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(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-01-31
(54)【発明の名称】ＬＯＵ０６４を使用した治療の方法
(51)【国際特許分類】
A61K 45/00 20060101AFI20240124BHJP
A61K 39/35 20060101ALI20240124BHJP
A61P 37/08 20060101ALI20240124BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240124BHJP
A61K 31/505 20060101ALI20240124BHJP
【ＦＩ】
A61K45/00
A61K39/35
A61P37/08
A61P43/00 121
A61K31/505
【審査請求】有
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023539015
(86)(22)【出願日】2022-12-12
(85)【翻訳文提出日】2023-06-23
(86)【国際出願番号】 IB2022062046
(87)【国際公開番号】W WO2023111802
(87)【国際公開日】2023-06-22
(31)【優先権主張番号】63/289,273
(32)【優先日】2021-12-14
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/290,916
(32)【優先日】2021-12-17
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/304,086
(32)【優先日】2022-01-28
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/369,017
(32)【優先日】2022-07-21
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
【公序良俗違反の表示】
（特許庁注：以下のものは登録商標）
１．ＴＷＥＥＮ
(71)【出願人】
【識別番号】504389991
【氏名又は名称】ノバルティス アーゲー
(74)【代理人】
【識別番号】100092783
【弁理士】
【氏名又は名称】小林 浩
(74)【代理人】
【識別番号】100095360
【弁理士】
【氏名又は名称】片山 英二
(74)【代理人】
【識別番号】100120134
【弁理士】
【氏名又は名称】大森 規雄
(74)【代理人】
【識別番号】100131990
【弁理士】
【氏名又は名称】大野 玲恵
(72)【発明者】
【氏名】バッタチャリア，スヴィック
(72)【発明者】
【氏名】ビエス，ブルーノ
(72)【発明者】
【氏名】チェンニ，ブルーノ
(72)【発明者】
【氏名】グラハム，ゴードン
(72)【発明者】
【氏名】ユーンケ，マイケル
(72)【発明者】
【氏名】リグエロス－セイラン，モニカ
(72)【発明者】
【氏名】ミハイルスク，ダン ドラゴス
(72)【発明者】
【氏名】スチュアート，ブリジット ダニエル
(72)【発明者】
【氏名】シン，キム－ヒエン
(72)【発明者】
【氏名】ラップ，カリン
【テーマコード（参考）】
4C084
4C085
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C084AA19
4C084MA02
4C084NA05
4C084ZB13
4C084ZC75
4C085AA03
4C085BB11
4C085CC21
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC42
4C086GA15
4C086MA01
4C086MA04
4C086NA14
4C086ZB13
4C086ZC75
(57)【要約】
本開示は、１つ以上のアレルゲン、好ましくは、食物アレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を、このような疾患又は病態を有する被験体において治療及び／又は予防する方法であって、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４を投与することを含む方法に関する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物、又は毒アレルギー反応の治療又は予防、例えばアナフィラキシー反応の治療又は予防に使用するための、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項2】
１つ以上のアレルゲンが、食物アレルゲンを含むか又は食物アレルゲンである、請求項１に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項3】
食物アレルゲンが、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、卵、大豆、ゴマ、魚介類、特に、ピーナッツから選択される、請求項２に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項4】
ＬＯＵ０６４が、毎日約２０ｍｇ～約２００ｍｇの用量で投与される、請求項１、２又は３のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項5】
ＬＯＵ０６４が、１日２回約１０ｍｇ～１日２回約１００ｍｇの用量で投与される、請求項４に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項6】
ＬＯＵ０６４が、１日２回約１０ｍｇの用量で投与される、請求項５に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項7】
ＬＯＵ０６４が、１日２回約２５ｍｇの用量で投与される、請求項５に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項8】
ＬＯＵ０６４が、１日２回約１００ｍｇの用量で投与される、請求項５に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項9】
ＬＯＵ０６４が、短期間、例えば６か月未満、好ましくは、３か月未満又は１か月未満にわたって投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項10】
ＬＯＵ０６４が、最大で１８週間の間、例えば４、１０、１２、１６又は１８週間の間に投与される、請求項９に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項11】
ＬＯＵ０６４が、長期間、例えば６か月超、好ましくは、１年又は１年超にわたって投与される、請求項１～８のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項12】
ＬＯＵ０６４が、単独療法として投与される、請求項１０又は１１に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項13】
ＬＯＵ０６４が、ＣＹＰ３Ａの強力な阻害剤、例えばＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害剤と同時に投与されない、請求項１～１２のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項14】
ＬＯＵ０６４が、治療剤と共投与される、請求項１～１１又は１３のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項15】
ＬＯＵ０６４が、コルチコステロイド及び／又は免疫抑制薬（例えば吸入コルチコステロイド）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（ＬＴＲＡ）、短時間作用性βアゴニスト（ＳＡＢＡ）又は長時間作用性βアゴニスト（ＬＡＢＡ）と共投与される、請求項１４に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項16】
ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法（ＯＩＴ）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、好ましくは、ＯＩＴと共投与される、請求項１～１１又は１３のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項17】
ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法（ＯＩＴ）、）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、好ましくは、ＯＩＴの補助剤である、請求項１６に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項18】
前記経口免疫療法が、ピーナッツタンパク質（例えばＰａｌｆｏｒｚｉａ（商標））である、請求項１６又は１７に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項19】
ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法の投与の少なくとも２日（例えば少なくとも２～１４日）前に開始して投与される、請求項１６～１８のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項20】
前記ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４が、前記免疫療法治療の漸増期中に投与される、請求項１９に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項21】
前記方法が、ＩｇＥ誘導アレルギー反応の予防である、請求項１～２０のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項22】
任意のアレルゲン（例えば食物アレルゲン）への偶発的曝露後のアナフィラキシーを予防するための、請求項１～２１のいずれか一項に記載の使用のための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項23】
ＬＯＵ０６４が、治療の最小で２日後（例えば２～１４日後、好ましくは、２～７日後）に最大の予防を達成する、請求項２１又は２２に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項24】
前記患者が、以下の基準：（ｅ）男性及び女性患者、６歳以上（例えば６～１１歳、１２～１７歳又は１８～５５歳）；
（ｆ）ピーナッツ、堅果、小麦、卵、牛乳、大豆、魚介類を含むがこれらに限定されない食物に対するアレルギーの確認された病歴；
（ｇ）陽性アレルゲン特異的ＩｇＥ（例えば、スクリーニング時にピーナッツｓＩｇＥ≧６のｋＵＡ／Ｌ）；及び
（ｈ）患者がアレルギーを有するアレルゲンに対して皮膚プリックテストが陽性（例えば、陰性対照と比較して、平均直径（最長直径及び中点直交直径）≧４ｍｍとして定義される）
のうちの１つ以上に従って選択される、請求項１～２３のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項25】
前記患者が、成人患者（１８歳以上）又は思春期の青年（１２～１７歳）である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項26】
前記患者が、２～１１歳、例えば２～５歳又は６～１１歳の小児である、請求項１～２４のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項27】
以下のうちの少なくとも１つに該当する：ＬＯＵ０６４による治療の最大で４週間後（例えば１週間後、又は２週間後、又は３週間後又は４週間後）、
ｄ．治療された患者の少なくとも９０％が、６００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｅ．治療された患者の少なくとも９０％が、１０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｆ．治療された患者の少なくとも８０％が、３０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、請求項１～２６のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項28】
前記患者が、０．４５～０．５の、合計ドメインスコアＦＡＱＬＱのベースラインからの減少を達成する、請求項１～２７のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項29】
前記患者が、合計ドメインスコアＦＡＩＭのベースラインからの減少を達成する、請求項１～２８のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項30】
６００ｍｇのアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）の二重盲検プラセボ対照食物負荷における、治療患者及び非治療患者の間の奏効率の実測差が、３５％より優れており、ここで、前記奏効率が、６００ｍｇの経口食物負荷に対する軽度の応答以下であると定義される、請求項１～２９のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項31】
治療の１２週目まで又は２４週目までに、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、及びリパーゼのレベルが、治療の開始時のベースラインレベルと比較して、１０％を超えて変化しない、請求項１～３０のいずれか一項に記載の使用のための、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項32】
ＬＯＵ０６４が、ＬＯＵ０６４のナノサイズ粒子を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３１のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項33】
ＬＯＵ０６４が、ＰＣＳによって測定した際の約５０ｎｍ～約７５０ｎｍの平均粒度を有するＬＯＵ０６４のナノサイズ粒子を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３２のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項34】
ＬＯＵ０６４が、約２：１の重量比でＬＯＵ０６４及びバインダーを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３３のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項35】
ＬＯＵ０６４が、約２：１：０．０８の重量比でＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３４のいずれか一項に記載の使用のためのそのＬＯＵ０６４。
【請求項36】
ＬＯＵ０６４が、約１：１の重量比でＬＯＵ０６４及びバインダーを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３３のいずれか一項に記載の使用のためのそのＬＯＵ０６４。
【請求項37】
ＬＯＵ０６４が、約１：１：０．０５の重量比でＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３４又は３６のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４。
【請求項38】
ＬＯＵ０６４が、ＬＯＵ０６４、バインダーとしてのポリビニルピロリドン－酢酸ビニルコポリマー及び界面活性剤としてのラウリル硫酸ナトリウムを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、請求項１～３７のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４。
【請求項39】
ＬＯＵ０６４が、約２５℃の温度及び１．５４０５ÅのＸ線波長、λで測定されるとき、７．８±０．２°２θ、９．２±０．２°２θ、１２．０±０．２°２θ、１３．６±０．２°２θ、１５．６±０．２°２θ、１６．０±０．２°２θ、１７．８±０．２°２θ、１８．３±０．２°２θ、１８．７±０．２°２θ、１９．２±０．２°２θ、１９．９±０．２°２θ、２２．１±０．２°２θ、２３．４±０．２°２θ、２３．９±０．２°２θ、２４．８±０．２°２θ、２５．２±０．２°２θ、２５．５±０．２°２θ、２７．２±０．２°２θ、及び２９．６±０．２°２θからなる群から選択される２θに関して１つ以上の代表的なピークを含むＸ線粉末回折パターンによって特徴付けられる無水遊離塩基の結晶形態である、請求項１～３８のいずれか一項に記載の使用のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項40】
ＩｇＥ誘導アレルギー反応の治療又は予防に使用するための薬剤の製造のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩であって、好ましくは、ＬＯＵ０６４が、１日２回約１０ｍｇ～１日２回約１００ｍｇの用量で投与される、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩。
【請求項41】
ＩｇＥ誘導アレルギー反応の治療又は予防のためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩の使用であって、好ましくは、前記ＬＯＵ０６４が、１日２回約１０ｍｇ～１日２回約１００ｍｇの用量で投与される、使用。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応の有効な抑制に使用するための、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩若しくは多形に関する。
【背景技術】
【0002】
食物アレルギーは、あらゆる国のあらゆる年齢の何百万もの人々を侵し、急増している罹患率は、それが新しく出現した公衆衛生上の優先事項であることを示唆する（Ｗａｒｒｅｎ ｅｔ ａｌ ２０２０）。食物アレルギーの根本的な原因は、アレルゲン特異的ＩｇＥがアレルゲン曝露に応答して合成され、肥満細胞及び好塩基球の表面膜においてそのＦｃ領域を介してＩｇＥに対する高親和性受容体（ＦｃεＲＩ受容体）に結合する免疫機構に関与する。（Ｓａｍｐｓｏｎ ｅｔ ａｌ ２００６）。食物アレルギーは、世界中の人々のほぼ１０％を侵し、一貫した疫学的傾向が、北米、欧州、アジア及びオーストラリアにわたって観察されており；最も一般的なアレルゲンは、ピーナッツ、堅果、海産物、卵、牛乳、小麦、大豆及び種子類である（Ｗａｒｒｅｎ ｅｔ ａｌ ２０２０，Ｓｉｃｈｅｒｅｒ ａｎｄ Ｓａｍｐｓｏｎ ２０１７）。ピーナッツ、堅果及び海産物に対するアレルギーは、通常、生涯にわたる（Ｊｏｎｅｓ ａｎｄ Ｂｕｒｋｓ ２０１７，Ｓｉｃｈｅｒｅｒ ａｎｄ Ｓａｍｐｓｏｎ ２０１７）。さらに、成人を含む食物アレルギー患者の３分の１～２分の１が、２種以上の食物にアレルギーがある可能性が高い（Ｇｕｐｔａ ｅｔ ａｌ ２０１１，Ｇｕｐｔａ ｅｔ ａｌ ２０１９）。アナフィラキシーは、場合により、食物、薬物、又は刺咬昆虫毒などの物質に対する生命に関わる全身性アレルギー反応である。免疫療法を用いたこれらの物質に対するアレルギーを軽減する取り組みにもかかわらず、アナフィラキシーの罹患率は増加している（Ｌｉｅｂｅｒｍａｎ Ｐ．ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２００６；９７（５）：５９６－６０２）。残念ながら、それは、即座の包括的医療処置を施したとしても、致死性であることが多い（Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０２０；１４５（４）：１０８２）。ＩｇＥ介在性アナフィラキシーを予防することができる公知の治療法はない。
【0003】
ＩｇＥ経路は、食物アレルギー、薬物アレルギー、アレルギー性鼻炎、喘息、及び慢性じんましんを含むほとんどのアレルギー性疾患の発病に中心的な役割を果たす。アレルゲン特異的ＩｇＥが、アレルゲンに結合して、肥満細胞及び好塩基球の表面における高親和性受容体（ＦｃεＲＩ）を架橋するとき、活性化されたシグナル伝達カスケードが、兆候及び症状を誘発するのに関与する、ヒスタミン、プロスタグランジン、ロイコトリエン、及びサイトカインを含む多くのアレルギーメディエーターの放出を引き起こす。
【0004】
これまで、アレルギー性疾患の治療は、特定のメディエーターの遮断（例えば、抗ヒスタミン剤又はロイコトリエン受容体アンタゴニストによる）及び／又はコルチコステロイドによる広い免疫抑制に大きく依存していた。
【0005】
現在、アナフィラキシーを予防することが可能な有効な治療はなく、治療の中心は、トリガーの回避による予防である。しかしながら、特に、食物アレルギーの場合、厳密な回避が、必ずしも可能であるわけではないため、標準治療は、兆候及び症状の早期発見、並びに反応が発生した後の筋肉内注射されるエピネフリンの使用からなる。対照的に、患者が、皮膚試験、アレルゲン免疫療法（ＩＴ）、及び薬物脱感作（全ての手順は、重篤な全身性反応のリスクを有する）の際などに、アレルゲンに意図的に曝される状況がある。例えば食物アレルゲン又は薬剤などのアレルゲンに対する脱感作は、これらが、典型的に、生命に関わる可能性のある反応のリスクのため患者の入院を必要とするため、高コストで労力を要する。
【0006】
経口免疫療法（ＯＩＴ）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、及び抗ＩｇＥモノクローナル抗体（オマリズマブ）と組み合わされたＯＩＴなどの、食物アレルギーについて試験された、いくつかの免疫療法が存在している。しかしながら、有効性及び安全性は、ピーナッツアレルギーについての１つの第ＩＩＩ相試験において実証されたに過ぎない。さらに、オマリズマブ－ＯＩＴ組合せの３つのランダム化比較試験があったのみであり、これらは、低出力の単施設試験であるため；これらの試験において、エビデンスレベルは低かった。長期の追跡観察を含む試験は稀であり、したがって、臨床的忍容性は、明確でなく、依然として不明である（Ｓｈｏｉｃｈｉｒｏ Ｔ ｅｔ ａｌ．ＥＭＪ．２０１９；４［４］：６３－７０）。
【0007】
現在、ピーナッツアレルギー患者のための承認された経口免疫療法（ＯＩＴ）（Ｐａｌｆｏｒｚｉａ（商標））は１つのみである。
【0008】
ＢＴＫは、ヒト肥満細胞及び好塩基球におけるＦｃεＲＩを介したシグナル伝達のために不可欠なキナーゼである。それはまた、Ｂ細胞成熟のために重要であるため、ＢＴＫは、Ｂ細胞悪性腫瘍の治療のために薬理学的に標的とされている。米国において現在３つのＦＤＡに承認されたＢＴＫ阻害剤（ＢＴＫｉｓ）がある。イブルチニブ（商標名Ｉｍｂｒｕｖｉｃａ（登録商標）；Ｐｈａｒｍａｃｙｃｌｉｃｓ、及びＡｂｂＶｉｅ）、アカラブルチニブ（Ｃａｌｑｕｅｎｃｅ（登録商標）；Ａｃｅｒｔａ及びＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、及びザヌブルチニブ（Ｂｒｕｋｉｎｓａ（登録商標）；ＢｅｉＧｅｎｅ）は全て、ＢＴＫの経口用共有結合小分子阻害剤である。
【0009】
さらに、いくつかのＢＴＫ阻害剤（ＢＴＫｉｓ）は、関節リウマチ（ＲＡ）、多発性硬化症（ＭＳ）、及び全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）などの自己免疫疾患の治療のための臨床試験中である。例えば、アカラブルチニブ及びザヌブルチニブ並びに新規な化合物ＯＮＯ－４０５９（チラブルチニブ）、ＨＭ７１２２４（ポセルチニブ）及びＡＢＢＶ－１０５（ウパダシチニブ）は、Ｂ細胞悪性腫瘍並びに／又はＲＡ、シェーグレン症候群（ＳｊＳ）及びＳＬＥなどの自己免疫疾患におけるそれらの有効性について現在試験されている。さらに、エボブルチニブ、トレブルチニブ及びフェネブルチニブは、ＭＳ患者において第ＩＩＩ相試験に入っており、オレラブルチニブは、第ＩＩ相試験において試験され、ＢＩＩＢ０９１は、ＭＳの治療における有効性について第Ｉ相試験において試験された。
【0010】
試験はまた、アレルギー患者における空気アレルゲン及び食物に対する皮膚プリックテスト反応性を低減するか又はなくすイブルチニブの能力（Ｄｉｓｐｅｎｚａ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１８；１４１（５）：１９１４－１９１６．ｅ７）及び皮膚テストが、イブルチニブ停止の１週間後にベースラインに戻ったことを実証し、これは、有効性の短い持続時間を示唆している（２０２１）。しかしながら、皮膚プリックテストにおいて見られる阻害作用が、皮膚以外の器官における阻害作用につながるかどうかは不明である。肥満細胞が存在する様々な組織へのＢＴＫｉｓの浸透度は不明である。イブルチニブが、循環好塩基球のＩｇＥ介在性活性化を防止する際に急速な有効性を有することが実証されているが、ＢＴＫｉｓが、肺、皮膚、及び消化管などの複数の器官における組織常在肥満細胞のＩｇＥ介在性活性化を十分に阻害し得るかどうかは不明である。
【0011】
ＢＴＫ阻害剤が、植物に対するアレルギー反応の予防及び／又は治療に使用され得るという示唆にもかかわらず、ＢＴＫ阻害剤は、臨床的に関連するアレルギー反応を抑制し、及び／又はヒトにおけるアナフィラキシーを予防することがまだ示されていない。アカラブルチニブが、現在、ピーナッツアレルギーの成人におけるピーナッツアレルゲンに対するアレルギー反応の予防において第ＩＩ相試験に入っているが、食物アレルギーに関連するＢＴＫ阻害剤の臨床的有効性データは、これまで報告されていない。
【0012】
さらに、いくつかのより以前に開発されたＢＴＫ阻害剤（例えばアカラブルチニブ、イブルチニブ）の選択性の欠如のため、それらのＢＴＫ阻害剤は、特に、長期／慢性及び安全な使用を必要とする適応症の治療のために、及び／又は小児若しくは思春期の青年集団において、非悪性適応症に好適でないことがある。現在承認されているＢＴＫ阻害剤の最も一般的な副作用としては、吐き気、下痢、発疹、感染症、血球減少、出血及び不整脈が挙げられる。特に、ファースト・イン・クラスの阻害剤であるイブルチニブの長期の毒性プロファイルは、十分に特徴付けられ、不整脈、出血、感染症、下痢、関節痛、及び高血圧症の臨床的に有意な発生を含む。米国食品医薬品局（ＵＳ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）からの承認を得る初期の第２世代ＢＴＫｉであるアカラブルチニブは、ＢＴＫに対する改善されたキナーゼ選択性を実証するが、感染症、頭痛、及び下痢を含む一般的に観察される有害反応を伴う（Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ Ａｍ Ｓｏｃ Ｈｅｍａｔｏｌ Ｅｄｕｃ Ｐｒｏｇｒａｍ．２０２０ Ｄｅｃ ４；２０２０（１）：３３６－３４５）。
【0013】
長期の安全性データは、現在開発中のＢＴＫ阻害剤について入手可能でないが、フェネブルチニブについての入手可能な安全性データは、ＢＴＫ阻害剤が直面し得る最大の障害が、慢性使用中の副作用が許容可能であるかどうかであることを示唆し得る。例えば、フェネブルチニブの第ＩＩａ相試験で顕著な主要な事象は、高用量治療アームにおける被験体の８．３％及び６．３％におけるＡＬＴ及び／又はＡＳＴの一時的なグレード３の増加であった。一部のＢＴＫｉｓについて既に観察された副作用のいくつかは、特に、長期の投与を必要とし得る場合、非悪性適応症を治療又は予防するためのそれらの使用を制限し得る。さらに、ＦＤＡに承認されたＢＴＫ阻害剤のいずれも、小児及び思春期の青年において承認されていない。したがって、小児における安全性データが入手可能になるまで、ＢＴＫ阻害剤が、小児におけるＩｇＥ誘導アレルギー反応の治療又は予防における使用のための実行可能な選択肢であるかどうかは不明である。
【0014】
上昇する罹患率（複数の食物に対するアレルギーを含む）のため、現在限られている治療選択肢、生命に関わる可能性のある結果、防御を与えるための単独での食物回避ができないこと、及び多くの場合、生涯にわたる疾病の負担のため、食物アレルギーに対する新規な安全な治療法を開発する大きな医療ニーズがある。
【図面の簡単な説明】
【0015】
【図1】マウスにおける受動皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）：ＬＯＵ０６４は、皮膚浮腫を阻害する。
【図2】投与の２．５時間後のＢＡＬＢ／ｃマウスの脾臓におけるＢＴＫ占有率。
【図3】マウス皮膚における逆受身アルサス（ＲＰＡ）反応：ＬＯＵ０６４は、皮膚腫脹を阻害する。
【図4】投与の５時間後のＣ５７Ｂ１６マウスの脾臓におけるＢＴＫ占有率。
【図5】皮膚腫脹に対するＬＯＵ０６４の時間依存性薬理作用。
【図6】３０ｍｇ／ｋｇのＬＯＵ０６４の単回投与後の皮膚腫脹の薬理学的阻害に対する脾臓及び肺における時間依存性ＢＴＫ占有率の比較。
【図7】１％ ｗ／ｖのＯＶＡ又は生理食塩水（エアロゾル、２１～２４日目）並びに１６時間の時点でＰＢＳ及び１６時間の時点でＰＢＳ（髄腔内（ｉ．ｔ．）群１及び２）又はポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ １００μｇ／動物、髄腔内（ｉ．ｔ．））を負荷された感作マウスにおける、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／Ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ））による処置、又はビヒクル（１０ｍＬ／Ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））処置の後の、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中の細胞の総数に対する影響。ＢＡＬＦを、ＯＶＡ負荷の２４時間後に収集した。
【図8】１％ ｗ／ｖのＯＶＡ又は生理食塩水（エアロゾル、２１～２４日目）並びに１６時間の時点でＰＢＳ及び１６時間の時点でＰＢＳ（髄腔内（ｉ．ｔ．）群１及び２）又はポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ １００μｇ／動物、髄腔内（ｉ．ｔ．））を負荷された感作マウスにおける、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／Ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ））による処置、又はビヒクル（１０ｍＬ／Ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））処置の後の、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中の好酸球の数に対する影響。ＢＡＬＦを、ＯＶＡ負荷の２４時間後に収集した。
【図9】１％ ｗ／ｖのＯＶＡ又は生理食塩水（エアロゾル、２１～２４日目）並びに１６時間の時点でＰＢＳ及び１６時間の時点でＰＢＳ（髄腔内（ｉ．ｔ．）群１及び２）又はポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ １００μｇ／動物、髄腔内（ｉ．ｔ．））を負荷された感作マウスにおける、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）による処置、又はビヒクル（１０ｍＬ／Ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））処置の後の、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中の好中球の数に対する影響。ＢＡＬＦを、ＯＶＡ負荷の２４時間後に収集した。
【図10】１％ ｗ／ｖのＯＶＡ又は生理食塩水（エアロゾル、２１～２４日目）並びに１６時間の時点でＰＢＳ及び１６時間の時点でＰＢＳ（髄腔内（ｉ．ｔ．）群１及び２）又はポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ １００μｇ／動物、髄腔内（ｉ．ｔ．））を負荷された感作マウスにおける、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）による処置、又はビヒクル（１０ｍＬ／Ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））処置の後の、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のマクロファージの数に対する影響。ＢＡＬＦを、ＯＶＡ負荷の２４時間後に収集した。
【図11】１％ ｗ／ｖのＯＶＡ又は生理食塩水（エアロゾル、２１～２４日目）並びに１６時間の時点でＰＢＳ及び１６時間の時点でＰＢＳ（髄腔内（ｉ．ｔ．）群１及び２）又はポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ １００μｇ／動物、髄腔内（ｉ．ｔ．））を負荷された感作マウスにおける、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／Ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）による処置、又はビヒクル（１０ｍＬ／Ｋｇ、経口（ｐ．ｏ．）、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））処置の後の、気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）中のリンパ球の数に対する影響。ＢＡＬＦを、ＯＶＡ負荷の２４時間後に収集した。
【図12】ナノサイズＬＯＵ０６４の好ましい粒度分布。
【図13】定常状態における脾臓ＢＴＫ占有率のシミュレーション。
【図14】（Ａ）定常状態におけるＢＴＫ占有率の２４時間にわたるトラフ。点としての中央値予測及び９５％の予測区間を示す垂直線を示すグラフ。（Ｂ）定常状態におけるＢＴＫ占有率の２４時間にわたる平均。点としての中央値予測及び９５％の予測区間を示す垂直線を示すグラフ。
【発明の概要】
【0016】
本発明の根底にある課題は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物アレルギー又は毒アレルギー反応、特に、１つ以上のアレルゲン、例えば食物アレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応、より特に、例えば、ＩｇＥ誘導アナフィラキシー反応の安全で有効な治療又は安全で有効な予防を提供することである。特に、本発明の目的は、ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応、例えばアナフィラキシー反応の安全で有効な長期の治療又は予防を提供することである。
【0017】
したがって、本発明は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物、又は毒アレルギー反応、より特に、食物アレルギー反応の治療及び／又は予防に使用するための、ＢＴＫ阻害剤、例えば可逆的又は不可逆的ＢＴＫ阻害剤に関する。特に、本発明は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物又は毒アレルギー反応、より特に、食物アレルギー反応の治療及び／又は予防における長期使用（すなわち、慢性使用）のために安全で好適な選択的ＢＴＫ阻害剤に関する。本発明に特に有用なのは、ＢＭＸ、ＩＴＫ及びＴＸＫなどの他の構造的に類似したＴｅｃファミリーキナーゼに対して選択的であるＢＴＫ阻害剤である。より特に、本発明に有用なのは、ｔｅｃよりＢＴＫに対して選択的である（例えば、少なくとも１０倍、少なくとも２０倍、少なくとも３０倍のＢＴＫ／Ｔｅｃ選択性）ＢＴＫ阻害剤である。
【0018】
本発明の別の目的は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物、又は毒アレルギー反応、より特に、食物アレルギー反応の改善された治療及び／又は予防を提供することである。本発明の一態様は、例えば食物アレルゲンの１つ又は混合物によって誘発されるＩｇＥ誘導アナフィラキシーの改善された予防を提供することである。例えば、本発明の一目的は、他のＢＴＫ阻害剤（例えば、より選択的の低いＢＴＫ阻害剤）による治療より有効及び／又はより安全な、特に、アカラブルチニブ、又はイブルチニブによる治療より有効及び／又はより安全な治療である、ＩｇＥ誘導アレルギーの治療又は予防を提供することである。また、本発明の一目的は、抗ＩｇＥモノクローナル療法による治療より有効な、より安全な及び／又はより好都合な、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、特に、食物アレルギー反応の治療及び／又は予防を提供することである。特に、本発明の目的は、作用発現に８～１２週間かかる抗ＩｇＥモノクローナル療法と比較して、より速い作用発現（例えば、４週間未満、２週間未満又は１週間未満）を有する、ＩｇＥ誘導アレルギー反応の治療及び／又は予防を提供すること、並びに自宅でより好都合に投与され、医療機関の使用を必要としない治療法を提供することである。
【0019】
したがって、ＩｇＥ誘導アレルギー反応、例えば食物、薬物、又は毒アレルギー反応、例えばアナフィラキシー反応を予防又は治療する方法、より特に、１つ以上の食物アレルゲン（例えばピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、大豆、卵、ゴマ、魚介類又はそれらの混合物）に対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を予防又は治療する方法であって、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４を、それを必要としている被験体に投与することを含む方法が、本明細書に開示される。
【0020】
本発明の別の態様は、１つ以上のアレルゲン（例えば、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、大豆、卵、ゴマ、魚介類又はそれらの混合物などの食物アレルゲン）に対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を治療又は予防するため、好ましくは、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を予防するための、不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩に関する。
【0021】
本発明のさらなる主題は、上述される治療に使用するための薬剤の製造のための方法である。
【0022】
以下の実施形態Ｅ１～Ｅ３９に要約される、本発明のさらなる態様、有利な特徴及び好ましい実施形態は、それぞれ単独で又は組み合わせて、本発明の目的を解決することに役立つ：
【0023】
Ｅ１．必要としている被験体における、１つ以上のアレルゲン（例えば薬物、毒又は食物アレルゲン）に対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を治療又は予防する方法であって、治療的に有効な用量の選択的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４を、患者に投与することを含む方法。
【0024】
Ｅ２．１つ以上のアレルゲンが、食物アレルゲンを含むか又は食物アレルゲンである、Ｅ１に記載の方法。
【0025】
Ｅ３．食物アレルゲンが、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、卵、大豆、ゴマ、魚介類、特に、ピーナッツから選択される、Ｅ２に記載の方法。
【0026】
Ｅ４．ＬＯＵ０６４の治療的に有効な用量が、毎日約２０ｍｇ～約２００ｍｇである、Ｅ１、Ｅ２又はＥ３に記載の方法。
【0027】
Ｅ５．ＬＯＵ０６４の治療的に有効な用量が、１日２回約１０ｍｇ～１日２回約１００ｍｇである、Ｅ４に記載の方法。
【0028】
Ｅ６．ＬＯＵ０６４の治療的に有効な用量が、１日２回約１０ｍｇである、Ｅ５に記載の方法。
【0029】
Ｅ７．ＬＯＵ０６４の治療的に有効な用量が、１日２回約２５ｍｇである、Ｅ５に記載の方法。
【0030】
Ｅ８．ＬＯＵ０６４の治療的に有効な用量が、１日２回約１００ｍｇである、Ｅ５に記載の方法。
【0031】
Ｅ９．ＬＯＵ０６４が、短期間、例えば６か月未満、好ましくは、３か月未満又は１か月未満にわたって投与される、Ｅ１～Ｅ８のいずれか１つに記載の方法。
【0032】
Ｅ１０．ＬＯＵ０６４が、最大で１８週間の間、例えば４、１０、１２、１６又は１８週間の間に投与される、Ｅ９に記載の方法。
【0033】
Ｅ１１．ＬＯＵ０６４が、長期間、例えば６か月超、例えば１年、好ましくは、１年超にわたって投与される、Ｅ１～Ｅ８のいずれか１つに記載の方法。
【0034】
Ｅ１２．ＬＯＵ０６４が、単独療法として投与される、Ｅ１～Ｅ１１のいずれか１つに記載の方法。
【0035】
Ｅ１３．ＬＯＵ０６４が、ＣＹＰ３Ａの強力な阻害剤、例えばＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害剤と同時に投与されない、Ｅ１～Ｅ１２のいずれか１つに記載の方法。
【0036】
Ｅ１４．ＬＯＵ０６４が、治療剤と共投与される、Ｅ１～Ｅ１１及びＥ１３のいずれか１つに記載の方法。
【0037】
Ｅ１５．ＬＯＵ０６４が、コルチコステロイド及び／又は免疫抑制薬（例えば吸入コルチコステロイド）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（ＬＴＲＡ）、短時間作用性βアゴニスト（ＳＡＢＡ）又は長時間作用性βアゴニスト（ＬＡＢＡ）と共投与される、Ｅ１４に記載の方法。
【0038】
Ｅ１６．ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法（ＯＩＴ）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、好ましくは、ＯＩＴと共投与される、請求項Ｅ１～Ｅ１１及びＥ１３のいずれか１つに記載の方法。
【0039】
Ｅ１７．ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法（ＯＩＴ）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、好ましくは、ＯＩＴの補助剤である、Ｅ１６に記載の方法。
【0040】
Ｅ１８．経口免疫療法が、ピーナッツタンパク質（例えばＰａｌｆｏｒｚｉａ）である、Ｅ１６又はＥ１７に記載の方法。
【0041】
Ｅ１９．ＬＯＵ０６４が、経口免疫療法の投与の少なくとも２日（例えば少なくとも２～１４日）前に開始して投与される、Ｅ１６～Ｅ１８のいずれか１つに記載の方法。
【0042】
Ｅ２０．ＬＯＵ０６４が、免疫療法治療の漸増期中に投与される、Ｅ１９に記載の方法。
【0043】
Ｅ２１．方法が、ＩｇＥ誘導アレルギー反応の予防である、Ｅ１～Ｅ２０のいずれか１つに記載の方法。
【0044】
Ｅ２２．任意のアレルゲン又はそれらの混合物（例えば食物アレルゲン）への偶発的曝露後のアナフィラキシーを予防するための、Ｅ１～Ｅ２１のいずれか１つに記載の方法。
【0045】
Ｅ２３．ＬＯＵ０６４が、治療の最小で２日後（例えば２～１４日後、好ましくは、２～７日後）に最大の予防を達成する、Ｅ２１又はＥ２２に記載の方法。
【0046】
Ｅ２４．患者が、以下の基準：
（ａ）男性及び女性患者、２歳以上（例えば２～５歳、又は６～１１歳、１２～１７歳又は１８～５５歳）；
（ｂ）ピーナッツ、堅果、小麦、卵、牛乳、大豆、魚介類を含むがこれらに限定されない食物に対するアレルギーの確認された病歴；
（ｃ）陽性アレルゲン特異的ＩｇＥ（例えば、スクリーニング時にピーナッツｓＩｇＥ≧６のｋＵＡ／Ｌ）；及び
（ｄ）患者がアレルギーを有するアレルゲンに対して皮膚プリックテストが陽性（例えば、陰性対照と比較して、平均直径（最長直径及び中点直交直径）≧４ｍｍの膨疹として定義される）
のうちの１つ以上に従って選択される、Ｅ１～Ｅ２３のいずれか１つに記載の方法。
（ａ）男性及び女性患者、２歳以上（例えば２～５歳、又は６～１１歳、１２～１７歳又は１８～５５歳）；
（ｂ）ピーナッツ、堅果、小麦、卵、牛乳、大豆、魚介類を含むがこれらに限定されない食物に対するアレルギーの確認された病歴；
（ｃ）陽性アレルゲン特異的ＩｇＥ（例えば、スクリーニング時にピーナッツｓＩｇＥ≧６のｋＵＡ／Ｌ）；及び
（ｄ）患者がアレルギーを有するアレルゲンに対して皮膚プリックテストが陽性（例えば、陰性対照と比較して、平均直径（最長直径及び中点直交直径）≧４ｍｍの膨疹として定義される）
のうちの１つ以上に従って選択される、Ｅ１～Ｅ２３のいずれか１つに記載の方法。
【0047】
Ｅ２５．患者が、成人患者（１８歳以上）又は思春期の青年（１２～１７歳）である、Ｅ１～Ｅ２４のいずれかに記載の方法。
【0048】
Ｅ２６．患者が、２～１１歳、例えば２～５歳又は６～１１歳の小児である、Ｅ１～Ｅ２４のいずれかに記載の方法。
【0049】
Ｅ２７．以下のうちの少なくとも１つに該当する：
ＬＯＵ０６４による治療の最大で４週間後（例えば１週間後、又は２週間後、又は３週間後又は４週間後）、
ａ．治療された患者の少なくとも９０％が、６００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｂ．治療された患者の少なくとも９０％が、１０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｃ．治療された患者の少なくとも８０％が、３０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、Ｅ１～Ｅ２６のいずれか１つに記載の方法。
ＬＯＵ０６４による治療の最大で４週間後（例えば１週間後、又は２週間後、又は３週間後又は４週間後）、
ａ．治療された患者の少なくとも９０％が、６００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｂ．治療された患者の少なくとも９０％が、１０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
ｃ．治療された患者の少なくとも８０％が、３０００ｍｇのピーナッツタンパク質の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、Ｅ１～Ｅ２６のいずれか１つに記載の方法。
【0050】
Ｅ２８．患者が、０．４５～０．５の、合計ドメインスコアＦＡＱＬＱのベースラインからの減少を達成する、Ｅ１～Ｅ２７のいずれか１つに記載の方法。
【0051】
Ｅ２９．患者が、合計ドメインスコアＦＡＩＭのベースラインからの減少を達成する、Ｅ１～Ｅ２８のいずれか１つに記載の方法。
【0052】
Ｅ３０．６００ｍｇのアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）の二重盲検プラセボ対照食物負荷における、治療患者及び非治療患者の間の奏効率の実測差が、３５％より優れており、ここで、奏効率が、６００ｍｇの経口食物負荷に対する軽度の応答以下であると定義される、Ｅ１～Ｅ２９のいずれか１つに記載の方法。
【0053】
Ｅ３１．治療の１２週目まで又は２４週目までに、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、及びリパーゼのレベルが、治療の開始時のベースラインレベルと比較して、１０％を超えて変化しない、Ｅ１～Ｅ３０のいずれか１つに記載の方法。
【0054】
Ｅ３２．ＬＯＵ０６４が、ＬＯＵ０６４のナノサイズ粒子を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３１のいずれか１つに記載の方法。
【0055】
Ｅ３３．ＬＯＵ０６４が、ＰＣＳによって測定した際の約５０ｎｍ～約７５０ｎｍの平均粒度を有するＬＯＵ０６４のナノサイズ粒子を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３２のいずれか１つに記載の方法。
【0056】
Ｅ３４．ＬＯＵ０６４が、約２：１の重量比でＬＯＵ０６４及びバインダーを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３３のいずれか１つに記載の方法。
【0057】
Ｅ３５．ＬＯＵ０６４が、約２：１：０．０８の重量比でＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３４のいずれか１つに記載の方法。
【0058】
Ｅ３６．ＬＯＵ０６４が、約１：１の重量比でＬＯＵ０６４及びバインダーを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３３のいずれか１つに記載の方法。
【0059】
Ｅ３７．ＬＯＵ０６４が、約１：１：０．０５の重量比でＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３３及びＥ３６のいずれかに記載の方法。
【0060】
Ｅ３８．ＬＯＵ０６４が、ＬＯＵ０６４、バインダーとしてのポリビニルピロリドン－酢酸ビニルコポリマー及び界面活性剤としてのラウリル硫酸ナトリウムを含む好適な経口医薬製剤の形態で投与される、Ｅ１～Ｅ３７のいずれか１つに記載の方法。
【0061】
Ｅ３９．ＬＯＵ０６４が、約２５℃の温度及び１．５４０５ÅのＸ線波長、λで測定されるとき、７．８±０．２°２θ、９．２±０．２°２θ、１２．０±０．２°２θ、１３．６±０．２°２θ、１５．６±０．２°２θ、１６．０±０．２°２θ、１７．８±０．２°２θ、１８．３±０．２°２θ、１８．７±０．２°２θ、１９．２±０．２°２θ、１９．９±０．２°２θ、２２．１±０．２°２θ、２３．４±０．２°２θ、２３．９±０．２°２θ、２４．８±０．２°２θ、２５．２±０．２°２θ、２５．５±０．２°２θ、２７．２±０．２°２θ、及び２９．６±０．２°２θからなる群から選択される２θに関して１つ以上の代表的なピークを含むＸ線粉末回折パターンによって特徴付けられる無水遊離塩基の結晶形態である、Ｅ１～Ｅ３８のいずれかに記載の方法。
【発明を実施するための形態】
【0062】
定義
本明細書において使用される際、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）は、細胞質チロシンキナーゼ及びＴＥＣキナーゼファミリーのメンバーである。ＢＴＫは、Ｂ細胞、マクロファージ、肥満細胞／好塩基球及び血小板を含む、適応及び自然免疫系の選択された細胞において発現される。ＢＴＫは、Ｆｃε受容体（ＩｇＥの場合ＦｃεＲ１）及び活性化Ｆｃγ受容体（ＩｇＧの場合ＦｃγＲ）、並びにＢ細胞抗原受容体（ＢＣＲ）及びＢＴＫ阻害剤を介したシグナル伝達のために不可欠である。イブルチニブのようなＢＴＫ阻害剤は、Ｂ細胞悪性腫瘍の治療のために承認されている（Ｈｅｎｄｒｉｋｓ ｅｔ ａｌ ２０１４）。最近、ＢＴＫの阻害が、インビトロでの肥満細胞及び好塩基球活性化／脱顆粒の阻害並びにＩｇＥ介在性アレルギーを患う患者による皮膚プリックテストにおける膨疹サイズの減少をもたらすことが実証された（Ｓｍｉｌｊｋｏｖｉｃ ｅｔ ａｌ ２０１７；Ｒｅｇａｎ ｅｔ ａｌ ２０１７；Ｄｉｓｐｅｎｚａ ｅｔ ａｌ ２０１８）。したがって、ＢＴＫの阻害は、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、慢性じんましん、アトピー性皮膚炎、喘息、及び原発性シェーグレン症候群を含む様々な自己免疫及び慢性炎症性疾患を治療するための魅力的な治療コンセプトである（Ｔａｎ ｅｔ ａｌ ２０１３；Ｗｈａｎｇ ａｎｄ Ｃｈａｎｇ ２０１４）。ＢＴＫ阻害剤の例としては、フェネブルチニブなどの非共有結合性、可逆的ＢＴＫ阻害剤、並びにエボブルチニブ、トレブルチニブ、リルザブルチニブ、チラブルチニブ、ブラネブルチニブ、オレラブルチニブ及びレミブルチニブ（ＬＯＵ０６４）などの、ＢＴＫの非共有結合性、不可逆的阻害剤が挙げられる。
本明細書において使用される際、ブルトン型チロシンキナーゼ（ＢＴＫ）は、細胞質チロシンキナーゼ及びＴＥＣキナーゼファミリーのメンバーである。ＢＴＫは、Ｂ細胞、マクロファージ、肥満細胞／好塩基球及び血小板を含む、適応及び自然免疫系の選択された細胞において発現される。ＢＴＫは、Ｆｃε受容体（ＩｇＥの場合ＦｃεＲ１）及び活性化Ｆｃγ受容体（ＩｇＧの場合ＦｃγＲ）、並びにＢ細胞抗原受容体（ＢＣＲ）及びＢＴＫ阻害剤を介したシグナル伝達のために不可欠である。イブルチニブのようなＢＴＫ阻害剤は、Ｂ細胞悪性腫瘍の治療のために承認されている（Ｈｅｎｄｒｉｋｓ ｅｔ ａｌ ２０１４）。最近、ＢＴＫの阻害が、インビトロでの肥満細胞及び好塩基球活性化／脱顆粒の阻害並びにＩｇＥ介在性アレルギーを患う患者による皮膚プリックテストにおける膨疹サイズの減少をもたらすことが実証された（Ｓｍｉｌｊｋｏｖｉｃ ｅｔ ａｌ ２０１７；Ｒｅｇａｎ ｅｔ ａｌ ２０１７；Ｄｉｓｐｅｎｚａ ｅｔ ａｌ ２０１８）。したがって、ＢＴＫの阻害は、関節リウマチ、多発性硬化症、全身性エリテマトーデス、慢性じんましん、アトピー性皮膚炎、喘息、及び原発性シェーグレン症候群を含む様々な自己免疫及び慢性炎症性疾患を治療するための魅力的な治療コンセプトである（Ｔａｎ ｅｔ ａｌ ２０１３；Ｗｈａｎｇ ａｎｄ Ｃｈａｎｇ ２０１４）。ＢＴＫ阻害剤の例としては、フェネブルチニブなどの非共有結合性、可逆的ＢＴＫ阻害剤、並びにエボブルチニブ、トレブルチニブ、リルザブルチニブ、チラブルチニブ、ブラネブルチニブ、オレラブルチニブ及びレミブルチニブ（ＬＯＵ０６４）などの、ＢＴＫの非共有結合性、不可逆的阻害剤が挙げられる。
【0063】
本明細書において使用される際、ＩｇＥは、免疫グロブリンＥを指す。
【0064】
「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という用語は、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」並びに「からなる（ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ）」を包含し、例えば、Ｘを「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」組成物は、Ｘのみからなってもよく、又は何か追加のものを含んでいてもよく、例えば、Ｘ＋Ｙであってもよい。
【0065】
数値ｘに関連する「約」という用語は、例えば、＋／－１０％を意味する。数値範囲又は数値のリストの前に使用される場合、「約」という用語は、一連の各数値に適用され、例えば、「約１～５」という語句は、「約１～約５」として解釈されるべきであり、又は、例えば、「約１、２、３、４」という語句は、「約１、約２、約３、約４など」として解釈されるべきである。
【0066】
本明細書において用いられる際に「薬学的に許容される」という語句は、妥当なベネフィット／リスク比に見合い、妥当な医学的判断の範囲内で、過度の毒性、刺激、アレルギー反応、又は他の問題若しくは合併症を伴わずに、ヒト及び動物の組織と接触して使用するのに好適な、化合物、材料、組成物、及び／又は剤形を指す。
【0067】
「塩（ｓａｌｔ）」」又は「塩（ｓａｌｔｓ）」という用語は、本発明の化合物の酸付加塩を指す。「塩」としては、特に、「薬学的に許容される塩」が挙げられる。「薬学的に許容される塩」という用語は、本発明の化合物の生物学的効果及び特性を保持し、典型的に、生物学的に又は他の形で有害でない塩を指す。多くの場合、本発明の化合物は、それに対するアミノ基の存在によって酸塩を形成することが可能である。塩の例は、参照により本明細書に援用される国際公開第２０２０／２３４７７９号パンフレット及び国際公開第２０１５／０７９４１７号パンフレットに開示されるものである。
【0068】
本明細書において使用される際、「多形」という用語は、結晶を形成する分子、原子、及び／又はイオンの同じ化学組成を有するが空間配置の異なる結晶形態を指す。ＬＯＵ０６４の結晶形態は、参照により本明細書に援用される国際公開第２０２０／２３４７７９号パンフレットに開示される。
【0069】
化合物、例えば、ＬＯＵ０６４に関連する「投与する」という語句は、任意の経路、好ましくは、経口投与による、被験体へのその化合物の送達を指すのに使用される。
【0070】
本明細書において使用される際、本開示の化合物（すなわち、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形の「治療有効量又は用量」という用語は、被験体（対象の患者）の生物学的又は医学的応答、例えば、酵素若しくはタンパク質活性の低下若しくは阻害を誘発し、又は症状を改善し、病態を緩和し、疾患進行を減速するか若しくは遅延させ、又は疾患を予防するなどの、本開示の化合物の量を指す。化合物、医薬組成物、又はそれらの組合せの治療的に有効な投与量は、患者の種、体重、年齢、性別、及び個体の病態、治療される障害若しくは疾患又はそれらの重症度に依存する。投与の頻度は、使用される化合物及び治療又は予防される特定の病態に応じて変化する。
【0071】
本明細書において使用される際、「薬学的に許容される担体」という用語は、当業者に公知であるように（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，１８ｔｈ Ｅｄ．Ｍａｃｋ Ｐｒｉｎｔｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０，ｐｐ．１２８９－１３２９を参照）、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、界面活性剤、酸化防止剤、保存料（例えば、抗菌剤、抗真菌薬）、等張剤、吸収遅延剤、塩、保存料、薬物安定剤、バインダー、賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、甘味料、着香剤、染料など及びそれらの組合せを含む。任意の従来の担体が、有効成分と不適合でない限り、治療用又は医薬組成物におけるその使用が想定される。
【0072】
「治療」又は「治療する」という用語は、被験体（好ましくは、ヒト）又は被験体から単離された組織若しくは細胞株への、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４若しくはその薬学的に許容される塩、又はＬＯＵ０６４若しくはその薬学的に許容される塩を含む医薬組成物の適用又は投与として本明細書において定義され、ここで、被験体は、特定の疾患（例えば、ＩｇＥ誘導食物アレルギー）、疾患に関連する症状（例えば、ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応）、又は疾患を発症しやすい傾向（該当する場合）を有し、その目的は、疾患の１つ以上の症状を治癒させること（該当する場合）、重症度を軽減すること、そのような症状を緩和、改善すること、疾患を改善すること、疾患の任意の関連症状又は疾患を発症しやすい傾向を軽減若しくは改善することである。「治療」又は「治療する」という用語は、疾患を有する疑いのある被験体並びに病気であるか又は疾患若しくは病状を患っていると診断された被験体を治療することを含む。
【0073】
本明細書において使用される際、疾患又は障害（ＩｇＥ誘導食物アレルギー）の「予防」、「予防する」、「予防すること」という用語は、疾患若しくは障害の予防的処置；又は疾患若しくは障害の発現若しくは進行を遅延させ、及び若しくは抑制すること（例えばＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を抑制すること）を指す。「予防」という用語は、前記アレルゲンに対するアレルギー反応に対する、患者被験体におけるアレルゲンに対する感受性を低下させること（すなわち、経口食物負荷によって評価した際に、アレルゲンに対する感受性の閾値を増加させること）を指す。この用語は、例えば、ベースラインから最小で８０％（例えばベースラインから８５％、９０％）だけ、既知のアレルゲン（例えば食物アレルゲン）への経口曝露時の食物アレルギー反応を軽減することを含む。この用語は、生命に関わる可能性のあるＩｇＥ誘導アレルギー反応及びより特に、ＩｇＥ誘導アナフィラキシーからの保護も含む。
【0074】
本明細書において使用される際、「アナフィラキシー」という用語は、生命に関わる可能性のある気道、呼吸器、又は循環系障害を伴い発現が速いことを特徴とする重篤な、生命に関わる全身性過敏性反応として、Ｗｏｒｌｄ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ Ｇｕｉｄａｎｃｅ ２０２０に従って定義され、必ずしもではないが、通常、皮膚及び粘膜変化を伴う。多種多様な分子が、アナフィラキシーを誘発し得る。これらは、ＩｇＥ依存的にアナフィラキシーを誘発する最もよく見られるタンパク質又は肥満細胞を直接活性化する分子である。ＩｇＥ介在性アナフィラキシーは、エフェクター細胞、主に、肥満細胞及び好塩基球において発現されるアレルゲン特異的ＩｇＥ／高親和性受容体（ＦｃεＲＩ）複合体と相互作用するアレルゲン（通常、タンパク質）の相互作用によって引き起こされる。
【0075】
本明細書において使用される際、「被験体の集団」という語句は、被験体の群を意味するのに使用される。
【0076】
本明細書において使用される際、「被験体」という用語は、動物を指す。典型的に、動物は、哺乳動物である。被験体はまた、例えば、霊長類（例えば、ヒト、男性又は女性）、ウシ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、マウス、魚類、鳥類などを指す。特定の実施形態において、被験体は、霊長類である。好ましい実施形態において、被験体は、ヒトである。「被験体」という用語は、それがヒトを指す場合、「患者」と同義的に使用される。
【0077】
本明細書において使用される際、被験体が、処置から生物学的に、医学的に又はクオリティ・オブ・ライフに利益を得られる場合、このような被験体は、治療又は予防「を必要としている」。
【0078】
開示される方法のある実施形態において、ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を有する被験体の集団を治療するのに使用される。
【0079】
本明細書において定義される際、「１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー（若しくはアレルギー反応）」又は「ＩｇＥ介在性アレルギー（若しくはアレルギー反応）」という用語は、同義的に使用され、例えば薬物アレルギー、毒アレルギー若しくは食物アレルギー（又はアレルギー反応）、好ましくは、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、大豆、卵、ゴマ、魚介類又はそれらの混合物などの食物アレルゲンに対するアレルギー反応を指す。ある実施形態において、食物アレルギーはまた、例えば、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギーの確定診断又は疑いの診断を有する成人及び２歳以上の小児患者における、食物アレルゲンに対する偶発的曝露後のアナフィラキシーを含むアレルギー反応の予防のための適応症を指す。「ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応」という用語は、食物に対する有害反応であり、非制御２型免疫応答によって引き起こされる。
【0080】
ある実施形態において、薬物アレルギーは、例えば１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギーの確定診断又は疑いの診断を有する、例えば成人及び２歳以上の小児患者における、薬物アレルゲンへの曝露後のアナフィラキシーを含むアレルギー反応の予防のための適応症を指す。
【0081】
ＩｇＥ介在性反応は、通常、即時発症反応（食物摂取から２時間までに生じる）及び即時プラス後期（即時発症症状の後、長期の又は持続性の症状が続く）に分けられる。ＩｇＥ介在性の薬物又は食物関連反応としては、皮膚症状（例えば血管性浮腫、急性じんましん）；消化管反応（症状は、唇、舌及び口蓋の掻痒及び腫脹、喉頭水腫、吐き気、腹部けいれん、嘔吐及び下痢）；呼吸器反応（例えばアレルギー性鼻炎結膜炎及び気管支収縮を含み得る）；全身性反応（急速進行性のアナフィラキシー、典型的に、胃腸（ＧＩ）又は呼吸器症状と組み合わされ、心血管虚脱を含む多臓器系反応である）が挙げられる。
【0082】
ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を用いた治療に対する非レスポンダーは、ベースラインの少なくとも８０％の改善を達成することができなかった又は症状の増悪を有していた被験体として定義される。ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を用いた治療に対するレスポンダーは、ベースラインの最小で８０％の改善を達成した被験体として定義される。
【0083】
「経口免疫療法」又は「ＯＩＴ」という用語は、アレルギーを有する患者が、前記アレルゲンに対するより安全な免疫応答を引き起こし、ある程度の脱感作を誘発するために、アレルギーがあるアレルゲン（例えば食物アレルゲン）を増加する量で何か月にもわたって徐々に摂取する治療法である。ＯＩＴ療法は、２つのフェーズからなる：１．アレルゲンの量をゆっくりと増加させることからなる漸増期－このフェーズは、何か月もかかることがある；及び２．患者が同じ用量を維持する維持期。残念ながら、漸増期は、アナフィラキシーを含む重篤なアレルギー反応のリスクを示す。維持量に到達し得る患者は、一般に、ＯＩＴを取る限り、偶発的曝露に起因する反応から保護される。
【0084】
「舌下免疫療法」又はＳＬＩＴという用語は、一般に毎日、舌下にアレルゲンを投与することを含む別の形態のアレルギー免疫療法である。現在、ＦＤＡによって承認されるＳＬＩＴの唯一の形態は、ブタクサ、オオアワガエリのような北部の牧草及びチリダニに対する錠剤である。錠剤は、１～２分間にわたって舌下に置き、次に、それが溶解した際に飲み込む。このプロセスが、週に３日ないし毎日繰り返される。錠剤は、花粉への耐性を高め、時間と共に症状を軽減する。有効性の継続のために、治療は、３年以上にわたって必要とされ得る。ブタクサ及び草の花粉のみに対するアレルギー錠剤が現在入手可能である。
【0085】
「経皮免疫療法」又はＥＰＩＴという用語は、皮膚への繰り返される適用によってアレルゲンを送達することにある別の形態のアレルゲン免疫療法である。ＥＰＩＴは、パッチを使用し、皮膚への連続した（及び一定の）アレルゲン曝露によって持続的な感作又は耐性を生じることを目的とする。
【0086】
本明細書において使用される際、患者に関連する「選択する」及び「選択された」は、特定の患者が、所定の基準を有する特定の患者に基づいて（によって）、患者のより大きい群から特異的に選択されることを意味するのに使用される。同様に、「選択的に治療する」又は「選択的に予防する」は、特定の疾患を有する患者（例えば、特定の食物アレルゲンに対するアレルギー反応を有することが分かっているか又は疑いのある患者）に治療又は予防を提供することを指し、ここで、その患者は、所定の基準を有する特定の患者に基づいて、患者のより大きい群から特異的に選択される。同様に、「選択的に投与する」は、所定の基準を有する特定の患者に基づいて（によって）、患者のより大きい群から特異的に選択される患者に薬物を投与することを指す。「選択する」、「選択的に治療する」及び「選択的に投与する」とは、患者がより大きい群の一員であることのみに基づいた標準的な治療計画が送達されるのではなく、患者の既往歴（例えば、過去の治療的介入、例えば、生物製剤による過去の治療）、生物学（例えば、特定の遺伝子マーカー）、及び／又は兆候（例えば、特定の診断基準を満たさない）に基づいた個別治療が患者に送達されることを意味する。本明細書において使用される治療の方法に関して、選択することは、特定の基準を有する患者の偶然の治療を指すのではなく、特定の基準を有する患者に基づいて、患者に治療を投与するための慎重な選択を指す。したがって、選択的な治療／投与は、患者の既往歴、疾患の症状、及び／又は生物学にかかわらず、特定の疾患を有する全ての患者に特定の薬物を送達する標準的な治療／投与と異なる。ある実施形態において、患者は、食物アレルゲンへの曝露に対する既知のアレルギー反応を有することに基づいて、治療のために選択された。
【0087】
本明細書において使用される際の「医薬組合せ」という用語は、２つ以上の有効成分の使用又はそれを混合するか又は組み合わせることから得られる生成物を意味する。本明細書において使用される際の医薬組合せが、有効成分の固定された組合せ及び固定されていない組合せの両方を含むと理解されるべきである。「固定された組合せ（ｆｉｘｅｄ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」という用語は、有効成分、例えば、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形）、及び１つ以上の組合せパートナーが、単一の実体又は剤形として同時に患者に投与されることを意味する。このような場合のこの用語は、１つの単位剤形（例えば、カプセル、錠剤、又はサシェ）における固定用量の組合せを指す。固定されていない組合せ（ｎｏｎ－ｆｉｘｅｄ ｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎ）」又は「パーツのキット」という用語はいずれも、有効成分、例えば、本開示の化合物及び１つ以上の組合せパートナー及び／又は１つ以上の助剤が、特定の時間制限なしに、同時に、並行して又は連続してのいずれかで、別個の実体として独立して患者に投与又は共投与されることを意味し、このような投与は、特に、これらの時間間隔が、組合せパートナーが共同効果、例えば、相加又は相乗効果を示すのを可能にする場合、患者の体内で２つの化合物の治療的に有効なレベルを提供する。「固定されていない組合せ」という用語は、カクテル療法、例えば、３つ以上の有効成分の投与にも適用される。したがって、「固定されていない組合せ」という用語は、本明細書に記載される化合物が、互いに独立して、すなわち、同時に又は異なる時点で投与され得るという意味で、特に、投与、使用、組成物又は製剤を定義する。「固定されていない組合せ」という用語は、単剤、例えばＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩若しくは多形を、異なる量の有効成分をその中に含有するそれぞれの独立した製剤との１つ以上の固定された組合せ生成物と一緒に、使用することも包含することが理解されるべきである。本明細書に記載される組合せ生成物並びに「固定されていない組合せ」という用語は、有効成分（本明細書に記載される化合物を含む）を包含し、組合せパートナーが、互いに独立して販売されてもいる完全に別個の医薬剤形又は医薬製剤として投与されることがさらに理解されるべきである。固定されていない組合せの使用説明書が、包装、例えば、リーフレットなど、又は医師及び／若しくは医療スタッフに提供される他の情報で提供され、又は提供されてもよい。その際、独立した製剤又は製剤、生成物、若しくは組成物のパーツは、同時に又は時間をずらして投与され得、すなわち、パーツのキットの個々のパーツはそれぞれ、パーツのキットの任意のパーツについて、異なる時点で及び／又は等しい若しくは異なる時間間隔で投与され得る。特に、投与の時間間隔は、パーツの組み合わされた使用により治療される疾患に対する効果が、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形のみの使用によって得られる効果より大きい／高くなるように選択され；したがって、本明細書に記載される医薬組合せに使用される化合物は、共同で活性である。医薬組合せとして投与される第２の薬剤に対する、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形の総量の比率は、治療される特定の患者亜集団のニーズ、又は例えば、患者の年齢、性別、体重などにより得る単独の患者のニーズにより適合させるために、変更又は調整され得る。
【0088】
本明細書において用いられる際の「共投与」又は「組み合わされた投与」などの用語は、本明細書に記載される１つ以上の化合物を、選択された組合せパートナーと一緒に、それを必要としている単独の被験体（例えば、患者又は被験体）に投与することを包含することを意味し、化合物が、必ずしも同じ投与経路によって及び／又は同時に投与されるわけではない治療計画を含むことが意図される。
【0089】
「補助剤」又は「補助療法」又は「アジュバント療法」という用語は、有効性を最大にし、安全性を改善するために、一次療法又は初期治療に加えて与えられる治療法である。本発明に関して、補助療法は、経口免疫療法（ＯＩＴ）の一次療法に加えた、ＢＴＫ阻害剤（例えばＬＯＵ０６４）の使用である。例えば、補助療法（すなわち、ＢＴＫ阻害剤又はＬＯＵ０６４）は、主な治療（例えばＯＩＴ）前、並びに漸増期中のアレルギー反応及び／又はアナフィラキシー反応を防止するために、ＯＩＴの漸増期中に与えられる。
【0090】
ＬＯＵ０６４
ＬＯＵ０６４（＝Ｎ－（３－（６－アミノ－５－（２－（Ｎ－メチルアクリルアミド）エトキシ）ピリミジン－４－イル）－５－フルオロ－２－メチルフェニル）－４－シクロプロピル－２－フルオロベンズアミド、ＩＮＮ：レミブルチニブ）は、ブルトン型チロシンキナーゼの選択的阻害のための薬物候補として国際公開第２０１５／０７９４１７ Ａ１号パンフレットに開示される。この化合物は、強力な高選択的な不可逆的共有結合ＢＴＫ阻害剤である。ＢＴＫの不活性な立体構造への結合のため、ＬＯＵ０６４は、優れたキナーゼ選択性を示し、したがって、キナーゼオフターゲット結合を低減し、共有結合阻害により、化合物は、長期の高い全身性化合物曝露の必要なく、強力及び持続的な薬力学的効果を示す（Ａｎｇｓｔ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ＬＯＵ０６４（Ｒｅｍｉｂｒｕｔｉｎｉｂ），ａ Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｈｉｇｈｌｙ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０２０ Ｍａｙ ２８；６３（１０）：５１０２－５１１８）。
ＬＯＵ０６４（＝Ｎ－（３－（６－アミノ－５－（２－（Ｎ－メチルアクリルアミド）エトキシ）ピリミジン－４－イル）－５－フルオロ－２－メチルフェニル）－４－シクロプロピル－２－フルオロベンズアミド、ＩＮＮ：レミブルチニブ）は、ブルトン型チロシンキナーゼの選択的阻害のための薬物候補として国際公開第２０１５／０７９４１７ Ａ１号パンフレットに開示される。この化合物は、強力な高選択的な不可逆的共有結合ＢＴＫ阻害剤である。ＢＴＫの不活性な立体構造への結合のため、ＬＯＵ０６４は、優れたキナーゼ選択性を示し、したがって、キナーゼオフターゲット結合を低減し、共有結合阻害により、化合物は、長期の高い全身性化合物曝露の必要なく、強力及び持続的な薬力学的効果を示す（Ａｎｇｓｔ，Ｄ．ｅｔ ａｌ．，Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ＬＯＵ０６４（Ｒｅｍｉｂｒｕｔｉｎｉｂ），ａ Ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ Ｈｉｇｈｌｙ Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ Ｃｏｖａｌｅｎｔ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｏｆ Ｂｒｕｔｏｎ’ｓ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０２０ Ｍａｙ ２８；６３（１０）：５１０２－５１１８）。
【0091】
本発明の方法において使用するためのＬＯＵ０６４は、式（Ｉ）：
によって表される遊離塩基である。
【化1】
によって表される遊離塩基である。
【0092】
他の実施形態において、Ｎ－（３－（６－アミノ－５－（２－（Ｎ－メチルアクリルアミド）エトキシ）ピリミジン－４－イル）－５－フルオロ－２－メチルフェニル）－４－シクロプロピル－２－フルオロベンズアミドは、参照により本明細書に援用される国際公開第２０２０／２３４７７９号パンフレット（実施例１）に開示されるように、遊離塩基の無水結晶形態Ａである。
【0093】
慢性自発性じんましん（ＣＳＵ）（国際公開第２０２０／２３４７８２ Ａ１号パンフレット）及びシェーグレン症候群（ＳｊＳ）（国際公開第２０２０／２３４７８１ Ａ１号パンフレット）の治療における使用のために既に提案されているＬＯＵ０６４は、ＳｊＳ（第２相）；ＣＳＵ及びＭＳ（第３相）についての臨床試験において現在試験されている。
【0094】
国際公開第２０２０／２３４７８２ Ａ１号パンフレットにおいて、１０ｍｇ、２５ｍｇ及び１００ｍｇの用量の１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）投与が、ＣＳＵにおいて最大の有効性を達成することが一般に示唆された。
【0095】
少なくとも中等度に活性なＣＳＵを有する、Ｈ１－抗ヒスタミン剤によるコントロール不十分な患者において１２週間にわたってレミブルチニブの有効性及び安全性を評価する第２ｂ相、無作為化二重盲検プラセボ対照試験において、患者に、レミブルチニブ１０ｍｇをｑ．ｄ．（１日１回）、３５ｍｇをｑ．ｄ．、１００ｍｇをｑ．ｄ．、１０ｍｇをｂ．ｉ．ｄ．（１日２回）、２５ｍｇをｂ．ｉ．ｄ．、１００ｍｇをｂ．ｉ．ｄ．、又はプラセボ（１：１：１：１：１：１：１の比率）を投与した。２５ｍｇをｂ．ｉ．ｄ．のレジメンが、特に有効であることが分かった。
【0096】
血液及び／又は組織におけるＢＴＫ占有率は、ＣＳＵ及びＳｊＳ試験などの臨床試験のための用量を選択するための好適なバイオマーカーであることが報告された（国際公開第２０２０／２３４７８２号パンフレット及び国際公開第２０２０／２３４７８１号パンフレット）。
【0097】
さらに、ＢＴＫ占有率及びＢＴＫ占有率の持続が、雌ラットの血液及び様々な組織において異なることが報告されている（国際公開第２０２０／２３４７８１号パンフレット）。
【0098】
異なる組織におけるＢＴＫ占有率は、異なる適応症における有効性及び最適な投与量選択に関連する。しかしながら、食物アレルギーによって引き起こされる複数のアレルギー反応に関連する全ての組織、ひいてはＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を治療又は予防するために浸透される必要がある組織についての現在一致する全体像はない。ラットにおいて報告されるように、ＢＴＫ占有率及びＢＴＫ占有率半減期は、血液及び様々な組織において異なる。
【0099】
さらに、ＢＴＫ占有率半減期は、ターンオーバー速度（細胞内のＢＴＫタンパク質が再生する能力）に依存する。このようなターンオーバー速度は、各組織で異なり、種特異的である。ＢＴＫ占有率は、同様に種特異的である化合物のＰＫ／ＰＤ特性にさらに依存する。
【0100】
したがって、経口食物負荷における臨床反応は、ＣＳＵ用量又は他の適応症について開示される任意の用量を用いて予想することはできない。
【0101】
本発明の方法において使用するための医薬組成物
ＢＴＫ阻害剤、すなわち、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは多形は、薬学的に許容される担体と組み合わせるときに、医薬組成物として使用され得る。このような組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形に加えて、担体、様々な希釈剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、及び当該技術分野において公知の他の材料を含有し得る。担体の特性は、投与経路に依存する。開示される方法に使用するための医薬組成物は、特定の標的とされる障害の治療のためのさらなる治療剤も含有し得る。例えば、医薬組成物は、抗炎症薬又は鎮痒剤も含み得る。このようなさらなる要因及び／又は薬剤は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形との相乗効果を生じるため、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形によって引き起こされる副作用を最小限に抑えるために、医薬組成物に含まれ得る。好ましい実施形態において、開示される方法において使用するための医薬組成物は、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ又は約１００ｍｇ、好ましくは、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ又は約１００ｍｇの用量で、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形を含む。
ＢＴＫ阻害剤、すなわち、式（Ｉ）の化合物、又はその薬学的に許容される塩若しくは多形は、薬学的に許容される担体と組み合わせるときに、医薬組成物として使用され得る。このような組成物は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形に加えて、担体、様々な希釈剤、充填剤、塩、緩衝剤、安定剤、可溶化剤、及び当該技術分野において公知の他の材料を含有し得る。担体の特性は、投与経路に依存する。開示される方法に使用するための医薬組成物は、特定の標的とされる障害の治療のためのさらなる治療剤も含有し得る。例えば、医薬組成物は、抗炎症薬又は鎮痒剤も含み得る。このようなさらなる要因及び／又は薬剤は、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形との相乗効果を生じるため、又は式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形によって引き起こされる副作用を最小限に抑えるために、医薬組成物に含まれ得る。好ましい実施形態において、開示される方法において使用するための医薬組成物は、約１０ｍｇ、約２０ｍｇ、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ又は約１００ｍｇ、好ましくは、約２５ｍｇ、約５０ｍｇ又は約１００ｍｇの用量で、式（Ｉ）の化合物又はその薬学的に許容される塩若しくは多形を含む。
【0102】
経口投与用の好適な組成物は、錠剤、トローチ剤、水性若しくは油性懸濁液、分散性散剤若しくは顆粒剤、エマルジョン、硬又は軟カプセル剤、又はシロップ若しくはエリキシル剤の形態で、有効量の本発明の化合物を含む。経口用として意図された組成物は、医薬組成物の製造のための当該技術分野において公知の任意の方法に従って調製され、このような組成物は、薬学的に洗練された口当たりの良い製剤を提供するために、甘味料、着香剤、着色剤及び保存剤からなる群から選択される１つ以上の薬剤を含有し得る。錠剤は、錠剤の製造に好適な非毒性の薬学的に許容される賦形剤と混合して有効成分を含有し得る。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、ラクトース、リン酸カルシウム又はリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤；造粒剤及び崩壊剤、例えば、トウモロコシデンプン、又はアルギン酸；バインダー、例えば、デンプン、ゼラチン又はアカシア；及び滑沢剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸又はタルクである。錠剤は、被覆されていないか、又は消化管における崩壊及び吸収を遅延させ、それによって、より長い期間にわたって持続的な活性をもたらすため、公知の技術によって被覆される。例えば、モノステアリン酸グリセリル又はジステアリン酸グリセリルなどの時間遅延材料が用いられ得る。経口用の製剤は、有効成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウム若しくはカオリンと混合された硬ゼラチンカプセルとして、又は有効成分が、水又は油媒体、例えば、ピーナッツ油、流動パラフィン若しくはオリーブ油と混合された軟ゼラチンカプセルとして提供され得る。
【0103】
開示される方法において使用するための医薬組成物は、従来の方法で製造され得る。一実施形態において、医薬組成物は、経口投与用に提供される。例えば、医薬組成物は、
ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及び／又はグリシン；
ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸、そのマグネシウム又はカルシウム塩及び／又はポリエチレングリコール；さらに錠剤用に
ｃ）バインダー、例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム及び／又はポリビニルピロリドン；必要に応じて
ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸若しくはそのナトリウム塩、又は発泡性混合物；及び／又は
ｅ）吸収剤、着色剤、香料及び甘味料
と一緒に有効成分を含む錠剤又はゼラチンカプセルである。
ａ）希釈剤、例えば、ラクトース、デキストロース、スクロース、マンニトール、ソルビトール、セルロース及び／又はグリシン；
ｂ）滑沢剤、例えば、シリカ、タルカム、ステアリン酸、そのマグネシウム又はカルシウム塩及び／又はポリエチレングリコール；さらに錠剤用に
ｃ）バインダー、例えば、ケイ酸アルミニウムマグネシウム、デンプンペースト、ゼラチン、トラガカント、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム及び／又はポリビニルピロリドン；必要に応じて
ｄ）崩壊剤、例えば、デンプン、寒天、アルギン酸若しくはそのナトリウム塩、又は発泡性混合物；及び／又は
ｅ）吸収剤、着色剤、香料及び甘味料
と一緒に有効成分を含む錠剤又はゼラチンカプセルである。
【0104】
したがって、本発明の方法において使用するための医薬組成物は、ＬＯＵ０６４及び１つ以上の薬学的に許容される担体を含み、これはそれぞれ、独立して、充填剤、滑沢剤、バインダー、崩壊剤及び流動促進剤から選択される。
【0105】
別の実施形態において、好適な医薬組成物、ＬＯＵ０６４は、任意の薬学的に許容される形態で存在し得る。医薬組成物は、錠剤又はカプセル形態であることが好ましいであろう。錠剤は、当該技術分野において公知の方法に従ってフィルムコーティング又は腸溶コーティングされ得る。ナノサイズ又はマイクロサイズ粒子として医薬組成物／製剤中にＬＯＵ０６４を含むことも好ましいであろう。
【0106】
ＬＯＵ０６４が、ナノサイズ粒子の形態で医薬製剤中に存在する場合、平均粒度は、１０００ｎｍ未満であり得る。好ましくは、ＬＯＵ０６４の平均粒度は、５００ｎｍ未満、より好ましくは、２５０ｎｍ未満であり得る。
【0107】
好ましい実施形態において、ＬＯＵ０６４の平均粒度は、約５０ｎｍ～約１０００ｎｍ、又は約５０ｎｍ～約７５０ｎｍ、又は約６０ｎｍ～約５００ｎｍ、又は約７０ｎｍ～約３５０ｎｍ、又は約１００ｎｍ～約１７０ｎｍであり得、より好ましくは、ＬＯＵ０６４の平均粒度は、約１００ｎｍ～約３５０ｎｍ、又は約１１０ｎｍ～約２００ｎｍ、又は約１２０ｎｍ～約１８０ｎｍ又は約１２０ｎｍ～約１６０ｎｍであり得、好ましくは、ＬＯＵ０６４の平均粒度は、約１５０ｎｍ～約２００ｎｍであり得る。
【0108】
ＬＯＵ０６４が、ナノサイズ粒子の形態で医薬製剤中に存在する場合、経口投与は、好ましくは、１日２回約５０ｍｇ～約１５０ｍｇの用量で、より好ましくは、１日２回約１００ｍｇの用量である。
【0109】
ＬＯＵ０６４が、マイクロサイズ粒子の形態で医薬製剤中に存在する場合、平均粒度は、１～５μｍ又は好ましくは、１．０～１．５μｍであり得る。好ましくは、ＬＯＵ０６４の平均粒度は、１．１～１．３μｍであり得る。
【0110】
ＬＯＵ０６４が、マイクロサイズ粒子の形態で医薬製剤中に存在する場合、経口投与は、好ましくは、１日２回約１００ｍｇ～約３００ｍｇの用量、例えば１日２回約１００ｍｇの用量である。
【0111】
好ましい実施形態において、多分散指数（ＰＩ）は、０．０１～０．５、より好ましくは、０．１～０．２、特に、０．１２～０．１４である。好ましい粒度分布が、図１２に示される。
【0112】
上記の平均粒度は、強度で重み付けされる。平均粒度は、動的光散乱によって決定され得る。好ましくは、平均粒度は、光子相関分光法（ＰＣＳ）によって決定される。特に、平均粒度を決定するために、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｌｔｄ．（ＵＫ）製のデバイス「Ｚｅｔａｓｉｚｅｒ Ｎａｎｏ ＺＳ」、Ｖｅｒｓｉｏｎ ７．１３が使用され得る。
【0113】
好ましくは、測定が、精製水中０．１ｍＭのＮａＣｌ溶液（１：１０）を用いて湿式分散方法として行われ、ここで、減衰指数（ａｔｔｅｎｕａｔｏｒ ｉｎｄｅｘ）は、２～９、特に、５である。測定は、好ましくは、２５℃で行われる。測定システムのさらなる好ましい設定は、以下の通りである：
セル：使い捨てサイジングキュベット
計数率（ｋｃＰｓ）：３１５
持続時間：６０秒
測定位置（ｍｍ）：４．６５。
セル：使い捨てサイジングキュベット
計数率（ｋｃＰｓ）：３１５
持続時間：６０秒
測定位置（ｍｍ）：４．６５。
【0114】
本発明の一実施形態において、ＬＯＵ０６４組成物は、ヒトへの経口投与のために適合された医薬組成物として、日常的な手順に従って製剤化される。典型的に、経口投与用の組成物は、カプセル剤又は錠剤である。
【0115】
一実施形態において、ＬＯＵ０６４のための製剤は、参照により本明細書に援用される米国仮特許出願第６３／１４１５５８号明細書又はそのファミリーメンバー（例えば国際公開第２０２２／１６２５１３号パンフレット）に開示される製剤化に従って製剤化される。
【0116】
本発明によれば、経口投与用の好適な医薬組成物は、ＬＯＵ０６４及びバインダーを含む。
【0117】
好適なバインダーとしては、ポリビニルピロリドン－酢酸ビニルコポリマー、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒプロメロース、カルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、カルボキシエチルセルロース、カルボキシメチルヒドロキシエチルセルロース、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、セラック、ポリビニルアルコール－ポリエチレングリコールコポリマー、ポリエチレン－プロピレングリコールコポリマー、又はそれらの混合物が挙げられる。好ましくは、バインダーは、ポリビニルピロリドン－酢酸ビニルコポリマーである。
【0118】
ＬＯＵ０６４及びバインダーの重量比は、約３：１～約１：３；例えば約３：１、約２：１、約１：１であり得、好ましくは、ＬＯＵ０６４及びバインダーの重量比は、約２：１又は約１：１である。
【0119】
好ましくは、経口投与用の好適な医薬組成物は、ＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含む。
【0120】
好適な界面活性剤としては、ラウリル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸カリウム、ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリルエーテル硫酸ナトリウム、ポリソルベート、ペルフルオロブタンスルホネート、スルホコハク酸ジオクチル、又はそれらの混合物が挙げられる。好ましくは、界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウムである。
【0121】
ＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤の重量比は、約２：１：０．５、又は約２：１：０．１、又は約２：１：０．０８、又は約２：１：０．０５、又は約２：１：０．０４、又は約２：１：０．０３、又は約２：１：０．０２である。好ましくは、ＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤の重量比は、約２：１：０．０８又は約１：１：０．０５である。
【0122】
特に好ましい実施形態において、経口投与用の好適な医薬組成物は、ＬＯＵ０６４、バインダー及び界面活性剤を含み、ここで、バインダーは、ポリビニルピロリドン－酢酸ビニルコポリマー（コポビドン）であり、界面活性剤は、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）であり、ＬＯＵ０６４、コポビドン及びＳＬＳの重量比は、約２：１：０．０８である。ＬＯＵ０６４が、好ましくは、ＰＣＳによって測定した際に約１００ｎｍ～約２００ｎｍの平均粒度を有するナノサイズ粒子の形態でこの医薬組成物中に存在することがさらに特に好ましい。
【0123】
ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩若しくはその結晶形態を用いた治療又は予防の方法。
必要としている被験体における、１つ以上のアレルゲン、例えば毒、薬物又は食物、例えばピーナッツに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を予防、治療又はそれらの過程を修正するのに使用するための、方法、及びＢＴＫ阻害剤、例えば、不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えば式（Ｉ）の化合物（すなわち、ＬＯＵ０６４）又はその薬学的に許容される塩若しくは多形が開示され、本明細書において、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を被験体に投与することを含む。この実施形態の一態様において、本発明は、必要としている被験体における、１つ以上のアレルゲン、例えばピーナッツに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を予防するのに使用するためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩に関し、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を被験体に投与することを含む。開示される方法に使用するためのＬＯＵ０６４が、上述されるように、医薬組成物に組み込まれ得、毒、薬物又は食物アレルギー患者（すなわち、ヒト患者）を治療するためにインビボで投与され得る。
必要としている被験体における、１つ以上のアレルゲン、例えば毒、薬物又は食物、例えばピーナッツに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を予防、治療又はそれらの過程を修正するのに使用するための、方法、及びＢＴＫ阻害剤、例えば、不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えば式（Ｉ）の化合物（すなわち、ＬＯＵ０６４）又はその薬学的に許容される塩若しくは多形が開示され、本明細書において、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を被験体に投与することを含む。この実施形態の一態様において、本発明は、必要としている被験体における、１つ以上のアレルゲン、例えばピーナッツに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を予防するのに使用するためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩に関し、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を被験体に投与することを含む。開示される方法に使用するためのＬＯＵ０６４が、上述されるように、医薬組成物に組み込まれ得、毒、薬物又は食物アレルギー患者（すなわち、ヒト患者）を治療するためにインビボで投与され得る。
【0124】
例えば、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応は、食物アレルギー反応、例えばピーナッツアレルギー反応である。
【0125】
さらに別の例において、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応疾患又は障害は、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、大豆、卵、ゴマ、魚介類アレルギー反応を指す。
【0126】
別の実施形態において、被験体は、食物アレルギー、例えばピーナッツアレルギーを患う。
【0127】
定義されたアレルゲン反応を阻害するＬＯＵ０６４の能力を、ファースト・イン・ヒューマン試験の反復用量漸増（ＭＡＤ）試験パートにおいて、健康なアトピー被験体における皮膚プリックテスト（ＳＰＴ）によって評価した。７種のアレルゲンによるＳＰＴ（草花粉混合物、樺の木花粉、ハンの木花粉、ハシバミの木花粉、イエダニ、ネコ皮屑及びウマ皮屑）を、いずれの投与の前（ベースライン）にも、並びに第１の投与後及び１１日間の１日１回の投与後の異なる時点で行った。試験は、１００ｍｇの用量まで膨疹サイズの用量依存的な減少を実証した。１００ｍｇを超えると、用量依存的な傾向は、明らかでないが、最も高い減少は、最も高い試験用量（６００ｍｇ ｑ．ｄ．）で観察された。全ての試験にわたって、参加者は、１００ｍｇ ｑｄ．以上の用量で膨疹サイズの平均で３ｍｍの減少を示した（Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｓｃｉ．２０２１；１４（５），ｐｐ １７５６－１７６８）。
【0128】
ＦｃεＲ１介在性好塩基球活性化の用量依存的な阻害も、ファースト・イン・ヒューマン試験中にＬＯＵ０６４で実証された。ＬＯＵ０６４の単回投与漸増試験（ＳＡＤ）において、ＣＤ６３によって測定した際のエクスビボ血液好塩基球活性化は、６０ｍｇの用量でほぼ完全に阻害され（＞８９％）、投与の２４時間後に高用量でほぼ１００％の阻害に達した。１００ｍｇ以上の用量は、ほぼ完全な阻害を実証した。対照的に、他の好塩基球活性化マーカー、ＣＤ２０３ｃ＋は、２００ｍｇのコホートにおいて８時間の時点で、最大で７９．４％の阻害を示した。反復用量漸増試験（ＭＡＤ）において、ＣＤ６３発現によって測定される血液好塩基球活性化の完全な阻害は、５０ｍｇ以上のＬＯＵ０６４の１日用量で、全治療期間（１～１２日目）及びそれを超える数日にわたって達成された。投与の最終日におけるＣＤ６３のトラフレベル阻害は、１０ｍｇ．ｑ．ｄ．（１日１回）の最も低い試験用量で８０％であり；これは、いずれかの高用量でより強力であった。用量依存的な阻害は、ＣＤ６３マーカーで観察され、投与の最終日の時点で１００ｍｇ ｑ．ｄ．以上で、９７％超のトラフ阻害に達した。ＣＤ２０３ｃ＋好塩基球の阻害は、それぞれ６３％及び６７％で、４００ｍｇ ｑ．ｄ．及び２００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄで最も高かった（Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎ．Ｔｒａｎｓｌ．Ｓｃｉ．２０２１；１４（５），ｐｐ １７５６－１７６８）。
【0129】
さらに、本発明者らは、オボアルブミン誘発性アナフィラキシーマウスモデル（実施例３）において、ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／Ｋｇ）による治療が、肺アナフィラキシーに関与する細胞（好酸球、好塩基球、マクロファージ及びリンパ球）の数を有意に減少させたことを実証した。それらの結果及び動物とヒトとの間の変換モデル（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂａｓｉｃ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｈａｒｍａｃｙ，７（２），２７－３１）に基づいて、３０ｍｇ／ｋｇについての計算されたヒト等価用量（ＨＥＤ）は、７０ｋｇの人について約１７０ｍｇに相当し、１０ｍｇ／ｋｇの最も低い有効用量についての計算されたヒト等価用量（ＨＥＤ）は、７０Ｋｇの人について約５６ｍｇに相当する（Ｎａｉｒ，Ａ．Ｂ．，＆ Ｊａｃｏｂ，Ｓ．（２０１６）。
【0130】
最後に、ヒトにおける脾臓ＢＴＫ占有率の社内予測モデル（実施例７）によれば、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）投与は、より高いＢＴＫ占有率を達成するために、同じ用量でのＱＤ投与より有効であることが示された（図１３）。したがって、２５ｍｇ ｂ．ｉ．ｄのＬＯＵ０６４の用量は、最小ヒト有効用量であり、１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の用量も、ヒトにおいて有効であることが示される。
【0131】
適切な投与量は、例えば、ＬＯＵ０６４の特定の薬学的に許容される塩、ＬＯＵ０６４の特定の多形形態、宿主、投与方法、医薬組成物、並びに治療される病態の性質及び重症度、並びに被験体が受けた過去の治療の性質に応じて変化するであろう。
【0132】
好ましい実施形態において、ＬＯＵ０６４は、体重、性別、年齢又は人種に関係なく投与され得る。例えば、６０ｋｇの体重を有する３５歳の女性が、９０ｋｇの体重を有する５０歳の男性と同じ用量を投与されることが好ましい。特に、体重、性別、年齢又は人種は、ＬＯＵ０６４の薬物動態に対する臨床的に有意な影響を与えない。
【0133】
最終的に、担当の医療従事者が、各個々の被験体を治療するＬＯＵ０６４の量を決定するであろう。ある実施形態において、担当の医療従事者は、低用量のＬＯＵ０６４を投与し、被験体の反応を観察し得る。
【0134】
本開示の一実施形態において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、毎日約２０ｍｇ～約２００ｍｇの用量で経口投与される。
【0135】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、毎日約２５ｍｇ、又は毎日約５０ｍｇ、又は毎日約７５ｍｇ、又は毎日約１００ｍｇの用量で投与される。この実施形態の一態様において、ＬＯＵ０６４は、約２５ｍｇ ＱＤ（１日１回）、又は約５０ｍｇ ＱＤ、又は約７５ｍｇ ＱＤ、又は約１００ｍｇ ＱＤの用量で投与される。
【0136】
本開示の一実施形態において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、１日２回約１０ｍｇ～１日２回約１００ｍｇ、例えば、約１０ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、約２５ｍｇ Ｂ．Ｉ．Ｄ、約５０ｍｇ Ｂ．Ｉ．Ｄ又は約１００ｍｇ Ｂ．Ｉ．Ｄの用量で経口投与される。
【0137】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、１日２回約１０ｍｇの用量で経口投与される。
【0138】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、１日２回約２５ｍｇの用量で経口投与される。
【0139】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、１日２回約５０ｍｇの用量で経口投与される。
【0140】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、１日２回約７５ｍｇの用量で経口投与される。
【0141】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、１日２回約１００ｍｇの用量で経口投与される。
【0142】
本開示の医薬組成物を使用する治療期間は、治療される疾患又は障害の重症度並びに各個々の被験体の病態及び個人的な反応に応じて変化するであろう。ある実施形態において、被験体は、短期間、例えば最大で４週間、例えば最大で６週間、例えば最大で８週間、例えば最大で１０週間、例えば最大で１２週間にわたってＬＯＵ０６４を投与される。ＬＯＵ０６４は、例えば、出張及び／又は休暇中の重度の食物アレルギー反応並びにトリガーの回避、アレルゲンへの曝露が十分に制御されない任意の他の状況を防止するために、本明細書において上に定義されるように、例えば、短期間で投与され得る。
【0143】
ある実施形態において、ＬＯＵ０６４は、アレルゲン（例えば食物アレルゲン）への曝露の潜在的リスクの少なくとも２日前に投与される。別の実施形態において、ＬＯＵ０６４は、アレルゲン（例えば食物アレルゲン）への曝露の潜在的リスクの前の少なくとも１週間以内、例えば１週間前、２週間前、３週間前又は４週間前に投与される。抗ＩｇＥ治療を超えるＬＯＵ０６４の利点は、アレルギー反応の最大の保護／予防を達成するための速い作用発現である。
【0144】
ある他の実施形態において、被験体は、長期間にわたってＬＯＵ０６４を投与される（例えばＬＯＵ０６４は、疾患が、その使用を正当化するよう存在する限り、例えば少なくとも６か月、例えば少なくとも１０か月、例えば１年間、例えば、１年間、２年間、３年間、４、年間、１０年間超にわたる全期間で無制限に使用される。ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、最大で２年間、５年間、１０年間、１５年間、２０年間又は生涯にわたって使用され得る。ある実施形態において、ＬＯＵ０６４による治療は、慢性治療である。
【0145】
本開示の治療又は使用の方法のいくつかを実施する際、治療的に有効な用量のＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩が、被験体、例えば、哺乳動物（例えば、ヒト）に投与される。開示される方法が、ＬＯＵ０６４又はその塩を用いて、ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応の治療又は予防を提供することが理解される一方、これは、治療が必ずしも単独療法であることを意味しない。
【0146】
本発明の一態様において、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、単独療法として被験体に投与される。
【0147】
本発明の別の態様において、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、組合せ療法として被験体に投与される。
【0148】
実際に、被験体が、ＬＯＵ０６４による治療のために選択される場合、ＬＯＵ０６４は、ＩｇＥに関与する疾患又は障害を患う被験体を治療するための他の薬剤及び治療法と組み合わせて、例えば、少なくとも１つのさらなる治療剤、例えば、抗ＩｇＥ抗体（例えばオマリズマブ又はリゲリズマブ）、コルチコステロイド又は免疫抑制薬、例えば、全身性コルチコステロイド又は免疫抑制薬と組み合わせて、本開示の方法に従って投与され得る。
【0149】
開示される使用、方法、及びキットのある実施形態において、被験体は、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導アレルギー反応を有し、ここで、アレルゲンは、薬物又は食物、例えば食物、例えばピーナッツである。ある実施形態において、被験体はまた、喘息及び／又はじんましんを有してもよく、例えば、喘息、アレルギー性喘息、鼻炎、アレルギー性鼻炎、じんましん及びＣＳＵから選択される疾患又は障害を有する。開示される使用、方法、及びキットのある実施形態において、被験体は、１つ以上のアレルゲン（例えば、ピーナッツ、堅果、牛乳、小麦、大豆、卵、ゴマ、魚介類又はそれらの混合物などの食物アレルゲン）に対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を有する。
【0150】
開示される使用、方法、及びキットの他の実施形態において、被験体は、１つ以上のアレルゲンに対するＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を有し、ここで、アレルゲンは、食物、例えばピーナッツである。
【0151】
例えば、治療される被験体がアレルギーである場合、又は被験体がまた、喘息、じんましん、及び鼻炎から選択される、例えば、アレルギー性喘息、ＣＳＵ、及びアレルギー性鼻炎から選択される別の疾患又は障害を患っている場合が該当し得る。
【0152】
１つ以上のさらなる薬剤と共投与される場合、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容されるは、他の薬剤と同時に、又は連続して投与され得る。連続して投与される場合、担当医は、他の薬剤と組み合わせてＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を投与する適切な順序及び共送達のための適切な投与量を決定するであろう。
【0153】
様々な治療法が、本明細書に開示される、ＩｇＥに関与する疾患又は障害の治療の際に、開示されるＬＯＵ０６４と有益に組み合わされ得る。このような治療法としては、例えば抗ＩｇＥ抗体（例えばオマリズマブ、リゲリズマブ）、コルチコステロイド（例えば、吸入若しくは全身性コルチコステロイド）、免疫抑制薬、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（ＬＴＲＡ）、短時間作用性βアゴニスト（ＳＡＢＡ）又は長時間作用性βアゴニスト（ＬＡＢＡ）が挙げられる。
【0154】
開示される使用、方法、及びキットのある実施形態において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、一次治療として処方されるか又は標準治療薬のいずれかに加えられ得る。
【0155】
別の実施形態において、ＬＯＵ０６４又は薬学的に許容される塩は、ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応を治療するための他の薬剤及び治療法と組み合わせて、本開示の方法に従って投与され得る。
【0156】
一実施形態において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、経口免疫療法（ＯＩＴ）、舌下免疫療法（ＳＬＩＴ）、経皮免疫療法（ＥＰＩＴ）、好ましくは、ＯＩＴと一緒に投与される。この実施形態の一態様において、ＬＯＵ０６４は、ＯＩＴの補助療法として投与される。
【0157】
経口免疫療法（ＯＩＴ）は、医学的管理下で与えられる漸増する量の食物アレルゲンを含む、食物アレルギーの潜在的な治療である。このような手順は、アレルゲンに対する脱感作をもたらす。ＯＩＴ治療法は、これらが、典型的に、生命に関わる可能性のある反応のリスクのため患者の入院を必要とするため、高コストで労力を要する。
【0158】
一実施形態において、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、本開示の方法に従って投与される場合、ＯＩＴ、ＳＬＩＴ、ＥＰＩＴ、好ましくは、ＯＩＴに関連する副作用（例えば、重篤な全身性反応、例えばアナフィラキシーなどのアレルギー反応）の頻度及び重症度を低下させる。
【0159】
別の実施形態において、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、本開示の方法に従って投与される場合、ＯＩＴ漸増（すなわち、ＯＩＴの漸増期）を短縮して、例えば、より多くの患者が、首尾よくＯＩＴを完了させることを可能にする。
【0160】
一実施形態において、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、ピーナッツタンパク質によるＯＩＴ治療法の補助療法として投与される。
【0161】
これまで、ピーナッツアレルギー患者におけるアレルギー反応を軽減するための単一の現在承認されているＯＩＴ製品は、Ｐａｌｆｏｒｚｉａ（商標）である。したがって、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４ ｔは、ピーナッツタンパク質（例えばＰａｌｆｏｒｚｉａ（商標））の補助剤として、本開示の方法に従って投与され得る。
【0162】
一実施形態において、本明細書に記載される方法に従って使用するためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、経口免疫療法の投与の少なくとも２日前、又は少なくとも１週間（７日）前、又は少なくとも２週間（１４日）前に開始して投与される。この実施形態の一態様において、本明細書に記載される方法に従って使用するためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、好ましくは、ＬＯＵ０６４は、免疫療法治療の漸増期の期間の間にさらに投与され、その後、ＯＩＴの維持期の開始時にＬＯＵ０６４を中止する。
【0163】
患者選択
一実施形態において、患者は、成人（１８歳以上）である。
一実施形態において、患者は、成人（１８歳以上）である。
【0164】
別の実施形態において、患者は、思春期の青年（１２～１７歳）である。
【0165】
さらに別の実施形態において、患者は、小児患者（２～１１歳又は６～１１歳）である。
【0166】
本発明の別の実施形態において、ＩｇＥ誘導食物アレルギー反応の治療又は予防のためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４を投与される患者は、以下の基準に従って選択される：
ａ）男性及び女性患者、２歳以上（例えば２～５歳又は６～１１歳、１２～１７歳又は１８～５５歳）；
ｂ）ピーナッツ、堅果、小麦、卵、牛乳、大豆、魚介類を含むがこれらに限定されない食物に対するアレルギーの確認された病歴；
ｃ）陽性アレルゲン特異的ＩｇＥ（例えば、スクリーニング時にピーナッツｓＩｇＥ≧６のｋＵＡ／Ｌ）；
ｄ）患者がアレルギーを有するアレルゲンに対して皮膚プリックテストが陽性（例えば、陰性対照と比較して、平均直径（最長直径及び中点直交直径）≧４ｍｍの膨疹として定義される）。
ａ）男性及び女性患者、２歳以上（例えば２～５歳又は６～１１歳、１２～１７歳又は１８～５５歳）；
ｂ）ピーナッツ、堅果、小麦、卵、牛乳、大豆、魚介類を含むがこれらに限定されない食物に対するアレルギーの確認された病歴；
ｃ）陽性アレルゲン特異的ＩｇＥ（例えば、スクリーニング時にピーナッツｓＩｇＥ≧６のｋＵＡ／Ｌ）；
ｄ）患者がアレルギーを有するアレルゲンに対して皮膚プリックテストが陽性（例えば、陰性対照と比較して、平均直径（最長直径及び中点直交直径）≧４ｍｍの膨疹として定義される）。
【0167】
上記の実施形態の一態様において、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩を投与される患者は、以下の基準のうちの１つを有すると定義される非制御喘息を有する患者でない：
－最初のスクリーニング来院の時点での患者の予測正常値ＦＥＶ１＜８０％
－スクリーニング来院前の１２か月以内に喘息のための１回の入院。
－最初のスクリーニング来院の時点での患者の予測正常値ＦＥＶ１＜８０％
－スクリーニング来院前の１２か月以内に喘息のための１回の入院。
【0168】
有効性
一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される全ての方法において使用するためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４に関し、ここで、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、治療のｘ週の時点で予防を達成する。この実施形態の一態様において、予防は、ベースラインからの最小で８０％の減少、（例えば、ベースラインからの最小で８５％の減少又は最小で９０％の減少）として定義される。
一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される全ての方法において使用するためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４に関し、ここで、ＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４は、治療のｘ週の時点で予防を達成する。この実施形態の一態様において、予防は、ベースラインからの最小で８０％の減少、（例えば、ベースラインからの最小で８５％の減少又は最小で９０％の減少）として定義される。
【0169】
一実施形態において、本発明は、本明細書に記載される方法において使用するためのＢＴＫ阻害剤、例えば不可逆的ＢＴＫ阻害剤、例えばＬＯＵ０６４に関し、ここで、以下のうちの少なくとも１つに該当する：
ＬＯＵ０６４による治療の最大で４週間後（例えば１週間後、又は２週間後、又は３週間後又は４週間後）、
－治療された患者の少なくとも９０％が、６００ｍｇの食物アレルゲン（例えば６００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
－治療された患者の少なくとも９０％が、１０００ｍｇの食物アレルゲン（例えば１０００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
－治療された患者の少なくとも８０％が、３０００ｍｇの食物アレルゲン（例えば３０００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない。
ＬＯＵ０６４による治療の最大で４週間後（例えば１週間後、又は２週間後、又は３週間後又は４週間後）、
－治療された患者の少なくとも９０％が、６００ｍｇの食物アレルゲン（例えば６００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
－治療された患者の少なくとも９０％が、１０００ｍｇの食物アレルゲン（例えば１０００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない、
－治療された患者の少なくとも８０％が、３０００ｍｇの食物アレルゲン（例えば３０００ｍｇのピーナッツタンパク質）の食物負荷時にアレルギー反応を示さない。
【0170】
別の実施形態において、本発明は、患者が、０．４５～０．５の合計ドメインスコアＦＡＱＬＱにおいてベースラインからの減少を達成する、本明細書に記載される方法において使用するためのＬＯＵ０６４に関する。
【0171】
ＦＡＬＱＬＱ（食物アレルギークオリティ・オブ・ライフ質問票）は、食物アレルギーを有する患者のための疾患特異的な健康関連クオリティ・オブ・ライフ（ＨＲＱｏＬ）質問票である。それらは、成人質問紙（ＡＦ）、小児質問紙（ＣＦ）、及びティーンエージャー質問紙（ＴＦ）並びに食物アレルギーの小児の保護者によって記入される２つの質問紙（保護者質問紙ＰＦ及び保護者質問紙ティーンエージャーＰＦＴ）を含め、開発され、認められている。これらの質問紙は、ＨＲＱｏＬ（健康関連クオリティ・オブ・ライフ）に対する食物アレルギーの影響を測定するための信頼性のある有効な手段である。より特定的に、食物アレルギークオリティ・オブ・ライフ質問票（ＦＡＱＬＱ）は、参加者のＨＲＱｏＬに対する食物アレルギーの影響を評価する（すなわち、ドメインは、偶発的曝露のリスク、情動効果、アレルゲン回避及び食事制限からなる）。ＦＡＱＬＱ－小児質問紙（８～１２歳）（Ｆｌｏｋｓｔｒａ－ｄｅ Ｂｌｏｋ ＢＭ ｅｔ ａｌ（２００９）Ｃｌｉｎｉｃａｌ．Ｅｘｐ．Ａｌｌｅｒｇｙ；３９：（１）１２７－３７）、ＦＡＱＬＱ－ティーンエージャー質問紙（１３～１７歳）（Ｆｌｏｋｓｔｒａ－ｄｅ Ｂｌｏｃｋ ＢＭ ｅｔ ａｌ．（２００８）Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；１２２：１３９－４４，１４４．ｅ１－２）及びＦＡＱＬＱ－成人質問紙（≧１８歳）（Ｆｌｏｋｓｔｒａ－ｄｅ Ｂｌｏｋ ＢＭ ｅｔ ａｌ（２００９）Ａｌｌｅｒｇｙ；６４（８）：１２０９－１７）は、自己記入式の有効な食物アレルギー特異的ＨＲＱｏＬ質問票である。ＦＡＱＬＱ－保護者質問紙（ＦＡＱＬＱ－ＰＦ）は、食物アレルギーを有する０～１２歳の小児の保護者によって記入される（Ｄｕｎｎ Ｇａｌｖｉｎ ｅｔ ａｌ（２００８），Ｃｌｉｎ Ｅｘｐ Ａｌｌｅｒｇｙ，４０（２０１０），４７６－４８５）。
【0172】
項目及びドメインの数は、実施されるＦＡＱＬＱ文書によって変化する。各質問は、１～７の７段階の尺度で採点される（すなわち、それぞれＨＲＱｏＬの「なし」から「最大の」低下）。総スコアは、全ての欠測でない項目の算術平均である。ドメインスコアが、同様に計算される。
【0173】
さらに別の実施形態において、本発明は、患者が、合計ドメインスコアＦＡＩＭのベースラインからの減少を達成する、本発明の方法において使用するためのＬＯＵ０６４に関する。
【0174】
ＦＡＩＭ（食物アレルギー独立測定）は、患者の転帰予測を測定するための有効な信頼性の高い手段であり、小児（ＦＡＩＭ－ＣＦ）、思春期の青年（ＦＡＩＭ ＴＦ）及び成人（ＦＡＩＭ ＡＦ）のために開発された（Ｆｌｏｋｓｔｒａ－ｄｅ Ｂｌｏｃｋ ｅｔ ａｌ．Ａｌｌｅｒｇｙ ６５（５）：６３０－５）。食物アレルギー独立測定（ＦＡＩＭ）は、参加者の感知される食物アレルギー重症度及び食物アレルギー関連リスクを反映する。ＦＡＩＭは、同様に０～６で採点される４つの質問を含み、より高いスコアは、アレルゲンが偶然に取り込まれる場合の有害転帰のより悪い予測（例えば、重篤な反応又は死亡）を示す。
【0175】
さらに別の実施形態において、本発明は、６００ｍｇのアレルゲン（例えば、ピーナッツアレルゲン）の二重盲検プラセボ対照食物負荷における、治療患者及び非治療患者の間の奏効率の実測差が、３５％より優れており、ここで、奏効率が、６００ｍｇの経口食物負荷に対する軽度の応答以下であると定義される、本明細書に記載される方法において使用するためのＬＯＵ０６４に関する。
【0176】
さらなる実施形態において、本発明は、患者が、経口食物負荷に対する軽度の応答を有さない又は軽度の応答以下を有する（例えば、６００ｍｇのアレルゲン（例えばピーナッツタンパク質の用量を投与された後）、本明細書に記載される方法において使用するためのＬＯＵ０６４に関する。軽度の応答は、以下のうちの１つ以上を含む食物アレルギー調査のコンソーシアム（ＣｏＦＡＲ：Ｓａｍｐｓｏｎ ＨＡ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ；１３０（６）：１２６０－７４）に従って定義される：
・皮膚において－限られた（わずかな）又は限局性のじんましん、腫脹（例えば、軽度の唇浮腫）、皮膚潮紅（例えば、軽度の紅斑のいくつかの領域）又は軽度の掻痒（例えば、時折の引っ掻き）
・呼吸器－鼻漏（例えば、時折鼻をすする又はくしゃみ）、鼻詰まり、時折の咳、喉の不調
・ＧＩ－軽度の腹部不快感（低下した活性を伴うか又は伴わない軽度の吐き気を含む）、息の詰まり（ｇａｇ）に続発すると考えられる孤発性嘔吐。
・皮膚において－限られた（わずかな）又は限局性のじんましん、腫脹（例えば、軽度の唇浮腫）、皮膚潮紅（例えば、軽度の紅斑のいくつかの領域）又は軽度の掻痒（例えば、時折の引っ掻き）
・呼吸器－鼻漏（例えば、時折鼻をすする又はくしゃみ）、鼻詰まり、時折の咳、喉の不調
・ＧＩ－軽度の腹部不快感（低下した活性を伴うか又は伴わない軽度の吐き気を含む）、息の詰まり（ｇａｇ）に続発すると考えられる孤発性嘔吐。
【0177】
別の実施形態において、本発明は、患者が、経口食物負荷に対する中等度の反応も重度の反応も生じない（例えば６００ｍｇのアレルゲン（例えばピーナッツタンパク質）の用量を投与された後、本明細書に記載される方法において使用するためのＬＯＵ０６４に関する。中等度の反応は、以下のうちの１つ以上を含む食物アレルギー調査のコンソーシアム（ＣｏＦＡＲ：Ｓａｍｐｓｏｎ ＨＡ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ；１３０（６）：１２６０－７４）に従って定義される：
・皮膚－全身性じんましん（例えば、多くの若しくは広範囲のじんましん）、腫脹（例えば、著しい唇又は顔面浮腫）、持続的な引っ掻きを引き起こす掻痒、紅斑の数か所以上の領域又は顕著な紅斑
・呼吸器－嗄声を伴わない咽喉絞扼感、持続的な咳、呼吸困難を伴わない喘鳴
・ＧＩ－低下した活性を伴う持続的な中等度の腹痛／けいれん／吐き気、嘔吐
・皮膚－全身性じんましん（例えば、多くの若しくは広範囲のじんましん）、腫脹（例えば、著しい唇又は顔面浮腫）、持続的な引っ掻きを引き起こす掻痒、紅斑の数か所以上の領域又は顕著な紅斑
・呼吸器－嗄声を伴わない咽喉絞扼感、持続的な咳、呼吸困難を伴わない喘鳴
・ＧＩ－低下した活性を伴う持続的な中等度の腹痛／けいれん／吐き気、嘔吐
【0178】
重度の反応は、以下のうちの１つ以上を含む食物アレルギー調査のコンソーシアム（ＣｏＦＡＲ：Ｓａｍｐｓｏｎ ＨＡ ｅｔ ａｌ．Ｊ．Ａｌｌｅｒｇｙ Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ；１３０（６）：１２６０－７４）に従って定義される：
・皮膚－重度の全身性じんましん／血管性浮腫／紅斑
・呼吸器－喉頭浮腫、嗄声を伴う咽喉絞扼感、呼吸困難を伴う喘鳴（ｗｈｅｅｚｉｎｇ）、喘鳴（ｓｔｒｉｄｏｒ）
・ＧＩ－重度の腹痛／けいれん／反復性嘔吐
・神経系－精神状態の変化
・循環系－臨床的に有意な血圧低下
・皮膚－重度の全身性じんましん／血管性浮腫／紅斑
・呼吸器－喉頭浮腫、嗄声を伴う咽喉絞扼感、呼吸困難を伴う喘鳴（ｗｈｅｅｚｉｎｇ）、喘鳴（ｓｔｒｉｄｏｒ）
・ＧＩ－重度の腹痛／けいれん／反復性嘔吐
・神経系－精神状態の変化
・循環系－臨床的に有意な血圧低下
【0179】
安全性
最大で６００ｍｇの単回投与及びさらに最大で１８日間にわたる１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．のＬＯＵ０６４の短期間の安全性が、第Ｉ相臨床試験において示された。しかしながら、長期の安全性に関連するデータは、現時点で入手可能でない。
最大で６００ｍｇの単回投与及びさらに最大で１８日間にわたる１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．のＬＯＵ０６４の短期間の安全性が、第Ｉ相臨床試験において示された。しかしながら、長期の安全性に関連するデータは、現時点で入手可能でない。
【0180】
共有結合不可逆的ＢＴＫ阻害剤エボブルチニブ及びトレブルチニブで観察された用量制限副作用を考慮すると、エボブルチニブは、第ＩＩ相臨床試験において７５ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の用量で既に用量制限肝酵素上昇を示し、トレブルチニブは、用量制限下痢を示し（Ｂｅｃｋｅｒ Ａ．ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ｓｃｉ；１３，３２５－３３６；Ｍｏｎｔａｌｂａｎ Ｘ．ｅｔ ａｌ．，２０１９，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ；３８０（２５）：２４０６－１７，Ｓｍｉｔｈ Ｐ．Ｆ．ｅｔ ａｌ．，２０１９，ＡＣＴＲＩＭＳ Ｆｏｒｕｍ，Ｆｅｂ ２８，２０１９，Ｐ０７２）、これらの有害事象の発生の有意な増加が、高用量でもＬＯＵ０６４で見られなかったことは有望なことである。本発明者らは、長期間（最大で５２週間）にわたる１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の高用量でも、ＬＯＵ０６４が安全であることを実証した（実施例１４）。特に、ＬＯＵ０６４は、長期間（最大で５２週間）にわたって１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の用量でいずれの用量制限肝酵素上昇及び他のオフターゲット効果も誘発しない。したがって、ＬＯＵ０６４は、長期の治療に適している。
【0181】
したがって、本発明の一目的は、記載される方法において使用するためのＬＯＵ０６４であり、ここで、治療の１２週まで、２４週まで又は５２週まで、アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）、アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）、及びリパーゼのレベルは、治療の開始時のベースラインレベルと比較して１０％を超えて変化しない。
【0182】
したがって、ＬＯＵ０６４は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）を効率的に予防するだけでなく、特に、治療が長期間にわたって維持される場合、他のＢＴＫ阻害剤と比較して、特に、アカラブルチニブと比較して、より良好な安全性プロファイルも有することが特に意外であった。例えば、主に、血液悪性疾患の治療のために現在承認されているＢＴＫ阻害剤（イブルチニブ、アカラブルチニブ、及びザヌブルチニブ）は、既知の安全性の障害を有する。主要な安全性の障害としては、感染症、血小板機能に対する影響（出血のリスク）、及び血球減少が挙げられる。１つ以上の承認されたＢＴＫｉｓについての他の安全性への懸念としては、心不整脈（心房細動及び粗動）及び、イブルチニブのみについて、心不全及び高血圧症が挙げられる。
【0183】
したがって、本発明の好ましい実施形態において、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）を治療又は予防するのに使用するためのＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、長期の治療に使用される。長期の治療という用語は、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩が、長期間にわたって使用されることを示す。例えば、ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、６か月、１０か月、１年間、２年間、３年間、４年間、１０年間超にわたって安全に使用され得る。ＬＯＵ０６４又はその薬学的に許容される塩は、最大で２年間、５年間、１０年間、１５年間、２０年間又は生涯にわたって使用され得る。
【0184】
一実施形態において、ＬＯＵ０６４は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）を効率的に予防するだけでなく、以下の特徴：
－ 感染症のリスクの臨床的に関連する増加なし、
－ 大量出血の臨床的に関連する増加なし、
－ 肝酵素の臨床的に関連する上昇なし
のうちの１つ以上を含む安全性プロファイルを有し；このような長期の治療を可能にする。
－ 感染症のリスクの臨床的に関連する増加なし、
－ 大量出血の臨床的に関連する増加なし、
－ 肝酵素の臨床的に関連する上昇なし
のうちの１つ以上を含む安全性プロファイルを有し；このような長期の治療を可能にする。
【0185】
ＬＯＵ０６４経口薬物曝露が、ＣＹＰ３Ａ阻害剤、特に、強力なＣＹＰ３Ａ阻害剤、例えば強力なＣＹＰ３Ａ４阻害剤と共に投与される場合、数倍増加され得ることが予想される。同様に、ＣＹＰ４Ａの、例えばＣＹＰ３Ａ４の強力な誘導剤は、曝露を著しく減少させ、ＬＯＵ０６４の有効性の低下をもたらし得る。ＬＯＵ０６４のこれらの特性は、ＩｇＥ誘導アレルギー反応の治療及び／又は予防だけでなく、任意のＢＴＫ介在性の病態のための治療及び／又は予防にも関連する。強力なＣＹＰ３Ａ阻害剤又はＣＹＰ３Ａ誘導剤は、ＦＤＡ ２０２０ガイドラインに従って定義される。したがって、強力なＣＹＰ３Ａ阻害剤（例えばＣＹＰ３Ａ４阻害剤）は、ＬＯＵ０６４との共投与後、ＬＯＵ０６４単独の投与と比較して、５倍超の曲線下面積（ＡＵＣ）の増加又はクリアランスの８０％超の減少をもたらす阻害剤である。強力なＣＹＰ３Ａ誘導剤（例えば強力なＣＹＰ３Ａ４誘導剤）は、ＬＯＵ０６４との共投与後、ＬＯＵ０６４単独の投与と比較して、ＡＵＣを８０％以上だけ（例えば８５％だけ、９０％だけ、９５％だけ）減少させる誘導剤である。
【0186】
強力なＣＹＰ３Ａ阻害剤及び／又は誘導剤、例えば強力なＣＹＰ３Ａ４阻害剤及び／又は誘導剤との同時投与は、おそらくＬＯＵ０６４薬物曝露の大きな変化を引き起こし得、回避されるべきである。強力なＣＹＰ３Ａ４阻害剤としては、ボセプレビル、クラリスロマイシン、コビシスタット、コニバプタン、ダノプレビル／リトナビル、ダルナビル／リトナビル、エルビテグラビル／リトナビル、イデラリシブ、インジナビル、インジナビル／リトナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ＬＣＬ１６１、ロピナビル／リトナビル、ミベフラジル、ネファゾドン、ネルフィナビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、サキナビル／リトナビル、テラプレビル、テリスロマイシン、チプラナビル／リトナビル、トロレアンドマイシン、Ｖｉｅｋｉｒａ ｐａｃｋ又は／及びボリコナゾールから選択される薬物が挙げられる。ＣＹＰ３Ａ４阻害剤は、グレープフルーツ果汁にも含まれ得る。
【0187】
したがって、別の好ましい実施形態において、ＬＯＵ０６４は、例えば、本明細書において上に定義されるように、ＣＹＰ３Ａ４の強力な阻害剤及び／又は誘導剤と同時に投与されない。
【0188】
ＬＯＵ０６４が、それらの曝露及び有効性に対する大きな影響なく、エチニルエストラジオール又はレボノルゲストレルなどの経口避妊薬と共投与され得ることがさらに分かっている。したがって、好ましい実施形態において、ＬＯＵ０６４は、経口避妊薬と共投与される。
【0189】
好ましい実施形態において、前投薬は、ＬＯＵ０６４の第１の投与の前に投与されない。
【0190】
共有結合不可逆的ＢＴＫ阻害剤として、ＬＯＵ０６４は、デノボタンパク質合成によって相殺されるＢＴＫの不可逆的阻害によって作用する。したがって、何らかの理論によって制約されるのを望むものではないが、Ｂ細胞枯渇後のＢ細胞プールの再構成は、数か月かかり得るが、ＢＴＫ阻害後のＢ細胞機能の回復は、中止の直後、特に、数日以内に達成され得ると考えられる。したがって、必要である場合、この治療法は、迅速に停止され得、それにより、予期せぬ状況が生じた場合に、臨床医及び患者に、より容易で及びより速い反応能力を与える。
【0191】
別の実施形態において、患者が次の１２か月以内に化学療法を受ける予定がある場合、ＬＯＵ０６４は、有利に選択される。
【0192】
特に、ＣＯＶＩＤ－１９パンデミックを考慮すると、Ｂ細胞枯渇患者は、感染症のより高いリスクを有する。さらに、完全に機能的な適応免疫応答がないことは、より重篤な経過につながる可能性が高い。
【0193】
しかしながら、ＬＯＵ０６４は、Ｂ細胞のプールの枯渇をもたらさないため、治療の停止は、完全なＢ細胞機能の迅速な回復につながる。これは、患者及び治療担当医師が、感染又はワクチン接種の要件、特に、生ワクチン及び弱毒化ワクチンによるワクチン接種に迅速に対応する可能性を与える。
【0194】
本発明によれば、ＬＯＵ０６４は、感染中、例えばＣＯＶＩＤ－１９感染中に投与され得る。したがって、ＬＯＵ０６４投与は、感染中、例えばＣＯＶＩＤ－１９感染中に継続され得る。
【0195】
好ましくは、ＬＯＵ０６４投与は、感染が解消されるまで、活動性感染、例えばＣＯＶＩＤ－１９を有する患者において遅延される。
【0196】
したがって、本発明の一実施形態は、ＣＯＶＩＤ－１９に急性感染したか又は以前に感染した患者が治療される、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）の治療又は予防に使用するためのＬＯＵ０６４に関する。
【0197】
さらなる実施形態において、ＬＯＵ０６４治療は、ＣＯＶＩＤ－１９感染中に継続される。
【0198】
好ましい実施形態において、ＬＯＵ０６４治療は、ＣＯＶＩＤ－１９感染中に中断され、感染を克服した後、継続される。
【0199】
本発明のさらに他の実施形態は、患者が、ＬＯＵ０６４治療中にワクチン接種される、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）の治療又は予防に使用するためのＬＯＵ０６４に関する。或いは、患者は、非生ワクチンにより、ＬＯＵ０６４治療中にワクチン接種され得る。一実施形態において、患者は、ＬＯＵ０６４治療中に（例えばＬＯＵ０６４治療を開始した１５日後の時点で）４価インフルエンザワクチン、ＰＰＶ－２３ワクチン又はＫＬＨ新抗原ワクチンを接種される。この実施形態の一態様において、４価インフルエンザワクチンを投与される患者は、ベースラインと比較してワクチン接種の２８日後の時点で、抗血球凝集素抗体力価の＞４倍の増加によって定義されるような応答を達成する。この実施形態の別の態様において、ＰＰＶ－２３ワクチンを投与される患者は、ベースラインと比較してワクチン接種の２８日後にＩｇＧ力価の＞２倍の増加を達成する。さらに別の実施形態において、ＫＬＨ新抗原ワクチンを投与される患者は、ワクチン接種の２８日後に抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価によって測定した際にＴ細胞依存性抗体反応を達成する。
【0200】
本発明の別の実施形態は、ＬＯＵ０６４治療が、ワクチン接種のために中止され、特に、ＬＯＵ０６４治療が、ワクチン接種の５～１０日前、例えば７又は８日前、好ましくは、６週間前に中止され、ワクチン接種後、例えば、ワクチン接種の５～２０日後、好ましくは、５～１０日後、又は最も好ましくは、１０～１５日後に継続される、ＩｇＥ誘導アレルギー反応（例えば食物アレルギー反応）の治療又は予防に使用するためのＬＯＵ０６４に関する。代替的な実施形態において、ワクチン接種は、生ワクチン及び／又は弱毒化ワクチンによるワクチン接種である。この実施形態の特定の態様において、患者は、ＬＯＵ０６４治療を中止した後（例えばＬＯＵ０６４治療を中止した５～１０日後又は７又は８日後）、４価インフルエンザワクチン、ＰＰＶ－２３ワクチン又はＫＬＨ新抗原ワクチンを接種される。この実施形態の一態様において、４価インフルエンザワクチンを投与される患者は、ベースラインと比較してワクチン接種の２８日後の時点で抗血球凝集素抗体力価の＞４倍の増加によって定義されるような応答を達成する。この実施形態の別の態様において、ＰＰＶ－２３ワクチンを投与される患者は、ＩｇＧ力価ベースラインと比較してワクチン接種の２８日後に＞２倍の増加を達成する。さらに別の実施形態において、ＫＬＨ新抗原ワクチンを投与される患者は、ワクチン接種の２８日後に抗ＫＬＨ ＩｇＧ及びＩｇＭ力価によって測定した際にＴ細胞依存性抗体反応を達成する。その後、ＬＯＵ０６４治療が、ワクチン接種の２９日後に開始して継続される。
【0201】
総則
本開示の１つ以上の実施形態の詳細が、上記の添付の説明に記載される。本明細書に記載されるものと同様又は同等の任意の方法及び材料が、本開示の実施又は試験において使用され得るが、好ましい方法及び材料がここで記載される。本開示の他の特徴、目的、及び利点が、本明細書及び特許請求の範囲から明らかであろう。本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形は、文脈上特に明記されない限り、複数の指示対象を含む（例えば、反応は、いくつかの反応を含み得る）。特に定義されない限り、本明細書において使用される全ての専門用語及び科学用語が、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に引用される全ての特許及び刊行物は、参照により援用される。以下の実施例は、本開示の好ましい実施形態をより詳細に例示するために示される。
本開示の１つ以上の実施形態の詳細が、上記の添付の説明に記載される。本明細書に記載されるものと同様又は同等の任意の方法及び材料が、本開示の実施又は試験において使用され得るが、好ましい方法及び材料がここで記載される。本開示の他の特徴、目的、及び利点が、本明細書及び特許請求の範囲から明らかであろう。本明細書及び添付の特許請求の範囲において、単数形は、文脈上特に明記されない限り、複数の指示対象を含む（例えば、反応は、いくつかの反応を含み得る）。特に定義されない限り、本明細書において使用される全ての専門用語及び科学用語が、本開示が属する技術分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。本明細書に引用される全ての特許及び刊行物は、参照により援用される。以下の実施例は、本開示の好ましい実施形態をより詳細に例示するために示される。
【0202】
これらの実施例は、添付の特許請求の範囲によって規定される、開示される主題の範囲を限定するものと決して解釈されるべきではない。
【実施例】
【0203】
実施例１：マウスにおける受身皮膚アナフィラキシー（ＰＣＡ）
ＬＯＵ０６４を、マウスＰＣＡモデルにおいて試験した。モデルには、８～１０週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを使用した。ハプテン特異的ＩｇＥによる受動感作のために、イソフルラン麻酔下のマウスに、右耳に生理食塩水中の２０μｌの抗ＤＮＰ ＩｇＥ及び左耳に２０μｌの生理食塩水の皮内注射を与えた。ＦｃεＲ特異的ＰＣＡの場合、マウスに、低用量の３ｎｇの抗ＤＮＰ ＩｇＥを与えた。最大ＰＣＡの場合、マウスに、高用量の２５ｎｇの抗ＤＮＰ ＩｇＥを与えた。
ＬＯＵ０６４を、マウスＰＣＡモデルにおいて試験した。モデルには、８～１０週齢のＢＡＬＢ／ｃマウスを使用した。ハプテン特異的ＩｇＥによる受動感作のために、イソフルラン麻酔下のマウスに、右耳に生理食塩水中の２０μｌの抗ＤＮＰ ＩｇＥ及び左耳に２０μｌの生理食塩水の皮内注射を与えた。ＦｃεＲ特異的ＰＣＡの場合、マウスに、低用量の３ｎｇの抗ＤＮＰ ＩｇＥを与えた。最大ＰＣＡの場合、マウスに、高用量の２５ｎｇの抗ＤＮＰ ＩｇＥを与えた。
【0204】
ＬＯＵ０６４を、５ｍｌ／ｋｇ体重の体積で経口（ｐ．ｏ．）投与した。第１の用量を、負荷の前の夕方に、感作の４時間後に投与した。翌朝、ハプテン負荷の２時間前に、マウスに、ＬＯＵ０６４の第２の経口投与を与えた。マウスを加熱されたチャンバーに入れることによって、第２の投与の２時間後に、マウスにハプテンを負荷した。次に、動物に、ＰＢＳで希釈された２００μｌの２％のエバンスブルー中の１００μｇのハプテンＤＮＰ－ＨＳＡ（ジニトロフェニル－ヒト血清アルブミン）を静脈内（ｉ．ｖ．）注射した。次に、マウスを、ちょうど３０分間にわたってケージに戻した。３０分後、次に、動物に、イソフルランで麻酔をかけ、化合物曝露の分析のためのＥＤＴＡ被覆採血管を用いて後眼窩で出血させた。次に、マウスを、頸椎脱臼によって殺処分した。６ｍｍのパンチ生検を、左耳及び右耳の両方から採取し、１００μｌのホルマリン中に入れた。皮膚生検を、８０℃で一晩インキュベートして、色素を抽出した。２４時間後、８０μｌのホルマリン溶液を、透明平底９６ウェルプレートに移し、光吸収を６２０ｎｍで読み取った。分析を、右耳（ＩｇＥ）から左耳（生理食塩水）を差し引くことによって行って、どのくらいの色素が生検の皮膚組織中に放出されたかを決定した。統計的有意性を、ＡＮＯＶＡによって決定した。脾臓を、ＢＴＫ占有率分析のために取り出した。
【0205】
血中濃度の分析：血液試料を、示されるように採取し、化合物測定を行った。血液試料に、アセトニトリル（４体積）と混合された構造的に類似した内部標準を添加し、約４０００ｒｐｍ（４℃）で遠心分離した。次に、上清を、マイクロタイタープレートに移した。各試料のアリコートを、親分子の濃度の決定のためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳシステム中に注入した。
【0206】
第２の化合物投与の２．５時間後の、マウス血液中に存在するＬＯＵ０６４の濃度が、表１中に低用量ＩｇＥ感作について示される。
【0207】
【表1】
【0208】
脾臓におけるＢＴＫ占有率の分析（図２）
ＬＯＵ０６４の投与後のＢＴＫ占有率のレベルを、総ＢＴＫタンパク質及び結合ＢＴＫ（＝遊離ＢＴＫ）について別個のＥＬＩＳＡにおいて決定した。ＢＴＫへの化合物の共有結合を、遊離ＢＴＫ（すなわち、化合物によって共有結合的に占有されない）及び総ＢＴＫタンパク質について免疫測定法を用いて決定した。遊離ＢＴＫ測定のために、試料を、ビオチン化共有結合ＢＴＫプローブ（Ｐｕｌｚ Ｒ ｅｔ ａｌ，ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１９，１０，１４６７－１４７２）と共にインキュベートし、次に、試料を、ストレプトアビジンＥＬＩＳＡプレートに加えて、プローブ結合ＢＴＫの結合を可能にした。ＢＴＫへのプローブの結合は、ＢＴＫへの化合物結合と互いに相容れない。プレート結合ＢＴＫを、抗ＢＴＫ抗体（Ｄ３Ｈ５、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いて検出した。総ＢＴＫ測定のために、ＥＬＩＳＡプレートを、Ｄ３Ｈ５抗ＢＴＫで被覆して、総ＢＴＫを捕捉した。次に、異なるエピトープに指向された抗ＢＴＫ抗体（ｎｏ．５３、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて、捕捉されたＢＴＫを検出した。各試料についてのそれぞれの遊離ＢＴＫレベルを、同じ試料における総ＢＴＫレベルに対して正規化し、これらの比率を、ビヒクル対照試料のパーセンテージとして表した。
ＬＯＵ０６４の投与後のＢＴＫ占有率のレベルを、総ＢＴＫタンパク質及び結合ＢＴＫ（＝遊離ＢＴＫ）について別個のＥＬＩＳＡにおいて決定した。ＢＴＫへの化合物の共有結合を、遊離ＢＴＫ（すなわち、化合物によって共有結合的に占有されない）及び総ＢＴＫタンパク質について免疫測定法を用いて決定した。遊離ＢＴＫ測定のために、試料を、ビオチン化共有結合ＢＴＫプローブ（Ｐｕｌｚ Ｒ ｅｔ ａｌ，ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１９，１０，１４６７－１４７２）と共にインキュベートし、次に、試料を、ストレプトアビジンＥＬＩＳＡプレートに加えて、プローブ結合ＢＴＫの結合を可能にした。ＢＴＫへのプローブの結合は、ＢＴＫへの化合物結合と互いに相容れない。プレート結合ＢＴＫを、抗ＢＴＫ抗体（Ｄ３Ｈ５、Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）を用いて検出した。総ＢＴＫ測定のために、ＥＬＩＳＡプレートを、Ｄ３Ｈ５抗ＢＴＫで被覆して、総ＢＴＫを捕捉した。次に、異なるエピトープに指向された抗ＢＴＫ抗体（ｎｏ．５３、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ）を用いて、捕捉されたＢＴＫを検出した。各試料についてのそれぞれの遊離ＢＴＫレベルを、同じ試料における総ＢＴＫレベルに対して正規化し、これらの比率を、ビヒクル対照試料のパーセンテージとして表した。
【0209】
脾臓ＢＴＫ占有率については、各脾臓を粉砕し、１０分間氷上で、プロテアーゼ阻害剤混合液（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ、Ｒｏｃｈｅ ＃１１ ８３６ １７０ ００１）及び５ｍＭのＥＤＴＡを含有する０．４ｍｌの冷Ｐｉｅｒｃｅ ＩＰ溶解緩衝液（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ ＃８７７８７）中で、ＧｅｎｔｌｅＭＡＣＳ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ、＃１３０－０９３－２３６）管中で溶解させた。脾臓溶解物を、遠心分離によって除去し、アリコートを、２時間にわたって室温で１０μＭの共有結合ビオチン化ＢＴＫプローブと共にインキュベートした。２つの別個のＥＬＩＳＡアッセイを実行して、総ＢＴＫタンパク質及びＢＴＫ結合共有結合プローブの相対レベル（遊離非占有ＢＴＫに相当する）を決定した。
【0210】
相対ＢＴＫ占有率を、各試料についての総ＢＴＫに対する遊離ＢＴＫ（結合ＢＴＫのシグナル）の比率：Ｒｉ＝遊離ＢＴＫ／総ＢＴＫとして計算した。次に、個々のＲｉ値を、ビヒクル群に対して正規化し、パーセント占有率：（Ｒｉビヒクル群の平均－Ｒｉ）／（Ｒｉビヒクル群の平均）＊１００％として表した。
【0211】
図２は、ＬＯＵ０６４の第２の経口投与の２．５時間後の脾臓における相対ＢＴＫ占有率を示す。ＢＴＫ占有率の高い及びほぼ最大レベルが、全ての用量レベルについて見られた。ビヒクル対照に対する占有レベルは、３ｍｇ／ｋｇについて８９．１％±１．７であり、１０～１００ｍｇ／ｋｇの用量について９８．４～９９．７％であった。
【0212】
結論：
上記の結果に基づいて、ＢＴＫ阻害剤、ＬＯＵ０６４は、皮膚の肥満細胞におけるＦｃεＲ応答を阻害するのに有効である（図１）。この試験は、アナフィラキシー反応のほぼ完全な阻害が、３ｍｇ／ｋｇ程度の用量で観察されたことを示した。第２の経口投与の２．５時間後のＬＯＵ０６４の血中濃度は、用量に比例した増加を示した。両方の実験における血液曝露は、同等であった。同じ時点で測定された脾臓ＢＴＫ占有率は、より低い用量について比例性を有してほぼ完全な目標占有率を示した。結論として、ＬＯＵ０６４は、２回の経口投与後に、マウスＰＣＡモデルにおいて著しく皮膚アナフィラキシーを阻害することが実証された。
上記の結果に基づいて、ＢＴＫ阻害剤、ＬＯＵ０６４は、皮膚の肥満細胞におけるＦｃεＲ応答を阻害するのに有効である（図１）。この試験は、アナフィラキシー反応のほぼ完全な阻害が、３ｍｇ／ｋｇ程度の用量で観察されたことを示した。第２の経口投与の２．５時間後のＬＯＵ０６４の血中濃度は、用量に比例した増加を示した。両方の実験における血液曝露は、同等であった。同じ時点で測定された脾臓ＢＴＫ占有率は、より低い用量について比例性を有してほぼ完全な目標占有率を示した。結論として、ＬＯＵ０６４は、２回の経口投与後に、マウスＰＣＡモデルにおいて著しく皮膚アナフィラキシーを阻害することが実証された。
【0213】
実施例２：マウス皮膚における逆受身アルサス（ＲＰＡ）反応
ＬＯＵ０６４の単回投与の効果を、急性マウス逆受身アルサス（ＲＰＡ）モデルにおいて試験して、ＩｇＧ免疫複合体によって引き起こされ、肥満細胞上のＦｃＧＲＩＩＩによって媒介される皮膚アナフィラキシー反応に対するその効果を評価した。８～１０週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ６マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ，Ｆｒａｎｃｅ）を使用した。マウスの背中を、皮膚注射の２４時間前に剃毛した。これは、皮膚の何らかの潜在的な刺激を解消することを可能にした。アルサス反応が、用量反応試験における化合物の２時間後又は時間経過試験において示される時点で引き起こされた。アルサス反応を引き起こすために、ＰＢＳ（Ｃ６５３４、Ｓｉｇｍａ）中３０μｇの濃度で５０μｌのＰＢＳ（対照部位）又はポリクローナルウサギ抗オボアルブミンＩｇＧを、背面皮膚中で皮内（ｉ．ｄ．）注入した。皮内注射の直後に、生理食塩水（０５４５０ Ｆｌｕｋａ）中の２００μｌのオボアルブミン（２０ｍｇ／ｋｇ）の静脈内（ｉ．ｖ．）注入を行った。オボアルブミンの注入の３時間後、マウスを殺処分し、化合物濃度の監視のために出血させ、脾臓を、ＢＴＫ占有率測定のために取り出した。注入された対照及び抗オボアルブミンＩｇＧ皮膚部位の厚さを、デジタルノギスを用いて測定し、次に、抗オボアルブミンＩｇＧ注入部位の厚さから生理食塩水対照部位を引いた厚さを、全ての治療群のマウスについて計算した。
ＬＯＵ０６４の単回投与の効果を、急性マウス逆受身アルサス（ＲＰＡ）モデルにおいて試験して、ＩｇＧ免疫複合体によって引き起こされ、肥満細胞上のＦｃＧＲＩＩＩによって媒介される皮膚アナフィラキシー反応に対するその効果を評価した。８～１０週齢の雌Ｃ５７Ｂｌ６マウス（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒ，Ｆｒａｎｃｅ）を使用した。マウスの背中を、皮膚注射の２４時間前に剃毛した。これは、皮膚の何らかの潜在的な刺激を解消することを可能にした。アルサス反応が、用量反応試験における化合物の２時間後又は時間経過試験において示される時点で引き起こされた。アルサス反応を引き起こすために、ＰＢＳ（Ｃ６５３４、Ｓｉｇｍａ）中３０μｇの濃度で５０μｌのＰＢＳ（対照部位）又はポリクローナルウサギ抗オボアルブミンＩｇＧを、背面皮膚中で皮内（ｉ．ｄ．）注入した。皮内注射の直後に、生理食塩水（０５４５０ Ｆｌｕｋａ）中の２００μｌのオボアルブミン（２０ｍｇ／ｋｇ）の静脈内（ｉ．ｖ．）注入を行った。オボアルブミンの注入の３時間後、マウスを殺処分し、化合物濃度の監視のために出血させ、脾臓を、ＢＴＫ占有率測定のために取り出した。注入された対照及び抗オボアルブミンＩｇＧ皮膚部位の厚さを、デジタルノギスを用いて測定し、次に、抗オボアルブミンＩｇＧ注入部位の厚さから生理食塩水対照部位を引いた厚さを、全ての治療群のマウスについて計算した。
【0214】
３、１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの単回の経口（ｐ．ｏ．）ナノ懸濁液強制投与として投与された、マウスにおける皮膚腫脹に対するＬＯＵ０６４治療の効果が、図３に示される。ビヒクル処置マウスと比較して、アルサス反応誘導の時間の２時間前に投与されたＬＯＵ０６４は、３時間の時点で皮膚腫脹反応の用量に関連する低下を実証した。アルサス反応の阻害は、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの２つの高用量でそれぞれ、７３．０％±１４．６及び６１．２％±１４．５で、統計的に有意であった。
【0215】
血液中のＬＯＵ０６４レベルの分析
血液試料を、示されるように採取し、化合物測定を行った。血液試料に、アセトニトリル（４体積）と混合された構造的に類似した内部標準を添加し、約４０００ｒｐｍ（４℃）で遠心分離した。次に、上清を、マイクロタイタープレートに移した。各試料のアリコートを、親分子の濃度の決定のためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳシステム中に注入した。ＬＯＵ０６４投与の５時間後の、マウス血液中に存在するＬＯＵ０６４の濃度が、表２に示される。
血液試料を、示されるように採取し、化合物測定を行った。血液試料に、アセトニトリル（４体積）と混合された構造的に類似した内部標準を添加し、約４０００ｒｐｍ（４℃）で遠心分離した。次に、上清を、マイクロタイタープレートに移した。各試料のアリコートを、親分子の濃度の決定のためにＬＣ－ＭＳ／ＭＳシステム中に注入した。ＬＯＵ０６４投与の５時間後の、マウス血液中に存在するＬＯＵ０６４の濃度が、表２に示される。
【0216】
【表2】
【0217】
ＢＴＫ占有率分析：
脾臓におけるＢＴＫ占有率について、実験を、ＰＣＡ実施例に記載されるように行った。肺ＢＴＫ占有率について、器官を生理食塩水でかん流させて、（溶解緩衝液体積が５００μｌであったことを除いて）脾臓の場合と同じように血液を除去した後、気管を含む完全な肺から溶解物を調製した。次に、肺溶解物を、別個のＥＬＩＳＡにおいて遊離ＢＴＫについて分析した。これは、抗ＢＴＫ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃８５４７、担体なし）を用いた捕捉工程からなっていた。次に、捕捉されたＢＴＫタンパク質を、室温で１時間にわたって１μＭの共有結合ビオチン化ＢＴＫプローブと共にインキュベートした。ＢＴＫ結合ビオチン化プローブを、ストレプトアビジン－ＨＲＰコンジュゲート（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃３９９９、１：１’０００の希釈で使用される）及び化学発光基質（Ｓｕｐｅｒｓｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ Ｐｉｃｏ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃３７０７０）によって検出した。発光値を、総ＢＴＫ ＥＬＩＳＡについてＢＴＫ捕捉抗体の非存在下で及びＢＴＫ結合ＥＬＩＳＡについてプローブの非存在下でそれぞれ測定された対照試料からのＥＬＩＳＡバックグラウンド読み取りに対して補正した。相対ＢＴＫ占有率を、各試料について総ＢＴＫに対する遊離ＢＴＫの比率（共有結合ビオチン化プローブ結合ＢＴＫのシグナル）：Ｒ＝遊離ＢＴＫ／総ＢＴＫとして計算した。次に、個々のＲｉ値を、ビヒクル群に対して正規化し、パーセント占有率：（Ｒｉビヒクル群の平均－Ｒｉ）／（Ｒｉビヒクル群の平均）＊１００％として表した。
脾臓におけるＢＴＫ占有率について、実験を、ＰＣＡ実施例に記載されるように行った。肺ＢＴＫ占有率について、器官を生理食塩水でかん流させて、（溶解緩衝液体積が５００μｌであったことを除いて）脾臓の場合と同じように血液を除去した後、気管を含む完全な肺から溶解物を調製した。次に、肺溶解物を、別個のＥＬＩＳＡにおいて遊離ＢＴＫについて分析した。これは、抗ＢＴＫ（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃８５４７、担体なし）を用いた捕捉工程からなっていた。次に、捕捉されたＢＴＫタンパク質を、室温で１時間にわたって１μＭの共有結合ビオチン化ＢＴＫプローブと共にインキュベートした。ＢＴＫ結合ビオチン化プローブを、ストレプトアビジン－ＨＲＰコンジュゲート（Ｃｅｌｌ Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ、＃３９９９、１：１’０００の希釈で使用される）及び化学発光基質（Ｓｕｐｅｒｓｉｇｎａｌ ＥＬＩＳＡ Ｐｉｃｏ、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ、＃３７０７０）によって検出した。発光値を、総ＢＴＫ ＥＬＩＳＡについてＢＴＫ捕捉抗体の非存在下で及びＢＴＫ結合ＥＬＩＳＡについてプローブの非存在下でそれぞれ測定された対照試料からのＥＬＩＳＡバックグラウンド読み取りに対して補正した。相対ＢＴＫ占有率を、各試料について総ＢＴＫに対する遊離ＢＴＫの比率（共有結合ビオチン化プローブ結合ＢＴＫのシグナル）：Ｒ＝遊離ＢＴＫ／総ＢＴＫとして計算した。次に、個々のＲｉ値を、ビヒクル群に対して正規化し、パーセント占有率：（Ｒｉビヒクル群の平均－Ｒｉ）／（Ｒｉビヒクル群の平均）＊１００％として表した。
【0218】
図４は、ＬＯＵ０６４の経口投与の５時間後の脾臓における相対ＢＴＫ占有率を示す。ＢＴＫ占有率の用量依存的な増加が見られ、３ｍｇ／ｋｇについて６８．１％±１０．０、１０ｍｇ／ｋｇについて８２．１％±２．９２、３０ｍｇ／ｋｇについて９１．３％±３．６２及び１００ｍｇ／ｋｇについて９９．３％±０．７の平均ＢＴＫ占有率を達成した。
【0219】
その後の試験において、本発明者らは、皮膚におけるＬＯＵ０６４の薬理作用の持続時間を評価した。アルサス反応が、３０ｍｇ／ｋｇのＬＯＵ０６４の経口投与の２時間後の時点で、以前の試験と同じ時点で引き起こされた場合、皮膚腫脹の阻害は、６５．７％（±１４．６）で最大であった。この時点で、効果は、以前の試験と類似の範囲内であった。アルサス反応が、より後の時点で引き起こされた場合、皮膚におけるＬＯＵ０６４の薬理作用が、４５時間の時点までにビヒクル群のレベルに戻ったことが明らかになった（図５）。
【0220】
同じ動物から、脾臓及び肺におけるＢＴＫ占有率を、終了の時点（アルサス反応を引き起こした３時間後）で分析した。脾臓及び肺におけるＢＴＫ占有率は、皮膚腫脹に対する薬理作用と比較して、非常に類似した動態を辿った（図６）。
【0221】
化合物曝露を、３０ｍｇ／ｋｇのＬＯＵ０６４の単回投与後の最初の時点で評価した（表３）。
【0222】
【表3】
【0223】
結論：
この実験は、ＩｇＧ免疫複合体及び炎症性ＦｃγＲによって媒介される遅延型皮膚アナフィラキシーのモデルであるマウスＲＰＡにおけるＬＯＵ０６４の効果を示した。ＲＰＡ応答の誘導の２時間前の、３、１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの単回用量のＬＯＵ０６４による経口治療は、免疫複合体負荷の３時間後に、用量依存的に皮膚腫脹を軽減した。皮膚腫脹阻害は、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの用量の両方で、統計的に有意であった。経口投与の５時間後のＬＯＵ０６４の血中濃度は、用量と共に増加し、いくらかの比例過剰（ｏｖｅｒｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌｉｔｙ）を示した。この限られた比例過剰が、Ｔｍａｘ又はＡＵＣの変化を反映しているかどうかは不明である。投与の５時間後に測定された脾臓ＢＴＫ占有率は、用量依存的な増加を示し、最大レベルに達した。３及び１０ｍｇ／ｋｇのより低い２つの用量で、脾臓占有率は、皮膚腫脹に対する効果を超えるようであった。これは、高度にかん流された脾臓と比較して、あまりかん流されない皮膚の単回投与後のわずかに遅い目標占有率動態を反映し得る。３０ｍｇ／ｋｇの単回投与後のＬＯＵ０６４の薬理作用は、アルサス反応が、経口投与の２時間後に引き起こされた場合に最大であった。アルサス反応が、より後の時点で引き起こされた場合、効果は減少し、投与の４５時間後の時点でビヒクル群と同様のレベルに達した。最後の時点に向かう皮膚腫脹阻害のベースラインドリフトは、時間の経過に伴う、群にわたるアルサス負荷に対する増加した応答に起因し得る。ビヒクル群を、２及び５時間の化合物群と同時に、１日目に測定した。同じ時間経過にわたって、ＢＴＫ占有率を、脾臓及び肺において監視した。両方の組織において、ＢＴＫ占有率は、皮膚腫脹に対する薬理作用と比較して、非常に類似した動態を辿った。皮膚におけるＢＴＫ占有率を測定するのに十分に感度の高い方法がない場合、ＬＯＵ０６４の単回経口投与後の皮膚ＢＴＫ占有率が、脾臓占有率及び皮膚薬理学と同様の動態を辿ることが推測され得る。結論として、ＬＯＵ０６４は、単回経口投与後のマウス逆受身アルサスモデルにおける皮膚腫脹を有意に及び用量依存的に阻害することが実証された。
この実験は、ＩｇＧ免疫複合体及び炎症性ＦｃγＲによって媒介される遅延型皮膚アナフィラキシーのモデルであるマウスＲＰＡにおけるＬＯＵ０６４の効果を示した。ＲＰＡ応答の誘導の２時間前の、３、１０、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの単回用量のＬＯＵ０６４による経口治療は、免疫複合体負荷の３時間後に、用量依存的に皮膚腫脹を軽減した。皮膚腫脹阻害は、３０及び１００ｍｇ／ｋｇの用量の両方で、統計的に有意であった。経口投与の５時間後のＬＯＵ０６４の血中濃度は、用量と共に増加し、いくらかの比例過剰（ｏｖｅｒｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎａｌｉｔｙ）を示した。この限られた比例過剰が、Ｔｍａｘ又はＡＵＣの変化を反映しているかどうかは不明である。投与の５時間後に測定された脾臓ＢＴＫ占有率は、用量依存的な増加を示し、最大レベルに達した。３及び１０ｍｇ／ｋｇのより低い２つの用量で、脾臓占有率は、皮膚腫脹に対する効果を超えるようであった。これは、高度にかん流された脾臓と比較して、あまりかん流されない皮膚の単回投与後のわずかに遅い目標占有率動態を反映し得る。３０ｍｇ／ｋｇの単回投与後のＬＯＵ０６４の薬理作用は、アルサス反応が、経口投与の２時間後に引き起こされた場合に最大であった。アルサス反応が、より後の時点で引き起こされた場合、効果は減少し、投与の４５時間後の時点でビヒクル群と同様のレベルに達した。最後の時点に向かう皮膚腫脹阻害のベースラインドリフトは、時間の経過に伴う、群にわたるアルサス負荷に対する増加した応答に起因し得る。ビヒクル群を、２及び５時間の化合物群と同時に、１日目に測定した。同じ時間経過にわたって、ＢＴＫ占有率を、脾臓及び肺において監視した。両方の組織において、ＢＴＫ占有率は、皮膚腫脹に対する薬理作用と比較して、非常に類似した動態を辿った。皮膚におけるＢＴＫ占有率を測定するのに十分に感度の高い方法がない場合、ＬＯＵ０６４の単回経口投与後の皮膚ＢＴＫ占有率が、脾臓占有率及び皮膚薬理学と同様の動態を辿ることが推測され得る。結論として、ＬＯＵ０６４は、単回経口投与後のマウス逆受身アルサスモデルにおける皮膚腫脹を有意に及び用量依存的に阻害することが実証された。
【0224】
実施例３：オボアルブミン誘導性アナフィラキシーマウスモデル
この実験を、ポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ）を注入されたＯＶＡ－感作マウスにおいてＬＯＵ０６４の抗炎症性効果（１０ｍｇ及び３０ｍｇ／Ｋｇを調べるために行った。
この実験を、ポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ）を注入されたＯＶＡ－感作マウスにおいてＬＯＵ０６４の抗炎症性効果（１０ｍｇ及び３０ｍｇ／Ｋｇを調べるために行った。
【0225】
【表4】
【0226】
動物：
雄Ｂａｌｂ／ｃマウス（２０～３０ｇ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒｓ ＵＫ Ｌｔｄ）を、５つのケージで試験の開始前の７日間にわたって飼育し、１２：１２時間の明暗サイクルに供した。マウスに、標準的なマウス餌を供給し、水を自由に与えた。
雄Ｂａｌｂ／ｃマウス（２０～３０ｇ、Ｃｈａｒｌｅｓ Ｒｉｖｅｒｓ ＵＫ Ｌｔｄ）を、５つのケージで試験の開始前の７日間にわたって飼育し、１２：１２時間の明暗サイクルに供した。マウスに、標準的なマウス餌を供給し、水を自由に与えた。
【0227】
アレルゲン曝露：
マウスを、０、７及び１４日目に、オボアルブミン（１５μｇ、皮下（ｓ．ｃ．））及び２５μＬのＩｍｊｅｃｔ Ａｌｕｍで能動感作した。肺における局所炎症反応を引き起こすために、マウスを、２１～２４日目に、２０分間にわたって超音波ネブライザー（Ａｅｒｏｇｅｎ）により生成された、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中１％ ｗ／ｖのオボアルブミンのエアロゾルに繰り返し曝露した。２４日目のＯＶＡへの最後の曝露の１６時間後、ポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ、１００μｇ／動物）又はビヒクル（ＰＢＳ）を、ケタミン（１００ｍｇ／Ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ．））及びキシラジン（１０ｍｇ／Ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ．））による麻酔下で、ＦＭＪ－２５０高圧シリンジ、Ｐｅｎｎ－Ｃｅｎｔｕｒｙ）と共にＭｉｃｒｏｓｐｒａｙｅｒ（モデルＩＡ－１Ｃを用いて気管内に送達した。
マウスを、０、７及び１４日目に、オボアルブミン（１５μｇ、皮下（ｓ．ｃ．））及び２５μＬのＩｍｊｅｃｔ Ａｌｕｍで能動感作した。肺における局所炎症反応を引き起こすために、マウスを、２１～２４日目に、２０分間にわたって超音波ネブライザー（Ａｅｒｏｇｅｎ）により生成された、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）中１％ ｗ／ｖのオボアルブミンのエアロゾルに繰り返し曝露した。２４日目のＯＶＡへの最後の曝露の１６時間後、ポリイノシン－ポリシチジル酸（ポリＩ：Ｃ、１００μｇ／動物）又はビヒクル（ＰＢＳ）を、ケタミン（１００ｍｇ／Ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ．））及びキシラジン（１０ｍｇ／Ｋｇ、腹腔内（ｉ．ｐ．））による麻酔下で、ＦＭＪ－２５０高圧シリンジ、Ｐｅｎｎ－Ｃｅｎｔｕｒｙ）と共にＭｉｃｒｏｓｐｒａｙｅｒ（モデルＩＡ－１Ｃを用いて気管内に送達した。
【0228】
ＬＯＵ０６４及びビヒクル処置：
マウスに、ＬＯＵ０６４又はビヒクル（０．５％のＴｗｅｅｎ８０／０．５％のメチルセルロース（４００ｃＰ）／９９％の水）経口（ｐ．ｏ．）を１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与し、次に、ポリＩ：Ｃの１時間前に単回用量のビヒクル（６７％のＰＥＧ２００／３３％のＰＢＳ）を与えた。
マウスに、ＬＯＵ０６４又はビヒクル（０．５％のＴｗｅｅｎ８０／０．５％のメチルセルロース（４００ｃＰ）／９９％の水）経口（ｐ．ｏ．）を１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与し、次に、ポリＩ：Ｃの１時間前に単回用量のビヒクル（６７％のＰＥＧ２００／３３％のＰＢＳ）を与えた。
【0229】
【表5】
【0230】
気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）及び細胞計数：
最後のＯＶＡ負荷の２４時間後、血液試料を、静脈穿刺によって、予め冷却されたＬｉ Ｈｅｐ管中に収集した。各試料を、穏やかに混合し、最大で１５分間濡れた氷上に保持してから、遠心分離（１５００ｇ、４℃で１０分間）にかけて、血漿を準備した。各試料を等分し、輸送まで－８０℃で貯蔵した。血液採取の直後に、動物を、ペントバルビタールの過量投与により殺処分した。次に、気管を、首の正中切開及び筋層の分離によって分離した。気管を小さく切開し、プラスチックカニューレを挿入し、縫合糸で所定の位置に固定した。次に、０．５ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水を用いて肺をフラッシュすることによって気道を洗浄した。回復した体積が１．６ｍＬになるまで、この手順を繰り返した。次に、分離されたＢＡＬＦを、４℃で１０分間にわたって１５００ｒｐｍで遠心分離して、任意の今後のサイトカイン分析のために、－８０℃で上清を等分した（４００μＬ）。次に、細胞ペレットを、１．６ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水中で再度懸濁させ、ＢＡＬ細胞を、総数及び差異数（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｎｕｍｂｅｒ）について分析した。ＢＡＬ流体試料の総及び差異細胞数を、ＸＴ－２０００ｉＶ ａｎａｌｙｓｅｒ（Ｓｙｓｍｅｘ）を用いて測定した。異なって分類される細胞型は、好酸球（図８）、好中球（図９）、又は単核細胞（マクロファージ（図１０）及びリンパ球（図１１）であった。
最後のＯＶＡ負荷の２４時間後、血液試料を、静脈穿刺によって、予め冷却されたＬｉ Ｈｅｐ管中に収集した。各試料を、穏やかに混合し、最大で１５分間濡れた氷上に保持してから、遠心分離（１５００ｇ、４℃で１０分間）にかけて、血漿を準備した。各試料を等分し、輸送まで－８０℃で貯蔵した。血液採取の直後に、動物を、ペントバルビタールの過量投与により殺処分した。次に、気管を、首の正中切開及び筋層の分離によって分離した。気管を小さく切開し、プラスチックカニューレを挿入し、縫合糸で所定の位置に固定した。次に、０．５ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水を用いて肺をフラッシュすることによって気道を洗浄した。回復した体積が１．６ｍＬになるまで、この手順を繰り返した。次に、分離されたＢＡＬＦを、４℃で１０分間にわたって１５００ｒｐｍで遠心分離して、任意の今後のサイトカイン分析のために、－８０℃で上清を等分した（４００μＬ）。次に、細胞ペレットを、１．６ｍＬのリン酸緩衝生理食塩水中で再度懸濁させ、ＢＡＬ細胞を、総数及び差異数（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｎｕｍｂｅｒ）について分析した。ＢＡＬ流体試料の総及び差異細胞数を、ＸＴ－２０００ｉＶ ａｎａｌｙｓｅｒ（Ｓｙｓｍｅｘ）を用いて測定した。異なって分類される細胞型は、好酸球（図８）、好中球（図９）、又は単核細胞（マクロファージ（図１０）及びリンパ球（図１１）であった。
【0231】
結論：ＬＯＵ０６４（１０ｍｇ／ｋｇ、３０ｍｇ／Ｋｇ）による治療は、肺アナフィラキシーに関与する細胞（好酸球、好塩基球、マクロファージ及びリンパ球）の数を有意に減少させた。
【0232】
実施例４：ＬＡＤ２細胞におけるＦｃεＲ誘発性肥満細胞脱顆粒の阻害
論拠及び方法：ヒト肥満細胞症細胞株ＬＡＤ２は、ＦｃεＲＩを発現し、受容体の架橋時に、細胞は、脱顆粒し、β－トリプターゼ及びヘキソサミニダーゼのような炎症性メディエーターを放出する（Ｗｅｒｎｅｒｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；１４（７）：４７８－９４）。アッセイは、４－ヒドロキシ－３－ヨード－５－ニトロフェニル酢酸（ＮＩＰ）ハプテン化ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及びＮＩＰ特異的キメラＩｇＥ抗体ＪＷ８を含む（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。ＬＡＤ２細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲを架橋させることによって引き起こした。１時間後、上清を収集し、β－トリプターゼレベルについて分析した。
論拠及び方法：ヒト肥満細胞症細胞株ＬＡＤ２は、ＦｃεＲＩを発現し、受容体の架橋時に、細胞は、脱顆粒し、β－トリプターゼ及びヘキソサミニダーゼのような炎症性メディエーターを放出する（Ｗｅｒｎｅｒｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１４，Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；１４（７）：４７８－９４）。アッセイは、４－ヒドロキシ－３－ヨード－５－ニトロフェニル酢酸（ＮＩＰ）ハプテン化ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）及びＮＩＰ特異的キメラＩｇＥ抗体ＪＷ８を含む（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。ＬＡＤ２細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲを架橋させることによって引き起こした。１時間後、上清を収集し、β－トリプターゼレベルについて分析した。
【0233】
結果：好塩基球活性化アッセイにおけるその強力な活性と一致して、ＬＯＵ０６４は、７．０ｎＭ±２．６（ｎ＝３）のＩＣ５０で、ＬＡＤ２細胞におけるＩｇＥ／ＦｃεＲ誘発性肥満細胞脱顆粒の強力な阻害を示した。
【0234】
実施例５：末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）誘導肥満細胞のＦｃεＲ誘発性脱顆粒の阻害
論拠及び方法：初代ヒト肥満細胞を、ＰＢＭＣから分離されたＣＤ３４陽性前駆細胞から得た（（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。健康なボランティアからの血液が、インフォームドコンセントの下で提供され、Ｓｗｉｓｓ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｃｔ及び責任ある倫理委員会による承認（Ｅｔｈｉｋｋｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｎｏｒｄｗｅｓｔ－ｕｎｄ Ｚｅｎｔｒａｌｓｃｈｗｅｉｚ）に従って、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｄｏｎｏｒ Ｐｒｏｇｒａｍによって収集された。簡潔に述べると、ＣＤ３４陽性細胞を、正の選択によって末梢血から分離し、ＳＣＦ、ＩＬ－６及びＩＬ－３を含有する培地中で培養した。６週間の分化培養の後、肥満細胞を収集し、ｃ－Ｋｉｔ（ＣＤ１１７）及びＦｃεＲＩの発現について表現型で特性評価した。脱顆粒は、ＮＩＰハプテン化ＢＳＡ及びＮＩＰ特異的キメラＩｇＥ抗体ＪＷ８に基づいている（ＲＤ－２０１３－００４１２に記載される）。肥満細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲを架橋させることによって引き起こした。１時間後、上清を収集し、β－トリプターゼレベルについて分析した。
論拠及び方法：初代ヒト肥満細胞を、ＰＢＭＣから分離されたＣＤ３４陽性前駆細胞から得た（（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。健康なボランティアからの血液が、インフォームドコンセントの下で提供され、Ｓｗｉｓｓ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｃｔ及び責任ある倫理委員会による承認（Ｅｔｈｉｋｋｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｎｏｒｄｗｅｓｔ－ｕｎｄ Ｚｅｎｔｒａｌｓｃｈｗｅｉｚ）に従って、Ｎｏｖａｒｔｉｓ Ｔｉｓｓｕｅ Ｄｏｎｏｒ Ｐｒｏｇｒａｍによって収集された。簡潔に述べると、ＣＤ３４陽性細胞を、正の選択によって末梢血から分離し、ＳＣＦ、ＩＬ－６及びＩＬ－３を含有する培地中で培養した。６週間の分化培養の後、肥満細胞を収集し、ｃ－Ｋｉｔ（ＣＤ１１７）及びＦｃεＲＩの発現について表現型で特性評価した。脱顆粒は、ＮＩＰハプテン化ＢＳＡ及びＮＩＰ特異的キメラＩｇＥ抗体ＪＷ８に基づいている（ＲＤ－２０１３－００４１２に記載される）。肥満細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲを架橋させることによって引き起こした。１時間後、上清を収集し、β－トリプターゼレベルについて分析した。
【0235】
結果：他のＦｃεＲ阻害活性と同様に、ＬＯＵ０６４は、５．７ｎＭ±２．４（ｎ＝７ドナー）のＩＣ５０で、初代ヒトＰＢＭＣ由来肥満細胞のインビトロ脱顆粒を強力に及び完全に阻止した。
【0236】
実施例６：皮膚由来ヒト肥満細胞の阻害。
論拠及び方法：皮膚組織を、初代ヒト組織肥満細胞の供給源として使用した。手術皮膚廃棄物試料が、インフォームドコンセントの下で提供され、Ｓｗｉｓｓ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｃｔ及び責任ある倫理委員会による承認（Ｅｔｈｉｋｋｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｎｏｒｄｗｅｓｔ ｕｎｄ Ｚｅｎｔｒａｌｓｃｈｗｅｉｚ）に従って、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｂａｓｅｌによって収集された。皮膚組織を解離させ、無傷の肥満細胞を、Ｋｕｌｋａ ａｎｄ Ｍｅｔｃａｌｆｅのプロトコル（Ｋｕｌｋａ ｅｔ ａｌ．２０１０、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；ＳＵＰＰＬ．９０：１－１１における現行のプロトコル）に従って準備した。分離された肥満細胞を、表現型で特性評価し、上述されるように脱顆粒アッセイに使用した（（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。肥満細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にプレインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲＩを架橋させることによって引き起こした。３０分後、上清を収集し、ＨＴＲＦに基づく免疫測定法（Ｃｉｓｂｉｏ Ｂｉｏａｓｓａｙｓ）を用いてヒスタミンについて分析した。
論拠及び方法：皮膚組織を、初代ヒト組織肥満細胞の供給源として使用した。手術皮膚廃棄物試料が、インフォームドコンセントの下で提供され、Ｓｗｉｓｓ Ｈｕｍａｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｃｔ及び責任ある倫理委員会による承認（Ｅｔｈｉｋｋｏｍｍｉｓｓｉｏｎ Ｎｏｒｄｗｅｓｔ ｕｎｄ Ｚｅｎｔｒａｌｓｃｈｗｅｉｚ）に従って、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ Ｂａｓｅｌによって収集された。皮膚組織を解離させ、無傷の肥満細胞を、Ｋｕｌｋａ ａｎｄ Ｍｅｔｃａｌｆｅのプロトコル（Ｋｕｌｋａ ｅｔ ａｌ．２０１０、Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ；ＳＵＰＰＬ．９０：１－１１における現行のプロトコル）に従って準備した。分離された肥満細胞を、表現型で特性評価し、上述されるように脱顆粒アッセイに使用した（（Ｎｅｕｂｅｒｇｅｒ，Ｍ．Ｓ．ｅｔ ａｌ．（１９８５），Ｎａｔｕｒｅ ３１４（６００８），ｐｐ ２６８－７０．ｄｏｉ：１０．１０３８／３１４２６８ａ０）。肥満細胞を、ＪＷ８ ＩｇＥ抗体で感作させ、次に、３７℃で３０分間にわたって連続化合物希釈物と共にプレインキュベートした。次に、脱顆粒を、ハプテン化ＮＩＰ－ＢＳＡを加えて、ＦｃεＲＩを架橋させることによって引き起こした。３０分後、上清を収集し、ＨＴＲＦに基づく免疫測定法（Ｃｉｓｂｉｏ Ｂｉｏａｓｓａｙｓ）を用いてヒスタミンについて分析した。
【0237】
結果：以前のタイプのＦｃεＲＩ誘発性細胞シグナル伝達における活性と同様に、ＬＯＵ０６４は、１６．５ｎＭ±５．０（ｎ＝２ドナー）のＩＣ５０で、ヒト初代皮膚由来肥満細胞からのヒスタミン放出を強力に阻害した。
【0238】
実施例４～６におけるいくつかの細胞型にわたって評価されたＬＯＵ０６４のインビトロ細胞内効力は、ＦｃεＲ経路によって誘導されるアレルギー性疾患におけるその使用を裏付ける。
【0239】
実施例７：ＬＯＵ０６４の用量（論拠）
マウスＰＣＡモデルにおいて、ＬＯＵ０６４が、３ｍｇ／ｋｇ程度の用量で皮膚の肥満細胞におけるＦｃεＲ応答を阻害するのに有効であることが実証された（図１）。ＩｇＥ誘導アレルギー反応（特に、食物アレルギー反応）の予防及び／又は治療における有効性を予測するためのより関連のあるバイオマーカーであり得る脾臓ＢＴＫ占有率は、１０及び１００ｍｇ／ｋｇでほぼ完全な占有率を示す。
マウスＰＣＡモデルにおいて、ＬＯＵ０６４が、３ｍｇ／ｋｇ程度の用量で皮膚の肥満細胞におけるＦｃεＲ応答を阻害するのに有効であることが実証された（図１）。ＩｇＥ誘導アレルギー反応（特に、食物アレルギー反応）の予防及び／又は治療における有効性を予測するためのより関連のあるバイオマーカーであり得る脾臓ＢＴＫ占有率は、１０及び１００ｍｇ／ｋｇでほぼ完全な占有率を示す。
【0240】
マウスにおいて、脾臓及び肺におけるＢＴＫ占有率が、非常に類似した動態を辿ったことがさらに実証された（図６）。
【0241】
ＬＯＵ０６４が、主に高用量で（３０ｍｇ／Ｋｇで７３％のアルサス反応の阻害で）、マウスＲＣＡモデルにおける皮膚腫脹を軽減するのに有効であることも実証された。
【0242】
重要なことに、オボアルブミン誘発性アナフィラキシーモデルにおけるマウスのＬＯＵ０６４治療が、１０ｍｇ／ｋｇ及び３０ｍｇ／ｋｇの用量で肺アナフィラキシーに関与する細胞の数の有意な減少をもたらしたことも実証された。
【0243】
全前臨床結果は、１０ｍｇ／ｋｇ程度の、マウスにおけるＬＯＵ０６４のための有効な用量を裏付ける。３０ｍｇ／ｋｇも、マウスにおいて有効であることが示された。
【0244】
ヒトの脾臓におけるさらなるＢＴＫ占有率は、用量選択をさらに補助するために、翻訳ＰＫ／ＰＤモデルを用いて予測された。
【0245】
ＬＯＵ０６４についての翻訳ＰＫ／ＰＤモデルを用いたＢＴＫ占有率の予測
血液におけるＢＴＫ占有率は、ＬＯＵ０６４薬理学的特性（不可逆的結合）による用量選択のための有益なバイオマーカーでない。それは、他のバイオマーカー（ＣＤ６３、ＣＤ２０３ｃ、皮膚プリックテスト）によって薬理学的活性を示す前に、低用量でさえ完全占有率に達する。組織における占有率は、ＬＯＵ０６４の予測される有効性をより代表し得る。
血液におけるＢＴＫ占有率は、ＬＯＵ０６４薬理学的特性（不可逆的結合）による用量選択のための有益なバイオマーカーでない。それは、他のバイオマーカー（ＣＤ６３、ＣＤ２０３ｃ、皮膚プリックテスト）によって薬理学的活性を示す前に、低用量でさえ完全占有率に達する。組織における占有率は、ＬＯＵ０６４の予測される有効性をより代表し得る。
【0246】
目的
この分析の目的は、健康なボランティアにおけるＬＯＵ０６４の薬物動態（ＰＫ）を特性評価し、以前に開発された、翻訳目標占有率モデルを用いて、ある範囲の用量及び投与計画（１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）対１日１回（ＱＤ））にわたるヒト脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率をシミュレートすることであった。
この分析の目的は、健康なボランティアにおけるＬＯＵ０６４の薬物動態（ＰＫ）を特性評価し、以前に開発された、翻訳目標占有率モデルを用いて、ある範囲の用量及び投与計画（１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）対１日１回（ＱＤ））にわたるヒト脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率をシミュレートすることであった。
【0247】
データ
Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．（２０２１）によって報告された第Ｉ相臨床試験からの薬物動態データを、１０２人の患者を含め、本分析において使用した。
Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．（２０２１）によって報告された第Ｉ相臨床試験からの薬物動態データを、１０２人の患者を含め、本分析において使用した。
【0248】
方法
脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率をシミュレートするための翻訳目標占有率モデルを、２工程手法を用いて開発した。
脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率をシミュレートするための翻訳目標占有率モデルを、２工程手法を用いて開発した。
【0249】
第１の工程において、集団ＰＫモデルが、Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．（２０２１）によって報告された第Ｉ相臨床試験からのＬＯＵ０６４ ＰＫデータを説明するために確立された。第２の工程において、集団ＰＫモデルからのパラメータ推定値を、ＢＴＫ占有率モデルにおいて使用して、血液及び脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率を予測した。最後に、ＢＴＫ占有率モデルを用いて、異なる用量で、異なる投与計画（１日１回（ＱＤ）、１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ））について脾臓／組織におけるＢＴＫ占有率を予測した。
【0250】
結果
集団ＰＫモデルが、Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．（２０２１）によって報告された第Ｉ相臨床試験からの中間ＰＫを説明するために開発された。５０ｍｇ未満の用量の反復投与後のクリアランスの変化に対処するために（高用量における差異を有さない１日目と比較した際の、１２日目の定常状態におけるより低いクリアランス）、クリアランスを、５０ｍｇ未満の用量について指数関数的時間減衰及び５０ｍｇ超の用量について一定のクリアランスの関数としてモデル化した。概して、得られた集団モデルは、ＰＫデータをある程度説明した。
集団ＰＫモデルが、Ｋａｕｌ ｅｔ ａｌ．（２０２１）によって報告された第Ｉ相臨床試験からの中間ＰＫを説明するために開発された。５０ｍｇ未満の用量の反復投与後のクリアランスの変化に対処するために（高用量における差異を有さない１日目と比較した際の、１２日目の定常状態におけるより低いクリアランス）、クリアランスを、５０ｍｇ未満の用量について指数関数的時間減衰及び５０ｍｇ超の用量について一定のクリアランスの関数としてモデル化した。概して、得られた集団モデルは、ＰＫデータをある程度説明した。
【0251】
ＰＫパラメータ推定値を、翻訳ＢＴＫ占有率モデルにおいて使用して、定常状態におけるＢＴＫ占有率をシミュレートした。ＢＴＫ占有率シミュレーションは、１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与が、より高いＢＴＫ占有率を達成するために、同じ用量の１日１回（ＱＤ）投与より有効であることを示した（２４時間区間にわたるトラフで又は平均して）。
【0252】
１日１回（ＱＤ）及び１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）レジメンで選択された投与回数について、２４時間の期間にわたるトラフ及び平均した定常状態ＢＴＫ占有率が、１日１回１０ｍｇ、３５ｍｇ、１００ｍｇ並びに１日２回１０ｍｇ、２５ｍｇ及び１００ｍｇの投与計画についてそれぞれ、図１４Ａ（定常状態におけるＢＴＫ占有率の２４時間にわたるトラフ）及び図１４Ｂ（定常状態におけるＢＴＫ占有率の２４時間にわたる平均）に示される。両方の図は、最大で２００ｍｇの１日用量（１００ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ））が、末梢標的組織においてトラフＢＴＫ占有率≧８０％を達成するために必要とされ得ることを示す。
【0253】
シミュレーションを、異なる投与計画を比較するために行った。経時的な１００ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、対１００ｍｇを１日１回（ＱＤ）の定常状態におけるシミュレートされる脾臓ＢＴＫ占有率の比較が、図１３に示される。グラフは、基本原理から予想されるように、１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与からの占有率が、１日１回（ＱＤ）投与と比較して、より高く、より変化が少ないことを示す。
【0254】
結論：
ＢＴＫ占有率シミュレーションは、１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与が、より高いＢＴＫ占有率を達成するために、同じ用量の１日１回（ＱＤ）投与より有効であることを示した（２４時間区間にわたるトラフで又は平均して）。
ＢＴＫ占有率シミュレーションは、１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）投与が、より高いＢＴＫ占有率を達成するために、同じ用量の１日１回（ＱＤ）投与より有効であることを示した（２４時間区間にわたるトラフで又は平均して）。
【0255】
動物及びヒトの間の変換モデル（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ｂａｓｉｃ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｐｈａｒｍａｃｙ，７（２），２７－３１）に基づいて、３０ｍｇ／ｋｇについての計算されるヒト等価用量（ＨＥＤ）は、７０ｋｇの人についての約１７０ｍｇに相当し、１０ｍｇ／ｋｇの最小有効用量についての計算されたヒト等価用量（ＨＥＤ）は、７０Ｋｇの人についての約５６ｍｇに相当する（Ｎａｉｒ，Ａ．Ｂ．，＆ Ｊａｃｏｂ，Ｓ．（２０１６）。
【0256】
最後に、ヒトにおける脾臓ＢＴＫ占有率の予測モデルによれば、１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）投与が、より高いＢＴＫ占有率を達成するために、同じ用量の１日１回（ＱＤ）投与より有効であることが示された（図１３）。したがって、２５ｍｇ ｂ．ｉ．ｄのＬＯＵ０６４の用量が、最小ヒト有効用量であり、１００ｍｇ ｂ．ｉ．ｄ．の用量も、ヒトにおいて有効であることが示される。
【0257】
実施例８：臨床試験ピーナッツアレルギーフェーズ２
示されるピーナッツアレルギーを有する成人患者における３つの投与計画（ＬＯＵ０６４ １０ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、２５ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）及び１００ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ））を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、４週間試験。
示されるピーナッツアレルギーを有する成人患者における３つの投与計画（ＬＯＵ０６４ １０ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、２５ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）及び１００ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ））を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、４週間試験。
【0258】
この「ピーナッツ試験」は、処置の４週間後に６００ｍｇのピーナッツタンパク質の二重盲検、プラセボ対照、経口食物負荷（ＤＢＰＣＦＣ）に対する客観的なアレルギー反応を示さない患者の割合で、プラセボと比較したＬＯＵ０６４（１０ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、２５ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）、及び１００ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ））の有効性を評価している。さらに、１週間のみのＬＯＵ０６４ ２５ｍｇを１日２回（Ｂ．Ｉ．Ｄ）で処置される患者が、同様に、６００ｍｇのピーナッツタンパク質のＤＢＰＣＦＣに対する客観的なアレルギー反応を示さない患者の割合を評価して、プラセボと比較されるであろう。全ての治療アームの二次エンドポイントは、１０００ｍｇ及び３０００ｍｇのピーナッツタンパク質に対する応答を含む。
【0259】
実施例９：臨床試験ピーナッツアレルギーフェーズ３
示されるピーナッツアレルギーを有する約３００人の成人及び思春期の青年（１２～５５歳）におけるＬＯＵ０６４を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、１０～１８週間試験。ピーナッツ試験は、１又は２週の時点で６００ｍｇ、１０００ｍｇ及び３０００ｍｇのピーナッツタンパク質のレベルの二重盲検、プラセボ対照、経口食物負荷（ＤＢＰＣＦＣ）に対する客観的なアレルギー反応を示さない参加者の割合で、プラセボと比較したＬＯＵ０６４の有効性を評価するであろう。
示されるピーナッツアレルギーを有する約３００人の成人及び思春期の青年（１２～５５歳）におけるＬＯＵ０６４を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、１０～１８週間試験。ピーナッツ試験は、１又は２週の時点で６００ｍｇ、１０００ｍｇ及び３０００ｍｇのピーナッツタンパク質のレベルの二重盲検、プラセボ対照、経口食物負荷（ＤＢＰＣＦＣ）に対する客観的なアレルギー反応を示さない参加者の割合で、プラセボと比較したＬＯＵ０６４の有効性を評価するであろう。
【0260】
実施例１０：臨床試験牛乳及び卵アレルギー
示される堅果、牛乳又はエビアレルギーを有する１２～５５歳の約４５０人の成人及び思春期参加者におけるＬＯＵ０６４を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、１０～１８週間バスケット試験。
示される堅果、牛乳又はエビアレルギーを有する１２～５５歳の約４５０人の成人及び思春期参加者におけるＬＯＵ０６４を評価する、ランダム化、二重盲検、プラセボ対照、１０～１８週間バスケット試験。
【0261】
堅果、牛乳及びエビアレルゲンを評価するバスケット試験は、１又は２週の時点で１’０００ｍｇ（非累積）及び３’０００ｍｇ（非累積）の堅果／牛乳／エビタンパク質の複数のレベルのＤＢＰＣＦＣに対する客観的なアレルギー反応を示さない患者の割合で、プラセボと比較したＬＯＵ０６４の有効性を評価している。
【0262】
実施例１１：１００ｍｇのフィルムコート錠
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
【0263】
【表6】
【0264】
実施例１２：２５ｍｇのフィルムコート錠
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
【0265】
【表7】
【0266】
実施例１３：１０ｍｇのフィルムコート錠
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
以下に、好ましい医薬組成物（フィルムコート錠）が示される。
【0267】
【表8】
【0268】
実施例１４：ＬＯＵ０６４の安全性
ＬＯＵ０６４の安全性が、ＭＳ以外の適応症、特に、慢性自発性じんましん（ＣＳＵ）及びシェーグレン症候群（ＳｊＳ）に罹患した患者で行われる第Ｉ相及び第ＩＩ相薬物動態及び臨床薬理学健康被験体試験及び第ＩＩ相／第ＩＩＩ相臨床試験において試験された。
ＬＯＵ０６４の安全性が、ＭＳ以外の適応症、特に、慢性自発性じんましん（ＣＳＵ）及びシェーグレン症候群（ＳｊＳ）に罹患した患者で行われる第Ｉ相及び第ＩＩ相薬物動態及び臨床薬理学健康被験体試験及び第ＩＩ相／第ＩＩＩ相臨床試験において試験された。
【0269】
第Ｉ相臨床試験におけるＬＯＵ０６４の短期間の安全性
単回投与として、又は最大で１８日間にわたる０．５ｍｇ～６００ｍｇの用量範囲をカバーする最大で１８日間にわたる複数回投与として、及びさらに最大で１２日間にわたる１００及び２００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）でのＬＯＵ０６４の短期間の安全性が、第Ｉ相臨床試験において示された（Ｋａｕｌ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０２１）．Ｒｅｍｉｂｒｕｔｉｎｉｂ（ＬＯＵ０６４）：Ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｐｏｔｅｎｔ ｏｒａｌ ＢＴＫ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｗｉｔｈ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ ｉｎ ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｐｈａｓｅ Ｉ ｔｒｉａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．１０．１１１１／ｃｔｓ．１３００５）。
単回投与として、又は最大で１８日間にわたる０．５ｍｇ～６００ｍｇの用量範囲をカバーする最大で１８日間にわたる複数回投与として、及びさらに最大で１２日間にわたる１００及び２００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）でのＬＯＵ０６４の短期間の安全性が、第Ｉ相臨床試験において示された（Ｋａｕｌ，Ｍ．ｅｔ ａｌ．（２０２１）．Ｒｅｍｉｂｒｕｔｉｎｉｂ（ＬＯＵ０６４）：Ａ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｐｏｔｅｎｔ ｏｒａｌ ＢＴＫ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｗｉｔｈ ｐｒｏｍｉｓｉｎｇ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓａｆｅｔｙ ａｎｄ ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎａｍｉｃｓ ｉｎ ａ ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ ｐｈａｓｅ Ｉ ｔｒｉａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ．１０．１１１１／ｃｔｓ．１３００５）。
【0270】
ＣＳＵ被験体における第２ｂ相試験（延長期）における安全性の要約（中間結果）
第２ｂ相試験に参加したＣＳＵを有する適格な被験体におけるＬＯＵ０６４の長期の安全性及び忍容性を評価するための５２週間の非盲検継続投与試験において、使用される用量は、１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）であった。
第２ｂ相試験に参加したＣＳＵを有する適格な被験体におけるＬＯＵ０６４の長期の安全性及び忍容性を評価するための５２週間の非盲検継続投与試験において、使用される用量は、１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）であった。
【0271】
安全性シグナルは、１７．８６週間の曝露中央値（範囲：２．９週間～４４．７）でＬＯＵ０６４の少なくとも１回の投与を与えられた１００人の被験体の中間分析に基づいて観察されなかった。カットオフの時点で、９３人の被験体（９３％）が、継続中であり、７人の被験体が、試験を中止しており；中止はいずれも有害事象によるものではなかった。表４は、中間分析のためのカットオフ日までに第２ｂ相試験において観察された安全性の要約を示す。
【0272】
【表9】
【0273】
５８人の被験体（５８％）は、少なくとも１つの、治療中に発生したＡＥを生じた。ＡＥの大部分は、重篤でなく、治療中止につながらず、重症度は軽度であった。最も高い頻度で罹患されるＳＯＣは、感染症及び寄生虫症（１４％）であり、続いて皮膚及び皮下組織障害（１３％）であり、特定の有害事象に関する傾向はなかった。最もよく見られる有害事象基本語（≧２％）は、頭痛（６％）、下痢（４％）、目まい（３％）及び胃腸炎（３％）であり；出血事象（出血ＳＭＱ広域並びに血小板凝集異常、血小板凝集減少、血小板凝集阻害、血小板機能障害、血小板機能試験異常及び血小板毒性を含むＰＴの下での事象として定義される）又はＳＯＣ血液及びリンパ系障害の下での事象は報告されなかった。３つのＳＡＥ：卵巣嚢胞、胸部痛及び虫垂炎が報告され；いずれも、試験薬に関連していると見なされなかった。
【0274】
第２ｂ相試験及び対応する非盲検継続投与試験からの結論
統合すると、評価された全ての用量にわたって、第２ｂ相試験における安全性に関する所見はなかった。さらに、ＬＯＵ０６４ １００ｍｇ １日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）を非盲検で使用する対応するＣＳＵ継続投与試験において、安全性シグナルは、３１－Ａｕｇ－２０２０の時点で登録された１００人の被験体において観察されなかった。提供される最も高い用量の１００ｍｇ ＬＯＵ０６４ １日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）は、忍容性良好であると見なされ、好ましい安全性プロファイルを有していた。
統合すると、評価された全ての用量にわたって、第２ｂ相試験における安全性に関する所見はなかった。さらに、ＬＯＵ０６４ １００ｍｇ １日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）を非盲検で使用する対応するＣＳＵ継続投与試験において、安全性シグナルは、３１－Ａｕｇ－２０２０の時点で登録された１００人の被験体において観察されなかった。提供される最も高い用量の１００ｍｇ ＬＯＵ０６４ １日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）は、忍容性良好であると見なされ、好ましい安全性プロファイルを有していた。
【0275】
ＣＳＵ被験体（中間結果／３５．１４週間の曝露中央値を有する患者）における第２ｂ相試験（延長期）における安全性の要約
１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）の用量で、第２ｂ相試験に参加したＣＳＵを有する適格な被験体におけるＬＯＵ０６４の長期の安全性及び忍容性を評価するための上記の５２週間の非盲検継続投与試験において、新たな中間分析を、３５．１４週間の曝露中央値を有する患者（Ｎ＝１８３）で行い、結果を、（１：１：１：１：１：１：１）レミブルチニブ１０ｍｇ ｑｄ（１日１回）、３５ｍｇ ｑｄ、１００ｍｇ ｑｄ、１０ｍｇ ｂｉｄ（１日２回）、２５ｍｇ ｂｉｄ、若しくは１００ｍｇ ｂｉｄ又はプラセボを最大で１２週間（ｗｋｓ）（ＮＣＴ０３９２６６１１）を与えられた、ＣＳＵを有する成人患者におけるランダム化二重盲検、プラセボ対照Ｐｈ２ｂコア試験における安全性結果と比較した（表５）。
１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）の用量で、第２ｂ相試験に参加したＣＳＵを有する適格な被験体におけるＬＯＵ０６４の長期の安全性及び忍容性を評価するための上記の５２週間の非盲検継続投与試験において、新たな中間分析を、３５．１４週間の曝露中央値を有する患者（Ｎ＝１８３）で行い、結果を、（１：１：１：１：１：１：１）レミブルチニブ１０ｍｇ ｑｄ（１日１回）、３５ｍｇ ｑｄ、１００ｍｇ ｑｄ、１０ｍｇ ｂｉｄ（１日２回）、２５ｍｇ ｂｉｄ、若しくは１００ｍｇ ｂｉｄ又はプラセボを最大で１２週間（ｗｋｓ）（ＮＣＴ０３９２６６１１）を与えられた、ＣＳＵを有する成人患者におけるランダム化二重盲検、プラセボ対照Ｐｈ２ｂコア試験における安全性結果と比較した（表５）。
【0276】
ＥＳ（中央値３５．１４週間、Ｎ＝１８３）の長期の曝露において、レミブルチニブ治療（５７．４％［ｎ＝１０５］）に対して少なくとも１つの有害作用（ＡＥ）を有する患者の割合は、ＣＳと同様であった（任意のレミブルチニブ用量によって示される）（５８．１％［ｎ＝１５５］；中央値１２．１４週間、Ｎ＝２６７）。ＥＳにおいて、４つの重篤な有害作用（ＳＡＥ）、治療中止及び死亡につながる６つのＡＥがあった。ＥＳ及びＣＳにおいて報告された器官別大分類（ＳＯＣ）によるＡＥの発生は、同様であった：感染症及び寄生虫症（２３．０％及び２４．０％）、続いて皮膚／皮下組織障害（１７．５％及び１６．９％）（表５）。基本語による報告されるＡＥの発生は、ＥＳ及びＣＳにおいて同等であり、頭痛（６．６％及び９．７％）が最も頻度が高かった。感染症（２３％）、出血（４．４％）及び血球減少（０．５％）などのＥＳにおけるＡＥＳＩの発生は、ＣＳと一致していた。新たに発生する顕著なアミノ基転移酵素の増加は、ＥＳ（個人的な理由で早期に中止した１人の患者において、４週間以内に正規化された、分離ＡＬＴ＞３×ＵＬＮ）及びＣＳ（治療に対して正規化された、１人の患者におけるＡＬＴ＞５×ＵＬＮ）の両方において１つであった。検査パラメータの分析は、有意な安全性の懸念を示さず、バイタルサインの臨床的に有意な変化は観察されなかった。いずれかの患者において示される有意なＥＣＧ所見又は＞５００ｍｓのＱＴはなかった。
【0277】
結論
レミブルチニブは、全用量範囲にわたって好ましい安全性プロファイルを示し、ＣＳＵを有する患者における最大で５２週間の１００ｍｇ ｂｉｄの用量へのより長い期間の曝露にわたって、新たな安全性シグナルは観察されなかった。
レミブルチニブは、全用量範囲にわたって好ましい安全性プロファイルを示し、ＣＳＵを有する患者における最大で５２週間の１００ｍｇ ｂｉｄの用量へのより長い期間の曝露にわたって、新たな安全性シグナルは観察されなかった。
【0278】
【表10】
【0279】
実施例１５：健康な被験体におけるレミブルチニブの同時及び断続的投与による３つの異なるタイプのワクチンに対する免疫応答の調節の評価
【0280】
【表11】
【0281】
試験デザイン
全体的な設計
このランダム化、二重盲検、プラセボ対照試験は、並行群間比較設計を有する。最大で２０％の推定中断率を考慮して最小で７２人の評価可能な完了者を達成するために、約９０人の、妊娠の可能性のない健康な女性及び男性参加者を、３つの治療群のいずれかにランダムに分ける。試験は、２８日のスクリーニング期間、４３日の治療期間、その後、最後の試験薬投与後の２週間以内に試験完了評価（５７日目）からなるであろう。安全性フォローアップの電話を、最後の試験薬投与の約３０日後（７３日目）に行う。参加者は、－１日目から１及び１４～１７日目に定住している。全体で、各参加者の最大試験期間は、約８５日間である。
全体的な設計
このランダム化、二重盲検、プラセボ対照試験は、並行群間比較設計を有する。最大で２０％の推定中断率を考慮して最小で７２人の評価可能な完了者を達成するために、約９０人の、妊娠の可能性のない健康な女性及び男性参加者を、３つの治療群のいずれかにランダムに分ける。試験は、２８日のスクリーニング期間、４３日の治療期間、その後、最後の試験薬投与後の２週間以内に試験完了評価（５７日目）からなるであろう。安全性フォローアップの電話を、最後の試験薬投与の約３０日後（７３日目）に行う。参加者は、－１日目から１及び１４～１７日目に定住している。全体で、各参加者の最大試験期間は、約８５日間である。
【0282】
インフルエンザのための同時及び断続的なレミブルチニブ治療シナリオ／Ｐｎｅｕｍｏｖａｘ（登録商標）２３及びＩｍｍｕｃｏｔｈｅｌ（登録商標）の影響を、プラセボに対して評価する。
【0283】
試験の実施
スクリーニング及びベースライン
スクリーニング時に適格基準を満たす参加者は、－１日目にベースライン評価を受けることになる。全てのベースライン安全性評価結果は、最初の投与前に入手可能でなければならない。ベースライン時に、参加者は、後述される３つの治療群のうちの１つにランダムに分けられる。
スクリーニング及びベースライン
スクリーニング時に適格基準を満たす参加者は、－１日目にベースライン評価を受けることになる。全てのベースライン安全性評価結果は、最初の投与前に入手可能でなければならない。ベースライン時に、参加者は、後述される３つの治療群のうちの１つにランダムに分けられる。
【0284】
治療
全ての参加者は、１日目から４２日目まで試験薬（レミブルチニブ１００ｍｇ又はプラセボ１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され、４３日目に治療来院の終了のために診療所に戻る。全ての参加者は、１５日目に４価インフルエンザワクチン、ＰＰＶ－２３ワクチン及びＫＬＨ新抗原ワクチンも投与される。ワクチン接種は、試験薬投与の３時間後に行われるべきである。
全ての参加者は、１日目から４２日目まで試験薬（レミブルチニブ１００ｍｇ又はプラセボ１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され、４３日目に治療来院の終了のために診療所に戻る。全ての参加者は、１５日目に４価インフルエンザワクチン、ＰＰＶ－２３ワクチン及びＫＬＨ新抗原ワクチンも投与される。ワクチン接種は、試験薬投与の３時間後に行われるべきである。
【0285】
臨床来院中及び定住（－１日目から１及び１４～１７日目）中、参加者は、診療所で治験職員によって試験薬を投与される。治療期間中の臨床来院からの退院時は、服薬日誌と共に、自宅で自己投与するために試験薬が参加者に与えられる。
【0286】
安全性評価は、身体検査、ＥＣＧ、バイタルサイン、標準的な臨床検査評価（血液学、血液化学、尿検査）有害事象及び重篤な有害事象モニタリングを含む。
【0287】
レミブルチニブ薬物動態を評価するために複数の血液試料が、８日目、１５日目及び３６日目に全ての参加者から得られた。
【0288】
群Ａ（同時のレミブルチニブ治療）：
参加者は、１５日目の３つのワクチンの投与前にＰＫ／ＰＤ定常状態を達成するために、１～７日目にプラセボ（１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））、続いて、試験８～１５日目にレミブルチニブによる治療（１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与される。参加者は、４２日目までレミブルチニブ（１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され続ける。
参加者は、１５日目の３つのワクチンの投与前にＰＫ／ＰＤ定常状態を達成するために、１～７日目にプラセボ（１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））、続いて、試験８～１５日目にレミブルチニブによる治療（１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与される。参加者は、４２日目までレミブルチニブ（１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され続ける。
【0289】
群Ｂ（断続的なレミブルチニブ治療）：
参加者は、ＰＫ／ＰＤ定常状態条件を達成するために、１～７日目にレミブルチニブ１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）で治療され、続いて、８～２８日目にプラセボ（１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され、１５日目に３つのワクチンを投与されることになる。レミブルチニブ１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）による治療は、２９～４２日目に再開される治療である。
参加者は、ＰＫ／ＰＤ定常状態条件を達成するために、１～７日目にレミブルチニブ１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ）で治療され、続いて、８～２８日目にプラセボ（１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．））を投与され、１５日目に３つのワクチンを投与されることになる。レミブルチニブ１００ｍｇを１日２回（ｂ．ｉ．ｄ．）による治療は、２９～４２日目に再開される治療である。
【0290】
群Ｃ（プラセボ）：
群Ｃの参加者は、１～４２日目にプラセボ（ｂ．ｉ．ｄ）を投与され、プラセボ条件下で１５日目に３つのワクチンを接種されることになる。
群Ｃの参加者は、１～４２日目にプラセボ（ｂ．ｉ．ｄ）を投与され、プラセボ条件下で１５日目に３つのワクチンを接種されることになる。
【0291】
主要な適格基準
・署名入りのインフォームドコンセントが、試験への参加前に得られなければならない。
・健康な、又は軽度の肥満であるかそれ以外は健康な、１８～５５歳（端点を含む）の男性及び妊娠の可能性のない女性参加者。
・参加者は、示されるように、既往歴、スクリーニング及びベースライン来院時の身体検査、バイタルサイン、ＥＣＧ、及び臨床検査によって決定した際に良好な健康状態であるべきである。
・スクリーニング及びベースライン時に、バイタルサイン（最高及び最低血圧及び脈拍数）が、座位で及び再度立位で（評価スケジュールによって必要とされる場合）評価される。座位バイタルサイン（３分間座った後）は、以下の範囲内であるべきである：
・３５．０～３７．５℃の鼓膜体温。
・９０～１３９ｍｍＨｇ（端点を含む）の最高血圧（ＳＢＰ）。
・５０～８９ｍｍＨｇ（端点を含む）の最低血圧（ＤＢＰ）。
・４５～９０ｂｐｍ（端点を含む）の脈拍数。
・参加者は、試験に参加するために体重が少なくとも５０ｋｇでなければならず、１８～３４．９ｋｇ／ｍ２の範囲内の体格指数（ＢＭＩ）を有さなければならない。
・参加者は、プロトコルによって必要とされる際に臨床現場に留まり、ＩＣＦにおいて概説される要件／指示に従う意思がなければならない。
・試験の要件を理解し、それに従うために、現地語を読み、話し、理解することができる。
・署名入りのインフォームドコンセントが、試験への参加前に得られなければならない。
・健康な、又は軽度の肥満であるかそれ以外は健康な、１８～５５歳（端点を含む）の男性及び妊娠の可能性のない女性参加者。
・参加者は、示されるように、既往歴、スクリーニング及びベースライン来院時の身体検査、バイタルサイン、ＥＣＧ、及び臨床検査によって決定した際に良好な健康状態であるべきである。
・スクリーニング及びベースライン時に、バイタルサイン（最高及び最低血圧及び脈拍数）が、座位で及び再度立位で（評価スケジュールによって必要とされる場合）評価される。座位バイタルサイン（３分間座った後）は、以下の範囲内であるべきである：
・３５．０～３７．５℃の鼓膜体温。
・９０～１３９ｍｍＨｇ（端点を含む）の最高血圧（ＳＢＰ）。
・５０～８９ｍｍＨｇ（端点を含む）の最低血圧（ＤＢＰ）。
・４５～９０ｂｐｍ（端点を含む）の脈拍数。
・参加者は、試験に参加するために体重が少なくとも５０ｋｇでなければならず、１８～３４．９ｋｇ／ｍ２の範囲内の体格指数（ＢＭＩ）を有さなければならない。
・参加者は、プロトコルによって必要とされる際に臨床現場に留まり、ＩＣＦにおいて概説される要件／指示に従う意思がなければならない。
・試験の要件を理解し、それに従うために、現地語を読み、話し、理解することができる。
【0292】
主要な除外基準
１．５半減期以内又は最初の投与前の３０日以内の、どちらか長い方の他の被験薬の使用。
１．５半減期以内又は最初の投与前の３０日以内の、どちらか長い方の他の被験薬の使用。
【0293】
２．臨床的に有意なＥＣＧ異常の現在の証拠若しくは既往歴又はＱＴ延長症候群若しくは心臓伝導における他の異常の家族歴（祖父母、両親、及び兄弟姉妹）、トルサード・ド・ポワント（ＴｄＰ）（例えば心不全、低カリウム血症）のさらなるリスク要因の履歴及び／又は既知の病歴又は現在の臨床的に有意な不整脈。ＰＲ＞２２０ｍｓｅｃ、ＱＲＳ複合＞１２０ｍｓｅｃ、男性及び女性についてＱＴｃＦ＞４５０ｍｓｅｃ、又は早期再分極、非特異的Ｓ－Ｔ又はＴ波変化以外の任意の他の形態学的変化として定義される異常なＥＣＧ。
【0294】
３．局所再発又は転移の証拠があるかどうかにかかわらず、過去５年以内の、治療された又は未治療の任意の器官系の悪性腫瘍（皮膚の限局性基底細胞癌又はインサイチュ子宮頸癌以外）の病歴又は存在。
【0295】
４．最初の投与前の２週間以内に解消されていない、（限定はされないが）心臓血管、肺、代謝、肝臓、腎臓、血液、内分泌、神経系又は精神疾患を含む任意の器官別大分類の何らかの臨床的に有意な疾患の病歴又は存在。
【0296】
５．レミブルチニブ若しくは同じ化合物クラスからの薬物又はその賦形剤に対する過敏性。
【0297】
６．何らかの急性感染、発熱又はこの試験において投与されるワクチンの任意の関連成分（例えば、鶏卵又は甲殻類／ＫＬＨ）に対する過敏性反応若しくは既知の過敏性を含む、Ｐｎｅｕｍｏｖａｘ ２３、インフルエンザ又はＫＬＨワクチンの使用についてのいずれかの禁忌。
【0298】
７．２０２２～２０２３年の季節性インフルエンザワクチンのワクチン接種歴又は登録前に２０２２～２０２３年のインフルエンザの季節中のインフルエンザ感染の既知の臨床診断。
【0299】
８．ＫＬＨによる過去の曝露又は免疫化の履歴。
【図1】
【図2】
【図3】
【図4】
【図5】
【図6】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13】
【図14】
【国際調査報告】