グリシン、サルコシン、アラニン、プロリン、セリン、ｂ－アラニンおよびｇ－アミノ酪酸］、ならびにベタイン［例えば、トリメチルグリシンおよびトリメチルアミンＮ－オキシド］）、ならびに非イオン性界面活性剤（例えば、アルキルポリグリコシド、ＰｒｏＴｅｋ（登録商標）アルキルサッカリド（例えば、長鎖脂肪酸または対応する長鎖アルコールに結合した単糖［例えば、グルコース］または二糖［例えば、マルトースもしくはスクロース］）、ならびにポリプロピレングリコール／ポリエチレングリコールブロック共重合体（例えば、ポロクサマー［例えば、Ｐｌｕｒｏｎｉｃ（商標）Ｆ－６８］、ならびにＧｅｎａｐｏｌ（登録商標）ＰＦ－１０およびそのバリアント）を含むが、これらに限定されない。このような物質は、ペプチド安定性を増加させるため、それらを使用して、製剤中のペプチド濃度を増加させることができる。製剤中のペプチド濃度が高いほど、制限された体積のボーラス投与（例えば、＜約１．５ｍＬ）を有する、皮下投与に特に有利である。加えて、このような物質を使用して、凍結乾燥されたペプチドの調製、保存および再構成中、ペプチドを安定化することができる。例示的な非経口製剤は、ペプチド産物、マンニトール、メチオニン、チオグリコール酸ナトリウム、ポリソルベート２０、ｐＨ調整剤（例えば、ＮａＯＨまたは／およびＨＣ１）ならびに脱イオン水を含む。本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチドとの使用に適する非経口製剤の賦形剤（例えば、ＮａＣｌなどを含む賦形剤の様々な組み合わせ）は周知であり、当業者にとって入手可能である。
【0040】
非経口（例えば、皮下、静脈内または筋肉内）投与について、１つまたは複数の賦形剤を含有する水性溶媒中のペプチド産物の無菌の溶液または懸濁液は、前もって予め調製し、例えば、単回使用ペンまたは用量カウンター付きペンの予め充填されたシリンジにおいて調製することができる。あるいは、ペプチド産物は、凍結乾燥（凍結乾燥）前に、任意選択的に、１つまたは複数の賦形剤を含有することができる水性溶媒において溶解または懸濁することができる。非経口投与の直前に、適当な容器（例えば、バイアル）に保存された凍結乾燥されたペプチド産物は、例えば、任意選択的に、１つまたは複数の賦形剤を含有することができる無菌の水を用いて再構成することができる。他の実施形態では、アゴニストペプチド産物は、鼻腔内投与される。鼻粘膜は、大きな表面積、多孔性内皮、高度に血管性の上皮下層および高い吸収率をもたらし、したがって、高いバイオアベイラビリティを可能にする。鼻腔内製剤は、溶解性エンハンサー（例えば、プロピレングリコール）、保水剤（例えば、マンニトールもしくはソルビトール）、緩衝液および水、ならびに任意選択的に、保存剤（例えば、塩化ベンザルコニウム）、粘膜付着性剤（例えば、ヒドロキシエチルセルロース）または／および浸透エンハンサーなどの賦形剤と共にペプチド産物を含むことができる。鼻腔内溶液または懸濁液製剤は、スポイト、ピペット、または例えば定量噴霧スプレーポンプを用いた噴霧を含むがこれらに限定されない、任意の適切な手段によって鼻腔に投与することができる。表２は、点鼻スプレー製剤の例示的な賦形剤を示す。
【0041】
【表2】
【0042】
さらなる実施形態では、ペプチド産物は、経口吸入または鼻吸入などの肺経路を介して投与される。肺は、全身循環の入り口として機能するため、薬物の肺投与は、肺障害または／および全身障害を処置することができる。肺薬物送達の利点は、例えば、１）初回通過代謝の回避；２）迅速な薬物作用；３）吸収のための肺胞領域の大きな表面積、肺の高い透過性（薄い気血関門）、および気道の豊富な血管系；ならびに４）大きな肺胞表面積に起因したＧＩ管と比較して低減した細胞外酵素レベルを含む。鼻吸入は、鼻腔内ならびに肺において経粘膜的に全身循環に薬物を送達することができるが、鼻吸入より経口吸入の利点は、薬物の肺へのより深い浸透／沈着を含む。経口または鼻吸入は、例えば、定用量吸入器（ＭＤＩ）、ネブライザーまたは乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）によって達成することができる。例えば、ペプチド産物は、経口または鼻吸入による気道へのエアロゾル投与用に製剤化することができる。薬物は、例えば、肺における薬物沈着および薬物懸濁液の安定性を改善するために、微粉化によって得ることができる小さな粒子サイズ（例えば、約０．５ミクロン～約５ミクロンの間）で送達される。ヒドロフルオロアルカン（ＨＦＡ、例えば、１，１，１，２－テトラフルオロエタン［ＨＦＡ－ｌ３４ａ］）、クロロフルオロカーボン（ＣＦＣ、例えば、ジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタンもしくはジクロロテトラフルオロエタン）、または適切なガス（例えば、酸素、圧縮空気もしくは二酸化炭素）などの、適切な噴霧剤とともに加圧パックにおいて提供することができる。エアロゾル製剤中の薬物は、肺への送達のため、噴霧剤に溶解されるか、より多くの場合では、懸濁される。ペプチド産物の界面活性剤部分は、界面活性剤の機能を果たすことができるが、エアロゾルは、界面活性剤（肺胞内の空気と水の界面における高い表面張力を低減することによって肺への浸透を強化し、薬物を乳化、可溶化もしくは／および安定化させ、例えば、レシチンなどのリン脂質であってもよい）または／ならびに安定剤などの賦形剤を含むことができる。例えば、ＭＤＩ製剤は、ペプチド産物、噴霧剤（例えば、１，１，１，２－テトラフルオロエタンなどのＨＦＡ）および共溶媒（例えば、エタノールなどのアルコール）、ならびに任意選択的に、界面活性剤（例えば、オレイン酸などの脂肪酸）を含むことができる。ＭＤＩ製剤は、任意選択的に、溶解ガス（例えば、Ｃ０２）を含むことができる。装置が作動後、放出されたエアロゾル液滴内のＣ０２気泡の破裂により、液滴がより小さな液滴に分割され、それにより薬物の呼吸可能な分画が増加する。別の例として、ネブライザー製剤は、ペプチド製剤、キレート剤または保存剤（例えば、エデト酸二ナトリウム）、等張化剤（例えば、ＮａＣｌ）、ｐＨ緩衝剤（例えば、クエン酸／クエン酸ナトリウム）および水、ならびに任意選択的に、界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０などのＴｗｅｅｎ（登録商標））を含むことができる。薬物は、例えば、スペーサーの有無にかかわらず、ネブライザーまたはＭＤＩによって送達することができ、送達される薬物用量は、計量チャンバー（ネブライザー）または計量バルブ（ＭＤＩ）によって制御することができる。
【0043】
表２は、例示的なＭＤＩ、ネブライザーおよびＤＰＩの製剤を示す。定用量吸入器（加圧式定用量吸入器［ｐＭＤＩ］とも呼ばれる）は、最も広く使用されている吸入装置である。計量バルブは、装置が作動するたびに正確な量のエアロゾル（例えば、約２０～１００ｐＬ）を送達する。ＭＤＩは、典型的には、使用者が吸入できる速度よりも速くエアロゾルを発生させ、エアロゾルの多くが口や喉に沈着する可能性がある。装置の作動と吸入との間の調整不良の問題は、例えば、呼吸作動型ＭＤＩまたは調整装置を使用することによって対処することができる。装置が使用者の吸気を感知したとき、呼吸作動型ＭＤＩ（例えば、Ｅａｓｉ ｂｒｅａｔｈｅ（登録商標））は、作動し、応答して薬物用量を吐出する。吸入流速は、アクチュエーターを介して調整され、使用者は、吸入中に装置を確実に作動させるための時間を有する。調整装置では、吸入器のマウスピース端に取り付けられたチューブであるスペーサー（または弁付き保持チャンバー）は、吸入器によって噴霧される薬物を保持するリザーバーまたはチャンバーとして機能し、エアロゾルが口に入る速度を低減し、それにより噴霧剤のより大きな液滴からの蒸発が可能になる。スペーサーは、吸入器の使用を簡単にし、上気道の代わりに肺に沈着した薬物の量を増加させる。スペーサーは、放出された薬物粒子のスペーサー内壁への静電付着を最小にするために、帯電防止ポリマーで作ることができる。ネブライザーは、約１～５ミクロンのエアロゾル液滴を生成する。ネブライザーは、肺に沈着する薬物の量に大きな影響を与える可能性のある、装置の作動と吸入の間の使用者調整を必要としない。ＭＤＩおよびＤＰ Ｉと比較して、ネブライザーは、より長い投与時間にわたってではあるが、より大量の薬物を送達することができる。ネブライザーの例としては、人力ネブライザー、ジェットネブライザー（例えば、ＡｅｒｏＥｃｌｉｐｓｅ（登録商標）ＩＩ ＢＡＮ［呼吸作動型］、ＣｏｍｐＡＩＲ（商標）ＮＥ－Ｃ８０ｌ［仮想バルブ］、ＰＡＲＩ ＬＣ（登録商標）Ｐｌｕｓ ［呼吸作動型］およびＳｉｄｅＳｔｒｅａｍ Ｐｌｕｓ［呼吸作動型］）、超音波ネブライザー、ならびに振動メッシュネブライザー（例えば、Ａｋｉｔａ２（登録商標）Ａｐｉｘｎｅｂ、計量チャンバー付きＩ－ｎｅｂ ＡＡＤシステム、ＭｉｃｒｏＡｉｒ（登録商標）ＮＥ－Ｕ２２、Ｏｍｒｏｎ Ｕ２２およびＰＡＲＩ ｅＦｌｏｗ（登録商標）ラピッド）が挙げられるが、これらに限定されない。一例として、パルス超音波ネブライザーは、パルス毎に一定量の薬物をエアロゾル化することができ、使用者が各呼吸を各パルスに同期させることを可能にする光音響トリガーを構成することができる。乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）を使用する経口吸入または鼻腔吸入のため、ペプチド産物は、乾燥微粉末の形態で提供することができ、ここで、薬物粒子は、例えば、分散粉末の空気力学的特性および肺における薬物沈着を改善するために、ある小さなサイズ（例えば、約０．５ミクロン～約５ミクロンの間）である。約０．５ミクロン～約５ミクロンの間の粒子は、終末細気管支および肺胞領域における沈降により沈着する。対照的に、より大きな粒子（＞５ミクロン）の大部分は、空気の流れに乗って気道の多くの分岐部に入ることはなく、むしろ喉の口腔咽頭領域を含む上気道への嵌入によって沈着する。ＤＰＩ製剤は、薬物粒子を単独で含有するか、またはラクトース、デンプン、デンプン誘導体（例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロース）もしくはポリビニルピロリジンなどの適切な大きめの基剤／担体の粉末とブレンドすることができる。担体粒子は、流動性を強化し、凝集を低減し、用量の均一性を改善し、薬物粒子の分散を助ける。ＤＰＩ製剤は、粒子間結合を妨害すること（抗付着作用により）によって製剤の性能を改善する、ステアリン酸マグネシウムまたは／およびロイシンなどの賦形剤を任意選択的に含有することができる。粉末製剤は、手動で装填するか、または吸入器に予め装填することができる、カプセル（例えば、ゼラチンカプセル）またはブリスターパック内のカートリッジなどの単位用量形態で提供することができる。薬物粒子は、吸入器のマウスピースまたはノーズピースを口または鼻に入れ、鋭く深く吸入して乱気流を生じさせ、一定時間（例えば、約５～１０秒間）呼吸を止めて、薬物粒子を気管支および肺胞領域に定着させることによって、肺に引き込むことができる。使用者がＤＰＩを作動させ、吸入すると、装置を通った気流が、せん断と乱流を起こし、吸入された空気が、パウダーベッドに導入され、静的なパウダーブレンドが、流動化され、使用者の気道に入る。そこで、薬物粒子は、乱流によって担体粒子から分離し、肺の奥深くまで運ばれ、一方、より大きな担体粒子は、口腔咽頭表面に衝突し、排除される。したがって、使用者の吸気流が、粉末の脱凝集および空気イオン化を達成し、肺における薬物沈着を決定する。（受動ＤＰＩは、薬物粒子を脱凝集させるために急速な吸気流を必要とするが、ＭＤＩまたはネブライザーが、乱流および速い流速を生じさせ、上気道における嵌入による薬物沈着を増加させるため、急速な吸気は、推奨されない。）ＭＤＩと比較して、ＤＰＩ（呼吸作動型ＤＰＩを含む）は、より大きな用量の薬物、より大きなサイズの薬物（例えば、高分子）を肺に送達できる可能性がある。
【0044】
ラクトース（例えば、アルファ－ラクトース一水和物）は、ＤＰＩ製剤において最も一般的に使用される担体である。ＤＣＬ １１、Ｆｌｏｗｌａｃ（登録商標）１００、Ｉｎｈａｌａｃ（登録商標）２３０、Ｌａｃｔｏｈａｌｅ（登録商標）３００、Ｌａｃｔｏｐｒｅｓｓ（登録商標）ＳＤ ２５０（噴霧乾燥ラクトース）、Ｒｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標）ＳＶ００３およびＳｏｒｂｏｌａｃ（登録商標）４００が挙げられるが、これらに限定されない。ＤＰＩ製剤は、単一のラクトースグレードまたは異なるラクトースグレードの組み合わせを含有することができる。例えば、Ｌａｃｔｏｈａｌｅ（登録商標）３００またはＳｏｒｂｏｌａｃ（登録商標）４００のような微細ラクトースグレードは、適当なＤＰＩ担体ではなく、Ｆｌｏｗｌａｃ（登録商標）１００、Ｉｎｈａｌａｃ（登録商標）２３０またはＲｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標）ＳＶ００３（例えば、粗ラクトースに対する微細ラクトースの約１：９の比）のような粗ラクトースグレードとブレンドして、流動を改善する必要があるかもしれない。
【0045】
表３および表４は、ＤＰＩ製剤において使用できるラクトースのグレード／タイプの非限定的な例を示す。担体の粒子サイズの分布は、薬物の微粒子分画／用量（ＦＰＦまたはＦＰＤ）に影響し、高いＦＰＦが、肺への薬物送達には望まれる。ＦＰＦ／ＦＰＤは、吸気中の空気力学的粒子サイズ＜５ミクロンでＤＰＩ装置から排出される呼吸可能な分画／用量塊である。高いＦＰＦ、したがって良好なＤＰＩ性能は、例えば、カプセルシェルまたはＤＰＩ装置内での薬物の沈着を回避し、本質的にすべての薬物を気道に送達するために、例えば、粗ラクトース（例えば、Ｒｅｓｐｉｔｏｓｅ（登録商標）ＳＶ００３）および約２０％ｗ／ｗの過量に対する微細ラクトース（例えば、Ｌａｃｔｏｈａｌｅ（登録商標）３００）の約１：９の比を有するＤＰＩ製剤から得ることができる。
【0046】
【表3】
【0047】
【表4】
【0048】
ＤＰＩ製剤の他の担体は、グルコース、マンニトール（例えば、結晶化マンニトール［Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ １１０ Ｃ］および噴霧乾燥マンニトール［Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ １１０Ｃ］およびスプレー乾燥マンニトール［Ｐｅａｒｌｉｔｏｌ １００ＳＤ］）、マルチトール（例えば、結晶化マルチトール［Ｍａｌｔｉｓｏｒｂ Ｐ９０］）、ソルビトールならびにキシリトールを含むが、これらに限定されない。ほとんどのＤＰＩは、エアロゾル生成のために使用者の吸入に依存する呼吸作動型（「受動型」）である。受動的ＤＰＩの例としては、Ａｉｒｍａｘ（登録商標）、Ｎｏｖｏｌｉｚｅｒ（登録商標）およびＯｔｓｕｋａ ＤＰＩ（コンパクトケーキ）が挙げられるが、これらに限定されない。空気分類技術（ＡＣＴ）は、ＤＰＩに利用される効率的な受動的粉末分散機序である。ＡＣＴでは、複数の供給流路が、接線気流を発生させ、これが、吸入中に装置内でサイクロンを生じる。例えば、粒子の脱凝集を助けるためにエネルギーを使用するパワーアシスト（「能動型」）ＤＰＩ（例えば、空気圧、衝撃力または振動に基づく）も存在する。例えば、Ｅｘｕｂｅｒａ（登録商標）吸入器の能動型機序は、スプリングまたは圧縮空気チャンバーに蓄えられた機械的エネルギーを利用する。能動型ＤＰＩの例としては、Ａｃｔｉｓｐｉｒｅ（登録商標）（単回単位用量）、Ａｓｐｉｒａｉｒ（登録商標）（複数用量）、Ｅｘｕｂｅｒａ（登録商標）（単回単位用量）、ＭｉｃｒｏＤｏｓｅ（登録商標）（複数単位用量および電子能動型）、Ｏｍｎｉｈａｌｅｒ（登録商標）（単回単位用量）、Ｐｆｅｉｆｆｅｒ ＤＰＩ（単回単位用量）、およびＳｐｉｒｏｓ（登録商標）（複数単位用量）が挙げられるが、これらに限定されない。ペプチド産物はまた、経口など他の経路で投与することもできる。経口製剤は、ペプチド産物および当該技術分野で公知の従来の賦形剤、ならびに任意選択的に、ナトリウムＶ－［８－（２－ヒドロキシベンゾイル）アミノカプリレート］（ＳＮＡＣ）などの吸収エンハンサーを含有することができる。ＳＮＡＣは、局所緩衝作用を介した酵素分解から保護し、ＧＩ吸収を強化する。経口投薬形態（例えば、錠剤、カプセル剤またはピル剤）は、任意選択的に、胃の強酸およびタンパク分解酵素からその内容物を保護するために、腸溶性コーティングを有することができる。一部の実施形態では、ペプチド産物は、徐放性組成物から送達される。本明細書で使用される場合、用語「徐放性組成物」は、徐放性、延長放出性、持続放出性、遅延放出性、遅い放出性および制御放出性組成物、システムおよび装置を包含する。一部の実施形態では、徐放性組成物は、少なくとも約１週間、２週間、３週間、１ヶ月間、２ヶ月間、３ヶ月間またはそれ以上の期間にわたってペプチド産物を送達する。一部の実施形態では、徐放性組成物は、生分解性ポリマーから構成され、ペプチド産物を取り込んでいるナノ粒子またはマイクロ粒子として製剤化される。ある特定の実施形態では、生分解性ポリマーは、乳酸または／およびグリコール酸［例えば、ポリ（Ｌ－ラクチド－ｃｏ－グリコリド）またはポリ（Ｌ－乳酸－ｃｏ－Ｄ，Ｌ－２－ヒドロキシオクタン酸）などのＬ－乳酸ベースのコポリマー］を含む。さらなる実施形態では、徐放性組成物は、ペプチド産物とポリマーの混合物が、対象に筋肉内または皮下注射されるときに生成されるデポーの形態である。ある特定の実施形態では、ポリマーは、ＰＥＧ、ポリ乳酸（ＰＬＡ）もしくはポリグリコール酸（ＰＧＡ）、またはそのコポリマー（例えば、ＰＬＧＡもしくはＰＬＡ－ＰＥＧ）であるか、またはそれらを含む。
【0049】
医薬組成物は、単回用量としての単位投薬形態で提示することができ、ここで、すべての有効成分および非有効成分は、適当な系で組み合わされ、成分は、投与されるべき組成物を形成するために混合される必要がない。単位投薬形態は、一般に、治療上有効な用量の薬物を含むが、複数の単位投薬形態を接種することにより治療上有効な用量を達成するように、適切な分画を含むことができる。単位投薬形態の例としては、経口摂取用の錠剤、カプセル剤またはピル剤；非経口（例えば、静脈内、皮下もしくは筋肉内）注射用の単回使用ペンまたは用量カウンター付きペンの予め充填されたシリンジ内の溶液；および吸入器に予め装填されたか、または手動で装填されたカプセル剤、カートリッジ剤またはブリスター剤が挙げられる。あるいは、医薬組成物は、有効成分、賦形剤および担体（例えば、溶媒）が、２つ以上の別々の容器（例えば、アンプル、バイアル、チューブ、ボトルまたはシリンジ）において提供され、投与されるべき組成物を形成するために組み合わせる必要がある、キットとして提示することができる。キットは、組成物（例えば、非経口的に注射されるべき溶液）の保存、調製および投与のための説明書を含有することができる。キットは、すべての有効成分および非有効成分を単位投薬形態において、または有効成分および非有効成分を２つ以上の別々の容器に含むことができ、本明細書に開示される医療状態を処置するために医薬組成物を投与または使用するための指示書を含むことができる。キットは、注射ペンまたは吸入器などの、組成物を送達するための装置をさらに含むことができる。一部の実施形態では、キットは、ペプチド産物もしくはその医薬的に許容される塩、またはそれを含む医薬組成物、ならびにインスリン抵抗性、糖尿病、メタボリックシンドローム、心血管疾患、肥満（非限定的に、インスリン抵抗性、糖尿病、メタボリックシンドローム、および／もしくは心血管疾患などの、１年より長く続く肥満または結果として生じる肥満関連状態を意味する「慢性的肥満」を含む）、あるいはこれらと関連する状態（例えば、ＮＡＳＨまたはＰＣＯＳ）などの、本明細書に開示される医療状態を処置するためのペプチド産物または組成物を投与または使用するための指示書を含有する。ある特定の実施形態では、キットは、注射ペンまたは吸入器などの、ペプチド産物または組成物を送達するための装置をさらに含有する。
【0050】
本開示はさらに、非限定的に、インスリン抵抗性、糖尿病、肥満、メタボリックシンドロームおよび心血管疾患、ならびにＮＡＳＨおよびＰＣＯＳなどのこれらに関連する状態などの、ＧＬＰ１Ｒおよび／またはＧＣＧＲに関連する状態を予防および／または処置するための、本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチド産物の使用を提供する。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチド産物を使用して、高血糖、インスリン抵抗性、高インスリン血症、糖尿病前症、糖尿病（１型および２型、妊娠糖尿病および若年性糖尿病を含む）、糖尿病合併症、糖尿病性神経障害、糖尿病性腎症、糖尿病性網膜症、高脂血症、高コレステロール血症、高トリグリセリド血症、遊離脂肪酸の血中レベルの上昇、肥満、メタボリックシンドローム、シンドロームＸ、心血管疾患（冠動脈疾患を含む）、アテローム性動脈硬化症、急性心血管症候群、虚血（心筋虚血および脳虚血／脳卒中を含む）、虚血再灌流障害（心筋および脳ＩＲＩを含む）、梗塞（心筋梗塞および脳梗塞を含む）、狭心症、心不全（例えば、鬱血性心不全）、末梢血管疾患、血栓症（例えば、深部静脈血栓症）、塞栓症（例えば、肺塞栓症）、全身性炎症（例えば、Ｃ反応性タンパク質の血中レベルの上昇によって特徴付けられるもの）、ならびに高血圧を処置することができる。デュアルアゴニストペプチド産物は、血糖依存性インスリン分泌の刺激、インスリン感受性の増加、脂肪燃焼の刺激および体重の低減を含む、様々な機序を介してそれらの治療効果を達成することができる。デュアルアゴニストペプチド産物はまた、例えば、膵ベータ細胞保護、心臓保護および創傷治癒を促進することができる。
【0051】
本明細書に記載されるペプチド産物を使用して、インスリン抵抗性または／および肥満に関連する他の状態を処置することができる。インスリン抵抗性または／および肥満と関連する他の状態は、関節炎（例えば、骨関節炎）、腰痛、呼吸障害（例えば、喘息、肥満低換気症候群［ピックウィック症候群］および閉塞性睡眠時無呼吸）、皮膚障害（例えば、糖尿病性潰瘍、黒色表皮腫、蜂巣炎、多毛症、間擦疹およびリンパ浮腫）、消化器疾患（例えば、胆石症［胆石］、胃食道逆流症［ＧＥＲＤ］および胃下垂症）、痛風、副腎皮質ホルモン分泌過多症（例えば、クッシング症候群）、腎障害（例えば、慢性腎臓病）、肝障害（例えば、アルコール性および非アルコール性ＦＬＤを含む脂肪肝疾患［ＦＬＤ］）、神経疾患（例えば、手根管症候群、認知症［例えば、アルツハイマー病および血管性認知症］、異常感覚性大腿痛、片頭痛および多発性硬化症）、泌尿器障害（例えば、勃起不全、性腺機能低下症および尿失禁）、多嚢胞性卵巣症候群、不妊症、月経障害、気分障害（例えば、うつ病）、ならびに癌（例えば、子宮内膜、食道、結腸直腸、胆嚢、腎臓、肝臓［例えば、肝細胞癌］、膵臓および皮膚［例えば、メラノーマ］の癌、ならびに白血病）を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチド産物 を使用して、多嚢胞性卵巣症候群（ＰＣＯＳ）を処置する。他の実施形態では、ペプチド産物を使用して、慢性腎臓／腎不全（ＣＫＦ／ＣＲＦ）としても知られる慢性腎臓病（ＣＫＤ）を処置する。ＣＫＤの最も一般的な原因は、糖尿病および長期にわたりコントロールされていない高血圧である。さらなる実施形態では、本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチド産物を使用して、脂肪肝疾患（ＦＬＤ）を処置する。一部の実施形態では、ＦＬＤは、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）である。ある特定の実施形態では、ＮＡＦＬＤは、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）である。肝性脂肪肝としても知られるＦＬＤは、肝臓における過剰な脂肪蓄積によって特徴付けられる。ＦＬＤは、アルコール性脂肪性肝疾患（ＡＦＬＤ）およびＮＡＦＬＤを含む。慢性アルコール中毒は、肝臓におけるアルコールの代謝中のアルデヒドなどの毒性代謝産物の産生に起因して脂肪肝を引き起こす。ＮＡＦＬＤは、以下に記載される。ＦＬＤは、糖尿病、肥満およびメタボリックシンドロームと関連している。脂肪肝は、肝硬変または肝癌（例えば、肝細胞癌［ＨＣＣ］）に発展することがある。肝硬変性ＡＦＬＤを有する患者の約１０％未満は、ＨＣＣを発症するが、硬変を有さずＮＡＳＨを有する人の最大約４５％は、ＨＣＣを発症する。ＨＣＣは、成人における原発肝臓癌の最も一般的なタイプであり、慢性肝炎症の設定で生じる。ＮＡＦＬＤは、栄養過多、高カロリー摂取、代謝機能障害（脂質異常症およびグルコースコントロールの障害）などの、アルコールの過剰摂取以外の原因により、脂肪、特に、遊離脂肪酸およびトリグリセリドが、肝細胞に蓄積する（脂肪肝）とき生じる脂肪肝によって特徴付けられる。肝臓は、肝機能を妨害することなく脂肪性のままであり得るが、脂肪肝が進行して、脂肪肝が、炎症、肝細胞のバルーン化および肝臓の線維化を伴うか、または伴わない亜脂肪損傷によって達成される状態である、ＮＡＳＨになり得る。線維化は、ＮＡＳＨによる死亡率の最も強い予測因子である。ＮＡＦＬＤは、脂肪肝単独；バルーン化を伴わないが、小葉または門脈の炎症を伴う脂肪肝；炎症を伴わないが、バルーン化を伴う脂肪肝；または炎症およびバルーン化を伴う脂肪肝によって特徴付けることができる。ＮＡＳＨは、ＮＡＦＬＤの最も極端な型である。ＮＡＳＨは、進行性の疾患であり、患者の約２０％が、肝硬変を発症し、約１０％が、肝硬変または肝癌（ＨＣＣなど）などの肝疾患で死亡する。ＮＡＦＬＤは、先進国で最も一般的な肝障害であり、ＮＡＳＨは、２０２０年までに米国におけるＣ型肝炎に代わる肝移植の主な原因と予測されている。米国における人の約１２～２５％が、ＮＡＦＬＤを有し、ＮＡＳＨは、米国における人の約２～５％に影響している。ＮＡＳＨを含むＮＡＦＬＤは、インスリン抵抗性、肥満およびメタボリックシンドロームと関連している。例えば、インスリン抵抗性は、脂肪肝から肝炎および線維症、ひいてはＮＡＳＨへの進行に寄与する。さらに、肥満は、ＮＡＳＨを促進し、悪化させ、体重減少は、ＮＡＳＨを緩和することができる。したがって、ＧＬＰ－１受容体（ＧＬＰ１Ｒ）アゴニスト、グルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）アゴニストおよびデュアルＧＬＰ１Ｒ／ＧＣＧＲアゴニストを含む、本明細書に記載されるペプチド産物は、ＮＡＳＨを含むＮＡＦＬＤを処置するために使用することができる。一部の実施形態では、ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）またはＰＣＯＳなどの、本明細書に開示されるインスリン抵抗性または／および肥満と関連する状態を処置するために使用されるデュアルアゴニストペプチド産物は、配列番号１～１０のデュアルアゴニストペプチド産物、および／またはその誘導体、ならびにその医薬的に許容される塩から選択される。
【0052】
一部の実施形態では、本デュアルアゴニストペプチド（複数可）を使用して、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニスト（例えば、セマグルチド）と比較して、１つまたは複数の有害事象（すなわち、患者および／または動物愛護に悪影響する予期せぬ事象）を低減しながら血糖を制御することができる。例示的な非限定的な有害事象としては、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および／または便秘が挙げられる。有害事象はまた、業界リソースに挙げられたもの、および／またはそうでなければ当業者に公知のものなどの、当業者に公知のいずれかを含み得る（例えば、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）（Ｐｈａｒｍ．、Ｍｅｄ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｍｅｄ．２０１８）および／またはＣｌａｒｋ、Ｍ． Ｊ． Ｂｉｏｍｅｄ． Ｉｎｆ．， ５４，２０１５年４月，ｐｐ．１６７－１７３を参照）。このような有害事象は、典型的には、臨床試験で使用される標準的な技術（例えば、医師の診察、調査／アンケート）を使用してヒトにおいて決定することができる。ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対する不均衡な親和性を有するアゴニスト（例えば、セマグルチド）の対象への投与の際に生じる、そのような有害事象の頻度および／または重篤度と比較して、本開示のデュアルアゴニストペプチド（例えば、配列番号１～１０のいずれか、またはその誘導体）は、そのような頻度および／または重篤度を、例えば、２０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％、９０％高い（最高１００％）減少させることができる。一部の実施形態では、本開示のデュアルアゴニストペプチド（例えば、配列番号１～１０のいずれか、またはその誘導体）は、有害事象を引き起こさない。
【0053】
本デュアルアゴニストペプチド産物は、本明細書に開示される状態の処置のための任意の適当な経路によって投与することができる。ペプチド産物の可能性のある投与経路は、経口、非経口（皮内、皮下、筋肉内、血管内、静脈内、動脈内、腹腔内、および局所を含む）、ならびに局所（経皮、経粘膜、鼻腔内（例えば、鼻スプレーまたは滴下による）、眼内（例えば、点眼薬による）、肺内（例えば、経口または鼻吸入による）、口腔、舌下、直腸（例えば、座剤による）、および膣（例えば、座剤による）を含む）を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、ペプチド産物は、皮下、静脈内または筋肉内など非経口投与される。他の実施形態では、ペプチド産物は、経口吸入または鼻吸入またはガス注入によって投与される。本明細書に開示される状態を処置するためのペプチド産物の治療上有効量および投与の頻度、ならびにペプチド産物を用いた処置の期間は、状態の性質および重症度、化合物の効力、投与経路、対象の年齢、体重、一般的な健康状態、性別および食餌、ならびに処置に対する対象の応答を含む様々な要因に依存し得、処置する医師によって決定され得る。一部の実施形態では、ペプチド産物は、本明細書に開示される状態（例えば、ＮＡＳＨまたはＰＣＯＳなどのインスリン抵抗性または／および肥満に関連するもの）の処置のため、約１週間にわたり、約０．０１ｍｇ～約０．１、１、５もしくは１０ｍｇ、または約０．１～１ｍｇもしくは１～１０ｍｇの用量で、非経口（例えば、皮下（ｓｃ）、静脈内（ｉｖ）または筋肉内（ｉｍ））投与される。さらなる実施形態では、ペプチド産物は、約１週間にわたり、約０．１～０．５ｍｇ、０．５～１ｍｇ、１～５ｍｇまたは５～１０ｍｇの用量で非経口（例えば、ｓｃ、ｉｖまたはｉｍ）投与される。ある特定の実施形態では、ペプチド産物は、約１週間にわたり、約０．１～１ｍｇ、または約０．１～０．５ｍｇもしくは０．５～１ｍｇの用量で非経口（例えば、皮下（ＳＣ）、静脈内（ＩＶ）または筋肉内（ＩＭ））投与される。当業者は、マウス、または他の前臨床動物モデルにおける有効用量が、ヒトのため調整され得ることを理解する。このように、非比例的調整（生物学的調整とも呼ばれる）により、より大きな動物における用量をマウスにおける用量から外挿し、動物の体重または体表面積に基づき均等な用量を得ることができる。
【0054】
ペプチド産物は、本明細書に開示される状態（例えば、ＮＡＳＨまたはＰＣＯＳなどの、インスリン抵抗性または／および肥満に関連するもの）の処置のため、任意の適当な頻度で投与することができる。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチド産物は、例えば、１日１回、２日に１回、３日に１回、１週間に２回、１週間に１回、または２週間に１回、ｓｃまたはｉｖで投与される。ある特定の実施形態では、ペプチド産物は、例えば、１週間に１回、ＳＣ、ＩＶ、またはＩＭで投与される。デュアルアゴニストペプチド産物は、患者にとって都合のよい任意の時間に投与することができる。デュアルアゴニストペプチド産物は、実質的に食事とともに（例えば、食事とともに、または食事の前もしくは後の約１時間もしくは３０分以内に）、または実質的に食事なしで（例えば、食事の前または後の少なくとも約１時間または２時間）摂取することができる。デュアルアゴニストペプチド産物を用いた医療状態の処置の長さは、例えば、状態の性質および重篤度ならびに処置に対する対象の応答に基づくことができ、処置する医師によって決定することができる。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチド産物は、少なくとも約２ヶ月、３ヶ月、６ヶ月、１年、１．５年、２年、３年、５年、１０年またはそれ以上など、本明細書に開示される状態を治療するために慢性的に投与される。デュアルアゴニストペプチド産物はまた、状態の臨床症状が消失するか、または血糖値、血圧、脂質の血中レベル、体重または肥満度指数、ウエストとヒップの比もしくは体脂肪率、またはその任意の組み合わせなどの臨床標的が達成されるまで、臨時（必要に応じて）摂取することができる。状態の臨床症状が再び現れるか、または臨床標的が維持されない場合、デュアルアゴニストペプチド産物の投与を再開することができる。本開示は、処置を必要とする対象に、治療上有効量の本明細書に記載されるペプチド産物もしくはその医薬的に許容される塩、またはそれを含む医薬組成物を投与することを含む、本明細書に記載される医療状態を処置する方法を提供する。本開示はさらに、医薬品として使用するための、本明細書に記載されるペプチド産物もしくはその医薬的に許容される塩、またはそれを含む組成物を提供する。さらに、本開示は、医薬の調製における、本明細書に記載されるペプチド産物またはその医薬的に許容される塩の使用を提供する。ペプチド産物を含有する医薬を使用して、本明細書に記載される任意の医療状態を処置することができる。ペプチド産物は、任意選択的に、１つまたは複数のさらなる治療剤と組み合わせて使用することができる。
【0055】
本明細書に記載されるデュアルアゴニストペプチド産物は、唯一の活性剤として投与するか、または任意選択的に、１つまたは複数の他のデュアルアゴニストペプチド産物、および／またはインスリン抵抗性、糖尿病、肥満、メタボリックシンドロームもしくは心血管疾患、またはＮＡＳＨもしくはＰＣＯＳなどの、それと関連する任意の状態などの、本明細書に開示される任意の障害を処置するためのさらなる治療剤と組み合わせて使用することができる。一部の実施形態では、１つまたは複数のさらなる治療剤は、抗糖尿病剤、抗肥満剤（脂質低下剤および満腹促進剤を含む）、抗アテローム硬化剤、抗炎症剤、酸化防止剤、抗線維化剤、降圧薬、およびその組み合わせから選択される。抗糖尿病剤は、ビグアナイド（例えば、ブホルミンおよびメトホルミン）を含む、ＡＭＰ活性化タンパク質キナーゼ（ＡＭＰＫ）アゴニスト；チアゾリジンジオン（例えば、バラグリタゾン、シグリタゾン、ダルジタゾン、エングリタゾン、ロベグリタゾン、ネトグリタゾン、ピオグリタゾン、リボグリタゾン、ロシグリタゾンおよびトゥログリタゾン）、ＭＳＤＣ－０６０２Ｋおよびサログリタザル（デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト）を含む、ペルオキシソーム増殖因子－活性化受容体ガンマ（ＰＰＡＲ－γ）アゴニスト；エキセンディン－４、アルビグルチド、デュラグルチド、エキセナチド、リラグルチド、リキシセナチド、セマグルチド、タスポグルチド、ＣＮＴ０７３６、ＣＮＴ０３６４９、ＨＭ１１２６０Ｃ（ＬＡＰＳ－エキセンディン）、ＮＮ９９２６（ＯＧ９Ｓ７ＧＴ）、ＴＴ４０１およびＺＹＯＧ１を含む、グルカゴン様ペプチド－１（ＧＬＰ－１）受容体アゴニスト；アログリプチン、アナグリプチン、デュトグリプチン、エボグリプチン、ゲミグリプチン、ゴソグリプチン、リナグリプチン、オマリグリプチン、サキサグリプチン、セプタグリプチン、シタグリプチン、テネリグリプチン、トレラグリプチンおよびビルダグリプチンを含む、ジペプチジルペプチダーゼ４（ＤＰＰ－４）阻害剤；カナグリフロジン（ＳＧＬＴ１も阻害する）、ダパグリフロジン、エンパグリフロジン、エルツグリフロジン、イプラグリフロジン、ルセオグリフロジン、エタボン酸レモグリフロジン、ソタグリフロジン（ＳＧＬＴ１も阻害する）およびトホグリフロジンを含む、ナトリウム－グルコース輸送タンパク質２（ＳＧＬＴ２）阻害剤；ルネグリチド（例えば、ミチグリニド、ナテグリニドおよびレパグリニド）ならびにスルホニルウレア（第一世代（例えば、アセトヘキサミド、カルブタミド、クロロプロプアミド、ジシクラミド［トルヘキサミド］、メタヘキサミド、トラザミドおよびトルブタミド）ならびに第二世代（例えば、グリベンクラミド、グリブリド、グリボルヌリド、グリクラジド、グリメピリド、グリピジド、グリキドン、グリソキセピドおよびグリクロピラミドを含む）を含む、膵ベータ細胞のＡＴＰ依存性Ｋ＋（ＫＡＴＰ）チャネルの遮断薬；速効性インスリン（例えば、インスリンアスパリ、インスリングルリジンおよびインスリンリスプロ）、中間型インスリン（例えば、ＮＰＨインスリン）、ならびに長時間作用性インスリン（例えば、インスリンデグルデク、インスリンデテミルおよびインスリングラルギン）を含む、インスリンおよびそのアナログ；ならびに／またはそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、抗糖尿病剤は、ビグアナイド（例えば、メトホルミン）、チアゾリジンジオン（例えば、ピオグリタゾンもしくはロジグリタゾン）またはＳＧＬＴ２阻害剤（例えば、エンパグリフロジンもしくはトホグリフロジン）、あるいはその任意の組み合わせであるか、または含む。抗肥満剤は、アンフェタミン、デクサムフェタミン、アンフェプラモン、クロベンゾレックス、マジンドール、フェンテルミン（トピラマートを含むか、または含まない）およびロルカセリンを含む、食欲抑制薬（食欲低下薬）；絨毛様神経栄養因子（例えば、アキソカイン）ならびにアミリン、カルシトニン、コレシストキニン（ＣＣＫ）、ＧＬＰ－１、レプチン、オキシントモジュリン、膵ポリペプチド（ＰＰ）、ペプチドＹＹ（ＰＹＹ）および神経ペプチドＹ（ＮＰＹ）のより長期作用性アナログを含む、満腹促進剤；カウレルペニネ、セチリスタット、エベラクトンＡおよびＢ、エステラスティン、リプスタチン、オルリスタット、ペルシクイニン、パンクリシンＡ～Ｅ、バリラクトンおよびビブララクトンを含む、リパーゼ阻害剤；抗高脂血症剤；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。抗高脂血症剤は、スタチン｛例えば、アトルバスタチン、セリバスタチン、フルバスタチン、メバスタチン、モナコリン（例えば、モナコリンＫ（ロバスタチン）、ピタバスタチン、プラバスタチン、ロスバスタチンおよびシンバスタチン｝ならびにフラバノン（例えば、ナリンゲニン）を含む、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤；ラパキスタット、ザラゴジン酸およびＲＰＲ－１０７３９３を含む、スクアレン合成酵素阻害剤；アントシアニン、アベナシオリド、クロロアセチル化ビオチン、シクロジム、ジクロホップ、ハロキシホップ、ソラフェン（例えば、ソラフェンＡｌａ）、５－（テトラデシルオキシ）－２－フランカルボン酸（ＴＯＦＡ）、ＣＰ－６４０１８６、ＧＳ－０９７６、ＮＤＩ－０１０９７６を含む、アセチル－ＣｏＡカルボキラーゼ（ＡＣＣ）阻害剤；７－（４－プロピルオキシ－フェニルエチニル）－３，３－ジメチル－３，４ジヒドロ－２Ｈ－ベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキセピン；Ｎ－エチル－Ｎ’－（３－｛［４－（３，３－ジメチル－１－オキソ－２－オキサ－７－アザスピロ［４．５］デク－７－イル）ピペリジン－１－イル］－カルボニル｝－１－ベンゾチエン－２－イル）ウレア；５－（３－アセタミドブタ－１－イニル）－２－（４－プロピルオキシフェノキシ）チアゾール；および１－（３－｛［４－（３，３－ジメチル－１－オキソ－２－オキサ－７－アザスピロ［４．５］デク－７－イル）ピペリジン－１－イル］－カルボニル｝－５－（ピリジン－２－イル）－２－チエニル）－３－エチルウレア；フィブラート（例えば、ベザフィブラート、シプロフィブラート、クリノフィブラート、クロフィブリン酸、クロフィブラート、アルミニウムクロフィブラート［アルフィブラート］、クロフィブリド、エトフィブラート、フェノフィブラート、フェノフィブラート、ゲムフィブロジル、ロニフィブラートおよびシンフィブラート）、イソフラボン（例えば、ダイゼインおよびゲニステイン）、ならびにペルフルオロアルカノイン酸（例えば、ペルフルオロオクタン酸およびペルフルオロノナン酸）を含む、ＰＰＡＲ－δアゴニスト；エラフィブラノール（デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト）、ＧＦＴ５０５（デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト）、ＧＷ０７４２、ＧＷ５０１５１６（デュアルＰＰＡＲ－β／δアゴニスト）、ソデルグリタザル（ＧＷ６７７９５４）、ＭＢＸ－８０２５、ならびにイソフラボン（例えば、ダイゼインおよびゲニステイン）を含む、ＰＰＡＲ－δアゴニスト；チアゾリジンジオン｛上記）、サログリタザル（デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト）、４－オキソ－２－チオキソチアゾリン（例えば、ロダニン）、ベルベリン、ホノキオール、ペルフルオロノナン酸、シクロペンテノンプロスタグランジン（例えば、シクロペンテノン１５－デオキシ－Ａ－プロスタグランジンＪ２［１５ｄ－ＰＧＪ２］）、ならびにイソフラボン（例えば、ダイゼインおよびゲニステイン）を含む、ＰＰＡＲ－γアゴニスト；内在性リガンド（例えば、２２（ｉ？）－ヒドロキシコレステロール、２４（Ａ）－ヒドロキシコレステロール、２７－ヒドロキシコレステロールおよびコレスタン酸などのオキシステロール）ならびに合成アゴニスト（例えば、アセチル－ポドカルピン酸ダイマー、ヒポコラミド、Ａ（Ｘ－ジメチル－３ｂ－ヒドロキシ－コレナミド［ＤＭＨＣＡ］、ＧＷ３９６５およびＴ０９０１３１７）を含む、肝臓Ｘ受容体（ＬＸＲ）アゴニスト；内在性リガンド（例えば、９－シス－レチノイン酸）ならびに合成アゴニスト（例えば、ベキサロテン、ＡＧＮ １９１６５９、ＡＧＮ １９１７０１、ＡＧＮ １９２８４９、ＢＭＳ６４９、ＬＧ１００２６８、ＬＧ１００７５４およびＬＧＤ３４６）を含む、レチノイドＸ受容体（ＲＸＲ）アゴニスト；アバシミベ、パクチミベ、ペリトリン、テルペンドールＣおよびフラバノン（例えば、ナリンゲニン）を含む、アシル－ＣｏＡコレステロールアシルトランスフェラーゼの阻害剤（ＡＣＡＴ、ＡＣＡＴ１［ＳＯＡＴ１］およびＡＣＡＴ２［ＳＯＡＴ２］を含む、アカステロールＧ－アシルトランスフェラーゼ［ＳＯＡＴ］）；アラムコール、ＣＡＹ－１０５６６、ＣＶＴ－１１１２７、ＳＡＲ－２２４、ＳＡＲ－７０７、ＸＥＮ－１０３を含む、ステアロイル－ＣｏＡ不飽和化酵素－１（ＳＣＤ－１、アカステアロイル－ＣｏＡデルタ－９不飽和化酵素）活性または発現の阻害剤；３－（２－ヒドロキシエトキシ）－４－メトキシ－Ｎ－［５－（３－トリフルオロメチルベンジル）チアゾール－２－イル］ベンズアミドおよび４－エチルアミノ－３－（２－ヒドロキシエトキシ）－Ｎ－［５－（３－トリフルオロメチルベンジル）チアゾール－２－イル］ベンズアミド；１’－｛６－［５－（ピリジン－３－イルメチル）－１，３，４－オキサジアゾール－２－イル］ピリダジン－３－イル｝－５－（トリフルオロメチル）－３，４－ジヒドロスピロ［クロメン－２，４’－ピペリジン］；５－フルオロ－１’－｛６－［５－（ピリジン－３－イルメチル）－１，３，４－オキサジアゾール－２－イル］ピリダジン－３－イル｝－３，４－ジヒドロスピロ［クロメン－２，４’－ピペリジン］；６－［５－（シクロプロピルメチル）－４，５－ジヒドロ－１’Ｈ，３Ｈ－スピロ［１，５－ベンゾキサアゼピン－２，４’－ピペリジン］－１’－イル］－Ｎ－（２－ヒドロキシ－２－ピリジン－３－イルエチル）ピリダジン－３－カルボキサミド；６－［４－（２－メチルベンゾイル）ピペリジン－１－イル］ピリダジン－３－カルボン酸（２－ヒドロキシ－２－ピリジン－３－イルエチル）アミド；４－（２－クロロフェノキシ）－Ｎ－［３－（メチルカルバモイル）フェニル］ピペリジン－１－カルボキサミド；コンジュゲートしたリノール酸のシス－９、トランス－１１異性体およびトランス－１０、シス－１２異性体、国際公開第２００９／１２９６２５Ａ１号に開示される、置換ヘテロ芳香族化合物、ＳＣＤ－１のｍＲＮＡを標的とするアンチセンスポリヌクレオチドおよびペプチド－核酸（ＰＮＡ）、ならびにＳＣＤ－１標的化ｓｉＲＮＡ；アナセトラピブ、ダルセトラピブ、エバセトラピブ、トルセトラピブおよびＡＭＧ ８９９（ＴＡ－８９９５）を含む、コレステリルエステル転送タンパク質（ＣＥＴＰ）阻害剤；インプリタビド、ロミタピド、ジルロタピド、ミトラタピド、ＣＰ－３４６０８６、ＪＴＴ－１３０、ＳＬｘ－４０９０、アンチセンスポリヌクレオチドおよびＭＴＴＰのｍＲＮＡを標的とするＰＮＡ、ＭＴＴＰ標的化マイクロＲＮＡ（例えば、ｍｉＲＮＡ－３０ｃ）、およびＭＴＴＰ標的化ｓｉＲＮＡを含む、ミクロソームトリグリセリド輸送タンパク質（ＭＴＴＰ）活性または発現の阻害剤；ＧＬＰ－１受容体アゴニスト；ＢＭＳ－９８６０３６（ペグ化ＦＧＦ２１）を含む、線維芽細胞成長因子２１（ＦＧＦ２１）ならびにそのアナログおよび誘導；ベルベリン（ＰＣ８Ｋ９レベルを低減する）、アネキシンＡ２（ＰＣＳＫ９活性を阻害する）、抗ＰＣＳＫ９抗体（例えば、アリロクマブ、ボコシズマブ、エボロクマブ、ＬＧＴ－２０９、ＬＹ３０１５０１４およびＲＧ７６５２）、ＰＣＳＫ９に結合するＬＤＬ受容体の上皮成長因子－Ａ（ＥＧＦ－Ａ）ドメインを模倣するペプチド、ＰＣＳＫ９結合アドネクチン（例えば、ＢＭＳ－９６２４７６）、ＰＣＳＫ９のｍＲＮＡを標的とするアンチセンスポリヌクレオチドおよびＰＮＡ、ならびにＰＣＳＫ９標的化ｓｉＲＮＡ（例えば、インクリシラン［ＡＬＮ－ＰＣＳ］およびＡＬＮ－Ｐ
ＣＳ０２）を含む、タンパク質促進転換酵素スブチリシン／ケキシンタイプ９（ＰＣＳＫ９）活性または発現の阻害剤；ａｐｏＡ－Ｉ模倣物（例えば、２Ｆ、３Ｆ、３Ｆ－１、３Ｆ－２、３Ｆ－１４、４Ｆ、４Ｆ－Ｐ－４Ｆ、４Ｆ－ＩＨＳ－４Ｆ、４Ｆ２、５Ｆ、６Ｆ、７Ｆ、１８Ｆ、５Ａ、５Ａ－Ｃ１、５Ａ－ＣＨ１、５Ａ－ＣＨ２、５Ａ－Ｈ１、１８Ａ、３７ｐＡ［１８Ａ－Ｐ－１８Ａ］、ＥＬＫ、ＥＬＫ－１Ａ、ＥＬＫ－１Ｆ、ＥＬＫ－１Ｋ１Ａ１Ｅ、ＥＬＫ－１Ｌ１Ｋ、ＥＬＫ－１Ｗ、ＥＬＫ－２Ａ、ＥＬＫ－２Ａ２Ｋ２Ｅ、ＥＬＫ－２Ｅ２Ｋ、ＥＬＫ－２Ｆ、ＥＬＫ－３ Ｅ３ＥＫ、ＥＬＫ－３Ｅ３Ｋ３Ａ、ＥＬＫ－３Ｅ３ＬＫ、ＥＬＫ－ＰＡ、ＥＬＫ－Ｐ２Ａ、ＥＬＫＡ、ＥＬＫＡ－ＣＨ２、ＡＴＩ－５２６１、ＣＳ－６２５３、ＥＴＣ－６４２、ＦＡＭＰ、ＦＲＥＬおよびＫＲＥＳならびにａｐｏＥ模倣物（例えば、Ａｃ－ｈＥｌ８Ａ－ＮＨ２、ＡＥＭ－２８、Ａｃ－［Ｒ］ｈＥｌ ８ Ａ－ＮＨ２、ＡＥＭ－２８－１４、ＥｐＫ、ｈＥｐ、ｍＲｌ８Ｌ、ＣＯＧ－１１２、ＣＯＧ－１３３およびＣＯＧ－１４１０）を含む、アポリポタンパク質模倣ペプチド；ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ａ－リノレン酸（ＡＬＡ）、フィッシュオイル（例えば、ＤＨＡおよびＥＰＡを含有する）、ならびにそのエステル（例えば、グリセリルおよびエチルエステル）を含む、オメガ－３脂肪酸；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、抗肥満剤は、リパーゼ阻害剤（例えば、オルリスタット）または／ならびに抗高脂質血症剤（例えば、アトルバスタチンなどのスタチン、もしくは／およびフェノフィブラートなどのフィブラート）であるか、または含む。降圧薬は、レニン阻害剤（例えば、アリスキレン）、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリルおよびトランドラプリル）、アンギオテンシンＩＩ受容体タイプ１（ＡＴＩＩ１）アンタゴニスト（例えば、アジルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン、フィマサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタンメドキソミル、オルメサルタン、テルミサルタンおよびバルサルタン）、ならびにアルドステロン受容体アンタゴニスト（例えば、エプレレノンおよびスピロノラクトン）を含む、レニン－アンギオテンシン－アルドステロン系（ＲＡＡＳ）のアンタゴニスト；ループ利尿薬（例えば、ブメタニド、エタクリン酸、フロセミドおよびトルセミド）、チアジド利尿薬（例えば、ベンドロフルメチアジド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、エピチジド、メチクロチアジドおよびポリチアジド）、チアジド様利尿薬（例えば、クロルタリドン、インダパミドおよびメトラゾン）、シクレタニン（早期遠位尿細管利尿薬）、カリウム節約型利尿薬（例えば、アミロリド、エプレレノン、スピロノラクトンおよびトリアムテレン）、ならびにテオブロミンを含む、利尿薬；ジヒドロピリジン（例えば、アムロジピン、レバムロジピン、シルニジピン、クレビジピン、フェロジピン、イスラジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピンおよびニトレンジピン）ならびに非ジヒドロピリジン（例えば、ジルチアゼムおよびベラパミル）を含む、カルシウムチャンネル遮断薬；クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、メチルドーパおよびモクソニジンを含む、α２－アドレナリン受容体アゴニスト；ドキサゾシン、インドラミン、ニセルゴリン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、プラゾシン、テラゾシンおよびトラゾリンを含む、α１－アドレナリン受容体アンタゴニスト（アルファ遮断薬）；アテノロール、ベタクソロール、ビソプロロール、カルテオロール、カルベジロール、ラベタロール、メトプロロール、ナドロール、ネビボロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロールおよびチモロールを含む、β－アドレナリン受容体（β１または／およびβ２）アンタゴニスト（ベータ遮断薬）；ブシンドロール、カルベジロールおよびラベタロールを含む、混合アルファ／ベータ遮断薬；選択的ＥＴＡ受容体アンタゴニスト（例えば、アンブリセンタン、アトラセンタン、エドネンタン、シタクセンタン、ジボテンタンおよびＢＱ－１２３）ならびにデュアルＥＴＡ／ＥＴＢアンタゴニスト（例えば、ボセンタン、マシテンタンおよびテゾセンタン）を含む、エンドセリン受容体アンタゴニスト；ヒドラルアジン、ミノキシジル、テオブロミン、ナトリウムニトロプルシド、有機硝酸塩（例えば、体内で一酸化窒素に変換される、一硝酸イソソルビド、硝酸イソソルビドおよびニトログリセリン）、内皮一酸化窒素合成酵素（ｅＮＯＳ）刺激因子（例えば、シクレタニン）、溶解性グアニル酸シクラーゼの活性化因子（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）、ホスホジエステラーゼタイプ５（ＰＤＥ５）阻害剤（例えば、アバナフィル、ベンズアミデナフィル、ダサンタフィル、ディナフィル、ロデェナフィル、ミロデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、ウデナフィル、バルデナフィル、ジピリダモール、パパベリン、プロペントフィリン、ザプリナストおよびＴ－１０３２）、プロスタグランジンＥｉ（アルプロスタジル）ならびにそのアナログ（例えば、リマプロストおよびミソプロストール）、プロスタサイクリンならびにそのアナログ（例えば、アタプロスト、ベラプロスト［例えば、エスベラプロスト］、５，６，７－トリノール－４，８－インター－ｗ－フェニレン－９－フルオロ－ＰＧｌ２、カルバサイクリン、イソカルバサイクリン、クリンプロスト、シプロステン、エプタロプロスト、シカプロスト、イロプロスト、ピミルプロスト、ＳＭ－１０９０６（デス－メチルピミルプロスト）、ナクサプロステン、タプロステン、トレプロスチニル、ＣＳ－５７０、ＯＰ－２５０７およびＴＹ－１１２２３）、非プロスタノイドプロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、ｌ－フタラジノール、ラリネパグ、セレキシパグ、ＡＣＴ－３３３６７９［ＭＲＥ－２６９、セレキシパグの活性な代謝産物］、およびＴＲＡ－４１８）、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤ならびにタンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）阻害剤（例えば、ＢＩＭ－１、ＢＩＭ－２、ＢＩＭ－３、ＢＩＭ－８、チェレリスリン、シクレタニン、ゴシポール、ミヤベノールＣ、ミリシトリン、ルボキシストーリンおよびベルバスコシドを含む、他の血管拡張剤；マグネシウムおよび硫酸マグネシウムを含む、鉱物；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、降圧薬は、チアジドまたはチアジド様利尿薬（例えば、ヒドロクロロチアジドもしくはクロルタリドン）、カルシウムチャンネル遮断薬（例えば、アムロジピンもしくはニフェジピン）、ＡＣＥ阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリルもしくはペリンドプリル）またはアンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、オルメサルタンメドキソミル、オルメサルタン、テルミサルタンもしくはバルサルタン）、あるいはその組み合わせであるか、または含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるペプチド産物は、ＮＡＳＨなどの、ＮＡＦＬＤを処置するための１つまたは複数のさらなる治療剤と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、１つまたは複数のさらなる治療剤は、抗糖尿病剤、抗肥満剤、抗炎症剤、抗線維化剤、酸化防止剤、降圧薬、およびその組み合わせから選択される。ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）を処置するために使用することができる治療剤は、ＰＰＡＲ－δアゴニスト（例えば、ＭＢＸ－８０２５、エラフィブラノール［デュアルＰＰＡＲ－α／δアゴニスト］およびＧＷ５０１５１６［デュアルＰＰＡＲ－β／δアゴニスト］）およびＰＰＡＲ－γアゴニスト（例えば、ピオグリタゾンなどのチアゾリジンジオン、およびサログリタザル［デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト］）を含む、ＰＰＡＲアゴニスト、ＰＰＡＲ－δおよび－γアゴニズムは、インスリン感受性を増加させ、ＰＰＡＲ－αアゴニズムは、脂肪肝を低減し、ＰＰＡＲ－δアゴニズムは、マクロファージおよびクッパー細胞の活性化を阻害する；肝糖新生、脂質生合成、脂肪肝および線維症を低減する、オベチコール酸および非ステロイド性ＦＸＲアゴニスト様ＧＳ－９６７４などの、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト；線維芽細胞成長因子１９（ＦＧＦ１９）ならびにＮＧＭ－２８２などのそのアナログおよび誘導体－ＦＧＦ１９アナログは、肝糖新生および脂肪肝を低減する；線維芽細胞成長因子２１（ＦＧＦ２１）ならびにＢＭＳ－９８６０３６（ペグ化ＦＧＦ２１）などのそのアナログおよび誘導体－ＦＧＦ２１アナログは、脂肪肝、細胞損傷および線維症を低減する；スタチン（例えば、ロスバスタチン）を含む、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤－スタチンは、脂肪性肝炎および線維症を低減する；ＮＤＩ－０１０９７６（肝標的化）およびＧＳ－０９７６などの、ＡＣＣ阻害剤－ＡＣＣ阻害剤は、脂質生合成および脂肪肝を低減する；アラムコールなどの、ＳＣＤ－１阻害剤－ＳＣＤ－１阻害剤は、脂肪肝を低減し、インスリン感受性を増加させる；カナグリフロジン、イプラグリフロジンおよびルセオグリフロジンなどの、ＳＧＬＴ２阻害剤－ＳＧＬＴ２阻害剤は、体重、肝ＡＬＴレベルおよび線維症を低減する；セニクリビロクなどの、ＣＣＲ２または／およびＣＣＲ５のアンタゴニスト－ＣＣＲ２のアンタゴニスト（ＣＣＬ２［ＭＣＰ１］に結合する）およびＣＣＲ５（ＣＣＬ５［ＲＡＮＴＥＳ］に結合する）は、炎症細胞（例えば、マクロファージ）の活性化および肝臓への遊走を阻害し、肝線維症を低減する；アポトーシスシグナル制御キナーゼ１（ＡＳＫ１）阻害剤（例えば、セロンセルチブ）およびカスパーゼ阻害剤（例えば、エムリカサン［パンカスパーゼ阻害剤］）を含む、アポトーシス阻害剤－アポトーシス阻害剤は、脂肪肝および線維症を低減する；シムツズマブなどの、リジルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤－ＬＯＸＬ２は、コラーゲン形成における鍵となる基質酵素であり、肝臓において高度に発現する；ＧＲ－ＭＤ－０２およびＴＤ１３９などの、ガレクチン－３阻害剤－ガレクチン－３は、肝線維症の発症に重要である；ビタミンＥ（例えば、ａ－トコフェロール）ならびに活性酸素種（ＲＯＳ）およびフリーラジカルのスカベンジャー（例えば、システアミン、グルタチオン、メラトニンおよびペントキシフィリン［また、ＴＮＦ－ａおよびホスホジエステラーゼの阻害を介した抗炎症］）を含む、酸化防止剤－ビタミンＥは、脂肪肝、肝細胞のバルーン化および小葉の炎症を低減する；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本明細書に記載されるペプチド産物を、ＰＰＡＲアゴニスト（例えば、エラフィブラノールなどのＰＰＡＲ－δアゴニストもしくは／およびピオグリタゾンなどのＰＰＡＲ－γアゴニスト）、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤（例えば、ロスバスタチンなどのスタチン）、ＦＸＲアゴニスト（例えば、オベチコール酸）または酸化防止剤（例えば、ビタミンＥ）、あるいはその任意の組み合わせと組み合わせて使用して、ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）を処置する。ある特定の実施形態では、ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）の処置のための、１つまたは複数のさらなる治療剤は、ビタミンＥまたは／およびピオグリタゾンであるか、または含む。当業者によって理解される通り、他の組み合わせがまた、使用されてもよい。
ＣＳ０２）を含む、タンパク質促進転換酵素スブチリシン／ケキシンタイプ９（ＰＣＳＫ９）活性または発現の阻害剤；ａｐｏＡ－Ｉ模倣物（例えば、２Ｆ、３Ｆ、３Ｆ－１、３Ｆ－２、３Ｆ－１４、４Ｆ、４Ｆ－Ｐ－４Ｆ、４Ｆ－ＩＨＳ－４Ｆ、４Ｆ２、５Ｆ、６Ｆ、７Ｆ、１８Ｆ、５Ａ、５Ａ－Ｃ１、５Ａ－ＣＨ１、５Ａ－ＣＨ２、５Ａ－Ｈ１、１８Ａ、３７ｐＡ［１８Ａ－Ｐ－１８Ａ］、ＥＬＫ、ＥＬＫ－１Ａ、ＥＬＫ－１Ｆ、ＥＬＫ－１Ｋ１Ａ１Ｅ、ＥＬＫ－１Ｌ１Ｋ、ＥＬＫ－１Ｗ、ＥＬＫ－２Ａ、ＥＬＫ－２Ａ２Ｋ２Ｅ、ＥＬＫ－２Ｅ２Ｋ、ＥＬＫ－２Ｆ、ＥＬＫ－３ Ｅ３ＥＫ、ＥＬＫ－３Ｅ３Ｋ３Ａ、ＥＬＫ－３Ｅ３ＬＫ、ＥＬＫ－ＰＡ、ＥＬＫ－Ｐ２Ａ、ＥＬＫＡ、ＥＬＫＡ－ＣＨ２、ＡＴＩ－５２６１、ＣＳ－６２５３、ＥＴＣ－６４２、ＦＡＭＰ、ＦＲＥＬおよびＫＲＥＳならびにａｐｏＥ模倣物（例えば、Ａｃ－ｈＥｌ８Ａ－ＮＨ２、ＡＥＭ－２８、Ａｃ－［Ｒ］ｈＥｌ ８ Ａ－ＮＨ２、ＡＥＭ－２８－１４、ＥｐＫ、ｈＥｐ、ｍＲｌ８Ｌ、ＣＯＧ－１１２、ＣＯＧ－１３３およびＣＯＧ－１４１０）を含む、アポリポタンパク質模倣ペプチド；ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）、ドコサペンタエン酸（ＤＰＡ）、エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ａ－リノレン酸（ＡＬＡ）、フィッシュオイル（例えば、ＤＨＡおよびＥＰＡを含有する）、ならびにそのエステル（例えば、グリセリルおよびエチルエステル）を含む、オメガ－３脂肪酸；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、抗肥満剤は、リパーゼ阻害剤（例えば、オルリスタット）または／ならびに抗高脂質血症剤（例えば、アトルバスタチンなどのスタチン、もしくは／およびフェノフィブラートなどのフィブラート）であるか、または含む。降圧薬は、レニン阻害剤（例えば、アリスキレン）、アンギオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリル、エナラプリル、ホシノプリル、リシノプリル、モエキシプリル、ペリンドプリル、キナプリル、ラミプリルおよびトランドラプリル）、アンギオテンシンＩＩ受容体タイプ１（ＡＴＩＩ１）アンタゴニスト（例えば、アジルサルタン、カンデサルタン、エプロサルタン、フィマサルタン、イルベサルタン、ロサルタン、オルメサルタンメドキソミル、オルメサルタン、テルミサルタンおよびバルサルタン）、ならびにアルドステロン受容体アンタゴニスト（例えば、エプレレノンおよびスピロノラクトン）を含む、レニン－アンギオテンシン－アルドステロン系（ＲＡＡＳ）のアンタゴニスト；ループ利尿薬（例えば、ブメタニド、エタクリン酸、フロセミドおよびトルセミド）、チアジド利尿薬（例えば、ベンドロフルメチアジド、クロロチアジド、ヒドロクロロチアジド、エピチジド、メチクロチアジドおよびポリチアジド）、チアジド様利尿薬（例えば、クロルタリドン、インダパミドおよびメトラゾン）、シクレタニン（早期遠位尿細管利尿薬）、カリウム節約型利尿薬（例えば、アミロリド、エプレレノン、スピロノラクトンおよびトリアムテレン）、ならびにテオブロミンを含む、利尿薬；ジヒドロピリジン（例えば、アムロジピン、レバムロジピン、シルニジピン、クレビジピン、フェロジピン、イスラジピン、レルカニジピン、ニカルジピン、ニフェジピン、ニモジピン、ニソルジピンおよびニトレンジピン）ならびに非ジヒドロピリジン（例えば、ジルチアゼムおよびベラパミル）を含む、カルシウムチャンネル遮断薬；クロニジン、グアナベンズ、グアンファシン、メチルドーパおよびモクソニジンを含む、α２－アドレナリン受容体アゴニスト；ドキサゾシン、インドラミン、ニセルゴリン、フェノキシベンザミン、フェントラミン、プラゾシン、テラゾシンおよびトラゾリンを含む、α１－アドレナリン受容体アンタゴニスト（アルファ遮断薬）；アテノロール、ベタクソロール、ビソプロロール、カルテオロール、カルベジロール、ラベタロール、メトプロロール、ナドロール、ネビボロール、オクスプレノロール、ペンブトロール、ピンドロール、プロプラノロールおよびチモロールを含む、β－アドレナリン受容体（β１または／およびβ２）アンタゴニスト（ベータ遮断薬）；ブシンドロール、カルベジロールおよびラベタロールを含む、混合アルファ／ベータ遮断薬；選択的ＥＴＡ受容体アンタゴニスト（例えば、アンブリセンタン、アトラセンタン、エドネンタン、シタクセンタン、ジボテンタンおよびＢＱ－１２３）ならびにデュアルＥＴＡ／ＥＴＢアンタゴニスト（例えば、ボセンタン、マシテンタンおよびテゾセンタン）を含む、エンドセリン受容体アンタゴニスト；ヒドラルアジン、ミノキシジル、テオブロミン、ナトリウムニトロプルシド、有機硝酸塩（例えば、体内で一酸化窒素に変換される、一硝酸イソソルビド、硝酸イソソルビドおよびニトログリセリン）、内皮一酸化窒素合成酵素（ｅＮＯＳ）刺激因子（例えば、シクレタニン）、溶解性グアニル酸シクラーゼの活性化因子（例えば、シナシグアトおよびリオシグアト）、ホスホジエステラーゼタイプ５（ＰＤＥ５）阻害剤（例えば、アバナフィル、ベンズアミデナフィル、ダサンタフィル、ディナフィル、ロデェナフィル、ミロデナフィル、シルデナフィル、タダラフィル、ウデナフィル、バルデナフィル、ジピリダモール、パパベリン、プロペントフィリン、ザプリナストおよびＴ－１０３２）、プロスタグランジンＥｉ（アルプロスタジル）ならびにそのアナログ（例えば、リマプロストおよびミソプロストール）、プロスタサイクリンならびにそのアナログ（例えば、アタプロスト、ベラプロスト［例えば、エスベラプロスト］、５，６，７－トリノール－４，８－インター－ｗ－フェニレン－９－フルオロ－ＰＧｌ２、カルバサイクリン、イソカルバサイクリン、クリンプロスト、シプロステン、エプタロプロスト、シカプロスト、イロプロスト、ピミルプロスト、ＳＭ－１０９０６（デス－メチルピミルプロスト）、ナクサプロステン、タプロステン、トレプロスチニル、ＣＳ－５７０、ＯＰ－２５０７およびＴＹ－１１２２３）、非プロスタノイドプロスタサイクリン受容体アゴニスト（例えば、ｌ－フタラジノール、ラリネパグ、セレキシパグ、ＡＣＴ－３３３６７９［ＭＲＥ－２６９、セレキシパグの活性な代謝産物］、およびＴＲＡ－４１８）、ホスホリパーゼＣ（ＰＬＣ）阻害剤ならびにタンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）阻害剤（例えば、ＢＩＭ－１、ＢＩＭ－２、ＢＩＭ－３、ＢＩＭ－８、チェレリスリン、シクレタニン、ゴシポール、ミヤベノールＣ、ミリシトリン、ルボキシストーリンおよびベルバスコシドを含む、他の血管拡張剤；マグネシウムおよび硫酸マグネシウムを含む、鉱物；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。ある特定の実施形態では、降圧薬は、チアジドまたはチアジド様利尿薬（例えば、ヒドロクロロチアジドもしくはクロルタリドン）、カルシウムチャンネル遮断薬（例えば、アムロジピンもしくはニフェジピン）、ＡＣＥ阻害剤（例えば、ベナゼプリル、カプトプリルもしくはペリンドプリル）またはアンギオテンシンＩＩ受容体アンタゴニスト（例えば、オルメサルタンメドキソミル、オルメサルタン、テルミサルタンもしくはバルサルタン）、あるいはその組み合わせであるか、または含む。一部の実施形態では、本明細書に記載されるペプチド産物は、ＮＡＳＨなどの、ＮＡＦＬＤを処置するための１つまたは複数のさらなる治療剤と組み合わせて使用される。一部の実施形態では、１つまたは複数のさらなる治療剤は、抗糖尿病剤、抗肥満剤、抗炎症剤、抗線維化剤、酸化防止剤、降圧薬、およびその組み合わせから選択される。ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）を処置するために使用することができる治療剤は、ＰＰＡＲ－δアゴニスト（例えば、ＭＢＸ－８０２５、エラフィブラノール［デュアルＰＰＡＲ－α／δアゴニスト］およびＧＷ５０１５１６［デュアルＰＰＡＲ－β／δアゴニスト］）およびＰＰＡＲ－γアゴニスト（例えば、ピオグリタゾンなどのチアゾリジンジオン、およびサログリタザル［デュアルＰＰＡＲ－α／γアゴニスト］）を含む、ＰＰＡＲアゴニスト、ＰＰＡＲ－δおよび－γアゴニズムは、インスリン感受性を増加させ、ＰＰＡＲ－αアゴニズムは、脂肪肝を低減し、ＰＰＡＲ－δアゴニズムは、マクロファージおよびクッパー細胞の活性化を阻害する；肝糖新生、脂質生合成、脂肪肝および線維症を低減する、オベチコール酸および非ステロイド性ＦＸＲアゴニスト様ＧＳ－９６７４などの、ファルネソイドＸ受容体（ＦＸＲ）アゴニスト；線維芽細胞成長因子１９（ＦＧＦ１９）ならびにＮＧＭ－２８２などのそのアナログおよび誘導体－ＦＧＦ１９アナログは、肝糖新生および脂肪肝を低減する；線維芽細胞成長因子２１（ＦＧＦ２１）ならびにＢＭＳ－９８６０３６（ペグ化ＦＧＦ２１）などのそのアナログおよび誘導体－ＦＧＦ２１アナログは、脂肪肝、細胞損傷および線維症を低減する；スタチン（例えば、ロスバスタチン）を含む、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤－スタチンは、脂肪性肝炎および線維症を低減する；ＮＤＩ－０１０９７６（肝標的化）およびＧＳ－０９７６などの、ＡＣＣ阻害剤－ＡＣＣ阻害剤は、脂質生合成および脂肪肝を低減する；アラムコールなどの、ＳＣＤ－１阻害剤－ＳＣＤ－１阻害剤は、脂肪肝を低減し、インスリン感受性を増加させる；カナグリフロジン、イプラグリフロジンおよびルセオグリフロジンなどの、ＳＧＬＴ２阻害剤－ＳＧＬＴ２阻害剤は、体重、肝ＡＬＴレベルおよび線維症を低減する；セニクリビロクなどの、ＣＣＲ２または／およびＣＣＲ５のアンタゴニスト－ＣＣＲ２のアンタゴニスト（ＣＣＬ２［ＭＣＰ１］に結合する）およびＣＣＲ５（ＣＣＬ５［ＲＡＮＴＥＳ］に結合する）は、炎症細胞（例えば、マクロファージ）の活性化および肝臓への遊走を阻害し、肝線維症を低減する；アポトーシスシグナル制御キナーゼ１（ＡＳＫ１）阻害剤（例えば、セロンセルチブ）およびカスパーゼ阻害剤（例えば、エムリカサン［パンカスパーゼ阻害剤］）を含む、アポトーシス阻害剤－アポトーシス阻害剤は、脂肪肝および線維症を低減する；シムツズマブなどの、リジルオキシダーゼ様２（ＬＯＸＬ２）阻害剤－ＬＯＸＬ２は、コラーゲン形成における鍵となる基質酵素であり、肝臓において高度に発現する；ＧＲ－ＭＤ－０２およびＴＤ１３９などの、ガレクチン－３阻害剤－ガレクチン－３は、肝線維症の発症に重要である；ビタミンＥ（例えば、ａ－トコフェロール）ならびに活性酸素種（ＲＯＳ）およびフリーラジカルのスカベンジャー（例えば、システアミン、グルタチオン、メラトニンおよびペントキシフィリン［また、ＴＮＦ－ａおよびホスホジエステラーゼの阻害を介した抗炎症］）を含む、酸化防止剤－ビタミンＥは、脂肪肝、肝細胞のバルーン化および小葉の炎症を低減する；ならびにそのアナログ、誘導体および塩を含むが、これらに限定されない。一部の実施形態では、本明細書に記載されるペプチド産物を、ＰＰＡＲアゴニスト（例えば、エラフィブラノールなどのＰＰＡＲ－δアゴニストもしくは／およびピオグリタゾンなどのＰＰＡＲ－γアゴニスト）、ＨＭＧ－ＣｏＡ還元酵素阻害剤（例えば、ロスバスタチンなどのスタチン）、ＦＸＲアゴニスト（例えば、オベチコール酸）または酸化防止剤（例えば、ビタミンＥ）、あるいはその任意の組み合わせと組み合わせて使用して、ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）を処置する。ある特定の実施形態では、ＮＡＦＬＤ（例えば、ＮＡＳＨ）の処置のための、１つまたは複数のさらなる治療剤は、ビタミンＥまたは／およびピオグリタゾンであるか、または含む。当業者によって理解される通り、他の組み合わせがまた、使用されてもよい。
【0056】
薬物動態（「ＰＫ」）パラメーターは、Ｐｈｏｅｎｉｘ（登録商標）ＷｉｎＮｏｎｌｉｎ（登録商標）バージョン８．１以上（Ｃｅｒｔａｒａ ＵＳＡ、Ｉｎｃ．、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ）を使用して推定することができる。血管外投与経路に合致した非コンパートメントアプローチが、パラメーター推定に使用することができる。個々の血漿中濃度－時間データは、薬物動態計算に使用することができる。個々の動物のパラメーター推定値に加えて、記述統計学（例えば、平均、標準偏差、変動係数、中央値、最小値、最大値）を必要に応じて決定することができる。量限界未満の濃度値は、記述統計学および薬物動態解析の決定のためゼロとして処理することができる。定定量限界未満の埋め込み濃度値は、薬物動態解析から除外することができる。すべてのパラメーターは、投薬日（１日目）の試験物質投薬群由来の血漿中の個々のデュアルアゴニストペプチド（またはその誘導体および／または代謝産物）濃度から得ることができる。規格外の用量製剤分析結果が得られない限り（その場合、実際の線量レベルを使用することができる）、パラメーターは、公称用量レベルを使用して推定することができる。パラメーターは、公称試料採取時間を使用して推定することができ、生化学分析試料採取偏差が記載されている場合、影響を受けた時点の実際の試料採取時間を使用することができる。生化学分析データは、薬物動態解析にそのまま使用することができ、もたらされた単位で表および図に示すことができる。薬物動態パラメーターは、分析機関によってもたらされた単位で計算し、提示することができる（例えば、ｈ＊ｎｇ／ｍＬをｈ＊μｇ／ｍＬに変換するなど、報告書での提示のために桁数を適切に調整することができる）。記述統計（例えば、平均値、標準偏差、変動係数、中央値、最小値、最大値）および薬物動態パラメーターは、必要に応じて、有効数字３桁まで決定することができる。必要に応じて、追加のデータ処理項目を記載することができる。データが許す限り、決定されるべきＰＫパラメーターは、以下のもの：Ｃｍａｘ：最大観察濃度；ＤＮ Ｃｍａｘ：用量正規化最大濃度、Ｃｍａｘ／用量として計算；Ｔｍａｘ：最大観察濃度の時間；ＡＵＣ０－ｔ：時間０から最終測定可能濃度の時間までの曲線下面積、線形台形規則を使用して算出；ＡＵＣ０－９６：時間０から時間９６までの曲線下面積、線形台形規則を使用して計算；ＤＮ ＡＵＣ０－９６：用量正規化ＡＵＣ０－９６、ＡＵＣ０－９６／用量として計算；ＡＵＣ０－ｉｎｆ：時間０から無限大までの曲線下面積（１日目のみ）、ＡＵＣ０－ｉｎｆ＝ＡＵＣ０－ｔ＋Ｃｔ／λｚとして計算（式中、Ｃｔは、最後に観察された定量可能な濃度であり、λｚは、消失速度定数である）；ｔ１／２：消失半減期、ｌｎ（２）／λｚとして計算）を含むことができるが、これらに限定されない。当業者によって理解されるであろう、追加のパラメーターおよび比較（例えば、性比、用量比例比など）も決定することができる。
【0057】
一部の実施形態では、本開示は、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対して親和性を有する少なくとも１つのデュアルアゴニストペプチドを含む医薬用量製剤（複数可）であって、ペプチドが、疎水性界面活性剤で修飾され；製剤が、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、１つまたは複数の有害事象の低減を伴って、血糖を制御し、および／または体重減少を誘導するように構成され、有害事象が、哺乳動物への投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される、医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、配列番号１～１０、またはその誘導体、またはその組み合わせのいずれか１つである。一部の実施形態では、デュアルアゴニストペプチドは、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対してほぼ等しい親和性を有し、さらに好ましい実施形態では、配列番号１である。一部の実施形態では、哺乳動物へのデュアルアゴニストペプチドの投与は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、投与の約４８時間または約９６時間後に低い血糖（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、または５０％低下のいずれか、好ましくは、少なくとも約５０％低下）；投与の約７２時間後に低い血糖（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％低い）；および／または投与の約１２０時間後に低い血糖をもたらす。一部の実施形態では、哺乳動物へのデュアルアゴニストペプチドの投与は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、全身体重減少を誘導し、および／または、肝臓重量減少を誘導する。一部の実施形態では、哺乳動物へのデュアルアゴニストペプチドの投与は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、低いＣｍａｘ（任意選択的に、１０、２０、３０、４０、５０％低いの少なくともいずれか、好ましくは、少なくとも約５０％低い）を示し；ほぼ等しいかまたは高いＴｍａｘ（任意選択的に、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％高いの少なくともいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％高い）を示す；同様のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）（任意選択的に、少なくとも約５０、６０、７０、８０、９０、９５、１００％のいずれか、好ましくは、少なくとも約８０～９０％、例えば、約８５～９３％）を示し；等しいかまたは高いＴ１／２（ｈｒ）（任意選択的に、少なくとも約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％のいずれか、好ましくは、少なくとも約５０または７５％、例えば、約５０～７５％）を示す；延長したＭＲＴ（ｈｒ）（任意選択的に、少なくとも約１０、２０、３０、４０、または５０％高いのいずれか、好ましくは、少なくとも約２５％高い）を示し；持続性ＰＫ／ＰＤプロファイルを示し；等しいかまたは高い糖調節作用を示し；高い全身体重減少、任意選択的に、その約２倍を誘導し；低い体脂肪量（任意選択的に、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％低い）を誘導し；および／または、ＮＡＳＨを処置するために投与された場合、増加した全身体重低減、肝臓重量減少、改善されたＮＡＳスコア、改善された肝胆道の脂肪肝、改善されたバルーン化、改善されたｃｏｌ１Ａ１染色、改善されたＡＬＴ、改善された肝ＴＧ／ＴＣ、および改善された血漿ＴＧ／ＴＣを誘導する。一部の実施形態では、哺乳動物へのデュアルアゴニストペプチドの投与は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、製剤の投与の約１４日後までに高い体重の減少（任意選択的に、少なくとも約１０、２０、３０、４０、または５０％高い、好ましくは、少なくとも約１５％高い）をもたらし；および／または製剤の投与の約２０～２８日後までに高い体重の減少（任意選択的に、少なくとも約１０、２０、３０、４０、または５０％のいずれか、好ましくは、少なくとも約２５％大きい）をもたらす。一部の実施形態では、哺乳動物へのデュアルアゴニストペプチドの投与は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、哺乳動物を痩せ型の正常な哺乳動物の正常体重範囲に戻すのに十分な、肥満哺乳動物における体重減少をもたらす。
【0058】
副作用または事象「を低減すること」または「の低減」は、ＧＬＰ１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、ＧＬＰ１ＲおよびＧＣＧＲに対してほぼ均衡のとれた親和性を有するアゴニストの投与後に、対象が経験する副作用の程度、持続時間、および／または頻度、ならびに対象群における発生率が低減することを指す。このような低減は、対象が、ＧＬＰ１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストに応答して経験するであろういくつかの副作用の予防を包含する。このような低減はまた、ＧＬＰ１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストの投与後に、対象が以前に経験した副作用を排除することも包含する。一部の実施形態では、副作用「を低減すること」または「の低減」は、胃腸の副作用の低減を包含し、有害事象が、ゼロまたは検出不可能なレベルまで低減される。他の実施形態では、副作用は、未処置の対象と同等のレベルまで低減されるが、完全には排除されない。さらに、ＧＬＰ－１ＲまたはＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアナログの哺乳動物への投与は、リガンドに対する感受性の弱い受容体を最大限に活性化するために過度に高い用量が必要となり、したがって、他のリガンドに対する生物学的に有効な用量レベルを超え、用量に関連した望ましくない副作用を引き起こす可能性がある。
【0059】
本開示はまた、哺乳動物の血糖を低下および／または安定化させるための方法であって、前記方法が、配列番号１～１０のデュアルアゴニストペプチド（またはその誘導体）、好ましくは、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対してほぼ等しい親和性を有するデュアルアゴニストペプチド（好ましくは、配列番号１）を哺乳動物に投与することを含み、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニスト（例えば、セマグルチド）と比較して１つまたは複数の有害事象の発生率、または重症度を低減し、有害事象が、哺乳動物への投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される、方法を提供する。一部の実施形態では、このような方法は、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドが投与される方法と比較して、投与の約４８時間または約９６時間後に低い血糖（１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低い、好ましくは、少なくとも約５０％低い）、投与の約７２時間後に低い血糖（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％低い）、および／または投与の約１２０時間後に低い血糖（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％低い）をもたらし；全身体重減少を誘導し、および／または肝臓重量減少を誘導し；低いＣｍａｘ（任意選択的に、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低い、好ましくは、少なくとも約５０％低い）、ほぼ等しいかまたは高いＴｍａｘ（任意選択的に、約１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低い、好ましくは、少なくとも約１００％高いＴｍａｘ）、同様のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）（任意選択的に、少なくとも約５０、６０、７０、８０、９０、９５、１００％のいずれか、好ましくは、少なくともその約８０～９０％、例えば、その約８５～９３％）、ほぼ等しいかまたは高いＴ１／２（ｈｒ）（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００％のいずれか、好ましくは、少なくとも約５０または７５％、または約５０～７５％低い）をもたらし；延長したＭＲＴ（ｈｒ）（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％のいずれか、好ましくは、少なくとも約２５％延長）をもたらし；持続性ＰＫ／ＰＤプロファイルをもたらし；ほぼ等しいかまたは高い糖調節作用をもたらし；高い全身体重減少（任意選択的に、約２倍の全身体重減少）をもたらし；低い体脂肪量（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％低いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１００％低い）をもたらし；製剤の投与の約１４日後までに高い体重の減少（任意選択的に、少なくとも１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％高いのいずれか、好ましくは、少なくとも約１５％高い）をもたらし；製剤の投与の約２０～２８日後までに高い体重の減少（任意選択的に、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００％高いのいずれか、好ましくは、少なくとも約２５％高い）をもたらし；および／もしくは哺乳動物の体重を痩せ型の正常な哺乳動物の正常な範囲内に戻すのに十分な、肥満哺乳動物における体重減少をもたらし；ならびに／または、本方法が、ＮＡＳＨを処置するためのものであるとき、増加した全身体重低減、肝臓重量減少、改善されたＮＡＳスコア、改善された肝胆道の脂肪肝、改善されたバルーン化、改善されたｃｏｌ１Ａ１染色、改善されたＡＬＴ、改善された肝ＴＧ／ＴＣ、および改善された血漿トリグリセリド（ＴＧ）／総コレステロール（ＴＣ）をもたらす。
【0060】
一部の実施形態では、本開示は、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中にアゴニストペプチド産物（例えば、配列番号１）および約０．０２５～０．０７５％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．２～０．５％（ｗ／ｗ）アルギニン、約３～６％（ｗ／ｗ）マンニトールを含む医薬用量製剤を提供する。好ましい実施形態では、医薬用量製剤は、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中に配列番号１、約０．０５０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．３４８％（ｗ／ｗ）アルギニン、および約４．２６０％（ｗ／ｗ）マンニトールを含むＡＬＴ－８０１である。
【0061】
一部の実施形態では、本開示は、約０．１５ｍｇ／ｋｇ／用量未満、任意選択的に、約０．０３～０．１０ｍｇ／ｋｇ／用量で、アゴニストペプチド産物（例えば、配列番号１）を哺乳動物に投与するよう構成された医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、０．１５ｍｇ／ｋｇ／用量未満のアゴニストペプチド産物を哺乳動物に投与するよう構成されている。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、０．０３～０．１５ｍｇ／ｋｇ／用量を投与するよう構成されている。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、１週間当たり約０．５～約１０ｍｇ；任意選択的に、１週間当たり約１～約７ｍｇ；または任意選択的に、１週間当たり約１～５ｍｇ投与するよう構成することができる。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、１週間に１回、最大６週間、哺乳動物に投与するように構成されている。一部の実施形態では、本開示は、治療用量に達するための時間が、約４週間以下であるように構成された医薬用量製剤を提供する。一部の実施形態では、治療用量は、Ｃｍａｘ約４００～約１３００ｎｇ／ｍｌ；Ｔｍａｘ約１０～約３６時間；および／またはＡＵＣ０－４８約１５，０００～４５，０００ｈ＊ｎｇ／ｍＬを示す。
【0062】
一部の実施形態では、本開示は、ヒトの血糖を低下させ、および／または体重を低下させる方法であって、ヒトに、配列番号１を含む医薬用量製剤を投与することを含み、ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して１つまたは複数の有害事象の発生が減少し、有害事象が、哺乳動物への投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択される、方法を提供する。一部の実施形態では、方法は、ａ）ＧＬＰ－１ＲおよびＧＣＧＲに対して不均衡な親和性を有するアゴニストと比較して、１つまたは複数の有害事象の発生率を低減し、有害事象は、哺乳動物への投与の際の、悪心、嘔吐、下痢、腹痛および便秘から選択され；ｂ）ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドが投与される方法と比較して、投与の約４８もしくは９６時間後に約５０％低い血糖、投与の約７２時間後に約１００％低い血糖、および／または投与の約１２０時間後に低い血糖をもたらし；ｃ）全身体重減少を誘導し、および／または肝臓重量減少を誘導し；ｄ）ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドが投与される方法と比較して、低いＣｍａｘ、または任意選択的に約５０％低いＣｍａｘをもたらし；ほぼ等しいかもしくは高いＴｍａｘ、または任意選択的に約１００％高いＴｍａｘをもたらし；同様のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）、または任意選択的に約８５～９３％のＡＵＣ（０－ｉｎｆ）をもたらし；ほぼ等しいかもしくはそれ未満のＴ１／２（ｈｒ）、または任意選択的に約５０～７５％のＴ１／２（ｈｒ）をもたらし；延長したＭＲＴ（ｈｒ）、または任意選択的に少なくとも約２５％長いＭＲＴ（ｈｒ）をもたらし；持続性ＰＫ／ＰＤプロファイルをもたらし、等しいかまたは高い糖調節作用を示し；高い全身体重減少、または任意選択的に約２倍の全身体重減少をもたらし；低い体脂肪量、任意選択的に、約１００％低い体脂肪量をもたらし；ならびに／または方法がＮＡＳＨを処置する場合、増加した全身体重低減、肝臓重量減少、改善されたＮＡＳスコア、改善された肝胆道の脂肪肝、改善されたバルーン化、改善されたｃｏｌ１Ａ１染色、改善されたＡＬＴ、改善された肝ＴＧ／ＴＣ、および改善された血漿ＴＧ／ＴＣをもたらし；ｅ）ほぼ等モルの用量で投与されるセマグルチドと比較して、製剤の投与の約１４日後に高い体重の減少、任意選択的に、約１５％高い減少をもたらし；および／または製剤の投与の約２０～２８日後までに高い体重の減少、任意選択的に、約２５％高い減少をもたらし；および／またはｆ）哺乳動物の体重を痩せ型の正常な哺乳動物の正常な体重範囲内に戻すのに十分な、肥満哺乳動物における体重減少をもたらす。好ましい実施形態では、方法は、体重減少を誘導するためのものである。
【0063】
一部の実施形態では、本明細書に開示される方法は、処置開始フェーズを含まない。言い換えると、第１の投与される用量は、重度の胃腸の副作用を回避するために量を決めることを必要としない治療である。例えば、一部の実施形態では、方法は、配列番号１などの、本開示のペプチドの１つまたは複数の第１の用量（処置開始フェーズ）、続いて、１つまたは複数のより大きい第２の用量のペプチドを投与することを含むことができ、第１および第２の用量のそれぞれが、１週間以上投与される。一部の実施形態では、第１の用量（複数可）および第２の用量（複数可）に、第２の用量（複数可）より高くてもよい、１つまたは複数の第３の用量が続くことができる。第１の用量、第２の用量、および第３の用量からの切替えは、毎週基準でなされ得る。例えば、第１の用量が、１週間以上後、より低い血糖および／または体重減少を誘導しないことが明らかになった場合、次いで、より高い第２の用量が、１週間以上投与され、続いて、第２の用量（複数可）の作用を解析することができる。有益な効果（例えば、血糖および／または体重の低下）が観察されない場合、第２の用量は、投与されることを継続することができる。有益な効果が観察されない場合、第３の用量が、１週間以上投与され、続いて、有益な効果が決定される。各用量で有害事象が観察されなければ、投与および分析のこのサイクルを必要に応じて繰り返すことができる。一部の実施形態では、血糖管理（例えば、血糖の減少）が、１つまたは複数の第１の用量の投与の約４週間後達成されなかったので、続く１つまたは複数のより高い第２の用量のペプチドが、投与され得る。一部の実施形態では、１つまたは複数の第１の用量は、治療効果（例えば、血糖の減少および／または体重減少）をもたらす意図なしで投与することができる。しかしながら、一部の実施形態では、方法は、処置開始フェーズを含まないで実施することができる。
【0064】
一部の実施形態では、本方法は、ヒトにおける血糖管理および／または体重減少のための第一線の適応症とすることができ、これは、ヒトにおける血糖管理および／または体重減少の誘導を目的として患者に投与される最初かつ唯一の活性剤であることを意味する。一部の実施形態では、本明細書に開示される方法は、食事および／または運動の補助療法を含むことができる。そのような実施形態では、ヒトは、医薬用量製剤を投与され得、医薬用量製剤の有益な効果を強化することができる食事および／または運動に関する指示とともに提供することができる。一部の実施形態では、医薬用量製剤が投与されるヒトは、２型糖尿病を有する。一部の実施形態では、ヒトは、２型糖尿病の有無にかかわらず、確立された心血管疾患を示し得る。
【0065】
一部の実施形態では、医薬用量製剤は、ほぼ毎週投与される。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、約２週間～約８２週間、またはそれ以上、ほぼ毎週ヒトに投与される。一部の実施形態では、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、約４週間～約８週間、任意選択的に、約６週間の毎週の投与としてヒトに投与される医薬用量製剤は、ヒトへの投与の約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間、または約７週間後に高い全身体重減少をもたらす。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、約１、８、１５、２２、２９、および３６日目に投与される。一部の実施形態では、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、ヒトへの単回用量の投与を含み得る方法は、投与の約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日または約７日後に低い血糖をもたらす。一部の実施形態では、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、ヒトへの約４週間～約８週間、任意選択的に約６週間の毎週の投与を含み得る方法は、投与の約１週間、約２週間、約３週間、約４週間、約５週間、約６週間または約７週間後に、高い全身体重減少をもたらす。一部の実施形態では、ほぼ等モルの投薬量のセマグルチドの投与と比較して、ヒトへの単回用量の投与を含み得る方法は、投与の約１日、約２日、約３日、約４日、約５日、約６日または約７日後に、低いＣｍａｘを示す。一部の実施形態では、方法は、医薬用量製剤を、成人のヒトに、約０．５ｍｇ／用量、約１．０ｍｇ／用量、約１．５ｍｇ／用量、約２．０ｍｇ／用量、約２．５ｍｇ／用量、約３．０ｍｇ／用量、約３．５ｍｇ／用量、約４．０ｍｇ／用量、約４．５ｍｇ／用量、約５．０ｍｇ／用量、または約５．５ｍｇ／用量で投与することを含むことができる。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、約１週間に１回または２週間に１回、任意選択的に、少なくとも１ヶ月間投与することができ、任意選択的に、ここで、それぞれの用量は、ほぼ同じ量のアゴニストペプチド産物を含む。一部の実施形態では、医薬用量製剤は、皮下投与することができる。一部の実施形態では、用量の１つまたは複数が、第一の経路（例えば、皮下）を介して投与され、続いて、異なる経路（例えば、経口）によって投与され得る。一部の実施形態では、治療用量に達するための時間は、約４週間以下である。一部の実施形態では、医薬用量製剤の投与は、Ｃｍａｘ約４００～約１３００ｎｇ／ｍｌ；Ｔｍａｘ約１０～約３６時間；および／またはＡＵＣ０－４８約１５，０００～４５，０００ｈ＊ｎｇ／ｍＬを示す。好ましい実施形態では、ヒトでの体重減少は、少なくとも５％、少なくとも１０％；または約１％～約２０％；もしくは約５％～約１０％（ｗ／ｗ）である。一部の実施形態では、１週間に１回、少なくとも６週間投与される（好ましくは、皮下）、約１．８ｍｇの配列番号１を含む医薬用量製剤の投与は、製剤が投与された集団よりも約３～５％を超える全身体重減少、好ましくは、約５％超、および／または約６％、好ましくは、約６．３％の、プラセボからの正味の変化をもたらす。一部の実施形態では、１週間に１回、少なくとも６週間投与される（好ましくは、皮下）、約１．２ｍｇの配列番号１を含む医薬用量製剤の投与は、製剤が投与される集団にわたり約２％の全身体重減少、好ましくは、約１．８％の全身体重減少（「平均体重減少」）、および／または約３％、好ましくは、約２．７％の、プラセボからの正味の変化をもたらす。本開示はまた、好ましい実施形態でもある、表７（体重減少）および／または表８（有害事象）に示すさらなる結果を提供する。一部の実施形態では、哺乳動物へのその投与は、痩せ型の正常なヒトの正常な範囲にヒトを戻すために十分な、肥満哺乳動物における体重減少をもたらす。一部の実施形態では、医薬剤形は、ポリソルベート２０、アルギニン、またはマンニトールのうちの１つまたは複数を含む水性製剤である。
【0066】
本開示の他の態様はまた企図され、それは、当業者によって理解されるであろう。
【0067】
本明細書において使用されるすべての技術用語および科学用語は、別段定義されない限り、またはその使用により他に明確に示されない限り、本出願が属する技術分野における当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書および添付の特許請求の範囲で使用される場合、「ａ」または「ａｎ」という語は、１つまたは複数を意味する。本明細書で使用される場合、「別の」という語は２つ目以上を意味する。頭字語「ａｋａ」は、別名（もまた知られている）を意味する。本明細書で使用される「例示的」という用語は、「例、実例または説明として役立つ」という意味である。本明細書において「例示的」として特徴付けられる任意の実施形態または特徴は、必ずしも、他の実施形態または特徴よりも好ましいまたは有利であると解釈されるものではない。一部の実施形態では、「約」または「およそ」という用語は、規定値の±１０％以内または±５％以内を意味する。用語「約」または「およそ」が、２つ以上の数値の系列または２つ以上の数値範囲の系列の最初の数値の前にある場合は常に、用語「約」または「およそ」は、その数値の系列またはその数値範囲の系列の各数値に適用される。本明細書では、ある特定の値について、および／または別の特定の値について、範囲を表すことがある。そのような範囲が表現される場合、別の態様では、ある特定の値から、および／または他の特定の値までが含まれる。同様に、値が近似値として表現される場合、先行詞約またはおよその使用により、特定の値が別の態様を形成することが理解されるであろう。さらに、各範囲の終点は、他の終点との関係においても、他の終点から独立しても有意であることが理解されるだろう。範囲（例えば、９０～１００％）は、範囲それ自体だけでなく、あたかも各値が個別に記載されているかのように、範囲内の各独立した値も含むことを意味する。任意または任意選択的には、その後に記述される事象または状況が発生する可能性がある、または発生しない可能性があることを意味し、その記述には事象または状況が発生する例と発生しない例が含まれることを意味する。本明細書において言及されているすべての刊行物、特許、および特許出願は、個々の刊行物、特許、または特許出願が参照により組み込まれることが具体的かつ個別に示されている場合と同じ程度に、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。
【0068】
ある特定の実施形態は、以下の実施例においてさらに説明される。これらの実施形態は、例としてのみ提供され、特許請求の範囲をいかなる形でも限定することを意図するものではない。
【実施例】
【0069】
実施例１
ペプチド合成
典型的なＮ－アルファ－Ｆｍｏｃベースのペプチド合成に首尾よく使うことができる多くの標準的な保護基およびカップリング剤が存在する。典型的な例は、米国特許第９，８５６，３０６Ｂ２号に挙げられ、それはその全体が参照により本開示に組み込まれる。さらなる例は、多くのレビューやプロトコール、例えば、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍによって公開され、定期的にオンラインで更新されているもの、およびより専門的なレビュー（例えば、Ｂｅｈｒｅｎｄｔ， Ｒ．ら（２０１５） Ｊ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉ ２２： ４～２７およびその中の参考文献）に見出すことができる。本明細書では、多くのペプチド合成受託機関で使用されている典型的な市販プロトコールを合成に使用した。より具体的なプロトコールを以下に示す。
ペプチド合成
典型的なＮ－アルファ－Ｆｍｏｃベースのペプチド合成に首尾よく使うことができる多くの標準的な保護基およびカップリング剤が存在する。典型的な例は、米国特許第９，８５６，３０６Ｂ２号に挙げられ、それはその全体が参照により本開示に組み込まれる。さらなる例は、多くのレビューやプロトコール、例えば、Ｎｏｖａｂｉｏｃｈｅｍによって公開され、定期的にオンラインで更新されているもの、およびより専門的なレビュー（例えば、Ｂｅｈｒｅｎｄｔ， Ｒ．ら（２０１５） Ｊ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｃｉ ２２： ４～２７およびその中の参考文献）に見出すことができる。本明細書では、多くのペプチド合成受託機関で使用されている典型的な市販プロトコールを合成に使用した。より具体的なプロトコールを以下に示す。
【0070】
Ｃ末端アミドアナログ－配列番号１の調製
Ｂｏｃ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－Ａｉｂ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｇｌｕ＊－Ｌｙｓ（ｉｖＤＤＥ）－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ＊－Ｇｌｕ（ｔＢｕ）Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｒｉｎｋアミド樹脂（配列番号１）の試料を、標準的なカップリングプロトコール、例えば、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）／ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＢＴ）カップリング、続いてピペラジンを用いた標準的な脱保護、次の工程のカップリングなどを使用して、Ｎ－アルファ－Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を順次添加することによって調製した（Ｇｌｕ＊およびＬｙｓ＊は、側鎖環状ラクタム結合を示し、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４／１，３－ジメチルバルビツール酸触媒を使用したアリルベースの側鎖保護の脱保護、ＮＭＰ中のＤＩＰＥＡおよび０．５％ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム三水和物およびＤＩＰＥＡを用いた洗浄、次いでＤＩＣ／Ｏｘｙｍａを用いたカップリングにより達成した）。ＤＭＦ中２％以上のヒドラジン水和物とのインキュベーションによる残基１７のＬｙｓ－Ｎ－イプシロン位のｉｖＤＤＥ基の脱保護、続いてＤＭＦ／ＣＨ２Ｃｌ２による洗浄、ＤＩＣ／ＨＢｔまたは他のカップリング剤の使用によるＤＭＦ／ＣＨ２Ｃｌ２中のｔｅｒｔ－ブチル１８－（［ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル］オキシ）オクタデカノエートによりＬｙｓ側鎖をアシル化した。カップリングの完了をニンヒドリンで確認し、生成物をＣＨ２Ｃｌ２で広範囲に洗浄した。
Ｂｏｃ－Ｈｉｓ（Ｔｒｔ）－Ａｉｂ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｇｌｙ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｐｈｅ－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｓｅｒ（ｔＢｕ）－Ｌｙｓ（Ｂｏｃ）－Ｔｙｒ（ｔＢｕ）－Ｌｅｕ－Ａｓｐ（ｔＢｕ）－Ｇｌｕ＊－Ｌｙｓ（ｉｖＤＤＥ）－Ａｌａ－Ａｌａ－Ｌｙｓ＊－Ｇｌｕ（ｔＢｕ）Ｐｈｅ－Ｉｌｅ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｒｐ（Ｂｏｃ）－Ｌｅｕ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ（Ｔｒｔ）－Ｔｈｒ（ｔＢｕ）－Ｒｉｎｋアミド樹脂（配列番号１）の試料を、標準的なカップリングプロトコール、例えば、ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＣ）／ヒドロキシベンゾトリアゾール（ＨＢＴ）カップリング、続いてピペラジンを用いた標準的な脱保護、次の工程のカップリングなどを使用して、Ｎ－アルファ－Ｆｍｏｃ保護アミノ酸を順次添加することによって調製した（Ｇｌｕ＊およびＬｙｓ＊は、側鎖環状ラクタム結合を示し、Ｐｄ（ＰＰｈ３）４／１，３－ジメチルバルビツール酸触媒を使用したアリルベースの側鎖保護の脱保護、ＮＭＰ中のＤＩＰＥＡおよび０．５％ジエチルジチオカルバミン酸ナトリウム三水和物およびＤＩＰＥＡを用いた洗浄、次いでＤＩＣ／Ｏｘｙｍａを用いたカップリングにより達成した）。ＤＭＦ中２％以上のヒドラジン水和物とのインキュベーションによる残基１７のＬｙｓ－Ｎ－イプシロン位のｉｖＤＤＥ基の脱保護、続いてＤＭＦ／ＣＨ２Ｃｌ２による洗浄、ＤＩＣ／ＨＢｔまたは他のカップリング剤の使用によるＤＭＦ／ＣＨ２Ｃｌ２中のｔｅｒｔ－ブチル１８－（［ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル］オキシ）オクタデカノエートによりＬｙｓ側鎖をアシル化した。カップリングの完了をニンヒドリンで確認し、生成物をＣＨ２Ｃｌ２で広範囲に洗浄した。
【0071】
生成樹脂は、切断カクテル（９４％ＴＦＡ：２％ＥＤＴ；２％Ｈ２Ｏ；２％ＴＩＳ）を用いて室温で２４０分間処理することにより、最終的な脱保護および樹脂からの切断に供される。混合物をＥｔ２Ｏを用いて処理し、生成物を沈殿させ、Ｅｔ２Ｏで広範囲に洗浄して、真空中で乾燥後、粗表題ペプチド生成物を得た。
【0072】
精製を、逆相（Ｃ１８）ｈｐｌｃで一括して行う。粗ペプチドを４．１×２５ｃｍのｈｐｌｃカラムに流速約１５ｍＬ／分で添加し（トリフルオロ酢酸０．１％水溶液中のＣＨ３ＣＮ有機修飾剤、緩衝液Ａ；０．１％ＴＦＡを含むＣＨ３ＣＮ、緩衝液Ｂ）、４０～７０％緩衝液Ｂの勾配を用いて溶出した。生成物画分を凍結乾燥し、分析的ｈｐｌｃ（１０．５分；０．１％ＴＦＡ中４０～７０％ＣＨ３ＣＮ）／質量分析（Ｍ＋１ピーク＝１９３７．４４；実測分子量３８７２．８８）により純度＞９４％の標題生成物ペプチド（配列番号１）を得る。同様の方法で、実施例に示す通り調製したグルクロン酸またはメリビウロン酸を使用して、本発明の他のアナログを調製した。
【0073】
分析データを表Ａに示す。
【0074】
【表5】
【0075】
化合物をＨＰＬＣ／ＭＳで分析して、純度データおよび同一性データ（分子イオン検出）を得る。ＨＰＬＣ技術は、挙げられた粒子サイズの、挙げられた材料で充填された分析カラムを利用し、データを、ｋ’値（ｋ’＝（Ｔｒ－Ｔ０）／Ｔ０）としてここに報告し、それは、システム構成およびデッドボリュームにはほとんど依存しないが、勾配および充填材料には依存すると予想する。すべての化合物は、純度約９５％であると報告した。
【0076】
表題化合物の対応する１－メチルおよび１－オクチルアナログを、同様の方法で調製するが、試薬１’－メチルβ－Ｄ－グルクロン酸および１’－オクチルβ－Ｄ－グルクロン酸（Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ）を使用する。対応する１－デシル、１－ドデシル、１－テトラデシル、１－ヘキサデシル、１－オクタデシルおよび１－エイコシルならびにさらなるアナログを、対応する単糖および二糖ウロン酸を使用して、上記の通り調製する。あるいは、１－アルキルグルクロニル、または他のウロンアシル化アナログを、脱保護または部分的に脱保護したペプチドの最初の精製、続いて所望のウロン酸試薬によるアシル化によって調製することもできる。あるいは、１－アルキルグルクロニル、または他のウロンアシル化アナログを、組換え調製したペプチドの最初の精製、続いて所望のウロン酸試薬による側鎖アミノ官能基の選択的アシル化によって調製することができる。
【0077】
Ａ．１－アルキルβ－ｄ－グルクロン酸。一般的な酸化方法。
アセトニトリル２０ｍＬおよび脱イオン水２０ｍＬ中の１－ドデシルβ－ｄ－グルコピラノシド［２．０ｇ、５．７４ｍｍｏｌ］の溶液に、（ジアセトキシヨード）ベンゼン［４．４ｇ、１３．７ｍｍｏｌ］およびＴＥＭＰＯ［０．１８ｇ、１．１５ｍｍｏｌ］を加える。得られた混合物を、反応完了まで（２０時間まで）室温で撹拌した。反応混合物を水で希釈し、凍結乾燥させて、ペプチドＬｙｓ側鎖へのカップリングに直接使用するのに十分な純度の白色粉末として粗生成物を得た（１．５２ｇ、７３％）。同様の方法で、本明細書に記載した他のペプチド産物をアシル化するために使用する他の１－アルキルβ－ｄ－グルクロン酸またはメリビウロン酸を調製した。対応する１－置換グルコシドまたはメリボシドを、これらの実施例の手法を用いて調製したが、実施例の合成手法から所望の鎖長を得るために適切な鎖長のジカルボン酸出発物質を、例えば、オクタデカン二酸の代わりにヘキサデカン二酸、ドデカン二酸などに置き換えた。
アセトニトリル２０ｍＬおよび脱イオン水２０ｍＬ中の１－ドデシルβ－ｄ－グルコピラノシド［２．０ｇ、５．７４ｍｍｏｌ］の溶液に、（ジアセトキシヨード）ベンゼン［４．４ｇ、１３．７ｍｍｏｌ］およびＴＥＭＰＯ［０．１８ｇ、１．１５ｍｍｏｌ］を加える。得られた混合物を、反応完了まで（２０時間まで）室温で撹拌した。反応混合物を水で希釈し、凍結乾燥させて、ペプチドＬｙｓ側鎖へのカップリングに直接使用するのに十分な純度の白色粉末として粗生成物を得た（１．５２ｇ、７３％）。同様の方法で、本明細書に記載した他のペプチド産物をアシル化するために使用する他の１－アルキルβ－ｄ－グルクロン酸またはメリビウロン酸を調製した。対応する１－置換グルコシドまたはメリボシドを、これらの実施例の手法を用いて調製したが、実施例の合成手法から所望の鎖長を得るために適切な鎖長のジカルボン酸出発物質を、例えば、オクタデカン二酸の代わりにヘキサデカン二酸、ドデカン二酸などに置き換えた。
【0078】
Ｂ．１８－（ｔｅｒｔブトキシ）－１８－オキソオクタデカン酸
トルエン（５００ｍｌ）中のオクタデカン二酸（４０ｇ、１２７ｍｍｏｌ）の懸濁液を窒素下、９５℃で加熱した。得られた溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジ－ｔｅｒｔ－ブチルアセタール（９８ｇ、４３４ｍｍｏｌ）を３～４時間かけて滴下添加した。反応液を同じ温度で一晩撹拌し、真空中で濃縮乾固し、高真空下に一晩置いた。得られた固体をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）に懸濁し、加熱および超音波処理し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄しながら、ＲＴで濾過した。濾液（２）を濃縮して、生成物を固体として得て（４５ｇ、８６％）、さらに精製することなく使用した。
トルエン（５００ｍｌ）中のオクタデカン二酸（４０ｇ、１２７ｍｍｏｌ）の懸濁液を窒素下、９５℃で加熱した。得られた溶液に、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミドジ－ｔｅｒｔ－ブチルアセタール（９８ｇ、４３４ｍｍｏｌ）を３～４時間かけて滴下添加した。反応液を同じ温度で一晩撹拌し、真空中で濃縮乾固し、高真空下に一晩置いた。得られた固体をＣＨ２Ｃｌ２（２００ｍｌ）に懸濁し、加熱および超音波処理し、ＣＨ２Ｃｌ２で洗浄しながら、ＲＴで濾過した。濾液（２）を濃縮して、生成物を固体として得て（４５ｇ、８６％）、さらに精製することなく使用した。
【0079】
Ｃ．ｔｅｒｔ－ブチル１８－ヒドロキシオクタデカノエート
ＴＨＦ中の１８－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－１８－オキソオクタデカン酸（４５ｇ、１２１ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下、氷浴上で冷却し、ボランジメチルスルフィド錯体（１６ｍｌ、１５８ｍｍｏｌ）で滴下処理した。活発なガス発生が、最初の数ミリリットルの添加で生じた。添加後、混合物をゆっくりとＲＴまで温め、一晩撹拌した。反応液を氷浴上で冷却し、飽和炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を真空中で濃縮し、高真空下に一晩置いた。残渣を温トルエン（２００ｍｌ）に溶解し、室温で数時間置いた。沈殿したジオールをセライトを通した濾過により除去し、ケーキをトルエンで洗浄した。トルエン溶液を、直接シリカゲルカラムに適用し、１０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで２０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出し、濃縮して生成物（２４ｇ、５１％）を静置すると固まる油として得た。1H NMR (500 MHz, d4-MeOH): δ = 3.64 (m, 2H), 2.21 (t, 2H, J = 9), 1.44 (s, 9H) 1.50-1.62 (m, 4H), 1.20-1.40 (m, 27H)
ＴＨＦ中の１８－（ｔｅｒｔ－ブトキシ）－１８－オキソオクタデカン酸（４５ｇ、１２１ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素下、氷浴上で冷却し、ボランジメチルスルフィド錯体（１６ｍｌ、１５８ｍｍｏｌ）で滴下処理した。活発なガス発生が、最初の数ミリリットルの添加で生じた。添加後、混合物をゆっくりとＲＴまで温め、一晩撹拌した。反応液を氷浴上で冷却し、飽和炭酸ナトリウム水溶液でクエンチし、酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を真空中で濃縮し、高真空下に一晩置いた。残渣を温トルエン（２００ｍｌ）に溶解し、室温で数時間置いた。沈殿したジオールをセライトを通した濾過により除去し、ケーキをトルエンで洗浄した。トルエン溶液を、直接シリカゲルカラムに適用し、１０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで２０％酢酸エチル／ヘキサン、次いで３０％酢酸エチル／ヘキサンで溶出し、濃縮して生成物（２４ｇ、５１％）を静置すると固まる油として得た。1H NMR (500 MHz, d4-MeOH): δ = 3.64 (m, 2H), 2.21 (t, 2H, J = 9), 1.44 (s, 9H) 1.50-1.62 (m, 4H), 1.20-1.40 (m, 27H)
【0080】
Ｄ．ｔｅｒｔ－ブチル１８－（［１－ベータ－Ｄ－グルコス－１－イル］オキシ）オクタデカノエート
ｔｅｒｔ－ブチル１８－ヒドロキシオクタデカノエート（４６ｇ、１２９ｍｍｏｌ）をトルエン（４００ｍｌ）に溶解し、真空中で濃縮しておよそ２５０ｍｌとし、窒素下で室温に戻した。この溶液にＨｇＯ（黄色）（２２．３ｇ、１０３ｍｍｏｌ）、ＨｇＢｒ２（３７ｇ、１０３ｍｍｏｌ）およびアセトブロムグルコースを激しく撹拌しながら加えた。アルコールが消費されるまで、撹拌を一晩続け、混合物をセライトを通して濾過した。濾液を銅（ＩＩ）トリフラート（１ｇ）で処理し、オルトエステル（ＴＬＣ上の生成物上のスポット）が分解するまで１時間撹拌した。反応液を次いで水で洗浄し、有機層を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５００ｍｌ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（メタノール中の５．４Ｍ）で０．５ｍｌずつ処理して、ｐＨを９にした（ｐＨ紙に直接スポット）。０．５時間毎にｐＨをチェックし、必要に応じて、ナトリウムメトキシドをさらに加えて、ｐＨを９に維持した。反応は４時間以内に完了した。酢酸を滴下添加して、ｐＨを７にし、混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルに添加し、５％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２、次いで１０％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、生成物を白色の固体として得た（５５ｇ、８２％）。1H NMR (400 MHz, d4-MeOH): δ = 4.30 (d, 1H, J = 7.6), 3.84 (m, 1H), 3.77 (d, 1H, J = 9.6), 3.45-3.60 (m, 2H), 3.36 (t, 1H, J = 9.2), 3.21 (t, 1H, J = 8.4), 2.20 (t, 2H, J = 7.2), 1.50-1.67 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.43-1.33 (m, 2H), 1.28 (br s, 24H)
ｔｅｒｔ－ブチル１８－ヒドロキシオクタデカノエート（４６ｇ、１２９ｍｍｏｌ）をトルエン（４００ｍｌ）に溶解し、真空中で濃縮しておよそ２５０ｍｌとし、窒素下で室温に戻した。この溶液にＨｇＯ（黄色）（２２．３ｇ、１０３ｍｍｏｌ）、ＨｇＢｒ２（３７ｇ、１０３ｍｍｏｌ）およびアセトブロムグルコースを激しく撹拌しながら加えた。アルコールが消費されるまで、撹拌を一晩続け、混合物をセライトを通して濾過した。濾液を銅（ＩＩ）トリフラート（１ｇ）で処理し、オルトエステル（ＴＬＣ上の生成物上のスポット）が分解するまで１時間撹拌した。反応液を次いで水で洗浄し、有機層を真空中で濃縮した。残渣をメタノール（５００ｍｌ）に溶解し、ナトリウムメトキシド（メタノール中の５．４Ｍ）で０．５ｍｌずつ処理して、ｐＨを９にした（ｐＨ紙に直接スポット）。０．５時間毎にｐＨをチェックし、必要に応じて、ナトリウムメトキシドをさらに加えて、ｐＨを９に維持した。反応は４時間以内に完了した。酢酸を滴下添加して、ｐＨを７にし、混合物を真空中で濃縮した。残渣をシリカゲルに添加し、５％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２、次いで１０％メタノール／ＣＨ２Ｃｌ２で溶出するシリカゲルクロマトグラフィーで精製して、生成物を白色の固体として得た（５５ｇ、８２％）。1H NMR (400 MHz, d4-MeOH): δ = 4.30 (d, 1H, J = 7.6), 3.84 (m, 1H), 3.77 (d, 1H, J = 9.6), 3.45-3.60 (m, 2H), 3.36 (t, 1H, J = 9.2), 3.21 (t, 1H, J = 8.4), 2.20 (t, 2H, J = 7.2), 1.50-1.67 (m, 4H), 1.43 (s, 9H), 1.43-1.33 (m, 2H), 1.28 (br s, 24H)
【0081】
Ｅ．ｔｅｒｔ－ブチル１８－（［ベータ－Ｄ－グルクロン－１－イル］オキシ）オクタデカノエート
ｔｅｒｔ－ブチル１８－（［１－ベータ－Ｄ－グルコス－１－イル］オキシ）オクタデカノエート（５０ｇ、９６ｍｍｏｌ）を、機械的に撹拌しながら２０００ｍｌの３つ口フラスコ中でジオキサン（８００ｍｌ）に溶解し、１０℃に冷却した。溶液に、２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）（１５０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）およびＫＢｒ（１．１４ｇ、９．６ｍｍｏｌ）を加えた。飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（３００ｍｌ）および１３％ＮａＯＣｌ溶液（１２０ｍｌ）を入れた滴下ロートをフラスコに固定した。炭酸塩溶液を迅速に滴下し、ＮａＯＣｌはゆっくりと滴下添加した（約１滴／秒）。炭酸塩１００ｍｌを加えた後、ｐＨをチェックし、必要に応じてさらに加えて、ｐＨ１０程度を維持した。温度は、終始１０℃～１５℃に維持した。３時間後、出発物質が残っていたので、さらにＮａＯＣｌ（１０ｍｌ）を迅速に加えた。０．５時間後、反応をメタノール（１０ｍｌ）でクエンチした。混合物を４０００ｍｌの三角フラスコに注ぎ、氷浴に浸し、６Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ３に調整した。混合物を、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび蒸留水で２回洗浄し、最後の洗浄で層を分離させた。有機層を真空中で濃縮して、生成物を白色の泡沫として得た（３８ｇ、７４％）。
ｔｅｒｔ－ブチル１８－（［１－ベータ－Ｄ－グルコス－１－イル］オキシ）オクタデカノエート（５０ｇ、９６ｍｍｏｌ）を、機械的に撹拌しながら２０００ｍｌの３つ口フラスコ中でジオキサン（８００ｍｌ）に溶解し、１０℃に冷却した。溶液に、２，２，６，６－テトラメチル－１－ピペリジニルオキシ（ＴＥＭＰＯ）（１５０ｍｇ、０．９６ｍｍｏｌ）およびＫＢｒ（１．１４ｇ、９．６ｍｍｏｌ）を加えた。飽和Ｎａ２ＣＯ３溶液（３００ｍｌ）および１３％ＮａＯＣｌ溶液（１２０ｍｌ）を入れた滴下ロートをフラスコに固定した。炭酸塩溶液を迅速に滴下し、ＮａＯＣｌはゆっくりと滴下添加した（約１滴／秒）。炭酸塩１００ｍｌを加えた後、ｐＨをチェックし、必要に応じてさらに加えて、ｐＨ１０程度を維持した。温度は、終始１０℃～１５℃に維持した。３時間後、出発物質が残っていたので、さらにＮａＯＣｌ（１０ｍｌ）を迅速に加えた。０．５時間後、反応をメタノール（１０ｍｌ）でクエンチした。混合物を４０００ｍｌの三角フラスコに注ぎ、氷浴に浸し、６Ｎ ＨＣｌを用いてｐＨ３に調整した。混合物を、酢酸エチルで希釈し、１Ｎ ＨＣｌおよび蒸留水で２回洗浄し、最後の洗浄で層を分離させた。有機層を真空中で濃縮して、生成物を白色の泡沫として得た（３８ｇ、７４％）。
【0082】
アノマーＣＨに対する２，３，４，５－テトラクロロニトロベンゼン（ＴＣＮＢ）内部標準を使用した定量的１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ、ｄ４－ＭｅＯＨ）により、予想重量の９４．８％を得る。ＴＬＣによる純度＞９５％（２０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ／２滴ＨＯＡｃ、２０％Ｈ２ＳＯ４／ＥｔＯＨ＋加熱を使用した染色）1H NMR (500 MHz, d4-MeOH): δ = 4.30 (d, 1H, J = 9.5), 3.85 (m, 1H), 3.77 (d, 1H, J = 7.5), 3.48-3.56 (m, 2H), 3.37 (t, 1H, J = 11.5), 3.21 (t, 1H, J = 9.5), 2.20 (t, 2H, J = 9.5), 1.52-1.66 (m, 4H), 1.44 (s, 9H), 1.34-1.42 (br, 2H), 1.28 (s, 25H).
【0083】
実施例２
デュアルアアゴニストペプチド － ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ
細胞アッセイを、ｃＡＭＰ刺激またはアレスチン活性化の読み取り値を使用した標準的な細胞アッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ、ＬｅａｄＨｕｎｔｅｒアッセイ）を使用して行った。化合物を、約１ｍｇの量に正確に秤量し、希釈およびアッセイのためＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（Ｆｒｅｍｏｎｔ、ＣＡ）に発送した。使用したアッセイは、細胞アッセイにおけるグルカゴン（ヒト、ＣＨＯ細胞にクローン化）およびＧＬＰ－１（ヒト、ＣＨＯ細胞にクローン化）受容体に対するものであった。アッセイを、０．１％卵白アルブミン存在下で行った。歴史的に、このようなアッセイは０．１％ＢＳＡの存在下で行われてきたが、血清アルブミンと非常に強固に結合する（＞９９％）これらの化合物については、結果がゆがめられ、化合物の作用がかなり弱くなる可能性がある。０．１％卵白アルブミンの使用により、この問題を回避することができる。卵白アルブミンを使用したときに見られる改善は、ペプチドに対する血清アルブミン結合の相対的な強固さの指標として見ることができる。
デュアルアアゴニストペプチド － ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイ
細胞アッセイを、ｃＡＭＰ刺激またはアレスチン活性化の読み取り値を使用した標準的な細胞アッセイ（ＤｉｓｃｏｖｅＲｘ、ＬｅａｄＨｕｎｔｅｒアッセイ）を使用して行った。化合物を、約１ｍｇの量に正確に秤量し、希釈およびアッセイのためＤｉｓｃｏｖｅｒＸ（Ｆｒｅｍｏｎｔ、ＣＡ）に発送した。使用したアッセイは、細胞アッセイにおけるグルカゴン（ヒト、ＣＨＯ細胞にクローン化）およびＧＬＰ－１（ヒト、ＣＨＯ細胞にクローン化）受容体に対するものであった。アッセイを、０．１％卵白アルブミン存在下で行った。歴史的に、このようなアッセイは０．１％ＢＳＡの存在下で行われてきたが、血清アルブミンと非常に強固に結合する（＞９９％）これらの化合物については、結果がゆがめられ、化合物の作用がかなり弱くなる可能性がある。０．１％卵白アルブミンの使用により、この問題を回避することができる。卵白アルブミンを使用したときに見られる改善は、ペプチドに対する血清アルブミン結合の相対的な強固さの指標として見ることができる。
【0084】
【表6】
【0085】
アッセイを、０．１％卵白アルブミンの存在下で行った。歴史的に、このようなアッセイは０．１％ＢＳＡ存在下で行われてきたが、血清アルブミンと非常に強固に結合する（＞９９％）これらの化合物については、結果がゆがめられ、化合物の作用がかなり弱くなる可能性がある。０．１％卵白アルブミンの使用により、この問題を回避することができる。卵白アルブミンを使用したときに見られる改善は、ペプチドに対する血清アルブミン結合の相対的な強固さの指標として見ることができ、以下の表を参照されたい。
【0086】
【表7】
【0087】
ここで、非常に強固な血清アルブミン結合体（脂肪酸の頭部基を模倣している、ＣＯ２Ｈを含む置換基を有する）は、ＢＳＡを卵白アルブミンによって置き換える際の、実質的な倍加改善を示し、脂肪酸模倣物に明確には結合しないことがわかる。倍加改善の程度から、ＢＳＡ上の脂肪酸結合部位への結合の強固さを読み取ることができる。したがって、セマグルチドは、１２倍改善する（強固な結合）が、ＥＵ－Ａ１８７３は、３０～４０×に改善し、これは、血清アルブミン結合を大幅に増加したことを示す。この程度の血清アルブミン結合は、配列番号１のバイオアッセイに見られるように、Ｃｍａｘの抑制と作用時間の延長をもたらすと予想され得る。
【0088】
上記の表５および表６に示したデータは、ＧＬＰ－１に偏った高い親和性を示すセマグルチドとは異なり、試験化合物がＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲの両方のアゴニスト（「デュアルアゴニスト」）であることを示す。このデータはまた、配列番号１が、ＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲに対してほぼ等しい親和性を有するデュアルアゴニストペプチドであることも示す。
【0089】
実施例３
健康な過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の単回および反復ＳＣ投与の安全性および忍容性を決定し、ＰＫ－ＰＤ関係に基づき有効用量範囲を特徴決定するための臨床試験
本試験は、健康な過体重および肥満の対象（ＢＭＩ２５．０～４０．０ｋｇ／ｍ２）におけるＡＬＴ－８０１の単回および反復ＳＣ投与の安全性および忍容性を評価し、薬物動態－薬力学的（ＰＫ－ＰＤ）関係に基づく有効用量範囲を特徴決定するよう設計する。過体重および肥満の健康なボランティアを、正常な体重の個体のＰＫと異なり得る、そのような対象におけるＰＫとして研究する。さらに、これらの対象は体重減少の予測されるＰＤ効果によりよく耐えることができ、処置から利益さえ得ることができる。妊娠の可能性を最小限にするため、適切な避妊措置が講じられており、予防処置を講じて、ＧＬＰ－１またはグルカゴンアナログを用いた処置のリスクに対象をさらす既存の状態を除外する。ＡＬＴ－８０１のグルコースホメオスタシスに対する作用が、非糖尿病集団においてよりよく特徴付けられるまで、糖尿病対象を除外した。過体重および肥満の対象のインスリン抵抗性のレベルは様々であると予想されるため、このクラスの他の化合物のデータと一緒に取得した、これらの試験で得られた観察結果は、糖尿病対象を研究したとき観察する効果を予測するはずである。ＡＬＴ－８０１の安全性、ＰＫまたはＰＤに対する作用の正確な評価に影響を及ぼす可能性のある除外項目を設定した。本試験で利用するＢＭＩの範囲のＰＫおよびＰＤパラメーターに対する作用を評価するための分析を行う。本試験では、ＡＬＴ－８０１の体重に対する作用を示し、肥満の一次処置としてのその使用を支持する。
健康な過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の単回および反復ＳＣ投与の安全性および忍容性を決定し、ＰＫ－ＰＤ関係に基づき有効用量範囲を特徴決定するための臨床試験
本試験は、健康な過体重および肥満の対象（ＢＭＩ２５．０～４０．０ｋｇ／ｍ２）におけるＡＬＴ－８０１の単回および反復ＳＣ投与の安全性および忍容性を評価し、薬物動態－薬力学的（ＰＫ－ＰＤ）関係に基づく有効用量範囲を特徴決定するよう設計する。過体重および肥満の健康なボランティアを、正常な体重の個体のＰＫと異なり得る、そのような対象におけるＰＫとして研究する。さらに、これらの対象は体重減少の予測されるＰＤ効果によりよく耐えることができ、処置から利益さえ得ることができる。妊娠の可能性を最小限にするため、適切な避妊措置が講じられており、予防処置を講じて、ＧＬＰ－１またはグルカゴンアナログを用いた処置のリスクに対象をさらす既存の状態を除外する。ＡＬＴ－８０１のグルコースホメオスタシスに対する作用が、非糖尿病集団においてよりよく特徴付けられるまで、糖尿病対象を除外した。過体重および肥満の対象のインスリン抵抗性のレベルは様々であると予想されるため、このクラスの他の化合物のデータと一緒に取得した、これらの試験で得られた観察結果は、糖尿病対象を研究したとき観察する効果を予測するはずである。ＡＬＴ－８０１の安全性、ＰＫまたはＰＤに対する作用の正確な評価に影響を及ぼす可能性のある除外項目を設定した。本試験で利用するＢＭＩの範囲のＰＫおよびＰＤパラメーターに対する作用を評価するための分析を行う。本試験では、ＡＬＴ－８０１の体重に対する作用を示し、肥満の一次処置としてのその使用を支持する。
【0090】
本試験の主要な目的は、有害事象（ＡＥ）、バイタルサイン、臨床安全性検査室（ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓａｆｅｔｙ ｌａｂ）、尿検査、理学的検査、および注射部位反応；グルコースホメオスタシス；血圧；心電図（ＥＣＫ）、ホルターモニタリングなどを評価することによって、単回および複数回の漸増皮下（ＳＣ）用量投与後の健康な過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性を評価することである。本試験の第２の目的は、１）単回および複数回の漸増ＳＣ用量投与後のＡＬＴ－８０１のＰＫ、ならびに２）単回および複数回投与後のＡＬＴ－８０１のＰＤ作用を評価することである。本試験の探索的目的は、１）複数回用量投与後のＡＬＴ－８０１によるＰＤ作用の拡大、および２）心拍数補正ＱＴ間隔（ＱＴｃ）延長に対するＡＬＴ－８０１の作用の評価を含む。ＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪含有量、体重、全身ＭＲＩによる体組成、インスリン抵抗性、全身性炎症、ならびにＧＬＰ－１およびグルカゴン標的関与を含む、試験評価は、体重減少および体組成の変化を含む、ＡＬＴ－８０１に期待されるＰＤ特性に基づく。グルコースホメオスタシスの測定は、グルコース制御に対するＧＬＰ－１およびグルカゴンアナログの潜在的作用に基づく。ＧＬＰ－１およびグルカゴンアゴニストは、血圧および心拍数の臨床的に重要でない変化と関連しているため、２４時間自由行動下血圧測定（ＡＢＰＭ）およびホルターモニタリングを含む。また、ＡＬＴ－８０１のＱＴ間隔延長に対する潜在的な作用に関する情報を提供するために、ホルターモニタリングも含む。ＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１／グルカゴンデュアルアゴニストの薬理学および安全性の経験に基づき、悪心および嘔吐を含むＧＩ ＡＥの用量関連の発生が生じる可能性がある。高血糖および低血糖の発生率および重症度を含む、グルコースホメオスタシスも評価する。体重減少はこの化合物の望ましい特性であるため、安全性よりもむしろ有効性をモニターする。ただし、体重減少が過剰であると判断する場合、その後のコホートにおける用量を調整することがある。体重減少のレベルが安全でない、または過度であるとみなす場合、試験投薬を個々の対象において一時中止または中断する可能性がある。対象は、薬物誘発性肝傷害についてもモニターする。血液試料を、別途同意を得た対象におけるバイオバンク用の研究薬物の投与前および最終投与後に採取する。これらの試料を使用して、可能性のある遺伝子解析を含む、ＮＡＳＨおよび関連する疾患におけるバイオマーカーが発見および／または検証する。
【0091】
本明細書に記載される本研究は、本試験は、健康な過体重および対象におけるＡＬＴ－８０１の単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）のファースト・イン・ヒューマ（ＦＩＨ）フェーズ１無作為化二重盲検プラセボ対照２部構成試験である。過体重から肥満の対象（肥満度指数［ＢＭＩ］２５．０～４０．０ｋｇ／ｍ２）を登録する。パート１の単回漸増用量（ＳＡＤ）フェーズでは、対象は、最長２８日間のスクリーニング期間を経験する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない過体重から肥満の対象を、８人の対象のコホート中３：１の比で無作為化し、６人の対象にＡＬＴ－８０１を、２人の対象にプラセボを投与する。試験薬（ＳＣ投与用のＡＬＴ－８０１として製剤化した配列番号１）を、すべてのＳＡＤコホートにおいて腹部に皮下（ＳＣ）投与する。対象は、試験薬投与の約１日前（－１日目）に研究ユニットに入院し、８日目に退院する。対象は、１日目に１回ＳＣ用量のＡＬＴ－８０１またはプラセボを投与する。６つのコホートを計画し、パート１についてはさらに２つの任意選択的なコホートを有する。以下の用量レベルと計画する：６０ｋｇのヒトに基づき、毎週の用量として０．４、１．２、２．４、４．８、７．２、および９．４ｍｇを１週間に１回（ＱＷ）投与する。これらの用量は、臨床的観察、あるいは入手可能なときは、ＰＫデータに基づいて変更してもよい。各ＳＡＤコホートの最初の２人の対象（１人のＡＬＴ－８０１、１人のプラセボ）には、残りの対象の少なくとも４８時間前にセンチネル法で投与する。対象は、１～５日目の評価前および８日目の評価前に少なくとも１０時間、一晩絶食し、食事を標準化する。対象は、ＥＣＧ、ＣＧＭ、およびＡＢＰＭを含む安全性を評価するための試験評価を受け、後述の評価スケジュールに記載するＰＫのため血液試料を採取する。研究ユニットを退院後、対象は外来受診し、２６日目まで３日毎にＰＫおよび安全性評価を受け、３５日目または投与期間中に決定した少なくとも５半減期のフォローアップ受診を受ける。薬理学的モデリングに基づいて予測した有効用量および曝露を達成しなかった場合、および／または単回用量用の最大認容量（ＭＴＤ）を６つの計画したコホート完了後に同定しなかった場合、最大２つのさらなる単回投与コホートをパート１に登録する。ＳＡＤコホート３の８日目が終了し、そのコホートの安全性を評価したら、パート２の複数回漸増用量（ＭＡＤ）フェーズを開始する。パート２の開始用量は一般的に、ＳＡＤコホート３の用量の２分の１である。
【0092】
インフォームド・コンセントの後、過体重から肥満の対象は、最長２８日間のスクリーニングを受ける。対象に、スクリーニング期間中も通常の食事と活動を維持し、試験参加中はいかなる時も新たな食事、サプリメント、運動プログラムを開始しないよう指示する。対象は、試験薬投与の約４日前（Ｄａｙ－４）に研究ユニットに入室し、標準化された食事を摂取する食事・運動慣らし期間に入る。標準化した食事は、体重、身長、年齢および性別に基づき対象間の差を考慮し、予測ＢＭＲ×１．５を使用して個別化した１日当たりのカロリーで提供する。研究参加者の活動レベルも標準化する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない対象を、－１日目に１２人の対象のコホート中５：１の比で無作為化し、１０人の対象にＡＬＴ－８０１ ＱＷを、２人の対象にプラセボＱＷを６週間投与する。試験薬は、すべてのＭＡＤコホートにおいて腹部に皮下（ＳＣ）投与する。
【0093】
対象は、１日目に試験薬の初回投与を受け、８日目に２回目の投与を受けるまで研究ユニットに留まる。次いで、対象は、１週間間隔で３回の外来受診（１５日目、２２日目、２９日目）のため戻り、３２日目～４３日目まで再入院する。対象は、３６日目に試験薬の最終投与を受ける。４３日目の退院後、対象は、７０日目または投与後５半減期のいずれか早い日に追跡調査のために戻る。対象は、本明細書に記載するＡＬＴ－８０１の安全性、ＰＤ、およびＰＫを評価するためのいくつかの試験評価を行う。安全性評価は、ＥＣＧ、ＣＧＭ、ＡＢＰＭを含む。ＰＤ評価は、人体計測、食事評価、画像診断、バイオマーカーのための採血を含む。ＧＩ症状に対する治療効果を評価するために、胃腸障害症状重症度指標の患者評価（ＰＡＧＩ－ＳＹＭ）を行う。血液試料を、ＰＫおよび免疫原性のため採取する。対象は、－１日目～５日目ならびに７、８、３６、３７、４２および４３日目の前に、少なくとも１０時間、一晩絶食する。さらに、対象は、－１、７、および４２日目の混合食耐性試験のため標準的な朝食を摂取する。
【0094】
ＭＡＤの用量は、臨床データおよび利用可能なときは、既に完了したＳＡＤおよびＭＡＤコホートからのＰＫデータに基づき選択する。薬理測定モデリングに基づき予測した有効用量および曝露を達成する、既に研究した用量レベルを拡大する、このフェーズのＭＴＤを同定しない場合、用量漸増を継続する、または薬理測定モデリングに基づき最大有効用量に到達する前にＧＩ不耐性を観察した場合、用量漸増スキームを検討するための、３つのＭＡＤコホートを計画し、必要に応じて、最大２つの追加のコホートを含む。
【0095】
パート１の最大推奨開始用量（ＭＲＳＤ）は、医薬品安全性試験において動物（ラットおよびサル）で決定したＮＯＡＥＬでのヒト等価用量（ＨＥＤ）の１０分の１に基づく。ラットとサルの両方が、ＡＬＴ－８０１に対して同様の臨床応答を有すると考えられたが、ＮＯＡＥＬにおける曝露は、ラットにおいてわずかに低かったため、ヒトでの開始用量はより保守的なものとなった。ラットＮＯＡＥＬは、高用量である０．４５ｍｇ／ｋｇ／週であり、これは、体表面積スケーリングに基づき、６０ｋｇのヒトにおいて０．４４ｍｇ／週に相当する。注目すべきは、サルでのＮＯＡＥＬも、高用量である０．２５ｍｇ／ｋｇであり、これは、体表面積スケーリングに基づき、６０ｋｇのヒトにおいて０．４９ｍｇ／週に相当する。安全性のために１０倍のスケーリング係数を使用して、ヒト開始用量０．４０ｍｇ／週を、６０ｋｇのヒトのため選択した。さらに、最大推奨開始用量（ＭＲＳＤ）で推定したヒト曝露は、サルＮＯＡＥＬでの曝露を大きく下回っており、特にラットＮＯＡＥＬでの曝露と同程度である。サルは、最も感受性の高い動物種ではないが、臨床的に最も関連性の高い毒性（すなわち、摂食量の低減および嘔吐）については生物学的により関連性の高い動物種であるため、これは特に重要である。パート１における臨床観察およびＰＫは、最終的に、パート２における投与検討の指針となる。
【0096】
ラットおよびサルでの試験におけるＡＬＴ－８０１の主な所見は、体重減少であった（例えば、実施例４を参照）。毎日投与したラットでのスケジュールを週３日に変更したところ、ＡＬＴ－８０１の食品消費および体重減少に対する影響が低減することによって忍容性が改善され、これは、作用機序と一致する。ＧＬＰ－１およびグルカゴンアゴニストの毒性もまた、ヒト試験においても十分に特徴付けた。前臨床試験の安全性に関する知見は、ＳＡＤコホート２への３倍の用量増量を支持する。続く増量は、試験のいずれのパートにおいても２倍を超えない。忍容性を改善することが必要な場合、用量漸増スキームを検討してもよい。これらの予測の信頼性に加えて、ヒトにおける用量と曝露の関係は、いくつかの前臨床動物種（マウス、ラット、ミニブタ、およびサル）の集団ＰＫモデルに基づき線形であると予測する。試験が進行中であるため、ヒトデータを用いてモデルを更新する。ヒトにおけるＡＬＴ－８０１の予測ｔ１／２は、１００時間台の範囲にあり、この仮定を、パート１でも確認する。週１回（ＱＷ）投与に基づき、定常状態での反復投与による推定蓄積量は、２倍以下である。複数回用量曝露が、単回用量曝露内に収まることを確実にするため、パート２の開始用量を、パート１のコホート３の用量の２分の１であると計画する。しかしながら、続くパート２コホートを、安全性およびＰＫデータに基づき調整しても良い。それぞれの守備よく行った用量レベルに漸増させるための決定は、パート１の８日目（単回投与の７日後）およびパート１の１５日目（２回目の投与の７日後）までの安全性および忍容性の評価に基づく。２週目以降の用量漸増の決定は、主に吐き気または嘔吐であると予想するＡＥが、投与の最初の２週間に生じるという、それより前のＧＬＰ－１およびＧＬＰ－１／グルカゴンデュアルアゴニスト試験からの所見に基づく。さらに、投与の最終週のＣｍａｘおよびＡＵＣｔａｕである予想は、既に完了したおよび安全性を評価したＳＡＤコホートにおけるＣｍａｘまたはＡＵＣｉｎｆを超えない。有効用量での動物における曝露およびヒトＰＫを予測するための動物ＰＫパラメーターの薬理学的モデリングに基づき、成人ヒトにおけるＥＤ８０～ＥＤ９０に相当する最大有効性の目標用量を、１～５ｍｇであると推定し、目標血漿濃度は、５０～１００ｎｇ／ｍｌであると推定する。したがって、推定開始用量は、予測した最低有効用量より約２．５倍低く、有効でないと予想する。
【0097】
安全性を最大にするために、単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）の漸増を、ラットにおけるＮＯＡＥＬでの曝露を超えないように計画する。しかしながら、ＰＤおよび忍容性から、過体重および肥満の対象が、ラットＮＯＡＥＬの曝露を超えると予想する用量から恩恵を受ける場合、ＳＡＤおよびＭＡＤ漸増を継続する前に、補助安全性および有効性データをＩＥＣに提示し、同意を得る。
【0098】
最低６人の対象が、パート１の用量漸増に必要であり、８人の対象が、パート２の用量漸増に必要であり、それぞれのコホート中の少なくとも１人の対象にプラセボを投与する。観察が、用量漸増がＭＴＤを超えていることを示唆する場合、示唆される次の用量レベルを、従前の処置コホートで観察した安全性および忍容性データの評価に基づき調整してもよい。投与は、ＭＴＤを同定するまで進めてもよく、それは、試験の各パートについて個別に決定する。利用可能なＰＫデータを使用して、意思決定の指針としてもよく、曝露が、ラットにおいてＮＯＡＥＬを超えると予測する場合、明確に考慮する。安全性を最大にするために、計画したＳＡＤおよびＭＡＤの漸増は、ラットにおけるＮＯＡＥＬでの曝露を超えない。
【0099】
スクリーニング活動の完了後、すべての組み入れ基準を満たし、かつ除外基準を満たさない対象を、双方向ウェブ応答システム（ＩＷＲＳ）により無作為化する。パート１では、各コホートの２人の対象を、ＡＬＴ－８０１またはセンチネル投与のためのプラセボ処置群に対して１対１に無作為に指定する。８人の対象の各コホート中の残りの６人の対象を、ＡＬＴ－８０１またはプラセボ処置群に無作為に指定し、５人をＡＬＴ－８０１群、１人をプラセボ群と指定し、各コホートで全体として３：１のＡＬＴ－８０１とプラセボの比である。パート２では、１２人のコホートを、ＡＬＴ－８０１群またはプラセボ群に対して５：１の比で無作為に指定し、１０人をＡＬＴ－８０１群に、２人をプラセボ群に指定する。
【0100】
配列番号１を、無菌緩衝水溶液（例えば、脱イオン水（ｐＨ７．７±０．１）中の約０．０５０％（ｗ／ｗ）ポリソルベート２０、約０．３４８％（ｗ／ｗ）アルギニン、約４．２６０％（ｗ／ｗ）マンニトール）中、ガラスバイアルにおいてＡＬＴ－８０１として製剤化し、終濃度２．５ｍｇ／ｍＬおよび総充填量１．２ｍＬで配列番号１を含み、皮下（ＳＣ）注射として投与する。パート１では、単回用量の試験薬を１日目に投与する。各ＳＡＤコホートの最初の２人の対象者（１人のＡＬＴ－８０１および１人のプラセボ）を、残りの対象への投与の少なくとも４８時間前にセンチネル法で投与する。パート２では、試験薬を６週間にわたりＱＷ投与する。用量を１、８、１５、２２、２９、および３６日目に行う。パート１の開始用量は０．４０ｍｇで、これはラットで副作用を観察しないレベル（ＮＯＡＥＬ）のヒト均等用量の１０分の１に相当し（安全性については０．４４ｍｇ／週から切り捨て）、用量漸増は、修正フィボナッチスキームに従い、０．４０、１．２、２．４、４．８、７．２、および９．４ｍｇの計画用量レベル（７日に１回投与する週１回用量と均等）の３倍以下である。パート２の開始用量を、パート１コホート３の用量の２分の１に計画する。しかしながら、続くパート２コホートを、安全性およびＰＫデータに基づき調整してもよい。各首尾よい用量レベルへの漸増の決定は、パート１の８日目（単回投与７日後）およびパート２の１５日目（２回目投与７日後）までの安全性および忍容性の評価に基づく。用量漸増を修飾してもよく、用量漸増スキームは、必要に応じて、または本明細書に記載する通りである。各用量のＡＬＴ－８０１またはプラセボを、適切な訓練を受けた臨床スタッフメンバーにより腹部にＳＣ注射として投与する。投与量は、選択した用量に基づき選択し、最終薬物製品についての濃度は、２．５ｍｇ／ｍＬとする。生理食塩水プラセボは、そのコホートにおいて投与したＡＬＴ－８０１の用量および容量に基づく容量に一致する。体重減少は、この化合物の望ましい特性であるため、安全性よりもむしろ有効性をモニターする。しかしながら、体重減少が過度であると判断した場合、続くコホートにおける用量を調整してもよい。体重減少のレベルが過度であるとみなす場合、試験薬は、個々の対象において一時中止または中止してもよい。制吐治療にもかかわらず、ＧＩ有害事象のレベルを、制吐剤処置にも関わらず、過度であり、忍容できないとみなす（例えば、重度のＧＩ ＡＥが＞２４時間続く）場合、試験薬を個々の対象において一時中止または中止してもよい。嘔吐が持続する場合は、対象に制吐剤を投与してもよい。この場合、５ＨＴ３受容体アンタゴニスト（例、オンダンセトロン）が好ましい。観察から、用量漸増がＭＴＤを超えていると示唆する場合、推奨用量レベルを、以前の処置コホートで観察した安全性および忍容性データの評価に基づき下方修正してもよい。投与は、ＭＴＤを特定するまで進めてもよく、それを試験の各部分について個別に決定する。利用可能なＰＫデータを使用して、意思決定を指針してもよい。
【0101】
血液試料を、パート１の－１、１、２、３、４、５、８、１１、１４、１７、２０、２３および２６日目の０、１、４、６、８、１２、および１６時間、ならびにパート２の－１、１、２、３、４、５、８、１５、２２、２９および３６～３８日目の０、１、４、６、８、１２、および１６時間にＰＫ評価のため採取する。ＰＫ試料の残りの血漿を、時間制限なく凍結保存してもよく、ＡＬＴ－８０１生体分析法の開発のため、またはＡＬＴ－８０１代謝産物を探索するために使用してもよい。ＥＣＧの読み取りの時間は、ＰＫ試料時間と一致する。複数の活動が同じ時間点で生じる場合、ＥＣＧをまず収集し、ＰＫ血液は、公称時間で行うべきである。ＰＤ評価は、パート２のみで行う。
【0102】
身長は、壁に取り付けたスタディオメーターまたはバランスビームスケールに取り付けたスタディオメーターのいずれか利用可能な方を使用してセンチメートルで測定する。対象は、靴下を履いているか、裸足でなければならない。スクリーニングの受診を除き、体重を、各公称時点の日のほぼ同じ時間で校正したスケールを使用してキログラムで測定する。絶食中および対象が排泄（すなわち、膀胱が空であること）を指示された後、ガウン（または臨床研究ユニットが用意した他の標準的な服装）、下着、および靴下（靴はなし）を着用している対象で、測定を行うべきである。ウエスト周囲径を、ガウンを着用している対象で測定するべきである。測定を、腸骨稜の上面と肋骨の外側下縁の中間の高さで行う。臍の高さまで測定する必要はない。メジャーは水平に保つ。身長、体重、およびウエスト周囲径を測定し、パート１およびパート２でのスケジュールに従いＢＭＩを計算し、記録する。身長の測定は、スクリーニング時のみ必要である。ウエスト周囲径を、パート２のみでの対象について測定する。
【0103】
ＦｉｂｒｏＳｃａｎ（登録商標）は、それぞれ、振動制御一過性エラストグラフィ（ＶＣＴＥ）およびＣＡＰにより、肝硬化および脂肪症を同時に測定することができる超音波に似た装置である。パート２の対象について、ＦｉｂｒｏＳｃａｎ（登録商標）を、少なくとも１０時間の一晩絶食後のスクリーニング中に測定する。ＦｉｂｒｏＳｃａｎ（登録商標）ＣＡＰを、ＭＲＩ－ＰＤＦＦ前に測定する。ＭＲＩ－ＰＤＦＦは、肝臓全体にわたる肝脂肪の正確で再現性のある定量的評価を可能にする定量的画像バイオマーカーである。パート２の対象について、ＭＲＩ－ＰＤＦＦをスクリーニング中（ＣＡＰが、≧３００ｄＢ／ｍ）および最短１０時間の絶食後のＥＯＳ受診時に測定する。肝脂肪パーセントを、肝脂肪含有量と同時に測定する総肝容積で補正する。全身ＭＲＩは、除脂肪体重を含む身体組成の測定のため使用する確立された画像技術である。パート２の対象について、スクリーニング中およびＥＯＳ受診時に、ＭＲＩ－ＰＤＦＦと併用して全身ＭＲＩを行う。
【0104】
パート１および２では、対象を、研究ユニットに入院期間中、対象に標準化した食事を提供する。１日のカロリーは、予測ＢＭＲ方程式に活動係数１．５を乗じて個別化し、大栄養素組成は４０～５０％炭水化物、１５～２５％タンパク質、３０～４０％脂肪で標準化する。パート２では、－１日目および４２日目のＰＤ評価に先立ち、－４日目～－２日目および３９日目～４１日目に同じ標準化した食事を提供する。食事のタイミングと種類はまた、対応するマニュアルのそれぞれに記載する通り、ＥＣＧ、ＭＲＩ－ＰＤＦＦ、ＭＭＴＴ評価に特定である。
【0105】
食物摂取と食欲を、自由食試験とＶＡＳ質問票を使用して評価する。
ＶＡＳ質問票は、空腹感、満腹感、膨満、ならびに甘味、塩味、風味、および脂肪などの特定の味を食べたいという欲求を記録する食欲研究の標準的な手法である［Ｆｌｉｎｔ ２０００］。被験者は、評価スケジュールで指定された日に、自由食の前および後にＶＡＳ質問票を完了する。自由食のサイズは、健康な過体重および肥満のボランティアの予想した摂取量を超える。試験食の間、対象を隔離し、環境要因を最小にする（すなわち、テレビ、携帯電話、コンピュータなどはなし）。対象者に、３０分以内に好きなだけ摂取し、心地よく満腹になるまで食べるように指示する。食前と食後の体重を記録して、食物摂取量を把握し、カロリー消費量を決定する。
ＶＡＳ質問票は、空腹感、満腹感、膨満、ならびに甘味、塩味、風味、および脂肪などの特定の味を食べたいという欲求を記録する食欲研究の標準的な手法である［Ｆｌｉｎｔ ２０００］。被験者は、評価スケジュールで指定された日に、自由食の前および後にＶＡＳ質問票を完了する。自由食のサイズは、健康な過体重および肥満のボランティアの予想した摂取量を超える。試験食の間、対象を隔離し、環境要因を最小にする（すなわち、テレビ、携帯電話、コンピュータなどはなし）。対象者に、３０分以内に好きなだけ摂取し、心地よく満腹になるまで食べるように指示する。食前と食後の体重を記録して、食物摂取量を把握し、カロリー消費量を決定する。
【0106】
基礎代謝量（ＢＭＲ）および安静時エネルギー消費量（ＲＥＥ）を、絶食条件下および少なくとも１０時間の絶食後の朝に評価する。安静時エネルギー消費量の評価を、－１日目および４２日目に行う。ＢＭＲおよびＲＥＥを、換気フード法（間接熱量測定法）を使用して測定する。ＢＭＲは、通常、１日のエネルギー消費量の主な構成要素であるため、エネルギー消費量を標的とする代謝性薬物開発プログラムにおいては、ＢＭＲに対する変化は、臨床的意義があるかもしれない。
【0107】
最低１０時間の絶食後、対象は、標準化した流動食（標準的なＭＭＴＴを構成する、脂肪、炭水化物、およびタンパク質の成分を含む栄養補助食品であるエンシュア・プラス［７００ｋｃａｌ］を６液量オンス）を５分以内に摂取する混合食耐性試験（ＭＭＴＴ）を受ける。ｔ＝０分の試料（すなわち、標準化した流動食の前）は、最後のＨＯＭＡ ＩＲ ２血液試料である（上記を参照）。ホルモンマーカーは、グルコース、インスリンおよびＣ－ペプチドを含む。最初の１５分間は５分間隔で、その後３０分間は標準化した流動食摂取後２４０分まで（この間、追加の食物摂取はない）試料を採取する。ＭＭＴＴ手法を、評価スケジュールで指定した日に行う。試験を標準化し、ばらつきを低減するために、各試験の前に、臨床研究ユニットへの入院後３日間の標準化した食事と標準化した身体活動の慣らし期間を設ける。
【0108】
対象が、少なくとも１０時間一晩絶食した後、１回目および２回目の投与の１日前、ならびに最後の投与の６日後に、ケトン体評価用の血液試料を採取する。ＦＧＦ－２１およびアディポネクチンの評価用の血液試料を、対象が少なくとも１０時間一晩絶食した後、採取する。最低１０時間の絶食後、コレステロール（総コレステロール、ＨＤＬ、ＬＤＬ）、Ａｐｏ ＡおよびＢ、リポタンパク質（ａ）、ＴＧ、およびトリパルミチンを含む、脂質の評価のため、表４に示す通り、試験薬の初回投与前および最終投与から６日後に血液を採取する。ＴＮＦ－α、ｈｓ－ＣＲＰ、レプチン、ＭＣＰ－１、およびＩＬ－６を含む炎症マーカーの評価のため、表４に示す通り、試験薬の１回目の投与前および最終投与から６日後に血液を採取する。グルコースホメオスタシスを、パート１およびパート２に示す期間中、Ｄｅｘｃｏｍ Ｇ６ ＣＧＭを使用して２４時間ＣＧＭにより評価する。
【0109】
安全性解析対象集団は、無作為化した対象のうち、試験薬を少なくとも１回投与したすべての無作為化した対象を含む。対象を、彼らが受けた処置によって解析する。ＰＫ集団は、ＡＬＴ－８０１を少なくとも１回投与し、解析に十分なＰＫデータを有する、すべての無作為化した対象を含む。ＱＴ集団は、含まれる被験者のうち、ベースライン時の少なくとも１回の時間一致ＥＣＧおよび投与後の対応する時間一致ＰＫ－ＥＣＧを有するＰＫ集団のすべての対象を含む。ＰＤ集団は、試験薬を少なくとも１回投与し、ベースラインおよびベースライン後の少なくとも１回のＰＤ評価の結果を有するすべての無作為化対象を含む。
【0110】
使用した統計方法では、記述統計学を使用して、人口統計学的特徴およびベースライン特徴の差異を評価する。病歴を、最新のＭｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）バージョンを使用してコード化し、対象毎に列挙する。連続安全性データを、用量レベルおよび処置（有効またはプラセボ）別に記述統計学（加算平均、標準偏差［ＳＤ］、中央値、最小値、および最大値）を用いて概説する。カテゴリー安全性データを、試験部位、用量レベル、処置、および利用可能な日毎の頻度数およびパーセンテージを用いて概説する。
【0111】
ＡＥを、最新のＭｅｄＤＲＡバージョンを使用してコード化する。報告者が使用した用語、基本語、ＳＯＣ、処置、重症度、および試験薬との関連を含む、対象毎のＡＥデータリストを提供する。処置下で発現したＡＥ（ＴＥＡＥ）を経験している対象の数ならびに個々のＴＥＡＥおよび注射部位反応の数を、処置群、ＳＯＣ、および基本語毎に概説する。ＴＥＡＥをまた、重症度（グレード１～４）および試験薬との関連（可能性が低い、可能性がある、おそらくあり）毎に概説する。中止規定の関連性を、関連している可能性がある、またはおそらく関連すると定義する。臨床検査評価、バイタルサイン評価、連続心臓モニタリング、ＥＣＧパラメーター（ホルターモニタリングを除く）、ＣＧＭ測定、ＡＢＰＭ測定、および食事負荷試験パラメーターを、試験パート、処置群、用量レベル、およびプロトコールで指定した収集時点毎に概説する。処置群別の各プロトコール指定時点におけるベースラインからの変化の要約も示す。理学的検査の変化を、各対象について列挙する。ＰＡＧＩ－ＳＹＭの解析は、統計解析計画書（ＳＡＰ）に詳述する。併用薬を、対象毎に列挙し、最新のＷＨＯ薬物辞書を使用してコード化する。
【0112】
薬物動態は、記述統計学（症例数［Ｎ］、加算平均、ＳＤ、変動係数［ＣＶ％］、中央値、最小値、および最大値）とともに、コホート毎に列挙し、概説する個々のＡＬＴ－８０１濃度データを含む。また、各コホートの個々および平均±ＳＤ ＡＬＴ－８０１濃度－時間プロファイルもグラフで示す。血漿ＡＬＴ－８０１非コンパートメント（ＮＣＡ）ＰＫパラメーターＣｍａｘ、最高血漿中濃度までの時間（Ｔｍａｘ）、ＡＵＣ０－ｔ、ＡＵＣ０－ｉｎｆ、消失速度定数（Ｋｅｌ）、ｔ１／２、見かけの全身クリアランス（ＣＬ／Ｆ）、および終末期の見かけの分布容積（Ｖｚ／Ｆ）（データがパラメーター決定に十分である場合）をＳＡＤパートについて推定する。ＭＡＤパートについて、Ｔｍａｘ、ＣｍａｘおよびＡＵＣｔａｕ ＰＫパラメーターを初回投与および最終投与後（１週目および６週目）に推定する。データが許す場合、Ｋｅｌ、ｔ１／２、定常状態における見かけの全身クリアランス（ＣＬＳＳ／Ｆ）および定常状態における見かけの分布容積（ＶＳＳ／Ｆ）を、６週目の投与後に推定する。薬物動態パラメーターを、それぞれの個体について列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何ＣＶ％）を使用してコホート毎に概説する。ベースラインＢＭＩのＰＫパラメーターに対する作用を、相関分析により評価する。用量比例性を、必要に応じて、パワーモデルアプローチを使用して評価する。蓄積を、１週目に対する６週目のＣｍａｘおよびＡＵＣ０－ｔａｕの比として評価する。定常状態を、初回投与から最終投与までのトラフ濃度の比較により評価する。
【0113】
ホルターモニターから抽出されたＥＣＧを、対象、受診、処置、および公称時点について盲検化した熟練した読影者の選択した集団で中央ＥＣＧ検査室で解析する。品質管理または利用可能性に基づく２回目のレビューが必要な場合を除き、１人の読影者が、個々の対象のＥＣＧを検討する。すべてのＥＣＧを、個々の対象について同じリードを用いて解析する。解析不可能な場合を除き、一次解析リードはリードＩＩであり、次に、Ｖ２またはＶ５を、個々の対象の全データセットに使用する。
【0114】
主要解析は、Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａ補正ＱＴ間隔（ΔΔＱＴｃＦ）を使用したプラセボ補正した、ベースラインからの投与後時点までの変化についての平均変化量および片側９５％上側信頼限界である。Ｂａｚｅｔｔの方法（ＱＴｃＢ）、個体補正法（ＱＴｃＩ）、または集団補正法（ＱＴｃＰ）など他の補正法を検討し、比較してもよい。最小値で、Ｆｒｉｄｅｒｉｃｉａの補正およびＢａｚｅｔｔの補正を分析し、示す。二次解析は、線形混合効果モデリングを使用して、時間的に一致した血漿濃度とΔΔＱＴｃＦの関係を含む。ＡＬＴ－８０１の反復投与の免疫原性を、ＭＡＤ期の最終受診時に採取したＥＬＩＳＡベースのアッセイを使用して、血清試料の評価により評価する。試験終了時の試料が陽性の場合は、試験中間資料も分析する。免疫原性は、該当する場合、安全性およびＰＫと相関してもよい。
【0115】
薬力学的試験は、肝脂肪含有量の変化、擬人化パラメーター、ＧＬＰ－１関与およびインスリン抵抗性、グルカゴン関与、ならびに脂質を含み、炎症マーカーを列挙し、記述統計学（症例数［Ｎ］、加算平均、ＳＤ、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何学的ＣＶ％）を用いて処置群毎に概説する。推測統計を、該当する場合は適用する。ベースラインＢＭＩのＰＤパラメーターに対する作用を、共変量解析により評価する。
【0116】
中間解析を、ＭＡＤコホート３における２回以上の投与完了後に行ってもよい。この解析の目的は、後続試験の用量選択を可能にすることである。この解析について、試験は盲検化したままであり、対象レベルの安全性、ＰＤ、および利用可能なＰＫデータを、解析のため非識別化する。試験パート、用量レベル、処置群（実薬またはプラセボ）、および適用可能な場合の日毎の概要データを報告する。中間解析の実施を、ＳＡＰに詳述する。
【0117】
実施例４
過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１第１相試験（６週目の中間データ）
本実施例は、臨床試験申請に基づいてオーストラリアで行われている、過体重および肥満のボランティアにおけるプラセボ対照のヒト初回単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験であるＡＬＴ－８０１第１相臨床試験の結果を示す。本試験の主要目的は、１２週間、週１回投与のプラセボと比較して、ＡＬＴ－８０１レシピエントにおける安全性、忍容性、薬物動態および体重減少を評価することである。ＭＡＤ期の投与は、ＡＬＴ－８０１ １．２ｍｇＳＣまたはプラセボを週１回投与されているコホートで開始し、高用量コホートを経て、現在１．２ｍｇおよび１．８ｍｇコホートの対象が６週間の処置を完了している。最初の２つの試験コホートについて、投与６週時点の中間解析を行い、本実施例において示す。
過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１第１相試験（６週目の中間データ）
本実施例は、臨床試験申請に基づいてオーストラリアで行われている、過体重および肥満のボランティアにおけるプラセボ対照のヒト初回単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験であるＡＬＴ－８０１第１相臨床試験の結果を示す。本試験の主要目的は、１２週間、週１回投与のプラセボと比較して、ＡＬＴ－８０１レシピエントにおける安全性、忍容性、薬物動態および体重減少を評価することである。ＭＡＤ期の投与は、ＡＬＴ－８０１ １．２ｍｇＳＣまたはプラセボを週１回投与されているコホートで開始し、高用量コホートを経て、現在１．２ｍｇおよび１．８ｍｇコホートの対象が６週間の処置を完了している。最初の２つの試験コホートについて、投与６週時点の中間解析を行い、本実施例において示す。
【0118】
本試験は、ＡＬＴ－８０１が健康な過体重および肥満のボランティアにおいて迅速かつ強固な体重減少を誘導することを示す。健康な過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１の進行中の１２週間の第１相プラセボ対照単回および複数回漸増用量試験の事前に規定した６週間の中間解析からの体重減少の結果を、表７に示す。ＡＬＴ－８０１の週１回１．８ｍｇ皮下投与（ＳＣ）使用し、解析は、６週目（４３日目）までに、プラセボ群における０．９％の体重増加と比較して、平均５．４％の体重減少を達成した（６．３％の、プラセボからの正味の変化）ことを示し、これは、試験処置前の目標である２％の体重減少を上回っている（表７、図１）。１．８ｍｇのＳＣ投与を受けた９人の対象のうち１人を除く全員が、６週目までに少なくとも３％の体重減少を達成した。毎週１．２ｍｇのＳＣ投与を受けた低用量コホートは、同じ時点で１．８％の体重減少（２．７％の、プラセボからの正味の変化）を達成した。
【0119】
【表8-1】
【0120】
【表8-2】
【0121】
本実施例に示した試験はまた、ＡＬＴ－８０１が、用量漸増なしで十分に忍容されることを示す。健康な過体重および肥満のボランティアにおける、ＡＬＴ－８０１の進行中の１２週間の第１相プラセボ対照単回および複数回漸増用量試験の事前に規定した６週間の中間解析の有害事象の結果を表８に示す。データは、ＡＬＴ－８０１が、用量漸増なしで十分に忍容性され、一過性の悪心の割合は、それぞれ、１．２ｍｇ用量で１４．３％、１．８ｍｇ用量で２２．２％であり、いずれの用量においても嘔吐、下痢、または便秘の報告はなかった。１．８ｍｇ用量での悪心のすべてが、重症度は軽度であった。これらの結果は、ＡＬＴ－８０１を、最も有効で十分に忍容されるＧＬＰ－１ベースの治療剤の中に位置付ける。胃腸事象は、他のＧＬＰ－１ベースの薬剤の、十分な忍容性を維持するための１６～２０週間にわたる用量決定が必要であった。
【0122】
【表9-1】
【0123】
【表9-2】
【0124】
【表9-3】
【0125】
解析は、６週目までに、プラセボ群における０．９％の体重増加と比較して、週１回１．８ｍｇ皮下投与（ＳＣ）を使用して、平均５．４％の体重減少（６．３％の、プラセボからの正味の変化）を達成したことを示し、これは、試験処置前の目標である２％の体重減少を上回っている。１．８ｍｇのＳＣ投与を受けた９人の対象のうち１人を除く全員が、６週目までに少なくとも３％の体重減少を達成した。毎週１．２ｍｇのＳＣ投与を受けた低用量コホートは、同じ時点で１．８％の体重減少（２．７％の、プラセボからの正味の変化）を達成した。ＡＬＴ－８０１は、用量漸増なしで十分に忍容され、一過性の悪心の割合は、それぞれ、１．２ｍｇ投与群で１４．３％、１．８ｍｇ投与群で２２．２％であり、いずれの用量でも嘔吐、下痢、または便秘の報告はなかった。これらの結果は、ＡＬＴ－８０１を、最も有効で十分に忍容されるＧＬＰ－１ベースの治療剤の中に位置付ける。胃腸事象は、他のＧＬＰ－１ベースの薬剤の、十分な忍容性を維持するための１６～２０週間にわたる用量決定が必要であった。
【0126】
実施例５
過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１（ペムビジュチド）第１相試験－１２週間の結果
本実施例は、臨床試験申請に基づいてオーストラリアで行われている、過体重および肥満のボランティアにおけるプラセボ対照のヒト初回単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験であるＡＬＴ－８０１（ペムビジュチド）を用いた第１相臨床試験の結果を示す。本試験の主要目的は、１２週間、週１回投与のプラセボと比較して、ＡＬＴ－８０１を投与した対象における安全性および忍容性、薬物動態、ならびに体重減少を評価することである。本試験を、カロリー制限または活動体重減少プログラムの不存在下で行なった。ある特定の実施形態では、ＡＬＴ－８０１（ペムビジュチドとしても知られる）は、肥満（すなわち、ＢＭＩが３０以上）または過体重（すなわち、ＢＭＩが２５以上）対象における慢性的な体重管理のための処置として、一次および単独処置として使用することができる。ある特定の他の実施形態では、ＡＬＴ－８０１（ペムビジュチドとしても知られる）は、肥満（すなわち、ＢＭＩ３０以上）または過体重（すなわち、ＢＭＩ２５以上）対象における慢性的な体重管理のための補助療法として、カロリー低減食および／または身体活動の増加と組み合わせて使用することができる。
過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１（ペムビジュチド）第１相試験－１２週間の結果
本実施例は、臨床試験申請に基づいてオーストラリアで行われている、過体重および肥満のボランティアにおけるプラセボ対照のヒト初回単回漸増用量（ＳＡＤ）および複数回漸増用量（ＭＡＤ）試験であるＡＬＴ－８０１（ペムビジュチド）を用いた第１相臨床試験の結果を示す。本試験の主要目的は、１２週間、週１回投与のプラセボと比較して、ＡＬＴ－８０１を投与した対象における安全性および忍容性、薬物動態、ならびに体重減少を評価することである。本試験を、カロリー制限または活動体重減少プログラムの不存在下で行なった。ある特定の実施形態では、ＡＬＴ－８０１（ペムビジュチドとしても知られる）は、肥満（すなわち、ＢＭＩが３０以上）または過体重（すなわち、ＢＭＩが２５以上）対象における慢性的な体重管理のための処置として、一次および単独処置として使用することができる。ある特定の他の実施形態では、ＡＬＴ－８０１（ペムビジュチドとしても知られる）は、肥満（すなわち、ＢＭＩ３０以上）または過体重（すなわち、ＢＭＩ２５以上）対象における慢性的な体重管理のための補助療法として、カロリー低減食および／または身体活動の増加と組み合わせて使用することができる。
【0127】
適格な参加者には、最小の肥満度指数（ＢＭＩ）２５ｋｇ／ｍ２を有する健康な非糖尿病対象を含んでいた。本試験のＭＡＤ部分において３４人の対象を、用量決定なしで１２週間週１回の、ペムビジュチド（１．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇ）またはプラセボの３回の皮下投与のうち１回を受けるよう指定した。行動およびカロリー制限介入を行わなかった。ＭＡＤ期での投与は、ＡＬＴ－８０１またはプラセボの１．２ｍｇＳＣを週１回投与するコホートから開始し、高用量コホートを経て、本実施例に示す通り、ＡＬＴ－８０１ １．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇ投与コホートにおける対象は、１２週間の処置を完了した。ＭＡＤ期の参加者の人口統計学的特徴を表９に示す。
【0128】
【表10】
【0129】
健康な過体重および肥満のボランティアにおけるＡＬＴ－８０１の週１回投与後の体重減少の結果を表１０に示す。結果は、ＡＬＴ－８０１が、健康な過体重および肥満のボランティアにおいて迅速かつ強固な体重減少を誘導することを示す。ＡＬＴ－８０１を週１回１．８ｍｇ皮下投与（ＳＣ）を使用して、１２週目（８５日目）までに、プラセボ群において１．６％のみの平均体重減少と比較して、１０．２５％の平均体重減少を達成した（表１０、図２）。さらに、１．８ｍｇの用量で、１００％の対象が、１２週目までに５％以上の体重減少を達成し、５５％の対象は、１２週目までに少なくとも１０％の体重を減少させた（図２）。１２週目に、週１．２ｍｇのＳＣ投与を受けた低用量コホートは、４．８７％の体重減少を達成し、週２．４ｍｇのＳＣ投与を受けた高用量コホートは、８．９５％の体重減少を達成した（表１０）。２．４ｍｇ用量では、１人を除くすべての対象が、１２週目までに５％の体重減少を達成した（図３）。１．８ｍｇおよび２．４ｍｇの用量における体重減少量は、所定の症例数および重複する信頼区間と本質的に同じであった。図３および図４に示す通り、体重減少傾向を１２週目まで維持し、これは、投与がより長期間維持するべきである場合、より高いレベルの予測体重減少を示した。対照的に、過体重または肥満の参加者において、週１回２．４ｍｇのセマグルチド投与と生活習慣介入でのベースラインから１２週目までの体重の平均変化は、６％のみであった（Ｗｉｌｄｉｎｇ ＪＰＨ， Ｂａｔｔｅｒｈａｍ ＲＬ， Ｃａｌａｎｎａ Ｓ， Ｄａｖｉｅｓ Ｍ， Ｖａｎ Ｇａａｌ ＬＦ， Ｌｉｎｇｖａｙ Ｉ， ＭｃＧｏｗａｎ ＢＭ， Ｒｏｓｅｎｓｔｏｃｋ Ｊ， Ｔｒａｎ ＭＴＤ， Ｗａｄｄｅｎ ＴＡ， Ｗｈａｒｔｏｎ Ｓ， Ｙｏｋｏｔｅ Ｋ， Ｚｅｕｔｈｅｎ Ｎ， Ｋｕｓｈｎｅｒ ＲＦ； ＳＴＥＰ １ Ｓｔｕｄｙ Ｇｒｏｕｐ．過体重または肥満の成人における週１回投与のセマグルチド（Ｏｎｃｅ－Ｗｅｅｋｌｙ Ｓｅｍａｇｌｕｔｉｄｅ ｉｎ Ａｄｕｌｔｓ ｗｉｔｈ Ｏｖｅｒｗｅｉｇｈｔ ｏｒ Ｏｂｅｓｉｔｙ）．Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ． ２０２１年３月１８日；３８４（１１）：９８９）。興味深いことに、異なるＡＬＴ－８０１投与群の１２週目の体重減少と対象年齢またはＢＭＩ（肥満度指数；ｋｇ／ｍ２）との間に相関を認めず（図５）、これは、本試験で観察した強固な体重減少を、すべての年齢および体重群において期待することを意味していた。
【0130】
【表11-1】
【0131】
【表11-2】
【0132】
【表11-3】
【0133】
【表11-4】
【0134】
【表11-5】
【0135】
【表11-6】
【0136】
１２週間のモニタリングについての有害事象を表１１に示す。結果は、ＡＬＴ－８０１が、用量漸増の必要なく、十分忍容されることを示す。処置下で発現した有害事象のすべてが、性質が軽度から中程度のものであり、薬物処置により消失し、特別な処置を必要としなかった。１人の患者は、上昇したＡＬＴレベルを経験したが、投与休止後速やかに回復した。特に、胃腸の有害事象は、大多数が一過性で軽度であり、薬物処置により消失した。また、これらの胃腸の有害事象は、性質が一過性のものであり、対象は、多くの場合１回のエピソードを経験し、その頻度は、処置期間中に減少した。有害事象のため試験を離脱した対象はいなかった（表１２を参照）。胃腸の現象は、十分な忍容性を維持するために１６～２０週間にわたる用量を決定するために、他のＧＬＰ－１ベースの薬剤が必要であった。例えば、成人患者における慢性的な体重管理について承認されているＷＥＧＯＶＹ（セマグルチド）（ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ａｃｃｅｓｓｄａｔａ．ｆｄａ．ｇｏｖ／ｄｒｕｇｓａｔｆｄａ＿ｄｏｃｓ／ｌａｂｅｌ／２０２１／２１５２５６ｓ０００ｌｂｌ．ｐｄｆ）は、有害事象の出現を管理するために０．５ｍｇから２．４ｍｇまでの１６週間の用量漸増が必要である。これらの結果は、ＡＬＴ－８０１を、最も有効で十分に忍容されるＧＬＰ－１ベースの治療剤の中に位置付ける。
【0137】
【表12-1】
【0138】
【表12-2】
【0139】
【表12-3】
【0140】
【表12-4】
【0141】
【表12-5】
【0142】
【表12-6】
【0143】
【表12-7】
【0144】
【表12-8】
【0145】
【表12-9】
【0146】
【表13】
【0147】
表１３に示すように、ＡＬＴ－８０１を用いた処置はまた、心血管系のリスクのバイオマーカーとみなされる収縮期血圧および拡張期血圧の低減を示す傾向にある。加えて、ＡＬＴ－８０１を用いた処置はまた、心血管系のリスクのバイオマーカーとしてもみなされる脂質を下げる傾向にある（表１４）。さらに、表１５に示すように、ＡＬＴ－８０１は、前糖尿病およびメタボリックシンドロームを低減する。ＡＬＴ－８０１を用いた処置は、グルコースホメオスタシスを維持し、これが、ＡＬＴ－８０１のＧＬＰ－１活性が、血糖に対するグルカゴン作用と有効に均衡をとることを示している（表１６）。表１７は、ＡＬＴ－８０１のグルカゴン活性に起因し得る作用である脂肪燃焼の増加に対するＡＬＴ－８０１の影響を示すケトン体産生の結果を示す。
【0148】
【表14】
【0149】
【表15】
【0150】
【表16】
【0151】
【表17】
【0152】
【表18】
【0153】
ＡＬＴ－８０１はまた、表１８に示すように、週１回の投与を支持し、許容可能な胃腸忍容性と関連し得る好ましい薬物動態学的（ＰＫ）プロファイルを示す。
【0154】
【表19】
【0155】
要約すると、本試験において、１．８ｍｇ皮下用量のＡＬＴ－８０１を用いた１２週間のみの処置後、印象的な１０．３％の体重減少を観察した。この効果を、２．４ｍｇ用量で維持した。１．８ｍｇ用量の対象の大部分（５５％）は、１０％を超える体重減少を示した。体重減少傾向を、１２週目まで維持した。ＡＬＴ－８０１は、十分に忍容され、主に軽度の有害事象を伴った。有害事象による試験中断に繋がる処置はなかった。直線的な体重減少率は、これらの作用が持続することを示唆している。セマグルチドのような他のＧＬＰ－１受容体バイアスアゴニストと比較すると、急激な体重減少を達成するのに必要とする用量漸増はなく、これは、良好な患者コンプライアンスを伴った。加えて、高血糖ＡＥ、および血糖管理または心拍数への悪影響は認められなかった。
【0156】
実施例６
２型糖尿病を有する過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性、薬力学および薬物動態を評価するための第１相無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験
本試験は、スクリーニング前少なくとも３ヶ月間、（１）食事および運動療法、（２）胃腸の症状（悪心、嘔吐、もしくは下痢）がないか、または軽度の胃腸の症状（悪心、嘔吐、もしくは下痢）を伴う、メトホルミン、ならびに／または（３）ナトリウムグルコース共輸送体（ＳＧＬＴ－２）療法のいずれかの併用療法の、Ｔ２ＤＭを有する過体重および肥満（肥満度指数（ＢＭＩ）２８．０～４０．０ｋｇ／ｍ２を有する１８～６５歳の男性または非妊娠女性対象）対象における、ＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性、薬力学（ＰＤ）および薬物動態（ＰＫ）、ならびにそのグルコース制御に対する作用を評価するための第１相無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験である。本試験では、ＡＬＴ－８０１またはプラセボを、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を有する患者（例えば、４８人の対象）への、週１回、最大１２回、皮下（ＳＣ）（好ましくは、腹部）注射で投与し、最大３５日間のスクリーニング期間、８５日間の処置期間、および２５日間のフォローアップ期間を含む約４．５ヶ月間である。
２型糖尿病を有する過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性、薬力学および薬物動態を評価するための第１相無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験
本試験は、スクリーニング前少なくとも３ヶ月間、（１）食事および運動療法、（２）胃腸の症状（悪心、嘔吐、もしくは下痢）がないか、または軽度の胃腸の症状（悪心、嘔吐、もしくは下痢）を伴う、メトホルミン、ならびに／または（３）ナトリウムグルコース共輸送体（ＳＧＬＴ－２）療法のいずれかの併用療法の、Ｔ２ＤＭを有する過体重および肥満（肥満度指数（ＢＭＩ）２８．０～４０．０ｋｇ／ｍ２を有する１８～６５歳の男性または非妊娠女性対象）対象における、ＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性、薬力学（ＰＤ）および薬物動態（ＰＫ）、ならびにそのグルコース制御に対する作用を評価するための第１相無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験である。本試験では、ＡＬＴ－８０１またはプラセボを、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を有する患者（例えば、４８人の対象）への、週１回、最大１２回、皮下（ＳＣ）（好ましくは、腹部）注射で投与し、最大３５日間のスクリーニング期間、８５日間の処置期間、および２５日間のフォローアップ期間を含む約４．５ヶ月間である。
【0157】
主な安全性の目的は、Ｔ２ＤＭ対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性を評価することであり、二次的な安全性の目的は、Ｔ２ＤＭ対象におけるＡＬＴ－８０１の血糖パラメーターならびに高血糖および低血糖の発生率に対する作用を評価することである。主な安全性評価項目は、有害事象（ＡＥ）、バイタルサイン、二重積（平均心拍数×平均収縮期血圧）、肝機能検査、高血糖および低血糖有害事象の発生率、理学的検査、注射部位反応、ならびに免疫原性を含む。二次的な安全性評価項目は、空腹時血清グルコース、ＣＧＭパラメーター（グルコース濃度－時間プロファイル下面積、範囲内時間、ならびに高血糖および低血糖）、ならびにＨｂＡ１ｃを含む、血糖パラメーターのベースラインからの変化を含む。連続安全性データを、用量レベルおよび処置（実薬またはプラセボ）毎に、記述統計学（加算平均、標準偏差［ＳＤ］、中央値、最小値、および最大値）を用いて要約する。カテゴリー別の安全性データを、用量レベル、処置群、および適用可能な場合の日毎に、頻度数およびパーセンテージを用いて要約する。ＡＥを、最新のＭｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）バージョンを使用してコード化する。報告者が使用した用語、基本語、器官別大分類（ＳＯＣ）、処置、重症度、および試験薬との関連を含む対象別ＡＥデータリストを提供する。処置下で発現したＡＥ（ＴＥＡＥ）を経験した対象の数、ならびに個々のＴＥＡＥおよび注射部位反応の数を、処置群、ＳＯＣおよび基本語毎に要約する。ＴＥＡＥをまた、重症度および試験薬との関連毎に要約する。肝機能検査および空腹時血清グルコースを含む臨床検査評価、バイタルサイン（ＲＰＰの計算を含む）、ならびにＥＣＧ評価を、処置群、用量レベル、およびプロトコール指定の収集時点毎に要約する。プロトコール指定の各時点におけるベースラインからの変化の要約も、処置群毎に示す。各対象についての理学的検査の変化も列挙する。併用薬を、対象毎に列挙し、最新版の世界保健機関（ＷＨＯ）薬物辞書を使用してコード化する。病歴を、最新のＭｅｄＤＲＡバージョンを使用してコード化し、対象毎に列挙する。
【0158】
主な薬力学的（ＰＤ）目的は、Ｔ２ＤＭ対象におけるインスリン感受性および分泌に対するＡＬＴ－８０１の作用を評価することである。これらは、ＭＭＴＴ（血清グルコース、Ｃ－ペプチドおよびインスリンの４時間にわたる曲線下面積（ＡＵＣ０－４））ならびにインスリン抵抗性のホメオスタシスモデル評価（ＨＯＭＡ ＩＲ）（空腹時血漿グルコースおよびインスリン）により測定するベースラインからのインスリン分泌および感受性の変化を含む。ＰＤの二次的な目的は、Ｔ２ＤＭ対象における、１３Ｃ－スピルリナ呼気試験によって測定する胃排出（ラグフェーズ、半減期、胃排出係数）、人体測定パラメーター（例えば、体重、ウエスト周囲径、ＢＭＩ）、脂質代謝（コレステロール（総コレステロール、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ）、アポリポタンパク質（Ａｐｏ）ＡおよびＢ、リポタンパク質（ａ）、ならびにトリグリセリド（ＴＧ））、代謝マーカー（レプチン、アディポネクチン）、炎症マーカー（腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ－ＣＲＰ）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤１（ＰＡＩ－１）、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、ならびにインターロイキン－６（ＩＬ－６））、ならびに脂肪毒性マーカーに対する、ＡＬＴ－８０１の作用を評価することである。インスリン感受性および分泌、人体測定パラメーター、脂質代謝、代謝マーカー、脂質毒性マーカー、炎症マーカーの変化を列挙し、記述統計学（症例数（Ｎ）、加算平均、ＳＤ、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何学的変動係数（ＣＶ％））を用いて処置群毎に要約する。ベースラインＢＭＩのＰＤパラメーターに対する作用を、共変量解析により評価する。ベースラインからのラグフェーズ、半減期、胃排出係数の変化データを列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、および最大値）を用いて要約する。
【0159】
クオリティ・オブ・ライフ（ＱｏＬ）作用もモニタリングする（ベースラインと比較したＳｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ－３６およびＩｍｐａｃｔ ｏｆ Ｗｅｉｇｈｔ ｏｎ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ－Ｌｉｔｅ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓバージョン（ＣＴについてのＩＷＱｏＬ－Ｌｉｔｅ）の変化）。身体的健康および精神的健康の２つの概要スコア、ＳＦ－３６の８つのドメインスコア、ならびにＣＴについてのＩＷＱｏＬ－Ｌｉｔｅ複合スコアのベースラインからの変化を列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何学的ＣＶ％）を用いて処置群毎に要約する。連続評価項目に適用可能な推測統計を、上記のように適用する。
【0160】
薬物動態（ＰＫ）の目的は、ＡＬＴ－８０１濃度およびベースラインからのメトホルミン濃度の変化を評価することである。個々のＡＬＴ－８０１およびメトホルミン濃度データを列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、および最大値）を用いて処置群および時点毎に要約する。各コホートの平均±ＳＤ ＡＬＴ－８０１濃度－時間プロファイルをグラフで示す。ベースラインからのメトホルミン濃度の変化を列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、および最大値）を用いて処置群および時点毎に要約する。個々の対象のＡＬＴ－８０１血漿濃度時間曲線および関連するＰＫパラメーターを予測できるように、集団ＰＫモデルを開発する。性別、年齢、体重、ＢＭＩ、および併用薬を含む共変量を可能な限り検討し、曝露応答関係は、有効性および安全性の評価項目について可能な限り検討する。
【0161】
インフォームド・コンセントの提供後、対象は、最長３５日間のスクリーニング期間を経験する。対象を、通常の食事、アルコール消費および身体活動を維持する方法、試験に参加している間のいかなる時も新たな食事、サプリメント、または運動プログラムを開始しないよう指導する。－８日目の受診時に開始する食事および運動に関するカウンセリングを行い、処置期間中の各受診時に補強する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない対象は、以下の処置群：ＡＬＴ－８０１、１．２ｍｇ、皮下（ＳＣ）、週１回、１２週間；ＡＬＴ－８０１、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；１週目に、ＡＬＴ－８０１、０．６ｍｇ、ＳＣ、２週目に、１．２ｍｇ、ＳＣ、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、２週間（３および４週目）、および２．４ｍｇ、ＳＣ、週１回、５週目～１２週目；ならびにプラセボ（０．９％ＮａＣｌ）、ＳＣ、週１回、１２週間のいずれかに１：１：１：１で無作為化する。対象を、ベースライン時のメトホルミン使用の有無で層別化する。各処置群には１２人の対象が存在する。対象は、１日目に試験薬の初回投与を受ける。その後の受診を、８５日目または表１の早期終了までクリニック、自宅または職場で毎週行う。対象は、１１０日目に安全性フォローアップのために再受診する。治験責任医師は、１２週間の処置期間中に肝機能検査値異常が悪化した対象における介入のタイミングおよび方法についての決定基準に従う。対象は、スクリーニング時、５週目、試験最終週に血糖値を測定するための７日間の持続グルコースモニタリング（ＣＧＭ）を受ける。グルコースおよびホルモンマーカーの測定との混合食事負荷試験（ＭＭＴＴ）を、スクリーニング時および処置期間の終了時に行う。対象はまた、ＡＬＴ－８０１の胃排出速度に対する作用を評価するために、スクリーニング時（－８日目）および８週目（５０日目）に１３Ｃ－スピルリナ胃排出呼気試験を受ける。空腹時血糖値を、グルコメーターにより測定し、－３５日目に開始し、処置期間中受診毎に試験スタッフが記録する。受診日以外の日にも、対象はまた、毎朝空腹時血糖をモニタリングし、記録し、読み取り値＞２４０ｍｇ／ｄＬまたは＜７０ｍｇ／ｄＬについては、試験実施施設に連絡する。ＣＧＭを行うときの週（スクリーニング、４週目、および１２週目）にて、任意のＣＧＭ読み取り値＜７０ｍｇ／ｄＬを、グルコメーターの読み取りによって確認する。対象をまた、低血糖の症状および処置について教育し、血糖値＜７０ｍｇ／ｍＬまたは低血糖を示唆する症状を経験した場合、グルコメーターの読み取り値を得る。対象は、自宅で経験した低血糖の症状を、事象の時のグルコメーターの読み取り値とともに記録し、各受診時に治験責任医師がこれを確認する。治験責任医師は、反復性食事カウンセリングを含む、空腹時血糖を制限内に維持する方法について対象にカウンセリングし、１２週間の処置期間中の持続性高血糖を有する対象における介入のタイミングおよび方法については決定基準に従う。空腹時血糖の有意な減少を繰り返し観察する（＜５０ｍｇ／ｄＬ）か、または対象が低血糖を処置するために介入もしくは外部からの援助を必要とする場合、対象は、試験から脱落し、交代することがある。まばらな血液試料を、ＡＬＴ－８０１ ＰＫについては集団ＰＫおよびＰＫ－ＰＤモデリングにおける他の試験のデータと組み合わせるために、メトホルミンのＰＫについては、ＡＬＴ－８０１の存在下でのメトホルミン濃度の経時的変化を評価するために採取する。血液試料を採取して、免疫原性も評価する。
【0162】
この試験の結果は、Ｔ２ＤＭを有する対象における週１回、最大１２回の皮下（ＳＣ）注射によって投与したＡＬＴ－８０１は、安全であり、忍容性であり、良好なＰＤ、クオリティ・オブ・ライフ、およびＰＫ作用ならびに対象におけるグルコース制御を有することを示す。
【0163】
実施例７
非アルコール性脂肪肝疾患を有する糖尿病および非糖尿病過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の第１相１２週間の無作為化二重盲検プラセボ対照試験
ＡＬＴ－８０１は、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対して等価なデュアルアゴニスト特性を有する修飾した２９のアミノペプチドである。ＡＬＴ－８０１は、脂肪症が、線維症を有するか、または有さない、肝細胞損傷および炎症（脂肪性肝炎）を導く非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）のサブグループである非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のため開発されている。米国（ＵＳ）では、ＮＡＳＨは、末期肝疾患または肝移植の主な原因となっている［Ｇｏｌｄｂｅｒｇ ２０１７］。肥満は、ＮＡＳＨの中心的な要因であり、体重減少は、肝脂肪の低減およびＮＡＳＨの改善をもたらす［Ｖｉｌａｒ－Ｇｏｍｅｚ ２０１５］。ＮＡＳＨを有する個体の８０％より多くは、過体重または肥満であり［Ｄｉｅｈｌ ２０１７］、現在利用可能な米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した体重減少を誘導するための薬理学的選択肢はないため、療法は、大部分、減量を達成することを目的とした生活習慣への介入に基づく。しかしながら、生活習慣の改善だけでは長期的な体重減少を達成し、維持することは困難である。グルカゴン様ペプチド－１受容体アゴニスト（ＧＬＰ－１ＲＡ）は、ＮＡＳＨを有する患者に対する処置選択肢として浮上してきた。１日１回投与のＧＬＰ－１ＲＡであるリラグルチドは、ＮＡＳＨの消失と関連し、肝線維症の改善傾向を伴う［Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ ２０１６］。最近の試験では、最大０．４ｍｇ／日のセマグルチド投与は、有意に高いＮＡＳＨの消失率とともに、最大１２．５％の平均体重減少と関連した。１０％以上の体重減少は、最適なＮＡＳＨ消失およぶ線維症の改善のカットオフと考えられている［Ｖｉｌａｒ－Ｇｏｍｅｚ ２０１５］。体重減少のレベルが高いほど、ＮＡＳＨ患者が直面する最も深刻な併存疾患を表す、心血管疾患および非肝臓悪性腫瘍の発生率の低下とも関連する。残念ながら、これらの試験において利用したリラグルチドおよびセマグルチドの用量は、患者の不快感およびコンプライアンス違反につながり得る胃腸（ＧＩ）ＡＥの高い割合と関連していた。ＧＬＰ－１ＲＡは、食欲および摂食に対する中枢作用を発揮し、一方、ＧＣＧＲアゴニスト（ＧＣＧＲＡ）は、動物モデルおよびヒトにおいてエネルギー消費を増加させる［Ｌｙｎｃｈ ２０１４］。ＧＣＧＲＡおよびＧＬＰ－１ＲＡの作用は、ＧＬＰ－１ＲＡ単独と比較して、相乗的に体重減少を促進することが示されている［Ｄａｙ ２０１２］。ＧＣＧＲＡはまた、脂肪分解を強化し、肝脂肪合成を抑制し、肝脂肪低減およびＮＡＳＨ消失のさらなる経路をもたらす［Ｓｃｈａｄｅ １９７９］。デュアルアゴニストは、ＧＣＧＲＡを同一分子中のＧＬＰ－１ＲＡと結合させる。肥満の非ヒト霊長類において、ＧＬＰ－１ＲＡ／ＧＣＧＲＡデュアルアゴニストの慢性投与は、ＧＬＰ－１ＲＡモノアゴニストと比較して、より大きく、体重を低減し、耐糖能を改善した［Ｔｓｃｈｏｐ ２０１６］。ＧＬＰ－１のグルカゴン活性に対して５：１に偏ったＧＬＰ－１／ＧＣＧＲデュアルアゴニストであるコタデュチドの臨床試験は、わずか６週間で肝脂肪分画が３９％と顕著に減少し、リラグルチド単独よりＮＡＳＨ関連のアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）低減のより大きな改善を示した。しかし、２６週間のコタデュチド投与にわたる体重減少の程度は、リラグルチドよりも有意に大きくなく（５．４％対５．５％）、５：１の比率は、肝脂肪低減には許容できるが、体重低減には最適ではないことを示唆していた［Ａｌｂａ ２０２１， Ａｍｂｅｒｙ ２０１８， Ｎａｈｒａ ２０２１， Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ ２０１６］。均衡のとれた（１：１）アゴニズムは、一方のアゴニストが他方のアゴニストよりも有利な偏った比率よりも、より大きな体重減少および代謝効果に関連することが示されている［Ｄａｙ ２０１２］。均衡のとれたデュアルアゴニストであるＪＮＪ ６４５６５１１１［Ａｌｂａ ２０２１］を用いた最近の試験は、わずか１２週間で体重の顕著な低減を達成した（ＮＣＴ０３５８６８３０）。証拠は、ＧＬＰ－１ＲＡ／ＧＣＧＲＡデュアルアゴニストも血糖管理にプラスの効果を発揮し得ることを示唆している［Ｎａｈｒａ ２０２１］。ＧＬＰ－１に偏ったＧＬＰ－１ＲおよびＧＬＰ－１ベースのデュアルレセプターアゴニストは、悪心、嘔吐および下痢を含む、ＧＩ副作用と一般的に関連している［Ｆｉｌｉｐｐａｔｏｓ ２０１４］。これらの薬剤はまた、副作用を低減するために長期にわたって漸増する必要があり［Ａｍｂｅｒｙ ２０１８， Ｎｅｗｓｏｍｅ ２０２０， Ｆｒｉａｓ ２０１８］、忍容性および投与レジメンの改善した薬剤を必要とする。ＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲアゴニズムの両方が、体重減少に寄与するため、単分子ＧＬＰ－１Ｒ／ＧＣＧＲデュアルアゴニストではより積極性の低い投与を期待し、ＧＩ毒性の発生率が低下する可能性がある。
非アルコール性脂肪肝疾患を有する糖尿病および非糖尿病過体重および肥満の対象におけるＡＬＴ－８０１の第１相１２週間の無作為化二重盲検プラセボ対照試験
ＡＬＴ－８０１は、グルカゴン様ペプチド１受容体（ＧＬＰ－１Ｒ）およびグルカゴン受容体（ＧＣＧＲ）に対して等価なデュアルアゴニスト特性を有する修飾した２９のアミノペプチドである。ＡＬＴ－８０１は、脂肪症が、線維症を有するか、または有さない、肝細胞損傷および炎症（脂肪性肝炎）を導く非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）のサブグループである非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）のため開発されている。米国（ＵＳ）では、ＮＡＳＨは、末期肝疾患または肝移植の主な原因となっている［Ｇｏｌｄｂｅｒｇ ２０１７］。肥満は、ＮＡＳＨの中心的な要因であり、体重減少は、肝脂肪の低減およびＮＡＳＨの改善をもたらす［Ｖｉｌａｒ－Ｇｏｍｅｚ ２０１５］。ＮＡＳＨを有する個体の８０％より多くは、過体重または肥満であり［Ｄｉｅｈｌ ２０１７］、現在利用可能な米国食品医薬品局（ＦＤＡ）が承認した体重減少を誘導するための薬理学的選択肢はないため、療法は、大部分、減量を達成することを目的とした生活習慣への介入に基づく。しかしながら、生活習慣の改善だけでは長期的な体重減少を達成し、維持することは困難である。グルカゴン様ペプチド－１受容体アゴニスト（ＧＬＰ－１ＲＡ）は、ＮＡＳＨを有する患者に対する処置選択肢として浮上してきた。１日１回投与のＧＬＰ－１ＲＡであるリラグルチドは、ＮＡＳＨの消失と関連し、肝線維症の改善傾向を伴う［Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ ２０１６］。最近の試験では、最大０．４ｍｇ／日のセマグルチド投与は、有意に高いＮＡＳＨの消失率とともに、最大１２．５％の平均体重減少と関連した。１０％以上の体重減少は、最適なＮＡＳＨ消失およぶ線維症の改善のカットオフと考えられている［Ｖｉｌａｒ－Ｇｏｍｅｚ ２０１５］。体重減少のレベルが高いほど、ＮＡＳＨ患者が直面する最も深刻な併存疾患を表す、心血管疾患および非肝臓悪性腫瘍の発生率の低下とも関連する。残念ながら、これらの試験において利用したリラグルチドおよびセマグルチドの用量は、患者の不快感およびコンプライアンス違反につながり得る胃腸（ＧＩ）ＡＥの高い割合と関連していた。ＧＬＰ－１ＲＡは、食欲および摂食に対する中枢作用を発揮し、一方、ＧＣＧＲアゴニスト（ＧＣＧＲＡ）は、動物モデルおよびヒトにおいてエネルギー消費を増加させる［Ｌｙｎｃｈ ２０１４］。ＧＣＧＲＡおよびＧＬＰ－１ＲＡの作用は、ＧＬＰ－１ＲＡ単独と比較して、相乗的に体重減少を促進することが示されている［Ｄａｙ ２０１２］。ＧＣＧＲＡはまた、脂肪分解を強化し、肝脂肪合成を抑制し、肝脂肪低減およびＮＡＳＨ消失のさらなる経路をもたらす［Ｓｃｈａｄｅ １９７９］。デュアルアゴニストは、ＧＣＧＲＡを同一分子中のＧＬＰ－１ＲＡと結合させる。肥満の非ヒト霊長類において、ＧＬＰ－１ＲＡ／ＧＣＧＲＡデュアルアゴニストの慢性投与は、ＧＬＰ－１ＲＡモノアゴニストと比較して、より大きく、体重を低減し、耐糖能を改善した［Ｔｓｃｈｏｐ ２０１６］。ＧＬＰ－１のグルカゴン活性に対して５：１に偏ったＧＬＰ－１／ＧＣＧＲデュアルアゴニストであるコタデュチドの臨床試験は、わずか６週間で肝脂肪分画が３９％と顕著に減少し、リラグルチド単独よりＮＡＳＨ関連のアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）低減のより大きな改善を示した。しかし、２６週間のコタデュチド投与にわたる体重減少の程度は、リラグルチドよりも有意に大きくなく（５．４％対５．５％）、５：１の比率は、肝脂肪低減には許容できるが、体重低減には最適ではないことを示唆していた［Ａｌｂａ ２０２１， Ａｍｂｅｒｙ ２０１８， Ｎａｈｒａ ２０２１， Ａｒｍｓｔｒｏｎｇ ２０１６］。均衡のとれた（１：１）アゴニズムは、一方のアゴニストが他方のアゴニストよりも有利な偏った比率よりも、より大きな体重減少および代謝効果に関連することが示されている［Ｄａｙ ２０１２］。均衡のとれたデュアルアゴニストであるＪＮＪ ６４５６５１１１［Ａｌｂａ ２０２１］を用いた最近の試験は、わずか１２週間で体重の顕著な低減を達成した（ＮＣＴ０３５８６８３０）。証拠は、ＧＬＰ－１ＲＡ／ＧＣＧＲＡデュアルアゴニストも血糖管理にプラスの効果を発揮し得ることを示唆している［Ｎａｈｒａ ２０２１］。ＧＬＰ－１に偏ったＧＬＰ－１ＲおよびＧＬＰ－１ベースのデュアルレセプターアゴニストは、悪心、嘔吐および下痢を含む、ＧＩ副作用と一般的に関連している［Ｆｉｌｉｐｐａｔｏｓ ２０１４］。これらの薬剤はまた、副作用を低減するために長期にわたって漸増する必要があり［Ａｍｂｅｒｙ ２０１８， Ｎｅｗｓｏｍｅ ２０２０， Ｆｒｉａｓ ２０１８］、忍容性および投与レジメンの改善した薬剤を必要とする。ＧＬＰ－１ＲとＧＣＧＲアゴニズムの両方が、体重減少に寄与するため、単分子ＧＬＰ－１Ｒ／ＧＣＧＲデュアルアゴニストではより積極性の低い投与を期待し、ＧＩ毒性の発生率が低下する可能性がある。
【0164】
本実施例は、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）を有する糖尿病および非糖尿病性過体重および肥満（肥満度指数［ＢＭＩ］２８．０～４０．０ｋｇ／ｍ２）対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性、ならびに肝脂肪分画、人体測定パラメーター、脂質代謝、炎症マーカーおよび線維症マーカーに対するその作用を評価するための第１相無作為化二重盲検プラセボ対照並行群試験を記載する。本試験を、１２週間のＡＬＴ－８０１処置後のＮＡＦＬＤを有する糖尿病および非糖尿病性過体重および肥満対象におけるＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪分画の変化を評価するよう設計する。試験はまた、１２週間の処置後の、体重、脂質代謝、代謝マーカー、および炎症マーカー、ならびにＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性の変化を評価する。対象を、ベースラインでの糖尿病の有無で層別化する。本試験を、１２週間のＡＬＴ－８０１処置後のＮＡＦＬＤを有する糖尿病および非糖尿病性過体重および肥満対象におけるＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪分画の変化を評価するよう設計する。本試験はまた、１２週間の処置後の、体重、脂質代謝、代謝マーカー、および炎症マーカーならびにＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性の変化を評価する。対象を、ベースラインでの糖尿病の有無で層別化する。
【0165】
本試験について、好適な対象は、ＦｉｂｒｏＳｃａｎ（登録商標）制御減衰パラメーター（ＣＡＰ）≧２８０ｄＢ／ｍ、および肝硬度測定（ＬＳＭ）＜８．５ｋＰａ、ならびに磁気共鳴画像プロトン密度脂肪分画（ＭＲＩ－ＰＤＦＦ）≧１０％と定義した、有意な線維症を伴わないＮＡＦＬＤを有するものである。対象が、２型糖尿病（Ｔ２ＤＭ）を有する場合、スクリーニング前少なくとも３ヶ月間の、（１）食事および運動療法、（２）胃腸症状（悪心、嘔吐もしくは下痢）を有さないか、または軽度の胃腸症状（悪心、嘔吐もしくは下痢）を伴う、メトホルミン、および／または（３）ナトリウムグルコース共輸送体－２（ＳＧＬＴ－２）療法のいずれかの組み合わせの安定なレジメンにある。インフォームド・コンセントの提供後、対象は、最長３５日間のスクリーニングを受ける。対象を、通常の食事、アルコール消費、および身体活動を維持する方法、ならびに試験参加中はいかなる時も新たな食事、サプリメント、または運動プログラムを開始しないよう指導する。１日目の受診時に食事および運動に関するカウンセリングを行い、その後の受診時にカウンセリングを強化する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない対象は、以下の処置群：１）ＡＬＴ－８０１、１．２ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；２）ＡＬＴ－８０１、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；３）１週目に、ＡＬＴ－８０１、０．６ｍｇ、ＳＣ、２週目に、１．２ｍｇ、ＳＣ、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、２週間（３および４週目）、および２．４ｍｇ、ＳＣ、週１回、５週目～１２週目；またはにプラセボ（０．９％ＮａＣｌ）、皮下（ＳＣ）、週１回、１２週間のいずれかに１：１：１：１で無作為化する。対象を、ベースライン時の糖尿病の有無で層別化する。各処置群において１８人の対象が存在する。対象は、１日目に試験薬の初回投与を受ける。その後の受診を、８５日目または早期終了までクリニック、自宅または職場で毎週行う。対象は、１１０日目に安全性フォローアップのために再受診する。治験責任医師は、１２週間の処置期間中に肝機能検査値異常が悪化した対象における介入のタイミングおよび方法についての決定基準に従う。空腹時血漿グルコース（ＦＰＧ）レベルはグルコメーターで測定し、ベースラインおよび各投与前に試験スタッフが記録する。非受診日においても、対象は、毎朝ＦＰＧをモニターし、記録し、読み取り値＞２４０ｍｇ／ｄＬまたは＜７０ｍｇ／ｄＬについては試験実施施設に連絡する。対象はまた、低血糖の症状および処置について教育を受け、血漿グルコース＜７０ｍｇ／ｍＬまたは低血糖を示唆する症状を経験した場合、グルコメーター読み取り値を得る。対象は、自宅で経験した低血糖のいずれかの症状を記録し、８日目から始まる各受診時に治験責任医師が確認する。治験責任医師は、食事のカウンセリングを繰り返し行うことを含む、ＦＰＧを制限内に維持する方法について対象をカウンセリングし、１２週間の処置期間中に持続性高血糖を有する対象に対する介入のタイミングと方法については、決定基準に従う。ＦＰＧの有意な減少を繰り返し観察した場合（ＦＰＧ＜５０ｍｇ／ｄＬ）、または対象が、低血糖を処置するために介入もしくは外部の援助を必要とする場合、対象は、試験から脱落し、交代することがある。まばらな血液試料を、ＡＬＴ－８０１薬物動態（ＰＫ）については集団ＰＫおよびＰＫ－ＰＤ（薬力学的）モデリングにおける他の試験のデータと組み合わせるために、メトホルミンのＰＫについては、ＡＬＴ－８０１の存在下でのメトホルミン濃度の経時的変化を評価するために採取する。血液試料を採取して、免疫原性も評価する。
【0166】
安全性評価項目は、有害事象（ＡＥ）、バイタルサインおよび二重積（平均心拍数×平均収縮期血圧として計算したＲＰＰ）、肝機能検査および血清グルコースを含む安全性検査、尿検査、理学的検査、注射部位反応、ならびに免疫原性（中和抗体）を含む。薬力学的（ＰＤ）評価項目は、ベースラインと比較したＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪分画の変化（相対的および絶対的％変化、肝脂肪分画が相対的に３０％、４０％、５０％低減した対象の割合、肝脂肪が正常化した対象の割合）、人体測定パラメーター（体重、ウエスト周囲径、およびＭＲＩ検査による体組成）、脂質代謝（総コレステロール（ＴＣ）、低密度リポタンパク質コレステロール（ＬＤＬ－Ｃ）、高密度リポタンパク質コレステロール（ＨＤＬ－Ｃ）、アポリポタンパク質Ａ（Ａｐｏ Ａ）およびＢ（Ａｐｏ Ｂ）、リポタンパク質（ａ）、トリグリセリド（ＴＧ））、代謝マーカー（ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）、アディポネクチン、レプチン）、炎症マーカー（ＴＮＦ、高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ－ＣＲＰ）、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤（ＰＡＩ－１））、線維化マーカー（Ｎ末端ＩＩＩ型コラーゲンプロペプチド（Ｐｒｏ－Ｃ３）、強化肝線維症（ＥＬＦ）検査）、脂質毒性マーカー、クオリティ・オブ・ライフ評価項目、ならびに薬物動態（ＰＫ）評価項目のベースラインからの変化を含む。ＮＡＦＬＤの先行研究で観察された処置作用に基づき、本試験は、０．０５の有意水準（両側）でプラセボＳＣ注射を受けた対象と比較したＡＬＴ－８０１を有する対象におけるベースラインと比較したＭＲＩ－ＰＤＦＦによる肝脂肪分画の変化における有意差を検出するのに十分な検出力を有する。試験薬を少なくとも１回投与された無作為化対象（安全性解析対象集団）を安全性解析にすべて含める。
【0167】
安全性の目的は、ＮＡＦＬＤを有する対象におけるＡＬＴ－８０１の安全性および忍容性を評価することである。主な安全性評価項目は、有害事象（ＡＥ）、バイタルサイン、二重積（平均心拍数×平均収縮期血圧）、肝機能検査、高血糖および低血糖有害事象の発生率、理学的検査、注射部位反応、ならびに免疫原性を含む。二次的な安全性評価項目は、空腹時血清グルコース、ＣＧＭパラメーター（グルコース濃度－時間プロファイル下面積、範囲内時間、ならびに高血糖および低血糖）、ならびにＨｂＡ１ｃを含むベースライン血糖パラメーターからの変化を含む。連続安全性データを、投与量レベルおよび処置（実薬またはプラセボ）毎に記述統計学（加算平均、標準偏差［ＳＤ］、中央値、最小値、および最大値）を用いて要約する。カテゴリー別の安全性データを、用量レベル、処置群、および適用可能な場合は日毎の頻度数およびパーセンテージを用いて要約する。ＡＥを、最新のＭｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）バージョンを使用してコード化する。報告者が使用した用語、基本語、器官別大分類（ＳＯＣ）、処置、重症度、および試験薬との関連を含む、対象毎のＡＥデータリストを提供する。処置下で発現したＡＥ（ＴＥＡＥ）を経験した対象の数ならびに個々のＴＥＡＥおよび注射部位反応の数を、処置群、ＳＯＣおよび基本語毎に要約する。ＴＥＡＥをまた、重症度および試験薬との関連毎に要約する。肝機能検査および空腹時血清グルコース、バイタルサイン（ＲＰＰの計算を含む）、ならびにＥＣＧ評価を含む臨床検査評価を、処置群、用量レベル、およびプロトコールが指定した収集時点毎に要約する。プロトコールが指定した各時点におけるベースラインからの変化の要約も、処置群毎に示す。理学的検査の変化も各対象について列挙する。併用薬を、対象毎に列挙し、最新版の世界保健機関（ＷＨＯ）薬物辞書を使用してコード化する。病歴を、最新のＭｅｄＤＲＡバージョンを用いてコード化し、対象毎に記載する。
【0168】
薬力学（ＰＤ）の目的は、ＮＡＳＨ対象における肝脂肪分画、人体測定パラメーター（例えば、体重、ウエスト周囲径、ＢＭＩ）、脂質代謝（例えば、コレステロール（総コレステロール、低密度リポタンパク質（ＬＤＬ－Ｃ）、高密度リポタンパク質（ＨＤＬ－Ｃ）、アポリポタンパク質（Ａｐｏ）ＡおよびＢ、リポタンパク質（ａ）、ならびにトリグリセリド（ＴＧ））、代謝マーカー（例えば、レプチン、ヘモグロビンＡ１ｃ（ＨｂＡ１ｃ）、アディポネクチン）、炎症マーカー（例えば、腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、高感度Ｃ反応性タンパク質（ｈｓ－ＣＲＰ）、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤－１（ＰＡＩ－１）、単球走化性タンパク質－１（ＭＣＰ－１）、インターロイキン－６（ＩＬ－６）、ならびにプラスミノーゲン活性化因子阻害剤－１（ＰＡＩ－１））、線維症マーカー（例えば、Ｎ末端ＩＩＩ型コラーゲンプロペプチド（Ｐｒｏ－Ｃ３）、強化肝線維症（ＥＬＦ）検査）、ならびに脂肪毒性マーカーに対するＡＬＴ－８０１の作用を評価することである。インスリン感受性および分泌、人体測定パラメーター、脂質代謝、代謝マーカー、脂質毒性マーカー、および炎症マーカーの変化を列挙し、記述統計学（症例数（Ｎ）、加算平均、ＳＤ、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何学的変動係数（ＣＶ％））を用いて処置群毎に要約する。ベースラインＢＭＩのＰＤパラメーターに対する作用を、共変量解析により評価する。
【0169】
クオリティ・オブ・ライフ（ＱｏＬ）への作用もモニターする（ベースラインと比較したＳｈｏｒｔ Ｆｏｒｍ－３６およびＩｍｐａｃｔ ｏｆ Ｗｅｉｇｈｔ ｏｎ Ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ Ｌｉｆｅ－Ｌｉｔｅ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｔｒｉａｌｓバージョン（ＣＴについてのＩＷＱｏＬ－Ｌｉｔｅ）の変化）。身体的健康および精神的健康の２つの概要スコア、ＳＦ－３６についての８つのドメインスコア、ならびにＣＴについてのＩＷＱｏＬ－Ｌｉｔｅの複合スコアのベースラインからの変化を列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、中央値、最小値、最大値、幾何平均、および幾何学的ＣＶ％）を用いて処置群毎に要約する。連続評価項目に適用可能な推測統計を、上記の通り適用する。
【0170】
薬物動態（ＰＫ）の目的は、ＡＬＴ－８０１濃度およびベースラインからのメトホルミン濃度の変化を評価することである。個々のＡＬＴ－８０１およびメトホルミン濃度データを列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、および最大値）を用いて処置群および時点毎に要約する。各コホートの個々および平均±ＳＤ ＡＬＴ－８０１濃度－時間プロファイルをグラフで示す。ベースラインからのメトホルミン濃度の変化を列挙し、記述統計学（Ｎ、加算平均、ＳＤ、ＣＶ％、中央値、最小値、および最大値）を用いて処置群および時点毎に要約する。個々の対象ＡＬＴ－８０１血漿中濃度時間曲線および関連するＰＫパラメーターの予測を可能にする集団ＰＫモデルを開発する。性別、年齢、体重、ＢＭＩ、および併用薬を含む共変量を可能な限り検討し、有効性と安全性の評価項目について曝露応答関係を可能な限り検討する。
【0171】
本試験の結果は、ＮＡＳＨを有する対象における週１回、最大１２回の皮下（ＳＣ）注射によって投与したＡＬＴ－８０１は、対象において安全であり、忍容性であり、プラスのＰＤ、クオリティ・オブ・ライフ、およびＰＫ作用、ならびにグルコース制御を示す。
【0172】
実施例８
ＡＬＴ－８０１を用いた処置による肝脂肪の低減
本実施例は、ヒト対象の肝脂肪分画に対するＡＬＴ－８０１の作用を評価する試験を記載する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない対象を、以下の処置群：１）ＡＬＴ－８０１、１．２ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；２）ＡＬＴ－８０１、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；３）１週目のＡＬＴ－８０１、０．６ｍｇ、ＳＣ、２週目の１．２ｍｇ、ＳＣ、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、２週間（３および４週目）、ならびに２．４ｍｇ、ＳＣ、週１回、５～１２週目；またはプラセボ（０．９％ＮａＣｌ）、皮下（ＳＣ）、週１回、１２週間の１つに１：１：１：１で無作為化する。結果を表１９～２３（前実施例の表１１および１６～１８も参照）および図６～１３に示す。図６～８は、すべての測定可能な対象に関するデータを示し、安全性に重大な問題はなく、肝脂肪低減を示している。図９～１０は、脂肪肝対象（脂肪肝疾患を有する対象）に関するデータを示す。
ＡＬＴ－８０１を用いた処置による肝脂肪の低減
本実施例は、ヒト対象の肝脂肪分画に対するＡＬＴ－８０１の作用を評価する試験を記載する。組み入れ基準を満たし、除外基準を満たさない対象を、以下の処置群：１）ＡＬＴ－８０１、１．２ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；２）ＡＬＴ－８０１、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、１２週間；３）１週目のＡＬＴ－８０１、０．６ｍｇ、ＳＣ、２週目の１．２ｍｇ、ＳＣ、１．８ｍｇ、ＳＣ、週１回、２週間（３および４週目）、ならびに２．４ｍｇ、ＳＣ、週１回、５～１２週目；またはプラセボ（０．９％ＮａＣｌ）、皮下（ＳＣ）、週１回、１２週間の１つに１：１：１：１で無作為化する。結果を表１９～２３（前実施例の表１１および１６～１８も参照）および図６～１３に示す。図６～８は、すべての測定可能な対象に関するデータを示し、安全性に重大な問題はなく、肝脂肪低減を示している。図９～１０は、脂肪肝対象（脂肪肝疾患を有する対象）に関するデータを示す。
【0173】
【表20】
【0174】
【表21】
【0175】
【表22】
【0176】
【表23】
【0177】
上記のように、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇのＡＬＴ－８０１を用いた６週間の処置後の、ベースラインでＭＲＩ－ＰＤＦＦ＞５％を有する対象におけるＭＲＩ－ＰＤＦＦで測定した肝脂肪含有量における強固な変化（平均相対変化率９０％超）。６週目の平均体重減少は、１．２ｍｇ、１．８ｍｇおよび２．４ｍｇのＡＬＴ－８０１で、それぞれ、１．８％、５．４％、および４．７％であり、プラセボでの平均体重増加は０．９％であった。本試験の結果は、ＡＬＴ－８０１が、脂肪症（脂肪肝疾患）を有する対象を含む、対象における肝脂肪を低減したことを示す。ＰＫプロファイルにより、週１回の投与が適切であることを確認した。血圧および血清脂質レベルも、すべての群を改善した。グルコースホメオスタシスを維持した。脂肪燃焼増加の指標であるケトン体産生（期待したグルカゴン効果）も改善した。
【0178】
試薬およびそれを使用する方法の他の利点も、当業者に理解されるように、本明細書中に提供される。ある特定の実施形態を好ましい実施形態の観点から説明してきたが、当業者には変形および変更が生じることが理解される。したがって、添付の特許請求の範囲は、以下の特許請求の範囲内に入るすべてのそのような等価な変形をカバーすることが意図される。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5A】
【図5B】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【図15】
【配列表】
【国際調査報告】