特表 2024-502671 ピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体の使用

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-01-22

(54)【発明の名称】ピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体の使用

(51)【国際特許分類】

   A61K 31/519 20060101AFI20240115BHJP

   A61P 35/00 20060101ALI20240115BHJP

   C07D 471/04 20060101ALN20240115BHJP

【ＦＩ】

A61K31/519

A61P35/00

C07D471/04 117A

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023543006

(86)(22)【出願日】2022-01-17

(85)【翻訳文提出日】2023-07-14

(86)【国際出願番号】 CN2022072322

(87)【国際公開番号】W WO2022152296

(87)【国際公開日】2022-07-21

(31)【優先権主張番号】202110061761.8

(32)【優先日】2021-01-18

(33)【優先権主張国・地域又は機関】CN

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】520175190

【氏名又は名称】クワンチョウ ジョーヨー ファーマテック カンパニー，リミティド

(71)【出願人】

【識別番号】518212539

【氏名又は名称】シャンハイ ジャ タン ファーマテック カンパニー リミテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110000338

【氏名又は名称】弁理士法人 ＨＡＲＡＫＥＮＺＯ ＷＯＲＬＤ ＰＡＴＥＮＴ ＆ ＴＲＡＤＥＭＡＲＫ

(72)【発明者】

【氏名】李永国

(72)【発明者】

【氏名】隗維

(72)【発明者】

【氏名】宋艾雲

(72)【発明者】

【氏名】葉未

【テーマコード（参考）】

4C065

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C065AA03

4C065BB10

4C065CC01

4C065DD02

4C065EE02

4C065HH06

4C065JJ01

4C065KK01

4C065LL01

4C065LL04

4C065PP12

4C065PP17

4C086AA01

4C086AA02

4C086CB09

4C086MA01

4C086MA04

4C086MA35

4C086MA52

4C086NA14

4C086ZB26

(57)【要約】

医薬の製造におけるピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体又はその薬学的に許容される塩の使用を開示し、前記医薬は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌及びＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌の１つ又は複数の治療及び／又は予防に使用される。

【特許請求の範囲】

【請求項1】

化合物Ｉの構造が下記式に示される通りであることを特徴とする、医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用であって、

【化1】

前記医薬は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防に使用される、使用。

【請求項2】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項3】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項4】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項5】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項6】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌であることを特徴とする、請求項１に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項7】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、
（１）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣明細胞癌であり、
（２）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であり、
（３）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、一次治療方法又は二次治療方法が無効な卵巣癌である、
条件の１つ又は複数を満たし、
好ましくは、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、
（１）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の左卵巣明細胞癌であり、
（ＩＩ）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、肝転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項３に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項8】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、
（１）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸部扁平上皮癌であり、
（２）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であり、
（３）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、一次治療方法、二次治療方法又は三次治療方法が無効な子宮頸癌である、
条件の１つ又は複数を満たし、
好ましくは、前記転移は、リンパ及び／又は肺であり；より好ましくは、前記リンパは、左鎖骨上リンパ及び／又は後腹膜リンパであることを特徴とする、請求項５に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項9】

（１）前記医薬は経口剤形で提供され、
（２）前記医薬は錠剤で提供され、
（３）前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量は、０．１～２．０ｍｇ／回であり、例えば、０．１ｍｇ／回、０．２ｍｇ／回、０．３ｍｇ／回、０．４ｍｇ／回、０．５ｍｇ／回、０．６ｍｇ／回、０．７ｍｇ／回、０．８ｍｇ／回、０．９ｍｇ／回、１．０ｍｇ／回、１．１ｍｇ／回、１．２ｍｇ／回、１．３ｍｇ／回、１．４ｍｇ／回、１．５ｍｇ／回、１．６ｍｇ／回、１．７ｍｇ／回、１．８ｍｇ／回、１．９ｍｇ／回又は２．０ｍｇ／回であり、
（４）前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与頻度は、１回／日又は２回／日である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項１～８のいずれか一項に記載の医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用。

【請求項10】

医薬キットＡと医薬キットＢを含む、組み合わせ医薬キットであって、
前記医薬キットＡはＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を検出する試薬を含み、前記医薬キットＢは化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を含み、
好ましくは、前記組み合わせ医薬キットは、
（１）前記医薬キットＡと医薬キットＢの投与時間は任意の順序又は前記医薬キットにおける前記医薬キットＡを最初に投与し、
（２）前記医薬キットＡにおいて、前記ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異検出試薬は、癌患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有しているかどうかを検出するために使用され、例えば、前記癌患者は、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、子宮頸癌及び膀胱癌の１つ又は複数を患っている患者であり、
（３）前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の含有量は治療有效量であり、
（４）前記医薬キットＢは更に薬学的に許容される助剤を含み、
（５）前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量及び投与頻度は請求項９に記載された通りである、
（６）前記組み合わせ医薬キットはＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防するために使用され、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は請求項１～８のいずれか一項に記載された通りである、
条件の１つ又は複数を満たす組み合わせ医薬キット。

【請求項11】

前記化合物Ｉの構造は下記に示される通りであることを特徴とする、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防するための化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩。

【化2】

（ただし、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、請求項１～８のいずれか一項に記載された通りである。）

【請求項12】

患者に治療有効量の化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を投与することを特徴とする、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防方法。

【化3】

（ただし、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、請求項１～８のいずれか一項に記載された通りである。）

【請求項13】

前記方法は更に、患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有するかどうかを検出するステップを含むことを特徴とする、請求項１２に記載のＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防方法。

【発明の詳細な説明】

【発明の詳細な説明】

【0001】

本出願は出願日が２０２１年１月１８である中国特許出願２０２１１００６１７６１８の優先権を主張する。本出願は上記の中国特許出願の全文を引用する。

【0002】

〔技術分野〕
本発明は生物医学の技術分野に関し、具体的には、本発明はピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体の使用に関する。

【0003】

〔背景技術〕
現在、悪性腫瘍は人の生命と健康を大きく脅かす疾患の１つであり、その罹患率及び死亡率は年々増加しており、癌による人の死亡率は心疾患・脳血管疾患に次ぐ第２位となっている。発癌の本質は、細胞の生理機能を調節する分子シグナルが伝達過程で異常を生じ、細胞の正常な生理機能が障害され、無限に増殖することである。細胞シグナル伝達は、腫瘍の発生、発展、再発及び転移と密接に関連している。腫瘍治療用の通常の細胞毒性薬剤は一般に、選択性が低く、副作用が強く、薬剤耐性が低いなどの欠点があり、これは抗腫瘍薬物の小分子標的薬物の研究方向への移行を促進している。

【0004】

ＰＩ３Ｋ－ＡＫＴ－ｍＴＯＲは、細胞の成長、分裂、生存及び生殖に重要な細胞周期制御の重要な経路であり、その過渡的な活性化は様々な腫瘍の発生、発達、生存、移動に関与している。ＰＩ３Ｋ（ホスファチジルイノシトール３－キナーゼ、ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ ３－ｋｉｎａｓｅ）、ＡＫＴ及びｍＴＯＲ（ｍａｍｍａｌｉａｎ ｔａｒｇｅｔ ｏｆ ｒａｐａｍｙｃｉｎ）はこの経路の重要な分子であるため、抗腫瘍治療の標的となり、ＰＩ３Ｋ又はｍＴＯＲの特異的な阻害剤はすでに販売されており、これらの２つの分子の二重阻害剤は、理論的には、より優れた抗腫瘍効果を発揮する可能性がある。

【0005】

ＰＦ－０５２１２３８４（ＰＫＩ－５８７）は、ファイザーによって開発されたＰＩ３Ｋ及びｍＴＯＲの二重標的阻害剤であり、現在第ＩＩ相臨床試験段階にある。エベロリムス（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）は、ノバルティス社が開発した経口ｍＴＯＲ単一標的阻害剤であり、商品名はＡｆｉｎｉｔｏｒであり、２００９年３月にＦＤＡにより販売が承認された。国際的にエベロリムスは、進行性腎細胞癌（ＲＣＣ）、結節性硬化症関連上衣下巨細胞星状細胞腫（ＴＳＣ－ＳＥＧＡ）及び腎血管筋脂肪腫（ＴＳＣ－ＡＭＬ）、進行性膵神経内分泌腫瘍（ｐＮＥＴ）、閉経後エストロゲン受容体陽性／ＨＥＲ－２陰性の進行乳癌（ＢＣ）などの腫瘍の複数の適応症に対して承認されている。

【0006】

〔発明の概要〕
本発明の目的は、化合物又はその薬学的に許容される塩が、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌に対して良好な抗腫瘍活性を有し、例えば、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌及びＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌の１つ又は複数に対して良好な抗腫瘍活性を有するピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体の使用を提供することである。

【0007】

本発明は、医薬の製造における、構造が下記式に示される通りである化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用を提供する。

【0008】

【化1】

【0009】

前記医薬は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防に使用される。

【0010】

ただし、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌であってもよい。

【0011】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であってもよい。

【0012】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌であってもよい。

【0013】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であってもよい。

【0014】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌であってもよい。

【0015】

本発明において、前記医薬は経口剤形で提供される。

【0016】

本発明において、前記医薬は錠剤で提供される。

【0017】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣明細胞癌であってもよく、例えば、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の左卵巣明細胞癌である。

【0018】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であってもよく、前記転移は肝転移であってもよい。

【0019】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、一次治療方法又は二次治療方法が無効な卵巣癌であってもよい。

【0020】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸部扁平上皮癌であってもよい。

【0021】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であってもよく、前記転移はリンパ及び／又は肺であってもよい。前記リンパは、左鎖骨上リンパ及び／又は後腹膜リンパであってもよい。

【0022】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、一次治療方法、二次治療方法又は三次治療方法が無効な子宮頸癌であってもよい。

【0023】

本発明はまた、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防するための、構造が下記に示される通りである化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を提供する。

【0024】

【化2】

【0025】

ただし、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は前記のいずれか１つのスキームに記載された通りである。

【0026】

本発明は、患者に治療有効量の前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を投与することを含む、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防する方法を提供する。前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は前記のいずれか１つのスキームに記載された通りである。

【0027】

医薬の製造における、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の使用又は前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防する方法において、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量は、対象者／患者の体重に従って投与してもよく、好ましくは、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量は、０．１～２．０ｍｇ／回であり、例えば：０．１ｍｇ／回、０．２ｍｇ／回、０．３ｍｇ／回、０．４ｍｇ／回、０．５ｍｇ／回、０．６ｍｇ／回、０．７ｍｇ／回、０．８ｍｇ／回、０．９ｍｇ／回、１．０ｍｇ／回、１．１ｍｇ／回、１．２ｍｇ／回、１．３ｍｇ／回、１．４ｍｇ／回、１．５ｍｇ／回、１．６ｍｇ／回、１．７ｍｇ／回、１．８ｍｇ／回、１．９ｍｇ／回又は２．０ｍｇ／回である。

【0028】

前記使用又は前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防方法において、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与頻度は、１回／日又は２回／日であってもよい。

【0029】

前記使用又は前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防方法において、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩は経口投与してもよい。

【0030】

好ましくは、前記使用又は前記癌の治療及び／又は予防方法において、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を経口投与し、投与量は０．１～２．０ｍｇ／回であり、例えば、０．１ｍｇ／回、０．４ｍｇ／回、０．５ｍｇ／回、０．６ｍｇ／回、０．７ｍｇ／回、０．９ｍｇ／回又は１．１ｍｇ／回であり、投与頻度は１回／日又は２回／日である。

【0031】

前記使用又は前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防方法において、更に、患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有するかどうかを検出するステップを含んでもよい。

【0032】

本発明はまた、医薬キットＡと医薬キットＢを含む、組み合わせ医薬キットを提供する。

【0033】

ここで、前記医薬キットＡはＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を検出する試薬を含み、前記医薬キットＢは化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を含む。

【0034】

好ましくは、前記医薬キットＡと医薬キットＢの投与時間は任意の順序又は前記医薬キットにおける前記医薬キットＡを最初に投与する。

【0035】

好ましくは、前記医薬キットＡにおいて、前記ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異検出試薬は、癌患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有しているかどうかを検出するために使用され、例えば、前記癌患者は、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、子宮頸癌及び膀胱癌の１つ又は複数を患っている患者である。

【0036】

好ましくは、前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の含有量は治療有效量である。

【0037】

好ましくは、前記医薬キットＢは更に薬学的に許容される助剤を含む。

【0038】

好ましくは、前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量及び投与頻度は前記のいずれか１つのスキームに記載された通りである。

【0039】

好ましくは、前記組み合わせ医薬キットはＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防するために使用され、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は前記のいずれか１つのスキームに記載された通りである。

【0040】

別途に説明しない限り、本明細書で用いられる以下の用語及び連語は以下の意味を含む。１つの特定の用語又は連語は、特別に定義されない場合、不確定又は不明瞭ではなく、普通の定義として理解されるべきである。本明細書で商品名が出た場合、相応の商品又はその活性成分を指す。

【0041】

本明細書で用いられる「薬学的許容される」は、それらの化合物、材料、組成物及び／又は剤形に対するもので、これらは信頼できる医学判断の範囲内にあり、ヒト及び動物の組織との接触に適し、毒性、刺激性、アレルギー反応又はほかの問題又は合併症があまりなく、合理的な利益／リスク比に合う。

【0042】

用語「薬学に許容される塩」とは、本発明の化合物と比較的に無毒で、薬学的に許容される酸又は塩基で製造された塩を指す。本発明の化合物に比較的に酸性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は適切な不活性溶媒において十分な量の薬学的に許容される塩基でこれらの化合物の中性の形態と接触することで塩基付加塩を得ることができる。薬学的に許容される塩基付加塩は、リチウム塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、アルミニウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、ビスマス塩、アンモニウム塩、ジエタノールアミン塩などが含まれるが、これらに限定されない。本発明で化合物に比較的塩基性の官能基が含まれる場合、単独の溶液又は、適切な不活性溶媒において十分な量の薬学的に許容される酸をこれらの化合物の中性形態と接触することで酸付加塩を得ることができる。前記薬学的に許容される酸は、無機酸を含み、前記無機酸は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、リン酸、亜リン酸、硫酸などが含まれるが、これらに限定されない。前記薬学的に許容される酸は、有機酸を含み、前記有機酸は、酢酸、プロピオン酸、シュウ酸、イソ酪酸、マレイン酸、マロン酸、安息香酸、コハク酸、スベリン酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、クエン酸、サリチル酸、酒石酸、メタンスルホン酸、イソニコチン酸、酸性クエン酸、オレイン酸、タンニン酸、パントテン酸、酒石酸水素、アスコルビン酸、ゲンチジン酸、フマル酸、グルコン酸、糖酸、ギ酸、エタンスルホン酸、パモ酸（即ち、４，４’－メチレンビス（３－ヒドロキシ－２－ナフトエ酸）、アミノ酸（グルタミン酸、アルギニンなど）などが含まれるが、これらに限定されない。本発明の化合物に比較的酸性及び比較的塩基性の官能基を含む場合、塩基付加塩又は酸付加塩に転換することができる。具体的には、Ｂｅｒｇｅ ｅｔ ａｌ．， “Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ”， Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ６６： １－１９ （１９７７）、又は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ： Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ， Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ， ａｎｄ Ｕｓｅ （Ｐ． Ｈｅｉｎｒｉｃｈ Ｓｔａｈｌ ａｎｄ Ｃａｍｉｌｌｅ Ｇ． Ｗｅｒｍｕｔｈ， ｅｄ．， Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ， ２００２）を参照することができる。

【0043】

用語「治療」とは、治療療法を指す。特定の疾患に関して、治療とは、（１）疾患又は症状の１つ又は複数の生物学的表現を緩和すること、（２）（ａ）疾患につながる又は疾患を引き起こす生物学的カスケードの１つ又は複数のポイント又は（ｂ）疾患の１つ又は複数の生物学的表現を干渉すること、（３）疾患に関連する１つ又は複数の症状、影響又は副作用、又は疾患又はその治療に関連する１つ又は複数の症状、影響又は副作用の改善、又は（４）疾患又は疾患の１つ又は複数の生物学的表現を減少することを指す。

【0044】

用語「予防」とは、疾患又は障害を獲得又は発症するリスクを低減することを指す。

【0045】

用語「治療有効量」とは、患者に投与された場合に、本願に記載の疾患又は症状を効果的に治療するために十分な化合物の量を指す。「治療有効量」は、化合物、疾患及びその重症度、ならびに治療される患者の年齢に応じて変更されるが、当業者は必要に応じて調整することができる。

【0046】

用語「薬学的に許容される助剤」とは、医薬品の製造及び処方の調整に使用される賦形剤及び付加剤を指し、有効成分を除く、薬物製剤に含まれるすべての物質を指す。詳細については、中華人民共和国薬局方２０２０ Ｉ－ＩＶ、又は、Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｅｘｃｉｐｉｅｎｔｓ（Ｒａｙｍｏｎｄ Ｃ Ｒｏｗｅ， ２００９ Ｓｉｘｔｈ Ｅｄｉｔｉｏｎ）を参照することができる。

【0047】

用語「患者」とは、本発明の実施例に従って、当該化合物を投与する予定であるか、既に投与された任意の動物、好ましくは、哺乳動物であり、最も好ましくは、ヒトである。用語「哺乳動物」は、任意の哺乳動物を含む。哺乳動物には、牛、馬、羊、豚、猫、犬、マウス、ラット、ウサギ、モルモット、サル、ヒトなどが含まれるが、これらに限定されなく、ヒトが最も好ましい。

【0048】

前記好ましい条件は、当技術分野の通常の知識を違反しない限り、任意に組み合わせて、本発明の各々の好ましい実施例を得ることができる。

【0049】

本発明で使用される試薬及び原料は市販品として入手できる。

【0050】

本発明の積極的な進歩効果は、化合物Ｉが、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌及びＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌の１つ又は複数に対して良好な抗腫瘍活性を有する。

【0051】

〔図面の簡単な説明〕
〔図１〕ヒト乳癌ＢＴ－４７４異種移植片腫瘍に対する化合物Ｉの体内薬効結果である。

【0052】

〔発明を実施するための形態〕
以下、実施例の形態によってさらに本発明を説明するが、これによって本発明を前記実施例の範囲内に限定するわけではない。以下の実施例において、具体的な条件が記載されていない実験方法は、通常の方法及び条件、或いは商品の説明書に従って選ばれた。

【0053】

下記の実施例における化合物Ｉは

【0054】

【化3】

【0055】

を指し、ピリド［１，２－ａ］ピリミジノン類似体である。

【0056】

実施例１ 体外でのＰＩＫ３ＣＡ突然変異体キナーゼ活性に対する化合物Ｉの阻害効果のＩＣ_５０試験
１．実験材料と方法
主な試薬：ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α／ｐ８５α（Ｐｒｏｍｅｇａから購入し、カタログ番号：Ｖ１７２１）、ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｅ５４２Ｋ）／ｐ８５α（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入し、カタログ番号：１４－７８２）、ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｅ５４５Ｋ）／ｐ８５α（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入し、カタログ番号：１４－７８３）及びヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｈ１０４７Ｒ）／ｐ８５α（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅから購入し、カタログ番号：１４－７９２）
実験方法：
１）化合物の調製、化合物Ｉの開始濃度は１００ｎＭであり、１０個濃度を３倍に順次に希釈し、試験プレートに移した。

【0057】

２）ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α／ｐ８５α、ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｅ５４２Ｋ）／ｐ８５α、ヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｅ５４５Ｋ）／ｐ８５α又はヒトＰＩ３Ｋ ｐ１１０α（Ｈ１０４７Ｒ）／ｐ８５αと試験緩衝液（１０μＭのホスファチジルイノシトール４，５－二リン酸及びｍｇ／ＡＴＰ）を培養した。ＡＴＰ溶液を加えて反応を開始させ、３０分間培養した。

【0058】

３）３０分間培養した後、停止溶液を加えて反応を停止させた。停止溶液にはＥＤＴＡ、ビオチン化ホスファチジルイノシトール－３，４，５－三リン酸が含まれている。

【0059】

４）ユウロピウムタグ付きの抗ＧＳＴモノクローナル抗体、ＧＳＴタグ付きのＧＲＰ１ ＰＨドメイン及びストレプトアビジンアロフィコシアニン（Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ ａｌｌｏｐｈｙｃｏｃｙａｎｉｎ）を含む、検出緩衝液を加えた。

【0060】

５）プレートを読み取り、式ＨＴＲＦ＝１００００×（Ｅｍ６６５ｎｍ／Ｅｍ６２０ｎｍ）に従って、ＨＴＲＦ値を計算した。Ｇｒａ ｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアを使用し、非線形回帰モデルを使用してＳ型用量－生存率曲線を描き、ＩＣ_５０値を計算した。

【0061】

２．実験結果

【0062】

【表1】

【0063】

表１の実験結果から、化合物Ｉは、ＰＩ３Ｋαキナーゼに対して強い阻害効果（ＩＣ_５０＝１ｎＭ）有することだけではなく、３つの代表的な突然変異体（Ｅ５４２Ｋ、Ｈ１０４７Ｒ及びＥ５４５Ｋ）に対しても野生型と同様の阻害効果を有することが分かる。

【0064】

実施例２ ＣＴＧ法によるＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌細胞株における化合物ＩのＩＣ_５０の測定
１．実験材料と方法
（１）細胞株

【0065】

【表2】

【0066】

（２）試薬
１）ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（ＥｘＣｅｌｌから購入し、製品番号：ＦＮＤ５００）；
２）ＤＭＥＭ培地（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：Ｃ１１９９５５００ＢＴ）；
３）Ｉｎｓｕｌｉｎ（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：ＥＰＸ０１０－１２００３－９０１）；
４）ＲＰＭＩ１６４０培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３０８０９．０１）；
５）ＭＥＭ培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３００２４．０１）。

【0067】

（３）試料と陽性対照品
試料：化合物Ｉ；
陽性対照品：Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、分子量：３００．０５；溶媒：ＰＢＳ（リン酸緩衝液）；保存条件：２～８℃；サプライヤー：Ｑｉｌｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ。

【0068】

（４）ＣＴＧ方法で化合物の細胞増殖ＩＣ_５０を測定した。

【0069】

ステップ１：指数増殖期にある細胞を回収し、Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ細胞カウンターで生細胞をカウントした。培地で細胞懸濁液を適切な温度に調節した。９６ウェル細胞プレートの各ウェルに９０μＬの細胞懸濁液を加え、最終の細胞濃度は１５００～６０００細胞／ウェルであった。

【0070】

ステップ２：化合物Ｉの投与開始濃度は３μＭであり、対照薬物Ｃｉｓｐｌａｔｉｎの投与開始濃度は１００μＭであり、３倍で連続希釈し、合計９個濃度勾配及び１つのＤＭＳＯ対照であり、各ウェルのＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であり、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベータで７２時間培養した。

【0071】

ステップ３：７２時間薬物処理した後、ＣＴＧ操作説明書に従って、各ウェルに予め室温に融解して平衡化したＣＴＧ溶液５０μＬ（培養体積の１／２）を加え、マイクロプレートシェーカーで２分間均一に混合し、室温に１０分間置き、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４プレートリーダーで蛍光シグナル値を測定した。

【0072】

（５）データ分析
細胞生存率は、式：Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}／Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}×１００％で計算した。ここで、Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}は薬物処理群の測定値であり、Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}は溶媒対照群の平均値である。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアを使用し、非線形回帰モデルを使用してＳ型用量－生存率曲線を描き、ＩＣ_５０値を計算した。

【0073】

２．実験結果

【0074】

【表3】

【0075】

表３の実験結果から、化合物ＩがＴ４７Ｄ及びＢＴ－４７４腫瘍細胞に対して５０％の阻害效果を達成した時に阻害剤の濃度が１μＭ未満であることが分かる。

【0076】

実施例３ ＣＴＧ法によるＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌細胞株における化合物ＩのＩＣ_５０の測定
１．実験材料と方法
（１）細胞株

【0077】

【表4】

【0078】

（２）試薬
１）ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（ＥｘＣｅｌｌから購入し、製品番号：ＦＮＤ５００）；
２）ＲＰＭＩ１６４０培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３０８０９．０１）；
３）ＭｃＣｏｙ’ｓ ５Ａ培地（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：１２３３０－０３１）；
４）ＭＥＭ培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３００２４．０１）；
５）ＭＥＭ ＮＥＡＡ（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：１１１４０－０５０）；
６）ピルビン酸ナトリウム（Ｇｉｂｃｏから購入した）。

【0079】

（３）試料と陽性対照品
試料：化合物Ｉ；
陽性対照品：
１）Ａｌｐｅｌｉｓｉｂ、分子量：４４１．４７；溶媒：ＤＭＳＯ；溶解後の保存条件：－２０℃；サプライヤー：Ｓｈａｎｇｈａｉ ＴＯＰＳＣＩＥＮＣＥ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．、ＣＡＳ号：１２１７４８６－６１－７；
２）Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、分子量：３００．０５；溶媒：ＰＢＳ（リン酸緩衝液）；保存条件：２～８℃；サプライヤー：Ｑｉｌｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ。

【0080】

（４）ＣＴＧ方法で化合物細胞増殖ＩＣ_５０を測定した。

【0081】

ステップ１：指数増殖期にある細胞を回収し、Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ細胞カウンターで生細胞をカウントした。培地で細胞懸濁液を適切な温度に調節した。９６ウェル細胞プレートの各ウェルに９０μＬの細胞懸濁液を加え、最終の細胞濃度は１５００～６０００細胞／ウェルであった。

【0082】

ステップ２：化合物Ｉ及び対照薬物Ａｌｐｅｌｉｓｉｂの投与開始濃度は３μＭであり、対照薬物Ｃｉｓｐｌａｔｉｎの投与開始濃度は１００μＭであり、３倍で連続希釈し、合計９個濃度勾配及び１つのＤＭＳＯ対照であり、各ウェルのＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であり、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベータで７２時間培養した。

【0083】

ステップ３：薬物処理７２時間後、ＣＴＧ操作説明書に従って、各ウェルに予め室温に融解して平衡化したＣＴＧ溶液５０μＬ（培養体積の１／２）を加え、マイクロプレートシェーカーで２分間均一に混合し、室温に１０分間置き、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４プレートリーダーで蛍光シグナル値を測定した。

【0084】

（５）データ分析
細胞生存率は、式：Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}／Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}×１００％で計算した。ここで、Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}は薬物処理群の測定値であり、Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}は溶媒対照群の平均値である。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアを使用し、非線形回帰モデルを使用してＳ型用量－生存率曲線を描き、ＩＣ_５０値を計算した。

【0085】

２．実験結果

【0086】

【表5】

【0087】

結論：化合物Ｉは、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を持つ子宮頸癌細胞の増殖を有意に阻害し、半減阻害濃度は０．０１５～０．１８０μＭであったが、対照化合物Ａｌｐｅｌｉｓｉｂは基本的に効果がなく、２つの細胞株における半減阻害濃度は最大濃度より３μＭ高く、更に、化合物Ｉは対照化合物Ｃｉｓｐｌａｔｉｎよりも、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌細胞に対して優れた増殖阻害を示した。

【0088】

実施例４ ＣＴＧ法によるＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌細胞株における化合物ＩのＩＣ_５０の測定
１．実験材料と方法
（１）細胞株

【0089】

【表6】

【0090】

（２）試薬
１）ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（ＥｘＣｅｌｌから購入し、製品番号：ＦＮＤ５００）；
２）ＭＥＭ培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３００２４．０１）；
３）ＭＥＭ ＮＥＡＡ（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：１１１４０－０５０）；
４）ピルビン酸ナトリウム（Ｇｉｂｃｏから購入した）。

【0091】

（３）試料と陽性対照品
試料：化合物Ｉ；
陽性対照品：
１）Ｅｒｄａｆｉｔｉｎｉｂ、分子量：４４６．５５；溶媒：ＤＭＳＯ；溶解後の保存条件：－８℃；サプライヤー：Ｓｈａｎｇｈａｉ ＴＯＰＳＣＩＥＮＣＥ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．、ＣＡＳ号：１３４６２４２－８１－６；
２）Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ、分子量：３００．０５；溶媒：ＰＢＳ（リン酸緩衝液）；保存条件：２～８℃；サプライヤー：Ｑｉｌｕ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ。

【0092】

（４）ＣＴＧ方法で化合物の細胞増殖ＩＣ_５０を測定した。

【0093】

ステップ１：指数増殖期にある細胞を回収し、Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ細胞カウンターで生細胞をカウントした。培地で細胞懸濁液を適切な温度に調節した。９６ウェル細胞プレートの各ウェルに９０μＬの細胞懸濁液を加え、最終の細胞濃度は１５００～６０００細胞／ウェルであった。

【0094】

ステップ２：化合物Ｉ及び対照薬物Ｅｒｄａｆｉｔｉｎｉｂの投与開始濃度は３μＭであり、対照薬物Ｃｉｓｐｌａｔｉｎの投与開始濃度は１００μＭであり、３倍で連続希釈し、合計９個濃度勾配及び１つのＤＭＳＯ対照であり、各ウェルのＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であり、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベータで７２時間培養した。

【0095】

ステップ３：薬物処理７２時間後、ＣＴＧ操作説明書に従って、各ウェルに予め室温に融解して平衡化したＣＴＧ溶液５０μＬ（培養体積の１／２）を加え、マイクロプレートシェーカーで２分間均一に混合し、室温に１０分間置き、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４プレートリーダーで蛍光シグナル値を測定した。

【0096】

（５）データ分析
細胞生存率は、式：Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}／Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}×１００％で計算した。ここで、Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}は薬物処理群の測定値であり、Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}は溶媒対照群の平均値である。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアを使用し、非線形回帰モデルを使用してＳ型用量－生存率曲線を描き、ＩＣ_５０値を計算した。

【0097】

２．実験結果

【0098】

【表7】

【0099】

結論：化合物Ｉは、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を持つ膀胱癌細胞の増殖を有意に阻害し、半減阻害濃度は１μＭ未満であったが、対照化合物Ｅｒｄａｆｉｔｉｎｉｂは基本的に効果がなく、２つの細胞株においての半減阻害濃度は最大濃度より３μＭ高く、更に、化合物Ｉは対照化合物Ｃｉｓｐｌａｔｉｎよりも、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌細胞に対して優れた増殖阻害を示した。

【0100】

実施例５ ＣＴＧ法によるＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌細胞株における化合物ＩのＩＣ_５０の測定
１．実験材料と方法
（１）細胞株

【0101】

【表8】

【0102】

（２）試薬
１）ＦＢＳ（ウシ胎児血清）（ＥｘＣｅｌｌから購入し、製品番号：ＦＮＤ５００）；
２）ＭｃＣｏｙ’ｓ ５Ａ培地（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：１２３３０－０３１）；
３）ＭＥＭ培地（Ｈｙｃｌｏｎｅから購入し、製品番号：ＳＨ３００２４．０１）。

【0103】

（３）試料と陽性対照品
試料：化合物Ｉ；
陽性対照品：Ａｌｐｅｌｉｓｉｂ、分子量：４４１．４７；溶媒：ＤＭＳＯ；溶解後の保存条件：－２０℃；サプライヤー：Ｓｈａｎｇｈａｉ ＴＯＰＳＣＩＥＮＣＥ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．、ＣＡＳ号：１２１７４８６－６１－７；
（４）ＣＴＧ方法による化合物細胞増殖ＩＣ_５０の測定
ステップ１：指数増殖期にある細胞を回収し、Ｖｉ－Ｃｅｌｌ ＸＲ細胞カウンターで生細胞をカウントした。培地で細胞懸濁液を適切な温度に調節した。９６ウェル細胞プレートの各ウェルに９０μＬの細胞懸濁液を加え、最終の細胞濃度は１５００～６０００細胞／ウェルであった。

【0104】

ステップ２：化合物Ｉ及び対照薬物Ａｌｐｅｌｉｓｉｂの投与開始濃度は３μＭであり、３倍で連続希釈し、合計９個濃度勾配及び１つのＤＭＳＯ対照であり、各ウェルのＤＭＳＯの最終濃度は０．１％であり、３７℃、５％のＣＯ_２インキュベータで７２時間培養した。

【0105】

ステップ３：薬物処理７２時間後、ＣＴＧ操作説明書に従って、各ウェルに予め室温に融解して平衡化したＣＴＧ溶液５０μＬ（培養体積の１／２）を加え、マイクロプレートシェーカーで２分間均一に混合し、室温に１０分間置き、Ｅｎｖｉｓｉｏｎ２１０４プレートリーダーで蛍光シグナル値を測定した。

【0106】

（５）データ分析
細胞生存率は、式：Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}／Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}×１００％で計算した。ここで、Ｖ_{ｓａｍｐｌｅ}は薬物処理群の測定値であり、Ｖ_{ｖｅｈｉｃｌｅ ｃｏｎｔｒｏｌ}は溶媒対照群の平均値である。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ ５．０ソフトウェアを使用し、非線形回帰モデルを使用してＳ型用量－生存率曲線を描き、ＩＣ_５０値を計算した。

【0107】

２．実験結果

【0108】

【表9】

【0109】

結論：化合物Ｉは、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を持つ子宮内膜癌細胞の増殖を有意に阻害し、半減阻害濃度は０．１μＭ以内であったが、対照化合物Ａｌｐｅｌｉｓｉｂは２ｕＭを超えた。対照薬と比較して、化合物ＩはＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌に対して有意な治療効果を示した。

【0110】

実施例６．ヒト乳癌ＢＴ－４７４皮下異種移植腫瘍ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスモデルにおける試験薬物の生体内薬効研究
実験目的：ヒト乳癌ＢＴ－４７４皮下異種移植腫瘍ＢＡＬＢ／ｃヌードマウスモデルにおける試験薬物の生体内薬効を研究するためである。

【0111】

実験デザイン
（１）細胞培養：ヒト乳癌ＢＴ－４７４細胞を体外単層培養し、培養条件はＨｙｂｒｉ－Ｃａｒｅ培地に１０％のウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌのペニシリン（Ｇｉｂｃｏから購入）及び１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏから購入）を加え、３７℃、５％のＣＯ_２で培養した。週に２回、トリプシン－ＥＤＴＡ（Ｇｉｂｃｏから購入し、製品番号：２５２００－０７２）を使用して通常の消化処理をし、継代培養した。細胞の飽和度が８０％～９０％に達する場合、細胞を収集してカウントし、接種した。

【0112】

（２）動物：ＢＡＬＢ／ｃヌードマウス、メス、６週齢、体重１６～１８ｇ。Ｓｈａｎｇｈａｉ Ｓｉｐｐｅ－Ｂｋ Ｌａｂ Ａｎｉｍａｌ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から提供された。

【0113】

（３）対照品
ＰＦ０５２１２３８４及びエベロリムスはＳｈａｎｇｈａｉ ＴＯＰＳＣＩＥＮＣＥ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．， Ｌｔｄ．から購入した。

【0114】

（４）腫瘍接種：各マウスの右背部に０．２ｍｌ（１×１０^７）ＢＴ－４７４細胞（マトリゲルを加え、体積比１：１）を皮下接種し、平均腫瘍体積が１２２ｍｍ^３に達した時点で群を分けて投与した。実験の群分け及び投与方法は下記の表１０を参照する。

【0115】

【表10】

【0116】

（４）体内薬効結果：図１及び表１１に示される通りである。

【0117】

ヒト乳癌ＢＴ－４７４異種移植モデルにおける化合物Ｉの体内有効性である。２０日間投与した後、溶媒対照群と比較して、化合物Ｉは０．０５ｍｇ／ｋｇ、０．１ｍｇ／ｋｇ及び０．３ｍｇ／ｋｇの投与量で、Ｔ／Ｃはそれぞれ：４４％、２３％及び１６％であり、ＴＧＩはそれぞれ７７％、１０９％及び１１８％であり、この結果からヒト乳癌ＢＴ－４７４異種移植モデにおいて、化合物Ｉは０．０５、０．１及び０．３ｍｇ／ｋｇの投与量でいずれも有意な抗腫瘍効果を有し、用量依存的な傾向がある。参照薬ＰＦ０５２１２３８４は２０ｍｇ／ｋｇ群（Ｔ／Ｃ＝１５％、ＴＧＩ＝１３４％、ｐ＝０．００６）で溶媒対照群と比較して有意な抗腫瘍効果を有した。エベロリムス（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）、５ｍｇ／ｋｇ（Ｔ／Ｃ＝１９％、ＴＧＩ＝１１３％、ｐ＜０．００１）は、溶媒対照群と比較して有意な抗腫瘍効果を有し、０．３ｍｇ／ｋｇの投与量の化合物Ｉは、５ｍｇ／ｋｇのエベロリムス（Ｅｖｅｒｏｌｉｍｕｓ）と同様な抗腫瘍効果を有した。

【0118】

【表11】

【0119】

結論：化合物ＩはＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌腫瘍の増殖を有意に阻害し、０．１ｍｇ／ｋｇ、０．３ｍｇ／ｋｇの非常に低用量の群で腫瘍縮小を引き起こす可能性があり、対照化合物エベロリムス（５ｍｇ／ｋｇ、高用量）と同様な効果があった。

【0120】

実施例７ 臨床試験における、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を有する子宮頸癌患者に対する化合物Ｉの有効性データ。

【0121】

症例データ：対象者１、女性、５０歳、２０１９年５月５日に「広範子宮全摘出術＋骨盤リンパ節郭清術」を受け、術後の病理報告で子宮頸部扁平上皮癌と示され、術後２０１９年５月～８月に術後補助療法を実施し、２０２０年８月２５日に画像検査で再発が判明され、一次治療、２０２０年１１月１０日に画像検査で疾患の進行が判明され、二次治療、２０２１年１月４日に画像検査で疾患の進行が判明され、三次治療、２０２１年６月まで疾患の進行後、２０２１年６月１８にインフォームドコンセントを得て、ＹａｋａｎｇｂｏヒトＰＩＫ３ＣＡ遺伝子変異検出キットを使用して遺伝子検査を実行し、遺伝子検査により、腫瘍がＰＩＫ３ＣＡ突然変異を持っていることが示され、「ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を有する婦人科腫瘍の治療に関する化合物Ｉの臨床研究」に参加し、２０２１年７月１日から２０２１年１０月２１日の第２回腫瘍評価期間中、化合物Ｉを含む錠剤を１．１ｍｇの投与量で、１日１回単回投与し、１．１ｍｇの投与量には、２錠の０．５ｍｇの化合物Ｉと１錠の０．１ｍｇの化合物Ｉが含まれた。ベースラインの標的病変は、リンパ（左鎖骨上）２６ｍｍ、右肺の下葉１７ｍｍ、左肺の下葉１４ｍｍ、リンパ（後腹膜）２１ｍｍ、全直径７８ｍｍであり、２０２１年８月に最初の腫瘍評価が実行され、標的病変は、リンパ（左鎖骨上）１３ｍｍ、右肺の下葉１３ｍｍ、左肺の下葉８ｍｍ、リンパ（後腹膜）１３ｍｍ、全直径４７ｍｍであり、ベースラインと比較して腫瘍縮小率は３９．７％であり、有効性評価はＰＲ（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持された）であり、２０２１年１０月２１日に２回目の腫瘍評価が実行され標的病変はリンパ（左鎖骨上）で１４ｍｍ、右肺の下葉１４ｍｍ、左肺の下葉ＮＥ（存在するが測定不可、５ｍｍ未満）、リンパ（後腹膜）１２ｍｍ、全直径４５ｍｍ未満であり、ベースラインと比較して腫瘍縮小率は４２．３％を超え、有効性評価はＰＲ（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持された）であった。

【0122】

結論：化合物Ｉは、臨床試験において、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌に対して治療効果を示し、対象者１には放射線療法、化学療法、化学療法と血管新生阻害剤などの三次治療が無効であったため、治療の選択肢がなくなった。化合物Ｉを投与した後、治療効果が有意であり、腫瘍はＰＲまで縮小した（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持した）。

【0123】

実施例８ 臨床試験における、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を有する卵巣癌患者に対する化合物Ｉの有効性データ。

【0124】

症例データ：対象者２、女性、４４歳、２０２０年４月２７日に「卵巣癌の細胞縮小手術（子宮全摘＋二重付属器＋大網＋虫垂切除＋右骨盤リンパ節生検）」を受け、術後の病理報告で左卵巣の明細胞癌が指摘され、一次治療方法で治療を受け、最後の化学療法日は２０２０年１０月１１日であり、２０２０年１０月２７日のＣＴ検査で肝転移の可能性が判明され、２０２０年１１月２３日に「肝腫瘍切除＋腹腔病変切除＋横隔膜部分切除＋横隔膜修復＋腸管癒着溶解」を実行し、術後の病理学報告では、肝臓に明細胞癌の転移が示され、患者は２０２１年１月に二次治療を受け、２０２１年４月８日にＭＲＩで腫瘍の進行が示された。２０２１年４月２３日にインフォームドコンセントを得て、次世代シークエンシングに基づく過去の遺伝子検出報告により、腫瘍がＰＩＫ３ＣＡ突然変異を保有していることが示され、「ＰＩＫ３ＣＡ突然変異を有する婦人科腫瘍の治療に関する化合物Ｉの臨床研究」に参加し、２０２１年５月１１日から２０２１年８月３１日の第２回腫瘍評価期間中、化合物Ｉを含む錠剤を１．１ｍｇの投与量で、１日１回単回投与し、１．１ｍｇの投与量には、２錠の０．５ｍｇの化合物Ｉと１錠の０．１ｍｇの化合物Ｉが含まれ、ベースラインの標的病変は、腹膜の右側にある傍結腸溝（最長直径は３５ｍｍ）であり、腹膜小網腔の最長直径は４７ｍｍであり、合計直径は８２ｍｍであり、２０２１年７月６日に最初の腫瘍評価が実行され、標的病変は（１）腹膜の右側にある傍結腸溝（測定不能、直径５ｍｍで計算）、腹膜小網腔の最長直径は３４ｍｍであり、合計直径は３９ｍｍであり、ベースラインと比較して腫瘍縮小率は５２．４％であり、有効性評価はＰＲ（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持された）であり、２０２１年８月３０日に２回目の腫瘍評価が実行され、標的病変は（１）腹膜の右側にある傍結腸溝（測定不能、直径５ｍｍで計算）、（２）腹膜小網腔の最長直径は２８ｍｍであり、合計直径は３３ｍｍであり、ベースラインと比較して腫瘍縮小率は５９．８％であり、有効性評価はＰＲ（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持された）であった。

【0125】

結論：化合物Ｉは、臨床試験において、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌に対して治療効果を示し、対象者２は二次標準治療後薬剤耐性を示したため、治療の選択肢がなくなった。化合物Ｉを投与した後、治療効果が有意であり、腫瘍はＰＲまでになり（部分的に緩和し、標的病変の最大直径の合計が≧３０％減少し、少なくとも４週間維持した）、継続して縮小した（腫瘍は５９．８％縮小した）。

【図面の簡単な説明】

【0126】

【図1】ヒト乳癌ＢＴ－４７４異種移植片腫瘍に対する化合物Ｉの体内薬効結果である。

【図1】

【手続補正書】

【提出日】2023-07-21

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

化合物Ｉの構造が下記式に示される通りであることを特徴とする、医薬の製造における化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を含む薬学的組成物の使用であって、

【化1】

前記医薬は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌の治療及び／又は予防に使用される、使用。

【請求項2】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の乳癌であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項3】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項4】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮内膜癌であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項5】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項6】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の膀胱癌であることを特徴とする、請求項１に記載の使用。

【請求項7】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、
（１）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣明細胞癌であり、
（２）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌であり、
（３）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、一次治療方法又は二次治療方法が無効な卵巣癌である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項３に記載の使用。

【請求項8】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、
（Ｉ）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の左卵巣明細胞癌であり、
（ＩＩ）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌は、肝転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の卵巣癌である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項３に記載の使用。

【請求項9】

前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、
（１）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸部扁平上皮癌であり、
（２）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、転移を有するＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌であり、
（３）前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の子宮頸癌は、一次治療方法、二次治療方法又は三次治療方法が無効な子宮頸癌である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項５に記載の使用。

【請求項10】

前記転移は、リンパ及び／又は肺であることを特徴とする、請求項９に記載の使用。

【請求項11】

前記リンパは、左鎖骨上リンパ及び／又は後腹膜リンパであることを特徴とする、請求項１０に記載の使用。

【請求項12】

（１）前記医薬は経口剤形で提供され、
（２）前記医薬は錠剤で提供され、
（３）前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量は、０．１～２．０ｍｇ／回であり、
（４）前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与頻度は、１回／日又は２回／日である、
条件の１つ又は複数を満たすことを特徴とする、請求項１～１１のいずれか一項に記載の使用。

【請求項13】

前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量は、０．１ｍｇ／回、０．２ｍｇ／回、０．３ｍｇ／回、０．４ｍｇ／回、０．５ｍｇ／回、０．６ｍｇ／回、０．７ｍｇ／回、０．８ｍｇ／回、０．９ｍｇ／回、１．０ｍｇ／回、１．１ｍｇ／回、１．２ｍｇ／回、１．３ｍｇ／回、１．４ｍｇ／回、１．５ｍｇ／回、１．６ｍｇ／回、１．７ｍｇ／回、１．８ｍｇ／回、１．９ｍｇ／回又は２．０ｍｇ／回であることを特徴とする、請求項１２に記載の使用。

【請求項14】

医薬キットＡと医薬キットＢを含む、組み合わせ医薬キットであって、
前記医薬キットＡはＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を検出する試薬を含み、前記医薬キットＢは化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩を含む、組み合わせ医薬キット；

【化2】

【請求項15】

前記組み合わせ医薬キットは、
（１）前記医薬キットＡと医薬キットＢの投与時間は任意の順序又は前記医薬キットにおける前記医薬キットＡを最初に投与し、
（２）前記医薬キットＡにおいて、前記ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異検出試薬は、癌患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有しているかどうかを検出するために使用され、
（３）前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の含有量は治療有效量であり、
（４）前記医薬キットＢは更に薬学的に許容される助剤を含み、
（５）前記医薬キットＢにおいて、前記化合物Ｉ又はその薬学的に許容される塩の投与量及び投与頻度は請求項１２又は１３に記載された通りである、
（６）前記組み合わせ医薬キットはＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌を治療及び／又は予防するために使用され、前記ＰＩＫ３ＣＡ突然変異の癌は請求項１～１１のいずれか一項に記載された通りである、
条件の１つ又は複数を満たす組み合わせ医薬キットであることを特徴とする、請求項１４に記載の組み合わせ医薬キット。

【請求項16】

前記医薬キットＡにおいて、前記ＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異検出試薬は、癌患者がＰＩＫ３ＣＡ遺伝子突然変異を有しているかどうかを検出するために使用され、前記癌患者は、乳癌、卵巣癌、子宮内膜癌、子宮頸癌及び膀胱癌の１つ又は複数を患っている患者であることを特徴とする、請求項１５に記載の組み合わせ医薬キット。

【国際調査報告】