特表 2024-505664 肺炎球菌コンジュゲートワクチン用のナノエマルションアジュバント組成物

(19)【発行国】日本国特許庁(JP)

(12)【公報種別】公表特許公報(A)

(11)【公表番号】

(43)【公表日】2024-02-07

(54)【発明の名称】肺炎球菌コンジュゲートワクチン用のナノエマルションアジュバント組成物

(51)【国際特許分類】

   A61K 39/09 20060101AFI20240131BHJP

   A61K 39/385 20060101ALI20240131BHJP

   A61K 39/39 20060101ALI20240131BHJP

   A61K 9/107 20060101ALI20240131BHJP

   A61K 47/26 20060101ALI20240131BHJP

   A61K 47/06 20060101ALI20240131BHJP

   A61K 47/18 20170101ALI20240131BHJP

   A61P 11/00 20060101ALI20240131BHJP

   A61P 31/04 20060101ALI20240131BHJP

   A61P 37/04 20060101ALI20240131BHJP

【ＦＩ】

A61K39/09

A61K39/385

A61K39/39

A61K9/107

A61K47/26

A61K47/06

A61K47/18

A61P11/00

A61P31/04

A61P37/04

【審査請求】有

【予備審査請求】未請求

(21)【出願番号】P 2023547152

(86)(22)【出願日】2022-02-02

(85)【翻訳文提出日】2023-09-27

(86)【国際出願番号】 US2022014812

(87)【国際公開番号】W WO2022169789

(87)【国際公開日】2022-08-11

(31)【優先権主張番号】63/145,651

(32)【優先日】2021-02-04

(33)【優先権主張国・地域又は機関】US

(81)【指定国・地域】

【公序良俗違反の表示】

（特許庁注：以下のものは登録商標）

１．ＴＷＥＥＮ

２．ＴＲＩＴＯＮ

３．ＢＲＩＪ

４．ＳＰＡＮ

(71)【出願人】

【識別番号】522242018

【氏名又は名称】メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー

(74)【代理人】

【識別番号】100114188

【弁理士】

【氏名又は名称】小野 誠

(74)【代理人】

【識別番号】100119253

【弁理士】

【氏名又は名称】金山 賢教

(74)【代理人】

【識別番号】100124855

【弁理士】

【氏名又は名称】坪倉 道明

(74)【代理人】

【識別番号】100129713

【弁理士】

【氏名又は名称】重森 一輝

(74)【代理人】

【識別番号】100137213

【弁理士】

【氏名又は名称】安藤 健司

(74)【代理人】

【識別番号】100143823

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 英彦

(74)【代理人】

【識別番号】100183519

【弁理士】

【氏名又は名称】櫻田 芳恵

(74)【代理人】

【識別番号】100196483

【弁理士】

【氏名又は名称】川嵜 洋祐

(74)【代理人】

【識別番号】100160749

【弁理士】

【氏名又は名称】飯野 陽一

(74)【代理人】

【識別番号】100160255

【弁理士】

【氏名又は名称】市川 祐輔

(74)【代理人】

【識別番号】100146318

【弁理士】

【氏名又は名称】岩瀬 吉和

(74)【代理人】

【識別番号】100127812

【弁理士】

【氏名又は名称】城山 康文

(72)【発明者】

【氏名】スミス，ウィリアム・ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】アール，パトリック・エル．

(72)【発明者】

【氏名】スークップ，ランダル・ジェイ．

(72)【発明者】

【氏名】スキナー，ジュリー・エム．

【テーマコード（参考）】

4C076

4C085

【Ｆターム（参考）】

4C076AA17

4C076BB11

4C076BB15

4C076CC06

4C076DD08F

4C076DD09F

4C076DD15F

4C076DD23Z

4C076DD34F

4C076DD49F

4C076DD50Z

4C076DD51Z

4C076DD59F

4C076DD60Z

4C076DD63F

4C076DD67Z

4C076DD70F

4C076EE23F

4C076FF16

4C076FF43

4C076FF61

4C085AA03

4C085AA04

4C085AA38

4C085BA14

4C085BA38

4C085CC07

4C085CC21

4C085DD52

4C085DD86

4C085EE01

4C085EE03

4C085EE06

4C085FF12

4C085FF17

4C085GG01

4C085GG03

(57)【要約】

本発明は、全般的には、肺炎球菌疾患の予防に関する。より詳細には、本発明は、肺炎球菌コンジュゲートと安定ナノエマルション（ＳＮＥ）とを含む組成物に関する。
【選択図】図４

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲートと安定ナノエマルション（ＳＮＥ）とを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物であって、
前記ＳＮＥがソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを含む、組成物。

【請求項2】

前記ＳＮＥが６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む、請求項１記載の組成物。

【請求項3】

前記ＳＮＥがカチオン性脂質を更に含む、請求項１または２記載の組成物。

【請求項4】

前記カチオン性脂質が（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンである、請求項３記載の組成物。

【請求項5】

３０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質を含む、請求項３または４記載の組成物。

【請求項6】

前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲートのそれぞれが、特定のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型の多糖を含み、
前記ストレプトコッカス・ニューモニエ血清型が、血清型：
ａ）４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
ｂ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
ｃ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
ｄ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
ｅ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｆ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｇ）１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｈ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｉ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｊ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｋ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｌ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｍ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｎ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
ｏ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
ｐ）３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ
からなる群から選択される、請求項１～５のいずれか１項記載の組成物。

【請求項7】

前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項１～６のいずれか１項記載の組成物。

【請求項8】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項9】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ ９からなる、請求項７記載の組成物。

【請求項10】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項11】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項12】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項13】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項14】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項15】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる、請求項７記載の組成物。

【請求項16】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ ６からなる、請求項７記載の組成物。

【請求項17】

前記組成物における前記ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型が、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ ７からなる、請求項７記載の組成物。

【請求項18】

前記ＳＮＥがＰＳ－２０を含む、請求項１～１７のいずれか１項記載の組成物。

【請求項19】

ｐＨ５．１～７．０の５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１～１８のいずれか１項記載の組成物。

【請求項20】

ｐＨ約５．８の約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１～１８のいずれか１項記載の組成物。

【請求項21】

請求項１～２０のいずれか１項記載の組成物の免疫学的有効量を患者に投与することを含む、患者における肺炎球菌疾患の治療または予防方法。

【請求項22】

肺炎球菌疾患の治療または予防のための、請求項１～２０のいずれか１項記載の組成物の使用。

【発明の詳細な説明】

【技術分野】

【0001】

本発明は肺炎球菌コンジュゲート（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）ワクチン用のナノエマルションアジュバント組成物に関する。

【背景技術】

【0002】

肺炎球菌疾患は、細菌ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）（肺炎球菌）によって引き起こされる感染症である。肺炎球菌血清型は、それによって異なる疾患症状を引き起こすことが公知であり、感染は、耳および副鼻腔の感染から肺炎および血流感染まで、様々な症状を引き起こしうる。肺炎球菌疾患は、特に高齢者および小児の間で、世界中で高い関連罹患率および死亡率を示す。現在、１００個の莢膜多糖が特定されている（Ｇａｎａｉｅ，Ｆ．ら（２０２０）Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｅｐｉｄｅｍｉｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１１，Ｉｓｓｕｅ ３，ｐ．１－１５）。これらの血清型はそれらの化学構造、血清学的応答および他の関連遺伝的突然変異によって区別される。

【0003】

１９８３年に、２３価肺炎球菌ワクチンであるＰＮＥＵＭＯＶＡＸ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ．，ａ ｓｕｂｓｉｄｉａｒｙ ｏｆ Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ，ＵＳＡ）が米国で承認された。このワクチンはＴ細胞非依存的応答による乳児における免疫原性の低下を示した。特に乳児におけるこの問題に対処するために、多糖を担体タンパク質に共有結合させることにより、免疫原性応答がＴ細胞依存的となった肺炎球菌コンジュゲートワクチン（ＰＣＶ）が開発された。２０００年に、７価肺炎球菌コンジュゲートワクチンであるＰＲＥＶＮＡＲ（登録商標）（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＬＣ，Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ，ＰＡ）が米国で承認された。２０１０年に、１３価肺炎球菌コンジュゲートワクチンであるＰＲＥＶＮＡＲ１３（登録商標）（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＬＣ，Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ，ＰＡ）が米国で承認された。２０２１年に、１５価肺炎球菌コンジュゲートワクチンであるＶＡＸＮＥＵＶＡＮＣＥ（登録商標）（Ｍｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ．，ａ ｓｕｂｓｉｄｉａｒｙ ｏｆ Ｍｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．，Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ，ＵＳＡ）、および２０価肺炎球菌コンジュゲートワクチンであるＰＲＥＶＮＡＲ２０（登録商標）（Ｗｙｅｔｈ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ ＬＬＣ，Ｃｏｌｌｅｇｅｖｉｌｌｅ，ＰＡ）も米国で承認された。他の多価ＰＣＶも公知であり、世界中で認可されている。

【0004】

認可されたＰＣＶは、現在、免疫原性を増強するためのアジュバントとしてアルミニウム含有誘導体を利用している。アルミニウムアジュバントが免疫原性応答をベースラインから増強するとしても、免疫原性応答が、特に乳児においては、より高い価数のＰＣＶに十分であるかどうかは不明である。したがって、現在のアルミニウムアジュバント標準物と比較して、多価ＰＣＶの場合に免疫原性を増強しうる他のアジュバントを特定することが必要とされている。

【発明の概要】

【0005】

発明の概括
本発明は、全般的には、肺炎球菌疾患の予防に関する。より詳細には、本発明は、肺炎球菌コンジュゲートと安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント製剤とを含む、ワクチンとして投与される組成物に関する。本開示は、とりわけ、乳化剤および／または可溶化剤および／または界面活性剤および／または脂質を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、界面活性剤および／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタンエステルおよび／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタンエステル、特にポリソルベート－２０もしくはポリソルベート－８０またはポロクサマー、および／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタンエステル、特にポリソルベート－２０もしくはポリソルベート－８０またはポロクサマー、および／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０、テルペンおよび所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０、スクアレンおよび所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は、とりわけ、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０、スクアレンおよびカチオン性脂質を含むＳＮＥを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本開示は更に、とりわけ、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、３）スクアレン、および所望により使用されてもよい４）カチオン性脂質を含むＳＮＥアジュバント製剤を含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。特定の肺炎球菌コンジュゲート組成物は、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、３）スクアレン、および４）カチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（「ＣＬＡ」；またはＳＮＥ中にカチオン性脂質が含まれる場合には「ＣＬＡ－ＳＮＥ」）を含むＳＮＥアジュバント製剤を含む。特定の肺炎球菌コンジュゲート組成物は、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、３）スクアレン、および４）カチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（「ＣＬＡ」；またはＳＮＥ中にカチオン性脂質が含まれる場合には「ＣＬＡ－ＳＮＥ」）を含むＳＮＥアジュバント製剤を含む。特定の肺炎球菌コンジュゲート組成物は、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、３）スクアレン、および４）カチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（「ＣＬＡ」；またはＳＮＥ中にカチオン性脂質が含まれる場合には「ＣＬＡ－ＳＮＥ」）を含むＳＮＥアジュバント製剤を含む。特定の肺炎球菌コンジュゲート組成物は、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、３）スクアレン、および４）カチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（「ＣＬＡ」；またはＳＮＥ中にカチオン性脂質が含まれる場合には「ＣＬＡ－ＳＮＥ」）を含むＳＮＥアジュバント製剤を含む。１）アジュバント非含有肺炎球菌コンジュゲート組成物、２）リン酸アルミニウムアジュバント含有（ＡＰＡ）肺炎球菌コンジュゲート組成物、または３）ＬＮＰアジュバント含有肺炎球菌コンジュゲート組成物の性能と比較して、記載されているＳＮＥアジュバント肺炎球菌コンジュゲート組成物は、試験された肺炎球菌血清型の大部分に関して、同等のまたは増強した免疫原性応答をもたらした。

【図面の簡単な説明】

【0006】

【図1】カチオン性脂質の選択された構造：（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（ＣＬＡ）；（６Ｚ，９Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタトリアコンタ－６，９，２６，２９－テトラエン－１８－アミン（ＣＬＸ）；およびＮ，Ｎ－ジメチル－１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル）ヘプタデカン－８－アミン（ＣＬＹ）。

【図2】ＣＬＡ－ＳＮＥ成分：（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（ＣＬＡ）、ＳＰＡＮ－８５、ＰＳ－２０およびスクアレン。

【図3】静的光散乱（ＳＬＳ）を利用したＣＬＡ－ＳＮＥアジュバントバルク製剤の特徴付け。実施例３を参照されたい。

【図4】ＳＮＥ内へのＣＬＡの取り込みに対する製剤化プロセスの影響。実施例４を参照されたい。

【図5A】表４に記載されている製剤でマウスを免疫化した後の免疫化前（プール化）および第３投与後（第３５日）の抗６Ｂ ＩｇＧ力価。エラーバーは９５％信頼区間の幾何平均である。ダネット（Ｄｕｎｎｅｔｔ）事後検定での一元配置分散分析によって分析された変換データ。^＊ｐ＜０．０５、^＊＊ｐ＜０．０１、^＊＊＊ｐ＜０．００１、^＊＊＊＊ｐ＜０．０００１。ＮＳは有意ではない。実施例６を参照されたい。

【図5B】表４に記載されている製剤で免疫化したマウスの免疫化前（プール化）および第３投与後（第３５日）（プール化）の血清型６Ｂオプソニン貪食殺滅力価。実施例６を参照されたい。

【図6A】第１投与後（ＰＤ１：丸）および第２投与後（ＰＤ２：四角）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較した場合の、ＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２４での免疫化の後の成体アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２００μｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ）を配合したＰＣＶ２４は、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例７を参照されたい。

【図6B】第２投与後（ＰＤ２）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較した場合の、表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。ＣＬＡ－ＳＮＥ（丸および三角）、ＣＬＡ－ＬＮＰ（四角）またはＳＮＥ（菱形）を配合したＰＣＶ２４は、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例７を参照されたい。

【図7A】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１および３に関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7B】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（個別／プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型４および５に関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7C】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型６Ａおよび６Ｂに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7D】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型６Ｃおよび７Ｆに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7E】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型８および９Ｖに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7F】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１０Ａおよび１１Ａに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7G】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１２Ｆおよび１４に関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7H】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１５Ａおよび１５Ｃに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7I】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１８Ｃおよび１９Ａに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7J】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルにおける免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型１９Ｆおよび２２Ｆに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7K】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルの免疫化前（プール化／個別）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型２３Ｂおよび２３Ｆに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7L】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルにおける免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型２４Ｆおよび３３Ｆに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図7M】表５に記載されている製剤による免疫化の後の成体アカゲザルにおける免疫化前（プール化）、第１投与後（第１４日）および第２投与後（第４２日）のオプソニン貪食殺滅力価。投与された用量体積は動物当たり０．１ｍＬであり、群ＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（８０μｇ）およびＰＣＶ２４／ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２０μｇ）では、それぞれ０．０８ｍｇまたは０．１２ｍｇのＣＬＡ送達用量をもたらす。血清型３５Ｂに関して多重オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された機能的抗体に関してアカゲザル血清を評価した。実施例７を参照されたい。

【図8A】第２投与後（第４２日）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４の免疫化と比較した場合の、ＰＣＶ１３、ＣＬＡ－ＬＮＰを含有するＰＣＶ２４（１２０μｇ用量）、ＣＬＡ－ＳＮＥを含有するＰＣＶ２４（２９５μｇ ＣＬＡおよび２．５ｍｇ スクアレン）、ＣＬＡ－ＳＮＥを含有するＰＣＶ２４（２９５μｇ ＣＬＡおよび０．５ｍｇ スクアレン）による免疫化の後の乳児アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例８を参照されたい。

【図8B】第１投与後（第１４日）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較した場合の、表６に記載されている選択された製剤による免疫化の後の乳児アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例８を参照されたい。

【図8C】第２投与後（第４２日）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較した場合の、表６に記載されている選択された製剤による免疫化の後の乳児アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例８を参照されたい。

【図8D】第３投与後（第７０日）における、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較した場合の、表６に記載されている選択された製剤による免疫化の後の乳児アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例８を参照されたい。

【図9】製剤組成物（ＣＬＡ－ＳＮＥ、ＣＬＡ－ＬＮＰおよびＳＮＥ）を使用した場合のＰＣＶ２４免疫化マウスは肺炎球菌血清型２４Ｆ気管内チャレンジから防御される。実施例９を参照されたい。

【図10A】図１０Ａ～１０Ｄ：４℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤のナノトラッキング（ナノ粒子追跡）分析（ＮＴＡ）（図１０Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｂ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｃ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１０Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図10B】図１０Ａ～１０Ｄ：４℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤のナノトラッキング（ナノ粒子追跡）分析（ＮＴＡ）（図１０Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｂ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｃ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１０Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図10C】図１０Ａ～１０Ｄ：４℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤のナノトラッキング（ナノ粒子追跡）分析（ＮＴＡ）（図１０Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｂ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｃ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１０Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図10D】図１０Ａ～１０Ｄ：４℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤のナノトラッキング（ナノ粒子追跡）分析（ＮＴＡ）（図１０Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｂ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１０Ｃ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１０Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図11A】図１１Ａ～１１Ｄ：４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤の動的光散乱（ＤＬＳ）（図１１Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｂ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｃ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１１Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図11B】図１１Ａ～１１Ｄ：４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤の動的光散乱（ＤＬＳ）（図１１Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｂ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｃ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１１Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図11C】図１１Ａ～１１Ｄ：４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤の動的光散乱（ＤＬＳ）（図１１Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｂ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｃ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１１Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図11D】図１１Ａ～１１Ｄ：４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤の動的光散乱（ＤＬＳ）（図１１Ａ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［６ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび３０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｂ：ＣＬＡ－ＳＮＥ［４ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡおよび４ｍｇ／ｍＬ スクアレン］、図１１Ｃ：ＳＮＥ［４０ｍｇ／ｍＬ スクアレン］および図１１Ｄ：ＳＮＥ［８ｍｇ／ｍＬ スクアレン］）。実施例１０を参照されたい。

【図12A】４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤に関してＵＰＬＣ－ＣＡＤによって測定されたＣＬＡ濃度（ｍｇ／ｍＬ）。実施例１１を参照されたい。

【図12B】４℃、２５℃および３７℃で１か月間貯蔵されたＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥ製剤に関してＵＰＬＣ－ＣＡＤによって測定されたスクアレン濃度（ｍｇ／ｍＬ）。実施例１１を参照されたい。

【図13A】ＣＬＡ－ＳＮＥ（１．２ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡ、６．５ｍｇ／ｍＬ スクアレン）を使用して製造され、４℃で１か月間貯蔵された肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲート共製剤の血清型特異的安定性。実施例１２を参照されたい。

【図13B】ＣＬＡ－ＳＮＥ（１．２ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡ、１．２ｍｇ／ｍＬ スクアレン）を使用して製造され、４℃で最長１か月間貯蔵された肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲート共製剤の血清型特異的安定性。実施例１２を参照されたい。

【図13C】ＳＮＥ（６．５ｍｇ／ｍＬ スクアレン）を使用して製造され、４℃で１か月間貯蔵された肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲート共製剤の血清型特異的安定性。実施例１２を参照されたい。

【図13D】ＳＮＥ（０．４ｍｇ／ｍＬ スクアレン）を使用して製造され、４℃で１か月間貯蔵された肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲート共製剤の血清型特異的安定性。実施例１２を参照されたい。

【図14A】第１投与後（第１４日）［Ｄ１４ＰＤ１と称される：四角］における、ＰＣＶ２１（アジュバント無し）と比較した場合の、ＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２１による免疫化の後の成体アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２００μｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ）を配合したＰＣＶ２１（ＳＴ当たり４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量は、Ｄ１４ＰＤ１において、ＰＣＶ２１（ＳＴ当たり４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例１３を参照されたい。

【図14B】第１投与後（第２８日）［Ｄ２８ＰＤ１と称される：四角］における、ＰＣＶ２１（アジュバント無し）と比較した場合の、ＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２１による免疫化の後の成体アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２００μｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ）を配合したＰＣＶ２１（ＳＴ当たり４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量は、Ｄ２８ＰＤ１において、ＰＣＶ２１（ＳＴ当たり４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例１３を参照されたい。

【図14C】第２投与後（第４２日）［Ｄ４２ＰＤ２と称される：四角］における、ＰＣＶ２１（アジュバント無し）と比較した場合の、ＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２１による免疫化の後の成体アカゲザルにおける血清型特異的ＩｇＧ力価の比。ＣＬＡ－ＳＮＥ（１２００μｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ）を配合したＰＣＶ２１（ＳＴ当たり４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量は、Ｄ４２ＰＤ２において、ＰＣＶ２１（４μｇ／ｍＬ）の０．２５ｍＬ用量と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。交差反応性を評価するために、血清型６Ｃおよび１５Ｂのデータが含まれている。実施例１３を参照されたい。

【図15A】透析後のＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％が自己集合前の「標的」（ｗ／ｗ）％に対してプロットされている。ＣＬＡ／スクアレンｗ／ｗ％比（Ｘ）を自己集合およびナノエマルション透析の前および後に逆相ＵＰＬＣ－ＣＡＤによって測定した。実施例１４を参照されたい。

【図15B】透析後のＣＬＡ－ＳＮＥナノ粒子の測定強度加重Ｚ平均ＤＬＳ直径（Ｘ）が、ＭＮＳ製剤のそれぞれに関して、透析後の測定ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％に対してプロットされている。実施例１４を参照されたい。

【図15C】ｐＨ５．５における透析後のＣＬＡ－ＳＮＥスクアレンナノ粒子（Ｘ）の測定されたゼータ電位が、ＭＮＳ調製製剤のそれぞれに関して、透析後の測定ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％に対してプロットされている。実施例１４を参照されたい。

【図16】形成され漸増ｐＨ値の水相（２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン）で処理されたＣＬＡ－ＳＮＥサンプルのＤＬＳ Ｚ平均直径。実施例１５を参照されたい。

【図17】形成され漸増ｐＨ値の水相（２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン）で処理されたＣＬＡ－ＳＮＥサンプルの最終［ＣＬＡ］（ｍｇ／ｍＬ）。実施例１５を参照されたい。

【0007】

発明の詳細な説明
驚くべきことに、安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント製剤（カチオン性脂質の存在下または非存在下）を含む肺炎球菌コンジュゲート組成物が、アルミニウムアジュバントを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物および／またはＬＮＰアジュバントを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物と比較して同等の又は増強した免疫原性応答をもたらすことが見出された。

【0008】

本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲートと安定ナノエマルション（ＳＮＥ）とを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0009】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートおよびＳＮＥならびに薬学的に許容される担体を含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0010】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、乳化剤および／または可溶化剤および／または界面活性剤および所望により使用されてもよいカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0011】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、界面活性剤および／またはテルペンまたはそれらの混合物を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0012】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、界面活性剤および／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0013】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１以上の界面活性剤および１以上のテルペンおよび所望により使用されてもよい１以上のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0014】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１～３個の界面活性剤および１～３個のテルペンおよび所望により使用されてもよい１～３個のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0015】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１～２個の界面活性剤および１～２個のテルペンおよび所望により使用されてもよい１～２個のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0016】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレンおよび所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含む。

【0017】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、スクアレンおよび所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含む。

【0018】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレンおよびカチオン性脂質を含む。

【0019】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、スクアレンおよびカチオン性脂質を含む。

【0020】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレンおよびカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンを含む。

【0021】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ＳＮＥはソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、スクアレンおよびカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンを含む。

【0022】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。幾つかの実施形態においては、肺炎球菌コンジュゲートワクチンはカチオン性脂質を含有しない。

【0023】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。幾つかの実施形態においては、肺炎球菌コンジュゲートワクチンはカチオン性脂質を含有しない。

【0024】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。

【0025】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。

【0026】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンを含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。

【0027】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンを含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供する。

【0028】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供し、ここで、カチオン性脂質は脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と会合していない。

【0029】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲートワクチンを提供し、ここで、カチオン性脂質は脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と会合していない。

【0030】

本発明は更に、薬学的に許容される担体を含む前記の肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0031】

１つの実施形態においては、組成物はカチオン性脂質ＣＬＡ、ＣＬＸまたはＣＬＹを含む。

【0032】

１つの実施形態においては、組成物はカチオン性脂質ＣＬＡを含む。

【0033】

１つの実施形態においては、組成物は、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ、ＣＬｉｎＤＭＡおよびＳ－オクチルＣＬｉｎＤＭＡから選択されるカチオン性脂質を含む。

【0034】

１つの実施形態においては、組成物におけるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートのそれぞれは、特定のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型の多糖を含み、ここで、コンジュゲートにおける多糖は、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０、２０Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆおよび３８（これらに限定されるものではない）を含む任意の公知血清型から選択される１以上の血清型を含む。もう１つの実施形態においては、血清型は４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。

【0035】

１つの実施形態においては、多糖－担体タンパク質コンジュゲートは、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０（２０Ａおよび２０Ｂ）、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆまたは３８からなる肺炎球菌血清型の群から選択される多糖を含む。もう１つの実施形態においては、血清型の群は４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0036】

１つの実施形態においては、本発明は、７つの異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されている安定ナノエマルション（ＳＮＥ）のいずれかとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなる。

【0037】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなる。

【0038】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる。

【0039】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなる。

【0040】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆからなる。、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0041】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0042】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0043】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0044】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0045】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、本明細書に記載されているＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなる。

【0046】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化（結合）されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0047】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0048】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0049】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0050】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0051】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0052】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0053】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0054】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0055】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0056】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0057】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0058】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0059】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0060】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0061】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0062】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0063】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0064】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0065】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0066】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0067】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0068】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0069】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0070】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0071】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0072】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0073】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0074】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0075】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0076】

前記組成物の１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－２０を含む。前記組成物のもう１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－８０を含む。

【0077】

前記組成物の１つの実施形態においては、組成物は、いずれかの他のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型の多糖を含有する多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含まない。

【0078】

本発明の組成物の１つの実施形態においては、担体タンパク質は、ＯＭＰＣ、ＰｈｔＤ、ｐＬｙｓ、ＤＴ（ジフテリアトキソイド）、ＴＴ（破傷風トキソイド）、ＴＴの断片Ｃ、百日咳トキソイド、コレラトキソイドおよびＣＲＭ１９７から選択される。もう１つの実施形態においては、担体タンパク質はＣＲＭ１９７である。

【0079】

本発明は、ｐＨ５．１～７．０における５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0080】

本発明は、ｐＨ約５．８における約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0081】

本発明は、ｐＨ５．８における２０ｍＭのヒスチジンおよび７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0082】

本発明は、ｐＨ５．１～７．０における５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジン、０．０１２５％～０．２％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０および２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0083】

本発明は、ｐＨ約５．８における約２０ｍＭのヒスチジン、０．０５％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０および約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0084】

本発明は、ｐＨ５．８における２０ｍＭのヒスチジン、０．０５％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０および７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む前記組成物を提供する。

【0085】

本発明はまた、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物の製造方法を提供する。

【0086】

本発明はまた、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物の製造方法を提供する。

【0087】

本発明はまた、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物の製造方法を提供する。

【0088】

本発明はまた、本発明の肺炎球菌コンジュゲート組成物を使用する、肺炎球菌疾患の治療または予防方法を提供する。

【0089】

本発明はまた、肺炎球菌疾患の治療または予防のための、本発明の肺炎球菌コンジュゲート組成物の使用を提供する。

【0090】

定義
本明細書の全体および添付の特許請求の範囲において用いる単数形は、文脈に明らかに矛盾しない限り、その複数対象物を含む。

【0091】

本明細書および添付の特許請求の範囲の全体において、以下の略語が適用される。
ＡＰＡ リン酸アルミニウムアジュバント
ＣＬＡ （（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン）
ＤＭＳＯ ジメチルスルホキシド
ＥＣＬ 電気化学発光
ＧＭＴ 幾何平均力価
ＨＰＳＥＣ 高性能サイズ排除クロマトグラフィー
ＩＤ 皮内
ＩＭ 筋肉
ＬＮＰ 脂質ナノ粒子
ＬＯＳ リポオリゴ糖
ＬＰＳ リポ多糖
ＭＥ マイクロエマルション
ＭＮＳ マイクロ流体ナノエマルション自己集合
Ｍｗ 分子量
ＮＥ ナノエマルション
ＮＭＷＣＯ 公称分子量カットオフ
ＯＰＡ オプソニン貪食アッセイ
ＰＣＶ 肺炎球菌コンジュゲートワクチン
ＰＤ１ 第１投与後
ＰＤ２ 第２投与後
ＰＤ３ 第３投与後
ＰＨＥ ホモジナイズ前エマルション
ＰｎＰｓ 肺炎球菌多糖
Ｐｓ 多糖
ＰＳ－２０ ポリソルベート－２０
ＰＳ－８０ ポリソルベート－８０
ＳＮＥ 安定ナノエマルション
ＳＰＡＮ－８５ ソルビタントリオレアート
ＳＴ６ＢまたはＳＴ－６Ｂ 血清型６Ｂ
ｗ／ｖ 体積当たりの重量

【0092】

本明細書中で値に関して用いる「約」なる語は、参照値と同じである値、または参照値に文脈上類似している値に関するものである。一般に、その状況（文脈）に精通している当業者は、その状況における「約」に含まれる差の絶対量および／または相対的度合を理解するであろう。例えば、幾つかの実施形態においては、「約」なる語は参照値の２５％以内、２０％以内、１９％以内、１８％以内、１７％以内、１６％以内、１５％以内、１４％以内、１３％以内、１２％以内、１１％以内、１０％以内、９％以内、８％以内、７％以内、６％以内、５％以内、４％以内、３％以内、２％以内、１％以内または１％未満以内の値の範囲を含みうる。

【0093】

本明細書中で用いる「アルケニル」なる語は、特定されている数の炭素原子を有する直鎖状、環状または分枝状の不飽和脂肪族炭化水素を意味する。１つの実施形態においては、アルケニル基は、８～２４個の炭素原子を含有する（Ｃ_８－Ｃ_２４アルケニル）。１つの実施形態においては、アルケニル基は直鎖状である。もう１つの実施形態においては、アルケニル基は分枝状である。もう１つの実施形態においては、アルケニル基は置換されていない。

【0094】

本明細書中で用いる「アルキル」なる語は、特定されている数の炭素原子を有する直鎖状、環状または分枝状の飽和脂肪族炭化水素を意味する。１つの実施形態においては、アルキル基は８～２４個の炭素原子を含有する（Ｃ_８－Ｃ_２４アルキル）。１つの実施形態においては、アルキル基は直鎖状である。もう１つの実施形態においては、アルキル基は分枝状である。もう１つの実施形態においては、アルキル基は置換されていない。

【0095】

本明細書中で定義される「アジュバント」は、本発明の免疫原性組成物の免疫原性を増強する（例えば、増加させる、加速する、延長させる、または調節する）のに役立つ物質である。本明細書に開示されているとおり、ＳＮＥは本発明に従うアジュバントとして使用されるべきである。アジュバントは、単独で投与された場合に弱免疫原性である（例えば、抗体価または細胞性免疫応答を全く又は弱くしか誘導しない）抗原に対する免疫応答を増強し、抗原に対する抗体価を増加させ、および／または個体における免疫応答を達成するのに有効な抗原の用量を減少させうる。本明細書中で用いる場合、「アジュバント添加組成物」は、アジュバントを含む組成物である。

【0096】

本明細書中で用いる「投与」なる語は、活性な物質、組成物または製剤を対象に供与する行為を意味する。人体への例示的な投与経路は、目（眼）、口（経口）、皮膚（経皮）、鼻（鼻腔内）、肺（吸入）、直腸、膣、口腔粘膜（頬）、耳、注射［例えば、静脈内（ＩＶ）、皮下、腫瘍内、腹腔内、筋肉内（ＩＭ）、皮内（ＩＤ）など］などを介したものでありうる。

【0097】

「抗原」なる語は、１以上の免疫応答をもたらしうる任意の抗原を意味する。抗原はタンパク質（組換えタンパク質を含む）、ポリペプチドまたはペプチド（合成ペプチドを含む）でありうる。特定の実施形態においては、抗原は脂質または炭水化物（多糖）である。特定の実施形態においては、抗原はタンパク質抽出物、細胞（腫瘍細胞を含む）または組織である。抗原は、体液性免疫応答および／またはＣＴＬ免疫応答をもたらす抗原でありうる。本発明の抗原はストレプトコッカス・ニューモニエ多糖である。

【0098】

「カチオン性脂質」なる語は、生理的ｐＨのような選択されたｐＨにおいて正味の正電荷を有する脂質種を意味する。カチオン性脂質は多成分ＳＮＥアジュバント製剤における成分として利用されうる。カチオン性脂質には、以下のものに開示されているもの（それらに限定されるものではない）が含まれうる、と当業者は認識するであろう：米国特許出願公開番号ＵＳ２００８／００８５８７０、ＵＳ２００８／００５７０８０、ＵＳ２００９／０２６３４０７、ＵＳ２００９／０２８５８８１、ＵＳ２０１０／００５５１６８、ＵＳ２０１０／００５５１６９、ＵＳ２０１０／００６３１３５、ＵＳ２０１０／００７６０５５、ＵＳ２０１０／００９９７３８、ＵＳ２０１０／０１０４６２９、ＵＳ２０１３／００１７２３９およびＵＳ２０１６／０３６１４１１、国際出願公開番号ＷＯ２０１１／０２２４６０、ＷＯ２０１２／０４０１８４、ＷＯ２０１１／０７６８０７、ＷＯ２０１０／０２１８６５、ＷＯ２００９／１３２１３１、ＷＯ２０１０／０４２８７７、ＷＯ２０１０／１４６７４０およびＷＯ２０１０／１０５２０９、ならびに米国特許番号ＵＳ５，２０８，０３６、ＵＳ５，２６４，６１８、ＵＳ５，２７９，８３３、ＵＳ５，２８３，１８５、ＵＳ６，８９０，５５７およびＵＳ９，６６９，０９７。

【0099】

本明細書中で用いる「組成物」なる語は、活性な医薬成分または生物学的成分（例えば、肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートおよびＳＮＥ）を、１以上の追加的な成分と共に含有する製剤を意味する。「組成物」なる語は「医薬組成物」および「製剤」と互換的に用いられる。組成物は液体または固体（例えば凍結乾燥物）でありうる。必要に応じて含まれうる追加的な成分には、薬学的に許容される賦形剤、添加剤、希釈剤、バッファー、糖、アミノ酸、キレート剤、界面活性剤、ポリオール、増量剤、安定剤、凍結乾燥保護剤（ｌｙｏ－ｐｒｏｔｅｃｔａｎｔ）、可溶化剤、乳化剤、塩、アジュバント、張性増強剤、運搬（送達）ビヒクルおよび抗微生物保存剤が含まれる。組成物は、使用される用量および濃度において被投与者に対して無毒性である。

【0100】

本発明の組成物に関して用いられた場合の「含む」なる語は、アジュバントおよび賦形剤のような任意の他の成分の包含、または具体的に挙げられていない１以上の多糖－担体タンパク質コンジュゲートの添加を意味する。

【0101】

多価多糖－担体タンパク質コンジュゲート製剤に関して用いられた場合の「からなる」または「からなり」なる語は、それらの特定のストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含有し、異なる血清型に由来する他のストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含有しない製剤に関するものである。

【0102】

「から実質的になる」およびその派生語、例えば「から実質的になり」または「から実質的になって」は、列挙されている任意の要素または要素群の包含、および列挙要素と類似した又は異なる性質の他の要素であって、特定されている投与レジメン、方法または組成物の基本的または新規特性を実質的に変化させない要素の随意的包含（すなわち、包含されていても包含されていなくてもよい）を示す。

【0103】

本明細書中で用いる「脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ」または「脱Ｏ－アセチル－１５Ｂ」または「脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ」は、Ｏ－アセチル含量が反復単位当たり５％未満である脱Ｏ－アセチル化血清型１５Ｂを意味する。もう１つの実施形態においては、Ｏ－アセチル含量は反復単位当たり１％未満である。もう１つの実施形態においては、Ｏ－アセチル含量は反復単位当たり０．５％未満である。もう１つの実施形態においては、Ｏ－アセチル含量は反復単位当たり０．１％未満である。脱Ｏ－アセチル化のための方法は当技術分野で公知であり、例えば、Ｒａｊａｍら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００７，１４（９）：１２２３－１２２７に記載されている。

【0104】

本明細書中で用いる「用量」なる語は、特定の時間において摂取される又は摂取されることが推奨される物質、ＡＰＩ（活性医薬成分）、製剤または組成物の量を意味する。

【0105】

本明細書中で用いる「免疫原性である」または「免疫原性」なる語は、抗原が対象において免疫応答を誘発しうることを意味する。「免疫原性組成物」なる語は、対象において免疫応答を誘発しうる物質、ＡＰＩ、製剤または組成物を意味する。本発明の肺炎球菌コンジュゲート組成物は免疫原性組成物である。

【0106】

「治療を要する」者には、以前にストレプトコッカス・ニューモニエに曝露または感染した者、以前にストレプトコッカス・ニューモニエに対してワクチン接種された者、および感染しやすい者、または感染可能性の低減が望ましい任意の者、例えば免疫不全者、高齢者、小児、成人または健常個体が含まれる。

【0107】

「肺炎球菌疾患の予防に適応となる」なる句は、肺炎球菌疾患全般、肺炎球菌肺炎、肺炎球菌髄膜炎、肺炎球菌性菌血症、ストレプトコッカス・ニューモニエにより引き起こされる侵襲性疾患およびストレプトコッカス・ニューモニエにより引き起こされる中耳炎（これらに限定されるものではない）を含むストレプトコッカス・ニューモニエの任意の血清型により引き起こされる１以上の疾患の予防に関して、ワクチンまたは組成物が米国食品医薬品局（ＵＳ Ｆｏｏｄ ａｎｄ Ｄｒｕｇ Ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ）のような１以上の規制当局により承認されることを意味する。

【0108】

本明細書中で用いる「脂質」なる語は、水に不溶性である又は低い水溶性を示すが多数の有機溶媒に可溶性でありうることにより特徴づけられる、脂肪酸のエステルである有機化合物の群のいずれかを意味する。脂質は以下の少なくとも３つのクラスに分類されうる：（１）「単純脂質」：これには、脂肪および油、およびワックスが含まれる；（２）「複合脂質」：これには、例えばリン脂質および糖脂質が含まれる；ならびに（３）「誘導脂質」：これには、例えばステロイドが含まれる。

【0109】

本明細書中で用いる「脂質ナノ粒子」（または「ＬＮＰ」）なる語は、複数のクラスおよび／またはタイプの脂質を含む、１０～１０００ナノメートルの長さまたは幅の寸法（例えば、最大の長さまたは幅の寸法）を有する粒子を形成する脂質組成物を意味する。例えば、本発明によれば、脂質ナノ粒子はカチオン性脂質のみから構成されることはない。

【0110】

本明細書中で用いる「中性脂質」なる語は、選択されたｐＨにおいて非荷電または中性両性イオン形態で存在する脂質種を意味する。生理学的ｐＨでは、そのような脂質には、例えば、ジアシルホスファチジルコリン、ジアシルホスファチジルエタノールアミン、セラミド、スフィンゴミエリン、セファリン、コレステロール、セレブロシドおよびジアシルグリセロールが含まれる。

【0111】

「患者」（あるいは、本明細書においては「対象」とも称される）は、ストレプトコッカス・ニューモニエに感染しうる哺乳動物を意味する。好ましい実施形態においては、患者はヒトである。患者は予防的または治療的に治療されうる。予防的治療は、肺炎球菌疾患またはその影響、例えば肺炎球菌肺炎の可能性または重症度を低下させるのに十分な防御免疫をもたらす。ストレプトコッカス・ニューモニエ感染またはその臨床効果の重症度を低減し、または再発を予防するために、治療的治療が行われうる。予防的治療は、本明細書に記載されているとおり、本発明の肺炎球菌コンジュゲート組成物を使用して行われうる。本発明の肺炎球菌コンジュゲート組成物またはワクチンは、一般集団、または肺炎球菌感染の高リスク者、例えば高齢者または高齢者と同居している若しくは高齢者の世話をしている者に投与されうる。

【0112】

本明細書中で用いる「ＰＣＶ１」は、担体タンパク質にコンジュゲート化（結合）されたストレプトコッカス・ニューモニエ血清型由来の莢膜多糖を含む１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む１価肺炎球菌コンジュゲートワクチンまたは組成物を意味する。特定の実施形態においては、担体タンパク質はＣＲＭ１９７である。

【0113】

本明細書中で用いる「ＰＣＶ１３」は、担体タンパク質にコンジュゲート化されたストレプトコッカス・ニューモニエ血清型由来の莢膜多糖をそれぞれが含む１３個のストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む１３価肺炎球菌コンジュゲートワクチンまたは組成物を意味し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエの血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆである。特定の実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートのそれぞれの担体タンパク質はＣＲＭ１９７である。

【0114】

本明細書中で用いる「ＰＣＶ２１」は、本明細書中で用いる場合、担体タンパク質にコンジュゲート化されたストレプトコッカス・ニューモニエ血清型由来の莢膜多糖をそれぞれが含む２０個のストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む２１価肺炎球菌コンジュゲートワクチンまたは組成物を意味し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエの血清型は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ、ならびに以下の血清群１５血清型、すなわち、１５Ｂ、１５Ｃまたは脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂの１つである。特定の実施形態においては、血清群１５血清型は血清型１５Ｃまたは脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂである。もう１つの実施形態においては、血清型１５血清型は血清型脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂである。特定の実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートの１以上の、担体タンパク質は、ＣＲＭ１９７である。他の実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートのそれぞれの、担体タンパク質は、ＣＲＭ１９７である。

【0115】

本明細書中で用いる「ＰＣＶ２４」は、本明細書中で用いる場合、担体タンパク質にコンジュゲート化されたストレプトコッカス・ニューモニエ血清型由来の莢膜多糖をそれぞれが含む２３個のストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む２４価肺炎球菌コンジュゲートワクチンまたは組成物を意味し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエの血清型は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ、ならびに以下の血清群１５血清型、すなわち、１５Ｂ、１５Ｃまたは脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂの１つである。特定の実施形態においては、血清群１５血清型は血清型１５Ｃまたは脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂである。もう１つの実施形態においては、血清型１５血清型は血清型脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂである。特定の実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートの１以上の、担体タンパク質は、ＣＲＭ１９７である。他の実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートのそれぞれの、担体タンパク質は、ＣＲＭ１９７である。

【0116】

医薬組成物の担体、希釈剤または賦形剤に関して、「薬学的に許容される」なる語は、担体、希釈剤または賦形剤が組成物のその他の成分と適合性であり、その被投与者に有害でないことを要することを示す。

【0117】

本明細書中で用いる「肺炎球菌コンジュゲート」または「肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲート」なる語はストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを意味する。

【0118】

本明細書中で用いる「肺炎球菌コンジュゲートワクチン」（または「ＰＣＶ」）なる語は、ストレプトコッカス・ニューモニエの血清型によって引き起こされる疾患または病理学的状態に対する能動免疫をもたらす肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む医薬製剤または組成物である。

【0119】

本明細書中で用いる「安定ナノエマルション」または「ＳＮＥ」なる語は、肺炎球菌コンジュゲートワクチンにおいてアジュバント特性を有する乳化剤および／または可溶化剤および／または界面活性剤および／または脂質の製剤を意味する。特に、ＳＮＥは、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、３）スクアレン、および所望により使用されてもよい４）カチオン性脂質を含むＳＮＥアジュバント製剤を意味する。

【0120】

「界面活性剤」は多成分ＳＮＥアジュバント製剤における安定化成分であり、以下のものを包含する：ポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤（一般にＴｗｅｅｎ、特にＰＳ－２０およびＰＳ－８０と称される）、エチレンオキシド（ＥＯ）、プロピレンオキシド（ＰＯ）および／またはブチレンオキシド（ＢＯ）のコポリマーであってＤＯＷＦＡＸ（商標）なる商品名で販売されているもの、例えば線状ＥＯ／ＰＯブロックコポリマー（ポロキサマー）；反復エトキシ（オキシ－１，２－エタンジイル）基の数が様々でありうるオクトキシノール［オクトキシノール－９（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００またはｔ－オクチルフェノキシポリエトキシエタノール）に特に関心が持たれる］；（オクチルフェノキシ）ポリエトキシエタノール（ＩＧＥＰＡＬ ＣＡ－６３０／ＮＰ－４０）；ノニルフェノールエトキシラート、例えばＴｅｒｇｉｔｏｌ（商標）ＮＰシリーズ；ラウリル、セチル、ステアリルおよびオレイルアルコールから誘導されるポリオキシエチレン脂肪エーテル（Ｂｒｉｊ界面活性剤として公知である）、例えばトリエチレングリコールモノラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ３０）；ならびにソルビタンエステル（一般にＳＰＡＮとして公知である）、例えばソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ－８５、Ｔｗｅｅｎ－８５または［２－［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－［（Ｚ）－オクタデカ－９－エノイル］オキシオキソラン－２－イル］－２－［（Ｚ）－オクタデカ－９－エノイル］オキシエチル］（Ｚ）－オクタデカ－９－エノアート）およびソルビタンモノラウラート。１つの実施形態においては、界面活性剤はソルビタンエステルおよびポロキサマーである。１つの実施形態においては、界面活性剤はポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）およびポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）である。

【0121】

「テルペン」は多成分ＳＮＥアジュバント製剤における安定化成分であり、以下のもの（それらに限定されるものではない）を包含する：モノテルペン、例えばゲラニオール、テルピネオール、リモネン、ミルセン、リナロオールおよびピネン；セスキテルペン、例えばフムレン、ファルネセンおよびファルネソール；ジテルペン、例えばカフェストール、カーウェオール、センブレンおよびタキサジエン；トリテルペン、例えばスクアレンおよびスクアランテ；テトラテルペン、例えば非環式リコピン、単環式ガンマ－カロテン、二環式アルファ－およびベータ－カロテン；ポリテルピンおよびノリソプレドイド。１つの実施形態においては、テルペンはスクアレンである。

【0122】

「治療的有効量」なる語は、ヒトまたは動物において所望の治療効果を生み出すのに十分な組成物またはワクチンの量、例えば、免疫応答を誘発し、疾患またはその症状を治療し、治癒させ、予防し、または疾患もしくはその症状の発生および進行を抑制するのに必要な量、ならびに／または疾患の症状を改善し、もしくは疾患の退縮を引き起こすのに必要な量を意味する。当業者は所与の組成物またはワクチンの治療的有効量を容易に決定しうる。

【0123】

本明細書中で用いる「価」なる語は組成物における特定されている数の多糖－担体タンパク質コンジュゲートの存在を意味する。

【0124】

本明細書中で用いる「ワクチン」または「ワクチン組成物」なる語は、抗体の産生を刺激し、感染症に対する免疫をもたらすために使用される生物学的製剤を意味する。

【0125】

カチオン性脂質
カチオン性脂質およびカチオン性脂質の製造方法は当技術分野で周知である。

【0126】

幾つかの実施形態においては、カチオン性脂質には、以下のものに記載されている任意のカチオン性脂質が含まれる：米国特許出願公開番号ＵＳ ２００８／００８５８７０、ＵＳ ２００８／００５７０８０、ＵＳ ２００９／０２６３４０７、ＵＳ ２００９／０２８５８８１、ＵＳ ２０１０／００５５１６８、ＵＳ ２０１０／００５５１６９、ＵＳ ２０１０／００６３１３５、ＵＳ ２０１０／００７６０５５、ＵＳ ２０１０／００９９７３８、ＵＳ ２０１０／０１０４６２９、ＵＳ ２０１３／００１７２３９およびＵＳ ２０１６／０３６１４１１、国際特許出願公開番号ＷＯ２０１１／０２２４６０ Ａ１；ＷＯ２０１２／０４０１８４、ＷＯ２０１１／０７６８０７、ＷＯ２０１０／０２１８６５、ＷＯ２００９／１３２１３１、ＷＯ２０１０／０４２８７７、ＷＯ２０１０／１４６７４０、ＷＯ２０１０／１０５２０９、ならびに米国特許第５，２０８，０３６号、第５，２６４，６１８号、第５，２７９，８３３号、第５，２８３，１８５号、第６，８９０，５５７号および第９，６６９，０９７号。

【0127】

幾つかの実施形態においては、本発明のカチオン性脂質は、以下の式１：

【化1】

（式中、
Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれメチルである；
Ｒ^３はＨである；
ｎは１または２である；
Ｌ_１はＣ_８－Ｃ_２４アルキルおよびＣ_８－Ｃ_２４アルケニルから選択される；ならびに
Ｌ_２はＣ_４－Ｃ_９アルキルおよびＣ_４－Ｃ_９アルケニルから選択される）
またはその任意の薬学的に許容される塩もしくは立体異性体によって示される構造を有する。

【0128】

カチオン性脂質はアミノアルキル脂質でありうる。

【0129】

カチオン性脂質は不斉アミノアルキル脂質でありうる。

【0130】

本発明の１つの実施形態においては、カチオン性脂質は（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（ＣＬＡ）、または（６Ｚ，９Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタトリアコンタ－６，９，２６，２９－テトラエン－１８－アミン（ＣＬＸ）、またはＮ，Ｎ－ジメチル－１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル）ヘプタデカン－８－アミン（ＣＬＹ）である。

【0131】

本発明のもう１つの実施形態においては、カチオン性脂質は以下のものから選択される：
ＤＬｉｎＤＭＡ；
ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ；
ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ；
ＣＬｉｎＤＭＡ；
Ｓ－オクチルＣＬｉｎＤＭＡ；
（２Ｓ）－１－｛７－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ヘプチルオキシ｝－３－［（４Ｚ）－デカ－４－エン－１－イルオキシ］－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－２－アミン；
（２Ｒ）－１－｛４－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ブトキシ｝－３－［（４Ｚ）－デカ－４－エン－１－イルオキシ］－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－２－アミン；
１－［（２Ｒ）－１－｛４－［（３β）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ブトキシ｝－３－（オクチルオキシ）プロパン－２－イル］グアニジン；
１－［（２Ｒ）－１－｛７－［（３β）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ヘプチルオキシ｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－２－アミン；
１－［（２Ｒ）－１－｛４－［（３β）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ブトキシ｝－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］プロパン－２－アミン；
（２Ｓ）－１－（｛６－［（３Ｐ））－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ヘキシル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（９Ｚ）－オクタデカ－９－エン－１－イルオキシ］プロパン－２－アミン；
（３β）－３－［６－｛［（２Ｓ）－３－［（９Ｚ）－オクタデカ－９－エン－１－イルオキシル］－２－（ピロリジン－１－イル）プロピル］オキシ｝ヘキシル）オキシ］コレスタ－５－エン；
（２Ｒ）－１－｛４－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ブトキシ｝－３－（オクチルオキシ）プロパン－２－アミン；
（２Ｒ）－１－（｛８－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－（ペンチルオキシ）プロパン－２－アミン；
（２Ｒ）－１－（｛８－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－３－（ヘプチルオキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－２－アミン；
（２Ｒ）－１－（｛８－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－［（２Ｚ）－ペンタ－２－エン－１－イルオキシ］プロパン－２－アミン；
（２Ｓ）－１－ブトキシ－３－（｛８－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－２－アミン；
（２Ｓ－１－（｛８－［（３Ｐ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］オクチル｝オキシ）－３－［２，２，３，３，４，４，５，５，６，６，７，７，８，８，９，９－ヘキサデカフルオロノニル）オキシ］－Ｎ，Ｎ－ジメチルプロパン－２－アミン；
２－アミノ－２－｛［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］メチル｝プロパン－１，３－ジオール；
２－アミノ－３－（｛９－［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ，１７ξ，２０ξ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ノニル｝オキシ）－２－｛［（９Ｚ，１２Ｚ）－オクタデカ－９，１２－ジエン－１－イルオキシ］メチル｝プロパン－１－オール；
２－アミノ－３－（｛６－［（３β，８ξ，９ξ，１４ξ，１７ξ，２０ξ）－コレスタ－５－エン－３－イルオキシ］ノニル｝オキシ）－２－｛［（９Ｚ）－オクタデカ－９－エン－１－イルオキシ］メチル｝プロパン－１－オール；
（２０Ｚ，２３Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナコサ－２０，２３－ジエン－１０－アミン；
（１７Ｚ，２０Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘキサコサ－１７，２０－ジエン－９－アミン；
（１６Ｚ，１９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタコサ－１６，１９－ジエン－８－アミン；
（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルドコサ－１３，１６－ジエン－５－アミン；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘニコサ－１２，１５－ジエン－４－アミン；
（１４Ｚ，１７Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルトリコサ－１４，１７－ジエン－６－アミン；
（１５Ｚ，１８Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルテトラコサ－１５，１８－ジエン－７－アミン；
（１８Ｚ，２１Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサ－１８，２１－ジエン－１０－アミン；
（１５Ｚ，１８Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルテトラコサ－１５，１８－ジエン－５－アミン；
（１４Ｚ，１７Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルトリコサ－１４，１７－ジエン－４－アミン；
（１９Ｚ，２２Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルオクタコサ－１９，２２－ジエン－９－アミン；
（１８Ｚ，２１Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサ－１８，２１－ジエン－８－アミン；
（１７Ｚ，２０Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘキサコサ－１７，２０－ジエン－７－アミン；
（１６Ｚ，１９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタコサ－１６，１９－ジエン－６－アミン；
（２２Ｚ，２５Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘントリアコンタ－２２，２５－ジエン－１０－アミン；
（２１Ｚ，２４Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルトリアコンタ－２１，２４－ジエン－９－アミン；
（１８Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサ－１８－エン－１０－アミン；
（１７Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘキサコサ－１７－エン－９－アミン；
（１９Ｚ，２２Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルオクタコサ－１９，２２－ジエン－７－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサン－１０－アミン；
（２０Ｚ，２３Ｚ）－Ｎ－エチル－Ｎ－メチルノナコサ－２０，２３－ジエン－１０－アミン；
１－［（１１Ｚ，１４Ｚ）－１－ノニルコサ－１１，１４－ジエン－１－イル］ピロリジン；
（２０Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサ－２０－エン－１０－アミン；
（１５Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘプタコサ－１５－エン－１０－アミン；
（１４Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナコサ－１４－エン－１０－アミン；
（１７Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナコサ－１７－エン－１０－アミン；
（２４Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルトリトリアコント－２４－エン－１０－アミン；
（２０Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナコサ－２０－エン－１０－アミン；
（２２Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルヘントリアコンタ－２２－エン－１０－アミン；
（１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタコサ－１６－エン－８－アミン；
（１２Ｚ，１５Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－２－ノニルヘニコサ－１２，１５－ジエン－１－アミン；
（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ヘプタデカン－８－アミン；
１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－ヘキシルシクロプロピル］－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナデカン－１０－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ノナデカン－１０－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－２１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ヘニコサン－１０－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｓ，２Ｓ）－２－｛［（１Ｒ，２Ｒ）－２－ペンチルシクロプロピル］メチル｝シクロプロピル］ノナデカン－１０－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ヘキサデカン－８－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｒ，２Ｓ）－２－ウンデシルシクロプロピル］テトラデカン－５－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－｛７－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ヘプチル｝ドデカン－１－アミン；
１－［（１Ｒ，２Ｓ）－２－ヘプチルシクロプロピル］－Ｎ，Ｎ－ジメチルオクタデカン－９－アミン；
１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－デシルシクロプロピル］－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタデカン－６－アミン；
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－［（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル］ペンタデカン－８－アミン；および
（１１Ｅ，２０Ｚ，２３Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルノナコサ－１１，２０，２３－トリエン－１０－アミン；
またはそれらの薬学的に許容される塩、または前記のもののいずれかの立体異性体。

【0132】

本発明のもう１つの実施形態においては、カチオン性脂質は、（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンまたはその薬学的に許容される塩もしくは立体異性体から選択される。

【0133】

本発明のもう１つの実施形態においては、カチオン性脂質は、（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（ＣＬＡ）である。

【0134】

本開示は、とりわけ、肺炎球菌コンジュゲートと、３つのＳＮＥ成分、すなわち、１）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、２）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、および３）スクアレンとを含む組成物を提供する。

【0135】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは３２～９７モル％のスクアレン、１～３４モル％のＳＰＡＮ－８５、および１～３４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0136】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは８６～９８モル％のスクアレン、１～７モル％のＳＰＡＮ－８５、および１～７モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0137】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは９２～９４モル％のスクアレン、３～４モル％のＳＰＡＮ－８５、および３～４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0138】

本発明の１つの実施形態においては、ＳＮＥは９２．９１モル％のスクアレン、３．９８モル％のＳＰＡＮ－８５、および３．１１モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0139】

本開示は、とりわけ、肺炎球菌コンジュゲートと、４つのＳＮＥ成分、すなわち、１）カチオン性脂質、２）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、３）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、および４）スクアレンとを含む組成物を提供する。特定のＳＮＥ組成物はカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン（「ＣＬＡ」；またはＳＮＥ中にカチオン性脂質が含まれる場合には「ＣＬＡ－ＳＮＥ」）を含む。

【0140】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは１～６０モル％のカチオン性脂質、３２～９７モル％のスクアレン、１～４モル％のＳＰＡＮ－８５、および１～４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0141】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは１０～１４モル％のカチオン性脂質、７８～８４モル％のスクアレン、１～６モル％のＳＰＡＮ－８５、および１～６モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0142】

幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは４０～４６モル％のカチオン性脂質、４４～５２モル％のスクアレン、１～８モル％のＳＰＡＮ－８５、および１～８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0143】

本発明の１つの実施形態においては、ＳＮＥは１３．８２モル％のカチオン性脂質、８０．０７モル％のスクアレン、３．４３モル％のＳＰＡＮ－８５、および２．６８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0144】

本発明の１つの実施形態においては、ＳＮＥは４４．５モル％のカチオン性脂質、５１．５６モル％のスクアレン、２．２１モル％のＳＰＡＮ－８５、および１．７２モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む。

【0145】

本発明の幾つかの実施形態においては、ＳＮＥは、界面活性剤、複数の界面活性剤の混合物、リン脂質、テルペン、テルペノイド、トリテルペンまたはそれらの組合せから選択されうる１以上の非カチオン性脂質を更に含む。

【0146】

幾つかの実施形態においては、界面活性剤には以下のものが含まれうる（それらに限定されるものではない）：ポリオキシエチレンソルビタンエステル界面活性剤（一般にＴｗｅｅｎと称される）、特にＰＳ－２０およびＰＳ－８０；エチレンオキシド（ＥＯ）、プロピレンオキシド（ＰＯ）および／またはブチレンオキシド（ＢＯ）のコポリマーであってＤＯＷＦＡＸ（商標）なる商品名で販売されているもの、例えば線状ＥＯ／ＰＯブロックコポリマー；反復エトキシ（オキシ－１，２－エタンジイル）基の数が様々でありうるオクトキシノール［オクトキシノール－９（Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００またはｔ－オクチルフェノキシポリエトキシエタノール）に特に関心が持たれる］；（オクチルフェノキシ）ポリエトキシエタノール（ＩＧＥＰＡＬ ＣＡ－６３０／ＮＰ－４０）；ノニルフェノールエトキシラート、例えばＴｅｒｇｉｔｏｌ（商標）ＮＰシリーズ；ラウリル、セチル、ステアリルおよびオレイルアルコールから誘導されるポリオキシエチレン脂肪エーテル（Ｂｒｉｊ界面活性剤として公知である）、例えばトリエチレングリコールモノラウリルエーテル（Ｂｒｉｊ３０）；ならびにソルビタンエステル（一般にＳＰＡＮとして公知である）、例えばソルビタントリオレアート（Ｓｐａｎ－８５、Ｔｗｅｅｎ－８５または［２－［（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ）－４－ヒドロキシ－３－［（Ｚ）－オクタデカ－９－エノイル］オキシオキソラン－２－イル］－２－［（Ｚ）－オクタデカ－９－エノイル］オキシエチル］（Ｚ）－オクタデカ－９－エノアート）およびソルビタンモノラウラート。

【0147】

幾つかの実施形態においては、界面活性剤の混合物、例えばＰＳ－２０／Ｓｐａｎ８５またはＰＳ－８０／Ｓｐａｎ８５混合物が使用されうる。ポリオキシエチレンソルビタンエステル、例えばポリオキシエチレンソルビタンモノオレアート（ＰＳ－８０）と、オクトキシノール、例えばｔ－オクチルフェノキシポリエトキシエタノール（トリトンＸ－１００）との組合せも適している。もう１つ有用な組合せは、ラウレス９と、ポリオキシエチレンソルビタンエステルおよび／またはオクトキシノールとを含む。

【0148】

幾つかの実施形態においては、界面活性剤または乳化剤の好ましい量は以下のとおりである：ポリオキシエチレンソルビタンエステル（例えば、ＰＳ－２０またはＰＳ－８０）０．０１～１０モル％、特に約１～４モル％；オクチルまたはノニルフェノキシポリオキシエタノール（例えば、Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、またはＴｒｉｔｏｎ系列の他の界面活性剤）０．００１～１０モル％、特に約１～４モル％ ｗ／ｖ、特に０．０１～０．１％ ｗ／ｖ；ポリオキシエチレンエーテル（例えば、ラウレス９）０．１～２０モル％、好ましくは０．５～１０モル％、特に１～４％モル％または約１０質量％。

【0149】

幾つかの実施形態においては、リン脂質には、天然リン脂質、例えばホスファチジルコリン（ＰＣ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＰＥ）およびホスファチジルグリセロール（ＰＧ）、ホスファチジルセリン（ＰＳ）、ホスファチジルイノシトール（ＰＩ）、ホスファチジン酸（ホスファチダート）（ＰＡ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン、モノアシル－ホスファチジルコリン（リソＰＣ）、１－パルミトイル－２－オレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＰＯＰＣ）、Ｎ－アシル－ＰＥ、ホスホイノシチドおよびホスホスフィンゴ脂質が含まれうるが、これらに限定されるものではない。リン脂質誘導体には、ホスファチジン酸（ＤＭＰＡ、ＤＰＰＡ、ＤＳＰＡ）、ホスファチジルコリン（ＤＤＰＣ、ＤＬＰＣ、ＤＭＰＣ、ＤＰＰＣ、ＤＳＰＣ、ＤＯＰＣ、ＰＯＰＣ、ＤＥＰＣ）、ホスファチジルグリセロール（ＤＭＰＧ、ＤＰＰＧ、ＤＳＰＧ、ＰＯＰＧ）、ホスファチジルエタノールアミン（ＤＭＰＥ、ＤＰＰＥ、ＤＳＰＥ ＤＯＰＥ）、ホスファチジルセリン（ＤＯＰＳ）が含まれる。脂肪酸には、Ｃ１４：０、パルミチン酸（Ｃ１６：０）、ステアリン酸（Ｃ１８：０）、オレイン酸（Ｃ１８：１）、リノール酸（Ｃ１８：２）、リノレン酸（Ｃ１８：３）およびアラキドン酸（Ｃ２０：４）、Ｃ２０：０、Ｃ２２：０およびレシシン（ｌｅｔｈｉｃｉｎ）が含まれる。本発明の特定の実施形態においては、リン脂質はホスファチジルセリン、１，２－ジステアロイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＳＰＣ）、１，２－ジパルミトレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン、１，２－ジミリストイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＭＰＣ）、ジラウロイルホスファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、１，２－ジエイコセノイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリンまたは１，２－ジオレオイル－ｓｎ－グリセロ－３－ホスホコリン（ＤＯＰＣ）でありうる。

【0150】

幾つかの実施形態においては、テルピンには以下のものが含まれうるが、それらに限定されるものではない：モノテルペン、例えばゲラニオール、テルピネオール、リモネン、ミルセン、リナロオールまたはピネン；セスキテルペン、例えばフムレン、ファルネセン、ファルネソール；ジテルペン、例えばカフェストール、カーウェオール、センブレンおよびタキサジエン、トリテルペン、例えばスクアレンおよびスクアランテ；テトラテルペン、例えば非環式リコピン、単環式ガンマ－カロテン、ならびに二環式アルファ－およびベータ－カロテン；ポリテルペンおよびノルイソプレノイド。幾つかの実施形態においては、テルピンはスクアレンである。

【0151】

本発明の１つの実施形態においては、ＳＮＥは５０～８５モル％のスクアレンおよび１～１０モル％の非イオン性界面活性剤を含む。この実施形態の１つの態様においては、非イオン性界面活性剤はＰＳ－２０とＳＰＡＮ－８５との混合物またはＰＳ－８０とＳＰＡＮ－８５との混合物を含む。

【0152】

本発明の１つの実施形態においては、ＳＮＥは０～４５モル％のカチオン性脂質、５０～８５モル％のスクアレン、および１～１０モル％の非イオン性界面活性剤を含む。この実施形態の１つの態様においては、非イオン性界面活性剤はＰＳ－２０とＳＰＡＮ－８５との混合物またはＰＳ－８０とＳＰＡＮ－８５との混合物を含む。

【0153】

ＳＮＥの一般的製造方法（カチオン性脂質の存在下および非存在下）
一般に、ＳＮＥは、例えば、最初に脂質成分を一緒にし混合することによって、または最初にカチオン性脂質のような単一の脂質を利用することによって形成されうる。混合しブレンドしたら（脂質成分を一緒にし混合する場合）、水性バッファーを加え、最初の脂質または脂質成分と混合して、ブレンドされたエマルション混合物を形成させる。ブレンドされたエマルション成分を最初に粗い均質化（ホモジナイゼーション）に付し、次いで細かい均質化に付す。次いで、得られた配合物を最終濾過工程に付し、４℃で貯蔵する。脂質溶液は１以上のカチオン性脂質、１以上のテルペン（例えば、スクアレン）、１以上のソルビタンベースの界面活性剤（例えば、ＰＳ－２０またはＰＳ－８０；ＳＰＡＮ－８５）を特定のモル比で含みうる。

【0154】

ＬＮＰの一般的製造方法
ＬＮＰおよびＬＮＰの製造方法は当技術分野で周知である。ＬＮＰは公知であり、以下の刊行物に記載されている：ＵＳ，７，６９１，４０５、ＵＳ２００６／００８３７８０、ＵＳ２００６／０２４０５５４、ＵＳ２００８／００２００５８、ＵＳ２００９／０２６３４０７、ＵＳ２００９／０２８５８８１、ＷＯ２００９／０８６５５８、ＷＯ２００９／１２７０６０、ＷＯ２００９／１３２１３１、ＷＯ２０１０／０４２８７７、ＷＯ２０１０／０５４３８４、ＷＯ２０１０／０５４４０１、ＷＯ２０１０／０５４４０５およびＷＯ２０１０／０５４４０６。

【0155】

ＬＮＰの製造方法は以下の４つの主要工程からなる：１）脂質混合物および水性バッファーの溶液調製、２）スプリットストリーム（ｓｐｌｉｔ ｓｔｒｅａｍ）混合によるＬＮＰ形成、３）限外濾過、および４）濾過。

【0156】

一般に、脂質成分をエタノールに溶解させた後、滅菌濾過して脂質混合物を形成させる。幾つかの水性バッファーも調製される。次いで脂質混合物とバッファー流とを、ＴチューブまたはＹミキサーを使用して混合し、次いで出口直後に水性バッファーで希釈し、それと混合して、ＬＮＰ中間体を形成させる。次いでＬＮＰ中間体を限外濾過に付して、該物質を濃縮すると共に、適切なバッファーに対して該物質をダイアフィルトレーションに付して、残留エタノールを除去する。ダイアフィルトレーションの後、最終目標濃度を達成するために最終濃縮工程を行う。次いでＬＮＰバルクを滅菌フィルターで濾過し、－７０℃で冷凍貯蔵する。

【0157】

肺炎球菌コンジュゲートワクチン組成物
肺炎球菌コンジュゲートワクチンまたは組成物は既に開示されている。ＷＯ２０１１／１００１５１、ＷＯ２０１９／１３９６９２およびＷＯ２０２０／１３１７６３を参照されたい。

【0158】

ストレプトコッカス・ニューモニエ由来の細菌莢膜多糖の例としては、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０（２０Ａおよび２０Ｂ）、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆまたは３８が挙げられる。

【0159】

莢膜多糖の一般的な製造方法
肺炎球菌コンジュゲートワクチン組成物の製造方法は既に開示されている。ＷＯ２０１１／１００１５１、ＷＯ２０１９／１３９６９２およびＷＯ２０２０／１３１７６３を参照されたい。

【0160】

細菌莢膜多糖、特に抗原として使用されているものは、本発明における使用に適しており、免疫原性および／または抗原性多糖を特定するための方法によって容易に特定されうる。ストレプトコッカス・ニューモニエ由来の細菌莢膜多糖の例としては、血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０（２０Ａおよび２０Ｂ）、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆまたは３８が挙げられる。

【0161】

多糖は公知技術によって精製されうる。しかし、本発明は、天然源から精製された多糖に限定されず、多糖は全合成または部分合成のような他の方法によって得られうる。ストレプトコッカス・ニューモニエ由来の莢膜多糖は、当業者に公知の標準的な技術によって製造されうる。例えば、多糖は細菌から単離可能であり、ある程度は公知方法によって（例えば、欧州特許番号ＥＰ４９７５２４およびＥＰ４９７５２５を参照されたい）、好ましくは、ホモジナイザーを使用して達成される顕微溶液化（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚａｔｉｏｎ）または化学的加水分解によってサイジングされうる。各多糖血清型に対応するストレプトコッカス・ニューモニエ株はダイズベースの培地において増殖されうる。次いで個々の多糖を、遠心分離、沈殿および限外濾過を含む標準的な工程によって精製することが可能である。例えば、米国特許出願公開第２００８／０２８６８３８号および米国特許第５，８４７，１１２号を参照されたい。粘度を低下させるために、ならびに／または濾過性およびその後のコンジュゲート化生成物のロット間の一貫性を改善するために、多糖をサイジングすることが可能である。

【0162】

標準的な技術を用いて、担体タンパク質と反応しうる官能性を導入するために、精製された多糖を化学的に活性化することが可能である。多糖の化学的活性化および後続の担体タンパク質へのコンジュゲート化（結合）は、米国特許第４，３６５，１７０号、第４，６７３，５７４号および第４，９０２，５０６号に記載されている手段によって達成される。簡潔に説明すると、肺炎球菌多糖を、ペルヨーダートに基づく酸化剤、例えば過ヨウ素酸ナトリウム、過ヨウ素酸カリウムまたは過ヨウ素酸と反応させて、隣接ヒドロキシル基の酸化的開裂をもたらして、反応性アルデヒド基を生成させる。ペルヨーダート（例えば、過ヨウ素酸ナトリウム、メタ過ヨウ素酸ナトリウムなど）の適切なモル当量には、０．０５～０．５モル当量（ペルヨーダート対多糖反復単位のモル比）または０．１～０．５モル当量が含まれる。ペルヨーダートの反応は、過ヨウ素酸ナトリウムへの反応性ヒドロキシル基の接近性を制御するジオールコンホメーション（例えば、非環式ジオール、シスジオール、トランスジオール）に応じて、３０分間から２４時間までの様々な時間を要しうる。

【0163】

「ペルヨーダート」なる語は過ヨウ素酸塩（ペルヨーダート）および過ヨウ素酸の両方を含む。この用語はまた、メタペルヨーダート（ＩＯ４^－）およびオルトペルヨーダート（ＩＯ６^－）の両方を含み、ペルヨーダートの種々の塩（例えば、過ヨウ素酸ナトリウムおよび過ヨウ素酸カリウム）を含む。莢膜多糖は、メタペルヨーダートの存在下または過ヨウ素酸ナトリウム（ＮａＩＯ_４）の存在下で酸化される。更に、莢膜多糖は、オルトペルヨーダートの存在下または過ヨウ素酸の存在下で酸化されうる。

【0164】

また、精製された多糖はリンカーに連結されうる。各莢膜多糖は、活性化され又はリンカーに連結されたら、担体タンパク質に個々にコンジュゲート化されて糖コンジュゲート（複合糖質）を形成する。多糖コンジュゲートは、公知のカップリング技術によって製造されうる。

【0165】

多糖はリンカーにカップリング（結合）されて、リンカーの遊離末端がエステル基である多糖－リンカー中間体を形成しうる。したがって、リンカーは、少なくとも１つの末端がエステル基であるリンカーである。他方の末端は、それが多糖と反応して多糖－リンカー中間体を形成しうるように選択される。

【0166】

多糖は、多糖における第一級アミン基を使用してリンカーにカップリングされうる。この場合、リンカーは、典型的には、両方の末端にエステル基を有する。これは、エステル基の１つを多糖の第一級アミン基と求核アシル置換により反応させることにより、カップリングが生じることを可能にする。該反応は、多糖がアミド結合を介してリンカーにカップリングされた多糖－リンカー中間体を生成する。したがって、該リンカーは、多糖の第一級アミン基と反応するための第１エステル基と、担体分子の第一級アミン基と反応するための第２エステル基とを提供する二官能性リンカーである。典型的なリンカーはアジピン酸Ｎ－ヒドロキシスクシンイミドジエステル（ＳＩＤＥＡ）である。

【0167】

カップリングは間接的に行われることも可能であり、すなわち、リンカーへのカップリングの前に多糖を誘導体化するために使用される追加的リンカーを使用して行われうる。

【0168】

多糖は、多糖の還元末端におけるカルボニル基を使用して、追加的リンカーにカップリングされうる。このカップリングは、以下の２つの工程、すなわち、（ａ１）カルボニル基を追加的リンカーと反応させる工程、および（ａ２）追加的リンカーの遊離末端をリンカーと反応させる工程を含む。これらの実施形態においては、追加的リンカーは、典型的には、両方の末端に第一級アミン基を有し、それにより、第一級アミン基の１つを多糖のカルボニル基と還元的アミノ化により反応させることにより工程（ａ１）を行うことを可能にする。多糖のカルボニル基と反応性である第一級アミン基が使用される。ヒドラジドまたはヒドロキシルアミノ基が好適である。同じ第一級アミン基が、典型的には、多糖（Ｐｓ）－Ｐｓカップリングの可能性を可能にする追加的リンカーの両方の末端に存在する。該反応は、多糖がＣ－Ｎ結合を介して追加的リンカーにカップリングされた多糖－追加的リンカー中間体を生成する。

【0169】

多糖は、多糖における異なる基、特にカルボキシル基を使用して、追加的リンカーにカップリングされうる。このカップリングは、以下の２つの工程、すなわち、（ａ１）該基を追加的リンカーと反応させる工程、および（ａ２）追加的リンカーの遊離末端をリンカーと反応させる工程を含む。この場合、追加的リンカーは、典型的には、両方の末端に第一級アミン基を有し、それにより、第一級アミン基の１つを多糖のカルボキシル基とＥＤＡＣ活性化により反応させることにより工程（ａ１）を行うことを可能にする。多糖のＥＤＡＣ活性化カルボキシル基と反応性である第一級アミン基が使用される。ヒドラジド基が好適である。同じ第一級アミン基が、典型的には、追加的リンカーの両方の末端に存在する。該反応は、多糖がアミド結合を介して追加的リンカーにカップリングされた多糖－追加的リンカー中間体を生成する。

【0170】

担体タンパク質
本発明の特定の実施形態においては、担体タンパク質としてＣＲＭ１９７を使用する。ＣＲＭ１９７はジフテリア毒素の無毒性変異体（すなわち、トキソイド）である。ＣＲＭ１９７は、カザミノ酸および酵母エキスベース培地内で増殖したコリネバクテリウム・ジフテリア（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａ）株Ｃ７（ｂ１９７）の培養物から単離されうる。更に、ＣＲＭ１９７は、米国特許第５，６１４，３８２号に記載されている方法に従い組換え的に製造されうる。典型的には、ＣＲＭ１９７は、限外濾過、硫酸アンモニウム沈殿およびイオン交換クロマトグラフィーの組合せにより精製される。幾つかの実施形態においては、ＣＲＭ１９７は、Ｐｆｅｎｅｘ Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（商標）（Ｐｆｅｎｅｘ Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を使用して、シュードモナス・フルオレセンス（シュードモナス・フルオレッセンス）（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）において製造される。

【0171】

他の適切な担体タンパク質には、追加的な不活性化（不活化）細菌毒素、例えばＤＴ（ジフテリアトキソイド）、ＴＴ（破傷風トキソイド）またはＴＴの断片Ｃ、百日咳トキソイド、コレラトキソイド（例えば、国際特許出願公開番号ＷＯ ２００４／０８３２５１に記載されているもの）、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＬＴ、大腸菌（Ｅ．ｃｏｌｉ）ＳＴ、およびシュードモナス・エルジノーサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）由来の外毒素Ａが含まれる。細菌外膜タンパク質、例えば外膜タンパク質複合体ｃ（ＯＭＰＣ）、ポーリン、トランスフェリン結合タンパク質、肺炎球菌表面タンパク質Ａ（ＰｓｐＡ；国際出願特許公開番号ＷＯ ０２／０９１９９８を参照されたい）、肺炎球菌アドヘシンタンパク質（ＰｓａＡ）、群Ａもしくは群Ｂストレプトコッカス由来のＣ５ａペプチダーゼ、またはヘモフィルス・インフルエンゼ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ）プロテインＤ、肺炎球菌ニューモリシン（Ｋｕｏら，１９９５，Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ６３；２７０６－１３）、例えば、何らかの様態で解毒されたｐｌｙ、例えばｄＰＬＹ－ＧＭＢＳ（国際特許出願公開番号ＷＯ ０４／０８１５１５を参照されたい）もしくはｄＰＬＹ－フォルモール（ｆｏｒｍｏｌ）、ＰｈｔＸ、例えばＰｈｔＡ、ＰｈｔＢ、ＰｈｔＤ、ＰｈｔＥおよびＰｈｔタンパク質の融合物、例えばＰｈｔＤＥ融合物、ＰｈｔＢＥ融合物（国際特許出願公開番号ＷＯ ０１／９８３３４およびＷＯ ０３／５４００７を参照されたい）も使用されうる。他のタンパク質、例えばオボアルブミン、キーホールリンペットヘモシアニン（ＫＬＨ）、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）またはツベルクリンの精製タンパク質誘導体（ＰＰＤ）、ＰｏｒＢ（Ｎ．ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ由来）、ＰＤ（Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅプロテインＤ；例えば欧州特許番号ＥＰ ０ ５９４ ６１０ Ｂを参照されたい）、またはその免疫学的に機能的な同等物、合成ペプチド（欧州特許番号ＥＰ０３７８８８１およびＥＰ０４２７３４７を参照されたい）、熱ショックタンパク質（国際特許出願公開番号ＷＯ ９３／１７７１２およびＷＯ ９４／０３２０８を参照されたい）、百日咳タンパク質（国際特許出願公開番号ＷＯ ９８／５８６６８および欧州特許番号ＥＰ０４７１１７７を参照されたい）、サイトカイン、リンホカイン、増殖因子またはホルモン（国際特許出願公開番号ＷＯ ９１／０１１４６を参照されたい）、種々の病原体由来抗原からの複数のヒトＣＤ４＋ Ｔ細胞エピトープを含む人工タンパク質（Ｆａｌｕｇｉら，２００１，Ｅｕｒ Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ ３１：３８１６－３８２４を参照されたい）、例えばＮ１９タンパク質（Ｂａｒａｌｄｏｉら，２００４，Ｉｎｆｅｃｔ Ｉｍｍｕｎ ７２：４８８４－７を参照されたい）、鉄取り込みタンパク質（国際特許出願公開番号ＷＯ ０１／７２３３７を参照されたい）、クロストリジウム・ディフィシレ（Ｃ．ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）の毒素ＡまたはＢ（国際特許公開番号ＷＯ ００／６１７６１を参照されたい）、およびフラゲリン（Ｂｅｎ－Ｙｅｄｉｄｉａら，１９９８，Ｉｍｍｕｎｏｌ Ｌｅｔｔ ６４：９を参照されたい）も担体タンパク質として使用されうる。

【0172】

多価ワクチンが使用される場合、多価ワクチンにおける抗原の１以上に、第２担体が使用されうる。第２担体タンパク質は、好ましくは、無毒性かつ無反応性であり、十分な量および純度で入手可能なタンパク質である。第２担体タンパク質も、抗原の免疫原性を増強するために、抗原、例えばストレプトコッカス・ニューモニエ多糖にコンジュゲート化または結合される。担体タンパク質は、標準的なコンジュゲート化法に適合しているべきである。第１担体タンパク質にコンジュゲート化されていない各莢膜多糖は、同じ第２担体タンパク質にコンジュゲート化されうる（例えば、各莢膜多糖分子は単一の担体タンパク質にコンジュゲート化される）。第１担体タンパク質にコンジュゲート化されていない莢膜多糖は２以上の担体タンパク質にコンジュゲート化されうる（各莢膜多糖分子は単一の担体タンパク質にコンジュゲート化される）。そのような実施形態においては、同じ血清型の各莢膜多糖は、典型的には、同じ担体タンパク質にコンジュゲート化される。他のＤＴ突然変異体、例えば以下のものも、第２担体タンパク質として使用されうる：ＣＲＭ１７６、ＣＲＭ２２８、ＣＲＭ４５（Ｕｃｈｉｄａら，１９７３，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ ２１８：３８３８－３８４４）；ＣＲＭ９、ＣＲＭ４５、ＣＲＭ１０２、ＣＲＭ１０３およびＣＲＭ１０７、ならびにＮｉｃｈｏｌｌｓおよびＹｏｕｌｅ，Ｇｅｎｅｔｉｃａｌｌｙ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｅｄ Ｔｏｘｉｎｓ，Ｆｒａｎｋｅｌ編，Ｍａｅｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ Ｉｎｃ，１９９２に記載されている他の突然変異を有するもの；Ｇｌｕ－１４８の欠失またはそれからＡｓｐ、ＧｌｎもしくはＳｅｒへの突然変異および／またはＡｌａ １５８からＧｌｙへの突然変異および米国特許第４，７０９，０１７号または米国特許第４，９５０，７４０号に開示されている他の突然変異を有するもの；Ｌｙｓ ５１６、Ｌｙｓ ５２６、Ｐｈｅ ５３０および／またはＬｙｓ ５３４の少なくとも１以上の残基の突然変異、ならびに米国特許第５，９１７，０１７号または米国特許第６，４５５，６７３５号に開示されている他の突然変異を有するもの；または米国特許第５，８４３，７１１号に開示されている断片。

【0173】

還元的アミノ化によるコンジュゲート化
担体タンパク質への多糖の共有結合は、多糖上のアミン反応性部分がタンパク質の第一級アミン基（主にリジン残基）に直接結合する還元的アミノ化によって行われうる。周知のとおり、還元的アミノ化反応は２段階のメカニズムで進行する。まず、分子１のアルデヒド基（Ｒ－ＣＨＯ）と分子２の第一級アミン基（Ｒ’－ＮＨ２）との反応によって、式Ｒ－ＣＨ＝Ｎ－Ｒ’のシッフ塩基中間体が形成される。第２工程において、シッフ塩基が還元されて、式Ｒ－ＣＨ２－ＮＨ－Ｒ’のアミノ化合物が形成される。多数の還元剤が利用可能であるが、シアノ水素化ホウ素ナトリウム（ＮａＣＮＢＨ_３）のような高選択性還元剤が最もよく使用される。なぜなら、そのような試薬はシッフ塩基のイミン官能基のみを特異的に還元するからである。

【0174】

多糖の全ては鎖の末端にアルデヒド官能基（末端アルデヒド官能基）を有するため、多糖の還元的アミノ化を含むコンジュゲート化法が非常に一般的に適用可能であり、反復単位内の他のアルデヒド官能基（鎖内アルデヒド官能基）が存在しない場合、そのような方法は、多糖分子が担体タンパク質の単一分子に結合したコンジュゲートを得ることを可能にする。

【0175】

典型的な還元剤はシアノ水素化ホウ素塩、例えばシアノ水素化ホウ素ナトリウムである。典型的に使用されるイミン選択的還元剤はシアノ水素化ホウ素ナトリウムであるが、シアノ水素化ホウ素カリウムを含む他のシアノ水素化ホウ素塩も使用されうる。シアノ水素化ホウ素ナトリウム試薬ロットにおける初期シアニドレベルおよびコンジュゲート化反応における残留シアニドレベルの差異は、一貫性のないコンジュゲート化性能をもたらして、コンジュゲートサイズおよびコンジュゲートＰｓ対ＣＲＭ１９７比のような製品特性の変動をもたらしうる。最終反応生成物における遊離シアニドレベルを制御および／または低減することにより、コンジュゲート化の変動性が低減されうる。

【0176】

多糖上の残留未反応アルデヒドは、所望により、水素化ホウ素ナトリウムのような強力な還元剤の添加によって還元されてもよい。一般に、強力な還元剤の使用が好ましい。しかし、一部の多糖では、この工程を回避することが好ましい。例えば、ストレプトコッカス・ニューモニエ血清型５には、強力な還元剤と容易に反応しうるケトン基を含有する。この場合、多糖の抗原構造を保護するために還元工程を回避することが好ましい。

【0177】

コンジュゲート化の後、濃縮／ダイアフィルトレーション操作、限外濾過、沈殿／溶出、カラムクロマトグラフィーおよびデプス濾過を含む当業者に周知の任意の技術の１以上によって、過剰なコンジュゲート化試薬ならびに残留遊離担体タンパク質および遊離多糖を除去するために、多糖－担体タンパク質コンジュゲートを精製する。例えば、米国特許第６，１４６，９０２号を参照されたい。１つの実施形態においては、精製工程は限外濾過による。

【0178】

肺炎球菌コンジュゲート組成物
本発明は、カチオン性脂質の存在下または非存在下、多糖－担体タンパク質コンジュゲートをＳＮＥと共に含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本発明は更に、カチオン性脂質および薬学的に許容される担体の存在下または非存在下、多糖－担体タンパク質コンジュゲートをＳＮＥと共に含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本発明は更に、カチオン性脂質および所望により使用されてもよい薬学的に許容される担体の存在下または非存在下、本明細書に記載されている多糖－担体タンパク質コンジュゲートの組合せのいずれかをＳＮＥと共に含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。本発明の組成物は、２～３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４または３５個の異なる多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含み、またはそれらから本質的になり、またはそれらからなり、ここで、コンジュゲートのそれぞれは、担体タンパク質にコンジュゲート化された異なる莢膜多糖を含む。１つの実施形態においては、多糖－担体タンパク質コンジュゲートの一部である多糖はストレプトコッカス・ニューモニエの血清型１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０（２０Ａまたは２０Ｂ）、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆおよび３８を含むが、これらに限定されるものではない。もう１つの実施形態においては、血清型の群は４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型の群は３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されている。もう１つの実施形態においては、全ての血清型は担体タンパク質にコンジュゲート化されている。もう１つの実施形態においては、好ましい担体タンパク質はＣＲＭ１９７である。

【0179】

使用方法／投与量
本発明の組成物は、全身または粘膜経路によりワクチンを投与することによって、感染、例えば肺炎球菌感染を受けやすいヒトを防御または治療するために使用されうる。１つの実施形態においては、本発明は、本発明の組成物の免疫学的有効量をヒトに投与することを含む、ストレプトコッカス・ニューモニエ莢膜多糖コンジュゲートに対する免疫応答を誘導する方法を提供する。もう１つの実施形態においては、本発明は、本発明の組成物の免疫学的有効量をヒトに投与する工程を含む、肺炎球菌感染に対してヒトにワクチン接種する方法を提供する。

【0180】

個々のワクチンの成分の最適量は、対象における適切な免疫応答の観察を含む標準的な研究によって確認できる。例えば、もう１つの実施形態においては、ヒトへのワクチン接種の投与量は動物研究からヒトのデータへの外挿によって決定される。もう１つの実施形態においては、投与量は経験的に決定される。

【0181】

本発明の方法は、侵襲性感染症（髄膜炎、肺炎および菌血症）および非侵襲性感染症（急性中耳炎および副鼻腔炎）の両方を含む、ストレプトコッカス・ニューモニエによって引き起こされる一次臨床症候群の予防および／または軽減のために使用されうる。

【0182】

本発明の組成物の投与は、筋肉内、腹腔内、皮内もしくは皮下経路による注射、または口腔／消化管、呼吸器または泌尿生殖路への粘膜投与のうちの１以上を含みうる。１つの実施形態においては、肺炎または中耳炎の治療のために鼻腔内投与を用いる（なぜなら、肺炎球菌の鼻咽頭保菌がより有効に予防されて、感染がその初期段階において軽減されうるからである）。

【0183】

各ワクチン用量におけるコンジュゲートの量は、有意な副作用を伴わずに免疫防御応答を誘導する量として選択されうる。そのような量は肺炎球菌血清型に応じて変動しうる。一般に、多糖に基づくコンジュゲートの場合、各用量は０．１～１００ｍｇ、特に０．１～１０ｍｇ、より詳細には１～５ｍｇの各多糖を含む。例えば、各用量は１００、１５０、２００、２５０、３００、４００、５００もしくは７５０ｎｇまたは１、１．５、２、３、４、５、６、７、７．５、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１８、２０、２２、２５、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０または１００ｍｇを含みうる。

【0184】

本発明の方法のいずれかによれば、１つの実施形態においては、対象はヒトである。特定の実施形態においては、ヒト患者は乳児（１歳未満）、幼児（約１２～２４ヶ月）または小児（約２～５歳）である。他の実施形態においては、ヒト患者は高齢患者（６５歳より上）である。本発明の組成物は、より年長の子供、青少年および成人（例えば、１８～４５歳または１８～６５歳）に対する使用にも適している。

【0185】

したがって、本発明の１つの実施形態は、本発明の組成物のいずれかの免疫学的有効量を対象に投与することを含む、患者または対象におけるストレプトコッカス・ニューモニエによって引き起こされる疾患または障害の治療または予防方法を含む。他の実施形態においては、本発明は、（ｉ）以下の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｅ）、（ｆ）または（ｇ）における使用のための、（ｉｉ）以下の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｅ）、（ｆ）または（ｇ）のための医薬または組成物としての使用のための、あるいは（ｉｉｉ）以下の（ａ）、（ｂ）、（ｃ）、（ｅ）、（ｆ）または（ｇ）のための医薬の製造（または生産）における使用のための、本発明の組成物（すなわち、本明細書の全体に記載されている組成物）を含む：（ａ）（例えば、人体の）治療、（ｂ）医薬、（ｃ）ストレプトコッカス・ニューモニエによる感染の治療または予防、（ｅ）ストレプトコッカス・ニューモニエ感染の再発の予防、（ｆ）ストレプトコッカス・ニューモニエ感染に関連する病的症状の進行、発症もしくは重症度の低減および／またはストレプトコッカス・ニューモニエ感染の可能性の低減、あるいは（ｇ）髄膜炎、肺炎、菌血症、急性中耳炎および副鼻腔炎（これらに限定されるものではない）を含むストレプトコッカス・ニューモニエ関連疾患の治療、予防、またはその発生、重症化もしくは進行の遅延、およびストレプトコッカス・ニューモニエによって引き起こされる疾患または障害の治療または予防。

【0186】

本発明の方法の１つの実施形態においては、本発明の組成物は単回接種として投与される。もう１つの実施形態においては、ワクチンは、適切な間隔をおいて２回、３回または４回以上投与される。例えば、組成物は１、２、３、４、５もしくは６ヶ月の間隔またはそれらの任意の組合せで投与されうる。免疫化スケジュールは、肺炎球菌ワクチンに関して定められたものに従うことが可能である。例えば、ストレプトコッカス・ニューモニエによって引き起こされる浸潤性疾患に対する乳児および幼児に関する通常のスケジュールは２月齢、４月齢、６月齢および１２～１５月齢である。したがって、好ましい実施形態においては、組成物は２月齢、４月齢、６月齢および１２～１５月齢における４用量シリーズとして投与される。

【0187】

本発明の組成物はストレプトコッカス・ニューモニエ由来の１以上のタンパク質をも含みうる。含まれるのに適したストレプトコッカス・ニューモニエタンパク質の例には、国際特許出願公開番号ＷＯ ０２／０８３８５５およびＷＯ ０２／０５３７６１において特定されているものが含まれる。

【0188】

本発明の製剤
幾つかの実施形態においては、ＳＮＥとストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、少なくとも１個、または少なくとも３個、または少なくとも７個、または少なくとも１０個、または少なくとも１３個、または少なくとも１５個、または少なくとも２０個、または少なくとも２４個、または少なくとも２７個、または少なくとも３０個のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９または４０個のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１０Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。幾つかの実施形態においては、ＳＮＥと、３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなるストレプトコッカス・ニューモニエ血清型を含有するストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートとを含む組成物を提供する。

【0189】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートおよび安定ナノエマルション（ＳＮＥ）を含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0190】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートおよびＳＮＥおよび薬学的に許容される担体を含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0191】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、乳化剤および／または可溶化剤および／または界面活性剤および所望により使用されてもよいカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0192】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、界面活性剤および／またはテルペンおよび／またはカチオン性脂質またはそれらの混合物を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0193】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１以上の界面活性剤および１以上のテルペンおよび所望により使用されてもよい１以上のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0194】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１～３個の界面活性剤および１～３個のテルペンおよび所望により使用されてもよい１～３個のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0195】

本発明は更に、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、１～２個の界面活性剤および１～２個のテルペンおよび所望により使用されてもよい１～２個のカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0196】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0197】

本発明は、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレン、および所望により使用されてもよいｉｖ）カチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0198】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、カチオン性脂質は脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と会合していない。

【0199】

本発明は更に、１）ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートと、２）ｉ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、（ｉｉ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）、ｉｉｉ）スクアレンおよびｉｖ）所望により使用されてもよいカチオン性脂質を含むＳＮＥとを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、カチオン性脂質は脂質ナノ粒子（ＬＮＰ）と会合していない。

【0200】

本発明は更に、薬学的に許容される担体を含む前記の肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供する。

【0201】

幾つかの実施形態においては、前記組成物は、担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む。

【0202】

前記組成物の１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－２０を含む。もう１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－８０を含む。

【0203】

１つの実施形態においては、組成物はカチオン性脂質ＣＬＡ、ＣＬＸまたはＣＬＹを含む。

【0204】

１つの実施形態においては、組成物はカチオン性脂質ＣＬＡを含む。

【0205】

１つの実施形態においては、組成物は、ＤＬｉｎＤＭＡ、ＤＬｉｎＫＣ２ＤＭＡ、ＤＬｉｎ－ＭＣ３－ＤＭＡ、ＣＬｉｎＤＭＡおよびＳ－オクチルＣＬｉｎＤＭＡから選択されるカチオン性脂質を含む。

【0206】

１つの実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートは、ＣＲＭ１９７である担体タンパク質にコンジュゲート化された１、２、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２０（２０Ａおよび２０Ｂ）、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ、３５Ｆおよび３８から選択される血清型のいずれか（これらに限定されるものではない）を含む特定のストレプトコッカス・ニューモニエ血清型の多糖を含有する。もう１つの実施形態においては、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートは、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。もう１つの実施形態においては、血清型は、担体タンパク質ＣＲＭ１９７に全てがコンジュゲート化されている血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含む、またはそれらから本質的になる、またはそれらからなる。

【0207】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0208】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0209】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0210】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0211】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0212】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0213】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0214】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0215】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0216】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、およびスクアレンを更に含む。

【0217】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0218】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0219】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0220】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0221】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0222】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0223】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0224】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0225】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0226】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質を更に含む。

【0227】

１つの実施形態においては、本発明は、７個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0228】

１つの実施形態においては、本発明は、１３個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0229】

１つの実施形態においては、本発明は、１５個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0230】

１つの実施形態においては、本発明は、２０個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0231】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0232】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0233】

１つの実施形態においては、本発明は、２４個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0234】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0235】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0236】

１つの実施形態においては、本発明は、２１個の異なるストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む肺炎球菌コンジュゲート組成物を提供し、ここで、ストレプトコッカス・ニューモニエ多糖は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂからなり、全ての血清型は担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されており、該組成物はソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）、ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）、スクアレン、およびカチオン性脂質ＣＬＡを更に含む。

【0237】

前記組成物の１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－２０を含む。もう１つの実施形態においては、ＳＮＥはＰＳ－８０を含む。

【0238】

幾つかの実施形態においては、約２μｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．０２μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0239】

幾つかの実施形態においては、約０．０４μｇ／ｍＬ～約８０ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0240】

幾つかの実施形態においては、約１００μｇ／ｍＬ～約４．２ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0241】

幾つかの実施形態においては、約１００μｇ／ｍＬ～約２０ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0242】

幾つかの実施形態においては、約２μｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは、共凍結乾燥（ｃｏ－ｌｙｏｐｈｉｌｉｚｅｄ）製剤として調製された約０．０２μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0243】

幾つかの実施形態においては、約２μｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質、２μｇ／ｍＬ～約２ｍｇ／ｍＬのＡＰＡの形態のアルミニウムおよび少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは、共凍結乾燥製剤として調製された約０．０２μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0244】

幾つかの実施形態においては、約２０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0245】

幾つかの実施形態においては、約６０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0246】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、約０．１μｇ／ｍＬ～約４００ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質を含み、更にＳＰＡＮ－８５、ＰＳ－２０またはＰＳ－８０およびスクアレンを含む組成物を提供する。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＡである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＸである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＹである。

【0247】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、約６０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質を含み、更に６μｇ／ｍＬ～２４０μｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６ｇ／ｍＬ～２４０ｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０ｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む組成物を提供する。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＡである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＸである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＹである。

【0248】

幾つかの実施形態においては、約６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．０２μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0249】

幾つかの実施形態においては、約６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0250】

幾つかの実施形態においては、約６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0251】

幾つかの実施形態においては、約２μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、２μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および２０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．００４μｇ／ｍＬ～約４０μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0252】

幾つかの実施形態においては、約６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは、共凍結乾燥製剤として調製された約０．０２μｇ／ｍＬ～約２００μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0253】

幾つかの実施形態においては、約２０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0254】

幾つかの実施形態においては、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ～２．４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0255】

幾つかの実施形態においては、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0256】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、組成物は６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ～２４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む。

【0257】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、組成物は６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む。

【0258】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、約３０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質を含み、更に６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６ｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０ｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む組成物を提供する。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＡである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＸである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＹである。

【0259】

幾つかの実施形態においては、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、約６０μｇ／ｍＬ～約２．４ｍｇ／ｍＬのカチオン性脂質を含み、更に６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６ｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０ｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬのスクアレンを含む組成物を提供する。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＡである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＸである。もう１つの実施形態においては、カチオン性脂質はＣＬＹである。

【0260】

幾つかの実施形態においては、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０またはＰＳ－８０、および６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬのスクアレン、および少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを含む組成物を提供し、ここで、コンジュゲートのそれぞれは約０．２μｇ／ｍＬ～約２４μｇ／ｍＬの濃度で存在する。

【0261】

本発明の組成物は、皮下、局所的、経口的、粘膜上、静脈内または筋肉内に投与されうる。組成物は、防御応答を誘発するのに十分な量で投与される。組成物は、種々の経路、例えば経口的、非経口的、皮下、粘膜上または筋肉内に投与されうる。投与される用量は、患者の全身状態、性別、体重および年齢ならびに投与経路に応じて変動しうる。

【0262】

本発明の組成物は、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、免疫原性組成物と称されうる。

【0263】

本発明の組成物は、前記の種々の実施形態において強調されているとおり、ワクチンまたはワクチン組成物と称されうる。

【0264】

１つの実施形態においては、ＳＮＥがＰＳ－２０、ソルビタントリオレアート、スクアレンおよび（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ １３，１６－ジエン－１－アミンを含む、組成物を提供する。

【0265】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが５～１５モル％のソルビタントリオレアート、２５～３５モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０、１～２．５モル％のスクアレンおよび５５～６５モル％の（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ １３，１６－ジエン－１－アミンを含む、組成物を提供する。

【0266】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが最大７５モル％のカチオン性脂質、最大３０モル％のソルビタントリオレアート、最大３０モル％のポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０および２５～８５モル％の量のスクアレンを含む、組成物を提供する。

【0267】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが最大５０モル％のカチオン性脂質、最大１０モル％のソルビタントリオレアート、最大１０モル％のポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０および５０～８０モル％の量のスクアレンを含む、組成物を提供する。

【0268】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが最大２４モル％のカチオン性脂質、１～８モル％のソルビタントリオレアート、１～８モル％のポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０および６０～７５モル％の量のスクアレンを含む、組成物を提供する。

【0269】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが約１０～１４モル％のカチオン性脂質、１～４モル％のソルビタントリオレアート、１～４モル％のポリソルベート－２０またはポリソルベート－８０および５０～８０モル％の量のスクアレンを含む、組成物を提供する。

【0270】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが３０～６５モル％のカチオン性脂質、５～３０モル％のソルビタントリオレアート、１０～４０モル％のスクアレンおよび０．５～４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0271】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが５５～６５モル％のカチオン性脂質、５～１５モル％のソルビタントリオレアート、２５～３５モル％のスクアレンおよび１～２．５モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0272】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが１３～４５モル％のカチオン性脂質、２～４モル％のソルビタントリオレアート、５０～８２モル％のスクアレンおよび１．５～３モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0273】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが１３～１４モル％のカチオン性脂質、１～２モル％のソルビタントリオレアート、７９～８１モル％のスクアレンおよび１～２モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0274】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが０モル％のカチオン性脂質、８～１０モル％のソルビタントリオレアート、８０～８４モル％のスクアレンおよび８～１０モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0275】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが２０モル％のカチオン性脂質、３０モル％のソルビタントリオレアート、２０モル％のスクアレンおよび３０モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0276】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが約２モル％のカチオン性脂質、約８モル％のソルビタントリオレアート、約８２モル％のスクアレンおよび約８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0277】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが２モル％のカチオン性脂質、８モル％のソルビタントリオレアート、８２モル％のスクアレンおよび８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0278】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが約１３．８２モル％のカチオン性脂質、約３．４３モル％のソルビタントリオレアート、約８０．０７モル％のスクアレンおよび約２．６８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0279】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが１３．８２モル％のカチオン性脂質、３．４３モル％のソルビタントリオレアート、８０．０７モル％のスクアレンおよび２．６８モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0280】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが約４４．５モル％のカチオン性脂質、約２．２１モル％のソルビタントリオレアート、約５１．５６モル％のスクアレンおよび約１．７２モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0281】

１つの実施形態においては、カチオン性脂質を含むＳＮＥが４４．５モル％のカチオン性脂質、２．２１モル％のソルビタントリオレアート、５１．５６モル％のスクアレンおよび１．７２モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0282】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが３２モル％のスクアレン、３４モル％のＳＰＡＮ－８５および３４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0283】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが９８モル％のスクアレン、１モル％のＳＰＡＮ－８５および１モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0284】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが８６モル％のスクアレン、７モル％のＳＰＡＮ－８５および７モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0285】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが９２モル％のスクアレン、４モル％のＳＰＡＮ－８５および４モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0286】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが９４モル％のスクアレン、３モル％のＳＰＡＮ－８５および３モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0287】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが９２．９１モル％のスクアレン、３．９８モル％のＳＰＡＮ－８５および３．１１モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0288】

１つの実施形態においては、ＳＮＥが６２モル％のスクアレン、１７モル％のＳＰＡＮ－８５および１７モル％のＰＳ－２０またはＰＳ－８０を含む、組成物を提供する。

【0289】

前記実施形態のそれぞれにおいては、組成物はストレプトコッカス・ニューモニエ多糖－担体タンパク質コンジュゲートを更に含む。

【0290】

本発明は、前記組成物の投与による、肺炎球菌疾患の治療または予防方法を提供する。

【0291】

本発明は、肺炎球菌疾患を治療または予防するための、前記組成物の使用を提供する。

【0292】

本明細書中に挙げられている全ての刊行物を、本発明に関して用いられうる方法および材料を記載し開示する目的で、参照により本明細書に組み入れることとする。本明細書におけるいかなるものも、本発明が先行発明のせいでそのような開示に先行する権利を有さないと認めるものと解釈されるべきではない。

【0293】

添付の図面を参照して本発明の種々の実施形態が本明細書に記載されているが、本発明はそれらの厳密な実施形態には限定されず、添付の特許請求の範囲に定められている本発明の範囲または精神から逸脱することなく種々の変更および修飾が当業者によって行われうると理解されるべきである。

【0294】

以下の実施例は本発明を例示するものであり、本発明を限定するものではない。

【0295】

実施例
実施例１：ＤＭＳＯコンジュゲート化を用いた肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートの製造
多糖（後記ならびに表および実施例において強調されているもの）を溶解し、目標分子量にサイジングし、化学的に活性化し、限外濾過によってバッファー交換した。活性化多糖および精製ＣＲＭ１９７を個別に凍結乾燥し、ＤＭＳＯに再溶解した。次いで、再溶解した多糖溶液およびＣＲＭ１９７溶液を後記のとおりに一緒にし、コンジュゲート化した。得られたコンジュゲートを限外濾過およびそれに続く最終的な０．２ミクロンの濾過によって精製した。望ましい特性を有するコンジュゲートを生成させるために、各工程における幾つかのプロセスパラメーター、例えばｐＨ、温度、濃度および時間を制御した。

【0296】

多糖のサイズ縮小
精製された肺炎球菌莢膜多糖（「Ｐｓ」とも称される）粉末を水に溶解した。サイズ縮小されなかったＳＴ－１９Ａ（血清型は「ＳＴ」とも称される）を除き、溶解多糖を０．４５ミクロンで濾過し、均質化（ホモジナイゼーション）または酸加水分解のいずれかに付してＰｓの分子量を減少させた。圧力および通過回数を制御することによって、均質化の目標Ｐｓサイズが達成された。温度および時間を制御することによって、酸加水分解の目標Ｐｓサイズが達成された。次いで多糖を０．２ミクロンで濾過し、濃縮し、５または１０ｋＤａのＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して水に対してダイアフィルトレーションした。

【0297】

脱Ｏ－アセチル化
サイズ縮小ＳＴ－１５Ｂ Ｐｓ溶液を６０℃に加熱し、重炭酸ナトリウムバッファー（ｐＨ９．４）を最終濃度５０ｍＭまで加えた。バッチを６０℃でインキュベートして、Ｏ－アセチル基を遊離させた。リン酸カリウムバッファー（ｐＨ６）を加えてｐＨを中和し、溶液を周囲温度まで冷却した。次いで溶液を濃縮し、５または１０ｋＤａのＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して水に対してダイアフィルトレーションした。

【0298】

脱ケタール化（ＳＴ－４のみ）
サイズ縮小ＳＴ－４ Ｐｓ溶液を酢酸ナトリウムバッファーで５０℃およびｐＨ４．１に調整して、多糖を部分的に脱ケタール化した。次いで多糖溶液を２２℃に冷却した後、活性化に付した。

【0299】

多糖の酸化
多糖溶液を、ＳＴ－５、７Ｆおよび１９Ｆを除く全ての血清型に関して２２℃に調整した。ＳＴ－５、７Ｆおよび１９Ｆは４℃に調整した。また、活性化による多糖のサイズ縮小を最小限に抑えるために、溶液を酢酸ナトリウムバッファーでｐＨ４～５に調整した。メタ過ヨウ素酸ナトリウム溶液の添加により、多糖活性化を開始させた。多糖活性化の目標レベル（多糖反復単位１モル当たりのアルデヒドのモル数）が達成されるように、メタ過ヨウ素酸ナトリウムの添加量を制御した。

【0300】

ＳＴ－５を除く全ての血清型の活性化生成物を１０ｍＭ リン酸カリウム（ｐＨ６．４）に対してダイアフィルトレーションし、次いで、５または１０ｋＤａＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して水に対してダイアフィルトレーションした。ＳＴ－５に関しては、活性化生成物を１０ｍＭ 酢酸ナトリウム（ｐＨ４．１）に対してダイアフィルトレーションし、次いで、５ｋＤａ ＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して水に対してダイアフィルトレーションした。全ての血清型に関して限外濾過を２～８℃で行った。

【0301】

ＣＲＭ１９７への多糖のコンジュゲート化
既に記載されているとおりに（ＷＯ ２０１２／１７３８７６ Ａ１）シュードモナス・フルオレッセンス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ）における発現によって得られた精製ＣＲＭ１９７を、５ｋＤａ ＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して２ｍＭ ホスファート（ｐＨ７．２）バッファーに対してダイアフィルトレーションし、０．２ミクロンで濾過した。活性化多糖を水およびスクロースと共に凍結乾燥のために配合した。ＣＲＭ１９７を６ｍｇ Ｐｒ／ｍＬ（ＣＲＭ１９７担体タンパク質は「Ｐｒ」とも称される）で１％ ｗ／ｖのスクロース濃度で凍結乾燥のために配合した。配合されたＰｓおよびＣＲＭ１９７の溶液を個別に凍結乾燥した。凍結乾燥したＰｓおよびＣＲＭ１９７材料を等体積のＤＭＳＯに個別に再溶解した。幾つかの血清型に関しては、塩のような添加剤をＰｓ－ＤＭＳＯに添加した。目標の多糖濃度および多糖対ＣＲＭ１９７質量比が達成されるように、多糖およびＣＲＭ１９７の溶液を混合した。該質量比は、生じるコンジュゲートにおける多糖対ＣＲＭ１９７比が制御されるように選択した。ほとんどの血清型の場合にシアノ水素化ホウ素ナトリウムのような還元剤を添加し、コンジュゲート化を２２℃で進行させた。

【0302】

最終的な還元
全ての血清型に関して、コンジュゲート化反応後に水素化ホウ素ナトリウムのような還元剤を添加し、２２℃でインキュベートした。該バッチを、約０．０２５％（ｗ／ｖ）ポリソルベート－２０を含有する１５０ｍＭ 塩化ナトリウム中に約４℃で希釈した。次いでリン酸カリウムバッファーを添加してｐＨを中和した。幾つかのロットを濃縮し、３０ｋＤａ ＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して、１５０ｍＭ 塩化ナトリウム、２５ｍＭ リン酸カリウム（ｐＨ７）に対して、約４℃でダイアフィルトレーションした。

【0303】

最終的な濾過および製品の貯蔵
次いで個々のバッチを濃縮し、３００ｋＤａ ＮＭＷＣＯ接線流限外濾過膜を使用して、０．０１５％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含有する１５０ｍＭ 塩化ナトリウム（ｐＨ７．０）中の１０ｍＭ ヒスチジンに対して、４℃でダイアフィルトレーションした。特に、ＳＴ－５に関しては、ダイアフィルトレーション工程の途中で、ＳＴ－５コンジュゲートを回収し、５０ｍＭ 重炭酸ナトリウム（ｐＨ９．３）と共に３時間インキュベートした。ダイアフィルトレーションを完了する前に、ＳＴ－５溶液を１．５Ｍ リン酸カリウム（ｐＨ６．０）で中和した。

【0304】

個々の残余（ｒｅｔｅｎｔａｔｅ）バッチを０．２ミクロンで濾過し（０．５ミクロンのプレフィルターを使用）、次いで、０．０１５％（ｗ／ｖ）ポリソルベート２０を含有する１５０ｍＭ 塩化ナトリウム（ｐＨ７．０）中の追加的な１０ｍＭ ヒスチジンで希釈し、アリコートに分注し、－６０℃以下で凍結した。血清型特異的コンジュゲートの詳細は、既に記載されているとおり見出されうる（ＷＯ２０１１／１００１５１、ＷＯ２０１９／１３９６９２およびＷＯ２０２０／１３１７６３）。

【0305】

実施例２：肺炎球菌コンジュゲート組成物の製剤化
実施例１に記載されているとおりに種々の化学を用いて製造された個々の肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートを、それぞれＰＣＶ１、ＰＣＶ２１またはＰＣＶ２４と称される１価、２１価または２４価肺炎球菌コンジュゲート組成物の製剤化に使用した。

【0306】

ＣＬＡ－ＳＮＥもしくはＳＮＥに添加される又はそのまま使用されるＰＣＶ１製剤は血清型６Ｂを含有し、これは、実施例１に記載されているとおりに非プロトン性（ＤＭＳＯ）溶媒中の還元的アミノ化を用いてコンジュゲート化され、ワクチン中で４μｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ）の肺炎球菌多糖（ＰｎＰ）の最終濃度となるように２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン（ｐＨ５．８）、１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび０．１％（ｗ／ｖ）ＰＳ－２０中で製剤化された。実施例１に記載されているとおりに非プロトン性（ＤＭＳＯ）溶媒中の還元的アミノ化を用いてコンジュゲート化されたＡＰＡおよび血清型６Ｂを使用して製造されたＰＣＶ１ワクチン製剤を、ワクチン中で４μｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ）の肺炎球菌多糖（ＰｎＰ）の最終濃度となるように、２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン（ｐＨ５．８）、１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび０．２％（ｗ／ｖ）ＰＳ－２０および２５０ｍｇ［Ａｌ^＋３］／ｍＬ（ＡＰＡの形態）中で製剤化した。

【0307】

ＣＬＡ－ＳＮＥもしくはＳＮＥに添加される又はそのまま使用されるＰＣＶ２１製剤は血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ（脱ＯＡｃ１５Ｂ）、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂを含有し、これらは、非プロトン性溶媒（例えば、ＤＭＳＯ）中の還元的アミノ化を用いて担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化され、２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン（ｐＨ５．８）、５０～１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび０．０２～０．１％ ＰＳ－２０中で製剤化された。ワクチン中で８４～１６８μｇ／ｍＬ ＰｎＰの最終濃度となるように、各多糖－担体タンパク質コンジュゲートを４～８μｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ）肺炎球菌多糖（ＰｎＰ）で製剤化した。

【0308】

ＣＬＡ－ＳＮＥもしくはＳＮＥに添加される又はそのまま使用されるＰＣＶ２４製剤は血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂを含有し、これらは、非プロトン性溶媒（例えば、ＤＭＳＯ）中の還元的アミノ化を用いて担体タンパク質ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化され、２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン（ｐＨ５．８）、５０～１５０ｍＭ ＮａＣｌおよび０．０２～０．１％ ＰＳ－２０中で製剤化された。ワクチン中で９６μｇ／ｍＬ ＰｎＰの最終濃度となるように、各多糖－担体タンパク質コンジュゲートを４μｇ／ｍＬ（ｗ／ｖ）肺炎球菌多糖（ＰｎＰ）で製剤化した。

【0309】

ＰＣＶ製剤を製造するために、肺炎球菌多糖（ＰｎＰとも称される）の表示最終濃度（ｗ／ｖ）を得るのに必要な１価バルクコンジュゲートの必要体積を、バッチ体積およびバルク多糖濃度に基づいて計算した。

【0310】

製剤化プロセスは、２０ｍＭ ヒスチジン、０．０５～０．１５％（ｗ／ｖ）ＰＳ－２０および１５０ｍＭ 塩化ナトリウム（ｐＨ５．８）中のＰｎＰブレンドの最終濃度の２倍におけるコンジュゲートバルクブレンドの製造からなるものであった。

【0311】

ヒスチジン（ｐＨ５．８）、ＰＳ－２０および塩化ナトリウム溶液を調製し、製剤化容器に加えた。凍結貯蔵された個々の肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートを２～８℃で解凍し、次いで製剤化容器に加えた。多糖－担体タンパク質コンジュゲートを製剤化バッファー（コンジュゲートブレンド）に添加する際、磁気攪拌棒または磁気インペラを使用して容器を混合して、均一性を確保した。全ての添加を行い、溶液を撹拌した後、コンジュゲートブレンドを滅菌フィルターに通し、ＡＰＡの存在下または非存在下で容器内に収集した。幾つかの場合には、バッチを目標濃度に調整するために、滅菌フィルターを１５０ｍＭ 塩化ナトリウムでチェイス（ｃｈａｓｅ）した。

【0312】

製剤をプラスチックシリンジ、ガラスシリンジまたはバイアル内に充填した。

【0313】

本明細書中で用いる１３価肺炎球菌コンジュゲートワクチンであるＰＣＶ１３製剤は、商業的に入手可能なＰＲＥＶＮＡＲ１３（登録商標）に由来するものであった。

【0314】

実施例３：カチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンの存在下および非存在下の安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント系の製造
ＳＮＥアジュバントは、ＣＬＡとも称される（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンまたはＣＬＸとも称される（６Ｚ，９Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタトリアコンタ－６，９，２６，２９－テトラエン－１８－アミンまたはＣＬＹとも称されるＮ，Ｎ－ジメチル－１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル）ヘプタデカン－８－アミン（図１）であるカチオン性脂質の存在下および非存在下で製造されうる。ＳＮＥは、カチオン性脂質、例えばＣＬＡの存在下（ＣＬＡ－ＳＮＥと称される；表１を参照されたい）およびカチオン性脂質の非存在下（ＳＮＥと称される；表２を参照されたい）、３つの安定化成分であるスクアレン、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）およびポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）からなる多成分エマルション製剤である。この製剤を、カチオン性脂質（使用する場合）、スクアレン、ＳＰＡＮ－８５およびＰＳ－２０または類似（例えば、界面活性剤、油および可溶化剤）成分を一緒にし混合することによって製造した（表１および図２）。混合しブレンドしたら、ヒスチジンバッファーを添加し、最初のエマルション成分と混合した。後記のとおり、ブレンドされたエマルション成分を、まず、粗い均質化に付し、次いで細かい均質化に付した。得られた製剤を最終的な０．２μｍの濾過工程に付した。望ましい特性を有するエマルション系を生成させるために、各工程における幾つかのプロセスパラメーター、例えば添加順序、混合時間、ｐＨ、温度、成分の濃度、均質化、微小流動化（マイクロフルイダイゼーション）を制御した。

【0315】

【表1】

【0316】

【表2】

【0317】

製剤の製造
安定エマルションのスクアレンおよび可溶化剤製剤（油相と称される）を、スクアレン、ＳＰＡＮ－８５、ＰＳ－２０およびＣＬＡを容器に加えることによって調製した。次いで磁気撹拌を１００～１０００ＲＰＭで１０～１２０分間行って、油相を混合した。これらの成分の混合後、２０ｍＭ ヒスチジン（ｐＨ５．８）から構成される水相を、磁気撹拌棒を使用して混合しながら油相にゆっくりと加えた。次いでこの製剤を再び１時間混合した。

【0318】

粗い均質化
次いで、ローターステーターホモジナイザーを周囲温度で使用して、油相と水相との混合物（予均質化エマルションまたはＰＨＥと称される）を均質化し、サイズ縮小させて、粗エマルションを形成させた。ホモジナイザーのアーム先端をＰＨＥ内に沈め、製剤化容器の底付近の所定の位置に維持し、６～１０ｋＲＰＭで５～１５分間作動させた。このプロセスは直径４～２０μｍの範囲のスクアレンエマルション粒子の均質マイクロエマルション（ＭＥ）懸濁液を与えた。これは、安定ナノエマルション（ＳＮＥ）を生成させるための、高圧ホモジナイザーにおけるマイクロフルイダイゼーションによる追加的なサイズ縮小に適していた。

【0319】

安定ナノエマルション（ＳＮＥ）を生成させるための細かい均質化
粗い均質化の後、安定したナノメートルサイズのエマルション粒子を生成させるために、高圧ホモジナイザー／マイクロフルイダイザーを使用して、エマルションを更に処理した。例えばマイクロフルイディクス（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓ）低体積マイクロフルイダイザー（Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｚｅｒ）（登録商標）、ＧＥＡ Ｇｒｏｕｐ ＰａｎｄａＰｌｕｓ ２０００またはＢｅｅ Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ、ＮａｎｏＤｅＢＥＥのような高圧ホモジナイザーにＭＥを導入し、再循環ループを確立した。高圧均質化によって発生する熱を中和するために、設定値５℃の温度制御ユニットによって供給される向流熱交換器が再循環ループ内に含まれている。所望のサイズおよび加工性のエマルション粒子を製造するために、このプロセス工程の操作設定値として２０ｋＰＳＩを選択した。高圧ホモジナイザーは、確立された再循環ループを通じて一定かつ変更不能な流量で作動する。この測定流量および処理ＭＥ体積を用いて、製剤全体が再循環ループを１回通過するのに必要な理論的時間を計算した。この計算された１回通過時間を考慮して、通常、少なくとも１０の所望の通過数に達するまで高圧ホモジナイザーを作動させて、ＳＮＥまたはＣＬＡ－ＳＮＥのいずれかを得た。

【0320】

濾過
製剤化後、ＳＮＥまたはＣＬＡ－ＳＮＥを０．８／０．２μｍのＰＥＳフィルターに通過させた。最適な質量収率と濾過による粒子の安定性を考慮して、フィルターを通過する流束４２ＬＭＨを選択した。

【0321】

Ｍａｌｖｅｒｎ Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｌｔｄ．のＭＳ３０００装置を使用するレーザー回折または静的光散乱（ＳＬＳ）技術を利用して、製造中のナノエマルションの体積－加重サイズ分布を測定した。次いでこのデータを分析して、散乱パターンを生成した粒子のサイズを計算した。予均質化エマルション（ＰＨＥ）、マイクロエマルション（ＭＥ）および安定ナノエマルション（ＳＮＥ）のサンプル画分を得た。これらのエマルション製剤を、３％のオブスキュレーション（ｏｂｓｃｕｒａｔｉｏｎ）となるように、５ｍＭ ヒスチジン（ｐＨ５．８）および２．５ｍＭ ＮａＣｌバッファー中に希釈し、ＳＬＳを行い、１２００ＲＰＭの再循環下で収集を行った。サンプルデータセットをデータセット当たり３０秒のスキャンで収集した。ＣＬＡ－ＳＮＥ製剤化プロセスにおける各工程からの３つのデータセットを図３に要約する。２０ｍＭ ヒスチジン（ｐＨ５．８）バッファーはプロセス中およびポリマー容器（例えば、プラスチック）内の貯蔵の際にはバルクの安定性にとって完全に適した製剤であったが、ガラス内の貯蔵の際には、ガラス表面へのＣＬＡ－ＳＮＥまたはＳＮＥの非特異的吸収が観察された。界面活性剤／可溶化剤、バッファーおよび塩を評価するスクリーニングを評価し、複数の製剤が、安定化製剤として選択された２０ｍＭ ヒスチジン、０．０５％ ＰＳ－２０および７５ｍＭ ＮａＣｌの選択された製剤によってこの安定性の問題の解決に成功したことを示した（データ非表示）。

【0322】

実施例４：安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント系の製造、およびＳＮＥのマイクロフルイダイゼーション直後の遊離塩基としてのＣＬＡまたはカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンの添加
ヒスチジン（ｐＨ５．８）バッファー中に配合されたＰＳ－２０、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）およびスクアレンを含むナノエマルション粒子内へのＣＬＡの取り込みに関して、２つの製剤化プロセスを評価した。第１のプロセス（プロセス１と称される）においては、実施例３に記載されているプロセスを用いてＳＮＥを製造した。第２のプロセス（プロセス２と称される）においては、ＰＳ－２０、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）およびスクアレンのみを一緒にし、混合した。混合しブレンドしたら、ヒスチジンバッファーを添加し、最初のエマルション成分（ＰＳ－２０、ソルビタントリオレアートおよびスクアレン）と混合した。実施例３に記載されているとおり、ブレンドされたエマルション成分を、まず、粗い均質化に付してマイクロエマルションＭＥを生成させ、次いでマイクロフルイダイゼーションに付してナノエマルション（ＮＥ）を生成させた。別のガラス容器において、０．２５ｍｇ／ｍＬのＣＬＡを室温で１００％エタノールに溶解した。次いで、所望の最終ＣＬＡ濃度を得るのに十分な体積のこのＣＬＡエタノール溶液を、ヒスチジンバッファー（ｐＨ５．８）中にＰＳ－２０、ソルビタントリオレアートおよびスクアレンを含有するＳＮＥに添加し、次いで室温で６０分間混合した。次いで、インキュベーション後、製剤を５００ｍＬのバッファーに対して１０ｍＬのサンプルの割合で５ｍＭ ヒスチジン、２．５ｍＭ ＮａＣｌ（ｐＨ５．８）に対して４℃で一晩、２回バッファー交換しながら透析した。次いで、ＵＰＬＣ－ＣＡＤを用いて、２つの処理済みエマルション（プロセス１および２）をＳＮＥ内へのＣＬＡの取り込みに関して検査した。結果は、プロセス２を用いた場合には、個々の製剤の目標取り込み率（（ｗ／ｗ）％）と比較して、有意な量のＣＬＡが取り込まれなかったことを示しており、このことは、ナノエマルションにおけるＣＬＡの取り込みおよび安定性の成功にはプロセス１が好ましいことを示している（図４）。

【0323】

実施例５：カチオン性脂質含有ＬＮＰアジュバントの製造
ＣＬＡ－ＬＮＰは、４つの成分、すなわち、１つのカチオン性脂質［ＣＬＡと称される；図１においては、好ましいカチオン性脂質であるＣＬＡ、すなわち（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンで示されている］、コレステロール、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）およびｅＰＥＧ－ＤＭＧからなる多成分ＬＮＰ製剤である。

【0324】

脂質成分に関する最終ＣＬＡ－ＬＮＰ製剤の相対目標モル％値は５８％ ＣＬＡ、３０％ コレステロール、２％ ｅＰＥＧ２０００－ＤＭＧおよび１０％ ＤＳＰＣである（表３）。

【0325】

【表3】

【0326】

ＣＬＡ－ＬＮＰの製造プロセスは以下の５つの工程からなる：１）脂質混合物および希釈シトラートＡの溶液調製；２）Ｔ混合によるＬＮＰ形成；３）限外濾過；４）バイオバーデン低減濾過；ならびに５）滅菌濾過およびバイアル充填。

【0327】

脂質混合物および希釈シトラートＡの溶液調製
脂質成分を秤量し、一緒にした後、エタノールに溶解し、次いで滅菌濾過して脂質混合物を得た。シトラートＡ（２０ｍＭ シトラート、ｐＨ５．０）を滅菌水で１の比率で希釈して、希釈シトラートＡ（ＤＣＡ）を得た。

【0328】

Ｔ混合によるＬＮＰ形成
次いで脂質混合物とＤＣＡとをＴチューブミキサーの隣接末端において一緒に混合した。Ｔ混合装置を出る流れを２０ｍＭ シトラート、３００ｍＭ ＮａＣｌ（ｐＨ６．０）で１：１に直ちに希釈し、次いでこの生成物混合物を１×ダルベッコリン酸緩衝生理食塩水で再び１：１に希釈し、次いで、形成されたＬＮＰとして収集した。次いでＬＮＰ中間体を周囲温度で３０分間インキュベートした後、４℃で一晩維持した。

【0329】

限外濾過
次いでＬＮＰ中間体を５００ｋＤａ ＮＭＷＣＯでの限外濾過に付して、該材料を約１０倍に濃縮すると共に、該材料を２０ｍＭトリス、１０％（ｗ／ｖ） スクロース（ｐＨ７．５）に対してダイアフィルトレーションした。ダイアフィルトレーションの後、最終目標濃度を得るために、最終濃縮工程を行った。

【0330】

バイオバーデン低減濾過
次いでアジュバントバルクを０．４５μｍの酢酸セルロース（ＣＡ）フィルターで、続いて０．２μｍのＣＡバイオバーデン低減フィルターで予備濾過し、－７０℃で冷凍貯蔵した。

【0331】

滅菌濾過およびバイアル充填
凍結したアジュバントバルクを、２５±３℃に制御された水浴において解凍した。解凍したアジュバントバルクを０．４５μｍのポリビニリデンフルオリド（ＰＶＤＦ）バイオバーデン低減フィルターおよび０．２２μｍのＰＶＤＦ滅菌グレードフィルターに通過させ、回収した。次いで、濾過したアジュバントバルクを２０ｍＭ トリス、１０％（ｗ／ｖ） スクロース（ｐＨ７．５）で目標ＬＮＰアジュバント濃度まで希釈した。次いで、この希釈された最終バルクアジュバントをガラスバイアル内に充填し、－７０℃で貯蔵した。

【0332】

実施例６：マウスにおけるＰＣＶ１免疫原性：アジュバント系の評価
若い雌ＢＡＬＢ／ｃマウス（６～８週齢、ｎ＝１０／群）を、種々のアジュバント（表４）を配合した０．１ｍＬのＰＣＶ１で、第０日、第１４日および第２８日に筋肉内（ＩＭ）に免疫化した。免疫化当たり０．０８μｇのＰｎＰｓ（ＣＲＭ１９７にコンジュゲート化された６Ｂ）を投与した。マウスは、いずれかの疾患または苦痛の兆候に関して、訓練を受けた動物管理スタッフによって少なくとも毎日観察された。ワクチン関連有害事象は認められなかったため、マウスにおける該ワクチン製剤は安全かつ高忍容性であるとみなされた。全ての動物実験は、米国国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）の実験動物の管理および使用に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）の推奨事項を厳密に遵守して行われた。マウス実験プロトコールはＭｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ，ＵＳＡ）における施設内動物管理使用委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって承認されたものであった。

【0333】

【表4】

【0334】

ＥＬＩＳＡを用いてマウス血清をＩｇＧ免疫原性に関して評価して、抗６Ｂ ＩｇＧ力価を評価した。機能的抗体は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ（ＵＡＢ）Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎによって所有されそれからライセンス供与されたＯｐｓｏｔｉｔｅｒ（登録商標）３ソフトウェアおよびＵＡＢ Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｔ Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｐａｔｈｏｇｅｎ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌｉｂｒａｒｙ）から入手可能な既に記載されているプロトコールに基づくオプソニン貪食アッセイ（ＯＰＡ）によって決定された（Ｃａｒｏ－Ａｇｕｉｌａｒ Ｉ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅ（２０１７）３５（６）：８６５－７２ならびにＢｕｒｔｏｎ Ｒ．Ｌ．およびＮａｈｍ Ｍ．Ｈ．Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００６）１３（９）：１００４－９を参照されたい）。図５Ａに示されているとおり、ＰＣＶ１免疫化は、ＡＰＡの存在下および非存在下で製剤化されたワクチンにおいて、６Ｂ血清型（ＳＴ－６Ｂ）に対する抗体価をＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて生成した。ＣＬＡ－ＳＮＥ（用量当たり０．０８、８または８０ｍｇのＣＬＡ）またはＳＮＥアジュバントと共に製剤化されたＳＴ－６Ｂはマウスにおいて免疫原性であることが判明し、単独で又はＡＰＡと共に製剤化されたＳＴ－６Ｂと比較して、第３投与後において、より高い免疫原性をもたらした。ＡＰＡの存在下および非存在下で製剤化されたＳＴ－６Ｂで免疫化されたＢＡＬＢ／ｃマウスにおいて、抗６Ｂ機能的抗体価が生成された（図５Ｂ）。

【0335】

実施例７：成体アカゲザルにおけるＰＣＶ２４の免疫原性
ＰＣＶ２４（血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂのそれぞれが個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されているもの）を成体アカゲザル免疫原性モデルにおいて評価した。第０日および第２８日に、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４、あるいはＳＮＥを配合した又はＳＮＥ（ＣＬＡ－ＳＮＥ）もしくはＬＮＰ（ＣＬＡ－ＬＮＰ）として配合されたＣＬＡを配合したＰＣＶ２４（表５）でアカゲザルを筋肉内に免疫化した。免疫化当たり０．１ｍＬの体積中の０．４μｇ ＰｎＰｓでＰＣＶ２４を投与した。研究開始前（免疫化前、第０日）ならびに第１４日（ＰＤ１）および第４２日（ＰＤ２）に血清を採取した。

【0336】

【表5】

【0337】

２４価ワクチンにおける血清型特異的ＩｇＧ免疫原性応答を評価するために、多重化電気化学発光（ＥＣＬ）アッセイを開発した。このアッセイは、Ｍａｒｃｈｅｓｅら及びＳｋｉｎｎｅｒら（Ｍａｒｃｈｅｓｅ Ｒ．Ｄ．ら，Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００９）１６（３）：３８７－９６およびＳｋｉｎｎｅｒ，Ｊ．Ｍ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅ（２０１１）２９（４８）：８８７０－８８７６）によって記載されている以前のアッセイに基づいて、アカゲザル血清で使用するために開発した。ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，ＬＬＣ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤの一部門）によって開発された技術は、９６ウェルプレート内のスポット上にコーティングされた肺炎球菌血清型多糖（１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆ、３５Ｂ）、および電気化学的刺激に際して発光するＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ（商標）標識抗体を利用する。ＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ（商標）標識抗ヒトＩｇＧを、アカゲザル血清サンプルを試験するための二次抗体として使用した。ＥＣＬおよび希釈度の対数目盛を使用して、カットオフ値（対照のＥＣＬシグナル）に対応する直線補間希釈度の逆数として、終点希釈力価を計算した。カットオフ線の完全に上に位置するサンプル曲線の最後の２つまたは３つのＥＣＬアッセイデータ点の切片および勾配を使用した直線外挿（対数－対数目盛）に基づいて、検討した最大希釈度を超えるサンプルに関して、力価を外挿した。全ての力価は、直線外挿希釈度を逆変換することによって得た。サンプル曲線がカットオフ線の完全に下に位置する場合には、全てのデータ分析ならびに図６Ａおよび６Ｂにおける力価として１００を用いた。機能的抗体は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ（ＵＡＢ）Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎによって所有されそれからライセンス供与されたＯｐｓｏｔｉｔｅｒ（登録商標）３ソフトウェアおよびＵＡＢ Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｔ Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｐａｔｈｏｇｅｎ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌｉｂｒａｒｙ）から入手可能な既に記載されているプロトコールに基づく多重化オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された（Ｃａｒｏ－Ａｇｕｉｌａｒ Ｉ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅ（２０１７）３５（６）：８６５－７２ならびにＢｕｒｔｏｎ Ｒ．Ｌ．およびＮａｈｍ Ｍ．Ｈ．Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００６）１３（９）：１００４－９を参照されたい）。

【0338】

１２００μｇ／ｍＬのＣＬＡ－ＳＮＥ（２５ｍｇ／ｍＬのスクアレン、５．０ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０、５．０ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５）を配合したＰＣＶ２４は成体アカゲザルにおいて免疫原性であることが判明し、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較して、第１投与後および第２投与後に、より高い免疫原性をもたらした（図６Ａ）。１２０μｇの用量レベルのＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２４は、第１投与後（ＰＤ１）および第２投与後（ＰＤ２）に、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４（実線）と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。ＰＤ２においては、ＣＬＡの２つの用量レベル（丸印で示されている１２０μｇまたは三角形で示されている８０μｇ）のＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２４は、ＡＰＡ（実線）を配合したＰＣＶ２４またはＣＬＡ－ＬＮＰ（１２０μｇ；正方形として表示）を配合したＰＣＶ２４と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。（図６Ｂ）。

【0339】

これらの同じ製剤は、試験した全ての時点でワクチン型細菌株を殺滅する機能的抗体を生成し（図７Ａ～７Ｍ）、再び、ＣＬＡ－ＳＮＥ、ＳＮＥ単独およびＣＬＡ－ＬＮＰは、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較してＰＣＶ２４応答を増強した。１つの例外は２３Ｂであり、その高い肺炎球菌予備免疫化がワクチン接種後の追加免疫応答を妨げた。全ての研究時点をプール化サンプルまたは個別のサンプルとしてのＭＯＰＡにおいて試験した（図７Ａ～７Ｍ）。ＰＤ１とＰＤ２との間でＯＰＡ力価の大きな差は観察されなかった。

【0340】

ＰＣＶ２４で免疫化した成体アカゲザルの血清を他のストレプトコッカス・ニューモニエ細菌に対する交差反応性に関して評価した。ＰＣＶ２４で免疫化したアカゲザルの血清は血清型６Ｃ（図６Ａ、６Ｂおよび７Ｄ）および１５Ｂ（図６Ａおよび６Ｂ）に対する交差反応性を示した。６Ｃに対する交差反応性は多価ＰＣＶ２４の一部としての多糖コンジュゲート６Ａ－ＣＲＭ１９７での免疫化によるものである可能性がある（Ｃｏｏｐｅｒ Ｄ，Ｙｕ Ｘ，Ｓｉｄｈｕ Ｍ，Ｎａｈｍ ＭＨ，Ｆｅｒｎｓｔｅｎ Ｐ，Ｊａｎｓｅｎ ＫＵ）。１３価肺炎球菌コンジュゲートワクチン（ＰＣＶ１３）はヒトにおいてストレプトコッカス・ニューモニエ血清型６Ｃおよび７Ａに対する交差機能的オプソニン貪食殺滅応答を誘発する（Ｖａｃｃｉｎｅ．２０１１；２９：７２０７－１１）。同様に、多価ＰＣＶの一部としての多糖コンジュゲート脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ－ＣＲＭ１９７での免疫化は血清型１５Ｃに対する交差反応性をもたらした（Ｒａｊａｍら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００７，１４（９）：１２２３－１２２７）。

【0341】

実施例８：乳児アカゲザル（ＩＲＭ）におけるＰＣＶ２４免疫原性研究
ＰＣＶ２４（血清型１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂのそれぞれが個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されている）およびアジュバント製剤を、前記実施例に記載されているとおり製造した。ＩＲＭ（乳児アカゲザル、ｎ＝５／群）を、第０日、第２８日および第５６日に、以下の表６に記載されているとおりに、０．１ｍＬのワクチンで筋肉内に免疫化した。研究開始前（前）ならびにび第１４日（ＰＤ１）、第４２日（ＰＤ２）および第７０日（ＰＤ３）に血清を採取した。ＩＲＭは、訓練を受けた動物管理スタッフによって、１日２回、疾患または苦痛のいずれかの兆候に関して観察された。ワクチン関連の有害事象は認められなかったため、ＩＲＭにおける該ワクチン製剤は安全かつ高忍容性であるとみなされた。

【0342】

【表6】

【0343】

２４価ワクチンにおける血清型特異的ＩｇＧ免疫原性応答を評価するために、前記のとおりに使用される多重化電気化学発光（ＥＣＬ）アッセイを開発した。ＥＣＬおよび希釈度の対数目盛を使用して、カットオフ値（対照のＥＣＬシグナル）に対応する直線補間希釈度の逆数として、終点力価を計算した。カットオフ線の完全に上に位置するサンプル曲線の最後の２つまたは３つのＥＣＬアッセイデータ点の切片および勾配を使用した直線外挿（対数－対数目盛）に基づいて、検討した最大希釈度を超えるサンプルに関して、力価を外挿した。次いで、直線外挿希釈度を逆変換することによって、力価を得た。サンプル曲線がカットオフ線の完全に下に位置する場合には、全てのデータ分析および図面における力価として１００を用いた。

【0344】

図８Ａに示されているとおり、第２投与後（第４２日）、ＣＬＡ－ＬＮＰを配合したＰＣＶ２４は、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４（丸印）と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。ＣＬＡ－ＳＮＥ（０．１ｍＬの用量当たり２．５ｍｇのスクアレン、０．２５ｍｇのＰＳ－２０、０．２５ｍｇのＳＰＡＮ－８５の存在下の２９５μｇのＣＬＡ；三角形で示されている）またはＣＬＡ－ＳＮＥ（０．１ｍＬの用量当たり０．５ｍｇのスクアレン、０．０５ｍｇのＰＳ－２０、０．０５ｍｇのＳＰＡＮ－８５の存在下の２９５μｇのＣＬＡ；菱形で示されている）を配合したＰＣＶ２４は、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。ＰＣＶ１３およびＰＣＶ２４／ＡＰＡは、ＳＴ５を除き、共通して血清型（ＳＴ）に対して同等の免疫原性を示す（正方形）。ＳＴ５は、ＰＣＶ２４／ＡＰＡに関して、より高い免疫原性を示す。

【0345】

ＣＬＡ－ＳＮＥ（０．１ｍＬの用量当たり２．５ｍｇのスクアレン、０．２５ｍｇのＰＳ－２０、０．２５ｍｇのＳＰＡＮ－８５の存在下の６０μｇのＣＬＡ；丸印で示されている）、ＣＬＡ－ＳＮＥ（０．１ｍＬの用量当たり２．５ｍｇのスクアレン、０．２５ｍｇのＰＳ－２０、０．２５ｍｇのＳＰＡＮ－８５の存在下の１２０μｇのＣＬＡ；三角形で示されている）またはＣＬＡ－ＳＮＥ（０．１ｍＬの用量当たり２．５ｍＬのスクアレン、０．２５ｍｇのＰＳ－２０、０．２５ｍｇのＳＰＡＮ－８５の存在下の２９５μｇのＣＬＡ；菱形で示されている）を配合したＰＣＶ２４は、ＰＤ１（図８Ｂ）、ＰＤ２（図８Ｃ）およびＰＤ３（図８Ｄ）において、ＡＰＡを配合したＰＣＶ２４と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。注目すべきことに、０．１ｍＬの用量当たり０．０８ｍｇのスクアレン、０．００８ｍｇのＰＳ－２０、０．００８ｍｇのＳＰＡＮ－８５を使用してＣＬＡ１２０μｇでＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２４は、０．１ｍＬの用量当たり０．５ｍｇのスクアレン、０．０５ｍｇのＰＳ－２０、０．０５ｍｇのＳＰＡＮ－８５を配合し１２０μｇ（ＣＬＡ）でＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２４、または０．１ｍＬの用量当たり２．５ｍｇのスクアレン、０．２５ｍｇのＰＳ－２０、０．２４ｍｇのＳＰＡＮ－８５と共にＣＬＡ２９５μｇでＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶと比較して同等の免疫原性をもたらす（データ非表示）。

【0346】

実施例９：マウスにおけるチャレンジからのＰＣＶ２４防御
若い雌スイス・ウェブスター（Ｓｗｉｓｓ Ｗｅｂｓｔｅｒ）マウス（６～８週齢、ｎ＝１０／群）を、第０日、第１４日および第２８日に、０．１ｍＬの２４価肺炎球菌コンジュゲートワクチン（ＰＣＶ２４）で筋肉内（ＩＭ）に免疫化した。ＰＣＶ２４を投与した。ＰＣＶ２４は、ＣＲＭ１９７にそれぞれがコンジュゲート化されているＰｎＰｓ（１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ）の０．４μｇで投与した。ＰＣＶ２４は、表７に記載されているとおりの幾つかのアジュバント系を使用して製剤化されたものであった。マウスは、いずれかの疾患または苦痛の兆候に関して、訓練を受けた動物管理スタッフによって毎日観察された。ワクチン関連有害事象は認められなかったため、マウスにおける該ワクチン製剤は安全かつ高忍容性であるとみなされた。全ての動物実験は、米国国立衛生研究所（Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｓ ｏｆ Ｈｅａｌｔｈ）の実験動物の管理および使用に関する指針（Ｇｕｉｄｅ ｆｏｒ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ ｏｆ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ａｎｉｍａｌｓ）の推奨事項を厳密に遵守して行われた。マウス実験プロトコールはＭｅｒｃｋ ＆ Ｃｏ．，Ｉｎｃ．（Ｋｅｎｉｌｗｏｒｔｈ，ＮＪ，ＵＳＡ）における施設内動物管理使用委員会（Ｉｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌ Ａｎｉｍａｌ Ｃａｒｅ ａｎｄ Ｕｓｅ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅ）によって承認されたものであった。

【0347】

第５３日に、マウスをイソフルランで麻酔し、ストレプトコッカス・ニューモニエ血清型２４Ｆで気管内チャレンジした。簡潔に説明すると、ストレプトコッカス・ニューモニエの対数期培養物を遠心分離し、洗浄し、滅菌ＰＢＳに懸濁させた。０．１ｍＬのＰＢＳ中の４．６×１０^６ ｃｆｕのストレプトコッカス・ニューモニエを、切歯によって直立に吊るされたマウスの喉に配置した。舌を外側にゆっくりと引っ張り、鼻孔を覆うことによって、該細菌の吸引を誘発した。マウスの体重を毎日測定し、体重減少が開始体重の２０％を超えた場合には安楽死させた。菌血症を評価するために、チャレンジ後の２４時間、４８時間および７２時間の時点で血液を採取した。マウスは、いずれかの疾患または苦痛の兆候に関して、訓練を受けた動物管理スタッフによって少なくとも１日２回観察された。

【0348】

アジュバント添加（ＣＬＡ－ＬＮＰ、ＣＬＡ－ＳＮＥまたはＳＮＥ単独）ワクチンを含むＰＣＶ２４で免疫化されたマウスは血清型２４Ｆの気管内チャレンジから防御された（図９）。アジュバントを含有するＰＣＶ２４製剤で免疫化された全てのマウスはチャレンジ後第７日において１００％の生存率を示し、一方、未処置（ナイーブ）マウスの生存率は１０％であった。このデータは、アジュバント製剤を含有するＰＣＶ２４が血清型２４ＦのＩＴチャレンジからマウスを防御することができたことを示している。

【0349】

【表7】

【0350】

実施例１０：ＮＴＡおよびＤＬＳを用いた場合のナノエマルション製剤の物理的安定性に対する時間および温度の影響
図１０に示されているとおり、前記実施例に記載されているとおり製造したナノエマルション系（ＣＬＡ－ＳＮＥまたはＳＮＥ）の安定性を評価するために、ナノ粒子追跡分析（ＮＴＡ）を用いた。この技術は、粒子サイズおよび濃度を推定するために、直接追跡ナノ粒子集団のビデオを、それらがブラウン運動によって移動するにつれて収集する。クラス１の６３５ｎｍレーザーは液体サンプルを通して８０ｍｍの赤色レーザービームを集束させて、急速に拡散する光点として粒子を照射する。ＣＣＤカメラは、それぞれの個々の照射粒子の運動を経時的に追跡するために、毎秒３０フレームのビデオを記録する。システムソフトウェアは、ビデオから、それぞれの個々の粒子の中心を特定し、独立して横断した距離を追跡して、平均二乗変位を決定する。ビデオ全体から収集された生データが分析されるまで、各フレームにおけるサンプル集団内の全ての粒子に関して、この追跡を同時に行った。追跡された全ての個々の粒子の平均二乗変位を同時に測定することによって、その拡散係数（Ｄｔ）および球面等価流体力学的半径（ｓｐｈｅｒｉｃａｌ ｅｑｕｉｖａｌｅｎｔ ｈｙｄｒｏｄｙｎａｍｉｃ ｒａｄｉｕｓ）（ｒｈ）を、ストークス－アインシュタイン方程式を適用することによって決定した。次いでソフトウェアはこの蓄積データを粒子サイズおよび濃度分布として表示する。粒子サイズおよび濃度だけでなく、個々の粒子の強度または明るさに関する生データ情報も収集された。データをまとめてフィッティングし、粒子サイズに対する粒子強度および粒子サイズに対する粒子濃度として個別にプロットし、次いで、全ての粒子集団の粒子サイズ、濃度および強度を比較する３次元等高線プロット上にプロットした。

【0351】

ナノエマルション製剤（ＣＬＡ－ＳＮＥまたはＳＮＥ）を４℃、２５℃および３７℃に最長１か月間さらしても、ＮＴＡを用いた評価において、ナノエマルションの粒子濃度またはサイズ分布における有意な変化は観察されなかった（図１０）。

【0352】

ナノエマルションは１０～１０００ｎｍの粒径範囲内で凝集しやすいため、ＤＬＳは、凝集現象を評価し定量するための適切な安定性表示技術となる。前記実施例に記載されているとおりに製造されたナノエマルション系の安定性を評価するために、動的光散乱（ＤＬＳ）を用いて、平均粒径分布を測定した。ＤＬＳ装置はレーザーを使用して、溶液中の粒子を照射し、次いで、ブラウン運動の結果としての経時的な散乱光の強度の変化を検査する。時間ゼロにおける強度に対する経時的な散乱光強度の相関性は指数関数的な減衰曲線または相関関数をもたらす。時間に対する相関関数における減衰速度は、大きな粒子よりも小さな粒子の場合の方が遥かに速く、これが粒子サイズの計算のための基礎となる。ナノエマルションを４℃、２５℃または３７℃に最大１ヶ月間さらしても、ナノエマルションのサイズ分布における変化はＤＬＳにより観察されなかった（図１１）。ＣＬＡ－ＳＮＥまたはＳＮＥに関しては、Ｚ平均は約１１０ｎｍ～１８０ｎｍのままであった。

【0353】

実施例１１：ＵＰＬＣ－ＣＡＤを用いた場合のナノエマルション製剤の化学的安定性に対する時間および温度の影響
前記実施例に記載されているとおりに製造されたナノエマルション系の化学的安定性を評価するために、荷電化粒子検出器と組合された超高性能液体クロマトグラフィー（ＵＰＬＣ－ＣＡＤ）を用いて、４℃、２５℃および３７℃での１か月間の貯蔵の際のＣＬＡ（ＣＬＡ－ＳＮＥのみ）の安定性およびスクアレン濃度を測定した。ナノエマルションを４℃、２５℃および３７℃に最大１ヶ月間さらしても、ＳＮＥ中のＣＬＡ（図１２Ａ）またはスクアレン（図１２Ｂ）の濃度は影響を受けなかった。更に、ＵＰＬＣ－ＣＡＤはスクアレンまたはＣＬＡの化学分解による分解生成物の生成を定量しうる。ＳＮＥまたはＣＬＡ－ＳＮＥアジュバント系を高温にさらしても、検出可能な分解ピークは観察されず、このことは、ＣＬＡ－ＳＮＥおよびＳＮＥアジュバント系のスクアレンおよびＣＬＡ成分が優れた熱安定性を有することを示している（データ非表示）。

【0354】

実施例１２：肺炎球菌コンジュゲートワクチンの安定性に対する安定エマルション系（＋／－ＣＬＡ）の影響
還元的アミノ化溶媒（非プロトン性ＤＭＳＯ）を使用して製造された個々の肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートを、前記実施例に記載されているとおり、１９２μｇ／ｍＬでＰＣＶ２４の製剤化に使用した。

【0355】

ＰＣＶ２４組成物を、表８に記載されている種々のアジュバント系とガラス容器内で一緒にし、４℃で最大３０日間放置した。該製剤は良好な安定性を示し、ＣＬＡ－ＳＮＥ（１．２ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ［６．５ｍｇ／ｍＬのスクアレン、０．６５ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０、０．６５ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５］または１．２ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡ－ＳＮＥ［１．２ｍｇ／ｍＬのスクアレン、０．１２ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０、０．１２ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５］）またはＳＮＥ（［６．５ｍｇのスクアレン、０．６５ｍｇのＰＳ－２０、０．６５ｍｇのＳＰＡＮ－８５］または［０．４ｍｇのスクアレン、０．０４ｍｇのＰＳ－２０、０．０４ｍｇのＳＰＡＮ－８５］）は、蛍光に基づくＥＬＩＳＡアッセイを用いた場合、肺炎球菌多糖－担体タンパク質コンジュゲートの用量の安定性に影響を及ぼさなかった（図１３Ａ～１３Ｄ）。

【0356】

【表8】

【0357】

実施例１３：成体アカゲザルにおけるＰＣＶ２１免疫原性
また、ＰＣＶ２１（血清型３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ（脱ＯＡｃ１５Ｂ）、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂのそれぞれが個別にＣＲＭ１９７にコンジュゲート化されている）を、前記実施例に記載されているとおり、成体アカゲザル免疫原性モデルにおいて評価した。アカゲザルを、第０日および第２８日に、ＰＣＶ２１単独で、またはＳＮＥとして製剤化されたＣＬＡ（ＣＬＡ－ＳＮＥ）を配合したＰＣＶ２１（表９）で、筋肉内に免疫化した。免疫化当たり０．２５ｍＬの体積中の１．０μｇのＰｎＰｓで、ＰＣＶ２１を投与した。研究開始前（免疫化前、第０日）ならびに第１４日（ＰＤ１）、第２８日（ＰＤ１）および第４２日（ＰＤ２）に血清を採取した。

【0358】

【表9】

【0359】

２１価ワクチンにおける血清型特異的ＩｇＧ免疫原性応答を評価するために、多重化電気化学発光（ＥＣＬ）アッセイを開発した。このアッセイは、Ｍａｒｃｈｅｓｅら及びＳｋｉｎｎｅｒら（Ｍａｒｃｈｅｓｅ Ｒ．Ｄ．ら，Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００９）１６（３）：３８７－９６およびＳｋｉｎｎｅｒ，Ｊ．Ｍ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅ（２０１１）２９（４８）：８８７０－８８７６）によって記載されている以前のアッセイに基づいて、アカゲザル血清で使用するために開発した。ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ（ＭｅｓｏＳｃａｌｅ Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃｓ，ＬＬＣ，Ｇａｉｔｈｅｒｓｂｕｒｇ，ＭＤの一部門）によって開発された技術は、９６ウェルプレート内のスポット上にコーティングされた肺炎球菌血清型多糖（３、６Ａ、６Ｃ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、脱ＯＡｃ１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ）、および電気化学的刺激に際して発光するＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ（商標）標識抗体を利用する。ＳＵＬＦＯ－ＴＡＧ（商標）標識抗ヒトＩｇＧを、アカゲザル血清サンプルを試験するための二次抗体として使用した。図１４Ａ、１４Ｂおよび１４Ｃでは、ＩｇＧ濃度を参照血清標準００７ｓｐから内挿した。機能的抗体は、Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ（ＵＡＢ）Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎによって所有されそれからライセンス供与されたＯｐｓｏｔｉｔｅｒ（登録商標）３ソフトウェアおよびＵＡＢ Ｐｎｅｕｍｏｃｏｃｃａｌ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ（Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ａｌａｂａｍａ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ａｔ Ｂｉｒｍｉｎｇｈａｍ Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ Ｐａｔｈｏｇｅｎ Ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ Ｌｉｂｒａｒｙ）から入手可能な既に記載されているプロトコールに基づく多重化オプソニン貪食アッセイ（ＭＯＰＡ）によって決定された（Ｃａｒｏ－Ａｇｕｉｌａｒ Ｉ．ら，Ｖａｃｃｉｎｅ（２０１７）３５（６）：８６５－７２ならびにＢｕｒｔｏｎ Ｒ．Ｌ．およびＮａｈｍ Ｍ．Ｈ．Ｃｌｉｎ．Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌ．（２００６）１３（９）：１００４－９を参照されたい）。

【0360】

１．２ｍｇ／ｍＬのＣＬＡ－ＳＮＥ（１．２ｍｇ／ｍＬのスクアレン、０．１２ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０、０．１２ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５）を配合したＰＣＶ２１は成体アカゲザルにおいて免疫原性であることが判明し、アジュバントの非存在下で製剤化されたＰＣＶ２１と比較して、第１投与後（第１４日－図１４Ａ；第２８日－図１４Ｂ）および第２投与後（第４２日；図１４Ｃ）に、より高い免疫原性をもたらした（図６Ａ）。３００μｇの用量レベルのＣＬＡ－ＳＮＥを配合したＰＣＶ２１は、第１投与後（ＰＤ１）および第２投与後（ＰＤ２）に、アジュバントの非存在下で製剤化されたＰＣＶ２１と比較して同等の又はより良好な免疫原性をもたらす。

【0361】

これらの同じ製剤は、試験した全ての時点でワクチン型細菌株を殺滅する機能的抗体を生成し、再び、ＣＬＡ－ＳＮＥは、単独で配合したＰＣＶ２１と比較してＰＣＶ２１応答を増強した。全ての研究時点をプール化サンプルまたは個別のサンプルとしてのＭＯＰＡにおいて試験した。ＰＤ１とＰＤ２との間でＯＰＡ力価の大きな差は観察されなかった（データ非表示）。

【0362】

ＰＣＶ２１で免疫化した成体アカゲザルの血清を他のストレプトコッカス・ニューモニエ細菌に対する交差反応性に関して評価した。ＰＣＶ２１で免疫化したアカゲザルの血清は血清型６Ｃ（図１４Ａ、１４Ｂおよび１４Ｃ）および１５Ｂ（図１４Ａ、１４Ｂおよび１４Ｃ）に対する交差反応性を示した。６Ｃに対する交差反応性は多価ＰＣＶ２４の一部としての多糖コンジュゲート６Ａ－ＣＲＭ１９７での免疫化によるものである可能性がある（Ｃｏｏｐｅｒ Ｄ，Ｙｕ Ｘ，Ｓｉｄｈｕ Ｍ，Ｎａｈｍ ＭＨ，Ｆｅｒｎｓｔｅｎ Ｐ，Ｊａｎｓｅｎ ＫＵ）。１３価肺炎球菌コンジュゲートワクチン（ＰＣＶ１３）はヒトにおいてストレプトコッカス・ニューモニエ血清型６Ｃおよび７Ａに対する交差機能的オプソニン貪食殺滅応答を誘発する（Ｖａｃｃｉｎｅ．２０１１；２９：７２０７－１１）。同様に、多価ＰＣＶの一部としての多糖コンジュゲート脱Ｏ－Ａｃ－１５Ｂ－ＣＲＭ１９７（脱ＯＡｃ１５Ｂ－ＣＲＭ１９７）での免疫化は血清型１５Ｃに対する交差反応性をもたらした（Ｒａｊａｍら，Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｖａｃｃｉｎｅ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ，２００７，１４（９）：１２２３－１２２７）。

【0363】

実施例１４：マイクロ流体（ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃ）ナノエマルション自己集合（ＭＮＳ）によるカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンの存在下および非存在下の安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント系の製造

【0364】

安定ナノエマルションアジュバントは、ＣＬＡ（図１）とも称されるイオン化可能なカチオン性脂質（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンの存在下および非存在下で製造される。ＳＮＥを製造するために、マイクロ流体ナノエマルション自己集合（ＭＮＳ）プロセスが用いられる。ＳＮＥは、ＣＬＡの存在下（ＣＬＡ－ＳＮＥと称される；表１０）またはＣＬＡの非存在下（ＳＮＥと称される；表１１）、３つの安定化成分、すなわち、スクアレン、ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）およびポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）からなる多成分エマルション製剤である。ＭＮＳで製造されたＳＮＥ／ＣＬＡ－ＳＮＥ製剤の生物物理学的特性（例えば、粒子サイズ、化学的組成）および安定性は、実施例３に記載されているＳＮＥ／ＣＬＡ－ＳＮＥ製剤の製造のための高圧微細均質化プロセスの場合に非常に類似している。本質的に、この実施例に記載されているマイクロ流体ナノエマルション自己集合（ＭＮＳ）プロセスは、安定ナノエマルション（ＳＮＥ）アジュバント系を製造するための代替プロセスである。この実施例に記載されているナノ粒子自己集合プロセスは、「マイクロフルイディクス」エタノール／水性混合装置を使用して行われた。しかし、本発明に記載されているエタノール／水流ナノ粒子自己集合プロセスは「マイクロ流体（マイクロフルイディック）」混合によって限定されない。より大きな体積の疎水性溶媒流と水溶液との混合が、実施例４に概説されているティー（Ｔｅｅ）混合プロセスを用いて達成されうる。

【0365】

ＳＮＥ ＭＮＳ製剤は、一般に、カチオン性脂質、スクアレン、ＳＰＡＮ－８５およびＰＳ－２０を目標濃度でエタノールのような適切な非水性溶媒中に溶解することによって製造されうる。自己集合手順は、エタノールに溶解した疎水性エマルション成分の流れを水性エマルション溶液の流れと一緒にすることを含む。２つの溶媒の流れが一緒になるにつれて、疎水性分子（すなわち、カチオン性脂質、スクアレン、ＳＰＡＮ－８５およびＰＳ－２０）が水性溶媒と相互作用する。次いで、後記のとおり、分子がナノサイズの粒子のエマルションへと集合する。ナノ粒子の自己集合エマルションの形成の後、幾つかの適切な手段によって、安定なスクアレンエマルションから残留エタノールを除去することが可能である。この実施例においては、水性バッファーを使用した一晩の透析によって、エタノールを０．１％（ｗ／ｖ）未満まで減少させた。得られたＳＮＥ製剤を、孔径０．２μｍの滅菌フィルターで濾過することによって滅菌した。望ましい特性を有するＳＮＥアジュバント系を生成させるために、各工程における幾つかのプロセスパラメーター、例えば添加順序、混合時間、温度、非水性成分の濃度、水性バッファー成分の濃度、水性ｐＨ、非水性溶液と水性溶液との混合比、総流量および廃棄物体積を制御した。

【0366】

【表10】

【0367】

【表11】

【0368】

マイクロ流体ナノエマルション自己集合を用いた製剤の製造
この実施例においては、生物物理学的特徴付けのために、２０ｍＭ ヒスチジン（ｐＨ５．８）におけるマイクロ流体ナノエマルション自己集合法によって、１つのＳＮＥ製剤および４つのＣＬＡ－ＳＮＥ製剤を製造した。自己集合ナノエマルションプロセスは、１５ｍｇ／ｍＬのスクアレン、１．５ｍｇ／ｍＬのＳＰＡＮ－８５および１．５ｍｇ／ｍＬのＰＳ－２０をエタノールに完全に溶解することから開始する。また、前記のエタノール溶液のそれぞれは０．７５、１．５、５．０または１５．０ｍｇ ＣＬＡ／ｍＬのＣＬＡをも含有していた。したがって、５つ全ての製剤に関する最初の「目標」ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％は０．０、５．０、１０．０、３３．３および１００（ｗ／ｗ）％ ＣＬＡ／スクアレンとなる。該製剤の全てのための水性バッファーはｐＨ５．８の２０ｍＭ ヒスチジンであった。Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ ＮａｎｏＳｙｓｔｅｍｓ，Ｉｎｃ．（Ｖａｎｃｏｕｖｅｒ，ＢＣ，Ｃａｎａｄａ）のベンチトップＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ（商標）装置を使用して、前記の１つのＳＮＥおよび４つのＣＬＡ－ＳＮＥアジュバントナノエマルションを自己集合させた。

【0369】

自己集合スクアレンナノ粒子製剤を以下の方法で製造した。１ｍＬ シリンジに、エタノールに溶解した０．７ｍＬ強の疎水性化合物混合物を充填し、一方、３ｍＬ シリンジに１．４ｍＬ強の２０ｍＭ ヒスチジン（ｐＨ５．８）水性バッファーを充填した。両方のシリンジに適切な量の溶液をローディングした後、シリンジをＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ（商標）装置に取り付けた。以下のマイクロ流体混合パラメーターをＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ（商標）内にプログラムした：ａ）総体積＝２ｍＬ、ｂ）流量比＝２：１（水対エタノール）、ｃ）総流量＝１２ｍＬ／分、ｄ）開始廃棄物体積＝０．２５ｍＬ、およびｅ）最終廃棄物体積＝０．０５ｍＬ。装置を作動させると、わずか数秒でエタノールと水溶液との混合プロセスが開始された。前記の５つの製剤のそれぞれに関して、約３０％ エタノール中の約２．０ｍＬの混合後ナノ粒子エマルションを１５ｍＬ ファルコンチューブ内に集めた。前記の５つの異なるＳＮＥおよびＣＬＡ－ＳＮＥ製剤のそれぞれに、新たなＮａｎｏＡｓｓｅｍｂｌｒ（商標）混合カートリッジを使用した。エタノール濃度は各製剤において一晩の透析によって減少する。透析後、分析的特徴付けまで、サンプルの全てを４℃で貯蔵した。

【0370】

分析的特徴付け
カチオン性脂質ＣＬＡおよびスクアレンは、図１５Ａに示されているとおり、ＭＮＳによって製造されたスクアレンＣＬＡ－ＳＮＥナノ粒子内に同等に取り込まれた。この実施例に記載されている製剤サンプルの全てに関して、プロセスエタノールを除去するための透析の後のＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％比（すなわち、ｙ軸）をエタノール溶液中の自己集合前のＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％（すなわち、ｘ軸）と比較した。ＭＮＳおよび透析の後の「測定された」ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％は少なくとも３５（ｗ／ｗ）％までは「目標」（ｗ／ｗ）％と等しかった。自己集合前の１００％の「目標」ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％においても、ＭＮＳで製造されたナノ粒子エマルション中のスクアレン含量と比較して、利用可能なＣＬＡの７０％以上がＣＬＡ－ＳＮＥナノ粒子内に取り込まれる。ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％比は、逆相ＵＰＬＣ－ＣＡＤによって測定した。ＣＬＡは、マイクロ流体ナノエマルション自己集合（ＭＮＳ）プロセスによって製造されたＣＬＡ－ＳＮＥ内に明らかに取り込まれている。

【0371】

ＭＮＳプロセスで製造されたＣＬＡ－ＳＮＥ製剤の強度加重Ｚ平均ＤＬＳ直径を、Ｍａｌｖｅｒｎ ＺｅｔａＳｉｚｅｒ Ｕｌｔｒａを使用して測定した。各製剤からの透析後ＣＬＡ－ＳＮＥサンプルのアリコートを２．０ｍＬの２０ｍＭ ヒスチジンバッファー（ｐＨ５．８）中で５０倍または１００倍に希釈した。平均ＤＬＳ直径および標準偏差を、各製剤に関して、測定された透析後ＣＬＡ／スクアレン（ｗ／ｗ）％に対してプロットし、図１５Ｂに示す。各製剤に関して、室温で３回のＤＬＳ測定を行った。標準偏差がデータポイントイメージより小さい場合を除き、標準偏差バーが示されている。ＭＮＳで製造されたＣＬＡ－ＳＮＥの強度重量Ｚ平均ＤＬＳ直径は約１５０～２８０ｎｍの範囲であり、これは、高圧均質化によって製造されたＣＬＡ－ＳＮＥナノ粒子に類似している。所望の直径を有するＣＬＡ－ＳＮＥアジュバント系を生成させるために、種々のＭＮＳプロセスパラメーター（例えば、この実施例において前記で示されているもの）を制御した。

【0372】

ＭＮＳプロセスで製造されたＣＬＡ－ＳＮＥスクアレンナノ粒子製剤の、ｐＨ５．５における測定されたゼータ電位を、図１５Ｃに示す。ゼータ電位は、Ｍａｌｖｅｒｎ ＺｅｔａＳｉｚｅｒ Ｕｌｔｒａを使用して測定された。各製剤からの透析後ＣＬＡ－ＳＮＥサンプルのアリコートを２．０ｍＬの２０ｍＭ シトラートＢＩＳ ＴＲＩＳプロパンバッファー（ｐＨ５．５）中で５０または１００倍に希釈した。各製剤に関して、室温で３回のゼータ電位測定を行った。標準偏差がデータポイントイメージより小さい場合を除き、標準偏差バーが示されている。０（ｗ／ｗ）％ ＣＬＡの（すなわち、ＣＬＡを含有しない）ＣＬＡ－ＳＮＥ製剤のゼータ電位は約－５ｍＶであった。図１５Ｃに示されているとおり、ＣＬＡの添加はナノ粒子のゼータ電位を約＋１０ｍＶへと有意に増加させた。

【0373】

実施例１５：水相ｐＨの変更によるＣＬＡ－ＳＮＥの製造の最適化
ＣＬＡ－ＳＮＥプロセスは、６．４の実測ｐＫａを有する可逆的なカチオン性ＣＬＡ分子の使用を含む。ＳＮＥ製造プロセスおよび最終マトリックスへのｐＨ５．８でのＣＬＡの添加はＣＬＡのプロトン化をもたらし、これは、ＣＬＡ－ＳＮＥ粒子および製造プロセスの中間体に全体的な正味の正電荷を与えるように働く。ＣＬＡ－ＳＮＥの製造はついには０．８／０．２μｍの濾過イベントとなり、このプロセス工程は、重大なフィルターファウリングおよび低い生成物収率が一貫して観察されていて、実施困難であることが判明していた。しかし、ＳＮＥの濾過は、同じ規模のこれらの濾過の難題を示さず、より効率的なナノエマルション濾過工程であった。重要なことに、ＣＬＡの非存在下、ＳＮＥは、ＣＬＡ－ＳＮＥで観察される強い正電荷を帯びない。より効率的なＣＬＡ－ＳＮＥ濾過工程のために非荷電ＣＬＡ－ＳＮＥを製造するために、水相（２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジン）のｐＨを調整した後でそれをＣＬＡ－ＳＮＥの製造に使用する一連の実験を行った。５．０、５．７、５．８、６．０、６．２、７．０および７．７の目標ｐＨを有する２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジンを調製した。次いで、１５ｍｇ／ｍＬ ＣＬＡを配合目標とするＣＬＡ－ＳＮＥ製造プロセスにおける水相として各バッファーを使用し、実施例３に記載されているまさにそのとおりにＣＬＡ－ＳＮＥ製造を進めた。均質化プロセス工程の完了時に、ＣＬＡ－ＳＮＥ中間体の粒子サイズを、Ｍａｌｖｅｒｎ Ｐａｎａｌｙｔｉｃａｌ ＮａｎｏＺＳを用いるＤＬＳによって測定した。次いで０．８／０．２μｍ ＰＥＳフィルターで濾過を行った。粒子サイズ分布を、ＤＬＳによって、濾過後に測定し、［ＣＬＡ］をＵＰＬＣ－ＣＡＤによって定量した。ｐＨ７．０または７．７を有する２０ｍＭ Ｌ－ヒスチジンを使用して製造されたＣＬＡ－ＳＮＥサンプルの場合には、フィルターに材料を適用すると直ちに完全なフィルターファウリングが観察され、濾過された材料の収集は不可能であったため、ＤＬＳまたはＵＰＬＣ－ＣＡＤによる定量は不可能であった。０の値は説明の目的で示されている。濾過前（予備濾過）サンプルにおいては、水相バッファーのｐＨが増加するにつれて、粒子サイズが増加する傾向がＤＬＳによって観察された（図１６）。この関係は濾過後サンプルにおいても維持され、各ＣＬＡ－ＳＮＥサンプルは濾過後の粒子サイズの程々の減少を示した。ただし、ｐＨ７．０および７．７のサンプルは明らかな例外であり、それらは、再び、完全なフィルターファウリングを直ちに示し、材料の回収は不可能であった。濾過後サンプルでは、水相のｐＨが増加するにつれて、最終ＣＬＡ－ＳＮＥ材料中の［ＣＬＡ］が減少することが観察された（図１７）。この関係は、より低いｐＨで水相を使用するＣＬＡ－ＳＮＥの製造が最終濾過におけるプロセス収率の増加、およびより効率的なＳＬＡ－ＣＡＮ製造プロセスをもたらすことを示している。

【図1】

【図2】

【図3】

【図4】

【図5A】

【図5B】

【図6A】

【図6B】

【図7A】

【図7B】

【図7C】

【図7D】

【図7E】

【図7F】

【図7G】

【図7H】

【図7I】

【図7J】

【図7K】

【図7L】

【図7M】

【図8A】

【図8B】

【図8C】

【図8D】

【図9】

【図10A】

【図10B】

【図10C】

【図10D】

【図11A】

【図11B】

【図11C】

【図11D】

【図12A】

【図12B】

【図13A】

【図13B】

【図13C】

【図13D】

【図14A】

【図14B】

【図14C】

【図15A】

【図15B】

【図15C】

【図16】

【図17】

【手続補正書】

【提出日】2023-09-27

【手続補正1】

【補正対象書類名】特許請求の範囲

【補正対象項目名】全文

【補正方法】変更

【補正の内容】

【特許請求の範囲】

【請求項1】

ａ）少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）；および
ｄ）スクアレン
を含む、組成物。

【請求項2】

前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、担体タンパク質とコンジュゲートしている、請求項１記載の組成物。

【請求項3】

前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項２記載の組成物。

【請求項4】

前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ
からなる群から選択される、請求項１～３のいずれか１項記載の組成物。

【請求項5】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬである、請求項１～４のいずれか１項記載の組成物。。

【請求項6】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬである、請求項１～４のいずれか１項記載の組成物。

【請求項7】

ａ）担体タンパク質にコンジュゲートしたストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖を含む、少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲート；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）；および
ｄ）スクアレン
を含み、
前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ
からなる群から選択され、
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、組成物。

【請求項8】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬである、請求項７記載の組成物。

【請求項9】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬである、請求項７記載の組成物。

【請求項10】

ａ）担体タンパク質にコンジュゲートしたストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖を含む、少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲート；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）；および
ｄ）スクアレン
を含み、
前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
からなる群から選択され、
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、組成物。

【請求項11】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４０ｍｇ／ｍＬである、請求項１０記載の組成物。

【請求項12】

ｐＨ５．１～７．０の５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１１記載の組成物。

【請求項13】

約ｐＨ５．８の約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１１記載の組成物。

【請求項14】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０濃度が、６μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２４ｍｇ／ｍＬである、請求項１０記載の組成物。

【請求項15】

ｐＨ５．１～７．０の５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１４記載の組成物。

【請求項16】

約ｐＨ５．８の約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項１４記載の組成物。

【請求項17】

ａ）少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）またはポリソルベート－８０（ＰＳ－８０）；
ｄ）スクアレン；および
ｅ）カチオン性脂質
を含む、組成物。

【請求項18】

前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、担体タンパク質とコンジュゲートしている、請求項１７記載の組成物。

【請求項19】

前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、請求項１８記載の組成物。

【請求項20】

前記カチオン性脂質が、下記式Ｉ：

【化1】

（式中、
Ｒ^１およびＲ^２はそれぞれメチルである；
Ｒ^３はＨである；
ｎは１または２である；
Ｌ_１はＣ_８－Ｃ_２４アルキルおよびＣ_８－Ｃ_２４アルケニルから選択される；ならびに
Ｌ_２はＣ_４－Ｃ_９アルキルおよびＣ_４－Ｃ_９アルケニルから選択される）
またはその任意の薬学的に許容される塩もしくは立体異性体
から選択される、請求項１７～１９のいずれか１項記載の組成物。

【請求項21】

前記カチオン性脂質が、下記：
（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン、
（６Ｚ，９Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタトリアコンタ－６，９，２６，２９－テトラエン－１８－アミン、および
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル）ヘプタデカン－８－アミン
から選択される、請求項１７～１９のいずれか１項記載の組成物。

【請求項22】

前記カチオン性脂質が、（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンである、請求項１７～１９のいずれか１項記載の組成物。

【請求項23】

前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ
からなる群から選択される、請求項１７～２２のいずれか１項記載の組成物。

【請求項24】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、３０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項１７～２３のいずれか１項記載の組成物。

【請求項25】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項１７～２３のいずれか１項記載の組成物。

【請求項26】

ａ）担体タンパク質にコンジュゲートしたストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖を含む、少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲート；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）；
ｄ）スクアレン；および
ｅ）カチオン性脂質
を含み、
前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
４、６Ｂ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆおよび２３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、９Ｖ、１４、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｆおよび３３Ｆ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
１、３、４、５、６Ａ、６Ｂ、７Ｆ、８、９Ｖ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１４、１５Ａ、１５Ｃ、１８Ｃ、１９Ａ、１９Ｆ、２２Ｆ、２３Ｂ、２３Ｆ、２４Ｆ、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ａ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ
からなる群から選択され、
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、組成物。

【請求項27】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、３０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項２６記載の組成物。

【請求項28】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項２６記載の組成物。

【請求項29】

ａ）担体タンパク質にコンジュゲートしたストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖を含む、少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲート；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）；
ｄ）スクアレン；および
ｅ）カチオン性脂質
を含み、
前記カチオン性脂質が、
（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミン、
（６Ｚ，９Ｚ，２６Ｚ，２９Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチルペンタトリアコンタ－６，９，２６，２９－テトラエン－１８－アミン、および
Ｎ，Ｎ－ジメチル－１－（（１Ｓ，２Ｒ）－２－オクチルシクロプロピル）ヘプタデカン－８－アミン
から選択され、
前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
からなる群から選択され、
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、組成物。

【請求項30】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、３０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項２９記載の組成物。

【請求項31】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項２９記載の組成物。

【請求項32】

ａ）担体タンパク質にコンジュゲートしたストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖を含む、少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖－担体タンパク質コンジュゲート；
ｂ）ソルビタントリオレアート（ＳＰＡＮ－８５）；
ｃ）ポリソルベート－２０（ＰＳ－２０）；
ｄ）スクアレン；および
ｅ）（１３Ｚ，１６Ｚ）－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－ノニルドコサ－１３，１６－ジエン－１－アミンであるカチオン性脂質
を含み、
前記少なくとも１つのストレプトコッカス・ニューモニエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）多糖が、血清型：
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、脱Ｏ－アセチル化－１５Ｂ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；ならびに
３、６Ａ、７Ｆ、８、９Ｎ、１０Ａ、１１Ａ、１２Ｆ、１５Ａ、１５Ｃ、１６Ｆ、１７Ｆ、１９Ａ、２０Ｂ、２２Ｆ、２３Ａ、２３Ｂ、２４Ｆ、３１、３３Ｆおよび３５Ｂ；
からなる群から選択され、
前記担体タンパク質がＣＲＭ１９７である、組成物。

【請求項33】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、３０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項３２記載の組成物。

【請求項34】

ｐＨ５．１～７．０の５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項３３記載の組成物。

【請求項35】

ｐＨ約５．８の約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項３３記載の組成物。

【請求項36】

前記ＳＰＡＮ－８５濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記ＰＳ－２０またはＰＳ－８０濃度が、６μｇ／ｍＬ～１４ｍｇ／ｍＬであり、
前記スクアレン濃度が、６０μｇ／ｍＬ～３４ｍｇ／ｍＬであり、および、
前記カチオン性脂質濃度が、６０μｇ／ｍＬ～２．４ｍｇ／ｍＬである、請求項３２記載の組成物。

【請求項37】

ｐＨ５．１～７．０の５ｍＭ～４０ｍＭのヒスチジンおよび２５ｍＭ～３００ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項３６記載の組成物。

【請求項38】

ｐＨ約５．８の約２０ｍＭのヒスチジンおよび約７５ｍＭのＮａＣｌを更に含む、請求項３６記載の組成物。

【国際調査報告】