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▶ カルビスタ・ファーマシューティカルズ・リミテッドの特許一覧
(19)【発行国】日本国特許庁(JP)
(12)【公報種別】公表特許公報(A)
(11)【公表番号】
(43)【公表日】2024-02-06
(54)【発明の名称】遺伝性血管性浮腫の治療
(51)【国際特許分類】
A61K 31/444 20060101AFI20240130BHJP
A61P 43/00 20060101ALI20240130BHJP
C07D 401/14 20060101ALI20240130BHJP
A61P 25/04 20060101ALI20240130BHJP
A61P 29/00 20060101ALI20240130BHJP
A61P 17/00 20060101ALI20240130BHJP
A61P 1/12 20060101ALI20240130BHJP
A61P 1/06 20060101ALI20240130BHJP
A61P 1/08 20060101ALI20240130BHJP
A61P 11/00 20060101ALI20240130BHJP
A61P 11/04 20060101ALI20240130BHJP
A61P 25/00 20060101ALI20240130BHJP
A61K 9/20 20060101ALI20240130BHJP
A61K 47/38 20060101ALI20240130BHJP
A61K 47/32 20060101ALI20240130BHJP
A61K 47/12 20060101ALI20240130BHJP
A61P 9/00 20060101ALI20240130BHJP
【ＦＩ】
A61K31/444
A61P43/00 105
C07D401/14
A61P25/04
A61P29/00
A61P17/00
A61P1/12
A61P1/06
A61P1/08
A61P11/00
A61P11/04
A61P25/00
A61K9/20
A61K47/38
A61K47/32
A61K47/12
A61P9/00
A61P43/00 111
【審査請求】未請求
【予備審査請求】未請求
(21)【出願番号】P 2023547813
(86)(22)【出願日】2022-02-09
(85)【翻訳文提出日】2023-10-06
(86)【国際出願番号】 GB2022050350
(87)【国際公開番号】W WO2022172006
(87)【国際公開日】2022-08-18
(31)【優先権主張番号】63/147,595
(32)【優先日】2021-02-09
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/212,224
(32)【優先日】2021-06-18
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/220,747
(32)【優先日】2021-07-12
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/277,753
(32)【優先日】2021-11-10
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(31)【優先権主張番号】63/286,363
(32)【優先日】2021-12-06
(33)【優先権主張国・地域又は機関】US
(81)【指定国・地域】
(71)【出願人】
【識別番号】515004935
【氏名又は名称】カルビスタ・ファーマシューティカルズ・リミテッド
(74)【代理人】
【識別番号】110001173
【氏名又は名称】弁理士法人川口國際特許事務所
(72)【発明者】
【氏名】フィーナー，エドワード・ポール
(72)【発明者】
【氏名】マーシュ，サリー・ルイーズ
(72)【発明者】
【氏名】マエッツェル，アンドレアス
(72)【発明者】
【氏名】スミス，マイケル・デイビッド
(72)【発明者】
【氏名】イア，クリストファー・マーティン
【テーマコード（参考）】
4C063
4C076
4C086
【Ｆターム（参考）】
4C063AA03
4C063BB09
4C063CC22
4C063DD12
4C063EE01
4C076AA36
4C076BB01
4C076CC01
4C076CC09
4C076CC11
4C076CC16
4C076CC18
4C076CC26
4C076CC29
4C076DD41C
4C076EE16
4C076EE31A
4C076EE32B
4C076FF02
4C076FF05
4C076FF06
4C076FF09
4C076FF31
4C076FF68
4C076GG14
4C086AA01
4C086AA02
4C086BC36
4C086GA07
4C086GA08
4C086MA01
4C086MA03
4C086MA04
4C086MA05
4C086MA35
4C086MA52
4C086NA10
4C086NA12
4C086NA14
4C086ZA02
4C086ZA08
4C086ZA36
4C086ZA60
4C086ZA66
4C086ZA71
4C086ZA73
4C086ZA89
4C086ZB21
4C086ZC02
(57)【要約】
本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の治療に関する。具体的には、本発明は、血漿カリクレイン阻害剤を、それを必要とする患者にオンデマンドで経口投与することによって、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）のオンデマンド治療を提供する。
【特許請求の範囲】
【請求項1】
遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａ【化1】
【請求項2】
前記治療が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから１２時間以内の、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減する、請求項１に記載の方法。
【請求項3】
前記治療が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから２４時間以内の、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減する、請求項１及び２のいずれか１項に記載の方法。
【請求項4】
前記治療が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから４時間以内の、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避する、請求項１～３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項5】
前記治療が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから１２時間以内の、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避する、請求項４に記載の方法。
【請求項6】
前記治療が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから２４時間以内の、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避する、請求項５に記載の方法。
【請求項7】
前記患者に、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから４時間以内に、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤が投与されない、請求項１～６のいずれか１項に記載の方法。
【請求項8】
前記患者に、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから１２時間以内に、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤が投与されない、請求項７に記載の方法。
【請求項9】
前記患者に、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用してから２４時間以内に、前記ＨＡＥ発作の第２の治療剤が投与されない、請求項８に記載の方法。
【請求項10】
前記発作が、前記患者に任意の第２の治療剤を投与することなく解消される、請求項１～９のいずれか１項に記載の方法。
【請求項11】
遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａ【化2】
【請求項12】
「症状緩和」は、前記発作が、７点遷移質問（７－ｐｏｉｎｔ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ）（７ＴＱ）に従って評価されたときに、２つの連続した時点で「少し良い」以上と評価されることを意味する、請求項１１に記載の方法。
【請求項13】
前記「２つの連続した時点」が、約３０分離れている、請求項１２に記載の方法。
【請求項14】
前記発作の前記症状緩和が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を投与した約１．５～３．０時間後に始まる、請求項１１～１３のいずれか１項に記載の方法。
【請求項15】
遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａ【化3】
【請求項16】
「症状緩和」は、複合ＶＡＳスコアの５０％の低下が３つの連続した時点で生じたことを意味する、請求項１５に記載の方法。
【請求項17】
前記「３つの連続した時点」が、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与後０～４時間以内で約３０分離れており、必要に応じて、前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与後４～１２時間以内で約１時間離れている、請求項１６に記載の方法。
【請求項18】
前記発作の前記症状緩和が、前記化合物を投与してから約３～９時間後に始まる、請求項１５～１７のいずれか１項に記載の方法。
【請求項19】
遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａ【化4】
【請求項20】
「悪化しない」は、前記発作が、前記化合物を投与してから１２時間以内に、５ＬＳについて１レベル以上悪化しなかったことを意味する、請求項１９に記載の方法。
【請求項21】
前記発作の症状が前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与後２４時間の期間以内に悪化しないように、前記治療が前記発作の進行を停止する、請求項１９に記載の方法。
【請求項22】
「悪化しない」は、前記発作が、前記化合物の投与から２４時間以内に、５ＬＳについて１レベル以上悪化しなかったことを意味する、請求項２１に記載の方法。
【請求項23】
遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａ【化5】
【請求項24】
前記重症度が、前記化合物を投与してから２４時間以内に「なし」に改善する、請求項２３に記載の方法。
【請求項25】
前記重症度が、前記化合物を投与してから１２時間以内に「なし」に改善する、請求項２３に記載の方法。
【請求項26】
前記重症度が、前記化合物を投与してから６時間以内に「なし」に改善する、請求項２３に記載の方法。
【請求項27】
前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）が、オンデマンドでの遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作の治療における使用のためのものであり、ＨＡＥ発作の症状の認識時にオンデマンドで経口投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項28】
認識される前記ＨＡＥ発作の症状が、組織の腫脹、疲労、頭痛、筋肉痛、皮膚の刺痛、腹痛、吐き気、嘔吐、下痢、嚥下困難、嗄声、息切れ、及び／または気分の変化のうちの少なくとも１つである、請求項２７に記載の方法。
【請求項29】
前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）が、前記ＨＡＥ発作の症状が認識されてから１時間以内にオンデマンドで経口投与される、請求項２８に記載の方法。
【請求項30】
前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）が、前記ＨＡＥ発作の症状が認識されてから３０分以内、２０分以内、１０分以内、または５分以内にオンデマンドで経口投与される、請求項２９に記載の方法。
【請求項31】
前記式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩もしくは溶媒和物）が、ＨＡＥ発作の前駆期においてオンデマンドで経口投与される、請求項３０に記載の方法。
【請求項32】
認識される前記症状が、軽微な腫脹、腹痛、または皮膚の発赤のうちの少なくとも１つである、請求項３１に記載の方法。
【請求項33】
認識される前記症状が、輪状紅斑である、請求項３１または３２のいずれかに記載の方法。
【請求項34】
前記治療が、前記ＨＡＥ発作の持続時間を短縮する、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項35】
前記化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）が、（ｉ）前記化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）、ならびに（ｉｉ）薬学的に許容される賦形剤、を含む経口剤形として投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項36】
前記経口剤形が、希釈剤としての微結晶セルロース、崩壊剤としてのクロスカルメロースナトリウム、結合剤としてのポリビニルピロリドン、及び任意選択により、滑沢剤としてのステアリン酸マグネシウムを含む錠剤である、請求項３５に記載の方法。
【請求項37】
前記患者に、約６００ｍｇの前記式Ａの化合物が投与される、先行請求項のいずれか１項に記載の方法。
【請求項38】
各投与量が、各々約３００ｍｇの前記式Ａの化合物を含む２つの錠剤として投与される、請求項３７に記載の方法。
【発明の詳細な説明】
【技術分野】
【0001】
本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の治療に関する。具体的には、本発明は、血漿カリクレイン阻害剤を、それを必要とする患者にオンデマンドで経口投与することによって、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）のオンデマンド治療を提供する。
【背景技術】
【0002】
血漿カリクレイン阻害剤は、多くの治療適用（特に遺伝性血管性浮腫の治療）を有する。
【0003】
血漿カリクレインは、キニノーゲンからキニンを遊離させることができるトリプシン様セリンプロテアーゼである（Ｋ．Ｄ．Ｂｈｏｏｌａ ｅｔ ａｌ．，“Ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ－Ｋｉｎｉｎ Ｃａｓｃａｄｅ”，Ｅｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａ ｏｆ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，ｐ４８３－４９３、Ｊ．Ｗ．Ｂｒｙａｎｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ－ｋｉｎｉｎ ｓｙｓｔｅｍ：ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ”Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ａｎｄ ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７，ｐ２３４－２５０，２００９、Ｋ．Ｄ．Ｂｈｏｏｌａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖ．，１９９２，４４，１、及びＤ．Ｊ．Ｃａｍｐｂｅｌｌ，“Ｔｏｗａｒｄｓ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｉｎｇ ｔｈｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ－ｋｉｎｉｎ ｓｙｓｔｅｍ：ｉｎｓｉｇｈｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ ｏｆ ｋｉｎｉｎ ｐｅｐｔｉｄｅｓ”，Ｂｒａｚｉｌｉａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ２０００，３３，６６５－６７７を参照されたい）。これは、このカスケードにおけるその役割がブラジキニンの放出または酵素的切断を伴わないものの、内因性血液凝固カスケードの不可欠なメンバーである。血漿プレカリクレインは、単一の遺伝子によってコードされ、肝臓、ならびに他の組織で合成することができる。血漿プレカリクレインは、活性化されて活性血漿カリクレインを与える高分子量キニノーゲン（ＨＫ）に結合したヘテロ二量体複合体として、血漿中で循環する不活性血漿プレカリクレインとして肝細胞によって分泌される。この接触活性化システム（または接触系）は、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）～第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ）を活性化する負に荷電した表面、負の表面を必要としない場合がある特定のプロテアーゼ、例えば、プラスミン（Ｈｏｆｍａｎ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎ Ｒｅｖ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１６）、または誤ってフォールディングされたタンパク質（Ｍａａｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔ ２００８）によって活性化することができる。ＦＸＩＩａは、血漿プレカリクレインの血漿カリクレインへの変換、及びそれに続く高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の切断を媒介して、強力な炎症ホルモンであるブラジキニンを生成する。キニンは、Ｇタンパク質共役受容体を介して作用する炎症の強力なメディエーターであり、キニンのアンタゴニスト（ブラジキニン受容体アンタゴニストなど）は、多くの障害の治療のための潜在的な治療剤として以前に研究されている（Ｆ．Ｍａｒｃｅａｕ ａｎｄ Ｄ．Ｒｅｇｏｌｉ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００４，３，８４５－８５２）。
【0004】
血漿カリクレインは、多くの炎症性障害において役割を果たすと考えられている。血漿カリクレインの主な阻害剤は、セルピンＣ１エステラーゼ阻害剤である。Ｃ１エステラーゼ阻害剤の遺伝的欠損を呈する患者は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）に罹患し、その結果、顔、手、喉、胃腸管及び性器の断続的な腫脹をもたらす。急性エピソード中に形成された水疱は、血管透過性の増加につながる、ブラジキニンを遊離する高分子量キニノーゲン（ＨＫ）を切断する高レベルの血漿カリクレインを含む。大型のタンパク質血漿カリクレイン阻害剤による治療は、血管透過性の増加を引き起こすブラジキニンの放出を防止することによってＨＡＥを効果的に治療することが示されている（Ａ．Ｌｅｈｍａｎｎ“Ｅｃａｌｌａｎｔｉｄｅ（ＤＸ－８８），ａ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ａｎｇｉｏｅｄｅｍａ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｌｏｓｓ ｉｎ ｏｎ－ｐｕｍｐ ｃａｒｄｉｏｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｕｒｇｅｒｙ”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．８，ｐ１１８７－９９）。
【0005】
遺伝性血管性浮腫は、血管の外に液体が蓄積し、血液またはリンパ液の正常な流れを遮断し、手、足、四肢、顔、腸管、または気道などの組織の急速な腫脹を引き起こす、再発性の急性発作を特徴とする稀な遺伝性疾患である。したがって、「遺伝性血管性浮腫」は、遺伝性機能不全／欠陥／変異によって引き起こされるブラジキニン媒介性血管性浮腫（例えば、重度の腫脹）の再発エピソードを特徴とする任意の障害として定義することができる。現在、ＨＡＥには、（ｉ）ＨＡＥ１型、（ｉｉ）ＨＡＥ２型、及び（ｉｉｉ）正常Ｃ１阻害剤ＨＡＥ（正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥ）の３つの既知のカテゴリーがある。しかし、ＨＡＥの分野は急速に発展しているため、将来的にはさらなる種類のＨＡＥが定義される可能性がある。
【0006】
理論に束縛されることを望むものではないが、ＨＡＥ１型は、血液中のＣ１阻害剤のレベルの低下をもたらすＳＥＲＰＩＮＧ１遺伝子の変異によって引き起こされると考えられる。理論に束縛されることを望むものではないが、ＨＡＥ２型は、血液中のＣ１阻害剤の機能不全を引き起こすＳＥＲＰＩＮＧ１遺伝子の変異によって引き起こされると考えられる。理論に束縛されることを望むものではないが、正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥの原因はそれほど明確に定義されておらず、基礎となる遺伝子機能不全／欠陥／変異は、時として未知のままであり得る。知られていることは、（ＨＡＥ１型及び２型は対照的に）正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥの原因が、Ｃ１阻害剤のレベルの低下または機能不全に関連していないことである。正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥは、家族歴を検討し、血管性浮腫が前世代から継承されていることに留意することによって診断することができる（したがって、それは遺伝性血管性浮腫である）。正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥは、Ｃ１阻害剤に関連するもの以外の遺伝子に機能不全／欠陥／変異があることを決定することによって診断することもできる。例えば、プラスミノーゲンによる機能不全／欠陥／変異が、正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥを引き起こす可能性があることが報告されている（例えば、Ｖｅｒｏｎｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ（Ｌａｕｓａｎｎｅ）．２０１９ Ｆｅｂ ２１；６：２８．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｍｅｄ．２０１９．０００２８、またはＲｅｃｋｅ ｅｔ ａｌ．，Ｃｌｉｎ Ｔｒａｎｓｌ Ａｌｌｅｒｇｙ．２０１９ Ｆｅｂ １４；９：９．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１３６０１－０１９－０２４７－ｘ．を参照されたい）。また、第ＸＩＩ因子の機能不全／欠陥／変異が、正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥを引き起こす可能性があることも報告されている（例えば、Ｍａｎｓｉ ｅｔ ａｌ．２０１４ Ｔｈｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，２７７；５８５－５９３、またはＭａａｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２０１９ Ｊａｎ；１７（１）：１８３－１９４．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊｔｈ．１４３２５を参照されたい）。
【0007】
急性ＨＡＥ発作（「ＨＡＥ発作」と短縮される）は、通常、初期の前駆段階（典型的には最長１２時間続き得る）、それに続く腫脹段階、次いで吸収段階、の３つの重要な臨床的に異なる段階を経て進行する。ＨＡＥ発作の大部分は、前駆症状を呈する。前駆段階の３分の２は、ＨＡＥ発作前６時間未満で出現し、ＨＡＥ発作の２４時間超前には前駆段階は出現しない（Ｍａｇｅｒｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ（２０１４）３９，ｐｐ２９８－３０３）。例えば、以下の前駆症状が観察され始め得る：軽微な腫脹（特に顔及び首に影響を与える）、典型的なタイプの腹痛、「輪状紅斑」と呼ばれる典型的な皮膚の発赤。発作は、最大の腫脹及び最大の痛みの出現（例：腹部発作）、不快感（例：末梢発作）、または生命への脅威（例：喉頭発作）に達したときに完全に発症する。発作がピークに達すると、その後の正常化までの期間は、腫脹が消失し、組織を貫通した液体が再吸収されるのにかかる時間によって決定される。
【0008】
合成の小分子血漿カリクレイン阻害剤は、以前に、例えば、Ｇａｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．（“Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｌｄｅｈｙｄｅ…．”Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．５２，ｐ６２－７１（１９９８））、Ｔ．Ｇｒｉｅｓｂａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（“Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｂｕｔ ｎｏｔ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｋｉｎｉｎｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ”Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ １３７，ｐ６９２－７００（２００２））、Ｅｖａｎｓ（“Ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｄｉｐｅｐｔｉｄｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”ＷＯ０３／０７６４５８）、Ｓｚｅｌｋｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｋｉｎｉｎｏｇｅｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ９２／０４３７１）、Ｄ．Ｍ．Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．（Ｉｍｍｕｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３２，ｐ１１５－１１６（１９９６））、Ｓｚｅｌｋｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｋｉｎｉｎｏｇｅｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ９５／０７９２１）、Ａｎｔｏｎｓｓｏｎ ｅｔ ａｌ．（“Ｎｅｗ ｐｅｐｔｉｄｅｓ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ”ＷＯ９４／２９３３５）、Ｊ．Ｃｏｒｔｅ ｅｔ ａｌ．（”Ｓｉｘ ｍｅｍｂｅｒｅｄ ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ ｕｓｅｆｕｌ ａｓ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ２００５／１２３６８０）、Ｊ．Ｓｔｕｒｚｂｅｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｂｒａｚｉｌｉａｎ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ２７，ｐ１９２９－３４（１９９４））、Ｋｅｔｔｎｅｒ ｅｔ ａｌ．（ＵＳ５，１８７，１５７）、Ｎ．Ｔｅｎｏ ｅｔ ａｌ．（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１，ｐ１０７９－１０９０（１９９３））、Ｗ．Ｂ．Ｙｏｕｎｇ ｅｔ ａｌ．（“Ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｓ．１６，ｐ２０３４－２０３６（２００６））、Ｏｋａｄａ ｅｔ ａｌ．（“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｐｌａｓｍｉｎ ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ”Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４８，ｐ１９６４－７２（２０００））、Ｓｔｅｉｎｍｅｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．（“Ｔｒｙｐｓｉｎ－ｌｉｋｅ ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ａｎｄ ｕｓｅ”ＷＯ０８／０４９５９５）、Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（“Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｈｉｇｈｌｙ ｐｏｔｅｎｔ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２，ｐ５４５－５５３（２００６））、Ｓｉｎｈａ ｅｔ ａｌ．（“Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”ＷＯ０８／０１６８８３）、Ｓｈｉｇｅｎａｇａ ｅｔ ａｌ．（“Ｐｌａｓｍａ Ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ２０１１／１１８６７２）、及びＫｏｌｔｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｈｉｇｈ－ａｆｆｉｎｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ”，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２０１１），１６２（７），１６３９－１６４９）に記載されている。また、Ｓｔｅｉｎｍｅｔｚｅｒ ｅｔ ａｌ．（“Ｓｅｒｉｎｅ ｐｒｏｔｅａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ２０１２／００４６７８）は、ヒトプラスミン及び血漿カリクレインの阻害剤である環化ペプチド類似体を記載している。
【0009】
上述により説明したように、ＨＡＥは、Ｃ１エステラーゼ阻害剤の遺伝的欠損または機能不全を呈する患者に現れることができる。したがって、いくつかのＨＡＥの現在の治療は、Ｃ１エステラーゼ阻害剤の欠乏または機能不全を正常化するためにＣ１エステラーゼ阻害剤を投与することを含む。このような治療は、予防的（すなわち、急性ＨＡＥ発作の症状がない場合に、急性ＨＡＥ発作の可能性を予防／低減させるために投与される）及び／または急性治療（すなわち、急性ＨＡＥ発作の症状が認められた場合に、急性ＨＡＥ発作の重症度を停止または低減させるために投与される）であり得る。
【0010】
Ｃｉｎｒｙｚｅ（登録商標）及びＨａｅｇａｒｄａ（登録商標）は、Ｃ１エステラーゼ阻害剤を含み、急性ＨＡＥ発作を防止する（すなわち、予防的治療）ことが示される。Ｃｉｎｒｙｚｅ（登録商標）による治療は、粉末からの溶液の調製を必要とし、その後３日または４日ごとに注射される。同様に、Ｈａｅｇａｒｄａ（登録商標）による治療は、粉末からの溶液の調製を必要とし、それはその後週に２回注射される。患者がこれらの治療剤を自己投与することは必ずしも可能ではなく、その場合、患者は、治療のために診療所に行く必要がある。したがって、これらの予防的治療は両方とも、患者の高い負担を強いる。加えて、Ｈａｅｇａｒｄａ（登録商標）のＦＤＡ添付文書は、「急性ＨＡＥ発作を治療するために使用されるべきではない」と述べており、したがって、ＨＡＥ発作が発症した場合、患者は追加の療法を必要とする場合がある。
【0011】
Ｂｅｒｉｎｅｒｔ（登録商標）及びＲｕｃｏｎｅｓｔ（登録商標）は、Ｃ１エステラーゼ阻害剤を含み、急性ＨＡＥ発作を治療することが示される。これらの治療の両方はまた、注射可能な溶液の調製と、それに続く注射を伴う。このプロセスは、特に、患者が急性ＨＡＥ発作を患っている場合、患者に負担を強いる可能性がある。投与量の自己投与もまた常に可能であるとは限らず、可能でない場合、薬物の投与は実質的に遅延され得、したがって患者の急性ＨＡＥ発作の重症度を増加させる。
【0012】
ＨＡＥの治療における医学的使用のために承認された選択的血漿カリクレイン阻害剤としては、Ｋａｌｂｉｔｏｒ（登録商標）（活性成分エカランチド）及びＴａｋｈｚｙｒｏ（登録商標）（活性成分ラナデルマブ）が挙げられる。両方の治療剤は、注射用溶液として製剤化される。エカランチドは、アナフィラキシー反応のリスクを呈する、大型タンパク質血漿カリクレイン阻害剤である。実際、Ｋａｌｂｉｔｏｒ（登録商標）の利点がそのリスクを上回らないと言われているため、Ｋａｌｂｉｔｏｒ（登録商標）のＥＵ販売承認申請は最近撤回された。ラナデルマブは、組換え完全ヒトＩｇＧ１カッパ軽鎖モノクローナル抗体である。ラナデルマブによる治療で報告された有害反応には、過敏症、注射部位の疼痛、注射部位の紅斑、及び注射部位の挫傷が含まれる。Ｔａｋｈｚｙｒｏ（登録商標）（活性物質ラナデルマブ）の認可されたＥＭＡラベルは、「急性ＨＡＥ発作の治療を意図するものではなく」、「ブレークスルーＨＡＥ発作の場合には、認可された救急薬で別の治療を開始すべきである」と述べている。また、注射であるので、これらの治療の両方は、高い患者負担を伴う。
【0013】
Ｂｅｒｏｔｒａｌｓｔａｔ（ＢＣＸ７３５３）は、例えば、Ｏｒｌａｄｅｙｏ（登録商標）というブランド名で、いくつかの国でＨＡＥの予防的治療（オンデマンド治療ではない）として承認されている。Ｈｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ（２０１９）１１（１７），１４３９－１４４４）は、より高い用量は、より高いレベルでの毒性の増加を示す、より多くの胃腸有害作用と関連付けられたと述べている。
【0014】
当該技術分野で知られている他の血漿カリクレイン阻害剤は、一般に小分子であり、そのうちのいくつかは、グアニジンまたはアミジンなどの高度に極性でイオン化可能な官能基を含む。最近、グアニジンまたはアミジン官能基を特徴としない血漿カリクレイン阻害剤が報告されている。例えば、Ｂｒａｎｄｌ ｅｔ ａｌ．（“Ｎ－（（６－ａｍｉｎｏ－ｐｙｒｉｄｉｎ－３－ｙｌ）ｍｅｔｈｙｌ）－ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ ａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”ＷＯ２０１２／０１７０２０）、Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．（“Ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”ＷＯ２０１３／００５０４５）、Ａｌｌａｎ ｅｔ ａｌ．（“Ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｅ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ”ＷＯ２０１４／１０８６７９），Ｄａｖｉｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｉｃ ｄｅｒｉｖａｔｅｓ”ＷＯ２０１４／１８８２１１）、及びＤａｖｉｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｎ－（（ｈｅｔ）ａｒｙｌｍｅｔｈｙｌ）－ｈｅｔｅｒｏａｒｙｌ－ｃａｒｂｏｘａｍｉｄｅｓ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ａｓ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”ＷＯ２０１６／０８３８２０）。
【0015】
本出願人は、ＷＯ２０１６／０８３８２０（ＰＣＴ／ＧＢ２０１５／０５３６１５）に開示されている、血漿カリクレインの阻害剤である新規の一連の化合物を開発した。これらの化合物は、血漿カリクレインに対して良好な選択性を示す。そのような化合物の１つは、Ｎ－［（３－フルオロ－４－メトキシピリジン－２－イル）メチル］－３－（メトキシメチル）－１－（｛４－［（２－オキソピリジン－１－イル）メチル］フェニル｝メチル）ピラゾール－４－カルボキサミド（以下の式Ａの化合物として示される）である。式Ａの化合物を含むＨＡＥの治療は、ＷＯ２０２０／２４９９７７にて議論されている。
【化1】
【0016】
患者のコンプライアンスを改善するために、患者の負担を軽減するＨＡＥの承認された治療の必要性が依然として存在する。現在のオンデマンド療法は、注射剤による治療であり、患者は、現在の療法からそのような代替療法に移行する場合、任意の代替（非注射可能）療法に信頼を持たなければならない。
【0017】
定義
「ＨＡＥの発作」、「ＨＡＥ発作」、及び「発作」などの用語は、本明細書では互換的に使用される。用語「遺伝性血管性浮腫」は、遺伝性の遺伝的機能不全、欠陥、または変異を原因とする、任意のブラジキニン媒介性血管性浮腫を意味する。結果として、用語「ＨＡＥ」は、少なくともＨＡＥ１型、ＨＡＥ２型、及び正常Ｃ１阻害剤ＨＡＥ（正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥ）を含む。
「ＨＡＥの発作」、「ＨＡＥ発作」、及び「発作」などの用語は、本明細書では互換的に使用される。用語「遺伝性血管性浮腫」は、遺伝性の遺伝的機能不全、欠陥、または変異を原因とする、任意のブラジキニン媒介性血管性浮腫を意味する。結果として、用語「ＨＡＥ」は、少なくともＨＡＥ１型、ＨＡＥ２型、及び正常Ｃ１阻害剤ＨＡＥ（正常Ｃ１－Ｉｎｈ ＨＡＥ）を含む。
【0018】
「症状緩和」の文脈で使用される場合、「連続した時点」という用語は、表３に記載されるような評価を意味し得る。具体的には、「連続した時点」は、（特に、化合物の投与後０～４時間以内で）３０分離れた評価を意味し得る。「連続した時点」はまた、（特に、化合物の投与後４～１２時間以内で）１時間離れた評価も意味することができる。「連続した時点」はまた、（特に、化合物の投与後１２～２４時間以内で）３時間離れた評価も意味することができる。
【0019】
本明細書に記載の本発明の治療のいずれにおいても、「式Ａの化合物」または「化合物」という用語は、「式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）」の略である。「溶媒和物」という用語は、本明細書では、本発明の化合物と、１つ以上の薬学的に許容される溶媒分子、例えば、エタノールまたは水と、を含む分子複合体を記述するために使用される。用語「水和物」は、溶媒が水である場合に用いられ、疑義を避けるために、用語「水和物」は用語「溶媒和物」に包含される。
【0020】
本明細書に記載の本発明の治療のいずれにおいても、「薬学的に許容される塩」という用語は、生理学的または毒性学的に許容される塩を意味し、薬学的に許容される酸付加塩を含む。例えば、（ｉｉ）本発明の化合物がアミノ基などの塩基性基を含む場合、形成することができる薬学的に許容される酸付加塩には、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、酢酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、コハク酸塩、シュウ酸塩、リン酸塩、エシル酸塩、トシル酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、ナフタレンジスルホン酸塩、マレイン酸塩、アジピン酸塩、フマル酸塩、馬尿酸塩、カンファー酸塩、キシナホ酸塩、ｐ－アセトアミド安息香酸塩、ジヒドロキシ安息香酸塩、ヒドロキシナフトエ酸塩、コハク酸塩、アスコルビン酸塩、オレイン酸塩、重硫酸塩などが含まれる。
【0021】
酸及び塩基の半塩、例えば、半硫酸塩及びヘミカルシウム塩もまた形成することができる。
【0022】
好適な塩の概説については、Ｓｔａｈｌ及びＷｅｒｍｕｔｈによる“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ”（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）を参照されたい。
【0023】
式Ａの化合物は、１つ以上の同位体富化原子の存在下のみが異なる化合物を含むことを意味する。例えば、水素が重水素もしくは三重水素に置換される、または炭素が１３Ｃもしくは１４Ｃに置換される化合物は、本発明の範囲内にある。
【0024】
「オンデマンド」治療は、ＨＡＥの文脈において、式Ａの化合物が、１つの特定のＨＡＥ発作に関連して、療法の必要性に応じて投与されることを意味する。「オンデマンド」は、ＨＡＥ発作の事実にかかわらず、規則的な間隔（例えば、１週間に１回、１週間に２回など）で連続的に式Ａの化合物の投与を必要としない。これは、療法のために連続的かつ定期的な投与を必要とする、いくつかの他の既知のＨＡＥ治療（例えば、上記のようなＣｉｎｒｙｚｅ（登録商標）及びＨａｅｇａｒｄａ（登録商標）による治療）とは対照的である。代わりに、本発明の治療において、式Ａの化合物は、患者が速効性の治療効果を必要とするときに服用される。これらは、以下でより詳細に説明される。
【0025】
本明細書に記載の本発明の治療のいずれにおいても、患者は、好ましくはヒトである。ＨＡＥは遺伝性疾患であり、すべての年齢の患者がＨＡＥ発作に罹患する可能性がある。したがって、ヒト患者は、小児（０～１８歳）または成人（１８歳以上）であり得る。具体的には、患者は１２歳以上であってもよい。患者はまた、２歳以上であってもよい。
【先行技術文献】
【特許文献】
【0026】
【特許文献1】国際公開第２００３／０７６４５８号
【特許文献2】国際公開第９２／０４３７１号
【特許文献3】国際公開第９５／０７９２１号
【特許文献4】国際公開第９４／２９３３５号
【特許文献5】国際公開第２００５／１２３６８０号
【特許文献6】米国特許第５，１８７，１５７号明細書
【特許文献7】国際公開第２００８／０４９５９５号
【特許文献8】国際公開第２００８／０１６８８３号
【特許文献9】国際公開第２０１１／１１８６７２号
【特許文献10】国際公開第２０１２／００４６７８号
【特許文献11】国際公開第２０１２／０１７０２０号
【特許文献12】国際公開第２０１３／００５０４５号
【特許文献13】国際公開第２０１４／１０８６７９号
【特許文献14】国際公開第２０１４／１８８２１１号
【特許文献15】国際公開第２０１６／０８３８２０号
【特許文献16】国際公開第２０２０／２４９９７７号
【非特許文献】
【0027】
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【非特許文献2】Ｊ．Ｗ．Ｂｒｙａｎｔ ｅｔ ａｌ．，“Ｈｕｍａｎ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ－ｋｉｎｉｎ ｓｙｓｔｅｍ：ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ”Ｃａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒ ａｎｄ ｈａｅｍａｔｏｌｏｇｉｃａｌ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｍｅｄｉｃｉｎａｌ ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，７，ｐ２３４－２５０，２００９
【非特許文献3】Ｋ．Ｄ．Ｂｈｏｏｌａ ｅｔ ａｌ．，Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｒｅｖ．，１９９２，４４，１
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【非特許文献5】Ｈｏｆｍａｎ ｅｔ ａｌ Ｃｌｉｎ Ｒｅｖ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｉｍｍｕｎｏｌ ２０１６
【非特許文献6】Ｍａａｓ ｅｔ ａｌ Ｊ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｉｎｖｅｓｔ ２００８
【非特許文献7】Ｆ．Ｍａｒｃｅａｕ ａｎｄ Ｄ．Ｒｅｇｏｌｉ，Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．，Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ，２００４，３，８４５－８５２
【非特許文献8】Ａ．Ｌｅｈｍａｎｎ“Ｅｃａｌｌａｎｔｉｄｅ（ＤＸ－８８），ａ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙ ａｎｇｉｏｅｄｅｍａ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ｌｏｓｓ ｉｎ ｏｎ－ｐｕｍｐ ｃａｒｄｉｏｔｈｏｒａｃｉｃ ｓｕｒｇｅｒｙ”Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｂｉｏｌ．Ｔｈｅｒ．８，ｐ１１８７－９９
【非特許文献9】Ｖｅｒｏｎｅｚ ｅｔ ａｌ．，Ｆｒｏｎｔ Ｍｅｄ（Ｌａｕｓａｎｎｅ）．２０１９ Ｆｅｂ ２１；６：２８．ｄｏｉ：１０．３３８９／ｆｍｅｄ．２０１９．０００２８
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【非特許文献11】Ｍａｎｓｉ ｅｔ ａｌ．２０１４ Ｔｈｅ Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，２０１５，２７７；５８５－５９３
【非特許文献12】Ｍａａｔ ｅｔ ａｌ．Ｊ Ｔｈｒｏｍｂ Ｈａｅｍｏｓｔ．２０１９ Ｊａｎ；１７（１）：１８３－１９４．ｄｏｉ：１０．１１１１／ｊｔｈ．１４３２５
【非特許文献13】Ｍａｇｅｒｌ ｅｔ ａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ（２０１４）３９，ｐｐ２９８－３０３
【非特許文献14】Ｇａｒｒｅｔｔ ｅｔ ａｌ．（“Ｐｅｐｔｉｄｅ ａｌｄｅｈｙｄｅ…．”Ｊ．Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｒｅｓ．５２，ｐ６２－７１（１９９８））
【非特許文献15】Ｔ．Ｇｒｉｅｓｂａｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（“Ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｏｆ ｔｉｓｓｕｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｂｕｔ ｎｏｔ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｓｙｍｐｔｏｍｓ ｍｅｄｉａｔｅｄ ｂｙ ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ ｋｉｎｉｎｓ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｐａｎｃｒｅａｔｉｔｉｓ ｉｎ ｒａｔｓ”Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ １３７，ｐ６９２－７００（２００２））
【非特許文献16】Ｄ．Ｍ．Ｅｖａｎｓ ｅｔ ａｌ．（Ｉｍｍｕｎｏｌｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，３２，ｐ１１５－１１６（１９９６））
【非特許文献17】Ｊ．Ｓｔｕｒｚｂｅｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．（Ｂｒａｚｉｌｉａｎ Ｊ．Ｍｅｄ．Ｂｉｏｌ．Ｒｅｓ２７，ｐ１９２９－３４（１９９４））
【非特許文献18】Ｎ．Ｔｅｎｏ ｅｔ ａｌ．（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４１，ｐ１０７９－１０９０（１９９３））
【非特許文献19】Ｗ．Ｂ．Ｙｏｕｎｇ ｅｔ ａｌ．（“Ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ｏｆ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ”Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔｓ．１６，ｐ２０３４－２０３６（２００６））
【非特許文献20】Ｏｋａｄａ ｅｔ ａｌ．（“Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｐｏｔｅｎｔ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｐｌａｓｍｉｎ ａｎｄ ｐｌａｓｍａ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ－ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ”Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．４８，ｐ１９６４－７２（２０００））
【非特許文献21】Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．（“Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｈｉｇｈｌｙ ｐｏｔｅｎｔ ｓｍａｌｌ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ”Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ２，ｐ５４５－５５３（２００６））
【非特許文献22】Ｋｏｌｔｅ ｅｔ ａｌ．（“Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｎｏｖｅｌ ｈｉｇｈ－ａｆｆｉｎｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｋａｌｌｉｋｒｅｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ”，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ（２０１１），１６２（７），１６３９－１６４９）
【非特許文献23】Ｈｗａｎｇ ｅｔ ａｌ．（Ｉｍｍｕｎｏｔｈｅｒａｐｙ（２０１９）１１（１７），１４３９－１４４４）
【非特許文献24】Ｓｔａｈｌ及びＷｅｒｍｕｔｈによる“Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓａｌｔｓ：Ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，Ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｕｓｅ”（Ｗｉｌｅｙ－ＶＣＨ，Ｗｅｉｎｈｅｉｍ，Ｇｅｒｍａｎｙ，２００２）
【発明を実施するための形態】
【0028】
これまでのところ、ＨＡＥの承認されたオンデマンド経口治療はなく、すべての承認された治療は注射剤である。ＨＡＥ発作は、早期治療後はより速く解消し、より短くなる（Ｍａｕｒｅｒ Ｍ ｅｔ ａｌ．ＰｌｏＳ ＯＮＥ ２０１３；８（２）：ｅ５３７７３．ｄｏｉ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００５３７７３）ため、発作が予想される、または進行中の場合の早期介入は、疾患を望ましく管理するために不可欠である。注射剤による治療は、患者が投与剤形を調製するか、または治療のために病院に移動することさえ必要とする場合があるため、投与の遅れに悩まされる。したがって、ＨＡＥ治療は、患者への高い負担によって引き起こされる投与の遅れによって損なわれることが多い。実際、Ｍａｕｒｅｒ Ｍらは、６０％を超える患者が、発作の発症後１時間を超えて、彼らのＨＡＥ注射剤を投与していると説明している。理論に束縛されることを望むものではないが、ＨＡＥ注射剤治療は、不便（自己投与が常に可能であるとは限らない）、疼痛（注射中及び注射後の両方）、及び希望（治療よりもむしろ、患者はより重篤でない発作を望むことが多い）などの理由で投与の遅れに悩むと考えられる。それにもかかわらず、現在、ＨＡＥ患者のオンデマンド治療のための注射療法に依存しており、経口オンデマンド療法が注射剤療法に取って代わることができるというさらなる患者の信頼が望ましいであろう。本発明は、この問題を解消することを目的とする。
【0029】
実施例６に記載される第２相試験からの有効性データは、式Ａの化合物による治療が、循環血漿カリクレインを急速に抑制し、発作の進行を停止し、症状を軽減し、患者の幸福を改善することを確認する。これらは統計的に有意な結果である。経口治療である式Ａの化合物は、ＨＡＥ発作が高重症度に達するのを防ぐことができる早期介入を可能にし、これは、治療転帰の改善（例えば、より早い症状緩和）につながり得る。患者は、式Ａの化合物による治療により、気分が良くなり、症状を迅速に解消することができる。実際、式Ａの化合物によって実証された有効性プロファイルは、迅速であり、現在承認されている注射用製品と同等であり、また、概して安全であり、忍容性も良好である。これらの効力の結果は、患者がオンデマンドで、具体的には、経口治療によりオンデマンドで投与することができ、依然として有効な治療を達成することができるというさらなる信頼を提供することができる。
【0030】
本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、本方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、発作の症状緩和は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与の３時間以内に始まる。この文脈での「症状緩和」という用語は、７点遷移質問（７－ｐｏｉｎｔ ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ ｑｕｅｓｔｉｏｎｓ）（７ＴＱ）に従って評価した場合、２つの連続した時点で発作が「少し良い」以上と評価されることを意味し得る。７ＴＱ（またはＰＧＩ－Ｃ）は、当技術分野で知られている指標であり、ＨＡＥ発作の進行をスコアリングし、発作を「はるかに良い」、「より良い」、「少し良い」、「変化なし」、「少し悪い」、「より悪い」、または「はるかに悪い」と報告するために使用できる。
【0031】
７ＴＱを使用して評価したとき、本発明の治療は、化合物を投与してから約０．６～３時間後に始まる症状緩和につながり得る。症状の緩和は、化合物を投与してから約１～３時間後に始まり得る。症状の緩和は、化合物を投与してから１．５～３時間後に始まり得る。症状緩和は、化合物を投与してから１．５～１．８時間後に始まり得る。症状の緩和は、化合物を投与してから約１．６時間後に始まり得る。
【0032】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、発作の症状緩和は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を投与した約１．５～９時間後に始まる。この文脈における用語「症状緩和」は、複合ＶＡＳスコア（ｃｏｍｐｏｓｉｔｅ ＶＡＳ ｓｃｏｒｅ）の５０％の低下が３つの連続した時点で生じたことを意味し得る。複合ＶＡＳスコアは、ＨＡＥ発作症状（腹痛、皮膚痛及び皮膚腫脹）の重症度の既知の評価であり、それぞれ、０（なし）及び１００（非常に重度）にアンカーされた１００ｍｍの視覚的アナログスケール（ＶＡＳ）で評価される。
【0033】
複合ＶＡＳスコアを使用して評価する場合、本発明の治療は、化合物を投与してから２．５～９時間後に始まる症状緩和につながり得る。症状緩和は、化合物を投与してから３～９時間後に始まり得る。症状の緩和は、化合物を投与してから４～７時間後に始まり得る。症状の緩和は、化合物を投与してから約６時間後に始まり得る。
【0034】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、治療は、発作の症状が、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与後１２時間の期間以内に悪化しないように、発作の進行を停止する。この文脈では、「悪化しない」とは、化合物を投与してから１２時間以内に、５ＬＳ上で発作が１レベル以上悪化しなかったことを意味し得る。５ＬＳ（ＰＧＩ－Ｓとも呼ばれる）は、ＨＡＥ発作の重大度を報告するために使用することができる、当技術分野で既知の尺度であり（例えば、Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｐｒｏｃ．２０１８ Ｊａｎ １；３９（１）：７４－８０．ｄｏｉ：１０．２５００／ａａｐ．２０１８．３９．４０９５）、例えば、発作を「なし」、「軽度」、「中程度」、「重度」または「非常に重度」として報告するために使用することができる。本発明による治療は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与後２４時間の期間以内に発作の症状が悪化しないように、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作の進行を停止することができる。この文脈では、「悪化しない」とは、化合物を投与してから２４時間以内に、５ＬＳ上で発作が１レベル以上悪化しなかったことを意味し得る。
【0035】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、治療は、発作の重症度を「なし」（５ＬＳに従って評価される場合）に改善する方法を提供する。本発明による治療は、化合物を投与してから２４時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから２１時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１８時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１５時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１２時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから９時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから６時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから４時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから２時間以内に発作の重症度を「なし」に改善することができる。
【0036】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、治療は、５ＬＳに従って評価されるとき、発作の重症度を１レベル以上改善する。「重症度を改善する」とは、発作の重症度を軽減すること、すなわち発作の症状がより良くなることを意味する。本発明による治療は、化合物を投与してから２４時間以内に５ＬＳに従って評価した場合に、発作の重症度を１レベル以上改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１８時間以内に５ＬＳに従って評価した場合に、発作の重症度を１レベル以上改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１２時間以内に５ＬＳに従って評価した場合に、発作の重症度を１レベル以上改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから９時間以内に５ＬＳに従って評価した場合に、発作の重症度を１レベル以上改善することができる。本発明による治療は、化合物を投与してから６時間以内に５ＬＳに従って評価した場合に、発作の重症度を１レベル以上改善することができる。
【0037】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）をオンデマンドで、それを必要とする患者に経口投与することを含み、治療は、式Ａの化合物を服用してから４時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減する。治療は、式Ａの化合物を服用してから６時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから８時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから１２時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから２４時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減することができる。治療は、発作を解消する第２の治療発作の必要性を完全に低減することができる。「発作を解消する」とは、ＨＡＥ発作が、それ以上の治療なしにクリアされることを意味する。
【0038】
より具体的には、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）をオンデマンドで必要とする患者に経口投与することを含み、治療は、式Ａの化合物を服用してから４時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避する。治療は、式Ａの化合物を服用してから６時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから８時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから１２時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避することができる。治療は、式Ａの化合物を服用してから２４時間以内の、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避することができる。治療は、発作を解消する第２の治療剤の必要性を回避することができる。
【0039】
さらにより具体的には、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、患者が、式Ａの化合物を摂取してから４時間以内に、ＨＡＥ発作の第２の治療剤を投与されない、方法を提供する。患者は、式Ａの化合物を摂取してから６時間以内に、第２の治療剤を投与されない場合がある。患者は、式Ａの化合物を摂取してから８時間以内に、ＨＡＥ発作の第２の治療剤を投与されない場合がある。患者は、式Ａの化合物を服用してから１２時間以内に、ＨＡＥ発作の第２の治療剤を投与されない場合がある。患者は、式Ａの化合物を摂取してから２４時間以内に、ＨＡＥ発作の第２の治療剤を投与されない場合がある。発作は、患者にいずれの第２の治療剤も投与することなく解消することができる。
【0040】
本明細書で使用される場合、「ＨＡＥ発作の第２の治療剤」または「第２の治療剤」は、化合物の初回用量ではない、ＨＡＥ発作を治療するための任意の用量の活性薬学的成分の投与である。第２の治療剤は、既存のＨＡＥ治療であり得る。例えば、「第２の治療剤」は、式Ａの化合物のｐｄＣ１ＩＮＨ、ｒｈＣ１ＩＮＨ、イカチバント、コネスタットアルファ（Ｒｕｃｏｎｅｓｔ（登録商標））、エカランチド、または第２の投与量であり得る。
【0041】
本発明の治療において、式Ａの化合物は、ＨＡＥ発作の症状の認識時にオンデマンドで経口投与することができる。各ＨＡＥ発作は、重症度及び影響を受ける領域の観点から異なる場合があるが、ＨＡＥに罹患している患者、ＨＡＥの知識を有する医療専門家、及びＨＡＥ患者の介護者（そして実際に当業者である）は、ＨＡＥ発作の症状を識別することに精通している。これらの症状には、以下が含まれるが、これらに限定されない：手、足、四肢、顔、腸管、及び／または気道などの組織の腫脹、疲労、頭痛、筋肉痛、皮膚の刺痛、腹痛、吐き気、嘔吐、下痢、嚥下困難、嗄声、息切れ、及び／または気分の変化。したがって、いくつかの実施形態では、式Ａの化合物の投与は、上記症状のうちの少なくとも１つの認識時に生じ得る。
【0042】
当業者はまた、「ＨＡＥ発作の症状の認識時に投与される」とは、ＨＡＥ発作の症状が認識された後、可能な限り迅速に投与が行われることを意味することを理解するであろう。例えば、患者は、ＨＡＥ発作の症状の認識時に治療が起こり得ることを確実にするために、常に（おそらく薬学的に許容される組成物の形態で）容易かつ容易に利用可能な式Ａの化合物を有することが期待される。つまり、治療はオンデマンドで行われる。例えば、式Ａの化合物は、ＨＡＥ発作の症状が認識されてから１時間以内、好ましくは、ＨＡＥ発作の症状が認識されてから３０分以内、２０分以内、１０分以内、または５分以内に投与することができる。
【0043】
ＨＡＥ発作の症状が前駆期で認識される場合、式Ａの化合物は、ＨＡＥ発作の前駆期に投与することができる。これらの状況では、認識される症状は、軽微な腫脹、特に、顔及び首に影響を及ぼす軽微な腫脹であり得る。さらに、または代替として、症状は腹痛であり得、特に、腹痛はＨＡＥ発作の特徴であると考えられる。加えて、または代替として、症状は、輪状紅斑などの皮膚の発赤であり得る。
【0044】
本発明による治療は、腹部ＨＡＥ発作を治療することができる。本発明による治療は、末梢性ＨＡＥ発作を治療することができる。
【0045】
上記のように、本発明による治療は、ＨＡＥ発作の重症度の増加を防ぐことができる。状況によっては、治療は発作の持続時間を短縮し、時には発作を完全に停止させることさえある。例えば、治療は、末梢性ＨＡＥ発作または腹部ＨＡＥ発作の進行を停止させることができる。いくつかの実施形態では、本発明による治療は、特に治療が前駆期に開始されるときに、その後の腫脹の発症を時には完全に、抑制することができる。具体的には、いくつかの実施形態では、治療が前駆期で開始されるとき、ＨＡＥ発作が腫脹段階に進行するのを防ぐことができる。
【0046】
上記の治療のいずれにおいても、症状は患者によって認識され得る。上記の治療のいずれにおいても、症状は、ＨＡＥの知識を有する医療専門家などの医療専門家によって認識され得る。上記の治療のいずれにおいても、症状は、患者の介護者によって認識され得る。
【0047】
本発明による治療は、５点リッカート尺度（５ＬＳ）で１レベル以上進行するＨＡＥ発作の割合を減少させることができる。本発明による治療は、化合物を投与してから１２時間以内に５ＬＳで１レベル以上進行するＨＡＥ発作の割合を減少させることができる。本発明による治療は、ＨＡＥ発作の解消時間を、５ＬＳ上で「なし」に改善することができる。５ＬＳは、ＨＡＥ発作の重症度を報告するために使用できる当技術分野で既知の尺度であり（例えば、Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｐｒｏｃ．２０１８ Ｊａｎ １；３９（１）：７４－８０．ｄｏｉ：１０．２５００／ａａｐ．２０１８．３９．４０９５）、例えば、発作を「なし」、「軽度」、「中程度」、「重度」または「非常に重度」として報告するために使用することができる。
【0048】
本発明による治療は、７点遷移質問（７ＴＱ）で「より悪い」または「はるかに悪い」と評価されるＨＡＥ発作の割合を減少させることができる。本発明による治療は、「より良い」または「はるかに良い」と評価されるＨＡＥ発作の割合を増加させることができる。７ＴＱは、ＨＡＥ発作の進行をスコアリングし、発作を「はるかに良い」、「より良い」、「少し良い」、「変化なし」、「少し悪い」、「より悪い」、または「はるかに悪い」と報告するために使用できる、当技術分野で知られている指標である。
【0049】
本発明者らは、２４時間以内に「より良い」以上のＰＧＩ－Ｃ（７ＴＱとしても知られる）評価を達成した患者は、救急薬を使用する可能性が低く（すなわち、ＨＡＥ発作の第２の治療を受ける可能性が低い）、ＰＧＩ－ＳまたはＶＡＳによって評価したときに、発作の解消を達成する可能性が高いことを特定した。
【0050】
したがって、本発明の他の治療に加えて、または代替的に、本発明はまた、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、７ＴＱを使用して評価すると、発作は、化合物を投与した約１．５～１６時間後に「より良い」以上の評価に改善する、方法を提供する。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約２．１時間及び１５時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約２．５～１０時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約２．５～８時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約３～８時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約４～６時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与してから約４．５～５．５時間後に、「より良い」以上の評価に改善される。より具体的には、発作は、化合物を投与した後、約５時間に、「より良い」以上の評価に改善される。
【0051】
したがって、本発明の他の治療に追加的または代替的に、本発明はまた、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法であって、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、２つの連続した時点にわたって７ＴＱを使用して評価すると、発作は、化合物を投与した約１．５～１６時間後に、「より良い」以上の評価に改善される、方法を提供する。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約２．１～１５時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約２．５～１０時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約２．５～８時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約３～８時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約４～６時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与してから約４．５～５．５時間後に始まり得る。より具体的には、「より良い」以上の評価は、化合物を投与した後約５時間に始まり得る。
【0052】
本発明者らは、２４時間以内に２つの連続した時点で「少し良い」以上のＰＧＩ－Ｃ（７ＴＱとしても知られる）評価を達成した患者は、救急薬を使用する可能性が低く（すなわち、ＨＡＥ発作の第２の治療を受ける可能性が低く）、発作の解消を達成する可能性が高いことを特定した。
【0053】
具体的には、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、発作の症状緩和は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を投与してから３時間以内（例えば、約１～約３時間、約１．５～約３時間、約１．５～約１．８時間、約１．６時間）以内に始まり、本文脈における「症状緩和」という用語は、７点遷移質問（７ＴＱ）に従って評価したときに、発作が２つの連続した時点で「少し良い」以上と評価されることを意味し得、治療は、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を低減する。
【0054】
より具体的には、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、発作の症状緩和は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を投与してから３時間以内（例えば、約１～約３時間、約１．５～約３時間、約１．５～約１．８時間、約１．６時間）以内に始まり、本文脈における「症状緩和」という用語は、７－点遷移質問（７ＴＱ）に従って評価したときに、発作が２つの連続した時点で「少し良い」以上と評価されることを意味し得、治療は、ＨＡＥ発作の第２の治療剤の必要性を回避する。
【0055】
さらにより具体的には、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、発作の症状緩和は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を投与してから３時間（例えば、約１～約３時間、約１．５～約３時間、約１．５～約１．８時間、約１．６時間）以内に始まり、ここで、本文脈における「症状緩和」という用語は、７点遷移質問（７ＴＱ）に従って評価されたときに、発作が２つの連続した時点で「少し良い」以上と評価されることを意味し得、患者は、ＨＡＥ発作の第２の治療剤を投与されない。
【0056】
代替的または追加的に、本発明は、遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の発作をオンデマンドで治療するための方法を提供し、方法は、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を必要とする患者に、それをオンデマンドで経口投与することを含み、治療は、発作の進行を低減する（または好ましくは、防止する）。例えば、治療は、２つの連続した時点にわたって、ＰＧＩ－Ｃ（７ＴＱとしても知られる）で「少し悪い」以上と評価される発作を防止することができる。治療は、化合物を投与してから１２時間以内に、２つの連続した時点にわたって、ＰＧＩ－Ｃで発作が「少し悪い」以上と評価されるのを防止することができる。より具体的には、治療は、化合物を投与してから２４時間以内に２つの連続した時点にわたって、ＰＧＩ－Ｃで発作が「少し悪い」以上と評価されるのを防止することができる。
【0057】
本発明の治療剤のうちのいずれかは、ＨＡＥの他の治療剤と組み合わせて使用され得る。具体的には、本明細書に記載の治療は、ＨＡＥの別の治療、例えば、ＨＡＥの予防的治療への「トップアップ」（または救急薬）として使用することができる。患者は、別の薬物によるＨＡＥの予防的治療を受けていてもよく、予防的治療によって予防されなかった急性ＨＡＥ発作（いわゆる「ブレークスルー発作」）を治療するために、本明細書に記載のオンデマンド治療を使用することができる。ＨＡＥの予防的治療は、Ｃ１阻害剤（Ｃｉｎｒｙｚｅ（登録商標）、Ｈａｅｇａｒｄａ（登録商標）、Ｂｅｒｉｎｅｒｔ（登録商標）等）、ラナデルマブ、及びベロトラルスタットから選択され得る。
【0058】
例えば、本発明は、予防のために既にＣ１阻害剤（Ｃｉｎｒｙｚｅ（登録商標）、Ｈａｅｇａｒｄａ（登録商標）、Ｂｅｒｉｎｅｒｔ（登録商標）など）を服用している患者のＨＡＥを治療するための方法を提供することができ、（本明細書に記載のオンデマンド治療のいずれかに従って）ブレークスルー発作を治療するために、式Ａの化合物を患者にオンデマンドで経口投与することを含む。また、（本明細書に記載のオンデマンド治療のいずれかに従って）ブレークスルー発作を治療するために、患者に式Ａの化合物をオンデマンドで経口投与することを含む、予防のために既にラナデルマブを服用している患者のＨＡＥを治療するための方法が提供される。また、（本明細書に記載のオンデマンド治療のいずれかに従って）ブレークスルー発作を治療するために、式Ａの化合物を患者にオンデマンドで経口投与することを含む、予防のために既にベロトラルスタットを服用している患者のＨＡＥを治療するための方法が提供される。
【0059】
ＨＡＥの予防的治療剤は、１－（｛４－［（５－フルオロ－２－オキソピリジン－１－イル）メチル］フェニル｝メチル）－Ｎ－［（３－フルオロ－４－メトキシピリジン－２－イル）メチル］－３－（メトキシメチル）ピラゾール－４－カルボキサミド（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）であってもよい。１－（｛４－［（５－フルオロ－２－オキソピリジン－１－イル）メチル］フェニル｝メチル）－Ｎ－［（３－フルオロ－４－メトキシピリジン－２－イル）メチル］－３－（メトキシメチル）ピラゾール－４－カルボキサミドは、「ＫＶＤ８２４」としても知られている。出願時点で、ＫＶＤ８２４は第１相試験を完了し、第２相試験を開始している（ＮＣＴ０５０５５２５８｜ＥｕｄｒａＣＴ番号：２０２１－０００１３６－５９－ＫＯＭＰＬＥＴＥ（商標）臨床試験）。その第１相試験では、ＫＶＤ８２４の濃度は、反復投与にわたって一貫した薬物動態プロファイルを提供することが示され、Ｃ１阻害剤及びラナデルマブの機能的濃度を上回る濃度で維持された。ＫＶＤ８２４（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を含むＨＡＥの予防的治療は、ＰＣＴ／ＧＢ２０２１／０５２６７８にも記載されており、ＫＶＤ８２４の血漿カリクレイン阻害剤活性は、ＷＯ２０１９／１０６３７７及びＷＯ２０１７／２０７９８３に記載されている。したがって、本発明はまた、予防のために既にＫＶＤ８２４（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）を服用している患者におけるＨＡＥを治療するための方法であって、（本明細書に記載のオンデマンド治療のいずれかに従って）ブレークスルー発作を治療するために、式Ａの化合物を患者にオンデマンドで経口投与することを含む方法を提供する。
【0060】
投与
本明細書に記載の本発明の治療のいずれにおいても、式Ａの化合物は、治療有効量で経口投与される。
本明細書に記載の本発明の治療のいずれにおいても、式Ａの化合物は、治療有効量で経口投与される。
【0061】
式Ａの化合物は、約１００ｍｇ～約１５００ｍｇ、約３００ｍｇ～約１８００ｍｇ、約１００ｍｇ～約１４００ｍｇ、約２００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約３００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約６００ｍｇ～約１２００ｍｇ、約４５０ｍｇ～約９００ｍｇ、約５００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約４５０ｍｇ～約６００ｍｇ、約５００ｍｇ～約７００ｍｇ（より具体的には６００ｍｇ）、一日当たり約８００ｍｇ～約１０００ｍｇ、約９００ｍｇ～約１４００ｍｇ（より具体的には１２００ｍｇ）、または約９００ｍｇ～約１２００ｍｇの量で投与することができる。投与量は、３００ｍｇであり得る。投与量は、６００ｍｇであり得る。１日の投与量は、９００ｍｇであり得る。別の特定の実施形態では、１日の投与量は、１２００ｍｇとすることができる。投与量は、１８００ｍｇである。
【0062】
好ましくは、投与量は、６００ｍｇである。好ましくは、投与量は、ＨＡＥ発作の症状が認識されてから１時間以内に投与される。
【0063】
投与量は、３００ｍｇであってもよい。好ましくは、投与量は、ＨＡＥ発作の症状が認識されてから１時間以内に投与される。
【0064】
患者に投与される各投与量を、少量の単位投与量に細分化することができる。例えば、化合物の好ましい６００ｍｇの投与量は、それぞれが３００ｍｇの化合物を含む２つの単位投与量（例えば、２つの錠剤）に細分することができる。
【0065】
本発明の治療は、経口投与を伴う。本発明の治療のいずれにおいても、式Ａの化合物は、式Ａの化合物及び薬学的に許容される賦形剤を含む経口剤形として投与され得る。経口剤形は、錠剤またはカプセル剤の形態であり得る。経口剤形は、錠剤であり得る。経口剤形は、カプセルであり得る。
【0066】
剤形は、希釈剤としての微結晶セルロース、崩壊剤としてのクロスカルメロースナトリウム、結合剤としてのポリビニルピロリドン、及び任意選択による、滑沢剤としてのステアリン酸マグネシウム、を含む錠剤であり得る。好ましい錠剤において、式Ａの化合物は、（ｉ）錠剤の総質量と比較して、錠剤の少なくとも約４０重量％（より具体的には、約４０重量％～約６０重量％）、（ｉｉ）錠剤の総質量と比較して、希釈剤の約２５重量％～約６０重量％（より具体的には、錠剤の総質量と比較して、約２５重量％～約４０重量％）、（ｉｉｉ）錠剤の総質量と比較して、崩壊剤の約１重量％～約１５重量％（より具体的には、約２重量％～約６重量％）、（ｉｖ）錠剤の総質量と比較して、結合剤の約１重量％～約２０重量％（より具体的には、約２重量％～約５重量％）、及び存在する場合、（ｖ）錠剤の総質量と比較して、滑沢剤の約０．１～約５重量％（より具体的には、約０．１重量％～約１．５重量％）を構成する。剤形は、３００ｍｇの化合物を含有する錠剤であってもよい。
【0067】
錠剤は、粒子外希釈剤としての微結晶セルロース、粒子外崩壊剤としてのクロスカルメロースナトリウム、粒子外結合剤としてのポリビニルピロリドン、及び／または粒子外滑沢剤としてのステアリン酸マグネシウム、を含む顆粒外賦形剤をさらに含むことができる。
【0068】
本明細書に記載の剤形（例えば、錠剤）は、フィルムコーティングすることができ、フィルムコーティングは、ヒプロメロース、ラクトース一水和物、二酸化チタン、及びトリアセチンのうちの１つ以上を含むことができる。
【0069】
本発明の治療のさらなる詳細
本明細書に示されるように、式Ａの化合物は、急速な作用の開始を有する。具体的には、式Ａの化合物は、血漿カリクレイン活性の強力な阻害剤であり、血漿カリクレイン、プレカリクレイン、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、及び第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ）間の接触活性化系の正のフィードバックループを中断するのに非常に効果的である。本明細書で提供される薬物動態及び薬力学的データは、これらの効果が、式Ａの化合物の経口投与の後に迅速に示されることを実証する。したがって、本発明の治療は、速効性であり、したがって、オンデマンドでのＨＡＥの治療に特に適している。
本明細書に示されるように、式Ａの化合物は、急速な作用の開始を有する。具体的には、式Ａの化合物は、血漿カリクレイン活性の強力な阻害剤であり、血漿カリクレイン、プレカリクレイン、第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）、及び第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ）間の接触活性化系の正のフィードバックループを中断するのに非常に効果的である。本明細書で提供される薬物動態及び薬力学的データは、これらの効果が、式Ａの化合物の経口投与の後に迅速に示されることを実証する。したがって、本発明の治療は、速効性であり、したがって、オンデマンドでのＨＡＥの治療に特に適している。
【0070】
上述のように、本発明の治療は、式Ａの化合物の濃度が血漿中で少なくとも５００ｎｇ／ｍＬである場合に特に有利である。少なくとも５００ｎｇ／ｍＬの血漿濃度は、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量に続いて観察され得る。
【0071】
本発明による治療は、進行中のＨＡＥ発作の重症度を短縮する（またはさらには停止する）のに特に適しているＨＫ（高分子量キニノーゲン）切断からの迅速な保護を提供する。本明細書に記載されるように、本発明による治療はまた、延長された薬力学的効果を有する。ＨＡＥの治療に関連する式Ａの化合物の薬力学的効果は、上記のように、ＨＡＥ発作を引き起こし得るＨＫ切断からの保護を提供することを含む。例えば、式Ａの化合物は、少なくとも（ｉ）血漿カリクレインを阻害すること、（ｉｉ）血漿プレカリクレインの切断を低減すること、及び／または（ｉｉｉ）第ＸＩＩ因子からの第ＸＩＩａ因子の生成を低減することによって、ＨＫ切断からの保護を提供することができる。
【0072】
本発明による治療は、投与量後１時間以内、特に式Ａの化合物の投与量が少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）である場合に、ＨＫ（高分子量キニノーゲン）切断からの保護を提供することができる。本発明による治療は、投与量後４５分以内、または投与量後３０分以内に、ＨＫ（高分子量キニノーゲン）切断からの保護を提供することができる。ＨＫ（高分子量キニノーゲン）からの切断に対する保護は、治療されていない血漿中のＨＫレベルを、治療された血漿中のＨＫレベル、すなわち、式Ａの化合物の投与量を受けた対象由来の血漿と比較し、次いで、血漿をデキストラン硫酸で活性化して、接触系を活性化してＨＫ切断を誘導することによって決定することができる。治療血漿中のＨＫレベルが、未治療血漿中のＨＫレベルを上回る場合、ＨＫは、活性化血漿中のＨＫ切断から保護されている。
【0073】
治療は、投与量後３０分以内に、特に、式Ａの化合物の投与量が少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）である場合に、血漿カリクレイン活性の少なくとも８０％を阻害することができる。本発明の一部の実施形態では、治療は、投与量後３０分以内に、特に、式Ａの化合物の投与量が少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）である場合に、血漿カリクレイン活性の少なくとも９０％を阻害することができる。治療は、投与量後３０分以内、特に、式Ａの化合物（またはその薬学的に許容される塩及び／または溶媒和物）の投与量が少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）である場合、血漿カリクレイン活性の少なくとも９５％を阻害することができる。血漿カリクレイン活性の阻害について言及される場合、血漿カリクレイン活性の阻害は、当該技術分野で既知の手順に従って、蛍光発生基質の時間依存的加水分解（例えば（Ｈ－Ｄ－Ｐｒｏ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－ＡＦＣ、Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｒｅｓｅａｒｃｈ）によって決定することができる。血漿カリクレイン活性の阻害は、ＨＡＥ状況をエミュレートするためにその後デキストラン硫酸で活性化された式Ａの化合物の投与量を服用した対象から得られた血漿において決定することができる。
【0074】
式Ａの化合物の治療上有効な濃度は、投与量の２０分後以内に達成することができる。
【0075】
式Ａの化合物のＴｍａｘは、投与量後３０分～３時間、好ましくは投与量後３０分～２時間とすることができる。
【0076】
治療は、特に式Ａの化合物の投与量が１００ｍｇ～２００ｍｇ（好ましくは１６０ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも４５分～２時間の間の期間、血漿カリクレイン活性の少なくとも９０％を阻害することができる。治療は、特に式Ａの化合物の投与量が１００ｍｇ～２００ｍｇ（好ましくは１６０ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも２０分～４時間の期間、血漿カリクレイン活性の少なくとも９０％を阻害することができる。治療は、特に式Ａの化合物の投与量が３００ｍｇ～８００ｍｇ（好ましくは６００ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも３０分～１０時間の期間、血漿カリクレイン活性の少なくとも９０％を阻害することができる。治療は、特に式Ａの化合物の投与量が３００ｍｇ～８００ｍｇ（好ましくは６００ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも２０分～６時間の期間、血漿カリクレイン活性の少なくとも９５％を阻害することができる。治療は、特に式Ａの化合物の投与量が３００ｍｇ～８００ｍｇ（好ましくは６００ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも２０分～６時間の間の期間、少なくとも９９％の血漿カリクレイン活性を阻害することができる。繰り返しになるが、血漿カリクレイン活性の阻害は、ＨＡＥ状況をエミュレートするためにその後デキストラン硫酸で活性化された式Ａの化合物の投与量を服用した対象から得られた血漿中で決定することができる。
【0077】
ＨＡＥの治療に関連する式Ａの化合物の薬力学的効果は、特に式Ａの化合物の投与量が３００ｍｇ～８００ｍｇ（好ましくは６００ｍｇ）の間である場合、投与量後少なくとも１２時間維持することができる。治療は、特に式Ａの化合物の投与量が１００ｍｇ～２００ｍｇ（好ましくは１６０ｍｇ）である場合、投与量後の少なくとも１０時間、血漿カリクレイン活性の少なくとも５０％を阻害することができる。薬力学的効果は、少なくとも、（ｉ）血漿カリクレインの阻害、（ｉｉ）ＨＫ切断の保護／ＨＫ切断の減少、（ｉｉｉ）第ＸＩＩ因子の切断による第ＸＩＩａ因子の生成からの保護（または減少）、及び／または（ｉｖ）血漿プレカリクレイン切断による血漿カリクレインの生成からの保護（または低減）を意味し得る。したがって、本発明による治療は、それらが十分に長い期間にわたって速効性及び強力（例えば、阻害性）であるため、有利に有効なＨＡＥ発作の治療であるために好適な候補である。
【0078】
上記のように、本発明の治療のいずれにおいても、式Ａの化合物は、血漿カリクレインを阻害することができる。
【0079】
本発明の治療のいずれにおいても、特に、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の後、式Ａの化合物は、第ＸＩＩ因子を切断して第ＸＩＩａ因子を生成することを阻害することができる。本発明の治療のいずれにおいても、特に、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の後、式Ａの化合物は、血漿プレカリクレインの血漿カリクレインへの切断を阻害することができる。本発明の治療のいずれにおいても、特に、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の後、式Ａの化合物は、投与量の後最大６時間、接触系の活性化の阻害（例えば、遮断）をもたらし得る。一部の実施形態では、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の投与量が投与される場合、接触系の活性化は、少なくとも６時間、例えば、投与量の後６時間～１２時間または１８時間、阻害（例えば、ブロック）され得る。
【0080】
実施例に実証されるように、式Ａの化合物は、血漿カリクレインの強力な阻害剤である。既に説明したように、血漿カリクレインを阻害することは、ＨＡＥ発作に寄与する高分子量キニノーゲンの切断を阻害する。加えて、及び実施例４に示されるように、式Ａの化合物はまた、接触系の活性化後の血漿プレカリクレインの切断及び第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ）の生成を低減することができる。これらの有利な追加の効果は、本発明の治療が非常に有効であることを支持し、特に、血漿の式Ａの化合物の濃度が少なくとも５００ｎｇ／ｍＬである場合に実証される。少なくとも５００ｎｇ／ｍＬの血漿濃度は、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０または約８０ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の投与後に観察され得る。
【0081】
本発明の治療において、特に、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の後、血漿カリクレインを阻害することに加えて、治療はまた、血漿プレカリクレインを切断し、血漿カリクレインを生成することを低減させ、及び／または投与後の第ＸＩＩａ因子（ＦＸＩＩａ）の生成を低減させることができる。したがって、特に、少なくとも約６０ｍｇ（より具体的には、少なくとも約７０ｍｇまたは約８０ｍｇ、例えば、約８０ｍｇ～約９００ｍｇ、約１００ｍｇ～約８００ｍｇ、約２００ｍｇ～約７００ｍｇ、約３００ｍｇ～約６００ｍｇ、または約４００ｍｇ～約６００ｍｇ、具体的には６００ｍｇ）の式Ａの化合物の投与量の後、治療は、血漿プレカリクレインの切断をブロックして、血漿カリクレインを生成し、及び／またはＦＸＩＩの切断をブロックして、ＦＸＩＩａを生成することができる。
【0082】
図中、「化合物」という用語は、式Ａの化合物を意味する。
【図面の簡単な説明】
【0083】
【図1】実施例１で生成された式Ａの化合物のＸ線粉末回折パターン。
【図2A】デキストラン硫酸（ＤＸＳ）活性化希釈血漿中の式Ａの化合物及びＣ１阻害剤Ｃ１－ＩＮＨの血漿カリクレイン阻害活性を示すアッセイ結果。
【図2B】ＤＸＳ活性化未希釈血漿中の式Ａの化合物及びＣ１阻害剤（Ｃ１－ＩＮＨ）の血漿カリクレイン阻害活性を示すアッセイ結果。
【図3A】ＤＸＳ活性化希釈血漿中の式Ａの化合物及びＣ１－ＩＮＨの血漿カリクレイン阻害活性を比較するアッセイ結果。
【図3B】事前に活性化された未希釈ヒト血漿に添加した後の式Ａ及びＣ１－ＩＮＨの化合物の阻害活性を比較するアッセイ結果。データは、ｎ＝３回の実験の経時的な総蛍光（蛍光単位）平均±ＳＥＭとして表される。
【図4A】８個の単一漸増用量コホートからの絶食対象における、用量後０～２４時間の間の式Ａの化合物の血漿濃度を示すアッセイ（生体分析）結果。
【図5A】コホート６～８（１６０ｍｇ、３００ｍｇ、及び６００ｍｇ）のＤＸＳ活性化未希釈血漿中の血漿カリクレイン活性を示すアッセイ結果。
【図5B】コホート８からの対象の未希釈血漿中の式Ａの化合物の平均血漿カリクレイン活性及び平均血漿濃度を示すアッセイ結果（６００ｍｇ用量）。
【図6A】６００ｍｇ用量の式Ａの化合物を受けた対象のＤＸＳ活性化未希釈血漿中の接触系活性化中の触媒活性の遅延時間を示す平均蛍光動態測定値を示すアッセイ結果。
【図7】コホート６～８（１６０ｍｇ、３００ｍｇ、及び６００ｍｇ）のＤＸＳ活性化未希釈血漿における投与後の選択された時点における平均ＨＫ保護、ならびに免疫ブロットデータの代表的なＷＥＳゲル画像を示すアッセイ結果。
【図8】コホート８（６００ｍｇ）における投与後の選択された時点でのＤＸＳ活性化ＨＫ切断に対する式Ａの化合物の効果、及び免疫ブロットデータの代表的なＷＥＳゲル画像を示すアッセイ結果。
【図9】コホート８（６００ｍｇ）における投与後の選択された時点における、ＤＸＳ活性化血漿プレカリクレイン（ＰＰＫ）切断に対する式Ａの化合物の効果、及び免疫ブロットデータの代表的なＷＥＳゲル画像を示すアッセイ結果。
【図10】コホート８（６００ｍｇ）における投与後の選択された時点でのＦＸＩＩａのＤＸＳ活性化生成に対する式Ａの化合物の効果、及び免疫ブロットデータの代表的なＷＥＳゲル画像の表現を示すアッセイ結果。
【図11】ＨＫ、ＦＸＩＩａ、ＰＰＫ分析のために選択された時点における、コホート８（６００ｍｇ）における用量後の様々な段階における式Ａの化合物の血漿濃度の効果を示すアッセイ（生体分析）結果。
【図12】ＤＸＳ活性化された未希釈血漿における式Ａの化合物が、血漿カリクレイン阻害活性に対する有意な食物効果を示さないアッセイ結果。
【図13A】ウエスタンブロッティングを用いて決定したＨＡＥ全未希釈血漿中のＨＫのデキストラン硫酸塩活性化切断の時間経過を示すアッセイ結果、及び代表的なブロット画像。
【図13B】ウエスタンブロッティングを用いて決定したＨＡＥ全未希釈血漿中のＨＫのデキストラン硫酸塩活性化切断の時間経過を示すアッセイ結果、及び代表的なブロット画像。
【図14A】デキストラン硫酸塩活性化健康対照血漿及びＨＡＥ血漿における全長ＨＫレベルにおける式Ａの化合物の用量応答、ならびに代表的なＷＥＳ系ゲル画像を示すアッセイ結果。
【図14B】デキストラン硫酸塩活性化健康対照血漿及びＨＡＥ血漿における全長ＨＫレベルにおける式Ａの化合物の用量応答、ならびに代表的なＷＥＳ系ゲル画像を示すアッセイ結果。
【図15a】第２相試験からの暫定的な薬物動態データ。
【図15b】健常ボランティアからのＰＫデータと重ねた、第２相試験のパート１からのＨＡＥ患者のＰＫプロファイル。
【図15c】化合物が投与されてから１２時間以内に、救急薬を使用した患者の累積％を示すグラフ。
【図15d】化合物が投与されてから１２時間以内に、（７ＴＱ法を使用して評価した）症状緩和を有する患者の累積％を示すグラフ。
【図15e】化合物の症状緩和までの時間データと、承認された注射剤製品Ｒｕｃｏｎｅｓｔ（登録商標）の既知の臨床データと、の比較を示すグラフ。
【図15f】化合物が投与されてから１２時間以内に、（複合ＶＡＳスコアを使用して評価されるように）症状緩和を有する患者の累積％を示すグラフ。
【図15g】化合物が投与されてから１２時間以内の平均複合ＶＡＳスコアを示すグラフ。
【図15h】承認された注射用製品であるＦｉｒａｚｙｒ（登録商標）（活性成分、イカチバント）の既知の臨床データを有する化合物で治療された患者の平均複合ＶＡＳスコアの比較を示すグラフ。
【図15i】化合物を投与してから１２時間以内に悪化しなかった、（５ＬＳ法を使用して評価した）ＨＡＥ発作の割合を示すグラフ。
【図16A】第１相多用量試験における４つのコホートの経時的な平均血漿濃度。
【図16B】第１相多用量試験における４つのコホートの経時的な平均血漿濃度（半対数スケール）。
【0084】
本明細書中に提供される実施形態は、以下の実施例を参照することにより、より完全に理解できる。これらの実施例は、本明細書に提供される治療を例示することを意図しているが、決して限定するものではない。実際、本発明の範囲は、特許請求の範囲によって定義される。
【0085】
ある特定の実施形態の実施例が本明細書に提供されるが、様々な変更及び修正が行われ得ることは、当業者には明らかであろう。かかる修正はまた、添付の特許請求の範囲内に入るように意図されている。
【0086】
全般的な実験の詳細
以下の実施例では、以下の略語及び定義が使用される：
以下の実施例では、以下の略語及び定義が使用される：
【表1】
【0087】
特に明記しない限り、すべての反応を窒素雰囲気下で行った。
【0088】
１Ｈ ＮＭＲスペクトルを、重水素溶媒を参照として室温で、Ｂｒｕｋｅｒ（４００ＭＨｚ）またはＪＥＯＬ（４００ＭＨｚ）分光計で記録した。
【0089】
Ｃｈｒｏｍｏｌｉｔｈ Ｓｐｅｅｄｒｏｄ ＲＰ－１８ｅカラム（５０×４．６ｍｍ）を使用して、１３分間をかけて、直線勾配で、１０％～９０％の０．１％ＨＣＯ２Ｈ／ＭｅＣＮから０．１％ＨＣＯ２Ｈ／Ｈ２Ｏへ、流速１．５ｍＬ／分で、または４分間にわたってＡｇｉｌｅｎｔ、Ｘ－Ｓｅｌｅｃｔ、酸性、５～９５％ＭｅＣＮ／水を使用して実施したＬＣＭＳを使用して、分子イオンを得た。Ｔｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＬＣシステムと併せた、エレクトロスプレーイオン化とともにＴｈｅｒｍｏｆｉｎｎｉｇａｎ Ｓｕｒｖｅｙｏｒ ＭＳＱ質量分析計を使用してデータを収集した。
【0090】
あるいは、Ａｇｉｌｅｎｔ Ｐｏｒｏｓｈｅｌｌ１２０ ＥＣ－Ｃ１８（２．７μｍ，３．０×５０ｍｍ）カラムを用いて、水中０．１％ｖ／ｖギ酸［溶出液Ａ］；ＭｅＣＮ［溶出液Ｂ］、流速０．８ｍＬ／分及び１．５分の試料間の平衡時間、以下に示す勾配を用いて実施したＬＣＭＳを用いて、分子イオンを得た。質量検出は、ＡＰＩ２０００質量分析計（エレクトロスプレー）によって提供した。
【表2】
【0091】
生成物をフラッシュクロマトグラフィーで精製した場合、「シリカ」とは、クロマトグラフィーのためのシリカゲル、０．０３５～０．０７０ｍｍ（２２０～４４０メッシュ）（例えば、Ｍｅｒｃｋシリカゲル６０）を指し、最大１０ｐ．ｓ．ｉの窒素の印加圧力は、カラム溶出を加速した。逆相分取ＨＰＬＣ精製は、Ｗａｔｅｒｓ２５２５バイナリ勾配ポンプシステムを使用して、典型的には２０ｍＬ／分の流量で、Ｗａｔｅｒｓ２９９６フォトダイオードアレイ検出器を使用して実施した。
【0092】
すべての溶媒及び市販の試薬は、受け取ったままで使用した。
【0093】
化学名は、ＭＤＬ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ＳｙｓｔｅｍｓのＩＳＩＳ Ｄｒａｗパッケージの一部として提供されるＡｕｔｏｎｏｍソフトウェア、またはＭａｒｖｉｎＳｋｅｔｃｈの構成要素またはＩＤＢＳ Ｅ－ＷｏｒｋＢｏｏｋの構成要素として提供されるＣｈｅｍａｘｏｎソフトウェアなどの自動化ソフトウェアを使用して生成された。
【0094】
Ｘ線粉末回折パターンをＰｈｉｌｉｐｓ Ｘ－Ｐｅｒｔ ＭＰＤ回折計上で収集し、別段の定めのない限り、以下の実験条件（方法Ａ）を使用して分析した：
陽極管：Ｃｕ
発電機の電圧：４０ｋＶ
管電流：４０ｍＡ
波長アルファ１：１．５４０６Å
波長アルファ２：１．５４４４Å
開始角度［２θ］：４
終了角度［２θ］：４０
連続掃引
陽極管：Ｃｕ
発電機の電圧：４０ｋＶ
管電流：４０ｍＡ
波長アルファ１：１．５４０６Å
波長アルファ２：１．５４４４Å
開始角度［２θ］：４
終了角度［２θ］：４０
連続掃引
【0095】
分析中の試料の約２ｍｇを、ＸＲＰＤゼロバックグラウンドの単一の斜めに切断されたシリカ試料ホルダー上で穏やかに圧縮した。次いで、試料を分析のために回折計にロードした。
【0096】
実施例１－式Ａの化合物の調製
Ａ．１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン
４－（クロロメチル）ベンジルアルコール（５．０ｇ、３１．９３ｍｍｏｌ）を、アセトン（１５０ｍＬ）中に溶解した。２－ヒドロキシピリジン（３．６４ｇ、３８．３ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１３．２４ｇ、９５．７８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で３時間撹拌し、その後、溶媒を真空中で除去し、残渣をクロロホルム（１００ｍＬ）中に取り込んだ。この溶液を水（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ）、溶出液３％ＭｅＯＨ／９７％ＣＨＣｌ３で精製して、１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（５．３０ｇ、２４．６２ｍｍｏｌ、収率７７％）として同定した白色固体を得た。
［Ｍ＋Ｎａ］＋＝２３８
Ａ．１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン
４－（クロロメチル）ベンジルアルコール（５．０ｇ、３１．９３ｍｍｏｌ）を、アセトン（１５０ｍＬ）中に溶解した。２－ヒドロキシピリジン（３．６４ｇ、３８．３ｍｍｏｌ）及び炭酸カリウム（１３．２４ｇ、９５．７８ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を５０℃で３時間撹拌し、その後、溶媒を真空中で除去し、残渣をクロロホルム（１００ｍＬ）中に取り込んだ。この溶液を水（３０ｍＬ）、ブライン（３０ｍＬ）で洗浄し、乾燥し（Ｎａ２ＳＯ４）、真空中で蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー（シリカ）、溶出液３％ＭｅＯＨ／９７％ＣＨＣｌ３で精製して、１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（５．３０ｇ、２４．６２ｍｍｏｌ、収率７７％）として同定した白色固体を得た。
［Ｍ＋Ｎａ］＋＝２３８
【0097】
Ｂ．１－（４－クロロメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン
１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（８．４５ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）、乾燥ＤＣＭ（８０ｍＬ）、及びトリエチルアミン（７．６６ｍｌ、５５．０ｍｍｏｌ）を氷浴で冷却した。塩化メタンスルホニル（３．９５ｍｌ、５１．０ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴中で１５分間撹拌した。氷浴を除去し、室温で一晩、撹拌を継続した。反応混合物を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）及び飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）に分配した。水層をさらなるＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１－（４－クロロメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（８．６５ｇ、３６．６ｍｍｏｌ、９３％収率）を淡黄色固体として得た。
［ＭＨ］＋＝２３４．１
１－（４－ヒドロキシメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（８．４５ｇ、３９．３ｍｍｏｌ）、乾燥ＤＣＭ（８０ｍＬ）、及びトリエチルアミン（７．６６ｍｌ、５５．０ｍｍｏｌ）を氷浴で冷却した。塩化メタンスルホニル（３．９５ｍｌ、５１．０ｍｍｏｌ）を添加し、氷浴中で１５分間撹拌した。氷浴を除去し、室温で一晩、撹拌を継続した。反応混合物を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）及び飽和ＮＨ４Ｃｌ水溶液（１００ｍＬ）に分配した。水層をさらなるＤＣＭ（２×５０ｍＬ）で抽出し、組み合わせた有機物をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、Ｎａ２ＳＯ４上で乾燥させ、濾過し、濃縮して、１－（４－クロロメチル－ベンジル）－１Ｈ－ピリジン－２－オン（８．６５ｇ、３６．６ｍｍｏｌ、９３％収率）を淡黄色固体として得た。
［ＭＨ］＋＝２３４．１
【0098】
Ｃ．３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸メチル
炭酸カリウム（５１９ｍｇ、３．７６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のメチル３－（メトキシメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４ーカルボキシレート（３２０ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、ＣＡＳ番号３１８４９６ー６６ー１（ＷＯ２０１２／００９００９に記載の方法に従って合成））及び１－（４－（クロロメチル）ベンジル）ピリジン－２（１Ｈ）－オン（５２７ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、６０℃で一晩加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で低減した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇカラム、イソヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製して、２つの位置異性体を得た。カラムから出た第二の異性体を収集して、３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸メチル（３７８ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、５３．７％収率）を無色のゴム状物として得た。
［ＭＨ］＋＝３６８．２
炭酸カリウム（５１９ｍｇ、３．７６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中のメチル３－（メトキシメチル）－１Ｈ－ピラゾール－４ーカルボキシレート（３２０ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ、ＣＡＳ番号３１８４９６ー６６ー１（ＷＯ２０１２／００９００９に記載の方法に従って合成））及び１－（４－（クロロメチル）ベンジル）ピリジン－２（１Ｈ）－オン（５２７ｍｇ、２．２６ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、６０℃で一晩加熱した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、ブライン（２×１００ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で低減した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー（４０ｇカラム、イソヘキサン中０～１００％のＥｔＯＡｃ）によって精製して、２つの位置異性体を得た。カラムから出た第二の異性体を収集して、３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸メチル（３７８ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、５３．７％収率）を無色のゴム状物として得た。
［ＭＨ］＋＝３６８．２
【0099】
Ｄ．３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸
ＴＨＦ（５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸メチル（３．７７ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）に、２ＭのＮａＯＨ溶液（１５．３９ｍｌ、３０．８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。１ＭのＨＣｌ（５０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で低減して、３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸（１．２２ｇ、３．４５ｍｍｏｌ、収率３３．６％）を白色粉末として得た。
［ＭＨ］＋＝３５４．２
ＴＨＦ（５ｍＬ）及びＭｅＯＨ（５ｍＬ）中の３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸メチル（３．７７ｇ、１０．２６ｍｍｏｌ）に、２ＭのＮａＯＨ溶液（１５．３９ｍｌ、３０．８ｍｍｏｌ）を添加し、室温で一晩撹拌した。１ＭのＨＣｌ（５０ｍＬ）を添加し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機層をブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥させ、濾過し、真空中で低減して、３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸（１．２２ｇ、３．４５ｍｍｏｌ、収率３３．６％）を白色粉末として得た。
［ＭＨ］＋＝３５４．２
【0100】
Ｅ．３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－カルボニトリル
大型のマイクロ波バイアルに、シアン化銅（Ｉ）（１．３０４ｇ、１４．５６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の２－ブロモ－３－フルオロ－４－メトキシピリジン（１ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応バイアルを密封し、１００℃まで１６時間加熱した。反応混合物を水（２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。濃い懸濁液を超音波処理し、沈殿した固体を破壊するために、超音波処理には追加の水（４０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を必要とした。組み合わせた層をセライトのプラグを通して濾過し、有機層を単離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－カルボニトリル（１００ｍｇ、０．５７８ｍｍｏｌ、収率１２％）として特定された淡緑色の固体を得た。
大型のマイクロ波バイアルに、シアン化銅（Ｉ）（１．３０４ｇ、１４．５６ｍｍｏｌ）を、ＤＭＦ（５ｍＬ）中の２－ブロモ－３－フルオロ－４－メトキシピリジン（１ｇ、４．８５ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応バイアルを密封し、１００℃まで１６時間加熱した。反応混合物を水（２０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２０ｍＬ）で希釈した。濃い懸濁液を超音波処理し、沈殿した固体を破壊するために、超音波処理には追加の水（４０ｍＬ）及びＥｔＯＡｃ（２×５０ｍＬ）を必要とした。組み合わせた層をセライトのプラグを通して濾過し、有機層を単離し、ブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、濾過し、溶媒を減圧下で除去して、所望の化合物３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－カルボニトリル（１００ｍｇ、０．５７８ｍｍｏｌ、収率１２％）として特定された淡緑色の固体を得た。
【0101】
Ｆ．（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イルメチル）－カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステル
３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－カルボニトリル（１００ｍｇ、０．５７８ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１０ｍＬ、２４７ｍｍｏｌ）中に溶解し、塩化ニッケル六水和物（１４ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、続いてジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２５５ｍｇ、１．１５７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた淡緑色溶液を氷塩浴で－５℃まで冷却し、次いで、反応温度を約０℃に維持しながら、水素化ホウ素ナトリウム（１５３ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。深褐色溶液を０℃で撹拌し続け、ゆっくりと室温まで温め、次いで、室温で３時間放置して撹拌した。反応混合物を蒸発させて４０℃で乾燥させ、黒色の残渣を得て、これをＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄した。エマルションが形成され、有機物が相分離カートリッジを介して分離され、濃縮された。粗液体をＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物である、（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イルメチル）－カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステルを透明な黄色の油状物として得た（１０８ｍｇ、収率６２％）。
［ＭＨ］＋＝２５７
３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－カルボニトリル（１００ｍｇ、０．５７８ｍｍｏｌ）を無水メタノール（１０ｍＬ、２４７ｍｍｏｌ）中に溶解し、塩化ニッケル六水和物（１４ｍｇ、０．０５８ｍｍｏｌ）、続いてジ－ｔｅｒｔ－ブチルジカーボネート（２５５ｍｇ、１．１５７ｍｍｏｌ）を添加した。得られた淡緑色溶液を氷塩浴で－５℃まで冷却し、次いで、反応温度を約０℃に維持しながら、水素化ホウ素ナトリウム（１５３ｍｇ、４．０５ｍｍｏｌ）を少量ずつ添加した。深褐色溶液を０℃で撹拌し続け、ゆっくりと室温まで温め、次いで、室温で３時間放置して撹拌した。反応混合物を蒸発させて４０℃で乾燥させ、黒色の残渣を得て、これをＤＣＭ（１０ｍＬ）で希釈し、炭酸水素ナトリウム（１０ｍＬ）で洗浄した。エマルションが形成され、有機物が相分離カートリッジを介して分離され、濃縮された。粗液体をＥｔＯＡｃ／イソヘキサンで溶出するクロマトグラフィーによって精製して、表題化合物である、（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イルメチル）－カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステルを透明な黄色の油状物として得た（１０８ｍｇ、収率６２％）。
［ＭＨ］＋＝２５７
【0102】
Ｇ．Ｃ－（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イル）－メチルアミン塩酸塩
（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イルメチル）－カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステル（１０８ｍｇ、０．３５８ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（１ｍＬ）中に取り込み、次いでＨＣｌ（イソプロピルアルコール中６Ｎ）（１ｍＬ、０．５７８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、４０℃で２時間撹拌し続けた。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでエーテルで粉砕し、超音波処理し、次いでデカントして、Ｃ－（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イル）－メチルアミン塩酸塩として同定されたクリーム色の固体（７５ｍｇ、５５％収率）を得た。
［ＭＨ］＋＝１５７
（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イルメチル）－カルバミン酸ｔｅｒｔ－ブチルエステル（１０８ｍｇ、０．３５８ｍｍｏｌ）をイソプロピルアルコール（１ｍＬ）中に取り込み、次いでＨＣｌ（イソプロピルアルコール中６Ｎ）（１ｍＬ、０．５７８ｍｍｏｌ）を室温で添加し、４０℃で２時間撹拌し続けた。反応混合物を減圧下で濃縮し、次いでエーテルで粉砕し、超音波処理し、次いでデカントして、Ｃ－（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イル）－メチルアミン塩酸塩として同定されたクリーム色の固体（７５ｍｇ、５５％収率）を得た。
［ＭＨ］＋＝１５７
【0103】
実施例１ａ－Ｎ－［（３－フルオロ－４－メトキシピリジン－２－イル）メチル］－３－（メトキシメチル）－１－（｛４－［（２－オキソピリジン－１－イル）メチル］フェニル｝メチル）ピラゾール－４－カルボキサミド（式Ａの化合物）
３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸（８２５ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）及びＣ－（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イル）－メチルアミン塩酸塩（４５０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を、０℃まで冷却しながらＤＣＭ中に溶解させた。１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（６２７．０ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３７８．８ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（１．６３ｍＬ、１１８２ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加し、混合物を室温まで温め、２０時間撹拌を続けた。クロロホルム（５０ｍＬ）を添加し、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、真空中で低減した。粗製物質を、メタノール／ＤＣＭで溶出するクロマトグラフィーによって精製した。溶媒を真空中で除去し、得られた固体をジエチルエーテルで粉砕した。得られた固体を濾過によって収集して、式Ａの化合物を得た。
［ＭＨ］＋＝４９２．０
ＮＭＲ （ＣＤ３ＯＤ） δ：３．４１ （３Ｈ， ｓ）， ４．０３ （３Ｈ， ｓ）， ４．６５ （２Ｈ， ｓ）， ４．７２ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．３Ｈｚ）， ５．２４ （２Ｈ， ｓ）， ５．３７ （２Ｈ， ｓ）， ６．４４ （１Ｈ， ｔｄ， Ｊ ＝ １．４， ６．８Ｈｚ）， ６．６２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ９．０Ｈｚ）， ７．１８－７．２２ （１Ｈ， ｍ）， ７．３１－７．３８ （４Ｈ， ｍ）， ７．５６－７．６０ （１Ｈ， ｍ）， ７．７５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．９， ７．１Ｈｚ）， ８．１８ （１Ｈ， ｓ）， ８．２７ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ５．６Ｈｚ） ｐｐｍ．
３－（メトキシメチル）－１－（４－（（２－オキソピリジン－１（２Ｈ）－イル）メチル）ベンジル）－１Ｈ－ピラゾール－４－カルボン酸（８２５ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）及びＣ－（３－フルオロ－４－メトキシ－ピリジン－２－イル）－メチルアミン塩酸塩（４５０ｍｇ、２．３４ｍｍｏｌ）を、０℃まで冷却しながらＤＣＭ中に溶解させた。１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミドヒドロクロリド（６２７．０ｍｇ、３．２７ｍｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（３７８．８ｍｇ、２．８０ｍｍｏｌ）、及びトリエチルアミン（１．６３ｍＬ、１１８２ｍｍｏｌ）を撹拌しながら添加し、混合物を室温まで温め、２０時間撹拌を続けた。クロロホルム（５０ｍＬ）を添加し、混合物を飽和ＮａＨＣＯ３水溶液で洗浄し、真空中で低減した。粗製物質を、メタノール／ＤＣＭで溶出するクロマトグラフィーによって精製した。溶媒を真空中で除去し、得られた固体をジエチルエーテルで粉砕した。得られた固体を濾過によって収集して、式Ａの化合物を得た。
［ＭＨ］＋＝４９２．０
ＮＭＲ （ＣＤ３ＯＤ） δ：３．４１ （３Ｈ， ｓ）， ４．０３ （３Ｈ， ｓ）， ４．６５ （２Ｈ， ｓ）， ４．７２ （２Ｈ， ｄ， Ｊ＝２．３Ｈｚ）， ５．２４ （２Ｈ， ｓ）， ５．３７ （２Ｈ， ｓ）， ６．４４ （１Ｈ， ｔｄ， Ｊ ＝ １．４， ６．８Ｈｚ）， ６．６２ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ９．０Ｈｚ）， ７．１８－７．２２ （１Ｈ， ｍ）， ７．３１－７．３８ （４Ｈ， ｍ）， ７．５６－７．６０ （１Ｈ， ｍ）， ７．７５ （１Ｈ， ｄｄ， Ｊ ＝ １．９， ７．１Ｈｚ）， ８．１８ （１Ｈ， ｓ）， ８．２７ （１Ｈ， ｄ， Ｊ ＝ ５．６Ｈｚ） ｐｐｍ．
【0104】
【0105】
実施例２－式Ａの化合物を含む剤形の調製
混合及びローラー圧縮
機器：Ｆｒｅｕｎｄ Ｖｅｃｔｏｒ ＴＦＣ Ｌａｂマイクロローター圧縮機及び造粒機（ローラー圧縮機及び造粒機は別個のものである）。機器パラメーターは以下のとおりである。
混合及びローラー圧縮
機器：Ｆｒｅｕｎｄ Ｖｅｃｔｏｒ ＴＦＣ Ｌａｂマイクロローター圧縮機及び造粒機（ローラー圧縮機及び造粒機は別個のものである）。機器パラメーターは以下のとおりである。
【表4】
【0106】
方法
以下の方法に従い、２つの錠剤製剤（錠剤Ａ及びＢ）を３０ｇのブレンドスケールで調製して、以下に示される量の成分を有する錠剤を作製した。
以下の方法に従い、２つの錠剤製剤（錠剤Ａ及びＢ）を３０ｇのブレンドスケールで調製して、以下に示される量の成分を有する錠剤を作製した。
【表5】
【0107】
各錠剤について、３４ｒｐｍのＴｕｒｂｕｌａ混合機を使用して、ガラス容器内のローラー圧縮機の範囲に適したスケールで、３５５μｍのふるいを通して粒子内成分を通過させることによって、混合物を調製した。次いで、混合物を、上記のパラメーターを使用してローラー圧縮機を通してランした。生成されたリボンを適切なサイズの容器に収集した。次いで、収集されたリボンを、１ｍｍスクリーンで固定された造粒機に供し、得られた粒子を、さらなる下流のプロセスのために収集した。
【0108】
打錠
機器：ＲＩＶＡ Ｍｉｎｉ単一ステーション錠剤プレス。機器パラメーターを以下に示す。
機器：ＲＩＶＡ Ｍｉｎｉ単一ステーション錠剤プレス。機器パラメーターを以下に示す。
【表6】
【0109】
その後、粒子を、それぞれ、粒子外賦形剤と混合した。粒子外賦形剤は、３４ｒｐｍのＴｕｒｂｕｌａ混合機を使用して、ガラス容器内の３５５μｍのふるいを通してスクリーニングすることによって調製した。次いで、目標錠剤重量を分配し、手動で錠剤に圧縮した。錠剤Ａは、７．２～８．８ｋＮの圧縮力で圧縮した。錠剤Ｂは、６．９～７．７ｋＮの圧縮力で圧縮した。
【0110】
錠剤は堅牢であることがわかった。錠剤Ａ及びＢを、その後、長期安定性試験に供した。
【0111】
上記の方法による錠剤の製造は、約６０分のローラー圧縮時間で１８０ｇにスケールされている。
【0112】
実施例３－式Ａの化合物とＣ１阻害剤（Ｃ１－ＩＮＨ）との比較
目的：血漿中のカリクレインキニン系の制御における、その最適な効力に寄与する式Ａの化合物の生化学的及び生体物理学的特性を同定すること。次に、これらの特性を、ＨＡＥの治療ベンチマークとして、Ｃ１－ＩＮＨと比較する。
目的：血漿中のカリクレインキニン系の制御における、その最適な効力に寄与する式Ａの化合物の生化学的及び生体物理学的特性を同定すること。次に、これらの特性を、ＨＡＥの治療ベンチマークとして、Ｃ１－ＩＮＨと比較する。
【0113】
方法：
インビトロでの血漿カリクレイン阻害活性を、標準的に公開されている方法を使用して決定した（例えば、Ｊｏｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｔｉｓｓ．Ｒｅａｃ．１９８６，８，１８５、Ｓｈｏｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９２，４３，１２０９、Ｓｔｕｒｚｅｂｅｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｈｏｐｐｅ－Ｓｅｙｌｅｒ，１９９２，３７３，１０２５を参照されたい）。ヒト血漿カリクレイン（Ｐｒｏｔｏｇｅｎ）を、蛍光基質Ｈ－ＤＰｒｏ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－ＡＦＣ及び様々な濃度の試験化合物とともに２５℃でインキュベートした。残留酵素活性（反応の初期速度）を、４１０ｎｍでの光学吸光度の変化を測定することによって決定し、試験化合物のＩＣ５０値を決定した。
インビトロでの血漿カリクレイン阻害活性を、標準的に公開されている方法を使用して決定した（例えば、Ｊｏｈａｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｉｎｔ．Ｊ．Ｔｉｓｓ．Ｒｅａｃ．１９８６，８，１８５、Ｓｈｏｒｉ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，１９９２，４３，１２０９、Ｓｔｕｒｚｅｂｅｃｈｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．Ｈｏｐｐｅ－Ｓｅｙｌｅｒ，１９９２，３７３，１０２５を参照されたい）。ヒト血漿カリクレイン（Ｐｒｏｔｏｇｅｎ）を、蛍光基質Ｈ－ＤＰｒｏ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－ＡＦＣ及び様々な濃度の試験化合物とともに２５℃でインキュベートした。残留酵素活性（反応の初期速度）を、４１０ｎｍでの光学吸光度の変化を測定することによって決定し、試験化合物のＩＣ５０値を決定した。
【0114】
酵素阻害剤複合体（Ｋｏｎ）の形成速度は、蛍光発生基質及び阻害剤の濃度範囲を含有する溶液と急速に混合した精製ＰＫａを使用して決定した。次に、時間依存的な阻害の確立を使用して、阻害剤の濃度ごとの酵素阻害剤複合体の形成速度を計算した。Ｋｏｎは、阻害剤濃度に対する阻害率をプロットすることによって計算した。表１のデータを、μＭ－１秒－１で示す。
【0115】
デキストラン硫酸で活性化された（ＤＸＳ、Ｓｉｇｍａ、１０μｇ／ｍｌ）血漿（１：４希釈または未希釈、ＶｉｓｕＣｏｎ－Ｆ対照血漿、Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ Ｉｎｃ）中のＰＫａの触媒活性を、蛍光発生基質の時間依存的加水分解によって決定した。ＩＣ５０及び効力決定のために、式Ａの化合物またはＣ１－ＩＮＨ（Ｓｉｇｍａカタログ番号Ｅ０５１８）を、ＤＸＳの血漿への添加の前（図２Ａ及び２Ｂ）または後（図３Ａ）のいずれかに添加した。
【0116】
未希釈の血漿中のＨＫのＤＸＳ活性化切断を、３００ｎＭのＰＫａ阻害剤の非存在下または存在下で実施し、７．５％のＣｒｉｔｅｒｉｏｎ ＴＧＸ Ｐｒｅｃａｓｔゲル（Ｂｉｏｒａｄ）を使用して、ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル電気泳動によって定量化した。免疫グロブリン－ＦＬ ＰＶＤＦ膜上に移した。画像分析は、ＬＩＣＯＲイメージングシステムを使用して行った。マウスモノクローナル抗ＨＫ抗体（ＭＡＢ１５６９２、Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を、従来の免疫ブロットに使用した。データは、未活性化血漿中のＨＫレベルと比較して、ＤＸＳによる２０分間のインキュベーション後に残存するＨＫの％として提示される（表１）。
【0117】
血漿遊離画分を「Ｒａｐｉｄ Ｅｑｕｉｌｉｂｒｉｕｍ Ｄｉａｌｙｓｉｓ」システム（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ）を使用して決定し、試験化合物をニートのヒト血漿中で５μＭで調製し、３７℃でリン酸緩衝液に対して５時間透析した。透析装置の２つのチャンバに分配された化合物の定量化を、ＬＣＭＳ／ＭＳを介して行った。合計の％として提示される血漿タンパク質に非結合の化合物の画分。
【0118】
ＤＸＳ刺激後に化合物を添加することによって、化合物が予め活性化された血漿の酵素活性を阻害する能力を評価した。血漿（２０μＬ）のアリコートを、１，３００ｍＭの蛍光基質（Ｈ－ＤＰｒｏ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－ＡＦＣ）を含有する２．５μＬの溶液、及び血漿カリクレイン－キニン経路の活性化剤であるデキストラン硫酸塩（ＤＸＳ；１００μｇ／ｍＬ）の２．５μＬの溶液と混合した。基質切断によって基質から遊離された蛍光の蓄積を１６分間にわたって監視することによって、酵素活性を直ちに測定した。ＤＸＳ添加後３．５分で、５μｌの阻害剤または水対照を各ウェルに添加した。化合物を３００、１０００及び３０００ｎＭの濃度で試験した。３０００ｎＭの濃度のＣ１－ＩＮＨ、及びビヒクル対照もまた含まれた。データを、図３Ｂに示す。
【0119】
結果：
図２に示すように、蛍光発生基質を使用するアッセイにおいて、式Ａの化合物は、それぞれ、希釈された血漿（図２Ａ）及び未希釈の血漿（図２Ｂ）において、外因性に添加されたＣ１－ＩＮＨに対して、１７倍及び２０倍の力価を有するＰＫａの非常に強力な阻害剤であるように見える。
図２に示すように、蛍光発生基質を使用するアッセイにおいて、式Ａの化合物は、それぞれ、希釈された血漿（図２Ａ）及び未希釈の血漿（図２Ｂ）において、外因性に添加されたＣ１－ＩＮＨに対して、１７倍及び２０倍の力価を有するＰＫａの非常に強力な阻害剤であるように見える。
【0120】
表１は、この実施例で試験した治療剤の生化学的プロファイルを示す。
【表7】
【0121】
図３Ａは、ＤＸＳで活性化された血漿（１：４に希釈）中の血漿カリクレイン活性に対する２つの阻害剤（式Ａの化合物及びＣ１－ＩＮＨの化合物）の効果の比較を示す。両方の阻害剤を、ＤＸＳの添加の約１００秒後に、それらのＩＣ５０の１０倍の濃度で血漿に添加した。
【0122】
図３Ｂは、血漿の活性化後の式Ａの化合物の添加が、Ｃ１－ＩＮＨのより遅い作用と比較して、酵素活性の迅速かつ用量依存的な阻害を引き起こすことを示す。
【0123】
表２は、上記のインビトロ血漿カリクレインアッセイに関する文献の方法を用いた、ヒトの単離された酵素に対する式Ａの化合物の生化学的効力及び選択性を示す。
【表8】
【0124】
実施例４－健康な男性における第Ｉ相単一漸増用量研究及び化合物の食物効果
目的：血漿カリクレイン触媒活性及びＨＫ切断について、エクスビボ全血漿アッセイを使用して、経口投与されたときの、健康な成人男性における第１相単一漸増用量試験からの試料における式Ａの化合物の薬力学的（ＰＤ）効果を評価すること。また、経口投与されたときの式Ａの化合物の安全性、忍容性及び薬物動態（ＰＫ）効果を調査することが目的であった。
目的：血漿カリクレイン触媒活性及びＨＫ切断について、エクスビボ全血漿アッセイを使用して、経口投与されたときの、健康な成人男性における第１相単一漸増用量試験からの試料における式Ａの化合物の薬力学的（ＰＤ）効果を評価すること。また、経口投与されたときの式Ａの化合物の安全性、忍容性及び薬物動態（ＰＫ）効果を調査することが目的であった。
【0125】
方法：
この研究は、食物効果及びカプセル／錠剤製剤についての無作為化、二重盲検、プラセボ対照の単一漸増用量（ＳＡＤ）及びクロスオーバー研究であった。
この研究は、食物効果及びカプセル／錠剤製剤についての無作為化、二重盲検、プラセボ対照の単一漸増用量（ＳＡＤ）及びクロスオーバー研究であった。
【0126】
６４人の健康な男性参加者（ｎ＝６人の活性、１コホート当たり２人のプラセボ、８人のＳＡＤコホート）に、式Ａの化合物：５、１０、２０、４０、８０、１６０、３００、または６００ｍｇ（カプセル中）を、単一漸増用量で投与した。
【0127】
８人の参加者に、カプセル及び錠剤製剤の交差研究において、１００ｍｇの式Ａの化合物を投与した。
【0128】
１２人の参加者に、食物効果クロスオーバー研究において、６００ｍｇの式Ａの化合物を投与した。
【0129】
薬物動態（ＰＫ）及びＰＤ評価のための試料を、４８時間にわたって間隔で繰り返し採取した。
【0130】
ＰＫ評価に使用される血漿試料を、検証された液体クロマトグラフィータンデム質量分析法（ＬＣ ＭＳ／ＭＳ）方法を使用して分析した。
【0131】
蛍光発生酵素アッセイ及びキャピラリーベースのＨＫ切断イムノアッセイを使用して、デキストラン硫酸塩（ＤＸＳ）刺激未希釈血漿中でＰＤ測定値を決定した。
【0132】
第１相試験の式Ａの化合物からのＤＸＳ刺激（Ｓｉｇｍａ；１０μｇ／ｍＬ）血漿試料中のＰＫａの触媒活性を、試験のすべての部分からのすべての試料中の蛍光発生基質の時間依存的加水分解によって決定した。
【0133】
ＤＸＳ刺激血漿中の検出可能なアミド分解酵素活性の出現までの時間（遅延時間）を、触媒活性アッセイから計算した。Ｓｐａｒｋ（Ｔｅｃａｎ）蛍光計の使用に基づく、血漿中の触媒活性の速度の検出感度は、１ΔＦ単位／秒に達する蛍光増加である。
【0134】
未希釈血漿中のＨＫのＤＸＳ刺激切断を、モノクローナル抗ＨＫ抗体及び化学発光ベースの検出を使用して、Ｗｅｓ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）でのキャピラリーベースの免疫測定によって定量した。未希釈のクエン酸化ヒト血漿中の血漿カリクレイン媒介性ＨＫ切断は、ＳＡＤ相からの選択された試料において、４℃でのＤＸＳ（６．２５μｇ／ｍｌ）との接触系活性化によって誘導された。
【0135】
血漿プレカリクレイン及び第ＸＩＩ因子（ＦＸＩＩ）のＤＸＳ刺激切断を、類似の方法で、Ｗｅｓ Ｓｙｓｔｅｍ（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）でのキャピラリーベースのイムノアッセイによって定量化した。
【0136】
結果：
図４Ａは、投与後０～２４時間の、式Ａの化合物の血漿濃度を示す。見てわかるように、経口投与されたとき、式Ａの化合物は、５ｍｇ～６００ｍｇの試験用量の範囲にわたって迅速かつ用量依存的な血漿曝露を達成した。図４Ａは、濃度曲線を示し、図４Ｂは、各ＳＡＤコホートのＣｍａｘを示す。式Ａの化合物をカプセル製剤として投与し、対象は絶食状態であった。
図４Ａは、投与後０～２４時間の、式Ａの化合物の血漿濃度を示す。見てわかるように、経口投与されたとき、式Ａの化合物は、５ｍｇ～６００ｍｇの試験用量の範囲にわたって迅速かつ用量依存的な血漿曝露を達成した。図４Ａは、濃度曲線を示し、図４Ｂは、各ＳＡＤコホートのＣｍａｘを示す。式Ａの化合物をカプセル製剤として投与し、対象は絶食状態であった。
【0137】
図５Ａは、コホート６、７、及び８からの試料上で実施される、活性化された未希釈血漿中の酵素アッセイを示す。１６０ｍｇ以上の用量は、コホート６では４５分～２時間、コホート７では２０分～４時間の間に、血漿カリクレイン触媒活性の９０％を超える平均阻害を示した。６００ｍｇ用量（コホート８）は、投与後３０分～６時間の血漿カリクレイン触媒活性の９０％を超える阻害、及び１０時間の５０％を超える阻害をもたらした（図５Ｂ）。
【0138】
未希釈血漿酵素アッセイからの速度論的蛍光測定は、アッセイ進行曲線としてプロットすることができる（図６Ａ及び６Ｂ）。これらの曲線は、式Ａの化合物が、酵素活性に対する阻害効果を有するだけでなく、接触系活性化中の触媒活性の出現までの時間（遅延時間）を増加させることを強調する。用量投与後の早期時点では、強力な活性化剤であるＤＸＳによる延長された活性化後でさえ、血漿試料は検出可能な触媒活性を示さなかった。この試験では、対象に、錠剤製剤中の６００ｍｇの用量を投与した。
【0139】
図７は、ＤＸＳ活性化未希釈血漿（ＳＡＤコホート６（１６０ｍｇ）、７（３００ｍｇ）及び８（６００ｍｇ））における平均ＨＫ保護率を示す。示されるように、式Ａの化合物の３つの用量すべてが、ある期間にわたって９０％を超える血漿カリクレイン触媒活性を阻害することができた。これらのＰＤ効果の持続時間は、用量比例的であった。式Ａの化合物は、単回の６００ｍｇ投与後、未希釈血漿中のＤＸＳ活性化切断からＨＫを少なくとも１０時間保護することが示されている。
【0140】
図７において、代表的なＷＥＳ系ゲル画像は、投与前（Ｐ－Ｄ）と比較して、６００ｍｇの式Ａの化合物を投与されたコホート８の単一の対象からの二重の未希釈血漿試料＋／－ＤＸＳ活性化において生成された。
【0141】
図７において、ＨＫ切断は、コホート６～８から選択された時点での未希釈血漿試料のＤＸＳ活性化後に評価された。データは、平均値＋／－ＳＥＭとして表され、ｎ＝６である。
【0142】
式Ａの化合物が、血漿カリクレイン及び第ＸＩＩａ因子の生成も低減したかどうかを評価するために、イムノアッセイを使用して、投与前及び投与後１２時間までの６００ｍｇのカプセル内経口投与における、ＤＸＳ活性化血漿中の接触系タンパク質のレベルを定量化した。これらのアッセイからの結果は、図８～１１に示され、式Ａの化合物が、ＨＫ切断を減少させるだけでなくＰＰＫ切断も減少させ、ＦＸＩＩａの生成を減少させることを示す。これらの結果は、式Ａの化合物が、ＦＸＩＩのＰＫａ刺激活性化によって媒介される正のフィードバックループの遮断を介して接触活性化系を阻害することを示唆する。
【0143】
図１２は、食事を与えられた状態、及び絶食状態で提供される６００ｍｇ錠剤の薬力学的（ＰＤ）プロファイルに、有意な食物効果が観察されなかったことを示す。見てわかるように、ＰＤ効果は、食事を与えられた状態、及び絶食状態で迅速に観察され、血漿カリクレイン阻害率は９０％を超え、両方の状態において３０分までに達成される。
【0144】
第Ｉ相試験では、重篤な有害事象は報告されなかった。忍容性シグナルもなかった。試験から撤退した対象はいなかった。
【0145】
これらのデータは、式Ａの化合物が、ブラジキニン及び接触活性化系に対して阻害効果を有することを実証する。上述のように、これらの薬力学的効果は、ＨＡＥなどの障害に関与する。これらのデータはまた、式Ａの化合物が、経口投与に好適な薬物動態プロファイルを有することを示す。
【0146】
実施例５－ＨＡＥ及び対照血漿中のＰＫａ媒介性切断からの高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の保護における、式Ａの化合物を調べるイムノアッセイ
方法：
未希釈のクエン酸化ヒト血漿中の高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の切断を、湿った氷上でのデキストラン硫酸塩（ＤＸＳ、Ｓｉｇｍａ＃３１３９５－１０Ｇ、６．２５μｇ／ｍｌ）との接触系活性化によって誘導した。プールされた正常（対照）ヒト血漿（ＶｉｓｕＣｏｎ－Ｆ Ｆｒｏｚｅｎ正常対照血漿）を、Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．から購入した。ＤＭＳＯ中の式Ａの化合物（「化合物」）の１０ｍＭの使用ストック（ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｏｃｋ）を調製し、１×ＰＢＳ中で記載されるそれぞれの最終濃度まで希釈した。ＨＡＥ血漿をＨＡＥ対象（ｎ＝６）から得て、Ｃ１阻害剤欠乏症をウエスタンブロッティングによって確認した。次いで、ＤＸＳ刺激された全未希釈血漿中の、ＰＫａ媒介切断からのＨＫの保護を、従来のウエスタンブロッティング及び半自動キャピラリーベースのイムノアッセイの２つの方法によって決定した。
方法：
未希釈のクエン酸化ヒト血漿中の高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の切断を、湿った氷上でのデキストラン硫酸塩（ＤＸＳ、Ｓｉｇｍａ＃３１３９５－１０Ｇ、６．２５μｇ／ｍｌ）との接触系活性化によって誘導した。プールされた正常（対照）ヒト血漿（ＶｉｓｕＣｏｎ－Ｆ Ｆｒｏｚｅｎ正常対照血漿）を、Ａｆｆｉｎｉｔｙ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ Ｉｎｃ．から購入した。ＤＭＳＯ中の式Ａの化合物（「化合物」）の１０ｍＭの使用ストック（ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｔｏｃｋ）を調製し、１×ＰＢＳ中で記載されるそれぞれの最終濃度まで希釈した。ＨＡＥ血漿をＨＡＥ対象（ｎ＝６）から得て、Ｃ１阻害剤欠乏症をウエスタンブロッティングによって確認した。次いで、ＤＸＳ刺激された全未希釈血漿中の、ＰＫａ媒介切断からのＨＫの保護を、従来のウエスタンブロッティング及び半自動キャピラリーベースのイムノアッセイの２つの方法によって決定した。
【0147】
ウエスタンブロッティング：ＳＤＳ－ＰＡＧＥゲル電気泳動は、７．５％のＣｒｉｔｅｒｉｏｎ ＴＧＸ Ｐｒｅｃａｓｔゲル（Ｂｉｏ－ｒａｄ）を使用して行った。免疫グロブリン－ＦＬ ＰＶＤＦ膜上に移した。画像分析は、ＬＩＣＯＲイメージングシステムを使用して行った。マウスモノクローナル抗ヒトＨＫ抗体（ＭＡＢ１５６９２、Ｒ＆Ｄ ｓｙｓｔｅｍｓ）を、従来の免疫ブロットに使用した。
【0148】
ＷＥＳシステム（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）によるキャピラリーベースのイムノアッセイ：
試料の調製：１部の５×蛍光マスターミックスを、４部の１：２００の血漿試料と混合する。ボルテックスして混合する。サンプル＋蛍光マスターミックスとビオチン化ラダーを９５℃で５分間加熱し、ボルテックスし、ＷＥＳプレートにロードする。モノクローナル抗ヒトＨＫ抗体を、Ｗｅｓシステム（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）を使用してこの化学発光ベースの検出方法に使用した。
試料の調製：１部の５×蛍光マスターミックスを、４部の１：２００の血漿試料と混合する。ボルテックスして混合する。サンプル＋蛍光マスターミックスとビオチン化ラダーを９５℃で５分間加熱し、ボルテックスし、ＷＥＳプレートにロードする。モノクローナル抗ヒトＨＫ抗体を、Ｗｅｓシステム（ＰｒｏｔｅｉｎＳｉｍｐｌｅ）を使用してこの化学発光ベースの検出方法に使用した。
【0149】
分析：ＤＸＳ誘導活性化を伴う各時点の試料の全長ＨＫ分子量について、Ｃｏｍｐａｓｓソフトウェア（ｃｂｚファイル）で取得されたピーク面積測定値を収集する。ピーク面積は、ＨＫのスペクトルピークプロファイルについて計算された面積として定義される。化合物による血漿カリクレイン阻害を測定するために、検出された全長ＨＫの割合を計算した。
【0150】
結果：
図１３Ａ及び１３Ｂは、ウエスタンブロッティング、及び代表的なブロットを用いて決定した、ＨＡＥ全未希釈血漿中のＨＫのデキストラン硫酸塩活性化切断の時間経過を示す。
図１３Ａ及び１３Ｂは、ウエスタンブロッティング、及び代表的なブロットを用いて決定した、ＨＡＥ全未希釈血漿中のＨＫのデキストラン硫酸塩活性化切断の時間経過を示す。
【0151】
図１４Ａ及び１４Ｂは、代表的なＷＥＳ系ゲル画像を示し、式Ａの化合物は、ＷＥＳシステムを使用したキャピラリーベースの免疫アッセイによって決定されたデキストラン硫酸で刺激されたＨＡＥ、及び健康な対照血漿の両方におけるＨＫ切断に対する用量依存的な保護を提供する。
【0152】
実施例６－式Ａの化合物の第２相試験
目的：遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型を有する成人対象における血管性浮腫発作のオンデマンド治療における式Ａの化合物の効力及び安全性を評価する。
目的：遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型を有する成人対象における血管性浮腫発作のオンデマンド治療における式Ａの化合物の効力及び安全性を評価する。
【0153】
方法：
試験は、遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型（ＥｕｄｒａＣＴ番号：２０１８－００４４８９－３２）を有する成人対象における血管性浮腫発作のオンデマンド治療における、経口血漿カリクレイン阻害剤である式Ａ（「化合物」）の化合物の、効力及び安全性を評価する、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、第２相クロスオーバー臨床試験であった。
試験は、遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型（ＥｕｄｒａＣＴ番号：２０１８－００４４８９－３２）を有する成人対象における血管性浮腫発作のオンデマンド治療における、経口血漿カリクレイン阻害剤である式Ａ（「化合物」）の化合物の、効力及び安全性を評価する、無作為化、二重盲検、プラセボ対照、第２相クロスオーバー臨床試験であった。
【0154】
目的：
主要目的：
・遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の末梢または腹部発作の進行の停止について、プラセボと比較した化合物の有効性を調べること。
主要目的：
・遺伝性血管性浮腫（ＨＡＥ）の末梢または腹部発作の進行の停止について、プラセボと比較した化合物の有効性を調べること。
【0155】
副次的目的：
・化合物の安全性及び忍容性を調査すること。
・ＨＡＥ発作の間の間欠期間（ｉｎｔｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｅｒｉｏｄ）中に服用されたときの化合物の薬物動態（ＰＫ）プロファイルを調査すること。
・ＨＡＥ発作間の間欠期間中に、残留切断高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の濃度を低減することにおける、化合物の薬力学的（ＰＤ）プロファイルを調査すること。
・ＨＡＥ発作間の間欠期間中の活性化血漿酵素活性の低下における、化合物のＰＤプロファイルを調べること。
・化合物の安全性及び忍容性を調査すること。
・ＨＡＥ発作の間の間欠期間（ｉｎｔｅｒｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｅｒｉｏｄ）中に服用されたときの化合物の薬物動態（ＰＫ）プロファイルを調査すること。
・ＨＡＥ発作間の間欠期間中に、残留切断高分子量キニノーゲン（ＨＫ）の濃度を低減することにおける、化合物の薬力学的（ＰＤ）プロファイルを調査すること。
・ＨＡＥ発作間の間欠期間中の活性化血漿酵素活性の低下における、化合物のＰＤプロファイルを調べること。
【0156】
設定：
これは、第２相、２パート、２シーケンス、２期間（２×２）クロスオーバー臨床試験であった。ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を有する対象は、ヨーロッパ及び米国のＨＡＥ治療センターを通じて募集された。
これは、第２相、２パート、２シーケンス、２期間（２×２）クロスオーバー臨床試験であった。ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を有する対象は、ヨーロッパ及び米国のＨＡＥ治療センターを通じて募集された。
【0157】
パート１では、対象は、ＨＡＥ発作間の間欠期間中の化合物の安全性、ＰＫ及びＰＤを調べるために、６００ｍｇの単回経口用量の化合物を投与された。
【0158】
１８歳以上の適格な成人対象は、治験への組み入れ及び治験薬の投与ためのスクリーニング評価し、それに続いて、４時間の診療所内での安全性及びＰＫ／ＰＤ評価を受けた。
【0159】
パート２では、対象を１：１～２の治療シーケンスに無作為化した。治験のこの部分は、診療所または病院から離れて実施された。シーケンス１（試験群１）において、対象は、最初の適格なＨＡＥ発作を治療するために、６００ｍｇの化合物の単回用量を受けた。この発作の解消後、対象は第２の適格なＨＡＥ発作を治療するために、単回用量のプラセボを投与された。
【0160】
シーケンス２（試験群２）では、対象は、最初の適格なＨＡＥ発作を治療するために、単回用量のプラセボを投与された。この発作の解消後、対象は、第２の適格なＨＡＥ発作を治療するために、６００ｍｇの化合物の単回用量を受けた。
【0161】
治験薬の各用量間に、最低４８時間のウォッシュアウト期間が必要であった。
【0162】
喉頭または顔面の発作は、治療適格ではなかった。ＨＡＥ発作は、発症の最初の１時間以内に、全般的な発作重症度尺度（ｇｌｏｂａｌ ａｔｔａｃｋ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｓｃａｌｅ）において、深刻になる前に治療されている必要がある。対象はまた、ＨＡＥ発作の開始を特定することができていなければならない。対象は、適格なＨＡＥ発作の発症時に、ＨＡＥ発作の説明を、専任の治験医師または有資格の被指名人に通知した。専任の治験医師または有資格の被指名人は、ＨＡＥ発作の適格性を確認し、治験薬の投与に同意した。ＨＡＥ発作は、対象の日記に、発作の場所、発作の症状、発症時間、発作の重症度、及び投与前の最後の実質的な食事の時間の記録を必要とした。対象は、指示されたように治験薬を服用し、以下の表３に記載されるように、４８時間の期間、ＨＡＥ発作症状の時間付き評価を完了した。専任の治験医師または有資格の被指名人は、対象の安全及び健康状態を確認するために、対象の適格なＨＡＥ発作の２４時間以内に対象に連絡した。対象は、安全上の懸念がある場合には、専任の治験医師または有資格の被指名人に連絡するように指示された。過敏症の場合、対象は、専任の治験医師または有資格の被指名人に連絡するか、最寄りの救急サービスに連絡した。専任の治験医師または有資格の被指名人は、２４時間／日及び７日間／週、対象の電話を受けることができた。
【表9】
【0163】
対象は、最初のＨＡＥ発作の後、２回目のＨＡＥ発作の前に、診療所に戻り、有害事象（ＡＥ）の報告、バイタルサインの記録、及び対象の日記のレビューを含む安全性チェックを受けた。
【0164】
パート２で２回のＨＡＥ発作が治療されると、対象は診療所に戻り、ＡＥ報告、バイタルサイン記録、及び検査室での安全性測定のための血液サンプリングを含む、最終的な安全性チェックを受けた。
【0165】
ＨＡＥ発作の症状が、対象によって、対象の通常の治療レジメンに従って治療を必要とするのに十分に重篤であると判定された場合、または対象が治験薬の治療を受ける資格がないとみなされた場合、または喉頭または顔面の症状と関連していた場合に、治験薬の服用後４時間後、または保証されたより早い時期に、従来の発作治療剤が許可された。従来の発作治療剤を使用する前に、対象は、従来の治療がプロトコルに従って適切であることを確認し、対象が症状の重症度を報告したことを専任の治験医師または有資格の被指名人に通知した。対象は、従来の発作治療剤（ｐｄＣ１ＩＮＨまたはｒｈＣ１ＩＮＨ静脈内投与［ｉｖ］またはイカチバント）でＨＡＥ発作を治療することが許された。
【0166】
治験薬生成物
式Ａの化合物－１００ｍｇフィルムコーティング錠剤。これらは、以下の賦形剤を含有した：微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウム。審美的コーティングは、ヒプロメロース、乳糖一水和物、二酸化チタン、及びトリアセチンを含有する。
式Ａの化合物－１００ｍｇフィルムコーティング錠剤。これらは、以下の賦形剤を含有した：微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウム。審美的コーティングは、ヒプロメロース、乳糖一水和物、二酸化チタン、及びトリアセチンを含有する。
【0167】
化合物１００ｍｇのプラセボ、フィルムコーティングされた錠剤。これらは、微結晶セルロース、コロイド状二酸化ケイ素、デンプングリコール酸ナトリウム、及びフマル酸ステアリルナトリウムを含有し、フィルムコーティングされており、審美的コーティングは、ヒプロメロース、乳糖一水和物、二酸化チタン、及びトリアセチンを含有する。
【0168】
この治験では、治験薬の用量の変更は許されなかった。
【0169】
対象の数
５０人の対象が治験を完了することを確実にするために、６８人の対象を治験に登録した。５３名の対象が、パート２を完了した。
５０人の対象が治験を完了することを確実にするために、６８人の対象を治験に登録した。５３名の対象が、パート２を完了した。
【0170】
集団：
治験集団は、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を有する１８歳以上の男性対象及び女性対象を含んだ。
治験集団は、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を有する１８歳以上の男性対象及び女性対象を含んだ。
【0171】
選択基準
１．１８歳以上の男性または女性の成人対象。
２．病歴の任意の時点でのＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の確定診断：
ａ．ＨＡＥ（皮下または粘膜、蕁麻疹を伴わない非掻痒性腫脹エピソード）と一致する、記録された臨床病歴、かつ
ｂ．Ｃ１エステラーゼ阻害剤（Ｃ１－ＩＮＨ）抗原、または正常レベルの４０％未満の機能レベル。正常レベルの４０～５０％の抗原または機能的Ｃ１－ＩＮＨレベルを有する対象は、Ｃ４レベルが正常範囲を下回り、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型と一致する家族歴も有する場合に登録された。
３．病歴に裏付けられる、過去９３日間に少なくとも３回のＨＡＥ発作が記録されている。
４．ＨＡＥの発作に対する従来の発作治療剤へのアクセスと使用能力。
５．以下に定義される適切な臓器機能：
ａ．正常範囲内のヘモグロビン、
ｂ．国際標準化比（ＩＮＲ）＜１．２、
ｃ．活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）≦正常上限（ＵＬＮ）、
ｄ．クレアチニン＜１×ＵＬＮ
ｅ．クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）≧６０ｍＬ／分、
ｆ．アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦２×ＵＬＮ、
ｇ．アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）≦２×ＵＬＮ、
ｈ．総ビリルビン≦１．５×ＵＬＮ、
ｉ．白血球≦１．５×ＵＬＮ、
ｊ．血小板≦１．５×ＵＬＮ。
６．出産可能性のある女性は、スクリーニング来院から試験フォローアップ手順の終了まで、非常に効果的な避妊を使用することに同意している必要がある。
非常に効果的な避妊方法としては以下が挙げられる。
ａ．排卵の阻害に関連する、プロゲストゲンのみの、ホルモン避妊：経口／注射／植え込み。
（エストロゲンを含むホルモン避妊は、除外基準３に従って除外した）。
ｂ．子宮内避妊具（ＩＵＤ）。
ｃ．子宮内ホルモン放出システム（ＩＵＳ）。
ｄ．両側の卵管閉塞。
ｅ．精管切除されたパートナー（パートナーが出産の可能性のある女性対象の唯一の性交渉の相手であり、精管切除されたパートナーが、外科的成功の医学的評価を受けたことを条件とする）。
ｆ．性的禁欲（この方法はスイスでは受け入れられない）。
注記：性的禁欲は、異性間の性交を控えることが明らかな場合にのみ、非常に効果的な方法とみなされた。性的禁欲の信頼性は、臨床試験の期間及び対象の好ましい通常のライフスタイルに関連して評価される必要があった。
７．外科的に不妊（子宮摘出術、両側卵巣摘出術、または両側卵管結紮術後の状態）または閉経後少なくとも１２か月間として定義された、出産能力のない女性は、研究中に避妊を必要としなかった。
８．出産可能性のある女性パートナーを持つ男性は、スクリーニング来院から治験フォローアップ手順の終了まで、禁欲に同意しているか、または選択基準６で定義されているように非常に効果的な避妊方法を使用している必要がある。
９．署名されたインフォームドコンセントを提供し、治験の要件と手順を遵守する意思と能力を有していた。
１．１８歳以上の男性または女性の成人対象。
２．病歴の任意の時点でのＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の確定診断：
ａ．ＨＡＥ（皮下または粘膜、蕁麻疹を伴わない非掻痒性腫脹エピソード）と一致する、記録された臨床病歴、かつ
ｂ．Ｃ１エステラーゼ阻害剤（Ｃ１－ＩＮＨ）抗原、または正常レベルの４０％未満の機能レベル。正常レベルの４０～５０％の抗原または機能的Ｃ１－ＩＮＨレベルを有する対象は、Ｃ４レベルが正常範囲を下回り、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型と一致する家族歴も有する場合に登録された。
３．病歴に裏付けられる、過去９３日間に少なくとも３回のＨＡＥ発作が記録されている。
４．ＨＡＥの発作に対する従来の発作治療剤へのアクセスと使用能力。
５．以下に定義される適切な臓器機能：
ａ．正常範囲内のヘモグロビン、
ｂ．国際標準化比（ＩＮＲ）＜１．２、
ｃ．活性化部分トロンボプラスチン時間（ａＰＴＴ）≦正常上限（ＵＬＮ）、
ｄ．クレアチニン＜１×ＵＬＮ
ｅ．クレアチニンクリアランス（ＣｒＣｌ）≧６０ｍＬ／分、
ｆ．アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）≦２×ＵＬＮ、
ｇ．アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）≦２×ＵＬＮ、
ｈ．総ビリルビン≦１．５×ＵＬＮ、
ｉ．白血球≦１．５×ＵＬＮ、
ｊ．血小板≦１．５×ＵＬＮ。
６．出産可能性のある女性は、スクリーニング来院から試験フォローアップ手順の終了まで、非常に効果的な避妊を使用することに同意している必要がある。
非常に効果的な避妊方法としては以下が挙げられる。
ａ．排卵の阻害に関連する、プロゲストゲンのみの、ホルモン避妊：経口／注射／植え込み。
（エストロゲンを含むホルモン避妊は、除外基準３に従って除外した）。
ｂ．子宮内避妊具（ＩＵＤ）。
ｃ．子宮内ホルモン放出システム（ＩＵＳ）。
ｄ．両側の卵管閉塞。
ｅ．精管切除されたパートナー（パートナーが出産の可能性のある女性対象の唯一の性交渉の相手であり、精管切除されたパートナーが、外科的成功の医学的評価を受けたことを条件とする）。
ｆ．性的禁欲（この方法はスイスでは受け入れられない）。
注記：性的禁欲は、異性間の性交を控えることが明らかな場合にのみ、非常に効果的な方法とみなされた。性的禁欲の信頼性は、臨床試験の期間及び対象の好ましい通常のライフスタイルに関連して評価される必要があった。
７．外科的に不妊（子宮摘出術、両側卵巣摘出術、または両側卵管結紮術後の状態）または閉経後少なくとも１２か月間として定義された、出産能力のない女性は、研究中に避妊を必要としなかった。
８．出産可能性のある女性パートナーを持つ男性は、スクリーニング来院から治験フォローアップ手順の終了まで、禁欲に同意しているか、または選択基準６で定義されているように非常に効果的な避妊方法を使用している必要がある。
９．署名されたインフォームドコンセントを提供し、治験の要件と手順を遵守する意思と能力を有していた。
【0172】
除外基準：
１．後天性Ｃ１阻害剤欠乏症、正常なＣ１－ＩＮＨ（ＨＡＥ ＩＩＩ型としても知られる）を伴うＨＡＥ、特発性血管性浮腫、または蕁麻疹に関連する血管性浮腫などの、別の形態の慢性血管性浮腫の併発診断。
２．現在の、ＨＡＥ予防のためのＣ１ＩＮＨ、アンドロゲン、ラナデルマブまたはトラネキサム酸の使用。
３．初回治験治療前９３日以内の、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤または全身吸収を伴う任意のエストロゲン含有薬物（経口避妊薬またはホルモン補充療法など）の使用。
４．アンドロゲン（例えば、スタノゾロール、ダナゾール、オキサンドロロン、メチルテストステロン、テストステロン）または抗線維素溶解剤の初回治験治療前３０日以内の使用。
５．初回治験治療前の１０週間以内のラナデルマブの使用。
６．治験への参加中の強力なＣＹＰ３Ａ４／ＣＹＰ２Ｃ９阻害剤及び誘導剤の使用。
注記：これらの薬剤には、コビシスタット、コニバプタン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ポサコナゾール、ボリコナゾール、リトナビル、ボセプレビル、テラプレビル、トロレアンドマイシン、クラリスロマイシン、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、フェノバルビタール、フルコナゾール、イソニアジド、メトロニダゾール、パロキセチン、スルファメトキサゾール、リファンピシン、セントジョンズワート、ジルチアゼム、イデラリシブ、ネファゾドン、及びネルフィナビルが含まれるが、これらに限定されない。
７．来院１時及び来院２時の用量前の、臨床的に有意な心電図異常（ＥＣＧ）。これには、ＱＴｃＦ＞４７０ｍｓｅｃ（女性の場合）または＞４５０ｍｓｅｃ（男性の場合）、ＰＲ＞２２０ｍｓｅｃ、または偶発的よりも頻繁である、及び／またはグルーピングでカップレットまたはそれ以上として発生する心室及び／または心房早期収縮が含まれるが、これらに限定されない。
８．狭心症、心筋梗塞、卒倒、臨床的に有意な心不整脈、左心室肥大、心筋症、またはその他の心血管異常の臨床的に有意な病歴。
９．治験責任医師の意見による、治験に参加することによって対象の安全性を危険にさらすであろう他の全身機能不全（例えば、胃腸、腎臓、呼吸器、心臓血管）または顕著な疾患または障害。
１０．治験責任医師によって決定された、治験の完了に干渉する可能性のある薬物乱用または依存の病歴。
１１．既知の乳糖アレルギーまたは不耐症。
１２．化合物またはプラセボ、または任意の賦形剤に対する既知の過敏症。
１３．初回治験治療前の、治験薬の最終投与から９３日以内、または５半減期以内（いずれか長いほう）の、介入的治験的臨床研究への参加。
１４．妊娠中または授乳中の対象。
１．後天性Ｃ１阻害剤欠乏症、正常なＣ１－ＩＮＨ（ＨＡＥ ＩＩＩ型としても知られる）を伴うＨＡＥ、特発性血管性浮腫、または蕁麻疹に関連する血管性浮腫などの、別の形態の慢性血管性浮腫の併発診断。
２．現在の、ＨＡＥ予防のためのＣ１ＩＮＨ、アンドロゲン、ラナデルマブまたはトラネキサム酸の使用。
３．初回治験治療前９３日以内の、アンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤または全身吸収を伴う任意のエストロゲン含有薬物（経口避妊薬またはホルモン補充療法など）の使用。
４．アンドロゲン（例えば、スタノゾロール、ダナゾール、オキサンドロロン、メチルテストステロン、テストステロン）または抗線維素溶解剤の初回治験治療前３０日以内の使用。
５．初回治験治療前の１０週間以内のラナデルマブの使用。
６．治験への参加中の強力なＣＹＰ３Ａ４／ＣＹＰ２Ｃ９阻害剤及び誘導剤の使用。
注記：これらの薬剤には、コビシスタット、コニバプタン、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ポサコナゾール、ボリコナゾール、リトナビル、ボセプレビル、テラプレビル、トロレアンドマイシン、クラリスロマイシン、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、フェノバルビタール、フルコナゾール、イソニアジド、メトロニダゾール、パロキセチン、スルファメトキサゾール、リファンピシン、セントジョンズワート、ジルチアゼム、イデラリシブ、ネファゾドン、及びネルフィナビルが含まれるが、これらに限定されない。
７．来院１時及び来院２時の用量前の、臨床的に有意な心電図異常（ＥＣＧ）。これには、ＱＴｃＦ＞４７０ｍｓｅｃ（女性の場合）または＞４５０ｍｓｅｃ（男性の場合）、ＰＲ＞２２０ｍｓｅｃ、または偶発的よりも頻繁である、及び／またはグルーピングでカップレットまたはそれ以上として発生する心室及び／または心房早期収縮が含まれるが、これらに限定されない。
８．狭心症、心筋梗塞、卒倒、臨床的に有意な心不整脈、左心室肥大、心筋症、またはその他の心血管異常の臨床的に有意な病歴。
９．治験責任医師の意見による、治験に参加することによって対象の安全性を危険にさらすであろう他の全身機能不全（例えば、胃腸、腎臓、呼吸器、心臓血管）または顕著な疾患または障害。
１０．治験責任医師によって決定された、治験の完了に干渉する可能性のある薬物乱用または依存の病歴。
１１．既知の乳糖アレルギーまたは不耐症。
１２．化合物またはプラセボ、または任意の賦形剤に対する既知の過敏症。
１３．初回治験治療前の、治験薬の最終投与から９３日以内、または５半減期以内（いずれか長いほう）の、介入的治験的臨床研究への参加。
１４．妊娠中または授乳中の対象。
【0173】
評価：
パート１：ＰＫ及びＰＤ測定のための血液試料を、以下の時点で採取した：投与前（０ｈ）、投与後１５分、３０分、４５分、１時間、１．５時間、２時間、３時間、及び４時間。バイタルサイン（収縮期血圧［ＳＢＰ］、拡張期血圧［ＤＢＰ］、脈拍数［ＰＲ］、呼吸数［ＲＲ］、及び体温）は、投与前（０ｈ）、投与後１ｈ、及び投与後４ｈに測定した。治療後の安全性の臨床評価のための試料を、４時間のＰＫ／ＰＤ試料とともに採取した。
パート１：ＰＫ及びＰＤ測定のための血液試料を、以下の時点で採取した：投与前（０ｈ）、投与後１５分、３０分、４５分、１時間、１．５時間、２時間、３時間、及び４時間。バイタルサイン（収縮期血圧［ＳＢＰ］、拡張期血圧［ＤＢＰ］、脈拍数［ＰＲ］、呼吸数［ＲＲ］、及び体温）は、投与前（０ｈ）、投与後１ｈ、及び投与後４ｈに測定した。治療後の安全性の臨床評価のための試料を、４時間のＰＫ／ＰＤ試料とともに採取した。
【0174】
パート２：治験薬の服用後、上記の表３に記載されるように、４８時間の期間に起こった、全体的なＨＡＥ発作の重症度及びＨＡＥ発作の重症度の変化の対象の評価。
【0175】
効力変数：
従来の発作治療剤を使用するまでの時間を評価した。対象日記は、従来の発作治療剤の使用までの時間及びＨＡＥ発作の重症度を含む効力エンドポイントを捕捉した。
従来の発作治療剤を使用するまでの時間を評価した。対象日記は、従来の発作治療剤の使用までの時間及びＨＡＥ発作の重症度を含む効力エンドポイントを捕捉した。
【0176】
全体的なＨＡＥ発作の重症度は、なし、軽度、中等度、重度及び非常に重度、としてスコア付けされた５点リッカート尺度（５ＬＳ）で評価した。
【0177】
ＨＡＥ発作の重症度の変化は、７－点遷移質問（７ＴＱ）を使用して評価し、はるかに良い／より良い／少し良い／変化なし／少し悪い／より悪い／はるかに悪い、とスコアリングした。
【0178】
ＨＡＥ発作症状（腹痛、皮膚痛及び皮膚腫脹）の種類は、それぞれ、０（なし）及び１００（非常に重度）にアンカーされた、１００ｍｍ視覚アナログ尺度（ＶＡＳ）で評価した。
【0179】
安全性変数：
・重篤な有害事象（ＳＡＥ）を含むＡＥ。
・臨床検査結果（臨床化学、血液学、凝固、及び尿検査）。
・バイタルサイン（ＳＢＰ、ＤＢＰ、ＰＲ、ＲＲ、体温）。
・身体検査の所見。
・ＥＣＧ結果。
・妊娠検査（出産の可能性がある女性の対象）。
・重篤な有害事象（ＳＡＥ）を含むＡＥ。
・臨床検査結果（臨床化学、血液学、凝固、及び尿検査）。
・バイタルサイン（ＳＢＰ、ＤＢＰ、ＰＲ、ＲＲ、体温）。
・身体検査の所見。
・ＥＣＧ結果。
・妊娠検査（出産の可能性がある女性の対象）。
【0180】
効力の評価のための基準
主要効力エンドポイント：
・従来の発作治療剤を使用するまでの時間。
主要効力エンドポイント：
・従来の発作治療剤を使用するまでの時間。
【0181】
副次的効力エンドポイント：
・５ＬＳ上で１レベル以上進行するか、または治験薬から１２時間以内に従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合。
・治療と、１２時間以内に最初に来る、（１）５ＬＳ上での１レベル以上の全般的な発作の重症度の進行、または（２）１従来の発作治療剤の使用の、のいずれか早いほう。
・５ＬＳ上で１レベル以上進行するか、または治験薬から１２時間以内に従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合。
・治療と、１２時間以内に最初に来る、（１）５ＬＳ上での１レベル以上の全般的な発作の重症度の進行、または（２）１従来の発作治療剤の使用の、のいずれか早いほう。
【0182】
探索的エンドポイント：
・化合物６００ｍｇ対プラセボの曲線下面積（ＡＵＣ）として表される、治験薬に続く５ＬＳ上での累積的な全般的発作の重症度。
・従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より悪い」または「はるかに悪い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より良い」または「はるかに良い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・治験薬投与から、全般的な発作重症度尺度（ｇｌｏｂａｌ ａｔｔａｃｋ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｓｃａｌｅ）（５ＬＳ）でＨＡＥ発作の解消を完了（なし、の評価）するまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より悪い、またははるかに悪いと評価されるまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より良い、またははるかに良いと評価されるまでの時間。
・化合物６００ｍｇ対プラセボの曲線下面積（ＡＵＣ）として表される、治験薬に続く５ＬＳ上での累積的な全般的発作の重症度。
・従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より悪い」または「はるかに悪い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より良い」または「はるかに良い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・治験薬投与から、全般的な発作重症度尺度（ｇｌｏｂａｌ ａｔｔａｃｋ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｓｃａｌｅ）（５ＬＳ）でＨＡＥ発作の解消を完了（なし、の評価）するまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より悪い、またははるかに悪いと評価されるまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より良い、またははるかに良いと評価されるまでの時間。
【0183】
一般的な統計的手法と解析の種類
分析セット：
・安全性セット（ＳＡＦ）：少なくとも１用量の治験薬（パート１の治験薬用量を含む）を服用した対象。
・完全分析セット（Ｆｕｌｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｅｔ）（効力に対して）（ＦＡＳ）：パート２で治験薬の両方の用量を受けたすべての無作為化対象。
・パープロトコルセット（Ｐｅｒ－Ｐｒｏｔｏｃｏｌ Ｓｅｔ）に従う（効力に対して）（ＰＰＳ）：両方の用量の治験薬（化合物）をパート２で投与され、重大なプロトコル逸脱がないパート２の無作為化対象。
・ＰＫ／ＰＤ分析セット：パート１でＰＫ／ＰＤ試料を採取したすべての対象。
分析セット：
・安全性セット（ＳＡＦ）：少なくとも１用量の治験薬（パート１の治験薬用量を含む）を服用した対象。
・完全分析セット（Ｆｕｌｌ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｓｅｔ）（効力に対して）（ＦＡＳ）：パート２で治験薬の両方の用量を受けたすべての無作為化対象。
・パープロトコルセット（Ｐｅｒ－Ｐｒｏｔｏｃｏｌ Ｓｅｔ）に従う（効力に対して）（ＰＰＳ）：両方の用量の治験薬（化合物）をパート２で投与され、重大なプロトコル逸脱がないパート２の無作為化対象。
・ＰＫ／ＰＤ分析セット：パート１でＰＫ／ＰＤ試料を採取したすべての対象。
【0184】
試料サイズ
５０人の対象の試料サイズ（シーケンス当たり２５）は、従来の発作治療剤を使用する時間の主要エンドポイントの５％アルファレベル（両側）での試験の９０％の検定力を提供するように提案された。この試料サイズは、対象の４０％が対照群で従来の発作治療剤を使用し、１０％が実験群で従来の発作治療剤を使用し、対象内のデータには最小限の相関があるという仮定に基づいて導き出された。最小相関の仮定は、試料サイズに関して保守的な仮定であるべきである。５０人の対象が治験を完了することを確実にするために、６８人の対象を登録した。５３名の対象が、パート２を完了した。
５０人の対象の試料サイズ（シーケンス当たり２５）は、従来の発作治療剤を使用する時間の主要エンドポイントの５％アルファレベル（両側）での試験の９０％の検定力を提供するように提案された。この試料サイズは、対象の４０％が対照群で従来の発作治療剤を使用し、１０％が実験群で従来の発作治療剤を使用し、対象内のデータには最小限の相関があるという仮定に基づいて導き出された。最小相関の仮定は、試料サイズに関して保守的な仮定であるべきである。５０人の対象が治験を完了することを確実にするために、６８人の対象を登録した。５３名の対象が、パート２を完了した。
【0185】
低頻度または不適格なＨＡＥ発作のために両方の治療期間を完了できない可能性のある対象、または何らかの理由で治験を早期に中止する対象を考慮するために、２０％（１０人の対象）によるオーバーサンプリングが提案された。したがって、治験登録は、５０人の対象が両方の治療期間を完了した後、主要な効力仮説に対処するのに十分であると考えられた。さらなる曝露は必要ではなく、不要とみなされ得るため、両方の期間を完了していない進行中の対象は、治験施設に戻り、来院４（早期中止来院）を完了するように求められた。完全であるか不完全であるかを問わず、すべての対象からのデータを、安全性セットで分析した。
【0186】
一般的な考慮事項：
個々の対象データを対象データリストに提示した。連続的及び分類的データについて、適切な記述的統計量を計算し、表形式で要約した。
個々の対象データを対象データリストに提示した。連続的及び分類的データについて、適切な記述的統計量を計算し、表形式で要約した。
【0187】
サンプル分析：
ＡＥは、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）辞書（ｖ２１．０以上）を使用してコード化され、好ましい用語及びシステム臓器クラス（ＳＯＣ）によって分類された。早期中止を引き起こす治療上出現する有害事象（ＴＥＡＥ）、重篤なＴＥＡＥ、及びＴＥＡＥのリストは、シーケンス群によって提供され、ＴＥＡＥの重症度及び治験薬との関係によってさらに分類される。
ＡＥは、Ｍｅｄｉｃａｌ Ｄｉｃｔｉｏｎａｒｙ ｆｏｒ Ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（ＭｅｄＤＲＡ）辞書（ｖ２１．０以上）を使用してコード化され、好ましい用語及びシステム臓器クラス（ＳＯＣ）によって分類された。早期中止を引き起こす治療上出現する有害事象（ＴＥＡＥ）、重篤なＴＥＡＥ、及びＴＥＡＥのリストは、シーケンス群によって提供され、ＴＥＡＥの重症度及び治験薬との関係によってさらに分類される。
【0188】
効力分析
主要エンドポイント
主要エンドポイントである、従来の発作治療剤の使用までの時間は、各対象の反復測定を反映するように、Ｆｅｉｎｇｏｌｄ及びＧｉｌｌｅｓｐｉｅ（１９９６）（Ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ ｔｒｉａｌｓ ｗｉｔｈ ｃｅｎｓｏｒｅｄ ｄａｔａ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １９９６；１５（１０）：９５３－９６７）によって提案された、Ｇｅｈａｎ検定の一般化を使用して分析した。治験薬の１２時間以内に悪化が生じなかった場合、対象は打ち切られたものとして扱われた。
主要エンドポイント
主要エンドポイントである、従来の発作治療剤の使用までの時間は、各対象の反復測定を反映するように、Ｆｅｉｎｇｏｌｄ及びＧｉｌｌｅｓｐｉｅ（１９９６）（Ｃｒｏｓｓｏｖｅｒ ｔｒｉａｌｓ ｗｉｔｈ ｃｅｎｓｏｒｅｄ ｄａｔａ．Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ ｉｎ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ １９９６；１５（１０）：９５３－９６７）によって提案された、Ｇｅｈａｎ検定の一般化を使用して分析した。治験薬の１２時間以内に悪化が生じなかった場合、対象は打ち切られたものとして扱われた。
【0189】
副次的エンドポイント
５ＬＳで１レベル以上悪化したＨＡＥ発作、または治験薬の１２時間以内に従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合は、治療アームを比較するために、Ｐｒｅｓｃｏｔｔ’ｓ ｔｅｓｔ（１９８１）（Ｔｈｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｓｕｃｃｅｓｓ ｒａｔｅｓ ｉｎ ｃｒｏｓｓ－ｏｖｅｒ ｔｒｉａｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ａｎ ｏｒｄｅｒ ｅｆｆｅｃｔ．Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ １９８１；３０：９－１５）を用いて分析した。
５ＬＳで１レベル以上悪化したＨＡＥ発作、または治験薬の１２時間以内に従来の発作治療剤を必要とするＨＡＥ発作の割合は、治療アームを比較するために、Ｐｒｅｓｃｏｔｔ’ｓ ｔｅｓｔ（１９８１）（Ｔｈｅ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｓｕｃｃｅｓｓ ｒａｔｅｓ ｉｎ ｃｒｏｓｓ－ｏｖｅｒ ｔｒｉａｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ａｎ ｏｒｄｅｒ ｅｆｆｅｃｔ．Ａｐｐｌｉｅｄ Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ １９８１；３０：９－１５）を用いて分析した。
【0190】
主要エンドポイントに使用されるアプローチと同様のアプローチに従って、治験薬と、５ＬＳにおいて１レベル以上で悪化するＨＡＥ発作の悪化または従来の発作治療剤の使用と、の間の時間のうちの、１２時間以内に最初に来るものを分析した。上記の試験に加えて、主要エンドポイント、副次的エンドポイント、及び探索的エンドポイントについて、それぞれの場合、化合物をプラセボと比較して、以下のような記述的統計を提示した：
【0191】
・化合物６００ｍｇ対プラセボのＡＵＣとして表される、治験薬の後の５ＬＳにおける累積の全体的な発作の重症度。
・従来の発作治療剤を必要としたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より悪い」または「はるかに悪い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より良い」または「はるかに良い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・治験薬投与から、全般的な発作重症度尺度（５ＬＳ）でＨＡＥ発作の解消を完了（なし、の評価）するまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より悪い、またははるかに悪いと評価されるまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より良い、またははるかに良いと評価されるまでの時間。
・従来の発作治療剤を必要としたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より悪い」または「はるかに悪い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・７ＴＱで「より良い」または「はるかに良い」と評価されたＨＡＥ発作の割合。
・治験薬投与から、全般的な発作重症度尺度（５ＬＳ）でＨＡＥ発作の解消を完了（なし、の評価）するまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より悪い、またははるかに悪いと評価されるまでの時間。
・７ＴＱで、ＨＡＥ発作が、より良い、またははるかに良いと評価されるまでの時間。
【0192】
ＰＫ分析：
非コンパートメントＰＫパラメーターには、血漿中の最大濃度（Ｃｍａｘ）、血漿中のＣｍａｘに達するまでの時間（ｔｍａｘ）、及び時間０から最後の試料までの曲線下面積（ＡＵＣ０－ｔ）が含まれた。コンパートメントＰＫモデリングは、化合物のＰＫを説明し、基礎となるＣｍａｘ、ｔｍａｘ、ＡＵＣ、見かけのクリアランス（ＣＬ／Ｆ）、見かけの分布体積（Ｖｄ／Ｆ）、及び推定される最終排出半減期（ｔ１／２）を生成する。
非コンパートメントＰＫパラメーターには、血漿中の最大濃度（Ｃｍａｘ）、血漿中のＣｍａｘに達するまでの時間（ｔｍａｘ）、及び時間０から最後の試料までの曲線下面積（ＡＵＣ０－ｔ）が含まれた。コンパートメントＰＫモデリングは、化合物のＰＫを説明し、基礎となるＣｍａｘ、ｔｍａｘ、ＡＵＣ、見かけのクリアランス（ＣＬ／Ｆ）、見かけの分布体積（Ｖｄ／Ｆ）、及び推定される最終排出半減期（ｔ１／２）を生成する。
【0193】
化合物のＰＫパラメーターは、Ｐｈｏｅｎｉｘ ＷｉｎＮｏｎｌｉｎを使用して、個々の濃度対時間データから決定した。理論時間からの逸脱した場合、血液試料の実際の時間を、導出されたＰＫパラメーターの計算に使用した。血漿中の化合物の個々の濃度及び由来するＰＫパラメーターを列挙し、各治療について要約した。個々及び幾何平均濃度－時間データを、線形及び半対数スケール上にプロットした。
【0194】
ＰＤ分析：
血漿中のＰＫａ酵素活性の２つの探索的尺度を使用して、血漿カリクレイン（ＰＫａ）活性に対する化合物の影響を分析した。
血漿中のＰＫａ酵素活性の２つの探索的尺度を使用して、血漿カリクレイン（ＰＫａ）活性に対する化合物の影響を分析した。
【0195】
・化合物を受ける前後に得られた血漿試料からの、外因的に活性化された血漿カリクレイン酵素活性の阻害を決定するためのアッセイ。
・血漿カリクレイン酵素活性からの、高分子量キニノーゲン（ＨＫ）基質（全血漿中に含まれる）の切断の保護のレベルを測定するためのアッセイ。
・血漿カリクレイン酵素活性からの、高分子量キニノーゲン（ＨＫ）基質（全血漿中に含まれる）の切断の保護のレベルを測定するためのアッセイ。
【0196】
各治療についてＰＤを要約した。個々及び平均データは、最終臨床試験報告書の付録にある報告書の補遺として提供された。
【0197】
【0198】
したがって、これらの予備的結果は、式Ａの化合物が、ＨＡＥ患者におけるオンデマンド経口投与に好適な薬物動態プロファイルを実証することを示す。
【0199】
図１５ｂは、健康なボランティアからのＰＫデータと重ね合わされた、パート１からのＨＡＥ患者の完全なＰＫプロファイルを示す。
【0200】
研究のパート２からの効力の結果
主要エンドポイント
化合物で治療された発作は、救急薬の使用を有意に減少させ（ｐ＝０．００１０）、１２時間時のプラセボでの３０．２％と比較して、化合物で治療された発作の１５．１％が救急薬治療された。化合物のこの効力利益は、２４時間において維持された（ｐ＝０．０００５）。２４時間時点で、救急薬の使用（ｐ＝０．０００５）は、化合物では２０．８％であったのに対し、プラセボでは３９．６％であった。
主要エンドポイント
化合物で治療された発作は、救急薬の使用を有意に減少させ（ｐ＝０．００１０）、１２時間時のプラセボでの３０．２％と比較して、化合物で治療された発作の１５．１％が救急薬治療された。化合物のこの効力利益は、２４時間において維持された（ｐ＝０．０００５）。２４時間時点で、救急薬の使用（ｐ＝０．０００５）は、化合物では２０．８％であったのに対し、プラセボでは３９．６％であった。
【0201】
図１５ｃは、化合物が投与されてから１２時間以内に救急薬を使用した患者の累積％を示す。
【0202】
副次的エンドポイント
この化合物は、Ｐａｔｉｅｎｔ Ｇｌｏｂａｌ Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｎｇｅスケール（ＰＧＩ－Ｃ）（７ＴＱとしても知られる）での症状緩和の発症までの時間（ｐ＝＜０．０００１）を、プラセボで治療された発作の中央値９時間に対して１．６時間に有意に短縮した。これは、化合物を用いた治療が、プラセボよりも素早く症状緩和を達成したことを示している。
この化合物は、Ｐａｔｉｅｎｔ Ｇｌｏｂａｌ Ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｃｈａｎｇｅスケール（ＰＧＩ－Ｃ）（７ＴＱとしても知られる）での症状緩和の発症までの時間（ｐ＝＜０．０００１）を、プラセボで治療された発作の中央値９時間に対して１．６時間に有意に短縮した。これは、化合物を用いた治療が、プラセボよりも素早く症状緩和を達成したことを示している。
【0203】
治験薬の１２時間以内に、化合物で治療された発作の８３．０％は、プラセボで治療された発作の５０．９％（ｐ＜０．００５）と比較して、「少し良い」以上（７ＴＱに従って評価された場合）の評価を受けた。治験薬の２４時間以内に、化合物で治療された発作の８４．９％は、プラセボで治療された発作の６４．２％と比較して、（７ＴＱに従って評価された場合）「少し良い」以上の評価を受けた（ｐ＜０．０５）。
【0204】
治験薬の１２時間以内に、化合物で治療された発作の５８．７％は、プラセボで治療された発作の３５．８％と比較して、「より良い」以上（７ＴＱに従って評価された場合）の評価を受けた（ｐ＝０．０３１９）。治験薬の２４時間以内に、化合物で治療された発作の６７．９％は、プラセボで治療された発作の４７．２％（ｐ＝０．０５９３）と比較して、「より良い」以上（７ＴＱに従って評価された場合）の評価を受けた。
【0205】
化合物による治療は、発作が「より良い」以上に評価される中央値時間の統計的に有意な短縮をもたらし（７ＴＱに従って評価された場合）、プラセボの中央値時間１５時間（ｐ＝０．００３６）と比較して、化合物による治療の中央値時間は５時間（ｐ＝０．０００３）であった。
【0206】
２４時間以内に「より良い」以上の評価を達成した発作のうち（７ＴＱに従って評価した場合）、６．１％が救急薬を使用し、ＰＧＩ－Ｓに従って評価した場合に、６６．７％が発作解消を達成し、ＶＡＳによって評価した場合に、７７．６％が発作解消を達成した。反対に、２４時間以内に「より良い」以上の評価を達成しなかった発作（７ＴＱに従って評価した場合）のうち、６３．８％が救急薬を使用し、ＰＧＩ－Ｓに従って評価した場合は、４．３％が発作解消を達成し、ＶＡＳによって評価した場合は、５．１％が発作解消を達成した。
【0207】
図１５ｄは、化合物が投与されてから１２時間以内に症状緩和（７ＴＱ法を使用して評価されたように）を有する患者の累積％を示す。図１５ｅは、承認された注射用製品であるＲｕｃｏｎｅｓｔ（登録商標）の既知の臨床データと、化合物と、の症状緩和までの時間のデータを比較する（Ｃｈａｒｌｅｓ Ｍ．Ｍａｐｌｅｔｈｏｒｐｅ，ＭＤ，ＰｈＤ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｒｅｖｉｅｗｅｒ.Ｓｕｍｍａｒｙ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ａｐｐｒｏｖａｌ，Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｃ１ Ｅｓｔｅｒａｓｅ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＳＴＮ：１２５４９５／０を参照されたい）。
【0208】
化合物で治療された発作は、症状緩和を、ビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）スコア（腹痛、皮膚痛、及び皮膚腫脹）を使用して評価した場合、症状緩和までの時間の中央値が６時間であり、１２時間を超えるプラセボで治療された発作（ｐ＜０．０００１）よりも素早く達成した。繰り返しになるが、これは、化合物を用いた治療がプラセボよりも素早く症状緩和を達成したことを実証した。
【0209】
図１５ｆは、化合物が投与されてから１２時間以内に症状緩和（複合ＶＡＳスコアを使用して評価されたように）を有する患者の累積％を示す。
【0210】
化合物で治療された発作は、１２時間（ｐ＝０．０００８）及び２４時間（ｐ＝０．０００５）にわたって（複合ＶＡＳスコアを使用して評価されるように）ＨＡＥ発作の重症度を低下させた。治験薬の１２時間以内に、プラセボで治療された発作の５４．７％が悪化しないのに対して、化合物で治療された発作の７９．２％が悪化しない。
【0211】
図１５ｇは、化合物が投与されてから１２時間以内の平均複合ＶＡＳスコアを示す。図１５ｇは、時間及びベースラインで調整されたＡＵＣであり、レスキュー後の薬物療法の評価を除外する。図１５ｈは、承認された注射用製品であるＦｉｒａｚｙｒ（登録商標）（活性成分、イカチバント）に対する、既知の臨床データを有する化合物で治療された患者の平均複合ＶＡＳスコアを比較する（Ｌｕｍｒｙ ｅｔ ａｌ．，Ａｎｎ Ａｌｌｅｒｇｙ Ａｓｔｈｍａ Ｉｍｍｕｎｏｌ．２０１１；１０７：５２９－５３７を参照されたい）。
【0212】
化合物は、経口投与の１２時間以内に、全般的な発作重症度尺度（ＰＧＩ－Ｓ）（５ＬＳとしても知られる）または救急薬の使用（ｐ＜０．０００１）によって評価されたときに、安定化または改善された発作の数を有意に増加させた。
【0213】
図１５ｉは、化合物が投与されてから１２時間以内に悪化しなかった（５ＬＳ法を使用して評価した）ＨＡＥ発作の割合を示す。上記のように、治験薬の１２時間以内に、プラセボで治療された発作の５４．７％が悪化しないのに対して、化合物で治療された発作の７９．２％が悪化しない。治験薬の２４時間以内に、プラセボで治療された発作の５０．９％が悪化しないのに対して、化合物で治療された発作の６９．８％が悪化しない。
【0214】
治験薬の１２時間以内に、ＰＧＩ－Ｓ（５ＬＳ法とも呼ばれる）を使用して評価された場合、プラセボで治療された発作の１８．９％と比較して、化合物で治療された発作の３７．７％は、「なし」に改善した。治験薬の２４時間以内に、プラセボで治療された発作の２６．４％が改善したのと比較して、化合物で治療された発作の５２．８％が「なし」に改善した。
【0215】
他の測定されたエンドポイントからの結果は、以下のとおりであった。
【表11-1】
【表11-2】
【0216】
式Ａの化合物で治療された発作のうち、３１．０％及び６９．０％がそれぞれ腹部発作及び末梢発作に分類され、腹部発作の７７．８％及び末梢発作の７７．５％が症状緩和を達成した（ＰＧＩ－Ｃスコアは、１２時間以内に少なくとも「少し良くなった」）。症状緩和までの時間の中央値は、腹部発作で１．５時間、末梢発作で２．５時間であった）。ベースライン発作の重症度は、腹部で１．７、末梢で１．５であり、「ベースライン発作の重症度」に、０～４の数値を割り当てて、カテゴリー的ＰＧＩ重症度尺度（ＰＧＩ－Ｓ）スコア（「なし」～「非常に重症」）と整合させることによって評価される。合計で、腹部発作の６１．１％、末梢発作の５０．０％が、２４時間以内に発作解消を達成した。
【0217】
安全性
治験では重篤な有害事象は報告されておらず、有害事象のために撤退した患者はいなかった。非盲検フェーズ（パート１）では、５人の患者が８つの治療中の薬物関連治療緊急有害事象（ＴＥＡＥ）を経験した。治験のクロスオーバー段階（パート２）では、化合物の投与後に、３人の患者（５．２％）が３回の治療中の薬物関連ＴＥＡＥを経験し、プラセボの投与後に、２人の患者（３．６％）が２回の治療中の薬物関連ＴＥＡＥを経験した。これらのデータを以下に示す。
治験では重篤な有害事象は報告されておらず、有害事象のために撤退した患者はいなかった。非盲検フェーズ（パート１）では、５人の患者が８つの治療中の薬物関連治療緊急有害事象（ＴＥＡＥ）を経験した。治験のクロスオーバー段階（パート２）では、化合物の投与後に、３人の患者（５．２％）が３回の治療中の薬物関連ＴＥＡＥを経験し、プラセボの投与後に、２人の患者（３．６％）が２回の治療中の薬物関連ＴＥＡＥを経験した。これらのデータを以下に示す。
【表12】
【0218】
実施例７－式Ａの化合物の第３相試験
遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型を有する青年及び成人患者における血管性浮腫発作のオンデマンド治療のための、経口血漿カリクレイン阻害剤である式Ａの化合物（「化合物」または「治験薬」）の２つの用量レベルの効力及び安全性を評価するための無作為化、二重盲検、プラセボ対照、第３相、３通りの交差試験。
遺伝性血管性浮腫Ｉ型またはＩＩ型を有する青年及び成人患者における血管性浮腫発作のオンデマンド治療のための、経口血漿カリクレイン阻害剤である式Ａの化合物（「化合物」または「治験薬」）の２つの用量レベルの効力及び安全性を評価するための無作為化、二重盲検、プラセボ対照、第３相、３通りの交差試験。
【0219】
目的：
主要目的：
・ＨＡＥ発作のオンデマンド治療の、プラセボと比較した、化合物の臨床的効力を実証すること。
主要目的：
・ＨＡＥ発作のオンデマンド治療の、プラセボと比較した、化合物の臨床的効力を実証すること。
【0220】
副次的目的：
・化合物の安全性及び忍容性を調査すること。
・化合物の安全性及び忍容性を調査すること。
【0221】
設定：
これは、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の１２歳以上の患者を対象とした二重盲検、無作為化、プラセボ対照、多施設臨床試験である。患者は、３通りのクロスオーバー設計で、６つの治療シーケンスに無作為化される。適格な発作は、最初は、各適格な発作と化合物または従来のオンデマンド治療の最終用量との間の最低４８時間のウォッシュアウト期間を伴って、１回の発作当たり単回用量のプラセボ、３００ｍｇ、または６００ｍｇの化合物で治療される。必要に応じて（患者によって決定されるように）、各発作に対して第２の用量の治験薬を投与してもよい。
これは、ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の１２歳以上の患者を対象とした二重盲検、無作為化、プラセボ対照、多施設臨床試験である。患者は、３通りのクロスオーバー設計で、６つの治療シーケンスに無作為化される。適格な発作は、最初は、各適格な発作と化合物または従来のオンデマンド治療の最終用量との間の最低４８時間のウォッシュアウト期間を伴って、１回の発作当たり単回用量のプラセボ、３００ｍｇ、または６００ｍｇの化合物で治療される。必要に応じて（患者によって決定されるように）、各発作に対して第２の用量の治験薬を投与してもよい。
【0222】
各無作為化患者のこの治験の推定期間は、スクリーニングから最終来院までの約２５週間であり、治療期間中の３回の適格な発作の治療を含む。
【0223】
この治験は、外来患者ベースで、ＨＡＥ治療センターで実施され、診療所内及び遠隔来院（ｔｅｌｅｖｉｓｉｔ）で構成されるであろう。遠隔来院は、電話を介して、またはインタラクティブなオーディオ／ビデオシステムを介して行うことができる。診療所来院が実施できない場合（パンデミックまたは患者が診療所来院に出席することを妨げる他の理由の場合など）に、関連する規制当局、治験参加施設の倫理委員会（ＥＣ）／施設内審査委員会（ＩＲＢ）、地域の規制、及びインフォームドコンセントによって患者が許可されている場合、これらの来院を実施するために在宅診療訪問（ｈｏｍｅ ｈｅａｌｔｈ ｖｉｓｉｔ）が使用される。在宅訪問は、適切に委任された在宅医療サービス提供者によって行われる。在宅診療訪問中に収集された情報は、診療所訪問で収集された情報を反映している。
【0224】
スクリーニング来院
１２歳以上の適格な患者は、治験参加のためのスクリーニング評価を受ける。すべての患者は、試験関連治療が実施される前に、インフォームドコンセントまたは同意を提供する。インフォームドコンセント及び同意は、国及び施設の規制によって許可されている場合、ｅ－ｃｏｎｓｅｎｔを通じて収集することができる。
１２歳以上の適格な患者は、治験参加のためのスクリーニング評価を受ける。すべての患者は、試験関連治療が実施される前に、インフォームドコンセントまたは同意を提供する。インフォームドコンセント及び同意は、国及び施設の規制によって許可されている場合、ｅ－ｃｏｎｓｅｎｔを通じて収集することができる。
【0225】
来院中は、身体検査、１２誘導心電図（ＥＣＧ）、臨床検査（ＨＡＥの診断検査を含む）、及びその他の評価を実施する。
【0226】
施設の職員は、ｅＤｉａｒｙで提供することが期待される情報と治験薬の使用について、患者を訓練する。
【0227】
無作為化来院
スクリーニング来院から４週間以内に、患者は無作為化来院に参加する。患者は、６つの治療シーケンスのうちの１つへの割り当てに基づいて、無作為化、ダブルダミー盲検化、クロスオーバー方式で、３つの治療を受けるように割り当てられる。無作為化は、患者が従来のオンデマンド治療のみを服用して治験に入るか、長期予防治療の安定した用量及びレジメンを服用して治験に入るか、によって層別化される。無作為化は、各治療シーケンスへのバランスのとれた割り当てを確実にするために、置換ブロック無作為化法を使用して、１：１：１：１：１：１の比で行われる。各患者は、以下の治療を受ける。
スクリーニング来院から４週間以内に、患者は無作為化来院に参加する。患者は、６つの治療シーケンスのうちの１つへの割り当てに基づいて、無作為化、ダブルダミー盲検化、クロスオーバー方式で、３つの治療を受けるように割り当てられる。無作為化は、患者が従来のオンデマンド治療のみを服用して治験に入るか、長期予防治療の安定した用量及びレジメンを服用して治験に入るか、によって層別化される。無作為化は、各治療シーケンスへのバランスのとれた割り当てを確実にするために、置換ブロック無作為化法を使用して、１：１：１：１：１：１の比で行われる。各患者は、以下の治療を受ける。
【0228】
・３００ｍｇの化合物（１×３００ｍｇの錠剤と１つの対応するプラセボ錠剤）
・６００ｍｇの化合物（２×３００ｍｇ錠）
・２つの対応するプラセボ錠剤
患者は、少なくとも３時間開けて投与される治験薬の最大２用量で、各適格な発作を治療する。第２の用量は、服用された場合、第１の用量と同じく割り当てられた治療となる。
・６００ｍｇの化合物（２×３００ｍｇ錠）
・２つの対応するプラセボ錠剤
患者は、少なくとも３時間開けて投与される治験薬の最大２用量で、各適格な発作を治療する。第２の用量は、服用された場合、第１の用量と同じく割り当てられた治療となる。
【0229】
この治験では、治験薬は、宅配サービスを介して患者に直接出荷される、または治験薬管理手順書（Ｐｈａｒｍａｃｙ Ｍａｎｕａｌ）に記載されているように、現地の規制または施設のローカルな慣行に従って治験診療所で調剤される。
【0230】
適格なＨＡＥ発作の治療
患者は、３つの別個の適格なＨＡＥ発作を、その発作のために割り当てられた治験薬治療剤で治療する。ＨＡＥ発作が治験薬による治療に適しているとみなされるためには、発作は以下の基準を満たさなければならない：
患者は、３つの別個の適格なＨＡＥ発作を、その発作のために割り当てられた治験薬治療剤で治療する。ＨＡＥ発作が治験薬による治療に適しているとみなされるためには、発作は以下の基準を満たさなければならない：
【0231】
・発作は、重度の喉頭発作ではない。
・患者は、発作の開始時刻を特定できる必要がある。
・患者が、ＨＡＥ発作を治療するために従来のオンデマンド治療または治験薬を使用してから、少なくとも４８時間が経過した。
・患者は、治験薬の最初の投与後、ｅＤｉａｒｙ評価の少なくとも最初の４時間を完了することができなければならない。
・発作後の遠隔来院は、以前の適格な発作に対して完了している（適格な発作２と３にのみ適用される）。
・患者は、発作の開始時刻を特定できる必要がある。
・患者が、ＨＡＥ発作を治療するために従来のオンデマンド治療または治験薬を使用してから、少なくとも４８時間が経過した。
・患者は、治験薬の最初の投与後、ｅＤｉａｒｙ評価の少なくとも最初の４時間を完了することができなければならない。
・発作後の遠隔来院は、以前の適格な発作に対して完了している（適格な発作２と３にのみ適用される）。
【0232】
適格な発作は、最初に治験薬の単回投与で治療されるべきである。患者は、発作の開始後できるだけ早く治療することを促される。
【0233】
必要に応じて（患者によって決定されるように）、以下のように、各発作に対して第２の用量の治験薬を投与してもよい。
【0234】
非咽頭発作
適格なＨＡＥ発作ごとに、治験薬の第２の用量を服用してもよい。
・患者が、ＨＡＥ発作の症状が、治験薬の第２の用量を必要とするほど重篤であると考えた場合、３時間後。
適格なＨＡＥ発作ごとに、治験薬の第２の用量を服用してもよい。
・患者が、ＨＡＥ発作の症状が、治験薬の第２の用量を必要とするほど重篤であると考えた場合、３時間後。
【0235】
治験薬の第２回の投与後、従来のオンデマンド治療を行ってもよい。
・患者が、ＨＡＥ発作症状が従来の治療を必要とするほど重篤であると判断した場合、１時間後。
・患者が、ＨＡＥ発作症状が従来の治療を必要とするほど重篤であると判断した場合、１時間後。
【0236】
症状が気道への関与に進行する場合、患者はいつでも従来のオンデマンド治療で治療することができる。
【0237】
喉頭の発作
治験薬物の最初の用量の後、従来のオンデマンド治療剤はいつでも服用され得る。
・ＨＡＥ発作の症状が悪化した場合、またはＨＡＥ発作の症状が患者によって直ちに治療を必要とするほど重篤であるとみなされた場合。
治験薬物の最初の用量の後、従来のオンデマンド治療剤はいつでも服用され得る。
・ＨＡＥ発作の症状が悪化した場合、またはＨＡＥ発作の症状が患者によって直ちに治療を必要とするほど重篤であるとみなされた場合。
【0238】
適格性を満たさない発作は、患者の通常の治療レジメンに従って従来のオンデマンド治療剤で治療され得る。
【0239】
従来のオンデマンド治療剤としては、血漿由来のＣ１阻害剤（ｐｄＣ１－ＩＮＨ）静脈内（ｉｖ）、組換えヒトＣ１－エステラーゼ阻害剤（ｒＣ１－ＩＮＨ）ｉｖ、イカチバントｓｃ、またはエカランチドｓｃが挙げられ得る。
【0240】
安全性または忍容性の懸念がある患者は、できるだけ早く治験責任医師または被指名人、または必要に応じて最寄りの緊急サービスに連絡する。
【0241】
治験コールセンター
治験薬の第１の投与後、第２の投与または従来のオンデマンド治療の前に、患者は、反復投与基準を思い出すために、指定された治験コールセンターに電話する必要がある。患者はコールセンターに連絡する必要がある：
１．治験薬の第１の投与後
２．治験薬の第２回の投与前
３．従来のオンデマンド治療の投与前。
治験薬の第１の投与後、第２の投与または従来のオンデマンド治療の前に、患者は、反復投与基準を思い出すために、指定された治験コールセンターに電話する必要がある。患者はコールセンターに連絡する必要がある：
１．治験薬の第１の投与後
２．治験薬の第２回の投与前
３．従来のオンデマンド治療の投与前。
【0242】
コールセンターのスタッフは、再投与のルールとｅＤｉａｒｙの評価要件を患者に思い出させる。コールセンターは、通話中にデータを収集しない。
【0243】
患者のｅＤｉａｒｙ
治験薬で治療された各ＨＡＥ発作について、患者は、発作の場所、発作の症状、発症日時、発作の重症度、第２の治験薬の投与時間（該当する場合）、及び該当する場合の従来のオンデマンド治療の使用を含む情報を、ｅＤｉａｒｙに記録する。患者は、表５に記載されているように、４８時間を通してＨＡＥ発作の時間付き評価を完了する。患者は、睡眠中を除くすべての時間付き日記評価を完了する必要があるが、患者は、治験薬の最初の投与後の少なくとも最初の４時間の日記評価を完了しなければならない。
治験薬で治療された各ＨＡＥ発作について、患者は、発作の場所、発作の症状、発症日時、発作の重症度、第２の治験薬の投与時間（該当する場合）、及び該当する場合の従来のオンデマンド治療の使用を含む情報を、ｅＤｉａｒｙに記録する。患者は、表５に記載されているように、４８時間を通してＨＡＥ発作の時間付き評価を完了する。患者は、睡眠中を除くすべての時間付き日記評価を完了する必要があるが、患者は、治験薬の最初の投与後の少なくとも最初の４時間の日記評価を完了しなければならない。
【表13】
【0244】
発作後の遠隔来院
患者の安全性と健康を確保し、治験薬の説明責任を確認し、患者の日記を確認（及び必要に応じて再訓練）し、有害事象（ＡＥ）及び併用薬物のレビューを受けるために、治験薬の投与に続いて（治験スタッフと患者との間の）遠隔来院が完了される。遠隔来院は、患者の日記の完了後の翌営業日までに行われる（訪問期間：＋１週間）。
患者の安全性と健康を確保し、治験薬の説明責任を確認し、患者の日記を確認（及び必要に応じて再訓練）し、有害事象（ＡＥ）及び併用薬物のレビューを受けるために、治験薬の投与に続いて（治験スタッフと患者との間の）遠隔来院が完了される。遠隔来院は、患者の日記の完了後の翌営業日までに行われる（訪問期間：＋１週間）。
【0245】
最終来院／早期終了
３回のＨＡＥ発作が治療された後、または早期終了時に、患者は、１週間以内にできるだけ早く診療所に戻り、ＡＥ報告、バイタルサイン記録、及び臨床検査安全性測定のための血液採取を含む最終的な安全性チェックを受ける。可能な限り、この来院は新しい薬または治療を開始する前に完了する必要がある。
３回のＨＡＥ発作が治療された後、または早期終了時に、患者は、１週間以内にできるだけ早く診療所に戻り、ＡＥ報告、バイタルサイン記録、及び臨床検査安全性測定のための血液採取を含む最終的な安全性チェックを受ける。可能な限り、この来院は新しい薬または治療を開始する前に完了する必要がある。
【0246】
治験薬生成物
式Ａの化合物－３００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤。これらには、以下の賦形剤が含まれた：微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウムの賦形剤。審美的コーティングには、ポリビニルアルコール、二酸化チタン、ポリエチレングリコール３３５０が含まれている。
式Ａの化合物－３００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤。これらには、以下の賦形剤が含まれた：微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウムの賦形剤。審美的コーティングには、ポリビニルアルコール、二酸化チタン、ポリエチレングリコール３３５０が含まれている。
【0247】
化合物錠剤のプラセボ。これらには、微結晶セルロース、クロスカルメロースナトリウム、ポビドン、ステアリン酸マグネシウムを含み、フィルムコーティングされている。審美的コーティングには、ポリビニルアルコール、二酸化チタン、及びポリエチレングリコール３３５０が含まれている。
【0248】
この治験では、治験薬の用量変更は許可されない。
【0249】
錠剤は丸ごと飲み込まなければならず、いかなる方法でも粉砕または改変してはならない。適格な発作は、発作の開始後できるだけ早く治験薬の単回投与で最初に治療されるべきである。必要に応じて（患者によって決定されるように）、各発作に対して第２の用量の治験薬を投与してもよい。
【0250】
患者数
約１１４人の患者が治験に登録され、約８４人の患者（少なくとも１２人の青年を含む）が治験を完了することを確実にする。
約１１４人の患者が治験に登録され、約８４人の患者（少なくとも１２人の青年を含む）が治験を完了することを確実にする。
【0251】
治験集団は、２つのサブセットで構成される：（１）従来のオンデマンド治療のみを受けて治験に入る患者、及び（２）長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者
【0252】
集団：
治験集団には、ＨＡＥ Ｉ型またはＨＡＥ ＩＩ型の診断が確認された、１２歳以上の男性及び女性患者が含まれる。
治験集団には、ＨＡＥ Ｉ型またはＨＡＥ ＩＩ型の診断が確認された、１２歳以上の男性及び女性患者が含まれる。
【0253】
治験集団には、従来のオンデマンド治療のみを受けて治験に入る患者のサブセットと、長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者のサブセットと、が含まれる。
【0254】
選択基準：
１．１２歳以上の男性または女性の患者。
２．病歴の任意の時点でのＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の確定診断：
ａ．ＨＡＥと一致する、記録された臨床病歴（ｓｃまたは粘膜、蕁麻疹を伴わない掻痒性腫脹エピソード）及び、
ｉ．スクリーニング期間中に得られたＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を確認する診断検査結果：Ｃ１－ＩＮＨ機能レベルが正常レベルの４０％未満。機能性Ｃ１－ＩＮＨレベルが正常レベルの４０～５０％である患者も、Ｃ４レベルも正常範囲を下回っている場合、登録されてもよい。スクリーニング期間中に、結果が臨床歴と一致しない場合、または治験責任医師が最近の予防的または治療的Ｃ１－ＩＮＨ使用によって混乱していると信じている場合、患者は再検査され得る、または
ｉｉ．ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の既知の変異を確認する、記録された遺伝子結果、のいずれか。
３．患者は、ＨＡＥ発作のための従来のオンデマンド治療にアクセスし、使用する能力を有する。
４．患者が、ＨＡＥに適応される薬物のうちの１つである、静脈内（ｉｖ）またはｓｃ血漿由来Ｃ１－ＩＮＨ、及び／またはラナデルマブのいずれかで長期予防治療を受けている場合、患者は、スクリーニング来院の前に少なくとも３か月間安定した用量及びレジメンを受けており、治験期間中、安定した用量及びレジメンを維持する意思がある必要がある。
５．患者の、減衰したアンドロゲン（ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ａｎｄｒｏｇｅｎｓ）の最後の用量は、無作為化の少なくとも２８日前であった。
６．患者は、無作為化前の３か月以内に、少なくとも２回のＨＡＥ発作を記録している。
７．患者は、以下の避妊要件のうちの１つを満たす必要がある：
ａ．妊娠可能で異性間活動的な女性患者は、スクリーニング来院から最終または早期終了（ＥＴ）来院まで避妊を使用することに同意する必要がある。許容される避妊方法には、以下の１つ以上が含まれる：
ｉ．排卵の阻害に関連するプロゲストゲンのみのホルモン避妊：経口／注射／植え込み（エチニルエストラジオールを含むエストロゲンを含むホルモン避妊は、除外４に従って除外される）。
ｉｉ．子宮内避妊具。
ｉｉｉ．子宮内ホルモン放出システム。
ｉｖ．両側の卵管閉塞。
ｖ．精管切除されたパートナー（パートナーが出産の可能性のある女性患者の唯一の異性愛者のパートナーであり、精管切除されたパートナーが手術の成功の医学的評価を受けていることを条件とする）。
ｖｉ．男性または女性用コンドーム。
ｖｉｉ．キャップ、ダイアフラム、または殺精子剤付きスポンジ。
ｂ．以下に定義するように、妊娠可能でない、または異性愛者が活動していない患者は、避妊を必要としない。治験過程中に患者の状況が変化した場合、選択基準７ａに指定された要件を満たす必要がある。
ｉ．治験期間に関して、異性愛者の禁欲の信頼性が評価されており、患者の好ましい通常のライフスタイルである場合、治験中に異性愛者の性交を控える女性患者。
ｉｉ．外科的に不妊（例えば、子宮摘出術後、両側卵巣摘出術、または両側卵管結紮術）であるか、または閉経後少なくとも１２か月間である女性患者。
ｉｉｉ．初経前であり、試験終了まで初経前のままである女性患者。
ｉｖ．男性患者（女性パートナーを含む）。
８．患者は、試験用錠剤を丸ごと飲み込むことができなければならない。
９．治験責任医師が評価したように、患者は治験薬を適切に受け取り、保管し、電子日記（ｅＤｉａｒｙ）を読んで理解し、完成させることができなければならない。
１０．治験責任医師は、患者がすべてのプロトコル要件を順守する意思があり、順守することができると考えている。
１１．患者は、署名されたインフォームドコンセントまたは同意（該当する場合）を提供する。親または法的に権限を与えられた代表者は、必要に応じて署名されたインフォームドコンセントを提供する必要がある。
１．１２歳以上の男性または女性の患者。
２．病歴の任意の時点でのＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の確定診断：
ａ．ＨＡＥと一致する、記録された臨床病歴（ｓｃまたは粘膜、蕁麻疹を伴わない掻痒性腫脹エピソード）及び、
ｉ．スクリーニング期間中に得られたＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型を確認する診断検査結果：Ｃ１－ＩＮＨ機能レベルが正常レベルの４０％未満。機能性Ｃ１－ＩＮＨレベルが正常レベルの４０～５０％である患者も、Ｃ４レベルも正常範囲を下回っている場合、登録されてもよい。スクリーニング期間中に、結果が臨床歴と一致しない場合、または治験責任医師が最近の予防的または治療的Ｃ１－ＩＮＨ使用によって混乱していると信じている場合、患者は再検査され得る、または
ｉｉ．ＨＡＥ Ｉ型またはＩＩ型の既知の変異を確認する、記録された遺伝子結果、のいずれか。
３．患者は、ＨＡＥ発作のための従来のオンデマンド治療にアクセスし、使用する能力を有する。
４．患者が、ＨＡＥに適応される薬物のうちの１つである、静脈内（ｉｖ）またはｓｃ血漿由来Ｃ１－ＩＮＨ、及び／またはラナデルマブのいずれかで長期予防治療を受けている場合、患者は、スクリーニング来院の前に少なくとも３か月間安定した用量及びレジメンを受けており、治験期間中、安定した用量及びレジメンを維持する意思がある必要がある。
５．患者の、減衰したアンドロゲン（ａｔｔｅｎｕａｔｅｄ ａｎｄｒｏｇｅｎｓ）の最後の用量は、無作為化の少なくとも２８日前であった。
６．患者は、無作為化前の３か月以内に、少なくとも２回のＨＡＥ発作を記録している。
７．患者は、以下の避妊要件のうちの１つを満たす必要がある：
ａ．妊娠可能で異性間活動的な女性患者は、スクリーニング来院から最終または早期終了（ＥＴ）来院まで避妊を使用することに同意する必要がある。許容される避妊方法には、以下の１つ以上が含まれる：
ｉ．排卵の阻害に関連するプロゲストゲンのみのホルモン避妊：経口／注射／植え込み（エチニルエストラジオールを含むエストロゲンを含むホルモン避妊は、除外４に従って除外される）。
ｉｉ．子宮内避妊具。
ｉｉｉ．子宮内ホルモン放出システム。
ｉｖ．両側の卵管閉塞。
ｖ．精管切除されたパートナー（パートナーが出産の可能性のある女性患者の唯一の異性愛者のパートナーであり、精管切除されたパートナーが手術の成功の医学的評価を受けていることを条件とする）。
ｖｉ．男性または女性用コンドーム。
ｖｉｉ．キャップ、ダイアフラム、または殺精子剤付きスポンジ。
ｂ．以下に定義するように、妊娠可能でない、または異性愛者が活動していない患者は、避妊を必要としない。治験過程中に患者の状況が変化した場合、選択基準７ａに指定された要件を満たす必要がある。
ｉ．治験期間に関して、異性愛者の禁欲の信頼性が評価されており、患者の好ましい通常のライフスタイルである場合、治験中に異性愛者の性交を控える女性患者。
ｉｉ．外科的に不妊（例えば、子宮摘出術後、両側卵巣摘出術、または両側卵管結紮術）であるか、または閉経後少なくとも１２か月間である女性患者。
ｉｉｉ．初経前であり、試験終了まで初経前のままである女性患者。
ｉｖ．男性患者（女性パートナーを含む）。
８．患者は、試験用錠剤を丸ごと飲み込むことができなければならない。
９．治験責任医師が評価したように、患者は治験薬を適切に受け取り、保管し、電子日記（ｅＤｉａｒｙ）を読んで理解し、完成させることができなければならない。
１０．治験責任医師は、患者がすべてのプロトコル要件を順守する意思があり、順守することができると考えている。
１１．患者は、署名されたインフォームドコンセントまたは同意（該当する場合）を提供する。親または法的に権限を与えられた代表者は、必要に応じて署名されたインフォームドコンセントを提供する必要がある。
【0255】
除外基準：
１．後天性Ｃ１阻害剤欠乏症、正常なＣ１－ＩＮＨ（以前はＨＡＥ ＩＩＩ型として知られていた）を伴うＨＡＥ、特発性血管性浮腫、または蕁麻疹に関連する血管性浮腫など、別の形態の慢性血管性浮腫の併発診断。
２．治験責任医師の見解による、ＨＡＥの管理のためのブラジキニン受容体２（ＢＲ２）遮断剤、Ｃ１－ＩＮＨ療法または血漿カリクレイン阻害剤療法に対する奏効不良の臨床的に有意な病歴。
３．スクリーニング来院後、または無作為化前の７日以内のアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤の使用。
４．スクリーニング来院の７日前までに全身吸収を伴う薬物（エチニルエストラジオールを含む経口避妊薬またはホルモン補充療法など）を含むエストロゲン。
５．スクリーニング来院から５半減期以内に開始する、治験への参加中の強力なシトクロムＰ４５０ ３Ａ４ ＣＹＰ３Ａ４阻害剤及び誘導剤の使用。
注記：これらの薬剤には、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：
阻害剤：ボセプレビル、クラリスロマイシン、コビシスタット、ダサブビル、デノプレビル、エルビテグラビル、イデラリシブ、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、ネファゾドン、ネルフィナビルオムビタスビル、パリタプレビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、テリスロマイシン、チプラナビル、トロレアンドマイシン、及びボリコナゾール。
誘導剤：アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピン、セントジョンズワート。
６．以下を含むがこれに限定されない、不十分な臓器機能：
ａ．アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）＞２×正常上限（ＵＬＮ）
ｂ．アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）＞２×ＵＬＮ
ｃ．直接ビリルビン＞１．２５×ＵＬＮ
ｄ．国際標準化比（ＩＮＲ）＞１．２
ｅ．チャイルド－ピュー（Ｃｈｉｌｄ－Ｐｕｇｈ）ＢまたはＣとして定義される、臨床的に有意な肝障害。
７．治験責任医師の意見による、治験に参加することにより患者の安全性を危険にさらす可能性のある、臨床的に有意な併存疾患または全身機能不全。
８．治験責任医師によって決定された、治験の完了を妨げる可能性のある薬物乱用または依存の履歴。
９．化合物またはプラセボ、または任意の賦形剤に対する既知の過敏症。
１０．第２相試験への以前の参加。
１１．ＨＡＥのための任意の遺伝子療法治療または治験への参加。
１２．スクリーニング前に治験薬を最後に投与してから４週間以内の、ＣＯＶＩＤ１９ワクチン治験を含む介入治験臨床試験への参加。
１３．妊娠中または授乳中の患者。
１．後天性Ｃ１阻害剤欠乏症、正常なＣ１－ＩＮＨ（以前はＨＡＥ ＩＩＩ型として知られていた）を伴うＨＡＥ、特発性血管性浮腫、または蕁麻疹に関連する血管性浮腫など、別の形態の慢性血管性浮腫の併発診断。
２．治験責任医師の見解による、ＨＡＥの管理のためのブラジキニン受容体２（ＢＲ２）遮断剤、Ｃ１－ＩＮＨ療法または血漿カリクレイン阻害剤療法に対する奏効不良の臨床的に有意な病歴。
３．スクリーニング来院後、または無作為化前の７日以内のアンジオテンシン変換酵素（ＡＣＥ）阻害剤の使用。
４．スクリーニング来院の７日前までに全身吸収を伴う薬物（エチニルエストラジオールを含む経口避妊薬またはホルモン補充療法など）を含むエストロゲン。
５．スクリーニング来院から５半減期以内に開始する、治験への参加中の強力なシトクロムＰ４５０ ３Ａ４ ＣＹＰ３Ａ４阻害剤及び誘導剤の使用。
注記：これらの薬剤には、以下のものが含まれるが、これらに限定されない：
阻害剤：ボセプレビル、クラリスロマイシン、コビシスタット、ダサブビル、デノプレビル、エルビテグラビル、イデラリシブ、インジナビル、イトラコナゾール、ケトコナゾール、ロピナビル、ネファゾドン、ネルフィナビルオムビタスビル、パリタプレビル、ポサコナゾール、リトナビル、サキナビル、テラプレビル、テリスロマイシン、チプラナビル、トロレアンドマイシン、及びボリコナゾール。
誘導剤：アパルタミド、カルバマゼピン、エンザルタミド、ミトタン、フェニトイン、リファンピン、セントジョンズワート。
６．以下を含むがこれに限定されない、不十分な臓器機能：
ａ．アラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）＞２×正常上限（ＵＬＮ）
ｂ．アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）＞２×ＵＬＮ
ｃ．直接ビリルビン＞１．２５×ＵＬＮ
ｄ．国際標準化比（ＩＮＲ）＞１．２
ｅ．チャイルド－ピュー（Ｃｈｉｌｄ－Ｐｕｇｈ）ＢまたはＣとして定義される、臨床的に有意な肝障害。
７．治験責任医師の意見による、治験に参加することにより患者の安全性を危険にさらす可能性のある、臨床的に有意な併存疾患または全身機能不全。
８．治験責任医師によって決定された、治験の完了を妨げる可能性のある薬物乱用または依存の履歴。
９．化合物またはプラセボ、または任意の賦形剤に対する既知の過敏症。
１０．第２相試験への以前の参加。
１１．ＨＡＥのための任意の遺伝子療法治療または治験への参加。
１２．スクリーニング前に治験薬を最後に投与してから４週間以内の、ＣＯＶＩＤ１９ワクチン治験を含む介入治験臨床試験への参加。
１３．妊娠中または授乳中の患者。
【0256】
評価：
効力変数：
・７ポイントの評価尺度で、はるかに良い、より良い、少し良い、変化なし、少し悪い、悪い、はるかに悪い、と評価された、Ｐａｔｉｅｎｔ ｇｌｏｂａｌ ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｈａｎｇｅ（ＰＧＩ－Ｃ）。
・Ｐａｔｉｅｎｔ ｇｌｏｂａｌ ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｖｅｒｉｔｙ（ＰＧＩ－Ｓ）は、なし、軽度、中等度、重度、及び非常に重度として５点評価尺度で評価した。
・腹痛、皮膚痛、及び皮膚腫脹に対して、０（なし）及び１００（非常に重度）にアンカーされたビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）。
・Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｇｅｎｅｒａｌ Ａｎｘｉｅｔｙ－Ｎｕｍｅｒｉｃ Ｒａｔｉｎｇ Ｓｃａｌｅ（ＧＡ－ＮＲＳ）は、０（まったく不安ではない）及び１０（非常に不安）にアンカーされた１１点尺度で採点した。
・従来のオンデマンド治療の使用。
効力変数：
・７ポイントの評価尺度で、はるかに良い、より良い、少し良い、変化なし、少し悪い、悪い、はるかに悪い、と評価された、Ｐａｔｉｅｎｔ ｇｌｏｂａｌ ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃｈａｎｇｅ（ＰＧＩ－Ｃ）。
・Ｐａｔｉｅｎｔ ｇｌｏｂａｌ ｉｍｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｅｖｅｒｉｔｙ（ＰＧＩ－Ｓ）は、なし、軽度、中等度、重度、及び非常に重度として５点評価尺度で評価した。
・腹痛、皮膚痛、及び皮膚腫脹に対して、０（なし）及び１００（非常に重度）にアンカーされたビジュアルアナログスケール（ＶＡＳ）。
・Ｍｏｄｉｆｉｅｄ Ｇｅｎｅｒａｌ Ａｎｘｉｅｔｙ－Ｎｕｍｅｒｉｃ Ｒａｔｉｎｇ Ｓｃａｌｅ（ＧＡ－ＮＲＳ）は、０（まったく不安ではない）及び１０（非常に不安）にアンカーされた１１点尺度で採点した。
・従来のオンデマンド治療の使用。
【0257】
安全性変数：
・重篤な有害事象を含む有害事象。
・臨床検査の結果。
・１２誘導心電図。
・バイタルサイン。
・身体検査の所見。
・重篤な有害事象を含む有害事象。
・臨床検査の結果。
・１２誘導心電図。
・バイタルサイン。
・身体検査の所見。
【0258】
効力の評価のための基準
主要効力エンドポイント：
・ＰＧＩ－Ｃ：最初の治験薬投与から１２時間以内に、少なくとも「少し良い」（２時間連続）と定義される症状緩和の開始までの時間。
主要効力エンドポイント：
・ＰＧＩ－Ｃ：最初の治験薬投与から１２時間以内に、少なくとも「少し良い」（２時間連続）と定義される症状緩和の開始までの時間。
【0259】
重要な副次的効力エンドポイント：
・ＰＧＩ－Ｓ：最初の治験薬投与から１２時間以内の、ベースラインからの減少の最初の発生までの時間。
・ＰＧＩ－Ｓ：ＨＡＥ発作の解消までの時間が、最初の治験薬投与から２４時間以内に「なし」と定義される。
・ＰＧＩ－Ｓ：最初の治験薬投与から１２時間以内の、ベースラインからの減少の最初の発生までの時間。
・ＰＧＩ－Ｓ：ＨＡＥ発作の解消までの時間が、最初の治験薬投与から２４時間以内に「なし」と定義される。
【0260】
副次的効力エンドポイント：
・ＰＧＩ－Ｃ：症状緩和の開始を伴う発作の割合が、最初の治験薬投与から４時間以内及び１２時間以内に少なくとも「少し良い」（連続して２時点）と定義される。
・ＰＧＩ－Ｃ：最初の治験薬投与の１２時間以内に、少なくとも「より良い」になるまでの時間。
・ＰＧＩ－Ｓ：最初の治験薬投与から２４時間以内の、ベースラインからの減少の最初の発生までの時間。
・複合ＶＡＳ：最初の治験薬投与から１２時間以内及び２４時間以内に、ベースラインから少なくとも５０％減少するまでの時間（連続して３時点）。
・ＰＧＩ－Ｃ：症状緩和の開始を伴う発作の割合が、最初の治験薬投与から４時間以内及び１２時間以内に少なくとも「少し良い」（連続して２時点）と定義される。
・ＰＧＩ－Ｃ：最初の治験薬投与の１２時間以内に、少なくとも「より良い」になるまでの時間。
・ＰＧＩ－Ｓ：最初の治験薬投与から２４時間以内の、ベースラインからの減少の最初の発生までの時間。
・複合ＶＡＳ：最初の治験薬投与から１２時間以内及び２４時間以内に、ベースラインから少なくとも５０％減少するまでの時間（連続して３時点）。
【0261】
探索的エンドポイント：
ＧＡ－ＮＲＳ：最初の治験薬投与の１２時間及び２４時間にわたる曲線下面積として表される、累積ＧＡ－ＮＲＳ。
ＧＡ－ＮＲＳ：最初の治験薬投与の１２時間及び２４時間にわたる曲線下面積として表される、累積ＧＡ－ＮＲＳ。
【0262】
一般的な統計的手法と解析の種類
分析セット：
・安全性セットには、少なくとも１用量の試験薬を受けたすべての患者が含まれる。
・完全分析セット（ＦＡＳ）は、それぞれの適格なＨＡＥ発作の後の少なくとも２つの期間（プラセボ期間を含む）から治験薬を受けたすべての無作為化された患者を含むであろう。１人以上の患者（複数可）が誤った治験薬を受けた場合、ＦＡＳを使用して要約されたデータは、無作為化治療に従って提示される。ＦＡＳ集団は、確認的な効力分析のための集団となる。
・パープロトコルセット（ＰＰＳ）は、３つの治験薬すべてを投与され、スケジュールされた評価を完了し、かつ主要効力エンドポイントに影響を及ぼす可能性のある事前に定義されたプロトコル逸脱を有しない、ＦＡＳからのすべての患者を含む。
分析セット：
・安全性セットには、少なくとも１用量の試験薬を受けたすべての患者が含まれる。
・完全分析セット（ＦＡＳ）は、それぞれの適格なＨＡＥ発作の後の少なくとも２つの期間（プラセボ期間を含む）から治験薬を受けたすべての無作為化された患者を含むであろう。１人以上の患者（複数可）が誤った治験薬を受けた場合、ＦＡＳを使用して要約されたデータは、無作為化治療に従って提示される。ＦＡＳ集団は、確認的な効力分析のための集団となる。
・パープロトコルセット（ＰＰＳ）は、３つの治験薬すべてを投与され、スケジュールされた評価を完了し、かつ主要効力エンドポイントに影響を及ぼす可能性のある事前に定義されたプロトコル逸脱を有しない、ＦＡＳからのすべての患者を含む。
【0263】
・サブグループ分析セット
・オンデマンド完全分析セット（オンデマンドＦＡＳ）には、従来のオンデマンド治療のみを受けて試験に参加するＦＡＳ患者が含まれる。
・オンデマンド完全分析セット（オンデマンドＦＡＳ）には、従来のオンデマンド治療のみを受けて試験に参加するＦＡＳ患者が含まれる。
【0264】
予防的完全分析セット（予防的ＦＡＳ）には、長期予防治療の安定した用量及びレジメンで試験に参加するＦＡＳ患者が含まれる。
【0265】
試料サイズ：
約１１４人の患者が治験に無作為化され、約８４人の患者（最小１２人の青年を含む）が治験を完了することを確実にする。治験集団は、２つのサブセットで構成される：（１）従来のオンデマンド治療のみを受けて治験に入る患者、及び（２）長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者
１．治験を完了する６６人の患者の試料サイズは、ＰＧＩ－Ｃによって定義されるように、最初の治験薬の投与の１２時間以内に、連続して２時点で少なくとも「少し良い」であると定義される、ＨＡＥ発作の症状緩和の開始までの時間の主要エンドポイントについて、２．５％アルファレベル（両側）での各ペアワイズ比較（化合物対プラセボ）を試験するための９０％の検定力を提供する。この試料サイズは、ＨＡＥ発作の症状緩和までの中央値時間が、第２相試験からの活性用量群で１．６時間、プラセボ群で９時間であるという仮定に基づいて導き出される。患者は一緒に治験を開始し、同じ期間追跡されると仮定し、対照群の患者の４９％、及び化合物用量群の患者の１７％が追跡不能（右側打ち切り）であると仮定する。保存的アプローチを採用し、並列群設計のための検定力計算のためのシミュレーションベースの手順を使用した両側二群生存比較Ｇｅｈａｎ Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定は、各治療群に８４人の患者がいる場合、中央値時間比が５．６（９／１．６）で標的の両側有意水準が２．５％であることを検出するための約９０％の検定力を有する。
２．第２相試験（実施例６）で観察された治療効果は、この治験では集団全体を代表すると仮定する。しかしながら、追加の治験集団（例えば、青年期患者ならびに治療効果が以前に特徴付けられたことがない長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者）が登録される。したがって、試験を完了する合計８４人の患者が提案される。この保存的アプローチは、この治験集団における真の治療効果が、第２相試験で観察されたものと異なる場合に、少なくとも９０％の検定力を維持する可能性を増加させる。
約１１４人の患者が治験に無作為化され、約８４人の患者（最小１２人の青年を含む）が治験を完了することを確実にする。治験集団は、２つのサブセットで構成される：（１）従来のオンデマンド治療のみを受けて治験に入る患者、及び（２）長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者
１．治験を完了する６６人の患者の試料サイズは、ＰＧＩ－Ｃによって定義されるように、最初の治験薬の投与の１２時間以内に、連続して２時点で少なくとも「少し良い」であると定義される、ＨＡＥ発作の症状緩和の開始までの時間の主要エンドポイントについて、２．５％アルファレベル（両側）での各ペアワイズ比較（化合物対プラセボ）を試験するための９０％の検定力を提供する。この試料サイズは、ＨＡＥ発作の症状緩和までの中央値時間が、第２相試験からの活性用量群で１．６時間、プラセボ群で９時間であるという仮定に基づいて導き出される。患者は一緒に治験を開始し、同じ期間追跡されると仮定し、対照群の患者の４９％、及び化合物用量群の患者の１７％が追跡不能（右側打ち切り）であると仮定する。保存的アプローチを採用し、並列群設計のための検定力計算のためのシミュレーションベースの手順を使用した両側二群生存比較Ｇｅｈａｎ Ｗｉｌｃｏｘｏｎ検定は、各治療群に８４人の患者がいる場合、中央値時間比が５．６（９／１．６）で標的の両側有意水準が２．５％であることを検出するための約９０％の検定力を有する。
２．第２相試験（実施例６）で観察された治療効果は、この治験では集団全体を代表すると仮定する。しかしながら、追加の治験集団（例えば、青年期患者ならびに治療効果が以前に特徴付けられたことがない長期予防治療の安定した用量及びレジメンで治験に入る患者）が登録される。したがって、試験を完了する合計８４人の患者が提案される。この保存的アプローチは、この治験集団における真の治療効果が、第２相試験で観察されたものと異なる場合に、少なくとも９０％の検定力を維持する可能性を増加させる。
【0266】
第２相試験と一致する約３０％の脱落率または未完了率があると仮定すると、３０人の患者（８４＋３０＝１１４）によるオーバーサンプリングが、稀な、もしくは適格でないＨＡＥ発作のためにすべての治療期間を完了しない可能性のある患者、または理由の如何を問わず試験を早期に中止する患者を考慮するために提案される。
【0267】
一般的な考慮事項：
連続データは、記述統計（数、算術平均、中央値、標準偏差、最小値、及び最大値）を使用して治療群ごとに要約される。分類データは、頻度表（頻度及び割合）を使用して治療群ごとに要約する。
連続データは、記述統計（数、算術平均、中央値、標準偏差、最小値、及び最大値）を使用して治療群ごとに要約される。分類データは、頻度表（頻度及び割合）を使用して治療群ごとに要約する。
【0268】
すべての解析は、ＳＡＳバージョン９．４以上または他の検証済みソフトウェアを使用して実施する。
【0269】
サンプル分析：
主要な効力エンドポイントの確認分析では、複数の用量レベルに対するＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重度調整が行われるため、ペアワイズの比較テストは、アルファ０．０２５の両側になる。副次的または探索的エンドポイントの分析には、多重度の調整はないであろう。
主要な効力エンドポイントの確認分析では、複数の用量レベルに対するＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの多重度調整が行われるため、ペアワイズの比較テストは、アルファ０．０２５の両側になる。副次的または探索的エンドポイントの分析には、多重度の調整はないであろう。
【0270】
治験には３つの治療群がある。
１．３００ｍｇの化合物
２．６００ｍｇの化合物
３．プラセボ
１．３００ｍｇの化合物
２．６００ｍｇの化合物
３．プラセボ
【0271】
２つのペアワイズの比較が実行される：３００ｍｇの化合物対プラセボ、及び６００ｍｇの化合物対プラセボ。
【0272】
確認的な効力分析は、完全分析セットで実施する。
【0273】
効力分析
固定シーケンス閉検定手順に従う。固定シーケンス閉検定手順では、正式な推論検定は、現在のステップで統計的有意性が宣言された場合にのみ、次のステップに進むことができる。治験シーケンスが停止した場合、治験シーケンス内の残りのエンドポイントは探索的とみなされる。固定治験手順は、プラセボとの用量比較ごとに別々に、最初に主要エンドポイントで、次に、重要な副次的エンドポイント１及び２で、使用される。
固定シーケンス閉検定手順に従う。固定シーケンス閉検定手順では、正式な推論検定は、現在のステップで統計的有意性が宣言された場合にのみ、次のステップに進むことができる。治験シーケンスが停止した場合、治験シーケンス内の残りのエンドポイントは探索的とみなされる。固定治験手順は、プラセボとの用量比較ごとに別々に、最初に主要エンドポイントで、次に、重要な副次的エンドポイント１及び２で、使用される。
【0274】
主要エンドポイント及び重要な副次的エンドポイントの両方での統計的検定は、同じ有意水準アルファ（０．０２５）であり、重要な副次的エンドポイント１は、主要エンドポイントでの検定が統計的に有意である場合にのみ検定される。投与量レベル内の治験は、主要エンドポイントでの検定が、有意水準０．０２５で化合物用量レベルの帰無仮説を拒絶できなかった場合、中止される。
【0275】
重要な副次的エンドポイント２は、重要な副次的エンドポイント１の検定が統計的に有意である場合にのみ検定される。重要な副次的エンドポイント１の試験で、０．０２５の有意水準で化合物用量レベルの帰無仮説を拒否できなかった場合、用量レベル内の試験は中止される。
【0276】
有意水準０．０２５は、元の有意水準０．０５を、各化合物用量レベルとプラセボとの間のエンドポイントファミリー内の比較の数で割ることによって得られるＢｏｎｆｅｒｒｏｎｉの調整有意水準であり、すなわち、調整有意水準は０．０２５（０．０５を２で割る）である。
【0277】
帰無仮説は、ＰＧＩ－Ｃによって定義される症状緩和が始まる時間の生存分布に、最初の治験薬投与から１２時間以内に連続して２つの時点で少なくとも「少し良い」（化合物群とプラセボ群の各用量の間に差はない）と、生存分布が異なるという代替仮説（化合物用量群のそれぞれとプラセボ群のそれぞれ）との間に差がないということである。
Ｈ０：ｔｋ－ｔｐ＝０
ここで、ｔｋは、化合物用量治療後のＨＡＥ発作の「少し良い」以上の評価への時間であり、ｔｐは、プラセボ後のＨＡＥ発作の「少し良い」以上の評価への時間である。
Ｈａ：ｔｋ－ｔｐ≠０
Ｈ０：ｔｋ－ｔｐ＝０
ここで、ｔｋは、化合物用量治療後のＨＡＥ発作の「少し良い」以上の評価への時間であり、ｔｐは、プラセボ後のＨＡＥ発作の「少し良い」以上の評価への時間である。
Ｈａ：ｔｋ－ｔｐ≠０
【0278】
主要エンドポイントは、打ち切りデータを有するクロスオーバー治験のための、Ｆｅｉｎｇｏｌｄ ａｎｄ Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ（１９９６）（ＦｅｉｎｇｏｌｄＭ，Ｇｉｌｌｅｓｐｉｅ ＢＷ．Ｃｒｏｓｓ－ｏｖｅｒ ｔｒｉａｌｓ ｗｉｔｈ ｃｅｎｓｏｒｅｄ ｄａｔａ．Ｓｔａｔ Ｍｅｄ．１９９６；１５：９５３－６７）によって提案された、Ｇｅｈａｎスコア変換を使用して解析され得る。
【0279】
主要エンドポイント事象を有する患者の数は、頻度及び生存推定値によって要約され、要約は、治療によって提示される。
【0280】
ＨＡＥ発作の重症度は、ＰＧＩ－Ｓ５点リッカート尺度でスコア、なし、軽度、中等度、重度、及び非常に重度として評価する。重症度の低下は、ベースラインで報告されたスコアよりも、ベースライン後の任意の重症度の低いレベルへの任意の変化として定義される。
【0281】
重要な副次的エンドポイントは、主要エンドポイント分析法（Ｇｅｈａｎスコア変換検定）と同じアプローチで分析する。重要な副次的エンドポイントは、固定シーケンス閉検定手順に従って検定する。重要な副次的エンドポイントは、頻度及び生存推定値によって要約され、要約は、治療によって提示される。
【0282】
主要及び重要な副次的有効性エンドポイントのサブグループ解析は、ＨＡＥ発作開始時の主要発作部位、性別、年齢、ベースライン重症度、領域、及び受けた投与回数によって行われる。頻度及び生存推定値は、各サブグループについて提示される。発作時間別のサブグループも調査してもよい。
【0283】
主要及び重要な副次的効力エンドポイントの分析は、ＦＡＳ及び予防ＦＡＳで実施する。
【0284】
副次的エンドポイントは、頻度及び割合によって要約し、治療ごとに提示する。
【0285】
すべての事象までの時間（ｔｉｍｅ－ｔｏ－ｅｖｅｎｔ）エンドポイントは、必要に応じて事象の頻度及びＫａｐｌａｎ－Ｍｅｉｅｒ推定値または生存推定値によって要約される。要約は、治療ごとに提示される。
【0286】
０時間（投与前）から最大１２時間、最大２４時間、または従来のオンデマンド治療の使用前の最後の時点、のいずれか早いほうまでの期間にわたるＧＡ－ＮＲＳの探索的エンドポイントのベースライン及び時間調整ＡＵＣは、線形台形ルールによって導き出される。ＡＵＣを説明的に要約する。治療間のＡＵＣの統計的比較は、治療、シーケンス、及び期間の固定効果を有する分散の混合効果分析、ならびに無作為効果としてシーケンス内にネストされた患者を使用して行う。
【0287】
安全性
安全性解析は、安全性セットを使用して、治療群ごとに行われる。安全性エンドポイントには、ＡＥ、臨床検査評価、バイタルサイン、及びＥＣＧ所見が含まれる。
安全性解析は、安全性セットを使用して、治療群ごとに行われる。安全性エンドポイントには、ＡＥ、臨床検査評価、バイタルサイン、及びＥＣＧ所見が含まれる。
【0288】
治験中に記録された有害事象及び重篤な有害事象（ＳＡＥ）は、全身臓器分類、好ましい用語、及び治療によって要約される。有害事象及び病歴は、最新バージョンのＭｅｄＤＲＡを使用してコード化する。
【0289】
治療出現有害事象（ＴＥＡＥ）、重篤なＴＥＡＥ、及び早期中止を引き起こすＴＥＡＥを有する患者の頻度及び割合は、治療群ごとに提供される。
【0290】
すべての有害事象の患者リスト、ならびに中止に至った死亡、ＳＡＥ、及びＡＥのリストが提供される。
【0291】
身体検査、ＥＣＧ、バイタルサイン、及び臨床検査の変数（中央検査室で測定）の場合、結果が正常または異常な患者の数と割合は、スケジュールされた各来院時にシーケンスごとに提示される。連続変数の記述的統計は、シーケンスごとの各パラメーターのベースラインからの変化の要約とともに、スケジュールされた来院時に提供される。
【0292】
実施例８－健康な成人対象における第１相多回投与試験
目的：健康な成人対象における１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として製剤化された化合物の投与後のＱＴｃにおける安全性、忍容性、薬物動態、及びベースラインからの変化を評価する。
目的：健康な成人対象における１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として製剤化された化合物の投与後のＱＴｃにおける安全性、忍容性、薬物動態、及びベースラインからの変化を評価する。
【0293】
主要目的：
・化合物の複数回投与の安全性及び忍容性を調査すること。
・化合物の複数回投与の安全性及び忍容性を調査すること。
【0294】
副次的目的：
・化合物の複数回用量の薬物動態（ＰＫ）を調べること。
・化合物の複数回用量の薬物動態（ＰＫ）を調べること。
【0295】
・１００ｍｇフィルム被覆錠（ＫａｌＶｉｓｔａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ）の化合物を健康な成人対象に投与した後の、濃度－ＱＴｃ関係を含む、ＥＣＧパラメーターに対する化合物の効果を評価する。
【0296】
探索的目的：
・化合物の複数回用量の薬力学（ＰＤ）を調べる。
・化合物の複数回用量の薬力学（ＰＤ）を調べる。
【0297】
方法：
これは、健康な成人男性及び女性対象において、化合物の安全性及び忍容性、ならびに１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として製剤化された化合物のＥＣＧ効果を評価するための、第１相、二重盲検、プラセボ対照、複数用量、複数コホート試験であった。
これは、健康な成人男性及び女性対象において、化合物の安全性及び忍容性、ならびに１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として製剤化された化合物のＥＣＧ効果を評価するための、第１相、二重盲検、プラセボ対照、複数用量、複数コホート試験であった。
【0298】
４つのコホートを評価した。コホート１、２、３は、それぞれ８人の対象を含んだ。コホート４は、１８人の対象を含んだ。すべての試みは、各コホートに等しい数の男性及び女性の対象を含むように行われた。
【0299】
試験中、６００ｍｇのフィルム被覆錠（６個の１００ｍｇ錠）としての化合物の経口用量、または６個の対応するプラセボ錠を、８時間ごとに１回（コホート１）４時間ごとに（コホート２）、または２時間ごとに（コホート３及び４）、健康な成人男性及び女性対象に、合計用量１８００ｍｇまで投与した。コホート１、２、３において、６人の対象は、１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として化合物を投与され、２人の対象は、コホート当たり合計８人の対象のプラセボを投与された。コホート４において、１２人の対象が、１００ｍｇのフィルムコーティングされた錠剤として化合物を投与され、６人の対象が、合計１８人の対象のプラセボを投与された。
【0300】
コホート１からコホート２及びコホート２からコホート３への進行は、コホート１及びコホート２の実施中に捕捉された安全性データ（ラボ、バイタルサイン、安全性ＥＣＧ、及び有害事象）のレビュー後に生じた。コホート４への進行は、コホート３からの安全性データ及び薬物動態データのレビュー後に生じた。コホート３からの薬物動態データをレビューして、第３の用量のＣｍａｘがベースラインからのＱＴｃ間隔の変化の評価を支持するのに十分に高いことを確認した。
【0301】
ＥＣＧを連続的に記録するために、ホルターモニターを各対象に取り付けた。モニターは、最初の投与の１時間前に取り付けられ、最終的な血液サンプル収集の後まで取り付けられたままであった。ホルターモニターの電極は、適切な間隔で診療所スタッフのメンバーによってチェックされ、それらが取り付けられていることが確認された。
【0302】
各コホートにおいて、血液試料を、投与前、第１の投与後の間隔、及び最終（第３の）投与後２４時間にわたる間隔（コホート１での初回投与から４０時間、コホート２での初回投与から３２時間、コホート３及び４での初回投与から２８時間）で収集した。対象は、投与の少なくとも１０時間前から各試験コホートにおける最終血液試料採取後まで臨床施設に閉じ込められ、安全性評価のために最終投与の５～７日後に診療所に戻された。
【0303】
化合物の薬物動態は、完全に検証された分析手順によって測定され、血漿カリクレイン阻害酵素活性に対する薬力学的効果は、探索的薬力学的評価によって評価された。
【0304】
統計的分析を行って、血漿薬物濃度と治験製剤のＥＣＧ効果のベースラインからの変化との間の関係を評価した。
【0305】
治療薬投与
コホート１
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、１６時間の期間にわたって８時間ごとに治験またはプラセボ治療（３回投与：０、８、及び１６時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）を受けた。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだ、または咀嚼した対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行った。
コホート１
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、１６時間の期間にわたって８時間ごとに治験またはプラセボ治療（３回投与：０、８、及び１６時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）を受けた。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだ、または咀嚼した対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行った。
【0306】
コホート２
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、８時間の期間にわたって４時間ごとに治験薬またはプラセボ治療薬（３回投与：０、４、及び８時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）を受けた。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだ、または咀嚼した対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行い、錠剤が咀嚼したり噛んだりせずに丸ごと飲み込まれたことを確認した。
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、８時間の期間にわたって４時間ごとに治験薬またはプラセボ治療薬（３回投与：０、４、及び８時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）を受けた。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだ、または咀嚼した対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行い、錠剤が咀嚼したり噛んだりせずに丸ごと飲み込まれたことを確認した。
【0307】
コホート３及びコホート４
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、４時間の期間にわたって２時間ごとに治験薬またはプラセボ治療薬を受けた（３回投与：０、２、及び４時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだまたは咀嚼した任意の対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行い、錠剤が咀嚼したり噛んだりせずに丸ごと飲み込まれたことを確認した。
対象は、直接観察下での２治療無作為化スケジュールに従って、４時間の期間にわたって２時間ごとに治験薬またはプラセボ治療薬を受けた（３回投与：０、２、及び４時間での、１００ｍｇフィルムコーティング錠としての化合物の６×１００ｍｇ、またはプラセボ投与、化合物またはプラセボの全用量１８００ｍｇ）。各用量を、２４０ｍＬの室温の水とともに投与した。対象は、咀嚼したり噛んだりせずに錠剤を丸ごと飲み込むように指示された。錠剤を噛んだまたは咀嚼した任意の対象は、研究から除外された。投与直後に口腔チェックを行い、錠剤が咀嚼したり噛んだりせずに丸ごと飲み込まれたことを確認した。
【0308】
すべての対象は、最初の投与前に少なくとも８時間絶食した（水を除く）。初回用量後、対象は、第１の投与の少なくとも６時間後まで絶食を続けた。
【0309】
対象を治療群に割り当てる方法：
コホート１、２、及び３
対象は、６人の対象が治験製品を投与され、２人の対象がプラセボを受けるように無作為化された。安全性対策として、各コホートについて定点（ｓｅｎｔｉｎｅｌ）投与スキームを組み込み、１人の対象が治験生成物を受け、１人の対象がプラセボ生成物を受け取り、コホートの残りが続いた。
コホート１、２、及び３
対象は、６人の対象が治験製品を投与され、２人の対象がプラセボを受けるように無作為化された。安全性対策として、各コホートについて定点（ｓｅｎｔｉｎｅｌ）投与スキームを組み込み、１人の対象が治験生成物を受け、１人の対象がプラセボ生成物を受け取り、コホートの残りが続いた。
【0310】
コホート４
対象は、１２人の対象が治験生成物を受け、６人の対象がプラセボを受けるように無作為化された。
対象は、１２人の対象が治験生成物を受け、６人の対象がプラセボを受けるように無作為化された。
【0311】
無作為化スケジュールは、ＳＡＳ（登録商標）、バージョン９．４以上を使用して、最初の投与コホートの前に生成された。
【0312】
結果：
治験中に重篤な有害事象は報告されず、ＡＥのために中止された対象はいなかった。報告されたすべての有害事象は、重症度が「軽度」であるとみなされ、治験の終了時に「回復／解消」の結果が得られた。
治験中に重篤な有害事象は報告されず、ＡＥのために中止された対象はいなかった。報告されたすべての有害事象は、重症度が「軽度」であるとみなされ、治験の終了時に「回復／解消」の結果が得られた。
【0313】
研究されたＥＣＧパラメーターに対する臨床的に関連する効果は同定されなかった。
【0314】
図１６Ａは、各コホートの初回用量後の式Ａの化合物の平均血漿濃度を示す。
【0315】
図１６Ｂは、各コホートについての式Ａの化合物の平均血漿濃度（半対数スケール）を示す。
【0316】
これらのデータは、式Ａの化合物が、複数の投与量で投与されたときに経口投与に好適な薬物動態プロファイルを有することを実証する。結果はさらに、式Ａの化合物を規則的な間隔で安全に用量され得ることを示唆している。
【図1】
【図2A】
【図2B】
【図3A】
【図3B】
【図4A】
【図4B】
【図5A】
【図5B】
【図6A】
【図6B】
【図7】
【図8】
【図9】
【図10】
【図11】
【図12】
【図13A】
【図13B】
【図14A】
【図14B】
【図15a】
【図15b】
【図15c】
【図15d】
【図15e】
【図15f】
【図15g】
【図15h】
【図15i】
【図16A】
【図16B】
【国際調査報告】