特表 2024-503079 カルシニューリン阻害剤の腎毒性を最小限に抑えるためのプロトコール

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-01-24

(54)【発明の名称】カルシニューリン阻害剤の腎毒性を最小限に抑えるためのプロトコール

(51)【国際特許分類】

   A61K 38/13 20060101AFI20240117BHJP

   A61P 13/12 20060101ALI20240117BHJP

   A61P 37/06 20060101ALI20240117BHJP

   A61P 43/00 20060101ALI20240117BHJP

   A61K 31/573 20060101ALI20240117BHJP

   A61K 31/5377 20060101ALI20240117BHJP

【ＦＩ】

A61K38/13

A61P13/12

A61P37/06

A61P43/00 121

A61K31/573

A61K31/5377

【審査請求】未請求

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023542902

(86)(22)【出願日】2022-01-14

(85)【翻訳文提出日】2023-09-04

(86)【国際出願番号】 IB2022050316

(87)【国際公開番号】W WO2022153250

(87)【国際公開日】2022-07-21

(31)【優先権主張番号】63/138,325

(32)【優先日】2021-01-15

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/245,779

(32)【優先日】2021-09-17

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(31)【優先権主張番号】63/246,765

(32)【優先日】2021-09-21

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

(71)【出願人】

【識別番号】519402236

【氏名又は名称】アウリニア ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド

(74)【代理人】

【識別番号】110002572

【氏名又は名称】弁理士法人平木国際特許事務所

(72)【発明者】

【氏名】マーティン，マイケル

(72)【発明者】

【氏名】フイジンガ，ロバート ビー．

(72)【発明者】

【氏名】ソロモンス，ネイル

【テーマコード（参考）】

4C084

4C086

【Ｆターム（参考）】

4C084AA02

4C084DA11

4C084MA02

4C084MA37

4C084MA52

4C084NA07

4C084ZA81

4C084ZB08

4C084ZC75

4C086BC73

4C086GA02

4C086GA12

4C086MA02

4C086MA04

4C086MA37

4C086MA52

4C086NA07

4C086ZA81

4C086ZB08

4C086ZC75

(57)【要約】

限定されるものではないが、カルシニューリン阻害剤の腎毒性などの望ましくない副作用を最小限に抑えながら、タンパク尿腎臓病の治療における、ボクロスポリンの有効性を最大限にするために薬力学レジメンを用いる方法を、本明細書で提供する。腎機能及び／または状態の調査方法、ならびに、望ましくない副作用を最小限に抑えながら、タンパク尿腎臓病の治療における、ボクロスポリンの有効性を最大化するために、ボクロスポリン投薬及び投与を変更、停止、回復、及び／または再開する、対応するプロトコールもまた提供する。
【選択図】図６

【特許請求の範囲】

【請求項1】

タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法であって、前記疾患を診断された対象、または移植を受けている、もしくは移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも５５週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、前記方法が、
（ａ）前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、前記対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記対象のｅＧＦＲが、目標％を超えて、所定の値未満まで低下した場合に、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記対象の前記ｅＧＦＲが、前記目標％を下回って低下した場合に、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、前記方法。

【請求項2】

前記第１の時点が、前記プロトコールの開始直前である、請求項１に記載の方法。

【請求項3】

前記所定の値が、５０～９０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である、請求項１または２に記載の方法。

【請求項4】

前記所定の値が、およそ６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である、請求項３に記載の方法。

【請求項5】

前記目標％が、２０～４５％の範囲である、請求項１～４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項6】

前記目標％が、およそ３０％である、請求項５に記載の方法。

【請求項7】

（ａ）前記対象の尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）が、朝最初の排尿、または２４時間の尿により測定すると＞１ｍｇ／ｍｇであることを判定することと、
（ｂ）前記対象が、＞４５ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の慢性腎疾患疫学共同式（ＣＫＤ－ＥＰ１）により測定されるｅＧＦＲを有することを判定することと、
により、前記対象において、前記方法を行う前に、前記対象が前記方法に適切であるか否かを同定することをさらに含み、（ａ）及び（ｂ）の条件が満たされる場合、前記対象が、前記方法に適切であると同定される、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項8】

タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法であって、前記疾患を診断された対象、または移植を受けている、もしくは移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、エンドポイントまでの計画された治療期間にわたり投与することを含み、前記方法が、
（ａ）前記治療期間の前の第１の時点、及び前記エンドポイントの前かつ前記治療期間の開始後に生じる第２の時点において、前記対象の尿タンパク質クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を測定し、前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＵＰＣＲのあらゆる低下を判定することと、
（ｂ）前記対象のＵＰＣＲが、前記第２の時点において、少なくとも所定量の低下を示すことができない場合に、前記対象にボクロスポリンを投与することを中断し、前記所定量の低下が示される場合に、前記投与を継続することと、
をさらに含む、前記方法。

【請求項9】

前記第１及び第２の時点において、前記対象の血液中のＣ３／Ｃ４濃度を測定することと、前記Ｃ３／Ｃ４の濃度が、前記第２の時点において正規化されたか否かを判定し、前記正規化が判明した場合、前記対象にボクロスポリンの投与を復活させる、または継続させ、正規化がまだ生じていない場合、前記中断を継続することと、をさらに含む、請求項８に記載の方法。

【請求項10】

タンパク尿腎臓病の治療方法であって、前記タンパク尿腎臓病と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、前記有効量が、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである、前記方法。

【請求項11】

移植と関連する慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性の軽減方法であって、移植を受けている、または移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、前記有効量が、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである、前記方法。

【請求項12】

移植拒絶反応の軽減方法であって、移植を受けている、または移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、前記有効量が、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである、前記方法。

【請求項13】

前記タンパク尿腎臓病が狼瘡性腎炎である、請求項１～１０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項14】

前記移植が、臓器移植または組織移植である、請求項１～９、１１、及び１２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項15】

前記臓器移植が、腎臓（腎）移植、肝移植、または心臓移植である、請求項１４に記載の方法。

【請求項16】

前記臓器移植が腎臓（腎）移植である、請求項１４または１５に記載の方法。

【請求項17】

前記対象が、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性に対する感受性が増加している、請求項１～１６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項18】

前記対象が、糸球体腎症を示す、請求項１～１７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項19】

前記対象が、
（ａ）Ｐ－糖タンパク質発現及び／または活性の変動；
（ｂ）ＣＹＰ３Ａ４／５発現及び／または活性の変動；
（ｃ）高齢の腎年齢；
（ｄ）塩分欠乏；
（ｅ）非ステロイド性抗炎症薬の使用；
（ｆ）ＴＧＦ－β及び／またはＡＣＥにおける遺伝多型；及び／または
（ｇ）膜性腎症
の１つ以上を示す、請求項１～１８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項20】

（ａ）前記対象の間質線維化及び尿細管萎縮を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１及び第２の時点の間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、皮質領域において５％超観察される場合に、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１及び第２の時点の間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、皮質領域において５％未満観察される場合に、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～１９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項21】

（ａ）前記対象における内側細動脈硝子化の存在を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～２０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項22】

内側細動脈硝子化が、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的に円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられること、及び／または血管内腔が狭くなることにより同定される、請求項２１に記載の方法。

【請求項23】

（ａ）前記対象における糸球体性損傷の存在を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体性損傷が存在する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～２２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項24】

糸球体損傷が、全体及び部分的糸球体硬化、尿細管萎縮、間質線維化、及び／または動脈硬化を含む、請求項２３に記載の方法。

【請求項25】

糸球体損傷が、総腎慢性スコアが１を超えるときに存在する、請求項２３または２４に記載の方法。

【請求項26】

（ａ）前記対象における傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成の存在を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～２５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項27】

ＪＧＡ過形成が、
（ａ）血管成分、メサンギウム細胞成分、尿細管成分（密集斑）の存在の１つ以上を含む、傍糸球体装置成分の増大、及び／または
（ｂ）細胞内レニン顆粒の存在
を含む、請求項２６に記載の方法。

【請求項28】

（ａ）前記対象における尿細管微小石灰化の存在を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～２７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項29】

（ａ）前記対象におけるＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値を超えた場合に、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値未満となった場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～２８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項30】

Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する前記所定の値が、皮質領域における尿細管でのＰ－ｇｐ発現の、１０％の喪失である、請求項２９に記載の方法。

【請求項31】

（ａ）前記対象におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアを、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲の外にある場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～３０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項32】

（ａ）ＣＮＩ腎毒性スコアの前記所定範囲が０～３である；及び／または
（ｂ）Ｂａｎｆｆスコアの前記所定範囲が０～３である、
請求項３１に記載の方法。

【請求項33】

（ａ）前記対象の、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）のうちの１つを、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲の外にある場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～３２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項34】

（ａ）ＮＩＨ－ＡＩの前記所定範囲が０～６である；及び／または
（ｂ）ＮＩＨ－ＣＩの前記所定範囲が０～３である；及び／または
（ｃ）ＴＩＡＩの前記所定範囲が０～５である、
請求項３３に記載の方法。

【請求項35】

（ａ）前記対象の尿検体での尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＵＡＧが所定範囲の外にある場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＵＡＧが前記所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～３４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項36】

ＵＡＧの前記所定範囲が２０～９０ｍＥｑ／Ｌである、請求項３５に記載の方法。

【請求項37】

（ａ）前記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び／または高尿酸血症を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び／または高尿酸血症が検出される場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～３６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項38】

（ａ）高カリウム血症が、５ｍｍｏｌ／Ｌを超える血清カリウム濃度により判定され、
（ｂ）低マグネシウム血症が、１．４ｍｇ／ｄＬ未満の血清マグネシウム濃度により判定され、
（ｃ）マグネシウム消費が、２ｍＥｑを超える尿マグネシウム濃度により判定され、
（ｄ）高尿酸血症が、７．０ｍｇ／ｄＬを超える血清尿酸濃度により判定される、
請求項３７に記載の方法。

【請求項39】

（ａ）前記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び／または血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＳＣｒ及び／またはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲を上回って上昇する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＳＣｒ及び／またはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～３８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項40】

（ａ）ＳＣｒレベルの前記所定範囲が０．８４～１．２１ｍｇ／ｄＬである；及び／または
（ｂ）ＳＣｙｓＣレベルの前記所定範囲が１ｍｇ／Ｌ未満である、
請求項３９に記載の方法。

【請求項41】

（ａ）前記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び／または血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＣｒＣｌレベルが、第１の所定範囲を下回って低下し、かつ、ＢＵＮレベルが、第２の所定範囲を上回って上昇する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記ＣｒＣｌ及び／またはＢＵＮレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～４０のいずれか１項に記載の方法。

【請求項42】

（ａ）ＣｒＣｌレベルの前記第１の所定範囲が、男性において１３７～１５０ｍＬ／分、及び女性において１２８～１３０ｍＬ／分であり、
（ｂ）ＢＵＮレベルの前記第２の所定の範囲が７～２０ｍｇ／ｄＬである、
請求項４１に記載の方法。

【請求項43】

（ａ）前記対象の腎血管抵抗及び／または腎血漿流量（ＲＰＦ）を、前記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記腎血管抵抗及び／またはＲＰＦが、所定の値の外側まで変化した場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記腎血管抵抗及び／またはＲＰＦが所定値内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～４２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項44】

ＲＰＦの前記所定の値が６００ｍＬ／分である、請求項４３に記載の方法。

【請求項45】

（ａ）前記対象の、朝／無作為の尿検体におけるアルブミン尿を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記アルブミン尿が検出される場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、前記アルブミン尿が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～４４のいずれか１項に記載の方法。

【請求項46】

アルブミン尿が、３０ｍｇ／ｇを超えるアルブミン／クレアチニン比率の存在により判定される、請求項４５に記載の方法。

【請求項47】

前記方法が、前記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度の実質的な増加もしくは低下をもたらさない、または１種以上の尿電解質の濃度が、前記所定の値未満で低下または増加する、請求項１～４６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項48】

（ａ）前記対象の１種以上の尿電解質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値を超えて低下または増加する場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、
（ｉｉ）前記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値未満で低下または増加する場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～４７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項49】

前記尿電解質が、マグネシウム、ナトリウム、及びカリウムの１つ以上から選択される、請求項４７または４８に記載の方法。

【請求項50】

前記尿電解質がマグネシウムであり、前記所定の値が約２０ｍｇ／ｄＬである、請求項４７または４８に記載の方法。

【請求項51】

前記尿電解質がナトリウムであり、前記所定の値が約５０ｍｍｏｌ／Ｌである、請求項４７または４８に記載の方法。

【請求項52】

前記尿電解質がカリウムであり、前記所定の値が約１０ｍｍｏｌ／Ｌである、請求項４７または４８に記載の方法。

【請求項53】

前記方法が、実質的な脂質異常症をもたらさない、または１種以上の脂質の濃度が、前記第２の時点において所定範囲内にある、請求項１～５２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項54】

（ａ）前記対象の１種以上の脂質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、
（ｂ）（ｉ）前記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲の外側にある場合、前記日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または前記対象へのボクロスポリンの投与を停止し、
（ｉｉ）前記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを前記対象に投与し続けることと、
をさらに含む、請求項１～５３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項55】

前記１種以上の脂質が、総コレステロール、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）コレステロール、及びトリグリセリドの１つ以上から選択される、請求項５３または５４に記載の方法。

【請求項56】

前記脂質が総コレステロールであり、前記所定範囲が１００～２００ｍｇ／ｄＬである、請求項５３または５４に記載の方法。

【請求項57】

前記脂質がトリグリセリドであり、前記所定範囲が５０～１５０ｍｇ／ｄＬである、請求項５３または５４に記載の方法。

【請求項58】

前記脂質がＬＤＬであり、前記所定範囲が５０～１３０ｍｇ／ｄＬである、請求項５３または５４に記載の方法。

【請求項59】

前記第１の時点が、前記プロトコールの開始直前である、請求項１～９、及び１３～５８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項60】

前記第２の時点が、前記第１の時点及び前記プロトコール開始の後である、請求項１～９、及び１３～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項61】

前記第２の時点が、前記計画される治療期間の中間地点の後である、請求項１～９、及び１３～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項62】

前記第２の時点が、前記計画される治療期間の終了後である、請求項１～９、及び１３～５９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項63】

前記所定の日用量が、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである、請求項１～６２のいずれか１項に記載の方法。

【請求項64】

前記対象の腎機能を、ｅＧＦＲを調査することにより、前記治療期間の終了後の時点で評価することをさらに含む、請求項１～６３のいずれか１項に記載の方法。

【請求項65】

前記治療期間の終了後の時点で、タンパク質／クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を調査することにより、前記対象に対する有効性を評価することをさらに含む、請求項６４に記載の方法。

【請求項66】

前記対象に、有効量のミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）を投与することをさらに含む、請求項１～６５のいずれか１項に記載の方法。

【請求項67】

前記対象に、有効量のコルチコステロイドを投与することをさらに含む、請求項１～６６のいずれか１項に記載の方法。

【請求項68】

前記治療期間が、少なくとも１００週間である、請求項１～６７のいずれか１項に記載の方法。

【請求項69】

前記治療期間が、少なくとも１５０週間である、請求項１～６８のいずれか１項に記載の方法。

【請求項70】

前記対象のｅＧＦＲを、第３の時点で判定することと、前記第３の時点でｅＧＦＲが、前記第１の時点で判定したｅＧＦＲと、前記目標％未満で異なると判定される場合、前記所定の日用量のボクロスポリンの投与を再開することと、をさらに含む、請求項１～９、及び１３～６９のいずれか１項に記載の方法。

【請求項71】

前記目標％が、２０～４５％である、請求項７０に記載の方法。

【請求項72】

前記目標％が、およそ３０％である、請求項７０に記載の方法。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

関連出願の相互参照
本出願は、２０２１年１月１５日に出願された、「ＰＲＯＴＯＣＯＬ ＴＯ ＭＩＮＩＭＩＺＥ ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ ＩＮＨＩＢＩＴＯＲ ＮＥＰＨＲＯＴＯＸＩＣＩＴＹ」と題する米国特許仮出願番号第６３／１３８，３２５号、２０２１年９月１７日に出願された、「ＰＲＯＴＯＣＯＬ ＴＯ ＭＩＮＩＭＩＺＥ ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ ＩＮＨＩＢＩＴＯＲ ＮＥＰＨＲＯＴＯＸＩＣＩＴＹ」と題する米国特許仮出願番号第６３／２４５，７７９号、及び２０２１年９月２１日に出願された、「ＰＲＯＴＯＣＯＬ ＴＯ ＭＩＮＩＭＩＺＥ ＣＡＬＣＩＮＥＵＲＩＮ ＩＮＨＩＢＩＴＯＲ ＮＥＰＨＲＯＴＯＸＩＣＩＴＹ」と題する米国特許仮出願番号第６３／２４６，７６５号からの優先権を主張し、これらの内容全体が参照として組み込まれている。

【0002】

本開示は、限定されるものではないが、カルシニューリン阻害剤の腎毒性などの望ましくない副作用を最小限に抑えながら、タンパク尿腎臓病の治療における、ボクロスポリンの有効性を最大限にするために薬力学レジメンを用いる方法に関する。腎機能及び／または状態の調査方法、ならびに、望ましくない副作用を最小限に抑えながら、タンパク尿腎臓病の治療における、ボクロスポリンの有効性を最大化するために、ボクロスポリン投薬及び投与を変更、停止、回復、及び／または再開する、対応するプロトコールもまた提供する。

【背景技術】

【0003】

シクロスポリン及びタクロリムスなどのカルシニューリン阻害剤薬物（ＣＮＩ）は、共に強力な免疫抑制剤であり、組織移植と組み合わせての使用を含む、様々な条件の治療で使用するために試験されている。これらの化合物は共に、長期の腎毒性を示す。

【0004】

長期使用でも許容される、効果的な免疫抑制剤であったＣＮＩを開発することが有益であろう。特に、このようなＣＮＩ、及び長期間にわたり当該ＣＮＩを投与する方法を同定することが有益であろう。

【発明の概要】

【0005】

いくつかの態様では、タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減するための方法、組成物、装置、及びシステムであって、対象を、上記方法に適切と同定することと、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを投与することと、上記治療期間の前、間、及び終了後の時点で、上記対象の腎機能を調査することと、を含む、上記方法、組成物、装置、及びシステムを本明細書において提供する。

【0006】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する、タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、上記疾患を診断された対象、または移植を受けている、もしくは移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも５５週間の計画された治療期間にわたり投与することを伴う。いくつかの例では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することと、上記第１の時点及び第２の時点との間において、上記対象のｅＧＦＲが、目標％を超えて、所定の値未満まで低下した場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの例では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することをさらに含み、上記第１の時点と第２の時点の間において、対象のｅＧＦＲが、上記目標％を下回って低下した場合に、方法は、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることを含む。

【0007】

任意の実施形態のいくつかにおいて、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。いくつかの実施例では、所定の値は、５０～９０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。任意の実施形態のいくつかにおいて、目標％は、２０～４５％の範囲である。いくつかの態様では、所定の値は、およそ６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である。いくつかの例では、目標％はおよそ３０％である。

【0008】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、（ａ）対象の尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）が、朝最初の排尿、または２４時間の尿により測定すると＞１ｍｇ／ｍｇであることを判定することと、（ｂ）対象が、＞４５ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の慢性腎疾患疫学共同式（ＣＫＤ－ＥＰ１）により測定されるｅＧＦＲを有することを判定することと、により、対象において、上記方法を行う前に、対象が上記方法に適切であるか否かを同定することをさらに含み、（ａ）及び（ｂ）の条件が満たされる場合、対象は、上記方法に適切であると同定される。

【0009】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する、タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、上記疾患を診断された対象、または移植を受けている、もしくは移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、エンドポイントまでの計画された治療期間にわたり投与することを伴い、（ａ）上記治療期間の前の第１の時点、及びエンドポイントの前かつ治療期間の開始後に生じる第２の時点において、上記対象の尿タンパク質クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を測定し、上記第１の時点と第２の時点との間で、上記ＵＰＣＲのあらゆる低下を判定することと、（ｂ）上記対象のＵＰＣＲが、上記第２の時点において、少なくとも所定量の低下を示すことができない場合に、対象にボクロスポリンを投与することを中断し、上記所定量の低下が示される場合に、上記投与を継続することと、をさらに含む。

【0010】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書に記載する方法は、上記第１及び第２の時点において、上記対象の血液中のＣ３／Ｃ４濃度を測定することと、Ｃ３／Ｃ４の濃度が、上記第２の時点において正規化されたか否かを判定し、上記正規化が判明した場合、対象にボクロスポリンの投与を復活させる、または継続させ、正規化がまだ生じていない場合、上記中断を継続することと、をさらに含む。

【0011】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示するタンパク尿腎臓病の治療方法は、タンパク尿腎臓病と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを伴い、上記有効量は、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである。

【0012】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する移植と関連する慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、移植を受けている、または移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを伴い、上記有効量は、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである。

【0013】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する移植拒絶反応を軽減する方法は、移植を受けている、または移植を受ける候補である対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを伴い、上記有効量は、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである。

【0014】

任意の実施形態のいくつかにおいて、タンパク尿腎臓病は狼瘡性腎炎である。

【0015】

任意の実施形態のいくつかにおいて、移植は、臓器移植または組織移植である。任意の実施形態のいくつかにおいて、臓器移植は、腎臓（腎）移植、肝移植、または心臓移植である。任意の実施形態のいくつかにおいて、臓器移植は腎臓（腎）移植である。

【0016】

任意の実施形態のいくつかにおいて、対象は、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの態様では、対象は、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性に対する感受性が増加しており、（ａ）Ｐ－糖タンパク質発現及び／または活性の変動、（ｂ）ＣＹＰ３Ａ４／５発現及び活性の変動、（ｃ）高齢の腎年齢、（ｄ）塩分欠乏、（ｅ）非ステロイド性抗炎症薬の使用、（ｆ）ならびに、ＴＧＦ－β及び／またはＡＣＥにおける遺伝多型のうちの１つ以上を示している。いくつかの態様では、対象は、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性に対する感受性が増加しており、（ａ）Ｐ－糖タンパク質発現及び／または活性の変動、（ｂ）ＣＹＰ３Ａ４／５発現もしくは活性の変動、（ｃ）高齢の腎年齢、（ｄ）塩分欠乏、（ｅ）非ステロイド性抗炎症薬の使用、（ｆ）またはＴＧＦ－β及び／またはＡＣＥにおける遺伝多型のうちの１つ以上を示している。

【0017】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の間質線維化及び尿細管萎縮を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、皮質領域において５％超観察される場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の間質線維化及び尿細管萎縮を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、皮質領域において５％未満観察される場合に、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。

【0018】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における内側細動脈硝子化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における内側細動脈硝子化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、内側細動脈硝子化は、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的に円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられること、及び血管内腔が狭くなることにより同定される。いくつかの態様では、内側細動脈硝子化は、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的に円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられること、または血管内腔が狭くなることにより同定される。

【0019】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における糸球体損傷の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における糸球体損傷の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、糸球体損傷は、全体及び部分的糸球体硬化、尿細管萎縮、間質線維化、ならびに動脈硬化を含む。いくつかの態様では、糸球体損傷は、全体及び部分的糸球体硬化、尿細管萎縮、間質線維化、または動脈硬化を含む。いくつかの例では、糸球体損傷は、総腎慢性スコアが１を超えるときに存在する。

【0020】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、ＪＧＡ過形成は、血管成分、メサンギウム細胞成分、尿細管成分（密集斑）、及び細胞内レニン顆粒の存在の１つ以上を含む、傍糸球体装置成分の増大を含む。いくつかの例では、ＪＧＡ過形成は、血管成分、メサンギウム細胞成分、尿細管成分（密集斑）、または細胞内レニン顆粒の存在の１つ以上を含む、傍糸球体装置成分の増大を含む。

【0021】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における尿細管微小石灰化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象における尿細管微小石灰化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。

【0022】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値を上回る場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値を下回る場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域における尿細管でのＰ－ｇｐ発現の、１０％の喪失である。

【0023】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、ＣＮＩ腎毒性スコアの所定範囲は０～３であり、Ｂａｎｆｆスコアの所定範囲は０～３である。いくつかの態様では、ＣＮＩ腎毒性スコアの所定範囲は０～３である、またはＢａｎｆｆスコアの所定範囲は０～３である。

【0024】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）のうちの１つ以上を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）のうちの１つ以上を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は０～６であり、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は０～３であり、ＴＩＡＩの所定範囲は０～５である。任意の実施形態のいくつかにおいて、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は０～６である、またはＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は０～３であり、ＴＩＡＩの所定範囲は０～５である。任意の実施形態のいくつかにおいて、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は０～６であり、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は０～３である、またはＴＩＡＩの所定範囲は０～５である。任意の実施形態のいくつかにおいて、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は０～６である、またはＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は０～３である、またはＴＩＡＩの所定範囲は０～５である。

【0025】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の尿検体での尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＵＡＧが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の尿検体での尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＵＡＧが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、ＵＡＧの所定範囲は２０～９０ｍＥｑ／Ｌである。

【0026】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び／または高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、高カリウム血症は、５ｍｍｏｌ／Ｌを超える血清カリウム濃度により判定される。いくつかの態様では、低マグネシウム血症は、１．４ｍｇ／ｄＬ未満の血清マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、マグネシウム消費は、２ｍＥｑを超える尿マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、高尿酸血症は、７．０ｍｇ／ｄＬを超える血清尿酸濃度により判定される。

【0027】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒ及びＳＣｙｓＣレベルが所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒ及びＳＣｙｓＣレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、ＳＣｒレベルの所定範囲は０．８４～１．２１ｍｇ／ｄＬであり、ＳＣｙｓＣレベルの所定範囲は１ｍｇ／Ｌ未満である。いくつかの例では、ＳＣｒレベルの所定範囲は０．８４～１．２１ｍｇ／ｄＬである、またはＳＣｙｓＣレベルの所定範囲は１ｍｇ／Ｌ未満である。

【0028】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌレベルが、第１の所定範囲を下回って低下し、かつ、ＢＵＮレベルが、第２の所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌレベルが、第１の所定範囲を下回って低下する、またはＢＵＮレベルが、第２の所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌ及びＢＵＮレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌまたはＢＵＮレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、ＣｒＣｌレベルの第１の所定範囲は、男性において１３７～１５０ｍＬ／分、及び女性において１２８～１３０ｍＬ／分でありＢＵＮレベルの第２の所定の範囲は７～２０ｍｇ／ｄＬである。

【0029】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗及びＲＰＦが、所定の値の外側まで変化した場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗またはＲＰＦが、所定の値の外側まで変化した場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗及びＲＰＦが、所定の値内に留まる場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗またはＲＰＦが、所定の値内に留まる場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施例では、ＲＰＦの所定の値は６００ｍＬ／分である。

【0030】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の、朝及び無作為の尿検体におけるアルブミン尿を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、アルブミン尿が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、上記対象の、朝及び無作為の尿検体におけるアルブミン尿を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、アルブミン尿が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、アルブミン尿は、３０ｍｇ／ｇを超えるアルブミン／クレアチニン比率の存在により判定される。

【0031】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書に記載の方法は、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿電解質濃度を実質的に低下または増加させない。任意の実施形態のいくつかにおいて、方法は、１種以上の尿電解質の濃度の実質的な増加もしくは低下をもたらさない、または１種以上の尿電解質の濃度は、上記第１の時点と第２の時点との間で、所定の値未満で低下または増加する。

【0032】

任意の実施形態のいくつかにおいて、（ａ）上記対象の１種以上の尿電解質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、（ｂ）（ｉ）上記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値を超えて低下または増加する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止し、（ｉｉ）上記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値未満で低下または増加する場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、を伴う方法を本明細書で提供する。

【0033】

任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質は、マグネシウム、ナトリウム、及びカリウムの１つ以上から選択される。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はマグネシウムであり、所定の値は約２０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はナトリウムであり、所定の値は約５０ｍｍｏｌ／Ｌである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はカリウムであり、所定の値は約１０ｍｍｏｌ／Ｌである。

【0034】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書に記載の方法は、実質的な脂質異常症をもたらさない、または１種以上の脂質の濃度が、上記第２の時点において所定範囲内にある。

【0035】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書で開示する方法は、（ａ）上記対象の１種以上の脂質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、（ｂ）（ｉ）上記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲の外側にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止し、（ｉｉ）上記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、１種以上の脂質は、総コレステロール、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）コレステロール、及びトリグリセリドの１つ以上から選択される。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質は総コレステロールであり、所定範囲は１００～２００ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はトリグリセリドであり、所定範囲は５０～１５０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はＬＤＬであり、所定範囲は５０～１３０ｍｇ／ｄＬである。

【0036】

提供される実施形態のいずれかにおいて、第１の時点は、上記プロトコール開始直前に提供される。任意の実施形態のいくつかにおいて、第２の時点は、第１の時点及び上記プロトコール開始の後である。任意の実施形態のいくつかにおいて、第２の時点は、計画される治療期間の中間地点の後である。任意の実施形態のいくつかにおいて、第２の時点は、計画される治療期間の終了後である。

【0037】

提供される実施形態のいずれかにおいて、所定の日用量は、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0038】

提供される実施形態のいずれかにおいて、方法は、上記対象の腎機能を、ｅＧＦＲを調査することにより、上記治療期間の終了後の時点で評価することをさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、方法は、上記治療期間の終了後の時点で、タンパク質／クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を調査することにより、上記対象に対する有効性を評価することをさらに含む。

【0039】

提供される実施形態のいずれかにおいて、方法は、上記対象に、有効量のミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）を投与することをさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、方法は、上記対象に、有効量のコルチコステロイドを投与することをさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、治療期間は、少なくとも１００週間である。任意の実施形態のいくつかにおいて、治療期間は、少なくとも１５０週間である。

【0040】

提供される実施形態のいずれかにおいて、方法は、対象のｅＧＦＲを、第３の時点で判定することと、上記第３の時点でｅＧＦＲが、上記第１の時点で判定したｅＧＦＲと、上記目標％未満で異なると判定される場合、上記所定の日用量のボクロスポリンの投与を再開することと、をさらに含む。いくつかの例では、目標％は２０～４５％である。いくつかの例では、目標％はおよそ３０％である。

【0041】

任意の実施形態のいくつかにおいて、タンパク尿腎臓病の治療において、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法であって、上記方法が、上記疾患と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、エンドポイントまでの計画された治療期間にわたり投与することを含み、上記治療期間の前の第１の時点、及びエンドポイントの前かつ治療期間の開始後に生じる第２の時点において、上記対象の尿タンパク質クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を測定し、上記第１の時点と第２の時点との間で、上記ＵＰＣＲのあらゆる低下を判定することと、上記対象のＵＰＣＲが、上記第２の時点において、少なくとも所定量の低下を示すことができない場合に、対象にボクロスポリンを投与することを中断し、上記所定量の低下が示される場合に、上記投与を継続することと、をさらに含む、上記方法を本明細書で開示する。

【0042】

任意の実施形態のいくつかにおいて、本明細書に記載する方法は、上記第１及び第２の時点において、上記対象の血液中のＣ３／Ｃ４濃度を測定することと、Ｃ３／Ｃ４の濃度が、上記第２の時点において正規化されたか否かを判定し、上記正規化が判明した場合、対象にボクロスポリンの投与を復活させる、または継続させ、正規化がまだ生じていない場合、上記中断を継続することと、をさらに含む。いくつかの態様では、方法は、上記対象に、有効量のミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）を投与することをさらに含む。いくつかの例では、方法は、対象に、有効量のコルチコステロイドを投与することをさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、所定の日用量は、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0043】

任意の実施形態のいくつかにおいて、狼瘡性腎炎と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、上記有効量が、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである、タンパク尿腎臓病の治療方法を本明細書で開示する。

【図面の簡単な説明】

【0044】

【図1】ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）及びコルチコステロイドを同時投与され（上図）、提示される先細りプロトコールに供される（下図）対象における、２４及び４８週における、プラセボに対するボクロスポリンの安全性及び有効性を比較する治験の略図を示す。

【図2A】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ４ｎを示す。

【図2B】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。主要代謝産物のボクロスポリン代謝産物である、ＩＭ９を示す。

【図2C】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１ｃ（Ｒ）を示す。

【図2D】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１ｃ（Ｓ）を示す。

【図2E】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１９（ＭｅＢｍｔ環化）を示す。

【図2F】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１９を示す。

【図2G】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ４を示す。

【図2H】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１－ジオール－１を示す。

【図2I】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１－ジオール－２を示す。

【図2J】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。ａａ－１の１－η炭素における構造が異なる、ＩＭ１－ジオール－２のジアステレオマーである、ボクロスポリン代謝産物のＩＭ１－ジオール－３を示す。

【図2K】様々なボクロスポリン代謝産物の構造を示す。トリヒドロキシ化した、仮説上のボクロスポリン代謝産物を示す。

【図3】シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）、ボクロスポリン（ＶＳＰ）、及びいずれかの親薬剤のＩＶ投与後の、マウス腎臓におけるこれらの代謝産物の、ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩイメージングを示す。質量シグナル比を、色強度マップ（ｍ／ｚ強度）として可視化し、検出した分子に対する空間情報を提供する。

【図4-1】シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）またはボクロスポリン（ＶＳＰ）親薬剤、及び投与後のマウス腎臓におけるこれらの代謝産物に対する、一連の重なり合った、及び個別のｉｎ ｓｉｔｕ ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ画像を示す。Ａは、各親薬剤に対する、個別の画像と並べた、シクロスポリンＡ［ＣｓＡ＋Ｎａ］^＋及びボクロスポリン代謝産物［ＶＳＰ＋Ｎａ］^＋の重なり画像を示す。Ｂは、ＣｓＡ代謝産物［ＡＭ４ｎ＋Ｎａ］^＋及びＶＳＰ代謝産物［ＩＭ４ｎ＋Ｎａ］^＋に対する、重なり画像及び個別の画像を示す。Ｃは、ＣｓＡ代謝産物［ＡＭ１／ＡＭ１ｃ／ＡＭ９＋Ｎａ］^＋及びＶＳＰ代謝産物［ＩＭ１ｃ／ＩＭ４／ＩＭ９＋Ｎａ］^＋に対する、重なり画像及び個別の画像を示す。質量シグナル比を、色強度マップ（ｍ／ｚ強度）として可視化し、検出した分子に対する空間情報を提供する。

【図4-2】シクロスポリンＡ（ＣｓＡ）またはボクロスポリン（ＶＳＰ）親薬剤、及び投与後のマウス腎臓におけるこれらの代謝産物に対する、一連の重なり合った、及び個別のｉｎ ｓｉｔｕ ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ画像を示す。Ｄは、ＣｓＡ代謝産物［ＡＭ１９／ＡＭ１ｃ９＋Ｎａ］^＋及びＶＳＰ代謝産物［ＩＭ１９（環状）＋Ｎａ］^＋に対する、重なり画像及び個別の画像を示す。Ｅは、ＣｓＡ代謝産物［ＡＭ１９／ＡＭ１ｃ９＋Ｎａ］^＋及びＶＳＰ代謝産物［ＩＭ１－ジオール－１／ＩＭ１９＋Ｎａ］^＋に対する、重なり画像及び個別の画像を示す。質量シグナル比を、色強度マップ（ｍ／ｚ強度）として可視化し、検出した分子に対する空間情報を提供する。

【図5】長期の安全性、及び忍容性継続研究の略図を示す。示すように、最初の１年の研究に含まれた３５７名の対象のうち、２１６名の対象が、継続研究に進んだ。

【図6】追加の４週間フォロアーップ時点を伴う３６ヶ月の期間にわたる、ボクロスポリン群の対象１１６名、及び対照群の対象１００名に対する、平均の推定糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を示す。同じ時点における各研究群における対象の数もまた示す。

【図7】追加の４週間フォロアーップ時点を伴う３６ヶ月の期間にわたる、ボクロスポリンの対象１１６名、及び対照群の対象１００名に対する、訪問毎の平均尿タンパク質クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を示す。同じ時点における各研究群における対象の数もまた示す。

【発明を実施するための形態】

【0045】

本発明は、例えば、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、カルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）腎毒性を回避しながら、ＣＮＩの長期使用を伴う、方法、プロトコール、治療レジメン、及び／または治療用使用などの使用に関する。いくつかの実施形態では、ＣＮＩはボクロスポリンである。いくつかの実施形態では、本発明は、急性または慢性ＣＮＩ腎毒性に対して感受性が高い、またはこれらのリスクが増加している、必要とする対象に、長期間にわたりＣＮＩを投与することを伴う。実施形態の一態様では、個体は免疫抑制療法を必要とし、カルシニューリン阻害剤の腎毒性の発症に関する１つ以上のリスク因子を呈する。

【0046】

いくつかの態様では、提供する方法及び使用は、ＣＮＩ療法を必要とする対象、例えば、狼瘡性腎炎を有する対象における、ボクロスポリンを用いる治療によって、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性またはリスクの実質的な増加を伴うことなく、安全かつ効果的な治療がもたらされるという観察結果に基づく。いくつかの態様では、本明細書で提供する結果は、ボクロスポリンを用いる治療レジメンが、対象の尿電解質及び／または脂質濃度に、実質的な影響を有しないことを裏付けする。いくつかの態様では、本明細書で提供する結果は、ボクロスポリンを用いる治療レジメンが、ＣＮＩ療法の有害反応であり得る、脂質濃度の実質的な低下または脂質異常症の軽減をもたらすことを裏付けする。提供する方法及び使用は、ボクロスポリン及びその代謝産物が、腎臓には高濃度で蓄積しない一方で、主に用いられるＣＮＩであるシクロスポリン、及びその代謝産物は、特に皮質に、高濃度で蓄積するという、イメージング研究からの観察結果にもまた基づく。したがって、本明細書に記載する結果は、ＣＮＩ療法を必要とする対象、特に、ＣＮＩ腎毒性の感受性またはリスクが増加した対象に対する、ボクロスポリンを用いる、ならびに、本明細書で提供する方法、治療レジメン、プロトコール、及び使用の利点を裏付けする。

【0047】

いくつかの態様では、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、または移植と関連する腎毒性の治療用薬剤の製造における、ボクロスポリンなどのカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の使用もまた提供する。いくつかの態様では、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、もしくは、移植と関連する腎毒性の治療で使用するための、または狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、もしくは、移植と関連する腎毒性を有する対象に投与するための、ボクロスポリンの投与方法もまた提供する。いくつかの態様では、ボクロスポリンの使用は、本明細書に記載の方法のいずれかに従う。

【0048】

例えば、本明細書に記載する方法または使用のいずれかに従い、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、または移植と関連する腎毒性を有する対象を選択することと、対象にボクロスポリンを投与することと、を伴う治療方法もまた提供する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンは、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、または移植と関連する腎毒性の治療をもたらす有効量で投与される。使用は、そのような方法及び治療における、ならびに、そのような治療方法を実施するための薬剤の調製における、ボクロスポリンの使用を含む。いくつかの実施形態では、方法は、例えば、提供する実施形態に従い、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、または移植と関連する腎毒性を有する、または有することが疑われる対象に、ボクロスポリンを投与することにより実施される。いくつかの実施形態では、方法はそれによって、対象における、狼瘡性腎炎などのタンパク尿腎臓病、または移植と関連する腎毒性を治療する。

【0049】

カルシニューリン阻害剤
シクロスポリンは、数十年にわたり、移植療法と組み合わさって用いられる、最前線のＣＮＩである。別のＣＮＩであるタクロリムスもまた、移植療法では用いられて成功している。

【0050】

シクロスポリン及びタクロリムスの免疫抑制性は、ホスファターゼであるカルシニューリンの阻害によりもたらされていると考えられている。シクロスポリン及びタクロリムスは、カルシニューリンのホスファターゼ活性を阻害すると考えられている。この阻害によりＩＬ－２産生が抑制され、故に、Ｔ細胞の活性化が抑制される。残念ながら、これら化合物をより長期間用いることで、現在は急性ＣＮＩ腎毒性として認識されている、ＧＦＲの可逆的減少などの腎機能不全、加えて、不可逆的かつ進行性の尿細管間隙損傷、及び糸球体硬化または慢性ＣＮＩ腎毒性の結果としての、不可逆的な腎機能損傷が引き起こされることが報告されている。

【0051】

全体が本明細書に参照により組み込まれている、米国特許第９，７６５，１１９号に記載されているボクロスポリンは、その毒性の低下、ならびに、対象への耐性及び有効性を最大化するように変動して投与することができる能力を考慮すると、優れたＣＮＩを呈する。いくつかの実施形態では、ＣＮＩ療法を必要とする対象には、ボクロスポリンが投与される。いくつかの態様では、ボクロスポリンは、バックグラウンド免疫抑制療法と共に、活性狼瘡性腎炎を有する対象に投与される。いくつかの態様では、ボクロスポリンは、一定の用量－濃度関係をもたらす、線形薬物動態プロファイルを示す。いくつかの態様では、ボクロスポリンは、通常、ＣＮＩの使用と関連する治療薬の監視の必要性を取り除くという利点をもたらす。

【0052】

ＣＮＩ療法、及びＣＮＩ腎毒性への感受性
ＣＮＩを用いて、様々な状態、特に、病状に対する自己免疫要素を含む状態に苦しむ対象が治療される。ＣＮＩの免疫抑制活性は、免疫系の活性と関連する状態における症状の、直接の原因の治療に役立つと考えられている。例えば、ＣＮＩは、単独で、または他の投薬と共に、特に、腎臓、肝臓、及び心臓移植を受ける対象において移植拒絶反応を防ぐために、移植療法の一部として使用される。ＣＮＩはまた、単独またはメトトレキサートと共に使用され、関節リウマチを治療する。ＣＮＩはまた、乾癬を治療するために使用される。ＣＮＩはまた、狼瘡性腎炎を治療するために使用される。残念ながら、（限定されるものではないが、狼瘡性腎炎などの）糸球体腎症を有する患者において、従来のＣＮＩを長期間投与することで、さらなる急性または慢性ＣＮＩ腎毒性に繋がる可能性がある。一般に、（限定されるものではないが、自己免疫性糸球体腎症などの）糸球体腎症と関連する、急性または慢性ＣＮＩ腎毒性の発症を呈する、または発症しやすい対象が、本発明の恩恵を受ける。

【0053】

以下：急性細小動脈症、尿細管空胞化、及び血栓性細小血管障害（ＴＭＡ）を呈する対象が、急性ＣＮＩ腎毒性になりやすい可能性がある。

【0054】

臓器移植または組織移植などの移植、及び例えば、移植拒絶反応を軽減または予防するためのＣＮＩ療法を受けた、または受ける候補である対象が、急性ＣＮＩ腎毒性になりやすい可能性がある。いくつかの態様では、対象は、腎臓（腎）移植、肝移植、または心臓移植を受けている可能性がある、または受ける候補である。いくつかの態様では、対象は、腎臓（腎）移植を受けている可能性がある、または受ける候補である。

【0055】

急性ＣＮＩ腎毒性の感受性を示す代表的な診断としては、例えば、他の治療用化合物により引き起こされる、変化した腎血行動態などの腎機能不全；マンニトール、グルコース、スクロース、デキストランなどの一般的な医薬賦形剤、または放射線造影剤により引き起こされる浸透性腎症；再発病（原発性ＨＵＳ／ＴＴＰ）、虚血再灌流傷害、腎感染症、ならびに、ｍＴＯＲ阻害剤及び抗ウイルス剤などの様々な他の薬物の副作用が挙げられる。

【0056】

以下：間質線維化及び尿細管萎縮、内側細動脈硝子化、糸球体被膜線維症、糸球体全体の硬化、焦点性分節糸球体硬化（ＦＳＧＳ）、傍糸球体装置過形成、ならびに尿細管微小石灰化を呈する対象は、慢性ＣＮＩ腎毒性になりやすい可能性がある。

【0057】

ＣＮＩ療法と関連する他の副作用としては脂質異常症が挙げられ、これは、心臓血管疾患リスクの増加に寄与する可能性がある。脂質異常症は、炎症、及びＣＮＩなどの免疫抑制剤の使用と関連している可能性がある。

【0058】

慢性ＣＮＩ腎毒性の感受性を示す代表的な診断としては、老化、虚血再灌流傷害、感染症（ＵＴＩ、ＣＭＶ）、慢性虚血、真性糖尿病、高血圧、糸球体虚血、骨及びミネラルの不均衡、ならびにタンパク尿が挙げられる。

【0059】

いくつかの態様では、ボクロスポリンを用いる治療によって、慢性ＣＮＩ腎毒性または急性ＣＮＩ腎毒性などのＣＮＩ腎毒性を、軽減、緩和、または改善することができる。いくつかの態様では、本明細書で提供する方法、プロトコール、及び使用のいずれかを、ＣＮＩ療法を必要とする、またはＣＮＩ腎毒性になりやすい可能性がある、もしくは、ＣＮＩ腎毒性に対して増加したリスクもしくは感受性を示し得る対象への治療目的で用いることができる。いくつかの態様では、本明細書に記載する対象、例えば、ＣＮＩ療法を必要とし、ＣＮＩ腎毒性になりやすい可能性がある、またはＣＮＩ腎毒性に対して増加したリスクもしくは感受性を示し得る対象のいずれかに、本明細書で提供する方法、プロトコール、及び使用のいずれかに従い、ボクロスポリンを投与することができる。

【0060】

カルシニューリン阻害剤の腎毒性に対するリスク因子
カルシニューリン阻害剤の腎毒性の発症に関する、様々な臨床的リスク因子が存在する。これらとしては、シクロスポリン及びタクロリムスへの全身過剰曝露、ｍＴＯＲ阻害剤の投与、腎臓の特異的ＡＢＣＢ１遺伝子型の存在、腎尿細管上皮細胞におけるＡＢＣＢ１タンパク質の発現、ＣＹＰ３Ａ４／５遺伝子型の存在、腎尿細管上皮細胞におけるＣＹＰ３Ａ４／５タンパク質の発現、ＣＮＩ代謝産物を変える他の薬物（例えば、ケトコナゾール）との相互作用、腎年齢が高いこと、非ステロイド性抗炎症薬の使用、塩分欠乏及び利尿薬の使用、ならびに、トランスフォーミング増殖因子β及びアンジオテンシン転換酵素を含むがこれらに限定されない他の遺伝子の遺伝多型が挙げられる。

【0061】

本明細書に記載の方法のいずれかに従ったいくつかの実施形態では、上記対象は、慢性的なカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、対応する個体の集団と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、個体の集団とは、罹患した集団全体を意味する。いくつかの実施形態では、個体の集団とは、特定の性別の集団全体を意味する。いくつかの実施形態では、個体の集団とは、特定の人種の集団全体を意味する。いくつかの実施形態では、個体の集団とは、特定の年齢群の集団全体を意味する。いくつかの実施形態では、個体の集団とは、特定の地理的領域の集団全体を意味する。いくつかの実施形態では、上記対象は、集団全体と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、罹患した集団全体と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、同じ性別の集団と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、同じ性別の集団と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、同じ人種の集団と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの実施形態では、上記対象は、同じ年齢群の集団と比較して、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加している。いくつかの態様では、提供される実施形態は、例えば、本明細書に記載する指標の１つ以上、または本明細書に記載する指標のうちの１つ以上の変化を調査または測定することにより、ＣＮＩ腎毒性のリスクを調査または監視することを含む。

【0062】

上記対象が、慢性的なカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性に対する感受性が増加しているいくつかの実施形態では、上記対象は、深刻な腎不全（ＣＬ_Ｃｒ≧９０ｍＬ／分）を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、ベースラインのｅＧＦＲで深刻な腎不全を示し、ベースラインｅＧＦＲは、約＞３０、＞３５、＞４０、＞４５、＞５０、＞６０、または＞７０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のうちの１つである。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘ及び／またはＡＵＣは、深刻な腎不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、増加している。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘは、深刻な腎不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、１．６倍、１．７倍、１．８倍、１．９倍、２．０倍、３．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＡＵＣは、深刻な腎不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、１．６倍、１．７倍、１．８倍、１．９倍、２．０倍、３．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。

【0063】

上記対象が、慢性的なカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性に対する感受性が増加しているいくつかの実施形態では、上記対象は、肝不全を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、軽度の肝不全（Ｃｈｉｌｄ－ＰｕｇｈＡ）、または中程度の肝不全（Ｃｈｉｌｄ－ＰｕｇｈＢ）を示す。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘ及び／またはＡＵＣは、肝不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、増加している。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘは、軽度または中程度の肝不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、約１．１倍、１．２倍、１．３倍、１．４倍、１．５倍、１．６倍、１．７倍、１．８倍、１．９倍、２．０倍、３．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＡＵＣは、軽度中程度の腎不全を有する対象において、そのような不全を有しない対応する対象と比較して、約１．１倍、１．２倍、１．４倍、１．６倍、１．８倍、２．０倍、２．２倍、２．４倍、２．６倍、２．８倍、３．０倍、４．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。

【0064】

ボクロスポリンは、感受性ＣＹＰ３Ａ４基質である。強力な、または中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤と同時投与することで、ボクロスポリン曝露が増加する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘ及び／またはＡＵＣは、強力なＣＹＰ３Ａ４阻害剤（例えば、ケトコナゾール、イトラコナゾール、クラリスロマイシン）、または中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤（例えば、ベラパミル、フルコナゾール、ジルチアゼム）を受ける対象において、そのようなＣＹＰ３Ａ４阻害剤を受けない対応する対象と比較して増加する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＣ_ｍａｘは、強力な、または中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤を受ける対象において、そのようなＣＹＰ３Ａ４阻害剤を受けない対応する対象と比較して、約１．１倍、１．２倍、１．４倍、１．６倍、１．８倍、２．０倍、２．２倍、２．４倍、２．６倍、２．８倍、３．０倍、４．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。いくつかの実施形態では、ボクロスポリンＡＵＣは、強力な、または中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤を受ける対象において、そのようなＣＹＰ３Ａ４阻害剤を受けない対応する対象と比較して、約２．０倍、２．２倍、２．４倍、２．６倍、２．８倍、３．０倍、３．２倍、３．４倍、３．６倍、３．８倍、４．０倍、５．０倍、１０．０倍またはそれ以上のいずれか１つだけ増加する。

【0065】

本明細書に記載の方法のいずれかに従ったいくつかの実施形態では、対象は、１種以上の腎疾患を患っている。いくつかの実施形態では、対象は、１種以上の腎疾患を患っており、１種以上の腎疾患は、慢性カルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）腎毒性に対する感受性の増加に寄与している。上記対象が、ＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加しているいくつかの実施形態では、上記対象は、１種以上の形態の糸球体腎症を示す。上記対象がＣＮＩ腎毒性に対する感受性が増加しており、上記対象が１種以上の形態の糸球体腎症を示すいくつかの実施形態では、従来のＣＮＩ（シクロスポリンまたはタクロリムスなど）を長期間投与することにより、限定されるものではないがさらなる急性及び慢性腎毒性などの、長期間の腎損傷がもたらされる可能性がある。いくつかの実施形態では、対象は糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は慢性糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は炎症性糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は非炎症性糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は自己免疫性糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は急性糸球体腎症を示す。いくつかの実施形態では、対象は糸球体腎炎を示す。いくつかの実施形態では、対象は慢性性糸球体腎炎を示す。いくつかの実施形態では、対象は急性糸球体腎炎を示す。いくつかの実施形態では、対象は炎症性腎疾患を示す。いくつかの実施形態では、対象は非炎症性腎疾患を示す。いくつかの実施形態では、対象は、自己免疫の文脈での炎症性腎疾患を示す。いくつかの実施形態では、自己免疫性腎疾患は、腎組織内での自己抗原（グッドパスチャー抗原など）から生じ得る。いくつかの実施形態では、自己免疫性腎疾患は、組織損傷事象（例えば、狼瘡性腎炎）を引き起こす、腎臓内での免疫複雑化を引き起こす腎臓の外にある自己抗原から生じ得る。いくつかの実施形態では、自己免疫性腎疾患は、腎臓内に由来もせず、また堆積もしていないが、抗体の、抗原または抗原を有する細胞との相互作用が疾患を引き起こす、抗原及び抗体（例えば、好中球細胞質抗原（ＡＮＣＡ）関連血管炎または糸球体腎炎に対する自己抗体）から生じ得る。いくつかの実施形態では、対象は、抗糸球体基底膜疾患（抗ＧＢＭ疾患）を患っている。いくつかの実施形態では、対象は、狼瘡性腎炎を患っている。いくつかの実施形態では、対象は、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を患っている。いくつかの態様では、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を有する対象の最大半数が、腎臓に深刻かつ永続的な損傷を、場合によっては腎不全をもたらし得る、ＬＮを発症する可能性がある。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＮＣＡ関連脈管炎を患っている。いくつかの実施形態では、対象は、ＡＮＣＡ関連糸球体腎炎を患っている。

【0066】

上記対象が、慢性的なカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性に対する感受性が増加しているいくつかの実施形態では、上記対象は、（ａ）Ｐ－糖タンパク質発現及び／または活性の変動；（ｂ）ＣＹＰ３Ａ４／５発現及び／または活性の変動、（ｃ）高齢の腎年齢；（ｄ）塩分欠乏；（ｅ）非ステロイド性抗炎症薬の使用；及び／または（ｆ）ＴＧＦ－β及び／またはＡＣＥ遺伝子における遺伝多型のうちの１つ以上を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、局所腎Ｐ－糖タンパク質の上方制御を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、上述した対応する集団と比較して、局所腎Ｐ－糖タンパク質の、およそ２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上の上方制御のいずれか１つを示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＡＢＣＢ１遺伝子において、１種以上の一塩基多型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＡＢＣＢ１遺伝子の３４３５位において、ＴＴ遺伝子型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、移植腎におけるＡＢＣＢ１遺伝子の３４３５位において、ＴＴ遺伝子型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＡＢＣＢ１遺伝子の２６７７位において、ＴＴ遺伝子型を示さない。いくつかの実施形態では、上記対象は、移植腎におけるＡＢＣＢ１遺伝子の２６７７位において、ＴＴ遺伝子型を示さない。いくつかの実施形態では、上記対象は、非ステロイド性抗炎症薬に曝露されている、またはこれを投与されている。いくつかの実施形態では、上記対象は、上述した対応する集団よりも、約１、２、３、４、５、８、１０、１２、１５、１８、２０、２５、３０、３５、４０歳のうちのいずれか１つの高齢の腎年齢などの、高齢の腎年齢を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、上述した対応する集団と比較して、最大１０％、２０％、３０％、４０％、５０％、６０％、７０％、８０％以上の枯渇といった、塩分欠乏を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、食事でのナトリウム制限の結果として塩分欠乏を示す。いくつかの実施形態では、上記対象における塩分欠乏は、上述した対応する集団と比較して、薬物の、およそ２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上のいずれか１つの薬物再吸収などの、薬物の腎尿細管への再吸収の増加をもたらす。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＣＹＰ３Ａ４及び／またはＣＹＰ３Ａ５遺伝子において、１種以上の多型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象はＣＹＰ３Ａ５＊１キャリアである。いくつかの実施形態では、上記対象の肝臓及び腸ＣＹＰ３Ａ５は、ＣＹＰ３Ａ５＊１から発現する。いくつかの実施形態では、上記対象はＣＹＰ３Ａ５＊１キャリアであり、対象の肝臓におけるタクロリムス代謝産物の生成は、上述した対応する集団における生成よりも、２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上のいずれか１つだけ高い。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＴＧＦ－β及び／またはアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）において、遺伝子多型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、約２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上のいずれか１つの活性の増加などの、ＡＣＥ活性の増加を有する。いくつかの実施形態では、上記対象は、約２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上のいずれか１つの、血清ＡＣＥ濃度の増加などの、ＡＣＥの血清濃度の増加を有する。いくつかの実施形態では、上記対象は、コドン１０においてＴＧＦ－β多型を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、同種異系移植片において局所ＴＧＦ－β産生の増加を示す。いくつかの実施形態では、上記対象は、ＴＧＦ－βの約２０％、４０％、５０％、７５％、１００％、２倍、５倍、１０倍、２０倍、５０倍、７５倍、１００倍、５００倍、１０００倍以上のいずれか１つの、尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ－βの上方制御などの、尿細管上皮細胞におけるＴＧＦ－βの上方制御を示す。

【0067】

タンパク尿腎臓病または移植の治療における、ＣＮＩ腎毒性の軽減方法
いくつかの態様では、タンパク尿腎臓病、または臓器移植、例えば、腎臓（腎）移植、心臓移植、肝移植、もしくは心臓移植などの移植の治療における慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性の軽減方法を提供する。

【0068】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示するタンパク尿腎臓病治療における、または移植と関連する慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、上記疾患を診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも５５週間の計画された治療期間にわたり投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することと、上記第１の時点及び第２の時点との間において、上記対象のｅＧＦＲが、目標％を超えて、所定の値未満まで低下した場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの例では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することをさらに含み、上記第１の時点と第２の時点の間において、対象のｅＧＦＲが、上記目標％を下回って低下した場合に、方法は、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることを含む。いくつかの実施形態では、治療期間は、少なくとも約５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０週のいずれか１つ、またはこれらの間のいずれかの長さの治療期間である。

【0069】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示するタンパク尿腎臓病治療における、または移植と関連する慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、狼瘡性腎炎を診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも５５週間の計画された治療期間にわたり投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することと、上記第１の時点及び第２の時点との間において、上記対象のｅＧＦＲが、目標％を超えて、所定の値未満まで低下した場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの例では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することをさらに含み、上記第１の時点と第２の時点の間において、対象のｅＧＦＲが、上記目標％を下回って低下した場合に、方法は、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることを含む。いくつかの実施形態では、治療期間は、少なくとも約５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０週のいずれか１つ、またはこれらの間のいずれかの長さの治療期間である。

【0070】

いくつかの実施形態では、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。いくつかの例では、所定の値は、約３０～約１１０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約５０～約９０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０～４０、４０～５０、５０～６０、６０～７０、７０～８０、８０～９０、９０～１００、及び１００～１１０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定の値は、約６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である。いくつかの実施形態では、目標％は、約１０％～約６０％の範囲である。いくつかの実施形態では、目標％は、約２０％～約４５％の範囲である。いくつかの実施形態では、目標％は、約１０％～２０％、２０％～３０％、３０～３５％、３５％～４０％、４０％～４５％、４５％～５０％、５０％～５５％、及び５５％～６０％のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、目標％はおよそ２０％である。いくつかの実施形態では、目標％はおよそ３０％である。

【0071】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示するタンパク尿腎臓病治療における、または移植と関連する慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法は、狼瘡性腎炎を診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも５５週間の計画された治療期間にわたり投与することを含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することと、上記第１の時点及び第２の時点との間において、上記対象のｅＧＦＲが、２０％超、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満に低下した場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの例では、方法は、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することをさらに含み、上記第１の時点と第２の時点の間において、対象のｅＧＦＲが、２０％を下回って低下した場合に、方法は、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることを含む。

【0072】

方法が、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象の、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）を調査することを含むいくつかの実施形態では、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。いくつかの実施形態では、方法は、上記プロトコールの開始後、２週毎に対象のｅＧＦＲを調査することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記プロトコールの開始後、初月は２週に１回、その後は４週に１回、対象のｅＧＦＲを調査することを含む。上記プロトコールの開始後の任意の調査において、上記対象のｅＧＦＲが、目標％を上回って低下し、所定の値を下回るいくつかの実施形態では、方法は、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することを含む。

【0073】

方法が、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象のｅＧＦＲを調査することを含むいくつかの実施形態では、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。上記プロトコールの開始後の調査において、上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して目標％を上回って低下し、所定の値を下回るいくつかの実施形態では、方法は、日用量を７．９ｍｇ ＢＩＤ減少させることを含む。上記プロトコールの開始後の調査において、上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して目標％を上回って低下し、所定の値を下回り、かつ、日用量が７．９ｍｇ ＢＩＤ減少するいくつかの実施形態では、方法は、用量減少から２週間後に、対象のｅＧＦＲを調査することを含み、最初の用量減少の２週間後の調査において、所定の値に対する第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して、上記対象のｅＧＦＲが目標％を上回って低下する場合、第２の、日用量の７．９ｍｇ ＢＩＤの減少をさらに含む。方法が１回以上の用量減少を含むいくつかの実施形態では、方法は、１回以上の用量減少後、２週毎に、対象のｅＧＦＲを調査することを含み、上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して目標％を下回って低下する場合に、各ｅＧＦＲ調査に対して、日用量を７．９ｍｇ ＢＩＤ増加させることを含む。いくつかの実施形態では、用量の増加は、用量の、初期の所定用量の超過を引き起こさない。いくつかの例では、所定の値は、約３０～約１１０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約５０～約９０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０～４０、４０～５０、５０～６０、６０～７０、７０～８０、８０～９０、９０～１００、及び１００～１１０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定の値は、約６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である。いくつかの実施形態では、目標％は、約１０％～約６０％の範囲である。いくつかの実施形態では、目標％は、約１０％～約４５％の範囲である。いくつかの実施形態では、目標％は、約１０％～２０％、２０％～３０％、３０～３５％、３５％～４０％、４０％～４５％、４５％～５０％、５０％～５５％、及び５５％～６０％のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、目標％はおよそ２０％である。

【0074】

上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点のｅＧＦＲと比較して約２０％～約３０％低下し、上記プロトコール開始後の調査において６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２を下回るいくつかの実施形態では、方法は、日用量を７．９ｍｇ ＢＩＤ減少させることを含む。上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点のｅＧＦＲと比較して約２０％～約３０％低下し、上記プロトコール開始後の調査において６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２を下回り、日用量が７．９ｍｇ ＢＩＤ減少するいくつかの実施形態では、方法は、用量減少から２週間後に、対象のｅＧＦＲを調査することを含み、上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して２０％を超えて低下し、最初の用量減少の２週間後の調査において、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満を下回る場合、第２の、日用量の７．９ｍｇ ＢＩＤの減少をさらに含む。方法が１回以上の用量減少を含むいくつかの実施形態では、方法は、１回以上の用量減少後、２週毎に、対象のｅＧＦＲを調査することを含み、上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して２０％を下回って低下する場合に、各ｅＧＦＲ調査に対して、日用量を７．９ｍｇ ＢＩＤ増加させることを含む。いくつかの実施形態では、用量の増加は、用量の、初期の所定用量の超過を引き起こさない。

【0075】

方法が、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において、対象のｅＧＦＲを調査することを含むいくつかの実施形態では、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して第１の目標％以上低下し、上記プロトコール開始後の任意の調査において所定の値を下回るいくつかの実施形態では、方法は、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することを含む。上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して目標％以上低下し、上記プロトコールの開始後の調査において所定の値を下回り、上記対象へのボクロスポリンの投与が停止されるいくつかの実施形態では、方法は、投与停止から２週間後に対象のｅＧＦＲを調査することを含み、上記対象のｅＧＦＲが、ボクロスポリンの投与中止の２週間後の調査において、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して第２の目標％を下回って低下している場合に、初期の所定用量で投与を再開することをさらに含む。いくつかの実施形態では、所定の値は、約５０～約９０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０～４０、４０～５０、５０～６０、６０～７０、７０～８０、８０～９０、９０～１００、及び１００～１１０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、所定の値は、約３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ｍＬ／分／１．７３ｍ^２のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定の値は、約６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である。いくつかの実施形態では、第１の目標％は、約１０％～約６０％の範囲である。いくつかの実施形態では、第１の目標％は、約２０％～約４５％の範囲である。いくつかの実施形態では、第１の目標％は、約１０％～２０％、２０％～３０％、３０～３５％、３５％～４０％、４０％～４５％、４５％～５０％、５０％～５５％、及び５５％～６０％のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、第１の目標％はおよそ３０％である。いくつかの実施形態では、第２の目標％は、約１０％～約６０％の範囲である。いくつかの実施形態では、第２の目標％は、約１０％～約４５％の範囲である。いくつかの実施形態では、第２の目標％は、約１０％～２０％、２０％～３０％、３０～３５％、３５％～４０％、４０％～４５％、４５％～５０％、５０％～５５％、及び５５％～６０％のいずれか１つの範囲である。いくつかの実施形態では、第２の目標％はおよそ２０％である。

【0076】

上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して３０％以上低下し、上記プロトコールの開始後の任意の調査において６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２を下回るいくつかの実施形態では、方法は、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することを含む。上記対象のｅＧＦＲが、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して３０％以上低下し、上記プロトコールの開始後の調査において６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２を下回り、上記対象へのボクロスポリンの投与が停止されるいくつかの実施形態では、方法は、投与停止から２週間後に対象のｅＧＦＲを調査することを含み、上記対象のｅＧＦＲが、ボクロスポリンの投与中止の２週間後の調査において、第１の時点におけるｅＧＦＲと比較して２０％を下回って低下している場合に、初期の所定用量で投与を再開することをさらに含む。

【0077】

任意の実施形態において、本明細書で開示する方法は、（ａ）対象の尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）が、朝最初の排尿、または２４時間の尿により測定すると＞１ｍｇ／ｍｇであることを判定することと、（ｂ）対象が、＞４５ｍＬ／分／１．７３ｍ^２の慢性腎疾患疫学共同式（ＣＫＤ－ＥＰ１）により測定されるｅＧＦＲを有することを判定することと、により、対象において、上記方法を行う前に、対象が上記方法に適切であるか否かを同定することをさらに含み、（ａ）及び（ｂ）の条件が満たされる場合、対象は、上記方法に適切であると同定される。いくつかの実施形態では、方法は、対象の尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）が、朝最初の排尿、または２４時間の尿により測定すると＞１．５ｍｇ／ｍｇであることを判定することを含む。

【0078】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の間質線維化及び尿細管萎縮を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１及び第２の時点の間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、所定パーセンテージの皮質領域を上回って観察される場合に、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の間質線維化及び尿細管萎縮を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１及び第２の時点の間で、間質線維化及び尿細管萎縮が、所定パーセンテージの皮質領域を下回って観察される場合に、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、所定パーセンテージは、０％、１％、２％、５％、１０％、１５％、２０％、２５％、もしくは５０％のいずれか１つ、またはこれらの間のいずれかのパーセンテージである。いくつかの実施形態では、所定パーセンテージは、約０％～５％、約５％～約２５％、約２５％～約５０％、または約５０％～約９９％のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定パーセンテージは、≦５％；５～２５％；２５～≦５０％；または＞５０％のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定パーセンテージは、約５％である。いくつかの実施形態では、間質線維化及び尿細管萎縮は、非瘢痕性皮質領域における単核球浸潤により判定され、これは、腎臓同種移植片拒絶に対するＢａｎｆｆの隙間炎症スコアに類似している。いくつかの実施形態では、単核球浸潤が関与する非瘢痕性皮質領域のパーセンテージは、ヘマトキシリン及びエオシン染色（Ｈ＆Ｅ）、過ヨウ素酸－Ｓｃｈｉｆｆ（ＰＡＳ）、銀及び三色染色、ならびにコラーゲンＩＩＩ免疫組織化学により評価され、以下のカテゴリーを用いて、半定量的に等級付けされる：０等級：≦５％；１等級：５～２５％；２等級：２５～≦５０％；３等級：＞５０％。

【0079】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における内側細動脈硝子化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における内側細動脈硝子化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、内側細動脈硝子化は、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的に円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられること、及び血管内腔が狭くなることにより同定される。いくつかの実施形態では、内側細動脈硝子化は、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的に円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられること、または血管内腔が狭くなることにより同定される。

【0080】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における糸球体損傷の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における糸球体損傷の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、糸球体損傷は、全体及び部分的糸球体硬化、尿細管萎縮、間質線維化、ならびに動脈硬化を含む。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、全体及び部分的糸球体硬化、尿細管萎縮、間質線維化、または動脈硬化を含む。いくつかの例では、糸球体損傷は、総腎慢性スコアが１を超えるときに存在する。糸球体損傷を判定するために、全体及び部分的糸球体硬化は０～３で、尿細管萎縮は０～３で、間質線維化は０～３で、及び動脈硬化症は０～１で、スコア付けされる。次に、スコアを加え（総腎慢性スコア）、最小（合計スコア０～１）、軽度（合計スコア２～４）、中程度（合計スコア５～７）、及び重度（合計スコア≧８）の、慢性病変の合計深刻度を等級付けする。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、総腎慢性スコアが、０、１、２、３、４、５、６、７、８のいずれか１つを上回るときに存在するものと判定される。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、総腎慢性スコアが、約１、約２～約４、約５～約７、または約８～約１０であるときに存在するものと判定される。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、軽度の糸球体損傷である。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、中程度の糸球体損傷である。いくつかの実施形態では、糸球体損傷は、深刻な糸球体損傷である。

【0081】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、ＪＧＡ過形成は、血管成分、メサンギウム細胞成分、尿細管成分（密集斑）、及び細胞内レニン顆粒の存在の１つ以上を含む、傍糸球体装置成分の増大を含む。いくつかの例では、ＪＧＡ過形成は、血管成分、メサンギウム細胞成分、尿細管成分（密集斑）、または細胞内レニン顆粒の存在の１つ以上を含む、傍糸球体装置成分の増大を含む。

【0082】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における尿細管微小石灰化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象における尿細管微小石灰化の存在を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化が存在しない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。

【0083】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値を上回る場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるＰ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、Ｐ－ｇｐの発現喪失が所定の値を下回る場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域における尿細管でのＰ－ｇｐ発現の、１０％の喪失である。糸球体及び尿細管上皮細胞におけるＰ－糖タンパク質発現は、強度及び分布に従い、半定量的にスコア付けすることができる。分類は、正常＝０ポイント、皮質領域に位置する尿細管の１０％未満における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；軽度の喪失＝１ポイント、皮質領域の尿細管の１０％～２４％における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；中程度の喪失＝２ポイント、皮質領域の尿細管の２５％～５０％における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；深刻な喪失＝３ポイント、皮質領域の尿細管の５０％超における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失を含むことができる。いくつかの実施形態では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域の尿細管におけるＰ－ｇｐ発現の、約５％～約５０％の喪失である。いくつかの実施形態では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域の尿細管におけるＰ－ｇｐ発現の、約５％、８％、１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％、４０％、４５％、または５０％の喪失のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域の尿細管におけるＰ－ｇｐ発現の、約１％～約５％、約５％～約１０％、約１０％～約２５％、約２５％～約５０％、または５０％以上の喪失のいずれか１つである。いくつかの例では、Ｐ－ｇｐの発現喪失に対する所定の値は、皮質領域における尿細管でのＰ－ｇｐ発現の、１０％の喪失である。

【0084】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣＮＩ腎毒性及び／またはＢａｎｆｆスコアが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＣＮＩ腎毒性スコアの所定範囲は、約０～１、０～２、０～３、０～４、０～５、０～６、０～７、０～８、０～９、または０～１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＣＮＩ腎毒性スコアの所定範囲は、約＜１、＜２、＜３、＜４、＜５、＜６、＜７、＜８、＜９、または＜１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、Ｂａｎｆｆスコアの所定範囲は、約０～１、０～２、０～３、０～４、０～５、０～６、０～７、０～８、０～９、または０～１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、Ｂａｎｆｆスコアの所定範囲は、約＜１、＜２、＜３、＜４、＜５、＜６、＜７、＜８、＜９、または＜１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＣＮＩ腎毒性スコアの所定範囲は０～３である、またはＢａｎｆｆスコアの所定範囲は０～３である。

【0085】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）のうちの１つを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）のうちの１つを、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点における腎生検により調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、及び／またはＴＩＡＩが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は、約０～１、０～２、０～３、０～４、０～５、０～６、０～７、０～８、０～９、０～１０、０～１１、０～１２、０～１３、０～１４、０～１５、０～１６、０～１７、０～１８、０～１９、または０～２０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は、＜１、＜２、＜３、＜４、＜５、＜６、＜７、＜８、＜９、＜１０、＜１１、＜１２、＜１３、＜１４、＜１５、＜１６、＜１７、＜１８、＜１９、または＜２０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は約０～６である。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は、約０～１、０～２、０～３、０～４、０～５、０～６、０～７、０～８、０～９、または０～１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は＜１、＜２、＜３、＜４、＜５、＜６、＜７、＜８、＜９、または＜１０のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は約０～３である。いくつかの実施形態では、ＴＩＡＩの所定範囲は、約０～１、０～２、０～３、０～４、０～５、０～６、０～７、０～８、０～９、０～１０、０～１１、０～１２、０～１３、０～１４、または０～１５のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は、＜１、＜２、＜３、＜４、＜５、＜６、＜７、＜８、＜９、＜１０、＜１１、＜１２、＜１３、＜１４、または＜１５のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＴＩＡＩの所定範囲は約０～５である。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は約０～６である、またはＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は約０～３である、及び／またはＴＩＡＩの所定範囲は約０～５である。いくつかの実施形態では、ＮＩＨ－ＡＩの所定範囲は０～６であり、ＮＩＨ－ＣＩの所定範囲は０～３である、またはＴＩＡＩの所定範囲は０～５である。

【0086】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の尿検体での尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＵＡＧが所定範囲の外にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の尿検体での尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＵＡＧが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。尿検体は、尿を酸化するのに十分な量の塩化アンモニウム（ＮＨ４Ｃｌ）を投与することを伴う、ＮＨ４＋負荷試験により調査することができる。尿ｐＨは、ＮＨ４＋分泌に対するサロゲートマーカーとして尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を用いて計算される。ＵＡＧは、尿内に存在するナトリウム（Ｎａ＋）及びカリウム（Ｋ＋）イオンから、尿クロール（Ｃｌ－）を差し引くことで導出される。いくつかの実施形態では、ＵＡＧの所定範囲は、約５～約１５０ｍＥｑ／Ｌである。いくつかの実施形態では、ＵＡＧの所定範囲は、約１０～約１２０、約１５～約１００、約２０～約９０、約３０～約８０、約４０～約７０、約５０～約６０、約１０～約９０、約１０～約６０、約２０～約１００、約２０～約９０、約２０～約６０、約３０～約１２０、約３０～約１００、約３０～約９０、約３０～約６０ｍＥｑ／Ｌのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＵＡＧの所定範囲は、約２０～約９０ｍＥｑ／Ｌである。

【0087】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び／または高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清及び尿試料において、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、高カリウム血症は、約４、５、６、７、８、９、または１０ｍｍｏｌ／Ｌのいずれか１つを超える血清カリウム濃度により判定される。いくつかの実施形態では、高カリウム血症は、約５ｍｍｏｌ／Ｌを超える血清カリウム濃度により判定される。いくつかの態様では、低マグネシウム血症は、約０．９、１．１、１．２、１．３、１．４、１．５、１．６、１．７、１．８、１．９、２．０、２．１、２．２、２．３、２．４、または２．５ｍｇ／ｄＬのいずれか１つを下回る血清マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、低マグネシウム血症は、約１．４ｍｇ／ｄＬ未満の血清マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、マグネシウム消費は、約０．８、１．０、１．２、１．４、１．６、１．８、２、２．２、２．４、２．６、２．８、３．０、３．５、または４．０ｍＥｑのいずれか１つを上回る尿マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、マグネシウム消費は、約２ｍＥｑを超える尿マグネシウム濃度により判定される。いくつかの態様では、高尿酸血症は、約４．０、４．５、５．０、５．５、６．０、６．５、７．０、７．５、８．０、８．５、９．０、９．５、または１０．０ｍｇ／ｄＬのいずれか１つを上回る血清尿酸値濃度により判定される。いくつかの態様では、高尿酸血症は、約７．０ｍｇ／ｄＬを超える血清尿酸濃度により判定される。

【0088】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒ及びＳＣｙｓＣレベルが所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒ及びＳＣｙｓＣレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料における血清クレアチニン（ＳＣｒ）及び血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの例では、ＳＣｒレベルの所定範囲は、約０．５～２．０、０．５～１．８、０．５～１．６、０．５～１．４、０．５～１．２１、０．５～１、０．８４～２．０、０．８４～１．８、０．８４～１．６、０．８４～１．４、０．８４～１．２１、または０．５～１ｍｇ／ｄＬのいずれか１つである。いくつかの例では、ＳＣｒレベルの所定範囲は、約１＜１．０、＜１．１、＜１．２、＜１．２１、＜１．３、＜１．４、＜１．５、＜１．６、＜１．７、＜１．８、＜１．９、または＜２．０ｍｇ／ｄＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＳＣｙｓＣレベルの所定範囲は、約＜０．５、＜０．６、＜０．７、＜０．８、＜０．９、＜１．０、＜１．１、＜１．２、＜１．３、＜１．４、＜１．５、＜１．６、＜１．７、＜１．８、＜１．９、または＜２．０ｍｇ／Ｌのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＳＣｙｓＣレベルの所定範囲は、１ｍｇ／Ｌ未満である。いくつかの例では、ＳＣｒレベルの所定範囲は０．８４～１．２１ｍｇ／ｄＬである、及び／またはＳＣｙｓＣレベルの所定範囲は１ｍｇ／Ｌ未満である。

【0089】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌレベルが、第１の所定範囲を下回って低下し、かつ、ＢＵＮレベルが、第２の所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌレベルが、第１の所定範囲を下回って低下する、またはＢＵＮレベルが、第２の所定範囲を上回って上昇する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌ及びＢＵＮレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の血清試料において、クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＣｒＣｌまたはＢＵＮレベルが所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＣｒＣｌレベルの第１の所定範囲は、男性において、約１２０～１７０、１３０～１７０、１３０～１６０、１３０～１５０、１３５～１７０、１３５～１６０、１３５～１５０、１３７～１７０、１３７～１３７～１６０、１３７～１５０ｍＬ、もしくは１４０～１４５ｍＬ／分のいずれか１つ、またはこれらの間のいずれかの範囲である。いくつかの実施形態では、ＣｒＣｌレベルの第１の所定範囲は、女性において、約１１０～１５０、１２０～１５０、１２０～１４０、１２０～１３５、１２５～１５０、１２５～１４０、１２５～１３０、もしくは１２８～１３０ｍＬ／分のいずれか１つ、またはこれらの間のいずれかの範囲である。いくつかの実施形態では、ＢＵＮレベルの第２の所定の範囲は、約５～３０、５～２５、６～２２、７～２０、８～１８、９～１５、１０～１２ｍｇ／ｄＬのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＣｒＣｌレベルの第１の所定範囲は、男性において１３７～１５０ｍＬ／分、及び女性において１２８～１３０ｍＬ／分でありＢＵＮレベルの第２の所定の範囲は７～２０ｍｇ／ｄＬである。

【0090】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗及びＲＰＦが、所定の値の外側まで変化した場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗またはＲＰＦが、所定の値の外側まで変化した場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗及びＲＰＦが、所定の値内に留まる場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、腎血管抵抗またはＲＰＦが、所定の値内に留まる場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、ＲＰＦの所定の値は、約５００～８００、５００～７００、５１０～６９０、５２０～６８０、５３０～６７０、５４０～６６０、５５０～６５０、５６０～６４０、５７０～６３０、５８０～６２０、または５９０～６１０ｍＬ／分のいずれか１つである。いくつかの実施形態では、ＲＰＦの所定の値は、約５００～７００、５２０～７００、５４０～７００、５６０～７００、５８０～７００、６００～７００、５００～６８０、５００～６６０、５００～６４０、５００～６２０、または５００～６２０ｍＬ／分のいずれか１つである。いくつかの例では、ＲＰＦの所定の値は、約６００ｍＬ／分である。

【0091】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の、朝及び無作為の尿検体におけるアルブミン尿を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、アルブミン尿が検出される場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の、朝及び無作為の尿検体におけるアルブミン尿を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、アルブミン尿が検出されない場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。尿アルブミンを分析し、アルブミン尿の、腎臓病：全体アウトカムの改善（ＫＤＩＧＯ）段階を基に分類し、クレアチニン（ｇ）で除したアルブミン（ｍｇ）として報告することができる。段階としては、Ａ１：３０ｍｇ／ｇ未満、Ａ２：３０～３００ｍｇ／ｇ、及びＡ３：３００ｍｇ／ｇ超が挙げられる。いくつかの実施形態では、アルブミン尿は、５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、７５、１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、または５００ｍｇ／ｇのいずれか１つを上回る、アルブミン／クレアチニン比率の存在により判定される。いくつかの実施形態では、アルブミン尿は、３０ｍｇ／ｇを超えるアルブミン／クレアチニン比率の存在により判定される。

【0092】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の１種以上の尿電解質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値を超えて低下または増加する場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の１種以上の尿電解質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第１の時点と第２の時点との間で、１種以上の尿電解質の濃度が所定の値未満で低下または増加する場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質は、マグネシウム、ナトリウム、及びカリウムの１つ以上から選択される。

【0093】

任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はマグネシウムであり、所定の値は、約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２５、３０、３５、または４０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はマグネシウムであり、所定の値は約２０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はナトリウムであり、所定の値は、約５、１０、１５、２０、２５、３０、３５、４０、４５、５０、６０、７０、８０、９０、または１００ｍｍｏｌ／Ｌである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はナトリウムであり、所定の値は約５０ｍｍｏｌ／Ｌである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はカリウムであり、所定の値は、約０．５、１、１．５、２、２．５、３、３．５、４、４．５、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、または２５ｍｍｏｌ／Ｌである。任意の実施形態のいくつかにおいて、尿電解質はカリウムであり、所定の値は約１０ｍｍｏｌ／Ｌである。

【0094】

いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の１種以上の脂質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲の外側にある場合、日用量を、７．９ｍｇ ＢＩＤずつ（複数可）減少させる、または上記対象へのボクロスポリンの投与を停止することと、をさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書で開示する方法は、上記対象の１種以上の脂質の濃度を、上記治療期間の異なる日の、少なくとも第１の時点及び第２の時点において調査することと、上記第２の時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲内にある場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けることと、をさらに含む。いくつかの態様では、対象が、第１の時点において所定範囲の外にある、１種以上の脂質の濃度を示す場合であっても、対象は、少なくとも第２の時点までボクロスポリンの投与を受け、この時点において、１種以上の脂質の濃度が所定範囲内にある。

【0095】

任意の実施形態のいくつかにおいて、１種以上の脂質は、総コレステロール、高比重リポタンパク（ＨＤＬ）コレステロール、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）コレステロール、及びトリグリセリドの１つ以上から選択される。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質は、総コレステロール、低比重リポタンパク（ＬＤＬ）コレステロール、及びトリグリセリドの１つ以上から選択される。

【0096】

任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質は総コレステロールであり、所定範囲は、１７０ｍｇ／ｄＬ未満、１００～２００、または１２５～２００ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質は総コレステロールであり、所定範囲は１００～２００ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はトリグリセリドであり、所定範囲は、１５０ｍｇ／ｄＬ未満、または５０～１５０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はトリグリセリドであり、所定範囲は５０～１５０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はＬＤＬであり、所定範囲は、１００、１１０、１２０、もしくは１３０ｍｇ／ｄＬ未満、または１０～１３０、３０～１３０、もしくは５０～１３０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はＬＤＬであり、所定範囲は５０～１３０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はＨＤＬであり、所定範囲は４０、４５、もしくは５０ｍｇ／ｄＬ以上、または３５～６０ｍｇ／ｄＬである。任意の実施形態のいくつかにおいて、脂質はＬＤＬであり、所定範囲は３５～６０ｍｇ／ｄＬである。

【0097】

本明細書に記載の方法のいずれかに従ったいくつかの実施形態では、所定の日用量は、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。いくつかの実施形態では、所定の日用量は、約７．９～２３．７、２３．７～３１．６、３１．６～３９．５、または３９．５～７９ｍｇのボクロスポリンのいずれか１つである。いくつかの実施形態では、所定の日用量は、約２、４、６、８、１０、１２、１４、１６、１８、２０、２４、２８、３２、３６、４０、６０、８０、１００ｍｇのボクロスポリン、またはこれらの間の任意の値である。

【0098】

いくつかの実施形態では、第１の時点は、上記プロトコールの開始の、約０．１、０．５、１、２、３、４、５、６、７、８、１２、１６、２４、３６、または４８時間前のいずれか１つである。上記実施形態のいずれかにおいて、第１の時点は、上記プロトコールの開始直前である。いくつかの実施形態では、第２の時点は、上記プロトコールの開始後約１、２、３、４、５、１０、１４、１５、２０、２５、２８、３０、４０、５０日以上のいずれか１つ、またはこれらの間の任意の時点である。いくつかの実施形態では、第２の時点は、上記プロトコールの開始後約１、２、３、４、５、８ １０、１２、１５、１６、２０、２４、２５、２８、３０、３２、３５、３６、４０、４５、５０、５５、６０、６５、７０、７５、８０、８５、９０、９５、１００、１１０、１２０、１５０週以上のいずれか１つ、またはこれらの間の任意の時点である。

【0099】

上記実施形態のいずれかにおいて、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約５、７．９、１０、１２、１５、１５．８、２０、２３．７、２５、２８、３０、３１．６、３５、３９．５、４０、４５、５０ｍｇのボクロスポリンＢＩＤのいずれか１つ、またはこれらの間の任意の量である。いくつかの実施形態では、所定の日用量は、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0100】

対象がベースラインにて深刻な腎不全を有する、本明細書に記載の方法のいずれか１つに従ったいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約２，５、７．９、１０、１２、１５、１５．８、２０、２３．７、２５、２８、３０、３１．６、３５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤのいずれか１つ、またはこれらの間の任意の量である。対象がベースラインで深刻な腎不全を有するいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0101】

対象が中程度の肝不全を有する、本明細書に記載の方法のいずれか１つに従ったいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約２，５、７．９、１０、１２、１５、１５．８、２０、２３．７、２５、２８、３０、３１．６、３５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤのいずれか１つ、またはこれらの間の任意の量である。対象が中程度の肝不全を有するいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0102】

対象に、１種以上の中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤が同時投与される、本明細書に記載の方法のいずれか１つに従ったいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約２、５、７．９、１０、１２、１５、１５．８、２０、２３．７、２５、２８、３０、３１．６、３５ｍｇのボクロスポリンのいずれか１つ、またはこれらの間の任意の量の、毎朝用量；及び約１、２、５、７．９、１０、１２、１５、１５．８、２０のいずれか１つ、またはこれらの間の任意の量の、午後用量を含む。対象に、１種以上の中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤が同時投与されるいくつかの実施形態では、有効量のボクロスポリンの所定の日用量は、約１５．８ｍｇのボクロスポリンの毎朝用量、及び約７．９ｍｇのボクロスポリンの毎午後用量を含む。いくつかの実施形態では、中程度のＣＹＰ３Ａ４阻害剤は、ベラパミル、フルコナゾール、ジルチアゼムのうちの１つを含む。

【0103】

上記実施形態のいずれかにおいて、方法は、上記対象の腎機能を、ｅＧＦＲを調査することにより、上記治療期間の終了後の時点で評価することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記治療期間の終了後の時点で、タンパク質／クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を調査することにより、上記対象に対する有効性を評価することをさらに含む。

【0104】

上記実施形態のいずれかにおいて、方法は、上記対象に、有効量のミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）を投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、上記対象に、有効量のコルチコステロイドを投与することをさらに含む。

【0105】

いくつかの実施形態では、本明細書で提供する方法及び使用を、持続性もしくは長期治療レジメンに用いることができる、及び／または慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減するために用いることができる。いくつかの実施形態では、治療期間は少なくとも５５週間である。いくつかの実施形態では、治療期間は少なくとも１００週間である。任意の実施形態のいくつかにおいて、治療期間は、少なくとも１５０週間である。いくつかの態様では、治療期間は、少なくとも１年、２年、または３年である。

【0106】

上記実施形態のいずれかにおいて、方法は、対象のｅＧＦＲを、第３の時点で判定することと、上記第３の時点でｅＧＦＲが、上記第１の時点で判定したｅＧＦＲと、上記目標％未満で異なると判定される場合、上記所定の日用量のボクロスポリンの投与を再開することと、をさらに含む。いくつかの例では、目標％は２０～４５％である。いくつかの例では、目標％はおよそ３０％である。

【0107】

いくつかの実施形態では、タンパク尿腎臓病の治療における、または移植と関連する、慢性的なカルシニューリン阻害剤の腎毒性を軽減する方法であって、上記方法が、上記疾患と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、エンドポイントまでの計画された治療期間にわたり投与することを含み、上記治療期間の前の第１の時点、及びエンドポイントの前かつ治療期間の開始後に生じる第２の時点において、上記対象の尿タンパク質クレアチニン比（ＵＰＣＲ）を測定し、上記第１の時点と第２の時点との間で、上記ＵＰＣＲのあらゆる低下を判定することと、上記対象のＵＰＣＲが、上記第２の時点において、少なくとも所定量の低下を示すことができない場合に、対象にボクロスポリンを投与することを中断し、上記所定量の低下が示される場合に、上記投与を継続することと、をさらに含む、上記方法を本明細書で開示する。

【0108】

いくつかの実施形態では、本明細書に記載する方法は、上記第１及び第２の時点において、上記対象の血液中のＣ３／Ｃ４濃度を測定することと、Ｃ３／Ｃ４の濃度が、上記第２の時点において正規化されたか否かを判定し、上記正規化が判明した場合、対象にボクロスポリンの投与を復活させる、または継続させ、正規化がまだ生じていない場合、上記中断を継続することと、をさらに含む。いくつかの態様では、方法は、上記対象に、有効量のミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）を投与することをさらに含む。いくつかの例では、方法は、対象に、有効量のコルチコステロイドを投与することをさらに含む。いくつかの実施形態では、所定の日用量は、３９．５ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または３１．６ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または２３．７ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または１５．８ｍｇのボクロスポリンＢＩＤ、または７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤである。

【0109】

いくつかの実施形態では、狼瘡性腎炎と診断された対象に、所定の日用量の、有効量のボクロスポリンを、少なくとも８週間の計画された治療期間にわたり投与することを含み、上記有効量が、１５．８ｍｇ ＢＩＤ、または７．９ｍｇボクロスポリンＢＩＤである、タンパク尿腎臓病の治療方法を本明細書で開示する。

【0110】

本出願で参照される、特許文書、科学記事、及びデータベースを含む全ての出版物は、各個別の出版物が、個別に参照により組み込まれるのと同じ程度に、あらゆる目的のためにそれら全体が参照により組み込まれている。本明細書で説明される定義が、参照により本明細書に組み込まれている特許、出願、公報、及び他の出版物で説明されている定義に反する場合、またはそうでなければ矛盾する場合、本明細書で記載される定義が、参照により本明細書に組み込まれている定義よりも優先される。

【0111】

本明細書で使用される節の見出しは、構成目的のみのためであり、記載される主題を限定するものと解釈されるべきではない。

【実施例】

【0112】

以下の実施例は例証目的でのみ含まれ、本開示の範囲を限定することを意図していない。

【0113】

実施例１：ＬＮ治療の４８週間研究
研究に登録された対象を３つの群に分け、８８名の対象は、２ｇのＭＭＦを毎日、加えて、経口コルチコステロイド－即ち、図１に示す先細り用量のプレドニゾン－２０～２５ｍｇ／日で開始し、１２週間後に、２．５ｍｇ／日に徐々に減少、を投与された対照群に属した。低用量群の８９名の対象は、このバックグラウンド治療を受けたが、加えて、１日２回、それぞれ７．９ｍｇ（即ち、２３．７ｍｇ）のボクロスポリンを含有する３つのカプセルの投与を受けた。本研究で使用したボクロスポリンは、９０％を超えるＥ異性体を含んだ。８８名の対象で構成される第３の群は、同様のバックグラウンド治療を受けたが、加えて、５つの、７．９ｍｇカプセル（即ち、３９．５ｍｇ）を１日２回投与された。研究は４８週間の期間にわたり行い、安全性を２４週の時点で調査した。

【0114】

対象は、研究に参加する前に、（ａ）朝一番の排尿により測定する尿タンパククレアチニン比率（ＵＰＣＲ）が＞１．５ｍｇ／ｍｇである、及び（ｂ）慢性腎疾患疫学共同式（ＣＫＤ－ＥＰ１）により測定するｅＧＦＲが、＞４５ｍＬ／分／１．７３ｍ^２である、と判定することによりスクリーニングした。対象は、２４週間及び４８週間後、加えて、５０週目の後続評価にて調査した。

【0115】

低用量投与は、高用量のボクロスポリン投与よりも良好な結果をもたらした。簡潔に述べると、対照の１９．３％に対し、低用量患者の３２．６％は、２４週の時点でＣＲを示し、対照の４９％と比較して、７０％がＰＲを示した。

【0116】

本実施例におけるＣＲは、有効性、安全性、及び低用量ステロイド：ＵＰＣＲ≦０．５ｍｇ／ｍｇ（確認済み）；ｅＧＦＲ＞６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２、またはベースラインの２０％以内；ステロイド≦１０ｍｇ／日；救助投薬の投与なし、を含む複合評価項目である。

【0117】

ＰＲは、安全性及び有効性：ベースラインからの、ＵＰＣＲの５０％の低下、及び救助投薬の使用なし、を含む複合評価項目である。

【0118】

副作用として経験するｅＧＦＲの低下の指標の有無に従い、用量が減少するまたは停止される、薬力学プロトコールの有効性を判定するために、治療が、本発明のプロトコールに従い変化したか否かを考慮して、患者のこれら３つの群を、治療の２４週間及び４８週間後に調査した。３つの群全てにおいて、上述の例示的プロトコール、即ち、各患者のｅＧＦＲが、ボクロスポリンの第１用量の投与直前、及び少なくとも１日後である第２の時点に測定されるプロトコールで説明される基準に従い、患者を調査し、
（ｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、３０％を超えて、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満まで低下した場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止し、
（ｉｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、２０％～３０％、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満の値まで低下した場合、用量を減らしたボクロスポリンを上記対象に投与し、
（ｉｉｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、＜２０％低下した場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けた。

【0119】

結果を、下表２及び３に示す。表２は、２４週間後の完全寛解（ＣＲ）または部分寛解（ＰＲ）のパーセンテージを示し、表３は、用量減少を伴わない、及び用量減少を伴った患者に対する、４８週間後のこれらの値を示す。

【表1】

【表2】

【0120】

本研究では、ＣＲは、ＵＰＣＲ≦０．５ｍｇ／ｍｇ；ｅＧＦＲ＞６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２、またはベースラインの２０％以内、≦１０ｍｇ／日のステロイド、及び救助投薬の投与なし、の複合として定義された。ＰＲは、ベースラインからの５０％のＵＰＣＲの低下、及び救助投薬の使用なしとして定義される。

【0121】

表２に示すように、２４週間後に、プラセボ患者の１２．５％、低用量患者の４３．８％、及び高用量ボクロスポリン患者の５３．４％が、治療中に用量減少を受けた。完全寛解を有する患者のパーセンテージは、薬力学的投与による投与群のいずれにも影響を与えず、部分寛解のパーセンテージもまた、ほぼ同じであったが、高用量群においては、部分寛解のパーセンテージが改善した。表３は４８週の時点で同様の結果を示すが、高いパーセンテージの患者が、用量減少を受けた。ここでも、全体の寛解に劇的な効果は示されなかった。

【0122】

実施例２：低用量プロトコール
実施例１におけるものと同様の臨床研究の過程において、対象のかなりの部分が、１日２回（ＢＩＤ）投与される１５．８ｍｇのボクロスポリンまでほぼ即座に減少された用量において、実質的な寛解を示したことが観察された。したがって、出願者らはこれらのデータを分析し、１５．８ｍｇまたは７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤを提供する用量プロトコールが、本プロトコールの薬力学的態様の有無に関係なく効果的であるという結論を下した。

【0123】

カプセルが７．９ｍｇのボクロスポリンを含有するため、１キャップは７．９ｍｇのボクロスポリンを表し、２キャップは１５．８ｍｇのボクロスポリンを表し、３キャップは２３．７ｍｇのボクロスポリンを表す、などである。治療のかなり初期において用量を７．９ｍｇのボクロスポリンＢＩＤまで減らした場合であっても、かなりの数の対象が、完全または部分寛解を示し、同様の結果が、１５．８ｍｇ ＢＩＤの投与に対しても得られた。

【0124】

実施例３：低用量コルチコステロイド
コルチコステロイドの用量は、表４及び５に示す「標準ケア」と比較して効果的に減少させることができ、１日当たり４ｍｇ以下までさらに減少させることができることもまた、出願者らは発見した。

【表3】

【表4】

【0125】

実施例４：ＬＮ治療の、５５週目後のフォローアップ調査
実施例１に記載するように、本研究に登録した対象を、治療の５５週間後に調査し、本明細書に記載するプロトコールに従って、治療を変えるか否かを調査する。

【0126】

３つの群全てにおいて、上記明細書に記載する例示的プロトコール、即ち、各患者のｅＧＦＲが、ボクロスポリンの第１用量の投与直前、及び少なくとも１日後である第２の時点に測定されるプロトコールで説明される基準に従い、対象を調査し、
（ｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、３０％以上、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満まで低下した場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止するか、または上記対象へのその用量を減少させ；
（ｉｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、２０％～３０％、６０ｍＬ／分／１．７３ｍ^２未満の値まで低下した場合、用量を減らしたボクロスポリンを上記対象に投与し、
（ｉｉｉ）上記対象のｅＧＦＲが、上記第１の時点と第２の時点との間で、２０％以下低下した場合、同じ所定の日用量のボクロスポリンを上記対象に投与し続けた。

【0127】

実施例５：間質線維化及び尿細管萎縮の調査
腎生検を、実施例４に記載する研究の過程の様々な時点において収集する。生検を全て、光学顕微鏡、免疫蛍光顕微鏡、及び電子顕微鏡を用いて調査する。収集した腎生検を、ヘマトキシリン及びエオシン染色（Ｈ＆Ｅ）、過ヨウ素酸－Ｓｃｈｉｆｆ（ＰＡＳ）、銀及び三色染色、ならびにコラーゲンＩＩＩ免疫組織化学により調査し、以下のカテゴリーを用いて、半定量的に等級付けする：０等級：≦５％；１等級：５～２５％；２等級：２５～≦５０％；３等級：＞５０％。このカテゴリーは、単核球浸潤が関与する非瘢痕性皮質領域のパーセンテージを示し、これは、腎臓同種移植片拒絶に対するＢａｎｆｆの隙間炎症スコアに類似している。三色染色を用いて、線維症の同定を補助する。間質線維化は、コラーゲンの蓄積として識別され、間質尿細管萎縮における関連する分子は、蒼白色の細胞質を含む小さな尿細管、または拡張した薄い尿細管により識別される。

【0128】

腎生検によって、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、間質線維化及び尿細管萎縮の存在が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検によって、上記第１の時点と第２の時点との間で、間質線維化及び尿細管萎縮の存在が明らかとならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0129】

実施例６：内側細動脈硝子化の調査
実施例５に記載するとおりに入手した腎生検を、内側細動脈硝子化に関してさらに調査する。輸入細動脈の媒体中に、結節型の硝子質堆積物が存在することは、輸入細動脈の壁周辺で、壊死平滑筋細胞が、局所的または円形の塊状タンパク質（硝子質）堆積物で置き換えられることにより同定される。さらなる調査は、正の腎アウトカムとは負に関連する、血管内腔の狭窄化の調査を含む。

【0130】

腎生検によって、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化の存在が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検によって、上記第１の時点と第２の時点との間で、内側細動脈硝子化の存在が明らかとならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0131】

実施例７：糸球体性被膜線維症、全体糸球体硬化、及び焦点性分節糸球体硬化（ＦＳＧＳ）の調査
実施例５に記載するとおりに入手した腎生検を、糸球体損傷に関してさらに調査する。全体糸球体硬化は、細動脈硝子化、細小動脈症、二次糸球体性虚血、及び／または失尿細管糸球体の存在により同定される。失尿細管糸球体の存在は、近位尿細管と切り離された糸球体の存在により特徴付けられる。失尿細管糸球体は、糸球体周囲線維化（被膜線維症）の存在、または拡大した糸球体性嚢胞の中で激しく収縮した糸球体の存在によってもまた同定される。焦点性分節糸球体硬化病変は、少なくとも１つの糸球の一部に硬化が存在することで同定され、全糸球体体積のおよそ１２．５％として同定されている。

【0132】

全体及び部分的糸球体硬化は０～３で、尿細管萎縮は０～３で、間質線維化は０～３で、及び動脈硬化症は０～１で、スコア付けされる。次に、スコアを加え（総腎慢性スコア）、最小（合計スコア０～１）、軽度（合計スコア２～４）、中程度（合計スコア５～７）、及び重度（合計スコア≧８）の、慢性病変の合計深刻度を等級付けする。

【0133】

腎生検によって、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷の存在が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検によって、上記第１の時点と第２の時点との間で、糸球体損傷の存在が示されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0134】

実施例８：傍糸球体装置過形成の調査
実施例５に記載するとおりに入手した腎生検を、傍糸球体装置（ＪＧＡ）過形成に関してさらに調査する。腎生検を、マッソン及び免疫ペルオキシダーゼ染色で染色し、免疫組織化学分析を行う。試料を、電子顕微鏡によってさらに分析する。ＪＧＡ過形成は、血管成分（輸入及び輸出細動脈の一部）、メサンギウム細胞成分（変性糸球体外及び糸球体内平滑筋細胞）、ならびに、尿細管成分（密集斑）、加えて、細胞内レニン顆粒の存在を含む傍糸球体装置成分の拡大によって評価される。

【0135】

腎生検によって、実施例４に記載する上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成の存在が明らかとなる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する。腎生検によって、上記第１の時点と第２の時点との間で、ＪＧＡ過形成の存在が明らかとならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0136】

実施例９：尿細管微小石灰化の調査
実施例５に記載するとおりに入手した腎生検を、尿細管微小石灰化に関してさらに調査する。脱灰していないホルマリン（４％）で固定した、パラフィン埋包生検の組織学スライドを、ヘマトキシリン・エオジン染色（Ｈ＆Ｅ）及び過ヨウ素酸シッフ（ＰＡＳ）染色、加えて、リン酸カルシウム沈着を可視化するためのフォン・コッサ及びアリザリン染色で分析する。電子顕微鏡を用いて、腎尿細管内でのカルシウムの沈着をさらに同定する。微小石灰化の密度を、生検１ミリメートル当たりの石灰化病巣の数として評価し、生検で発見される石灰化病巣の総数を、スライドで測定した生検の総面積で除することにより計算する（１平方ミリメートル当たりの病巣総数）。

【0137】

腎生検によって、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化の存在が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検によって、上記第１の時点と第２の時点との間で、尿細管微小石灰化の存在が明らかとならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0138】

実施例１０：Ｐ－糖タンパク質発現クレアチニンクリアランスの調査
実施例５に一般に記載する対象から入手した腎生検を、Ｐ－糖タンパク質発現に関して調査する。Ｐ－糖タンパク質（Ｐ－ｇｐ）発現を、抗Ｐ－糖タンパク質抗体を用いて、腎生検を染色することにより分析する。糸球体及び尿細管上皮細胞におけるＰ－糖タンパク質発現は、強度及び分布に従い、半定量的にスコア付けする。分類は、正常＝０ポイント、皮質領域に位置する尿細管の１０％未満における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；軽度の喪失＝１ポイント、皮質領域の尿細管の１０％～２４％における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；中程度の喪失＝２ポイント、皮質領域の尿細管の２５％～５０％における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失；深刻な喪失＝３ポイント、皮質領域の尿細管の５０％超における、Ｐ－ｇｐ発現の喪失、を含む。Ｐ－糖タンパク質の発現の低下は、腎病状を示唆している。

【0139】

腎生検により、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＰ－ｇｐの発現喪失が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検により、上記第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＰ－ｇｐの発現喪失が明らかにならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0140】

実施例１１：カルシニューリン阻害剤の腎毒性及びＢａｎｆｆスコアの調査
上述の薬力学的プロトコールの有効性をさらに判定するために、実施例５に記載のとおりに入手した腎生検を、カルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の腎毒性及びＢａｎｆｆスコアに関して、さらに調査する。慢性的な変化の深刻度を等級付けするために、生検を全て、半定量的にスコア付けする。ＣＮＩ腎毒性スコアは、０～３のスケールで等級付けされる６つのパラメーターに基づき評価され、これにより、可能となる合計スコアは１８である。６つのパラメーターとしては、（１）等尺性尿細管液胞化（ｔｖ）、（２）末梢または内側細動脈硝子質（ａｈ）、（３）縞状間質線維化、（４）糸球体の虚血性崩壊、（５）傍糸球体装置過形成、及び（６）尿細管ジストロフィー石灰化が挙げられる。Ｂａｎｆｆの慢性スコア（ＢＣｈＳ）を判定するために、腎生検を、移植糸球体症（ｃｇ）、尿細管萎縮（ｃｔ）、間質線維化（ｃｉ）、及び慢性的な血管変化（ｃｖ）に関して分析し、０～３のスケールで等級付けする。腎病状の深刻度は、軽度、中程度、及び深刻に分類分けされる。

【0141】

腎生検により、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＣＮＩ腎毒性スコア、またはＢａｎｆｆの慢性スコア（ＢＣｈＳ）が明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検により、第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＣＮＩ腎毒性スコア、またはＢａｎｆｆの慢性スコア（ＢＣｈＳ）が明らかにならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0142】

実施例１２：活性及び慢性指数の調査
実施例５に記載のとおりに入手した腎生検を、アメリカ国立衛生研究所の活動指数（ＮＩＨ－ＡＩ）、アメリカ国立衛生研究所の慢性指数（ＮＩＨ－ＣＩ）、及び尿細管間質性活動指数（ＴＩＡＩ）を用いてさらに調査する。生検スライドを、ヘマトキシリン・エオジン（Ｈ＆Ｅ）、トリクロム、ならびに、Ｃ３、Ｃ４、Ｃ５、Ｃ１ｑ、ＩｇＧ、ＩｇＭ、及びＩｇＡによる免疫蛍光法で染色した。電子顕微鏡写真を収集し、解釈を容易にした。

【0143】

指数は、０～３のスケール（スコア０＝存在しない、１＝＜２５％の糸球体、２＝２５～５０％の糸球体、及び３＝＞５０％の糸球体を表す）で、生検における、後述する各特徴を示す糸球体のパーセンテージをスコア付けすることを含む。

【0144】

ＮＩＨ ＡＩに関して、内毛細管の細胞過多、糸球体性毛細管ループ内の好中球または核崩壊、類線維素壊死、硝子質沈着、細胞または線維細胞性半月体、及び間質性炎症を含む、疾患活動性の指標を調査する。半月体及び類線維素壊死は、予後に悪影響を及ぼすため、２倍で重み付けをする。スコア範囲は０～２４であり、０を不活性とみなす。高いＮＩＨ－ＡＩ値（＞６）は、重大な変化とみなす。

【0145】

ＮＩＨ－ＣＩの指標としては、全体糸球体硬化、線維性半月体、尿細管萎縮、及び間質線維化の全てのパーセンテージが挙げられる。ＮＩＨ－ＣＩスコア範囲は０～１２であり、０が慢性性なしを表す。高いＮＩＨ－ＣＩ値（＞３）は、腎不全の進行と相関している。

【0146】

ＴＩＡＩに関しては、尿細管細胞の核濃縮、核活性化、壊死、平滑化、尿細管内腔内のマクロファージ、尿細管内腔内の上皮細胞、及び間質性炎症を調査する。ＴＩＡＩスコア範囲は０～２１であり、０は間質性活性がないことを示す。

【0147】

統計分析を行い、カテゴリー変数の頻度を判定する。Ｐ値＜０．０５を、統計的に有意とみなす。

【0148】

腎生検により、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、またはＴＩＡＩが明らかになる場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎生検により、上記第１の時点と第２の時点との間で、所定範囲外のＮＩＨ－ＡＩ、ＮＩＨ－ＣＩ、またはＴＩＡＩが明らかにならない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0149】

実施例１３：遠位尿細管アシドーシス（高クロール性代謝性アシドーシス）の調査
尿検体を、実施例４に実質的に記載するように、研究の過程における様々な時点において収集し、尿を酸化するのに十分な量の塩化アンモニウム（ＮＨ_４Ｃｌ）を投与することを伴う、ＮＨ４＋負荷試験を用いて調査した。尿ｐＨは、ＮＨ_４ ^＋分泌に対するサロゲートマーカーとして尿アニオンギャップ（ＵＡＧ）を用いて計算される。ＵＡＧは、尿内に存在するナトリウム（Ｎａ^＋）及びカリウム（Ｋ^＋）イオンから、尿クロール（Ｃｌ^－）を差し引くことで導出される。

【0150】

尿ｐＨの低下が起こらないことは、２０～９０ｍＥｑ／Ｌを上回る範囲を特徴とする、不適切に正のＵＡＧにより検出される。正のＵＡＧ結果を、遠位尿細管アシドーシスの指標として用いる。

【0151】

正のＵＡＧが、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。負のＵＡＧが、上記第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0152】

実施例１４：イオン恒常性の調査
血清及び尿試料を、実施例４に記載する調査の異なる時点において対象から入手し、高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、及び高尿酸血症を調査する。高カリウム血症を、採取した血清試料から調査し、軽度（５．１～＜６ｍｍｏｌ／Ｌ）、中程度（６～＜７ｍｍｏｌ／Ｌ）、及び深刻（≧７ｍｍｏｌ／Ｌ）に分類する。低血清マグネシウム（低マグネシウム血症）は、標準的な参照範囲を下回る、即ち、１．４～１．８ｍｇ／ｄＬ未満の血清マグネシウム濃度として判定する。２ｍＥｑ（１ｍｍｏｌまたは２４ｍｇ）を超えるマグネシウム分泌を示す尿分析は、腎マグネシウム消費を示すものとして分類する。尿酸の増加（高尿酸血症）は、採取した血清試料から調査し、標準的な上限値である６．０～７．０ｍｇ／ｄＬを上回る値として分類する。

【0153】

高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。高カリウム血症、低マグネシウム血症、マグネシウム消費、または高尿酸血症が、上記第１の時点と第２の時点との間で検出されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0154】

実施例１５：血清クレアチニン及びシスタチンＣの調査
血清試料を、実施例４に記載する研究に登録した対象から採取する。血清クレアチニン（ＳＣｒ）は、酵素法、及びＪａｆｆｅ法により推定する。血清シスタチンＣ（ＳＣｙｓＣ）は、粒子増強比濁分析免疫アッセイ（ＰＥＮＩＡ）、及び粒子増強比濁免疫アッセイ（ＰＥＴＩＡ）により推定する。ＳＣｒレベルの増加は、正常範囲の０．８４～１．２１ｍｇ／ｄＬ（７４．３～１０７ｍｍｏｌ／Ｌ）を上回る値として判定される。ＳＣｙｓＣレベルの増加は、１ｍｇ／Ｌを上回る値として判定される。

【0155】

ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルの増加が、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。ＳＣｒまたはＳＣｙｓＣレベルの増加が、上記第１の時点と第２の時点との間で検出されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0156】

実施例１６：クレアチニンクリアランス及び血中尿素窒素（ＢＵＮ）の調査
実施例４に記載する研究に登録した対象を、クレアチニンクリアランス及び血中尿素窒素に関してさらに調査する。身長及び体重を含む対象の個体群統計を記録し、血清クレアチニン（ＳＣｒ）を、実施例１５に記載のとおりに測定する。時間を計って尿試料を採取し、時間、体積、及びクレアチニン濃度を記録する。

【0157】

クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）は、女性においては＊０．８５の補正を用いて、Ｃｏｃｋｃｒｏｆｔ－Ｇａｕｌｔの式：ＣｒＣｌ＝（（１４０－年齢）＊（体重（ｋｇ））／７２＊ＳＣｒ）を用いて計算する。クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）もまた、Ｄｕｂｏｉｓ及びＤｕｂｏｉｓ式：ＣｒＣｌ＝（尿クレアチニン＊尿体積）／（血清クレアチニン＊時間（分））を用いて計算する。男性において、標準的な上部範囲である、１３７～１５０ｍＬ／分、及び女性において１２８～１３０ｍＬ／分の、クレアチニンクリアランスの外まで値が減少することは、腎病状を示唆している。

【0158】

血清試料を採取し、血中尿素窒素（ＢＵＮ）レベルを分析する。ＢＵＮは、標準的な計装を用いて定量的に測定する。標準範囲の７～２０ｍｇ／ｄＬ（２．５～７．１ｍｍｏｌ／Ｌ）を上回るＢＵＮの増加は、腎病状を示唆している。

【0159】

ＣｒＣｌ値の減少、またはＢＵＮレベルの増加が、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。ＣｒＣｌ値の減少、またはＢＵＮレベルの増加が、上記第１の時点と第２の時点との間で検出されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0160】

実施例１７：腎血管抵抗及び腎血漿流量の調査
実施例４に記載する研究に登録した対象を、腎血管抵抗及び腎血漿流量（ＲＰＦ）に関してさらに調査する。腎血管抵抗は、平均動脈圧により除した腎血流量として計算される。腎血流量は、腎動脈に固定した、小型パルスドップラープローブにより測定する。平均動脈圧は、オシロメーターデバイスを用いる血圧の測定、続いて、以下の式：（収縮期血圧＋２（拡張期血圧））／３を用いる計算により測定される。

【0161】

腎血漿流量を調査するために、血清及び尿試料を、上記実施例に概して記載するとおりに採取し、パラアミノ馬尿酸（ＰＡＨ）を分析する。尿の流速及び体積を、ｃｃ／分で測定する。ＲＰＦを、（尿内のＰＡＨ＊尿の流速（ｃｃ／分））／血漿内のＰＡＨとして計算する。標準範囲の６００ｍＬ／分の外の値は、腎病状を示唆している。

【0162】

腎血管抵抗またはＲＰＦの変化が、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。腎血管抵抗またはＲＰＦの変化が、上記第１の時点と第２の時点との間で検出されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0163】

実施例１８：アルブミン尿の調査
実施例４に記載のとおり、本研究におけるアルブミン／クレアチニン比率として、２４時間の尿採取、または早朝／無作為検体で尿アルブミンを測定する。試料を分析し、アルブミン尿の、腎臓病：全体アウトカムの改善（ＫＤＩＧＯ）段階を基に分類し、クレアチニン（ｇ）で除したアルブミン（ｍｇ）として報告することができる。段階としては、Ａ１：３０ｍｇ／ｇ未満、Ａ２：３０～３００ｍｇ／ｇ、及びＡ３：３００ｍｇ／ｇ超が挙げられる。

【0164】

尿路感染症を除く２つの機会においてアルブミン尿が存在することは、糸球体性機能不全を示唆している。３ヶ月以上アルブミン尿が続くことは、慢性腎疾患を示唆している。

【0165】

アルブミン尿が、実施例４に記載する第１の時点と第２の時点との間で検出される場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を停止する、または減少させる。アルブミン尿が、上記第１の時点と第２の時点との間で検出されない場合、上記対象へのボクロスポリンの投与を、同じ所定の日用量で継続する。

【0166】

実施例１９：ボクロスポリンで治療した狼瘡性腎炎患者における、電解質特性の調査
腎臓内で調節される電解質不均衡は、充実性臓器移植におけるカルシニューリン阻害剤（ＣＮＩ）の使用と関連していることが報告されている（Ｇｒａｔｒｅａｋ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｒｅｐｏｒｔｓ．２０２０；８（１）：ｅ１４３１６－ｅ；Ｄｅｒａｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ Ｉｎｔｅｒｎ Ｍｅｄ．１９９２；１１７（７）：５７８－８３）。ＣＮＩの使用による腎毒性の臨床所見は、例えば、経時的な、尿及び／または血清電解質濃度の変化を調査することにより裏付けることができる。狼瘡性腎炎を有する対象の尿電解質における免疫抑制療法と組み合わせた、ＣＮＩボクロスポリンの効果を調査した。

【0167】

活性狼瘡性腎炎を有する対象において、二重盲検無作為化比較試験を行い、プラセボと比較して、経口ボクロスポリン（２３．７ｍｇ、１日２回）の有効性及び安全性を調査した。ＭＭＦ（目標用量の１ｇを１日２回）、及び低用量の経口ステロイド（１６週目に、２．５ｍｇ／日に急激に漸減）もまた、ボクロスポリン及びプラセボ群の両方において、対象に投与した。

【0168】

ＭＭＦ及び低用量ステロイドと組み合わせてボクロスポリンで治療した、狼瘡性腎炎を有する患者は、ＭＭＦ及び低用量ステロイドのみで治療した患者と比較して、有意に高い完全腎奏効率を達成した（１年の時点で、４０．８％と２２．５％；ＯＲ ２．６５；ｐ＜０．０００１）。

【0169】

各治療群における６０名の患者からの、２４時間の時点での尿試料を、電解質の尿分析のために選択した。試料は、治療に対して、１年の時点で、ベースラインから、尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）の少なくとも５０％の低下の応答をした患者（治療応答者）、当該応答をしなかった患者（非応答者）、及び研究中に、推定される糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）の、ベースラインから少なくとも３０％の低下を有した患者からのものを含んだ。マグネシウム、カリウム、及びナトリウムの、ベースラインから１年での平均変化を、２４時間尿排泄濃度として示した。

【0170】

尿電解質排泄濃度の、ベースラインからの平均変化は、マグネシウム（＜１３．４ｍｇ／ｄＬ）及びカリウム（＜６．４ｍｍｏｌ／Ｌ）に対しては小さく、サブグループのいずれに対しても、治療群の間で有意差は見られなかった。１年の時点で、対照群における応答者（１４．０ｍｍｏｌ／Ｌの増加）を除き、全てのサブグループ（＜３０．５ｍｍｏｌ／Ｌ）において、ナトリウム排泄濃度はベースラインから低下した（表６）。

【表5】

【0171】

ボクロスポリンで治療した患者の、平均血清電解質濃度は、正常範囲内であった（Ｒｏｖｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｌａｎｃｅｔ．２０２１ Ｍａｙ ２９；３９７（１０２８９）：２０７０－２０８０）。ボクロスポリンの研究投与の時点で、マグネシウム、カリウム、及びナトリウムの、尿電解質排泄濃度のベースラインからの変化は、治療に対する応答に関係なく、いずれの治療群においても臨床的に有意でなかった。

【0172】

研究結果により、報告される、血清での正常な電解質濃度と共に、ボクロスポリンが、電解質の平均濃度に実質的な影響を及ぼさないことが確認される。結果は、狼瘡性腎炎を有する患者、特に、ＣＮＩ腎毒性に対するリスクが増加している可能性がある患者の治療に対する、ボクロスポリンの安全性及び有効性をさらに裏付ける。

【0173】

実施例２０：マトリックス支援レーザー脱離／イオン化質量分析イメージング（ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ）による、マウス腎組織におけるシクロスポリンＡ、ボクロスポリン、及び代謝産物の局在化
シクロスポリンＡ及びボクロスポリンは構造的に類似しているものの、２つの化合物は、異なる代謝安定性及び分布を示し、これらは、固有の有効性及び安全性プロファイルに寄与している可能性がある。シクロスポリンＡの特定の代謝産物は、腎毒性と相関している（Ｗｕ ａｎｄ Ｋｕｃａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２０１９；２０（２）：８４－９０（７））。マウス腎臓における、シクロスポリンＡ、ボクロスポリン、及びこれらの代謝産物の局在化及び分布を、マトリックス支援レーザー脱離／イオン化質量分析イメージング（ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ）を用いて、ＩＶ投与後に調査した。ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩは、標識化を必要とせずに、生物学的組織試料における、分子の空間配置を高感度でマルチプレックス分析する。

【0174】

ヒトにおける、シクロスポリンＡの主要代謝経路としては、ヒドロキシル化及びＮ－脱メチル化が挙げられる。これらのプロセスは、親化合物よりも比較的毒性が低い代謝産物をもたらすが、腎臓での代謝は、肝臓におけるほど効率的ではない。シクロスポリンＡの代謝産物としては、ＡＭ１、ＡＭ１ｃ、ＡＭ４Ｎ、ＡＭ９、ＡＭ１９、及びＡＭ１ｃ９が挙げられる。ＡＭ１９及びＡＭ１ｃ９などの、いくつかの代謝産物は、シクロスポリンＡで治療した対象における腎毒性と相関している（Ｗｕ ａｎｄ Ｋｕｃａ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２０１９；２０（２）：８４－９０（７））。

【0175】

ボクロスポリンの主要代謝産物としては、ＩＭ４ｎ、ＩＭ９、ＩＭ１ｃ（Ｒ）、ＩＭ１ｃ（Ｓ）、ＩＭ１９（ＭｅＢｍｔ：環化）、ＩＭ１９、ＩＭ４、ＩＭ１－ジオール－１、ＩＭ１－ジオール－２、及びＩＭ１－ジオール－３、ならびに、トリヒドロキシ化された、予測ボクロスポリン代謝産物が挙げられる（例示的なボクロスポリン代謝産物の構造を示す、図２Ａ～図２Ｋを参照されたい）。

【0176】

マウスに、尾静脈注射によってシクロスポリンＡまたはボクロスポリンのいずれかを投与し、投与後に腎臓を回収した。腎臓を凍結切片処理し、ＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ分析のためにマトリックスで覆った。試料を、質量分析計にてラスタプロセスで測定し、空間的に分解された質量スペクトルを入手した。検出した分子を、色強度マップとして可視化した（ｍ／ｚ ０％～１００％）。次に、試料の組織学的染色を行った。同じ試料の、組織学的染色及びＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ測定値を、同時に記録した。

【0177】

下表７は、シクロスポリンＡ及びボクロスポリン代謝産物の、実際の、及び実験上の、質量電荷比（ｍ／ｚ）、加えて、質量精度（ｐｐｍ）を示す。

【表6】

【0178】

図３は、例示的なマウス腎臓のＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ、光学イメージング、ならびにヘマトキシリン及びエオジン（Ｈ＆Ｅ）を示す。シクロスポリンＡと比較して、ボクロスポリンの分布及び強度は、腎臓全体を通して、特に皮質において相対的に弱かった（［ＶＳＰ＋Ｎａ］^＋ ｖｓ ［ＣｓＡ＋Ｎａ］^＋）。シクロスポリンＡ代謝産物と比較したときに、腎臓への蓄積、分布、及び強度が減少ないし低下したことは、いくつかのボクロスポリン代謝産物に対して明白であった。他のボクロスポリン代謝産物と同様に、仮説上のトリヒドロキシ化代謝産物［（ＩＭ１９＋ＯＨ）＋Ｎａ］^＋は、腎臓において実質的に蓄積しないようであった。他のボクロスポリン代謝産物、及び親化合物そのものとは対照的に、［ＩＭ１ｃ／ＩＭ４／ＩＭ９＋Ｎａ］^＋は、腎臓に大規模に分布し、全体の強度をより大きく示した。図４Ａ～図４Ｅは、各化合物またはその代謝産物のそれぞれの、分子局在化に加えて、重なり合ったシクロスポリンＡ及びボクロスポリンの、一連のＭＡＬＤＩ－ＭＳＩ画像を示す。［ＩＭ１ｃ／ＩＭ４／ＩＭ９＋Ｎａ］^＋の例外はあれど、ボクロスポリン及びその代謝産物は、シクロスポリンＡ及びその代謝産物よりも、腎臓には大幅に低い程度で、かつ、大幅に低い強度で分布したようであった。

【0179】

まとめると、これらの結果は、シクロスポリンＡ及びその代謝産物と比較して、ボクロスポリン及びその代謝産物の固有の腎臓分布と一致している。腎臓における、シクロスポリンＡ及びその代謝産物の広きにわたる分布及び強度は、この化合物の腎毒性を部分的に説明し得る。対照的に、腎臓全体における、ボクロスポリン及びその代謝産物の、強度、蓄積、及び分布の低下ないし減少は、ボクロスポリンの忍容性の向上、及び腎毒性の低下を裏付け、ＣＮＩ療法を必要とする対象、特に、ＣＮＩ腎毒性に罹りやすい可能性がある、または高いリスクもしくは感受性を示し得る対象における、ボクロスポリン療法の使用を裏付ける。

【0180】

実施例２１：ボクロスポリンで治療した狼瘡性腎炎患者における、脂質プロファイルの調査
脂質異常症は、狼瘡性腎炎（ＬＮ）を治療するために用いる免疫抑制剤の、潜在的な副作用である。ＬＮは、心臓血管疾患のリスク増加と関連しており、炎症及び免疫抑制剤と関連する脂質異常症により悪化する可能性がある。ボクロスポリンは、シクロスポリンＡと構造的に類似しており、これに対しては、脂質異常症が既知の副作用である。他の病状に対するボクロスポリン治療は、平均脂質濃度において中立の影響を有することが報告されている。本実施例は、ＬＮを有する対象の脂質濃度への、ボクロスポリンの影響を調査する。ＬＮを有する対象の脂質濃度における、免疫抑制療法と組み合わせたボクロスポリンの影響を調査した。

【0181】

生検で証明された活性狼瘡性腎炎（クラスＩＩＩ、ＩＶ、またはＶ±ＩＩＩ／ＩＶ）、及びタンパク尿≧１．５ｍｇ／ｍｇ（クラスＶに対しては≧２ｍｇ／ｍｇ）を有する対象を、第２相及び第３相臨床試験に登録し、プラセボ（対照）と比較しての、ボクロスポリンの有効性及び安全性を調査した。患者全員に、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）（目標の１ｇ ＢＩＤ）、及び急速に漸減する低用量ステロイドを同時に投与した。同様に設計した臨床試験からプールしたデータは、ボクロスポリンをＭＭＦ及び低用量ステロイドに加えることで、治療から１年で、著しく高い完全な腎奏効率（ＣＲＲ）がもたらされた（４３．７％と２３．３％；ＯＲ ２．７６；Ｐ＜０．０００１）ことを示した。

【0182】

プールしたデータセットをさらに分析し、ＬＮを有する対象における脂質濃度への、ボクロスポリンの影響を調査した。プールしたデータは、ボクロスポリン（２３．７ｍｇ ＢＩＤ）群に２６８名の患者を、プラセボ治療対照群において２６６名の患者を含んだ。空腹時総コレステロール、低密度リポタンパクコレステロール（ＬＤＬ）、高密度リポタンパクコレステロール（ＨＤＬ）、及びトリグリセリドを、ＣＬＩＡ認定の中央実験室で、ベースライン及び１年のフォローアップ時に調査した。

【0183】

表８は、ベースラインから１年までの、ボクロスポリンまたはプラセボ（対照）で治療した対象の、脂質プロファイルの変化を示す。総コレステロール、ＬＤＬ、及びトリグリセリドの平均値は、ベースラインにおいてはそれぞれの正常範囲を上回っており、ボクロスポリン及びプラセボ群の両方において、研究中に減少した。１年の時点で、ベースラインからの減少は、総コレステロール（Ｐ＝０．００６２）及びＬＤＬ（Ｐ＝０．０２３）に関しては、対照群よりもボクロスポリン群において有意に大きかった。トリグリセリドの、ベースラインからの全体的な減少は、１年の時点においても、ボクロスポリン治療患者よりも大きかった（Ｐ＝０．０７６８）。１年の時点で、総コレステロールが正常範囲の患者のパーセンテージは、ボクロスポリン群において約４２％増加（ベースラインにおける１７．３％から、５９．２％）し、対照群において２９％増加（ベースラインにおける１９．４％から、４８．３％）した。正常なＬＤＬのパーセンテージは、対照群における約２１％の増加（ベースラインにおける３４．５％から、５５．２％）と比較して、ボクロスポリン群において約４２％増加（ベースラインにおける２９．７％から、７１．４％）した。正常なトリグリセリドを有する対象のパーセンテージは、ボクロスポリン群において３２．３％から５６．１％に、対照群において３６．１％から５３．６％に増加した。平均ＨＤＬレベルは、両群において正常範囲内にあり、研究を通して安定したままであった。

【表7-1】

【表7-2】

【0184】

ベースラインから１年間のフォローアップまで、総コレステロール、ＬＤＬコレステロール、及びトリグリセリドレベルは、両方の治療群で改善された。ボクロスポリン群は、より高いＣＲＲ率と共に、脂質の大幅な減少、及び対象が正常な脂質範囲に入るパーセンテージが全体的により高いことを示した。ＬＮ患者における心臓血管疾患のリスクを考慮すると、臨床試験で観察された、ＣＲＲの改善、及び脂質濃度への好ましい影響は、ＬＮ及び他の疾患の治療のための、ＣＮＩボクロスポリンの使用をさらに裏付ける。

【0185】

実施例２２：長期の安定性及び忍容性の継続研究
狼瘡性腎炎（ＬＮ）に対して、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）及びステロイドと組み合わせた、１２ヶ月のボクロスポリン治療を以前に終えた対象を、同じ治療をさらに２年行う、長期の継続研究に登録した。

【0186】

継続研究では、実施例２１に概して記載するとおりに、狼瘡性腎炎を有する対象において、プラセボと比較してボクロスポリンを、ミコフェノール酸モフェチル（ＭＭＦ）と低用量ステロイドと組み合わせて調査した。継続研究には、さらに２４ヶ月間、概して図５に示すように、最初の１年間の研究に含まれた３５７名の対象のうち、２１６名が関与し、同じ治療群：低用量ステロイドを１日２回１ｇで、ＭＭＦと組み合わせて、ボクロスポリンの、２３．７ｍｇ・１日２回の同じ治療を受けるボクロスポリン群に１１６名の患者、及び低用量ステロイドを１日２回１ｇで、ＭＭＦと組み合わせてプラセボで受ける対照群に１００名の患者、で継続した。ボクロスポリン群における９０名の対象、及び対照群における７８名の対象が、研究終了時に合計３６ヶ月の治療を受けた。対象の個体群統計を表９に示す。

【表8】

【0187】

表１０は、治療前ベースライン、及び治療から１年（１２ヶ月）のベースラインにおける、平均補正推定糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）、及び平均尿タンパク質クレアチニン比率（ＵＰＣＲ）において、観察された値を示す。

【表9】

【0188】

ボクロスポリン治療群の１１６名の対象において、平均推定糸球体濾過量（ｅＧＦＲ）は、図６に示すように、３６ヶ月にわたり安定していた。さらに、活性対照群と比較して、ボクロスポリン治療群は、３６ヶ月の時点において、＋２．７ｍＬ／分のベースラインｅＧＦＲから増加を示した。平均ｅＧＦＲは、ボクロスポリン治療群において、３６ヶ月にわたり安定していた。

【0189】

平均ＵＰＣＲは、図７に示すように、３年のあらゆる時点において、ボクロスポリン治療群において下回っていた。

【0190】

ボクロスポリンは十分忍容され、予想外の安全性シグナルは観察されなかった。表１１は、有害事象の一覧を示す。両方の研究群において、かなりの深刻な有害事象率が存在した（ボクロスポリン治療群において１９％、及び活性対照群において２４％）。さらに、ボクロスポリン治療群において死亡例はなかったが、活性対照群においては４件の死亡例があった。ボクロスポリン治療群（１２．９％の離脱）と比較して、活性対照群では、離脱のパーセンテージが高かった（１５．０％の離脱）。

【表10】

【0191】

バックグラウンド免疫抑制療法と組み合わせた、活性狼瘡性腎炎（ＬＮ）を有する成人、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を有する対象における深刻な合併症の治療のための、ボクロスポリンの長期安全性及び忍容性を調査する、３年の長期継続研究の結果は、ＬＮを有する対象に対する、ボクロスポリンの長期治療を裏付ける。結果は、タンパク尿の効果的な治療及び実質的な軽減を維持しながら、最大３年の治療後でさえも、長期安全性及び忍容性、ｅＧＦＲに最小の影響を示す。

【0192】

本発明の範囲は、例えば、本発明の様々な態様を示すために提供される、特定の開示される実施形態に限定されることを意図するものではない。本記載の組成物及び方法に対する様々な変更は、本明細書の記載及び教示から明らかになるであろう。そのような変形は、本開示の真の範囲及び趣旨から逸脱することなく行われ得るとともに、本開示の範囲に含まれることが意図されている。

【図1】

【図2A】

【図2B】

【図2C】

【図2D】

【図2E】

【図2F】

【図2G】

【図2H】

【図2I】

【図2J】

【図2K】

【図3】

【図4-1】

【図4-2】

【図5】

【図6】

【図7】

【国際調査報告】