特表 2024-500900 自己免疫疾患および炎症性疾患を治療するためのＩＬ－２ムテイン

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-01-10

(54)【発明の名称】自己免疫疾患および炎症性疾患を治療するためのＩＬ－２ムテイン

(51)【国際特許分類】

   C12N 15/26 20060101AFI20231227BHJP

   C07K 14/55 20060101ALI20231227BHJP

   C12N 15/63 20060101ALI20231227BHJP

   C12N 1/15 20060101ALI20231227BHJP

   C12N 1/19 20060101ALI20231227BHJP

   C12N 1/21 20060101ALI20231227BHJP

   C12N 5/10 20060101ALI20231227BHJP

   C12P 21/02 20060101ALI20231227BHJP

   A61K 38/20 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 37/02 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 19/02 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 29/00 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 1/04 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 17/06 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 25/00 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 3/10 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 27/02 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 17/00 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 17/14 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20231227BHJP

   A61P 1/16 20060101ALI20231227BHJP

【ＦＩ】

C12N15/26

C07K14/55 ZNA

C12N15/63 Z

C12N1/15

C12N1/19

C12N1/21

C12N5/10

C12P21/02 C

A61K38/20

A61P43/00 111

A61P37/02

A61P19/02

A61P29/00 101

A61P1/04

A61P17/06

A61P25/00

A61P13/12

A61P3/10

A61P27/02

A61P17/00

A61P17/14

A61P37/06

A61P1/16

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023538101

(86)(22)【出願日】2021-12-21

(85)【翻訳文提出日】2023-08-14

(86)【国際出願番号】 US2021064476

(87)【国際公開番号】W WO2022140312

(87)【国際公開日】2022-06-30

(31)【優先権主張番号】63/129,712

(32)【優先日】2020-12-23

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】522242018

【氏名又は名称】メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】アルベス，スティーブン・イー．

(72)【発明者】

【氏名】アザディ，グレア

(72)【発明者】

【氏名】ボーモント，マリベル

(72)【発明者】

【氏名】ベンソ，リア

(72)【発明者】

【氏名】チェン，アラン・シー．

(72)【発明者】

【氏名】ゲオルギエフ，ピーター

(72)【発明者】

【氏名】ホール，ブライアン・イー．

(72)【発明者】

【氏名】フアン，ベロニカ・エム．

(72)【発明者】

【氏名】ムーア，レニー

(72)【発明者】

【氏名】スリラマン，ヴェンカタラマン

(72)【発明者】

【氏名】チャンフーバー，ジエ

【テーマコード（参考）】

4B064

4B065

4C084

4H045

【Ｆターム（参考）】

4B064AG05

4B064CA10

4B064CA19

4B064CE12

4B064DA01

4B065AA90X

4B065AA90Y

4B065AB01

4B065AC14

4B065BA02

4B065CA24

4B065CA44

4C084AA02

4C084AA07

4C084BA01

4C084BA21

4C084DA14

4C084NA14

4C084ZA01

4C084ZA33

4C084ZA68

4C084ZA75

4C084ZA81

4C084ZA89

4C084ZA92

4C084ZA96

4C084ZB07

4C084ZB08

4C084ZB15

4C084ZC35

4C084ZC41

4H045AA10

4H045AA20

4H045AA30

4H045BA10

4H045CA40

4H045DA04

4H045EA20

4H045FA74

(57)【要約】

ＩＬ－２受容体サブユニットには結合するがＩＬ－２受容体サブユニットに対しては測定可能な結合を示さないＩＬ－２ムテインを本明細書において提供する。そのようなＩＬ－２ムテインを含む組成物、キット、方法および使用も提供する。
【選択図】なし

【特許請求の範囲】

【請求項1】

配列番号１または２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインであって、ここで、配列番号１または２の１９位のＤがＮで置換されており、配列番号１または２の３３位のＰがＲで置換されており、ここで、該ポリペプチドが、所望により、配列番号１または２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい、前記ＩＬ－２ムテイン。

【請求項2】

配列番号１または２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインであって、ここで、配列番号１または２の１９位のＤがＮで置換されており、配列番号１または２の６７位のＥがＳで置換されており、ここで、該ポリペプチドが、所望により、配列番号１または２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい、前記ＩＬ－２ムテイン。

【請求項3】

第１ポリペプチドが配列番号１または２の６７位のＥからＳへの置換を更に含む、請求項１記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項4】

第１ポリペプチドが配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、または７３位のＱからＰへの置換を含む、請求項１～３のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項5】

第１ポリペプチドが、以下の３つの置換、すなわち、配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、または７３位のＱからＰへの置換のうちの任意の２つを更に含む、請求項１～３のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項6】

第１ポリペプチドが配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、および７３位のＱからＰへの置換を更に含む、請求項１～３のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項7】

配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテイン。

【請求項8】

第１ポリペプチドが、配列番号１３、１４または１５に記載されているアミノ酸配列を更に含む、請求項１～７のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項9】

第１ポリペプチドが、配列番号１６に記載されているリンカーを更に含む、請求項８記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項10】

第２ポリペプチドを更に含み、
（１）第１ポリペプチドが、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含み、または
（２）第１ポリペプチドが、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項８または９記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項11】

第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、
第１ポリペプチドが、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む、
ＩＬ－２ムテイン。

【請求項12】

第１ポリペプチドが、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１１記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項13】

第１ポリペプチドが、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１１記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項14】

第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、
第１ポリペプチドが、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む、
ＩＬ－２ムテイン。

【請求項15】

第１ポリペプチドが、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１４記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項16】

第１ポリペプチドが、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１４記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項17】

第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、
第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれが、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３または５４に記載されているアミノ酸配列を含む同じアミノ酸配列を含む、
ＩＬ－２ムテイン。

【請求項18】

第１ポリペプチドが配列番号４５のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む、請求項１７記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項19】

第１ポリペプチドが配列番号４６のアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドが配列番号４６のアミノ酸配列を含む、請求項１７記載のＩＬ－２ムテイン。

【請求項20】

請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインと薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項21】

治療的有効量の請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法。

【請求項22】

ＩＬ－２媒介性疾患が自己免疫疾患である、請求項２１記載の方法。

【請求項23】

ＩＬ－２媒介性疾患が関節リウマチ、クローン病、乾癬、乾癬性関節炎、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、皮膚エリテマトーデス（ＣＬＥ）、ループス腎炎、強直性脊椎炎、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、視神経脊髄炎、セリアック病、強皮症、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎または炎症性ミオパチーである、請求項２１記載の方法。

【請求項24】

それを要する対象においてＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化することなく制御性Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、
方法。

【請求項25】

それを要する対象において、ＩＬ－２受容体αサブユニットを発現する細胞を活性化することなく、ＩＬ－２受容体βサブユニットを発現する細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、
方法。

【請求項26】

（ａ）請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインの第１ポリペプチド、
（ｂ）請求項１０～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインの第２ポリペプチド、または
（ｃ）請求項１０～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインの第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチド
をコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸。

【請求項27】

請求項２６記載の単離された核酸を含む発現ベクター。

【請求項28】

請求項２６記載の単離された核酸または請求項２７記載の発現ベクターを含む宿主細胞。

【請求項29】

ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、
（ａ）請求項２８記載の宿主細胞を培養すること、
（ｂ）請求項２７記載の発現ベクターを発現させること、または
（ｃ）請求項２６記載の単離された核酸を発現させること
を含む、ＩＬ－２ムテインの製造方法。

【請求項30】

対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための、請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物の使用。

【請求項31】

対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療のための、請求項１～１９のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物の使用。

【請求項32】

対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための医薬を製造するための、請求項１～１７のいずれか１項記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項２０記載の医薬組成物の使用。

【請求項33】

ＩＬ－２媒介性疾患が自己免疫疾患である、請求項３０～３２のいずれか１項の使用。

【請求項34】

ＩＬ－２媒介性疾患が関節リウマチ、クローン病、乾癬、乾癬性関節炎、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、皮膚エリテマトーデス（ＣＬＥ）、ループス腎炎、強直性脊椎炎、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、視神経脊髄炎、セリアック病、強皮症、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎または炎症性ミオパチーである、請求項３０～３２のいずれか１項記載の使用。

【請求項35】

ＩＬ－２媒介性疾患がＧＶＨＤである、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項36】

ＩＬ－２媒介性疾患がＳＬＥである、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項37】

ＩＬ－２媒介性疾患がＣＬＥである、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項38】

ＩＬ－２媒介性疾患が多発性硬化症である、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項39】

ＩＬ－２媒介性疾患が潰瘍性大腸炎である、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項40】

ＩＬ－２媒介性疾患がクローン病である、請求項２３記載の方法または請求項３４記載の使用。

【請求項41】

請求項１８記載のＩＬ－２ムテインと薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項42】

請求項１９記載のＩＬ－２ムテインと薬学的に許容される担体とを含む医薬組成物。

【請求項43】

治療的有効量の請求項１８記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項４１記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法。

【請求項44】

治療的有効量の請求項１９記載のＩＬ－２ムテインまたは請求項４２記載の医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

分野

【0002】

本発明は、ＩＬ－２受容体αサブユニットには結合するがＩＬ－２受容体βサブユニットに対しては測定可能な結合を示さないＩＬ－２ムテイン（mutein）に関する。本発明はまた、そのようなＩＬ－２ムテインを含む組成物、キット、方法および使用に関する。

【0003】

関連出願に対する相互参照

【0004】

本出願は２０２０年１２月２３日付出願の米国仮特許出願第６３／１２９，７１２号の利益を主張するものであり、その内容の全体を参照により本明細書に組み入れることとする。

【0005】

電子的に提出される配列表に対する言及

【0006】

本出願の配列表は、ファイル名「２５１８４ＷＯＰＣＴ－ＳＥＱＬＩＳＴ－２１ＮＯＶ２０２１．ＴＸＴ」、２０２１年１１月２１日の作成日および１３２ＫＢのサイズを有するＡＳＣＩＩ形式の配列表として、ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して電子的に提出される。ＥＦＳ－Ｗｅｂを介して提出されるこの配列表は本明細書の一部であり、その全体を参照により本明細書に組み入れることとする。

【背景技術】

【0007】

インターロイキン２（ＩＬ－２）の生物活性は、以下の２つまたは３つのポリペプチドサブユニットを含む多サブユニットＩＬ－２受容体（ＩＬ－２Ｒ）複合体によってもたらされる。すなわち、ＣＤ２５（ＩＬ－２Ｒ αサブユニット）はＩＬ－２に対するＩＬ－２複合体のアフィニティを増強し、一方、ＣＤ１２２（ＩＬ－２Ｒ βサブユニット）およびＣＤ１３２（ＩＬ－２Ｒ γサブユニット）はシグナル伝達に要求される。二量体ＩＬ－２Ｒ β／γ複合体および三量体ＩＬ－２Ｒ α／β／γ複合体は種々の免疫細胞亜型によって異なって発現される。例えば、高アフィニティ三量体ＩＬ－２Ｒ α／β／γ複合体は制御性Ｔ（Ｔｒｅｇ）細胞によって高レベルで構成的に発現され、ＣＤ４＋ Ｔエフェクター細胞によって低レベルで一過性に発現され、一方、中程度のアフィニティの二量体ＩＬ－２Ｒ β／γ複合体は主にＣＤ８＋ Ｔ細胞およびナチュラルキラー細胞上で発現される（Ｓｔａｕｂｅｒら，（２００６）ＰＮＡＳ ＵＳＡ １０３（８）：２７８８－９３；ＭａｌｅｋおよびＣａｓｔｒｏ，（２０１０）Ｉｍｍｕｎｉｔｙ ３３（２）：１５３－１６５；ＲｏｓｓおよびＣａｎｔｒｅｌｌ，（２０１８）Ａｎｎｕ Ｒｅｖ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３６：４１８－４３３）。したがって、二量体または三量体ＩＬ－２Ｒ複合体に結合する傾向を有するＩＬ－２ムテインは種々の細胞型を活性化し、それぞれ免疫の活性化または抑制をもたらしうる。免疫媒介性疾患を治療するための、異なる細胞型においてＩＬ－２Ｒシグナルをより選択的に活性化しうる革新的なＩＬ－２ムテイン、例えば、自己免疫疾患および炎症性疾患の治療のための、ＩＬ－２Ｒ αサブユニットに選択的に結合する生物学的に最適化されたＩＬ－２ムテインを特定する必要性は未だ満たされていない。

【発明の概要】

【0008】

発明の概括

【0009】

本開示は、ＩＬ－２受容体αサブユニットには結合するがＩＬ－２受容体βサブユニットに対しては測定可能な結合を示さないＩＬ－２ムテインを提供する。また、そのようなＩＬ－２ムテインを含む方法または使用、そのようなＩＬ－２ムテインを含む組成物またはキット、そのようなＩＬ－２ムテインをコードするポリヌクレオチド配列を含む単離された核酸およびベクター、そのような単離された核酸またはベクターを含む細胞（例えば、宿主細胞）、ならびにそのようなＩＬ－２ムテインの製造方法も、本明細書において提供する。

【0010】

１つの態様においては、ＩＬ－２受容体αサブユニットには結合するがＩＬ－２受容体βサブユニットには直接的に結合しないＩＬ－２ムテインを本明細書において提供する。

【0011】

特定の実施形態においては、配列番号１または２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１または２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１または２の３３位のＰはＲで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１または２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。

【0012】

前記のＩＬ－２ムテインの特定の実施形態においては、配列番号１または配列番号２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換は、配列番号１または２の６７位のＥからＳへの置換、６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換および７３位のＱからＰへの置換からなる群から選択される。

【0013】

幾つかの実施形態においては、配列番号１または２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１または２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１または２の６７位のＥはＳで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１または２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、ここで、該ポリペプチドは、所望により、配列番号２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。

【0014】

他の実施形態においては、配列番号１または２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１または２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１または２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１または２の６７位のＥはＳで置換されており、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１または２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、該ポリペプチドは、所望により、配列番号１に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、該ポリペプチドは、所望により、配列番号２に対する１以上の追加的なアミノ酸置換を含んでいてもよい。

【0015】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、または７３位のＱからＰへの置換を更に含む。

【0016】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは以下の３つの置換のうちの任意の２つを更に含む：配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、または７３位のＱからＰへの置換。

【0017】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１または２の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換、および７３位のＱからＰへの置換を更に含む。

【0018】

特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。

【0019】

ＩＬ－２ムテインの幾つかの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１３、１４または１５に記載されているアミノ酸配列を更に含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。

【0020】

ＩＬ－２ムテインの他の実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１６に記載されているリンカーを更に含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。

【0021】

種々の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第２ポリペプチドを更に含む。幾つかの実施形態においては、第１ポリペプチドと第２ポリペプチドとは同じである。他の実施形態においては、第１ポリペプチドと第２ポリペプチドとは同じでない。

【0022】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0023】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0024】

もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0025】

幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0026】

幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0027】

特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0028】

特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドと第２ポリペプチドとは、同じアミノ酸配列を含む。特定の実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのアミノ酸配列のそれぞれは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３または５４に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４９に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５０に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５１に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５２に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５３に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５４に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0029】

もう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つと薬学的に許容される担体とを含む薬学的組成物を提供する。

【0030】

更にもう１つの態様においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法を提供する。

【0031】

特定の実施形態においては、ＩＬ－２媒介性疾患は免疫疾患である。他の実施形態においては、ＩＬ－２媒介性疾患は自己免疫疾患である。

【0032】

幾つかの実施形態においては、免疫疾患は関節リウマチ、クローン病、乾癬、乾癬性関節炎、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、皮膚エリテマトーデス（ＣＬＥ）、ループス腎炎、強直性脊椎炎、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、視神経脊髄炎、セリアック病、強皮症、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎または炎症性ミオパチーである。１つの実施形態においては、免疫疾患は関節リウマチである。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はクローン病である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は乾癬である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は乾癬性関節炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は多発性硬化症である。１つの実施形態においては、免疫疾患はＳＬＥである。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はＣＬＥである。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はループス腎炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は強直性脊椎炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はＩ型糖尿病である。１つの実施形態においては、免疫疾患はシェーグレン症候群である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患は潰瘍性大腸炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は視神経脊髄炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はセリアック病である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は強皮症である。１つの実施形態においては、免疫疾患は側頭動脈炎である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はアトピー性皮膚炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は円形脱毛症である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はＧＶＨＤである。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は自己免疫性肝炎である。１つの実施形態においては、免疫疾患は原発性硬化性胆管炎である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患は炎症性ミオパチーである。

【0033】

更にもう１つの態様においては、対象において、ＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化することなく制御性Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのうちのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを、それを要する対象に投与することを含む方法を提供する。

【0034】

更にもう１つの態様においては、対象において、ＩＬ－２受容体αサブユニットを発現する細胞を活性化することなく、ＩＬ－２受容体βサブユニットを発現する細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを、それを要する対象に投与することを含む方法を提供する。

【0035】

１つの態様においては、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々のポリペプチドのいずれか１つをコードするヌクレオチド配列を含む単離された核酸を提供する。１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第１ポリペプチドのいずれか１つをコードする。もう１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第２ポリペプチドのいずれか１つをコードする。更にもう１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第１ポリペプチドおよび種々の第２ポリペプチドのいずれか１つをコードする。

【0036】

もう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々の単離された核酸のいずれか１つを含む発現ベクターを提供する。

【0037】

更にもう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々の単離された核酸のいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の発現ベクターのいずれか１つを含む宿主細胞を提供する。

【0038】

更にもう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つの製造方法を提供する。１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の宿主細胞のいずれか１つを培養することを含む。もう１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の発現ベクターのいずれか１つを発現させることを含む。更にもう１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の単離された核酸のいずれか１つを発現させることを含む。

【0039】

更にもう１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0040】

１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療のための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0041】

もう１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための医薬の製造のための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0042】

本明細書に記載されている種々の使用の幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２媒介性疾患は免疫疾患である。本明細書に記載されている種々の使用の他の実施形態においては、ＩＬ－２媒介性疾患は自己免疫疾患である。

【0043】

本明細書に記載されている種々の使用の特定の実施形態においては、免疫疾患は関節リウマチ、クローン病、乾癬、乾癬性関節炎、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）、皮膚エリテマトーデス（ＣＬＥ）、ループス腎炎、強直性脊椎炎、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、視神経脊髄炎、セリアック病、強皮症、側頭動脈炎、アトピー性皮膚炎、円形脱毛症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎または炎症性ミオパチーである。１つの実施形態においては、免疫疾患は関節リウマチである。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はクローン病である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は乾癬である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は乾癬性関節炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は多発性硬化症である。１つの実施形態においては、免疫疾患はＳＬＥである。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はＣＬＥである。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はループス腎炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は強直性脊椎炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はＩ型糖尿病である。１つの実施形態においては、免疫疾患はシェーグレン症候群である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患は潰瘍性大腸炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は視神経脊髄炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はセリアック病である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は強皮症である。１つの実施形態においては、免疫疾患は側頭動脈炎である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はアトピー性皮膚炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は円形脱毛症である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患はＧＶＨＤである。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は自己免疫性肝炎である。１つの実施形態においては、免疫疾患は原発性硬化性胆管炎である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患は炎症性ミオパチーである。

【図面の簡単な説明】

【0044】

【図1A】図１Ａ～１Ｃは、例示的なＩＬ－２ムテインが初代ヒトＴｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋ ＦｏｘＰ３＋）（図１Ａ）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ８＋）（図１Ｂ）またはＣＤ４＋ 通常型Ｔ細胞（Ｔｃｏｎｖ）細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５－ ＦｏｘＰ３－）（図１Ｃ）におけるｐＳＴＡＴ５応答を活性化する能力を示す。

【図1B】上記

【図1C】上記

【0045】

【図2A】図２Ａ～２Ｃは、より例示的なＩＬ－２ムテインが初代ヒトＴｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋ ＦｏｘＰ３＋）（図２Ａ）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ８＋）（図２Ｂ）またはＴｃｏｎｖ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５－ ＦｏｘＰ３－）（図２Ｃ）におけるｐＳＴＡＴ５応答を活性化する能力を示す。

【図2B】上記

【図2C】上記

【0046】

【図3A】図３Ａ～３Ｃは、より例示的なＩＬ－２ムテインが初代ヒトＴｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋ ＦｏｘＰ３＋）（図２Ａ）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ８＋）（図２Ｂ）またはＴｃｏｎｖ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５－ ＦｏｘＰ３－）（図２Ｃ）におけるｐＳＴＡＴ５応答を活性化する能力を示す。

【図3B】上記

【図3C】上記

【0047】

【図4A】図４Ａ～４Ｃは、例示的なＩＬ－２ムテインが初代アカゲザルＴｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋ ＣＤ１２７－ ＦｏｘＰ３＋）（図４Ａ）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ８＋）（図４Ｂ）またはＴｃｏｎｖ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５－ ＦｏｘＰ３－）（図４Ｃ）におけるｐＳＴＡＴ５応答を活性化する能力を示す。

【図4B】上記

【図4C】上記

【0048】

【図5A】図５Ａ～５Ｃは、例示的なＩＬ－２ムテインが初代アカゲザルＴｒｅｇ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５＋ ＣＤ１２７－ ＦｏｘＰ３＋）（図５Ａ）、ＣＤ８ Ｔ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ８＋）（図５Ｂ）またはＴｃｏｎｖ細胞（ＣＤ３＋ ＣＤ４＋ ＣＤ２５－ ＦｏｘＰ３－）（図５Ｃ）におけるｐＳＴＡＴ５応答を活性化する能力を示す。

【図5B】上記

【図5C】上記

【0049】

【図6A】図６Ａ～６Ｄは、例示的なＩＬ－２ムテインで処置された異種ＧｖＨＤマウスにおけるヒトＴｒｅｇの増殖を示す。図６Ａは２１ＢＭＴの結果を示し、図６ＢはＤＮＢ５５８の結果を示し、図６Ｃは４８ＢＭＰの結果を示し、図６ＤはＤＮＢ５５７の結果を示す。脾臓内のヒトＣＤ４^＋ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇの割合をＦＡＣＳによって定量した。Ｔｒｅｇの倍率変化は（処置マウスからのヒトＣＤ４Ｔ細胞におけるＴｒｅｇ％ ／ アイソタイプ対照群からのヒトＣＤ４ Ｔ細胞におけるＴｒｅｇ％の平均）として計算される。血液中のムテインの濃度を毎日測定し、右側のＹ軸を用いてプロットした。 ^＊ Ｓｉｄａｋの多重比較検定を用いる一元配置分散分析によるアイソタイプ対照と比較した統計的有意差。

【図6B】上記

【図6C】上記

【図6D】上記

【0050】

【図7A】図７Ａ～７Ｄは、例示的なＩＬ－２ムテインで処置された異種ＧｖＨＤモデルにおけるヒトＴｒｅｇ上のＣＤ２５増殖の増加を示す。図７Ａは２１ＢＭＴの結果を示し、図７ＢはＤＮＢ５５８の結果を示し、図７Ｃは４８ＢＭＰの結果を示し、図７ＤはＤＮＢ５５７の結果を示す。脾臓内のヒトＣＤ４^＋ Ｔｒｅｇ細胞上のＣＤ２５の平均蛍光強度（ＭＦＩ）をＦＡＣＳによって定量した。倍率変化は、（処置マウス由来のヒトＣＤ４^＋ Ｔｒｅｇ細胞上のＣＤ２５のＭＦＩ ／ アイソタイプ対照群由来のヒトＣＤ４^＋ Ｔｒｅｇ細胞上のＣＤ２５のＭＦＩの平均）として計算される。 ^＊ Ｓｉｄａｋの多重比較検定を用いる一元配置分散分析によるアイソタイプ対照と比較した統計的有意差。

【図7B】上記

【図7C】上記

【図7D】上記

【0051】

【図8A】図８Ａ～８Ｄは、実施例８に記載されているＰＫ／ＰＤ研究から得られた、経時的な濃度（ｎＭ）、およびＴｒｅｇにおけるベースラインからの経時的な倍率変化を示す。図８Ａは２１ＢＭＴの結果を示し、図８ＢはＤＮＢ５５８の結果を示し、図８Ｃは４８ＢＭＰの結果を示し、図８ＤはＤＮＢ５５７の結果を示す。

【図8B】上記

【図8C】上記

【図8D】上記

【0052】

【図9】ＦＩＧ．９Ａ～９Ｄは、１価および２価のＩＬ－２ムテインの配向を示す非限定的な概略ＦＩＧ．である。ＦＩＧ．９Ａは、Ｃ末端においてＦｃのＮ末端に連結されたＩＬ－２ムテインを有する２価分子を示す。ＦＩＧ．９Ｂは、Ｃ末端においてＦｃのＮ末端に連結されたＩＬ－２ムテインを有する１つの鎖を有する１価分子を示し、第２の鎖はＦｃ部分であり、それらの２つのＦｃ領域は相補的ノブおよびホール突然変異を介して結合している。ＦＩＧ．９Ｃは、Ｃ末端においてＩＬ－２ムテインのＮ末端に連結されたＦｃを有する２価分子を示す。ＦＩＧ．９Ｄは、Ｃ末端においてＩＬ－２ムテインのＮ末端に連結されたＦｃを有する１価分子を示し、第２の鎖はＦｃ部分であり、それらの２つのＦｃ部分は相補的ノブおよびホール突然変異を介して結合している。

【発明を実施するための形態】

【0053】

詳細な説明

【0054】

定義

【0055】

本発明がより容易に理解されうるように、特定の科学技術用語を以下に具体的に定義する。本明細書の他の箇所で特に定義されていない限り、本明細書中で用いる全ての他の科学技術用語は、本発明が属する技術分野の当業者によって一般的に理解される意味を有する。

【0056】

添付の特許請求の範囲を含む本明細書において用いる単数形の語は、文脈が別段の明らかな定めを示していない限り、対応する複数形を含む。同様に、文脈が別段の明らかな定めを示していない限り、複数形の語は、対応する単数形を含む。

【0057】

「ＩＬ－２ムテイン」は、１以上のアミノ酸置換、欠失または付加を有する部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列を含む分子を意味する。「ＩＬ－２ムテイン」なる語は、１以上のアミノ酸置換、欠失または付加を有する部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列を含む任意の融合タンパク質、タンパク質コンジュゲートまたは多サブユニットタンパク質（例えば、二量体）を含む。特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、１以上のアミノ酸置換、欠失または付加を有する１つの部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列を含み、したがって、「１価」ＩＬ－２ムテインと称される。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、１以上のアミノ酸置換、欠失または付加をそれぞれが有する２つの部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列を含み、したがって、「２価」ＩＬ－２ムテインと称される。完全長の野生型ヒトＩＬ－２アミノ酸配列は配列番号３９に記載されている。部分的なヒトＩＬ－２アミノ酸配列は、配列番号３９に記載されている完全長野生型ヒトＩＬ－２アミノ酸配列の少なくとも５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％を含む。

【0058】

本明細書中で用いる「８６ＢＣＨ」、「９９ＢＨＹ」、「４３ＢＧＯ」、「４４ＢＧＯ」、「５４ＢＧＯ」、「４７ＢＪＯ」、「４８ＢＪＯ」、「４９ＢＪＯ」、「６５ＢＪＯ」、「４４ＢＪＰ」、「４５ＢＪＰ」、「４６ＢＪＰ」または「４７ＢＪＰ」のようなそれぞれの特定のＩＬ－２ムテインは、表１に示されているその特定のアミノ酸置換、欠失または付加を有する部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列、およびその特定のアミノ酸置換、欠失または付加を有する部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２アミノ酸配列を含む任意の融合タンパク質、タンパク質コンジュゲートまたは多サブユニットタンパク質（例えば、二量体）を含む。

【0059】

「Ｆｃ」領域またはドメインは、抗体のＣ_Ｈ２およびＣ_Ｈ３ドメインを含む重鎖フラグメントを意味する。抗体は免疫グロブリン分子の任意のクラス（例えば、ＩｇＧ、ＩｇＥ、ＩｇＭ、ＩｇＤおよびＩｇＡ）または任意のサブクラス（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１およびＩｇＡ２）のものでありうる。２つのＦｃ領域またはドメインは、２以上のジスルフィド結合によって、およびＣ_Ｈ３ドメインの疎水性相互作用によって、二量体を形成しうる。「Ｆｃ変異体」は、野生型Ｆｃ領域またはドメインと比較して１以上のアミノ酸置換、欠失または挿入を含有する。

【0060】

「結合する」または「結合」なる語は、例えば複合体を形成することを含む、分子間の相互作用を意味する。相互作用は、例えば、水素結合、イオン結合、疎水性相互作用および／またはファンデルワールス相互作用を含む非共有結合相互作用でありうる。複合体は、共有結合または非共有結合、相互作用または力によって結合した２以上の分子の結合も含みうる。特に示されていない限り、本明細書中で用いる「結合アフィニティ」は、結合ペアのメンバー（例えば、ＩＬ－２ムテインおよびＩＬ－２受容体サブユニット）間の１：１相互作用を反映する固有の結合アフィニティを意味する。ＩＬ－２受容体サブユニットに対するＩＬ－２ムテインの結合速度（ｋ_ｏｎ）に対する解離速度（ｋ_ｏｆｆ）の比（ｋ_ｏｆｆ／ｋ_ｏｎ）は「解離定数」（または互換的に用いられる「平衡解離定数」）ＫＤであり、これはアフィニティに逆相関する。ＫＤ値が低ければ低いほど、アフィニティは高くなる。ＫＤの値はＩＬ－２ムテインとＩＬ－２受容体サブユニットとの複合体によって異なり、ｋ_ｏｎとｋ_ｏｆｆとの両方に依存する。本明細書において提供されるＩＬ－２ムテインの解離定数ＫＤは、本明細書において提供される任意の方法または当業者に周知の任意の他の方法、例えば表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイ、例えばＢｉａｃｏｒｅおよびＫｉｎＥｘＡ（これらに限定されるものではない）を使用して決定されうる。

【0061】

動物、ヒト、対象、細胞、組織、器官または生物学的流体に適用される「投与する」または「投与」は、動物、ヒト、対象、細胞、組織、器官または生物学的流体との外因性医薬、治療用物質、診断剤または組成物の接触を意味する。

【0062】

「対象」なる語は、任意の生物、好ましくは動物、より好ましくは哺乳動物（例えば、ヒト、ラット、マウス、イヌ、ネコまたはウサギ）を含む。好ましい実施形態においては、「対象」なる語はヒトを意味する。「それを要する」対象は、ＩＬ－２によって媒介される疾患もしくは障害と診断された、それを有する疑いがある、またはＩＬ－２によって媒介される疾患もしくは障害の素因を有する個体、あるいはＩＬ－２媒介性障害の予防が望まれる対象である。

【0063】

「エフェクター機能」は、抗体イソタイプによって様々である、抗体のＦｃ領域に起因する生物活性を意味する。抗体エフェクター機能の例には、Ｃｌｑ結合および補体依存性細胞傷害（ＣＤＣ）；Ｆｃ受容体結合；抗体依存性細胞性細胞傷害（ＡＤＣＣ）；食作用；細胞表面受容体（例えば、Ｂ細胞受容体）のダウンレギュレーション；ならびにＢ細胞活性化が含まれる。

【0064】

本明細書中で用いる「細胞」、「宿主細胞」、「細胞系」および「細胞培養」なる表現は互換的に用いられ、全てのそのような表現は後代を含む。

【0065】

「治療する」または「治療」は、本発明のＩＬ－２ムテインのいずれかを含有する組成物のような作用因子を、該作用因子が治療活性を示す１以上の疾患症状を有する又は該疾患を有する疑いのある対象または患者に内的または外的に投与することを意味する。典型的には、作用因子は、いずれかの臨床的に測定可能な度合によるそのような症状の退縮の誘導またはそのような症状の進行の抑制、遅延もしくは減速により、治療対象または集団における１以上の疾患症状を軽減するのに有効な量で投与される。いずれかの特定の疾患症状を軽減するのに有効な作用因子の量は患者の病態、年齢および体重、ならびに対象において所望の応答を惹起する薬物の能力のような要因によって変動しうる。疾患症状が軽減したかどうかは、その症状の重症度または進行状態を評価するために医師または他の熟練した医療提供者によって典型的に用いられるいずれかの臨床的尺度により評価されうる。この語は更に、障害に関連した症状の発生の遅延および／またはそのような障害の症状の重症度の軽減を含む。この語は更に、既存の無制御の又は望ましくない症状の改善、追加的な症状の予防、およびそのような症状の根本原因の改善または予防を含む。したがって、この語は、障害、疾患もしくは症状を有する脊椎動物対象、またはそのような障害、疾患もしくは症状を発生する可能性を有する脊椎動物対象に、有益な結果がもたらされていることを示す。

【0066】

「予防する」、「予防し」および「予防」なる語は、疾患、障害、病状または関連症状（例えば、ＧＶＨＤ、ＳＬＥ、ＣＬＥ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎またはクローン病）の発生（または再発）の可能性を低減することを意味する。

【0067】

「ＩＬ－２媒介性疾患」、「ＩＬ－２媒介性障害」および「ＩＬ－２媒介性状態」は互換的に用いられ、ＩＬ－２シグナル伝達によって完全もしくは部分的に引き起こされる又はＩＬ－２シグナル伝達の結果である任意の疾患、障害または状態、および／または、全身においてまたは選択された細胞型、組織もしくは器官においてＩＬ－２シグナル伝達を調節することが望ましい任意の疾患、障害または状態を意味する。

【0068】

本明細書中で用いる「治療的有効量」なる語は、所与の疾患、障害もしくは状態および／またはそれに関連する症状（例えば、ＧＶＨＤ、ＳＬＥ、ＣＬＥ、多発性硬化症、潰瘍性大腸炎またはクローン病）の重症度および／または持続期間を低減および／または改善するのに十分な、作用因子（例えば、本明細書において提供されるＩＬ－２ムテインまたは本明細書に記載されている任意の他の作用因子）の量を意味する。本開示の物質／分子／作用因子（例えば、ＩＬ－２ムテイン）の「治療的有効量」は、個体の病態、年齢、性別および体重ならびに該物質／分子／作用因子が個体において所望の応答を誘発する能力のような要因によって変動しうる。治療的有効量は、該物質／分子／作用因子の任意の毒性または有害な効果よりも、治療的に有益な効果が勝る量を含む。特定の実施形態においては、「治療的有効量」なる語は、対象または哺乳動物における疾患、障害または状態を「治療」するのに有効である、ＩＬ－２ムテインまたは他の作用因子（例えば、薬物）の量を意味する。

【0069】

本明細書中で用いる「担体」には、用いられる用量および濃度でそれに曝露される細胞または哺乳動物に対して無毒性である薬学的に許容される担体、賦形剤または安定剤が含まれる。しばしば、生理的に許容される担体はｐＨ緩衝水溶液である。生理的に許容される担体の例には、以下のものが含まれる：バッファー、例えばホスファート、シトラートおよび他の有機酸；抗酸化剤、例えばアスコルビン酸；低分子量（例えば、約１０アミノ酸残基未満）のポリペプチド；タンパク質、例えば血清アルブミン、ゼラチンもしくは免疫グロブリン；親水性ポリマー、例えばポリビニルピロリドン；アミノ酸、例えばグリシン、グルタミン、アスパラギン、アルギニンもしくはリジン；単糖、二糖および他の炭水化物、例えばグルコース、マンノースもしくはデキストリン；キレート剤、例えばＥＤＴＡ；糖アルコール、例えばマンニトールもしくはソルビトール；塩形成性対イオン、例えばナトリウム；および／または非イオン性界面活性剤、例えばＴＷＥＥＮ（商標）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）およびＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）。「担体」なる語は希釈剤、アジュバント［例えば、フロイントアジュバント（完全または不完全）］、賦形剤またはビヒクルをも意味しうる。医薬担体を含むそのような担体は、無菌液体、例えば水、および油、例えば、石油、動物、植物または合成由来のもの、例えばラッカセイ油、ダイズ油、鉱油、ゴマ油などでありうる。組成物（例えば、医薬組成物）を静脈内投与する場合、水は典型的な担体である。生理食塩水ならびにデキストロースおよびグリセロールの水溶液も、特に注射用溶液のための、液体担体として使用されうる。適切な賦形剤（例えば、医薬賦形剤）には、デンプン、グルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、麦芽、コメ、小麦粉、チョーク、シリカゲル、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセロール、タルク、塩化ナトリウム、脱脂粉乳、グリセロール、プロピレン、グリコール、水、エタノールなどが含まれる。組成物は、所望により、少量の湿潤剤、乳化剤またはｐＨ緩衝剤をも含有しうる。組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液（エマルション）、錠剤、丸剤、カプセル剤、散剤、徐放性製剤などの形態をとりうる。製剤を含む経口組成物には、標準的な担体、例えば医薬等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、セルロース、炭酸マグネシウムなどが含まれうる。適切な医薬担体の例は、ＲｅｍｉｎｇｔｏｎおよびＧｅｎｎａｒｏ，Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１８ｔｈ ｅｄ．１９９０）に記載されている。医薬化合物を含む組成物は、適切な数の担体と共に、例えば単離または精製された形態の、ＩＬ－２ムテインを含有しうる。

【0070】

本明細書中で用いる「薬学的に許容される」なる語は、米国連邦政府もしくは州政府の規制当局によって承認されていること、または動物、特にヒトにおける使用に関して米国薬局方、欧州薬局方もしくは他の一般に認められている薬局方に収載されていることを意味する。

【0071】

「単離された核酸」は、天然配列に天然で付随する他のゲノムＤＮＡ配列ならびにタンパク質または複合体、例えばリボソームおよびポリメラーゼから実質的に分離された核酸、例えばＲＮＡ、ＤＮＡまたは混合核酸である。「単離された」核酸分子は、核酸分子の天然源に存在する他の核酸分子から分離されたものである。更に、「単離された」核酸分子、例えばｃＤＮＡ分子は、組換え技術によって産生された場合には他の細胞物質または培地を実質的に含有しないことが可能であり、あるいは化学合成された場合には化学的前駆体または他の化学物質を実質的に含有しないことが可能である。特定の実施形態においては、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインをコードする１以上の核酸分子は単離または精製されている。この語は、天然に存在する環境から取り出された核酸配列を含み、組換え若しくはクローン化ＤＮＡ単離物、および化学合成類似体、または異種系によって生物学的に合成された類似体を含む。実質的に純粋な分子は該子の単離された形態を含みうる。

【0072】

本明細書において互換的に用いられる「ポリヌクレオチド」または「核酸」は、任意の長さのヌクレオチドのポリマーを意味し、ＤＮＡおよびＲＮＡを含む。ヌクレオチドは、デオキシリボヌクレオチド、リボヌクレオチド、修飾されたヌクレオチドもしくは塩基および／またはそれらの類似体、あるいはＤＮＡもしくはＲＮＡポリメラーゼによって又は合成反応によってポリマー内に組み込まれうる任意の基質でありうる。ポリヌクレオチドは、修飾ヌクレオチド、例えばメチル化ヌクレオチドおよびその類似体を含みうる。本明細書中で用いる「オリゴヌクレオチド」は、一般には約２００ヌクレオチド長未満である（必ずしもその必要はない）、短い、一般には一本鎖の合成ポリヌクレオチドを意味する。「オリゴヌクレオチド」および「ポリヌクレオチド」なる語は互いに排他的ではない。ポリヌクレオチドに関する前記の説明はオリゴヌクレオチドにも同等に完全に適用されうる。本開示のＩＬ－２ムテインを産生する細胞には、ＩＬ－２ムテインをコードする核酸が導入された宿主細胞が含まれうる。適切な宿主細胞は後記に開示されている。

【0073】

ＩＬ－２ムテイン

【0074】

本発明は、ＩＬ－２受容体αサブユニットには結合するがＩＬ－２受容体βサブユニットへの測定可能な結合を示さないＩＬ－２ムテインを提供する。

【0075】

本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインは、ＩＬ－２参照アミノ酸配列、例えば配列番号３９に記載されている野生型アミノ酸配列に対する１以上のアミノ酸置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子でありうる。幾つかの実施形態においては、１以上のアミノ酸置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子は、別のポリペプチド、例えば、ヒト免疫グロブリン（例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３またはＩｇＧ４）のＦｃ領域に融合している。Ｆｃ領域は野生型Ｆｃであることが可能であり、あるいは、所望の特徴または特性、例えば改変された血清半減期、補体結合、Ｆｃ受容体結合および／またはエフェクター機能（例えば、抗原依存性細胞傷害性）を有するＦｃ変異体であることが可能である。

【0076】

１つの実施形態においては、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を低減／除去する、野生型Ｆｃポリペプチド配列に対する２つのアミノ酸置換、すなわちＬ２３４ＡおよびＬ２３５Ａ（「ＬＡＬＡ」突然変異と称されることもある）で修飾されている。もう１つの実施形態においては、Ｆｃ領域は、エフェクター機能を低減／除去する３つのアミノ酸置換、すなわちＬ２３４Ａ、Ｌ２３５ＡおよびＤ２６５Ｓ（「ＬＡＬＡＤＳ」突然変異と称されることもある）で修飾されている。更にもう１つの実施形態においては、Ｆｃ領域は、血清中の半減期を増加させる３つのアミノ酸置換、すなわちＭ２５２Ｙ、Ｓ２５４ＴおよびＴ２５６Ｅ（「ＹＴＥ」突然変異と称されることもある）で修飾されている。更にもう１つの実施形態においては、Ｆｃ変異体は、本明細書に記載されている種々の突然変異の組合せ、例えばＬＡＬＡおよびＹＴＥ突然変異、またはＬＡＬＡＤＳおよびＹＴＥ突然変異を有する。Ｆｃ変異体と融合した１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子は、Ｆｃ変異体を介してホモ二量体を形成しうる。そのようなホモ二量体は２つのＩＬ－２突然変異分子を含有し、したがって、２価ＩＬ－２ムテインである。図９Ａおよび９Ｃは２価ＩＬ－２ムテインの非限定的な概略図を示す。

【0077】

他の実施形態においては、Ｆｃ変異体のペアは、ノブ突然変異を含む１つのＦｃ領域（「Ｆｃノブ」）と、ホール突然変異を含む別のＦｃ領域（「Ｆｃホール」）とを含む。ＦｃノブとＦｃホールとはヘテロ二量体を形成しうる（「ノブ・イン・ホール」突然変異と称されることもある）。特定の実施形態においては、Ｆｃ領域は２つのアミノ酸置換、すなわちＳ３５４ＣおよびＴ３６６Ｗ（「ノブ」突然変異と称されることもある）で修飾されている。他の実施形態においては、Ｆｃ領域は４つのアミノ酸置換、すなわちＹ３４９Ｃ、Ｔ３６６Ｓ、Ｌ３６８ＡおよびＹ４０７Ｖ（「ホール」突然変異と称されることもある）で修飾されている。特定の実施形態においては、Ｆｃ領域は、「ホール」突然変異と称される４つのアミノ酸置換で修飾されており、２つの追加的なアミノ酸置換、すなわちＨ４３５ＲおよびＹ４３５Ｆを更に含有する。１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子はＦｃノブまたはＦｃホールと融合しうる。幾つかの実施形態においては、Ｆｃノブと融合した１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子はＦｃホールとペアになって１価ＩＬ－２ムテインを形成している。特定の実施形態においては、Ｆｃホールと融合した１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子はＦｃノブとペアになって１価ＩＬ－２ムテインを形成している。図９Ｂおよび９Ｄは１価ＩＬ－２ムテインの非限定的な概略図を示す。他の実施形態においては、１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子は、ノブもホールも有さないＦｃと融合しており、Ｆｃ融合ＩＬ－２分子はホモ二量体２価ＩＬ－２ムテインを形成しうる（例えば、２価ＩＬ－２ムテインの非限定的な例として、図９Ａおよび９Ｃを参照されたい）。

【0078】

１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子は、ＩＬ－２分子とＦｃ変異体との間の種々のペプチドリンカーを介して、Ｆｃ変異体のＮ末端またはＣ末端に融合しうる。１つの実施形態においては、１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子はＦｃ変異体のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２分子のＣ末端とＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。もう１つの実施形態においては、１以上の置換、欠失または付加を含む部分的なまたは完全長のヒトＩＬ－２分子はＦｃ変異体のＣ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２分子のＮ末端との間に存在する。

【0079】

特定の実施形態においては、配列番号１、２または４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１、２または４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１、２または４０の３３位のＰはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されている。

【0080】

幾つかの実施形態においては、配列番号１、２または４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１、２または４０の１９位のＤおよび配列番号１、２または４０の６７位のＥはＳで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されている。

【0081】

他の実施形態においては、配列番号１、２または４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含むＩＬ－２ムテインを提供し、ここで、配列番号１、２または４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１、２または４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１、２または４０の６７位のＥはＳで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されている。

【0082】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは配列番号１、２または４０の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換または７３位のＱからＰへの置換を更に含む。

【0083】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは以下の３つの置換のうちの任意の２つを更に含む：配列番号１、２または４０の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換または７３位のＱからＰへの置換。

【0084】

ＩＬ－２ムテインの更に他の実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１、２または４０の６８位のＶからＡへの置換、７０位のＮからＲへの置換および７３位のＱからＰへの置換を更に含む。

【0085】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。

【0086】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。

【0087】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位はＰはＲで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。

【0088】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＮで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。

【0089】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＡで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。

【0090】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。

【0091】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号１の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。

【0092】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＲで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＳで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号２の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。

【0093】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７０位のＮ。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の３３位のＰはＲで置換されており、配列番号４０の６７位のＥはＳで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７０位のＮはＲで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。

【0094】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号１の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号１の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号１の７３位のＱはＰで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号２の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号２の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号２の７３位のＱはＰで置換されている。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含み、ここで、配列番号４０の１９位のＤはＮで置換されており、配列番号４０の６８位のＶはＡで置換されており、配列番号４０の７３位のＱはＰで置換されている。特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドを含む。

【0095】

ＩＬ－２ムテインの幾つかの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１３、１４または１５に記載されているアミノ酸配列を更に含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列を含む、そして配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を更に含む第１ポリペプチドを含む。

【0096】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。

【0097】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。

【0098】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列とを含む第１ポリペプチドを含む。

【0099】

ＩＬ－２ムテインの他の実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカーを更に含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１６に記載されているリンカーを更に含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号４１に記載されているリンカーを更に含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号４２に記載されているリンカーを更に含む。幾つかの実施形態においては、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されている第１アミノ酸配列は、配列番号１３、１４または１５に記載されている第２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカーは第１アミノ酸配列のＣ末端と第２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。もう１つの実施形態においては、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されている第１アミノ酸配列は、配列番号１３、１４または１５に記載されている第２アミノ酸配列のＣ末端に融合しており、ペプチドリンカーは第２アミノ酸配列のＣ末端と第１アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0100】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号１６に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。幾つかの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0101】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４１に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。幾つかの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0102】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１３に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１４に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列と、更に配列番号１５に記載されているアミノ酸配列と、配列番号４２に記載されているリンカーとを含む第１ポリペプチドを含む。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。幾つかの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0103】

種々の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第２ポリペプチドを更に含む。幾つかの実施形態においては、第２ポリペプチドは第１ポリペプチドと同じである。他の実施形態においては、第２ポリペプチドは第１ポリペプチドと異なる。更に他の実施形態においては、第２ポリペプチドは部分長または完全長のＩＬ－２アミノ酸配列を含まない。

【0104】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号４１に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じ第２ポリペプチドとを含む。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。幾つかの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0105】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号４１に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。第１ポリペプチドの１つの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。第１ポリペプチドのもう１つの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0106】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号４１に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。第１ポリペプチドの１つの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。第１ポリペプチドのもう１つの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。

【0107】

１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６、４１または４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号４１に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号４２に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号５に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号６に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号９に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１０に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。もう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１１に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。更にもう１つの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。第１ポリペプチドの１つの実施形態においては、ＩＬ－２アミノ酸配列はＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＩＬ－２のＣ末端とＦｃまたはＦｃ変異体のＮ末端との間に存在する。第１ポリペプチドのもう１つの実施形態においては、ＦｃまたはＦｃ変異体アミノ酸配列はＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端に融合しており、ペプチドリンカーはＦｃまたはＦｃ変異体のＣ末端とＩＬ－２アミノ酸配列のＮ末端との間に存在する。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第２ポリペプチドは第１ポリペプチドと同じであり、ここで、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３または５４に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号４９に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５０に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５１に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５２に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５３に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドのそれぞれは、配列番号５４に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0108】

幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0109】

幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号１９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0110】

特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインは第１ポリペプチドおよび第２ポリペプチドを含み、ここで、第１ポリペプチドは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号２９に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３０に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３１に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３２に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。もう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３５に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３６に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３７に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。更にもう１つの実施形態においては、第１ポリペプチドは、配列番号３８に記載されているアミノ酸配列を含み、第２ポリペプチドは、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む。

【0111】

ＩＬ－２ムテインの使用方法

【0112】

本発明はまた、ＩＬ－２媒介性疾患（例えば、免疫疾患）を予防もしくは治療すること、ＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化せずに制御性Ｔ細胞を選択的に活性化すること、またはＩＬ－２受容体αサブユニット発現細胞を活性化せずにＩＬ－２受容体βサブユニット発現細胞を選択的に活性化すること（これらに限定されるものではない）を含む、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの使用方法を含む。

【0113】

対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法を本明細書において提供する。特定の実施形態においては、該方法は、本明細書において提供されるＩＬ－２ムテインを、ＩＬ－２媒介性疾患を治療するための治療的有効量で、対象に投与することを含む。また、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の予防方法を本明細書において提供する。特定の実施形態においては、該方法は、本明細書において提供されるＩＬ－２ムテインを、ＩＬ－２媒介性疾患を予防するのに有効な量で、対象に投与することを含む。幾つかの実施形態においては、対象はＩＬ－２媒介性疾患を有する。他の実施形態においては、対象は、ＩＬ－２媒介性疾患に罹患するリスクを有する。

【0114】

本明細書において提供される種々の方法の幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２媒介性疾患は免疫障害である。

【0115】

特定の実施形態においては、免疫障害は炎症性疾患である。１つの実施形態においては、炎症性疾患はブドウ膜炎である。

【0116】

本明細書において提供される種々の方法の特定の実施形態においては、免疫障害は自己免疫疾患、例えば関節リウマチ、クローン病、乾癬、乾癬性関節炎、多発性硬化症、ループス、強直性脊椎炎、Ｉ型糖尿病、シェーグレン症候群、潰瘍性大腸炎、視神経脊髄炎、セリアック病、強皮症および側頭動脈炎である。幾つかの実施形態においては、ループスはＳＬＥ、ＣＬＥまたはループス腎炎である。１つの実施形態においては、自己免疫疾患は関節リウマチである。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はクローン病である。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は乾癬である。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は多発性硬化症である。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は強直性脊椎炎である。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はＩ型糖尿病である。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はシェーグレン症候群である。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は潰瘍性大腸炎である。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は視神経脊髄炎である。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はセリアック病である。１つの実施形態においては、自己免疫疾患は側頭動脈炎である。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患は強皮症である。１つの実施形態においては、自己免疫疾患はループスである。１つの実施形態においては、自己免疫疾患はＳＬＥである。もう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はＣＬＥである。更にもう１つの実施形態においては、自己免疫疾患はループス腎炎である。

【0117】

本明細書において提供される種々の方法の他の実施形態においては、免疫障害は、過敏症疾患、例えばアトピー性皮膚炎、過敏性血管炎およびアレルギー、例えばアレルギー性喘息、アレルギー性鼻炎（花粉症）、蕁麻疹（じんま疹）およびアナフィラキシーである。１つの実施形態においては、免疫障害はアトピー性皮膚炎である。もう１つの実施形態においては、免疫障害は過敏性血管炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫障害はアレルギーである。１つの実施形態においては、免疫障害はアレルギー性喘息である。もう１つの実施形態においては、免疫障害はアレルギー性鼻炎（花粉症）である。更にもう１つの実施形態においては、免疫障害は蕁麻疹（じんま疹）である。特定の実施形態においては、免疫障害はアナフィラキシーである。

【0118】

特定の実施形態においては、過敏症疾患はＴ細胞過敏症疾患である。対象の免疫障害に関して用いられる「Ｔ細胞過敏症」なる語は、一過性または慢性の異常に高いレベルのＴ細胞エフェクター機能を意味する。特定の実施形態においては、Ｔ細胞エフェクター機能はＴＨ２サイトカインの分泌を含む。例示的なＴＨ２サイトカインには、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－９、ＩＬ－１３、ＩＬ－３１およびＴＳＬＰが含まれるが、これらに限定されるものではない。１つの実施形態においては、ＴＨ２サイトカインはＩＬ－２である。幾つかの実施形態においては、対象は、一過性または慢性の異常に高いレベルの２、３、４、５、６、７、８、９または１０個の異なるＴＨ２サイトカインを有し、そのうちの１つはＩＬ－２である。

【0119】

幾つかの実施形態においては、免疫疾患は円形脱毛症、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、自己免疫性肝炎、原発性硬化性胆管炎または炎症性ミオパチーである。１つの実施形態においては、免疫疾患は円形脱毛症である。もう１つの実施形態においては、免疫疾患はＧＶＨＤである。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は自己免疫性肝炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は原発性硬化性胆管炎である。更にもう１つの実施形態においては、免疫疾患は炎症性ミオパチーである。

【0120】

したがって、幾つかの実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療方法を提供する。

【0121】

特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象における免疫障害の治療方法を提供する。

【0122】

他の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象における自己免疫疾患の治療方法を提供する。

【0123】

更に他の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象における炎症性疾患の治療方法を提供する。

【0124】

特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供する。

【0125】

もう１つの特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供する。

【0126】

更にもう１つの特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供する。

【0127】

更にもう１つの特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供する。

【0128】

更にもう１つの特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供する。

【0129】

更にもう１つの特定の実施形態においては、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つを対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供する。

【0130】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0131】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0132】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0133】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＧＶＨＤの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0134】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0135】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0136】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0137】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＳＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0138】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0139】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0140】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0141】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるＣＬＥの治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0142】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0143】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0144】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0145】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における多発性硬化症の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0146】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0147】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0148】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0149】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象における潰瘍性大腸炎の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0150】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１７に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0151】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１４に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７または２８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号５５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0152】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１５に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７または３８に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号１８に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0153】

特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列および配列番号１３に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じである第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号３、４、５、６、７、８、９、１０、１１または１２に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号７に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号８に記載されているアミノ酸配列、配列番号１３に記載されているアミノ酸配列および配列番号１６に記載されているリンカー配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、第１ポリペプチドと同じアミノ酸配列であるアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４５に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。特定の実施形態においては、治療的有効量のＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物を対象に投与することを含む、対象におけるクローン病の治療方法を提供し、ここで、ＩＬ－２ムテインは、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第１ポリペプチドと、配列番号４６に記載されているアミノ酸配列を含む第２ポリペプチドとを含む。

【0154】

更にもう１つの態様においては、対象において、ＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化することなく制御性Ｔ細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物を、それを要する対象に投与することを含む方法を提供する。幾つかの実施形態においては、ＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化することなく制御性Ｔ細胞を選択的に活性化することはインビトロまたはエクスビボ法によって測定されうる。特定の実施形態においては、ＣＤ８＋ Ｔ細胞を活性化することなく制御性Ｔ細胞を選択的に活性化することは、本明細書において提供される実施例に記載されているｐＳＴＡＴ５アッセイ（これに限定されるものではない）を含む、当業者に公知の任意の方法によって測定されうる。

【0155】

更にもう１つの態様においては、対象において、ＩＬ－２受容体αサブユニットを発現する細胞を活性化することなく、ＩＬ－２受容体βサブユニットを発現する細胞を選択的に活性化する方法であって、治療的有効量の本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物を、それを要する対象に投与することを含む方法を提供する。幾つかの実施形態においては、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物の。幾つかの実施形態においては、ＩＬ－２受容体αサブユニットを発現する細胞を活性化することなく、ＩＬ－２受容体βサブユニットを発現する細胞を選択的に活性化することは、インビトロまたはエクスビボ法によって測定されうる。特定の実施形態においては、ＩＬ－２受容体αサブユニットを発現する細胞を活性化することなく、ＩＬ－２受容体βサブユニットを発現する細胞を選択的に活性化することは、本明細書において提供される実施例に記載されているｐＳＴＡＴ５アッセイ（これに限定されるものではない）を含む、当業者に公知の任意の方法によって測定されうる。

【0156】

更にもう１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0157】

１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患の治療のための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0158】

もう１つの態様においては、対象におけるＩＬ－２媒介性疾患を治療するための医薬の製造のための、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つまたは本明細書に記載されている種々の医薬組成物のいずれか１つの使用を提供する。

【0159】

本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインの種々の使用において、ＩＬ－２媒介性疾患は、本開示に記載されている任意の免疫疾患（例えば、自己免疫疾患または炎症性疾患）でありうる。

【0160】

核酸、発現ベクター、細胞、およびＩＬ－２ムテインの製造方法

【0161】

また、本明細書に開示されているそのようなＩＬ－２ムテインをコードするポリヌクレオチド配列を含む単離された核酸およびベクター、そのような単離された核酸またはベクターを含む細胞（例えば、宿主細胞）、ならびにそのようなＩＬ－２ムテインの製造方法を、本明細書において提供する。

【0162】

１つの態様においては、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインのいずれか１つのポリペプチドをコードする単離された核酸を本明細書において提供する。１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第１ポリペプチドのいずれか１つをコードする。もう１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第２ポリペプチドのいずれか１つをコードする。更にもう１つの実施形態においては、単離された核酸は、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインの種々の第１ポリペプチドのいずれか１つおよび種々の第２ポリペプチドのいずれか１つをコードする。更にもう１つの実施形態においては、単離された核酸は、表９に開示されている１以上のポリペプチドをコードする。

【0163】

もう１つの態様においては、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインの第１ポリペプチドをコードする単離された第１核酸および第２ポリペプチドをコードする単離された第２核酸を提供する。

【0164】

もう１つの実施形態においては、単離された核酸はシグナル配列を更にコードする。

【0165】

もう１つの態様においては、本明細書に開示される種々の単離された核酸の１以上を含む発現ベクターを提供し、ここで、核酸は、宿主細胞が発現ベクターでトランスフェクトされた場合に宿主細胞によって認識される制御配列に機能的に連結されている。

【0166】

更にもう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々の単離された核酸または種々の発現ベクターの１以上を含む宿主細胞を提供する。幾つかの実施形態においては、宿主細胞は、本明細書に開示されている種々の単離された核酸の１以上を含む。他の実施形態においては、宿主細胞は、本明細書に開示されている種々の発現ベクターの１以上を含む。更に他の実施形態においては、宿主細胞は、本明細書に開示されている種々の発現ベクターの１つを含み、ここで、発現ベクターは、本明細書に開示されている種々の単離された核酸の１以上を含む。更に他の実施形態においては、宿主細胞は、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインの第１ポリペプチドをコードする第１核酸を含む第１発現ベクターと、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインの第２ポリペプチドをコードする第２核酸を含む第２発現ベクターとを含む。

【0167】

更にもう１つの態様においては、本明細書に記載されている種々のＩＬ－２ムテインのいずれか１つの製造方法を提供する。１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の宿主細胞のいずれか１つを培養することを含む。もう１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の発現ベクターのいずれか１つを発現させることを含む。更にもう１つの実施形態においては、該方法は、ＩＬ－２ムテインが発現される条件下、本明細書に記載されている種々の単離された核酸のいずれか１つを発現させることを含む。

【0168】

本発明のＩＬ－２ムテインの種々の製造方法の特定の実施形態においては、該方法は、宿主細胞もしくは培地またはインビトロ発現系からＩＬ－２ムテインを単離することを更に含む。

【0169】

本明細書に開示されているＩＬ－２ムテインの発現のための宿主として利用可能な哺乳類細胞系は当技術分野で周知であり、Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｔｙｐｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ（ＡＴＣＣ）から入手可能な多数の不死化細胞系を包含する。これらは、とりわけ、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞、ＮＳＯ、ＳＰ２細胞、ＨｅＬａ細胞、ベビーハムスター腎臓（ＢＨＫ）細胞、サル腎細胞（ＣＯＳ）、ヒト肝細胞癌細胞（例えば、Ｈｅｐ Ｇ２）、Ａ５４９細胞、３Ｔ３細胞、ＨＥＫ－２９３細胞および多数の他の細胞系を包含する。使用されうる他の細胞系としては、昆虫細胞、例えばＳｆ９細胞、両生類細胞、細菌細胞、植物細胞および真菌細胞が挙げられる。宿主細胞の所望の特性および／または発現されるＩＬ－２ムテインの所望の特性を達成するために、これらの細胞系のゲノム内に種々の修飾（例えば、グルタミンシンテターゼノックアウト、栄養要求性突然変異など）が導入されうる。

【0170】

をコードする組換え発現ベクターを哺乳類宿主細胞内に導入する場合、宿主細胞におけるＩＬ－２ムテインの発現、あるいはより好ましくは、宿主細胞が培養される培地内へのＩＬ－２ムテインの分泌を可能にするのに十分な時間にわたって、宿主細胞を培養することにより、ＩＬ－２ムテインを製造する。

【0171】

ＩＬ－２ムテインは、標準的なタンパク質精製方法を用いて培地から回収されうる。

【0172】

一般に、個々の細胞系またはトランスジェニック動物において産生される糖タンパク質は、該細胞系またはトランスジェニック動物において産生される糖タンパク質に特徴的なグリコシル化パターンを有する。したがって、ＩＬ－２ムテインの個々のグリコシル化パターンは、ＩＬ－２ムテインを製造するために使用される個々の細胞系またはトランスジェニック動物に左右される。種々のＩＬ－２ムテインまたはそのようなＩＬ－２ムテインをコードする単離された核酸の開示は、ＩＬ－２ムテインが有しうるグリコシル化パターンには無関係である。

【0173】

医薬組成物および投与

【0174】

もう１つの態様においては、本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインと薬学的に許容される担体とを含む組成物を提供する。

【0175】

幾つかの実施形態においては、組成物は追加的な作用因子を更に含む。

【0176】

特定の実施形態においては、追加的な作用因子は、本明細書に開示されているＩＬ－２ムテインが治療に使用されるのと同じ障害を治療するのに有効な作用因子である。幾つかの実施形態においては、追加的な作用因子は、本明細書に開示されているＩＬ－２ムテインの副作用の１以上を緩和するのに有効な作用因子である。

【0177】

本明細書に記載されているＩＬ－２ムテインの医薬組成物または無菌組成物を製造するために、本発明のＩＬ－２ムテインを薬学的に許容される担体または賦形剤と混合する。例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ＳｃｉｅｎｃｅｓおよびＵ．Ｓ．Ｐｈａｒｍａｃｏｐｅｉａ：Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｆｏｒｍｕｌａｒｙ，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ（１９８４）を参照されたい。

【0178】

治療用物質および診断用物質の製剤は、例えば凍結乾燥粉末、スラリー、水性の溶液または懸濁液の形態で、許容される担体、賦形剤または安定剤と混合することにより製造されうる（例えば、Ｈａｒｄｍａｎら（２００１）Ｇｏｏｄｍａｎ ａｎｄ Ｇｉｌｍａｎ’ｓ Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｇｅｎｎａｒｏ（２０００）Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ：Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，ＷｉｌｌｉａｍｓおよびＷｉｌｋｉｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ａｖｉｓら（編）（１９９３）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｐａｒｅｎｔｅｒａｌ Ｍｅｄｉｃａｔｉｏｎｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｔａｂｌｅｔｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；Ｌｉｅｂｅｒｍａｎら（編）（１９９０）Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｏｓａｇｅ Ｆｏｒｍｓ：Ｄｉｓｐｅｒｓｅ Ｓｙｓｔｅｍｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，ＮＹ；ＷｅｉｎｅｒおよびＫｏｔｋｏｓｋｉｅ（２０００）Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔ Ｔｏｘｉｃｉｔｙ ａｎｄ Ｓａｆｅｔｙ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照されたい）。

【0179】

単独で又は別の作用因子と組合せて投与されるＩＬ－２ムテイン組成物の毒性および治療効力は、例えばＬＤ_５０（集団の５０％に致死的である用量）およびＥＤ_５０（集団の５０％において治療的に有効である用量）を決定するための、細胞培養または実験動物における標準的な薬学的手法により決定されうる。毒性効果と治療効果との用量比は治療係数（ＬＤ_５０／ＥＤ_５０）である。特定の態様においては、高い治療係数を示す抗体が望ましい。これらの細胞培養アッセイおよび動物研究から得られたデータは、ヒトにおける使用のための投与量の範囲の決定において使用されうる。そのような化合物の投与量は、好ましくは、毒性をほとんど又は全く伴わないＥＤ_５０を含む循環濃度の範囲内である。該投与量は、使用される剤形および投与経路に応じて、この範囲内で変動しうる。

【0180】

もう１つの実施形態においては、本明細書に開示されているＩＬ－２ムテインを含む組成物を、Ｐｈｙｓｉｃｉａｎｓ’Ｄｅｓｋ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ２００３（Ｔｈｏｍｓｏｎ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ；５７ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ（２００２年１１月１日））に従い、対象に投与する。

【0181】

本発明のＩＬ－２ムテインおよび組成物の投与様式は様々でありうる。適切な投与経路には、経口、直腸、経粘膜、腸、非経口、筋肉内、皮下、皮内、髄内、髄腔内、直接心室内、静脈内、腹腔内、鼻腔内、眼内、吸入、吹送、局所、皮膚、経皮または動脈内が含まれる。

【0182】

特定の実施形態においては、本発明のＩＬ－２ムテインは例えば注射のような侵襲的経路によって投与されうる。追加的な実施形態においては、ＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物は静脈内、皮下、髄腔内、筋肉内または脳内に投与される。１つの特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物は静脈内に投与される。もう１つの特定の実施形態においては、ＩＬ－２ムテインまたはその医薬組成物は皮下に投与される。

【0183】

組成物は、当技術分野で公知の医療装置を使用して投与されうる。例えば、本発明の医薬組成物は、例えば予充填（プレフィルド）シリンジまたは自動注射器を含む皮下注射針を使用する注射によって投与されうる。

【0184】

本明細書に開示されている医薬組成物は注入によっても投与されうる。

【0185】

投与レジメンは、ＩＬ－２ムテインの血清または組織代謝回転速度、症状の程度、ＩＬ－２ムテインの免疫原性、および生物学的マトリックスにおける標的細胞の接近可能性を含む幾つかの要因に左右される。好ましくは、投与レジメンは、望ましくない副作用を最小にすると同時に標的病態の改善をもたらすのに十分なＩＬ－２ムテインを送達する。したがって、送達される生物学的物質の量は、部分的には、個々のＩＬ－２ムテインおよび治療される状態の重症度に左右される。適切な用量を選択する際の指針が利用可能である（例えば、Ｗａｗｒｚｙｎｃｚａｋ（１９９６）Ａｎｔｉｂｏｄｙ Ｔｈｅｒａｐｙ，Ｂｉｏｓ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂ．Ｌｔｄ，Ｏｘｆｏｒｄｓｈｉｒｅ，ＵＫ；Ｋｒｅｓｉｎａ（編）（１９９１）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｃｈ（編）（１９９３）Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ａｎｄ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｔｈｅｒａｐｙ ｉｎ Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｂａｅｒｔら（２００３）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：６０１－６０８；Ｍｉｌｇｒｏｍら（１９９９）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４１：１９６６－１９７３；Ｓｌａｍｏｎら（２００１）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４４：７８３－７９２；Ｂｅｎｉａｍｉｎｏｖｉｔｚら（２０００）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４２：６１３－６１９；Ｇｈｏｓｈら（２００３）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４８：２４－３２；Ｌｉｐｓｋｙら（２０００）Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．３４３：１５９４－１６０２を参照されたい）。

【0186】

適切な用量の決定は、例えば、治療に影響を及ぼすことが当技術分野で知られている又は疑われているパラメータまたは因子を用いて、臨床家によりなされる。幾つかの実施形態においては、用量は最適用量より幾分少ない量から開始し、ついで、負の副作用と比較して所望または最適効果が得られるまで、それを少しずつ増量する。

【0187】

既に記載されているとおり、ＩＬ－２ムテインは１以上の追加的な作用因子と共投与されうる。ＩＬ－２ムテインは作用因子に連結されることが可能であり（例えば、コンジュゲート）、あるいは作用因子とは別に投与されうる。後者（別々の投与）の場合、ＩＬ－２ムテインは作用因子の前、後またはそれと同時に投与されることが可能であり、あるいは他の公知療法と共投与されうる。

【0188】

キット

【0189】

また、適切なパッケージング材（包装梱包材）内にパッケージングされた本明細書において提供されるＩＬ－２ムテインまたはその組成物（例えば、医薬組成物）を含むキットを本明細書において提供する。キットは、所望により、成分の記載、またはそれにおける成分のインビトロ、インビボもしくはエクスビボでの使用のための説明を含むラベルまたはパッケージング・インサート（添付文書）を含んでいてもよい。

【0190】

「パッケージング材」なる語は、キットの成分を収容する物理的構造を意味する。パッケージング材は成分を無菌状態に保つことが可能であり、そのような目的に一般に使用される材料（例えば、紙、段ボール、ガラス、プラスチック、ホイル、アンプル、バイアル、チューブなど）から構成されうる。

【0191】

本明細書において提供されるキットはラベルまたはインサートを含みうる。ラベルまたはインサートには、「印刷物」、例えば紙またはボール紙が含まれ、これは、別個であるか、または成分、キットもしくはパッケージング材（例えば、箱）に添付されており、あるいは、例えば、キット成分を含有するアンプル、チューブまたはバイアルに付属している。ラベルまたはインサートには更に、コンピュータ可読媒体、例えば、ディスク（例えば、ハードディスク、カード、メモリディスク）、光学ディスク、例えばＣＤ－もしくはＤＶＤ－ＲＯＭ／ＲＡＭ、ＤＶＤ、ＭＰ３、磁気テープ、または電気的記憶媒体、例えばＲＡＭおよびＲＯＭ、またはこれらのハイブリッド、例えば磁気／光学記憶媒体、ＦＬＡＳＨ（フラッシュ）メディアまたはメモリ式カードが含まれうる。ラベルまたはインサートは製造者の情報、ロット番号、製造者の所在地および日付を特定する情報を含みうる。

【0192】

本明細書において提供されるキットは他の成分を更に含みうる。キットの各成分は個別の容器内に封入されることが可能であり、種々の容器の全てが単一パッケージ内に配置されうる。また、キットは冷蔵保管用に設計されうる。

【0193】

一般的方法

【0194】

分子生物学における標準的な方法は、Ｓａｍｂｒｏｏｋ，ＦｒｉｔｓｃｈおよびＭａｎｉａｔｉｓ（１９８２ ＆ １９８９ ２^ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ，２００１ ３^ｒｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；ＳａｍｂｒｏｏｋおよびＲｕｓｓｅｌｌ（２００１）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ，３^ｒｄｅｄ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；Ｗｕ（１９９３）Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＤＮＡ，Ｖｏｌ．２１７，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ．に記載されている。標準的な方法は、Ａｕｓｂｅｌら（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，ＶｏＩｓ．１－４，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹにも記載されており、これは、細菌細胞におけるクローニングおよびＤＮＡ突然変異誘発（Ｖｏｌ．１）、哺乳類細胞および酵母におけるクローニング（Ｖｏｌ．２）、複合糖質およびタンパク質発現（Ｖｏｌ．３）、ならびにバイオインフォマティクス（Ｖｏｌ．４）を記載している。

【0195】

免疫沈降、クロマトグラフィー、電気泳動、遠心分離および結晶化を含むタンパク質精製のための方法が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．１，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ）。化学分析、化学修飾、翻訳後修飾、融合タンパク質の製造、タンパク質のグリコシル化が記載されている（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２０００）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｖｏｌ．２，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；Ａｕｓｕｂｅｌら（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．３，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，ＮＹ，ＮＹ，ｐｐ．１６．０．５－１６．２２．１７；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ，Ｃｏ．（２００１）Ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｆｏｒ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ；ｐｐ．４５－８９；Ａｍｅｒｓｈａｍ Ｐｈａｒｍａｃｉａ Ｂｉｏｔｅｃｈ（２００１）ＢｉｏＤｉｒｅｃｔｏｒｙ，Ｐｉｓｃａｔａｗａｙ，Ｎ．Ｊ．，ｐｐ．３８４－３９１を参照されたい）。ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体の製造、精製およびフラグメント化が記載されている（Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ（１９９９）Ｕｓｉｎｇ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ，ＮＹ；ＨａｒｌｏｗおよびＬａｎｅ，前掲）。リガンド／受容体相互作用を特徴づけるための標準的な技術が利用可能である（例えば、Ｃｏｌｉｇａｎら（２００１）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．４，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋを参照されたい）。

【0196】

蛍光標識細胞分取検出系（ＦＡＣＳ）を含むフローサイトメトリーのための方法が利用可能である（例えば、Ｏｗｅｎｓら（１９９４）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ｆｏｒ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒａｃｔｉｃｅ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｇｉｖａｎ（２００１）Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，２^ｎｄ ｅｄ．；Ｗｉｌｅｙ－Ｌｉｓｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪ；Ｓｈａｐｉｒｏ（２００３）Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ｆｌｏｗ Ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ，Ｈｏｂｏｋｅｎ，ＮＪを参照されたい）。例えば診断試薬としての使用のための、核酸プライマーおよびプローブを含む核酸、ポリペプチドならびに抗体を修飾するのに適した蛍光試薬が利用可能である（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，Ｉｎｃ．，Ｅｕｇｅｎｅ，ＯＲ；Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ（２００３）Ｃａｔａｌｏｇｕｅ，Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ，ＭＯ）。

【0197】

免疫系の標準的な組織学的方法が記載されている（例えば、Ｍｕｌｌｅｒ－Ｈａｒｍｅｌｉｎｋ（編）（１９８６）Ｈｕｍａｎ Ｔｈｙｍｕｓ：Ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ，Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹ；Ｈｉａｔｔら（２０００）Ｃｏｌｏｒ Ａｔｌａｓ ｏｆ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ，Ｌｉｐｐｉｎｃｏｔｔ，Ｗｉｌｌｉａｍｓ，ａｎｄ Ｗｉｌｋｉｎｓ，Ｐｈｉｌａ，ＰＡ；Ｌｏｕｉｓら（２００２）Ｂａｓｉｃ Ｈｉｓｔｏｌｏｇｙ：Ｔｅｘｔ ａｎｄ Ａｔｌａｓ，ＭｃＧｒａｗ－Ｈｉｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，ＮＹを参照されたい）。

【0198】

例えば抗原フラグメント、リーダー配列、タンパク質フォールディング、機能的ドメイン、グリコシル化部位および配列アライメントを決定するためのソフトウェアパッケージおよびデータベースが利用可能である（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ，Ｖｅｃｔｏｒ ＮＴＩ（登録商標）Ｓｕｉｔｅ（Ｉｎｆｏｒｍａｘ，Ｉｎｃ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，ＭＤ）；ＧＣＧ Ｗｉｓｃｏｎｓｉｎ Ｐａｃｋａｇｅ（Ａｃｃｅｌｒｙｓ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）；ＤｅＣｙｐｈｅｒ（登録商標）（ＴｉｍｅＬｏｇｉｃ Ｃｏｒｐ．，Ｃｒｙｓｔａｌ Ｂａｙ，Ｎｅｖａｄａ）；Ｍｅｎｎｅら（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ １６：７４１－７４２；Ｍｅｎｎｅら（２０００）Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｎｏｔｅ １６：７４１－７４２；Ｗｒｅｎら（２００２）Ｃｏｍｐｕｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｐｒｏｇｒａｍｓ Ｂｉｏｍｅｄ．６８：１７７－１８１；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８３）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．１３３：１７－２１；ｖｏｎ Ｈｅｉｊｎｅ（１９８６）Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１４：４６８３－４６９０を参照されたい）。

【0199】

実施例１．ＩＬ－２ムテインのクローニング、発現および精製

【0200】

種々のＩＬ－２ムテインをコードするポリヌクレオチドを合成し、ＰＴＴ５プラスミド（Ｃａｎａｄｉａｎ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｏｕｎｃｉｌ）内にクローニングした。Ｇｉｂｃｏ ＥｘｐｉＣＨＯまたはＥｘｐｉ２９３発現培地内で懸濁状態で増殖するＥｘｐｉＣＨＯまたはＥｘｐｉ２９３細胞を、商業的に入手可能な試薬ＥｘｐｉＦｅｃｔａｍｉおよびプロトコール（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ）を用いて、種々のＩＬ－２ムテインをコードするポリヌクレオチドを含むＰＴＴ５構築物で一過性にトランスフェクトした。簡潔に説明すると、Ｖｉ－Ｃｅｌｌ（Ｂｅｃｋｍａｎ－Ｃｏｕｌｔｅｒ）を使用した測定で９５％を超える生存率で、細胞１ｍＬ当たり１μｇの全ＤＮＡを使用して第０日に細胞をトランスフェクトした。２価ＩＬ－２ムテインを発現させるために、Ｆｃ変異体Ｆｃ－１（配列番号１３）を含有するＩＬ－２ムテインをコードするＰＴＴ５構築物をトランスフェクトした。１価ＩＬ－２ムテインを発現させる幾つかの実施形態においては、Ｆｃ変異体Ｆｃ－２（配列番号１４）を含有するＩＬ－２ムテインをコードする第１ ＰＴＴ５構築物、およびＦｃ変異体Ｆｃ－４（配列番号１７）をコードする第２ ＰＴＴ５構築物をコトランスフェクトし、第１ ＰＴＴ５構築物と第２ ＰＴＴ５構築物との比は３：１であった。１価ＩＬ－２ムテインを発現させる他の実施形態においては、Ｆｃ変異体Ｆｃ－３（配列番号１５）を含有するＩＬ－２ムテインをコードする第１ ＰＴＴ５構築物、およびＦｃ変異体Ｆｃ－５（配列番号１８）をコードする第２ ＰＴＴ５構築物をコトランスフェクトし、第１ ＰＴＴ５構築物と第２ ＰＴＴ５構築物との比は３：１である。Ｅｘｐｉ２９３細胞に関しては第５日に、ＥｘｐｉＣＨＯ細胞に関しては８０％を超える細胞生存率に応じて第８日～第１２日の間に、培養物を回収した。ＡＫＴＡ ＦＰＬＣ系（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）においてプロテインＡクロマトグラフィー（ｍＡｂＳｅｌｅｃｔ Ｓｕｒｅ ＬＸ，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）を使用して、１価または２価のＩＬ－２ムテインを清張化上清から精製した。ローディング後、樹脂を２０カラム容量のＰＢＳで洗浄し、２０ｍＭ 酢酸ナトリウム（ｐＨ３．５）を使用してＩＬ－２ムテインを溶出した。２価ＩＬ－２ムテインの場合、プロテインＡクロマトグラフィーに続いて陰イオン交換（Ｃａｐｔｏ Ｑ，ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ）に通過させることで、均一性の高いタンパク質を得るのに典型的には十分であった。１価ＩＬ－２ムテインの場合、最初のプロテインＡ精製および陰イオン交換の通過の後、陽イオン交換クロマトグラフィー（Ｃａｐｔｏ Ｓ）を使用して、Ｆｃ変異体ホモ二量体、ＩＬ－２ムテイン単量体および／またはＩＬ－２ムテインホモ二量体のような夾雑物から、所望の１価ヘテロ二量体ＩＬ－２ムテインを分離して、９５％を超える１価ヘテロ二量体を得た。変異体の分離には、変異体によって異なる塩およびｐＨ条件が必要であった。特定の場合には、サイズ排除クロマトグラフィーを更に使用して、９５％を超える１価ヘテロ二量体を得た。

【0201】

実施例２．表面プラズモン共鳴によるヒトＩＬ２－ＲαまたはＩＬ２－Ｒβに対するＩＬ－２ムテインの結合アフィニティの決定

【0202】

Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００（Ｃｙｔｉｖａ）装置における表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）アッセイを用いて、ポリヒスチジンタグ付きＩＬ－２受容体に対するＩＬ－２ムテインの結合アフィニティを決定した。Ｂｉａｃｏｒｅ Ｔ２００評価ソフトウェアを使用して、各滴定系列を１：１結合モデルまたは定常状態アフィニティにフィットさせた。結合速度定数（ｋ_ｏｎ、Ｍ^－１ｓ^－１）および解離速度定数（ｋ_ｏｆｆ、ｓ^－１）を滴定セットごとに決定し、それらを用いて、各受容体に対する各ＩＬ－２ムテインの解離定数ＫＤ＝ｋ_ｏｆｆ／ｋ_ｏｎを計算した。

【0203】

ＩＬ－２受容体に対するＩＬ－２ ＦｃムテインおよびＷＴ－ＩＬ－２ Ｆｃ融合対照のアフィニティを測定するために、ＩＬ－２ Ｆｃ融合体を抗ヒトＩｇＧ Ｆｃ抗体表面上に捕捉し、次いでアナライトとしてのＩＬ－２受容体を捕捉した。例示的なＩＬ－２ムテインである８６ＢＣＨ、４３ＢＧＯ、４４ＢＧＯ、４７ＢＪＯ、４８ＢＪＯ、４９ＢＪＯ、６５ＢＪＯ、４４ＢＪＰ、４５ＢＪＰ、４６ＢＪＰおよび４７ＢＪＰは１価であり、一方、５４ＢＧＯは４３ＢＧＯの２価形態であり、４８ＢＭＰは４９ＢＪＯの２価形態であり、２１ＢＭＴは６５ＢＪＯの２価形態である。８６ＢＣＨは、野生型ヒトＩＬ－２（配列番号３９）の３位に対応するＴからＡへの置換、および１２５位に対応するＣからＳへの置換を含有し、これを対照として使用した。その他の例示的なＩＬ－２ムテインは全て、野生型ヒトＩＬ－２のそれぞれ３位および１２５位に対応する同じＴからＡへの置換およびＣからＳへの置換を含有する。表１は、各ＩＬ－２ムテイン内に導入されたアミノ酸置換を要約したものである。そのような置換の位置は野生型ヒトＩＬ－２アミノ酸配列（配列番号３９）に基づいている。配列番号１および２のそれぞれは、野生型ヒトＩＬ－２アミノ酸配列（配列番号３９）において見出される最初のアミノ酸を含有しないため、そのような置換は、配列番号１または２に基づいて示されている場合とは異なることに注意されたい。

【0204】

【表1】

【0205】

表２に示されているとおり、ヒトＩＬ－２Ｒαに対する対照８６ＢＣＨの結合アフィニティ（４つの試験の平均）は約３０ｎＭであり、一方、ヒトＩＬ－２Ｒαに対するその他の例示的なＩＬ－２ムテインのアフィニティは１．１ｎＭ～４４ｎＭの範囲であった。一方、ヒトＩＬ－２Ｒβに対する対照８６ＢＣＨのアフィニティ（４つの試験の平均）は約１５００ｎＭであり、一方、その他の例示的なＩＬ－２ムテインはいずれも、３μＭでアッセイされた場合、ヒトＩＬ－２Ｒβに対する検出可能な結合を示さなかった。

【0206】

【表2】

【0207】

実施例３．ヒト末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）ｐＳＴＡＴ５アッセイ

【0208】

ＩＬ－２ムテインを系列希釈で調製し、５０μＬをＵ底プレートに２通りに加えた。５０μＬのＰＢＭＣ（約５００ｋｃ／ｗ）を加え、サンプルを３７℃、５％ ＣＯ２で３０分間（「ｍ」）静置した。冷ＰＢＳを加え、サンプルを遠心分離し、上清を除去した。ＩＣ固定バッファー（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ００－８２２２－４９）を加え、混合し、サンプルを室温で２０分間インキュベートした。サンプルをＦＢＳ染色バッファー（ＢＤ Ｃａｔ ５５４６５６）で２回洗浄し、次いで、覆いをした状態で氷上で抗ＣＤ３抗体（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ４７－００３８－４２）および抗ＣＤ５６抗体（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ Ｃａｔ ３１８３３４）で３０分間染色した。サンプルを染色バッファーで２回洗浄し、予め冷却されたＰｅｒｍ Ｂｕｆｆｅｒ ＩＩＩ（ＢＤ Ｃａｔ ５５８０５０）を使用して、覆いをした状態で氷上で３０分間透過処理した。次いでサンプルを染色バッファーで２回洗浄し、覆いをした状態で氷上で抗ＣＤ４（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ４６－００４７－４２）、抗ＣＤ８（ＢＤ Ｃａｔ ５５５６３４）、抗ＣＤ２５（ＢＤ Ｃａｔ ３３５８０７）、抗ＣＤ１２７（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ １２－１２７８－４２）、抗ｐＳＴＡＴ５ Ｙ６９４（ＢＤ Ｃａｔ ６１２５９９）および抗ＦｏｘＰ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ４８－４７７７－４２）で１時間処理した。サンプルを染色バッファーで２回洗浄し、１３０μＬ中に再懸濁させた。次いでサンプルをＢＤ Ｓｙｍｐｈｏｎｙフローサイトメーターで分析した。

【0209】

ＦＣＳファイルをＦｌｏｗＪｏまたはＦＣＳＥｘｐｒｅｓｓ内に取り込んだ。前方散乱と側方散乱との対比を用いて、リンパ球をゲーティングした。前方散乱面積と前方散乱高との対比を用い、次いで前方散乱高と前方散乱幅との対比を用いて、単一細胞をゲーティングした。そこから、ＣＤ５６を発現するＣＤ３陰性細胞をＮＫ細胞に対してゲーティングした（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ３陽性細胞をＣＤ４陽性またはＣＤ８陽性細胞にサブゲーティングした（これらのＣＤ８陽性細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ２５およびＦｏｘＰ３の発現を用いてＣＤ４陽性細胞を更に分解し、ＣＤ４陽性であるがＣＤ２５およびＦｏｘＰ３に関して二重陰性である細胞をＴｃｏｎｖ細胞として特定した（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ２５およびＦｏｘＰ３に関して二重陽性であるＣＤ４陽性細胞を制御性Ｔ細胞として特定した（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。未処理サンプルを使用して、ｐＳＴＡＴ５陽性細胞に関するゲーティングを導いた。

【0210】

Ｆｃ変異体を含む種々の例示的なＩＬ－２ムテインの系列希釈物でＰＢＭＣを刺激した。８６ＢＣＨまたは９９ＢＨＹを対照として使用した。９９ＢＨＹと８６ＢＣＨとの唯一の違いは、９９ＢＨＹにおけるＦｃ変異体がそのＣ末端リジン残基を欠いていることである。最高濃度における陽性ｐＳＴＡＴ５の比率を１００％として用い、未処理体を０％として用いて、その他の例示的なＩＬ－２ムテインのｐＳＴＡＴ５応答を８６ＢＣＨまたは９９ＢＨＹに対して正規化した。対数（アゴニスト）対応答 － －可変勾配（４パラメーター）フィットを用いて用量応答曲線を作成し、ＥＣ５０を計算した。

【0211】

そのようなＩＬ－２ムテインがｐＳＴＡＴ５を活性化する能力を、ＣＤ４^＋ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ 制御性（Ｔｒｅｇ）細胞およびエフェクターＴ細胞集団（ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を含む）でのゲーティングによって、複数のドナーからのＰＢＭＣの混合集団において評価した。Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞と比較して、対照に対する、より低いｐＳＴＡＴ５ ＥＣ５０応答を示した。このことは、Ｔｒｅｇ細胞上で発現される三量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ α／β／γ）に対するアフィニティが、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞上で発現される二量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ β／γ）に対するアフィニティより高いことと合致している（８６ＢＣＨに関しては図１Ａ～１Ｃ、および９９ＢＨＹに関しては図２Ａ～２Ｃ）。対照的に、その他の例示的なＩＬ－２ムテインでのＰＢＭＣの刺激は、最大１μＭの濃度で、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においてＳＴＡＴ５リン酸化を誘導することなく、Ｔｒｅｇにおいて選択的にＳＴＡＴ５リン酸化を誘導した（図１Ａ～１Ｃおよび図２Ａ～２Ｃ）。ＣＤ４^＋ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ Ｔｒｅｇ細胞コンパートメントに対するこれらのムテインの優先的活性に合致して、０．１μＭより高い用量におけるＳＴＡＴ５リン酸化の誘導は、対照と比較して、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においては最小であった。（図１Ｂ～１Ｃおよび図２Ｂ～２Ｃ）。これらの応答は複数のドナー（ｎ＝７）にわたって一貫していた。これらの結果は、種々の例示的なＩＬ－２ムテインが、ＣＤ８^＋ Ｔエフェクター細胞またはＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を活性化することなく、初代ヒトＴｒｅｇ細胞を選択的に活性化したことを実証している。

【0212】

初代ヒトＴｒｅｇ細胞を活性化するための例示的なＩＬ－２ムテインのＥＣ５０値を以下の表３Ａに要約する。

【0213】

【表3A】

【0214】

以下の表３Ｂに示されているとおり、再び９９ＢＨＹを対照として使用して、追加的な例示的ＩＬ－２ムテインに関して、前記と同じ実験を行った。

【0215】

【表3B】

【0216】

ＤＮＢ５５８は１価であり、６５ＢＪＯ（同様に１価）および２１ＢＭＴ（２価）と同じＩＬ－２突然変異を有する。ＤＮＢ５５８と６５ＢＪＯとは、６５ＢＪＯがＦｃ領域内に追加的な突然変異を有するという点で異なる。ＤＮＢ５５７は１価であり、４９ＢＪＯ（１価）および４８ＢＭＰ（２価）と同じＩＬ－２突然変異を有する。ＤＮＢ５５７と４９ＢＪＯとは、４９ＢＪＯがＦｃ領域内に追加的な突然変異を有するという点で異なる。

【0217】

同様に、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞と比較して、対照に対する、より低いｐＳＴＡＴ５ ＥＣ５０応答を示した。このことは、Ｔｒｅｇ細胞上で発現される三量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ α／β／γ）に対するアフィニティが、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞上で発現される二量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ β／γ）に対するアフィニティより高いことと合致している（９９ＢＨＹに関する図３Ａ）。対照的に、評価された追加的な例示的ＩＬ－２ムテインでのＰＢＭＣの刺激は、最大１μＭの濃度で、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においてＳＴＡＴ５リン酸化を誘導することなく、Ｔｒｅｇにおいて選択的にＳＴＡＴ５リン酸化を誘導した（図３Ａ～３Ｃ）。ＣＤ４^＋ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ Ｔｒｅｇ細胞コンパートメントに対するこれらのムテインの優先的活性に合致して、０．１μＭより高い用量におけるＳＴＡＴ５リン酸化の誘導は、対照と比較して、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においては最小であった。（図３Ｂ～３Ｃ）。これらの応答は複数のドナー（ｎ＝７）にわたって一貫していた。これらの結果はこれまでの結果に合致しており、種々の例示的なＩＬ－２ムテインが、ＣＤ８^＋ Ｔエフェクター細胞またはＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を活性化することなく、初代ヒトＴｒｅｇ細胞を選択的に活性化したことを実証している。

【0218】

実施例４．アカゲザル全血ｐＳＴＡＴ５アッセイ

【0219】

ＩＬ－２ムテインを系列希釈で調製し、２５μＬをディープウェルプレートに２通りに加え、密封し、３７℃、５％ ＣＯ_２で３０分間静置した。室温のアカゲザル全血１００μＬを加え、混合した。サンプルを３７℃、５％ ＣＯ_２で２０分間インキュベートした。細胞を抗ＣＤ３（ＢＤ Ｃａｔ ５５７９１７）抗体、抗ＣＤ１２７（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ １２－１２７８－４２）抗体、抗ＣＤ２５（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ２５－０２５７－４２）抗体および抗ＮＫＧ２Ａ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ Ｃａｔ １３０－１１３－５６５）抗体で染色し、覆いをした状態で穏やかに振盪しながら室温で２０分間インキュベートした。次いで細胞を細胞溶解し、１×細胞溶解（Ｌｙｓｅ）／固定（Ｆｉｘ）バッファー（ＢＤ Ｃａｔ ５５８０４９）を使用して固定し、十分に混合し、覆いをした状態で室温で１０分間インキュベートした。細胞をＦＢＳ染色バッファー（ＢＤ Ｃａｔ ５５４６５６）で２回洗浄し、９６ウェルプレートに移した。予め冷却されたＰｅｒｍ Ｂｕｆｆｅｒ ＩＩＩ（ＢＤ Ｃａｔ ５５８０５０）をサンプルに加え、混合し、覆いをした状態で氷上で３０分間インキュベートした。サンプルを染色バッファーで２回洗浄した。細胞内抗体である抗ＦｏｘＰ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃａｔ ４８－４７７７－４２）、抗ｐＳＴＡＴ５ Ｙ６９４（ＢＤ Ｃａｔ ６１２５９９）、抗ＣＤ４（ＢＤ Ｃａｔ ５５２８３８）および抗ＣＤ８（ＢＤ Ｃａｔ ５６３７９５）をサンプルに加え、覆いをした状態で室温で１時間インキュベートした。サンプルを染色バッファーで２回洗浄し、１３０μＬに再懸濁させた。サンプルをＢＤ Ｓｙｍｐｈｏｎｙフローサイトメーターで分析した。

【0220】

ＦＣＳファイルをＦｌｏｗＪｏ内に取り込んだ。前方散乱と側方散乱との対比を用いて、リンパ球をゲーティングした。前方散乱面積と前方散乱高との対比を用いて、単一細胞をゲーティングした。そこから、ＮＫＧ２Ａを発現するＣＤ３陰性細胞をＮＫ細胞に対してゲーティングした（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ３陽性細胞をＣＤ４陽性またはＣＤ８陽性細胞にサブゲーティングした（これらのＣＤ８陽性細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ２５およびＦｏｘＰ３の発現を用いてＣＤ４陽性細胞を更に分解し、ＣＤ４陽性であるがＣＤ２５およびＦｏｘＰ３に関して二重陰性である細胞をＴｃｏｎｖ細胞として特定した（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ４陽性細胞を更にＣＤ２５およびＣＤ１２７にサブゲーティングした。ＣＤ２５陽性かつＣＤ１２７陰性である細胞をＦｏｘＰ３に関して評価し、これらを制御性Ｔ細胞として特定した（これらの細胞からｐＳＴＡＴ５発現を評価した）。ＣＤ２５、ＦｏｘＰ３およびｐＳＴＡＴ５に関するＦＭＯを用いてゲーティングを導いた。

【0221】

Ｆｃ変異体を含む種々の例示的なＩＬ－２ムテインの系列希釈物で該全血を刺激した。９９ＢＨＹを対照として使用した。最高濃度における陽性ｐＳＴＡＴ５の比率を１００％として用い、未処理体を０％として用いて、その他の例示的なＩＬ－２ムテインのｐＳＴＡＴ５応答を９９ＢＨＹに対して正規化した。対数（アゴニスト）対応答 － －可変勾配（４パラメーター）フィットを用いて用量応答曲線を作成し、ＥＣ５０を計算した。

【0222】

そのようなＩＬ－２ムテインがｐＳＴＡＴ５を活性化する能力を、ＣＤ４^＋ ＣＤ１２７^－ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ 制御性（Ｔｒｅｇ）細胞およびエフェクターＴ細胞集団（ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を含む）でのゲーティングによって、複数のアカゲザルドナーからの全血マトリックスにおいて評価した。Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞と比較して、対照に対する、より低いｐＳＴＡＴ５ ＥＣ５０応答を示した。このことは、Ｔｒｅｇ細胞上で発現される三量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ α／β／γ）に対するアフィニティが、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞上で発現される二量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ β／γ）に対するアフィニティより高いことと合致している（９９ＢＨＹに関しては図３Ａ～３Ｃ）。対照的に、その他の例示的なＩＬ－２ムテインでの全血の刺激は、最大３μＭの濃度で、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においてＳＴＡＴ５リン酸化を誘導することなく、Ｔｒｅｇにおいて選択的にＳＴＡＴ５リン酸化を誘導した（図４Ａ～４Ｃ）。ＣＤ４^＋ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ Ｔｒｅｇ細胞コンパートメントに対するこれらのムテインの優先的活性に合致して、１μＭより高い用量におけるＳＴＡＴ５リン酸化の誘導は、対照と比較して、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においては最小であった。（図４Ｂ～４Ｃ）。これらの応答は複数のドナー（ｎ＝２）にわたって一貫していた。これらの結果は、種々の例示的なＩＬ－２ムテインが、ＣＤ８^＋ Ｔエフェクター細胞またはＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を活性化することなく、初代アカゲザルＴｒｅｇ細胞を選択的に活性化したことを実証している。

【0223】

初代アカゲザルＴｒｅｇ細胞を活性化するための例示的なＩＬ－２ムテインのＥＣ５０値を以下の表４Ａに要約する。

【0224】

【表4A】

【0225】

以下の表４Ｂに示されているとおり、再び９９ＢＨＹを対照として使用して、追加的な例示的ＩＬ－２ムテインに関して、前記と同じ実験を行った。ＤＮＢ５５８は１価であり、６５ＢＪＯ（同様に１価）および２１ＢＭＴ（２価）と同じＩＬ－２突然変異を有する。ＤＮＢ５５７は１価であり、４９ＢＪＯ（１価）および４８ＢＭＰ（２価）と同じＩＬ－２突然変異を有する。

【0226】

【表4B】

【0227】

同様に、Ｔｒｅｇ細胞は、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞と比較して、対照に対する、より低いｐＳＴＡＴ５ ＥＣ５０応答を示した。このことは、Ｔｒｅｇ細胞上で発現される三量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ α／β／γ）に対するアフィニティが、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞上で発現される二量体ＩＬ－２受容体複合体（ＩＬ－２Ｒ β／γ）に対するアフィニティより高いことと合致している（９９ＢＨＹに関する図５Ａ）。対照的に、評価された追加的な例示的ＩＬ－２ムテインでのＰＢＭＣの刺激は、最大１μＭの濃度で、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においてＳＴＡＴ５リン酸化を誘導することなく、Ｔｒｅｇにおいて選択的にＳＴＡＴ５リン酸化を誘導した（図５Ａ～５Ｃ）。ＣＤ４^＋ ＣＤ２５^＋ Ｆｏｘｐ３^＋ Ｔｒｅｇ細胞コンパートメントに対するこれらのムテインの優先的活性に合致して、０．１μＭより高い用量におけるＳＴＡＴ５リン酸化の誘導は、対照と比較して、ＣＤ８^＋ Ｔ細胞およびＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞においては最小であった。（図５Ｂ～５Ｃ）。これらの応答は複数のドナー（ｎ＝７）にわたって一貫していた。これらの結果はこれまでの結果に合致しており、種々の例示的なＩＬ－２ムテインが、ＣＤ８^＋ Ｔエフェクター細胞またはＣＤ４^＋ ＣＤ２５^－ Ｆｏｘｐ３^－ Ｔ細胞を活性化することなく、初代ヒトＴｒｅｇ細胞を選択的に活性化したことを実証している。

【0228】

実施例５．ｘｅｎｏ－ＧｖＨＤモデルにおけるヒトＴｒｅｇの増殖および活性化

【0229】

ｈｕＰＢＭＣ－ＮＳＧマウスを使用したｘｅｎｏ－ＧｖＨＤ（移植片対宿主病）モデルにおいて、ムテインがヒトＴｒｅｇを増殖させ活性化する能力に関してムテインを評価した。ＮＳＧマウスをＪａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙから購入し、ヒトＰＭＢＣをマウスに移植した。ヒトＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）移植の１４～１７日後、マウスを１用量のＩＬ－２ムテインで処置した。この実施例において評価した例示的なＩＬ－２ムテインを以下の表５に示す。該マウスからの脾細胞を、ＦＡＣＳ（蛍光活性化細胞選別）分析によって、５日間または一部の研究においては８日間、毎日、プロファイリングした。脾細胞内のヒトＴｒｅｇはヒトＣＤ４５^＋ ＣＤ５６^－ ＣＤ３^＋ ＣＤ４^＋ ＣＤ１２７^ｌｏｗ Ｆｏｘｐ３^＋ Ｔ細胞として特定された。評価した全てのムテインはヒトＣＤ４^＋ ＦｏｘＰ３^＋ Ｔｒｅｇ発現を増強した（図６Ａ～６Ｄ）。

【0230】

ヒトＴｒｅｇ上のＣＤ２５の表面発現をＦＡＣＳ分析によって定量した。評価した全てのＩＬ－２ムテインはＴｒｅｇ表面上のＣＤ２５発現を増強した（図７Ａ～７Ｄ）。

【0231】

【表5】

【0232】

実施例６．アカゲザルにおける１価および２価形態のムテインのＰＦ／ＰＫプロファイル

【0233】

２価および１価の形態である特定の例示的なＩＬ－２ムテインのＰＫ／ＰＤプロファイルを皮下送達後に評価した。研究計画を以下の表６に示す。生物学的にナイーブなアカゲザル雄サルを研究に使用した。１群当たり３匹の動物を使用した。第０日および第１４日に皮下投与経路により動物に投与し、投与溶液量は１ｍＬ／ｋｇであった。研究期間は２８日間であった。

【0234】

【表6】

【0235】

薬物動態（ＰＫ）血清（それぞれ１００μＬの７つのアリコート）を以下のとおりに得た：第０日第１投与：投与前、１５分、２時間、６時間；第１日、第２日、第３日、第７日、第９日；第１４日第２回投与：投与前、１５分、２時間、６時間；第１５日、第１６日、第１７日、第２１日、第２３日、第２８日。ｐＳＴＡＴ５アッセイのために全血（２アリコート）を収集し、薬力学（ＰＤ）分析のために免疫表現型検査（Ｔｒｅｇ、Ｔｃｏｎｖ、ＣＤ８、ＮＫ細胞）を以下のとおりに行った。

【0236】

パネルＡ：第－５日、第０日第１投与：投与前；第１日、第３日、第４日、第７日、第９日；第１４日第２回投与：投与前；第１５日、第１７日、第１８日、第２１日、第２３日、第２８日。

【0237】

パネルＢ：第－５日；第０日第１投与：投与前、２時間；第１日、第２日、第３日、第７日、第９日；第１４日第２投与：投与前、２時間；第１５日、第１６日、第１７日、第２１日、第２３日、第２８日。

【0238】

血清化学およびＣＲＰ（ｃ反応性タンパク質）を以下のとおりに評価した：第－５日、第０日第１投与：投与前、２時間；第１日、第７日；第１４日第２投与：投与前、２時間；第１５日、第１６日、第１７日、第２１日、第２３日、第２８日。血液学を以下のとおりに評価した：第－５日、第０日第１投与：投与前；第１日、第３日、第４日、第７日、第９日；第１４日第２投与：投与前；第１５日、第１７日、第１８日、第２１日、第２３日、第２８日。

【0239】

第１投与後のＰＫ／ＰＤの結果を１価ムテインおよび２価ムテインの両方に関して以下に示し（それぞれ表７Ａおよび表７Ｂを参照されたい）、また、図８Ａ～８Ｄに示す。

【0240】

【表7A】

【0241】

【表7B】

【0242】

また、表８は、アカゲザルＳＴＡＴ５およびヒトＳＴＡＴ５の結果と共に、評価し例示的なＩＬ－２ムテインに関する種々のＰＫ／ＰＤの結果を示す。以下の表８におけるアカゲザルおよびヒトのＳＴＡＴ５アッセイに関する結果は、幾何平均を用いて計算された。

【0243】

【表8】

【0244】

本明細書中に引用されている全ての参考文献を、各個の刊行物、データベースエントリー（例えば、ＧｅｎＢａｎｋ配列またはＧｅｎｅＩＤエントリー）、特許出願または特許が参照により本明細書に組み入れられると具体的かつ個別に示されている場合と同様に、参照により本明細書に組み入れることとする。参照により組み入れるというこの陳述は、そのような引用が、参照により組み入れるという宣誓陳述の直前または直後にない場合であっても、３７ Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（１）に従い、各個の刊行物、データベースエントリー（例えば、Ｇｅｎｂａｎｋ配列またはＧｅｎｅＩＤエントリー）、特許出願または特許［それらのそれぞれは３７ Ｃ．Ｆ．Ｒ．§１．５７（ｂ）（２）に従い明らかに特定されるものである］に関するものであることを出願人が意図しているものである。参照により組み入れるという宣誓陳述が本明細書中に含まれている場合、それは、参照により組み入れるというこの一般的（ｇｅｎｅｒａｌ）陳述を何ら弱めるものではない。本明細書における参考文献の引用は、該参考文献が関連先行技術であると自認するものではなく、また、それは、これらの刊行物または文書の内容または日付に関して何ら自認するものでもない。

【0245】

本発明は、本明細書に記載されている特定の実施形態によって範囲において限定されるものではない。実際、本明細書に記載されているものに加えて、本発明の種々の修飾が前記説明および添付図面から当業者に明らかとなるであろう。そのような修飾は添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれると意図される。

【0246】

前記の明細書は、当業者が本発明を実施しうるのに十分なものであるとみなされる。本明細書に示され記載されているものに加えて、本発明の種々の修飾が前記説明から当業者に明らかとなり、添付の特許請求の範囲の範囲内に含まれる。

【0247】

以下の表９は、本明細書に開示されている全ての配列を要約したものである。

【0248】

【表9】

【図1A】

【図1B】

【図1C】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図3A】

【図3B】

【図3C】

【図4A】

【図4B】

【図4C】

【図5A】

【図5B】

【図5C】

【図6A】

【図6B】

【図6C】

【図6D】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図8D】

【図9】

【配列表】

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【国際調査報告】